PT97184B - Processo para a preparacao de composicoes farmaceutica uteis no tratamento de seres humanos submetidos a transplante de medula ossea, tratamento citostatico ou irradiacao - Google Patents
Processo para a preparacao de composicoes farmaceutica uteis no tratamento de seres humanos submetidos a transplante de medula ossea, tratamento citostatico ou irradiacao Download PDFInfo
- Publication number
- PT97184B PT97184B PT97184A PT9718491A PT97184B PT 97184 B PT97184 B PT 97184B PT 97184 A PT97184 A PT 97184A PT 9718491 A PT9718491 A PT 9718491A PT 97184 B PT97184 B PT 97184B
- Authority
- PT
- Portugal
- Prior art keywords
- treatment
- linomide
- cells
- bone marrow
- preparation
- Prior art date
Links
- 238000011282 treatment Methods 0.000 title claims abstract description 29
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 5
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 title claims description 3
- 230000008569 process Effects 0.000 title claims description 3
- SGOOQMRIPALTEL-UHFFFAOYSA-N 4-hydroxy-N,1-dimethyl-2-oxo-N-phenyl-3-quinolinecarboxamide Chemical compound OC=1C2=CC=CC=C2N(C)C(=O)C=1C(=O)N(C)C1=CC=CC=C1 SGOOQMRIPALTEL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 54
- 229960003522 roquinimex Drugs 0.000 claims abstract description 49
- 239000000824 cytostatic agent Substances 0.000 claims abstract description 5
- 230000001085 cytostatic effect Effects 0.000 claims abstract description 5
- 238000010322 bone marrow transplantation Methods 0.000 claims description 13
- 230000037396 body weight Effects 0.000 claims description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 4
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 claims description 3
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 claims 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 26
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 20
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 18
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 14
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 11
- CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N Cyclophosphamide Chemical compound ClCCN(CCCl)P1(=O)NCCCO1 CMSMOCZEIVJLDB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 9
- 229960004397 cyclophosphamide Drugs 0.000 description 9
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 8
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 7
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 7
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 7
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 6
- 210000002798 bone marrow cell Anatomy 0.000 description 6
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 5
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 5
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 5
- 210000000278 spinal cord Anatomy 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 4
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 4
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 description 4
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 4
- 101000581981 Homo sapiens Neural cell adhesion molecule 1 Proteins 0.000 description 3
- 102100027347 Neural cell adhesion molecule 1 Human genes 0.000 description 3
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 3
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 3
- 210000001939 mature NK cell Anatomy 0.000 description 3
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 3
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 3
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 3
- 208000031261 Acute myeloid leukaemia Diseases 0.000 description 2
- 235000019890 Amylum Nutrition 0.000 description 2
- 229920003084 Avicel® PH-102 Polymers 0.000 description 2
- COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N Busulfan Chemical compound CS(=O)(=O)OCCCCOS(C)(=O)=O COVZYZSDYWQREU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- XOGTZOOQQBDUSI-UHFFFAOYSA-M Mesna Chemical compound [Na+].[O-]S(=O)(=O)CCS XOGTZOOQQBDUSI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 101000981253 Mus musculus GPI-linked NAD(P)(+)-arginine ADP-ribosyltransferase 1 Proteins 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 229920003081 Povidone K 30 Polymers 0.000 description 2
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 2
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 2
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 2
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 2
- 229960002092 busulfan Drugs 0.000 description 2
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 2
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 2
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 2
- 230000003394 haemopoietic effect Effects 0.000 description 2
- JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N hydrocortisone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3[C@@H](O)C[C@](C)([C@@](CC4)(O)C(=O)CO)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 JYGXADMDTFJGBT-VWUMJDOOSA-N 0.000 description 2
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 231100000518 lethal Toxicity 0.000 description 2
- 230000001665 lethal effect Effects 0.000 description 2
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 2
- 229960000906 mephenytoin Drugs 0.000 description 2
- GMHKMTDVRCWUDX-UHFFFAOYSA-N mephenytoin Chemical compound C=1C=CC=CC=1C1(CC)NC(=O)N(C)C1=O GMHKMTDVRCWUDX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000005105 peripheral blood lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 2
- 238000011127 radiochemotherapy Methods 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 208000006313 Delayed Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 102000006354 HLA-DR Antigens Human genes 0.000 description 1
- 108010058597 HLA-DR Antigens Proteins 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 1
- 208000033776 Myeloid Acute Leukemia Diseases 0.000 description 1
- 101100342977 Neurospora crassa (strain ATCC 24698 / 74-OR23-1A / CBS 708.71 / DSM 1257 / FGSC 987) leu-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- CXOFVDLJLONNDW-UHFFFAOYSA-N Phenytoin Chemical compound N1C(=O)NC(=O)C1(C=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 CXOFVDLJLONNDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000012980 RPMI-1640 medium Substances 0.000 description 1
- 101150057615 Syn gene Proteins 0.000 description 1
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 229960004150 aciclovir Drugs 0.000 description 1
- MKUXAQIIEYXACX-UHFFFAOYSA-N aciclovir Chemical compound N1C(N)=NC(=O)C2=C1N(COCCO)C=N2 MKUXAQIIEYXACX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000735 allogeneic effect Effects 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 230000000118 anti-neoplastic effect Effects 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 1
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 1
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 230000000973 chemotherapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 230000001143 conditioned effect Effects 0.000 description 1
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 1
- 238000002784 cytotoxicity assay Methods 0.000 description 1
- 231100000263 cytotoxicity test Toxicity 0.000 description 1
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 239000003651 drinking water Substances 0.000 description 1
- 235000020188 drinking water Nutrition 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N ethyl mercaptane Natural products CCS DNJIEGIFACGWOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 239000012894 fetal calf serum Substances 0.000 description 1
- 239000012997 ficoll-paque Substances 0.000 description 1
- 238000001943 fluorescence-activated cell sorting Methods 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 210000003714 granulocyte Anatomy 0.000 description 1
- 238000003306 harvesting Methods 0.000 description 1
- 210000003958 hematopoietic stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000777 hematopoietic system Anatomy 0.000 description 1
- 229960000890 hydrocortisone Drugs 0.000 description 1
- 230000000642 iatrogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 239000002955 immunomodulating agent Substances 0.000 description 1
- 229940121354 immunomodulator Drugs 0.000 description 1
- 239000003022 immunostimulating agent Substances 0.000 description 1
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 1
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 1
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 230000001524 infective effect Effects 0.000 description 1
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 1
- 239000003226 mitogen Substances 0.000 description 1
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 1
- 229960002036 phenytoin Drugs 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 1
- 238000011552 rat model Methods 0.000 description 1
- 230000035939 shock Effects 0.000 description 1
- 229910001220 stainless steel Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000010935 stainless steel Substances 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 210000001550 testis Anatomy 0.000 description 1
- 210000002303 tibia Anatomy 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 210000000689 upper leg Anatomy 0.000 description 1
- DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N β‐Mercaptoethanol Chemical compound OCCS DGVVWUTYPXICAM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
- A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Quinoline Compounds (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
Description
Descrição referente a patente de invenção de KABI PHARMACIA AB, sueca, industrial e comercial, com sede em S-751 82 Uppsala, Suécia, (inventores: Bob Nilsson, Terje Kalland e Birgitta Termander, residentes na Suécia), para PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICA UTEIS NO TRATAMENTO DE SERES HUMANOS SUBMETIDOS A TRANSPLANTE DE MEDULA ÓSSEA, TRATAMENTO CITOSTÁTICO OU IRRADIAÇÃO CONTENDO N-FENIL-N-METIL-1,2-DI-HIDRO-4-HIDROXI-1-METIL-2-0X0-QUIN0LINA-3-CARB0XAMIDA(LINOMIDE)
DESCRIÇÃO
ÂMBITO DA INVENÇÃO
A presente invenção refere-se à utilização de Linomide ou de um seu sal farmaceuticamente aceitavel para o tratamento de seres humanos submetidos a transplantações de medula óssea, tratamento citostático, irradiações ou suas combinações.
ANTECEDENTES DA INVENÇÃO
As transplantações de medula óssea (TMO) tem progredido nos últimos 15 anos desde um procedimento a ser utilizado apenas como ultima medida em casos desesperados ate ser uma modalidade terapeuticamente eficaz para o tratamento de pacientes seleccionados com doenças malignas.
Ê geralmente sabido que a dose da maior parte dos agentes quimioterapêuticos antineoplasticos que pode ser administrada e largamente limitada pela toxicidade em relaçao a medula normal. Todavia, a disponibilidade da medula doada para transplantaçao faz com que seja possivel administrar quimioterapia em doses supraletais num esforço para destruir uma fracçao muito elevada de células malignas e permite utilizar a medula doada para salvar o paciente de uma morte iatrogénica. A medula infundida reconstruirá os sistemas hematopoiético e imunológico do hospedeiro. Além disso, se o sistema imune da medula transplantada puder exercer um efei.to anti-tumor, a tr ansplantaçao da medula pode representar também uma forma de imunoterapia de tumores adoptiva.
Os enxertos de medula autólogos referem-se à própria medula do paciente que foi obtida e normalmente conservada criogenicamente e reinfundida apos o paciente ter sido submetido a uma quimio-radioterapia supraletal. Obtem-se medula singénica a partir de um doador que seja um gemeo geneticamente idêntico e obtém-se medula alogónica a partir de um doador de origem geneticamente diferente.
Os pacientes com cancro sao frequentemente tratados com um regime quimioterapêutico de doses elevadas ou recorre-se à irradiaçao corporal total (ICT) para erradicar as células malignas. A maior parte dos regimes preliminares engloba a ICT supraletal porque possui um efeito anti-tumor, pode penetrar em sítios privilegiados (por exemplo, SNC e testículos) em que a quimioterapia ó ineficaz, e é suficientemente imunossupressiva para permitir o enxerto.
regime mais vulgarmente utilizado consiste em administrar ciclofosfamida (60 mg/Kg/dia, IV) durante dois dias consecutivos seguindo-se uma dose supraletal de ICT, normalmente 1000 rad, fornecidos à razão de 5 a 8 rad/minuto, ou 200 a 225 rad/dia durante 6 a 7 dias. A medula é infundida nas 24 horas que se seguem à última dose de ICT.
As primeiras 3 ou 4 semanas após o enxerto sao críticas uma vez que a quimio-radioterapia erra2 dica todas as funções da medula normal e existe um intervalo de tempo antes de ocorrer uma produção celular detectável devida à medula infundida. A. contagem de granulócitos atinge normalmente 500 mm apos 2 a 4 semanas. A produção de plaquetas geralmente leva mais tempo. Até que decorra esse periodo de tempo, o paciente necessita de cuidados que o suportem com utilização adequada de transfusões e antibióticos.
SUMÁRIO DA INVENÇÃO
Em conformidade com a presente invenção descobriu-se agora surpreendentemente que o composto N-fenil-N-metil-1,2-di-hidro-4-hidroxi-l-metil-2-oxo-quinolina-3-carboxamida possui propriedades que podem ser úteis para o tratamento de um ser vivo submetido a transplantações da medula óssea, tratamento citostático, irradiaçao ou suas combinações .
A Linomide^), cuja designação química é N-fenil-N-metil-1,2-di-hidro-4-hidroxi-l-metil-2-oxo-quinolina-3-carboxamida, foi descrita pela primeira vez na patente norte-americana Ne . 4547511 como agente imunoestimulador. Este agente, também conhecido pela designação genérica de roquinimex, pode ser utilizado também na forma de um sal farmaceuticamente aeeitavel tal como os sais de Na ou Ca.
Demonstrou-se que a Linomide possui poderosas propriedades imunoestimuladoras em diversos modelos de murganhos e de ratos (1-5) e também em estudos clínicos iniciais. Permite também aumentar a reacçao à hipersensibilidade retardada, a capacidade de os linfócitos responderem aos mitogenos das células T e B e possui efeitos auxiliares idênticos sobre a produção de anticorpos. Uma das características principais da Linomide reside na sua capacidade para estimular a actividade das células aniquiladoras naturais (NK) (ou ÁN) em diversos orgãos.
mecanismo primário de acção da Linomide ainda nao está bem esclarecido. Todavia, a análise dos efeitos da Linomide sobre células NK dos murganhos demonsJ trou surpreendentemente que o seu mecanismo de acçao e distinto do mecanismo de qualquer dos imunomoduladores sintéticos descritos .
Em experiencias piloto efectuadas em seres humanos descobriu-se surpreendentemente que a Linomide possui um efeito benefico sobre a regeneração das células linfóides após a transplantaçao de medula óssea.
Em conformidade com a presente invenção, a Linomide pode ser administrada pela boca, intramuscular ou parenteralmente em doses compreendidas entre 0.01 e 10, de preferência entre 0.05 ele mais preferencialmente entre
0.2 e 0.3 mg/Kg de peso corporal diariamente ou com a frequência de 2 semanas de intervalo, e mais preferencialmente duas vezes por semana.
As composiçoes utilizadas para experiências clínicas podem ser, por exemplo, as seguintes:
Composição 1
Roquinimex....................10 mg
Lactosum,....................100 mg
Amylum maydis................ 60 mg
Aqua purificata........ 25 mg*
Avicel PH 102................ 20 mg
Kollidon 30.................. 5 mg
Sterotex regular............. 5 mg
Composição II
Roquinimex.................. 5 mg
Lactosum............... 105 mg
Amylum maydis................ 60 mg
Aqua purificata.............. 25 mg*
Avicel PH 102................ 20 mg
Kollidon 30 ............ 5 mg
Sterotex regular............. 5 mg
Desaparece da formulação no decurso da preparaçao.
Encontram-se descritas outras composições na patente norte-americana Ns . 4547511 anteriormente referida e aqui incorporada como referência.
' EXEMPLOS
I. Experiências em animais
Para se determinar o efeito da Linomide sobre a regeneração de células linfóides após a sua depleçao, fez-se o acompanhamento da .actividade das células NK no baço dos morganhos após exposição â ciclofosfamida ou a irradiaçao.
Tratamento dos animais
Todos os animais utilizados possuiam entre 5 e 8 semanas de idade e eram morganhos C57B1/6 obtidos em Gamle Bomholtgaard, Ry, Dinamarca.
Administrou-se Linomide (LS 2616; Pharmacia LEO Therapeutics AB, Helsingborg, Suécia), continuamente a murganhos através da sua água de beber numa quantidade correspondente a uma dose diária de 160 mg/Kg, Antecipadamente havia sido descoberto que este regime de dosagem era óptimo para estimular a actividade das células NK. Em experiências de transplantaçao de medula óssea singénica os recipiendos foram irradiados com 800 rad e decorridos 4 horas injectados
i.v. com 2 χ 107 células de medula ossea singénica preparadas conforme adiante descrito. A ciclofosfamida (Sendoxan: Pharmcia, Uppsala, Suécia) foi administrada em injecção i.p. única correspondente a 300 mg/Kg.
Preparações celulares
As células da medula óssea foram preparadas inundando a tíbia e o femur .com RPMI 1640 arrefecido com gelo (Flow Laboratories, Irvine, Escócia) enriquecido com Hepes 25 mM, L-glutamina 2mM, 2-mercapto-etanol 5 x
1θ-5 m 107o de soro de vitela fetal (Flow Laboratories) e penicilina/estreptomicina (100U/pg/ml) (meio completo). As células do baço foram preparadas fazendo a crivagem dos baços através de uma malha de aço inoxidável. Os glóbulos vermelhos foram, removidos da preparaçao de células, do baço por tratamento de choque hipotónico conforme descrito pormenorizadamente noutra publicação (3).
Ensaio de citotoxicidade
As células cuja actividade NK se pretendia testar foram examinadas através de um ensaio conven- 51 cional de libertação de Cr contra células alvo YAC-1 conforme descrito pormenorizadamente noutra publicação (3). Resumidamen3 te, efectuou-se a incubaçao de 5 x 10 células alvo marcadas com ^^Cr utilizando células infectoras na proporção de 100:1,
50:1 e 25:1 em 200 pl de meio completo durante 4 horas e depois 51 determinou-se a quantidade libertada de Cr em 100 pl de sobrenadente num contador LKB 1272 Clinigamma. A citotoxicidade percentual especifica determinou-se pela expressão cpm do teste - cpm espontâneas 1 1 _ X 100 cpm total - cpm espontâneas
A libertação espontânea foi determinada por incubaçao das células ' alvo apenas em meio e pela libertação total por incubaçao em SDS a 0,1%.
Culturas de medula óssea
Preparou-se uma cultura de 5 x 10^ células de medula ossea separadas conforme anteriormente descri_ to em 200 pl de meio completo enriquecido com concentrações óptimas (40 U/ml) ou sub-optimas (10 U/ml) de rIL-2 durante 4 dias conforme descrito noutra publicação (6). As culturas foram realizadas em placas de microtitulação de 96 cavidades de fundo arredondado.
A Linomide dissolvida em meio comple6
to foi adicionada no início das culturas segundo concentrações indicadas na secção correspondente aos Resultados.
As culturas das células de baço provenientes do mesmo murganho foram realizadas em paralelo. Resumidamente, preparou-se uma cultura de 5 x 10^ células por ml em meio completo durante 4 dias em presença de rlL-2 (10 U/ml) e para várias concentrações de Linomide.
Análise estatística
Todos os dados foram analisados em conformidade com o teste de Mann-Whitney.
RESULTADOS
Verificou-se a existência de uma forte depressão de actividade das células NK após a deterioração do tecido hematopoiêtico com uma dose única elevada de ciclofosfamida. Os murganhos expostos à Linomide demonstraram uma retenção ligeiramente melhor da actividade das células NK e uma recuperação significativamente mais rápida e um nível mais elevado de actividade das células NK do que os murganhos de controlo (Fig. 1).
efeito da Linomide sobre a recuperação das células NK após a irradiaçao letal e a transplantaçao de medula óssea singênica foram acompanhados por uma forma idêntica (Fig. 2). Foi possível detectar a actividade das células NK no baço de pacientes sujeitos a transplantaçao de medula ossea ao 6S dias apos a transplantaçao. A recuperação foi nitidamente mais lenta do que após a depleçao com ciclofosfamida embora se tivesse alcançado uma recuperação plena ao 12s dias em animais tratados com Linomide e ao 14s dia nos animais de controlo. 0 nível de actividade das células NK comparável com o dos murganhos de controlo completamente recuperados foi obtido ao 10- dia nos murganhos tratados com Linomide.
Para se examinar directamente o efeito da Linomide sobre os progenitores de células NK, efectu7
ou-se uma análise por diluição restrita da frequência das células de medula óssea susceptíveis de se desenvolverem em células NK activas liticamente in vitro em presença de IL-2. 0 tratamento dos murganhos durante 4 dias com Linomide aumentou a frequência dos precursores das células NK da medula óssea de 1/11 900 para 1/6 000 (Fig. 3).
Recentemente foi descrito um sistema de cultura que permite gerar células NK maduras a partir de progenitores de medula óssea inactlva liticamente em presença de IL-2 (6). 0 efeito da Linomide in vitro foi examinado neste sistema de cultura (Fig. 4). A Linomide isoladamente na ausência de IL-2 nao é capaz de suportar a maturaçao das células NK conforme confirmado pelo aparecimento de actividade citotoxica. Por outro lado, a Linomide nao favorece a actividade citotóxica forte em cultura de medula óssea em presença de quantidades óptimas (40 U/ml) de IL-2. Todavia, para concentrações sub-óptimas de IL-2 (10 U/ml) a Linomide para concentrações compreendidas entre 1 e 50 pg/ml aumentou significativamente a actividade citotoxica. Nao foi possivel detectar qualquer efeito da linomide sobre as células NK maduras obtidas em cultura de baço na presença ou na ausência de IL-2.
II - Estudos com pacientes
Como parte da fase II de um estudo piloto aberto efectuado com pacientes sofrendo de Leucemia Mielogenica Aguda em fase de remissão, estudou-se o efeito, da Linomide sobre a regeneração das células hematopoiêticas apos a transplantaçao de medula óssea autóloga.
Colheita de medula óssea
No periodo que medeia entre 1 e 2 meses antes da infusão de medula aspirou-se medula dos pacientes numa quantidade correspondente a 15 ml/Kg de peso corporal. Concentrou-se a medula e armazenou-se a temperatura de -196 C ate ao dia da reinfusao.
Procedimentos que precedem a infusão ll2 dia: aplicou-se o cateter venoso central. Preparou-se uma amostra de sangue e avaliou-se o estado da fase de remissão. Teve início o tratamento com ovirax (Aciclovir).
102 dia: teve início a terapia com Fenantoina (fenitoi na). Isolou-se o paciente.
82 a 5a dias: administraçao oral de Myeleran (Busulfano) na dose de 1 mg(Kg em cada 6 horas).
42 dia;
32 dia;
administraçao de ciclofosfamida na dose de 60 mg/Kg i.v., infusão de Uromitexan na dose de 24 mg/Kg x 4. Teve início o tratamento profilático contra infecçoes.
administraçao de ciclofosfamida e de Uromitexan
2e dia terminou Zilonic.
terapia com Fenantoina e com
Dia 0:
a medula foi rapidamente descongelada e reinfundida. Antes da infusão administrou-se Soly-Glyc (hidrocortisona) no total de 100 mg i.v.
Dosagem da Linomide
Administrou-se 0.3 mg/Kg de peso corporal, uma vez por semana, durante períodos de 3 semanas alternados-tom periodos de 3 semanas sem qualquer fármaco. 0 tratamento foi iniciado no momento da transplantaçao da medula óssea.
Análise imunológica fenotipo das células mononucleares foi analisado em Ficoll-Paque, separadas do sangue periférico antes da TMO e no final de cada ciclo de 3 semanas em presença ou na ausência de Linomide.' Foram efectuadas duas análises de tipo FACS (ou RCAR) conforme descrito numa obra já publicada (7) com os seguintes anticorpos monoclonais:
Leu-M3, HLA-DR, Leu-1, Leu-12, Leu-16, Leu-11, Leu-19, Leu-3, Leu-4.
Determinou-se a actividade citotoxica das células mononucleares do sangue periférico contra a linha celular K-562 sensível às células NK recorrendo a um ensaio 51 convencional de libertação de Cr conforme descrito antes.
RESULTADOS
Foi observado um aumento nítido do número de células com o fenotipo NK (CD56) e também da actividade citotoxica contra a linha K-562 no paciente 1 (Fig. 5,6) e no paciente 2 (Fig. 7,8) no final dos períodos de tratamento com Linomide. Em contraste a frequência das células NK e também a actividade das células NK foi inferior no final de todos os intervalos na ausência de Linomide. Deste modo, a Linomide aumenta o numero de células NK maduras apos a transplantaçao de medula óssea.
III - Estudos com pacientes
Foram estudados 5 adultos (3 machos, 2 fêmeas, idades compreendidas entre 48 e 57 anos), com LMA sujeitos a TMOA na primeira fase de remissão completa. Antes da TMOA, todos os pacientes foram condicionados com Busulfano (16 mg/Kg) e com ciclofosfamida (120 mg(Kg) seguida pela infusão de células autologas de medula descongelada.
Calendário do tratamento
A Linomide foi administrada oralmente em solução aquosa com início no dia da infusão da medula.A dose foi de 0.3 mg/Kg uma vez por semana durante as primeiras 3 semanas, seguindo-se 3 semanas de terapia. Este ciclo de tratamento com Linomide durante 3 semanas seguido por 3 semanas de interrupção do tratamento foi mantido ao longo de 6 meses.
Tomando tudo em consideração, o estudo revelou que a terapia com Linomide após a TMOA pode ser benéfico para os pacientes no que diz respeito a sobrevivêii cia sem leucemia e às complicações infecciosas. Os efeitos observados são da mesma ordem de grandeza correspondente ao que se verificou após a infusão de IL2, mas os efeitos secundários foram consideravelmente mais suaves. A Linomide beneficia da conveniência de representar um fármaco para administraçao oral que é facilmente administrado a um maior numero de pacientes .
LEGENDAS DAS FIGURAS
Figura 1: Efeito da Linomide sobre a regeneração da actividade das células NK no baço apos uma injecção unica de ciclofosfamida. o - o, controlo; · - · murganhos * tratados com Linomide. p<0.05. Resulatdos de uma experiência única com 24 murganhos por grupo.
Figura 2: Efeito da Linomide sobre a regeneração da actividade das células NK no baço apos irradiaçao letal e exerto de medula óssea singénica. o -o, controlo; · - · »1»
T· murganhos tratados com Linomide. p<0.05.
Resultados de uma ou duas experiências idênticas com 21 e 19 animais respectivamente, por grupo.
Figura 3: Análise de diluição restrita da frequência dos progenitores das células NK na medula óssea do murganho de controlo ou do murganho tratado com Linomide (160 mg/KG/dia durante 4 dias), o - o, controlo;
• - · murganhos tratados com Linomide. * n p 4 0.05 .
Resultados de 1 de 3 experiências com resultados consistentes.
Figura 4: Efeito da Linomide in vitro em culturas de medula ossea ou de células do baço com actividade de células NK. Símbolos abertos, culturas enriquecidas com 10 U/ml IL-2, simbolos fechados, ausência de IL-2. Circulos, células de medula ossea, triângulos,
células do baço. As células foram examinadas para verificação da sua citotoxicidade contra as células YAC-1 após cultura durante 3 dias, proporção E:A 100:1. p<,0.05. Resultados de 1 de 2 experiências idênticas.
Figura 5: Frequência de células positivas CD56 no sangue periférico do paciente 1 antes e em momentos diferentes após a transplantaçao de medula óssea autóloga. Com = no fim de um período de 3 semanas de tratamento com Linomide, sem = no fim de um período de 3 semanas correspondente a um intervalo sem qualquer tratamento
Figura 6: Actividade citotoxica contra a linha K-562 dos linfócitos do sangue periférico do paciente 1 antes e em momentos diferentes após a transplantaçao de medula óssea autologa. Com = no fim de um período de 3 semanas correspondente a um intervalo sem qualquer tratamento. Proporção efector: alvo (E:A) 15:1.
Figura 7: Frequência das células positivas CD56 no sangue periférico do paciente 2 antes e em momentos diferentes apos a transplantaçao de medula óssea autóloga. Com = no fim de um período de 3 semanas de tratamento com Linomide, sem = no fim de um periodo de 3 semanas correspondente a um intervalo sem qualquer tratamento
Figura 8: Actividade citotoxica contra a linha K-562 dos linfécitos do sangue periférico do paciente 2 antes e em momentos diferentes após a transplantaçao de medula ossea autologa. Com = no fim de um período de 3 semanas de tratamento com Linomide, sem = no fim de um periodo de 3 semanas correspondente a um intervalo sem qualquer tratamento. Proporção efector: alvo (E:A) 30:1.
REFERENCIAS
1. Larsson, E.L., Joki, A.L. and Stalhandske, T.: Mechanism of action of the new immunmodulator LS 2616.
Int. J. Immunopharmacol. 9:425, 1987.
2. Kalland, T., Alm, G., and Stalhandske, T.: Augmentation of mouse natural killer cell activity by LS 2616, a new immunomudulator.
J.Immunol. 134:3956, 1985.
3. Stalhandske, T., and Kalland, T.: Effect of the novel immunomodulator LS 2616 on the delayed-type hypersensitivity reaction to Bordetella pertussis in the rat. Immunopharmacol. 11:87, 1986.
4. Tarkowski, A., Gunnarson, K., and Stalhandske, T.: Sucessful treatment of autoimmunity in MRL/1 mice with LS 2616, a new immunmodulator. Arthritis and Rheum. 29:1405, 1986.
5. Kalland, T. : Effects of the immunomodulator LS 2616 on growth and metastatis of the murinne B16-F10 melanoma.
Câncer Res. 46:3018, 1986.
6. Kalland, T.: Interleukin 3 is a major negative regulator of the generation of natural killer cells from bone marrow precursors.
J. Immunol. 137:2268, 1986.
7. Bengtsson, Μ. , Totterman, T.H., Smedmyr, B., Festin, R., Oberg, G. and Sominnsson, B.: Regeneration of functional and activated NK and T subset cells in the marrow and blood after autologous bone marrow transplantation: A prospective study with 2/3-color FACS analysis. Leukemia 3:68, 1989.
Claims (1)
- REIVINDICAÇÃOProcesso para a preparaçao de uma composição farmacêutica para o tratamento de seres humanos submetidos a transplante de medula ossea, tratamento citostatico ou irradiaçao para administraçao oral ou percuteral, caracterizado por se incorporar com ingrediente activo N-fenil-N-metil-1,2-di-hidro-4-hidroxi-l-metil-2-oxo-quinolina-3-carboxamida (Linomide) ou os seus sais farmaceuticamente aceitáveis, numa proporção que proporcione a administraçao de 0,01 a 10 mg de preferência 0,05 a 1 mg por Kg de peso de corpo de paciente.A requerente reivindica a prioridade do pedido de patente sueco apresentado em 27 de Março de 1990, sob o Na. 9001111-5.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SE9001111A SE9001111D0 (sv) | 1990-03-27 | 1990-03-27 | Supportive use |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PT97184A PT97184A (pt) | 1991-12-31 |
| PT97184B true PT97184B (pt) | 1998-07-31 |
Family
ID=20379010
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PT97184A PT97184B (pt) | 1990-03-27 | 1991-03-27 | Processo para a preparacao de composicoes farmaceutica uteis no tratamento de seres humanos submetidos a transplante de medula ossea, tratamento citostatico ou irradiacao |
Country Status (13)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP0522001B1 (pt) |
| JP (1) | JPH05505194A (pt) |
| AT (1) | ATE139695T1 (pt) |
| AU (1) | AU640223B2 (pt) |
| CA (1) | CA2077996C (pt) |
| DE (1) | DE69120529T2 (pt) |
| DK (1) | DK0522001T3 (pt) |
| ES (1) | ES2089206T3 (pt) |
| GR (1) | GR3020667T3 (pt) |
| IE (1) | IE76287B1 (pt) |
| PT (1) | PT97184B (pt) |
| SE (1) | SE9001111D0 (pt) |
| WO (1) | WO1991014432A1 (pt) |
Families Citing this family (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SE9201076L (sv) * | 1992-04-06 | 1993-10-07 | Shimon Slavin | Användningen av gamla läkemedel för behandling av diabetes |
| SE9400810D0 (sv) * | 1994-03-10 | 1994-03-10 | Pharmacia Ab | New use of Quinoline-3-carboxamide compounds |
| SE9400809D0 (sv) * | 1994-03-10 | 1994-03-10 | Pharmacia Ab | New use of quinoline-3-carboxamide compounds |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| IE52670B1 (en) * | 1981-03-03 | 1988-01-20 | Leo Ab | Heterocyclic carboxamides,compositions containing such compounds,and processes for their preparation |
-
1990
- 1990-03-27 SE SE9001111A patent/SE9001111D0/xx unknown
-
1991
- 1991-03-20 DK DK91907089.6T patent/DK0522001T3/da active
- 1991-03-20 AT AT91907089T patent/ATE139695T1/de active
- 1991-03-20 CA CA002077996A patent/CA2077996C/en not_active Expired - Fee Related
- 1991-03-20 WO PCT/SE1991/000204 patent/WO1991014432A1/en not_active Ceased
- 1991-03-20 JP JP3506524A patent/JPH05505194A/ja active Pending
- 1991-03-20 ES ES91907089T patent/ES2089206T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1991-03-20 AU AU75623/91A patent/AU640223B2/en not_active Ceased
- 1991-03-20 DE DE69120529T patent/DE69120529T2/de not_active Expired - Fee Related
- 1991-03-20 EP EP91907089A patent/EP0522001B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1991-03-22 IE IE97391A patent/IE76287B1/en not_active IP Right Cessation
- 1991-03-27 PT PT97184A patent/PT97184B/pt not_active IP Right Cessation
-
1996
- 1996-07-31 GR GR960402025T patent/GR3020667T3/el unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CA2077996C (en) | 1996-03-12 |
| ES2089206T3 (es) | 1996-10-01 |
| JPH05505194A (ja) | 1993-08-05 |
| WO1991014432A1 (en) | 1991-10-03 |
| DE69120529D1 (de) | 1996-08-01 |
| PT97184A (pt) | 1991-12-31 |
| DE69120529T2 (de) | 1997-01-30 |
| AU640223B2 (en) | 1993-08-19 |
| GR3020667T3 (en) | 1996-10-31 |
| IE76287B1 (en) | 1997-10-08 |
| DK0522001T3 (da) | 1996-09-16 |
| IE910973A1 (en) | 1991-10-09 |
| EP0522001A1 (en) | 1993-01-13 |
| SE9001111D0 (sv) | 1990-03-27 |
| AU7562391A (en) | 1991-10-21 |
| CA2077996A1 (en) | 1991-09-28 |
| EP0522001B1 (en) | 1996-06-26 |
| ATE139695T1 (de) | 1996-07-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Kleinerman et al. | Enhancement of naturally occurring human spontaneous monocyte-mediated cytotoxicity by cis-diamminedichloroplatinum (II) | |
| McCarthy et al. | Transfusion of circulating stem cells | |
| Truitt et al. | Characterization of alloimmunization-induced T lymphocytes reactive against AKR leukemia in vitro and correlation with graft-vs-leukemia activity in vivo. | |
| Currier et al. | Effect over time of in-vivo administration of the polysaccharide arabinogalactan on immune and hemopoietic cell lineages in murine spleen and bone marrow | |
| US5504092A (en) | Use of Linomide to increase hemopoietic cell precursors | |
| Mulé et al. | Eradication of a disseminated syngeneic mouse lymphoma by systemic adoptive transfer of immune lymphocytes and its dependence upon a host component (s) | |
| Franks et al. | The effect of sex hormones on the growth of HeLa tumour nodules in male and female mice | |
| Poydock et al. | Inhibiting effect of vitamins C and B12 on the mitotic activity of ascites tumors | |
| AU2002311601C1 (en) | Non-myeloablative tolerogenic treatment with tyrphostins | |
| JP4371437B2 (ja) | 悪性腫瘍の治療方法 | |
| PT97184B (pt) | Processo para a preparacao de composicoes farmaceutica uteis no tratamento de seres humanos submetidos a transplante de medula ossea, tratamento citostatico ou irradiacao | |
| Krahenbuhl et al. | Effects of Corynebacterium parvum treatment and Toxoplasma gondii infection on macrophage-mediated cytostasis of tumour target cells | |
| van Dijken et al. | Effect of graft-versus-host disease on hematopoiesis after bone marrow transplantation in mice | |
| Wang et al. | Immunotherapy of a murine lymphoma by adoptive transfer of syngeneic macrophages activated with bisantrene | |
| PT972519E (pt) | Indutores de imunotolerância | |
| Palladino et al. | Immunity to transplantable carcinogen induced fibrosarcomas in B2/B2 chickens: II. Macrophage dependency of adoptive T cell mediated tumor immunity | |
| SUTTON et al. | Drug effects on survival of homografts of skins | |
| PT1562571E (pt) | Combinação de derivados de diamina e agentes imunossupressores para a indução da tolerância imunológica | |
| Chany et al. | Effect of coordinated therapeutic assays using C. parvum, interferon and arginine butyrate on spontaneous disease and survival of AKR mice | |
| Rios et al. | Experimental cancer immunotherapy using a neuramimidase-treated non-viable frozen tumor vaccine | |
| Kreider et al. | Abrogation of tumor rejection by trypan blue | |
| Mookerjee et al. | Interaction of Anti-Thymocyte Serum with Hematopoietic Stem Cells: I. Effects in Vitro and in Vivo | |
| Konno et al. | Increased lethality and delay in the recovery of hemopoietic stem cells after irradiation in mice exposed to nitrous oxide | |
| JPH0748279A (ja) | 後天性免疫不全症候群の治療法 | |
| Stinner et al. | Syngeneic and Autologous Bone Marrow Transplantation after Noncurative Chemotherapy with AAFC, DMM, and Cyclophosphamide in Tumor-bearing Mice |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| BB1A | Laying open of patent application |
Effective date: 19910909 |
|
| FG3A | Patent granted, date of granting |
Effective date: 19980421 |
|
| MM3A | Annulment or lapse |
Free format text: LAPSE DUE TO NON-PAYMENT OF FEES Effective date: 19991031 |