RS55237B1 - Fenotiazin diaminijum soli i njihova primena - Google Patents

Fenotiazin diaminijum soli i njihova primena

Info

Publication number
RS55237B1
RS55237B1 RS20160880A RSP20160880A RS55237B1 RS 55237 B1 RS55237 B1 RS 55237B1 RS 20160880 A RS20160880 A RS 20160880A RS P20160880 A RSP20160880 A RS P20160880A RS 55237 B1 RS55237 B1 RS 55237B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
compound
use according
lmt
disease
treatment
Prior art date
Application number
RS20160880A
Other languages
English (en)
Inventor
Colin Marshall
Scott Clunas
John Mervyn David Storey
James Peter Sinclair
Thomas Craven Baddeley
Ahtsham Ishaq
Michael Simpson
Craig Williamson
Barry Alan Wood
Claude Michel Wischik
Charles Robert Harrington
Janet Elizabeth Rickard
David Horsley
Yin Sze Loh
Karrar Ahmad Khan
Christopher Paul Larch
Original Assignee
Wis Ta Laboratories Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Wis Ta Laboratories Ltd filed Critical Wis Ta Laboratories Ltd
Publication of RS55237B1 publication Critical patent/RS55237B1/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D279/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one nitrogen atom and one sulfur atom as the only ring hetero atoms
    • C07D279/10—1,4-Thiazines; Hydrogenated 1,4-thiazines
    • C07D279/14—1,4-Thiazines; Hydrogenated 1,4-thiazines condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D279/18—[b, e]-condensed with two six-membered rings
    • C07D279/20—[b, e]-condensed with two six-membered rings with hydrogen atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/54—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one sulfur as the ring hetero atoms, e.g. sulthiame
    • A61K31/5415—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one sulfur as the ring hetero atoms, e.g. sulthiame ortho- or peri-condensed with carbocyclic ring systems, e.g. phenothiazine, chlorpromazine, piroxicam
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0053—Mouth and digestive tract, i.e. intraoral and peroral administration
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/20—Pills, tablets, discs, rods
    • A61K9/2095—Tabletting processes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A61P21/02—Muscle relaxants, e.g. for tetanus or cramps
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A61P21/04—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system for myasthenia gravis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A61P33/02—Antiprotozoals, e.g. for leishmaniasis, trichomoniasis, toxoplasmosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A61P33/02—Antiprotozoals, e.g. for leishmaniasis, trichomoniasis, toxoplasmosis
    • A61P33/06—Antimalarials
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D279/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings having one nitrogen atom and one sulfur atom as the only ring hetero atoms
    • C07D279/10—1,4-Thiazines; Hydrogenated 1,4-thiazines
    • C07D279/14—1,4-Thiazines; Hydrogenated 1,4-thiazines condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D279/18—[b, e]-condensed with two six-membered rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/20—Pills, tablets, discs, rods
    • A61K9/28—Dragees; Coated pills or tablets, e.g. with film or compression coating
    • A61K9/2893—Tablet coating processes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2/00—Disinfection or sterilisation of materials or objects, in general; Accessories therefor
    • A61L2/02—Disinfection or sterilisation of materials or objects, in general; Accessories therefor using physical processes
    • A61L2/08—Radiation
    • A61L2/084—Visible light
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61L—METHODS OR APPARATUS FOR STERILISING MATERIALS OR OBJECTS IN GENERAL; DISINFECTION, STERILISATION OR DEODORISATION OF AIR; CHEMICAL ASPECTS OF BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES; MATERIALS FOR BANDAGES, DRESSINGS, ABSORBENT PADS OR SURGICAL ARTICLES
    • A61L2103/00—Materials or objects being the target of disinfection or sterilisation
    • A61L2103/05—Living organisms or biological materials
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C303/00—Preparation of esters or amides of sulfuric acids; Preparation of sulfonic acids or of their esters, halides, anhydrides or amides
    • C07C303/32—Preparation of esters or amides of sulfuric acids; Preparation of sulfonic acids or of their esters, halides, anhydrides or amides of salts of sulfonic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C309/00—Sulfonic acids; Halides, esters, or anhydrides thereof
    • C07C309/01—Sulfonic acids
    • C07C309/02—Sulfonic acids having sulfo groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C309/03—Sulfonic acids having sulfo groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic saturated carbon skeleton
    • C07C309/04—Sulfonic acids having sulfo groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic saturated carbon skeleton containing only one sulfo group
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C309/00—Sulfonic acids; Halides, esters, or anhydrides thereof
    • C07C309/01—Sulfonic acids
    • C07C309/02—Sulfonic acids having sulfo groups bound to acyclic carbon atoms
    • C07C309/03—Sulfonic acids having sulfo groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic saturated carbon skeleton
    • C07C309/05—Sulfonic acids having sulfo groups bound to acyclic carbon atoms of an acyclic saturated carbon skeleton containing at least two sulfo groups bound to the carbon skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C309/00—Sulfonic acids; Halides, esters, or anhydrides thereof
    • C07C309/01—Sulfonic acids
    • C07C309/28—Sulfonic acids having sulfo groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of a carbon skeleton
    • C07C309/29—Sulfonic acids having sulfo groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of a carbon skeleton of non-condensed six-membered aromatic rings
    • C07C309/30—Sulfonic acids having sulfo groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of a carbon skeleton of non-condensed six-membered aromatic rings of six-membered aromatic rings substituted by alkyl groups
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
    • C07C309/00—Sulfonic acids; Halides, esters, or anhydrides thereof
    • C07C309/01—Sulfonic acids
    • C07C309/28—Sulfonic acids having sulfo groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of a carbon skeleton
    • C07C309/33—Sulfonic acids having sulfo groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of a carbon skeleton of six-membered aromatic rings being part of condensed ring systems
    • C07C309/34—Sulfonic acids having sulfo groups bound to carbon atoms of six-membered aromatic rings of a carbon skeleton of six-membered aromatic rings being part of condensed ring systems formed by two rings
    • C07C309/35—Naphthalene sulfonic acids
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • AIDS & HIV (AREA)
  • Psychology (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen- Or Sulfur-Containing Heterocyclic Ring Compounds With Rings Of Six Or More Members (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Description

OBLAST TEHNIKE
[0001]Ovaj pronalazak se uglavnom odnosi na oblast fenotiazin jedinjenja, posebno određenih fenođazin diaminijum soli, uključujući njihovu upotrebu i njihove sastave. U nekim aspektima pronalazak se odnosi na bisfsulfonsku kiselinu) soli jedinjenja diaminofenotiazina kao što su Af./V.iV'.iV'-tetrametil-lOH-fenotiazin-3,7-diaminom. Jedinjenja ovog pronalaska su korisni, na primer, u lečenju taupatija kao što su Alchajmerova bolest (AD).
POZADINA
[0002]Određeni broj patenata i publikacija su ovde citirani, kako bi se potpunije opisao i obelodanio pronalazak i stanje tehnike na koje se pronalazak odnosi.
[0003]U ovom opisu, uključujući patentne zahteve koji slede, osim ako kontekst ne zahteva drugačije, reč „obuhvata" i varijacije kao što su „sadrži" i „sastoji" treba da se shvate u smislu uključivanja navedenih celina ili koraka ili grupe celina ili koraka, ali istovremeno neće isključivati bilo koju drugu celinu ili korak ili celine ili korake.
[0004]Mora se napomenuti da, kako se koristi u specifikaciji i patentnim zahtevima, oblici jednine uključuju pluralne oblike osim ako kontekst jasno ne nalaže drugačije. Tako, na primer, pozivanje na „farmaceutski nosač" obuhvata smese dva ili više takvih nosača, i slično.
[0005]Rasponi su često ovde dati kao „oko" jedne određene vrednosti, i/ili „oko" druge određene vrednost. Kad je takav raspon dat, drugo otelotvorenje obuhvata od jedne određene vrednosti i/ili druge određene vrednosti. Slično, kada su vrednosti izražene kao aproksimacija, upotrebom, prethodnog „otprilike", podrazumeva se da određene vrednosti formiraju drugo otelotvorenje.
[0006]Svi podnaslovi su ovde uključeni samo kao pogodnost, i ne mogu tumačiti kao ograničavanje obelodanjenja na bilo koji način.
[0007]Uslove demencije često karakteriše progresivna akumulacija unutarćelijskih i/ili izvanćelijskih naslaga proteinskih struktura, kao što su B-amiloidni plakovi i neurofibrilni čvorovi (NFT) u mozgovima obolelih pacijenata. Pojava ovih lezija uglavnom se podudara sa patološkom neurofibrilarnom degeneracijom i atrofijom mozga, kao i sa slabljenjem kognitivnih sposobnosti (pogledati, npr. Mukaetova-Ladinska, E.B. et al., 2000, Am. J. Pathol., Vol. 157, No. 2, pp. 623-636).
[0008]Kod Alchajmerove bolesti neuritski plakovi i NFT sadrže uparene helikoidalne filamente (PHF), čiji je glavni sastojak protein tau povezan sa mikrotubulama (pogledati, npr. VVischik et al., 1988, PNAS USA, Vol. 85, pp. 4506-4510). Plakovi sadrže vanćelijske P-amiloidne fibrile dobijene od abnormalnog procesuiranja amiloid prekursor proteina (APP) (pogledati, na primer, Kang et al., 1987, Nature, Vol. 325, p. 733). Članak od VVischik et al. (u 'Neurobiologv of Alchajmer's Disease', 2nd Edition, 2000, Eds. Dawbarn, D. and Allen, S.J., The Molecular and Cellular Neurobiologv Series, Bios Scientific Publishers, Oxford) detaljno raspravlja pretpostavljenu ulogu tau proteina kod patogeneze neurodegenerativnih demencija. Gubitak normalnog oblika tau, akumulacija patoloških PHF-a i gubitak sinapsi središnjeg frontalnog korteksa su svi u korelaciji sa pripadajućim kognitivnim oštećenjima. Dalje, gubitak sinapsi i gubitak piramidalnih ćelija korelira sa morfometrijskim merama tau-reaktivne neurotibrilarne patologije, koji se poklapa, na molekularnom nivou, sa gotovo potpunom preraspodelom tau proteina od rastvorljivog do polimeriziranog oblika (tj. PHF) u Alchajmerovoj bolesti.
[0009]Tau postoji u alternativno povezanim izo-oblicima, koji sadrže tri ili četiri kopije ponovljene sekvence koja odgovara mikrotubulom veznom domenu (pogledati, npr. Goedert, M., et al, 1989, EMBO J., Vol. 8, pp. 393-399; Goedert, M., et al., 1989, Neuron, Vol. 3, pp. 519-526). Tau u PHF je proteolitički prerađen u jezgro domen (pogledati, npr. Wischik, C.M., et al., 1988, PNAS USA, Vol. 85, pp. 4884-4888; VVischik et al., 1988, PNAS USA, Vol. 85, pp. 4506-4510; Novak, M., et al., 1993, EMBO J., Vol. 12, pp. 365-370), koji se sastoji od verzije ponovljenog domena sa pomerenom fazom; samo tri ponavljanja su uključena u stabilnim tau-tau interakcijama (pogledati, na primer, Jakes, R., et al., 1991, EMBO J., Vol. 10, pp. 2725-2729). Jednom formirani, PHF-nalik tau agregati deluju kao seme za daljnje hvatanje i pružaju osnovu proteolitičke obrade tau proteina pune dužine (pogledati, npr. VVischik et al., 1996, PNAS USA, Vol. 93, pp. 11213-11218).
[0010]Pomeranje faze koje se posmatra u ponovljenom domenu tau ugrađenog u PHF sugeriše da ponovljen domen prolazi kroz indukovane promene konformacije tokom uklapanja u vlakno. Tokom nastajanja AD, predviđa se da ova promena konformacije može da se inicira vezivanjem tau za patološki supstrat, kao što su oštećeni ili mutirani membranski proteini (pogledati, na primer, VVischik, C.M., et al., 1997, in 'Microtubule-associated proteins: modifications in disease", Eds. Avila, J., Brandt, R. and Kosik, K. S. (Hanvood Academic Publishers, Amsterdam) pp. 185-241).
[0011]U toku njihovog oblikovanja i akumulacije, PHF se najpre skuplja da formira amorfne agregate unutar citoplazme, verovatno od ranih tau oligomera koji postaju skraćeni pre ili u toku, PHF skupljanja (videti, npr., Mena, R., et al., 1995, Acta Neuropathol., Vol. 89, pp. 50-56; Mena, R., et al., 1996, Acta Neuropathol., Vol. 91, pp. 633-641). Ta vlakna zatim formiraju klasične intraćelijske NFT. U tom stanju, PHF se sastoje od jezgre od krnjeg tau i pomućenog spoljnog sloja koji sadrži tau pune dužine (pogledati, na primer, VVischik et al., 1996, PNAS USA, Vol, 93, pp 11213-11218). Postupak sklapanja je eksponencijalan, konzumira ćelijsku izvor taua koji normalno funkcionišu i izaziva novu sintezu tau kako bi se nadoknadio deficit (pogledati, npr. Lai, R. Y. K., et al., 1995, Neurobiologv of Ageing, Vol. 16, No. 3, pp. 433-445). Na kraju, funkcionalni poremećaj neurona napreduje do tačke ćelijske smrti, ostavljajući iza sebe vanćelijski NFT. ćelijska smrt je u uskoj vezi sa brojem vanćelijskih NFT (pogledati, npr. VVischik et al., in 'Neurobiologv of Alchajmer's Disease', 2nd Edition, 2000, Eds. Dawbarn, D. and Allen, S.J., The Molecular and Cellular Neurobiologv Series, Bios Scientific Publishers, Oxford). Budući da su čvorovi ekstrudovani u vanćelijski prostor postoji progresivni gubitak nejasnog spoljnog sloja neurona sa odgovarajućim gubitkom N-izrazalne tau imunoreaktivnosti, ali uz očuvanje tau imunoreaktivnosti povezane sa PHF jezgrom (pogledati, npr. Bondareff, W. et al., 1994, J. Neuropath. Exper. Neurol., Vol. 53, No. 2, pp. 158-164).
Jedinjenja diaminofenotiazina
[0012]Metitioninijum hlorid (MTC) (takođe poznat kao metilensko plavo (MB), metiltionin hiorid; tetrametiltionin hlorid, 3,7-bis(dimetilamino)fenotiazin-5-ijum hlorid, CI. osnovno plavo 9; tetrametiltionin hlorid; 3,7bis (dimetilamino) phenazathionijum hlorid; Švajcarsko plavo; CI. 52015, CI. rastvor plavo 8-anilin ljubičasto i Urolene Blue®) je niske molekularne težine (319,86), rastvorljivo u vodi, tricikličko organsko jedinjenje sljedeće formule:
Metitioninijum hlorid (MTC) je dobro poznata fenotiazin boja i redoks indikator, a takođe je korišćen kao optička sonde biofizikalnih sistema, kao interkalator kod nanoporoznih materijala, kao redoks posrednik, i pri fotoelektrohromnog snimanja.
Metitioninijum hlorid (MTC) i drugi diaminofenotiazins su opisani kao inhibitori agregacije proteina kod bolesti kod kojih proteini agregiraju patološki.
[0013]Posebno, diaminopenothiazini koji uključuju MTC pokazali su da inhibiraju agregaciju tau proteina i ometaju strukturu PHF i preokreću proteolitičku stabilnost PHF jezgra (pogledati, na primer, VVO 96/30766, HofmannLa Roche). Takva jedinjenja opisana su za upotrebu u lečenju ili profilaksi raznih bolesti, uključujući Alchajmerovu bolest.
[0014]VVO2007/110630 (VVisTa Laboratories Ltd) takođe opisuje određena specifična diaminofenotiazin jedinjenja koja se odnose na MTC, uključujući ETC, DEMTC, DMETC, DEETC, MTZ, ETZ, MTI, MTILHI, ETI, ETLHI, MTN, i ETN, koji su korisni kao lekovi, na primer, pri lečenju Alchajmerove bolesti.
[0015]Osim toga, VVO 2005/030676 (The University Court of the University of Aberdeen) diskutuje radioaktivno obilježene fenotiazine, i njihovu primenu u dijagnostici i terapiji, na primer, taupatija.
[0016]Metitioninijum hlorid (MTC) takođe je opisan za druge medicinske upotrebe. Na primer, on se trenutno koristi za lečenje metemoglobinemije (stanje koje nastaje kada krv ne može da isporuči kiseonik, gde je to potrebno u telu). MTC se koristi se kao medicinska boja (na primer, za bojenje pojedinih delova tela, pre ili tokom operacije); dijagnostički (na primer, kao indikator boja za otkrivanje određenih jedinjenja prisutnih u urinu); blagi mokraćnog antiseptik; stimulans za sluzne površine; lečenje i preventivu za kamen u bubregu; i u dijagnostici i lečenju melanoma.
[0017]MTC se koristi za lečenje malarije, bilo pojedinačno (pogledati, npr. Guttmann, P. and Ehrlich, P., 1891, "Uber die wirkung des methvlenblau bei malaria," Beri. Klin. VVoschenr., Vol. 28, pp. 953-956) ili u kombinaciji s klorokinom (pogledati, npr. Schirmer, H., et al., 2003, "Methvlene blue as an antimaiarial agent," Redox Report, Vol. 8, pp. 272-275; Rengelshausen, J., et al., 2004, "Pharmacokinetic interaction of chloroquine and methvlene blue combination against malaria," European Journal of Clinical Pharmacologv, Vol. 60, pp. 709-715).
[0018]MTC (pod imenom Virostatd*1, od Bioenvision Inc., New York) je takođe pokazao jaku virucidnu aktivnost in vitro. Specifično, VirostatcD je delotvoran protiv virusa poput HlV-a i virusa zapadnog Nila u laboratorijskim testovima. Virostat® je trenutno u kliničkim ispitivanjima za lečenje hroničnog hepatitisa C, virusne infekcije jetre. Virus, HCV, je glavni uzrok akutnog hepatitisa i hronične bolesti jetre, uključujući cirozu i rak jetre.
[0019]MTC, u kombinaciji sa svetlom, može takođe sprečiti replikaciju nukleinske kiseline (DNA ili RNA). Plazma, trombociti i crvene krvne ćelije ne sadrže nuklearne DNK ili RNK. Kada se MTC uvede u kivne komponente, on prolazi bakterijske ćelijske zidove ili virusne membrane i zatim prelazi u unutrašnjost strukture nukleinske kiseline. Kada se aktivira svetlom, jedinjenje se vezuje na nukleinsku kiselinu virusnog ili bakterijskog patogena, Čime sprečava replikaciju DNA ili RNA. Zato što MTC može deaktivirati patogene, ona ima potencijal da smanji rizik od prenosa patogena koji bi ostali neprimećeni testiranjem.
[0020]Oralne i parenteralne formulacije MTC su komercijalno dostupne u Sjedinjenim Američkim Državama, obično pod nazivom Urolene Blue®.
Redukovani Pleuko') oblici
[0021]MTC, fenotiazin-5-ijum so, može da se smatra za „oksidovan oblik" u odnsti na odgovarajuće 10H-fenotiazin jedinjenje, N,N,N',N'-tetrametil-10H-fenotiazin-3,7-diamin, koji može da se smatra za „redukovan oblik":
[0022]„Rredukovan oblik" (ili „leuko oblik") je poznat da je nestabilan i može lako i brzo da oksidira kako bi se dobio odgovarajući „oksidovan" oblik.
[0023]May et al. (Am J Phvsiol Cell Phvsiol, 2004, Vol. 286, pp. C1390-C1398) pokazali su da ljudski eritrociti sekvencijalno smanjuju i zauzimaju MTC; da sami MTC nisu uzeti od strane ćelija; da je redukovan oblik MTC onaj koji prolazi kroz ćelijsku membranu; da je stopa apsorpcije enzima zavisna; da su MTC i redukovani MTC koncentrisani u ćelijama (redukovani MTC se ponovno uravnotežuje kada se nađe unutar ćelije da oblikuje MTC).
[0024]MTC i slični lekovi se uzimaju u crevima i ulaze u krvotok. Neapsorbovan lek se sliva do probavnog kanala, do distalnog creva. Jedna važna nuspojava je efekat neapsorbovanog leka u distalnom crevu, npr. senzitizacija distalnog creva i/ili antimikrobni efekati neapsorbovanog leka na floru u distalnom crevu, što dovodi do dijareje. Stoga, poželjno je smanjiti količinu leka koji se sliva u distalno crevo. Povećanjem uzimanje leka u crevima (npr. povećanjem bioraspoloživost leka), doza se može smanjiti, a nuspojave, kao što je dijareja, mogu se poboljšati.
[0025]Budući da se redukovani oblik MTC preuzima od strane ćelija, može biti poželjno davati redukovani oblik pacijentima. To takođe može smanjiti oslanjanje na korak enzimske redukcije koji ograničava brzinu.
[0026]VVO 02/055720 (The Universitv Court of the Universitv of Aberdeen) opisuje upotrebu redukovanih oblika pojedinih diaminofenotiazins za lečenje bolesti koje agregiraju proteina, primarno taupatija.
[0027]VVO2007/110.627 (VVisTa Laboratories Ltd) otkrili određene 3,7-diamino-lOH-phenothiaziniurn soli, delotvorne kao lekovi ili pro-lekovi za lečenje bolesti, uključujući Alchajmerovu bolest. Ova jedinjenja su takode u „redukovanom" ili „leuko" obliku kada se posmatraju u odnosu na MTC. Među njima su sledećc soli:
[0028]Iako daje određene prednosti nad upotrebom MTC, sinteza LMT.2HC1 pod određenim uslovima može dovesti do zarobljavanja CH3C1 unutar kristala. To zatim treba ukloniti jer je CH3C1 otrovan, i nivoe treba držati ispod bezbednih nivoa.
[0029]Dalje. LMT.2HBr sadrži jone bromida. To je po pravilu manje poželjno jer je bromid toksičan pri visokim nivoima ili hroničnom doziranju, i na nižim nivoima, može uzrokovati nuspojave kao što je zbunjenost kod pacijenata.
[0030]N,N,N')N'-tetrametil-10H-fenotiazin-3,7-diaminijum bis (metansulfonat) (LMT.2MsOH) je obelodanjen od strane Chemical Abstracts s registarskim brojema 1236208-20-0 iz 2010. godine.
[0031]Stoga može da se vidi da bi pružanje daljih soli metiltioninijum jedinjenja za upotrebu u postupku lečenja ili profilakse ljudskog ili životinjskog tela primenom terapije, koji imaju jednu ili više željenih svojstava u odnosu na one već poznate, dalo doprinos struci.
[0032]Dalje, pružanje novih formulacija metiltioninijum jedinjenja za upotrebu u postupku lečenja ili profilakse ljudskog ili životinjskog tela terapijom koja bi se poboljšala stabilnost, apsorpciju i \ ili na drugi način poboljšala njihovu delotvornost kao terapeutskih sredstava, takođe bi dalo doprinos struci.
SAŽETAK PRONALASKA
[0033]Pronalazači have su identifikovali novu klasu stabilnih fenotiazin diaminijum jedinjenja za primenu u postupku tretmana ili profilakse ljudskog ili životinjskog tela terapijom koja ima unapređena svojstva u poređenju sa prethodno obelodanjenim diarninofenotiazin jedinjenjima i solima koji se koriste kao farmakološki agensi.
[0034]Svojstva jedinjenja su opisana ovde, čime može da se vidi da u poželjnim otelotvorenjima pronalazak može da pruži jedno ili više unapređeno fizičko, farmakokinetičko, biohemijsko ili drugo korisno svojstvo.
[0035]U jednom aspektu ovaj pronalazak daje jedinjenje koje ima formulu:
ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, solvat, ili hidrat, za primenu u postupku tretmana ili profilakse ljudskog ili životinjskog tela terapijom.
[0036]Ovde su takođe opisani postupci za sintezu gore opisanog jedinjenja.
[0037] Ovde je takođe opisan farmaceutski sastav koji obuhvata jedinjenje kako je opisano ovde i farmaceutski prihvatljiv nosač ili rastvarač.
[0038]Ovde je takođe opisan postupak pripreme farmaceutskog sastava koji obuhvata mešanje jedinjenja kako je opisano ovde i farmaceutski prihvatljivog nosača ili rastvarača.
[0039]Ovde je takođe opisan farmaceutski sastav u čvrstom obliku doziranja, koji obuhvata jedinjenje kako je opisano ovde i dalje koji obuhvata barem jedan rastvarač odgovarajući za suvo kompresovanje, i opciono jedan ili više drugih ekscipijensa.
[0040]Ovde je takođe opisan proces za proizvodnju farmaceutskog sastava putem postupka suvog kompresovanja, gde je navedeni sastav čvrst oblik doziranja koji obuhvata jedinjenje kako je opisano ovde, barem jedan rastvarač odgovarajući za suvo kompresovanje, i opciono jedan ili više drugih ekscipijensa.
[0041]Ovde je takođe opisan slobodan, kohezivni prašak, koji obuhvata jedinjenje kako je opisano ovde i barem jedan rastvarač odgovarajući za suvo kompresovanje, i opciono jedan ili više drugih ekscipijensa, gde je navedeni prašak u stanju da se kompresuje u čvrst oblik doziranja.
[0042]Ovde je takođe opisan postupak preusmeravanja i/ili inhibiranja agregacije proteina (npr., tau proteina, sinukleina, itd.,), na primer, agregiranjem proteina povezanog sa neurodegenerativnim bolestima i/ili kliničkom demencijom, koji obuhvata dovođenje u dodir proteina sa delotvornom količinom jedinjenja ili sastava kako je opisano ovde. Takav postupak može da se obavi in vitro, ili in vivo.
[0043]Ovde je takođe opisan postupak tretmana ili profilakse bolesnog stanja kod pacijenta koji obuhvata davanje navedenom pacijentu profilaktički ili terapetuski delotvorne količine jedinjenja kako je opisano ovde, poželjno u obliku farmaceutskog sastava, poželjno farmaceutski sastav u čvrstom obliku doziranja, kako je dalje opisano ovde.
[0044]Ovde je takođe opisana primena jedinjenja ili sastava kako je opisano ovde, u proizvodnji lekova za primenu u tretmanu ili profilaksi bolesnog stanja.
[0045] U nekim otelotvorenjima, bolesno stanje je bolest agregiranja proteina.
U nekim otelotvorenjima, bolesno stanje je tauopatija, npr., neurodegenerativna tauopatija, npr., Alchajmerova bolest ili druga ovde opisana bolest.
U nekim otelotvorenjima, bolesno stanje je rak kože, npr., melanom.
U nekim otelotvorenjima, bolesno stanje je virusno, bakterijsko ili protozoalno bolesno stanje, npr., Hepatitis C, HIV, virus zapadnog nila (WNV), ili malarija.
[0046]Ovde je takođe opisan postupak deaktiviranja patogena u uzorku (na primer, uzorak krvi ili plazme), koji obuhvata korake uvođenja jedinjenja ili sastava kako je opisano ovde, u uzorak, i zatim izlaganje uzorka svetlosti.
[0047]Ovde je takođe opisan komplet koji obuhvata (a) jedinjenje kako je opisano ovde, poželjno dato kao farmaceutski sastav u odgovarajućem kontejneru i/ili sa odgovarajućim pakovanjem; i (b) instrukcije za primenu, na primer, pisane instrukcije kako primeniti jedinjenje ili sastav.
KRATAK OPIS SKICA
[0048]Slika 1 prikazuje IH NMR spektar primernog jedinjenja pronalaska (LMT.2MsOH) u deuterisanom metanolu (CD3OD) na 600 MHz.
Slika 2 prikazuje<I3>C NMR spektar LMT.2MsOH u CD3OD na frekvenciji od 100,56 MHz.
Slika 3 prikazuje DEPT-135 spektar LMT.2MsOH u CD(OD na frekvenciji od 100,56 MHz.
Slika 4 prikazuje HSQC spektar LMT.2MsOH u CD3OD na frekvenciji od 100,56 MHz.
Slika 5 prikazuje proširenu sekciju HSQC spektra LMT.2MsOH u CD3OD na frekvenciji od 100,56 MHz.
Slika 6 prikazuje infracrveni (FT-IR) spektar LMT.2MsOH (KBr).
Slika 7 prikazuje udar elektrona (EI) maseni spektar LMT.2MsOH.
Slika 8 prikazuje elektrosprej jonizaciju (ESI) maseni spektar LMT.2MsOH.
Slika 9 prikazuje UWVis spektar LMT.2MsOH u dejonizovanoj vodi.
Slika 10 prikazuje HPLC trag za LMT.2MsOH.
Slika 11 prikazuje praškasti rendgenski difraktogram za LMT.2MsOH, meren sa Cu Ka radijacijom.
Slika 12 prikazuje FT-Raman spektar za kristalni LMT.2MsOH. Najsnažniji signali su primećeni na 1615cm"<1>, 1588 cm"<1>1258 cm1, i 1042 cm '.
Slika 13 prikazuje termogravimetrijski profil za kristalni LMT.2MsOH. Konstantne težine su detektovane sa TG i TG-FTIR do početka razgradnje na 240-270 °C.
Slika 14 prikazuje analizu diferencijalne kalorimetrije za kristalni LMT.2MsOH. Oštar m.p. na 271 °C (AH = 87 J/g) je odmah praćen razgradnjom
Slike 15a i 15b prikazuju krivu dinamičke sorpciju pare (DVS) za kristalni LMT.2MsOH mereno na 25 °C sa 5%/h stopom snimanja. Horizontalne isprekidane linije ukazuju na korake uzimanja vode od
jednog ekvivalenta. Stabilna težina uzorka (manje od 0,5% promene težine) je primećena na relativnoj vlažnosti (r.v.) u rasponu između 0% i 70%. Iznad te r.v., uzimanje vode je naglo povećano, i uzorak je na kraju postao tečan. Nakon sušenja, vodeni sadržaj je smanjen ponovo do otprilike 4 ekvivalenta na 50% r.v. DVS kriva kristalne dihidrohlorid soli (LMT.2HC1) is prikazana za poređenje sa isprekidanom linijom, DVS kriva dihidrobromid soli (LMT.2HBr) as tačkastom linijom.
Slika 15c prikazuje dinamičku sorpciju pare (DVS) krive za kristalni LMT.2MsOH kao funkciju vremena. Relativna vlažnost je takođe prikazana (desna osa). Horizontalne isprekidane linije ukazuju na koraje od jednog ekvivalenta uzimanja vode.
Slika 16 prikazuje slike polarizirajućeg mikroskopa za LMT.2MsOH (levo) i rekristalisani LMT.2MsOH (desno). Kristali do 100 mm veličine su dobijeni rekristalizacijom od 2-PrOH/voda. Kristali su nepravilnog oblika.
Slike 17a-c prikazuje rendgenske kristalne strukture od LMTEsOH, LMT.EDSA. i LMT.2MsOH
Slika 18 prikazuje poređenje koncentracija plazme MT dela tokom vremena nakon doziranja LMT.2HBr, LMT.2HC1 i LMT.2MsOH.
Slika 19 je dijagram aparature korisćene u ispitivanjima rastvaranja (pogledati Primer formulisanja 12).
DETALJAN OPIS PRONALASKA
[0049]Pronalazači su identifikovali novu klasu fenotiazin diaminijum jedinjenja koja imaju poželjna fizička ili druga svojstva i/ili iznenađujuće unapređuju aktivnost u poređenju sa prehodno obelodanjenim diaminofenotiazin jedinjenjima i solima.
[0050]U drugim aspektima dodatno su date nove formulacije fenotiazin diaminijum jedinjenja, uključujući (ali ne ogrančavajući se na) gore navedenu klasu.
Jedinjenja
[0051]U opštem smislu, ako kontekst ne nalaže drugačije, jedinjenja opisana ovde mogu se opisati kao bis(sulfonat) soli ili (bis(sulfonska kiselina) soli) od 3,7-diamino-lOH-fenotiazin jedinjenja. Drugim rečima, jedinjenja su soli odgovarajućeg 3,7-diamino-lOH-fenotiazin jedinjenja sa organskm sulfonskim kiselinama.
[0052]Specifičnije, jedinjenje pronalaska je bis(sulfonat) so jedinjenja naredne formule:
ili farmaceutski prihvatljiva so, solvat, ili hidrat za primenu u postupku tretmana ili profilakse ljudskog ili životinjskog tela terapijom.
[0053]Jedinjenja opisana ovde mogu se smatrati za proizvode koji se dobijaju od reakcije 3,7diamino-10H-fenotiazin jedinjenja, na primer kako je dato gore, sa dva organska sulfonska kiselina dela.
[0054]Opisana ovde su jedinjenja opšte formule (I):
gde:
svaki od R' i R<3>je nezavisno izabran iz grupe koju čine: -H, Ci.4alkil, C-Malkenil, i halogenovani G-4alkil;
svaki odR3NAiR3m jenezavisno izabran iz grupe koju čine: -H, CMalkil, C^alkenil, i halogenovani Ct-ialkil;
svaki od R7NA i R7NB je nezavisno izabran iz grupe koju čine: -H, CMalkil, C2-4alkenil, i halogenovani CMalkil;
i gde:
svaki od R<A>i R<B>je nezavisno izabran iz grupe koju čine:
CMalkil, halogenovani CMalkil, i Cs-ioaril;ili
R<A>i R<B>su vezani da obrazuju grupu R<AB>, gde je R<AH>izabran iz grupe koju čine:
G-6 alkilen i Cs-io arilen;
i njegove farmaceutski prihvatljive soli, solvati, i hidrati.
[0055]Jedinjenja opisana ovde su predstavljena ovde opštom formulom koja prikazuje strukturu 3,7diamino-lOJ^-fenotiazin jedinjenja, sa 3,7-diamino grupa u protonovanom obliku.
[0056]Rezultujuća duplo pozitivno naelektrisana vrsta je povezana sa dva sulfonat kontrajon dela {koji mogu opciono biti prisutni na istom molekulu, tj. gde su R<A>i R<l*>vezani):
[0057]Međutim, stručnjak u oblasti će razumeti, da ista so može jednako biti predstavljena na druge načine, kao što su, na primer:
itd.,
So li i solvati
[0058] Iako su jedinjenja opisana ovde sama po sebi soli, mogu takođe biti data u obliku mešane soli (tj., jedinjenje pronalaska u kombinaciji sa drugom soli). Takve mešane soli su namenjene da budu obuhvaćene izrazom ,,i njegove farmaceutski prihvatljive soli". Ukoliko nije drugačije navedeno, referenca na određeno jedinjenje takođe uključuje njegove soli.
[0059]Jedinjenja pronalaska mogu takođe biti data u obliku solvata ili hidrata. Izraz „solvat" se ovde koristi u konvencionalnom smislu da se odnosi na kompleks supstance koja se rastvara (npr., jedinjenje, so jedinjenja) i rastvarač. Ako je rastvarač voda, solvat se može konvencionalno nazvati hidratom, na primer, mono-hidrat, dihidrat, tri-hidrat, itd., Ukoliko nije drugačije navedeno, bilo koja referenca na jedinjenje takođe uključuje njegove solvatne i hidratne oblike.
[0060]Prirodno, solvati ili hidrati soli jedinjenja su takođe obuhvaćeni ovim pronalaskom.
Izocopske varijacije
[0061JU nekim otelotvorenjima, jedan ili više atom ugljenika jedinjenja je "C, UC ili<l4>C.
[0062]U nekim otelotvorenjima, jedan ili više atom ugljenika jedinjenja je "C.
[0063]U nekim otelotvorenjima, jedan ili više atom ugljenika jedinjenja je "C.
[0064]U nekim otelotvorenjima, jedan ili više atom ugljenika jedinjenja jeI4C.
[0065]U nekim otelotvorenjima, jedan ili više atom azota jedinjenja je !5N.
[0066]U nekim otelotvorenjima, jedan ili više ili svi atomi ugljenika od jedne ili više ili svake od grupa R3NAR3NB>R7NA|R7NB_RlR9RAj R<B>je<M>,-L3C>jU )4?
[0067]U nekim otelotvorenjima, jedan ili više ili svi atomi ugljenika od jedne ili više ili svake od grupa RiN\RiNB,R<7>NA i R7NB je "C, l3C, ili,<4>C.
[0068]Pronalazak se odnosi na jedinjenje 1 za primenu u postupku tretmana ili profilakse ljudskog ili životinjskog tela terapijom:
rV,W,iV',/V'-tetrametil-10H-fenotiazin-3,7-diaminijum bis(metansulfonat).
[0069]Ovo jedinjenje može takođe da se navodi kao:
W,iV,W,iV,-tetrametil-10H-fenotiazin-3,7-diamin bis(hidrometansulfonat)
Leuko metiltioninijum bis(hidrometansulfonat)
Leuko metiltioninijum bis(mesilat)
LMTM
LMT.2MsOH
Či stoća
[0070]Jedinjenja ovog pronalaska mogu se konvencionalno opisati kao da su u „stabilnom redukovanom obliku". Jedinjenja oksiduju (npr., autoksiduju) kako bi dala odgovarajuće oksidovane oblike. Stoga, verovatno je, ako ne i neizbežno, da sastavi koji obuhvataju jedinjenja ovog pronalaska sadrže, kao nečistoće, barem malo odgovarajućeg oksidovanog jedinjenja.
[0071]Stoga, drugi aspekt ovog pronalaska odnosi se na jedinjenja kako je opisano ovde, u značajno pročišćenom obliku i/ili u obliku značajno slobodnom od zagađivača (npr., odgovarajuća oksidovana jedinjenja, drugi zagađivači).
[0072]U nekim otelotvorenjima, značajno pročišćen oblik je barem 50% težine čist, npr., barem 60% težine Čist, npr., barem 70% težine čist, npr., barem 80% težine čist, npr., barem 90% težine čist, npr., barem 95% težine čist, npr., barem 97% težine čist, npr., barem 98% težine čist, npr., barem 99% težine čist.
[0073]U nekim otelotvorenjima, zagađivač predstavlja ne više od 50% težine, npr., ne više od 40% težine, npr., ne više od 30% težine, npr., ne više od 20% težine, npr., ne više od 10% težine, npr., ne više od 5% težine, npr., ne više od 3% težine, npr., ne više od 2% težine, npr., ne više od 1% težine.
Postupci proizvoda
[0074] U nekim otelotvorenjima, jedinjenje je ono koje je dobijeno, ili se može dobiti, postupkom kako je opisano ovde.
Hemijska sinteza
[0075] Postupci za hemijsku sintezu jedinjenja ovog pronalaska su opisani ovde. Ovi i/ili drugi dobro poznati postupci mogu se modifikovati i/ili adaptirati na poznate načine kako bi se omogućila sinteza dodatnih jedinjenja unutar opsega ovog pronalaska.
Jedinjenja formule (1):
[0076] mogu se pripremiti od jedinjenja formule (II):
gde R<1>,R9,R3NA,R3<N>B, R7NA, iR<7m>su kako je prethodno definisano.
[0077]Jedinjenja formule (II) mogu se, na primer, pripremiti od jedinjenja formule (III):
Rs R™R'
R ?R(III)
[0083]Prsten amino grupa može se zatim zaštititi, na primer kao acetat, na primer koristeći sirćetni anhidrid i piridin.
[0084] Azotne grupe mogu se zatim redukovati do amino grupa, na primer koristeći tin(II)hloride sa etanolom.
[0085] Amino grupe mogu se zatim supstituisati, na primer disupstituisati, na primer metil disupstituisati, na primer koristeći metil jodid, natrijum hidroksid, DMSO, i tetra-n-butil amonijum bromid, kako bi se dobio IV-acetilom zaštićen 3,7-dialkilamino-lOH-fenotiazin.
[0086] Primeri takvih postupaka su ilustrovani na Šemama 1 i 1 b. Primena bilo kog ili više ovde opisanih reagenasa u postupku je naravno obuhvaćena ovim pronalaskom:
[0087]Amino grupi od ovog AT-acetil meduproizvoda može se zatim ukloniti zaštita, tj. N-acetil grupa može se ukloniti, na primer koristeći vodenu kiselinu.
[0088]Jedinjenja formula (II) i (III) mogu se takođe napraviti koristeći postupke obelodanjene u WO2008/007074. Ovaj dokument obelodanjuje jedinjenja formule (111) i jedinjenja formule (II) gde je R<Proi>acil grupa, na primer acetil grupa.
[0089]U jednom pristupu, odgovarajući tioninijum hlorid (npr., metil tioninijum hlorid, etil tioninijum hlorid, itd) mogu pivo biti redukovani i acilovani kako bi se dobio odgovarajući l-(3,7-bis-dimetilamino-fenotiazin-10-il)-etanon, na primer, reakcijom sa hidrazinom (NH2NH2), metil hidrazinom (MeNHNFh), ili natrijum borohidridom (NaBhU); i sirćetni anhidrid ((FhCCOhO); na primer, u prisustvu odgovarajuće baze, na primer, piridina (CsPbN) ili Hunigove baze (diizopropiletilamine, CsHisN), na primer, u odgovarajući rastvarač, na primer, etanol ili acetonitril. Redukovanom i acilovanom jedinjenju (formule (III)) može se zatim ukloniti zaštita (uklanjanjem acetil grupe), na primer reakcijom sa odgovarajućom kiselinom, kako bi se dobilo jedinjenje formule (II) ili se može koristiti direktno. Poželjno, ova reakcija može dati proizvod sa visokim stepenom čistoće.
[0090]Primer je prikazan u narednoj šemi.
[0091]U drugom pristupu, odgovarajuća tioninijum so, na primer, etil tioninijum polu cink hlorid, može se istovremeno redukovanti i protektovati amino prsteno grupa, na primer, reakcijom sa redukujućim agensom fenilhidrazinom, etanolom, sirćetnim anhidridom, i piridinom.
[0092]Primer je prikazan u narednoj šemi:
[0093]Obelodanjenje ovde stoga daje postupak pripreme 3,7-diamino-10H-fenotiazin jedinjenja formule (I): od jedinjenja formule (II):
gde suRA,R<B>,R<1>,R9,R3<NA>, R3NBR7<NA>, iR7N<B>kako je prethodno definisano.
[0094]U nekim otelotvorenjima, postupak obuhvata korak:
formiranja soli (SF).
[0095]U nekim otelotvorenjima, formiranje soli (SF) obuhvata tretman jedinjenja formule (II) sa odgovarajućom sulfonskom kiselinom.
[0096]U nekim otelotvorenjima, formiranje soli obuhvata tretman rastvora jedinjenja formule (U) sa odgovarajućom sulfonskom kiselinom, u organskom rastvaraču.
[0097]Obelodanjenje ovde daje postupak pripreme 3,7-diamino-lOH-fenotiazin jedinjenja formule (I): od jedinjenje formule (III):
gde su R<A>, R<B>, R1,R9,R3NA,R3N<B>,R7N<A>, i R<7NB>kako je prethodno definisano i gde jeRPr<01>amin zaštitna grupa.
[0098]Širok izbor od amin zaštitnih grupa se široko koriste i dobro su poznate u organskoj sintezi. Pogledati, na primer, Protective Groups in Organic Svnthesis (T. Green and P. Wuts; 4th Edition; John Wiley and Sons, 2006).
[0099]U nekim otelotvorenjima, amin zaštitna grupa je zaštitna grupa koja može da se odvoji kiselinom.
[0100]U nekim otelotvorenjima, amin zaštitna grupa je acil grupa, kao Što je acetil grupa.
[0101]U nekim otelotvorenjima, postupak obuhvata korake:
uklanjanja zaštite amino prstena (DP); i
formiranja soli (SF).
[0102]Uklanjanje zaštite amino prstena (DP) obuhvata uklanjanje zaštitne grupe kako bi se N-zaštićena amino prsten grupa (-NR<Ht01->) pretvorila u slobodnu amino prsten grupu (-NH-). Uklanjanje zaštite jedinjenja formule (III) daje odgovarajuće jedinjenje formule (II).
[0103]Postupci za uklanjanje amin zaštitne grupe su poznati u struci. Pogledati, na primer, Protective Groups in Organic Svnthesis (T. Green and P. Wuts; 4th Edition; John Wtley and Sons, 2006).
[0104]U nekim otelotvorenjima, korak uklanjanja zaštite amino prstena (DP) i korak ođ formiranja soii (SF) su obavljeni istovremeno (tj., kao jedan korak), na primer:
[0105]U nekim otelotvorenjima, istovremeno uklanjanje zaštite amino prstena (DP) i formiranja soli (SF) obuhvata tretman jedinjenja formule (III) sa odgovarajućom sulfonskom kiselinom, kako bi se dobila bis(sulfonat) so formule (I).
[0106]U nekim otelotvorenjima, istovremeno uklanjanje zaštite amino prstena i formiranje soli mogu da obuhvataju tretman rastvora jedinjenja formule (III) u organskom rastvaraču sa sulfonskom kiselinom i vodom.
[0107]U nekim otelotvorenjima, organski rastvarač je toluen.
[0108]U postupcima opisanim ovde, sulfonska kiselina može se izabrati iz grupe koju čine alkilsulfonske kiseline i arilsulfonske kiseline. Sulfonska kiselina može biti formule RASO3H ili RBSChH, gde su R<A>i R" kako su definisani ovde.
[0109]U nekim otelotvorenjima, sulfonska kiselina može biti disulfonska kiselina. Tj. jedinjenje koje sadrži dva dela sulfonske kiseline po molekulu. Ti delovi sulfonske kiseline mogu biti vezani npr. alkilen ili arilen grupom.
[0110]U nekim otelotvorenjima sulfonska kiselina može se izabrati iz grupe koju čine: metansulfonska kiselina (MsOH), etansulfonska kiselina (EsOH), benzensulfonska kiselina (BSA), naftalensulfonska kiselina (NSA), p-toluensulfonska kiselina (TsOH), etandisulfonska kiselina (EDSA), propandisulfonska kiselina (PDSA) i naftalen-l,5-disulfonska kiselina (NDSA).
[0111]U nekim otelotvorenjima, fenotiazinski početni materijal (tj. jedinjenje formule (Hl) je pivo zagrejan u navedenom organskom rastvarač dok nije potpuno rastvoren i rezultujući rastvor je filtriran pre dodavanja reagensa (tj. sulfonska kiselina i voda).
[0112]U nekim otelotvorenjima, jedinjenje je zagrejano u navedenom organskom rastvaraču na temperaturi od oko 60-80 °C, na primer na temperaturi od oko 70 °C.
[0113]U nekim otelotvorenjima, sulfonska kiselina je dodata u količini od barem 2 molarna ekvivalenta, na primer oko 2,2 molarna ekvivalenta, relativno u odnosu na fenotiazinski početni materijal. Ako je disulfonska kiselina korišćena, shvatiće se da će molarna količina kiseline biti barem 1 molarni ekvivalent, na primer oko 1,1 molamog ekvivalenta, kako bi se postigao isti broj dela sulfonske kiseline po molekulu fenotiazinskog početnog materijala.
[0114]Može biti poželjno dodati sulfonsku kiselinu polako kako bi se sprečio rast temperature (egzoterm). Stoga, u nekim otelotvorenjima, sulfonska kiselina je dodata postepeno. U nekim otelotvorenjima, sulfonska kiselina je dodata na temperaturi od oko 15-25 °C.
[0115]U nekim otelotvorenjima, nakon dodavanja sulfonske kiseline i vode, reakcija je zagrejana do temperatura od oko 80-90 °C.
U nekim otelotvorenjima, reakcija je održavana na ovoj temperaturi dok nije procenjena gotovom, npr. hromatografskom analizom.
[0116]U nekim otelotvorenjima, nakon reakcije, rastvor je tretiran sa kontra rastvaračom do taloženja proizvoda. U nekim otelotvorenjima, kontra rastvarač je alkohol, na primer etanol.
[0117]Može biti poželjno „posejati" reakcionu smesu sa malom količinom, na primer, oko 1 mg po gramu početnog materijala (jedinjenje formule (II), od željenog bis(sulfonat) proizvoda. Bez želje da se ograniči teorijom, smatra se da sejanje osigurava rano i efikasno taloženje željenog proizvoda, smanjujući mogućnost za moguće neželjene reakcije i stvaranje nusproizvoda. Za sejanje se takođe misli da je od koristi pri kontrolisanju veličine čestica taloženog proizvoda.
[0118] Stoga u nekim otelotvorenjima, nakon reakcije, rezultujuća smesa je posejana sa malom količinom željene bis(sulfonat) soli.
U nekim otelotvorenjima, sejanje obuhvata cestice željene bis(sulfonat) soli koja je taložena.
U nekim otelotvorenjima, sejanje obuhvata čestice od željene bis(sulfonat) soli koja je taložena do veličine od manje od oko 100 mm.
[01191 U nekim otelotvorenjima, taložen proizvod je izolovan filtracijom.
U nekim otelotvorenjima, nakon filtracije, proizvod je opran sa organskim rastvaračem, na primer etanolom ili acetonitrilom.
[0120] Formiranje soli (SF) daje bis(sulfonat) so formule (I) jedinjenja formule (II):
[0121]Kako je objašnjeno gore, bis(sulfonat) so može se takođe pripremiti direktno od odgovarajućeg amino-zaštićenog (npr. N-acetil) jedinjenja formule (III).
[0122]U ovom slučaju, formiranje soli može se obaviti u isto vreme kad i uklanjanje zaštite, na primer koristeći odgovarajuću sulfonsku kiselinu, npr. metansulfonsku kiselinu, za korak uklanjanja zaštite. Primer je ilustrovan u narednoj šemi:
[0123] Opisan ovde je postupak pripreme jedinjenje formule (I):
gde su RA, R<B>,R1,R9,R3NA,R3NB,R7NA, i R<7NR>kako je definisano u prethodnom postupku koji obuhvata:
pripreme jedinjenja formule (IT) ili (III) kako je definisano ovde, praćeno
formiranjem soli (SF) i/ili
uklanjanjem zaštite amino prstena (DP).
[0124]Koraci formiranja soli (SF) i uklanjanja zaštite amino prstena (DP) su kako je opisano gore.
[0125]U nekim otelotvorenjima, priprema navedenog jedinjenja formule (II) ili (III) obuhvata postupak kako je obelodanjeno u WO2007/l 10627.
U nekim otelotvorenjima, priprema navedenog jedinjenja formule (II) ili (III) obuhvata postupak kako je obelodanjeno u VVO2008/007074.
[0126]U nekim otelotvorenjima, priprema jedinjenja formule (II) obuhvata uklanjanje zašLite amino prstena (DP) jedinjenja formule (III), kako je dato gore.
[0127]U nekim otelotvorenjima, priprema jedinjenja formule (III) obuhvata jedan ili više korak izabran iz grupe koju čine:
nitracija (NO),
zaštita amino prstena (AP),
nitro redukcija (NR),
supstitucija amina (AS).
[0128]U nekim otelotvorenjima, priprema jedinjenje formule (II I) obuhvata korake
redukcija (RED), i
zaštita amino prstena (AP).
[0129]Koraci se mogu obaviti u bilo kom logičkom redu. U nekim otelotvorenjima, koraci su obavljeni u navedenom redu (tj., bilo koji naveden korak je obavljeni u isto vreme kad, ili nakon, prethodnog navedenog koraka).
[0130]U nekim otelotvorenjima, nitracija (NO) obuhvata:
nitraciju (NO), gde je lOH-fenotiazin pretvoren u 3,7-dinitro-lOH-fenotiazin, na primer:
[0131]U nekim otelotvorenjima, nitracija je obavljena koristeći nitrit, na primer, natrijum nitrit, na primer, natrijum nitrit sa sirćetnom kiselinom, i rastvarač kao što je dimetil sulfoksid, dimetil formamid, acetonitirl, tetrahidrofuran, dimetoksietan, aceton, dihlorometan ili hloroform.
[0132]U nekim otelotvorenjima, zaštita amino prstena (AP) obuhvata:
zaštitu amino prstena (AP), gde je amino prsteno grupa (-NH-) 3,7-dinitro-lOH-fenotiazina pretvorena u zaštićenu grupu amino prstena (-NR<p101>), na primer:
[0133]U nekim otelotvorenjima, zaštita amino prstena je postignuta kao acetat, na primer, koristeći sirćetni anhidrid, na primer, koristeći sirćetni anhidrid i bazu kao što je amin baza, na primer trietilamin ili piridin.
[0134]U nekim otelotvorenjima, korak nitro redukcije (NR) obuhvata:
nitro redukciju (NR), gde je svaka od nitro (-NCb) grupa zaštićenog 3,7-dinitro-iOH-fenotiazina pretvorena u amino (-NH2) grupu, na primer:
[0135]U nekim otelotvorenjima, nitro redukcija može se obaviti koristeći, na primer, tin (II) hlorid, na primer, tin (II) hlorid sa etanolom.
U nekim otelotvorenjima, nitro redukcija može se obaviti koristeći, na primer, paiadijum na uglju (Pd/C) i vodonik u, na primer, 2-metil-tetrahidrofuranu.
U nekim otelotvorenjima, nitro redukcija može se obaviti koristeći, na primer, cink i vodeni amonijum hlorid u metanolu i tF.
[0136]U nekim otelotvorenjima, korak supstitucije amina (AS) obuhvata:
supstituciju amina (AS), gde je svaka od amino (-NFI2) grupa zaštićenog 3,7-diamino-lOH-fenotiazina pretvorena u disupstituisanu amino grupu, na primer:
[0137]U nekim otelotvorenjima, supstitucija amina je obavljena koristeći alkil halid, na primer, alkil jodid, na primer, metil jodid, na primer, metil jodid sa natrijum hidroksidom, DMSO, toluen i tetra-n-butil amonijum bromid.
U nekim otelotvorenjima, supstitucija amina obuhvata tretman sa formaldehidom (npr. paraformaldehid, formalin) pod redukujućim uslovima. Na primer, tretman sa formalinom i vodoničnim gasom, u prisustvu Pd/C katalizatora; ili tretman sa paraformaldehiđom u prisustvu redukujućeg agensa kao što je natrijum cijanoborohidrid i sirćetne kiseline.
[0138]U nekim otelotvorenjima, korak redukcije (RED) je: redukcija (RED), gde je 3,7-di(disupstituisan aminoj-tioninijum so redukovana kako bi se dobio odgovarajući 3,7di(disupstituisan amino)-10H-fenotiazin, na primer tretmanom sa redukujućim agensom, kao što je hidrazin (NH2NH2), metil hidrazin (MeNHNH2), ili natrijum borohidrid i bazom, kao što je piridin, trietilamin, ili Hunigova baza (diizopropiletilamin).
[0139]U nekim otelotvorenjima, korak zaštite amino prstena (AP) je: zaštita amino prstena (AP), gde je 3,7-di(disupstituisan amino)-10H-fenotiazin zaštićen, na primer tretmanom sa sirćetnim anhidridom, kako bi se dobio odgovarajući zaštićen 3,7-di(disupstituisan amino)-10H-fenotiazin, na primer odgovarajući /V-acetil 3,7-di(disupstituisan amino)-10H-fenotiazin.
[0140JU nekim otelotvorenjima, koraci su obavljeni u navedenom redu (tj., bilo koji naveden korak je obavljeni u isto vreme kad, ili nakon, prethodnog navedenog koraka).
[0141]U nekim otelotvorenjima, korak redukcije (RED) i korak zaštite amino prstena (AP) su obavljeni istovremeno (tj., kao jedan korak).
[0142]Na primer, u nekim otelotvorenjima, kombinovan korak redukcije (RED) i korak zaštite amino prstena (AP) je:
redukcija (RED) i zaštita amino prstena (AP), gde je 3,7-di(disupstituisan amino)-tioninijum so redukovana kako bi se dobio odgovarajući 3,7-di(disupstituisan amino)-10H-fenotiazin, i amino prsten grupa (-NH-) 3,7di(disupstituisan amino)-10H-fenotiazina je pretvorena u zaštićenu amino prsten grupu (~ Rpm) kako bi se dobio odgovarajući zaštićen 3,7-di(disupstituisan amino)-10H-fenotiazin, na primer:
gde je Y kontrajon. U nekim otelotvorenjima, Y predstavlja Cl".
[0143]U nekim otelotvorenjima, 3,7-di(disupstituisan amino)-tioninijum so je metiltioninijum hlorid
(MTC).
[0144]U nekim otelotvorenjima, korak kombinovane redukcije (RED) i korak zaštita amino prstena (AP) je postignut koristeći hidrazin, kao što je fenilhidrazin, MeNHNFh, ili NFhNEb.HSO i sirćetni anhidrid.
[0145]U nekim otelotvorenjima, korak je obavljen pod atmosferom azota.
[0146]U nekim otelotvorenjima korak kombinovane redukcije (RED) i korak zaštite amino prstena (AP) je obavljeni koristeći, na primer, fenilhidrazin, etanol, sirćetni anhidrid, i piridin.
[0147]U nekim otelotvorenjima, korak kombinovane redukcije (RED) i korak zaštite amino prstena (AP) je obavljeni koristeći, na primer, hidrazin hidrat, acetonitril, sirćetni anhidrid, i trietilamin, pod atmosferom azota.
[0148]U nekim otelotvorenjima, zaštićen 3,7-di(distipstituisan amino)-lOH-fenotiazin, na primer N-acetil 3,7-di(disupstituisan amino)-10H-fenotiazin, podvrgnut je koraku pročišćavanja.
U nekim otelotvorenjima, pročišćavanje obuhvata dodavanje organskog rastvarača, na primer toluena, i kiseline, na primer sirćetne kiseline, kako bi se rastvorilo jedinjenje, praćeno korakom pranja.
U nekim otelotvorenjima, pranje obuhvata dodavanje vode i/ili vodene sirćetne kiseline rastvoru jedinjenja; agitaciju i/ili grejanje; i razdvajanje organskog sloja.
U nekim otelotvorenjima, pranje je ponovljeno, na primer do tri puta.
U nekim otelotvorenjima, pranje je praćeno izolacijom pročišćenog proizvoda.
U nekim otelotvorenjima, izolacija pročišćenog proizvoda obuhvata hlađenje, taloženje i filtraciju proizvoda.
Kristalni oblici
[0149]U nekim otelotvorenjima, jedinjenje za primenu u postupku tretmana ili profilakse ljudskog ili životinjskog tela terapijom pronalaska je dato u kristalnom obliku.
[0150]U nekim otelotvorenjima, kristalni oblik je „Oblik A" kako je opisano ovde.
[0151]U nekim otelotvorenjima, kristalni oblik ima strukturu prikazanu na Slici 17 i/ili je karakterisan kristalnim podacima prikazanim u Aneks Tabeli 1 i/ili atomskim koordinatama prikazan u Aneks Tabeli 2 i/ili dužinama i uglovima veza prikazanim u Aneks Tabeli 3 i/ili parameterima anizotropanskog pomeranja prikazanim u Aneks Tabeli 4 i/ili vodoničnim koordinatama i parametrima izotropskog pomeranja prikazanim u Aneks Tabeli 5.
Obrtanje i/ ili inhibiciia agregacije proteina
[0152] Opisana ovde je primena jedinjenja ili sastava kako su opisani ovde, da reguliše (npr., da obrne i/ili inhibira) agregaciju proteina, na primer, agregaciju proteina povezanu sa neurodegenerativnim bolestima i/ili kliničkom demencijom. Agregacije mogu biti in vitro, ili in vivo, i mogu se povezati sa bolesnim stanjem kako je razmotreno u nastavku.
[0153] Opisan ovde je postupak regulisanja (npr., obrtanje i/ili inhibicija) agregacije proteina, na primer, agregacije proteina povezane sa neurodegenerativnim bolestima i/ili kliničkom demencijom, koji obuhvata dovođenje u dodir proteina sa delotvornom količinom jedinjenja ili sastava kako su opisani ovde. Postupak se može obaviti in vitro, ili in vivo.
[0154] Opisan ovde je postupak regulisanja (npr., obrtanje Lili inhibicija) agregacije proteina u mozgu sisata, gde je agregacija povezana sa bolesnim stanjem kako je opisano ovde, tretman koji obuhvataju korak davanja navedenom sisaru kod kog postoji potreba navedenog tretmana, profilaktički ili terapetuski delotvorne količini jedinjenja ili sastava kako su opisani ovde, koji su inhibitor navedene agregacije.
Postupci tretmana
[0155] Opisana ovde je postupak tretmana koji obuhvataju davanja do pacijentu kod kog postoji potreba tretmana profilaktički ili terapetuski delotvorne količine jedinjenja kako je opisano ovde, poželjno u obliku farmaceutskog sastava.
Primena u postupcima terapije
[0156] Ovaj pronalazak odnosi se na jedinjenje ili sastav kako su opisani ovde, za primenu u postupku tretmana (npr., bolesnog stanja) ljudskog ili životinjskog tela terapijom.
Pr imena u proizvodnji lekova
[0157] Opisana ovde je primena jedinjenja ili sastava kako su opisani ovde, u proizvodnji lekova za primenu u tretmanu (npr., bolesnog stanja).
Tr etirana bolesna stanja - bolesti agregacije proteina
[0158] Jedinjenja i sastavi ovog pronalaska su korisni pri tretmanu ili profilaksi bolesti agregacije proteina.
[0159] Stoga, u nekim otelotvorenjima, bolesna stanja su bolesti agregacije proteina, i, na primer, tretman je sa količinom jedinjenja ili sastava kako su opisani ovde, dovoljno da inhibira agregaciju proteina povezanu sa navedenim bolesnim stanjem.
[0160] Uglavnom, agregacija proteina je nastaje od indukovane konformacione interakcije polimerizacije tj., kada konformaciona promena proteina, ili njegovog fragmenta, dovodi do usmerenog vezivanja i agregacije daljih (prekursor) molekula proteina na način samorazmnožavanja. Jednom kad počne nukleacija, agregaciona kaskada može da se dogodi što uključuje indukovanu konformađonu polimarizaciju daljih molekula proteina, što dovodi do formiranja tokstičnih fragmenata roizvoda u agregatima koji su značajno otporni na dalju proteolizu. Za tako stvorenu agregaciju proteina se smatra da je glavni uzrok bolesnih stanja manifestovanih kao neurodegeneracija, klinička demencija, i drugi patološki simptomi.
[0161] Naredna Tabela navodi različite agregacije proteina povezane sa bolestima i odgovarajuće bolesti agregacije proteina. Primena jedinjenja i sastava pronalaska u odnosu na te proteine ili bolesti je obuhvaćena ovim pronalaskom.
[01621Kako je opisano u VVO 02/055720, VVO2007/110630, i VVO2007/110627, diaminofenotiazini su korisni u inhibiciji takvih bolesti agregacije proteina.
[0163]Stoga će se razumeti da, osim kad kontekst ne nalaže drugačije, opis otelotvorenja u odnosu na tau protein ili ili proteina nalik tau (npr., MAP2; pogledati u nastavku), treba da se uzme kao primenjiv jednako na druge ovde razmatrane proteine (npr., P-amiloid, sinuklein, prion, itd.,) ili druge proteine koji mogu inicirati ili proći kroz slične patološke agregacije posredstvom konformacionih promena u domenu kritičnom za propagaciju agregacije, ili koji daju proteolitičku stabilnost tako formiranom agregatu (pogledati, npr., članak od VVischik et al. u "Neurobiologv of Alzheimer's Disease", 2nd Edition, 2000, Eds. Dawbarn, D. i Allen, S.J., The Molecular and Cellular Neurobiologv Series, Bios Scientific Publishers, Oxford). Svi takvi proteini mogu se ovde nazivati „proteini bolesti agregacije".
[0164]Isto tako, kada se ovde pominju ,,tau-tau agregacije", ili slično, one se takode mogu uzeti kao primenjive na druge „agregacija-protein agregacija", kao što je B-amiloid agregacija, prion agregacija, sinuklein agregacija, itd., Istom se odnosi na ,,taz proteolitičku degradaciju" itd.,
Poželjni proteini bolesti agregiranja
[0165]Poželjna ostvarenja ovog pronalaska zasnovana su na tau proteinu. Pojam „tau protein", kako se ovde koristi, odnosi se uglavnom na bilo koji proteina iz porodice tau proteina. Tau proteini se karakterišu kao jedna od većih prodica proteina koja pomaže pročišćavane sa mikrotubulama tokom ponovljenih ciklusa sklapanja i rasklapanja (pogledati, npr. Shelanski et al., 1973, Proc. Natl. Acad. Sci. USA, Vol. 70, pp. 765-768), i poznati su kao proteini povezani sa mikrotubulama (MAP). Članovi tau porodice dijele zajedničke karakteristike, tj. imaju karakterističan N-izrazalni segment, sekvence od oko 50 aminokiselina umetnutih u N-izrazalni segmenta, koji se razvojno regulišu u mozgu, karakteristična regija tandemskog ponavljanja se sastoji od 3 ili 4 tandem ponavljanja 31-32 aminokiselina, i C-izrazalnog repa.
[0166]MAP2 je dominantni protein povezan sa mikrotubulama u somatodendritičkim odeljku (pogledati, npr. Matus, A., in "Microtubules" [Hyams and LIoyd, Eds ] pp. 155-166, John Wiley and Sons, New York, USA). MAP2 izoformi su gotovo identični tau proteinu u regiji tandemskog ponavljanja, ali značajno se razlikujuu sekvenci i opsegu N-izrazalnog domena (pogledati, npr. Kindler and Garner, 1994, Mol. Brain Res., Vol. 26, pp. 218-224). Ipak, agregacija u regiji tandemskog ponavljanja nije selektivan za tau domen ponavljanja. Tako će biti jasno da se svaka diskusija ovde u vezi sa tau proteinom ili tau tau agregacijom treba uzeti kao da se odnosi takođe na tau-MAP2 agregacije, MAP2-MA.P2 agregacije, i tako dalje.
[0167]U nekim otelotvorenjima, protein je tau protein.
[0168]U nekim otelotvorenjima, protein je sinuklein, npr. a- ili p-sinuklein.
[0169]U nekim otelotvorenjima, protein je TDP-43.
[0170}TAR DNA-vezujući protein 43 (TDP-43) je protein sa 414 amino kiselina kodiran na hromozomu TARDBP lp36.2. Protein je visoko očuvan, široko eksprimiran, i pretežno lokalizovan u jezgru, ali može se pomerati između jezgra i citoplazme (Mackenzie etal201U). On je uključen u regulaciju transkripcije i srastanja, i može imati ulogu u drugim procesima, kao što su; obrada mikroRNK, apoptoze ćelijske deobe, stabilizacija RNK, regulisanje neuronske plastičnosti i održavanje dendritičkog integriteta. Osim toga, od 2006. godine postoji znatan broj dokaza nagomilanih u prilog TDP-43 toksičkog dobitka od funkcije hipoteze u amiotrofičnog lateralnoj sklerozi (ALS). TDP-43 je inherentno protein sklon agregaciji i agregati nastaliin vitrosu ultrastrukturalno slični TDP-43 depozitima primećenim u degenerišućim neuronima kod pacijenata sa ALS (Johnson et al 2009). Johnson et al (2008) su pokazali da kada TDP-43 je eksprimiran u modelu kvasca, samo je agregirani oblik otrovan. Nekolikoin vitrostudija takođe je pokazalo da C-izrazalni fragmenti TDP-43 imaju veću verovatnoću od TDP-43 pune dužine da formiraju nerastvorljive citoplazmatske agregate koji postaju ubikvitinirani i toksični za ćelije (Arai et al 2010; [gaz et al 2009; Nonaka et al 2009; Zhang et al 2009). Iako Nonaka et al (2009) navode da ovi citoplazmatski agregati vezuju endogene proteine pune dužine, urušavajući ga iz jezgra, Zhang et al (2009) su otkrili zadržavanje normalnog eksprimiranja jezgra, sugerišući čist toksični učinak za agregate. Yang et al (2010) su opisali hvatanje TDP-43 pune dužine unutar agregata C- i N-izrazalnih fragmenata TDP-43 u NSC34 kulturi motornih neurona. Prerastanje neurita, ometan kao rezultat prisustva takvih skraćenih fragmenata može se spasiti prekomernim eksprimiranjem proteina pune dužine. Iako nije utvrđena uloga neuritain vivo,ovaj model će podržati predlog iznet od strane Nonake i kolega za ulogu TDP-43 agregacije u ALS patogenezi.
[0171]Mutantsko TDP-43 eksprimiranje u ćelijskim kulturama je više puta navedeno da rezultuje u povećanoj generaciji C-izrazalnih fragmenata sa još većom citoplazmatskom agregacije i toksičnim efektima nego divlji tipa proteina (Kabashi et al 2008; Sreedharan et al 2008; Johnson et al 2009; Nonaka et al 2009; Arai et al 2010; Barmarda et al 2010; Kabashi et al 2010).
[0172]Kad je protein tau protein, u nekim aspektima u primeni ovog pronalaska, osigurava se postupak inhibicije proizvodnje proteinskih agregata (npr. u obliku uparenih helikoidalnih vlakana (PHF), prema potrebi u neurofibrilarnim Čvorovima (NFT) u mozgu sisara. gde je tretman kao što je gore opisano.
Poželjne indikacije-bolesti agregacije proteina
[0173]Značajno, nije samo Alchajmerova bolest (AD) slučaj gde tau protein (i njegova nenormalna funkcija ili procesuiranje) može odigrati ulogu. Za patogenezu neurodegenerativnih bolesti kao što su Pikova bolest i progresivna supranuklearna paraliza (PSP) takođe se čini da koreliraju sa akumulacijom patološki okrnjenih tau agregata u zupčastom girusu i zvezdastim piramidalnim ćelijama neokorteksa, respektivno. Ostale demencije uključuju frontotemporalnu demenciju (FTD); FTD sa parkinsonizmom povezanim sa hromozomom 17 (FTDP-17); kompleks disinhibicija-demencija-parkinsonizam-amiotrofija (DDPAC); pallido-ponto-nigralna degeneracija (PPND); Guam-ALS sindrom; pallido-nigro-lujsianska degeneracija (PNLD); kortiko-bazalna degeneracije (CBD) itd., (pogledati, npr., Članak od VVischik et al. in "Neurobiologv of Alchajmer's Disease", 2nd Edition, 2000, Eds. Dawbarn, D. and Allen, S.J., The Molecular and Cellular Neurobiologv Series, Bios Scientific Publishers, Oxford; especiallv Table 5.1). Sve ove bolesti, koji se karakterišu primarno ili delimično abnormalnom tau agregacijom, se ovde nazivaju „taupatije".
[0174]Prema tome, u nekim otelotvorenjima, bolesno stanje je tauopatija.
U nekim otelotvorenjima, bolesno stanje je neurodegenerativna tauopatije.
[0175]U nekim otelotvorenjima, bolesno stanje se bira iz grupe koju čine Alchajmerova bolest (AD), Pikova bolest, progresivna supranuklearna paraliza (PSP), frontalno-temporalna demencija (FTD) FTD sa parkinsonizmom povezanim sa hromozomom 17 (FTDP 17), sindromi frontotemporalne lobarne degeneracije (FTLD); kompleks disinhibicija-demencija-parkinsonizam-amiotrofija (DDPAC), palido-ponto-nigralna degeneracija (PPND), Guam-ALS sindrom, pallido-nigro-lujsianska degeneracija (PNLD), kortiko-bazalna degeneracija (CBD), demencije sa argirofilnim zrncima (AgD) , demencija pugilistika (DP) ili hronična traumatska encefalopatija (CTE), Daunov sindrom (DS), demencija sa Levijevim telima (DLB), potkožni sklerozni panencefalitis (SSPE), MCI, Nieman-Pikova bolesti, tip C (NPC), Sanfilipo sindrom tipa B (mukopolisaharidoza III B), ili miotonična distrofija (DM), DM1 ili DM2 ili hronična traumatska encefalopatija (CTE).
[0176]U nekim otelotvorenjima, bolesno stanje je poremećaj lizosomnog čuvanja sa tau patologijom. NPC je uzrokovan mutacijom genaNPC1,koja utiče na metabolizam holesterola (Love et al, 1995) i Sanfilipo sindrom tipa B je uzrokovan mutacijom u genuNAGLU,gde se nalazi lizozomna akumulacija heparin sulfata (Ohmi et al. 2009 }. Kod tih poremećaja lizosomnog skladištenja, tau patologija se posmatra i njeno lečenje može smanjiti napredovanje bolesti. Ostali poremećaji lizozomnog skladištenja mogu takođe biti karakterisani akumulacijom tau.
[01771Upotreba fenotiazin diaminijum soli pri tretmanu Parkinsonove bolesti i MCI je detaljnije opisana u PCT/GB2007/001105 i PCT/GB2008/002066.
[0178]U nekim otelotvorenjima, bolesno stanje je Parkinsonova bolest, MCI ili Alchajmerova bolest.
[0179]U nekim otelotvorenjima, bolesno stanje je Hantingtonova bolest ili drugi poliglutaminski poremećaji kao što je spinalna bulbarna mišićne atrofije (ili Kenedijeva bolest), i dentatorubropalidoluisianska atrofija i različite spinocerebralne ataksije.
U nekim otelotvorenjima, bolesno stanje je FTLD sindrom(koj) može biti, na primer tauopatija ili TDP-43 proteinopatija, pogledati u nastavku).
U nekim otelotvorenjima, bolesno stanje je PSP ili ALS.
[0180]U nekim otelotvorenjima, tretman (npr. Tretman neurodegenerativne tauopatije, npr.. Alchajmerove bolesti) može biti u kombinaciji sa jednim ili više drugih agenasa, na primer, jedan ili više inhibitor kolinesteraze (kao Donepezil (takođe poznat kao Aricept™), Rivastigmin (takođe poznat kao Exelon™), Galantamin (takođe poznat kao Reminyl<IM>), antagonisti NMDA receptora (kao što je, Memantin (takođe poznat kao Ebixa™, Namenda™), agonisti muskarinijskog receptora, i/ili inhibitori procesiranja amiloid prekursor proteina koja dovodi do pojačane generacije beta-amiloida.
[0181]TDP-43 proteinopatije su amiotrofna lateralna skleroza (ALS; ALS-TDP) i frontotemporalna lobarna degeneracija (FTLD-TdP).
[0182]Uloga TDP-43 kod neurodegeneracije kod ALS i drugih neurodegenerativnih poremećaja je opisana u nekoliko skorijih publikacija (Chen-Plotkinet al2010; Gendronet al2010;Geser et al2010; Mackenzieet
£3/2010).
[0183]ALS je neurodegenerativna bolest, karakterisana progresivnom paralizom i klonulošću mišića, koja sledi degeneraciju gornjih i donjih motornih neurona u primarnom motornom korteksu, mozgu i kičmenoj moždini. To se ponekad naziva i bolest motornih neurona (BMN), ali postoje i bolesti osim ALS koji utiču na niže ili više motorne neurona. Definitivna dijagnoza zahteva znake gornjih i donjih motorni neurona u hulharnnj i muskulaturi ruku i nogu sa jasnim dokazima kliničke progresije koje se ne mogu obasniti drugim oboljenjima (Wijesekera and Letgh 2009).
[0184]Iako su većina slučajeva ALS-TDP, postoje i drugi slučajevi u kojima se patološki protein razlikuje od TDP-43. Krivo savijeni SODI je patološki protein u ubikvitinski-pozitivnim inkluzijama u ALS sa SODI mutacijama (Seetharamanet al2009), i vrlo malim deo (oko 3-4%) od familijarnog ALS, zbog mutacija u FUS (fuzionisan u sarkoma protein), ubikvitiniran patološki protein je FUS (Vanceet al2009; Blairet al2010). Za FUS, kao i TDP-43, čini se da je važan u nuklearnoj-citoplazmatskom premeštanju iako su načini na koje se prekida nuklearni uvoz FUS i dalje nejasni. Nova molekularna klasifikacija ALS, prilagođena iz Mackenzieet al(2010), odražava različite osnovne patološke mehanizame u različitim podtipovima (pogledati Tabelu u nastavku).
[0185]Nova molekularna klasifikacija ALS (modifikovana iz Mackenzie etal2010). U većini slučajeva, TDP-43 je patološki ubikvitiniran protein koji se nalazi u ALS.
[0186]Amiotrofična lateralna skleroze je prepoznata kao nosologični entitet gotovo vek i po, i priznaje se u ICD-10 i klasifikovana kao podtip MND u ICD 10 (G12.2). Takođe su prihvaćeni pouzdani klinički dijagnostici su dostupni za ALS, koje se razlikuju malo od Čarkotovog izvornog opisa i neuropatoloških kriterijuma, oslikavajući osnovnu molekularnu patologiju.
[0187]Dok ALS je klasifikovan patološki u tri podgrupe, ALS-TDP, ALS-SOD1 i ALS-FUS, oba potonja stanja su retka. Najveći studija do sada pokazala je da svi sporadični ALS slučajevi imaju TDP-43 patologiju (Mackenzie et al 2007). Samo oko 5% od ALS-a je familijarno (Bvrne et al 2010) i mutacije u SODI, najčešće mutacije pronađene u FALS, odgovorne su za 12-23% slučajeva (Andersen et al 2006). SODI mogu takođe biti uključeni u 2-7% od SALS. Mutacije u FUS se pojavljuju daleko rede, što je odgovorno samo za 3-4% od FALS (Blair et al 2010). Dakle, može se biti pouzdano predvideti da će klinički slučaj SALS imati patologiju zasnovanu na TDP-43. Isto to se može pouzdano predvideti kod FALS zbog mutacija u TDP-43, koje čine oko 4% slučajeva (Mackenzie et al 2010). ALS sa mutacijama u: VCP, odgovoran za 1-2% FALS (Johnson et al 2010), ANG (Seilhean et al 2009) i CHMP2B (Cox et al 2010) takođe su prijavljeni da su povezanu sa TDP-43 pozitivnom patologijom. Iako za SODI, FUS i ATXN2 mutacije nije pronađeno da su povezane sa TDP-43 pozitivnim agregacijama, prijavljeno je da je TDP-43 umešan u patološke procese koji proizlaze iz ovih mutacija (Higashi et al 2010; Ling et al 2010; Elden et al 2010).
[0188]Stoga je utvrđeno da TDP-43 ima važnu i potencijalno središnju ulogu, u patogenezi velike većini slučajeva SALS i može biti upleten u patogenezu značajnog dela FALS. ALS se sada široko smatra TDP-43 proteinopatijom (Neumann et al 2009) i brojnain vitroiin vivoispitivanja pružila su potporu hipotezi da je toksični dobitak funkcije usled TDP-43 agregacije je odgovoran za barem neke o neurotoksičnosti kod bolesti.
[0189]Sindromi FTLD su neočekivan napad, neumitno progresivna, neurodegenerativna stanja, sa najvećim brojem početaka u kasnim srednjim godinama. Tu je često pozitivna porodična anamneza sličnih poremećaja kod rođaka prvog stepena.
[0190]Bihevijoralna varijanta FTD se karakteriše ranim istaknutim promenama u društvenim i međuljudskim funkcijama, često u pratnji ponavljaju ponašanja i promene obrazaca ishrane. Kod semantičke demencije postoji istaknut problem sa pronalaženjem reči, bez obzira na na drugi način tečan govor, sa degrađiranim objektom znanja i razumevanjem jedne rečni kod kognitivnih procena. Progresivna netečna afazija predstavlja se sa kombinacijom motoričkih govornih problema i gramatičkog deficita. Osnovna klinička dijagnostika osobina za ova tri sindroma FTLD prikazana je u narednoj Tabeli, a potpuni kriterijumi kod Neary et al (1998).
[0191]Otkriće da TDP-43-pozitivne inkluzije karakterišu ALS i FTLD-TDP (Neumannet al2006) ubrzo je praćeno identifikacijom genetskih mutacija u genu TARDBP i u porodičnim iusporadičnim slučajevima ALS (Gitchoet al2008; Sreedharan et al., 2008). Do sada, 38 različitih TARDBP mutacije je pnjaveno u 79 genealogijski nepovezanih porodica širom sveta (Mackenzie et al 2010). TARDBP mutacije čine oko 4% svih porodičnih i oko 1,5% sporadičnih ALS slučajeva.
[0192]U decembru 2010. godine, identifikovane su mutacije u trinaest gena koji su povezani sa porodičnim i sporadičnim ALS. Povezanost ALS sa pet drugih hromozoma lokusa je dokazana, ali do sad nisu identifikovane specifične mutacije.
Metiltioninijum ( MT) u TDP- 43 proteinopatijama
[0193]MT ima način delovanja koji cilja i može smanjiti TDP-43 agregacije proteina u ćelijama, što je patološko obeležje velike većine porodičnih i sporadičnih ALS, a takođe je karakterističan za FTLD-P.
[0194]Osim toga, laboratorijski podaci pokazuju da metiltioninijum inhibira stvaranje TDP-43 agregata u SHSY5Y ćelijama. Nakon tretiranja sa 0,05 pM MT, broj TDP-43 agregata je smanjen za 50%. Ovi rezultati su potvrđeni imunoblot analizom (Yamashita et al 2009).
[0195]Jedinjenja i sastavi pronalaska mogu prema tome biti korisni za lečenje amiotrofične lateralne skleroze (ALS) i frontotemporalne lobarne degeneracije (FTLD).
Metiltioninijum ( MT) kod Hantingtonove bolesti i poligiutaminskih poremećaja
[0196]MT smanjuje agregacije poliglutamin proteina u ćelijama, što je patološki oblik Hantingtonove bolesti. Hantingtonova bolest je uzrokovana širenjem prevedenog CAG ponavljanja koje se nalazi na N-izrazusu Hantingtinona. Divlji tip hromozoma sadrži 6-34 ponavljanja, dok kod Hantingtonove bolesti hromozomi sadrže 36-121 ponavljanja. Životno doba početka bolesti obrnuto je srazmerno dužini CAG puteva koji kodiraju poliglutaminska ponavljanja unutar proteina.
[0197]Laboratorijski podaci pokazuju da metiltioninijum inhibira stvaranje agregata derivata Hantingtinona koji sadrže poliglutaminske nastavke 102 ostatka kod zebrice (Van Bebber et al. 2010). MT, kada se testira na 0, 10 i 100 pM, sprečava stvaranje takvih agregata kod zebrice na nači zavisan od doze..
[0198]Jedinjenja i sastavi pronalaska mogu prema tome biti korisni za lečenje Hantingtonove bolesti i drugih poligiutaminskih poremećaja kao što je spinalna bulbarna mišićna atrofija (ili Kenedijeva bolest), o dentatorubropalidoluizijansa atrofija i razne spinocerebralne ataksije (Orr & Zoghbi, 2007).
Mitohondrijske bolesti i Lafora bolesti
[0199]Organ koji je najčešće pogođen mitohondrijske bolestima, posebno bolestima respiratornog lanca (RCD), osim skeletnih mišića, je centralni nervni sistem (CNS). CNS manifestacije RCD-a sadrže epizode nalik napadima, epilepsiju, migrenu, ataksiju, spastičnost, poremećaje kretanja, psihijatrijske poremećaje, opadanja kognitivnih funkcija, ili čak demenciju (mitohondrijalna demencija). Do sada je mitohondrijska demencija prijavljena kod MELAS, MERRF, LHON, CPEO, KSS, MNGIE, NARP, Leihovog sindroma, i Alpers-Hutenlokerove bolesti (Finsterer, 2009). Postoje četiri kompleksa u mitohondrijskom respiratornom lancu, koji uključuju niz elektronskih transfera. Abnormalna funkcija bilo kog od tih kompleksa može rezultovati u mitohondrijskoj bolesti sekundarnoj abnormalnom transportnom lancu elektrona i zatim abnormalnoj mitohondrijskoj respiraciji. Kompleks HI mitohondrijalnog respiratornog lancu deluje da prenese elektrone za citohrom c.
[0200]Jedinjenja i sastavi pronalaska mogu se takođe koristiti za lečenje mitohondrijske bolesti koje su povezane sa deficijentnim i/ili oslabljenim funkcionisanjem kompleksa III respiratornog lanca. Jedinjenja imaju sposobnost delovanja kao delotvorni elektronski nosač i/ili transfer, kako tioninijum deo ima nizak redoks potencijal pretvaranja između oksidovanog i redukovanog oblika. U slučaju da poremećena i/ili deficijentna funkcija kompleksa III dovodi do mitohondrijske bolesti, jedinjenja pronalaska su takođe u mogućnosti da obavljaju transport elektrona i transfer ulogu kompleksa III zbog sposobnosti tioninijum dela da se premešta između oksidovanog i redukovanog oblika, tako da deluje kao nosač elektrona umesto sub-optimalno funkcionisanje kompleksa III, prenoseći elektrone do citohroma c.
[0201]Jedinjenja i sastavi pronalaska takođe imaju sposobnost stvaranja aktivnog tioninijum dela koji ima sposobnost da preusmerava pogrešno savijene proteinske/aminokiselinske monomere/oligomere dalje od Hsp70 ADP-povezanih proteinskih akumulacija i/ili ponovnog savijanja puteva, i umesto da rekanališe te abnormalno savijene proteinske monomere/oligomere ka putu koji vodi direktno do ubikvitin-proteazoma sistema (UPS) zavisnog od Hsp70 ATP, put koji uklanja te pogrešno savijene proteinske/aminokiselinske monomere/oligomere putem direktne rute (Jimval et al. 2009).
[0202]Lafora bolest (LD) je autosomno recesivna fatalna epilepsija koja se javlja u tinejdžerskom dobu povezana sa postupnom akumulacijom slabo razgranatog i nerastvorljivog glikogena, nazvanog poliglukozan, u mnogim tkivima. U mozgu, poliglukozan tela, ili Lafora tela, formiraju se u neuronima. Inhibicija Hsp 70 ATPaze od strane MT (Jimval et al 2009) može regulisati na gore uklanjanje pogrešno savijenih proteina. Lafora bolest nastaje prvenstveno usled defekta lizosomskog ubikvitina-proteazoma sistema (UPS) zbog mutacija u Laforin ili Malin genima, koji se nalaze na hromozomu 6, što ima za posljedicu inkluzije koje mogu ubrzati agregacije pogrešno savijenog tau proteina. Sekundarna miiohondrijski šteta od oslabljenog UPS može dalje rezultovati potisnutom mitohondrijskom aktivnosti i oslabljenim lancem prenosa elektrona što dovodi do daljeg lipofuskina i pokretanja napada koji su karakteristični za Lafora bolest.
[0203]MT deo može rastaviti postojeće tau agregate, smanjiti više tau akumulacija i poboljšati učinkovitost lizosomske efikasnosti inhibirajući Hsp70 ATPazu. MT može dovesti do smanjenja broja tau čvorova poboljšavajući uklanjanje tao monomera/oligomera od strane ubikvitinskog proteazoma sistema, kroz svoje inhibitivno delovanje na Hsp70 ATPazu.
[0204]Prema tome jedinjenja i sastavi ovog pronalaska mogu biti korisni pri lečenju Lafora bolesti.
Tretiranja stanja bolesti - druga stanja bolesti
[0205]U nekim otelotvorenjima, bolesno stanje je rak kože.
U nekim otelotvorenjima, bolesno stanje je melanom.
U nekim otelotvorenjima, bolesno stanje je virusno, bakterijske ili protozoalno bolesno stanje.
U nekim otelotvorenjima, (protozoalno) bolesno stanje je malarija, lečenje može biti u kombinaciji sa jednim ili više antimikrobnih agenasa, na primer, klorokinom i/ili atovakinom
[0206]U nekim otelotvorenjima (virusno) bolesno stanje uzrokovano je Hepatitisom C, Hl-omV, ili virusom zapadnog Nila (VVNV).
Tretman
[0207]Izraz „tretman", kako se ovde koristi u kontekstu tretiranja stanja, odnosi se uglavnom na tretman i terapiju, čoveka ili životinje (npr., u veterini), pri čemu se postiže neki željeni terapeutski efekt na primer, inhibicija napretka stanja, i uključuje smanjenje tempa progresa, zaustavlja tempo progresa, regresiju stanja, poboljšanje stanja, i lečenje stanja. Tretman kao profilaktička mera (tj., profilaksa, prevencija) je takođe uključen.
[0208]Izraz „terapeutski delotvoma količina", kako se ovde koristi, odnosi se na količinu jedinjenja ovog pronalaska, ili materijala, sastava ili oblika doziranja navedenog jedinjenja, koji je delotvoran za dobijanje nekog željenog terapeutskog efekta, praćenog sa razumnim odnosom koristi i rizika, kada se daje u skladu sa željenim režimom lečenja.
[0209]Isto tako, izraz „profilaktički delotvorna količina", kako se ovde koristi, odnosi se na količinu jedinjenja ovog pronalaska, ili materijala, sastava ili oblika doziranja navedenog jedinjenja, koji je delotvoran za dobijanje nekog željenog profilaktičkog efekta, praćenog sa razumnim odnosom koristi i rizika, kada se daje u skladu sa željenim režimom lečenja.
[0210]„Profilaksu" u kontekstu ove prijave ne treba shvatiti da zaokružuje potpuni uspeh, tj. potpunu zaštitu ili potpunu prevenciju. Približnije, profilaksa u ovom kontekstu odnosi se na meru koja se daje pre otkrivanja simptomatskog stanja sa ciljem očuvanja zdravlja, pomažući da se odloži, ublažava ili izbegne određeno stanje.
[0211]Izraz „lečenje" uključuje kombinaciju tretmana i terapija, kod kojih su dva ili vise tretmana ili terapije u kombinaciji, na primer, u nizu ili istovremeno. Primeri lečenja i terapija uključuju, ali nisu ograničeni na, hemoterapiju (davanja aktivnih agenasa, uključujući, npr., lekove, antitela (npr., kao u imunoterapiji), prolekove (npr., kao u fotodinamičkoj terapiji, GDF.PT, ADEPT, itd.,), operaciju, terapiju zračenjem, i genska terapija.
[0212]Na primer, može biti korisno kombinovati terapiju sa jedinjenjem kako je ovde opisano sa jednim ili više drugih (npr., 1,2,3, 4) agenasa ili terapija.
[0213]Određene kombinacija biće na odluci lekara koji će odabrati doze koristeći njegovo/njeno opšte znanje i režime doziranja koji su poznati stručnjaku.
[0214]Agensi (tj. jedinjenje kao što je ovde opisano, plus jedan ili više drugih agenasa) mogu se primeniti istovremeno ili uzastopno, i mogu se davati u pojedinačno različitim rasporedima doziranja i putem različitih puteva doziranja. Na primer, kada se daju jedni za drugim, sastojci se mogu primeniti u uskim razmacima (npr., u trajanju od 5-10 minuta) ili u dužim intervalima (npr., 1, 2, 3. 4 ili više sati razmaka, ili čak i duži periodi kad je to potrebno), gde precizan režim doziranja odgovara svojstvima terapijskog agensa.
[0215]Agensi (tj. jedinjenje kao što je ovde opisano, plus jedan ili više drugih agenasa) mogu biti formulisani zajedno u jednom obliku za doziranje, ili umesto toga, pojedinačni agensi mogu se formulisati odvojeno i prezentovati zajedno, u obliku kompleta, prema potrebi zajedno sa uputstvima za njihovu upotrebu.
Načini primene
[0216]Jedinjenje prema pronalasku ili farmaceutskom sastavu koji ga sadrži, može se primeniti pacijentu bilo kojim uobičajenim putem davanja, bilo sistemski/periferno ili lokalno (na primer, na mesto željenog delovanja).
[0217]Načini davanja uključuju, ali nisu ograničeni na, oralno (na primer, gutanjem); davanje na usta; ispod jezika; transdermalno (uključujući, na primer, flastere, gips i slično); transmukozno (uključujući, na primer, flastere, gipa i slično); intranazalno (na primer, nazalni sprej); okulamo (na primer, kapi za oči); plućno (na primer, terapijom inhalacije ili insuflacije, npr. putem aerosola, npr. Kroz usta ili nos); rektalno (npr. u obliku čepića ili klistira); vaginalno (na primer, pesarom); parenteralno, na primer, injekcijom, uključujući potkožno, intradermalno, intramuskularno, intravenozno, intraarterijsko, intrakardijalno, intratekalno, intraspinalno, intrakapsularno, potkapsularno, intraorbitalno, intraperitonealno, intralrahealno, intraartikulamom subarahnoidno, i intrasternalno (uključujući, npr. intrakatereske injekcije u mozak); putem implantacije depoa ili rezervoara, na primer, potkožno ili intramuskularno.
[0218]Poželjni sastavi su oralni sastavi, formulisani kao stoje u nastavku opisano detaljno.
Pacijent
[0219]Pacijent može biti životinja, sisar, placentni sisar, glodar (na primer zamorče, hrčak, pacov, miš), miš, dvojezubac (npr., zec), ptica, pas, mačka, konj, svinja, ovca, govedo (npr. Krava), primata, majmuna, majmun (npr. marmozet, babun), kljunar, veliki majmun (npr. gorila, šimpanza, orangutan, gibon), ili čovek.
[0220]Dalje, pacijent može biti u bilo kom od svojih oblika razvoja, na primer, fetus.
[0221]U nekim ostvarenjima, pacijent je ljudsko biće.
Sastavi/ formulacije
[0222]lako je moguće da se jedinjenje iz pronalaska koristi (na primer, primenjuje) samo, često je poželjno da se da u smesi ili formulaciji.
[0223]Ovde su takođe opisani sastavi koji sadrže jedinjenja kao što je ovde opisano, i farmaceutski prihvatljiv nosač ili razredivač.
[0224]U nekim oblicima, sastav je farmaceutski sastav (npr. Formulacija, priprema, lek) koji sadrži jedinjenje kao što je ovde opisano, i farmaceutski prihvatljiv nosač, razredivač ili ekscipijens.
[0225]U nekim oblicima, sastav je farmaceutski sastav koji sadrži najmanje jedno jedinjenje, kako je ovde opisano, zajedno sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih sastojaka, dobro poznatim stručnjacima u ovoj oblasti, uključujući, ali ne ograničavajući se na, farmaceutski prihvatljive nosače, rastvarače, ekscipijense, katalizatore, punila, pufere, konzervanse, antioksidanse, lubrikante, stabilizatore, agense za rastvaranje, površinske agense (npr., agense za kvašenje), agense za maskiranje, agense za bojenje, agense za poboljšanje ukusa i 7_aslađivače.
[0226]U nekim oblicima, sastav dalje sadrži i druge aktivne agense, na primer, terapeutske ili profilaktičke agense.
[0227]Prikladni nosači, razređivači, ekscipijensi, itd., mogu se naći u standardnim farmaceutskim tekstovima. Pogledati, na primer, Handbook of Pharmaceutical Additives, 2nd Edition (eds. M. Ash and I. Ash), 2001 (Svnapse Information Resources, Inc., Endicott, New York, USA), Remington's Pharmaceutical Sciences, 20th edition, pub. Lippincott, VVilliams & VVilkins, 2000; i Handbook of Pharmaceutical Excipients, 2nd edition, 1994.
[0228]Ovde su takođe opisani postupci za pripremu farmaceutskog sastava koji sadrži barem jedno ["CJ -radioobeleženo jedinjenje, kako je ovde definisano, zajedno sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih sastojaka, dobro poznatim stručnjacima u ovoj oblasti, npr., nosači , razređivači, ekscipijensi , itd., Ako su formulisani kao diskretne jedinice (npr. Tablete, itd.,), svaka jedinica sadrži unapred određenu količinu (dozu) jedinjenja.
[0229]Izraz „farmaceutski prihvatljiv" kako se ovde koristi, odnosi se na jedinjenja, sastojke, materijale, sastave, oblike doziranja i slično, koji su, u okviru medicinskog mišljenja, prikladni za upotrebu u dodiru sa tkivima pacijenta u pitanju (npr., čoveka) bez preterane toksičnosti, iritacije, alergijskog odgovora, ili drugih problema ili komplikacija, srazmerno sa razumnim odnosom koristi i rizika. Svaki nosač, razredivač, ekscipijens itd., takođe mora biti „prihvatljiv" u smislu da je kompatibilan sa ostalim sastojcima formulacije.
[0230]Formulacije se mogu pripremiti bilo kojim postupcima dobro poznatim u farmaceutskoj struci. Takvi postupci uključuju korak dovođenja u dodir jedinjenja sa nosačem koji sadrži jedan ili više pomoćnih sastojaka. Uglavnom, formulacije su pripremljene jednolično i blisko dovodeći jedinjenje u dodir sa nosačima (npr. Tečni nosači, fino usitnjen čvrst nosač, itd), i zatim oblikovanjem proizvoda, ako je potrebno.
[0231]Sastav se može biti pripremiti da pruži brzo ili sporo otpuštanje; neposredno, odloženo, tempirano ili neprekidno otpuštanje; ili njihove kombinacije.
[0232]Formulacije prikladne za parenteralno davanje (npr. injekcijom), uključuju vodene i nevodene, izotonične, bez pirogena, sterilne tečnosti (npr., rastvore, suspenzije), u kojima se jedinjenje rastvara, suspenzuje, ili na drugi način daje (npr. u lipozomima ili drugim mikročesticama). Takve tečnosti mogu dodatno sadržati druge farmaceutski prihvatljive sastave, kao Što su antioksidansi, puferi, konzervansi, stabilizatori, bakteriostati, agensi za suspenzovanje, agensi za zgušnjavanje i rastvore koji čine formulaciju izotoničnom sa krvi (ili drugom relevantnom telesnom tečnosti) namenjenog primaoca. Primeri ekscipijenasa uključuju, na primer, vodu, alkohole, poltole, glicerol, biljna ulja i slično. Primeri prikladnih izotonicnih nosača za upotrebu u takvim sastavima uključuju natrijum hlorid za injekcije, Ringerov rastvor, ili laktoznu Ringerovu injekciju. Tipično, koncentracija jedinjenja u tečnosti je od oko 1 ng/ml do oko 10 mg/ml, na primer od oko 10 ng/ml do 1 mg/ml. Sastavi mogu biti dati u jediničnoj dozi ili višestrukoj dozi, na primer, ampuli i bočici, i mogu bili sačuvani u suvo zamrznutim (liofiliziranim) uslovima koji zahtevaju samo dodavanje sterilnog tečnog nosača, na primer vode za injekcije, neposredno pre upotrebe. Improvizirani injekcijski rastvori i suspenzije mogu se pripremiti iz sterilnih prašaka, granula i tableta.
Primeri nekih poželjnih formulacija
[0233]Pronalazak daje jedinicu doziranja (npr. Farmaceutsku tabletu ili kapsulu) koja se sastoji od 20 do 300 mg jedinjenja kao što je ovde opisano (npr. dobijena, ili se može dobiti, na način kao što je opisano ovde, koja ima čistoću, kako je opisano ovde, itd), i farmaceutski prihvatljivog nosača, razredivača ili ekscipijensa.
[0234]U nekim otelotvorenjima, jedinica doziranja je tableta.
U nekim otelotvorenjima, jedinica za doziranje je kapsula.
[0235]U nekim otelotvorenjima, kapsule su želatinske kapsule.
U nekim otelotvorenjima, kapsule su HPMC (hidroksipropilmetilceluloza) kapsule.
[0236]U nekim otelotvorenjima, količina je od 30 do 200 mg.
U nekim otelotvorenjima, količina je oko 30 mg.
U nekim otelotvorenjima, količina je oko 60 mg.
U nekim otelotvorenjima, količina je oko 100 mg.
U nekim otelotvorenjima, količina je oko 150 mg. U nekim otelotvorenjima, količina je oko 200 mg.
[0237]Kroz ovaj tekst, količine doziranja, npr. Kao što je gore navedeno, mogu se odnositi na količinu samog jedinjenja ili se mogu odnositi na količinu slobodnog baznog ekvivalenta (tj. Količina LMT grupe), koji se nalazi u jedinici za doziranje. Obe ove mogućnosti su izričito opisane u ovom pronalasku.
[0238]U nekim otelotvorenjima, farmaceutski prihvatljiv nosač, razredivač ili ekscipijens je ili sadrži jednu ili oba od glicerida (npr. Gelucire 44/14®,lauroii makrogol-32 gliceridi PhEur, USP) i koloidni silicijum dioksid (npr. 2% Aerosil 200 ®; Colliodal Silicon Dioxide PhEur, USP).
Nove formulacije - čvrsti oblici doziranja
[0239]Postupci koji se obično koriste za formuliranje tableta i filmova često zahtevaju korišćenje toplote praćen niskom viažnoŠću tokom procesa sušenja.
[02401LMTM i ostale leuko-metiltionijum soli su potencijalno sklone oksidaciji do metiltionijum dela (MT) i degradaciji npr. do L Azure B (LAB) (pogledati šemu ispod):
[02411Za materijale, kao što je npr. LMTM, koji je sklon oksidaciji (kao što je objašnjeno gore), konvencionalni postupci formulacije mogu dovesti do degradacije i stoga, potencijalno, do nestabilnosti u performansama proizvoda.
[0242] Princip formulacija iz ovog pronalaska je, dakle, pružanje postupka za proizvodnju kompresovanih farmaceutskih sastava i kapsula koje sadrže leuko-metiltionijum soli npr. Bis(metansulfonat) (LMTM) kao aktivnu supstancu, tehnologijom direktne kompresije tableta ili drugim jedinstvenih tehnikama tabletiranja, i kapsuliranjem, gde aktivna supstanca značajno postoji u stabilnom obliku.
[0243] Postupak koji se najčešće koristi za pripremu čvrstih oblika za doziranje je mokra granulacija (još se naziva i vlažna granulacija). To uključuje dodavanje tečnosti za granulaciju prašku. Tečnost za granulaciju može biti voda ili neki drugi rastvarač koji je dovoljno je volatilan da se zatim može ukloniti sušenjem. Granulirajuća tečnost može takođe uključiti veznik. Nakon što je rastvarač uklonjen, dobivena masa se melje.
[0244] Mokra granulacija se često preferira u odnosu na direktnu kompresiju, jer je za vlažnu granulaciju verovatno da će nadvladati bilo kakve probleme povezane sa fizičkim karakteristikama različitih sastojaka formulacije. Vlažne granulacije daju materijal, koji ima potreban protok i kohezivna svojstava potrebnih za dobijanje prihvatljivog čvrstog oblika doziranja. Uniformnost sadržaja čvrstog oblikazadoziranje je uglavnom poboljšana vlažnom granulacijom jer sve granule obično sadrže istu količinu leka. Segregacija leka iz ekscipijensa se takođe izbegava.
[0245] Kod direktne kompresije pojedini sastojci sastava koji se kompresuje su pomešani bez prethodne granulacije i zatim su direktno kompresovani. lako se za ovo čini se da je elegantan i jednostavan proces, može biti teško dobili tim putem komercijalno iskoristive tablete koje imaju dovoljno snage i koje se raspadaju dovoljno brzo nakon primene. Takođe, mnoge aktivne supstance ne mogu biti obrađene direktnim kompresovanjem, jer se one ne mogu se komprimirati bez koraka granulacije.
[0246] Sada je, neočekivano, otkriveno da su jedinjenja prema ovom pronalasku stabilna u suhom komprimiranom čvrstom obliku za doziranje kao što je tableta, tokom proizvodnje i skladištenja, i da se količina degradacionih produkata kao što su L Azure B (LAB) i metiltioninijum (MT) koja nastaje može kontrolisati unutar specifikacija (npr. LAB manje od 2% i MT manje od 12%).
[0247] Ovo je u suprotnosti sa ponašanjem npr. LMTM pri procesuiraju uobičajenim postupcima vlažne granulacija. Bez. namere da se vežemo za teoriju, kod uobičajene vlažne granulacije LMTM, na primer, može biti vrlo nestabilan i znatna količinu LAB i MT može se formirati.
[0248] U skladu s tim, ovaj pronalazak daje farmaceutski sastav koji sadrži jedinjenje prema ovom pronalasku, u čvrstom obliku doze. sastav poželjno dalje sadrži barem jedan razredivač pogodan za suvu kompresiju. Farmaceutski sastav je karakterisan time da jedinjenje postoji u značajno stabilnom obliku.
[0249]Prikazani pronalazak takođe pruža protočan, kohezivni prah, koji sadrži jedinjenje prema ovom pronalasku i najmanje jedan razredivač pogodan za suvu kompresiju, i prema potrebi jedan ili više drugih ekscipijensa, gde je spomenuti prah pogodna da se kompresuje u čvrst oblik doziranja.
[0250]Ovi sastavi i formulacije se inicijalno ovde opisan u odnosu na bis(sulfonat) soli ovog pronalaska, posebno LMTM. Međutim, prednosti ovog načina formulacije mogu se primeniti na ostale članove leuko-metiltionijum porodice soli.
[0251]Na primer, formulacije koje su ovde opisane mogu se primeniti i na 3,7-diamino-lOH-fenotiazinijum soii opisane u VVO2007/110627 (VVtsTa Laboratories Ltd.), koje su ukratko objašnjene gore. One uključuju leukometiltionijum bis(hidrobromid) (LMT.2HBr, LMTB) i leuko-metiltionijum bis (hidrohlorid)
(LMT.2HC1, LMTC).
[0252]Prema tome, ovaj pronalazak takođe daje farmaceutski sastav koji sadrži jedinjenje naredne formule
I:
gde:
R<1>, R9,R3N\R3NB, R7NA iR7N<U>su kako je prethodno definisano;
gde je svaki od HX<!>i HXJ nezavisno protična kiselina;
ili njihova farmaceutski prihvatljiva so, solvat ili hidrat;
u čvrstom obliku doziranja kako je opisano ovde.
[0253]Zarad celovitosti, napomena je da, kako bi razumeo stručnjak u oblasti, gore navedena formula može isto da se napiše kao:
gdesuX<1>i X2 odgovarajući kontrajoni.
[0254]Poželjno je da su X<1>i X" nezavisno sulfonat (kao alkilsulfonat ili arilsulfonat, na primer R<A>SO( ili R<B>S03kao što je gore definirano) ili halid (Cl-, Br-, I-). Drugim rećima, HX' i HX<i>su poželjno nezavisno sulfonske kiseline (R<A>S03H, R<R>S03H) ili hidrohalidi (HC1, HBr, HI).
[0255]Kao što se koristi u daljnjem tekstu, izraz „aktivni sastojak" odnosi se na relevantne leuko(metiltioninijum) soli. Drugim riječima, odnosi se na jedinjenje formule (I), kao Što je jedinjenje prema ovom pronalasku, na primer LMTM.
[0256]Prikazani pronalazak takođe daje postupak za proizvodnju spomenutih farmaceutskih sastava, postupkom suve kompresije. Postupak poželjno obuhvata suvu kompresiju smese intimnog praha aktivnog jedinjenja sa najmanje jednim razređivačem prikladnim za suvu kompresiju, i po izboru jednim ili više drugih ekscipijenasa.
[0257]U nekim otelotvorenjima, postupak obuhvata direktno kompresovanje.
[0258] U nekim otelotvorenjima, postupak obuhvata jednostavno direktno kompresovanje.
U nekim otelotvorenjima, postupak sadrži suvu granulaciju.
U nekim otelotvorenjima, postupak obuhvata vlažnu granulaciju ekscipijenasa, nakon čega sledi dodavanje aktivnog sastojka van-granularno.
[0259] Čvrsti oblici za doziranje prema pronalasku imaju prednost da pokazuju dugotrajnu hemijsku i fizičku stabilnost aktivnog sastojka (jedinjenje prema ovom pronalasku - na primer LMTM). Farmaceutski sastavi prema ovom pronalasku takođe imaju brze stope rastvaranja čak i nakon dugoročnog čuvanja.
[0260]„Značajno stabilan" oblik aktivnog sastojka znači u ovom kontekstu, oblik koji ne reaguje da formira nečistoće, kao što su oksidativne nečistoće i drugih proizvodi razgradnje do bilo kog značajnog stupnja tokom postupka formulisanja, ili skladištenje formulisanog proizvoda.
[0261]Zbog toga se u ovom kontekstu može odnositi na materijal koji sadrži, na primer, manje od 20% težine, manje od 15% težine ili manje od 10% težine oksidativnih nečistoća ili drugih proizvoda degradacije. Drugim recima, materijal koji sadrži najmanje 80% težine, najmanje 85% težine, ili najmanje 90% težine čistog aktivnog sastojka, u izvornom (nereagovanom) obliku.
[0262]U nekim otelotvorenjima, materijal koji sadrži aktivni sastojak može sadržati, na primer, manje od 20% težine, manje od 15% težine, manje od 12% težine ili manje od 10% težine MT. U nekim otelotvorenjima, takav materijal može sadržati, na primer, manje od 5% težine, manje od 3% težine ili manje od 2% težine LAB.
[0263] „Stabilna" tableta, u kontekstu ovog opisa, je tableta koja ostaje uglavnom stabilna i nakon produženog skladištenja pod kontrolisanim uslovima temperature i vlažnosti. Ispitivanje stabilnosti može se sprovesti sa čvrstim oblicima doziranja direktno izloženim izabranim uslovima, ili s čvrstim oblicima doziranja sadržanim unutar ambalaže.
Sadržaj aktivnog sastojka
[0264]Količina aktivnog sastojka u neobloženom sastavu je uglavnom više od oko 10% težine, ali može biti više od 20%, ili više od 30% težine. Količina aktivnog sastojka je obično manja od oko 70% težine, i obično manja od 60% ili manja od 50% težine, u formulaciji tablete. Tipično, količina aktivnog sastojka u jezgru sastava neobeležene tablete je stoga od oko 10% težine (ili 20% ili 30%) do oko 70% težine (ili 60% ili 50%). Kada se prevlaka nanose na sastav, kao što je opisano u nastavku, ukupna masa sastava se povećava, a time se i udeo aktivnog sastojka u ukupnom sastavu nešto smanjuje.
Razređivači
[0265] Aktivni sastojak sam po sebi ne mora biti podložan kompresovanju i stoga može da zahteva dodavanje odgovarajućeg razređivača za pomoć kompresije.
[0266] Farmaceutski sastavi iz pronalaska stoga obično sadrže najmanje 15% težine, još češće najmanje 20%, najmanje 30%, najmanje 40% ili najmanje 50% težine razređivača.
[0267]Razređivači koji mogu da se koristiti obuhvataju jedan ili više od sledećeg: mikrokristalna celuloza, laktoza, manitol, soli kalcijuma, kao što su, dibazni kalcijum fosfat, kalcijum sulfat i kalcijum karbonat, i šećeri kao što su laktoza, saharoza, dekstroza i maltodekstrin.
[0268] Poželjni razređivači su mikrokristalna celuloza, laktoza i manitol. Raspršivanjem osušeni oblici laktoze i manitola su posebno pogodni oblici tih jedinjenja za direktno kompresovanje ili suvo granuliranje.
[0269]Neočekivano je otkriveno da kada se aktivni sastojak kao što je ovde opisano, na primer, jedinjenje iz ovog pronalaska, kao Što je LMTM, formuliše sa razređivačima suve kompresije, kao što su jedan ili više od skdćeg: mikrokristalna celuloza, raspršivanjem osušena laktoza, bezvodna laktozu i manitol, dobiveni čvrsti oblici doziranja su stabilni u smislu da aktivni sastojak ostaje hemijski stabilan čak i nakon produženog skladištenja.
[0270]Obelodanjenje tako daje postupak za dobijanje tableta niske, srednje ili visoke doze, na primer LMTM tablete sa niskim, srednjim ili visokim dozama, koje su stabilne i imaju dobre profile rastvaranja, prihvatljiv stepen tvrdoće i otpornosti na struganje, i kratko vreme razgradnje.
Rastvaranja sastava pronalaska
[0271]Tvorci ovog pronalaska su takođe neočekivano otkrili da jedinstveni oblici čvrstog doziranja opisani ovde omogućuje vrlo brzo stopu rastvaranja.
[0272]Kao što je objašnjeno ranije, bez namere da se vežemo za teoriju, smatra se da aktivni metiltioninijum (MT) može poželjno da se apsorbuje iz želuca i/ili gornjeg gastrointestinalnog trakta. Formulacija leuko (metiltioninijum) soli za brzu razgrađivanje i brzo rastvaranje stoga može biti korisna, budući da bi se to postiglo maksimalnu moguću količinu leka na predviđenom mestu apsorpcije.
[0273]Brzina stopa rastvaranja čvrstih oblika doziranja koji su ovde opisani znači da su sposobni za brzo rastvaranje u želucu i/ili gornjem gastrointestinalnom traktu i stoga tu isporučuju aktivni sastojak efikasno, za brzu apsorpciju.
[0274]U nekim otelotvorenjima, formulacije iz ovog pronalaska, kada se procenjuju pomoću uobičajenog postupka farmakopeje, daju najmanje 80% rastvaranja u 30 minuta, poželjno 80% rastvaranja u 15 minuta, još poželjnije najmanje 80% rastvaranja u 10 minuta.
[0275]U nekim otelotvorenjima, formulacije iz ovog pronalaska, kada se procenjuju pomoću uobičajenog postupka farmakopeje, daju najmanje 90% rastvaranja u 30 minuta, poželjno barem 90% rastvaranja u 15 minuta, još poželjnije barem 90% rastvaranja u 10 minuta.
[0276]U nekim otelotvorenjima, formulacije iz ovog pronalaska, kada se procenjuju pomoću uobičajenog postupka farmakopeje, daju najmanje 95% rastvaranja u 30 minuta, poželjno barem 95% rastvaranja u 1.5 minuta, još poželjnije barem 95% rastvaranja u 10 minuta.
[0277]Stope rastvaranja mogu se meriti standardnim postupcima farmakopeje kako je opisano u United States Pharmacopeia (USP) General Chapter <711>. Sadašnji, USP je USP 34 (2011). Na primer, stopa rastvaranja za formulacije iz pronalaska može se meriti pomoću uređaja prema USP Dissolution Apparatus 2 (Paddle).
[0278]U nekim otelotvorenjima, gore navedene stope rastvaranja procenjene su u 0,1 M klorovodičnoj kiselini na radnoj koncentraciji od~5 mg/ml LMT, uz mešanje pri brzini lopaticama od 50 rpm. U nekim otelotvorenjima, stope rastvaranja se procenjuju spektrofotometrijskom analizom. U nekim otelotvorenjima, analiza sadrži U V/vis spektrofotometriju (Amax LMT = 255 nm).
[0279]Kao posledica njihove iznenađujuće visoke stope rastvaranja, ovde opisani postupci za formulaciju mogu dati aktivno jedinjenje sa visokom bioraspoloživosti.
[0280]Brzi stopa rastvaranja ostaje i nakon dužeg skladištenja, čak i ako se skladište nalazi se pod „slrestnim" uslovima (tj. povećana temperatura i vlažnost). Brza stopa rastvaranja, i stoga dobra bioraspoloživost sastava formulisanih u skladu sa postupcima ovog pronalaska takođe je visoko tolerantna na varijacije same formulacije.
Drugi sastojci
[0281]Farmaceutski sastav uglavnom će takođe sadržiti lubrikant. Primeri lubrikanata uključuju magnezijum stearat, kalcijum stearat, natrijum stearil-fumarat, stearinsku kiselina, glicerilbehaptat, polietilen glikol, polimere etilen oksida (na primer, one koja je dostupna pod registriranim žigom Carbowax od Union Carbide, Inc., Danburv, CT), natrijum lauril sulfat, magnezijum lauril stearat, smesu magnezijum stearata sa natrijum lauril sulfata i hidrogenirano biljno ulje. Poželjni lubrikanti uključuju kalcijum stearat, magnezijum stearat i natrijum stearil-fumarat. Najpoželjniji lubrikant je magnezijum stearat. Lubrikanti uglavnom čine od oko 0,5 do oko 5,0% ukupne (neobložene) težine tablete. Količina lubrikanta iznosi uglavnom od oko 1,0 do oko 2,0%, poželjno 0,5 do 2,0% težine.
[0282]Osim rastvarača i lubrikanata, drugi uobičajeni ekscipijensi mogu takođe biti prisutni u farmaceutskim sastavima ovog pronalaska. Takvi dodatni ekscipijensi uključuju agense za razgradnju, veznike, agense za poboljšanje ukusa, boje i agense za klizanje. Neki ekscipijenti mogu imati više funkcija, na primer, kao veznici i agensi za razgrađivanje tablete.
[0283]Agens za razgrađivanje tablete može biti prisutan u količini koja je potrebna da se postigne brzo rastvaranje. Agensi za razgrađivanje su ekscipijensi koje se suprotstavljaju fizičkoj snazi lepljenja čestica za
tablete ili kapsule, kada se oblik za doziranje stavi u vodeno okruženje. Primeri agenasa za razgrađivanje uključuju unakrsno povezani polivinilpirolidon (krospovidon), natrijum-karboksimetilskrob, umreženu natrijum karboksimetilcelulozu (natrijum kroskarmeloza), i preželatinizovani škrob. Uglavnom, količina agensa za razgradnju može biti od 0 do oko 25% težine, još češće od oko 1% do oko 15% težine, i obično manje od 10% ili manje od 5% težine, u odnosu na sastav.
[0284]Veznici su ekscipijensi koji doprinose prianjanju čestica u čvrstom formulacijom. Primeri veznika uključuju derivate celuloze (karboksimetilceluloza, hidroksipropilmetilceluloza, hidroksipropil celuloza, hidroksietil-celuloza, etilceluloza, mikrokristalne celuloza) i šećere kao što su laktoza, saharoza, dekstroza, glukoza, maltodekstrin, i manitol, ksilitol, polimetakrilati, polivinilpirolidon, sorbitol, pred-želatinizirani škrob, alginske kiseline, i njihovih soli, poput natrijevog alginata, magnezijum aluminijum silikat, polietilen glikol, karagenan i slično. Uglavnom, količina veziva može široko varirati, npr. od 0% do 95% težine sastava. Kao što je gore navedeno, ekscipijensi mogu imati višestruku funkciju. Na primer, tablete za razređivanje mogu takođe služiti kao veznici.
[0285]Klizači su supstance koje se dodaju u prah radi poboljšanja sposobnosti protočnosti. Primeri klizača uključuju magnezijum stearat, koloidni silicijum dioksid (na primer, one koje prodaje Aerosil), škrob i talk. Klizači mogu biti prisutni u farmaceutskom sastavu u količini od 0 do oko 5% težine. Ponovno, međutim, valja naglasiti da se ekscipijensi mogu imati višestruku funkciju. Lubrikant, na primer magnezijum stearat, može delovati i kao klizač.
[0286]Primeri boja koje se mogu inkorporisati u farmaceutske sastave iz pronalaska uključuju titanijum dioksid i/ili boje prikladne za hranu kao što su one poznate kao FD & C boje i prirodne agense za bojenje. Agensi za bojenje se verovatno neće koristiti u mešavini praha koja je kompresovana u skladu sa aspektima pronalaska koji je pre razmotren, ali može biti dio prevlake koja se nanosi na sastav, kao što je opisano niže, u kom slučaju agens za bojanje može biti prisutan u filmu prevlake u količini do oko 2,0% težine.
[0287]Tablete su poželjno presvučene sa konvencionalnim filmom prevlake, koje daje žilavost, lakoću gutanja, i elegantan izgled konačnom proizvodu. Mnogi polimerni materijali za premazivanje raspršivanjem su poznati u struci. Poželjni materijal za oblaganje filmom je hidroksipropilmetilceluloza (HPMC) ili polivinil alkohol delom hidrolizovan (PVA). HPMC i PVA se mogu dobiti komercijalno, na primer od kompanije Colorcon, u formulacijama za oblaganju koje sadrže ekscipijense koji služe kao pomoć za oblaganje, pod registrovanim igom Opadry. Opadry formulacije mogu sadržiti talk, polidekstrozu, triacetin, polietilen glikol, polisorbat 80, titanijum dioksid, i jednu ili više boja ili lakova. Drugi prikladni polimeri koji stvaraju film mogu se takođe koristiti, uključujući hidroksipropilcelulozu, vinil polimere, kao što je polivinil pirolidon i polivinil acetat, i akrilat-metakrilat. Upotreba oblaganja filmom je koristan zbog lakoće rukovanja i zbog plavo nepresvučeno jezgro može zaprljati unutrašnjost usta tokom gutanja. Premaz takođe poboljšava stabilnost oblika doziranja na svetlu.
[0288]Oblaganje tableta se može uobičajeno sprovesti upotrebom uobičajenih posuda za prevlačenje. U poželjnim otelotvorenjima postupka, oblaganje se prethodno zagreva pomoću zagrejanog ulaznog vazduha dok temperatura ispusta ne dostigne 35-55°C, poželjnije 40-50°C. To obično zahteva primenu zagrejanog ulaznog vazduha pri ulaznoj temperaturi od 45-75°C, poželjnije 50-65 ° C, tokom 10-15 minuta. Jezgre tableta koja sadrže aktivni sastojak (npr. LMTM) se zatim dodaju u posudu za oblaganje, i vodeni tanki sloj se nanosi. Brzina prskanja se kontroliše tako da se temperatura sloja održava na 38-48°C, poželjnije 42-44°C, dok se ne postigne željeni porast težine (težina prevlake).
Postupci suve kompresije
[0289]„suva kompresije", kao što se ovde koristi, odnosi se na tehnike kompresije koje ne uključuju upotrebu toplote i vlage. Suva kompresija može obuhvatati direktno kompresovanje aktivnog sastojka sa prikladnim razredivačem, ili može obuhvatati suvu granulaciju (npr. nabijanje/postupak dvostruke kompresije ili pomoću valjka).
[0290]Direktna kompresija može obuhvatati jednostavno direktno kompresovanje aktivnog sastojka sa razređivačima pogodnim za direktnu kompresiju. Alternativno, može obuhvatati granulacije, na primer vlažnu granulacijom, ekspicijense da proizvedu suvu granuliranu mešavinu ekscipijensa koja se zatim može direktno komprsovati sa suvim aktivnim sastojkom (i prema potrebi daljim suvim ekscipijensom). To može biti nazvano kao „ekstra-granularna ugradnja" aktivnog sastojka.
[0291]U skladu s time, u nekim otelotvorenjima čvrsti oblici doziranja iz pronalaska mogu se proizvesti u procesu proizvodnje koji obuhvata jednostavno direktno kompresovanje. U ovom otelotvorenju, sastojci
tablete, tj. aktivni sastojci (na primer LMTM), rastvarači i drugih izborni ekscipijensi se zajedno mešaju u obliku čvrstih čestica za stvaranje homogene smese, npr. u nekontinuiranoj mešalici, a zatim komprimiraju pomoću uređaja za tabletiranje.
[0292]U drugim otelotvorenjima, sastav je pripremljen postupkom suve granulacije. Suva granulacija se odnosi na proces granulacije bez upotrebe granulacionih tečnosti. Da bi se materijal se suvo granulirao, najmanje jedan od njegovih sastavnih dijelova, ili aktivni sastojak ili razredivač, mora imati kohezivna svojstva. Suva granulacija može se provesti procesom poznatim kao „nabijanje". Kod „nabijanja" materijal koji se granulira se najpre pravi u velikoj komprseoanij masi ili „grumenu", tipično pomoću prese za tablete sa alatom sa velikim ravnim licem (primer linearne presa je prikazan u US 4,880,373). Relativno gust grumen može se formirati ostavljajući dovoljno vremena da vazduh pobegne iz materijala koji se kompresuje. Komprimirani grumeni se potom melju kroz željeno sito ručno ili automatski, na primer, putem mlina za usitnjavanje. Formiranje granula „nabijanjem" takođe je poznato kao prekompresovanje. Kada se
tablete izrađuju od granuliranog nabijenog materijala, proces se naziva „dvostruki postupak kompresije".
[0293]Suvi granulat se može sprovesti pomoću „valjka za sabijanje". U valjku za sabijanje, čestice materijala se konsoliduju i zgušnjavaju polaganjem materijala između dva valjka visokog pritiska. Zgusnuti materijal iz valjka za sabijanje se zatim mlevenjem redukuje do uniformne veličine granula. Uniformne granule se zatim mešaju sa drugim supstancama, kao što su lubrikanti, za stavljanje materijala u tablete (kao što je, na primer, rotacionom mašinom za tabletiranje). Osim farmaceutske upotrebe, sabijanja valjkom se koristi u drugim industrijama, kao Što su prehrambena industrije, industrije stočne hrane i industrije đubriva.
[0294]Za suvo granuliranje se danas uglavnom pođrazumeva sabijanje valjkom ili nabijanje, i dobro je poznato stručnjacima u ovoj oblasti (pogledati, na primer, Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets (Lieberman, Lachman, and Schwartz (Eds); Marcel Dekker, Ine, 2nd Edition, 1989) i Remington's Pharmaceutical Sciences (A. R. Gennaro (Ed); Mack Publishing Co, Easton, PA, 18th edition, 1990)).
[0295]U daljnjim otelotvorenjima ovog pronalaska, tablete se pripremaju vlažnim granuliranjem ekscipijenasa i ugradnjom aktivnog sastojka (na primer LMTM) izvan granula. Tipično, takav postupak uključuje vlažne razređivače kao što su laktoza i/ili mikrokristalna celuloza sa vodom, po potrebi uz dodatak veznika, kao Što je polivinil pirolidon. Vlažna masa se suši i zatim propušta kroz sito, kako bi se formirale granule. Aktivni sastojak, i preostali ekscipijensi, kao što su agensi za podmazivanje, se zatim mešaju sa suvim granulama i kompresuju u oblik tableta.
Upotreba kiselina u sastavima pronalaska
[0296]Sastavi koji sadrže leuko (metiltioninijum) jedinjenja, uključujući jedinjenja ovog pronalaska, kao što su LMTM mogu se, u nekim ostvarenjima, stabilizovati dodatkom odgovarajuće količine pojedinih kiselina u velikoj zapremini supstance pre formulacije. Te kiseline se mogu koristiti za sprečavanje stvaranja daljeg MT, tokom formuiisanja i tokom trajanja proizvoda, čime se dobija stabilan farmaceutski sastav za potrebe postizanja regulacionog odobrenja sa povezanim uštedama u ambalaži.
[0297]Stoga, takođe je dobijen ovim pronalaskom je i farmaceutski sastav koji sadrži aktivni sastojak kao što je ovde opisano i farmaceutski prihvatljiv nosač, gde navedene formulacije dodatno sadrže kiselinu u količini dovoljnoj za sprečavanje nastanka MT. Bez namere da se vežemo za teoriju, smatra se da su u prednosti one koje imaju pKl veći od 1,5. U nekim otelotvorenjima, kiselina je prisutna u količini od 5% do 25% težine.
[0298]Poželjno je da je sastav pripremljen postupkom suve kompresije kao što je gore opisano.
[0299]Povoljne kiseline za tu svrhu su maleinska kiselina (pKl 1.9), fosfatna kiselina ( pKl 2,12), askorbinska kiselina ( pKl 4.17), sorbinska kiselina ( pKl 4,76), asparaginska kiselina, i sijalinska kiseline. Stabilizujući učinak dodane kiseline može se povećati izborom odgovarajućeg nosača. Nosač je ponajpre manitol, celulozni materijal, ili škrob, ili njihova smesa. Nosač je obično prisutan u količini od najmanje 40% težine sastava.
Veličina čestice
[0300]takođe je otkriveno da se značajno smanjenje formiranja MT može postići odabirom odgovarajućeg opsega veličine čestica za suve praskaste smese, tipično gde više od 10% čestica ima veličinu veću od 10 mikrona. Stoga ovaj pronalazak takođe daje farmaceutski sastav koji sadrži aktivni sastojak kao što je ovde opisano i farmaceutski prihvatljiv nosač, dodatno karakterisan time da se navedeni sastav sastoji od čestica kod kojih više od 10% ima veličinu veću od 10 mikrona.
Nosači
[0301]Otkriveno je da se značajno smanjenje formiranja MT takođe može postići s izborom odgovarajućeg nosača, posebno onog koji ima oblik čestica koja je sprečavaju ulazak vode. Elcema TM, na primer, koja ima dugačke, lamelne čestice koje su glatkog i ravnog oblika sa neporoznom površinom, Čini se da se smanji stvaranje MT ograničavajući pristup vodi. Etilceluloza, manitol i Starch 1500 TM i mikrokristalna celuloza su takođe posebno prikladni za tu svrhu.
[0302]Zbog toga se prikazani pronalazak takođe odnosi na farmaceutski sastav koji sadrži leuko (metiltioninijum) jedinjenje, na primer, jedinjenje prema ovom pronalasku, kao što su LMTM, i farmaceutski prihvatljiva podlogu, karakterisano time da je spomenuti nosač Elcema TM, etilceluloza, manitol, ili Starch 1500 TM.
Inkapsulacija
[0303]Stabilizovane praškaste meŠavine kako su ovde opisane mogu biti formulisane, na primer, kompresovanjem u tablete ili punjenjem u kapsula (sa ili bez prethodne konverzije granuliranog praška načinima kao Što je opisano u primerima formulacija 1 do 4), pri čemu farmaceutski sastavi imaju odličnu trajnost.
[0304]Kapsule kao što je ovde opisano su obično od želatina ili poželjno HPMC. Poželjni ekscipijensi uključuju laktozu, škrob, celulozu, mlečni šećer i polietilen glikole visokog MW.
Zaključci
[0305]Farmaceutski sastavi i formulacije pripremljeni u skladu s gore opisanim postupcima stabilniji su, neposredno nakon završetka proizvodnje, nego formulacije proizvedene korsiteći uobičajene vodene granulacije. Osim toga oni mogu pokazati poboljšanu stabilnost pri skladištenju.
[0306]Na primer, farmaceutska formulacija tako pripremljena, sa sadržajem od 10 do 50% od težine LMTM, poželjnije 15% do 40% od težine LMTM, omogućuje da se u standardnim testovima stabilnosti, na primer u ubrzanom dugoročnom testu stabilnosti, pri temperaturi od 25°C i relativnoj vlažnosti 60±5% sadržaj L Azure B se ne povećava za više od 2%, u odnosu na LMTM vrh, u roku od 24 meseca.
[0307]Za vreme obrade i na čuvanja leuko (metiltioninijum) jedinjenja, kao što je LMTM. takode mogu oksidovati kako bi proizveli malu količinu MT (pogledati Šemu, gore).
[0308]Prisustvo relativno malih koncentracija (npr. manje od 12%) MT u leuko-formulacijama ovog pronalaska, premda je to nepoželjno, ne smatra se da ima štetan klinički značajper sejer i kada se telu da MT u svom nabijenom ili oksidovanom obliku od LMTM i raznih drugih leuko soli, to stanje se zatim može redukovati do nenabijenog (redukovanog) MT oblika pre apsorpcije. Osim male količine MT nastale tokom obrade, kao što je mešanje i tabletiranje, leuko-metiltioninijum soli ovog pronalaska mogu reagovati sa kiseonikom apsorbovanim na ekscipijensima i prisutnim u tableti kako bi se dobilo više MT posebno u prisustvu vlage.
[0309]Jedna prednost formulacija ovog pronalaska je da se minimizuje količina MT formiranog u tabletama, npr. manje od 12% tokom 0 godine, ako se čuvaju na 25°C uz relativnu vlagu od 60%. To se odnosi na kumulativni iznos MT formiran tokom obrade i čuvanja tableta: uglavnom, metode formulacija opisane ovde uzrokuju manje od 5% formiranja MT tokom prerade; zatim se formira najviše oko 5-7% MT tokom skladištenja gotovog proizvoda. To daje rok trajanja od najmanje 24 meseca.
[0310]Ovo je demonstrirano u primerima formulacija u nastavku.
D oziranje
[0311]Biće prihvaćeno od stručnjaka da odgovarajuće doze jedinjenja, i sastava koji sadrže jedinjenja, mogu varirati od pacijenta do pacijenta. Određivanje optimalnog doziranja će uglavnom uključivati uravnoteženje nivoa terapijskog davanja prema bilo kom riziku ili nuspojavama. Veličina odabrane doze zavisiće od različitim faktorima, uključujući, ali ne ograničavajući se na, aktivnost određenog jedinjenja, način davanja, vreme davanja, brzina izlučivanja jedinjenja, trajanja lečenja, drugih lekova, jedinjenja i/ili materijala koji se koriste u kombinaciji, ozbiljnosti stanja, kao i vrste, pola, starosti, težine, stanja, opšteg zdravlja i prethodnih bolesti pacijenta. Količina jedinjenja i način primene će biti na odluci lekara, veterinara ili kliničara, iako će se uglavnom doza birati kako bi se postigle lokalne koncentracije na mestu primene koje postižu željeni učinak, bez uzrokovanja Štetnih ili pogubnih nuspojava.
[0312]Davanje se može vršiti u jednoj dozi, kontinuirano ili sa prekidima (npr. u podeljenim dozama u odgovarajućim intervalima) tokom trajanja tretmana. Postupci za određivanje najefikasnijih načina i doza primene dobro su poznati su-učnjacima u ovoj oblasti i variraće sa formulacijom za lečenje i svrhom terapije, ciljanih ćelija koje se leče, i pacijenta koji se leči. Jednokratna ili višekratna primena može se sprovesti sa nivoom doziranja i obrascem koji se bira od strane lekara, veterinara ili kliničara.
[0313]Uglavnom, pogodna doza jedinjenja je u rasponu od oko 100 ng do oko 25 mg (tipično oko 1 ug do oko 10 mg) po kilogramu telesne težine pacijenta dnevno.
[0314]U nekim otelotvorenjima, jedinjenje se primenjuje na ljudskom pacijentu prema sledećem režimu doziranja: oko 100 mg, 3 puta dnevno.
[0315]U nekim otelotvorenjima, jedinjenje se primenjuje na ljudskom pacijentu prema sledećem režimu doziranja: oko 150 mg, 2 puta dnevno.
[0316]U nekim otelotvorenjima, jedinjenje se primenjuje na ljudskom pacijentu prema sledećem režimu doziranja: oko 200 mg, 2 puta dnevno.
PRIMERI
[0317]Naredni primeri su dati isključivo da ilustruju ovaj pronalazak bez namere da mu ograničavaju opseg.
Primer 1 - Sinteza i karakterisanje
Laboratorijska sinteza - acetil - N . N . N '. N '- tetrametiifenoatiazin - 3J - diamina
[0318]
korak i; NaN02, DMSO, CHjCOOH, korak ii; (H?CCO)02, Et:)N, DMF, korak iii; Pd/C, 2-MeTHF, H2korak iv; H2CO, H2ili korak iii; Zn, (vodeni) NH4C1, MeOH, THF korak iv; H2CO, NaGNBH),
CHhCOOH
Sinteza 3, 7- dinitro- H- fenotiazina ( 2)
[0319]U 1-litarsku bocu sa tri grla i okruglim dnom (RBF) opremljenu sa termometrom, levkom za kapanje i kondenzatorom dodat je fenotiazin (MW 199,28 g/mol, 25,00 g, 125,5 mmol) i dimetilsulfoksid (250 ml) smesa je mešana tokom 2 minuta ili dok se fenotiazin nije rastvoren. Kondenzator je zatim povezan za DrešeI bocu polu-popunjenu sa vodom. Natrijum nitrit (MW 69,00 g/mol, 51,94 g, 752,7 mmol) je zatim dodat u RBF i sirćetna kiselina (150 ml) je dodata levku za kapanje. Sirćetna kiselina je zatim dodata u RBF kapanjem tokom perioda od 20 minuta. Svetio žuti mulj postaje crvene boje i u čvrstom obliku se taloži van rastvora. Nakon završetka dodavanja sirćetne kiseline smesa je mešana tokom 2 sata na sobnoj temperaturi
(36-20 °C) pre povećanja temperature do 95 °C i mešana tokom 17 sati. Nakon tog vremena smesa je ohlađena do 50 °C i metanol (100 ml) je dodat i smesa je ohlađena dalje do 22 °C. Ohlađena smesa je zatim filtrirana i grudva je oprana sa metanolom (3 x 25 ml), oprana gntdva je ostavljena na filteru sa vakuumom primenjenim tokom 30 minuta pre sušenja tokom 15 sati na 50 °C kako bi se dobio proizvod kao braon čvrsto telo (MW 289,27 g/mol, 29,45 g, 81 %).
Napomene
[0320]1. Dodavanje sirćetne kiseline proizvelo je NOksgasove, koji su pretvoreni u azotnu kiselinu dopuštanjem gasu da se penuša u Drešel boci polu-popunjenoj sa vodom.
2. Dodavanje sirćetne kiseline je egzotermno i smesa raste od 22 °C do 36<S>C.
3. Metanol je dodat kako bi pomogao rastvaranje bilo kog natrijum acetata i kao anti-rastvarač kako bi maksimizovao prinos proizvoda. 4. Sinteza je takođe bila uspeŠna koristeći dimetilformamid (DMF), acetonitril (MeCN), tetrahidrofuran (THF), aceton ili dimetoksietane (DME) kao rastvarač reakcije.
[0321]NMR:proizvod (5 mg) je rastvoren u DMSO-d6 (1,5 ml) i može da zahteva da bude zagrejan da potpuno rastvori čvrsto telo.
6u(400 MHz; DMSO-d6): 6,72 (2H, d,J8,8, ArH, 7,77 (2H, d, J 2,8,ArH),7,87 (2H, dd, J 2,8, 8,8, ArH)
Sinteza 3, 7- dinitro— acetilfenotiazina ( 3)
[0322]U 500 ml bocu sa tri grla i okruglim dnom opremljenu sa termometrom i kondenzatorom dodat je 3,7-dinitrolOH-fenotiazin (MW 289,27 g/mol, 29,00 g, 100 mmol), dimetilformamid (58 ml), acetni anhidrid (MW 102,09 g/mol, 102,09 g, 1000 mmol) i trietilamin (MW 101,19 g/mol, 40,88 g, 401 mmol). Smesa je zagrejana do 105 °C i mešana na toj temperaturi tokom 3 sata. Smesa je ohlađena do sobne temperature (21 °C) pre nego što je ohlađena do 5<C>C kakva je mešana tokom 1 sata. proizvod je izolovan filtracijom i opran je sa metanolom (3 x 30 ml) kako bi se dobilo svetio žuto kristalno čvrsto telo, koje je osušeno na 50 °C tokom 15 sati (MW 331,31 g/mol, 26,94 g, 81 %).
Beleške
[0323]
1. Kristali proizvoda formirali su se tokom reakcije, nakon~1 sata na 105 °C.
2. Nakon hlađenja najveći deo proizvoda se taloži na - 70 °C.
3. Proizvod je bio narandžaste boje pre nego što je opran sa metanolom.
]0324]NMR:proizvod (10 mg) je rastvoren u DMSO-d6 (1,5 ml).
5u(400 MHz; DMSO-d6): 2,25 (3H, s,CH3),7,92 (2H, d, J 8,8, ArH), 8,28 (2H, dd, J 8,8, 2, ArH), 8,47 (2H, d,J2, ArH)
Sinteza - Acetil- N, N, N' N'- tetrametiifenotiazin- 3, 7- diamina ( 5)
[0325JU 100-ml bocu sa tri grla i okruglim dnom opremljenu sa termometrom i kondenzatorom dodat je 3,7-dinitro-10-acetilfenotiazin (MW 331,31 g/mol, 5 g, 15,09 mmol), paladijum na ugljeniku (10 %, suv, 0,5
g) i 2-metiltetrahidrofuran (25 ml). Boca je uklonjena i pročišćena sa vodonikom 5 puta pre nego što je smesa zagrejana do 56 °C. nakon 17 sati za redukciju je procenjeno da je dostigla završetak (pogledati tik
usiove) što je dalo jedinjenje 4, i formalin je dodat (MW 30,03 g/mol, 14,7 g, 181,1 mmol). Boca je još jednom uklonjena i pročišćena 5 puta sa vodonikom. nakon 71 sata od dodavanje formalina (ukupno vreme 88 sati) na 56 °C za tetra-metilacijau je procenjeno da je kompletirana. Smesa je filtrirana na 50 °C, siv katalizator je opran sa 2-metiltetrahidrofuranom (3x5 ml) i filtrat i ispiranja su kombinovani. Tom rastvoru dodat je metanol (5 ml) kako bi se homogenizovala smesa. hlađenje do 5 °C rezultovalo je u bezbojnom čvrstom telu taloženom od rastvora, dalje dve zapremine metanola (10 ml) su dodate i mulj je mešan tokom 50 minuta na 5 °C. sirov proizvod je izolovan filtracijom kako bi se dobilo bezbojno čvrsto telo, koje je je oprano sa metanolom (3x5 ml) i osušeno na 50 °C tokom 16 sati (MW 327,45 g/mol, 2,26 g, 46 %). Filtratu od izolacionog procesa dodata je voda (50 ml), koje je dala dalje čvrsto telo. suspenzija je mešana na 5 °C
tokom 2 sata pre nego što je prikupljena filtracijom, oprana sa metanolom (3x5 ml) i osušena na 50 °C tokom 13 sati. (MW 327,45 g/mol, 0,83 g, 17 %). ukupni prinos proizvoda je (3,09 g, 63 %).
Beleške
[0326]1. Tik uslovi normalne faze, eluent 75 % etil acetat, 25 % petroleum špiritus (40-60 °C), i UV lampa na 254nm. 2. Faktor zadržavanja dinitro početnog materijala je 0,68 kao žuta tačka, faktor zadržavanja proizvoda hidrogenacije je 0,25 kao plava tačka i faktor zadržavanja proizvoda metilacije je 0,67 kao svetio plava tačka. 3. Postupak tik analize koraka hidrogenacije su direktne tačke dok u analizi proizvoda metilacije reakcionom ostatku koji je ekstrakovan sa etil acetatom dodaje voda i zatim se stvaraju tačke. 4. Nakon 17 sati tik pokazuje dve tačke, glavna tačka je redukcioni proizvod, mala tačka je nepoznata.
5. Nakon 88 sati tik pokazuje uglavnom tetra-metilovan proizvod kao glavnu tačku.
6. Tipično, redukcija i metilacija će biti gotovi unutar 72 sata.
7. 1 sata NMR spektroskopi dva uzorka dali su identične spektrume, tragovi 2-metiltetrahidrofurana su detektovani zajedno sa nepoznatim signalom na 5 ppm.
[0327]NMR:proizvod (10 mg) je rastvoren u CDCb (1,5 ml).
5,i(400 MHz; CDC13): 2,09 (3H, s, CH3), 2,86 (12H, s, NCH3), 6,54 (2H, d, J 8, ArH), 6,64 (2H, s, ArH), 7,19 (2H, brds, ArH)
Alternativna Sinteza - Acetil- N, NtN' N'- tetrametilfenotiazin- 3, 7- diatmn ( 5)
[0328]U 50-ml bocu sa okruglim dnom dodat je 3,7-dinitro-10-acetilfenotiazin (M W 331,31 g/mol, 1 g, 3,02 mmol), cink prah (MW 65,39 g/mol, 1,38 g, 21,13 mmol), metanol (6 ml) i tetrahidrofuran (2 ml). Smesa je zagrejana do 50<C>C nakon čega je topli rastvor (45-50 °C) vodenog amonijum hlorida (MW 53,49 g/mol, 2,26 g, 42,26 mmol nije rastvoren u 6 ml vode) dodat polako kako bi se održao pažljivi refluks. Smesa je zatim zagrejana do 70 °C i mešana na toj temperaturi tokom dva sata nakon čega je ohlađena do sobne temperature (23 °C). Ohlađena smesa je filtrirana kako bi se uklonile cink soli i filtrat koji sadrži jedinjenje 4 je tretiran sa paraformaldehidom (MW 30,03 g/mol, 1,09 g, 36,22 mmol), natrijum cijanoborohidridom (MW 62,84 g/mol, 1,14 g, 18,11 mmol) i sirćetnom kiselinom (2 ml). Smesa je zagrejana do 50 °C i mešana na toj temperaturi tokom 3 sata. nakon hlađenja do sobne temperature (23 °C), voda (2 x 10 ml) je dodata i bezbojni mulj je mešan tokom 16 sati. čvrsto telo je zatim prikupljeno filtracijom i oprano je sa metanolom (3x2 ml) kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (MW 327,45 g/mol, 0,91 g, 92 %) kao beličasto čvrsto telo.
Beleške
[0329]1. Reakcija redukcije koristeći cink i vodeni amonijum hlorid je bila brza i čista i trebalo joj je samo 2 sata da dostigne kraj i druge tačke nisu primećene tlc analizom. 2. Reduktivna metilacija koristeći natrijum cijanoborohidrid, paraformaldehid i sirćetnu kiselinu je brz i čist, i treba mu samo 3 sata do reach completion.
[0330]NMR:proizvod (10 mg) je rastvoren u CDCb (1,5 ml).
5n(400 MHz; CDCb): 2,17 (3H, s,CH3),2,94 (12H, s, NCHj), 6,61 (2H, d,J S,ArH), 6,71 (2H, s, ArH), 7,26 (2H, brd s, ArH)
Sinteza l: Sinteza N , N , N ', N '- tetrametil - H - fenotiazin - 3 , 7 - diaminiium bis ( metanesulfonata ) fLMTJMsOH )
[0331]
[0332]10-Acetil-Af,iV,JVW'-tetrametil-10H-fenotia2in-37-diarriin (AcMT) (150 g) je dodat u bocu sa tri grlića i okruglim dnom. Toluen (1,8 I) je dodat i smesa zagrejana do refluksa tokom 30 min. rastvoru je dopušteno da se ohladi do 70 °C pre nego što je provučen kroz linijski 5 u filter do obloženog suda opremljenog sa aparaturom za destilaciju.<1>Toluen (150 ml) je dodat u bocu sa okruglim dnom. Ovo je korišćeno do isprati transfer liniju i filter. otprilike 1,4 1 toluena je destilovano pod smanjenim pritiskom."Temperatura je snižena do 18 °C pre dodavanja vode (42 ml).<3>Ovo je praćeno dodavanjem metanesulfonske kiseline (MSA) (65,5 ml, 99%, 2,2 ekvivalentno) tokom perioda od 5 minuta.<4>Drugi deo vode (18 ml) je dodat. Smesa je zagrejana do 85 °C tokom 3 sata tokom čega je vreme reakcije ocenjeno kompletnim od strane dc analize. Dvofaznom rastvoru je dopušteno da se ohladi do 50 °C pre dodavanja apsolutnog EtOH (150 ml) tokom 20 minuta.<3>Smesa je posejana koristeći 150 mg A/,/V,.fV',<r>V'-tetrametil-10H-fenotiazin-3,7-diaminijum bis(metanesulfonata).68 Drugi deo EtOH (600 ml) je dodat tokom 90 minuta'1 i reakciji je dopušteno da se ohladi do 20 °C tokom 1 sata.<:D>Mešana je na toj temperaturi tokom 1 sata pre nego što je čvrsto telo prikupljeno filtracijom. Grudva je je oprana sa 3 x 300 ml od MeCN," sušena na suvo tokom 5 minuta i smeštena pod vakuum preko noći kako bi se dobio proizvod kao žuti kristalno čvrsto telo (85-90 % prinos).
vmai«(KBr)/cm-'; 3430 (rVH), 3014(- CH),2649(C-H),1614 (C=C), 1487 (C-C), 1318 (S=0), 1199 (S02-0), 1059 (S=0), 823 (ArC=-H)
5„(600 MHz; CD3OD); 2,71 (6H, s, SCH3). 3,21 (I2H, s, NCft), 6,75 (2H, d, J 8,8 Hz, ArH), 7,22 (4H, d J 2,9 Hz, ArH), 7,24 (4H, dd J 2,9, 8,8 Hz, ArH),
6C(100 MHz; CD3OD); 38,2 (SCH3), 45,9 (NCH3), 115,0 (CH), 118,2 (CH), 118,7 (QC), 119,9 (QH), 137,1 (CH), 142,8 (QC)
MP: 271 °C
m/z(EI+): izračunato 285,129970; primećeno 285,131292 (100%, [M-2MSAI+).
m/z (ES-): izračunato 95; primećeno 95 (100%, [M-LMT|-).
Elemental analize % (C18H27N306S3): izračunato C (45,26), N (8,80), S (20,14), H (5,70);
primećeno C (45,19), N (8,76), S (19,84), H (5,53)
Napomene
[03331
1. Zagrevanje do refluksa osigurava kompletno rastvaranje AcMT za transfer kroz 5 u filter. Toluen je
dobar rastvarač i 70 °C cilj je kompromis između osiguravanja da materijal ostaje u rastvoru i minimizovanja potencijalne štete plastičnim crevima i filteru.
2. 500 ml preostalog toluena osigurava da reakciona zapremina zadovolji minimalnu dubinu mešanja reaktora. 3. Količina vode je kontrolisana kako bi se osiguralo da proizvod kristalizira u obliku tečnog taloga. Posejavanje reakcije redukuje uticaj malih varijacija u zapremini vode. 4. 2,2 ekvivalenta MSA su korišćena za efekat hidrolize i formirali su so, dok su ostavili dovoljan broj viška kiseline (0,2 ekv.) kako bi se osigurala stabilnost proizvoda u rastvoru. Dodatak MSP uzrokuje blago oslobađanje rastvora, stoga je 5 minuta vremena dodavanja. 5. EtOH se koristi kao protiv-rastvarač kako bi se istaložio proizvod. Jedan deo se dodaje pre sejanja kako bi se osiguralo da se sejanje ne otopi. Prošireno vreme dodavanja osigurava kontrolisanu kristalizaciju proizvoda (pogledati beleške 718). 6. Moguće je sprovesti reakciju bez korišćenja sejanja, međutim njegova ugradnja osigurava rano taloženje LMT.2MsOH što pak sprečava stvaranje nusproizvoda (poput alkohola ester EMS, potencijalni genotoksični nusroizvod - ne detektovan u postupku sinteze) i inkapsulacija EtOH. 7. Sejanje je korisno kao sredstvo za kontrolu veličine čestica proizvoda. Kada se semenski materijal koji se koristio bio usitnjen u tarioniku do < 100 pm je primećeno je značajno smanjenje prosečne veličine čestica proizvoda. Kad se koristi <100 p seme koje nije uzemljeno, takav učinak nije primećen. Dakle, bez želje da se vežemo teorijom, čini se da sposobnost semena za kontrolu veličine čestica nije funkcija veličine čestica semena, i da je vezan za udeo unutrašnjih ili „novih" kristalnih strana kojima je mrvljenje semena izloženo. 8. Na kraju, kada je semenski materijal bio relativno velika i nezgnječen, znatna količinu proizvoda (koža) može se zakačiti za stranu reaktorske posudu tokom EtOH dodavanja. To se može smanjiti uvođenjem toplo/hladno ciklus u postupku nakon EtOH dodavanja. Međutim, neočekivana korist od korišćenja smrvljenog semena je da je nivo ogoljenih materijala koji je prisutan nakon EtOH dodavanjaOsmanjen za~90%. Stoga više nije bilo potrebno sprovoditi toplo/hladno ciklus. Čini se da je to povezano sa malom veličinom semena pre nego novim stranama, jer kada se reakcija sprovodi upoUebom nezgnječenih<<>10Q u semena, primećeno je isto smanjenje u ogoljavanju. 9. Brzina dodavanja EtOH ima uticaj na veličinu čestica i EtOH uključivanje. Brzo dodavanje (<1 sat) smanjuje veličinu Čestica, međutim uključivanje etanola se povećava. Sporo dodavanje (2 sata) ima suprotan efekat, pa se tako mora se postići ravnoteža. 10. Stopa hlađenje ima sličan, iako smanjen efekat. Brzo hlađenje (<l sat) dovodi do smanjenja veličine čestica, uz istovremeno povećanje nivoa EtOH. Sporo hlađenje ima suprotan učinak. 11. EtOH jednako delotvoran kao i MeCN u uklanjanju povezanih supstanci, međutim njegova upotreba popraćena je malim povećanjem nivoa zadržanog EtOH.
Karakterisanie N , N . N ', N '- tetrametil - H - fenotiazin - 3 , 7 - diaminiium bis ( metanesulfonata ) ( LMTJMsOH )
Etementalna analize ( Mikroanalize)
[0334]Analize ima dobru korelaciju između teoretskih vrednosti i vrednosti analize za ugljenik, azot, vodonik i sumpor.
[0335]Rezultati elementalne analize:
' H-spektroskopija nuklearne magnetne rezonance ( NMR)
[0336]IH NMR spektar je dobijen u deuteriranom metanolu CD3OD, na Varian 600 MHz instrumentu i prikazan je na Slici 1.
[0337]Raspodela 'H NMR spektra je u nastavku:
' 3C - spektroskopija nuklearne magnetne rezonance ( NMR)
[0338]<l3>C NMR spektar je dobijen na Varian 400 MHz NMR instrumentu na frekvenciji od 100,56 MHz u deuteriranom metanolu CD3OD i prikazanje na Slici 2.
[0339]Početna raspodela<n>C-NMR spektra je zasnovana na korelaciji sa graficima poznatih hemijskih pomeranja, (referenca u literaturi: Structure Determination of Organic Compounđs: Tables of Spectral Data, Pretsch E., et al., Springer, London, p 122).
[0340]Dalje raspodele koriste DEPT-135, HSQC i HMBC eksperimente do nedvosmisleno potvrde raspodele. DEPT-135 (Distortionless Enhancement by Polarisation Transfer), HSQC (Heteronuclear Single Quantum Coherence) i HMBC (Heteronuclear Multiple Bond Correlation) spektri su dobijeni na Varian 400 MHz NMR instrumentu na frekvenciji od 100,56 MHz (pogledati Slike 3-5).
Infracrvena spektroskopija ( IR)
[0341]Uzorak je dubinski mešan i uzemljen u malteru i mrvljen sa 200 mg nevodenim KBr. Ova smesa se zaiim smešta na disk, koristeći kalup na pritisku od 1500 psi. IR spektar je zatim dobijen na Nicolet Avatar 320 FT-IR spektrometru. Spektar prikazan je na Slici 6.
Raspodela infracrvenog spektra:
Masena spektrometrija ( MS)
[0342]Analiza masene spektrometrije je sprovedena koristeći VVaters, LCT Premier XE maseni spektrometar. Stopa protoka od 1 ml/čas je usvojena. Izvor korišćen za analize aktivne komponente je jonizacija udara elektrona u pozitivnom modu. Izvor korišćen za analize metanesulfonat kontrajona je jonizacija spreja elektrona u pozitivnom modu,
[03431Koristeći jonizaciju udara elektrona glavni vrhunac je primećen na 285 (pogledati Sliku 7). Ovo odgovara molekularnom jonu CieHisNjS. Poređenje tačne izmerene mase i teoretske vrednosti je dato u nastavku:
[0344]Merena tačna masa je u dobrom odnosu sa izračunatom masom za C15H19N3S.
[0345]Koristeći jonizaciju spreja elektrona glavni vrhunac je primećen na 95 (pogledati Sliku 8). Ovo odgovara molekularnom jonu od kontrajona CHjOjS:
Uhraljubičasto vidljiva spektroskopija ( UV- Vis)
[0346]5 mg uzorak je rastvoren u dejonizovanoj vodi, i napravljen do 100 ml u volumetrijskoj boci. Analiza je sprovedena koristeći kvarcne kivete u Perkin Elmer Lambda 25 UV/Vis spektrometru. UV-Vis spektar prikazan je na Slici 9.
[0347]Koeficijent pronalazakiranja za lambda maksimalno na 255 nm je 34254,64. Ovo je izračunato prema da Beer-Lambert zakonu:
gde A = logaritam apsorpcije (VD 3,5860; C - koncentracija Mol/L; I = dužina puta 1 cm
Tečna hromatografija visokih performansi ( HPLC)
[0348]A 100 mg uzorak je predat za HPLC analizu. Analiza je sprovedena na Agilent 1200 serijama sa VWD detektor ili PDA za identitet, prema postupku koji je sažet u tabeli u nastavku.
[0349]HPLC trag prikazan je na Slici 10. Organska čistoća je dobijeno da bude 99,45 % po težini.
Kristalni oblik
[0350]U gore navedenom postupku, LMT,2MsOH je proizveden u kristalnom obliku. Kristalni oblik LMT,2MsOH je ilustrovan sa difrakcionim spektrom sa rendgenskim praškom prikazanim na Slici 11. XRPD pokazuje oštre signale, što je indikativno za visok stepen kristalnog poretka. Varijacije u relativnom intenzitetu vrhunca se mogu primetiti, i mogu se pripisati efektima orentacije u kombinaciji sa razlikama u veličini čestica. Samo varijacije svetla u relativnom intenzitetu vrhunca (manje od 50%) su primećene kao funkcije debljine uzorka (0,1 mm u odnosu na 1,0 mm).
[0351]Kristalni oblik je dalje karakterisan sa FT-Raman, termogravimetrom (TG), kalorimetrom diferencijalnog skeniranja (DSC), analizom dinamičke sorpcije isparenja (DVS), i mikroskopom (Slike 12-16). Ovaj oblik može konvencionalno da se naziva kao „Oblik A"
[0352]Kristali za jednokristalnu rendgensku analizu su dobijeni od etanola, metanesulfonske kiseline i vode. Pogledati Sliku 17c.
Detalji instrumenata
[0353]Difrakciia rendgenskog pudera:Bruker 08 Advance, Cu Ka radijacija (A- 1,54180 A), 40 kV/40 mA, LynxEye detektor, 0,02° veličina koraka na 29, 37 s po koraku, 2,5°-50<o>28 opseg skeniranja. Uzorci su pripremljeni na silikonskom jednokristalnom držaču uzoraka sa 0,1 ili 1,0 mm dubinom bez bilo kog posebnog tretmana osim primene blagog pritiska kako bi se dobila ravna površina. Svi uzorci su rotirani tokom merenja.
[0354]Kalorimetra diferencijalnog skeniranja:Perkin Elmer DSC 7. Zlatne retorte zatvorene pod bi>, stopom zagrevanja 20 °C/min, skeniranje od -50 °C do 280 °C.
[0355]Dinamička sorpcija isparavanja:Projekt Messtechnik SPS 11-lOOn analizer sorpcije isparavanja vode. uzorci su smešteni u aluminijumske retorte na vrhuncu mikrobalansa i dovedeni su u ravnotežu na 25 °C i 50% r.h. pre počinjanja predefinisanog programa vlažnosti na 25°C(50-0-95-50% r.h., skeniranje sa A r.h. = 5% h"<1>i sa „isohumid" periodima uravnotežavanja na ekstremne vrednosti).
[0356]FT - Raman spektroskopija:Bruker RFS100. Nd:iAG 1064 nm uzbuđivanje, 50 mVV snaga lasera, Ge-detektor, 128 skeniranja, ospeg 50-3500 cm ', 2 cm'<1>ponovni rastvor. Aluminijumski držač uzoraka.
[0357]Mikroskopija polarizuiućeg svetla:Leitz Orthoplan mikroskop sa Leica OFC280 CCO kamerom.
[0358]TC:TA Instruments TGA Q5000. Otvorena aluminijumska retorta, N2atmosfera, stopa zagrevanja 10 °C min<1>, opseg 25-300 °C.
[0359]TG - FT1R:Netzsch Thermo-Microbalance TG 209 sa Bruker FT-IR spektrometrom Vector 22. Aluminijumske retorta sa mikro rupama, N2atmosfere, stopa zagrevanja 10 °C min-l, opseg 25-250 °C.
[0360] Bez želje da se veže teorijom, sugeriše se da taj oblik predstavlja jedini stabilam polomorfni oblik pdLMT.2MsOH. Ispitivanja polimofrizma su pokazala da je A je ponovno proizveden u skoro svim sistemima kristalizacije (ispitivanja su obavljena koristeći degazirane rastvarače, pod inertnom atmosferom).
[0361] Amornfi LMT,2MsOH se može pripremiti isparavanjem vodenog rastvora LMT,2MsOH, međutim vodeni materijal rekristališe do Oblika A nakon daljeg sušenja.
Si nteza AcMT i LMTJMsOH u industrijskim razmerama
[0362]
i; I^H^O. Et3N. MeCN, N2, 65 °C, 1 h. ii; Ac20, N2. 95 °C. 2 h. iii; MSA. H20, Toiuene, N2. 85 °C, iv EtOH.
Sinteza u velikoj razmeri - acetH- N, N, N' N'- tetrametU- H- fenotiazin- 3, 7~ diamina ( AcMT)
[0363] Acetoniuil (MeCN) (300 l) je dodat u reaktor 1 (Rl) i ohlađen do -5-0 °C. Metiltioninijum hlorid trihidrat (MTC,3H20) (150 kg) je dodat i temperatura je povećana do 15-25 °C. Trietilamin (Et3N) (100 I) je dodat praćen sa MeCN ispiranjem (20 1). Hidrazin hidrat (N2H.4.H1O) (12 I) je dodat tokom 30 minuta. Temeperatura reakcije je povećana do 60-70 °C tokom 1 sata i zatim održavana na toj temperaturi tokom 1 sala pre nego što je smanjena do 40-50 °C. Acetni anhidrid (Ac>0) (240 I) je dodat tokom 1 sata praćen sa MeCN (20 I) ispiranjem. Temperature pripreme je je povećana do 90-100 °C tokom 2 sata: Temperatura je smanjena do 55-65 °C i voda (340 I) je dodata tokom 2 sata uz održavanje temperature. Temperatura pripreme je zatim smanjena do -5-5 °C tokom 2 sata i održana tu tokom 6 sati. čvrsto telo je prikupljeno filuacijom. grudva je potpuno oslobođena od tečnosti pre nego što je voda (400 I) dodat do Rl. Temperaturi u Rl je dopušteno da poraste do 15-25 °C pre nego što je voda korišćena u delovima da opere filter grudvu. proizvod je osušeno pod mlazom azota za 6 sati pre nego što je otpušten (prinos: 90-110 kg).
Pročušćavaje u velikoj razmeri - acetil- N, N, N' N'- tetrametil- H- fenotiazin- 3, 7- diamian ( AcMT)
[0364J Voda (300 I) je dodat do Rl, praćena sa 10-Acetil-A<r>,/V,/V'N'-tetrametil-10H-fenotiazin-3,7-diaminom (AcMT) (100 kg). Toluen (400 I) i 80% vodena sirćetna kiselina (40 I) su dodati, praćeni sa vodenim ispiranjem (50 1). Temperatura pripreme je je povećana do 75-85 °C tokom 1 sata. mešalica je zaustavljena i slojevima je dopušteno da se smire tokom 30 minuta, niži vodeni sloj je uklonjen i sveža voda (300 I), 80% vodena sirćetna kiselina (40 I) praćena sa vodenim ispiranjem (50 I) su zatim dodati. Smesa je mešana na 75-85 °C tokom 1 sata pre nego što je mešalica zaustavljena i slojevima je dopušteno da se smire tokom 30 minuta, niži vodeni sloj je uklonjen i sveža voda (300 I), 80% vodena sirćetna kiselina (40 1) praćena sa vodenim ispiranjem (50 l) su zatim dodati. Smesa je mešana na 75-85 °C tokom 1 sata pre nego što je mešalica zaustavljena, slojevima je dopušteno da se smire tokom 30 minuta pre nego što je niži sloj uklonjen 1 voda (390 I) je dodat i smesa je mešana tokom 1 sata. mešalica je zaustavljena i slojevima je dopušteno da se smire tokom 30 minuta, niži vodeni sloj je uklonjen i temperatura je smanjena do -5-5 °C. Temperatura omotača je je povećana do 80 °C i zatim kada je dostigla 60 °C temperatura je smanjena do -10-0 °C tokom 2 sata. Smesa je mešana tokom 4 sata pre nego što je prebačena do filtera. grudva je potpuno oslobođena od tečnosti pre nego što je toluen (150 I) dodat do Rl. Toluen je mešana u Rl tokom 30 minuta pre nego što je korišćen u delovima do opere filter grudvu. proizvod je osušen na filteru pod mlazom azota tokom 48 sati dok gubitak na sušenju nije bio <1 % pre nego što je otpušten (prinos: 75-90 kg).
Sinteza u velikoj razmeri N, N, N', N'- tetrametil- H- fenotiazin- 3, 7- diaminijum bis( metanesuifonata)
( LMT, 2MsOH)
[0365]AcMT (18-22 kg) je dodat do Rl. Toluen (zapremina (1) = 16 x AcMT težina) je dodat i smesa je zagrejana do 90-100 °C tokom 30 minuta, rastvoru je dopušteno da se ohladi do 60-80 °C pre nego što je pro-vučen kroz linijski 5 m filter u reaktoru 2 (R2). Toluen (50 I) je dodat u reaktor 1 (još uvek na -70 °C) i me-šan tokom 30 minuta. Ovo je korišćeno kako bi se isprali transfer linija i filter. Gore navedeni proces je ponovljen još jednom. Proces uklanjanja viška toluena R2 destilacijom pod smanjenim pritiskom je zatim otpo-čet. Ako kapacitet R2 dozvoljava, još dva delova AcMT (18-22 kg svaki) su prebačeni iz Rl u R2 prateći postupak opisan ovde. destilacija je kompletna kada je zapremina pripreme u R2 smanjena do -340 I. Temperature je povećana do 95-105 °C tokom 15 -30 minuta pre nego Što je ohlađena do 15-25 °C. voda (20 I) je dodata u R2. Ovo je praćeno dodavanjem metanesulfonske kiseline (MSA) (33 I, 99%, 2,2 ekvivalentno) uz održavanje temperature pripreme na 15-30 °C. drugi deo vode (10 I) je dodat i smesa je mešana na toj temperaturi tokom 2 sata. Smesa je zagrejana do 80-90 °C tokom 3-4 sata. Dvofaznom rastvoru je dopušteno da se ohladi do 48-58 °C pre nego što je apsolutni EtOH (75 I) dodat tokom 15-30 minuta, mešalica je zaustavljena i smesa je posejana koristeći 150 g od smrvljenog (<100 m) N,N,N',N'-tetrametil-l0H-fenouazin-3,7-diaminijum bis(metanesulfonata). drugi deo od EtOH (300 I) je dodat tokom 80-110 minuta. Temperatura omo-tača je podešena na 10 °C i kada je temperature dostigla 25 °C temperatura omotača je ponovo podešena na 20 °C. Mešano je na 15-25 °C tokom 2 sata pre nego što je čvrsto telo prikupljeno filtracijom. grudva je dubinski oslobođena od tečnosti. MeCN (300 I) je dodat u R2 i mešan tokom 15 minuta pre nego Što je kori-šćen iz delova da opere filter grudvu. Drugi 300 I deo od MeCN dodat je u R2 i proces pranja je ponovljen, proizvod je osušen na filteru dok gubitak na sušenju nije bio <0,2 % pre nego stoje otpušten (80-90 % prinos).
Komparativna sinteza 2: sinteza i analiza N . N , N \ N '- tetrametil - H - fenotiazin - 3 , 7 - diaminiiimi
bisfetanesulfonata ) ( LMTJEsOH )
[0366]
;oraki \H20 MeOH EsOH. IPAAceton
Sintetički postupak za LMT, 2EsOH
[0367]Sinteza LMT,2EsOH je sprovedena sa kiselom hidrolizom 10-Acetil- rV,/V,/V',iV'-tetrametil-10Hfenotiazin-3,7-diamina. Konšćena kiselina je etanesulfonska kiselina i kombinacija rastvarača je vodeni metanol.
Eksperimentalni detalji
[0368]U 100 ml bocu sa okruglim dnom dodati su 10-Acetil-A/,JV,W',Af'-tetrametil-10H-fenotiazin-3,7-dtamin (5 g, 15,27 mmol, MW 327,45 g/mol), (70 %, aq) etanesulfonska kiselina (7,21 g, 45,81 mmol, MW 110,13 g/mol) i metanol (25 ml). Smesa je zagrejana do 75 °C i mešana na toj temperaturi 4 sata pre nego što je smesa ohlađena preko ledene vode. Čvrsto telo se nije formiralo i metanol je uklonjen pod vakuumom kako bi se dobilo viskozno zeleno ulje. Tom ulju dodat je izopropanol (25 ml) i smesa je zagrejana do refluksa kako bi se obezbedio homogeni rastvor. Nakon što je ohlađena dodat je aceton dok se nije formirao talog, suspenzija je ohlađena preko ledene vode tokom 1 sata pre nego što je filtrirana kako bi se dobio sirov proizvod kao žuto čvrsto telo, koje je postalo zeleno nakon izlaganja vazduhu. Sirovina je oprana sa acetonom (3x5 ml) i osušena na vazduhu tokom 3 dana kako bi se dobio sirov proizvod (3,35 g, 43 %, MW 505,68 g/mol) kao svetio zeleno čvrsto telo.
<v>maks (KBrj/cm<1>;3448(IVH),3263(- CH),3030 {- CH), 2987 (CH), 2938 (CH), 2582 (SOjH), 2452( S03H),1487( C- C),1211 (0=S=0), 1188 (0=S=0), 1145 (0=SO), 1026. 6H(400 MHz; D2O): 1,07 (6H, t,J7,6, CHj), 2,72 (4H, q,J7,6, SCHj), 3,02 (12H, s, NCH3),6,54 (2H, d, i 9,2, ArH), 7,02 (4H, brd s, ArH);
5t(100 MHz; D2O): 142,3 (QC), 136,6 (QC), 119,9 (CH), 118,4 (QC), 118,2 (CH), 115,2 (CH), 46,2 (NCH3), 45,3
(SCH2), 8,3 (CH3).
MP: 208-210 °C (IPA/aceton)
m/z (E1+): izračunata masa 285,129970; primećeno 285,129761 (100%, [M-2EsOH)+).
m/z (ES-): izračunata masa 109; primećeno 109 (100%, [M-LMT] ).
Khstalografija
[0369]1 g uzorka LMT,2EsOH je rastvoreno u sirćetnoj kiselini (-0,1 g) i etil acetat je slojed na vrh i dop-ušteno je da se polako širi tokom 3 dana u mraku. Kristali su se razvili i prikupljeni su i analizirani sa sa rendgenskom difrakcijom i potvrđen je proizvod kao bis(etanesulfonat). Pogledati Sliku 17a.
Komparativna sinteza 3: sinteza i analiza N , N , N ', N '- Tetrametil - H - fenotiazin - 3 , 7 - diaminiium
bis ( ptoluensulfonata ) ( LMTJTsOH )
[0370]
Sintetički postupak za LMT, 2TsOH
[0371]Sinteza LMT,2TsOH je sprovedena sa neutrališućim N,iV,N',N'-tetrametil-10H-fenotiazin-3,7diaminijum dihloridom sa natrijum karbonatom i ekstrakovanjem neutralnih vrsta u organski rastvarač. ekstrakt je tretiran sa p-toluensulfonskom kiselinom i smesa je koncentrisana do sušenja.
Eksperimentalni detalji
[0372]U 50 ml pehar dodali su natrijum karbonat (0,59 g, 5,58 mmol, MW 105,99 g/mol) i voda (10 ml), smesa je mešana dok se čvrsto telo nije rastvorilo. U 100 ml levak za razdvajanje dodati suN, N, N', N'-TetrametillOH-fenotiazin-3,7-diaminijum dihlorid (1 g, 2,79 mmol, MW 358,33 g/mol), tetrahidrofuran (35 ml) i dieđleter (5ml) i zatim vodeni rastvor natrijum karbonata. Neutrala vrsta je ekstrakovana u sloj organskog rastvarača i razdvojena od vodenog sloja. Organskom ekstraktu dodat je p-toluensulfonska kiselina monohidrat (1,06 g, 5,58 mmol, MW 190,20 g/mol) prethodno rastvoren u tetrahidrofuranu (5ml) i smesa je koncentrisana do sušenja kako bi se dobio proizvod (MW 629,8216 g/mol) kao hrskava zelena amorfna pena. <v>™ks(KBr)/cm-'; 3440( NH),3270 (=CH), 3032 (=CH), 2628 (S03H), 1484fC-Q,1194 (0=S=0), 1122 (O=S=0), 1032.
6h(400 MHz; D20); 2,24 (6H, s,C/ft),3,09 (12H, s, NCHj), 6,62 (2H, d, J 8,4, ArH), 7,10 (4H, s, ArH), 7,13 (4H, d, J 8,4, Ts-H), 7,61 (4H, d, J 8,4, Ts-H)
6c(100 MHz; D20); 19,9 (CH3), 45,9 (NCH3), 115,0 (CH), 118,2 (CH), 118,6 (QC), 119,9 (CH), 125,5 (CH), 128,5 (CH), 137,0 (QC), 140,5 (QC), 141.9 (QC), 142,8 (QC).
Mp: 108 °C (THF/EtjO)
m/z (EI+): izračunata masa 285,129970; primećeno 285,129398 (100%, [M-2TsOHr).
m/z (ES-): izračunata masa 171,0116; primećeno 171,0121 (100%, [M-LMT]-).
Komparativna sinteza 4: sinteza i analiza N . N . N '. N '- Tetrametil - H - fenotiazin - 3 . 7 - diaminijum
etanedisulfonata ( LMT . EDSA )
[0373]
[0374]Sinteza LMT.EDSA je sprovedena sa kiselom hidrolizom 10-acetil-lV,rV,lV',jv"-tetrametil-10H-fenotiazin-3,7-diamina. Korišćena kiselina je 1,2-etanedisulfonska kiselina i kombinacija raslvarača je vodeni etanol.
Eksperimentalni detalji
[0375]U 25 ml bocu sa okruglim dnom dodati su 10-acetil-/v",/V,N',iV'-tetrametil-10H-fenotiazin-3,7-diamin (1 g, 3,05 mmol, MW 327,45 g/mol), 1,2-etanedisulfonska kiselina monohidrai (0,95 g, 4,58 mmol, MW 208,21 g/mol), voda (1 ml) i etanol (5 ml). Smesa je zagrejana do 85 °C i mešana naloj temperaturi tokom 2,5 sata kada se žuto zeleno Čvrstom telo taložilo od rastvora. Mulj je ohlađen preko ledene vode tokom 30 minuta pre filtriranja kako bi se dobio sirov proizvod kao zeleno žuto čvrsto telo. Sirovina je oprana sa etanolom (3x3 ml) i osušena na vazduhu tokom 15 minuta pre nego što je osušena u rerni tokom 3,5 sata na 70 °C kako bi se dobio sirov proizvod (1,33 g, 91 %, MW 475,61 g/mol) kao žuto Čvrsto telo.
Pročitavanje LMT. EDSA
[0376]U 50 ml kupastu bocu dodati su sirov LMT.EDSA (1 g, 2,10 mmol, MW 475,61 g/mol) i voda (10 ml). Mulj je zagrejana do 95 °C i mešana na toj temperaturi dok se čvrsto telo nije rastvorilo. Rastvoru je zatim dopušteno da se ohladi do 25 °C kada se formiralo svetio zeleno kristalno čvrsto telo. mulj je zatim ohlađen preko ledene vode tokom 30 minuta pre filtriranja, čvrsto telo je prikupljeno i oprano sa metanolom (3x3 ml) i osušena na vazduhu tokom 18 sati kako bi se dobio pročišćen proizvod (0,88 g, 88 %, MW 475,61 g/mol) kao kristalno svetio zeleno čvrsto telo.
<v>makS(KBr)/cm-'; 3408( NH),3280(=CH),3221 (C-H), 3036 (=CH), 2574( SO3H),2480( SO3H),1484( C- C),1226 (0=S=O)
5h(400 MHz; D2O); 2,98 (12H, s, NCH3), 3,06 (4H,s, SCffc), 6,45 (2H, d, J 6, ArH), 6.95 (4H, d J 4, ArH) 6c(100 MHz; D2O); 46,2 (NCH3), 46,4 (SCH2), 115,1 (CH), 118,1 (CH), 118,4 (QC), 119,8 (CH), 136,5 (QC), 142,1 (QC)
MP: rastvaranje na 268 °C (H2O)
m/z (EI+): izračunato 285,129970; primećeno 285,130948 (100%, [M-EDSA]').
m/z (ES-): izračunato 188,9528; primećeno 188,9535 (100%, [M-LMT]-).
Kristalografija
[0377J40 mg uzorak LMT.EDSA je rastvoren u vrućoj deuteriranoj vodi (~I ml) i dopušteno mu je da se polako ohladi u mraku. Kristali koji su se razvili su prikupljeni i analizirani sa rendgenskom difrakcijom i potvrđen je proizvod kao monohidrat od 1:1 LMT do EDS A adukta. Pogledati Sliku 17b.
Komparativna sinteza5:sinteza i analiza N , N . N ', N '- Tetrameiil - H - fenotiazin - 3 , 7 - diaminiium
na ftalenedisulfonata ( LMT . NDSA )
[0378]
Sintetički postupak za LMT. NDSA
[0379]Sinteza LMT.NDSA je sprovedena sa kiselom hidrolizom 10-acetil- N.iV.i<V>V</>V'-tetrametii-10H-fenotiazin-3,7-diamina. Korišćena kiselina je 1,5-naftalenedisulfonska kiselina i kombinacija rastvaraca je vodeni etanol.
Eksperimentalni detalji
[0380]U 25 ml bocu sa okruglim dnom dodau su lO-Acetil-AT.iV.iV'^/V'-ieirametil-lOH-fenoiiazin-SJ-diamin (1 g, 3,05 mmol, MW 327,45 g/mol), 1,5-naftalenedisulfonska kiselina tetrahidrat (1,65 g, 4,58 mmol, MW 360,36 g/mol), voda (1 ml) i etanol (5 ml). Smesa je zagrejana do 85 °C i mešana na toj temperaturi tokom 30 minuta kada je smesa još uvek bila nerastvorljiva. Vrućoj smesi dodata je voda (4 ml) i reakcija je zagrejana do 95 °C i mešana na toj temperaturi tokom 8 sati. suspenzija je ohlađena preko ledene vode tokom 10 minuta pre nego što je filtrirana kako bi se dobio sirov proizvod kao svetio zeleno čvrsto telo. Sirovina je oprana sa etanolom (3 x 5 ml) i osušena na vazduhu tokom 3 dana kako bi se dobio sirov proizvod (1,75 g, 100 %, MW 573,71 g/mol) kao svetio zeleno-plavo čvrsto telo.
vm^(KBrVcm<1>; 3382( NH),3302 (=CH), 3040(=CH),2525( SOiH),1478( C- C),1238 (0=S=0), 1219 (0=S=0), 1179, 1158, 1030.
6n(400 MHz; D20); 3,06 (12H, s, NCHs), 6,70 (2H, brd, ArH), 7,14 (4H, brd, ArH), 7,43 (2H, t,J8,0, 7,6, Naf-H), 7,94 (2H, d, J 7,2, Naf-H), 8,87 (2H, d, J 78,4, Naf-H), 9,10 (IH, s, NH)
5C(100 MHz; D20); 46,0 (NCH3), 115,3 (CH), 117,5 (QC), 118,7 (CH), 120,4 (CH), 124,6 (CH), 124,7 (CH), 129,6 (CH), 129,9 (QC), 138,3 (QC), 141,7 (QC), 143,8 (QC).
MP; rastvaranje na 256°C (MeCN)
m/z (EI+): izračunata masa 285,129970; primećeno 285,130367 (100%, [M-NDSA]<*>}.
m/z (ES-): izračunata masa 286,9684; primećeno 286,9697 (100%, [M-LMT|-).
Primer 2 - ispitivanja rastvorliivosti
i) Rascvorljivost N, N, N\ N'- tetrametil- H- fenotiazin- 3, 7- diaminijum dibromid, dihlohd i bis( metanesulfonat)
( LMT, 2HBr, LMT. 2HCI i LMT, 2MsOH) soli
[0381]Dva vodena rastvora (pH 2,00 i 3,01 na 21,4 °C) su pripremljena sa pažljivim dodavanjem HC1 (5 M) dejonizovanoj vodi.
[0382]U svakom eksperimentu 5 ml ostatka jednog od gore navedenih rastvora je zagrejano do 37 °C. Deo odgovarajuće soli (LMT,2MsOH, LMT.2HC1 ili LMT,2HBr) je dodat i smesa mešana nekoliko trenutaka da omogući kompletno rastvaranje čvrstog tela. Ovo korak je ponavljan dok dalje rastvaranje nije prestalo da se dešava.
[0383]Rezultati su prikazani u Tabeli:
[0384]Kao što može da se vidi, LMT,2MsOH ima dobru rastvorljivost u vodi.
ii) pH zavisnost LMT, 2MsOH soli
[0385]U povezanom eksperimentu tri puferirana rastvora pripremljena (pH2,pH 3, i pH 7) kako sledi:
pH 2 puferiran vodeni rastvor
[0386]Rastvor (0,2 M) kalijum Klorida (KCI) (0,745 g u 50 mL dejonizovane vode) je početno pripremljen. Od tog rastvora 50 mL je uzeto i rastvoreno sa otprilike 80 mL dejonizovane vode. Rastvor (0,2 M) hlorovodonične kiseline (HC1) je zatim korišćen da prilagodi pH do 2, pre daljeg rastvaranja sa dejonizovanom vodom da dostigne 200 mL. Finalni pH od 2,00 na 21,6 °C je zabeležen.
pH 3 puferiran vodeni rastvor
[0387]Rastvor (0,1 M) kalijum vodonik ftalata (2,042 g u 100 mL dejonizovane vode) je početno pripremljen. Od tog rastvora 100 mL je uzeto i rastvoreno sa otprilike 50 mL dejonizovane vode. Rastvor 0,2 M HC1 je zatim korišćen da prilagodi pH do 3, pre daljeg rastvaranja sa dejonizovanom vodom da dostigne 200 mL. Finalni pH od 2,99 na 21,7 °C je zabeležen.
pH 7 puferiran vodeni rastvor
[0388]Monobazni rastvor (0,1 M) kalijum fosfata (KFLPOj) (1,370 g u 100 mL dejonizovane vode) je početno pripremljen. Od tog rastvora 100 mL je uzeto i rastvoreno sa otprilike 80 mL dejonizovane vode. Rastvor 0,5 M natrijum hidroksida (NaOH) je zatim korišćen da prilagodi pH do 7, pre daljeg rastvaranja sa dejonizovanom vodom da dostigne 200 mL. Finalni pH od 7,07 na 22 °C je zabeležen.
Postupak
[0389]5 mL ostatka puferiranog vodenog rastvora dodato je bočici koja je sadržala mikro-buve. Ova bočica je smeŠtena u vodenu kadu podešenu na 25 °C. Rastvoru je dodat LMT,2MsOH u 1 - 1,5 g delovima. nakon svakog dodavanja, 10 minuta mešanja je dopušteno kako bi se obezbedile maksimalne mogućnosti za rastvaranje, homogenost smese je ocenjena odokativno. Ako je čvrsto telo još uvek prisutno, nakon mešanja, kao je procenjeno vizuelnom inspekcijom, ocenjeno je daje dostignuta tačka saturacije.
Rezultati
[0390]Viskoznost rezultujućih smesa isključuje adekvatnu izolaciju viška čvrstog tela, stoga nije moguće odrediti tačne vrednosti rastvorljivosti. Posledično, svaki od rezultata je obavljen kao opseg, u kom ukupna dodata masa LMT,2MsOH pre tačke saturacije čini donji limit, i ukupna dodata masa LMT,2MsOH nakon tačke saturacije daje gornji limit.
[0391]Rezultati svakog od tri eksperimenta su prikazani u nastavku:
[0392]Kao što može da se vidi, rastvorljivost blago opada kako se pH smanjuje, međutim LMT,2MsOH se pokazao dobro u sva tri vodena sistema.
[0393]Kao zaključak, LMT,2MsOH ima bolju rastvorljivost u vodi nego MTC (nije prikazano) i poboljšanu rastvorljivost u poređenju sa odgovarajućim solima hlorida i bromida. Ovo sugeriše povećanu korisnost u smislu tretmana i ovde opisanih primena.
Primer 3 - inhibiranje agregiranja i toksičnosti
Postupci: test čvrste faze za tau agregiranje
[0394]Test tau-tau agregiranja koristi pročišćene rekombinantne tau fragmente u imunotestu čvrste faze. postupci su detaljno opisani u npr. WO 96/30766. Ukratko, test meri vezivanje okrnjenog tau (amino kiseline 297-391) u rastvoru za čvrstu fazu vezanog okrnjenog tau (ostaci 297-390). Vezivanje gore navedenog je detektovano sa aniitelom mAb 423, koje specifično prepoznaje peptide koji sadrže C-tertninalni Glu-391 ostatak. Tau kompleks formiranin vitroje sličan agregiranom kompleksu koji se formira kod Alchajmerove bolesti kao posedila stabilnoti interakcije patološkog tau-tau vezivanja kroz domen ponavljanja 94/95-amino kiseline (ostaci 297-390), dobijeno u proteolitički stabilnom jezgru uparenim sa spiralnim vlaknom.
[0395]B50vrednost (izražene kao srednje ± SE) je određena kao koncentracija jedinjenja na kojoj je tau-tau vezivanje smanjeno za 50%.
Postupci: Test tau agregiranja zasnovan na ćelijama
[0396]Test je zasnovan na 3T6 mišjim ćelijama koje su napravljene tako da eksprimiraju i ljudski tau protein pune dužine (htau40) pod kontrolom inducibilnog promotera (pOPRSVI), i da eksprimiraju niske nivoe okrnjenog tau (295-390, dGA) pod kontrolom konstitutivnog promotera (pcDNA3,l). Eksprimiranjc velikih količina htau40 je indukovano dodavanjem 1PTG (10-50mM), koji za uzvrat dovodi do proizvodnje dodatnog okrnjenog tau putem procesa u kom se agregiranje i procesuranje tau pune dužine dešavaju u prisustvu dGA tau koji deluje kao šablon. Dodavanje inhibitora tau-tau agregiranja testu blokira taj proces. Postupci su detaljnije opisani u WO 02/055720.
[0397]Rezultati su izraženi kao koncentracija na koje je 50% inhibicije generisanja 12 kD fragmenta. Ovo se naziva EC50 vrednost.
[03981Ćelije (4A i hjihovi klonovi) se uzgajaju do -80% konfluence u 10-cm sudu, pre podele na dve 24-komorične ploče, i dopušteno im je da rastu tokom 24 sata. Testirani predmet je dodat pri različitim kon-centracijama i, nakon 24 sata, IPTG je dodat, nakon inkubacije preko noći medijum je uklonjen, komorice su oprane sa PBS i ćelije su prikupljene dodavanjem Laemli pufera. uzorci su čuvani na -20°C za predstojeću želatin electroforezu, Western mrlje i označavanje antitela. uzorci su razdvojeni sa SDS PAGE, prebačeni do PVDF membrane i tau obeleženi sa 7/51 antitelom detektovanim sa ECL na Kodak Image Station. jedinjenje je tipično testirano na četiri koncentracije u triplikatu preko ospega koncentracija, gde su svi uzorci testirani na jednom želatinu. Odnos intenziteta dGA do htau40 veza, normalizovan do kontrolnih uzoraka u kojima nije bdo leka, je napravljen u odnosu na koncentracije leka i EC50 vrednost je određena grafički od koncentracija kod kojih odnos pada do 0,5.
[0399]postupak je sumiran u Tabeli 1 u nastavu. MTC (TRks0014,047) je korišćen kao kontrola u svim eksperimentima i ECso vrednost je normalizovana do MTC koji je imao ECso= 0,59mM.
Postupci: test ćeiijske toksičnosti
[0400]Ćelije (3TG mišji fibroblast) su uzgajane do -80% konfluence u 10-cm sudu, pre podele na 96-komorične ploče, 10% od 10-cm suda po 96-komoričnoj ploči, 50ml po komorici. Jedna kolona od 8 komorica je osavljena prazna (da bude prazni reagens u testu). Ćelijama je dopušteno da rastu preko noći pre nego što je lek dodat u četiri komorice na početnoj koncentraciji (tipično 200mM za MTC ili LMT,2HBr) i u narednim komoricama koristeći 1:2 serije razblaživanja, uz finalne četiri komorice sa ćelijama korišćenim kao kontrola bez leka. Ovo omogućava da se sva leka testiraju po 96-komoričnoj ploči. Ćelije su ostavljene u prisustvu leka tokom 48 sati, nakon čega je medijum uklonjen i ćelije su oprane sa PBS. Broj ćelija je određen koristeći Cytotox 96-komorični komplet (Promega) koje je zasnovan na laktat dehidrogenaza (LDIT) testu. Test kvantitativno measures LDH, stabilan citosolni enzim oslobođen pri lizi ćelija. Oslobođen LDH je meren enzimskim tesom što rezultuje u konverziji teuazolijum soli u crven formazan proizvod. Količina formirane boje je proporcionalna broju liziranih ćelija.
[0401]Ukratko, ćelije su lizirane sa 50%ml/komoriđ lx pufer za lizu tokom 45-60 minuta, praćeno sa 50ml/komorici LDH test reagensom tokom 30 minuta i reakcija je zaustavljena sa 50ml/komorici puferom za zausavljanje. Apsorpcija je pročitana na 490nm. Apsorpcija relativna netretiranim komoricama (netretirane ćelije - 1,0) povučena u odnosu na koncentracije leka. LDso je određen grafički od koncentracije na kojoj se apsorpcija smanjuje za 50%. MTC (TRksOO 14,047) je korišćen kao kontrola u svim eksperimentima kada je tesiran LMT,2HBr i LDso vrednost je korigovana do MTC sa LDsu = 65mM.
Rrezultati puferiranja:
[0402]Različite bis(sulfonat) soli su testirane i poređene sa bis(halid) solimaN, N, N', N'-tetrametil-lOH-fenotiazin-3,7-diaminijum dihlorida (LMTC, LMT.2HC1) i W,/V,JV',iV'-tetrametil-10H-fenotiazin-3,7-diaminijum di(bromida) LMT,2HBr i sa metiltioninijum hloridom (MTC).
[0403]In vitropodaci za različite oblike metiltioninijum soli su sumirani u Tabeli 2 u nastavku:
Komentari
[0404]EC30vrednosti (srednje + SE) za LMT,2MsOH i LMT.2HCI su 0,19 ± 0,04 mM i 0,63 ± 0,10 mM, respektivno, sa odgovarajućim terapeutskim indeksima 179 i 102.
[0405]Relativna potentnost jedinjenja u modelu tau-tau agregiranja zasnovanom na ćelijama je LMT,2MsOH > MTC, LMT,2HBr, LMT.2HC1. Terapeutski indeks je 63% veći za LMT,2MsOH u poređenju sa MTC.
[0406]Poredak potentnosti u testu zasnovanom na ćelijama je MTC, LMT,2MsOH > LMT.2HCI > LMT,2HBr. Bs„ vrednosti za LMT,2MsOH i LMT,2HC1 su 238,2 ± 74,2 mM i 360,8 ± 38,2 mM, respekbvno. Poredak relativne potentnosti u testu bez ćelja je LMT,2MsOH > MTC, LMT,2HC1, LMT,2HBr.
Primer 4- toksikologija, nečistoće i efekat na hematopoetski sistem
[0407]LMT,2HBr, LMT.2HC1, LMT,2MsOH ili MTC su primenjivani dnevno tokom 14 dana ženskim VVistar pacovima; doze su 95 mg MT/kg/dan od dana l do 10 i 60 mg MT/kg/dan od dana 11 do 14. Klinički znaci poput povišenog držanja tela, pokornog ponašanja i generalna slabost su primećeni u svim tretiranim grupama. Smrti povezane sa tretmanom dogodile su se u LMT,2HBr- i MTC-tretman grupama.
[0408]Promene u parametrima crvenih krvnih ćelija primećene u krvi i koštanoj srži svih tretiranih grupa su indikativne za regenerativnu anemiju. One uključuju: smanjen broj crvenih krvnih ćelija, nisku koncentraciju haemoglobina i povećan broj retikulocita u krvi i povećan broj prekursora crvenih ćelija u koštanoj srži. Ovo histološki odgovara povećanim nivoima eritropoezi u slezini.
[0409]Smanjenje broja neutrofilnih granulocita je primećeno u koštana srž svih tretiranih životinja iako je razmera tog efekta značajno veća kod LMT,2HBr-tretiranih grupa nego kod drugih grupa. Ova razlika je takođe kod ozbiljnosti neutropenije primećene u pripremljenim brisevima krv gde je obeleženo osiromašenje zrelih neutrofila kod LMT,2HBr-tretiranih životinja, skroman pad kod MTC i bez pada u LMT,2HC1 ili LMT,2MsOH grupama. Rezultati te studije sugerišu da, makar kod pacova, LMT,2HBr ima veću sklonost da uzrokuje osiromašenje neutrofila nego LMT.2HC1, LMT,2MsOH ili MTC. Smanjenje broja zrelih neutrofila i granulocita je takođe primećeno u koštanoj srži na visokoj dozi (45 mg MT/kg/dan) u 6-omeseČnoj studiji LMT-2HBr kod pacova. Smanjenje neutrofila ili neutropenija primećeni nakon LMT,2HBr, iako mogu da se preokrenu, učinili bi pacijente pođložnijim bakterijskim infekcijama jer je njihova primarna uloga uništavanje bakterija.
[0410]Stoga LMT,2MsOH pokazuje unapređene osobine u poređenju sa LMT,2HBr kod pacova u smislu tolerantnosti (smrti povezane sa dozama) i u odgovoru neutrofila.
[0411]Tabela: odgovor neutrofila kod pacova nakon 14 dana oralne primene različitih oblika soli LMT. Ukupni neutofili zabeleženi kao procenat od ukupnog broja belih ćelija (otprilike 100 belih krvnih ćelija (opseg 100 do 107) su ispitani za svaki slajd; frekvencija u prisustvu nezrelih neutrofila je zabeležen po grupi životinja; smrti povezane sa dozama zabeležen su kao broj životinja po grupi od 8 pacova.
[0412]Iako su LMT.2HC1 i LMT,2MsOH uporedivi u gore navedenoj analizi, postoji razlika u nečistoćama dobijena kod dva oblika soli. Za LMT.2HC1, prisustvo medi hlorida je detektovano tokom sinteze i zadržano unutar proizvoda na takav način da je teško da se ukloni u potpunosti. U poređenju sa tim, nečistoće kao etil i metil metanesulfonat (EMS, MMS) mogu da se kontrolišu do mnogo nižih nivoa u LMT,2MsOH sintetičkom procesu.
[0413]Ispitivanja hemopoetskog sistema su obavljena kod pacova, majmuna i svinja.
[0414]Najnižedoze kod kojih je metemoglobinemija primećeno su 15 mg MT/kg/dan kod pacova (MTC i LMT,2HBr) ili 30 mg MT/kg/dan (LMT,2MsOH), 5,3 mg MT/kg/dan kod primata (MTC), i 10 mg MT/kg/dan (LMT,2MsOH i LMT,2HBr) kod svinja.
[0415]Nakon prvih 28 dana doziranja u 9-mesečnoj LMT,2MsOH studiji kod svinja, nije bilo indikacija metemoglobinemiije pri 3 mg MT/kg/dan.
[0416]Međutim, kao što je očekivano, kada su nivoi doza MTC, LMT,2HBr ili LMT,2MsOH povećani, znaci oksidativnog stresa RBC-a pojavili su se u obliku vezanom za doze, osvedočeno povećanjem nivoa metemoglobina, i konačno na dozama koje nisu tolerisane, formiranje Heinz tela (agregati denaturisanog, taloženog hemoglobina unutar crven ćelija).
Primer 5 - farmakokinetika
[0417]Slika 18 pokazuje poređenje koncentracija plazme kdo svinja MT dela tokom vremena nakon doziranja LMT,2HBr, LMT.2HC1 i LMT,2MsOH pri (dve oralne doze, 2 i 15 mg/kg).
[0418]Kao što može da se vidi, Cmak5 (pri TTOks od 1 sata) za LMT,2MsOH je više nego dva puta veći nego za LMT.2HC1 ili LMT,2HBr. Stoga LMT,2MsOH može dati efektivnije izlaganje MT nego LMT.2HC1 ili LMT,2HBr.
Primer 6 - ispitivanje želudačne iritacije
[04191Studija (28-dana, pacovi sa MTC ili LMT,2HBr): učestalost i ozbiljnost odabranih mikroskopskih nalaza u stomaku mrtvih životinja:
[0420]Od gore navedenog, naredno može da se predvidi sa 10 po grupi:
[0421]Studija (28-dana pacovi sa LMT,2MsOH): učestalost i ozbiljnost odabranih mikroskopskih nalaza u grudnoj kosti, jetri, slezini i stomaku mrtvih životinja:
Učestalost i ozbiljnost odabranih nalaza u grudnoj kosti, jetri, slezini:
[0422]Ovi rezultati pokazuju da LMT,2MsOH uzrokuje manje želudačne iritacije nego LMT.2H.Br.
Primer 7 - formulacije
Primer formulacije 1: priprema LMTM tableta koristeći direktnu kompresiju
[0423] Tablete koje imaju naredne sastave su pripremljene postupkom direktne kompresije:
[0424] LMTM, raspršivanjem osušen manitol, mikrokristalna celuloza, krospovidon i magnezijum stearat su stopljeni u blender mešalici, i zatim kompresovani koristeći mašinu za pravljenje tableta.
[0425] Jezgra tableta su zatim obložena filmom sa vodenom suspezijom od Opadrv<*>blue (<*>registrovan žig Colorcon-a za veliki broj materijala za oblagnje filmom).
Primer formulacije 2: priprema LMTM tableta koristeći suvu granulaciju ( sabijanje valjkom )
[0426] Tablete koje imaju naredne sastave su pripremljene postupkom suve granulacije:
[0427]LMTM, raspršivanjem osušen manitol, mikrokristalna celuloza, krospovidon i magnezijum stearat su stopljeni u blender mešalici. Smesa je zatim suvo granulirana koristeći valjak za sabijanje i zatim mlevena sa oscilirajućim granulatorom koristeći odgovarajuću podlogu. U tom slučaju, pola magnezijum stearata je korišćeno pre sabijanja valjkom i pola magnezijum stearata je zatim dodatu u granulaciju i stopljeno je pre kompresovanja na konvencionalnoj mašini za pravljenje tableta.
[0428] Jezgra tableta su zatim obložena filmom sa vodenom suspezijom od Opadrv<*>blue (<*>registrovan žig Colorcon-a za veliki broj materijala za oblagnje filmom).
Primer formulacije 3: priprema LMTM tableta koristeći suvu granulaciju ( nabijanje )
[0429] Tablete koje imaju naredne sastave su pripremljene postupkom dalje suve granulacije.
[0430]LMTM i ekscipijensi su stopljeni u blender mešalici, i zatim kompresovani kako bi se dobili grumeni (obučna, ravna tableta) koristeći mašinu za pravljenje tableta.
[0431] Grumeni su zatim mleveni koristeći oscilirajućim granulator opremljen sa 20 meš podlogom.
[0432] U tom primeru, pola magnezijum stearata je korišćeno pre nabijanje i zatim pola magnezijum stearata dodato je granulaciji i stopljeni su pre kompresovanja na konvencionalnoj mašini za pravljenje tableta.
[0433] Jezgra tableta su zatim obložena filmom sa vodenom suspezijom od Opadrv<*>blue (<*>registrovan žig Colorcon-a za veliki broj materijala za oblaganje filmom).
Primer formulacije 4: priprema LMTM tableta sn mokrom nranulacijom od ekscipijenasa i uključivanje
LMTM ekstragranularnosti
[0434] Tablete koje imaju naredne sastave su pripremljene postupkom mokre granulacije:
[0435]Manitol, krospovidon (trećina ukupnog) i mikrokristalna celuloza su stopljeni u blender mešalici. Stopljeni materijal je zatim granuliran koristeći rastvor PVP u vodi. Mokra masa je osušeno u tečnoj suŠilici i za:im mlevena koristeći oscilirajući granulator opremljen sa odgovarajućom podlogom.
[0436]Mleveni materijal je zatim stopljeni sa ostatkom Krospovidona i magnezijum stearata, i LMTM, pre kompresovanja na konvencionalnoj mašini za tablete. Jezgra tableta su zatim obložena filmom sa vodenom suspezijom od Opadrv<*>blue (<*>registrovan žig Colorcon-a za veliki broj materijala za oblagnje filmom).
Primer formulacije 5: pri<p>rema LMTM kapsulea
[0437] Kapsule koje imaju narede sastave su pripremljeni.
[0438]LMTM i ekscipijensi su stopljeni u blender mešalici. Rezultujuće mešavle lekova su napunjene u kapsule (50, 75, 100, 125 i 150mg formulacije u kapsuli veličine l i 200mg formulacije u kapsuli veličine 0) koristeći mašinu za punjenje kapsula. Pripremljene su i želatin kapsule i HPMC kapsule.
Pr imer formulacije 6: rezultati testa stabilnosti LMTM 75ma tablete obložene filmom
[0439]
Pr imer formulacije 7: rezultati testa stabilnosti LMTM lOOmg tablete obložene filmom
[0440]
Pr imer formulacije 8: rezultati testa stabilnosti LMTM 75ma tablete obložene filmom
[0441]
Primer formulacije 9: rezultati testa stabilnosti LMTM lOOma tablete obložene filmom
[0442]
Pr imer formulacije 10: LMTB lOOmg tablete obložene filmom
[0443]
[0444]Tablete koje imaju gore navedenu formulaciju su pripremljene postupkom direktne kompresije kako je opisano ovde i zatim obložene filmom (pogledati Primer formulacije 1).
Primer formulacije 11: LMTM 75ma tablete obložene filmom
[0445]
[0446]Tablete koje imaju gore navedenu formulaciju su pripremljene postupkom direktne kompresije kako je opisano ovde i zatim obložene filmom (pogledati Primer formulacije 1).
Pr imer formulacije 12-ispitivanje rastvaranja
[0447]LMTB tablete obložene filmom (3 x iOOmg) i LMTM tablete (4 x 75mg), pripremljene kao u Primerima formulacija 10 i 11, su mešane (pogledati Sliku 19) na brzini lopatica od SOrprn i stopa rastvaranja je procenjena, koristeći standardni postupak farmakopeje (USP 34) i uslove navedene u nastavku.
[0448]Rezultati su prikazani u narednim tabelama.
LMTM ( 4 x 75m<g>; Broj serije: A04827) rastvaranje (% rastvorenih) :
LMTB ( 3 x lOOmg; Broj serije: A02581) rastvaranje % ( rastvorenih) :
[0449]Tablete koje su se čuvale pod različitim vremenskim intervalima, pod uobičajenim (25<D>C/ 60% RH) ili uslovima „stresa" (40°C/ 75% RH), su takođe testirane koristeći isti postupak.
[0450]Rezultati su prikazani u tabelama u nastavku.
LMTM ( 4 x 75mg: Broj serije: A04827) - Čuvano na 25°C/ 60% RH rastvaranje (% rastvoreno) :
LMTM ( 4 x 75mg: Broj serije: A048271- čuvano na 4Q°C/ 75% RH rastvaranje (% rastvoreno) :
LMTB ( 3 x lOOmg: Broj serije: A02581) - čuvano na 25 °C/ 60% RH rastvaranje (% rastvoreno) :
LMTB( 3x lOOmg; Broj serije: A02581) - čuvano na 40°C/ 75% RH rastvaranje (% rastvoreno) :
Aneks - Kristalo<g>rafski podaci
Kristalografski podaci za LMT . EDSA ( Slika 17a ) :
[0451]
Tabela 1. Kristalni podaci i struktura rafiniranja za LMT.EDSA.
Kristalografski podaci za LMT . 2EsOH ( Slika 17b )
[0452]
Kristalografski podaci za LMTJMsOH ( Slika 17c )
[0453]
Simetrija transformacija korišćena da generiše ekvivalentne atome:
R eference:
[0454]Abrahamson, M., Jonsdottir, S., Olafsson, I. & Grubb, A. (1992) Hcrcditary cystadn C amy!oid angiopathy identification of the disease-causing mutation and specific diagnosis by polymerase chain reaction based analysis. Human Genetics 89, 377-380.
Andersen, P. (2006) Amvotrophic lateral sclerosis associated with mutations in the CuZn superoxide dismutase gene. Current Neurology and Neuroscience Reports 6, 37-46.
Arai, T., Hasegawa, M, Nonoka, T., Kametani, F., Yamashita, M., Hosokawa, M., Niizato, K., Tsuchiya, K., Kobayashi, Z., Ikeda, K., Yoshida, M, Onaya, M., Fujishiro, H. & Akiyama, H. (2010) Phosphorylated and cleaved TDP-43 in ALS, FTLD and other neurodegenerative disorders and in cellular models of TDP-43 proteinopathy. Neuropathology 30, 170-181.
Askanas, V., Engel, W.K. & Nogalska, A. (2009) Inclusion body myositis: a degenerative muscle disease associated with intra-muscle fiber multi-protein aggregates, proteazome inhibition, endoplasmic reticulum stress and decreased lysosomal degradation. Brain Pathology 19, 493-506.
Barmada, S.J., Skibinski, G., Korb, E., Rao, E.J., Wu, J.Y. & Finkbeiner, S. (2010) Cvtoplasmic mislocalization of
TDP-43 is toxic to neurons and enhanced by a mutation associated with familial amyotrophic lateral sclerosis. Journal of Neuroscience 30, 639-649.
Blair, LP., VVilliams, K.L., VVarraich, S.T., Durnall, J.C., Thoeng, A.D., Manavis, J., Blumbergs, P.C., Vucic, S., Kiernan, M.C. & Nicholson, G.A. (2010) FUS mutations in amyotrophic lateral sclerosis: clinical, pathoiogical, neurophvsiological and genetic analvsis. Journal of Neurology Neurosurgerv and Psychiatry 81, 639-645.
Booth, D.R., Šunde, M., Bellotti, V., Robinson, C.V., Hutchinson, VV.L., Fraser, P.E., Hawkins, P.N., Dobson, C.M.,
Radford, S.E., Blake, C.C.F. & Pepys, M.B. (1997) Instability, unfolding and aggregation of human lysozyme variants underlying amyloid fibrillogenesis. Nature 385, 787-793.
Byrne, S., Walsh, C, Lynch, C, Bede, P., Elamin, M., Kenna, K., McLaughlin, R. & Hardiman, 0.
(2011) Rate of familial amyotrophic lateral sclerosis: a systematic review and meta-analysis. Journal of Neurology, Neurosurgery & Psychiatry 82, 623-627.
Carrell, R.W. & Gooptu, B. (1998) Conformational changes and disease - serpins, prions and Alchajmer's. Current Opinion in Structural Biology 8, 799-809.
Chen-Plotkin, A.S., Lee, V.M.Y. & Trojanowski, J.Q. (2010) TAR DNA-binding protein 43 in neurodegenerative disease. Nature Reviews Neurology 6, 211-220.
Chiti, F., VVebster, P., Taddei, N., Clark, A., Stafani, M., Ramponi, G. & Dobson, C. (1999) Designing conditions for in vitro formation of amyloid protofilaments and fibrils. Proceedings of the National Academy of Sciences, USA 96, 3590-3594.
Cox, L.E., Ferraiuolo, L., Goodall, E.F., Heath, P.R., Higginbottom, A., Mortibovs, FL, Hollinger, H.C., Hartley, J.A., Brockington, A., Burness, C.E., Morrison, K.E., VVharton, S.B., Grierson, A.J., Ince, P.G., Kirby, J. & Shaw, PJ.
(2010) Mutations in CHMP2B in lower motor neuron predominant amyotrophic lateral sclerosis (ALS). PLOS One
5, e9872.
Czech, C, Tremp, G. & Pradier, L. (2000) Presenilins and Alchajmer's disease: biological functions and pathogenic mechanisms. Progress in Neurobiology 60, 363-384.
Daviš, R.L., Shrimpton, A.E., Holohan, P.D., Bradshavv, C, Feiglin, D., Collins, G.H., Sonderegger, P., Kinter, J.,
Becker, L.M., Lacbav/an, F., Krasnevvich, D., Muenke, M., Lawrence, D.A., Yerby, M.S., Shaw, C-M., Gooptu, B.,
Elliott. P.R., Finch, J.T., Carrell. R.W. & Lomas, D.A. (1999) Familial dementia caused by polymerization of mutant neuroserpin. Nature 401, 376-379.
DiFiglia, M., Sapp, E., Chase, K.O., Davies, S.W., Bates, G.P., Vonsattel, J.P. & Aronin, N. (1997) Aggregation of huntingtin in neuronal intranuclear inclusions and dyslrophic neurites in brain. Science 277, 1990-1993.
Dische, F.E., Wernstedt, C, VVestermark, G.T., VVestermark, P., Pepys, M.B., Rennie, J.A., Gilbey, S.G. & VVatkins, P.J. (1988) Insulin as an amvloid-fibril protein at sites of repeated insulin injections in a diabetic patient. Diabetologia 31, 158-161.
Elden, A.C., Kim, H.-J., Hart, M.P., Chen-Plotkin, A.S., Johnson, B.S., Fang, X., Armakola, M., Geser, F., Greene, R., Lu, M.M., Padmanabhan, A., Clay-Falcone, D., McCluskev, L., Elman, L., Juhr, D., Gruber, P.J., Rub, U., Auburger, G., Trojanovvski, J.Q., Lee, V.M.Y., Van Deerlin, V.M., Bonini, N.M. 8t Gitler, A.D. (2010) Ataxin-2 intermediatelength polygIutamine expansions are associated with increased risk for ALS. Nature 466, 1069-1075.
Finsterer, J (2009) Mitochondrial disorders, cognitive impairment and dementia. J. Neurol. Sci.
283:143-148
Gasset, M., Bladwin, M.A., Lloyd, D.H., abriel, J.-M., Holtzman, D.M., Cohen, F.E., Fletterick, R. & Prusiner, S.B. (1992) Predicted a-helical region of the prion protein when synthesized as peptides form amy!oid. Proceedings of the National Academy of Sciences, USA 89, 10940-10944.
Gendron, T.F., Josephs, K.A. & Petrucelli, L. (2010) Review: Transactive response DNA-binding protein 43 (TDP43): mechanisms of neurodegeneration. Neuropathologv and Applied Neurobiologv 36,97-112.
Geser, F„ Lee, V.M.-Y. & Trojanowski, J.Q. (2010) Amvotrophic lateral sclerosis and frontotemporal lobar degeneration: A spectrum of TDP-43 proteinopathies. Neuropathologv 30, 103-112.
Gitcho, M.A., Baloh, R.H., Chakravertv, S., Mayo, K., Norton, J.B., Levitch, D., Hatanpaa, K.J., White, C.L., III, Bigio, E.H., Caselli, R., Baker, M., Al-Lozi, M.T., Morris, J.C., Pestronk, A„ Rademakers, R., Goate, A.M. & Cairns, NJ. (2008) TDP-43 A315T mutation in familial motor neuron disease. Annals of Neurology 63, 535-538. Glenner, G.G. & Wong, C.W. (1984) Alchajmer's disease: initial report of the purification and characterisation of a novel cerebrovascular amvloid protein. Biochemical and Biophysical Research Communications 120, 885-890.
Goate, A., Chartier-Harlin, M.-C, Mullan, M., Brown, J., Crawford, F., Fidani, L., Giuffra, L., Haynes, A,, Irving, N., James, L., Mant, R., Nevvton, P., Rooke, K., Roques, P., Talbot, C, Pericak-Vance, M., Roses, A., VVilliamson, R.,
Rossor, M., Owen, M. & Hardy, J. (1991) Segregation of a missense mutation in the amyloid precursor protein gene with familial Alchajmer's disease. Nature 349, 704-706.
Gorevic, P.D., Casev, T.T., Stone, W.J., DiRaimondo, C.R., Prelli, F.C. & Frangione, B. (1985) b-2 Microglobulin is an amyloidogenic protein in man. Journal of Clinical Investigation 76, 2425-2429.
Gustavsson, A., Engstrom, U. & VVestermark, P. (1991) Normal transthvretin and svnthetic transthyretin fragments form amyloid-like fibrils in vitro. Biochemical and Biophysical Research Communications 175, 1159-1164.
Higashi, S., Tsuchiva, Y., Araki, T., Wada, K. & Kabuta, T, (2010) TDP-43 physically interacts with amyotrophic lateral sclerosis-linked mutant CuZn superoxide dismutase. Neurochemistrv Internationa] 57, 906-913.
Hutton, M., Lendon, C, Rizzu, P., Baker, M., Froelich, S., Houlden, H., Pickering-Brown, S., Chakraverty, S., Isaacs, A., Grover, A., Hackett, J., Adamson, J., Lincoln, S., Dickson, D., Davies, P., Petersen, R.C., Stevens, M., de Graaf,
E., VVauters, E„ van Baren, J., Hillebrand, M., Joosse, M., Kwon, J.M., Nowotny, P., Che, L.K., Norton, J., Morris,
J.C., Reed, L.A., Trojanowski, J.Q., Basun, H., Lannfelt, L., Neystat, M., Fahn, S., Dark, F., Tannenberg, T., Dodd, P.R., Hayward, N., Kwok, J.B.J., Schofield, P.R., Andieadis, A., Snowden, J„ Craufurd, D., Nearv, D., Owen, F., Oostra, B,A., Hardv, J., Goate, A., van Swieten, J., Mann, D., Lynch, T. &. Heutink, P. (1998) Association of missense and 5'-splice-site mutations in tau with the inherited dementia FTDP-17. Nature 393, 702-705.
Igaz, L.M., Kwong, L.K., Chen-Plotkin, A., Winton, M.J., Unger, T.L., Xu, Y., Neumann, M., Trojanowski, J.Q. & Lee,
V.M.Y. (2009) Expression of TDP-43 C-terminal fragments in vitro recapitulates pathological features of TDP-43 proteinopathies. Journal of Biological Chemistry 284, 8516-8524.
Jinwal, UK, Miyata, Y, Koren, J, III, Jones, JR, Trotter, JH et al. (2009) Chemical manipulation of Hsp70 ATPase activity regulates tau stability. J. Neurosci. 29:12079-12088
Johansson, B., VVernstedt, C. &. VVestermark, P. (1987) Atrial natriuretic peptide deposited as atrial amyloid fibrils. Biochemical and Biophysical Research Communications 148, 1087-1092.
Johnson, B.S., McCaffery, J.M., Lindquist, S. & Gitler, A.D. (2008) A yeast TDP-43 proteinopathy model: Exploring the molecular determinants of TDP-43 aggregation and cellular toxicity. Proceedings of the National Academy of Sciences 105, 6439-6444.
Johnson, B.S., Snead, D., Lee, J.J., McCaffery, J.M., Shorter, J. & GiUer, A.D. (2009) TDP-43 is intrinsically aggregation-prone, and amyotrophic lateral sclerosis-linked mutations accelerate aggregation and increase toxicity. Journal of Biological Chemistry 284, 20329-20339.
Johnson, J.O., Mandrioli, J., Benatar, M., Abramzon, Y., Van Deerlin, V.M., Trojanowski, J.Q., Gibbs, J.R., Brunetti, M., Gronka, S., Wuu, J., Ding, J., McCluskey, L., Martinez-Lage, M., Falcone, D., Hernandez, D.G., Arepalli, S.,
Chong, S., Schymick, J.C., Rothstein, J., Landi, F., Wang, Y.-D., Calvo, A., Mora, G., Sabatelli, M„ Monsurro, M.R.,
Battistini, S., Salvi, F., Spataro, R„ Sola, P., Borghero. G., Galassi, G., Scholz, S.W., Tavlor, J.P., Restagno, G., Chio, A. & Travnor, B.J. (2010) Exome sequencing reveals VCP mutations as a cause of familial ALS. Neuron 68, 857-864.
Kabashi, E., Lin, L., Tradewell, M.L., Dion, P.A., Bercier, V., Bourgouin, P., Rochefort, D., Bel Had, S., Durham,
H.D., Velde, C.V., Rouleau, G.A. & Drapeau, P. (2010) Gain and loss of function of ALS-related mutations of TARDBP (TDP-43) cause motor deficits in vivo. Human Molecular Genetics 19. 671-683.
Kabashi, E., Valdmanis, P.N., Dion, P., Spiegelman, D., McConkey, B.J., Velde, C.V., Bouchard, J.-P., Lacomblez, L., Pochigaeva, K., Salachas, F., Pradat, P.-F., Gamu, W., Meininger, V., Dupre, N. & Rouleau, G.A. (2008) TARDBP mutations in individuals with sporadic and familial amyotrophic lateral sclerosis. Nature Genetics 40, 572-574. Ling, S.-C., Albuquerque, C.P., Han, J.S., Lagier-Tourenne, C., Tokunaga, S., Zhou, H. & Cleveland, D.W. (2010)
ALS-associated mutations in TDP-43 increase its stabilitv and promote TDP-43 complexes with FUS/TLS. Proceedings of the National Academy of Sciences 107, 13318-13323.
Lomas, D.A., Evans, D.L., Finch, J.T. & Carrell, R.W. (1992) The mechanism of Z al-antitrypsin accumulation in the liver. Nature 357, 605-607.
Love, S., Bridges, L.R. & Case, CP. (1995) Neurofibrillary tangles in Niemann-Pick disease tvpe C. Brain 118, 119-129.
Mackenzie, I.R.A., Bigio, E.H.. Ince, P.G., Geser, F., Netimann, M., Cairns, N.J., Kwong, L.K., Forman, M.S., Ravits, J., Stewart, H., Eisen, A., McClusky, L., Kretzschmar, H.A., Monoranu, C.M., Highley, J.R., Kirby, J., Siddique, T, Shaw, P.J., Lee, V.M.Y. & Trojanowski, J.Q. (2007) Pathological TDP-43 distinguishes sporadic amyotrophic lateral sclerosis from amyotrophic lateral sclerosis vvith SODI mutations. Annals of Neurology 61, 427-434.
Mackenzie, I.R.A., Rademakers, R. & Neumann, M. (2010) TDP-43 and FUS in amyotrophic lateral sclerosis and frontotemporal dementia. The Lancet Neurologv 9, 995-1007.
Maury, CP. & Baumann, M. (1990) lsolation and characterizauon of cardiac amyloid in familial amyloid polyneuropathy type IV (Finnish): relation of the amyloid protein to variant gelsolin. Biochimica et Biophysica Acta 1096, 84-86. Neary, D., Snovvden, J.S., Gustafson, L., Passant, U., Stuss, D., Black, S., Freedman, M., Kertesz, A., Robert, P.H., Albert, M., Boone, K., Miller, B.L., Cummings, J. & Benson, D.F. (1998) Frontotemporal lobar degeneration: a consensus on clinical diagnostic criteria. Neurology 51, 1546-1554.
Neumann, M. (2009) Molecular neuropathologv of TDP-43 proteinopathies. International Journal of Molecular Sciences 10, 232-246.
Neumann, M., Sampathu, D.M., Kwong, L.K., Truax, A.C., Micsenyi, M.C., Chou, T.T., Bruce, J., Schuck, T., Grossman, M., Clark, C.M., McCluskev, L.F., Miller, B.L., Masliah, E., Mackenzie, I.R., Feldman, H., Feiden, W., Kretzschmar, H.A., Trojanovvski, J.Q. & Lee, V.M.Y. (2006) Ubiquitinated TDP-43 in frontotemporal lobar degeneration and amvotrophic lateral sclerosis. Science 314, 130-133.
Nonaka, T., Kametani, F., Arai, T., Akiyama, H. & Hasegavva, M. (2009) Truncation and pathogenic mutations facilitate the formation of intracellular aggregates of TDP-43. Human Molecular Genetics 18, 3353-3364.
Ohmi, K., Kudo, L.C., Ryazantsev, S., Zhao, H.-Z., Karsten, S.L. & Neufeld, E.F. (2009) Sanfilippo syndrome tvpe B, a lysosomal storage disease, is also a tauopathv. Proceedings of the National Academy of Sciences 106,8332-8337.
Orr, H.T. & Zoghbi, H.Y. (2007) Trinucleotide repeat disorders. AnnuaJ Review of Neuroscience 30. 575-621.
Paulson, H.L. (1999) Human genetics '99: trinucleotide repeats. American Journal of Human Genetics 64, 339-345. Pepys, M.B., Havvkins, P.N., Booth, D.R., Vigushin, D.M., Tennent, G.A., Soutar, A.K., Totty, N., Nguyen, O., Blake, C.C.F., Terry, C.J., Feest, T.G., Zalin, A.M. & Hsuan, J.J. (1993) Human lysozyme gene mutations cause hereditary svstemic amyloidosis. Nature 362, 553-557.
Polymeropoulos, M.H., Lavedan, C, Leroy, E., Ide, S.E., Dehejia, A., Dutra, A., Pike, B., Root, H., Rubenstein, J., Boyer, R., Stenroos, E.S., Chandrasekharappa, S., Athanassiadou, A., Papaetropoulos, T., Johnson, W.G„ Lazzarini, A.M., Duvoisin, R.C., Di lorio, G., Golbe, L.l. & Nussbaum, R.L.
(1997) Mutation in the a-svnuclein gene identified in families with Parkinson's disease. Science 276, 2045-2047.
Prusiner, S.B., Scott, M.R., DeArmond, S.J. & Cohen, F.E. (1998) Prion protein biology. Cell 93, 337-348.
Seetharaman, S.V., Prudencio, M„ Karch, C., Holloway, S.P., Borchelt, D.R. & Hart, P.J. (2009) Immature copperzinc superoxide dismutase and familial amyotrophic lateral sclerosis. Experimental Biology and Medicine 234, 1140-1154.
Seilhean, D., Cazeneuve, C., Thuries, V., Russaouen, O., Millecamps, S., Salachas, F., Meininger, V., LeGuern,
E. & Duyckaerts, C. (2009) Accumulation of TDP-43 and a-actin in an amyotrophic lateral sclerosis patient with the K17I ANG mutation Acta Neuropathologica 118, 561-573.
Shibata, N„ Hirano, A., Kobayashi, M., Siddique, T., Deng, H.X., Hung, W.Y., Kato, T. & Asavama, K. (1996) Intense superoxide dismutase-1 immunoreactivity in intracytoplasmic hyaline inclusions of familial amyotrophic lateral sclerosis with posterior column involvement. Journal of Neuropathologv and Experimental Neurology 55, 481-490.
Sletten, K., VVestermark, P. & Natvig, J.B. (1976) Characterization of amvloid fibril proteins from medullary carcinoma of the thyroid. Journal of Experimental Medicine 143, 993-998.
Spillantini, M.G., Crowther, R.A., Jakes, R., Hasegawa, M. & Goedert, M. (1998) a-Synuclein in filamentous inclusions of Lewy bodies from Parkinson's disease and dementia with Lewy bodies. Proceedings of the National Academy of Sciences, USA 95, 6469-6473.
Sreedharan, J., Blair, I.P., Tripathi, V.B., Hu, X., Vance, C., Rogelj, B., Ackerley, S., Durnall, J.C., VVilliams, K.L.,
Buratti, E., Baralle, F., de Belleroche, J., Mitchell, J.D., Leigh, P.N, Al-Chalabi, A., Miller, C.C., Nicholson, G. & Shaw, C.E. (2008) TDP-43 mutations in familial and sporadic amyotrophic lateral sclerosis. Science 319, 1668-1672. Uemichi, T., Liuepnicks, J.j. & Benson, M.D. (1994) Hereditarv renal amyloidosis with a novel variant fibrinogen. Journal of Clinical Investigation 93, 731-736.
van Bebber, F., Paquet, D., Hruscha, A., Schmid, B. & Haass, C. (2010) Methylene blue fails to inhibit Tau and polvglutamine protein dependent toxicity in zebrafish. Neurobiology of Disease 39, 265-271.
Vance, C., Rogelj, B., Hortobagyi, T., De Vos, K.J., Nishimura, A.L., Sreedharan, J., Hu, X., Smith, B., Ruddv, D., VVright, P., Ganesalingam, J., VVilliams, K.L., Tripathi, V., Ai-Saraj, S., Al-Chalabi, A., Leigh, P.N., Blair, LP., Nicholson, G., de Belleroche, J., Gallo, J.-M., Miller, C.C. & Shavv, C.E.
(2009) Mutations in FUS, an RNA processing protein, cause familial amvotrophic lateral sclerosis type 6. Science 323, 1208-1211.
VVestermark, P., Engstrom, U., Johnson, K.H., VVestermark. G.T. & Betsholtz, C. (1990) Islet amyloid polypeptide: pinpointing amino acid residues linked to amvloid fibril formation. Proceedings of the National Academy of Sciences, USA 87, 5036-5040.
VVestermark, P., Johnson, K.H. & Pitkanen, P. (1985) Svstemic amyloidosis: A review with emphasis on pathogenesis. Applied Physiology 3, 55-68.
VVestermark, P., Johnson, K.H., O'Brien, T.D. & Betsholtz, C. (1992) Islet amvloid polvpeptide - a nove! controversv in diabetes research. Diabetologia 35, 297-303.
VVijesekera, L. & Leigh, P.N. (2009) Amvotrophic lateral sclerosis. Orphanet Journal of Rare Diseases 4, 3.
VVischik, C.M., Novak, M., Thogersen, H.C., Edwards, P.C., Runsvvick, M.J., Jakes, R., VValker, J.E., Milstein, C, M., R. & Klug, A. (1988) Isolation of a fragment of tau derived from the ćore of the paired helical filament of Alchajmer's disease. Proceedings of the National Academv of Sciences, USA 85, 4506-4510.
Yamashita, M., Nonaka, T., Arai, T., Kametani, F., Buchman, V.L., Ninkina, N., Bachurin, S.O., Akivama, H., Goedert, M. & Hasegawa, M. (2009) Methylene blue and dimebon inhibit aggregation of TDP-43 in cellular models. FEBS Letters 583, 2419-2424.
Zhang, Y.-J., Xu, Y.-F., Cook, C, Gendron, T.F., Roettges, P., Link, C.D., Lin, VV.-L., Tong, J„ Castanedes-Casey, M., Ash, P., Gass, J., Rangachari, V., Buratti, E., Baralle, F., Golde, T.E., Dickson, D.VV. & Petrucelli, L. (2009) Aberrant cleavage of TDP-43 enhances aggregation and cellular toxicity. Proceedings of the National Academy of Sciences 106, 7607-7612.

Claims (26)

  1. ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, solvat ili hidrat, za primenu u postupku tretmana ili profilakse ljudskog ili životinjskog tela terapijom.
  2. 2. Jedinjenje za primenu prema patentnom zahtevu 1 koji je u kristalnom obliku.
  3. 3. Jedinjenje za primenu prema patentnom zahtevu l ili patentnom zahtevu 2 koji je u značajno pročišćenom obliku.
  4. 4. Jedinjenje za primenu prema patentnom zahtevu 1 ili patentnom zahtevu 2 koje je prisutno u sastavu koji obuhvata jedinjenje i farmaceutski prihvatljiv nosač ili rastvarač.
  5. 5. Jedinjenje za primenu kako se zahteva u patentnom zahtevu 4 gde je navedeno jedinjenje farmaceutski sastav koji je čvrst oblik doziranja koji obuhvata jedinjenje i barem jedan rastvarač pogodan za suvu kompresiju.
  6. 6. Jedinjenje za primenu prema patentnom zahtevu 5 gde je Čvrst oblik doziranja proizveden direktnom kompresijom ili suvom granulacijom.
  7. 7. Jedinjenje za primenu prema patentnom zahtevu 5 ili patentnom zahtevu 6, gde je barem jedan navedeni rastvarač izabran iz grupe koju čine mikrokristalin celuloza, laktoza, manitol, soli kalcijuma kao što su, dibazni kalcijum fosfat, kalcijum sulfat, kalcijum karbonat, i šećeri kao što su laktoza, sukroza, dekstroza i maltodekstrin.
  8. 8. Jedinjenje za primenu prema bilo kom patentnom zahtevu od 5 do 7, gde navedeni sastav dalje obuhvata barem jedan agens za razgrađivanje.
  9. 9. Jedinjenje za primenu prema patentnom zahtevu 8 gde je agens za razgrađivanje izabran iz grupe koju čine unakrsno vezan polivinilpirolidon, glikolate natrijum škroba, unakrsno vezana natrijum carboksimetil celuloza, ili preželatiniran škrob.
  10. 10. Jedinjenje za primenu prema bilo kom patentnom zahtevu od 5 do 9 gde je čvrst oblik doziranja obložen filmom.
  11. 11. Jedinjenje za primenu prema bilo kom patentnom zahtevu od 5 do 10, gde navedeni sastav dalje obuhvata kiselinu koja ima pKl više 1,5.
  12. 12. Jedinjenje za primenu prema patentnom zahtevu 11, gde je kiselina izabrana iz grupe koju čine maleinska kiselina, fosforna kiselina, askorbinska kiselina, sorbinska kiselina, asparaginska kiselina i sijalna kiselina.
  13. 13. Jedinjenje za primenu prema patentnom zahtevu 11 ili patentnom zahtevu 12, gde navedeni sastav dalje obuhvata nosač izabran iz grupe koju čine manitol, celulozni materijal, škrob, ili njihove mešavine.
  14. 14. Jedinjenje za primenu prema bilo kom patentnom zahtevu od 5 do 13 naznačen time da navedeni sastav obuhvata čestice od kojih više od 10% ima veličinu veću od 10 mikrona.
  15. 15. Jedinjenje za primenu prema bilo kom patentnom zahtevu od 1 do 14 koje je za primenu u postupku tretmana ili profilakse TDP-43 proteinopatije.
  16. 16. Jedinjenje za primenu prema bilo kom patentnom zahtevu od 1 do 14 koje je za primenu u postupku tretmana ili profilakse tauopatije.
  17. 17. Jedinjenje za primenu prema bilo kom patentnom zahtevu od 1 do 14 koje je za primenu u postupku tretmana ili profilakse bolesti i stanja iz grupe koju čine Alchajmerova bolest, Pikova bolest, progresivna supranuklearna paraliza (PSP), frontotemporalna demencija (FTD), FTD sa parkinsonizmom povezanim sa hromozomom 17, sindromi frontotemporalne lobarne degeneracije (FTLD) ; disinhibitorska demencija-parkinsonizam-amiotrofija kompleks, palido-ponto-nigralna degeneracija, Guam-ALS sindrom, palido nigro luizijanska degeneracija, kortiko-bazalna degeneracija, demencija sa argirofilnim naborima, demencija pugilistica ili hronična traumatična encefalopatija, Daunov sindrom, demencija sa Levijevim telima, subakutni sklerozni panencefalitis, blage kognitivne smetnje, Nieman-Pikova bolest, tipa C, Sanfilipo sindrom tipea B, miotonične distrofije DM1 ili DM2 ili amiotrofična lateralna skleroza (ALS).
  18. 18. Jedinjenje za primenu prema bilo kom patentnom zahtevu od 1 do 14 koje je za primenu u postupku tretmana ili profilakse Alchajmerove bolesti.
  19. 19. Jedinjenje za primenu prema bilo kom patentnom zahtevu od 1 do 14 koje je za primenu u postupku tretmana ili profilakse Parkinsonove bolesti.
  20. 20. Jedinjenje za primenu prema bilo kom patentnom zahtevu od 1 do 14 koje je za primenu u postupku tretmana ili profilakse PSP, ALS, ili FTLD.
  21. 21. Jedinjenje za primenu prema bilo kom patentnom zahtevu od 1 do 14 koje je za primenu u postupku tretmana ili profilakse poliglutaminskog poremećaja.
  22. 22. Jedinjenje za primenu u skladu sa patentnim zahtevom 21 koje je za primenu u postupku tretmana ili profilakse Hantingtonove bolesu, spinalne bulbarne mišićne atrofije, dentatorubropalidoluizijanske atrofija ili spinocerebelarne ataksijaze.
  23. 23. Jedinjenje za primenu prema bilo kom patentnom zahtevu od 1 do 14 koje je za primenu u postupku tretmana ili profilakse raka kože ili melanoma; ili virusnog, bakterijskog ili protozoalnog bolesnog stanja.
  24. 24. Jedinjenje za primenu prema patentnom zahtevu 23 gde je virusna, bakterijska ili protozoalna bolest izabrana iz grupe koju čine Hepatitis C, HIV, virus zapadnog Nila (WNV) i malarija.
  25. 25. Jedinjenje za primenu prema bilo kom patentnom zahtevu od 1 do 24 gde se navedeni tretman ili profilaksa jedinjenja primenjuje oralno.
  26. 26. Jedinjenje za primenu prema bilo kom patentnom zahtevu od 4 do 14 gde je sastav tableta ili kapsula.
RS20160880A 2011-02-11 2011-08-15 Fenotiazin diaminijum soli i njihova primena RS55237B1 (sr)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
SG2011010600 2011-02-11
US201161485880P 2011-05-13 2011-05-13
PCT/GB2011/001221 WO2012107706A1 (en) 2011-02-11 2011-08-15 Phenothiazine diaminium salts and their use
EP11749476.5A EP2673266B1 (en) 2011-02-11 2011-08-15 Phenothiazine diaminium salts and their use

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS55237B1 true RS55237B1 (sr) 2017-02-28

Family

ID=44532939

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20160880A RS55237B1 (sr) 2011-02-11 2011-08-15 Fenotiazin diaminijum soli i njihova primena

Country Status (25)

Country Link
US (6) US9283230B2 (sr)
EP (1) EP2673266B1 (sr)
JP (2) JP5898701B2 (sr)
KR (1) KR101888713B1 (sr)
CN (2) CN103649061B (sr)
AR (2) AR082699A1 (sr)
AU (1) AU2011358840B2 (sr)
BR (1) BR112013020539A2 (sr)
CA (1) CA2827027C (sr)
CY (1) CY1118102T1 (sr)
DK (1) DK2673266T3 (sr)
EA (1) EA025033B1 (sr)
ES (1) ES2594703T3 (sr)
HR (1) HRP20161291T1 (sr)
HU (1) HUE031633T2 (sr)
IL (2) IL227736A (sr)
LT (1) LT2673266T (sr)
MY (1) MY165906A (sr)
PL (1) PL2673266T3 (sr)
PT (1) PT2673266T (sr)
RS (1) RS55237B1 (sr)
SG (1) SG192666A1 (sr)
SI (1) SI2673266T1 (sr)
SM (1) SMT201600389B (sr)
WO (1) WO2012107706A1 (sr)

Families Citing this family (43)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE602007008550D1 (de) 2006-03-29 2010-09-30 Wista Lab Ltd 3,7-diamino-10h-phenothiazinsalze und ihre verwendung
EP2457904B1 (en) 2006-07-11 2014-11-19 Wista Laboratories Ltd. Methods of synthesis and/or purification of diaminophenothiazinium compounds
US9925282B2 (en) 2009-01-29 2018-03-27 The General Hospital Corporation Cromolyn derivatives and related methods of imaging and treatment
CN102958525B (zh) 2010-04-30 2017-05-24 普罗瑟塔抗病毒股份有限公司 抗病毒化合物
AU2011358840B2 (en) 2011-02-11 2017-05-04 TauRx Therapeutics Management Ltd Phenothiazine diaminium salts and their use
WO2012145567A1 (en) 2011-04-20 2012-10-26 Prosetta Antiviral Inc. Antiviral compounds
US10058530B2 (en) 2012-10-25 2018-08-28 The General Hospital Corporation Combination therapies for the treatment of Alzheimer's disease and related disorders
EP2911664B1 (en) 2012-10-25 2019-05-08 The General Hospital Corporation Combination therapies for the treatment of alzheimer's disease and related disorders
US10525005B2 (en) 2013-05-23 2020-01-07 The General Hospital Corporation Cromolyn compositions and methods thereof
KR101741235B1 (ko) * 2013-08-15 2017-05-29 유파마 피티와이 엘티디 디아미노페노티아지니움 화합물을 정제하는 방법
AU2014340182B2 (en) 2013-10-22 2019-05-23 The General Hospital Corporation Cromolyn derivatives and related methods of imaging and treatment
US11530374B2 (en) * 2014-05-06 2022-12-20 Milliken & Company Laundry care compositions
JP2018514523A (ja) * 2015-04-16 2018-06-07 ノバルティス アーゲー リボシクリブ錠剤
GB201512678D0 (en) * 2015-07-20 2015-08-26 Wista Lab Ltd Methods of chemical synthesis
CN105541756B (zh) * 2015-12-17 2018-02-09 陕西方舟制药有限公司 一种制备1‑(3，7‑双二甲氨基‑吩噻嗪‑10‑基)乙酮的方法
CN106046027B (zh) * 2016-06-30 2019-03-05 广东工业大学 一种含吡咯并吩噻嗪-1,3-二酮衍生物及其制备方法与应用
HRP20230628T1 (hr) 2016-07-25 2023-09-29 Wista Laboratories Ltd. Primjena i doziranje diaminofenotiazina
CA3033079A1 (en) 2016-08-31 2018-03-08 The General Hospital Corporation Macrophages/microglia in neuro-inflammation associated with neurodegenerative diseases
GB201614834D0 (en) * 2016-09-01 2016-10-19 Wista Lab Ltd Treatment of dementia
GB201621817D0 (en) 2016-12-21 2017-02-01 Wista Lab Ltd Methods of chemical synthesis
KR20210070232A (ko) 2017-07-20 2021-06-14 아즈테라피즈 인코포레이티드 크로몰린 나트륨 및 이부프로펜의 분말화된 제형
JP6958860B2 (ja) 2017-11-07 2021-11-02 学校法人自治医科大学 ミトコンドリアの機能障害の改善剤、及びミトコンドリアの機能障害に起因する疾患又は症状の予防又は治療薬、並びにそれらの用途
CA3105392A1 (en) 2018-07-02 2020-01-09 The General Hospital Corporation Powdered formulations of cromolyn sodium and .alpha.-lactose
MA52591A (fr) 2018-07-12 2021-06-02 Hexamer Therapeutics Inc Échafaudage peptidique autoassemblé
PT3826639T (pt) 2018-07-26 2024-10-09 Wista Lab Ltd Dosagem otimizada de diaminofenotiazinas em populações
WO2020048593A1 (en) 2018-09-05 2020-03-12 Wista Laboratories Ltd. Network methods for neurodegenerative diseases
EP3893945A4 (en) 2018-12-10 2022-11-30 The General Hospital Corporation CROMOGLYC ESTERS AND THEIR USES
GB201909454D0 (en) 2019-07-01 2019-08-14 Wista Lab Ltd Enhancers
GB201909493D0 (en) 2019-07-01 2019-08-14 Wista Lab Ltd Therapeutic interactions
GB201909506D0 (en) 2019-07-02 2019-08-14 Wista Lab Ltd Synaptopathies
US12458622B2 (en) 2020-04-06 2025-11-04 The General Hospital Corporation Methods of treatment of coronavirus-induced inflammation conditions
GB202006659D0 (en) 2020-05-05 2020-06-17 Wista Lab Ltd Therapeutic treatments
CN116056724A (zh) * 2020-05-05 2023-05-02 维斯塔实验室有限公司 用于治疗covid-19的甲基硫堇鎓化合物
JP2023524146A (ja) * 2020-05-05 2023-06-08 ウィスタ ラボラトリーズ リミテッド 低酸素血症の治療に使用されるメチルチオニニウム化合物
GB202010652D0 (en) 2020-07-10 2020-08-26 Wista Lab Ltd Anti-tau antibodies
KR102396975B1 (ko) 2022-01-11 2022-05-12 이덕형 페이스 리프팅기 및 이를 위한 동작 방법
GB202204185D0 (en) 2022-03-24 2022-05-11 Wista Lab Ltd Oral treatment
EP4512802A1 (en) * 2022-04-19 2025-02-26 Leadway (HK) Limited Purification method for electron mediator
JP2025518248A (ja) 2022-05-31 2025-06-12 ウィスタ ラボラトリーズ リミテッド メチルチオニニウム（ｍｔ）含有化合物を利用した神経変性障害の処置
CA3268316A1 (en) 2022-09-21 2024-03-28 Wista Laboratories Ltd. NEW FORMULATIONS AND VEHICLES
CN120282787A (zh) * 2022-11-30 2025-07-08 E·塞尔尼 用于治疗乙型肝炎和/或丁型肝炎感染的亚甲蓝
WO2024184146A1 (en) 2023-03-03 2024-09-12 Wista Laboratories Ltd. Diaminophenothiazine for the treatment of microvascular brain disease disease
CN119212703A (zh) * 2023-04-27 2024-12-27 寿协株式会社 肌萎缩性侧索硬化症的治疗剂或预防剂

Family Cites Families (48)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
BE569430A (sr) 1957-07-17
US4309255A (en) 1980-09-10 1982-01-05 International Business Machines Corporation Electrochromic recording paper
US4622395A (en) 1984-10-01 1986-11-11 Minnesota Mining And Manufacturing Company Phenoxazine and phenothiazine dyes and leuco forms thereof
US4647525A (en) 1984-10-01 1987-03-03 Minnesota Mining And Manufacturing Company Stabilized leuco phenazine dyes and their use in an imaging system
GB8724412D0 (en) 1987-10-19 1987-11-25 Medical Res Council Protein
US4880373A (en) 1988-04-28 1989-11-14 The Upjohn Company Tablet press
US5571666A (en) 1988-10-28 1996-11-05 Oklahoma Medical Research Foundation Thiazine dyes used to inactivate HIV in biological fluids
CA2011116C (en) 1989-03-06 1999-11-16 Murray A. Kaplan Lyophilized bmy-28142 dihydrochloride for parenteral use
US5220009A (en) 1990-05-03 1993-06-15 Yeda Research And Development Company Limited Phenothiazinium salts and their use for disinfecting aqueous effluents
JPH0725786A (ja) 1990-05-16 1995-01-27 Univ Rockefeller アルツハイマー病を伴うアミロイドーシスの治療
EP0600951A4 (en) 1991-08-01 1996-10-30 Paul H Voorheis Diagnostic method for alzheimer's disease.
WO1993003177A1 (en) 1991-08-09 1993-02-18 Massachusetts Institute Of Technology Novel tau/neurofilament protein kinases
DE4140192C2 (de) 1991-12-05 1996-02-29 Alfatec Pharma Gmbh Sol-gesteuerte Thermokolloidmatrix auf Gelatinebasis für perorale Retardformen
ATE386115T1 (de) 1991-12-06 2008-03-15 Max Planck Gesellschaft Verwendung von proteinkinasen zur diagnose und behandlung der alzheimer krankheit
JPH06289015A (ja) 1993-03-30 1994-10-18 Sunstar Inc フェノチアジン系色源体安定化組成物
GB9316727D0 (en) 1993-08-12 1993-09-29 Inst Of Psychiatry Models of alzheimers's disease
GB9317193D0 (en) 1993-08-18 1993-10-06 Zeneca Ltd Method
EP0778773A1 (en) 1994-08-08 1997-06-18 Albert Einstein College Of Medicine Of Yeshiva University Methods for treating and/or preventing alzheimer's disease using phenothiazines and/or thioxanthenes
DE4430091A1 (de) 1994-08-25 1996-02-29 Bayer Ag Verwendung von N-substituierten Phenothiazinen
GB9506197D0 (en) 1995-03-27 1995-05-17 Hoffmann La Roche Inhibition of tau-tau association.
US5804601A (en) 1995-04-10 1998-09-08 Takeda Chemical Industries, Ltd. Aromatic hydroxamic acid compounds, their production and use
US5693638A (en) 1996-02-23 1997-12-02 Myers; Daniel Method of treating a migraine headache
US6333322B1 (en) 1996-03-13 2001-12-25 Eisai Co., Ltd. Nitrogen-containing tricyclic compounds and drugs containing the same
CA2278245A1 (en) 1997-01-21 1998-07-23 The American National Red Cross Intracellular and extracellular decontamination of whole blood and blood components by amphiphilic phenothiazin-5-ium dyes plus light
WO1999062548A1 (en) 1998-06-01 1999-12-09 Advanced Research And Technology Institute Methods and compositions for diagnosing tauopathies
FR2788436A1 (fr) 1999-01-14 2000-07-21 Pf Medicament Composition d'un derive de phenothiazine
EP1248518A2 (en) 2000-01-21 2002-10-16 PHARMACIA &amp; UPJOHN COMPANY Transgenic mouse model of human neurodegenerative disease
GB0017060D0 (en) 2000-07-11 2000-08-30 Hunter Fleming Ltd Production, stabilisation and use of reduced forms of pharmaceutical compounds
GB0100119D0 (en) 2001-01-03 2001-02-14 Univ Aberdeen Materials and methods relating to protein aggregation in neurodegenerative disease
GB0101049D0 (en) 2001-01-15 2001-02-28 Univ Aberdeen Materials and methods relating to protein aggregation in neurodegenerative disease
GB0106953D0 (en) 2001-03-20 2001-05-09 Univ Aberdeen Neufofibrillary labels
WO2003000714A2 (en) 2001-06-22 2003-01-03 Panacea Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for preventing protein aggregation in neurodegenerative diseases
GB0117326D0 (en) 2001-07-16 2001-09-05 Univ Aberdeen Napthoquinone-type inhibitors of protein aggregation
US7410965B2 (en) 2002-05-29 2008-08-12 Gruenenthal Gmbh Delayed release pharmaceutical composition containing 1-dimethyl-amino-3-(3-methoxyphenyl)-2-methyl-pentan-3-ol
US6953974B2 (en) 2003-08-26 2005-10-11 Texas Instruments Incorporated EEPROM device and method for providing lower programming voltage
GB0322756D0 (en) 2003-09-29 2003-10-29 Univ Aberdeen Methods of chemical synthesis
BRPI0416928A (pt) 2003-11-28 2007-01-16 Photopharmica Ltd desenvolvimento de derivados biologicamente ativos de azul de metileno
US7790881B2 (en) 2004-09-23 2010-09-07 Wista Laboratories Ltd. Methods of chemical synthesis and purification of diaminophenothiazinium compounds including methylthioninium chloride (MTC)
EP1799662B1 (en) 2004-09-23 2013-04-17 Wista Laboratories Ltd. Methods of chemical synthesis and purification of diaminophenothiazinium compounds including methylthioninium chloride (mtc)
WO2006091728A2 (en) 2005-02-24 2006-08-31 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Microtubule stabilizing compounds and methods of their use
US20070116757A1 (en) 2005-11-08 2007-05-24 Collegium Pharmaceutical, Inc. Methylene Blue Derivatives
JP5654748B2 (ja) 2006-03-29 2015-01-14 ウイスタ・ラボラトリーズ・リミテッドＷｉｓｔａ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ Ｌｔｄ． タンパク質凝集の阻害物質
DE602007008550D1 (de) * 2006-03-29 2010-09-30 Wista Lab Ltd 3,7-diamino-10h-phenothiazinsalze und ihre verwendung
EP2853293B1 (en) 2006-03-29 2017-11-22 WisTa Laboratories Ltd. Thioninium compounds and their use
EP2457904B1 (en) 2006-07-11 2014-11-19 Wista Laboratories Ltd. Methods of synthesis and/or purification of diaminophenothiazinium compounds
WO2008155533A2 (en) * 2007-06-19 2008-12-24 Wista Laboratories Ltd Phenothiazine compounds for treating mild cognitive impairment
US9149481B2 (en) 2007-10-03 2015-10-06 Wista Laboratories Ltd. Therapeutic use of diaminophenothiazines
AU2011358840B2 (en) 2011-02-11 2017-05-04 TauRx Therapeutics Management Ltd Phenothiazine diaminium salts and their use

Also Published As

Publication number Publication date
US10864216B2 (en) 2020-12-15
SG192666A1 (en) 2013-09-30
AR082699A1 (es) 2012-12-26
AU2011358840B2 (en) 2017-05-04
JP6093890B2 (ja) 2017-03-08
KR101888713B1 (ko) 2018-08-14
EA201391158A8 (ru) 2016-05-31
HUE031633T2 (en) 2017-07-28
CA2827027A1 (en) 2012-08-16
PT2673266T (pt) 2016-10-07
CA2827027C (en) 2019-06-04
US20130315992A1 (en) 2013-11-28
BR112013020539A2 (pt) 2017-09-26
EA201391158A1 (ru) 2014-02-28
DK2673266T3 (en) 2016-10-24
SI2673266T1 (sl) 2016-11-30
US12064439B2 (en) 2024-08-20
US20200246350A1 (en) 2020-08-06
AU2011358840A1 (en) 2013-09-12
ES2594703T3 (es) 2016-12-22
US20190046537A1 (en) 2019-02-14
HRP20161291T1 (hr) 2016-11-18
EP2673266B1 (en) 2016-07-27
AR121016A2 (es) 2022-04-06
US20220098161A1 (en) 2022-03-31
KR20140007428A (ko) 2014-01-17
US11180464B2 (en) 2021-11-23
SMT201600389B (it) 2017-01-10
LT2673266T (lt) 2016-10-10
WO2012107706A8 (en) 2013-09-19
US20160237048A1 (en) 2016-08-18
CN103649061A (zh) 2014-03-19
EP2673266A1 (en) 2013-12-18
IL249056B (en) 2019-09-26
JP2014505095A (ja) 2014-02-27
EA025033B1 (ru) 2016-11-30
IL227736A (en) 2017-07-31
IL227736A0 (en) 2013-09-30
US9283230B2 (en) 2016-03-15
PL2673266T3 (pl) 2017-01-31
CN103649061B (zh) 2016-04-20
US9907804B2 (en) 2018-03-06
JP5898701B2 (ja) 2016-04-13
CN105853439A (zh) 2016-08-17
WO2012107706A1 (en) 2012-08-16
US20250000871A1 (en) 2025-01-02
HK1186738A1 (en) 2014-03-21
MY165906A (en) 2018-05-18
JP2016138117A (ja) 2016-08-04
IL249056A0 (en) 2017-01-31
CY1118102T1 (el) 2017-06-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US12064439B2 (en) Phenothiazine diaminium salts and their use
US9040567B2 (en) BAX agonist, compositions, and methods related thereto
JP6991214B2 (ja) チオスルホン酸とアニリンとのペルヨーデート媒介酸化カップリングの工程によるチオスルホン酸の合成
KR102743295B1 (ko) Cftr 조절제 및 이의 이용 방법
CN110054625A (zh) N-酰基苯磺酰胺异羟肟酸类Bcl-2、HDAC双靶点抑制剂及制备方法和应用
HK1186738B (en) Phenothiazine diaminium salts and their use
WO2024061971A1 (en) Novel formulations and vehicles
JP2025533497A (ja) タウ凝集阻害剤としてのチアゾール誘導体
Chojnacki Novel Compounds as Potential Alzheimer's Disease Therapeutics and Inhibitors of the Nlrp3 Inflammasome