RO138083A2 - Produs topic pentru afecţiuni ale pielii care cumulează un proces inflamator cu un proces infecţios, pe bază de extracte din plante - Google Patents

Abstract

Invenţia se referă la un procedeu de obţinere a unui produs topic cu acţiune asupra afecţiunilor pielii care cumulează un proces inflamator cu un proces infecţios de tip acneea vulgara şi foliculita. Procedeul, conform invenţiei, constă în etapele: realizarea bazei de hidrogel, prin combinare la temperatura camerei a 0,50% carbopol şi 0,25...0,50% emulgator uzual, cu apă distilată, adăugarea prin picurare a unui amestec din 1,5 % vitamina E, 1,00...5,50% ulei din fructe de tamanu, 0,25...0,50% agent activ de suprafaţă uzual şi 0,5% trietanolamină, adăugarea componentei hidrofile constând din 5% extract activ standardizat din Flori de fân, eventual de tip Ceai Flori de fân în etanol 40% , rezultând un produs omogen, formulat ca hidrogel uşor sau cremă, care asigură un conţinut de 100 mg GAE/100g hidrogel sau cremă, de culoare alb-gălbui, pH 5,3...5,5, cu miros caracteristic, de plante.

Description

OFICIUL DE STAT PENTRU INVENȚII $1 MĂRCI Cerere da brevet de Invenție

Nr..............................···“

Data depozit.........(1.7..7.10.-...¾¾

R0138083 Α2

DESCRIEREA INVENȚIEI

Titlu “Produs topic pentru afecțiuni ale pielii care cumulează un proces inflamator cu un proces infectios, pe baza de extracte din plante”

Autori: Pîrvu Lucia Camelia, Bâzdoacă Cristina, Rasit luksel

Invenția se referă la un produs topic care are la baza un extract activ însumând compuși naturali din 51 specii vegetale, cu acțiune asupra afecțiunilor pielii care cumulează un proces inflamator cu un proces infectios, cum sunt de exemplu acneea vulgara si foliculita, si la procedeul de preparare al acestuia in doua variante de formulare.

Asa cum se cunoaște, acneea vulgara si foliculita se aseamana prin aceea ca ambele afecțiuni se derulează cu apariția unor pustule inflamate, asociate sau nu cu un proces infectios, localizate la nivelul folicului pilos in cazul foliculitei, respectiv la nivelul glandei sebacee in cazul acneei, diferența principala dintre aceste doua afecțiuni dermatologice fiind mecanismul de apariție. Astfel, foliculita are frecvent drept cauza infecția cu Staphylococcus aureus, dar poate sa apara si in afara unei infectii microbiene; acneea juvenila are drept cauza infundarea porilor cu celulele moarte ale pielii, formarea excesiva de sebum de către glandele sebacee, urmata sau nu de infecție cu Propionibacterium acnes. Ambele afecțiuni se derulează cu pustule inflamate care, daca se infectează, se pot complica prin raspandirea inflamatiei si infecției in țesuturile adanci ale epidermului. In cazul adâncirii inflamatiei si infecției, rezulta furuncule, care se vindeca mult mai greu, lașa invariabil cicatrici permanente, vizibile si inestetice, de asemenea se poate ajunge la distrugerea foliculului pilos cu pierderea parului, in cazul particular al foliculitei. In acest context comun de locație si mecanism de derulare, se impun doua masuri majore cu efect de prevenire si tratament a pustulelor inflamate: o igiena sporita din momentul apariției primelor semne de afectare dermatologica, si intervenția locala cu un produs specializat cu efect sinergie antiinflamator, calmant si antimicrobian, pentru a nu permite adancirea si cronicizarea leziunilor acneice si de tip foliculita. Asa cum se cunoaște, vindecarea unei leziuni este un proces complex care include re-formarea straturilor țesutului pielii si controlul infecției, pentru a minimiza timpul, aspectul si cicatricile inconveniente, prin urmare se impune un produs cu efect sinergie.

In Romania, produsele dedicate afecțiunilor dermatologice de tip acnee sau foliculita din categoria adjuvant (produse dermatocosmetice) se găsesc in formulări de tip crema, unguent, lotiune, hidrogel, baton, plasture, etc., si au de regula ca ingredient activ extracte vegetale, frecvent din galbenele, patlagina, mușețel, amica, ori diferite opoterapice in combinație cu uleiuri grase si volatile din diferite surse vegetale. Produsele specializate, din categoria medicament, predomina in formulare de tip unguent, crema sau hidrogel, si au de regula ca ingredient activ substanțe de sinteza, din categoria antiinflamatoare, ori antimicrobiene, mai rar combinatii sinergice ale ambelor clase.

i

R0138083 Α2

In afara de substanța activa propriu-zisa, formulele topice uzuale conțin un număr variabil de excipienti meniti sa realizeze baza de produs, sa solubilizeze compușii activi in formularea propusa, sa confere emolienta, sa faciliteze absorbția, respectiv sa ofere diferite avantaje in penetrarea transdermica si cedarea la tinta a compușilor activi.

Se dau in continuare doua exemple din literatura de specialitate, formulări topice pe baza de asocieri de compuși naturali si ingrediente active vegetale cu acțiune anti-inflamatoare, anti-algica si cicatrizanta. Astfel, brevetul RO 110906 Bl descrie compoziția unui unguent cu acțiune antiinflamatoare si antialgica: produsul, conform invenției este constituit din 20...72 parti extract ulei de Flos Amica sii Folium Betulae, 0,80...1,20 parti Oleum Pini, 26...50 parti baza de unguent, care este compusa din 38,50 parti ceara, 46 parti alcool cetilic, 13 parti ulei de cocos si 2,50 parti agent de emuslificare, la care se pot adauga 50 parti extract alcoolic de Flos Arnicae si Folium Betulae (rapoarte de greutate). Brevetul RO 131198B1 descrie compoziția pentru un gel antiinflamator pe baza de chitosan si extracte de plante: produsul, conform invenției, este constituit din 15....20% chitosan, 30...40% carbopol, 0.8% trietanolamina, 2...3% glicerina si 8,25% extracte reunite de sulfina, mesteacăn, trei frați patati, roinita si cretisoare, avand un continui total de aminoacizi, exprimat in acid glutamic, de 0,5...0,07%, si de apa distilata pana la 100%.

Problema tehnica propusa spre rezolvare de către prezenta invenție consta in obținerea unui produs topic in doua variante de formulare, crema si hidrogel ușor, cumulând compuși activi naturali din 51 specii vegetale, așadar cu multiple componente active care converg către stoparea inflamatiei si infecției din zonele pielii si țesuturilor subdiacente afectate de acnee si/sau foliculita, ori pentru alte afecțiuni dermice care cumulează inflamatia cu infecția; cele doua formule pot fi avizate de către aplicantul brevetului, fie ca produse dermatocosmetice, fie ca dispozitive medicale.

Soluția punctuala consta in asocierea componentelor active dintr-un extract standardizat obtinut din *Ceai Flori de fan cu ulei din fructe de tamanu (Calophyllum inophyllum), intr-o formulare de tip crema, respectiv hidrogel ușor, in baza de carbopol - pemulen.

*Ceai Flori de fan este o materie prima vegetala complexa comercializata de către unitățile de profil din Romania, care reconstituie un produs din medicina populara, si anume ansamblul de specii vegetale care se găsesc in faneturi si pășuni. Florile de fan sunt recomandate si utilizate in medicina populara pentru multiple afecțiuni care au ca numitor comun inflamatia, infecția, scăderea rezistentei si a imunității, totodată si pentru purificarea, întinerirea si frumusețea pielii.

Produsul comercializat *Ceai Flori de fan (de la Hypericum Impex SRL) se prezintă ca un amestec standardizat de 51 specii vegetale, incluzând arbori din flora spontana a României, plus o serie de plante cultivate cu valoare fitoterapeutica foarte ridicata.

R0138083 Α2

Se aduc in continuare argumente științifice privind convergenta de efect antiinflamator - calmant antimicrobian al ansamblului de specii vegetale care compun produsul vegetal *Ceai flori de fan :

- sunatoarea (Hypericum perforatuni) a demonstrat un efect de reducere a nivelului citokinei pro-inflamatoare TNF-alpha (factorul de necroza tumoral), si un efect inhibitor asupra limfocitelor activate de la nivelul dermului (P Mansouri et al, 2017), totodată s-a dovedit cu activitate de grăbire a vindecării rănilor (Ipek Peșin Siintar et al, 2009) si efect antimicrobian cert (Zeb Saddiqe et al, 2010), ceea ce susține utilizarea extractelor de sunătoare in formule topice in care suprimarea inflamatiei si infecției reprezintă cei doi poli necesari vindecării corecte si rapide a țesutului lezat;

- menta (Mentha piperită) a crescut expresia genei TGF-beta (un factor de creștere si transformare a țesuturilor care controlează creșterea, proliferarea, diferențierea si apoptoza celulara), care actioneaza specific in procesul de vindecare a leziunilor, totodată s-a evidențiat cu efect antimicrobian cert (Mohammad Ho sein Amirzade-Iranaq et al, 2022), așadar extractele sunt benefice in leziuni topice;

- coada șoricelului (Achillea millefolium) a redus semnificativ expresia nitric oxid sintazei inductibile (INOS), ciclooxigenazei 2 (COX-2) si interleukinei 6 (IL-), in studii pe celule Raw264.7 stimulate cu lipopolizaharida (LPS), fapt care indica un efect antiinflamator cert, dar si beneficiul in tratamentul dermatitei atopice si proprietăți calmante asupra leziunilor dermului (David R Burk et al, 2010);

- coada calului (Equisetum arvense) are efect cicatrizat marcat la nivelul pielii si mucoaselor prin conținutul ridicat in minerale si siliciu organic, totodată interfera cu funcția celulelor imunocompetente, ceea ce conferă extractelor sale un efect antiinflamator susținut (Carsten Grundemann et al, 2014);

- paducelul {Crataegus monogynă) este dovedit cu activitate foto-protectoare si antiinflamatoare prin opunerea deteriorării matricei extracelulare si a perturbării proliferării celulare, totodată prin marirea supraviețuirii celulare, ceea ce aduce beneficii in vindecarea rănilor (Federico Martinelli et al, 2021);

- aloea (Aloe arborescens) si produsele derivate sunt de necontestat in ceea ce privește efectul calmant si de grăbire a vindecării leziunilor pielii si mucoaselor, iar studiile clinice arata eficienta inclusiv in abordarea leziunile cronice si / sau (auto)imune ale dermului (Davood Hekmatpou et al, 2021);

- frunza de alun (Corylus avellana) imbunatateste răspunsul bactericid al macrofagelor la om, punctual prin acțiunea împotriva Staphylococcus aureus, prin creșterea expresiei genelor antiinflamatorii si a metabolismului fierului (Giulia Cappelli et al, 2018);

- branca ursului (Heracleum spondylium) s-a dovedit cu activitate antifungica si antimicrobiană punctual asupra tulpinilor de Staphylococcus aureus (Daniela Benedec et al, 2017);

- busuiocul de câmp (Prunella vulgaris) este demonstract cu efect antiinflamator si calmant, totodată cu efect anti-complement, ceea ce indica beneficii extinse in dermatita atopica si alergii cutanate,

R0138083 Α2 t

totodată s-a evidențiat activ pe tulpini implicate in infectii dermice, cum sunt Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis si Propionibacterium acnes (Junying Pan et al, 2022);

- frunza de castan (Castanea sativa) a blocat patogenicitatea si virulenta tulpinilor de Staphylococcus aureus, fara a permite instalarea rezistentei microbiene (Cassandra L. Quave et al, 2015);

- cicoarea {Cichorium intybus) este cunoscuta pentru efectele benefice asupra aparatului digestiv, dar are si un efect antioxidant, antiinflamator si antimicrobian marcat (Katarzyna Janda et al, 2021);

- cimbrișorul de câmp (Thymus serpyllum) este un antimicrobian redutabil, activ pe tulpini de Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae, Yersinia enterocolitica, Listeria monocytogenes, Enterococcus faecalis, Salmonella typhiriwn, Salmonella enteriditis, Actinobacillu spleuropneumoniae, Streptococcus suis, Actinobacillus suis, Haemophilus parasuis, Pasteurella multocida si Bordetella bronchiseptica (Shashank M. Patil et al, 2021);

- crăițele (Tagetes patula) au indicat activitate marcata pe multiple tulpini de bacterii, fungi, drojdii, virusuri, si chiar paraziti, fiind utilizate frecvent in produse specializate (Muhammad Riaz et al, 2021);

- cretisoara (Alchemilla vulgaris) este foarte activa in tratamentul rănilor prin proprietățile astringente marcate, dovedite in special in formulare de tip hidrogel, ceea ce subliniază necesitatea unui vehicul adecvat pentru incorporarea extractelor din plante in utilizare topica (Marija Tasic-Kostov et al, 2019);

- cretusca (Filipendula ulmaria) prin extracție in etanol concentrat a indicat o activitate antioxidanta marcata prin suprimarea speciilor reactive de oxigen intracelular si superoxid mitocondrial, generate in culturi de celule HaCaT expuse la citokine proinflamatoare (TNF-α si interferon-yamma/lY), totodată s-a dovedit activa in reducerea sintezei unor citokine proinflamatoare foarte puternice, cum sunt protein kinaza activata de mitogeni (MAPK) si factorul nuclear kappa-amplificator (NF-κΒ), prin flavonoidele active (+)-catechina, miquelianina, scutelarina si quercitrina (Xiao-JieMi et al, 2022);

- fasolea negra si tecile de fasole (Phaseolus vulgaris) au indicat un efect antioxidant marcat care le recomanda punctual in aplicatii cosmetice (David Fonseca-Hemăndez et al, 2021);

- frunza de frasin (Fraxinus excelsior) a prezentat efecte sinergice de tip antiinflamator, antioxidant, calmant si antimicrobian, așadar este potrivita in formule adresate afecțiunilor inflamatorii ale dermului, prin compușii activi specifici esculetin, esculin, fraxin si fraxetin (Iqra Sarfraz et al, 2017);

- gălbenelele (Calendula officinalis), in extracte/formule polare si nepolare, sunt, cel mai probabil, cu cea mai mare întrebuințare in tratamentul afecțiunilor dermului, efectul cicatrizant marcat fiind cel mai important atribut al produselor derivate rezultate; efectul se realizează prin cumulul de efecte antiinflamatorii si antibacteriene, la care se aduga efecte angiogenice si fibroplastice, care actioneaza sinergie in fazele de vindecare ale rănilor de diferite etiologii (Leila Maria Leal Parente et al, 2012);

R0138083 Α2

- ghimpele (Xanthium spinosum), in extracte polare si nepolare, a indicat efect inhibitor cert asupra tulpinilor de Staphylococcus aureus sensibile si rezistente la meticilina (Javad Sharifi Rad.et al, 2013);

- hameiul (Humulus lupulus) sub forma de extract 1% a demonstrat un efect antiinflamator similar cu al hidrocortizonului 1%, in mod punctual in formulare de tip oil-in-water, O/W (Zita Hurth et al., 2022), ceea ce argumentează necesitatea unui produs topic in 2 formulări, una hidrofila si cealalta lipofila, si aplicarea lor alternativa, pentru obținerea maximului de eficienta a componentelor active;

- iedera (Hedera helix) este un antiinflamator remarcabil, comparabil cu diclofenacul; datele arata ca extractele alcoolice administrate intraperitoneal inhiba 88,89% din inflamatia de ureche, in model de edem la șoarece indus cu formol in vivo, fata de medicamentul de referința, diclofenac, care inhiba echivalentul a 94,44% din inflamatie (Anuradha Rai, 2013);

- ienuparul (Juniperus comunis) in extracție hidro-alcoolica este dovedit cu efecte genoprotectoare, antioxidante, antifungice si antiinflamatoare (Irina Fierascu et al, 2018);

- busuiocul cerbilor (Mentha pulegium), prin luteolin si apigenin, a indicat activitate antiradicala si antibacteriana puternica, punctual asupra Staphylococcus aureus sensibil si rezistent la meticilina, fiind astfel recomandat in terapia combinata împotriva bacteriilor patogene (Aires Alfredo et al, 2016);

- lichenul de piatra (Cetraria islandica) in extracție alcoolica a prezentat activitate antioxidanta, antimicrobiana, remarcabile, mai ales asupra Bacillus cereus (Darko Grujicic at al, 2014);

- fructul de maces (Roșa canina) si produsele derivate sunt foarte bogate in vitamine (in special Vitamina C) si polifenoli ceea ce asigura un efect antioxidant extins, atat in mediu polar, cat si nepolar, fiind de interes crescut in primul rând pentru reducerea stresului oxidativ (Ines Mărmol et al, 2017);

- frunza de mesteacăn (Betula verrucosa), in extracte brute, fracții selective, ori compuși activi izolati s-au dovedit cu un spectru foarte larg de activitati farmacologice, incluzând efecte imunomodulatoare, antiinflamatoare, antimicrobiene, antivirale si antioxidante, ceea ce le recomanda in produse care se adreseaza afecțiunilor pielii si domeniul dermatologiei (Subha Rastogi et al, 2014);

- mușețelul (Matricaria chamomilla) este o specie cu întrebuințare foarte intensa in industria dermatocosmeticelor; extractele derivate sunt incluse cu predilecție in produse care se adreseaza bebelușilor si copiilor mici, efectul calmant de electie al mușețelului fiind rezultatul sinergiei efectelor antioxidant, antialergic, antiinflamator si antimicrobian (Janmejai K Sri vasta va et al, 2010);

- napraznicul (Geranium robertianum) a indicat un efect antiinflamator puternic si un mecanism de acțiune care sugerează o activitate antiinflamatoare prin efectul scavenger asupra radicalul NO'fMarcelo D Catarino et al, 2017);

- orzul (Hordeum vulgare) a indicat activitate împotriva tuturor agonistilor plachetari la om, cu excepția adenindifosfatului, totodată a inhibat principalele caile inflamatorii la om (calea

R0138083 Α2 ciclooxigenazei/ COX si calea lipooxigenazei/ LOX), in plus a dovedit o activitate stimulatoare asupra activitatii superoxid dismutazei (SOD) si glutation peroxidazei (GPx); punctual, fracția apoasa a fost cea mai eficienta in stimularea activitatii SOD, fracția cloroform a indicat cea mai mare eficienta in inhibiția caii proinflamatoare COX, fracția hexan a excelat in inhibita caii proinflamatoare LOX, in același timp a sporit activitatea GPx (Saima Gul et al, 2014);

- papadia (Taraxacum officinale) este intens utilizata in cosmetica pentru proprietățile antiinflamatoare prin reducerea nivelului citokinelor NO, PGE2 si prin reducerea expresiei iNOS si COX-2, respectiv inactivarea caii de semnalizare a MAP Kinazei (Yoon-Jeoung Koh et al, 2010), totodată a indicat efect antibacterian si antifungic; datele indica si un efect antipigmentar si de refacere a elesticitati pielii, in mod particular ca urmare a conținutului proportionat de Vitamina A, C si E;

- patlagina (Plantago major) este o alta specie foarte utilizata in tratamentul afecțiunilor pielii si mucoaselor in special ca urmare a efectului calmant, vindecător si cicatrizant, realizat prin sinergismul mucilagiilor, alantoinei, mineralelor si polifenolilor activi care permit un cumul de efect antiinflamator, antioxidant, anticomplementar, antialergic si antimicrobian (Anne Berit Samuelsen. 2000);

- pedicuta (Lycopodium clavatum) este demosnstrata cu efect antiinflamator in extracție si formulare grasa, nepolara, cel mai probabil indus de alcaloidul licopodin (Ilkay Orhan et al, 2007);

- conurile de pin negru (Pinus nigră) in extract nepolar au indicat proprietăți remarcabile in grăbirea vindecării rănilor (Ipek Suntar et al, 2012);

- priboiul (Geranium macrorrhizum) este activ mai ales in formulare grasa, iar nanoemulsiile au dovedit o eficienta mare in tratamentul leziunilor aferente arsurilor severe; punctual, datele au indicat scăderea diametrului unor plăgi arse de 4 ori fata de martorul netratat, de asemenea scăderea de 3,81 ori nivelul seric de interleukina-6 (IL-6), si de 4 ori a zonei de inhibiție împotriva Staphylococcus aureus, comparativ cu martorul netratat (Waleed Y. Rizg et al, 2022);

- pufulita cu flori mici (Epilobium parviflorium) este recunoscuta pentru proprietățile antimicrobiene si antiinflamatoare marcate, care sunt rezultatul conținutul ridicat in derivati glicozilati de miricetin si miricetin-galoil, de asemenea a dovedit preferința pentru formulare corespunzătoare tenului gras, ceea ce recomanda in mod particular extractele alcoolice din pufulita pentru tratamentul pustulelor acneice, prezente in cazul persoanelor cu ten gras (Lucia Pirvu at al, 2015, 2019);

- rostopasca (Chelidonium majus) in combinație cu celuloza microbiana in studiu in vitro a dovedit ca reduce nivelul secreției citokinelor pro-inflamatoare IL-1 β, IL-8 si INF-α, totodată a indicat si un efect antiinflamator marcat, pe deasupra activitate antimicrobiana si antibiofilm asupra Staphylococcus aureus, Pseudomonas aeruginosa si Candida albicans, ceea ce justifica utilizarea in tratamentul leziunilor inflamate si infectate, si ca pansament ocluziv de suprafața (Sylwia Zielihska et al, 2022);

R0138083 Α2

- salcâmul (Robinia pseudacaciă) a indicat un efect de activare a SOD (cu 76,41%), totodată si de inhibiție asupra tulpinii de Staphylococcus aureus, formularea in lipozomi aducand o eficacitate sporita in experiment punctual de permeabilitate dermica (Soo Hyeon Heo et al, 2022);

- coaja de salcie (Salix albă) si salicina sunt cele mai utilizate ingrediente active din industria cosmetica pentru formule care se adreseaza problematicii acneei; fata de ingredientul activ separat, salicina, extractul total din coaja de salcie, bogat in polifenoli, flavonoide si taninuri, acizi fenolici, salicina, vitamine si minerale benefice a avut avantajul unei compozitii sinergice (Adolf Nahrstedt et al, 2017), respectiv a indicat efect antiiflamator cert (Mohd Shara et al, 2015), pe deasupra efect decapant asupra straturilor suprapuse si îngroșate de celule specifice pustulei acneice;

- salvia (Salvia pratense) este o specie vegetale cu un continui ridicat de acizi fenolici si flavonoide cu activitate antioxidanta puternica, fapt care rezida intr-un efect antiinflamator si calmant intens in special asupra țesuturilor afectate de stresul oxidativ, cum este pielea fetei (Umut Kerem Kolac et al, 20170); salvia a indicat si efecte antimicrobiene certe pe Enterococcus faecalis, Bacillus cereus, B. subtilis, Staphylococcus epidermidis, S. aureus si S. typhimurium (Nikola Sreckovic et al, 2020);

- sanziana galbena (Galium verum) are efecte antibacteriene si antifungice pe tulpini patogene si oportuniste (ex., Candida albicans, Trichophyton rubrum si Cryptococcus neoformans), de asemenea are activitate antiinflamatoare certa prin inhibiția activării macrofageler (Paulina Bolivar et al, 2011);

- sclipetele (Potentilla erectă), bogat in agrimoniin, a dovedit efect de inhibiție doza-dependent fata de inflamatia indusa de UVB in vivo, de asemenea a redus semnificativ producția de PGE2 indusa de UVB, respectiv a demonstrat proprietăți antiinflamatorii in vitro si in vivo in model de inflamatie indusa cu UVB, ceea ce este inalt concludent pentru leziunile pielii (Julia Hoffmann et al, 2016);

- silurul (Euphrasia roskoviană) a protejat împotriva foto-imbatranirii induse de UVB, in model de fibroblaste umane normale, dovedind astfel beneficiul in formule dermice (Ying Liu et al, 2018);

- florile de soc (Sambucus nigră) au efect antiinflamator prin modularea funcțiilor macrofagelor si neutrofilelor, prin efectul asupra migrării celulelor si promovarea fagocitozei, in același timp au indicat efect relaxant la nivelul țesutului muscular neted, vascular si nevascular, fiind astfel un instrument important pentru gestionarea inflamatiei acute la om (Jose RobertoSantin et al, 2022);

- sulfina (Melilotus officinalis), punctual extractele in apa, acetona, dietil eter si etanol au indicat efecte antioxidante crescute, iar screening-ul de activitate antimicrobiana pe 25 de microorganisme a indicat un efect mai mare asupra bacteriilor Gram-pozitiv decât asupra bacteriilor Gram-negativ, extractul in acetona fiind cel mai competent in inhibiția microbiana (Katarina G. Mladenovic et al, 2016);

R0138083 Α2

- talpa gastei (Leonurus cardiacă), prin fenolii cu structura de tip 3,4-dihidroxifenil a demonstrat capacitatea de a restabili producția de hipothiocianit (-OSCN) de către lactoperoxidaza, o enzima esențiala pentru răspunsul imun umoral împotriva agentilor patogeni (Jorg Flemmig et al, 2015);

- florile de tei (Tilia cordată) excelează la capitolul efect emolient, calmant si antiinflamator, fiind un remediu eficient in formule adresate leziunilor pielii si mucoaselor (Aleksandra Kruk et al, 2022);

- traista ciobanului (Capsella bursa-pastoris), prin conținutul in izotiocianat si sulforafan, are proprietăți antiinflamatoare si antibacteriene marcate, punctual s-a demonstrat ca scade nivelul de oxid nitric (NO), nivelul citokinelor pro-inflamatoare (IL-Ιβ, IL-6 si IL-10) si prostaglandinei E2 (PGE2), de asemenea a indus scăderea nivelul nitric oxid sintazei inductibile (iNOS) si ciclooxigenazei 2 (COX-2), ceea ce rezulta intr-o activitate antiinflamatoare puternica; la acestea, se adauga activitatea demonstrata asupra enterococilor rezistenti la vancomicină (VRE) si Bacillus anthracis, prin urmare are o plaja de utilizare extinsa in chimia farmaceutica (Woo Jin Choi et al, 2014);

- trei frați patati (Viola tricolor), tinctura, a redus semnificativ procentele de leucocite si monocite polimorfonucleare, de asemenea a indus activarea fagocitelor circulante, ceea ce rezida intr-un efect antiinflamator in locuri greu accesibile, precum tesurile grase din măduvă osoasa (Anca Toiu, 2007);

- troscotul (Polygonum aviculare), in extract alcoolic bogat in derivati de luteolin, a dovedit efecte antiinflamatoare si analgezice semnificative, prin reducerea eliberării PGE2 si suprimarea expresiei genelor mediate de factorul nuclear NF-κΒ, totodată si inhibiția COX-2 (Bing-BingShen et al, 2018);

- urzica (Urtica dioicd), sub forma de ceai, infuzat, decoct ori extract alcoolic, este intens utilizata in tratamentul eritemului pielii si scalpului, mai ales in contextul asocierii cu infectii fungice, prin urmare este evident beneficiul in afecțiuni dermice de tip foliculita (Yasaman Taheri et al, 2022);

- zmeurul (Rubus idaeus) este cunoscut pentru efectul antiseptic si utilitatea in tratamentul diferitor boli ale pielii; punctual, s-a demostrat ca preparatele in etanol au activitate bactericida si fungicida certa pe suprafața pielii, totodată si faptul ca preparatele foarte hidrofile (logP < 0) simt mai eficiente prin dispunere in straturile duble lipidice din miezul apos al lipozomilor, si nu in învelișul lipidic (Eukasz Kucharsk et al, 2022), ceea ce indica inca o data importanta formulării duble hidrofile si hidrofofe a extractelor active vegetale, precum si necesitatea altemanatei unor astfel de preparate complexe care însumează compuși cu polaritati foarte diferite, in tratamentul leziunilor țesuturilor in care coexista un proces inflamator si un proces infectios.

Uleiul din semințe de tamanu (Calophyllum inophyllum) este folosit in mod tradițional in Indonezia pentru a trata o gama larga de leziuni ale pielii, de la arsuri, cicatrici si răni infectate, pana la boli de piele precum dermatoza, urticaria si eczema. Testele pe celule de keratinocite au dovedit, pe de o parte, siguranța in utilizare si, pe de alta parte, efectul de grăbire al vindecării rănilor de pana la 2,1 ori mai mare fata de martorul de keratinocite netratate. In plus, s-a dovedit ca uleiul de tamanu are 8

R0138083 Α2 efect împotriva bacteriilor Gram-pozitiv prin inhibarea directa a creșterii mitotice, si împotriva bacteriilor Gram-negativ prin eliberarea crescută de Șeta-defensina 2 de către macrofagele activate, iar concentrațiile pentru inhibiția creșterii bacteriilor si pentru promovarea vindecarea rănilor s-au dovedit a fi mai mici decât cele care induc efecte citotoxice. In plus, uleiul de tamanu s-a dovedit activ pe tulpini de Staphylococcus aureus, componentele responsabile de inhibarea creșterii bacteriene dovedindu-se a fi in fracția mai polara a uleiului, ceea ce indica o solubilizare buna in formule de tip crema grasa (O/W) (Mathieu Cassien et al, 2021: Ravi Raj Pal et al, 2019; Win Min Oo, 2018).

In acest context compozițional foarte complex, produsul topic, in cele doua variante de formulare, crema si hidrogel ușor, subiect al invenției, poate fi utilizat ca adjuvant, ori ca tratament al afecțiunilor pielii care se derulează cu inflamatie si infecție asociata; conform invenției, acesta este constituit din 0,50% carbopol, 0,25...0,50% pemulen, 0,25...0,50% plurol, 0,5% trietanolamina, 1,5% vitamina E, 1,00....5,50% ulei din fructe de tamanu si 5,00% extract standardizat din Flori de fan, ceea ce conferă un continui standardizat de polifenoli totali exprimati in acid galic de 100 mg GAE/lOOg produs activ, si apa distilata pana la 100% (procente de masa).

Procedeul de obținere a produsului topic, conform invenției, consta in realizarea bazei de hidrogel, respectiv crema, prin combinarea la temperatura camerei (18 - 20°C) cu agitare continua (300 - 500 r.p.m.) a componentelor carbopol si pemulen cu apa distilata, urmat de incorporarea in baza de hidrogel, respectiv crema, mai întâi a amestecului de uleiuri in combinație cu plurol, după care a extractului activ standardizat din Flori defan astfel incat sa rezulte o concentrație standardizata de 100 mg GAE / lOOg produs activ, urmat de ajustareapH-ului compoziției la 5,3 - 5,5.

Produsul topic, in variantele de formulare hidrogel ușor si crema, prezintă următoarele avantaje: - prin numărul foarte ridicat de compuși activi furnizați de extractul din Flori de fan produsul topic cumulează proprietăți antiinflamatoare extinse, pentru o plaja mare de citokine proinflamatoare, in același timp are efecte calmante, de grăbire a vindecării țesutului, si potențial antimicrobian fara sa permite instalarea rezistentei la antibiotice, germenii infectiosi neputand contracara o informație antimicrobiana atat de diversa cum este aceea adusa de 51 de specii vegetale;

- extractul din Flori de fan in combinație cu ulei de tamanu si Vitamina E, in varianta hidrogel ușor si crema, conferă contextul de compoziție chimica necesar pentru o acțiune sinergica antiinflamatoare, calmanta si antimicrobiana, necesara vindecării leziunilor de tip acnee si foliculita;

- prin polaritatea diferita a formulelor, se creaza condițiile manifestării activitatii biologice atat a componentelor active polare, cat si a celor nepolare, dar impune alternarea aplicării acestora;

- prin formularea propusa, produsul topic este omogen, stabil si intra rapid in piele.

- prin formularea propusa, produsul topic nu conține parfum si conservanti chimici;

R0138083 Α2

3-5

- prin formularea propusa, produsul are un miros plăcut de plante si efect de autoconservare;

- prin extractul activ standardizat din materia prima Flori de fan, produsul topic valorifica la un nivel superior cunoștințe din medicina populara, validate de sute de ani de utilizare.

Se dau in continuare doua exemple de realizare a invenției, aferente celor doua variante de formulare, si a extractului activ standardizat din Flori de fan, care asigura proprietățile terapeutice ale produsului topic, in legătură cu tabelele si figurile care prezintă caracteristicile compoziționale fizico-chimice, calitative si cantitative ale acestora.

Exemplu 1. Produs topic sub forma de hidrogel ușor utilizabil ca adjuvant sau tratament in afecțiuni dermatologice care asociaza un proces inflamator cu un proces infectios, si care, conform invenției este constituit din următoarele componente: carbopol, pemulen, plurol, Vitamina E, trietanolamina, ulei din fructe de tamanu (Calophyllum inophyllum), extract standardizat de Flori de fan (cu un conținut de 51 specii vegetale). Procedeu de obținere: Se cântăresc 0,5 g carbopol, 0,25 g pemulen, 0,25 g plurol, 1,5 g Vitamina E, 1 g ulei din fructe de tamanu (Calophyllum inophyllum), 0,5 g trietanolamina si 5 g extract standardizat din Flori de fan si 91 g apa distilata. Ingredientele carbopol si pemulen se amesteca cu apa distilata si se prepara baza de hidrogel. Peste baza de hidrogel se adauga, prin picurare, la temperatura camerei, amestecul de Vitamina E, ulei din fructe de tamanu si plurol. In continuare, se aduga extractul standardizat din Flori de fan si trietanolamina. Rezulta 100 g compoziție sub forma de hidrogel ușor, stabil, de culoare alb-galbui, cu miros plăcut de plante.

Exemplu 2. Produs topic sub forma de crema utilizabil ca adjuvant sau tratament in afecțiuni dermatologice care asociaza un proces inflamator cu un proces infectios, si care, conform invenției este constituit din următoarele componente: carbopol, pemulen, plurol, Vitamina E, trietanolamina, ulei din fructe de tamanu (Calophyllum inophyllum), extract standardizat de Flori de fan (cu un continui de 51 specii vegetale). Procedeu de obținere: Se cântăresc 0,5 g carbopol, 0,5 g pemulen, 0,5 g plurol, 1,5 g Vitamina E, 5,5 g ulei din fructe de tamanu (Calophyllum inophyllum), 0,5 g trietanolamina si 5 g extract standardizat din Flori de fan si 86 g apa distilata. Ingredientele carbopol si pemulen se amesteca cu apa distilata si se prepara baza de hidrogel. Peste baza de hidrogel se adauga, prin picurare, la temperatura camerei, amestecul de Vitamina E, ulei din fructe de tamanu si plurol. In continuare, se aduga extractul standardizat din Flori de fan si trietanolamina. Rezulta 100 g compoziție sub forma de crema, stabila, de culoare alb-galbui, cu miros plăcut de plante.

Extractul standardizat din Flori de fan, se obține din amestecul de plante uscate si măcinate cunoscute sub denumirea *Ceai Flori de fan, produse si comercializate de unitățile de profil (ex., Hypericum Impex SRL). Punctual, peste planta uscata si macinata se adauga etanol 70% (v/v), 1:10 g/v, si se lașa la macerat timp de 10-12 zile, la întuneric, cu agitare ocazionala. Extractul hidroalcoolic io

R0138083 Α2

32rezultat se analizeaza dpdv a conținutului in polifenoli, prin metode calitative (ex., cromatografie in strat subțire, HPTLC) si cantitative adecvate (cf. Farmacopeea in vigoare), se concentrează la reziduu, iar reziduul se reia in etanol 40% (v/v) asfel incat sa rezulte un continui standardizat in polifenoli totali (ex., 2% GAE, g/g). Extractul standardizat se utilizează ca atare in preparea produsului topic.

Nota: Variabilitatea inerenta a extractelor vegetale si a metabolitilor secundari prezenti in acestea, in funcție de condițiile anuale de creștere, este compensata cantitativ prin utilizarea unui extract standardizat, iar din punct de vedere calitativ este un avantaj deoarece evita instalarea rezistentei.

Metodele de testare analitica si farmacologica utilizate

Testele analitice asupra produsului topic, in cele doua variante de formulare, si asupra extractului activ standardizat din Flori de fan au fost efectuate in conformitate cu prevederile Farmacopeei Romane, Ediția a X-a, FRX, cap.2.

Pentru testarea farmacologica s-a utilizat un model in vivo, punctual modelul de edem al labei de șobolan indus cu un agent flogistic (carrageenan), si s-a realizat in contextul utilizării brevetului pentru realizarea unui produs finit de tip dispozitiv medical. Modelul de edem al labei de șobolan indus cu un agent flogistic este un model uzual, unanim acceptat pentru demonstrarea efectului antiiflamator a unui produs medicamentos la om, marimea edemului/inflamatiei fiind evaluata prin metoda pletismometriei computerizate. Menționam faptul ca testele farmacologice s-au realizat in acord cu prevederile si reglementările FELASA (Federation of European Laboratory Animal Science Associations), preluate de ARSAL (Asociația Romană pentru Stiinta Animalelor de Laborator), aflate in vigoare. Pentru limitarea numărului de animale testate, testele s-au realizat doar asupra formulei topice de tip hidrogel.

Astfel, conform testelor analitice calitative si cantitative realizate, cele doua formule active prezintă următoarele caracteristici fizico-chimice si organoleptice:

Nr. crt.	Caracteristici	Rezultate si observatii per varianta de formulare
Formulare Hidrogel ușor	Formulare Crema
1.	Aspect	Produs omogen fara faze separate	Produs omogen fara faze separate
2.	Culoare	Alb - gălbuie	Alb - gălbuie
3.	Miros	Caracteristic plante, plăcut	Caracteristic plante, plăcut
4.	pH compoziție (la 25°C)	5,3-5,5	5,3-5,5
5.	Stabilitatea produsului testata la 35°C, minim 8h	Stabil	Stabil

R0138083 Α2

Extractul activ standardizat din Flori de fan in etanol 40% (v/v) prezintă următoarele caracteristici compoziționale fizico-chimice, cantitative si calitative:

Nr. crt.	Caracteristici fizico-chimice Cantitative	Extract din Flori de fan in etanol 40% (v/v)
Condiții de admisibilitate	Rezultate
1.	Densitate, d2020:	0,970 ± 10% (0,873 - 1,067)	0,98
2.	Dozare total poiifenoli, exprimati in acid galic, GAE (g /100 mL):	2,0 ±7,5% (1,85-2,15)	2,05
	Caracteristici fizico-chimice calitative	Se realizează cromatografie in strat subțire (HPTLC) pentru fiecare șarja de produs topic, necesare pentru a evalua si compara variabilitatea compoziționala anuala
1.	Se analizeaza: - Aspectul benzilor caracteristice in sistem de migrare si developare pentru poiifenoli vegetali, - 7?/-ul benzilor in comparație cu substanțele de referința > Rutin (Rf-~Q,35 - 0,44) > Acid ciorogenic (Λ/Μ),45 -0,52) > Acid cafeic (Λ/&0,95- 0,98)	Se dau mai jos 2 exemplu de cromatograme pentru materii prime, Ceai Flori de fan, achiziționat in doi ani consecutivi (anul 2018 si anul 2019)
	' (iiit iiii w w*		j (111 QO '-'W Ibi

Produsul topic pe baza de extract din Flori de fam hidrogel ușor, a prezentat armatoarele rezultate la testarea in vivo a efectului antiinflamator in model de edem de laba de șobolan indus cu carrageenan, in conmaratie cu un produs topic de referința pe baza de diclofenac gel:

Loturi test	Indici de infiamație (%) la	Variația volumului edemului/inflamatiei (%) ia finalul experimentului
3 ore	5 ore
Lot martor iritat netratat	29,26	18,56	37% - scădere de volum
Lot test iritat tratat cu un produs topic pe baza de diclofenac gel (substanța de referința)	17,33	27,23	57% - creștere de volum
Lot test iritat tratat cu baza de hidrogel - subiect al invenției	46,62	51,52	11 % - creștere de volum
Lot test iritat tratat cu produsul topic pe baza de extract din Flori de fan in formulare de tip hidrogel - subiect al invenției	58,77	44,85	24% - scădere volum

CONCLUZIE - Din analiza variației de volum (%) a edemului/mflamatiei loturilor test in comparație cu lotul martor iritat netratat se constata superioritatea neta a produsului topic pe baza de extract din Flori de fan, ceea ce susține efectul antiinflamator sinergie, extins al produsului topic care face subiectul invenției.

Claims (3)

1. R0138083 Α2

   REVENDICĂRI

   1. Compoziție pentru un produs topic, formulat ca hidrogel ușor sau crema, care poate fi utilizat ca adjuvant, ori ca tratament al afecțiunilor pielii care cumulează un proces inflamator cu un proces infectios, cum este cazul foliculitei si acneei, caracterizat prin aceea ca este constituit din 0,50% carbopol, 0,25...0,50% pemulen, 0,25...0,50% plurol, 0,5% trietanolamina, 1,5% vitamina E, 1,00....5,50% ulei din fructe de tamanu si 5,00% extract standardizat din Ceai Flori de fan, si apa distilata pana la 100% (procente de masa).
2. 2. Procedeul de obținere a unui produs topic sub forma de hidrogel ușor care poate fi utilizat ca adjuvant ori tratament al afecțiunilor pielii care se derulează cu inflamatie si infecție caracterizat prin aceea ca se realizează o baza de hidrogel din 0,5 g carbopol, 0,25 g pemulen si 91 g apa distilata in care se adauga, mai intai componenta uleioasa constând in amestecul de 1,5 g Vitamina E, 1 g ulei din fructe de tamanu (Calophyllum inophylluiri) si 0,25 g plurol, urmat de componenta hidrofila constând in 5 g extract activ standardizat in etanol 40% din Flori de fan care asigura un conținut de 100 mg GAE /100 g hidrogel, si se ajusteaza pH-ul cu trietanolamina. Rezulta 100 g compoziție sub forma de hidrogel ușor, stabil, de culoare alb-galbui, cu miros plăcut de plante.
3. 3. Procedeul de obținere a unui produs topic sub forma de crema care poate fi utilizat ca adjuvant ori tratament al afecțiunilor pielii care se derulează cu inflamatie si infecție caracterizat prin aceea ca se realizează o baza de crema din 0,5 g carbopol, 0,5 g pemulen si 86 g apa distilata in care se adauga, mai intai componenta uleioasa constând in amestecul de 1,5 g Vitamina E, 5,5 g ulei din fructe de tamanu (Calophyllum inophylluiri) si 0,50 g plurol, urmat de componenta hidrofila constând in 5 g extract activ standardizat in etanol 40% din Flori de fan care asigura un continui de 100 mg GAE / 100 g crema, si in final se ajusteaza pH-ul cu trietanolamina. Rezulta 100 g compoziție sub forma de crema, stabila, de culoare alb-galbui, cu miros plăcut de plante.