RS54769B1 - Visoko koncentrovane farmaceutske formulacije koje sadrže anti-cd20 antitelo - Google Patents

Visoko koncentrovane farmaceutske formulacije koje sadrže anti-cd20 antitelo

Info

Publication number
RS54769B1
RS54769B1 RS20160354A RSP20160354A RS54769B1 RS 54769 B1 RS54769 B1 RS 54769B1 RS 20160354 A RS20160354 A RS 20160354A RS P20160354 A RSP20160354 A RS P20160354A RS 54769 B1 RS54769 B1 RS 54769B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
antibody
formulation
highly concentrated
stable pharmaceutical
pharmaceutical formulation
Prior art date
Application number
RS20160354A
Other languages
English (en)
Inventor
Michael Adler
Hanns-Christian Mahler
Oliver Boris Stauch
Original Assignee
Hoffmann La Roche
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=43732866&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RS54769(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Hoffmann La Roche filed Critical Hoffmann La Roche
Publication of RS54769B1 publication Critical patent/RS54769B1/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2887—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against CD20
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39591—Stabilisation, fragmentation
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
    • A61K38/46—Hydrolases (3)
    • A61K38/47—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2), e.g. cellulases, lactases
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/10—Alcohols; Phenols; Salts thereof, e.g. glycerol; Polyethylene glycols [PEG]; Poloxamers; PEG/POE alkyl ethers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/12—Carboxylic acids; Salts or anhydrides thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
    • A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
    • A61K47/183—Amino acids, e.g. glycine, EDTA or aspartame
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/20—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing sulfur, e.g. dimethyl sulfoxide [DMSO], docusate, sodium lauryl sulfate or aminosulfonic acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/22—Heterocyclic compounds, e.g. ascorbic acid, tocopherol or pyrrolidones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/42—Proteins; Polypeptides; Degradation products thereof; Derivatives thereof, e.g. albumin, gelatin or zein
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A61K9/0021—Intradermal administration, e.g. through microneedle arrays or needleless injectors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/19—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles lyophilised, i.e. freeze-dried, solutions or dispersions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/30—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants from tumour cells
    • C07K16/3061—Blood cells
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/54—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the route of administration
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C07K2317/734—Complement-dependent cytotoxicity [CDC]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/94—Stability, e.g. half-life, pH, temperature or enzyme-resistance

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

Visoko koncentrisana, stabilna farmaceutska formulacija za subkutano primenjivanje farmaceutski aktivnog anti-CD20 antitela, koja sadrži:a. 50 do 350 mg/ml anti-CD20 antitela;b. 1 do 100 mM puferskog sredstva koje obezbeđuje pH od 5.5 ± 2.0;c. 1 do 500 mM stabilizatora ili mešavine dva ili više stabilizatora;d. 0.01 do 0.1 % nejonskog surfaktanta; ie. 1'000 do 16'000 IJ/ml enzima hijaluronidaze, poželjno oko 2'000 IJ/ml ili 12' 000 IJ/ml.Prijava sadrži još 23 patentna zahteva.

Description

Ovaj pronalazak, kao što je definisan patentnim zahtevima, odnosi se na visoko koncentrovane, stabilne farmaceutske formulacije farmaceutski aktivnog anti-CD20 antitela ili mešavine molekula takvog antitela za supkutano inektovanje. Takve formulacije sadrže, pored velikih količina anti-CD20 antitela ili njihove mešavine, puferišuće sredstvo, stabilizator ili mešavinu dva ili više sredstava za stabilizaciju, ne-jonski surfaktant i efektivnu količinu najmanje jednog enzima hijaluronidaze. Pronalazak se, takođe, odnosi na postupak za izradu navedene formulacije i na korišćenje takvih formulacija.
Stanje pronalaska
Farmaceutsko korišćenje antitela u porastu je tokom poslednjih godina. U mnogim slučajevima, takva antitela se primenjuju ili putem injekcija ili putem infuzije, intravenskim (IV) putem. Nažalost, količina antitela koja može biti primenjena intravenskim putem, ograničena je fizičko-hemijskim karakteristikama antitela, a posebno njegovom rastvorljivošću i stabilnošću u pogodnoj tečnoj formulaciji i zapreminom infuzione tečnosti. Alternativni putevi primene su supkutano ili intramuskulamo injiciranje. Ovi putevi injiciranja zahtevaju visoku koncentraciju proteina u konačnom rastvoru koji se injektuje [Shire, S.J., Shahrokh, Z. et al., "Challenges in the deveioptnent of high protein concentration formulations", J. Pharm. Sci. 2004; 93(6): 1390-1402; Roskos, L.K., Daviš CG. et al., "The clinical pharmacologv of therapeutic antibodies", Drug Development Research 2004; 61(3): 108-120]. Da bi se povećala zapremina, a time i terapeutska doza, koja se može bezbedno i komforno primenjivati supkutano, preporuka je da se koristi glikozaminoglikanaza enzim(enzimi), da bi se povećao intersticijski prostor u koji se formulacija antitela može injicirati [VVO2006/091871].
VVO2007/005608 se odnosi na IL-12p40 vezujuće proteine, posebno na hlL12ilihlL-23.
US2007/071675 se odnosi na vezujuće proteine, koji sadrže polipeptidni lanac, pri čemu navedeni polipeptidni lanac sadrži VD1-(X1)n-VD2-C-(X2)n (prvi i drugi varijabilni domen, aminokiselinu ili polipeptid konstantnog domena i Fc region.
VVO2009/080541 se odnosi na određene formulacije specifičnog anti-CD20 antitela tipa II.
Bookbinder i saradnici (Journal of Controlled Release, vol. 114, no. 2, Aug 2006, p. 230-241) prikazuju depolimerizaciju intersticijskog matriksa sa rHuPH20 i testove PEG-interferona alfa-2b i u fliksimabu.
Primeri stabilnih formulacija farmaceutski aktivih antitela za terapeusku upotrebu koji se trenutno nalaze na tržištu su: RITUXAN®/MABTHERA® (Rituximab) je himerično antitelo koje se vezuje za CD20 antigen na B-ćelijama. Komercijalna formulacija je sterilni, bistri, bezbojni, tečni koncentrat bez konzervansa za intravensku (IV) primenu. Rituximab se nabavlja u koncentraciji od 10 mg/mL (10 mL) u bočicama za jednokratno korišćenje od 100 mg ili 500 mg (50 mL). Proizvod je formulisan u 9 mg/mL natrijum hlorida, 7.35 mg/mL natrijum citrat dehidrata, 0.7 mg/mL polisorbata 80 i vode za injekcije. pH je podešen do 6.5. Alternativna tečna formulacija za Rituximab, koja je pogodna za IV primenu, prikazana u US Patentu No. 6,991,790. HERCEPTIN™ (Trastuzumab) je monoklonsko antitelo koje je usmereno prema HER2 receptom (anti-HER2), i koje se trenutno u Evropi nalazi na tržištu u formi liofilizovanog praška od 150 mg (koji sadrži antitelo, a,a-trehaloza dihidrat, L-histidin i L-histidin hidrohlorid i polisorbat 20), koji bi, za potrebe infuzija, trebalo da se rekonstituiše sa vodom za injekcije, da bi se proizvela injekciona doza od približno 21 mg/ml. U SAD i mnogim drugim zemljama, na tržištu se nalazi bočica sa višestrukom dozažom, koja sadrži 440 mg trastuzumaba.
AVASTIN™ (Bevacizumab) je monoklonsko antitelo, usmereno prema vaskularnom endotelijalnom faktoru rasta (VEGF), koje se trenutno u Evropi na tržištu nalazi kao tečna formulacije u dva tipa bočica: a) 100 mg bevacizumaba u 4 ml, odnosno b) 400 mg bevacizumaba u 16 ml, čime se dobija završna koncentracija od 25 mg/ml u vodi za injekcije, koja sadrži i sledeće ekscipijense:
trehaloza, dihidrat, natrijum fosfat i polisorbat 20.
Budući da je utvrđeno da su prethodne formulacije antitela pogodne za korišćenje za intravensku primenu, postoji potreba da se obezbede visoko koncentrovane, stabilne farmaceutske formulacije terapeutski aktivnih antitela za supkutano injiciranje. Prednost supkutanih injekcija jeste ta što one omogućuju zdravstvenom radniku da primenu pacijentu izvrši kao razmerno kratku intervenciju. Pored toga, pacijent se može obučiti da sam daje supkutanu injekciju. Uglavnom su injekcije, koje se primenjuju supkutanim putem, ograničene na približno 2 ml. Za pacijente kojima su potrebne višestruke doze, može se injicirati nekoliko formulacija jedinične doze na više pozicija na površini tela.
Sledeća dva proizvoda antitela za supkutanu primenu već se nalaze na tržištu.
HUMIRA™ (Adalimumab) je monoklonsko antitelo usmereno prema tumor nekrozis faktoru alfa (TNF alfa), koje se u Evropi trenutno nalazi u prodaji u obliku doze od 40 mg u 0.8 ml.
Injiciranje parenteralnih lekova u hipodermis je uopšteno ograničeno na zapremine manje od 2 ml, zbog viskoelastične rezistencije na hidrauličnu provodljivost u supkutanom (SC) tkivu i prooizvednog protivnog pritiska nakon injiciranja [Aukland K. and Reed R., "Interstitial-Lvmphatic Mechanisms in the control of Extracellular Fluid Volume", Physiology Reviews", 1993; 73:1-78], kao i zbog percepcije boli.
Izrada proteinskih formulacija visoke koncentracije veoma je izazovna i postoji potreba da se svaka formulacija adaptira na određene upotrebijene proteine, budući da svaki protein ima drugačije agregaciono ponašanje. Postoji sumnja da agregati izazivaju imunogeničnost terapeutskih proteina u najmanje nekoliko slučajeva. Imunogena reakcija protiv agregata proteina ili antitela može dovesti do proizvodnje neutrališućih antitela, koja mogu terapeutski protein ili antitelo učiniti neefektivnim. Izgleda da je imunogeničnost proteinskih agregata najproblematičnija u slučajevima korišćenja supkutanih injekcija, čijom ponovljenom upotrebom raste rizik od imunog odgovora.
Dok su antitela veoma slična po ukupnoj strukturi, postoje razlike u sastavu aminokiselina (posebno u CDR regionima, odgovornim za vezivanje antigena) i modelu glikozilacije. Pored toga, mogu postojati dodatne post-translacijske modifikacije, kao što su varijante naelektrisanja i glikozilacije.
izlaganje suštine pronala skaa
Ovaj pronalazak obezbeđuje visoko koncentrovanu, stabilnu farmaceutsku formulaciju farmaceutski aktivnog anti-CD20 antitela ili mešavine molekula takvog antitela, poželjno za supkutano injiciranje, kao što je definisano patentnim zahtevima.
Određenije visoko koncentrovana, stabilna farmaceutska formulacija farmaceutski aktivne formulacije anti-CD20 antitela ovog pronalaska sadrži: - približno 20 do 350 mg/ml anti-CD20 antitela; - oko 1 do 100 mM puferišućeg sredstva, koji se obezbeđuje pH od 5.5 ± 2.0; - oko 1 do 500 mM stabilizatora ili mešavine dva ili više stabilizatora, pri čemu je metionin opciono korišćen kao drugi stabilizator, poželjno u koncentraciji od 5 do 25 mM;
- 0.01 do 0.1 % ne-jonskog surfaktanta; i
- poželjno efektivnu količinu najmanje jednog enzima hijaluronidaze.
injekcionu zapreminu za supkutanu primenu (koncentracija: 50 mg antitela po ml injekcione zapremine).
XOLAIR™ (Omalizumab) monoklonsko antitelo usmereno prema imunoglobulinu E (anti-lgE), koje se trenutno nalazi na tržištu u obliku liofilizovanog praška od 150 mg (koji sadrži: antitelo, saharozu, histidin i histidin hidrohlorid monohidrat i polisorbat 20), koje bi se rekonstituisalo sa vodom za supkutanu injekciju, da bi se proizvela injekciona doza od 125 mg/ml.
Trenutno na tržištu nema raspoložive visoko koncentrovane, stabilne farmaceutske formulacije anti-CD20 antitela, koja je pogodna za supkutanu primenu. Sledstveno tome, postoji potreba da se obezbede veoma koncentrovane, stabilne farmaceutske formulacije terapeutskih aktivnih antitela za supkutano injiciranje.
Detaljan opis pro na laska
Naziv "antitelo" ovde je korišćen u najširem smislu i specifično obuhvata antitela pune dužine, antitela proizvedena genetskim inženjeringom, slična monoklonskim antitelima, ili rekombinantna antitela, poliklonska antitela, muItispecifična antitela (npr.,. bispecifična antitela), obrazovana od najmanje dva antitela pune dužine, himerična antitela, humanizovana antitela, potpuno humana antitela, kao i fragmente takvih antitela, sve dotle dok ona ispoljavaju željenu biološku aktivnost.
Naziv "monoklonsko antitelo", kako je ovde korišćen, odnosi se na antitelo, dobijeno iz populacije suštinski homogenih antitela, t.j., pojedinačna antitela, koja su sadržana u populaciji su identična i/ili se vezuju za isti epitop, s izuzetkom mogućih varijanti koje se mogu razviti tokom proizvodnje, a takve su varijante uopšteno prisutne u neznatnim količinama. Kao suprotnost preparatima poliklonskih antitela, koji obično uključuju različita antitela, usmerena prema različitim determinantama (epitopima), svako monoklonsko antitelo je usmereno prema jednoj determinanti na antigenu. Pored njihove specifičnosti, monoklonska antitela su pogodna zbog toga što nisu kontaminirana drugim imunoglobulinima. Oznaka "monoklonsko" ukazuje na karakter antitela, koje je dobijeno iz suštinski homogene populacije antitela, i ne bi se trebala tumačiti kao zahtev za proizvodnju antitela bilo kojim određenim postupkom. Na primer, monoklonska antitela, koja bi se koristila u skladu sa ovim pronalaskom, mogu biti izrađena hibridoma postupkom, koji su prvi opisali Kohler i saradnici u Nature, 256:495
(1975), ili se mogu izaditi postupcima rekombinovanja DNK (vidi, npr., U.S. Patent No. 4,816,567). "Monoklonska antitela" mogu, takođe, biti izolovana iz biblioteka antitela faga, korišćenjem tehnika koje su opisali Clarkson i saradnici u Nature, 352:624-628
(1991) i Marks i saradnici, J. Mol. Biol., 222:581-597 (1991). Nazivi "monoklonsko antitelo" ili "smeša monoklonskog antitela", kako je ovde korišćen, odnosi se na preparat molekula antitela jednog aminokiselinskog sastava. Sledstveno tome, naziv "humano monoklonsko antitelo" odnosi se na antitela, koja pokazuju jedinstvenu specifičnost vezivanja, i koja poseduju varijabilne i konstantne regione, dobijene iz imunoglobulinskih sekvenci humane germinativne linije. U jednom ostvarenju, humana monoklonska antitela proizvode se posredstvom hibridoma, koji uključuju B-ćelije dobijene iz transgenske životinje, a ne od čoveka, npr., iz transgenskog miša, koji poseduje genom, koji sadrži transgen humanog teškog lanca i transgen humanog lakog lanca, spojen sa obesmrćenom ćelijom. Naziv "monoklonska antitela", ovde specifično uključuje takozvana himerična antitela, u kojima je deo teškog i/ili lakog lanca identičan ili homologan sa odgovarajućim sekvencama antitela dobijenih iz određene vrste, ili koja pripadaju određenoj klasi ili podklasi antitela, dok je preostali deo lanca(lanaca) identičan ili homologan sa odgovarajuućim sekvencama u antitelima, koja su dobijena iz druge vrste ili pripadaju drugoj klasi ili podklasi antitela, kao i fragmente takvih antitela, sve dotle dok ona ispoljavaju željenu biološku aktivnost (U.S. Patent No. 4,816,567; i Morrison et al, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 81:6851-6855 (1984)). Himerična antitela od značaja ovde uključuju "primatizovana" antitela, koja sadrže antigen-vezujuće sekvence varijabilnog domena, dobijene od primata koji nije čovek (npr.,. Old VVorld Monkev, Ape, itd.) i sekvence humanog konstantnog regiona. "Fragmenti antitela" obuhvataju deo antitela pune dužine, uopšteno barem njegov antigen-vezujući deo ili varijabilni region. Primeri fragmenata antitela uključuju: Fab, Fab', F(ab')2 i Fv fragmente; diatela, jednolančane molekule antitela, imunotoksine i multispecifična antitela formirana od fragmenata antitela. Pored toga, fragmenti antitela sadrže jednolančane polipeptide, koji imaju karakteristike VH lanca, to jest koji su u stanju da se udruže zajedno sa VL lancem, koji se vezuje sa CD20 antigenom. "Fragmenti antitela", takođe. uključuju fragmente koji per se nisu u stanju da obezbede efektorske funkcije (ADCC/CDC), ali obezbeđuju ovu funkciju na način koji je u skladu sa pronalaskom, nakon što je sjedinjen sa pogodnim konstantnim domenom(domenima) antitela. "Antitelo pune dužine" je ono koje sadrži antigen-vezujući varijabilni region, kao i konstantni domen lakog lanca (CL) i konstantne domene teškog lanca, CH1, CH2 i CH3. Konstantni domeni mogu biti konstantni domeni nativne sekvence (npr., konstantni domeni humane nativne sekvence) ili varijante njihove aminokiselinske sekvence. Poželjno, antitelo pune dužine ima jednu ili više efektorskih funkcija.
Antitelo sa "varijantom aminokiselinske sekvence" ovde je antitelo sa sekvencom aminokiselina koja se razlikuje od one kod antitela glavne vrste. Uobičajeno, varijante aminokiselinske sekvence posedovaće najmanje oko 70% homolognosti sa antitelom glavne vrste, poželjno ono će posedovati najmanje oko 80%, a još poželjnije najmanje oko 90% homolognosti sa antitelom glavne vrste. Varijante aminokiselinske sekvence poseduju supstitucije, delecije i/ili adicije na određenim položajima unutar ili u neposrednoj blizini aminokiselinske sekvence antitela glavne vrste. Primeri varijanti aminokiselinskih sekvenci ove obuhvataju kiselu varijantu (npr., deamidovanu varijantu antitela), baznu varijantu, antitelo sa ekstenzijom amino-terminalnog lidera (npr., VHS-) na jednom ili dva njihova laka lanca, antitelo sa C-terminalnim lizinskim ostatkom na jednom ili dva njihova teška lanca, itd., i uključuje kombinacije varijacija aminokiselinskih sekvenci teških i/ili lakih lanaca. Varijanta antitela od posebnog značaja ovde je antitelo koje sadrži ekstenziju amino-terminalnog lidera na jednom ili dva njihova laka lanca, a opciono dalje sadrži druge razlike aminokiselinske sekvence i/ili glikozilacijske razlike u odnosu na antitelo glavne vrste.
Antitelo sa "glikozilacijskom varijantom" ovde je antitelo sa jednim ili više ugljenohidratnih delova, vezanih na njih, koji se razlikuju od jednog ili više delova ugljenih hidrata, privršćenih za antitelo glavne vrste. Primeri glikozilacijskih varijanti ovde uključuju antitelo sa G1 ili G2 oligosaharidnom strukturom, umesto GO oligosaharidne strukture, koja je vezana za njegov Fc region, antitelo sa jednim ili više ugljenohidratnih delova, koji su vezani za jedan ili dva njegova laka lanca, antitelo bez delova ugljenih hidrata, vezanih za jedan ili dva teška lanca antitela, itd., i kombinacije glikozilacijskih izmena. Pored toga, naziv "glikozilacijska varijanta" uključuje isto tako, antitela proizvedena glikoinženjeringom, kao što su antitela koja su opisana u WO 1'331'266 i USP 7'517'670. "Efektorske funkcije" antitela odnose se na one biološke aktivnosti, koje se mogu pripisati Fc regionu (nativna sekvenca Fc regiona ili varijanta aminokiselinske sekvence Fc regiona) antitela. Primeri efektorskih funkcija antitela uključuju vezivanje C1q; komplement-zavisnu citotoksičnost (CDC); Fc receptorsko vezivanje; antitelo-zavisnu ćelijski-posredovanu citotoksičnost (ADCC); fagocitozu; nishodnu regulaciju receptora ćelijske površine (npr., B-ćelijski receptor; BCR), itd.
U zavisnosti od aminokiselinske sekvence konstantnog domena njihovih teških lanaca, antitela pune dužine mogu se pripisati različitim "klasama". Postoji pet glavnih klasa antitela pune dužine: IgA, IgD, IgE, IgG i IgM, a nekoliko njih može biti dalje podeljeno na "podklase" (izotipovi), npr., lgG1, lgG2, lgG3, lgG4, IgA i lgA2. Konstantni domeni teškog lanca koji odgovaraju različitim klasama antitela označavaju se sa a [alfa], 5 [delta], t [epsilon], v [gama], odnosno m [mu]. Strukture podjedinica i tro-dimenzionalne konfiguracije različitih klasa imunoglobulina dobro su poznate.
Na ovom mestu, "biološka aktivnost" monoklonskog antitela odnosi se na sposobnost antitela da se vezuje sa antigenom, a za rezultat ima merljivi biološki odgovor, koji se može izmeriti in vitro ili in vivo. Takva aktivnost može biti antagonistička (na primer kada je antitelo CD20 antitelo) ili agonistička.
Naziv "humanizovano antitelo" odnosi se na antitela, u kojima su regioni okvira ili "regioni koji određuju komplementarnost" (CDR) modifikovani tako da sadrže CDR imunoglobulina različite specifičnosti u poređenju sa onim iz matičnog immunoglobulin. U poželjnom ostvarenju, mišji CDR je nanesen kao graft na region okvira humanog antitela da bi se pripremilo "humanizovano antitelo." Posebno poželjni CDR-i odgovaraju onima koji predstavljaju sekvence koje prepoznaju antigene, koji su nastavku naznačeni za himerična i bifunkcionalna antitela. U najvećem broju slučajeva, humanizovana antitela su humani imunoglobulini {antitelo primaoca), u kojima su ostaci iz hipervarijabilnog regiona primaoca zamenjeni ostacima iz hipervarijabilnog regiona vrste koja nije ljudska (donorsko antitelo), kao što je miš, pacov, zec ili primat, koji nije čovek, a koji poseduje željenu specifičnost, afinitet i kapacitet. U nekim slučajevima, ostaci okvirnog regiona (FR) humanog imunoglobulina zamenjeni su odgovarajućim ostacima koji nisu ljudski. Pored toga, humanizovana antitela mogu sadržavati ostatke, koji se ne nalaze u antitelu primaoca ili u antitelu donora. Ove modifikacije su izvršene da bi se dalje poboljšale karakteristike antitela. Uopšteno, humanizovano antitelo će da sadrži u suštini sve ili barem jedan, a obično dva, varijabilna domena, u kojima sve ili suštinski sve hipervarijabilne petlje odgovaraju onima iz ne-humanog imunoglobulina, a svi ili suštinski svi FR-i su oni iz sekvenci humanog imunoglobulina. Humanizovano antitelo opciono će, takođe, da sadrži najmanje deo imunoglobulinskog konstantnog regiona (Fc), obično onaj iz humanog imunoglobulina (vidi, npr., Riechmann, L, et al., Nature 332 (1988) 323-327; i Neuberger, M.S., et al., Nature 314 (1985) 268-270).
Naziv "himerično antitelo" odnosi se na monoklonsko antitelo koje sadrži varijabilni region, t.j., vezujući region, iz jednog izvora ili vrste, i najmanje deo konstantnog regiona, koji je dobijen iz različitog izvora ili vrste, a koji se uglavnom priprema rekombinantnim DNK tehnikama. Himerična antitela koja sadrže mišji varijabilni region i humani konstantni region posebno su poželjna. Takva mišje/humana himerična antitela su proizvod ekspresovanih imunoglobulinskih gena, koji sadrže segmente DNK, koji kodiraju varijabilne regione mišjeg imunoglobulina i segmente DNK koji kodiraju konstantne regione humanog imunoglobulina. Drugi oblici "himeričnih antitela", koji su obuhvaćeni ovim pronalaskom, su oni u kojima je klasa ili podklasa modifikovana ili izmenjena u odnosu na onu originalnog antitela. Takva "himerična" antitela se, takođe, označavaju kao "antitela sa skretanjem klase". Postupci za proizvodnju himeričnih antitela obuhvataju konvencionalne tehnike rekombinovanja DNK i genske transfekcije, koje su sada dobro poznate u struci (vidi, npr., Morrison, S.L., et al., Proc. Natl. Acad Sci. USA 81 (1984) 6851-6855; US 5,202,238 i US 5,204,244).
Naziv "humano antitelo", kao što je ovde korišćen, utvrđen je kako bi uključio antitela koja poseduju varijabilne i konstantne regione dobijene iz imunoglobulinskih sekvenci humane germinativne linije. Humana antitela su u ovoj stručnoj oblasti dobro poznata (van Dijk, M.A., i van de VVinkel, J.G., Curr. Opin. Pharmacol. 5 (2001) 368-374). Na osnovu takve tehnologije, mogu biti proizvedena humana antitela prema velikom broju ciljnih antigena. Primeri humanih antitela su, na primer, opisani u Kellermann, S. A., et al., Curr Opin Biotechnol. 13 (2002) 593-597.
Naziv "rekombinantno human antitelo", kao što je ovde korišćen, utvrđen je kako bi obuhvatio sva humana antitela, koja se pripremaju, ekspresuju, kreiraju ili izoluju na rekombinantne načine, kao što su antitela, izolovana iz ćelije domaćina, kao što je NSO ili CHO ćelija, ili iz životinje (npr., miša), koja je transgenska za humane imunoglobulinske gene, ili antitela, koja se ekspresuju korišćenjem rekombinantnog ekspresionog vektora, transfektovanog u ćeliju domaćina. Takva rekombinantna humana antitela imaju varijabilne i konstantne regione dobijene iz imunoglobulinskih sekvenci humane germinativne linije u rearanžiranom obliku. Rekombinantna humana antitela u skladu sa pronalaskom bila su podvrgnuta in vivo somatskoj hipermutaciji. Sledstveno tome, aminokiselinske sekvence VH i VL regiona rekombinantnih antitela su sekvence koje, budući da su dobijene iz ili srodne sa VH i VL sekvencama humane germinativne linije, ne mogu prirodno postojati in vivo u okviru repertoara humanih antitela germinativne linije.
Kako je ovde korišćeno,"specifično vezivanje" ili "vezivati se specifično za" odnosi se na specifično vezivanje antitela za CD20 antigen. Poželjno afinitet vezivanja ima vrednost Kd od 10~<9>mol/l ili manje (npr., 10"<10>mol/l), poželjno ima vrednost Kd od 10~<10>mol/l ili manje (npr., 10~<12>mol/l). Afinitet vezivanja se utvrđuje standardnim testom vezivanja, kao što je tehnika površinske plazmon rezonance (BIACORE®).
Naziv "molekul nukleinske kiseline", kao stoje ovde korišćen, utvrđen je kako bi uključio molekule DNK i molekule RNK. Molekul nukleinske kiseline može biti jednolančani ili dvo-lančani, ali je poželjna dvo-lančana DNK. "Konstantni domeni" nisu direktno uključeni u vezivanje antitela za antigen, ali su uključeni u efektorske funkcije (ADCC, vezivanje komplementa i CDC). "Varijabilni region" (varijabilni region lakog lanca (VL), varijabilni region teškog lanca (VH)), kako je ovde korišćen, označava svaki par lakih i teških lanaca koji je direktno uključen u vezivanje antitela za antigen. Domeni varijabilnih regiona humanih lakih i teških lanaca imaju istu opštu strukturu, a svaki domen sadrži četiri okvirna (FR) regiona, čije su sekvence u širokoj meri konzervisane, a povezane su pomoću tri "hipervarijabilna regiona" (ili regiona koji određuju komplementarnost, CDR-i). Regioni okvira poprimaju tzv. "(3-presavijenu" konformaciju, a CDR-i mogu formirati petlje koje povezuju "B-presavijenu" strukturu. CDR-i u svakom lancu drže se u svojoj tro-dimenzionalnoj strukturi pomoću regiona okvira i obrazuju zajedno sa CDR-ima iz drugog lanca antigen-vezujući položaj. Regioni CDR3 teškog i lakog lanca antitela igraju posebno značajnu ulogu u specifičnosti/afinitetu vezivanja antitela u skladu sa pronalaskom i, sledstveno tome, obezbeđuju dalji cilj pronalaska.
Nazivi "hipervarijabilni region" ili "antigen-vezujući deo antitela", kako se ovde koristi, odnosi se na aminokiselinske ostatke antitela, koji su odgovorni za vezivanje antigena. Hipervarijabilni region sadrži aminokiselinske ostatke iz "regiona koji određuju komplementarsnost" ili "CDR-a". Regioni "okvira" ili "FR" regioni su oni regioni varijabilnog domena, koji se razlikuju od ostataka hipervarijabilnog regiona kako su ovde definisani. Sledstveno tome, laki i teški lanci antitela od N- do C-kraja sadrže domene FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3 i FR4. Specijalno je CDR3 teškog lanca region koji najviše doprinosi vezivanju antigena. CDR i FR regioni se određuju prema standardnoj definiciji Kabata i saradnika u Sequences of Proteins of Immunological Interest, 5. izdanje. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD. (1991) i/iii onim ostacima koji se nalaze u "hipervarijabilnoj petlji".
Nazivi "CD20" i "CD20 antigen" ovde su korišćeni kao zamena jedan drugom, a uključuju bilo koje varijante, izoforme i homologe, u odnosu na vrstu, humanog CD20, koji se prirodno ekspresuju od strane ćelija ili se ekspresuju na ćelijama transfektovanim sa CD20 genom. Vezivanje antitela pronalaska za CD20 antigen ima posredničku ulogu u uništavanju ćelija koje ekspresuju CD20 (npr., tumorska ćelija), putem inaktivacije CD20. Uništavanje ćelija koje ekspresuju CD20 može se odvijati posredstvom jednog ili više sledećih mehanizama: antitelo-zavisna ćelijska citotoksičnost (ADCC), komplement-zavisna citotoksičnost (CDC), uključujući ćelijsku smrt i/ili apoptozu, homotipsku agregaciju, itd..
Sinonimi za CD20, kako je u struci utvrđeno, uključuju B-limfocitni antigen CD20, B-limfocitni površinski antigen B1, Leu-16 i Bp35.
Naziv "anti-CD20 antitelo" u skladu sa pronalaskom je antitelo, koje se specifično vezuje za CD20 antigen. U zavisnosti od karakteristika vezivanja i bioloških aktivnosti anti-CD20 antitela u odnosu na CD20 antigen, mogu se razlikovati dva tipa anti-CD20 antitela (tip I i tip II anti-CD20 antitela), prema Craggu , M.S., i saradnicima, u Blood 103 (2004) 2738-2743; i Craggu, M.S., i saradnicima u Blood 101 (2003) 1045-1051, vidi Tabelu 1.
Jedno suštinsko svojstvo tip I i tip II anti-CD20 antitela je njihov način vezivanja. Tako, tip I i tip II anti-CD20 antitela mogu da se klasifikuju odnosom kapaciteta vezivanja za CD20 na Raji ćelijama (ATCC-No. CCL-86) navedenog anti-CD20 antitela u poređenju sa rituksimabom.
Kako je ovde korišćeno, "anti-CD20 antitelo" može biti ili tip I ili tip II antitelo. Poželjno, to je tip I antitelo, najpoželjnije, to je rituksimab.
Tip I anti-CD20 antitela ima odnos kapaciteta vezivanja za CD20 na Raji ćelijama (ATCC No. CCL-86) navedenog anti-CD20 antitela u poređenju sa rituksimabom od 0.8 do 1.2, poželjno od 0.9 do 1.1. Primeri ovakvog tip I anti-CD20 antitela uključuju npr., rituksimab, u EP2000149B1 (Anderson et. al., vidi npr., slike 4 i 5), 1F5 lgG2a (ECACC, hibridoma; Press et al., Blood 69/2:584-591 (1987)), HI47 lgG3 (ECACC, hibridoma), 2C6 lgG1 (kako je opisano u: VVO2005/103081), 2F2 lgG1 ili ofatumumab (kako je izloženo u: WO 2004/035607 i VVO2005/103081) i 2H7 lgG1 (kako je izloženo u: WO 2004/056312) i WO 2006/084264 (npr., varijante izložene u tabelama 1 i 2). Poželjno navedeni tip I anti-CD20 antitela je monoklonsko antitelo koje se vezuje za isti epitop kao rituksimab.
Tip II anti-CD20 antitela ima odnos kapaciteta vezivanja za CD20 na Raji ćelijama (ATCC No. CCL-86) navedenog anti-CD20 antitela u poređenju sa rituksimabom od 0.3 do 0.6, poželjno od 0.35 do 0.55, još bolje 0.4 do 0.5. Primeri ovakvog tip II anti-CD20 antitela uključuju npr., tozitumomab (B1 lgG2a), humanizovano B-Ly1 antitelo lgG1 (himerično humanizovano lgG1 antitelo kako je izloženo u VVO2005/044859), 11B8 lgG1 (kako je izloženo u VVO 2004/035607), kao i AT80 lgG1. Poželjno, navedeni tip II anti-CD20 antitela je monoklonsko antitelo koje se vezuje za isti epitop kao humanizovano B-Ly1 antitelo (kako je izloženo u VVO2005/044859). "Odnos kapaciteta vezivanja za CD20 na Raji ćelijama (ATCC-No. CCL-86) anti-CD20 antitela u poređenju sa rituksimabom" se određuje direktnim merenjem imunofluorescencije (meri se srednja vrednost fluorescentnih intenziteta (MFI)) korišćenjem navedenog anti-CD20 antitela konjugovanog sa Cy5 i rituksimaba konjugovanog sa Cy5 u FACSArray (Becton Dickinson) sa Raji ćelijama (ATCC-No, CCL-86), a računa se na sledeći način:
MFI je srednja vrednost intenziteta fluorescencije. "Odnos Cy5-vezivanja" kako je ovde korišćeno, označava broj molekula obeleženih sa Cy5 po molekulu antitela.
Uobičajeno navedeni tip I anti-CD20 antitela ima odnos kapaciteta vezivanja za CD20 na Raji ćelijama (ATCC-No. CCL-86) navedenog prvog anti-CD20 antitela u poređenju sa rituksimabom od 0.8 do 1.2, poželjno 0.9 do 1.1.
Uobičajeno navedeni tip II anti-CD20 antitela ima odnos kapaciteta vezivanja za CD20 na Raji ćelijama (ATCC-No. CCL-86) navedenog sekundarnog anti-CD20 antitela u poređenju sa rituksimabom od 0.3 do 0.6, poželjno 0.35 do 0.55, još bolje 0.4 do 0.5.
U poželjnom ostvarenju, navedeni tip II anti-CD20 antitela, poželjno humanizovano B-Ly1 antitelo, ima povećanu antitelo-zavisnu ćelijsku citotoksičnost
(ADCC).
Pod "antitelom koje ima povećanu antitelo-zavisnu ćelijsku citotoksičnost (ADCC)" podrazumeva se antitelo, na način kako je taj izraz ovde definisan, koje ima povećanu ADCC, određeno ma kojim pogodnim postupkom poznatim stručnoj osobi u ovoj oblasti. Jedan prihvaćeniin vitroADCC test je sledeći: 1) test koristi ciljane ćelije za koje se zna da ekspresuju ciljni antigen kog prepoznaje antigen-vezujući region antitela; 2) test koristi humane mononuklearne ćelije periferne krvi (PBMCs), izolovane iz krvi nasumično odabranih zdravih donora, kao efektorne ćelije;
3) test se izvodi prema sledećem protokolu:
i) PBMCs se izoluju korišćenjem standardnih procedura centrifugiranja prema gustini i suspenduju pri 5 X 106 ćelija/ml u RPMI medijumu ćelijske kulture;
ii) ciljane ćelije se uzgajaju standardnim postupcima kulture tkiva, sakupljaju u eksponencijalnoj fazi rasta sa viabilnošću većom od 90%, ispiraju u RPMI medijumu ćelijske kulture, obeležavaju sa 100 mikro-Kirija<51>CI ispiraju dva puta sa medijumom ćelijske kulture i, resuspenduju u medijumu ćelijske kulture pri gustini od 10<5>ćelij<a/>ml;
iii) 100 mikrolitara finalne gornje suspenzije ciljanih ćelija se prenosi u svaku reakcionu poziciju mikrotitarske ploče sa 96 reakcionih pozicija;
iv) antitelo se serijski razblažuje od 4000 ng/ml do 0.04 ng/ml u medijumu ćelijske kulture i 50 mikrolitara dobijenih rastvora antitela se dodaje u ciljne ćelije u 96-pozicionoj mikrotitarskoj ploči, testirajući u triplikatu različite koncentracije antitela pokrivajući gornji celokupni koncentracioni opseg;
v) za maksimalno oslobađanje (MR) kontrole, 3 dodatna reakciona mesta na ploči koja sadrže obeležene ciljne ćelije, primaju 50 mikrolitara 2% (VN) vodenog rastvora nejonskog deterdženta (Nonidet, Sigma, St. Louis), umesto rastvora antitela (gornja tačka iv);
vi) za spontano oslobađanje (SR) kontrole, 3 dodatna reakciona mesta na ploči koja sadrže obeležene ciljne ćelije, primaju 50 mikrolitara RPMI medijuma ćelijske kulture umesto rastvora antitela (gornja tačka iv);
vii) 96-poziciona mikrotitarska ploča se onda centrifugira 50 x g u toku 1 minuta i inkubira 1 sat na 4°C;
viii) 50 mikrolitara PBMC suspenzije (gornja tačka i) se dodaje u svaku poziciju da bi se dobio odnos efektora prema ciljnoj ćeliji od 25 : 1 i, ploče se smeštaju u inkubator u atmosferi 5% C02na 37 C u toku 4 sata;
ix) supernatant bez ćelija iz svake pozicije se sakupi i eksperimentalno oslobođena radioaktivnost (ER) se izmeri korišćenjem gama brojača;
x) procenat specifične lize se računa za svaku koncentraciju antitela prema formuli {ERMR)/(MR-SR) x 100, gde je ER prosečna vrednost izmerene radioaktivnosti (vidi gornju tačku ix) za tu koncentraciju antitela, MR je prosečna izmerena radioaktivnost (vidi gornju tačku ix) za MR kontrole (vidi gornju tačku V), a SR je prosečna izmerena radioaktivnost (vidi gornju tačku ix) za SR controle (vidi gornju tačku vi);
4) "povećanje ADCC" je definisano ili kao povećanje maksimalnog procenta
specifične lize koje se zapaža unutar koncentracionog opsega antitela testiranog gore i/ili smanjenje koncentracije antitela neophodne da se postigne polovina maksimalnog procenta specifične lize koje se zapaža unutar koncentracionog opsega antitela testiranog gore. Povećanje ADCC je u odnosu na ADCC, mereno gornjim testom, posredovano istim antitelom, koje je proizvedeno istim tipom ćelija domaćina, korišćenjem istih standardnih postupaka proizvodnje, prečišćavanja, formulisanja i čuvanja, koji su poznati stručnim licima u ovoj oblasti, ali koje nije proizvedeno u ćelijama domaćina konstruisanim da prekomerno ekspresuju GnTill.
Navedena "povećana ADCC" može se dobiti glikoinženjeringom navedenih antitela, što znači pojačanje pomenutih prirodnih, ćelijski posredovanih efektornih funkcija monoklonskih antitela konstruisanjem njihove oligosaharidne komponente na način opisan u: Umana, P. et al., Nature Biotechnol. 17:176-180 (1999) and U.S. Pat. No. 6,602,684.
Izraz "komplement-zavisna citotoksičnost (CDC)" odnosi se na lizu humanih tumorskih ciljanih ćelija antitelom prema pronalasku u prisustvu komplementa. CDC se poželjno meri tretmanom preparata ćelija koje ekspresuju CD20 sa anti-CD20 antitelom prema pronalasku u prisustvu komplementa. CDC se nalazi ukoliko antitelo u koncentraciji od 100 nM indukuje lizu (ćelijsku smrt) 20% ili više tumorskih ćelija nakon 4 sata. Test se poželjno izvodi sa 51Cr ili Eu obeleženim tumorskim ćelijama i merenjem oslobođenog<51>Cr ili Eu. Kontrole obuhvataju inkubaciju tumorskih ciljnih ćelija sa komplementom ali bez antitela.
Uobičajeno tip I i tip II anti-CD20 antitela lgG1 izotipa imaju karakteristična CDC svojstva. Tip I anti-CD20 antitela ima povećanu CDC (ako je lgG1 izotip) i tip II anti-CD20 antitela ima smanjenu CDC (ako je lgG1 izotip) u poređenju jedan sa drugim. Poželjno oba tip I i tip II anti-CD20 antitela su antitela lgG1 izotipa.
Antitelo "rituksimab" je genetski konstruisano himerično humano monoklonsko antitelo koje sadrži gama 1 misiji konstantni domen, usmereno protiv humanog CD20 antigena. Ovo himerično antitelo sadrži humane gama 1 konstantne domene i identifikuje se nazivom "C2B8" u EP2000149B1 (Anderson et. al., vidi npr. slike 4 i 5). Rituksimab je odobren za lečenje pacijenata sa relapsnim ili refraktarnim CD20 pozitivnim B-ćelijskim ne-Hodgkinovim limfomom niskog gradusa ili folikularnim. Ispitivanja mehanizma dejstvain vitrosu pokazala da rituksimab ispoljava humanu komplement-zavisnu citotoksičnost (CDC) (Reff et. al, Blood 83(2): 435-445 (1994)). Sem toga, ispoljava značajnu aktivnost u testovima koji mere antitelo-zavisnu ćelijsku citotoksičnost (ADCC).
Izraz "humanizovano B-Ly1 antitelo" se odnosi na humanizovano B-I_y1 antitelo, kako je izloženo u W02005/044859, koje je dobijeno od mišijeg monoklonskog anti-CD20 antitela B-Ly1 (varijabilni region mišijeg teškog lanca (VH): SEQ ID NO: 1; varijabilni region mišijeg lakog lanca (VL): SEQ ID NO: 2; vidi: Poppema, S. and Visser, L., Biotest Bulletin 3: 131-139 (1987)) putem himerizacije sa humanim konstantnim domenom iz lgG1 i zatim, humanizacijom (vidi VVO2005/044859). Ova "humanizovana B-Ly1 antitela" su detaljno izložena u VVO2005/044859.
Poželjno "humanizovano B-Ly1 antitelo" ima varijabilni region teškog lanca (VH) odabran iz grupe SEQ ID No: 3 do SEQ ID No: 20 (B-HH2 do B-HH9 i B-HL8 do B-HL17 u VVO2005/044859). Posebno poželjni su Seq. ID brojevi: 3, 4, 7, 9, 11, 13 i 15 (B-HH2, BHH-3, B-HH6, B-HH8, B-HL8, B-HL11 i B-HL13 iz VVO2005/044859). Najpoželjnije, navedeni VH je BHH6. Poželjno "humanizovano B-Ly1 antitelo" ima varijabilni region lakog lanca (VL) iz SEQ ID No: 20 (B-KV1) u VVO2005/044859. Sem toga, humanizovano B-Ly1 antitelo je poželjno lgG1 antitelo. Poželjno su takva humanizovana B-Ly1 antitela glikokonstruisana (GE) u Fc regionu prema procedurama opisanim u VVO2005/044859, WO 2004/065540, Umana, P. et al., Nature Biotechnol. 17:176-180 (1999) i WO 99/154342. Većina glikokonstruisanih humanizovanih B-Ly1 antitela ima izmenjen profil glikozilacije u Fc regionu, poželjno imajući snižen nivo ostataka fukoze. Poželjno najmanje 40% ili više (u jednom ostvarenju između 40% i 60%, u drugom ostvarenju najmanje 50%, a u opet još jednom ostvarenju najmanje 70% ili više) oligosaharida Fc regiona su ne-fukozilovani. Sem toga, oligosaharidi Fc regiona su poželjno bisektovani. Najpoželjnije, "humanizovano B-Ly1 antitelo" sadrži VH B-HH6 i VL B-KV1 iz W02005/044859. Kako je ovde korišćeno, navedeno antitelo je, isto tako, označeno kao "HuMab<CD20>". Navedeno antitelo je označeno sa INN Afutuzumab. U još jednom poželjnom ostvarenju, navedeno antitelo ima snižen nivo ostataka fukoze kako je gore definisano i/ili oligosaharidi Fc regiona su najpoželjnije bisektovani. U opet drugom najpoželjnijem ostvarenju, navedeno antitelo ispoljava povećanu ADCC kako je gore definisano.
Oligosaharidna komponenta može značajno uticati na svojstva relevantna za efikasnost terapeutskog glikoproteina, uključujući fizičku stabilnost, otpornost na napad proteaze, interakcije sa imunim sistemom, farmakokinetiku, kao i specifičnu biološku aktivnost. Ova svojstva mogu zavisiti ne samo od prisustva ili odsustva, već isto tako i od specifičnih struktura oligosaharida. Mogu se postaviti izvesne generalizacije između strukture oligosaharida i funkcije glikoproteina. Na primer, izvesne oligosaharidne strukture posreduju brzi klirens glikoproteina iz krvotoka preko interakcija sa specifičnim proteinima koji vezuju ugljene hidrate, dok druge mogu vezati antitela i otpočeti neželjene imune reakcije. (Jenkins et al., Nature Biotechnol. 14:975-81 (1996)).
Ćelije sisara su poželjni domaćini za produkciju terapeutskih glikoproteina, zahvaljujući svojoj mogućnosti da glikoziluju proteine u najkomaptibilniji oblik za primenu ljudima. (Cumming et al., Glycobiology 1:115-30 (1991); Jenkins et al., Nature Biotechnol. 14:975-81 (1996)). Bakterije veoma retko glikoziluju proteine i, kao i druge vrste uobičajenih domaćina, kao što su kvasci, filamentozne gljive, insekti i ćelije biljaka, daju glikozilacione profile koji se povezuju sa brzim klirensom iz krvotoka, nepoželjnim imunolološkim interakcijama i, u nekim specifičnim slučajevima, smanjenom biološkom aktivnosti. Od ćelija sisara, ovarijalne ćelije kineskog hamstera (CHO) se najčešće koriste tokom poslednje dve decenije. Osim što proizvode pogodne profile glikozilacije, ove ćelije omogućavaju konzistentno stvaranje genetički stabilnih, visoko produktivnih klonalnih ćelijskih linija. Mogu se uzgajati do velikih gustina u jednostavnim bioreaktorima korišćenjem medijuma bez seruma i, omogućiti razvoj bezbednih i reproducibilnih bioprocesa. Druge ćelije životinja koje se obično koriste uključuju bubrežne ćelije bebe hamstera (BHK), mijeloma ćelije NS0- i SP2/0-miša. Nedavno, testirana je i produkcija iz transgenskih životinja. (Jenkins et al.. Nature Biotechnol. 14: 975-981 (1996)).
Sva antitela sadrže ugljenohidratne strukture na konzervisanim položajima u konstatnim regionima teškog lanca, uz to da svaki izotip ima različitu paletu N-vezanih ugljenohidratnih struktura, koje promenljivo utiču na sastav proteina, sekreciju ili funkcionalnu aktivnost (VVright, A., and Morrison, S. L, Trends Biotech. 15: 26-32
(1997)). Struktura privezanih N-vezanih ugljenih hidrata varira značajno, što zavisi od stepena obrade i, može obuhvatiti visoku-manozu, višestruko razgranate kao i biantenarne komplekse oligosaharida. Uobičajeno, postoji heterogena obrada jezgrenih oligosaharidnih struktura koje su prikačene na naročitom položaju glikozilacije tako da čak monoklonska antitela postoje kao multiple glikoforme. Na sličan način, pokazalo se da se glavne razlike u glikozilaciji antitela javljaju među ćelijskim nizovima, a nešto manje razlike viđaju se za dati ćelijski niz koji je uzgajan pod različitim uslovima kultivacije (Lifely, M. R. et al., Glycobiology 5(8):813-22 (1995)).
Jedan od načina da se dobije veliki rast potencije, a da se održi jednostavan proizvodni proces i potencijalno izbegnu značajni, neželjeni sporedni efekti, jeste da se uvećaju prirodne, ćelijski posredovane efektorne funkcije monoklonskih antitela konstruisanjem njihove oligosaharidne komponente kako je opisao Umana, P. et al., Nature Biotechnol. 17:176-180 (1999) i u U.S. Pat. No. 6,602,684. lgG1 tip antitela, najčešće korišćena antitela u imunoterapiji kancera, su glikoproteini koji imaju očuvan N-vezani glikozilacioni položaj na Asn297 u svakom CH2 domenu. Dva kompleksa biantenarnih oligosaharida prikačenih za Asn297 su polženi između CH2 domena, kako formiraju široke kontakte sa kičmom polipeptida i, njihovo prisustvo je suštinsko za antitelo radi posredovanja efektornih funkcija, kao što je antitelo-zavisna ćelijska citotoksičnost (ADCC) (Lifely, M. R., et al., Glycobiology 5: 813-822 (1995); Jefferis, R., et al., Immunol. Rev. 163: 59-76 (1998); VVright, A. and Morrison, S. L, Trends Biotechnol. 15: 26-32(1997)).
Prethodno je pokazano da prekomerna ekspresija B(1,4)-N-acetil-glukozaminiltransferaze III (GnTIII), glikoziltransferaze koja katalizuje formiranje bisektovanih oligosaharida u ovarijalnim ćelijama kineskog hamstera (CHO), značajno povećavain vitroADCC antineurobiastom aktivnost himeričnog monoklonskog antitela (chCE7) proizvedenog u konstruisanim CHO ćelijama. (Vidi: Umana, P. et al., Nature Biotechnol. 17: 176-180 (1999); i WO 99/154342, pri čemu su celokupni sadržaji ovde obuhvaćeni kao reference). Antitelo chCE7 pripada velikoj klasi nekonjugovanih monoklonskih antitela koja imaju visok afinitet i specifičnost prema tumoru, ali su isuviše slaba da bi bila klinički korisna kada se proizvode u standardnim industrijskim ćelijskim linijama kojima nedostaje GnTIII enzim (Umana, P., et al., Nature Biotechnol. 17:176-180 (1999)). Ova studija je bila prva koja je pokazala da bi se veliki porast ADCC aktivnosti mogao dobiti konstruisanjem ćelija koje proizvode antitela za ekspresiju GnTIII, što, isto tako, dovodi do porasta proporcije konstantnog regiona (Fc)-pridruženih, bisektovanih oligosaharida, uključujući bisektovane, ne-fukozilovane oligosaharide, nad nivoima nađenim kod antitela koja se javljaju u prirodi.
Izraz "ekspresija CD20" antigena treba da naznači značajan nivo ekspresije CD20 antigena u ćeliji, poželjno na površini B-ćelija, još poželjnije B-ćelijama tumora odnosno kancera, poželjno ne-solidnog tumora. Pacijenti koji imaju "kancer koji ekspresuje CD20" mogu biti otkriveni standardnim testovima poznatim u struci. "Ekspresija CD20" antigena isto tako, poželjno treba da naznači značajan nivo ekspresije CD20 antigena u ćeliji, poželjno na površini B-ćelija, još poželjnije B-ćelijama u autoimunoj bolesti. CD20 antigenska ekspresija se meri upotrebom npr. imunohistohemijske (IHC) detekcije, FACS ili preko detekcije odgovarajućih mRNA na bazi PCR-a. "Pacijenti" ili "osobe" su bilo koji od sisara koji pate od stanja ili bolesti prema pronalasku, a poželjno su ljudi.
Izraz "kancer koji ekspresuje CD20", kako je ovde korišćen, odnosi se pre svega na limfome (poželjno B-ćelijske ne-Hodgkinove limfome (NHL)) i limfocitne leukemije. Ovi limfomi i limfocitne leukemije obuhvataju, npr.: (a) folikularne limfome, (b) limfomi malih neotcepljenih ćelija / Burkittov limfom (uključujući endemski Burkittov limfom, sporadični Burkittov limfom i ne-Burkittov limfom), (c) limfome marginalne zone (uključujući B-ćelijski limfom ekstranodalne marginalne zone (limfomi mukoza-povezanog limfatičnog tkiva, MALT), B-ćelijski limfom nodalne marginale zone i limfom slezinske marginal zone), (d) limfom mantle ćelija (MCL), (e) limfom džinovskih ćelija (uključujući B-ćelijski difuzni limfom džinovskih ćelija (DLCL), difuzni limfom mešanih ćelija, imunoblastni limfom, primarni mediastinalni limfom B-ćelija, angiocentrični limfom-plućni limfom B-ćelija), (f) leukemiju vlasastih ćelija, (g) limfocitni limfom, VValdenstromovu makroglobulinemiju, (h) akutnu limfocitnu leukemiju (ALL), hroničnu limfocitnu leukemiju (CLL), limfom malih limfocita (SLL), B-ćelijsku prolimfocitnu leukemiju, (i) neoplazme plazmatskih ćelija, mijelom plazma ćelija, multipli mijelom, plazmacitom i (j) Hodgkinovu bolest.
Poželjno, kancer koji ekspresuje CD20 je B-ćelijski ne-Hodgkinov limfom (NHL). Drugi primeri kancera koji ekspresuju CD20 obuhvataju: limfom mantle ćelija (MCL), akutnu limfocitnu leukemiju (ALL), hroničnu limfocitnu leukemiju (CLL), B-ćelijski limfom difuznih velikuh ćelija (DLCL), Burkittov limfom, leukemiju vlasastih ćelija, folikularni limfom, multipli mijelom, limfom marginalne zone, post transplantacioni limfoproliferativni poremećaj (PTLD), HIV udruženi limfom, VValdenstromova makroglobulinemija, ili primarni CNS limfom.
Kako je ovde korišćeno, "autoimuna bolest" se odnosi na bolest ili poremećaj koja nastaje iz i usmerena je protiv sopstvenih tkiva pojedinca. Primeri autoimunih bolesti ili poremećaja obuhvataju, ali nisu ograničeni ovima, artritis (reumatoidni artritis, juvenilni reumatoidni artritis, osteoartritis, psorijazni artritis), psorijazu, dermatitis, polimiozitis/dermatomiozitis, toksičnu epidermalnu nekrolizu, sistemsku sklerodermu i sklerozu, odgovore koji su u vezi sa inflamatornom bolesti creva, Crohnovu bolest, ulcerativni kolitis, respiratorni distres sindrom, respiratorni distres sindrom odraslih (ARDS), meningitis, encefalitis, uveitis, kolitis, glomerulonefritis, alergijska stanja, ekcem, astmu, stanja koja uključuju infiltraciju T ćelijama i hronične inflamatorne odgovore, aterosklerozu, autoimuni miokarditis, deficijenciju leukocitne adhezije, sistemski lupus eritematozus (SLE), juvenilni početak dijabetesa, multiplu sklerozu, alergijski encefalomijelitis, imune odgovore povezane sa akutnom i zakasnelom preosetljivosti posredovane citokinima i T-limfocitima, tuberkulozu, sarkoidozu, granulomatozu uključujući VVegenerovu granulomatozu, agranulocitozu, vaskulitis (uključujući ANCA), aplastičnu anemiju, Diamond Blackfan anemiju, imunu hemolitičnu anemiju uključujući autoimunu hemolitičku anemiju (AIHA), pernicioznu anemiju, čistu aplaziju crvenih ćelija (PRCA), deficijenciju faktora VIII, hemofiliju A, autoimunu neutropeniju, pancitopeniju, leukopeniju, bolesti koje uključuju leukocitnu dijapedezu, inflamatorne poremećaje centralnog nervnog sistema (CNS), sindrom višestrukog oštećenja organa, miasteniju gravis, bolesti posredovane kompleksom antigen-antitelo, bolest anti-glomerularne bazne membrane, sindrom anti-fosfolipidnih antitela, alergijski neuritis, Bechetovu bolest, Castlemanov sindrom, Goodpastureov sindrom, Lambert-Eaton mijasteni sindrom, Revnaudov sindrom, Sjorgenov sindrom, Stevens Johnsonov sindrom, pemfigoidnu bulozu, pemfigus, autoimune poliendokrinopatije, s nefropatiju, IgM polineuropatije ili IgM posredovane neuropatije, idiopatsku trombocitopenijsku purpuru (ITP), trombotsku trombocitopenijsku purpuru (TTP), autoimunu trombocitopeniju, autoimunu bolest ovarijuma i testisa uključujući autoimuni orhitis i ooforitis, primarni hipotiroidizam; autoimune endokrine bolesti uključujući autoimuni tiroiditis, hronični tiroiditis (Hashimotov tiroiditis), subakutni tiroiditis, idiopatski hipotiroidizam, Addisonova bolest, Graveova bolest, autoimune poliglandularne sindrome (ili poliglandularne I endokrinopatske sindrome), tip I dijabetes, isto tako, nazvan insulin-zavisnim diabetesom I melitus (IDDM) i Sheehanov sindrom; autoimuni hepatitis, limfoidni intersticijalni pneumonitis (HIV), bronhiolitis obliterans (ne-transplantirani) vs NSIP, Guillain-Barreov sindrom, vaskulitis velikih sudova (uključujući polimijalgiju reumatiku i arteritis gigantskih ćelija (Takavasu)), vaskulitis srednjih sudova (uključujući Kavvasakijevu bolest i poliarteritis nodozu), ankilozni spondilitis, Bergerovu bolest (IgA nefropatija), brzo progresivni glomerulonefritis, primarnu bilijarnu cirozu, celijačni spru (glutenska enteropatija), krioglobulinemiju, amiotrofičnu lateralnu sklerozu (ALS), bolest koronarnih arterija itd. "Sredstvo inhibicije rasta" kada je ovde korišćeno, odnosi se na jedinjenje ili smešu koje inhibira rast ćelija, posebno kancerske ćelije koje ekspresuju CD20 biloin vitroiliin vivo.Tako, sredstvo inhibicije rasta može biti ono koje značajno smanjuje procenat ćelija koje ekspresuju CD20 u S fazi. Primeri sredstava inhibicije rasta obuhvataju sredstva koja blokiraju progresiju ćelijskog ciklusa (na mestu koje nije S faza), kao što su sredstva koja indukuju G1 zastoj i zastoj M-faze. Klasični blokatori M-faze uključuju vinke (vinkristin i vinblastin), taksane i topo II inhibitore, kao što su: doksorubicin, epirubicin, daunorubicin, etopozid i bleomicin. Ona sredstva koja zaustavljaju G1, isto tako, prelivaju se u zastoj S-faze, na primer, DNA alkilirajuća sredstva, kao što su: tamoksifen, prednizon, dakarbazin, mehioretamin, cisplatin, metotreksat, 5-fluorouracil i ara-C. Dalje informacije, mogu se videti u: " The Molecular Basis of Cancer", Mendelsohn and Israel, eds., Chapter 1, naslovljeno: "Cell cycle regulation, oncogenes, and antineoplastic drugs" by Murakami et al. (WB Saunders: Philadelphia, 1995), posebno na strani 13. "Tretman" se odnosi i na terapeutski tretman i na profilaktičke ili preventivne mere. Oni kojima je tretman neophodan obuhvataju one koji već imaju bolest, kao i one kod kojih bolest treba sprečiti. Prema tome, pacijent kog treba lečiti prema ovome može biti dijagnostikovan da ima bolest ili može imati predispoziciju ili da je suspektan za bolest.
Izraz "citotoksično sredstvo" kako je ovde korišćen, odnosi se na supstancu koja inhibira ili sprečava funkciju ćelija i/ili prouzrokuje destrukciju ćelija. Izraz treba da obuhvati radioaktivne izotope (npr., At21<1>, I<131>, I<125>, Y<9t>), Re18S,Re188, Sm153,Bi<2>12,P32iradioaktivne izotope Lu), hemoterapeutska sredstva, kao i toksine, kao što su toksini malih molekula ili enzimski aktivni toksini bakterijskog, gljivičnog, biljnog ili životinjskog porekla, uključujući fragmente i/ili njihove varijante.
"Hemoterapeutsko sredstvo" je hemijsko jedinjenje koje je od koristi u lečenju raka. Primeri hemoterapeutskih sredstava uključuju: alkilacijska sredstva, kao što su
tiotepa i ciklofosfamid (CYTOXAN™); alkil sulfonate, kao što je busulfan, improsulfan i piposulfan; aziridine, kao što je benzodopa, karbokvon, meturedopa i uredopa; etilenimine i metilamelamine, koji uključuju altretamin, trietilenmelamin, trietilenfosforamid, trietilentiofosforamid i trimetiiolomelarnin; acetogenine (posebno bulatacin i bulatacinon); delta-9-tetrahidrokanabinol (dronabinol, MARENOL™); beta-lapahon; lapahol; kolhicine; betulinsku kiselinu; kamptotecin (uključujući sintetski analog topotekan (HYCAMTIN™), CPT-11 (irinotekan, CAMPTOSAR™), a ceti I kamptotecin, skopolektin i 9-aminokamptotecin); briostatin; kalistatin; CC-1065 (uključujući njegove sintetske analoge adozelesin, karzelesin i bizelesin); podofilotoksin; podofilinsku kiselinu; teniposid; kriptoficine (posebno kriptoficin 1 i kriptoficin 8); doiastatin; duokarmicin (uključujući sintetske analoge, KVV-2189 i CB1-TM1); eleuterobin; pankratistatin; sarkodiktin; spongistatin; azotne muštarde, kao što je hlorambucil, hlornafazin, holofosfamid, estramustin, ifosfamid, mehloretamin, mehloretamin oksid hidrohlorid, meifalan, novembicin, fenesterin, prednimustin, trofosfamid, uracil mustard; nitrozuree. kao što su karmustin, hlorozotocin, fotemustin, lomustin, nimustin i ranirnustin; antibiotike, kao što su enediin antibiotici (npr., kaliceamicin, posebno kaliceamicin gama 11 i kaliceamicin omega 11 (vidi, npr., Angew, Chemie Intl. Ed. Engl., 33: 183-186 (1994)); dinemicin, uključujući dinemicin A; esperamicin; kao i neokarzinostatin hromofor i srodne hromoproteinske enediin antiobiotske hromofore), aklacinomicine, aktinomicin, autramicin, azaserin, bleomicine, kaktinornicin, karabicin, karminomicin, karzinofilin, hromomicine, daktinomicin, daunorubicin, detorubicin, 6-diazo-5-okso-L-norleucin, doksorubicin (uključujući ADRIAMYCIN™, morfolino-doksorubicin, cijanomorfolino-doksorubicin, 2-pirolino-doksorubicin, doksorubicin HC! liposomsku injekciju (DOXIL™), liposomalni doksorubicin TLC D-99 (MYOCET™), pegilovani liposomalni doksorubicin (CAELYX™) i deoksidoksorubicin), epirubicin, ezorubicin, idarubicin, marceiomicin, mitomicine, kao što je mitomicin C, mikofenolnu kiselinu, nogalamicin, olivomicine, peplomicin, potfiromicin, puromicin, kvelamicin, rodorubicin, streptonigrin, streptozocin, tubercidin, ubenimeks, zinostatin, zorubicin; anti-metabolite, kao što su metotreksat, gemcitabin (GEMZAR™), tegafur (UFTORAL™), kapecitabin (XELODA™), epotilon i 5-fluorouracil (5-FU); analoge folne kiseline, kao što su denopterin, metotreksat, pteropterin, trimetreksat; purinske analoge, kao što su fludarabin, 6-merkaptopurin, tiamiprin, tiogvanin; pirimidinske analoge, kao što su ancitabin, azacitidin, 6-azauridin, karmofur, citarabin, dideoksiuridin, doksifluridin, enocitabin, floksuridin; anti-adrenalne lekove, kao što su aminoglutetimid, mitotan, trilostan; sredstva za obnavljanje folne kiseline, kao što je frolinska kiselina; aceglaton; aldofosfamid glikozid; aminolevulinsku kiselinu; eniluracil; amsakrin; bestrabucil; bisantren; edatraksat; defofamin; demekolcin; diazikvon; elfornitin; eliptinijum acetat; etoglucid; galijum nitrat; hidroksiureu; lentinan; lonidainin; majtansinoide, kao što su majtansin i ansamitocini; mitogvazon; mitoksantron; mopidanmol; nitraerin; pentostatin; fenamet; pirarubicin; lozoksantron; 2-etilhidrazid; prokarbazin, PSKL™ polisaharidni kompleks (JHS Natural Products, Eugene, OR); razoksan; rizoksin; sizofiran; spirogermarijum; tenuazonsku kiselinu; triazikvon; 2,2',2"-trihlorotrietilamin; trihotecene (posebno T-2 toksin, verakurin A, roridin A i angvidin); uretan; dakarbazin; manomustin; mitobronitol; mitolaktol; pipobroman; gacitozin; arabinozid ("Ara-C"); tiotepu; taksoid, npr., paklitaksel (TAXOL™), albuminskim-inženjeringom proizvedenu nanočestičnu formulaciju paklitaksela (ABRAXANE™) i docetakseia (TAXOTERE™); hloranbucil; 6-tiogvanin; merkaptopurin; metliotreksat; platinska sredstva, kao što su cisplatin, oksaliplatin i karboplatin; vinke, koji sprečavaju polimerizaciju tubulina pri formiranju mikrotubula, uključujući vinblastin (VELBAN™), vinkristin (ONCOVIN™), vindesin (ELDISINE™), FILDESIN™) i vinorelbin (NAVELBINE™)); etoposid (VP-16); ifosfamid; mitoksantron; leukovorin; novantron; edatreksat; daunomicin; aminopterin; ibandronat; inhibitor topoizomeraze RFS 2000; difluorometilornitin (DMFO); retinoide, kao što su retinoinska kiselina, uključujući beksaroten (TARGRETIN™); bisfosfonate, kao što su klodronat (na primer, BONEFOS™ ili OSTAC™), etidronat (DIDROCAL™), NE-58095, zoledronska kiselina/zoledronat (ZOMETA™), alendronat (FOSAMAJX™), pamidronat (AREDIA™), tiludronat (SKELID™) ili risedronat (ACTONEL™); troksacitabin (analog 1,3-dioksolan nukleozid citozina); antisens oligonukleotide, posebno one koji inhibiraju ekspresiju gena na putu signalizacije, koji je uključen u proliferaciju aberantnih ćelija, kao što su, na primer, PKC-alfa, Raf, H-Ras i receptor epidermalnog faktora rasta (EGF-R); vakcine, kao što su THERATOPE™ vakcina i vakcine za gensku terapiju, na primer, ALLOVECTIN™ vakcina, LEUVECTIN™ vakcina i VAXID™ vakcina; inhibitor topoizomeraze 1 (npr., LURTOTECAN™}; rmRH (npr., ABARELIX™); BAY439006 (sorafenib; Bayer); SU-11248 (Pfizer); perifosin, COX-2 inhibitor (npr., celekoksib ili etorikoksib), inhibitor proteosoma (npr., PS341); bortezomib (VELCADE™); CCI-779; tipifarnib (R1 1577); orafenib, ABT510; Bcl-2 inhibitor, kao što je oblimersen natrijum (GENASENSE™); piksantron; inhibitore EGFR-a (vidi definiciju u nastavku); inhibitore tirozin kinaze (vidi definiciju u nastavku); i farmaceutski prihvatljive soli, kiseline ili derivate bilo kog od prethodnih jedinjenja; kao i kombinacije dva ili više prethodnih jedinjenja, kao što su CHOP, što je skraćenica za kombinovanu terapiju ciklofosfamida, doksorubicina, vinkristina i prednizoiona (koji opciono dalje sadrži interferon-V (CHVP/interferon- ), FOLFOX, što je skraćenica za režim lečenja sa oksaliptatinom (ELOXAT!N™), u kombinaciji sa 5-FU i leukovorinom, CVP (ciklofosfamid, vinkristin i prednizolon), MCP (mitozantron, hlorambucii i prednizolon), FC (fludarabin i ciklofosfamid), ICE (ifosfamid, karboplatin i etoposid), i deksametazon, citarabin i cisplatin (DHAP), deksametazon, doksorubicin liposomalni i vinkristin (DVD), itd.
"Anti-angiogeno sredstvo" se odnosi na jedinjenje koje blokira ili interferira, do izvesnog stepena, razvijanje krvnih sudova. Anti-angiogeni faktor može, na primer, biti mali molekul ili antitelo, koje se vezuje za faktor rasta ili receptor faktora rasta, koji je uključen u poticanje angiogeneze. Ovde je poželjni anti-angiogeni faktor antitelo koje se vezuje za vaskularni endotelni faktor rasta (VEGF), kao što je bevacizumab
(AVASTIN™).
Naziv "citokin" je generički naziv za proteine koje oslobađa jedna ćelijska populacija, a koji na drugoj ćeliji dejstvuju kao intercelularni medijatori. Primeri takvih citokina su: limfokini, monokini i uobičajeni polipeptidni hormoni. Među citokine su uključeni i hormon rasta, kao što je humani hormon rasta, N-metionil humani hormon rasta i goveđi hormon rasta, paratiroidni hormon, tiroksin, insulin, proinsulin, relaksin; prorelaksin, glikoproteinski hormoni, kao što su folikulo-stimulirajući hormon (FSH), tireo-stimulišući hormon (TSH) i luteinizirajući hormon (LH), jetreni faktor rasta; fibroblastni faktor rasta, prolaktin, placentni laktogen, tumor nekrozis faktor a i B, mullerian-inhibirajuća supstanca, peptid povezan sa mišjim gonadotropinom, inhibin; aktivin, vaskularni endotelni faktor rasta, integrin, trombopoetin (TPO), nervni faktori rasta, kao što su NGF-B, faktor rasta trombocita; transformišući faktori rasta (TGF-i), kao što su TGF-a i TGF-p, insulinu sličan faktor rasta I i -II, eritropoetin (EPO), osteo-induktivni faktori; interferoni, kao što su interferon-a, -B i -y, faktori koji stimulišu kolonije (CSF-i), kao što su makrofagni-CSF (M-CSF), granulocitno-makrofagni-CSF (GM-CSF) i granulocitni CSF (G-CSF), interleukini (IL-i), kao što su: IL-1, IL-1a, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-11. IL-12, tumor nekrozis faktor, kao što je TNF-ct ili TNF-B, i drugi polipeptidni faktori, koji uključuju LIF i kit ligand (KL). Kao što je ovde korišćen, naziv citokin uključuje proteine iz prirodnih izvora ili iz rekombinantne ćelijske kulture i biološki aktivne ekvivalente nativne sekvence citokina.
Naziv "efektivna količina" odnosi se na količinu koja obezbeđuje željeni efekat. U slučaju sastojka formulacije, kao što je enzim hijaluronidaza, u skladu sa ovim pronalaskom efektivna količina je količina koja je potrebna za povećavanje disperzije i apsorpcije uporedo primenjenog anti-CD20 antitela, na takav način da anti-CD20 antitelo može delovati na terapeutski delotvoran način kao što je prethodno prikazano. U slučaju farmaceutske supstance leka, to je količina aktivnog sastojka, koja je delotvorna u tečenju bolesti kod pacijenta. Kada je bolest maligna bolest, efektivna količina leka može redukovati broj ćelija raka; smanjiti veličinu tumora; inhibirati (t.j., usporiti do izvesnog stepena i poželjno zaustaviti) infiltraciju ćelija raka u periferne organe; sprečiti (t.j., usporiti do izvesnog stepena i poželjno zaustaviti) metastaze tumora; inhibirati, do određenog stepena, tumorski rast; i/ili ublažiti do izvesnog stepena jedan ili više simptoma maligne bolesti. Prema stepenu do koga lek može sprečiti rast i/ili uništiti postojeće ćelije raka, on može biti citostatični i/ili citotoksični lek. Efektivna količina može produžiti preživljavanje bez progresije bolesti, dovesti do ciljnog odgovora (uključujući parcijalni odgovor, PR, ili potpuni odgovor, CR), povećati ukupno vreme preživljavanja, i/ili ublažiti jedan ili više simptoma raka.
Naziv "farmaceutska formulacija" odnosi se na preparat, koji je u takvom obliku da omogućuje da biološka aktivnost aktivnog sastojka bude delotvorna, i koji ne sadrži dodatne komponente, koje nisu prihvatljive toksičnosti za ispitanika, kome bi se formulacija primenjivala. Takve formulacije su sterilne.
"Sterilna" formulacija je aseptična ili oslobođena prisustva svih živućih organizama i njihovih spora.
"Stabilna" formulacija je formulacija u kojoj je sav, u njoj sadržani, protein, suštinski zadržao svoju fizičku stabilnost i/ili hemijsku stabilnost i/ili biološku aktivnost nakon čuvanja na temperaturi nameravanog skladištenja, npr., 2 - 8°C. Poželjno, formulacija suštinski zadržava svoju fizičku i hemijsku stabilnost, kao i biološku aktivnost nakon skladištenja. Period skladištenja je uopšteno odabran na osnovu navedenog roka trajanja formulacije. Pored toga, formulacija je poželjno stabilna nakon zamrzavanja (na, npr., -20°C) i razmrzavanja formulacije, na primer nakon 1 ili više ciklusa zamrzavanja i odmrzavanja. Razne analitičke tehnike za merenje stabilnosti proteina raspoložive su ovoj oblasti, a prikazane su, na primer, u Peptide and Protein Drug Deliverv, 247-301, Vincent Lee Ed., Marcel Dekker, Inc., New York, New York, Pubs. (1991) i Jones, A. Adv. Drug Deliverv Rev. 10: 29-90 (1993). Stabilnost može biti merena na odabranoj temperaturi tokom odabranog vremenskog trajanja. Stabilnost se može proceniti kvalitativno i/ili kvantitativno na mnoštvo različitih načina, koji uključuju procenu formiranja agregata (na primer, korišćenjem hromatografije sa isključivanjem prema
veličini, merenjem turbiditeta, t/ili vizuelnim pregledom; utvrđivanjem heterogenosti naelektrisanja, korišćenjem katjon izmenjivačke hromatografije ili kapilarne zonske elektroforeze; SDS-PAGE analizom radi poređenja redukovanog i intaktnog antitela; procenom biološke aktivnosti ili antigen-vezujuće funkcije antitela; itd.. Nestabilnost može uključiti bilo koji od navedenih procesa: agregaciju, deamidaciju (npr., Asn deamidaciju), oksidaciju (npr., Met oksidaciju), izomerizaciju (npr., Asp izomerizaciju), isecanje/hidrolizu/fragmentaciju (npr., fragmentiranje zglobnog regiona), formiranje sukcinimida, nespareni cistein(cisteini), itd..
Terapeutske formulacije antitela, korišćenih u skladu sa ovim pronalaskom, pripremaju se za skladištenje mešanjem antitela koje poseduje željeni stepen čistoće sa opcionim farmaceutski prihvatljivim nosačima, ekscipijensima ili stabilizatorima (Remingtonov Pharmaceutical Sciences 16. izdanje, Osol, A. Ed. (1980)), u formi liofilizovanih formulacija ili tečnih rastvora. Prihvatljivi nosači, ekscipijensi ili stabilizatori su netoksični za primaoca u korišćenim dozažama i koncentracijama.
Naziv "surfaktant", kako je ovde korišćen, označava farmaceutski prihvatljiv površinski aktivan agens. U formulaciji pronalaska, količina surfaktanta je opisana procentima, izraženim kao težina/zapremina. Najčešće korišćena jedinica za odnos težina/zapremina je mg/mL. Pogodni primeri farmaceutski prihvatljivih surfaktanata uključuju: polioksietilen-sorbitan estre masnih kiselina (Tvveen), polietilen-polipropilen glikole, polioksietilen-stearate, polioksietilen alkil etre, npr., polioksietilen monolauril etar, alkilfenilpolioksi-etilen etre (Triton-X), kopolimer polioksietilen-polioksipropilen (Poloxamer, Pluronic) i natrijum dodecil sulfat (SDS). Najpogodniji estri polioksietilensorbitan-masnih kiselina su polisorbat 20 (prodaje se pod trgovačkim nazivom Tvveen 20™) i polisorbat 80 (u prodaji se nalazi pod trgovačkim imenom Tvveen 80™). Najpogodniji kopolimeri polietilen-polipropilen su oni koji se u prodaji nalaze pod nazivima Pluronic® F68 ili Poloxamer 188™. Poželjni polioksietilen-stearati su oni koji se u prodaji nalaze pod trgovačkim nazivom Myrj™. Najpogodniji polioksi-etilen alkil etri su oni koji se u prodaji nalaze pod trgovačkim nazivom Brij™. Najpogodniji alkilfenolpoli-oksietilen etri su oni koji se na tržištu nalaze pod trgovačkim nazivom Triton-X.
Naziv "pufer", kako je ovde korišćen, označava farmaceutski prihvatljivi pufer. Kao što je ovde korišćen, naziv "puferišuće sredstvo koje obezbeđuje pH od 5.5 ± 2.0" odnosi se na sredstvo koje omogućuje da rastvor koji ga sadrži bude otporan na promene pH, delovanjem komponenti konjugata njegove kiseline/baze. Pogodni farmaceutski prihvatljivi puferi u skladu sa pronalaskom sadrže, ali bez ograničavanja na njih, histidin-pufere, citrat-pufere, glukonat-pufere, sukcinat-pufere, acetat-pufere, glicilglicin i druge pufere organskih kiselina, i fosfat-pufere. Poželjni puferi uključuju L-histidin ili mešavine L-histidina sa hidrohloridom L-histidina sa izotoničnim sredstvima uz potencijalno podešavanje pH sa, u struci poznatom, kiselinom ili bazom. Najpoželjniji je L-histidin.
"Histidin pufer" je pufer koji sadrži aminokiselinu histidin. Primeri histidin pufera uključuju histidin hlorid, histidin acetat, histidin fosfat, histidin sulfat. Utvrđeno je da je poželjni histidin pufer, utvrđen u ovim primerima, histidin hlorid. U poželjnom ostvarenju, histidin hloridni pufer se priprema titracijom L-histidina (slobodna baza, čvrsta masa) sa razblaženom hlorovodoničnom kiselinom ili rastvaranjem L-histidina i hidrohlorida L-histidina (npr., u vidu monohidrata) u definisanoj količini i odnosu.
Pod pojmom "izotoničan" podrazumeva se da formulacija od značaja ima suštinski isti osmotski pritisak kao humana krv. Izotonične formulacije će uopšteno imati osmolalitet od~300 mOsm/kg. Izotoničnost se može izmeriti korišćenjem osmometra na principu snižavanja napona pare rastvora ili snižavanja tačke mržnjenja.
Naziv "sredstva za izotoničnost", kako je ovde korišćen, označava farmaceutski prihvatljiva sredstva za izotoničnost. Sredstva za izotoničnost koriste se da bi se obezbedila izotonična formulacija. Izotonična formulacija je tečnost ili tečnost rekonstituisana iz forme čvrste faze, npr., liofilizovani oblik, i označava rastvor koji ima isti tonus kao neki drugi rastvor sa kojim se isti upoređuje, kao što je fiziološki slani rastvor i krvni serum. Pogodna sredstva za izotoničnost obuhvataju, ali se istima ne ograničavaju, soli, koje uključuju, ali ne ograničavajući se na njih, natrijum hlorid (NaCI) ili kalijum hlorid, šećere i šećerne alkohole, uključujući, ali bez ograničavanja njima, glukozu, saharozu, trehalozu ili glicerol i bilo koju komponentu iz grupe aminokiselina, šećera, soli i njihovih kombinacija. Sredstva za izotoničnost se uopšteno koriste u ukupnoj količini od oko 5 mM do oko 350 mM.
Izraz "tečnost", kako je ovde korišćen u vezi sa formulacijom u skladu sa pronalaskom, označava formulaciju koja je u tečnom stanju na temperatuuri od najmanje oko 2 do oko 8 °C.
Izraz "liofilizovan", kako je ovde korišćen u vezi sa formulacijom u skladu sa pronalaskom, označava formulaciju koja je osušena zamrzavanjem formulacije, nakon čega je sledila sublimacija leda iz zamrznutog sadržaja, posredstvom bilo kog, u struci poznatog, postupka sušenja zamrzavanjem, na primer, uz pomoć komercijalno dostupnih sprava za sušenje zamrzavanjem.
Naziv "soli", kako je ovde korišćen, označava so u količini od oko 1 mM do približno 500 mM. Ne-ograničavajući primeri soli obuhvataju soli sa bilo kojom od kombinacija katjona, natrijuma, kalijuma, kalcijuma ili magnezijuma sa anjonima, hloridom, fosfatom, citratom, sukcinatom, sulfatom ili njihovim mešavinama.
Naziv "aminokiselina", kako je ovde korišćen, označava aminokiselinu u količini od oko 1 do oko 100 mg/mL, koja uključuje, ali bez ograničavanja na njih, arginin, glicin, ornitin, glutamin, asparagin, lizin, histidin, glutaminsku kiselinu, asparaginsku kiselinu, izoleucin, leucin, alanin, fenilalanin, tirozin, triptofan, metionin, serin i prolin.
"Saharid" ovde uključuje opštu smešu (CH20)n i njene derivate, uključujući monosaharide, disaharide, trisaharide, polisaharide, šećerne alkohole, reduktivne šećere, ne-reduktivne šećere, itd.. Primeri saharida ovde uključuju glukozu, saharozu, trehalozu, laktozu, fruktozu, maltozu, dekstran, glicerin, dekstran, eritritol, glicerol, arabitol, silitol, sorbitol, manitol, melibiozu, melezitozu, rafinozu, manotriozu, stahiozu, maltozu, laktulozu, maltulozu, giucitol, maltitol, laktitol, izo-maltulozu, itd.. U definiciju u skladu sa pronalaskom uključeni su, takođe, glukozamin, N-metilglukozamin {takozvani "meglumin"), galaktozamin i neuraminska kiselina i kombinacije saharida u skladu sa pronalaskom. Poželjni saharid ovde je ne-reduktivni disaharid, kao što je trehaloza ili saharoza. Najpoželjniji saharid u skladu sa ovim pronalaskom je trehaloza.
Naziv "stabilizator" odnosi se na farmaceutski prihvatljive stabilizatore, kao što su, primera radi, ali bez ograničavanja na njih, aminokiseline i šećeri, kao što su u prethodnim poglavljima opisani, kao i komercijalno dostupni dekstran i bilo koje vrste i molekulske težine, kako je u struci poznato.
Izraz "antioksidans" označava farmaceutski prihvatljiiv antioksidans. On može da uključi eksipijense, kao što je metionin, benzilalkohol ili bilo koji drugi ekscipijens, koji se koristi da bi se oksidacija svela na minimum.
Izraz "postupak lečenja" ili njemu ekvivalentni izrazi, kada se primenjuje, na primer, na rak, odnosi se na proceduru ili pravac delovanja koji je utvrđen da bi se smanjio ili eliminisao broj ćelija raka kod pacijenta, ili da bi se ublažili simptomi raka. "Postupak lečenja" raka ili drugog proliferativnog poremećaja ne znači obavezno da će ćelije raka ili drugog poremećaja, biti, stvarno, eliminisane, da će broj ćelija raka ili poremećaja biti, stvarno, redukovan, ili da će simptomi raka ili drugog poremećaja biti, stvarno, ublaženi. Često će postupak lečenja raka biti vršen čak i kada postoji mala verovatnoća uspeha, ali se njime, sa datom istorijom bolesti i procenjenim očekivanim preživljavanjem pacijenta, uprkos tome, izgleda potiče sveukupni povoljni pravac delovanja.
Problem koji treba resiti ovim pronalaskom je, prema tome, obezbediti nove visoko koncentrisane, stabilne farmaceutske formulacije farmaceutski aktivnog anti-CD20 antitela ili mešavina takvih molekula antitela za subkutanu injekciju. Takve formulacije obuhvataju, sem visokih količina anti-CD20 antitela ili njegovih mešavina, pufersko sredstvo, stabilizator ili mešavinu dva ili više stabilizatora, nejonski surfaktant i poželjno, efektivnu količinu najmanje jednog enzima hijaluronidaze. Proizvodnja visoko-koncentrisanih formulacija antitela je izazov zbog toga što moguće povećanje viskoznosti pri visokim koncentracijama proteina i moguće povećanje agregacije proteina, fenomen koji jeper sekoncentraciono-zavisan. Visoki viskoziteti negativno utiču na mogućnosti procesa (npr., korake pumpanja i filtriranja) formulacija antitela i primenu (npr., mogućnosti šprica). U nekim slučajevima, dodavanjem podloga mogu se smanjiti visoki viskoziteti. Veliki izazov je obuzdavanje i ispitivanje agregacije proteina. Sa agregacijom se može računati tokom različitih koraka proizvodnog procesa, koji obuhvataju fermentaciju, prečišćavanje, formulisanje, kao i u periodu čuvanja. Različiti faktori, kao što su temperatura, koncentracija proteina, stres mućkanjem, smrzavanje i topljenje, efekti rastvarača i surfaktanta, kao i hemijske modifikacije, mogu uticati na ponašanje u vezi sa agregacijom terapeutskog proteina. U toku razvoja visoko koncentrisanih formulacija antitela mora se pratiti tendencija agregacije proteina i obuzdavati dodavanjem različitih podloga i surfaktanata [Kiese S. et al., J. Pharm. Sci., 2008; 97(10); 4347-4366].
U prvom aspektu, ovaj pronalazak obezbeđuje visoko koncentrisanu, stabilnu farmaceutsku formulaciju farmaceutski aktivnog anti-CD20 antitela ili mešavine takvih molekula antitela za parenteralnu primenu. Poželjno, način aplikacije je intravensko primenjivanje u vidu bolusa ili kontinuirane infuzije tokom vremenskog perioda, intramuskulamim, intraperitonealnim, tntracerobrospinalnim, subkutanim, intra-artikularnim, intrasinovijalnim ili intratekalnim putem. Poželjno je intravensko ili subkutano primenjivanje antitela; najpoželjnija je subkutana injekcija. Kako je prethodno objašnjeno, nije jednostavno napraviti visoko koncentrisanu, stabilnu farmaceutsku formulaciju CD20 antitela, koja je suštinski bez čestica. Ukoliko je takva formulacija namenjena subkutanom primenjivanju, onda poželjno ostvarenje takve formulacije je kombinovano sa enzimom hijaluronidaze.
Preciznije, visoko koncentrisana, stabilna farmaceutska formulacija farmaceutski aktivnog anti-CD20 antitela ovog pronalaska sadrži: - otprilike 20 do 350 mg/ml anti-CD20 antitela; - otprilike 1 do 100 mM puferišućeg sredstva koje obezbeđuje pH od 5.5 ± 2.0; - otprilike 1 do 500 mM stabilizatora ili smeše dva ili više stabilizatora, pri čemu se metionin eventualno koristi kao sekundarni stabilizator, poželjno u koncentraciji od 5 do 25 mM;
- 0.01 do 0.1 % nejonskog surfaktanta; i
- poželjno efektivnu količinu najmanje jednog enzima hijaluronidaze.
Visoko koncentrisana, stabilna farmaceutska formulacija farmaceutski aktivnog anti-CD20 antitela ovog pronalaska može da se obezbedi u tečnom obliku ili može da se obezbedi u liofilizovanom obliku. Koncentracija antitela u rekonstituisanoj formulaciji se može povećati rekonstitucijom liofilizovane formulacije kako bi se obezbedila koncentracija proteina u rekonstituisanoj formulaciji koja je oko 2-40 puta veća od koncentracije proteina u smeši pre koraka liofilizacije.
Poželjna koncentracija anti-CD20 antitela je 50 do 150 mg/ml, još bolje iznosi 75 do 150 mg/ml, čak još bolje je 120 ± 20 mg/ml, a najpoželjnije otprilike 120 mg/ml.
Poželjna koncentracija puferskog sredstva je 1 do 50 mM, poželjnija iznosi 10 do 30 mM; najpoželjnija koncentracija je oko 20 mM. Licima stručnim u ovoj oblasti su poznata brojna puferska sredstva, kako je prethodno istaknuto. Poželjno pufersko sredstvo je odabrano iz grupe koju čine: histidinski pufer, pufer sirćetne kiseline i pufer limunske kiseline, najpoželjniji je L-histidin/HCI pufer. Histidinski pufer prema pronalasku se koristi u količini od otprilike 1mM do otprilike 50 mM, poželjno od oko 10 mM do oko 30 mM i, još najbolje od otprilike 20 mM. Pufer sirćetne kiseline prema pronalasku je poželjno od oko 10 mM do oko 30 mM i, najpoželjnije od otprilike 20 mM. Pufer limunske kiseline prema pronalasku je poželjno u količini od oko 10 mM do oko 30 mM i, najpoželjnije od otprilike 20 mM.
Nezavisno od pufera koji će da se koristi, pH će se podešavati na vrednost sadržanu između 4.5 do otprilike 7.0 i poželjnije od 5.5 do otprilike 6.5, isto tako poželjno, vrednost će poželjno biti odabrana iz sledeće grupe: 5.5, 6.0, 6.1 i 6.5. Ovaj pH se može postići podešavanjem sa kiselinom ili bazom, poznato u ovoj stručnoj oblasti, ili korišćenjem odgovarajućih mešavina puferskih komponenti ili oba.
Stabilizator(i) (koristi se kao sinonim za izraz "stabilišuće sredstvo" u ovom Opisu patenta) je/su poželjno odabran(i) iz grupe koju čine: so, ugljenihidrat, saharid i amino kiselina(e), poželjnije ugljenihidrat ili saharid, još poželjnije šećer koji je zvanično odobren kao pogodan aditiv ili podloga u farmaceutskim formulacijama, najpoželjnije odabran iz grupe koju čine: a,a-trehaloza dihidrat, NaCI i metionin. Poželjna koncentracija stabilizatora je 15 do 250 mM, ili još poželjnije 150 do 250 mM. Najpoželjnija je koncentracija od otprilike 210 mM. Formulacija može sadržavati sekundarni stabilizator, pri čemu je ovaj sekundarni stabilizator poželjno metionin, poželjno u koncentraciji od 5 do 25 mM, još bolje u koncentraciji od 5 do 15 mM. Najpoželjnija koncentracija metionina je otprilike 10 mM.
Nejonski surfaktant je poželjno polisorbat, poželjnije je odabran iz grupe koju čine: polisorbat 20, polisorbat 80 i polietilen-polipropilen kopolimer. Koncentracija nejonskog surfaktanta je 0.01 do 0.1 % (tež/vol), ili 0.02 do 0.08 % (tež/vol) i poželjno 0.02 do 0.06 % (tež/vol), najpoželjnije otprilike 0.06 % (tež/vol).
Izraz "šećer" kako je ovde korišćen označava farmaceutski prihvatljiv šećer koji se koristi u količini od otprilike 25 mM do oko 500 mM. Poželjno, 100 do 300 mM. Još poželjnije, 180 do 240 mM. Najpoželjnije je 210 mM.
Koncentracija enzima hijaluronidaze zavisi od enzima hijaluronidaze koji se zapravo koristi za pripremu formulacije prema pronalasku. Lice stručno u ovoj oblasti može jednostavno odrediti efektivnu količinu enzima hijaluronidaze na osnovu daljeg izlaganja u nastavku Opisa. Enzim treba da se obezbedi u dovoljnoj količini tako da je moguće povećanje u disperziji i absorpciji anti-CD20 antitela koje se primenjuje istovremeno. Efektivna količina enzima hijaluronidaze poželjno je otprilike 1'000 do 16'000 I J/ml, pri čemu navedena količina odgovara otprilike 0.01 mg do 0.15 mg proteina na osnovu predpostavljene specifične aktivnosti od 100'000 I J/mg. Poželjna koncentracija enzima hijaluronidaze je otprilike 1'500 do 12'000 U/ml. Najpoželjnija koncentracija je od otprilike 2'000 I J/ml ili oko 12'000 I J/ml. Ovde ranije precizirane količine odgovaraju količini enzima hijaluronidaze koja se početno dodaje formulaciji. Enzim hijaluronidaze je prisutan ili kao kombinovana konačna formulacija ili se koristi za istovremeno primenjivanje, npr., u vidu ko-formulacije kako je dalje opisano u nastavku. Bitan momenat za formulaciju iz zahteva je taj da kada je spremna za upotrebu i/ili injektovanje ima sastav koji je zahtevan.
Enzim hijaluronidaze može biti poreklom od životinja, humanih uzoraka ili proizveden putem tehnologije rekombinantne DNA kako je dalje opisano u nastavku.
Preciznije, visoko koncentrovane, stabilne farmaceutske formulacije prema ovom pronalasku imaju jedan od sledećih poželjnih sastava: a) 100 do 150 mg/ml anti-CD20 antitela, pri čemu je ovo antitelo poželjno rituksimab, okrelizumab ili HuMab<CD20>; 1 do 50 mM histidinskog pufera, poželjno L-histidin / HCI pri pH od otprilike 5.5; 15 do 250 mM stabilizatora koji je poželjno a,a-trehaloza dihidrat i eventualno metionin kao sekundarni stabilizator u koncentraciji od 5 do 25 mM; ne-jonski surfaktant odabran iz grupe: polisorbat 20 i polisorbat 80, poželjno 0.02 do 0.06 % (tež/vol), i eventualno 1'000 do 16'000 U/ml enzima hijaluronidaze, poželjno rHuPH20, najbolje u koncentraciji od 2'000 IJ/ml ili 12'000 IJ/ml. b) 120 ± 20 mg/ml anti-CD20 antitela, pri čemu je ovo antitelo poželjno rituksimab, okrelizumab ili HuMab<CD20>; 10 do 30 mM, poželjno 20 mM histidinskog pufera, poželjno L-histidin / HCI pri pH od otprilike 5.5; 150 do 250 mM, poželjno 210 mM stabilizatora koji je poželjno a,a-trehaloza dihidrat i eventualno metionin kao sekundarni stabilizator u koncentraciji od 5 do 25 mM, poželjno 5 do 15 mM, najpoželjnije 10 mM; ne-jonski surfaktant odabran iz grupe: polisorbat 20 i polisorbat 80, poželjno 0.02 do 0.06 % (tež/vol), i eventualno 1'000 do 16'000 IJ/ml, poželjno 1'500 do 12'000 IJ/ml, najpoželjnije 2'000 IJ/ml ili 12'000 IJ/ml enzima hijaluronidaze, poželjno rHuPH20. c) 120 mg/ml anti-CD20 antitela, pri čemu je ovo antitelo poželjno rituksimab, okrelizumab ili HuMab<CD20>; 10 do 30 mM, poželjno 20 mM histidinskog pufera,
poželjno L-histidin / HCI pri pH od otprilike 5.5; 150 do 250 mM, poželjno 210 mM stabilizatora koji je poželjno a,a-trehaloza dihidrat i eventualno metionin kao sekundarni stabilizator u koncentraciji od 5 do 25 mM, poželjno 5 do 15 mM, najpoželjnije 10 mM; ne-jonski surfaktant odabran iz grupe: polisorbat 20 i polisorbat 80, poželjno 0.02 do 0.06 % (tež/vol), i eventualno 1'000 do 16'000 IJ/ml, poželjno 1'500 do 12'000 IJ/ml, najpoželjnije 2'000 IJ/ml ili 12'000 IJ/ml enzima hijaluronidaze, poželjno rHuPH20.
d) 120 mg/ml anti-CD20 antitela, poželjno rituksimab; 20 mM histidinskog pufera, poželjno L-histidin / HCI pri pH od otprilike 5.5; 210 mM a,a-trehaloze dihidrata i eventualno 10 mM metionina kao sekundarnog stabilizatora; ne-jonski surfaktant odabran iz grupe: polisorbat 20 i polisorbat 80, poželjno 0.02 do 0.06 % (tež/vol), i eventualno 2'000 IJ/ml ili 12'000 IJ/ml enzima hijaluronidaze, poželjno rHuPH20.
e) Liofilizovana formulacija koja sadrži 120 mg/ml anti-CD20 antitela, poželjno rituksimab; 20 mM histidinskog pufera, poželjno L-histidin / HCI pri pH od otprilike
5.5; 210 mM a,a-trehaloze dihidrata i eventualno 10 mM metionina kao sekundarnog stabilizatora; ne-jonski surfaktant odabran iz grupe: polisorbat 20 i polisorbat 80, poželjno 0.02 do 0.06 % (tež/vol), i eventualno 2'000 IJ/ml ili 12'000 IJ/ml enzima hijaluronidaze, poželjno rHuPH20.
Obezbeđena je stabilna farmaceutska formulacija farmaceutski aktivnog anti-CD20 antitela koja sadrži oko 30 mg/ml do 350 mg/ml, na primer, oko 30 mg/ml do 100mg/ml (uključujući oko 30mg/ml, oko 50mg/ml ili oko 100mg/ml) okrelizumaba (npr. humanizovanog 2H7.v16); oko 1 do 100 mM puferskog sredstva (npr. natrijum acetata) koje obezbeđuje pH od 5.5 ± 2.0 (npr. pH 5.3); oko 15 do 250 mM stabilizatora ili mešavine dva ili više stabilizatora (uključujući trehalozu, npr. oko 8% trehaloze dihidrata); oko 0.01 do 0.1 % (tež/vol) nejonskog surfaktanta; i eventualno efektivnu količinu najmanje jednog enzima hijaluronidaze (npr. rhHUPH20), poželjno u količini od oko 1,500 U/ml do oko 12,000 U/ml.
Alternativne smeše poželjnih formulacija su date u primerima.
Predloženo je korišćenje malih količina rastvorljivih glikoproteina hijaluronidaze (sHASEGPs) radi olakšavanja subkutane injekcije terapijskih proteina i antitela; vidi VVO2006/091871. Pokazalo se da dodavanje ovakvih rastvorljivih glikoproteina hijaluronidaze (bilo u vidu kombinovane formulacije bilo ko-administracijom) olakšava primenjivanje terapijskog leka u hipodermis. Brzom depolimerizacijom hijaluronan HA u ekstracelularnom prostoru, sHASEGP smanjuje viskozttet intersticijuma, čime povećava hidrauličnu provodljivost i omogućava bezbedno i lagodno primenjivanje velikih volumena u subkutano tkivo. Povećana hidraulična provodljivost indukovana pomoću sHASEGP kroz smanjeni viskozitet intersticijuma omogućava veću disperziju, potencijalno povećavajući sistemsku bioraspoloživost SC primenjenog terapeutskog leka.
Visoko koncentrisane, stabilne farmaceutske formulacije ovog pronalaska koje sadrže rastvarljiv glikoprotein hijaluronidaze su na taj način posebno pogodne za subkutanu injekciju. Stručnim licima je jasno razumljivo da takva formulacija koja sadrži anti-CD20 antitelo i rastvorljiv glikoprotein hijaluronidaze može da se obezbedi za primenjivanje u obliku jedne kombinovane formulacije ili alternativno u obliku dve zasebne formulacije koje se mogu pomešati neposredno pre supkutanog injektovanja. Alternativno, anti-CD20 antitelo i rastvorljivi glikoprotein hijaluronidaze mogu da se primene kao zasebne injekcije na različitim mestima na telu, poželjno na mestima koja su u neposrednom susedstvu. Isto je tako moguće da se injektuju terapijska sredstva prisutna u formulaciji prema ovom pronalasku u vidu uzastopnih injekcija, npr., prvo rastvorljivi glikoprotein hijaluronidaze a zatim, injektuje se formulacija sa anti-CD20 antitelom. Ovo injektovanje se isto tako može izvesti obrnutim redosledom, npr. prvo injektovanjem formulacije sa anti-CD20 antitelom a zatim, injektuje se rastvorljivi glikoprotein hijaluronidaze. U slučaju kada se anti-CD20 antitelo i rastvorljivi glikoprotein hijaluronidaze primenjuju u vidu zasebnih injekcija, jedan ili oba proteina se moraju obezbediti sa puferišućim sredstvom, stabilizatorom(ima) i nejonskim surfaktantom, u koncentracijama kako su precizirane u priključenim patentnim zahtevima ali, isključujući enzim hijaluronidaze. Enzim hijaluronidaze onda može biti obezbeđen npr., u L-histidin /HCI puferu sa pH od oko 6.5, 100 do 150 mM NaCI i 0.01 do 0.1 % (tež/vol) polisorbat 20 ili polisorbat 80. U poželjnom ostvarenju, anti-CD20 antitelo je obezbeđeno sa puferskim sredstvom, stabilizatorom (ima) nejonskim surfaktantom u koncentracijama kako su precizirane u priključenim patentnim zahtevima.
Kako je prethodno naglašeno, može se razmotriti da rastvorljivi glikoprotein hijaluronidaze bude sledeća podloga u anti-CD20 formulaciji. Rastvorljivi glikoprotein hijaluronidaze se može dodati u anti-CD20 formulaciju u toku proizvodnje anti-CD20 formulacije ili se može dodati neposredno pre injektovanja. Alternativno, rastvorljivi glikoprotein hijaluronidaze može da se obezbedi u vidu zasebne injekcije. U poslednjem slučaju, rastvorljivi glikoprotein hijaluronidaze može da se obezbedi u zasebnoj ampuli bilo u liofilizovanom obliku koji se mora rekonstituisati sa pogodnim razblaživačima pre nego što se izvede subkutano injektovanje, bilo u vidu tečne formulacije koju je obezbedio proizvođač. Anti-CD20 formulacija i rastvorljivi glikoprotein hijaluronidaze mogu da se obezbede u vidu zasebnih entiteta ili mogu, isto tako, da se obezbede u vidu pakovanja koja sadrže obe injekcione komponente i prikladna uputstva za njihovo subkutano primenjivanje. Takođe, mogu biti obezbeđene i prikladne instrukcije za rekonstituisanje i/ili primenjivanje jedne ili obe formulacije.
Tako, ovaj pronalazak, isto tako, obezbeđuje farmaceutske smeše koje se sastoje od visoko koncentrisane, stabilne farmaceutske formulacije farmaceutski aktivnog anti-CD20 antitela ili smeše takvog antitela i pogodne količine najmanje jednog enzima hijaluronidaze u obliku pakovanja koje sadrži obe injekcione komponente i prikladna uputstva za njihovo subkutano primenjivanje.
Sledeći aspekt ovog pronalaska se odnosi na injekcione uređaje koji sadrže visoko koncentrisanu, stabilnu farmaceutsku formulaciju prema ovom pronalasku. Takva formulacija može da se sastoji od farmaceutski aktivnog anti-CD20 antitela ili smeše molekula takvog antitela i pogodnih podloga kako je objašnjeno u nastavku i, može dodatno sadržavati rastvorljivi glikoprotein hijaluronidaze bilo u vidu kombinovane formulacije bilo u vidu zasebne formulacije za zajedničko primenjivanje.
U prethodnoj tehnici su prepoznata različita anti-CD20 antitela. Takva antitela su poželjno monoklonska antitela. Mogu ili biti takozvana himerična antitela, humanizovana antitela ili potpuno humana antitela. Mogu biti ili anti-CD20 antitela pune dužine; fragmenti anti-CD20 antitela koji imaju istu biološku aktivnost: uključujući varijante amino kiselinske sekvence i/ili giikozilacione varijante takvih antitela ili fragmenata. Primeri humanizovanih anti-CD20 antitela su poznati pod INN nazivima rituksimab, okrelizumab i afutuzumab (HuMab<CD20>). Najuspešnije terapeutsko anti-CD20 antitelo je rituksimab koje prodaje Genentech Inc. i F. Hoffinann-La Roche Ltd pod trgovačkim nazivima MABTHERA™ ili RITUXAN™.
Anti-CD20 antitelo, kako je ovde definisano, poželjno je odabrano iz grupe rituksimaba (vidi, npr., US Patent No. 7,381,560 i EP2000149B1 u Anderson et. al., vidi, npr., slike 4 i 5), okrelizumaba (kako je izložen u: WO 2004/056312) i WO 2006/084264 (npr., varijante izložene u tabelama 1 i 2), poželjno varijanta v.16 ili v. 114 ili v.511 i afutuzumaba (HuMab<CD20>; vidi VVO2005/044859). Najpoželjnije anti-CD20 antitelo je rituksimab. Izrazi "rituksimab", "okrelizumab" i "afutuzumab" (HuMab<CD20>) obuhvataju sva odgovarajuća anti-CD20 antitela koja u potpunosti ispunjavaju zahteve neophodne za dobijanje odobrenja za trgovanje, kao identičan ili biosličan proizvod u zemlji ili na teritoriji koje su odabrane iz grupe, koju čine: USA, Evropa i Japan. Rituksimab ima CDR regione, koji su definisani u: US Patent No. 7,381,560 i EP2000149B1.
U prethodnoj tehnici prepoznati su brojni rastvorljivi glikoproteini hijaluronidaze. U cilju daljeg definisanja funkcije, data je sledeća informacija o stanju mehanizma dejstva i osobinama ovakvih rastvorljivih glikoproteina hijaluronidaze.
SC (hipodermalni) intersticijalni matriks je sastavljen od mreže fibroznih proteina položenih unutar viskoelastičnog gela glikozaminoglikana, Hijaluronan (HA), ne-sulfatovani disaharid koji se linearno ponavlja, je glavni glikozaminoglikan SC tkiva. HA u intersticijum sekretuju fibroblasti kao molekul sa velikom težinom, megadaltonski viskozni polimer koji se odmah zatim lokalno degradira, u limfi i, u jetri, dejstvom lizozomalnih hijaluronidaza i egzoglikozidaza. Otprilike 50% hijaluronana u telu, proizvodi SC tkivo, pri čemu se otprilike dobija 0.8 mg/gm vlažne težine tkiva [Aukland K. and Reed R., "Interstitial-Lvmphatic Mechanisms in the control of Extracellular Fluid Volu me", Physiology Reviews", 1993; 73:1-78], Određeno je da odrastao čovek, prosečne težine 70 kg sadrži 15 grama HA, od kojih se 30 procenata obrće (sintetiše i degradira) tokom dana [Laurent L.B., et al., "Catabolism of hyaluronan in rabbit skin takes place locally, in lymph nodes and liver", Exp. Physiol. 1991; 76: 695-703]. Kao glavni sastojak komponente slične gelu hipodermalnog matriksa, HA značajno doprinosi viskozitetu istog.
Glikozaminoglikani (GAGs) su kompleks ravnolančanih polisaharida ekstracelularnog matriksa (ECM). GAGs se karakterišu ponavljanjem disaharidnih struktura N-supstituisanog heksozamina i uronske kiseline (u slučaju hijaluronana (HA), hondroitin sulfata (CS), hondroitina (C), dermatan sulfata (DS), heparan sulfata (HS), i heparina (H)), ili galaktoze (u slučaju keratan sulfata (KS)). Osim HA, svi postoje kao kovalentno vezani za jezgro proteina. GAGs sa svojim jezgrenim proteinima se po strukturi nazivaju proteoglikanima (PGs).
Hijaluronan (HA) se nalazi kod sisara pre svega u vezivnim tkivima, koži, hrskavici i u sinovijalnoj tečnosti. Hijaluronan je, isto tako, glavni sastojak vitreusa u oku. U vezivnom tkivu, hidrataciona voda povezana sa hijaluronanom stvara hidratisane matrice između tkiva. Hijaluronan ima ključnu ulogu u biološkom fenomenu, koji je povezan sa ćelijskom pokretljivošću uključujući brzi razvoj, regeneraciju, popravku, embriogenezu, embriološki razvoj, zarastanje rane, angiogenezu i tumorigenezu [Toole, Cell Biol. Extracell. Matrix, Hay (ed), Plenum Press, New York, 1991; pp. 1384-1386; Bertrand et al., Int. J. Cancer 1992; 52:1-6; Knudson et al., FASEB J. 1993; 7:1233-1241], Sem toga, nivoi hijaluronana su u korelaciji sa agresivnošću tumora [Ozello et al., Cancer Res. 1960; 20:600-604: Takeuchi et al., Cancer Res. 1976; 36:2133-2139; Kimata etal., Cancer Res. 1983; 43:1347-1354],
HA se nalazi u ekstracelularnom matriksu mnogih ćelija, naročito u mekim vezivnim tkivima. HA su pripisane različite fiziološke funkcije, kao uproteinskoj homeostazi u vodi i plazmi [Laurent T.C. et al., FASEB J., 1992; 6: 2397-2404]. Kod proliferišućih ćelija raste produkcija HA i, može imati ulogu u mitozi. Takođe je upleten u pokretljivost i migraciju ćelija. HA izgleda da ima važne uloge u ćelijskoj regulaciji, razvoju i diferencijaciji [Laurent et al., supra].
HA se široko koristi u kliničkoj medicini. Kao potvrđeno korisna, pokazala su se njegova svojstva u zaštiti tkiva i reološkim osobinama u hirurgiji oka (npr., u zaštiti endotelijuma korneje tokom operacija katarakte). Serumski HA je dijagnostički element bolesti jetre i različitih upalnih stanja, kao što je reumatoidni artritis. Intersticijalni edem, prouzrokovan nagomilavanjem HA, može dovesti do disfunkcije različitih organa [Laurent et al., supra].
Interakcije hijaluronana i proteina, isto tako, uključene su u strukturu ekstracelularnog matriksa ili "cementne supstance".
Hijaluronidaze su grupa enzima generalno aktivnih u neutralnoj ili kiseloj sredini, koje su rasprostranjene širom životinjskog carstva. Hijaluronidaze se razlikuju u zavisnosti od specifičnosti supstrata i mehanizma dejstva (WO 2004/078140). Postoje tri opšte klase hijaluronidaza: 1. hijaluronidaze sisarskog tipa, (EC 3.2.1.35) koje su endo-beta-N-acetiheksozaminidaze sa glavnim krajnjim proizvodima tetrasaharidima i heksasaharidima. Obe imaju hidrolitičke i transglikozidazne aktivnosti i, mogu razgraditi hijaluronan i hondroitin sulfate (CS), generalno C4-S i C6-S. 2. Bakterijske hijaluronidaze (EC 4.2.99.1) degradiraju hijaluronan i, do određenog stepena, CS i DS. One su endo-beta-N-acetiheksozaminidaze koje deluju putem reakcije beta eliminacije koja proizvodi primarno disaharidne krajnje proizvode. 3. Hijaluronidaze (EC 3.2.1.36) iz lišajeva, drugih parazita i zglavkara su endo-beta-glukuronidaze koje stvaraju tetrasaharidne i heksasaharidne krajnje proizvode hidrolizom beta 1-3 veza.
Hijaluronidaze sisara se mogu dalje podeliti u dve grupe: enzimi sa neutralnom aktivnošću i sa kiselom aktivnošću. U ljudskom genomu ima šest gena nalik hijaluronidazi, HYAL1, HYAL2, HYAL3, HYAL4, HYALP1 i PH20/SPAM1. HYALP1 je pseudogen, a HYAL3 nije ispoljio enzimsku aktivnost prema ni jednom poznatom supstratu. HYAL4 je hondroitinaza i ispoljava neznatnu aktivnost prema hijaluronanu. HYAL1 je prototipski kiselo-aktivni enzim i PH20 je prototipski neutralno-aktivni enzim. Kiselo-aktivna hijaluronidaza, kao što je HYAL1 i HYAL2 generalno nema katalitičku aktivnost u neutralnom pH (tj., pri pH 7). Na primer, HYAL1 ima neznatnu katalitičku aktivnostin vitroiznad pH 4.5 [Frost I G. and Stem, R., "A microtiter-based assay for hvaluronidase activitv not requiring specialized reagents", Anal. Biochemistn/, 1997; 251:263-269], HYAL2 je kiselo-aktivni enzim sa veoma niskom specifičnom aktivnostiin
vitro.
Enzimi nalik hijaluronidazi, takođe, mogu da se okarakterišu kao oni koji koji se generalno zarobljavaju na plazmatskoj membrani preko glikozilfosfatidil inozitolnog sidra kao što su humani HYAL2 i humani PH20 [Danilkovitch-Miagkova etal., Proc. Natl. Acad. Sci. U SA, 2003; 100(8):4580-4585; Phelps et al., Science 1988; 240(4860): 1780-1782], i kao oni koji su generalno rastvorljivi kao humani HYAL1 [Frost, I.G. et al., "Purification, cloning, and expression of human plasma hvaluronidase", Biochem. Biophvs. Res. Commun. 1997; 236(1):10-15]. Međutim, postoje varijacije od vrste do vrste: goveđi PH20 na primer, veoma labavo se vezuje za plazmatsku membranu i ne usidrava se preko fosfolipazno osetljivog sidra [Lalancette et al, Biol Reprod., 2001; 65(2):628- 36]. Ova jedinstvena karakteristika goveđe hijaluronidaze omogućila je korišćenje rastvorljivog enzima hijaluronidaze iz goveđih testisa u vidu ekstrakta za kliničko korišćenje (Wydase™, Hyalase™). Druge PH20 vrste su enzimi koji se usidravaju lipidno i koji generalno nisu rastvorljivi bez upotrebe deterdženata ili lipaza. Na primer, humani PH20 se usidrava za plazmatsku membranu preko GPI sidra. Pokušaji da se naprave humane PH20 DNA konstrukcije koje ne bi unosile lipidno sidro u polipeptid doveli su ili do katalitički inaktivnog enzima, ili nerastvornog enzima [Arming et al., Eur. J. Biochem., 1997; 1; 247(3):810-4]. Hijaluronidaza koja se javlja u prirodi iz makaka sperme, se nalazi i u rastvorljivoj i u membranskoj formi. Dok 64 kDa-ski oblik koji se vezuje za membranu ima enzimsku aktivnost pri pH 7.0, 54 kDa-ski oblik je aktivan jedino pri pH 4.0 [Cherr et al., Dev. Biol., 1996;10; 175(1): 142-53]. Tako, rastvorljivi oblici PH20 često nemaju enzimsku aktivnost u neutralnim uslovima.
Kako je gore zapaženo i prema izlaganjima u WO2006/091871 i US Patentu No. 7,767,429, male količine rastvorljivih glikoproteina hijaluronidaze (sHASEGPs) se mogu uneti u formulaciju sa ciljem olakšavanja primene terapijskog leka u hipodermis. Brzom depolimerizacijom HA u ekstracelularnom prostoru, sHASEGP smanjuje viskozitet intersticijuma, čime se povećava hidraulično provođenje i omogućava se bezbedno i lagodno primenjivanje većih zapremina u SC tkivo. Povećano hidraulično provođenje koje indukuje sHASEGP putem snižavanja intersticijalnog viskoziteta omogućava veću disperziju, potencijalno povećavajući sistemsku bioraspoloživost terapijskog leka primenjenog SC.
Kada se injektuju u hipodermis, depolimerizacija HA, koju izvrši sHASEGP, je lokalizovana na injektovanom mestu u SC tkivu. Eksperimentalni podaci pokazuju da se sHASEGP liokalno inaktivira u intersticijelnom prostoru i da ima poluživot od 13 do 20 minuta kod miševa, bez detektabiine sistemske apsorpcije u krvotok nakon jedne intravenske doze CD-1 miševima. Unutar vaskularnog odeljka, sHASEGP pokazuje poluživot od 2.3 i 5 minuta kod miševa, odnosno Cvnomolgus majmuna, pri dozama od 0.5 mg/kg. Brzi klirens sHASEGP, u kombinaciji sa kontinuiranom sintezom HA supstrata u SC tkivu, dovodi do prolaznog i lokalno-aktivnog povećanja permeacije za druge molekule koji su ko-injektovani, efekti koji su potpuno reverzibilni u okviru 24 do 48 sati nakon primenjivanja [Bywaters G.L., et al., "Reconstitution of the dermal barrier to dye spread after Hvaluronidase injection", Br. Med. J., 1951; 2 (4741): 1178-1183].
Osim dejstava na disperziju tečnosti lokalno, sHASEGP, isto tako, deluju tako da povećavaju apsorpciju. Makromolekuli veći od 16 kilodaltona (kDa) su najvećim delom isključeni od apsorpcije kroz kapilare difuzijom i, uglavnom se apsorbuju preko drenažnih limfnih nodusa. Subkutano primenjivanje makromolekula, kao što je npr., terapijsko antitelo (molekulske težine u prošeku 150 kDa) mora, zbog toga, proputovati intersticijelni matriks pre dospeća u drenažne limfatike zbog dalje apsorpcije u vaskularni odeljak. Povećavanjem disperzije na lokalu, sHASEGP povećavaju brzinu (Ka) apsorpcije mnogih makromolekula. Ovo dovodi do povećavanja pika nivoa u krvi (Cmax) i, moguće do povećanja bioraspoloživosti u poređenju sa SC primenom u odsustvu sHASEGP [Bookbinder L.H., et al., "A recombinant human enzyme for enhanced interstitial transport of therapeutics", J. Control. Release 2006; 114:230-241].
Prizvodi hijaluronidaze koja je poreklom od životinja klinički se koriste već 60 godina, primarno za povećavanje disperzije i apsorpcije drugih lekova koji se zajedno primenjuju i za hipodermoklize (SC injekcija/infuzija tečnosti u velikoj zapremini) [Frost G.I., "Recombinant human hvaluronidase (rHuPH20): an enabling platform for subcutaneous drug and fluid administration", Expert Opinion on Drug Delivery, 2007; 4: 427-440]. Detalji o mehanizmu dejstva hijaluronidaza su detaljno opisani u sledećim publikacijama: Duran-Reynolds F., "A spreading factor in certain snake venoms and its relation to their mode of action", CR Soc Biol Pariš, 1938; 69-81; Chain E., "A mucolytic enzyme in testes extracts", Nature 1939; 977-978; VVeissmann B., "The transglycosylative action of testicular hyaluronidase", J. Biol. Chem., 1955; 216: 783-94; Tammi, R., Saamanen, A.M., Maibach, H.I., Tatnmi M., "Degradation of newly synthesized high molecular mass hyaluronan in the epidermal and dermal compartments of human skin in organ culture", J. Invest. Dermatol. 1991; 97:126-130; Laurent, U.B.G., Dahl, L.B., Reed, R.K., "Catabolism of hvaluronan in rabbit skin takes place locallv, in lymph nodes and liver", Exp. Physiol. 1991; 76: 695-703; Laurent, T.C. and Fraser, J.R.E., "Degradation of Bioactive Substances: Physiology and Pathophysiology", Henriksen, J.H. (Ed) CRC Press, Boca Raton, FL; 1991. pp. 249-265; Harris, E.N., et al., "Endocytic function, glycosaminoglycan specificity, and antibody sensitivity of the recombinant human 190-kDa hyaluronan receptor for endocytosis (HARE)", J. Biol. Chem. 2004; 279:36201-36209; Frost, G.I., "Recombinant human hyaluronidase (rHuPH20): an enabling platform for subcutaneous drug and fluid administration", Expert Opinion on Drug Delivery, 2007; 4: 427-440. Proizvodi hijaluronidaze, odobreni u zemljama Evropske Unije uključuju Hylase® "Dessau" i Hyalase®. Proizvodi hijaluronidaze životinjskog porekla, odobreni u US uključuju Vitrase™, Hydase™ i Amphadase™.
Bezbednost i efikasnost proizvoda hijaluronidaze su utvrđeni i potvrđeni. Najznačajniji utvrđeni bezbednosni rizik je preosetljivost i/ili alergeničnost, što se smatra da je u vezi sa manjkom u čistoći preparata koji su poreklom od životinja [Frost, G.I., "Recombinant human hvaluronidase (rHuPH20): an enabling platform for subcutaneous drug and fluid administration", Expert Opinion on Drug Delivery, 2007; 4 : 427-440]. Treba naglasiti da postoje razlike u odnosu na odobreno doziranje hijaluronidazama koje su poreklom od životinja, između Ujedinjenog Kraljevstva (UK), Nemačke i Sjedinjenih Američkih Država (US). U UK, uobičajena doza, kao adjuvans, u subkutanoj ili intramuskularnoj injekciji je 1500 jedinica, koja se dodaje direktno u injekciju. U US, uobičajena doza koja se za ove svrhe koristi je 150 jedinica. U hipodermoklizama, hijaluronidaza se koristi da pomogne subkutano primenjivanje relativno velikih zapremina tečnosti. U UK, generalno se daje 1500 jedinica hijaluronidaze sa svakih 500 do 1000 ml tečnosti za subkutanu upotrebu. U US, 150 jedinica se smatra odgovarajućim za svaki litar hipodermokliznog rastvora. U Nemačkoj, za ove svrhe smatra se odgovarajućim 150 do 300 jedinica. U UK, difuzija lokalnih anestetika se ubrzava dodavanjem 1500 jedinica. U Nemačkoj i u US, za ove svrhe smatra se odgovarajućim 150 jedinica. Uprkos razlikama u dozama (doziranje u UK je deset puta više nego u US), nisu zabeležene primetne razlike u profilima bezbednosti od proizvoda hijaluronidaze životinjskog porekla koji se nalaze na tržištu u US odnosno, UK
2. decembra 2005, Halozyme Therapeutics Inc. je dobio odobrenje od FDA za injektabilnu formulaciju rekombinantne humane hijaluronidaze, rHuPH20 (HYLENEX™). FDA je odobrila HYLENEX™ u dozi od 150 jedinica za SC primenjivanje za sledeće indikacije:
- kao adjuvans za povećanje apsorpcije i disperzije drugih injektovanih tekova
- za hipodermoklize
- kao pomoćno sredstvo u SC urografiji za poboljšanje resorpcije radioneprozirnih sredstava.
Kao deo tog regulatornog pregleda utvrđeno je da rHuPH20 ima ista svojstva povećavanja disperzije i apsorpcije drugih injektovanih iekova kao i prethodno potvrđeni preparati hijaluronidaze poreklom od životinja, ali sa unapređenim bezbednosnim profilom. Posebno, upotreba rekombinantne humane hijaluronidaze (rHuPH20) u poređenju sa hijaluronidazama poreklom od životinja minimizuje mogući rizik od kontaminacije sa životinjskim patogenima i prenosivim spongiformnim encefalopatijama.
Rastvorljivi hijaluronidazni glikoproteini (sHASEGP), postupak za proizvodnju istih i i njihova upotreba u farmaceutskim smešama opisano je u WO 2004/078140.
Opširan eksperimentalni rad, kako je dalje u nastavku istaknuto, pokazao je da formulacija iz zahteva iznenađujuće ima veoma poželjnu stabilnost pri čuvanju i ispunjava sve neophodne zahteve da bi bila odobrena od strane zdravstvenih autoriteta.
Veruje se da enzim hijaluronidaze u formulaciji prema ovom pronalasku uvećava oslobađanje anti-CD20 antitela u sistemsku cirkulaciju, npr., povećanjem apsorpcije aktivne supstance (deluje kao pojačivač permeacije). Isto tako, veruje se da enzim hijaluronidaze povećava oslobađanje terapeutskog anti-CD20 antitela u sistemsku cirkulaciju preko subkutanog puta primenjivanja reverzibilnom hidrolizacijom hijaluronana, ekstracelularne komponente SC intersticijelnog tkiva. Hidroliza hijaluronana u hipodermisu privremeno otvara kanale u intersticijelnom prostoru SC tkiva i tako poboljšava oslobađanje terapeutskog anti-CD20 antitela u sistemsku cirkulaciju. Sem toga, primenjivanje pokazuje smanjenje bola kod ljudi i manje bubrenje SC tkiva zbog zapremine.
Hijaluronidaza, kada se lokalno primeni ima svoj ukupan efekat lokalno. Drugim recima, hijaluronidaza se lokalno inaktiviše i metaboliše u minutima i, nije zabeleženo da ima sistemska ili dugotrajna dejstva. Brza inaktivacija hijaluronidaze u okviru nekoliko minuta kada prodre u krvotok sprečava realne mogućnosti izvođenja komparabilnih ispitivanja biodistribucije sa različitim proizvodima hijaluronidaze. Ovo svojstvo, isto tako, minimizuje svaku moguću brigu o sistemskoj bezbednosti jer proizvod hijaluronidaze ne može delovati na udaljenim mestima.
Ujednačavajuća karakteristika svih enzima hijaluronidaze prema ovom pronalasku jeste njihova sposobnost da depolimerizuju hijaluronan, bez obzira na razlike u hemijskoj strukturi, vrsti izvora, u izvorima tkiva, ili serijama proizvoda leka koji su poreklom od istih vrsta i tkiva. Neobične su po činjenici da je njihova aktivnost ista (osim potencije) uprkos tome što imaju različite strukture.
Enzim hijaluronidaza prema formulaciji ovog pronalaska se karakteriše time da nema sporedan efekat na integritet molekula anti-CD20 antitela u ovde opisanoj stabilnoj farmaceutskoj formulaciji. Sem toga, enzim hijaluronidaza jedino modifikuje oslobađanje anti-CD20 antitela u sistemsku cirkulaciju ali, ne poseduje nijedno svojstvo koje bi moglo obezbediti ili doprineti terapijskim efektima sistemski apsorbovanog anti-CD20 antitela. Enzim hijaluronidaza nije sistemski bioraspoloživ i sporedno ne utiče na integritet molekula anti-CD20 antitela pri preporučenim uslovima čuvanja stabilne farmaceutske formulacije prema pronalasku. Iz tog razloga ga treba smatrati kao podlogu u formulaciji anti-CD20 antitela prema ovom pronalasku. Kako ne ispoljava terapeutsko dejstvo, predstavlja sastojak farmaceutskog oblika odvojen od terapijski aktivnog anti-CD20 antitela.
Brojni pogodni enzimi hijaluronidaze prema ovom pronalasku su poznati iz prethodne tehnike. Poželjan enzim je humani enzim hijaluronidaze, najpoželjniji, enzim poznat kao rHuPH20. rHuPH20 je član familije B-1,4 glikozil hidrolaza aktivnih u neutralnoj i kiseloj sredini, koji depolimerizuje hijaluronan hidrolizom p-1,4 veze između C1 položaja N-acetil glukozamina i C4 položaja glukuronske kiseline. Hijaluronan je polisaharid, rasprostranjen u intracelularnoj cementnoj supstanci vezivnog tkiva, kao što je subkutano intersticijelno tkivo, kao i u izvesnim specijalizovanim tkivima, kao što su pupčanik i humor vitreusa. Hidroliza hijaluronana privremeno smanjuje viskoznost intersticijelnog tkiva i podstiče disperziju injektovanih tečnosti ili lokalizovanih transudata ili eksudata, na koji način olakšava njihovu apsorpciju. Efekti hijaluronidaze su lokalni i reverzibilni sa potpunom rekonstitucijom tkivnog hijaluronana, koja se javlja u okviru 24 do 48 sati [Frost, G.I., "Recombinant human hvaluronidase (rHuPH20): an enabling platform for subcutaneous drug and fluid administration", Expert Opinion on Drug Deliverv, 2007; 4:427-440], Povećanje permeabiliteta vezivnog tkiva putem hidrolize hijaluronana u korelaciji je sa efikasnosti hijaluronidaze tj, njene mogućnosti da poveća disperziju i apsorpciju ko-primenjenih molekula.
Humani genom sadrži nekoliko gena hijaluronidaze. Samo PH20 genski proizvod ima efektivnu aktivnost hijaluronidaze u fiziološkim ekstracelularnim uslovima i deluje kao sredstvo širenja, dok hijaluronidaze aktivne u kiseloj sredini nemaju ovo svojstvo.
rHuPH20 je prvi i jedini rekombinantni humani enzim hijaluronidaze koji je trenutmo moguće koristiti za terapijsku upotrebu. Humani genom sadrži nekoliko gena hijaluronidaze; samo PH20 genski proizvod ima efektivnu aktivnost hijaluronidaze u fiziološkim ekstracelularnim uslovima i deluje kao sredstvo širenja. Humani PH20 protein koji se javlja u prirodi ima lipidno sidro povezano sa karboksi terminalnom amino kiselinom koja je usidrena u plazma membrani. rHuPH20 enzim, koji je razvijen halozimom je skraćena deleciona varijanta kojoj nedostaju takve amino kiseline u karboksi terminusu, koje su odgovorne za lipidno vezivanje. Ovo omogućava rastvorljivi, enzim aktivan pri neutralnom pH, sličan proteinu rasprostranjenom u preparatima goveđih testisa. rHuPH20 protein je sintetisan sa 35 amino kiselinskim signalnim peptidom koji je uklonjen sa N-terminusa u toku procesa sekrecije. Zreli rHuPH20 protein sadrži autentične N-terminalne amino kiselinske sekvencione ortologe prema onima koji su nađeni u nekim preparatima goveđe hijaluronidaze.
PH20 hijaluronidaze, PH20 životinjskog porekla i rekombinantnu humanu rHuPH20, depolimerizuju hijaluronan hidrolizom B-1,4 veze između C1 položaja N-acetil glukozamina i C4 položaja glukuronske kiseline. Najmanji digestioni proizvod je tetrasaharid [VVeissmann, B., "The transglycosylative action of testicular hyaluronidase", J. Biol. Chem., 1955; 216: 783-94]. Ova struktura N-acetil glukozamin/glukuronska kiselina se ne nalazi u N-vezanim glikanima rekombinantnih bioloških proizvoda i zbog toga, rHuPH20 neće uticati na glikozilaciju antitela sa kojima je formulisan, kao npr., na rituksimab. Sam rHuPH20 enzim poseduje šest N-povezanih glikana po molekulu sa strukturama jezgra slično, kao što se nalazi kod monoklonskih antitela. Kao što se pred postavlja, ove N-povezane strukture se ne menjaju tokom vremena, potvrđujući nedostatak enzimske aktivnosti rHuPH20 na ovim N-vezanim glikanskim strukturama. Kratak poluživot rHuPH20 i stalna sinteza hijaluronana dovodi do kratkog i lokalnog dejstva enzima na tkiva.
Enzim hijaluronidaza, koji je u podlozi u formulacijama za subkutanu primenu koje su u skladu sa ovim pronalaskom, poželjno je proizveden tehnologijom rekombinantne DNA. Na ovaj način je osigurano da se sve vreme dobija isti protein (identična amino kiselinska sekvenca) i da se izbegnu alergijske reakcije koje prouzrokuju kontaminacioni proteini koji su zajedno prečišćeni u toku procesa ekstrakcije iz tkiva. Enzim hijaluronidaze koji se koristi u formulaciji prema ovom pronalasku je poželjno humani enzim, najpoželjnije rHuPH20.
Aminokiselinska sekvenca rHuPH20 (HYLENEX™) je dobro poznata i, može se dobiti u CAS Registry No. 75971-58-7. Prosečna molekulska težina je 61 kDa (vidi, isto tako, US Patent No. 7,767,429).
Izvedena su višestruka strukturna i funkcionalna poređenja između hijaluronidaze sisara koja se javlja u prirodi i PH-20 cDNA klonova od ljudi i drugih sisara. PH-20 gen je gen koji se koristi za rekombinantni proizvod rHuPH20; međutim, proizvod rekombinantnog leka je 447 amino kiselinska skraćena verzija punog proteina kog kodira PH-20 gen. Strukturne sličnosti u odnosu na amino kiselinske sekvence retko prelaze 60% u poređenju. Funkcionalna poređenja pokazuju da je aktivnost rHuPH20 veoma slična onoj koja je prethodno odobrena za proizvode hijaluronidaze. Ovaj podatak je u skladu sa kliničkim nalazima tokom proteklih 50 godina da su, nezavisno od izvora hijaluronidaze, jednake klinička bezbednost i efikasnost jedinica hijaluronidaze.
Korišćenje rHuPH20 u SC formulacijama anti-CD20 antitela prema ovom pronalasku omogućava primenjivanje većih zapremina proizvoda leka i potencijalno povećanje apsorpcije subkutano primenjenog CD20 antitela, poželjno rituksimaba u sistemsku cirkulaciju.
Osmolalnost stabilne farmaceutske formulacije prema pronalasku je 350 ± 50 mOsm/kg.
Stabilna farmaceutska formulacija prema pronalasku je suštinski bez vidljivih (pregledano ljudskim okom) čestica. Sub-vidljive čestice (mereno zatamljenjem svetla) trebalo bi poželjno da ispune sledeći kriterijum:
- maksimalan broj čestica £ 10^m po ampuli -> 6000
- maksimalan broj čestica<>>25^m po ampuli -> 600
U sledećem aspektu, ovaj pronalazak obezbeđuje upotrebu formulacije za izradu leka koji je koristan za lečenje bolesti ili poremećaja koji odgovara na lečenje sa anti-CD20 antitelom, kao što je pre svega kancer ili ne-maligna bolest kod osobe, a koje obuhvata primenjivanje ovde opisane formulacije osobi u količini koja je delotvorna za lečenje takve bolesti ili poremećaja. Poželjno, anti-CD20 antitelo se zajedno primenjuje istovremeno ili uzastopno sa hemoterapeutskim sredstvom.
U sledećem aspektu, ovaj pronalazak obezbeđuje postupak za lečenje bolesti ili poremećaja koji odgovara na lečenje sa anti-CD20 antitelom (npr., kancer (pre svega) ili ne-maligna bolest) kod osobe, koji obuhvata primenjivanje ovde opisane formulacije osobi u količini koja je delotvorna za lečenje takve bolesti ili poremećaja. Kancer ili ne-maligna bolest će generalno obuhvatiti ćelije koje ekspresuju CD20, tako da će CD20 antitelo iz terapijske farmaceutske SC formulacije prema ovom pronalasku moći da se veže za pogođene ćelije. Kancer je pre svega kancer koji ekspresuje CD20. Ne-maligna bolest koja se može lečiti smešom prema ovom pronalasku je pre svega autoimuna bolest, kako je ovde definisana. Poželjno, anti-CD20 antitelo se zajedno primenjuje istovremeno ili uzastopno sa hemoterapeutskim sredstvom.
Dodavanje hijaluronidaze u formulaciju omogućava povećanje volumena injekcije, koji se može bezbedno i lagodno primeniti subkutano. Poželjni volumen injekcije je 1 do 15 ml. Zapaženo je da primenjivanje formulacije prema ovom pronalasku povećava disperziju, apsorpciju i bioraspoloživost terapijskog antitela. Veliki molekuli (tj. > 16 kDa) koji se primenjuju preko SC puta se prvenstveno apsorbuju u vaskularni odeljak kroz drenažne limfne tečnosti [Supersaxo, A., et al., "Effect of Molecular VVeight on the Lvmphatic Absorption of VVater-Soluble Compounds Following Subcutaneous Administration", 1990; 2:167-169; Svvartz, M. A., "Advanced Drug Deliverv Review, The physiology of the lymphatic system", 2001; 50: 3-20], Brzina kojom ovi veliki molekuli ulaze u sistemsku cirkulaciju je tako usporena u odnosu na intravensku infuziju, zbog čega potencijalno dovodi do smanjene učestalosti/jačine reakcija koje se povezuju sa infuzijom.
Za proizvodnju subkutane formulacije CD20 antitela (poželjno rituksimaba) prema pronalasku neophodne su visoke koncentracije antitela (otpr. 120 mg/ml) u finalnom koraku prečišćavanja proizvodnog procesa. Zbog toga je u konvencionalni proizvodni proces CD20 antitela, poželjno rituksimaba, uključen dodatni korak u procesu (ultrafiltracija/dijafiltracija). Visoko koncentrisana, stabilna farmaceutska formulacija anti-CD20 antitela prema ovom pronalasku može, isto tako, da se obezbedi u vidu formulacije stabilisanog proteina koja se može rekonstituisati sa pogodnim diluentom da bi se stvorila rekonstituisana formulacija sa visokom koncentracijom anti-CD20 antitela.
SC formulacija CD20 antitela prema ovom pronalasku se poželjno koristi za lečenje kancera, poželjno kancera koji ekspresuje CD20.
Izraz "otprilike" kako je korišćen u Opisu ovog patenta, treba da precizira da data specifična vrednost može varirati do izvesnog stepena, kao npr., označava da su varijacije u opsegu od ± 10 %, poželjno ± 5 %, najpoželjnije ± 2 % obuhvaćene datom vrednošću.
Pored prethodnih testova, stručno lice može koristiti različite dostupnein vivotestove. Na primer, ćelije organizma pacijenta mogu da se izlože antitelu koje je eventualno obeleženo sa detektabilnim obeleživačem, npr. radioaktivnim izotopom, a ispitivanje vezivanja antitela za ćelije u pacijentu se može izvesti, npr., spoljnim skeniranjem na radioaktivnost ili analiziranjem biopsije, uzete od pacijenta koji je prethodno izložen antitelu.
Smatra se da SC formulacija CD20 antitela prema ovom pronalasku može, isto tako, da se koristi za lečenje različitih ne-malignih bolesti ili poremećaja, a takve obuhvataju: autoimune bolesti kako su ovde definisane; endometrioze; sklerodermu; restenoze; polipe kao što su polipi kolona, nazalni polipi i gastrointestinalni polipi; fibroadenom; respiratornu bolest; holecistitis; neurofibromatozu; policističnu bubrežnu bolest; inflamatornu bolest; kožne poremećaje uključujući psorijazu i dermatitis; vaskularnu bolest; stanja koja uključuju abnormalnu proliferaciju vaskularnih epitelijelnih ćelija; gastrointestinalne ulcere; Menetrierovu bolest, sekretujuće adenome ili sindrom gubitka proteina; renalne poremećaje; angiogene poremećaje; očnu bolest, kao što je makularna degeneracija kao posledica starenja, pred postavljen i očni histoplasmozni sindrom, retinalnu neovaskularizaciju zbog proliferativne dijabetične retinopatije, retinalnu vaskularizaciju, dijabetičnu retinopatiju ili makularnu degeneraciju kao posledicu starenja; koštano-povezane patologije, kao što su: osteoartritis, rahitis i osteoporoza; oštećenja nakon cerebralnog ishemijskog ispada; fibrotske ili edemijske bolesti, kao što su: ciroza jetre, fibroza pluća, sarkoidoza, tiroiditis, hiperviskozni sistemski sindrom, Osier VVeber-Renduovu bolest, hroničnu okluzivnu bolest pluća, ili edem nakon opekotina, traumu, radijaciju, šlog, hipoksiju ili ishemiju; hipersenzitivnu reakciju kože; dijabetičnu retinopatiju i dijabetičnu nefropatiju; Guillain-Barreov sindrom; bolest kalem protiv domaćina ili odbacivanje transplanta; Pagetovu bolest; upalu kosti ili zgloba; fotostarenje (npr. uzrokovano UV zračenjem kože kod ljudi); benignu prostatičnu hipertrofiju; izvesne infekcije mikroorganizmima, uključujući mikrobne patogene izdvojene od adenovirusa, hantavirusa, Borrelia burgdorferi, Yersinia spp. i Bordetella pertussis; trombe prouzrokovane agregacijom trombocita; stanja reproduktivnog sistema kao što su endometrioza, sindrom hiperstimulacije jajnika, preeklampsija, disfunkcionalno krvarenje iz materice, ili menometrorhagija; sinovitis; aterom; akutne i hronične nefropatije (uključujući proliferativni glomerulonefritis i dijabetom indukovanu bubrežnu bolest); ekcem; hipertrofično formiranje ožiljaka; endotoksični šok i gljivičnu infekciju; familijarni adenomatozni polipozis; neurodegenerativne bolesti (npr., Alzheimerova bolest, demencija povezana sa AIDS-om, Parkinsonova bolest, amiotrofična lateralna skleroza, retinitis pigmentoza, spinalna muškularna atrofija i cerebelarna degeneracija); mijelodisplazne sindrome; aplastičnu anemiju; ishemijsko oštećenje; fibrozu pluća, bubrega ili jetre; bolest preosetljivosti posredovanu T-ćelijama; infantilnu hipertrofičnu pilori stenozu; urinarni obstruktivni sindrom; psorijazni artritis; i Hasimotov tiroiditis. Poželjne ne-maligne indikacije za terapiju su, kako su ovde definisane.
Kada je indikacija kancer, pacijent može biti tretiran kombinacijom formulacije antitela i hemoterapeutskog sredstva. Kombinovano primenjivanje obuhvata ko-primenjivanje ili istovremeno primenjivanje, korišćenjem zasebnih formulacija ili jedne farmaceutske formulacije, ili istovremenog primenjivanja bilo kojim redosledom, pri čemu poželjno, postoji vremenski period dok oba (ili svi) aktivna sredstva istovremeno dostignu svoje biološke aktivnosti. Tako, hemoterapeutsko sredstvo može biti primenjeno pre, ili posle, primenjivanja formulacije antitela prema ovom pronalasku. U ovom ostvarenju, vreme između najmanje jednog primenjivanja hemoterapeutskog sredstva i najmanje jednog primenjivanja formulacije antitela prema ovom pronalasku poželjno iznosi otprilike 1 mesec ili kraće, a najpoželjnije otprilike 2 nedelje ili kraće. Alternativno, hemoterapeutsko sredstvo i formulacija antitela prema ovom pronalasku se pacijentu primenjuju zajedno, u jednoj formulaciji ili zasebnim formulacijama.
Lečenje sa pomenutom formulacijom antitela će dovesti do poboljšanja znakova ili simptoma kancera ili bolesti. Recimo, kada je bolest koja se leči kancer, takva terapija mora dovesti do boljeg preživljavanja (preživljavanja u totalu i/ili preživljavanja bez progresije bolesti) i/ili može dovesti do objektivnog kliničkog odgovora (delimičnog ili potpunog). Sem toga, lečenje kombinacijom hemoterapeutskim sredstvom i formulacijom antitela može dovesti do sinergističkog ili odgovora većeg od aditiva, u smislu terapeutskog benefita za pacijenta.
Poželjno, antitelo u primenjenoj formulaciji je golo antitelo. Ipak, primenjeno antitelo može biti konjugovano sa citotoksičnim sredstvom. Poželjno, imunokonjugat i/ili antigen za koji je vezan je/su ćelijski internaiizovani, što kao rezultat ima povećanje terapijske efikasnosti imunokonjugata u ubijanju ćelija kancera za koje se vezuje. U poželjnom ostvarenju, citotoksično sredstvo cilja ili interferira sa nukleinskom kiselinom u ćeliji kancera. Primeri ovakvih citotoksičnih sredstava uključuju majtansinoide, kaliohemicine, ribonukleaze i DNA endonukleaze. Poželjni imunokonjugati su Rituksimab-majtanzinoidni imunokonjugati slično Trastuzumab-DM1 (T-DM1) kako su opisani u WO 2003/037992, poželjnije, imunokonjugat T-MCC-DM1.
Radi subkutanog oslobađanja, formulacija se može primeniti putem pogodnog uređaja, kao što je (bez ograničenja na iste) špric; injekciono sredstvo (npr., INJECT-EASE™ i GENJECT™ uređaj); infuziona pumpa (kao npr., Accu-Chek™): injektorno penkalo (kao GENPEN™); uređaj bez igle (npr., MEDDECTOR™ i BIOJECTOR™); ili putem sistema oslobađanja subkutanim flasterom.
Količina primenjene anti-CD20 antitelo formulacije za prevenciju ili lečenje bolesti, kao i vreme primenjivanja će zavisiti od tipa (vrsta, rod, starost, težina, itd.) i stanja pacijenta koji se leći i težine bolesti ili stanja koje se leći. Za određivanje odgovarajuće doze važni su tok bolesti, bez obzira na to da li se antitelo primenjuje preventivno ili u terapeutske svrhe, prethodna terapija, klinička istorija bolesti pacijenta, kao i njegov odgovor na antitelo. Konačnu odluku u određivanju doze daje nadležni lekar. Antitelo se pogodno primenjuje pacijentu jednom ili tokom nekoliko tretmana. U zavisnosti od vrste i težine bolesti, otprilike je 1 i^g /kg do 50 mg/kg (npr., 0.1-20 mg/kg) navedenog anti-CD20 antitela eventualna početna doza za primenjivanje pacijentu.
Poželjna doza pomenutog anti-CD20 antitela biće u opsegu od otprilike 0.05mg/kg do otprilike 30mg/kg telesne težine. Tako, jedna ili više doza od otprilike 0.5mg/kg, 2.0mg/kg, 4.0mg/kg, 10 mg/kg ili 30mg/kg (ili ma koje kombinacije ovih) može da se primeni pacijentu. U zavisnosti od tipa (vrste, roda, starosti, težine, itd.) i stanja pacijenta, kao i vrste anti-CD20 antitela, doza navedenog prvog se može razlikovati od doze drugog anti-CD20 antitela. Ovakve doze se mogu primenjivati na dnevnoj bazi ili sa pauzama, npr., svakog trećeg do šestog dana ili čak svake jedne do tri nedelje. Može se primeniti početna viša doza, koju slede, jedna ili više, nižih doza. Na osnovu kliničkih studija (vidi, isto tako, Primere 3 i 4 za ne-ograničavajuće primere rituksimaba), poželjni dozni opseg je 300 mg/m<2>do 900 mg/m<2.>Bolje, poželjni dozni opseg navedenog anti-CD20 antitela je otprilike 375 mg/m<2>do otprilike 800 mg/m<2.>Poželjne specifične doze navedenog anti-CD20 antitela su doze od otprilike 375 mg/m<2>, otprilike 625 mg/m<2>i otprilike 800 mg/m<2>. Isto tako, poželjne su fiksne doze navedenog anti-CD20 antitela.
U jednom ostvarenju, fiksno doziranje kod B-ćelijskih limfoma, pre svega ne-Hodgkinovog limfoma, je sledeće. Poželjno je oko 1200 mg do oko 1800 mg navedenog anti-CD20 antitela po dozi. Poželjnije su doze odabrane iz grupe od oko 1300 mg, oko 1500 mg, oko 1600 mg i oko 1700 mg navedenog anti-CD20 antitela po dozi. Najpoželjnije, fiksna doza za pacijente sa B-ćelijskim limfomom, pre svega za pacijente sa ne-Hodgkinovim limfomom, je oko 1400 mg navedenog anti-CD20 antitela {npr., rituksimab) po dozi, koja se može primeniti prema brojnim šemama uključujući, otprilike svaka 2 meseca {uključujući otprilike svakih 8 nedelja), otprilike svakih 3 meseca (uključujući otprilike svakih 12 nedelja), ili oko 2 godine {ili duže), itd (vidi, isto tako, Primere 3 i 4 kao neograničavajuće primere za rituksimab).
U drugom ostvarenju, fiksne doze za pacijente sa leukemijom, pre svega za pacijente sa hroničnom limfocitnom leukemijom (CLL), su sledeće. Poželjne su otprilike 1600 mg do otprilike 2200 mg navedenog anti-CD20 antitela po dozi. Poželjnije su doze odabrane iz grupe od otprilike 1700 mg, otprilike 1800 mg, otprilike 1900 mg, i otprilike 2100 mg navedenog anti-CD20 antitela po dozi. U jednom ostvarenju, fiksna doza za pacijente sa leukemijom, pre svega za pacijente sa CLL, je otprilike 1870 mg navedenog anti-CD20 antitela (npr., rituksimab) po dozi.
U opet drugom ostvarenju, fiksne doze za pacijente sa autoimunom bolesti, kao što je reumatoidni artritis, multipla skleroza, lupus nefritis, dijabetes, ITP i vaskulitis su sledeće. Poželjne su otprilike 1200 mg do otprilike 2200 mg navedenog anti-CD20 antitela po dozi, na primer, otprilike 1500mg navedenog anti-CD20 antitela (npr., rituksimab) po dozi.
Ukoliko se primenjuje hemoterapeutsko sredstvo, uobičajeno se primenjuje u dozama koje su za njega predviđene, ili eventualno, smanjene zbog kominovanog dejstva lekova ili zbog negativnih neželjenih dejstava koja se pripisuju hemoterapeutskom sredstvu. Izrada i profili doziranja za takva hemoterapeutska sredstva mogu da se upotrebe prema uputstvima proizvođača ili kako je empirijski određeno od strane stručnih lica. Izrada i profili doziranja za takva hemoterapeutska sredstva su, isto tako, opisana u: Chemotherapv Service Ed., M.C- Perry, VVilliams & VVilkins, Baltimore, MD (1992).
Stabilna farmaceutska formulacija farmaceutski aktivnog anti-CD20 antitela prema pronalasku, poželjno se primenjuje u vidu subkutane injekcije, pri čemu se primenjivanje poželjno ponavlja nekoliko puta u vremenskim intervalima od 3 nedelje (q3w). Najpoželjnije, celokupna zapremina tečnosti injekcije se primenjuje u okviru vremenskog perioda od 1 do 10 minuta, poželjno 2 do 6 minuta, najpoželjnije 3 ± 1 minuta. Najpoželjnije, primenjuje se 2 ml/minut, tj., na primer otprilike 240 mg/min. Za većinu pacijenata kod kojih se ne primenjuju druga intravenska (IV) hemoterapeutska sredstva, ovakvo subkutano primenjivanje omogućava rast ubeđenja pacijenta o mogućoj samo-primeni kod kuće. Ovo dovodi do povećane komplijanse i trebalo bi da smanji/eliminiše troškove povezane sa IV primenom (npr., trošak angažovanja medicinske sestre za IV primenu, trošak jednodnevnog ležanja, transport pacijenta, itd). Subkutano primenjivanje prema pronalasku će uglavnom biti povezano i sa smanjenom učestalošću i/ili jačinom reakcija koje se povezuju sa infuzionim primenjivanjem.
U poželjnom ostvarenju, lek je koristan za sprečavanje ili smanjivanje metastaza ili daljeg širenja kod pacijenata koji su oboleli od kancera koji ekspresuje CD20. Lek je koristan za povećavanje trajanja preživljavanja takvog pacijenta, povećavanje preživljavanja bez progresije kod takvog pacijenta, povećavanje trajanja odgovora, što dovodi do statistički značajnog i klinički značajnog poboljšanja lečenog pacijenta mereno trajanjem preživljavanja, preživljavanja bez progresije, brzinom odgovora ili trajanjem odgovora. U poželjnom ostvarenju, lek je koristan za povećanje brzine odgovora u grupi pacijenata.
U kontekstu ovog pronalaska, u lečenju anti-CD20 antitelom kancera koji ekspresuju CD20, može se koristiti jedno ili više dodatnih drugih sredstava koja ihibiraju rast, citotoksičnih, hemoterapeutskih, anti-angiogenih, anti-kancerskih ili citokina, ili jedinjenja koja povećavaju efekte ovakvih sredstava. Poželjno, lečenje anti-CD20 antitelom se sprovodi bez ovakvih dodatnih citotoksičnih, hemoterapeutskih ili anti-kancerskih sredstava, ili jedinjenja koja povećavaju efekte ovakvih sredstava.
Ovakva sredstva obuhvataju, na primer: alkilirajuća sredstva ili sredstva sa alkilacionim dejstvom, kao ciklofosfamid (CTX; npr. citoksan®}, hlorambucil (CHL; npr. leukeran®), cisplatin (CisP; npr. platinol®) busulfan (npr. mileran®), melfalan, karmustin (BCNU), streptozotocin, trietilenmelamin (TEM), mitomicin C, i slične; anti-metabolite, kao metotreksat (MTX), etopozid (VP16; npr. vepesid®), 6-merkaptopurin (6MP), 6-tiokgvanin (6TG), citarabin (Ara-C), 5-fluorouracil (5-FU), kapecitabin (npr. Xeloda®), dakarbazin (DTIC), i slične; antibiotike, kao aktinomicin D, doksorubicin (DXR; npr. adriamicin®), daunorubicin (daunomicin), bleomicin, mitramicin i slične; alkaloide, kao vinka alkaloide kao što su vinkristin (VCR), vinblastin, i slični; i druga antitumorska sredstva, kao paklitaksel (npr. taksol®) i paklitaksel derivate, citostatska sredstva, glukokortikoide, kao deksametazon (DEX; npr. dekadron®) i kortikosteroide, kao prednizon, inhibitori nukleozidnog enzima, kao hidroksiurea, enzimi aminokiselinskog smanjivanja, kao asparaginaza, leukovorin i drugi derivati folne kiseline, kao i slična, raznolika antitumorska sredstva. Sledeća sredstva mogu, isto tako, da se koriste kao dodatna sredstva: arnifostin (npr. etiol®), daktinomicin, mehloretamin (nitrogen mustard). streptozocin, ciklofosfamid, lomustin (CCNU), doksorubicin lipo {npr. doxil®), gemcitabin {npr. gemzar®), daunorubicin lipo (npr. daunoksom®}, prokarbazin, mitomicin, docetaksel (npr. taksoter®), aldesleukin, karboplatin, oksaliplatin, kladribin, kamptotecin, CPT 11 (irinotekan), 10-hidroksi 7-etil-kamptotecin (SN38), floksuridin, fludarabin, ifosfamid, idarubicin, mesna, interferon beta, interferon alfa, mitoksantron, topotekan, leuprolid, megestrol, melfalan, merkaptopurin, plikamicin, mitotan, pegaspargaza, pentostatin, pipobroman, plikamicin, tamoksifen, tenipozid, testolakton, tiogvanin, tiotepa, uracil mustard, vinorelbin, hlorambucil. Poželjno, lečenje anti-CD20 antitelom se sprovodi bez takvih dodatnih sredstava.
Upotreba gore opisanih citotoksičnih i antikancerskih sredstava, kao i antiproliferativnog ciljno-specifičnog antikancerskog leka kao inhibitora protein kinaze u hemoterapeutskim režimima je generalno dobro opisana u tehnikama terapije kancera, a njihova upotreba ovde pod pada pod ista shvatanja praćenja tolerancije i efektivnosti i kontrolisanja puteva primene i doziranja, uz izvesna podešavanja. Na primer, aktuelne doze citotoksičnih sredstava mogu varirati u zavisnosti od odgovora ćelija pacijenta u kulturi koji se određuje upotrebom postupaka histokulture. Generalno, doza će biti smanjena u poređenju sa količinom upotrebljenom u odsustvu dodavanja drugih sredstava.
Uobičajene doze delotvornog citotoksičnog sredstva mogu biti u opsezima koje preporučuje proizvođač, a gde je indikovanoin vitroodgovorima ili odgovorima u modelima na životinjama, mogu biti smanjene za do otprilike jedan stepen veličine koncentracije ili količine. Tako, aktuelna doza će zavisiti od procene lekara, stanja pacijenta, kao i delotvornosti terapijskog postupka na osnovuin vitroodgovora primarno uzgajanih malignih ćelija ili histouzgajanih uzoraka tkiva, ili odgovora zapaženih u odgovarajućim modelima na životinjama.
U kontekstu ovog pronalaska može se sprovesti efektivna količina jonizujućeg zračenja i/ili se može upotrebiti radiofarmak pored lečenja anti-CD20 antitelom kancera koji ekspresuju CD20. Izvor zračenja za pacijenta koji se leći može biti ili spoljašnji ili unutrašnji. Kada je izvor za pacijenta spoljašnji, terapija je poznata kao terapija spoljašnjim zrakom zračenja (EBRT). Kada je izvor zračenja za pacijenta unutrašnji, tretman se naziva brahiterapija (BT). Radioaktivni atomi za upotrebu u kontekstu ovog pronalaska mogu da se odaberu iz grupe koju čine, ali nisu ovima ograničeni, radijum, cezijum-137, iridijum-192, americijum-241, zlato-198, kobalt-57, bakar-67, tehnecijum-99, jod-123, jod-131 i indijum-111. Takođe je moguće da se antitelo obeleži sa takvim radioaktivnim izotopima. Poželjno, lečenje anti-CD20 antitelom se sprovodi bez sprovođenja jonizujućeg zračenja.
Radijaciona terapija je standardni tretman obuzdavanja neisecivih ili inoperabilnih tumora i/ili tumorskih metastaza. Poboljšani rezultati se viđaju kada se radijaciona terapija kombinuje sa hemoterapijom. Radijaciona terapija se zasniva na principu da visoko-dozno zračenje oslobođeno na ciljnu površinu dovodi do smrti reproduktivnih ćelija i u tumoru i u normalnim tkivama. Režim doziranja radijacije je generalno definisan u smislu absorbovane doze radijacije (Gy), vremena i frakcionisanja i, onkolozi ga moraju pažljivo definisati. Količina zračenja koju pacijent prima zavisiće od različitih uslova, ali dva najvažnija su lokacija tumora u odnosu na druge kritične strukture ili organe u telu i stepena do kog se tumor raširio. Uobičajeni profil tretmana za pacijenta koji se podvrgava radijacionoj terapiji biće profil lečenja tokom perioda od 1 do 6 nedelja, sa ukupnom dozom između 10 i 80 Gy primenjene pacijentu u pojedinačnoj dnevnoj frakciji od otprilike 1.8 do 2.0 Gy, 5 dana nedeljno. U poželjnom ostvarenju ovog pronalaska postoji sinergija kada se tumori kod ljudi pacijenata tretiraju kombinacijom tretmana pronalaska i radijacije. Drugim recima, inhibicija rasta tumora putem sredstava koja sadrže formulaciju CD20 antitela pronalaska se uvećava kada se kombinuju sa zračenjem, eventualno sa dodatnim hemoterapeutikom ili antikancerskim sredstvom. Parametri adjuvantnih radijacionih terapija su, na primer, sadržani u WO 99/60023.
Drugi terapeutski režimi se mogu kombinovati sa obuhvaćenim antitelom, ali ne ograničavajući se na drugo (treće, četvrto itd.) hemoterapeutsko sredstvo(a) (drugim rečima "koktel" različitih hemoterapeutskih sredstava); drugo monoklonsko antitelo; sredstvo inhibicije rasta; citotksično sredstvo; hemotarapeutsko sredstvo; anti-angiogeno sredstvo; i/ili citokin, itd.; ili svaku pogodnu njihovu kombinaciju.
Osim prethodno pominjanih terapeutskih režima, pacijent može biti podvrgnut hirurškom uklanjanju kancerskih ćelija i/ili terapiji zračenjem.
U drugom ostvarenju pronalaska, obezbeđuje se predmet proizvodnje, koji je sadržan u farmaceutskoj formulaciji ovog pronalaska i, obezbeđena su uputstva za njegovu upotrebu. Ovaj predmet proizvodnje podrazumeva i kontejner. Pogodni kontejneri obuhvataju, na primer, boce, ampule (npr., ampule sa višestrukim ili dvostrukim pregradama), špriceve (kao što su špricevi sa višestrukim ili dvostrukim pregradama) i test epruvete. Kontejner može biti od različitih materijala, kao što su staklo ili plastika. U kontejneru se čuva formulacija i on je obeležen, ili ima pridodatu oznaku, može imati uputstva za korišćenje. Kontejner u kom se čuva formulacija može biti ampula za višekratnu upotrebu, kojom se omogućava višestruko primenjivanje (npr., od 2 do 6 primena) rekonstituisane formulacije. Predmet proizvodnje može dalje obuhvatiti druge materijale poželjne sa komercijalnog i aspekta upotrebe, uključujući druge pufere, razblaživaće, filtere, igle, špriceve i inserte u pakovanju sa uputstvima za korišćenje.
Antitelo koje se formuliše prema ovom pronalasku poželjno je suštinski čisto, željeno suštinski homogeno (tj., nema kontaminantnih proteina itd., pri čemu se enzim hijaluronidaza u formulaciji prema ovom pronalasku ne smatra kontaminirajućim proteinom anti-CD20 monoklonskog antitela prema ovom pronalasku).
Pronalazak će se u potpunosti bolje shvatiti kroz Primere koji slede. Oni, međutim, ne treba da budu uzeti kao graničnici smisla pronalaska.
Primeri
Formulacije anti-CD20 za subkutano primenjivanje prema pronalasku su razvijene na osnovu eksperimentalnih rezultata kako je u nastavku prikazano, korišćenjem opštih proizvodnih i analitičkih postupaka i testova kako je istaknuto u nastavku.
Primer 1: Proizvodnja visoko koncentrovanih tečnih formulacija
Rituksimab se proizvodi opšte poznatim tehnikama proizvodnje rekombinantnih proteina. Genetski konstruisana ovarijalna ćelijska linija kineskog hamstera (CHO) pripremljena je na način opisan u EP-B-2000149 i ekspandovana u ćelijskoj kulturi iz glavne banke ćelija. Monoklonsko antitelo rituksimaba se sakupi iz fluida ćelijske kulture i prečisti korišćenjem afinitetne hromatografije sa imobilisanim Proteinom A, katjon izmenjivačkom hromatografijom, korakom filtracije radi uklanjanja virusnih kontaminata, zatim anjon izmenjivačkom hromatografijom i, korakom ultrafiltracije/dijafiltracije.
rHuPH20 se proizvodi opšte poznatim tehnikama proizvodnje rekombinantnih proteina. Ovaj postupak počinje otapanjem ćelija iz radne banke ćelija (WCB) ili glavne banke ćelija (MCB) i ekspanzijom kroz ćelijsku kulturu u serijama boca za uzgajanje kulture sa mešalicom (spinner boce). Koristi se ćelijska kultura do 6 litara da bi se obezbedio kontinuirani izvor ćelija održavanih pod selektivnim pritiskom sa
metotreksatom. Kada je ekspandovana na otprilike 36 litara, kultura se prenosi u bioreaktor od 400 litara kako se postiže konačna zapremina serije od otprilike 300 litara. Bioreaktor za proizvodnju se podešava na način punjenja serijom, bez biranja pritiska, i u trajanju faze produkcije od otprilike dve nedelje. rHuPH20 se izlučuje u fluid kulture. Bioreaktor od 1000 litara može, isto tako, da se koristi za konačnu zapreminu serije od 500 litara. Posle završetka faze proizvodnje, sakupljanje se razvrstava filtracijom i, zatim tretira sa rastvaračem/deterdžentom kako bi se inaktivirali virusi. Protein se onda prečišćava serijom od četiri hromatografska procesa na koloni kako bi se uklonila onečišćenja proizvoda i ona koja su u vezi sa proizvodnim postupkom. Izvodi se korak filtracije virusa, zatim se filtrirani sadržaj ukoncentriše i, formuliše u konačnom puferu: 10 mg/mL rHuPH20 u 20 mM L-histidin/HC! pufera, pH 6.5, 130 mM NaCI, 0.05% (tež/vol) polisorbat 80. Sadržaj rHuPH20 se čuva na ispod -70°C.
Ostale podloge za formulaciju prema ovom pronalasku široko se koriste u praksi i poznate su stručnim licima u ovoj oblasti. Zbog toga ne postoji potreba da se one detaljno navode.
Formulacije u vidu tečnog proizvoda leka za subkutano primanjivanje prema pronalasku su razvijene na sledeći način: Za izradu tečnih formulacija, rituksimab je puferski izmenjen prema dijafiltracionom puferu koji sadrži anticipirani sastav puferske smeše i zahtevano je da je, ukoncentrisan dijafiltracijom do koncentracije antitela od otprilike 200 mg/ml. Posle završetka operacije dijafiltracije, podloge (npr. trehaloza, rHuPH20, surfaktant) su dodate u vidu matičnih rastvora rastvoru antitela. Konačno, koncentracija proteina je podešena sa puferom do konačne koncentracije rituksimaba od otprilike 120 mg/ml.
Sve formulacije su sterilno filtrirane kroz 0.22nm-ske filtere sa neznatnim vezivanjem proteina i, aseptički punjene u sterilne 6 ml-ske staklene bočice zatvorene sa ETFE (kopolimer etilen i tetrafluoroetilen)-obloženim gumenim zatvaračima i aluminijumskim prekrivačima. Zapremina punjenja je bila oko 3.0 ml. Ove formulacije su čuvane pod različitim klimatskim uslovima (5°C, 25°C i 40°C) u različitim vremenskim intervalima i, podvrgnute su stresu mućkanjem (1 nedelja mućkanja pri frekvenciji od 200 rpm na 5°C i 25°C) i , postupcima izazivanja stresa postupkom smrzavanja-topljenja. Uzorci su analizirani pre i posle primene stres testova sledećim analitičkim postupcima:
1) UV spektrofotometrija; 2) Hromatografija isključivanja prema veličini (SEC); 3) pomoću jon-izmenjivačke hromatografije (IEC); 4) pomoću zamućenja rastvora;
5) za vidljive čestice; i
6) za aktivnost rHuPH20.
UV spektroskopija, koja se koristi za određivanje sadržaja proteina, izvedena je na Perkin Elmer A35 UV spektrofotometru u opsegu talasnih dužina od 240 nm do 400 nm. Uzorci sa čistim proteinom su razblaženi na otprilike 0.5 mg/ml sa odgovarajućim puferom formulacije. Koncentracija proteina je izračunata prema Jednačini 1.
UV svetlosna absorpcija na 280 nm je korigovana za rasipanje svetlosti na 320 nm i pomnožena faktorom razblaženja, koji je određen iz izmerenih masa i gustina čistih uzoraka i pufera za razblaživanje. Brojilac je podeljen proizvodom dužine puta kroz kivetu d i ekstinkcionog koeficijenta£.
Hromatografija isključivanja po veličini (SEC) je korišćena za detekciju rastvorljivih vrsta velike molekulske težine (agregata) i proizvoda hidrolize malih molekulskih težina (LMVV) u formulacijama. Postupak koristi pogodni HPLC instrument opremljen sa UV detektorom (detekciona talasna dužina 280nm) i sa kolonom TosoHaas TSK G3000SWXL (7.8x300 mm). Intaktni monomer, agregati i proizvodi hidrolize su razdvojeni putem profila izokratskog eluiranja, upotrebom 0.2M dikalijum hidrogen fosfata, 025 M kalijum hlorida, pH 7.0 uz brzinu protoka od 0.5ml/min,
Jono tzmenjivačka hromatografija (IEC) je izvedena radi detektovanja hemijskih degradacionih proizvoda koji menjaju neto sadržaj rituksimaba u formulacijama. Za ove potrebe, rituksimab se podvrgne digestiji sa papainom. Postupak koristi pogodan HPLC instrument opremljen sa UV detektorom (detekciona talasna dužina 280nm) i sa analitičkom katjon-izmenjivačkom kolonom Polvmer Labs PL-SCX 1000A. Kao mobilne faze A i B korišćeni su 10mM MES, pH 6.0 odnosno, 10mM MES, 0.2 M natrijum hlorid, pH 6.0 uz brzinu protoka od 1 ml/min.
Za određivanje turbiditeta, izmerena je opalescencija u FTU (jedinice turbiditeta) korišćenjem HACH 2100AN turbidimetra na sobnoj temperaturi.
Uzorci su analizirani na vidljive čestice korišćenjem instrumenta Seidenader V90-T za vizuelnu inspekciju.
In vitroenzimsko ispitivanje rHuPH20 kao hijaluronidaze je korišćeno kao test aktivnosti. Test je zasnovan na formiranju nerastvornog precipitata kada se hijaluronan (natrijum hijaluronat) veže za katjonski precipitant. Enzimska aktivnost je izmerena inkubiranjem rHuPH20 sa hijaluronan substratom i zatim taloženjem nesvarenog hijaluronana sa zakiseljenim serumskim albuminom (konjski serum). Turbiditet je izmeren na talasnoj dužini od 640 nm i pad turbiditeta, posledica enzimske aktivnosti na hijaluronanski substrat je mera enzimske aktivnosti. Postupak je izveden upotrebom standardne krive napravljene sa razblaženjima rHuPH20 test referentnog standarda, a aktivnost u uzorcima je određena sa krive.
Rezultati testiranja stabilnosti formulacija A do J su dati u tabelama pridodatim u nastavku.
Smeše i podaci o stabilnosti proizvoda leka Rituksimab u vidu tečnih formulacija prema ovom pronalasku
Formulacija A je tečna formulacija sa sastavom 120 mg/ml rituksimaba, 20 mM L-histidina, 210 mM trehaloze dihidrata, 10 mM metionina, 0.06% polisorbata 80, 2,000 IJ/ml rHuPH20 na pH 5.5.
Formulacija B jetečna formulacija sa sastavom 120 mg/ml rituksimaba, 20 mM L-histidina, 210 mM trehaloze dihidrata, 10 mM metionina, 0.06% polisorbata 80, 2,000 IJ/ml rHuPH20 na pH 6.1.
FormulacijaC je tečna formulacija sa sastavom 120 mg/ml rituksimaba, 20 mM L-histidina, 210 mM trehaloze dihidrata, 10 mM metionina, 0.06% polisorbata 80, 12,000 IJ/ml rHuPH20 na pH 5.5.
Formulacija Dje tečna formulacija sa sastavom 120 mg/ml rituksimaba, 20 mM sirćetne kiseline, 210 mM trehaloze dihidrata, 10 mM metionina, 0.06% polisorbata 80, 12,000 IJ/ml rHuPH20 na pH 5.5.
Formulacija Eje tečna formulacija sa sastavom 120 mg/ml rituksimaba, 20 mM L-histidina, 210 mM trehaloze dihidrata, 10 mM metionina, 0.06% polisorbata 20, 12,000 IJ/ml rHuPH20 na pH 5.5.
FormulacijaF je tečna formulacija sa sastavom 120 mg/ml rituksimaba, 20 mM L-histidina, 120 mM natrijum hlorida, 10 mM metionina, 0.02% polisorbata 80, 12,000 IJ/ml rHuPH20 na pH 5.5.
Formulacija G je tečna formulacija sa sastavom 120 mg/ml rituksimaba, 20 mM limunske kiseline, 120 mM natrijum hlorida, 10 mM metionina, 0.02% polisorbata 80, 12,000 IJ/ml rHuPH20 na pH 6.5.
Formulacija Hje tečna formulacija sa sastavom 120 mg/ml rituksimaba, 20 mM limunske kiseline, 210 mM trehaloze dihidrata, 10 mM metionina, 0.06% polisorbata 80, 12,000 IJ/ml rHuPH20 na pH 6.5.
FormulacijaI je tečna formulacija sa sastavom 120 mg/ml rituksimaba, 20 mM L-histidina, 120 mM natrijum hlorida, 10 mM metionina, 0.04% polisorbata 80, 12,000 IJ/ml rHuPH20 na pH 6.0.
Formulacija Jje tečna formulacija sa sastavom 25 mg/ml GA101 (huMAb<CD20>), 20 mM L-histidina, 240 mM trehaloze dihidrata, 0.02% poloksamera 188, 2,000 IJ/ml rHuPH20 na pH 6.0.
Primer 2: Izrada tečnih formulacija humanizovanog 2H7 anti-CD20
Za izradu tečnih formulacija, rekombinantno humanizovano 2H7 anti-CD20 antitelo (2H7.v16 kako je izloženo u WO 2006/084264) je puferski izmenjeno prema dijafiltracionom puferu sadržavajući očekivani puferski sastav i gde je bilo neophodno, ukoncentrisano na koncentraciju antitela od otprilike 60 i 120 mg/ml. Posle dobijanja ciljne koncentracije, u rastvor antitela su dodavane podloge {npr., trehaloza, rHuPH20, polisorbat 20) u vidu matičnih rastvora. Konačno, koncentracija proteina je podešena uz pomoć pufera konačne formulacije na koncentraciju humanizovanog 2H7 od otprilike 30, 50 i 100 mg/ml.
Sve formulacije su sterilno filtrirane kroz 0.22^m-ske filtere sa neznatnim vezivanjem proteina i, aseptički punjene u sterilne 3 ml-ske staklene bočice zatvorene sa fluoro-smolnim laminatnim butil gumenim čepovima i prekrivene sa aluminijum/ plastičnim zatvaračima sa delom za povlačenje prstima. Zapremina punjenja je bila otprilike 1.2 ml. Ove formulacije su čuvane na različitim temperaturama {5°C, 25°C i 40°C) u različitim vremenskim intervalima. Uzorci su analizirani na stabilnost za svaku vremensku tačku sledećim analitičkim postupcima:
1) UV spectrofotometrija
2) Hromatografija isključivanja prema veličini (SEC); 3) jono-izmenjivačka hromatografija (IEC); 4) test komplement-zavisne citotoksičnosti (CDC) za aktivnost humanizovanog 2H7
5) turbidimetrijski test za aktivnost rHuPH20
1) . Koncentracija proteina je određena spektroskopijom ultravioletne apsorpcije korišćenjem Agilent 8453 spektrofotometra na opsegu talasnih dužina 240 nm do 400 nm. Uzorci su gravimetrijski razblaženi na otprilike 0.5 mg/ml sa odgovarajućim puferom formulacije. Koncentracije proteina su izračunate upotrebom Jednačine 1:
Koncentracija proteina = ((Amax- A320x DF) / (E(cm<2>/mg) x d(cm)) (Jednačina 1)
u kojoj je DF dilucioni faktor, d je dužina puta kroz kivetu i z je koeficijent ekstinkcije, koji iznosi 1.75 (cm<2>/mg~<1>) za 2H7 naAnax.Apsorpcija UV svetlosti naAm3X(obično 278 do 280 nm) je korigovana za rasipanje svetlosti na 320 nm i pomnožena sa dilucionitn faktorom, koji je određen iz izmerenih masa i gustina čistog uzorka i pufera za razblaživanje. Brojilac je podeljen proizvodom dužine puta kroz kivetu d i koeficijenta ekstinkcije£.
2) . Hromatografija isključivanja prema veličini (SEC) je korišćena za detekciju rastvorljivih vrsta velike molekulske težine (agregata) i proizvoda hidrolize malih
molekulskih težina (fragmenata) u formulacijama. SEC je izvedena na HPLC-u Agilent Technologies, Inc. 1100 serije, opremljenim sa UV detektorom (detekciona talasna dužine 280nm) i TSK G3000SWXL kolonom (7.8x300 mm). Intaktni monomer, agregati i produkti hidrolize su razdvojeni putem profila izokratskog eluiranja, korišćenjem 0.20M kalijum fosfata i 0.25M kalijum hlorida na pH 6.2 sa brzinom protoka od 0.3 ml/min. 3) . Jono-izmenjivačka hromatografija (IEC) je izvedena radi detektovanja hemijskih degradacionih proizvoda koji menjaju neto sadržaj anti-CD20 antitela u formulacijama. Za ove potrebe, anti-CD20 antitelo se inkubira sa karboksipeptidazom B koja katalizuje hidrolizu baznih amino kiselina. Jono-izmenjivačka hromatografija je izvedena na Agilent Technologies, Inc. 1100 series HPLC sa UV detektorom (detekciona talasna dužina 280nm) i Dionex ProPac WCX-10 (4 x 250 mm) kolonom. Kisele i bazne varijante su razdvojene upotrebom linearnog gradijenta od 25mM kalijum fosfata na pH 6.9 (mobilna faza A) i 120mM kalijum hlorida rastvorenog u 25mM kalijum fosfata (mobilna faza B) sa brzinom protoka od 0.5 mL/min. 4) . Test komplement-zavisne citotoksičnosti (CDC) je izveden radi određivanjain vitroaktivnosti anti-CD20 antitela. Test potencije komplement-zavisne citotoksičnosti (CDC) se koristi kako bi se izmerila mogućnost antitela da lizira humane B limfoblastoidne (VVIL2-S) ćelije u prisustvu humanog komplementa. Test se izvodi u mikrotitarskim pločama sa 96 reakcionih pozicija za kulturu tkiva. U ovom testu, različite koncentracije referentnog materijala anti-CD20 antitela, kontrole, ili uzorka(aka), koji su razblaženi u test diluentu se inkubira sa VVIL2-S ćelijama (50,000 ćelija/poziciji) u prisustvu fiksne količine humanog komplementa. Ploča se inkubira na 37°C/5% C02u vlažnom inkubatoru u toku 1 do 2 sata. Na kraju inkubacionog perioda, dodaje se 50 \ aL redoks boje, ALAMARBLUE™ u svaku reakcionu poziciju i ploča se inkubira 15 do 26 sati. ALAMARBLUE™ je redoks boja koja fluorescira na ekscitacionoj talasnoj dužini od 530 nm i emisionoj talasnoj dužini od 590 nm kada je redukuju žive ćelije. Zbog toga, izmene u boji i fluorescenciji su proporcionalne broju vijabilnih ćelija. Rezultati, izraženi u relativnim jedinicama fluorescencije (RFU), se postavljaju prema koncentracijama anti-CD20 antitela i, koristi se program paralelnih linija za određivanje aktivnosti anti-CD20 antitela u uzorcima u odnosu na referentni materijal. 5) . Turbidimetrijski test je korišćen za određivanje aktivnosti i koncentracije enzima hijaluronidaze. Ovaj postupak je zasnovan na formiranju nerastvornog taloga kada se hijaluronska kiselina veže sa zakišeljenim serum albuminom. Ukratko, pripreme se serije razblaženja radnog referentnog standarda rhuPH20 hijaluronidaze (Halozvme, Inc.) u opsegu od 2.5 IJ/ml do 0.25 IJ/ml u diluentu za enzim (70 mM NaCI, 25 mM PIPES, pH 5.5, 0.66 mg/ml želatinski hidrolizat, 0.1 % humani serum albumin). Test uzorci su razblaženi do konačne koncentracije od 1.5 IJ/ml u diluentu za enzim. 30^il razblaženja standarda i uzorka se prenese u ploču sa "crnim providnim dnom" od 96 reakcionih pozicija (Nunc). Ploča se zatim prekrije i prethodno zagreva 5 minuta na 37°C. Reakcija zatim otpočinje dodavanjem 30 uJ prethodno zagrejanog 0.25 mg/ml rastvora supstrata hijaluronske kiseline (70 mM NaCI, 25 mM PIPES, pH 5.5, 0.25 mg/ml osušen natrijum hijaluronat, Lifecore Biomedical). Ploča se podvrgne mućkanju u kratkom vremenskom periodu i inkubira 10 minuta na 37°C. Posle ovog inkubacionog koraka, reakcija se zaustavlja dodavanjem 240 ^l radnog rastvora seruma (2.5 % konjski serum, 500 mM kalijum acetat, pH 4.25). Posle perioda od 30 minuta razvijanja na sobnoj temperaturi, turbiditet reakcije je izmeren na talasnoj dužini od 640 nm na čitaču mikrotitarskih ploča. Pad turbiditeta, nastao zbog enzimske aktivnosti na supstrat hijaluronske kiseline, je mera aktivnosti hijaluronidaze. Aktivnost u uzorku je određena u odnosu na kalibracionu krivu generisanu sa razblaženjima radnog referentnog standarda rhuPH20.
Rezultati dobijeni sa različitim formulacijama humanizovanog 2H7 antitela su prikazani u sledećim tabelama:
Formulacija K je tečna formulacija, koja ima sastav: 30 mg/ml humanizovanog 2H7, 30 mM natrijum acetata, 8% trehaloza dihidrata, 0.02% polisorbata 20, 0 IJ/ml rhuPH20 sa pH 5.3.
Formulacija Lje tečna formulacija, koja ima sastav: 30 mg/ml humanizovanog 2H7, 30 mM natrijum acetata, 8% trehaloza dihidrata, 0.02% polisorbata 20, 1500 IJ/ml rhuPH20 sa pH 5.3.
FormulacijaM je tečna formulacija, koja ima sastav: 30 mg/ml humanizovanog 2H7, 30 mM natrijum acetata, 8% trehaloza dihidrata, 0.02% polisorbata 20, 12 000 IJ/ml rhuPH20 sa pH 5.3.
FormulacijaN je tečna formulacija, koja ima sastav: 50 mg/ml humanizovanog 2H7, 30 mM natrijum acetata, 8% trehaloza dihidrata, 0-02% polisorbata 20, 0 IJ/ml rhuPH20 sa pH 5.3.
Formulacija Oje tečna formulacija, koja ima sastav: 50 mg/ml humanizovanog 2H7, 30 mM natrijum acetata, 8% trehaloza dihidrata, 0.02% polisorbata 20,1500 IJ/ml rhuPH20 sa pH 5.3.
Formulacija Pje tečna formulacija, koja ima sastav: 50 mg/ml humanizovanog 2H7, 30 mM natrijum acetata, 8% trehaloza dihidrata, 0.02% polisorbata 20, 12 000 IJ/ml rhuPH20 sa pH 5.3.
FormulacijaQ je tečna formulacija, koja ima sastav: 100 mg/ml humanizovanog 2H7, 30 mM natrijum acetata, 8% trehaloza dihidrata, 0.02% polisorbata 20, 0 IJ/ml rhuPH20 sa pH 5.3.
Formulacija Rje tečna formulacija, koja ima sastav: 100 mg/ml humanizovanog 2H7, 30 mM natrijum acetata, 8% trehaloza dihidrata, 0.02% polisorbata 20, 1500 IJ/ml rhuPH20 sa pH 5.3.
FormulacijaS je tečna formulacija, koja ima sastav: 100 mg/ml humanizovanog 2H7, 30 mM natrijum acetata, 8% trehaloza dihidrata, 0.02% polisorbata 20, 12 000 IJ/ml rhuPH20 sa pH 5.3.
Primer 3: Tretman pacijenata sa formulacijom
Režimi koji obuhvataju rituksimab postali su standard lečenja pacijenata koji boluju od različitih CD20-pozitivnih B-ćelijskih maligniteta. Danas, rituksimab se primenjuje kao intravenska (IV) infuzija tokom nekoliko časova. Mnogi pacijenti se žale na ovo dugačko trajanje infuzije i sporedne efekte povezane sa infuzijom, kao na neprijatne posledice trenutnog terapeutskog tretmana. Sem toga, neophodna procedura za utvrđivanje intravenskog pristupa se smatra invazivnom i može biti bolna, naročito kod pacijenata sa malignim bolestima koji se ponavljano tretiraju. Subkutano (SC) primenjivanje bi moglo značajno da pojednostavi tretman, skrati primenu na manje od 10 minuta i unapredi iskustvo pacijenta. Razvijena je rekombinantna humana hijaluronidaza (rHuPH20) i odobrena je za poboljšanje disperzije i apsorpcije ko-administriranih lekova. Kombinovana je sa rituksimabom na koji način je omogućeno da se injekcioni volumeni veći od 10 mL bezbedno i lagodno primene SC. Ciljevi ovog tretmana su bili da se odabere doza SC formulacije rituksimaba sa rHuPH20, pripremljene kako je opisano u Primeru 1 (Formulacija A), omogućavajući uporedno izlaganje IV rituksimabu, kao i da se ispita njena bezbednost i podnošljivost kod muških i ženskih pacijenata sa folikularnim limfomom (FL) tokom tretmana održavanja.
Ovaj primer je obezbedio podatke u 1 stadijumu iz randomizovane, otvorene, multicentrične adaptivne faze lb studije. 124 pacijenta su nasumično odabrana u jednu od četiri grupe na tretmanu održavanja rituksimaba: 16 pacijenata IV kontrola, 34 pacijenta SC doza 1 (375 mg/m<2>), 34 pacijenta SC doza 2 (625 mg/m<2>) i 40 pacijenata SC doza 3 (800 mg/m<2>). Pre randomizacije, kvalifikovani pacijenti su lečeni sa najmanje jednom IV dozom rituksimaba od 375 mg/m<2>u podešavanju održavanja. Za pacijente randomizovane na jedan od SC profila, jedna IV doza je zamenjena SC dozom. Pacijenti su primali rituksimab po režimu ili svakih 2 meseca (q2m) ili svaka 3 meseca (q3m), već prema lokalnoj praksi. Podaci o bezbednosti su bili dostupni od ukupno 119 pacijenata. Rituksimab SC se generalno dobro podnosi. Nisu zabeležena klinički značajna zapažanja o ozbiljnijim sporednim efektima koji bi bili povezani sa tretmanom. Ukupno je prijavljeno 95 sporednih događaja (AEs) kod 46 pacijenata (39%). Najčešće prijavljen AE je bila "reakcija povezana sa primenjivanjem" (AAR, uključujući ospu, eritem i blagu nelagodu). Ovi AARs su bili reverzibilni, predominantno blagi po intenzitetu i samo je 1 događaj zahtevao tretman (metoklopramid radi mučnine). Ukupno, AE profil nije značajno različit od onog očekivanog kod pacijenata lečenih sa rituksimabom IV (posle AAR, najčešći događaji su bili gastrointestinalni poremećaji i blage infekcije). Prijavljena su četiri ozbiljna sporedna događaja (SAEs) kod 4 pojedinačna pacijenta, svi prijavljeni kao nepovezani sa ispitivanjem lečenja. Nije bilo AEs koji su doveli do smrti, odustajanja ili prekidanja tretmana.
Ukupna zapremina primenjena SC kod svakog pacijenta bila je u rasponu između 4.4 - 15.0 mL. Prosečno trajanje injektovanja je bilo 2 mL/min. Maksimalne serumske koncentracije rituksimaba u SC profilu javljale su se između dana 2 i dana 8 (48 h i 168 h). Farmakokinetski parametri su bili linearni u odnosu na dozu kroz opseg SC primenjenih doza (375, 625 i 800 mg/m<2>). Koncentracije rituksimaba na dan 28 (C28) 1 stepen serumke izloženosti (AUC0-57) kod pacijenata koji su primili 625 mg/m<2>rituksimaba SC su bile uporedive sa onima kod pacijenata koji su primili standardnu IV dozu rituksimaba od 375 mg/m<2>SC.
U zaključku, subkutani rituksimab se može osloboditi brzo, lagodno i bezbedno uz postizanje serumske izloženosti uporedive sa odobrenim intravenskim formulacijama kod FL pacijenata tokom tretmana održavanja. Iskustvo pacijenata je bilo poželjno. Ovi rezultati podržavaju dalje testiranje subkutanog rituksimaba i, odabrane su fiksne doze od 1400 mg rituksimaba SC za formal C,roughne-inferiornosti testiranje u fazi 2 ispitivanja.
Primer 4: Rituksimab SQ vs. Rituksimab IV kod pacijenatasafolikularnim ne-Hodgkinovim limfomom
Pacijenti sa prethodno nelečenim folikularnim (niskog gradusa) limfomom su lečeni tretmanom održavanja ili sa: (a) SC formulacijom rituksimaba (proizvedena prema Primeru 1, Formulacija A) u kombinaciji sa CHOP ili CVP, ili sa: (b) rituksimabom IV u kombinaciji sa CHOP ili CVP.
Pacijenti će biti randomizovani za primanje 375 mg/m<2>rituksimaba u vidu intravenske infuzije ili 1400 mg rituksimaba koji će se dati subkutano. Sem toga, pacijenti će primiti standardnu hemoterapiju (CVP ili CHOP). Pacijenti koji postignu potpuni ili delimičan odgovor posle 8 ciklusa tretmana, primaće tretman održavanja tokom sledećih najduže 12 ciklusa. Ciklusi tretmana održavanja biće ponavljani svakih 8 nedelja. Anticipirano vreme za studiju lečenja je 96 nedelja.
Očekuje se da tretman sa 1400mg SQ rituksimab anti-CD20 antitela kao tretman održavanja svakih 8 nedelja do ukupno 12 ciklusa bude bezbedan i efikasan za lečenje folikularnog limfoma, eventualno u kombinaciji sa hemoterapijom (uključujući CHOP ili CVP).

Claims (24)

1. Visoko koncentrisana, stabilna farmaceutska formulacija za subkutano primenjivanje farmaceutski aktivnog anti-CD20 antitela, koja sadrži: a. 50 do 350 mg/ml anti-CD20 antitela; b. 1 do 100 mM puferskog sredstva koje obezbeđuje pH od5.5 ±2.0; c. 1 do 500 mM stabilizatora ili mešavine dva ili više stabilizatora; d. 0.01 do 0.1 % nejonskog surfaktanta; i e. 1'000 do 16'000 IJ/ml enzima hijaluronidaze, poželjno oko 2'000 IJ/ml ili 12' 000 IJ/ml.
2. Visoko koncentrisana, stabilna farmaceutska formulacija anti-CD20 antitela prema zahtevu 1, u kojoj je koncentracija anti-CD20 antitela 100 do 150 mg/ml, poželjno 120 ± 20 mg/ml.
3. Visoko koncentrisana, stabilna farmaceutska formulacija anti-CD20 antitela prema ma kom od zahteva 1 do 2, u kojoj je pufersko sredstvo u koncentraciji od 1 do 50 mM.
4. Visoko koncentrisana, stabilna farmaceutska formulacija anti-CD20 antitela prema ma kom od zahteva 1 do 3, u kojoj pufersko sredstvo obezbeđuje pH od 5.5 do 6.5, poželjno odabran od sledećih vrednosti: 5.5, 6.0, 6.1 i 6.5.
5. Visoko koncentrisana, stabilna farmaceutska formulacija anti-CD20 antitela prema ma kom od zahteva 1 do 4, u kojoj je pufersko sredstvo histidinski pufer.
6. Visoko koncentrisana, stabilna farmaceutska formulacija anti-CD20 antitela prema ma kom od zahteva 1 do 5, u kojoj je stabilizator saharid, kao što je npr. a,a-trehaloza dihidrat ili saharoza.
7. Visoko koncentrisana, stabilna farmaceutska formulacija anti-CD20 antitela prema ma kom od zahteva 1 do 6, u kojoj je stabilizator u koncentraciji od 15 do 250 mM.
8. Visoko koncentrisana, stabilna farmaceutska formulacija anti-CD20 antitela prema zahtevu 6 ili 7, u kojoj se metionin koristi kao sekundarni stabilizator
9. Visoko koncentrisana, stabilna farmaceutska formulacija anti-CD20 antitela prema zahtevu 8, u kojoj se metionin nalazi u koncentraciji od 5 do 25 mM.
10. Visoko koncentrisana, stabilna farmaceutska formulacija anti-CD20 antitela prema ma kom od zahteva 1 do 9, u kojoj je nejonski surfaktant polisorbat, poželjno odabran iz grupe, koju čine: polisorbat 20, polisorbat 80 i polietilen-polipropilen kopolimer.
11. Visoko koncentrisana, stabilna farmaceutska formulacija anti-CD20 antitela prema zahtevu 10, u kojoj je koncentracija polisorbata 0.02 % (tež/vol) do 0.08 % (tež/vol).
12. Visoko koncentrisana, stabilna farmaceutska formulacija anti-CD20 antitela prema ma kom od zahteva 1 do 11, pri čemu je enzim hijaluronidaza rHuPH20.
13. Visoko koncentrisana, stabilna farmaceutska formulacija anti-CD20 antitela prema ma kom od zahteva 1 do 12, pri čemu je anti-CD20 antitelo rituksimab.
14. Visoko koncentrisana, stabilna farmaceutska formulacija anti-CD20 antitela prema ma kom od zahteva 1 do 12, pri čemu je anti-CD20 antitelo okrelizumab.
15. Visoko koncentrisana, stabilna farmaceutska formulacija anti-CD20 antitela prema ma kom od zahteva 1 do 12, pri čemu je anti-CD20 antitelo HuMab<CD20>.
16. Visoko koncentrisana, stabilna farmaceutska formulacija anti-CD20 antitela prema ma kom od zahteva 1 do 15, koja je stabilna prilikom zamrzavanja i topljenja.
17. Visoko koncentrisana, stabilna farmaceutska formulacija anti-CD20 antitela prema ma kom od zahteva 1 do 16, koja je u tečnom obliku.
18. Visoko koncentrisana, stabilna farmaceutska formulacija anti-CD20 antitela prema ma kom od zahteva 1 do 17, koja je u liofilizovanoj formi
19. Visoko koncentrisana, stabilna farmaceutska formulacija anti-CD20 antitela prema ma kom od zahteva 1 do 18, koja sadrži 120 mg/ml rituksimaba, 20 mM L-histidina, 210 mM trehaloza dihidrata, 10 mM metionina, 0.06% polisorbata 80, 2000 IJ/ml rHuPH20 pri pH 5.5.
20. Formulacija prema ma kom od zahteva 1 do 18, za korišćenje u lečenju bolesti ili poremećaja koje(i) odgovaraju na tretman sa anti-CD20 antitelom, pre svega kancera ili ne-maligne bolesti kod osobe, a koje podrazumeva primenjivanje ovde opisane formulacije osobi u količini koja je delotvorna za lečenje navedene bolesti ili poremećaja.
21. Formulacija za korišćenje prema zahtevu 20, pri čemu se formulacija zajedno primenjuje, istovremeno ili uzastopno, sa hemoterapijom.
22. Formulacija za korišćenje prema zahtevu 20 ili 21, pri čemu formulacija sadrži fiksnu dozu od 1200 mg do 2200 mg anti-CD20 antitela.
23. Formulacija za korišćenje prema zahtevu 20 ili 21, pri čemu formulacija sadrži fiksnu dozu od 1200 mg do 1800 mg anti-CD20 antitela.
24. Formulacija za korišćenje prema zahtevu 20 ili 21, pri čemu formulacija sadrži fiksnu dozu od1600 mg do 2200 mg anti-CD20 antitela.
RS20160354A 2009-09-11 2010-09-10 Visoko koncentrovane farmaceutske formulacije koje sadrže anti-cd20 antitelo RS54769B1 (sr)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP09170110 2009-09-11
EP10751675.9A EP2475353B1 (en) 2009-09-11 2010-09-10 Highly concentrated pharmaceutical formulations comprising anti-cd20 antibody
PCT/EP2010/063271 WO2011029892A2 (en) 2009-09-11 2010-09-10 Highly concentrated pharmaceutical formulations

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS54769B1 true RS54769B1 (sr) 2016-10-31

Family

ID=43732866

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20160354A RS54769B1 (sr) 2009-09-11 2010-09-10 Visoko koncentrovane farmaceutske formulacije koje sadrže anti-cd20 antitelo

Country Status (41)

Country Link
US (6) US20110076273A1 (sr)
EP (5) EP3064196A1 (sr)
JP (4) JP5674788B2 (sr)
KR (3) KR20120051094A (sr)
CN (2) CN102686216B (sr)
AR (1) AR078161A1 (sr)
AU (1) AU2010294186B2 (sr)
BR (1) BR112012005017B8 (sr)
CA (1) CA2771571C (sr)
CL (1) CL2012000620A1 (sr)
CO (1) CO6440527A2 (sr)
CR (1) CR20120090A (sr)
CY (1) CY1117941T1 (sr)
DK (2) DK2475353T3 (sr)
DO (2) DOP2012000064A (sr)
EA (2) EA031972B1 (sr)
EC (1) ECSP12011722A (sr)
ES (2) ES2953478T3 (sr)
FI (1) FI3061445T3 (sr)
GT (1) GT201200069A (sr)
HR (2) HRP20231019T1 (sr)
HU (2) HUE062860T2 (sr)
IL (2) IL218165A (sr)
LT (1) LT3061445T (sr)
MA (1) MA33592B1 (sr)
MX (3) MX2012002861A (sr)
MY (2) MY174009A (sr)
NZ (2) NZ621448A (sr)
PE (2) PE20121178A1 (sr)
PH (1) PH12016501002B1 (sr)
PL (2) PL2475353T3 (sr)
PT (1) PT3061445T (sr)
RS (1) RS54769B1 (sr)
SG (1) SG179030A1 (sr)
SI (2) SI2475353T1 (sr)
SM (2) SMT202300282T1 (sr)
TN (1) TN2012000101A1 (sr)
TW (2) TWI515021B (sr)
UA (1) UA104909C2 (sr)
WO (1) WO2011029892A2 (sr)
ZA (1) ZA201201605B (sr)

Families Citing this family (116)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
HUE038955T2 (hu) 2003-11-05 2018-12-28 Roche Glycart Ag Antigén-kötõ molekulák fokozott Fc receptor-kötõ affinitással és effektor funkcióval
EP3266453A1 (en) 2008-07-03 2018-01-10 Mayo Foundation for Medical Education and Research Treating cancer
PT3228320T (pt) 2008-10-17 2020-03-26 Sanofi Aventis Deutschland Combinação de uma insulina e de um agonista do glp-1
PH12011502708B1 (en) 2009-07-06 2017-11-10 Sanofi Aventis Deutschland Insulin preparations containing methionine
US9345661B2 (en) 2009-07-31 2016-05-24 Genentech, Inc. Subcutaneous anti-HER2 antibody formulations and uses thereof
AR078161A1 (es) 2009-09-11 2011-10-19 Hoffmann La Roche Formulaciones farmaceuticas muy concentradas de un anticuerpo anti cd20. uso de la formulacion. metodo de tratamiento.
JP5832439B2 (ja) 2009-11-13 2015-12-16 サノフィ−アベンティス・ドイチュラント・ゲゼルシャフト・ミット・ベシュレンクテル・ハフツング Ｇｌｐ−１アゴニスト、インスリン及びメチオニンを含む薬学的組成物
SG10201500871TA (en) 2009-11-13 2015-04-29 Sanofi Aventis Deutschland Pharmaceutical composition comprising a glp-1 agonist and methionine
CN103179978A (zh) 2010-08-30 2013-06-26 赛诺菲-安万特德国有限公司 Ave0010用于制造供治疗2型糖尿病用的药物的用途
CN107320734A (zh) 2011-04-29 2017-11-07 西莱克塔生物科技公司 从合成纳米载体中控制释放免疫抑制剂
HUE048876T2 (hu) 2011-05-09 2020-08-28 Mayo Found Medical Education & Res Rákos megbetegedések kezelése
US9821032B2 (en) 2011-05-13 2017-11-21 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Pharmaceutical combination for improving glycemic control as add-on therapy to basal insulin
JP6367115B2 (ja) 2011-08-29 2018-08-01 サノフィ−アベンティス・ドイチュラント・ゲゼルシャフト・ミット・ベシュレンクテル・ハフツング ２型糖尿病患者の血糖コントロールに使用する組合せ医薬
TWI559929B (en) 2011-09-01 2016-12-01 Sanofi Aventis Deutschland Pharmaceutical composition for use in the treatment of a neurodegenerative disease
WO2013036296A1 (en) * 2011-09-06 2013-03-14 Selecta Biosciences, Inc. Compositions and methods for producing antigen-specific induced tolerogenic dendritic cells with synthetic nanocarriers
EP2771031B1 (en) 2011-10-28 2018-04-18 Prothena Biosciences Limited Humanized antibodies that recognize alpha-synuclein
EP2807188B1 (en) 2012-01-27 2019-09-11 Prothena Biosciences Limited Humanized antibodies that recognize alpha-synuclein
SI2849723T1 (sl) 2012-05-18 2018-09-28 Genentech, Inc. Formulacije z visoko koncentracijo monoklonskih protiteles
US20150239977A1 (en) * 2012-09-27 2015-08-27 Massachusetts Institute Of Technology Cd20- and egfr-binding proteins with enhanced stability
WO2014052713A2 (en) 2012-09-27 2014-04-03 Massachusetts Institute Of Technology Her2-and vegf-a-binding proteins with enhanced stability
US10413606B2 (en) 2012-10-01 2019-09-17 Mayo Foundation For Medical Education And Research Methods for treating cancer with nanoparticle complexes of albumin-bound paclitaxel and anti-VEGF antibodies
UA118441C2 (uk) 2012-10-08 2019-01-25 Протена Біосаєнсиз Лімітед Антитіло, що розпізнає альфа-синуклеїн
EP2727602A1 (en) * 2012-10-31 2014-05-07 Takeda GmbH Method for preparation of a high concentration liquid formulation of an antibody
AR093908A1 (es) * 2012-12-12 2015-06-24 Teva Pharma Fusion de la hormona de crecimiento humana y albumina, formulacion y usos de la misma
EP2945703A4 (en) 2013-01-15 2016-08-31 Teva Pharma ALBU-BCHE FORMULATIONS, PREPARATION THEREOF AND USES THEREOF
TWI780236B (zh) 2013-02-04 2022-10-11 法商賽諾菲公司 胰島素類似物及/或胰島素衍生物之穩定化醫藥調配物
CN105188751A (zh) * 2013-03-12 2015-12-23 泰华制药工业有限公司 利妥昔单抗诱导疗法继而醋酸格拉替雷疗法
MX365567B (es) * 2013-03-13 2019-06-07 Genentech Inc Formulaciones de anticuerpo.
US11576863B2 (en) 2013-03-15 2023-02-14 Takeda Pharmaceutical Company Limited Formulation of an antibody and use thereof
CN105307641A (zh) 2013-05-03 2016-02-03 西莱克塔生物科技公司 用于降低不期望体液免疫应答的给药组合
US10513555B2 (en) * 2013-07-04 2019-12-24 Prothena Biosciences Limited Antibody formulations and methods
IL312865B2 (en) 2013-09-11 2025-06-01 Eagle Biologics Inc Liquid protein formulations containing viscosity-lowering agents
AU2014337263B2 (en) * 2013-10-16 2019-12-12 Outlook Therapeutics, Inc. Buffer formulations for enhanced antibody stability
ES2875878T3 (es) 2013-11-18 2021-11-11 Formycon Ag Composición farmacéutica de un anticuerpo anti-VEGF
JP6641280B2 (ja) 2014-01-09 2020-02-05 サノフイＳａｎｏｆｉ インスリンアナログおよび／またはインスリン誘導体の安定化された医薬製剤
CA2932873A1 (en) 2014-01-09 2015-07-16 Sanofi Stabilized pharmaceutical formulations of insulin aspart
KR20160104726A (ko) 2014-01-09 2016-09-05 사노피 인슐린 유사체 및/또는 인슐린 유도체의 안정화된 무글리세롤 약제학적 제형
US9603927B2 (en) 2014-02-28 2017-03-28 Janssen Biotech, Inc. Combination therapies with anti-CD38 antibodies
US9732154B2 (en) 2014-02-28 2017-08-15 Janssen Biotech, Inc. Anti-CD38 antibodies for treatment of acute lymphoblastic leukemia
EP3154586B1 (en) * 2014-06-13 2020-05-27 Mayo Foundation for Medical Education and Research Treating lymphomas
US10213513B2 (en) 2014-06-16 2019-02-26 Mayo Foundation For Medical Education And Research Treating myelomas
WO2016011262A1 (en) * 2014-07-16 2016-01-21 New York University Use of hyaluronidase for treatment of muscle stiffness
EA201790551A1 (ru) 2014-09-07 2017-07-31 Селекта Байосайенсиз, Инк. Способы и композиции для ослабления иммунных ответов к пропускающему экзон вирусному трансферному вектору
ES2949173T3 (es) * 2014-09-15 2023-09-26 Hoffmann La Roche Formulaciones de anticuerpo
CN107073132B (zh) 2014-10-06 2021-08-27 梅约医学教育与研究基金会 载体-抗体组合物及其制备和使用方法
PE20171094A1 (es) 2014-12-04 2017-08-07 Janssen Biotech Inc Anticuerpos anti-cd38 para el tratamiento de la leucemia linfoblastica aguda
CN107206058A (zh) 2014-12-12 2017-09-26 赛诺菲-安万特德国有限公司 甘精胰岛素/利西拉来固定比率配制剂
AR103173A1 (es) 2014-12-22 2017-04-19 Novarits Ag Productos farmacéuticos y composiciones líquidas estables de anticuerpos il-17
EP3247718B1 (en) 2015-01-21 2021-09-01 Outlook Therapeutics, Inc. Modulation of charge variants in a monoclonal antibody composition
TWI748945B (zh) 2015-03-13 2021-12-11 德商賽諾菲阿凡提斯德意志有限公司 第２型糖尿病病患治療
TW201705975A (zh) 2015-03-18 2017-02-16 賽諾菲阿凡提斯德意志有限公司 第２型糖尿病病患之治療
US9981021B1 (en) 2015-04-09 2018-05-29 Kinetiq, Inc. Subcutaneous therapeutic enzyme formulations, uses, and methods for generating thereof
CN104761645A (zh) * 2015-04-30 2015-07-08 山东禹王制药有限公司 α干扰素融合蛋白制剂及应用
DE102015107307B3 (de) * 2015-05-11 2016-09-08 Labor L + S Aktiengesellschaft Optisches Verfahren zur Gehaltsbestimmung von Hyaluronsäure
CR20170526A (es) * 2015-05-20 2018-04-03 Janssen Biotech Inc ANTICUERPOS ANTI-CD38 PARA EL TRATAMIENTO DE AMILOIDOSIS DE CADENA LIGERA y OTRAS ENFERMEDADES MALIGNAS HEMATOLÓGICAS POSITIVAS PARA CD38
US20170044265A1 (en) 2015-06-24 2017-02-16 Janssen Biotech, Inc. Immune Modulation and Treatment of Solid Tumors with Antibodies that Specifically Bind CD38
ES2699526T3 (es) * 2015-07-28 2019-02-11 Hoffmann La Roche Prueba de endotoxinas bacterianas mejorada para la determinación de endotoxinas
TW201707725A (zh) 2015-08-18 2017-03-01 美國馬友醫藥教育研究基金會 載體－抗體組合物及其製造及使用方法
TW201713360A (en) 2015-10-06 2017-04-16 Mayo Foundation Methods of treating cancer using compositions of antibodies and carrier proteins
US10781261B2 (en) 2015-11-03 2020-09-22 Janssen Biotech, Inc. Subcutaneous formulations of anti-CD38 antibodies and their uses
JP7027321B2 (ja) 2015-11-03 2022-03-01 ヤンセン バイオテツク，インコーポレーテツド 抗ｃｄ３８抗体の皮下製剤及びその使用
JP6134081B1 (ja) * 2015-12-10 2017-05-24 株式会社メニコン ペプチド組成物
WO2017120501A1 (en) 2016-01-07 2017-07-13 Mayo Foundation For Medical Education And Research Methods of treating cancer with interferon
EP3411401A1 (en) 2016-02-03 2018-12-12 Oncobiologics, Inc. Buffer formulations for enhanced antibody stability
US11351254B2 (en) 2016-02-12 2022-06-07 Mayo Foundation For Medical Education And Research Hematologic cancer treatments
WO2017165440A1 (en) 2016-03-21 2017-09-28 Mayo Foundation For Medical Education And Research Methods for reducing toxicity of a chemotherapeutic drug
EP3432928A4 (en) 2016-03-21 2019-11-20 Mayo Foundation for Medical Education and Research PROCESS FOR IMPROVING THE THERAPEUTIC INDEX FOR CHEMOTHERAPEUTIC
US10618969B2 (en) 2016-04-06 2020-04-14 Mayo Foundation For Medical Education And Research Carrier-binding agent compositions and methods of making and using the same
WO2018002181A1 (en) 2016-06-28 2018-01-04 Umc Utrecht Holding B.V. TREATMENT OF IgE-MEDIATED DISEASES WITH ANTIBODIES THAT SPECIFICALLY BIND CD38
CN109789127B (zh) 2016-07-29 2022-03-25 英克特诺治疗公司 吲哚啉酮化合物的用途
EP3504241B1 (en) * 2016-08-29 2024-05-15 Tiziana Life Sciences PLC Anti-cd3 antibody formulations
CN109890419A (zh) 2016-09-01 2019-06-14 梅约医学教育与研究基金会 用于治疗癌症的载体-pd-l1结合剂组合物
CN109843336A (zh) 2016-09-01 2019-06-04 梅约医学教育与研究基金会 用于靶向t细胞癌症的方法和组合物
CN109843924A (zh) 2016-09-06 2019-06-04 梅约医学教育与研究基金会 治疗表达pd-l1的癌症的方法
AU2017324947A1 (en) 2016-09-06 2019-03-28 Mayo Foundation For Medical Education And Research Paclitaxel-albumin-binding agent compositions and methods for using and making the same
US11590098B2 (en) 2016-09-06 2023-02-28 Mayo Foundation For Medical Education And Research Methods of treating triple-negative breast cancer using compositions of antibodies and carrier proteins
JP7560946B2 (ja) * 2016-11-10 2024-10-03 トランスレイト バイオ， インコーポレイテッド メッセンジャーｒｎａの皮下送達
EP4599848A3 (en) 2017-03-11 2025-12-03 Cartesian Therapeutics, Inc. Methods and compositions related to combined treatment with anti-inflammatories and synthetic nanocarriers comprising an immunosuppressant
US10646569B2 (en) 2017-05-16 2020-05-12 Bhami's Research Laboratory, Pvt. Ltd. High concentration protein formulations with reduced viscosity
KR20200036889A (ko) * 2017-07-28 2020-04-07 에프. 호프만-라 로슈 아게 이중특이성 항체 제형
CN107596349A (zh) * 2017-10-26 2018-01-19 刘冬连 一种稳定的红细胞生成素制剂配方
US11618787B2 (en) 2017-10-31 2023-04-04 Janssen Biotech, Inc. Methods of treating high risk multiple myeloma
CN107898756B (zh) * 2017-12-22 2020-11-20 东曜药业有限公司 一种用于皮下或肌肉注射的高浓度尼妥珠单抗制剂及其制备方法和应用
TW202011995A (zh) * 2018-07-03 2020-04-01 比利時商葛萊伯格有限公司 高濃度液體抗體配製物
MX2020009824A (es) 2018-07-25 2021-01-15 Alteogen Inc Nuevas variantes de hialuronidasa y composicion farmaceutica que comprende la misma.
HRP20260607T1 (hr) * 2018-09-13 2026-06-05 F. Hoffmann-La Roche Ag Formulacija protutijela na csf-1r
MX2021004356A (es) 2018-10-18 2021-05-31 Merck Sharp & Dohme Llc Formulaciones de anticuerpos anti-rsv y metodos de uso de las mismas.
MA54089A (fr) 2018-10-31 2022-02-09 Merck Sharp & Dohme Anticorps anti-pd-1 humain et procédés d'utilisation associés
JP7503056B6 (ja) 2018-11-07 2024-07-16 メルク・シャープ・アンド・ドーム・エルエルシー 抗ｌａｇ３抗体および抗ｐｄ－１抗体の共－製剤
CN111202845A (zh) * 2018-11-22 2020-05-29 上海医药集团股份有限公司 包含抗cd20抗体的药物配制剂及其制备方法和应用
PE20212185A1 (es) 2019-02-18 2021-11-11 Lilly Co Eli Formulacion de anticuerpos terapeuticos
CN112203642B (zh) 2019-03-25 2025-03-07 阿特根公司 用于皮下注射的包含人透明质酸酶ph20变体和药物的药物组合物
US12553041B2 (en) 2019-06-04 2026-02-17 Cartesian Therapeutics Inc. Formulations and doses of pegylated uricase
CN114555117A (zh) * 2019-10-12 2022-05-27 百奥泰生物制药股份有限公司 抗cd20抗体制剂及抗cd20抗体在治疗cd20阳性疾病中的应用
CN114641270A (zh) * 2019-11-15 2022-06-17 豪夫迈·罗氏有限公司 防止水性蛋白质溶液中可见颗粒的形成
JP2023504748A (ja) * 2019-12-09 2023-02-06 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ｐｄ－ｌ１抗体製剤
CU20190104A7 (es) 2019-12-17 2021-08-06 Ct Inmunologia Molecular Formulación estable del anticuerpo nimotuzumab
TW202615652A (zh) 2020-01-23 2026-04-16 南韓商阿特根公司 新穎的具有改善的穩定性的玻尿酸酶變異體及含有其的醫藥組合物
FI129383B (en) 2020-06-15 2022-01-31 Faron Pharmaceuticals Oy Stable anti-clever-1 antibody formulation
WO2022031093A1 (ko) 2020-08-07 2022-02-10 (주)알테오젠 재조합 히알루로니다제의 생산 방법
EP4200333A1 (en) * 2020-08-24 2023-06-28 Amgen Inc. Pharmaceutical formulation comprising a bite, bispecific antibody, and methionine
PT4267105T (pt) 2020-12-28 2025-04-30 Bristol Myers Squibb Co Composições de anticorpos e métodos de utilização das mesmas
AU2021416156A1 (en) 2020-12-28 2023-06-22 Bristol-Myers Squibb Company Methods of treating tumors
WO2022141232A1 (zh) * 2020-12-30 2022-07-07 上海宝济药业有限公司 一种重组人透明质酸酶制剂及其应用
US20240197783A1 (en) 2021-04-21 2024-06-20 Indapta Therapeutics, Inc. Methods of treatment and dosing of natural killer cell compositions
CN115671267A (zh) * 2021-07-23 2023-02-03 上海宝济药业有限公司 一种皮下抗生素药物组合物
CN113855798A (zh) * 2021-09-30 2021-12-31 佛山汉腾生物科技有限公司 抗cd20的抗体制剂
WO2023091887A1 (en) 2021-11-16 2023-05-25 Genentech, Inc. Methods and compositions for treating systemic lupus erythematosus (sle) with mosunetuzumab
AU2023254206A1 (en) * 2022-04-13 2024-10-17 Genentech, Inc. Pharmaceutical compositions of mosunetuzumab and methods of use
KR20230150203A (ko) * 2022-04-20 2023-10-30 주식회사 알토스바이오로직스 오크렐리주맙(Ocrelizumab)을 포함하는 약학적 조성물과 그의 용도
US20250375524A1 (en) 2022-06-30 2025-12-11 Indapta Therapeutics, Inc. Combination of engineered natural killer (nk) cells and antibody therapy and related methods
MA70850A1 (fr) * 2022-07-26 2025-10-31 Joint Stock Company "Biocad" Composition pharmaceutique d'anticorps anti-cd20 et son utilisation
IL325726A (en) * 2023-07-11 2026-03-01 Genentech Inc Compositions and methods for treating multiple sclerosis
WO2025037336A1 (en) * 2023-08-12 2025-02-20 Dr. Reddy's Laboratories Limited Pharmaceutical formulations of anti-cd 20 antibody and methods of preparing the same
WO2026029570A1 (ko) * 2024-07-31 2026-02-05 삼성바이오에피스 주식회사 항-cd20 항체의 안정한 액상 제형
CN120514848B (zh) * 2025-07-28 2025-10-28 上海翰森生物医药科技有限公司 一种cd19抗体药物制剂

Family Cites Families (149)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2795529A (en) 1954-06-17 1957-06-11 American Home Prod Stabilized hyaluronidase solution containing calcium chloride
CU22545A1 (es) 1994-11-18 1999-03-31 Centro Inmunologia Molecular Obtención de un anticuerpo quimérico y humanizado contra el receptor del factor de crecimiento epidérmico para uso diagnóstico y terapéutico
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
US4753894A (en) 1984-02-08 1988-06-28 Cetus Corporation Monoclonal anti-human breast cancer antibodies
US4943533A (en) 1984-03-01 1990-07-24 The Regents Of The University Of California Hybrid cell lines that produce monoclonal antibodies to epidermal growth factor receptor
US6893625B1 (en) * 1986-10-27 2005-05-17 Royalty Pharma Finance Trust Chimeric antibody with specificity to human B cell surface antigen
IL85035A0 (en) * 1987-01-08 1988-06-30 Int Genetic Eng Polynucleotide molecule,a chimeric antibody with specificity for human b cell surface antigen,a process for the preparation and methods utilizing the same
JP2547556B2 (ja) * 1987-02-06 1996-10-23 株式会社 ミドリ十字 ｒ−グロブリンの液状製剤
US5204244A (en) 1987-10-27 1993-04-20 Oncogen Production of chimeric antibodies by homologous recombination
US5202238A (en) 1987-10-27 1993-04-13 Oncogen Production of chimeric antibodies by homologous recombination
WO1989006692A1 (en) 1988-01-12 1989-07-27 Genentech, Inc. Method of treating tumor cells by inhibiting growth factor receptor function
US5721348A (en) 1990-12-14 1998-02-24 University Of Connecticut DNA encoding PH-20 proteins
AU658396B2 (en) 1991-03-06 1995-04-13 Merck Patent Gesellschaft Mit Beschrankter Haftung Humanized and chimeric monoclonal antibodies
JPH04346934A (ja) * 1991-05-24 1992-12-02 Green Cross Corp:The γ−グロブリンの液状製剤
EP0590058B1 (en) 1991-06-14 2003-11-26 Genentech, Inc. HUMANIZED Heregulin ANTIBODy
AU4025193A (en) 1992-04-08 1993-11-18 Cetus Oncology Corporation Humanized C-erbB-2 specific antibodies
JPH08504172A (ja) 1992-06-30 1996-05-07 オンコロジクス，インコーポレイティド 抗−ｅｒｂＢ−２モノクロナール抗体の組み合わせ物及び使用方法
US7744877B2 (en) 1992-11-13 2010-06-29 Biogen Idec Inc. Expression and use of anti-CD20 Antibodies
US5736137A (en) * 1992-11-13 1998-04-07 Idec Pharmaceuticals Corporation Therapeutic application of chimeric and radiolabeled antibodies to human B lymphocyte restricted differentiation antigen for treatment of B cell lymphoma
ATE139900T1 (de) * 1992-11-13 1996-07-15 Idec Pharma Corp Therapeutische verwendung von chimerischen und markierten antikörper gegen menschlichen b lymphozyt beschränkter differenzierung antigen für die behandlung von b-zell-lymphoma
GB9401182D0 (en) 1994-01-21 1994-03-16 Inst Of Cancer The Research Antibodies to EGF receptor and their antitumour effect
US20030180290A1 (en) * 1995-06-07 2003-09-25 Idec Pharmaceuticals Corporation Anti-CD80 antibody having ADCC activity for ADCC mediated killing of B cell lymphoma cells alone or in combination with other therapies
CA2222231A1 (en) 1995-06-07 1996-12-19 Imclone Systems Incorporated Antibody and antibody fragments for inhibiting the growth of tumors
US6267958B1 (en) 1995-07-27 2001-07-31 Genentech, Inc. Protein formulation
US6685940B2 (en) 1995-07-27 2004-02-03 Genentech, Inc. Protein formulation
CA2226575C (en) 1995-07-27 2011-10-18 Genentech, Inc. Stabile isotonic lyophilized protein formulation
US5783186A (en) 1995-12-05 1998-07-21 Amgen Inc. Antibody-induced apoptosis
EP0852951A1 (de) 1996-11-19 1998-07-15 Roche Diagnostics GmbH Stabile lyophilisierte pharmazeutische Zubereitungen von mono- oder polyklonalen Antikörpern
ES2293661T3 (es) * 1996-11-27 2008-03-16 Genentech, Inc. Purificacion por afinidad de polipeptido en una matriz de proteinas a.
US6235883B1 (en) 1997-05-05 2001-05-22 Abgenix, Inc. Human monoclonal antibodies to epidermal growth factor receptor
ATE230277T1 (de) 1997-06-13 2003-01-15 Genentech Inc Stabilisierte antikörperformulierung
US6171586B1 (en) * 1997-06-13 2001-01-09 Genentech, Inc. Antibody formulation
US6991790B1 (en) * 1997-06-13 2006-01-31 Genentech, Inc. Antibody formulation
US20040191256A1 (en) * 1997-06-24 2004-09-30 Genentech, Inc. Methods and compositions for galactosylated glycoproteins
JP4334141B2 (ja) 1998-04-20 2009-09-30 グリカート バイオテクノロジー アクチェンゲゼルシャフト 抗体依存性細胞傷害性を改善するための抗体のグリコシル化操作
ATE370961T1 (de) * 1998-05-06 2007-09-15 Genentech Inc Reinigung von antikörpern durch ionenaustauschchromatographie
AU4079999A (en) 1998-05-15 1999-12-06 Imclone Systems Incorporated Treatment of human tumors with radiation and inhibitors of growth factor receptor tyrosine kinases
PT1974747E (pt) 1998-08-11 2012-09-05 Biogen Idec Inc Terapias de combinação para linfomas de células b compreendendo a administração de anticorpo anti-cd20
MXPA01004649A (es) * 1998-11-09 2002-05-06 Idec Pharma Corp Tratamiento con anticuerpo quimerico anti-cd20 para pacientes que reciben transplantes de medula osea o celulas madre de sangre periferica.
ES2351149T3 (es) 1998-11-09 2011-02-01 Biogen Idec Inc. Anticuerpo quimérico dirigido contra cd20, el rituxan, para uso en el tratamiento de la leucemia linfocítica crónica.
AR024464A1 (es) 1999-06-25 2002-10-02 Genentech Inc Anticuerpos anti-erbb2 humanizados.
US20020006404A1 (en) * 1999-11-08 2002-01-17 Idec Pharmaceuticals Corporation Treatment of cell malignancies using combination of B cell depleting antibody and immune modulating antibody related applications
KR20020072277A (ko) * 1999-11-08 2002-09-14 아이덱 파마슈티칼즈 코포레이션 항-ｃｄ20 항체 및/또는 화학요법 및 방사선요법과결합하여 항-ｃｄ40ｌ 항체를 이용한 ｂ세포 악성종양의치료방법
US20020028178A1 (en) * 2000-07-12 2002-03-07 Nabil Hanna Treatment of B cell malignancies using combination of B cell depleting antibody and immune modulating antibody related applications
YU63302A (sh) 2000-02-25 2005-09-19 The Government Of The Un.Stat. Anti-egfrv iii scfvs sa pojačanom citotoksičnošću i povećanim prinosom, imunotoksini na bazi istog i metodi za upotrebu na bazi istog
US6632979B2 (en) 2000-03-16 2003-10-14 Genentech, Inc. Rodent HER2 tumor model
EP1283722A1 (en) * 2000-03-31 2003-02-19 Idec Pharmaceuticals Corporation Combined use of anti-cytokine antibodies or antagonists and anti-cd20 for the treatment of b cell lymphoma
WO2001080884A1 (en) * 2000-04-25 2001-11-01 Idec Pharmaceuticals Corporation Intrathecal administration of rituximab for treatment of central nervous system lymphomas
CA2409361A1 (en) 2000-05-19 2001-11-22 Scancell Limited Humanised antibodies to the epidermal growth factor receptor
AU6836301A (en) * 2000-06-20 2002-01-02 Idec Pharma Corp Treatment of b-cell associated diseases such as malignancies and autoimmune diseases using a cold anti-cd20 antibody/radiolabeled anti-cd22 antibody combination
US8632778B2 (en) 2000-08-11 2014-01-21 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Stabilized anti-interleukin-6 antibody-containing preparations
WO2002022212A2 (en) 2000-09-18 2002-03-21 Idec Pharmaceuticals Corporation Combination therapy for treatment of autoimmune diseases using b cell depleting/immunoregulatory antibody combination
CN103333860B (zh) 2000-10-06 2015-07-08 协和发酵麒麟株式会社 产生抗体组合物的细胞
DE60139944D1 (de) 2000-10-12 2009-10-29 Genentech Inc Niederviskose konzentrierte proteinformulierungen
US8703126B2 (en) 2000-10-12 2014-04-22 Genentech, Inc. Reduced-viscosity concentrated protein formulations
AU2002213357A1 (en) * 2000-10-20 2002-05-06 Idec Pharmaceuticals Corporation Variant igg3 rituxan r and therapeutic use thereof
US20020159996A1 (en) * 2001-01-31 2002-10-31 Kandasamy Hariharan Use of CD23 antagonists for the treatment of neoplastic disorders
US20030211107A1 (en) 2002-01-31 2003-11-13 Kandasamy Hariharan Use of CD23 antagonists for the treatment of neoplastic disorders
US20030103971A1 (en) * 2001-11-09 2003-06-05 Kandasamy Hariharan Immunoregulatory antibodies and uses thereof
CA2436180C (en) * 2001-01-31 2011-11-08 Idec Pharmaceutical Corporation Immunoregulatory antibodies and uses thereof
JP4679035B2 (ja) 2001-04-02 2011-04-27 ジェネンテック， インコーポレイテッド 併用療法
KR100945108B1 (ko) 2001-06-13 2010-03-02 젠맵 에이/에스 표피 성장 인자 수용체 (ｅｇｆｒ)에 대한 인간모노클로날 항체
PL213948B1 (pl) * 2001-10-25 2013-05-31 Genentech Inc Kompozycje zawierajace glikoproteine, czasteczka kwasu nukleinowego kodujaca te glikoproteine, komórka gospodarza, sposób wytwarzania glikoproteiny, kompozycja do zastosowania do leczenia, zastosowanie kompozycji i zestaw zawierajacy kompozycje
DE10153197A1 (de) 2001-10-27 2003-05-08 Merck Patent Gmbh Pigment mit Metallglanz
WO2003068260A1 (fr) 2002-02-14 2003-08-21 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Produits pharmaceutiques en solution contenant des anticorps
US20030180292A1 (en) * 2002-03-14 2003-09-25 Idec Pharmaceuticals Treatment of B cell malignancies using anti-CD40L antibodies in combination with anti-CD20 antibodies and/or chemotherapeutics and radiotherapy
KR100944575B1 (ko) 2002-10-17 2010-02-25 젠맵 에이/에스 Ｃｄ20에 대한 인간 모노클로날 항체
HUE035898T2 (en) * 2002-12-16 2018-05-28 Genentech Inc Immunoglobulin variants and their applications
WO2004060053A2 (en) * 2002-12-16 2004-07-22 Genentech, Inc. Transgenic mice expressing human cd20
KR101498588B1 (ko) 2003-01-22 2015-03-05 로슈 글리카트 아게 융합 구성체와 Ｆｃ 수용체 결합 친화도 및 이펙터 기능이 증가된 항체를 생성하기 위한 이의 용도
US20060104968A1 (en) * 2003-03-05 2006-05-18 Halozyme, Inc. Soluble glycosaminoglycanases and methods of preparing and using soluble glycosaminogly ycanases
US20090123367A1 (en) 2003-03-05 2009-05-14 Delfmems Soluble Glycosaminoglycanases and Methods of Preparing and Using Soluble Glycosaminoglycanases
US7871607B2 (en) 2003-03-05 2011-01-18 Halozyme, Inc. Soluble glycosaminoglycanases and methods of preparing and using soluble glycosaminoglycanases
EP2330213A1 (en) 2003-03-05 2011-06-08 Halozyme, Inc. Soluble hyaluronidase glycoprotein (sHASEGP), process for preparing the same, uses and pharmaceutical compositions comprising thereof
PT1610820E (pt) 2003-04-04 2010-12-16 Novartis Ag Formulações de elevada concentração de anticorpos e proteínas
US20050158303A1 (en) 2003-04-04 2005-07-21 Genentech, Inc. Methods of treating IgE-mediated disorders comprising the administration of high concentration anti-IgE antibody formulations
ME00426B (me) * 2003-04-09 2011-10-10 Genentech Inc Liječenje autoimunih bolesti kod pacijenata sa neadekvatnim odgovorom na tnf-alfa inhibitor
KR20060080535A (ko) 2003-05-14 2006-07-10 이뮤노젠 아이엔씨 약물 콘쥬게이트 조성물
US8088387B2 (en) 2003-10-10 2012-01-03 Immunogen Inc. Method of targeting specific cell populations using cell-binding agent maytansinoid conjugates linked via a non-cleavable linker, said conjugates, and methods of making said conjugates
ES2537738T3 (es) * 2003-06-05 2015-06-11 Genentech, Inc. Terapia de combinación para trastornos de células B
US20050163775A1 (en) * 2003-06-05 2005-07-28 Genentech, Inc. Combination therapy for B cell disorders
WO2005017529A1 (en) * 2003-07-29 2005-02-24 Genentech, Inc. Assay for human anti cd20 antibodies and uses therefor
WO2005023328A2 (en) 2003-08-26 2005-03-17 Becton Dickinson And Company Methods for intradermal delivery of therapeutics agents
EP1660129A2 (en) * 2003-08-29 2006-05-31 Genentech, Inc. Anti-cd20 therapy of ocular disorders
HUE038955T2 (hu) * 2003-11-05 2018-12-28 Roche Glycart Ag Antigén-kötõ molekulák fokozott Fc receptor-kötõ affinitással és effektor funkcióval
AU2004303848A1 (en) * 2003-12-19 2005-07-07 Genentech, Inc. Detection of CD20 in transplant rejection
JP2007514787A (ja) * 2003-12-19 2007-06-07 ジェネンテック・インコーポレーテッド 自己免疫疾患の治療におけるｃｄ２０の検出
RU2006140377A (ru) * 2004-04-16 2008-05-27 Дженентек, Инк. (Us) Способ усиления уничтожения в-клеток
ZA200608572B (en) * 2004-04-16 2008-06-25 Genentech Inc Assay for antibodies
BRPI0509412A (pt) * 2004-04-16 2007-09-04 Genentech Inc método de tratamento de policondrite ou mononeurite multiplex em mamìferos e artigo industrializado
EP1740946B1 (en) 2004-04-20 2013-11-06 Genmab A/S Human monoclonal antibodies against cd20
RU2006142857A (ru) 2004-05-05 2008-06-10 Дженентек, Инк. (Us) Профилактика аутоиммунного заболевания
EP1769243A2 (en) 2004-05-15 2007-04-04 Genentech, Inc. Cross-screening system and methods for detecting a molecule having binding affinity for a target molecule
NZ551180A (en) 2004-06-01 2009-10-30 Genentech Inc Antibody drug conjugates and methods
SG183012A1 (en) * 2004-06-04 2012-08-30 Genentech Inc Method for treating multiple sclerosis
JP2008501706A (ja) * 2004-06-04 2008-01-24 ジェネンテック・インコーポレーテッド 疾患の治療方法
US20060062787A1 (en) * 2004-07-22 2006-03-23 Genentech, Inc. Method for treating Sjogren's syndrome
UA90480C2 (uk) 2004-07-22 2010-05-11 Джэнэнтэк, Инк. Фармацевтична композиція, що має протипухлинну активність, яка включає антитіло до her2
CA2577133A1 (en) * 2004-08-19 2006-03-23 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
JP2008513367A (ja) 2004-09-08 2008-05-01 ジェネンテック・インコーポレーテッド デスレセプターリガンド及びｃｄ２０抗体の使用方法
RU2007112952A (ru) * 2004-09-08 2008-10-20 Дженентек, Инк. (Us) Способы применения лигандов рецепторов смерти и cd20-антител
CN101087807A (zh) * 2004-10-05 2007-12-12 健泰科生物技术公司 治疗血管炎的方法
JO3000B1 (ar) 2004-10-20 2016-09-05 Genentech Inc مركبات أجسام مضادة .
NZ555286A (en) * 2004-12-17 2010-04-30 Genentech Inc Antiangiogenesis therapy of autoimmune disease in patients who have failed prior therapy
EP2290088A1 (en) * 2004-12-22 2011-03-02 Genentech, Inc. Methods for producing soluble multi-menbrane-spanning proteins
US20060188495A1 (en) * 2005-01-13 2006-08-24 Genentech, Inc. Treatment method
PA8661401A1 (es) 2005-01-28 2006-09-08 Wyeth Corp Formulaciones del liquido polipeptido estabilizado
DOP2006000029A (es) 2005-02-07 2006-08-15 Genentech Inc Antibody variants and uses thereof. (variantes de un anticuerpo y usos de las mismas)
TW200714289A (en) 2005-02-28 2007-04-16 Genentech Inc Treatment of bone disorders
AR053579A1 (es) * 2005-04-15 2007-05-09 Genentech Inc Tratamiento de la enfermedad inflamatoria intestinal (eii)
CA2607475A1 (en) * 2005-04-22 2006-11-02 Genentech, Inc. Method for treating dementia or alzheimer's disease with a cd20 antibody
EP1883424A2 (en) * 2005-05-18 2008-02-06 Biogen Idec Inc. Methods for treating fibrotic conditions
US7601335B2 (en) 2005-05-20 2009-10-13 Genentech, Inc. Pretreatment of a biological sample from an autoimmune disease subject
CN103145837A (zh) * 2005-06-30 2013-06-12 Abbvie公司 Il-12/p40结合蛋白
PE20070207A1 (es) 2005-07-22 2007-03-09 Genentech Inc Tratamiento combinado de los tumores que expresan el her
US7700299B2 (en) 2005-08-12 2010-04-20 Hoffmann-La Roche Inc. Method for predicting the response to a treatment
US7612181B2 (en) 2005-08-19 2009-11-03 Abbott Laboratories Dual variable domain immunoglobulin and uses thereof
KR20140053410A (ko) 2005-08-19 2014-05-07 아보트 러보러터리즈 이원 가변 도메인 면역글로불린 및 이의 용도
AU2006290433B2 (en) 2005-08-26 2012-06-07 Roche Glycart Ag Modified antigen binding molecules with altered cell signaling activity
CA2629306A1 (en) * 2005-11-23 2007-05-31 Genentech, Inc. Methods and compositions related to b cell assays
JP5405122B2 (ja) 2005-12-21 2014-02-05 ワイス・エルエルシー 低粘度のタンパク質製剤およびその用途
JP5231810B2 (ja) 2005-12-28 2013-07-10 中外製薬株式会社 抗体含有安定化製剤
TW200806317A (en) 2006-03-20 2008-02-01 Wyeth Corp Methods for reducing protein aggregation
CA2647111A1 (en) 2006-03-28 2007-10-04 F. Hoffmann-La Roche Ag Anti-igf-1r human monoclonal antibody formulation
NZ576032A (en) 2006-10-12 2012-03-30 Genentech Inc Antibodies to lymphotoxin-alpha
PE20090329A1 (es) 2007-05-30 2009-03-27 Abbott Lab Anticuerpos humanizados contra el globulomero ab(20-42) y sus usos
US20090004189A1 (en) * 2007-06-18 2009-01-01 Genentech, Inc. Biological markers predictive of rheumatoid arthritis response to b-cell antagonists
EP2586788B1 (en) * 2007-07-09 2017-11-29 Genentech, Inc. Prevention of disulfide bond reduction during recombinant production of polypeptides
US20110243931A1 (en) * 2007-09-02 2011-10-06 Thomas Friess Combination therapy with type i and type ii anti-cd20 antibodies
US20090214561A1 (en) * 2007-09-24 2009-08-27 David Robert Close Treatment method
US20090098118A1 (en) * 2007-10-15 2009-04-16 Thomas Friess Combination therapy of a type ii anti-cd20 antibody with an anti-bcl-2 active agent
RU2010120674A (ru) 2007-10-22 2011-11-27 Шеринг Корпорейшн (US) Полностью человеческие анти-vegf-антитела и способы их применения
US20090110688A1 (en) * 2007-10-24 2009-04-30 Georg Fertig Combination therapy of type ii anti-cd20 antibody with a proteasome inhibitor
HUE024877T2 (en) * 2007-10-30 2016-02-29 Genentech Inc Antibody purification by cation exchange chromatography
WO2009080541A1 (en) * 2007-12-21 2009-07-02 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibody formulation
KR20100102172A (ko) * 2007-12-21 2010-09-20 제넨테크, 인크. 리툭시마브-난치성 류마티스성 관절염 환자의 요법
PE20091174A1 (es) 2007-12-27 2009-08-03 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Formulacion liquida con contenido de alta concentracion de anticuerpo
US7914785B2 (en) 2008-01-02 2011-03-29 Bergen Teknologieverforing As B-cell depleting agents, like anti-CD20 antibodies or fragments thereof for the treatment of chronic fatigue syndrome
EP2085095B1 (en) 2008-01-17 2012-03-07 Philogen S.p.A. Combination of an anti-EDb fibronectin antibody-IL-2 fusion protein, and a molecule binding to B cells, B cell progenitors and/or their cancerous counterpart
BRPI0909227B8 (pt) 2008-03-25 2021-05-25 Roche Glycart Ag uso de um anticorpo b-ly1 humanizado e um ou mais agentes quimioterápicos selecionados do grupo consistindo em ciclofosfamida,vincristina e doxorubicina para a fabricação de um medicamento para o tratamento de um linfoma não hodgkin de células b (nhl)
WO2009134738A1 (en) 2008-04-29 2009-11-05 Genentech, Inc. Responses to immunizations in rheumatoid arthritis patients treated with a cd20 antibody
BRPI0918297A2 (pt) 2008-09-10 2016-05-03 Hoffmann La Roche "dispositivo de distribuição de droga para bombear a medicação para dentro do corpo de um usuário"
AR073295A1 (es) * 2008-09-16 2010-10-28 Genentech Inc Metodos para tratar la esclerosis multiple progresiva. articulo de fabricacion.
PE20110302A1 (es) 2008-09-19 2011-05-21 Hoffmann La Roche Formulacion farmaceutica de un anticuerpo contra p-selectina
US9345661B2 (en) 2009-07-31 2016-05-24 Genentech, Inc. Subcutaneous anti-HER2 antibody formulations and uses thereof
WO2011017330A1 (en) 2009-08-04 2011-02-10 Genentech Inc Concentrated polypeptide formulations with reduced viscosity
AR078161A1 (es) 2009-09-11 2011-10-19 Hoffmann La Roche Formulaciones farmaceuticas muy concentradas de un anticuerpo anti cd20. uso de la formulacion. metodo de tratamiento.
KR101933197B1 (ko) 2010-11-08 2018-12-27 제넨테크, 인크. 피하 투여용 항―ｉｌ―6 수용체 항체
WO2013031266A1 (ja) 2011-08-26 2013-03-07 テルモ株式会社 シリンジ及びシリンジ収納容器

Also Published As

Publication number Publication date
TW201114449A (en) 2011-05-01
US20110076273A1 (en) 2011-03-31
WO2011029892A3 (en) 2011-09-15
US10377831B2 (en) 2019-08-13
CL2012000620A1 (es) 2013-09-06
JP2013504540A (ja) 2013-02-07
CA2771571C (en) 2013-11-12
PL3061445T3 (pl) 2023-11-06
US10280227B2 (en) 2019-05-07
ECSP12011722A (es) 2012-04-30
DK3061445T3 (da) 2023-09-11
SMT201600176B (it) 2016-08-31
KR101782195B1 (ko) 2017-09-26
HUE062860T2 (hu) 2023-12-28
US10752696B2 (en) 2020-08-25
PL2475353T3 (pl) 2016-10-31
HK1208176A1 (en) 2016-02-26
MY174009A (en) 2020-03-03
CO6440527A2 (es) 2012-05-15
EP4218716A1 (en) 2023-08-02
EP3061445A1 (en) 2016-08-31
US20250197520A1 (en) 2025-06-19
BR112012005017B8 (pt) 2021-09-21
ES2953478T3 (es) 2023-11-13
EA201792552A1 (ru) 2018-09-28
SG179030A1 (en) 2012-04-27
PH12016501002A1 (en) 2018-01-29
KR20120051094A (ko) 2012-05-21
US20190367629A1 (en) 2019-12-05
DOP2012000064A (es) 2012-05-31
IL218165A (en) 2016-12-29
PH12016501002B1 (en) 2018-01-29
US20150086537A1 (en) 2015-03-26
ES2574052T3 (es) 2016-06-14
CN104399075B (zh) 2018-11-06
CY1117941T1 (el) 2017-05-17
AR078161A1 (es) 2011-10-19
CN102686216A (zh) 2012-09-19
TWI515021B (zh) 2016-01-01
UA104909C2 (uk) 2014-03-25
AU2010294186B2 (en) 2013-09-19
PT3061445T (pt) 2023-08-28
JP5674788B2 (ja) 2015-02-25
JP6364310B2 (ja) 2018-07-25
WO2011029892A2 (en) 2011-03-17
TW201429506A (zh) 2014-08-01
KR20140006112A (ko) 2014-01-15
TN2012000101A1 (en) 2013-09-19
KR20170034441A (ko) 2017-03-28
EA031972B1 (ru) 2019-03-29
NZ598653A (en) 2014-03-28
MX2012002861A (es) 2012-04-20
HK1174553A1 (en) 2013-06-14
SI3061445T1 (sl) 2023-10-30
IL249066A0 (en) 2017-01-31
CA2771571A1 (en) 2011-03-17
CR20120090A (es) 2012-07-12
HRP20231019T1 (hr) 2023-12-08
MX360435B (es) 2018-10-31
IL218165A0 (en) 2012-07-31
DK2475353T3 (en) 2016-05-30
EP4218715A1 (en) 2023-08-02
FI3061445T3 (fi) 2023-08-30
PE20121178A1 (es) 2012-09-06
EA201200475A1 (ru) 2012-10-30
PE20151425A1 (es) 2015-09-18
JP2015061839A (ja) 2015-04-02
BR112012005017A2 (pt) 2020-10-27
ZA201201605B (en) 2019-09-25
MA33592B1 (fr) 2012-09-01
JP2020011962A (ja) 2020-01-23
JP6934919B2 (ja) 2021-09-15
DOP2016000110A (es) 2016-08-15
EP2475353A2 (en) 2012-07-18
CN104399075A (zh) 2015-03-11
AU2010294186A1 (en) 2012-03-08
SMT202300282T1 (it) 2023-11-13
HUE029078T2 (en) 2017-02-28
US20160137742A1 (en) 2016-05-19
MX360432B (es) 2018-10-31
CN102686216B (zh) 2014-11-05
NZ621448A (en) 2015-07-31
SI2475353T1 (sl) 2016-08-31
HRP20160807T1 (hr) 2016-08-26
US20210054092A1 (en) 2021-02-25
JP2017200924A (ja) 2017-11-09
IL249066B (en) 2018-02-28
KR101782301B1 (ko) 2017-09-26
GT201200069A (es) 2014-05-26
TWI515020B (zh) 2016-01-01
LT3061445T (lt) 2023-09-25
EP2475353B1 (en) 2016-04-13
BR112012005017B1 (pt) 2021-09-08
EP3061445B1 (en) 2023-07-05
MY197773A (en) 2023-07-13
EP3064196A1 (en) 2016-09-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US10752696B2 (en) Highly concentrated pharmaceutical formulations
AU2013266987B2 (en) Highly concentrated pharmaceutical formulations comprising anti - CD20 antibody
HK1174553B (en) Highly concentrated pharmaceutical formulations comprising anti - cd20 antibody
HK1208176B (en) Highly concentrated pharmaceutical formulations comprising anti - cd20 antibody
EA041673B1 (ru) Высококонцентрированные фармацевтические композиции, содержащие антитело к cd20, их применение и способ лечения с помощью таких композиций