PT96505B - Processo para preparacao de compostos tetra-aza macrociclicos contendo um anel de 6 elementos e de composicoes farmaceuticas que os contem - Google Patents

Description

A presente invenção refere—se aos objectos carac— terisadoc nas reivindicações, x.e, agentes eomplexantes, compostos ccrplezos e sais de c or.pl ex os tetrs-aza macroeíelicos contendo um anel de 6 elementos, bem como a composições que os contêm, sua utilização como meio de diagnóstico e terapêutica, bem como a processos para a preparação de tais compostos e composições.

Os complexos metálicos foram já considerados no início dos anos 50 como meios de contraste para radíologoa. Cs compostos então utilizados ereja no entanto de tal forma tóxicos, que não se podia pensar na sxia utilização no ser humano, Boi portanto bastante surpreendente o facto de determinados sais complexos se revelassem suficientemente to- 1 leráveis, podendo assim considerar-se uma utilização de rotina no ser humano» para fins de diagnóstico » Como primeiro representante desta classe de compostos foi registado o sal dimeglumínico da Gd BSâ (complexo de gadulínio-III do ácido dietileno-triamino-pentaacético) descrito na Patente europeia com o n^s de publicação 71564» como agente de contraste para a Kernspintomographie” (tomografia de resonâneia magnética nuclear? ou TAC?)· 0 principal campo dessa utilização são as doenças do sistema nervoso central»

Um dos motivos fundamentais para a boa utilidade de Gd DTPA em clínica reside na elevada eficácia da “Kernspintomographie” (tomcgrafia de resonâneia magnética nuclear? ou TAC?), em especial no caso de muitos ttumores cerebrais. Graças ã sua elevada eficácia» o Gd BT3?À pode ser doseado a 0,1 mmol/kg de peso corporal, ou seja» uma dose muito inferior por exemplo que as dos agastes de contraste em muitos exames radiologicos.

Como outro representante dos sais complexos, revelou-se também útil para fins de diagnóstico o sal de meglumina da Gd DOTA (complexo de g&dolínio-III do ácido 1,4,7,10 -tetraazaciclodecano-tetraacêtico)»

Do entanto, verifica-se a necessidade de poder utilizar doses mais elevadas dos quelatos, como é o caso em especial para a detecção de determinadas doenças não do sistema central com o auxílio da tomografia de resonâneia magnética nuclear” (diagnóstico pôr H£AJ), e sobretudo no caso de utilização de quelatos como meio de contraste radiológico

A fim de manter tão redusida quanto possível a sobrecarga de volume do organismo, é necessário utilizar soluçCes de quelatos muito concentradas» Gs quelatos até agora conhecidos são pouco adequados para o feito, sobretudo devido a sua elevada osaolalidade.

Dessa forma» verifica-se a necessidade de qualatos que apresentem uma osaolelidade inferior ã dos cuelatos já conhecidos* Sm simultâneo» têm âe ser no entanto satisfeitas as exigências colocadas a esses compostos para utilização no ser humano, relatívamente à distância entre a dose eficaz e a dose tóxica determinada em ensaios com animais (espectro

terapêutico), â especificidade orgânica, â estabilidade, ao eíeito potenciador do contraste, â tolerância, bem como â solubilidade dos compostos complexos.

Assim, a presente invenção tea como objectivo apresentar esses compostos, bem como composições que os contêm, e ainda ei’iar um processo tanto quanto possível simples para a sua preparação, Ssses objeetivos são conseguidos pela presente invenção.

Os compostos complexos a que se refere a presente invenção e as soluções com eles preparadas, satisfazem de forma surpreendente as citadas exigências. Possuem uma osmolalidade reduzida, bem como ua espectro terapêutico e/ou uma estabilidade e capacidade de armazenamento dos componentes caímicos da solução e/ou uma especificidade orgânica e/ou um efeito potenciador do contraste Cp.o. capacidade de relaxamento) e/ou tolerância (p.e« menos efeitos secundários cárdio-vasculares ou de tipo alérgico) aais vantajosos do que os meios de diagnóstico até agcra utilizados, mesmo sem medidas específicas, a sua farmacocinética permite uma melhoria do diagnóstico de numerosas doenças. Os complexos são na sua maior parte eliminados sem alteração, e relativamente depressa, pelo que sobretudo no caso da utilisação de iões metálicos relativamente tóxicos, não se observam mesmo doa doses elevadas, quaisquer efeitos prejudiciais.

À utilização prática dos novos complexos e agentes formadores de complexos 4 facilitada â sua boa estabilidade química.

uma outra vantagem importante dos complexos e agentes complexantes descritos 4 a sua extrema versatilidade química. Iara além do átomo central, 4 possível, através da selecção de variadíssimos substituintes no macrocieio e/ou dos agentes formadores dos sais, adaptar as suas propriedades âs exigências de eficácia, farmacocinética, tolerância, solubilidade, facilidade de manuseamento, etc» Assim, 4 possível por exemplo, conseguir-se uma especificidade concreta dos compostos para diagnóstico e terapêutica relativamente a estruturas do organismo, a determinadas substâncias bioquímicas, a processos metabólicos, e ao estado dos tecidos

ou líquidos orgânicos.

Os compostos macrocíclicos a que se refere a presente invenção são caracterizados pela fórmula geral 1:

G

Zi1

,1 ,1

(I) cooz na qual _XJ>. representa uma ligação simples ou uma ligação dupla,

Q representa um átomo de azoto ou um radical HE,

X representa um átomo de hidrogénio, um grupo -(CH₂) -R ou. um grupo -(CE₉) -(CE) -CE₉OE com iii | XX

OH η = 1 a 5, m = 0 a 2 e = um átomo

--2

Ά representa com

E = 0 a 4, de

-,1 hidrogénio ounum grupo hidrózi, ou um grupo “(^CH2'⁾n“^⁰^l^^CÍH2h<^^C6^K4^q”^PL“ e q = 0 ou 1, e 2

E = um átomo de hidrogénio, um grupo alcóxi com C1-C4, um grupo funcional ou ligado através desse grupo funciona,! de uma hiomolécula ou macromolécula,

A^X, A², Β^Χ, Β², C^X, G², Β^Χ, D², 1^Χ, Β², ϊ¹» e F² represen2 tam, independentemente uns dos outros, respectivamente X ,

A

G representa B ou um segundo macrociclo ligado através de K, com a fórmula geral II

CiD,

I coos na qual A representa uma ligação directa, um grupo bis(car* bonilamino) (-TÍE-GG-CG-IH-) ou um grupo alquileno com Cl* -C14 que apresenta eventualmente nos seus terminais grupos carbonilo ( CG) ou carbonilamino (-HE-CO-) ou átomos de oxigénio, e que apresenta eventualmente um ou mais átomos de oxigénio, grupos hidréxi-netileno (-OE-GB), CE(X²)CG0S, grupos imino substituídos com acilo ou hidréxi-acilo, ou uma a duas ligaçSes C-C duplas e/ou G-C triplas;

representa um átomo de hidrogénio e/ou um equivalente de um ião metálico de um elemento com os números de ordem 21-29, 31, 52, 57-59, 42-44, 49 ou 57-85?

com a condição de os 12 substituintes do anel A^X a F² representarem pelo menos 8 átomos do hidrogénio, de X^x e X² sé poderem representar em simultâneo átomos de hidrogénio se pelo menos um dos substituintes do anel A^X a F² não representar um átomo de hidrogénio e de o macrociclo da fórmula

- 5 geral I não conter mais de uaa bio-molécula ou maero-molécuia, bem como os seus sais com bases orgánieas/inorgânicas amino-ácidos ou amidas de amino-ácidos»

Dá-se preferência aos compostos tetra-asa da fórmula geral III

CK-X² (III), _Λ , 0002 na qual ♦ »» representa uma ligação simples ou uma ligação dupla,

Q representa um átomo de asoto ou um radical IH,

X representa um átomo de hidrogénio, úm grupo -(ΟΙ^^-Σί. ou um grupo -(CH₂)_ffl-í&M)_n«CH₂0H com

OH η «X a 5, m ss 0 a 2 e

K^ = um átomo de hidrogénio ou um grupo hidróxi,

1 0

X representa X ou um grupo -0¾) £-(0).,-(0^)^.-( CgH^-E com

K = 0 a 4, e q = 0 ou 1, e

Kg - um átomo de hidrogénio, um grupo alcóxi coa C1-C4, um grupo funcional ou ligado através desse grupo funcional de uma biomoléeuls. ou macromoléeuda,

A¹, B¹, C³· e B¹ representai, independentemente uns dos outros respectivamente X^,

G representa K₂ ou ua segundo macrociclo ligado através de K, com a fórmula geral IV

I

0002 na qual E representa uma ligação directa, um grupo bis(carbonilamíno) (-KE-CO-CO-IE-) ou um grupo alquileno com 01-014 que apresenta eventualmente nos seus terminais grupos carbonilo (+00) ou carbonulamino (-IE-CO-) ou átomos de oxigénio, e que apresenta eventualmente um ou mais átomos de oxigénio, grupos hidróxi-metileno (-0E-0H), 0Η(Χ₂)0002, grupos imino substituídos com acilo ou hidróxi-acilo, ou uma a duas ligações G-0 duplas e/ou 0-0 triplas;

representa um átomo de hidrogénio e/ou um equivalente de um ião metálico de um elemento com os números de ordem 21-29, 31, 32, 37-39, 42-44, 49 ou 57-83;

com a condição de X^ e X₂ só representarem em simultâneo hidrogénio, se pelo menos um dos 4 substituintes do anel Aj, B^, 0_χ e Bj não representar hidrogénio, e se desejado, os restantes grupos C0₂h se apresentarem sob a forma de ésteres ou amidas, bem como os seus sais com bases orgâni- 7 -

caj/inorgáaicas, amino-ácidos ou amidas de amino-ácidos,

Cs compostos da fórmula geral IX con 2 = hidrogénio são designados agentes complesantes, e com pelo menos dois dos rsubstituintes ~ equivalentes de iões metálicos são designados complexos metálicos.

Os elementos com o número de ordem acima referido que constitui o ião central dos sais complexos fisiológica* mente toleráveis» também pode» como é óbvio» ser radioacti* vo consoante o fim a que se destina a composição farâeêutica de diagnóstico a que se refere a presente invenção,

Se a composição farmacêutica a que se refere a presente invenção for destinada ao diagnóstico por Bí«» o ião central do sal complexo tem âe ser paramagnético, Trata-se neste caso em especial dos iões bi- e trivalente com os números de ordem 21*29, 42» 44 e 58-70, Iões adequados são por exemplo os iões cróraio(XII), aanganês(II), ferro(II) cobalto(XI), niquel(IJ), cobre(II)» praseodímio(III), neodímio(lll), samário(lll) e Yterbium(Ill). Devido ao seu momento magnético muito forte dá-se especial preferência aos iões gadolínio(XIX), térbio(XXX), disprósioCXXX)» holmio(III), erbio(ni) e ferro(Ill).

Para utilisação das composições farmacêuticas a que se refere a presente invenção na medicina nuclear, o átomo central tem de ser raúioactivo, São por exemplo adequados os radio-isótopos dos elementos cobre, cobalto» gálio, germânio, itrium, estrôncio, tecnetium, indium, Yterbium, gadolínio, samãrio e iridio, no caso de as composições farmacêuticas a que se refere a presente invenção destinarem ã utilisação em diagnóstico radiológico, o ião centsrl tem de ser derivado de um elemento com um núsiero de ordem mais elevado, a fim de obter uma absorção suficiente dos SX. Descobriu-se que para este efeito são adequadas composições farmacêuticas contendo um sal complexo fisiologioaaente tolerável com iões centrais de elementos com os números de ordem entre 21-29, 42, 44 e 57-83J trata-se por exemplo do ião lantânio(XI) e dos . iões acima referidos da série dos lantanídeos.

Como grupos preferidos para 2* podem eitar-se os

drogénio.

A cadeia alquileno representada por K, à qual está ligado o segundo macrociclo ΪΧ ou XV, apresenta nas posições terminais eventualmente grupos carbonilo (CO), carbonil-amino ou átomos de oxigénio, e contém 1-14 átomos de carbono· Pode ser interrompida por um ou aais átomos de oxigénio, grupos hidréxi-metileno (-CHOH-), ou grupos imino substituídos com GH(2 )COOS, acilo ou hidroxi-acilo, ou por uma a duas ligações duplas C=C e/ou ligações triplas C=C. Os dois macrosielos podem também ser ligados através de uma ligação simples. Gomo grupos acilo eventual* mente bidroxilados poderá considerar-se radicais acilo com até 10 átomos de carbono. Podem citar-se a título de exemplo os radicais acetilo, propionilo» butirilo, bengoilo o hidréxi-acetilo.

A cadeia alauileno pode ser linear ou ramificada» satura ou insaturada, o eventualmente interrompida como acima referido. 3?ode apresentar até 4 átomos de oxigénio e/ou até 2 grupos carboximetil-imiao. São exemplos da cadei alquileno os gruposí

-(Cfí₂)₂-, -CH₂-0-GH₂, ~(GH₂)₄-, *(GH^-CH_o-G-CB₂-CH₂)-, -ÍCH -g-ce₂)₂-,

•Ο-(CE ₂ -CE₂-E-CE₂- _t —{CH₂5 pCH=CH—(CH₂)₂«

CO-GEgOH .lie preferência, os dois macrociclos são ligados por meio de uma ligação directa ou através do grupo ~(0)θ

-(cn_e)_n-(yE)_k^E_a)_n- (0)!.

QE

Grupos funcionais preferidos para 1 são por exemplo os grupos maleiaido-benzoilo, 3-sulfemaleimido-ben· zoilo, 4*Cmaleimidometil)-cicloEexil-carbonilo, 4-^-sulfe· —(maleimidometil) ‘-cicloliexil-oarbonil, 4— (p-maleimidofenil) -butirilo, 3»(2-piridilditio)-propionilo, metacriioil-(pen•cametileno)-amido, bromo-aeetilo, iodo-aeetílo, 3-iodo-propilo, 2-bromo-etilo, 3-aearcapto-propilo, 2-mercapto-stilo, fenileno-isotíocianato, 3-amino-propilo, éster bensílico, éster etílico, éster t-butílico, amimo, hidroxi, alou.il— -amimo con 01-06, amino-carbonilo, liidrasino, Eidrasinocarconilo, maleimido, metacrilamido, iaetacriloil-hidrasinocarbonilo, maleimidamido-earbonilo, hanlogénio, mercapto, hidr^ zino-tri&etilmo-hidraBino-carboailo, araino-dimetilenoamido' carbonilo, bromo-carbonilo, fenileno-diasénio, isotiocianato, semicarbazida, tiosemicarbagida, e isocianato#

Como ilustração, apresentam-se alguns grupos seleccionados i

-CE₂-C₆H4-C(Cfí₂5₃^

Γ

Λί

-CH₂-C _βΗ₄-0 (CE ₂) -KH-r •CE₂-C₆E₄-0(GE2)5^C02^CH2^C 6^H 5 * “^CH2“^C 6^E4~°“^CE2~^0G 2^CH 2° 6^K 5 *

-CE₂-0gH^-O(CE₂5çCOEEEE₂, -CE₂-CgE^-eOEEES<%^, -CHg-CgH^-O (fiTT \ _ΛΧΤ

-ch₂-c₆e₄.

;H₂)^3BKB_2> «CB₂«-CgH^“ô(CH₂)^-COBE-*H

.CH₂-C₆H₄-0CH₂)^Br_# eG₂-e_gH^«<0₂,

-CE_?-C₆E₄*0(CH₂)_RC01®KH-(CH₂)₅*HOE₂, -CH^EIEg» -CSg-bE,

GKHlííi zj >

£_ t-(OH ) 8H, -eH,-OgH.-O-CH,COBr, -OgH^HHCOCE^r,

3 % ~CIí_o~C£K₄*0G&2*^^®**(P®2) » —CgE^—Ug>

-^C6^H4^ncò* , ·4®0ίΜϊΜΗ₂, -ffiCS-EH-lIS

0

-ΟΗ₂-0₆Η₄-Ο-0Η₂-ΟΗ«®Σ₂ , -aií₂-CgH_A-0-GS₂-C-W-CCE₂)_Ί θ-Ο-ΚΗΕ G G ~ „ ..... II__ ~ II i í —GEg*θ(GHg)^q“G—ÍSEQsHg» “-OCHg—C—lá— CK₂~ -(CHGE) , ~CH_n0E, *♦» zL l·

-CH₂-CH-CH₂, -CH₂-0-(GH₂)₅*É , -0Η₂-0~(0Ε₂)_Λ-δΗ_ί —Chg—0—(CEg) ^Shiiíjttgf » —CHg—G—CHg—CHg*

-Mí₂, ^S₂-Q-CE₂^H-e~(0H₂)₂~S~3 w , 0H₂-O-eH₂-C-£íH-(eE₂)_lo J^TUUyFn, c-o_ce₄-íí

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—C—Gl, —C—G—C—«•U—íí^ •CHxsGE-CGgE, na& quais ϊϊ e fi* podem ser iguais ou diferentes, e representam respectivaaeat© um átomo de hidrogénio, ua radical alquilo saturado ou insaturaso, evontualaente substituído com um grupo fenilo, ou um grupo fenilo. Dá-se especial preferência aos grupos -H0B, -Ι0₂> -OH, SSCGCfígBr, —iiHGGGHgCl, — GOgH e **Οβϊ»^,

Os restantes átomos de hidrogénio ácidos, ou seja aqueles que não foram substituídos pelo ião central, podem ser substituídos eventuslmente no todo ou em parte por ca~ tiões do bases orgânicas e/ou inorgânicas ou aainoácidos.

Os respectivos grupos ácidos pode também ser total ou parcial.-ente transformados em esteres ou amidas·

GatiOes inorgânicos adequados são por exemplo os iões de lítio, de potássio, de cálcio, de magnésio e em es- 12 -

pecial de sódio, Catiões adequados de bases orgânicas são, entre outros, os de aminas primárias, secundárias e terciárias, como p.e. etanolamina, dietanol-amina, morfolina, glucamina, Η,Κ-âimetil-glucamina e em sepecial 1-metil-glucamina. Gatiões adequados de aminoácidos são p.e. os da lisina, arginina e ornitins, bem como as amidos de outros aminoácidos ácidos ou neutros· ésteres adequados são de preferência os cm um radical alquilo com C1-G6; podem citar-se p.e. os radicais metilo, etilo, tert.-butilo, benssilp e 4-metóxí-benzilo.

Gaso se pretenda que os grupos de ácido carboxflico se apresentem pelo menos em parte como amidas, podem considerar-se como radicais hidrocarbonetos saturados, insaturados, lineares ou ramificados ou cíclicos, com até 5 átomos de carbono, eventualmente substituídos com 1-3 grupos hidrôxi ou alcôxi cora G1-C4*

Podem referir-se por exemplo os grupos metilo, etilo, 2-hidróxietilo, 2-hidróxí-l-(hidroximetil)-etilo, l-(hidróximetil)-etilo, propilo, isopropenilo, 2-hidrôxi-propilo, 3-kidróxi-propilo, 2,3-dihidróxi, butilo, isobutilo, isobutileno, 2-hidróxi-butilo, ã-hidrôxi-butilo, 4-hidróxi-butilo, 2-, 3-, e 4-hidróxi-2-metil-butilo, 2- e 3-bidróxi-isobutilo, 2,3,4-trihidróxi-butilo, 1,2,4-trihi— dróxi-butilo-pentilo, ciclopentilo e 2-metóxi-etilo. 0 radical amido pode também ser um anel heterocíelieo com 5 ou 6 átomos, formado com inclusão do átomo de azoto da amida. Iodem citar-se p.e·, os anéis pirrolídinilo, piperidinilo, pirazolidinilo, pirrolinilo, pirazolinilo, piperazinilo, morfolinilo, imidazolidinilo, oxazolidinilo, tiazolidinilo.

Os compostos a que se refere a presente invenção apresentam as propriedades desejada inicialmente descritas. Contêm os iões metálicos necessários a sua utilização ligados de forma estável no complexo, valor da osmolalidade, responsável pelos efeitos secundários, tais como dores, lesões dos vasos sanguíneos e perturbações do sistema eárdio-vaseular, foi notoriamente reduzido em comparação com o de aagnevisto (Exemplo lb: 0.53 £esmol/kg7 relativamente a magnevísto j 1,96 ^õsmol/kg/, 0,5

mcl/1 π 37°C5,

Surpreendentemente elevado é o valor da relaxivi* dade, cue constitui una grandesa de medida da imagem proíectada na &RI; a potenciação do sinal no plasma foi, por exemplo na caso do composto do exemplo 1b, duplicada em relação ao magnevisto»

Una outra vantagem da presente invenção reside no facto de serem agora postos ã disposição complexos com subs· tituintes hidrófilos ou lipdfilos* Sesta forma, é agora possível controlar a tolerância e farasco-cinétioa destes complexos através da substituição ou.ímica.

Através da seleoção de feio- e macromoléculas adequadas (ver abaixo) em & , obtâm-se complexos da presente invenção, cue apresentam uma especificidade tecidular e orgânica surpreendente-mente elevada·

A preparação dos compostos a çue se refere 8 presente invenção faz-se eliminando mma composto da fórmula gerei!¹

« í

0002* na cual

1*2’ 1 ?

G¹, X eX representam respectivsmente G, S e X em que os grupos hidróxi e funcionais neles contidos se apresenta® nas su-as formas protegidas ou como formas prévias, e 2’ representa um atomo de hidrogénio ou um grupo de protec- 14 -

ção de ácido, os grupos de proteeção, eventualmente ®e gerar o grupo funcional desejado, e se desejado, se fazerem reagir em seguida os agentes complexantes assim obtidos da fórmula geral I com 3 representando hidrogénio, por processo em si já conhecido, com pelo menos um óxido metálico ou sal metálico de um elemento com os números de ordem 21-29, 31, 32, 37-39, 42-44, 49 ou $7-83, se desejado se ligarem o£ grupos funcionais a uma bio-molécula ou macromolécula - podendo & eomplexação ser efectuada antes ou depois da eliminação dos grupos de protecção dos grupos hidróxi e dos grupos funcionais, ou da geração dos grupos funcionais e ligação a bio-molécula ou macro-molécula - e em seguida, se desejado, se substituírem ainda os átomos de hidrogénio ácidos presentes por catióes de bases orgânicas e/ou inorgânicas, de arnino-ácidos ou de a&idss de aaino-ácidos, ou se transformarem os respectivos grupos acilo total ou parcialmente ea ésteres ou amidas.

Como grupos de protecção g* podem considerar-se grupos alquilo de cadeia curta, arilo ou ar-alcuilo, p,e. metilo, etilo, propilo, n-butilo, t-butilo, fenilo, bensilO;, difenil-metilo, trifenil-metilo, bis(p-nitrofenilo)-metilo, bem como grupos trialquil-sililo.

2’ pode também representar um metal alcalino,

A eliminação dos grupos de proteccão fas-se através de processos conhecidos dos especialistas, por exemplo através de hidrólise, hidrogenólise, saponifícação alcalina dos ésteres com alcalis em solução aquosa-alcoólica a temperaturas de 0-$0°C, saponifícação ácida com ácidos minerais, ou no caso de p»e» ésteres t-butílicos, com o auxílio de ácido trifluor—acético»

Como grupos de proteccão para grupos hidróxi podem considerar-se p.e. os grupos bensilo, 4-metóxi-benzilo, 4-nitro-benzilo, tritilo, difenil-metilo, trimetil-sililo, dimetil-t-butilsililo e difenil-t-butilsililo.

Os grupos hidróxi podem também apresentar-se sob a forma de éteres 53-13?» éteres x-alcóxi-etílieos, éteres ASM

ou ésteres com ácidos carboxílicos aromáticos ou alifáticos como p.e. ácido acético ou ácido benséieo. Io caso de poli5is, ou gruídos hidróxi podem também apresentar-se sob a ror ma de acetcds, com p.e. acetona, acetaldeído, ciclo-hexanona ou benzaldeído.

Os grupos hidréxi presentes ea X e X podem também apresentar-se protegidos através de esteriíicação iutraaolecular com os grupos carbosílicos aa posição x, for mando as respectivas lactonas.

Os grupos de protecção de hidróxi podem ser eliidinados pelos processos conhecidos dos especialistas, descritos na literatura, p.e. através de hidrogenélise, cisão reúutiva coa lítio/amoníaco, tratamento dos ésteres e acetaís com ácido ou tratamento dos ésteres com alcalis (ver p.e., Irotective Groups inOrgaaic Syathesís, S.U.Greene, John fciley and òons, 1981).

a síntese de compostos diméricos, i.e., de eompostos que apresentam ua segundo anel maerocíclico da fórmula feôral 11 ou IV, faz-se pelos processos conhecidos da literatura, p.e. através de uma reaeção de adição/eliminação de uma anina com um composto carboaiio (p.e. cloreto de scilo, anidrido misto, éster activado, aldeído)i de dois anéis aâiino-suhstituidos coa um composto dicarbonilo (p.e. cloreto do oxalilo, glutar-disideído)j de dois niiróxidos p-nitro-substituidcs com bis-alcoolatos /ver S.JClingsberg, fhe uhemistry of Heterocyclic Cospounds, Interscienee Publishers líew lork, pág. 514 (1961/7; de dois anéis, apresentando cada w deles um grupo nucleófilo, coa um composto siquileno que apresente dois grupos de eliminação, ou no caso de acetilenos terminais, através de acoplação aoxidativa (Cadiot, Chodfcieuicz, in Yiehe ^Àcetylenes', 597-647, líarcel Behker, New lork, 1969).

A cadeia que liga os anéis pode, em seguida, ser modificada através de reacçCes subsequentes (p.e» hidrogenação).

ή síntese de compostos ligados directazaente (i.e», 4 representa uma ligação directa, ver exemplo 4), pode ser

- 16 CHETKjijRr^’' feita através de ciclização de tetrshelegeno-metil-4,4*-bispiridinas (ver abaixo)*

A síntese dos eduetos I’ faz-se através de alqui* lação de compostos da fórmula geral ¥

na qual V representa hidrogénio e ¥ representa um grupo de protecção de amino» ou

U representa grupos de protecção de amino e V representa hidrogénio» podendo U e ¥ ser também idênticos» com compostos da fórmula geral VI

1*

2Γ

Hf-GE-CGOg* (VI) ou compostos da fórmula geral VII

2’

Nf-CH-GOOS* (VII) nas quais líf representa um elemento de eliminação nucleófugo, como p.e. Cl, Br, I, CH^C^SO^, CE^SG^, é-BOg-CgE^&O^, CK^O^.

Os grupos hidróxi eventualmente presentes em X¹

2» ,

X podem também formar uma lactona com o radical Og**

Como reagentes de alquilação podes citar-se por exemploi ácido bromo-aeático» bromo-acetato de aetilo» bromo-acetato de t-butilo, cloro-acetato de bensilo, 2-cloro-5-benziloxi-propanocarboxilato de sódio (IP 0 525 762), 2-bromo-5-benziloxi-propanocarboxilatoede t—butilo («T.Gen, Chem.,b&bít 56. 52, 1966), 5,4-0-isopropilideno-2-p-tolilsufonil-5,4-dihidroxi-butirato de etilo (Synth.Comm· 1*5.» 5077 1988), x-bromo-butiro-laetona»

Como grupos de protecção de amino V ou V podem citar-se» p.e.: formilo, trifluor-aeetato, bensoato, 4-nitro-benzoato, acetato, tosilato, mesilato» bensilo, 4-nitro -benzilo, 4-metóxi-benzilo, trimetil-sililo» dimetíl-t-butil-sililo.

A alquilação dos compostos da fórmula geral V de modo a obter os eductos da fórmula geral I¹» como os compostos da fórmula geral VI ou VII, fas-se em solventes polares aproticos, como p.e. dimetil-formamída» acetonitrilo, dimetil-sulfóxido, tetrahidrofurano aquoso, dioxano ou hexa metil-fosfotriamida, na presença de um agente captador de ácidos, como p.e· amina terciária (p.e* trietil-amina, trimetil-amina, H,Κ-dimetil-amino-piridina, 1,5-diazabiciclo_j/4.5«G7uoneno-5 (DEM), l»5-diazabiciclo_J/5.4*07» 1,5-diazabiciclo^j.4.07undeceno-5 (DEU), carbonatos» bicarbonatos e hidróxidos alcalinos e de terras alcalinas (p.e. carbonato, hidróxido e bicarbonato de sódio, lítio, magnésio, cálcio» bário e potássio), a temperaturas entre -10°C e 120°C, de preferência entre 0°C e 50°C, podendo eventualmente ser adicionadas quantidades catalíticas de iodeto ou brometo.

Após eliminação do(s) restante(s) grupo(s) de protecção de amino pelos métodos conhecidos dos especialistas (p.e. hidrólise ácida ou alcalina» hidrogenólise)» eliminação reductiva com metais alcalinos em amoníaco líquido» reacção com fluoreto de tetrabutil-amónia)» faz(em)-se reagir a(s) restante(s) função(Ses) amino numa segunda reac ção de alquilação, com os compostos VII ou VI, de modo a obter compostos com X¹ X².

A transformação de um composto prévio do anel de

elementos desejado, contido no composto final, fas-se pelos processos conhecidos dos especialistas, Podem referir-se a título de exemplo, a hidrogenação de piridina /Idvan* Catai» 14, 205 (196^27» desoxigenação de anéis nitróxido /Ê.Klingsberg, The Chemistry of Heterocyclic Compounds, Volume 14, parte 2, Interscience Publishers, Hev York, pág. 120 (196127» transformação e introdução de grupos funcionais no anel de 6 elementos, p«e* libertação de grupos hidréxi fenólieos /j.Org.Chem. 55* 5 (198827, introdução de substituintes halogénios ^I.Oingsberg» lhe Chemistry of Heterocyclic Compounds, Volume 14, parte 2, Interscience Publishers, New Torh, pág. 341 ((361), Houben-Weyl, ííethoden der organischen Chemie, Vol. V/3, 651 (196227·

A funcionalização de derivados da 4-halogeno-pi— ridina (p.e, permuta de azidas) no processo de transferência de fases, utilizando 18-crona-6 ou halogeneto de tetrabutil-amónia como catalisador, é descrita em »Hhese Transfer Reactions” (lluka Compendium Vol,2, Ualter B. Keller, úeorg Thieme Verlag, btuttgart, Kev Xork). umgrupo asida assim obtido pode ser transformado numa função amino através de métodos conhecidos dos especialistas (p.e. hidrogenação catalítica, Houben-Ueyl, ”Methoden der organischen Chemie», Vol. 11/1, 539) ou transformação com níquel de Raney/hidrazina (patente alemã 3 150 917). Esse grupo amino pode ser transformado num grupo isotiocianato através de métodos conhecidos da literatura (p.e. com tiofosgéaio num sistema bifásico, S. Seharma, Synthesis 1978, 805, 3.E.John son, J* Hed.Chem. 1989, Vol, 32, 256).

Através de transformação de uma função amino com um halogeneto de halogene-acetilo, é possível obter um grupo x-halogene-acetamido (JAOS 1969., Vol. 90, 4508? Chem. rharm.Bull. 29 (1), 128, 1981), que tal como p.e. 0 grupo isocianato, é adequado para a acoplação de bio- e macro-moléculas»

Á síntese dos compostos da fórmula geral V é realizada através de ciclisação de acordo com métodos conhecidos da literatura ^p.e· Org.Syath» 58» 86 (197827» Maerocy19 -

clic Polyether Syntheses, Spriager Verlag, Hei deito erg, I?ew York (1982), Coord.Chem.Eev. 2» 3 (1968), fnn.Ohem. 1976, 916, JOrg.Chem. 49« 110 (1984).7, um dos dois compostos reagentes apresenta no final da cadeia dois grupos de elimina* ç&o, e o outro dois átomos de azoto, que libertam de forma nucleófila esses grupos de fuga.

Como exemplo podem referir-se a transformação de dietilenotriaminas substituídas com â e D , cujos átomos de azoto terminais libertam de forma nucleofila os grupos de fuga de p.e, 2,6-dihalGgenometiX-piridinas, 2,6-ditosilme* til-piridinas ou 2,6-dimesilmetil-piriâinas. Para síntese de dímeros ligados directamente são utilizados na reacção de ciclização 2,2*, 6,6¹-tetracloroaetil-4,4’*bispiridinas (ver p.e, b yn th es is 552, 1989),

Os átomos de azoto são eventualmente protegidos (p.e. sob a forma de tosilatos ou trifluor-acetatos), e são libertos pelos processos conhecidos, antes da subsequente reacção de alquilação (os tosilatos p.e. com ácidos minerais, metais alcalinos em amoníaco líquido, ácido bromídrico e fenol, RedAl^, hidreto de alumínio e lítio, amalgama de sódio, ver p.e. Liebigs fnn. Chem, 1977, 1544, fetrahedron letters 1976. 5477; os trifluor-acetatos p.e. com ácidc minerais ou amoníaco em metanol, ver Setrahedron. letters 1967, 289)i

Para preparação de macrociclos coza diferentes subs tituintes nos átomos de azoto, esses átomos podem ser protegidos nos eductos com diferentes grupos de protecção, p.e, com grupos tosilato e benzíloi Estes últimos são depois tam* bém eliminados pelos processos conhecidos da literatura (de preferência através de hidrogenação, p.e, patente EB 252 751).

Ho caso de se utilizarem diésteres na reacção de ciclização, os compostos dícetónicos assim obtidos têm de ser reduzidos pelos processos conhecidos dos especialistas p.e* com diaborano.

Podem também ser cielisados os hisaldeídos ou bicetonas terminais, substituídos em conformidade, p.e. 2,6-bisacetil-piridina* com as bís-aminas terminais respectiva- 20 -

aiente desejadas} a redução das bases de Schiff assim obtidos faz-se xjgIos processos conhecidos da literatura» p.e* através de hidrogenação eatalrtica ^Helv. Chia.Acta 61,

1376 (197SJ7.

A preparação das aminas necessárias como compostos de partida para a eiclização faz-se esi analogia com os métodos conhecidos da literatura (p.e. 11 299 795)*

Partindo de um aminoácido ií-protegido obtém-se uma triamina através de transformação com uma dismina parcialmente protegida (p.e. segundo o método da carbo-diimida eliminação dos grupos de protecção e redução com diboraao.

Como substituintes que podem ser transformados num grupo funcional adequado para a ligação a una macro” ou biomolécula» são adequados entre outros» os radicais hidróxi e nitrobenzilo, hidróxi e carbóxi-alquilo, bem como tioalquilo con até 20 átomos de carbono. São transformados pelos processos conhecidos dos especialistas ^Ghem.fharm.Bull 35» 674 (1335), Compendium of Org. Synthesis Vol. 1-5,

Ailey and oons, Xnc.» houbem-Ueyl, hethoden der organischen Chemie, Vol. VIII» Georg fhieme Yerlag» btuttgart, J.Brochem. 92, 1413, (198227 nos substituintes desejados (p.e. com os grupos amino» hidrazino, hidrazino-earbonilo, epóxido, anidrido» metacriloilo, hidrazino-earbonilo, maleimidamido-acarbonilo» halogeno» halogeno-carbonilo, mercapto» isotiocianato» como grupos funcionais), devendo no entanto no caso do radical aitrobenzilo, proceder-se em primeiro lugar a uma hidrogenação catalítica (p.e. segundo l.h.hylander, Catalytrc Hrdrogenatron over rlatium metais, Academia Press 1967), de modo a obter o derivado annaino-benzilo.

Sxemplos da transformação de grupos hidróxi ou amino ligados a radicais alifáticos ou aromáticos, são as transformações realizadas em solventes adequados como tetrahidro-furanc, dimetóxietano ou drmetrl-sulfóxido, em sistomas aquoqos bifásicos» como p.e. água/diclorometano» na presença de um agente captador de ácidos, como p.e. hidróxido de sódio, hidreto de sódio ou carbonatos alcalinos — 21 —

ou áe terras alcalinas, como p.e. carbonato de sódio, magnésio, potássio ou cálcio, ou poli-(4-vinipiridina) Heillex a temperatura entre 0°G e o jionto cie ebulição do respectivo solvente, mas de preferência entre 2G°C e 60°C, com um substracto da fórmula geral VIII nf-I-lu (¥1X1) na qual 1 representa um radical de hidrocarboneto alifátieo, aromático, aralifético, de cadeia linear, ramificada ou cíclica, com até 20 átomos de carbono, e 3*u representa o grupo funcional terminal desejado, eventualaente na sua forma protegida (BB-OB 34 17 413)· Como exeRplos de compostos da fórmula geral VIII podem citar-seí br(CE₂)₂EH₂, Br(CH₂)₅OE, BrOEgCOOCE^, BrCH^O^Bu, ClGEgOOMiNL₂,

BríCE^GOgC^, BrGEgCOBr, BrGSgCOEHg, ClGEgCGOC^,

ErGiigGõitEtóEg, BrGEg-CE-GE^, Cl^?^>0^(GE₂)^Br, BrGHgCSíH, BrGE< Ch =Gíi ₂, Br GE ₂C Oõ · fs transfro&açCes de grupos carbóxi podem ser feitas, p.e. segundo o método da carbodiiaida (Meser, Eeagents for Organic syntheses 10, 142) através de um anidrido misto /Grg. Brep. Broc. Xnt. 7, 215 (197527ou através de um éster activado (Adv. Qrg.Chem. parte B, 472).

Os ligantes complexantes assim obtidos (bem como os complexos), podem também ser ligados as bio- ou macromoléeulas, das quais se sabe se acumularem nos orgãos ou partes de orgão a examinar» Tais moléculas são p.e. ensim&s, hormonas, polissacáridos tais como dextrano ou amidas, porfirinas, bleomicinas, insulina, prostaglandinas, hormonas esteróides, aaino-açdeares, peptídeos tais como polilisina, proteínas (como p.e. iaunoglobulinas, anticorpos monoelonais lectinas), lipídeos (também sob a forma de lipossomas) e nucleótidos do tipo BIíA ou BEA. Devem salientar-se em especial os conjugados com albuminas, tais como seralbumina humana, anticorpos, como p.e. monoelonais, anticorpos espeeí’ ficos para antigénios associados a tumores ou antimiosina.

Em lugar de macromoléeulas biológicas podem também ser liga- 22 -

dos polímeros sintéticos adequados, tais como polietileno-iminas» poliamidas, poliureias, poliéteres tais como polietileno-glicóis e poli-tiourelas, As composições farmacêuticas formadas a partir destes compostos são adequados p.e. para utilização no diagnóstico de tumores e do enfarte bem como no tratamento de tumores. Os anticorpos monoclonais (p.e. llature 256, 495, 1975) tem relativamente aos anticorpos policlonais, a vantagem de serem sepecíficos de uma determinante de antigénio, de possuirem uma afinidade de ligação definida, de serem homogéneos (desta forma torna-se bastante mais fécil a preparação de compostos puros) e de poderem ser preparados em grandes quantidades em culturas celulares. Como tais são adequados para a representação de tumores anticorpos monoclonais, ou os seus fragmentos Fab e F(ab’)₂* ã^{ue sS}·⁰ P°^r exemplo específicos para os tumores humanos do tracto gastro-intestinal, da mama, do fígado, da bexiga, das glândulas generativas e dos melanomas /ãancer Treatment Bepts. 68. 517, (1984), Bio Sei 54, 150, (188427, ou que são dirigidos contra o antigénio carcinoma-embrional (CSA), corigonadotrofina humana (B-ECC) ou outros antigénio tumoraís, tais como glicoproteínas /New Engl. d, med. 298, 1384 (1975), VS-F 4,351,647/. São também adequados entre outros, os anticorpos anti-miosina, anti-insulina e anti-fibrina (US-3? 4,036,945).

Os carcinomas do cólon podem ser detectados por diagnóstico Bi-JS com o auxílio de conjugados complexados com iões de gadolínio(III) com o anticorpo 17-lA (Centocor, UuA).

Para exames ao fígado ou para o diagnóstico de tumores são adequados p.e, conjugados ou compostos de inclusão com liposomas, que são aplicados p.e. como vesículas unilamelares ou multilamelares de fosfatidil-colina e colesterol,

No caso dos conjugados de anticorpos, a ligação do anticorpo ao complexo ou ligante não pode conduzir â perca ou redução da afinidade e especificidade de ligação do anticorpo ao antigénio.

Isso pode resultar quer da ligação ao componente - 23 de hidrato de carbono na parte Be da glicoproteína ou nos fragmentos Pab ou P(ab’)₂, quer da ligação a átomos de enxofre do anticorpo ou dos fragmentos de anticorpos.

ho primeiro caso há que realizar primeiro uma cisão oxidativa das unidades glicosídeas para geração de grupos f037m.il o susceptíveis de acoplação» Bsta oxidação pode ser feita por via química com agentes oxidantes como p.e, ácido periodíridco, metaperiodato de sódio ou metaperiodato de potássio, segundo métodos conhecidos da líteratu ra (p.e. J. Histochem. and Cytoehem» 22, 1084, 1974) em solução aquosa, em concentrações de 1 a 1O0, de preferência 1 a 20 mg/ml, e com uma concentração do agente oxidante entre 0,001 e 10 M£ol, de preferência 1 a 10 mUol, a um pE de aprox. 4 a 8, uma temperatura entre 0 e 37°C e com uma duração da reacção entre 1$ minutos e 24 horas, A oxidação também pode ser realizada por via ensiaática» p.e» com o auxílio de galactose-oxidase, com uma concentração de enzima de lG-100 unidades/ml, uma concentração do substracto de 1-20 mg/ml, a um pH de 5-8, com uma duração da reacção de 1-8 horas e a uma temperatura de 20-40°G (p.e. J.Biol.Ghem. 234» 445, 1959).

Aos aldeídos gerados por oxidação são ligados complexos ou ligantes com grupas funcionais adequados, tais como p.e. liidrasina» hidrasida, hidroxil-amina, fenil-hidrazina, semicarbazida e tiosemicarbazida, através de reacy ção a 0-37°G, com uma duração da reacção de 1 a 65 horas, a um pE entre aprox. 5,5 e 8, com uma concentração de anticorpos de 0,Ç a 20 mg/ral e uma proporção molar de agente complexante para os aldeídos dos anticorpos de 1:1 a 1000:1 A posterior estabilização do conjugado faz-se através de redução da ligação dupla, p.e» com borohidreto de sódio ou ciano-borohidreto de sódio? o agente redutor é aplicado para tal com um excesso de 10 a 100 vezes (p.e. J. Biol. Chem. 25£, 4359» 1979).

A segunda possibilidade da formação de conjugados de anticorpos parte de uma redução suave das pontes dissulfídricas da molécula de imunoglobulina; desta forma são quebradas as pontes dissulfídricas mais sensíveis existen- 24 -

tes entre as cadeias H da molécula do anticorpo, enquanto que as ligaçães S-S da região que liga o antigénio permanecem intactas, pelo que praticamente não se verifica qualquer redução da afinidade e especificidade de ligação do anticorpo (Eiochem. 18* 2226, 1979, Bandbook of Experimental Immunology, ¥ol* 1, Seeond idition, Blackueel Scientific Publications, London 1975» Ohapter 10), Emseguida, fazem-se reagir estes grupos sulfidrilo livres nas regiães das cadeias inter-B são com grupos funcionais adequados dos agentes complexanfees ou complexos metálicos, a O-57°G, a um pE de aprox. 4-7, e cora uma duração da, reacção de 5 a, 72 horas, por forma a criar uma ligação covalente que não influencie a região de ligação do antigénio no anticorpo. Como grupos reactivos adequados podem citar-se p.e. os grupos halogeno-alquilo, halogena-aeetílo, pmercurio-benzoato, iso cianato, tiol, epéxído, bem como grupos que podem ser submetidos a uma reacção de adição de tlichael, como p.e. mal eimidas e grupos metacrilo (p.e. J.âjaer.Chem.Soc. 101. 5097, 1979).

Era ligação dos fragmentos de anticorpos com os complexos ou ligantes existem ainda uma série de linker bifuncionais adequados, muitas vezes ã venda no mercado (ver p.e. fierce, Bandbook and General Catalogue 1986), que são reactivos tanto em relação aos grupos SE dos fragmentos, como aos grupos aaino ou hidrasino dos complexos.

Como exemplos podem citar-se: m-i-ialeimidobenzoil-I-hidréxi-sncciníaido-éster (BBS), m-Haleimidobensoil-I-sulfo- succinisiido-éster (sulfo-EBS), N-bueeiniaidil-2Z-(iodGscetil)-amino7-benzoato (SXAB), buc cinimidíl-4(B-maleímidometil)-cieioh exaro-1-c arboxilato (SBCC), buccinimidil-4(p-maleimidofenil)-butirato (SBPB),

N-buccinimidil-5-(2-piridilditio)-propionato (SXO),

4-^5-( 2,5-Dioxo~5-pirrolinil) -propionoléxi7-5-oxo-2,5-difenil-2,5-dihidrotiofeno-1,1-diéxido,

Ac etil-alanil-leucil-alanil-aminobenzilo,

Acetamido-p-tioureido-berzilo.

Eodem também ser utilizadas para. a, acoplação, lí- 25 -

gações de tipo não covalonte, podendo contribuir para a ligação tanto ligações iénicas, como as pontes de van der Waals e de hidrogénio» em proporção e potência alternada (principio da fechadura e chave) (p.e» avidina-biotina» antieorpo-antigénio)» São também possíveis compostos de inclusão (host-guest) de complexos mais pequenos em cavidades maiores das maeromoléculas» princípio da acoplação consiste em preparar em primeiro lugar uma macromoléculs, Mxuncional, procedendo à fusão de um hibridoma de anticorpo dirigido contra um antigénio turnoral, com um segundo hibridoma de anticorpo dirigido contra um complexo da presente invenção, ou ligando quimicamente ambos os anticorpos através cie um *linker” (p.e» pelo processo descrito in J.Amer, Chem.Soc. 101» 3097 (1979), ou ligando o anticorpo dirigido contra o antigénio a avidina (ou biotiaa), eventualmeato através de um “linker” £u.J»Hnatovich et al», J.Hucl.ked., 28, 1294 (1987j.7· Bm lugar dos anticorpos podem também ser utilisados os respectivos fragmentos P(ab) ou PCab*)^· Iara a aplicação farmacêutica injecta-se em primeiro lugar a macro molécula bifuncional, que se acumula no local desejado, e depois desfasado no tempo, o composto complexo da presente invenção /êventualmente ligado a biotiaa (ou svidinaj/, que é acoplado in vivo no local de aetuação desejado e alí pode desenvolver 0 seu efeito diagnóstico ou terapêutico» Para além disso, podem também ser utilisados outros métodos de ligação, como p.e» o ⁿBeversible Sadiolabeling’¹ descrito in “Irotein xailoring' poõd tied. Uses* /Sm» Ghem.&oc.Symp./ (1985), 349»

Com a chamada acoplação em fases sólidas dispomos de um método especialmente simples para a preparação de conjugados de anticorpos ou de conjugados de fragmentos de anticorpos: o anticorpo é acoplado a uma fase estacionária (p.e. uma resina de permuta iéniea) que se encontra por exemplo dentro de uma coluna de vidro, X²cr meio de passagem sucessivas através da coluna de unia solução adequada para a geração de grupos aldeídos, lavagem e passagem de uma solução do complexo funcionalisado, e por fim eluição do con- 26 jugado, obtêm-se rendimentos muito elevados do conjugado.

Sste processo permite a produção automática e contínua de quaisquer quantidades de conjugados»

Também outros passos da aeoplação podem ser realizados desta forma.

Assim» é possível por exemplo a preparação de conjugados do fragmento através da sequência redução de papaina/linker bifuncional/eomplexo ou ligaate funcionalisado.

Cs compostos as-sim obtidos são em seguida purificados de preferência por eromatografia sobre resinas de permuta iónica, num aparelho de croiaatografia líquida “fast protein”.

A preparação dos complexos metálicos a que se refere a presente invenção faz-se através dos processos descrito na 1'atente alemã 34 01 052» dissolvendo ou suspendendo o óxido metálico ou o cal metálico (y.s. o nitrato, acetato, carbonato, cloreto ou sulfato) do olemento com os números de ordem 21-29, 42, 44, 57-83 em água e/ou num álcool de cadeia curta (como metanol» etanol ou isopropanol) e fazendo reagir com a solução eu suspensão da quantidade equivalente do ligaate formador do complexo» e se desejado, subs tituindo em seguida átomos ácidos de hidrogénio presentes por catiOes de bases inorgânicas e/ou orgânicas ou de aainoácidos»

A introdução dos iões metálicos desejados pode ser feita tanto antes, coso depois da eliminação dos grupos de protecção dos grupos hidróxi ou funcionais, ou antes ou depois da geração de grupos funcionais e da ligação a uma macro- ou bi o-molécula»

A neutralização de eventuais grupos carboxílicos livres ainda presentes fas-se cora o auxílio de bases inorgânicas (p.e. hiclróxidos, carbonatos ou bicarbonatos), por exemplo de sódio, potássio» lítio» magnésio ou cálcio e/ou bases orgânicas tais como, entre outras, ©minas primárias» secundárias e terciárias, como p.e. etanolamina, morfolina, glucamina» H-metil-glueamina» ΕΓ,Η-dimetil-glueasiin.©, bem como aminoácidos corno p.e» lisina» arginina e ornitína» ou de amidas de aminoácidos originalmente neutros ou ácidos»

Σ’ara preparação dos compostos complexos neutros pode juntar-se por exemplo aos sais complexos ácidos, em solução ou suspensão aciuosa, a quantidade das bases desejadas até se atingir o ponto neutro* A solução assim obtida pode depois ser evaporada ã secura no vácuo* Por vezes é vantajoso precipitar os sais neutros formados, através da adição de solventes miscíveis com água, como p.e. álcoois t de cadeia curta (metanol, etanol, isopropanol e outros), cetonas de cadeia curta (acetona e outras), éteres polares (tetraliidro-furano, dioxano, 1—2»dimet<5xi-etano e outros), por forma a obter assim cristalizados fáceis de isolar e de purificar. Com especialmente vantajosa revelou-se a adição da base desejada â mistura de reacção logo durante a formação dos complexos» poupando-se assim um i^asso do processo.

íío caso de os compostos complexos adidos conterem vários grupos ácidos livres, é por veses indicada a formação de sais mistos, contendo como contra-iães tanto eatiSes orgânicos como inorgânicos*

Isso pode ser feito, p.e. fazendo reagir o ligante formador dos complexos em suspensão ou solução aquosa, com o óxido ou sal do elemento fornecedor do ião central» e metade da quantidade de base orgânica necessária para a neutralização, isolando depois o sal complexo formado» e se desejado purificando—o, e depois fazendo-se reagir com a quantidade necessária de base inorgânica até neutralização completa, A sequência da adição das bases pode também ser a inversa*

Uma outra possibilidade de obter os compostos complexos neutos consiste em transformar os grupos ácidos remanescentes no complexo» total ou parcialmente em, p.e.» ésteres ou smidas.

Isso pode ser realizado através de reacção posterior do complexo já pronto (p.e* por meio de transformação total dos grupos carboxílicos livres com dimetil—sulfato)·

Os conjugados de anticorpos e complexo são dializados antes da aplicação in vivo» após incubação com um • agente complexante fraco» como p.e, citrato de sódio» etile28

no-diaminotetra-aeetato de sódio, a fim de eliminar átomos metálicos ligados de forma fraca,

A preparação das composições farmacêuticas a que se refere a presente invenção faz-se igualaente pelos processos em si já conhecidos, suspendendo ou dissolvendo os compostos complexos da presente invenção em meio aquoso — eventualmente juntando os aditivos usuais em galénica — e eventualmente esterilizando em seguida a solução ou suspensão. Aditivos adequados são p.e. os tampões fisiologicamente toleráveis (p»e. trometamina), agentes formadores de complexos (p.e. ácido dietileno-triamino-peataaeêtieo) ou * se necessário - electrólitos como p.e» cloreto de sódio, ou - se necessário - anti-oxidantes como p.e. ácido ascórbíco.

Mo caso de serem desejáveis para a administração parentárica ou outros fins, soluções ou suspensões das composições a que se refere a presente invenção em água ou solução salina fisiológica, são misturadas com um ou mais dos adjuvantes usuais em galánica (p.e. metil-eelulose, lactose, manitol) e/ou agentes tensio-aetivos (p.e. lectinas, fween ^K » hyrj' ^J e/ou agentes aromatizastes para correcção do sabor (p.e. óleos essenciais)*

Bm princípio é também possível a preparação das composições farmacêuticas a que se refere a presente invenção sem isolar os sais complexos. Im qualquer dos casos há que ter o máximo cuidado na formação dos quelatos, por forma a que os sais e soluções salinas da presente invenção sejam praticamente isentos de iões metálicos não coaplexados, que possam ser tóxicos.

Isso pode ser assegurado p.e. com o auxílio de indicadores corados como laranja de xilenol, através de titulações de controle durante o processo de preparação. Assim, a presente invenção refere-se também a um processo para preparação dos compostos complexos e dos seus sais. Como forma de segurança última resta a purificação do sal complexo isolado.

As composições farmacêuticas a que se refere a presente invenção contêm de preferência 0,1 uHol - 1 Ilol/l de sal complexo, e são doseadas el geral ea quantidades de

0,1 m.ol - 5 milol/hg. Bestinaa-se s, aplicação parentérica e entérica. Os compostos complexos a que se refere a presente invenção são utilizadosi

1. para diagnósticos por 5ΊΗ e BS, sob a forma dos seus complexos com iões dos elementos eoa os números de ordem 21-29, 42» 44 e 57-83;

2. para o radio-diagnóstico e rsdío-terapêiitiea» sob a forma dos seus complexos com os radio-isótopos dos elementos com os números de ordem 27, 29, 51, 32» 37-39, 43, 49, 62, 70, 75 e 77.

As composições farmacêuticas a que se refere a presente invenção satisfazem as numerosas exigências para se adequarem como meio de contraste para a tomografia de resonância magnética nuclear (7). Assim, são excepeionalmente adequados para» após administração oral ou parentérica, melhorarem através do aumento da intensidade do sinal» a expressão da imagem obtida com o auxílio do fomógrafo de resonância magnética nuclear, Para alem disso» apresentam a elevada eficácia necessária para sobrecarregar o organismo com as quantidades mínimas possíveis de compostos estranhos, e a boa tolerância necessária para manter o carácter não invasivo dos exames.

A boa solubilidade em água e a reduzida osmolalidade das composições a que se refere a presente invenção permitem a preparação de soluções sXtgsneate concentradas» por forma a manter a sobrecarga de volume do sistema circulatório dentre de limites rascáveis» i.e., os meies de diagnóstico para a I-d-117 têm de ser 100 a 1000 vezes mais facilmente solúveis em água do que para a espeetroscopia por Ri«íN» Para além disso» as composições a que se refere a presente invenção apresentam não só uma elevada estabilidade in vitro, mas também uma estabilidade surpreendeutemente elevada in vivo, pelo que uma libertação ou um permuta dos iões não ligados de forma covslente nos complexos - e por si tóxicos - durante o período de tempo em que os novos meios de contraste são novaaente eliminados, só se ias de forma extremamente lenta.

w 30 ~

Em geral, as composições a que se refere a presente invenção são doseadas para utilização como seios de diagnóstico para SEE, em quantidades de 0,0001 - 5 maol/Ag, de preferência 0,005-0,5 m£ol/£g« Os pormenores da utilização são discutidos p.e. in K.J. Winmann et al.» Am.J.of Eoentgenology 142» 619 (1984)*

Doses espeeialmente reduzidas (inferiores a 1 mg/ Kg de peso corporal) de meios de diagnóstico específicos para EEK são utilizadas p.e* para detenção de tumores e do enfarte do miocãrdio.

Para alem disso, os compostos complexos e que se refere a presente invenção podem ser utilizados com vantagem como reagentes de susceptibilidade e como reagentes «shift para a espectros copia de Bua in vivo.

As composições a que se refere a presente invenção são também adequadas como meio de radio-diagnóstido, graças ãs suas propriedades radioactivas favoráveis e ã boa estabilidade dos compostos complexos nelas contidos. Pormenores sobre a sua aplicação e dosagens são descritos, p.e», in Kadiotracers for aedical Applications% CBG-Press, Boca Eaton, florida.

Um outro método de visualização de imagens com radío-isótopos é a tomografia de emissão de positrões, que utiliza isótopos emissores de positrões, tais como p.e. ⁴³tíc, ⁴⁴ac, ⁵²Pe, ⁵⁵Co e ^6SGa (Beiss, Ϊ.Β.; Phelps, Li.Bjj Positron Emissíon Tomography of Brain, Springer Verlag Eerlin, Eeidelberg, iíew York, 1983).

Os compostos a que se refere a presente invenção podem também ser utilizados na terapêutica radio-imunológica ou com radiações. Esta distingue-se dos métodos de diagnóstico apenas pela quantidade e tipo do isótopo utilizado 0 seu objectivo reside na destruição das células turno rais através de radiações de Onda curta, ricas e energia, com um alcance tanto quanto possível reduzido. Iões E-enissores adequados são p.e. ⁴⁶Sc, ⁴⁷Sc, ⁴⁸Sc, ⁷²Ga, ⁷³0a e ⁹⁰T. iões x-emissores adequados, com tempos de semi-vida reduzidos, são p.e. ²¹¹Bi, ²ⁱ²Bi, ²¹^Bi e ²¹⁴Si, dando-se preferência

^*1 ο ao ‘‘Bi. Um ião emissor de fotões e electrões adequado é o ¹·^>εθά, cue pode ser obtido a partir fie ‘^Gá por meio de captação de neutrões*

Ho caso de a composição farmacêutica a que se refere a presente invenção se destinar a ser utilizada na variante proposta por íul* fíills et al. £Sature Vol, 33*6, (1988), pág. 7877 para a terapêutica por radiações, o ião central tem de derivar de ua isótopo de UõBbauer, como p.e» ^Pe ou ^^Bu.

Ha aplicação in vivo cias composições farmacêuticas a que se refere a presente invenção, estas podem ser administradas em conjunto com ua exeipiente adequado, como p.e» soro ou solução salina fisiológica, e em conjunto com usa outra proteína, como p.e. albumina sêricva humana. A dosagem depende do tipo de perturbação celular, do ião metálico utilizado e do tipo do método, p.e» braqui-terapêutica,

As composições farmacêuticas a que se refere a presente invenção são aplicadas por via parentériea, de preferência por via i.v. * Pormenores da aplicação fie meios radio-terapêi¹ ticos são discutidos p.e. in P.w.hozak et al., ΙΙΒΡΒΟ, Outubro fie 1986, 262.

As composições farmacêuticas a que se refere a presente invenção são excepeionelmente indicadas como seios de contraste para radiologia, sendo em especial de salientar que com elas não se observam as conhecidas reacções anafiláticas dos meios fie contraste contendo iodo em exames bioquímico-farmacolólieos. São especialmente úteis devido ãs vantagens propriedades de absorção nas zonas de tensão do tubo mais elevadas para as técnicas fie substraeções»

Em geral, as composições farmacêuticas a que se re fere a presente invenção são fioseafias para a utilização como meio de contraste rafiiológieo, em analogia com por exemplo o meglumin-fiiatrizoato, em quaatidaes de 0,1-5 m&ol/Kg, fie preferência 0,25-1 mEol/Eg.

Pormenores fia utilização fie meios de fiignóstico radiológicos são discutidos p.e. in Barhe, Koentgenkontras; tmittel, O.fhieme, Beipzig (1970) e P.fhurn, S. Bttcheler 52

Einftíhrung in die Boentgendiagnostik”, G.-lhieme» Stuttgart Sev York (1977).

Ka globalidade, conseguiu-se sintetizar nos agentes complexantes, complexos metálicos e sais de complexos metálicos, que abrem novas possibilidades na medicina diagnóstica e terapêutica. Sobretudo o desenvolvimento de novos processos geradores de imagens no campo do diagnóstico médico torna desejável este desenvolvimento.

Os exemplos seguintes destinam-se a melhor ilustrar os objectos da presente invenção.

EXEEP1G 1

a) 3,6,9-tris^dihidro-2 (3E) -furanona-3-ilT-3,6,9,15-tetraasabiciclo^5.3.l/pentadeca-l(15),11,13-trieno

A19 g (48,48 mmol) de 3,6,9,15-tetraazabiciclo^ 3.l7-pentadeca-l(15),ll,13-trieno, 33,5 g (242,38 mmol) de carbonato de potássio e 805 mg (4,85 mmol) de iodeto de potássio em 200 ml de acetonitrilo, juntar 40 g (242,38 mmol) de x-bromo-S-butirolactona. ferver esta mistura sob refluxo durante 48 horas. Evaporar ã secura no vácuo, iletomar o resíduo em 5000e cloreto de metileno e extrair 3x com 150 ml de água. Secar a fase orgânica sobre sulfato de magnésio e evaporar no vácuo. Purificar o resíduo através de cromatografia sobre silicagel (eluente: cloreto de metileno/metanol 15:1).

Eendimentoí 7,11 g (32$ do valor teórico) de um óleo ligeiramente amarelado, que solidifica depois de repousar. Análise:

C 60,25 E 6,59 N 12,22 (calculado)

C 60,18 H 6,64 li 12,17 (obtido)

b) Complexo de gadolínio do ácido 3,6,9,15-tetraazabiciclo/5.3.l7-P entadeca-1(15),11,13-trieno-3,6,9-tris/x-(2-hidróxietil)-acét1co7

Dissolver 6,7 g (14,61 asiol) do composto do exemplo la) em 50 ml de água desionizada e acertar a pE 5,5 adicionando HC1 llí. Juntar 2,65 £ (7,3 mmol) de óxido de

- 33 gadolínio e ferver 3 horas sob refluxo. Agitar a solução arrefecida durante 1 h com respectivamente 10 ml de resina ácida de permuta iónica (IB 120) e 10 ml de resina alcalina de permuta iênica (ISA 410). Filtrar as resinas e ferver o filtrado durante lh sobre carvão activo. Após filtração e liofilização obtêm-se 9,25 g (950 do valor teórico) de um pó amorfo, incolor (contêm 8,30 de água seg. a análise)» Análise (corrigida para água):

C 41,43 H 4,99 E 8,40 Gd 23,58 (calculado)

C 41,35 K 5,09 N 8,34 Gd 23,50 (obtido)

c) Complexo de európío do ácido 3,6,9,15-tetraaKabicicIo/5.3»l7-pentadeca-l (15) ,11,13-trieno-3,6,9-tris/x-C 2-hidróxietil)-acético/

Por processo análogo obtém-se com ^X^^XSu₂0^ o respectivo complexo de európio.

Análise (corrigida para água):

C 41,76 E 5,03 N 8,47 Eu 22,97 (calculado)

C 41,68 H 5,12 E 8,39 Bu 22,88 (obtido)

EXEMPLO 2

a) ácido 3,6,9,15-tetraazabiciclo-/J.3.l7-pentadeca*l(15),11 13-trieno-3,6,9-tris/x-(benziloximetil)-acético/

Aquecer durante 48 h a 7G°C 10 g (48,48 mmol) de

3,6,9,15-tetraazabiciclo/9,3,l/-pentadeea-l (15),11,13-trieno e 114,71 g (484,8 mmol) de 2-cloro-3-bensilóxi-propionato de sódio em 200 ml água. Diluir a solução com 400 ml d.e água e juntar 300 ml de EC1 2N< Extrair 5x com respectivamente 200 ml de cloreto de metileno* Evaporar a fase aquosa no vácuo. Dissolver o resíduo em 300 ml de etanol e filtrar o cloreto de sódio. Evaporar no vácuo e eromatografar o óleo remanescente sobre silieagel (eluente: etanol/água s= 20:1). Evaporar as fracções principais no vácuo e dissolver em 50 ml de HC1 a 50. Vazar a solução sobre uma coluna cheia com Beillex («poli-4-vinilpiridina) e eluir o composto com uma mistura de água/metanol 3:1* Depois de evaporar as fracções principais, obtêm-se 12,93 £ (360 do valor teórico) de um composto sólido fortemente higroscópio© (9,1$ de água seg. análise)*

Análise (corrigida para água):

C 66,47 H 6,55 H 7,56 (calculado)

C 66,58 H 6,60 E 7,48 (obtido)

b) Acido 5,6,9,l5-tetraazabiciclo-^.5*l7-pentadeca-l(15)11,15-trieno~5,ó, 9-tris^x-(hidroximetÍl)-aeético7

Dissolver 12,6 g (17,01 mmol) do composto do exemplo 2a) numa mistura de 200 ml de metanol/100 ml de água e juntar 4 g de catalizador de paládio (10$ de Pd sobre carvão activo). Eidrogenar durante 5 h a 50°C. Eiltar o catalizador e evaporar no vácuo. Rendimento: 7,84 g (98$ do valor teórico) de um composto gelatinoso (6,9$ de água seg. análise)»

Análise (corrigida para água):

C 51,06 E 6,45 E 11,91 (calculado)

50,97 E 6,51 E 11,81 (obtido)

c) Complexo de gadolínio do ácido 5,6,9,15-tetraazabiciclo /5»5 · l7-P entadeca-1 ¢15),11»15-tri eno-5,6,9«t ris£x- (h í dróxi inetil)«~aeetico7

Dissolver 7,5 g (15,94 mmol) do composto do exem pio 2b) em 50 ml de água desionisada e juntar 2,89 g (7,97 mol) de óxido de gadolínio. Aquecer 5 horas a 90°0. Agitar a solução arrefecida durante lha temperatura ambiente, com respectivamente 2 ml de resina ácida de permuta iónica (IE 120) e 2 ml de resina alcalina de permuta iónica (ISA 410), Eiltar as resinas e ferver o filtrado durante pouco tempo com carvão activo» Após filtração e liofilízação obtêm-se 9,56 g (96$ do valor teórico) de um pó amorfo, in color (contém 8,1$ de água seg» a análise).

Análise (corrigida para água):

C 58,45 E 4,56 1 8,97 Gd

C 58,57 E 4,45 E 8,89 Gd

25,17 (calculado) 25,06 (obtido)

DXBEPDO 5

a) 3,6t9>15~letraazablcielo«/§,3*l7~peutadeea*l(15),11,13tri eno*3 ,6,9-tris/^x-(l,2-0-isopropilideno-l,2-dihidroxi-etil)acetato/ de etilo

Ferver durante 48 h sob refluxo uma mistura de 15 g (72,21 mmol) de 3,6,9,15-tetraazabiciclo^f.3.l/-penta* deca-l(15),11,13-trieno, 156,38 g (436,28 mmol) de 3,4*0* -isopropilideno*2-(p-tolilsulfonil) 3 ,4*dibidroxí-butirato de etilo, 60,3 g (436,28 mmol) de carbonato de potássio e 2,41 ê (14,54 mmol) de iodeto de potássio em 400 ml de ace* tonitrilo. Evaporar a secura no vácuo e retomar o resíduo em 500 ml de cloreto de metíleao. Extrair 3x com 200 ml de água e secar a fase orgânica sobre sulfato de magnésio. Depois de evaporar, cromatografar o óleo remanescente através de cromatografia sobre silicagel (elucnte; cloreto de meti* leno/hexano/metanolss 20s4íl).

Fendimento; 17,24 g <31/3 do valor teórico) de um óleo amare lo, viscoso,

Análisej

C 59,67 E 7,91 0 7,32 (calculado)

C 59,59 E 7,98 H 7,27 (obtido)

b) ácido 3»6»9»15*tetraazabiciclo~^§.3,l7-pentadeca-l(15), 11,13-tri eno-3»6,9-tris^x*(1,2-dihidroxi*etil)-acético/

Dissolver 16,5 g (21,57 mmol) do composto do exemplo 3a) em 100 ml de etanol e juntar 50 ml de DaOH 5E. Ferver 10 b sob refluxo e evaporar no vácuo. Dissolver o resíduo em 250 ml de metanol e filtrar o cloreto de sódio. Evaporar o filtrado no vácuo e purificar o resíduo sobre resina de permuta ióníca, como segue; Dissolver em 50 ml de água e vazar a solução numa coluna de resina de permuta ca* tiónica (IH 120). Depois de vaiar com água, eluir o ligante com solução aquosa de amoníaco 0,51. Evaporar as fracçSes principais, retomar num pouco de água e vazar sobre uma coluna de resina de permuta iónica (IEA 67). lavar primeiro com água e depois eluir com ácido fórmico 0,5 E. Evaporar á secura no vácuo e dissolver o resíduo num pouco de metanol quente. 0 composto em epígrafe cristaliza adicionando

cuidadosamente acetona, e arrefecendo em banho de gelo. Rendimento: 8,22 g (680 do valor teórico) de um composto gelatinoso (9,20 de água seg» análise).

Análise (corrigida para água)?

49,28 li 6,47 Π 9,99 (calculado)

C 49,17 H 6,56 K 9,88 (obtido)

C) Complexo de gadolínio do ácido 3,6,9,15-tetraasabiciclo/5.2.l7-pent adeca-1(15),11,13-1rieno-3, 6,9-tris/x-(1,2-dihidroxietil)-acético/

Dissolver 8 g (14,27 mmol) do composto do exemplo 3b) em 60 ml de água desionizada e juntar 2,58 g (7,135 mmol) de óxido de gadolínio. Aquecer 3 horas a 9C^,õ0. Agitar a solução arrefecida durante lha temperature ambiente, com respectivaaente 2 ml de resina ácida de permuta iónica (IS 120) e 2 ml de resina alcalina (IRA 410). filtrar as resinas e ferver o filtrado com carvão activo» Após filtração e liofilização obtêm-se 9,89 g (970 do valor teórico) de um pó amorfo, incolor (contém 7,30 de água seg. a análise).

Análise (corrigida para água):

C 38,65 H 4,65 1 7,84 Gd 22,00 (calculado)

C 38,54 E 4,74 Is 7,78 Gd 21,92 (obtido)

BXEiuílQ 4

a) 2,2* ,6,6*-^ffetra{hidroximetil)-4,4*-bipiridina

Dissolver 50 g (128,77 mmol) de 2,2*,6,6*-tetra(metoxicarboxil)-4,4’-bipiridina numa mistura de 400 ml de dioxano/400 ml de água e juntar pouco a pouco 48,71 g (1,28 mol) de borohidreto de sódio. Agitar durante a noite a temperatura ambiente» Acidificar a solução coa HC1 5Π c evaporar à secura» fuspender o resíduo ea 1 de BaOE 1B e extrair 3x com 250 ml de clorofórmio. Secar as fases orgânicas sobre sulfato de magnésio e evaporar no vácuo. Becristalizar o resíduo coa etanol/éter.

Rendimento?29,53 g (830 do valor teórico) de cristais incolores »

5,84 δ 10,14 (calculado)

5,93 δ 10,06 (obtido)

Análise:

C 60,86 H C 60,77 fí

b) 2,2»,6,6¹-TetraCclorometil)-4»4’-bipiridina

Perver sob refluxo durante 5 h, 29 g (104,96 mmol) do composto do exemplo 4a) em 250 g (2,1 mmol) de cloreto de tionilo. Evaporar à secura e retomar o resíduo em 200 ml de solução de soda concentrada. Extrair 2x com 150 ml de cloreto de metileno. Secar as fases orgânicas sobre sulfato de magnésio e evaporar no vácuo. lie cristalizar o resíduo com éter/hexano.

Rendimento: 35,54 g (94$ do valor teórico) de cristais incolores.

Análise:

C 48,03 H 3,45 δ 8,08 Gd 40,51 (calculado)

C 48,10 H 3,40 δ 7,96 Gd 40,59 (obtido)

c) 13,13* -Bis/3,6,9-tris(p-tolisulfonil)-3,6»9,15-tetraazabiciclo-/9.3»l7-pentadeea-l(15),11,13-trieno7

A 118,43 g (194,25 mmol) de E,M»*-sal dissódio de δ,δ* ,K* ’-tris(ptolilsulfonil)-dietilenotriamina em 1600 ml de dimetilformamida juntar gota a gota a 1CC°0 e ao longo de 4 horas, uma solução de 34 g (97,12 mmol) do composto do exemplo 4b) (dissolvidos em 700 ml de dimetilformamida). Agitar durante a noite a 1O0°C. A solução quente juntar gota a gota 2 1 de água e deixar arrefecer a O°0, Eiltrar o precipitado por aspiração e lavar com água. Depois de secar no vácuo (60°C), recristalizar com acetonitrilo. Obtêm-se 79,13 g (61$ do valor teórico) de um pó creme.

Análise:

C 57,55 H 5,28 δ 8,39 S 14,40 (calculado)

C 57,47 H 5,35 δ 8,31 S 14,32 (obtido)

d) 13,13’-Bis/3,6,9,15-tetraazabiciclo-/^,3,l7-pentadeca-l(15),11,13-trieno7 oetahidro-suXfat©

Peitar 79 g (59,15 mmol) do composto do exemplo 4c) em 270 ml de ácido sulfúrico conc. e agitar 48 M a 100°C. Arrefecer a 0°C e juntar gota a gota 1,35 1 de éter absoluto. filtrar o precipitado por aspiração e agitar em 500 ml de metanol» Depois de filtrar e evaporar no vácuo obtêm-se

65,74 g (93% do valor teórico) derrete ao ar. Análise s	de um composto sólido que
C 22,11 E 4,22	E	9,38 0	21,46	(calculado)
C 22,04 E 4,33	E	4,33 S	21,38	(obtido)

e) 13,13 * -Bis^, 6,5 jlS-tetraasabieiclQ-^. 3»l7*-pcntadeca«l (15)>ll»13-trieno7

Dissolver 65,5 g (54τθ0 msol) do composto do exemplo 4d) em 100 ml de *água e acertar a pH 13 com EaOE a 32%. Extrair 3x com 2ÇO ml de tolueno quente» ferver as fases de tolueno reunidas durante 1 h com 20 g de hidróxido de sódio finamente pulverizado. filtrar e evaporar o filtrado ã secura» Rendimentos 21,6 g (96% do valor teórico) de um composto sólido ligeiramente amarelado.

Análises

C 64,36 E 8,35 H 27,29 (calculado)

C 64,27 E 8,44 li 27,22 (obtido)

f) Ácido 13»13^,-bis£3,6,9»15-tetraazabicielo-^5.3«x7»pentadeca-l(15),ll,13*trieno-3,6,9-tris^x-(bensiloximetil)-acético7

Aquecer durante 48 h a 70°0 21,5 g (52,37 mmol) do composto do exemplo 4e) e 247,8 g (1,05 mol) de 2-cloro-3-bensilóxi-propionato de sódio em 400 ml água. Diluir a solução com 800 ml de água e juntar 600 al de H01 211» Bxtrair 5x com respectivamente 300 ml de cloreto de metileno. Svaporar a fase aquosa no vácuo. Dissolver o resíduo em 500 ml de etanol e filtrar o cloreto de sódio» Evaporar no vácuo e cromatografar o resíduo sobre sílícagel (eluente: etanol/ água « 20sl}* Evaporar as fracçSes principais no vácuo e dissolver em 100 ml de EC1 a 5%. Vazar a solução sobre uma coluna cheia com Eeillex^(«poli-4-vinilpiridina) e eluír o composto com uma mistura de água/metanol 2:1. Depois de eva-

porar as fracçães principais, obtêm-se 20,92 g (27/ fio valor teórico) fie um composto sólido fortemente higroscópios (8,1/ de água seg. análise)·

Análise (corrigida para água):

C 66,56 H 6,40 H 7,57 (calculado)

C 66,47 H 6,51 E 7,48 (obtido)

g) Ácido 13,13*-bis/3,6,9,15-tetraazabieiolo-^.3.1/-pentadeca-l(15),ll,13*trieno-3,6,9-tris£x-(hidroximefil)-acético7

Dissolver 20,5 g (13,85 mmol) do composto do exemplo 4£) numa mistura de 300 ml de metanol/150 ml de água e juntar 7 g de catalisador de paládio (10/ de j?d sobre carvão activo), Hidrogenar durante 5 h a 50°C. Piltrar o catalisador e evaporar no vácuo. Uendimento: 12,62 g (97/ do valor teórico) de um composto gelatinoso (8,5/ de agua seg» análise) ·

Análise (corrigida para água):

C 51,17 H 6,23 E 11,93 (calculado)

C 51,07 E 6,31 E 11,87 (obtido)

h) Complexo de gadolínio do ácido 13,13*~bis^3,6,9,15-tetraasabi ci clo-^5 ·3 *l7-P ent adec a-1 (15), 11,13-tri eno-3,6,9-tris ^x-(h idroximet il}-acé t ico/

Dissolver 12 g (12,78 mmol) do composto do exemplo 4g) em 80 ml de água desionisada s juntar 4,63 g (12,78 mmol) de Óxido de gadolínio. Aquecer 3 horas a 9C°C. Agitar a solução arrefecida durante lha temperatura ambiente, com respectivamente 5 ml de resina ácida de permuta iónica (XE 120) e 5ml de resina alcalina (ISA 410). filtrar as resinas e ferver o filtrado rapidamente com carvão activo» Após filtração e liofilização obtêm-se 15,3 g’ (96/ do valor teórico) de um pó amorfo, inclor (contém 9,3/ de água seg. a análise) Análise (corrigida para água):

38,52 E 4,20 K 8,98 Gd 25,21 (calculado)

C 38,46 H 4,28 1 8,91 6d 25,14 (obtido)

EXEMPLO 5

a) Trans-5-(p-tolisulfcnil )-amíno-6-(p-tolilsulfonilóxi)-2,2-dimetil-1,3*dioxepan

A uma solução de 100 g de trans-6-amino-2,3-dioxepan-5-ol em 903 ml de piridina, juntar a -5° - 0°C e agitando sempre, 295,67 g de cloreto de p-tolil-sulfonilo, a pouco e pouco· Deixar repousar durante 72 horas a +4°0 e depois introduzir a mistura em 10 1 de água com gelo, agitando bem, Depois de filtrar por aspiração e de lavar o resíduo com água, secar o resíduo em estufa a 50°0 e 200 Torr durante 48 horas· Para purificar, recristalizar o composto bruto em 5 1 de dioxano· Obtêm-se 196 fe do composto em epígrafe sob a forma de pó branco* p.f» 200-202°0.

b) bal monossódico de 1Ϊ-/2-(ΐϊ-tolisúlíonilaminoJ-etil/^ptolisulfonsmida

Suspender 150 g de N-£2-(Xí-tolisulfonilamino)-etil7-p*tolilsulfonamida em 1,25 1 de etanol, ferver sob refluxo a adicionar gota a gota uma solução de 10,3 g de sódio em 300 ml de etanol, formando assim uma solução· Be* £ois de arrefecer, precipita o composto em epígrafe* Filtrai* por aspiração, lavar o precipitado com etanol e secar a 50°C e 200 Torr· Obtêm-se 119 g do composto em epígrafe sob a forma de pó branco·

c) Cis-2,2-Dimetil-’5~£M-(p-tolílsulfonil)-amino7-6“/S'-(p-tolilsulfonil)-Π-(N*-2-p-tolilsulf onilaminometil27-l*3-dioxepan

Ouspender 116 g do sal monossódico do exemplo 5b) em 2,66 1 de dimetil-foraamida. A 100°0 juntar gota a gota 141 g de trans-5-(p-tolilsulfonil)-amino-6-(p-tolilsulfonilóxi)-2,2-dimetíl-l,3~dioxepan em 1,5 1 de dimetil-formamida e agitar durante 5 h a 12O°0 de temperatura do banho# Evaporar depois a solução de reacção no vácuo, até obter 1 litro, e diluir com 10 de água com gelo» Filtrar por aspiração, lavar o precipitado com água e secar a 50°C e 200 Torr. Obtêm?se 182 g do composto em epígrafe bruto, que para purificação é fervido com 1,85 1 de etanol. Depois de

filtrar e secar, obtêm-se 125 g do composto em epígrafe sob a forma de pó branco* p.f,: 190-194°0»

d) Sal dissódico de cís-2,2-dirâetil-5-/J^-(p-iolilsulfonil)~ -amino7-6-/J-(p-tolilsulfonil)-Π-(Π * -2-p-tolilsulfonilaaínometiliZ-l»3-dioxepan

Suspender 87,8 g do composto do exemplo 5c) em 410 ml de etsnol, aquecer à fervura e juntar gota a gota uma solução de 6,67 g de sódio em 200 Im de etanol# Arrefecer em banho de gelo, juntar 450 ml de éter e filtrar o precipitado por aspiração. Secar a 80°0 e 200 torr# Obtêm-se 91 g do composto em epígrafe sob a forma de pó branco#

e) Acetonída de 4,5-bis(hidroxemetil)-3,6»9-tritosilsulfonil-3,6,9, 15-t et raazabicielo^· 3# l/p ent adeca-1 (15} ,11,13-trieno

Dissolver 78,75 do sal dissódico do exemplo Çd) em 880 ml de dimetil-formamida, aquecer a 100°0 e juntar gota a gota uma solução de 19,53 g de bis-(2,6-clorometil)-piridina em 360 ml de dimetil-formsmida, aquecer ainda durante 5 h a 12O°C e evaporar no vácuo até obter 300 ml» Agitar a solução em 5 1 de água coa gelo» filtrar por aspiração, lavar p precipitado com água e secar. Kecristalisar o composto bruto com 700 ml de dioxano e obtêm-se 45 g do composto em epógrafe bruto sob a forma de pó branco» B.f.: 244-250°C*

f) Acetonída de 4,5-bis(hidroximetil)-3,6,9,15-tetraazabiciclo£5 ♦5»l7p entadeca-1(15),11,13-trieao

A 260 ml de amoníaco líquido juntar uma suspensão de 20 g do composto obtido ao exemplo 5e) em 140 ml de tetràhidrofurano, agitar em banho de gelo a -$0°C e juntar pouco a pouco um total de 14,4 g de sódio. Agitar durante 5 h a -60°G, retirar o banho de gelo e juntar gota a gota 50 ml de etanolj deixar evaporar o amoníaco, evaporar a secura no vácuo, e purificar o resíduo por cromatígrafía sobre silicagel. Aluir com clorofórmio/etanol/solução conc. de amoníaco (5:1:0,5) e obtêm-se assim 5,5° £ do composto em epígrafe sob a forma de óleo*

Análises

C 62,72 K 8,55 E 18,29 (calculado)

G 62,51 E 8,41 E 18,45 (obtido)

g) Acetonida de 4,Ç-bis(hidroxinetil)-5,6,9,15-tetraaEabiciclo^J.5.l7pentadeca-l(15),11,X5-irieno~5,6,9-tris(acetato de tert.Lutílo)

A uma solução de 4 g do composto do exemplo lf) em 100 ml de tetráhiCro-íUrano e 10 ml de água, juntar 5,51 g de carbonato de sódio anidro e 10,2 g de bromo-acetato de tert.-butilo, e agitar 5 h a 50°C» filtrar, evaporar no vácuo e agutar o resíduo oleoso com 50 ml de hexano, e decantar. Purificar o resíduo por cromatografia sobre 100 g de silicagel com dicloro-notano (1-100 de etanol). Obtêm-se 5,7 g do composto em epígrafe sob a forma de óleo amarelo claro.

h) ácido 4,5—bis(hidroximetil)-5,6,9,15-tetraaaabiciclo-^.

5.l7-pentadeca-l(15),11,15-tríeno-5,6,9-tric-acético

Agitar durante 5 h a 50°C uma mistura de 5,5 £ do éster do exemplo Ig) e 50 nl de ácido trifluor-acético. Juntar 10 ml de água, agitai’ mais 2 h a 5G°C o evaporar a secura no vácuo. Dissolver o resíduo em 20 ml de água e passai a solução atravóe de uma coluna com 100 ml de Aeíllex^s («poli-4-vinilpiridina) e eluir com 100 ml de água, e eveporar o eluado no vácuo. Obtêm-se um pó amorfo, que contém ainda 8,50 de água. Aendimento: 2,90 g.

Análise:

C 51,81 h 6,41 H 12,72 (calculado)

C 51,65 E 6,70 s 12,51 (obtido)

i) Complexo de gadolínio do ácido 4,5-bis(hídroximetil)-5,6,

9,15-tetraazabiciclo^I.3.i7pentadeca-l(15),ll,15-trieno-5,6, 9-tris-aeético

Agitar durante 5 n a 90°0, 2 g (teor de humidade

8,5^, corresponde a 1,83 g = 4,29 mmol) de ácido 4,5-bis(bidroximetil)-3»6»9,15-tetraasabiciclo^y.3.1/Pentadeca-1(15), ll,13-trieno-3,6,9-tris-acêtico (preparação ver exemplo 5b) e 778 mg de óxido de gadolínio com 50 sil de água, Depois de arrefecer, agitar sucessivamente com 10 mi de resina de permuta anióaica 2BÀ-410 e 10 ml de resina de permuta catiónica IRC-50» filtrar e liofilisar a solução» Obtêm-se 2,35 g do composto em epígrafe, sob a forma de pó solto, branco» teor de humidade seg. titulação de Earl-Piseherj 7,3/3.

Análise (após eorrecção do teor de água): ^^9^25^^4^8 C 38,38 Π 4,24 H 9,42 fí-d 26,44 (calculado)

C 38,51 H 4,31 S 9,36 Gd 26,19 (obtido)

EXEnlDO 6

a) Acetonida de 4»5-bis(bidrozisetil)—Stó^St-tris-^dibidroSÍ 3H)~furanona-3~ilZ-3»6,5,15-tetraazabicielo/f.3.l7pentadeca-1(15),11,13-trieno

A uma solução de 5 £ (16,34 mmol) de caetonida de 4»5-bis (hidroxometil )-3,6,9,15-t etraasbiciclo^. 3.l7-pentadeca*l(15),11,13-trieno em 100 ml de acetonitrilo juntar 12 g de carbonato de potássio, 260 mg de iodeto de potássio e 13,50 g de x-bromo-8-butirolactona, e deirar ferver durante 48 b. Evaporar no vácuo, dissolver o resíduo es cloreto de metileno e extrair· várias vezes com água, secar a fase orgânica sobre sulfato de sódio e evaporar no vácuo, fíromstografar 0 óleo remanescente através de crom&tografia sobre 150 g de silicagel (eluentescloreto de aetileno/netancX» 15:1)* Obtêm-se 5,3 £ do composto em epígrafe sob a forma de óleo viscoso, amarelo claro.

b) Ácido 4»5-bis (hidroximetil) -3,6,9»15-t etraazabiciclo^. 3. l7-pentadeca-l(15)»11,13-trienc-3,6,9-tris-/x-(2-bidróxi-etil27aoático

Dissolver 5 g do composto do exemplo 6a) em 50 ml de água ae acertar a pH 2 com ácido clorídrico. Sorver du. rante 5 b sob refluxo e passar a solução através de usa co• luna com 10 g de fieillex (poli-4-vinilpiriuina), lavar a eo44

luna com 20 ml de água e liofilizar os eluados reunidos. Obtêm-se 4,05 g do composto em epígrafe, sob a forma de pá solto com um teor de água de 7,2$,

Análise (apás correcção do teor de água):

C 52,44 H 7,04 H 9,78 (calculado)

C 52,61 H 7,33 B 9,62 (obtido)

c) Complexo de gadolínio do ácido 4,5-bis(hidroximetil)-3,

6,9,15-tetraaxabieiclo^.3.l7pentadeoa-l (15),11,13-trieno-3,6»9-trÍs-^x-(2*hidrQxietil^7*aeético

Agitar durante 4 h a 90°C, 1,50 g (2,68 mKol) de ácido 4,5-bis(hidroximetil)-3»6,9,15-teiraazabieielo/§.3*l7pentadeca-1(15),11,13-trieno-3,6,9-tris-/x(S-hiaroxietil)/-acético e 487 mg de áxido de gadolínio com 25 ml de água. Depois de arrefecer» agitar a solução sucessivamente com 5 ml de resina de permuta asiánica IBA-410 e 5 ml de resina de permuta catiánica IBC-50» filtrar e liofilizar. Obtêm-se 1,69 g do composto em epígrafe» sob a forma de pá branco, com um teor de humidade de 4,3$*

Análise (apás correcção do teor de água): ^G25^H37^GâíU°ll C 41,31 H 5,13 B 7,71 Gd 21,63 (calculado)

C 41,07 H 5,33 H 7,61 Gd 21,89 (obtido)

EXEKPIO 7

a) 4-Hidroximetil-3,6,9-tritosil-3,6,9,15-tetraazabiciclo ^5.3.l7pentaâeca-l(15),11,13-trieno

A uma solução de 59,57 g de 3-aza-l-bidroximetÍl-1,3,5-tritosilpentadiamina (preparação, ver Patente International PCT/DE 88/00200, WO 88/08422, pág. 45) em 500 ml de dimetilfoxmamida, juntar pouco a pouco 9,60 g de uma suspensão a 50$ de hidreto de sódio em áleo mineral e aquecer 1 h a 80°C. A esta solução juntar gota a gota 17,61 g de 2,6-bis(clorometil)piridina dissolvida em 150 râl de dimetilformamida, e aquecer durante 6 h a 110%. Evaporar no vácuo até aprox, 220 ml» e juntar gota a gota 1 1 de água, filtrar o precipitado, lavar com água e secar durante a noite a $Q°C e 200 mbar. Hecristalizar o composto bruto com 500 ml de eta* 45 nol, obtendo-se assim 45 g do composto em epígrafe sob a forma de composto sólido amarelo.

b) 4-Kidroximetil-3,6,9,15-tetraazabiciclo-^. 3.l7~pentadeea 1(15),11,13-trieno

Aquecer durante 48 h a 100°G 42 g do composto do exemplo 7a) com 120 ml de ácido sulfúrico cone* Arrefecer a 0°C e juntar gota a gota 550 ml de éter diatílico. Piltrar o sal do composto em epígrafe, que precipita, e juntar 40 g de hidróxido de sódio; extrair várias vezes com dicloro-metano. Secar as fases orgânicas reunidas sobre sulfato de sódio e evaporar no vácuo. Obtêm-se 13,5 g do composto em epígrafe sob a forma de óleo viscoso.

c) Ácido 4-hidroximetil-3»6,9 >15-tetraazabieiclo-^»3«l7“ —pentadeca-1(15),11,13-trieno-3, 6,9-t riacético

Dissolver 10 g da amina do exemplo 7b) em 100 ml de água e juntar 13,21 g de ácido cloro-acético. Agitar durante 5 h a 60°C e manter durante esse tempo o pH a 9,0 através da adição de KaOE 101» Arrefecer a 0°G, juntar 100 ml de etanol e acidificar com EG1 cone» a pE 1» filtrar o precipitado por aspiração» dissolver em 50 ml de água e pas« ar a solução através de uma coluna coe 30 ml de Eeillex (poli-4-vinilpiridina), lavar com 50 ml de água» reunir os eluados e liofilizar. Obtêm-se 16,8 g do composto em epígra· fe» sob a forma de pó amorfo com um teor de água de S,3/>·· Análise (após correcção do teor de água):

Análises

C 52,68 fí 6,39 S 13,65 (calculado)

C 52,49 H 6,54 1 13,81 (obtido)

d) Complexo de gaâolínio do ácido 4-hidroximetil-3,6»9,15-t et raazabiciclo^. 3. l7p entadeca-1 (15 ) »11 »13-trieno-3,6,9-tris-acético

A uma solução de 2,3 g de 4-hidroximetil-3,6,9,15tetraasabiciclo/5.3.l7pentadeca-l(15),ll»13-trieno em 30 ml de água» juntar 1,015 g de óxido de gadolínio e aquecer ãu-

rante lha 9G°G. Filtrar o pouco óxido que não reagiu, e varar a solução suoessivamente sobre 10 ml de resina de permuta aniónica Ϊ1Α-410 e 10 ml de resina de permuta eatiónica IEC-50, lavar com 30 ml de água e liofilisar os eluados reunidos, Obtêm-se 3,05 g do composto em epígrafe, sob a forma de pó com um teor de humidade de 7,5^*

Análise (após correcção do teor de água):

C 38,29 K 4,11 H 9,92 Gd 27,85 (calculado)

C 38,44 H 4,32 1 9,68 Gd 27,71 (obtido)

EXEwPW 8

a) Ácido 4-benziloximetil-3,6» 9,15-tetraasabiciclo-^Su 3.l7~ pentadeca-l(15),11,13-trieno-3,6,9-triacêtieo

A uma solução de 10 g (1 24,36 ramol) de ácido 4-h.idroximetil-3,6,9 ,15-tetraazabiciclo-^, 3*l7-*pentadeca-l ( 15),ll,13-trieno-3,6,9-triacético (preparado seg» exemplo 7b) em 150 ml de dimetiXformamida, juntar 0,5 g da iodeto de potássio, 4,17 g de brometo de bensilo e 5 g de carbonato de sódio, Aquecer 20 h a 60°C, evaporar no vácuo, juntar 100 ml de água e 300 ml de etanol, e acidificar com SCI conc. a pH 2» Filtrar o precipitado por aspiração, dissolver em 100 ml de água e passar a solução através de uma coluna com 50 g de Eeillex (poli-4-vinilpiridina), lavar a coluna com 50 ml de água, e liofilisar as fases aquosas reunidas. Obtêm -se 8 g do composto em epígrafe, sob a forma de pó amorfo. Análise:

C 59,99 E 6,44 E 11,19 (calculado)

G 59,71 H 6,49 E 11,58 (obtido)

b) Complexo de gadolínio do ácido 4-benziloxilsetil-3,6,9,15 t etraazabiciclo/9»3»l7pentadeea-X (15) ,11 ,13*trieno-3,6,9-trisacético

A uma solução de 5 g de ácido 4-benziloximetil-3,

6,9,15-tetraazabiciclo^.3,i7pentadeca-l(15),11,13-trieno-3,6,9-tris-acético em 100 ml de égua, juntar 1,81 g de Óxido de gadolínio e aquecer durante 3 h a 8090°0. Filtrar e vazar a solução sucessivamente sobre colunas com 15 ml de

- 47 resina de permuta aniónica IRA-410 e 15 ml d© resina de permuta catiónica IRG-50, lavar as colunas com 75 ml de água e liofilizar as fases aquosas reunidas. Obtêm-se 5,85 g do composto em epígrafe, sob a forma de pó amorfo com um teor de humidade de 7,4%.

Análise (após correcção do teor de água):

C 45,86 H 4,46 E 0,56 Gd 24,02 (calculado)

C 45,69 H 4,71 E 8,72 Gd 23,81 (obtido)

EXEKP10 9

Complexo de gadolínio do ácido 3,6,9,15-tetraazabiciclo^.

*l7-P entadecano-3,6,9-t ris/x (hidroxim etil)acético/

Dissolver 4,5 g (7,2 mmol) do composto do exemplo 2c) em 150 ml de água desionizada e hidrogenar em autoclave sobre catalisador de ródio (5% Eh/C) n 30 lar e 4C°C. lassadas 12 horas filtrar o catalizador e agitar o filtrado du rante 1 hora com 3 ml de resina de permuta catiónica ΐκ-120 e 3 mi de resina de permuta aniónica XEA-410. filtrar as resinas e liofilizar.

Rendimento: 4,18 g (92% do valor teórico) de um pó incolor, amorfo (contém 6,7% de água seg. análise)»

Análise (após correcção do teor de água);

C 30,08 H 5,27 1T 8,88 Gd 24,93 (calculadoj

C 30,01 H 5^4 E 8,78 Gd 24,86 (obtido)

EXEKPX.Q 10

Processo para preparação de uma solução do complexo de gadolínio (III) do ácido 3,6,9,15-tetraazabiciclo^,3*i7-pentadecano-l(15) ,ll,13-trieno-3,6,9-tris/x-( 2-hidroxíetil)acé tico7

a) Dissolver 361 g (0,5 mol) do complexo obtido no exemplo lb) (teor de água 8,3%) em 500 ml de água pro injectona (p.i·)» aquecendo ligeiramente. Depois de juntar 0,8 g de trometamina completar a solução a 1000 ml com água p.i.» Ultrafiltrar a solução e vazar em frascos* Após esterilização a quente está pronta para aplicação parentérica como meio de diagnóstico»

b) A solução ultrafiltrada obtida no exemplo 10a) ê vazada em multivials sob condições assépticas e liofilizada.

Após adição da'quantidade desejada de água p.i» obtêm-se a dose de administração adequada para injecção intrasticial para a radio-terapêutica.

nglvIOICACtteS

- ΐε· Processo para preparação de compostos macrocícli cos com a fórmula geral I

0002 na qual

... representa uma ligação simples ou uma ligação dupla,

Q representa um átomo de azoto ou um radical ΠΗ,

X¹ representa um átomo de hidrogénio, um grupo ou grupo -(OEg )_a-(0H)_n-0H₂0h com »

OH n — 1 a 5, m = 0 a 2e

B² = um átomo de hidrogénio ou um grupo hidráxi,

X² representa X¹ ou um grupo “CCHgJ^-COl^-COHg^-COgH^) _Q-h²

Κ = 0 a 4, e q ss O ou 1, e p

R e um átomo de hidrogénio, um grupo alcóxi com G1-C4, um grupo funcional ou ligado através desse grupo funcional de uma biomolécula ou macromolécula,

A¹, A², B¹, B², C¹, G², B¹, D², B¹, l², r¹ e B² representam, independentemente uns dos outros, respectivamente X², p

G representa ΈΓ ouua segundo macrociclo ligado através de K, com a fórmula geral IX

í coos na qual E representa uma ligação directa, um grupo bis(carbonilamino) (-EE-CO-CO-HH-) ou um grupo alquileno cora Gl-C14 que apresenta eventualmente nos seus terminais grupos carbonilo ( GO) ou carbonilamino (-IE-GG-) ou átomos âe oxigénio, e que apresenta eventualmente um ou mais átomos de oxigénio, grupos hidróxi-metileno (-CS-GB), Ch(A²)GGG2, grupos imino substituídos com acilo ou hidróxi-acilo, ou uma a duas ligações C-C duplas e/ou C-G triplas;

Z representa um átomo de hidrogénio e/ou xaa equivalente de um ião metálico de um elemento com os números de ordem 21-29, 31, 32, 37-39, 42-44, 49 ou 57-83?

com a condição de os 12 substituintes do anel A¹ a B² re

presentarem pelo menos 8 átomos de hidrogénio, de X e X só poderem representarem ©a simultâneo átomos de hidrogénio 1 2 se pelo menos um dos substituiates do anel Γ a 3? não representar um átomo de hidrogénio e do o m&croefelo da fórmula geral 1 não conter mais d© uma bio-molécula ou macro-molécula» bem como os seus sais com bases orgânicas/inorgânicas, amino-ácidos ou amidas de smino-áeidos, caracterizado por um composto da fórmula geral 1’

COGZ’ na qual

1* 2’ 12 G, X e X representam respectivamente G, X e X em que os grupos hidróxi e funcionais neles contidos se apresentam nas suas formas protegidas ou como formas prévias e,

Z’ representa um átomo de hidrogénio ou um grupo de protecç ção de ácido, e por processos era si conhecidos, se eliminarem os grupos de protecção, eventualmente se gerar o grupo funcional desejado, e se desejado, se desejado, se fazerem reagir os agentes complexantes assim obtidos da fórmula geral 1 com z representando hidrogénio» por processo em si conhecido, com pelo menos um óxido metálico ou sal metálico de um elemento com os números de ordem 21-29, 51, 52, 57-59, 42-44» 49 ou

57-83, se desejado se ligarem os grupos funcionais a uma bio-molécula ou macro-molécula * podendo a complexação ser efeetuada antes ou depois da eliminação dos grupos de protecção dos grupos hidréxi e dos grupos funcionais, ou da geração dos grupos funcionais e ligação ã biomolécula ou macro-molécula - e em seguida, se desejado, se substituírem ainda os átomos de hidrogénio ácidos presentes por catiões de bases orgânicas e/ou inorgânicas, de amino-ácidos ou de amidas de aminoácicios, ou se transformarem os respec tivos grupos aclilo total ou parcialmente em ésteres ou amidas.

Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por se obterem compostos macrocíclicos com a fórmula geral XIX

I

CQOÊ (XII), na qual representa uraa ligação simples ou uma ligação dupla, representa um átomo de azoto ou um radical ΠΙί, representa um átomo de hidrogénio, um grupo ou um grupo -(6h₂)_m-(Çh) _a~OB₂0H ^ΰθπ1 - 52 X η = 1 a 5, ei s t a 2 e um átomo d© hidrogénio ou m grupo hidrôxi,

X² representa X^3, ou um grupe -(CB₉)_a-(G)₁-(GE₂)_E-(egE₄)^-l² com

K 2= 0 a 4, e q = 0 ou 1, e o

E = um átomo de hidrogénio, tua grupo alcóxi com C1-C4, um grupo funcional ou ligado através desse grupo funcional de uma biomolêeula ou macroaolécula, 111 1

A , B , G e B representam, independentemente uns doe cup tros, respectivamente X ,

G representa B₂ ^{ou Wíi} segundo aacrociclo ligado atraváe de K, com a fórmula geral IV

X

I

200C-CH

A¹

(ÍV),

I coos na qual K representa uma ligação directa, um grupo his(carbonilarnino) (-^H-CO-CO-ÍB) ou um grupo alquileno com 01-014 que apresenta eventualmente nos sess terminais grupos earbonilo (+CG) ou carbonilamino (-HH-GG-) ou átomos do oxigénio, e que apresenta eventualmente um ou mais átomos de oxl génio, grupos hidróxi-?aetileno (-CH-GE), CB(Xg5GGGg, grupos imino substituídos com acílo ou hidrÓ::i-ucilo, ou una a duas ligações 0-0 duplas e/ou G-C triplos;

B representa um átomo de hidrogénio e/ou equivalente de um

ião metálico de um elemento com os números de ordem 21-29, 31, 32, 37-39, 42-44, 49 ou 57-83;

com a condição de e S^só representarem em simultâneo hidrogénio, se pelo menos um dos 4 substituintes do anel A^, e Dj- ⁿ&° representar hidrogénio, e se desejado, os restantes grupos CG^A apresentarem sob a forma de ésteres ou amidas, bem como os seus sais com bases orgânicas/inorgânicas, amino-ácidos ou amidas de amino-ácidos.

- jz Processo de acordo com a reivindicação 1, earacterizado por se obter um composto da fórmula geral Ϊ na qual 2 representa átomos de hidrogénio.

— 4 ^s~ —

Processo de acordo cora a reivindicação 1, caracterizado por se obterem compostos da fórmula geral I, na qual pelo menos dois dos substituintes 2 representam equivalentes de iões metálicos de pelo menos um elemento com os números de ordem 21-29, 42, 44 ou 57-83, ou de pelo menos um radio-nuelídeo de uia elemento com os números de ordem 27, 29, 31, 32, 37-39, 43, 43, 62, 64, 70 ou 77.

Claims (1)

1. Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por se obter um composto da fórmula geral 1, na qual K representa um grupo -(0)_q-(Gh.,}^“(0)^ ^j

   GE ligação directa.

   - 6«

   Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por se obter um composto da fórmula geral I, na qual o grupo funcional representado nor E tem as definições 2

   NCS, H0_2> OH, HHHH₂, HHg» SEOOCHgBr, SSCHOE^l* GGgB, Gôa^.

   - 70 ·

   Processo de acordo cosi a reivindicação 1, caracterizado por se obter um composto da fórluma geral I» na qual a bio-molécula ou riacro-moléeula eventualmente' presente em F-₂ é um anticorpo ou tus. fragmento de anticorpo.

   ~ θδ «.

   Processo de acordo coa a reivindicação 1, carae— terizado por se obter um composto da fórmula geral I, na qual a bio-molécula ou mscro-molécula eventualmente presente em R₂ ê uma proteína tal como albumina, globulina ou lectina.

   .» 5 s «.

   Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado por se obter um composto da fórmula geral I» na qual a bio-molécula ou macro-molécula eventualmente presente em R₂ é um polissacarídeo tal como amido, dextrano ou dextrina.

   — 1G£ —

   Processo de acordo com a reivindicação 1, caraeterizado por ©e obter w composto da fórmula geral I, na qual Χ_χ representa GH^GE» GSgCHgOH, OHOBOEgGB,

   - 11 £ Processo de acordo com a reivindicação 2» caracterizado por se obter um composto da fórmula geral 1X2, ns qual X_2> Bj,, e/ou 3^ representam CHgOH, CEgCSgOM,

   - 55 CH₂0CK₂CgE_ç, CEOECfígOH, OE^OgE^OfíB^, CE^B^, eEgOgB^CCHg) COOH, CE₂Cgfi₄XCã. ^J ~ 126 froce&so para preparação de xxna composição farmacêutica contendo pelo menos ua composto da fórmula geral I quando preparado de acordo cgb a reivindicação 1, earscterizado por se incorporar o composto complexaate dissolvido ou suspenso en água ou en solução salina fisiológica, eventualmenfe con os adjuvantes usuais ea galénica, ama formulação adequada para aplieçãc entérica ou pareateriea.

   A requerente reivindica a prioridade do pedido de patente alemão apresentado en 18 de Janeiro fie 1990, sob o H«. 1 40 01655.2.

   lisboa, 17 de Janeiro de 1991

   PKOGESbO PAEA PEEPÀBAÇlO SE CGEPOSTOS TBTSA-A2A EACEOCfCLI cos corarao w ato sb e wesjtqs s se coesos icfe bajbaCÊUTICAS QUE OS GOKTÊíi*

   A invenção refere-se a ura processo para preparação de compostos macrocíelicos com a fórmula geral I

   G (I), eoGg que compreende num composto da fórmula geral I* G (I), e por processos em si conhecidos, eliminarem-se os grupos de protecção, eventualmente se gerar o grupo funcional desejado, e se desejado, fazerem-se reagir os agentes eomplexantes assim obtidos da fórmula geral 1 com ?» representando hidrogénio, por processo em si conhecido, com pelo menos um óxido metálico ou sal metálico de um elemento com os números de ordem 21-29, 31, 32, 37-39, 42-44, 49 ou 57-83, se desejado se ligarem os grupos funcionais a uma bio-molécula ou macro-molécula * podendo a eomplexação ser efectuada antes ou depois da eliminação dos grupos de protecção dos grupos hidróxi e dos grupos funcionais, ou da geração dos grupos funcionais e ligação ã biomolécula ou macro-molécula - e em seguida, se desejado, substituirem-se ainda os átomos de hidrogénio ácidos presentes por catiães de bases orgânicas e/ou inorgânicas, de amino-ácidos ou de amidas