PT98362B - Processo para a preparacao de derivados de tioalquiltio-cefalosporina e de composicoes farmaceuticas que os contem - Google Patents

Description

PATENTE DE INVENÇÃO d e

PROCESSO PARA A PREPARAÇÃO DE DERIVADOS DE TIOALQUILTIO-CEFALOSPORINA E DE COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS QUE OS CONTÊM

Requerente

SHIONOGI & CO., LTD., japonesa, industrial e comercial, com sede em 1-8, Doshomachi 3-chome, Chuo-ku,

Osaka 541 , Japão.

A presente invenção refere-se a novos derivados de cefalosporina, aos processos para a preparação destes compostos, a composições antibióticas que contêm, como ingrediente activo, um composto de acordo com a presente invenção e a métodos para o tratamento de infecções bacterianas mediante administração das referidas composições a pacientes.

Verificou-se que as cefalosporinas são antibióticos úteis de largo espectro antibacteriano, tendo sido até agora preparados diversos derivados de cefalosporinas que se encontram disponíveis. No entanto, devido ao aparecimento de bactérias de baixa sensibilidade ou resistentes, existe a necessidade permanente de agentes antibióticos úteis e aperfeiçoados.

A Requerente efectuou investigações com o objectivo de desenvolver novos e úteis antibióticos e sintetizou muitos derivados de cefalosporina, que apresentam na posição 3 do núcleo de cefem uma cadeia lateral tioalquiltio que comporta como substituinte um grupo heterocíclico, tendo sido determinadas as respeçtivas actividades antibacte_v -χ

4.

rianas. A Requerente descobriu agora que uma certa classe dos referidos compostos tem actividade bactericida ou antibacteriana potente e apresenta uma elevada concentração no sangue mediante administração oral.

Assim, a presente invenção proporciona compostos de fórmula geral γ

AcíL-NH _ χ

I Π R R.-Het ,_T,

Ç) S^{Z 1}

COOH na ' qual Acil representa um grupo acilo ^- 2 ’ ^{Het re}P^{resenta um} S-^upo hetereoaromático monocíclico opcionalmente substituído contendo um ou mais heteroátomos; R^ representa uma ligação simples ou um grupo alquileno C^- C^; R₂ representa um grupo alquileno de cadeia linear ou ramificada; X representa um átomo de enxofre ou um grupo sulfóxido; e Y representa um átomo de hidrogénio ou um grupo metoxi, ou os seus sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico ou os seus derivados amino-, carboxi- e/ou hidroxi-protegidos

Em seguida, ’ apresentam-se as definições de termos tais como se utilizam na presente descrição e nas reivindicações.

Na definição de Het, a designação grupo heteroaromático refere-se a um anel penuagonal ou hexagonal que contém mais do que um heteroátomo escolhido entre átomos de azoto, enxofre e similares. São exemplos preferidos de grupos heteroaromáticos os anéis hecerocíclicos pentagonais que contêm 3 ou 4 heteroátomos escolhidos entre átomos de azoto e de enxofre. São exemplos específicos os grupos piridilo, triazolilo, tais como 1,2,3- ou 1 ,2,4-triazolilo, tiadiazolilo, como 1,2,3- ou 1,3,4-tiadiazolilo, tetrazolilo e similares. Os grupos heteroaromáticos podem comportar um ou mais substituintes escolhidos entre, por exemplo, grupos alquilo inferior, tais como metilo, etilo e similares. Os grupos heteroaromáticos espeeialmente preferidos são os grupos 1,2,3- ou 1,2,4-triazolilo e 1,2,3- cu 1,3,4-tiadiazolilo opcionalmente substituídos, nos suais o grupo substituinte é um grupo metilo.

Na definição de Acil, a designaçãc grupo acilo C^-C^₂ refere-se a um grupo acilo com 1 a '2 átomos de carbono. São exemplos de grupos acilo -C^ ₂ ²³ grupos alcanoílo, aroílo ou aralcanoílo homocíclicos ou heterocíclicos. Os grupos acilo podem comportar substituinte's) apropriado(s) e os grupos funcionais podem ser protegidos por meio de grupos protectores geralmente utilizados na classe das cefalosporinas. Os grupos acilo preferidos são os grupos alcanoílo -Cg , aroílo C^-C^ e aralcanoílo pentagonais ou hexagonais, homocíclicos ou heterocíclicos, tendo, cada um, um substituinte opcional. Os exemplos de substituintes opcionais incluem átomos de halogéneo e grupos alquilo -C^ , carboxialquilo ’ alcenilo, cicloalcenilo, amino, imino, hidroxiimino, alquilíCL-C^)-oxii mino, alcenil(C₂-C^ )-oxiimino, cicloalquiKCg-C^ )-cxiimino, carboxialquil(-C^ )-tio, hidroxi, oxo, alcoxi 0^ -C^ e similares. Os substituintes preferidos são os grupes halogeno-alquiltio, alcoxiimino, alcoxiimino cíclico, alceniloxiimino, amino, amino protegido, hidroxi, oxo, hidrcxiimino, hidroxiimino protegido, carboxialcoxiimino, carboxialceniloxiimino e similares.

Os exemplos típicos dos grupos acilo opcionalmente substituídos incluem (Z)-(2-aminotiazol-4-il)-2-hidroxiinu noacetilo, 2-(2-aminotiazol-4-il)acetilo, -fenilgiicilo, D-mandeloílo, 2-(2-aminotiazol-4-il)glioxililo, difluorometiif tioacetilo, (Z)-2-(2-aminotiazol-4-il)-2-pentenoílo, (Z)-2-(2-aminotiazol-4-il)~2-tetra-hidropiraniloxiiminoacetiio, (Z)-2-(2-aminot.iazol-4-il )-2-tritiloxiiminoacetilo, (Z)-2-C 2-aminotiazol-4-il)-2-(2-propeniloxiimino)acetilo, (Z)-2-(2-aminotiazol-4-il)-2-ciclopentiloxiiminoacetilo, (Z)-2-(2-aminotiazol-4-il)-2-(carboximetoxiimino)acetilo, (Z)-2-(2-aminotiazolo-4-il)-2- C( S )-1 -carboxietoxiimino )J acetilo, (Z)-2-(1 -carboxi-1 -metiletoxiimino)acetilo, (Z)-2-(2-aminotiazol-4-il)-2-(1-car boxiviniloxiimino)acetilo e similares. São grupos acilo especialmente preferidos os grupos (Z)-2-(2-aminotiazol-4-il)-2-hidroxiiminoacetilo em que o grupo hidroxiimino está opcíonalmente modificado com um grupo hidroxi-protector, alquilo C^-C^ ou carboxialquilo Cg-C^.

A expressão grupo alquileno -C^ de cadeia linear ou ramificada refere-se a grupos metileno, etileno, metilmetileno e similares.

Embora todos os compostos de fórmula geral I defi nida antes sejam apropriados para os objectivos da presente invenção, existem alguns compostos preferidos. Assim, os compostos rios quais representa uma ligação simples,

R₂ representa um grupo metileno, Het representa um grupe 2-piridilo, 1,2,3- ou 1,2,4-triazolilo, 1,2,3- ou 1,3,4-tiadiazolilo, opcíonalmente substituídos com um grupo metilo; X representa um átomo de enxofre; Y representa um átomo de hidrogénio; e Acil representa um grupo (Z)-2-(2-aminotiazol-4-il)-2-hidroxiiminoacetilo são especial mente preferidos.

Para os objectivos da presente invenção, os grupos funcionais, tais como grupos carboxilo, amino e hidroxilo, podem ser convencionalmente protegidos com grupos protectores apropriados normalmente utilizados no campo dos antibióticos de cefalosporina.

Os grupos protectores do radical carboxilo são escolhidos entre os utilizados na técnica e têm como função bloquear o grupo carboxilo enquanto se dão as reacçoes noutros pontos da molécula. Estes grupos contêm geralmente menos de cerca de 19 átomos de carbono e ligam-se ao grupo carboxilo reversivelmente sem afectar as outras partes da molécula. Os exemplos típicos incluem grupos alquilo -Cg eventualmente substituídos, por exemplo, metilo, metoximetilo, etilo, etoximetilo, iodometilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, etoxietilo, metiltioetilo, metano-sulfoniletilo, tricloroetilo, t-butilo e similares;

grupos alcenilo C„ -C_o eventualmente substituídos, uor 3 o exemplo, propenilo, alilo, isoprenilo, hexenilo, fenilpropenílo, dimetil-hexenilo e similares; grupos aralquilo C? -C1g eventualmente substituídos, por exemplo, benzilo, metilbenzilo, dimetilbenzilo, metoxibenzilo, etoxibenzilo, nitrobenzilo, aminobenzilo, difenilmetilo, feniletilo, tritílo, di-t-butil-hidroxibenzilo, ftalidilo, fenacilo e similares; grupos arilo Cg-C₁₂ eventualmente substituídos, por exemplo, fenilo, toluílo, diisopropilfenilo, xililo, triclorofenilo, pentaclorofenilo, indanilo e similares; grupos amino -C^₂ eventualmente substituídos, por exemplo, um éster com acetona-oxima, acetofenona-oxima, acetoaldoxima, N-hidroxissucci_nimida, N-hidroxiftalimida ou similares; grupos sililo hidrocarbonados Cg-C^₂ eventualmente substituídos, por exemplo, trimetilsililo, dimetilmetoxi-sililo, t-butildimetilsililo e similares; grupos estanilo hidrocarbonados C₃~C₁₂ eventualmente substituídos, por exemplo, trimetil-estanilo e similares. Outros grupos carboxi-protectores são os grupos que formam ésteres com actividade farmacológica. Os exemplos destes grupos incluem grupos alquilo ^C2^-C15 1-(oxigénio-substituído), por exemplo um grupo alcanoiloxialquilo de cadeia linear ou ramificada, ciclizado ou parcialmente ciclizado, tal como acetoximetilo, acetoxietilo, propioniloximetilo, pivaloiloximetilo, pivaloiloxietilo, ciclo-hexanoacetoxietilo, ciclo-hexanocarboniloxiciclo-hexilmetilo e similares; alcoxicarboniloxialguilo Cg-dj,. , tal como etoxicarboniloxietilo, isopropoxicarboniloxipropilo, isopropoxicarboniloxietilo, t-butoxicarboniloxietilo, isopentiloxicarboniloxipropilo, ciclo-hexiloxicarboniloxietilo, ciclo-nexilmetoxicarboniloxietilo, borniloxicarboniloxiisopropilo e similares; alcoxialquilo C₂ -C θ , tal como metoximetilo, metoxietilo e similares; 2-oxacicloalquilo

-Cg , tal como tetra-hidropiranilo, tetra-hidrofuranilo e similares; aralquilo Cg-C^₂ substituído, por exemplo, fenacilo, ftalidilo e similares; arilo Cg-C₁₂ , por exemplo, fenilo, xililo, indanilo e similares; alcenilo C₂-C₁₂ ’ por exemplo, alilo, isoprenilo, 2-oxo-1,3-dioxolil-4-il-metilo e similares. Nos grupos indicados antes, o grupo protector utilizado para bloquear o grupo carboxilo durante as reacções é normalmente removido no passo final da reacção e, portanto, a sua estrutura não é essencial. Assim, o especialista na matéria compreenderá facilmente que os grupos protectores podem ser escolhidos entre vários grupos equivalentes incluindo amidas, anidridos de ácido formados com ácido carbónico ou com ácidos carboxílicos e similares, desde que o grupo carboxilo em causa seja adequadamente protegido.

grupo hidroxi-protector é um grupo protector convencional no domínio das cefalosporinas, que possa ser introduzido e removido sem afectar desfavoravelmente a parte restante da molécula. Os exemplos típicos destes grupos incluem grupos que formam éster facilmente removíveis, por exemplo, acilo carboxílico C^-Ο^θ (alcanoilo, tal como for milo, acetilo, propionilo, pivaloílo e aroilo C? -C^θ , tal como benzoilo, toluílo, xiloílo), acilo carbónico o (alcoxicarbonilo, tricloroalcoxicarbonilo, benziloxicarbonilo, p-nitrobenziloxicarbonilo, p-metoxibenziloxicarbonilo, o-nitrobenziloxicarbonilo, aliloxicarbonilo); um grupo que forma éter C₂ -C^ facilmente removível (tetra-hidropiranilo, tetra-nidrofuranilo, metoximetilo, metoxietoximetilo, etc.), hidrocarbilsililo Cg-C^ θ (trimetilsililo, trietilsililo, dimetilfenilsililo, difenil-t-butilsililo, dimetil-t-pentilsililo, etc.) e aralquilo C₇~C₁₉ reactivo (trifenilmetilo, etc.).

grupo amino-protector é um grupo protector C -^20 convencional no domínio das cefalosporinas, que possa ser introduzido e removido sem afectar desfavoravelmente a parte restante da molécula. Os exemplos típicos destes grupos incluem os grupos alquilo C^-Cg (t-butilo, metoximetilo, metoxietoximetilo, tricloroetilo, tetra-hidropiranilo, etc.), aralquilo Cg (benzilo, metilbenzilo, benzidrilo, tritilo, metoxibenzilo, nitrobenzilo, etc.), alquil(C^-Cg) -tio, aril(Cg -C _{1 2} )-tio[(nitrofeniltio, etc.), cicloalquilideno C^-Cg, acilo C^-Οθ por exemplo, alcanoilo C^-Cg (formilo, acetilo, cloroacetilo, trifluoroacetilo, etc.), alcoxi (C₂ -C₂ )-carbonilo (em que a parte alquilo é um grupo metilo, etilo, propilo, ciclopropilmetilo, ciclopropiletilo, isopropilo, butilo, isobutilo, pentilo, hexilo, tricloroetilo, piridilmetilo, ciclopentilo, ciclo-hexilc. etc.), aralcoxi (Cg -C^g )-carbonilo (em que a parte aralquilo é um grupo benzilo, benzidrilo, nitrobenzilo, etc.), aroílo

C„-C_dc- (benzoilo, ni trobenzoí lo, etc.), acilo C~-C„„ de / I ο ο Ί 0 um ácido dibásico (succinilo, ftaloílo, etc.), clsro-sulfonilo, acilo C_Q-C₁₀ fosfórico (dialcoxifosforilo, diclorofosforilo, etc.)], trialquiKCg -Cg )-sililo, alcoxidialquil (Cg-Cg )-sililo ou similares, e alquilideno C^-Cg cu aralquilideno C^-C^ (benzilideno, metilbenzilideno, nitrcbenzilideno, etc.). 0 sal de adição de ácido é também um composto com o grupo amino protegido. Um ou dois dos grupos protectores indicados antes pode(m) ligar-se ao grupo amino.

Os derivados de cefalosporina de fórmula geral I de acordo com a presente invenção podem ser preparados mediante qualquer dos processos convencionais utilizados na especialidade, os quais geralmente compreendem a preparação do ácido da cadeia lateral, substituinte na posição 3, núcleo cefem, introdução da cadeia lateral 7-acilo e do substituinte na posição 3, desprotecção e similares. Contudo, os compostos de fórmula geral I podem ser convenientemente preparados de acordo com qualquer dos processos seguintes 1 , 2 e 3 da presente invenção.

Processo 1

No primeiro processo, podem preparar-se os derivados de cefalosporina de fórmula geral I mediante introdução de um grupo acilo em uma amina de fórmula geral

COOR (III) na qual Het, X, Y, R^ definidos antes e R hidrogénio ou um grupo e R^ têm os significados representa um átomo de protector do grupo carboxilo, que consiste em fazer reagir o composto de fórmula geral

III ou geral	um seu derivado reactivo	com um ácido de fórmula
	Acil - OH
	na qual Acil representa	um grupo acilo eventual-
	mente protegido,
ou com	um seu derivado reactivo,	para se obter um compostc

de fórmula geral

,-Het

II) na qual Acil, Het, X, Y, R, R^ e R₂ têm os significados definidos antes, e desproteger o composto de fórmula geral II. De preferência efectua-se a redução dos sulfóxidos de fórmula geral II antes da desprotecção.

Processo 2

No segundo processo, podem preparar-se os derivados de cefalosporina de fórmula geral I fazendo reagir um composto de fórmula geral γ

COOR (IV) na qual Acil representa um grupo acilo eventualmente protegido, R - representa um grupo alquilo ou arilo e R, X e Y têm os significados definidos antes, ou um seu derivado reactivo, com um composto de fórmula geral

AcSR₂SR^ Het na qual Ac representa um grupo acilo e Het, R^ e R₂ têm os significados definidos antes, para se obter um composto de fórmula geral II, e desproteger o composto de fórmula geral II. Tal como se referiu antes, os sulfóxidos de fórmula geral II são, de preferência, reduzidos antes da desprotecção.

Processo 3

No terceiro processo, podem preparar-se os derivados de cefalosporina da fórmula geral I fazendo reagir um composto de fórmula geral

na qual Acil representa um grupo acilo eventualmente protegido, R, X e Y têm os significados definidos antes e M representa um átomo de hidrogénio ou de um metal pesado, ou um seu derivado reactivo, com um composto de fórmula geral

Hal-R₂SR₁Het na qual Hal representa um átomo de halogéneo, Het, R^ e R₂ têfn os significados definidos antes, ou um seu derivado reactivo, para se obter um composto de fórmula geral II, e desproteger o composto de fórmula geral II. Os sulfóxidos de fórmula geral II são reduzidos antes da desprotecção.

Todos os compostos iniciais necessários para os processos descritos antes, isto é, núcleo cefem, ácido da cadeia lateral da posição 7 e o substituinte da posição 3, são preparados, por exemplo, de acordo com os processos descritos nas Preparações. No entanto, a presente invenção não se limita à utilização dos compostos iniciais preparados pelos procedimentos aqui descritos podendo utilizar-se quaisquer compostos equivalentes, preparados por processos conhecidos, para se obterem os compostos de fórmula geral I.

Em seguida, apresenta-se a descrição de cada um dos processos.

Os compostos iniciais do processo 1 , uma 7-amina de fórmula geral III e um ácido, podem preparar-se, por exemplo, de acordo com os procedimentos descritos na Preparação 6 ou nas Preparações 1 e 2, respectivamente.

Pode efectuar-se a amidação pela qual se introduz um grupo acilo na posição 7 do núcleo cefem, fazendo reagir um ácido carboxílico ou um seu derivado reactivo com uma 7-amina ou com um seu derivado reactivo. A reacção de amidação pode ser efectuada em condições reaccionais bem conhecidas na técnica. Assim, faz-se reagir a amina com um ligeiro excesso do ácido, no seio de um dissolvente apropriado, na presença de um agente de condensação, a uma temperatura compreendida entre cerca de -30° e 50°C, de pre ferência entre cerca de -10° e 30° C, durante cerca de 10 minutos a cerca de 10 horas, vantajosamente durante cerca de 30 minutos a 2 horas.

Os exemplos de agentes de condensação incluem carbodiimidas, tais como N,N¹-dietilcarbodiimida, N,N'-diciclo-hexilcarbodiimida e similares; compostos de carbonilo, tais como carbonildiimidazol e similares; sais de isoxazolínio; compostos de acilamino, tais como 2-etoxi—1-etoxicarbonil-1 ,2-di-hidroquinolina; ácido fosfórico halogenado; halogeneto de sulfonilo; ou enzima amidada e similares.

De preferência, faz-se reagir a amina com 1 a 2 moles de ácido carboxílico na presença de 1 a 2 moles de agente de condensação, no seio de um dissolvente que não contenha hidrogénio activo, tal como diclorometano, clorofórmio, acetato de etilo, acetonitrilo ou similares.

Os derivados reactivos de 7-amina são compostos cefémicos cujo grupo 7-amino é activado com o auxílio de vários grupos, por exemplo, grupos sililo, tais como trimetilsililo, metoxidimetilsililo, t-butildimetilsililo e similares; grupos estanilo, tais como trimetil-estanilo e similares; grupos alquileno através dos quais o grupo amino se liga ao alcanal, acetona, acetilacetona, éster acetoacetato, acetoacetoanilida, acetacetonitrilo, ciclopentanodiona, acetilbutilolactona e similares para formar uma enamina; grupos alquilideno, tais como 1-halogeno-alquilideno, 1-halogeno-aralquilideno, 1-alcoxialquilideno,

1-alcoxiaralquilideno, 1-alcoxi-1-fenoxialquilideno, alquilideno, aralquilideno e similares; ácidos, tais como ácidos minerais, ácidos carboxílicos, ácidos sulfónicos e similares, com os quais o grupo amino forma um sal; grupos acilo que são fáceis de remover, tais como alcanoílo e similares; ou outros grupos -C^q utilizáveis para este fim. Entre os derivados reactivos de uma amina incluem-se também compostos em que os grupos funcionais diferentes do grupo 7-amino foram protegidos.

Os exemplos dos derivados reactivos de ácido carboxílico (Acil-OH) incluem anidridos simétricos ou mistos Canidridos mistos de ácido com ácido mineral (ácido fosofórico, ácido sulfúrico, semi-éster de ácido carbónico e similares), ácido orgânico (ácido alcanóico, ácido aralcanóico, ácido sulfónico e similares) e similares]; anidridos intramoleculares (cetona, isocianato e similares); halogenetos de ácido (anidrido misto de ácido com halogeneto de hidrogénio); halogenetos de ácido; ésteres activos, por exemplo, éster de enol (éster de vinilo, éster de isopropilo e similares), ésteres de arilo (éster de fenilo, éster de halogeno-fenilo, éster de. nitrofenilo e similares), ésteres heterocíclicos (éster de piridilo, éster de benzotriazolilo e similares) ésceres de compostos de N-hidroxi, ésteres de diacil-hidroxilamina (éster de N-hidroxissuccinimidoílo, éster de N-hidroxiftalimidoíIo e similar), ésteres de tiol (éster de aralquiltiol, éster de tiol heterocíclico e similares); amidas activas (amida aromática formada com imidazol, triazol, 2-etoxi-1 ,2-di-hidroquinolina ou similares ou diacilanilida) e similares.

Deixam-se reagir os derivados reactivos de amina e/ou ácido carboxílico referidos antes, na presença de agentes de fixação de ácido, por exemplo, bases inorgânicas, tais como óxidos, hidróxidos, carbonatos, hidrogenocarbonatos de metais alcalinos ou de metais alcalino-terrosos; bases orgânicas, tais como aminas terciárias, aminas aromáticas e similares; oxiranos, tais como óxido de alquileno, óxido de aralquileno e similares; sais de piridínio, tais como tricloreto de tripiridínio-triazina e similares; adsorventes, tais como Celite e similares. De preferência, faz-se reagir a amina com 1 a 2 moles de um derivado reactivo de ácido carboxílico (Acil-OH) e 0 a 2 moles de um agente de fixação de ácido, no seio de um dissolvente inerte, isento de hidrogénio activo. A reacção entre um éster enzimático e um halogeneto de ácido efectua-se mesmo no seio de um dissolvente aquoso.

Depois de c.ompletada a reacção, neutraliza-se a mistura reaccional com ácido, extraí-se com um dissolvente e concentra-se. 0 resíduo, após purificação, por exemplo, por recrisralização em um dissolvente ou por cromatografia em coluna, dá um composro protegido de fórmula geral II, o qual, em seguida, se desprotege convencionalmente para dar o produto final, o derivado de cefalosporina de fórmula geral I.

Pode preparar-se um dos compostos iniciais do Processo 2, o composto de fórmula geral IV, por exemplo, mediante amidação de um correspondente composto tendo um grupo amino na posição 7/3 mediante métodos bem conhecidos e geralmente utilizados para amidação, tal como se descreve na Preparação 7.

outro composto inicial, o composto aciltioalquitio (Ac-SI^SR-jHet) pode ser preparado mediante tratamento de um correspondente tiol heterociclico com hidreto de sódio, a uma temperatura compreendida entre cerca de -30° e 30°C, no seio de um dissolvente, tal como dimetilformamida e similares, para se obter um mercaptido de metal alcalino, o qual se faz reagir com tiolcarboxilato de halogenometilo, para dar o composto aciltioalquiltio.

Em alternativa, faz-se reagir um mercaptido heterociclico de metal alcalino com, por exemplo, bromoclorometano, para dar um composto de fórmula geral CIRgSR^Het, que se faz reagir com um sal de tiolcarboxilato para dar o composto aciltiometilo de fórmula geral AcSRgSR^Het.

A reacção entre o composto de fórmula geral IV e o composto aciltioalquiltio efectua-se, de preferência, fazendo reagir o composto de fórmula geral VI com uma quantidade igual ou com um excesso, de preferência 1 a 10 equivalentes, com maior preferência 1 a 3 equivalentes, de derivado de acetilo ou de benzoil-tiometiltio, no seio de um dissolvente apropriado, na presença de uma base, tal como metóxido de sódio, a uma temperatura compreendida entre -90° e 50°C, de preferência entre cerca de -80° e -10°C, durante cerca de 5 minutos a cerca de 20 horas, vantajosamente durante cerca de 18 minutos a cerca de 7 horas.

Podem utilizar-se quaisquer dissolventes orgânicos, desde que não sejam ácidos. São exemplos de dissolventes especialmente preferidos o tetra-hidrofurano, a dimetilformamida, o acetonitrilo, a dimetilacetoamida, a hexametilfosforamida, o dimetilsulfóxido, o metanol, o etanol, o propanol e similares.

Processo 2 é também eficazmente efectuado utilizando um derivado tioalquiltio de metal alcalino, preparado mediante reacção do composto aciltioalquiltio com um alcóxido de metal alcalino.

Depois de completada a reacção, neutraliza-se a mistura reaccional com ácido, dilui-se com água e extraí-se com um dissolvente apropriado. São exemplos de dissolventes apropriados o acetato de etilo, o diclorome14 tano e similares. Em seguida, seca-se o extracto. concentra-se sob pressão reduzida, se necessário, e purifica-se o resíduo apropriadamente mediante, por exemplo, extracção, lavagem, recristalização ou cromatografia em coluna com gel de sílica. Os dissolventes utilizados para a recristalização são tolueno, acetato de etilo, acetonitrilo, diclorometano, metanol ou similares. Os eluentes apropriados para a cromatografia são misturas de tolueno e de acetato de etilo. A desprotecção dá o derivado de cefalosporina de fórmula geral I pretendido.

Embora o composto inicial do Processo 3, o composto de fórmula geral V, possa ser um sal de metal ou de uma base orgânica, tal como a piridina, é de preferência um sal de' prata. 0 átomo de halogéneo do halogeneto de metiltiometilo pode ser um átomo de cloro, bromo ou de iodo, vantajosamente um átomo de iodo.

Podem preparar-se os compostos de fórmula geral V a partir de um composto inicial apropriado, por exemplo, um composto de fórmula geral IV referido antes, tal como se descreve a seguir. Após sulfoxidação, se necessário, converte-se um composto de fórmula geral IV num 3-tiol que, em seguida, se faz reagir com uma base para se obter um sal, de preferência um sal de prata.

A sulfoxidação é efectuada fazendo reagir o composto protegido de -fórmula geral IV, no seio de um dissolvente apropriado, com 1 a 2 moles de um agente oxidante, por exemplo, peróxido de hidrogénio, ácido peracético, ácido m-cloroperbenzóico e similares, a uma temperatura compreendida entre cerca de -40° e 10° C, durante cerca de 10 minutos a 5 horas. Em seguida, trata-se a mistura reaccional com uma solução aquosa de tiossulfato de sódio, diluí-se com um dissolvente, seca-se e concentra-se para se obter um produto bruto. Se necessário, purifica-se o produto bruto mediante, por exemplo, cromatografia em coluna com gel de sílica utilizando como eluente diclorometano, clorofórmio ou similares.

Prepara-se o 3-tiol a partir de composto 3-sulfoniloxi dissolvendo este último num dissolvente apro- 15 priado, adicionando-lhe hidrogeno-sulfureto de sódio e deixando reagir a uma temperatura compreendida er.rre cerca de -40° e 0 °C durante cerca de 30 a 60 minutos. Keutraliza-se a mistura com um ácido, tal como ácido clorídrico, e extraí-se com um dissolvente orgânico apropriado, tal como o acetato de etilo. Seca-se o extracto e concentra-se para se obter o tiol. São exemplos de dissolventes apropriados a dimetilformamida, o acetonitrilo e similares.

Prepara-se um sal de prata de 3-ticl fazendo reagir o referido tiol com um ligeiro excesso de nitrato de prata no seio de um dissolvente apropriado, a uma temperatura compreendida entre cerca de -30° e 20° C durante cerca de 10 a 30 minutos. São exemplos de dissolventes o tetra-hidrofurano, o diclorometano e similares. Separa-se o sal de prata mediante, por exemplo, diluição da mistura reaccional com água, extracção da solução diluída com diclorometano e concentração do extracto.

Pode preparar-se o derivado alquiltio halogenado de fórmula geral Hal-R SR^ Het mediante clorometilação de um tiol heterocíclico com bromoclorometano no seio de um dissolvente, tal como a dimetilformamida, na presença de uma base, por exemplo, o hidreto de sódio. Em seguida, se necessário, submete-se o produto clorometilado obtido a uma reacção de substituição de iodo com iodeto de sódio.

Efectua-se a reacção entre o composto de fórmula geral V e o derivado metiltio 2-halogena.do no seio de um dissolvente apropriado, a uma temperatura compreendida entre cerca de 0 ⁰ e 30°C durante 2 a 20 horas. Sãc exemplos de dissolventes apropriados a hexametilfosforamida, a dimetilformamida e similares. Extrai-se o produto com um dissolvente orgânico, tal como o acetato de etilo ou outro semelhante e concentra-se o extracto. Em seguida, purifica-se o resíduo mediante, por exemplo, cromatografia em coluna com gel de sílica.

Efectua-se a redução do sulfóxido de fórmula geral II utilizando quaisquer agentes redutores normalmente utilizados no domínio da cefalosporina, tais como tricloreto de fósforo, cloreto estanoso e similares.

Como passo final, desprotege-se o composto de fórmula geral II para se obter o derivado de cefalosporina de fórmula geral I de acordo com a presente invenção.

Efectua-se a desprotecção de acordo com os procedimentos convencionai s.

Pode efectuar-se a desprotecção dos grupos carboxi-protectores no seio de um dissolvente inerre utilizando um processo convencional. Por exemplo, suando o grupo carboxi-protector é um grupo que forma éster reactivo, este pode ser removido mediante tratamento do produto protegido no seio de um dissolvente com ácido, base, solução tampão, resina permutadora de iões e similares. Quando o grupo carboxi-protector é um grupo que forma um éster insuficientemente reactivo, este pode ser activado mediante processos convencionais antes da desprotecção. 0 modo de efectuar a activação depende do tipo de éster do seguinte modo: os ésteres de tricloroetilo são tratados com metal e ácido; os ésteres de p-nitrobenzilo são tratados por hidrogenação; com sais do ácido ditiónico; ou com metal e ácido; os ésteres de fenacilo são tratados por radiação de luz.

Os grupos carboxi-protectores que sãc grupos aralquilo podem ser removidos mediante hidrogenação catalítica com paládio, platina, níquel ou outros semelhantes.

Os grupos carboxi-protectores que são grupos alquilo terciário, ciclopropilmetilo, 2-alcenilo, aralquilo, sulfoniletilo podem ser removidos mediante tratamento do produto com ácido, eventualmente na presença de um agente de fixação de catiões, tal como anisol, benzenotiol e similares. Os exemplos de ácidos incluem ácidos inorgânicos; ácidos de Lewis, tais como cloreto de alumínio, cloreto estânico, tetracloreto de titânio e similares; ácidos sulfónicos, tais como ácido benzeno-sulfónico, ácido metano-sulfónico, ácido trifluorometano-sulfónico e similares; ácidos carboxílicos fortes, tais como ácido trifluoroacético e similares.

Quando o grupo carboxi-protector é um grupo 2-alcenilo, pode ser removido mediante tratamento do produto

- 17 com compostos quelatos de triarilfosfina-paládio.

Se o grupo carboxi-protector for um grupe fenacilo, 2-alcenilo, hidroxiaralquilo ou semelhante, pode ser removido mediante tratamento do produto com um álcali ou com um reagente nucleófilo.

Como é do conhecimento dos especialistas na matéria, podem também utilizar-se outros processos equivalentes para a desprotecção.

Os grupos hidroxi protegidos podem ser convenientemente desprotegidos, por exemplo, pela acção de um ácido carboxílico forte, um ácido de Lewis (por exemplo cloreto de alumínio, óxido de bis(alquil-estanilo)), etc., se necessário na presença de um agente de fixação de catiões para cindir a ligação éter, pela acção de um ácido ou de uma base para hidrolisar um grupo éster, etc.. Esta reacção é usualmente efectuada no seio de um dissolvente a uma temperatura compreendida entre -10° e 50° C, durante 30 minutos a 10 horas, para se obter o composto de hidroxi pretendido.

grupo amino protegido pode ser convenientemente desprotegido, por exemplo, do modo seguinte:

a) Um grupo amino-protector alcoxicarbonilo (t-butoxicarbonilo, etc.) ou similar: com o auxílio de um ácido forte (ácido trifluoroacético, ácido trifluorometano-sulfónico, etc.), ácido de Lewis (cloreto de alumínio, cloreto estânico, cloreto de titânio, cloreto de zinco, etc.) ou outros ácidos, se necessário na presença de um agente de fixação de catiões (anisol, benzenotiol, etc.).

b) Um grupo aralcoxicarbonilo (carbobenzoxi, metilcarbobenzoxi, difenilmetoxicarbonilo, etc.) ou um grupo amino-protector semelhante: com o auxílio do referido ácido de Lewis e de um agente de fixação de catiões ou com hidrogénio (hidrogenação catalítica com um catalisador de paládio ou de níquel, etc.).

c) Um grupo alcanoílo inferior (formilo, acetilo, cloroacetilo, etc.), um grupo que forma uma base de Schiff (um grupo com um átomo de carbono divalenze, por exemplo, etilideno, propilideno, benzilideno, benzilideno substituído, etc.), aralquilo (tritilo, tritilc substituído, etc.), ariltio (fenilsulfenilo, etc.), tetra-hidropiranilo, sililo ou estanilo (trimetil-estanilo, trimetilsililo, etc.) ou similares: com o auxílio de um ácido (ácido clorídrico, ácido sulfúrico, ácido metano-sulfónico, etc. ou semelhantes.

d) Outros grupos: utilizam-se processos específicos para cada grupo protector (por exemplo, utiliza-se a tioureia para halogenoacetilo ou N-alquilditiocarbamato; hidrazina para acilo de ácido dibásico; pentacloreto de fósforo e alcanol para amida; etc.).

Os procedimentos de desprotecçâo indicados antes e outros semelhantes estão descritos, por exemplo, em J.F.W. McOmie Ed. , Protective Groups in Oorganic Chemistry, Nova Iorque, PLEUM PRESS, 1973, p.183; S. Patai,

Ed. , The Chemistry of Functional Groups, Londres, Interscience Publ., John Wiley & Sons Ltd., 1969; Flynn Ed., Cephalosporins and Penicillins, Nova Iorque, Academic Press, 1972, etc..

Assim, a presente invenção proporciona também um processo para a preparação dos compostos a que se refere a reivindicação 1 , que consiste em introduzir um substituinte na posição 3, um grupo éster 4-carboxilato, um sal de

4-carboxilato ou um grupo 7-acilo, reduzir o sulfóxido ou desproteger. Podem obter-se variantes estruturais mediante modificação do núcleo cefem, por exemplo, na posição 7, caso seja necssário.

Em seguida, converte-se eventualmente o ácido livre de fórmula geral I obtido nos seus sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, por processos convencionais, tal como se descreve a seguir. Estes sais podem ser formados com a base correspondente utilizada para fins clínicos no domínio dos antibióticos de cefalosporina, por exemplo, sais de metal leve, tais como sais de lítio, sódio, potássio, magnésio, cálcio ou de alumínio, os quais proporcionam iões fisiologicamente aceitáveis. Outros sais preferidos são os formados com alquil(-C^ ₂ /amónio, tais como trimetilamónio, trietilamónio, metilmsrfolínio e semelhantes; ou com bases aromáticas C^-C^, tais como piridinio, colidínio, picolínio, quinolínio, dimetilanilínio ou semelhantes. Além disso, pode proteger-se o derivado de cefalosporina de fórmula geral I com qualquer dcs grupos que formam éster farmacologicamente activo C₂~C^^ referidos antes, para se obterem ésteres que apresentam actividades bactericidas mediante administração por via oral e por via parenteral, especialmente administração por via oral.

Os carboxilatos dos ácidos livres de fórmula geral I podem obter-se de modo convencional fazendo reagir o ácido de fórmula geral I com uma base ou com um sal de um ácido carboxílico fraco formado com a base. Por exemplo, neutraliza-se um ácido de fórmula geral I com uma base (um hidróxido, um carbonato ou um hidrogenocarbonato de um metal leve) ou submete-se a uma decomposição de permuta com um sal de um ácido carboxílico inferior (acetato de sódio, lactato de sódio, 2-etil-hexanoato de sódio e similares). Pode isolar-se o sal obtido mediante separação por diluição da mistura reaccional com um dissolvente apropriado no qual o sal seja praticamente insolúvel ou se dissolva pouco ou mediante liofilização.

A reacção completa-se geralmente dentro de 1 a 10 minutos a uma temperatura inferior a cerca de 50° C. Quando não se verificam reacções secundárias, pode deixar-se prosseguir a reacção durante um período mais prolongado.

Fazendo reagir os carboxilatos dos compostos de fórmula geral I com ácido, obtêm-se os compostos de fórmula geral I. Nestas condições, a presente invenção proporciona também um processo para a preparação de compostos de fórmula geral I mediante reacção de um sal de um composto de fórmula geral I com um ácido.

Quando os compostos de fórmula geral I comportam um grupo básico, tal como um grupo amino, podem fazer-se reagir com um ácido, por exemplo, ácido clorídrico ou ácido acético, para se obter um sal de adição de ácido tal como se definiu antes, de um modo convencional, no domínio da cefalosporina, nomeadamente fazendo reagir o composto de fórmula geral I com cerca de 1 a 2 moles de um ácido, a uma temperatura compreendida entre cerca de 0° e 50°C durante cerca de 10 a 90 minutos.

Embora os Processos 1 , 2 e 3 sejam preferíveis para a preparação dos compostos de fórmula geral I, a presente invenção não se limita aos compostos preparados por estes Processos, estando todos os compostos de fórmula geral I preparados por quaisquer outros processos convencionais compreendidos no âmbito da presente invenção.

As reacções referidas antes são efectuadas a uma temperatura compreendida entre cerca de -80° e 100°C,de preferência entre cerca de -40° e 50° C, durante cerca de 10 minutos a 20 horas, em geral. Quando o produto é estável o tempo de reacção pode ser mais prolongado. Nas reacções referidas antes, quaisquer técnicas convencionais, tais como o dissolvente de reacção, condição anidra, introdução de gás inerte, agitação, etc., estão incluídas como opção.

de dissolventes de reacção para antes os hidrocarbonetos, tais octano, benzeno, tolueno, xileno

Sao exemplos os processos referidos como pentano, hexano e outros semelhantes; hidrocarbonetos halogenados, tais como diclorometano, clorofórmio, tetracloreto de carbono, dicloroetano, tricloroetano, clorobenzeno e similares; éteres, tais como éter dietílico, éter metilisobutílico, dioxano, tetra-hidrofurano e semelhantes; cetonas, tais como acetona, metiletilcetona, ciclo-hexanona e semelhantes; ésteres, tais como acetato de etilo, acetato de isobutilo, benzoato de metilo e semelhantes; hidrocarbonetos nitros, tais como nitrometano, nitrobenzeno e semelhantes; nitrilos, tais como acetonitrilo, benzonitrilo e semelhantes; amidas, tais como, formamida, acetamida, dimetilformamida, dimetilacetamida, hexametilfosforamida e semelhantes; sulfóxidos, tais como dimetilsulfóxido e outros; ácidos carboxilicos, tais como ácido fórmico, ácido acético, ácido propiõnico e semelhantes; bases orgânicas, tais como dietilamina, trietilamina, piridina, picolina, colidina, quinolina e semelhantes; álcoois, tais como metanol, etanol, propanol, hexanol, octanol, álcool benzílico e semelhantes; água;

e outras séries de solventes industriais ou a respectiva mistura.

Separa-se o produto pretendido da mistura reaccional mediante remoção dos contaminantes, tais comc compostos iniciais que não reagiram, sub-produtos ou dissolventes, por meio de procedimentos convencionais, tais como extracção, evaporação, lavagem, concentração, precipitação, filtração, secagem e similares. Submete-se o produto isolado a processamento convencional, tal como adsorção, eluição, destilação, precipitação, recristalizaçâo, cromatografia e similares ou quaisquer combinações destas técnicas.

Embora se dê preferência aos Processos 1 , 2 e 3 para a preparação dos compostos de fórmula geral I, a presente invenção não se limita aos compostos preparados por estes processos, estando todos os compostos de fórmula geral I preparados por quaisquer outros processos convencionais compreendidos no âmbito da presente invenção.

Efectuaram-se as experiências in vitro e in vivo com os compostos da presente invenção para determinar a sua potência como antibióticos. Por ensaio in vitro, os compostos de fórmula geral I demonstraram ser altamente eficazes contra bactérias gram positivas, por exemplo Staphylococcus aureus e Streptococcus pyogenes, bem como contra bactérias gram negativas, por exemplo, Escherichia coli, Enterobacter cloacar, Pseudomonas aeruginosa, Proteus vulgaris, Proteus mirabilis, Serratia marcescens, Haemophilus influenzae, Klebsiella pneumoniae e Morgania morganii.

Deste modo, a presente invenção proporciona um método para combater as bactérias que consiste em fazer contactar as bactérias com uma quantidade eficaz de um composto de fórmula geral I.

Determinou-se a taxa de absorção in vivo dos compostos de fórmula geral I após administração por via oral, administrando um composto de acordo com a presente invenção a um murganho e determinando a respectiva concentra22

ção	no sangue. Os	resultados mostram que	cs ctmpostcs
de	fórmula geral 1	proporcionam elevadas	csncer.traçces
no	sangue mediante	administração por via	oral revelando
uma	excelente taxa de	absorção.

Nestas condições, os compostos de fórmula geral I são eficazes como antibióticos mediante administração por via oral ou por via parenteral e são utilizáveis no tratamento de infecções provocadas por uma larga variedade de bactérias sensíveis aos compostos de fórmula geral 1.

Num outro aspecto da presente invenção, proporciona-se um método para o tratamento ou o sontrolo de infecções bacterianas no homem, nos animais, em materiais perecíveis ou como desinfectantes, que consiste em aplicar uma quantidade.eficaz de um composto de fórmula geral I.

A presente invenção proporciona também composições farmacêuticas que contêm, como ingredier.ee activo, uma quantidade eficaz de um composto de fórmula geral I, um seu sal aceitável sob o ponto de vista farmacêutico ou um seu derivado hidroxi-protegido e/ou aminc-proregido.

Para administração por via oral, podem fcrmular-se os compostos de fórmula geral I em composições convencionais, tais como cápsulas, comprimidos, grânulos, pós e suspensões, juntamente com veículos aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico, diluentes ou éxcipiéntés. Para administração por via parenteral, formulam-se cs compostos de fórmula geral I sob a forma de, por exemplo, soluções ou suspensões injectáveis por via subcutânea, intramuscular, intravenosa ou intraperitonial. Além disso, os compostos de acordo com a presente invenção podem ser formuladas sob a forma de pomadas, supositórios, linimentos e similares.

As doses diárias apropriadas para cs compostos de fórmula geral I estão compreendidas entre cerca de 1Omg e cerca de 4000mg, de preferência entre cerca ce 10Omg e cerca de 2000mg, para administração por via oral, e entre cerca de 10mg e cerca de 4000mg, de preferência entre cerca de 50mg e cerca de 2000mg, para administração por via parenteral.

Os Exemplos que se seguem são apresentados para ilustrar melhor a presente invenção e não devem ser considerados como limitando o seu âmbito.

As abreviaturas utilizadas nos Exemplos são as seguintes:

Ac = acetilo; At = 2-aminotiazol-4-ilo; Bh = difenilmetilo; Boc = t-butoxicarbonilo; Et = etilo; Me = metilo; Ph = fenilo; PMB = p-metoxibenzilo; Tr = tritilo.

Preparação 1 aciltiometilo

NaSHet -> AcSCH^SHet

1) Het = 1 ,2,3-triazol (1P1)

A uma suspensão de 38 g (309 nmoles) do sal de sódio de 1,2,3-triazol-4-tiol em 150 ml de dimetilformamida, à temperatura de -20°C, adicionam-se, gota a gota, 37,4g (300 mmoles) de tiolacetato de clorometilo, durante 10 minutos, e agita-se a mistura à mesma temperatura durante 30 minutos e à temperatura ambiente durante 2 horas, diluí-se com água e extrai-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com água, com solução aquosa de hidrogenocarbonato de sódio e com água, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se sob pressão reduzida. Lava-se o resíduo cristalino com hexano, seca-se e recristaliza-se em éter para se obter em 38,9g de 4-acetiltiometiltio-1,2,3-triazol. Rendimento: 69%; p.f. 88° - 89°C.

RMN J (CDC1 ) ppm: 2,36(s, 3H), 4,37(s, 2H) ,

6.3(s largo, 1H), 7,73(s, 1H).

IV κ (CHC1₃) cm~^{* 1} : 3430, 31 52, 1 693, 1 1 31.

2) Het = 1,2,4-triazol (1P4)

A uma solução de 2,23g (22,1 mmoles) em 30 ml de dimetilformamida, adicionam-se 840mg (21 mmoles, a

60% em óleo) de hidreto de sódio e agita-se a mistura à temperatura ambiente durante.10 minutos. A esta solução, a uma temperatura compreendida entre -50° e -60°C, adiciona-se uma solução de 2,50g (20,1 mmoles) de tiolacetato de diclorometilo em 5 ml de dimetilformamida e agita-se a mistura à mesma temperatura durante 20 minutos, mistura-se com uma outra solução de 6,70g ; 24 mmoles) de cloreto de tritilo e 1,94 ml (24,0 mmoles) de piridina, agita-se sob arrefecimento com gelo durante 28 horas, dilui-se com água e extrai-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se sob pressão reduzida. Purifica-se o resíduo mediante cromatografia em gel de silica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (20:1) e cristaliza-se em éter para se obter em 3,37g de 3-acetiltiometiltio-1-tritil-1 ,2,4-triazol, sob a forma de cristais incolores. Rendimento: 39%; p.f. 124° - 125°C.

RMN (CDC1₃ ) ppm: 2,32(s, 3H), 4,50(s, 2H),

7,1-7,2(m, 6H), 7,3- 7,4 (m, 9H), 7',90(s, 1H).

IV(CHC1₃ ) cm¹: 1690, 1490, 1472, 1444, 1383,

352, 1 271 , 1 228, 1 1 31 .

3) Het - 5-tetrazolilo (3PA3)

A uma solução de 3,00g (29,41 mmoles) de tetrazol-5-tiol em 50 ml de di-metilformamida, sob arrefecimento com gelo, adicionam-se 2,59g (64,75 mmoles numa suspensão a 60% em óleo) de hidreto de sódio e agita-se a mistura sob arrefecimento com gelo durante 5 a 6 minutos. À mistura adiciona-se uma solução de 4,39g (35,26 mmoles) de tiolacetato de clorometilo em 10 ml de dimetilformamida e agita-se a mistura à temperatura ambiente durante 2 horas. Diluí-se a mistura reaccional com 11 ml de ácido clorídrico a 10% e com água e extrai-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio, filtra-se e concentra-se. Purifica-se o resíduo por cromatografia em coluna de gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (1:1) e lava-se o resíduo obtido

- 25 com uma mistura de n-hexano e com éter para se obterem, 2,49g de 5-acetilriometiltiotetrazol sob a forma de cristais incolores. Rendimento: 45%; p.f. 90°C.

RMN _á (CDC1₃ ) ppm: 2,42(s, 3H) , 4,6E:s, 2H).

8-9(s largo, 1 H).

IV j/ (CHC1₃) cm^-1: 3072 largo, 1692, 1520, 1356,

31 ·

4) Het = 2-piridilo (2PA3).

A uma solução de 1,11g (9,98 mmoles) de 2-mercaptopiridina em 10 ml de dimetilformamida, adicionam-se 400mc (dispersão em óleo a 60%) de hidreto de sódio e agita-se a mistura à temperatura ambiente durante 2 a 3 minutos. A esta mistura reaccional, à temperatura de -30°C, adicionam-se uma solução de 1,12g (9,00 mmoles) de tiolacetato de clorometilo em 2 ml de dimetilformamida e agita-se a mistura a uma temperatura compreendida entre -20 ⁰ e -30° 2 durante 1 hora. Diluí-se a mistura reaccional com acetato de etilo, lava-se com água e com uma solução concentrada ce cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se. Purifica-se o resíduo por cromatografia em gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de toluer.o/acetatc de etilo (20:1) para se obter 1,43g de 2-acetiltiometiltiopiridina sob a forma de um óleo amarelo. Rendimento: 72%.

RMN _ó (CDC1₃ ) ppm: 2,35(s, 3H) , 4,65(s, 2H), 7,O3(ddd, J=7,4 Hz, J=4,9 Hz, J=1,0 Hz, 1H), 7,l8(ddd,

J=8,0 Hz, J=1,0 Hz, J=1,0 Hz, 1H), 7,51 (ddd, >8,0 Hz,

J=7,4 Hz, J=1,8 Hz, 1H), 8,47 (ddd, J=4,9 Hz, >1,8 Hz,

J=1,0 Hz, 1H).

IV p (CHC1 ) cm^-1: 1686, 1576, 1556, 1452, 1414,

1353, 1123, 956.

5) Het = 1,2,3-triazol-4-ilo: utilizando o derivado benzoílico (4P7)

1. A uma suspensão de 10,Og (81,3 mmoles) go sal de sódio 1,2,3-triazol-4-iltiol em ' 100 ml de dimetilformamida, sob arrefecimento com gelo, adicionam-se 100 ml de bromoclorometano e agita-se a mistura durante 1 hora à mesma temperatura. Diluí-se a mistura reaccional com água e extrai-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se para se obterem 10,21g de 4-clorometiltio-1,2,3-triazol sob a forma de cristais incolores. Rendimento: 84%; p.f.: 79° - 80°C.

RMN ₆ (CDC1 ) ppm: 4,93(s, 2H) , 7,91 (s, 1H),

9,6-10,2(s largo, 1H).

IV _v (Nujol) cm“¹ : 3140, 1499, 1393, 1246, 1230,

1117, 1002.

2. A uma solução de 470 mg (3,4 mmoles) de ácido tiobenzóico em 1 ml de dimetilformamida, sob arrefecimento com gelo, adicionam-se 136 mg (3,4 mmoles numa dispersão em óleo a 60%) de hidreto de sódio e, em seguida, ao fim de 10 minutos, 449 mg (3 mmoles) de 4-clorometiltio-1 ,2,3-triazol e agita-se a mistura sob arrefecimento com gelo durante 10 minutos e à temperatura ambiente durante 4 horas. Diluí-se a mistura reaccional com água e extrai-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com uma solução aquosa de hidrogenocarbonato de sódio a 5%, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se. Pu,rifica-se o resíduo por cromatografia em gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de touleno/acetato de etilo (5:1) para se obterem 417 mg de 4-benzoiltiometiltio-1,2,3-triazol. Rendimento: 55%.

A rescristalização deste produto em uma mistura de hexano/éter etílico dá agulhas incolores de p.f. 72,5° - 73,5°C.

RMN j (CDC1₃) ppm: 4,57(s, 2H), 7,4-7,65(m, 3H), 7,75(s, 1H), 7,9-7,96(m, 1H).

IV (CHCIJ cm^-1: 3425, 3146, 1667, 1206, 1175,

911 .

Preparação 2 clorometilo

NaSHet > ClCH₂SHet

- 27 1) Het - tritil-1,2,4-triazol-3-ilo (A-ó).

A uma solução de 10,Og (59 mmoles) de 1,2,4-triazol-3-iltiol em 100 ml de dimetilfcrmamida, sob arrefecimento com gelo, adicionam-se 3,96g (99 mmoles, numa dispersão em óleo a 60%) de hidreto de sódio e agita-se a mistura à mesma temperatura durante 10 minutos para se obter o 1,2,4-triazol-3-il-mercapteto de sódio, mistura-se com 100 ml de bromoclorometano e agita-se à mesma temperatura durante 14 horas. Diluí-se a mistura reaccional com acetato de etilo, lava-se com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se.

A uma solução de resíduo, 3-clorometiltio-1,2,4-triazol, em 100 ml de dimetilformamida, adicionam-se, sob arrefecimento com gelo, 27,6g (99 mmoles) de cloreto de tritilo e 13,8 ml de trietilamina e agita-se a mistura durante 30 minutos sob arrefecimento com gele. Diluí-se a mistura reaccional com água e extraí-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com uma solução saturada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se. Cristaliza-se o resíduo em éter etilico para se obterem 20,2g de tritil-3-clorometiltio-1 ,2,4-triazol seb a forma de cristais brancos. Rendimento: 52%; p.f.: 121° - 122°C.

RMN (CDC1₃ ) _ ppm: 5,18(s, 2H), 7,1-7,2(m, 6H),

7,3-7,4 (m, 9H), 7,95 (s, 1H).

IV χ) (CHC1 ) cm^-1: 1599, 1492, 1472, 1445, 1 389, 1365, 1353, 1325.

2) Het = 1-metil-1,2,4-triazol-3-ilo e 2-metil-1,2,4-trizol-3-ilo (4P4)

1. A uma mistura de 10,1g (0,10 mole) de 1,2,4-triazol-3-iltiol e 17,2g (0,11 mole) de cloreto de p-metoxibenzilo em 50 ml de diclorometano, adiciona-se uma mistura de

105 ml de uma solução aquosa de hidróxido de sódio 1N e

750 mg (2,3 mmoles) de brometo de tetrabutilamónio e agita-se a mistura à temperatura ambiente durante 16 horas.

Extraí-se a mistura reaccional com acetato de etilo. Lava- 28 -se o extracto com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se. Cristaliza-se o resíduo em tolueno para se obterem 16,71g de 3-p-metoxibenziltio-1 ,2,4-triazol sob a forma de cristais incolores. Rendimento: 76%; p.f.: 100° - 101°C.

RMN (CDClg) ppm: 3,77(s, 3H), 4,32(s, 2H),

6,79-6,83, 7,23-7,27 (A2B2, 4H) , 7,O-7,8(s largo, 1H), 8,13(s, 1H).

IV _v’ (CHClg ) cm^-1 : 3400, 31 20br, 1611, 1512, 1485, 1465, 1441, 1302.

2. A uma solução de 10,Og (45,2 mmoles) de 3-p-metoxibenziltio-1,2,4-triazol em 100 ml de metanol, adiciona-se, sob arrefecimento com gelo, uma solução de diazometano em éter etílico (preparada a partir de 15g de N-nitrosometilureia) e agita-se a mistura durante 1 hora. Concentra-se a mistura reaccional e purifica-se por cromatografia em coluna Lobar utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (1:2 a 1:3) para se obterem 5,17g de 3-p-metoxibenziltio-2-metil-1 ,2,4-triazol.

RMN _á (CDClg) ppm: 3,63(s, 3H), 3,79(s, 3H),

4,34(s, 2H), 6,80-6,84, 7,19-7,24 (A2B2, 4H) , 7,88(s, 1H).

IV J (CHC1 ) cm^-1: 1611, 1511, 1476, 1464, 1440, 1360, 1302; rendimento: 49%; e 3,60g de 3-p-metoxibenziltio—1-metil-1 ,2,4-triazol: RMN (CDClg ) ppm: 3,78(s, 3H),

3,87(s, 3H), 4,31(S, 2H), 6,80-6,85, 7,30-7,34(A2B2, 4H), 7,99(s, 1H). IV J (CHClg ) cm^-1 : 1612, 1 51 2, 1465, 1440,

1421, 1356, 1302. Rendimento: 34%.

3. A uma solução de 5,O9g (21,7 mmoles) de 3-p-metoxibenziltio-2-metil-1,2,4-triazol em uma mistura de 40 ml de diclorometano e de 40 ml de metanol, adicionam-se 5,90g (25,9 mmoles) de perclorato de prata e agita-se a mistura à temperatura ambiente durante 90 minutos. Diluí-se a mistura reaccional com 100 ml de metanol e recolhem-se mediante filtração os cristais obtidos de 3-argentiotio-2-mecil-1 ,2,4-triazol, lavam-se com metanol e secam-se. A uma suspensão deste produto em 40 ml de dimetilformamida, adicionam-se 40 ml de bromoclorometano e 2,32g (de 65.2 mmoles) de cloreto de lítio e agita-se a misrura durante 22 horas à temperatura ambiente. Mistura-se a mistura reaccional com uma solução saturada de cloreto de sódio e com acetato de etilo e filtra-se para remover a matéria insolúvel.

Recolhe-se a fase orgânica, lava-se com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se. Purifica-se o resíduo por cromatografia em gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (4:1) para se obter 1,62g de 3-clorometiltio-2-metil-l ,2,4-triazol sob a forma de um óleo incolor. Rendimento: 46%.

RMN,· (CDC1_) o 3 ppm: 3,&7(s,

3H), 5,19(s, 2H),

7,96(s, 1H).

IVp (CHC1₃) cm^-1: 1479, 1395, 1360.

4. A uma solução de 3,55g (15,1 mmoles) de 3-p-metoxibenziltio-1 -metil-1,2,4-triazol numa mistura de 30 ml de diclorometano e de 30 ml de metanol adicionam-se 4,1 Ig (18,1 mmoles) de perclorato de prata e agita-se a mistura à temperatura ambiente durante 90 minutos. Dilui-se a mistura reaccional com 100 ml de metanol e recolhem-se por filtração os cristais obtidos de 3-argentiotio-1-metil-1,2,4-triazol, lavam-se com metanol e secam-se. A uma solução deste produto em 30 ml de dimetilformamida adicionam-se 30 ml de bromoclorometano e 1 ,96g (45,3 mmoles) de cloreto de lítio e agita-se a mistura à temperatura ambiente durante 21 horas. À mistura reaccional adicionam-se uma solução concentrada de cloreto de sódio e acetato de etilo e filtra-se para remover a matéria insolúvel. Recolhe-se a fase orgânica, lava-se com uma solução saturada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se. Purifica-se o resíduo por cromatografia em gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (2:1) para se obter 1,05g de 3-clorometiltio-1-metil-1,2,4-triazol, sob a forma de um óleo incolor. Rendimento: 43%.

RMN _s (CDC1₃ ) ppm: 3,93(s, 3H), 5,21(s, 2H),

8,06(s, 1H).

IV^ (CHC1₃) cm^-1: 1509, 1471, 1424, 1392, 1359.

3) Het = 1,2,3-tiadiazolilo (3PA1-1).

A uma solução de 2,50g (pureza: 70,9%; 10,07 mmoles) de di-hidrato do sal de sódio de 1,2,3-tiadiazol-5-tiol em 20 ml de dimetilformamida adicionam-se, sob arrefecimento com gelo, 20 ml de bromoclorometano, de uma só vez, e agita-se a mistura sob arrefecimento com gelo durante 90 minutos. Diluí-se a mistura reaccional com água e extrai-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio, filtra-se e concentra-se. Purifica-se o resíduo por cromatografia em coluna de gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (20:1), para se obterem 1,60g de 5-cloro-metiltio-1 ,2,3-tiadiazol sob a forma de um óleo incolor. Rendimento: 95%·

RMN _á (CDC1 ) ppm: 4,93(s, 2H), 8,69(s, 1H).

IV p (CHC1 ) cm^-1: 141 9, 1 395, 1 256, 1102.

4) Het - 1,3,4-tiadiazol-2-ilo (2PA1-1).

A uma solução de 4,72g (40 mmoles) de 1,3,4-tiadiazol-2-tiol em 80 ml de dimetilformamida, adicionam-se sob arrefecimento com gelo, 1,76g (1,1 equivalentes;

mmoles; numa dispersão em óleo a 60%) de hidreto de sódio, em porções, e agita-se a mistura durante 15 minutos. A solução resultante adicionam-se 80 ml de bromoclorometano e agita-se a mistura à mesma temperatura durante mais 2 horas. Diluí-se a mistura reaccional com água e extraí-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato sódio e concentra-se. Purifica-se o resíduo por cromatografia em gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (20:1) para se obterem 6,O5ç de 2-clorometiltio-1,3,4-tiadiazol sob a forma de um ólec incolor. Rendimento: 91%.

RMN _ó (CDC1₃ ) ppm: 5,32(s, 2H), 9,16( = , 1H).

IV _v (CHC1 ) cm^-1 : 1 389, 1 373, 1 232, 1 061.

5) Het = 2-metil-1,3,4-tiadiazol-5-ilo (2PA1-2).

A uma solução de 2,64g (20 mmoles) de 2-metil—1,3,4-tiadiazol—5—tiol em 40 ml de dimetilformamida adicionam-se, sob arrefecimento com gelo, 880 mg (1,1 equivalentes, 22 mmoles; numa dispersão em óleo a 60%) de hidreto de sódio, em porções, e agita-se a mistura durante 10 minutos. À solução resultante adicionam-se 40 ml de bromoclorometano e agita-se a mistura à mesma temperatura durante mais 1 hora e 30 minutos. Diluí-se a mistura reaccicr.al com água e extraí-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e purifica-se por cromatografia em gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (10:1) para se obterem 3,3g de

5-clorometiltio-2-metil-1,3,4-tiadiazol sob a forma de um óleo incolor. Rendimento: 91%.

1189.

RMN (CDC1₃

IV p (CHC1 ) cm ppm: 2,79(s, 3H) , 5,24( = , 2H) .

1430

392, 1 380, 1 232,

6) Het = 1-metil-5-tetrazolilo (3PA1-2).

A uma solução de 2, OOg (14,5 mmoles) de sal de sódio de 1-metiltetrazol-5-tiol em 20 ml de dimetilformamida, adicionam-se, sob arrefecimento com gelo, 20 ml de bromoclorometano, durante 90 minutos.

de uma só vez, e agita-se a mistura Diluí-se a mistura reaccional com agua e extrai-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio, filtra-se e concentra-se. Purifica-se o resíduo por cromatografia em coluna de gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (20:1 - 10:1) para se obter 1 ,73g de 5-clorometiltio-1-metiltetrazol sob a forma de cristais incolores. Rendimento: 72%; p.f.: 55° - 56°C.

RMN _Á (CDC1₃ ) ppm: 4,03(s, 3H), 5,29(s, 2H).

IV (CHC1₃ ) cm^-1’ : 1467, 1408, 1384, 1278,

1235, 1171.

7) Het = 2-metiltetrazol-5-ilo (4P5).

1. A uma solução de 7,00g (31,5 mmoles) em 150 ml de metanol adiciona—se, sob arrefecimento com gelo, uma solução de diazometano em éter etílico (preparada a partir de 14g de N-nitrosometil-ureia) e agita-se a mistura durante 1 hora e, em seguida, concentra-se. Purifica-se o resíduo por cromatografia em coluna de Lobar utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (5:1) para se obterem 4,86g de 5-p-metoxibenziltio-2-metiltetrazol: RMN _ó (CDC1 ₃) ppm: 3,78(s, 3H), 4,29(s, 3H) , 4,38(s, 2H),

6.81- 6,85, 7,30-7,34 (A2B2, 4H). IV (CHC1₃ ) cm^-1 : 1611,

1512, 1390, 1324, 1303, sob a forma de um óleo incolor; rendimento: 65%; e 2,71g de 5-p-metoxibenziltio-1-metiltetrazol: RMN _á (CDC1 ) ppm: 3,79(s, 3H), 3,80(s, 3H), 4,49(s, 2H),

6.82- 6,86, 7,27-7,31 (A2B2, 4H). IV (CHC1₃ ) cm^-1 : 1613,

1513, 1465, 1305, sob a forma de cristais incolores.

Rendimento: 36%.

2. A uma solução de 4,86g (20,59 mmoles) de 5-p-metoxibenziltio-2-metiltetrazol em uma mistura de 40 ml de diclorometano e de 40 ml de metanol adicionam-se 6,17g (26,78 mmoles) de perclorato de prata e agita-se a mistura à temperatura ambiente durante 2 horas. Diluí-se a mistura reaccional com 100 ml de metanol e recolhem-se por filtração os cristais de 5-argentiotio-2-metiltetrazol obtidos, lavam-se com metanol e secam-se. A uma sOlução deste produto em 40

Πιΐ de dimetilformamida adicionam-se 40 ml de bromoclorometano e 2,67g (61,7 mmoles) de cloreto de lítio e agita-se a mistura à temperatura ambiente durante 20 horas. Mistura-se a mistura reaccional com uma solução saturada de cloreto de sódio e com acetato de etilo e filtra-se para remover a matéria insolúvel. Recolhe-se a fase orgânica, lava-se com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se. Purifica-se o resíduo por cromatografia em gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (20:1) para se obterem 1 ,91g de 5-clorometiltio-2-metiltetrazol sob a forma de um óleo incolor. Rendimento: 56%.

RMN ₆ (CDC1₃) ppm: 4,37(s, 3H) , 5,23(s, 2H) .

IVv (CHCL₃) cm^-1: 1440, 1422, 1410, 1395, 1325. Preparação 3 Substituição com iodo

Nal

ClCH^SHet --> ICH₂SHet

1) Het = 1-metil-1 ,2,4-triazol-3-ilo (4P4).

A uma solução de 981 mg (6,0 mmoles) de 3-clorometiltio-1-metil-1,2,4-triazol em 10 ml de acetona adiciona-se 1,78g (12 mmoles) de iodeto de sódio e agita-se a mistura à temperatura de 50° C durante 3 horas. Diluí-se a mistura reaccional com água e extrai-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com água, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se para se obterem 1,50g de 3-iodometiltio-1-metil-1,2,4-triazol sob a forma de um óleo amarelo. RMN (CDC1₃) ppm: 3,94(s, 3H), 4,75(s, 2H), 8,07(s, 1H).

2) Het = 2-metil-1 ,2,4-triazol-3-ilo (4P4).

A uma solução de 981 mg (6,0 mmoles) de 3-clorometiltio-2-metil-1,2,4-triazol em 10 ml de acetona adicionam-se 1,78g (12,0 mmoles) de iodeto de sódio e agita-se a mistura à temperatura de 50°C durante 3 horas.

Diluí-se a mistura reaccional com água e extraí-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com água, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se para se obterem ,47g de 3-iodometiltio-2-metil-1 ,2,4-triazol sob a forma de um óleo amarelo.

RMN_Ó- (CDC1 ) ppm: 3,84(s, 3H) , 4,71(s, 2H), 7,98(s, 1H).

3) Het = 1 ,2,3-tiadiazol-5-ilo (3PA2-1).

A uma solução 999 mg (6,00 mmoles) de 5-clorometiltio-1,2,3-tiadiazol em 10 ml de acetona adicionam-se 1,78g (12,00 mmoles) de iodeto de sódio e agita-se a mistura à temperatura de 50°C durante 2 horas. Depois de arrefecer, diluí-se a mistura com água e extraí-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto uma vez com água, seca-se sobre sulfato de sódio, filtra-se e concentra-se para se obterem 1,55g de 5-iodometiltio-1,2,3-tiadiazol sob a forma de um óleo castanho.

RMN (CDC1₃) ppm: 4,53(s, 2H), 8,62(s, 1H).

4) Het = 1,3,4-tiadiazol-2-ilo (2PA2-1).

A uma solução de 849 mg (5,1 mmoles) de 2-clorometiltio-1 ,3,4-tiadiazol em 10 ml de acetona adicionam-se 1 , 5g (2,0 equivalentes: 10 mmoles) de iodeto de sódio e agita-se a mistura à temperatura de 50°C durante 3 horas. Depois de arrefecer, diluí-se a mistura reaccional com água e extraí-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com água, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se para se obterem 1,2g (contendo cerca de 10% do composto inicial clorometilo) de 1,3,4-tiadiazol sob a forma de um óleo amarelo.

RMN _ύ (CDC1 ) ppm: 4,85(s, 2H), 9,14(s, 1H).

5) Het = 2-metil-1 ,3,4-tiadiazol-5-ilo (2PA2-2).

A uma solução de 730 mg (4 mmoles) de 5-clorometiltio-2-metil-1,3,4-tiadiazol ém 6 ml de acetona adicionam- 35

-se 1 , 2g (2,0 equivalentes: 8 mmoles) de iodeto de sódio e agita-se a mistura à temperatura de 55°C durante 2 horas. Diluí-se a mistura reaccional com água e extraí-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com água, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se para se obter 1 ,05g de 5-iodometiltio-2-metil-1 ,3,4-tiadiazol sob a forma de um óleo amarelo.

RMNj (CDC1₃) ppm: 2,79(s, 3H), 4,78(s, 2H).

6) Het = 1-metiltetrazol-5-ilo (3PA2-2).

A uma solução de 987 mg (6,0 mmoles) de 5-clorometiltio-1-metiltetrazol em 10 ml de acetona adicionam-se 1,78g (12,0 mmoles) de iodeto de sódio e agita-se a mistura à temperatura de 50°C durante 3 horas. Depois de arrefecer, diluí-se a mistura reaccional com água e extraí-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com água, seca-se sobre sulfato de sódio, filtra-se e concentra-se para obter 1,33g (contendo cerca de 20% molar do cloreto) de 5-iodometiltio-1-metiltetrazol sob a forma de um óleo amarelo.

RMN ι (CDC1₃) ppm: 3,98(s, 3H), 4,76(s, 2H).

7) Het = 2-metiltetrazol-5-ilo (4P5 parte 3).

A uma solução de 987 mg (6,0 mmoles) de 5-clorometiltio-2-metiltetrazol em 10 ml de acetona adicionam-se 1 ,78g (12,00 mmoles) de iodeto de sódio e agita-se a mistura à temperatura de 50°C durante 3 horas. Diluí-se a mistura reaccional com água e extraí-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com água, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se para se obterem 1,43g de 5-iodometiltio-2-metiltetrazol sob a forma de um óleo amarelo.

RMN j (CDC1₃) ppm: 4,38(s, 3H), 4,74(s, 2H). Preparação 4 Modificação em Het ) Introdução do grupo tritilo para se obter um grupo tritil-1 ,2,3-triazol-4-ilo (1P2);

A uma suspensão de 109g (870 mrnoles) de sal de sódio de 1 ,2,3-triazol-4-tiol em 300 ml de dimetilformamida adicionam-se, gota a gota, a uma temperatura compreendida entre -20° e -30 °C, 109g (870 mrnoles) de tiolacetato de clorometilo e agita-se a mistura à temperatura ambiente durante 2 horas. À mistura reaccional adicionam-se, sob arrefecimento com gelo, 292g (1,05 moles) de cloreto de tritilo e 84,6 ml (1,05 moles) de piridina e agita-se a mistura à temperatura ambiente durante 18 horas, diluí-se com diclorometano, lava-se com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e

concentra-se sob pressão reduzida, em éter etílico obtendo-se l83g -1-tritil-1,2,3-triazol. Rendimento: sob a forma de cristais incolores.	Cristaliza-se o resíduo de 4-acetiltiometiltio-
49%;	p.f.: 115° -	116°C,
RMN (CDC13 ) ppm: 2,29(s,	3H), 4,34(s	, 2H) ,
75Ο5-7,15(ιη, 6H), 7,3-7,4(m, 9H), 7,47 (s,	1H) .
IV -g (CHC13 ) cm 1 :	1 688,	1488, 1442,	1199,
1128, 1072, 1033, 954.
2) Introdução do grupo metilo	para	se obter um	grupo

(1/2)-meti1-1 ,2,3-triazol-4-ilo (1 P3)·

A uma solução de 6g (31,75 mrnoles) de 4-acetiltiometiltio-1,2,3-triazol em 30 ml de tetra-hidrofurano adicionam-se, gota a gota, à temperatura de -78° C, uma solução de bis(trimetilsilil)-amideto de lítio 1M em 35ml (35 mrnoles) de tetra-hidrofurano e agita-se a mistura à mesma temperatura durante 5 minutos e adicionam-se 4,0 ml (35 mrnoles) de trifluorometano-sulfonato de metilo. Após agitação à mesma temperatura durante 2 horas, diluí-se a mistura reaccional com 26 ml de ácido clorídrico a 10% e com água e extraí-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com uma solução aquosa de hidrogenocarbonato de sódio e com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se. Purifica-se o resíduo por cromatografia em gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de n-hexano/acetato de etilo (1:2) para se obterem 2,22g de 4-acetiltiometiltio-3-metil-1 ,2,3-triazol: RMN (CDCl^) ppm: 2,32(s, 3H), 4,13(s, 5H),

7,77(s, 1H); IV (CHC1₃) cm^-1: 1698, 1429, 1355, 1263,

1226, 1205, 1127, 1100, 957; p.f.: 37° - 38°C. Rendimento: 34%; e 884 mg de 4-acetiltiometiltio-1-metil-1 ,2,3-triazol: RMN j (CDC'13) ppm: 2,35(s, 3H), 4,11 (s, 3H),

4,33(s, 2H), 7,59 (s, 1H); IV _p (CHC'13) cm^-1: 1691, 1434, 1354, 1285, 1131, 1106, 1048, 1031, 956; p.f.: 71° - 72°C. Rendimento: 14%]; e 175 mg de 4-acetiltiometiltio-2-metil-1,2,3-triazol: RMN (CDC13) ppm: 2,35(s, 3H), 4,20(s, 3H), 4,30(s, 2H), 7,56(s, 1H); IV (CHC1₃) cm¹: 1691, 1446, 1369, 1130, 1006, 990, 956.Oil. Rendimento: 3%.

Preparação 5 Introdução do grupo 7-acilo

COOBh

->

Acil-NH _A

N

OSO^Me

COOBh

1) Acil = (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-pentenoílo (4P10-1 ).

A uma suspensão de 1,49g (3 mmoles) de cloridrato do éster de difenilmetilo do ácido 7^-amino-3-metano-sulfoniloxi-3-cefem-4-carboxílico e de 1,03g (3,45 mmoles) de ácido (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-pentenóico em 30 ml de diclorometano adicionam-se, à temperatura de -30°C, 1,1 ml (10 mmoles) de N-metilmorfolina e, decorridos 2 minutos, 0,49 ml (3,27 mmoles) de diclorofosfato de fenilo e agita-se a mistura à mesma temperatura durante 1 hora e 20 minutos. Mistura-se a mistura reaccional com 6 ml de ácido de clorídrico 1N e extraí-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com água, com uma solução aquosa de hidrogenocarbonato de sódio a 5% e com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato

- 38 de sódio e concentra-se. Dissolve-se o resíduo (2,6g) em 100 ml de isopropanol quente, arrefece-se e recolhe-se mediante filtração o pó amarelo pálido que se separa, obtendo-se 2,01g do éster de difenilmetilo dc ácido 7p- [(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-pentenoilamino] -3-metano-sulfoniloxi-3-cefem-4-carboxílico. Rendimento: 91%.

RMN _ò (CDClg ) ppm: 1,12(t, J=7,6Hz, 3H),

1,54(s, 9H), 2,5-2,7(m, 2H), 2,85(s, 3H), 3,55, 3,8O(ABq,

J=18Hz, 2H), 5,O9(d, J=5Hz, 1H), 5,95(dd, J=5Hz, J=8Hz,

1H), 6,45(t, J=7,4Hz, 1H), 6,74(s, 1H), 6,86(s, 1H),

7,2-7,5(m, 10H), 7,8O(d, J=8Hz, 1H).

IV .q (CHClg) cm ^_1 : 3400, 1 786, 1725, 1 669,

1545, 1367, 1287, 1220, 1156.

2) Acil = (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiimino-acetilo (1P5).

ácido

A uma suspensão de 41,79 (78,8 mmoies) de (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacético em 600 ml de diclorometano adicionam-se, à temperatura de -3O°C, 7,575g (75 mmoies) de N-metilmorfolina e agita-se a mistura durante 10 minutos, mistura-se com 37,27g (75 mmoies) de cloridrato do éster de difenilmetilo do ácido '7 /? - amino-3-metano-sulfoniloxi-3-cefem-4-carboxílico, agita-se à mesma temperatura durante 50 minutos, mistura-se com 14,38g (75 mmoies) de cloridrato de 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)-carbodiimida, agita-se sob arrefecimento com gelo durante 3 horas, diluí-se com água e extraí-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com água, reduzida. Purifica-se de sílica utilizando seca-se e concentra-se sob pressão o resíduo por cromatografia em gel como eluente tolueno contendo uma mistura de ácido acético a 0,5% e de acetato de etilo (10:1) e trata-se o eluído com uma mistura de éter etílico/hexano para se obterem 57,42g do éster de difenilmetilo do ácido 7/3 - f (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)39

-2-tritiloxiiminoacetamido J -3-metano-sulfoniloxi-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de um pó incolor. Rendimento: 79%. Este produto contém cerca de 5% do isómero 2-cefem.

RMN (CDClg) ppm: 1,48(s, 9H), 2,78(s, 3H) ,

3,45, 3,76(ABq, J=18,β Hz, 2H), 5,13(d, J=5Hz, 1H), 6,OÓ(dd, j=5Hz, J=8,8Hz, 1H), 6,96(s, 1H), 7,O2(s, 1H), 7,2-7,5 (m, 26H).

IV j (CHClg ) cm^-1 : 3400, 1 793, 1724, 1 690,

1543, 1513, 1493, 1445, 1368, 1285, 1222, 1157.

3) Acil = (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetilo (1P6).

A uma suspensão de 37,27g (75 mmoles) de cloridrato do éster de difenilmetilo do ácido 7/3 -amino-3-metano-sulfoniloxi-3-cefem-4-carboxílico e de 45,63g (86 mmoles) do ácido (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacético em 600 ml de diclorometano adicionam-se, à temperatura de -30° C, 27,2 ml (0,25 mole) de N-metilmorfolina, durante 3 minutos. Decorridos 4 minutos, adicionam-se à mistura 12,3 ml (82 mmoles) de diclorofosfato de fenilo. Depois de agitar durante 3 horas, diluí-se a mistura com 40 ml de ácido clorídrico a 10% e com água e extraí-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com água, com uma solução . aquosa de hidrogenocarbonato de sódio, com ácido clorídrico diluído e com água, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se sob pressão reduzida. Dissolve-se o resíduo em 2 litros de isopropanol mediante aquecimento e arrefece-se para se obterem 67g do éster de difenilmetilo do ácido 7/3-[(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetamidoJ-3-metano-sulfoniloxi-3-cefem-4-carboxílico sob a forma de um pó incolor. Rendimento: 92%.

4) Acil = (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-metoxiimino-acetilo (3PB-1 ).

A uma suspensão de 994 mg (2 mmoles) de cloridrato do éster de difenilmetilo 'do ácido 7 β -amino-3-metano- 40 -sulfoniloxi~3-cefem-4-carboxílico e de 662 mg (2,2 mmoles) de ácido (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-metoxiiminoacético em 16 ml de diclorometano adicionam-se, à temperatura de -30° C, 0,72 ml (6,6 mmoles) de N-metilmorfolina e 0,33 ml (2,2 mmoles) de diclorofosfato de fenilo e agita-se a mistura à mesma temperatura durante 2,5 horas. Interrompe-se a reacção mediante adição de 5 ml de ácido clorídrico a 10% e extraí-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com água, com uma solução aguosa de hidrogenocarbonato de sódio a 5% e com água, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se. Purifica-se o resíduo por cromatografia em gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (2:1) contendo 0,5% -de ácido acético, para se obter 1.07g do éster de difenilmetilo do ácido 7/3-C(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-metoxiiminoacetil]-amino-3-metano-sulfoniloxi-3-cefem-4-carboxílico. Rendimento: 72%.

RMN j (CDC1 ) ppm: 1 ,53 (s, 9H) , 2,83(s, 3H),

3,63, 3,88(ABq, J=19Hz, 2H), 4,09(s, 3H), 5,l8(d, J=5Hz,

IH), 6,04(dd, J=5Hz, J=9Hz, 1H), 6,95 (s, 1H), 7,2-7,5 (m, 13H).

5) Acil = (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-ciclopentiloxiiminoacetilo (4P10-3).

A uma suspensão de 1,49g de (3 mmoles) do cloridrato do éster de difenilmetilo do ácido 7^3-amino-3-metano-sulfoniloxi-3-cefem-4-carboxílico e de 1,23g (3,5 mmoles) de ácido (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilamino-tiazol-4-il)-2-ciclopentiloxiiminoacético em 30 ml de diclorometano à temperatura de -30° C adicionam-se 1,1 ml (10 mmoles) de N-metilmorfolina e, decorrido 1 minuto, 0,49 ml (3,3 mmoles) de diclorofosfato de fenilo e agita-se a mistura à mesma temperatura durante 2 horas. Mistura-se a mistura reaccional com 6 ml de ácido clorídrico 1N e com 50 ml de água e extrai-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com água, com uma solução aquosa de hidrogenocarbonato de sódio a 5% e com água, seca-se sobre sulfato de sódio e purifica-se mediante cromatografia em gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tolueno .'acetato de etilo (5:1) contendo 0,5% de ácido acético, para se obterem 1,86g do éster de difenilmetilo do ácido 7ρ-[(Ζ)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-ciclopentiloxiiminoacetamidoj-3-metano-sulfoniloxi-3-cefem-4-carboxílico sob a forma de uma espuma branca. Rendimento: 78%.

RMN j (CDC1₃ ) ppm: 1,53(s, 9H), 1,3-2,0 (m, 8H), 2,80(s, 3H), 3,61, 3,88(ABq, J=19Hz, 2H),

4,9-5,0(m, 1H), 5,17(d, J=5Hz, 1H), 6,04(dd, J=5Hz, J=9Hz, 1H), 6,96(s, 1H), 7,3-7,5(m, 12H), 8,6(s largo, 1H).

IV 0 (CHC1₃ ) cm^-1 : 3400, 1 792, 1724, 1685, 1543, 1367, 1226, 1220, 1158.

6) Acil = (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-(2-propeniloxiimino)-acetilo (4P10-2).

A uma suspensão de 1,49g (3 mmoles) de cloridrato de éster de difenilmetilo do ácido 7^-amino-3-metano-sulfoniloxi-3-cefem-4-carboxílico e de 1,13g (3,46 mmoles) de ácido (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-(2-propeniloxiimino)-acético em 30 ml de diclorometano, à temperatura de -30° C, adicionam-se 1,1 ml (10 mmoles) de N-metilmorfolina e,. decorrido 1 minuto, 0,49 ml (3,27 mmoles) de diclorofosfato de fenilo e agita-se a mistura à mesma temperatura durante 2 horas. Mistura-se a mistura reaccional com 6 ml de ácido clorídrico 1N e com 30 ml de água e extrai-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com água, com uma solução aquosa de hidrogenocarbonato de sódio a 5% θ com água, seca-se sobre sulfato de sódio e purifica-se por cromatografia em gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (5:1) contendo 0,5% de ácido acético, para se obterem 1 ,83g do éster de difenilmetilo do ácido 7β-[(Ζ)~ -2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-(2-propeniloxiimino)-acetamido ] -3-metano-sulfoniloxi-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de uma espuma de cor amarelo pálido. Rendimen- 42 to: 79%.

	RMN <	> (CDC13 ) ppm: 1,53(s, 9H),	2,32(s, 3H),
3,61 ,	3,86(ABq,	J=20Hz, 2H), 4,80(d, J=6Hz,	2K. ,	5,17(d,
J=5Hz,	1H), 5,	23-5,40(m, 2H) , 5,94-6,13(m,	2H)	, 6,95
(s, 1H	), 7,2-7,5(	m, 12H), 8,6(s largo, 1H).
	iv ;	(CHC13 ) cm ~1 : 3400, 1792,	1 25	, 1686,
1544,	1367, 1286,	1223, 1219, 1160.

Preparação 6 ácido de cadeia lateral na posição

1) Ácido (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazsl-4-il)-2-tritiloxiiminoacético (4P1: BocATtr)

C-COOH .C-COOEt

II

NOH

BocNH aT

NOH

BocNH

N-irP^-00011

AsMc

40Tr

1. A uma suspensão de 86g (0,4 mole) do éster de etilo do ácido (Z)-2-(2-aminotiazol-4-il)-2-hidroxiiminoacético em 1200 ml de diclorometano adicionam-se 9,6g (79 mmoles) de 4-dimetilaminopiridina e, em seguida, 240 ml (1,04 mole) de dicarbonato de di-t-butilo, gota a gota, à remperatura ambiente, e agita-se a mistura durante 19 horas. Mistura-se a mistura reaccional com 500 ml de ácido clorídrico 0,5N e recolhe-se a fase de diclorometano. Lava-se a fase orgânica com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se. Dilui-se o resíduo com 200 ml de etanol e concentra-se novamente. A uma solução do resíduo em 300 ml de etanol, sob arrefecimento com gelo, adiciona-se, gota a gota, uma solução de 64g (1,6 mole) de hidróxido de sódio em 300 ml de água e agita-se a mistura sob arrefecimento com gelo durante 30 minutos e à temperatura ambiente durante 19 horas. Mistura-se a mistura reaccional com 140 ml de ácido clorídrico concentrado e com 1000 ml -de água arrefecida com gelo e extrai-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com água, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se. Lava-se o resíduo cristalino obtido com água, seca-se e lava-se com éter etílico para se obterem 86,3g de ácido (Z)—2—(2— -t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-hidroxiiminoacético sob a forma de cristais incolores; p.f. 170° - 173° C (com decomposição).

RMN (CDC1₃ -CD₃SOCD₃ ) ppm: 1,55(s, 9K), 7,38 (s, 1H).

IV J (Nujol) cm^-1: 3640, 3510, 3125, 2520 largo, 1730, 1635, 1600, 1530, 1295, 1165, 1000.

2. A uma solução de 86,3g (0,30 mole) de ácido (Z) -2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-hidroxiiminoacético em 600 ml de dimetilformamida adicionam-se 92g (0,67 mole) de carbonato de potássio e 10Og (0,36 mole) de cloreto de trifenilmetilo e agita-se a mistura à temperatura ambiente durante 3 dias. Verte-se a mistura reaccional em uma mistura de 111 ml de ácido clorídrico concentrado e de 1 500 ml de água arrefecida com gelo e extrai-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com água, com uma solução aquosa de hidrogenocarbonato de sódio a 5%, com ácido clorídrico a 2% e com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se. Oristaliza-se o resíduo em diclorometano para se obterem 144g de ácido (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxii minoacético sob a forma de cristais incolores. Rendimento: 91%; p.f . : 1 57° - 1 58°C.

RMN _ó (CDC1₃-CD₃SOCD ) ppm: 1,50(s, 9H) , 7,04 (s,1H), 7,2-7,4(m, 15H).

IV J (Nujol) cm“¹ : 3200, 1726, 1697, 1563,

1281, 1243, 1155.

2) Acido (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-pentenóico (S1108)

ClCHgCOCH^COOMe s=c(nh₂)₂ m · ~ i- C—COOMe h₂n

CHEt

BocNH

C-COOH

II

CHEt

EtCHO

1. A uma solução de 700 mg (4,65 mmoles) do éster de metilo do ácido 4-cloroacetoacético e de 405 mg (6,97 mmoles) de propionaldeído e de 28 mg (0,47 mmole) de ácido acético em 3 ml de diclorometano, adiciona-se uma solução de 24 mg (0,28 mmole) de piperidina em 0,5 ml de diclorometano e agita-se a mistura à temperatura de -27° C durante 120 minutos. Lava-se a mistura reaccional com ácido clorídrico diluído e com água e concentra-se sob pressão reduzida a uma temperatura inferior - a 15 °C para se obterem 818 mg do éster de metilo do ácido 4-cloro-2-propilidenoaoetoacético. Rendimento: 92%.

RMN_ó (CDClg) ppm: 1,08(t, J=7,5Hz, 3H), 1 ,55(t, J=7,5Hz, 3H), 2,2-2,8(m, 2H), 3,78(s, 3H), 3,82(s, 3H) , 4,35(s, 2H), 4,40(s, 2H), 7,0-7,4 (m, 1H).

2. A uma solução de 818 mg (4,29 mmoles) do éster de metilo do ácido 4-cloro-2-propilidenoacetoacético em 2,1 ml de dimetilformamida adicionam-se 957 mg (9,3 mmoles) de brometo de sódio e agita-se a mistura à temperatura de 22°0 durante 2 horas para se obter uma solução de éster de metilo do ácido 4-bromo-2-propilidenoacetoacético, RMN (CDC1 ) ppm: 1,15(t, J=7,5Hz, 3H), 2,5O(q, J=7,5Hz, 3H) , 2,53 (q, J=7,5Hz, 2H), 3,82(s, 3H), 3,9O(s, 3H) , 4,15(s, 2H),

4,22 (s, 2H), 7,10ft, J=7,5Hz, 1H), 7,12(t, J=7,5Hz, 1H). Dilui -se esta solução com 0,7 ml de diclorometano, mistura-se com uma solução de 354 mg (4,65 mmoles) de tioureia em 1,4 ml de dimetilformamida e agita-se a uma temperatura compreendida entre -15° C e 30° 0 durante 25 minutos. Lava-se a mistura reaccional com umà solução aquosa de hidróxido de sódio e com uma solução concentrada de cloreto de sódio, concentra-se a uma temperatura inferior a 15°C, sob pressão reduzida, mistura-se com 1,8 ml de acetona e neutraliza-se com ácido clorídrico a 35%· Lavam-se com acerona os cristais separados e secam-se para se obterem 452 mg do cloridrato do éster de metilo do ácido (Z)-2-(2-aminotiazol-4-il)-2-pentenóico. Rendimento: 43%; p.f.: 79° - 80° C (com decomposição).

A análise elementar dá valores correspondentes à fórmula ^cg^H-] ₂ ^N2°2^{S - HC1} ’ ^H2° ’

RMN _ò (CD OD) ppm: 1,14(t, J=8Hz, 3H), 2,61(qd, J=7,6Hz, 2H), 3,84(s, 3H), 6,71(t, J=7,6Hz, 1H), 6,83(s,

1H).

IV ' (CHC1, cm

3360, 3095, 1 721, 1 635,

1592, 1235

3. Agita-se uma solução de 550 mg (2,2 mmoles) de cloridrato do éster de metilo do ácido (Z)-2-(2-aminotiazol-4-il)-2-pentenóico em 3,8 ml de uma solução sódio a 7%. Recolhe-se até 1,7 ml. Mistura-se ml de diclorometano, com aquosa de hidrogenocarbonato de a fase orgânica e concentra-se a solução obtida com uma solução de 0,53 ml (2,3 mmoles = 1,05 equivalentes) de dicarbonato de di-t-butilo e de 57 · μΐ (0,72 mmole) de piridina ou 27 mg (0,22 mmole) de dimetilaminopiridina em 0,8 ml de diclorometano e agita-se à temperatura de 25° C durante 6 horas. Mistura-se a mistura reaccional com 1,72 ml de ácido clorídrico a 1,6% e agita-se. Recolhe-se a fase orgânica, lava-se com uma solução aquosa de hidrogenocarbonato de sódio, seca-se e concentra-se sob pressão reduzida. Purifica-se o resíduo por cromatografia em coluna em gel de sílica para se obterem 528 mg do éster de metilo do ácido (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-pentenóico sob a forma de um óleo. Rendimento: 71%.

RMN j (CDC1₃) ppm: 1,10(t, J=7,6Hz, 3H), 1,52 (s, 9H), 2,42(qd, J=7,6Hz, 2H), 3,85(s, 3H), 6,76(t, J=7,6Hz,

- 46 TH), 6,89(s, 1H).

IV Q (CHC1 ) cm’¹: 3680, 1723, 1522, 1218.

4. A uma solução de 425 mg (1,4 mmoles) de éster de metilo do ácido (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il )-2-pentenóico em 1,3 ml de isopropanol e 3,7 ml de água adicionam-se 163 mg (4,1 mmoles) de hidróxido de sódio e agita-se a mistura à temperatura de 65°C durante 90 minutos. Ajusta-se o pH da mistura reaccional para 4,7 com ácido clorídrico a 35% e mantém-se à temperatura de 20°C durante 1 hora. Recolhem-se por filtração os cristais que se separam, lavam-se com isopropanol e secam-se para se obterem 325 mg do ácido (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-pentenóico. Rendimento: 86%; p.f.: 187° C (com decomposição).

RMN (CDC13) ppm: 1,09(t, J=7,6Hz, 3H), 1,55(s, 9H) 2,64(qd, J=7,6Hz, 2H), 6,69(t, J=7,6Hz, IH), 6,96(s, 1H).

IV Q (CHC1₃ ) cm’¹: 3160, 2 548 largo, 1721,

1685, 1556, 1252, 1156.

Preparação 7 outras modificações no anel de cefem

1) Preparação da 7[^-amina: Het = 1 ,2,3-triazol-4-ilo (1P7)

A uma solução de 629 mg (1 mmole) do éster de difenilmetilo do ácido 7/3-fenilacetamido-3-( 1 , 2,3-triazol-4-il)-tiometiltio-3-cefem-4-carboxílico em 7 ml de diclorometano, sob arrefecimento com gelo, adicionam-se 162 μΐ (2 mmoles) de piridina e 380 mg (1,8 mmoles) de pentacloreto de fósforo e agita-se a mistura à temperatura ambiente durante 40 minutos. Gota a gota, adiciona-se a solução a uma solução de 0,46 ml de 1,3-butanodiol em 2 ml de diclorometano à temperatura de -30° C. Depois de agitar sob arrefecimento com gelo durante 30 minutos, diluí-se a mistura reaccional com água e extraí-se com diclorometano. Seca-se o extracto sobre sulfato de sódio e concentra-se sob pressão reduzida. A recristalizaçâo do resíduo em uma mistura de. acetato de etilo/diclorometano dá 518 mg de um pó que contém o cloridrato do éster de difenilmetilo do ácido 7 p -amino-3-( 1 ,2,3-triazol-4-il)-tiomeriltio-3-cefem-4-carboxílico. Faz-se uma suspensão de 100 mg deste pó em diclorometano, agita-se com uma solução aquosa de hidrogenocarbonato de sódio a 5%, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se sob pressão reduzida. Furifica-se o resíduo por cromatografia em gel de sílica para se obterem 10 mg do éster de dif enilmetilo do ácido 7/3-amino-3-( 1 ,2,3-triazol-4-il)-tiometiltio-3-cefem-4-carboxílico. Rendimento: 10%.

RMN j (CDC1₃-CD₃OD) ppm: 3,61, 3,73(ABq, J=17Hz, 2H), 4,07, 4,14 (ABq, J=14Hz, 2H) , 4,74(d, J’=5Hz, 1H),

4,95(d, J=5Hz,. 1H), 6,96 (s, 1H), 7,2-7,5(m, 10H), 7,56 (s, 1H).

IV (CHC1₃) cm^-1: 1776, 1726.

2) Preparação da 7p -amina: Het = tritil-1,2,3-triazol-4-ilo (4P9).

1) A uma solução de 10, Og (15,9 mrnoles) do éster de difenilmetilo do ácido 7β -fenilacetamido-3-(1,2,3-triazol-4-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico em 100 ml de diclorometano, sob arrefecimento com gelo, adicionam-se 1,54 ml (19,1 mrnoles) de piridina e 5,32g (19,1 mrnoles) de cloreto de tritilo e ágita-se a mistura à temperatura ambiente durante 1 hora. Mistura-se a mistura reaccional com 2 ml de ácido clorídrico a 10%, diluí-se com água e extrai-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com água, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se. A uma solução do resíduo em 50 ml de diclorometano, sob arrefecimento com gelo, adicionam-se 2,57 ml (31,8 mrnoles) de piridina e 5,96g (28,6 mrnoles) de pentacloreto de fósforo e agita-se a mistura durante 30 minutos. Adiciona-se a mistura reaccional, gota a gota, a uma solução de 8,6 ml (95,9 mrnoles) de 1 ,3-butanodiol em 25 ml de diclorometano à temperatura de -30°C e agita-se a mistura a uma temperatura compreendida entre -20° e -30°0 durante 10 minutos e sob arrefecimento

- 48 com gelo durante 40 minutos. Mistura-se a mistura reaccional com água, diluí-se com diclorometano, lava-se com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se. Tritura-se o resíduo com éter etílico, lava-se com éter etílico, e dissolve-se em diclorometano, lava-se com uma solução aquosa de hidrogenocarbonato de sódio a 5%, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se. Purifica-se o resíduo por cromatografia em gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (2:1) para se obterem 6,70g de éster de difenilmetilo do ácido 7-amino-3-( tritil—1,2,3-triazol-4-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico sob a forma de uma espuma de cor amarelo pálido; rendimento:

56%; RMN_á (ÇDC1 ) ppm: 3,62, 3,82(ABq, J=17,6Hz, 2H),

1390, 1368 e 2,72g de éster de difenilmetilo do ácido 7 p-amino-3-(1,2,3-triazol-4-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxí lico, sob a forma de um pó cristalino de cor amarelo pálido; RMN & (CDC1₃ ) ppm: 3,58, 3,73(ABq, J=17,5Hz, 2H), 4,05,

3) Oxidação para sulfóxido (2PB1 )

A uma solução de 30,Og (30,9 mmoles) do éster de difenilmetilo do ácido 70-[(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetamidoJ-3-metano-sulfoniloxi-3-cefem-4-carboxílico em 300 ml de diclorometano à temperatura de -30° C, adicionam-se 7,33g (80% de pureza: 1,1 equivalentes: 34,0 mmoles) de ácido m-cloroperbenzóico e agita-se a mistura a uma temperatura compreendida entre -20° e -30° C durante 20 minutos. Decorridos 20 minutos, mistura-se a mistura reaccional com 15 ml de uma solução aquosa de tiossulfato de sódio a 5%, lava-se com uma solução aquosa de hidrogenocarbonato de^- sódio a 5% θ com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se. Purifica-se o resíduo por cromatografia em coluna de gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (5:1 a 3:1) para se obterem 28,9g do 1 já-óxido do éster de difenilmetilo do ácido 7/3-f(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tri_ tiloxiiminoacetilamino]-3-metano-sulfoniloxi-3-cefem-4-carboxílico sob a forma de uma espuma de cor castanho pálido. Rendimento: 95%.

RMN _á (CDC1₃ ) ppm: 1,50(s, 9H), 2,74(s, 3H),

3,35, 3,89(ABq, J=18,6Hz, 2H) , 4,55(d, J=5,0Hz, 1H), 6,31 (dd, J=5,0Hz, J=1O,1Hz, 1H), 7,00(s, 2H), 7,15~7,5O(m,

25H), 7,88(d, J=10,1Hz, 1H), 8,33(s largo, 1H).

IV _v (CHC1₃ ) cm^-1 : 3400, 1 806, 1725, 1 687,

1543, 1510, 1493, 1368, 1282, 1227, 1188, 1154.

4) Substituição para se obter o tiol (2PB2)

A uma solução de 25,0g (25,3 mmoles) do 1 /3-óxido do éster de difenilmetilo do ácido 7/3-f(Z)-2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetamidoj-3-metano-sulfoniloxi-3-cefem-4-carboxílico em 200 ml de dimetilformamida, à temperatura de -30° C, adicionam-se 5,O7g (70%; 2,5 equivalentes: 63,4 mmoles) de hidrato de hidrogenossulfureto de sódio e agita-se a mistura a uma temperatura compreendida entre -20° e -30° C durante 1 hora. Mistura-se a mistura reaccional com 20 ml de ácido clorídrico a 10%, dilui-se com água e extrai-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com uma solução de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se. Dissolve-se o resíduo em tolueno e concentra-se até à secura para se obterem 23,3g (contendo 8% em peso de tolueno) do 1/3-óxido do éster de difenilmetilo do ácido 7/3-(( Z)-2-t-bu toxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetamidoj-3-mer capto-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de uma espuma de cor amarela. Rendimento: 91%.

RMN (CDCip ppm: 1,49(s, 9H), 3,27, 3,67(ABq,

J=18,4Hz, 2H), 4,50 (d, J=4,8Hz, 1H), 5,12(s largo, 1H),

6,25(dd, J=4,8Hz, J=10,0Hz, 1H), 6,9O(s, 1H). 7,01(s,

1H), 7,15-7,61 (m, 25H), 7,84(d, J=10,0Hz, íH) , 8,41 (s largo, 1H).

IV j CHC1 ) cm¹ : 3396, 1 799, 171 5, 1 686, 1543, 1509, 1493, 1445, 1383, 1369, 1277, 1155Exemplo 1 Substituição na posição 3 com tiolacilato

Adl-NH

OSO^Me

Acil-NH._o

COOBh

S-^SHet I

COOBh ) Acil = fenilacetilo

Het = 1,2,3-triazol-4-ilo (1P8)

A uma solução de 920mg (4,87 mmoles) de 4-acetiltiometiltio-1 ,2,3-triazol em 24 ml de dimetilformamida, à temperatura de -60° C, adicionam-se, gota a gota, 7,5 ml de uma solução de metóxido de sódio em metanol 1,28N. Após agitar à mesma temperatura durante 30 minutos, adiciona—se, gota a gota, uma solução de 2,32g (4 mmoles) do éster de difenilmetilo do ácido 7[3-fenilacetamido-3-metano -sulfoniloxi-3-cefem-4-carboxílico em 8 ml de dimetilformamida. Decorridos 30 minutos, neutraliza-se a mistura reaccional com ácido clorídrico a 10%, dilui-se com água e extrai-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com água, seca-se sobre sulfato de sódio e purifica-se por cromatografia em gel de sílica. Cristaliza-se a fracção em acetato de etilo para se obterem 1,14g do éster de difenilmetilo do ácido 7õ -fenilacetamido-3-(1 ,2,3-triazol-4-il)-tiometiltio-3-cefem-4-carboxílico. Rendimento: 45%; p.f. 169° - 171°C (com decomposição).

RMN _ó (CDC1₃-CD₃OD) ppm: 3,52, 3,62(A3q, J=17Hz,

2H), 3,64(s, 2H), 4,07, 4,11(ABq, J=14Hz, 2H) , 4,95(d,

J=5Hz, 1H), 5,74(d, J=5Hz, 1H), 6,32(s, 1H), 7,2-7,5(m,

15H), 7,57(s, 1H).

IV J (KBr) cm^-1: 3400, 3500, 1784, 1700, 1 650,

1520, 1375, 1220, 1770.

2) Acil = (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-pente noílo Het = 1 ,2,3-triazol-4-ilo (4E2-1)

A uma solução de 230 mg (1,22 mmoles) de 4-acetiltiometiltio-1 ,2,3-triazol em 6 ml de dimetilformamida, adicionam-se, gota a gota, 1,9 ml de uma solução 1,26N de metóxido de sódio em metanol à temperatura de -60° C e agita-se a mistura durante 20 minutos, mistura-se com uma solução de 740 mg (1 mmole) de éster de difenilmetilo do ácido 7/3-[(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-pen tenoilaminoJ-3-metano-sulfoniloxi-3-cefem-4-carboxílico em 3 ml de dimetilformamida e agita-se à mesma temperatura durante 40 minutos. Dilui-se a mistura reaccional com 2 ml de ácido clorídrico a 1 0% e com 30 ml de água e extrai-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com água, seca-se sobre sulfato de sódio e purifica-se por cromatografia em gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (2:1) para se obterem 553mg do éster de difenilmetilo do ácido 7/3-f(Z )-2-( 2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-pentenoilamino J -3-(1,2,3-triazol-4-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico sob a forma de uma espuma incolor. Rendimento: 70%.

RMN _á (CDC1₃) ppm: 1,14(t, J=7,6Hz, 3H), 1,54 (s, 9H), 2,55-2,75(m, 2H), 2,9-3,3(largo, 2H), 3,91, 4,07(ABq, J=12Hz, 2H), 4,98(d, J=4,4Hz, 1H), 5,5-5,6(largo, 1H),

6,44(t, J=7,4Hz, 1H), 6,82(s, 1H), 6,83(s, 1H), -7,2-7,5 (m, 10H), 7,62(s, 1H), 8.11(d, J=8Hz, 1H).

IV J (CHC1₃ ) cm^-1 : 3420, 3330, 31 50, 1 758,

1712, 1665, 1551, 1218, 11553) Acil = (z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2- ciclo pentiloxiiminoacetilo Her= 1,2,3-triazol-4-ilo '4E2-3).

A uma solução de 374mg (1,98 mmoles) de 4-acetiltiometiltio-1 ,2,3-triazol em 9 ml de dimetilformamida, adicionam-se, gota a gota, 3,1 ml de uma solução 1,26N de metóxido de sódio em metanol e agita-se a mistura à temperatura de -60° C durante 25 minutos. A esta mistura adiciona-se, gota a gota, uma solução de 1,20g (1,5 mmoles) do éster de difenilmetilo do ácido 7jl-[(Z)-2-(2-t-bucoxicarbonilaminotiazol-4-i1)-2-ciclopentiloxiiminoacetamidoJ-3-metano-sulfoniloxi-3-cefem-4-carboxílico em 4,5 ml de dimetilformamida e agita-se a mistura à mesma temperatura durante 40 minutos, mistura-se com 0,3 ml de ácido acético, dilui-se com . água e extrai-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com água, com uma solução aquosa de hidrogenocarbonato de sódio a 5% e com água, seca-se sobre sulfato de sódio e purifica-se por cromatografia em gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (3:1 - 2:1). Cristaliza-se o produto eluído em tolueno e recristaliza-se em acetato de etilo para se obterem 274 mg do éster de difenilmetilo do ácido 7/5-L(Z)-2-(2 -t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il-2-ciclopentiloxiiminoacetami doJ -3-0 ,2,3-triazol-4-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico. Rendimento: 22%; p.f.: 198°C (com decomposição).

RMN 5 (CDC1₃ -CD 0D) ppm: 1,55(s, 9H), 1,3-2,0 (m, 8H), 3,56, 3,72(ABq, J=17Hz, 2H), 4,15(s, 2H) , 4,9-5,0(m, 1H), 5,O6(d, J=4,8Hz, 1H), 5,86(d, J=4,8Hz,

1H), 6,97(s, 1H), 7,3-7,5(m, 11H), 7,60(s, 1H).

IV (KBr) cm^-1 : 3330, 3200, 1785, 1725, 1698,

1660, 1570, 1525, 1370, 1241, 1220, 1160.

4) Acil = (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-(2-pro peniloxiimino)-acetilo Het - 1 ,2,3-triazol-4-ilo (4E2-2).

A uma solução de 230 mg (1,22 mmoles) de 4-acetiltiometiltio-1 ,2,3-triazol em 6 ml de dimetilformamida,

- 53 adicionam-se, gota a gota, 1,9 ml de uma solução 1,26N de metóxido de sódio em metanol à temperatura de -60° C e agita-se a mistura à mesma temperatura durante 25 minutos e arrefece-se até à temperatura de -78°C. À mistura reaccional, adiciona-se, gota a gota, uma solução de 770 mg (1 mmole) do éster de difenilmetilo do ácido 7j3-[(Z)-2-(2-t-bu toxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-(2-propeniloxiimino)-acetamido-3-metano-sulfoniloxi-3-cefem-4-carboxílico em 3 ml de dimetilformamida e agita-se a mistura à mesma temperatura durante 40 minutos. Diluí-se a mistura reaccional com 2 ml de ácido clorídrico 1N e com 50 ml de água e extraí-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com água, seca-se sobre sulfato de sódio e purifica-se por cromatografia em gel de síl-ica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (2:1). Cristaliza-se o produto eluído em tolueno para se obterem 415 mg do éster do difenilmetilo do ácido 7β- C(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-(2-propeniloxi imino) -acetamidoj-3- (1,2,3-triazol-4-i1 tiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico sob a forma de cristais incolores. Rendimento: 51%; p.f. 167° - 170°C (com decomposição) .

3,69(ABq,

5,O7(d,

5,37(dd,

6,04(ddt,

RMN £ (CDClg -CDg 0D) ppm: 1,55(s, 9H),

J=17Hz, 2H), 4,16 (s, 2H), 4,82(d, J=5,8Hz,

J=4,6Hz, 1H), 5,26(dd, J=1,4Hz, J=10,6Hz,

J=1,4Hz, J=17,4Hz, 1H), 5,86(d, J=4,6Hz,

J=5,8Hz, J=10,6Hz, J=17,4Hz, 1H), 6,97(s,

3,54, 2H) , 1H) , 1H) , 1H) ,

7,3-7,5(m, 11H), 7,60(s, 1H).

IV ú (CHClg ) cm^-1: 3400, 3300, 3200, 1782, 1717,

1696, 1658, 1534, 1370, 1281, 1240, 1221, 1154.

5) Acil = (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetilo Het = 1 ,2,3-triazol-4-ilo (1E02)

A uma solução de 11,50g (61 mmoles) de 4-acetiltiometiltio-1,2,3-triazol em 300 ml de dimetilformamida adicionam-se, gota a gota, 94 ml de uma solução 1,28N de metóxido de sódio em metanol a uma temperatura compreendida entre

-60° e -50 °C. Depois de agitar durante 20 minutos, adicionam-se, gota a gota, à mistura, à mesma temperatura durante 7 minutos, uma solução de 48,55g (50 mmoles) ds éster de difenilmetilo do ácido 7/3-f(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetamidoJ-3-metano-sulforiloxi-3-ce fem-4-carboxílico em 190 ml de dimetilformamida. Decorridos 50 minutos, dilui-se a mistura reaccional com 10 ml de ácido acético e com 2 litros de água e extrai-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com uma solução saturada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se sob pressão reduzida. Cristaliza-se o resíduo em tolueno e recristaliza-se em uma mistura de acetato de etilo/tolueno para se obterem 29,14g do éster de difenilmetilc do ácido 7β-[(Z )-2-(2-t-butoxicarbonilamino-4-tiazolil)-2-tritiloxiiminoacetamidoJ-3-(1 ,2,3-triazol-4-il)-tiometiltio-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de cristais incolores. Rendimento: 57% ; p.f.: 190° - 200°C (com decomposição).

RMN (CDC1 ₃-CD ₃0D) ppm: 1,53(s, $H), 3,45,

3,63(ABq, J=17,2Hz, 2H), 4,12, 4,15 (ABq, J=14,2Hz, 2H),

5,O8(d, J=5Hz, 1H), 5,88(d, J=5Hz, 1H), 6,98(s, 1H), 7,08 (s, 1H), 7,2-7,5(m, 25K), 7,60(s, 1H).

IV q (KBr) cm^-1 : 3390, 3210, 1800, 1725, 3688,

1555, 1495, 1449, 1375, 1275, 1245, 1225, 1155.

6) Acil = (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritilo xiiminoacetilo Het = 1,2,3-triazol-4-ilo (com tiolbenzoato) (4E2-4)

A uma solução de 150 mg (0,60 mmole) de 4-benzoiltiometiltio-1,2,3-triazol em 3 ml de dimetilformamida à temperatura de -60°C adiciona-se 0,95 ml de uma solução 1,26N de metóxido de sódio em metanol e agita-se a mistura durante 80 minutos a uma temperatura compreendida entre -50° e -60°C. À temperatura de -70°C, adiciona-se uma solução de 485 mg (0,5 mmole) do éster de difenilmetilc do ácido 7 ji— E( Z )-2-( 2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il )-2-tritiloxiiminoacetamidoJ-3-metano-sulfoniloxi.-3-cefem-4-carboxílico em 2 ml de dimetilformamida e agita-se a mistura a temperatura o de -70 C durante 20 minutos. Mistura-se a mistura reaccional com 0,1 ml de ácido acético, dilui-se com água e extraiLava-se o extracto com uma solução de sódio, seca-se sobre sulfate Cristaliza-se o resíduo em tolueno para se obterem 227 mg do éster de difenilmetilo co ácido 7 fi-[(2)-2-( 2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetamidoj-3-(1 , 2,3-triazol-4~iltiometiltio )-3-cefem.-4-carbc xílico, sob a forma de cristais incolores. Rendimento: 44%.

-se com acetato de etilo concentrada de cloreto de sódio e concentra-se.

RMN ó (CDC1₃ -CD₃ 0D) ppm: 1,53(s, 9H), 3,45,

3,63(ABq, J=17,2Hz, 2H), 4,12, 4,15 (ABq, J=14,2Hz, 2H) ,

5,O8(d, J=5Hz, -1H), 5,88(d, J=5Hz, 1H), 6,98(s, 1H), 7,O8(s, 1H), 7,2-7,5(m, 25H), 7,60(s, 1H).

IV 9 (KBr) cm^-1 : 3390, 3210, 1 800, 1 725, 1 688,

1555, 1495, 1449, 1375, 1275, 1245, 1225, 1155.

7) Acil = (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-triti_L loxiiminoacetilo Het - 1-tritil-1,2,3-triazol-4-ilo (1E3)

A uma solução de 25,Og (58 mmoles) de 4-acetiltiometiltio-1-tritil-1,2,3-triazol em uma mistura de 300 ml de dimetilformamida e de 100 ml de tetra-hidrofurano, à o temperatura de -78 C, adicionam-se, gota a gota, 37,8 ml (51 mmoles) de uma solução 1,35N de metóxido de sódio em metanol. Após agitação durante 15 minutos, adiciona-se à mistura, à temperatura de -78°C, durante 5 minutos, uma solu ção de 45,0g (46,3 mmoles) do éster de difenilmetilo do ácido 7fi- [(2 )-2-( 2-t-butoxic arboni lamino tiazol-4-il )-2-tri tilo xiiminoacetamido J -3-metano-sulfoniloxi-3-cefem-4-carboxílico em uma mistura de 120 ml de dimetilformamida e de 45 ml de tetra-hidrofurano. Depois de agitar durante 1 hora à temperatura de -78° C, dilui-se a mistura reaccional com ml de ácido clorídrico a 10% e com 1,5 litros de água e extrai-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se 'sob pressão reduzida. Purifi- 56 ca-se o resíduo por cromatografia em gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (15 a 10:1) e tritura-se em uma mistura de hexano/éter etílico, para se obterem 49,1g do éster de difenilmetilo do ácido 7_i3-f(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetamidoJ-3-(1-tritil-1 ,2,3-triazol-4-il)-tiometil tio-3-cefem-4-carboxílico sob a forma de um pó branco. Rendimento: 84%.

RMN j (CDC1₃) ppm: 1,50(s, 9H) , 3,31, 3,56(ABq, J=17Hz, 2H), 4,05(s, 2H), 4,97(d, J=4,8Hz, 1H), 5,84(dd,

J=4,8Hz, J=8,7Hz, 1H), 6,86(s, 1H), 7,02(s, 1H), 7,05-7,4(m,

41H), 7,45(s, 1H), 8,4-8,7(s largo, 1H).

IV j · (CHC1₃) cm^-1: 3400, 1 783, 171 8, 1 685,

1541 , 1490, 1443, 1368, 11 54.

8) Acil = (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-metoxii minoacetilo Het = 1-tritil-1,2,3-triazol-4-ilo (3E1-2-2)

A uma solução de 414mg (0,96 mmole) de 4-acetiltiometiltio-1-tritil-1 ,2,3-triazol em uma mistura de 5 ml de dimetilformamida e 2,5 ml de tetra-hidrofurano adiciona-se 0,69 ml (0,88 mmole) de uma solução 1,28N de metóxido de sódio à temperatura de 78°C e agita-se a mistura durante 12 horas. A esta mistura, adiciona-se, gota a gota, uma solução de 594 mg (0,8 -mmole) do éster de difenilmetilo do ácido 7^-[(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-meto xiiminoacetil]-amino-3-metano-sulfoniloxi-3-cefem-4-carboxílico em 2,5 ml de dimetilformamida durante 2 minutos e agita-se a mistura à mesma temperatura durante 1 hora. À mistura adiciona-se 1 ml de ácido clorídrico a 10% para interromper a reacção e extrai-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com água, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se. Purifica-se o resíduo por cromatografia em gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (2:1), para se obterem 579mg do éster de difenilmetilo do ácido 7/^-r(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-metoxiiminoacetilJ-amino-3-(1 - tritil-1 ,2,3-triazol-4-il)-tiometiltio-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de uma espuma branca. Rendimento: 70%.

RMN J (CDClg) ppm: 1,52(s, 9H), 3,65, 3,81(ABq,

J=18Hz, 2H), 4,10, 4,19(ABq, J=12Hz, 2H), 5,O2(d, J=4,8Hz,

1H), 5,9O(dd, J=4,8Hz, J=8,8Hz, 1H), 6,87(s, 1H), 7,0-7,5(m,

27H), 8,8(s largo, 1H).

IV j (CHClg) cm^-1: 3400, 1780, 1720, 1680, 1540,

370.

9) Acil = (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetilo Het = 1-metil-1,2,3-triazol-4-ilo (1E4-1)

A uma solução de 392 mg (1,93 mmoles) de 4-acetiltiometiltio-1-metil-1 ,2,3-triazol em uma mistura de 6 ml de dimetilformamida e 2 ml de tetra-hidrofurano adicionam-se, gota a gota, 1,33 ml (1,70 mmoles) de uma solução 1,28N de metóxido de sódio em metanol. Após agitação durante 15 minutos, adiciona-se à mistura uma solução de 1,50g (1,54 mmoles) de éster de difenilmetilo do ácido 7/3—f(Z)—2—(2— -t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetamido] -3-metano-sulfoniloxi-3-cefem-4-carboxílico em 5 ml de dimetilformamida. Após agitação durante 1 hora à mesma temperatura, neutraliza-se a mistura reaccional com ácido clorídrico a 10%, dilui-se com água e extrai-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se sob pressão reduzida. Purifica-se o resíduo por cromatografia em gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (3:2) para se obterem 1 ,43g do éster de difenilmetilo do ácido 7(3-Γ(Ζ)-2-(2-t-butoxi carbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetamidoJ-3-(1 -me til-1,2,3-triazol-4-il)-tiometiltio-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de uma espuma incolor. Rendimento: 90%.

RMN (CDClg) ppm: 1,49(s, 9H), 3,35, 3,51(ABq,

J=16,8Hz, 2H), 3,92(s, 3H), 4,08(s, 2H), 5,O6(d, J=4,7Hz,

1H), 5,91(dd, J=8,6Hz, J=4,7Hz, 1H), 6,93(s, 1H), 6,99(s, 1H), 7,15-7,5O(m, 26H) , 7,66(d,.· j=8,6Hz, 1H), 8,83(s largo, 1H) .

- 58 IV ; (CHCl ) cm ¹ : 3390, 1781, 1714, 1 684,

1540, 1490, 1443, 1366, 1281, 1218, 1153, 970.

10) Acil = (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-triti_ loxiiminoacetilo. Het = 2-metil-1,2,3-triazol-4-ilo (1E4-2)

A uma solução de 392 mg (1,93 mmoles) de 4-acetiltiometiltio-2-metil-1 ,2,3-triazol em uma mistura de 8 ml de dimetilformamida e de 4 ml de tetra-hidrofurano adicionam-se, gota a gota, 1,33 ml (1,70 mmoles) de uma solução de 1,28N de metóxido de sódio em metanol à temperatura de -78 °C e agita-se a mistura durante 15 minutos. À mistura adiciona-se uma solução de 1,50g (1,54 mmoles) do éster de difenilmetilo do ácido 7p-[(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetamido J -3-metano-sulfoniloxi-3-cefem-4-carboxílico em 5 ml de dimetilformamida. Após agitação durante 1 hora à mesma temperatura, neutraliza-se a mistura reaccional com ácido clorídrico a 10%, dilui-se com água e extrai-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se sob pressão reduzida. Purifica-se o resíduo por cromatografia em gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de n-hexano/acetato de etilo (1:1) para se obterem 1 ,45g do éster de difenilmetilo do ácido 7β-[(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)2-tritiloxiiminoacetilaminoJ-3-(2-metil-1,2,3-triazol-4-il)-tio metiltio-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de uma espuma incolor. Rendimento: 91%.

RMN £ (CDC1 ) ppm: 1,50(s, 9H), 3,32, 3,43(ABq,

J=16,8Hz, 2H), 3,98(s, 2H), 4,10(s, 3H) , 5,O7(d, J=4,9Hz,

1H), 5,86(dd, J=8,3Hz, J=4,9Hz, 1H), 6,90(s, 1H), 6,99(s, 1H), 7,15-7,45(m, 25H) , 7,49(s, 1H), 7,6l(d, J=8,3Hz, 1H), 8,85(s largo, 1H).

IV (CHCl 2 ) cm^-1 : 3402, 1785, 171 7, 1686,

1543, 1493, 1445, 1369, 1280, 1155, 1115, 1079, 972, 910.

11) Acil = ^^-^-t-butoxicarbonilaminotiazol-d-iD^-triti^ loxiiminoacetilo Het = 1-tritil-1,2,4-triazol-3-ilo (1E5) ·

A uma solução de 1,1 7g (2,71 mmoles) de 3-acetiltiometiltio-1-tritil-1 ,2,4-triazol em uma mistura de 1 Oml de dimetilformamida e de 5 ml de tetra-hidrofurano, adicionam-se, gota a gota, 2,0 ml (2,56 mmoles) de uma solução, ,28N de metóxido de sódio em metanol, à temperatura de -78° C, e agita-se a mistura durante 15 minutos. A esta mistura adiciona-se, gota a gota, uma solução de 2,40g (2,47 mmoles) do éster de difenilmetilo do ácido 7y3-f(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il-2-tritiloxiiminoacetamidoJ-3-metano-sulfoniloxi-3-cefem-4-carboxílico em 5 ml de dimetilformamida. Após agitação durante 50 minutos à mesma temperatura, interrompe-se a reacção mediante a adição de 0,95 ml de ácido clorídrico a 10%, dilui-se com água e extrai-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com uma solução concentrada de cloreto de sódio,, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se sob pressão reduzida. Purifica-se o resíduo por cromatografia em gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (3:1) para se obterem 1,93g do éster de difenilmetilo do ácido 7β- [(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetamidoJ-3-(1-tritil-1,2,4-triazol-3-il)-tiometiltio-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de uma espuma incolor.

RMN y (CDC1₃) ppm: 1,50(s, 9H), 3,30, 3,41(ABq,

J=17,4Hz, 2H), 4,17(s, 2H) , 4,95(d, J=4,9Hz, 1H), 5,9O(dd,

J=4,9Hz, J=8,5Hz, 1H), 6,94(ε, 1H), 7,02(s, 1H), 7,05-7,55(m, 41H), 7,89(s, 1H), 8,4-8,6(s largo, 1H).

IV j (CHClg ) cm¹: 3398, 1781, 1715, 1683,

1540, 1490, 1442, 1367, 1270, 1154.

12) Acil = (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-triti_ loxiiminoacetilo Het = 5-tetrazolilo (3E1-2-1)

A uma solução de 478 mg (2,52 mmoles) de 5-acetil60 tiometiltiotetrazol em 30 ml de dimetilformamida, sob arrefecimento até à temperatura de -70 °C, adicionam-se, cota a gota, 3,9 ml de uma solução 1,26N de metôxido de sódio em metanol e agita-se a mistura a uma temperatura compreendida entre -60° e 65 °C durante 25 minutos. À mistura reaccional, com arrefecimento à temperatura de -70° C, adiciona-se, gota a gota, uma solução de 2,00g (2,06 mmoles) do éster de difenilmetilo do ácido 7/3-[(Z )-2-( 2-t-butoxicarboni laminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetilo J -amino-3-metano-sulfoniloxi-3-cefem-4-carboxílico em 7 ml de dimetilformamida e agita-se a mistura a uma temperatura compreendida entre -65° e -70°C durante 40 minutos. Mistura-se a mistura reaccional com 0,5 ml de ácido clorídrico a 10%, dilui-se com água e extrai-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio, filtra-se e concentra-se. Purifica-se o resíduo por cromatografia em coluna de gel de sílica utilizando como eluente tolueno/acetato de etilo (1:1) - acetato de etilo - acetato de etilo contendo 0,5% de ácido acético, obtendo-se 968 mg do éster de difenilmetilo do ácido 7 p - [ (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetilJ -amino-3-(tetrazol-5-il)-tiometiltio-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de uma espuma de cor amarelo pálido contendo um sub-produto não identificado (cerca de 10%).

RMN j (CDC1₃ -CD₃ 0D) ppm: 1,52(s, 9H), 3,58,

3,71(ABq, J=17,6Hz, 2H), 4,46(s, 2H), 5,10(d, J=4,8Hz,

1H), 5,99(d, J=4,8Hz, 1H), 6,95(s, 1H), 7,06(s, 1H), 7,15-7,5O(m, 25H).

IV (CHC1₃ ) cm^-1: 3402, 3200br, 1 786, 1 71 7,

1672, 1544, 1492, 1446, 1369, 1280, 1154.

13) Acil = 2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetilo Het = 2 - piridilo (2E1-3)

A uma solução de 249 mg (1,25 mmoles) de 2-acetiltiometiltio-piridina em uma mistura de 4 ml de dimetilformami61 da e 2 ml de tetra-hidrofurano, com arrefecimento até à temperatura de -78° C, adiciona-se, gota a gota, 0,87 ml (1,10 mmoies) de uma solução 1,26N de metóxido de sódio em metanol e agita-se a mistura à temperatura de -78° C durante 15 minutos. A esta mistura reaccional adiciona-se uma solução de 971 mg (1,00 mmole) do éster de difenilmetilo do ácido 7 β - L (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetamido]-3-metano-sulfoniloxi-3-cefem -4-carboxílico em 2 ml de dimetilformamida e agita-se a mistura à temperatura de -78 °C durante 1 hora. Mistura-se a mistura reaccional com ácido clorídrico a 10% para interromper a reacção, dilui-se com água e extrai-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com uma solução aquosa diluída de hidrogenocarbonato de sódio e com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se. Purifica-se o resíduo por cromatografia em gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (4:1) e efectua-se uma nova cromatografia em gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (7:1) para se obterem 753 mg do éster de difenilmetilo do ácido 7/3-í'(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-trit iloxi iminoacet amido J-3-(p:irid -2-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de uma espuma incolor. Rendimento: 73%.

RMN (CDClg) ppm: 1,51(s, 9H) , 3,42, 3,56(ABq,

J=17,2Hz, 2H), 4,45(s, 2H), 5,04(d, J=4,9Hz, 1H), 5,87(dd,

J=4,9Hz, J=8,6Hz, 1H), 6,90(s, 1H), 7,01(ddd, J=7,4Hz,

J=4,9Hz, J=1,OHz, 1H), 7,O3(s, 1H), 7,11-7,53(m, 28H) ,

8,4l(ddd, J=4,9Hz, J=1,8Hz, J=1,0Hz, 1H), 8,55(s largo, 1H).

IV g) (CHClg) cm^-1: 3402, 1784, 1717, 1686, 1574, 1 543, 1 514, 1493, 1450, 1 369, 1282, 11 54.

Exemplo 2 substituição na posição 3 com um átomo de iodo

Acil-NH <Αγ' SAg

COOBh

Acil-NH

O

Ml

SHet

COCBh

1) Acil = (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2tritiloxiiminoacetilo Het = tritil-1 ,2,4-triazol-3-ilo (4E3-4)

A uma suspensão de 11, 75g (30,0 mmoles) de tritil-3-clorometiltio-1 ,2,4-triazol em 150 ml de acetona, adicionam-se 9,00g (60,0 mmoles) de iodeto de sódio e agita-se a mistura à temperatura de 50 °C durante 3 horas. Dilui-se a mistura reaccional com água e extraí-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se para se obterem 13g de tritil-3-iodometiltio-1 ,2,4-triazole sob a forma de cristais amarelos f RMN (CDCl^) ppm: 4,70(s, 2H), 7,1 a 7,2(m, 6H), 7,3 a 7,4(m, 9H), 7,96(s,

1H)j . A uma solução de 16,8g (15 mmoles) de 1-óxido do éster de difenilmetilo do ácido 7/3-f(Z )-2-( 2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetilaminoJ-3-argentiotio-3-cefem-4-carboxílico em. 90 ml de hexametilfosforamida, adicionam-se 1 3g de tritil-3-iodometiltio-1,2,4-triazol e agita-se a mistura à temperatura ambiente durante 3 horas. Diluí-se a mistura reaccional com acetato de etilo, mistura-se com uma solução saturada de cloreto de sódio e filtra-se através de Celite. Recolhe-se a fase orgânica, lava-se com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se concentra-se. Purifica-se gel de sílica utilizando tolueno/acetato de etilo sobre sulfato de sódio e o resíduo por cromatografia em como elue.nte uma mistura de (5:1-3:1) para se obterem 11,29g do 1-óxido do éster de difenilmetilo do ácido 7f'3-[(Z)-2-(2~t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetilaminoJ-3-(triti 1-1 ,2,4-triazol -3-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de

- 63 uma espuma de cor castanho pálido. Rendimento: 59%.

RMN (CDC1₃) ppm: 1,49(s, 9H) , 3,19, 3,82(ABq,

J=18,5Hz, 2H), 4,19(d, J=4,6Hz, 1H), 4,16, 4,22(ABq, J=13,7Hz,

2H), 6,19(dd,	J=4,6Hz,	J=10,1Hz, 1H), 6,97(s,	1H),
7,O5-7,5(m, 41H)	, 7,9O(s	, 1H), 8,04(d, J=10,1Hz, 1H),	8,30
(s largo, 1H).		cm-1 : 3400, 1 804, 1725, 1689,
IV Q	(CH313 )	1 543,
1496, 1449, 1371	, 1040.

2) Acil = (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetilo Het = 1-metil-1 ,2,4-triazol-3-ilo (4E3-2).

A uma solução de 3,37g (3 mmoles) de 1-óxido do éster de difenilmetilo do ácido 7(3-E(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-i1)-2-tritiloxiiminoacetilamino]-3-argentio tio-3-cefem-4-carboxílico em 20 ml de hexametilfosforamida, adicionam-se 1,50g de 3-iodometiltio-1-metil-1,2,4-triazol e agita-se a mistura à temperatura ambiente durante 3 horas. Dilui-se a mistura reaccional com uma solução saturada de cloreto de sódio e com acetato de etilo e filtra-se para remover a matéria insolúvel. Recolhe-se a fase orgânica, lava-se com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se. Purifica-se o resíduo por cromatografia em gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (1:1) para se obterem 1,82g do 1-óxido do éster de difenilmetilo do ácido 7(3- C(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetilamino] —3—(1-metil-1 ,2,4-triazol-3-iltio-metil tio)-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de uma espuma de cor castanho amarelado. Rendimento: 58%.

RMN (CDC1 ) ppm: 1,46(s, 9H), 3,76(s, 3H),

3,49, 4,12(ABq, J=18,4Hz, 2H), 4,28(s, 2H), 4,46(d, J=4,8Hz,

1H), 6,24(dd, J=4,8Hz, J=9,8Hz, 1H), 6,93(s, 1H), 6,98(s, 1H), 7,2-7,55(m, 25H), 7,91(s, 1H), 8,O2(d, J=9,8Hz, 1H), 8,66(s largo, 1H) .

- 64 IV J (CHC1₃ ) cm ¹: 3410, 1 803, 1724, 1689, 1 545, 1510, 1497, 1450, 1372, 1042.

3) Acil = (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-critiloxiiminoacetilo Het - 2-metil-1,2,4-triazol-3-ilo (4E3-1).

A uma solução de 3,37g (3 mmoles) de 1-óxido do éster de difenilmetilo do ácido 7^-Γ(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetilamino J -3-argentiotio-3-cefem-4-carboxílico em 20 ml de hexametilfosforamida, adiciona-se uma solução de 1,47g de 3-iodometiltio-2-metil-1,2,4-triazol em 3 ml de hexametilfosforamida e agita-se a mistura à temperatura ambiente durante 3 horas. Dilui-se a mistura reaccional com uma solução saturada de cloreto de sódio e com acetato de etilo e filtra-se para remover a matéria insolúvel. Recolhe-se a fase orgânica, lava-se com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se. Purifica-se o resíduo por cromatografia em gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (1:1) para se obterem 1,76g do 1-óxido do éster de difenilmetilo do ácido 7/3—Γ(Ζ)-2I

-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetilamino]-3-(2-metil-1,2,4-triazol-3-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de uma espuma de cor castanho. Rendimento: 56%.

RMN $ (CDC1 ) ppm: 1,47(s, 9H); 3,ββ(ε, 3H) ,

3,47, 3,97(ABq, J=18,8Hz, 2H), 4,38(d, J=4,8Hz, 1H), 4,22,

4,48(ABq, J=13,7Hz, 2H), 6,25(dd, J=4,8Hz, J=10,0Hz, 1H),

6,96(s, 1H); 6,97(s, 1H), 7,2-7,5(m, 25H), 7,79(s, 1H),

8,02(d, J=10,0Hz, 1H), 8,59(s largo, 1H).

IV ú (CHC1₃) cm’'¹: 3400, 1 805, 1 722, 1688, 1 542, 1509, 1496, 1449, 1371 , 1041 .

4) Acil = (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetilo Het = 1 ,2,3-tiadiazol-5-ilo (3E1-1-1).

A uma solução de 3,0g (92% de pureza: 3,0 mmoles) do 1(3-óxido do éster de difenilmetilo do ácido 7β-[(Z)-2-(2-t- 65 -butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetil]- amino-3-mercapto-3-cefem-4-carboxílico em 20 ml de tetra-hidrofurano, adiciona-se uma solução de 560 mg (3,3 mrnoles) de nitrato de prata em 3 ml de agua e agita-se a mistura sob arrefecimento com gelo durante 20 minutos. Dilui-se a mistura reaccional com água e extrai-se com diclorometano. Lava-se o extracto uma vez com água, seca-se sobre sulfato de sódio, filtra-se e concentra-se para se obterem 3,37g do 1(3-óxido do éster de difenilmetilo do ácido 7/5-[(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetil]-amino -3-argentiotio-3-cefem-4-carboxílico, sob a fôrma de uma espuma de cor castanho amarelado.

A uma solução deste sal de prata em 20 ml de hexametilfosforamida adiciona-se uma solução de 1,55g de 5-iodometiltio-1 ,2,3-tiadiazol em 3 ml de hexametilfosforamida e agita-se a mistura à temperatura ambiente durante 3 horas. Mistura-se a mistura reaccional com uma solução concentrada de cloreto de sódio e extrai-se com acetato de etilo. Depois de separar por filtração a matéria insolúvel, lava-se o extracto com água, seca-se sobre sulfato de sódio, filtra-se e concentra-se. Purifica-se o resíduo por cromatogrãfia em coluna de gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (3:1 - 2:1) para se obterem 1,49g do 1β -óxido do éster de difenilmetilo do ácido 7β-[(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritilo xiiminoacetilj-amino-3-(1 ,2,3-tiadiazol-5-il)-tiometiltio-3-ce fem-4-carboxílico, sob a forma de um pó de cor branco sujo. Rendimento: 47%.

RMN (CDC1₃) ppm: 1,48(s, 9H), 3,23, 3,91(ABq, J=17,6Hz, 2H), 3,91, 4,09(ABq, J=14,1Hz, 2H), 4,49(d, J=4,8Hz, 1H), 6,31(dd, J=4,8Hz, J=10,0Hz, 1H), 6,98(s, 1H), 7,00(s, 1H), 7,15-7,5(m, 25H), 7,96(d, J=10,0Hz, 1H), 8,45(s largo, 1H), 8,47(s, 1H).

IV o (CHC1 ) cm“¹ : 3400, 1804, 171 8, 1690, 1543, 1510, 1493, 1446, 1369, 1226, 1154, 1031.

5) Acil = (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetilo Het = 1 ,3 ,,4-tiadiazol-2-ilo (2E1-1).

1. A uma solução de 2,78g (3 mmoles) do 1 β-óxido dc éster de difenilmetilo do ácido 7p-[(Z)—2—(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetamidoj-3-mercapto-3-cefem-4-carboxílico em 20 ml de tetra-hidrofurano, adiciona-se uma solução de 560 mg (1 ,1 equivalentes: 3,3 mmoles) de nitrato de prata em 3 ml água sob arrefecimento com gelo. Decorridos 10 minutos, dilui-se a mistura reaccional com água e extrai-se com diclorometano. Lava-se o extracto com água, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se para se obterem 3,4g de um resíduo sob a forma de uma espuma de cor castanho. A uma suspensão deste sal de prata em 20 ml de hexametilfosforamida, adicionam-se 1,2g de 2-iodometiltio-1,3,4-tiadiazol à temperatura ambiente e agita-se a mistura durante 17 horas. Dilui-se a mistura reaccional com uma solução concentrada de cloreto de sódio e extrai-se com acetato de etilo. Filtra-se o extracto para remover o sólido, lava-se com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se. Purifica-se o resíduo por cromatografia em gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (3:1 a 2:1) para se obterem 776 mg do 1 β-óxido do éster de difenilmetilo do ácido 7β-Ε(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetamidoj-3-(1 ,3,4-tia diazol-2-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de uma espuma de cor castanho pálido. Rendimento: 25%.

RMN _A (CDC1 ) ppm: 1,49(s, 9H), 3,74, 3,98(ABq,

J=18Hz, 2H), 4,29, 4,84(ABq, J=14Hz, 2H) , 4,55(d, J=4,8Hz,

1H), 6,27(dd, J=4,8Hz, J=10Hz, 1H), 6,98(s, 1H), 7,00(s, 1H), 7,2-7,5(m, 25H), 7,86(d, J=10Hz, 1H), 8,45(s largo, 1H), 9,00(s, 1H).

IV (CHC1₃ ) cm¹ : 3400, 1802, 1718, 1688,

1544, 1369, 1154.

2. Divide-se em 2 partes uma solução de 0,2g do sal de prata do 1/3-óxido do éster de difenilmetilo do ácido 7β-[(Ζ) -2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetamido]-3-mercapto-3-cefem-4-carboxílico em 2 ml de hexametilfos

- 67 foramida e adiciona-se 0,05g de 2-clorometiltio-1,3,4-tiadiazol a uma das partes e 0,05g de 2-bromometiltio-1,3,4-tiadiazol à outra parte. Depois de deixar em repouso à temperatura ambiente durante 10 horas, o cromatograma de camada fina, utilizando como eluente tolueno/acetato de etilo (2:1) de cada uma das porções dá uma mancha com um valor de Rf igual ao do produto descrito no parágrafo anterior (Rf = 0,2).

3. Adicionam-se 1,85g (2 mmoles) do 1 β-óxido do éster de difenilmetilo do ácido 7/3-[(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetamido]-3-mercapto-3-cefem-4-carboxílico a uma solução de 675 mg (2,6 mmoles) de 2-iodometiltio-1,3,4-tiadiazol em 10 ml de dimetilformamida à temperatura 'de -50° C. À mistura, adiciona-se, gota a gota, 0,21 ml (2,6 mmoles) de piridina e agita-se a mistura à temperatura de -50°C durante 1 hora. Mistura-se a mistura reaccional com 3 ml de ácido clorídrico 1N, dilui-se com água e extrai-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com água, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se. Purifica-se o resíduo por cromatografia em gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato dê etilo (3:1 a 2:1) para se obterem 305 mg do 1Ô-óxido do éster de difenilmetilo do ácido 7^-[(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetamidoJ-3-(1,3,4-tiadiazol-2-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de uma espuma de cor castanho pálido. Rendimento: 15%.

6) Acil = (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritil xiiminoacetilo Het = 2-metil-1,3,4-tiadiazol-5-ilo (2E1-2) .

A uma solução de 1 ,85g (2 mmoles) do 1/3 -óxido do éster de difenilmetilo do ácido 7β-C(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetamidoJ-3-mercapto-3-cefem-4-carboxílico em 12 ml de tetra-hidrofurano adiciona-se uma solução de 373 mg (1,1 equivalentes: 2,2 mmoles) de nitrato de prata em 2 ml de água, sob arrefecimento com gelo, e agita-se a mistura durante 10 minutos. Dilui-se a mistura reaccional com água e extrai-se com diclorometa- 68 no. Lava-se o extracto com água, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se para se obterem 2,1 g do sal de prata sob a forma de uma espuma de cor castanho. A uma suspensão deste sal em 10 ml de hexametilfosforotriamida adiciona-se 1,05g de 5-iodometiltio-2-metil-1 ,3,4-tiadiazol e agita-se a mistura à temperatura ambiente durante 4 horas. Dilui-se a mistura reaccional com uma solução concentrada de cloreto de sódio e estrai-se com acetato de etilo. Filtra-se o extracto para remover a substância sólida, lava-se com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se. Purifica-se o resíduo por cromatografia em gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (3:1 a 2:1) para se obterem 382mg do 1 /3-óxido do éster de difenilmetilo do ácido 7p-[(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetamido3-3-(2-metil-1 ,3,4-tiadiazol-5-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de uma espuma de cor amarelo pálido. Rendimento: 18%.

RMN _ó· (CDC1₃ ) ppm: 1,49(s, 9H), 2,68(s, 3H), 3,76, 3,97(ABq, J=19Hz, 2H), 4,23, 4,75(ABq, J=14Hz, 2H),

4,60(d, J=4,6Hz, 1H), 6,28(dd, J=4,6Hz, J=10Hz, 1H), 6,97(s,

1H), 7,oo(s, 1H), 7,2-7,5(m, 25H), 7,89(d, J=10Ez, 1H),

8,5(s largo, 1H).

IV 0 (CHC1₃ ) cm^-1: 3400, 1 802, 171 8, 1686, 1 543, 1369, 1218, 1154.

7) Acil = (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetilo Het = 1-metil-5-tetrazolilo (3E1-1-2).

1. A uma solução de 3,0g (92% de pureza: 3,0 mmoles) do Ιβ-óxido do éster de difenilmetilo do ácido 7/5-[(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetil3~amino -3-mercapto-3-cefem-4-carboxílico em 20 ml de tetra-hidrofurano, adiciona-se uma solução de 560 mg (3,3 mmoles) de nitrato de prata em 3 ml de água, sob arrefecimento com gelo, e agita-se a mistura durante 20 minutos. Dilui-se a mistura reaccional com água e extrai-se com diclorometano. Lava-se o extracto com água, secasse sobre sulfato de sódio,

- 69 filtra-se e concentra-se para se obterem 3,37g do 1/3-óxido do éster de difenilmetilo do ácido 7/3-f(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-i1)-2-tritiloxiiminoacetil3-amino-3-argentiotio-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de uma espuma de cor castanho amarelado.

2. A uma solução deste sal de prata em 20 ml de hexametilfosforamida adiciona-se uma solução de 1,33g de 5-iodometiltio-1-metil-tetrazol em 3 ml de hexametilfosforamida e agita-se a mistura à temperatura ambiente durante 16 horas. Dilui-se a mistura reaccional com uma solução concentrada de cloreto de sódio e extrai-se com acetato de etilo. Depois de separar por filtração a matéria insolúvel, lava-se o extracto com água, seca-se sobre sulfato de sódio filtra-se e coricentra-se. Purifica-se o resíduo por cromatografia em coluna de gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (3:1 - 2:1) para se obterem 773 mg de 1 (3-óxido do éster de difenilmetilo do ácido 7/3- C(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetil3-arnino-3-(1 -metil-5-tetrazolil)-tiome tiltio-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de uma espuma de cor castanho. Rendimento: 24%.

RMN j (CDClg) ppm: 1,48(s, 9H), 3,75(s, 3H),

3,73, 3,89(ABq, J=17,6Hz, 2H), 4,22, 4,76(ABq, J=14,2Hz,

2H), 4,50(d, J=4,6Hz, 1H), 6,27(dd, J=4,6Hz, j=10,2Hz,

1H), 6,97(s, 1H), 7,00(s, 1H), 7,1O-7,5O(m, 25H), 7,73(d,

J=10,2Hz, 1H), 8,48(s largo, 1H).

IV g (CHC1₃ ) cm^-1 : 3400, 1 802, 171 8, 1686,

1543, 1510, 1493, 1446, 1369, 1275, 1227, 1154, 1031.

8) Acil = (Z)-2-(2-t-butoxicarbonílaminotiazol-4-il)-2-triti loxiiminoacetilo Het = 2-metiltetrazol-5-ilo (4E3-3)

A uma solução de 3,37g (3 mmoles) de 1-óxido do éster de difenilmetilo do ácido 7/3-C(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-i1)-2-tritiloxiiminoacetilaminoJ-3-argentiotio-3-cefem-4-carboxílico em 20 ml de hexametilfosforamida, adiciona-se uma solução de 1,43g de 5-iodometiltio-2-metil tetrazol em 3 ml de hexametilfosforamida e agita-se a

- 70 mistura à temperatura ambiente durante 3 horas. Dilui-se a mistura reaccional com uma solução saturada de cloretc de sódio e com acetato de etilo e filtra-se. Recolhe-se a fase orgânica do filtrado, lava-se com uma solução saturada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se. Purifica-se o resíduo por cromatografia em gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (4:1 - 3:1) para se obterem 1 ,43g do 1-óxido do éster de difenilmetilo do ácido 7|6-£(z)-2-(2-t-outoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoace~ilamino J -3-(2-metiltetrazol-5-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de uma espuma amarela. Rendimento: 45%.

RMN £ (CDC1₃) ppm: 1,47(s, 9H), 3,50, 4,02(ABq,

J=17,9Hz, 2H), 4,22(s, 3H), 4,24, 4,41(ABq, J=13,9Hz, 2H), 4,49(d, J=4,8Hz, 1H), 6,27(dd, J=4,8Hz, J=10,0Hz,

1H), 6,95(s, 1H), 6,99(s, 1H), 7,2-7,5(m, 25H), 7,91(d,

J=10,0Hz, 1H), 8,45(s largo, 1H).

IV J (CHC1₃ ) cm^-1: 3410, 1 806, 1725, 1690,

1543, 1510, 1496, 1450, 1382, 1372, 1320, 1044.

Exemplo 3 modificações no grupo Het

1) remoção do grupo tritilo do anel tritil-1,2,4-triazol (4E4)

A uma solução de 11 ,3g do 1-óxido do éster de difenilmetilo do ácido 7β-Γ(Z)-2-(2-t-bunoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetilamino]-3-(tritil-1,2,4-tria zol-3-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico em 60 ml de acetona, sob arrefecimento com gelo, adicionam-se 1,68g (8,33 mmoles) de mono-hidrato do ácido _p-tolueno-sulfónico e agita-se a mistura à temperatura ambiente durante 4 horas. Dilui-se a mistura reaccional com acetato de etilo, lava-se com uma solução aquosa de hidrogenocarbonato de sódio a 5% θ com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se. Purifica-se o resíduo por cromatografia em gel de sílica utilizando como eluente uma ’mi^stura tolueno/acetato de etilo (1:1 - 1:2) para se obterem 2,84g do 1 -óxido do éster de difenilmetilo do ácido 7^-f(Z)-2-(2-t-bu\.oxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetilaminoj-3-(1,2,4-triazol-3-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de uma espuma castanha. Rendimento: 31%.

RMN £ (CDClg-CD gOD) ppm: 1,51(s, 9H), 3,58,

4,06(ABq, J=17,8Hz, 2H), 4,30(s, 2H), 4,62(d, J=4,7Hz,

1H), 6,22(d, J=4,7Hz, 1H), 6,89(s, 1H), 7,O3(s, 1H),

7,15-7,4(m, 25H), 8,01(s, 1H).

IV j (CHC1 ) cm^-1 : 3380, 32001argo, 1 803,

1720, 1690, 1547, 1510, 1497, 1450, 1372, 1040.

2) metilação do anel de 1 ,2,3-triazol nas posições

1,2 e 3 (1E6).

A uma solução de 6,00g (5,87 mmoles) do éster de difenilmetilo do ácido 7p-C(Z)-2-(2-t-butoxicarbcnilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetamido] -3-(1,2,3-triazol-4-il1 -tiometiltio-3-cefem-4-carboxílico em uma mistura de 60 ml de diclorometano e de 30 ml de tetra-hidrofurano, adicionam-se, à temperatura de -50°C, 1,12g (6,43 mmoles) de diisopropiletilamina. Depois de agitar a uma temperatura compreendida entre -40° e -50°C durante 3 minutos, adiciona-se à mistura 0,73 ml (6,45 mmoles) de éster de metilo do ácido trifluorometano-sulfónico. Depois , de agitar à mesma temperatura durante 30 minutos, interrompe-se a reacção com 2,4 ml de ácido clorídrico a 10%, dilui-se com água e extrai-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com água e com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se sob pressão reduzida. Purifica-se o resíduo por cromatografia em gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (3:2) para se obterem 1 ,84g do éster de difenilmetilo do ácido 7^-[( Z )-2-( 2-t-butoxicarbonilaminot iazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetamido]-3-(3-meti1-1,2,3-triazol -4-il)-tiometiltio-3-cefem-4-carboxílico. Rendimento: 30%.

- 72 RMN <> (CDC1₃ -CD₃ OD) ppm: 1,52(s, 9H), 3,43, 3,55(ABq,

J=17,3Hz, 2H), 3,87, 3,94(ABq, J=13,7Hz, 2H) , 3,95(s,

3H), 5,12 (d, J=4,8Hz, 1H), 5,99(d, J=4,8Hz, 1H), 6,96(s,

1K), 7,O6(s, 1H), 7,15-7,5O(m, 25H), 7,73(s, 1H): IV(CHC13) cm : 3398, 3300, 1784, 1714, 1683, 1540, 1490, 1443, 1366, 1277, 1220, 1153, 1114, 1077, 970, 910; e 2,7¼ (rendimento: 46%) do éster de difenilmetilo do ácido

7/3-f(Z )-2-( 2-t-butoxicarboni lamino tiazol-4-il)-2-tritiloxiimi_ noacetamido]-3-(1 -metil-1,2,3-triazol-4-il)-tiometiltio-3-cefem-4-carboxílico; e 0,5¼ (rendimento: 8%) do éster de difenilmetilo do ácido 7/3 -[(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilamino-4-tiazolil)-2-tritiloxiiminoacetamidoJ-3-(2-metil-1,2,3-tria zol-4-il)-tiometiltio-3-cefem-4-carboxílico.

3) metilação do anel 1,2,4-triazol (4E5).

A uma solução de 2,7¼ (2,61 mmoles) de 1-óxido do éster de difenilmetilo do ácido 7/3-í(Z)-2-(2-t-butoxicarbo nilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetilamino J -3-0,2,4-triazol-3-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico em 50 ml de te tra-hidrofurano à temperatura de -78° C, adicionam-se 2,9ml de uma solução 1M de bis (trimetilsilil )-amideto de Iítio em tetra-hidrofurano e agita-se a mistura à temperatura de -78°C durante 10 minutos, mistura-se com 0,33 ml (2,92 mmo les) do éster de metilo do ácido trifluorometano-sulfónico e agita-se à temperatura de -78°C durante 30 minutos. Mistura-se a mistura reaccional com 2,1 ml de ácido clorídrico a 10%, dilui-se com água e extrai-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com uma solução aquosa de hidrogeno carbonato de sódio e com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se. Purifica-se o resíduo por cromatografia em gel de sílica utilizando como eluente acetato de etilo, para se obter O,73g do 1-óxido do éster de difenilmetilo do ácido 7 fi-L (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-i1)-2-tritiloxiiminoacetilamino J -3-(4-metil-1 ,2,4-triazol-3-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de uma espuma cor castanho pálido, rendimento: 27%.

RMN _ò (CDC1₃-CD₃OD) ppm: 1,51(s, 9H) , 3,31 (s,

3H), 3,85(s, 2H), 4,12, 4,70(ABq, J=14,6Hz, 2H), 4,74(d,

J=4,8Hz, 1H), 6,26(d, J=4,8Hz, 1H), 6,96(s, 1H), 7,01(s,

1H), 7,2-7,5(m, 25H), 8,11 (s largo, 1H).

IV (CHC1 ) cm^-1 : 3400, 1805, 1722, 1690,

1545, 1 507, 1497, 1450, 1372, 1040.

Exemplo 4 sulfóxido

- 73 0

COOBh

SHet

COOBh

1) Redução: Acil = (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetilo Het = 1-metil-1 ,2,4-triazol-3-ilo (4E6-2).

A uma solução de 1,78g (1 ,69 mmoles) do 1 -óxido do éster de difenilmetilo do ácido 7(3—f(Z)—2—(2-t-butoxicarbo nilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetilaminoJ-3-(1-metil-1 ,2,4-triazol-3-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico em 15ml de dimetilformamida à temperatura de -20° C, adiciona-se 0,42 ml (4,18 mmoles) de tricloreto de fósforo e agita-se a mistura à mesma temperatura durante 20 minutos. Verte-se a mistura reaccional em duas camadas de acetato de etilo e de uma solução aquosa fria de hidrogenocarbonato de sódio. Recolhe-se a fase orgânica, lava-se com água e com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se. Purifica-se o resíduo por cromatografia em gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (2:1) para se obterem, 1,59g do éster de difenilmetilo do ácido 7β-[(Ζ)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiinti noacetamido]-3-(1-metil-1 ,2,4-triazol-3-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico sob a formá de uma espuma castanha.

- 74 Rendimento: 91%.

RMN _ύ (CDC1₃) ppm: 1,50(s, 9H), 3,41, 3,49(ABq,

J=17,8Hz, 2H), 3,76(s, 3H), 4,25(s, 2H) , 5,O5(d, J=4,6Hz,

1H), 5,85(dd, J=4,6hz, J=8,2Hz, 1H), 6,89(s, 1H), 7,00(s,

1H), 7,2-7,5(m, 25H) , 7,77(d, J=8,2Hz, 1H), 7,89(s, 1H),

9,0-9,3(s largo, 1H).

IV J (CHC1₃ ) cm^-1 : 3410, 1 790, 1725, 1690,

1542, 1509, 1496, 1449, 1372.

2) Redução: Acil = (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetilo Het = 2-metil-1 ,2,4-triazol-3-il (4E6-1).

A'uma solução de 1 ,73g (1,64 mmoles) do 1-óxido do éster de difenilmetilo do ácido 7,ó-[-(Z)-2-(2-t-butoxicarbo nilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetilamino]-3-(2-metil1,2,4-triazol-3-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico em 15 ml de dimetilformamida, adicionam-se, à temperatura de -2O°C,O,41 ml (4,08 mmoles) de tricloreto de fósforo e agita-se a mistura à mesma temperatura durante 20 minutos. Verte-se a mistura reaccional em duas camadas de acetato de etilo e de uma solução aquosa de hidrogenocarbonato de sódio fria e agita-se. Reco-lhe-se a fase orgânica, lava-se com água e com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre· sulfato de sódio e concentra-se. Purifica-se o resíduo por cromatografia em gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (2:1) para se obterem 1,60g do éster de difenilmetilo do ácido 7^-[(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetilaminoj-3-(2-metil-1 ,2,4-triazol-3 -iltio metiltio)-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de uma espuma de cor castanho escuro. Rendimento: 94%.

RMN £ (CDC1₃) ppm: 1,49(s, 9H), 3,37, 3,46(ABq,

J=17,9Hz, 2H), 3,69(s, 3H), 4,29, 4,48(ABq, J=13,4Hz,

2H), 5,01(d, J=4,6Hz, 1H), 5,91(dd, J=4,6Hz, J=8,6Hz,

1H), 6,93(s, 1H), 6,95(s, 1H), 7,2-7,5(m, 25H), 7,83(d,

J=8,6Hz, 1H), 7,84(s, 1H), 9,15-9>3(s largo, 1H).

IV (CHC1₃ ) cm ¹ : 3420, 1 790, 172-, 1690,

1542, 1497, 1450, 1 372.

3) Redução: Acil - (Z )-2-( 2-t-butoxic arbonilamir.oti azol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetilo Het = 4-metil-1,2,4-triazol-3-ilo (4E6-4).

A uma solução de 706 mg (0,671 mmole) do

-óxido do éster de difenilmetilo do ácido 7/5-f(Z)-2-(2-t-bu toxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetilaminoJ-3-(4-metil-1,2,4-triazol-3-iltiometiltio-3-cefem-4-carboxílico em 8 ml de dimetilformamida adiciona-se 0,17 ml (1,69 mmoles) de tricloreto de fósforo e agita-se a mistura à temperatura de -20° C durante 30 minutos. Verte-se a mistura reaccional em duas camadas arrefecidas com gelo de acetato de etilo e de uma solução aquosa de hidrcgenocarbonato de sódio a 5%· Recolhe-se a fase orgânica, lava-se com água e com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se.

Purifica-se o resíduo por cromatografia em gel de sílica utilizando como eluente acetato de etilo, para se obterem

404 mg do éster de difenilmetilo do ácido 7/5-f (Z)-2-( 2-t-but xicarbonilaminotiazol-4-i1)-2-tritiloxiiminoacetilaminoJ-3-( -metil-1,2,4-triazol-3-iltio)-metiltio-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de uma espuma de cor castanho pálido. Rendimento: 58%.

RMN 5 (CDC1 ) ppm: 1,46(s, 9H), 3,31's, 3H),

3,43, 3,56(ABq, J=17,2Hz, 2H), 4,34, 4,67(ABq, J=14,2Hz,

2H), 5,04(d, J=5,0Hz, 1H), 5,94(dd, J=5,0Hz, J=8,5Hz,

1H), 6,91(s, 1H), 6,95(s, 1H), 7,2-7,5(m, 25H), 8,O5(s,

1H), 8,27(d, >8,5Hz, 1H), 9,7-1O,1(s largo, 1H).

IV d (CHC1₃ ) cm^-1: 3410, 1 789, 1723, 1689,

1542, 1507, 1495, 1448, 1370.

4) Redução: Acil = (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetilo Het = 1,2,3-tiadiazol-5-ilo (3E2-1).

- 76 A uma solução de 1,46 g (1,38 mmoles) do 1 (3-óxido do éster de difenilmetilo do ácido 7β-[(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetil ] -amino-3-0 ,2,3 -tiadiazol-5-il)-tiometiltio-3-cefem-4-carboxílico em 1 2 ml de dimetilformamida, sob arrefecimento à temperatura de -20°C adiciona-se 0,35 ml (3,48 mmoles) de tricloreto de fósforo e agita-se a mistura à temperatura de -20°C durante 20 minutos. Verte-se a mistura reaccional em duas camadas de acetato de etilo e de 35 ml de uma solução aquosa de hidrocenocarbonato de sódio a 5%, sob arrefecimento com gelo. Recolhe-se a camada orgânica, lava-se com água e com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio, filtra-se e cnoncentra-se. Purifica-se o resíduo obtido mediante cromatografia em coluna de gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (5:1) para se obterem 1 ,24g do éster de difenilmetilo do ácido 7 β- [(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetil]-amino-3-(1 ,2,3-tiadiazol-5-il)-tiometiltio-3-cefem -4-carboxílico, sob a forma de uma espuma amarela. Rendimento: 86%.

RMN _è (CDC1₃-CD₃ 0D) ppm: 1,52(s, 9H), 3,51, 3,67 (ABq, J=17,6hz, 2H), 4,00, 4,1ó(ABq, J=13,7Hz, 2H), 5,13(d,

J=5,0Hz, 1H), 6,02(d, J=5,0Hz, 1H), 6,99(s, 1H), 7,O5(s,

1H), 7,15-7,5O(m, 25H), 8,.5l(s, 1H).

IV j (CHClg) cm^-1: 3400, 1789, 171 8, 1686, 1 543,

1492, 1445, 1369, 1277, 1225, 1154.

5) Redução: Acil = (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetilo Het = 1,3,4-tiadiazol-2-ilo (2E2-1).

A uma solução de 760 mg (0,72 mmole) do 1j3-óxido do éster de difenilmetilo do ácido 7 -L(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetamido]-3-(1,3,4-tidi zol-2-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico em 7 ml de dimeti formamida adicionam-se 180 μΐ (2,5 equivalentes: 1,79 mmoles) de tricloreto de fósforo à temperatura de -30° C e agita-se a mistura durante 30 minutos. Verte-se a mistura reaccional em 70 ml de uma solução aquosa de hidrogenocarbonato de sódio a 5% e extrai-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com água, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se. Purifica-se o resíduo mediante cromatografia em gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (4:1) para se obterem 544 mg do éster de difenilmetilo do ácido 7-[(Z)-2-(2-t-butoxicarbcnilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetamido ] -3-(1,3,4-tiadiazol-2-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de uma espuma de cor amarelo pálido. Rendimento: 73%.

RMN £ (CDC1₃ ) ppm: 1,50(s, 9K), 3,51, 3,67(ABq, J=17Hz, 2H), 4,53, 4,58(ABq, J=14Hz, 2H) , 5,O7(d,

J=4,8Hz, 1H), . 5,98(dd, J=4,8Hz, J=9Hz, 1H), 6,97(s, 1H), 7,O3(s, 1H), 7,2-7,5(m, 25H), 7,58(d, J=9Hz, 1H), 8,6 (s largo, 1H), 8,98(s, 1H).

IV (CHC1₃) cm¹: 3400, 1787, 1719, 1690, 1544, 1370, 1220, 1155.

6) Redução: Acil = (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetilo Het = 2-metil-1,3,4-tiadiazol-5-ilo (2E2-2).

A uma solução de 362 mg (0,339 mmole) do 1β-óxido do éster de difenilmetilo do ácido 7 -(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetami'doj-3-(2-metil) -1 , 3,4-tiadiazol-5-iltiometiltio) -3-cef em-4-c ar boxí_ lico em 3 ml de dimetilformamida adicionam-se 85 μΐ (2,5 equivalentes: 0,85 mmole) e agita-se a mistura durante minutos. Verte-se a mistura reaccional em 25 ml de uma solução aquosa de hidrogenocarbonato de sódio a 5% e extrai-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com água, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se. Purifica-se o resíduo mediante cromatografia em gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (4:1) para se obterem 246 mg do éster de difenilmetilo do ácido 7 -E(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilamino-4-tiazolil)-2-tritiloxiiminoacetamido]-3-(2-metil-l ,3,4-tiadiazol-5-iltio metiltio)-3-cefem-4-carboxílico,. sob a forma de uma espuma

- 78 de cor amarelo pálido. Rendimento: 69%.

RMN s, (CDC1₃) ppm: 1,50(s, 9H) , 2,69(s,

3H), 3,53, 3,68(ABq, J=18Hz, 2H) , 4,50(s, 2H), 5,O7(d, J=5Hz, 1H), 6,OO(dd, J=5Hz, J=9Hz, 1H), 6,97(s, 1H), 7,O3(s, 1H), 7,2-7,5(m, 25H), 7,69(d, j=9Hz, 1H), 8,85/ largo, 1H) .

IV j (CHC1₃ ) cm^-1 : 3400, 1 787, 1720, 1690, 1543, 1369, 1219, 11557) Redução: Acil = (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetilo Het = 1-metil-5-tetrazolilo (3E2-2).

. A uma solução de 745 mg (0,708 mmole) de 1 β-óxido do éster de difenilmetilo do ácido 7/3-f'Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetilJ-amino-3-(1 -metil-5-tetrazolil)-tiometiltio-3-cefem-4-carboxílico em 7 ml de dimetilformamida, mediante arrefecimento à temperatura de -20 °C, adiciona-se 0,18 ml (1,79 mmoles) de triclòreto de fósforo e agita-se a mistura à temperatura de -20° C durante 20 minutos. Verte-se a mistura reaccional em duas camadas de acetato de etilo e de 20 ml de uma solução aquosa de hidrogenocarbonato de sódio a 5%, sob arrefecimento com gelo. Recolhe-se a fase orgânica, lava-se com água e com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio, filtra-se e concentra-se. Purifica-se o resíduo por cromatografia em coluna de gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (3:1) para se obterem 608 mg do éster de difenilmetilo do ácido 7/3—Γ(Ζ)-2-(2-t-buto xicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetilJ-amino-3-(1-metil-5-tetrazolil)-tiometiltio-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de uma espuma castanha. Rendimento: 83%.

RMN j (CDC1₃ -CD ₃0D) ppm: 1,52(s, 9H),

3,57, 3,73(ABq, J=17,6Hz, 2H), 3,81(s, 3H) , 4,56(s, 2H),

5,O9(d, J=5,0Hz, 1H), 6,02(d, J=5,0Hz, 1H), 6,94(s, 1H), 7,05 (s, 1H), 7,15-7,5O(m, 25H).

IV J (CHC1₃) cm ¹: 3400, 1788, 1717, 1686, 1543, 1492, 1446, 1 ó69 , 1 279, 1 227, 1 1 54.

8) Redução: Acil = (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetilo Het = 2-metiltetrazol-5-ilo (4E6-3).

A uma solução de 1,38 g (1,31 mmoles) de 1 —óxido do éster de difenilmetilo do ácido 7/3-ΠΖ)-2-(2-£· -butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetilamino] -3-(2-metiltetrazol-5-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico em 15 ml de dimetilformamida, à temperatura de -20°C, adiciona-se 0,33 ml (3,28 mmoles) de tricloreto de fósforo e agita-se a mistura à mesma temperatura durante 20 minutos. Verte-se a mistura reaccional em duas camadas frias de uma solução aquosa de hidrogenocarbonato de sódio e de acetato de etilo e agita-se. Recolhe-se a fase orgânica, lava-se com água e com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se. Purifica-se o resíduo por cromatografia em gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (5:1) para se obterem 1,20g do éster de difenilmetilo do ácido 7P-f(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetilamino ] -3-(2-metiltetrazol-5-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de uma espuma amarela. Rendimento: 88%..

RMN _á (CDC1 ) ppm: 1,50(s, 9H), 3,40 (s largo, 2H), 4,25(s, 3H), 4,28(s, 2H), 5,O7(d, J=4,8Hz,

1H), 5,85(dd, J=4,8Hz, J=8,2Hz, 1H), 6,89(s, 1H), 6,98(s,

1H), 7,2-7,5(m, 25Η), 7,57(d, J=8,2Hz, 1Η), 8,7-8,9 (s largo, 1H).

IV J (CHC1₃ ) cm^-1 : 3420, 1792, 1725,

1690, 1542, 1497, 1450, 1392, 1372, 1323.

9) Oxidação: Acil = 2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2 -tritiloxiiminoacetilo Het = 1,2,3-triazol-4-ilo.

A uma solução de 511 mg (0,5 mmole) do éster de difenilmetilo do ácido -7p-f(Z)-2-(2-t-butoxicarboni80 laminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetamidoJ-3-(1 , 2,3-triazol -4-il)-tiometiltio-3-cefem-4-carboxílico em uma mistura de 10 ml de diclorometano e de 10 ml de metanol, adicionam-se 54 mg (80% de pureza: 0,25 mmole) de ácido m-cloroperbenzóico à temperatura de -30°C e agita-se a mistura durante 1 hora. Dilui-se a mistura reaccional com uma solução aquosa de tiossulfato de sódio a 5% e extrai-se com acetato de etilo. Lava-se a solução extracto com uma solução aquosa de hidrogenocarbonato de sódio, dilui-se com ácido clorídrico e com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se sob pressão reduzida. Purifica-se o resíduo mediante cromatografia em gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (2:1 a 1:1) para se obterem 232mg do 1—óxido do éster de difenilmetilo do ácido 7/3—£ Z)-2-(2-b-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetamidoJ-3-(1,2,3-triazol-4-il)-tiometiltio-3-cefem-4-carboxílico. Rendi mento: 45%. Recupera-se uma parte do composto inicial (236 mg: rendimento de 48%).

RMN £ (CDC1₃) ppm: 1,42(s, 9H) , 3,45,

3,94(ABq, J=18Hz, 2H), 3,83, 4,09(ABq, J=14Hz, 2H), 4,54 (d, J=4,8Hz, 1H), 6,l8(dd, J=4,8Hz, J=9Hz, 1H). 6,94(s. 1H); 6,96(s, 1H), 7,2-7,6(m, 26H), 8,O2(d, J=9Hz, 1H).

IV Q (CHC1₃) cm¹: 3380, 3200, 1799, 1716, 1690, 1545, 1370, 1155Exemplo 5 amidação

COOBh

Acil-] <S. SHet

COOBh

1) Acil = difluorometiltioacetilo Het = 1,2,3-triazol-4-ilo (4E1-5)

A uma solução de 550 mg (1,06 mmoles) do éster de difenilmetilo do ácido 7/3-amino-3-(1 ,2,3-triazol-4-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico e de 160 mg 1,13 mmo les) do ácido difluorometiltioacético em 8 ml de diclorometano, sob arrefecimento à temperatura de -30° C, adicionam-se 0,27 ml (2,46 mmoles) de N-metilmorfolina e 0,19 ml (1,27 mmoles) de diclorofosfato de fenilo e agita-se a mistura à temperatura de -30° C durante 1 hora. Mistura-se a mistura reaccional com 1 ml de ácido clorídrico a 10%, dilui-se com água e extrai-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com uma solução aquosa de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se. Purifica-se o resíduo por cromatografia em coluna de gel de sílica utili-zando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (1:1) para se obterem 475 mg do éster de difenilmetilo do ácido 7P-difluorometiltioacetamido-3-(1,2,3-triazol-4-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de uma espuma amarelo pálido. Rendimento: 69%.

RMN £ (CDC1₃) ppm: 3,56(s, 2H), 3,59(s,

2H), 4,05(s, 2H), 4,99(d, J=4,8Hz, 1H), 5,79(dd, J=8,7Hz,

J=4,8Hz, 1H), 6,90(s, 1H), 6,91(t, J=56,2Hz, 1H),

7,1-7,5(m, 10H), 7,59(s, 1H), 7,68(d, J=8,7Hz, 1H).

IV 0 (CHCI₃) cm¹: 3430, 33001arco, 1785,

1690, 1512, 1496, 1454, 13.78, 1333.

2) Acil = N-t-butoxicarbonil-2-fenilglicilo Het = tritil-1,2,3-triazol-4-ilo (4E1-2)

A uma solução de 914 mg (1,21 mmoles) do éster de difenilmetilo do ácido 7/8-amino-3-(tritil-1 , 2,3-triazol-4-iltiometiltio)-3-cef em-4-carboxí lico e de 320mg. (1,27 mmoles) de D-N-t-butoxicarbonil-2-fenilglicina em 9 ml de diclorometano, sob arrefecimento à temperatura de -30°C, adicionam-se 0,31 ml (2,82 mmoles) de N-metilmorfolina e 0,22 ml (1,47 mmoles) de diclorofosfato de fenilo e agita-se a mistura à mesma temperatura durante 40 minutos. Mistura-se a mistura reaccional.com 1 ml de ácido clorídrico a 10%, dilui-se com água e extrai-se com acetato de etilo.

- 82 Lava-se o extracto com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e cor.centra-se. Purifica-se o resíduo por cromatografia em gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (10:1) para se obterem 501 mg do éster de difenilmetilo do ácido 7,ó-(D-N-t-buticarbonil-2-fenilglicilamino)-3-(triti1-1 ,2,3-triazol-4-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico sob a forma de uma espuma incolor. Rendimento: 42%.

RMN (CDC1₃ ) ppm: 1,42(s, SH), 3,22,

3,44(ABq, J=17,5Hz, 2H), 3,93, 3,98(ABq, J=13,3Hz, 2H),

4,8l(d, J=4,8Hz, 1H), 5,20(d, J=6,0Hz, 1H), 5,62(d, J=6,0Hz, 1H), 5,76(dd, J=4,8Hz, J=9,1Hz, IH), 6,50(d, J=9,1Hz,

1H), 6,91(s, ,1H), 7,O5-7,15(m, 6H), 7,25-7,45'm, 24H),

7,59(s, 1H).

IV q (CHC1₃) cm”¹: 3420, 1788, 1710, 1697, 1495, 1455, 1448, 1370.

3) Acil = D-mandeloílo

Het - tritil-1,2,3-triazol-4-ilo (4E1-3).

A uma solução de 800 mg (1,06 mmoles) do éster de difenilmetilo do ácido 7(3-amino-3-( tritil-1 ,2,3-triazol-4-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico e de 242mg (1,59 mmoles) de ácido D-(-)-mandélico em 4 ml de diclorometano adicionam-se 328 mg (1 ,59 mmoles) de diciclo-hexilcarbodiimida e agita-se a mistura sob arrefecimento com gelo durante 1 hora. Concentra-se a mistura reaccional, dilui-se com acetato de etilo e filtra-se para remover o sólido. Lava-se o filtrado com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se sob pressão reduzida. Purifica-se o resíduo mediante cromatografia em coluna de Lobar utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (2:1) para se obterem 466 mg do éster de difenilmetilo do ácido 7₍ó-D-mandelamindo-3-(tritil-1 ,2,3-triazol-4-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxíli co, sob a forma de uma espuma amarela. Rendimento: 50%.

- 83 RMN s, (CDClg) ppm: 3,41(d, J=3,3Hz, 1H),

3,57, 3,78(ABq, J=17,4Hz, 2H) , 4,06, 4j6(ABq, J=13,4Hz,

2H), 4,91(d, J=4,8Hz, 1H), 5,15(d, J=3,3Hz, 1H), 5,69(dd, >4,8Hz, J=9,2Hz, 1H), 6,88(s, 1H), 6,98(d, J=9,2Hz, 1H),

7,O5-7,15(m, 6H), 7,25-7,4(m, 24H), 7,45(s, 1H).

IV J (CHClg) cm¹: 3600, 3400, 1788, 1725, 1692, 1602, 1 509, 1495, 1450, 1 375, 1 315 .

4) Acil = (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-acetilo Het = tritil-1,2,3-triazol-4-ilo (4E1-1)

A uma solução de 800 mg (1,06 mmoies) do éster de difenilmetilo do ácido 7/3-amino-3-( tritil-1 , 2,3-triazol-4-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico e de 287mg (1,11 mmoies) do ácido 2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-acético em 8 ml de diclorometano, sob arrefecimento à temperatura de -30 °C, adicionam-se 0,27 ml (2,46 mmoies) de N-metilmorfolina e 0,19 ml (1,27 mmoies) de diclorofosfato de fenilo e agita-se a mistura à temperatura de -30° C durante 40 minutos. Interrompe-se a reacção com 1 ml de ácido clorídrico a 10%, dilui-se com água e extrai-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se. Purifica-se o resíduo por cromatografia em gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (3:1) para se obterem 812mg do éster de difenilmetilo do ácido 7fi-t2-(2-t-butoxicarbonila minotiazol-4-i1)-acetamido]-3-(tritil-1,2,3-triazol-4-iltiome tiltio)-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de uma espuma amarelo pálido. Rendimento: 77%.

RMN _ó (CDClg) ppm: 1,57(s, 9H), 3,41(s,

2H), 3,72, 3,75(ABq, J=17,8Hz, 2H), 4,02, 4,06(ABq, J=13,6Hz, 2H), 4,79(d, J=4,6Hz, 1H), 5,54(dd, J=8,0Hz, J=4,6Hz,

1H), 6,57(s, 1H), 6,76(s, 1H), 7,O5-7,15(m, 6H), 7,25-7,5(m, 19H), 7,44 (s, 1H), 7,76(d, J=8,0Hz, 1H).

IV (CHC1 ) cm^-1: 3420, 3340, 3170, 1780, 1718, 1672, 1604, 1545, 1497, 1450, 1372, 1328.

- 84 5) Acil = 2-( 2-;t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il) -glioxilo (4E1-4) Het = tritil-1,2,3-triazol-4-ilo.

A uma solução de 800 mg (1 ,Có mmoles) do éster de difenilmetilo do ácido 7/3-amino-3-( tritil-1 ,2,3f

-triazol-4-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico e de 3O3mg (1,11 mmoles) do ácido 2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-glioxílico em 8 ml de diclorometano, sob arrefecimento à temperatura de -30° C, adicionam-se 0,27 ml (2,46 mmoles) de N-metilmorfolina e 0,19 ml (1,27 mmoles) de diclorofosfato de fenilo e agita-se a mistura à temperatura de -30° C durante 1 hora. Mistura-se a mistura reaccional com 1 ml de ácido clorídrico a 10%, dilui-se com água e extrai-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se. Purifica-se o resíduo per cromatografia em gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (2:1) para se obterem 679mg do éster de difenilmetilo do ácido 7/5-f2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-glioxililamino]-3-(tritil-1 ,2,3-triazol-4-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de uma espuma amarela. Rendimento: 64%.

RMN (CDC1₃ ) ppm: 1,55(s, 9H), 3,67,

3,85(ABq, J=17,1Hz, 2H), 4,10, 4,21(ABq, j=13,3Hz, 2H),

5,00(d, J=4,7Hz, 1H), 5,7O(dd, J=9,2Hz, J=4,7Hz, 1H),

6,91(s, 1H), 7,O5-7,15(m, 6H), 7,2-7,45(m, 19H), 7,47(s,

1H), 8,19(d, j=9,2Hz, 1H), 8,5-8,6(s largo, 1H), 8,36(s, 1H).

IV (CHC1 ) cm^-1: 3400, 1788, 1725, 1702, 1672, 1565, 1512, 1495, 1480, 1448, 1372.

6) Acil = (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-triti_ loxiiminoacetilo Het = 1 ,2,3-triazol-4-ilo (1E01).

A uma suspensão de 110 mg (0,2 mmole) do cloridrato do éster de difenilmetilo do ácido 7/ó-amino-3-(1,2,3-triazol-4-il)-tiometiltio-3-cefem-4-carboxílico e de 122 mg (0,23 mmole) de ácido (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminòacético em 3 ml de dicloro- 85 metano, adicionam-se 72 μΐ (0,66 mmole) de N-metilmorfolina e 33 μΐ (0,22 mmole) de diclorofosfato de fenilo à temperatura de -30 °C. Depois áe agitar durante 2 horas, dilui-se a mistura reaccional com ácido clorídrico a 10% e extrai-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com água e seca-se, purifica-se mediante cromatografia em gel de sílica e cristaliza-se em tolueno para se obterem 110mg do éster de difenilmetilo do ácido 7^3-f(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetamido j -3-(3,2,3-triazol-4-il)-tiometiltio-3-cefem-4-carboxílico; p.f.:

190°- 200°C (com decomposição).

RMN j (CDC1₃ -CD ₃ 0D) ppm: 1,53(s, 9H) ,

3,45, 3,63(ABq; J=17,2Hz, 2H), 4,12, 4,15(ABq, J=14,2Hz,

2H), 5,O8(d, J=5Hz, 1H), 5,88(d, J=5Hz, 1H), 6,98(s, 1H),

7,O8(s, 1H), 7,2-7,5(m, 25H), 7,60(s, 1H).

IV (KBr) cm^-1 : 3390, 3210, 1 800, 1 725,

1688, 1555, 1495, 1449, 1375, 1275, 1245, 1225, 1155.

7) Acil = (Z)-2-(2-tritilaminotiazol-4-il)-2-(difenilmetoxicarbonilmetoxiimino)-acetilo Het = tritil-1,2,3-triazol-4-ilo (4E1-6).

A uma solução de 800 mg (1,06 mmoles) do éster de difenilmetilo do ácido 7p-amino-3-(tritil-1,2,3-triazol-4-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico e de 728mg (1,11 mmoles) do ácido (Z)-2-(2-tritilaminotiazol-4-il)-2-(difenilmetoxicarbonilmetoxiimino)-acético em 8 ml de cio\ o rometano, sob arrefecimento a temperatura de -30 C, adicionam-se 0,27 ml (2,46 mmoles) de N-metilmorfolina e 0,19ml (1,27 mmoles) de diclorofosfato de fenilo e agita-se a mistura à temperatura de -30°C durante 30 minutos. Mistura-se a mistura reaccional com 1 ml de ácido clorídrico a 10%, dilui-se com água e extrai-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se. Purifica-se o resíduo por cromatografia em gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (10:1) para se obterem 1 ,07g do éster de difenilmetilo do ácido 7/3-f(Z)-2-(2-tritilaminotiazol-4-il)-2-(difenil me toxicarbonilmetoxiimino)-acetamido]-3-(triti1-1 , 2,3-triazol

-4-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de uma espuma amarela. Rendimento: 73%.

RMN (CDClg) ppm: 3,32, 3,62(ABq, J=17,1Hz, 2H), 4,07, 4,12(ABq, J=13,2Hz, 2H) , 4,90(d, J=5,0Hz, 1H),

4,93, 5,03(ABq, J=17,0Hz, 2H), 5,8O(dd, J=9,1Hz, J=5,0Hz,

1H), 6,81(s, 1H), 6,87(s, 1H), 6,93(s, 1H), 7,0-7,4(m,

51H), 7,45(s, 1H), 8,11(d, J=9,1Hz, 1H).

IV 0 (CHClg) cm^-' : 3410, 1790, 1740, 1688, 1526, 1498, 1451, 1380.

8) Acil = (Z)-2-(2-tritilaminotiazol-4-il)-2-f(S)-1-difenilmetoxicarboniletoxiiminoj-acetilo Het = tritil-1 ,2,3-triazol-4-ilo (4E1-7).

A uma solução de 800 mg (1,06 mmoles) do éster de difenilmetilo-do ácido 7^3-amino-3-( tritil-1 , 2,3triazol-4-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxilico e de 744mg (1,12 mmoles) de ácido (Z)-2-(2-tritilaminotiazol-4-il)-2-[(S) -1-difenilmetoxicarboniletoxiimino J -acético em 8 ml de diclorometano, sob arrefecimento até à temperatura de -30°C, adicionam-se 0,27 ml (2,46 mmoles) de N-metilmorfolina e 0,19 ml (1,27 mmoles') de diclorofosfato de fenilo e agita-se a mistura à temperatura de -30°C durante 1 hora. Mistura-se a mistura reaccional com 1 ml de ácido clorídrico a 10%, dilui-se com água e extrai-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com uma solução aquosa de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se. Purifica-se o resíduo mediante cromatografia em gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (10:1) para se obterem 1,05 g do éster de difenilmetilo do ácido 7β-f(Z)-2-(2-tritilaminotiazol-4-il)-2-f(S)-1-difenilmetoxicarboniletoxiiminoj-acetamido]-3-(tritil-1 ,2,3-triazol-4-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de uma espuma amarela. Rendimento: 70%.

- 87 RMN _â (CDC1 ₃) ppm: 1 ,65(d, J=7,2Hz, 3H),

3,41, 3,66(ABq, J=16,8Hz, 2H), 4,12, 4,l6(ABq, J=13',4Hz,

2H), 4,91(d, J=4,6Hz, 1H), 5,2O(q, J=7,2Hz, 1H), 5,82(dd,

J=8,7Hz, J=4,6Hz, 1H), 6,77(s, 1H), 6,85(s, 1H), 6,87(s,

IH) , 7,0-7,4(m, 51H), 7,45(s, 1H), 8,22(d, J=8,7Hz, 1H).

IV J (CHC1₃) cm^-1: 3400, 1787, 1730, 1685, 1523, 1493, 1447, 1375.

9) Acil - (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)—2—(1-difeniImetoxicarbonilviniloxiimino)-acetilo Het = tritil-1,2,3-triazol-4-ilo (4E1-9).

A uma solução de 800 mg (1,06 mmoles) do éster de difenilmetilo do ácido 7/3-amino-3-( tritil-1 ,2,3-triazol-4-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico e de 786mg (1,12 mmoles) do sal de diciclo-hexilamina do ácido (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-(1-difeniImetoxicarboni 1_ viniloxiimino)-acético em 8 ml de diclorometano, sob arrefecimento à temperatura de -30°C, adicionam-se 0,15 ml (1,36 mmo les) de N-metilmorfolina e 0,19 ml (1,27 mmoles) de diclorofosfato de fenilo e agita-se a mistura à temperatura de

O

-30 C durante 40 minutos. Mistura-se a mistura reaccional com 1 ml de ácido clorídrico a 10%, dilui-se com água e extrai-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se. Purifica-se o resíduo por cromatografia em coluna de gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (5:1) para se obterem 936 mg do éster de difenilmetilo do ácido 7β-[(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-(1-difenilme toxicarboniIviniloxiimino)-acetamido]-3-(tritil-1,2,3-triazol -4-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de uma espuma amarela. Rendimento: 70%.

RMN (CDC1 ) ppm: 1,53(s, 9H), 3,33,

3,51(ABq, J=18,0Hz, 2H) , 4,07(s, 2H)', 4,80(d, J=4,8Hz,

1H), 5,66(s, 1H), 5,73(dd, J=4,8Hz, J=9,OHz, 1H), 5,89(5, 1H), 6,84(s, 1H), 6,93(s, 1H), 7,0-7,4(m, 36H), 7,45(s, 1H), 7,68(d, j'=9,0Hz, 1H), 8,7-9'.,1(s largo, 1H).

IV p (CHC1₃) cm ¹ : 3400, 1786, 1724, 1695, 1545, 1494, 1445, 1370.

10) Acil = (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-(1-t-butoxicarbonil-1 -metiletoxiimino)-acetilo Het = tritil-1 ,2,3-triazol-4-ilo (4E1-8).

A uma solução de 800 mg (1,06 mmoles) de éster de difenilmetilo do ácido 7,ó-amino-3-( tritil-1 , 2,3-triazol-4-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico e de 479mg (1,12 mmoles) do ácido (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-(1-t-butoxicarbonil-1-metiletoxiimino)-acético em 8ml de diclorometano, sob arrefecimento até à temperatura de -30°C, adicionam-se 0,27 ml (2,46 mmoles) de N-metilmorfolina e 0,19 ml (1,27 mmoles) de diclorofosfato de fenilo e agita-se a mistura à temperatura de -30° C durante 50 minutos. Mistura-se a mistura reaccional com 1 ml de ácido clorídrico a 10%, dilui-se com água e extrai-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se. Purifica-se o resíduo mediante cromatografia em coluna de gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (10:1 a 5:1) para se obterem 855 mg do éster de difenilmetilo 'do ácido 7β- [(Z) -2- (2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-i1) -2- (1 - t-butoxicarbonil-1 -metiletoxiimino')-acetamido]-3-( tritil-1 , 2,3-triazol-4-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de uma espuma amarela. Rendimento: 69%.

RMN (CDC1₃) ppm: 1 ,39 (s, 9H) , 1,53(s,

9H), 1,61(s, 3H), 1,63(s, 3H), 3,63, 3,84(ABq, J=17,3Hz,

2H); 4,09, 4,20(ABq, J=13,4Hz, 2H), 5,01(d, J=4,9Hz, 1H),

5,94(dd, J=9,0Hz, J=4,9Hz, 1H), 6,88(s, 1H), 7,05-7,4(m,

26H), 7,46(s, 1H), 8,19(d, J=9,0Hz, 1H), 8,1-8,4(s largo, 1H)

IV ) (CHC1₃) cm^-1 : 3420, 1788, 1725, 1687,

1545, 1495, 1445, 1371 .

Exemplo 6 variantes estruturais

1) R₂ = metileno (4P3) (4E2-4'.) (4E7-17)

- 89 1. A uma suspensão de 19,Og (0,283 mmole) de azeto de sódio em 130 ml de dimetilformamida adicionam-se 76, Og (0,273 mmole) de cloreto de tritilo e agita-se a mistura à temperatura ambiente durante 5 horas. Dilui-se a mistura reaccional com água e extrai-se com éter etílico. Lava -se o extracto com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se para se obter azeto de tritilo. A uma solução deste azeto em 300 ml de acetona adicionam-se 24 ml (0,27 mmole) propiolato de metilo e aquece-se a mistura sob refluxo durante 6 dias. Arrefece-se a mistura reaccional até à temperatura ambiente e dilui-se com éter etílico. Recolhem-se por filtração os cristais que se separam obtendo-se 62,0g de éster de met-ilo do, ácido 1-tritil-1 ,2,3-triazol-4-ilcarboxílico, sob a forma de cristais incolores. Rendimento: 62%; p.f.: 189° - 190°C.

RMN j (CDC1₃) ppm: 3,93(s, 3H), 7,O5-7,15(m, 6H), 7,3-7,4(m, 9H) 8,O2(s, 1H).

IV .J (CHC1 ₃ ) cm^-1 : 1722, 1544, 1492,

1444, 1338.

2. A uma suspensão de 6,17g (0,163 mmole) de hidreto de alumínio e lítio em 600 ml de tetra-hidrofurano, sob arrefecimento com gelo, adicionam-se 40,Og (0,108 mmole) do éster de metilo do ácido 1-tritil-1,2,3-triazol-4-carboxílico e agita-se a mistura à temperatura ambiente durante 1 hora. À mistura reaccional, adiciona-se, gota a gota, sob arrefecimento com gelo, tetra-hidrofurano aquoso. Neutraliza-se a mistura com ácido clorídrico a 10%, filtra-se para remover a matéria insolúvel, dilui-se com acetato de etilo, lava-se com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se. Lavam-se os cristais formados, com éter etílico, para se obterem 33,4g de 1-tritil-1 ,2,3-triazol-4-il-metanol, sob a forma de cristais brancos. Rendimento: 91%;

p.f.: 200° - 201°C.

RMN (CDClg) ppm: 2,4-2,9(s largo, 1H),

4,76(s, 2H), 7,O5-7,15(m, 6H), 7,3-7,4(m, 9H), 7,43(s, 1H).

IV (CHClg ) cm^{- 1} : 3600, 3600-3200br,

1600, 1490, 1443.

- 90 3. A uma solução de 8,00g (23,5 mmoles) de 1-tritil—1,2,3-triazol-4-ilmetanol em uma mistura de 150 ml de diclorometano e de 15 ml de dimetilformamida, à remperatura de -40 °C, adicionam-se 3,9 ml (28,0 mmoles) de trietilamina e 2,2 ml (28,4 mmoles) de cloreto de metanc-sulfonilo e agita-se a mistura a uma temperatura compreendida entre -30° e -40°C durante 25 minutos. Dilui-se a mistura reaccional com água e extrai-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com' uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se. A uma solução do resíduo em 150 ml de acetona adicionam-se 4,02g (35,2 mmoles) de tiolacetato de potássio e 7,O3g (46,9 mmoles) de iodeto de sódio e agita-se a mistura à temperatura ambiente durante 2 horas. Dilui-se a mistura reaccional com água e extrai-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com água e com uma solução saturada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se. Lavam-se os cristais formados, com éter etílico, para se obterem 8,01g de 4-acetiltioacetiltiometil-1-tritil-1,2,3-triazol sob a forma de cristais brancos. Rendimento: 86%; p.f.:

172° - 173°C.

RMN _ò (CDClg) ppm: 2,32(s, 3H) , 4,19(s,

2H), 7,O5-7,15(m, 6H), 7,3-7,4(m, 10H).

IV J (CHClg) cm¹ : 1685, 1491, 1444.

4. A uma suspensão de 1 ,07g (28,2 mmoles) de hidreto de alumínio e lítio em 100 ml de tetra-hidrofurano, sob arrefecimento com gelo, adicionam-se 7,50g (18,8 mmoles) de 4-acetiltiometil-1-tritil-1 ,2,3-triazol e agita-se a mistura à temperatura ambiente durante 40 minutos. À mistura reaccional adiciona-se, gota a gota, tetra-hidrofurano aquoso e neutraliza-se a mistura com ácido clorídrico a 10%. Filtra-se a solução e dilui-se o filtrado com acetato de etilo, lava-se com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se. Cristaliza-se o resíduo em éter etílico e lava-se com éter etílico para se obterem 5,14g de 1-tritil-1,2,3-triazol-4-ilmetilmercaptano, sob a forma de cristais brancos. Rendimento: 77%; p.f.: 140° - 141°C.

3,84(d.

RMN _á

J=7,8Hz, 2H), (CDC1₃ ) ppm: 1,99(t, J=7,8Hz, 1H),

6H), 7,3-7,4(m, 10H).

1491, 1444.

7,1-7,2(m, IV d (CHC1₃) cm^-1

5. A uma solução de 3,00g (8,40 mmoles) de 1-tritil-1 , 2,3-triazol-4-ilmetilmercaptano em 10 ml de dimetilformamida adicionam-se 370 mg (dispersão em óleo a 60%: 9,25 mmoles) de hidreto de sódio e agita-se a mistura durante 5 minutos à temperatura ambiente. À mistura reaccional adiciona-se uma solução de 15 ml de bromoclorometano em 15 ml de dimetilformamida à temperatura de -30° C e agita-se a mistura a uma temperatura compreendida entre -20° e -30 °C durante 30 minutos. Dilui-se a mistura reaccional com água e extrai-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se. A uma solução do resíduo em 30 ml de ace'tona adicionam-se 1 ,92g (16,8 mmo les) de tioacetato de potássio e agita-se; a mistura à temperatura ambiente durante 1 hora. Dilui-se a mistura reaccional com água e extrai-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com água, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se. Purifica-se o resíduo mediante cromatografia em gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (10:1) e cristaliza-se em éter etílico para se obterem 2,65g de 4-acetiltiometiltiometil-1-tritil-1 ,2,3-triazol, sob a forma de cristais incolores. Rendimento: 71%; p.f.: 106°C.

RMN _ó (CDC1 ) ppm: 2,32(s, 3H), 3,89(s,

2H), 4,04(s, 2H), 7,1-7,2(m, 6Η)(, 7,3-7,4(m, 9H), 7,93(s, 1H)

	IV J (CHC13) cm 1: 1690, 1491 ,	1440.
6.	Substituição na posição 3 com um	grupo	acilato
	A uma solução de 756 mg	(1 ,70	mmoles)

de 4-acetiltiometiltiometil-1-tritil-1 ,2,3-triazol em uma mis_ tura de 8 ml de dimetilformamida e de 4 ml de tetra-hidrofurano, sob arrefecimento até à temperatura de -78°C, adicionam -se 1,24 ml (1,59 mmoles) de uma solução 1,28N de metóxido de sódio em metanol e agita-se a mistura durante 15 minutos à temperatura de -78° C. À mistura reaccional adiciona-se uma solução de 1,50g (1,54 mmoles) do éster de difenilmetilo do ácido 7/3-C(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetamido]-3-metano-sulfoniloxi-3-cefem-4-car boxílico em 5 ml de dimetilformamida e agita-se a mistura à temperatura de -78° C durante 50 minutos. Mistura-se a mistura reaccional com 1 ml de ácido clorídrico a 10%, dilui-se com água e extrai-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se. Purifica-se o resíduo duas vezes por cromatografia em coluna de Lobar utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (3:1) e uma vez por cromatografia em gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (10:1-5:1) para se obterem 1 ,18g do éster de difenilmetilo do ácido 7/3-f(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetamido]—3—(1 -tritil -1,2,3-triazol-4-ilmetiltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de uma espuma incolor. Rendimento: 60%.

RMN $ (CDC1₃ ) ppm: 1,50(s, 9H), 3,35,

3,51(ABq, J=17,0Hz, 2H), 3,77(s, 4H) , 5,04(d, J=4,6Hz,

1H), 5,89(dd, J=4,6Hz, J=8,4Hz, 1H), 6,89(s, 1H), 7,02(s,

1H), 7,O5-7,6O(m, 42H), 8,65(s largo, 1H).

IV v (CHC1₃) cm^-1: 3400, 1784, 1717, 1686, 1542, 1492, 1445, 1369.

7. Desprotecção

A uma solução de 1,13g (0,884 mmole) do éster de difenilmetilo do ácido 7/3-Í(Z )-2-( 2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiimino-acetamido J -3-0-tritil-1 ,2,3— -triazol-4-ilmetiltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico em uma mistura de 3 ml de anisol e de 12 ml ,de nitrometano à temperatura de -40 °C adiciona-se uma solução de 0,94g (7,07 mrnoles) de cloreto de alumínio em 3 ml de anisol e agita-se a mistura a uma temperatura compreendida entre -30°C e -40°C durante 1 hora. Mistura-se a mistura reaccional com 7,5 ml de ácido clorídrico 1N e dilui-se com água. Lava-se a solução aquosa com acetato de etilo. Concentra-se a fase aquosa sob pressão reduzida para eliminar os dissolventes orgânicos que restam, submete-se a uma cromatografia numa coluna de copolímero de estireno-divinilbenzeno utilizando como eluente uma mistura de metanol/água (4:1). Lava-se o pó obtido com acetato de etilo para se obterem 318 mg de ácido 7/3 —Γ(Z)-2-(2-aminotiazol-4-il)-2-hidroxiiminoacetamido)-3-(1 ,2,3-triazol-4-ilmetiltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de um pó branco amarelado. Rendimento: 68%.

RMN _á (D₂0-NaHC0₃) ppm: 3,53, 3,79(ABq, J=17,4Hz, 2H), 3,77, 3,87(ABq, J=13,8Hz, 2H), 4,00, 4,03(ABq, J=14,8Hz, 2H), 5,26(d, J=4,6Hz, 1H), 5,83(d, J=4,6Hz, 1H), 6,99(s, 1H), 7,88(s, 1H).

IV j (KBr) cm ^-1 : 3100largo, 1 760, 1 655, 1600, 1525, 1385, 1345Este composto é um poderoso agente antibacteriano contra Morgania morganii SR9 (0,1 qg/ml) e Enterobacter cloacae SR233 (0,8 pg/ml) e apresenta uma elevada concentração no sangue após administração por via oral (12,1 μσ/ml: 15 minutos; murganhos).

2) R^ = metilmetileno (4P8) (4E9)

1. A uma solução de 2,00g (16,3 mrnoles) do sal de sódio de 1,2,3-triazol-4-iltiol em 8 ml de dimetilformamida, à temperatura de -30°C, adicionam-se 2,40g (94%: 16,3 mrnoles)

- 94 de tiolacetato de 1-cloroetilo em 3 ml de dimetilformamida e agita-se a mistura à temperatura ambiente durante 1 hora. Dilui-se a mistura reaccional com água e extrai-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se. Purifica-se o resíduo por cromatografia em gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (2:1) para se obterem 2,90g de 4-(1-acetiltioetiltio)-1 ,2,3-triazol, sob a forma de um óleo incolor. Rendimento: 88%.

RMN _δ (CDC1₃ ) ppm: 1,67(d, J=7,0Hz, 3H), 2,30(s, 3H), 4,93(q, J=7,0Hz, 1H), 7,85(s, 1H), 9,5-10,5 (s largo, 1H). .

IV J (CHC13) cm^-1: 3440, 3160largo, 1692, 1487, 1445, 1378, 1358.

2. A uma solução de 127 mg (0,626 mmole) de tiolacetato de 1E-(1,2,3-triazol-4-iltio)-etilo em 4 ml de dimetilformann da, à temperatura de -70° C, adiciona-se 0,67 ml (1,21 mmoles) de uma solução 1 , 8N de metôxido de lítio em metanol e agita-se a mistura durante 1 hora a uma temperatura compreendida -55° e -60°C. A esta solução, à temperatura de -78 °C, adiciona-se uma solução de 316 mg (0,5 mmole) do éster de difenilmetilo do ácido 7^-fenilacetilamino-3-trifluorometano-sulfoniloxi-3-cefem-4-carboxílico em 3 ml de dimetilformamida e agita-se a mistura à temperatura de -78°C durante 10 minutos. Mi-stura-se a mistura reaccional com 1 ml de ácido clorídrico a 10%, dilui-se com água e extrai-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se. Purifica-se o resíduo por cromatografia em gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (1:1) para se obterem 100 mg do éster de difenilmetilo do ácido 7(?>-fenilacetilamino-3-[1 E-1(1,2,3-triazol-4-iltio)-etil]-tio~3-cefem-4-carboxílico e do seu isómero 2-cefem. Repetindo a cromatografia, pode isolar-se o éster de difenilmetilo do ácido

- 95 7 p-fenilacetilamino-3-[lE-(1, 2,3-triazol-4-iltio)-etilJ-tio-3-cefem-4-carboxílico.

RMN _á (CDC1₃ ) ppm: 1 ,47(d, J=6,8Hz, 3H),

3) 7^-metoxi (4P11) (4E8)

1. A uma solução de 8,02g (10,7 mmoles) do éster de difenilmetilo do ácido 7/3-amino-3-( tritil-1 , 2,3-triazol-4-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico em 200 ml de benzeno adicionam-se 3,00g (12,8 mmoles) de 3,5-di-t-butil-4-hidroxibenzaldeído, aquece-se. a mistura durante 90 minutos sob destilação azeotrópica e concentra-se a mistura. A uma solução do resíduo em uma mistura de 100 ml de benzeno e 70 ml de diclorometano à temperatura de -30°C adicionam-se 5,3g de sulfato de magnésio e 10,7g de péroxido de níquel e agita-se a mistura à temperatura ambiente durante 1 hora. Filtra-se a mistura reaccional para remover a substância sólida. Ao filtrado, à temperatura de -40° C, adicionam-se 180 ml de metanol, seca-se sobre peneiros moleculares de 4°A e agita-se a mistura à temperatura ambiente durante 1 hora, depois do que se concentra. Purifica-se o resíduo por cromatografia em gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (20:1), para se obterem 8,58g do éster de difenilmetilo do ácido 7(3-( 3,5-di-t-butil-hidroxibenzilideno )-amino-7<*-metoxi-3- (tri tril-1,2,3-triazol-4-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico_} sob a forma de uma espuma amarela. Rendimento: 80%.

RMN j (CDC1₃ ) ppm: 1,46(s, 18H), 3,57(s,

- 96 2. A uma solução de 8,39g (8,40 mmoles) do éster de difenilmetilo do ácido 7(3-(3,5-di-t-butil-4-hidrcxibenzilideno)-amino-7cA-metoxi-3-( tritil-1 , 2,3-triazol-4-iltiometiltio )-3-cefem-4-carboxílico em uma mistura de 40 ml de tetra-hidrofurano e de 160 ml de metanol adicionam-se 2,11g (12,6 mmoles) de reagente T de Girard, 0,1 ml de água e 0,1 ml de ácido acético e agita-se a mistura à temperatura ambiente durante 2 horas. Co.ncentra-se a mistura reaccional, dilui-se com água arrefecida com gelo e extrai-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se. Purifica-se o resíduo por cromatografia em gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (10:1 a 3:1) para se obterem 5,1 Og do éster de difenilmetilo do ácido 7/3-amino-7o⁽>-metoxi-3-(tritil-1 ,2,3-triazol-4-iltiometiltio) - 3-cef em-4-c ar boxí li_ co, sob a forma de uma espuma amarelo pálido. Rendimento: 78%

RMN _à (CDC1₃ ) ppm: 3,5O(s,- 3H) , 3,48,

3,66(ABq, J=15,8Hz, 2H) , 4,15(s, 2H), 4,85(s, 1H), 6,89(s,

1H), 7,O5-7,5(m, 25H), 7,5O(s, 1H).

IV J (CHC1₃) cm^-1 : 1777, 1705, 1602, 1495,

1446, 1378.

3. A uma solução de 1,50g (1,92 mmoles) do éster de difenilmetilo do ácido 7 (ó-amino-7 <A-metoxi-3-(tritil-1 , 2,3-triazol-4-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico em 10 ml de di clorometano, à temperatura de -40° C, adicionam-se 0,48ml (4,37 mmoles) de N-metilmorfolina e 299 mg (2,11 mmoles) de ácido difluorometiltioacêtico e, em seguida, 0,34 ml (2,27 mmoles) de diclorofosfato de fenilo e agita-se a mistura a uma temperatura empreendida entre -30° e -40°C duran te 1 hora. Mistura-se a mistura reaccional com 2 ml de ácido clorídrico a 10%, dilui-se com água e extrai-se com acetato de etilo. Lava-se o extracto com ácido clorídrico diluído, com uma solução aquosa de hidrogenocarbonato de sódio a 5% θ com uma solução concentrada de cloreto de sódio, seca-se sobre sulfato de sódio e concentra-se.

- 97 Purifica-se o resíduo por cromatografia em gel de sílica utilizando como eluente uma mistura de tolueno/acetato de etilo (3:1) para se obterem 1,55g do éster de difenilmetilo do ácido 7(6—difluorometiltioacetilamino—7<X-metoxi-3-(tritil-1 ,2,3-triazol-4-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de uma espuma de cor amarelo pálido. Rendimento: 89%.

RMN £ (CDC1₃) ppm: 3,47, 3,54(ABq, J=15,0Hz,

2H), 3,6O(s, 5H), 4,05, 4,13(ABq, J=13,6Hz, 2H), 4,98(s, 1H), 6,84(s, 1H), 6,94(t, J=55,8Hz, 1H), 7,05-7,4(m, 26H) , 7,49(s, 1H).

IV V (CHC1₃) cm¹ : 3380, 1778, 1696, 1600,

1495, 1447, 1382.

4. A uma solução de 1 ,51 g (1,66 mmoles) do éster de difenilmetilo do ácido 7p-difluorometiltioacetilamino-7o<-metoxi-3-(tritil-1 ,2,3-triazol-4-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico em uma mistura de 2,4 ml de anisol e de 6 ml de diclorometano, sob arrefecimento com gelo, adicionam-se 6 ml de ácido trifluoroacético e agita-se a mistura sob arrefecimento com gelo durante 50 minutos e à temperatura ambiente durante 20 minutos. Arrefece-se a mistura reaccional com gelo, mistura-se com 2 ml de água e com acetato de etilo, lava-se com água, seca-se .sobre sulfato de sódio e concentra-se. Dissolve-se o resíduo em acetato de etilo e extrai-se com uma solução aquosa de hidrogenocarbonato de sódio a 5%. Ajusta-se o pH do extracto aquoso para um valor compreendido entre 2,0 e 3,0 com ácido clorídrico a 10% e extrai-se com acetato de etilo. Seca-se o extracto sobre sulfato Pulveriza-se o resíduo com uma de hexano para se obterem 195mg do ácido 7P>-difluorometiltio^acetilamino-7<*—metoxi-3-1 ,2,3-tria zol-4-iltiometiltio-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de uma espuma amarelo pálido. Rendimento: 24%.

de sódio e concentra-se. mistura de éter etílico e

RMN ₆ (D₂0-NaHC0₃) ppm: 3,55(s, 3H), 3,36,

3,65(ABq, J=17,Hz, 2H), 3,74(s, 2H), 4,11, 4,19(ABq, J=13,8Hz,

- 98 2Η), 5,15(s, 1H), 7,11(t, J=55,4Hz, 1H), 7,98(s, 1H).

IV v (KBr) cm^-1 : 32401argo, 1 770, 1 680,

1520, 1365.

Exemplo 7 desprotecção

AcilNH__s η l____

SHet

AcilNH

COOBh

Χλ

COOH

1) Acil = difluorometiltioacetilo

Het = 1 ,2,3-triazol-4-ilo (4E7-5)

A uma solução de 450 mg (0,710 mmole) do éster de difenilmetilo do ácido 7(3-difluorometiltioacetamido-3-(1 ,2,3-triazol-4-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico em uma mistura de 3 ml de diclorometano e de 1,2 ml de anisol, sob arrefecimento com gelo, adicionam-se 3 ml de ácido trifluoroacético e agita-se a mistura sob arrefecimento com gelo durante 1 hora. Concentra-se a mistura reaccional até à mistura e pulveriza-se o resíduo com éter etilico, lava-se e seca-se para se obterem 257 mg de ácido 7/3-dif luorometiltioacetamido-3-(1 , 2,3-triazol-4-iltio metiltio)-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de um pó branco. Rendimento; 77%.

RMN 5 (D₂0-NaHC0₃) ppm: 3,47, 3,67(ABq,

J=17,4Hz, 2H), 3,68(s, 2H), 4,12, 4,24(ABq, J=13,4Hz,

2H), 5,11(d, J=4,6Hz, 1H), 5,66(d, J=4,6Hz, 1H), 7,09 (t, JHF=55,4Hz, 1H), 8,01(s, 1H).

IV J (KBr) cm^-1 : 34001argo, 3260, 1 765,

1662, 1545, 1360, 1333.

Este composto é um potente agente antibacteriano contra Staphylococcus aureus Smith (0,1 pg/ml) e apresenta uma elevada concentração no sangue após administra- 99 ção por via oral (28 μ9/πι1: 15 minutos; murganhos).

2) Acil - fenilacetilo

Het = 1 ,2,3-triazol-4-ilo (3E3-1)

A uma suspenção de 186 mg (0,296 mmole) de éster de difenilmetilo do ácido 7/3-fenilacetilamino-3-(1 ,

2.3- triazol-4-il)-tiometiltio-3-cefem-4-carboxílico em 3 ml de diclorometano, sob arrefecimento com gelo, adicionam-se 0,45 ml de anisol e 0,45 ml de ácido trifluoroacético e agita-se a mistura durante 1 hora e 40 minutos. Concentra-se a mistura reaccional, tritura-se com hexano e lava-se com acetato de etilo para se obterem 67 mg do ácido 7 j3-fenilacetilamino-3-(1 ,2,3-triazol-4-il)-tiometiltio-3-cefem-4-carboxílico sob a forma de um sólido branco. Rendimento: 49%.

RMN £ (DgO-NaHCOg) ppm: 3,40, 3,5ó(ABq, J=17Hz, 2H). 3,66, 3»7O(ABq, J=15Hz, 2H), 4,07, 4,20(ABq, J=14HZ, 2H), 5,O3(d, J=5HZ, 1H), 5,61(d, J=5Hz, 1H),

7.3- 7,5(m, 5H), 7,9O(s, 1H).

IV (KBr) cm¹ : 3440, 1775, 1705, 1660,

1540, 1353, 1238.

Este composto apresenta uma forte actividade antibacteriana contra Staphylococcus aureus Smith (0,05 gg/ml) e 209P JC-1 (0,05 μg/ml) e apresenta uma elevada concentração no sangue após administração por via oral (15 pg/ml: 15 minutos; murganhos).

3) Acil - D-mandeloílo

Het = (tritilo para H)-1,2,3-triazol-4-ilo (4E7-3)

A uma solução de 445 mg (0,502 mmole) do éster de difenilmetilo do ácido 7p-D-mandelamido-3-(triti^ —1 , 2,3-triazol-4-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico em uma mistura de 0,8 ml de anisol e de 2 ml de diclorometano, sob arrefecimento com gelo, adicionam-se 2 ml do ácido trifluoroacético e agita-se a mistura sob arrefecimento ccm gelo durante 30 minutos e a temperatura ambiente durante

100 minutos. Dilui-se a mistura reaccional com 10 ml de metanol e concentra-se. Dissolve-se o resíduo em uma solução aquosa de hidrogenocarbonato de sódio, lava-se ccm acetato de etilo, acidifica-se com ácido clorídrico a 10% e extrai-se com acetato de etilo. Seca-se o extracto sobre sulfato de sódio e concentra-se. Pulveriza-se o resíduo com éter etílico para se obterem 59,2 mg do ácido 7^-D-mandelamido-3-(1,2,3-triazol-4-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de um pó branco amarelado. Rendimento: 25%.

RMN _à (DgO-NaHCOg) ppm: 3,39, 3,62(ABq, J=17,4Hz 2H), 4,10, 4,21(ABq, J=13,8Hz, 2H), 5,O7(d, J=4,3Hz, 1H), 5,27(s, 1H), 5,62(d, J=4,8Hz, 1H), 7,46(s, 5H), 8,02(s, 1H) .

IV _υ (KBr) cm”¹ : 3360 largo, 1 770, 1 673,

1520, 1452, 1365.

Este composto apresenta uma elevada concentração no sangue após administração por via oral (18,5 pg/ml: 15 minutos; murganhos).

4) Acil = (Z)-2- [ 2-(t-butoxicarbonilamino para amino)-tiazol-4-il]-2-pentenoílo Het = 1 ,2,3-triazol-4-ilo (4E7-6)

A uma solução de 537 mg (0,68 mmole) de éster de difenilmetilo do ácido 7[S-[(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-pentenoilaminoj-3-(1 ,2,3-triazol-4-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico em uma mistura de 2 ml de anisol e de 8 ml de nitrometano, à temperatura de -30° C, adiciona-se uma solução de 0,54g (4 mmoies) de cloreto de alumínio em 2 ml de anisol e agita-se a mistura durante 1 hora. Dilui-se a mistura reaccional com 3 ml de etanol, agita-se durante 5 minutos, mistura-se com 8 ml de ácido clorídrico 1 N e com 200 ml de água, lava-se com acetato de etilo e concentra-se sob pressão reduzida para eliminar os dissolventes orgânicos que restam. Submete-se a solução aquosa resultante a cromatografia sobre copolímero de estireno-divinílbenzeno utilizando como

101 eluente uma mistura de metanol/água (4:1), para se obterem 156 mg do ácido Ίβ-f(Z)-2-(2-aminotiazol-4-il)-2-pentenoilaminoJ-3-(1 ,2,3-triazol-4-iltiometiltio)-3-cefem-4-c=rboxílico sob a forma de um sólido branco. Rendimento: 44%.

RMN (D^O-NaHCO^) ppm: 1,07(t, J=7,8Hz, 3H), 2,24(quin, J=7,8Hz, 2H), 3,50, 3,72(ABq, J=17Hz,

2H), 4,12, 4,24(ABq,	J=14Hz, 2H), 5,19(d, J=4,3Hz,	1H) ,
5,79(d,	J=4,8Hz, 1H)	, 6,37(t, J=8Hz, 1H), 6,50(s,	1H) ,
8,O3(s,	1H) .	(KBr) cm-1: 3400br, 1 763, 1 655,
	IV /	1 530,

1388, 1348.

5) Acil = (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-iI)-2-tritiloxiiminoacetilo

Het = 1 ,2,3-triazol-4-ilo (1E08)

A uma suspensão de 9,2g (9 mmoles) do éster de difenilmetilo do ácido 7(3-^ (Z)-2-(2-t-buaoxicarboni laminotiazol-4-i1)-2-tritiloxiiminoacetamido]-3-( 1,2,3-tria zol-4-il)-tiometiltio-3-cefem-4-carboxílico em uma mistura de 18 ml de anisol e de 72 ml de nitrometano adiciona-se, gota a gota, uma solução de 9,6g (72 mmoles) de cloreto de alumínio em 31 ml de anisol à temperatura de -30° C. Depois de agitar durante 1 hora à mesma temperatura, interrom pe-se a reacção com 25 ml de etanol, agita-se durante alguns minutos, dilui-se com 75 ml de ácido clorídrico 1N e com 500 ml de água e lava-se com acetato de etilo. Separa-se a fase aquosa, concentra-se para eliminar os dissolventes orgânicos e passa-se através de uma coluna de adsorvente de copolímero de estireno-divinilbenzeno. Elui-se o produto com uma mistura de metanol e água (4:1) para se obterem 4,19g de ácido 7^-r(^z)“^2-(^{2-aminotiazol_}4-il) -2-hidroxiiminoacetamido]-3-(l ,2,3-triazol-4-il)-tiometiltio-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de um pó amarelo pálido. Rendimento: 90%.

102

RMN _δ (DgO-NaHCOg) ppm: 3,51, 3,75(A3q,

J=17,2HZ, 2H), 4,14, 4,25(ABq, J=1 3,9Hz , 2H), 5,21(d,

J=4,7Hz, 1H), 5,84(d, J=4,7Hz, 1H), 6,99(s, 1H), 8,O7(s, 1H).

IV „ (KBr) cm : 3280, 3100, 1760, 1 660,

1590, 1525, 1385, 1345, 1175, 995.

Este composto apresenta um forte acção antíbacteriana contra Escherichia coli 7437 (0,02 pg/ml e Enterobacter cloacae SR233 (0,8 pg/ml) e apresenta uma elevada concentração no sangue após administração por via oral (29,6 pg/ml: 15 minutos; murganhos).

6) Acil = (Z)-2-f2-(t-butoxicarbonilamino para amino)-tiazol -4-ilJ-2-metoxiiminoacetilo

Het = 1-’(tritil para H)-1 ,2,3-triazol-4-ilo (3E3-5)

A uma solução de 570 mg (0,55 mmole) do éster de difenilmetilo do ácido 7ô—f(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-metoxiiminoacetil]-amino-3-(1-tritil-1,2, 3-triazol-4-il)-tiometiltio-3-cefem-4-carboxílico em uma mistura de 1,7 ml de anisol e de 5 ml de nitrometano, à temperatura de -30° C, adiciona-se uma solução de 0,51g (3,83 mmoles) de cloreto de alumínio em 1,8 ml de anisol e agita-se a mistura durante 30 minutos. Mistura-se a mistura reaccional com 4 ml de ácido clorídrico 1N e com 10 ml de acetato de etilo, agita-se à temperatura ambiente durante 5 minutos, verte-se em uma solução de 3,2g de hidrogenocarbonato de sódio e 100 ml de água e agita-se durante vários minutos. Depois de separar por filtração a matéria insolúvel, lava-se a mistura reaccional com acetato de etilo e concentra-se sob vazio para eliminar os dissolventes orgânicos. Purifica-se a fase aquosa resultante mediante cromatografia num copolímero de estireno-divinilbenzeno utilizando como eluente uma mistura de água/metanol (10:1), para se obterem 194 mg do sal de sódio do ácido 7p-f(Z)-2-(2-aminotiazol-4-il) -2-metoxiiminoacetil ] -amino-3-(1 ,2,3-triazol-4-il)-tiometiltio-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de uma espuma branca. Rendimento: 64%.

103

RMN _á (D₂0) ppm: 3,48, 3,67(ABc. J=17Hz,

2H), 3,99(s, 3H), 4,11, 4,23(ABq, J=14Hz, 2H) . 5,17/,

J=5Hz, 1H), 1390, 1040.	5,8O(d, J=5Hz, 1H), 7,02(s,	1H) , 1 753,	7,5(s, 1H).
	(KBr) cm	: 3400,	1650,	1 605,
	Este	composto	apresenta	uma	forre	acção
antibacteriana contra	Proteus	vulgaris	CN329	(0,22	pg/ml)

e Morgania morganii SR9 (0,1 pg/ml) e apresenta uma elevada concentração no sangue (15 pg/ml; murganhos; 15 minutos) após administração por via oral.

7) Acil = (Z)-2-[2-t-butoxicarbonilamino para aminr)-tiazol-4-il)-2-ciclopentiloxiiminoacetilo Het = 1,2,3-triazol-4-il (4E7-11)

A uma suspensão de 258 mg (0,334 mmole) do éster de difenilmetilo do ácido 7^-[(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-i1)-2-ciclopentiloxiiminoacetamidoJ-3-( 1 ,

2,3-triazol-4-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico em uma mis tura de 1 ml de anisol e de 4 ml de nitrometano, à temperatura de -30°C, adiciona-se uma solução de 0,25g (1,83 mmoles) de cloreto de alumínio em 1 ml de anisol e agita-se a mistura durante 50 minutos. Dilui-se a mistura reaccional com 2 ml de etanol, agita-se à mesma temperatura durante 5 minutos, mistura-se com 4 ml de ácido clorídrico 1N e com 200 ml de água e agita-se à temperatura ambiente durante 5 minutos. Recolhe-se a camada aquosa, lava-se com acetato de etilo, concentra-se sob pressão reduzida para eliminar os dissolventes orgânicos que restam e submete-se a cromatografia sobre um copolímero de estireno-divinilbenzeno utilizando como eluente uma mistura de metanol/água (4:1), para se obterem 93 mg do ácido 7/)- [(Z)-2-( 2-aminotiazol-4-il)-2-ciclopentiloxiiminoacetamido J —3—(1,2,3-triazol-4-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de um sólido branco. Rendimento: 53%.

- 104 RMN _ó (D₂O-NaHCO₃) ppm: 1,4-2,0(m, 8H), 3,52, 3,7O(ABq, J=17Hz, 2H), 4,13, 4,23(ABq, J=14Hz, 2H), 5,17(d, J=4.5Hz, 1H), 5,77(d, J=4,8Hz, 1H), 6,98(s, 1H), 8,03(s, IH).

IV d (KBr) cm^-1: 3300 largo, 1765, 1 665, 1 526, 1 385, 1343

Este composto apresenta uma forte acção anzibacteriana contra Escherichia coli EC-14 (0,8 pg/ml) e Pseudomonas aeruginosa A2561 9 (0,8 4g/ml).

8) Acil = (Z)-2-C 2-( t-butoxicarbonilamino para amino)-tiazol-4-i1]-2-(propeniloxiimino)-acetilo Het - 1,2,3-triazol-4-ilo (4E7-10)

A uma solução de 376 mg (0,46 mmole) do éster de difenilmetilo do ácido 7p-[^(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-(2-propeniloxiimino)-aeetamido]-3-(1 ,2,3-triazol-4-iltio metiltio)-3-cefem-4-carboxílico em uma mistura de 1,5 ml de anisol e de 6 ml de nitrometano, à temperatura de -30°C, adiciona-se uma solução de O,37g (2,8 mmoles) de cloreto de alumínio e de

1,5 ml de anisol e agita-se a mistura durante 50 minutos. Mistura-se a mistura reaccional com 2 ml de etanol e agita-se à mesma temperatura durante 5 minutos e mistura-se com 5 ml de ácido clorídrico 1N e com 200 ml de água. Recolhe-se a fase aquosa, lava-se com acetato de etilo e concentra-se sob pressão reduzida para eliminar os dissolventes orgânicos que restam. Submete-se a camada orgânica resultante a cromatografia sobre copolímero de estireno-divinilbenzeno utilizando com eluente uma mistura de metanol/agua (4:1). Lava-se o produto eluído com acetato de etilo para se obterem 127 mg de ácido 7β-[(Z)-2-(2-aminotiazol -4-il)-2-(2-propeniloxiimino)-acetamido]-3-0 ,2,3-triazol-4-iltio metiltio)-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de um sólido branco. Rendimento: 50%.

RMN £ (D ₂0-NaHCO ₃ ) ppm: 3,48, 3,67(ABq, J=17Hz,

2H), 4,11, 4,24(ABq, J=14Hz, 2H), 4,72(d, J=5,6Hz, 2H), 5,l8(d, J=4,6Hz, 1H), 5,3O(dd, J=1,6Hz, J=1Ο,όΗζ, 1H), 5,37(dd, J=1,6Hz, J=17,4Hz, 1H), 5,82(d, J=4,6Hz, 1H), 6,O7(ddt, J=5,6Hz, J=10,6Hz, J=17,4Hz, 1H), 7,O3(s, 1H), 7,99(s, 1H).

IV (KBr) cm¹ : 3450, 3270, 1753, 1653, 161 8,

545, 1 532, 1 384, 1357, 1021, 1000.

- 105 Este composto apresenta uma forte acção antibacteriana contra Escherichia coli EC-14 (0,4 pg/ml) e Enr.erobacter cloacae SR233 (0,8 pg/ml).

9) Acil = N-(t-butoxicarbonilo para H)-2-fenilglicilo

Het = (tritilo para H)-1 ,2,3-triazol-4-ilo (4E7-2)

A uma solução de 480 mg (0,487 mmole) do éster de difenilmetilo do ácido 7^-(N-t-butoxicarbonil-2-fenilglicilamino)-3-(tritil-1 ,2,3-triazol=4-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico em uma mistura de 1,2 ml de anisol e de 3 ml de diclorometano, sob arrefecimento com gelo, adicionam-se 3 ml de ácido trifluoroacétíco e agita-se a mistura sob arrefecimento com gelo durante 30 minutos e à temperatura ambiente durante 50 minutos. Agita-se a mistura reaccional com água arrefecida com gelo e com acetato de etilo sob arrefecimento com gelo. Recolhe-se a fase aquosa, concentra-se sob pressão reduzida para eliminar os dissolventes orgânicos que restam e submete-se a cromatografia em coluna sobre uma resina de copolímero de estireno-divinilbenzeno utilizando como eluente uma mistura de metanol/água (4:1). Pulveriza-se o resíduo com acetato de etilo para se obterem 157 mg do ácido 7^-(2-fe nilglicilamino)-3-(1,2,3-triazol-4-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de um pó branco. Rendimento: 67%.

RMN £ (D₂0) ppm: 3,46, 3,67(ABq, J=17,1Hz,

2H), 4,25, 4,31(ABq, J-14,2Hz, 2H), 5,13(d, J=4,4Hz, 1H),

5,27(s, 1H), 5,66(d, J=4,4Hz, 1H), 7,54(s, 5H), 8,O7(s, 1H).

IV q (KBr) cm^-1 : 3400, 30601argo, 1 763,

1690, 1595, 1458, 1388, 1345.

10) Acil = 2[-2-(t-butoxicarbonilamino para amino)-tiazol-4-il]-acetilo

Het = (tritilo para H)-1,2,3-triazol-4-ilo (4E7-1)

A uma solução 779 mg (0,784 mmole) do éster de difenilmetilo do ácido 7β-[2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-acetamido ] -3-(tritil-1 ,2,3-triazol-4-iltiome106 tiltio)-3-cefem-4-carboxílico em uma mistura de 3 ml de anisol e de 12 ml de nitrometano, à temperatura de -40°C, adi_ ciona-se uma solução de O,83g (6,24 mmoles) de cloreto de alumínio em 3 ml de anisol e agita-se a mistura a uma temperatura compreendida entre -30° e -40°C durante 50 minutos. Mistura-se a mistura reaccional com 6,3 ml de ácido clorídrico 1N, dilui-se com água, lava-se com acetato de etilo e concentra-se sob pressão reduzida para eliminar os dissolventes orgânicos que restam. Submete-se a solução residual a cromatografia sobre copolímero de estireno-divinilbenzeno utilizando como eluente uma mistura de metanol/água (4:1) e lava-se o pó resultante com acetato de etilo para se obterem 225 mg de ácido 7^-C2-(2-aminotiazol-4-il)-acetamidoJ3—(1,2,3-triazol-4-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de um pó branco. Rendimento: 59%.

RMN _á (Dg 0-CD ₃OD-NaHCO ₃ ) ppm: 3,57(s, 2H), 3,43, 3,60(ABq, J=17,4Hz, 2H), 4,08, 4,20(ABq, J=13,8Hz, 2H), 5,06(d, J=4,7Hz, 1H), 5,65(d, J=4,7Hz, 1H), 6,49(s,

IH) , 7,92(s, 1H).

IV _v (KBr) cm^-1: 3510, 3260br, 1 759, 1664,

1579, 1551 , 1401, 1 352, 1 326.

Este composto apresenta uma potente acção antibacteriana contra Staphylococcus aureus Smith (0,1 pg/ml), Escherichia coli EC-14 (0,8 pg/ml), e Proteus vulgaris

CN-329 (0,8 pg/ml) e apresenta uma elevada concentração no sangue após administração por via oral (17,1 pg/ml; 15 minutos; murganhos).

II) Acil = 2[- 2-(t-butoxicarbonilamino para amino)-tiazol-4-ilj-glioxililo

Het = (tritilo para H)-1,2,3-triazol-4-ilo (4E7-4)

À uma solução de 649 mg (0,644 mmole) do éster de difenilmetilo do ácido 7/3-Γ2-( 2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-glioxililaminoj-3-(tritil-1 ,2,3-triazol-4-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico em uma mistura de 2,5 ml

- 107 de anisol e de 10 ml de nitrometano, à temperatura de -40° 0, adiciona-se uma solução de 0,69g (5,19 mmoles) de cloreto de alumínio em 2,5 ml de anisol e agita-se a mistura a uma temperatura compreendida entre -30° e -40°C durante 50 minutos. Mistura-se a mistura reaccional com 5,2 ml de ácido clorídrico 1N, dilui-se com água, lava-se com acetato de etilo e concentra-se sob pressão reduzida para eliminar os dissolventes orgânicos çue restam. Submete-se a solução aquosa remanescente em cromatografia numa coluna analítica de copolímero de estireno-divinilbenzeno utilizando como eluente uma mistura de metanol/água (3:2). Lava-se o pó resultante com acetato de etilo para se obterem 130 mg de ácido 7p-[2-(2-aminotiazol-4-il)-glioxililamido]-3-(1 ,-2,3-triazol-4-iltiometiltio )-3-cefen-4-carboxí

lico, sob a	forma de	um pó	amarelo.	Rendimento	: 40%.
	RMN £	(CD.SOCD	3) ppm: 3,83(s, 2H),	4,44(s,
2H) , 5,1 9 (d,	J=4,6Hz.	, 1H) ,	5,68(dd,	J=8,2Hz,	>4,6Hz,
1H), 7,40(s ,	2H), 7,87(	s, 1H),	7,9-8,1(s	largo, 1H),	9,81(d,

J=8,2Hz, 1H).

IV j (KBr) cm^-1 : 33001argo, 3120, 1764,

1660, 1620, 1519, 1480, 1355Este composto apresenta uma forte acção antibacteriana contra Esçherichia coli EC-14 (0,4 pg/ml).

12) Acil = (Z)-2-[2-(t-butoxicarbonilamino para amino)-tiazol-4-il]-2-(tritilo para H)-oxiiminoacetilo Het = (tritilo para H)-1 ,2,3-triazol-4-ilo (1E09)

A uma solução de 29g (22,9 mmoles) do éster de difenilmetilo do ácido 7(3-[ (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetamido]-3-(1-tritil-1,2, 3-triazol-4-il)-tiometiltio-3-cefem-4-carboxílico em uma mistura de 50 ml de anisol e de 200 ml de nitrometano, adiciona-se, gota a gota, uma solução de 20,7g (156 mmoles) de cloreto de alumínio em 50 ml de anisol, a uma temperatura compreendida entre -30° e -40°C, e agita-se a mistura durante 1 hora à mesma temperatura. Dilui-se a mistura

- 108 reaccional com 200 ml de ácido clorídrico 1N e com água e lava-se com acetato de etilo. Concentra-se a fase aquosa sob pressão reduzida para eliminar o dissolvente orgânico e passa-se através de uma coluna de adsorvente de copolímero de estireno-divinilbenzeno. Elui-se o produto com metanol aquoso (4:1) para se obterem 8,O7g do ácido 7/3-E(Z)-2-(2-aminotiazol-4-il)-2-hidroxiiminoacetamidoJ-3-(1 , 2,3-triazol-4-il)-tiometiltio-3-cefem-4-carboxílico, sob a for ma de um pó amarelo pálido. Rendimento: 68%.

RMN/ (D₂ 0-NaHC0₃ ) ppm: 3,51, 3,75(ABq,

J=17,2Hz, 2H), 4,14, 4,25(ABq, J=13,9Hz, 2H) , 5,21(d,

J=4,7Hz, 1H), 5,84(d, J=4,7Hz, 1H), 6,99(s, 1H), 8,O7(s, 1H).

. IV 0 (KBr) cm^-1 : 3280, 3100, 1760, 1660,

1590, 1525, 1385, 1345, 1175, 995.

Este composto apresenta uma forte acção antibacteriana contra Escherichia coli 7437 (0,02 pg/ml) e Enterobacter cloacae SR233 (0,8 pg/ml) e apresenta uma elevada concentração no sangue após administração por via oral (29,6 pg/ml; 15 minutos; murganhos).

13) (isolado sob a forma de sal de dissódio)

Acil = (Z)-2-|]2-(tritilamino para amino)-tiazol-4-ilJ-(2-difenilmetoxicarbonilo para carboxi)-metoxiiminoacetilo

Het = (tritilo para H)-1 ,2,3-triazol-4-ilo (4E7-12)

Durante 3 horas agita-se à temperatura ambiente uma solução de 1 ,04g (0,749 mmole) do éster de difenilmetilo do ácido 7/3-[(Z)-2-(2-tritilaminotiazol-4-il)-2-(difenilmetoxicarbonilmetoxiimino)-acetamido ] -3-(tritil-1,2,3-triazol-4-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico em uma mistura de 16 ml de ácido fórmico a 98% e de 0,8ml de água. Concentra-se a mistura reaccional. Lava-se o resíduo com éter etílico, filtra-se e seca-se. A uma solução deste resíduo em uma mistura de 2 ml de anisol e de 8 ml de nitrometano, à temperatura de -40° C, adiciona-se uma solução de 0,50g (3,76 mmoles) de cloreto de alumínio

- 109 em 2 ml de anisol e agita-se a uma temperatura compreendida entre -30° e -40 °C durante 1 hora. Dilui-se a mistura reaccional com 3,8 ml de ácido clorídrico 1N e com água, lava-se com acetato de etilo e concentra-se sob pressão reduzida para eliminar os dissolventes orgânicos. Submete-se a solução aquosa restante a cromatografia sobre um copolímero de estireno-divinilbenzeno utilizando como eluente uma mistura de metanol/água (4:1). Lava-se o resíduo com acetato de etilo e dissolve-se em uma solução aquosa diluída de hidrogenocarbonato de sódio e purifica-se por cromatografia sobre um copolímero analítico de estireno-divinilbenzeno utilizando água como eluente. Liofiliza-se o eluído e pulveriza-se com acetato de etilo para se obterem 121 -mg do sal de sódio do ácido )-2-(2-amino tiazol-4-il)-2-(sódio-oxicarbonilmetoxiimino)-acetamidoJ-3-(1,2,3-triazol-4-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de um pó branco a amarelo pálido. Rendimento: 26%.

RMN _s (D₂0) ppm: 3,49, 3,70(ABq, J=17,4Hz, 2H), 4,12, 4,24(ABq, J=13,8 Hz, 2H), 4,57(s, 2H) , 5,l8(d,

J=4,8Hz, 1H), 5,82(d, J=4,8Hz, 1H), 7,04(s, 1H), 8,O2(s, 1H).

IV j (KBr) cm : 3600-24001argo, 1760,

1655, 1595, 1530, 1390, 1350, 1320.

Este composto apresenta uma forte acção antibacteriana contra Proteus mirabilis PR-4 (0,006 μς/πιΐ) e Proteus vulgaris CN-329 (0,006 μς/τηΐ).

14) (isolado sob a forma de sal de dissódio)

Acil = (Z)-2-[2-(tritilamino para amino)-tiazol-4-ilJ-2[(S) —1-(difenilmetoxicarbonilo para carboxi)-etoxiimino]-acetilo

Het = (tritilo para H)-1 ,2,3-triazol-4-ilo (4E7-13)

Durante 3 horas agita-se à temperatura ambiente uma solução de 1,01g (0,720 mmole) do éster de difenilmetilo do ácido 7Ó-[(Z)-2— (2-tritilaminotiazol-4-il)_

110

-2- l( S)-1-difenilmetoxicarboniletoxiiminoj-acetamidoj-3-(tritril-1,2,3-triazol-4-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico em uma mistura de 16 ml de ácido fórmico a 98% e de 0,8 ml de água. Concentra-se a mistura reaccional e lava-se o resíduo com éter etílico, filtra-se e seca-se. Dissolve-se o produto em uma mistura de 2 ml de anisol e de 8 ml de nitrometano, arrefece-se até à temperatura de -40° C, mistura-se com uma solução de 0,48g (3,61 mmoles) de cloreto de alumínio em 2 ml de anisol e agita-se a uma temperatura compreendida entre -30° e -40°C durante 90 minutos. Mistura-se a mistura reaccional com 3,6 ml de ácido, clorídrico 1N, dilui-se com água, lava-se com acetato de etilo e concentra-se sob pressão reduzida para eliminar os dissolventes orgânicos · que restam. Submete-se a solução aquosa resultante a uma cromatografia sobre copolímero de estireno-divinilbenzeno utilizando como eluente uma mistura de metanol/água (4:1). Lava-se o pó resultante com acetato de etilo, dissolve-se em uma solução aquosa diluída de hidrogenocarbonato de sódio e purifica-se por cromatografia analítica num copolímero de estireno-divinilbenzeno utilizando água como eluente e liofiliza-se. Lava-se o liofilizado com acetato de etilo e pul.veriza-se para se obterem 1 03mg do sal de sódio do ácido 7(3-[(Z)-2-(2-aminotiazol-4-il)-2-f(S) —1 -sódio-oxicarboniletoxiimino] -acetamidoj -3-(1 , 2,3-triazol-4-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de um pó branco a amarelado pálido. Rendimento: 23%.

RMN _á (D₂ 0) ppm: 1 ,46(d, J=7,0Hz, 3H),

3,48, 3,67(ABq, J=17,2Hz, 2H), 4,11, 4,23(ABq, J=13,8Hz,

2H), 4,65(q, J=7,0Hz, 1H), 5,l8(d, J=4,8Hz, 1H), 5,84(d,

J=4,8Hz, 1H), 7,02(s, 1H), 7,98(s, 1H).

IV (KBr) cm^-1 : 3600-24001argo, 1760,

1655, 1590, 1528, 1388, 1350.

Este composto apresenta uma forte acçâo antibacteriana contra Proteus mirabilis PR4 (0,01 pg/ml), Proteus vulgaris CN-329 (0,006 pg/ml) e Escherichia coli

EC-14 (0,2 pg/ml).

111

15) Acil = (ζ)-2-(2-(t-butoxicarbonilamino para amino)-tiazol -4-il]-2-(l-(difenilmetoxicarbonilo para carbcxi)-viniloxiiminoj-acetilo

Het = (tritilo para H)-1,2,3-triazol-4-ilc (4E7-15)

A uma solução de 910 mg (0,723 mmole) do éster de difenilmetilo do ácido 7^-[(Z)-2-(2-t-cutoxicarbo nilaminotiazol-4-il)-2-(1 -difeniImetoxi-carbonilviniloxiimino)-acetamido] -3-(tritil-1 ,2,3-triazol-4-iltiometiIrio)-3-cefem-4-carboxílico em uma mistura de 3 ml de ar.isol e de 12 ml de nitrometano, à temperatura de -40 °C, adiciona-se uma solução de O,77g (5,79 mmoles) de cloreto de alumínio em 3 ml de anisol e agita-se a mistura a uma temperatura compreendida entre -30° e -40°C durante 50 minutos. Mistura-se a mistura reaccional com 5,8 ml de ácido clorídrico 1N, dilui-se com água, lava-se com acetato de etilo e concentra-se sob pressão reduzida para eliminar os dissolventes orgânicos que restam. Submetem-se a solução aquosa resultante a cromatografia sobre copolímero de estireno-divinilbenzeno utilizando como eluente uma mistura de metanol/água (4:1) e lava-se o pó resultante ccm acetato de etilo para se obterem 326 mg do ácido 7β-[(Z)-2-' 2-aminotiazol-4-il)-2-(1 -carboxiviniloxiimino)-acetamidoJ -3-0,2,3-triazol-4-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico, scb a forma de um pó branco a amarelo pálido. Rendimento: 77%.

RMN _á (D₂0-NaHC0₃) ppm: 3,48, 3,68(ABq,

J=17,4Hz, 2H), 4,11, 4,23(ABq, J=13,9Hz, 2H) , 5,168(d,

J=1,7Hz, 1H), 5,171(d, J=4,8Hz, 1H), 5,32(d, J=1,7Hz,

1H), 5,87(d, J=4,8Hz, 1H), 7,21(s, 1H), 8,03(s, 1H).

IV j (KBr) cm^-1: 3600-2400br, 1766, 1660,

1630, 1580, 1530, 1390, 1360.

Este composto é um poderoso riano contra Proteus mirabilis PR4 (<0,003 marcescens SR 1005 (0,8 pg/ml).

agente antibactepg/ml) e Serratia

Acil = (Z)-2-(2-(t-butoxicarbonilamino para amino)-tiazol. -4-il]-2-[(1-t-butoxicarbonílo para carboxi)-1-metileto16)

112 xiimino] -acetilo

Het = (tritilo para H)-1 ,2,3-triazol-4-ilc (4E7-14)

A uma solução de 822 mg (0,736 mmole) do éster de difenilmetilo do ácido 7(3-£(Z)-2-(2-t-'outoxicarbonilaminotiazol-4-i1)-2-(1-t-butoxicarbonil-1-metiletoxiimino ) -acetamido] -3- ( tritil-1 ,2,3-triazol-4-iltiometiloio)-3-cefem-4-carboxílico em uma mistura de 3 ml de ar.isol e de 12 ml de nitrometano, à temperatura de -40 °C, adiciona-se uma solução de O,75g (5,64 mmoles) de cloreto ce alumínio em 3 ml de anisol e agita-se a mistura a uma cemperatura compreendida entre -30° e -40°C durante 1 hora. Mistura-se a mistura reaccional com 5,7 ml de ácido clorídrico 1N, dilui-se .com água, lava-se com acetato de etilo e concentra-se sob pressão reduzida para eliminar os dissolventes orgânicos que. restam. Submete-se a solução residual a cromatografia sobre copolímero de estireno-divinilbenzeno utilizando como eluente uma mistura de metanol/água (4:1) e lava-se o pó obtido com acetato de etilo para se obterem 299 mg de ácido 7^>-í (Z)-2-(2-aminotiazol-4-il)-2-í 1 -carboxi—1-metiletoxiimino)-acetamido]-3-(1 ,2,3-triazol-4-iitiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico sob a forma de um pó branco a amarelado pálido. Rendimento: 71%.

RMN (D₂0-NaHC0₃) ppm: 1,48(s, 3H), 1,50(s, 3H), 3,50, 3,69(ABq, J=17,4Hz, 2H), 4,12, 4,24(ABq, J=13,9Hz,

2H) ,	5,19(d, J=4,9Hz,	1H) ,	5,82(d,	J=4,9Hz, 1H)	, 6,99(s,
1H) ,	8,01 (s, 1H) .		-1 cm :
	IV p	(KBr)	3600-24001argo, 1768,
1670,	1635, 1580, 1535,	1 385,	1 360.
	Este composto	é um potente agente	antibacte-
riano	contra Proteus	mirabilis PR4	(0,01 pg/ml),	Serratia

marcescens A1388O (0,8 pg/ml) e Pseudomonas aeruginosa

A25619 (1,6 pg/ml).

17) Acil = (Z)-2-[2-(t-butoxicarbonilo para amino)-tiazol-4-il]-2-(tritilo para H)-oxiiminoacetilo Het = 1-metil-1 ,2,3-triazol-4-ilo (1E10-1).

- 113

A uma solução de 708 mg (0,683 mmole) do éster de difenilmetilo do ácido 7(3-f(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetamidoJ-3-( 1 -metil-1,2,3-triazol-4-il)-tiometiltio-3-cefem-4-carboxílico em uma mistura de 2 ml de anisol e de 8 ml de nitrometanc adiciona-se, gota a gota, uma solução de 727 mg (5,47 mmoles) de cloreto de alumínio em 2 ml de anisol. à temperatura de -40°C, e agita-se a mistura durante 1 hora a uma temperatura compreendida entre -30° e -40°C. Dilui-se a mistura reaccional com 5,5 ml de ácido clorídrico 1N e com água e lava-se com acetato de etilo. Concentra-se a fase aquosa sob pressão reduzida para eliminar o dissolvente orgânico e passa-se através de uma coluna de adsorvente de copolímero de estireno-divinilbenzeno. Elui-se o produto com uma mistura de metanol/água (4:1) para se obterem 96,3 mg de ácido 7β-[(Z)-2-(2-aminotiazol-4-il)-2-hidroxiiminoacetamido)-3-(1-metil-1,2,3-triazol-4-il)-tiometiltio-3-cefem-4-car boxílico, sob a forma de um pb amarelo pálido. Rendimento: 27%.

RMN (D₂O-NaHCO₃) ppm: 3,50, 3,81 (ABq,

J=17,4HZ, 2H), 4,11(s, 3H), 4,12, 4,22(ABq, J=14,0Hz,

2H), 5,24(d, J=4,6Hz, 1H), 5,83(d, J=4,6Hz, 1H), 6,99(s,

1H), 8,O9(S, 1H).

IV _v (KBr) cm^-1 : 3252, 2928, 1 770, 1 650,

1620, 1 523, 1404, 1348, 1181, 1019.

Este composto é um poderoso agente antibacteriano contra Escherichia coli 7437 (0,02 pg/ml), Enterobacter cloacae SR233 (0,8 pg/ml) e Haemophilus influenzae SR35O8 (0,1 pg/ml).

18) Acil - (Z)-2-[2-(t-butoxicarbonilamino para amino)-tiazol-4-il)-2-(tritilo para H)-oxiiminoacetilo Het = 2-metil-1 ,2,3-triazol-4-ilo (1E10-2)

A uma solução de 1,39g (1,34 mmoles) do éster de difenilmetilo do ácido 7β-[(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetamido3-3-(2-metil-1 ,2,3- 114 -triazol-4-il)-tiometiltio-3-cefem-4-carboxílico em uma mistu ra de 5 ml de etanol e de 20 ml de nitrometano adiciona-se, gota a gota, uma solução de 1,43g (10,8 mmoies) de cloreto de alumínio em 5 ml de anisol, à temperatura de -40° C. Depois de agitar a uma temperatura compreendida entre -30° e -40 °C durante 1 hora. Dilui-se a mistura com 11 ml de ácido clorídrico 1N e com água e lava-se com acetato de etilo. Concentra-se a fase orgânica sob pressão reduzida para eliminar os dissolventes orgânicos e passa-se através de uma coluna de adsorvente de copolímero de estireno-divinilbenzeno. Elui-se o produto com uma mistura de metanol/água (4:1) para se obterem 534 mg do ácido 7 β- [(Z)-2-(2-aminotiazol-4-il)-2-hidroxiiminoacetamido]-3-(2-metil-1 ,2,3-triazol-4-il)-tiometiltio-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de um pó de cor amarelo pálido. Rendimento: 75%.

RMN j (DgO-NaHCOg) ppm: 3,52, 3,8O(ABq,

J=17,3Hz, 2H), 4,17(s, 3H); 4,18, 4,25(ABq, J=13,7Hz,

2H), 5,23(d, J=4,8Hz, 1H), 5,82(d, J=4,8Hz, 1H), 6,99(s,

1H), 7,84(s, 1H).

IV p (KBr) cm¹ : 3288, 1 768, 1 663, 1 606,

1530, 1365, 1255, 1177, 1005.

Este composto é um poderoso agente antibacteriano contra Escherichia coli 7437 (0,02 pg/ml).

19) Acil = (Z)-2-[2-(t-butoxicarbonilamino para amino)-tiazol-4-il]-2-(tritilo para H)-oxiiminoacetilo Het = 3 metil-1 ,2,3-triazol-4-ilo (1E10-3)

A uma solução de 900 mg (0,869 mmole) do éster de difenilmetilo do ácido 7|3-[(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetamidoJ-3-(3-metil-1,2,3-triazol-4-il)-tiometiltio-3-cefem-4-carboxílico em uma mistura de 4 ml de anisol e de 16 ml de nitrometano adiciona-se uma solução de 924 mg (6,95 mmoies) de cloreto de alumínio e de 2 ml de anisol à temperatura de -40° C e agita-se a mistura durante 1 hora a uma temperatura compreen- 115 dida entre -40° e -30°C. Dilui-se a mistura reaccional com 7 ml de ácido clorídrico 1N e com água e lava-se com acetato de etilo. Concentra-se a fase aquosa sob pressão reduzida para eliminar o dissolvente orgânico e passa-se através de uma coluna de adsorvente de copolímero de estireno-divinilbenzeno. Elui-se o produto com uma mistura de metanol/água (4:1) para se obterem 366 mg do ácido 7 fi- f(Z)-2-(2-aminotiazol-4-il)-2-hidroxiiminoacetamidoJ-3-(3-metil-1 ,2,3-triazol-4-il)-tiometiltio-3-cefem-4-car-

boxílico, 80%.	sob	a forma de	um pó amarelo pálido. Rendimento:
		RMN ξ	(D	^O-NaHCO^) ppm: 3,53,	3,78(ABq,
J=17,4Hz,	2H)	4,08(s	5	3H), 4,14, 4,27(ABq,	J=14,1Hz,
2H), 5,23(d,	J=4,5Hz,	1H	), 5,84(d, J=4,5Hz, 1H)	, 6,98(s,

1H), 7,95(5, 1H).

IV j (KBr) cm^-1 : 3204, 2984, 1768, 1664,

1610, 1 529, 1 382, 1 347, 1262, 1176, 1127, 996.

Este composto é um poderoso agente antibacteriano contra Escherichia coli 7437 (0,02 pg/ml) e Enterobacter cloacae SR233 (0,4 pg/ml).

IV J (KBr ) cm^-1 : 3204, 2984, 1768, 1664,

1610, 1 529, 1382, 1 347, 12.62, 1176, 1127, 996.

Este composto é um poderoso agente antibacteriano contra Escherichia coli 7437 (0,02 pg/ml) e Enterobacter cloacae SR233 (0,4 pg/ml).

20) Acil = (Z)-2-[2-(t-butoxicarbonilamino para amino)-tiazol-4-il]-2-(tritilo para H)-oxiiminoacetilo Het = 1-(tritilo para H)-1 ,2,4-triazol-4-ilo (1E11)

A uma solução de 1 ,89g (1,50 mmoles) do éster de difenilmetilo do ácido 7^-n^z)^-2_í^2_Í^-l:>utox:i-^carbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetamidoj-3-(1-tritil-1 ,2,

4-triazol-3-il)-tiometiltio-3-cefem-4-carboxílico em uma mis- 116 tura de 7 ml de anisol e de 28 ml de nítrometano adiciona-se, gota a gota, uma solução de 1,99g (15 mmoles) de cloreto de alumínio em 7 ml de anisol, a uma temperatura compreendida entre -30° e -40° C, e agita-se a mistura à mesma temperatura durante 1 hora. Dilui-se a mistura reaccional com 15 ml de ácido clorídrico 1N e com água e lava-se com acetato de etilo. Concentra-se a fase aquosa sob pressão reduzida para eliminar os dissolventes orgânicos e passa-se através de uma coluna de adsorvente de copolímero de estireno-divinilbenzeno. Dilui-se o produto com uma mistura de metanol/água (2:3) para se obterem 418 mg do ácido 7/^-[ (Z)-2-(2-aminotiazol-4-il)-2-hidroxiiminoacetamido J-3-(1 ,2,4-triazol-3-il)-tiometiltio-3-cefem-4-carboxílico sob a forma de um pó amarelo pálido. Rendimento total: 34%.

RMN £ (D₂0-NaHC0₃) ppm: 3,54, 3,79(ABq,

J=17,4Hz, 2H), 4,42(s, 2H), 5,21(d, J=4,3Hz, 1H), 5,83(d,

J=4,3Hz, 1H), 6,98(s, 1H), 8,40(s, 1H).

IV q (KBr ) cm^-1 : 3280, 3132, 1768, 1665,

1605, 1 530, 1 390, 1 349, 1 273, 1178, 1004.

Este composto é um potente agente antibacteriano contra Escherichia coli 7437 (0,02 pg/ml) Enterobacter cloacae SR233 (0,8 pg/ml) e Klebsiella pneumoniae SR1 (0,05 pg/ml).

21) Acil = (Z)-2-[2-(t-butoxicarbonilamino para amino)-tiazol-4-ilj-2-(tritilo para H)-oxiiminoacetilo Het = 1-metil-1 ,2,4-triazol-3-ilo (4E7-7)

A uma solução de 1,52g (1,47 mmoles) do éster de difenilmetilo do ácido 7(8-[ (Z)-2-( 2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetilamino ] -3-(1-metil^ -1,2,4-triazol-3-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico em uma mistura de 5 ml de anisol e de 20 ml de nítrometano à temperatura de -40 °C, adiciona-se uma solução de 1,56g (11,7 mmoles) em 5 ml de anisol e agita-se a mistura a uma temperatura compreendida entre -30° e -40° C durante

- 117 hora. Mistura-se a mistura reaccional com 12 ml de ácido clorídrico 1N, dilui-se com água, lava-se. com acetato de etilo, concentra-se para eliminar os dissolventes orgânicos que restam e passa-se através de uma coluna de adsorvente de copolímero de estireno-divinilbenzeno. Elui-se o produto adsorvido com uma mistura de água/metanol (1:4). Concentra-se o eluído para se obter um pó e lava-se com acetato de etilo para se obterem 628 mg de ácido 7p-f(Z)-2-(2-aminotiazol-4-il)-2-hidroxiiminoacetilamino]-3-(1-metil-1 ,2,4-tria zol-3-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de um pó amarelo. Rendimento: 81%.

RMN £ (D₂0-NaHC0₃) ppm: 3,55, 3,83(ABq,

J=17,2Hz, 2H), 3,89(s, 3H), 4,40(s, 2H) , 5,24(d, J=4,7Hz,

1H), 5,82(d, J=4,7Hz, 1H), 6,99(s, 1H), 8,36(s, 1H).

IV (KBr) cm^{- 1} : 32001argo, 1765, 1 660,

1630, 1600, 1520, 1380, 1348.

22) Acil = (Z)-2-[2-(t-butoxicarbonilamino para amino)-tiazol-4-il]-2-(tritílo para H)-oxiiminoacetilo Het = 2-metil-1 ,2,4-triazol-3-ilo (4E7-8)

A uma solução de 1,54g (1,49 mmoles) do éster de difenilmetilo do ácido 7p-[(Z)-2-(2-jt-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetilamino J -3-(2-metil-1,2,4-triazol-3-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico em uma mistura de 5 ml de anisol e de 20 ml de nitrometano, à temperatura de -40° C, adiciona-se uma solução de 1,58 g (11,9 mmoles) de cloreto de alumínio em 5 ml de anisol e agita-se a mistura a uma temperatura compreendida entre -30° e -40°C durante 50 minutos. Mistura-se a mistura reaccional com 12 ml de ácido clorídrico 1N, dilui-se com água, lava-se com acetato de etilo, concentra-se para eliminar os dissolventes orgânicos que restam e passa-se através de uma coluna de adsorvente de copolímero de estireno-divinilbenzeno. Elui-se o dissolvente adsorvido com uma mistura de água/metanol (1:4). Concentra-se o eluído para se obter um pó que se lava com acetato de

- 118 etilo obtendo-se 654 mg de ácido 7/3 —[ (Z)-2-( 2-aminotiazol-4-il)-2-hidroxiiminoacetil]-3-(2-metil-1 ,2,4-triazol-3-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico. Rendimento: 83%.

RMN £ (D^O-NaHCO^) ppm: 3,54, 3,81(ABq, J=17,4Hz, 2H), 3,85(s, 3H), 4,44, 4,50(ABq, J=14,1Hz, 2H), 5,21(d,

J=4,8Hz, 1H), 5,83(d, J=4,8Hz, 1H), 6,98(s, 1H), 8,03 (s, 1H).

IV g (KBr) cm”¹ : 32001argo, 1765, 1 655, 1 600,

1525, 1473, 1382, 1345.

23) Acil = (Z)—2— [ 2-(t-butoxicarbonilamino para amino)-tiazol-4-il]-2-(tritilo para H)-oxiiminoacetilo Het = 4-metil-1 ,2,4-triazol-3-ilo (4E7-16)

A uma solição de 378 mg (0,365 mmole) do éster de difenilmetilo do ácido 7β-[ (Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetilaminoj-3-(4-metil-1 ,2,4-triazol-3-iltiometiltio-3-cefem-4-carboxílico em uma mistura de 1 ml de anisol e de 4 ml de nitrometano, à temperatura de -40°C, adiciona-se uma solução de 388 mg (2,92 mmoles) de cloreto de alumínio em 1 ml de anisol e agita-se a mistura a uma temperatura compreendida entre -30° e -40°C durante 50 minutos. Mistura-se a mistura reaccional com 3 ml de ácido clorídrico 1N, dilui-se com água, lava-se com acetato de etilo, concentra-se sob pressão reduzida para eliminar os dissolventes orgânicos que restam e purifica-se por cromatografia sobre uma resina de copolímero de estireno-divinilbenzeno utilizando como eluente uma mistura de metanol/água (4:1). Lava-se o pó resultante com acetato de etilo para se obterem 150 mg de ácido 7/í>-[(Z)-2-(2-aminotiazol-4-il)-2-hidroxiiminoacetilamino]-3-(4-metil —1,2,4-triazol-3-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de um pó amarelo. Rendimento: 78%.

RMN ₆ (D₂0-NaHC0₃) ppm: 3,69(s, 3H), 3,53,

3,8O(ABq, J=17,5Hz, 2H), 4,35, 4,50(ABq, 13,4Hz, 2H), 5,19(d, J=4,9Hz, 1H), 5,83(d, J=4,9Hz, 1H), 7,00(s, 1H), 8,5O(s, 1H).

- 119 IV (KBr) cm ¹ : 32001argo, 1 767, 1655, 1 630, 1605, 1520, 1377, 1340;

Este composto é um poderoso agente antibacteriano contra Escherichia coli EC-14 (0,05 pg/ml) e Morgania morganii SR9 (0,1 pg/ml).

24) Acil = (Z)-2-[ 2-(t-butoxicarbonilamino para amino)tiazol-4-il]-2-(tritilo para H)-oxiiminoacetilo Het = 1,2,3-tiadiazol-5-ilo (3E3-2)

A uma solução de 1,28g (1,16 mmoles) do éster de difenilmetilo do ácido 7/3-[(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetil]-amino-3-(1 ,2,3-tiadia zol-5-il)-tiometiltio-3-cefem-4-carboxílico em uma mistura de 4 ml de anisol e de 16 ml de nitrometano, sob arrefecimento a uma temperatura compreendida entre -30° e -40°C, adi ciona-se uma solução de 1,23g (9,25 mmoles) de cloreto de alumínio em 4 ml de anisol e agita-se a mistura a uma temperatura compreendida entre -30° e -40° C durante 50 minutos. À mistura reaccional adicionam-se 10 ml de ácido clorídrico 1N, dilui-se com água e lava-se com acetato de etilo. Concentra-se a fase aquosa para eliminar os dissolventes orgânicos, purifica-se por cromatografia num copolímero de estireno-divinilbenzeno utilizando como eluente uma mistura d'e metanol/água (4:1) e lava-se o pó resultante com acetato de etilo para se obterem 440mg de ácido 7p-(Z)-2-f(2-aminotiazol-4-il)-2-hidroxiiminoacetil]-amino-3-(1 ,2,3-tiadiazol-5-il)-tiometiltio-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de um pó amarelo. Rendimento: 71%.

RMN j (D₂0-NaHC0₃) ppm: 3,58, 3,88(ABq, J=17,4Hz, 2H), 4,37, 4,48(ABq, J=14,1Hz, 2H) , 5,25(d, J=4,7Hz, 1H),

5,83(d, J=4,7Hz, 1H), 6,97(s, 1H), 8,76(s, 1H).

IV J (KBr) cm^-1 : 32001argo, 1760, 1655, 1600,

1520, 1380, 1340, 1200, 1170.

20

Este composto apresenta uma forte acção antibacteriana contra Escherichia coli 7437 (0,01 pg/ml), Escherichia coli SR377 (0,4 pg/ml), Morgania morganii SR9 (0,05 pg/ml) e Enterobacter cloacae SR233 (0,4 pg/ml).

25) Acil - (Z)-2-f2-(t-butoxicarbonilamino para amino)-tia zol-4-il]-2-(tritilo para H)-oxiiminoacetilo Het = 1,3,4-tiadiazol-2-ilo (2E3-1)

A uma solução de 535 mg (0,51 mmole) do éster de difenilmetilo do ácido 7/3-f(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetamido ] -3-(1,3,4-tiadiazol-2-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico em uma mistura de 1 ml de anisol e de 4 ml de nitrometano, adiciona-se uma solução de 0,6lg (4,6 mmoles) de cloreto de alumínio em 2 ml de anisol, à temperatura de -30° C, e agita-se a mistura durante 40 minutos. Mistura-se a mistura reaccional com 2 ml de etanol durante 5 minutos à mesma temperatura, dilui-se com 6 ml de ácido clorídrico 1N e com 200 ml de água e lava-se com acetato de etilo. Concentra-se a fase aquosa sob pressão reduzida para eliminar os dissolventes orgânicos e passa-se através de uma coluna de copolímero de estireno-divinilbenzeno. Elui-se o produto adsorvido com uma mistura de metanol/água (4:1). Concentra-se o eluído para se obterem 201 mg do ácido 7/3-f(Z)-2-(2-aminotiazol-4-il )-2-hidroxiiminoacetamido J -3-0 ,3,4-tiadia zol-2-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de um sólido de cor amarelo pálido. Rendimento: 74%.

RMN (D₂0-NaHC0g) ppm: 3,60, 3,89(ABq, J=17Hz, 2H), 4,57, 4,64(ABq, J=14Hz, 2H), 5,24(d, J=5Hz, 1H),

5,83(d, J=5Hz, 1H), 6,98(s, 1H), 9,41(s, 1H).

IV jy (KBr) cm^-1: 3300, 1765, 1 665, 1600, 1370.

Este composto é um poderoso agente antibacteriano contra Escherichia coli SR377 (0,4 pg/ml), Enterobacter cloacae SR233 (0,4 pg/ml) e Morgania morganii SR9 (0,1 pg/ml).

121

26) Acil = (Z)-2-[2-(t-butoxícarbonilamino para amino)-tiazol-4-il]-2-(tritilo para H)-oxiiminoacetilo Het = 2-metil-1 ,3,4-tiadiazol-5-ilo (2E3-2)

A uma solução de 388 mg (0,368 mmoles) do éster de difenilmetilo do ácido 7^-f(Z)-2-(2-t-butoxicarboni laminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetamidoJ-3-(2-metil-1,3, 4-tiadiazol-5-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico em uma mis_ tura de 1 ml de anisol e de 4 ml de nitrometano, à temperatura de -30°C, adiciona-se uma solução de 0,45q (9,2 equivalentes: 3,4 mmoles) de cloreto de alumínio em 1,5 ml de anisol e agita-se a mistura durante 40 minutos. Mistura-se a. mistura reaccional com 2 ml de etanol, agita-se durante 5 minutos à mesma temperatura e dilui-se com 6 ml de ácido clorídrico 1N e com 200 ml de água. Recolhe-se a fase aquosa, lava-se com acetato de etilo, concentra-se sob pressão reduzida para eliminar os dissolventes orgânicos e passa-se através de uma coluna de copolímero de estireno-divinilbenzeno. Elui-se a coluna com uma mistura de metanol/água (4:1). Concentra-se o eluído para se obterem 149 mg do ácido 7(3-[(Z)-2-(2-aminotiazol-4-il)-2-hidroxiiminoacetamido]-3-(2-metil-1 ,3,4-tiadiazol-5-

-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico.	Rendimento:	75%.
RMN j (D2	0-NaHC0	3 ) ppm:	2,72(s,	3H) ,	3,58,
3,87(ABq, J=17Hz, 2H) ,	4,51 ,	4,57(ABq,	j=14Hz	, 2H) ,	5,23
(d, J=5Hz, 1H), 5,83(d,	J=5Hz,	1H), 6,97	(s, 1H).
IV g (KBr	) cm	: 3200,	1772,	1668,	1605,

1515, 1390, 1340.

Este composto é um forte agente antibacteriano contra Escherichia coli 7437 (0,02 pg/ml), Enterobacter cloacae SR233 (0,8 pg/ml), Escherichia coli SR377 (0,8 μ9/ηι1) e Morgania morganii SR9 (0,05 μρ/πιΐ).

27) Acil = (Z)-2-[2-(t-butoxicarbonilamino para amino)-tiazol-4-il]-2-(tritilo para H)-oxiiminoacetilo Het = tetrazol-5-ilo (3E3-3)

22

A uma solução de 942 mg (contendo cerca de 10% de subproduto) do éster de difenilmetilo do ácido 7^-[(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-rritiloxiiminoacetilJ-amino-3-(5-tetrazolil)-tiometiltil-3-cefem-4-car boxilico em uma mistura de 3 ml de anisol e de 12 ml de nitrometano, mediante arrefecimento a uma temperatura compreendida entre -30° e -40 °C, adiciona-se uma solução de 980 mg (7,37 mmoles) de cloreto de alumínio em 3 ml de anisol e agita-se a mistura a uma temperatura compreendida entre -30° e -40 °C durante 1 hora. Dilui-se a mistura reaccional com 7,5 ml de ácido clorídrico 1N e com água, lava-se com acetato de etilo, concentra-se sob pressão reduzida para eliminar os dissolventes orgânicos e submete-se a uma cromatografia num copolímero de estireno-divinilbenzeno utilizando como eluente uma mistura de metanol/água (2:3). Lava-se o pó resultante com acetato de etilo para se obterem 289 mg de ácido 7^-[(Z)-2-(2-aminotiazol-4-il)-2-hidroxiiminoacetil]-amino-3-(tetrazol-5-il)-tiometiltio-3-cefem-4-carboxílico , sob a forma de um pó amarelo pálido. Rendimento: 28% (a partir do éster de difenilmetilo do ácido 7p~f(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-triti_ loxiiminoacetil]-amino-3-metano-sulfoniloxi-3-cefem-4-carboxílico).

RMN J (D₂0-NaHC0₃) ppm: 3,47, 3,65(ABq, J=17,4Hz

2H), 4,38, 4,43(ABq, J=13,7Hz, 2H), 5,l8(d, J=4,6Hz,

1H), 5,83(d, J=4,6Hz, 1H), 6,99(s, 1H).

IV (KBr) cm^-1: 32001argo, 1 765, 1650, 1600,

1525, 1385, 1345, 1175.

Este composto apresenta uma forte acção antibacteriana contra Escherichia coli 7437 (0,01 μg/ml).

28) Acil = (Z)-2-[2-(t-butoxicarbonilamino para amino)-tiazol-4-il]-2-(tritilo para H)-oxiiminoacetilo Het = 1-metil-5-tetrazolilo (3E3-4)

A uma solução de 576 mg (0,555 mmole) do éster de difenilmetilo do ácido 7β-[(Z)-2-(2-t-butoxicarbo- 123 nilaminotiazol-4-il)-2-triuiloxiiminoacetilJ-amino-3-(1-metil -5-tetrazolil)-tiometiltio-3-cefem-4-carboxílico em uma mistu ra de 2 ml de anisol e de δ ml de nitrometano, sob arrefecimento a uma temperatura compreendida entre -30° e -40°C, adiciona-se uma solução de 591 mg (4,44 mrnoles) em 2 ml de anisol e agita-se a mistura a uma temperatura compreendida entre -30° e -40°C durante 1 hora. Dilui-se a mistura reaccional com 5 ml de ácido clorídrico 1N e com água e lava-se com acetato de etilo. Concentra-se a fase aquosa sob pressão reduzida para eliminar os dissolventes orgânicos e purifica-se mediante cromatografia num copolímero de estireno-divinilbenzeno utilizando como eluente uma mistura de metanol/água (4:1). Lava-se o pó resultante com acetato de etilo para se obterem 200 mg do ácido 7/3-f(Z)-2-(2-aminotiazol-4-il)-2-hidroxiiminoacetil]-amino-3-(1 -meti1-5-tetrazolil)-tiometiltio-3-cefem-4-carboxílico, sob a forma de um pó amarelo. Rendimento: 68%.

RMN _à (D₂O-NaHCO₃) ppm: 3,59, 3,9O(ABq, J=17,4Hz 2H), 4,00(s, 3H), 4,58, 4,63(ABq, J=13,8Hz, 2H), 5,24(d,

J=4,9Hz, 1H), 5,83(d, J=4,9Hz, 1H), 6,98(s, 1H).

IV J (KBr) cm¹: 33001argo, 1765, 1660, 1605,

525, 1 385, 1 345, 11 70.

Este composto apresenta uma forte acção antibacteriana contra Escherichia coli 7437 (0,02 μς/πιΐ), Escherichia coli SR377 (0,4 pg/ml), Morgania morganii SR9 (0,1 4g/ml) e Enterobacter cloacae SR233 (0,8 pg/ml).

29) Acil = (Z)-2-[2-(t-butoxicarbonilamino para amino)-tiazol-4-il}-2-(tritilo para H)-oxiiminoacetilo Het = 2-metiltetrazol-5-ilo (4E7-09).

A uma solução de 1,16g (1,12 mrnoles) do éster de difenilmetilo do ácido 7ó^_L(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilamino tiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetilaminoJ -3-(2-metiltetrazol -5-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico em uma mistura de 4 ml de anisol e de 16 ml de nitrometano, à temperatura

- 124 de -40° C, adiciona-se uma solução de 1,1 9g (8,95 mmoles) de cloreto de alumínio em 4 ml de anisol e agita-se a mistura a uma temperatura compreendida entre -30° e -40°C du rante 1 hora. Mistura-se a mistura reaccional com 9 ml de ácido clorídrico 1N, dilui-se com água, lava-se com acetato de etilo, concentra-se para eliminar os dissolventes orgânicos que restam e passa-se através de uma coluna de adsorvente de copolímero de estireno-divinilbenzeno. Elui-se o produto adsorvido com uma mistura de água/metanol (1 :4) e concentra-se para se obter um pó que se lava com acetato de etilo obtendo-se 466 mg do ácido 7β-[(Z)-2-(2-aminotiazol-4-il)-2-hidroxiiminoacetamidoJ-3-(2-metiltetrazol-5-iltiometiltio)-3-cef'em-4-carboxílico, sob a forma de um pó amarelo. Rendimento: 79%.

RMN £ (D₂O-NaHCO₃) ppm: 3,58, 3,88(ABq, J=17,3Hz 2H), 4,36(s, 3H), 4,50(s, 2H) , 5,26(d, J=4,7Hz, 1H),

5,82(d, J=4,7Hz, 1H), 6,98(s, 1H).

IV J (KBr) cm^-1: 33001argo, 1767, 1660, 1630,

1600, 1 528, 1 387, 1 340, 1321 .

30) Acil = (Z)-2-[2-(t-butoxicarbonilamino para amino)-tiazol-4-il]-2-(tritilo para H)-oxiiminoacetilo Het = 2-piridilo (2E3-3)

A uma solução de 722 mg (0,70 mmole) do éster de difenilmetilo do ácido 7β-[(Z)-2-(2-t-butoxicarbonilaminotiazol-4-il)-2-tritiloxiiminoacetamido] -3-(2-piridiltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico em uma mistura de 2 ml de anisol e de 8 ml de nitrometano, sob arrefecimento até à temperatura de -40°C, adiciona-se uma solução de 744mg (5,59 mmoles) de cloreto de alumínio em 2 ml de anisol e agita-se a mistura a uma temperatura compreendida entre -30° e -40 °C durante 1 hora. Dilui-se a mistura reaccional com 6 ml de ácido clorídrico 1N e com água, lava-se com acetato de etilo, concentra-se sob pressão reduzida para eliminar os dissolventes orgânicos e passa-se através de uma coluna de copolímero de estireno-divinilbenzeno. Elui-se o produto adsorvido com uma mistura de metanol/água

- 125 (4:1). Concentra-se o eluído, lava-se o resíduo com acetato de etilo e seca-se, para se obterem 289 mg de ácido

7(3- [ (Z) -2- (2-aminotiazol-4~il)-2-hidroxiiminoacetilaminoj-3-(2-piridiltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico. Rendimento:

79%.

RMN _è (D₂0-NaHC0₃) ppm: 3,55, 3,78(ABq, J=17,2Hz 2H), 4,43, 4,49(ABq, J=14,0Hz, 2H), 5,l6(d, J=4,6Hz, 1H), 6,96(s, 1H), 7,23(ddd, J=7,5Kz, J=4,9Hz, J=O,8Hz, 1H), 7,46(d largo, J=8,OHz, 1H), 7,74(ddd, >8,0Hz, J=7,5Hz, J=1,6Hz, 1H), 8,39(d largo, J=4,9Hz, 1H).

IV J (KBr) cm^-1 : 3320, 2976, 1764, 1665,

1619, 1575, 1530, 1415, 1353, 1120.

Este composto é um poderoso agente antibacteriano contra Escherichia coli 7437 (0,01 pg/ml) e apresenta uma elevada concentração no sangue após administração por via oral (18,7 (ig/ml: 15 minutos; murganhos).

Ensaiou-se cada um dos compostos do seguinte modo

Actividade antibacteriana in vitro: Sobre uma placa de agar aplica-se uma solução de composto em ensaio em uma solução aquosa de hidrogenocarbonato de sódio 0,01N, pelo método da diluição dupla, e determinam-se as concentrações inibidoras mínimas contra bactérias Gram-negativas e Gram-positivas, de acordo com o método padrão da Japan Society of Chemoterapy.

Concentração no sangue 15 minutos após administração por via oral: Administra-se a um murganho (pesando cerca de 25g), através de um tubo entérico, um composto em ensaio (40 mg/kg) em uma suspensão de 5% de goma arábica. Decorridos 15 minutos recolhe-se o sangue da cavidade do coração e determina-se a concentração do composto em ensaio pelo método de cultura de banda utilizando Escherichia coli 7437.

26

Exemplo 8 Composições farmacêuticas.

) Grânulos ácido 7β-[(Z)-2-(2-aminotiazol-4-il)-2-hidroxiiminoacetilaminoJ-3-(1 ,2,3-triazol-4-iltiometiltio)-3-cefem-4-car boxílico 100 mg lactose 600 mg amido de milho 290 mg hidroxipropilcelulose 1 0 mg

Granulam-se os produtos referidos antes por um método húmido convencional, preparando-se composições sob a forma -de grânulos de 1g cada um e administra-se 3 vezes por dia a um paciente que sofra de uma infecção provocada por bactérias sensíveis.

2) Comprimidos ácido 7p-[(Z)-2-(2.-aminotiazol-4-il)-2-metoxiiminoacetilaminoJ-3-(1,2,3-triazol-4-iltiometiltio)-3-cefem-4-car-

boxílico	100	mg
lactose	65	mg
amido de milho	32	mg
hidroxipropilcelulose	2	mg
estearato de magnésio	1	mg
Granulam-se estes produtos	por um método

convencional húmido e formulam-se numa máquina para fazer comprimidos de modo a obter comprimidos com o diâmetro de 7,5 mm e administra-se 3 .vezes por dia a um paciente que sofra de uma infecção causada por bactérias sensíveis.

3) Cápsulas duras ácido 7β-C(Z)-2-(2-aminotiazol-4-il)-2-metoxiiminoacetilaminoJ-3-(1,2,4-triazol-3-iltiometiltio)-3-cefem-4-carboxílico j00 mg

- 127 amido de milho 47 mg estearato de magnésio 1 ,5 mg pó de talco 1 ,5 mg

Granulam-se os produtos referidos antes por um método convencional húmido e enchem-se cápsulas de gelatina dura de tamanho N2. 4 e administram-se 3 vezes por dia a um paciente que sofra de uma infecção provocada por bactérias sensíveis.

Claims (6)

1. REIVINDICAÇÕES

   12. - Processo para a preparação de compostos de fórmula geral

   Acil-NH «AsA/ ¹

   R.-Het

   COOH (I) na qual Acil representa um grupo acilo C^-C^gj Het representa um grupo heteroaromático monocíclico opcionalmente substituído contendo um ou mais heteroátomos; R^ representa uma ligação simples ou um grupo alquileno C^-C^; Rg representa um grupo alquileno C^ -C^ , de cadeia linear ou ramificada; X representa um átomo de enxofre ou um grupo sulfóxido; e Y representa um átomo de hidrogénio ou um grupo metoxi;

   e os seus sais aceitáveis sob o ponto de vista farmacêutico ou os seus derivados amino-, carboxi- e/ou hidroxi-protegidos caracterizado pelo facto de:

   1) se fazer reagir um composto de fórmula geral

   Y

   COOR (III) na qual Het, R , Rg, X e Y têm os significados definidos antes e R representa um átomo de hidrogénio ou um grupo protector de carboxi,

   - 129 ou um seu derivado reactivo, com um ácido de fórmula geral

   Acil-OH na qual Acil representa um grupo acilo opcionalmen te protegido, ou um seu derivado reactivo, para se obter um composto de fórmula geral

   Rj-Het (II) na qual Acil Het, R, R^, Rg, X e Y têm os significados definidos antes; ou
2. 2) se fazer reagir um composto de fórmula geral na qual Acil, R, X e Y têm os significados definidos antes e R^ representa um grupo alquilo ou arilo;

   ou um seu derivado reactivo, com um composto de fórmula geral

   AcSRgSR₁Het na qual Ac representa um grupo acilo e Het, R ^{e R}2 ^¹¹¹ °^{S s}iU^nif:i-^cados definidos antes,

   - 130 para se obter um composto de fórmula geral II na qual Acil, Het, R, R^ , R₂, X e Y têm os significados definidos antes; ou
3. 3) se fazer reagir um composto de fórmula geral

   Acil-NH^i

   COOR (V) na qual Acil, R, X e Y têm os significados definidos antes e M representa um átomo de hidrogénio ou de um metal pesado, ou um seu derivado reactivo, com um composto de fórmula geral

   Hal-RpSR^Het na qual Hal representa um átomo de halogéneo e Het, R^ e R₂ têm os significados definidos antes, ou um seu derivado reactivo, para se obter um composto de fórmula geral II na· qual Acil, Het, R, R^ , R₂ , X e Y têm os significados definidos antes; ou
4. 4) se reduzir um composto de fórmula geral II na qual X representa um grupo sulfóxido e Acil, Het, R, R^ , R₂ e Y têm os significados definidos antes, com um reagente redutor, para se obter um composto de fórmula geral II na qual X representa um átomo de enxofre; ou
5. 5) se fazer reagir um composto de fórmula geral II na qual R representa um átomo de hidrogénio e Acil, Het, R , R₂ , X e Y têm os significados definidos antes, com uma base, para se obter um sal de um

   - 131 composto de fórmula geral I; e
6. 6) se desproteger um composto de fórmula geral II na qual os grupos representados por Acil e/ou Het contêm um grupo amino, hidroxi ou carboxi protegidos e/ou R representa um grupo protector de carboxi e R, Rg, X e Y têm os significados definidos antes, por um método convencional apropriado para cada grupo protector.

   2®. - Processo de acordo com a reivindicação 1 , para a preparação de compostos de fórmula geral I na qual Acil representa um grupo alcanoilo -Cθ eventualmente substituído, aroílo C^-C^ eventualmente substituído ou um grupo aralcanoílo homocíclico pentagonal ou hexagonal eventualmente substituído ou aralcanoílo heterocíclico pentagonal ou hexagonal eventualmente substituído e Het, R^ , Rg , Xe Y têm os significados definidos antes, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.

   3²· - Processo de acordo com a reivindicação 2, para a preparação de compostos de fórmula geral I na qual o substituinte do grupo representado por Acil é escolhido entre halgenoalquiltio, ·alcoxi-imino, alcoxi-imino cíclico, alceniloxi-imino, amino, amino protegido, hidroxi, oxo, hidroxi-imino, hidroxi-imino protegido, carboxialcoxi-imino e carboxialceniloxi-imino, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos inciais correspondentemente substituídos .

   42. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de compostos de fórmula geral I na qual Acil representa um grupo 2-(2-aminotiazol-4-il)-2-hidroxi-iminoacetilo cujo radical hidroxi-imino está opcionalmente modificado com um grupo hidroxi-protector, um grupo alquilo C —C ou carboxialquilo C -C^ e Het, R„ , R„, X e Y têm os significados definidos antes, caracterizado pelo facto

   - 132 de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.

   52. - Processo de acordo com a reivindicação 1 , para a preparação de compostos de fórmula geral I na qual Het representa um grupo heteroaromático pentagonal contendo 3 ou 4 heteroátomos escolhidos entre azoto e enxofre e Acil, , R₂, X e Y têm os significados definidos antes, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.

   65. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de compostos de fórmula geral I na qual Het representa um grupo piridilo comportando eventualmente como substituinte um radical alquilo -C , triazolilo comportando eventualmente como substituinte um radical alquilo C -C, tiadiazolilo comportando eventualmente como substituinte um radical alquilo -C^ ou tetrazolilo comportando eventualmente como substituinte um radical alquilo C^-C^ e Acil, R^, R₂ , X e Y têm os significados definidos antes, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.

   75. - Processo de acordo com a reivindicação 1 , para a preparação de compostos de fórmula geral I na qual Het representa um grupo 1,2,3- ou 1,2,4-triazolilo, 1,2,3- ou 1,2,4-triazolilo comportando como substituinte um radical metilo, 1,2,3- ou 1 ,3,4-tiadiazolilo ou 1,2,3- ou 1,3,4-tiadiazolilo comportando como substituinte um radical metilo; e Acil, R^, R₂ , X e Y têm os significados definidos antes, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.

   82. - Processo de acordo com a reivindicação 1 , para a preparação de compostos de fórmula geral I na qual R^ repre senta uma ligação simples e Acil, Het, R₂ , X e Y têm os significados definidos antes, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais cor.respondentemente substituídos.

   4- 133 ge. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de compostos de fórmula geral Ξ na qual R₂ representa um grupo metileno e Acil, Het, , X e Y têm os significados definidos antes, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.

   105. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de compostos de fórmula geral I na qual X representa um átomo de enxofre e Acil, Het, R, , R_o e Y têm os significados definidos antes, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.

   Het, R.

   112. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de compostos de fórmula geral I na qual Y representa um átomo de hidrogénio e Acil, e X têm os significados definidos antes, pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.

   Ί ’ 2 caracterizado

   122. - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de compostos de fórmula geral I na qual R^ representa uma ligação simples; Rg representa um grupo metileno; Het representa um grupo 1,2,3- ou 1,2,4-triazolilo, 1,2,3- ou 1,3,4-tiadiazolilo, cada um dos quais comporta opcionalmente como substituinte um radical metilo; X representa um átomo de enxofre; Y representa um átomo de hidrogénio; e Acil representa um grupo 2-(2-aminotiazol-4-il)-2-hidroxi-iminoacetilo, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.

   13²· - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de compostos de fórmula geral I na qual Het representa um grupo 2-piridilo e Acil, R^ , Rg , X e Y têm os significados definidos antes, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.

   - 134 149. - Processo de acordo com a reivindicação 1 , para a preparação de compostos de fórmula geral I na qual Het representa um grupo 1,3,4-tiadiazolilo e Acil, , R₂,

   X e Y têm os significados definidos antes, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.

   15²· - Processo de acordo com a reivindicação 1, para a preparação de compostos de fórmula geral I na qual Het representa um grupo 1,2,3-triazolilo e Acil, R^ , , X e Y têm os significados definidos antes, caracterizado pelo facto de se utilizar compostos iniciais correspondentemente substituídos.

   169. - Processo de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo facto de se fazer reagir um sal de um composto de fórmula geral I com um ácido.

   17-. - Processo para a preparação de composições farmacêuticas, caracterizado pelo facto de se misturar uma quantidade eficaz de um composto de fórmula geral I, preparado pelo processo de acordo com a reivindicação 1 , como ingrediente activo, com um veículo aceitável em farmácia.

   189. - Método para' combater bactérias, caracterizado pelo facto de se fazer contactar as bactérias com uma quantidade eficaz compreendida entre 10 mg e_ 4000 mg de um composto de fórmula geral I preparado pelo processo de acordo com a reivindicação 1.

   199. - Método para tratamento de infecções causadas por bactérias sensíveis, caracterizado pelo facto de se administrar a um paciente uma quantidade eficaz, compreendida entre 10 mg e 4000 mg, por dia, de um composto de fórmula geral I, preparado pelo processo de acordo com a reivindica-