RS55933B1 - Upotreba alginatnih oligomera u borbi protiv biofilmova - Google Patents

Upotreba alginatnih oligomera u borbi protiv biofilmova

Info

Publication number
RS55933B1
RS55933B1 RS20170466A RSP20170466A RS55933B1 RS 55933 B1 RS55933 B1 RS 55933B1 RS 20170466 A RS20170466 A RS 20170466A RS P20170466 A RSP20170466 A RS P20170466A RS 55933 B1 RS55933 B1 RS 55933B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
biofilm
alginate oligomer
subject
alginate
residues
Prior art date
Application number
RS20170466A
Other languages
English (en)
Inventor
Edvar Onsoyen
Rolf Myrvold
Original Assignee
Algipharma As
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Algipharma As filed Critical Algipharma As
Publication of RS55933B1 publication Critical patent/RS55933B1/sr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
    • A61K31/734—Alginic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N43/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds
    • A01N43/02—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having rings with one or more oxygen or sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • A01N43/04—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having rings with one or more oxygen or sulfur atoms as the only ring hetero atoms with one hetero atom
    • A01N43/14—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having rings with one or more oxygen or sulfur atoms as the only ring hetero atoms with one hetero atom six-membered rings
    • A01N43/16—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having rings with one or more oxygen or sulfur atoms as the only ring hetero atoms with one hetero atom six-membered rings with oxygen as the ring hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N31/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing organic oxygen or sulfur compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N63/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing microorganisms, viruses, microbial fungi, animals or substances produced by, or obtained from, microorganisms, viruses, microbial fungi or animals, e.g. enzymes or fermentates
    • A01N63/50—Isolated enzymes; Isolated proteins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N65/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing material from algae, lichens, bryophyta, multi-cellular fungi or plants, or extracts thereof
    • A01N65/03—Algae
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/65—Tetracyclines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7028—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages
    • A61K31/7034—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin
    • A61K31/7036—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin having at least one amino group directly attached to the carbocyclic ring, e.g. streptomycin, gentamycin, amikacin, validamycin, fortimicins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/02—Inorganic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/46—Ingredients of undetermined constitution or reaction products thereof, e.g. skin, bone, milk, cotton fibre, eggshell, oxgall or plant extracts
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/30—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic compounds
    • A61K8/64—Proteins; Peptides; Derivatives or degradation products thereof
    • A61K8/66—Enzymes
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K8/00—Cosmetics or similar toiletry preparations
    • A61K8/18—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition
    • A61K8/72—Cosmetics or similar toiletry preparations characterised by the composition containing organic macromolecular compounds
    • A61K8/73—Polysaccharides
    • A61K8/733—Alginic acid; Salts thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/02—Stomatological preparations, e.g. drugs for caries, aphtae, periodontitis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/08—Drugs for disorders of the urinary system of the prostate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/16—Otologicals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/02—Local antiseptics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q11/00—Preparations for care of the teeth, of the oral cavity or of dentures; Dentifrices, e.g. toothpastes; Mouth rinses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q17/00—Barrier preparations; Preparations brought into direct contact with the skin for affording protection against external influences, e.g. sunlight, X-rays or other harmful rays, corrosive materials, bacteria or insect stings
    • A61Q17/005—Antimicrobial preparations
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61Q—SPECIFIC USE OF COSMETICS OR SIMILAR TOILETRY PREPARATIONS
    • A61Q19/00—Preparations for care of the skin
    • A61Q19/007—Preparations for dry skin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
    • A61K38/46—Hydrolases (3)
    • A61K38/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • A61K38/482—Serine endopeptidases (3.4.21)
    • A61K38/4826—Trypsin (3.4.21.4) Chymotrypsin (3.4.21.1)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
    • A61K38/46—Hydrolases (3)
    • A61K38/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • A61K38/482—Serine endopeptidases (3.4.21)
    • A61K38/486—Elastase (3.4.21.36 or 3.4.21.37)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
    • A61K38/46—Hydrolases (3)
    • A61K38/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • A61K38/488—Aspartic endopeptidases (3.4.23), e.g. pepsin, chymosin, renin, cathepsin E
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
    • A61K38/46—Hydrolases (3)
    • A61K38/48—Hydrolases (3) acting on peptide bonds (3.4)
    • A61K38/4886—Metalloendopeptidases (3.4.24), e.g. collagenase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y304/00—Hydrolases acting on peptide bonds, i.e. peptidases (3.4)
    • C12Y304/21—Serine endopeptidases (3.4.21)
    • C12Y304/21004—Trypsin (3.4.21.4)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y304/00—Hydrolases acting on peptide bonds, i.e. peptidases (3.4)
    • C12Y304/21—Serine endopeptidases (3.4.21)
    • C12Y304/21036—Pancreatic elastase (3.4.21.36)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y304/00—Hydrolases acting on peptide bonds, i.e. peptidases (3.4)
    • C12Y304/21—Serine endopeptidases (3.4.21)
    • C12Y304/21037—Leukocyte elastase (3.4.21.37), i.e. neutrophil-elastase

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Agronomy & Crop Science (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Birds (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Oral & Maxillofacial Surgery (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)

Description

Opis
[0001] Ovaj pronalazak odnosi se na borbu protiv biofilmova. Određenije, ovaj pronalazak odnosi se na upotrebu određene klase alginatnih oligomera koji imaju najmanje 70% guluronat (G) ostataka, u borbi protiv biofilmova, uključujući i one na biotičkim i nebiotičkim površinama. Tako, obezbeđene su i medicinske i nemedicinske upotrebe i postupci, u borbi protiv biofilmne infekcije ili u borbi protiv obrazovanja biofilma na neživim površinama npr. za dezinfekciju i čišćenje. Pronalazak je baziran na začuđujućem otkriću da su određeni alginatni oligomeri tj. oni koji imaju najmanje 70% G ostataka, sposobni da međusobno deluju sa i ometaju biofilm.
[0002] Generalno, biofilm je skup, ili zajednica, mikroorganizama okruženih matricom ekstracelularnih polimera (takođe poznati u stanju tehnike i kao glikokaliks). Ovi ekstracelularni polimeri su obično polisaharidi, pre svega polisaharidi proizvedeni od samih organizama, ali mogu sadržavati i druge biopolimere. Biofilm je obično prikačen za neku površinu, koja može biti inertna ili živa, ali je takođe primećeno da se biofilmovi mogu obrazovati iz mikroorganizama prikačenih jedan za drugi ili u bilo kojoj tački interakcije. Prema tome, biofilm je generalno okarakterisan kao veoma organizovana višećelijska zajednica mikroorganizama upakovana u, ili okružena nekom ekstracelularnom polimernom matricom, generalno polisaharidnom matricom, i generalno u bliskom pridruživanju sa površinom ili mestom spajanja. Takav način rasta je zaštitan za mikroorganizme, i čini ih teškim za uklanjanje ili iskorenjivanje (na primer, kako je objašnjeno u nastavku, koji se opire ili je otporan na anti-mikrobne agense ili odbranu domaćina ili mehanizme klirensa). Veruje se da, u skladu sa ovim pronalaskom, alginatni oligomeri mogu međusobno reagovati sa polimernom matricom biofilma, i tako oslabiti biofilm. Kako je objašnjeno u nastavku, biofilmovi izazivaju značajne komercijalne, industrijske i medicinske probleme, u pogledu infekcija. kontaminacije, stvaranja naslaga i kvarenja itd, i tako ovaj pronalazak obezbeđuje značajnu prednost u omogućavanju ili olakšavanju borbe protiv takvih biofilmova, čineći ih lakšim za uklanjanje ili redukciju, npr. pogodnijim za uticaj anti-mikrobnih agenasa (uključujući dezinfektante ili antibiotike) ili zaista u slučaju infekcije, na imuni odgovor inficiranog domaćina. Efikasnost antimikrobnih agenasa, i terapeutskih i neterapeutskih, a koji naročito uključuju antibiotike, može se pojačati na ovaj način.
[0003] Biofilmovi su sveprisutni na različitim površinama ili mestima spajanja (npr. mesta spajanja voda/čvrsta materija i voda/gas (na primer voda/vazduh)) ukoliko postoje uslovi pogodni za opstanak mikrobne kolonizacije. U osnovi, neki biofilm će se obrazovati gde god ima mikroorganizama i neko mesto spajanja ili površina, naročito neka površina izložena vodi ili vlazi, a biofilmovi se danas smatraju prirodnim stanjem mikrobnog rasta na takvim površinama ili mestima spajanja. U osnovnim crtama, kako je prethodno navedeno, biofilm je kompleks i organizovani razmeštaj mikrobnih kolonija na nekoj površini, ili na nekom mestu spajanja, koji se može pojaviti naročito u prisustvu vode ili vlage.
Organizacija ovih kolonija rezultira iz sposobnosti mikroorganizama da proizvedu neku ekstracelularnu matricu u kojoj su ćelije "ugrađene". Ova matrica se obrazuje od biopolimera proizvedenih od strane mikroorganizama sa polisaharidima kao tipično predominanti polimer.
[0004] Mikroorganizmi u nekoj zajednici biofilma pokazuju karakteristike na ćelijskom nivou (fenotip) koje ne dele sa njihovim planktonskim (slobodno-plutajućim) ekvivalentima. Zapravo, veruje se da su ti mikroorganizmi u nekom biofilmu suštinski različiti od planktonskih slobodno-plutajućih ćelija. Dalje razlike mogu se takođe primeniti na nivou zajednice i odnose se na efekte na ekstracelularnoj matrici. Možda je najistaknutiji uobičajeno primećeni fenomen taj da mikroorganizmi u nekom okruženju biofilma ne pokazuju istu osetljivost na anti-mikrobne agense, npr. antibiotike, anti-gljivične agense i mikrobicide, i imune odbrane domaćina ili mehanizme klirensa. Smatralo se da ova rezistentnost postoji zbog barijernog efekta ekstracelularne matrice i/ili fenotipne promene u samim microbima. Primera radi, kada se biofilmovi obrazuju, antitela se više ne pričvršćuju za mikroorganizme (npr. bakterije) unutar biofilma. Eksperimenti su pokazali antitela gusto skorena van biofilma, ali ne i unutar samog biofilma. Ispitivanja aktivnosti belih krvnih zrnaca protiv biofilmova, pokazala su slična saznanja.
Proizvodnja toksina takođe se može razlikovati između planktonskog mikroba i njegovog ekvivalenta koji zaostaje u nekoj koloniji biofilma što sugeriše fenotipne promene u mikrobima. Takođe se smatra da mikroorganizmi u biofilmovima mogu rasti sporije, a kao rezultat mogu preuzimati anti-mikrobne agense sporije.
[0005] Biofilmovi se lako obrazuju na površinama vodene životne sredine, a već postojeća mikrobna kolonija na bilo kojoj površini izloženoj vodi (bilo koja "mokra" površina) skoro zasigurno će postojati kao biofilmna struktura. Dalje, sada je jasno i u velikoj meri dokumentovano da se biofilmovi takođe mogu obrazovati u slučaju mikrobne infekcije tj. unutar ili na zaraženom domaćinu. Takva obrazovanja biofilma takođe se mogu pojaviti na "fiziološkoj" ili "biološkoj" površini, koja je na nekoj oživljenoj ili biotičkoj površini, ili nekoj površini na ili u zaraženom organizmu domaćina (npr. humani ili ne-humani životinjski subjekat), na primer na unutrašnjoj ili spoljašnjoj površini tela ili tkiva. Takva obrazovanja biofilma (ili infekcija) na telesnom tkivu smatra se da značajno potpomažu razne infektivne bolesti, uključujući na primer endokarditis prirodnih zalistaka (mitralni, aortni, trikuspidna, pulmonalis srčani zalisci), akutni otitis media (srednje uho), hronični bakterijski prostatitis (prostata), cističnu fibrozu (pluća), upalu pluća (respiratorni trakt), periodontitis (tkiva koja nose zube, npr. gingiva, parodontalni ligament, alveolarna kost). Razume se, oba pomenuta utočišta biofilma prisutna su kada su medicinska sredstva ugrađena, a obrazovanje biofilma na takvim implantiranim ("ugrađenim") sredstvima mogu dovesti do kliničkih problema sa infekcijom na takvim mestima, kao što je endokarditis protetičkog zalistka i infekcije povezane sa nekim sredstvom, na primer sa intrauterinim sredstvima, kontaktnim sočivima, protezama (npr. protetički zglobovi) i na mestima katerizacije, na primer sa centralnim venskim ili urinarnim kateterima.
[0006] Značajan problem i rizik sa takvim biofilmin infekcijama ogleda se u tome što se mikroorganizmi (ili određenije mikrokolonije) mogu otkinuti i odvojiti od biofilma, i ući u tkiva, uključujući značajno i cirkulaciju. Takvi mikroorganizmi izvedeni iz cirkulacije mogu izazvati dodatne infekcije i dovesti do značajnih kliničkih problema, pogotovo jer odvojeni cirkulišući mikroorganizmi mogu imati rezistentne karakteristike roditeljske zajednice.
[0007] Biofilmna infekcija obično se razvija postepeno i može sporo da razvije vidljive simptome.
Međutim, kada se utvrde, biofilmovi kakvi su navedeni, teški su za uklanjanje te je biofilmna infekcija obično uporna, i retko se može razrešiti odbranom domaćina ili imunim mehanizmima, čak i kod pojedinaca sa zdravim urođenim i stečenim imunim odgovorima. Aktivni odgovori domaćina mogu zaista biti štetni, na primer imunitet posredovan ćelijama (npr. invazivni neutrofili) može izazvati kolateralno oštećenje u susednom tkivu domaćina. Biofilmne infekcije odgovaraju samo prolazno na antibiotsku terapiju. Tako, dok se planktonske mikrobne ćelije mogu otkloniti antitelima ili fagocitima, i pošto su podložne anti-mikrobima, mikroorganizmi u biofilmovima nastoje da budu otporni na antitela, fagocite i anti-mikrobe. Fagociti se privlače biofilmom, ali ih fagocitoza odbija. Fagocitni enzimi se ipak ispuštaju i mogu da oštete tkivo oko biofilma. Planktonske bakterije mogu se osloboditi iz biofilma i takvo oslobađanje može da izazove diseminaciju i akutnu infekciju u susednom tkivu.
[0008] Površine tela ili tkiva koje su mrtve ili oštećene (npr. nekrotične ili upaljene) naročito su pogodne za biofilmnu infekciju. Rane su podložne infekciji i obrazovanje biofilma može se pojaviti u ranama koje ne zarastu u kraćem vremenskom periodu. Rane su idealno okruženje za obrazovanje biofilmova budući da su pogodni za bakterijsku kolonizaciju i imaju dostupan supstrat i površinu za koju bi se prikačio biofilm. Problematično, infekcija rana često odlaže zarastanje i tako čini te rane pogodnije za obrazovanja biofilma i utvrđenih infekcija. Rane kod koji se zarastanje odužilo (takozvane hronične rane) predstavljaju mesta posebne brige koja se tiče obrazovanja biofilma. Hronična rana je neko zapaljensko stanje, sa povišenim nivoima pro-zapaljenskih citokina. Efekti ovih citokina su da proizvode rojenje površine imunim ćelijama (neutrofilima i makrofagama). Ukoliko se taj odbrambeni sistem na bilo koji način odlaže (kao kod hroničnih rana), bakterije ili ostali mikroorganizmi imaju vremena da se prikače na površinu i uđu u proces rasta biofilma. Dokaz da sve više raste tako da i hronične i akutne rane mogu biti mesta biofilme infekcije, sa dokazom različitih mikrobnih zajednica ili populacija u ranama, naročito hroničnim ranama, uključujući anaerobne bakterije unutar hroničnih rana. Infekcije hroničnih rana dele dve važne osobine sa ostalim biofilmnim infekcijama: uporna infekcija koja se ne može srediti imunim sistemom domaćina čak i kod pojedinaca sa zdravim urođenim i stečenim imunonoliškim reakcijama, i povećanu rezistentnost na sistemske i topikalne antimikrobne agense. Na taj način, infekcija na bazi biofilma veoma se teško tretira, a biofilmne kontaminacije su veoma teške za iskorenjivanje. Čest debriman je jedan od klinički najefikasnijih tretmana koji pomažu u lečenju hroničnih rana. On je efektivno tretiranje, delom, jer fizički uklanja biofilm iz tih rana. On je sličan razrešivanju infekcija iz biofilmom-kolonizovanih ugrađenih medicinskih sredstava (npr. katetera)- gde je antibiotska terapija neefikasna, a gde je najefikasniji pristup da se ukloni ili zameni biofilmom inficirano sredstvo.
[0009] Hronične rane predstavljaju glavni zdravstveni problem po celom svetu i predstavljaju značajno crpljene kliničkih resursa. Tri principijelna tipa hroničnih rana predstavljaju dijabetski ulkus stopala, venski čirevi nogu i dekubitne rane, iako i druge rane, uključujući hirurške rane, mogu postati hronične. Nega takve rane nameće ogromne materijalne troškove i troškove pacijentima, te bi stoga neki efektivni anti-biofilmni tretman, ili zaista bilo kakav tretman koji potpomaže ili olakšava lečenje biofilmova, i na taj način ubrzava ili olakšava zarastanje rana, bio veoma značajan uticaj.
[0010] Uopštenije, uzimajući u obzir raspostranjenu pojavu biofilmova i medicinskih, ekoloških, industrijskih ili ostalih komercijalnih problema koje izazivaju, bilo koje sredstvo za poboljšanje ili omogućavanje borbe protiv biofilmova bilo bi veoma značajno, kako klinički tako i komercijalno.
[0011] Prema tome, postoji potreba za novim postupcima za borbu protiv biofilmova, i u kliničkim i industrijskim ili komercijalnim situacijama, a ovaj pronalazak je usmeren na rešavanju te potrebe.
[0012] Hu, X.; et al., 2005, Journal of Applied Phycology, Vol 17(1), 57-60 opisuju antibakterijsku aktivnost liaza-depolimerizovanih proizvoda alginata.
[0013] Kitamikado, M., et al., 1993, Nippon Suisan Gakkaishi, Vol 59(2), 315-320 opisuju bakteriostatičnu aktivnost oligosaharida pripremljenih od alginata enzimskom degradacijom.
[0014] EP 0506326 opisuju upotrebu diekvitorijalno vezanih beta 1-4 poliuronata za citokinsku simulaciju i naknadne antibakteriološke efekte.
[0015] Moskowitz, S. M., 2004, Journal of Clinical Microbiology vol 42(5), 1915-1922 opisuje klinički izvodljiva ispitivanja osteljivosti biofilma za izolovanje Pseudomana aeriginosa od pacijenata sa cističnom fibrozom.
[0016] Određenije, i kako je prethodno naznačeno, smatra se da je određena klasa alginata, određenije alginatni oligomeri koji imaju najmanje 70% G ostataka, efektivna kao anti-biofilmni agensi. takvi alginatni oligomeri mogu međusobno reagovati sa ekstracelularnim polimerima biofilma, i time ih oslabiti, omogućavajući ili olakšavajući njihovo uklanjanje il lomljenje (ili prekid), i/ili olakšavajući pristup anti-mikrobnim agensima do biofilma, čime se ojačava njihova efikasnost protiv biofilma. Na taj način, u skladu sa ovim pronalaskom predložen je novi postupak ili sredstvo za borbu protiv biofilma, koji uključuje upotrebu takvih alginatnih oligomera.
[0017] U nastavku, pozivanje na "alginatni oligomer" ili "alginatne oligomere" u kontekstu ovog pronalaska odnosi se na alginatne oligomere koji imaju najmanje 70% G ostataka, ukoliko eksplicitno nije naznačeno drugačije.
[0018] Alginati su linearni polimeri (1-4) povezane β-D-manuronske kiseline (M) i/ili njenog C-5 epimera α-L-guluronske kiseline (G). Primarna struktura alginata može da varira u velikoj meri. M i G ostaci mogu biti organizovani kao homopolimerni blokovi kontinulanih M ili G ostataka, budući da se blokovi naizmeničnih M i G ostataka i pojedinačnih M ili G ostataka mogu naći isprepletani sa ovim blok strukturama. Alginatni molekul može da obuhvata neke ili sve ove strukture, a takve strukture ne moraju biti uniformno distribuirane kroz polimer. Ekstremno, postoji kao homopolimer guluronske kiseline (poliguluronat) ili homopolimer manuronske kiseline (polimanuronat).
[0019] Alginati su izolovani iz braon morskih algi (npr. određene vrste Durvillea, Lessonia i Laminaria) i bakterija kao što su Pseudomonas aeruginosa i Azotobacter vinelandii. Druge pseudomonade (npr. Pseudomonas fluorescens, Pseudomonas putida, i Pseudomonas mendocina) zadržavaju genetsku sposobnost da proizvedu alginate, ali u divljini one ne proizvode primetne nivoe alginata. Mutiranjem ovih ne-proizvodećih pseudomonada može se indukovati proizvodnja stabilno velikih količina alginata.
[0020] Alginat se sintetizuje kao polimanuronat, a G ostaci se obrazuju akcijom epimeraza (naročito C-5 epimeraza) na M ostacima u polimeru. U slučaju alginata ekstrahovanih od strane algi, G ostaci su predominantno organizovani kao G blokovi zbog enzima uključenih u alginatnu biosintezu u algama koje preferencijalno uvode G
koji je blizu drugog G, konvertujući na taj način rastezanja M ostataka u G-blokovima. Objašnjenje ovih biosintetičkih sistema omogućava proizvodnju alginata sa specifično primarnom strukturom (WO 94/09124, Gimmestad, M et al, Journal of Bacteriology, 2003, Vol 185(12) 3515-3523 i WO 2004/011628).
[0021] Alginati se tipično izoluju iz prirodnih izvora kao veliki polimeri visoke molekularne mase (npr. prosečna molekularna masa u opsegu 300,000 do 500,000 Daltona. Međutim, poznato je da se takvi veliki alginatni polimeri mogu degradirati, ili slomiti, npr. hemijskom ili enzimatskom hidrolizom kako bi se proizvele alginatne strukture niže molekularne mase. Alginati koji se primenjuju industrijski tipično imaju prosečnu molekulsku masu u opsegu od 100,000 do 300,000 Daltona (tj. takvi alginati se još uvek smatraju velikim polimerima) iako se alginati prosečne molekularne mase od približni 35.000 Daltona koriste u farmaceuticima.
[0022] Pronađeno je da alginatni oligomeri koji imaju najmanje 70% G ostataka imaju sposobnost da ometaju ekstracelularnu matricu biofilmova. Bez želje za vezivanjem za bilo koju teoriju, smatra se da ovo ometanje izaziva lomljenje ekstracelularne matrice biofilma što vodi ka fizičkom prekidu biofilma. Lomljenje takođe povećava izloženost mikroorganizama unutar biofilma (ili njihovih imunogenih komponenti, npr. LPS i peptidoglikan strukturama) imunim odbranama zaraženog domaćina i/ili bilo kog od antimikrobnih agenasa koji su, ili će se primeniti. Lomljenje takođe redukuje bliskost odnosa između ekstracelularne matrice i mikroorganizama što vodi ka povećanoj osetljivosti tih mikroorganizama na anti-mikrobne agense na fenotipnom nivou.
[0023] Pronalazak prema tome obezbeđuje postupak za borbu protiv biofilma koji nije u ili na humanom ili ne-humanom telu, pri čemu pomenuti postupak obuhvata dovođenje u kontakt pomenutog biofilma sa nekim alginatnim oligomerom, pri čemu taj alginatni oligomer ima najmanje 70% G ostataka.
[0024] Pronalazak dalje obezbeđuje alginatni oligomer za upotrebu u tretiranju biofilmnih infekcija kod subjekta, pri čemu taj alginatni oligomer ima najmanje 70% G ostataka.
[0025] Pronalazak još dalje obezbeđuje upotrebu alginatnog oligomera u proizvodnji leka za upotrebu u tretiranju biofilmnih infekcija kod subjekta pri čemu taj alginatni oligomer ima najmanje 70% G ostataka.
[0026] Kako je prethodno navedeno, alginati se tipično pojavljuju kao polimeri neke prosečne molekularne mase od najmanje 35.000 Daltona tj. približno 175 do 190 monomernih ostataka, iako se tipično znatno veći i alginatni oligomer
u skladu sa ovim pronalaskom može definisati kao materijal dobijen frakcionisanjem (tj. redukcijom veličine) nekog alginatnog polimera, najčešće prirodnog alginata. Alginatni oligomer može se smatrati alginatom prosečne molekularne mase od manje od 35.000 Daltona (tj. manje od približno 190 ili manje od 175 monomernih ostataka), određenije alginat prosečne molekularne mase od manje od 30.000 Daltona (tj. manje od približno 175 ili manje od 150 monomernih ostataka) još određenije prosečne molekularne mase od manje od 25.000 ili 20.000 Daltona (tj. manje od približno 135 ili 125 monomernih ostataka ili manje od približno 110 ili 100 monomernih ostataka).
[0027] Alternativno, oligomer generalno obuhvata 2 ili više jedinica ili ostataka, a alginatni oligomer za upotrebu prema ovom pronalasku tipično sadrži 2 do 100 monomernih ostataka, poželjno 2 do 75, poželjno 2 do 50, poželjnije 2 do 40, 2 do 35 ili 2 do 30, tj. alginatni oligomer za upotrebu prema ovom pronalasku tipično ima prosečnu molekulsku masu od 350 to 20.000 Daltona, poželjno 350 do 15,000 Daltona, poželjno 350 do 10.000 Daltona i poželjnije 350 do 8000 Daltona, 350 do 7000 Daltona, ili 350 do 6.000 Daltona.
[0028] Alternativno, alginatni oligomer može imati stepen polimerizacije (DP), ili neki broj prosečnog stepena polimerizacije (DPn) od 2 do 100, poželjno 2 do 75, poželjno 2 do 50, poželjnije 2 do 40, 2 do 35 ili 2 do 30.
[0029] Kako je prethodno naznačeno, biofilmovi se tipično obrazuju na površinama ili mestima spajanja, a biofilm koji se tretira u skladu sa ovim pronalaskom može biti na bilo kojoj površini ili mestu spajanja. Na taj način, ciljani biofilm može biti na bilo kojoj oživljenoj ili neoživljenoj (ili biotička ili abiotička), površini tj. bilo kojoj živoj površini, ili površini izvedenoj od živog materijala (npr. mrtvo ili oštećeno tkivo npr. nekrotično tkivo) (izraz "oživljen" ovde se koristi da uključi bilo koju živu površinu ili bilo koju površinu izvedenu iz živog materijala, određenije živa površina koja je umrla), ili bilo koja inertna ili neživa površina (površina koja prethodno nije bila živa ili oživljena).
[0030] Izraz "dovođenje u kontakt" obuhvata bilo koje sredstvo dostavljanja alginatnog oligomera do biofilma, bilo direktno ili indirektno, i tako bilo koje sredstvo za nanošenje alginatnog oligomera na biofilm ili za izlaganje biofilma alginatnom oligomeru npr. nanošenjem alginatnog oligomera direktno na biofilm, ili davanjem alginatnog oligomera subjektu sa biofilmnom infekcijom. Prma tome, podrazumeva se da su i in vitro i in vivo postupci uključeni.
[0031] Još određenije, biofilm se dovodi u kontakt sa efektivnom količinom alginatnog oligomera, određenije nekom količinom alginatnog oligomera efektivna koja je u borbi protiv biofilma.
[0032] Alginatni oligomer će, kako je prethodno naznačeno, sadržavati (ili obuhvatati) ostatke ili jedinice guluronata ili guluronske kiseline (G) i/ili manuronata ili manuronske kiseline (M). Alginatni oligomer prema ovom pronalasku poželjno suštinski sastavljen jedino od, ili suštinski jedino od (tj. sastoji se esencijalno od) ostataka uronata/uronske kiseline, određenije jedino od ili suštinski jedino od G i/ili M ostataka. Drugim rečima, u alginatnom oligomeru koji se upotrebljava u ovom pronalasku, najmanje 80%, određenije najmanje 85, 90, 95 ili 99% monomernih ostataka mogu biti ostaci uronata/uronske kiseline, ili, određenije G i/ili M ostaci. Drugim rečima, poželjni alginatni oligomer ne obuhvata druge ostatke ili jedinice (npr. druge saharidne ostatke, ili određenije druge ostatke uronske kiseline/uronata).
[0033] Alginatni oligomer poželjno je linerani oligomer.
[0034] Kako je već naznačeno, alginatni oligomer za upotrebu u skladu sa ovim pronalaskom sadrži najmanje 70% G ostataka (tj. najmanje 70% monomernih ostataka alginatnog oligomera biće G ostaci). Specifična ostvarenja tako uključuju alginatne oligomere sa (npr. koji sadrže) 70 do 100% G (guluronatnih) ostataka.
[0035] Poželjno najmanje 75%, još određenije najmanje 80, 85, 95 ili 99% monomernih ostataka je guluronat. U jednom ostvarenju alginatni oligomer može biti neki oligoguluronat (tj. homooligomer G, ili 100% G)
[0036] U dalje poželjnom ostvarenju, prethodno opisani alginati ovog pronalaska imaju primarnu strukturu u kojoj je većina G ostataka u takozvanim G-blokovima. Poželjno najmanje 50%, poželjnije najmanje 70 ili 75%, a najpoželjnije najmanje 80, 85, 90 ili 95% pojedinačnih G ostataka su u G-blokovima. G blok je kontinulana sekvenca od najmanje dva G ostatka, poželjno najmanje 3 kontinulana G ostatka, poželjnije najmanje 4 ili 5 kontinulanih G ostataka, najpoželjnije najmanje 7 kontinulanih G ostataka.
[0037] Određenije najmanje 90% G ostataka povezani su sa 1-4 za drugi G ostatak. Određenije najmanje 95%, poželjnije najmanje 98%, a najpoželjnije najmanje 99% G ostataka alginata povezani su sa 1-4 za drugi G ostatak.
[0038] Alginatni oligomer za upotrebu u ovom pronalasku poželjno je 3- do 35-merni, poželjnije 3- do 28-merni, određenije 4- do 25-merni, naročito 6- do 22-merni, određenije 8- do 20-merni, naročito 10do 15-merni, npr. koji imaju molekulsku masu u opsegu 350 do 6400 Daltona ili 350 do 6000 Daltona, poželjno 550 do 5500 Daltona, poželjno 750 do 5000 Daltona, i naročito 750 do 4500 Daltona.
[0039] On može biti jedno jedinjenje ili može biti mešavina jedinjenja, npr. čitavog niza stepena polimerizacije. Kako je prethodno naznačeno, monomerni ostaci u alginatnom oligomeru, mogu biti isti ili različiti i ne moraju svi nositi grupe električnog naelektrisanja iako je poželjno da većina (npr. najmanje 60%, poželjno najmanje 80% poželjnije najmanje 90%) nosi. Poželjno je da suštinska većina, npr. najmanje 80%, poželjnije najmanje 90% naelektrisanih grupa ima isti polaritet. Kod alginatnog oligomera, odnos hidroksil grupa prema naelektrisanim grupama poželjno je najmanje 2:1, određenije najmanje 3:1.
[0040] Alginatni oligomer ovog pronalaska može imati neki stepen polimerizacije (DP), ili neki broj prosečnog stepena polimerizacije (DPn), od 3-28, 4-25, 6-22, 8-20 ili 10-15, ili 5 do 18 ili 7 to 15 ili 8 to 12, naročito 10.
[0041] Distribucija molekularne mase poželjno je takva da ne više od 5% mola ima DP od dva ili više u odnosu na relevantnu gornju granicu za DPn. Isto tako, poželjno je ne više od 5% mola ima DP ispod broja dva manje u odnosu na relevantnu donju granicu za DPn. Pogodni alginatni oligomeri opisani su u WO2007/039754, WO2007/039760, i WO 2008/125828.
[0042] Reprezentativni pogodni alginatni oligomeri imaju DPnu opsegu 5 do 30, guluronat/galakturonat frakciju (FG) od najmanje 0.80, manuronat frakciju (FM) od ne više od 0.20, i najmanje 95 mol% od DP ne višim od 25.
[0043] Dalje pogodni alginatni oligomeri imaju broj prosečnog stepena polimerizacije u opsegu 7 do 15 (poželjno 8 do 12), guluronat/galakturonat frakciju (FG) od najmanje 0.85 (poželjno najmanje 0.90), manuronat frakciju (FM) od ne više od 0.15 (poželjno ne više od 0.10), i koji imaju najmanje 95% mola sa stepenom polimerizacije manjim od 17 (poželjno manji od 14).
[0044] Dalje pogodni alginatni oligomeri imaju broj prosečnog stepena polimerizacije u opsegu 5 do 18<(naročito 7 do 15), guluronat/galakturonat frakciju (F>G<) od najmanje 0.80 (poželjno najmanje 0.85,>naročito najmanje 0.92), manuronat frakciju (FM) od ne više od 0.20 (poželjno ne više od 0.15, naročito ne više od 0.08), i koji imaju najmanje 95% mola sa stepenom polimerizacije manjim od 20 (poželjno manji od 17).
[0045] Dalje pogodni alginatni oligomeri imaju broj prosečnog stepena polimerizacije u opsegu 5 do 18, guluronat/galakturonat frakciju (FG) od najmanje 0.92, manuronat frakciju (FM) od ne više od 0.08, i koji imaju najmanje 95% mola sa stepenom polimerizacije manjim od 20.
[0046] Dalje pogodni alginatni oligomeri imaju broj prosečnog stepena polimerizacije u opsegu 5 do 18 (poželjno 7 do 15, poželjnije 8 do 12, naročito oko 10), guluronat/galakturonat frakciju (FG) od najmanje 0.80 (poželjno najmanje 0.85, poželjnije najmanje 0.90, naročito najmanje 0.92, određenije najmanje 0.95), manuronat frakciju (FM) od ne više od 0.20 (poželjno ne više od 0.15, poželjnije ne više od 0.10, naročito ne više od 0.08, određenije ne više od 0.05), i koji imaju najmanje 95% mola sa stepenom polimerizacije manjim od 20 (poželjno manje od 17, poželjnije manje od 14).
[0047] Dalje pogodni alginatni oligomeri imaju broj prosečnog stepena polimerizacije u opsegu 7 do 15 (poželjno 8 do 12), guluronat/galakturonat frakciju (FG) od najmanje 0.92 (poželjno najmanje 0.95), manuronat frakciju (FM) od ne više od 0.08 (poželjno ne više od 0.05), i koji imaju najmanje 95% mola sa stepenom polimerizacije manjim od 17 (poželjno manji od 14).
[0048] Dalje pogodni alginatni oligomeri imaju broj prosečnog stepena polimerizacije u opsegu 5 do 18, guluronat/galakturonat frakciju (FG) od najmanje 0.80, manuronat frakciju (FM) od ne više od 0.20, i koji imaju najmanje 95% mola sa stepenom polimerizacije manjim od 20.
[0049] Dalje pogodni alginatni oligomeri imaju broj prosečnog stepena polimerizacije u opsegu 7 do 15, guluronat/galakturonat frakciju (FG) od najmanje 0.85, manuronat frakciju (FM) od ne više od 0.15, i koji imaju najmanje 95% mola sa stepenom polimerizacije manjim od 17.
[0050] Dalje pogodni alginatni oligomeri imaju broj prosečnog stepena polimerizacije u opsegu 7 do 15, guluronat/galakturonat frakciju (FG) od najmanje 0.92, manuronat frakciju (FM) od ne više od 0.08, i koji imaju najmanje 95% mola sa stepenom polimerizacije manjim od 17.
[0051] Alginatni oligomer tipično nosi neko naelektrisanje, pa se tako takođe mogu koristiti kontra joni za alginatni oligomer koji mogu biti bilo koji jon koji se može fiziološki tolerisati, naročito oni koji se uobičajeno koriste za naelektrisane supstance lekova, npr. natrijum, kalijum, amonijum, hlorid, mezilat, meglumin, itd. Joni koji promovišu geliranje alginata npr. grupa 2 metalnih jona.
[0052] Dok alginatni oligomer može biti neki sintetički materijal generisan iz polimerizacije pogodnih brojeva guluronata i manuronat ostataka, alginatni oligomeri za upotrebu u ovom pronalasku mogu se pogodno dobiti, proizvedesti ili izvesti, iz prirodnih izvora kao što su oni prethodno navedeni, određenije materijali koji su prorodan izvor alginata.
[0053] Cepanje polisaharida na oligosaharid radi proizvodnje alginatnog oligomera koji se može primeniti u skladu sa ovim pronalaskom, može se izvesti primenom uobičajenih tehnika polisaharidne lizije kao što su enzimska digestija i kisela hidroliza. Oligomeri se tada mogu odvojiti iz proizvoda polisaharidnog lomljenja hromatografski primenom neke jonoizmenjivačke smole ili frakcionisaim taloženjem ili rastvaranjem ili filtracijom. US 6,121,441 i WO 2008/125828, koji su eksplicitno uključeni kao referenca u svojoj celosti, opisuju postupak pogodan za pripremanje alginatnih oligomera za upotrebu u ovom pronalasku. Dalje informacije i opis mogu se naći u na primer "Handbooks of Hydrocolloids", Ed. Phillips i Williams, CRC, Boca Raton, Florida, USA, 2000.
[0054] Alginatni oligomeri takođe mogu biti hemijski modifikovani, uključujući, ali neograničavajući se na modifikaciju radi dodavanja naelektrisanih grupa (kao što su karboksilovani ili karboksimetilirani glikani) i alginatnih oligomera modifikovanih radi menjanja fleksibilnosti (npr. perjodatnom oksidacijom).
[0055] Alginatni oligomeri (na primer oligoguluronske kiseline) pogodni za upotrebu prema ovom pronalasku mogu se pogodno proizvesti kiselom hidrolizom alginske kiseline iz, ali neograničavajući se na Laminaria hyperbora i Lessonia nigrescens, rastvaranjem pri neutralnoj pH, dodavanjem mineralne kiseline kako bi se redukovala pH do 3.4 kako bi se istaložio alginatni oligomer (oligoguluronska kiselina), pranjem slabom kiselinom, resuspendovanjem pri neutralnoj pH i sušenjem zamrzavanjem.
[0056] Alginati za proizvodnju alginatnih oligomera ovog pronalaska takođe se mogu dobiti direktno iz pogodnih bakterijskih izvora npr. Pseudomonas aeruginosa ili Azotobacter vinelandii, iako se smatra da su alge najpogodniji izvori uzimajuću u obzir činjenicu da alginati proizvedeni u ovim organizmima teže da imaju primarnu strukturu u kojoj je većina G ostataka uređena u G-blokovima pre nego kao pojedinačni ostaci.
[0057] Molekularni aparat uključen u alginatnu biosintezu u Pseudomonas fluorescens i Azotobacter vinelandii kloniran je i okarakterisan (WO 94/09124; Ertesvåg, H., et al, Metabolic Engineering, 1999, Vol 1, 262-269; WO 2004/011628; Gimmestad, M., et al (gore); Remminghorst i Rehm, Biotechnology Letters, 2006, Vol 28, 1701-1712; Gimmestad, M. et al, Journal of Bacteriology, 2006, Vol 188(15), 5551-5560), a alginati iskrojene primarne strukture mogu se lako dobiti upravljanjem ovim sistemima.
[0058] G sadržaj alginata (na primer neki materijal koji je izvor alginata) može se povećati epimerizacijom, na primer manuran C-5 epimerazama iz A.vinelandii ili drugim enzimom epimeraze. Tako, na primer in vitro epimerizacija se može izvesti bez izolovanja epimeraze iz Pseudomonas ili Azotobacter, npr. AlgG iz Pseudomonas fluorescens ili Azotobacter vinelandii ili AlgE enzima (AlgE1 do AlgE7) iz Azotobacter vinelandii. Upotreba epimeraza iz drugih organizama koji su sposobni da proizvedu alginat, naročito alge, takođe je specifično obuhvaćena. In vitro epimerizacija niskih G alginata sa Azotobacter vinelandii AlgE epimerazama, opisana je detaljnije u Ertesvåg et al (gore) i Strugala et al (Gums and Stabilisers for the Food Industry, 2004, 12, The Royal Society of Chemistry, 84 - 94).
Epimerizacija jednom ili više Azotobacter vinelandii AlgE epimeraza pre nego sa AlgE4 je poželjna budući da su ovi enzimi sposobni da proizvedu G blok strukture. Mutirane verzije ili homolozi iz drugih organizama takođe su specifično razmatrani za upotrebu. WO 94/09124 opisuje rekombinantne ili modifikovane manuronan C-5 epimeraza enzime (AlgE enzime) na primer kodirane epimeraza sekvencama u kojima su DNK sekvence koje kodiraju različite domene ili module epimeraza izmešane ili obrisane i rekombinovane. Alternativno, mutanti prirodnih epimeraza enzima, (AlgG ili AlgE) mogu se koristiti, dobijeni na primer usmeravanjem na mestu ili nasumičnom mutagenezom AlgG ili AlgE gena.
[0059] Drugačiji pristup je da se kreiraju Pseudomonas i Azotobacter organizmi koji su muturani u nekim ili svim njihovim epimeraza genima na takav način da ovi mutanti proizvode alginate potrebnih struktura proizvodnje alginatnog oligomera, ili čak i alginatnih oligomera potrebnih struktura i veličine (ili molekularne mase). Generisanje nekog broja Pseudomonas fluorescens organizama sa mutiranim AlgG genima, opisano je detaljnije u WO 2004/011628 i Gimmestad, M., et al, 2003 (gore). Generisanje nekog broja Azotobacter vinelandii organizama sa mutiranim AlgE genima, opisano je u Gimmestad, M., et al, 2006 (gore). Stručnjak će biti sposoban da upotrebom ovih tehnika proizvede nove mutante koji bi mogli da proizvedu alginatne oligomere ovog pronalaska bez nepotrebnog opterećenja.
[0060] Dalji pristup je da se obrišu ili inaktiviraju endogeni epimeraza geni iz Azotobacter ili Pseudomonas organizma i zatim da se uvede jedan ili više egzogenih epimeraza gena, koji mogu ili ne moraju biti mutirani (tj. mogu biti divlji tip ili modifikovani) i čija ekspresija može biti kontrolisana, na primer upotrebom induktivnih ili drugih "promotera koji se mogu kontrolisati". Odabirom odgovarajuće kombinacije gena, mogu se proizvesti alginati prethodno određene primarne strukture.
[0061] Dalji pristup bio bi da se uvede neka ili sva mašinerija za biosintezu alginata od Pseudomonas i/ili Azotobacter u organizam koji ne proizvodi alginat (npr. E. coli) i da se indukuje proizvodnja alginata iz ovih genetski modifikovanih organizama.
[0062] Kada se koriste ovi sistemi na bazi kulture, na primarnu strukturu alginata ili alginatnih oligomera može se uticati uslovima kulture. U okviru znanja i sposobnosti jednog stručnjaka je da podesi parametre kulture kao što su temperatura, osmolaritet, nivoi/izvori nutrijenata i atmosferski parameteri radi upravljanja primarnom strukturom alginata proizvedenih određenim organizmom.
[0063] Izrazi koji se tiču "G ostataka/G" i "M ostataka/M" ili guluronske kiseline ili manuronske kiseline, ili guluronata ili manuronata, odnose se naizmenično kao pozivanje na guluronsku kiselinu/guluronat i manuronsku kiselinu/manuronat (posebno na α-L-guluronsku kiselinu/guluronat i β-D-manuronsku kiselinu/manuronat), a dalje uključuju njihove derivate u kojima je jedan ili više dostupnih bočnih lanaca ili grupa modifikovano bez rezultiranja u anti-biofilmnoj aktivnosti koja je suštinski niža od one kod nemodifikovanog polimera. Uobičajene saharid modifikujuće grupe mogle bi da uključe acetilne, sulfatne, amino, deoksi, alkoholne, aldehidne, ketonske, estarske i anhidro grupe. Alginatni oligomeri takođe mogu biti hemijski modifikovani kako bi se dodale naelektrisane grupe (kao što su karboksilovani ili karboksimetilirani glikani), i kako bi se izmenila fleksibilnost (npr. perjodatnom oksidacijom).
Stručnjaku će biti jasno da postoji još hemijskih modifikacija koje se mogu izvesti na monosaharidnim subjedinicama oligosaharida i da se one mogu primeniti na alginate ovog pronalaska.
[0064] Pod "biofilm" podrazumeva se zajednica mikroorganizama okarakterisana preovlađivanjem sesilnih ćelija koje su prikačene za substratum ili mesto spajanja ili jedna za drugu (takođe mogu biti prisutne i neke pokretne ćelije), i koje su ugrađene u matricu ekstracelularnih polimera (određenije nekih ekstracelularnih polimera koje su one proizvele) okarakterisane time što mikroorganizmi ove kolonije eksprimiraju izmenjeni fenotip u odnosu na brzinu rasta i transkripciju gena (na primer u poređenju sa njihovim "ne-biofilmnim" ili slobodno-plutajućim ili planktonskim naspramnim delovima).
[0065] Izraz "borba protiv biofilma" ovde se koristi široko kako bi se obuhvatio bilo koji efekat ometanja, redukovanja, ili lomljenja biofilma (tj. "napad" na postojeći biofilm) ili kako bi ga učinio podložnijim za efekte nekog anti-mikrobnog agensa ili imunog odgovora domaćina, kao i inhibiranje, redukovanje ili odlaganje formiranja biofilma. Tako "borba protiv" uključuje tretiranje biofilma koje ima negativne efekte na biofilm.
[0066] "Borba protiv biofilma" tako uključuje reakcione mere ili tretmane. Borba protiv biofilma prema tome obuhvata eliminaciju biofilma, redukciju veličine biofilma, redukciju u broju mikroba u nekoj koloniji biofilma, redukciju u ili prestanak u brzini rasta biofilma, redukciju u ili prestanak u brzini širenja broja mikroba u koloniji biofilma, redukciju u fizičkom integritetu biofilma, povećanje u
osetljivosti mikroba u koloniji biofilma na anti-mikrobni agens ili mehanizme imune odbrane domaćina i povećanje u propustljivosti biofilma prema anti-mikrobnog agensu ili mehanizmu imune odbrane domaćina.
[0067] Alginatni oligomeri ovog pronalaska tako se mogu koristiti klinički, npr. u tretiranju biofilmnih infekcija, ili mogu se koristiti u čišćenju ili dekontaminaciji bilo koje površine, npr. komercijalnih ili industrijskih površina.
[0068] Veličina, struktrura, integritet, i broj mikroorganizama u nekom biofilmu može se analizirati bilo kojim pogodnim postupkom. Primera radi, skeniranje i transmisiona elektronska mikroskopija često se primenjuju kako bi se ocenila veličina, integritet i struktura biofilma. Histohemijsko bojenje mikroorganizama i/ili komponenti ekstracelularne matrice takođe je rutinsko (npr. BODIPY™ 630/650-X SE boja za komponentne matrice iz Pseudomonas biofilmova i FM™ 1-43 boja za Pseudomonas ćelijske membrane) i može se primeniti za određivanje broja mikroba i strukture i intergriteta biofilma vizuelno ili pomoću sredstva za sortiranje ćelija, konfokalnih mikroskopa ili epifluorescentnih mikroskopa. MBEC ogled, Moskowitz SM, et al (2004) J Clin Microbiol, 42: 1915-1922 i opisan detaljnije u Primerima može se koristiti za određivanje osetljivosti mikroorganizama u nekom biofilmu na neki anti-mikrobni agens. Donlan and Costerton, 2002, Clin. Mic. Rev., Vol 15(2), 167-193 obezbeđuje dalje primere.
[0069] Biofilmovi koje treba uništiti u skladu sa ovim pronalaskom nisu ograničeni u pogledu mikroorganizama u biofilmovima kako alginatni oligomer ovog pronalaska, inter alia, cilja ekstracelularnu matricu. Na taj način, biofilm može da obuhvata bilo koju klasu, genus ili vrstu mikroorganizma, određenije bilo koji mikroorganizam koji može da obrazuje biofilm. Takvi mikroorganizmi uključuju tipično bakterije, uključujući bilo koji genus ili vrstu bakterija. Tako, bakterije mogu biti gram pozitivne ili gram negativne, ili bez odgovora na gram test. One mogu biti aerobne ili anaerobne. Bakterije mogu biti patogene ili ne-patogene, ili kvarljiva ili indikatorska bakterija. Primeri rodova ili vrsta bakterija uključuju, ali nisu ograničeni na, Abiotrophia, Achromobacter, Acidaminococcus, Acidovorax, Acinetobacter, Actinobacillus, Actinobaculum, Actinomadura, Actinomyces, Aerococcus, Aeromonas, Afipia, Agrobacterium, Alcaligenes, Alloiococcus, Alteromonas, Amycolata, Amycolatopsis, Anaerobiospirillum, Anaerorhabdus, Arachnia, Arcanobacterium, Arcobacter, Arthrobacter, Atopobium, Aureobacterium, Bacteroides, Balneatrix, Bartonella, Bergeyella, Bifidobacterium, Bilophila Branhamella, Borrelia, Bordetella, Brachyspira, Brevibacillus, Brevibacterium, Brevundimonas, Brucella, Burkholderia, Buttiauxella, Butyrivibrio, Calymmatobacterium, Campylobacter, Capnocytophaga, Cardiobacterium, Catonella, Cedecea, Cellulomonas, Centipeda, Chlamydia, Chlamydophila, Chromobacterium, Chryseobacterium, Chryseomonas, Citrobacter, Clostridium, Collinsella, Comamonas, Corynebacterium, Coxiella, Cryptobacterium, Delftia, Dermabacter, Dermatophilus, Desulfomonas, Desulfovibrio, Dialister, Dichelobacter, Dolosicoccus, Dolosigranulum, Edwardsiella, Eggerthella, Ehrlichia, Eikenella, Empedobacter, Enterobacter, Enterococcus, Erwinia, Erysipelothrix, Escherichia, Eubacterium, Ewingella, Exiguobacterium, Facklamia, Filifactor, Flavimonas, Flavobacterium, Francisella, Fusobacterium, Gardnerella, Globicatella, Gemella, Gordona, Haemophilus, Hafnia, Helicobacter, Helococcus, Holdemania, Ignavigranum, Johnsonella, Kingella, Klebsiella, Kocuria, Koserella, Kurthia, Kytococcus, Lactobacillus, Lactococcus, Lautropia, Leclercia, Legionella, Leminorella, Leptospira, Leptotrichia, Leuconostoc, Listeria, Listonella, Megasphaera, Methylobacterium, Microbacterium, Micrococcus, Mitsuokella, Mobiluncus, Moellerella, Moraxella, Morganella, Mycobacterium, Mycoplasma, Myroides, Neisseria, Nocardia, Nocardiopsis, Ochrobactrum, Oeskovia, Oligella, Orientia, Paenibacillus, Pantoea, Parachlamydia, Pasteurella, Pediococcus, Peptococcus, Peptostreptococcus, Photobacterium, Photorhabdus, Plesiomonas, Porphyrimonas, Prevotella, Propionibacterium, Proteus, Providencia, Pseudomonas, Pseudonocardia, Pseudoramibacter, Psychrobacter, Rahnella, Ralstonia, Rhodococcus, Rickettsia Rochalimaea Roseomonas, Rothia, Ruminococcus, Salmonella, Selenomonas, Serpulina, Serratia, Shewanella, Shigella, Simkania, Slackia, Sphingobacterium, Sphingomonas, Spirillum, Staphylococcus, Stenotrophomonas, Stomatococcus, Streptobacillus, Streptococcus, Streptomyces, Succinivibrio, Sutterella, Suttonella, Tatumella, Tissierella, Trabulsiella, Treponema, Tropheryma, Tsakamurella, Turicella, Ureaplasma, Vagococcus, Veillonella, Vibrio, Weeksella, Wolinella, Xanthomonas, Xenorhabdus, Yersinia, i Yokenella; npr. gram-pozitivne bakterije kao što su, M. tuberculosis, M. bovis, M. typhimurium, M. bovis soj BCG, BCG podsojevi, M. avium, M. intracellulare, M. africanum, M. kansasii, M. marinum, M. ulcerans, M. avium subvrste paratuberculosis, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Staphylococcus equi, Streptococcus pyogenes, Streptococcus agalactiae, Listeria monocytogenes, Listeria ivanovii, Bacillus anthracis, B. subtilis, Nocardia asteroides, Actinomyces israelii, Propionibacterium acnes, i Enterococcus vrste i Gram-negativne bakterije kao što su Clostridium tetani, Clostridium perfringens, Clostridium botulinum, Pseudomonas aeruginosa, Vibrio cholerae, Actinobacillus pleuroupale plućae, Pasteurella haemolytica, Pasteurella multocida, Legionella pneumophila, Salmonella typhi, Brucella abortus, Chlamydia trachomatis, Chlamydia psittaci, Coxiella burnetii, Escherichia coli, Neisseria meningitidis, Neisseria gonorrhea, Haemophilus influenzae, Haemophilus ducreyi, Yersinia pestis, Yersinia enterolitica, Escherichia coli, E. hirae, Burkholderia cepacia, Burkholderia pseudomallei, Francisella tularensis, Bacteroides fragilis, Fusobacterium nucleatum, Cowdria ruminantium.
[0070] Tako, kao reprezentativni primer, biofilm može da sadrži bakterije roda Staphylococcus, Pseudomonas, Legionella, Mycobacterium, Proteus, Klebsiella, Fusobacterium ili druge enterične ili koliformne bakterije.
[0071] Biofilmovi takođe mogu da sadrže gljive, uključujući na primer iz roda Candida, Aspergillus, Pneumocystis, Penicillium i Fusarium. Reprezentativne fungalne vrste uključuju, ali nisu ograničene na, Candida albicans, Candida dubliniensis, Cryptococcus neoformans, Histoplasma capsulatum, Aspergillus fumigatus, Coccidioides immitis, Paracoccidioides brasiliensis, Blastomyces dermitidis, Pneumocystis carinii, Penicillium marneffei, Alternaria alternata.
[0072] Neki biofilm takođe može da sadrži alge, a reprezentativne vrste algi uključuju Chaetophora, Chlorella protothecoides, Coleochaete scutata, Coleochaete soluta, Cyanidioschyzon merolae Aphanochaete, Gloeotaenium, Oedogonium, Oocystis, Oscillatoria, Paradoxia multisitia, Phormidium, Chroococcus, Aphanothece, Fragilaria, Cocconeis, Navicula, Cymbella, Phaeodactylum kao i cijanobakterije (plavo-zelene alge) i dijatome kao što su Nitzschia palea.
[0073] Biofilmovi takođe mogu da sadrže i druge organizme kao što su, na primer, paraziti, npr. protozoe kao što su Toxoplasma vrste npr. Toxoplasma gondii, Plasmodium vrste kao što su Plasmodium falciparum, Plasmodium vivax, Plasmodium malariae. Trypanosoma brucei, Trypanosoma cruzi, Leishmania vrste kao što su Leishmania major, Schistosoma kao što su Schistosoma mansoni i Entamoeba histolytica.
[0074] Za biofilm je uobičajeno da obuhvata pomešanu koloniju mikroorganizama, te biofilm koji se iskorenjuje alginatnim oligomerima prema ovom pronalasku može da obuhvata bilo koji broj prethodno navedene vrste. Poželjno najmanje dve, poželjnije najmanje 5, a najpoželjnije najmanje 10.
[0075] Poželjno, kolonija biofilma obuhvata mikrobe iz najmanje jednog od sledećih rodova:
Citrobacter, Enterobacter, Escherichia, Hafnia, Serratia, Yersinia, Peptostreptococcus, Bacteroides, Pseudomonas, Legionella, Staphylococcus, Enterococcus, Streptococcus, Klebsiella, Candida, Proteus, Burkholderia, Fusobacterium i Mycobacterium, primera radi, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Legionella pneumophila, Candida albicans, Pseudomonas aeruginosa, Burkholderia cepacia i Streptococcus Pyogenes.
[0076] Kako je prethodno naznačeno biofilm može biti prisutan na nekoj površini. Ta površina nije ograničena i uključuje bilo koju površinu na kojoj se može pojaviti mikroorganizam, naročito, kako je prethodno naznačeno, neka površina izložena vodi ili vlazi. Površina može biti biotička ili abiotička, a neoživljene (ili abiotičke) površine uključuju bilo kakvu takvu površinu koja može biti izložena mikrobnom kontaktu ili kontaminaciji. Tako su naročito uključene površine mašinerije, pre svega industrijske mašinerije, ili bilo koja površina izložena vodenoj sredini (npr. nautička oprema, ili brodovi ili čamci ili njihovi delovi ili komponente), ili bilo koja površina izložena bilo kom delu okoline, npr. cevima ili na zgradama. Takve nežive površine izložene mikrobnom kontaktu ili kontaminaciji uključuju određenije bilo koji deo: uređaja ili opreme za obradu, pripremanje, skladištenje ili isporučivanje hrane i pića, uređaja za kondicioniranje vazduha, industrijske mašinerije, npr. u hemijskim ili biotehnološkim postorenjima za obradu, rezervoarima za skladištenje i medicinskoj ili hirurškoj opremi. Bilo koji uređaj ili oprema za nošenje ili transportovanje ili dostavljanje materijala, koji mogu biti izloženi vodi ili vlazi pogodni su za obrazovanje biofilma. Takve površine uključuju naročito cevi (koji izraz se koristi veoma široko, a ovde da uključi bilo koji vod ili tok). Reprezentativne neoživljene ili abiotičke površine uključuju, ali nisu ograničene na opremu ili površine za obradu, skladištenje, isporučivanje ili pripremanje hrane, površine rezervoara, transportnih traka, podova, odvoda, rashlađivača, zamrzivača, opreme, zidova, ventila, kaiševa, cevi, vodova za kondicioniranje vazduha, aparata za hlađenje, linija za isporuku hrane i pića, izmenjivača toplote, korita čamaca ili bilo kog dela konstrukcije čamaca koji je izložen vodi, cevi za dostavu vode u stomatologiji, vodova kod naftnih bušotina, kontaktnih sočiva i kaseta za skladištenje. Kako je prethodno naznačeno, medicinska ili hirurška oprema ili sredstva predstavljaju posebnu klasu površina na kojima se može obrazovati neki biofilm. Oni uključuju bilo koju vrstu linije, uključujući kateter (npr. centralni venski i urinarni kateter), protetička pomagala npr., srčani zalisci, veštački zglobovi, veštački zubi, zubne krunice, zubne kapice i implanti mekog tkiva (npr. implanti dojke, zadnjice i usne). Bilo kakvo implantabilno (ili "koji se ugrađuje") medicinsko sredstvo je uključeno (npr. stentovi, intrauterina sredstva, pejsmejkeri, cevi za intubaciju, proteze ili protetička pomagala, linije ili kateteri). "Ugradno" medicinsko sredstvo može da uključi neko sredstvo u kojem je bilo koji njegov deo sadržan unutar tela, tj. sredstvo može biti potpuno ili delimično ugradno.
[0077] Površina može biti izrađena od bilo kog materijala. Na primer on može biti metal, npr. aluminijum, čelik, nerđajući čelik, hrom, titanijum, gvožđe, njihove legure, i slično. Površina takođe može biti plastika, na primer, poliolefin (npr., polietilen, polietilen (ultra visoke molekularne mase), polipropilen, polistiren, poli(met)akrilat, akrilonitril, butadien, ABS, akrilonitril butadien, itd.), poliester (npr., polietilen tereftalat, itd.), i poliamid (npr., najlon), njihove kombinacije, i slično. Drugi primeri uključuju acetalni kopolimer, polifenilsulfon, polisulfon, politermid, polikarbonat, polietaretarketon, poliviniliden fluorid, poli(metil metakrilat) i poli(tetrafluoroetilen). Površina takođe može biti cigla, pločica, keramika, porcelan, drvo, vinil, linoleum, ili tepih, njihove kombinacije, i slično. Površine takođe mogu biti hrana, na primer, govedina, živina, svinjetina, povrće, voće, riba, ljuskari, njihove kombinacije, i slično.
[0078] Biotičkia ili oživljena površina može da uključi bilo koju površinu ili mesto spajanja u ili na telu.
Ona se može, kako je prethodno naznačeno na taj način, gledati kao "fiziološka" ili "biološka" površina. Ona može biti bilo koja unutrašnja ili spoljašnja telesna površina, uključujući bilo koje tkivo, koja može da uključuji hematološko ili hematopoezno tkivo (npr. krv). Kako je prethodno opisano, mrtvo ili umiruće (npr. nekrotično) ili oštećeno (npr. upaljeno ili prekinuto ili pštećeno) tkivo naročito je pogodno za rast biofilma rast i takvo tkivo je obuhvaćeno izrazom "oživljeno" ili "biotičko". Površina može biti mukozalna ili ne-mukozalna.
[0079] Reprezentativne biotičke površine uključuju, ali nisu ograničene na bilo koju površinu u oralnoj šupljini, npr. zube, gingivu, gingivalne fisure, periodontalne džepove, reproduktivni trakt (npr. cerviks, uterus, jajovode), peritoneum, srednje uho, prostatu, urinarni trakt, vaskularnu intimu, konjuktivu, tkivo rožnjače, respiratorni trakt, tkivo pluća (npr. bronhijalno ili alveolarno), srčane zaliske, gastrointestinalni trakt, kožu, skalp, nokte i unutrašnjost rana, naročito hroničnih rana, koje mogu biti površinske ili unutrašnje rane.
[0080] U jednom aspektu površina nije mukozalna, ili određenije nema hiperviskoznu mukoznu oblogu. Stručnjak zna da odredi kada je mukoza na datoj površini hiperviskozna. U jednom ostvarenju površina nije površina tkiva koje sekretuje mukozu. Određenije u takvom ostvarenju površina nije površina mukozno prekrivenog tkiva. Stručnjak sa svojim opštim poznavanjem tkiva zna kada se radi o tkivima koja sekteruju mukozu i onih koja su obložena mukozom.
[0081] Na taj način može se videti da pronalazak obezbeđuje medicinske upotrebe alginatnih oligomera kakvi su ovde definisani, za tretiranje biofilmnih infekcija prisutnih kod subjekta (npr. biofilmna infekcija sa bilo kojim mikroorganizmom, uključujući bakterije, viruse, gljive ili parazite kao što su protozoa). Infekcija može biti patogena infekcija. Reprezentativni primeri mikroorganizama koji mogu da izazovu infekciju opisani su iznad. Mogu se pomenuti i infekcije izazvane od strane Citrobacter, Enterobacter, Escherichia, Hafnia, Serratia, Yersinia, Peptostreptococcus, Bacteriodes, Pseudomonas, Legionella, Staphylococcus, Enterococcus, Streptococcus, Klebsiella, Candida, Proteus, Burkholderia, Fusobacterium i Mycobacterium, primera radi, Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Legionella pneumophila, Candida albicans, Pseudomonas aeruginosa, Burkholderia cepacia i Streptococcus Pyogenes. Posebno se mogu pomenuti Infekcije izazvane od strane Pseudomonas, npr. Pseudomonas aeruginosa.
[0082] Izraz "kod subjekta" ovde se široko koristi kako bi uključio biofilmnu infekciju koja se pojavila unutar subjekta ili na subjektu, npr. na nekoj spoljašnjoj telesnoj površini. Biofilmna infekcija može biti hronična (tj. može biti hronična biofilmna infekcija), npr. neka infekcija koja je uporna tokom najmanje 5 ili najmanje 10 dana, naročito najmanje 20 dana, određenije najmanje 30 dana, određenije najmanje 40 dana. Hronične infekcije obično se manifestuju kao biofilmne infekcije, ali biofilmna infekcija ne mora da bude hronična infekcija kako je ovde definisana.
[0083] U ovom aspektu pronalaska biofilmna infekcija može se pojaviti na površini u ili na subjektu (tj. biotička površina kako je prethodno opisana) i/ili površina medicinskog sredstva, naročito nekog implantabilnog ili "ugradnog" medicinskog sredstva.
[0084] Subjekat može biti bilo koji humani ili ne-humani životinjski subjekat, ali određenije može biti kičmenjak, na primer sisarski subjekat, pričiji subjekat, riba ili reptil. Humani subjekti su poželjni, ali subjekat može biti, na primer, bilo koja životinja za uzgoj ili domaća životinja, ili na primer neka životinja u zoološkom vrtu. Tako, reprezentativne životinje uključuju pse, mačke, zečeve, miševe, morsku prasad, hrčke, konje, svinje, ovce, koze, krave, ptice i ribu. Veterinarske upotrebe ovog pronalaska takođe su pokrivene. Subjekat se može posmatrati kao pacijent.
[0085] Biofilmna infekcija može se pojaviti kod bilo kog subjekta, ali su neku subjekti podložniji infekciji od drugih. Subjekti koji su podložni biofilmnoj infekciji uključuju, ali nisu ograničeni na, subjekte čija je epitelna i/ili endotelijalna barijera oslabila ili kompromitovana, subjekte čija je odbrana na bazi sekrecije od infekcije mikroorganizama infekcija ukinuta, prekinuta, oslabiljena ili ugrožena, i subjekte koji su imunokompromitovani, imunodeficijentni ili imunosupresivni (tj. subjekat kod kog bilo koji deo imunog sistema ne funkcioniše normalno, ili funkcioniše delimično normano, drugim rečima kod kog bilo koji deo imunog odgovora, ili imune aktivnosti je redukovan ili oštećen, bilo zbog bolesti ili kliničke intervencije ili drugog tremana, ili na bilo koji drugi način).
[0086] Reprezentativni primeri subjekata koji su podložni biofilmnoj infekciji uključuju, ali nisu ograničeni na, subjekte sa prethodno utvrđenom infekcijom (npr. bakterijama, virusima, gljivama ili parazitima kao što su protozoe), naročito subjekti sa HIV, subjekti sa sepsom i subjekti sa septičkim šokom; subjekti sa imunodeficijencijom, npr. subjekti koji se pripremaju za, koji su pod ili koji se oporavljalju od hemoterapije i/ili radioterapije, subjekti kojima je transplantiran neki organ (npr. koštana srž, jetra, pluće, srce, srčani zalistak, bubreg, itd.) (uključujući autograftne, alograftne i ksenograftne pacijente), subjekti sa SIDA; subjekti koji borave duže vreme u zdravstvenoj ustanovi, npr. bolnica, naročito subjekti na intezivnoj nezi ili kritičnoj nezi (tj. one jedinice koje su u vezi sa sistemima za davanja životne podrške ili podrške organa pacijentima); subjekti koji boluju od neke traume; subjekti sa opekotinama, subjekti sa akutnim i/ili hroničnim ranama; neonatalni subjekti; stariji subjekti; subjekti sa kancerom (ovde su definisani da uključuju bilo koje neoplastično stanje; maligno ili ne-maligno), naročito one sa kancerima imunog sistema (npr. leukemije, limfomi i drugi hematološki kanceri); subjekti koji boluju od auto-imunih stanja kao što je od reumatoidnog artritisa, dijabetesa melitusa tipa I, Kronove bolesti, naročito oni koji su pod imunosupresionim tretmanom ovih bolesti; subjekti sa redukovanom ili ukinutom epitelijalnom ili endotelijalnom sekrecijom (npr. mukoza, suze, pljuvačka) i/ili izbijanjem sekrecije (npr. subjekti sa slabo funkcionišućom cilijom na mukozalnom tkivu i/ili pacijenti sa hiperviskoznom mukozom (npr. pušači i subjekti sa HOBP, bonhitisom, cističnom fibrozom, emfizemom, kancerom pluća, astmom, upalom pluća ili sinusitisom) i subjekti opremljeni sa nekim medicinskim sredstvom.
[0087] Tako, subjekti kod kojih se biofilmne infekcije mogu naročito suzbijati u skladu sa ovim pronalaskom uključuju pacijente koji ostaju oštećeni, bilo zbog slabe perfuzije, ponavljauće traume, slabe nutricije, slabe oksigenacije ili disfunckije belih krvnih zrnaca.
[0088] Posebno su naznačeni subjekti koji su doživeli neku fizičku traumu. Sama trauma može da izazove slabljenje ili kompromitovanje epitelne i/ili endotelijalne barijere subjekta ili subjekat može postati imunokompromitovan u odgovoru na traumu (odgovora na šok). Izraz "trauma" široko se odnosi na napad na ćelije od strane stranih tela i/ili fizičko oštećenje ćelija. Pod stranim telima uključeni su mikroorganizmi, čestice, hemijski agensi, i slično. Među fizičkim povredama, uključene su mehaničke povrede; termičke povrede, kao što su one koje su rezultat prekomerne toplote ili hladnoće; električne povrede kao što su one izazvane kontaktom sa izvorom električnog potencijala; i radijacione povrede izazvane, na primer, produženim, pojačanim izlaganjem infracrvenom, ultraljubičastom ili jonizujućem zračenju.
[0089] Takođe, posebno su naznačeni subjekti koji imaju opekotine. Bilo koja opekotina, određenije ozbiljnije oštećenje, ima značajan uticaj na integritet epitelne i/ili endotelijalne barijere subjekta i subjekat će često postati imunokompromitovan u odgovoru na opekotinu (odgovor na šok).
[0090] Tipični agensi koji izazaivaju opekotine su ekstremne temperature (npr. vatra i tečnosti i gasovi ekstremnih temperatura), struja, korozivne hemikalije, trenje i zračenje. Obim i trajanje uzlaganja, zajedno sa intenzitetom/jačinom tog agensa, rezultiraju kao opekotine razne ozbiljnosti. Šurenje (tj. trauma povezana sa tečnostima i/ili gasovima velike temperature) smatra se opekotinom.
[0091] Ozbiljnost epidermalnih opekotina uobičajeno je klasifikovano na dva načina. Najuobičajenije je klasifikovanje po stepenima. Opekotine prvog stepena obično su ograničene na eritem (crvenilo) u generalnoj površini povrede i belim plakom na mestu povrede. Ćelijska trauma ovih povreda prostire se duboko koliko i epidermis. Opekotine drugog stepena takođe pokazuju eritem u generalnoj površini povrede, ali sa površinskim plikovima na epidermisu. Ćelijska trauma opekotina drugog stepena uključuje površinki (papilarni) dermis i takođe može da uključi i duboki (retikularni) sloj dermisa.
Opekotine trećeg stepena su one kod kojih se epidermis izgubljen sa oštećenjem hipodermisa.
Oštećenje je tipično ekstremno i uključuje ugljenisanje. Ponekad je eshara, (crno, nekrotično tkivo) prisutno. Oštećenja trećeg stepena mogu zahtevati presađivanje. Kod opekotina četvrtog stepena dolazi do katasrofalnog oštećenja hipodermisa, npr. hipodermis je potpuno izgubljen, sa oštećenjem koji se prostire do ispod tkiva mišića, tetiva, i ligamenata. Ugljenisanje i eshara se mogu primetiti. Presađivanje je neophodno ukoliko se ne ispostavi da su opekotine fatalne.
[0092] Još jedan klasifikacioni sistem je klasifikacija po dubini. Opekotine "površinske dubine" odgovaraju opekotinama prvog stepena. Spektar opekotina drugog stepena pokriven je sa dve klase opekotina „delimične dubine“. "Delimično duboko-površinske" su opekotine koje utiču na epidermis samo do papilarnog dermisa. "Delimično duboko-duboke" su opektine koje utiču na derimis do retikularnog dermisa. Opekotine "potpune dubine" odgovaraju opekotinama trećeg i četvrtog stepena.
[0093] Neke fizičke povrede, npr. neke opekotine, i napad na ćelije od strane stranih tela rezultiraju formiranjem rana. Određenije, ranom se može smatrati probijanje, ili ljuštenje, tkiva. Rana takođe može biti izazvana spontanim obrazovanjem lezija kao što su kožni čirevi (npr. venski, dijabetični ili čirevi izazvani pritiskom), analne fisure ili čirevi u ustima.
[0094] Rane se tipično definišu ili kao akutne ili hronične. Akutne rane su rane koje prolaze redom kroz tri prepoznatljiva procesa zarastanja (tj. zapaljensku fazu, proliferativnu fazu i fazu remodelovanja) bez produženog vremenskog toka. Međutim, hronične rane, su one koje ne ispunjavaju sekvencu redosleda biohemijskih događaja procesa zarastanja jer je ta rana zaostala u jednoj od faza zarastanja. Uobičajeno, hronične rane zaostaju u zapaljenskoj fazi. U skladu sa određenim aspektom ovog pronalaska, hronična rana je rana koja se zaraste unutar najmanje 40 dana, naročito najmanje 50 dana, određenije najmanje 60 dana, određenije najmanje 70 dana.
[0095] Kako je prethodno opisano, rane su idealno okruženje za infekciju, uključujući biofilmnu infekciju, i naročito hroničnu biofilmnu infekciju, zbog manjka epitelne barijere i dostupnosti supstrata i površine za kolonizaciju i pričvršćivanje biofilma. Problematično, infekcija rana često odlaže dalje zarastanje i tako čini da je rana podložnija obrazovanju biofilma i utvrđenih infekcija. Alginatni oligomeri ovog pronalaska su prema tome efektivni u tretiranju biofilmne infekcije rane, te tretman hroničnih rana predstavlja jedan od poželjnih aspekata ovog pronalaska.
[0096] Prema tome, u jednom ostvarenju ovog pronalaska alginatni oligomeri koji imaju najmanje 70% G ostataka koriste se u tretiranju biofilmne infekcije, naročito hronične biofilmne infekcije, prisutne kod prethodno pomenutih subjekata, određenije kod subjekata sa respiratornim bolestima ili poremećajima npr. cistična fibroza, rane, opekotine i/ili traume, pri čemu pomenuti tretman obuhvata davanje farmaceutski efektivne količine alginatnog oligomera kako je ovde definisano subjektu.
[0097] U jednom veoma važnom aspektu, alginatni oligomeri mogu se koristiti za tretiranje biofilmne infekcije prisutne u ranama, npr. opekotine, na primer u tretiranju inficirane rane, npr. opekotine.
[0098] Putem sposobnosti da tretiraju biofilmnu infekciju rane, ovde definisani alginatni oligomeri mogu ukloniti jednu ili više prepreka u zarastanju rana i prema tome ovde definisani alginatni oligomeri takođe su efektivni u promovisanju zarastanja akutnih i hroničnih rana.
[0099] Pod promivisanjem zarastanja podrazumeva se da tretman ubrzava proces zarastanja rane koja je predmet lečenja (tj. progresiju rane kroz tri prepoznatljive faze procesa zarastanja). Ubrzavanje procesa zarastanja može se manifestovati kao povećanje u brzini progresije kroz jednu, dve ili sve faze zarastanja (tj. zapaljenska faza, proliferativna faza i/ili faza remodelovanja). Ukoliko je ta rana hronična rana koja je zapela u jednoj od faza zarastanja, ubrzavanje se može ogledati kao ponovno uspostavljanje linernog, sekvencijalnog procesa zarastanja nakon zastoja. Drugim rečima, tretman pomera ranu iz nezarastajućeg stanja u stanje u kojem rana počinje progres kroz faze zarastanja. Taj progres nakon ponovnog početka može biti pri normalnoj brzini, ili čak i sporijoj brzini u odnosu na brzinu kojom bi normalna akutna rana zarasla.
[0100] Alginatni oligomeri mogu se koristiti za tretiranje biofilmne infekcije gde god da se ona može pojaviti u ili na telu. Tako, u još jednom ostvarenju, biofilmna infekcija može biti neka infekcija medicinskog sredstva, naročito nekog ugradnog medicinskog sredstva.
[0101] Kako je prethodno naznačeno, biofilmovi se pojavljuju na zubima, na primer u obliku zubnog plaka. Alginatni oligomeri mogu se koristiti u skladu sa ovim pronalaskom kao oralni agensi za zdravstvenu negu, na primer u kontroli zubnog plaka, npr. radi njegovog uklanjanja, ili redukovanja ili radi redukovanja ili odlaganja njegovog razvoja. Oni se takođe mogu koristiti u tretiranju infekcija ili infektivnih bolesti koje se mogu pojaviti u oralnoj šupljini, na primer gingivitis i periodontitis.
[0102] Dok je kako je prethodno naznačeno tretman biofilmne infekcije pluća i respiratrnog trakta i svih površina tela generalno pokriveno ovim pronalaskom, u jednom ostvarenju, medicinske upotrebe ovog pronalaska nisu usmerene na tretman (i) biofilmova u respiratornom traktu pacijenata koji boluju od HOBP (hronične opstruktivne bolesti pluća), određenije sinusa i pluća, određenije u tretiranju cistične fibroze, hronične opstruktivne bolesti pluća, emfizema, bonhitisa i sinusitisa; (ii) u srednjem uhu pacijenata koji boluju od lepljivog uha; ili (iii) u reproduktivnom traktu ženskih pacijenata sa oslabljenom plodnošću; ili (iv) u digestivnom traktu pacijenata sa zastojem u digestivnom traktu (npr. konstipacija).
[0103] U specifičnom ostvarenju ovog pronalaska alginatni oligomeri mogu se koristiti u tretiranju endokarditisa prirodnih zalistaka, akutnog otitis media, hroničnog bakterijskog prostatitisa, upale pluća, zubnog plaka, periodontitisa, biofilmne infekcije kod respiratornih bolesti, koje mogu da uključuju cističnu fibrozu i astmu, i infekcije povezane sa sredstvom koje se odnosi na implantabilna ili protetička medicinska sredstva npr. endokarditis protetičkog zalistka ili infekcija linija ili katetera ili veštačkih zglobova ili zamena za tkivo.
[0104] "Farmaceutski efektivna" količina alginata je količina alginata koja obezbeđuje merljiv efekat na ciljanom biofilmu (kakav je ovde definisan) i/ili merljiv efekat na stanje koje se cilja. Ova količina može se odrediti u odnosu na standardnu praksu za određivanje doznih kloličina, a stručnjak će lako detektovati dokaz uspešnog tretmana na osnovu iskustva i pomoću rutinskih testova koji su mu dostupni i koji su konstruisani da prate veličinu, strukturu, integritet i broj kolonija biofilma (primera radi oni opisani iznad) i testova konstruisani da prate ciljano stanje.
[0105] Pogodne doze alginatnog oligomera variraće od subjekta do subjekta i mogu ih odrediti lekar ili veterinar u skladu sa težinom, starosti i polom subjekta, težine stanja, načina davanja i takođe u odnosu na određeni alginatni oligomer koji je odabran. Tipično alginatni oligomeri ovog pronalaska nanose se na biofilm pri lokalnoj koncentraciji od do 10%, poželjno do 6%, poželjnije do 4% a najpoželjnije do 2%.
[0106] "Tretman" kada se koristi u vezi sa biofilmnom infekcijom (tj. u vezi sa tretmanom medicinskog stanja/infekcije kod subjekta nasuprot kada se koristi u vezi sa samim biofilmom) ovde se široko koristi da uključi bilo koji terapeutski efekat, tj. bilo koji blagodetan efekat na stanje ili u vezi sa biofilmnom infekcijom. Tako ne samo da uključuje iskorenjivanje ili eliminaciju infekcije, ili lečenje subjekta ili infekcije, već i poboljšanje infekcije ili stanja subjekta. Tako je uključeno na primer, poboljšanje bilo kog simptoma ili znaka infekcije, ili bilo kog klinički prihvaćenog indikatora infekcije/stanja (na primer smanjenje veličine rane ili ubrzano zarastanje). Tretman tako uključuje i kurativnu i palijativnu terapiju, npr. pred-postojeće infekcije ili dijagnistikovane infekcije/stanja, tj. reakcionarni tretman.
[0107] "Tretman" kako se ovde koristi takođe uključuje ograničavanje ili redukovanje postojećeg stanja, ili jednog ili više njegovih simptoma, na primer u odnosu na stanje ili simptom pre tretmana. Tretman tako eksplicitno uključuje bilo koje odlaganje razvoja postojećeg stanja ili simptoma, ili redukciju ili ograničenje razvoja ili progresije stanja ili simptoma.
[0108] Takođe je opisano kako se alginatni oligomeri mogu uzimati kao profilaktički tretman, na primer da spreče, ili najmanje umanje rizik, biofilmne infekcije (npr. od strane patogena). Ovo je jedna od specifičnih upotreba u nezi hospitalizovanih pacijenata kako se rizik od dobijanja nosokomijalne infekcije (opšte poznato kao povezana sa bolnicom/stečena infekcija ili infekcija povezana sa zdravstvenom negom), npr. Staphylococcus aureus, Methicilin Resistant Staphylococcus aureus (MRSA), Pseudomonas aeruginosa, Acinetobacter baumannii, Stenotrophomonas maltophilia, Clostridium difficile, Mycobacterium tuberculosis i Vancomicin-Resistant Enterococcus, može minimizirati sa profilaktičkim režimom alginatnih oligomera kakvi su ovde definisani. Ovo je takođe jedna od određenih upotreba u nezi subjekata koji boluju od neke traume, subjekata sa opekotinama i subjekata sa ranama, od kojih su svi, kako je prethodno opisano, podložniji patogenskoj infekciji u odnosu na subjekta koji nije oboleo na sličan način.
[0109] Generalno, subjekti kojima je potreban tretman prema ovom pronalasku dijagnostikuje se po obolevanju od ciljanog stanja, ili je identifikovan kao neko ko ima biofilmnu infekciju.
[0110] Dalje je opisano kako se alginatni oligomeri mogu uzeti kao profilaktički tretman radi prevencije, ili najmanje minimiziranja rizika, od razvoja biofilmne infekcije, uključujući na primer infekciju rane, endokarditis prirodnih zalistaka, akutni otitis media, hronični bakterijski prostatitis, periodontitis, infekcije respiratornog trakta i pluća (npr. cistična fibroza ili druge respiratorne bolesti, zubni plak, upala pluća, ili infekcija izazvana (npr. ugradnim) medicinskim sredstvom.
[0111] U jednom poželjnom ostvarenju ovog pronalaska, alginatni oligomeri mogu se koristiti u vezi ili kombinaciji sa nekim anti-mikrobnim agensom. U kontekstu medicinske upotrebe, takav agens može biti bilo koji klinički-koristan anti-mikrobni agens, a naročito neki antibiotik. U kontekstu ne-kliničke upotrebe, anti-mikrobni agens može ponovo biti bilo koji anti-mikrobni agens primenjen u ove svrhe, npr. bilo koji dezinfektant ili antiseptik ili agens za čišćenje ili sterilisanje. Agensi se mogu koristiti odvojeno, ili zajedno u istoj kompoziciji, simultano ili sekvencijalno ili odvojeno, npr. u željenom vremenskom intervalu.
[0112] Tako kao reprezentativni primer, anti-mikrobni agens može se koristiti nakon alginatnih oligomera, ali i prethodna ili simultana upotreba može biti pogodna u nekim okolnostima.
[0113] Može se koristiti bilo koji anti-mikrobni agens koji cilja najmanje jedan mikroorganizam u ciljanom biofilmu. Odabir anti-mikrobnog agensa naravno treba da bude pogodan za površinu koja je pod tretmanom, ali primera radi anti-mikrobni agensi, npr. antibiotički, anti-gljivični, antiseptični mogu se koristiti i/ili uslovi za sterilisanje kao što je zračenje (npr. UV, X-zračno, gama) ekstremi temperature, i ekstremi pH.
[0114] Reprezentativni antibiotici uključuju, ali nisu ograničeni na the aminoglikozide (npr. amikacin, gentamicin, kanamicin, neomicin, netilmicin, streptomicin, tobramicin); karbecefeme (npr. lorakarbef); cefalosporine 1. generacije (npr cefadroksil, cefazolin, cefaleksin); cefalosporine 2. generacije (npr. cefaklor, cefamandol, cefaleksin, cefoksitin, cefprozil, cefuroksim); cefalosporine 3. generacije (npr. cefiksim, cefdinir, cefditoren, cefoperazon, cefotaksim, cefpodoksim, ceftazidim, ceftibuten, ceftizoksim, ceftriakson); cefalosporine 4. generacije (npr. cefepim); makrolide (npr. azitromicin, klaritromicin, diritromicin, eritromicin,t roleandomicin); monobaktame (npr. aztreonam); peniciline (npr. amoksicilin, ampicilin,karbenicilin, kloksacilin, dikloksacilin, nafcilin, oksacilin, penicilin G, penicilin V, piperacilin, tikarcilin); polipetidne antibiotike (npr. bacitracin, kolistin, polimiksin B); kvinolone (npr. ciprofloksacin, enoksacin, gatifloksacin, levofloksacin, lomefloksacin, moksifloksacin, norfloksacin, ofloksacin, trovafloksacin); sulfonamide (npr. mafenid, sulfacetamid, sulfametizol, sulfasalazin, sulfisoksazol, trimetoprim-sulfametoksazol); tetracikline (npr. demeklociklin, doksiciklin, minociklin, oksitetraciklin, tetraciklin); karbapeneme (npr. imipenem, meropenem, ertapenem, doripenem, panipenem/betamipron, biapenem, PZ-601); hloramfenikol; klindamicin, etambutol; fosfomicin; izoniazid; linezolid; metronidazol; nitrofurantoin; pirazinamid; kvinupristin/dalfopristin; rifampin; spektinomicin; i vankomicin. Antibiotici vankomicin, tobramicin, meropenem, ciprofloksacin, piperacilin, kolistin, aztreonam, ciprofloksacin i azithromicin su poželjni.
[0115] Reprezentativni antiseptici uključuju, ali nisu ograničeni na hlorni izbeljivač (natrijum hipohlorit), kvaternarna amonijum jedinjenja (npr. benzalkonjium hlorid, cetil trimetilamonijum bromid, cetilpiridinijum hlorid), vodonik peroksid, fenolna jedinjenja (npr. TCP), alkohole (npr. etanol), Virkon™, jedinjenja joda (npr. povidon-jod), jedinjenja srebra (npr. elementarne nano/mikročestice srebra).
[0116] Reprezentativni antifungicidi uključuju, ali nisu ograničeni na poliene (npr. natamicin, rimocidin, filipin, nistatin, amfotericin B, kandicin; imidazole (npr. mikonazol, ketokonazol, klotrimazol, ekonazol, bifonazol, butokonazol, fentikonazol, izokonazol, oksikonazol, sertakonazol, sulkonazol, tiokonazol); triazole (npr. flukonazol, itrakonazol, izavukonazol, ravukonazol, posakonazol, vorikonazol,terkonazol); alilamine (npr. terbinafin, amorolfin, naftifin, butenafin); i ehinokandini (npr. anidulafungin, kaspofungin, mikafungin).
[0117] Anti-mikrobni agens može se primeniti pre, simultano sa ili nakon alginata. Pogodno antimikrobni agens nanosi se suštinski u isto vreme sa alginatom ili posle. Na primer, anti-mikrobni agens nanosi se najmanje 1 sat, poželjno najmanje 3 sata, poželjnije najmanje 5, a najpoželjnije najmanje 6 sati posle alginatnog oligomera. Kako bi se optimizovao anti-mikrobni efekat anti-mikrobnog agensa, antimikrobni agens može se dati (npr. dati ili dostaviti) u više navrata u vremenskim tačkama pogodnim za dati agens. Stručnjak je sposoban da osmisli pogodno doziranje ili režim upotrebe. Kod dugoročnih tretmana, alginat se takođe može koristiti u više navrata. To može biti često kao i anti-mikrobni agens, ali obično manje frekventno. Zahtevana učestalost zavisiće od lokacije biofilmne infekcije, kompozicije kolonije i upotrebljenog anti-mikroba, a stručnjak je sposoban da oprimizuje šablone doze ili upotrebe kako bi optimizovao rezultate
[0118] U poželjnom ostvarenju, anti-mikrobni agens se može koristiti ili naneti posle fizičkog uklanjanja ili redukcije (npr. debriman) biofilma sa površine.
[0119] Nakon uklanjanja, ili pokušaja uklanjanja biofilma, površina se može dovesti u kontak sa alginatnim oligomerima tokom između 0 i 24 sata, naročito 2 i 12 sati, određenije 4 i 8 sati, određenije 5 i 7 sati, npr.6 sati. Nakon toga, anti-mikrobni agens može se naneti ako je poželjno. Takav scenario može biti poželjan ili naročito primenjiv u kliničkim uslovima. U slučaju rane inficirane biofilmom, trajanje inkubacije može biti pogodno konstruisano da odgovara određenim promenama preliva na rani.
[0120] Fizičko uklanjanje biofilma može se izvesti sa bilo kojim pogodnim hirurškim, mehaničkim ili hemijskim sredstvom. Pogodno to može biti upotreba tečne, gel, gel-solne, polučvrste kompozicije ili gasa nanetog pod pritiskom na biofilm, primenom sonikacije, lasera, ili abraziva. Kompozicija koja se primenjuje u samom uklanjanju ili kao rastvor za pranje pre, tokom ili posle može pogodno da sadrži alginatni oligomer.
[0121] Na taj način, u jednom specifičnom ostvarenju, obezbeđen je sterilni vodeni debridman rastvor za rane ili sterilni debridman rastvor na bazi ulja za rane koji sadrži alginatni oligomer kakav je ovde definisan i dalje koji sadrži najmanje jedan proteolitički enzim i/ili najmanje jednu abrazivnu čvrstu fazu, pri čemu je pomenuta kompozicija neki sterilni vodeni rastvor ili sterilni rastvor na bazi ulja. Pogodni proteolitički enzimi uključuju kolagenazu, tripsin, pepsin ili elastazu. Pogodne abrazivne čvrste faze uključuju koloidni silicijum dioksid, usitnjeni plavac, usitnjeni biljni ili životinjski oklop.
[0122] Upotreba u kombinaciji ili vezi sa drugim agensom za ometanje biofilmova može biti pogodna. Biofilm ometači uključuju, ali nisu ograničeni na proteazu, npr. serinsku proteazu, metaloproteazu i cisteinsku proteazu (primeri ovih vrsta proteaza navedeni su u EP0590746); nukleazu, npr. DNaza I i II, RNaza A, H, I, II, III, P, PhyM, R; lipazu i enzime sposobne za degradiranje polisaharida, gelsolin, tiol redukujući agens, acetilcistein, nenaelektrisani polisaharid male molekularne mase (npr. dekstran), ili anjonske poliamino kiseline (npr. poli ASP ili poli GLU).
[0123] Posebno se mogu navesi alginatna liaza, a njena kombinovana upotreba sa nekim alginatnim oligomerom kakav je ovde definisan predstavlja moguće specifično ostvarenje ovog aspketa pronalaska.
[0124] Upotreba u kombinaciji ili vezi sa imunostimulatornim agensima takođe može biti pogodna u tretiranju biofilmova u kliničkim situacijama. Ovi imunostimulatorni agensi mogu se pogodno primeniti u vremenskim tačkama koje odgovaraju onima koje su opisane iznad u vezi sa anti-mikrobnim agensom i mogu se opciono upotrebiti u kombinaciji sa nekim alginatnim oligomerom i nekim anti-mikrobnim agensom. Pogodni imunostimulatorni agensi uključuju, ali nisu ograničeni na citokine npr. TNF, IL-1, IL-6, IL-8 i imunostimulatorne alginate, kao što su alginati sa velikim sadržajem M kako je opisano na primer u US 5,169,840, WO91/11205 i WO03/045402, ali uključuju bilo koji alginat sa imunostimulatornim karakteristikama.
[0125] Upotreba alginatnih oligomera u kombinaciji ili vezi sa faktorima rasta, npr. PDGF, FGF, EGF, TGF, hGF i enzimima takođe može biti pogodna u medicinskim svrhama ovog pronalaska. Reprezentativni primeri pogodnih enzima uključuju ali nisu ograničeni na proteazu, npr. serinska proteaza, metaloproteaza i cisteinska proteaza (primeri ovih vrsta proteaza navedeni su u EP0590746); nukleazu, npr. DNaza I i II, RNaza A, H, I, II, III, P, PhyM, R; lipazu i enzime sposobne za degradiranje polisaharida.
[0126] Upotreba alginatnih oligomera u kombinaciji ili vezi sa fiziološki tolerišućim agensima za redukovanje mukozalne viskoznosti takođe mogu biti pogodni, npr. enzimi cepanja nukleinske kiseline (npr. DNaza kao što je DNaza I), gelsolin, tiol redukujući agens, acetilcistein, natrijum hlorid, nenaelektrisani polisaharidi male molekularne mase (npr. dekstran), arginin (ili drugi prekursori azotnog oksida ili simulatori sinteze), ili anjonske poliamino kiseline (npr. poli ASP ili poli GLU). Ambroksol, romheksin, karbocistein, domiodol, eprazinon, erdostein, letostein, mesna, nelteneksin, sobrerol, stepronin, tiopronin predstavljaju specifične mukolitike. Upotreba DNaze je naročito poželjna.
[0127] Kako je prethodno opisano, alginatni oligomeri mogu se koristiti opciono sa bilo kojim drugim terapeutski aktivnim agensom koji može biti poželjan za upotrebu, npr. anti-zapaljenskim agensom. Kombinovana upotreba alginatnog oligomera sa daljim terapeutski aktivnim agensom (npr. antimikrobni ili anti-zapaljenski agens) može pogodno obezbediti dozu (npr. uobičajenu ili normalnu dozu) daljeg terapeutski aktivnog agensa koja se treba redukovati npr. može se koristiti u svojoj normalnoj ili uobičajenoj dozi ili pri sniženoj dozi, na primer do 50% (ili 50%) njegove normalne doze.
[0128] Pronalazak obuhvata upotrebu jednog alginatnog oligomera ili mešavine (mnoštva/plurariteta) različitih alginatnih oligomera. Tako, na primer, može se koristiti kombinacija različitih alginatnih oligomera (npr. dva ili više).
[0129] U slučaju medicinske upotrebe, alginati ovog pronalaska mogu se davati subjektu u bilo kom pogodnom obliku ili bilo kojim pogodnim putem, npr. topikalnom, oralnom, parenteralnom, enteralom, parenteralnom putanjom ili inhalacijom. Poželjno, alginat se daje topikalno, oralno ili parenteralno ili inhalacijom.
[0130] Stručnjak će biti sposoban da formuliše alginate ovog pronalaska u farmaceutske kompozicije koje su prilagođene za ove putanje davanja u skladu sa uobičajenim postupcima iz ove oblasti i koji su detaljno opisani u literaturi. Samo radi zapažanja, Primeri 11 i 12 opisuju dve moguće kompozicije (topikalne kompozicije i debriman tečnost).
[0131] Prema tome, ovde je obezbeđena farmaceutska kompozicija za upotrebu u tretiranju ili sprečavanju biofilmne infekcija koja obuhvata alginatni oligomer kakav je ovde definisan zajedno sa najmanje jednim farmaceutski prihvatljivim nosačem, razblaživačem ili ekscipijensom.
[0132] Aktivni sastojak može biti inkorporiran, opciono zajedno sa drugim aktivnim agensima, sa jednim ili više konvencionalnih nosača, razblaživača i/ili ekscipijenasa, kako bi se proizveo konvencionalni galenski preparati kao što su tablete, pilule, praškovi (npr. praškovi za inhalaciju), lozenge, kesice, vrećice, eliksiri, suspenzije, emulzije, rastvori, sirupi, aerosoli (kao čvrsta materija ili u tečnom medijumu), sprejevi (npr. nazalni sprejevi), kompozicije za upotrebu nebulajzerima, masti, meke i tvrde želatisnke kapsule, supozitorije, sterilni injektabilni rastvori, sterilno upakovani praškovi, i slično.
[0133] Primeri pogodnih nosača, ekscipijenasa, i razblaživača su laktoza, dekstroza, saharoza, sorbitol, manitol, skrobovi, guma akacija, kalcijum fosfat, inertni alginati, tragakant, želatin, kalcijum silikat, mikrokristalna celuloza, polivinilpirolidon, celuloza, vodeni sirup, voda, voda/etanol, voda/glikol, voda/polietilen, hipertonična slana voda, glikol, propilen glikol, metil celuloza, metilhidrokibenzoati, propil hidroksibenzoati, talk, magnezijum stearat, mineralno ulje ili masne materije kao što su teške masti ili njihove pogodne mešavine. Poželjni ekscipijensi i razblaživači su manitol i hipertonična slana voda (slani rastvor).
[0134] Kompozicije mogu dodatno da uključuju agense za podmazivanje, agense za vlaženje, agense za emulgovanje, agense za suspendovanje, prezervative, zaslađivače, arome, i slično.
[0135] Kako je prethodno opisano, alginatni oligomeri predloženi za upotrebu prema ovom pronalasku mogu se koristiti u kombinaciji sa drugim terapeutski agensima, na primer da se daju zajedno, u jednoj farmaceutskoj formulaciji ili kompoziciji, ili odvojeno (tj. za odvojenu, sekvencijalnu ili simultanu upotrebu). Tako, alginati ovog pronalaska mogu se kombinovati sa drugim (ili dodatnim) terapeutski aktivnim agensom, npr. u farmaceutskom kompletu ili kao kombinovani ("kombinacija") proizvod.
[0136] Još dalji aspekt ovog pronalaska obezbeđuje proizvod koji sadrži alginatni oligomer kako je ovde definisan i neki drugi aktivni agens kao kombinovani preparat za odvojenu, simultanu i sekvencijalnu upotrebu u tretiranju biofilmnih infekcija prisutnih kod subjekta.
[0137] Dodatni terapeutski aktivni agensi mogu biti uključeni u farmaceutske kompozicije, kako je diskutovano u vezi sa kombinovanim terapijama.
[0138] Oblici koji se mogu davati parenteralno, npr., intravenozni rastvori, trebalo bi da su sterilni i bez fiziološki neprihvatljivij agenasa, i trebalo bi da imaju nizak osmolaritet kako bi se minimizirala iritacija ili drugi štetni efekti nakon davanja, a takvi rastvori poželjno su izotonični ili blago hipertonični, npr. hipertonična slana voda (slani rastvor). Pogodna vozila uključuju vodena vozila koja se uobičajeno koriste za davanje parenteralnih rastvora kao što su rastvor natrijum hlorida, Ringerov rastvor, rastvor dekstroze, rastvor dekstroze i natrijum hlorida, laktadni Ringerov rastvor i ostali rastvori kao što su oni opisani u Remington's Pharmaceutical Sciences, 15th ed., Easton: Mack Publishing Co., pp.1405-1412 i 1461-1487 (1975) i The National Formulary XIV, 14th ed. Washington: American Pharmaceutical Association (1975). Rastvori mogu da sadrže prezervative, antimikrobne agense, pufere i antioksidanse koji se konvencionalno primenjuju za parenteralne rastvore, ekscipijense i druge aditive koji su kompatibilni sa biopolimerima i koji se ne utiču na proizvodnju, skladištenje ili upotrebu proizvoda.
[0139] Za topikalno davanje, alginatni oligomer može biti inkorporiran u kreme, masti, gelove, transdermalne flastere i slično. Alginatni oligomeri takođe mogu biti inkorporirani u medicinske obloge, na primer obloge za rane npr. tkane (npr. tekstilne) obloge ili ne-tkane obloge (npr. gelovi ili obloge sa gelastom komponentom). Upotreba alginatnih polimera u oblogama je poznata, i takve obloge, ili zaista bilo kakve obloge, mogu dalje uključivati alginatne oligomere ovog pronalaska.
[0140] Na taj način, ovde su takođe obezbeđene obloge za ranu koje obuhvataju alginatni oligomer (koji može biti bilo koji alginatni oligomer kakav je ovde definisan).
[0141] Dalji topokalni sistemi za koje se smatra da su pogodni, predstavljaju sisteme za in situ dostavu leka, na primer gelovi u kojima se čvrste, polu-čvrste, amorfne ili tečno kristalne gel matrice obrazuju in situ i koje mogu da obuhvataju alginatni oligomer. Takve matrice mogu se konstruisati da pogodno kontrolišu oslobađanje alginatnog oligomera iz te matrice, npr. oslobađanje može biti odloženo i/ili produženo tokom odabranog vremenskog perioda. Takvi sistemi mogu da obrazuju gelove samo nakon dovođenja u kontakt sa biološkim tkivima ili fluidima. Tipično gelovi su bioadhezivni. Dostava do bilo kog mesta na telu koja se može zadržati ili prilagoditi da zadrži pred-gel kompoziciju može biti ciljana takvom tehnikom dostave. Takvi sistemi opisani su u WO 2005/023176.
[0142] Za primenu na oralne, bukalne i denalne površine, posebno su pomenute paste i tečnosti za ispiranje usta. Tako, ovde je takođe obezeđena kompozicija za oralnu zdravstvenu negu, ili oralnu higijenu, koja obuhvata alginatni oligomer (koji može biti bilo koji alginatni oligomer kakav je ovde definisan), naročito tečnost za ispiranje usta i pasta.
[0143] Kako je prethodno naznačeno, poželjna kompozicija za upotrebu u ovom pronalasku je debridman kompozcija koja se primenjuje u nekom debriman procesu za uklanjanje biofilma, na primer sa tkiva. Tipično kao takva kompozicija može se koristiti tečna, ali i gel, gel-solna, ili polučvrsta kompozicija. Ta kompozicija može se koristiti za odstranjivanje biofilma (npr. nanošenjem na tkivo pod pritiskom) i/ili se mogu se koristiti za natapanje tkiva pre, tokom i/ili posle debrimana drugim putem kao što su hirurškim, mehaničkim ili hemijskim procesima. Stručnjak je sposoban da formuliše debridman kompozcije u skladu sa ovim pronalaskom.
[0144] U slučaju biofilmova na nekoj neživoj površini, alginatni oligomer može se naneti na površinu koja treba da se tretira u bilo kojoj pogodnoj kompoziciji ili formulaciji, ili bilo kojim pogodnim sredstvom. Tako alginatni oligomer mogu biti u tečnom, gel, gel-solnom, polučvrstom obliku (npr. rastvori, suspenzije, homogenati, emulzije, paste, praškovi, aerosoli, pare). Tipično kompozicije za tretiranje biofilmova na takvoj neživoj površini biće neka nefarmaceutski prihvatljiva kompozicija. Odabir odabira kompozicije diktiriraće se od strane biofilmne strukture i kompozicije kolonije i lokacije. Primera radi, ukoliko je lokacija biofilma fluidni vod, može biti pogodno da se nanosi fluidna kompozicija. Takođe može biti poželjna upotreba kompozicija koja se zadržava na površini koja se treira, ali koja neće procureti u fluid u normalnoj upotrebi, npr. adhezivni gel. Stručnjak će lako pripremiti pogodne kompozicije upotrebom uobičajenih znanja. Primera radi, alginatni oligomer može se dodati u formulaciju boje i naneti na površinu koja se treira, npr. korito čamca ili drugi deo konstrukcije čamca koja je izložena vodi, ili na zgradu ili bilo koji njen deo, rezervoar (npr. skladišni ili rezervoar za obrađivanje) ili zaista bilo koji deo bilo koje industrijske mašinerije. Takve kompozicije takođe mogu pogodno da obuhvataju neki anti-mikrobni agens, kakav je ovde opisan, npr. hlorni izbeljivač, TCP, etanol, Virkon™, povidon-jod, jedinjenja srebra itd. Kako kompozicije ne moraju da budu farmaceutski prihvatljive, mogu se koristiti jači antimikrobi uzimajući u obzir oštećenje površine, ekološku kontaminaciju, bezbednost korisnika i kontaminacije tretiranih površina i interakcija sa drugim komponentama te kompozicije.
[0145] Kompozicije za upotrebu u ovom pronalasku mogu biti formulisane tako da obezbede brzo, produženo ili odloženo oslobađanje aktivnog sastojka posle primenjivanja na subjektu/površini upošljavanjem procedura koje su dobro poznate u struci. Adhezivne kompozicije takođe su poželjne. Adhezivne, ili formulacije sa produženim i/ili odloženim oslobađanjem biti naročito pogodne.
[0146] Ovde su takođe opisani proizvodi podložni za biofilmnu kolonizaciju čije su podložne površine prethodno tretirane nekim alginatnim oligomerom kakav je ovde definisan. Ovde su opisani neograničavajući primeri proizvoda i površina podložnih kolonizaciji biofilma. Naročito se navode oprema za obradu, skladištenje ili odlaganje hrane i pića i medicinska sredstva. Pretretman se može postići na bilo koji pogodan način, na primer bilo koji oblik nanošenja alginatnog oligomera na površinu, pre svega oblaganje površine, npr. sušenje raspršivanjem, polimerno oblaganje polimerom koji inkorporira alginatni oligomer, i farbanjem, glaziranjem ili lakiranjem kompozicijama boje, glazure ili laka koje sadrže alginatni oligomer. Takve "oblagajuće" kompozicije (npr. boja, glazura ili lak) koje sadrže alginatni oligomer predstavljaju dalji aspekat ovog pronalaska. Alternativno, alginatni oligomer može biti inkorporiran u materijal od kojeg se proizvodi ta površina. Ovaj pristup je pogodan za površine proizvedene od polimera kao što su plastike i silikoni, npr. medicinska sredstva ovde opisana.
[0147] U specifičnom ostvarenju, pronalazak obezbeđuje implantabilno medicinsko sredstvo koje obuhvata neku neživu površinu koja je obložena sa nekim alginatnim oligomerom kakav je ovde definisan.
[0148] Pronalazak će dalje biti opisan sa pozivanjem na sledeće neograničavajuće Primere u kojima: FIG.1 pokazuje rast bakterija u Pseudomonas biofilmovima, generisanim tokom noći, a zatim tretirani mucinom (2.5g/L) i G-fragmentima (0, 1%, 2% ili 6%) tokom noći, na 0h, 6h i 24h nakon celonoćnog tretmana amikacinom (4096-0 µg/ml).
FIG.2 pokazuje rast bakterija u Pseudomonas biofilmovima, generisanim tokom noći, a zatim tretirani mucinom (2.5g/L) i G-fragmentima (0, 1%, 2% ili 6%) tokom noći, na 0h, 6h i 24h nakon celonoćnog tretmana oksitertaciklinom (4096-0 µg/ml).
FIG.3 pokazuje rast bakterija u Pseudomonas biofilmovima generisanim mucinom (2.5g/L) i G-fragmentima (0, 1%, 2% ili 6%) tokom noći, na 0h, 6h i 24h nakon celonoćnog tretmana oksitertaciklinom (4096-0 µg/ml).
FIG.4 pokazuje rast bakterija u Pseudomonas biofilmovima, generisanim mucinom (2.5g/l) tokom 6h, a zatim tretirani mucinom (2.5g/L) i G-fragmentima (0 ili 6%) tokom noći, na 0, 6 i 24h nakon celonoćnog tretmana amikacinom, tobramicinom, oksitetraciklinom ili 'amikacinom oksitetraciklinom' (4096-0 µg ml<-1>).
FIG.5 pokazuje rast bakterija u Pseudomonas PAO1 biofilmovima, generisanim tokom 6h bez mucina, a zatim tretirani G-fragmentima (0 ili 6%) bez mucina, na 0h, 6h i 24h nakon celonoćnog tretmana amikacinom (4096-0 µg/ml) ili tobramicinom (1024-0 µg/ml).
FIG.6 pokazuje rast bakterija u Pseudomonas PAO1 biofilmovima, generisanim mucinom (2.5g/l) tokom 6h, a zatim tretirani mucinom (2.5g/L) i 'G-blokom #0802' (0 ili 6%) tokom noći, na 0, 6 i 24h nakon celonoćnog tretmana amikacinom (4096-0 µg ml<-1>) ili tobramicinom (1024-0 µg ml<-1>).
FIG.7 pokazuje rast bakterija u Staphylococcus aureus soj ATCC 6538 biofilmovima, generisanim mucinom (2.5g/l) tokom 6h, a zatim tretirani mucinom (2.5g/L) i G-fragmentima (0 ili 6 %) tokom noći, na 0, 6 i 24h nakon celonoćnog tretmana oksitertaciklinom (4096-0 µg ml<-1>).
FIG.8 pokazuje rast bakterija u MRSA iz rane izolovanim '1103' biofilmovima, generisanim mucinom (2.5g/L) tokom 6h, a zatim tretirani mucinom (2.5g/L) i G-fragmentima (0 ili 6%) dodavanjem tokom noći, na 0h, 6h i 24h nakon celonoćnog tretmana tobramicina (1024-0 µg/ml).
FIG.9 pokazuje efekat G-fragmenata i mucina na pričvršćivanje Candida albicans ATCC 90028 i Candida dubliniensis CD36<T>u biofilmovima generisanim mucinom (2.5g/L) i G-fragmentima na 0 ili 2% tokom noći.
FIG.10 pokazuje elektronske mikroslike Pseudomonas biofilmovima generisanih mucinom (2.5g/l) tokom 6h, a zatim tretirani mucinom (2.5g/L) i G-fragmentima na 0 ili 2% tokom 24h.
PRIMERI
Primer 1 - Materijali i Standardni Postupci
Bakterijski sojevi.
[0149] Dve kolekcije kulturnih sojeva Pseudomonas aeruginosa PAO1 (ATCC 15682, izolovan iz rane) i Staphylococcus aureus (ATCC 6538) upotrebljeni su za MBEC oglede zajedno sa kliničkim izolatom iz hroničnog venskog nožnog čira, S. aureus (MRSA) '1103'. Dve Candida vrste-sojeva, C. albicans ATCC 90028 i C. dubliniensis CD36<T>upotrebljeni su za ispitivanje pričvršćivanja.
Hemijski i bakterijski medijumi.
[0150] Bakterijske kolonije uzgajane su na krvnoj agar bazi Br2, (BA; Lab15, LabM, Bury, UK) dopunjena sa 5% ovčije krvi i upotrebljena u inokulisanom tripton soja bujonu (TSB, CM0129, Oxoid, Basingstoke, UK) radi rasta tokom noći. Biofilmovi su generisani u katjon-podešenom Mueller-Hinton bujonu (CAMHB; Lab114, LabM). Svi upotrebljeni antibiotici bili su farmaceutskog razreda (Sigma-Aldrich, Gillingham, UK) i uključuju amikacin, oksitetraciklin i tobramicin. Svinjski gastrični mucinski glikoprotein (prečišćen od strane Jeff Pearson, Newcastle University) i alginatni oligomeri CF-5/20 ("G-fragmenti"; 2600Da, %G 90-95) i G-blok #0802 (6400 Da, %G 91) obezbeđeni su Algipharma AS, Sandvika, Norway.
Ispitivanje minimalne koncetracije iskorenjivanja biofilma (MBEC).
[0151] MBEC postupak koji je primenjen prilagođen je od strane Moskowitz SM, et al (2004) J Clin Microbiol 42:1915-1922. Posle preuzimanja iz skladišta na -80°C, bakterijski izolati su uzgajani na BA i zatim uzgajani tokom noći na TSB. Nakon razblaživanja bakterijskih kultura u 0.5 McFarland u CAMHB sa ili bez mucina (2.5g/l), 100 µl je transferovano u bazenčiće mikrotitarske ploče ravnog dna sa 96 bazenčića. U Primeru 3, bakterijske kulture su razblažene u 0.5 McFarland in CAMHB mucinom (2.5g/l) i alginatom i 100 µl je transferovano u bazenčiće mikrotitarske ploče ravnog dna sa 96 bazenčića
[0152] Ploče su zatim uvijene u parafilm kako bi se sprečila dehidratacija i inkubirane na 37°C kako bi se omogućilo obrazovanje biofilma. Vremena inkubisanja i uslovi su varirali kako je ispod opisano.
[0153] Posle obrazovanja biofilma, planktonske ćelije i supernatan su uklonjeni i svaki bazenčić je opran sterilnim fosfatnim puferovanim slanim rastvorom (PBS). Posle pranja, ćelije su tretirane kombinacijom alginata i/ili antibiotika sa ili bez mucina (2.5g/l) u 100 µl CAMHB. Ploče su zatim uvijene u parafilm i inkubirane na 37°C uz blago naginjanje. Vremena inkubisanja i uslovi su varirali kako je ispod opisano. Primenjeni antibiotici i koncetracioni opsezi pokazani su u nastavku.
[0154] Bazenčići su oprani sa PBS i 100 µl svake koncetracije serijskog razblaženja antibiotika u CAMHB zatim je dodato u duplikatu. Ploče su ponovo uvijene u parafilm i inkubirane na 37°C uz blago naginjanje tokom noći.
[0155] U svim MBEC ogledima finalni broj ćelija ocenjen je kako sledi. Bazenčići su oprani PBS i biofilmovi resuspendovani u 100 µl CAMHB energičnim pipetiranjem. Optička gustina na 620 nm (OD620) izmerena je na čitaču mikroploča (FLUOstar OPTIMA, BMG LABTECH) odmah (0 h) i posle inkubacije na 37°C na 6 h i 24 h.
[0156] MBEC vrednost je ona koncetracija antibiotika koja inhibira sav rast bakterija u test uzorku. Bakterijski rast izmeren je povećavanjem u apsorbanciji uzorka. Prema tome, redukcija u MBEC vrednosti je pokazatelj da je osetljivost uzorka na antibiotik povećana (tj. potrebno je manje antibiotika da bi se sprečio rast bakterija).
Upotrebljeni antibiotici i koncetracioni opsezi.
[0157]
acioni opseg (µg ml<-1>)
Ispitivanje minimalne koncetracije iskorenjivanja biofilma (MBEC) bez mucina.
[0158] Pseudomonas aeruginosa PAO1 (ATCC 15682) upotrebljena je za određivanje MBEC vrednosti bez dodavanja mucina. MBEC protokol praćen je kako je ovde opisano, ali bez dodavanja mucina u medijum rasta. Dva antibiotika, amikacin i tobramicin su testirani.
Ispitivanje pričvršćivanja kvasca.
[0159] Ispitivanje pričvršćivanja koje je primenjeno prilagođeno je od Djordjevic et al., (2002) Appl Environ Microbiol 68:2950-2958. C. albicans ATCC 90028 i C. dubliniensis CD36<T>su Candida sojevi primenjeni za oglede pričvršćivanja. Candida je uzgajana na Sabouraud dekstroza agaru (Lab33, LabM) i u bujonu prenoćene kulture uzgajane su u Sabouraud telnom medijumu (Lab9, LabM). Posle dodavanja od 5 µl prekonoćne kulture, 95 µl CAMHB sa dodatim mucinom (2.5g/l) i G-fragmentima (pri koncetracijama od 0, 2%, 6% ili 10%) dodati su bazenčiće. Ploče su umotane u parafilm i inkubirane na 37°C tokom noći kako bi se omogućilo obrazovanja biofilma.
[0160] Planktonske ćelije i supernatant su uklonjeni iz bazenčića pre pranja dobijenih biofilmova (3x) sterilnim dH2O. Ploče su zatim osušene na 56°C tokom 45 min. Svaki bazenčič je zatim obojen sa 150 µl 1% (v/v) kristalne ljubičaste boje (u vodi) tokom 45 min. Ploče su ponovo oprane (3x) sa dH2O, pre dodavanje 200 µl 95% etanola. Posle 5 min, 100 µl iz svakog bunarčića transferovano je u novu mokrititarsku ploču. OD je zatim izmeren na čitaču ploče pri 540 nm.
Rast biofilmova za uslikavanje.
[0161] Nakon uzimanja iz skladišta na -80°C, bakterijski izolati su uzgajani na BA i zatim uzgajani tokom noći na TSB. Nakon razblaživanja bakterijskih kultura u 0.5 McFarland u CAMHB mucinom (2.5g/l), 100 µl je transferovano u bazenčiće mikrotitarske ploče ravnog dna sa 96 bazenčića. Ploče su zatim uvijene u parafilm kako bi se sprečila dehidratacija i inkubirane na 37°C tokom 6h kako bi se omogućilo obrazovanja biofilma. Posle obrazovanja biofilma, planktonske ćelije i supernatan su uklonjeni i svaki bazenčić je opran sterilnim fosfatnim puferovanim slanim rastvorom (PBS). Posle pranja, ćelije su tretirane G fragmentima i mucinom (2.5g/l) u 100 µl CAMHB. Ploče su zatim uvijene u parafilm i inkubirane na 37°C for 24h uz blago naginjanje.
Skenirajuća elektronska mikroskopija (SEM) Pseudomonas biofilmova.
[0162] Glutaraldehid (2%) dodat je u G-fragmentom tretirane biofilmove i fiksiran na sobnoj temperaturi tokom 24 sata. Uzorci su dehidrirani u gradiranim serijama etanolskih koncetracija, osušeni u sušači kritične tačke (Balzers CPD 030, Germany), montirani na aluminijumske stubce, obloženi zlatom u uređaju za oblaganje raspršivanjem (EMscope model AE 1231, UK), i zatim pregledane na skenirajućem elektronskom mikroskopu (FEI-Philips XL-20, The Netherlands).
Upotreba konfokalne mikroskopije neporemećenih biofilmova ili BODIPY<®>630/650-X SE
[0163] G-fragmentom tretirani biofilmovi oprani su sterilnom destilovanom vodom i obojeni sa BODIPY<®>630/650-X SE bojom (BODIPY<®>630/650-X SE, Invitrogen Ltd) koja selektivno boji komponente matrice (EPS) u Pseudomonas biofilmovima.
[0164] BODIPY<®>630/650-X SE je dodata (100 µl (10 µg/ml)) u svaki uzorak biofilma. Preparat je inkubiran u tami tokom 1 sata, a zatim analiziran pomoću CLSM.
Primer 2 - Merenje MBEC vrednosti za preko noćne Pseudomonas aeruginosa biofilmove prethodno tretirane G-fragmentima
[0165] Usledio je MBEC ogled koji je prethodno opisan. Biofilmovi su generisani u pločama tokom noći bez mucina. Nakon pranja sa PBS, biofilmovi su inkubisani sa 0, 1, 2 ili 6% G-fragmentima i mucinom tokom noći. Posle pranja sa PBS, ćelije su inkubisane tokom noći antibioticima (amikacin ili oksitetraciklin) i bez mucina. Rezultati su grafički prikazani na FIG.1 i 2 i prikazani u Tabelama 2 i 3 ispod. Kao što se može videti, celonoćno prethodno tretiranje biofilma G fragmentima izazvalo je redukcije u 6h i 24h MBEC vrednostima za amikacin ili oksitetraciklin.6h MBEC vrednosti za amikacin i oksitetraciklin prepolovljene su za 1% G fragmenata i podeljeni na četiri dela pomoću 2 i 6% G fragmenata.24h MBEC vrednosti za oksitetraciklin prepolovljene su za sve koncetracije G fragmenata.
24h MBEC vrednosti za amikacin su redukovane iako nije bilo moguće kvantifikovati ovu redukciju. To pokazuje da celonoćno prethodno tretiranje G fragmentima povećava osetljivost Pseudomonas aeruginosa u biofilmovima na ove antibiotike.
Ključ
[0166]
Primer 3 - Merenje MBEC vrednosti za Pseudomonas aeruginosa biofilmove generisane u prisustvu G-fragmenata
[0167] Usledio je MBEC ogled koji je prethodno opisan. Biofilmovi su generisani u pločama tokom noći u prisustvu mucina i 0, 1, 2 ili 6% G fragmenata. Posle pranja, biofilmovi su izloženi oksitetraciklinu (bez mucina) tokom noći. Rezultati su grafički prikazani na FIG.3 i prikazani u Tabelama 4 i 5 ispod. Kao što se može videti, pri svim koncetracijama testiranih G fragmenata, generisanje biofilmova u prisustvu G-fragmenata prepolovilo je 24h MBEC vrednosti.6h MBEC vrednosti su prepolovljene kada su upotrebljeni 2% i 6% G fragmenti.1% G fragmenti nisu uspeli da izazovu redukciju. Ovi podaci pokazuju da su Pseudomonas aeruginosa u biofilmovima generisani u prisustvu G fragmenata podložniji oksitetraciklinu od Pseudomonas aeruginosa u biofilmovima generisani u odsustvu G fragmenata.
Ključ
Primer 4- Merenje MBEC vrednosti za Pseudomonas aeruginosa biofilmove generisane tokom 6h i prethodno tretirane G-fragmentima
[0169] Usledio je MBEC ogled koji je prethodno opisan sa mucinom prisutnim kroz ceo ogled. Biofilmovi su generisani u prisustvu mucina tokom 6-časovne inkubacije, oprani i inkubisani G-fragmentima i mucinom tokom noći. Posle pranja sa PBS kulture su izložene antibioticima (amikacin, tobramicin, oksitetraciklin ili kombinacija amikacina i oksitetraciklina) bez mucina. Rezultati su grafički prikazani na FIG.4 i prikazani u Tabelama 6 i 7. Kao što se može videti, prethodno 6H tretiranje biofilmova sa 6% G fragmentima izazvali su 6h MBEC vrednosti za sve testirane antibiotike do najmanje četvrtine, tj. osetljivost Pseudomonas aeuroginosa u ovim biofilmovima na ove antibiotike najmanje je kvadruplirano. Zapravo, 6% G fragmenti izazvali su 6h MBEC vrednost za oksitetraciklin do pada od 1/8 kontrolne vrednosti.24h MBEC vrednosti za amikacin i tobramicin su prepolovljene.24h MBEC vrednost za oksitetraciklin i amikacin/oksitetraciklin mešavinu nije pokazala bilo kakvu promenu u MBEC vrednostima.
Ključ
[0170]
Primer 5 - Merenje MBEC vrednosti za Pseudomonas aeruginosa biofilmove generisane tokom 6h bez mucina i prethodno tretirani G-fragmentima bez mucina
[0171] Protokol Primera 4 ponovljen je primenom tobramicina i amikacina, ali bez dodavanja mucina. Rezultati su prikazani na FIG.5. Kao što se može videti, u odsustvu mucina G-fragmenti su i dalje sposobni da prepolove MBEC vrednosti u svim osim u 24h MBEC vrednostima za amikacin. Ovo je pokazatelj da mucin ne igra značajnu ulogu u efekrima viđenim u prethodnim Primerima.
Primer 6 - Merenje MBEC vrednosti za Pseudomonas aeruginosa biofilmove generisane tokom 6h i prethodno tretirane sa različitim alginatnim oligomerom
[0172] MBEC ogled opisan u Primeru 4 ponovljen je sa alternativnim alginatnim oligomerom, G-blok (#0802) (6400 MW, u poređenju sa CF-5/20 G-fragmentima, 2600 MW) i primenom tobramicina i amikacina. MBEC vrednost na 24h za amikacin podeljena je na četiri dela pomoću prethodnog tretiranja biofilma sa 6% G-blok (#0802). Isti tretman rezultirao je kao 24h MBEC vrednost za prepolovljivanje tobramicina. Ovi podaci pokazuju da neki drugi alginatni oligomer može izmamiti povećanje osetljivosti Pseudomonas aeruginosa PA01 u biofilmovima na tobramicin i amikacin.
Primer 7 - Merenje MBEC vrednosti za 6h biofilmove koji sadrže druge bakterije prethodno tretirane G-fragmentima
[0173] Efekat G-fragmenata na biofilmove Staphylococcus aureus ispitan je primenom MBEC ogleda opisan u Primeru 4 i oksitetraciklian. Kao što se može videti na FIG.7, predtretman biofilmova koji sadrži S. aureus ATCC 6538 sa 6% G fragmentima prepolovilo je MBEC vrednosti 6 i 24 h za oksitetraciklin. Kao što se može videti na FIG.8, pretretman biofilmova koji sadrže MRSA iz rane izolovani '1103' sa 6% G fragmentima prepolovio je MBEC vrednost na 24 h za tobramicin. Ovi podaci pokazuju da se druge bakterije uobičajeno pronađene u biofilmovima, mogu načiniti podložnijim na oksitetraciklin i tobramicin prethodnim tretiranjem ovih biofilmova G fragmentima.
Primer 8 - Efekat G-fragmenata na pričvršćivanje kvasca u biofilmu
[0174] Efekat G-fragmenata na pričvršćivanje Candida albicans i Candida dubliniensis u biofilmu ispitano je primenom ispitivanja pričvršćivanja opisano iznad. Smanjenje u pričvršćivanju obe Candida vrste primećeno je kada su biofilmovi koji sadrže ove kvasce obrazovani u prisustvu 2% G-fragmenata i mucina u poređenju sa mucinom kao samo kontrole. (FIG.9). Ovi podaci pokazuju da G fragmenti mogu da utiču na pričvršćivanje ćelija kvasca u razvijanju biofilmova.
Primer 9 – Mikroskopska analiza strukture Pseudomonas biofilma i efekti G-fragmenata [0175] Ukupne strukture Pseudomonas biofilmova praćeno je primenom skenirajuće elektronske mikroskopije (SEM) FIG.10 pokazuje efekat 2% G fragmenata na strukturu biofilma. Ekstracelularno polisaharidno (EPS) oblaganje ćelijske površine pokazalo je da je prekinuto sa 2% G-fragmentima.
Primer 10- Mikroskopska analiza strukture Pseudomonas biofilma i efekti G-fragmenata [0176] Efekat G fragmenata na strukturu Pseudomonas biofilmne matrice ispitano je primenom konfokalne mikroskopije neporemećenih biofilmova obeleženih sa fluorescentnom bojom BODIPY® 630/650-X SE. Ova boja selektivno boji komponente matrice (EPS) u Pseudomonas biofilmovima. Blaga fragmentacija biofilmne matrice primećena je sa povećavajućim koncetracijama G-fragmenata u poređenju sa kontrolom 'samog mucina'.
Primer 11 - Topikalna kompozicija koja obuhvata alginatni oligomer
[0177] Primer topikalne kompozicije (hidratantni losion za negu kože tela) koja obuhvata alginatni oligomer, pripremljena je sa sledećim sastojcima.
Uljana faza:
Vodena faza:
Primer 12 - Debridman kompozcija koja obuhvata alginatni oligomer
[0178] Primer tečne debridman kompozcije koja obuhvata alginatni oligomer pripremljena je sa sledećim sastojcima.

Claims (18)

Patentni zahtevi
1. Postupak za borbu protiv biofilma koji nije u ili na humanom ili ne-humanom telu, pri čemu pomenuti postupak obuhvata dovođenje u kontakt pomenutog biofilma sa nekim alginatnim oligomerom, gde alginatni oligomer ima najmanje 70% G ostataka.
2. Postupak prema zahtevu 1, u kojem je pomenuti biofilm na nekoj neživoj površini.
3. Postupak prema zahtevu 1 ili zahtevu 2, u kojem je biofilm na nekoj površini koja je odabrana od površina koje se koriste u uređajima ili opremi za obradu, pripremanje, skladištenje ili isporučivanje hrane i pića, površina uređaja za kondicioniranje vazduha, površina industrijske mašinerije, površina rezervoara za skladištenje, površina medicinske i hirurške opreme, površina vodene/pomorske opreme ili površina zgrada i ostalih konstrukcija, a gde je ta površina poželjno odabrana od opreme ili površine za obradu, skladištenje, isporučivanje ili pripremanje hrane, površina rezervoara, transportnih traka, podova, odvoda, rashlađivača, zamrzivača, opreme, zidova, ventila, kaiševa, cevi, vodova za kondicioniranje vazduha, aparata za hlađenje, linija za isporuku hrane i pića, izmenjivača toplote, korita čamaca, cevi za dostavu vode u stomatologiji, vodova kod naftnih bušotina, kontaktnih sočiva, kutija za odlaganje kontaktnih sočiva, katetera, protetičkih pomagala ili implantabilnih medicinskih sredstava.
4. Postupak prema bilo kom od zahteva 1 do 3 u kojem alginatni oligomer
(i) ima prosečnu molekulsku masu od manje od 35.000 Daltona, poželjno manje od 30.000, 25.000 ili 20.000 Daltona;
(ii) ima broj prosečnog stepena polimerizacije od 2 do 100, poželjno 2 do 75, 2 do 50, 2 do 35, ili 2 do 30; (iii) je 3- do 35-merni, 3- do 28-merni, 4- do 25-merni, 6- do 22-merni, 8- do 20-merni, ili 10- do 15-merni;
(iv) ima najmanje 80, 85, 90 ili 95% G ostataka; i/ili
(v) ima primarnu strukturu u kojoj je najmanje 90% G ostataka povezano sa 1-4 za drugi G ostatak.
5. Alginatni oligomer za upotrebu u tretiranju biofilmnih infekcija prisutnih kod subjekta, pri čemu taj alginatni oligomer ima najmanje 70% G ostataka.
6. Upotreba alginatnog oligomera u proizvodnji leka za upotrebu u tretiranju biofilmnih infekcija prisutnih kod subjekta pri čemu taj alginatni oligomer ima najmanje 70% G ostataka.
7. Alginatni oligomer za upotrebu u tretiranju biofilmnih infekcija prema zahtevu 5 ili upotreba prema zahtevu 6 pri čemu alginatni oligomer
(i) ima prosečnu molekulsku masu od manje od 35.000 Daltona, poželjno manje od 30.000, 25.000 ili 20.000 Daltona;
(ii) ima broj prosečnog stepena polimerizacije od 2 do 100, poželjno 2 do 75, 2 do 50, 2 do 35, ili 2 do 30; (iii) je 3- do 35-merni, 3- do 28-merni, 4- do 25-merni, 6- do 22-merni, 8- do 20-merni, ili 10- do 15-merni;
(iv) ima najmanje 80, 85, 90 ili 95% G ostataka; i/ili
(v) ima primarnu strukturu u kojoj je najmanje 90% G ostataka povezano sa 1-4 za drugi G ostatak.
8. Alginatni oligomer za upotrebu u tretiranju biofilmnih infekcija ili upotreba prema bilo kom od zahteva 5 do 7, gde je biofilm u ili na unutrašnjoj ili spoljašnjoj telesnoj površini, i poželjno gde je unutrašnja ili spoljašnja telesna površina odabrana od površina u oralnoj šupljini, reproduktivnom traktu, urinarnom traktu, respiratornom traktu, gastrointestinalnom traktu, peritoneumu, srednjem uhu, prostati, vaskularnoj intimi, konjuktivi, tkivu rožnjače, tkivu pluća, srčanim zaliscima, koži, skalpu, noktima ili unutrašnjosti rana.
9. Alginatni oligomer za upotrebu u tretiranju biofilmnih infekcija ili upotreba prema bilo kom od zahteva 5 do 8 gde je subjekat neki subjekat odabran od subjekta sa prethodno utvrđenom infekcijom, imunokompromitovanog subjekta, subjekta koji je podvrgnut intenzivnoj ili kritičnoj nezi, subjekta koji boluje od traume, subjekta sa opekotinama, subjekta sa akutnom i/ili hroničnom ranom, neonatalnog subjekta, starijeg subjekta, subjekta sa kancerom, subjekta koji boluje od nekog autoimunog stanja, subjekta sa redukovanom ili ukinutom epitelijalnom ili endotelijalnom sekrecijom i/ili izbijanjem sekrecije ili subjekta kome je ugrađeno neko medicinsko sredstvo, i poželjno gde je subjekat odabran od subjekta sa nekim stanjem odabranim od HIV, sepse, septičkog šoka, SIDA, kancera imunog sistema, reumatoidnog artritisa, dijabetesa melitusa tipa I, Kronove bolesti, HOBP, bonhitisa, cistične fibroze, emfizema, kancera pluća, astme, upale pluća i sinuzitisa, subjekta koji se priprema za, koji je pod, ili koji se oporavlja od hemoterapije i/ili radioterapije, subjekta podvrgnutog transplantaciji organa, subjekta koji boravi u nekoj zdravstvenoj ustanovi ili pušača.
10. Alginatni oligomer za upotrebu u tretiranju biofilmnih infekcija ili upotreba kakva je navedena u bilo kom od zahteva 5 do 9 gde se pomenuti alginatni oligomer primenjuje za tretiranje biofilmne infekcije u ranama i/ili opekotinama ili u ugrađenom medicinskom sredstvu.
11. Alginatni oligomer za upotrebu u tretiranju biofilmnih infekcija ili upotreba kakva je navedena u bilo kom od zahteva 5 do 10 gde se alginatni oligomer primenjuje u tretiranju zubnog plaka, gingivitisa, periodontitisa, endokarditisa prirodnih zalistaka, akutnog otitis media, hroničnog bakterijskog prostatitisa, upale pluća, astme ili infekcije povezane sa nekim sredstvom povezanim sa implantabilnim i/ili protetičkim medicinskim sredstvima ili zamenama za tkivo.
12. Postupak, alginatni oligomer za upotrebu u tretiranju biofilmnih infekcija ili upotreba prema bilo kom od zahteva 1 do 11, gde se pomenuti alginatni oligomer primenjuje u kombinaciji sa anti-mikrobnim agensom, i gde je poželjno taj anti-mikrobni agens neki antibiotik ili neki antigljivični agens ili neki antiseptik, dezinfektant, agens za sterilisanje ili čišćenje.
13. Postupak, alginatni oligomer za upotrebu u tretiranju biofilmnih infekcija ili upotreba prema bilo kom od zahteva 1 do 12, gde se alginatni oligomer primenjuje u kombinaciji sa najmanje jednim drugim agensom za ometanje biofilma i/ili agensom za redukovanje viskoznosti sluznice, poželjno odabran od proteaza, nukleaza, lipaza, enzima sposobnih za degradiranje polisaharida, gelsolina, agensa koji redukuje tiol, acetilcisteina, natrijum hlorida, ili anjonske poliamino kiseline, i prekursora azotnog oksida ili stimulatora sinteze, i naročito gde se pomenuti alginatni oligomer primenjuje u kombinaciji sa nekom alginatnom liazom i/ili enzimom DNaze.
14. Postupak, alginatni oligomer za upotrebu u tretiranju biofilmnih infekcija, ili upotreba prema bilo kom od zahteva 1 do 13, gde se pomenuti alginatni oligomer primenjuje u kombinaciji sa dodatnim terapeutski aktivnim agensom, poželjno imunostimulatornim agensom, faktorom rasta ili antizapaljenskim agensom.
15. Proizvod koji sadrži alginatni oligomer kakav je definisan u bilo kom od zahteva 1, 4 ili 7 i neki drugi aktivni agens kao kombinovani preparat za odvojenu, simultanu i sekvencijalnu upotrebu u tretiranju biofilmne infekcije prisutne kod subjekta, pri čemu je aktivni agens poželjno kakav je definisan u bilo kom od zahteva 12 do 14.
16. Proizvod prema zahtevu 15 u obliku nekog hipertoničnog slanog rastvora, rastvora za inhalaciju, praha za inhalaciju, nazalnog spreja, debridman kompozcije, topikalne kompozicije, paste za zube ili tečnosti za ispiranje usta.
17. Implantabilno medicinsko sredstvo koje obuhvata neku neživu površinu koja je obložena alginatnim oligomerom kakav je definisan u bilo kom od zahteva 1, 4 ili 7.
18. Sterilni vodeni debridman rastvor za rane ili sterilni debridman rastvor za rane na bazi ulja koji sadrži alginatni oligomer kakav je definisan u bilo kom od zahteva 1, 4 ili 7 i koji dalje sadrži najmanje jedan proteolitički enzim i/ili najmanje jednu abrazivnu čvrstu fazu, pri čemu je pomenuta kompozicija neki sterilni vodeni rastvor ili sterilni rastvor na bazi ulja.
RS20170466A 2007-11-27 2008-10-24 Upotreba alginatnih oligomera u borbi protiv biofilmova RS55933B1 (sr)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US99661107P 2007-11-27 2007-11-27
PCT/GB2008/003607 WO2009068841A2 (en) 2007-11-27 2008-10-24 Use of alginate oligomers in combating biofilms

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS55933B1 true RS55933B1 (sr) 2017-09-29

Family

ID=40527942

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20170466A RS55933B1 (sr) 2007-11-27 2008-10-24 Upotreba alginatnih oligomera u borbi protiv biofilmova

Country Status (17)

Country Link
US (3) US8680072B2 (sr)
EP (1) EP2268142B1 (sr)
JP (2) JP5639475B2 (sr)
KR (1) KR101690631B1 (sr)
CN (3) CN101939030B (sr)
AU (1) AU2008328567B2 (sr)
BR (1) BRPI0819613B1 (sr)
CA (1) CA2706637C (sr)
DK (1) DK2268142T3 (sr)
ES (1) ES2625866T3 (sr)
HU (1) HUE034051T2 (sr)
PL (1) PL2268142T3 (sr)
PT (1) PT2268142T (sr)
RS (1) RS55933B1 (sr)
RU (1) RU2527894C2 (sr)
SI (1) SI2268142T1 (sr)
WO (1) WO2009068841A2 (sr)

Families Citing this family (58)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP5548121B2 (ja) 2007-05-14 2014-07-16 リサーチ ファウンデーション オブ ステイト ユニバーシティ オブ ニューヨーク バイオフィルム中の細菌細胞における生理学的分散応答の誘導
KR101690631B1 (ko) 2007-11-27 2017-01-09 알지파마 아이피알 에이에스 바이오필름 퇴치에 있어서의 알기네이트 올리고머의 용도
GB0909529D0 (en) * 2009-06-03 2009-07-15 Algipharma Ipr As Alginate oligomers for the inhibition of microbial adherence to surfaces
GB0909557D0 (en) * 2009-06-03 2009-07-15 Algipharma Ipr As Anti-microbial alginate oligomers
BRPI1011248A2 (pt) * 2009-06-03 2016-03-22 Algipharma As métodos in vitro ou ex vivo de superação de resitência a pelo menos um antibiótico, para combate de contaminação de um sítio e melhora da eficácia de um antibiótico de macrolídeo para inibir o crescimento de bactéria mdr gram negativa, uso de um oligômero de alginato e produto
GB2477914B (en) 2010-02-12 2012-01-04 Univ Newcastle Compounds and methods for biofilm disruption and prevention
US9572774B2 (en) 2011-05-19 2017-02-21 Savara Inc. Dry powder vancomycin compositions and associated methods
GB201116010D0 (en) * 2011-09-15 2011-10-26 Algipharma As Use of alginate oligomers to enhance the effects of antifungal agents
WO2013139861A1 (en) 2012-03-20 2013-09-26 Luc Montagnier Methods and pharmaceutical compositions of the treatment of autistic syndrome disorders
MX2014013745A (es) 2012-05-11 2016-05-05 Smith & Nephew Inc Uso de seaprose para eliminar la pelicula biologica bacteriana.
GB201208879D0 (en) * 2012-05-21 2012-07-04 London School Hygiene & Tropical Medicine Therapeutic for treating Clostridium difficile infection
US9546361B2 (en) * 2012-10-12 2017-01-17 Lehigh University Thermally stable enzymes, compositions thereof and methods of using same
US20150329725A1 (en) * 2012-12-25 2015-11-19 Zhe Liu Materials and Methods
KR101438969B1 (ko) * 2012-12-27 2014-09-11 현대자동차주식회사 무취 에바코어 코팅용 미생물 슈도모나스 나이트로리듀센스 및 이의 용도
US10203329B2 (en) 2013-09-12 2019-02-12 The Johns Hopkins University Biofilm formation to define risk for colon cancer
GB201322777D0 (en) * 2013-12-20 2014-02-05 Algipharma As Use of alginate oligomers as blood anticoagulants
MX2016008304A (es) * 2013-12-23 2017-01-09 Norwegian Univ Of Science And Tech Usos de oligouronatos en el tratamiento de cancer.
KR20160119259A (ko) * 2014-02-28 2016-10-12 알지파마 에이에스 낭포성 섬유증 및 cftr 이온 채널의 기능 결함과 관련된 기타 병태의 치료제로서 알기네이트 올리고머의 용도
MX376770B (es) * 2014-04-11 2025-03-07 Novozymes As Composición detergente.
FR3024358B1 (fr) * 2014-08-01 2017-11-10 Soc De Courtage Et De Diffusion Codif Int Compositions cosmetiques et complements alimentaires neuro-protecteurs comprenant de l'oligoalginate ayant un degre de polymerisation de 10 pour lutter contre le vieillissement de la peau.
GB201415381D0 (en) 2014-08-29 2014-10-15 Algipharma As Inhalable powder formulations of alginate oligomers
GB201504878D0 (en) 2015-03-23 2015-05-06 Algipharma As Use of alginate oligomers and CFTR modulators in the treatment of conditions associated with CFTR dysfuntion
GB201517639D0 (en) 2015-10-06 2015-11-18 Algipharma As Use of alginate oligomers to treat or prevent microbial overgrowth in the intestinal tract
WO2017064066A1 (en) * 2015-10-12 2017-04-20 Amsilk Gmbh Use of a biopolymer for reducing the formation of a biofilm
RU2646488C2 (ru) * 2016-04-25 2018-03-05 Государственное бюджетное образовательное учреждение высшего профессионального образования "Оренбургский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ГБОУ ВПО ОрГМУ Минздрава России) Средство для селективного влияния на биопленкообразование микроорганизмами
CA3031866A1 (en) * 2016-07-27 2018-02-01 Smith & Nephew, Inc. Use of thermolysin to reduce or eliminate bacterial biofilms from surfaces
US10266793B2 (en) 2016-09-30 2019-04-23 Novaflux, Inc. Compositions for cleaning and decontamination
GB2555391B (en) * 2016-10-21 2019-06-26 Algipharma As Bacitracin-alginate oligomer conjugates
WO2018073449A1 (en) * 2016-10-21 2018-04-26 Algipharma As Polymyxin-alginate oligomer conjugates
JP6927512B2 (ja) * 2016-10-26 2021-09-01 地方独立行政法人神奈川県立産業技術総合研究所 物体表面の抗菌性試験用菌液媒体
US11072668B2 (en) 2017-01-03 2021-07-27 The University Of North Carolina At Chapel Hill Nitric oxide-releasing alginates as biodegradable antibacterial scaffolds and methods pertaining thereto
WO2018140707A1 (en) 2017-01-30 2018-08-02 Smith & Nephew, Inc. Synergistic combination of thermolysin and an antibacterial agent to reduce eliminate bacterial biofilms from surfaces
JP7403152B2 (ja) 2017-03-28 2023-12-22 ザ ユニバーシティ オブ ノース カロライナ アット チャペル ヒル 生分解可能な抗菌性スキャフォールドとしての一酸化窒素放出性ポリアミノグリコシドおよびそれに関する方法背景
AU2018369760B2 (en) 2017-11-15 2025-01-02 The University Of North Carolina At Chapel Hill Nitric oxide-releasing hyperbranched compounds as antibacterial scaffolds and methods pertaining thereto
WO2019173539A1 (en) 2018-03-06 2019-09-12 The University Of North Carolina At Chapel Hill Nitric oxide-releasing cyclodextrins as biodegradable antibacterial scaffolds and methods pertaining thereto
EP3775133B1 (en) 2018-04-03 2024-10-09 Novaflux, Inc. Cleaning composition with superabsorbent polymer
US11541105B2 (en) 2018-06-01 2023-01-03 The Research Foundation For The State University Of New York Compositions and methods for disrupting biofilm formation and maintenance
GB201812473D0 (en) 2018-07-31 2018-09-12 Algipharma As Method for the qualitative and quantitative detection of alginate oligomers in body fluids
US12478571B2 (en) 2018-12-17 2025-11-25 Pontis Biologics, Inc. Enzyme based compositions and methods for removing dental calculi
WO2020131952A1 (en) * 2018-12-17 2020-06-25 Mynarcik Dennis C Compositions and methods for removing dental calculi
CN109431962B (zh) * 2018-12-19 2021-10-29 仙婷(广州)科技研发有限公司 一种浮游生物代谢物和浮游生物发酵液及其应用
JP7645546B2 (ja) 2018-12-28 2025-03-14 ザ ユニバーシティ オブ ノース カロライナ アット チャペル ヒル 一酸化窒素放出抗菌性ポリマーおよびそれから製造された足場、ならびにそれに関する方法
US20220306968A1 (en) 2019-06-06 2022-09-29 Danisco Us Inc Methods and compositions for cleaning
GB201908639D0 (en) 2019-06-17 2019-07-31 Algipharma Ipr As Use of alginate oligomers in the anticoagulation therapy of subjects at risk of blood clots which have an abnormally dense microstructure
JP7273983B2 (ja) * 2019-09-27 2023-05-15 森永乳業株式会社 酪酸菌用プレバイオティクス組成物
US11918677B2 (en) 2019-10-03 2024-03-05 Protegera, Inc. Oral cavity cleaning composition method and apparatus
US12064495B2 (en) 2019-10-03 2024-08-20 Protegera, Inc. Oral cavity cleaning composition, method, and apparatus
US20210330715A1 (en) * 2020-04-23 2021-10-28 Amebagone, Llc Anti-biofilm agents and uses thereof
KR102450964B1 (ko) * 2020-04-27 2022-10-05 경희대학교 산학협력단 아세타니솔을 포함하는 바이오필름 형성 억제용 조성물
RU2759744C1 (ru) * 2020-09-07 2021-11-17 Олег Владимирович Емшанов Способ борьбы с биологическими плёнками
WO2022094163A1 (en) * 2020-10-29 2022-05-05 The Procter & Gamble Company Cleaning composition comprising alginate lyase enzymes
KR102566917B1 (ko) * 2021-03-16 2023-08-14 영남대학교 산학협력단 쏘팔메토 오일 및 이의 불포화 지방산을 유효성분으로 함유하는 다중 병원성 미생물 바이오필름 형성 억제용 조성물
US20240384205A1 (en) 2021-09-03 2024-11-21 Danisco Us Inc. Laundry compositions for cleaning
KR102731274B1 (ko) * 2021-12-09 2024-11-19 한양대학교 에리카산학협력단 1d-1h nmr 분석을 통한 마이크로캡슐의 생분해 메커니즘의 예측방법
JP2026502943A (ja) 2022-12-30 2026-01-27 アルギファルマ エーエス 経口投与されるポリペプチド治療剤の全身バイオアベイラビリティを高める組成物および方法
CN116019828B (zh) * 2023-02-17 2025-09-30 山东大学 一种聚甘露糖醛酸在制备胃和/或肠内菌落调节剂的应用
WO2025110156A1 (ja) * 2023-11-20 2025-05-30 国立大学法人神戸大学 腸内細菌叢において被験物質を評価する方法
WO2026008878A1 (en) 2024-07-04 2026-01-08 Algipharma As Antimycotic polyene-alginate oligomer conjugates

Family Cites Families (81)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE268865C (sr)
US1234567A (en) * 1915-09-14 1917-07-24 Edward J Quigley Soft collar.
NL297511A (sr) 1956-12-20
FR7576M (sr) 1968-03-27 1970-01-05
HU172831B (hu) * 1976-03-31 1978-12-28 Egyt Gyogyszervegyeszeti Gyar Sposob poluchenija kompleksov oligo- i poligalakturonnyk kislot s ionami zhiznenno vazhnykh metallov
JPH0714842B2 (ja) * 1985-12-11 1995-02-22 ダイセル化学工業株式会社 防かび殺菌方法
DD268865A1 (de) 1987-01-16 1989-06-14 Adw Ddr Verfahren zur herstellung eines pharmazeutischen praeparates
US4898852A (en) 1987-06-02 1990-02-06 Walsh William E Cyclopolgalcturonic acid composition and treatment
US4855128A (en) * 1988-01-14 1989-08-08 Warner-Lambert Company Saccharide inhibition of dental plaque
GB8803157D0 (en) * 1988-02-11 1988-03-09 Nat Res Dev Denture protection
US5139945A (en) * 1988-09-16 1992-08-18 Novo Industri A/S Thermostable alginate lyase from bacillus steraothermophilus
AU7221691A (en) 1990-01-23 1991-08-21 Terje Espevik Mannuronic acid containing alginate wound healing composition and method
JPH0436228A (ja) * 1990-05-30 1992-02-06 Lion Corp 口腔用組成物
CN1021798C (zh) 1990-12-19 1993-08-18 大连市医药科学研究所 净癣涂膜剂制备工艺
US5169840A (en) * 1991-03-27 1992-12-08 Nobipols Forskningsstiftelse Diequatorially bound β-1, 4 polyuronates and use of same for cytokine stimulation
US5166137A (en) * 1991-03-27 1992-11-24 Nobipols Forskningsstiftelse Guluronic acid polymers and use of same for inhibition of cytokine production
JPH05252970A (ja) 1991-10-04 1993-10-05 Maruha Corp 静菌作用を有するアルギン酸オリゴ糖の製造法及 びそれを有効成分として含む静菌剤
CA2106609A1 (en) 1992-09-28 1994-03-29 Irene Yeatman Aldridge Proteases to inhibit and remove biofilm
GB9221163D0 (en) 1992-10-08 1992-11-25 Nobipol And Protan Biopolymer Dna compounds
DE4330773A1 (de) * 1993-09-10 1995-03-16 Laevosan Gmbh & Co Kg Blockierung der Anlagerung von Keimen an menschliche Zellen
AUPM322393A0 (en) 1993-12-24 1994-01-27 Austin Research Institute, The Mucin carbohydrate compounds and their use in immunotherapy
JPH093031A (ja) 1995-04-17 1997-01-07 Mitsubishi Chem Corp ヒドロキサム酸誘導体並びにそれを含有する農園芸用殺菌剤
CA2235069C (en) * 1995-10-19 2010-12-14 Advanced Reproduction Technologies, Inc. Methods and compositions to improve germ cell and embryo survival and function
JP3512553B2 (ja) 1996-01-30 2004-03-29 ポーラ化成工業株式会社 便秘抑制剤及びそれを含有する組成物
GB9605247D0 (en) * 1996-03-13 1996-05-15 Giltech Ltd Composition
EP0807631B1 (en) 1996-05-15 2003-03-12 Sankyo Company Limited Tricyclic compounds having fungicidal activity, their preparation and their use
NO305441B1 (no) * 1996-07-12 1999-05-31 Norsk Hydro As Anvendelse av G-blokk polysakkarider
JPH10127281A (ja) * 1996-10-31 1998-05-19 Tanabe Seiyaku Co Ltd Ｐｅｇ修飾アルギン酸リアーゼおよびその用途
US6395307B1 (en) * 1997-04-30 2002-05-28 Reckitt Benckiser (Uk) Limited Pourable alginate compositions
NO305033B1 (no) 1997-05-09 1999-03-22 Algipharma As Fremgangsmate for fremstilling av uronsyreblokker fra alginat
GB2325233B (en) 1997-05-16 2001-07-18 Norsk Hydro As Substrates having bound polysaccharides and bacterial nucleic acids
US6339075B1 (en) * 1997-06-30 2002-01-15 The University Of British Columbia Use of dextran and other polysaccharides to improve mucus clearance
WO1999014312A1 (en) 1997-09-12 1999-03-25 University Of Maryland Preparation and use of biofilm-degrading, multiple-specificity, hydrolytic enzyme mixtures
US6830745B1 (en) * 1997-10-16 2004-12-14 Pharmacal Biotechnologies, Llc Compositions for treating biofilm
US20020022005A1 (en) * 1997-10-16 2002-02-21 Budny John A. Compositions for treating cystic fibrosis
JP2000063208A (ja) * 1998-08-20 2000-02-29 Daicel Chem Ind Ltd 抗菌性組成物
KR100322511B1 (ko) 1998-11-13 2002-10-25 한국해양연구원 알긴산 올리고당 유도체를 이용한 적조소멸제 및 어병치료제
US20040224922A1 (en) * 1999-08-26 2004-11-11 Malcolm King Use of charged dextran as a mucoactive agent and methods and pharmaceutical compositions relating thereto
WO2001015672A2 (en) 1999-08-26 2001-03-08 Governors Of The University Of Alberta Use of charged dextran as a mucoactive agent and methods and pharmaceutical compositions relating thereto
AU7434200A (en) * 1999-09-23 2001-04-24 Reckitt Benckiser (Uk) Limited Method for combating hard water and scale by using algins
DE10006989A1 (de) * 2000-02-16 2001-08-23 Nutricia Nv Antiadhäsive Kohlenhydratmischung
PL202918B1 (pl) 2000-03-07 2009-08-31 Rush Presbyterian St Luke Przeciwbakteryjna i antykoncepcyjna kompozycja oraz jej zastosowanie
GB0005743D0 (en) * 2000-03-10 2000-05-03 Reckitt & Colmann Prod Ltd Pharmaceutical compositions including alginates
DE10019076A1 (de) * 2000-04-06 2001-10-18 Lang Christine Verwendung von Polygalakturoniden als Lebensmittelzusatzstoffe
DE122011100043I1 (de) * 2000-12-27 2011-12-15 Gilead Sciences Inc Inhalierbares aztreonam zur behandlung und vorbeugung von bakteriellen lungeninfektionen.
ITMI20010347A1 (it) 2001-02-21 2002-08-21 Grisotech S A Complessi di immunoglobuline e polisaccaridi per assorbimento orale etrans-mucosale
US7494669B2 (en) 2001-02-28 2009-02-24 Carrington Laboratories, Inc. Delivery of physiological agents with in-situ gels comprising anionic polysaccharides
JP2002315551A (ja) * 2001-04-19 2002-10-29 Yoshinaga Nakai 食品用防腐剤およびその製造方法
NO326145B1 (no) 2001-11-30 2008-10-06 Fmc Biopolymer As Fremgangsmate for a stimulere vektokning hos pattedyr, fugler og krypdyr.
NO324131B1 (no) 2001-11-30 2007-09-03 Fmc Biopolymer As Fremgangsmate for fremstilling av alginat som har et hoyt mannuronsyre-innhold
AU2002364491A1 (en) * 2002-01-03 2003-07-30 Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem Edible compositions capable of removing oral biofilm
DE10221748B4 (de) 2002-05-16 2006-08-10 Kaczmarek, André, Dr.med.dent. Antimykotisches Haftpulver gegen Prothesenstomatitis, die Herstellung und Verabreichungsform
US6610331B1 (en) * 2002-05-30 2003-08-26 Scott M. Sweazy Fertility kit
NO20023581D0 (no) 2002-07-26 2002-07-26 Fmc Biopolymer As Nye mutantstammer av Pseudomonas fluorescens og varianter derav, metoder for produksjon og bruk derav til produksjon avalginat
US20070237812A1 (en) 2006-04-11 2007-10-11 Tyco Healthcare Group Multi-layer wound dressings
GB0300597D0 (en) * 2003-01-10 2003-02-12 Microbiological Res Authority Phage biofilms
US7674837B2 (en) * 2003-09-08 2010-03-09 Fmc Biopolymer As Gelled biopolymer based foam
CA2540104A1 (en) 2003-09-30 2005-04-07 Solubest Ltd. Water soluble nanoparticles comprising inclusion complexes
JP2005145885A (ja) 2003-11-14 2005-06-09 Japan Science & Technology Agency アルギン酸オリゴマーからなる免疫機構賦活剤
AU2004315890A1 (en) 2003-12-04 2005-09-01 Burwell, Steve Mr. Methods and compositions for preventing biofilm formations, reducing existing biofilms, and for reducing existing biofilms, and for reducing populations of bacteria
KR20070001970A (ko) * 2004-02-26 2007-01-04 보오슈 앤드 롬 인코포레이팃드 알기네이트 점탄성 조성물, 사용 방법 및 팩키지
EP1799232B1 (en) * 2004-10-12 2015-10-07 FMC Biopolymer AS Self-gelling alginate systems and uses thereof
EP1714660A1 (en) 2005-04-21 2006-10-25 N.V. Nutricia Uronic acid and probiotics
US20080227732A1 (en) 2005-05-13 2008-09-18 Venus Remedies Limited Treatment and Control of Severe Infections Including Cystic Fibrosis
EP1745705A1 (en) 2005-07-20 2007-01-24 N.V. Nutricia Process for preparing uronic acid oligosaccharides by extrusion
GB2430881B (en) 2005-10-06 2010-10-13 Ntnu Technology Transfer As Oligoelectrolyte polyols for the treatment of mucosal hyperviscosity
JP5110860B2 (ja) * 2006-11-30 2012-12-26 花王株式会社 バイオフィルム制御剤組成物
EP1872791A1 (en) 2006-06-30 2008-01-02 Institut Pasteur Use of bacterial polysaccharides for biofilm inhibition
EP2046288B1 (en) * 2006-07-14 2013-07-03 FMC Biopolymer AS Hydrogels containing low molecular weight alginates and biostructures made therefrom
DE102006059510A1 (de) 2006-12-14 2008-06-19 Grünenthal GmbH Beschichtete Pellets
WO2008082948A2 (en) 2006-12-29 2008-07-10 Bausch & Lomb Incorporated Ophthalmic alginate composition related methods of manufacture and methods of use
EP2526928B1 (en) 2007-02-05 2018-12-26 Biophile Corporation, Ltd Increased effectiveness of allylamine drug compounds
GB0707096D0 (en) * 2007-04-12 2007-05-23 Ntnu Technology Transfer As Method
JP2008285431A (ja) 2007-05-16 2008-11-27 Japan Science & Technology Agency 養殖魚のウイルス感染症の予防・治療組成物
US20090036554A1 (en) 2007-08-01 2009-02-05 Burke Susan E Ophthalmic compositions comprising a terpene compound
US20090036404A1 (en) 2007-08-02 2009-02-05 Macleod Steven K Ophthalmic compositions comprising a carboxyl-modified fructan or a salt thereof
KR101690631B1 (ko) * 2007-11-27 2017-01-09 알지파마 아이피알 에이에스 바이오필름 퇴치에 있어서의 알기네이트 올리고머의 용도
US20110076240A1 (en) 2008-04-18 2011-03-31 Day Donal F Antifungal and Anti-Cariogenic Cellobio-Oligosaccharides Produced by Dextransucrase
WO2010069519A1 (en) 2008-12-18 2010-06-24 Merz Pharma Gmbh & Co. Kgaa Topical compositions comprising at least one active ingredient poorly soluble in water and biopolymers such as hyaluronic acid with a pka-value between 5-7
BRPI1011248A2 (pt) * 2009-06-03 2016-03-22 Algipharma As métodos in vitro ou ex vivo de superação de resitência a pelo menos um antibiótico, para combate de contaminação de um sítio e melhora da eficácia de um antibiótico de macrolídeo para inibir o crescimento de bactéria mdr gram negativa, uso de um oligômero de alginato e produto
GB0909529D0 (en) 2009-06-03 2009-07-15 Algipharma Ipr As Alginate oligomers for the inhibition of microbial adherence to surfaces

Also Published As

Publication number Publication date
WO2009068841A2 (en) 2009-06-04
ES2625866T3 (es) 2017-07-20
US9877983B2 (en) 2018-01-30
CN104189908B (zh) 2017-01-11
AU2008328567A1 (en) 2009-06-04
US20140205643A1 (en) 2014-07-24
KR101690631B1 (ko) 2017-01-09
CA2706637C (en) 2016-11-29
RU2527894C2 (ru) 2014-09-10
KR20100099213A (ko) 2010-09-10
EP2268142A2 (en) 2011-01-05
RU2010120766A (ru) 2012-01-10
EP2268142B1 (en) 2017-02-22
CA2706637A1 (en) 2009-06-04
JP2015057402A (ja) 2015-03-26
CN101939030A (zh) 2011-01-05
CN104189908A (zh) 2014-12-10
JP5639475B2 (ja) 2014-12-10
JP6014101B2 (ja) 2016-10-25
WO2009068841A3 (en) 2010-06-03
CN107050047B (zh) 2021-06-11
BRPI0819613B1 (pt) 2018-12-11
CN101939030B (zh) 2014-09-03
DK2268142T3 (en) 2017-05-22
US20180092939A1 (en) 2018-04-05
HUE034051T2 (en) 2018-01-29
CN107050047A (zh) 2017-08-18
BRPI0819613A2 (pt) 2014-10-07
PL2268142T3 (pl) 2017-08-31
US8680072B2 (en) 2014-03-25
AU2008328567B2 (en) 2014-06-05
PT2268142T (pt) 2017-06-02
WO2009068841A8 (en) 2010-02-25
SI2268142T1 (sl) 2017-09-29
JP2011505340A (ja) 2011-02-24
US20100305062A1 (en) 2010-12-02
US10624920B2 (en) 2020-04-21

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US10624920B2 (en) Use of alginate oligomers in combating biofilms
RU2582938C2 (ru) Альгинатные олигомеры для применения в преодолении множественной лекарственной устойчивости у бактерий
WO2010139959A2 (en) Alginate oligomers for the inhibition of microbial adherence to surfaces
WO2010139958A1 (en) Anti-microbial alginate oligomers