PL213948B1 - Kompozycje zawierajace glikoproteine, czasteczka kwasu nukleinowego kodujaca te glikoproteine, komórka gospodarza, sposób wytwarzania glikoproteiny, kompozycja do zastosowania do leczenia, zastosowanie kompozycji i zestaw zawierajacy kompozycje - Google Patents

Kompozycje zawierajace glikoproteine, czasteczka kwasu nukleinowego kodujaca te glikoproteine, komórka gospodarza, sposób wytwarzania glikoproteiny, kompozycja do zastosowania do leczenia, zastosowanie kompozycji i zestaw zawierajacy kompozycje

Info

Publication number
PL213948B1
PL213948B1 PL372709A PL37270902A PL213948B1 PL 213948 B1 PL213948 B1 PL 213948B1 PL 372709 A PL372709 A PL 372709A PL 37270902 A PL37270902 A PL 37270902A PL 213948 B1 PL213948 B1 PL 213948B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
region
glycoprotein
amino acid
composition
antibody
Prior art date
Application number
PL372709A
Other languages
English (en)
Other versions
PL372709A1 (pl
Inventor
Leonard G. Presta
Original Assignee
Genentech Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=26990808&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=PL213948(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Genentech Inc filed Critical Genentech Inc
Publication of PL372709A1 publication Critical patent/PL372709A1/pl
Publication of PL213948B1 publication Critical patent/PL213948B1/pl

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2896—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against molecules with a "CD"-designation, not provided for elsewhere
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A61P21/04—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system for myasthenia gravis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/10—Antimycotics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/38—Drugs for disorders of the endocrine system of the suprarenal hormones
    • A61P5/40—Mineralocorticosteroids, e.g. aldosterone; Drugs increasing or potentiating the activity of mineralocorticosteroids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/04—Inotropic agents, i.e. stimulants of cardiac contraction; Drugs for heart failure
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/12—Antihypertensives
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/32—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against translation products of oncogenes
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/42—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against immunoglobulins
    • C07K16/4283—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against immunoglobulins against an allotypic or isotypic determinant on Ig
    • C07K16/4291—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against immunoglobulins against an allotypic or isotypic determinant on Ig against IgE
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/40—Immunoglobulins specific features characterized by post-translational modification
    • C07K2317/41—Glycosylation, sialylation, or fucosylation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C07K2317/732—Antibody-dependent cellular cytotoxicity [ADCC]

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Transplantation (AREA)

Description

Niniejszy wynalazek dotyczy kompozycji zawierających glikoproteinę, cząsteczki kwasu nukleinowego kodującej tę glikoproteinę, komórki gospodarza, sposobu wytwarzania glikoproteiny, kompozycji do zastosowania do leczenia, zastosowania kompozycji i zestawu zawierającego kompozycję. W niniejszym wynalazku opisano kompozycję, która zawiera glikoproteiny ze zmodyfikowanymi wzorami glikozylacji.
Stan techniki
Przeciwciała
Przeciwciała są białkami, które wykazują swoistość wiązania z konkretnym antygenem. Przeciwciała natywne są zwykle heterotetramerowymi glikoproteinami o wielkości około 150000 daltonów, składające się z dwóch identycznych łańcuchów lekkich (L) i dwóch identycznych łańcuchów ciężkich (H). Każdy łańcuch lekki jest połączony z łańcuchem ciężkim jednym kowalencyjnym wiązaniem dwusiarczkowym, natomiast liczba wiązań dwusiarczkowych pomiędzy łańcuchami ciężkimi jest różna w różnych izotypach immunoglobulin. Każdy łańcuch ciężki i lekki ma również regularnie rozmieszczone wewnątrzłańcuchowe mostki dwusiarczkowe. Każdy łańcuch ciężki ma na jednym końcu domenę zmienną (VH), po której następuje kilka domen stałych. Każdy łańcuch lekki ma na jednym końcu domenę zmienną (VL), a na drugim końcu domenę stałą; domena stała łańcucha lekkiego pasuje do pierwszej domeny stałej łańcucha ciężkiego, a domena zmienna łańcucha lekkiego pasuje do domeny zmiennej łańcucha ciężkiego. Uważa się, że poszczególne reszty aminokwasowe tworzą połączenie pomiędzy domenami zmiennymi łańcucha lekkiego i łańcucha ciężkiego.
Termin „zmienny” dotyczy faktu, że niektóre części domen zmiennych przeciwciał wykazują bardzo duże różnice w sekwencji pomiędzy przeciwciałami i są wykorzystywane w wiązaniu i specyficzności poszczególnych przeciwciał wobec konkretnego antygenu. Jednakże, zmienność nie jest równomiernie rozmieszczona na przestrzeni domen zmiennych przeciwciał. Zazwyczaj koncentruje się ona w trzech odcinakach zwanych regionami determinującymi dopasowanie (CDR, od ang. complementarity determining region) w domenach zmiennych zarówno łańcucha lekkiego, jak i ciężkiego. Najbardziej zakonserwowane części domen zmiennych są nazywane regionem zrębowym (FR). Każda z domen zmiennych natywnych łańcuchów lekkich i ciężkich zawiera cztery FR, przyjmujące w większości konfigurację β-kartki, połączone przez trzy CDR, które tworzą pętle łączące, a w niektórych przypadkach tworzą część struktury β-kartki. CDR w każdym łańcuchu są utrzymywane razem w bliskości przez regiony FR i, wraz z CDR z innego łańcucha, uczestniczą w tworzeniu się miejsca wiążącego antygen przeciwciał (patrz Kabat i wsp., Sequences of Proteins of Immunological Interest, wyd. 5, Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD (1991)].
Domeny stałe nie uczestniczą bezpośrednio w wiązaniu się przeciwciała z antygenem, ale pełnią one funkcje efektorowe. W zależności od sekwencji aminokwasowej domeny stałej łańcuchów ciężkich, przeciwciała i immunoglobuliny można przypisać do różnych „klas”. Istnieje pięć głównych klas immunoglobulin: IgA, IgD, IgE, IgG i IgM, a kilka z nich można dalej podzielić na „podklasy” (izotypy), np. IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA i IgA2. Regiony domen stałych łańcuchów ciężkich, które odpowiadają różnym klasom przeciwciał są nazywane odpowiednio, α, β, ε, γ i μ. Wiadomo, że spośród różnych klas ludzkich immunoglobulin jedynie ludzkie IgG1, IgG2, IgG3 i IgM aktywują dopełniacz; ludzkie IgG1 i IgG3 pośredniczą w ADCC bardziej skutecznie niż IgG2 i IgG4.
Schematyczne przedstawienie struktury natywnej IgG1 jest pokazane na fig. 1A, gdzie wskazane są różne części natywnej cząsteczki przeciwciała. Trawienie przeciwciał papainą prowadzi do wytworzenia dwóch identycznych fragmentów wiążących antygen, nazywanych fragmentami Fab, każdy z pojedynczym miejscem wiązania antygenu i pozostałego fragmentu „Fc”, którego nazwa odzwierciedla zdolność do łatwej krystalizacji. Struktura krystaliczna regionu Fc ludzkiej IgG została ustalona (Deisenhofer, Biochemistry 20: 2361-2370 (1981)). W cząsteczkach ludzkiej IgG region Fc jest wytwarzany poprzez cięcie papainą po stronie N Cys 226. Region Fc zajmuje centralne miejsce biorąc pod uwagę funkcje efektorowe przeciwciał.
Zostały opisane też inne cząsteczki typu przeciwciała. Przykładowo, opisano w piśmiennictwie „immunoadhezyny”, które łączą w sobie domenę wiązania heterologicznego białka, takiego jak receptor, ligand lub enzym, z funkcjami efektorowymi regionu Fc. Taką przykładową cząsteczką jest immunoadhezyna: receptor czynnika martwicy nowotworów-IgG (TNFR-IgG) opisana w patencie USA nr
610 297. Opisano również immunoadhezyny bispecyficzne i chimery przeciwciało-immunoahezyna.
PL 213 948 B1
Stabila, P., Nature Biotech, 16: 1357 (1998) opisuje inną zakotwiczoną w błonie komórkowej fuzję białkową zawierającą region. Fuzja białkowa w tym odnośniku stanowi połączenie domeny transbłonowej typu II, która lokuje się w błonie komórkowej z końcem N regionu Fc.
Przeciwciała i immunoadhezyny stosowane są jako leki w ludzkich chorobach (Glennie i wsp. Immunol. Today 21: 403-410 (2000); King i wsp. Curr. Opin. Drug Discovery Develop 2: 110-117 (1999); Vaswani i wsp. Ann. Allergy Asthma Immunol. 81: 105-119 (1998) oraz Abraham i wsp. Sec. Intern. Autumnal Them. Meeting on Sepsis, Deauville, France (1995)). Niektóre z tych przeciwciał i immunoadhezyn, np. te, wiążą się z receptorem albo ligandem i blokują w ten sposób oddziaływanie liganda z receptorem mogą działać bez wykorzystywania mechanizmów efektorowych przeciwciała. Inne mogą wymagać zaangażowania układu immunologicznego do zabicia komórki docelowej (Clynes i wsp. Nature Med. 6: 443-446 (2000); Clynes i wsp. PNAS (USA) 95: 652-656 (1998) oraz Anderson i wsp. Biochem. Soc. Trans. 25: 705-708 (1997)).
Funkcje efektorowe przeciwciał
Funkcje efektorowe, w których bierze udział region Fc przeciwciała można podzielić na dwie kategorie: (1) funkcje efektorowe, która działają po związaniu się przeciwciała z antygenem (te funkcje obejmują udział kaskady dopełniacza lub komórek niosących receptor Fc (FcR); i (2) funkcje efektorowe, która działają niezależnie od wiązania antygenu (te funkcje nadają utrzymywanie się w układzie krążenia i zdolność do przenikania przez bariery komórkowe poprzez transcytozę), Ward i Ghetie, Therapeutic Immunology 2: 77-94 (1995).
Podczas gdy wiązanie przeciwciała do odpowiedniego antygenu ma efekt neutralizujący, który mógłby zapobiegać wiązaniu obcego antygenu do jego endogennego celu (np. receptora lub liganda), samo wiązanie może nie usuwać obcego antygenu. Aby być skuteczne w usuwaniu i/lub niszczeniu obcych antygenów, przeciwciało powinno posiadać zarówno wiązanie o wysokim powinowactwie do swego antygenu, jak i wydajne funkcje efektorowe.
Interakcja przeciwciał i kompleksów przeciwciało-antygen z komórkami układu immunologicznego wywołuje różne odpowiedzi, w tym zależną od przeciwciała cytotoksyczność z udziałem komórek (ADCC, od ang. cell-mediated cytotoxicity) i cytotoksyczność zależną od dopełniacza (CDC od ang. complement dependent cytotoxicity) (przegląd w Daeron, Annu. Rev. Immunol. 15: 203-234 (1997); Ward i Ghetie, Therapeutic Immunol. 2: 77-94 (1995) oraz Ravetch i Kinat, Annu. Rev. Immunol. 9: 457-492 (1991)).
W kilku funkcjach efektorowych przeciwciała pośredniczą receptory Fc (FcRs), które wiążą region Fc przeciwciała. FcRs są definiowane przez swoją specyficzność względem izotypów immunoglobulin; receptory Fc dla przeciwciał IgG są określane jako FcyR, dla IgE jako FcsR, dla IgA jako FcaR i tak dalej. Zidentyfikowano trzy podklasy FcyR: FcyRI (CD64), FeyRII (CD32) i FcyRIII (CD16). Ponieważ każda podklasa FcyR jest kodowana przez dwa lub trzy geny i alternatywne składanie RNA prowadzi do wielu transkryptów, istnieje szeroka różnorodność izoform FcyR. Trzy geny kodujące podklasę FeyRI (FcyRIA, FcyRIB i FcyRIC) tworzą skupienie w regionie lq21.1 długiego ramienia chromosomu I; geny kodujące izoformy FcyRII (FcyRIIA, FcyRIIB i FcyRIIC) i dwa geny kodujące FcyRIII (FcyRIIIA i FcyRIIIB) są wszystkie skupione w regionie lq22. Te różne podtypy FcR są wyrażane na różnych typach komórek (przegląd w Ravetch i Kinat, Annu. Rev. Immunol. 9: 457-492 (1991)). Na przykład u ludzi FcyRIIIB znajduje się tylko na neutrofiłach, podczas gdy FcyRIIIA znajduje się na makrofagach, monocytach, komórkach naturalnych zabójcach (NK) i subpopulacji komórek T.
Strukturalnie wszystkie FcyR są członkami nadrodziny immunoglobulin mających łańcuch, a wiążący IgG z zewnętrzną częścią złożoną albo z dwóch (FcyRI i FcyRIII) albo z trzech (FcyRI) domen podobnych do Ig. Dodatkowo, FcyRI i FcyRIII mają dodatkowe łańcuchy białkowe (y, Ζ) związane z łańcuchem α, które działają w transdukcji sygnału. Te receptory także różnią się swym powinowactwem względem IgG. FcyRI wykazuje wysokie powinowactwo względem IgG, Ka = 108-109 M-1 (Ravetch i wsp. Ann. Rev. Immunol. 19: 275-290 (2001)) i może wiązać monomeryczną IgG. Przeciwnie
-1
FcyRII i FcyRIII wykazują stosunkowo słabsze powinowactwo dla monomerycznej IgG Ka < 10 M (Ravetch i wsp. Ann. Rev. Immunol. 19: 275-290 (2001)) i dlatego też oddziałują skutecznie tylko z multimerowymi kompleksami immunologicznymi. Receptory FcyRII obejmują FcyRIIA („receptor aktywujący”) i FcyRIIB („receptor hamujący”), które mają podobne sekwencje aminokwasowe, które przede wszystkim różnią się w swoich domenach cytoplazmatycznych. Receptor aktywujący FcyRIIA zawiera motyw aktywujący immunoreceptora oparty na tyrozynie (ITAM, od ang. immunoreceptor tyrosine-based activation motif) w swojej domenie cytoplazmatycznej. Receptor hamujący FcyRIIB zawiera motyw hamujący immunoreceptora oparty na tyrozynie (tyrosine-based inhibition motif - ITIM)
PL 213 948 B1 w swojej domenie cytoplazmatycznej (patrz przegląd w Daeron, Annu. Rev. Immunol. 15: 203-234 (1997)). Komórki NK niosą tylko FcyRIIIA i wiązanie przeciwciał do FcyRIIIA prowadzi do aktywności ADCC przez komórki NK.
W populacji ludzkiej znaleziono warianty alleliczne kilku ludzkich FcyR. Wykazano, że te alleliczne formy wariantowe wykazują różnice w wiązaniu ludzkiego i mysiego IgG i szereg badań asocjacyjnych korelowało wyniki kliniczne z obecnością specyficznych form allelicznych (przegląd w Lehrnbecher i wsp. Blood 94 (12): 4220-4232 (1999)). Kilka badań dotyczyło dwóch form FcyRIIA, R131 i H131 i ich asocjacji z wynikami klinicznymi (Hatta i wsp. Genes and Immunity 1: 53-60 (1999); Yap i wsp., Lupus 8: 305-310 (1999); i Lorenz i wsp. European J. Immunogenetics 22: 397-401 (1995)). Dwie formy alleliczne FcyRIIIA, F158 i V158, są badane dopiero teraz (Lehrnbecher i wsp., jak wyżej oraz Wu i wsp., J. Clin. Invest. 100 (5): 1059-1070 (1997)). Allotyp FcyRIIIA (Val158) oddziałuje z ludzką IgG lepiej niż allotyp FcyRIIIA (Phe158) (Shields i wsp. J. Biol. Chem. 276: 6591-6604 (2001); Koene i wsp. Blood 90: 1109-1114 (1997) oraz Wu i wsp. J.Clin. Invest. 100: 1059-1070 (1997)).
Innym typem receptora jest noworodkowy receptor Fc (FcRn). FcRn jest strukturalnie podobny do głównego antygenu zgodności tkankowej (MHC) i składa się z łańcucha α niekowalencyjnie powiązanego z p2-mikroglobuliną.
Zaproponowano, że FcRn reguluje homeostazę IgG w krwi, a także być może kontroluje transcytozę przez tkanki (Ghetie i wsp. Annu. Rev. Immunol. 18: 739-766 (2000)).
Miejsca wiązania FcyR na ludzkich i mysich przeciwciałach uprzednio zmapowano do tak zwanego „dolnego regionu zawiasowego” złożonego z reszt 233-239 (numery indeksu EU jak w Kabat i wsp., Sequences of Proteins of Immunological Interest, wyd. 5 Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD. (1991)). Woof i wsp. Molec. Immunol. 23: 319-330 (1986); Duncan i wsp. Nature 332: 563 (1988); Canfield i Morrizon, J. Exp. Med. 173: 1483-1491 (1991); Chappel i wsp., Proc. Natl. Acad. Sci USA 88: 9036-9040 (1991). Spośród reszt 233-239, P238 i S239 wymieniano jako możliwie biorące udział w wiązaniu.
Inne uprzednio cytowane obszary być może biorące udział w wiązaniu FcyR to: G316-K338 (ludzka IgG) dla ludzkiego FcyRI (tylko na podstawie porównania sekwencji; nie oceniano mutantów z podstawieniami); (Woof i wsp. Molec. Immunol. 23: 319-330 (1986)); K274-R301 (ludzka IgG1) dla ludzkich FcyRIII (na podstawie peptydów) (Sarmay i wsp. Molec. Immunol. 21: 43-51 (1984)); Y407-R416 (ludzka IgG) dla ludzkiego FcyRIII (na podstawie peptydów) (Gergely i wsp. Biochem. Soc. Trans. 12: 739-743 (1984)); jak i N297 i E318 (mysia IgG2b) dla mysiego FcyRII (Lund i wsp., Molec. Immunol. 29: 53-59 (1992)). Patrz też Armour i wsp. Eur. J. Immunol. 29: 2613-2624 (1999).
W WO 00/42072 (Presta) ujawniono warianty polipeptydów z ulepszonym lub osłabionym wiązaniem FcRs. Zawartość tej publikacji jest tu wyłączona jako odniesienie. Patrz także Shields i wsp. J. Biol. Chem. 9 (2): 6591-6604 (2001).
Clq i dwie proteazy serynowe Clr i Cis, tworzą kompleks Cl, pierwszy składnik szlaku cytotoksyczności zależnej od dopełniacza (CDC). Clq jest cząsteczką sześciowartościową z masą cząsteczkową około 460000 i budową porównywaną z bukietem tulipanów, w którym wszystkie sześć kolagenowych „łodyg” jest połączonych z sześcioma globularnymi regionami głowy. Burton i Woof, Advances in Immunol. 51: 1-84 (1992). Aby zaktywować kaskadę dopełniacza konieczne jest, by Clq związał przynajmniej dwie cząsteczki IgG1, IgG2 lub IgG3 (uważa się, że IgG4 nie aktywuje dopełniacza), ale tylko jedną cząsteczkę IgM, przyłączoną do docelowego antygenu. Ward i Ghetie, Therapeutic Immunology 2: 77-94 (1995) na stronie 80.
W oparciu o wyniki modyfikacji chemicznych i badań krystalograficznych, Burton i wsp. Nature, 288: 338-344 (1980) zaproponowali, że miejsce wiązania dla składnika Clq dopełniacza na IgG obejmuje ostatnie dwie (C-końcowe) nici β domeny CH2. Burton później zasugerował (Molec. Immunol., 22(3): 161-206 (1985)), że region obejmujący reszty aminokwasów 318 do 337 może bierze udział we wiązaniu dopełniacza.
Duncan i Winter, Nature 332: 738-40 (1988), stosując mutagenezę ukierunkowaną donieśli, że Glu318, Lys320 i Lys322 tworzą miejsce wiązania do Clq. Dane Duncan i Winter uzyskano poprzez testowanie wiązania izotypu mysiej IgG2b do Clq świnki morskiej. Rolę reszt Glu318, Lys320 i Lys322 we wiązaniu Clq potwierdzono przez zdolność krótkiego peptydu zawierającego te reszty do hamowania Iizy z udziałem dopełniacza. Podobne wyniki ujawniono w patencie USA nr 5 648 260 wydanym 15 lipca, 1997 i patencie USA nr 5 624 821 wydanym 29 kwietnia, 1997.
Reszta Pro331 jest podejrzewana o wiązanie Clq na podstawie analizy zdolności podklas ludzkiej IgG do przeprowadzenia Iizy komórek z udziałem dopełniacza. Mutacja Ser331 do Pro331 w IgG4
PL 213 948 B1 nadała zdolność do aktywacji dopełniacza (Tao i wsp., J. Exp. Med., 178: 661-667 (1993); Brekke i wsp., Eur. J. Immunol., 24: 2542-47 (1994)).
Z porównania danych grupy Wintera i prac Tao i wsp. i Brekke i wsp., Ward i Ghetie wywnioskowali w swojej pracy przeglądowej, że istnieją przynajmniej dwa różne regiony biorące udział we wiązaniu Clq: jeden na nici β domeny CH2 niosącej reszty Glu318, Lys320 i Lys322 i drugi na skręcie zlokalizowanym bardzo blisko tej samej nici β i zawierającym kluczową resztę aminokwasu w pozycji 331.
Inne prace sugerowały, że ludzkie reszty IgG1 Lys235 i W Gly237 zlokalizowane w dolnym regionie zawiasowym, odgrywają kluczową rolę w wiązaniu i aktywacji dopełniacza. Xu i wsp., J. Immunol. 150:152A (Abstrakt) (1993). W0 94/29351 opublikowany 22 grudnia, 1994, donosi, że reszty aminokwasów potrzebne do wiązania przez Clq i FcR ludzkiej IgG1 są zlokalizowane w N-końcowym regionie domeny CH2, tzn. obejmuje reszty 231 do 238.
Zaproponowano dalej, że zdolność IgG do wiązania Clq i aktywacji kaskady dopełniacza także zależy od obecności, braku lub modyfikacji reszty węglowodanowej umieszczonej między dwiema domenami CH2 (jest ona normalnie zakotwiczona na Asn297). Ward i Ghetie, Therapeutic Immunology 2: 77-94 (1995) na stronie 81.
Warianty polipeptydowe ze zmienionymi sekwencjami aminokwasowymi regionu Fc i zwiększoną lub zmniejszoną zdolnością do wiązania Clq opisano w patencie USA nr 6 194 551 B1 i WO 99/51642. Zawartości tych publikacji patentowych jest tu konkretnie włączona jako odniesienie. Patrz także Idusogie i wsp. J. Immunol. 164: 4178-4184 (2000).
Inne sposoby, które poprawiają angażowanie układu immunologicznego obejmują przeciwciała bispecyficzne, w których jedno ramię przeciwciała wiąże i receptor IgG (Segal i wsp. J. Immunol. Meth. 248: 1-6 (2001) oraz fuzje białowe mi cytokina-IgG (Penichet i wsp. J. Immunol. Meth. 248: 91-101 (2001)).
Glikozylacja przeciwciał
Wiele polipeptydów, w tym przeciwciał, podlega szeregu modyfikacjom potranslacyjnym z udziałem reszt węglowodanowych, takim jak glikozylacja oligosacharydami. Takie glikozylowane polipeptydy są określane jako „glikoproteiny”.
Istnieje kilka czynników, które mogą wpływać na glikozylację. Wykazano, że gatunek, typ tkanki i komórki są ważne dla sposobu, w jaki zachodzi glikozylacja. Dodatkowo, otoczenie zewnątrzkomórkowe przez zmienione warunki hodowli, takie jak stężenie surowicy, może mieć bezpośredni wpływ na glikozylację. (Lifely i wsp. Glycobiology 5 (8): 813-822 (1995)). Zaproponowano różne metody, aby zmienić wzór glikozylacji uzyskiwany w danym organizmie gospodarza obejmujące wprowadzenie lub nadekspresję pewnych enzymów biorących udział w wytwarzaniu oligosacharydów. (Patent USA nr 5 047 335; patent USA nr 5 510 261). Te schematy nie są ograniczane do metod wewnątrzkomórkowych (patent USA nr 5 278 299).
Wszystkie przeciwciała zawierają węglowodany w konserwatywnych pozycjach w regionach stałych łańcucha ciężkiego. Każdy izotyp przeciwciała ma odrębną odmianę struktur węglowodanowych związanych z N. Poza węglowodanem przyłączonym do ciężkiego łańcucha, do 30% ludzkich IgG ma glikozylowany region Fab. IgG ma pojedynczy związany z N dwuantenowy węglowodan na Asn297 domeny CH2. W pełni obrobiona struktura węglowodanu przyłączonego do Asn297 jest przedstawiona na fig. 2. W przypadku IgG z surowicy lub produkowanej ex vivo w hybrydomach lub komórkach poddanych inżynierii genetycznej, IgG są heterogenne pod względem węglowodanu połączonego z Asn297. Jefferis i wsp. Immunol. Rev. 163: 59-76 (1998); i Wright i wsp. Trends Biotech 15: 26-32 (1997). W przypadku IgG, oligosacharyd rdzeniowy normalnie składa się z GlcNAc2Man3-GlcNAc, z różnymi liczbami zewnętrznych reszt. Fig. 2 tutaj przedstawia szlak obróbki oligosacharydu do dojrzałego węglowodanu. Wcześnie syntetyzowana forma Glu3Man9GlcNac2 jest przenoszona na Asn297 w domenie CH2 przeciwciała, gdy wyłania się ono z rybosomu. Po odcięciu trzech końcowych glukoz, gdy glikoproteina przechodzi przez retikulum endoplazmatyczne, glikoproteina przemieszcza się do cis aparatu Golgiego, gdzie reszty mannozy usuwane są enzymatycznie przez α-mannozydazy. Obróbka może zatrzymać się w tym stadium, dając hiper-mannozylowane glikoproteiny. W przeciwnym wypadku obróbka może być kontynuowana do uzyskania Man5GlcNac2. Działanie N-acetyloglikozaminylotransferazy i w środkowym aparacie Golgiego jest etapem zaangażowania w syntezie złożonych oligosacharydów. W aparacie Golgiego, środkowym i trans, oligosacharyd jest poddawany dalszym etapom obróbki, w których reszty mannozy są przycinane i kolejno dodawane są reszty cukrów. Nowo syntetyzowana glikoproteina następnie wychodzi z aparatu Golgiego i jest transportowana do błony komórkowej lub jest wydzielana.
PL 213 948 B1
Zmienność wśród poszczególnych IgG wynika z przyłączenia galaktozy i/lub galaktozy-kwasu sialowego do dwóch końcowych GlcNac lub przyłączenia trzeciego ramienia GlcNAc (rozdzielająca GlcNAc). Badano węglowodan przyłączony do Asn297 IgG. Brak węglowodanu wpływa na wiązanie
Clq i FcyR (i w efekcie wpływa na aktywację dopełniacza i ADCC). Leatherbarrow i wsp. Molec. Immunol. 22: 407-415 (1985); Duncan i wsp. Nature 332: 738-740 (1988); Walker i wsp. Biochem. J. 259: 347-353 (1989); Dorai i wsp. Hybridoma 10: 211-217 (1990) oraz Horan Hand i wsp. Cancer Immunol. Immunother. 35: 165-174 (1992). Podczas gdy brak węglowodanu nie wydaje się wpływać na wiązanie FeRn (Hobbs i wsp. Molec. Immunol. 29: 949-956 (1992) oraz Kim i wsp. Eur. J. Immunol. 24: 542-548 (1994)), wpływ na klirans nie jest pewny (Dorai i wsp. Hybridoma 10: 211-217 (1990); Horan Hand i wsp. Cancer Immunol. Immunother. 35: 165-174 (1992); Hobbs i wsp. Molec. Immunol. 29: 949-956 (1992); Kim i wsp. Eur. J. Immunol. 24: 542-548 (1994); Wawrzynczak i wsp. Biochem. Soc. Trans. 17: 1061-1062 (1989) oraz Tao i wsp. J. Immuno. 143: 2595-2601 (1989)). Gdy węglowodan jest obecny charakter reszt cukrowych może także wpływać na funkcje efektorowe IgG. Doniesiono, że obecność lub brak końcowych reszt galaktozy wpływa na funkcje (Wright i wsp. J. Immunol. 160: 3393-3402 (1998)) i wydaje się korelować z reumatoidalnym zapaleniem stawów (Parekh i wsp. Nature 316: 452-457 (1985)). Ludzka IgG izolowana z surowic pacjentów ze szpiczakiem mnogim wykazuje ekstrema w obecności/braku fukozy, galaktozy i rozdzielającej N-acetyloglikozoaminy (Parekh i wsp. Nature 316: 452-457 (1985)). Raju i wsp. opisują zmienność glikozylacji IgG z różnych gatunków (Raju i wsp. Glycobiology 10 (5): 477-486 (2000)).
Boyd i wsp. stwierdzili, że usunięcie końcowego kwasu sialowego z pochodzących z CHO CAMPATH-1H za pomocą trawienia glikopeptydazą F nie wpływało na żadną z testowanych aktywności IgG, podczas gdy stwierdzono, że usunięcie większości reszt galaktozy z desialylowanych CAMPATH-1H zmniejsza (ale nie znosi) aktywność lityczną dopełniacza. Usunięcie galaktozy nie wpływała na inne aktywności. Boyd i wsp. Molec. Immunol. 32 (17/18): 1311-1318 (1995). Kumpel i wsp., Hum. Antibod. Hybridomas, 5 (3-4): 143-151 (1994) donoszą, że galaktozylacja ludzkiego monoklonalnego przeciwciała IgG wpływa na aktywność funkcjonalną z udziałem Fc.
Rothman i wsp. testowali funkcję ADCC monoklonalnej IgG oczyszczanej z hybrydom traktowanych inhibitorami glikozydazy, które działały w różnych stadiach szlaku obróbki węglowodanów. Rothman i wsp. Molecular Immunol. 26 (12): 1113-1123 (1989). Traktowanie kastanosperminą, która hamuje usuwanie reszt glukozy z tworzącego się oligosacharydu (Kaushal i wsp. Meth. Enzymol. 230: 316-329 (1994)), wykazało zwiększoną ADCC komórek NK, które wyrażają (wykazują ekspresję) tylko FcyRIII, ale nie dla innych typów komórek efektorowych, takich jak monocyty. Analiza wiązania pektyny sugerowała, że w traktowanej kastanosperminą IgG brakowało fukozy; jednak możliwe jest, że IgG będąca wynikiem traktowania kastanosperminą miała inną strukturę węglowodanów, taką jak hipermannozylacja, jak również końcowe reszty glukozy (Kaushal i wsp. Meth. Enzymol. 230: 316-329 (1994); Hashim i wsp. Immunology 63: 383-388 (1988); Hashim i wsp. Molec. Immunol. 24: 1087-1096 (1987)), nie spotykane zazwyczaj na IgG wydzielanej z nietraktowanych komórek lub z surowicy ludzkiej.
WO 97/30087 opisuje przygotowanie glikozylowanych przeciwciał gdzie miejsce N-glikozylacji domeny Fc przeciwciała jest podstawione dwuantenowym oligosacharydem.
Umana i wsp. wprowadzili gen β-(1,4)-N-acetyloglukozaminylotransferazy III (GcTIII), który katalizuje dodatek rozdzielającej GlcNAc do węglowodanowego rdzenia przyłączonego do Asn297 przeciwciała komórek jajnika chomika chińskiego (Chinese hamster ovary CHO). Glikoformy produkowane przez komórki CHO poddane inżynierii genetycznej uważano za posiadające zoptymalizowane ADCC. Patrz WO 99/54342 i Umana i wsp., Nature Biotechnology, 17: 176-180 (1999).
WO 98/58964 (Raju i wsp.) opisuje kompozycje przeciwciał, gdzie zasadniczo cały związany z N oligosacharyd jest oligosacharydem G2. G2 dotyczy dwuantenowej struktury z dwiema końcowymi Gal i brakiem NeuAc. WO 99/22764 (Raju i wsp.) dotyczy kompozycji przeciwciał, które są zasadniczo wolne od glikoprotein mających związany z N oligosacharyd G1, G0 lub G-1 w swojej domenie CH2. G1 dotyczy struktury dwuantenowej mającej jeden Ga1 i pozbawionej NeuAc, G0 dotyczy struktury dwuantenowej, gdzie nie są obecne końcowe NeuAc lub Ga1 i G-1 dotyczy jednostki rdzenia minus jedna GlcNAc.
W WO 0/61739 ujawniono, że 47% przeciwciał anty-hIL-5R wyrażanych przez YB2/0 (szpiczak szczura) ma połączone α-1-6 fukozą łańcuchy cukrowców, w porównaniu z 73% tych przeciwciał wyrażanych przez komórki NSO (szpiczak myszy). Stosunek względny fukozy przeciwciał α-hIL-5R wyrażanych przez różne komórki gospodarza wynosił YB2/0 < CHO/d < NSO.
PL 213 948 B1
Routier i wsp. badali wzór glikozylacji humanizowanego przeciwciała IgG1 (Dl.3) wyrażanego w komórkach CHO-DUKX. Struktury N-glikanów wyrażanych na CHO były dwuantenowymi N-glikanami z rdzeniową fukozą, ale były pozbawione rozdzielającej GlcNAc i kwasu sialowego. Struktury były heterogenne względem końcowej galaktozylacji i zostały więc VB nazwane G2, G1 i G0. Routier i wsp. Glycoconjugate J. 14: 201-207 (1997).
Uprzednio doniesiono, że znaleziono fukozę połączoną z O na szeregu polipeptydów i że przyłączona fukoza jest ważna dla właściwej aktywności polipeptydu. Patrz W098/33924, który opisuje metody glikozylacji resztą O-fukozy. Stankova i wsp. J. Immunol. 135 (6): 3719-3728 (1985) stwierdzili, że fukoza znacząco wzmaga zdolność cytolityczną indukowanych przez mieszaną hodowlę leukocytów (mixed leukocyte culture-MCL) lub przez preinkubowane komórki efektorowe. Cameron i wsp. Immunol. Lett. 11: 39-44 (1985) stwierdzili, że α-L-fukoza wydaje się odgrywać ważną rolę w interakcjach makrofagów z komórkami guza.
Istnieje ciągła potrzeba w tej dziedzinie wytwarzania glikoprotein, takich jak przeciwciała, mających ulepszoną aktywność biologiczną.
Streszczenie wynalazku
Przedmiotem niniejszego wynalazku jest kompozycja, charakteryzująca się tym, że zawiera glikoproteinę posiadającą region Fc ludzkiej IgG, przy czym 51-100% tej glikoproteiny w kompozycji zawiera strukturę dojrzałego rdzenia węglowodanowego, pozbawionego fukozy, przyłączonego do regionu Fc glikoproteiny, przy czym region Fc zawiera sekwencję aminokwasową, która różni się od natywnej sekwencji regionu Fc ludzkiej IgG i gdzie glikoproteina ta:
(a) wiąże się z FcyRIII z większym powinowactwem; lub (b) pośredniczy w zależnej od przeciwciała toksyczności za pośrednictwem komórek (ADCC) bardziej skutecznie niż glikoproteina ze strukturą dojrzałego rdzenia węglowodanowego zawierającego fukozę, przyłączoną do regionu Fc glikoproteiny i fizjologicznie akceptowalny nośnik, zaróbkę lub stabili zator.
Korzystnie, kompozycja według wynalazku charakteryzuje się tym, że wspomniany region Fc zawiera podstawienia aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 256, 290, 298, 312, 326, 330, 333, 334, 360, 378 lub 430, stosując numerację EU dla reszt regionu Fc.
Bardziej korzystnie, region Fc zawiera podstawienia aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji 298, 333 i 334, a jeszcze bardziej korzystnie region Fc zawiera podstawienia aminokwasowe w pozycjach 298, 333 i 334.
Najkorzystniej zastępującymi resztami w pozycjach 298, 333 i 334 są alaniny.
W kompozycji według wynalazku korzystnie region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 238, 239, 248, 249, 252, 254, 255, 256, 258, 265, 267 , 268, 269, 270, 272, 276, 278, 280, 283, 285, 286, 289, 290 , 292, 293, 294, 295, 296, 298, 301, 303, 305, 307, 309, 312 , 315, 320, 322, 324, 326, 327, 329, 330, 331, 333, 334, 335, 337, 338, 340, 360, 373, 376, 378, 382, 388, 389, 398, 414 , 416, 419, 430, 434, 435, 437, 438 lub 439 regionu Fc.
Bardziej korzystnie, region Fc zawiera podstawienia aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 238, 239, 248, 249 , 252, 254, 265, 268, 269, 270, 272, 278, 289, 292, 293, 294, 295, 296, 298, 301, 303, 322, 324, 327, 329, 333, 335, 338, 340, 373, 376, 382,
388, 389, 414, 416, 419, 434, 435, 437, 438 lub 439 regionu Fc.
Również korzystnie, region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 238, 265, 269, 270, 327 lub 329 regionu Fc i tym, że region Fc wykazuje zmniejszone wiązanie do FcyRI w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
W innej korzystnej realizacji wynalazku region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 238, 265, 269, 270, 292, 294, 295, 298, 303, 324, 327, 329, 333, 335, 338, 373, 376, 414, 416, 419, 435, 438 lub 439 regionu Fc, przy czym region Fc wykazuje zmniejszone wiązanie do FcyRII w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
W następnej korzystnej realizacji wynalazku w kompozycji według wynalazku region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 238,
239, 248, 249, 252, 254, 265, 268, 269, 270, 272, 278, 289, 293, 294, 295, 296, 301, 303, 322, 327,
329, 338, 340, 373, 376, 382, 388, 389, 416, 434, 435 lub 437 regionu Fc, a region Fc wykazuje zmniejszone wiązanie do FcyRIII w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
PL 213 948 B1
Również korzystnie, kompozycja według wynalazku zawiera glikoproteinę, której region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych
255, 256, 258, 267, 268, 272, 276, 280, 283, 285, 286, 290, 298, 301, 305, 307, 309, 312, 315, 320, 322, 326, 330, 331, 333, 334, 337, 340, 360, 378, 398 lub 430 regionu Fc, przy czym region Fc wykazuje zwiększone wiązanie do jednego lub większej liczby FcyR w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
Bardziej korzystnie, wspomniany region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w pozycji 298 i/lub 333 regionu Fc, przy czym region Fc wykazuje zwiększone wiązanie do FcyRIII w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
Jeszcze bardziej korzystnie, w kompozycji według wynalazku, region Fc wykazuje ponadto zmniejszone wiązanie do FcyRII w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
W innym korzystnym wykonaniu wynalazku region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 255, 256, 258, 267, 268, 272, 276,
280, 283, 285, 286, 290, 301, 305, 307, 309, 312, 315, 320, 322, 326, 330, 331, 337, 340, 378, 398 lub 430 regionu Fc, przy czym Fc wykazuje zwiększone wiązanie do FcyRII w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
Bardziej korzystnie, region Fc wykazuje zmniejszone wiązanie do FcyRIII.
Jeszcze bardziej korzystnie, region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 268, 272, 298, 301, 322 lub 340 regionu Fc.
W kompozycji według wynalazku region Fc glikoproteiny ma korzystnie zmienione powinowactwo wiązania do FcRn w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
Bardziej korzystnie, region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 238, 252, 253, 254, 255, 256, 265, 272, 286, 288, 303, 305, 307, 309, 311, 312, 317, 340, 356, 360, 362, 376, 378, 380, 382, 386, 388, 400, 413, 415, 424, 433, 434, 435, 436, 439 lub 447 regionu Fc.
Również korzystnie, region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 252, 253, 254, 255, 288, 309, 386, 388, 400, 415, 433, 435, 436, 439 lub 447 regionu Fc i tym, że region Fc wykazuje zmniejszone wiązanie do FcRn w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
Region Fc może także korzystnie zawierać podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 238, 256, 265, 272, 286, 303, 305, 307, 311, 312, 317, 340, 356, 360, 362, 376, 378, 380, 382, 413, 424 lub 434 regionu Fc i tym, że region Fc wykazuje zwiększone wiązanie do FcRn w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
Kompozycja według wynalazku korzystnie charakteryzuje się tym, że region Fc ma zmienione wiązanie Clq i/lub funkcję cytotoksyczności zależną od dopełniacza (CDC), a bardziej korzystnie region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 270, 322, 326, 327, 329, 331, 333 i 334 łańcucha ciężkiego.
W innym korzystnym wykonaniu wynalazku kompozycja charakteryzuje się tym, że sekwencja arainokwasowa regionu Fc zawiera zmianę sekwencji aminokwasowej, która zmienia natywny wzór glikozylacji glikoproteiny.
Korzystnie, glikoproteina w kompozycji według wynalazku jest zasadniczo wolna od rozdzielającej N-acetyloglukozaminy (GlcNAc) przyłączonej do struktury dojrzałego rdzenia węglowodanowego. Glikoproteina w kompozycji według wynalazku ma rozdzielającą N-acetyloglukozaminę (GlcNAc) przyłączoną do struktury dojrzałego rdzenia węglowodanowego.
Również korzystnie, glikoproteina ma jedną lub większą liczbę reszt galaktozy przyłączonych do struktury dojrzałego rdzenia węglowodanowego.
Glikoproteina korzystnie jest zasadniczo wolna od jednej lub większej liczby reszt galaktozy przyłączonych do struktury dojrzałego rdzenia węglowodanowego.
Glikoproteina korzystnie ma jedną lub większą liczbę reszt kwasu sialowego przyłączonych do struktury dojrzałego rdzenia węglowodanowego.
Glikoproteina korzystnie jest zasadniczo wolna od jednej lub większej liczby reszt kwasu sialowego przyłączonych do struktury dojrzałego rdzenia węglowodanowego.
Także korzystnie, 100% glikoproteiny w kompozycji zawiera strukturę dojrzałego rdzenia węglowodanowego, pozbawionego fukozy, przyłączoną do regionu Fc glikoproteiny.
PL 213 948 B1
Kompozycja według wynalazku korzystnie charakteryzuje się tym, że region Fc obejmuje region
Fc ludzkiej IgG, gdzie bardziej korzystnie region Fc ludzkiej IgG obejmuje region Fc ludzkiej IgGx, IgG2, IgG3 lub IgG4.
Bardziej korzystnie, glikoproteina wiąże się z FcyRIII, a jeszcze bardziej korzystnie glikoproteina wiąże się z FcyRIII z lepszym powinowactwem albo pośredniczy w zależnej od przeciwciała toksyczności za pośrednictwem komórek (ADCC) bardziej skutecznie niż glikoproteina ze strukturą dojrzałego rdzenia węglowodanowego zawierającego fukozę, przyłączoną do regionu Fc glikoproteiny.
W następnym korzystnym rozwiązaniu kompozycji według wynalazku glikoproteina obejmuje przeciwciało, przy czym korzystnym przeciwciałem jest przeciwciało chimerowe, humanizowane albo ludzkie. Przeciwciało to wiąże się z antygenem wybranym z grupy składającej się z markera powierzchniowego komórek B, receptora ErbB, antygenu związanego z nowotworem i czynnika angiogennego. Również korzystnie przeciwciało wiąże się z CD20, HER2, czynnikiem wzrostu śródbłonka naczyń (VEGF), CD40 lub antygenem komórek macierzystych prostaty (PSCA). Przeciwciało to także korzystnie obejmuje humanizowane przeciwciało anty-HER2, chimerowe przeciwciało anty-CD20 i humanizowane przeciwciało anty-VEGF.
Kompozycja według wynalazku charakteryzuje się tym ponadto, że 90-99% glikoproteiny w kompozycji zawiera strukturę dojrzałego rdzenia węglowodanowego, pozbawionego fukozy, przyłączoną do regionu Fc glikoproteiny.
Kompozycja według wynalazku charakteryzuje się tym, że glikoproteina została wytworzona przez komórkę jajnika chomika chińskiego (CHO), a korzystniej komórką CHO jest komórka Lec13.
Kompozycja według wynalazku jest preparatem farmaceutycznym, który w korzystnej realizacji może zawierać ponadto dopuszczalny farmaceutycznie nośnik, która to kompozycja korzystnie jest jałowa, i ewentualnie może być korzystnie zliofilizowana.
W kompozycji według wynalazku glikoproteina jest immunoadhezyną.
Kompozycja według wynalazku jest skoniugowana z cząsteczką heterologiczną, którą to cząsteczką heterologiczną korzystnie jest czynnik cytotoksyczny, enzym albo czynnik umożliwiający uzyskanie obrazu.
Przedmiotem wynalazku jest także kompozycja, która zawiera glikoproteinę, która jest immunoadhezyną i która to kompozycja jest koniugowana z cząsteczką heterologiczną, przy czym cząsteczką heterologiczną jest czynnik cytotoksyczny, enzym lub czynnik umożliwiający uzyskanie obrazu, łącznie z dopuszczalnym farmaceutycznie nośnikiem.
Przedmiotem wynalazku jest także cząsteczka kwasu nukleinowego, która koduje glikoproteinę opisaną w wynalazku zawierającą region Fc jak zdefiniowano.
Przedmiotem wynalazku jest również komórka gospodarza zawierająca kwas nukleinowy jak zdefiniowano w powyżej, przy czym 80-100% glikoproteiny wytwarzanej przez komórkę gospodarza zawiera strukturę dojrzałego rdzenia węglowodanowego, pozbawionego fukozy, przyłączoną do regionu Fc glikoproteiny.
Korzystnie, komórka gospodarza jest komórką jajnika chomika chińskiego (CHO), bardziej korzystnie komórką CHO jest komórka Lec13.
Przedmiotem wynalazku jest również sposób wytwarzania glikoproteiny, polegający na tym, że obejmuje hodowanie komórki gospodarza zdefiniowanej powyżej, tak, że kwas nukleinowy podlega ekspresji.
Sposób według wynalazku obejmuje ponadto odzyskanie glikoproteiny z hodowli komórki gospodarza.
Sposób według wynalazku obejmuje ponadto łączenie glikoproteiny z cząsteczką heterologiczną. Korzystną cząsteczką heterologiczną jest czynnik cytotoksyczny, enzym albo czynnik umożliwiający uzyskanie obrazu.
Przedmiotem wynalazku jest kompozycja jak zdefiniowano w powyżej do zastosowania do leczenia ssaka mającego chorobę lub zaburzenie wybrane z grupy składającej się z raka, choroby autoimmunologicznej, choroby zapalnej, infekcji lub innego stanu, gdzie pożądane jest usunięcie komórek albo tkanki. W przypadku kompozycji według wynalazku, korzystnie ssakiem jest człowiek, bardziej korzystnie człowiek u którego zachodzi ekspresja FcyRI11 (F158).
Przedmiotem wynalazku jest także zastosowanie skutecznej terapeutycznie ilości kompozycji jak zdefiniowano powyżej do wytwarzania leku do leczenia ssaka mającego chorobę lub zaburzenie wybrane z grupy składającej się z raka, choroby autoimmunologicznej, choroby zapalnej, infekcji lub innego stanu, gdzie pożądane jest usunięcie komórek albo tkanki.
PL 213 948 B1
W zastosowaniu według wynalazku, korzystnie ssakiem jest człowiek, a bardziej korzystnie człowiek, u którego zachodzi ekspresja FcyRIII (F158).
Przedmiotem wynalazku jest także zestaw terapeutyczny albo diagnostyczny zawierający kompozycję według wynalazku jak zdefiniowano powyżej oraz instrukcję jej użycia.
Wykazano, że kompozycje według wynalazku wykazują zdumiewające, 100-krotne polepszenie wiązania się z FcyRIIIA (F158), które nie jest aż tak efektywne jak oddziaływanie FeyRIIIA (V158) z ludzką IgG. A zatem przewiduje się, że ta kompozycja będzie lepsza od kompozycji opisywanych uprzednio, szczególnie do leczenia pacjentów-ludzi, którzy posiadają ekspresję FcyRIIIA (F158). FcyRIIIA (F158) jest bardziej powszechny niż FcyRIIIA (V158) u normalnych, zdrowych Afroamerykanów i członków rasy kaukaskiej. Patrz Lehrnbecher i wsp. Blood 94: 4220 (1999).
Niniejsze zgłoszenie wykazuje ponadto synergiczny wzrost wiązania FcyRIII i/lub funkcji ADCC, które są wynikiem połączenia ujawnionych tu wariantów glikozylacji z modyfikacją(ami) sekwencji aminokwasowej regionu Fc glikoproteiny. W celu wytworzenia wariantu sekwencji aminokwasowej o zwiększonej aktywności ADCC zwykle konstruuje się wariant regionu Fc o zwiększonym powinowactwie wiązania się z FcyRIII, który uważa się za ważny FcR w pośredniczeniu w ADCC. Przykładowo, można wprowadzić modyfikację aminokwasową (np. podstawienie) do rodzicielskiego regionu Fc w dowolnej, jednej lub większej liczbie pozycji aminokwasowych, 256, 290, 298, 312, 326, 330, 333, 334, 360, 378 lub 430 w celu wytworzenia takiego wariantu. Wariant o zwiększonym powinowactwie wiązania z FcyRIII może mieć ponadto zmniejszone powinowactwo wiązania z FcyRII, a w szczególności zmniejszone powinowactwo hamowania receptora FcyRIIB. W korzystnym wykonaniu, region Fc ma podstawienia aminokwasowe w pozycjach 298, 333 i 334, np. S298A/E333A/K334A. Region Fc o zmienionej sekwencji aminokwasowej obejmuje ponadto wariant glikozylacji, który jeszcze bardziej wzmacnia ADCC. Przykładowo, wariant regionu Fc może mieć przyłączoną strukturę dojrzałego węglowodanu rdzeniowego, w którym brak fukozy.
A zatem, wynalazek dostarcza kompozycji zawierającej glikoproteinę mającą region Fc, gdzie około 51-100% glikoproteiny w kompozycji zawiera strukturę dojrzałego węglowodanu rdzeniowego, w którym brak fukozy, przyłączoną do regionu Fc glikoproteiny i gdzie region Fc zawiera sekwencję aminokwasową, która różni się od natywnej sekwencji regionu Fc.
Korzystniej, jeżeli około 80-100% glikoproteiny w kompozycji zawiera strukturę dojrzałego węglowodanu rdzeniowego, w którym brak fukozy, a najkorzystniej jeżeli około 90-99% glikoproteiny w kompozycji zawiera strukturę dojrzałego węglowodanu rdzeniowego, w którym brak fukozy.
Glikoproteina może obejmować na przykład przeciwciało lub immunoadhezynę. Glikoproteina zawiera generalnie region Fc, korzystnie ludzki region Fc; np. region Fc ludzkiej IgG1, IgG2, IgG3 lub IgG4. Glikoproteina wykazuje zwiększone wiązanie do FcyRIII (takiego jak FcyRIIIA (F158) i/lub Fcy-RIIIA (V158)) i zwiększoną ADCC w stosunku do glikoproteiny z fukozą przyłączoną do struktury dojrzałego węglowodanu rdzeniowego.
Wynalazek dostarcza również kompozycji farmaceutycznej zawierającej glikoproteinę i, ewentualnie, dopuszczalny farmaceutycznie nośnik lub rozcieńczalnik. Ten preparat do potencjalnego użycia terapeutycznego jest jałowy i może być zIiofilizowany.
Rozważa się zastosowania diagnostyczne i terapeutyczne ujawnionej tu glikoproteiny. W zastosowaniu diagnostycznym wynalazek dostarcza sposobu ustalania obecności antygenu będącego przedmiotem zainteresowania, obejmujący wystawienie próbki podejrzewanej o to, że zawiera antygen na działanie glikoproteiny i ustalenie wiązania się glikoproteiny z próbką.
W zastosowaniu terapeutycznym, wynalazek dostarcza sposobu leczenia ssaka cierpiącego albo podatnego na chorobę lub schorzenie, który mógłby odnieść korzyść z takiego leczenia, obejmujący podawanie ssakowi skutecznej terapeutycznie ilości ujawnionej tu kompozycji, szczególnie tam, gdzie kompozycja jest preparatem farmaceutycznym.
Wynalazek dostarcza ponadto komórki gospodarza kodującej glikoproteinę zawierającą region Fc, gdzie około 80-100% glikoproteiny w kompozycji zawiera strukturę dojrzałego węglowodanu rdzeniowego, w którym brak fukozy, przyłączoną do regionu Fc glikoproreiny. Ponadto, wynalazek dostarcza sposobu wytwarzania glikoproteiny obejmujący hodowanie komórki gospodarza w taki sposób, że kwas nukleinowy ulega ekspresji i ewentualnie, odzyskanie glikoproteiny z hodowli komórki gospodarza (np. z pożywki hodowlanej komórki gospodarza).
Wynalazek dostarcza ponadto glikoprotein w artykule przemysłowym albo zestawie, który można zastosować dla celów leczenia choroby albo schorzenia.
PL 213 948 B1
Krótki opis rysunków
Figura 1A to schematyczne przedstawienie natywnej IgG i jej enzymatycznego trawienia z wytworzeniem różnych fragmentów przeciwciała. Mostki dwusiarczkowe są reprezentowane przez podwójne linie pomiędzy domenami CH1 i CL i dwiema domenami CH2. V to domena zmienna; C to domena stała; L oznacza łańcuch lekki, a H oznacza łańcuch ciężki.
Figura 1B przedstawia schematycznie strukturę w pełni obrobionego lub „dojrzałego” węglowodanu rdzeniowego (2100) przyłączonego do Asn297 IgG z surowicy, strukturę dojrzałego węglowodanu rdzeniowego z pojedynczą resztą galaktozy (2110) jak również strukturę węglowodanu rdzeniowego z dwiema resztami galaktozy oraz rozdzielającym GlcNAc (3120). Liczby reszt, odpowiednio, Glc-NAc, fukozy, galaktozy i kwasu sialowego są przedstawione w systemie numeracji czterocyfrowej pokazanym na tej figurze.
Figura 2 ilustruje dodawanie oligosacharydu do Asn297 w domenie CH2 IgG, po którym następuje jej obróbka w aparacie Golgiego, cis, medial i trans, z wytworzeniem złożonej, dwuantenowej, w pełni obrobionej struktury węglowodanu. Kastanospermina hamuje usuwanie reszt z powstającego oligosacharydu.
Figura 3 pokazuje oligosacharydy łańcucha ciężkiego (Fc) znajdujące się na przeciwciałach wyrażanych w komórkach CHO z normalnym metabolizmem fukozy.
W dalszych legendach do figur i przykładach, stosowane są następujące oznaczenia: „Hu4D5” to oznaczenie dla humanizowanego przeciwciała anty-HER2 4D5, jajnik chomika chińskiego jest oznaczony jako „CHO”, komórki CHO-DP12 hodowane w 15 cm płytkach są oznaczone „CHO-P”, komórki CHO-DP12 hodowane w obrotowych butelkach są oznaczone jako „CHO-S”, ludzkie komórki nerki zarodkowej 293 są oznaczone jako „HEK293”, „Lec 13” reprezentuje linię komórkową CHO z defektywnym metabolizmem fukozy otrzymaną od Pamela Stanley z Albert Einstein College of Medicine z Yeshiva University, Bronx, New York, Hu4D5 z podstawieniami S298A/E333A/K334A w jego regionie Fc jest nazywany „Hu4D5-AAA”, „E27” poddane dojrzewaniu pod względem powinowactwa/humanizowane przeciwciało anty-IgE opisane w patencie USA nr 6 172 213, E27 z podstawieniami S298A/E333A/K334A w jego regionie Fc jest nazywany „E27-AAA”, a zależna od przeciwciała cytotoksyczność z udziałem komórek jednojądrzastych komórek z krwi obwodowych jest oznaczona „PBMC ADCC”
Figura 4 pokazuje wiązanie się monomerów Hu4D5 z ludzkim FcyRI. Przeciwciało Hu4D5 wyrażono w komórkach CHO-S, komórkach HEK293, CHO-P lub komórkach Lec13 CHO (dwie różne partie).
Figura 5 pokazuje wiązanie się dimerów Hu4D5 z ludzkim FcyRIIB. Przeciwciało Hu4D5 wyrażono w komórkach CHO-S lub Lec13 (trzy różne partie).
Figura 6 pokazuje wiązanie się dimerów Hu4D5 z ludzkim FcyRIIA (R131). Przeciwciało Hu4D5 wyrażono w komórkach CHO-S lub Lec13 (trzy różne partie).
Figura 7 ilustruje wiązanie się dimerów Hu4D5 z ludzkim FcyRIIA (H131). Przeciwciało Hu4D5 wyrażono w komórkach CHO-S lub Lec13 (trzy różne partie).
Figura 8 pokazuje wiązanie się dimerów Hu4D5 lub Hu4D5-AAA wyrażanych w komórkach CHO-S lub Lec13 komórkach (odpowiednio dwie i trzy różne partie), z ludzkim FcyRIIIA (V158).
Figura 9 pokazuje wiązanie się dimerów Hu4D5 wyrażanych w komórkach CHO-S lub Lec13 (trzy różne partie) albo dimerów Hu4D5-AAA wyrażanych w komórkach Lec13 (dwie różne partie), z ludzkim FcyRIIIA (F158).
Figura 10 przedstawia wiązanie się dimerów anty-IgE (E27) z ludzkim Fc (RIIIA (V158). E27 wyrażane w komórkach HEK293, komórkach CHO-P (dwie partie) lub komórkach Lec13 (dwie partie) testowano w tym badaniu.
Figura 11 przedstawia wiązanie się dimerów anty-IgE (E27) z ludzkim FcyRIIIA (F158). E27 wyrażane w komórkach HEK293, komórkach CHO-P (dwie partie) lub komórkach Lec13 komórkach (dwie partie) testowano w tym badaniu.
Figura 12 ilustruje wiązanie się heksamerów anty-IgE (E27) i E27-AAA do FcyRIIIA (Fl58). Przeciwciała były wyrażane w komórkach CHO-P, Lec13 lub HEK293.
Figura 13 ilustruje wiązanie się heksamerów anty-IgE (E27) i E27-AAA do Fc(RIIIA (V158). Przeciwciała były wyrażane w komórkach CHO-P, Lec13 lub HEK293 komórkach.
Figura 14 przedstawia wiązanie się Hu4D5 wyrażanego w komórkach CHO-P, CHO-S lub Lec13 komórkach z ludzkim FcRn.
PL 213 948 B1
Figura 15 przedstawia wiązanie się Hu4D5 i anty-CD20 (RITUXAN®) z ludzkim Clq. Hu4D5 było ® wyrażane w komórkach CHO-P lub Lec13 komórkach (dwie partie). RITUXAN® było wyrażane w komórkach CHO-P.
®
Figura 16 reprezentuje wiązanie się Hu4D5 lub RITUXAN® z ludzkim Clq. Hu4D5 zastosowane w tym doświadczeniu było wyrażane w komórkach CHO-P, Lec13 (trzy różne partie) lub w komórkach CHO-S. RITUXAN® było wyrażane w komórkach CHO-P.
Figura 17 przedstawia PBMC ADCC wobec komórek raka sutka SKBR3 (E:T 30:1) przy użyciu dawcy FcyRIII VF. Pokazana jest spontaniczna ADCC w porównaniu do tej powodowanej Hu4D5 wyrażanym w komórkach CHO-S lub Lec13.
Figura 18 przedstawia PBMC ADCC wobec komórek raka sutka (E:T 30:1) przy użyciu innego dawcy FcyRIII VF. Pokazana jest spontaniczna ADCC w porównaniu do tej powodowanej Hu4D5 wyrażanym w komórkach CHO-S lub Lec13.
Figura 19 przedstawia PBMC ADCC wobec komórek raka sutka (E:T 30:1) przy użyciu dawcy FcyRIII FF. Pokazana jest spontaniczna ADCC w porównaniu do tej powodowanej Hu4D5 wyrażanym w komórkach CHO-S lub Lec13.
Figura 20 przedstawia PBMC ADCC wobec komórek raka sutka (E:T 30:1) przy użyciu innego dawcy FcyRIII FF. Pokazana jest spontaniczna ADCC w porównaniu do tej powodowanej Hu4D5 wyrażanym w komórkach CHO-S lub Lec13.
Figura 21 przedstawia monocytową ADCC wobec komórek raka sutka (E:T 10:1) przy użyciu dawcy FcyRIIA RR donor. Pokazana jest spontaniczna ADCC w porównaniu do tej powodowanej Hu4D5 wyrażanym w komórkach CHO-S lub Lec13.
Figura 22 przedstawia monocytową ADCC wobec komórek raka sutka (E:T 10:1) przy użyciu dawcy FcyRIIA HH donor. Pokazana jest spontaniczna ADCC w porównaniu do tej powodowanej Hu4D5 wyrażanym w komórkach CHO-S lub Lec13.
Figura 23 przedstawia dopasowanie regionów Fc natywnych sekwencji IgG. Pokazane są sekwencje regionu Fc natywnych sekwencji IgG, humlgGl (nie-A i A allotypy) (odpowiednio, SEK NR ID: 112), humIgG2 (SEK NR ID: 3), humIgG3 (SEK NR ID: 4) i humIgG4 (SEK NR ID: 5). Sekwencja ludzkiej IgG1 jest allotypu nie-A, a różnice pomiędzy tą sekwencją z allotypem A (w pozycjach 356 i 358; system numerowania EU) są pokazane poniżej sekwencji ludzkiej IgG1. Pokazane są również sekwencje regionu Fc natywnych mysich sekwencji IgG, murlgGl (SEK NR ID: 6), murIgG2A (SEK NR ID: 7), murIgG2B (SEK NR ID: 8) i murIgG3 (SEK NR ID: 9).
Figura 24 przedstawia wiązanie się Hu4D5 i Hu4D5-AAA z CD56 dodatnimi komórkami naturalnych zabójców (NK). Testowanymi produktami były: (1) połączona z FITC anty-ludzka IgG, (2) Hu4D5 z CHO-S, (3) Hu4D5 wyrażone w komórkach Lec 13 i (4) Hu4D5-AAA wyrażane komórkach w Lec 13.
Figura 25 pokazuje barwienie fluorescencyjne oczyszczonych komórek NK wyrażających receptory FcyRIII (F/F).
Figura 26 dostarcza porównania aktywności NK ADDC Hu4D5 z CHO-S, Hu4D5 z komórek Lec13, Hu4D5-AAA z komórek Lec 13 i Hu4D5 z komórek HEK293. Dawcą był FcyRIII (F/F).
Figura 27 powtarza doświadczenie z fig. 26 z różnym dawcą FcyRIII (F/F).
Figura 28 przedstawia wiązanie się monomerów Hu4D5anty-HER2 z linią CHO stabilnie stransfekowaną ludzkim łańcuchem α i łańcuchem γ Fc(RIIIA (reprezentatywny wykres dla jednego testu). Hu4D5 CHO-S, otwarte kółka; Hu4D5 Lec13-D, otwarte kwadraty; Hu4D5 Lec13-E, otwarte romby; Hu4D5 Lec13-F, otwarte trójkąty; Hu4D5 HEK293-/y\A, wypełnione otwarte; Hu4D5 Lec13-AAA-B, wypełnione kwadraty; Hu4D5 Lec13-AAA-C, wypełnione romby.
Szczegółowy opis korzystnych wykonań wynalazku
I. Definicje
W niniejszym opisie i zastrzeżeniach, numeracja reszt w łańcuchu ciężkim immunoglobuliny jest tą z indeksu EU, jak w Kabat i wsp., Sequences of Proteins of Immunological Interest, wyd. 5. Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD (1991), konkretnie włączone jako odniesienie. „Indeks EU jak w Kabat” dotyczy numerowania reszt w ludzkim przeciwciele IgG1 EU.
Grupy węglowodanowe według niniejszego wynalazku będą opisane w odniesieniu do powszechnie stosowanej nomenklatury dla opisu oligosacharydów. Przegląd chemii węglowodanów który stosuje tę nomenklaturę znajduje się w Hubbard i wsp. Ann. Rev. Biochem. 50: 555-583 (1981).
Nomenklatura ta obejmuje na przykład, Man, która reprezentuje mannozę; GlcNAc, która reprezentuje
2-N-acetyloglukozaminę; Gal, która reprezentuje galaktozę; Fuc dla fukozy; i Gic, która reprezentuje
PL 213 948 B1 glukozę. Kwasy sialowe są opisane przez skróty NeuNAc, dla kwasu 5-N- acetyloneuraminowego i NeuNGc dla 5-glikoliloneuraminowego.
Termin „glikozylacja” oznacza przyłączenie oligosacharydów (węglowodanów zawierających dwa lub większą liczbę cukrów prostych połączonych razem, np. złożonych z dwóch do około dwunastu połączonych razem cukrów prostych) do glikoproteiny. Boczne łańcuchy oligosacharydowe są zazwyczaj przyłączone do szkieletu glikoproteiny poprzez N lub poprzez O. Oligosacharydy według niniejszego wynalazku występują za ogół jako oligosacharydy przyłączone poprzez N do domeny CH2 regionu Fc.
„Glikozykacja poprzez N” dotyczy przyłączenia grupy węglowodanowej do reszty asparaginowej w łańcuchu glikoproteinowym. Specjalista w tej dziedzinie będzie wiedział, że na przykład każda domena CH2 mysiej IgG1, IgG2a, IgG2b i IgG3 jak również ludzkiej IgG1, IgG2, IgG3, IgG4, IgA i IgD ma pojedyncze miejsce dla glikozylacji poprzez N przy reszcie aminokwasowej 297 (Kabat i wsp. Sequences of Proteins of Immunological Interest, 1991).
„Glikoproteiny” to polipeptydy mające przyłączony jeden lub większą liczbę bocznych łańcuchów oligosacharydowych.
Dla potrzeb niniejszego wynalazku „struktura dojrzałego węglowodanu rdzeniowego” dotyczy poddanej obróbce struktury węglowodanu rdzeniowego przyłączonej do regionu Fc, która generalnie składa się z następujących struktur węglowodanowych GlcNAc(Fukoza)-GlcNAc-Man-(Man-GlcNAc)2, typowo dwuantenowych oligosacharydów przedstawionych schematycznie poniżej:
Termin ten obejmuje w szczególności formy G1 struktury dojrzałego węglowodanu rdzeniowego, w której brak reszty β1,2 GlcNAc. Korzystne jest, jednakże jeżeli struktura węglowodanu m rdzeniowego zawiera obydwie reszty β1,2 GlcNAc. Struktura dojrzałego węglowodanu rdzeniowego tutaj generalnie nie jest hipermannozylowana.
Struktura dojrzałego węglowodanu rdzeniowego jest przyłączona do regionu Fc glikoproteiny, na ogół poprzez m przyłączenie przez N do Asn297 domeny CH2 regionu Fc.
„Rozdzielająca GlcNAc” to reszta GlcNAc przyłączona do β^4 mannozy w strukturze dojrzałego węglowodanu rdzeniowego. Rozdzielająca GlcNAc może być przyłączona enzymatycznie do struktury dojrzałego węglowodanu rdzeniowego przez enzym β-(1,4)-N-acetyloglukozaminylotransferazę III (GnTIII). Komórki CHO normalnie nie wyrażają GnTIII (Stanley i wsp. J. Biol. Chem. 261: 13370-13378 (1984)), ale mogą być poddane manipulacjom aby to robić (Umana i wsp. Nature Biotech. 17: 176-180 (1999)).
Glikoproteina, która jest „zasadniczo wolna” od jednej lub większej liczby wybranych grup cukrowych (np. rozdzielającej GlcNAc albo jednej lub większej liczby reszt galaktozy albo jednej lub większej liczby reszt kwasu sialowego) jest wytwarzana zazwyczaj w komórce gospodarza, który jest defektywny pod względem dodawania w wybranej(ych) grupy cukrowej do struktury dojrzałego węglowodanu rdzeniowego, tak że około 90-100% glikoproteiny w kompozycji nie będzie miała wybranej (ych) grupy cukrowej przyłączonej do struktury dojrzałego węglowodanu rdzeniowego.
A „glikozydaza” to enzym uczestniczący w biosyntezie połączonych przez asparaginę (połączonych przez N) glikoprotein. Enzym „skracający” to taki, który usuwa oligosacharyd(y), podczas gdy „transferaza” dodaje oligosacharyd(y). Przykłady glikozydaz obejmują glukozydazy skracające, takie jak glukozydaza I i glukozydaza II; skracające mannozydazy takie jak mannozydaza szorstkiego endoplazmatyczego retikulum (mannozydaza rER), mannozydaza IA, mannozydaza IB i mannozydaza II; jak również transferazy takie jak glikosylotransferazy, np. β(1,4)-Ν-acetyloglukozaminylotransferaza III (GnT III), Gal-transferazy, transferazy kwasu sialowegi i fuc-transferazy.
PL 213 948 B1 „Inhibitor glikozydazy” dotyczy związku lub kompozycji, który zmiesza albo zapobiega obróbkce oligosacharydu połączonego poprzez N przez jeden albo większą liczbę glikozydaz. Przykłady obejmują nojirymycynę, 1-deoksynojirymycynę (dNM), N-Metylo-1-deoksynojirymycynę (M-dNM), kastanosperminę, bromokonduritol, 1-deoksymannojirymycynę (dMM), australinę, MDL, lentiginozynę i swainzoninę (Sw). Inhibitory glikozydazy są omówione w Fuhrmann i wsp. Biochim. Biophys. Acta 825: 95-110 (1985); Kaushal i Elbein, Methods in Enzym. 230: 316-329 (1994) oraz Elbein, A. FASEB 5: 3055-3063 (1991).
„Lec13” dotyczy opornej na lektynę zmutowanej linii komórkowej jajnika chomika chińskiego (CHO), która wykazuje defektywny metabolizm fukozy i dlatego ma zmniejszoną zdolność do dodawania fukozy do złożonych węglowodanów. Ta linia jest opisana w Ripka i Stanley, Somatic Cell & Molec. Gen. 12 (1): 51-62 (1986) oraz Ripka i wsp. Arch. Biochem. Biophys. 249 (2): 533-545 (1986) I jest dostępna z Albert Einstein College of Medicine z Yeshiva University, Bronx, New York. Uważa się, że w komórkach Lec13 brak jest transktyptu dla GDP-D-mannozo-4,6-dehydratazy, kluczowego enzymu metabolizmu fukozy. Ohyama i wsp. J. Biol. Chem. 273 (23): 14582-14587 (1988). GDP-D-mannozo-4,6-dehydrataza wytwarza GDP-mannozo-4-keto-6-D-deoksymannozę z GDP-mannozy, która jest następnie przekształcana przez białko FX do GDP-L- fukozy. Ekspresja fukozylowanych oligosacharydów jest zależna od donorowych substratów GDP-L-fukozy i fukozylotransferazy(az).
„Fukozylotransferaza” to enzym, który dodaje jedną lub większą liczbę fucoz do glikoproteiny. Przykłady obejmują a1,6-fukozyoltransferazę, FucTI, FucTII, FucTIII, FucTIV, FucTV, FucTVI i FucTVII. Świńskie i ludzkie Porcine and human a1,6-fukozyoltransferazy są opisane, odpowiednio, w Uozumi i wsp. J. Biol. Chem. 271: 27810-27817 (1996) i Yanagidani i wsp. J. Biochem. 121: 626-632 (1997).
„Sialilotransferaza” to enzym, który dodaje jedną lub większą liczbę reszt kwasu sialowego do glikoproteiny. α2,3-sialilotransferaza może dodawać reszty(ę) kwasu sialowego do reszt(y) galaktozy przyłączonych do struktury dojrzałego węglowodanu rdzeniowego.
„Galaktotransferaza” to enzym, który dodaje jedną lub większą liczbę reszt galaktozy do glikoproteiny. β1,4-galaktozylotransferaza może dodawać reszty(ę) galaktozy do struktury dojrzałego węglowodanu rdzeniowego.
Termin „region Fc zawierający glikoproteinę” dotyczy glikoproteiny, takiej jak przeciwciało albo immunoadhezyna, która zawiera region Fc.
Termin „region Fc” jest stosowany do zdefiniowania regionu C-końcowego łańcucha ciężkiego immunoglobuliny, np. jak pokazano na fig. 1. „Regionem Fc” może być region Fc o sekwencji natywnej albo wariant regionu Fc. Jakkolwiek granice regionu Fc łańcucha ciężkiego immunoglobuliny mogą różnić się, region Fc łańcucha ciężkiego ludzkiej IgG jest zwykle zdefiniowany jako rozciągający się od reszty aminokwasowej w pozycji około Cys226 lub od pozycji około Pro230, do końca karboksylowego regionu Fc. Region Fc immunoglobuliny generalnie zawiera dwie domeny stałe, domenę CH2 i CH3, jak pokazano na przykład na fig. 1A.
„Funkcjonalny region Fc” posiada co najmniej jedną „funkcję efektorową” regionu Fc o sekwencji natywnej. Przykładowe „funkcje efektorowe” obejmują wiązanie Clq, cytotoksyczność zależną od dopełniacza; wiązanie receptora Fc; cytotoksyczność z udziałem komórek zależną od przeciwciała (ADCC); fagocytozę; obniżenie aktywności receptorów powierzchniowych (np. receptora komórek B; BCR), itd. Takie funkcje efektorowe generalnie wymagają, aby region Fc region był połączony z domeną wiążącą (np. domeną zmienną przeciwciała) i mogą być testowane przy zastosowaniu różnych testów, na przykład jak tu ujawnionych.
„Region Fc o sekwencji natywnej” obejmuje sekwencję identyczną z sekwencją aminokwasową regionu Fc znajdywanego w naturze. Ludzkie regiony Fc o sekwencji natywnej są pokazane na fig. 23 i obejmują region Fc ludzkiej IgG1 o sekwencji natywnej (allotypy nie-A i A); region Fc ludzkiej IgG2 o sekwencji natywnej; region Fc ludzkiej IgG3 o sekwencji natywnej i region Fc ludzkiej IgG4 o sekwencji natywnej jak również ich naturalnie występujące warianty. Mysie regiony Fc o sekwencji natywnej są również pokazane na fig. 23. Inne przykłady regionów Fc o sekwencji natywnej obejmują region Fc ludzkiej IgA o sekwencji natywnej i region Fc ludzkiej IgD o sekwencji natywnej.
„Wariant regionu Fc” obejmuje sekwencję aminokwasową, która różni się od sekwencji regionu Fc o sekwencji natywnej co najmniej jedną „modyfikacją aminokwasową”. Korzystne jest, jeżeli wariant regionu Fc ma co najmniej jedno podstawienie aminokwasowe w porównaniu do regionu Fc o sekwencji natywnej albo regionu Fc polipeptydu rodzicielskiego, np. od jednego do około dziesięciu podstawień aminokwasowych, korzystnie od około jednego do około pięciu podstawień aminokwasowych w regionie Fc o sekwencji natywnej albo regionie Fc polipeptydu rodzicielskiego. Korzystnie będzie,
PL 213 948 B1 jeżeli rozważany tu wariant regionu Fc ma co najmniej około 80% identyczności sekwencji z regionem Fc o sekwencji natywnej albo regionem Fc polipeptydu rodzicielskiego, najkorzystniej co najmniej około 90% identyczności, korzystniej co najmniej około 95% identyczności.
„Homologia” jest zdefiniowana jako procent reszt w sekwencji aminokwasowej wariantu, które są identyczne po dopasowaniu sekwencji i wprowadzeniu przerw, jeżeli to konieczne, dla uzyskania maksymalnego procentu homologii. Metody i programy komputerowe do dopasowania są dobrze znane w tej dziedzinie. Jednym z takich programów komputerowych jest „Align 2” autorstwa Genentech, Inc., który został złożony z dokumentacją w biurze United States Copyright Office, Washington, DC 20559, 10 grudnia, 1991.
Terminy „receptor Fc” albo „FcR” są stosowane dla opisania receptora, który wiąże się z regionem Fc przeciwciała. Korzystnym FcR jest ludzki FcR o sekwencji natywnej. Ponadto, korzystnym FcR jest taki, który wiąże się z przeciwciałem IgG (receptorem gamma) i obejmuje receptory podklas FcyRI, FcyRII oraz FcyRIII, włączając w to warianty alleliczne i formy tych receptorów powstałe w wyniku alternatywnego składania. Receptory FcyRII obejmują FcyRIIA („receptor aktywujący”) i FcyRIIB („receptor hamujący”), które mają podobne sekwencje aminokwasowe, różniące się głównie w domenach cytoplazmatycznych. Receptor aktywujący FcyRIIA zawiera w swojej domenie cytoplazmatycznej immunoreceptorowy, oparty o tyrozynę motyw aktywacyjny (ITAM, od ang. immunoreceptor tyrosine-based activation motif). Receptor hamujący FcyRIIB zawiera w swojej domenie cytoplazmatycznej immunoreceptorowy, oparty o tyrozynę motyw hamujący (ITIM, od ang. immunoreceptor tyrosine-based inhibition motif) (patrz praca przeglądowa Daeron, Annu. Rev. Immunol. 15: 203-234 (1997)). Omawiane tu receptory Fc obejmują dwa znane, występujące naturalnie allotypy, FcyRII (H131) i FcyRII (R131), ludzki FcyRII który został zidentyfikowany na podstawie aminokwasu w pozycji 131 (Clark i wsp. J. Immunol. 143: 1731-1734 (1989)) oraz występujące naturalnie allotypy ludzkiego FcyRIIIA. Ludzki FcyRIIIA ma naturalnie występujące allotypy w pozycji 48 (Leu, His lub Arg) i w pozycji 158 (Val lub Phe). Allotyp FcyRIIIA (V158) oddziałuje z ludzką IgG lepiej niż allotyp FcyRIIIA (F158) (Shields i wsp. J. Biol. Chem. 276: 6591-6604 (2001); Koene i wsp. Blood 90: 1109-1114 (1997) oraz Wu i wsp. J. Clin. Invest. 100: 1059-1070 (1997)). Przegląd FcR jest w Ravetch i Kinet, Annu. Rev. Immunol 9: 457-92 (1991); Capel i wsp., Immunomethods 4: 25-34 (1994) oraz de Haas i wsp., J. Lab. Clin. Med. 126: 330-41 (1995). Inne FcR, włączając w to te, które będą zidentyfikowane w przyszłości, są tu objęte terminem „FcR”. Termin obejmuje również receptor noworodkowy, FcRn, który jest odpowiedzialny za przeniesienie matczynych IgG do płodu (Guyer i wsp., J. Immunol. 117: 587 (1976) oraz Kim i wsp., J. Immunol 24: 249 11994)).
„Cytotoksyczność z udziałem komórek zależna od przeciwciała” i „ADCC” dotyczą reakcji z udziałem komórek, w której niespecyficzne komórki cytotoksyczne, które wyrażają receptory Fc (FcR) (np. komórki naturalnych zabójców, ang. Natural Killer (NK), komórki obojętnochłonne i makrofagi) rozpoznają związane przeciwciało na komórce docelowej, a następnie powodują lizę komórki docelowej. Komórki pierwotne uczestniczące w ADCC, komórki NK, wyrażają jedynie FcyRIII, podczas gdy monocyty wyrażają FcyRI, FcyRII i FcyRIII. Ekspresja FcR na komórkach krwiotwórczych jest zestawiona w tabeli 3 na stronie 464 w Ravetch i Kinet, Annu. Rev. Immunol 9: 457-92 (1991).
„Ludzkie komórki efektorowe” to leukocyty, które wyrażają jedną albo większą liczbę FcR i pełnią funkcje efektorowe. Korzystne jest, jeżeli komórki wyrażają co najmniej FcyRIII i pełnią funkcje efektorowe ADCC. Przykłady ludzkich leukocytów, które pośredniczą w ADCC obejmują jednojądrzaste komórki z krwi obwodowej (PBMC), komórki naturalnych zabójców (NK), monocyty, cytotoksyczne komórki T i komórki obojętnochłonne; przy czym korzystne są komórki PBMC i NK. Komórki efektorowe można izolować z naturalnych źródeł, np. z krwi albo PBMC, jak tu opisano.
„Region zawiasowy” jest generalnie zdefiniowany jako rozciągający się od około Glu216 lub od około Cys226 do około Pro230 ludzkiej IgG1 (Burton, Molec. Immunol. 22: 161-206 (1985)). Regiony zawiasowe innych izotypów IgG można dopasować do sekwencji IgG1 poprzez umieszczenie pierwszej i ostatniej cysteiny tworzącej wiązania S-S wewnątrz łańcucha ciężkiego w tej samej pozycji.
„Niższy region zawiasowy” regionu Fc jest normalnie zdefiniowany jako ciąg reszt położony bezpośrednio po stronie C regionu zawiasowego, tj. reszty 233 do 239 regionu Fc.
Termin „domena CH2” jak używa się w niniejszym opisie jest tu stosowany dla opisania domeny
CH2 mającej pojedyncze miejsce przyłączenia co najmniej jednego oligosacharydu poprzez N, generalnie przy Asn297. Jest charakterystyczne dla glikoproteiny według niniejszego wynalazku, że zawiera albo może być tak zmodyfikowana aby zawierać co najmniej jedną domenę CH2 mającą przyłączony poprzez N oligosacharyd domeny CH2 ludzkiej IgG. Korzystne jest, jeżeli domeną CH2 jest dome16
PL 213 948 B1 na CHy2 ludzkiej IgG. Domena CH2 ludzkiej IgG zwykle rozciąga się od aminokwasu około 231 do aminokwasu około 340 regionu Fc, stosując indeks EU do numerowania reszt łańcucha ciężkiego immunoglobuliny.
„Domena CH3” zawiera ciąg reszt C-końcowych w stosunku do domeny CH2 regionu Fc (tj. od reszty aminokwasowej około 341 do reszty aminokwasowej około 447 IgG).
Terminy „aminokwasy” i „aminokwas” dotyczą wszystkich występujących naturalnie alfaaminokwasów, w obydwu formach stereoizomerycznych oraz ich analogów i pochodnych. Analog jest zdefiniowany jako podstawienie atomu w aminokwasie innym atomem, który ma zwykle podobne właściwości. Pochodna jest zdefiniowana jako aminokwas, który ma przyłączoną inną cząsteczkę albo atom. Pochodne będą obejmować, na przykład acetylację grupy aminowej, aminację grupy karboksylowej lub oksydację reszt siarkowych dwóch cząsteczek cysternowych z wytworzeniem cysteiny.
Stosowany tu termin „polipeptyd” dotyczy generalnie peptydów i białek mających więcej niż około dziesięć aminokwasów. Polipeptydy mogą być homologiczne względem komórki gospodarza, w której są wyrażane lub, korzystnie, mogą być egzogenne, co oznacza, że są one heterologiczne, tj. obce względem zastosowanej komórki gospodarza, tak jak w przypadku chimerowych, humanizowanych lub ludzkich przeciwciał wytwarzanych przez komórkę CHO.
Termin „przeciwciało” jest tu stosowany w najszerszym znaczeniu i obejmuje przeciwciała monoklonalne (włączając w to przeciwciała monoklonalne pełnej długości), przeciwciała poliklonałne, przeciwciała multispecyficzne (np. przeciwciała bispecyficzne) i fragmenty przeciwciał o ile wykazują one pożądaną aktywność biologiczną.
„Fragmenty przeciwciał” zdefiniowane dla potrzeb niniejszego wynalazku obejmują część nienaruszonego przeciwciała, na ogół zawierającą miejsce wiązania antygenu nienaruszonego przeciwciała lub region Fc przeciwciała. Przykłady fragmentów przeciwciał obejmują przeciwciała liniowe; cząsteczki przeciwciał jednołańcuchowych i przeciwciała multispecyficzne utworzone z fragmentów przeciwciał.
Stosowany tu termin „przeciwciało monoklonalne” dotyczy przeciwciała otrzymanego z populacji zasadniczo homogennych przeciwciał, tj. poszczególne przeciwciała zawarte w populacji są identyczne z wyjątkiem możliwych naturalnie występujących mutacji, które mogą być obecne w niewielkiej liczbie. Przeciwciała monoklonalne są wysoce specyficzne, będąc skierowanymi wobec pojedynczego miejsca antygenowego. Ponadto, w przeciwieństwie do preparatów przeciwciał poliklonalnych, które zawierają różne przeciwciała skierowane przeciw różnym determinantom (epitopom), każde przeciwciało monoklonalne jest skierowane przeciw pojedynczej determinancie antygenu. Określenie „monoklonalny” nie ma być traktowane jako wymaganie odnośnie wytwarzania przeciwciała jakąś konkretną metodą. Przykładowo, monoklonalne przeciwciała do zastosowania zgodnie z niniejszym wynalazkiem mogą być wytwarzane metodą hybrydom po raz pierwszy opisaną przez Kohler i wsp., Nature, 256: 495 (1975) albo wytwarzane metodami rekombinowania DNA (patrz np. patent USA nr 4 816 567). „Przeciwciała monoklonalne” można również izolować z fagowych bibliotek przeciwciałowych przy zastosowaniu technik opisanych na przykład w Clackson i wsp., Nature, 352: 624-628 (1991) oraz Marks i wsp., J. Mol. Biol., 222: 581-597 (1991).
Stosowane tu przeciwciała monoklonalne obejmują w szczególności przeciwciała (immunoglobuliny) „chimerowe”, w których część łańcucha lekkiego i/lub ciężkiego jest identyczna albo homologiczna z odpowiadającymi im sekwencjami przeciwciał pochodzących z określonych gatunków albo należących do określonej klasy przeciwciał, podczas gdy reszta łańcucha(ów) jest identyczna albo homologiczna z odpowiednimi sekwencjami przeciwciał pochodzących z innego gatunku albo należących do określonej klasy albo podklasy przeciwciał, jak również fragmenty takich przeciwciał tak długo, jak wykazują one pożądaną aktywność biologiczną (patent USA nr 4 816 567 oraz Morrison i wsp., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 81: 6851-6855 (1984)).
„Humanizowane” postaci przeciwciał nie-ludzkich (np. mysich) to chimerowe przeciwciała, które zawierają minimalną sekwencję pochodzącą z immunoglobuliny nie-ludzkiej. W większości przypadków, humanizowane przeciwciała są ludzkimi immunoglobulinami (przeciwciało-biorca), w którym reszty z regionu hiperzmiennego biorcy są zastąpione resztami hiperzmiennego regionu przeciwciała z gatunku innego niż człowiek (przeciwciało donorowe), takiego jak mysz, szczur, królik albo naczelny nie-człowiek, mającego pożądaną specyficzność, powinowactwo i pojemność. W niektórych przypadkach, reszty regionu zrębowego (FR) ludzkiej immunoglobuliny są zastąpione przez odpowiadające im reszty nie-ludzkie. Ponadto humanizowane przeciwciała mogą zawierać reszty, które nie są znajdywane w przeciwciele biorcy ani w przeciwciele donorowym. Tych modyfikacji dokonuje się w celu dalPL 213 948 B1 szej zmiany właściwości przeciwciała. Generalnie, humanizowane przeciwciała będą zawierały zasadniczo wszystkie spośród co najmniej jednej, a typowo dwóch domen zmiennych, w których wszystkie albo zasadniczo wszystkie pętle hiperzmienne odpowiadają tym z immunoglobulin nie-ludzkich i wszystkie albo zasadniczo wszystkie FR są z sekwencji immunoglobuliny ludzkiej. Humanizowane przeciwciała będą ewentualnie zawierały co najmniej cześć regionu stałego immunoglobuliny (Fc), typowo z immunoglobuliny ludzkiej. Dla dalszych szczegółów patrz Jones i wsp., Nature 321: 522-525 (1986); Riechmann i wsp., Nature 332: 323-329 (1988) oraz Presta, Curr. Op. Struct. Biol 2: 593-596 (1992).
„Przeciwciało ludzkie” to takie, które ma sekwencję aminokwasową, która odpowiada sekwencji przeciwciała wytwarzanego przez człowieka i/lub zostało wytworzone przy zastosowaniu dowolnej z ujawnionych tu technik wytwarzania ludzkich przeciwciał. Definicja ludzkiego przeciwciała specyficznie wyklucza przeciwciało humanizowane zawierające nie-ludzkie reszty wiążące antygen. Ludzkie przeciwciała można wytwarzać przy zastosowaniu różnych technik znanych w tej dziedzinie. W jednym z wykonań, ludzkie przeciwciało wybiera się z biblioteki fagowej, gdzie ta biblioteka fagowa wyraża ludzkie przeciwciała (Vaughan i wsp. Nature Biotechnology 14: 309-314 (1996): Sheets i wsp. PNAS (USA) 95: 6157-6162 (1998)); Hoogenboom i Winter, J. Mol. Biol., 227: 381 (1991); Marks i wsp., J. Mol. Biol., 222: 581 (1991)). Ludzkie przeciwciała można również wytwarzać poprzez wprowadzenie ludzkich Ioci immuboglobulinowych do transgenicznych zwierząt np. myszy, u których endogenne geny immuboglobulinowe zostały częściowo albo całkowicie zinaktywowane. Po prowokacji, obserwowane jest wytwarzanie ludzkich przeciwciał ściśle przypominające to, co obserwuje się u ludzi we wszystkich aspektach, włączając w to rearanżację genu, składanie i repetruar przeciwciał. Podejście to jest opisane na przykład w patentach USA nr 5 545 807; nr 5 545 806; nr 5 569 825; nr 5 625 126; nr 5 633 425; nr 5 661 016 oraz następujących publikacjach naukowych: Marks i wsp., Bio/Technology 10: 779-783 (1992); Lonberg i wsp., Nature 368: 856-859 (1994); Morrison, Nature 368: 812-13 (1994); Fishwild i wsp., Nature Biotechnology 14: 845-51 (1996); Neuberger, Nature Biotechnology 14: 826 (1996); Lonberg i Huszar, Intern. Rev. Immunol. 13: 65-93 (1995). Alternatywnie, ludzkie przeciwciało można otrzymać poprzez unieśmiertelnianie ludzkich limfocytów B wytwarzających przeciwciało skierowane wobec docelowego antygenu (takie limfocyty B można pobrać z osobnika albo mogą być iramunizowane in vitro). Patrz np., Cole i wsp., Monoclonal Antibodies and Cancer Therapy, Alan R. Liss, p. 77 (1985); Boerner i wsp., J. Immunol., 147 (1): 86-95 (1991) oraz patent USA nr 5 750 373.
Stosowany tu termin „region hiperzmienny” odnosi się do reszt aminokwasowych przeciwciała, które są odpowiedzialne za wiązanie antygenu. Region hiperzmienny generalnie obejmuje reszty aminokwasowe z „regionu determinującego dopasowanie” albo „CDR” (tj. reszty 24-34 (L1), 50-56 (L2) i 89-97 (L3) w domenie zmiennej łańcucha lekkiego i 31-35 (H1), 50-65 (H2) i 95-102 (H3) w domenie zmiennej łańcucha ciężkiego; Kabat i wsp., Sequences of Proteins of Immunological Interest, wyd. 5, Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD. (1991) i/lub reszty z „pętli hiperzmiennej” (tj. reszty 26-32 (L1), 50-52 (L2) i 91-96 (L3) w domenie zmiennej łańcucha lekkiego oraz 26-32 (H1), 53-55 (H2) i 96-101 (H3) w domenie zmiennej łańcucha ciężkiego; Chothia i Lesk, J. Mol. Biol., 196: 901-917 (1987)). Resztami „regionu zrębowego” lub „FR” są reszty domeny zmiennej inne niż zdefiniowane tu reszty regionu hiperzmiennego.
Stosowany tu termin „immunoadhezyna” oznacza cząsteczki typu przeciwciała, które stanowią połączenie „domeny wiążącej” heterologicznego białka „adhezyny” (np. receptora, ligandu lub enzymu) z domeną stałą immunoglobulin. Strukturalnie, immunoadhezyny są fuzją sekwencji aminokwasowej adhezyny z pożądaną specyficznością wiązania, która jest inna niż miejsce rozpoznawania i miejsca wiązania antygenu (miejsca przyłączania antygenu) przeciwciała (tj. jest „heterologiczną”) i sekwencji domeny stałej immunoglobuliny.
Stosowany tu termin „domena wiążąca ligand” dotyczy dowolnego natywnego receptora na powierzchni komórki albo jego dowolnego regionu lub pochodnej zachowującej co najmniej jakościową zdolność wiązania ligandu odpowiadającego mu receptora natywnego. W konkretnym wykonaniu, receptor pochodzi z białka powierzchniowego mającego domenę zewnątrzkomórkową, który jest homologiczny do członka nadrodziny genowej immunoglobulin. Innymi receptorami, które nie są członkami nadrodziny genowej immunoglobulin, ale pomimo tego są objęte tą definicją są receptory dla cytokin, a w szczególności receptory z aktywnością kinazy tyrozynowej (receptorowe kinazy tyrozynowe), przedstawiciele nadrodzin hemopoetyny i receptora czynnika wzrostu nerwów oraz cząsteczki związane z adhezją komórkową, np. selektyny (E-, L- i P).
PL 213 948 B1
Termin „domena wiążąca receptor” jest stosowany dla oznaczenia dowolnego natywnego ligandu dla receptora, włączając w to cząsteczki związane z adhezją komórkową, albo dowolnego regionu lub pochodnej takiego natywnego ligandu, zachowującej co najmniej jakościową zdolność wiązania receptora odpowiadającego mu natywnego ligandu. Ta definicja, miedzy innymi, obejmuje konkretnie sekwencje ligandów dla wspominanych powyżej receptorów.
„Chimera przeciwciało-immunoadhezyna” obejmuje cząsteczkę, która stanowi połączenie co najmniej jednej domeny wiążącej przeciwciała (jak tu zdefiniowano) z co najmniej jedną immunoadhezyną (jak zdefiniowano w tym opisie). Przykładowymi chimerami przeciwciało-immunoadhezyna są bispecyficzne chimery CD4-IgG jak opidsano w Berg i wsp., PNAS (USA) 88: 4723-4727 (1991) oraz Chamow i wsp., J. Immunol. 153: 4268 (1994).
Termin „preparat” jest tu zastosowany dla zdefiniowania kompozycji lub glikoproteiny, która została zidentyfikowana i wydzielona i/lub odzyskana ze składników jego otoczenia. Składniki zanieczyszczające z jego otoczenia to materiały, które przeszkadzałyby w zastosowaniach diagnostycznych i «ft, terapeutycznych kompozycji lub glikoproteiny i mogą obejmować enzymy, hormony i inne białkowe albo niebiałkowe substancje rozpuszczone. Preparat według wynalazku jest zasadniczo wolny od tych zanieczyszczeń. W korzystnych wykonaniach, preparat glikoproteiny będzie oczyszczony (1) do ponad 95% przeciwciała, wagowo, przy określaniu metodą Lowry, a korzystniej do ponad 99% wagowo, (2) do stopnia dostatecznego dla otrzymania co najmniej 15 reszt N-końcowej albo wewnętrznej sekwencji aminokwasowej poprzez zastosowanie separatora wirówkowego albo (3) do homogenności określanej poprzez SDS-PAGE w warunkach redukujących albo nie redukujących przy zastosowaniu barwienia błękitem Coomassie albo korzystniej barwienia srebrem.
Dla obecnych potrzeb „preparat farmaceutyczny” to taki, który jest przystosowany i odpowiedni do podawania ssakowi, a w szczególności człowiekowi. A zatem, kompozycję można zastosować do leczenia choroby albo schorzenia ssaka. Ponadto, glikoproteina, która jest aktywnym składnikiem kompozycji, została poddana jednemu lub większej liczbie etapów oczyszczania lub izolacji tak, że zanieczyszczenie(a), które mogłyby przeszkadzać w jej zastosowaniu terapeutycznemu zostały od niej oddzielone. Generalnie, kompozycja farmaceutyczna zawiera glikoproteinę i dopuszczalny farmaceutycznie nośnik lub rozcieńczalnik, przykłady których są opisane poniżej. Ten preparat jest zazwyczaj jałowy i może być zliofiiizowany.
Dla celów niniejszego wynalazku „glikoproteina rodzicielska” to glikoproteina mająca taką samą sekwencję aminokwasową i strukturę dojrzałego węglowodanu rdzeniowego jak wariant glikoproteiny według niniejszego wynalazku, z tą różnicą, że fukoza jest przyłączona do struktury dojrzałego węglowodanu rdzeniowego. Przykładowo, w kompozycji zawierającej glikoproteinę rodzicielska, około 50-100% albo około 70-100% glikoproteiny rodzicielskiej zawiera strukturę dojrzałego węglowodanu rdzeniowego mającą przyłączoną fukozę.
Wariant glikoproteiny, który wiąże się z FcR z „lepszym powinowactwem” niż rodzicielska glikoproteina, jest takim, który wiąże się z dowolnym, jednym albo większą liczbą zidentyfikowanych powyżej FcR z zasadniczo lepszym powinowactwem wiązania niż rodzicielska glikoproteina, kiedy ilości wariantu glikoproteiny i glikoproteiny rodzicielskiej w teście wiązania są zasadniczo takie same. Przykładowo, wariant o zwiększonym powinowactwie wiązania FcR może wykazywać od około 5-krotnego do około 1000-krotnego, np. od około 10-krotnego do około 500-krotnego polepszenia powinowactwa wiązania FcR w porównaniu z glikoproteiną rodzicielską, gdzie powinowactwa wiązania FcR jest określane na przykład jak ujawniono tu w przykładach.
Wariant glikoproteiny, który „pośredniczy w zależnej od przeciwciała cytotoksyczności z udziałem komórek (ADCC) w obecności ludzkich komórek efektorowych bardziej skutecznie” niż rodzicielski polipeptyd, to taki, który in vitro lub in vivo jest zasadniczo bardziej skuteczny w pośredniczeniu w ADCC, kiedy ilości wariantu glikoproteiny i glikoproteiny rodzicielskiej użyte w teście są zasadniczo takie same. Generalnie, takie warianty glikoproteiny będą zidentyfikowane przy zastosowaniu testu ADCC in vitro jak tu ujawniono, ale bierze się również pod uwagę inne testy i metody określania aktywności ADCC np. w modelach zwierzęcych, itd. Korzystny wariant glikoproteiny jest około 1,5 razy do około 100 razy, np. od około dwóch razy do około pięćdziesięciu razy bardziej skuteczny w pośredniczeniu w ADCC niż glikoproteina rodzicielska, np. w ujawnionym tu teście in vitro.
„Modyfikacja aminokwasowa” dotyczy zmiany w sekwencji aminokwasowej ustalonej uprzednio sekwencji aminokwasowej. Przykładowe modyfikacje obejmują podstawienia, insercje i/lub delecje aminokwasów. Korzystną modyfikacją aminokwasową jest tu podstawienie.
PL 213 948 B1 „Modyfikacja aminokwasowa” w konkretnej pozycji, np. regionu Fc, oznacza podstawienie lub delecję wskazanej reszty albo insercję co najmniej jednej reszty obok wskazanej reszty. Insercja „obok” wskazanej reszty oznacza insercję w odstępie jednej do dwóch reszt. Insercja może być N-końcowe lub C-końcowe w stosunku do wskazanej reszty.
„Podstawienie aminokwasowe” oznacza zastąpienie co najmniej jednej istniejącej reszty aminokwasowej w ustalonej uprzednio sekwencji aminokwasowej inną „zastępującą” resztą aminokwasową. Zastępująca reszta lub reszty mogą być „resztami aminokwasowymi występującymi naturalnie”, (tj. kodowanymi przez kod genetyczny) i wybranymi z grupy składającej się z: alaniny (Ala); argininy (Arg); asparaginy (Asn); kwasu asparaginowego (Asp); cysteiny (Cys); glutaminy (Gln); kwasu glutaminowego (Glu); glicyny (Gly); histydyny (His); izoleucyny (He); leucyny (Leu); lizyny (Lys); metioniny (Met); fenyloalaniny (Phe); proliny (Pro); seryny (Ser); treoniny (Thr); tryptofanu (Trp); tyrozyny (Tyr) i waliny (Val). Korzystne jest, jeżeli zastępującą resztą nie jest cysteina. Podstawienie jedną albo większą liczbą reszt aminokwasowych nie występujących naturalnie jest tu również objęte definicją podstawienia aminokwasowego.
„Reszta aminokwasowa nie występująca naturalnie” dotyczy reszty innej niż występujące naturalnie reszty wymienione powyżej, która ma zdolność do wiązania się kowalencyjnie z sąsiednią resztą(-ami) w łańcuchu polipeptydowym. Przykłady reszt aminokwasowych nie występujących naturalnie obejmują norleucynę, ornitynę, norwalinę, homoserynę i inne analogi reszt aminokwasowych, takie jak te opisane w Ellman i wsp. Meth. Enzym. 202: 301-336 (1991). W celu wytworzenia takich reszt aminokwasowych nie występujących naturalnie można zastosować procedury z Noren i wsp. Science 244: 182 (1989) oraz Ellman i wsp., jak wyżej. Pokrótce, procedury te obejmują, aktywację chemiczną supresorowego tRNA resztą aminokwasową nie występującą naturalnie, a następnie transkrypcję i translację RNA in vitro.
„Insercja aminokwasowa” dotyczy wstawienia co najmniej jednego aminokwasu do ustalonej uprzednio sekwencji aminokwasowej. Jakkolwiek insercja zwykle stanowi wstawienie jednej albo dwóch reszt aminokwasowych, niniejsze zgłoszenie bierze pod uwagę większe „insercje peptydowe”, np. wstawienia od około trzech do około pięciu albo nawet do około dziesięciu reszt aminokwasowych. Wstawiona reszta(y) mogą być występującymi naturalnie albo nie występującymi naturalnie, jak ujawniono powyżej.
„Delecja aminokwasowa” oznacza usunięcie co najmniej jednej reszty aminokwasowej z ustalonej uprzednio sekwencji aminokwasowej.
„Clq” to polipeptyd, który zawiera miejsce wiązania dla regionu Fc immunoglobuliny. Clq razem z dwiema proteazami serynowymi, Clr i Cis, tworzą kompleks Cl, pierwszy składnik szlaku cytotoksyczności zależnej od dopełniacza (CDC, od ang. complement dependent cytotoxicity). Ludzki Clq można kupić, np. z Quidel, San Diego, CA.
„Leczenie” odnosi się zarówno do traktowania terapeutycznego i profilaktycznego albo środków zapobiegawczych. Potrzebujący leczenia obejmują tych, u których już występuje choroba, jak również tych, u których chce się zapobiec chorobie.
„Schorzenie lub choroba” to jakikolwiek stan, w którym odnosi się korzyści z leczenia glikoproteiną. Obejmuje to przewlekłe i ostre choroby i schorzenia, włączając w to stany patologiczne, które predysponują ssaka do wystąpienia choroby będącej przedmiotem zainteresowania. W jednym z wykonań chorobą jest rak, choroba autoimmunologiczna, choroba zapalna, infekcja i inny stan, taki jak wole, gdzie pożądane jest usunięcie niepożądanej tkanki albo komórek. Korzystną chorobą lub schorzeniem, które ma być tu leczone jest rak albo choroba autoimmunologiczna.
Terminy „rak i rakowaty” dotyczą albo opisują stan fizjologiczny u ssaków, który typowo charakteryzuje się nieregulowanym wzrostem komórkowym. Przykłady raka obejmują między innymi raka, chłoniaka, raka z niedojrzałych komórek, mięśniaka oraz białaczkę. Bardziej konkretnie przykłady takich raków obejmują raka płaskokomórkowego, raka płuc z małych komórek, raka płuc nie z małych komórek, gruczolakoraka płuc, płaskokomórkowego raka płuc, raka otrzewnej, raka wątrobokomórkowego, raka żołądka, włączając w to raka żołądkowo-jelitowego, raka trzustki, glejaka, raka szyjki macicy, raka jajnika, raka wątroby, raka pęcherza, wątrobiaka, raka sutka, raka okrężnicy, raka odbytnicy, raka jelita grubego, raka śluzówki macicy lub macicy, raka gruczołu śliniankowego, raka nerki, raka prostaty, raka sromu, raka tarczycy, raka wątroby i różne typy raka głowy i szyi.
„Rak komórek B” obejmuje tu chłoniaka nieziarniczego (NHL, ang. non-Hodkin's lymphoma), włączając w to NHL grudkowego/o niskiej złośliwości; NHL z małych limfocytów (SL, ang. small lymphocytic), grudkowego chłoniaka nieziarniczego (NHL) o średniej złośliwości, rozlanego NHL o śred20
PL 213 948 B1 niej złośliwości, NHL immunoblastycznego o wysokiej złośliwości, NHL Iimfoblastycznego o wysokiej złośliwości, NHL z małych komórek o szczelinowatym jądrze o wysokiej złośliwości, masywną chorobę NHL, chłoniaka z komórek płaszcza, chłoniaka związanego z AIDS oraz makroglobulinemię Waldenstroma); białaczkę, włączając w to ostrą białaczkę Iimfoblastyczną (ALL, ang. acute lymphoblastic leukemia), przewlekłą białaczkę limfocytową (CLL, ang. chronic lymphocytic leukemia), białaczkę kosmatokomórkową, przewlekłą białaczkę szpikową i inne nowotwory hematologiczne. Takie nowotwory można leczyć przeciwciałami skierowanymi przeciw markerom powierzchniowym komórek B, takim jak CD20.
Rak „niezależny od hormonu” to taki, którego proliferacja nie jest zależna od obecności hormonu, który wiąże się z receptorem wyrażanym przez komórki raka. Takie raki nie podlegają klinicznej regresji po zastosowaniu strategii farmakologicznych albo chirurgicznych, które zmniejszają stężenie hormonu w pobliżu guza. Przykłady raków niezależnych od hormonu obejmują niezależnego od androgenu raka prostaty, niezależnego od estrogenu raka sutka, raka śluzówki macicy i raka jajnika. Takie raki mogą zaczynać się jako guzy zależne od hormonu i rozwijać się od stadium zależnego od hormonu do opornego na hormon po terapii przeciwhormonalnej.
„Choroba autoimmunologiczna” jest tu nienowotworową chorobą lub schorzeniem powstającą z i skierowaną przeciw własnym tkankom osobnika. Przykłady chorób i schorzeń autoimmunologicznych obejmują między innymi odpowiedzi zapalne, takie jak choroby zapalne skóry włączając w to łuszczycę i zapalenie skóry (np. atopowe zapalenie skóry); ogólnoustrojową twardzinę i stwardnienie; odpowiedzi związane z chorobą zapalną jelita grubego (takie jak choroba Crohna i wrzodziejące zapalenie okrężnicy); zespół ostrego wyczerpania oddechowego (włączając w to zespół ostrego wyczerpania oddechowego dorosłych; ARDS); zapalenie skóry; zapalenie opon mózgowych; zapalenie mózgu; zapalenie błony naczyniowej oka; zapalenie okrężnicy; zapalenie kłębuszków nerkowych; stany alergiczne, takie jak egzema i astma oraz inne stany związane z naciekaniem komórek T i przewlekłymi odpowiedziami zapalnymi; miażdżycę tętnic; niedobór adhezji leukocytów; reumatoidalne zapalenie stawów; toczeń ogólnoustrojowy (SLE, ang. systemie lupus erythematosus); cukrzycę (np. cukrzycę typu I lub cukrzycę insulinozależną); stwardnienie rozsiane; zespół Reynauda; autoimmunologiczne zapalenie tarczycy; alergiczne zapalenie mózgu i rdzenia; zespół Sjorgena; cukrzycę młodzieńczą i choroby autoimmunologiczne związane z ostrą albo przewlekłą nadwrażliwością z udziałem cytokin i limfocytów T typowo występującą w gruźlicy, sarkoidozie, zapaleniu wielomięśniowym, ziarniniakowatości i zapaleniu naczyń; anemię złośliwą (choroba Addisona)); choroby związane z diapedezą leukocytów; choroby zapalne centralnego układu nerwowego (CNS, ang. central nervous system); zespół uszkodzenia wielonarządowego; anemię hemolityczną (włączając w to między innymi krioglobinemię lub anemię Coombs dodatnią); poważne osłabienie mięśni; choroby z udziałem kompleksu antygen-przeciwciało; chorobę przeciw kłębuszkowej błonie podstawnej; zespół antyfosfolipidowy; alergiczne zapalenie nerwu; chorobę Gravesa; zespół miasteniczny Lamberta-Eatona; pęcherze pęcherzycopodobne; pęcherzycę; autoimmunizacyjne poliendokrynopatie; chorobę Reitera; zespół sztywnienia; chorobę Behceta; wielkokomórkowe zapalenie tętnic; zapalenie nerek związane z kompleksem immunologicznym; nefropatię IgA; polineuropatie IgM; immunologiczną plamicę małopłytkową (ITP, ang. immune thrombocytopenic purpura) lub immunologiczną małopłytkowość, etc.
„Choroba zapalna” dotyczy stanów patologicznych będących wynikiem zapalenia, typowo powodowanego przez chemotaksję komórek obojętnochłonnych. Przykłady takich chorób obejmują choroby zapalne skóry, włączając w to włączając w to łuszczycę i atopowe zapalenie skóry; uogólnioną twardzinę i stwardnienie; odpowiedzi związane z chorobą zapalną jelita grubego (takie jak choroba Crohna i wrzodziejące zapalenie okrężnicy); choroby związane z reperfuzją niedokrwienną obejmujące operacyjne reperfuzyjne uszkodzenie tkanek, stany niedokrwienne serca, takie jak zawał mięśnia sercowego, zatrzymanie serca, reperfuzja po operacji serca i zwężenie po przezświatłowej wieńcowej angioplastyce bez naruszania skóry, udar i tętniak tętnicy brzusznej; obrzęk mózgowy po udarze; uraz czaszki; szok oligemiczny; zamartwicę; zespół ostrego wyczerpania oddechowego dorosłych; ostre uszkodzenie płuc; chorobę Behceta; zapalenie skórno-mięśniowe; zapalenie opon mózgowych; zapalenie mózgu; zapalenie błony naczyniowej oka; gościec zwyradniający; zapalenie nerek w toczniu rumieniowatym układowym; choroby autoimmunologiczne, takie jak reumatoidalne zapalenie stawów, zespół Sjorgena, zapalenie naczyń; choroby związane z diapedezą leukocytów; choroby zapalne centralnego układu nerwowego (CNS, ang. central nervous system); zespół uszkodzenia wielonarządowego po posoczniczy lub urazie; zapalenie wątroby u alkoholików, bakteryjne zapalenie płuc; choroby z udziałem kompleksu antygen-przeciwciało, włączając w to zapalenie kłębuszków nerkowych; poPL 213 948 B1 socznicę; sarkoidozę; immunopatologiczne odpowiedzi na transplantację tkanki/narządu; zapalenia płuc, włączając w to zapalenie opłucnej, zapalenie pęcherzyków płucnych, zapalenie naczyń, zapalenie płuc, przewlekłe zapalenie oskrzeli, rozstrzenie oskrzelowe, rozlane uogólnione zapalenie oskrzeklików, zapalenie płuc związane z nadwrażliwością, samoistne zwóknienie płuc (IPF od ang. idiopathic pulmonary fibrosis) i mukowiscydozę, itd. Korzystne wskazania obejmują ostre uszkodzenie płuc, zespół ostrego wyczerpania oddechowego dorosłych, reperfuzją niedokrwienną (włączając w to operacyjne reperfuzyjne uszkodzenie tkanek, niedokrwienie mięśnia sercowego i ostry zawał mięśnia sercowego), szok oligemiczny, astmę, bakteryjne zapalenie płuc i chorobą zapalną jelit taką jak wrzodziejące zapalenie okrężnicy. Choroby autoimmunologiczne mogą zachodzić na choroby zapalne a może być tak, że choroby zapalne mogą zachodzić na autoimmunologiczne.
„Blokowanie odpowiedzi immunologicznej” na obcy antygen ma oznaczać zmniejszenie albo zapobieganie co najmniej jednej odpowiedzi z udziałem odporności będącej wynikiem wystawienia na antygen, tj. poprzez zapobieganie albo zmniejszenie wytwarzania przeciwciał skierowanych przeciw antygenowi u ssaka. Alternatywnie albo dodatkowo, można poddawać supresji idiotyp, „pacyfikować” usuwanie komórek opłaszczonych przez przeciwciało i/lub wpływać na prezentację alloantygenu poprzez pozbycie się komórek prezentujących antygen.
„Obcy antygen” ma oznaczać cząsteczkę albo cząsteczki, która jest/są nie-endogenna(e) albo natywna(e) dla ssaka, który jest wystawiony na ich działanie. Obcy antygen może wzbudzić odpowiedź immunologiczną, np. odpowiedź humoralną i z udziałem komórek T u ssaka. Generalnie, obcy antygen będzie prowokować wytwarzanie przeciwciał przeciw niemu. Przykłady branych tu pod uwagę obcych przeciwciał obejmują immunogenne czynniki terapeutyczne, np. białka, takie jak przeciwciała, a w szczególności przeciwciała zawierające nie-ludzkie reszty aminokwasowe (np. przeciwciała gryzoni, chimerowe/humanizowane i prymatyzowane); toksyny (ewentualnie skoniugowane z cząsteczką docelową, taką jak przeciwciało, gdzie cząsteczka docelowa może być również immunogenna), wektory wirusowe do terapii genowej, takie jak retrowirusy i adenowirusy; przeszczepy, czynniki infekcyjne (np. bakterie i wirusy); alloantygeny (tj. antygeny, które występują u niektórych, ale nie innych przedstawicieli tego samego gatunku), takie jak różnice w typach krwi, antygeny ludzkich limfocytów (HLA, ang. human lymphocyte antigens), antygeny płytek krwi, antygeny wyrażane na przeszczepianych narządach, składniki krwi, czynniki ciążowe (Rh) i hemofilityczne (np. czynnik VIII i czynnik IX).
„Antygen związany z nowotworem” dla obecnych celów to antygen charakteryzujący się wysoką ekspresją na komórkach nowotworowych w porównaniu z komórkami prawidłowymi. Konkretne przykłady obejmują receptory ErbB, markery powierzchniowe komórek B, gangliozyd GD2, GD3 i GM2 (Ragupathi G., Cancer Immunol. Immunother. 43: 152 (1996)); CD52 (Ginaldi i wsp., Leukemia Research 22: 185 (1998)); antygen komórek macierzystych prostaty (PSCA, od ang. prostate stem cell antigen) oraz MAGE (Kirkin i wsp., APMIS 106: 665 (1998)).
„Czynnik angiogenny”, tutaj, to cząsteczka, która stymuluje angiogenezę. Przykłady obejmują czynnik wzrostu śródbłonka naczyń (VEGF, od ang. vascular endothelial growth factor), zasadowy lub kwaśny czynnik wzrostu fibroblastów (FGF, od ang. basic or acidic fibroblast growth factor) oraz pochodzący z płytek krwi czynnik wzrostu komórek śródbłonka Hft (PD-ECGF, od ang. platelet-derived endothelial cell growth factor).
„Receptor ErbB” to receptorowa kinaza tyrozynowa, która należy do rodziny receptora ErbB i obejmuje receptory EGFR, ErbB2, ErbB3 i ErbB4 oraz innych członków tej rodziny, którzy będą zidentyfikowani w przyszłości. Receptor ErbB będzie generalnie zawierać domenę zewnątrzkomórkową, która może wiązać się z ligandem ErbB; lipofilową domenę transbłonową; konserwowaną wewnątrzkomórkową domenę kinazy tyrozynowej oraz karboksykońcową domenę przekazującą sygnały niosącą kilka m reszt tyrozynowych, które mogą być fosforylowane.
Terminy „ErbB1”, „receptor nabłonkowego czynnika wzrostowego” i „EGFR” są tu stosowane wymiennie i odnoszą się do natywnej sekwencji EGFR ujawnionej na przykład w Carpenter i wsp., Ann. Rev. Biochem. 56: 881-914 (1987), włączając w to występujące naturalnie ich zmutowane postaci (np. mutanta delecyjnego EGFR, jak w Humphrey i wsp., PNAS (USA) 87: 4207-4211 (1990)). erbBl odnosi się do genu kodującego produkt białkowy EGFR.
Wyrażenia „ErbB2” i „HER2” są tu stosowane wymiennie i odnoszą się do natywnej sekwencji ludzkiego białka HER2 opisanej na przykład w Semba i wsp., PNAS (USA) 82: 6497-6501 (1985) oraz
Yamamoto i wsp., Nature 319: 230-234 (1986) (numer dostępu do Genebank X03363). Przykłady przeciwciał, które wiążą się z HER2 obejmują MAbs 4D5, 7C4, 7F3 i 7C2 jak również ich humanizowane warianty, włączając w to huMAb4D5-1, huMAb4D5-2, huMAb4D5-3, huMAb4D5-4, huMAb4 D5-5,
PL 213 948 B1 huMAb4D5-6, huMAb4D5-7 i huMAb4D5-8 jak opisano w tabeli 3 patentu USA nr 5 821 337, włączonego tu dokładnie jako odniesienie; oraz humanizowane zmutowane 2C4 nr 560, 561, 562, 568, 569, 570, 571, 574 lub 56869 jak opisano w W001/00245. 7C2 i 7F3 oraz ich humanizowane warianty są opisane w W098/17797. Korzystnymi przeciwciałami są te zawierające ciężkie i lekkie regiony zmienne huMAb4D5-8 albo mutant 574 humanizowanych 2C4.
„Trastuzumab” (HERCEPTIN®) to humanizowane przeciwciało, pochodzące ze zrekombinowanego DNA, które wiąże się z wysokim powinowactwem w teście opartym na komórkach (Kd = 5 nM) z domeną zewnątrzkomórkową HER2. Przeciwciałem jest przeciwciało IgG1, które zawiera regiony zmienne łańcucha ciężkiego i lekkiego wariantu huMAb4D5-8, jak opisano w tabeli 3 patentu USA nr 5 821 337. Przeciwciało jest wytwarzane przez komórki CHO-DP12.
„ErbB3” i „HER3” odnoszą się do polipeptydu receptorowego, jak ujawniono na przykład w patentach USA nr 5 183 884 i 5 480 968, jak również Kraus i wsp., PNAS (USA) 86: 9193-9197 (1989).
Terminy „ErbB4” i „HER4” odnoszą się tu do receptorowego polipeptydu, jak ujawniony na przykład EP zgłoszeniu patentowym nr 599 274; Plowman i wsp., Proc. Natl Acad. Sci USA, 90: 1746-1750 (1993) oraz Plowman i wsp., Nature, 366: 473-475 (1993), włączając w to jego izoformy, np. ujawnione w WO 99/19488, opublikowanym 22 kwietnia, 1999.
„Marker powierzchniowy komórek B” oznacza tu antygen wyrażany na powierzchni komórek B, który może stanowić cel dla przeciwciała, które się do niego wiąże. Przykładowe markery powierzchniowe komórek B obejmują markery powierzchniowe leukocytów CD10, CD19, CD20, CD21, CD22, CD23, CD24, CD37, CD40, CD53, CD72, CD73, CD74, CDw75, CDw76, CD77, CDw7 8, CD7 9a, CD79b, CD80, CD81, CD82, CD83, CDw84, CD85 i CD86. Marker powierzchniowy komórek B będący przedmiotem szczególnego zainteresowania jest preferencyjnie wyrażany na komórkach B w porównaniu do innych tkanek - nie komórek B ssaków i może być wyrażany zarówno na prekursorowych komórkach B, jak i dojrzałych komórkach B. W jednym z wykonań, markerem jest taki, jak CD20 lub CD19, który znajduje się na komórkach B w czasie różnicowania linii od stadium komórki macierzystej aż do punktu tuż przed ostatecznym różnicowaniem w komórki plazmatyczne. Korzystnymi markerami powierzchniowymi komórek B są tu CD19, CD20, CD22 i CD40.
Antygen „CD20” to nieglikozylowana fosfoproteina o wielkości około 35 kDa znajdująca się na powierzchni ponad 90% komórek B z krwi obwodowej albo narządów Iimfatycznych. CD20 jest wyrażany w czasie wczesnego rozwoju komórek pre-B i pozostaje aż do różnicowania się komórek plazmatycznych. CD20 jest obecny zarówno na prawidłowych komórkach B, jak i nowotworowych komórkach B. Inne nazwy dla CD20 w literaturze obejmują „antygen ograniczony do limfocytów B” i „Bp35”. Antygen CD20 jest opisany na przykład w Clark i wsp. PNAS (USA) 82: 1766 (1985).
Przykłady przeciwciał, które wiążą się antygenem CD20 obejmują: „C2B8” które jest teraz nazywane „Rituximab” („RITUXAN®)”) (patent USA nr 5 736 137, włączony tu dokładnie jako odniesienie); wyznakowane itrem[90] mysie przeciwciało 2B8 oznaczone „Y2B8” (patent USA nr 5 736 137,
131 włączony tu dokładnie jako odniesienie); mysie IgG2a „B1” ewentualnie wyznakowane 131I z wytwo131 ™ rzeniem przeciwciała „131I-B1” (BEXXART™) (patent USA nr 5 595 721, włączony tu dokładnie jako odniesienie); mysie przeciwciało monoklonalne „1F5” (Press i wsp. Blood 69 (2): 584-591 (1987)); przeciwciało „chimerowe 2H7” (patent USA nr 5 677 180, włączony tu dokładnie jako odniesienie) oraz monoklonalne przeciwciała L27, G28-2, 93-1 B3, B-C1 lub NU-B2 dostępne z International Leukocyte Typing Workshop (Valentine i wsp., W: Leukocyte Typing III (McMichael, wyd., str. 440, Oxford University Press (1987)).
®
Terminy „Rituximab” lub „RITUXAN®” oznaczają tu poddane zabiegom inżynierii genetycznej chimerowe mysie/ludzkie przeciwciało monoklonalne skierowane przeciw antygenowi CD20 i oznaczone „C2B8” w patencie USA nr 5 736 137, włączonym tu dokładnie jako odniesienie. Przeciwciałem jest immunoglobulina IgG1 kappa zawierająca mysie sekwencje regionu zmiennego łańcucha lekkiego i ciężkiego oraz ludzkie sekwencje regionu stałego. Rituximab ma powinowactwo wiązania dla antygenu CD20 wynoszące około 8,0 nM. Rituximab jest wytwarzane przez komórki CHO DG44.
Termin „ssak” obejmuje dowolnego zwierzęta zaklasyfikowane jako ssak, włączając w to ludzi, krowy, konie, psy i koty. W korzystnym wykonaniu wynalazku ssakiem jest człowiek.
Stosowane tu określenie „czynnik hamujący wzrost” dotyczy związku albo kompozycji, która hamuje wzrost komórki (np. komórki nowotworowej) in vitro bądź in vivo. A zatem, czynnikiem hamującym wzrost może być taki, który znacząco zmniejsza udział procentowy komórek w fazie S. Przykłady czynników hamujących wzrost obejmują czynniki, które blokują postęp cyklu komórkowego (w punkcje innym niż faza S), takie jak czynniki, które indukują zatrzymanie fazy G1 i M. Klasyczne
PL 213 948 B1 czynniki blokujące fazę M obejmują czynniki winka (winkrystynę i winblastynę), taksany oraz inhibitoty topo II, takie jak doksorubicyna, epirubicyna, daunorubicyna, etopozyd oraz bleomycyna. Te czynniki, które powodują zatrzymanie w fazie Gl wpływają również na zatrzymanie w fazie S, na przykład, czynniki alkilujące DNA, takie jak tamoksifen, prednizon, dakarbazyna, mechloretamina, cisplatyna, metotreksan, 5-fluorouracyl oraz ara-C. Dalsze informacje można znaleźć w The Molecular Basis of Cancer, Mendelsohn i Israel, wyd., Rozdział I, zatytułowany „Cell cycle regulation, oncogenes and antineoplastic drugs” autorstwa Murakami i wsp. (WB Saunders: Philadelphia, 1995), a w szczególności str. 13.
Przykładami przeciwciał „hamujących wzrost” są takie, które wiążą się z antygenem i hamują wzrost komórek nowotworowych z wyrażających ten antygen. Korzystne hamujące wzrost przeciwciała anty-HER2 hamują wzrost komórek raka sutka SK-BR-3 w hodowli komórkowej więcej niż 20%, a korzystnie więcej niż 50% (np. od około 50% do około 100%) przy stężeniu przeciwciał od około 0,5 do 30 μg/ml, gdzie hamowanie wzrostu określa się sześć dni po wystawieniu komórek SK-BR-3 na przeciwciało (patrz patent USA nr 5 677 171 wydany 14 października 1997). Korzystnym hamującym wzrost przeciwciałem jest huMAb4D5-8.
Przeciwciało, które „indukuje śmierć komórki” jest takim, które powoduje, że żywa komórka staje się nieżywą. Komórką jest generalnie taka, która wyraża antygen, z którym wiąże się przeciwciało. Śmierć komórek można określać in vitro w nieobecności dopełniacza i efektorowej komórki immunologicznej w celu rozróżnienia śmierci komórki indukowanej przez zależną od przeciwciała cytotoksyczność z udziałem komórek (ADCC) i cytotoksyczność zależną od dopełniacza (CDC). A zatem, test na śmierć komórek można przeprowadzać przy zastosowaniu surowicy inaktywowanej termicznie (tj. w nieobecności dopełniacza) i w nieobecności immunologicznych komórek efektorowych. W celu określenia, czy przeciwciało ma zdolność do indukowania śmierci komórki, można testować utratę integralności błony, którą ocenia się poprzez pobieranie jodku propidynowego (PI), błękitu trypanowego (patrz Moore i wsp., Cytotechnology 17: 1-11 (1995)) oraz 7AAD w stosunku do komórek nietraktowanych. Korzystnymi przeciwciałami indukującymi śmierć komórki są takie, które indukują pobieranie PI w teście PI w komórkach BT474.
Przeciwciało, które „indukuje apoptozę” to takie, które indukuje programowaną śmierć komórki, co określa się poprzez wiązanie aneksyny V, fragmentację DNA, kurczenie się komórek, rozszerzanie się endoplazmatycznego retikulum, fragmentację komórki i/lub tworzenie się pęcherzyków błonowych (zwanych ciałkami apoptotycznymi). Komórka wyraża antygen, do którego wiąże się przeciwciało. Korzystne jest jeżeli komórką jest komórka nowotworowa. Dostępnych jest wiele metod dla oceniania zdarzeń komórkowych związanych z apoptozą. Przykładowo, można mierzyć przemieszczanie się fosfatydyloseryny (PS) poprzez wiązanie aneksyny; fragmentację DNA można oceniać poprzez obserwację drabinki DNA, jak ujawniono tu w przykładzie; a kondensację jądrowo/chromatynową łącznie z fragmentacją DNA można oceniać poprzez wzrost liczby komórek hipodiploidalnych. Korzystne jest, jeżeli cząsteczką, która indukuje apoptozę jest taka, która prowadzi do około 2- do 50-krotnej, korzystniej 5- do 50-krotnej, a najkorzystniej, około 10- do 50-krotnej indukcji wiązania aneksyny w stosunku do komórek nie traktowanych w teście wiązania aneksyny z zastosowaniem komórek BT474.
Termin „ilość skuteczna terapeutycznie” odnosi się ilości leku skutecznej do leczenia choroby albo schorzenia u ssaka. W przypadku nowotworu, skuteczna terapeutycznie ilość leku może zmniejszyć liczbę komórek nowotworowych; zmniejszyć rozmiar guza; zahamować (tj. zwolnić do pewnego stopnia, a korzystnie zatrzymać) naciekanie komórek nowotworowych do narządów obwodowych; zahamować (tj. zwolnić do pewnego stopnia, a korzystnie zatrzymać) przerzuty raka; zahamować do pewnego stopnia wzrost guza i/lub w pewnym stopniu złagodzić jeden albo więcej objawów związanych z nowotworem. W zakresie, w którym lek może zapobiegać wzrostowi i zabijać istniejące komórki nowotworowe, może być on cytostatyczny i/lub cytotoksyczny. Dla terapii nowotworów skuteczność można mierzyć na przykład poprzez badanie czasu rozwoju choroby (TTP, ang. time to disease progression) i/lub ustalanie szybkości odpowiedzi (RR, ang. response rates).
„Rak wyrażający antygen” jest takim, który zawiera komórki, które mają dostateczne poziomy antygenu na swojej powierzchni komórkowej, aby przeciwciało anty-antygen mogło związać się z nim i mieć efekt terapeutyczny względem nowotworu.
Rak „charakteryzujący się nadmierną aktywacją” receptora jest takim, w którym nadmiar aktywacji receptora w komórkach nowotworowych znacząco przewyższa poziom aktywacji tego receptora w komórkach nienowotworowych z tego samego typu tkanki. Taka nadmierna aktywacja może być spowodowana przez nadekspresję receptora i/lub większe niż normalnie poziomy ligandu dostępnego
PL 213 948 B1 dla aktywacji receptora w komórkach nowotworowych. Taka nadmierna aktywacja może powodować i/lub być spowodowana przez stan rakowy komórki nowotworowej. W niektórych wykonaniach, nowotwór będzie poddany testowi diagnostycznemu lub prognostycznemu, w celu ustalenia, czy następuje amplifikacja i/lub nadekspresja receptora, która prowadzi do takiej nadmiernej aktywacji receptora. Alternatywnie lub dodatkowo, nowotwór może być poddany testowi diagnostycznemu lub prognostycznemu, w celu ustalenia, czy następuje w nowotworze amplifikacja i/lub nadekspresja ligandu, której towarzyszy nadmierna aktywacja receptora. W podzestawie takich nowotworów, nadmierna aktywacja receptora może być wynikiem autokrynnego szlaku stymulacji.
Rak, który „naprodukuje” receptor to taki, który ma znacząco wyższy poziom receptora, takiego jak HER2, na powierzchni swoich komórek w porównaniu w komórkami nierakowymi z tego samego typu tkanki. Taka nadprodukcja może być spowodowana przez amplifikację genu albo poprzez wzrost transkrypcji albo translacji. Nadprodukcja receptora może być oznaczona w teście diagnostycznym albo prognostycznym poprzez określenie wzrostu poziomu białka receptora obecnego na powierzchni komórki np. poprzez zastosowanie testu immunohistochemicznego; IHC). Alternatywnie albo dodatkowo, można zmierzyć poziomy kwasów nukleinowych kodujących receptor w komórce, np. poprzez fluorescencyjną hybrydyzację in situ (FISH; patrz WO 98/45479 opublikowany październik, 1998), analizę Southern albo techniki reakcji łańcuchowej polimerazy (PCR), takie jak ilościowy PCR w czasie rzeczywistym (RT-PCR). Można również badać nadprodukcję receptora poprzez mierzenie wyrzucanych antygenów (np. domeny zewnątrzkomórkowej) w płynach biologicznych, takich jak surowica (patrz np. patent USA nr 4 933 294 wydany 12 czerwca, 1990; WO 91/05264 opublikowany 18 kwietnia, 1991; patent USA nr 5 401 638 wydany 28 marca, 1995 oraz Sias i wsp., J. Immunol. Methods 132: 73-80 (1990)). Poza powyższymi testami dostępne są dla specjalistów różne testy in vivo. Przykładowo, można eksponować komórki wewnątrz ciała pacjenta na przeciwciało, które jest fakultatywnie wyznakowane wykrywalnym znacznikiem np. radioaktywnym izotopem i wiązanie przeciwciała z komórkami u pacjenta można zmierzyć na przykład poprzez zewnętrzne skanowanie radioaktywności albo analizowanie biopsji pobranej od pacjenta wystawionego uprzednio na działanie przeciwciała.
Rak, który „naprodukuje” ligand to taki, który ma znacząco wyższy poziom ligandu, w porównaniu w komórkami nierakowymi z tego samego typu tkanki. Taka nadprodukcja może być spowodowana przez amplifikację genu albo poprzez wzrost transkrypcji albo translacji. Nadprodukcja receptora może być oznaczona diagnostycznie poprzez określenie poziomów ligandu (albo kodującego go kwasu nukleinowego) u pacjenta, np. w biopsji guza nowotworowego albo poprzez zastosowanie różnych testów diagnostycznych, takich jak IHC, FISH, analiza Southern, PCR albo testy in vivo jak opisano powyżej.
Stosowany tu termin „czynnik cytotoksyczny” dotyczy substancji, która hamuje albo przeciwdziała funkcji komórek i/lub powoduje zniszczenie komórek. Termin ma obejmować izotopy radioaktywne (np. At211, I131, I125, Y90, Re186, Re188, Sm153, Bi212, P32 oraz radioaktywne izotopy Lu), czynniki chemioterapeutyczne oraz toksyny, takie jak niskocząsteczkowe toksyny albo enzymatycznie aktywne toksyny pochodzenia bakteryjnego, roślinnego albo zwierzęcego, włączając w to ich fragmenty i/lub warianty.
„Czynnik chemioterapeutyczny” to związek chemiczny przydatny w leczeniu raka. Przykłady czynników chemioterapeutycznych obejmują czynniki alkilujące, takie jak tiotepa i cyklosfosfamid ™ (CYTOXAN™); sulfoniany alkilowe, takie jak busulfan, improsulfan i piposulfan; azyrydyny, takie jak benzodopa, karbokuon, meturedopa i uredopa; etylenoiminy i metylamelaminy, włączając w to altretaminę, trietyIomelaminy, trietylenofosforamid, trietylenotiofosforoamid i trimetylolomelaminę; iperyty azotowe, takie jak chlorambucyl, chloronafazyna, chorofosfamid, estramustyna, ifosfamid, mechloroetamina, chlorowodowek tlenku mechloroetaminy, melfalan, nowembichina, fenesteryna, prednimustyna, trofosfamid, iperyt uraculowy; nitrosury, takie jak karmustyna, chlorozotocyna, fotemustyna, lomustyna, nimustyna, ranimustyna; antybiotyki, takie jak aklacynomyzyny, aktynomycyna, autramycyna, azaseryna, bleomycyny, kaktynomycyna, kalicheamycyna, karabicyna, karminomycyna, karzynofilina, chromomycyny, daktynomycyna, daunorubicyna, detorubicyna, 6-diazo-5-okso-L-norleucyna, doksorubicyna, epirubicyna, ezorubicyna, idarubicyna, marcelomycyna, mitomycyny, kwas mykofenolowy, nogalamycyna, oligomycyny, peplomycyna, potfiromycyna, puromycyna, kelamycyna, rodorubicyna, streptonigryn, streptozocyna, tubercydyna, ubenimeks, zynostatyna, zorubicyna; anty- metabolity, takie jak metotreksan i 5-fluorouracyl (5-FU); analogi kwasu foliowego, takie jak denopteryna, metotreksan, pteropteryna, trimetreksan; analogi puryn, takie jak fludarabina, 6-merkaptopuryna, tiamipryna, tioguanina; analogi pirymidyn, takie jak ancytabina, azacytydyna, 6-azaurydyna, karmofur, cytaraPL 213 948 B1 bina, dideoksyurydyna, doksyflurydyna, enocytabina, floksyurydyna, 5-FU; androgeny takie jak kalusteron, propionian dromostanolonu, epitiostanol, mepitiostan, testolakton; czynniki antyadrenalgiczne, takie jak aminoglutetimid, mitotan, trilostan; dopełniacz dla kwasu foliowego, taki jak kwas frolinowy; aceglaton; glikozyd aldofosfamidu; kwas aminolewulinowy; amsakryna; bestrabucyl; bisantren; edatraksan; defofamina; demekolcyna; diazykuon; elfornityna; octan eliptynowy; etoglucyd; azotan galu; hydrokslomocznik; lentinan; lonidamina; mitoguazon; raitoxantron; mopidamol; nitracrina; pentostatin; fenamet; pirarubicyna; kwas podofilinowy acid; 2-etylohydrazyd; prokarbazyna; PSK; razoksan; sizofiran; spirogermanium; kwas tenuazonowy; triazikon; 2,2',2'-trichlorotrietyloamina; uretan; windesyna;
dakarbazyna; mannomustyna; mitobronitol; mitolaktol; pipobroman; gacytozyna; arabinozyd („Ara-C”);
® cyklofosfamid; tiotepa; taksany, np. paklitaksel (TAXOL®, Bristol-Myers Squibb Oncology, Princeton, ®
NJ) oraz doksetaksel (TAXOTERE®, Rhone-Poulenc Rorer, Antony, France); chlorambucyl; gemcytabina; 6-tioguanina; merkaptopuryna; metotreksan; analogi platyny, takie jak cysplatyna i karboplatyna; winblastyna; platyna; etopozyd (VP-16); ifosfamid; mitomycyna C; mitoksantron; winkrystyna; winorelbina; nawelbina; nowantron; tenipozyd; daunomycyna; aminopteryna; kseloda; ibandronan; CPT-11; inhibitor topoizomerazy RFS 2000; difluorometyloornityna (DMFO); kwas retynowy; esperamycyny; kapecytabina oraz farmaceutycznie dopuszczalne sole, kwasy albo pochodne dowolnej z powyższych. Definicja ta obejmuje również czynniki przeciwhormonalne, które działają regulując albo hamując działanie hormonów na nowotwory, takie jak anty-estrogeny włączając w to na przykład tamoksifen, raloksifen, 4(5)-imidazole hamujące aromatazę, trioksifen, keoksifen, LY117018, onapriston i toremifen (Fareston) oraz antyandrogeny, takie jak flutamid, nilutamid, bikalutamid, leuprolid i goserelin oraz farmaceutycznie dopuszczalne sole, kwasy albo pochodne dowolnej z powyższych.
Stosowany tu termin „lek kierowany przez EGFR” dotyczy czynnika terapeutycznego, który wiąże się z EGFR i, ewentualnie hamuje aktywację EGFR. Przykłady takich czynników obejmują przeciwciała i małe cząsteczki, które wiążą się z EGFR. Przykłady przeciwciał, które wiążą się z EGFR obejmują MAb 579 (ATCC CRL HB 8506), MAb 455 (ATCC CRL HB8507), MAb 225 (ATCC CRL 8508), MAb 528 (ATCC CRL 8509) (patrz patent USA nr 4 943 533, Mendelsohn i wsp.) oraz ich warianty, takie jak chimery 225 (C225) i ludzkie 225 o przywróconym kształcie (H225) (patrz, WO 96/40210, Imclone Systems Inc.); przeciwciał, które wiążą się ze zmutowanym EGFR typu II (US patent nr 5 212 290); humanizowane i chimerowe przeciwciała, które wiążą się z EGFR jak opisano w patencie USA nr 5891996 oraz ludzkie przeciwciała, które wiążą się z EGFR (patrz WO 98/50433, Abgenix). Przeciwciało anty-EGFR może być połączone z czynnikiem cytotoksycznym tworząc immunokoniugat (patrz np. EP659, 439A2, Merck Patent GmbH). Przykłady takich małych cząsteczek, które wiążą się z EGFR obejmują ZD1839 (IRESSA®) (Astra Zeneca), CP-358774 lub OSI-774 (TARCEVA™) (Genentech) i AG1478.
Termin „cytokina” to ogólny termin dla białek uwalnianych przez jedną populację komórek, które działają na inne komórki jako międzykomórkowe przekaźniki. Przykładami takich cytokin są limfokiny, monokiny i tradycyjne hormony peptydowe. Wśród tych cytokin są: hormon wzrostu, taki jak ludzki hormon wzrostu, pochodna N-metionylowa ludzkiego hormonu wzrostu i bydlęcy hormon wzrostu; hormon przytarczycy; tyroksyna; insulina; proinsulina; relaksyna; prorelaksyna; hormony glikoproteinowe takie jak hormon folikulotropowy (FSH), tyrotropina (TSH), hormon luteinizujący (LH); wątrobowy czynnik wzrostowy; fibroblastowy czynnik wzrostowy; prolaktyna; laktogen łożyskowy; czynnik martwicy nowotworów a i β; substancja hamująca mullerian; mysi peptyd związany z gonadotropiną; inhibina; aktywina; naczyniowy śródbłonkowy czynnik wzrostowy; integryna; trombopoetyna (TPO); nerwowe czynniki wzrostowe takie jak NGF-α; czynnik wzrostowy płytek krwi; transformujące czynniki wzrostowe (TGF), takie jak TGF-α i TGF-β; czynnik wzrostowy insulino-podobny I i II; erytropoetyna (EPO); czynniki osteoinduktywne; interferony, takie jak interferon-α, -β i -γ; czynniki stymulujące kolonie (CSF), takie jak CSF makrofagów (M-CSF); CSF granulocytów- makrofagów (GM-CSF); i CSF granulocytów (G-CSF); interleukiny (IL), takie jak IL-1, IL-1a, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-11, IL-12; czynnik martwicy nowotworów, taki jak TNF-α lub TNF-β oraz inne czynniki polipeptydowe, włączając w to ligand LIF i kit (KL). Stosowany tu termin cytokina obejmuje białka ze źródeł naturalnych albo z hodowli zrekombinowanych komórek albo biologicznie aktywne ekwiwalenty cytokin o sekwencji natywnej.
Termin „prolek” stosowany w tym zgłoszeniu dotyczy formy prekursorowej albo pochodnej aktywnej farmaceutycznie substancji, która jest mniej toksyczna wobec komórek nowotworowych w porównaniu z lekiem rodzicielskim i podlega aktywacji enzymatycznej albo przekształceniu w bardziej aktywną postać rodzicielską. Patrz, np. Wilman, „Prodrugs in Cancer Chemotherapy” Biochemical
PL 213 948 B1
Society Transactions, 14, str. 375-382, 615th Meeting Belfast (1986) oraz Stella i wsp., „Prodrugs: A Chemical Approach to Targeted Drug Delivery” Directed Drug Delivery, Borchardt i wsp., (wyd.), str. 247, 267, Humana Press (1985). Proleki według tego wynalazku obejmują między innymi proleki zawierające tiofosforany, proleki zawierające siarczan, proleki zawierające peptyd, proleki ze zmodyfikowanymi D-aminokwasami, proleki glikozylowane, proleki zawierające laktam, proleki zawierające fenoksyacetamid ewentualnie podstawione albo proleki zawierające fenyloacetamid, ewentualnie podstawione, 5-fluorocytozynę i inne proleki 5-fluorourydynowe, które można przekształcić w bardziej aktywne wolne leki cytotoksyczne. Przykłady leków cytotoksycznych, które można przekształcić w postać proleku do zastosowania w tym wynalazku obejmują miedzy innymi opisane powyżej czynniki chemioterapeutyczne.
„Liposom” to mały pęcherzyk składający się z różnych typów lipidów, fosfolipidów i/lub związków powierzchniowo czynnych, które są przydatne do dostarczania leku (takiego jak ujawniona tu kompozycja glikoproteinowa i, ewentualnie, czynnik chemioterapeutyczny) do ssaka. Składniki liposomu są zwykle zorganizowane w postaci podwójnej warstwy, podobnie do organizacji lipidów w błonach biologicznych.
Termin „dołączona ulotka” jest tu użyty w odniesieniu do instrukcji zwykle dołączanych do handlowych opakowań produktów terapeutycznych, która zawiera informacje o wskazaniach, zastosowaniu, dawkowaniu, podawaniu, przeciwwskazaniach i/lub ostrzeżeniach dotyczących zastosowania takiego produktu terapeutycznego „Wyizolowana” cząsteczka kwasu nukleinowego to cząsteczka kwasu nukleinowego, która jest zidentyfikowana i oddzielona od co najmniej jednej cząsteczki kwasu nukleinowego stanowiącej zanieczyszczenie, z którą występuje normalnie razem w naturalnym źródle kwasu nukleinowego. Wyizolowana cząsteczka kwasu nukleinowego jest odmienna od postaci albo układu, w którym występuje w naturze. Wyizolowane cząsteczki kwasu nukleinowego można zatem odróżnić od cząsteczki kwasu nukleinowego występującej w naturalnych komórkach. Jednakże, wyizolowana cząsteczka kwasu nukleinowego obejmuje cząsteczkę kwasu nukleinowego zawartą w komórkach, które wyrażają przeciwciało, gdzie na przykład cząsteczka kwasu nukleinowego jest w pozycji chromozomowej innej niż w komórkach naturalnych.
Kwas nukleinowy jest „połączony funkcjonalnie”, kiedy jest umieszczony w funkcjonalnym związku z inną sekwencją kwasu nukleinowego. Przykładowo, DNA dla presekwencji albo lidera do sekrecji jest połączony funkcjonalnie z DNA dla polipeptydu, jeżeli jest wyrażany jako prebiałko, które uczestniczy w sekrecji polipeptydu; promotor albo wzmacniacz jest połączony funkcjonalnie z sekwencją kodującą, jeżeli wpływa na transkrypcję sekwencji, albo miejsce wiązania rybosomu jest połączone funkcjonalnie z sekwencją kodującą, jeżeli jest umieszczone tak, aby ułatwić translację. Generalnie, „połączone funkcjonalnie” oznacza, że sekwencje, które podlegają łączeniu są ciągłe, a w przypadku lidera do sekrecji, ciągłe i w fazie odczytu. Jednakże wzmacniacze nie muszą być ciągle. Łączenia dokonuje się poprzez ligację w dogodnych miejscach restrykcyjnych. Jeżeli takie miejsca nie istnieją, używa się syntetycznych oligonukleotydowych adaptorów zgodnie z konwencjonalną praktyką.
„Wyizolowana” cząsteczka kwasu nukleinowego to cząsteczka kwasu nukleinowego, która jest zidentyfikowana i oddzielona od co najmniej jednej cząsteczki kwasu nukleinowego stanowiącej zanieczyszczenie, z którą występuje normalnie razem w naturalnym źródle kwasu nukleinowego. Wyizolowana cząsteczka kwasu nukleinowego jest odmienna od postaci albo układu, w którym występuje w naturze. Wyizolowane cząsteczki kwasu nukleinowego można zatem odróżnić od cząsteczki kwasu nukleinowego występującej w naturalnych komórkach. Jednakże, wyizolowana cząsteczka kwasu nukleinowego obejmuje cząsteczkę kwasu nukleinowego zawartą w komórkach, które wyrażają przeciwciało, gdzie na przykład cząsteczka kwasu nukleinowego jest w pozycji chromosomowej innej niż w komórkach naturalnych.
„Sekwencje kontrolujące” ekspresję dotyczą sekwencji DNA niezbędnych do ekspresji połączonych z nimi funkcjonalnie sekwencji kodujących w danym organizmie gospodarza. Sekwencje kontrolujące, które są odpowiednie dla organizmów prokariotycznych, obejmują promotor, ewentualnie sekwencję operatorową oraz miejsce wiązania rybosomu. Wiadomo, że komórki eukariotyczne wykorzystują promotory, sygnały poliadenylacji i wzmacniacze.
Kwas nukleinowy jest „połączony funkcjonalnie” kiedy jest umieszczony w związku funkcjonalnym z inną sekwencją kwasu nukleinowego. Przykładowo, DNA dla prosekwencji albo lidera sekrecyjnego jest połączony funkcjonalnie z DNA dla polipeptydu jeżeli jest wyrażany jako prebiałko, które uczestniczy w sekrecji polipeptydu; promotor albo wzmacniacz jest połączony funkcjonalnie z sekwenPL 213 948 B1 cją kodującą jeżeli wpływa na transkrypcję sekwencji; albo miejsce wiązania rybosomu jest połączone funkcjonalnie z sekwencją kodującą jeżeli jest umieszczone tak, aby ułatwiać translację. Generalnie, „połączony funkcjonalnie” oznacza, że połączone sekwencje DNA są ciągłe, a w przypadku sekwencji lidera sekrecyjnego ciągłe i w fazie odczytu. Natomiast wzmacniacze nie muszą być ciągłe. Połączenie uzyskuje się poprzez ligację w odpowiednich miejscach restrykcyjnych. Jeżeli takie miejsca nie istnieją, stosowane są syntetyczne oligonukleotydy- adaptory albo łączniki, zgodnie z konwencjonalną praktyką.
Stosowany tu termin ekspresyjna „komórka”, „linia komórkowa” i „hodowla komórkowa” są stosowane wymiennie i wszystkie te określenia obejmują potomstwo. A zatem, słowa „transformant” i „komórki transformanta” obejmują pierwotną komórkę obiektu i hodowle z niej pochodzące niezależnie od liczby transferów. Jest również zrozumiałe, że całe potomstwo nie musi być całkowicie identyczne pod względem zawartości DNA na skutek przemyślanych albo przypadkowych mutacji. Zmutowane potomstwo, które ma taką samą funkcję albo aktywność biologiczną jak poszukiwana przy wyjściowo stransformowanych komórkach, jest również tu włączone. Tam gdzie zamierzone są inne cele, będzie to jasne z kontekstu.
II. Sposoby wykonania wynalazku
Wynalazek ten dotyczy sposobu przygotowania zasadniczo homogennego preparatu glikoproteiny zawierającej region Fc, gdzie około 80-100% glikoproteiny w kompozycji zawiera dojrzały węglowodan rdzeniowy pozbawiony fukozy, przyłączony do regionu Fc glikoproteiny. W korzystnych wykonaniach białko jest przeciwciałem lub immunoadhezyną. Glikoproteiny mogą być przygotowane na przykład przez (a) zastosowanie komórki gospodarza poddanej inżynierii genetycznej lub zmutowanej, w której brak metabolizmu fukozy, tak że ma zmniejszoną zdolność (lub nie jest zdolna) do fukozylacji wyrażanych w niej białek;
(b) hodowanie komórek w warunkach, które zapobiegają lub zmniejszają fukozylację;
(c) potranslacyjne usunięcie fukozy (np. enzymem fukozydazą);
(d) potranslacyjne dodanie pożądanego węglowodanu, np. po zrekombinowanej ekspresji nieglikozylowanej glikoproteiny;
(e) oczyszczenie glikoproteiny tak, by wybrać produkt, który nie jest fukozylowany.
Obecny wynalazek rozważa połączenie dwóch lub więcej z tych przykładowych sposobów (a)-(e).
Najbardziej korzystnie jeżeli, kwas nukleinowy kodujący pożądaną glikoproteinę jest wyrażany w komórce gospodarza, która ma zmniejszoną zdolność (lub nie jest zdolna) do fukozylacji wyrażanych w niej białek. Korzystnie, jeżeli komórka gospodarza jest komórką jajnika chomika chińskiego (CHO) pozbawioną reduktazy dihydrofolianu (DHFR), np. komórką Lec13 CHO lub np. komórką CHO-K1, DUX-B11, CHO-DP12 lub CHO-DG44 CHO, która była zmodyfikowana tak, że wytwarzana w niej glikoproteina nie jest znacząco fukozylowana. Tak więc komórka może wykazywać zmienioną ekspresję lub aktywność enzymu fukozylotransferazy albo inny enzym biorący udział w dodawaniu fukozy do związanego z N oligosacharydu może mieć zmniejszoną aktywność i/lub obniżone poziomy w komórce gospodarza.
Struktura węglowodanu rdzeniowego jest dojrzała, tak więc na ogół należy unikać stosowania inhibitorów, takich jak kastanospermina, które hamują lub przeszkadzają w obróbce dojrzałego węglowodanu. Według jednego z korzystnych wykonań około 80-100% glikoproteiny w kompozycji odzyskanej ze zrekombinowanej komórki gospodarza wytwarzającej glikoproteinę będzie miała strukturę węglowodanu rdzeniowego, która jest pozbawiona fukozy przyłączonej do regionu Fc glikoproteiny, dalej nazywana „kompozycją glikoproteiny wolną od fukozy”. „Odzyskana” ma tu oznaczać materiał uzyskany bezpośrednio z hodowli komórek gospodarza bez poddawania tego materiału etapowi oczyszczania, który wzbogaca w glikoproteinę wolną od fukozy.
Jednak, niniejszy wynalazek rozważa wzbogacanie ilości glikoproteiny wolnej od fukozy za pomocą różnych technik, takich jak oczyszczanie z zastosowaniem substratu lektynowego aby usunąć glikoproteinę zawierająca fukozę z pożądanej kompozycji.
Będzie oczywiste, że ilość wolnej od fukozy glikoprotein z różnych partii zrekombinowanej produkowanej glikoproteiny może być różna. Na przykład, w przykładach poniżej % całkowitego oligosacharydu bez fukozy przyłączonego do glikoproteiny wyrażanej przez komórki CHO-Lec13 był w zakresie 88%-95%.
Korzystnie, jeżeli około 90-99% glikoproteiny w kompozycji zawiera strukturę dojrzałego węglowodanu rdzeniowego, która jest pozbawiona fukozy przyłączonej do regionu Fc glikoproteiny.
PL 213 948 B1
W kompozycji mogą istnieć różne formy struktury węglowodanów. Na przykład, węglowodan przyłączony do glikoproteiny może być przedstawiony za pomocą następującego wzoru:
Χ4 - Χ3- GN - Μ
Χι\μ - GN - GN
Χ4 - Χ3 - Χ2 - Μ / gdzie:
M to mannoza,
GN to GlcNAc,
X1 to ewentualna rozdzielająca reszta GlcNAc, z dodatkowym monosacharydem(ami), ewentualnie przyłączonym do rozdzielającej GlcNAc,
X2 to korzystna reszta GlcNAc,
X3 to ewentualna reszta Ga1, jedna reszta Ga1 może być przyłączona do każdego ramienia GN,
X4 to ewentualne końcowe reszty kwasu sialowego, mogą być przyłączone jedna lub dwie reszty kwasu sialowego.
Wolne od fukozy ujawnione tu kompozycje glikoproteinowe wykazują zwiększone wiązanie jednego lub więcej receptorów FcyRIII w porównaniu z kompozycją tej samej glikoproteiny, ale gdzie większość (np. około 50-100% lub około 70-100%) glikoproteiny w tej kompozycji ma fukozę przyłączoną do struktury dojrzałego rdzeniowego węglowodanu (dalej tu „kompozycja glikoproteiny zawierająca fukozę”). Na przykład, kompozycje glikoproteiny wolne od fukozy tu ujawnione mogą wykazywać 100-1000-krotnie zwiększone wiązanie do FcyRIII, takiego jak FcyRIII (F158), w porównaniu z kompozycjami glikoproteinowymi zawierającymi fukozę. Jako że allotyp F158 jest mniej skuteczny w interakcji z ludzką IgG niż V158, uważa się, że to zapewnia znaczącą przewagę z terapeutycznego punku widzenia, szczególnie u pacjentów, którzy wyrażają FcyRIII (F158). Co więcej, ujawniona tu wolna od fukozy kompozycja glikoproteinowa wykazuje lepszą aktywność ADCC w porównaniu z odpowiednimi kompozycjami glikoproteinowymi zawierającymi fukozę, np. z około 2-20-krotnie polepszoną aktywnością ADCC.
Poza wolną od fukozy strukturą dojrzałego rdzeniowego węglowodanu, dodatkowe oligosacharydy mogą być przyłączone do struktury węglowodanu rdzeniowego. Na przykład rozdzielająca GlcNAc może być przyłączona lub nie. Jako przykład, komórka gospodarza może być pozbawiona enzymu GnTIII i w efekcie glikoproteina może być zasadniczo wolna od rozdzielającej GlcNAc. Alternatywnie, glikoproteina może być wyrażana w komórce gospodarza (np. gospodarza Y0 lub komórce CHO poddanej inżynierii genetycznej), która dodaje rozdzielającą GlcNAc.
Jedna lub więcej (na ogół jedna lub dwie) reszty galaktozy mogą być też przyłączone do struktury węglowodanu rdzeniowego. W końcu jedna lub więcej końcowych reszt kwasu sialowego (na ogół jedna lub dwie) mogą być przyłączone do struktury węglowodanu rdzeniowego, np. przez połączenie z resztą (resztami) galaktozy.
Kompozycje tu ujawnione są w korzystnym wykonaniu wytwarzane i przeznaczone do zastosowań terapeutycznych. Tak więc korzystna kompozycja jest preparatem farmaceutycznym zawierającym glikoproteinę i farmaceutycznie dopuszczalny nośnik lub rozcieńczalnik, tak jak te podane przykładowo poniżej. Takie preparaty są zazwyczaj jałowe i mogą być liofilizowane.
W korzystnym wykonaniu wynalazku glikoproteiną jest przeciwciało i przykładowe sposoby wytwarzania przeciwciał są opisane bardziej szczegółowo w następujących częściach. Glikoproteiną może jednak być dowolna inna glikoproteina zawierająca region Fc, np. immunoadhezyna. Sposoby wytwarzania immunoadhezyn są tu podane bardziej szczegółowo poniżej.
A. Warianty sekwencji regionu Fc
W jednym z wykonań wynalazku, wariant glikozylacji obejmuje ponadto wariant regionu Fc z sekwencją aminokwasową, która różni się od natywnej sekwencji regionu Fc. Tam gdzie region wariantu Fc ma więcej niż jedno podstawienie aminokwasowe, na ogół, ale niekoniecznie, podstawienia aminokwasowe w tej samej klasie są łączone, aby uzyskać pożądany wynik. Różne klasy podstawień aminokwasowych są opisane w następującej tabeli.
PL 213 948 B1
T a b e l a 1
Klasy wariantów regionu Fc
Klasa Zdolność wiązania FcR Pozycja podstawienia (podstawień) w regionie Fc
1A zmniejszone wiązanie do wszystkich FcyR 238, 265, 269, 270, 297*, 327, 329
1B zmniejszone wiązanie do obydwu, FcyRII i FcyRIII 239, 294, 295, 303, 338, 373, 376, 416, 435
2 zwiększone wiązanie do obydwu, FcyRII i FcyRIII 256, 290, 312, 326, 330, 339, 378, 430
3 zwiększone wiązanie do FcyRII i brak wpływu na wiązanie FcyRIII 255, 258, 267, 276, 280, 283, 285, 286, 305, 307, 309, 315, 320, 331, 337, 398
4 zwiększone wiązanie do FcyRII i zmniejszone wiązanie do FcyRIII 268, 272, 301, 322, 340
5 zmniejszone wiązanie do FcyRII i brak wpływu na wiązanie do FcyRIII 292, 324, 335, 414, 419, 438, 439
6 zmniejszone wiązanie do FcyRII i zwiększone wiązanie do FcyRIII 298, 333
7 brak wpływu na wiązanie do FcyRII i zmniejszone wiązanie do FcyRIII 248, 249, 252, 254, 278, 289, 293, 296, 338, 382, 388, 389, 434, 437
8 brak wpływu na wiązanie FcyRII i zwiększone wiązanie do FcyRIII 334, 360
* wersja deglikozylowana
Poza podstawieniami aminokwasowymi, niniejszy obecny wynalazek rozważa inne modyfikacje sekwencji aminokwasowych wyjściowego regionu Fc w celu wytworzenia wariantu regionu Fc ze zmienioną funkcją efektorową.
Można na przykład usunąć jedną lub więcej reszt aminokwasowych z regionu Fc aby zmniejszyć wiązanie się z FcR. Na ogół usuwa się jedną lub więcej reszt regionu Fc tu zidentyfikowanych jako przeprowadzających wiązanie FcR, aby wytworzyć taki wariant regionu Fc. Na ogół nie więcej niż jedna do dziesięciu reszt regionu Fc będzie usunięta według tego wykonania wynalazku. Region Fc zawierający jedną lub więcej delecji aminokwasów będzie korzystnie zachowywał przynajmniej około 80% i korzystnie przynajmniej około 90%, i najbardziej korzystnie przynajmniej około 95% wyjściowego regionu Fc albo natywnej sekwencji ludzkiego regionu Fc.
Można też wytworzyć warianty regionu Fc z insercjami aminokwasów, które to warianty mają zmienioną funkcję efektorową. Na przykład, można wprowadzić przynajmniej jedną resztę aminokwasową (np. jedną do dwóch reszt aminokwasów i na ogół nie więcej niż dziesięć reszt) obok jednej lub więcej pozycji regionu Fc zidentyfikowanych tu jako wpływające na wiązanie FcR. Przez „obok” rozumie się w obrębie jednej do dwóch reszt aminokwasowych w zidentyfikowanych tu resztach regionu Fc. Takie warianty regionu Fc mogą wykazywać zwiększone lub zmniejszone wiązanie FcR i/lub aktywność ADCC. Aby wytworzyć takie warianty insercyjne, można ocenić strukturę ko-kryształu polipeptydu zawierającego region wiązania FcR (np. zewnątrz komórkową domenę FcR będącego przedmiotem zainteresowania) i region Fc, do którego reszta (reszty) aminokwasów mają być wstawione (patrz na przykład, Deisenhofer, Biochemistry 20 (9): 2361-2370 (1981) oraz Burmeister i wsp., Nature 342: 379-383, (1994)) aby racjonalnie zaprojektować wariant regionu Fc z np. poprawioną zdolnością wiązania FcR. Taka insercja (insercje) będą na ogół zrobione w pętli regionu Fc, ale nie w strukturze drugorzędowej (np. w nici β) regionu Fc.
Przez wprowadzenie odpowiedniej sekwencji aminokwasowej w rodzicielskim regionie Fc, można wytworzyć wariant regionu Fc, który (a) pośredniczy w zależnej od przeciwciał cytotoksyczności zależnej od komórek (ADCC) w obecności ludzkich komórek efektorowych bardziej skutecznie i/lub (b) wiąże receptor Fc gamma (FcyR) z lepszym powinowactwem niż wyjściowy polipeptyd. Takie warianty regionu Fc będą na ogół zawierały przynajmniej jedną modyfikację aminokwasową w regionie Fc. Uważa się, że łączenie modyfikacji aminokwasowych jest szczególnie korzystne. Na przykład, wariant region Fc może zawierać dwie, trzy, cztery, pięć itd. podstawień, np. konkretnych, określonych tu pozycji regionu Fc.
PL 213 948 B1
Korzystne jest, jeżeli rodzicielski polipeptyd-region Fc jest ludzkim regionem Fc, np. natywną sekwencją ludzkiego regionu Fc ludzkiej IgG1 (allotypy A i nie-A), IgG2, IgG3 lub IgG4. Takie sekwencje przedstawiono na fig. 23.
Aby wytworzyć region Fc z polepszoną aktywnością ADCC, korzystne jest, jeżeli rodzicielski polipeptyd ma uprzednio istniejącą aktywność ADCC, np. zawiera region Fc ludzkiej IgG1 lub ludzkiej IgG3. W jednym z wykonań, wariant z zwiększoną ADCC pośredniczy w ADCC znacząco bardziej skutecznie niż przeciwciało z regionem Fc IgG1 lub IgG3 o natywnej sekwencji i regionem wiązania antygenu wariantu. Korzystnie, jeżeli wariant zawiera lub jest zasadniczo złożony z, podstawień dwóch lub trzech reszt w pozycjach 298, 333 i 334 regionu Fc. Najkorzystniej, jeżeli reszty w pozycjach 298, 333 i 334 są podstawione (np. resztami alaniny). Co więcej, aby wytworzyć wariant regionu Fc ze zwiększoną aktywnością ADCC na ogół konstruuje się wariant regionu Fc ze zwiększonym powinowactwem wiązania do FcyRIII, który uważa się za ważny FcR w przeprowadzaniu ADCC. Na przykład, można wprowadzić modyfikację aminokwasową (np. podstawienie) do rodzicielskiego regionu Fc w jednym lub więcej aminokwasów w pozycjach 256, 290, 298, 312, 326, 330, 333, 334, 360, 378 lub 430, aby wytworzyć taki wariant. Wariant ze zwiększonym powinowactwem wiązania do FcyRIII może dalej mieć zmniejszone powinowactwo wiązania dla FcyRII, szczególnie zmniejszone powinowactwo do hamującego receptora FcyRIIB.
Modyfikacja(e) aminokwasowe korzystnie wprowadza się do domeny CH2 regionu Fc, ponieważ tu podane eksperymenty m wskazują, że domena CH2 jest ważna dla aktywności wiązania FcR. Co więcej, w odróżnieniu od nauk z tej dziedziny, cytowanych powyżej, obecne zgłoszenie rozważa wprowadzenie modyfikacji do części regionu Fc innego niż w dolnym regionie zawiasowym.
Przydatne pozycje aminokwasowe do modyfikacji w celu wytworzenia wariantu regionu Fc IgG ze zmienionym powinowactwem wiązania lub aktywnością receptora Fc gamma (FcyR) obejmują dowolną jedną lub więcej pozycji aminokwasowych 238, 239, 248, 249, 252, 254, 255, 256, 258, 265, 267, 268, 269, 270, 272, 276, 278, 280, 283, 285, 286, 289, 290, 292, 293, 294, 295, 296, 298, 301, 303, 305, 307, 309, 312, 315, 320, 322, 324, 326, 327, 329, 330, 331, 333, 334, 335, 337, 338, 340, 360, 373, 376, 378, 382, 388, 389, 398, 414, 416, 419, 430, 434, 435, 437, 438 lub 439 regionu Fc.
Korzystnie, jeżeli rodzicielski region Fc stosowany jako matryca do wytworzenia takich wariantów zawiera region Fc ludzkiej IgG. Gdy podstawiona jest reszta 331, rodzicielski region Fc korzystnie nie jest z ludzkiej IgG3 o sekwencji natywnej lub wariant regionu Fc zawierający podstawienie w pozycji 331 korzystnie wykazuje zwiększone wiązanie do FcR, np. do FcyRII.
Aby wytworzyć wariant regionu Fc ze zmniejszonym wiązaniem do FcyR można wprowadzić modyfikację aminokwasową w dowolnej jednej lub więcej pozycji aminokwasowej 238, 239, 248, 249, 252, 254, 265, 268, 269, 270, 272, 278, 289, 292, 293, 294, 295, 296, 298, 301, 303, 322, 324, 327, 329, 333, 335, 338, 340, 373, 376, 382, 388, 389, 414, 416, 419, 434, 435, 437, 438 lub 439 regionu Fc.
Warianty, który wykazują zmniejszone wiązanie do FcyRI, obejmują te zawierające modyfikację aminokwasową regionu Fc w dowolnej jednej lub więcej pozycji aminokwasów 238, 265, 269, 270, 327 lub 329.
Warianty, które wykazują obniżone wiązanie do FcyRII obejmują te zawierające modyfikację aminokwasu regionu Fc w dowolnej jednej lub więcej pozycji aminokwasowych 238, 265, 269, 270, 292, 294, 295, 298, 303, 324, 327, 329, 333, 335, 338, 373, 376, 414, 416, 419, 435, 438 lub 439.
Warianty regionu Fc, które wykazują zmniejszone wiązanie do FcyRIII obejmują te zawierające modyfikację aminokwasową regionu Fc w dowolnej jednej lub więcej pozycji aminokwasowej 238, 239, 248, 249, 252, 254, 265, 268, 269, 270, 272, 278, 289, 293, 294, 295, 296, 301, 303, 322, 327, 329, 338, 340, 373, 376, 382, 388, 389, 416, 434, 435 lub 437.
Można także wytworzyć warianty ze zwiększonym wiązaniem jednego lub więcej FcyR. Takie warianty regionu Fc mogą zawierać modyfikację aminokwasową w dowolnej jednej lub więcej pozycji aminokwasów 255, 256, 258, 267, 268, 272, 276, 280, 283, 285, 286, 290, 298, 301, 305, 307, 309, 312, 315, 320, 322, 326, 330, 331, 333, 334, 337, 340, 360, 378, 398 lub 430 regionu Fc.
Na przykład, wariant ze zwiększoną aktywnością wiązania FcyR może wykazywać zwiększone wiązanie do FcyRIII, i ewentualnie może wykazywać ponadto zmniejszone wiązanie do FcyRII; np. wariant może zawierać modyfikację aminokwasową w pozycji 298 i/lub 333 regionu Fc.
Warianty ze zwiększonym wiązaniem do FcyRII obejmują te zawierające modyfikację aminokwasową w dowolnej jednej lub więcej pozycji aminokwasowych 255, 256, 258, 267, 268, 272, 276,
280, 283, 285, 286, 290, 301, 305, 307, 309, 312, 315, 320, 322, 326, 330, 331, 337, 340, 378, 398 lub 430 regionu Fc. Takie warianty mogą dalej wykazywać zmniejszone wiązanie do FcyRIII. Na przyPL 213 948 B1 kład, mogą zawierać modyfikację aminokwasową regionu Fc w dowolnej jednej lub więcej pozycji aminokwasych 268, 272, 298, 301, 322 lub 340.
Jakkolwiek korzystne jest zmienianie wiązania do FcyR, warianty regionu Fc ze zmienionym powinowactwem wiązania dla receptora noworodkowego (FcRn) są tu także rozważane. Oczekuje się, że warianty regionu Fc ze zwiększonym powinowactwem do FcRn będą miały dłuższy czas półtrwania w surowicy i takie cząsteczki będą miały użyteczne zastosowania w sposobach leczenia zwierząt, gdy długi okres półtrwania podawanego peptydu jest pożądany, np. aby leczyć przewlekłą chorobę lub schorzenie. Przeciwnie, oczekuje się, że warianty regionu Fc ze zmniejszonym powinowactwem wiązania FcRn będą miały krótsze okresy półtrwania i takie cząsteczki mogą, na przykład, być podawane ssakowi wówczas, gdy krótszy czas w krążeniu może być korzystny, np. dla obrazowania diagnostycznego lub dla polipeptydów, które mają toksyczne efekty uboczne gdy krążą w krwiobiegu przez przedłużone okresy czasu itd. Oczekuje się, że warianty regionu Fc ze zmniejszonym powinowactwem wiązania mają mniejszą szansę przechodzenia przez łożysko i mogą więc być stosowane w leczeniu chorób lub schorzeń u kobiet w ciąży.
Warianty regionu Fc ze zmienionym powinowactwem wiązania do FcRn obejmują te zawierające modyfikację aminokwasową regionu Fc dowolnej jednej lub więcej pozycji aminokwasowych 238, 252, 253, 254, 255, 256, 265, 272, 286, 288, 303, 305, 307, 309, 311, 312, 317, 340, 356, 360, 362, 376, 378, 380, 382, 386, 388, 400, 413, 415, 424, 433, 434, 435, 436, 439 lub 447. Te, które wykazują zmniejszone wiązanie do FcRn będą na ogół zawierały modyfikację aminokwasową regionu Fc w dowolnej jednej lub więcej pozycji aminokwasów 252, 253, 254, 255, 288, 309, 386, 388, 400, 415, 433, 435, 436, 439 lub 447; a te ze zwiększonym wiązaniem do FcRn będą zazwyczaj zawierały modyfikację aminokwasową regionu Fc w dowolnej jednej lub więcej pozycji aminokwasowych 238, 256, 265, 272, 286, 303, 305, 307, 311, 312, 317, 340, 356, 360, 362, 376, 378, 380, 382, 413, 424 lub 434.
Wariant(y) polipeptydu wytworzone jak opisano powyżej mogą być poddane dalszym modyfikacjom, często w zależności od przeznaczonego zastosowania polipeptydu. Takie modyfikacje mogą obejmować dalsze zmiany sekwencji aminokwasu (podstawienie, insercja i/lub delecja reszt aminokwasowych), fuzję z heterologicznym polipeptydem(ami) i/lub modyfikacje kowalencyjne. Takie „dalsze modyfikacje” mogą być przeprowadzone przed, równocześnie z lub po modyfikacji aminokwasowej(ych) ujawnionych powyżej, które powodują zmianę wiązania receptora Fc i/lub aktywności ADCC. W jednym z wykonań można połączyć tu podane modyfikacje w regionie Fc z podstawieniami w regionie Fc ujawnionymi w cytowanych odnośnikach w części „Dziedziny pokrewne” tego zgłoszenia.
Alternatywnie lub dodatkowo, może być przydatne połączenie powyższych modyfikacji aminokwasowych z jedną lub więcej modyfikacjami aminokwasowymi, które zmieniają wiązanie Clq i/lub funkcję cytotoksyczności zależnej od dopełniacza regionu Fc.
Wyjściowy polipeptyd będący przedmiotem szczególnego zainteresowania jest zazwyczaj tym, który wiąże Clq i wykazuje cytotoksyczność zależną od dopełniacza (CDC). Dalsze podstawienia aminokwasowe tu opisane będą na ogół służyły do zmiany wyjściowego polipeptydu do wiązania Clq i/lub modyfikowania jego funkcji cytotoksyczności zależnej od dopełniacza, np. zmniejszenie i korzystnie zniesienie tych funkcji efektorowych. Jednak rozważane są tu polipeptydy zawierające podstawienia w jednej lub więcej z opisanych pozycji z polepszonym wiązaniem Clq i/lub funkcją cytotoksyczności zależną od dopełniacza (CDC). Na przykład, wyjściowy polipeptyd może nie być zdolny do wiązania Clq i/lub pośredniczeniu w CDC i może być modyfikowany zależnie od nauk tu podanych tak, że nabiera tych dalszych funkcji efektorowych. Co więcej, polipeptydy z uprzednio istniejącą zdolnością wiązania Clq dowolnie dalej mające zdolność do brania udziału w CDC mogą być modyfikowane tak, że jedna lub obie z tych aktywności są zwiększone.
Aby wytworzyć region Fc ze zmienionym wiązaniem Clq i/lub funkcją cytotoksyczności zależną od dopełniacza (CDC) pozycje aminokwasowe do modyfikowania są na ogół wybierane z pozycji łańcucha ciężkiego 270, 322, 326, 327, 329, 331, 333 i 334, gdzie numerowanie reszt łańcucha ciężkiego IgG jest tym podanym w indeksie EU jak w Kabat i wsp., Sequences of Proteins of Immunological Interest, wyd. 5 Public Health Service, National Institutes of Health, Bethesda, MD (1991). W jednym z wykonań tylko jedna z ośmiu zidentyfikowanych powyżej pozycji jest zmieniona aby wytworzyć wariantowy region polipeptydu ze zmienionym wiązaniem Clq i/lub funkcją cytotoksyczność zależną od dopełniacza (CDC).
Korzystnie, tylko reszta 270, 329 lub 322 jest zmieniona w tym przypadku. Alternatywnie, dwie lub więcej z pozycji zidentyfikowanych m powyżej są zmodyfikowane. Jeśli podstawienia mają być łączone, na ogół podstawienia, które zwiększają wiązanie ludzkiego Clq (np. w resztach w pozycjach
PL 213 948 B1
326, 327, 333 i 334) lub te, które zmniejszają wiązanie ludzkiego Clq (np. w resztach w pozycjach 270, 322, 329 i 331) są łączone. W tym ostatnim wykonaniu wszystkie cztery pozycje (tzn. 270, 322, 329 i 331) mogą być podstawione.
Korzystnie, dalsze podstawienia w dwóch, trzech lub wszystkich pozycjach 326, 327, 333 lub 334 są łączone, dowolnie z innymi podstawieniami regionu Fc aby wytworzyć polipeptyd ze zwiększonym wiązaniem ludzkiego Clq i korzystnie zwiększoną aktywnością CDC in vitro lub in vivo.
Prolina jest konserwowana w pozycji 329 w ludzkich IgG. Ta reszta jest korzystnie zastępowana alaniną, jednak podstawienie dowolnym innym aminokwasem jest rozważane, np. seryną, treoniną, asparaginą, glicyną lub waliną.
Prolina jest konserwowana w pozycji 331 w ludzkiej IgG1, IgG2 i IgG3, ale nie TgG4 (która ma resztę seryny w pozycji 331). Reszta 331 jest korzystnie zastępowana przez alaninę lub inny aminokwas, np. serynę (dla regionów IgG innych niż IgG4), glicynę lub walinę.
Lizyna 322 jest konserwowana w ludzkich IgG i ta reszta jest korzystnie zastępowana przez resztę alaniny, ale rozważa się podstawienie dowolną inną resztą aminokwasy np. seryna, treonina, glicyna lub walina.
D270 jest konserwowana w ludzkich IgG i ta reszta może być zastąpiona przez inną resztę aminokwasu np. alanina, seryna, treonina, glicyna, walina lub lizyna.
K326 jest też konserwowana w ludzkich IgG. Ta reszta może być podstawiona przez inną resztę włączając, w to między innymi, walinę, kwas glutaminowy, alaninę, glicynę, kwas asparaginowy, metioninę lub tryptofan, przy czym tryptofan jest korzystny.
Podobnie, E333 jest też konserwowana w ludzkich IgG. E333 jest korzystnie zastępowana przez resztę aminokwasową z mniejszą objętością łańcucha bocznego, taką jak walina, glicyna, alanina lub seryna, przy czym seryna jest korzystna.
K334 jest konserwowana w ludzkich IgG i może być podstawiona przez inną resztę taką jak alanina lub inna reszta.
W ludzkiej IgG1 i IgG3, resztą 327 jest alanina. Aby wytworzyć wariant ze zwiększonym wiązaniem Clq, tę alaninę można podstawić inną resztą taką jak glicyna. W IgG2 i IgG4, resztą 327 jest glicyna i to może być zastąpione przez alaninę (lub inną resztę) aby zmniejszyć wiązanie Clq.
Jak ujawniono powyżej, można zaprojektować region Fc ze zmienioną funkcją efektorową np. przez modyfikację wiązania Clq i/lub wiązania FcR w ten sposób zmieniając aktywność CDC i/lub aktywność ADCC. Na przykład, można wytworzyć wariant regionu Fc ze zwiększonym wiązaniem Clq i zwiększonym wiązaniem FcyRIII np. mającym zarówno zwiększoną aktywność ADCC i zwiększoną aktywność CDC. Alternatywnie, gdy pożądane jest zmniejszenie lub usunięcie funkcji efektorowej można skonstruować wariant region Fc ze zmniejszoną aktywnością CDC i/lub zmniejszoną aktywnością ADCC. W innych wykonaniach można zwiększyć tylko jedną z tych aktywności i dowolnie także zmniejszyć drugą aktywność np. aby wytworzyć wariant regionu Fc ze zwiększoną aktywnością ADCC, ale zmniejszoną aktywnością CDC i vice versa.
Pod względem dalszych zmian sekwencji aminokwasów, dowolna reszta cysteiny nie biorąca udziału w utrzymywaniu właściwej konformacji wariantu polipeptydu może być także podstawiona, na ogół seryną aby poprawić stabilność oksydacyjną cząsteczki i zapobiec błędnemu wiązaniu krzyżowemu.
Inny typ podstawienia aminokwasu służy do zmiany wzoru glikozylacji polipeptydu. Można to uzyskać przez delecję jednej lub więcej reszt węglowodanowych znajdowanych w polipeptydzie i/lub dodanie jednego lub więcej miejsca glikozylacji, które nie są obecne w polipeptydzie. Glikozylacja polipeptydów jest typowo albo jako połączenie przez N albo połączenie przez O. Połączenie przez z N dotyczy przyłączenia reszty węglowodanu do łańcucha bocznego reszty asparaginy. Sekwencja tripeptydu asparagina-X-seryna i asparagina-X-treonina, gdzie X jest dowolnym aminokwasem z wyjątkiem proliny są miejscami rozpoznawania przyłączania enzymatycznego reszty węglowodanu do łańcucha bocznego asparaginy. Tak więc, obecność dowolnej z tych sekwencji tripeptydu w polipeptydzie tworzy potencjalne miejsce glikozylacji. Glikozylacja poprzez O dotyczy przyłączenia jednego z cukrów N-acetylogalaktozaminy, galaktozy lub ksylozy do hydroksyaminokwasu, najczęściej seryny lub treoniny, choć 5-hydroksyprolina lub 5-hydroksylizyna może być też stosowana. Dodanie miejsc glikozylacji do polipeptydu jest dogodnie przeprowadzane przez zmianę sekwencji aminokwasów tak, że zawiera jedną lub więcej z opisanych powyżej sekwencji tripeptydów (dla glikozylacji związanej z N). Ta zmiana może być przeprowadzona przez dodatek lub podstawienie przez jedna lub więcej reszt
PL 213 948 B1 seryny lub treonina do sekwencji oryginalnego polipeptydu (dla miejsc glikozylacji związanych z O). Przykładowy wariant glikozylacji ma podstawienie aminokwasu reszty Asn 297 łańcucha ciężkiego.
Co więcej klasa, podklasa lub allotyp regionu Fc może być zmieniony przez jedno lub więcej kolejnych podstawień aminokwasowych aby wytworzyć region Fc z sekwencją aminokwasową bardziej homologiczną do innej klasy, podklasy lub allotypu w zależności od potrzeby. Mysi region Fc może być zmieniony aby wytworzyć sekwencję aminokwasową bardziej homologiczną do ludzkiego region Fc; ludzki nie będący allotypem A IgG1 region Fc może być zmodyfikowany aby uzyskać allotyp A IgG1 ludzkiego regionu etc. W jednym z wykonań modyfikacje aminowe tu podane, które zmieniają wiązanie FcR i/lub aktywność ADCC są dokonywane w domenie CH2 regionu Fc i domenę CH3 usuwa się lub zastępuje inną domeną dimerizacji. Korzystnie jednak zatrzymuje się domenę CH3 (poza obecnymi w niej modyfikacjami aminokwasowymi, które zmieniają funkcje efektorowe, jak tu ujawniono).
Glikoproteina wytworzona jak opisano powyżej może być poddana dalszym modyfikacjom, często zależnie od planowanego zastosowania glikoproteiny. Takie modyfikacje mogą obejmować dalsze zmiany sekwencji aminokwasów (podstawienie, insercja i/lub deleeja reszt aminokwasowych), fuzję z heterologicznym polipeptydem(ami) i/lub modyfikacje kowalencyjne.
Inny typ podstawienia aminokwasowego służy do zmiany wzoru glikozylacji glikoproteiny. Takie warianty glikozylacji mogą być dodatkowe oprócz wariantów glikozylacji pod względem braku fukozy tu opisanych i mogą być uzyskane przez delecję jednej lub więcej grup węglowodanowych spotykanych w glikoproteinie, i/lub dodanie jednego lub więcej miejsc glikozylacji, które nie są obecne w glikoproteinie. Glikozylacja glikoprotein jest typowo poprzezz N albo poprzez O. Połączenie poprzez N dotyczy przyłączenia reszty węglowodanu do bocznego łańcucha reszty asparaginy. Sekwencje tripeptydu asparagina-X-seryna i asparagina-X-treonina, gdzie X jest dowolnym aminokwasem z wyjątkiem proliny są miejscami rozpoznawania do przyłączania enzymatycznego reszty węglowodanu do bocznego łańcucha asparaginy. Tak więc, obecność dowolnej z tych sekwencji tripeptydów w glikoproteinie tworzy potencjalne miejsce glikozylacji. Glikozylacja poprzez O dotyczy przyłączenia jednego z cukrów, N-acetylogalaktozominy, galaktozy lub ksylozy do hydroksyaminokwasu, najczęściej seryny lub treoniny, choć 5-hydroksyprolina lub 5-hydroksylizyna mogą być także stosowane. Dodanie miejsc glikozylacji do glikoproteiny dogodnie przeprowadza się przez zmianę sekwencji aminokwasów tak, że zawiera ona jedną lub więcej z opisanych powyższej sekwencji tripeptydu (dla miejsca z wiązanego z miejscem N-glikozylacji). Zmiana może być też przeprowadzona przez dodanie lub podstawienie jednej lub więcej reszt seryny lub treoniny do sekwencji oryginalnej glikoproteiny (dla miejsc glikozylacji poprzez O).
B. Badanie aktywności biologicznej
Wariant glikoproteiny może być poddany jednemu lub więcej oznaczeniom aby ocenić ewentualne zmiany aktywności biologicznej w porównaniu z polipeptydem wyjściowym.
Korzystne jest, jeżeli wariant glikoproteiny zasadniczo zachowuje zdolność wiązania antygenu w porównaniu z peptydem nie będącym wariantem tzn. zdolność wiązania jest słabsza mniej niż 20-krotnie, np. jest słabsza nie więcej niż 5-krotnie niż polipeptydu nie będącego wariantem. Zdolność wiązania wariantu polipeptydu można oznaczyć stosując techniki, takie jak na przykład analiza sortowania komórek aktywowanego fluorescencją (FACS) lub radioimmunoprecypitacja (RIA).
Można ocenić zdolność wariantu glikoproteiny do wiązania FcR. Gdy FcR jest receptorem Fc o wysokim powinowactwie, takim jak FcyRI, FcRn, FcyRIIB lub FcyRIIIA, wiązanie można mierzyć przez miareczkowanie wariantu monomerycznej glikoproteiny i pomiar związanego wariantu glikoproteiny stosując przeciwciało, które specyficznie wiąże wariant glikoproteiny w standardowym formacie ELISA (patrz przykłady poniżej). Inne oznaczenie wiązania FcR dla FcR z niskim powinowactwem jest opisane w WO nr 00/42072 (Presta) i patencie USA nr 6 242 195 B1.
Aby ocenić aktywność ADCC wariantu glikoproteiny w oznaczeniu in vitro można przeprowadzić oznaczenie ADCC stosując zmienne stosunki efektor:cel. Przydatne „komórki efektorowe” do takich oznaczeń obejmują jednojądrzaste komórki krwi obwodowej (PBMC) i komórki naturalnych zabójców (NK). Alternatywnie lub dodatkowo aktywność ADCC wariantu glikoproteiny można oszacować in vivo, np. w modelu zwierzęcym, takim jak ujawniono w Clynes i wsp. PNAS (USA) 95: 652-656
Można ocenić zdolność wariantu do wiązania Clq i brania udziału w cytotoksyczności zależnej od dopełniacza (CDC).
Aby oznaczyć wiązanie Clq można przeprowadzić ELISA wiązania Clq. Pokrótce, płytki do oznaczeń można powlec przez noc w 4°C wariantem glikoproteiny lub wyjściowym polipeptydem (kontrola) w buforze do powlekania. Płytki można następnie przepłukać i zablokować. Po płukaniu do każ34
PL 213 948 B1 dej studzienki można dodać próbkę ludzkiego Clq i inkubować przez 2 godz. w temperaturze pokojowej. Po dalszym płukaniu do każdej studzienki można dodać 100 μl przeciwciała Clq skoniugowanego z peroksydazą przeciw dopełniaczowi i inkubować przez 1 godzinę w temperaturze pokojowej. Płytki można ponownie płukać buforem do płukania i do każdej studzienki można dodać 100 μl buforu substratu zawierającego OPD (dichlorowodorek O-fenylenodiaminy (Sigma)). Reakcja utleniania, obserwowana przez pojawianie się żółtej barwy, może przebiegać przez 30 minut i można ją zahamować przez dodanie 100 μl 4,5 N H2SO4. Wówczas można odczytać absorbancję przy (492--405) nm.
Przykładowym wariantem glikoproteiny jest taki, który wykazuje „znaczące obniżenie wiązania Clq” w tym oznaczeniu. To oznacza, że około 100 μg/ml wariantu glikoproteiny wykazuje zmniejszenie około 50-krotne lub większe wiązania Clq w porównaniu ze 100 μg/ml kontrolnego przeciwciała mającego niezmutowany reqion Fc IgG1. W najbardziej korzystnym wykonaniu wariant glikoproteiny „nie wiąże Clq”, tzn. 100 μg/ml wariantu glikoproteiny wykazuje około 100-krotne lub większe zmniejszenie wiązania Clq w porównaniu z 100 μg/ml przeciwciała kontrolnego.
Inny przykładowy wariant to taki, który ma „lepsze powinowactwo wiązania do ludzkiego Clq niż wyjściowy polipeptyd”. Taka cząsteczka może na przykład, wykazywać poprawę dwukrotną lub większą, a korzystnie pięciokrotną lub większą wiązania ludzkiego Clq w porównaniu z wyjściowym polipeptydem (np. przy wartościach IC50 dla tych dwóch cząsteczek). Na przykład, wiązanie ludzkiego Clq może być około dwukrotnie do około 500-krotne, a korzystnie od około dwukrotnie do około pięciokrotnie do około 1000-krotnie poprawione w porównaniu z wyjściowym polipeptydem.
Aby zbadać aktywację dopełniacza, można przeprowadzić oznaczenie cytotoksyczności zależnej od dopełniacza np. jak opisano w Gazzano-Santoro i wsp., J. Immunol. Methods 202: 163 (1996). Pokrótce, różne stężenia wariantu glikoproteiny i ludzki dopełniacz mogą być rozcieńczone buforem. Komórki, które wyrażają antygen, z którym wiąże się wariant glikoproteiny mogą być rozcieńczone do ~ 1 x 106 komórek/ml. Mieszaniny wariantu glikoproteiny, rozcieńczonego ludzkiego dopełniacza i komórek wyrażających antygen można dodać do płytki z 96-płaskodennymi studzienkami i inkubować przez 2 godz. w 37°C i 5% CO2 aby ułatwić lizę komórek z udziałem dopełniacza. Następnie do każdej studzienki można dodać 50 ml błękitu alamar (Accumed International) i inkubować przez noc w 37°C. Absorbancję mierzy się stosując 96-studzienkowy fluorymetr ze wzbudzeniem przy 530 nm i emisji przy 590 nm. Wyniki można wyrazić jako jednostki względnej fluorescencji (relative fluorescence units (RFU)). Stężenia próbki można wyliczyć z krzywej standartowej i podaje się procent aktywności dla wariantu glikoproteiny będącego przedmiotem zainteresowania w porównaniu z polipeptydem nie będącym wariantem.
Jeszcze inny przykładowy wariant „nie aktywuje dopełniacza”. Na przykład, 0,6 μg/ml wariantu glikoproteiny wykazuje około 0-10% aktywności CDC w tym oznaczeniu w porównaniu z 0,6 μg/ml kontrolnego przeciwciała mającego niezmutowany region Fc IgG1. Korzystnie, wariant nie wydaje się mieć żadnej aktywności CDC w powyższym oznaczeniu CDC.
Glikoproteina może być taką, która wykazuje zwiększony CDC w porównaniu z wyjściowym polipeptydem, np. wykazując około dwukrotne do około 100-krotnego zwiększenie aktywności CDC in vitro lub in vivo (np. przy porównywaniu wartości IC50 dla każdej cząsteczki).
Warianty regionu Fc ze zmienionym powinowactwem wiązania dla receptora noworodkowego (FcRn) są tu także rozważane. Oczekuje się, że warianty regionu Fc ze zwiększonym powinowactwem do FcRn będą miały dłuższe okresy półtrwania w surowicy i takie cząsteczki będą miały użyteczne zastosowania w metodach leczenia ssaków, gdy pożądany jest długi okres półtrwania podawanej glikoproteiny, np. by leczyć przewlekła chorobę lub schorzenie. Przeciwne, oczekuje się, że warianty regionu Fc ze zmniejszonym powinowactwem wiązania do FcRn będą miały krótsze okresy półtrwania i takie cząsteczki mogą, na przykład, być podawane ssakowi gdy krótszy czas w krążeniu może być korzystny, np. dla obrazowania diagnostycznego lub dla polipeptydów, które mają toksyczne efekty uboczne gdy krążą w krwiobiegu przez przedłużone okresy czasu itd. Oczekuje się, że warianty regionu Fc ze zmniejszonym powinowactwem wiązania do FcRn mają mniejszą szansę przechodzenia przez łożysko i mogą więc być stosowane w leczeniu chorób lub zaburzeń u kobiet w ciąży.
C. Wytwarzanie przeciwciał
W korzystnym wykonaniu wynalazku, glikoproteiną, która jest zmodyfikowana według nauk tego wynalazku jest przeciwciało. Techniki wytwarzania przeciwciał są jak następuje:
(i) Wybór i wytwarzanie antygenu
Tam gdzie glikoproteiną jest przeciwciało, jest ono skierowane przeciw antygenowi będącemu przedmiotem zainteresowania. Korzystne jest, jeżeli jest ważną biologicznie glikoproteiną i podawanie
PL 213 948 B1 przeciwciała ssakowi cierpiącemu z powodu choroby albo schorzenia może prowadzić do korzyści terapeutycznej u ssaka. Jednakże, przeciwciała skierowane przeciw antygenom niepolipeptydowym (takim jak związane z nowotworem antygeny glikolipidowe; patrz patent USA nr 5 091 178) są również brane pod uwagę.
Tam, gdzie antygenem jest polipeptyd, może to być cząsteczka transbłonowa (np. receptor) albo ligand, taki jak czynnik wzrostu. Przykładowe antygeny obejmują cząsteczki takie jak renina; hormon wzrostu, włączając w to ludzki hormon wzrostu i bydlęcy hormon wzrostu; czynnik uwalniający hormon wzrostu; hormon przytarczycy; tyroksyna; lipoproteiny; alfa-1-antytrypsyna; łańcuch A insuliny; łańcuch B insuliny; proinsulina; hormon folikulotropowy; kalcytonina; hormon luteinizujący; glukagon; czynniki krzepnięcia, takie jak czynnik VIIIC, czynnik IX, czynnik tkankowy (TF) i czynnik von Wiłlebranda; czynnik przeciw-krzepnięciu, taki jak Białko C; przedsionkowy czynnik wydalania sodu z moczem; czynnik powierzchniowo czynny płuc; aktywator plazminogenu, taki jak aktywator plazminogenu urokinazowy albo z ludzkiego moczu albo typu tkankowego (t-PA); bombezyna; trombina; krwiotwórczy czynnik wzrostowy; czynnik martwicy nowotworów alfa i beta; enkefalinaza; RANTES (ang. regulated on activation normally T-cell expressed and secreted, regulowany przy aktywacji, normalnie wyrażany i wydzielany przez komórki T); ludzkie makrofagowe białko zapalne (MIP-1-alfa, ang. macrophage inflammatory protein); albumina z surowicy, taka jak ludzka albumin z surowicy; substancja hamująca Mullerian; łańcuch A relaksyny; łańcuch B relaksyny; prorelaksyna; mysi peptyd związany z gonadotropiną; białko bakteryjne, takie jak beta-laktamaza; DNaza; IgE; antygen związany z cytotoksycznymi limfocytami T (CTLA, ang. cytotoxic T-lymphocyte associated antygen), taki jak CTLA-4; inhibina; aktywina; naczyniowy śródbłonkowy czynnik wzrostowy (VEGF, ang. vascular endothelial growth factor); receptory hormonów lub czynników wzrostowych; białko A lub D; czynniki reumatoidalne; czynnik neurotropowy, taki jak czynnik neurotropowy pochodzący z kości (BDNF, ang. bonederived neurotrophic factor), neurotrofina-3, -4, -5 lub -6 (NT-3, NT-4, NT-5 lub NT-6) albo czynnik wzrostu nerwów, taki jak NGF-β; czynnik wzrostowy pochodzący z płytek krwi (PDGF, ang. plateletderived growth factor); fibroblastowy czynnik wzrostowy taki jak aFGF i bFGF; naskórkowy czynnik wzrostowy (EGF); transformujący czynnik wzrostowy (TGF), taki jak TGF-alfa i TGF-beta, włączając w to TGF^1, TGF-2, TGF3, TGF- β4 lub TGF^5; czynnik wzrostowy insulino-podobny I i II (IGF-I i IGF-II); des(1-3)-IGF-I (mózgowy IGF-I), białka wiążące czynnik wzrostowy insulino-podobny; białka CD, takie jak CD3, CD4, CD8, CD19, CD20 i CD25 (podjednostka Tac receptora IL-2); erytropoetyna; czynniki osteoinduktywne; immunotoksyny; białko morfogenetyczne kości (BMP, ang. bone morphogenetic protein); interferony, takie jak interferon -alfa, -beta i -gamma; czynniki stymulujące klonie (CSF), np. M-CSF, GM-CSF i G-CSF; interleukiny (IL), np., IL-1, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9 i IL-10; dysmutaza ponadtlenkowa; receptory komórek T; powierzchniowe białka błonowe; czynnik przyśpieszający rozkład; antygen wirusowy, taki jak na przykład, część otoczki AIDS; białka transportowe; receptory zasiedlania; adresyny; białka regulacyjne; integryny, takie jak CD11a, CD11b, CD11c, CD18 oraz ICAM, VLA-4 lub VCAM; antygen związany z nowotworem, taki jak receptor HER2, HER3 lub HER4; oraz fragmenty dowolnego z wymienionych powyżej polipeptydów.
Przykładowe cząsteczki docelowe dla przeciwciał objętych niniejszym wynalazkiem obejmują markery powierzchniowe albo białka CD, takie jak CD3, CD4, CD8, CD19, CD20, CD22, CD34 i CD40; członków rodziny receptora ErbB, takich jak receptor EGF, receptor HER2, receptor HER3 lub receptor HER4; antygen specyficzny dla komórek macierzystych prostaty (PSCA); cząsteczki adhezji komórkowej, takie jak LFA-1, Mac1, pl50.95, VLA-4, ICAM-1, VCAM, integryna α4/β7 i integryna αν/β3, włączając w to jej podjednostki α lub β (np. przeciwciała anty-CD11a, anty-CD18 lub anty-CD11b); czynniki wzrostowe, takie jak VEGF; czynnik tkankowy (TF, ang. tissue factor); interferon alfa (α-IFN); interleukina, taka jak IL-8; IgE; antygeny grupy krwi; receptor flk2/flt3; receptor otyłości (OB); receptor mpl; CTLA-4; białko C, itd.
Rozpuszczalne antygeny lub ich fragmenty, ewentualnie połączone z innymi cząsteczkami, można zastosować jako immunogeny do wytwarzania przeciwciał. Dla cząsteczek transbłonowych, takich jak receptory, jako immunogen można użyć ich fragmenty (np. zewnątrzkomórkową domenę receptora). Alternatywnie, jako immunogen można użyć komórki wyrażające cząsteczkę transbłonową. Takie komórki mogą pochodzić ze źródła naturalnego (np. nowotworowych linii komórkowych) albo mogą być komórkami, które zostały stransformowane technikami rekombinowania DNA w celu uzyskania ekspresji cząsteczki transbłonowej. Inne antygeny i ich postaci przydatne do wytwarzania przeciwciał będą oczywiste dla specjalistów w tej dziedzinie.
PL 213 948 B1 (ii) Przeciwciała poliklonalne
Przeciwciała poliklonalne korzystnie wzbudza się w zwierzętach poprzez wielokrotne podskórne (sc) albo dootrzewnowe (ip) wstrzyknięcie odpowiedniego antygenu i adiuwanta. Może być przydatne sprzężenie odpowiedniego antygenu z białkiem, które jest immunogenne w gatunkach, które mają być immunizowane, np. hemocyjaniną ze skałoczepa, albuminą z surowicy, wołową tyroglobuliną albo inhibitorem trypsyny z ziaren soi, stosując czynnik bifunkcjonalny albo derywatyzujący, na przykład ester maleimidobenzoylosulfosukcynoimidowy (sprzężenie poprzez reszty cysteinowe), N-hydroksysukcynimid (poprzez reszty lizyowe), glutaraldehyd, bezwodnik bursztynianowy, SOCl2 lub
R1N=C=NR, gdzie R i R1 są różnymi grupami alkilowymi.
Zwierzęta immunizuje się przeciw antygenowi, immunogennym koniugatom albo pochodnym poprzez zmieszanie np. 100 μg lub 5 μg białka albo koniugatu (dla królików i myszy, odpowiednio) z 3 objętościami kompletnego adiuwanta Freunda i wstrzykniecie roztworu doskórne w wielu miejscach. Miesiąc później zwierzętom podaje się dawkę przypominającą wstrzykując doskórnie w wielu miejscach 1/5 do 1/10 wyjściowej ilości peptydu albo koniugatu w kompletnym adiuwancie Freunda. Siedem do 14 dni później zwierzęta skrwawia się i surowice testuje pod kątem miana przeciwciała. Zwierzętom podaje się dawki przypominające aż do osiągnięcia plateau. Korzystne jest, jeżeli zwierzętom podaje się dawkę przypominającą z koniugatem tego samego antygenu, ale sprzężonym z różnymi białkami i/lub poprzez inny czynnik łączący krzyżowo. Koniugaty można również wytwarzać w zrekombinowanych hodowlach komórkowych jako fuzje białkowe. Ponadto, czynniki agregujące, takie jak ałun są odpowiednie do zastosowania do wzmacniania odpowiedzi immunologicznej.
(ii) Przeciwciała monoklonalne
Przeciwciała monoklonalne można wytworzyć stosując metodę hybrydom opisaną po raz pierwszy przez Kohler i wsp., Nature, 256: 495 (1975) albo można wytwarzać metodami rekombinowania DNA (patent USA nr 4 816 567).
W metodzie hybrydomy, mysz albo inne odpowiednie zwierzę będące gospodarzem, takie jak chomik, immunizuje się jak opisano powyżej w celu wzbudzenia limfocytów, które wytwarzają albo są zdolne do wytwarzania przeciwciał wiążących się specyficznie z białkiem zastosowanym do immunizacji. Alternatywnie, limfocyty można immunizować in vitro. Limfocyty można następnie poddać fuzji z komórkami szpiczaka stosując odpowiedni czynnik powodujący fuzję, taki jak glikol polietylenowy, do wytwarzania komórek hybrydomy (Goding, Monoclonal Antybodies: Principles and Practice, str. 59-103 (Academic Press, 1986).
Utworzone w ten sposób komórki hybrydomy wysiewa się i hoduje na odpowiedniej pożywce hodowlanej, która korzystnie zawiera jedną albo większą liczbę substancji, które hamują wzrost i przeżycie nie poddanych fuzji rodzicielskich komórek szpiczaka. Przykładowo, jeśli w rodzicielskim szpiczaku brak jest enzymu fosforybozylotransferazy hipokantyno-guaninowej (HGPRT lub HPRT), pożywka hodowlana dla hybrydom zwykle zawiera hipoksantynę, aminopterynę oraz tymidynę (pożywka HAT), które to substancje zapobiegają wzrostowi komórek z brakiem HGPRT.
Korzystnymi komórkami szpiczaka są takie, które podlegają fuzji wydajnie, utrzymują stabilny poziom wytwarzania przeciwciała przez wybrane komórki wytwarzające przeciwciało i są wrażliwe na pożywkę, taką jak HAT. Wśród nich, korzystnymi liniami komórkowymi szpiczaka są linie mysiego szpiczaka, takie jak te pochodzące z mysich nowotworów MOPC-21 i MPC-11 dostępne z Salk Institute Cell Distribution Center, San Diego, California USA oraz komórki SP-2 lub X63-Ag8-653 dostępne z American Type Culture Collection, Rockville, Maryland USA. Zostały również opisane komórki ludzkiego szpiczaka i linie komórkowe mysio-ludzkiego heretoszpiczaka do wytwarzania ludzkich przeciwciał monoklonalnych (Kozbor, J. Immunol., 133: 3001 (1984) oraz Brodeur i wsp., Monoclonal Antybody Production Techniques and Applications, str. 51-63 (Marcel Dekker, Inc., New York, 1987)).
Pożywki hodowlane, w których hoduje się komórki, testuje się pod kątem wytwarzania przeciwciał monoklonalnych skierowanych wobec antygenu. Korzystne jest, jeżeli specyficzność wiązania przeciwciał monoklonalnych wytwarzanych przez komórki hybrydomy określa się poprzez immunoprecypitację albo test wiązania in vitro, taki jak test radioimmunologiczny (RIA) albo enzymatyczny test immunosorpcyjny (ELISA).
Po zidentyfikowaniu komórek hybrydomy, które wytwarzają przeciwciała o pożądanej specyficzności, powinowactwie i/lub aktywności, klon można subklonować poprzez procedurę ograniczonych rozciehczeń i hodować według standardowych metod (Goding, Monoclonal Antybodies: Principles and
Practice, str. 59-103 (Academic Press, 1986). Odpowiednie pożywki hodowlane do tych celów obejPL 213 948 B1 mują na przykład pożywkę, D-MEM lub pożywkę RPMI-1640. Ponadto, komórki hybrydomy można hodować in vivo w nowotworach puchlinowych u zwierząt.
Przeciwciała monoklonalne wydzielane przez subklony dogodnie jest wydzielać z pożywki hodowlanej, płynów puchlinowych albo surowicy poprzez konwencjonalne procedury oczyszczania przeciwciał, takie jak na przykład chromatografia na białku A-sefarozie, hydroksyloapatycie, elektroforeza w żelu, dializa albo chromatografia powinowactwa.
DNA kodujący przeciwciała monoklonalne można łatwo wyizolować i zsekwencjonować stosując konwencjonalne procedury (np. poprzez zastosowanie sond oligonukleotydowych, które mają zdolność wiązania się specyficznie z genami kodującymi lekkie i ciężkie łańcuchy mysich przeciwciał). Komórki hybrydomy służą jako korzystne źródło takiego DNA. Po wyizolowaniu, DNA można umieszczać w wektorach ekspresyjnych, które transfekuje się następnie do komórek gospodarza, takich jak komórki E. coli, małpie komórki COS, komórki jajnika chomika chińskiego (ang. Chinese Hamster Ovary, CHO) lub komórki szpiczaka, które w innym przypadku nie wytwarzają przeciwciała, w celu otrzymania syntezy przeciwciał monoklonalnych w zrekombinowanych komórkach gospodarza. Artykuły przeglądowe na temat rekombinowanej ekspresji w bakteriach DNA kodującego przeciwciała obejmują Skerra i wsp., Curr. Opinion in Immunol, 5: 256-262 (1993) oraz Pluckthun, Immunol. Revs., 130: 151-188 (1992). Rekombinowana ekspresja przeciwciał jest opisana bardziej szczegółowo poniżej.
W dalszym wykonaniu, przeciwciała monoklonalne albo fragmenty przeciwciał można izolować z przeciwciałowych bibliotek fagowych wytworzonych przy zastosowaniu technik opisanych w McCafferty i wsp., Nature, 348: 552-554 (1990). Clackson i wsp., Nature, 352: 624-628 (1991) oraz Marks i wsp., J. Mol. Biol, 222: 581-597 (1991) opisują izolację przeciwciał mysich i ludzkich, odpowiednio, przy zastosowaniu bibliotek fagowych. Kolejne publikacje opisują wytwarzanie ludzkich przeciwciał o wysokim powinowactwie (rzędu nM) poprzez tasowanie łańcuchów (Marks i wsp., Bio/Technology, 10: 779-783 (1992)), jak również kombinatoryczną infekcję i rekombinację in vivo jako strategię konstruowania bardzo dużych bibliotek fagowych (Waterhouse i wsp., Nuc. Acids. Res., 21: 2265-2266 (1993)). A zatem techniki te stanowią atrakcyjną alternatywę wobec tradycyjnych technik hybrydom monoklonalnych przeciwciał do izolacji przeciwciał monoklonalnych.
DNA można również modyfikować, na przykład poprzez podstawienie sekwencji kodującej domen stałych ludzkiego łańcucha ciężkiego i lekkiego w miejsce homologicznych sekwencji mysich (patent USA nr 4 816 567 oraz Morrison i wsp., Proc. Natl Acad. Sci. USA, 81: 6851 (1984)) albo poprzez połączenie kowalencyjne sekwencji kodujących immunoglobulinę, całych albo części, z sekwencją kodującą polipeptydu innego niż immunoglobulina.
Typowo, takim polipeptydem innym niż immunoglobulina zastępuje się domeny regionu stałego przeciwciała albo zastępuje się zmienne miejsca wiązania antygenu w celu wytworzenia chimerowego dwuwartościowego przeciwciała zawierającego jedno miejsce wiązania antygenu mające specyficzność wobec antygenu i inne miejsce wiążące antygen mające specyficzność wobec odmiennego antygenu.
(iv) Przeciwciała humanizowane i ludzkie
Przeciwciało humanizowane ma wprowadzoną jedną albo większą liczbę reszt aminokwasowych ze źródła innego niż człowiek. Te nie-ludzkie reszty aminokwasowe są często określane jako reszty „zaimportowane”, które są typowo wzięte z „zaimportowanej” domeny zmiennej. Humanizację można zasadniczo przeprowadzić według metody Winter i współpracowników (Jones i wsp., Nature, 321: 522-525 (1986); Riechmann i wsp., Nature, 332: 323-327 (1988); Verhoeyen i wsp., Science, 239: 1534-1536 (1988)), poprzez zastąpienie sekwencji jednego lub więcej CDR gryzoni odpowiadającymi im sekwencjami przeciwciała ludzkiego. A zatem, takimi przeciwciałami „humanizowanymi” są przeciwciała chimerowe (patent USA nr 4 816 567), gdzie zasadniczo mniej niż nienaruszona ludzka domena zmienna została zastąpiona odpowiednią sekwencją z gatunku innego niż człowiek. W praktyce, przeciwciałami humanizowanymi są typowo przeciwciała ludzkie, w których niektóre reszty z regionu hiperzmiennego i możliwe że niektóre reszty FR są zastąpione resztami z analogicznych miejsc w przeciwciałach gryzoni.
Wybór ludzkich domen zmiennych, zarówno lekkiej, jak i ciężkiej, która ma być zastosowana do wytwarzania humanizowanych przeciwciał jest bardzo ważna dla zmniejszenia antygenności. Według tak zwanej metody „najlepszego dopasowania” sekwencje domeny zmiennej przeciwciała gryzonia przeszukuje się wobec całej biblioteki znanych ludzkich sekwencji ludzkiej domeny zmiennej. Ludzka sekwencja, która jest najbliższa tej z gryzoni jest następnie zaakceptowana jako ludzki region zrębowy (FA) dla humanizowanego przeciwciała (Sims i wsp., J. Immunol, 151: 2296 (1993); Chothia i wsp.,
PL 213 948 B1
J. Mol Biol, 196: 901 (1987)). Inne metody stosują konkretny region zrębowy pochodzący z sekwencji najwyższej zgodności wszystkich ludzkich przeciwciał z danej podgrupy łańcuchów lekkich i ciężkich. Ten sam region zrębowy może być zastosowany dla kilku różnych przeciwciał humanizowanych (Carter i wsp., Proc. Natl Acad. Sci. USA, 89: 4285 (1992); Presta i wsp., J. Immunol, 151: 2623 (1993)).
Ważne jest ponadto, żeby przeciwciała były humanizowane z zachowaniem wysokiego powinowactwa do antygenu i innych korzystnych właściwości biologicznych. Aby osiągnąć ten cel według korzystnych metod humanizowane przeciwciała wytwarza się poprzez przeprowadzenie analizy sekwencji rodzicielskich I różnych zaprojektowanych produktów humanizowanych przy użyciu trójwymiarowych modeli sekwencji rodzicielskich i humanizowanych. Trójwymiarowe modele immunoglobulin są powszechnie dostępne i są znane specjalistom w tej dziedzinie. Dostępne są programy komputerowe, które ilustrują i pokazują możliwe trójwymiarowe struktury konformacyjne wybranych kandydatów dla sekwencji immunoglobulin. Badanie tych obrazów umożliwia analizę prawdopodobnej roli reszt w funkcjonowaniu sekwencji immunoglobuliny-kandydata, tj. analizę reszt, które wpływają na zdolność immunoglobuliny- kandydata do wiązania się ze swoim antygen. W ten sposób można wybrać reszty FR i połączyć sekwencje biorcy i zaimportowane, uzyskując pożądane właściwości przeciwciała, takie jak zwiększone powinowactwo do docelowych antygenu(ów). Generalnie, reszty regionu CDR mają bezpośredni i najbardziej znaczący wpływ na wiązanie antygenu.
Alternatywnie, możliwe jest obecnie wytwarzanie transgenicznych zwierząt (np. myszy), które po immunizacji są zdolne do wytwarzania pełnego repertuaru ludzkich przeciwciał w nieobecności wytwarzania endogennych immunoglobulin. Przykładowo, opisano, że homozygotyczna delecja regionu łącznikowego łańcucha ciężkiego (JH) przeciwciała w mutancie chimerowym i w linii płciowej myszy prowadzi do całkowitego zahamowania wytwarzania endogennych przeciwciał.
Przeniesienie ludzkiego układu genów z ludzkiej linii płciowej do takiego mutanta w linii płciowej myszy będzie prowadziła do wytwarzania ludzkich przeciwciał po prowokacji antygenem. Patrz np. Jakobovits i wsp., Proc. Natl Acad. Sci USA, 90: 2551 (1993); Jakobovits i wsp., Nature, 362: 255-258 (1993); Bruggermann i wsp., Year in Immuno., 7: 33 (1993) oraz Duchosal i wsp. Nature 355: 258 (1992). Ludzkie przeciwciała mogą również pochodzić z bibliotek z prezentacją na fagach (Hoogenboom i wsp., J. Mol. Biol., 227: 381 (1991); Marks i wsp., J. Mol. Biol., 222: 581-597 (1991); Vaughan I wsp. Nature Biotech 14: 309 (1996)).
(v) Przeciwciała multispecyficzne
Przeciwciała multispecyficzne mają specyficzności wiązania wobec co najmniej dwóch różnych antygenów. Jakkolwiek takie cząsteczki normalnie będą wiązać jedynie dwa antygeny (tj. przeciwciała bispecyficzne, BsAbs), przeciwciała z dodatkowymi specyficznościami, takie jak przeciwciała trispecyficzne, są objęte przez stosowane tu wyrażenie. Przykłady BsAbs obejmują te, które mają jedno ramię skierowane wobec antygenowi komórki nowotworowej, a drugie ramię skierowane wobec cząsteczce
HER2 będącej cytotoksycznym włącznikiem, takie jak anty-FcYRI/anty-CD15, anty-pl85 /FcyRIII (CD16), anty-CD3/anty-rakowa komórka B (1D10), anty-CD3/anty-pl85HER2, anty-CD3/anty-p97, anty-CD3/-anty-rak komórek nerkowych, anty-CD3/anty-OVCAR-3, anty-CD3/L-D1 (anty-rak okrężnicy), anty-CD3/anty-analog hormonu stymulującego melanocyty, anty-receptor EGF/anty-CD3, anty-CD3-antyCAMA1, anty-CD3/anty-CD19, anty-CD3/MoV18, anty-cząsteczka adhezji komórek nerwowych (NCAM)/anty-CD3, anty-białko wiążące folian (FBP)/anty-CD3, anty-antygen związany z uogólnionym rakiem (AMOC-31)/anty-CD3; BsAbs z jednym ramieniem, które wiąże się specyficznie z antygenem nowotworowym i jednym ramieniem, które wiąże się z toksyną, takie jak anty-saporyna/anty-Id-1, anty-CD22/anty-saporyna, anty-CD7/anty-saporyna, anty-CD38/anty-saporyna, anty-CEA/anty-łańcuch A rycyny, anty-interferon-α (FN^/anty-idiotyp hybrydomy, anty-CEA/anty-alkaloid winka; BsAbs dla enzymów - konwertaz aktywujących proleki, takie jak anty-CD30/anty-alkaliczna fosfataza (która katalizuje przekształcenie proleku - fosforanu mitomycyny do alkoholu mitomycyny); BsAbs, które można użyć jako czynniki do lizowania skrzepów, takie jak anty-fibryna/anty-tkankowy aktywator plazminogenu (tPA), anty-fibryna/anty-aktywator plazminogenu typu urokinazy (uPA); BsAbs dla kierowania kompleksów immunologicznych do komórkowych receptorów powierzchniowych, takie jak anty-likporoteina o niskiej gęstości (LDL)/anty-receptor Fc (np. FcyRI, FcyRII lub FcyRIII); BsAbs do zastosowania w terapii chorób infekcyjnych, takie jak anty-CD3/anty-wirus opryszczki pospolitej (HSV), anty kompleks receptora komórek T:CD3/anty-wirus grypy, anty-FcYR/anty-HIV; BsAbs dla wykrywania nowotworu in vitro lub in vivo, takie jak anty-CEA/anty-EOTUBE, anty-CEA/anty-DPTA, anty-p185HER2/anty-hapten; BsAbs jako adiuwanty szczepionkowe oraz BsAbs jako narzędzia diagnostyczne, takie jak
PL 213 948 B1 anty-królicza IgG/anty-ferrytyna, anty-peroksydaza chrzanowa (HRP)/anty-hormon, anty-somatostatyna/anty-substancja P, anty-HRP/anty-FITC, anty-CEA/anty-e-galaktozydaza.
Przykłady przeciwciał trispecicznych obejmują anty-CD3/anty-CD4/anty-CD37, anty-CD3/anty-CD5/anty-CD37 i anty-CD3/anty-CD8/anty-CD37.
Przeciwciała bispecyficzne można wytwarzać jako przeciwciała pełnej długości albo fragmenty przeciwciał (np. przeciwciała bispecyficzne F(ab')2). Przegląd przeciwciał bispecyficznych jest w Segal i wsp. J. Immunol. Methods 248: 1-6 (2001).
Sposoby wytwarzania przeciwciał bispecyficznych są znane w tej dziedzinie. Tradycyjne wytwarzanie bispecyficznych przeciwciał pełnej długości opiera się na jednoczesnej ekspresji dwóch lekkich i ciężkich łańcuchów immunoglobuliny, gdzie te dwa łańcuchy mają różne specyficzności (Miilstein i wsp., Nature, 305: 537-539 (1983)). Dzięki losowemu doborowi łańcuchów lekkich i ciężkich, hybrydomy te (kwadromy) wytwarzają potencjalnie mieszaninę 10 różnych cząsteczek przeciwciał, z których tylko jedna ma prawidłową strukturę bispecyficzną. Oczyszczanie prawidłowej cząsteczki, które zwykle wykonuje się poprzez etapy oczyszczania przez powinowactwo jest raczej kłopotliwe, a wydajność produktów niska. Podobne procedury są ujawnione w WO 93/08829 i Traunecker i wsp., EMBO J., 10: 3655-3659 (1991).
W różnych podejściach domeny zmienne przeciwciała z pożądanymi specyficznościami wiązania (miejsca połączenia przeciwciało-antygen) łączy się z sekwencjami domen stałych immunoglobuliny, zawierającymi co najmniej część regionu zawiasowego, CH2 i CH3. Korzystne jest posiadanie pierwszego regionu stałego łańcucha ciężkiego (CH1) zawierającego miejsce niezbędne do wiązania łańcucha lekkiego, obecnego w co najmniej jednej z fuzji. DNA kodujący fuzję łańcucha ciężkiego immunoglobuliny i jeżeli to pożądane, łańcuch lekki immunoglobuliny, wstawia się do odrębnych wektorów ekspresyjnych i przeprowadza kotransfekcję do odpowiedniego organizmu gospodarza. To daje dużą elastyczność w dobieraniu wzajemnych proporcji trzech fragmentów polipeptydowych w wykonaniach, tam gdzie stosowanie nierównych proporcji trzech fragmentów polipeptydowych przy konstrukcji dostarcza optymalnych wydajności. Możliwe jest jednakże wstawienie sekwencji kodujących dla dwóch albo wszystkich trzech łańcuchów polipeptydowych do jednego wektora ekspresyjnego, kiedy ekspresja co najmniej dwóch łańcuchów polipeptydowych w równych proporcjach prowadzi do wysokich wydajności lub kiedy stosunki nie mają szczególnego znaczenia.
W korzystnym wykonaniu tego podejścia przeciwciała składają się z hybrydowego łańcucha ciężkiego immunoglobuliny z pierwszą specyficznością wiązania w jednym ramieniu i hybrydowej pary łańcuchów lekkich immunoglobuliny (dostarczającego drugiej specyficzności wiązania) w drugim ramieniu. Stwierdzono, że ta niesymetryczna struktura ułatwia rozdzielenie pożądanych bispecyficznych składników od niepożądanej kombinacji łańcuchów immunoglobulinowych, ponieważ obecność łańcucha lekkiego immunoglobuliny tylko w jedynej połowie bispecyficznej cząsteczki dostarcza łatwego sposobu rozdziału. Podejście to jest ujawnione w WO 94/04690. Dla dalszych szczegółów wytwarzania bispecyficznych przeciwciał, patrz na przykład Suresh i wsp., Methods In Enzymology, 121: 210 (1986). Według innego podejścia opisanego w patencie W096/27011, miejsce styku pomiędzy parą cząsteczek przeciwciała można poddać manipulacjom tak, aby zmaksymalizować udział procentowy heterodimerów, które odzyskuje się z hodowli zrekombinowanych komórek. Korzystne miejsce styku obejmuje co najmniej część domeny stałej CH3 przeciwciała. W tej metodzie, jeden albo więcej małych bocznych łańcuchów aminokwasowych z miejsca styku w pierwszej cząsteczce przeciwciała zastępuje się dłuższymi łańcuchami bocznymi (np. tyrozyną albo tryptofanem). Kompensujące „zagłębienia” o identycznych albo podobnych rozmiarach co duży łańcuch(y) boczny(e) wytwarza się w miejscu styku w drugiej cząsteczce przeciwciała poprzez zastąpienie dużego aminokwasowego łańcucha bocznego mniejszym (np. alaniną albo treoniną). Dostarcza to mechanizmu dla zwiększenia wydajności heterodimeru w stosunku do niepożądanych produktów końcowych, takich jak homodimery.
Przeciwciała bispecyficzne obejmują przeciwciała połączone krzyżowo lub „heterokoniugaty”. Przykładowo, jedno z przeciwciał w heterokoniugacie może być połączone z awidyną, a inne z biotyną. Zaproponowano, żeby takie przeciwciała wykorzystać do kierowania komórek układu immunologicznego do niechcianych komórek (patent USA nr 4 676 980) i do leczenia zakażenia HIV (WO 91/00360, WO 92/20373 i EP 03 089). Przeciwciała-immunokoniugaty można wytwarzać stosując dowolne dogodne metody łączenia krzyżowego. Odpowiednie czynniki do łączenia krzyżowego są dobrze znane w tej dziedzinie i są ujawnione w patencie USA nr 4 676 980, razem z wieloma innymi technikami łączenia krzyżowego.
PL 213 948 B1
Bierze się również pod uwagę możliwość zastosowania przeciwciał z więcej niż dwiema wartościowościami. Przykładowo, można wytworzyć przeciwciała trój specyficzne. Tutt i wsp., J. Immunol. 147: 60 (1991).
(vi) Przeciwciała wielowartościowe
Przeciwciało wielowartościowe może być internalizowane (albo katabolizowane) szybciej niż przeciwciało dwuwartościowe przez komórkę wyrażającą antygen, do którego wiążą się przeciwciała. Przeciwciałami według wynalazku mogą być przeciwciała wielowartościowe (które są innymi niż klasy IgM) z trzema albo większą liczbą miejsc wiązania (np. przeciwciała czterowartościowe), które można łatwo wytworzyć poprzez ekspresję zrekombinowanych kwasów nukleinowych kodujących łańcuchy polipeptydowe przeciwciała. Przeciwciało wielowartościowe może zawierać domenę dimeryzacji i trzy lub więcej miejsc wiązania antygenu. Korzystna domena dimeryzacji zawiera (albo składa się z) region Fc albo region zawiasowy. W tym wykonaniu przeciwciało będzie zawierało region Fc i trzy lub więcej miejsc wiązania antygenu po stronie amino-końcowej regionu Fc. Korzystne przeciwciało wielowartościowe tu ujawnione zawiera (albo składa się z) trzech do około ośmiu, ale korzystnie czterech miejsc wiązania antygenu. Przeciwciało wielowartościowe zawiera co najmniej jeden łańcuch polipeptydowy (a korzystnie dwa łańcuchy polipeptydowe) gdzie łańcuch(y) polipeptydowy(e) zawiera dwie lub więcej domen zmiennych. Przykładowo, łańcuch(y) polipeptydowy (e) może zawierać VD1-(X1)n-VD2-(X2)n-Fc, gdzie VD1 jest pierwszą domeną zmienną, VD2 jest drugą domeną zmienną, Fc jest jednym łańcuchem polipeptydowym regionu Fc, X1 i X2 reprezentują aminokwas albo polipeptyd, a n to 0 lub 1. Przykładowo, łańcuch(y) polipeptydowy(e) może zawierać VH-CH1-elastyczny łącznik-VH-CH1-łańcuch regionu Fc albo VH-CH1-VH-CH1-łańcuch regionu Fc. Korzystne jest, jeżeli przeciwciało wielowartościowe tu rozważane zawiera ponadto co najmniej dwa (a korzystnie cztery) polipeptydy domen zmiennych łańcucha lekkiego. Przeciwciało wielowartościowe tu rozważane może zawierać na przykład od około dwóch do około ośmiu polipeptydów domen zmiennych łańcucha lekkiego. Rozważane tu polipeptydy domen zmiennych łańcucha lekkiego zawierają domenę zmiennej łańcucha lekkiego i ewentualnie zawierają ponadto domenę CL. Przeciwciała wielowartościowe są opisane w WO 01/00238 i WO 00/44788.
(vii) Przeciwciała z rozwiniętym powinowactwem
Rozważane tu przeciwciało może być przeciwciałem z rozwiniętym powinowactwem zawierającym podstawienie(a) jednego albo większej liczby reszt regionu hiperzmiennego przeciwciała rodzicielskiego (np. przeciwciała humanizowanego albo ludzkiego). Generalnie, otrzymany w rezultacie wariant(y) wybierane do dalszych badań będą miały polepszone właściwości biologiczne w stosunku do przeciwciał rodzicielskich, z których zostały wytworzone. Dogodny sposób wytwarzania takich wariantów z podstawieniami obejmuje rozwijanie powinowactwa przy zastosowaniu prezentacji na fagach. W skrócie, kilka miejsc w regionach hiperzmiennych (np. 6-7 miejsc) mutuje się w celu wytworzenia wszystkich możliwych podstawień aminokwasowych w każdym miejscu. Wytworzone w ten sposób warianty przeciwciała prezentuje się w sposób monowartościowy na cząstkach fagów nitkowatych jako fuzje z produktem genu III M13 zapakowanym w każdej cząstce. Warianty prezentowane na fagach przeszukuje się następnie pod kątem aktywności biologicznej (np. powinowactwa wiązania) jak tu ujawniono. W celu zidentyfikowania miejsc regionu zmiennego będących kandydatami na modyfikację, przeprowadza się alaninową mutagenezę skaningową w celu zidentyfikowania reszt regionu biorących znaczący udział w wiązaniu antygenu. Alternatywnie albo dodatkowo, może być korzystna analiza struktury krystalicznej kompleksu antygen-przeciwciało w celu zidentyfikowania miejsc styku pomiędzy przeciwciałem i jego antygenem. Takie reszty na styku lub sąsiadujące są kandydatami na podstawienia zgodnie z omówionymi tu technikami. Po wytworzeniu takich wariantów, zestawy wariantów poddaje się przeszukiwaniu jak tu opisano i przeciwciała o lepszych właściwościach w jednym albo większej liczbie odpowiednich testów można wybrać do dalszych badań, (vii) Immunokoniugaty
Wynalazek dotyczy również terapii immunokoniugatami zawierającymi glikoproteinę połączoną z czynnikiem przeciwnowotworowym, takim jak czynnik cytotoksyczny lub czynnik hamujący wzrost.
Czynniki chemioterapeutyczne przydatne do wytwarzania takich immunokoniugatów zostały opisane powyżej.
Koniugaty przeciwciała i jednej albo większej liczby małych cząsteczek toksyn, takich jak kalicheamycyna, maitansynoidy, trichoten i CC1065 oraz pochodne tych toksyn, które mają aktywność toksyny są tu również brane pod uwagę.
PL 213 948 B1
W jednym z korzystnych wykonań wynalazku, glikoproteina według wynalazku jest połączona z jedną albo większą liczbą cząsteczek maitansynoidu.
Koniugaty glikoproteina-maitansynoid można wytwarzać poprzez połączenie chemiczne glikoproteiny (np. przeciwciała) z cząsteczką maitansynoidu bez znaczącego zmniejszenia aktywności biologicznej zarówno glikoproteiny, jak cząsteczki maitansynoidu. Wykazano skuteczność około 3-4 cząsteczek maitansynoidu połączonych z cząsteczką przeciwciała w zwiększaniu cytotoksyczności komórek docelowych bez negatywnego wpływania na funkcję albo rozpuszczalność przeciwciała, jakkolwiek można się spodziewać, że nawet jedna cząsteczka toksyny/przeciwciało będzie zwiększać cytotoksyczność w porównaniu z zastosowaniem nagiego przeciwciała. Maitansynoidy są dobrze znane w tej dziedzinie i mogą być syntetyzowane znanymi technikami albo izolowane z naturalnych źródeł. Przydatne maitansynoidy są ujawnione na przykład w patencie USA nr 5 208 020. Korzystnymi maitansynoidami są maitansynol i analogi maitansynolu zmodyfikowane w pierścieniu aromatycznym albo innych pozycjach cząsteczki maitansynolu, takie jak rozmaite estry maitansynolu. Istnieje wiele grup łączących znanych w dziedzinie wytwarzania koniugatów przeciwciało-maitansynoid, włączając w to między innymi te ujawnione w patencie USA 5208020 lub patencie EP nr 0 425 235 B1 oraz Chari i wsp., Cancer Research 52: 127-131 (1992). Grupy łączące obejmują grupy dwusiarczkowe, grupy tioetereowe, grupy kwasolabilne, grupy fotolabilne, grupy rozkładane przez peptydazy albo grupy rozkładane przez esterazy jak ujawniono w wymienionych powyżej patentach, przy czym korzystne są grupy dwusiarczkowe i tioeterowe. Koniugaty przeciwciała i maitansynoidu można wytwarzać przy użyciu rozmaitych bifunkcjonalnych czynników łączących białka, takich jak N- sukcynimidylo-3-(2-pirydylotio)propionian (SPDP), sukcynimidylo-4-(N-maleimidometylo)cykloheksano-1-karboksylan, iminotiolan (IT), bifunkcjonlne pochodne imidoesterów (takie jak dimetyloadipimidan HCl), aktywne estry (takie jak disukinimidylosuberan), aldehydy (takie jak glutareldehyd), związki bis-azydowe (takie jak bis(p-azydobenzoylo) heksanodiamina), pochodne bis-diazoniowe (takie jak bis-(p-diazoniumbenzoylo)etylenodiamino), diizocyjaniany (takie jak tolieno 2,6-diizocyjanian) oraz bis-aktywne związki fluoru (takie jak 1,5-difluoro-2,4-dinitrobenzen).
Szczególnie korzystnymi czynnikami łączącymi dla dostarczania wiązań dwusiarczkowych są N-sukcynimidylo-3-(2-pirydylotio)propionian (SPDP) (Carlsson i wsp., Biochem. J. 173: 723-737 [1978]) i N-sukcynimidylo-4-(2-pirydylotio)pentanian (SPP). Łącznik może być przyłączony do cząsteczki maitansynoidu w różnych pozycjach, w zależności od typu połączenia. Przykładowo, wiązanie estrowe może być utworzone w pozycji C-3 mającej grypę hydroksylową, w pozycji C-14 zmodyfikowanej hyrdoksymetylem, w pozycji C-15 zmodyfikowanej grupą hydroksylową oraz pozycji C-20 mającej grupę hydroksylową przy zastosowaniu konwencjonalnych technik łączenia. W korzystnym wykonaniu, połączenie jest tworzone w pozycji C-3 maitansynolu albo analogu maitansynolu.
Inny immunokoniugat będący przedmiotem zainteresowania stanowi glikoproteina połączona z jedną albo większą liczbą cząsteczek kalicheamycyny. Rodzina antybiotyków kalicheamycynynowych ma zdolność wytwarzania dwuniciowych pęknięć w DNA przy sub-pikomolowych stężeniach. Po wytwarzanie koniugatów z rodziny kalicheamycyny patrz patenty USA nr nr 5 712 374, 5 714 586, 5 739 116, 5 767 285, 5 770 701, 5 770 710, 5 773 001, 5 877 296 (wszystkie dla American Cyanamid Company). Analogi strukturalne kalicheamycyny, które można zastosować obejmują między innymi γ1 1, α21, α31, N-acetylo-γ-ι1, PSAG i θ1 1 (Hinman i wsp. Cancer Research 53: 3336-3342 (1993) oraz Lode i wsp. Cancer Research 58: 2925-2928 (1998)) i wspomniane powyżej patenty USA dla American Cyanamid Company. Innym lekiem przeciwnowotworowym, z którym glikoproteina może być połączona to QFA, który jest antyfolianem. Zarówno kalicheamycyna, jak i QFA mają wewnątrzkomórkowe miejsce działania i nie przechodzą łatwo przez błonę plazmatyczną. A zatem pobieranie przez komórki tych czynników poprzez internalizację za pośrednictwem przeciwciała znacznie zwiększa ich efekty cytotoksyczne.
Inne czynniki przeciwnowotworowe, które można łączyć z glikoproteinami według wynalazku obejmują BCNU, streptozoicynę, winkrystynę i 5-fluorouracyl, rodzinę czynników znanych wspólnie jako kompleks LL-E33288 opisany w patentach USA nr 5 053 394, nr 5 770 710, jak również esperamycyny (patent USA nr 5 877 296).
Aktywne enzymatycznie toksyny i ich fragmenty, które można zastosować obejmują łańcuch A błonicy, niewiążące się aktywne fragmenty toksyny błonicy, łańcuch A egzotoksyny (z Pseudomonas aeruginosa), łańcuch A rycyny, łańcuch A abryny, łańcuch A modecyny, alfa-sarcynę, białka Aleurites fordii, białka dlantyny, białka Phytolaca americana (PAPI, PAPII i PAP-S), inhibitor Momordica charan42
PL 213 948 B1 tya, kurcynę, krotynę, inhibitor Sapaonaria officinalis, żeloninę, mitożelinę, restriktocynę, fenomycynę, enomycynę oraz trikoteceny. Patrz, na przykład, WO 93/21232 opublikowany 28 października, 1993.
Niniejszy wynalazek bierze ponadto pod uwagę immunokoniugaty utworzone pomiędzy glikoproteiną i związkiem o aktywności nukleolitycznej (np. rybonukleazą albo nukleazą DNA, taką jak deoksyrybonukleaza; DNaza).
Do wybiórczego niszczenia nowotworu, przeciwciało może zawierać wysoce radioaktywny atom. Rozmaite izotopy radioaktywne są dostępne do wytwarzania radiokoniugatów przeciwciał. Przykłady obejmują At211, I131, I125, Y90, Re186, Re188, Sm153, Bi212, P32 oraz radioaktywne izotopy Lu. Kiedy koniugat jest używany do diagnozy, może on zawierać atom radioaktywny do badań scyntygraficznych, na przykład tc99m lub I123, albo znacznik spinowy do obrazowania przy zastosowaniu jądrowego rezonansu magnetycznego (NMR, od ang. nuclear magnetic resonance) (znanego również jako obrazowanie rezonansem magnetycznym, ang. magnetic resonance imaging, mri) taki jak znowu jod-123, jod-131, ind-111, fluor-19, węgiel-13, azot-15, tlen-17, gadolin, mangan lub żelazo.
Znaczniki radioaktywne i inne znaczniki mogą być włączone do koniugatu w różny sposób. Przykładowo, peptyd może być biosyntetyzowany albo może być syntetyzowany poprzez chemiczną syntezę aminokwasu przy zastosowaniu odpowiednich prekursorów aminokwasów, zawierających na przykład fluor-19 w miejsce tlenu. Znaczniki, takie jak tc99m lub I123, Re180, Re188 oraz In111 mogą być przyłączone poprzez resztę cysteinową w peptydzie. Itr-90 może być przyłączony poprzez resztę lizynową. Metodę IODOGEN (Fraker i wsp. Biochem. Biophys. Res. Commun. 80: 49-57 (1978) można zastosować do włączenia jodu-123. „Monoclonal Antibodies in Immunoscintigraphy” (Chatal, CRC Press 1989) opisuje szczegółowo inne metody.
Koniugaty glikoproteiny i czynnika cytotoksycznego można wytwarzać przy użyciu rozmaitych bifunkcjonalnych czynników łączących z białkami, takich jak N-sukcynimidylo-3-(2-pirydylotio)propionian (SPDP), sukcynimidylo-4-(N-maleimidometylo)cykloheksano-1-karboksylan, iminotiolan (IT), bifunkcjonlne pochodne imidoesterów (takie jak dimetyloadipimidan HCl), aktywne estry (takie jak disukcymidylosuberan), aldehydy (takie jak glutareldehyd), związki bis-azydowe (takie jak bis(p-azydobenzoylo) heksanodiamina), pochodne bis-diazoniowe (takie jak bis-(p-diazoniumbenzoylo)etylenodiamina), diizocyjaniany (takie jak tolleno-2,6-diizocyjanian) oraz bis-aktywne związki fluoru (takie jak 1,5-difluoro-2,4-dinitrobenzen). Na przykład, immunotoksynę rycynową można wytworzyć jak opisano w Vitetta i wsp. Science 238: 1098 (1987). Wyznakowany węglem-14 kwas 1-izotiocyjanatobenzylo-3-metylodietylenotriaminopentaoctowy (MX-DTPA) jest przykładowym czynnikiem chelatującym do przyłączania radionukleotydu do przeciwciała. Patrz WO 94/11026. Łącznik może być „łącznikiem podatnym na cięcie” ułatwiającym uwolnienie leku cytotoksycznego w komórce. Przykładowo można zastosować łącznik nietrwały w kwasach, łącznik wrażliwy na peptydazę, łącznik dimetylowy lub łącznik zawierający disiarczek (Chari i wsp. Cancer Research 52: 127- 131 (1992), patent USA nr 5 208 020).
Alternatywnie, można wytworzyć fuzję białkową fest zawierającą glikoproteinę i czynnik cytotoksyczny, np. poprzez techniki rekombinowania DNA albo syntezę peptydów. Odcinek DNA może zawierać odpowiednie regiony kodujące dwie części koniugatu bądź sąsiadujące ze sobą bądź oddzielone przez region kodujący peptydowy łącznik, który nie niszczy pożądanych właściwości koniugatu.
W jeszcze innym wykonaniu, przeciwciało można połączyć z „receptorem” (takim jak streptawidyna) do zastosowania we wstępnym docieraniu do nowotworu, gdzie koniugat receptor-przeciwciało podaje się pacjentowi, po czym usuwa się z układu krążenia niezwiązany koniugat przy zastosowaniu czynnika usuwającego, a następnie podaje „ligand” (np. awidynę), który jest połączony z czynnikiem cytotoksycznym (np. radionukleotydem).
(ix) Zależne od przeciwciała leczenie prolekiem za pośrednictwem enzymu (ADEPT, od ang. Antybody Dependent Enzyme Mediated Prodrug Therapy)
Przeciwciała według niniejszego wynalazku można również użyć w ADEPT poprzez połączenie przeciwciała z aktywującym prolek enzymem, który przekształca prolek (np. peptydylowy czynnik chemioterapeutyczny, patrz WO 81/01145) w aktywny lek przeciwnowotworowy. Patrz na przykład WO 88/07378 i patent USA nr 4 975 278.
Składnik enzymatyczny immunokoniugatu przydatny w ADEPT obejmuje dowolny enzym zdolny do działania na prolek w taki sposób, że przekształca go w bardziej aktywną, cytotoksyczną postać.
Enzymy, które są użyteczne w tej metodzie obejmują między innymi alkaliczną fosfatazę przydatną do przekształcania proleków zawierających fosforan w wolne leki; deaminazę cytozynową przydatną do przekształcania nietoksyczną 5-fluorocytozynę w lek przeciwnowotworowy, 5-fluorouracyl;
PL 213 948 B1 proteazy, takie jak proteaza Serratia, termolizyna, subtilizyna, karboksypeptydazy i katepsyny (takie jak katepsyny B i L), które są przydatne do przekształcania proleków zawierających peptyd w wolne leki; D-alanylokarboksypeptydazy, przydatne do przekształcania proleków, które zawierają podstawniki D-aminokwasowe; enzymy trawiące węglowodan, takie jak beta-galaktozydaza i neuraminidaza przydatne do przekształcania proleków glokozylowanych w wolne leki; betalaktamaza przydatna do przekształcania pochodnych beta-laktamowych leków w wolne leki oraz amidazy penicyliny, takie jak amidaza penicyliny V, amidaza penicyliny V, przydatne do przekształcania w wolne leki pochodnych leków ze przyłączonymi do azotu w aminie grupami fenoksyacetylowymi lub fenyloacetylowymi, odpowiednio. Alternatywnie, przeciwciała z aktywnością enzymatyczną, znane również jako „abzymy” można zastosować do przekształcania proleków według wynalazku w wolne aktywne leki (patrz, np., Massey, Nature 328: 457-458 (1987)). Koniugaty przeciwciało-abzym można wytworzyć jak tu popisano dla dostarczania abzymu do populacji komórek nowotworowych.
Enzymy według tego wynalazku mogą być kowalencyjnie łączone z przeciwciałami technikami dobrze znanymi w tej dziedzinie, takimi jak zastosowanie dyskutowanych powyżej heterobifunkcjonalnych odczynników łączących krzyżowo. Alternatywnie, można skonstruować fuzje białkowe zawierające co najmniej jeden region wiążący antygen przeciwciała według wynalazku połączony z co najmniej funkcjonalnie aktywną częścią enzymu według wynalazku przy zastosowaniu technik rekombinowania DNA dobrze znanych w tej dziedzinie (patrz, np. Neuberger i wsp., Nature, 312: 604608 (1984).
(x) Inne modyfikacje przeciwciał
Brane są tu pod uwagę inne modyfikacje glikoproteiny. Przykładowo, glikoproteina może być połączona z rozmaitymi niebiałkowymi polimerami, np. glikolem polietylenowym, glikolem polipropylenowym, polioksyalkilenami lub kopolimerami glikolu polietylenowego lub glikolu polipropylenowego. Przeciwciało może być również zamknięte w mikrokapsułkach wytworzonych na przykład technikami koacerwacji albo poprzez polimeryzację międzyfazową (na przykład mikrokapsułkach hydroksymetylocelulozowych lub żelatynowych i mikrokapsułkach poli(metylometacylanowych), odpowiednio), w koloidalnych systemach dostarczania leków (na przykład, liposomach, mikrokulkach albuminowych, mikroemulsjach, nanocząstkach i nanokapsułkach) albo w makroemulsjach. Takie techniki są ujawnione w Remington's Pharmaceutical Sciences, wyd. 16, Oslo, A., Wyd., (1980).
Ujawnione tu glikoproteiny mogą również być wytwarzane jako immunoliposomy. „Liposom” to mały pęcherzyk złożony z różnego rodzaju lipidów, fosfolipidów i/lub związków powierzchniowoczynnych, które są przydatne do dostarczania leku ssakowi. Składniki liposomu są zazwyczaj zorganizowane w postaci podwójnej warstwy, podobnie jak przy organizacji lipidów w błonach biologicznych. Liposomy zawierające przeciwciało wytwarza się metodami znanymi w tej dziedzinie, takimi jak opisane w Epstein i wsp., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 82: 3688 (1985); Hwang i wsp., Proc. Natl Acad. Sci. USA, 77: 4030 (1980); pat. USA nr 4 485 045 i 4 544 545 oraz WO 97/38731 opublikowany 23 października, 1997. Liposomy o zwiększonym czasie krążenia są ujawnione w patencie USA nr 5 013 556.
Szczególnie przydatne liposomy można wytworzyć przy zastosowaniu metody odparowania z odwróconą fazą z użyciem kompozycji lipidowej zawierającej fosfatydylcholinę, cholesterol i pochodne PEG fosfatydyloetanolaminy (PEG-PE). Liposomy przetłacza się przez filtry o określonych rozmiarach porów w celu uzyskania liposomów o pożądanej średnicy. Fragmenty Fab' przeciwciała według niniejszego wynalazku można łączyć z liposomami jak opisano w Martin i wsp. J. Biol. Chem. 257: 286-288 (1982) poprzez reakcję wymiany dwusiarczkowej. W liposomie fakultatywnie zawarty jest czynnik chemioterapeutyczny. Patrz Gabizon i wsp. J. National Cancer Inst. 81 (19) 1484 (1989).
(xi) Przykładowe przeciwciała
Korzystne przeciwciała w zakresie niniejszego wynalazku obejmują te zawierające sekwencje aminokwasowe następujących przeciwciał:
przeciwciał anty-HER2, włączając w to przeciwciała zawierające regiony zmienne łańcuchów ciężkich i lekkich huMAb 4D5-8 (Carter i wsp., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 89: 4285-4289 (1992), patent USA nr 5 725 856);
przeciwciał anty-CD20, takich jak chimerowe anty-CD20 „C2B8”, jak w patencie USA nr 5 736 137 (RITUXAN®), chimerowy lub humanizowany wariant przeciwciała 2H7, jak w patencie USA nr 5 721 108 B1 lub Tositumomab (BEXXAR®);
anty-IL-8 (St John i wsp., Chest, 103:932 (1993) i międzynarodowa publikacja nr WO 95/23865);
przeciwciał anty-VEGF, włączając w to przeciwciała anty-VEGF humanizowane i/lub z rozwiniętym powinowactwem, takie jak humanizowane przeciwciało anty-VEGF huA4.6.1 AVASTIN™ (Kim
PL 213 948 B1 i wsp., Growth Factors, 7: 53-64 (1992), międzynarodowa publikacja nr WO 96/30046 oraz WO 98/45331, opublikowane 15 października, 1998); przeciwciał anty-PSCA (W001/40309);
przeciwciał anty-CD40, włączając w to S2C6 i ich humanizowane warianty (WO 00/7 5348); anty-CD11a (patent USA nr 5 622 700, WO 98/23761, Steppe i wsp., Transplant Intl. 4: 3-7 (1991) oraz Hourmant i wsp., Transplantation 58: 377-380 (1994));
anty-IgE (Presta i wsp., J. Immunol. 151: 2623-2632 (1993) i międzynarodowa publikacja nr WO
95/19181; patent USA nr 5 714 338, wydany 3 lutego, 1998 lub patent USA nr 5 091 313, wydany 25 lutego, 1992, WO 93/04173 opublikowane 4 marca, 1993 lub WO 99/01556 opublikowane 14 stycznia, 1999, patent USA nr 5714338);
anty-CD18 (patent USA nr 5 622 700, wydany 22 kwietnia, 1997, albo jak w WO 97/26912, opublikowane 31 lipca, 1997); przeciwciała anty-receptor Apo-2 (WO 98/51793 opublikowane 19 listopada, 1998);
przeciwciał anty-TNF-α, włączając w to cA2 (REMICADE®), CDP571 i MAK-195 (patrz patent USA nr 5 672 347 wydany 30 września, 1997, Lorenz i wsp. J. Immunol., 156 (4): 1646-1653 (1996) oraz Dhainaut i wsp. Crit. Care Med. 23 (9):1461-1469 (1995));
anty-czynnik tkankowy (TF, od ang. Tissue Factor) (patent europejski nr 0 420 937 B1 przyznany 9 listopada, 1994);
anty-ludzka integryna α4-β7 (WO 98/06248 opublikowane 19 lutego, 1998);
anty-EGFR (chimerowe lub humanizowane przeciwciało 225, jak w WO 96/40210 opublikowanym 19 grudnia, 1996);
przeciwciał anty-CD3, takich jak OKT3 (patent USA nr 4 515 893 wydany 7 maja, 1985); przeciwciał anty-CD25 lub anty-tac, takich jak CH1-621 (SIMULECT®) i (ΖΕΝΑΡΑΧ®) (patrz patent USA nr 5 693 762 wydany 2 grudnia, 1997);
przeciwciał anty-CD4, takich jak przeciwciało cM-7412 (Choy i wsp. Arthritis Rheum 39 (1): 52-56 (1996));
przeciwciał anty-CD52, takich jak CAMPATH-1H (Riechmann i wsp. Nature 332: 323-337 (1988);
przeciwciał anty-receptor Fc, takich jak przeciwciało M22 skierowane przeciw FcyRI, jak w Graziano i wsp. J. Immunol. 155 (10): 4996-5002 (1995);
przeciwciał anty-antygen karcynoembrionalny (CEA, od carcinoembryonic antigen), takich jak hMN-14 (Sharkey i wsp. CancerRes. 55 (23 Suppl): 5935s-5945s (1995);
przeciwciał skierowanych przeciw komórkom nabłonkowym sutka, włączając w to huBrE-3, hu-Mc 3 i CHL6 (Ceriani i wsp. Cancer Res. 55 (23): 5852s-5856s (1995) oraz Richman i wsp. Cancer Res. 55 (23 Supp): 5916s-5920s (1995));
przeciwciał, które wiążą się z komórkami raka okrężnicy, takich jak C242 (Litton i wsp. Eur J. Immunol. 26 (1): 1-9 (1996));
przeciwciał anty-CD38, np. AT 13/5 (Ellis i wsp. J. Immunol. 155 (2): 925-937 (1995)); przeciwciał anty-CD33, takich jak Hu M195 (Jurcic i wsp. Cancer Res 55 (23 Suppl): 5908s-5910s (1995) i CMA-676 lub CDP771;
przeciwciał anty-CD22, takich jak LL2 lub LymphoCide (Juweid i wsp. Cancer Res 55 (23 Suppl): 5899s-5907s (1995);
przeciwciał anty-EpCAM, takich jak 17-1A (PAN0REX®);
przeciwciał anty-GpIIb/IIIa, takich jak abciximab lub c7E3 Fab (REOPRO®);
przeciwciał anty-RSV, takich jak MEDI-493 (SYNAGIS®);
przeciwciał anty-CMV, takich jak PROTOVIR®; przeciwciał anty-HIV, takich jak PRO542;
przeciwciał anty-wirus zapalenia wątroby, takich jak przeciwciało przeciw zapaleniu wątroby B,
OSTAVIR®;
przeciwciała OvaRex anty-CA 125; przeciwciała BEC2 anty-idiotypowy epitop GD3; przeciwciała VITAXIN® anty-αvβ3;
przeciwciała anty-ludzkie komórki raka, takiego jak ch-G250; ING-1; przeciwciała anty-ludzki 17-1A (3622W94); przeciwciała anty-ludzki rak okrężnicy i odbytnicy (A33);
przeciwciała anty-ludzki czerniak R24, skierowanego przeciw gangliozydowi GD3; anty-ludzki rak płaskokomórkowy (SF-25); oraz
PL 213 948 B1 przeciwciał anty-ludzki antygen leukocytowy (HLA, human leukocyte antigen), takich jak Smart IDlO i przeciwciało Oncolym (Lym-1) anty-HLA DR.
Jakkolwiek korzystne jest, jeżeli glikoproteina będąca przedmiotem zainteresowania to przeciwciało, bierze się również pod uwagę inne glikoproteiny zawierające region Fc, które można zmodyfikować według opisanych tu metod. Przykładem takiej cząsteczki jest immunoadhezyna.
D. Wytwarzanie immunoadhezyn
Najprostszy i najbardziej oczywisty projekt imunoadhezyny łączy w sobie domenę/y wiążące adhezyny (np. zewnątrzkomórkową domenę (ECD) receptora) z regionem Fc łańcucha ciężkiego immunoglobuliny. Zwykle, podczas wytwarzania immunoadhezyn według niniejszego wynalazku, kwas nukleinowy kodujący domenę wiążącą adhezyny będzie przyłączony w postaci fuzji na końcu C do kwasu nukleinowego kodującego koniec N sekwencji domeny stałej immunoglobuliny, jednak fuzje N-końcowe są także możliwe.
Typowo, w takich fuzjach kodowany chimerowy polipeptyd zachowa przynajmniej funkcjonalnie aktywne domeny zawiasową, CH2 i CH3 regionu stałego łańcucha ciężkiego immunoglobuliny. Robi się także fuzje na końcu C części Fc domeny stałej lub bezpośrednio N-końcowe do CH1 łańcucha ciężkiego lub odpowiedniego regionu łańcucha lekkiego. Dokładne miejsce, w którym zrobiona jest fuzja, nie jest istotne; poszczególne miejsca są dobrze znane i można je wybrać w celu zoptymalizowania aktywności biologicznej, wydzielania lub właściwości wiążących immunoadhezyny.
W korzystnym wykonaniu sekwencja adhezyny jest przyłączona w postaci fuzji do końca N regionu Fc immunoglobuliny Gi (IgG1). Możliwe jest przyłączenie całego regionu stałego łańcucha ciężkiego do sekwencji adhezyny. Jednak, bardziej korzystnie, w fuzji stosuje się sekwencję zaczynającą się w regionie zawiasowym zaraz powyżej miejsca cięcia dla papainy, które określa chemicznie Fc IgG (tj. reszty 216, przyjmując, że pierwszą resztą regionu stałego łańcucha ciężkiego jest 114) lub analogicznego miejsca innych immunoglobulin.
W szczególnie korzystnym wykonaniu sekwencja aminokwasowa immnunoadhezyny jest przyłączona w postaci fuzji do (a) regionu zawiasowego i CH2 oraz CH3 lub (b) domen CH1, zawiasowej, CH2 oraz CH3 łańcucha ciężkiego IgG.
W przypadku immunoadhezyn bispecyficznych immunoadhezyny organizują się w multimery, a w szczególności w heterodimery lub heterotetramery. Ogólnie, te złożone immunoglobuliny będą posiadały znane struktury jednostkowe. Podstawowa czterołańcuchowa jednostka strukturalna jest formą, w której występują IgG, IgD oraz IgE. Czterołańcuchowa jednostka strukturalna jest powtarzana w immunoglobulinach o wyższej masie cząsteczkowej; IgM ogólnie występuje jako pentamer czterech podstawowych jednostek utrzymywany razem przy użyciu wiązań dwusiarczkowych. Globulina IgA, a czasami globulina IgG, także mogą występować w formie multimerycznej w osoczu. W przypadku multimeru każda z czterech jednostek może być taka sama lub inna.
Różne przykładowe złożone immunoadhezyny objęte zakresem niniejszego wynalazku są poniżej schematycznie przedstawione w postaci diagramów:
(a) ACL-ACL;
(b) ACH-(ACh, ACL-ACH,- ACL-VHCH lub VLCL-ACH);
(c) ACL-ACH-(ACL-ACH, ACL-VHCH, VLCL-ACH Lub VLCL-VHCH) (d) ACL-VHCH- (ACH lub ACL-VHCH Lub VLCL-ACH);
(e) VLCL-ACH-(ACL-VHCH Lub VLCL-ACH) oraz (f) (A-Y)n-(VLCL-VHCH)2, gdzie:
każde A oznacza identyczne lub różne sekwencje aminokwasowe adhezyn;
VL to domena zmienna łańcucha lekkiego immunoglobuliny;
VH to domena zmienna łańcucha ciężkiego immunoglobuliny;
CL to domena stała łańcucha lekkiego immunoglobuliny;
CH to domena stała łańcucha ciężkiego immunoglobuliny; n to liczbę całkowita większa niż 1;
Y to reszta czynnika wytwarzającego kowalencyjne wiązania krzyżowe.
Dla zwięzłości opisu powyższe struktury pokazują tylko kluczowe cechy; nie wskazują one domen łączących (J) lub innych domen immunoglobulin, ani nie pokazano wiązań dwusiarczkowych. Jednak, kiedy takie domeny są wymagane do aktywności wiążącej, powinno się całość tak skonstruować, aby były one obecne w swoich zwykłych pozycjach, które zajmują w cząsteczkach immunoglobulin.
PL 213 948 B1
Alternatywnie, sekwencje adhezyn można wstawić pomiędzy sekwencje łańcucha ciężkiego i łańcucha lekkiego immunoglobuliny, tak aby otrzymać immunoglobulinę zawierającą chimerowy łańcuch ciężki. W tym wykonaniu sekwencje adhezyny są przyłączone w postaci fuzji do końca 3' łańcucha ciężkiego immunoglobuliny na każdym ramieniu immunoglobuliny, albo pomiędzy domenę zawiasową i CH2 lub pomiędzy domeny CH2 i CH3. Podobne konstrukty zostały opisane w Hoogenboom i wsp., Mol. Immunol., 28: 1027-1037 (1991).
Jakkolwiek obecność łańcucha lekkiego immunoglobuliny nie jest wymagana w immunoahezynach według niniejszego wynalazku, łańcuch lekki immunoglobuliny może być obecny albo w postaci kowalencyjnie związanej z fuzją polipeptydową adhezyna-łańcuch ciężki immunoglobuliny albo bezpośrednio przyłączony w postaci fuzji do adhezyny. W pierwszym przypadku DNA kodujący łańcuch lekki immunoglobuliny typowo wykazuje koekspresję z DNA kodującym fuzję białkową adhezynałańcuch ciężki immunoglobuliny. W trakcie wydzielania hybrydowy łańcuch ciężki i łańcuch lekki będą kowalencyjnie związane w celu zapewnienia struktury immunoglobulinopodobnej zawierającej dwie połączone przy użyciu wiązania dwusiarczkowego pary łańcuch ciężki immunoglobuliny-łańcuch lekki. Sposoby odpowiednie do wytwarzania takich struktur są ujawnione na przykład w patencie USA nr 4 816 567 wydanym 28 marca 1989.
Immunoadhezyny najdogodniej konstruuje się poprzez połączenie sekwencji cDNA kodującej część adhezyny z sekwencją cDNA immunoglobuliny w ramce odczytu. Jednak można także zastosować fuzję do fragmentów genomowych immunoglobulin (patrz, np., Aruffo i wsp., Cell, 61: 1303-1313 (1990) oraz Stamenkovic i wsp., Cell, 66: 1133-1144 (1991)). Drugi typ fuzji wymaga obecności sekwencji regulatorowych Ig dla ekspresji. cDNA kodujące regiony stałe łańcucha ciężkiego IgG można wyizolować technikami hybrydyzacji lub łańcuchowej reakcji polimerazy (PCR) w oparciu o opublikowane sekwencje z bibliotek cDNA pochodzących z limfocytów śledziony lub krwi obwodowej. cDNA kodujące części „adhezynową” i immunoglobulinową immunoadhezyny są wstawione tandemowo do wektora plazmidowego, który kieruje wydajną ekspresją w wybranych komórkach gospodarza.
E. Wektory, komórki gospodarzy i metody rekombinowania DNA
Wynalazek dostarcza również wyizolowanego kwasu nukleinowego kodującego ujawnioną tu glikoproteinę, wektorów i komórek gospodarzy zawierających kwas nukleinowy oraz technik rekombinowania DNA do wytwarzania glikoproteiny.
Aby wytworzyć glikoproteinę poprzez rekombinowanie DNA, izoluje się kodujący je kwas nukleinowy i wstawia do zdolnego do replikacji wektora w celu dalszego klonowania (powielania DNA) lub do ekspresji. DNA kodujący glikoproteinę można łatwo wyizolować i zsekwencjonować przy zastosowaniu konwencjonalnych procedur (np. poprzez użycie sond oligonukleoytydowych, które są zdolne do specyficznego wiązania się z genami kodującymi glikoproteinę). Dostępnych jest wiele wektorów. Składniki wektorów generalnie obejmują między innymi jeden albo więcej spośród: sekwencji sygnałowej, początku replikacji, jednego albo większej liczby genów markerowych i elementów wzmacniających, promotora oraz sekwencji terminacyjnej dla transkrypcji.
(i) Sekwencja sygnałowa
Glikoproteinę według tego wynalazku można wytwarzać poprzez rekombinowanie DNA nie tylko bezpośrednio, ale również jako fuzję polipeptydową z peptydem heterologicznym, którym jest korzystnie sekwencja sygnałowa albo inny polipeptyd mający specyficzne miejsce cięcia na końcu N dojrzałego białka albo polipeptydu. Korzystne jest, jeżeli wybrana heterologiczną sekwencja sygnałowa jest taką, która jest rozpoznawana i ulega obróbce (tj. cięciu przez peptydazę sygnałową) w komórce gospodarza. W przypadku prokariotycznych komórek gospodarza, które nie rozpoznają i dokonują obróbki sekwencji sygnałowej natywnego polipeptydu, sekwencję sygnałową zastępuje się sekwencją prokariotczną wybraną na przykład z grupy złożonej z liderów alkalicznej fosfatazy, penicylinazy, lpp, wrażliwej na ciepło enterotoksyny II. Do wydzielenia z drożdży natywną sekwencję sygnałową można zastąpić, np. przez lider inwertazy drożdżowej, lider czynnika α (włączając w to lidery czynnika α Saccharomyces i Kluyveromyces) albo lider alkalicznej fosfatazy, lider glukoamylazy C. albicans lub sekwencję sygnałową opisaną w WO 90/13646. Przy ekspresji w komórkach ssaków, dostępne są ssacze sekwencje sygnałowe, jak również wirusowe lidery sekrecyjne, na przykład sekwencja sygnałowa gD wirusa opryszczki pospolitej. DNA dla takiego regionu prekursorowego poddaje się ligacji w ramce odczytu z DNA kodującym polipeptyd.
PL 213 948 B1 (ii) Początek replikacji
Zarówno wektory do ekspresji, jak i klonowania, zawierają sekwencję kwasu nukleinowego, która umożliwia wektorowi replikację w komórkach jednego albo większej liczby wybranych gospodarzy. Generalnie, w wektorach do klonowania sekwencją tą jest taka, która umożliwia wektorowi replikację niezależnie od DNA chromosomowego gospodarza i obejmuje początki replikacji albo autonomicznie replikujące się sekwencje. Takie sekwencje są dobrze znane dla wielu bakterii, drożdży i wirusów. Początek replikacji z plazmidu pBR322 jest odpowiedni dla większości bakterii Gram-ujemnych, początek replikacji plazmidu 2μ jest odpowiedni dla drożdży, a różne początki wirusowe (SV40, polyoma, adenowirusa, VSV lub BPV) są przydatne dla wektorów do klonowania w komórkach ssaczych. Generalnie początek replikacji nie jest potrzebny w ssaczych wektorach ekspresyjnych (początek replikacji SV40 może być typowo używany jedynie dlatego, że zawiera wczesny promotor).
(iii) Gen selekcyjny
Wektory do ekspresji i klonowania mogą zawierać gen selekcyjny, zwany również markerem selekcyjnym. Typowe geny selekcyjne kodują białka, które:
(a) nadają oporność na antybiotyki lub inne toksyny, np., ampicylinę, neomycynę, metotreksan lub tetracyklinę;
(b) komplementują niedobory auksotroficzne albo (c) dostarczają krytycznych składników odżywczych niedostępnych ze złożonej pożywki, np. gen kodujący racemazę D-alaniny dla Bacilli.
Jeden ze schematów selekcji wykorzystuje lek dla zahamowania wzrostu komórki gospodarza. Te komórki, które zostały z powodzeniem stransformowane heterologicznm genem, wytwarzają białko nadające oporność na lek, a zatem przezywają tryb selekcji. W przykładach takiej selekcji dominującej stosuje się leki: neomycynę, kwas mykofenolowy i higromycynę.
Inny przykład odpowiednich markerów selekcyjnych dla komórek ssaczych stanowią te, które umożliwiają identyfikację komórek zdolnych do pobierania kwasu nukleinowego dla polipeptydu, takie jak DHFR, kinaza tymidynowa, metalotioneina-I i -II, korzystnie geny metalotionein naczelnych, deaminaza adenozynowa, dekarboksylaza ornitynowa, etc.
Przykładowo, komórki stransformowane genem selekcyjnym DHFR identyfikuje się najpierw poprzez hodowanie wszystkich transformantów w pożywce hodowlanej, która zawiera metotreksan (Mtx), współzawodniczącego antagonistę DHFR.
Odpowiednimi komórkami gospodarza, kiedy stosuje się DHFR typu dzikiego, jest linia komórkowa jajnika chomika chińskiego (CHO) bez aktywności DHFR.
Alternatywnie, komórki gospodarza (a w szczególności gospodarza typu dzikiego, który zawiera endogenny DHFR) transformowane lub kotransformowane sekwencjami DNA kodującymi polipeptyd, białko DHFR typu dzikiego i inny marker selekcyjny, taki jak 3'-fosfotransferazę aminoglikozydową (APH) można selekcjonować poprzez hodowlę komórek na pożywce zawierającej czynnik selekcyjny dla podlegającego selekcji markera, takiego jak antybiotyk aminoglikozydowy, np. kanamycyna, neomycyna lub G418. Patrz patent USA nr 4 965 199.
Odpowiednim genem selekcyjnym do zastosowania w drożdżach jest gen trpl obecny w plazmidzie YRp7 (Stinchcomb i wsp., Nature, 282: 39 (1979)). Gen trp1 dostarcza markera selekcyjnego dla zmutowanego szczepu drożdży z brakiem zdolności do wzrostu na tryptofanie, na przykład ATCC nr 44076 lub PEP4-1 (Jones, Genetics, 85: 12 (1977). Brak trp1 w genomie komórek gospodarza drożdżowego stwarza odpowiednie środowisko dla wykrywania transformacji poprzez wzrost w nieobecności tryptofanu. Podobnie szczepy drożdży bez Leu2- (ATCC 20622 lub 38626) są komplementowane przez znane plazmidy niosące gen Leu2.
Dodatkowo, wektory pochodzące z 1,6 μm kolistego plazmidu pKD1 można użyć do transformacji drożdży Kluyveromyces. Alternatywnie, doniesiono o systemie ekspresji do wytwarzania na dużą skalę zrekombinowanej chymozyny cielęcej dla K. laetis. Van den Berg, BiolTechnology, 8: 135 (1990). Ujawniono również stabilne wielokopiowe wektory do ekspresji do wydzielenia dojrzałej zrekombinowanej ludzkiej albuminy surowiczej przez przemysłowe szczepy Kluyveromyces. Fleer i wsp., BiolTechnology, 9: 968-975 (1991).
(iv) Składnik promotorowy
Wektory do ekspresji i klonowania zwykle zawierają promotor, który jest rozpoznawalny przez organizm gospodarza i jest połączony funkcjonalnie z kwasem nukleinowym dla polipeptydu. Promotory przydatne do zastosowania z gospodarzami prokariotycznymi obejmują promotor phoA, β-laktamazy oraz systemy promotorowe laktozy, alkalicznej fosfatazy, system promotorowy tryptofanu (trp)
PL 213 948 B1 i promotory hybrydowe, takie jak promotor tac. Jednakże przydatne są inne znane promotory bakteryjne. Promotory do zastosowania w systemach bakteryjnych będą również zawierały sekwencję Shine-Dalgarno (S. D.) połączoną funkcjonalnie z DNA kodującym przeciwciało wielowartościowe.
Sekwencje promotorowe są znane dla organizmów eukariotycznych. W zasadzie wszystkie geny eukariotyczmne mają region AT-bogaty położony około 25 do 30 zasad od miejsca, gdzie rozpoczyna się transkrypcja. Inna sekwencja znajdująca się 70 to 80 zasad od miejsca startu transkrypcji wielu genów to region CNCAAT, gdzie N może być dowolnym nukleotydem. Na końcu 3' większości genów eukariotycznych jest sekwencja AATAAA, która może być sygnałem dla dodania ogona poli A do końca 3' sekwencji kodującej. Wszystkie te sekwencje są odpowiednio wstawione do eukariotycznych wektorów ekspresyjnych.
Przykłady odpowiednich sekwencji promotorowych do zastosowania z gospodarzami drożdżowymi obejmują promotory kinazy 3-fosfoglycerynianowej lub innych enzymów glikolitycznych, takich jak enolaza, dehydrogenaza glyceraldehydo-3-fosforanowa, heksokinaza, dekarboksylaza pirogronianowa, fosfofruktokinaza, izomeraza glukozo-6- fosforanowa, mutaza 3-fosfoglicerynianowa, kinaza pirogronianowa, izomeraza triozofosforanowa, izomeraza fosfoglukozowa i glukokinaza.
Inne promotory drożdżowe, które są promotorami indukowalnymi, mającymi dodatkową zaletę transkrypcji kontrolowanej przez warunki wzrostu to regiony promotorowe dla dehydrogenazy alkoholowej 2, izocytochromu C, kwaśnej fosfatazy, enzymów rozkładających związanych z metabolizmem azotu, metalotioneiny, dehydrogenazy gliceraldehydo-3-fosforanowej oraz enzymów odpowiedzialnych za wykorzystanie maltozy i galaktozy. Odpowiednie wektory i promotory do zastosowania przy ekspresji w drożdżach są opisane ponadto w EP nr 73 657. Wzmacniacze drożdżowe są również korzystnie stosowane z promotorami drożdżowymi.
Transkrypcja polipeptydu z wektorów w ssaczych komórkach gospodarza jest kontrolowana na przykład przez promotory otrzymane z genomów wirusów, takich jak wirus polyoma, wirus ospy drobiu, adenowirus (taki jak Adenowirus 2), bydlęcy wirus brodawczaka, ptasi wirus mięsaka, cytomegalowirus, retrowirus, wirus zapalenia wątroby B, a najkorzystniej Małpi Wirus 40 (SV40), z heterologicznych promotorów ssaczych, np., promotora aktyny lub promotora immunoglobuliny, promotorów szoku cieplnego, przy założeniu, że promotory są zgodne z systemami komórkowymi gospodarza.
Wczesne i późne promotory wirusa SV40 można dogodnie otrzymać z fragmentu restrykcyjnego SV40, który również zawiera wirusowy początek replikacji SV40. Najwcześniejszy promotor ludzkiego cytomegalowirusa dogodnie jest otrzymać jako fragment restrykcyjny HindIII E. System ekspresji DNA w gospodarzach ssaczych przy zastosowaniu jako wektora bydlęcego wirusa brodawczaka jest ujawniony w patencie USA nr 4 419 446. Modyfikacja tego systemu jest opisana w patencie USA nr 4601978. Patrz także Reyes i wsp., Nature 297: 598-601 (1982) na temat ekspresji cDNA ludzkiego β-interferonu w komórkach mysich pod kontrolą promotora kinazy tymidynowej z wirusa opryszczki pospolitej. Alternatywnie jako promotor można zastosować długie odwrócone powtórzenia wirusa mięsaka Rousa.
(v) Element wzmacniacza
Transkrypcja DNA kodującego polipeptyd według tego wynalazku u wyższych Eucaryota jest często wzmacniana poprzez wstawienie do wektora sekwencji wzmacniacza. Znanych jest wiele sekwencji wzmacniaczy z genów ssaczych (globiny, elastazy, albuminy, α-fetoproteiny oraz insuliny). Jednakże, typowo używa się wzmacniacza z wirusa komórek eukariotycznych. Przykłady obejmują wzmacniacz SV40 po stronie późnej początku replikacji (bp 100-270), wzmacniacz wczesnego promotora cytomegalowirusa, wzmacniacz polyoma po stronie późnej początku replikacji oraz wzmacniacze adenowirusa. Patrz także Yaniv, Nature 297: 17-18 (1982) na temat elementów wzmacniających dla aktywacji promotorów eukariotycznych. Wzmacniacz może być wstawiony do wektora w pozycji 5' lub 3' sekwencji kodującej polipeptyd, ale korzystne jest, jeżeli jest położony po stronie 5' promotora.
(vi) Składnik terminacji transkrypcji
Wektory do ekspresji stosowane w komórkach gospodarza eukariotycznego (drożdże, grzyby, rośliny, zwierzęta, człowiek lub komórki jądrzaste innych organizmów wielokomórkowych) będą również sekwencje niezbędne do terminacji transkrypcji i do stabilizowania mRNA. Takie sekwencje są powszechnie dostępne z końców 5', a czasami 3' nie ulegających translacji regionów eukariotycznych albo wirusowych DNA lub cDNA. Regiony te zawierają odcinki nukleotydowe podlegające transkrypcji jako fragmenty poliadenylowane w nie ulegającej translacji części mRNA kodującego polipeptyd. Jednym z przydatnych składników terminacji transkrypcji jest region poliadenylacji bydlęcego hormonu wzrostu. Patrz WO 94/11026 i ujawniony tam wektor ekspresyjny.
PL 213 948 B1 (vii) Selekcja i transformacja komórek gospodarza
Odpowiednie komórki gospodarza do klonowania i ekspresji DNA w rozważanych tu wektorach są opisanymi powyżej komórkami prokariotycznymi, drożdżowymi albo wyższych Eukaryota. Odpowiednie tego celu organizmy prokariotyczne obejmują Eubacteriae, takie jak organizmy Gram ujemne lub Gram dodatnie, na przykład, Enterobacteriaceae, takie jak Escherichia, np., E. coli, Enterobacter, Erwinia, Klebsiella, Proteus, Salmonella, np., Salmonella typhimurium, Serratia, np. Serratia marcescans oraz Shigella, jak również Bacilli, takie jak B. subtilis i B. Iicheniformis (np. B. Iicheniformis 41 P ujawniony w DD 266710 opublikowanym 12 kwietnia 1989), Pseudomonas, takie jak P. aeruginosa i Streptomyces. Jednym z korzystnych gospodarzy do klonowania w E. coli jest E. coli 294 (ATCC 31446), jakkolwiek inne szczepy, takie jak E. coli B, E. coli X1776 (ATCC 31537) i E. coli W3110 (ATCC 27325) są również odpowiednie. Przykłady te stanowią ilustrację, a nie ograniczenie.
Poza organizmami prokariotycznymi, mikroorganizmy eukariotyczne, takie ja grzyby nitkowate albo drożdże są przydatnymi gospodarzami do klonowania i ekspresji dla wektorów kodujących polipeptyd. Saccharomyces cerevisiae albo zwyczajne drożdże piekarnicze, są najpowszechniej używanymi wśród mikroorganizmów gospodarzami - niższymi Eukaryota. Jednakże powszechnie dostępne są i przydatne tu liczne inne rodzaje, gatunki i szczepy, takie jak Schizosaccharomyces pombe; gospodarze Kluyveromyces, tacy jak, np., K. lactis, K. fragilis (ATCC 12424), K. bulgaricus (ATCC 16045), K. wickeramii (ATCC 24,178), K. waltii (ATCC 56500,), K. drosophilarum (ATCC 36906),
K. Thermotolerans oraz K. marxianus; Yarrowia (EP nr 402 226); Pichia pastors (EP nr 183 070); Candida; Trichoderma reesia (EP nr 244 234); Neurospora crassa; Schwanniomyces, taki jak Schwanniomyces occidentalis oraz grzyby nitkowate, takie jak np. Neurospora, Penicillium, Tolypocladium i gospodarze Aspergillus, tacy jak A. nidulans i A. niger.
Odpowiednie komórki gospodarzy do ekspresji glikozylowanego polipeptydu pochodzą z organizmów wielokomórkowych. Przykłady komórek bezkręgowców obejmują komórki roślinne i komórki owadów. Zidentyfikowano liczne szczepy bakulowirusowe i warianty oraz odpowiadające im permisywne komórki gospodarzy owadzich z gospodarzy takich jak Spodoptera frugiperda (gąsienica), Aedes aegypti (komar), Aedes albopictus (komar), Drosophila melanogaster (muszka owocowa) oraz Bombyx mori. Rozmaite szczepy wirusowe do transfekcji są publicznie dostępne, np. wariant L-1 Autographa cali fornica NPV oraz szczep Bm-5 Bombyx mori NPV i takie wirusy można zastosować tu według niniejszego wynalazku, szczególnie do transfekcji komórek Spodoptera frugiperda.
Hodowle komórek roślinnych: bawełny, kukurydzy, ziemniaka, soi, petunii, pomidora i tytoniu można również użyć jako gospodarzy.
Jednakże, główne zainteresowanie dotyczy komórek kręgowców, a namnażanie komórek kręgowców w hodowli (hodowli tkankowej) stało się rutynową procedurą. Przykładami przydatnych linii komórek ssaków-gospodarzy jest linia komórek małpiej nerki CV1 transformowana SV40 (COS-7, ATCC CRL 1651); linia ludzkiej embrionalnej nerki (293 lub komórki 293 subklonowane do wzrostu w hodowli zawiesinowej, Graham i wsp., J. Gen Virol. 36: 59 (1977)); komórki nerki noworodka chomika (BHK, ATCC CCL 10); komórki jajnika chomika chińskiegi/DHFR (CHO, Urlaub i wsp., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77: 4216 (1980)); mysie komórki sertoli (TM4, Mather, Biol. Reprod. 23: 243-251 (1980)); małpie komórki nerki (CV1 ATCC CCL 70); komórki nerki zielonej małpy afrykańskiej (VERO76, ATCC CRL-1587); ludzkie komórki raka szyjki macicy (HELA, ATCC CCL 2); komórki nerki psa (MDCK, ATCC CCL 34); komórki wątroby szczura buffalo (BRL 3A, ATCC CRL 1442); ludzki komórki płuc (W138, ATCC CCL 75); ludzkie komórki wątroby (Hep G2, HB 8065); mysi rak gruczołu mlecznego (MMT 060562, ATCC CCL51); komórki TRI (Mather i wsp., Annals N. Y. Acad. Sci. 383: 44-68 (1982)); komórki MRC 5; komórki FS4; mysie komórki szpiczaka, takie jak NSO (np. RCB0213, Bebbington i wsp., Bio/Technology 10: 169 (1992)) oraz komórki SP2/0 (np. komórki SP2/0-Ag14, ATCC CRL 1581); szczurze komórki szpiczaka, takie jak komórki YB2/0 np. komórki YB2/3HL.P2.G11.16Ag.20, ATCC CRL 1662); oraz ludzka linia wątrobiaka (Hep G2). Komórki CHO bez reduktazy dihydrofolianowej (DHFR) są korzystną linią komórkową do wykonania wynalazku, z CHO-K1, DUX-B11, CHO-DP12, CHO-DG44 (Urlaub i wsp., Somatic Cell and Molecular Genetics 12: 555 (1986)) oraz Lec 13 będące przykładowymi przykładowymi liniami gospodarzy CHO. Komórki DUX-B11 zostały stransfekowane pSVEHIGNeo niosącym cDNA dla preproinsuliny, z wytworzeniem klonu CHO-DP12. W przypadku komórek gospodarza CHO-K1 (ATCC CRL 61), DUX-B11 (Simonsen i wsp. PNAS (USA) 80: 2495-2499 (1983)), DG44 lub CHO-DP12, mogą być one zmienione w taki sposób, że brak im zdolności do fukozylacji wyrażanych w nich białek.
PL 213 948 B1
Wynalazek można również zastosować do komórek hybrydom. Termin „hybrydoma” dotyczy hybrydowej linii komórkowej wytwarzanej poprzez fuzję nieśmiertelnej linii komórkowej pochodzenia immunologicznego i komórki wytwarzającej przeciwciało. Termin obejmuje potomstwo heterohybrydowych fuzji szpiczaka, które są wynikiem fuzji z komórkami ludzkimi i mysią linia komórkową szpiczaka połączonymi następnie z komórką plazmatyczną, powszechnie znane jako linia komórkowa triomy. Ponadto, termin ma obejmować dowolną unieśmiertelnioną linię komórkową, która wytwarza przeciwciała, taką jak na przykład kwadromy (patrz, np., Milstein i wsp., Nature, 537: 3053 (1983)). Hybrydowe llinie komórkowe mogą być z dowolnego gatunku, włączając w to człowieka i mysz.
W najbardziej korzystnych wykonaniach komórką ssaka jest komórka ssaka inna niż hybrydoma, która została stransformowana egzogennym wyizolowanym kwasem nukleinowym kodującym polipeptyd będący przedmiotem zainteresowania. „Egzogenny kwas nukleinowy” lub „heterologiczny kwas nukleinowy” ma oznaczać sekwencję kwasu nukleinowego, która jest obca dla komórki albo homologiczna dla komórki, ale w pozycji w obrębie kwasu nukleinowego komórki gospodarza, w której kwas nukleinowy normalnie się nie znajduje.
(viii) Hodowanie komórek gospodarzy
Komórki gospodarza transformuje się opisanymi powyżej wektorami do klonowania i ekspresji w celu wytworzenia polipeptydu i hoduje w konwencjonalnej pożywce hodowlanej zmodyfikowanej odpowiednio do indukowania promotorów, selekcjonowania transformantów albo powielania genów kodujących pożądane sekwencje.
Komórki gospodarzy stosowane do wytwarzania polipeptydu według tego wynalazku można hodować w rozmaitych pożywkach. Dostępne handlowo pożywki, takie jak Ham's FlO (Sigma), Minimal Essential Medium ((MEM), (Sigma), RPMI-1640 (Sigma) oraz Dulbecco's Modified Eagle's Medium ((DMEM), Sigma) są przydatne do hodowania komórek gospodarzy. Ponadto, jako pożywkę hodowlaną dla komórek gospodarza można użyć dowolną z pożywek opisanych w Ham i wsp., Meth. Enz. 58: 44 (1979), Barnes i wsp., Anal. Biochem. 102: 255 (1980), pat. USA nr 4 767 704; 4 657 866; 4 927 762; 4 560 655 lub 5 122 469; WO 90/03430; WO 87/00195 lub patent USA nr 30 985. Dowolna z tych pożywek może być uzupełniona, jak potrzeba, hormonami i/lub innymi czynnikami wzrostowymi (takimi jak insulina, transferyna lub nabłonkowy czynni wzrostowy), sole (takie jak chlorek sodu, wapń, magnez i fosforan) bufory (takie jak HEPES), nukleotydy (takie jak adenozyna i tymidyna), antybiotyki (takie jak lek GENTAMYCIN™), elementy śladowe zdefiniowane jako związki nieorganiczne zwykle obecne w stężeniu końcowym w zakresie mikromolarnym) oraz glukoza lub ekwiwalentne źródło energii. Dowolne inne niezbędne uzupełnienia można również dodać w odpowiednich stężeniach, które będą znane specjalistom w tej dziedzinie. Warunki hodowli, takie jak temperatura, pH i temu podobne, są takie, jak stosowane uprzednio dla komórek gospodarza wybranego do ekspresji i będą oczywiste dla przeciętnego specjalisty w tej dziedzinie.
Wszystkie pożywki hodowlane typowo dostarczają co najmniej jednego składnika spośród jednego lub większej liczby następujących kategorii:
1) źródło energii, zwykle w postaci węglowodanu takiego jak glukoza;
2) wszystkie niezbędne aminokwasy i zwykle podstawowy zestaw dwudziestu aminokwasów plus cystyna;
3) witaminy i/lub inne związki organiczne wymagane w niskich stężeniach;
4) wolne kwasy tłuszczowe; oraz
5) elementy śladowe, gdzie elementy śladowe są zdefiniowane jako związki nieorganiczne albo występujące naturalnie elementy, które są typowo wymagane w bardzo niskich stężeniach, zwykle w zakresie mikromolowym.
Korzystne jest, jeżeli pożywka hodowlana jest wolna od surowicy, np. zawiera mniej niż około 5%, korzystnie mniej niż 1%, korzystniej mniej niż 0 do 0,1% surowicy i innych białek pochodzenia zwierzęcego. Jednakże mogą być one stosowane, jeśli potrzeba. W korzystnym wykonaniu wynalazku pożywka do hodowli komórek zawiera nadmiar aminokwasów. Aminokwasy, które są dostarczone w nadmiarze mogą być wybrane spośród Asn, Asp, Gly, He, Leu, Lys, Met, Ser, Thr, Trp, Tyr i Val. Korzystnie, Asn, Asp, Lys, Met, Ser i Trp są dostarczone w nadmiarze. Przykładowo, można użyć aminokwasów, witamin, elementów śladowych i innych składników pożywki w pojedynczym albo dwukrotnym zakresie wyszczególnionym w patencie europejskim EP nr 307 247 lub patencie USA nr 6 180 401. Te dwa dokumenty są tu włączone jako odniesienie.
Do hodowli komórek ssaczych wyrażających pożądane białko i zdolnych do dodawania pożądanych węglowodanów w określonych pozycjach, można użyć wielu warunków hodowli przywiązując
PL 213 948 B1 szczególną uwagę hodowanym komórkom gospodarza. Odpowiednie warunki hodowli dla komórek ssaków są dobrze znane w tej dziedzinie (Cleveland i wsp., J. Immunol. Methods 56: 221-234 (1983)) albo mogą był łatwo ustalone przez specjalistę w tej dziedzinie (patrz na przykład, Animal Cell Culture: A Practical Approach wyd. 2, Rickwood, D. i Hames, B. D., wyd. Oxford University Press, New York (1992)) i różnią się zależnie od konkretnej wybranej komórki gospodarza.
(ix) Oczyszczanie glikoproteiny
Kiedy stosuje się techniki rekombinowania DNA, glikoproteina może być wytwarzana wewnątrzkomórkowo, w przestrzeni periplazmatycznej albo wydzielana bezpośrednio do pożywki. Jeżeli glikoproteina jest wytwarzana wewnątrzkomórkowo, w pierwszym etapie cząsteczkowe resztki, czy to komórki gospodarza czy fragmenty po lizie, usuwa się na przykład poprzez wirowanie albo ultrawirowanie. Carter i wsp., BiolTechnology 10: 163-167 (1992) opisuje procedurę izolowania przeciwciał, które są wydzielane do przestrzeni periplazmatycznej E. coli. Pokrótce, masę komórek rozmraża się w obecności octanu sodowego (pH 3,5), EDTA i fenylometylsulfonylofluorku (PMSF) przez około 30 min. Resztki komórek usuwa się poprzez wirowanie. Tam gdzie glikoproteina jest wydzielana do pożywki, supernatanty z takich systemów ekspresyjnych generalnie najpierw zatęża się przy użyciu dostępnych handlowo filtrów do zatężania białek, na przykład jednostek do ultrafiltracji Amicon lub Millipore Pellicon. Inhibitor proteaz, taki jak PMSF może być dodany na dowolnym z powyższych etapów w celu hamowania proteolizy, a antybiotyki można dodać w celu zapobiegania wzrostu przypadkowych zanieczyszczeń.
Kompozycję glikoproteiny wytworzoną z komórek można oczyścić stosując na przykład chromatografię na hydroksyloapatycie, elektroforezę w żelu, dializę oraz chromatografię powinowactwa, przy czym korzystną techniką oczyszczania jest chromatografia powinowactwa. Przydatność białka A jako ligandu powinowactwa zależy od rodzaju i izotypu regionu Fc immunoglobuliny, który jest obecny w glikoproteinie. Białko A można zastosować do oczyszczania przeciwciał, które opierają się na ludzkich łańcuchach ciężkich γ1, γ2 lub γ4 (Lindmark i wsp., J. Immunol. Meth. 62: 1-13 (1983)). Białko G jest polecane dla wszystkich izotypów mysich i ludzkiej γ3 (Guss i wsp., EMBO J. 5: 1567- 1575 (1986)). Podłożem, do którego ligand powinowactwa jest przytwierdzony jest najczęściej agaroza, ale dostępne są również inne podłoża. Stabilne mechanicznie podłoża, takie jak szkło o określonych porach lub poli(styrenodiwinylo)benzen umożliwiają szybsze tempo przepływu i krótszy czas obróbki niż można uzyskać z agarozą. Tam gdzie glikoproteina zawiera domenę CH3, do oczyszczania przydatna jest żywica Bakerbond ABX™ (J. T. Baker, Phillipsburg, NJ). Dostępne są również inne techniki oczyszczania białka, takie jak frakcjonowanie na kolumnie jonowymiennej, wytrącanie etanolem, HPLC z odwróconymi fazami, chromatografia na krzemionce, chromatografia na heparynaSEPHAROSE™, chromatografia na żywicy jonowymiennej anionowej albo kationowej (takiej jak kolumna z kwasu poliasparaginowego), chromatoognoskowanie, SDS-PAGE oraz wytrącanie siarczanem amonu, zależnie od glikoproteiny, która ma być odzyskana.
W jednym z wykonań glikoproteinę można oczyścić poprzez zastosowanie adsorpcji na substracie lektynowym (np. kolumnie powinowactwa do lektyny) w celu usunięcia z preparatu glikoproteiny zawierającej fukozę i wzbogacić go w glikoproteinę wolną od fukozy.
F. Analiza glikoprotein
Złożoną część węglowodanową glikoproteiny wytwarzanej sposobem według niniejszego wynalazku można łatwo analizować w celu ustalenia, czy reakcja glikozylacji opisana powyżej jest kompletna. Oligosacharydy analizuje się konwencjonalnymi technikami analizy węglowodanów. A zatem, przykładowo, techniki takie jak analiza na filtrach z lektyną, dobrze znane w tej dziedzinie, pokazują proporcje końcowej mannozy lub innych cukrów, takich jak galaktoza.
Korzystne jest, jeżeli węglowodany analizuje się przy zastosowaniu spektralna analizę mas MALD1-T0F jak w przykładzie 1, poniżej oraz Shields i wsp., J. Biol. Chem. 9 (2): 6591-6604 (2001).
Znanych jest w tej dziedzinie kilka metod analizy glikozylacji i są one przydatne w kontekście niniejszego wynalazku. Takie metody dostarczają informacji dotyczącej tożsamości i składu oligosacharydu przyłączonego do peptydu. Sposoby analizy węglowodanu przydatne w niniejszym wynalazku obejmują między innymi chromatografię na HPAEC-PAD, która wykorzystuje chromatografię anionowymienną z wysokim pH w celu rozdzielenia oligosacharydów w oparciu o ładunek; NMR; spektrometrię mas; HPLC; GPC; analizę składu monosacharydów; kolejne trawienia enzymatyczne.
Dodatkowo, znane są sposoby uwalniania oligosacharydów. Metody te obejmują:
1) enzymatyczną, np. z zastosowaniem fukozydazy, takiej jak α-L-fukozydazy w celu usunięcia fukozy;
PL 213 948 B1
2) eliminację poprzez zastosowanie ostrych warunków alkalicznych w celu uwolnienia głównie struktur połączonych przez O;
3) metody chemiczne z użyciem bezwodnej hydrazyny w celu uwolnienia oligosacharydów połączonych, zarówno przez N, jak i przez O;
Cukry obojętne i aminowe można oznaczyć poprzez wysokosprawną chromatografię anionowymienną w połączeniu z pulsową detekcją amperometryczną (HPAE-PAD Carbohydrate System, Dionex Corp.). Przykładowo, cukry można uwalniać poprzez hydrolizę w 20% (obj./obj.) kwasie trifluorooctowym w IOO0C przez 6 godz. Hydrolizaty suszy się następnie poprzez liofilizację lub przy zastosowaniu Speed-Vac (Savant Instruments). Reszty rozpuszcza się następnie w 1% roztworze trójwodnego octanu sodowego i analizuje na kolumnie HPLC-AS6 jak opisano w Anumula i wsp. Anal. Biochem. 195: 269-280 (1991).
Kwas sialowy można oznaczyć oddzielnie poprzez zastosowanie bezpośredniej metody kolorymetrycznej według Yao i wsp. Anal Biochem. 179: 332-335 (1989)) w trzech powtórzeniach próbek. W korzystnych wykonaniach używany jest kwas tiobarbaturowy (TBA) według Warren, L. J. Biol. Chem., 238: (8) (1959).
Alternatywnie, można przeprowadzić analizę węglowodanów na filtrze. Według tej procedury związane z białkiem węglowodany wykrywa się stosując komercyjny system wykrywania glikanów (Boehringer), który opiera się na procedurze oksydacyjnej analizy immunologicznej na filtrze opisanej przez Haselbeck i Hosel (Haselbeck i wsp. Glycoconjugate J., 7: 63 (1990)).
Metody analizy obejmują te opisane dla analizy oligosacharydów związanych z przeciwciałem i opisane na przykład w Wormald i wsp., Biochem. 36: 1370-1380 (1997); Sheeley i wsp. Anal. Biochem. 247: 102-110 (1997) oraz Cant i wsp., Cytotechnology 15: 223-228 (1994), jak również zacytowanych tam odnośnikach.
G. Kompozycje farmaceutyczne
Kompozycje terapeutyczne glikoproteiny można wytwarzać poprzez mieszanie glikoproteiny mającej pożądany stopień czystości z ewentualnymi farmaceutycznie dopuszczalnymi nośnikami, zaróbkami lub stabilizatorami (Remington's Pharmaceutical Sciences wydanie 16, Osol, A. Ed. (1980)), w postaci preparatów liofilizowanych albo roztworów wodnych. Dopuszczalne nośniki, zaróbki lub stabilizatory są nietoksyczne dla biorców w zastosowanych dawkach i stężeniach i obejmują bufory, takie jak fosforan, cytrynian i inne kwasy organiczne, przeciwutleniacze, włączając w to kwas askorbinowy i metioninę; środki konserwujące (takie jak chlorek oktadecylodimetylobenzyloamonowy; chlorek heksametoniowy; chlorek benzalkoniowy, chlorek benzetoniowy; alkohol fenolowy, butylowy lub benzylowy; parabeny alkilowe, takie jak paraben metylowy lub propylowy; katechol; rezorcynol; cycloheksanol; 3-pentanol; oraz m-krezol); polipeptydy o niskiej masie cząsteczkowej (mniej niż około 10 reszt); białka, takie jak albumina z surowicy, żelatyna albo immunoglobuliny; polimery hydrofilowe, takie jak poliwinylopirolidon; aminokwasy takie jak glicyna, glutamina, asparagina, histidyna, arginina lub lizyna; monosaccharydy, disacharydy i inne węglowodany włączając w to glukozę, mannozę lub dekstryny; czynniki chelatujące, takie jak EDTA; cukry, takie jak sacharoza, mannitol, trehaloza lub sorbitol; tworzące sole jony, takie jak sodowe; kompleksy metali (np. kompleksy Zn-białko) i/lub niejonowe związki powierzchniowo czynne, takie jak TWEEN™, PLURONICS™ lub glikol polietylenowy (PEG).
Rozważane tu kompozycje mogą również zawierać jeden albo większą liczbę związków czynnych niezbędnych podczas leczenia przy poszczególnych wskazaniach, korzystnie o uzupełniających się aktywnościach, które nie mają na siebie wzajemnie szkodliwego wpływu. Przykładowo, kombinacja może zawierać ponadto inne przeciwciało albo czynnik chemioterapeutyczny. Takie cząsteczki powinny być obecne w kompozycji w ilościach, które są skuteczne dla zamierzonych potrzeb.
Składniki czynne można również zamykać w mikrokapsułkach wytwarzanych na przykład techniką koacerwacji albo polimeryzacji międzyfazowej, na przykład mikrokapsułkach hydroksymetylocelulozowych albo żelatynowych, odpowiednio i mikrokapsułkach poli(metylometacylanowych), odpowiednio, w koloidalnym systemie dostarczania leków (na przykład liposomy, mikrokulki albuminowe, mikroemulsje, nanocząstki i nanokapsułki) lub w makroemulsjach. Takie techniki są ujawnione w Remington's Pharmaceutical Sciences wyd. 16, Osol, A. Ed. (1980).
Kompozycje do stosowania in vivo muszą być jałowe. To można łatwo osiągnąć poprzez filtrację przez błony filtracyjne.
Można również wytworzyć preparaty o opóźnionym uwalnianiu. Odpowiednie przykłady preparatów o opóźnionym uwalnianiu obejmują półprzepuszczalne podłoża ze stałych hydrofobowych poliPL 213 948 B1 merów zawierających przeciwciało, gdzie podłoża wytwarza się w postaci uformowanych artykułów, np. błon albo mikrokapsułek. Przykłady podłóż o opóźnionym uwalnianiu obejmują poliestry, hydrożele (na przykład, poli(2-hydroksyetylometakrylan) albo poli(winyloalkohol)), polimleczany (patent USA nr 3 773 919), kopolimery kwasu L-glutaminowego oraz γ-etylo-L-glutaminianu, nie podlegający rozkładowi octan etyleno-winylowy, podlegające rozkładowi kopolimery kwas mlekowy-kwas glikolowy, takie jak LUPRON DEPOT™ (wstrzykiwalne mikrokulki składające się kopolimeru kwas mlekowykwas glikolowy i octanu leuprolidowego) oraz kwas poli-D-(-)-3-hydroksymasłowy. Jakkolwiek polimery, takie jak octan etyleno-winylowy i kwas mlekowy-kwas glikolowy umożliwiają uwalnianie cząsteczek na przestrzeni 100 dni, pewne hydrożele uwalniają białka w krótszych okresach czasu. Po zamknięciu w kapsułki przeciwciała pozostają w organizmie przez długi i mogą denaturować albo agregować jako wynik wystawienia na działanie wilgoci w 37°C, co prowadzi do utraty aktywności biologicznej i możliwych zmian w immunogenności. Można zaprojektować racjonalne strategie dla stabilizacji w zależności od mechanizmu, który w tym uczestniczy. Przykładowo, jeżeli odkryty mechanizm agregacji jest tworzeniem się międzycząsteczkowych wiązań S-S poprzez wymianę tio-disiarczkową, stabilizację można uzyskać poprzez modyfikacje reszt sulfhydrylowych, liofilizację z roztworów kwaśnych, kontrolowanie zawartości wilgoci, z zastosowaniem odpowiednich dodatków i opracowywanie specyficznych złóż polimerowych.
Kompozycje farmaceutyczne mogą być liofilizowane. Kompozycje liofilizowanych przeciwciał są opisane w patencie USA nr 6 267 958. Stabilne wodne kompozycje przeciwciał są opisane w patencie USA nr 6 171 586 B1.
H. Nie-terapeutyczne zastosowania glikoproteiny
Glikoproteinę według wynalazku można zastosować jako czynnik do oczyszczania poprzez powinowactwo. W tym procesie, glikoproteinę unieruchamia się na fazie stałej, takiej jak złoże Sephadex albo bibuła filtracyjna stosując metody znane w tej dziedzinie. Doprowadza się do kontaktu unieruchomionej glikoproteiny z próbką zawierającą antygen, który ma być oczyszczony, a następnie podłoże przemywa się odpowiednim roztworem, który będzie usuwać zasadniczo cały materiał z próbki z wyjątkiem antygenu, który ma być oczyszczony, związanym z unieruchomioną glikoproteiną. Na koniec podłoże przemywa się innym odpowiednim roztworem, takim jak bufor glicynowy pH 5,0, który będzie uwalniał antygen z glikoproteiny.
Glikoproteina może być również przydatna w testach diagnostycznych, np. do wykrywania ekspresji antygenu będącego przedmiotem zainteresowania w konkretnych komórkach, tkankach lub surowicy.
Do zastosowań diagnostycznych, glikoproteina będzie typowo wyznakowana wykrywalną resztą. Dostępnych jest wiele znaczników, które generalnie grupuje się w następujące kategorie:
oc -i λ ή o jod (a) Radioizotopy, takie jak 35S, 14C, 125I, 3H i 131I. Glikoproteina może być wyznakowana radioizotopem przy użyciu technik opisanych na przykład w Current Protocols in Immunology, tomy 1 i 2, Coligen i wsp., Wyd. Wiley-Interscience, New York, New York, Wyd. (1991), a radioaktywność można mierzyć przy zastosowaniu zliczania w scyntylatorze.
(b) Znaczniki fluorescencyjne, takie jak chelaty ziem rzadkich (chelaty europu) lub fluoresceina i jej pochodne, rodamina i jej pochodne, dansyl, Lissamina, fikoerytryna i czerwień teksańska są dostępne. Znaczniki fluorescyjne można połączyć z glikoproteiną przy zastosowaniu technik ujawnionych na przykład w Current Protocols in Immunology, jak wyżej. Fluorescencję można oceniać ilościowo przy użyciu fluorymetru.
(c) Różne znaczniki substrat-enzym są dostępne, a patent USA nr 4 275 149 dostarcza przeglądu niektórych spośród nich. Enzym generalnie katalizuje zmianę chemiczną chromogennego substratu, którą można mierzyć przy zastosowaniu różnych technik. Na przykład, enzym może katalizować zmianę koloru substratu, którą można mierzyć spektrofotometrycznie. Alternatywnie, enzym może zmieniać fluorescencję lub chemiluminescencję substratu. Techniki oceny ilościowej zmiany fluorescencji są opisane powyżej. Substrat chemiluminescencyjny staje się wzbudzony elektronicznie przez reakcję chemiczną i może następnie emitować światło, które można mierzyć (stosując na przykład chemiluminometr) albo przekazywać energię do fluorescencyjnego akceptora. Przykłady znaczników fluorescencyjnych obejmują lucyferazy (np. lucyferazę ze świetlika i lucyferazę bakteryjną; patent USA nr 4 737 456), lucyferynę, 2,3-dihydroftalazynodiony, dehydrogenazę jabłczanową, ureazę, peroksydazę, taką jak peroksydaza z chrzanu (HRPO), alkaliczną fosfatazę, β-galaktozydazę, glukoamylazę, lizozym, oksydazy sacharydowe (np. oksydaza glukozy, oksydaza galaktozy oraz dehydrogenaza glukozo-6-fosforanu), oksydazy heterocykliczne (takie jak urykaza i oksydaza ksantynowa), lakto54
PL 213 948 B1 peroksydaza, mikroperoksydaza i temu podobne. Techniki przyłączania enzymów do przeciwciał są opisane w O'Sullivan i wsp., Methods for the Preparation of Enzyme-Antybody Conjugates for use in Enzyme Immunoassay, w Methods in Enzym. Wyd. J. Langone & H. Van Vunakis), Academic Press, New York, 73: 147-166 (1981).
Przykłady połączenia enzym-substrat obejmują na przykład:
(i) Peroksydazę z chrzanu (HRPO) z nadtlenkiem wodoru jako substratem, gdzie peroksydaza nadtlenkowa utlenia prekursor barwnika (np. ortofenylenodiaminę (OPD) lub 3,3',5,5'-tetrametylobenzydynohydrochlorek (TMB));
(ii) alkaliczną fosfatazę (AP) z para-nitrofenylofosforanem jako substratem chromogennym; oraz (iii) β-D-galaktozydazę (β-D-Gal) z chromogennym substratem (np. p-nitrofenylo-D-galaktozydazą) lub fluorogennym substratem 4-metyloumbeliferylo-(3-β-D-galaktozydazą).
Wiele innych kombinacji enzym-substrat dostępnych jest dla specjalistów w tej dziedzinie. Dla ich ogólnego przeglądu patrz patenty USA nr 4 275 149 i nr 4 318 980.
Czasami znacznik jest połączony bezpośrednio z glikoproteiną. Specjalista w tej dziedzinie będzie wiedział o wielu technikach, którymi można to osiągnąć. Przykładowo, glikoproteinę można połączyć z biotyną i dowolny ze znaczników z tych trzech szerokich kategorii wspomnianych powyżej, można połączyć ze awidyną lub vice versa. Biotyna wiąże się wybiórczo z awidyną, a zatem w ten pośredni sposób można połączyć znacznik z glikoproteiną. Alternatywnie, aby uzyskać pośrednie połączenie znacznika z glikoproteiną, glikoproteinę łączy się z małym haptenem (np. digoksyną), a jeden z różnych typów wspomnianych powyżej znaczników łączy się z polipeptydem anty-hapten (np. przeciwciałem anty-digoksyną). A zatem można uzyskać pośrednie połączenie znacznika z glikoproteiną.
W innym wykonaniu wynalazku, glikoproteina nie musi być znakowana, a jego obecność może być wykrywana przy zastosowaniu wyznakowanego przeciwciała, które wiąże się z glikoproteiną.
Glikoproteinę według niniejszego wynalazku można wykorzystać w dowolnym ze znanych testów, takich jak testy współzawodnictwa o wiązanie, bezpośrednie i pośrednie testy kanapkowe i testy immunoprecypitacji. Zola, Monoclonal Antybodies: A Manual of Techniques, str. 147-158 (CRC Press, Inc. 1987).
Glikoproteinę można również zastosować w testach diagnostycznych in vivo. Generalnie, glikoproteinę znakuje się radionuklidem (takim jak 111I, 99Tc, 14C, 131I, 125I, 3H, 32P lub 35S), tak, że antygen albo wyrażające go komórki można zlokalizować przy użyciu immunoscyntografii.
I. Zastosowania glikoproteiny in vivo
Bierze się pod uwagę możliwość zastosowania glikoproteiny według niniejszego wynalazku do leczenia ssaka, np. pacjenta cierpiącego z powodu albo predysponowanego do choroby lub schorzenia, który mógłby odnieść korzyść z podawania glikoproteiny. Stanów, które można leczyć glikoproteiną jest wiele i obejmują nowotwór (np. tam, gdzie glikoproteina wiąże się antygenem związanym z nowotworem, antygenem powierzchniowym komórek B, takim jak CD20, receptorem ErbB, takim jak receptor HER2, czynnikiem angiogennym, takim jak czynnik wzrostu śródbłonka naczyń (VEGF, od ang. vascular endothelial growth factor); stany alergiczne, takie jak astma (z przeciwciałem anty-IgE) oraz choroby, w których pośredniczy LFA-1 (np. gdzie glikoproteiną jest przeciwciało anty-LFA-1 lub anty-ICAM-1) etc. W przypadku przeciwciała, które wiąże się z antygenem powierzchniowym komórek B, takim jak CD20, korzystnymi wskazaniami są nowotwory komórek B (np. chłoniak nieziarniczy), choroba autoimmunologiczna albo do blokowania odpowiedzi immunologicznej na obcy antygen (patrz WO nr 01/03734).
Tam gdzie przeciwciało wiąże się z receptorem ErbB, stanem jest korzystnie nowotwór wyrażający ErbB, np. łagodne i złośliwe guzy charakteryzujące się nadekspresją receptora ErbB. Takie nowotwory obejmują miedzy innymi raka sutka, raka płaskokomórkowego, raka płuc z małych komórek, raka płuc nie z małych komórek, raka żołądkowo-jelitowego, raka trzustki, glejaka, raka szyjki macicy, raka jajnika, raka wątroby, raka pęcherza, wątrobiaka, raka okrężnicy, raka okrężnicy i odbytnicy, raka śluzówki macicy, raka gruczołu śliniankowego, raka nerki, raka wątroby, raka prostaty, raka sromu, raka tarczycy, nowotworów wątroby i różne typy raka głowy i szyi.
Według wskazówek tu zawartych, można wytworzyć glikoproteinę z wariantem regionu Fc o polepszonej aktywności ADCC. Takie cząsteczki znajdą zastosowanie w leczeniu różnych chorób.
Przykładowo, glikoproteinę o polepszonej aktywności ADCC można zastosować do leczenia chorób lub schorzeń, gdzie pożądana jest eliminacja tkanki albo obcego mikroorganizmu. Przykładowo, glikoproteinę można zastosować do leczenia raka; chorób autoimmunologicznych, chorób zapalPL 213 948 B1 nych; infekcji (np. bakteryjnych, wirusowych, grzybowych lub drożdżowych) i innych stanów (takich jak wole) gdzie pożądane jest usunięcie tkanki, itd.
Glikoproteinę podaje się dowolnym z odpowiednich sposobów, włączając w to podawanie pozajelitowe, podskórne, dootrzewnowe, dopłucne, donosowe, a jeśli to pożądane przy miejscowym leczeniu immunosupresyjnym, douszkodzeniowe. Wlewy pozajelitowe obejmują podawanie domięśniowe, dożylne, dotętnicze, dootrzewnowe lub podskórne. Ponadto, dogodne jest podawanie glikoproteiny poprzez pulsowy wlew, najkorzystniej ze zmniejszającymi się dawkami glikoproteinę. Korzystne jest, jeżeli dawki podaje się w zastrzykach, najkorzystniej zastrzykach dożylnych albo podskórnych, w zależności po części od tego, czy podawanie jest krótkie czy długotrwałe.
Dla zapobiegania albo leczenia choroby odpowiednia dawka glikoproteiny będzie zależała od typu choroby, która ma być leczona, ostrości i przebiegu choroby, tego czy przeciwciało jest podawane dla celów zapobiegawczych czy leczniczych, wcześniejszej terapii, historii klinicznej pacjenta i odpowiedzi glikoproteinę oraz opinii prowadzącego lekarza. Dogodne jest podawanie pacjentowi glikoproteiny jednorazowo albo w postaci serii dawek.
W zależności od typu i ostrości choroby, wyjściowa proponowana dawka glikoproteiny do podania pacjentowi, podawana na przykład jednokrotnie więcej razy albo jako ciągły wlew, wynosi około 1 μg/kg do 15 mg/kg (np. 0,1-20 mg/kg). Typowa dzienna dawka może mieścić się w zakresie od około 1 μg/kg do 100 mg/kg lub więcej w zależności od wspomnianych powyżej czynników. Przy podawaniu powtarzanym na przestrzeni kilku dni lub dłużej, zależnie od stanu chorobowego, leczenie podtrzymuje się aż do pożądanego zniesienia objawów chorobowych. Jednakże mogą być użyteczne inne tryby podawania. Postęp tej terapii można łatwo śledzić przy zastosowaniu konwencjonalnych technik i testów. Przykłady tutaj pokazują, że można podawać niższe dawki glikoproteiny (np. przeciwciała wolnego od fukozy), w porównaniu z glikoproteiną zawierającą fukozę.
Kompozycja glikoproteiny będzie wytworzona, dawkowana i podawana w sposób zgodny z dobrą praktyka medyczną. Czynniki brane pod uwagę w tym kontekście obejmują konkretne schorzenia poddawane leczeniu, konkretnego ssaka poddanego leczeniu, stan kliniczny konkretnego pacjenta, przyczyny choroby, miejsca dostarczania czynnika, sposobu podawania, trybu podawania i innych czynników znanych praktykującym lekarzom. „Skuteczna leczniczo ilość” glikoproteiny, która ma być podawana będzie zależeć od takich uwarunkowań i jest minimalna ilością konieczną do zapobiegania, łagodzenia i leczenia choroby albo schorzenia. Glikoproteina nie musi być, ale jest fakultatywnie mieszane z jednym albo większą liczbą czynników obecnie stosowanych do zapobiegania albo leczenia danej choroby. Skuteczna ilość takich innych czynników zależy od ilości glikoproteiny obecnej w kompozycji, typu choroby lub leczenia i innych dyskutowanych powyżej parametrów. Są one generalnie stosowane w tych samych dawkach i tymi samymi drogami podawania jak stosowane tu wcześniej lub około 1 do 99% stosowanych tu uprzednio dawek.
Kompozycje terapeutycznego przeciwciała są generalnie umieszczane w pojemniku mającym jałowy dostęp, na przykład torbie lub fiolce z roztworem dożylnym mającym zatyczkę, którą można przebić igłą do zastrzyków podskórnych.
Pacjent z nowotworem, który ma być traktowany przeciwciałem jako antagonistą jak tu ujawniono, może również otrzymać radioterapię. Alternatywnie albo dodatkowo, pacjentowi można podać środek chemioterapeutyczny. Przygotowanie i schemat podawania środków chemioterapeutycznych można przeprowadzić według instrukcji producenta lub po empirycznym ustaleniu przez specjalistę w tej dziedzinie. Przygotowanie i schemat podawania leku w takiej chemioterapii są także opisane w Chemotherapy Service wyd., M. C. Perry, Williams & Wilkins, Baltimore, MD (1992). Podanie środka chemioterapeutycznego może poprzedzać lub następować po podaniu antagonisty lub można go podać równocześnie. Przy wskazaniach nowotworowych, może być pożądane podawanie również dodatkowych przeciwciał wobec antygenów związanych z nowotworem albo czynników angiogennych, takich jak przeciwciała, które wiążą się z HER2 lub jak czynnik wzrostu śródbłonka naczyń (VEGF). Alternatywnie albo dodatkowo, pacjentowi można podać jednocześnie jedną albo większa liczbę cytokin.
Wynalazek dostarcza ponadto produkt fabryczny zawierający materiały przydatne do leczenia na przykład nowotworu. Produkt fabryczny zawierają pojemnik oraz etykietkę. Odpowiednie pojemniki obejmują na przykład butelki, fiolki i probówki testowe. Pojemniki mogą być wytworzone z rozmaitych materiałów, takich jak szkło albo plastyk. Pojemniki zawierają kompozycję zawierającą opisany tu preparat glikoproteiny. Składnikiem czynnym w kompozycji jest konkretna glikoproteina. Etykietka na pojemniku wskazuje, że kompozycja ma być stosowana do leczenia albo zapobiegania konkretnej choroby albo schorzenia i może również zawierać wskazówki stosowania in vivo, takie jak opisano
PL 213 948 B1 powyżej. Zestaw według wynalazku zawiera pojemnik opisany powyżej i drugi pojemnik zawierający bufor. Może on ponadto zawierać inne materiały pożądane z punktu widzenia handlowego i użytkownika, włączając w to inne bufory, rozcieńczalniki, filtry, igły i strzykawki i wkładki w opakowaniu z instrukcjami stosowania.
Wynalazek został zilustrowany następującymi przykładami.
Przykłady
Aby ocenić rolę fukozylowanego oligosacharydu w funkcji IgG stosowano linię komórkową Lec13 (Ripka i wsp. Arch. Biochem. Biophys. 249: 533-545 (1986)) do wyrażania ludzkiej IgG1. Ta linia komórkowa CHO ma upośledzoną zdolność do dodawania fukozy, ale poza tym dodawała do IgG oligosacharyd, który był podobny do spotykanego w normalnych liniach CHO i w surowicy ludzkiej. Powstałe produkty IgG stosowano do oceny wpływu fukozylowanego węglowodau na funkcje efektorowe przeciwciała, w tym wiązanie ludzkiego FcyR, ludzkiego Clq, ludzkiego FcRn i ADCC stosując ludzkie komórki efektorowe.
P r z y k ł a d 1
Wiązanie do ludzkiego FcR
Konstrukty cDNA do stabilnych linii komórkowych: Łańcuchy ciężki i lekki humanizowanego przeciwciała anty-HER2 (Carter i wsp., Proc. Natl. Acad. Sci. USA, 89: 4285 (1992)), humanizowane, dojrzałe pod względem powinowactwa przeciwciało anty-IgE E27 (patent USA nr 6 172 213) i chimerowe przeciwciało anty-CD20 C2B8 (patent US nr 5 736 137) subklonowano do uprzednio opisanego wektora ekspresyjnego do komórek ssaczych (Lucas i wsp. Nucl. Acid Res. 24, 1774-1779 (1996)).
Stosowano puromycynę jako marker selekcyjny w komórkach DHFR(+), takich jak komórki Lec13 i zatrzymano miejsce DHFR do amplifikacji metotreksatem stabilnej linii komórkowej.
Transfekcja i hodowanie komórek CHO Lec13 i typu dzikiego: linię komórkową CHO ProLec13.6a (Lec13) otrzymano od Profesor Pameli Stanley z Albert Einstein College of Medicine z Yeshiva University. Linie rodzicielskie są Pro- (auksotrof prolinowy) i Gat- (auksotrof glicynowy, adenozynowy i tymidynowy). Linia komórkowa CHO-DP12 stosowana do przeciwciał typu dzikiego jest pochodną linii komórkowej CHO-K1 (ATCC #CCL-61), która ma niedobór reduktazy dihydrofolianu i ma obniżone wymaganie dla insuliny.
Linie komórkowe transfekowano cDNA stosując metodę Superfect (Qiagen, Valencia, CA). Selekcję komórek Lec13 wyrażających transfekowane przeciwciała przeprowadzono stosując dichlorowodorek puromycyny (Calbiochem, San Diego, CA) przy 10 pg/ml w podłożu hodowlanym zawierającym: podłoże MEM Alpha z L-glutaminą, rybonukleozydami i deoksyrybonukleozydami (GIBCO-BRL, Gaithersburg, MD), uzupełnione 10% inaktywowanym FBS (GIBCO), 10 mM HEPES i 1 x penicyliną/streptomycyną (GIBCO). Komórki CHO selekcjonowano podobnie w podłożu wzrostowym zawierającym Hama F12 bez GHT: DMEM z małą ilością glukozy bez glicyny z NaHCO3 uzupełnione 5% FBS (GIBCO), 10 mM HEPES, 2 mM L-glutaminą, 1 x GHT (glicyna, hipoksantyna, tymidyna) i 1 x penicylina/streptomycyna.
Kolonie tworzyły się w ciągu dwóch do trzech tygodni i były łączone do ekspansji i ekspresji białek. Pule komórek pierwotnie zaszczepiano przy 3 x 106 komórek/10 cm płytkę do ekspresji białek na małą skalę. Komórki przenoszono na podłoża bez surowicy po osiągnięciu 90-95% konfluencji i po 3-5 dniach zbierano supernatanty komórek i testowano w ELISA Fc IgG- i nienaruszony IgG aby ocenić poziomy ekspresji białek. Komórki Lec13 i CHO zaszczepiano przy około 8 x 106 komórek/15 cm płytka jednego dnia przed przerzuceniem na podłoże produkcyjne PS24 uzupełnione 10 mg/L zrekombinowanej ludzkiej insuliny i 1 mg/L pierwiastków śladowych.
Ekspresja białek: komórki Lec13 i CHO pozostawały w podłożu produkcyjnym wolnym od surowicy przez 3-5 dni. Supernatanty zbierano i klarowano przez wirowanie w stożkowych probówkach 150 ml aby usunąć komórki i pozostałości. Dodano inhibitory proteaz PMSF i aprotyninę (Sigma, St. Louis, MO) i supernatanty zatężono 5-krotnie na mieszanych komórkach stosując filtry MWCO30 (Amicon, Beverly, MA) przed natychmiastowym oczyszczeniem stosując chromatografię z białkiem G (Amersham Pharmacia Biotech, Piscataway, NJ)). Dla wszystkich białek wymieniono bufor do soli fizjologicznej buforowanej fosforanem (PBS) stosując zatężacze Centripriep-30 (Amicon) i analizowano za pomocą elektroforezy w żelu SDS-poliakryloamid.
Oznaczono stężenia białek stosując A280 i sprawdzono stosując analizę składu aminokwasów.
Średnio komórki Lec13 generowały 10 pg mAb na płytkę 15 cm; ekspresja w kontrolnych komórkach
CHO dla wszystkich przeciwciał była 4-5 razy wyższa niż w komórkach Lec13. Przeciwciała wygenePL 213 948 B1 rowane z CHO-DP12 hodowanych na płytkach będą oznaczane jako CHO-P. Komórki CHO-DP12 5 hodowano także w butelkach do mieszania. Komórki zaszczepiano przy 6 x 105 komórek/ml i hodowano w 37°C przez dwa dni. Trzeciego dnia zmieniono temperaturę na 33°C i pozwolono komórkom na wzrost aż żywotność spadła do 70% ze względu na spadek pH do -6,5. Przeciwciała pochodzące z komórek HO-DP12 hodowanych w butelkach do mieszania będzie określane jako CHO-S.
Analiza poprzez spektrometrię mas przy zastosowaniu laserowej desorpcja/jonizacji z czasem przelotu na matrycy (ang. Matrix-Assisted Laser Desorption/Ionization Time-of-flight, MALDI-TOF) oligosacharydów związanych z asparaginą: oligosacharydy związane przez N uwolniono ze zrekombinowanych glikoprotein stosując procedurę Papac i wsp., Glycobiology 8, 445-454 (1998). Pokrótce, studzienki 96-studzienkowej płytki do mikromiareczkowania wyścielonej PVDF (Millipore, Bedford, MA) kondycjonowano 100 μl metanolu, który był przeciągany przez membrany PDVF przez przyłożenie próżni do wielopróbkowego aparatu próżniowego Millipore Multiscreen. Kondycjonowane membrany PVDF płukano 3 x 250 μl wody.
Między wszystkimi etapami płukania studzienki w pełni opróżniano przykładając niewielką próżnię do aparatu. Membrany płukano buforem do redukcji i karboksymetylacji (RCM) złożonym z 6M chlorowodorku guanidyny, 360 mM Tris, 2 mM EDTA, pH 8,6. Próbki glikoproteiny (50 μg) nanoszono do poszczególnych studzienek, ponownie przeciągano przez membrany PVDF przez zastosowanie niewielkiej próżni i studzienki płukano 2 x 50 μl buforu RCM.
Immobilizowane próbki redukowano przez dodanie 50 μl 0,1M roztworu ditiotreitolu (DTT) do każdej studzienki i inkubację płytki mikrotytracyjnej w 37°C przez 1 godz. DTT usunięto za pomocą próżni i studzienki płukano 4 x 250 μl wody.
Reszty cysteiny karboksymetylowano przez dodatek 50 μl 0,1M roztworu kwasu jodooctowego (IAA), który był świeżo przygotowywany w 1M NaOH i rozcieńczany do 0,1M buforem RCM. Karboksymetylację uzyskano przez inkubację przez 30 min w ciemności w temperaturze otoczenia. Do płytki przyłożono próżnię w celu usunięcia roztworu IAA i studzienki płukano 4 x 250 μl oczyszczonej wody. Membrany PVDF blokowano przez dodatek 100 μl 1% roztworu PVP360 (poliwinylopirolidyna m. cz. 360000) (Sigma) i inkubację przez 1 godz. w temperaturze otoczenia. Usunięto roztwór PVP-360 za pomocą niewielkiej próżni i studzienki przepłukano 4 x 250 μl wody.
Do każdej studzienki dodano roztwór do trawienia PNGase F (New England Biolabs, Beverly, MA), 25 μl roztworu 25 jednostek/ml w 10 mM Tris octan, pH 8,4 i trawiono przez 3 godz. w 37°C. Po trawieniu próbki przeniesiono do 500 ml probówek Eppendorfa i do każdej próbki dodano 2,5 ml roztworu 1,5 M kwasu octowego.
Zakwaszone próbki inkubowano przez 3 godz. w temperaturze otoczenia aby przekształcić oligosacharydy z glikozyloamin do formy hydroksylowej. Przed analizą widm masowych MALDI-TOF uwolnione oligosacharydy odsolono stosując 0,7ml złoże żywicy kationowymiennej (żywica AG50W-X8 w formie wodorowej) (Bio-Rad, Hercules, CA) upakowanej jako zawiesina do zwartych probówek do reakcji (US Biochemical, Cleveland, OH).
Dla analizy spektralnej mas MALDI-TOF próbek na sposób dodatni, odsolone oligosacharydy (próbki 0,5 ml) naniesiono na nierdzewny cel z 0,5 ml matrycy kwasu 2,5 dihydroksybenzoesowego (sDHB), którą przygotowano przez rozpuszczenie 2 mg kwasu 2,5 dihydroksybenzoesowego z 0,1 mg kwasu 5-metoksysalicylowego w 1 ml etanol/10 mM chlorek sodu 1:1 (obj/obj).
Mieszaninę próbka/matryca suszono pod próżnią. W celu analizy w sposobie negatywnym, odsolone oligosacharydy (próbki 0,5 ml) naniesiono na nierdzewny cel z razem z 0,5 ml matrycy 2',4',6'-trihydroksyacetofeno-nowej (THAP) przygotowanej w 1:3 (obj/obj) acetonitryl/13,3 mM bufor cytrynian amonu.
Mieszaninę próbka/matrycę suszono pod próżnią i następnie pozostawiono do wchłonięcia wilgoci z powietrza przed analizą. Uwolnione oligosacharydy analizowano za pomocą MALDI-TOF na spektrometrze masowym PerSeptive BioSystems Voyager-DE. Spektrometr masowy uruchamiano przy 20 kV albo w sposobie dodatnim albo ujemnym z liniową konfiguracją i stosując opóźnioną ekstrakcję. Dane pozyskiwano stosując moc lasera 1300 i w wariancie sumowania danych (240 skany) aby poprawić stosunek sygnału do szumu.
Przyrząd kalibrowano mieszaniną standardowych oligosacharydów i dane wygładzano stosując punktowy algorytm Savitskyego-Golaya przed przypisaniem mas. Integrację danych widm mas uzyskano stosując pakiet oprogramowania Caesar 7.0 (SciBridge Software).
Wyniki podsumowano w następującej tabeli.
PL 213 948 B1
T a b e l a 2
Wiązanie przeciwciał do ludzkiego FcyR
Średnia (S. D.) N %-Fukc % Ga10 %Ga11 %Ga12
1 2 3 4 5 6 7
FYRIa’b
CHO-S 1,00 5 3 53 42 6
HO-P 0,97 (0,07) 5 2 73 25 3
Lec13(A) 1,04 (0,07) 4 92 50 43 1
Lec13(B) 1,04 (0,10) 5 91 55 40 5
FcyRIIA (R131)c
CHO-S 1,00 3 3 53 42 6
CHO-P 0,87 (0,14) 2 2 73 25 3
Lec13(A) 1,70 (0,04) 3 92 50 43 7
Lec13(B) 1,49 (0,16) 3 91 55 40 5
Lec13(C) 1,77 (0,38) 3 93 51 43 7
Lec13(D) 1,71 (0,40) 3 88 51 43 7
Lec13-Avg 1,62 (0,32) 12 91 (2) 52 (2) 42 (2) 7 (1)
FcyRIIA (H131)d
CHO-S 1,00 3 3 53 42 6
CHO-P 0,87 (0,07) 2 2 73 25 3
Lec13(A) 0,93 (0,08) 3 92 50 43 7
Lec13(B) 0,75 (0,07) 3 91 55 40 5
Lec13(C) 0,94 (0,15) 3 93 51 43 7
Lec13(D) 0,91 (0,07) 3 88 51 43 7
Lec13-Avg 0,88 (0,12) 12 91 (2) 52 (2) 42 (2) 7 (1)
FcyRBc
CHO-S 1,00 3 3 53 42 6
CHO-P 0,81 (0,11) 2 2 73 25 3
Lec13(A) 2,27 (0,35) 3 92 50 43 7
Lec13(B) 1,51 (0,22) 3 91 55 40 5
Lec13(C) 2,07 (0,33) 2 93 51 43 7
Lec13(D) 1,60 (0,45) 3 88 51 43 7
Lec13-Avg 1,81 (0,49) 12 91 (2) 52 (2) 42 (2) 7 (1)
FcyRIIIA (F158)e
CHO-S 1,00 3 3 53 42 6
CHO-P 0,94 (0,01) 2 2 73 25 31
Lec13(A) 27,0 (2,1) 3 92 50 43 7
Lec13(B) 22,8 (2,3) 3 91 55 40 5
Lec13(C) 25,1 (2,4) 3 93 51 43 7
Lec13(D) 22,3 (1,0) 3 88 51 43 7,1
Lec13-Avg 24,3 (2,6) 12 91 (2) 52 (2) 42 (2) 7 (1)
PL 213 948 B1 cd tabeli 2
1 2 3 4 5 6 7
HEK2 93-AAA 20,8 (0,9) 2
Lec13-AAA(A) 32,8 1 195 75 22 2
Lec13-AAA(B) 32,9 (2,9) 3 92 75 22 3
Lec13-AAA(C) 34,8 (3,0) 2
Lec13-AAA-Avg 33,5 (2,1) 6
FcyRIIIA (F158)f
HEK293 1,00 2
DP12 0,35 (0,01) 2
Lec13 7,63 (0,20) 2
FcyRIIIA (F158)g
HEK293 1,00 3
CHO-P 0,65 (0,24) 3
Lec13 1,92 (0,39) 3
HEK293-AAA 1,87 (0,24) 3
FcyRIIIA (F158) - transfekowane komórki CHOh
CHO-S 1,00 4
Lec13-D 15,7 2,4 4
Lec13-E 17,0 3,1 3
Lec13-F 15,8 3,2 3
Lec13-Avg 16,1 2,5 10
HEK2 93-AAA 10,7 1,4 3
Lec13-AAA-B 26,8 6,6 3
Lec13-AAA-C 25,9 5,9 3
Lec13-AAA-Avg 26,4 5,6 6
FcyRIIIA (V158)e
CHO 1,00 3 3 53 42 6
DP12 0,61 (0,01) 2 2 73 25 3
Lec13(A) 14,9 (2,9) 3 92 50 43 7
Lec13(B) 12,5 (1,3) 3 91 55 40 5
Lec13(C) 12,6 (3,3) 3 93 51 43 7
Lec13(D) 14,5 (1,9) 3 88 51 43 7
Lec13-Avg 13,6 (2,4) 12 91 (2) 52 (2) 42 (2) 7 (1)
HEK2 93-AAA 9,3 1
Lec13-AAA(A) 25,4 1 95 75 22 2
Lec13-AAA(B) 23,8 (1,1) 3 92 75 22 3
Lec13-AAA(C) 22,5 (0,2) 2
Lec13-AAA-Avg 23,1 (1,4) 6
PL 213 948 B1 cd tabeli 2
1 2 3 4 5 6 7
FcyRIIIA (V158)f
HEK293 1,00 2
CHO-P 0,32 (0,01) 2
Lec13 6,44 (0,19) 2
FcyRIIIA (V158)g
HEK293 1,00 3
CHO-P 1,00 (0,13) 3
Lec13 1,18 (0,10) 3
HEK293-AAA 1,15 (0,05) 3
Wszystkie wartości są stosunkiem A(wariant)/A(standard) mierzonymi przy A490nm<· CHO-S przedstawia IgG wyrażaną przez komórki CHO w butelkach do mieszania, CHO-P przedstawia IgG wyrażaną przez komórki CHO na płytkach 15 cm, Lec13 przedstawia IgG wyrażaną przez komórki Lec 13 na płytkach, HEK293 przedstawia IgG wyrażaną ludzkie komórki nerki 293, AAA przedstawia wariant IgG1 Ser298Ala/Glu333Ala/Lys334Ala, Lec13-S przedstawia IgG wyrażaną przez komórki Lec13 w butelkach do mieszania (zamiast płytek), litery w nawiasach przedstawiają niezależnie wyrażane partie IgG b dimery Hu4D5 przy [mAb] = 0,12 pg/ml c %-Fuk to procent całkowitego oligosacharydu bez fukozy, %Ga10, %Ga11, %Ga12 to procent całkowitego oligosacharydu bez (agalaktozyl), z jedną (monogalaktozyl), lub dwiema (digalaktozyl) resztami galaktozy kowalencyjnie związanymi z końcowymi resztami mannozy. Wartości w nawiasach są odchyleniami od średniej dla czterech niezależnie wyrażanych partii Lec13-Hu4D5 d dimery Hu4D5 przy [mAb] = 3,33 pg/ml e dimery Hu4D5 przy [mAb] = 1,11 pg/ml f dimery Hu4D5 przy [mAb] = 0,12 pg/ml g dimery E27 przy [mAb] = 0,12 pg/ml h heksamery E27 przy [mAb] = 0,12 pg/ml
Oznaczenia do mierzenia wiązania IgG1 do FcYR i FcRn (oparte na ELISA i w komórkach) opisano uprzednio (Shields i wsp. J. Biol. Chem. 27 6: 6591-6604 (2001) i WO 00/42072 (Presta).
Monomeryczna Lec13-Hu4D5 IgG1 wiązała ludzki FcYRI równoważnie do wiązania Hu4D5-CHO-S i CHO-P (fig. 4; tabela 2). Choć obecność węglowodanu jest potrzebna dla wiązania FcYRI (Walker i wsp. Biochem. J. 259: 347-353 (1989)), równoważne wiązanie IgG1 niezależnie od różnic w zawartości fukozy (Lec13 w porównaniu z CHO) lub zawartości galaktozy (CHO-P w porównaniu z CHO-S) wykazuje, że ludzki FcYRI nie jest wrażliwy na obecność tych reszt na węglowodanie. Wpływ galaktozylacji na wiązanie IgG do ludzkiego FcYRI badano uprzednio (Wright i wsp. J. Immunol. 160: 3393-3402 (1998); Kumpel i wsp. Human Antibod. Hybridomas 5: 143-151 (1994); i Tsuchiya i wsp. J. Rheumatol. 16: 285-290 (1989)) i przegląd tych danych sugeruje, że jeśli galaktozylacja ma wpływ na wiązanie FcYRI, jest on subtelny i może być zależny od izotypu (Wright i wsp. J. Immunol. 160: 3393-3402 (1998)).
W przeciwieństwie do monomerycznego wiązania IgG1 do ludzkiego FcYRI oznaczenie wiązania dla ludzkiego FcYR o niskim powinowactwie (FcYRII, FcYRIII) wymagało tworzenia dimerów (Hu4D5, HuE27) lub heksamerów (HuE27) aby spowodować wykrywanie wiązania. Ludzki FcYRIIA ma dwa znane, występujące naturalnie allotypy, które są określane przez aminokwas w pozycji 131 (Clark i wsp. J. Immunol. 143: 1731-1734 (1989)).
Ludzki FcYRIIIA ma naturalnie występujące allotypy w pozycji 48 (Leu, His lub Arg) i w pozycji 158 (Val lub Phe); allotyp FcYRIIIA (Val158) oddziałuje z ludzką IgG lepiej niż allotyp FcYRIIIA (Phel58) (Shields i wsp. J. Biol. Chem. 276: 6591-6604 (2001); Koene i wsp. Blood 90: 1109-1114 (1997); i Wu i wsp. J. Clin. Invest. 100: 1059-1070 (1997)).
Wiązanie dimerów Lec13-Hu4D5 do ludzkiego FcYRIIB i polimorficznej formy R131 ludzkiego FcYRIIA wykazało 1,8-krotną i 1,6-krotną poprawę wiązania, odpowiednio w porównaniu z CHO-Hu4D5 (fig. 5, 6; tabela 2). Przeciwnie, brak fukozy nie wpływał na wiązanie do polimorficznej formy H131 ludzkiego FcYRIIA (fig. 7; tabela 2).
Podobna poprawa wiązania IgG1 bez fukozy do zarówno ludzkiego FcYRIIA (R131) i FcYRIIB, z których każdy ma argininę w pozycji 131, w porównaniu z brakiem efektu na FcYRIIA (H131) sugeruje, że fukoza może albo bezpośrednio oddziaływać z resztą FcYR pozycji 131 lub zmienia konformację
PL 213 948 B1
IgG1 tak, by wywierać subtelny, negatywny wpływ na wiązanie gdy arginina jest obecna w FcyR w pozycji 131.
Obie polimorficzne formy FcyRIIIA wykazały znacząco ulepszone wiązanie do IgG1 pozbawionej fukozy. Wiązanie dimerycznego Lec13-Hu4D5 do FcyRIIIA (V158) wykazało 14-krotną poprawę w stosunku do CHO-Hu4D5 (fig. 8; tabela 2) i wiązanie do FcyRIIIA (F158) wykazało przynajmniej 100-krotną poprawę (fig. 9). Dimery Lec13-HuE27 też wykazały poprawione wiązanie do obu polimorficznych form FcyRIIIA (fig. 10, 11; tabela 2).
W uprzednich badaniach wpływu wariantów sekwencji białka ludzkiej IgG1 na wiązanie do ludzkiego FcyR, stosowano heksameryczne kompleksy złożone z trzech anty-IgE E27 i trzech IgE (Shields i wsp. J. Biol. Chem. 276: 6591-6604 (2001)); stąd też te kompleksy są trimerami w anty-IgE E27. W tamtych badaniach poprawa wiązania wariantu S298A/E333A/K334A-IgG1 do FcyRIIIA (F158) i FcyRIIIA (V158) była 1,5- do 2-krotna i 1,1-krotna, odpowiednio; choć poprawa może wydawać się minimalna, wpływ na ADCC był znaczący (Shields i wsp. J. Biol. Chem. 276: 6591-6604 (2001)).
W obecnych badaniach, heksameryczny kompleks S298A/E333A/K334A-IgG1 wykazał poprawione wiązanie do obu polimorficznych form FcyRIIIA zgodnie z wartościami z poprzednich badań (fig. 12, 13; tabela 2); podobnie heksameryczny kompleks Lec13-HuE27 (natywna IgG1) wykazał polepszone wiązanie około 2-krotne do FcyRIIIA (F158) (tabela 2). Gdy były oznaczane jako dimery, S298A/E333A/K334A-wariant IgG1 z fukozą wykazał 9-krotną i 20-krotną poprawę w wiązaniu FcyRIIIA (V158) i FcyRIIIA (F158), odpowiednio; ten sam wariant bez fukozy wykazał jeszcze większą poprawę wiązania do polimorficznych form 21-krotny i 33-krotny, odpowiednio (tabela 2).
Tak więc, brak fukozy nie tylko zwiększa wiązanie natywnej IgG1 do FcyRIIIA ale także może zwiększyć wiązanie wariantów IgG1. Tak więc, zmiany białka i węglowodanu są synergistyczne.
Dla wszystkich form HuE27 (natywna, S298A/E333A/K334A-IgG1, pochodząca z Lec13), poprawa wiązania większego kompleksu (trimeryczny w HuE27) była znacznie mniejsza niż obserwowana dla tego samego mAb jako kompleksu dimerycznego. Na przykład, wiązanie Lec13-HuE27 jako dimeru wykazało około 20-krotną poprawę, ale tylko 2-krotną poprawę dla większego kompleksu (tabela 2). Sugeruje to, że jako że wielkość kompleksu awidyczności może zacząć dominować nad wiązaniem.
Poprawione wiązanie się IgG1 z brakiem fukozy z FcyRIIIA potwierdzono z pełnej długości łańcuchem a FcyRIIIA (Phe158) wyrażanym razem z łańcuchem y na komórkach CHO (fig. 28; tabela 2). W przypadku samej fuzji białkowej łańcucha α w teście ELISA, niedobór fukozy był synergistyczny z wariantem S298A/E333A/K334A-IgG1.
Oceniano także wiązanie natywnęj i pozbawionej fukozy IgG1 do mysich FcyRII i FcyRIII. Ludzka IgG1, nawet jako dimery, słabo wiąże się do tych receptorów i nie stwierdzono poprawy wiązania z IgG1 bez fukozy. Inny receptor dla IgG, noworodkowy receptor Fc (FcRn), jest strukturalnie niespokrewniony z FcyR (Burmeister i wsp. Nature 372: 379-383 (1994); i Raghavan i wsp. Annu. Rev. Cell Dev. Biol. 12: 181-220 (1996)) i zaproponowano, że bierze udział w szeregu procesów biologicznych, w tym szybkości kliransu IgG (Ghetie i wsp. Annu. Rev. Immunol. 18: 739-766 (2000)).
Wiązanie fukozylowanych i nie-fukozylowanych IgG1 do FcRn było równoważne (fig. 14). To nie jest dziwne ponieważ aglikozylowana IgG1 wiąże ten receptor podobnie do glikozylowana IgG1 (agliko Ab wiąże FcRn).
Brak fukozy na węglowodanie związanym z Asn297 dał znacząco poprawione wiązanie do ludzkiego FcyRIIIA (obu form polimorficznych F158 i V158) w oznaczeniu w formacie ELISA. Zwiększone wiązanie do FcyRIIIA zostało dalej wzmocnione przez zdolność IgG fukoza-minus do wzmagania cytotoksyczności w oznaczeniach ADCC stosujących oczyszczone ludzkie PBMC. Poprawiona cytotoksyczność była szczególnie widoczna przy niższych stężeniach przeciwciała, sugerując, że terapeutyczne przeciwciała, które stosują ADCC mogłyby być podawane przy niższej dawce aby zapewnić ekwiwalentne zabijanie komórek jak wyższa dawka fukozylowanej IgG.
Stwierdzono mniejszą poprawę w wiązaniu IgG fukoza-minus do ludzkiego FcyRIIA (R131) i FcyRIIB; nie stwierdzono różnicy dla ludzkiego FcyRIIA(H131). Dwa pierwsze receptory mają argininę w pozycji 131, implikując, bez ograniczania się do tej teorii, że w fukozylowanej IgG reszta fukozy może albo oddziaływać bezpośrednio (i ewidentnie, negatywnie) z resztą 131 FcyRII lub może subtelnie wpływać na konformację IgG, co daje w efekcie interakcję negatywną.
Chociaż poprawa wiązania IgG fukoza-minus do FcyRIIA (R131) i FcyRIIB w oznaczeniach w formacie ELISA było małe (~ 2-krotne), oznaczenia ADCC stosujące monocyty także wykazały pewną zwiększoną cytotoksyczność przy niższych stężeniach przeciwciała. Monocyty wyrażają FcyRI,
PL 213 948 B1
FcyRIIA, FcyRIIB i tylko subpopulacja monocytów wyraża FcyRIIIA. Ponieważ wiązanie do ludzkiego FcyRI było równoważne dla zarówno fukozylowanej IgG i IgG fukoza-minus, poprawa w ADCC najprawdopodobniej nie jest wynikiem różnicowej interakcji z FcyRI. Zarówno monocyty dawcy FcyRIIA (R131/R131) i FcyRIIA (H131/H131) wykazały pewną poprawę w ADCC (fig. 21, 22) sugerując bez ograniczania się do dowolnej jednej teorii, że:
(1) FcyRIIA może nie być wyrażany na dostateczne wysokim poziomie na monocytach aby wykazać różnicę między dwiema formami polimorficznymi, (2) FcyRIIB może być dominującym wiązaniem FcyR (wpływając ekwiwalentnie na zarówno monocyty R131/R131 i H131/H131) lub (3) subpopulacja monocytów wyrażających FcyRIIA jest odpowiedzialna za poprawiony ADCC.
Porównanie węglowodanu obecnego na natywnej IgG z IgG1 produkowaną przez Lec13 i przez
CHO nie wykazywało wyraźnych różnic w stopniu galaktozylacji i tak więc wyniki mogą być przypisane wyłącznie obecności/brakowi fukozy.
Jednak dla wariantu IgG1 S298A/E333A/K334A produkowana przez Lec13, HEK293 i DP12 IgG1 wykazała zróżnicowaną galaktozylację. Jednak kombinacja wariantów sekwencji białka i braku fukozy nie wydawały się być addytywne.
Uprzednie badania wariantów sekwencji białka ludzkiej IgG wykazały, że podstawienia alaniny (i inne) w niektórych pozycjach Fc mogły zmniejszać lub poprawić wiązanie do FcyR jak i wykazywać poprawione ADCC (Shields i wsp. J. Biol. Chem. 276 (9): 6591-6604 (2001)). Jest interesujące, że niektóre z nich nie były w pobliżu interfejsu interakcji spotykanego w strukturze kryształu kompleksu Fc ludzkiej IgG-ludzki FcyRIIIA (Sondermann i wsp. Nature 406: 267-273 (2000)).
Na przykład, z trzech podstawień alaniną S298A/E333A/K334A stosowanych w tych badaniach tylko S298 jest na złączu Fc-FcyRIIIA w strukturze kryształu. Podobnie w strukturze ko-kryształu żadna z obu reszt fukozy na dwóch ciężkich łańcuchach Fc oddziałuje z FcyRIIIA. Inspekcja struktur kryształów Fc or IgG ludzkich lub gryzoni wykazuje, że fukoza może przyjmować zmienne konformacje i wykazuje wysokie czynniki B, sugerując wysoki stopień mobilności.
Normalne komórki CHO i HEK293 dodają fukozę do oligosacharydu IgG w wysokim stopniu (97-98%). IgG z surowic są także wysoce fukozylowane.
P r z y k ł a d 2
Wiązanie Clq i FcRn
Wiązanie Clq do przeciwciał jest pierwszym etapem w klasycznym szlaku aktywacji dopełniacza (Makrides, S. C. Pharmacol. Rev. 50: 59-87 (1998)). Charakter węglowodanu na IgG wpływa na oddziaływanie z Clq (Wright i wsp. J. Immunol. 160: 3393-3402 (1998); Boyd i wsp. Molec. Immunol. 32: 1311- 1318 (1995); i Tsuchiya i wsp. J. Rheumatol. 16: 285-290 (1989)). Hu4D5 wiąże ludzki Clg słabiej niż RITUXAN©, chimerowa IgG1 mysz/człowiek anty-CD20 (fig. 15, 16) (Idusogie i wsp. J. Immunol. 164: 4178-4184 (2000)) i brak fukozy nie wpływał na zdolność Hu4D5 do interakcji z ludzkim Clq (fig. 15, 16). Podobnie obecność lub brak fukozy nie wydają się wpływać na wiązanie IgG1 do FcRn.
P r z y k ł a d 3
Cytotoksyczność komórkowa zależna od przeciwciała (ADCC)
Wpływ braku fukozy na ADCC oceniano stosując Lec13-Hu4D5 IgG1 na linię ludzką raka piersi SK-BR-3 (Hudziak i wsp. Mol. Cell Biol. 9: 1165-1172 (1989)). PBMC od dwóch dawców Fc(RIIIA (V158/F158) i dwóch dawców FcyRIIIA (F158/F158) stosowano jako komórki efektorowe w stosunku efektor:cel 30:1. U wszystkich dawców IgG1 bez fukozy wykazał znaczącą poprawę w ADCC w porównaniu z IgG1 z fukozą (fig. 17-20). Istotne jest, że dla wszystkich dawców poprawa cytotoksyczności była bardziej widoczna w miarę obniżana stężenia przeciwciała. To może być odbiciem większej poprawy wiązania obserwowanej dla dimerów w porównaniu z heksametrami, tzn. wariant fuktozaminus może wymagać mniej mAb na powierzchni komórki docelowej aby wpłynąć na wiązanie/aktywację komórki efektorowej.
Ludzkie monocyty wyrażają FcyRI, FcyRIIA, FcyRIIB i tylko subpopulacja wyraża FcyRIIIA. Ponieważ brak fukozy nie wpływał na wiązanie do FcyRI ale miał niewielki wpływ na wiązanie do FcyRIIA (R131) i FcyRIIB, przeprowadzono oznaczenia ADCC stosując oczyszczone ludzkie monocyty jako komórki efektorowe przy stosunkach efektor: cel 20:1, 10:1 i 5:1. Oczyszczanie monocytów jest trudniejsze niż oczyszczanie PBMC i z tego powodu oznaczenie ADCC jest trudniejsze. Jak z ADCC PBMC, ADCC monocytów wykazywały poprawioną cytotoksyczność dla IgG1 pozbawionej fukozy choć efekt wydaje się mniej wyraźny i zdolność monocytów do zabijania docelowych komórek jest obniżona w porównaniu z PBMC (fig. 21-22).
PL 213 948 B1
P r z y k ł a d 4
Aktywność ADCC przeciwciał z wariantem Fc
Następujące doświadczenia porównywały:
(1) Hu4D5 wyrażany w komórkach CHO (Hu4D5 CHO-S), (2) wariant Hu4D5 z niedoborem fukozy wyrażany w komórkach Lec13 (hu4D5 Lec13), (3) wariant Hu4D5 z podstawieniem potrójnym alaniny w domenie Fc wyrażany w komórkach 293 HEK (Hu4D5 HEK293-AAA) i (4) wariant Hu4D5 z podstawieniem potrójnym alaniny w domenie Fc wyrażany w komórkach Lec13 (Hu4D5-Lec13-AAA).
Metody ADCC: komórki naturalnych zabójców (NK) oczyszczono z obwodowej krwi 2 dawców stosując negatywną selekcję z paciorkami magnetycznymi (Miltenyi Biotech, Auburn, CA). Dawców wybrano tak, by byli homozygotyczni względem allelu wyrażającego formę F158 FcyR3 (CD16)(F/F158) (Shields i wsp., J. Biol. Chem. 27 6: 6591-6604 (2001)), która wykazuje fenotyp wiązania o niższym powinowactwie dla IgG.
Komórki raka piersi SKBR-3 z nadekspresją HER2 oposonizowano z I ng/ml każdego przeciwciała przez 45 minut w 25°C w podłożach do oznaczeń (50:50 Hams F12: DMEM zawierające 1% inaktywowaną termicznie płodową surowicę bydlęcą i 10 mM bufor Hepes) i następnie traktowano różnymi stężeniami komórek NK ze stosunkiem efektora do celu (E:T) w zakresie od 0:1 do 0,156 przez 5 godzin w 37°C w nawilżanym inkubatorze CO2. Cytotoksyczność mierzono na podstawie uwalniania dehydrogenazy mleczanowej (LDH) stosując handlowy zestaw (Roche Diagnostics, Indianapolis, IN).
Metoda barwienia komórek NK za pomocą pośredniej immunofluorescencji: oczyszczone komórki NK inkubowano z 2 μg/ml każdego wariantu Hu4D5 przez 30 min. w 4°C w buforze do barwienia (sól fizjologiczna buforowana fosforanem, 0,1% bydlęca albumina surowicza, 0,01% azydek sodu). Komórki płukano 3 razy i inkubowano z połączonym z fikoerytryną mysim mab anty-ludzki CD56 (Pharmingen, San Diego, CA) i FITC - kozi F(ab')2 specyficzny wobec ludzkiej IgG (F(ab')2 (Jackson Immunoresearch, West Grove, PA) przez dodatkowe 30 min. w 4°C.
Komórki analizowano pod kątem 2-barwnego barwienia immunofluorescencyjnego na cytometrze przepływowym 2 barwnym FACS-can™ (B. D. Biosciences, San Jose, CA).
Wniosek: u obu dawców (5365 i 7580), wystąpiła zwiększona aktywność ADCC przy stosunkach E/T większych niż 2 (patrz figury 26 i 27) dla formy Hu4D5-Lec13-AAA Hu4D5 względem formy Hu4D5-Lec13, co sugeruje synergistyczne zwiększenie wiązania FcyRIII/ADCC w potrójnym alaninowym wariancie Fc z brakiem fukozy.
To zwiększone wiązanie potwierdzono poprzez barwienie z pośrednią immunofluorescencją komórek NK u dawcy 5365 (patrz figury 24 i 25) w komórkach NK wyrażających CD56/CD16.
PL 213 948 B1
Lista sekwencji <110> Genenteeh, Inc.
<12 0> Kompozycje glikoprotein <130> P1877R1PCT <140> PCT/US02/33739 <141> 2002-10-22 <150> US 60/337,642 <151> 2001-10-25 <150> US 60/347,694 <151> 2002-01-09 <160> 9 <21Q> 1 <211> 218 <212> PRT <213> homo sapiens <400> 1
Pro 1 Ala Pro Glu Leu 5 Leu ciy Gly Pro Ser 10 Val Phe Leu Phe Pro 15
Pro Lys Pro Lys ASp 20 Thr Leu Met Ile Ser 25 Arg Thr Pro Glu Val 30
Thr Cys Val Val Val 35 Asp Val Ser His Glu 40 Asp Pro Glu Val Lys 45
Phe Asn Trp Tyr Val 50 Asp Gly Val Glu Val 55 His Asn Ala Lys Thr 60
Lys Pro Arg Glu Glu 65 Gin Tyr Asn Ser Thr 70 Tyr Arg Val Val Ser 75
Val Leu Thr Val Leu 80 His Gin Asp Trp Leu 85 Asn Gly Lys Glu Tyr 90
Lys Cys Lys Val Ser 95 Asn Lys Ala Leu Pro 100 Ala Pro Ile Glu Lys 105
Thr Ile Ser Lys Ala 110 Lys Gly Gin Pro Arg 115 Glu Pro Gin Val Tyr 120
Thr Leu Pro Pro Ser 125 Arg Glu Glu Met Thr 130 Lys Asn Gin Val Ser 135
Leu Thr Cys Leu Val 140 Lys Gly Phe Tyr Pro 14 5 Ser Asp Ile Ala Val 150
Glu Trp Glu Ser Asn 155 Gly Gin Pro Glu Asn 160 Asn Tyr Lys Thr Thr 165
Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
PL 213 948 B1
Leu Thr Val ASp Lys 185 Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val 190 Phe Ser 195
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys
200 205 210
Ser Leu. Ser Leu Ser Pro Gly Lys
215
<210> 2
<211> 218
<212> PR?
<213> homo sapiens
<4Q0> 2
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro
1 5 10 15
Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
20 25 30
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys
35 40 45
Phe Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr
50 55 60
Lys Pro Arg Glu Glu Gin Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
65 70 75
Val Leu Thr Val Leu His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr
80 85 90
Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys
95 100 105
Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr
110 115 120
Thr Leu Pro Pro Ser Arg Asp Glu Leu Thr Lys Asn Gin Val Ser
125 130 135
Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Al a Val
140 145 150
Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr
155 160 165
Pro Pro Val lj O Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
170 175 180
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser
185 190 195
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys
200 205 210
Ser Leu Ser L Ser Pro Gly Lys
215 <210> 3
PL 213 948 B1 <211> 217 <212> PRT <213> homo sapiens
<400> 3 Alei Gly Pro Ser Val 10 Phe Leu Phe Pro Pro 15
Pro 1 Ara Pro Pro Vai 5
Lys Pro Lys Asp Thr Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr
20 25 30
Cys Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gin Phe
35 40 45
Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys
50 55 60
Pro Arg Glu Glu Gin Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val. Ser Val
65 70 75
Leu Thr Val Val His Gin Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys
80 85 90
Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr
95 100 105
Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr Thr
110 115 120
Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gin Val Ser Leu
125 130 135
Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Al a Val Glu
140 145 150
Trp Glu Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro
1S5 160 165
Pro Met Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys Leu
170 175 180
Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Val Phe Ser Cys
185 190 195
Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys Ser
200 205 210
leu Ser leu Ser Pro Gly Lys
215 <210> 4 <211> 218 <212> PRT <213> homo sapiens <400> 4
Pro 1 Ala Pro Glu Leu 5 Leu Gly Gly Pro Ser 10 Val Phe Leu Phe Pro 15
Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val
25 30
PL 213 948 B1
Thr Cys Val Val Val 35 Asp val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Gin
40 45
Phe Lys Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr
50 55 60
Lys Pro Arg Glu Glu Gin Phe Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser
65 70 75
Val Łeu Thr Val Leu His Gin ASP Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr
80 85 90
Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys
95 100 105
Thr Ile Ser Lys Thr Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr
110 115 120
Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu Met Thr Lys Asn Gin Val Ser
125 130 135
Leu Thr Cys Leu val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val
140 145 150
Glu Trp Glu Ser Ser Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Asn Thr Thr
155 160 165
Pro Pro Met Łeu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Lys
170 175 180
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Gin Gly Asn Ile Phe Ser
185 190 195
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn Arg Phe Thr Gin Lys
200 205 210
Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys
215 <210> 5 <211> 218 <212> PRT <213> homo sapiens <400> 5
Pro 1 Ala Pro Glu Phe 5 Leu Gly Gly Pro Ser 10 Val Phe Leu Phe Pro 15
Pro Lys Pro Lys Asp 20 Thr Leu Met Ile Ser 25 Arg Thr Pro Glu Val 30
Thr Cys Val Val Val 35 Asp Val Ser Gin Glu 40 Asp Pro Glu Val Gin 45
Phe Asn Trp Tyr Val 50 Asp Gly Val Glu Val 55 His Asn Ala Lys Thr 60
Lys Pro Arg Glu Glu CjJl π Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser
10 75
PL 213 948 B1
Val Leu Thr Val Leu 80 His Gin Asp Trp Leu 85 Asn Gly Lys Glu Tyr 90
Lys Cys Lys Val Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys
95 100 105
Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly Gin Pro Arg Glu Pro Gin Val Tyr
110 115 120
Thr Leu Pro Pro Ser Gin Glu Glu Met Thr Lys Asn Gin Val Ser
125 130 135
Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val
140 145 150
Glu Trp Glx Ser Asn Gly Gin Pro Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr
155 160 165
Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe Leu Tyr Ser Arg
17 0 175 180
Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gin Glu Gly Asn Val Phe Ser
185 190 195
Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr Gin Lys
200 205 210
Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys
215 <210> 6 <211> 215 <212> PRT <213> Mus musculus <400> δ
Thr 1 Val Pro Glu Val 5 Ser Ser Val Phe Ile 10 Phe Pro Pro Lys Pro 15
Lys Asp Val Leu Thr 20 Ile Thr Leu Thr Pro 25 Lys Val Thr Cys Val 30
Val Val Asp I le Ser 35 Lys Asp Asp Pro Glu 40 Val Gin Phe Ser Trp 4 5
Phe Val Asp Asp Val 50 Glu Val His Thr Ala 55 Gin Thr Gin Pro Arg 60
Glu Glu Gin Phe Asn 65 Ser Thr Phe Arg Ser 70 Val Ser Glu Leu Pro 75
Ile Met His Gin Asp 80 Cys Leu Asn Gly Lys 85 Glu Phe Lys Cys Arg 90
Val Asn Ser Ala Ala 95 Phe Pro Ala Pro Ile 100 Glu Lys Thr Ile Ser 105
Lys Thr Lys Gly Arg 110 Pro Lys Ala Pro Gin 115 Val Tyr Thr Ile Pro 120
Pro Pro Lys Glu Gin. Met Ala Lys Asp Lys Val Ser Leu Thr Cys
PL 213 948 B1
125 130 135
Met Ile Thr Asp Phe 140 Phe Pro Glu Asp Ile 145 Thr Vai Glu Trp Gin 150
Trp Asn Gly Gin Pro Ala Glu Asn Tyr Lys Asn. Thr Gin Pro Tle
155 160 165
Met Asp Thr Asp Gly Ser Tyr Phe Val Tyr Ser Lys Leu Asn Val
170 175 180
Gin Lys Ser Asn Trp Glu Ala Gly Asn Thr Phe Thr Cys Ser Val
185 190 195
Leu His GXxi Gly Leu His Asn His His Thr Glu Lys Ser Leu Ser
200 205 210
His Ser Pro Gly Lys
215 <210> 7 <211> 218 <212.'- PRT <213> Mus musculus <400> 7
Pro 1 Ala Pro Asn Leu 5 Leu Gly Gly Pro Ser 10 Val Phe Ile Phe Pro 15
Pro Lys Ile Lys Asp 20 Val Leu Met Ile Ser 25 Leu Ser Pro Ile Val 30
Thr Cys Val Val Val 35 Asp Val Ser Glu Asp 40 Asp Pro Asp Val Gin 45
Ile Ser Trp Phe Val 50 Asn Asn Val Glu Val 55 His Thr Ala Gin Thr 60
Gin Thr His Arg Glu 65 Asp Tyr Asn Ser Thr 70 Leu Arg Val Val Ser 75
Ala Leu Pro Ile Gin 80 His Gin Asp Trp Met 85 Ser Gly Lys Glu Phe 90
Lys cys Lys Val Asn 95 Asn Lys Asp Leu Pro 100 Ala Pro Ile Glu Arg 105
Thr Ile Ser Lys Pro 110 Lys Gly Ser Val Arg 115 Ala Pro Gin Val Tyr 120
Va.l Leu Pro Pro Pro 125 Glu Glu Gili Met Thr 130 Lys Lys Gin Val Thr 135
Leu Thr Cys Met Val 140 Thr Asp Phe Met Pro 145 Glu Asp Ile Tyr Val 150
Glu Trp Thr Asn Asn 155 Gly Łys Thr Glu Leu 160 Asn Tyr Lys Asn Thr 165
Glu Pro Val Leu Asp 170 Ser Asp Gly Ser Tyr 175 Phe Met Tyr Ser Lys 180
PL 213 948 B1
Leu Arg Val Glu Lys Lys Asn Trp Val Glu Arg Asn Ser Tyr Ser
185 190 195
Cys Ser val Val His Glu Gly Leu His Asn His His Thr Thr Lys
200 205 210
Ser Phe Ser Arg Thr Pro Gly Lys
215 <210> 8 <2łl> 218 <212> PRT <213> Mus musculus <400> 8
Pro Ala 1 Pro Asn Leu Glu Gly Gly Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro 15
5 10
Pro Asn Ile Lys Asp Val Leu Met Ile Ser Leu Thr Pro Lys val
20 25 30
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Glu Asp Asp Pro Asp Val Gin
35 40 45
Ile Ser Trp Phe vai Asn Asn Val Glu Val His Thr Ala Gin Thr
50 55 60
Gin Thr His Arg Glu Asp Tyr Asn Ser Thr Ile Arg Val Val Ser
65 70 75
His Leu Pro Ile Gin His Gin Asp Trp Met Ser Gly Lys Glu Phe
80 85 90
Lys Cys Lys Val Asn Asn Lys Asp Leu Pro Ser Pro Ile Glu Arg
95 100 105
Thr Ile Ser Lys Pro Lys Gly Leu Val Arg Ala Pro Gin Val Tyr
110 115 120
Thr Leu Pro Pro Pro Ala Glu Gin Leu Ser Arg Lys Asp Val Ser
125 130 135
Leu Thr Cys Leu Val Val Gly Phe Asn Pro Gly Asp Ile Ser Val
140 145 150
Glu Trp Thr Ser Asn Gly His Thr Glu Glu Asn Tyr Lys Asp Thr
155 160 165
Ala Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Tyr Phe Ile Ser Lys
170 175 180
Leu Asn Met Lys Thr Ser Lys Trp Glu Lys Thr Asp Ser Phe Ser
185 190 195
Cys Asn Val Arg His Glu Gly Leu Lys Asn Tyr Tyr Leu Lys Lys
200 205 210
Thr Tle Ser Arg Ser Pro Gry Lys
215
PL 213 948 B1 <210> 9 <211> 218 < 212 > PRT <213> Mus musculus <400> 9
Pro 1 Pro Gly Asn Ile 5 Leu Gly Gly Pro Ser 10 Val Phe Ile Phe Pro 15
Pro Lys Pro Lys Asp Ala Leu Met Ile Ser Leu Thr Pro Lys Val
20 25 30
Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Glu Asp Asp Pro Asp Val His
35 40 45
Val Ser Trp Phe Val Asp Asn Lys Glu Val His Thr Ala Trp Thr
50 55 60
Gin Pro Arg Glu Ala Gin Tyr Asn Ser Thr Phe Arg Val Val Ser
65 70 75
Ala Leu Pro Ile Gin His Gin Asp Trp Met Arg dy Lys Glu Phe
80 85 90
Lys Cys Lys Val Asn Asn Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Arg
95 100 105
Thr Ile Ser Lys Pro Lys Gly Arg Ala Gin Thr Pro Gin Val Tyr
110 115 120
Thr Ile Pro Pro Pro Arg Glu Gin Met Ser Lys Lys Lys Val Ser
125 130 135
Leu Thr Cys Leu val Thr Asn Phe Phe Ser Glu Ala Ile Ser Val
140 145 150
Glu Trp Glu Arg Asn Gly Glu Leu Glu Gin Asp Tyr Lys Asn Thr
155 160 165
Pro Pro Ile Leu Asp Ser Asp Gly Thr Tyr Phe Leu Tyr Ser Lys
170 175 180
Leu Thr Val Asp Thr Asp Ser Trp Leu Gin Gly Glu Ile Phe Thr
185 190 195
Cys Ser Val Val His Glu Ala Leu His Asn His His Thr Gin Lys
200 205 210
Asn Leu Ser Arg Ser Pro Gly Lys
215

Claims (65)

1. Kompozycja, znamienna tym, że zawiera glikoproteinę posiadającą region Fc ludzkiej IgG, przy czym 51-100% tej glikoproteiny w kompozycji zawiera strukturę dojrzałego rdzenia węglowodanowego, pozbawionego fukozy, przyłączonego do regionu Fc glikoproteiny, przy czym region Fc zawiera sekwencję aminokwasową, która różni się od natywnej sekwencji regionu Fc ludzkiej IgG i gdzie glikoproteina ta:
(a) wiąże się z FcyRIII z większym powinowactwem; lub (b) pośredniczy w zależnej od przeciwciała toksyczności za pośrednictwem komórek (ADCC) bardziej skutecznie niż glikoproteina ze strukturą dojrzałego rdzenia węglowodanowego zawierającego fukozę, przyłączoną do regionu Fc glikoproteiny i fizjologicznie akceptowalny nośnik, zaróbkę lub stabilizator.
2. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że region Fc zawiera podstawienia aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 256, 290, 298, 312, 326, 330, 333, 334, 360, 378 lub 430, stosując numerację EU dla reszt regionu Fc.
3. Kompozycja według zastrz. 2, znamienna tym, że region Fc zawiera podstawienia aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji 298, 333 i 334.
4. Kompozycja według zastrz. 3, znamienna tym, że region Fc zawiera podstawienia aminokwasowe w pozycjach 298, 333 i 334.
5. Kompozycja według zastrz. 4, znamienna tym, że zastępującymi resztami w pozycjach 298, 333 i 334 są alaniny.
6. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 238, 239, 248, 249, 252,
254, 255, 256, 258, 265, 267, 268, 269, 270, 272, 276, 278, 280, 283, 285, 286, 289, 290, 292, 293,
294, 295, 296, 298, 301, 303, 305, 307, 309, 312, 315, 320, 322, 324, 326, 327, 329, 330, 331, 333,
334, 335, 337, 338, 340, 360, 373, 376, 378, 382, 388, 389, 398, 414, 416, 419, 430, 434, 435, 437,
438 lub 439 regionu Fc.
7. Kompozycja według zastrz. 6, znamienna tym, że region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 238, 239, 248, 249, 252, 254, 265, 268, 269, 270, 272, 278, 289, 292, 293, 294, 295, 296, 298, 301, 303, 322, 324, 327, 329,
333, 335, 338, 340, 373, 376, 382, 388, 389, 414, 416, 419, 434, 435, 437, 438 lub 439 regionu Fc.
8. Kompozycja według zastrz. 6, znamienna tym, że region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 238, 265, 269, 270, 327 lub 329 regionu Fc i tym, że region Fc wykazuje zmniejszone wiązanie do FcyRI w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
9. Kompozycja według zastrz. 6, znamienna tym, że region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 238, 265, 269, 270, 292, 294, 295, 298, 303, 324, 327, 329, 333, 335, 338, 373, 376, 414, 416, 419, 435, 438 lub 439 regionu Fc i tym, że region Fc wykazuje zmniejszone wiązanie do FcyRII w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
10. Kompozycja według zastrz. 6, znamienna tym, że region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 238, 239, 248, 249, 252, 254, 265, 268, 269, 270, 272, 278, 289, 293, 294, 295, 296, 301, 303, 322, 327, 329, 338, 340, 373, 376, 382, 388, 389, 416, 434, 435 lub 437 regionu Fc i tym, że region Fc wykazuje zmniejszone wiązanie do FcyRIII w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
11. Kompozycja według zastrz. 6, znamienna tym, że region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 255, 256, 258, 267, 268, 272, 276, 280, 283, 285, 286, 290, 298, 301, 305, 307, 309, 312, 315, 320, 322, 326, 330, 331, 333,
334, 337, 340, 360, 378, 398 lub 430 regionu Fc i tym, że region Fc wykazuje zwiększone wiązanie do jednego lub większej liczby FcyR w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
12. Kompozycja według zastrz. 11, znamienna tym, że region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w pozycji 298 i/lub 333 regionu Fc i tym, że region Fc wykazuje zwiększone wiązanie do FcyRIII w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
13. Kompozycja według zastrz. 12, znamienna tym, że region Fc wykazuje ponadto zmniejszone wiązanie do FcyRII w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
PL 213 948 B1
14. Kompozycja według zastrz. 11, znamienna tym, że region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 255, 256, 258, 267, 268, 272, 276, 280, 283, 285, 286, 290, 301, 305, 307, 309, 312, 315, 320, 322, 326, 330, 331, 337, 340, 378, 398 lub 430 regionu Fc i tym, że region Fc wykazuje zwiększone wiązanie do FcYRII w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
15. Kompozycja według zastrz. 14, znamienna tym, że region Fc wykazuje zmniejszone wiązanie do FcYRIII.
16. Kompozycja według zastrz. 15, znamienna tym, że region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 268, 272, 298, 301, 322 lub 340 regionu Fc.
17. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że region Fc ma zmienione powinowactwo wiązania do FcRn w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
18. Kompozycja według zastrz. 17, znamienna tym, że region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 238, 252, 253, 254, 255, 256, 265, 272, 286, 288, 303, 305, 307, 309, 311, 312, 317, 340, 356, 360, 362, 376, 378, 380, 382, 386, 388, 400, 413, 415, 424, 433, 434, 435, 436, 439 lub 447 regionu Fc.
19. Kompozycja według zastrz. 18, znamienna tym, że region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 252, 253, 254, 255, 288, 309, 386, 388, 400, 415, 433, 435, 436, 439 lub 447 regionu Fc i tym, że region Fc wykazuje zmniejszone wiązanie do FcRn w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
20. Kompozycja według zastrz. 18, znamienna tym, że region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 238, 256, 265, 272, 286, 303, 305, 307, 311, 312, 317, 340, 356, 360, 362, 376, 378, 380, 382, 413, 424 lub 434 regionu Fc i tym, że region Fc wykazuje zwiększone wiązanie do FcRn w stosunku do regionu Fc o sekwencji natywnej.
21. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że region Fc ma zmienione wiązanie Clq i/lub funkcję cytotoksyczności zależną od dopełniacza (CDC).
22. Kompozycja według zastrz. 21, znamienna tym, że region Fc zawiera podstawienie aminokwasowe w dowolnej z jednej albo większej liczby pozycji aminokwasowych 270, 322, 326, 327, 329, 331, 333 i 334 łańcucha ciężkiego.
23. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że sekwencja aminokwasowa regionu Fc zawiera zmianę sekwencji aminokwasowej, która zmienia natywny wzór glikozylacji glikoproteiny.
24. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że glikoproteina jest zasadniczo wolna od rozdzielającej N- acetyloglukozaminy (GlcNAc) przyłączonej do struktury dojrzałego rdzenia węglowodanowego.
25. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że glikoproteina ma rozdzielającą N acetyloglukozaminę (GlcNAc) przyłączoną do struktury dojrzałego rdzenia węglowodanowego.
26. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że glikoproteina ma jedną lub większą liczbę reszt galaktozy przyłączonych do struktury dojrzałego rdzenia węglowodanowego.
27. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że glikoproteina jest zasadniczo wolna od jednej lub większej liczby reszt galaktozy przyłączonych do struktury dojrzałego rdzenia węglowodanowego.
28. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że glikoproteina ma jedną lub większą liczbę reszt kwasu sialowego przyłączonych do struktury dojrzałego rdzenia węglowodanowego.
29. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że glikoproteina jest zasadniczo wolna od jednej lub większej liczby reszt kwasu sialowego przyłączonych do struktury dojrzałego rdzenia węglowodanowego.
30. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że 80-100% glikoproteiny w kompozycji zawiera strukturę dojrzałego rdzenia węglowodanowego, pozbawionego fukozy, przyłączoną do regionu Fc glikoproteiny.
31. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że region Fc obejmuje region Fc ludzkiej IgG.
32. Kompozycja według zastrz. 31, znamienna tym, że region Fc ludzkiej IgG obejmuje region Fc ludzkiej IgGi, IgG2, IgG3 lub IgG4.
33. Kompozycja według zastrz. 32, znamienna tym, że glikoproteina wiąże się z FcYRIII.
34. Kompozycja według zastrz. 33, znamienna tym, że glikoproteina wiąże się z FcYRIII z lepszym powinowactwem albo pośredniczy w zależnej od przeciwciała toksyczności za pośrednictwem
PL 213 948 B1 komórek (ADCC) bardziej skutecznie niż glikoproteina ze strukturą dojrzałego rdzenia węglowodanowego zawierającego fukozę, przyłączoną do regionu Fc glikoproteiny.
35. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że glikoproteina obejmuje przeciwciało.
36. Kompozycja według zastrz. 35, znamienna tym, że przeciwciałem jest przeciwciało chimerowe, humanizowane albo ludzkie.
37. Kompozycja według zastrz. 35, znamienna tym, że przeciwciało wiąże się z antygenem wybranym z grupy składającej się z markera powierzchniowego komórek B, receptora ErbB, antygenu związanego z nowotworem i czynnika angiogennego.
38. Kompozycja według zastrz. 35, znamienna tym, że przeciwciało wiąże się z CD20, HER2, czynnikiem wzrostu śródbłonka naczyń (VEGF), CD40 lub antygenem komórek macierzystych prostaty (PSCA).
39. Kompozycja według zastrz. 38, znamienna tym, że przeciwciało obejmuje humanizowane przeciwciało anty-HER2, chimerowe przeciwciało anty-CD20 i humanizowane przeciwciało anty-VEGF.
40. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że 90-99% glikoproteiny w kompozycji zawiera strukturę dojrzałego rdzenia węglowodanowego, pozbawionego fukozy, przyłączoną do regionu Fc glikoproteiny.
41. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że glikoproteina została wytworzona przez komórkę jajnika chomika chińskiego (CHO).
42. Kompozycja według zastrz. 41, znamienna tym, że komórką CHO jest komórka Lec13.
43. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że jest preparatem farmaceutycznym.
44. Kompozycja według zastrz. 43, znamienna tym, że zawiera ponadto dopuszczalny farmaceutycznie nośnik.
45. Kompozycja według zastrz. 43, znamienna tym, że jest jałowa.
46. Kompozycja według zastrz. 43 lub zastrz. 44, znamienna tym, że jest zliofilizowana.
47. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że glikoproteina jest immunoadhezyną.
48. Kompozycja według zastrz. 1, znamienna tym, że jest skoniugowana z cząsteczką heterologiczną.
49. Kompozycja według zastrz. 48, znamienna tym, że cząsteczką heterologiczną jest czynnik cytotoksyczny, enzym albo czynnik umożliwiający uzyskanie obrazu.
50. Kompozycja, znamienna tym, że zawiera glikoproteinę jak zdefiniowano w zastrz. od 47 do 49 łącznie z dopuszczalnym farmaceutycznie nośnikiem.
51. Cząsteczka kwasu nukleinowego, znamienna tym, że koduje glikoproteinę zawierającą region Fc jak zdefiniowano w zastrz. 1.
52. Komórka gospodarza, znamienna tym, że zawiera kwas nukleinowy jak zdefiniowano w zastrz. 51, gdzie 80-100% glikoproteiny wytwarzanej przez komórkę gospodarza zawiera strukturę dojrzałego rdzenia węglowodanowego, pozbawionego fukozy, przyłączoną do regionu Fc glikoproteiny.
53. Komórka gospodarza według zastrz. 52, znamienna tym, że jest komórką jajnika chomika chińskiego (CHO).
54. Komórka gospodarza według zastrz. 53, znamienna tym, że komórką CHO jest komórka Lec13.
55. Sposób wytwarzania glikoproteiny, znamienny tym, że obejmuje hodowanie komórki gospodarza zdefiniowanego w zastrz. od 52 do 54, tak, że kwas nukleinowy podlega ekspresji.
56. Sposób według zastrz. 55, znamienny tym, że obejmuje ponadto odzyskanie glikoproteiny z hodowli komórki gospodarza.
57. Sposób według zastrz. 56, znamienny tym, że obejmuje ponadto łączenie glikoproteiny z cząsteczką heterologiczną.
58. Sposób według zastrz. 57, znamienny tym, że cząsteczką heterologiczną jest czynnik cytotoksyczny, enzym albo czynnik umożliwiający uzyskanie obrazu.
59. Kompozycja jak zdefiniowano w zastrz. 1 do zastosowania do leczenia ssaka mającego chorobę lub zaburzenie wybrane z grupy składającej się z raka, choroby autoimmunologicznej, choroby zapalnej, infekcji lub innego stanu, gdzie pożądane jest usunięcie komórek albo tkanki.
60. Kompozycja według zastrz. 59, znamienna tym, że ssakiem jest człowiek.
61. Kompozycja według zastrz. 60, znamienna tym, że człowiek wyraża FcyRI11 (F158).
62. Zastosowanie skutecznej terapeutycznie ilości kompozycji zdefiniowanej w zastrz. 1 do wytwarzania leku do leczenia ssaka mającego chorobę lub zaburzenie wybrane z grupy składającej się
PL 213 948 B1 z raka, choroby autoimmunologicznej, choroby zapalnej, infekcji lub innego stanu, gdzie pożądane jest usunięcie komórek albo tkanki.
63. Zastosowanie według zastrz. 62, znamienne tym, że ssakiem jest człowiek.
64. Zastosowanie według zastrz. 63, znamienne tym, że człowiek wyraża FcYRIII (F158).
65. Zestaw terapeutyczny albo diagnostyczny zawierający kompozycję, jak zdefiniowano w zastrz. 1 oraz instrukcję jej użycia.
PL372709A 2001-10-25 2002-10-22 Kompozycje zawierajace glikoproteine, czasteczka kwasu nukleinowego kodujaca te glikoproteine, komórka gospodarza, sposób wytwarzania glikoproteiny, kompozycja do zastosowania do leczenia, zastosowanie kompozycji i zestaw zawierajacy kompozycje PL213948B1 (pl)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US33764201P 2001-10-25 2001-10-25
US34769402P 2002-01-09 2002-01-09

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL372709A1 PL372709A1 (pl) 2005-07-25
PL213948B1 true PL213948B1 (pl) 2013-05-31

Family

ID=26990808

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL372709A PL213948B1 (pl) 2001-10-25 2002-10-22 Kompozycje zawierajace glikoproteine, czasteczka kwasu nukleinowego kodujaca te glikoproteine, komórka gospodarza, sposób wytwarzania glikoproteiny, kompozycja do zastosowania do leczenia, zastosowanie kompozycji i zestaw zawierajacy kompozycje

Country Status (18)

Country Link
US (5) US20030157108A1 (pl)
EP (1) EP1443961B1 (pl)
JP (3) JP2005532253A (pl)
KR (1) KR100988949B1 (pl)
CN (1) CN100423777C (pl)
AT (1) ATE430580T1 (pl)
AU (1) AU2002337935B2 (pl)
BR (1) BR0213761A (pl)
CA (1) CA2463879C (pl)
DE (1) DE60232265D1 (pl)
DK (1) DK1443961T3 (pl)
ES (1) ES2326964T3 (pl)
HU (1) HUP0600342A3 (pl)
IL (2) IL161412A0 (pl)
MX (1) MXPA04003798A (pl)
NZ (1) NZ532526A (pl)
PL (1) PL213948B1 (pl)
WO (1) WO2003035835A2 (pl)

Families Citing this family (1783)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6136311A (en) 1996-05-06 2000-10-24 Cornell Research Foundation, Inc. Treatment and diagnosis of cancer
WO2001060397A1 (en) * 2000-02-16 2001-08-23 Genentech, Inc. Uses of agonists and antagonists to modulate activity of tnf-related molecules
US7183387B1 (en) 1999-01-15 2007-02-27 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
US6737056B1 (en) * 1999-01-15 2004-05-18 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
CA2704600C (en) 1999-04-09 2016-10-25 Kyowa Kirin Co., Ltd. A method for producing antibodies with increased adcc activity
WO2000067796A1 (en) 1999-05-07 2000-11-16 Genentech, Inc. Treatment of autoimmune diseases with antagonists which bind to b cell surface markers
FR2807767B1 (fr) 2000-04-12 2005-01-14 Lab Francais Du Fractionnement Anticorps monoclonaux anti-d
US7598055B2 (en) * 2000-06-28 2009-10-06 Glycofi, Inc. N-acetylglucosaminyltransferase III expression in lower eukaryotes
US7449308B2 (en) * 2000-06-28 2008-11-11 Glycofi, Inc. Combinatorial DNA library for producing modified N-glycans in lower eukaryotes
ES2252261T3 (es) * 2000-06-28 2006-05-16 Glycofi, Inc. Metodos para producir glicoproteinas modificadas.
US8697394B2 (en) * 2000-06-28 2014-04-15 Glycofi, Inc. Production of modified glycoproteins having multiple antennary structures
US20060029604A1 (en) * 2000-06-28 2006-02-09 Gerngross Tillman U Immunoglobulins comprising predominantly a GlcNAc2Man3GlcNAc2 glycoform
JP2004508420A (ja) * 2000-09-18 2004-03-18 アイデック　ファーマスーティカルズ　コーポレイション Ｂ細胞枯渇抗体／免疫調節性抗体の組合せを用いて自己免疫疾患を治療するための併用療法
US6946292B2 (en) 2000-10-06 2005-09-20 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Cells producing antibody compositions with increased antibody dependent cytotoxic activity
US7981420B2 (en) 2000-12-22 2011-07-19 Max-Planck-Gesellschaft Zur Foederung Der Wissenschaften E.V. Therapeutic use of antibodies directed against repulsive guidance molecule (RGM)
BR0211614A (pt) * 2001-08-03 2006-10-31 Genentech Inc polipeptìdeo tacis e br3 e empregos dos mesmos
CA2463879C (en) * 2001-10-25 2012-12-04 Genentech, Inc. Glycoprotein compositions
US20040093621A1 (en) * 2001-12-25 2004-05-13 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd Antibody composition which specifically binds to CD20
US20060024292A1 (en) * 2001-12-27 2006-02-02 Gerngross Tillman U Immunoglobulins comprising predominantly a Gal2GlcNAc2Man3GlcNAc2 glycoform
IL162835A0 (en) * 2002-01-09 2005-11-20 Medarex Inc Human monoclonal antibodies against cd30
US20070148171A1 (en) * 2002-09-27 2007-06-28 Xencor, Inc. Optimized anti-CD30 antibodies
US20040132101A1 (en) 2002-09-27 2004-07-08 Xencor Optimized Fc variants and methods for their generation
US20080254027A1 (en) * 2002-03-01 2008-10-16 Bernett Matthew J Optimized CD5 antibodies and methods of using the same
US7662925B2 (en) * 2002-03-01 2010-02-16 Xencor, Inc. Optimized Fc variants and methods for their generation
US20080260731A1 (en) * 2002-03-01 2008-10-23 Bernett Matthew J Optimized antibodies that target cd19
US20080152649A1 (en) * 2002-03-01 2008-06-26 Xencor, Inc. Optimized igf-1r antibodies and methods of using the same
US20100311954A1 (en) * 2002-03-01 2010-12-09 Xencor, Inc. Optimized Proteins that Target Ep-CAM
US8188231B2 (en) 2002-09-27 2012-05-29 Xencor, Inc. Optimized FC variants
US7317091B2 (en) 2002-03-01 2008-01-08 Xencor, Inc. Optimized Fc variants
US20090042291A1 (en) * 2002-03-01 2009-02-12 Xencor, Inc. Optimized Fc variants
EP1500400A4 (en) * 2002-04-09 2006-10-11 Kyowa Hakko Kogyo Kk MEDICAMENT WITH ANTIBODY COMPOSITION
ATE503829T1 (de) 2002-04-09 2011-04-15 Kyowa Hakko Kirin Co Ltd Zelle mit erniedrigter oder deletierter aktivität eines am gdp-fucosetransport beteiligten proteins
CA2481925A1 (en) * 2002-04-09 2003-10-16 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Therapeutic agent for patients having human fc.gamma.riiia
WO2004011611A2 (en) * 2002-07-25 2004-02-05 Genentech, Inc. Taci antibodies and uses thereof
US8968730B2 (en) 2002-08-14 2015-03-03 Macrogenics Inc. FcγRIIB specific antibodies and methods of use thereof
US8946387B2 (en) 2002-08-14 2015-02-03 Macrogenics, Inc. FcγRIIB specific antibodies and methods of use thereof
DK1534335T4 (en) 2002-08-14 2015-10-05 Macrogenics Inc FCGAMMARIIB-SPECIFIC ANTIBODIES AND PROCEDURES FOR USE THEREOF
WO2004024768A2 (fr) * 2002-09-13 2004-03-25 Laboratoire Francais Du Fractionnement Et Des Biotechnologies Anticorps induisant la production de cytokines
US20060235208A1 (en) * 2002-09-27 2006-10-19 Xencor, Inc. Fc variants with optimized properties
TWI335821B (en) * 2002-12-16 2011-01-11 Genentech Inc Immunoglobulin variants and uses thereof
CA2512729C (en) 2003-01-09 2014-09-16 Macrogenics, Inc. Identification and engineering of antibodies with variant fc regions and methods of using same
US7960512B2 (en) 2003-01-09 2011-06-14 Macrogenics, Inc. Identification and engineering of antibodies with variant Fc regions and methods of using same
CA2512974A1 (en) 2003-01-13 2004-07-29 Macrogenics, Inc. Soluble fc.gamma.r fusion proteins and methods of use thereof
DE10303974A1 (de) 2003-01-31 2004-08-05 Abbott Gmbh & Co. Kg Amyloid-β(1-42)-Oligomere, Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung
US7332299B2 (en) 2003-02-20 2008-02-19 Glycofi, Inc. Endomannosidases in the modification of glycoproteins in eukaryotes
US8388955B2 (en) * 2003-03-03 2013-03-05 Xencor, Inc. Fc variants
US8084582B2 (en) 2003-03-03 2011-12-27 Xencor, Inc. Optimized anti-CD20 monoclonal antibodies having Fc variants
US20090010920A1 (en) 2003-03-03 2009-01-08 Xencor, Inc. Fc Variants Having Decreased Affinity for FcyRIIb
US20070275460A1 (en) * 2003-03-03 2007-11-29 Xencor.Inc. Fc Variants With Optimized Fc Receptor Binding Properties
US9051373B2 (en) 2003-05-02 2015-06-09 Xencor, Inc. Optimized Fc variants
CN1802388B (zh) * 2003-05-09 2011-01-05 杜克大学 Cd20特异抗体及使用它们的方法
JP2007526220A (ja) 2003-06-05 2007-09-13 ジェネンテック・インコーポレーテッド Ｂ細胞疾患の併用療法
US20050163775A1 (en) * 2003-06-05 2005-07-28 Genentech, Inc. Combination therapy for B cell disorders
FR2858235B1 (fr) 2003-07-31 2006-02-17 Lab Francais Du Fractionnement Utilisation d'anticorps optimises en adcc pour traiter les patients faibles repondeurs
AU2004266159A1 (en) 2003-08-22 2005-03-03 Biogen Idec Ma Inc. Improved antibodies having altered effector function and methods for making the same
MXPA06002134A (es) * 2003-08-29 2006-05-31 Genentech Inc Terapia de trastornos oculares.
US8399618B2 (en) 2004-10-21 2013-03-19 Xencor, Inc. Immunoglobulin insertions, deletions, and substitutions
US8101720B2 (en) 2004-10-21 2012-01-24 Xencor, Inc. Immunoglobulin insertions, deletions and substitutions
US9714282B2 (en) 2003-09-26 2017-07-25 Xencor, Inc. Optimized Fc variants and methods for their generation
US8883147B2 (en) 2004-10-21 2014-11-11 Xencor, Inc. Immunoglobulins insertions, deletions, and substitutions
US20060134105A1 (en) * 2004-10-21 2006-06-22 Xencor, Inc. IgG immunoglobulin variants with optimized effector function
JPWO2005035586A1 (ja) * 2003-10-08 2007-11-22 協和醗酵工業株式会社 融合蛋白質組成物
US20050226867A1 (en) * 2003-10-08 2005-10-13 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. IL-5R-specific antibody composition
US20050287138A1 (en) * 2003-10-08 2005-12-29 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. CCR4-specific antibody composition
US20060021071A1 (en) * 2003-10-09 2006-01-26 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Cell in which genome is modified
US7691810B2 (en) 2003-10-09 2010-04-06 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd Method of producing recombinant antithrombin III composition
WO2005035740A1 (ja) * 2003-10-09 2005-04-21 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. 無血清馴化したゲノム改変細胞
WO2005035753A1 (ja) * 2003-10-10 2005-04-21 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha 機能蛋白質を代替する二重特異性抗体
FR2861395B1 (fr) 2003-10-23 2006-02-17 Lab Francais Du Fractionnement Facteur viii viralement securise a faible teneur en multimeres superieurs
US9296820B2 (en) 2003-11-05 2016-03-29 Roche Glycart Ag Polynucleotides encoding anti-CD20 antigen binding molecules with increased Fc receptor binding affinity and effector function
EP1701979A2 (en) * 2003-12-03 2006-09-20 Xencor, Inc. Optimized antibodies that target the epidermal growth factor receptor
WO2005053742A1 (ja) * 2003-12-04 2005-06-16 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. 抗体組成物を含有する医薬
KR101225299B1 (ko) 2003-12-10 2013-01-24 메다렉스, 인코포레이티드 인터페론 알파 항체 및 그의 용도
PL1691837T3 (pl) 2003-12-10 2012-11-30 Squibb & Sons Llc IP-10 przeciwciała i ich zastosowanie
KR20060107555A (ko) * 2003-12-19 2006-10-13 제넨테크, 인크. 이식 거부에서 ｃｄ20의 검출
CN1917901A (zh) * 2003-12-19 2007-02-21 健泰科生物技术公司 自身免疫病疗法中cd20的检测
EP1697520A2 (en) * 2003-12-22 2006-09-06 Xencor, Inc. Fc polypeptides with novel fc ligand binding sites
EP1737890A2 (en) * 2004-03-24 2007-01-03 Xencor, Inc. Immunoglobulin variants outside the fc region
AU2005233387B2 (en) * 2004-04-15 2011-05-26 Glycofi, Inc. Production of galactosylated glycoproteins in lower eukaryotes
ZA200608982B (en) * 2004-05-05 2008-06-25 Genentech Inc Preventing autoimmune disease by using an anti-CD20 antibody
CA2565874C (en) 2004-05-10 2017-10-03 Macrogenics, Inc. Humanized fc.gamma.riib-specific antibodies and methods of use thereof
MXPA06014067A (es) * 2004-06-04 2007-02-15 Genentech Inc Metodo para tratar lupus.
AU2005249566B2 (en) * 2004-06-04 2010-11-11 Genentech, Inc. Method for treating multiple sclerosis
US7662381B2 (en) 2004-06-21 2010-02-16 Medarex, Inc. Interferon alpha receptor 1 antibodies and their uses
US20150010550A1 (en) 2004-07-15 2015-01-08 Xencor, Inc. OPTIMIZED Fc VARIANTS
EP2471813B1 (en) * 2004-07-15 2014-12-31 Xencor, Inc. Optimized Fc variants
BRPI0513100A (pt) * 2004-07-22 2007-10-23 Genentech Inc métodos de tratamento da sìndrome de sjÍgren e artigos manufaturados
AU2005287406B2 (en) 2004-07-26 2011-08-18 Biogen Ma Inc. Anti-CD154 antibodies
DK1773884T3 (da) 2004-08-03 2012-05-21 Innate Pharma Terapeutiske og diagnostiske fremgangsmåder og sammensætninger til targeting af 4ig-b7-h3 og dets tilsvarende nk-celle-receptor
EP1778726A4 (en) * 2004-08-16 2009-03-18 Medimmune Inc INTEGRIN ANTAGONISTS WITH IMPROVED ANTIBODY-DEPENDENT CELL-ASSAYED CYTOTOXICITY ACTIVITY
US20060074225A1 (en) * 2004-09-14 2006-04-06 Xencor, Inc. Monomeric immunoglobulin Fc domains
WO2006039644A2 (en) * 2004-10-01 2006-04-13 Medarex, Inc. Methods of treating cd30 positive lymphomas
BRPI0516297A (pt) * 2004-10-05 2008-09-02 Genentech Inc métodos de tratamento de vasculite e artigos de fabricação
JO3000B1 (ar) 2004-10-20 2016-09-05 Genentech Inc مركبات أجسام مضادة .
AU2005304624B2 (en) * 2004-11-12 2010-10-07 Xencor, Inc. Fc variants with altered binding to FcRn
US8546543B2 (en) 2004-11-12 2013-10-01 Xencor, Inc. Fc variants that extend antibody half-life
US8367805B2 (en) 2004-11-12 2013-02-05 Xencor, Inc. Fc variants with altered binding to FcRn
US8802820B2 (en) 2004-11-12 2014-08-12 Xencor, Inc. Fc variants with altered binding to FcRn
WO2006060664A2 (en) * 2004-12-03 2006-06-08 The Uab Research Foundation Single-drug multi-ligand conjugates for targeted drug delivery
EP1858925A2 (en) * 2005-01-12 2007-11-28 Xencor, Inc. Antibodies and fc fusion proteins with altered immunogenicity
TW200637574A (en) * 2005-01-13 2006-11-01 Genentech Inc Treatment method
CN102580084B (zh) 2005-01-21 2016-11-23 健泰科生物技术公司 Her抗体的固定剂量给药
DOP2006000029A (es) * 2005-02-07 2006-08-15 Genentech Inc Antibody variants and uses thereof. (variantes de un anticuerpo y usos de las mismas)
PL1871805T3 (pl) * 2005-02-07 2020-03-31 Roche Glycart Ag Cząsteczki wiążące antygen, które wiążą egfr, wektory kodujące te cząsteczki oraz ich zastosowania
HUE025945T2 (en) 2005-02-15 2016-07-28 Univ Duke Anti-CD19 antibodies and their applications in oncology
CN101160324B (zh) 2005-02-18 2013-04-24 米德列斯公司 缺乏岩藻糖残基的抗前列腺特异性膜抗原(psma)单克隆抗体
ES2498794T3 (es) 2005-02-18 2014-09-25 Medarex, L.L.C. Anticuerpos monoclonales contra CD30 que carecen de restos fucosilo
EP1850874B1 (en) 2005-02-23 2013-10-16 Genentech, Inc. Extending time to disease progression or survival in ovarian cancer patients using pertuzumab
WO2006100582A1 (en) * 2005-03-25 2006-09-28 Glycart Biotechnology Ag Antigen binding molecules directed to mcsp and having increased fc receptor binding affinity and effector function
AU2006232287B2 (en) 2005-03-31 2011-10-06 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Methods for producing polypeptides by regulating polypeptide association
GB0507123D0 (en) * 2005-04-08 2005-05-11 Isis Innovation Method
ES2971647T3 (es) 2005-04-15 2024-06-06 Macrogenics Inc Diacuerpos covalentes y usos de los mismos
AR053579A1 (es) * 2005-04-15 2007-05-09 Genentech Inc Tratamiento de la enfermedad inflamatoria intestinal (eii)
WO2006116246A2 (en) * 2005-04-25 2006-11-02 Medarex, Inc. Method of treating cd30 positive lymphomas
US8008443B2 (en) * 2005-04-26 2011-08-30 Medimmune, Llc Modulation of antibody effector function by hinge domain engineering
EP1885755A4 (en) 2005-05-05 2009-07-29 Univ Duke CD19 ANTIBODY THERAPY FOR AUTOIMMUNE DISEASES
DK2439273T3 (da) 2005-05-09 2019-06-03 Ono Pharmaceutical Co Humane monoklonale antistoffer til programmeret død-1(pd-1) og fremgangsmåder til behandling af cancer ved anvendelse af anti-pd-1- antistoffer alene eller i kombination med andre immunterapeutika
BRPI0611445A2 (pt) * 2005-05-09 2010-09-08 Glycart Biotechnology Ag molécula de ligação a antìgeno glicomanipulada, polinucleotìdeo, polipeptìdeo, vetor, célula hospedeira, método para produção, uso e composição farmacêutica
ZA200709956B (en) * 2005-05-20 2009-02-25 Genentech Inc Pretreatment of a biological sample from an autoimmune disease subject
US20090208500A1 (en) * 2005-06-03 2009-08-20 Genentech, Inc. Method of producing antibodies with improved function
KR20080025174A (ko) 2005-06-23 2008-03-19 메디뮨 인코포레이티드 응집 및 단편화 프로파일이 최적화된 항체 제제
CN103145842A (zh) 2005-06-30 2013-06-12 Abbvie公司 Il-12/p40结合蛋白
AU2006265936A1 (en) * 2005-07-01 2007-01-11 Medimmune, Llc An integrated approach for generating multidomain protein therapeutics
PT1907424E (pt) 2005-07-01 2015-10-09 Squibb & Sons Llc Anticorpos monoclonais humanos para o ligando 1 de morte programada (pd-l1)
WO2007008943A2 (en) 2005-07-08 2007-01-18 Xencor, Inc. Optimized anti-ep-cam antibodies
WO2007009469A2 (en) * 2005-07-21 2007-01-25 Genmab A/S Potency assays for antibody drug substance binding to an fc receptor
US7923538B2 (en) 2005-07-22 2011-04-12 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd Recombinant antibody composition
PL2573114T3 (pl) 2005-08-10 2016-10-31 Identyfikacja i inżynieria przeciwciał z wariantami regionów FC oraz sposoby ich stosowania
EP1937306B1 (en) * 2005-08-19 2016-02-17 Janssen Biotech, Inc. Proteolysis resistant antibody preparations
NZ612578A (en) 2005-08-19 2014-11-28 Abbvie Inc Dual variable domain immunoglobin and uses thereof
US7612181B2 (en) 2005-08-19 2009-11-03 Abbott Laboratories Dual variable domain immunoglobulin and uses thereof
EP2500355A3 (en) 2005-08-19 2012-10-24 Abbott Laboratories Dual variable domain immunoglobulin and uses thereof
AU2006287173A1 (en) * 2005-09-02 2007-03-08 Glycofi, Inc Immunoglobulins comprising predominantly a GICNAcMan3GIcNAc2 glycoform
EP1928905B1 (de) 2005-09-30 2015-04-15 AbbVie Deutschland GmbH & Co KG Bindungsdomänen von proteinen der repulsive guidance molecule (rgm) proteinfamilie und funktionale fragmente davon sowie deren verwendung
WO2007041635A2 (en) * 2005-10-03 2007-04-12 Xencor, Inc. Fc variants with optimized fc receptor binding properties
WO2007044616A2 (en) 2005-10-06 2007-04-19 Xencor, Inc. Optimized anti-cd30 antibodies
KR20080073293A (ko) 2005-10-14 2008-08-08 메디뮨 엘엘씨 항체 라이브러리의 세포 디스플레이
WO2007045477A2 (en) 2005-10-21 2007-04-26 Novartis Ag Human antibodies against il-13 and therapeutic uses
MY149159A (en) 2005-11-15 2013-07-31 Hoffmann La Roche Method for treating joint damage
ES2618543T3 (es) * 2005-11-23 2017-06-21 Genentech, Inc. Métodos y composiciones relacionados con ensayos de linfocitos B
US8691224B2 (en) 2005-11-30 2014-04-08 Abbvie Inc. Anti-Aβ globulomer 5F7 antibodies
HRP20140240T4 (hr) 2005-11-30 2017-02-24 Abbvie Inc. Monoklonalna antitijela protiv amiloidnih beta proteina i njihova upotreba
BRPI0619118A2 (pt) 2005-12-02 2011-09-13 Genentech Inc composições e métodos para o tratamento de doenças e desordens associadas com a sinalização de citocina
US8383118B2 (en) 2005-12-08 2013-02-26 Medarex, Inc. Human monoclonal antibodies to fucosyl-GM1 and methods for using anti-fucosyl-GM1
BRPI0706840A2 (pt) 2006-01-05 2011-04-05 Genentech Inc anticorpos anti- ephb4 isolado polinucleotìdeo, vetor, célula hospedeira, método para produção de um anticorpo anti ephb4, método para produção de um imunoconjugado anti ephb4, método para a detecção de ephb4, método para diagnosticar um distúrbio composição, método para inibir a angiogênese, método para tratar um cáncer, tumor e/ou distúrbio da proliferação celular e uso de um anticorpo
US20070166306A1 (en) * 2006-01-17 2007-07-19 Fey Georg H M Anti-CD19 antibody composition and method
US20090060921A1 (en) * 2006-01-17 2009-03-05 Biolex Therapeutics, Inc. Glycan-optimized anti-cd20 antibodies
JP2009526520A (ja) 2006-01-17 2009-07-23 バイオレックス セラピュティックス インク 植物中でのｎ−グリカンのヒト化及び最適化のための組成物及び方法
US20090175886A1 (en) * 2006-01-17 2009-07-09 Medarex, Inc. Monoclonal antibodies against cd30 lacking in fucosyl and xylosyl residues
CA2638811A1 (en) * 2006-02-03 2007-08-16 Medimmune, Llc Protein formulations
EP1999148B8 (en) 2006-03-06 2014-03-05 Medlmmune, LLC Humanized anti-cd22 antibodies and their use in treatment of oncology, transplantation and autoimmune disease
AR059851A1 (es) 2006-03-16 2008-04-30 Genentech Inc Anticuerpos de la egfl7 y metodos de uso
CA2646329C (en) 2006-03-20 2018-07-03 The Regents Of The University Of California Engineered anti-prostate stem cell antigen (psca) antibodies for cancer targeting
EP2009101B1 (en) 2006-03-31 2017-10-25 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Antibody modification method for purifying bispecific antibody
CN104761637B (zh) 2006-03-31 2021-10-15 中外制药株式会社 调控抗体血液动力学的方法
EP2011870A4 (en) * 2006-04-14 2010-09-15 Medical & Biol Lab Co Ltd MUTANT POLYPEPTIDE WITH EFFECTOR FUNCTION
EP2032606B1 (en) 2006-05-30 2013-11-27 Genentech, Inc. Antibodies and immunoconjugates and uses therefor
NZ572177A (en) * 2006-06-06 2012-02-24 Genentech Inc Anti-dll4 antibodies and methods using same
EP2029159A2 (en) * 2006-06-06 2009-03-04 Genentech, Inc. Compositions and methods for modulating vascular development
ES2599319T3 (es) 2006-06-26 2017-02-01 Macrogenics, Inc. Anticuerpos específicos de Fc RIIB y métodos de uso de éstos
WO2008002933A2 (en) 2006-06-26 2008-01-03 Macrogenics, Inc. Combination of fcgammariib antibodies and cd20-specific antibodies and methods of use thereof
EP1878747A1 (en) 2006-07-11 2008-01-16 greenovation Biotech GmbH Glyco-engineered antibodies
US20100166741A1 (en) * 2006-07-13 2010-07-01 Genentech , Inc. Altered br-3 binding polypeptides
JP2009543579A (ja) 2006-07-19 2009-12-10 ザ・トラスティーズ・オブ・ザ・ユニバーシティ・オブ・ペンシルバニア 抗炎症反応のための標的としてのＷＳＸ−１／ｐ２８
GB0615266D0 (en) * 2006-08-01 2006-09-06 Immunobiology Ltd Composition and method for mediating an immune response
AR062223A1 (es) * 2006-08-09 2008-10-22 Glycart Biotechnology Ag Moleculas de adhesion al antigeno que se adhieren a egfr, vectores que los codifican, y sus usos de estas
PL2383297T3 (pl) 2006-08-14 2013-06-28 Xencor Inc Zoptymalizowane przeciwciała ukierunkowane na CD19
CA2662350A1 (en) 2006-09-05 2008-03-13 Medarex, Inc. Antibodies to bone morphogenic proteins and receptors therefor and methods for their use
JP2010502224A (ja) 2006-09-08 2010-01-28 アボット・ラボラトリーズ インターロイキン１３結合タンパク質
RU2495882C2 (ru) * 2006-09-08 2013-10-20 Медиммун, Ллк. Гуманизированные антитела к cd19 и их применение для лечения онкологического, связанного с трансплантацией и аутоиммунного заболевания
US8911964B2 (en) 2006-09-13 2014-12-16 Abbvie Inc. Fed-batch method of making human anti-TNF-alpha antibody
AU2007294731B2 (en) 2006-09-13 2014-04-17 Abbvie Inc. Cell culture improvements
WO2008036688A2 (en) * 2006-09-18 2008-03-27 Xencor, Inc. Optimized antibodies that target hm1.24
MX2009003306A (es) 2006-10-02 2009-04-23 Medarex Inc Anticuerpos humanos que se unen a cxcr4 y sus usos.
UA94484C2 (uk) 2006-10-12 2011-05-10 Дженентек, Інк. Антитіла до лімфотоксину-альфа
AU2007313300A1 (en) * 2006-10-16 2008-04-24 Medimmune, Llc. Molecules with reduced half-lives, compositions and uses thereof
EP3040347A3 (en) 2006-10-20 2016-09-21 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Pharmaceutical composition comprising anti-hb-egf antibody as active ingredient
US7846434B2 (en) * 2006-10-24 2010-12-07 Trubion Pharmaceuticals, Inc. Materials and methods for improved immunoglycoproteins
JP2010507394A (ja) * 2006-10-24 2010-03-11 トルービオン ファーマスーティカルズ インコーポレイテッド 改良免疫糖タンパク質のための物質および方法
BRPI0717638A2 (pt) 2006-10-27 2013-11-12 Genentech Inc Anticorpors e imunoconjugados e usos para os mesmos
US8618248B2 (en) 2006-10-31 2013-12-31 President And Fellows Of Harvard College Phosphopeptide compositions and anti-phosphopeptide antibody compositions and methods of detecting phosphorylated peptides
EP2097447A4 (en) 2006-11-15 2010-12-29 Medarex Inc HUMAN MONOCLONAL ANTIBODIES AGAINST BTLA AND METHODS OF USE
US8455626B2 (en) 2006-11-30 2013-06-04 Abbott Laboratories Aβ conformer selective anti-aβ globulomer monoclonal antibodies
US8481683B2 (en) 2006-12-01 2013-07-09 Medarex, Inc. Human antibodies that bind CD22 and uses thereof
US20080127996A1 (en) * 2006-12-04 2008-06-05 Weinhold Dennis G Method and apparatus to remediate an acid and/or liquid spill
US8652466B2 (en) 2006-12-08 2014-02-18 Macrogenics, Inc. Methods for the treatment of disease using immunoglobulins having Fc regions with altered affinities for FcγRactivating and FcγRinhibiting
CL2007003622A1 (es) 2006-12-13 2009-08-07 Medarex Inc Anticuerpo monoclonal humano anti-cd19; composicion que lo comprende; y metodo de inhibicion del crecimiento de celulas tumorales.
MX2009006277A (es) 2006-12-14 2009-07-24 Medarex Inc Anticuerpos humanos que se enlazan a cd70 y usos de los mismos.
JP2010517944A (ja) * 2007-01-26 2010-05-27 バイオインヴェント インターナショナル アーベー Ｄｌｌ４シグナリング阻害薬およびその使用
MX2009008430A (es) 2007-02-09 2009-10-28 Genentech Inc Anticuerpos anti-robo4 y sus usos.
US8895004B2 (en) 2007-02-27 2014-11-25 AbbVie Deutschland GmbH & Co. KG Method for the treatment of amyloidoses
SI2132573T1 (sl) 2007-03-02 2014-07-31 Genentech, Inc. Napovedovanje odziva na inhibitor dimerizacije HER na osnovi nizke ekspresije HER3
AU2008227024A1 (en) * 2007-03-07 2008-09-18 Glycofi, Inc. Production of glycoproteins with modified fucosylation
ME00832B (me) 2007-03-22 2012-03-20 Ucb Biopharma Sprl Vezivni proteini uključujući antitjela, derivate antitjela i fragmente antitjela, koji specifično vezuju cd154 i njihova upotreba
JP2010524467A (ja) * 2007-04-16 2010-07-22 モメンタ ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド 規定の糖タンパク質産物および関連の方法
AU2008247382B2 (en) 2007-05-07 2014-06-05 Medimmune, Llc Anti-ICOS antibodies and their use in treatment of oncology, transplantation and autoimmune disease
MX376656B (es) 2007-05-14 2025-03-07 Kyowa Kirin Co Ltd Metodos para reducir niveles de basófilos.
EP2176298B1 (en) 2007-05-30 2017-11-15 Xencor, Inc. Methods and compositions for inhibiting cd32b expressing cells
PL2171090T3 (pl) 2007-06-08 2013-09-30 Genentech Inc Markery ekspresji genów odporności guza na leczenie hamujące HER2
US7580304B2 (en) * 2007-06-15 2009-08-25 United Memories, Inc. Multiple bus charge sharing
EP2158221B1 (en) 2007-06-21 2018-08-29 MacroGenics, Inc. Covalent diabodies and uses thereof
EP2175016A4 (en) 2007-06-25 2012-03-28 Forerunner Pharma Res Co Ltd ANTI-PROMININ-1 ANTIBODY WITH ADCC ACTIVITY OR CDC ACTIVITY
US20110077383A1 (en) * 2007-07-03 2011-03-31 Medimmune, Llc Hinge domain engineering
KR102055873B1 (ko) 2007-07-09 2019-12-13 제넨테크, 인크. 폴리펩티드의 재조합 생산 동안의 디술피드 결합 환원의 방지
KR20100058509A (ko) 2007-07-31 2010-06-03 메디뮨 엘엘씨 다중특이적 에피토프 결합 단백질 및 이의 용도
WO2009032949A2 (en) 2007-09-04 2009-03-12 The Regents Of The University Of California High affinity anti-prostate stem cell antigen (psca) antibodies for cancer targeting and detection
JP5607530B2 (ja) 2007-09-04 2014-10-15 コンピュゲン エルティーディー． ポリペプチド並びにポリヌクレオチド、並びに薬剤および生物製剤生産のための薬剤標的としてのその利用
ES2595638T3 (es) 2007-09-26 2017-01-02 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Método para modificar el punto isoeléctrico de un anticuerpo mediante la sustitución de aminoácidos en una CDR
KR101680906B1 (ko) 2007-09-26 2016-11-30 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 항체 정상영역 개변체
ES2526355T3 (es) * 2007-10-01 2015-01-09 Bristol-Myers Squibb Company Anticuerpos humanos que se adhieren a mesotelina, y usos de los mismos
CA2700410C (en) * 2007-10-03 2020-10-06 Cornell University Treatment of proliferative disorders using antibodies to psma
TWI489993B (zh) 2007-10-12 2015-07-01 Novartis Ag 骨硬化素（ｓｃｌｅｒｏｓｔｉｎ）抗體組合物及使用方法
HUE030134T2 (en) 2007-10-16 2017-04-28 Zymogenetics Inc Combination of transmembrane activator and calcium modulator and cyclophilin ligand interactor (TACI) and anti-CD20 agents for the treatment of autoimmune diseases
BRPI0820327A2 (pt) 2007-11-02 2020-10-06 Novartis Ag moléculas e métodos para modulação de proteína relacionada ao receptor de lipoproteína de baixa densidade 6 (lrp6)
KR101867606B1 (ko) 2007-11-07 2018-06-18 제넨테크, 인크. 미생물 질환의 치료를 위한 조성물 및 방법
US8637435B2 (en) * 2007-11-16 2014-01-28 Merck Sharp & Dohme Corp. Eukaryotic cell display systems
TWI468417B (zh) 2007-11-30 2015-01-11 Genentech Inc 抗－ｖｅｇｆ抗體
AU2008337517B2 (en) 2007-12-14 2014-06-26 Novo Nordisk A/S Antibodies against human NKG2D and uses thereof
US9266967B2 (en) 2007-12-21 2016-02-23 Hoffmann-La Roche, Inc. Bivalent, bispecific antibodies
ES2388017T3 (es) * 2007-12-21 2012-10-05 Roche Glycart Ag Ensayo de estabilidad de anticuerpos
US20090162359A1 (en) 2007-12-21 2009-06-25 Christian Klein Bivalent, bispecific antibodies
KR101759457B1 (ko) 2007-12-21 2017-07-31 메디뮨 리미티드 인터루킨-4 수용체 알파(ＩＬ-4Ｒα)에 대한 결합 구성원-173
HRP20150279T1 (hr) 2007-12-26 2015-05-08 Xencor, Inc. Fc inaäśice s promijenjenim vezanjem na fcrn
EP2077281A1 (en) 2008-01-02 2009-07-08 Bergen Teknologioverforing AS Anti-CD20 antibodies or fragments thereof for the treatment of chronic fatigue syndrome
US7914785B2 (en) 2008-01-02 2011-03-29 Bergen Teknologieverforing As B-cell depleting agents, like anti-CD20 antibodies or fragments thereof for the treatment of chronic fatigue syndrome
EP2241578B1 (en) 2008-01-11 2016-04-20 The University of Tokyo Anti-cldn6 antibody
KR20100097737A (ko) * 2008-01-15 2010-09-03 에프. 호프만-라 로슈 아게 Ｃｃｒ５에 대한 어푸코실화된 항체 및 이의 용도
TWI472339B (zh) 2008-01-30 2015-02-11 Genentech Inc 包含結合至ｈｅｒ２結構域ii之抗體及其酸性變異體的組合物
EP2650017A3 (en) 2008-02-05 2014-01-22 Bristol-Myers Squibb Company Alpha 5 - beta 1 antibodies and their uses
US12492253B1 (en) 2008-02-25 2025-12-09 Xencor, Inc. Anti-human C5 antibodies
US8962803B2 (en) 2008-02-29 2015-02-24 AbbVie Deutschland GmbH & Co. KG Antibodies against the RGM A protein and uses thereof
JP5731827B2 (ja) 2008-03-03 2015-06-10 グライコフィ， インコーポレイテッド 下等真核生物中での組換えタンパク質の表面ディスプレイ
EP2604279A1 (en) 2008-03-27 2013-06-19 ZymoGenetics, Inc. Compositions and methods for inhibiting PDGFRBETA and VEGF-A
ES2589912T3 (es) 2008-04-02 2016-11-17 Macrogenics, Inc. Anticuerpos específicos para el complejo BCR y procedimientos de uso de los mismos
WO2009123894A2 (en) 2008-04-02 2009-10-08 Macrogenics, Inc. Her2/neu-specific antibodies and methods of using same
SG190572A1 (en) 2008-04-29 2013-06-28 Abbott Lab Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
EA201001734A1 (ru) 2008-05-02 2011-10-31 Новартис Аг Улучшенные связывающие молекулы на основе фибронектина и их применение
EP2116556B1 (en) 2008-05-09 2016-03-23 AbbVie Deutschland GmbH & Co KG Antibodies to receptor of advanced glycation end products (RAGE) and uses thereof
TW201006485A (en) 2008-06-03 2010-02-16 Abbott Lab Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
CA2726087A1 (en) 2008-06-03 2009-12-10 Tariq Ghayur Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
US20110081347A1 (en) 2008-06-04 2011-04-07 Macrogenics, Inc. Antibodies with Altered Binding to FcRn and Methods of Using Same
CA2729567C (en) 2008-06-30 2018-04-24 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Anti-cd27 antibody
TW201014602A (en) 2008-07-08 2010-04-16 Abbott Lab Prostaglandin E2 binding proteins and uses thereof
CN102149825B (zh) 2008-07-08 2015-07-22 Abbvie公司 前列腺素e2双重可变结构域免疫球蛋白及其用途
US8067339B2 (en) * 2008-07-09 2011-11-29 Merck Sharp & Dohme Corp. Surface display of whole antibodies in eukaryotes
AU2009202778B2 (en) * 2008-07-11 2014-05-08 Commonwealth of Australia as represented by and acting through the Department of Climate Change, Energy, the Environment and Water Improved baiting method and composition
PY09026846A (es) 2008-08-05 2015-09-01 Novartis Ag Composiciones y métodos para anticuerpos que se dirigen a la proteína de complemento c5
AR072999A1 (es) 2008-08-11 2010-10-06 Medarex Inc Anticuerpos humanos que se unen al gen 3 de activacion linfocitaria (lag-3) y los usos de estos
AR073295A1 (es) 2008-09-16 2010-10-28 Genentech Inc Metodos para tratar la esclerosis multiple progresiva. articulo de fabricacion.
BRPI0918670B8 (pt) 2008-09-17 2021-05-25 Xencor Inc anticorpo
JP5913980B2 (ja) * 2008-10-14 2016-05-11 ジェネンテック， インコーポレイテッド 免疫グロブリン変異体及びその用途
BRPI0920572A8 (pt) 2008-10-20 2015-10-27 Abbott Lab Inativação viral durante a purificação dos anticorpos
NZ592095A (en) 2008-10-20 2013-01-25 Abbott Lab Isolation and purification of il-12 and tnf-alpha antibodies using protein a affinity chromatography
JP5933975B2 (ja) 2008-11-12 2016-06-15 メディミューン，エルエルシー 抗体製剤
DK2361085T4 (en) 2008-11-22 2018-10-08 Hoffmann La Roche USE OF ANTI-VEGF ANTIBODY IN COMBINATION WITH CHEMOTHERY TO TREAT CANCER CANCER
GB2466025A (en) 2008-12-08 2010-06-09 Univ Francois Rabelais De Tour C3/ITGAM polymorphisms and cancer prognosis
US20110311450A1 (en) 2008-12-08 2011-12-22 Zurit Levine Polypeptides and polynucleotides, and uses thereof as a drug target for producing drugs and biologics
EA022752B1 (ru) 2008-12-09 2016-02-29 Галозим, Инк. Длинные растворимые полипептиды рн20 и их использование
DK2786762T3 (da) 2008-12-19 2019-05-06 Macrogenics Inc Kovalente diabodies og anvendelser deraf
WO2010075249A2 (en) 2008-12-22 2010-07-01 Genentech, Inc. A method for treating rheumatoid arthritis with b-cell antagonists
CA2746330C (en) 2008-12-23 2017-08-29 Genentech, Inc. Immunoglobulin variants with altered binding to protein a
US20110142836A1 (en) * 2009-01-02 2011-06-16 Olav Mella B-cell depleting agents for the treatment of chronic fatigue syndrome
ES2539045T3 (es) 2009-01-19 2015-06-25 Innate Pharma Anticuerpos anti-KIR3D
ES2712732T3 (es) * 2009-02-17 2019-05-14 Cornell Res Foundation Inc Métodos y kits para el diagnóstico de cáncer y la predicción de valor terapéutico
WO2010096394A2 (en) 2009-02-17 2010-08-26 Redwood Biosciences, Inc. Aldehyde-tagged protein-based drug carriers and methods of use
CN102421800A (zh) * 2009-02-23 2012-04-18 格兰马克药品股份有限公司 结合cd19的人源化抗体及其用途
US8030026B2 (en) 2009-02-24 2011-10-04 Abbott Laboratories Antibodies to troponin I and methods of use thereof
WO2010099186A1 (en) * 2009-02-25 2010-09-02 Merck Sharp & Dohme Corp. Her2 antibody compositions
TWI541021B (zh) 2009-03-05 2016-07-11 艾伯維有限公司 Ｉｌ－１７結合蛋白
CN102341412B (zh) 2009-03-05 2018-01-05 梅达雷克斯有限责任公司 特异于cadm1 的全人抗体
US8283162B2 (en) 2009-03-10 2012-10-09 Abbott Laboratories Antibodies relating to PIVKAII and uses thereof
MY152068A (en) 2009-03-20 2014-08-15 Genentech Inc Bispecific anti-her antibodies
NZ594343A (en) 2009-03-25 2013-10-25 Genentech Inc Novel anti-alpha5beta1 antibodies and uses thereof
MA33208B1 (fr) 2009-03-25 2012-04-02 Genentech Inc Anticorps anti-fgfr3 et procédés d'utilisation de ceux-ci
US20100247484A1 (en) 2009-03-31 2010-09-30 Heinrich Barchet Combination therapy of an afucosylated antibody and one or more of the cytokines gm csf, m csf and/or il3
CA2756244A1 (en) 2009-04-02 2010-10-07 Roche Glycart Ag Multispecific antibodies comprising full length antibodies and single chain fab fragments
MX2011010166A (es) 2009-04-07 2011-10-11 Roche Glycart Ag Anticuerpos biespecificos anti-erbb-3/anti-c-met.
SG175077A1 (en) 2009-04-07 2011-11-28 Roche Glycart Ag Trivalent, bispecific antibodies
EP2417164A1 (en) 2009-04-07 2012-02-15 Roche Glycart AG Bispecific anti-erbb-2/anti-c-met antibodies
DK2421898T3 (en) 2009-04-20 2016-05-30 Oxford Biotherapeutics Ltd Cadherin-17 SPECIFIC ANTIBODIES
PE20120532A1 (es) 2009-04-27 2012-05-18 Novartis Ag ANTICUERPOS ANTI-ActRIIB
JP2012524524A (ja) 2009-04-27 2012-10-18 ノバルティス アーゲー ＩＬ−１２レセプターβ１サブユニットに特異的な治療用抗体の組成物および使用方法
PE20120540A1 (es) 2009-05-27 2012-05-09 Hoffmann La Roche Anticuerpos triespecificos o tetraespecificos
EP2435476A4 (en) * 2009-05-27 2013-04-17 Synageva Biopharma Corp ANTIBODIES OBTAINED FROM BIRDS
US8409838B2 (en) 2009-06-02 2013-04-02 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Fucosylation-deficient cells
US20100316639A1 (en) 2009-06-16 2010-12-16 Genentech, Inc. Biomarkers for igf-1r inhibitor therapy
US9676845B2 (en) 2009-06-16 2017-06-13 Hoffmann-La Roche, Inc. Bispecific antigen binding proteins
EP3431501A1 (en) 2009-06-18 2019-01-23 Pfizer Inc Anti notch-1 antibodies
JP2009292822A (ja) * 2009-07-23 2009-12-17 Chugai Pharmaceut Co Ltd 機能蛋白質を代替する二種特異性抗体
TW201106972A (en) 2009-07-27 2011-03-01 Genentech Inc Combination treatments
BR112012007875A2 (pt) 2009-07-31 2016-11-22 Medarex Inc anticorpos totalmente humanos para btla
NZ597531A (en) 2009-07-31 2014-05-30 Genentech Inc Inhibition of tumor metastasis using bv8- or g-csf-antagonists
HRP20200768T4 (hr) 2009-08-11 2025-03-28 F. Hoffmann - La Roche Ag Proizvodnja proteina u mediju za uzgoj stanica bez glutamina
CA2769595A1 (en) 2009-08-14 2011-02-17 Roche Glycart Ag Combination therapy of an afucosylated cd20 antibody with fludarabine and/or mitoxantrone
TWI409079B (zh) 2009-08-14 2013-09-21 Roche Glycart Ag 非典型岩藻醣化ｃｄ２０抗體與苯達莫斯汀（ｂｅｎｄａｍｕｓｔｉｎｅ）之組合療法
NZ598131A (en) 2009-08-15 2014-08-29 Genentech Inc Anti-angiogenesis therapy for the treatment of previously treated breast cancer
CN102574917A (zh) 2009-08-17 2012-07-11 株式会社未来创药研究所 含有抗hb-egf抗体作为有效成分的药物组合物
WO2011021146A1 (en) 2009-08-20 2011-02-24 Pfizer Inc. Osteopontin antibodies
TW201113037A (en) 2009-08-28 2011-04-16 Hoffmann La Roche Antibodies against CDCP1 for the treatment of cancer
TWI412375B (zh) 2009-08-28 2013-10-21 Roche Glycart Ag 人類化抗ｃｄｃｐ１抗體
KR101528013B1 (ko) * 2009-08-31 2015-06-16 로슈 글리카트 아게 친화성-성숙된 인간화된 항-ｃｅａ 단일클론 항체
WO2011028811A2 (en) 2009-09-01 2011-03-10 Abbott Laboratories Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
CA2772715C (en) 2009-09-02 2019-03-26 Genentech, Inc. Mutant smoothened and methods of using the same
WO2011028952A1 (en) 2009-09-02 2011-03-10 Xencor, Inc. Compositions and methods for simultaneous bivalent and monovalent co-engagement of antigens
WO2011029823A1 (en) 2009-09-09 2011-03-17 Novartis Ag Monoclonal antibody reactive with cd63 when expressed at the surface of degranulated mast cells
AR078161A1 (es) 2009-09-11 2011-10-19 Hoffmann La Roche Formulaciones farmaceuticas muy concentradas de un anticuerpo anti cd20. uso de la formulacion. metodo de tratamiento.
EP2478013B1 (en) 2009-09-16 2018-10-24 F.Hoffmann-La Roche Ag Coiled coil and/or tether containing protein complexes and uses thereof
JP5898082B2 (ja) 2009-10-07 2016-04-06 マクロジェニクス，インコーポレーテッド フコシル化程度の変更により改良されたエフェクター機能を示すＦｃ領域含有ポリペプチドおよびその使用法
WO2011045704A1 (en) 2009-10-12 2011-04-21 Pfizer Inc. Cancer treatment
EP2470569A1 (en) 2009-10-13 2012-07-04 Oxford Biotherapeutics Ltd. Antibodies against epha10
BR112012008833A2 (pt) 2009-10-15 2015-09-08 Abbott Lab imunoglobulinas de dominio variavel duplo e usos das mesmas
RU2559533C2 (ru) 2009-10-22 2015-08-10 Дженентек, Инк. Антитела против гепсина и способы их применения
SG10201407757XA (en) 2009-10-23 2015-01-29 Millennium Pharm Inc Anti-gcc antibody molecules and related compositions and methods
WO2011056497A1 (en) 2009-10-26 2011-05-12 Genentech, Inc. Activin receptor type iib compositions and methods of use
WO2011056502A1 (en) 2009-10-26 2011-05-12 Genentech, Inc. Bone morphogenetic protein receptor type ii compositions and methods of use
WO2011056494A1 (en) 2009-10-26 2011-05-12 Genentech, Inc. Activin receptor-like kinase-1 antagonist and vegfr3 antagonist combinations
UY32979A (es) 2009-10-28 2011-02-28 Abbott Lab Inmunoglobulinas con dominio variable dual y usos de las mismas
WO2011051327A2 (en) 2009-10-30 2011-05-05 Novartis Ag Small antibody-like single chain proteins
WO2011053707A1 (en) 2009-10-31 2011-05-05 Abbott Laboratories Antibodies to receptor for advanced glycation end products (rage) and uses thereof
WO2011051466A1 (en) 2009-11-02 2011-05-05 Novartis Ag Anti-idiotypic fibronectin-based binding molecules and uses thereof
CA2780221A1 (en) 2009-11-04 2011-05-12 Fabrus Llc Methods for affinity maturation-based antibody optimization
ES2784123T3 (es) 2009-11-04 2020-09-22 Merck Sharp & Dohme Anticuerpo anti TSLP genomodificado
EP2496601B1 (en) 2009-11-05 2017-06-07 F. Hoffmann-La Roche AG Methods and composition for secretion of heterologous polypeptides
EP2507265B1 (en) 2009-12-01 2016-05-11 Compugen Ltd. Antibody specific for heparanase splice variant T5 and its use.
AU2010325969B2 (en) 2009-12-02 2016-10-20 Imaginab, Inc. J591 minibodies and cys-diabodies for targeting human prostate specific membrane antigen
MX2012006560A (es) 2009-12-08 2012-10-05 Abbott Gmbh & Co Kg Anticuerpos monoclonales contra la proteina rgm a para utilizarse en el tratamiento de degeneracion de capa de fibra de nervio retinal.
WO2011071577A1 (en) 2009-12-11 2011-06-16 Genentech, Inc. Anti-vegf-c antibodies and methods using same
BR112012017164A2 (pt) 2009-12-22 2019-09-24 Novartis Ag proteína de fusão de região constante de anticorpo-cd47 tetravalente
RS54795B1 (sr) 2009-12-22 2016-10-31 Roche Glycart Ag Anti-her3 antitela i njihova korišćenja
EA201270662A1 (ru) 2009-12-23 2013-01-30 4-Антибоди Аг Связывающие элементы для человеческого цитамегаловируса
EP2516465B1 (en) 2009-12-23 2016-05-18 F.Hoffmann-La Roche Ag Anti-bv8 antibodies and uses thereof
WO2011091078A2 (en) 2010-01-19 2011-07-28 Xencor, Inc. Antibody fc variants with enhanced complement activity
WO2011092233A1 (en) 2010-01-29 2011-08-04 Novartis Ag Yeast mating to produce high-affinity combinations of fibronectin-based binders
US20110189178A1 (en) * 2010-02-04 2011-08-04 Xencor, Inc. Immunoprotection of Therapeutic Moieties Using Enhanced Fc Regions
US20120296403A1 (en) 2010-02-10 2012-11-22 Novartis Ag Methods and compounds for muscle growth
KR20130009760A (ko) 2010-02-10 2013-01-23 이뮤노젠 아이엔씨 Ｃｄ２０ 항체 및 이의 용도
US9556249B2 (en) 2010-02-18 2017-01-31 Genentech, Inc. Neuregulin antagonists and use thereof in treating cancer
CN102985441B (zh) 2010-02-19 2015-04-22 俄克拉何马大学董事会 抑制Wnt信号传导途径的单克隆抗体及其制备方法和用途
TWI619509B (zh) 2010-02-23 2018-04-01 建南德克公司 治療先前未經治療之ⅲ期或ⅳ期卵巢癌、輸卵管癌或原發性腹膜癌之卡鉑、太平洋紫杉醇與抗-vegf抗體之組合
RU2012140429A (ru) 2010-02-24 2014-03-27 Мерк Шарп Энд Домэ Корп. Способ увеличения занятости участков n-ликозилирования на терапевтических гликопротеинах, продуцируемых в p pastoris
KR101159068B1 (ko) * 2010-03-03 2012-06-22 사회복지법인 삼성생명공익재단 분자영상 프로브 제조용 신규 리간드, 그 리간드를 포함하는 분자영상 프로브, 그 분자영상 프로브를 포함하는 분자영상 입자, 그 제조방법 및 그것을 포함하는 약학 조성물
PH12012501751A1 (en) 2010-03-04 2012-11-12 Macrogenics Inc Antibodies reactive with b7-h3, immunologically active fragments thereof and uses thereof
EP2542256B1 (en) 2010-03-04 2019-05-22 MacroGenics, Inc. Antibodies reactive with b7-h3, immunologically active fragments thereof and uses thereof
AR080795A1 (es) 2010-03-24 2012-05-09 Genentech Inc Anticuerpos anti-lrp6 (proteina relacionada con el receptor ldl tipo 6)
MX374075B (es) 2010-03-26 2025-03-05 Dartmouth College Proteina mediadora de celula t regulatoria vista, agentes de enlace de vista y uso de los mismos.
US20150231215A1 (en) 2012-06-22 2015-08-20 Randolph J. Noelle VISTA Antagonist and Methods of Use
TW201138821A (en) 2010-03-26 2011-11-16 Roche Glycart Ag Bispecific antibodies
US10745467B2 (en) 2010-03-26 2020-08-18 The Trustees Of Dartmouth College VISTA-Ig for treatment of autoimmune, allergic and inflammatory disorders
JP2013528357A (ja) 2010-03-29 2013-07-11 ザイムワークス，インコーポレイテッド 強化又は抑制されたエフェクター機能を有する抗体
EP2555801A4 (en) * 2010-04-07 2014-02-26 Momenta Pharmaceuticals Inc SELECTION AND USE OF HOST CELLS FOR THE MANUFACTURE OF GLYCOPROTEINS
WO2011127322A1 (en) 2010-04-07 2011-10-13 Momenta Pharmaceuticals, Inc. High mannose glycans
US8987419B2 (en) 2010-04-15 2015-03-24 AbbVie Deutschland GmbH & Co. KG Amyloid-beta binding proteins
RU2585489C2 (ru) 2010-04-27 2016-05-27 Рош Гликарт Аг КОМБИНИРОВАННАЯ ТЕРАПИЯ АФУКОЗИЛИРОВАННЫМ АНТИТЕЛОМ CD20 И ИНГИБИТОРОМ mTOR
EP2566892B1 (en) 2010-05-06 2017-12-20 Novartis AG Compositions and methods of use for therapeutic low density lipoprotein-related protein 6 (lrp6) antibodies
PH12012502193A1 (en) 2010-05-06 2021-08-09 Novartis Ag Compositions and methods of use for therapeutic low density lipoprotein - related protein 6 (lrp6) multivalent antibodies
AR081246A1 (es) 2010-05-14 2012-07-18 Abbott Lab Proteinas de union a il-1
WO2011146568A1 (en) 2010-05-19 2011-11-24 Genentech, Inc. Predicting response to a her inhibitor
WO2011147834A1 (en) 2010-05-26 2011-12-01 Roche Glycart Ag Antibodies against cd19 and uses thereof
WO2011153243A2 (en) 2010-06-02 2011-12-08 Genentech, Inc. Anti-angiogenesis therapy for treating gastric cancer
NZ701208A (en) 2010-06-03 2016-05-27 Genentech Inc Immuno-pet imaging of antibodies and immunoconjugates and uses thereof
RU2577986C2 (ru) 2010-06-18 2016-03-20 Дженентек, Инк. Антитела против axl и способы их применения
EP3323830B1 (en) 2010-06-19 2023-08-23 Memorial Sloan-Kettering Cancer Center Anti-gd2 antibodies
US20130189268A1 (en) 2010-06-22 2013-07-25 Precision Biologics, Inc. Colon and pancreas cancer specific antigens and antibodies
WO2011161119A1 (en) 2010-06-22 2011-12-29 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibodies against insulin-like growth factor i receptor and uses thereof
WO2011161189A1 (en) 2010-06-24 2011-12-29 F. Hoffmann-La Roche Ag Anti-hepsin antibodies and methods of use
WO2012006500A2 (en) 2010-07-08 2012-01-12 Abbott Laboratories Monoclonal antibodies against hepatitis c virus core protein
WO2012006503A1 (en) 2010-07-09 2012-01-12 Genentech, Inc. Anti-neuropilin antibodies and methods of use
UY33492A (es) 2010-07-09 2012-01-31 Abbott Lab Inmunoglobulinas con dominio variable dual y usos de las mismas
WO2012010582A1 (en) 2010-07-21 2012-01-26 Roche Glycart Ag Anti-cxcr5 antibodies and methods of use
EP2596026B1 (en) 2010-07-23 2020-04-08 Trustees of Boston University Anti-despr inhibitors as therapeutics for inhibition of pathological angiogenesis and tumor cell invasiveness and for molecular imaging and targeted delivery
US9120862B2 (en) 2010-07-26 2015-09-01 Abbott Laboratories Antibodies relating to PIVKA-II and uses thereof
AU2011283694B2 (en) 2010-07-29 2017-04-13 Xencor, Inc. Antibodies with modified isoelectric points
JP2013535198A (ja) 2010-07-30 2013-09-12 グリコド 哺乳類のグリコシル化経路を有する酵母人工染色体
AU2011286024B2 (en) 2010-08-02 2014-08-07 Macrogenics, Inc. Covalent diabodies and uses thereof
EP3252072A3 (en) 2010-08-03 2018-03-14 AbbVie Inc. Dual variable domain immunoglobulins and uses thereof
KR20130045914A (ko) 2010-08-03 2013-05-06 에프. 호프만-라 로슈 아게 만성 림프구성 백혈병(cll) 생체지표
JP2013541937A (ja) 2010-08-05 2013-11-21 エフ．ホフマン−ラ ロシュ アーゲー 抗ｍｈｃ抗体−抗ウイルス性サイトカイン融合タンパク質
WO2012019061A2 (en) 2010-08-05 2012-02-09 Stem Centrx, Inc. Novel effectors and methods of use
CA2806021C (en) 2010-08-13 2019-05-21 Roche Glycart Ag Anti-fap antibodies and methods of use
EP2603529A1 (en) 2010-08-13 2013-06-19 Roche Glycart AG Anti-tenascin-c a2 antibodies and methods of use
EP3533803B1 (en) 2010-08-14 2021-10-27 AbbVie Inc. Anti-amyloid-beta antibodies
WO2012022734A2 (en) 2010-08-16 2012-02-23 Medimmune Limited Anti-icam-1 antibodies and methods of use
TW201208703A (en) 2010-08-17 2012-03-01 Roche Glycart Ag Combination therapy of an afucosylated CD20 antibody with an anti-VEGF antibody
AU2011290672B2 (en) 2010-08-20 2015-07-09 Novartis Ag Antibodies for epidermal growth factor receptor 3 (HER3)
CN103068846B9 (zh) 2010-08-24 2016-09-28 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 包含二硫键稳定性Fv片段的双特异性抗体
KR101603001B1 (ko) 2010-08-25 2016-03-11 에프. 호프만-라 로슈 아게 Il-18r1에 대한 항체 및 그의 용도
JP2013539364A (ja) 2010-08-26 2013-10-24 アッヴィ・インコーポレイテッド 二重可変ドメイン免疫グロブリンおよびその使用
SG10201506782XA (en) 2010-08-27 2015-10-29 Stem Centrx Inc Notum protein modulators and methods of use
MX2013002084A (es) 2010-08-31 2013-05-09 Genentech Inc Biomarcadores y metodos de tratamiento.
AU2011295715B9 (en) 2010-09-03 2017-02-23 Abbvie Stemcentrx Llc Novel modulators and methods of use
WO2012035518A1 (en) 2010-09-17 2012-03-22 Compugen Ltd. Compositions and methods for treatment of drug resistant multiple myeloma
ES2719624T3 (es) 2010-09-23 2019-07-11 Prec Biologics Inc Peptidomiméticos de cáncer de colon y de páncreas
DK2625197T3 (en) 2010-10-05 2016-10-03 Genentech Inc Smoothened MUTANT AND METHODS OF USING THE SAME
EP2625203A1 (en) 2010-10-05 2013-08-14 Novartis AG Anti-il12rbeta1 antibodies and their use in treating autoimmune and inflammatory disorders
ES2758994T3 (es) 2010-11-05 2020-05-07 Zymeworks Inc Diseño anticuerpo heterodimérico estable con mutaciones en el dominio Fc
KR20190120439A (ko) 2010-11-08 2019-10-23 제넨테크, 인크. 피하 투여용 항―ｉｌ―6 수용체 항체
WO2012064836A1 (en) 2010-11-10 2012-05-18 Genentech, Inc. Methods and compositions for neural disease immunotherapy
TWI452136B (zh) 2010-11-17 2014-09-11 中外製藥股份有限公司 A multiple specific antigen-binding molecule that replaces the function of Factor VIII in blood coagulation
CA2818813C (en) 2010-11-23 2020-10-06 Alder Biopharmaceuticals, Inc. Anti-il-6 antibodies for the treatment of oral mucositis
CA2818173C (en) 2010-11-30 2022-05-03 Genentech, Inc. Low affinity blood brain barrier receptor antibodies and uses therefor
PT3434767T (pt) 2010-11-30 2026-01-23 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Agente terapêutico indutor de citotoxicidade
NZ611428A (en) 2010-12-08 2015-07-31 Stemcentrx Inc Novel modulators and methods of use
WO2012076670A2 (en) 2010-12-10 2012-06-14 Novartis Ag Antibody formulation
AU2011342799B2 (en) 2010-12-15 2016-06-09 Wyeth Llc Anti-Notch1 antibodies
WO2012080389A1 (en) 2010-12-16 2012-06-21 Roche Glycart Ag Combination therapy of an afucosylated cd20 antibody with a mdm2 inhibitor
RU2578468C2 (ru) 2010-12-16 2016-03-27 Дженентек, Инк. Способы диагностики и лечения, связанные с ингибированием th2
BR112013014527A2 (pt) 2010-12-20 2017-03-07 Genentech Inc anticorpo isolado, ácido nucleico isolado, célula hospedeira, método para produzir um anticorpo, imunoconjugado, formulação farmacêutica, uso do imunoconjugado, método para tratamento de um indivíduo que tem um câncer positivo para mesotelina, para inibição de proliferação de uma célula positiva para mesotelina, para detecção de mesotelina humana em uma amostra biológica e para detectar um câncer positivo para mesotelina
PE20141060A1 (es) 2010-12-21 2014-09-26 Abbvie Inc Inmunoglobulinas de dominio variable dual biespecificas de il-1 alfa y beta y su uso
CN103261230A (zh) 2010-12-22 2013-08-21 霍夫曼-拉罗奇有限公司 抗pcsk9抗体及使用方法
SG191153A1 (en) 2010-12-23 2013-07-31 Hoffmann La Roche Polypeptide-polynucleotide-complex and its use in targeted effector moiety delivery
WO2012092539A2 (en) 2010-12-31 2012-07-05 Takeda Pharmaceutical Company Limited Antibodies to dll4 and uses thereof
WO2012097333A2 (en) 2011-01-14 2012-07-19 Redwood Bioscience, Inc. Aldehyde-tagged immunoglobulin polypeptides and method of use thereof
US9540443B2 (en) 2011-01-26 2017-01-10 Kolltan Pharmaceuticals, Inc. Anti-kit antibodies
KR20130118941A (ko) 2011-02-10 2013-10-30 로슈 글리카트 아게 면역치료법
SA112330278B1 (ar) 2011-02-18 2015-10-09 ستيم سينتركس، انك. مواد ضابطة جديدة وطرق للاستخدام
AR085404A1 (es) 2011-02-28 2013-09-25 Hoffmann La Roche Proteinas de union a antigeno
MX342034B (es) 2011-02-28 2016-09-12 Hoffmann La Roche Proteinas monovalentes que se unen a antigenos.
PE20141017A1 (es) 2011-03-02 2014-08-25 Roche Glycart Ag Anticuerpos del cea
EP2686671A4 (en) 2011-03-12 2015-06-24 Momenta Pharmaceuticals Inc N-GLYCANES CONTAINING N-ACETYLHEXOSAMINE IN GLYCOPROTEIN PRODUCTS
JP2014509864A (ja) 2011-03-23 2014-04-24 グリコド Ｇｄｐ−フコースを産生可能な酵母組換え細胞
ES2692268T5 (en) 2011-03-29 2025-02-26 Roche Glycart Ag Antibody fc variants
CA2828890A1 (en) 2011-04-07 2012-10-11 Genentech, Inc. Anti-fgfr4 antibodies and methods of use
NZ713461A (en) 2011-04-15 2017-02-24 Compugen Ltd Polypeptides and polynucleotides, and uses thereof for treatment of immune related disorders and cancer
DK2699598T3 (en) 2011-04-19 2019-04-23 Pfizer COMBINATIONS OF ANTI-4-1BB ANTIBODIES AND ADCC-INducing ANTIBODIES FOR TREATMENT OF CANCER
US8476409B2 (en) 2011-04-19 2013-07-02 Merrimack Pharmaceuticals, Inc. Bispecific anti-IGF-1R and anti-ErbB3 antibodies
US9062106B2 (en) 2011-04-27 2015-06-23 Abbvie Inc. Methods for controlling the galactosylation profile of recombinantly-expressed proteins
EA201892619A1 (ru) 2011-04-29 2019-04-30 Роше Гликарт Аг Иммуноконъюгаты, содержащие мутантные полипептиды интерлейкина-2
WO2012146630A1 (en) 2011-04-29 2012-11-01 F. Hoffmann-La Roche Ag N-terminal acylated polypeptides, methods for their production and uses thereof
US8679767B2 (en) 2011-05-12 2014-03-25 Genentech, Inc. Multiple reaction monitoring LC-MS/MS method to detect therapeutic antibodies in animal samples using framework signature peptides
NO2707391T3 (pl) 2011-05-13 2018-04-07
EA030462B1 (ru) 2011-05-16 2018-08-31 Дженентек, Инк. Агонисты fgfr1 и способы их применения
BR112013029892A2 (pt) 2011-05-21 2016-12-20 Macrogenics Inc polipeptídeo, molécula de ligação a antígeno, diacorpo e uso de uma porção polipeptídica de uma proteína de ligação a soro desimunizada
ES2765874T3 (es) 2011-05-25 2020-06-11 Innate Pharma Sa Anticuerpos anti-KIR para el tratamiento de trastornos inflamatorios
WO2012170742A2 (en) 2011-06-07 2012-12-13 University Of Hawaii Treatment and prevention of cancer with hmgb1 antagonists
US9244074B2 (en) 2011-06-07 2016-01-26 University Of Hawaii Biomarker of asbestos exposure and mesothelioma
EP2718325A4 (en) 2011-06-13 2015-03-11 ABGENOMICS COöPERATIEF U A ANTI-PSGL-1 ANTIBODIES AND USES THEREOF
WO2012172495A1 (en) 2011-06-14 2012-12-20 Novartis Ag Compositions and methods for antibodies targeting tem8
US8623666B2 (en) 2011-06-15 2014-01-07 Hoffmann-La Roche Inc. Method for detecting erythropoietin (EPO) receptor using anti-human EPO receptor antibodies
BR112013031762A2 (pt) 2011-06-16 2016-09-13 Novartis Ag proteínas solúveis para utilização como terapêuticos
US20140120555A1 (en) * 2011-06-20 2014-05-01 Pierre Fabre Medicament Anti-cxcr4 antibody with effector functions and its use for the treatment of cancer
ES2677367T3 (es) 2011-06-22 2018-08-01 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Anticuerpos anti-Axl y usos de los mismos
CA2839508A1 (en) 2011-06-22 2012-12-27 Inserm (Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale) Anti-axl antibodies and uses thereof
CN103649125A (zh) 2011-06-22 2014-03-19 霍夫曼-拉罗奇有限公司 利用包含mhc i类的复合物通过循环中的病毒特异性细胞毒性t细胞清除靶细胞
PL2726508T3 (pl) 2011-06-28 2017-12-29 Oxford Biotherapeutics Ltd Przeciwciała przeciwko cyklazie ADP-rybozylowej 2
AR086823A1 (es) 2011-06-30 2014-01-22 Genentech Inc Formulaciones de anticuerpo anti-c-met, metodos
US9428574B2 (en) 2011-06-30 2016-08-30 Compugen Ltd. Polypeptides and uses thereof for treatment of autoimmune disorders and infection
JP6472999B2 (ja) 2011-07-01 2019-02-20 ノバルティス アーゲー 代謝障害を治療するための方法
UA117901C2 (uk) 2011-07-06 2018-10-25 Ґенмаб Б.В. Спосіб посилення ефекторної функції вихідного поліпептиду, його варіанти та їх застосування
WO2013008171A1 (en) 2011-07-11 2013-01-17 Glenmark Pharmaceuticals S.A. Antibodies that bind to ox40 and their uses
SG10201505454SA (en) 2011-07-13 2015-09-29 Abbvie Inc Methods and compositions for treating asthma using anti-il-13 antibodies
WO2013010955A1 (en) 2011-07-15 2013-01-24 Morphosys Ag Antibodies that are cross-reactive for macrophage migration inhibitory factor (mif) and d-dopachrome tautomerase (d-dt)
CN103827134A (zh) 2011-07-20 2014-05-28 泽普泰恩股份有限公司 多肽分离方法
WO2013013013A2 (en) * 2011-07-21 2013-01-24 Alnylam Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for producing modified glycoproteins
US20130022551A1 (en) 2011-07-22 2013-01-24 Trustees Of Boston University DEspR ANTAGONISTS AND AGONISTS AS THERAPEUTICS
KR20140068877A (ko) 2011-08-17 2014-06-09 제넨테크, 인크. 불응성 종양에서의 혈관신생의 억제
MX2014001766A (es) 2011-08-17 2014-05-01 Genentech Inc Anticuerpos de neuregulina y sus usos.
RU2014109038A (ru) 2011-08-23 2015-09-27 Рош Гликарт Аг Антитела к хондроитинсульфат протеогликану меланомы
EP2748202B1 (en) 2011-08-23 2018-07-04 Roche Glycart AG Bispecific antigen binding molecules
CA2843158A1 (en) 2011-08-26 2013-03-07 Merrimack Pharmaceuticals, Inc. Tandem fc bispecific antibodies
WO2013040433A1 (en) 2011-09-15 2013-03-21 Genentech, Inc. Methods of promoting differentiation
SG11201400724SA (en) 2011-09-19 2014-04-28 Genentech Inc Combination treatments comprising c-met antagonists and b-raf antagonists
JP6041882B2 (ja) 2011-09-23 2016-12-14 ロシュ グリクアート アーゲー 二重特異性抗ｅｇｆｒ／抗ｉｇｆ−１ｒ抗体
HUE034044T2 (en) 2011-09-30 2018-01-29 Dana Farber Cancer Inst Inc Therapeutic peptides
US9663573B2 (en) 2011-10-05 2017-05-30 Genentech, Inc. Methods of treating liver conditions using Notch2 antagonists
US12466897B2 (en) 2011-10-10 2025-11-11 Xencor, Inc. Heterodimeric human IgG1 polypeptides with isoelectric point modifications
WO2013054307A2 (en) 2011-10-14 2013-04-18 Novartis Ag Antibodies and methods for wnt pathway-related diseases
BR112014008862A2 (pt) 2011-10-14 2018-08-07 Genentech Inc anticorpo isolado que se liga à htra1, ácido nucleico isolado, célula hospedeira, imunoconjugado, formulação farmacêutica, métodos e usos
US9358250B2 (en) 2011-10-15 2016-06-07 Genentech, Inc. Methods of using SCD1 antagonists
WO2013059531A1 (en) 2011-10-20 2013-04-25 Genentech, Inc. Anti-gcgr antibodies and uses thereof
WO2013059740A1 (en) 2011-10-21 2013-04-25 Foundation Medicine, Inc. Novel alk and ntrk1 fusion molecules and uses thereof
HK1200322A1 (en) 2011-10-24 2015-08-07 Abbvie Inc. Immunobinders directed against sclerostin
MX2014004991A (es) 2011-10-28 2014-05-22 Genentech Inc Combinaciones terapeuticas y metodos para tratar el melanoma.
CN109134658B (zh) 2011-10-31 2022-10-14 中外制药株式会社 控制了重链与轻链的缔合的抗原结合分子
US9221907B2 (en) 2011-11-01 2015-12-29 Bionomics Inc. Anti-GPR49 monoclonal antibodies
WO2013067057A1 (en) 2011-11-01 2013-05-10 Bionomics, Inc. Anti-gpr49 antibodies
CN104053671A (zh) 2011-11-01 2014-09-17 生态学有限公司 治疗癌症的抗体和方法
US10598653B2 (en) 2011-11-01 2020-03-24 Bionomics Inc. Methods of blocking cancer stem cell growth
US9580509B2 (en) 2011-11-07 2017-02-28 Medimmune, Llc Multispecific and multivalent binding proteins and uses thereof
SG11201402485UA (en) 2011-11-21 2014-06-27 Genentech Inc Purification of anti-c-met antibodies
US20130302274A1 (en) 2011-11-25 2013-11-14 Roche Glycart Ag Combination therapy
CN104105709A (zh) 2011-12-05 2014-10-15 诺华股份有限公司 抗her3的结构域ii的表皮生长因子受体3(her3)抗体
EP3590538A1 (en) 2011-12-05 2020-01-08 Novartis AG Antibodies for epidermal growth factor receptor 3 (her3)
WO2013083497A1 (en) 2011-12-06 2013-06-13 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibody formulation
EP2791164B1 (en) 2011-12-13 2017-08-16 Glykos Finland Oy Non-fucosylated glycoprotein comprising the Fc domain of an antibody
WO2013087992A1 (en) * 2011-12-13 2013-06-20 Glykos Finland Oy Glycoprotein
RS60499B1 (sr) 2011-12-20 2020-08-31 Medimmune Llc Modifikovani polipeptidi za bispecifične skelete antitela
ES2728278T3 (es) 2011-12-21 2019-10-23 Novartis Ag Composiciones que comprenden anticuerpos dirigidos al factor P y C5
CN104011080B (zh) 2011-12-22 2017-10-20 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 用于真核细胞的全长抗体展示系统及其用途
SG10201900915WA (en) 2011-12-22 2019-03-28 Hoffmann La Roche Expression vector element combinations, novel production cell generation methods and their use for the recombinant production of polypeptides
ES2791758T3 (es) 2011-12-22 2020-11-05 Hoffmann La Roche Organización de vectores de expresión, procedimientos de generación de células de producción novedosos y su uso para la producción recombinante de polipéptidos
AR089434A1 (es) 2011-12-23 2014-08-20 Genentech Inc Procedimiento para preparar formulaciones con alta concentracion de proteinas
JP2015502397A (ja) 2011-12-23 2015-01-22 ファイザー・インク 部位特異的コンジュゲーションのための操作された抗体定常領域、ならびにそのための方法および使用
WO2013102144A2 (en) 2011-12-30 2013-07-04 Halozyme, Inc. Ph20 polypeptede variants, formulations and uses thereof
WO2013101771A2 (en) 2011-12-30 2013-07-04 Genentech, Inc. Compositions and method for treating autoimmune diseases
TW201333035A (zh) 2011-12-30 2013-08-16 Abbvie Inc 針對ｉｌ－１３及／或ｉｌ－１７之雙特異性結合蛋白
CA2863224A1 (en) 2012-01-09 2013-07-18 The Scripps Research Institute Ultralong complementarity determining regions and uses thereof
JP2015509091A (ja) 2012-01-09 2015-03-26 ザ スクリプス リサーチ インスティテュート ヒト化抗体
US9200072B2 (en) 2012-01-18 2015-12-01 Genentech Inc. Anti-LRP5 antibodies and methods of use
JP2015506944A (ja) 2012-01-18 2015-03-05 ジェネンテック， インコーポレイテッド Ｆｇｆ１９修飾薬を使用する方法
GB201201314D0 (en) 2012-01-26 2012-03-07 Isis Innovation Composition
EP3369746A1 (en) 2012-01-27 2018-09-05 AbbVie Deutschland GmbH & Co KG Composition and method for diagnosis and treatment of diseases associated with neurite degeneration
KR20140119777A (ko) 2012-01-31 2014-10-10 제넨테크, 인크. 항-ig-e m1'' 항체 및 그의 사용 방법
CA2848985A1 (en) 2012-02-01 2013-08-08 Compugen Ltd. C10rf32 antibodies, and uses thereof for treatment of cancer
AU2013218017B2 (en) 2012-02-07 2017-12-07 Innate Pharma MICA binding agents
CA2861124A1 (en) 2012-02-10 2013-08-15 Genentech, Inc. Single-chain antibodies and other heteromultimers
KR102148303B1 (ko) 2012-02-11 2020-08-26 제넨테크, 인크. R-스폰딘 전위 및 그의 사용 방법
MX360352B (es) 2012-02-15 2018-10-30 Hoffmann La Roche Cromatografia de afinidad basada en receptores fc.
US20130259867A1 (en) 2012-03-27 2013-10-03 Genentech, Inc. Diagnosis and treatments relating to her3 inhibitors
AR090549A1 (es) 2012-03-30 2014-11-19 Genentech Inc Anticuerpos anti-lgr5 e inmunoconjugados
WO2013155346A1 (en) 2012-04-11 2013-10-17 The Regents Of The University Of California Diagnostic tools for response to 6-thiopurine therapy
WO2013158279A1 (en) 2012-04-20 2013-10-24 Abbvie Inc. Protein purification methods to reduce acidic species
US9067990B2 (en) 2013-03-14 2015-06-30 Abbvie, Inc. Protein purification using displacement chromatography
WO2013158273A1 (en) 2012-04-20 2013-10-24 Abbvie Inc. Methods to modulate c-terminal lysine variant distribution
US9156915B2 (en) 2012-04-26 2015-10-13 Thomas Jefferson University Anti-GCC antibody molecules
US9056910B2 (en) 2012-05-01 2015-06-16 Genentech, Inc. Anti-PMEL17 antibodies and immunoconjugates
WO2013170191A1 (en) 2012-05-11 2013-11-14 Genentech, Inc. Methods of using antagonists of nad biosynthesis from nicotinamide
EP2849723B1 (en) 2012-05-18 2018-05-02 Genentech, Inc. High-concentration monoclonal antibody formulations
WO2013177062A2 (en) 2012-05-21 2013-11-28 Genentech, Inc. Methods for improving safety of blood-brain barrier transport
RU2625771C2 (ru) 2012-05-23 2017-07-18 Дженентек, Инк. Способ отбора терапевтических средств
EP2852610B1 (en) 2012-05-23 2018-07-11 Glykos Finland Oy Production of fucosylated glycoproteins
MX2014014162A (es) 2012-05-24 2015-02-04 Hoffmann La Roche Anticuerpos multiespecificos.
WO2013176754A1 (en) 2012-05-24 2013-11-28 Abbvie Inc. Novel purification of antibodies using hydrophobic interaction chromatography
WO2013181575A2 (en) 2012-06-01 2013-12-05 Momenta Pharmaceuticals, Inc. Methods related to denosumab
EP2855520B1 (en) 2012-06-04 2018-09-26 Novartis AG Site-specific labeling methods and molecules produced thereby
KR101566539B1 (ko) 2012-06-08 2015-11-05 국립암센터 신규한 Ｔｈ2 세포 전환용 에피토프 및 이의 용도
US9216219B2 (en) 2012-06-12 2015-12-22 Novartis Ag Anti-BAFFR antibody formulation
EP2861624A1 (en) 2012-06-15 2015-04-22 F. Hoffmann-La Roche AG Anti-pcsk9 antibodies, formulations, dosing, and methods of use
JP6285923B2 (ja) 2012-06-22 2018-02-28 トラスティーズ・オブ・ダートマス・カレッジ 新規ＶＩＳＴＡ−Ｉｇコンストラクト及び自己免疫、アレルギー性及び炎症性障害の処置のためのＶＩＳＴＡ−Ｉｇの使用
US9890215B2 (en) 2012-06-22 2018-02-13 King's College London Vista modulators for diagnosis and treatment of cancer
WO2014004549A2 (en) 2012-06-27 2014-01-03 Amgen Inc. Anti-mesothelin binding proteins
RU2639287C2 (ru) 2012-06-27 2017-12-20 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг Способ отбора и получения высокоселективных и мультиспецифичных нацеливающих групп с заданными свойствами, включающих по меньшей мере две различные связывающие группировки, и их применения
KR20150030744A (ko) 2012-06-27 2015-03-20 에프. 호프만-라 로슈 아게 표적에 특이적으로 결합하는 하나 이상의 결합 단위를 포함하는 항체 Ｆｃ－영역 접합체의 제조 방법 및 그의 용도
UY34887A (es) 2012-07-02 2013-12-31 Bristol Myers Squibb Company Una Corporacion Del Estado De Delaware Optimización de anticuerpos que se fijan al gen de activación de linfocitos 3 (lag-3) y sus usos
RU2684595C2 (ru) 2012-07-04 2019-04-09 Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг Ковалентно связанные конъюгаты антиген-антитело
DK2869837T3 (en) 2012-07-04 2016-09-26 Hoffmann La Roche Anti-theophylline antibodies and methods of use
EP2870180B1 (en) 2012-07-04 2024-08-28 F. Hoffmann-La Roche AG Anti-biotin antibodies and methods of use
US9803191B2 (en) 2012-07-05 2017-10-31 Genentech, Inc. Expression and secretion system
CN104428007B (zh) 2012-07-09 2018-03-16 基因泰克公司 包含抗cd22抗体的免疫缀合物
AR091703A1 (es) 2012-07-09 2015-02-25 Genentech Inc Anticuerpos e inmunoconjugados que comprenden anticuerpos anti-cd22
CN104411337A (zh) 2012-07-09 2015-03-11 基因泰克公司 包含抗cd79b抗体的免疫偶联物
IN2014DN10652A (pl) 2012-07-09 2015-09-11 Genentech Inc
UY34905A (es) 2012-07-12 2014-01-31 Abbvie Inc Proteínas de unión a il-1
SG11201408538PA (en) 2012-07-13 2015-02-27 Roche Glycart Ag Bispecific anti-vegf/anti-ang-2 antibodies and their use in the treatment of ocular vascular diseases
BR112014032169A2 (pt) 2012-07-18 2017-08-01 Glycotope Gmbh tratamentos terapêuticos com anticorpos anti-her2 tendo uma fucosilação baixa
NZ630363A (en) 2012-07-25 2018-09-28 Celldex Therapeutics Inc Anti-kit antibodies and uses thereof
EP2877589B1 (en) 2012-07-26 2024-03-06 Momenta Pharmaceuticals, Inc. Glycoproteins with anti-inflammatory properties
MY175687A (en) 2012-08-07 2020-07-06 Roche Glycart Ag Composition comprising two antibodies engineered to have reduced and increased effector function
HUE045144T2 (hu) 2012-08-29 2019-12-30 Hoffmann La Roche Véragygát-shuttle
US9512214B2 (en) 2012-09-02 2016-12-06 Abbvie, Inc. Methods to control protein heterogeneity
HK1211981A1 (en) 2012-09-02 2016-06-03 Abbvie Inc. Methods to control protein heterogeneity
US9376489B2 (en) 2012-09-07 2016-06-28 Novartis Ag IL-18 binding molecules
US9381244B2 (en) 2012-09-07 2016-07-05 King's College London VISTA modulators for diagnosis and treatment of cancer
TW202037609A (zh) 2012-11-01 2020-10-16 美商艾伯維有限公司 抗-vegf/dll4雙重可變區域免疫球蛋白及其用途
US11230589B2 (en) 2012-11-05 2022-01-25 Foundation Medicine, Inc. Fusion molecules and uses thereof
EP2914621B1 (en) 2012-11-05 2023-06-07 Foundation Medicine, Inc. Novel ntrk1 fusion molecules and uses thereof
MA38165A1 (fr) 2012-11-08 2018-07-31 Hoffmann La Roche Protéines de liaison à l'antigène her3 se liant à l'épingle à cheveux beta de her3
CN104968367B (zh) 2012-11-13 2018-04-13 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 抗血凝素抗体和使用方法
EP2733153A1 (en) 2012-11-15 2014-05-21 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods for the preparation of immunoconjugates and uses thereof
WO2014084859A1 (en) 2012-11-30 2014-06-05 Novartis Ag Molecules and methods for modulating tmem16a activities
EP3508215A3 (en) 2012-12-03 2019-10-02 Bristol-Myers Squibb Company Enhancing anti-cancer activity of immunomodulatory fc fusion proteins
DK2928921T3 (da) 2012-12-05 2021-04-19 Novartis Ag Sammensætninger og fremgangsmåder til antistoffer målrettet epo
WO2014096015A1 (en) 2012-12-21 2014-06-26 F. Hoffmann-La Roche Ag Disulfide-linked multivalent mhc class i comprising multi-function proteins
US9550986B2 (en) 2012-12-21 2017-01-24 Abbvie Inc. High-throughput antibody humanization
WO2014106015A2 (en) 2012-12-28 2014-07-03 Abbvie, Inc. Multivalent binding protein compositions
US9458244B2 (en) 2012-12-28 2016-10-04 Abbvie Inc. Single chain multivalent binding protein compositions and methods
CA2896723C (en) 2012-12-28 2024-02-13 Precision Biologics, Inc. Humanized monoclonal antibodies and methods of use for the diagnosis and treatment of colon and pancreas cancer
WO2014106602A1 (en) 2013-01-02 2014-07-10 Glenmark Pharmaceuticals S.A. Antibodies that bind to tl1a and their uses
KR20200024345A (ko) 2013-01-10 2020-03-06 젠맵 비. 브이 인간 IgG1 Fc 영역 변이체 및 그의 용도
AR094403A1 (es) 2013-01-11 2015-07-29 Hoffmann La Roche Terapia de combinación de anticuerpos anti-her3
US10487155B2 (en) 2013-01-14 2019-11-26 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
US9605084B2 (en) 2013-03-15 2017-03-28 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
US11053316B2 (en) 2013-01-14 2021-07-06 Xencor, Inc. Optimized antibody variable regions
KR102211837B1 (ko) 2013-01-14 2021-02-03 젠코어 인코포레이티드 신규한 이형이량체 단백질
US9701759B2 (en) 2013-01-14 2017-07-11 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
WO2014113510A1 (en) 2013-01-15 2014-07-24 Xencor, Inc. Rapid clearance of antigen complexes using novel antibodies
CA3150658A1 (en) 2013-01-18 2014-07-24 Foundation Medicine, Inc. Methods of treating cholangiocarcinoma
EP2948177A1 (en) 2013-01-22 2015-12-02 AbbVie Inc. Methods for optimizing domain stability of binding proteins
WO2014116749A1 (en) 2013-01-23 2014-07-31 Genentech, Inc. Anti-hcv antibodies and methods of using thereof
EP2953976B1 (en) 2013-02-08 2021-03-24 Novartis Ag Specific sites for modifying antibodies to make immunoconjugates
LT2953969T (lt) 2013-02-08 2019-12-10 Novartis Ag Anti-il-17a antikūnai ir jų panaudojimas autoimuninių ir uždegiminių ligų gydymui
WO2014124258A2 (en) 2013-02-08 2014-08-14 Irm Llc Specific sites for modifying antibodies to make immunoconjugates
US10034921B2 (en) 2013-02-13 2018-07-31 Laboratoire Français Du Fractionnement Et Des Biotechnologies Proteins with modified glycosylation and methods of production thereof
EP3594230A1 (en) 2013-02-13 2020-01-15 Laboratoire Français du Fractionnement et des Biotechnologies Highly galactosylated anti-tnf-alpha antibodies and uses thereof
ES2747920T3 (es) 2013-02-14 2020-03-12 Innate Pharma Anticuerpo anti-NKP46 para diagnóstico de un linfoma de células T periféricas no cutáneo (PTCL)
ES2878749T3 (es) 2013-02-20 2021-11-19 Innate Pharma Un compuesto que se une específicamente a KIR3DL2 para el uso en el tratamiento de linfoma de células T periférico
JP2016509045A (ja) 2013-02-22 2016-03-24 エフ・ホフマン−ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト がんを治療し、薬剤耐性を防止する方法
US20140242083A1 (en) 2013-02-26 2014-08-28 Roche Glycart Ag Anti-mcsp antibodies
US9487587B2 (en) 2013-03-05 2016-11-08 Macrogenics, Inc. Bispecific molecules that are immunoreactive with immune effector cells of a companion animal that express an activating receptor and cells that express B7-H3 and uses thereof
MX2015011428A (es) 2013-03-06 2016-02-03 Genentech Inc Metodos para tratar y prevenir la resistencia a los farmacos para el cancer.
HK1220465A1 (zh) 2013-03-06 2017-05-05 Merrimack Pharmaceuticals, Inc. 抗c-met串联fc双特异性抗体
HK1207960A1 (en) 2013-03-12 2016-02-19 Abbvie Inc. Human antibodies that bind human tnf-alpha and methods of preparing the same
US9498532B2 (en) 2013-03-13 2016-11-22 Novartis Ag Antibody drug conjugates
JP2016516046A (ja) 2013-03-14 2016-06-02 ジェネンテック， インコーポレイテッド がんの治療方法及びがん薬物耐性を阻止する方法
US9017687B1 (en) 2013-10-18 2015-04-28 Abbvie, Inc. Low acidic species compositions and methods for producing and using the same using displacement chromatography
WO2014159579A1 (en) 2013-03-14 2014-10-02 Abbvie Inc. MUTATED ANTI-TNFα ANTIBODIES AND METHODS OF THEIR USE
EP3611189A1 (en) 2013-03-14 2020-02-19 Novartis AG Antibodies against notch 3
SMT202100464T1 (it) 2013-03-14 2021-11-12 Macrogenics Inc Molecole bispecifiche che sono immunoreattive con cellule effettrici immunitarie che esprimono un recettore di attivazione
JP2016512241A (ja) 2013-03-14 2016-04-25 アボット・ラボラトリーズＡｂｂｏｔｔ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ 改良された抗体検出のためのｈｃｖｎｓ３組換え抗原およびこの突然変異体
MX362075B (es) 2013-03-14 2019-01-07 Abbott Lab Ensayo de combinación de antígeno-anticuerpo del virus de la hepatitis c (vhc) y métodos y composiciones para usarlo.
MX2015010854A (es) 2013-03-14 2016-07-20 Genentech Inc Combinaciones de un compuesto inhibidor de mek con un compuesto inhibidor de her3/egfr y metodos de uso.
JP6436965B2 (ja) 2013-03-14 2018-12-12 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ｂ７−ｈ４抗体及びイムノコンジュゲート
US9499614B2 (en) 2013-03-14 2016-11-22 Abbvie Inc. Methods for modulating protein glycosylation profiles of recombinant protein therapeutics using monosaccharides and oligosaccharides
WO2014143343A1 (en) 2013-03-14 2014-09-18 Abbott Laboratories Hcv core lipid binding domain monoclonal antibodies
US9562099B2 (en) 2013-03-14 2017-02-07 Genentech, Inc. Anti-B7-H4 antibodies and immunoconjugates
KR20150131177A (ko) 2013-03-15 2015-11-24 제넨테크, 인크. 항-CRTh2 항체 및 그의 용도
US10106624B2 (en) 2013-03-15 2018-10-23 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
JP2016515120A (ja) 2013-03-15 2016-05-26 バイオジェン・エムエイ・インコーポレイテッドＢｉｏｇｅｎ ＭＡ Ｉｎｃ． 抗アルファｖベータ５抗体を用いた急性腎損傷の治療及び予防
RU2680267C2 (ru) 2013-03-15 2019-02-19 Мемориал Слоан Кеттеринг Кэнсер Сентер Высокоаффинные антитела к gd2
WO2014143739A2 (en) 2013-03-15 2014-09-18 Biogen Idec Ma Inc. Anti-alpha v beta 6 antibodies and uses thereof
ES2701051T3 (es) 2013-03-15 2019-02-20 Novartis Ag Conjugados de anticuerpo-fármaco
BR112015023120A2 (pt) 2013-03-15 2017-11-21 Genentech Inc método para identificar um indivíduo com uma doença ou disfunção, método para prever a responsividade de um indivíduo com uma doença ou disfunção, método para determinar a probabilidade de que um indivíduo com uma doença ou disfunção exibirá benefício do tratamento, método para selecionar uma terapia, usos de um antagonista de ligação do eixo pd-l1, ensaio para identificar um indivíduo com uma doença, kit de diagnóstico, método para avaliar uma resposta ao tratamento e método para monitorar a resposta de um indivíduo tratado
US9260527B2 (en) 2013-03-15 2016-02-16 Sdix, Llc Anti-human CXCR4 antibodies and methods of making same
WO2014145016A2 (en) 2013-03-15 2014-09-18 Genentech, Inc. Il-22 polypeptides and il-22 fc fusion proteins and methods of use
SG11201507427QA (en) 2013-03-15 2015-10-29 Genentech Inc Compositions and methods for diagnosis and treatment of hepatic cancers
WO2014144280A2 (en) 2013-03-15 2014-09-18 Abbvie Inc. DUAL SPECIFIC BINDING PROTEINS DIRECTED AGAINST IL-1β AND / OR IL-17
WO2014150877A2 (en) 2013-03-15 2014-09-25 Ac Immune S.A. Anti-tau antibodies and methods of use
WO2014144466A1 (en) 2013-03-15 2014-09-18 Biogen Idec Ma Inc. Anti-alpha v beta 6 antibodies and uses thereof
ES2708565T3 (es) 2013-03-15 2019-04-10 Atyr Pharma Inc Conjugados de Fc-histidil-ARNt sintetasa
US10450361B2 (en) 2013-03-15 2019-10-22 Momenta Pharmaceuticals, Inc. Methods related to CTLA4-Fc fusion proteins
CA2905123A1 (en) 2013-03-15 2014-09-18 Genentech, Inc. Methods of treating cancer and preventing cancer drug resistance
SG11201506766PA (en) 2013-03-15 2015-09-29 Dana Farber Cancer Inst Inc Therapeutic peptides
EP2970486B1 (en) 2013-03-15 2018-05-16 Xencor, Inc. Modulation of t cells with bispecific antibodies and fc fusions
US10858417B2 (en) 2013-03-15 2020-12-08 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
UA118028C2 (uk) 2013-04-03 2018-11-12 Рош Глікарт Аг Біспецифічне антитіло, специфічне щодо fap і dr5, антитіло, специфічне щодо dr5, і спосіб їх застосування
CA2908819A1 (en) 2013-04-22 2014-10-30 Glycotope Gmbh Anti-cancer treatments with anti-egfr antibodies having a low fucosylation
WO2014177459A2 (en) 2013-04-29 2014-11-06 F. Hoffmann-La Roche Ag Fc-receptor binding modified asymmetric antibodies and methods of use
MX364861B (es) 2013-04-29 2019-05-09 Hoffmann La Roche Anticuerpos anti-receptor del factor de crecimiento de tipo insulinico humano 1 (anti-igf-1r) con abolicion de la union al fcrn y su uso en el tratamiento de enfermedades oculares vasculares.
UA118029C2 (uk) 2013-04-29 2018-11-12 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг Модифіковане антитіло, що зв'язується з людським fcrn, й способи його застосування
WO2014186310A1 (en) 2013-05-13 2014-11-20 Momenta Pharmaceuticals, Inc. Methods for the treatment of neurodegeneration
EP3594240B1 (en) 2013-05-20 2023-12-06 F. Hoffmann-La Roche AG Anti-transferrin receptor antibodies and methods of use
RU2687044C2 (ru) 2013-05-31 2019-05-06 Дженентек, Инк. Антитела против стеночной тейхоевой кислоты и их конъюгаты
MX369022B (es) 2013-05-31 2019-10-25 Genentech Inc Anticuerpos anti-ácido teicoico de la pared celular y conjugados.
KR102332303B1 (ko) 2013-05-31 2021-11-26 자임워크스 인코포레이티드 감소되거나 침묵화된 효과기 기능을 갖는 이종다량체
UY35620A (es) 2013-06-21 2015-01-30 Novartis Ag Anticuerpos del receptor 1 de ldl oxidado similar a lectina y métodos de uso
AR096601A1 (es) 2013-06-21 2016-01-20 Novartis Ag Anticuerpos del receptor 1 de ldl oxidado similar a lectina y métodos de uso
TW201534726A (zh) 2013-07-03 2015-09-16 Halozyme Inc 熱穩定ｐｈ２０玻尿酸酶變異體及其用途
CA2918370A1 (en) 2013-07-18 2015-01-22 Fabrus, Inc. Humanized antibodies with ultralong complementarity determining regions
WO2015017146A2 (en) 2013-07-18 2015-02-05 Fabrus, Inc. Antibodies with ultralong complementarity determining regions
KR102516152B1 (ko) 2013-08-01 2023-03-31 파이브 프라임 테라퓨틱스, 인크. 비푸코실화된 항-ｆｇｆｒ２ｉｉｉｂ 항체
SG11201601044XA (en) 2013-08-12 2016-03-30 Genentech Inc Compositions and method for treating complement-associated conditions
HK1219280A1 (zh) 2013-08-14 2017-03-31 Novartis Ag 治疗偶发性包涵体肌炎之方法
US20150093399A1 (en) 2013-08-28 2015-04-02 Bioasis Technologies, Inc. Cns-targeted conjugates having modified fc regions and methods of use thereof
JP2016537399A (ja) 2013-09-17 2016-12-01 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ｌｇｒ５抗体を使用する方法
ES2881306T3 (es) 2013-09-27 2021-11-29 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Método para la producción de heteromultímeros de polipéptidos
WO2015050959A1 (en) 2013-10-01 2015-04-09 Yale University Anti-kit antibodies and methods of use thereof
SI3052192T1 (sl) 2013-10-02 2020-11-30 Medimmune, Llc Nevtralizarijoča protitelesa proti-influenci A in njihove uporabe
US9598667B2 (en) 2013-10-04 2017-03-21 Abbvie Inc. Use of metal ions for modulation of protein glycosylation profiles of recombinant proteins
JP2016537965A (ja) 2013-10-11 2016-12-08 ジェネンテック， インコーポレイテッド Ｎｓｐ４阻害剤及び使用方法
CN105813654B (zh) 2013-10-11 2019-05-31 美国政府(由卫生和人类服务部的部长所代表) Tem8抗体及其用途
BR112016006929A2 (pt) 2013-10-11 2017-09-19 Hoffmann La Roche Anticorpo, ácido nucleico, vetor de expressão, célula hospedeira, métodos de preparação de anticorpo, de tratamento de pacientes e de geração de um anticorpo, composição farmacêutica e uso do anticorpo
WO2015057622A1 (en) 2013-10-16 2015-04-23 Momenta Pharmaceuticals, Inc. Sialylated glycoproteins
US9085618B2 (en) 2013-10-18 2015-07-21 Abbvie, Inc. Low acidic species compositions and methods for producing and using the same
US9181337B2 (en) 2013-10-18 2015-11-10 Abbvie, Inc. Modulated lysine variant species compositions and methods for producing and using the same
US8946395B1 (en) 2013-10-18 2015-02-03 Abbvie Inc. Purification of proteins using hydrophobic interaction chromatography
BR112016008477A2 (pt) 2013-10-18 2017-10-03 Genentech Inc Corpos, ácido nucleico, célula hospedeira, método de produção de um anticorpo, imunoconjugado, formulação farmacêutica e usos do anticorpo
WO2015057939A1 (en) 2013-10-18 2015-04-23 Biogen Idec Ma Inc. Anti-s1p4 antibodies and uses thereof
AR098155A1 (es) 2013-10-23 2016-05-04 Genentech Inc Métodos para diagnosticar y tratar trastornos eosinofílicos
CN105849125B (zh) 2013-11-07 2020-05-15 国家医疗保健研究所 神经调节蛋白变构抗her3抗体
US20150139988A1 (en) 2013-11-15 2015-05-21 Abbvie, Inc. Glycoengineered binding protein compositions
LT3071597T (lt) 2013-11-21 2020-10-12 F. Hoffmann-La Roche Ag Antikūnai prieš alfa-sunukleiną ir jų naudojimo būdai
WO2015082446A1 (en) 2013-12-02 2015-06-11 F. Hoffmann-La Roche Ag Treatment of cancer using an anti-cdcp1 antibody and a taxane
EP3077504B1 (en) 2013-12-06 2019-08-14 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Therapeutic peptides
NZ720769A (en) 2013-12-09 2022-10-28 Allakos Inc Anti-siglec-8 antibodies and methods of use thereof
WO2015089375A1 (en) 2013-12-13 2015-06-18 The General Hospital Corporation Soluble high molecular weight (hmw) tau species and applications thereof
SG11201604784XA (en) 2013-12-13 2016-07-28 Genentech Inc Anti-cd33 antibodies and immunoconjugates
WO2015095423A2 (en) 2013-12-17 2015-06-25 Genentech, Inc. Combination therapy comprising ox40 binding agonists and pd-1 axis binding antagonists
AU2014364593A1 (en) 2013-12-17 2016-07-07 Genentech, Inc. Methods of treating cancer using PD-1 axis binding antagonists and an anti-CD20 antibody
JP2017507900A (ja) 2013-12-17 2017-03-23 ジェネンテック， インコーポレイテッド Ｐｄ−１軸結合アンタゴニスト及び抗ｈｅｒ２抗体を使用してｈｅｒ２陽性がんを治療する方法
IL263466B2 (en) 2013-12-17 2023-10-01 Genentech Inc Anti-CD3 antibodies and methods of using them
TWI670283B (zh) 2013-12-23 2019-09-01 美商建南德克公司 抗體及使用方法
US11014987B2 (en) 2013-12-24 2021-05-25 Janssen Pharmaceutics Nv Anti-vista antibodies and fragments, uses thereof, and methods of identifying same
WO2015097536A2 (en) 2013-12-24 2015-07-02 Janssen Pharmaceutical Nv Anti-vista antibodies and fragments
EP3089758B1 (en) 2014-01-03 2021-01-27 F.Hoffmann-La Roche Ag Covalently linked helicar-anti-helicar antibody conjugates and uses thereof
BR112016014945A2 (pt) 2014-01-03 2018-01-23 F. Hoffmann-La Roche Ag conjugado, formulação farmacêutica e uso
WO2015103549A1 (en) 2014-01-03 2015-07-09 The United States Of America, As Represented By The Secretary Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to hiv-1 env and their use
CN105899540B (zh) 2014-01-03 2020-02-07 豪夫迈·罗氏有限公司 双特异性抗-半抗原/抗-血脑屏障受体的抗体、其复合物及它们作为血脑屏障穿梭物的应用
CA2932547C (en) 2014-01-06 2023-05-23 F. Hoffmann-La Roche Ag Monovalent blood brain barrier shuttle modules
RU2727639C2 (ru) 2014-01-15 2020-07-22 Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг Варианты fc-области с модифицированной способностью связываться с fcrn и с сохраненной способностью связываться с белком а
WO2015110923A2 (en) 2014-01-21 2015-07-30 Acerta Pharma B.V. Methods of treating chronic lymphocytic leukemia and small lymphocytic leukemia usng a btk inhibitor
EP3096797A1 (en) 2014-01-24 2016-11-30 F. Hoffmann-La Roche AG Methods of using anti-steap1 antibodies and immunoconjugates
ES2694857T3 (es) 2014-02-04 2018-12-27 Genentech, Inc. Smoothened mutante y métodos de uso de la misma
EP3102230B1 (en) 2014-02-08 2021-04-28 F. Hoffmann-La Roche AG Methods of treating alzheimer's disease
CA2938466C (en) 2014-02-08 2021-11-02 Genentech, Inc. Methods of treating alzheimer's disease
EA201691610A8 (ru) 2014-02-12 2018-05-31 Дженентек, Инк. Анти-jagged1 антитела и способы применения
KR20160135190A (ko) 2014-02-14 2016-11-25 앤드류 에스. 카이 혈관형성 암의 치료를 위한 개선된 방법
UA117608C2 (uk) 2014-02-21 2018-08-27 Дженентек, Інк. Спосіб лікування еозинофільного захворювання у пацієнта шляхом застосування біспецифічного анти-il-13/il-17 антитіла
TWI558399B (zh) 2014-02-26 2016-11-21 美國禮來大藥廠 癌症之組合療法
DK3110446T3 (da) 2014-02-28 2022-02-28 Allakos Inc Fremgangsmåder og sammensætninger til behandling af Siglec-8-associerede sygdomme
TW201622744A (zh) 2014-03-04 2016-07-01 美國禮來大藥廠 癌症之組合療法
JP2017509337A (ja) 2014-03-12 2017-04-06 ノバルティス アーゲー イムノコンジュゲートを作製する抗体を修飾するための特定部位
AU2015229035B2 (en) 2014-03-14 2021-08-05 Genentech, Inc. Methods and compositions for secretion of heterologous polypeptides
CA2939006A1 (en) 2014-03-14 2015-09-17 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Vaccine compositions and methods for restoring nkg2d pathway function against cancers
KR102345173B1 (ko) 2014-03-14 2021-12-29 이나뜨 파르마 에스.에이. 증가된 안정성을 가진 인간화 항체
CN106103478B (zh) 2014-03-21 2020-04-03 豪夫迈·罗氏有限公司 抗体体内半寿期的体外预测
AR099812A1 (es) 2014-03-21 2016-08-17 Abbvie Inc Anticuerpos y conjugados de anticuerpo y fármaco anti-egfr
WO2015140591A1 (en) 2014-03-21 2015-09-24 Nordlandssykehuset Hf Anti-cd14 antibodies and uses thereof
RU2016141385A (ru) 2014-03-24 2018-04-28 Дженентек, Инк. Лечение рака антагонистами с-мет и их корреляция с экспрессией hgf
EP3699195A3 (en) 2014-03-28 2020-11-04 Xencor, Inc. Bispecific antibodies that bind to cd38 and cd3
SG11201607969XA (en) 2014-03-31 2016-10-28 Genentech Inc Anti-ox40 antibodies and methods of use
KR20160146747A (ko) 2014-03-31 2016-12-21 제넨테크, 인크. 항혈관신생제 및 ox40 결합 효능제를 포함하는 조합 요법
UA117289C2 (uk) 2014-04-02 2018-07-10 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг Мультиспецифічне антитіло
CA2944649C (en) 2014-04-04 2022-06-21 Bionomics, Inc. Humanized antibodies that bind lgr5
AU2015244814B2 (en) 2014-04-07 2020-12-24 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Immunoactivating antigen-binding molecule
SG11201608192SA (en) 2014-04-11 2016-10-28 Medimmune Llc Bispecific her2 antibodies
JP2017518737A (ja) 2014-04-21 2017-07-13 ミレニアム ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッドＭｉｌｌｅｎｎｉｕｍ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ， Ｉｎｃ． ＳＹＫ標的治療薬のための抗ｐＳＹＫ抗体分子及びその使用
TW201622746A (zh) 2014-04-24 2016-07-01 諾華公司 改善或加速髖部骨折術後身體復原之方法
WO2015164615A1 (en) 2014-04-24 2015-10-29 University Of Oslo Anti-gluten antibodies and uses thereof
MX2016014434A (es) 2014-05-13 2017-02-23 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Molecula de union a antigeno redirigida a celulas t para celulas que tienen funcion de inmunosupresion.
WO2015179658A2 (en) 2014-05-22 2015-11-26 Genentech, Inc. Anti-gpc3 antibodies and immunoconjugates
RU2016144405A (ru) 2014-05-23 2018-06-26 Дженентек, Инк. MiT БИОМАРКЕРЫ И СПОСОБЫ ИХ ПРИМЕНЕНИЯ
EA035419B9 (ru) 2014-05-29 2020-08-07 Мэкроудженикс, Инк. Триспецифичные связывающие молекулы и способы их применения
EP3613433B1 (en) 2014-05-30 2022-01-05 Shanghai Henlius Biotech, Inc. Anti-epidermal growth factor receptor (egfr) antibodies
PE20170441A1 (es) 2014-06-06 2017-04-26 Bristol Myers Squibb Co Anticuerpos contra el receptor del factor de necrosis tumoral inducido por glucocorticoides (gitr) y sus usos
US11123426B2 (en) 2014-06-11 2021-09-21 The Trustees Of Dartmouth College Use of vista agonists and antagonists to suppress or enhance humoral immunity
CN106459202A (zh) 2014-06-11 2017-02-22 豪夫迈·罗氏有限公司 抗LgR5抗体及其用途
CN107073121A (zh) 2014-06-13 2017-08-18 基因泰克公司 治疗及预防癌症药物抗性的方法
EP3161001A2 (en) 2014-06-25 2017-05-03 Novartis AG Antibodies specific for il-17a fused to hyaluronan binding peptide tags
BR112016029935A2 (pt) 2014-06-26 2017-10-31 Hoffmann La Roche ?anticorpos anti-brdu, complexo, formulação farmacêutica e uso de anticorpo?
WO2015197598A2 (en) 2014-06-27 2015-12-30 Innate Pharma Multispecific antigen binding proteins
JP6822849B2 (ja) 2014-06-27 2021-01-27 イナート・ファルマ・ソシエテ・アノニムＩｎｎａｔｅ Ｐｈａｒｍａ Ｐｈａｒｍａ Ｓ．Ａ． 多重特異的ＮＫｐ４６結合タンパク質
CN106488775A (zh) 2014-07-11 2017-03-08 基因泰克公司 Notch途径抑制
RU2715038C2 (ru) 2014-07-11 2020-02-21 Дженентек, Инк. Антитела анти-pd-l1 и способы их диагностического применения
MX392761B (es) 2014-07-15 2025-03-21 Medimmune Llc Anticuerpos anti-influenza b neutralizantes y usos de los mismos.
SG11201700446XA (en) 2014-07-21 2017-02-27 Glykos Finland Oy Production of glycoproteins with mammalian-like n-glycans in filamentous fungi
WO2018140026A1 (en) 2017-01-27 2018-08-02 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Bispecific her2 and cd3 binding molecules
WO2016020791A1 (en) 2014-08-05 2016-02-11 Novartis Ag Ckit antibody drug conjugates
WO2016020882A2 (en) 2014-08-07 2016-02-11 Novartis Ag Angiopoetin-like 4 (angptl4) antibodies and methods of use
WO2016020880A2 (en) 2014-08-07 2016-02-11 Novartis Ag Angiopoietin-like 4 antibodies and methods of use
TW201609099A (zh) 2014-08-11 2016-03-16 艾森塔製藥公司 使用布魯頓（Ｂｒｕｔｏｎ）氏酪胺酸激酶（ＢＴＫ）抑制劑以治療慢性淋巴球性白血病和小淋巴球性白血病之方法
TW201618775A (zh) 2014-08-11 2016-06-01 艾森塔製藥公司 Ｂｔｋ抑制劑、ｐｉ３ｋ抑制劑、ｊａｋ－２抑制劑、ｐｄ－１抑制劑及／或ｐｄ－ｌ１抑制劑之治療組合物
MA40513A (fr) 2014-08-12 2017-06-21 Novartis Ag Conjugués médicament-anticorps anti-cdh6
WO2016030488A1 (en) 2014-08-27 2016-03-03 Innate Pharma Treatment of celiac disease
DK4074735T3 (da) 2014-08-28 2025-07-14 Bioatla Inc Betinget aktive kimæriske antigenreceptorer til modificerede t-celler
TWI751102B (zh) 2014-08-28 2022-01-01 美商奇諾治療有限公司 對ｃｄ１９具專一性之抗體及嵌合抗原受體
USD791797S1 (en) * 2014-09-11 2017-07-11 Express Scripts, Inc. Display screen with a graphical user interface
USD791796S1 (en) * 2014-09-11 2017-07-11 Express Scripts, Inc. Display screen with a graphical user interface
LT3191135T (lt) 2014-09-12 2020-11-25 Genentech, Inc. Anti-her2 antikūnai ir imunokonjugatai
MA40579A (fr) 2014-09-12 2016-03-17 Genentech Inc Anticorps anti-cll-1 et immunoconjugués
WO2016040724A1 (en) 2014-09-12 2016-03-17 Genentech, Inc. Anti-b7-h4 antibodies and immunoconjugates
MX2017003472A (es) 2014-09-17 2017-10-31 Genentech Inc Inmunoconjugados que comprenden anticuerpos anti-her2.
HUE049175T2 (hu) 2014-09-23 2020-09-28 Hoffmann La Roche Eljárás anti-CD79b immunkonjugátumok alkalmazására
TWI700300B (zh) 2014-09-26 2020-08-01 日商中外製藥股份有限公司 中和具有第ｖｉｉｉ凝血因子（ｆｖｉｉｉ）機能替代活性的物質之抗體
MA40764A (fr) 2014-09-26 2017-08-01 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Agent thérapeutique induisant une cytotoxicité
TWI701435B (zh) 2014-09-26 2020-08-11 日商中外製藥股份有限公司 測定ｆｖｉｉｉ的反應性之方法
MX386297B (es) 2014-09-29 2025-03-18 Univ Duke Moleculas biespecificas que comprenden un brazo orientado a la envoltura vih-1.
JP2017531642A (ja) 2014-10-03 2017-10-26 マサチューセッツ インスティテュート オブ テクノロジー エボラ糖タンパク質に結合する抗体およびその使用
MA41044A (fr) 2014-10-08 2017-08-15 Novartis Ag Compositions et procédés d'utilisation pour une réponse immunitaire accrue et traitement contre le cancer
JP2017536102A (ja) 2014-10-16 2017-12-07 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗アルファ−シヌクレイン抗体及び使用方法
MA41480A (fr) 2014-10-17 2017-12-19 Glenmark Pharmaceuticals Sa Anticorps qui se lient au ccr6 et leurs utilisations
US10329348B2 (en) 2014-10-23 2019-06-25 Innate Pharma Treatment of cancers using anti-NKG2A agents
US10626176B2 (en) 2014-10-31 2020-04-21 Jounce Therapeutics, Inc. Methods of treating conditions with antibodies that bind B7-H4
CA2966523A1 (en) 2014-11-03 2016-05-12 Genentech, Inc. Assays for detecting t cell immune subsets and methods of use thereof
WO2016073380A1 (en) 2014-11-03 2016-05-12 Genentech, Inc. Method and biomarkers for predicting efficacy and evaluation of an ox40 agonist treatment
CA2961439A1 (en) 2014-11-05 2016-05-12 Genentech, Inc. Anti-fgfr2/3 antibodies and methods using same
US20160152720A1 (en) 2014-11-06 2016-06-02 Genentech, Inc. Combination therapy comprising ox40 binding agonists and tigit inhibitors
CA2960569A1 (en) 2014-11-06 2016-05-12 F. Hoffmann-Laroche Ag Fc-region variants with modified fcrn- and protein a-binding properties
DK3215528T3 (da) 2014-11-06 2019-10-07 Hoffmann La Roche Fc-regionvarianter med modificeret FcRn-binding og anvendelsesfremgangsmåder
CN107105632A (zh) 2014-11-10 2017-08-29 豪夫迈·罗氏有限公司 肾病动物模型及其治疗剂
CR20170240A (es) 2014-11-10 2018-04-03 Genentech Inc Anticuerpos anti-interleucina-33 y sus usos
WO2016077789A1 (en) 2014-11-14 2016-05-19 The Usa, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to ebola virus glycoprotein and their use
TW201625692A (zh) 2014-11-14 2016-07-16 諾華公司 抗體藥物結合物
EP3224275B1 (en) 2014-11-14 2020-03-04 F.Hoffmann-La Roche Ag Antigen binding molecules comprising a tnf family ligand trimer
DK3218490T3 (en) * 2014-11-15 2019-02-18 Zumutor Biologics Inc DNA BINDING DOMAIN OF CRISPR SYSTEM FOR PRODUCING NON-FUCOSYLED AND PARTICULAR FUCOSYLED PROTEINS
SG10201807625PA (en) 2014-11-17 2018-10-30 Genentech Inc Combination therapy comprising ox40 binding agonists and pd-1 axis binding antagonists
JP6859259B2 (ja) 2014-11-19 2021-04-14 ジェネンテック， インコーポレイテッド ＢＡＣＥｌに対する抗体及び神経疾患免疫療法のためのその使用
WO2016081640A1 (en) 2014-11-19 2016-05-26 Genentech, Inc. Anti-transferrin receptor / anti-bace1 multispecific antibodies and methods of use
CN107428820B (zh) 2014-11-19 2022-03-22 阿克松神经系统科学公司 在阿尔茨海默氏病中的人源化tau抗体
US10508151B2 (en) 2014-11-19 2019-12-17 Genentech, Inc. Anti-transferrin receptor antibodies and methods of use
EP4141032B1 (en) 2014-11-20 2024-05-29 F. Hoffmann-La Roche AG Combination therapy of t cell activating bispecific antigen binding molecules and pd-1 axis binding antagonists
JP6668345B2 (ja) 2014-11-21 2020-03-18 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ 修飾された重鎖定常領域を含む抗体
AU2015349878A1 (en) 2014-11-21 2017-05-25 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies against CD73 and uses thereof
EP3223907A2 (en) 2014-11-26 2017-10-04 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind cd3 and cd38
US10259887B2 (en) 2014-11-26 2019-04-16 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind CD3 and tumor antigens
PE20171324A1 (es) 2014-11-26 2017-09-11 Xencor Inc Anticuerpos heterodimericos que se unen a cd3 y a antigenos tumorales
HK1243931A1 (zh) 2014-12-03 2018-07-27 F. Hoffmann-La Roche Ag 抗金黄色葡萄球菌抗体利福霉素缀合物及其用途
EP3227332B1 (en) 2014-12-03 2019-11-06 F.Hoffmann-La Roche Ag Multispecific antibodies
RU2017118792A (ru) 2014-12-03 2019-01-09 Дженентек, Инк. Конъюгаты антитела к staphylococcus aureus с рифамицином и их применение
ES2744540T3 (es) 2014-12-05 2020-02-25 Hoffmann La Roche Anticuerpos anti-CD79b y procedimientos de uso
CA2969730A1 (en) 2014-12-05 2016-06-09 Immunext, Inc. Identification of vsig8 as the putative vista receptor and its use thereof to produce vista/vsig8 modulators
JP6864953B2 (ja) 2014-12-09 2021-04-28 アンスティチュ ナショナル ドゥ ラ サンテ エ ドゥ ラ ルシェルシュ メディカル Ａｘｌに対するヒトモノクローナル抗体
KR20170085595A (ko) 2014-12-10 2017-07-24 제넨테크, 인크. 혈뇌 장벽 수용체 항체 및 사용 방법
US10093733B2 (en) 2014-12-11 2018-10-09 Abbvie Inc. LRP-8 binding dual variable domain immunoglobulin proteins
UY36449A (es) 2014-12-19 2016-07-29 Novartis Ag Composiciones y métodos para anticuerpos dirigidos a bmp6
KR101860280B1 (ko) 2014-12-19 2018-05-21 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 항-마이오스타틴 항체, 변이체 Fc 영역을 함유하는 폴리펩타이드, 및 사용 방법
BR112017011235A2 (pt) 2014-12-19 2018-02-06 Chugai Pharmaceutical Co Ltd anticorpos anti-c5 e métodos de uso
WO2016097865A1 (en) 2014-12-19 2016-06-23 Regenesance B.V. Antibodies that bind human c6 and uses thereof
WO2016105450A2 (en) 2014-12-22 2016-06-30 Xencor, Inc. Trispecific antibodies
JP6180663B2 (ja) 2014-12-23 2017-08-16 ブリストル−マイヤーズ スクイブ カンパニーＢｒｉｓｔｏｌ−Ｍｙｅｒｓ Ｓｑｕｉｂｂ Ｃｏｍｐａｎｙ Ｔｉｇｉｔに対する抗体
PL3240801T3 (pl) 2014-12-31 2021-06-14 Checkmate Pharmaceuticals, Inc. Skojarzona immunoterapia nowotworów
WO2016111947A2 (en) 2015-01-05 2016-07-14 Jounce Therapeutics, Inc. Antibodies that inhibit tim-3:lilrb2 interactions and uses thereof
ES2818103T3 (es) 2015-01-16 2021-04-09 Juno Therapeutics Inc Anticuerpos y receptores de antígenos quiméricos específicos para ROR1
CN113956354A (zh) 2015-01-22 2022-01-21 中外制药株式会社 两种以上抗-c5抗体的组合与使用方法
RU2017129236A (ru) 2015-01-26 2019-03-07 Макродженикс, Инк. Мультивалентные молекулы, содержащие dr5-связывающие домены
JP2018506275A (ja) 2015-01-28 2018-03-08 ジェネンテック， インコーポレイテッド 多発性硬化症の遺伝子発現マーカー及び治療
EP3253784B1 (en) 2015-02-04 2020-05-06 Genentech, Inc. Mutant smoothened and methods of using the same
KR102605798B1 (ko) 2015-02-05 2023-11-23 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 이온 농도 의존적 항원 결합 도메인을 포함하는 항체, Fc 영역 개변체, IL-8에 결합하는 항체, 및 그들의 사용
CN107847584B (zh) 2015-02-09 2022-01-25 纪念斯隆凯特琳癌症中心 具有人a33抗原和dota金属复合物亲和力的多特异性抗体及其用途
WO2016128912A1 (en) 2015-02-12 2016-08-18 Acerta Pharma B.V. Therapeutic combinations of a btk inhibitor, a pi3k inhibitor, a jak-2 inhibitor, a pd-1 inhibitor, and/or a pd-l1 inhibitor
DK3653221T5 (da) 2015-02-19 2024-08-26 Compugen Ltd Anti-pvrig-antistoffer og anvendelsesfremgangsmåder
US10550173B2 (en) 2015-02-19 2020-02-04 Compugen, Ltd. PVRIG polypeptides and methods of treatment
WO2016138160A1 (en) 2015-02-24 2016-09-01 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Middle east respiratory syndrome coronavirus immunogens, antibodies, and their use
WO2016135041A1 (en) 2015-02-26 2016-09-01 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Fusion proteins and antibodies comprising thereof for promoting apoptosis
US10227411B2 (en) 2015-03-05 2019-03-12 Xencor, Inc. Modulation of T cells with bispecific antibodies and FC fusions
MX2017011486A (es) 2015-03-16 2018-06-15 Genentech Inc Métodos de detección y cuantificación de il-13 y sus usos en el diagnóstico y tratamiento de enfermedades asociadas a th2.
WO2016146833A1 (en) 2015-03-19 2016-09-22 F. Hoffmann-La Roche Ag Biomarkers for nad(+)-diphthamide adp ribosyltransferase resistance
ES2789348T3 (es) 2015-03-20 2020-10-26 Us Health Anticuerpos neutralizantes para GP120 y sus usos
RS60614B1 (sr) 2015-03-23 2020-08-31 Jounce Therapeutics Inc Antitela za icos
WO2016153572A1 (en) * 2015-03-25 2016-09-29 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Bispecific multivalent fusion proteins
WO2016160976A2 (en) 2015-03-30 2016-10-06 Abbvie Inc. Monovalent tnf binding proteins
JP7082484B2 (ja) 2015-04-01 2022-06-08 中外製薬株式会社 ポリペプチド異種多量体の製造方法
WO2016161390A1 (en) 2015-04-03 2016-10-06 Eureka Therapeutics, Inc. Constructs targeting afp peptide/mhc complexes and uses thereof
SI3280441T1 (sl) 2015-04-07 2022-01-31 Alector Llc Protitelesa anti-sortilin in metoda njihove uporabe
CN107810197B (zh) 2015-04-24 2022-10-25 豪夫迈·罗氏有限公司 鉴定包含结合多肽的细菌的方法
EP3288981A1 (en) 2015-05-01 2018-03-07 Genentech, Inc. Masked anti-cd3 antibodies and methods of use
WO2016179194A1 (en) 2015-05-04 2016-11-10 Jounce Therapeutics, Inc. Lilra3 and method of using the same
EP3091033A1 (en) 2015-05-06 2016-11-09 Gamamabs Pharma Anti-human-her3 antibodies and uses thereof
HK1248577A1 (zh) 2015-05-11 2018-10-19 F. Hoffmann-La Roche Ag 治疗狼疮性肾炎的组合物和方法
ES2835866T5 (es) 2015-05-12 2024-12-02 Hoffmann La Roche Procedimientos terapéuticos y de diagnóstico para el cáncer
WO2016188911A1 (en) 2015-05-22 2016-12-01 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Human monoclonal antibodies fragments inhibiting both the cath-d catalytic activity and its binding to the lrp1 receptor
ES2789500T5 (es) 2015-05-29 2023-09-20 Hoffmann La Roche Procedimientos terapéuticos y de diagnóstico para el cáncer
DK3303396T5 (da) 2015-05-29 2024-10-07 Bristol Myers Squibb Co Antistoffer mod ox40 og anvendelser deraf
HK1250723A1 (zh) 2015-05-29 2019-01-11 F. Hoffmann-La Roche Ag 人源化抗埃博拉病毒糖蛋白抗体和使用方法
AR105618A1 (es) 2015-05-29 2017-10-25 Genentech Inc Metilación del promotor del ligando al receptor de muerte programada (pd-l1) en cáncer
CN107810198B (zh) 2015-05-29 2021-09-03 艾伯维公司 抗cd40抗体及其用途
HK1249016A1 (zh) 2015-06-02 2018-10-26 豪夫迈‧罗氏有限公司 使用抗il-34抗体治疗神经疾病的组合物和方法
WO2016196975A1 (en) 2015-06-03 2016-12-08 The United States Of America, As Represented By The Secretary Department Of Health & Human Services Neutralizing antibodies to hiv-1 env and their use
CN107921094B (zh) 2015-06-04 2022-03-01 圣拉斐尔医院有限公司 Igfbp3及其用途
WO2016193497A1 (en) 2015-06-04 2016-12-08 Ospedale San Raffaele Srl Inhibitor of igfbp3/tmem219 axis and diabetes
NZ775762A (en) 2015-06-05 2025-02-28 Genentech Inc Anti-tau antibodies and methods of use
EP3303387A2 (en) 2015-06-05 2018-04-11 Novartis AG Antibodies targeting bone morphogenetic protein 9 (bmp9) and methods therefor
MX2017015937A (es) 2015-06-08 2018-12-11 Genentech Inc Métodos de tratamiento del cáncer con anticuerpos anti-ox40 y antagonistas de unión al eje de pd-1.
TWI773646B (zh) 2015-06-08 2022-08-11 美商宏觀基因股份有限公司 結合lag-3的分子和其使用方法
JP2018521019A (ja) 2015-06-08 2018-08-02 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ｏｘ４０抗体を使用して癌を治療する方法
AU2016274767B2 (en) 2015-06-09 2022-05-19 Eureka Therapeutics, Inc. T cell receptor-like antibody agents specific for EBV latent membrane protein 2A peptide presented by human HLA
TWI870335B (zh) 2015-06-12 2025-01-21 美商宏觀基因股份有限公司 變異的嵌合4d5抗體及其與抗pd-1抗體聯合用於治療癌症的應用
CN108064246A (zh) 2015-06-15 2018-05-22 基因泰克公司 抗体和免疫结合物
TW201710286A (zh) 2015-06-15 2017-03-16 艾伯維有限公司 抗ｖｅｇｆ、ｐｄｇｆ及／或其受體之結合蛋白
EP3916018A1 (en) 2015-06-16 2021-12-01 Genentech, Inc. Anti-cd3 antibodies and methods of use
DK3310814T5 (da) 2015-06-16 2024-10-07 Hoffmann La Roche Humaniserede og affinitetsmodnede antistoffer mod FcRH5 og fremgangsmåder til anvendelse
US10501545B2 (en) 2015-06-16 2019-12-10 Genentech, Inc. Anti-CLL-1 antibodies and methods of use
CN107787331B (zh) 2015-06-17 2022-01-11 豪夫迈·罗氏有限公司 抗her2抗体和使用方法
KR102689256B1 (ko) 2015-06-17 2024-07-30 제넨테크, 인크. Pd-1 축 결합 길항제 및 탁산을 사용하여 국소적 진행성 또는 전이성 유방암을 치료하는 방법
US20190194315A1 (en) 2015-06-17 2019-06-27 Novartis Ag Antibody drug conjugates
US10774145B2 (en) 2015-06-17 2020-09-15 Allakos Inc. Methods and compositions for treating fibrotic diseases
AU2016284871B2 (en) 2015-06-23 2022-09-29 Innate Pharma Multispecific NK engager proteins
CN107531788B (zh) 2015-06-24 2022-06-21 豪夫迈·罗氏有限公司 对her2和血脑屏障受体特异性的三特异性抗体及使用方法
CA2990360C (en) 2015-06-24 2024-02-13 Janssen Pharmaceutica Nv Anti-vista antibodies and fragments
EP3108897A1 (en) 2015-06-24 2016-12-28 F. Hoffmann-La Roche AG Antibodies against human csf-1r for use in inducing lymphocytosis in lymphomas or leukemias
HUE057952T2 (hu) 2015-06-24 2022-06-28 Hoffmann La Roche Anti-transzferrin receptor antitestek testreszabott affinitással
UY36751A (es) 2015-06-26 2017-01-31 Novartis Ag Anticuerpos de factor xi y métodos de uso
EP3313885A1 (en) 2015-06-29 2018-05-02 H. Hoffnabb-La Roche Ag Type ii anti-cd20 antibody for use in organ transplantation
EP3978525A1 (en) 2015-06-29 2022-04-06 Ventana Medical Systems, Inc. Materials and methods for performing histochemical assays for human pro-epiregulin and amphiregulin
FR3038517B1 (fr) 2015-07-06 2020-02-28 Laboratoire Francais Du Fractionnement Et Des Biotechnologies Utilisation de fragments fc modifies en immunotherapie
US20180305451A1 (en) 2015-07-13 2018-10-25 Compugen Ltd. Hide1 compositions and methods
HUE068868T2 (hu) 2015-07-30 2025-02-28 Macrogenics Inc PD-1-hez kötõdõ molekulák és alkalmazásukra szolgáló eljárások
US11236159B2 (en) 2015-08-03 2022-02-01 Novartis Ag Methods of treating FGF21-associated disorders
US11254744B2 (en) 2015-08-07 2022-02-22 Imaginab, Inc. Antigen binding constructs to target molecules
CN105384825B (zh) 2015-08-11 2018-06-01 南京传奇生物科技有限公司 一种基于单域抗体的双特异性嵌合抗原受体及其应用
WO2018028647A1 (en) 2016-08-10 2018-02-15 Legend Biotech Usa Inc. Chimeric antigen receptors targeting bcma and methods of use thereof
WO2017033113A1 (en) 2015-08-21 2017-03-02 Acerta Pharma B.V. Therapeutic combinations of a mek inhibitor and a btk inhibitor
CN108026180B (zh) 2015-08-28 2022-06-07 豪夫迈·罗氏有限公司 抗羟腐胺赖氨酸抗体及其用途
EA038332B1 (ru) 2015-09-09 2021-08-10 Новартис Аг Молекулы, связывающиеся с тимусным стромальным лимфопоэтином (tslp), и способы применения таких молекул
HRP20210650T1 (hr) 2015-09-09 2021-05-28 Novartis Ag Protutijela koja vežu timusni stromalni limfopoetin (tslp) i postupci uporabe protutijela
WO2017046746A1 (en) 2015-09-15 2017-03-23 Acerta Pharma B.V. Therapeutic combinations of a btk inhibitor and a gitr binding molecule, a 4-1bb agonist, or an ox40 agonist
EP3747472B1 (en) 2015-09-15 2024-04-03 Acerta Pharma B.V. Therapeutic combinations of a cd19 inhibitor and a btk inhibitor
US9862760B2 (en) 2015-09-16 2018-01-09 Novartis Ag Polyomavirus neutralizing antibodies
CA2999369C (en) 2015-09-22 2023-11-07 Spring Bioscience Corporation Anti-ox40 antibodies and diagnostic uses thereof
PE20181363A1 (es) 2015-09-23 2018-08-27 Genentech Inc Variantes optimizadas de anticuerpos anti-vegf
JP6955487B2 (ja) 2015-09-24 2021-10-27 アブビトロ， エルエルシー Ｈｉｖ抗体組成物および使用方法
PE20181046A1 (es) 2015-09-25 2018-07-03 Genentech Inc Anticuerpos anti-tigit y metodos de uso
AR106188A1 (es) 2015-10-01 2017-12-20 Hoffmann La Roche Anticuerpos anti-cd19 humano humanizados y métodos de utilización
AR106189A1 (es) 2015-10-02 2017-12-20 Hoffmann La Roche ANTICUERPOS BIESPECÍFICOS CONTRA EL A-b HUMANO Y EL RECEPTOR DE TRANSFERRINA HUMANO Y MÉTODOS DE USO
CR20180243A (es) 2015-10-02 2018-07-31 Genentech Inc Conjugados de anticuerpo-fármaco de pirrolobenzodiazepina y métodos de uso
EP3150636A1 (en) 2015-10-02 2017-04-05 F. Hoffmann-La Roche AG Tetravalent multispecific antibodies
TWI873952B (zh) 2015-10-02 2025-02-21 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 雙特異性抗‐人類cd20/人類轉鐵蛋白受體抗體及使用方法
WO2017055404A1 (en) 2015-10-02 2017-04-06 F. Hoffmann-La Roche Ag Bispecific antibodies specific for pd1 and tim3
US10526413B2 (en) 2015-10-02 2020-01-07 Hoffmann-La Roche Inc. Bispecific antibodies specific for OX40
IL293708B2 (en) 2015-10-06 2026-04-01 Genentech Inc A method for treating multiple sclerosis
CA2997809A1 (en) 2015-10-07 2017-04-13 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Il-7r-alpha specific antibodies for treating acute lymphoblastic leukemia
AU2016334623A1 (en) 2015-10-07 2018-02-15 F. Hoffmann-La Roche Ag Bispecific antibodies with tetravalency for a costimulatory TNF receptor
WO2017066714A1 (en) 2015-10-16 2017-04-20 Compugen Ltd. Anti-vsig1 antibodies and drug conjugates
US10604577B2 (en) 2015-10-22 2020-03-31 Allakos Inc. Methods and compositions for treating systemic mastocytosis
AU2016342269A1 (en) 2015-10-22 2018-03-29 Jounce Therapeutics, Inc. Gene signatures for determining icos expression
EP3368092B9 (en) 2015-10-29 2020-07-29 Novartis AG Antibody conjugates comprising toll-like receptor agonist
EP3184547A1 (en) 2015-10-29 2017-06-28 F. Hoffmann-La Roche AG Anti-tpbg antibodies and methods of use
WO2017072210A1 (en) 2015-10-29 2017-05-04 F. Hoffmann-La Roche Ag Anti-variant fc-region antibodies and methods of use
MY196448A (en) 2015-10-30 2023-04-12 Genentech Inc Anti-Htra1 Antibodies and Methods of use Thereof
US10407510B2 (en) 2015-10-30 2019-09-10 Genentech, Inc. Anti-factor D antibodies and conjugates
ES2875274T3 (es) 2015-11-02 2021-11-10 Hoffmann La Roche Procedimientos de preparación de formas fucosiladas y afucosiladas de una proteína
WO2017079479A1 (en) 2015-11-03 2017-05-11 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Neutralizing antibodies to hiv-1 gp41 and their use
CN118725134A (zh) 2015-11-08 2024-10-01 豪夫迈·罗氏有限公司 筛选多特异性抗体的方法
WO2017086419A1 (ja) 2015-11-18 2017-05-26 中外製薬株式会社 液性免疫応答の増強方法
WO2017086367A1 (ja) 2015-11-18 2017-05-26 中外製薬株式会社 免疫抑制機能を有する細胞に対するｔ細胞リダイレクト抗原結合分子を用いた併用療法
AU2016356780A1 (en) 2015-11-19 2018-06-28 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies against glucocorticoid-induced tumor necrosis factor receptor (GITR) and uses thereof
MX2018006181A (es) 2015-11-23 2018-09-24 Five Prime Therapeutics Inc Inhibidores de fgfr2 solos o en combinacion con agentes que estimulan el sistema inmunitario en el tratamiento contra el cancer.
WO2017095875A1 (en) 2015-11-30 2017-06-08 Bristol-Myers Squibb Company Anti human ip-10 antibodies and their uses
RU2018124307A (ru) 2015-12-04 2020-01-14 Новартис Аг Антительно-цитокиновые привитые композиции и способы применения для иммунорегуляции
CA3007030A1 (en) 2015-12-07 2017-06-15 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind cd3 and psma
IL313608A (en) 2015-12-09 2024-08-01 Hoffmann La Roche Antibody against CD20 type II to reduce the formation of antibodies against drugs
EP3178848A1 (en) 2015-12-09 2017-06-14 F. Hoffmann-La Roche AG Type ii anti-cd20 antibody for reducing formation of anti-drug antibodies
IL260021B (en) 2015-12-14 2022-09-01 Macrogenics Inc Bispecific molecules that are immunoreactive for pd1 and ctla4 and methods for using them
HUE065073T2 (hu) 2015-12-18 2024-04-28 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Anti-C5 antitestek és alkalmazási eljárások
AR107078A1 (es) 2015-12-18 2018-03-21 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Anticuerpo antimiostatina, polipéptidos que contienen regiones fc variantes así como métodos de uso
RU2018126297A (ru) 2015-12-18 2020-01-22 Новартис Аг Антитела, нацеленные на cd32b, и способы их применения
WO2017110980A1 (ja) 2015-12-25 2017-06-29 中外製薬株式会社 増強された活性を有する抗体及びその改変方法
AU2016381992B2 (en) 2015-12-28 2024-01-04 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Method for promoting efficiency of purification of Fc region-containing polypeptide
CN115400220A (zh) 2015-12-30 2022-11-29 豪夫迈·罗氏有限公司 减少聚山梨酯降解的制剂
KR20180097615A (ko) 2016-01-08 2018-08-31 에프. 호프만-라 로슈 아게 Pd-1 축 결합 길항물질 및 항-cea/항-cd3 이중특이성 항체를 사용하는 cea-양성 암의 치료 방법
KR20180098671A (ko) * 2016-01-11 2018-09-04 인히브릭스, 인크. 다가 및 다중특이적 ox40-결합 융합 단백질
DK3402503T3 (da) 2016-01-13 2020-12-21 Acerta Pharma Bv Terapeutiske kombinationer af et antifolat og en btk-hæmmer
US20190016791A1 (en) 2016-01-20 2019-01-17 Genentech, Inc. High dose treatments for alzheimer's disease
EP3411396A1 (en) 2016-02-04 2018-12-12 Curis, Inc. Mutant smoothened and methods of using the same
US11421028B2 (en) 2016-02-06 2022-08-23 Epimab Biotherapeutics, Inc. Fabs-in-tandem immunoglobulin and uses thereof
WO2017137830A1 (en) 2016-02-12 2017-08-17 Janssen Pharmaceutica Nv Anti-vista (b7h5) antibodies
AU2017219254B2 (en) 2016-02-17 2019-12-12 Novartis Ag TGFbeta 2 antibodies
JP6821693B2 (ja) 2016-02-29 2021-01-27 ジェネンテック， インコーポレイテッド がんのための治療方法及び診断方法
EP3423491A1 (en) 2016-03-01 2019-01-09 H. Hoffnabb-La Roche Ag Obinutuzumab variants having altered cell death induction
EP3423494A1 (en) 2016-03-04 2019-01-09 Bristol-Myers Squibb Company Combination therapy with anti-cd73 antibodies
US10611800B2 (en) 2016-03-11 2020-04-07 Pfizer Inc. Human cytomegalovirus gB polypeptide
US11072666B2 (en) 2016-03-14 2021-07-27 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Cell injury inducing therapeutic drug for use in cancer therapy
US11767362B1 (en) 2016-03-15 2023-09-26 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Methods of treating cancers using PD-1 axis binding antagonists and anti-GPC3 antibodies
EP3430047A1 (en) 2016-03-15 2019-01-23 Innate Pharma Anti-mica antibodies
WO2017161414A1 (en) 2016-03-22 2017-09-28 Bionomics Limited Administration of an anti-lgr5 monoclonal antibody
CN109641955B (zh) 2016-03-22 2022-07-08 国家医疗保健研究所 人源化抗claudin-1抗体及其用途
CN108700598A (zh) 2016-03-25 2018-10-23 豪夫迈·罗氏有限公司 多路总抗体和抗体缀合的药物量化测定法
US11104739B2 (en) 2016-04-14 2021-08-31 Bristol-Myers Squibb Company Combination therapy using an anti-fucosyl-GM1 antibody and an anti-CD137 antibody
EP3865511A1 (en) 2016-04-14 2021-08-18 F. Hoffmann-La Roche AG Anti-rspo3 antibodies and methods of use
GEP20227398B (en) 2016-04-15 2022-07-25 Macrogenics Inc Novel b7-h3 binding molecules, antibody drug conjugates thereof and usage thereof
SMT202600033T1 (it) 2016-04-15 2026-03-09 Bioatla Inc Anticorpi anti-axl, frammenti di anticorpo e loro immunoconiugati e loro utilizzi
MX2018012493A (es) 2016-04-15 2019-06-06 Genentech Inc Métodos para controlar y tratar el cáncer.
KR20230119259A (ko) 2016-04-15 2023-08-16 이뮤넥스트, 인크. 항-인간 vista 항체 및 이의 용도
KR20190003958A (ko) 2016-04-15 2019-01-10 제넨테크, 인크. 암의 치료 및 모니터링 방법
CA3019588A1 (en) 2016-04-20 2017-10-26 Merck Sharp & Dohme Corp. Cmv neutralizing antigen binding proteins
JP2019515677A (ja) 2016-04-26 2019-06-13 アール．ピー．シェーラー テクノロジーズ エルエルシー 抗体複合体ならびにそれを作製および使用する方法
WO2017189724A1 (en) 2016-04-27 2017-11-02 Novartis Ag Antibodies against growth differentiation factor 15 and uses thereof
CR20180554A (es) 2016-04-28 2019-01-10 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Preparaciones que contienen anticuerpos
WO2017192589A1 (en) 2016-05-02 2017-11-09 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to influenza ha and their use and identification
WO2017191101A1 (en) 2016-05-02 2017-11-09 F. Hoffmann-La Roche Ag The contorsbody - a single chain target binder
WO2017194442A1 (en) 2016-05-11 2017-11-16 F. Hoffmann-La Roche Ag Antigen binding molecules comprising a tnf family ligand trimer and a tenascin binding moiety
JP7089483B2 (ja) 2016-05-11 2022-06-22 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト 修飾された抗テネイシン抗体及び使用方法
EP3243836A1 (en) 2016-05-11 2017-11-15 F. Hoffmann-La Roche AG C-terminally fused tnf family ligand trimer-containing antigen binding molecules
EP3243832A1 (en) 2016-05-13 2017-11-15 F. Hoffmann-La Roche AG Antigen binding molecules comprising a tnf family ligand trimer and pd1 binding moiety
PL3455261T3 (pl) 2016-05-13 2022-12-12 Bioatla, Inc. Przeciwciała anty-ror2, fragmenty przeciwciał, ich immunokoniugaty oraz ich zastosowania
WO2017198731A1 (en) 2016-05-18 2017-11-23 Genmab B.V. Antibodies and methods of use thereof in treatment of infectious disease
CN118436801A (zh) 2016-05-20 2024-08-06 豪夫迈·罗氏有限公司 Protac抗体缀合物及其使用方法
TW201802121A (zh) 2016-05-25 2018-01-16 諾華公司 抗因子XI/XIa抗體之逆轉結合劑及其用途
EP3465221B1 (en) 2016-05-27 2020-07-22 H. Hoffnabb-La Roche Ag Bioanalytical method for the characterization of site-specific antibody-drug conjugates
EP3252078A1 (en) 2016-06-02 2017-12-06 F. Hoffmann-La Roche AG Type ii anti-cd20 antibody and anti-cd20/cd3 bispecific antibody for treatment of cancer
WO2018220099A1 (en) 2017-06-02 2018-12-06 F. Hoffmann-La Roche Ag Type ii anti-cd20 antibody and anti-cd20/cd3 bispecific antibody for treatment of cancer
WO2017214452A1 (en) 2016-06-08 2017-12-14 Xencor, Inc. Treatment of igg4-related diseases with anti-cd19 antibodies crossbinding to cd32b
RU2018147224A (ru) 2016-06-08 2020-07-14 Эббви Инк. Конъюгаты антитела к egfr и лекарственного средства
WO2017214462A2 (en) 2016-06-08 2017-12-14 Abbvie Inc. Anti-cd98 antibodies and antibody drug conjugates
US20200147235A1 (en) 2016-06-08 2020-05-14 Abbvie Inc. Anti-cd98 antibodies and antibody drug conjugates
WO2017214322A1 (en) 2016-06-08 2017-12-14 Abbvie Inc. Anti-b7-h3 antibodies and antibody drug conjugates
BR112018075639A2 (pt) 2016-06-08 2019-04-09 Abbvie Inc. conjugados de anticorpo fármaco anti-egfr
MX2018015285A (es) 2016-06-08 2019-09-18 Abbvie Inc Anticuerpos anti-b7-h3 y conjugados de anticuerpo y farmaco.
AU2017279550A1 (en) 2016-06-08 2019-01-03 Abbvie Inc. Anti-B7-H3 antibodies and antibody drug conjugates
JP2019524651A (ja) 2016-06-08 2019-09-05 アッヴィ・インコーポレイテッド 抗ｃｄ９８抗体及び抗体薬物コンジュゲート
AU2017277534A1 (en) 2016-06-08 2019-01-03 Abbvie Inc. Anti-EGFR antibody drug conjugates
JP7010854B2 (ja) 2016-06-14 2022-01-26 ゼンコア インコーポレイテッド 二重特異性チェックポイント阻害剤抗体
AU2017283787B2 (en) 2016-06-15 2020-09-17 Novartis Ag Methods for treating disease using inhibitors of bone morphogenetic protein 6 (BMP6)
EP3257866A1 (en) 2016-06-17 2017-12-20 Academisch Medisch Centrum Modified anti-tnf antibody and use thereof in the treatment of ibd
KR102376582B1 (ko) 2016-06-17 2022-03-18 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 항-마이오스타틴 항체 및 사용 방법
JP7133477B2 (ja) 2016-06-24 2022-09-08 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ポリユビキチン多重特異性抗体
CN109715663B (zh) 2016-06-28 2022-11-25 Xencor股份有限公司 结合生长抑素受体2的异源二聚抗体
WO2018007999A1 (en) 2016-07-08 2018-01-11 Staten Biotechnology B.V. Anti-apoc3 antibodies and methods of use thereof
CN109757103B (zh) 2016-07-14 2024-01-02 百时美施贵宝公司 针对tim3的抗体及其用途
WO2018014260A1 (en) 2016-07-20 2018-01-25 Nanjing Legend Biotech Co., Ltd. Multispecific antigen binding proteins and methods of use thereof
JP7062640B2 (ja) 2016-07-29 2022-05-06 ジュノー セラピューティクス インコーポレイテッド 抗ｃｄ１９抗体に対する抗イディオタイプ抗体
ES3041722T3 (en) 2016-07-29 2025-11-14 Inst Nat Sante Rech Med Antibodies targeting tumor associated macrophages and uses thereof
US20190185578A1 (en) 2016-07-29 2019-06-20 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Bispecific antibody exhibiting increased alternative fviii-cofactor-function activity
WO2018022438A1 (en) 2016-07-29 2018-02-01 Eli Lilly And Company Combination therapy with merestinib and anti-pd-l1 or anti-pd-1 inhibitors for use in the treatment of cancer
HRP20260151T1 (hr) 2016-08-02 2026-03-27 Visterra, Inc. Modificirani polipeptidi i njihova uporaba
WO2018027042A1 (en) 2016-08-03 2018-02-08 Bio-Techne Corporation Identification of vsig3/vista as a novel immune checkpoint and use thereof for immunotherapy
BR112019002331A2 (pt) 2016-08-05 2019-06-18 Allakos Inc anticorpos anti-siglec-7 para o tratamento do câncer e métodos para obtenção dos mesmos
EP3494991A4 (en) 2016-08-05 2020-07-29 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha COMPOSITION FOR THE PROPHYLAXIS OR TREATMENT OF IL-8 RELATED DISEASES
WO2018029124A1 (en) 2016-08-08 2018-02-15 F. Hoffmann-La Roche Ag Therapeutic and diagnostic methods for cancer
JP7033328B2 (ja) 2016-08-16 2022-03-10 エピムアブ バイオセラピューティクス インコーポレイテッド 一価の非対称タンデムＦａｂ二重特異性抗体
IL317989A (en) 2016-08-17 2025-02-01 Compugen Ltd Anti-TIGIT antibodies, anti-PVRIG antibodies and combinations thereof
US10793632B2 (en) 2016-08-30 2020-10-06 Xencor, Inc. Bispecific immunomodulatory antibodies that bind costimulatory and checkpoint receptors
CN107384932B (zh) 2016-08-31 2020-10-20 北京天广实生物技术股份有限公司 抗人cd20人源化单克隆抗体mil62、其制备方法及用途
US10981976B2 (en) 2016-08-31 2021-04-20 University Of Rochester Human monoclonal antibodies to human endogenous retrovirus K envelope (HERV-K) and use thereof
CA3035081A1 (en) 2016-09-02 2018-03-08 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Composition and methods of treating b cell disorders
PL3509637T3 (pl) 2016-09-06 2025-03-10 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Sposoby zastosowania dwuswoistego przeciwciała, które rozpoznaje czynnik krzepnięcia IX i/lub aktywowany czynnik krzepnięcia IX oraz czynnik krzepnięcia X i/lub aktywowany czynnik krzepnięcia X
US11168148B2 (en) 2016-09-07 2021-11-09 The Regents Of The University Of California Antibodies to oxidation-specific epitopes
SG10201607778XA (en) 2016-09-16 2018-04-27 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Anti-Dengue Virus Antibodies, Polypeptides Containing Variant Fc Regions, And Methods Of Use
CN109689682B (zh) 2016-09-19 2022-11-29 豪夫迈·罗氏有限公司 基于补体因子的亲和层析
PT3528838T (pt) 2016-09-23 2023-09-04 Hoffmann La Roche Utilizações de antagonistas de il-13 para tratamento de dermatite atópica
MX2019003768A (es) 2016-10-03 2019-06-24 Juno Therapeutics Inc Moleculas de enlace especificas de hpv.
JP7050770B2 (ja) 2016-10-05 2022-04-08 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト 抗体薬物コンジュゲートの調製方法
CA3038712A1 (en) 2016-10-06 2018-04-12 Genentech, Inc. Therapeutic and diagnostic methods for cancer
WO2018068201A1 (en) 2016-10-11 2018-04-19 Nanjing Legend Biotech Co., Ltd. Single-domain antibodies and variants thereof against ctla-4
MX2019004371A (es) 2016-10-13 2019-11-18 Massachusetts Inst Technology Anticuerpos que se unen a la proteina de envoltura del virus zika y usos de los mismos.
MY203000A (en) 2016-10-14 2024-06-01 Xencor Inc Il15/il15r� heterodimeric fc-fusion proteins
EP3529277A1 (en) 2016-10-21 2019-08-28 Innate Pharma Treatment with anti-kir3dl2 agents
CA3080270A1 (en) 2016-10-25 2018-05-03 Inserm (Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale) Monoclonal antibodies binding to the cd160 transmembrane isoform
WO2018081648A2 (en) 2016-10-29 2018-05-03 Genentech, Inc. Anti-mic antibidies and methods of use
TWI788307B (zh) 2016-10-31 2023-01-01 美商艾歐凡斯生物治療公司 用於擴增腫瘤浸潤性淋巴細胞之工程化人造抗原呈現細胞
US20190276549A1 (en) 2016-11-01 2019-09-12 Genmab B.V. Polypeptide variants and uses thereof
HRP20211703T1 (hr) 2016-11-02 2022-02-04 Jounce Therapeutics, Inc. Protutijela protiv pd-1 i njihova upotreba
MY200695A (en) 2016-11-03 2024-01-11 Bristol Myers Squibb Co Activatable anti-ctla-4 antibodies and uses thereof
JP2020500020A (ja) 2016-11-14 2020-01-09 ノバルティス アーゲー 融合誘導性タンパク質ｍｉｎｉｏｎに関連する組成物、方法、および治療上の使用
JP7784795B2 (ja) 2016-11-15 2025-12-12 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ｃｄ２０／抗ｃｄ３二重特異性抗体による処置のための投与
JP6709340B2 (ja) 2016-11-16 2020-06-10 イーライ リリー アンド カンパニー エクソン１４スキッピング変異（複数可）またはエクソン１４スキッピング表現型を有するがんの併用療法
JOP20190100A1 (ar) 2016-11-19 2019-05-01 Potenza Therapeutics Inc بروتينات ربط مولد ضد مضاد لـ gitr وطرق استخدامها
EP4015532A1 (en) 2016-11-21 2022-06-22 cureab GmbH Anti-gp73 antibodies and immunoconjugates
EP3544628A4 (en) 2016-11-23 2020-11-18 Immunoah Therapeutics, Inc. 4-1BB BINDING PROTEINS AND THEIR USES
TN2019000164A1 (en) 2016-11-23 2020-10-05 Bioverativ Therapeutics Inc Mono- and bispecific antibodies binding to coagulation factor ix and coagulation factor x
UA128383C2 (uk) 2016-12-07 2024-07-03 Дженентек, Інк. Антитіло до тау-білка та спосіб його застосування
MX2019006330A (es) 2016-12-07 2019-09-26 Genentech Inc Anticuerpos anti-tau y metodos de uso.
EP3551663A1 (en) 2016-12-12 2019-10-16 H. Hoffnabb-La Roche Ag Methods of treating cancer using anti-pd-l1 antibodies and antiandrogens
EP3554544A4 (en) 2016-12-16 2020-07-29 Bluefin Biomedicine, Inc. ANTI-PROTEIN 1 ANTIBODY CONTAINING AN ANTI-CUB DOMAIN (CDCP1), ANTIBODY-DRUG CONJUGATES AND THEIR METHODS OF USE
AU2017380981B2 (en) 2016-12-19 2025-01-30 F. Hoffmann-La Roche Ag Combination therapy with targeted 4-1BB (CD137) agonists
KR102692708B1 (ko) 2016-12-20 2024-08-07 에프. 호프만-라 로슈 아게 항-cd20/항-cd3 이중특이성 항체 및 4-1bb(cd137) 작용물질의 병용 요법
US20190322767A1 (en) 2016-12-23 2019-10-24 Innate Pharma Heterodimeric antigen binding proteins
JOP20190134A1 (ar) 2016-12-23 2019-06-02 Potenza Therapeutics Inc بروتينات رابطة لمولد ضد مضادة لنيوروبيلين وطرق استخدامها
AU2017383232B2 (en) 2016-12-23 2024-09-12 Novartis Ag Factor XI antibodies and methods of use
WO2018127473A1 (en) 2017-01-03 2018-07-12 F. Hoffmann-La Roche Ag Bispecific antigen binding molecules comprising anti-4-1bb clone 20h4.9
US20180230218A1 (en) 2017-01-04 2018-08-16 Immunogen, Inc. Met antibodies and immunoconjugates and uses thereof
CN112210010B (zh) 2017-01-06 2023-12-05 优特力克斯有限公司 抗-人4-1bb抗体及其应用
MX2019007963A (es) 2017-01-06 2019-10-21 Iovance Biotherapeutics Inc Expansion de linfocitos infiltrantes de tumor (til) con agonistas de la superfamilia de recptor de factor de necrosis tumoral (tnfrsf) y combinaciones terapeuticas de til- y agonistas de tnfrsf.
CA3049165A1 (en) 2017-01-06 2018-07-12 Iovance Biotherapeutics, Inc. Expansion of tumor infiltrating lymphocytes with potassium channel agonists and therapeutic uses thereof
US11584733B2 (en) 2017-01-09 2023-02-21 Shuttle Pharmaceuticals, Inc. Selective histone deacetylase inhibitors for the treatment of human disease
ES2914123T3 (es) 2017-01-09 2022-06-07 Shuttle Pharmaceuticals Inc Inhibidores selectivos de la histona desacetilasa para el tratamiento de una enfermedad humana
EP3568468A4 (en) 2017-01-12 2020-12-30 Eureka Therapeutics, Inc. RECOMBINATION PRODUCTS TARGETING PEPTIDE HISTONE H3 / MHC COMPLEXES AND THEIR USES
KR102572663B1 (ko) 2017-02-08 2023-09-01 노파르티스 아게 Fgf21 모방 항체 및 이의 용도
US11266745B2 (en) 2017-02-08 2022-03-08 Imaginab, Inc. Extension sequences for diabodies
EP3580235B1 (en) 2017-02-10 2024-05-01 The United States of America, as represented by the Secretary, Department of Health and Human Services Neutralizing antibodies to plasmodium falciparum circumsporozoite protein and their use
JP6995127B2 (ja) 2017-02-10 2022-02-04 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗トリプターゼ抗体、その組成物、及びその使用
EP3580233A1 (en) 2017-02-10 2019-12-18 Genmab B.V. Polypeptide variants and uses thereof
EP3882271A3 (en) 2017-02-10 2022-01-05 Eutilex Co., Ltd. Ifn-gamma-inducible regulatory t cell convertible anti-cancer (irtca) antibody and uses thereof
WO2018146253A1 (en) 2017-02-10 2018-08-16 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and pharmaceutical compositions for the treatment of cancers associated with activation of the mapk pathway
CA3051839A1 (en) 2017-02-17 2018-08-23 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies to alpha-synuclein and uses thereof
AU2018227428A1 (en) 2017-02-28 2019-10-17 Bristol-Myers Squibb Company Use of anti-CTLA-4 antibodies with enhanced ADCC to enhance immune response to a vaccine
TW201837467A (zh) 2017-03-01 2018-10-16 美商建南德克公司 用於癌症之診斷及治療方法
CN110392697A (zh) 2017-03-02 2019-10-29 国家医疗保健研究所 对nectin-4具有特异性的抗体及其用途
KR101994456B1 (ko) * 2017-03-15 2019-06-28 이건무 당 수액제 조성물
MA49279A (fr) 2017-03-22 2020-02-05 Hoffmann La Roche Compositions d'anticorps optimisées pour le traitement de troubles oculaires
LT3600415T (lt) 2017-03-24 2025-12-29 Novartis Ag Antikūnas prieš ii tipo aktivino receptorių, skirtas naudoti širdies nepakankamumo gydymui
EP3601337A1 (en) 2017-03-28 2020-02-05 Genentech, Inc. Methods of treating neurodegenerative diseases
EP3601346A1 (en) 2017-03-29 2020-02-05 H. Hoffnabb-La Roche Ag Bispecific antigen binding molecule for a costimulatory tnf receptor
US20200148785A1 (en) * 2017-03-29 2020-05-14 Glycotope (GmbH) Pd-l1 and ta-muc1 antibodies
WO2018178047A1 (en) * 2017-03-29 2018-10-04 Glycotope Gmbh Multispecific antibody constructs binding to muc1 and cd3
CN110573528B (zh) 2017-03-29 2023-06-09 豪夫迈·罗氏有限公司 针对共刺激性tnf受体的双特异性抗原结合分子
WO2018178123A1 (en) * 2017-03-29 2018-10-04 Glycotope Gmbh BISPECIFIC MUC-1 x PD-L1 ANTIBODIES
JOP20190203A1 (ar) 2017-03-30 2019-09-03 Potenza Therapeutics Inc بروتينات رابطة لمولد ضد مضادة لـ tigit وطرق استخدامها
CN110461358A (zh) 2017-03-31 2019-11-15 公立大学法人奈良县立医科大学 可用于预防和/或治疗凝血因子ⅸ异常、包含代替凝血因子ⅷ的功能的多特异性抗原结合分子的药物组合物
MX2019011769A (es) 2017-04-03 2019-11-07 Hoffmann La Roche Anticuerpos que se unen a steap-1.
WO2018185618A1 (en) 2017-04-03 2018-10-11 Novartis Ag Anti-cdh6 antibody drug conjugates and anti-gitr antibody combinations and methods of treatment
JP6997209B2 (ja) 2017-04-04 2022-02-04 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト Ｃｄ４０およびｆａｐに特異的に結合することができる新規な二重特異性抗原結合分子
EP4516809A3 (en) 2017-04-05 2025-09-03 F. Hoffmann-La Roche AG Bispecific antibodies specifically binding to pd1 and lag3
KR102294136B1 (ko) 2017-04-05 2021-08-26 에프. 호프만-라 로슈 아게 항-lag3 항체
TWI796329B (zh) 2017-04-07 2023-03-21 美商默沙東有限責任公司 抗－ilt4抗體及抗原結合片段
KR20200005540A (ko) 2017-04-14 2020-01-15 제넨테크, 인크. 암의 진단 및 치료 방법
EP3612567B1 (en) 2017-04-19 2024-09-11 Bluefin Biomedicine, Inc. Anti-vtcn1 antibodies and antibody drug conjugates
CA3060514A1 (en) 2017-04-20 2018-10-25 Atyr Pharma, Inc. Compositions and methods for treating lung inflammation
CN110506056A (zh) 2017-04-21 2019-11-26 斯塔滕生物技术有限公司 抗apoc3抗体和其使用方法
EP3624820A1 (en) 2017-04-21 2020-03-25 H. Hoffnabb-La Roche Ag Use of klk5 antagonists for treatment of a disease
EP3615574A4 (en) 2017-04-26 2021-02-24 Eureka Therapeutics, Inc. SPECIFIC GLYPICAN 3 RECOGNIZING CONSTRUCTS AND THEIR USE
SG11201909395TA (en) 2017-04-27 2019-11-28 Tesaro Inc Antibody agents directed against lymphocyte activation gene-3 (lag-3) and uses thereof
AR111651A1 (es) 2017-04-28 2019-08-07 Novartis Ag Conjugados de anticuerpos que comprenden agonistas del receptor de tipo toll y terapias de combinación
EP3618868A4 (en) 2017-05-05 2021-02-24 Allakos Inc. METHODS AND COMPOSITIONS FOR TREATING ALLERGIC EYE DISEASES
KR20200003913A (ko) 2017-05-10 2020-01-10 이오반스 바이오테라퓨틱스, 인크. 액상 종양으로부터의 종양 침윤 림프구의 확장 및 그의 치료 용도
WO2018209125A1 (en) 2017-05-10 2018-11-15 Fred Hutchinson Cancer Research Center Epstein barr virus antibodies, vaccines, and uses of the same
EP3625251A1 (en) 2017-05-15 2020-03-25 University Of Rochester Broadly neutralizing anti-influenza monoclonal antibody and uses thereof
PT3624837T (pt) 2017-05-16 2025-10-01 Five Prime Therapeutics Inc Anticorpos anti-fgfr2 em combinação com agentes quimioterapêuticos no tratamento do cancro
MY206158A (en) 2017-05-24 2024-12-02 Novartis Ag Antibody-cytokine engrafted proteins and methods of use in the treatment of cancer
WO2018215937A1 (en) 2017-05-24 2018-11-29 Novartis Ag Interleukin-7 antibody cytokine engrafted proteins and methods of use in the treatment of cancer
WO2018215938A1 (en) 2017-05-24 2018-11-29 Novartis Ag Antibody-cytokine engrafted proteins and methods of use
JOP20190271A1 (ar) 2017-05-24 2019-11-21 Novartis Ag بروتينات مطعّمة بسيتوكين- الجسم المضاد وطرق الاستخدام للاضطرابات المتعلقة بالمناعة
US20200299400A1 (en) 2017-05-25 2020-09-24 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies comprising modified heavy constant regions
JP7348072B2 (ja) 2017-06-01 2023-09-20 コンピュジェン リミテッド 三重併用抗体療法
CA3102086A1 (en) 2017-06-06 2018-12-13 Relinia, Inc. Single-chain tnf receptor 2 agonist fusion proteins
UY37758A (es) 2017-06-12 2019-01-31 Novartis Ag Método de fabricación de anticuerpos biespecíficos, anticuerpos biespecíficos y uso terapéutico de dichos anticuerpos
CA3066918A1 (en) 2017-06-12 2018-12-20 Bluefin Biomedicine, Inc. Anti-il1rap antibodies and antibody drug conjugates
WO2018229706A1 (en) 2017-06-16 2018-12-20 Novartis Ag Combination therapy for the treatment of cancer
WO2018229715A1 (en) 2017-06-16 2018-12-20 Novartis Ag Compositions comprising anti-cd32b antibodies and methods of use thereof
WO2019006472A1 (en) 2017-06-30 2019-01-03 Xencor, Inc. TARGETED HETETRODIMERIC FUSION PROTEINS CONTAINING IL-15 / IL-15RA AND ANTIGEN-BINDING DOMAINS
JP7760242B2 (ja) 2017-07-21 2025-10-27 ジェネンテック， インコーポレイテッド がんの治療法及び診断法
BR112020001653A2 (pt) 2017-07-26 2020-07-21 Forty Seven, Inc. anticorpos anti-sirp-alfa e métodos relacionados
WO2019059411A1 (en) 2017-09-20 2019-03-28 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha DOSAGE FOR POLYTHERAPY USING PD-1 AXIS BINDING ANTAGONISTS AND GPC3 TARGETING AGENT
PE20210005A1 (es) 2017-09-29 2021-01-05 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Molecula de union al antigeno multiespecifica que tiene actividad de sustitucion de la funcion de cofactor del factor viii de coagulacion de sangre (fviii) y formulacion farmaceutica que contiene tal molecula como ingrediente activo
JP2020537515A (ja) 2017-10-03 2020-12-24 ジュノー セラピューティクス インコーポレイテッド Ｈｐｖ特異的結合分子
EP3694552A1 (en) 2017-10-10 2020-08-19 Tilos Therapeutics, Inc. Anti-lap antibodies and uses thereof
AU2018347521A1 (en) 2017-10-12 2020-05-07 Immunowake Inc. VEGFR-antibody light chain fusion protein
WO2019081983A1 (en) 2017-10-25 2019-05-02 Novartis Ag CD32B TARGETING ANTIBODIES AND METHODS OF USE
PE20210119A1 (es) 2017-10-31 2021-01-19 Staten Biotechnology B V Anticuerpos anti-apoc3 y metodos de uso de estos
JP2021500902A (ja) 2017-11-01 2021-01-14 エフ・ホフマン−ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト 新規ｔｎｆファミリーリガンド三量体含有抗原結合分子
CN119161488A (zh) 2017-11-01 2024-12-20 中外制药株式会社 具有降低的生物活性的抗体变体和同种型
BR112020007630A2 (pt) 2017-11-01 2020-11-17 F. Hoffmann-La Roche Ag anticorpo biespecífico ox40, produto farmacêutico, composição farmacêutica e anticorpos biespecíficos anti-fap/ anti-ox40
MY205342A (en) 2017-11-01 2024-10-16 Hoffmann La Roche Bispecific 2+1 contorsbodies
SG11202003501XA (en) 2017-11-01 2020-05-28 Juno Therapeutics Inc Antibodies and chimeric antigen receptors specific for b-cell maturation antigen
TW201923089A (zh) 2017-11-06 2019-06-16 美商建南德克公司 癌症之診斷及治療方法
US10981992B2 (en) 2017-11-08 2021-04-20 Xencor, Inc. Bispecific immunomodulatory antibodies that bind costimulatory and checkpoint receptors
JP2021502100A (ja) 2017-11-08 2021-01-28 ゼンコア インコーポレイテッド 新規抗ｐｄ−１配列を用いた二重特異性および単一特異性抗体
EP4640703A3 (en) 2017-11-14 2026-04-08 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Anti-c1s antibodies and methods of use
EP3713959A1 (en) 2017-11-21 2020-09-30 Innate Pharma Multispecific antigen binding proteins
EP3714041A1 (en) 2017-11-22 2020-09-30 Iovance Biotherapeutics, Inc. Expansion of peripheral blood lymphocytes (pbls) from peripheral blood
EP3713965A1 (en) 2017-11-22 2020-09-30 Novartis AG Reversal binding agents for anti-factor xi/xia antibodies and uses thereof
CA3083363A1 (en) 2017-12-01 2019-06-06 Novartis Ag Polyomavirus neutralizing antibodies
CN111615520A (zh) 2017-12-01 2020-09-01 辉瑞大药厂 抗cxcr5抗体及其组合物和用途
US20210369775A1 (en) 2017-12-15 2021-12-02 Iovance Biotherapeutics, Inc. Systems and methods for determining the beneficial administration of tumor infiltrating lymphocytes, and methods of use thereof and beneficial administration of tumor infiltrating lymphocytes, and methods of use thereof
MA51184A (fr) 2017-12-15 2020-10-21 Juno Therapeutics Inc Molécules de liaison à l'anti-cct5 et procédés d'utilisation associés
IL275426B2 (en) 2017-12-19 2025-03-01 Xencor Inc Engineered il-2 fc fusion proteins
MX2020006119A (es) 2017-12-21 2020-08-24 Hoffmann La Roche Anticuerpos de union a hla-a2/wt1.
EP3502140A1 (en) 2017-12-21 2019-06-26 F. Hoffmann-La Roche AG Combination therapy of tumor targeted icos agonists with t-cell bispecific molecules
EA202091540A1 (ru) 2017-12-22 2021-03-22 Джаунс Терапьютикс, Инк. Антитела к lilrb2
US20190211098A1 (en) 2017-12-22 2019-07-11 Genentech, Inc. Use of pilra binding agents for treatment of a disease
WO2019129137A1 (zh) 2017-12-27 2019-07-04 信达生物制药(苏州)有限公司 抗lag-3抗体及其用途
CN109970857B (zh) 2017-12-27 2022-09-30 信达生物制药(苏州)有限公司 抗pd-l1抗体及其用途
WO2019129136A1 (zh) 2017-12-27 2019-07-04 信达生物制药(苏州)有限公司 抗pd-l1抗体及其用途
EP3732203A4 (en) 2017-12-28 2021-12-15 Nanjing Legend Biotech Co., Ltd. ANTIBODIES AND THEIR VARIANTS DIRECTED AGAINST PD-L1
CN117050184A (zh) 2017-12-28 2023-11-14 南京传奇生物科技有限公司 针对tigit的单域抗体和其变体
EP3731864A1 (en) 2017-12-29 2020-11-04 F. Hoffmann-La Roche SA Anti-vegf antibodies and methods of use
JP7490565B2 (ja) 2017-12-29 2024-05-27 アレクトル エルエルシー 抗ｔｍｅｍ１０６ｂ抗体及びその使用方法
EP3724223A1 (en) 2018-01-02 2020-10-21 The United States of America, as represented by The Secretary, Department of Health and Human Services Neutralizing antibodies to ebola virus glycoprotein and their use
MX2020007077A (es) 2018-01-04 2020-10-28 Iconic Therapeutics Inc Anticuerpos anti-factor tisular, conjugados anticuerpo-farmaco y metodos relacionados.
AU2019205090A1 (en) 2018-01-05 2020-08-06 Ac Immune Sa Misfolded TDP-43 binding molecules
US12247060B2 (en) 2018-01-09 2025-03-11 Marengo Therapeutics, Inc. Calreticulin binding constructs and engineered T cells for the treatment of diseases
CN112004537A (zh) 2018-01-09 2020-11-27 穿梭药业公司 用于治疗人疾病的选择性组蛋白去乙酰化酶抑制剂
EP3737700A1 (en) 2018-01-12 2020-11-18 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies against tim3 and uses thereof
CN111699200B (zh) 2018-01-15 2023-05-26 南京传奇生物科技有限公司 针对pd-1的单域抗体和其变体
EP3740505A1 (en) 2018-01-16 2020-11-25 Lakepharma Inc. Bispecific antibody that binds cd3 and another target
CN112020365A (zh) 2018-01-26 2020-12-01 豪夫迈·罗氏有限公司 组合物和使用方法
CR20200327A (es) 2018-01-26 2020-11-05 Genentech Inc Proteínas de fusión fc il-22 y métodos de uso
US11472874B2 (en) 2018-01-31 2022-10-18 Alector Llc Anti-MS4A4A antibodies and methods of use thereof
US11807663B2 (en) 2018-02-01 2023-11-07 Innovent Biologics (Suzhou) Co., Ltd. Fully humanized anti-B cell maturation antigen (BCMA) single-chain antibody and use thereof
US11787857B2 (en) 2018-02-02 2023-10-17 Bio-Techne Corporation Compounds that modulate the interaction of VISTA and VSIG3 and methods of making and using
IL325995A (en) 2018-02-08 2026-03-01 Genentech Inc Bispecific antigen binding molecules and methods of use
KR20220098056A (ko) 2018-02-09 2022-07-08 제넨테크, 인크. 비만 세포 매개 염증성 질환에 대한 치료 및 진단 방법
TWI829667B (zh) 2018-02-09 2024-01-21 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 結合gprc5d之抗體
WO2019160866A2 (en) 2018-02-13 2019-08-22 Checkmate Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for tumor immunotherapy
CA3090795A1 (en) 2018-02-13 2019-08-22 Iovance Biotherapeutics, Inc. Expansion of tumor infiltrating lymphocytes (tils) with adenosine a2a receptor antagonists and therapeutic combinations of tils and adenosine a2a receptor antagonists
JP7350756B2 (ja) 2018-02-14 2023-09-26 アバ セラピューティクス アーゲー 抗ヒトｐｄ－ｌ２抗体
RU2020130795A (ru) 2018-02-21 2022-03-21 Дзе Юнайтед Стэйтс Оф Америка, Эс Репрезентед Бай Дзе Секретэри, Департмент Оф Хелт Энд Хьюман Сервисиз Нейтрализующие антитела к env вич-1 и их применение
KR20200123118A (ko) 2018-02-21 2020-10-28 제넨테크, 인크. IL-22 Fc 융합 단백질로 치료를 위한 투약
CN111836831A (zh) 2018-02-26 2020-10-27 豪夫迈·罗氏有限公司 用于抗tigit拮抗剂抗体和抗pd-l1拮抗剂抗体治疗的给药
CN112088169A (zh) 2018-03-12 2020-12-15 纪念斯隆凯特琳癌症中心 双特异性结合剂及其用途
EP3765489B1 (en) 2018-03-13 2024-10-16 F. Hoffmann-La Roche AG Therapeutic combination of 4-1bb agonists with anti-cd20 antibodies
TWI841551B (zh) 2018-03-13 2024-05-11 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 使用靶向4-1bb (cd137)之促效劑的組合療法
EP3765522A4 (en) 2018-03-14 2022-05-18 Beijing Xuanyi Pharmasciences Co., Ltd. ANTI-CLAUDIN 18.2 ANTIBODIES
US20200040103A1 (en) 2018-03-14 2020-02-06 Genentech, Inc. Anti-klk5 antibodies and methods of use
CN119930831A (zh) 2018-03-14 2025-05-06 纪念斯隆凯特琳癌症中心 抗聚唾液酸抗体及其用途
EP3765517A1 (en) 2018-03-14 2021-01-20 Elstar Therapeutics, Inc. Multifunctional molecules that bind to calreticulin and uses thereof
CN112119090B (zh) 2018-03-15 2023-01-13 中外制药株式会社 对寨卡病毒具有交叉反应性的抗登革热病毒抗体及使用方法
BR112020019083A2 (pt) 2018-03-21 2020-12-29 Five Prime Therapeutics, Inc. Anticorpos, ácido nucleico, composições, célula e métodos para preparar um anticorpo, para tratar câncer, para tratar uma doença infecciosa, para tratar uma inflamação, para a identificação de um anticorpo, para melhorar a eficácia antitumoral de um anticorpo, para melhorar a farmacocinética de um anticorpo, para selecionar um anticorpo, para melhorar a eficácia de anticorpos, para isolar anticorpos, para detectar vista em uma amostra e para tratar câncer
EP3768715A1 (en) 2018-03-23 2021-01-27 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies against mica and/or micb and uses thereof
JP2021519073A (ja) 2018-03-29 2021-08-10 ジェネンテック， インコーポレイテッド 哺乳動物細胞におけるラクトジェニック活性の制御
TW202003567A (zh) 2018-03-30 2020-01-16 大陸商南京傳奇生物科技有限公司 針對lag-3之單一結構域抗體及其用途
TW202011029A (zh) 2018-04-04 2020-03-16 美商建南德克公司 偵測及定量fgf21之方法
CA3096052A1 (en) 2018-04-04 2019-10-10 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind fibroblast activation protein
EP3773908A1 (en) 2018-04-05 2021-02-17 Juno Therapeutics, Inc. T cell receptors and engineered cells expressing same
AU2019247511B2 (en) 2018-04-06 2025-10-16 Atyr Pharma, Inc. Compositions and methods comprising anti-NRP2 antibodies
BR112020020479A2 (pt) 2018-04-09 2021-01-12 Checkmate Pharmaceuticals Empacotamento de oligonucleotídeos em partículas similares a vírus
EP3552631A1 (en) 2018-04-10 2019-10-16 Inatherys Antibody-drug conjugates and their uses for the treatment of cancer
SG11202007961QA (en) 2018-04-13 2020-09-29 Hoffmann La Roche Her2-targeting antigen binding molecules comprising 4-1bbl
SG11202010163QA (en) 2018-04-18 2020-11-27 Xencor Inc Pd-1 targeted heterodimeric fusion proteins containing il-15/il-15ra fc-fusion proteins and pd-1 antigen binding domains and uses thereof
EP3781598A1 (en) 2018-04-18 2021-02-24 Xencor, Inc. Tim-3 targeted heterodimeric fusion proteins containing il-15/il-15ra fc-fusion proteins and tim-3 antigen binding domains
CA3096703A1 (en) 2018-05-03 2019-11-07 University Of Rochester Anti-influenza neuraminidase monoclonal antibodies and uses thereof
EP3788079A4 (en) 2018-05-03 2022-12-21 Shanghai Epimab Biotherapeutics Co., Ltd. ANTIBODIES WITH HIGH AFFINITY TO PD-1 AND LAG-3 AND BI-SPECIFIC BINDING PROTEINS PRODUCTION THEREOF
MX2020011552A (es) 2018-05-03 2020-11-24 Genmab Bv Combinaciones de variantes de anticuerpos y usos de las mismas.
AU2019271148B9 (en) 2018-05-14 2025-05-29 Werewolf Therapeutics, Inc. Activatable interleukin-2 polypeptides and methods of use thereof
WO2019222296A1 (en) 2018-05-14 2019-11-21 Werewolf Therapeutics, Inc. Activatable interleukin 12 polypeptides and methods of use thereof
SG11202010496WA (en) 2018-05-18 2020-12-30 Daiichi Sankyo Co Ltd Anti-muc1 antibody-drug conjugate
JP7337099B2 (ja) 2018-05-25 2023-09-01 アレクトル エルエルシー 抗ｓｉｒｐａ抗体およびその使用法
TWI869346B (zh) 2018-05-30 2025-01-11 瑞士商諾華公司 Ｅｎｔｐｄ２抗體、組合療法、及使用該等抗體和組合療法之方法
EP3801766A1 (en) 2018-05-31 2021-04-14 Novartis AG Hepatitis b antibodies
KR102870868B1 (ko) 2018-06-01 2025-10-15 노파르티스 아게 Bcma에 대한 결합 분자 및 이의 용도
KR20210016448A (ko) 2018-06-01 2021-02-15 컴퓨젠 엘티디. 항-pvrig/항-tigit 이중특이적 항체 및 사용 방법
WO2019227490A1 (en) 2018-06-01 2019-12-05 Tayu Huaxia Biotech Medical Group Co., Ltd. Compositions and methods for imaging
EP3818085A4 (en) 2018-06-01 2022-03-09 Tayu Huaxia Biotech Medical Group Co., Ltd. COMPOSITIONS AND THEIR USES FOR THE TREATMENT OF DISEASES OR DISORDERS
EP3802599B1 (en) 2018-06-03 2023-12-20 LamKap Bio beta AG Bispecific antibodies against ceacam5 and cd47
WO2019235426A1 (ja) 2018-06-04 2019-12-12 中外製薬株式会社 細胞質内での半減期が変化した抗原結合分子
TWI851577B (zh) 2018-06-07 2024-08-11 美商思進公司 喜樹鹼結合物
US11993661B2 (en) 2018-06-18 2024-05-28 Eureka Therapeutics, Inc. Constructs targeting prostate-specific membrane antigen (PSMA) and uses thereof
MY205645A (en) 2018-06-23 2024-11-02 Genentech Inc Methods of treating lung cancer with a pd-1 axis binding antagonist, a platinum agent, and a topoisomerase ii inhibitor
BR112020026819A2 (pt) 2018-06-29 2021-04-20 Alector Llc anticorpos isolados, ácido nucleico, vetor, células hospedeiras, método de produção de um anticorpo, composição farmacêutica, métodos para tratar o câncer e para tratar uma doença e usos de um anticorpo
TW202519260A (zh) 2018-07-02 2025-05-16 美商安進公司 抗steap1抗原結合蛋白
CA3105448A1 (en) 2018-07-03 2020-01-09 Elstar Therapeutics, Inc. Anti-tcr antibody molecules and uses thereof
WO2020007817A1 (en) 2018-07-04 2020-01-09 F. Hoffmann-La Roche Ag Novel bispecific agonistic 4-1bb antigen binding molecules
CN113056483B (zh) 2018-07-09 2025-08-01 戊瑞治疗有限公司 结合到ilt4的抗体
WO2020014306A1 (en) 2018-07-10 2020-01-16 Immunogen, Inc. Met antibodies and immunoconjugates and uses thereof
PE20210687A1 (es) 2018-07-11 2021-04-08 Bristol Myers Squibb Co Anticuerpos de union a vista a ph acido
US20200017600A1 (en) 2018-07-13 2020-01-16 Genmab A/S Variants of cd38 antibody and uses thereof
US20240254252A1 (en) 2018-07-13 2024-08-01 Genmab A/S Trogocytosis-mediated therapy using cd38 antibodies
LT3618928T (lt) 2018-07-13 2023-04-11 Alector Llc Anti-sortilino antikūnai ir jų panaudojimo būdai
WO2020018789A1 (en) 2018-07-18 2020-01-23 Genentech, Inc. Methods of treating lung cancer with a pd-1 axis binding antagonist, an antimetabolite, and a platinum agent
MX2021000745A (es) 2018-07-20 2021-03-26 Surface Oncology Inc Composiciones anti-cd112r y metodos.
JP7490925B2 (ja) 2018-07-26 2024-05-28 エータイアー ファーマ， インコーポレイテッド Ｎｒｐ２関連疾患を治療するための組成物および方法
MX2021000827A (es) 2018-08-03 2021-03-25 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Molecula de union a antigeno que contiene dos dominios de union a antigeno que estan enlazados entre si.
MA50586A (fr) 2018-08-09 2020-09-16 Regeneron Pharma Procédés d'évaluation de l'affinité de liaison d'une variante d'anticorps au récepteur fc néonatal
KR102259473B1 (ko) 2018-08-10 2021-06-02 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 항cd137 항원 결합 분자 및 그의 사용
WO2020036867A1 (en) 2018-08-13 2020-02-20 Inhibrx, Inc. Ox40-binding polypeptides and uses thereof
CN121248772A (zh) 2018-08-17 2026-01-02 Ab工作室有限公司 催化抗体和其使用方法
TW202021618A (zh) 2018-08-17 2020-06-16 美商２３與我有限公司 抗ｉｌ１ｒａｐ抗體及其使用方法
TW202031273A (zh) 2018-08-31 2020-09-01 美商艾歐凡斯生物治療公司 抗ｐｄ－１抗體難治療性之非小細胞肺癌（ｎｓｃｌｃ）病患的治療
GB201814281D0 (en) 2018-09-03 2018-10-17 Femtogenix Ltd Cytotoxic agents
EP3850013A4 (en) 2018-09-10 2022-10-05 Nanjing Legend Biotech Co., Ltd. SINGLE DOMAIN ANTIBODIES AGAINST CLL1 AND USES THEREOF
WO2020053742A2 (en) 2018-09-10 2020-03-19 Novartis Ag Anti-hla-hbv peptide antibodies
WO2020056170A1 (en) 2018-09-12 2020-03-19 Fred Hutchinson Cancer Research Center Reducing cd33 expression to selectively protect therapeutic cells
CA3109366A1 (en) 2018-09-13 2020-03-19 The Board Of Regents Of The University Of Texas System Novel lilrb4 antibodies and uses thereof
AU2019342099A1 (en) 2018-09-19 2021-04-08 Genentech, Inc. Therapeutic and diagnostic methods for bladder cancer
EP3853251A1 (en) 2018-09-19 2021-07-28 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and pharmaceutical composition for the treatment of cancers resistant to immune checkpoint therapy
IL281423B2 (en) 2018-09-20 2024-08-01 Iovance Biotherapeutics Inc Expansion of TILS from cryopreserved tumor samples
KR102739487B1 (ko) 2018-09-21 2024-12-10 제넨테크, 인크. 3중-음성 유방암에 대한 진단 방법
US20220002370A1 (en) 2018-09-27 2022-01-06 Xilio Development, Inc. Masked cytokine polypeptides
CN112654641A (zh) 2018-10-01 2021-04-13 豪夫迈·罗氏有限公司 具有与cd40的三价结合的双特异性抗原结合分子
WO2020070041A1 (en) 2018-10-01 2020-04-09 F. Hoffmann-La Roche Ag Bispecific antigen binding molecules comprising anti-fap clone 212
EP3632929A1 (en) 2018-10-02 2020-04-08 Ospedale San Raffaele S.r.l. Antibodies and uses thereof
AU2019355971B2 (en) 2018-10-03 2025-05-08 Xencor, Inc. IL-12 heterodimeric Fc-fusion proteins
PE20211213A1 (es) 2018-10-05 2021-07-05 Five Prime Therapeutics Inc Formulaciones de anticuerpos anti-fgfr2
CN113164780A (zh) 2018-10-10 2021-07-23 泰洛斯治疗公司 抗lap抗体变体及其用途
UY38407A (es) 2018-10-15 2020-05-29 Novartis Ag Anticuerpos estabilizadores de trem2
WO2020081493A1 (en) 2018-10-16 2020-04-23 Molecular Templates, Inc. Pd-l1 binding proteins
EP3867646A1 (en) 2018-10-18 2021-08-25 F. Hoffmann-La Roche AG Diagnostic and therapeutic methods for sarcomatoid kidney cancer
MY195550A (en) 2018-10-29 2023-01-31 Hoffmann La Roche Antibody Formulation
US20230053449A1 (en) 2018-10-31 2023-02-23 Novartis Ag Dc-sign antibody drug conjugates
WO2020096927A1 (en) 2018-11-05 2020-05-14 Iovance Biotherapeutics, Inc. Expansion of tils utilizing akt pathway inhibitors
US12611427B2 (en) 2018-11-05 2026-04-28 Iovance Biotherapeutics, Inc. Treatment of NSCLC patients refractory for anti-PD-1 antibody
WO2020094609A1 (en) 2018-11-06 2020-05-14 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and pharmaceutical compositions for the treatment of acute myeloid leukemia by eradicating leukemic stem cells
CN113366022B (zh) 2018-11-16 2025-11-21 纪念斯隆凯特琳癌症中心 针对粘蛋白-16的抗体及其使用方法
CN116003597A (zh) 2018-11-27 2023-04-25 舒泰神（北京）生物制药股份有限公司 特异性识别粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子受体α的抗体及其用途
EP3887397A1 (en) 2018-11-28 2021-10-06 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies comprising modified heavy constant regions
EP4198057A1 (en) 2018-12-05 2023-06-21 F. Hoffmann-La Roche AG Diagnostic methods and compositions for cancer immunotherapy
BR112021010908A2 (pt) 2018-12-06 2021-08-31 Genentech, Inc. Método para tratamento de linfoma difuso de grandes células b, kit e imunoconjugado
US12234289B2 (en) 2018-12-07 2025-02-25 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Immunosuppresive agent
JP2022513198A (ja) 2018-12-10 2022-02-07 ジェネンテック， インコーポレイテッド Ｆｃ含有タンパク質への部位特異的コンジュゲーションのための光架橋性ペプチド
EP3894543A1 (en) 2018-12-14 2021-10-20 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Isolated mhc-derived human peptides and uses thereof for stimulating and activating the suppressive function of cd8cd45rc low tregs
TW202039554A (zh) 2018-12-19 2020-11-01 瑞士商諾華公司 抗ＴＮＦ－α抗體
AR117327A1 (es) 2018-12-20 2021-07-28 23Andme Inc Anticuerpos anti-cd96 y métodos de uso de estos
AR117453A1 (es) 2018-12-20 2021-08-04 Genentech Inc Fc de anticuerpos modificados y métodos para utilizarlas
US20220089694A1 (en) 2018-12-20 2022-03-24 The U.S.A., As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Ebola virus glycoprotein-specific monoclonal antibodies and uses thereof
EP3898671A1 (en) 2018-12-21 2021-10-27 F. Hoffmann-La Roche AG Antibody that binds to vegf and il-1beta and methods of use
CR20210330A (es) 2018-12-21 2021-07-20 Hoffmann La Roche ANTICUERPOS QUE SE UNEN A CD3 (Divisional 2021-0325)
US11629172B2 (en) 2018-12-21 2023-04-18 Pfizer Inc. Human cytomegalovirus gB polypeptide
CA3120474A1 (en) 2018-12-21 2020-06-25 23Andme, Inc. Anti-il-36 antibodies and methods of use thereof
UA128001C2 (uk) 2018-12-21 2024-03-06 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг Націлені на пухлину агоністичні cd28-антигензв'язувальні молекули
WO2020127628A1 (en) 2018-12-21 2020-06-25 F. Hoffmann-La Roche Ag Tumor-targeted superagonistic cd28 antigen binding molecules
CA3122773A1 (en) 2018-12-26 2020-07-02 Xilio Development, Inc. Anti-ctla4 antibodies and methods of use thereof
EP3902830A1 (en) 2018-12-30 2021-11-03 F. Hoffmann-La Roche AG Anti-rabbit cd19 antibodies and methods of use
WO2020146740A1 (en) 2019-01-10 2020-07-16 Iovance Biotherapeutics, Inc. System and methods for monitoring adoptive cell therapy clonality and persistence
WO2020148207A1 (en) 2019-01-14 2020-07-23 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Human monoclonal antibodies binding to hla-a2
AU2020208193A1 (en) 2019-01-14 2021-07-29 BioNTech SE Methods of treating cancer with a PD-1 axis binding antagonist and an RNA vaccine
CN109762067B (zh) 2019-01-17 2020-02-28 北京天广实生物技术股份有限公司 结合人Claudin 18.2的抗体及其用途
CN113396162B (zh) 2019-01-22 2024-08-16 百时美施贵宝公司 抗IL-7Rα亚基的抗体及其用途
US11414496B2 (en) 2019-01-23 2022-08-16 Takeda Pharmaceutical Company Limited Anti-CD38 binding domains
CN113795511B (zh) 2019-01-23 2024-07-23 大有华夏生物医药集团有限公司 抗pd-l1双抗体及其用途
WO2020153467A1 (ja) 2019-01-24 2020-07-30 中外製薬株式会社 新規がん抗原及びそれらの抗原に対する抗体
SG11202107976SA (en) 2019-01-29 2021-08-30 Juno Therapeutics Inc Antibodies and chimeric antigen receptors specific for receptor tyrosine kinase like orphan receptor 1 (ror1)
GB201901197D0 (en) 2019-01-29 2019-03-20 Femtogenix Ltd G-A Crosslinking cytotoxic agents
CN119039441A (zh) 2019-02-21 2024-11-29 马伦戈治疗公司 与nkp30结合的抗体分子及其用途
GB2599228B (en) 2019-02-21 2024-02-07 Marengo Therapeutics Inc Multifunctional molecules that bind to T cell related cancer cells and uses thereof
WO2020176748A1 (en) 2019-02-27 2020-09-03 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-tigit and anti-cd20 or anti-cd38 antibodies
CA3132185A1 (en) 2019-03-01 2020-09-10 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind enpp3 and cd3
WO2020180733A1 (en) 2019-03-01 2020-09-10 Iovance Biotherapeutics, Inc. Expansion of tumor infiltrating lymphocytes from liquid tumors and therapeutic uses thereof
US10570210B1 (en) 2019-03-04 2020-02-25 Beijing Mabworks Biotech Co.Ltd Antibodies binding CD40 and uses thereof
WO2020185535A1 (en) 2019-03-08 2020-09-17 Genentech, Inc. Methods for detecting and quantifying membrane-associated proteins on extracellular vesicles
EP3938400B1 (en) 2019-03-11 2025-07-30 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Cd22 antibodies and methods of using the same
EP3938403A1 (en) 2019-03-14 2022-01-19 F. Hoffmann-La Roche AG Treatment of cancer with her2xcd3 bispecific antibodies in combination with anti-her2 mab
JP7301155B2 (ja) 2019-04-12 2023-06-30 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト リポカリンムテインを含む二重特異性抗原結合分子
CN113924118A (zh) 2019-04-18 2022-01-11 百时美施贵宝公司 在低ph下具有增强的结合特异性的伊匹单抗变体
CN114007643A (zh) 2019-04-19 2022-02-01 中外制药株式会社 识别抗体改变部位的嵌合受体
BR112021020867A2 (pt) 2019-04-19 2022-01-04 Genentech Inc Anticorpos, ácido nucleico, vetor, célula hospedeira, método de produção de um anticorpo, imunoconjugado, formulação farmacêutica, usos do anticorpo, método de tratamento de um indivíduo com câncer e método para reduzir a depuração
EP3962523A2 (en) 2019-05-03 2022-03-09 The United States of America, as represented by the Secretary, Department of Health and Human Services Neutralizing antibodies to plasmodium falciparum circumsporozoite protein and their use
CN114269376A (zh) 2019-05-03 2022-04-01 豪夫迈·罗氏有限公司 用抗pd-l1抗体治疗癌症的方法
EP3969035A4 (en) 2019-05-14 2023-06-21 Werewolf Therapeutics, Inc. SEPARATION UNITS AND METHODS AND THEIR USE
AU2020275415B2 (en) 2019-05-14 2026-01-15 Genentech, Inc. Methods of using anti-CD79B immunoconjugates to treat follicular lymphoma
EP4696320A2 (en) 2019-05-15 2026-02-18 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Anti-c1s antibody
CN113853219B (zh) 2019-05-20 2025-01-07 诺华股份有限公司 具有包含亲水性基团的接头的抗体药物缀合物
EP3972997A1 (en) 2019-05-20 2022-03-30 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM) Novel anti-cd25 antibodies
CN118994397A (zh) 2019-05-21 2024-11-22 诺华股份有限公司 针对bcma的三特异性结合分子及其用途
US12037378B2 (en) 2019-05-21 2024-07-16 Novartis Ag Variant CD58 domains and uses thereof
WO2020236974A1 (en) 2019-05-21 2020-11-26 University Of Georgia Research Foundation, Inc. Antibodies that bind human metapneumovirus fusion protein and their use
JP7489407B2 (ja) 2019-05-21 2024-05-23 ノバルティス アーゲー Ｃｄ１９結合分子及びその使用
AU2020278907A1 (en) 2019-05-23 2022-01-20 Ac Immune Sa Anti-TDP-43 binding molecules and uses thereof
EP3983441A1 (en) 2019-06-11 2022-04-20 Alector LLC Anti-sortilin antibodies for use in therapy
US11066469B2 (en) 2019-06-12 2021-07-20 Novartis Ag Natriuretic peptide receptor 1 antibodies and methods of use
KR20220025848A (ko) 2019-06-26 2022-03-03 에프. 호프만-라 로슈 아게 Cea 및 4-1bbl에 결합하는 항체의 융합
WO2020260326A1 (en) 2019-06-27 2020-12-30 F. Hoffmann-La Roche Ag Novel icos antibodies and tumor-targeted antigen binding molecules comprising them
WO2021003297A1 (en) 2019-07-02 2021-01-07 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Monoclonal antibodies that bind egfrviii and their use
MY208387A (en) 2019-07-09 2025-05-05 Beijing Solobio Genetechnology Co Ltd Antibodies specifically recognizing pseudomonas pcrv and uses thereof
MX2022000111A (es) 2019-07-10 2022-02-10 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Moleculas de union a claudina-6 y usos de las mismas.
AR119382A1 (es) 2019-07-12 2021-12-15 Hoffmann La Roche Anticuerpos de pre-direccionamiento y métodos de uso
WO2021010326A1 (ja) 2019-07-12 2021-01-21 中外製薬株式会社 抗変異型ｆｇｆｒ３抗体およびその使用
AR119393A1 (es) 2019-07-15 2021-12-15 Hoffmann La Roche Anticuerpos que se unen a nkg2d
EP3999540A1 (en) 2019-07-16 2022-05-25 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM) Antibodies having specificity for cd38 and uses thereof
WO2021014389A1 (en) 2019-07-24 2021-01-28 H. Lundbeck A/S Anti-mglur5 antibodies and uses thereof
EP4003417A2 (en) 2019-07-29 2022-06-01 Compugen Ltd. Anti-pvrig antibodies formulations and uses thereof
CN114174338A (zh) 2019-07-31 2022-03-11 豪夫迈·罗氏有限公司 与gprc5d结合的抗体
CA3248329A1 (en) 2019-07-31 2025-11-29 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibodies binding to gprc5d
CA3145885A1 (en) 2019-07-31 2021-02-04 Jeonghoon Sun Anti-ms4a4a antibodies and methods of use thereof
JP7181438B2 (ja) 2019-08-06 2022-11-30 アプリノイア セラピューティクス リミテッド 病理学的タウ種に結合する抗体及びその使用
CN114340675A (zh) 2019-09-12 2022-04-12 豪夫迈·罗氏有限公司 治疗狼疮性肾炎的组合物和方法
TW202124446A (zh) 2019-09-18 2021-07-01 瑞士商諾華公司 與ｅｎｔｐｄ２抗體之組合療法
CN114502590A (zh) 2019-09-18 2022-05-13 诺华股份有限公司 Entpd2抗体、组合疗法、以及使用这些抗体和组合疗法的方法
PH12022550646A1 (en) 2019-09-18 2023-04-03 Genentech Inc Anti-klk7 antibodies, anti-klk5 antibodies, multispecific anti-klk5/klk7 antibodies, and methods of use
CA3149719A1 (en) 2019-09-19 2021-03-25 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies binding to vista at acidic ph
CN114423454A (zh) 2019-09-20 2022-04-29 豪夫迈·罗氏有限公司 抗类胰蛋白酶抗体的给药
JP2022548978A (ja) 2019-09-27 2022-11-22 ジェネンテック， インコーポレイテッド 薬抗ｔｉｇｉｔ及び抗ｐｄ－ｌ１アンタゴニスト抗体を用いた処置のための投薬
WO2021064184A1 (en) 2019-10-04 2021-04-08 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and pharmaceutical composition for the treatment of ovarian cancer, breast cancer or pancreatic cancer
WO2021076196A1 (en) 2019-10-18 2021-04-22 Genentech, Inc. Methods of using anti-cd79b immunoconjugates to treat diffuse large b-cell lymphoma
JP2023500651A (ja) 2019-11-04 2023-01-10 コンピュジェン リミテッド 抗ｐｖｒｉｇ抗体製剤および抗ｐｄ－１抗体による併用療法
KR20220092580A (ko) 2019-11-06 2022-07-01 제넨테크, 인크. 혈액암의 치료를 위한 진단과 치료 방법
US20220396839A1 (en) 2019-11-12 2022-12-15 Foundation Medicine, Inc. Methods of detecting a fusion gene encoding a neoantigen
MX2022005666A (es) 2019-11-14 2022-10-07 Werewolf Therapeutics Inc Polipeptidos de citocina activables y metodos de uso de los mismos.
WO2021094620A1 (en) 2019-11-15 2021-05-20 Enthera S.R.L. Tmem219 antibodies and therapeutic uses thereof
US20230039165A1 (en) 2019-11-21 2023-02-09 Enthera S.R.L. Igfbp3 antibodies and therapeutic uses thereof
EP3831849A1 (en) 2019-12-02 2021-06-09 LamKap Bio beta AG Bispecific antibodies against ceacam5 and cd47
US20230057899A1 (en) 2019-12-05 2023-02-23 Compugen Ltd. Anti-pvrig and anti-tigit antibodies for enhanced nk-cell based tumor killing
EP4069742A1 (en) 2019-12-06 2022-10-12 Juno Therapeutics, Inc. Anti-idiotypic antibodies to gprc5d-targeted binding domains and related compositions and methods
CN115916817A (zh) 2019-12-06 2023-04-04 朱诺治疗学股份有限公司 针对bcma靶向结合结构域的抗独特型抗体及相关组合物和方法
EP4072682A1 (en) 2019-12-09 2022-10-19 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM) Antibodies having specificity to her4 and uses thereof
WO2021119505A1 (en) 2019-12-13 2021-06-17 Genentech, Inc. Anti-ly6g6d antibodies and methods of use
MX2022007231A (es) 2019-12-13 2022-07-12 Alector Llc Anticuerpos anti-mertk y metodos de uso de los mismos.
KR20220100963A (ko) 2019-12-18 2022-07-18 에프. 호프만-라 로슈 아게 Hla-a2/mage-a4에 결합하는 항체
JP7676408B2 (ja) 2019-12-20 2025-05-14 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 脱フコシル化抗体を生成するためのフコシル化阻害剤の使用
CN113045655A (zh) 2019-12-27 2021-06-29 高诚生物医药(香港)有限公司 抗ox40抗体及其用途
UA128549C2 (uk) 2019-12-27 2024-08-07 Чугаі Сейяку Кабусікі Кайся Антитіло до ctla-4 та його застосування
TWI877278B (zh) 2019-12-30 2025-03-21 美商思進公司 以非海藻糖苷化抗－ｃｄ７０抗體治療癌症之方法
WO2021136308A1 (en) 2020-01-03 2021-07-08 Biosion Inc. Antibodies binding bcma and uses thereof
AU2020416273A1 (en) 2020-01-03 2022-07-28 Marengo Therapeutics, Inc. Anti-TCR antibody molecules and uses thereof
CN114929734A (zh) 2020-01-09 2022-08-19 豪夫迈·罗氏有限公司 新型含有4-1bbl三聚体的抗原结合分子
CN110818795B (zh) 2020-01-10 2020-04-24 上海复宏汉霖生物技术股份有限公司 抗tigit抗体和使用方法
TWI869528B (zh) 2020-01-13 2025-01-11 美商威特拉公司 C5ar1抗體分子及其用途
US20230272105A1 (en) 2020-01-16 2023-08-31 Genmab A/S Formulations of cd38 antibodies and uses thereof
WO2021194481A1 (en) 2020-03-24 2021-09-30 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-tigit and anti-pd-l1 antagonist antibodies
WO2022050954A1 (en) 2020-09-04 2022-03-10 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-tigit and anti-pd-l1 antagonist antibodies
WO2021155295A1 (en) 2020-01-31 2021-08-05 The Cleveland Clinic Foundation Anti-müllerian hormone receptor 2 antibodies and methods of use
MX2022009391A (es) 2020-01-31 2022-09-26 Genentech Inc Metodos para inducir linfocitos t especificos para neoepitopo con un antagonista de union al eje de pd-1 y una vacuna de arn.
KR20220137698A (ko) 2020-02-05 2022-10-12 라리마 테라퓨틱스, 인코포레이티드 Tat 펩티드 결합 단백질 및 이의 용도
TWI895351B (zh) 2020-02-12 2025-09-01 日商中外製藥股份有限公司 用於癌症之治療的抗cd137抗原結合分子
TWI890283B (zh) 2020-02-14 2025-07-11 美商基利科學股份有限公司 結合ccr8之抗體及融合蛋白及其用途
WO2021168292A1 (en) 2020-02-20 2021-08-26 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Epstein-barr virus monoclonal antibodies and uses thereof
EP3868396A1 (en) 2020-02-20 2021-08-25 Enthera S.R.L. Inhibitors and uses thereof
BR112022017174A2 (pt) 2020-02-27 2022-10-18 Chia Tai Tianqing Pharmaceutical Group Co Ltd Anticorpo monoclonal isolado, ou uma porção de ligação ao antígeno do mesmo, nucleotídeo, vetor de expressão, célula hospedeira, composição farmacêutica e métodos de tratamento de uma doença alérgica e de um tumor
KR20220148209A (ko) 2020-02-28 2022-11-04 상하이 헨리우스 바이오테크, 인크. 항cd137 작제물 및 그 용도
KR20220145859A (ko) 2020-02-28 2022-10-31 상하이 헨리우스 바이오테크, 인크. 항cd137 작제물, 다중 특이적 항체 및 그 용도
AU2021236302A1 (en) 2020-03-12 2022-10-20 Immune-Onc Therapeutics, Inc. Novel anti-LILRB4 antibodies and derivative products
PE20230252A1 (es) 2020-03-13 2023-02-07 Genentech Inc Anticuerpos anti-interleucina-33 y sus usos de estos
CN117551194A (zh) 2020-03-19 2024-02-13 基因泰克公司 同种型选择性抗TGF-β抗体及使用方法
EP4107186A1 (en) 2020-03-23 2022-12-28 Genentech, Inc. Tocilizumab and remdesivir combination therapy for covid-19 pneumonia
JP2023518815A (ja) 2020-03-23 2023-05-08 ジェネンテック， インコーポレイテッド Ｉｌ６アンタゴニストによるｃｏｖｉｄ－１９肺炎を含む肺炎の治療方法
CN115867577A (zh) 2020-03-23 2023-03-28 基因泰克公司 用于预测covid-19肺炎中对il-6拮抗剂反应的生物标志物
AU2021242249A1 (en) 2020-03-24 2022-08-18 Genentech, Inc. Tie2-binding agents and methods of use
JP2023518841A (ja) 2020-03-26 2023-05-08 ジェネンテック， インコーポレイテッド 宿主細胞タンパク質が減少した修飾哺乳動物細胞
US20230128499A1 (en) 2020-03-27 2023-04-27 Novartis Ag Bispecific combination therapy for treating proliferative diseases and autoimmune diseases
CN116075525A (zh) 2020-03-31 2023-05-05 艾莱克特有限责任公司 抗mertk抗体及其使用方法
AR121706A1 (es) 2020-04-01 2022-06-29 Hoffmann La Roche Moléculas de unión a antígeno biespecíficas dirigidas a ox40 y fap
WO2021202235A1 (en) 2020-04-01 2021-10-07 University Of Rochester Monoclonal antibodies against the hemagglutinin (ha) and neuraminidase (na) of influenza h3n2 viruses
WO2021202959A1 (en) 2020-04-03 2021-10-07 Genentech, Inc. Therapeutic and diagnostic methods for cancer
US20230272056A1 (en) 2020-04-09 2023-08-31 Merck Sharp & Dohme Llc Affinity matured anti-lap antibodies and uses thereof
WO2021207662A1 (en) 2020-04-10 2021-10-14 Genentech, Inc. Use of il-22fc for the treatment or prevention of pneumonia, acute respiratory distress syndrome, or cytokine release syndrome
CN115916822A (zh) 2020-04-24 2023-04-04 基因泰克公司 使用抗CD79b免疫缀合物的方法
JP2023523145A (ja) 2020-04-27 2023-06-02 ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ カリフォルニア リポ蛋白（ａ）に対するイソ型非依存性抗体
EP4143345A1 (en) 2020-04-28 2023-03-08 Genentech, Inc. Methods and compositions for non-small cell lung cancer immunotherapy
MX2021015024A (es) 2020-04-28 2022-01-18 Univ Rockefeller Anticuerpos anti-sars-cov-2 ampliamente neutralizantes y métodos de uso de los mismos.
TW202200212A (zh) 2020-05-03 2022-01-01 中國大陸商聯寧（蘇州）生物製藥有限公司 包含抗-trop-2抗體之抗體藥物結合物
CN121851171A (zh) 2020-05-12 2026-04-14 正大天晴药业集团股份有限公司 St2抗原结合蛋白
CA3180683A1 (en) 2020-05-12 2021-11-18 Inserm (Institut National De La Sante Et De La Recherche Medicale) New method to treat cutaneous t-cell lymphomas and tfh derived lymphomas
WO2021231976A1 (en) 2020-05-14 2021-11-18 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind prostate specific membrane antigen (psma) and cd3
US20230192867A1 (en) 2020-05-15 2023-06-22 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies to garp
EP4157881A4 (en) 2020-05-27 2024-10-09 Staidson (Beijing) Biopharmaceuticals Co., Ltd. ANTIBODIES THAT SPECIFICALLY RECOGNIZE NERVE GROWTH FACTOR AND THEIR USES
WO2021243204A1 (en) 2020-05-29 2021-12-02 23Andme, Inc. Anti-cd200r1 antibodies and methods of use thereof
CN116529260A (zh) 2020-06-02 2023-08-01 当康生物技术有限责任公司 抗cd93构建体及其用途
EP4157462A1 (en) 2020-06-02 2023-04-05 Dynamicure Biotechnology LLC Anti-cd93 constructs and uses thereof
PE20240080A1 (es) 2020-06-08 2024-01-16 Hoffmann La Roche Anticuerpos anti-hbv y metodos de uso
JP2023529206A (ja) 2020-06-12 2023-07-07 ジェネンテック， インコーポレイテッド がん免疫療法のための方法及び組成物
AU2021293038A1 (en) 2020-06-16 2023-02-02 F. Hoffmann-La Roche Ag Methods and compositions for treating triple-negative breast cancer
KR20230024368A (ko) 2020-06-18 2023-02-20 제넨테크, 인크. 항-tigit 항체 및 pd-1 축 결합 길항제를 사용한 치료
WO2021255146A1 (en) 2020-06-19 2021-12-23 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibodies binding to cd3 and cea
WO2021255155A1 (en) 2020-06-19 2021-12-23 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibodies binding to cd3 and cd19
PE20230835A1 (es) 2020-06-19 2023-05-19 Hoffmann La Roche Anticuerpos que se unen a cd3
PH12022553489A1 (en) 2020-06-19 2024-04-22 Hoffmann La Roche Antibodies binding to cd3 and folr1
TWI810589B (zh) 2020-06-21 2023-08-01 美商輝瑞股份有限公司 人巨細胞病毒糖蛋白Ｂ（ｇＢ）多肽
WO2021259880A1 (en) 2020-06-22 2021-12-30 Almirall, S.A. Anti-il-36 antibodies and methods of use thereof
AU2021295549A1 (en) 2020-06-23 2022-11-24 F. Hoffmann-La Roche Ag Agonistic CD28 antigen binding molecules targeting Her2
CA3184747A1 (en) 2020-06-24 2021-12-30 Genentech, Inc. Apoptosis resistant cell lines
CN115916830A (zh) 2020-06-25 2023-04-04 豪夫迈·罗氏有限公司 抗cd3/抗cd28双特异性抗原结合分子
CA3183835A1 (en) 2020-06-25 2021-12-30 Jeanne E. Baker High affinity antibodies targeting tau phosphorylated at serine 413
JP2023532197A (ja) 2020-06-30 2023-07-27 江蘇恒瑞医薬股▲ふん▼有限公司 抗ｃｄ７０抗体及びその応用
CR20230076A (es) 2020-07-10 2023-03-13 Hoffmann La Roche Anticuerpos que se unen a células cancerosas y dirigen radionucleótidos a dichas células
JP7726978B2 (ja) 2020-07-13 2025-08-20 上海君▲実▼生物医▲薬▼科技股▲分▼有限公司 抗ｃｌｄｎ－１８．２抗体及びその用途
JP7846667B2 (ja) 2020-07-16 2026-04-15 レジェンド バイオテック アイルランド リミテッド Ｃｄ２０結合分子及びその使用
PH12023550112A1 (en) 2020-07-17 2024-06-24 Genentech Inc Anti-notch2 antibodies and methods of use
GB2597532A (en) 2020-07-28 2022-02-02 Femtogenix Ltd Cytotoxic compounds
US20230322935A1 (en) 2020-07-29 2023-10-12 Dynamicure Biotechnology Llc Anti-cd93 constructs and uses thereof
EP4189071A1 (en) 2020-08-03 2023-06-07 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM) Population of treg cells functionally committed to exert a regulatory activity and their use for adoptive therapy
JP2023536602A (ja) 2020-08-03 2023-08-28 ジェネンテック， インコーポレイテッド リンパ腫のための診断及び治療方法
EP4192868A1 (en) 2020-08-05 2023-06-14 Juno Therapeutics, Inc. Anti-idiotypic antibodies to ror1-targeted binding domains and related compositions and methods
BR112023002123A2 (pt) 2020-08-07 2023-03-07 Genentech Inc Proteína de fusão fc, ácidos nucleicos isolados, método de produção da proteína de fusão fc, formulação farmacêutica, métodos para expandir o número de células dendríticas (dcs) em um indivíduo e para tratar um câncer, proteína fc sem efetora e anticorpo
CN116194480A (zh) 2020-08-13 2023-05-30 百时美施贵宝公司 将il-2重定向到目的靶细胞的方法
TW202221026A (zh) 2020-08-14 2022-06-01 瑞士商Ａｃ 免疫有限公司 人源化抗ｔｄｐ－４３結合分子及其用途
WO2022043517A2 (en) 2020-08-27 2022-03-03 Cureab Gmbh Anti-golph2 antibodies for macrophage and dendritic cell differentiation
CA3192344A1 (en) 2020-08-28 2022-03-03 Genentech, Inc. Crispr/cas9 multiplex knockout of host cell proteins
EP4208201A1 (en) 2020-09-04 2023-07-12 F. Hoffmann-La Roche AG Antibody that binds to vegf-a and ang2 and methods of use
IL301269A (en) 2020-09-14 2023-05-01 Ichnos Sciences S A Antibodies that bind to IL1RAP and their uses
EP4213877A1 (en) 2020-09-17 2023-07-26 Genentech, Inc. Results of empacta: a randomized, double-blind, placebo-controlled, multicenter study to evaluate the efficacy and safety of tocilizumab in hospitalized patients with covid-19 pneumonia
CN118146384A (zh) 2020-09-28 2024-06-07 安济盛生物医药有限公司 抗硬骨抑素构建体及其用途
KR20230104611A (ko) 2020-09-30 2023-07-10 드렌 바이오, 인크. 항-cd94 항체 및 이의 사용 방법
WO2022069940A1 (en) 2020-09-30 2022-04-07 Compugen Ltd. Combination therapy with anti-pvrig antibodies formulations, anti-tigit antibodies, and anti-pd-1 antibodies
CN116406291A (zh) 2020-10-05 2023-07-07 基因泰克公司 用抗fcrh5/抗cd3双特异性抗体进行治疗的给药
WO2022076606A1 (en) 2020-10-06 2022-04-14 Iovance Biotherapeutics, Inc. Treatment of nsclc patients with tumor infiltrating lymphocyte therapies
JP2023546359A (ja) 2020-10-06 2023-11-02 アイオバンス バイオセラピューティクス，インコーポレイテッド 腫瘍浸潤リンパ球療法によるｎｓｃｌｃ患者の治療
CA3198102A1 (en) 2020-10-07 2022-04-14 Dren Bio, Inc. Anti-dectin-1 antibodies and methods of use thereof
TW202231292A (zh) 2020-10-13 2022-08-16 美商健生生物科技公司 用於調節分化簇ｉｖ及／或ｖｉｉｉ的經生物工程改造之ｔ細胞介導之免疫力、材料、及其他方法
CA3198456A1 (en) 2020-10-14 2022-04-21 Five Prime Therapeutics, Inc. Anti-c-c chemokine receptor 8 (ccr8) antibodies and methods of use thereof
WO2022084210A1 (en) 2020-10-20 2022-04-28 F. Hoffmann-La Roche Ag Combination therapy of pd-1 axis binding antagonists and lrrk2 inhitibors
WO2022084400A1 (en) 2020-10-20 2022-04-28 Kantonsspital St. Gallen Antibodies or antigen-binding fragments specifically binding to gremlin-1 and uses thereof
AR123855A1 (es) 2020-10-20 2023-01-18 Genentech Inc Anticuerpos anti-mertk conjugados con peg y métodos de uso
EP4232822A2 (en) 2020-10-26 2023-08-30 Compugen Ltd. Pvrl2 and/or pvrig as biomarkers for treatment
WO2022093981A1 (en) 2020-10-28 2022-05-05 Genentech, Inc. Combination therapy comprising ptpn22 inhibitors and pd-l1 binding antagonists
JP7716473B2 (ja) 2020-11-04 2025-07-31 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ｃｄ２０／抗ｃｄ３二重特異性抗体の皮下投薬
TWI874719B (zh) 2020-11-04 2025-03-01 美商建南德克公司 用抗cd20/抗cd3雙特異性抗體進行治療之給藥
AU2021374594B2 (en) 2020-11-04 2026-03-05 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-cd20/anti-cd3 bispecific antibodies and anti-cd79b antibody drug conjugates
TW202227481A (zh) 2020-11-04 2022-07-16 美國洛克菲勒大學 中和抗sars-cov-2抗體
IL302412A (en) 2020-11-06 2023-06-01 Novartis Ag Anti-CD19 and B-cell targeting agent combination therapy for the treatment of B-cell malignancies
CA3199095A1 (en) 2020-11-06 2022-05-12 Novartis Ag Cd19 binding molecules and uses thereof
CN116390949A (zh) 2020-11-06 2023-07-04 百时美施贵宝公司 作为单一疗法给药和施用非岩藻糖基化抗ctla-4抗体
CN117916261A (zh) 2020-11-16 2024-04-19 豪夫迈·罗氏有限公司 与靶向fap的cd40激动剂的组合疗法
JP2024504547A (ja) 2020-11-20 2024-02-01 インセルム（インスティチュート ナショナル デ ラ サンテ エ デ ラ リシェルシェ メディカル） 抗ｃｄ２５抗体
EP4247497A1 (en) 2020-11-20 2023-09-27 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM) Anti-cd25 antibodies
WO2022115865A2 (en) 2020-11-25 2022-06-02 Xilio Development, Inc. Tumor-specific cleavable linkers
WO2022116877A1 (en) 2020-12-02 2022-06-09 Shanghai Henlius Biotech, Inc. ANTI-GARP/TGFβ ANTIBODIES AND METHODS OF USE
EP4255930A1 (en) 2020-12-02 2023-10-11 Alector LLC Methods of use of anti-sortilin antibodies
EP4255451A4 (en) 2020-12-03 2025-01-01 The Board Of Regents Of The University Of Texas System Methods for identifying lilrb-blocking antibodies
TW202237638A (zh) 2020-12-09 2022-10-01 日商武田藥品工業股份有限公司 烏苷酸環化酶ｃ（ｇｃｃ）抗原結合劑之組成物及其使用方法
TW202237639A (zh) 2020-12-09 2022-10-01 日商武田藥品工業股份有限公司 鳥苷酸環化酶ｃ（ｇｃｃ）抗原結合劑之組成物及其使用方法
EP4259164A1 (en) 2020-12-11 2023-10-18 Iovance Biotherapeutics, Inc. Treatment of cancer patients with tumor infiltrating lymphocyte therapies in combination with braf inhibitors and/or mek inhibitors
EP4259661A1 (en) 2020-12-14 2023-10-18 Novartis AG Reversal binding agents for anti-natriuretic peptide receptor 1 (npr1) antibodies and uses thereof
AU2021401302A1 (en) 2020-12-17 2023-07-06 Iovance Biotherapeutics, Inc. Treatment with tumor infiltrating lymphocyte therapies in combination with ctla-4 and pd-1 inhibitors
EP4262827A1 (en) 2020-12-17 2023-10-25 Iovance Biotherapeutics, Inc. Treatment of cancers with tumor infiltrating lymphocytes
WO2022132904A1 (en) 2020-12-17 2022-06-23 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Human monoclonal antibodies targeting sars-cov-2
WO2022140797A1 (en) 2020-12-23 2022-06-30 Immunowake Inc. Immunocytokines and uses thereof
CN114685669A (zh) 2020-12-30 2022-07-01 和铂医药(苏州)有限公司 结合trop2的抗体及其用途
JP2024501845A (ja) 2020-12-31 2024-01-16 アイオバンス バイオセラピューティクス，インコーポレイテッド 腫瘍浸潤リンパ球の自動化された産生のためのデバイス及びプロセス
JP2024503826A (ja) 2021-01-06 2024-01-29 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト Ｐｄ１－ｌａｇ３二重特異性抗体及びｃｄ２０ ｔ細胞二重特異性抗体を用いる併用療法
EP4276466A4 (en) 2021-01-08 2024-12-18 Beijing Hanmi Pharmaceutical Co., Ltd. ANTIBODY SPECIFICALLY BINDING WITH PD-L1 AND ANTIGEN-BINDING FRAGMENT OF ANTIBODY
WO2022148413A1 (zh) 2021-01-08 2022-07-14 北京韩美药品有限公司 特异性结合4-1bb的抗体及其抗原结合片段
US20250277031A1 (en) 2021-01-08 2025-09-04 Beijing Hanmi Pharmaceutical Co., Ltd. Antibody specifically binding to cd47 and antigen-binding fragment thereof
JP2024504931A (ja) 2021-01-12 2024-02-02 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト がん細胞に結合し、放射性核種を前記細胞に標的化するスプリット抗体
CA3204291A1 (en) 2021-01-13 2022-07-21 F. Hoffmann-La Roche Ag Combination therapy
CA3204628A1 (en) 2021-01-13 2022-07-21 John T. POIRIER Antibody-pyrrolobenzodiazepine derivative conjugate
CA3173944A1 (en) 2021-01-13 2022-07-21 Visterra, Inc. Humanized complement 5a receptor 1 antibodies and methods of use thereof
MX2023008285A (es) 2021-01-13 2023-09-12 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Conjugado de anticuerpo anti-dll3-farmaco.
WO2022155324A1 (en) 2021-01-15 2022-07-21 The Rockefeller University Neutralizing anti-sars-cov-2 antibodies
AR124681A1 (es) 2021-01-20 2023-04-26 Abbvie Inc Conjugados anticuerpo-fármaco anti-egfr
WO2022162203A1 (en) 2021-01-28 2022-08-04 Vaccinvent Gmbh Method and means for modulating b-cell mediated immune responses
CN117120084A (zh) 2021-01-28 2023-11-24 维肯芬特有限责任公司 用于调节b细胞介导的免疫应答的方法和手段
WO2022165275A2 (en) 2021-01-28 2022-08-04 Compugen Ltd. Combination therapy with anti-pvrig antibodies formulations and anti-pd-1-antibodies
JP2024504493A (ja) 2021-01-28 2024-01-31 ヴァクスィーンヴェント ゲーエムベーハー Ｂ細胞媒介性免疫応答を調節するための方法及び手段
WO2022165266A1 (en) 2021-01-28 2022-08-04 Compugen Ltd. Anti-pvrig antibodies formulations and uses thereof
WO2022165260A1 (en) 2021-01-29 2022-08-04 Iovance Biotherapeutics, Inc. Methods of making modified tumor infiltrating lymphocytes and their use in adoptive cell therapy
WO2022169872A1 (en) 2021-02-03 2022-08-11 Genentech, Inc. Multispecific binding protein degrader platform and methods of use
AU2022221297A1 (en) 2021-02-09 2023-08-03 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Antibodies targeting the spike protein of coronaviruses
WO2022173689A1 (en) 2021-02-09 2022-08-18 University Of Georgia Research Foundation, Inc. Human monoclonal antibodies against pneumococcal antigens
KR20230146032A (ko) 2021-02-15 2023-10-18 다케다 야쿠힌 고교 가부시키가이샤 Tgf-b 신호전달을 조절하기 위한 세포 치료 조성물 및 방법
CA3209364A1 (en) 2021-03-01 2022-09-09 Jennifer O'neil Combination of masked ctla4 and pd1/pdl1 antibodies for treating cancer
EP4301467A1 (en) 2021-03-01 2024-01-10 Xilio Development, Inc. Combination of ctla4 and pd1/pdl1 antibodies for treating cancer
US20240181073A1 (en) 2021-03-03 2024-06-06 Sorrento Therapeutics, Inc. Antibody-Drug Conjugates Comprising an Anti-BCMA Antibody
TW202302646A (zh) 2021-03-05 2023-01-16 美商當康生物科技有限公司 抗vista構築體及其用途
EP4301138A2 (en) 2021-03-05 2024-01-10 Iovance Biotherapeutics, Inc. Tumor storage and cell culture compositions
US11739144B2 (en) 2021-03-09 2023-08-29 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind CD3 and CLDN6
EP4305065A1 (en) 2021-03-10 2024-01-17 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind cd3 and gpc3
IL305758A (en) 2021-03-10 2023-11-01 Immunowake Inc Immunomodulatory compounds and their uses
WO2022192647A1 (en) 2021-03-12 2022-09-15 Genentech, Inc. Anti-klk7 antibodies, anti-klk5 antibodies, multispecific anti-klk5/klk7 antibodies, and methods of use
AU2022238526A1 (en) 2021-03-15 2023-09-07 F. Hoffmann-La Roche Ag Compositions and methods of treating lupus nephritis
WO2022197947A1 (en) 2021-03-18 2022-09-22 Alector Llc Anti-tmem106b antibodies and methods of use thereof
IL305690B2 (en) 2021-03-18 2025-10-01 Medimmune Ltd A therapeutic binding molecule that binds to CCR9
WO2022197877A1 (en) 2021-03-19 2022-09-22 Genentech, Inc. Methods and compositions for time delayed bio-orthogonal release of cytotoxic agents
US20240191191A1 (en) 2021-03-19 2024-06-13 Iovance Biotherapeutics, Inc. Methods for infiltrating lymphocyte (til) expansion related to cd39/cd69 selection and gene knockout in tils
JP2024511610A (ja) 2021-03-23 2024-03-14 アレクトル エルエルシー コロナウイルス感染の治療及び予防のための抗ｔｍｅｍ１０６ｂ抗体
CA3213080A1 (en) 2021-03-23 2022-09-29 Krit RITTHIPICHAI Cish gene editing of tumor infiltrating lymphocytes and uses of same in immunotherapy
WO2022200303A1 (en) 2021-03-23 2022-09-29 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods for the diagnosis and treatment of t cell-lymphomas
JP2024512029A (ja) 2021-03-25 2024-03-18 アイオバンス バイオセラピューティクス，インコーポレイテッド Ｔ細胞共培養効力アッセイのための方法及び組成物、ならびに細胞療法製品との使用
EP4314049A1 (en) 2021-03-25 2024-02-07 Dynamicure Biotechnology LLC Anti-igfbp7 constructs and uses thereof
WO2022200525A1 (en) 2021-03-26 2022-09-29 Innate Pharma Multispecific proteins comprising an nkp46-binding site, a cancer antgienge binding site fused to a cytokine for nk cell engaging
EP4320153A1 (en) 2021-04-09 2024-02-14 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods for the treatment of anaplastic large cell lymphoma
AR125344A1 (es) 2021-04-15 2023-07-05 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Anticuerpo anti-c1s
CA3215830A1 (en) 2021-04-19 2022-10-27 Rafael CUBAS Chimeric costimulatory receptors, chemokine receptors, and the use of same in cellular immunotherapies
EP4326855A1 (en) 2021-04-19 2024-02-28 Genentech, Inc. Modified mammalian cells
WO2022223651A1 (en) 2021-04-23 2022-10-27 F. Hoffmann-La Roche Ag Prevention or mitigation of nk cell engaging agent-related adverse effects
CA3213632A1 (en) 2021-04-30 2022-11-03 F. Hoffmann-La Roche Ag Dosing for combination treatment with anti-cd20/anti-cd3 bispecific antibody and anti-cd79b antibody drug conjugate
EP4334343A2 (en) 2021-05-06 2024-03-13 The Rockefeller University Neutralizing anti-sars- cov-2 antibodies and methods of use thereof
IL308351A (en) 2021-05-12 2024-01-01 Genentech Inc Methods for using anti-CD79B immunoconjugates to treat diffuse large B-cell lymphoma
EP4337330A1 (en) 2021-05-14 2024-03-20 Genentech, Inc. Methods for treatment of cd20-positive proliferative disorder with mosunetuzumab and polatuzumab vedotin
AU2022273303A1 (en) 2021-05-14 2023-11-02 Genentech, Inc. Agonists of trem2
US20220372114A1 (en) 2021-05-17 2022-11-24 Curia Ip Holdings, Llc Sars-cov-2 spike protein antibodies
WO2022245877A1 (en) 2021-05-17 2022-11-24 Curia Ip Holdings, Llc Sars-cov-2 spike protein antibodies
JP2024519029A (ja) 2021-05-17 2024-05-08 アイオバンス バイオセラピューティクス，インコーポレイテッド Ｐｄ－１遺伝子編集された腫瘍浸潤リンパ球及び免疫療法におけるその使用
WO2022243261A1 (en) 2021-05-19 2022-11-24 F. Hoffmann-La Roche Ag Agonistic cd40 antigen binding molecules targeting cea
CN117396599A (zh) 2021-05-21 2024-01-12 基因泰克公司 用于生产目的重组产物的经修饰的细胞
AR126009A1 (es) 2021-06-02 2023-08-30 Hoffmann La Roche Moléculas agonistas de unión al antígeno cd28 que se dirigen a epcam
TW202306994A (zh) 2021-06-04 2023-02-16 日商中外製藥股份有限公司 抗ddr2抗體及其用途
WO2022258678A1 (en) 2021-06-09 2022-12-15 Innate Pharma Multispecific proteins binding to nkp30, a cytokine receptor, a tumour antigen and cd16a
KR20240019786A (ko) 2021-06-09 2024-02-14 이나뜨 파르마 에스.에이. Cd20, nkp46, cd16에 결합하고 il-2에 접합된 다중특이적 항체
CA3216220A1 (en) 2021-06-09 2022-12-15 F. Hoffmann-La Roche Ag Combination of a particular braf inhibitor (paradox breaker) and a pd-1 axis binding antagonist for use in the treatment of cancer
WO2022258691A1 (en) 2021-06-09 2022-12-15 Innate Pharma Multispecific proteins binding to nkg2d, a cytokine receptor, a tumour antigen and cd16a
BR112023025331A2 (pt) 2021-06-09 2024-02-27 Innate Pharma Proteína multiespecífica, composição farmacêutica, célula recombinante, ácido nucleico ou conjunto de ácidos nucleicos, uso de uma proteína ou composição, métodos ou uso
CN117980333A (zh) 2021-06-11 2024-05-03 基因泰克公司 用st2拮抗剂治疗慢性阻塞性肺疾病的方法
EP4355786A1 (en) 2021-06-16 2024-04-24 Alector LLC Bispecific anti-mertk and anti-pdl1 antibodies and methods of use thereof
WO2022266221A1 (en) 2021-06-16 2022-12-22 Alector Llc Monovalent anti-mertk antibodies and methods of use thereof
US12227574B2 (en) 2021-06-17 2025-02-18 Amberstone Biosciences, Inc. Anti-CD3 constructs and uses thereof
US20240279321A1 (en) 2021-06-18 2024-08-22 Therini Bio, Inc. ANTIBODIES WHICH BIND HUMAN FIBRIN OR FIBRINOGEN yC DOMAIN AND METHODS OF USE
WO2022269451A1 (en) 2021-06-22 2022-12-29 Novartis Ag Bispecific antibodies for use in treatment of hidradenitis suppurativa
TWI879694B (zh) 2021-06-25 2025-04-01 日商中外製藥股份有限公司 抗ctla-4抗體的用途
AR126220A1 (es) 2021-06-25 2023-09-27 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Anticuerpo anti-ctla-4
TW202317190A (zh) 2021-06-29 2023-05-01 美商思進公司 以非岩藻糖基化抗ｃｄ７０抗體及ｃｄ４７拮抗劑之組合治療癌症之方法
EP4363450A1 (en) 2021-07-01 2024-05-08 Compugen Ltd. Anti-tigit and anti-pvrig in monotherapy and combination treatments
CN118103397A (zh) 2021-07-08 2024-05-28 舒泰神(加州)生物科技有限公司 特异性识别tnfr2的抗体及其用途
EP4370545A1 (en) 2021-07-12 2024-05-22 Genentech, Inc. Structures for reducing antibody-lipase binding
US12240910B2 (en) 2021-07-14 2025-03-04 Genentech, Inc. Anti-C-C motif chemokine receptor 8 (CCR8) antibodies and methods of use
EP4372001A4 (en) 2021-07-14 2025-02-12 Jiangsu Hengrui Pharmaceuticals Co., Ltd. ANTIGEN-BINDING MOLECULE SPECIFICALLY BINDING TO HGFR AND EGFR, AND PHARMACEUTICAL USE THEREOF
US20240343817A1 (en) 2021-07-14 2024-10-17 Staidson (Beijing) Biopharmaceuticals Co., Ltd. Antibody that specifically recognizes cd40 and application thereof
EP4373859A1 (en) 2021-07-22 2024-05-29 F. Hoffmann-La Roche AG Heterodimeric fc domain antibodies
EP4373270A2 (en) 2021-07-22 2024-05-29 Iovance Biotherapeutics, Inc. Method for cryopreservation of solid tumor fragments
WO2023004386A1 (en) 2021-07-22 2023-01-26 Genentech, Inc. Brain targeting compositions and methods of use thereof
JP2024527961A (ja) 2021-07-28 2024-07-26 アイオバンス バイオセラピューティクス，インコーポレイテッド Ｋｒａｓ阻害剤と併用した腫瘍浸潤リンパ球療法によるがん患者の治療
CN117794953A (zh) 2021-08-03 2024-03-29 豪夫迈·罗氏有限公司 双特异性抗体及使用方法
US20240336697A1 (en) 2021-08-07 2024-10-10 Genentech, Inc. Methods of using anti-cd79b immunoconjugates to treat diffuse large b-cell lymphoma
CN117897409A (zh) 2021-08-13 2024-04-16 基因泰克公司 抗类胰蛋白酶抗体的给药
WO2023021055A1 (en) 2021-08-19 2023-02-23 F. Hoffmann-La Roche Ag Multivalent anti-variant fc-region antibodies and methods of use
CA3229448A1 (en) 2021-08-23 2023-03-02 Immunitas Therapeutics, Inc. Anti-cd161 antibodies and uses thereof
US20250127915A1 (en) 2021-08-26 2025-04-24 Shanghai Junshi Biosciences Co., Ltd. Anti-cldn-18.2 antibody-drug conjugate and use thereof
JP2024534151A (ja) 2021-08-27 2024-09-18 ジェネンテック， インコーポレイテッド タウ病態の治療方法
MX2024002611A (es) 2021-08-30 2024-05-29 Lassen Therapeutics 1 Inc Anticuerpos anti-il-11ra.
WO2023034750A1 (en) 2021-08-30 2023-03-09 Genentech, Inc. Anti-polyubiquitin multispecific antibodies
IL311141A (en) 2021-09-06 2024-04-01 Genmab As Antibodies capable of binding to CD27, their variants and uses thereof
WO2023039488A1 (en) 2021-09-09 2023-03-16 Iovance Biotherapeutics, Inc. Processes for generating til products using pd-1 talen knockdown
CA3232223A1 (en) 2021-09-17 2023-03-23 Ying Fu Synthetic humanized llama nanobody library and use thereof to identify sars-cov-2 neutralizing antibodies
US20250000903A1 (en) 2021-09-24 2025-01-02 Iovance Biotherapeutics, Inc. Expansion processes and agents for tumor infiltrating lymphocytes
WO2023056240A2 (en) 2021-09-28 2023-04-06 Frontaim Biomedicines, Inc. Multiple formats of molecular complexes
WO2023056403A1 (en) 2021-09-30 2023-04-06 Genentech, Inc. Methods for treatment of hematologic cancers using anti-tigit antibodies, anti-cd38 antibodies, and pd-1 axis binding antagonists
EP4410839A4 (en) 2021-09-30 2025-10-08 Bio Thera Solutions Ltd ANTI-B7-H3 ANTIBODY AND ITS USE
EP4413998A4 (en) 2021-10-08 2026-02-25 Chugai Pharmaceutical Co Ltd METHOD FOR PREPARING A PRE-FILLED SYRINGE FORMULATION
WO2023064958A1 (en) 2021-10-15 2023-04-20 Compugen Ltd. Combination therapy with anti-pvrig antibodies formulations, anti-tigit antibodies, and anti-pd-1 antibodies
WO2023069919A1 (en) 2021-10-19 2023-04-27 Alector Llc Anti-cd300lb antibodies and methods of use thereof
WO2023077015A2 (en) 2021-10-27 2023-05-04 Iovance Biotherapeutics, Inc. Systems and methods for coordinating manufacturing of cells for patient-specific immunotherapy
US20250251400A1 (en) 2021-11-05 2025-08-07 American Diagnostics & Therapy, Llc (Adxrx) Monoclonal Antibodies Against Carcinoembryonic Antigens, and Their Uses
EP4430072A1 (en) 2021-11-10 2024-09-18 Genentech, Inc. Anti-interleukin-33 antibodies and uses thereof
CA3237410A1 (en) 2021-11-10 2023-05-19 Friedrich Graf Finck VON FINCKENSTEIN Methods of expansion treatment utilizing cd8 tumor infiltrating lymphocytes
AU2022390134A1 (en) 2021-11-16 2024-05-16 Ac Immune Sa Novel molecules for therapy and diagnosis
TW202337494A (zh) 2021-11-16 2023-10-01 美商建南德克公司 用莫蘇妥珠單抗治療全身性紅斑狼瘡（ｓｌｅ）之方法及組成物
TW202330617A (zh) 2021-11-25 2023-08-01 大陸商正大天晴藥業集團股份有限公司 抗Siglec-15抗體及其應用
WO2023094525A1 (en) 2021-11-25 2023-06-01 Veraxa Biotech Gmbh Improved antibody-payload conjugates (apcs) prepared by site-specific conjugation utilizing genetic code expansion
DK4186529T3 (da) 2021-11-25 2025-08-25 Veraxa Biotech Gmbh Forbedrede antistof-payload-konjugater (apc) fremstillet ved stedspecifik konjugering ved hjælp af genetisk kodeudvidelse
EP4437006A1 (en) 2021-11-26 2024-10-02 F. Hoffmann-La Roche AG Combination therapy of anti-tyrp1/anti-cd3 bispecific antibodies and tyrp1-specific antibodies
EP4445911A4 (en) 2021-12-06 2025-10-22 Beijing Solobio Genetechnology Co Ltd BISPECIFIC ANTIBODY THAT BINDS SPECIFICALLY TO KLEBSIELLA PNEUMONIAE O1 AND O2 ANTIGENS AND COMPOSITION
AR127887A1 (es) 2021-12-10 2024-03-06 Hoffmann La Roche Anticuerpos que se unen a cd3 y plap
US20250051440A1 (en) 2021-12-14 2025-02-13 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Depletion of nk cells for the treatment of adverse post-ischemic cardiac remodeling
KR20240122784A (ko) 2021-12-17 2024-08-13 상하이 헨리우스 바이오테크, 인크. 항-ox40 항체 및 사용 방법
KR20240116755A (ko) 2021-12-17 2024-07-30 상하이 헨리우스 바이오테크, 인크. 항-ox40 항체, 다중 특이적 항체 및 이의 사용 방법
CR20240246A (es) 2021-12-20 2024-07-19 Hoffmann La Roche Anticuerpos agonistas anti-ltbr y anticuerpos biespecificos que los comprenden
UY40097A (es) 2022-01-07 2023-07-14 Johnson & Johnson Entpr Innovation Inc Materiales y métodos de proteínas de unión a il-1b
US20230322958A1 (en) 2022-01-19 2023-10-12 Genentech, Inc. Anti-Notch2 Antibodies and Conjugates and Methods of Use
US20250333485A1 (en) 2022-01-27 2025-10-30 The Rockefeller University Broadly neutralizing anti-sars-cov-2 antibodies targeting the n-terminal domain of the spike protein and methods of use thereof
EP4469065A1 (en) 2022-01-28 2024-12-04 Iovance Biotherapeutics, Inc. Cytokine associated tumor infiltrating lymphocytes compositions and methods
CA3243416A1 (en) 2022-01-28 2023-08-03 Iovance Biotherapeutics, Inc. TUMOR INFILTRATION LYMPHOCYTES MODIFIED TO EXPRESS PAYLOADS
WO2023144303A1 (en) 2022-01-31 2023-08-03 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Cd38 as a biomarker and biotarget in t-cell lymphomas
KR20240142563A (ko) 2022-02-10 2024-09-30 더 유나이티드 스테이츠 오브 어메리카, 애즈 리프리젠티드 바이 더 세크러테리, 디파트먼트 오브 헬쓰 앤드 휴먼 서비씨즈 코로나바이러스를 광범위하게 표적으로 하는 인간 모노클로날 항체
CA3243689A1 (en) 2022-02-16 2023-08-24 Ac Immune Sa Humanized Anti-TDP-43 Bonding Molecules and Their Uses
AU2023221861A1 (en) 2022-02-18 2024-09-05 Rakuten Medical, Inc. Anti-programmed death-ligand 1 (pd-l1) antibody molecules, encoding polynucleotides, and methods of use
EP4489790A1 (en) 2022-03-10 2025-01-15 Vivasor, Inc. Antibody-drug conjugates and uses thereof
WO2023178192A1 (en) 2022-03-15 2023-09-21 Compugen Ltd. Il-18bp antagonist antibodies and their use in monotherapy and combination therapy in the treatment of cancer
IL314907A (en) 2022-03-15 2024-10-01 Yeda Res & Dev Antibodies against GITR and their uses
US20240103010A1 (en) 2022-03-18 2024-03-28 Compugen Ltd. Pvrl2 and/or pvrig as biomarkers for treatment
MX2024011468A (es) 2022-03-23 2024-09-25 Hoffmann La Roche Tratamiento conjunto de un anticuerpo biespecifico anti-cd20/anti-cd3 y quimioterapia.
CA3245762A1 (en) 2022-03-25 2023-09-28 Shanghai Henlius Biologics Co., Ltd. ANTI-MSLN ANTIBODIES AND METHODS OF USE
US20250197482A1 (en) 2022-03-26 2025-06-19 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Bispecific antibodies to hiv-1 env and their use
JP2025511000A (ja) 2022-03-28 2025-04-15 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト インターフェロンガンマバリアントおよびこれを含む抗原結合分子
EP4499228A1 (en) 2022-03-28 2025-02-05 The United States of America, as represented by the Secretary, Department of Health and Human Services Neutralizing antibodies to hiv-1 env and their use
WO2023187657A1 (en) 2022-03-30 2023-10-05 Novartis Ag Methods of treating disorders using anti-natriuretic peptide receptor 1 (npr1) antibodies
IL315770A (en) 2022-04-01 2024-11-01 Genentech Inc Dosage for treatment with bispecific anti-FCRH5/anti-CD3 antibodies
WO2023196877A1 (en) 2022-04-06 2023-10-12 Iovance Biotherapeutics, Inc. Treatment of nsclc patients with tumor infiltrating lymphocyte therapies
US20260043816A1 (en) 2022-04-08 2026-02-12 Ac Immune Sa Anti-TDP-43 Binding Molecules
WO2023198648A1 (en) 2022-04-11 2023-10-19 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Methods for the diagnosis and treatment of t-cell malignancies
WO2023198727A1 (en) 2022-04-13 2023-10-19 F. Hoffmann-La Roche Ag Pharmaceutical compositions of anti-cd20/anti-cd3 bispecific antibodies and methods of use
WO2023201299A1 (en) 2022-04-13 2023-10-19 Genentech, Inc. Pharmaceutical compositions of therapeutic proteins and methods of use
WO2023198874A1 (en) 2022-04-15 2023-10-19 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Methods for the diagnosis and treatment of t cell-lymphomas
JP2025512401A (ja) 2022-04-15 2025-04-17 アイオバンス バイオセラピューティクス，インコーポレイテッド 特定のサイトカインの組み合わせ及び／またはＡＫＴｉ処理を使用したＴＩＬ拡張プロセス
US20250257123A1 (en) 2022-04-20 2025-08-14 Kantonsspital St. Gallen Antibodies or antigen-binding fragments pan-specifically binding to gremlin-1 and gremlin-2 and uses thereof
AU2023264069A1 (en) 2022-05-03 2024-10-24 Genentech, Inc. Anti-ly6e antibodies, immunoconjugates, and uses thereof
CN119487065A (zh) 2022-05-09 2025-02-18 舒泰神（北京）生物制药股份有限公司 特异性识别gdf15的抗体及其应用
CA3251533A1 (en) 2022-05-10 2023-11-16 Iovance Biotherapeutics, Inc. TREATMENT OF CANCER PATIENTS WITH TUMOR-INFILTRATING LYMPHOCYTE THERAPIES IN COMBINATION WITH AN IL-15R AGONIST
AR129268A1 (es) 2022-05-11 2024-08-07 Hoffmann La Roche Anticuerpo que se une a vegf-a e il6 y métodos de uso
JP2025517650A (ja) 2022-05-11 2025-06-10 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ＦｃＲＨ５／抗ＣＤ３二重特異性抗体による処置のための投与
WO2023222886A1 (en) 2022-05-20 2023-11-23 Depth Charge Ltd Antibody-cytokine fusion proteins
WO2023235699A1 (en) 2022-05-31 2023-12-07 Jounce Therapeutics, Inc. Antibodies to lilrb4 and uses thereof
KR20250022049A (ko) 2022-06-07 2025-02-14 제넨테크, 인크. 항-pd-l1 길항제 및 항-tigit 길항제 항체를 포함하는, 폐암 치료의 효율을 결정하는 방법
US20250382354A1 (en) 2022-06-08 2025-12-18 Institute For Research In Biomedicine (Irb) Cross-specific antibodies, uses and methods for discovery thereof
WO2024003310A1 (en) 2022-06-30 2024-01-04 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Methods for the diagnosis and treatment of acute lymphoblastic leukemia
WO2024011114A1 (en) 2022-07-06 2024-01-11 Iovance Biotherapeutics, Inc. Devices and processes for automated production of tumor infiltrating lymphocytes
US12600801B2 (en) 2022-07-11 2026-04-14 Fred Hutchinson Cancer Center Single-domain antibodies that bind ROR1
AU2023305619A1 (en) 2022-07-13 2025-01-23 F. Hoffmann-La Roche Ag Dosing for treatment with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies
KR20250040020A (ko) 2022-07-19 2025-03-21 제넨테크, 인크. 항-fcrh5/항-cd3 이중특이성 항체로 치료하기 위한 투약법
CN120322455A (zh) 2022-07-19 2025-07-15 舒泰神(加州)生物科技有限公司 特异性识别b和t淋巴细胞衰减器(btla)的抗体及其应用
TW202417504A (zh) 2022-07-22 2024-05-01 美商建南德克公司 抗ｓｔｅａｐ１抗原結合分子及其用途
PE20251075A1 (es) 2022-07-22 2025-04-10 Bristol Myers Squibb Co Anticuerpos que se unen a la pad4 humana y usos de los mismos
JP2025526336A (ja) 2022-07-22 2025-08-13 アンスティチュ ナショナル ドゥ ラ サンテ エ ドゥ ラ ルシェルシュ メディカル Ｔ細胞悪性腫瘍におけるバイオマーカー及びバイオターゲットとしてのｇａｒｐ
US20260035460A1 (en) 2022-07-28 2026-02-05 Adeboye Henry ADEWOYE, MD Combination therapy with anti-pvrig antibodies formulations and anti-pd-1 antibodies
MA71628A (fr) 2022-07-29 2025-05-30 Alector Llc Anticorps anti-gpnmb et leurs méthodes d'utilisation
WO2024023283A1 (en) 2022-07-29 2024-02-01 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Lrrc33 as a biomarker and biotarget in cutaneous t-cell lymphomas
WO2024030829A1 (en) 2022-08-01 2024-02-08 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Monoclonal antibodies that bind to the underside of influenza viral neuraminidase
US20260021181A1 (en) 2022-08-01 2026-01-22 Iovance Biotherapeutics, Inc. Chimeric costimulatory receptors, chemokine receptors, and the use of same in cellular immunotherapies
CA3263779A1 (en) 2022-08-05 2024-02-08 Janssen Biotech, Inc. CD98 LINKAGE CONSTRUCTIONS FOR THE TREATMENT OF BRAIN TUMORS
US20260048119A1 (en) 2022-08-05 2026-02-19 Bristol-Myers Squibb Company Anti-ctla4 antibodies for treatment of kras mutant cancers
MA71684A (fr) 2022-08-05 2025-05-30 Janssen Biotech, Inc. Protéines de liaison de récepteur de transferrine pour traitement de tumeurs cérébrales
US20260053742A1 (en) 2022-08-19 2026-02-26 Evive Biotechnology (Shanghai) Ltd Formulations comprising g-csf and uses thereof
EP4577578A1 (en) 2022-08-22 2025-07-02 Abdera Therapeutics Inc. Dll3 binding molecules and uses thereof
WO2024044675A1 (en) 2022-08-25 2024-02-29 Beigene, Ltd. Methods of cancer treatment using anti-pd1 antibodies in combination with anti-tim3 antibodies
WO2024044779A2 (en) 2022-08-26 2024-02-29 Juno Therapeutics, Inc. Antibodies and chimeric antigen receptors specific for delta-like ligand 3 (dll3)
EP4581366A1 (en) 2022-09-01 2025-07-09 Genentech, Inc. Therapeutic and diagnostic methods for bladder cancer
WO2024054822A1 (en) 2022-09-07 2024-03-14 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Engineered sars-cov-2 antibodies with increased neutralization breadth
EP4584296A1 (en) 2022-09-07 2025-07-16 Dynamicure Biotechnology LLC Anti-vista constructs and uses thereof
WO2024052503A1 (en) 2022-09-08 2024-03-14 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Antibodies having specificity to ltbp2 and uses thereof
IL319568A (en) 2022-09-15 2025-05-01 Avidicure Ip B V Multispecific antigen-binding proteins for NK cell stimulation and their uses
WO2024062076A1 (en) 2022-09-21 2024-03-28 Domain Therapeutics Anti-ccr8 monoclonal antibodies and their therapeutic use
EP4590705A1 (en) 2022-09-21 2025-07-30 Domain Therapeutics Anti-ccr8 monoclonal antibodies and their therapeutic use
WO2024062072A2 (en) 2022-09-21 2024-03-28 Domain Therapeutics Anti-ccr8 monoclonal antibodies and their therapeutic use
WO2024064826A1 (en) 2022-09-22 2024-03-28 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Neutralizing antibodies to plasmodium falciparum circumsporozoite protein and their use
EP4596580A4 (en) 2022-09-27 2026-01-21 Staidson Beijing Biopharmaceuticals Co Ltd ANTIBODIES TO SPECIFICALLY RECOGNIZE LIGHT LIGANDS AND THEIR USE
WO2024077239A1 (en) 2022-10-07 2024-04-11 Genentech, Inc. Methods of treating cancer with anti-c-c motif chemokine receptor 8 (ccr8) antibodies
JP2025536268A (ja) 2022-10-12 2025-11-05 アンスティチュ ナショナル ドゥ ラ サンテ エ ドゥ ラ ルシェルシュ メディカル Ｔ細胞悪性腫瘍におけるバイオマーカー及びバイオターゲットとしてのｃｄ８１
CN120693395A (zh) 2022-10-20 2025-09-23 北京三诺佳邑生物技术有限责任公司 特异性结合TRAIL或FasL的抗体组合以及双特异性抗体
WO2024086796A1 (en) 2022-10-20 2024-04-25 Alector Llc Anti-ms4a4a antibodies with amyloid-beta therapies
KR20250093336A (ko) 2022-10-25 2025-06-24 제넨테크, 인크. 다발성 골수종에 대한 치료 및 진단 방법
JP2025537137A (ja) 2022-11-04 2025-11-14 ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド 抗ｃｃｒ８抗体、化学療法及び免疫療法の組み合わせを使用する抗がん療法
WO2024098024A1 (en) 2022-11-04 2024-05-10 Iovance Biotherapeutics, Inc. Expansion of tumor infiltrating lymphocytes from liquid tumors and therapeutic uses thereof
EP4612277A1 (en) 2022-11-04 2025-09-10 Iovance Biotherapeutics, Inc. Methods for tumor infiltrating lymphocyte (til) expansion related to cd39/cd103 selection
EP4615872A1 (en) 2022-11-08 2025-09-17 Genentech, Inc. Compositions and methods of treating childhood onset idiopathic nephrotic syndrome
EP4615580A1 (en) 2022-11-09 2025-09-17 CIS Biopharma AG Anti-l1-cam antibodies and their uses for diagnostic and therapeutic applications
WO2024100170A1 (en) 2022-11-11 2024-05-16 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibodies binding to hla-a*02/foxp3
EP4619045A1 (en) 2022-11-17 2025-09-24 Sanofi Ceacam5 antibody-drug conjugates and methods of use thereof
JP2025539816A (ja) 2022-11-21 2025-12-09 アイオバンス バイオセラピューティクス，インコーポレイテッド 腫瘍浸潤リンパ球の増幅のための２次元プロセス及びそれからの治療法
JP2025539712A (ja) 2022-11-21 2025-12-09 アイオバンス バイオセラピューティクス，インコーポレイテッド 遺伝子編集されたｔ細胞の増殖能を評価するための方法
TW202434306A (zh) 2022-11-24 2024-09-01 瑞士商百濟神州瑞士有限責任公司 抗ｃｅａ抗體藥物軛合物及使用方法
JPWO2024111657A1 (pl) 2022-11-25 2024-05-30
EP4588936A1 (en) 2022-12-08 2025-07-23 Changchun Bcht Biotechnology Co. Antibodies specifically binding to rsv
JP2025541340A (ja) 2022-12-16 2025-12-18 フィアン セラピューティクス エルティーディー Ｃｕｂ ｄｏｍａｉｎ－ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ｐｒｏｔｅｉｎ １（ｃｄｃｐ１）に対する抗体およびその使用
WO2024137381A1 (en) 2022-12-19 2024-06-27 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Monoclonal antibodies for treating sars-cov-2 infection
TW202430560A (zh) 2023-01-06 2024-08-01 美商拉森醫療公司 抗ｉｌ－１８ｂｐ抗體
KR20250133728A (ko) 2023-01-06 2025-09-08 라센 테라퓨틱스, 인코포레이티드 항-il-18bp 항체
CN120787238A (zh) 2023-01-06 2025-10-14 拉森医疗公司 用于治疗甲状腺眼病的抗IL-11Rα抗体
WO2024148232A2 (en) 2023-01-06 2024-07-11 Alector Llc Anti-il18 binding protein antibodies and methods of use thereof
WO2024151885A1 (en) 2023-01-13 2024-07-18 Iovance Biotherapeutics, Inc. Use of til as maintenance therapy for nsclc patients who achieved pr/cr after prior therapy
JP2026510546A (ja) 2023-01-18 2026-04-08 ジェネンテック， インコーポレイテッド 多重特異性抗体およびその使用
CN121293352A (zh) 2023-01-19 2026-01-09 广州百济神州生物制药有限公司 抗cmet抗体及使用方法
CN120569410A (zh) 2023-01-25 2025-08-29 豪夫迈·罗氏有限公司 与csf1r和cd3结合的抗体
WO2024170543A1 (en) 2023-02-14 2024-08-22 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Anti-cd44 antibodies and uses thereof
AU2024221322A1 (en) 2023-02-17 2025-07-03 Apogee Therapeutics, Inc. Antibodies that bind interleukin 4 receptor alpha and methods of use
WO2024182443A2 (en) 2023-02-27 2024-09-06 Compugen Ltd. Triple combination therapy with anti-pvrig antibodies, anti-tigit antibodies, and pembrolizumab
AR132043A1 (es) 2023-03-03 2025-05-21 Beigene Switzerland Gmbh Anticuerpos muc1 y métodos de uso
JP2026506241A (ja) 2023-03-03 2026-02-20 ビーワン メディシンズ ワン ゲーエムベーハー Ｃｄ１６ａ抗体及び使用方法
EP4676975A1 (en) 2023-03-03 2026-01-14 Beone Medicines I GmbH Muc1 and cd16a antibodies and methods of use
TW202436345A (zh) 2023-03-06 2024-09-16 瑞士商百濟神州瑞士有限責任公司 抗ｃｄ３多特異性抗體及使用方法
WO2024184810A1 (en) 2023-03-06 2024-09-12 Beigene Switzerland Gmbh Anti-cldn6 and anti-cd3 multispecific antibodies and methods of use
WO2024184812A1 (en) 2023-03-06 2024-09-12 Beigene Switzerland Gmbh Anti-cldn6 antibodies and methods of use
EP4676596A1 (en) 2023-03-08 2026-01-14 AC Immune SA Anti-tdp-43 binding molecules and uses thereof
JP2026509243A (ja) 2023-03-10 2026-03-17 ジェネンテック， インコーポレイテッド プロテアーゼとの融合およびその使用
EP4428158A1 (en) 2023-03-10 2024-09-11 Istituto Romagnolo per lo Studio dei Tumori "Dino Amadori" - IRST S.r.l. Lung cancer targeting human antibodies and therapeutic uses thereof
EP4428159A1 (en) 2023-03-10 2024-09-11 Istituto Romagnolo per lo Studio dei Tumori "Dino Amadori" - IRST S.r.l. Melanoma targeting human antibodies and therapeutic uses thereof
WO2024188965A1 (en) 2023-03-13 2024-09-19 F. Hoffmann-La Roche Ag Combination therapy employing a pd1-lag3 bispecific antibody and an hla-g t cell bispecific antibody
WO2024206738A1 (en) 2023-03-31 2024-10-03 Immunai Inc. Humanized anti-trem2 antibodies
CN120936626A (zh) 2023-03-31 2025-11-11 基因泰克公司 抗αvβ8整合素抗体及使用方法
CN121969398A (zh) 2023-04-05 2026-05-01 维硕公司 抗体偶联药物及其用途
WO2024211235A1 (en) 2023-04-05 2024-10-10 Sorrento Therapeutics, Inc. Antibody-drug conjugates and uses thereof
CN121969397A (zh) 2023-04-05 2026-05-01 维硕公司 抗体偶联药物及其用途
CN121263432A (zh) 2023-04-12 2026-01-02 上海康抗生物技术有限公司 包含掩蔽型白介素12的多功能分子及使用方法
KR20260012304A (ko) 2023-04-17 2026-01-26 피크 바이오, 인크. 항체 및 항체-약물 접합체 및 사용 방법 및 합성 공정 및 중간체
AU2024270495A1 (en) 2023-05-05 2025-10-09 Genentech, Inc. Dosing for treatment with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies
EP4709752A1 (en) 2023-05-08 2026-03-18 F. Hoffmann-La Roche AG Targeted interferon alpha fusion proteins and methods of use
EP4709484A1 (en) 2023-05-10 2026-03-18 Genentech, Inc. Methods and compositions for treating cancer
TW202509071A (zh) 2023-05-12 2025-03-01 丹麥商珍美寶股份有限公司 能夠與ｏｘ４０結合之抗體、其變異體及其用途
AU2024273454A1 (en) 2023-05-16 2025-11-27 F. Hoffmann-La Roche Ag Pd-1-regulated il-2 immunocytokine and uses thereof
WO2024243355A1 (en) 2023-05-24 2024-11-28 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Human monoclonal antibodies that target the rh5 complex of blood-stage plasmodium falciparum
WO2024246083A1 (en) 2023-06-01 2024-12-05 F. Hoffmann-La Roche Ag Bispecific antibodies targeting bcma and cd28
TW202502811A (zh) 2023-06-01 2025-01-16 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 與ｂｃｍａ特異性結合之免疫刺激性抗原結合分子
KR20260021689A (ko) 2023-06-08 2026-02-13 제넨테크, 인크. 림프종 진단 및 치료 방법을 위한 대식세포 시그니처
WO2024251884A1 (en) 2023-06-09 2024-12-12 Innate Pharma Nk cell engager proteins comprising anti-cd20 and ant-nkp46 antibody, linked to il-2 in treatment of r/r b-nhl
CN121311247A (zh) 2023-06-09 2026-01-09 舒泰神（北京）生物制药股份有限公司 特异性结合masp3的抗体以及特异性结合masp3和masp2的多特异性抗体
EP4477236A1 (en) 2023-06-14 2024-12-18 Inatherys Combination therapy for treating a tumor using adc comprising anti-cd71 antibodies and bh3 mimetics
CN121358781A (zh) 2023-06-16 2026-01-16 江苏贝捷泰生物科技有限公司 特异性识别因子XIIa的抗体及其应用
KR20260026086A (ko) 2023-06-21 2026-02-25 에프. 호프만-라 로슈 아게 Fap 표적화 림포톡신 베타 수용체 작용제를 이용한 조합 요법
EP4731255A1 (en) 2023-06-22 2026-04-29 Genentech, Inc. Treatment of multiple myeloma
EP4731668A1 (en) 2023-06-22 2026-04-29 Genentech, Inc. Antibodies and uses thereof
TW202515608A (zh) 2023-06-26 2025-04-16 以色列商坎布根有限公司 Ｉｌ—１８ｂｐ拮抗抗體及其於癌症治療之單一療法及組合療法的用途
AU2024309736A1 (en) 2023-06-30 2026-01-15 Evive Biotechnology (Shanghai) Ltd G-csf dimer for use in the treatment or prevention of chemotherapy or radiotherapy induced neutropenia
WO2025014896A1 (en) 2023-07-07 2025-01-16 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Humanized 40h3 antibody
WO2025015318A2 (en) 2023-07-13 2025-01-16 Iovance Biotherapeutics, Inc. Cytokine encoding lentiviral vectors and uses thereof for making tumor infiltrating lymphocytes
WO2025012417A1 (en) 2023-07-13 2025-01-16 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Anti-neurotensin long fragment and anti-neuromedin n long fragment antibodies and uses thereof
WO2025019790A1 (en) 2023-07-19 2025-01-23 Iovance Biotherapeutics, Inc. Treatment of cancer patients with tumor infiltrating lymphocyte therapies in combination with trop-2 targeting adc
KR20260041867A (ko) 2023-07-21 2026-03-27 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 Pad4 조정제의 시트룰린화 및 활성을 평가하는 방법
AU2024300009A1 (en) 2023-07-21 2026-01-08 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Bispecific antibodies that broadly target coronaviruses
WO2025021790A2 (en) 2023-07-24 2025-01-30 F. Hoffmann-La Roche Ag Multispecific antibodies
AU2024300993A1 (en) 2023-07-26 2026-01-22 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibodies binding to cd3
WO2025027529A1 (en) 2023-07-31 2025-02-06 Advesya Anti-il-1rap antibody drug conjugates and methods of use thereof
WO2025034806A1 (en) 2023-08-08 2025-02-13 Wisconsin Alumni Research Foundation Single-domain antibodies and variants thereof against fibroblast activation protein
WO2025032069A1 (en) 2023-08-09 2025-02-13 F. Hoffmann-La Roche Ag Mono and multispecific anti-trem2 antibodies, methods and uses thereof
KR20260051042A (ko) 2023-08-09 2026-04-15 에프. 호프만-라 로슈 아게 단일 및 다중특이성 항-trem2 항체, 그 방법 및 용도
CN121620524A (zh) 2023-08-09 2026-03-06 豪夫迈·罗氏有限公司 抗A-β蛋白抗体、方法及其用途
AU2024324215A1 (en) 2023-08-11 2026-02-26 Abalytics Oncology, Inc. Anti-ctla-4 antibodies and related binding molecules and methods and uses thereof
WO2025045251A2 (en) 2023-09-03 2025-03-06 Kira Pharmaceuticals (Us) Llc Multispecific constructs comprising anti-factor d moiety
WO2025064539A1 (en) 2023-09-19 2025-03-27 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Dept. Of Health And Human Services Herv-e antibodies and methods of their use
EP4590715A1 (en) 2023-09-21 2025-07-30 Domain Therapeutics Anti-ccr8 monoclonal antibodies and their therapeutic use
EP4590714A1 (en) 2023-09-21 2025-07-30 Domain Therapeutics Anti-ccr8 monoclonal antibodies and their therapeutic use
AR133909A1 (es) 2023-09-25 2025-11-12 Hoffmann La Roche ANTICUERPO QUE SE UNE A C3bBb
US20250109187A1 (en) 2023-09-28 2025-04-03 Novavax, Inc. ANTI-SARS-CoV-2 SPIKE (S) ANTIBODIES AND THEIR USE IN TREATING COVID-19
WO2025068957A1 (en) 2023-09-29 2025-04-03 Novartis Ag Bispecific antibodies for use in lowering the risk of cardiovascular disease events in subjects known to be a carrier of clonal expansion of hematopoietic cell lines with somatic mutations
WO2025072726A1 (en) 2023-09-29 2025-04-03 Trex Bio, Inc. Tnf-alpha variant fusion molecules
JP7645562B1 (ja) 2023-10-03 2025-03-14 憲章 喜多村 分泌型タンパク質の合成方法
EP4537907A1 (en) 2023-10-10 2025-04-16 Enthera S.r.l. Cd248 inhibitors and uses thereof
WO2025085489A1 (en) 2023-10-17 2025-04-24 Bristol-Myers Squibb Company Gspt1-degrading compounds, anti-cd33 antibodies and antibody-drug conjugates and uses thereof
WO2025101484A1 (en) 2023-11-06 2025-05-15 Iovance Biotherapeutics, Inc. Treatment of endometrial cancers with tumor infiltrating lymphocyte therapies
WO2025099120A1 (en) 2023-11-09 2025-05-15 F. Hoffmann-La Roche Ag Multispecific antibodies with conditional activity
WO2025106427A1 (en) 2023-11-14 2025-05-22 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Neutralizing and protective monoclonal antibodies against respiratory syncytial virus (rsv)
WO2025106474A1 (en) 2023-11-14 2025-05-22 Genentech, Inc. Therapeutic and diagnostic methods for treating cancer with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies
WO2025111402A1 (en) 2023-11-21 2025-05-30 Board Of Regents Of The University Of Nebraska Anti-amyloid beta antibodies and related compositions and methods thereof
WO2025117384A1 (en) 2023-12-01 2025-06-05 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Broadly neutralizing influenza hemagglutinin stem-directed antibodies
WO2025120015A1 (en) 2023-12-06 2025-06-12 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Cd5 targeting antibodies with depleting and t or b-cell activation effects
WO2025125118A1 (en) 2023-12-11 2025-06-19 F. Hoffmann-La Roche Ag Protease activatable fc domain binding molecules
WO2025125386A1 (en) 2023-12-14 2025-06-19 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibodies that bind to folr1 and methods of use
TW202530255A (zh) 2023-12-15 2025-08-01 法商亞維西亞有限公司 抗ｉｌ－１ｒａｐ結合結構域及其抗體－藥物偶聯物
TW202535949A (zh) 2023-12-20 2025-09-16 美商必治妥美雅史谷比公司 靶向IL-18受體β(IL-18RB)之抗體及相關方法
WO2025137523A2 (en) 2023-12-20 2025-06-26 Apogee Therapeutics, Inc. Pharmaceutical formulations of antibodies that bind interleukin 13
WO2025132503A1 (en) 2023-12-20 2025-06-26 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibodies binding to ceacam5
WO2025137410A1 (en) 2023-12-20 2025-06-26 Apogee Therapeutics, Inc. Pharmaceutical compositions of anti-il-13 antibodies with and without c-terminal lysine
WO2025137284A2 (en) 2023-12-21 2025-06-26 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Broadly neutralizing antibodies against sars-cov-2 and sars-cov variants
WO2025133290A1 (en) 2023-12-21 2025-06-26 Temper Bio Protein for immune regulation
WO2025133042A2 (en) 2023-12-22 2025-06-26 F. Hoffmann-La Roche Ag Activatable fusion proteins and methods of use
WO2025145207A1 (en) 2023-12-29 2025-07-03 Bristol-Myers Squibb Company Combination therapy of kras inhibitor and treg-depleting agent
JP2026508860A (ja) 2024-01-05 2026-03-13 ビーワン メディシンズ ワン ゲーエムベーハー 抗ＦＧＦＲ２ｂ抗体、コンジュゲート、及び使用方法
WO2025149633A1 (en) 2024-01-12 2025-07-17 Laigo Bio B.V. Bispecific antigen binding proteins
WO2025155877A2 (en) 2024-01-18 2025-07-24 The Regents Of The University Of California Antibodies binding to pad4 and uses thereof
WO2025171182A1 (en) 2024-02-08 2025-08-14 Iovance Biotherapeutics, Inc. Treatment of cancer patients with tumor infiltrating lymphocyte therapies in combination with cancer vaccine
WO2025174974A1 (en) 2024-02-14 2025-08-21 Bristol-Myers Squibb Company Anti-cd33 antibodies and uses thereof
WO2025179281A1 (en) 2024-02-23 2025-08-28 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Treatment of cardiovascular disease with antxr1 antibodies
WO2025184208A1 (en) 2024-02-27 2025-09-04 Bristol-Myers Squibb Company Anti-ceacam5 antibodies and uses thereof
US12521446B2 (en) 2024-02-27 2026-01-13 Bristol-Myers Squibb Company Anti-CEACAM5 antibody drug conjugates
WO2025184416A1 (en) 2024-02-27 2025-09-04 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Single-domain antibodies and bispecific antibodies against hiv-1 and their use
WO2025184421A1 (en) 2024-02-28 2025-09-04 Juno Therapeutics, Inc. Chimeric antigen receptors and antibodies specific for delta-like ligand 3 (dll3) and related methods
WO2025181189A1 (en) 2024-03-01 2025-09-04 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibodies binding to cd3
WO2025191136A1 (en) 2024-03-15 2025-09-18 Avidicure Ip B.V. Muteins of 4-1bb ligand extracellular domain, fusion proteins comprising the same and uses thereof
WO2025191139A1 (en) 2024-03-15 2025-09-18 Avidicure Ip B.V. Conjugates of her2-specific antigen binding proteins and cytokines
WO2025191133A1 (en) 2024-03-15 2025-09-18 Avidicure Ip B.V. Il-21 muteins, fusion proteins comprising the same and uses thereof
WO2025199352A2 (en) 2024-03-20 2025-09-25 Juno Therapeutics, Inc. Antibodies specific for solute carrier family 34 member 2 (slc34a2)
WO2025196639A1 (en) 2024-03-21 2025-09-25 Seagen Inc. Cd25 antibodies, antibody-drug conjugates, and uses thereof
WO2025215060A1 (en) 2024-04-11 2025-10-16 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibodies that specifically bind modified oligonucleotides
WO2025226808A1 (en) 2024-04-24 2025-10-30 Genentech, Inc. Compositions and methods of treating lupus nephritis
WO2025224297A1 (en) 2024-04-26 2025-10-30 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Antibodies having specificity to tgfbi and uses thereof
WO2025240670A2 (en) 2024-05-15 2025-11-20 Abalytics Oncology, Inc. Anti-pd-1 antibodies and related binding molecules and methods and uses thereof
WO2025238187A1 (en) 2024-05-15 2025-11-20 Cis Biopharma Ag Immunoconjugates targeting l1-cam
WO2025238052A1 (en) 2024-05-15 2025-11-20 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Depletion of plasmacytoid dendritic cells for the treatment of respiratory viral infections
WO2025242732A1 (en) 2024-05-21 2025-11-27 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Pan antibodies against sars-cov-2 spike protein and uses thereof for therapeutical purposes
WO2025245176A1 (en) 2024-05-22 2025-11-27 Bristol-Myers Squibb Company Multispecific antibody constructs
WO2025242909A1 (en) 2024-05-24 2025-11-27 Paul Scherrer Institut CD30-targeting antibody-radioligand conjugates and their therapeutic use
WO2025250969A1 (en) 2024-05-31 2025-12-04 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Anti-cd74 antibodies, conjugates and uses thereof
WO2025255405A1 (en) 2024-06-06 2025-12-11 Bristol-Myers Squibb Company Anti-fap antibodies and uses thereof
WO2025255353A1 (en) 2024-06-06 2025-12-11 Apogee Therapeutics, Inc. Dosage and administration of an anti-ox40l antibody
WO2025255349A1 (en) 2024-06-06 2025-12-11 Bristol-Myers Squibb Company Multispecific anti-cd40 / anti-fap antibodies and uses thereof
WO2025257181A1 (en) 2024-06-11 2025-12-18 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Antibodies targeting trans-active response dna-binding protein-43 (tdp-43)
WO2025262564A1 (en) 2024-06-17 2025-12-26 Pfizer Inc. Use of anti-cxcr5 antibodies
WO2025264960A1 (en) 2024-06-21 2025-12-26 Apogee Therapeutics, Inc. Antibodies that bind il-13 and antibodies that bind ox40l
WO2025264972A1 (en) 2024-06-21 2025-12-26 Apogee Therapeutics, Inc. Antibodies that bind il-4r alpha and antibodies that bind
WO2026006784A1 (en) 2024-06-28 2026-01-02 Iovance Biotherapeutics, Inc. Methods of making tumor reactive peripheral blood lymphocytes (trpbl)
WO2026013218A1 (en) 2024-07-10 2026-01-15 Ac Immune Sa Anti-tdp-43 vectors, binding molecules and uses thereof
WO2026021476A1 (en) 2024-07-24 2026-01-29 Beone Guangzhou Biologics Manufacturing Co., Ltd. Anti-cmet and anti-egfr multispecific antibody drug conjugates
EP4684803A1 (en) 2024-07-25 2026-01-28 CeMM - Forschungszentrum für Molekulare Medizin GmbH Antibody conjugated chemical inducers of degradation of rbm39 and therapeutic uses thereof
WO2026030464A1 (en) 2024-07-30 2026-02-05 Genentech, Inc. Dosage regimen for reducing cytokine release syndrome (crs) with anti-fcrh5/anti-cd3 bispecific antibodies in multiple myeloma therapy
WO2026030473A1 (en) 2024-07-31 2026-02-05 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services West nile virus neutralizing monoclonal antibodies
WO2026035866A1 (en) 2024-08-07 2026-02-12 Iovance Biotherapeutics, Inc. Treatment of cancer patients with tumor infiltrating lymphocyte therapies in combination with a lag-3 inhibitor and a pd-1 inhibitor
WO2026035986A1 (en) 2024-08-07 2026-02-12 Bighat Biosciences, Inc. Humanized anti-cdh17 antibodies and use of the same
WO2026041568A1 (en) 2024-08-20 2026-02-26 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibodies binding to cd3 and dotam
WO2026050244A1 (en) 2024-08-26 2026-03-05 Angitia Incorporated Limited Methods of treating or preventing osteoporosis and low bone mass
WO2026052839A1 (en) 2024-09-06 2026-03-12 Hone Bio Limited Targeting fusion proteins
WO2026068504A2 (en) 2024-09-24 2026-04-02 The University Of Bristol Novel protein conjugates
WO2026072685A1 (en) 2024-09-25 2026-04-02 Genentech, Inc. Compositions and methods of treating lupus nephritis
WO2026072794A2 (en) 2024-09-26 2026-04-02 Iovance Biotherapeutics, Inc. Expansion processes for til product enriched with neoantigen- reactive t cells (narts)
WO2026073840A1 (en) 2024-10-01 2026-04-09 F. Hoffmann-La Roche Ag Antibodies that bind to cd3 and uses therefor
WO2026080829A1 (en) 2024-10-10 2026-04-16 Apogee Therapeutics, Inc. Methods of administering antibodies that bind interleukin 13
EP4729541A1 (en) 2024-10-16 2026-04-22 Paolo Fiorina Anti- igfbp7 antibodies and uses thereof
WO2026085415A1 (en) 2024-10-18 2026-04-23 Apogee Therapeutics, Inc. Antibodies that bind il-13 and antibodies that bind tslp in combination with hyaluronidase or a variant thereof
WO2026085417A2 (en) 2024-10-18 2026-04-23 Apogee Therapeutics, Inc. Antibodies that bind interleukin 4 receptor alpha in combination with hyaluronidase or a variant thereof
WO2026085414A1 (en) 2024-10-18 2026-04-23 Apogee Therapeutics, Inc. Antibodies that bind tslp and antibodies that bind interleukin 4 receptor alpha in combination with hyaluronidase or a variant thereof
WO2026085419A2 (en) 2024-10-18 2026-04-23 Apogee Therapeutics, Inc. Antibodies that bind il-13 in combination with hyaluronidase or a variant thereof

Family Cites Families (85)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US627375A (en) * 1899-06-20 Giulio serra zanetti
US4752601A (en) * 1983-08-12 1988-06-21 Immunetech Pharmaceuticals Method of blocking immune complex binding to immunoglobulin FC receptors
US5225539A (en) * 1986-03-27 1993-07-06 Medical Research Council Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies
US6548640B1 (en) * 1986-03-27 2003-04-15 Btg International Limited Altered antibodies
JP3101690B2 (ja) * 1987-03-18 2000-10-23 エス・ビィ・２・インコーポレイテッド 変性抗体の、または変性抗体に関する改良
US5204244A (en) * 1987-10-27 1993-04-20 Oncogen Production of chimeric antibodies by homologous recombination
US5047335A (en) * 1988-12-21 1991-09-10 The Regents Of The University Of Calif. Process for controlling intracellular glycosylation of proteins
US5419904A (en) * 1990-11-05 1995-05-30 The Regents Of The University Of California Human B-lymphoblastoid cell line secreting anti-ganglioside antibody
US5278299A (en) * 1991-03-18 1994-01-11 Scripps Clinic And Research Foundation Method and composition for synthesizing sialylated glycosyl compounds
US6582959B2 (en) * 1991-03-29 2003-06-24 Genentech, Inc. Antibodies to vascular endothelial cell growth factor
WO1994004679A1 (en) * 1991-06-14 1994-03-03 Genentech, Inc. Method for making humanized antibodies
WO1993010260A1 (en) * 1991-11-21 1993-05-27 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Controlling degradation of glycoprotein oligosaccharides by extracellular glycosisases
GB9206422D0 (en) * 1992-03-24 1992-05-06 Bolt Sarah L Antibody preparation
US5736137A (en) * 1992-11-13 1998-04-07 Idec Pharmaceuticals Corporation Therapeutic application of chimeric and radiolabeled antibodies to human B lymphocyte restricted differentiation antigen for treatment of B cell lymphoma
US6180377B1 (en) * 1993-06-16 2001-01-30 Celltech Therapeutics Limited Humanized antibodies
US6086875A (en) * 1995-01-17 2000-07-11 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Receptor specific transepithelial transport of immunogens
US6030613A (en) * 1995-01-17 2000-02-29 The Brigham And Women's Hospital, Inc. Receptor specific transepithelial transport of therapeutics
US5731168A (en) * 1995-03-01 1998-03-24 Genentech, Inc. Method for making heteromultimeric polypeptides
US5747035A (en) * 1995-04-14 1998-05-05 Genentech, Inc. Polypeptides with increased half-life for use in treating disorders involving the LFA-1 receptor
US5869046A (en) * 1995-04-14 1999-02-09 Genentech, Inc. Altered polypeptides with increased half-life
US5730977A (en) * 1995-08-21 1998-03-24 Mitsui Toatsu Chemicals, Inc. Anti-VEGF human monoclonal antibody
US6277375B1 (en) * 1997-03-03 2001-08-21 Board Of Regents, The University Of Texas System Immunoglobulin-like domains with increased half-lives
KR100816621B1 (ko) * 1997-04-07 2008-03-24 제넨테크, 인크. 항-ｖｅｇｆ 항체
US20040191256A1 (en) * 1997-06-24 2004-09-30 Genentech, Inc. Methods and compositions for galactosylated glycoproteins
US6172213B1 (en) * 1997-07-02 2001-01-09 Genentech, Inc. Anti-IgE antibodies and method of improving polypeptides
US6194551B1 (en) * 1998-04-02 2001-02-27 Genentech, Inc. Polypeptide variants
US6528624B1 (en) * 1998-04-02 2003-03-04 Genentech, Inc. Polypeptide variants
US6242195B1 (en) * 1998-04-02 2001-06-05 Genentech, Inc. Methods for determining binding of an analyte to a receptor
DK1071700T3 (da) * 1998-04-20 2010-06-07 Glycart Biotechnology Ag Glykosylerings-modifikation af antistoffer til forbedring af antistofafhængig cellulær cytotoksicitet
US7183387B1 (en) * 1999-01-15 2007-02-27 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
US6737056B1 (en) * 1999-01-15 2004-05-18 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
PL209392B1 (pl) * 1999-01-15 2011-08-31 Genentech Inc Przeciwciało, komórka gospodarza, sposób wytwarzania przeciwciała oraz zastosowanie przeciwciała
US6676927B1 (en) * 1999-01-20 2004-01-13 The Rockefeller University Animal model and methods for its use in the selection of cytotoxic antibodies
CA2704600C (en) * 1999-04-09 2016-10-25 Kyowa Kirin Co., Ltd. A method for producing antibodies with increased adcc activity
US6703020B1 (en) * 1999-04-28 2004-03-09 Board Of Regents, The University Of Texas System Antibody conjugate methods for selectively inhibiting VEGF
FR2807767B1 (fr) * 2000-04-12 2005-01-14 Lab Francais Du Fractionnement Anticorps monoclonaux anti-d
JP2003531149A (ja) * 2000-04-13 2003-10-21 ザ・ロツクフエラー・ユニバーシテイ 抗体由来の免疫応答の増強
US20060034830A1 (en) * 2000-06-28 2006-02-16 Gerngross Tillman U Immunoglobulins comprising predominantly a GalGlcNAcMan5GLcNAc2 glycoform
US20060034828A1 (en) * 2000-06-28 2006-02-16 Gerngross Tillman U Immunoglobulins comprising predominantly a GlcNAcMAN5GLCNAC2 glycoform
US20060029604A1 (en) * 2000-06-28 2006-02-09 Gerngross Tillman U Immunoglobulins comprising predominantly a GlcNAc2Man3GlcNAc2 glycoform
US7598055B2 (en) * 2000-06-28 2009-10-06 Glycofi, Inc. N-acetylglucosaminyltransferase III expression in lower eukaryotes
US20060024304A1 (en) * 2000-06-28 2006-02-02 Gerngross Tillman U Immunoglobulins comprising predominantly a Man5GlcNAc2 glycoform
US6946292B2 (en) * 2000-10-06 2005-09-20 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Cells producing antibody compositions with increased antibody dependent cytotoxic activity
US7754208B2 (en) * 2001-01-17 2010-07-13 Trubion Pharmaceuticals, Inc. Binding domain-immunoglobulin fusion proteins
IL157946A0 (en) * 2001-04-02 2004-03-28 Genentech Inc Combination therapy
GB0118662D0 (en) * 2001-07-31 2001-09-19 Univ Southampton Binding agents
CA2463879C (en) * 2001-10-25 2012-12-04 Genentech, Inc. Glycoprotein compositions
US20040093621A1 (en) * 2001-12-25 2004-05-13 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd Antibody composition which specifically binds to CD20
US20060034829A1 (en) * 2001-12-27 2006-02-16 Gerngross Tillman U Immunoglobulins comprising predominantly a MAN3GLCNAC2 glycoform
US20060024292A1 (en) * 2001-12-27 2006-02-02 Gerngross Tillman U Immunoglobulins comprising predominantly a Gal2GlcNAc2Man3GlcNAc2 glycoform
US20040002587A1 (en) * 2002-02-20 2004-01-01 Watkins Jeffry D. Fc region variants
US8188231B2 (en) * 2002-09-27 2012-05-29 Xencor, Inc. Optimized FC variants
US20040132101A1 (en) * 2002-09-27 2004-07-08 Xencor Optimized Fc variants and methods for their generation
US7317091B2 (en) * 2002-03-01 2008-01-08 Xencor, Inc. Optimized Fc variants
US20070148171A1 (en) * 2002-09-27 2007-06-28 Xencor, Inc. Optimized anti-CD30 antibodies
US20080152649A1 (en) * 2002-03-01 2008-06-26 Xencor, Inc. Optimized igf-1r antibodies and methods of using the same
US7662925B2 (en) * 2002-03-01 2010-02-16 Xencor, Inc. Optimized Fc variants and methods for their generation
CA2481925A1 (en) * 2002-04-09 2003-10-16 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Therapeutic agent for patients having human fc.gamma.riiia
US7217797B2 (en) * 2002-10-15 2007-05-15 Pdl Biopharma, Inc. Alteration of FcRn binding affinities or serum half-lives of antibodies by mutagenesis
US7361740B2 (en) * 2002-10-15 2008-04-22 Pdl Biopharma, Inc. Alteration of FcRn binding affinities or serum half-lives of antibodies by mutagenesis
TWI335821B (en) * 2002-12-16 2011-01-11 Genentech Inc Immunoglobulin variants and uses thereof
CA2512729C (en) * 2003-01-09 2014-09-16 Macrogenics, Inc. Identification and engineering of antibodies with variant fc regions and methods of using same
US8084582B2 (en) * 2003-03-03 2011-12-27 Xencor, Inc. Optimized anti-CD20 monoclonal antibodies having Fc variants
US20090010920A1 (en) * 2003-03-03 2009-01-08 Xencor, Inc. Fc Variants Having Decreased Affinity for FcyRIIb
DK1641823T3 (da) * 2003-06-12 2011-12-12 Lilly Co Eli GLP-1-analog fusionsproteiner
US20050106667A1 (en) * 2003-08-01 2005-05-19 Genentech, Inc Binding polypeptides with restricted diversity sequences
US7758859B2 (en) * 2003-08-01 2010-07-20 Genentech, Inc. Anti-VEGF antibodies
AU2004266159A1 (en) * 2003-08-22 2005-03-03 Biogen Idec Ma Inc. Improved antibodies having altered effector function and methods for making the same
AU2004273791A1 (en) * 2003-09-05 2005-03-31 Genentech, Inc. Antibodies with altered effector functions
GB0324368D0 (en) * 2003-10-17 2003-11-19 Univ Cambridge Tech Polypeptides including modified constant regions
EP1701979A2 (en) * 2003-12-03 2006-09-20 Xencor, Inc. Optimized antibodies that target the epidermal growth factor receptor
EP1697748A4 (en) * 2003-12-22 2007-07-04 Centocor Inc METHODS FOR GENERATING MULTIMEDIA MOLECULES
US20060018911A1 (en) * 2004-01-12 2006-01-26 Dana Ault-Riche Design of therapeutics and therapeutics
AU2005206277B2 (en) * 2004-01-22 2011-06-23 Merck Patent Gmbh Anti-cancer antibodies with reduced complement fixation
US20060009360A1 (en) * 2004-06-25 2006-01-12 Robert Pifer New adjuvant composition
AU2005285347A1 (en) * 2004-08-19 2006-03-23 Genentech, Inc. Polypeptide variants with altered effector function
US20060074225A1 (en) * 2004-09-14 2006-04-06 Xencor, Inc. Monomeric immunoglobulin Fc domains
WO2006036834A2 (en) * 2004-09-24 2006-04-06 Amgen Inc. MODIFIED Fc MOLECULES
AU2005335714B2 (en) * 2004-11-10 2012-07-26 Macrogenics, Inc. Engineering Fc antibody regions to confer effector function
US8367805B2 (en) * 2004-11-12 2013-02-05 Xencor, Inc. Fc variants with altered binding to FcRn
US20070135620A1 (en) * 2004-11-12 2007-06-14 Xencor, Inc. Fc variants with altered binding to FcRn
US8802820B2 (en) * 2004-11-12 2014-08-12 Xencor, Inc. Fc variants with altered binding to FcRn
WO2007008943A2 (en) * 2005-07-08 2007-01-18 Xencor, Inc. Optimized anti-ep-cam antibodies
US7923538B2 (en) * 2005-07-22 2011-04-12 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd Recombinant antibody composition
JP5913980B2 (ja) * 2008-10-14 2016-05-11 ジェネンテック， インコーポレイテッド 免疫グロブリン変異体及びその用途

Also Published As

Publication number Publication date
US20110086050A1 (en) 2011-04-14
CA2463879C (en) 2012-12-04
HUP0600342A2 (en) 2006-08-28
DE60232265D1 (de) 2009-06-18
ATE430580T1 (de) 2009-05-15
JP2005532253A (ja) 2005-10-27
CN100423777C (zh) 2008-10-08
US20030157108A1 (en) 2003-08-21
EP1443961B1 (en) 2009-05-06
DK1443961T3 (da) 2009-08-24
HK1076388A1 (zh) 2006-01-20
KR100988949B1 (ko) 2010-10-20
US20070020260A1 (en) 2007-01-25
HUP0600342A3 (en) 2011-03-28
JP2014076997A (ja) 2014-05-01
EP1443961A2 (en) 2004-08-11
AU2002337935B2 (en) 2008-05-01
EP1443961A4 (en) 2005-11-23
US20100255013A1 (en) 2010-10-07
CA2463879A1 (en) 2003-05-01
BR0213761A (pt) 2005-04-12
ES2326964T3 (es) 2009-10-22
IL161412A0 (en) 2004-09-27
JP2010248228A (ja) 2010-11-04
US20080095762A1 (en) 2008-04-24
KR20040066105A (ko) 2004-07-23
WO2003035835A3 (en) 2003-10-16
IL220142A0 (en) 2012-07-31
PL372709A1 (pl) 2005-07-25
WO2003035835A2 (en) 2003-05-01
NZ532526A (en) 2007-01-26
MXPA04003798A (es) 2004-07-30
CN1607960A (zh) 2005-04-20

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR100988949B1 (ko) 당단백질 조성물
AU2002337935A1 (en) Glycoprotein compositions
US20220002430A1 (en) Immunoglobulin variants and uses thereof
ZA200701715B (en) Polypeptide variants with altered effector function
KR20080032065A (ko) 푸코실화 수준이 조절된 항체의 생성 방법
JP2002510481A (ja) 抗体変異体及びその断片
ZA200403000B (en) Glycoprotein compositions.
HK1076388B (en) Glycoprotein compositions
HK1156047A (en) Immunoglobulin variants and uses thereof
HK1074208B (en) Immunoglobulin variants and uses thereof
HK1120058A (en) Immunoglobulin variants and uses thereof
HK1154871A (en) Immunoglobulin variants and uses thereof
HK1129406B (en) Immunoglobulin variants and uses thereof
HK1129406A (zh) 免疫球蛋白變體及其用途