RS20050947A

RS20050947A - So fosforne kiseline i inhibitora dipeptidil peptidaze-iv

Info

Publication number: RS20050947A
Application number: YUP-2005/0947A
Authority: RS
Inventors: Karl Hansen; Robert Wenslow; Stephen Howard Cypes; Alex Minhua Chen; Russell Ferlita; Ivan Lee; Vicky Vydra
Original assignee: Merck & Co. Inc.,
Priority date: 2003-06-24
Filing date: 2004-06-18
Publication date: 2008-04-04
Also published as: DE602004008938D1; GEP20084489B; AR044705A1; JP4463768B2; EP1654263B2; AU2004253889A1; SI1654263T2; DOP2004000941A; EP1654263A1; NO20060362L; TWI347185B; DK1654263T3; CR8117A; NZ544026A; AR094185A2; CN100430397C; ES2291907T5; EP1654263B1; HK1095144A1; RS51873B

Abstract

Dihidrogenfosfatna so 4-okso-4-[3-(trifluorometil)-5,6-dihidro[1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-7(8H)-il]-1-(2,4,5-trifluorofenil)butan-2-amina je snažan inhibitor dipeptidil peptidaze-IV i korisna je za prevenciju i/ili lečenje ne-insulin zavisnog dijabetes melitusa, koji je označen i kao dijabetes tipa 2. Pronalazak se takođe odnosi na kristalni monohidrat dihidrogenfosfatne soli, kao i na postupak za njegovo pripremanje, farmaceutske kompozicije koje sadrže ovaj novi oblik i postupke za njegovu primenu u lečenju dijabetesa, gojaznosti i visokog krvnog pritiska.

Description

SO FOSFORNE KISELINE IINHIBITORA

DIPEPTIDIL PEPTIDAZE-IV

OBLAST PRONALASKA

Ovaj pronalazak se odnosi na posebnu so inhibitora dipeptidil peptidaze-IV. Pronalazak se naročito odnosi na dihidrogenfosfatnu so 4-okso-4-[3-(trifluorometil)-5,6-dihidro[l,2,4] triazolo[4,3-a] pirazin-7(5//)-il]-l-(2,4,5-trifluorofenil)butan-2-amina, koja je snažan inhibitor dipeptidil peptidaze-IV. Ova nova so i njeni kristalni hidrati su korisni za lečenje i prevenciju bolesti i stanja za koje je inhibitor dipeptidil peptidaze-IV naznačen, posebno dijabetesa tipa 2, gojaznosti i visokog krvnog pritiska. Pronalazak se dalje odnosi na farmaceutske kompozicije koje sadrže dihidrogenfosfatnu so i njene kristalne hidrate koji su korisni za lečenje dijabetesa tipa 2, gojaznosti i visokog krvnog pritiska, kao i na postupke za pripremanje dihidrogenfosfatne soli i njenih kristalnih hidrata i njihovih farmaceutskih kompozicija.

OSNOVA PRONALASKA

Inhibicija dipeptidil peptidaze-IV (DP-IV), enzima koji inaktivira insulinotropni peptid zavistan od glukoze (GIP) i glukagonu sličan peptid 1 (GLP-1), predstavlja novi pristup lečenju i prevenciji dijabetesa tipa 2, koji je poznat i kao ne-insulin zavistan dijabetes melitus (NIDDM). Terapeutski potencijal inhibitora DP-IV za lečenje dijabetesa tipa 2 je prikazan u: C.F. Deacon and JJ. Holst, "Dipeptidvl peptidase IV inhibition as an approach to the treatment and prevention of Type 2 diabetes: a historical perspective," Biochem. Biophvs. Res. Cornmun., 294: 1-4 (2000); K. Augustvns, et al., "Dipeptidvl peptidase IV inhibitors as new therapeutic agents for the treatment of Type 2 diabetes, " Expert. O<p>in. Ther. Patents, 13: 499-510 (2003); i D.J. Drucker, "Therapeutic potential of dipeptidvl peptidase IV inhibitors for the treatment of Type 2 diabetes, " Expert Opin. Investis. Drugs. 12: 87-100 (2003).

WO 03/004498 (objavljen 16.01.2003.), za Merck & Co., opisuje klasu beta-amino tetrahidrotriazolo[4,3-a]pirazina, koji su snažni inhibitori DP-IV i prema tome su korisni za lečenje dijabetesa tipa 2. U WO 03/004498 posebno je dat 4-okso-4-[3-(trifluorometil)-5,6-dihidro[l,2,4]triazolo[4,3-<3]pirazin-7(5//)-il]-l-(2,4,54rilfuorofenil)butan-2-Farmaceutski prihvatljive soli ovog jedinjenja su generički obuhvaćene unutar WO 03/004498.

Međutim, u prethodno navedenom dokumentu nije dat poseban opis novo otkrivene jednobazne dihidrogenfosfatne soli 4-okso-4-[3-(trilfuorometil)-5,6-dihidro[l,2,4]triazolo[4,3-o]pirazin-7(<S//)-il]-l-(2,4,5-trifluorofenil)butan-2-amina sa strukturnom formulom I koja je data u daljem tekstu.

REZIME PRONALASKA

Ovaj pronalazak se bavi novom dihidrogenfosfatnom soli inhibitora dipeptidil peptidaze-IV (DP-IV) 4-okso-4-[3-(trifluorometil)-5,6-dihidro[l ,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-7(5//)-il]-l-(2,4,5-trifluorofenil)butan-2-amina i njenim kristalnim hidratima, posebno kristalnim monohidratom. Dihidrogenfosfatna so i kristalni hidrati ovog pronalaska su korisni za pripremanje farmaceutskih kompozicija 4-okso-4-[3- (trifluorometil)-5,6-dihidro[l,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-7(5i^)-il]-l-(2,4,5-trifluorofenil)butan-2-amina, zbog njihove jednostavne obrade, rukovanja i doziranja. Ova jedinjenja naročito pokazuju poboljšanu fizičku i hemijsku stabilnost, kao što je stabilnost na stres, visoke temperature i vlažnost, kao i poboljšane fizičkohemijske osobine, kao što su rastvorljivost i brzina rastvaranja, što ih čini posebno pogodnim za proizvodnju različitih farmaceutskih oblika doze. Pronalazak se takođe bavi farmaceutskim kompozicijama koje sadrže novu so i hidrate, kao i postupcima za njihovu primenu kao inhibitora DP-IV, posebno za prevenciju ili lečenje dijabetesa tipa 2, gojaznosti i visokog krvnog pritiska.

KRATAK OPIS SLIKA

SL. 1 je karakterističan dijagram difrakcije rendgenskih zraka kristalnog monohidrata dihidrogenfosfatne soli strukturne formule II.

SL. 2 je spektar nuklearne magnetne rezonance (NMR) ugljenika-13 uz obrtanje pod čarobnim uglom (CPMAS) kristalnog monohidrata dihidrogenfosfatne soli strukturne formule

II.

SL. 3 je spektar nuklerane magnetne rezonance (NMR) fluora-19 uz obrtanje pod čarobnim uglom (MAS) kristalnog monohidrata dihidrogenfosfatne soli strukturne formule II.

SL. 4 je tipična kriva termogravimetrijske analize (TGA) kristalnog monohidrata dihidrogenfosfatne soli strukturne formule II.

SL. 5 je tipična kriva diferencijalne skenirajuće kalorimetrije (DSC) kristalnog monohidrata dihidrogenfosfatne soli strukturne formule II.

DETALJAN OPIS PRONALASKA

Ovaj pronalazak daje novu jednobaznu dihidrogenfosfatnu so 4-okso-4-[3-(trifiuorometil)-5,6-dihidro [ 1,2,4]triazolo [4,3 -a]pirazin-7(S//)-il] -1 -(2,4,5 - trifluorofenil)butan-2-amina sledeće strukturne formule I:

ili njen kristalni hidrat. Posebno, ovaj pronalazak daje kristalni monohidrat dihidrogenfosfatne soli formule I.

Dihidrogenfosfatna so ovog pronalaska ima centar asimetrije na stereogenom atomu ugljenika koji je označen sa<*>i prema tome može se javiti u obliku racemata, racemske smeše i pojedinačnih enantiomera, pri čemu su svi izomerni oblici obuhvaćeni ovim pronalaskom. Posebni enantiomeri, koji su u značajnoj meri oslobođeni drugih enantiomera, obuhvaćeni su obimom pronalaska, kao i smeše dva enantiomera.

Jedna varijanta ovog pronalaska daje dihidrogenfosfatnu so (2i?)-4-okso-4-[3-(trifluorometil)-5,6-dihidro [ 1,2,4] triazolo [4,3 -o]pirazin-7(&ft)-il] -1-(2,4,5-trifluorofenil)butan-2-amina strukturne formule II:

ili njen kristalni hidrat.

Druga varijanta ovog pronalaska daje dihidrogenfosfatnu so (25)-4-okso-4-[3-(trifluorometil)-5,6-dihidro [ 1,2,4]triazolo [4,3 -a ]pirazin-7(&ft)-il] -1 -(2,4,5 - trifluorofenil)butan-2-amina strukturne formule III:

ili njen kristalni hidrat.

Tačnije, dihidrogenfosfatna so ovog pronalaska sastoji se od jednog molarnog ekvivalenta mono-protonovanog 4-okso-4-[3-(trifluorometil)-5,6-dihidro[l,2,4]triazolo[4,3-aJpirazin-7(5/f)-il]-l-(2,4,5-trifluorofenil)butan-2-amin katjona i jednog molarnog ekvivalenta dihidrogenfosfatnog (bifosfatnog) anjona.

U sledećoj varijanti ovog pronalaska, dihidrogenfosfatna so strukturnih formula I-E je kristalni hidrat. U jednoj klasi ove varijante, kristalni hidrat je kristalni monohidrat.

Sledeća varijanta ovog pronalaska daje lekovitu supstancu (od dihidrogenfosfatne soli) sa strukturnim formulama I-E koja sadrži kristalni monohidrat u količini koja se može detektovati. "Lekovita supstanca" označava aktivni farmaceutski sastojak ("API"). Količina kristalnog monohidrata u lekovitoj supstanci može se kvantitativno odrediti primenom fizičkih postupaka kao što su rendgenska difrakcija praška, nuklearna magnetna rezonatna spektroskopija čvrste faze fluora-19 uz obrtanje pod čarobnim uglom (MAS), nuklearna magnetna rezonantna spektroskopija na čvrstoj fazi ugljenika-13 uz obrtanje pod čarobnim uglom (CPMAS), Fourier-Transform infracrvena spektroskopija čvrste faze i Raman spektroskopija. U klasi ove varijante, lekovita supstanca sadrži oko 5 mas.% do oko 100 mas.% kristalnog monohidrata. U drugoj klasi ove varijante, lekovita supstanca sadrži oko 10 mas.% do oko 100 mas.% kristalnog monohidrata. U trećoj klasi ove varijante, lekovita supstanca sadrži oko 25 mas.% do oko 100 mas.% kristalnog monohidrata. U četvrtoj klasi ove varijante, lekovita supstanca sadrži oko 50 mas.% do oko 100 mas.% kristalnog monohidrata. U petoj klasi ove varijante, lekovita supstanca sadrži oko 75 mas.% do oko 100 mas.% kristalnog monohidrata. U šestoj klasi ove varijante, sva lekovita supstanca od dihidrogenfosfatne soli je kristalni monohidrat ovog pronalaska, tj., lekovita supstanca od dihidrogenfosfatne soli je monohidrat u čistoj fazi.

Kristalna dihidrogenfosfatna so ovog pronalaska pokazuje farmaceutske prednosti u odnosu na slobodnu bazu i prethodno opisanu hidrohloridnu so (WO 03/004498) kod pripremanja farmaceutskog lekovitog proizvoda koji sadrži farmakološki aktivni sastojak. Posebno, povećana hemijska i fizička stabilnost kristalnog monohidrata dihidrogenfosfatne soli predstavlja korisne osobine prilikom pripremanja čvrstih farmaceutskih oblika doze koji sadrže farmakološki aktivni sastojak.

Dihidrogenfosfatna so ovog pronalaska, koja pokazuje snažne inhibitorne osobine prema DP-IV, posebno je korisna za prevenciju ili lečenje dijabetesa tipa 2, gojaznosti i visokog krvnog pritiska.

Sledeći aspekt ovog pronalaska daje postupak za prevenciju ili lečenje kliničkih stanja za koja je inhibitor DP-IV naznačen, pri čemu taj postupak obuhvata primenu na pacijenta, kod koga postoji potreba za ovakvom prevencijom ili lečenjem, profilaktički ili terapeutski efikasne količine dihidrogenfosfatne soli strukturne formule I ili njenog hidrata, a posebno njenog kristalnog monohidrata. Takva klinička stanja obuhvataju dijabetes, posebno dijabetes tipa 2, hiperglikemiju, insulinsku rezistenciju i gojaznost.

Ovaj pronalazak takođe daje primenu dihidrogenfosfatne soli strukturne formule I ili njenog hidrata, posebno kristalnog monohidrata, za proizvodnju leka za prevenciju ili lečenje kliničkih stanja za koja je naznačen inhibitor DP-IV.

Ovaj pronalazak takođe daje farmaceutske kompozicije koje sadrže dihidrogenfosfatnu so strukturne formule I ili njen hidrat, posebno kristalni monohidrat, zajedno sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih nosača ili inertnih punilaca. U jednoj varijanti farmaceutska kompozicija sadrži terapeutski efikasnu količinu aktivnog farmaceutskog sastojka u smeši sa farmaceutski prihvatljivim inertnim puniocima, pri čemu aktivni farmaceutski sastojak sadrži detektabilnu količinu kristalnog monohidrata ovog pronalaska. U drugoj varijanti farmaceutska kompozicija sadrži terapeutski efikasnu količinu aktivnog farmaceutskog sastojka u smeši sa farmaceutski prihvatljivim inertnim puniocima, pri čemu aktivni farmaceutski sastojak sadrži oko 5 mas.% do oko 100 mas.% kristalnog monohidrata ovog pronalaska. U klasi ove druge varijante, aktivni farmaceutski sastojak u takvim kompozicijama sadrži oko 10 mas.% do oko 100 mas.% kristalnog monohidrata. U drugoj klasi ove varijante, aktivni farmaceutski sastojak u takvim kompozicijama sadrži oko 25 mas.% do oko 100 mas.% kristalnog monohidrata. U trećoj klasi ove varijante, aktivni farmaceutski sastojak u takvim kompozicijama sadrži oko 50 mas.% do oko 100 mas.% kristalnog monohidrata. U četvrtoj klasi ove varijante, aktivni farmaceutski sastojak u takvim kompozicijama sadrži oko 75 mas.% do oko 100 mas.% kristalnog monohidrata. U petoj klasi ove varijante, sav aktivni farmaceutski sastojak je kristalni monohidrat dihidrigenfosfatne soli ovog pronalaska, tj., aktivni farmaceutski sastojak je monohidrat dihidrogenfosfatne soli u čistoj<f>azi.

Kompozicije prema pronalasku su pogodne u oblicima jedinice doze kao što su

tablete, pilule, kapsule, praško vi, granule, sterilni rastvori ili suspenzije, dozirani aerosol ili tečni sprejevi, kapi, ampule, uređaji za samo-injektiranje ili supozitorije. Kompozicije su namenjene za oralnu, parenteralnu, intranazalnu, sublingvalnu ili rektalnu primenu, ili za primenu inhalacijom ili uduvavanjem. Formulacija kompozicija prema pronalasku može se pogodno postići primenom postupaka koji su poznati iz tehnike, na primer, kao što je opisano u Remington' s Pharmaceutical Sciences, 17<th>ed., 1995.

Režim doziranja je izabran na osnovu različitih faktora uključujući tip, vrstu, starost, telesnu težinu, pol i medicinsko stanje pacijenta; težinu stanja koje će se lečiti; način primene; i bubrežnu i jetrenu funkciju pacijenta. Kvalifikovani lekar ili veterinar jednostavno može da odredi i prepiše efikasnu količinu leka koja je potrebna za prevenciju, ublažavanje ili zaustavljanje napredovanja stanja.

Oralne doze ovog pronalaska, kada se koriste za naznačena dejstva, biće u opsegu između oko 0.01 mg po kg telesne težine na dan (mg/kg/dan) do oko 100 mg/kg/dan, poželjno 0.01 do 10 mg/kg/dan, a najpoželjnije 0.1 do 5.0 mg/kg/dan. Za oralnu primenu, kompozicije su poželjno obezbeđene u obliku tableta koje sadrže 0.01, 0.05, 0.1, 0.5, 1.0, 2.5, 5.0, 10.0, 15.0, 25.0, 50.0, 100, 200 i 500 miligrama aktivnog sastojka za simptomatsko podešavanje doze prema pacijentu koji će se tretirati. Lek tipično sadrži od oko 0.01 mg do oko 500 mg aktivnog sastojka, poželjno, od oko 1 mg do oko 200 mg aktivnog sastojka. Intravenozno, najpoželjnije doze biće u opsegu od oko 0.1 do oko 10 mg/kg/minuti u toku infuzije sa konstantnom brzinom. Pogodno, kristalni oblici ovog pronalaska mogu se primenjivati u pojedinačnoj dnevnoj dozi, ili ukupna dnevna doza se može primenjivati u podeljenim dozama od dva, tri ili četiri puta dnevno. Osim toga, kristalni oblici ovog pronalaska mogu se primenjivati u intranazalnom obliku lokalnom primenom pogodnih intranazalnih nosača, ili transdermalno, primenom onih oblika transdermalnih kožnih flastera koji su dobro poznati kvalifikovanim stručnjacima. Za primenu u obliku transdermalnog sistema za primenu, primena doze će, naravno, pre biti neprekidna nego isprekidana u toku režima doziranja.

U postupcima ovog pronalaska, dihidrogenfosfatna so i njeni kristalni hidrati koji su ovde detaljno opisani mogu da formiraju aktivni farmaceutski sastojak, a obično se primenjuju u smeši sa pogodnim farmaceutskim razblaživačima, inertnim puniocima ili nosačima (zajednički označeni kao materijali „nosači") koji su prikladno izabrani s obzirom na nameravani oblik primene, to jest, oralne tablete, kapsule, eliksiri, sirupi i slično, a u skladu sa uobičajenom farmaceutskom praksom.

Na primer, za oralnu primenu u obliku tablete ili kapsule, aktivni farmaceutski sastojak može se kombinovati sa oralnim, ne-toksičnim, farmaceutski prihvatljivim, inertnim nosačem kao što su laktoza, škrob, saharoza, glukoza, metilceluloza, magnezijumstearat, dikalcijumfosfat, kalcijumsulfat, manitiol, sorbitol i slično; za oralnu primenu u tečnom obliku, aktivni farmaceutski sastojak može da se kombinuje sa bilo kojim oralnim, ne-toksičnim, farmaceutski prihvatljivim inertnim nosačem kao što su etanol, glicerol, voda i slično. Osim toga, kada je poželjno ili neophodno, pogodna vezujuća sredstva, lubrikansi, dezintegraciona sredstva i sredstva za bojenje takođe se mogu dodati u smešu.

Pogodna vezujuća sredstva obuhvataju škrob, želatin, prirodne šećere kao što su glukoza ili beta-laktoza, kukuruzne zasladivače, prirodne i sintetičke smole kao što su akacija, tragantova guma ili natrijumalginat, karboksimetilceluloza, polietilenglikol, voskovi i slično. Lubrikansi korišćeni u ovim oblicima doze obuhvataju natrij umoleat, natrij umstearat, magnezij umstearat, natrijumbenzoat, natrij umacetat, natrijumhlorid i slično.

Dezintegraciona sredstva obuhvataju, bez ograničenja, škrob, metilcelulozu, agar, bentonit, ksantan gumu i slično.

Nađeno je da su dihidrogenfosfatna so strukturne formule I i kristalni monohidrat visoko rastvorljivi u vodi, što ih čini posebno pogodnim za pripremanje formulacija, posebno intranazalnih i intravenoznih formulacija, koje zahtevaju relativno koncentrovane vodene rastvore aktivnog sastojka. Nađeno je da je rastvorljivost kristalnog monohidrata dihidrogenfosfatne soli formule I u vodi oko 72 mg/mL.

Prema sledećem aspektu, ovaj pronalazak daje postupak za pripremanje dihidrogenfosfatne soli formule I, pri čemu taj postupak obuhvata reakciju 4-okso-4-[3-(trifluorometil)-5,6-dihidro[l,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-7(5//)-il]-l-(2,4,5-trifluorofenil)butan-2-amina sledeće strukturne formule IV:

sa približno jednim ekvivalentom fosforne kiseline u pogodnom C1-C5alkanolu, kao što su metanol, etanol, izopropilalkohol (IPA) i izoamilalkohol (IAA) ili vodeni rastvor CpCs alkanola. Reakcija je izvedena na temperaturnom opsegu od oko 25°C do oko 80°C. Rastvor fosforne kiseline se može dodati rastvoru amina, ili se dodavanje može izvesti u obrnutom smeru. Kristalni monohidrat dihidrogenfosfatne soli dobijen je kristalizacijom iz vodenog rastvora C1-C5alkanola i dihidrogenfosfatne soli kao što je opisano u daljem tekstu.

OPŠTI POSTUPCI ZA KRISTALIZACIJU MONOHIDRATA DIHIDROGENFOSFATNE SOLI STRUKTURNE FORMULE I:

(a) U sistemu etanola/vode na 25°C:

(1) kristalizacija iz smeše jedinjenja I u etanolu i vodi, tako daje koncentracija vode iznad 31 masenih procenata,

(2) izdvajanje nastale čvrste faze, i

(3) uklanjanje rastvarača iz nje.

(b) U sistemu izoamilalkohola (IAA) /vode na 25°C: (1) kristalizacija iz smeše jedinjenja I u IAA i vodi, tako da je koncentracija vode iznad 2.9 masenih procenata;

(2) izdvajanje nastale čvrste faze; i

(3) uklanjanje rastvarača iz nje.

(c) U sistemu IAA/voda na 40°C:

(1) kristalizacija iz smeše jedinjenja I u IAA i vodi, tako da je koncentracija vode iznad 3.6 masenih procenata;

(2) izdvajanje nastale čvrste faze; i

(3) uklanjanje rastvarača iz nje.

(d) U sistemu IAA/vode na 60°C:

(1) kristalizacija iz smeše jedinjenja I u IAA i vodi, tako da je koncentracija vode iznad 4.5 masenih procenata;

(2) izdvajanje nastale čvrste faze; i

(3) uklanjanje rastvarača iz nje.

(e) U sistemu izopropilalkohol (IPA) /voda na 25°C: (1) kristalizacija iz smeše jedinjenja I u IPA i vodi, tako daje koncentracija vode iznad 7.0 masenih procenata;

(2) izdvajanje nastale čvrste faze; i

(3) uklanjanje rastvarača iz nje.

(f) U sistemu IP A/voda na 40°C:

(1) kristalizacija iz smeše jedinjenja I u IPA i vodi, tako daje koncentracija vode iznad 8.1 masenih procenata;

(2) izdvajanje nastale čvrste faze; i

(3) uklanjanje rastvarača iz nje.

(g) U sistemu IP A/voda na 75 °C:

(1) kristalizacija iz smeše jedinjenja I u IPA i vodi, tako daje koncentracija vode iznad oko 20 masenih procenata;

(2) izdvajanje nastale čvrste faze; i

(3) uklanjanje rastvarača iz nje.

Početno jedinjenje strukturne formule IV može se pripremiti primenom postupaka koji su detaljno prikazani na Šemama 1-3 i u Primeru 1 u daljem tekstu.

U sledećem aspektu, ovaj pronalazak daje postupak za lečenje i/ili prevenciju kliničkih stanja za koja je naznačen inhibitor DP-IV, pri čemu taj postupak obuhvata primenu na pacijenta, kod koga postoji potreba za takvom prevencijom ili lečenjem, profilaktički ili terapeutski efikasne količine soli Formule I kao što je određeno u prethodnom tekstu ili njenog kristalnog hidrata.

Sledeći neograničavajući Primeri namenjeni su za ilustraciju ovog pronalaska i ne bi ih trebalo tumačiti kao ograničavajuće u odnosu na obim i smisao ovog pronalaska.

Ovde opisana jedinjenja mogu biti u obliku tautomera kao što su keto-enol tautomeri. Pojedinačni tautomeri kao i njihove smeše su obuhvaćeni jedinjenjima strukturne formule I.

Termin "% enantiomernog viška" (skraćeno "ee") označavaće % glavnog enantiomera manje % manjeg enantiomera. Prema tome, 70% enantiomernog viška odgovara formiranju 85% jednog enantiomera i 15% drugog. Termin "enantiomerni višak" je sinonim za termin "optička čistoća".

PRIMER

( 2R V4- okso- 4- 13 -( trifluorometin- 5, 6- dihidro r 1, 2, 41triazolo \ 43 - flbirazin- 7(& flVill - 1 - f 2. 4. 5-trifluorofenil) butan- 2- amin dihidrogenfosfat monohidrat

Priprema 3-( trifluorometil)- 5, 6, 7, 8- tetrahidrori, 2, 41triazolo[ 4, 3- lflpirazin hidrohlorida ( 1- 4)

Korak A: Priprema bishidrazida ( 1- 1)

Hidrazin (20.1 g, 35 mas.% u vodi, 0.22 mol) pomešan je sa 310 mL acetonitrila. Dodavano je 31.5 g etiltrifluoroacetata (0.22 mol) u toku 60 min. Unutrašnja temperatura je uvećana od 14°C do 25°C. Dobijeni rastvor je ostavljen da odstoji na 22-25°C 60 min. Rastvor je hlađen do 7°C. Istovremeno je dodavano 17.9 g 50 mas.% vodenog rastvora NaOH (0.22 mol) i 25.3 g hloracetilhlorida (0.22 mol) u toku 130 min na temperaturi ispod 16°C. Kada je reakcija završena, smeša je vakuumski destilovana radi uklanjanja vode i etanola na 27-30°C i pod vakuumom od 26~27 Hg. U toku destilacije, lagano je dodavano 720 mL acetonitrila radi održavanja konstantne zapremine (približno 500 mL). Suspenzija čvrstih čestica u tečnosti je filtrirana da bi se uklonio natrijumhlorid. Ostatak sa filtra je ispiran sa oko 100 mL acetonitrila. Posle uklanjanja rastvarača dobijen je bis-hidrazid KL (43.2 g, 96.5% prinos, 94.4 površinskih% čistoće pomoću HPLC analize).

'H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): 5 4.2 (s, 2H), 10.7 (s, IH) i 11.6 (s, IH) ppm.

<13>C-NMR (100 MHz, DMSO-d6): 5 41.0, 116.1 (q, J = 362 Hz), 155.8 (q, J = 50 Hz) i 165.4 ppm.

Korak B: Priprema 5-( trifluorometil)- 2-( hlormetil)- L3, 4- oksadiazola ( 1- 2)

BishidrazidIAiz Koraka A (43.2 g, 0.21 mol) u ACN (82 mL) hlađen je do 5°C. Dodat je fosforoksihlorid (32.2 g, 0.21 mol), uz održavanje temperature ispod 10°C. Smeša je zagrevana do 80°C i ostavljena da odstoji na ovoj temperaturi 24 h sve dok HPLC nije pokazao manje od 2 površinskih % KL U posebnom sudu, 260 mL IPAc i 250 mL vode je mešano i hlađeno do 0°C. Reakciona suspenzija je dodavana u smešu do gašenja reakcije, uz istovremeno održavanje unutrašnje temperature ispod 10°C. Posle dodavanja, smeša je snažno mešana 30 min, temperatura je povećana do sobne temperature i vodeni sloj je uklonjen. Organski sloj je zatim ispran sa 215 mL vode, 215 mL 5 mas.% vodenog rastvora natrijumbikarbonata i konačno sa 215 mL 20 mas.% vodenog fiziološkog rastvora. Prinos prema HPLC analizi posle obrade bio je 86-92%. Isparljive supstance su uklonjene destilacijom na 75-80 mm Hg i na 55°C da bi se dobilo ulje koje se može upotrebiti direktno u Koraku C bez dodatnog prečišćavanja. Proizvod se može prečistiti na drugi način destilacijom da bi se dobilo K2 u prinosu od 70-80%.

'H-NMR (400 MHz, CDC13): 5 4.8 (s, 2H) ppm.

<13>C-NMR (100 MHz, CDC13): 5 32.1, 115.8 (q, J = 337 Hz), 156.2 (q, J = 50 Hz) i 164.4 ppm.

Korak C: Priprema N-[( 2Z)- piperazin- 2- ilidenltrifluoroacetohidrazida ( 1- 3)

U rastvor etilendiamina (33.1 g, 0.55 mol) u metanolu (150 mL) koji je hlađen na - 20°C dodat je destilovan oksadiazol K2 iz Koraka B (29.8 g, 0.16 mol), uz održavanje unutrašnje temperature na -20°C. Pošto je dodavanje završeno, dobijena suspenzija je ostavljena da odstoji na -20°C 1 h. Zatim je dodat etanol (225 mL) i suspenzija je lagano zagrevana do -5°C. Posle 60 min na -5°C, suspenzija je filtrirana i isprana etanolom (60 mL) na -5°C. Dobijen je amidin K3 kao bela čvrsta supstanca u prinosu od 72% (24.4 g, 99.5 površinskih mas.% čistoće pomoću HPLC).

'H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8 2.9 (t, 2H), 3.2 (t, 2H), 3.6 (s, 2H) i 8.3 (b, IH) ppm.

<I3>C-NMR (100 MHz, DMSO-d6): 8 40.8, 42.0, 43.3, 119.3 (q, J = 350 Hz), 154.2 i 156.2 (q, J = 38 Hz) ppm.

Korak D: Priprema 3-( trifluorometil)- 5, 6, 7, 8- tetrahidrorL2, 41triazolo[ 4, 3- a] pirazin

hidrohlorida ( 1- 4)

Suspenzija amidina 1-3 (27.3 g, 0.13 mol) u 110 mL metanola zagrevana je do 55°C. 37% hlorovodonična kiselina (11.2 mL, 0.14 mol) dodavana je u toku 15 min na istoj temperaturi. U toku dodavanja, sva čvrsta supstanca je rastvorena čime se dobija bistar rastvor. Reakcija je ostavljena da odstoji 30 min. Rastvor je ohlađen do 20°C i ostavljen da odstoji na ovoj temperaturi sve dok se nije formirao začetni kristal (10 min do 1 h). Dodato je 300 mL MTBE na 20°C u trajanju od 1 h. Dobijena suspenzija je hlađena do 2°C, ostavljena da odstoji 30 min i filtrirana. Čvrsta supstanca je filtrirana sa 50 mL etanola:MTBE (1:3) i sušena pod vakuumom na 45°C. Prinos triazola M bio je 26.7 g (99.5 površinskih mas.% čistoće pomoću HPLC).

'H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): 5 3.6 (t, 2H), 4.4 (t, 2H), 4.6 (s, 2H) i 10.6 (b, 2H) ppm;<13>C-NMR (100 MHz, DMSO-d6): 8 39.4, 39.6, 41.0, 118.6 (q, J = 325 Hz), 142.9 (q, J = 50 Hz) i 148.8 ppm.

Korak A: Priprema 4- okso- 4-[ 3-( trilfuorometil)- 5, 6- dihidro[ 1, 2, 41triazolor4, 3 - alpirazin-7 ( 8H )- iY \- l - f 2 A5- trilfuorofeninbutan- 2- ona( 2- 3)

2,4,5-Trifiuorofenilsirćetna kiselina ( 2- 1) (150 g, 0.789 mol), Meldrum-ova kiselina (125 g, 0.868 mol) i 4-(dimetilamino)piridin (DMAP) (7.7 g, 0063 mol) sipani su u posudu zapremine 5 L sa tri grlića. Dodat je N,N-dimetilacetamid (DMAc) (525 mL) u jednom delu

na sobnoj temperaturi da bi se čvrsta supstanca rastvorila. Dodat je N,N-diizopropiletilamin (282 mL, 1.62 mol) u jednom delu na sobnoj temperaturi, uz održavanje temperature ispod 40°C. Pivaloilhlorid (107 mL, 0.868 mol) je ukapavan u toku 1 do 2 h, uz istovremeno održavanje temperature između 0 i 5°C. Reakciona smeša je ostavljena da odstoji na 5°C 1 h. Dodat je triazolhidrohlorid L4 (180 g, 0.789 mol) u jednom delu na 40-50°C. Reakcioni rastvor je ostavljen da odstoji na 70°C nekoliko časova. Zatim je ukapavan 5% vodeni rastvor natrijumhidrogenkarbonata (625 mL) na 20-45°C. U smešu je dodata klica kristala i ona je ostavljena da odstoji na 20-30°C 1-2 časa. Zatim je ukapavano još 525 mL 5% vodenog rastvora natrij umhidrogenkarbonata u trajanju od 2-3 časa. Posle držanja nekoliko časova na sobnoj temperaturi, suspenzija je hlađena do 0-5°C i ostavljena da odstoji 1 h pre filtriranja čvrste supstance. Vlažni ostatak sa filtra je premešten i ispran sa 20% vodenim rastvorom DMAc (300 mL), a nakon toga još dva puta sa 20% vodenim rastvorom DMAc (400 mL) i konačno vodom (400 mL). Ostatak sa filtra je sušen usisavanjem na sobnoj temperaturi. Izolovani prinos krajnjeg proizvoda 2^3 bio je 89%.

Korak B: Priprema ( 2Z)- 4- okso- 4- r3-( trifluorometil)- 5. 6- dihidrorL2, 41triazolor4. 3-a] pirazin- 7(^//)- ill- l-( 2, 4, 5- trifluorofenil) but- 2- en- 2- amina ( 2- 4)

Posuda zapremine 5 L sa okruglim dnom napunjena je metanolom (100 mL), ketoamidom 2^3 (200 g) i amonijumacetatom (110.4 g). Zatim su dodati metanol (180 mL) i 28% vodeni rastvor amonijumhidroksida (58.6 mL), uz održavanje temperature ispod 30°C u toku dodavanja. U reakcionu smešu je dodata nova količina metanola (100 mL). Smeša je zagrevana na temperaturi refluksa i ostavljena da odstoji 2 h. Reakcija je hlađena do sobne temperature i zatim do oko 5°C u ledenom kupatilu. Posle 30 min, čvrsta supstanca je filtrirana i sušena da bi se dobilo 24 u obliku čvrste supstance (180 g); m. p. 271.2°C.

Korak C: Priprema ( 2i?)- 4- okso- 4- r3-( trifluorometil)- 5. 6- dihidro\ 1, 2, 41triazolor4. 3-a] pirazm- 7( iS//)- il]- l-( 2, 4, 5- trifluorofcml) butan- 2- amina ( 2- 5)

Posuda zapremine 500 ml napunjena je hloro(l,5-ciklooktadien)rodijum(I) dimerom {[Rh(cod)Cl]2} (292 mg, 1.18 mmol) i( R, S)/-butil Josiphos (708 mg, 1.3 mmol) pod atmosferom azota. Zatim je dodat degazirani MeOH (200 mL) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 h. Hidrogenizator zapremine 4 L napunjen je enamin amidom 2j4 (118 g, 0.29 mol) zajedno sa MeOH (1 L). Suspenzija je degazirana. Rastvor katalizator je zatim prebačen u hidrogenizator pod azotom. Posle degaziranja tri puta, enamin amid je hidrogenizovan pod 200 psi gasovitog vodonika na 50°C 13 h. Prinos je određen pomoću HPLC i iznosio je 93%, a optička čistoća je bila 94% enantiomernog viška.

Optička čistoća je dodatno povećana na sledeći način. Metanolski rastvor iz reakcije hidrogenizacije (18 g u 180 mL MeOH) je koncentrovan i prebačen u metil r-butil etar (MTBE) (45 mL). U ovaj rastvor dodat je vodeni rastvor H3P04(0.5 M, 95 mL). Posle razdvajanja slojeva, u vodeni sloj je dodat 3N NaOH (35 mL), a zatim je vodeni sloj ekstrahovan sa MTBE (180 mL + 100 mL). MTBE rastvor je koncentrovan i rastvarač je prebačen u vreli toluen (180 mL, oko 75°C). Vreli rastvor toluena je zatim ostavljen da se lagano hladi do 0°C, (5-10 h). Kristali su izolovani filtracijom (13 g, prinos 72%, 98-99% enantiomerni višak); m. p. 114.1-115.7°C.

'H NMR (300 MHz, CD3CN): 8 7.26 (m), 7.08 (m), 4.90 (s), 4.89 (s), 4.14 (m), 3.95 (m), 3.40 (m), 2.68 (m), 2.49 (m), 1.40 (bs).

Jedinjenje 2^5 postoji u obliku rotamera amidne veze. Osim ukoliko nije naznačeno drugačije, glavni i manji rotameri su grupisani zajedno s obzirom da signali ugljenika-13 nisu dobro razvijeni:<13>C NMR (CD3CN): 8 171.8, 157.4 (ddd,JCF=242.4, 9.2, 2.5 Hz), 152.2 (glavni), 151.8 (manji), 149.3 (ddd;JCF= 246.7, 14.2, 12.9 Hz), 147.4 (ddd,JCF= 241.2, 12.3, 3.7 Hz), 144.2 (q,Jcf=38.8 Hz), 124.6 (ddd,JCF=18.5, 5.9, 4.0 Hz), 120.4 (dd,JCF=19.1, 6.2 Hz), 119.8 (q,JCF= 268.9 Hz), 106.2 (dd,JCF= 29.5, 20.9 Hz), 50.1, 44.8, 44.3 (manji), 43.2 (manji), 42.4, 41.6 (manji), 41.4, 39.6, 38.5 (manji), 36.9.

Kristalna slobodna baza takođe se može izolovati na sledeći način:

(a) U reakcionu smešu po završetku koraka hidrogenizacije dodato je 25 mas.% Ecosorb C-941. Smeša je mešana pod azotom jedan čas i zatim je filtrirana. Ostatak sa filtra je ispran sa 2 L/kg metanola. Izdvojeno je oko 95% slobodne baze i optička čistoća je bila oko 95% enantiomernog viška. (b) Rastvor slobodne baze u metanom je koncentrovan do zapremine od 3.5-4.0 L/kg (na osnovu količine dodate slobodne baze) i zatim je prebačen u izopropanol (IPA) do krajnje zapremine od 3.0 L/kg IPA. (c) Suspenzija je zagrevana do 40°C i ostavljena da odstoji 1 h na 40°C, a zatim je hlađena do 25°C u trajanju od 2 h. (d) Dodavanje heptan (7 L/kg) u trajanju od 7 h i suspenzija je mešana 12 h na 22-25°C. Koncentracija supernatanta pre filtriranja je 10-12 mg/g. (e) Suspenzija je filtrirana i čvrsta supstanca je isprana sa 30% IPA/heptanom (2 L/kg).

(f) Čvrsta supstanca je sušena u vakuumskom termostatu na 40°C.

(g) Optička čistoća slobodne baze je oko 99% enantiomernog viška.

Za određivanje procenta konverzije u proizvod korišćeni su sledeći uslovi tečne hromatografije visokog učinka (HPLC):

Kolona: Waters Symmetry Cl8, 250 mm x 4.6 mm

Eluent: Rastvarač A: 0.1 zapr.% HC104/H20

Rastvarač B: acetonitril

Gradijent: 0 min 75% A : 25% B

10 min 25% A : 75% B

12.5 min 25% A : 75% B

15 min 75% A: 25% B

Stopa protoka: 1 mL/min

Zapremina injekcije: 10 uL

UV detekcija: 210 nm

Temp. kolone: 40°C

Vremena zadržavanja: jedinjenje 2j4: 9.1 min

jedinjeje 2^ 5: 5.4 min

tBuJosiphos: 8.7 min

Za određivanje optičke čistoće korišćeni su sledeći uslovi tečne hromatografije visokog učinka (HPLC):

Kolona: Chirapak, AD-H, 250 mm x 4.6 mm

Eluent: Rastvarač A: 0.2 zapr.% dietilamin u heptanu

Rastvarač B: 0.1 zapr.% dietilamin u etanolu

Izokratsko vreme obrade: 18 min

Stopa protoka: 0.7 mL/min

Zapr. injekcije: 7 uL

UV detekcija: 268 nm

Temp. kolone: 35°C

Vremena zadržavanja: (i?)-amin 2-5: 13.8 min

(5)-amin 2^5: 11.2 min f2j?)- 4- okso- 4- r3-( trifluorometiiy^

trifluorofenil) butan- 2- amin dihidrogenfosfat monohidrat

Posuda zapremine 250 mL sa okruglim dnom koja je povezana sa nadzemnom mešalicom, omotačem za zagrevanje i termoelementom, napunjena je sa 31.5 mL izopropanola (IPA), 13.5 mL vode, 15.0 g (36.9 mmol) (2J?)-4-okso-4-[3-(trifluorometil)-5,6-dihidro[l,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-7(5//)-il]-l-(2,4,54rifluorofenil)butan-2-amina slobodne baze i 4.25 g (36.9 mmol) 85% vodenog rastvora fosforne kiseline. Smeša je zagrevana do 75°C. Gusti beli talog je formiran na nižim temperaturama, ali on se rastvorio kada je temperatura dostigla 75°C. Rastvor je hlađen do 68°C i zatim održavan na toj temperaturi 2 h. Za to vreme formirana je suspenzija sa čvrstim česticama [u rastvor se može uneti klica kristala od 0.5 do 5 mas.% monohidrata sa malom veličinom čestica (mlevene u Alpine mlinu)]. Suspenzija je zatim hlađena brzinom od 4°C/h do 21°C i zatim održavana na toj temperaturi preko noći. U suspenziju je zatim dodato 105 mL IPA. Posle 1 h suspenzija je filtrirana i isprana sa 45 mL IPA (čvrsta supstanca se takođe može isprati rastvorom vode/IPA da bi se izbeglo prevođenje u druge kristalne oblike). Čvrsta supstanca je sušena na friti sa otvorom za vazduh. Izdvojeno je 18.6 g čvrste supstance. Nađeno je da čvrsta supstanca ima više od 99.8% čistoće i to preko HPLC površinskih procenata (HPLC uslovi isti kao oni navedeni u prethodnom tekstu). Analiza raspodele veličine čestica izolovane čvrste supstance pokazala je srednju PSD od 80 mikrona sa 95% manjih od 180 mikrona. Pokazano je daje kristalni oblik čvrste supstance monohidrat i to pomoću rendgenske difrakcije praška i temogravimetrijske analize.

Ispitivanja rendgenske difrakcije praška se široko primenjuju za opisivanje molekularnih struktura, kristalnosti i polimorfizma. Dijagram rendgenske difrakcije praška kristalnog dihidrogenfosfat monohidrata je dobijen na Philips Analvtical X'Pert PRO X-ray Diffraction System sa PW3040/60 konzolom. Kao izvor upotrebljena je PW3373/00 keramička Cu LEF cev za X-zrake sa K-Alpha zračenjem.

SL. 1 prikazuje dijagram difrakcije rendgenskih zraka za kristalni monohidratni oblik dihidrogenfosfatne soli strukturne formule II. Monohidrat je pokazao karakteristične difrakcione maksimume koji odgovaraju d-rastojanjima od 7.42, 5.48 i 3.96 angstrema. Za monohidrat dalje su karakteristična d-rastojanja od 6.30, 4.75 i 4.48 angstrema. Za monohidrat su dalje karakteristična d-rastojanja od 5.85, 5.21 i 3.52 angstrema.

Pored dijagrama rendgenske difrakcije praška koji su opisani u prethodnom tekstu, kristalni monohidratni oblik dihidrogenfosfatne soli strukturne formule II je dalje opisan njegovim<13>C i<19>F spektrom nuklearne magnetne rezonance (NMR) u čvrstoj fazi. NMR spektar ugljenika-13 u čvrstoj fazi je dobijen na Bruker DSX 400WB NMR sistemu korišćenjem Bruker 4 mm dvostruko rezonantne CPMAS probe. Za NMR spektar ugljenika-13 korišćeno je obrtanje protona/ugljenika-13 pod čarobnim uglom sa različitim opsegom unakrsne polarizacije. Uzorak je obrtan na 15.0 kHz, a ukupno 2048 skeniranja je sakupljeno sa zakašnjenjem sledećeg ciklusa od 20 sekundi. Proširenje linije od 40 Hz je primenjeno na spektar pre izvođenja FT. Hemijska pomeranja su zabeležena na TMS skali upotrebom karbonil ugljenika glicina (176.03 p.p.m.) kao sekundarne kontrole.

NMR spektar fluora-19 u čvrstoj fazi dobijen je na Bruker DSX 400WB NMR sistemu korišćenjem Bruker 4mm CRAMPS probe. Za NMR spektar korišćen je jednostavan pulsno-zbirni pulsni program. Uzorci su obrtani na 15.0 kHz, a ukupno 16 skeniranja je sakupljeno sa zadržavanjem narednog ciklusa od 30 sekundi. Korišćen je zatvarač od vespela za ublažavanje podloge od fluora. Proširenje linije od 100 Hz je primenjeno za spektar pre izvođenja FT. Hemijska pomeranja su zabeležena korišćenjem poli(tetrafluoroetilena) (teflona) kao spoljašnje sekundarne kontrole kojoj se pripisuje hemijsko pomeranje od -122 ppm.

SL. 2 prikazuje CPMAS NMR spektar uglejnika-13 u čvrstoj fazi za kristalni monohidratni oblik dihidrogenfosfatne soli strukturne formule II. Monohidratni oblik je pokazao karakteristične signale sa vrednostima hemijskog pomeranja od 169.1, 120.8 i 46.5 p.p.m. Dodatne osobine monohidratnog oblika bili su signali sa vrednostima hemijskog pomeranja od 159.0, 150.9 i 40.7 ppm.

SL. 3 prikazuje MAS NMR spektar fluora-19 u čvrstom stanju za kristalni monohidratni oblik dihidrogenfosfatne soli strukturne formule II. Monohidratni oblik je pokazao karakteristične signale sa vrednostima hemijskog pomeranja od -64.5, -114.7, -136.3 i -146.2 p.p.m.

Dodatne osobine monohidratnog oblika bili su signali sa vrednostima hemijskog pomeranja od -96.5,- 104.4, -106.3 i -154.5 ppm.

SL. 4 prikazuje karakterističnu krivu termogravimetrijske analize (TGA) za kristalni monohidratni oblik dihidrogenfosfatne soli strukturne formule II. Korišćen je Perkin Elmer model TGA 7 ili ekvivalentni instrument. Eksperimenti su izvedeni pod protokom azota i korišćenjem brzine zagrevanja od 10°C/min do maksimalne temperature od približno 250°C. Posle automatskog tariranja vage, 5 do 20 mg uzorka je dodato na tas od platine, peć je uzdignuta i započet je program zagrevanja. Rezultate za težinu/temperaturu automatski je sakupljao instrument. Analiza rezultata izvedena je izborom Delta Y funkcije u okviru softvera instrumenta i izborom temperatura između kojih će se računati gubitak težine.

Gubici težine su beleženi sve do početka razlaganja/isparavanja. TGA je pokazala gubitak težine od oko 3.3647 %, od temperature okoline do oko 250°C.

SL. 5 prikazuje karakterističnu DSC krivu za kristalni monohidratni oblik dihidrogenfosfatne soli strukturne formule II. Korišćeni su TA Instrumenti DSC 2910 ili ekvivalentni instrumenti. Između 2 i 6 mg uzorka je odmereno u otvoreni tas. Ovaj tas je zatim uvijen i postavljen u položaj uzorka u kalorimetrijskoj ćeliji. Prazan tas je postavljen u kontrolni položaj. Kalorimetrijska ćelija je zatvorena i protok azota je propušten kroz ćeliju. Program zagrevanja je namešten tako da zagreva uzorak sa brzinom zagrevanja od 10°C/min do temperature od približno 250°C. Program zagrevanja je započet. Kada je program završen, rezultati su analizirani korišćenjem programa za DSC analizu koji se nalazi u sklopu sistemskog softvera. Endoterma topljenja se nalazi između tačaka polazne temperature koje su iznad i ispod temperaturnog opsega u kome je endoterma zabeležena. Zabeleženi rezultati su početna temperatura, maksimalna temperatura i entalpija.

Kristalni monohidrat dihidrogenfosfatne soli ovog pronalaska ima čistoću faze najmanje oko 5% oblika sa prethodno navedenim fizičkim osobinama rendgenske difrakcije praška, MAS NMR fluora-19, CPMAS NMR ugljenika-13 i DSC. U jednoj varijanti čistoća faze je najmanje oko 10% oblika sa prethodno navedenim fizičkim osobinama u čvrstom stanju. U drugoj varijanti čistoća faze je najmanje oko 25% oblika sa prethodno navedenim fizičkim osobinama u čvrstom stanju. U trećoj varijanti čistoća faze je najmanje oko 50% oblika sa prethodno navedenim fizičkim osobinama u čvrstom stanju. U četvrtoj varijanti čistoća faze je najmanje oko 75% oblika sa prethodno navedenim fizičkim osobinama u čvrstom stanju. U petoj varijanti čistoća faze je najmanje oko 90% oblika sa prethodno navedenim fizičkim osobinama u čvrstom stanju. U šestoj varijanti kristalni monohidrat dihigrogenfosfatne soli je čisti oblik faze sa prethodno navedenim fizičkim osobinama u čvrstom stanju. Termin "čistoća faze" označava čistoću čvrstog stanja monohidrata dihidrogenfosfatne soli u odnosu na određeni kristalni ili amorfni oblik soli kako je određeno pomoću fizičkih postupaka na čvrstoj fazi koji su opisani u ovoj prijavi.

Nađeno je da je kristalni monohidrat dihidrogenfosfatne soli stabilan pod uslovima okoline. Nađeno je da se on prevodi u dehidriram monohidrat ako se zagreva iznad 40°C pod protokom veoma suvog azota. Dehidriram monohidrat se prevodi nazad u monohidrat pod uslovima okoline.

PRIMERI FARMACEUTSKIH KOMPOZICIJA:

1) Postupak direktnog presovanja:

Monohidrat dihidrogenfosfatne soli je formulisan u tabletu postupkom direktnog presovanja. Tableta jačine 100 mg sastavljena je od 128.4 mg aktivnog sastojka, 127.8 mg mikrokristalne celuloze, 127.8 mg manitola (ili 127.8 mg dikalcijumfosfata), 8 mg natrijum kroskarmeloze, 8 mg magnezijumstearata i 16 mg Opadrv belog (zakonom zaštićen materijal za premaz napravljen od strane Colorcon, West Point, PA). Aktivni sastojak, mikrokristalna celuloza, manitol (ili dikalcijumfosfat) i kroskarmeloza su prvo pomešani, a smeša je zatim podmazana sa magnezij umstearatom i presovana u tablete. Tablete su zatim obložene filmom od Opadrv White.

2) Postupak sabijanja valjkom:

Monohidrat dihidrogenfosfatne soli je formulisan u tabletu pomoću postupka sabijanja valjkom. Tableta jačine 100 mg sastavljena je od 128.4 mg aktivnog sastojka, 45 mg mikrokristalne celuloze, 111.6 mg dikalcijumfosfata, 6 mg natrijum kroskarmeloze, 9 mg magnezij umstearata i 12 mg Opadrv belog (zakonom zaštićen materijal za premaz napravljen od strane Colorcon, West Point, PA). Aktivni sastojak, mikrokristalna celuloza, dikalcijumfosfat i kroskarmeloza su prvo pomešani, a smeša je zatim podmazana sa jednom trećinom ukupne količine magnezij umstearata i sabijana valjkom u trake. Ove trake su zatim mlevene i nakon toga dobij ene granule su podmazane sa preostalom količinom magnezij umstearata i presovane u tablete. Tablete su zatim obložene filmom od Opadrv White. 3) Intravenozna (i.v.) vodena formulacija je određena kao monohidrat dihidrogenfosfatne soli formule I u 10 mM natrijumacetatu/0.8% fiziološkom rastvoru sa pH vrednošću od 4.5±0.2. Za formulaciju sa koncentracijom od 4.0 mg/mL, 800 mg NaCl je rastvoreno u 80 mL vode, zatim je dodato 57.5 uL glacijalne sirćetne kiseline, a nakon toga i 512 mg monohidrata dihidrogenfosfatne soli. pH vrednost je podešena do 4.5±0.2 sa 0.1 N rastvorom NaOH. Krajnja zapremina je podešena do 100 mL sa vodom. Rastvor od 2.0 mg/mL može se pripremiti razblaživanjem 50.0 mL rastvora od 4.0 mg/mL do 100.0 mL sa placebom. Rastvor od 1.0 mg/mL može se pripremiti razblaživanjem 25.0 mL rastvora od 4.0 mg/mL do 100.0 mL sa placebom. ^ s^-.,.

Claims

1. Dihidrogenfosfatna so 4-okso-4-[3-(trifluorometil)-5,6-dihidro[l,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-7(5//)-il]-l-(2,4,5-trifiuorofenil)butan-2-amina strukturne formule I: ili njen farmaceutski prihvatljiv hidrat.

2. So prema patentnom zahtevu 1 strukturne formule II, koja ima (i?)-konfiguraciju na hiralnom centru označenom sa<*> ;

3. So prema patentnom zahtevu 1 strukturne formule III, koja ima (^-konfiguraciju na hiralnom centru označenom sa<*>

4. So prema patentnom zahtevu 2, naznačena time daje kristalni monohidrat.

5. Monohidrat prema patentnom zahtevu 4, naznačen karakterističnim apsorpcionim trakama dobijenim iz dijagrama rendgenske difrakcije praška na spektralnim d-rastojanjima od 7.42, 5.48 i 3.96 angstrema.

6. Monohidrat prema patentnom zahtevu 5, naznačen karakterističnim apsorpcionim trakama dobij enim iz dijagrama rendgenske difrakcije praška na spektralnim d-rastojanjima od 6.30, 4.75 i 4.48 angstrema.

7. Monohidrat prema patentnom zahtevu 6, naznačen karakterističnim apsorpcionim trakama dobij enim iz dijagrama rendgenske difrakcije praška na spektralnim d-rastojanjima od 5.85, 5.21 i 3.52 angstrema.

8. Monohidrat prema patentnom zahtevu 7, naznačen dijagramom rendgenske difrakcije praška sa SL. 1.

9. Monohidrat prema patentnom zahtevu 4, naznačen spektrom CPMAS nuklearne magnetne rezonance ugljenika-13 u čvrstoj fazi koji pokazuje signale na 169.1, 120.8 i 46.5 ppm.

10. Monohidrat prema patentnom zahtevu 9, naznačen spektrom CPMAS nuklearne magnetne rezonance ugljnenika-13 u čvrstoj fazi koji pokazuje signale na 159.0, 150.9 i 40.7 ppm.

11. Monohidrat prema patentnom zahtevu 10, naznačen spektrom CPMAS nuklearne magnetne rezonance ugljenika-13 u čvrstom stanju sa SL. 2.

12. Monohidrat prema patentnom zahtevu 4, naznačen spektrom MAS nuklearne magnetne rezonance fluora-19 u čvrstom stanju koji pokazuje signale na -64.5, -114.7, -136.3 i -146.2 ppm.

13. Monohidrat prema patentnom zahtevu 12, naznačen spektrom MAS nuklearne magnetne rezonance fluora-19 u čvrstom stanju koji pokazuje signale na -96.5,-104.4, -106.3 i -154.5 ppm.

14. Monohidrat prema patentnom zahtevu 13, naznačen spektrom MAS nuklearne magnetne rezonance fluora-19 u čvrstom stanju sa SL. 3.

15. Monohidrat prema patentnom zahtevu 4, naznačen krivom termogravimetrijske analize sa SL. 4.

16. Monohidrat prema patentnom zahtevu 4, naznačen krivom diferencijalne skenirajuće kalorimetrije sa SL. 5.

17. So prema patentnom zahtevu 4 koja sadrži detektabilnu količinu pomenutog kristalnog monohidrata.

18. So prema patentnom zahtevu 4 koja sadrži oko 5 mas.% do oko 100 mas.% pomenutog kristalnog monohidrata.

19. So prema patentnom zahtevu 4 koja sadrži oko 10 mas.% do oko 100 mas.% pomenutog kristalnog monohidrata.

20. So prema patentnom zahtevu 4 koja sadrži oko 25 mas.% do oko 100 mas.% pomenutog kristalnog monohidrata.

21. So prema patentnom zahtevu 4 koja sadrži oko 50 mas.% do oko 100 mas.% pomenutog kristalnog monohidrata.

22. So prema patentnom zahtevu 4 koja sadrži oko 75 mas.% do oko 100 mas.% pomenutog kristalnog monohidrata.

23. So prema patentnom zahtevu 4 koja je po masi u potpunosti sastavljena od pomenutog kristalnog monohidrata.

24. So koja sadrži jone monoprotonovanog 4-okso-4-[3-(trifluorometil)-5,6-dihidro[ 1,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-7(&ff)-il]-l-(2,4,5-trifluorofenil)butan-2-amin katjona i dihidrogenfosfatni anjon.

25. Farmaceutska kompozicija koja sadrži profilaktički ili terapeutski efikasnu količinu soli prema patentnom zahtevu 1 ili njenog farmaceutski prihvatljivog solvata zajedno sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih nosača.

26. Farmaceutska kompozicija koja sadrži profilaktički ili terapeutski efikasnu količinu soli prema patentnom zahtevu 4 ili njenog farmaceutski prihvatljivog solvata zajedno sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih nosača.

27. Postupak za lečenje dijabetesa tipa 2 koji obuhvata primenu na pacijenta, kod koga postoji potreba za takvim tretmanom, terapeutski efikasne količine soli prema patentnom zahtevu 1 ili njenog farmaceutski prihvatljivog hidrata.

28. Postupak za lečenje dijabetesa tipa 2 koji obuhvata primenu na pacijenta, kod koga postoji potreba za takvim tretmanom, terapeutski efikasne količine soli prema patentnom zahtevu 4.

29. Postupak za pripremanje soli prema patentnom zahtevu 1 koji obuhvata korak spajanja jednog ekvivalenta 4-okso-4-[3-(trifluorometil)-5,6-dihidro[l,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-7(5//)-il]-l-(2,4,5-trifluorofenil)butan-2-amina u organskom rastvaraču ili vodenom rastvoru organskog rastvarača sa oko jednim ekvivalentom fosforne kiseline na temperaturi u opsegu od oko25-100°C.

30. Postupak prema patentnom zahtevu 29, naznačen time da je pomenuti organski rastvarač C1-C5linearni ili granati alkanol.

31. Primena soli prema patentnom zahtevu 1 kao aktivnog sastojka u proizvodnji leka za primenu u lečenju dijabetesa tipa 2.

32. Primena soli prema patentnom zahtevu 4 kao aktivnog sastojka u proizvodnji leka za primenu u lečenju dijabetesa tipa 2.

33. Farmaceutska kompozicija prema patentnom zahtevu 25 prilagođena za i.v. primenu.

34. So fosforne kiseline i 4-okso-4-[3-(trifluorometil)-5,6-dihidro[l,2,4]triazolo[4,3-a]pirazin-7(S/f)-il]-l-(2,4,5-trifluorofenil)butan-2-amina koja je pripremljena na osnovu postupka prema patentnom zahtevu 29.

35. Postupak za pripremanje kristalnog monohidrata prema patentnom zahtevu 4, naznačen time da obuhvata sledeće korake: (a) kristalizovanje pomenute dihidrogenfosfatne soli prema patentnom zahtevu 1 na 25°C iz smeše izopropanola i vode, tako da je koncentracija vode iznad 6.8 masenih procenata; (b) izdvajanje nastale čvrste faze; i (c) uklanjanje rastvarača iz nje. ??TMEN?o?-?