RS56342B1 - Pirimidini kao blokatori natrijumskog kanala - Google Patents

Pirimidini kao blokatori natrijumskog kanala

Info

Publication number
RS56342B1
RS56342B1 RS20170917A RSP20170917A RS56342B1 RS 56342 B1 RS56342 B1 RS 56342B1 RS 20170917 A RS20170917 A RS 20170917A RS P20170917 A RSP20170917 A RS P20170917A RS 56342 B1 RS56342 B1 RS 56342B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
amino
alkyl
phenyl
pyrimidine
carboxamide
Prior art date
Application number
RS20170917A
Other languages
English (en)
Inventor
Chiyou Ni
Minnie Park
Bin Shao
Laykea Tafesse
Jiangchao Yao
Mark Youngman
Original Assignee
Purdue Pharma Lp
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Purdue Pharma Lp filed Critical Purdue Pharma Lp
Publication of RS56342B1 publication Critical patent/RS56342B1/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
    • C07D239/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D239/24—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D239/28—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D239/32—One oxygen, sulfur or nitrogen atom
    • C07D239/42—One nitrogen atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/04—Centrally acting analgesics, e.g. opioids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/06—Antimigraine agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/08—Antiepileptics; Anticonvulsants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/24—Antidepressants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/06—Antiarrhythmics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D233/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings
    • C07D233/54—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D233/66—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazole or hydrogenated 1,3-diazole rings, not condensed with other rings having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D233/90—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
    • C07D239/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D239/24—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D239/28—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D239/32—One oxygen, sulfur or nitrogen atom
    • C07D239/34—One oxygen atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
    • C07D239/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D239/24—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D239/28—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D239/46—Two or more oxygen, sulphur or nitrogen atoms
    • C07D239/48—Two nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Psychology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)

Description

Oblast pronalaska
Ovaj pronalazak pripada oblasti medicinske hemije. Pronalazak obezbeđuje nova supstituisana jedinjenja pirimidina i upotrebu ovih jedinjenja kao blokatora voltažno-zavisnih natrijumskih (Na+) kanala.
Stanje tehnike
Voltažno-zavisni natrijumski kanali (VGSCs) su nađeni u svim nadražljivim ćelijama. U nervnim ćelijama centralnog nervnog sistema (CNS) i perifernog nervnog sistema (PNS) natrijumski kanali su primarno odgovorni za generisanje brzog porasta akcionog potencijala. Na ovaj način natrijumski kanali su od suštinskog značaja za pokretanje i širenje električnih signala u nervnom sistemu. Pravilan rad natrijumskih kanala je stoga neophodan za normalno funkcionisanje neurona. Shodno tome, nepravilan rad natrijumskog kanala se smatra osnovom različitih medicinskih poremećaja (Videti Hubner et al., Hum. Mol. Genet.11:2435-2445 (2002) za opšti pregled naslednih poremećaja jonskih kanala) uključujući epilepsiju (Yogeeswari et al, Curr. Drug Target 5:589-602 (2004)), aritmiju (Noble, Proc. Natl. Acad. Sci. USA 99:5755-5756 (2002)), miotoniju (Cannon, Kidney Int.57:772-779 (2000)) i bol (Wood et al., J. Neurobiol., 61:55-71 (2004)).
Voltažno-zavisni natrijumski kanali su sačinjeni od α-subjedinice, koja obrazuje jezgro kanala i odgovorna je za otvaranje/zatvaranje kanala zavisno od napona i prodiranje jona, i nekoliko pomoćnih β-subjedinica (videti, npr., Chahine et al., CNS & Neurological Disorders-Drug Targets 7:144-158 (2008) i Kyle and Ilyin, J. Med. Chem. 50:2583-2588 (2007)). α-Subjedinice su veliki proteini sačinjeni od četiri homologa domena. Svaki domen sadrži šest delova u obliku α-heliksa koji prolaze kroz membranu. Za sada je poznato devet članova familije α-subjedinica voltažno-zavisnog natrijumskog kanala. Nazivi ove familije uključuju SCNx, SCNAx i Navx.x (videti tabelu 1, ispod). Familija VGSC je filogenetski podeljena na dve potfamilije Nav1.x (svi sem SCN6A) i Nav2.x (SCN6A). Nav1.x potfamilija može funkcionalno da se podeli na dve grupe, one koje su osetljive na blokiranje tetrodotoksinom (TTX-osetljive ili TTX-s) i one koje su otporne na blokiranje tetrodotoksinom (TTX-otporne ili TTX-r).
Postoje tri člana podgrupe TTX-otpornih natrijumskih kanala. Proizvod gena SCN5A (Nav1.5, H1) se skoro isključivo eksprimira u srčanom tkivu i za njega je pokazano da se nalazi u osnovi raznovrsnih srčanih aritmija i drugih poremećaja provodljivosti (Liu et al., Am. J. Pharmacogenomics 3:173-179 (2003)). Shodno tome, blokatori Nav1.5 su našli kliničku primenu u lečenju takvih poremećaja (Srivatsa et al., Curr. Cardiol. Rep.4:401-410 (2002)). Ostali TTX-otporni natrijumski kanali, Nav1.8 (SCN10A, PN3, SNS) i Nav1.9 (SCN11A, NaN, SNS2) se eksprimiraju u perifernom nervnom sistemu i pokazuju prioritetnu ekspresiju u primarnim nociceptivnim neuronima. Humane genetske varijante ovih kanala nisu povezane ni sa jednim naslednim kliničkim poremećajem. Međutim, aberantna ekspresija Nav1.8 je nađena u CNS-u kod humanih pacijenata sa multiple sklerozom (MS) i takođe u glodarskom modelu MS (Black et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 97:11598-115602 (2000)). Dokaz za učešće u nocicepciji je i asocijativan (prioritetna ekspresija u nociceptivnim neuronima) i direktan (genetski knockout). Nav1.8-null miševi su ispoljavali karakteristično nociceptivno ponašanje kao odgovor na akutnu štetnu stimulaciju, ali su pokazivali značajne nedostatke u prenetom bolu i hiperalgeziji (Laird et al., J. Neurosci.22:8352-8356 (2002)).
TABELA 1
Familija gena za voltažno-zavisni natrijumski kanal
Nav1.7 (PN1, SCN9A) VGSC je osetljiv na blokiranje tetrodotoksinom i prvenstveno se ispoljava u perifernim simpatetičkim i senzornim neuronima. Gen SCN9A je kloniran iz brojnih vrsta, uključujući čoveka, pacova i zeca, i pokazana je ~90% aminokiselinska identičnost između sekvenci kodiranih genima čoveka i pacova (Toledo-Aral et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 94:1527-1532 (1997)).
Sve veći broj dokaza ukazuje na to da Nav1.7 igra ključnu ulogu u različitim bolnim stanjima, uključujući akutni, inflamatorni i/ili neuropatski bol. Delecija gena SCN9A u nociceptivnim neuronima miševa vodi povećanju pragova mehaničkog i termičkog bola i smanjenju ili ukidanju odgovora na inflamatorni bol (Nassar et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 101:12706-12711 (2004)).
Sredstva koja blokiraju natrijumski kanal su opisana kao efikasna u lečenju različitih bolesnih stanja, i našla su naročitu primenu kao lokalni anestetici, npr., lidokain i bupivakain, i u lečenju srčanih aritmija, npr., propafenon i amiodaron, i epilepsije, npr., lamotrigin, fenitoin i karbamazepin (videti Clare et al., Drug Discovery Today 5:506-510 (2000); Lai et al., Annu. Rev. Pharmacol. Toxicol.44:371-397 (2004); Anger et al., J. Med. Chem.44:115-137 (2001), i Catterall, Trends Pharmacol. Sci.8:57-65 (1987)). Za sva ova sredstva se smatra da deluju putem interferiranja sa brzim ulaskom jona natrijuma.
Za druge blokatore natrijumskog kanala, kao što su BW619C89 i lifarizin, pokazano je da su neuroprotektivni u životinjskim modelima kod globalne i fokalne ishemije (Graham et al., J. Pharmacol. Exp. Ther. 269:854-859 (1994); Brown et al., British J. Pharmacol. 115:1425-1432 (1995)).
Prijavljeno je da sredstva koja blokiraju natrijumski kanal mogu da budu korisna u lečenju bola, uključujući akutni, hronični, inflamatorni, neuropatski i druge vrste bola kao što je rektalni, okularni i submandibularni bol koji su obično povezani sa paroksizmalnim ekstremnim poremećajem bola; videti, na primer, Kyle and Ilyin., J. Med. Chem.50:2583-2588 (2007); Wood et al., J. Neurobiol. 61:55-71 (2004); Baker et al., TRENDS in Pharmacological Sciences 22:27-31 (2001); i Lai et al., Current Opinion in Neurobiology 13:291-297 (2003); lečenju neuroloških poremećaja kao što je epilepsija, konvulzije, epilepsija sa febrilnim konvulzijama, epilepsija sa benignim familijarnim neonatalnim infantilnim konvulzijama, nasledni poremećaji bola, npr., primarna ertermalgija i paroksizmalni ekstremni poremećaj bola, familijarna hemiplegična migrena i poremećaj pokreta; i lečenju drugih psihijatrijskih poremećaja kao što je autizam, cerebelarna atrofija, ataksija i mentalna retardacija; videti, na primer, Chahine et al., CNS & Neurological Disorders-Drug Targets 7:144-158 (2008) i Meisler and Kearney, J. Clin. Invest.115:2010-2017 (2005). Pored prethodno navedenih kliničkih primena, karbamazepin, lidokain i fenitoin se koriste za lečenje neuropatskog bola, kao što je bol koji potiče od trigeminalne neuralgije, dijabetičke neuropatije i drugih oblika oštećenja nerva (Taylor and Meldrum, Trends Pharmacol. Sci.16:309-316 (1995)). Osim toga, na osnovu brojnih sličnosti između hroničnog bola i tinitusa, (Moller, Am. J. Otol.18:577-585 (1997); Tonndorf, Hear. Res.28:271-275 (1987)) predloženo je da tinitus treba posmatrati kao oblik hroničnog osećaja bola (Simpson, et al., Tip.20:12-18 (1999)). Zaista, za lidokain i karbamazepin je pokazano da su efikasni u lečenju tinitusa (Majumdar, B. et al., Clin. Otolaryngol. 8:175-180 (1983); Donaldson, Laryngol. Otol.95:947-951 (1981)).
WO 01/68612 A2 je usmerena na arilom supstituisane piridine, pirimidine, pirazine i triazine i njihove upotrebe.
Ilyin et al. opisuju farmakologiju 2-[4-(4-hloro-2-fluorofenoksi)fenil]pirimidin-4-karboksamida u „The journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics" 3:1083-1093 (2006).
McNamara et al. su objavili tekst o korišćenju kokristala glutarne kiseline za poboljšanje oralne bioraspoloživosti API sa slabom rastvorljivošću u „Pharmaceutical Research" 23:1888-1897 (2006).
EP 1911 753 A1 opisuje spirociklična jedinjenja.
WO 2006/127588 A1 se odnosi na jedinjenja 4-amido-pirimidina, njihove derivate i kompozicije, i postupke sinteze korisne za modulaciju ATP-vezujućih kasetnih („ABC") transportera ili njihovih fragmenata.
WO 2004/087679 A1 je usmerena na derivate 2,4,6-trisupstituisanog pirimidina korisne za lečenje neoplastičnimh i autoimunih bolesti.
Obrecht et al. su objavili u „Helvetica Chimica Acta" Vol. 80 (1997), stranice 65-72, „A novel and Efficient Approach for the Combinatorial Synthesis of Structurally Diverse Pyrimidines on Solid Support".
WO 2007/080382 A1 se odnosi na derivate morfolino-pirimidina i njihovu upotrebu u lečenju.
WO 2008/125833 A1 opisuje jedinjenje pirimidina i njegovu upotrebu kao inhibitora fosfatidil-inozitol 3-kinaze (PI3K).
WO 2009/066084 A1 opisuje 2-morfolinopirimidine i njihovu upotrebu kao inhibitora PI3 kinaze.
WO 2009/007751 A1 opisuje jedinjenja morfolino-supstituisane heteroarile, postupak za njihovu pripremu, farmaceutske kompozicije koje sadrže ova jedinjenja i njihovu upotrebu u lečenju.
WO 2011/080568 A1 se odnosi na jedinjenja pirimidina kao inhibitore MTOR i PI3K. WO 2012/052390 A1 opisuje derivate N-2-(2-piridinil)-4-pirimidinil-beta-alanina kao inhibitore histonske demetilaze JMJD3.
WO 2004/084824 A2 je usmerena na 6-člane heterocikle supstituisane biarilom kao blokatore natrijumskog kanala.
Mnogi pacijenti sa akutnim ili hroničnim poremećajima bola pokazuju slab odgovor na sadašnje terapije bola, i razvoj rezistentnosti ili neosetljivosti na opijate je uobičajen. Uz to, mnogi od trenutno dostupnih tretmana imaju neželjene sporedne efekte.
S obzirom na ograničenu efikasnost i/ili neprihvatljive sporedne efekte trenutno dostupnih sredstava, postoji hitna potreba za efikasnijim i bezbednijim analgeticima koji deluju blokiranjem natrijumskih kanala.
KRATAK REZIME PRONALASKA
U jednom aspektu, predmetni pronalazak obezbeđuje supstituisana jedinjenja pirimidina predstavljena formulama I-XV dalje u tekstu, i farmaceutski prihvatljive soli i solvate pomenutih jedinjenja, ovde zajednički označene kao "jedinjenja pronalaska". U nastavku, termin "jedinjenja pronalaska" se odnosi na ovde opisana jedinjenja, međutim, zaštita se traži samo za ona jedinjenja koja potpadaju pod priložene patentne zahteve, a jedinjenja koja ne potpadaju pod priložene patentne zahteve su referentna jedinjenja.
U drugom aspektu, predmetni pronalazak obezbeđuje upotrebu jedinjenja pronalaska kao blokatora jednog ili više natrijumskih (Na<+>) kanala.
U drugom aspektu, predmetni pronalazak obezbeđuje postupak za lečenje poremećaja koji reaguje na blokiranje jednog ili više natrijumskih kanala kod sisara, koji obuhvata primenu na sisara efikasne količine jedinjenja pronalaska.
U drugom aspektu, predmetni pronalazak obezbeđuje postupak za lečenje bola (npr., akutni bol, hronični bol, koji uključuje, ali nije ograničen na, neuropatski bol, postoperativni bol i inflamatorni bol, ili hirurški bol), koji obuhvata primenu efikasne količine jedinjenja pronalaska na sisara kome je lečenje potrebno. Posebno, predmetni pronalazak obezbeđuje postupak za preventivno ili palijativno lečenje bola primenom efikasne količine jedinjenja pronalaska na sisara kome je lečenje potrebno.
U drugom aspektu, predmetni pronalazak obezbeđuje postupak za lečenje moždanog udara, oštećenja neurona usled povrede glave, epilepsije, konvulzija, generalizovane epilepsije sa febrilnim konvulzijama, ozbiljne mioklonične epilepsije u ranom detinjstvu, gubitka neurona nakon globalne i fokalne ishemije, migrene, familijarne primarne eritromelalgije, paroksizmalnog ekstremnog poremećaja bola, cerebelarne atrofije, ataksije, distonije, tremora, mentalne retardacije, autizma, neurodegenerativnog poremećaja (npr., Alchajmerova bolest, amiotrofična lateralna skleroza (ALS), ili Parkinsonova bolest), manične depresije, tinitusa, miotonije, poremećaja pokreta, ili srčane aritmije, ili obezbeđivanje lokalne anestezije, koji obuhvata primenu efikasne količine jedinjenja pronalaska na sisara kome je lečenje potrebno.
U drugom aspektu, predmetni pronalazak obezbeđuje farmaceutsku kompoziciju koja sadrži jedinjenje pronalaska i jedan ili više farmaceutski prihvatljivih nosača.
U drugom aspektu, predmetni pronalazak obezbeđuje farmaceutsku kompoziciju za lečenje poremećaja koji reaguje na blokiranje natrijumskih jonskih kanala, pri čemu farmaceutska kompozicija sadrži efikasnu količinu jedinjenja pronalaska u smeši sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih nosača.
U drugom aspektu, predmetni pronalazak obezbeđuje postupak modulacije natrijumskih kanala kod sisara, koji koji obuhvata primenu na sisara efikasne količine najmanje jednog jedinjenja pronalaska.
U drugom aspektu, predmetni pronalazak obezbeđuje jedinjenja pronalaska za upotrebu u lečenju bola kod sisara, npr., akutnog bola, hroničnog bola, koji uključuje, ali nije ograničen na, neuropatski bol, postoperativni bol i inflamatorni bol, ili hirurški bol.
U drugom aspektu, predmetni pronalazak obezbeđuje jedinjenja pronalaska za upotrebu u lečenju moždanog udara, oštećenja neurona usled povrede glave, epilepsije, konvulzija, generalizovane epilepsije sa febrilnim konvulzijama, ozbiljne mioklonične epilepsije u ranom detinjstvu, gubitka neurona nakon globalne i fokalne ishemije, migrene, familijarne primarne eritromelalgije, paroksizmalnog ekstremnog poremećaja bola, cerebelarne atrofije, ataksije, distonije, tremora, mentalne retardacije, autizma, neurodegenerativnog poremećaja (npr., Alchajmerova bolest, amiotrofična lateralna skleroza (ALS), ili Parkinsonova bolest), manične depresije, tinitusa, miotonije, poremećaja pokreta, ili srčane aritmije, ili obezbeđivanje lokalne anestezije, kod sisara.
U drugom aspektu, predmetni pronalazak obezbeđuje radioaktivno obeleženo jedinjenje pronalaska i upotrebu ovakvih jedinjenja kao radioliganda u pogodno odabranim testovima kompetitivnog vezivanja i metodologijama skrininga. Stoga, predmetni pronalazak dalje obezbeđuje postupak za skrining sposobnosti jedinjenja-kandidata da se veže za natrijumski kanal ili subjedinicu natrijumskog kanala korišćenjem radioaktivno obeleženog jedinjenja pronalaska. U izvesnim primerima izvođenja, jedinjenje je radioaktivno obeleženo sa<3>H,<11>C, ili<14>C. Ovaj test kompetitivnog vezivanja može da se izvede upotrebom bilo koje prikladno odabrane metodologije. U jednom primeru izvođenja, postupak skrininga obuhvata: i) uvođenje fiksne koncentracije radioaktivno obeleženog jedinjenja u in vitro preparat koji sadrži natrijumski kanal koji je rastvorljiv ili vezan za membranu, subjedinicu ili fragment pod uslovima koji dozvoljavaju da se radioaktivno obeleženo jedinjenje veže za kanal, subjedinicu ili fragment, navedenim redom, da bi se obrazovao konjugat; ii) titraciju konjugata sa jedinjenjem-kandidatom; i iii) određivanje sposobnosti jedinjenja-kandidata da ukloni radioaktivno obeleženo jedinjenje sa pomenutog kanala, subjedinice ili fragmenta.
U drugom aspektu, predmetni pronalazak obezbeđuje jedinjenje pronalaska za upotrebu u proizvodnji leka za lečenje bola kod sisara. U jednom primeru izvođenja, predmetni pronalazak obezbeđuje upotrebu jedinjenja pronalaska u proizvodnji leka za palijativno ili preventivno lečenje bola, kao što je akutni bol, hronični bol, ili hirurški bol.
U drugom aspektu, predmetni pronalazak obezbeđuje jedinjenje pronalaska za upotrebu u proizvodnji leka za lečenje moždanog udara, oštećenja neurona usled povrede glave, epilepsije, konvulzija, generalizovane epilepsije sa febrilnim konvulzijama, ozbiljne mioklonične epilepsije u ranom detinjstvu, gubitka neurona nakon globalne i fokalne ishemije, migrene, familijarne primarne eritromelalgije, paroksizmalnog ekstremnog poremećaja bola, cerebelarne atrofije, ataksije, distonije, tremora, mentalne retardacije, autizma, neurodegenerativnog poremećaja (npr., Alchajmerova bolest, amiotrofična lateralna skleroza (ALS), ili Parkinsonova bolest), manične depresije, tinitusa, miotonije, poremećaja pokreta, ili srčane aritmije, ili obezbeđivanje lokalne anestezije, kod sisara.
Dodatni primeri izvođenja i prednosti pronalaska će biti objašnjeni delimično u opisu koji sledi, i proisteći će iz opisa, ili se mogu naučiti praktikovanjem pronalaska. Primeri izvođenja i prednosti pronalaska će biti ostvareni i postignuti pomoću elemenata i kombinacija koje su posebno istaknute u priloženim patentnim zahtevima.
Treba razumeti da su i navedeni rezime i detaljni opis koji sledi samo primer i objašnjenje, i ne ograničavaju pronalazak za koji se traži zaštita.
DETALJAN OPIS PRONALASKA
Jedan aspekt predmetnog pronalaska se zasniva na upotrebi jedinjenja pronalaska kao blokatora Na+ kanala. U pogledu ovog pronalaska, jedinjenja pronalaska su korisna za lečenje poremećaja koji reaguju na blokiranje natrijumskih jonskih kanala.
U jednom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja predstavljena formulom I:
i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati,
u kojoj:
W1 i W2 su N i W3 je CR3; ili
W1 i W3 su N i W2 je CR3; ili
W2 i W3 su N i W1 je CR3;
A1 je odabran iz grupe koja se sastoji od:
a) izborno supstituisanog arila;
b) izborno supstituisanog heteroarila;
c) izborno supstituisanog cikloalkila;
d) izborno supstituisanog heterociklo; i
e) aralkila;
X je odabran iz grupe koja se sastoji od:
a) —O—;
b) —S—;
c) —SO—;
d) —SO2—;
e) —(CR<7a>R<7b>)m—;
f) —NR<8>—;
g) —SO2NR<9>—; i
h) —NR<9>SO2—;
svaki R7a i R7b, koji mogu da budu isti ili različiti, je odabran iz grupe koja se sastoji od:
a) vodonika;
b) halo;
c) alkila; i
d) arila; ili
svaki R7a i R7b uzet zajedno sa atomom ugljenika za koji je vezan obrazuje 3- do 8-člani izborno supstituisani cikloalkil ili 3- do 8-članu izborno supstituisanu heterociklo grupu;
m je 0, 1, 2, ili 3;
R8 je odabran iz grupe koja se sastoji od vodonika i alkila;
R9 je odabran iz grupe koja se sastoji od vodonika i alkila;
A2 je odabran iz grupe koja se sastoji od:
a) izborno supstituisanog arila;
b) izborno supstituisanog heteroarila;
c) izborno supstituisanog heterociklo; i
d) izborno supstituisanog cikloalkila; ili
A2 je odsutan;
E je odabran iz grupe koja se sastoji od:
a) hidroksi;
b) alkoksi; i
c) —NR<1>R<2>grupe;
R1 je odabran iz grupe koja se sastoji od:
a) vodonika;
b) alkila;
c) aralkila;
d) (heterociklo)alkila;
e) (heteroaril)alkila;
f) (amino)alkila;
g) (alkilamino)alkila;
h) (dialkilamino)alkila;
i) (karboksamido)alkila;
j) (cijano)alkila;
k) alkoksialkila;
l) hidroksialkila; i
m) heteroalkila;
R2 je odabran iz grupe koja se sastoji od vodonika i alkila; ili
R1 i R2 uzeti zajedno sa atomom azota za koji su vezani obrazuju 3- do 8-članu izborno supstituisanu heterociklo grupu;
R3 je odabran iz grupe koja se sastoji od:
a) vodonika;
b) halo;
c) nitro;
d) cijano;
e) hidroksi;
f) amino;
g) alkilamino;
h) dialkilamino;
i) haloalkila;
j) hidroksialkila;
k) alkoksi;
l) haloalkoksi; i
m) alkoksialkila;
Z je odabran iz grupe koja se sastoji od —NR<5>— i —O—;
R4 je odabran iz grupe koja se sastoji od:
c) hidroksialkila;
d) hidroksi(cikloalkil)alkila; i
e) (heterociklo)alkila;
svaki R10a, R10b, R10c i R10d je nezavisno jedan od drugog odabran iz grupe koja se sastoji od:
a) vodonika;
b) hidroksi;
c) izborno supstituisanog alkila;
d) aralkila;
e) (heterociklo)alkila;
f) (heteroaril)alkila;
g) (amino)alkila;
h) (alkilamino)alkila;
i) (dialkilamino)alkila;
j) (karboksamido)alkila;
k) (cijano)alkila;
l) alkoksialkila;
m) hidroksialkila;
n) heteroalkila;
o) izborno supstituisanog cikloalkila;
p) izborno supstituisanog arila;
q) izborno supstituisanog heterociklo; i
r) izborno supstituisanog heteroarila; ili
R10a i R10b uzeti zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani obrazuju 3- do 8-člani izborno supstituisani cikloalkil ili 3- do 8-članu izborno supstituisanu heterociklo grupu;
r je 1, 2, ili 3;
s je 1, 2, ili 3;
R11 je odabran iz grupe koja se sastoji od:
a) hidroksi;
b) alkoksi; i
c) —NR<1a>R<2a>grupe;
R1a je odabran iz grupe koja se sastoji od:
a) vodonika;
b) alkila;
c) aralkila;
d) (heterociklo)alkila;
e) (heteroaril)alkila;
f) (amino)alkila;
g) (alkilamino)alkila;
h) (dialkilamino)alkila;
i) (karboksamido)alkila;
j) (cijano)alkila;
k) alkoksialkila;
l) hidroksialkila; i
m) heteroalkila;
R2a je odabran iz grupe koja se sastoji od vodonika i alkila; ili
R1a i R2a uzeti zajedno sa atomom azota za koji su vezani obrazuju 3- do 8-članu izborno supstituisanu heterociklo grupu;
R12 je odabran iz grupe koja se sastoji od:
a) vodonika;
b) izborno supstituisanog alkila;
c) (amino)alkila;
d) (alkilamino)alkila;
e) (dialkilamino)alkila;
f) (karboksamido)alkila;
g) (cijano)alkila;
h) alkoksialkila;
i) hidroksialkila; i
j) heteroalkila;
R5 je odabran iz grupe koja se sastoji od:
a) vodonika
b) alkila;
c) hidroksialkila; i
d) alkilsulfonila; ili
R4 i R5 uzeti zajedno sa atomom azota za koji su vezani obrazuju 3- do 8-članu izborno supstituisanu heterociklo grupu.
U jednom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja predstavljena formulom I, kao što je definisano u patentnom zahtevu 1.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja predstavljena formulom I, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojoj, kada Z predstavlja — NR<5>— i R<4>i R<5>uzeti zajedno sa atomom azota za koji su vezani obrazuju 3- do 8-članu izborno supstituisanu heterociklo grupu, tada je R1 odabran iz grupe koja se sastoji od:
a) vodonika;
b) (heterociklo)alkila;
c) (heteroaril)alkila;
d) (amino)alkila;
e) (alkilamino)alkila;
f) (dialkilamino)alkila;
g) (karboksamido)alkila;
h) (cijano)alkila;
i) alkoksialkila;
j) hidroksialkila; i
k) heteroalkila.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja predstavljena formulom I, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojoj kada Z predstavlja — NR<5>—, R<4>i R<5>uzeti zajedno sa atomom azota za koji su vezani obrazuju 3- do 8-članu izborno supstituisanu heterociklo grupu, i A2 je odsutan, tada je X odabran iz grupe koja se sastoji od:
a) —O—;
b) —S—;
c) —SO—;
d) —SO2—
e) —(CR<7a>R<7b>)m—;
f) —SO2NR<9>—; i
g) —NR<9>SO2—.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja predstavljena formulom I, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojoj je A2 odabran iz grupe koja se sastoji od:
a) izborno supstituisanog arila;
b) izborno supstituisanog heteroarila;
c) izborno supstituisanog heterociklo; i
d) izborno supstituisanog cikloalkila.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja predstavljena formulom I, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojoj je X odabran iz grupe koja se sastoji od:
a) —O—;
b) —S—;
c) —SO—;
d) —SO2—
e) —(CR<7a>R<7b>)m—;
f) —SO2NR<9>—; i
g) —NR<9>SO2—.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja predstavljena formulom I, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojoj:
W1 i W2 su N i W3 je CH;
A1 je odabran iz grupe koja se sastoji od izborno supstituisanog arila i izborno supstituisanog heteroarila;
X je —O—;
A2 je odabran iz grupe koja se sastoji od:
a) izborno supstituisanog arila, npr., izborno supstituisanog fenila;
b) izborno supstituisanog heteroarila, npr., izborno supstituisanog piridila; c) izborno supstituisanog heterociklo, npr., izborno supstituisanog piperidinila, izborno supstituisanog piperazinila, ili izborno supstituisanog azetidinila; i
d) izborno supstituisanog cikloalkila, npr., izborno supstituisanog cikloheksenila, ili izborno supstituisanog cikloheksila; i E je odabran iz grupe koja se sastoji od —OH, —OMe, —OtBu, i —NH2.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja predstavljena formulom I, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojoj kada Z predstavlja — NR<5>— i R<4>i R<5>uzeti zajedno sa atomom azota za koji su vezani obrazuju 3- do 8-članu izborno supstituisanu heterociklo grupu, tada je R1 odabran iz grupe koja se sastoji od:
a) vodonika;
b) (heterociklo)alkila;
c) (heteroaril)alkila;
d) (amino)alkila;
e) (alkilamino)alkila;
f) (dialkilamino)alkila;
g) (karboksamido)alkila;
h) (cijano)alkila;
i) alkoksialkila;
j) hidroksialkila; i
k) heteroalkila, i
A2 je odabran iz grupe koja se sastoji od:
a) izborno supstituisanog arila;
b) izborno supstituisanog heteroarila;
c) izborno supstituisanog heterociklo; i
d) izborno supstituisanog cikloalkila.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja predstavljena formulom II:
i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojoj A1 , X, E, R4 , W1 , W2 , W3 i Z predstavljaju kao što je prethodno definisano u vezi sa formulom I, i R<6a>i R<6b>su nezavisno jedan od drugog odabrani iz grupe koja se sastoji od:
a) vodonika;
b) halo;
c) nitro;
d) cijano;
e) hidroksi;
f) amino;
g) alkilamino;
h) dialkilamino;
i) haloalkila;
j) hidroksialkila;
k) alkoksi;
l) haloalkoksi;
m) karboksi; i
n) alkoksikarbonila.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja predstavljena formulom III:
i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojoj A1 , X, E, R4 , W1 , W2 , W3 i Z predstavljaju kao što je prethodno definisano u vezi sa formulom I, i R<6a>i R<6b>predstavljaju kao što je prethodno definisano u vezi sa formulom II.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja predstavljena formulom IV:
i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojoj A1 , X, E, R4 , W1 , W2 , W3 i Z predstavljaju kao što je prethodno definisano u vezi sa formulom I, i R<6a>i R<6b>predstavljaju kao što je prethodno definisano u vezi sa formulom II.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja predstavljena formulom V:
i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojoj A1 , X, E, R4 , W1 , W2 , W3 i Z predstavljaju kao što je prethodno definisano u vezi sa formulom I, i R<6a>i R<6b>predstavljaju kao što je prethodno definisano u vezi sa formulom II.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja predstavljena formulom VI:
i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojoj A1 , R1 , R2 , R4 , W1 , W2 , W3 i Z predstavljaju kao što je prethodno definisano u vezi sa formulom I.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja predstavljena formulom VII:
i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojoj A1 , R1 , R2 , R4 , W1 , W2 , W3 i Z predstavljaju kao što je prethodno definisano u vezi sa formulom I.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja predstavljena formulom VII, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojoj:
W1 i W2 su N i W3 je CH;
A1 je odabran iz grupe koja se sastoji od izborno supstituisanog arila, npr., izborno supstituisanog fenila, i izborno supstituisanog heteroarila, npr., izborno supstituisanog piridila; i
R1 i R2 predstavljaju vodonik.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja predstavljena formulom VIII:
i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojoj A1 , R1 , R2 , R4 , W1 , W2 , W3 i Z predstavljaju kao što je prethodno definisano u vezi sa formulom I.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja predstavljena formulom VIII, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojoj:
W1 i W2 su N i W3 je CH;
A1 je odabran iz grupe koja se sastoji od izborno supstituisanog arila, npr., izborno supstituisanog fenila, i aralkila, npr., benzila, ili —CH(4-F-Ph)2; i
R1 i R2 su vodonik.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja predstavljena formulom IX:
i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojoj A1 , R1 , R2 , R4 , W1 , W2 , W3, X i Z predstavljaju kao što je prethodno definisano u vezi sa formulom I.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja predstavljena formulom IX, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojoj:
W1 i W2 su N i W3 je CH;
X je —O—;
A1 je izborno supstituisani aril, npr., izborno supstituisani fenil; i
R1 i R2 su vodonik.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja predstavljena formulom XII:
i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojoj A1 , R1 , R2 , R4 , W1 , W2 , W3 i Z predstavljaju kao što je prethodno definisano u vezi sa formulom I, t predstavlja 1, 2, 3, ili 4, i u predstavlja 1, 2, 3, ili 4.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja predstavljena formulom XII, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojoj t i u predstavljaju 1.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja predstavljena formulom XII, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojoj t i u predstavljaju 2.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja predstavljena formulom XII, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojoj:
W1 i W2 su N i W3 je CH;
A1 je izborno supstituisani aril, npr., fenil;
R1 i R2 su vodonik; i
t i u su 1; ili
t i u su 2.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja predstavljena formulom XIII:
i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojoj A1 , R1 , R2 , R4 , W1 , W2 , W3 i Z predstavljaju kao što je prethodno definisano u vezi sa formulom I, v predstavlja 1, 2, 3, ili 4, w predstavlja 1, 2, 3, ili 4, i predstavlja jednogubu ili dvogubu vezu.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja predstavljena formulom XIII, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojoj v i w predstavljaju 2.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja predstavljena formulom XIII, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojoj:
W1 i W2 su N i W3 je CH;
A1 is izborno supstituisani aril, npr., izborno supstituisani fenil;
R1 i R2 su vodonik; i
v i w su 2.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja bilo koje od formula I-IX, XII, ili XIII, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojima R3 predstavlja vodonik.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja bilo koje od formula I-IX, XII, ili XIII, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojima W1 i W2 predstavljaju N i W3 predstavlja CH.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja bilo koje od formula I-IX, XII, ili XIII, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojima W1 i W3 predstavljaju N i W2 predstavlja CH.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja bilo koje od formula I-IX, XII, ili XIII, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojima W2 i W3 predstavljaju N i W1 predstavlja CH.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja bilo koje od formula I-IX, XII, ili XIII, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojima Z predstavlja — O—.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja bilo koje od formula I-IX, XII, ili XIII, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojima Z predstavlja — NR<5>—.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja bilo koje od formula I-IX, XII, ili XIII, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojima Z predstavlja — NR<5>— i R<4>i R<5>uzeti zajedno sa atomom azota za koji su vezani obrazuju 5- ili 6-članu izborno supstituisanu heterociklo grupu.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja bilo koje od formula I-IX, XII, ili XIII, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojima Z predstavlja — NR<5>— i R<4>i R<5>uzeti zajedno sa atomom azota za koji su vezani obrazuju 5- ili 6-članu izborno supstituisanu heterociklo grupu odabranu iz grupe koja se sastoji od:
u kojoj su:
R13a, R13b, R13c, R13d, R13e i R13f nezavisno jedan od drugog izabrani iz grupe koja se sastoji od:
a) vodonika;
b) hidroksi;
c) hidroksialkila;
d) karboksi;
e) alkoksikarbonila; i
f) karboksamido grupe;
Y je odabran iz grupe koja se sastoji od O, S i NR14; i
R14 je odabran iz grupe koja se sastoji od vodonika i alkila.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja bilo koje od formula I-IX, XII, ili XIII, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojima Z predstavlja — NR<5>— i R<4>i R<5>uzeti zajedno sa atomom azota za koji su vezani obrazuju 6-članu izborno supstituisanu heterociklo grupu izabranu iz grupe koja se sastoji od:
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja bilo koje od formula I-IX, XII, ili XIII, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojima:
R4 je odabran iz grupe koja se sastoji od:
b) hidroksialkila; i
c) hidroksi(cikloalkil)alkila;
R10a je odabran iz grupe koja se sastoji od:
a) vodonika;
b) izborno supstituisanog alkila;
c) aralkila;
e) (heteroaril)alkila;
f) (amino)alkila;
g) (alkilamino)alkila;
h) (dialkilamino)alkila;
i) (karboksamido)alkila;
k) alkoksialkila; i
l) hidroksialkila;
R10b je odabran iz grupe koja se sastoji od vodonika i alkila; ili
R10a i R10b uzeti zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani obrazuju 3- do 6-člani cikloalkil; i
R5 je odabran iz grupe koja se sastoji od vodonika i alkilsulfonila; ili
R4 i R5 uzeti zajedno sa atomom azota za koji su vezani obrazuju 3- do 8-članu izborno supstituisanu heterociklo grupu.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja bilo koje od formula I-IX, XII, ili XIII, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojima R4 predstavlja:
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja bilo koje od formula I-IX, XII, ili XIII, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojima R4 predstavlja:
R10a i R10b uzeti zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani obrazuju 3- do 6-člani cikloalkil.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja bilo koje od formula I-IX, XII, ili XIII, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojima R11 predstavlja —NR<1a>R<2a>, i R<1a>i R<2a>predstavljaju kao što je prethodno definisano.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja bilo koje od formula I-IX, XII, ili XIII, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojima R11 predstavlja —NR<1a>R<2a>, R<1a>je odabran iz grupe koja se sastoji od alkila i hidroksialkila, i R<2a>je vodonik.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja bilo koje od formula I-IX, XII, ili XIII, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojima R11 predstavlja —NR<1a>R<2a>i R<1a>i R<2a>uzeti zajedno sa atomom azota za koji su vezani obrazuju 5- ili 6-članu izborno supstituisanu heterociklo grupu.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja bilo koje od formula I-IX, XII, ili XIII, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojima R11 predstavlja —NR<1a>R<2a>i R<1a>i R<2a>predstavljaju vodonik, tj., R<11>je amino.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja bilo koje od formula I-IX, XII, ili XIII, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojima R4 predstavlja:
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja bilo koje od formula I-IX, XII, ili XIII, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojima je R4 odabran iz grupe koja se sastoji od:
u kojoj, R10a je odabran iz grupe koja se sastoji od vodonika i alkila; i
R10b je odabran iz grupe koja se sastoji od:
a) vodonika;
b) hidroksi; i
c) alkila.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja bilo koje od formula I-IX, XII, ili XIII, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojima je R4 odabran iz grupe koja se sastoji od:
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja bilo koje od formula I-IX, XII, ili XIII, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojima je R4 odabran iz grupe koja se sastoji od:
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja bilo koje od formula I-IX, XII, ili XIII, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojima je R4 hidroksialkil ili hidroksi(cikloalkil)alkil.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja bilo koje od formula I-IX, XII, ili XIII, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojima je R4 hidroksialkil.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja bilo koje od formula I-IX, XII, ili XIII, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojima je R4 hidroksialkil ili hidroksi(cikloalkil)alkil izabran iz grupe koja se sastoji od:
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja bilo koje od formula I-IX, XII, ili XIII, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojima je A1 odabran iz grupe koja se sastoji od izborno supstituisanog arila i izborno supstituisanog heteroarila.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja bilo koje od formula I-IX, XII, ili XIII, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojima je A1 izborno supstituisani aril.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja formula VIII, XII, ili XIII, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojima je A1 odabran iz grupe koja se sastoji od izborno supstituisanog arila i aralkila.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja formule I, pod uslovom da, kada je A2 odsutan, tada X predstavlja —O— i A<1>je izborno supstituisani aril.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja predstavljena formulom I, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, pod uslovom da, kada je A2 odsutan, tada X predstavlja —(CR<7a>R<7b>)m—, m je 0, i A1 je izborno supstituisana heterociklo grupa.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja predstavljena formulom I, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojoj je A2 izborno supstituisani C4-8cikloalkil koji je delimično nezasićen, tj., A2 je izborno supstituisani C4-
8cikloalkenil. U drugom primeru izvođenja, A2 je C6cikloalkenil.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja formule IX, u kojoj je A1 izborno supstituisani aril i X predstavlja
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja bilo koje od formula I-IX, XII, ili XIII, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojima je A1 izborno supstituisani aril i izborni supstituenti su izabrani iz grupe koja se sastoji od halo, cijano, haloalkil, hidroksialkil, alkoksi i haloalkoksi grupe.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja bilo koje od formula I-IX, XII, ili XIII, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojima E predstavlja -NR1R2.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja bilo koje od formula I-IX, XII, ili XIII, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojima E predstavlja -NR1R2 , R1 je odabran iz grupe koja se sastoji od:
a) vodonika;
b) (heterociklo)alkila;
c) (heteroaril)alkila;
d) (amino)alkila;
e) (alkilamino)alkila;
f) (dialkilamino)alkila;
g) (karboksamido)alkila;
h) (cijano)alkila;
i) alkoksialkila;
j) hidroksialkila; i
k) heteroalkila, i
R2 je vodonik.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja bilo koje od formula I-IX, XII, ili XIII, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojima E predstavlja -NH2.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja bilo koje od formula I-V, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojima je X odabran iz grupe koja se sastoji od:
a) —O—;
u kojoj su R7a, R7b i R8 vodonik, i m je 0 ili 1.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja bilo koje od formula I-V, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojima je R3 odabran iz grupe koja se sastoji od:
a) vodonika;
b) halo;
c) nitro;
d) cijano;
e) amino;
f) alkilamino;
g) dialkilamino;
h) haloalkila;
i) hidroksialkila;
j) alkoksi;
k) haloalkoksi; i
l) alkoksialkila.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja formule X:
i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojoj A1 , R1a, R2a, W1 , W2 , W3 i Z predstavljaju kao što je prethodno definisano u vezi sa formulom I.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja formule XI:
i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojoj A1 , R1a, R2a, W1 , W2 , W3 i Z predstavljaju kao što je prethodno definisano u vezi sa formulom I.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja formule X ili XI, u kojima:
W1 i W2 su N i W3 je CH; ili
W1 i W3 su N i W2 je CH; ili
W2 i W3 su N i W1 je CH;
A1 je odabran iz grupe koja se sastoji od izborno supstituisanog fenila i izborno supstituisanog piridila;
Z je odabran iz grupe koja se sastoji od —O— i —NH—;
R1a je odabran iz grupe koja se sastoji od:
a) vodonika;
b) alkila;
c) (amino)alkila;
d) (alkilamino)alkila;
e) (dialkilamino)alkila;
f) (karboksamido)alkila; i
g) hidroksialkila; i
R2a je vodonik; ili
R1a i R2a uzeti zajedno sa atomom azota za koji su vezani obrazuju izborno supstituisanu 5- ili 6-članu heterociklo grupu, npr., pirolidin, piperidin, piperazin, N-metilpiperazin, morfolin,
i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja formule X ili XI, u kojima je A1 izborno supstituisani fenil.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja formule X ili XI, u kojima Z predstavlja —NH—.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja formule X ili XI, u kojima Z predstavlja —O—.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja formule X ili XI, u kojima R1a i R2a predstavljaju vodonik.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja formule X ili XI, u kojima:
W1 i W2 su N i W3 je CH;
A1 je odabran iz grupe koja se sastoji od izborno supstituisanog fenila i izborno supstituisanog piridila;
Z predstavlja —O—; i
R1a i R2a predstavljaju vodonik,
i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja formule XIV:
i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojoj A1 , W1 , W2 , W3 i Z predstavljaju kao što je prethodno definisano u vezi sa formulom I.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja formule XV:
i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati, u kojoj A1 , W1 , W2 , W3 i Z predstavljaju kao što je prethodno definisano u vezi sa formulom I.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja formule XIV ili XV, u kojima:
W1 i W2 su N i W3 je CH; ili
W1 i W3 su N i W2 je CH; ili
W2 i W3 su N i W1 je CH;
A1 je odabran iz grupe koja se sastoji od izborno supstituisanog fenila i izborno supstituisanog piridila; i
Z je odabran iz grupe koja se sastoji od —O— i —NH—,
i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja formule XIV ili XV, u kojima je A1 izborno supstituisani fenil.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja formule XIV ili XV, u kojima je A1 izborno supstituisani piridil.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja formule XIV ili XV, u kojima Z predstravlja —NH—.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja formule XIV ili XV, u kojima Z predstavlja —O—.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja formule XIV ili XV, u kojima:
W1 i W2 su N i W3 je CH;
A1 je odabran iz grupe koja se sastoji od izborno supstituisanog fenila i izborno supstituisanog piridila; i
Z predstavlja —NH—,
i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja bilo koje od formula I-XV, u kojima je A1 supstituisani piridil koji ima jedan ili dva supstituenta ili supstituisani fenil koji ima jedan, dva, ili tri supstituenta.
Pronalazak se odnosi na jedinjenja bilo koje od formula I-XV, u kojima je A1 supstituisani piridil koji ima jedan ili dva supstituenta ili supstituisani fenil koji ima jedan, dva ili tri supstituenta, pri čemu je svaki supstituent nezavisno izabran iz grupe koja se sastoji od halo, cijano, hidroksi, amino, haloalkil, alkoksi, haloalkoksi i alkil grupe.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja bilo koje od formula I-XV, u kojima je A1 supstituisani piridil koji ima jedan supstituent ili supstituisani fenil koji ima jedan ili dva supstituenta, pri čemu je svaki supstituent nezavisno izabran iz grupe koja se sastoji od halo, cijano, hidroksi, amino, haloalkil, alkoksi, haloalkoksi i alkil grupe.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja bilo koje od formula I-XV, u kojima je A1 supstituisani piridil koji ima jedan supstituent ili supstituisani fenil koji ima jedan ili dva supstituenta, pri čemu je svaki supstituent nezavisno izabran iz grupe koja se sastoji od fluoro, hloro, cijano, C1-4haloalkil, (npr. F3C—), C1-4haloalkoksi, (npr., F3CO—), C1-4alkoksi i C1-C4alkil grupe.
U drugom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska su jedinjenja iz TABELE 2, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i solvati.
*Označena jedinjenja su referentna jedinjenja.
Hemijski nazivi primera jedinjenja su obezbeđeni u TABELI 3.
TABELA 3
*Označena jedinjenja su referentna jedinjenja.
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "alkil", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, odnosi se na ravni ili razgranati alifatični ugljovodonični lanac koji sadrži od jednog do dvanaest atoma ugljenika (tj., C1-12alkil) ili naznačeni broj atoma ugljenika (tj., C1alkil kao što je metil, C2alkil kao što je etil, C3alkil kao što je propil ili izopropil, itd). U jednom primeru izvođenja, alkil grupa je odabrana iz C1-10alkil grupe ravnog lanca. U drugom primeru izvođenja, alkil grupa je odabrana iz C1-10alkil grupe razgranatog lanca. U drugom primeru izvođenja, alkil grupa je odabrana iz C1-6alkil grupe ravnog lanca. U drugom primeru izvođenja, alkil grupa je odabrana iz C1-6alkil grupe razgranatog lanca. U drugom primeru izvođenja, alkil grupa je odabrana iz C1-4alkil grupe ravnog lanca. U drugom primeru izvođenja, alkil grupa je odabrana iz C1-4alkil grupe razgranatog lanca. U drugom primeru izvođenja, alkil grupa je odabrana iz C2-4alkil grupe ravnog ili razgranatog lanca. Neograničavajući primeri C1-10alkil grupa uključuju metil, etil, propil, izopropil, butil, sek-butil, terc-butil, izo-butil, 3-pentil, heksil, heptil, oktil, nonil, decil, i slično. Neograničavajući primeri C1-4alkil grupa uključuju metil, etil, propil, izopropil, butil, sek-butil, terc-butil i izo-butil grupe.
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "izborno supstituisani alkil", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, znači da je prethodno definisani alkil ili nesupstituisan ili supstituisan sa jednim, dva, ili tri supstituenta nezavisno odabrana od nitro, haloalkoksi, ariloksi, aralkiloksi, alkiltio, sulfonamido, alkilkarbonil, arilkarbonil, alkilsulfonil, arilsulfonil, ureido, guanidino, karboksi, karboksialkil, cikloalkil grupe, i slično. U jednom primeru izvođenja, izborno supstituisani alkil je supstituisan sa dva supstituenta. U drugom primeru izvođenja, izborno supstituisani alkil je supstituisan sa jednim supstituentom. Neograničavajući primeri izborno supstituisanih alkil grupa uključuju —CH2CH2NO2, — CH2CH2CO2H, —CH2CH2SO2CH3, —CH2CH2COPh, —CH2C6H11, i slično.
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "cikloalkil", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, odnosi se na zasićene i delimično nezasićene (koji sadrže jednu ili dve dvogube veze) ciklične alifatične ugljovodonike koji sadrže od jedan do tri prstena koji imaju od tri do dvanaest atoma ugljenika (tj., C3-12cikloalkil) ili naznačeni broj ugljenika. U jednom primeru izvođenja, cikloalkil grupa ima dva prstena. U jednom primeru izvođenja, cikloalkil grupa ima jedan prsten. U drugom primeru izvođenja, cikloalkil grupa je odabrana iz C3-8cikloalkil grupe. U drugom primeru izvođenja, cikloalkil grupa je odabrana iz C3-
6cikloalkil grupe. Neograničavajući primeri cikloalkil grupa uključuju ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil, cikloheptil, ciklooktil, norbornil, dekalin, adamantil, cikloheksenil grupu, i slično.
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "izborno supstituisani cikloalkil", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, označava da je prethodno definisani cikloalkil ili nesupstituisan ili supstituisan sa jednim, dva, ili tri supstituenta nezavisno odabrana od halo, nitro, cijano, hidroksi, amino, alkilamino, dialkilamino, haloalkil, hidroksialkil, alkoksi, haloalkoksi, ariloksi, aralkiloksi, alkiltio, karboksamido, sulfonamido, alkilkarbonil, arilkarbonil, alkilsulfonil, arilsulfonil, ureido, guanidino, karboksi, karboksialkil, alkil, cikloalkil, alkenil, alkinil, aril, heteroaril, heterociklo, alkoksialkil, (amino)alkil, hidroksialkilamino, (alkilamino)alkil, (dialkilamino)alkil, (cijano)alkil, (karboksamido)alkil, merkaptoalkil, (heterociklo)alkil i (heteroaril)alkil grupe. U jednom primeru izvođenja, izborno supstituisani cikloalkil je supstituisan sa dva supstituenta. U drugom primeru izvođenja, izborno supstituisani cikloalkil je supstituisan sa jednim supstituentom. Neograničavajući primeri izborno supstituisanih cikloalkil grupa uključuju:
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "cikloalkenil", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, odnosi se na delimično nezasićenu cikloalkil grupu kao što je definisano u prethodnom tekstu. U jednom primeru izvođenja, cikloalkenil ima jednu ugljenik-ugljenik dvogubu vezu. U drugom primeru izvođenja, cikloalkenil grupa je odabrana iz C4-8cikloalkenil grupe. Primeri cikloalkenil grupe uključuju ciklopentenil, cikloheksenil i slično.
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "izborno supstituisani cikloalkenil", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, označava da je prethodno definisani cikloalkenil ili nesupstituisan ili supstituisan sa jednim, dva, ili tri supstituenta nezavisno odabrana od halo, nitro, cijano, hidroksi, amino, alkilamino, dialkilamino, haloalkil, monohidroksialkil, dihidroksialkil, alkoksi, haloalkoksi, ariloksi, aralkiloksi, alkiltio, karboksamido, sulfonamido, alkilkarbonil, arilkarbonil, alkilsulfonil, arilsulfonil, ureido, guanidino, karboksi, karboksialkil, alkil, cikloalkil, alkenil, alkinil, aril, heteroaril, heterociklo, alkoksialkil, (amino)alkil, hidroksialkilamino, (alkilamino)alkil, (dialkilamino)alkil, (cijano)alkil, (karboksamido)alkil, merkaptoalkil, (heterociklo)alkil i (heteroaril)alkil grupe. U jednom primeru izvođenja, izborno supstituisani cikloalkenil je supstituisan sa dva supstituenta. U drugom primeru izvođenja, izborno supstituisani cikloalkenil je supstituisan sa jednim supstituentom. U drugom primeru izvođenja, cikloalkenil je nesupstituisan.
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "alkenil", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, odnosi se na alkil grupu kao što je prethodno definisano, koja sadrži jednu, dve ili tri ugljenik-ugljenik dvogube veze. U jednom primeru izvođenja, alkenil grupa je odabrana iz C2-6alkenil grupe. U drugom primeru izvođenja, alkenil grupa je odabrana iz C2-4alkenil grupe. Neograničavajući primeri alkenil grupa uključuju etenil, propenil, izopropenil, butenil, sek-butenil, pentenil i heksenil.
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "izborno supstituisani alkenil", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, znači da je prethodno definisani alkenil ili nesupstituisan ili supstituisan sa jednim, dva ili tri supstituenta nezavisno odabrana od halo, nitro, cijano, hidroksi, amino, alkilamino, dialkilamino, haloalkil, hidroksialkil, alkoksi, haloalkoksi, ariloksi, aralkiloksi, alkiltio, karboksamido, sulfonamido, alkilkarbonil, arilkarbonil, alkilsulfonil, arilsulfonil, ureido, guanidino, karboksi, karboksialkil, alkil, cikloalkil, alkenil, alkinil, aril, heteroaril, ili heterociklo grupe.
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "alkinil", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, odnosi se na alkil grupu kako je prethodno definisano, koja sadrži od jedne do tri ugljenik-ugljenik trogube veze. U jednom primeru izvođenja, alkinil ima jednu ugljenik-ugljenik trogubu vezu. U jednom primeru izvođenja, alkinil grupa je odabrana iz C2-
6alkinil grupe. U drugom primeru izvođenja, alkinil grupa je odabrana iz C2-4alkinil grupe. Neograničavajući primeri alkinil grupa uključuju etinil, propinil, butinil, 2-butinil, pentinil i heksinil grupe.
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "izborno supstituisani alkinil", kako se ovde koristi samostalno, ili kao deo druge grupe, označava da je prethodno definisani alkinil ili nesupstituisan ili supstituisan sa jednim, dva ili tri supstituenta nezavisno odabrana od halo, nitro, cijano, hidroksi, amino, alkilamino, dialkilamino, haloalkil, hidroksialkil, alkoksi, haloalkoksi, ariloksi, aralkiloksi, alkiltio, karboksamido, sulfonamido, alkilkarbonil, arilkarbonil, alkilsulfonil, arilsulfonil, ureido, guanidino, karboksi, karboksialkil, alkil, cikloalkil, alkenil, alkinil, aril, heteroaril, ili heterociklo grupe.
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "haloalkil", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, odnosi se na alkil grupu supstituisanu sa jednim ili više atoma fluora, hlora, broma i/ili joda. U jednom primeru izvođenja, alkil grupa je supstituisans sa jednim, dva, ili tri atoma fluora i/ili hlora. U drugom primeru izvođenja, haloalkil grupa je odabrana iz C1-4haloalkil grupe. Neograničavajući primeri haloalkil grupa uključuju fluorometil, difluorometil, trifluorometil, pentafluoroetil, 1,1-difluoroetil, 2,2-difluoroetil, 2,2,2-trifluoroetil, 3,3,3-trifluoropropil, 4,4,4-trifluorobutil i trihlorometil grupe.
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "hidroksialkil", kako se ovde koristi samostalno, ili kao deo druge grupe, odnosi se na alkil grupu supstituisanu sa jednom ili više, npr., jednom, dve, ili tri, hidroksi grupe. U jednom primeru izvođenja, hidroksialkil grupa je monohidroksialkil grupa, tj., supstituisana je sa jednom hidroksi grupom. U drugom primeru izvođenja, hidroksialkil grupa je dihidroksialkil grupa, tj., supstituisana je sa dve hidroksi grupe. U drugom primeru izvođenja, hidroksialkil grupa je odabrana iz C1-4hidroksialkil grupe. Neograničavajući primeri hidroksialkil grupa uključuju hidroksimetil, hidroksietil, hidroksipropil i hidroksibutil grupe, kao što je 1-hidroksietil, 2-hidroksietil, 1,2-dihidroksietil, 2-hidroksipropil, 3-hidroksipropil, 3-hidroksibutil, 4-hidroksibutil, 2-hidroksi-1-metilpropil i 1,3-dihidroksiprop-2-il.
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "(cikloalkil)alkil", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, odnosi se na alkil grupu supstituisanu sa najmanje jednom izborno supstituisanom cikloalkil grupom. Neograničavajući primeri (cikloalkil)alkil grupa uključuju:
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "hidroksi(cikloalkil)alkil", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, odnosi se na (cikloalkil)alkil grupu supstituisanu sa najmanje jednom hidroksi grupom. Hidroksi grupa(e) može da bude na bilo kom dostupnom položaju. Neograničavajući primeri hidroksi(cikloalkil)alkil grupa uključuju:
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "alkoksi", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, odnosi se na izborno supstituisani alkil, izborno supstituisani cikloalkil, izborno supstituisani alkenil, ili izborno supstituisani alkinil vezan za završni atom kiseonika. U jednom primeru izvođenja, alkoksi grupa je odabrana iz C1-4alkoksi grupe. U drugom primeru izvođenja, alkoksi grupa je odabrana iz C1-4alkil grupe vezane za završni atom kiseonika, npr., metoksi, etoksi i terc-butoksi grupe.
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "alkiltio", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, odnosi se na atom sumpora supstituisan sa izborno supstituisanom alkil grupom. U jednom primeru izvođenja, alkiltio grupa je odabrana iz C1-4alkiltio grupe. Neograničavajući primeri alkiltio grupa uključuju —SCH3, i —SCH2CH3.
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "alkoksialkil", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, odnosi se na alkil grupu supstituisanu sa alkoksi grupom. Neograničavajući primeri alkoksialkil grupa uključuju metoksimetil, metoksietil, metoksipropil, metoksibutil, etoksimetil, etoksietil, etoksipropil, etoksibutil, propoksimetil, izo-propoksimetil, propoksietil, propoksipropil, butoksimetil, terc-butoksimetil, izobutoksimetil, sek-butoksimetil i pentiloksimetil.
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "heteroalkil", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo grupe, odnosi se na stabilmi ugljovodonični radikal ravnog ili razgranatog lanca koji sadrži od 1 do 10 atoma ugljenika i najmanje dva heteroatoma, koji mogu da budu isti ili različiti, odabrana od O, N, ili S, gde: 1) atom(i) azota i atom(i) sumpora mogu izborno da budu oksidovani; i/ili 2) atom(i) azota može izborno da bude kvaternizovan(i). Heteroatomi mogu da budu smešteni na bilo kojoj unutrašnjoj poziciji heteroalkil grupe ili na poziciji na kojoj je heteroalkil grupa povezana sa ostatkom molekula. U jednom primeru izvođenja, heteroalkil grupa sadrži dva atoma kiseonika. Neograničavajući primeri heteroalkil grupa uključuju —CH2OCH2CH2OCH3, —OCH2CH2OCH2CH2OCH3, —CH—2NHCH2CH2OCH2, —OCH2CH2NH2i —NHCH2CH2N(H)CH3.
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "haloalkoksi", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, odnosi se na haloalkil vezan za završni atom kiseonika. Neograničavajući primeri haloalkoksi grupa uključuju fluorometoksi, difluorometoksi, trifluorometoksi i 2,2,2-trifluoroetoksi grupu.
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "aril", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, odnosi se na monociklični ili biciklični aromatični prstenasti sistem koji ima od šest do četrnaest atoma ugljenika (tj., C6-C14aril). Neograničavajući primeri aril grupa uključuju fenil (označen skraćenicom "Ph"), naftil, fenantril, antracil, indenil, azulenil, bifenil, bifenilenil i fluorenil grupe. U jednom primeru izvođenja, aril grupa je odabrana od fenil ili naftil grupe.
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "izborno supstituisani aril", kako se ovde koristi samostalno, ili kao deo druge grupe, znači da je prethodno definisani aril ili nesupstituisan ili supstituisan sa jednim do pet supstituenata nezavisno odabranih od halo, nitro, cijano, hidroksi, amino, alkilamino, dialkilamino, haloalkil, hidroksialkil, alkoksi, haloalkoksi, ariloksi, aralkiloksi, alkiltio, karboksamido, sulfonamido, alkilkarbonil, arilkarbonil, alkilsulfonil, arilsulfonil, ureido, guanidino, karboksi, karboksialkil, alkil, cikloalkil, alkenil, alkinil, aril, heteroaril, heterociklo, alkoksialkil, (amino)alkil, hidroksialkilamino, (alkilamino)alkil, (dialkilamino)alkil, (cijano)alkil, (karboksamido)alkil, merkaptoalkil, (heterociklo)alkil, ili (heteroaril)alkil grupe. U jednom primeru izvođenja, izborno supstituisani aril je izborno supstituisani fenil. U jednom primeru izvođenja, izborno supstituisani fenil ima četiri supstituenta. U drugom primeru izvođenja, izborno supstituisani fenil ima tri supstituenta. U drugom primeru izvođenja, izborno supstituisani fenil ima dva supstituenta. U drugom primeru izvođenja, izborno supstituisani fenil ima jedan supstituent. Neograničavajući primeri supstituisanih aril grupa uključuju 2-metilfenil, 2-metoksifenil, 2-fluorofenil, 2-hlorofenil, 2-bromofenil, 3-metilfenil, 3-metoksifenil, 3-fluorofenil, 3-hlorofenil, 4-metilfenil, 4-etilfenil, 4-metoksifenil, 4-fluorofenil, 4-hlorofenil, 2,6-difluorofenil, 2,6-di-hlorofenil, 2-metil, 3-metoksifenil, 2-etil, 3-metoksifenil, 3,4-dimetoksifenil, 3,5-di-fluorofenil 3,5-di-metilfenil, 3,5-dimetoksi, 4-metilfenil, 2-fluoro-3-hlorofenil i 3-hloro-4-fluorofenil. Termin izborno supstituisani aril je određen tako da uključuje grupe koje imaju spojene izborno supstituisane cikloalkil i spojene izborno supstituisane heterociklo prstenove. Primeri uključuju
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "ariloksi", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, odnosi se na izborno supstituisani aril vezan za završni atom kiseonika. Neograničavajući primer ariloksi grupe je PhO—.
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "aralkiloksi" kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, odnosi se na aralkil grupu vezanu za završni atom kiseonika. Neograničavajući primer aralkiloksi grupe je PhCH2O—.
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "heteroaril" ili "heteroaromatični" se odnosi na monociklične i biciklične aromatične prstenaste sisteme koji imaju od 5 do 14 atoma u prstenu (tj., C5-C14heteroaril) i 1, 2, 3, ili 4 heteroatoma nezavisno odabrana od kiseonika, azota i sumpora. U jednom primeru izvođenja, heteroaril ima tri heteroatoma. U drugom primeru izvođenja, heteroaril ima dva heteroatoma. U drugom primeru izvođenja, heteroaril ima jedan heteroatom. U jednom primeru izvođenja, heteroaril je C5heteroaril. U drugom primeru izvođenja, heteroaril je C6heteroaril. Neograničavajući primeri heteroaril grupa uključuju tienil, benzo[b]tienil, nafto[2,3-b]tienil, tiantrenil, furil, benzofuril, piranil, izobenzofuranil, benzooksazonil, hromenil, ksantenil, 2H-pirolil, pirolil, imidazolil, pirazolil, piridil, pirazinil, pirimidinil, piridazinil, izoindolil, 3H-indolil, indolil, indazolil, purinil, izohinolil, hinolil, ftalazinil, naftiridinil, cinolinil, hinazolinil, pteridinil, 4aH-karbazolil, karbazolil, β-karbolinil, fenantridinil, akridinil, pirimidinil, fenantrolinil, fenazinil, tiazolil, izotiazolil, fenotiazolil, izoksazolil, furazanil i fenoksazinil. U jednom primeru izvođenja, heteroaril je odabran od tienila (npr., tien-2-il i tien-3-il), furila (npr., 2-furil i 3-furil), pirolila (npr., 1H-pirol-2-il i 1H-pirol-3-il), imidazolila (npr., 2H-imidazol-2-il i 2H-imidazol-4-il), pirazolila (npr., 1H-pirazol-3-il, 1H-pirazol-4-il i 1H-pirazol-5-il), piridila (npr., piridin-2-il, piridin-3-il i piridin-4-il), pirimidinila (npr., pirimidin-2-il, pirimidin-4-il, pirimidin-5-il i pirimidin-5-il), tiazolila (npr., tiazol-2-il, tiazol-4-il i tiazol-5-il), izotiazolila (npr., izotiazol-3-il, izotiazol-4-il i izotiazol-5-il), oksazolila (npr., oksazol-2-il, oksazol-4-il i oksazol-5-il) i izoksazolil (npr., izoksazol-3-il, izoksazol-4-il i izoksazol-5-il). Termin "heteroaril" je određen tako da takođe uključuje moguće N-okside. Primeri N-oksida uključuju piridil N-oksid i slično.
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "izborno supstituisani heteroaril", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, znači da je prethodno definisani heteroaril ili nesupstituisan ili supstituisan sa jednim do četiri supstituenta, npr., sa jednim ili dva supstituenta, nezavisno odabrana od halo, nitro, cijano, hidroksi, amino, alkilamino, dialkilamino, haloalkil, hidroksialkil, alkoksi, haloalkoksi, ariloksi, aralkiloksi, alkiltio, karboksamido, sulfonamido, alkilkarbonil, arilkarbonil, alkilsulfonil, arilsulfonil, ureido, guanidino, karboksi, karboksialkil, alkil, cikloalkil, alkenil, alkinil, aril, heteroaril, heterociklo, alkoksialkil, (amino)alkil, hidroksialkilamino, (alkilamino)alkil, (dialkilamino)alkil, (cijano)alkil, (karboksamido)alkil, merkaptoalkil, (heterociklo)alkil i (heteroaril)alkil grupe. U jednom primeru izvođenja, izborno supstituisani heteroaril ima jedan supstituent. U jednom primeru izvođenja, izborno supstituisan je izborno supstituisan piridil, tj., 2-, 3-, ili 4-piridil. Bilo koji dostupan atom ugljenika ili azota može da bude supstituisan. U drugom primeru izvođenja, izborno supstituisani heteroaril je izborno supstituisani indol.
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "heterocikl" ili "heterociklo", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, odnosi se na zasićene i delimično nezasićene (npr., koje sadrže jednu ili dve dvogube veze) ciklične grupe koje sadrže jedan, dva, ili tri prstena koji imaju od tri do četrnaest članova prstena (tj., 3- do 14-člani heterociklo) i najmanje jedan heteroatom. Svaki heteroatom je nezavisno izabran iz grupe koja se sastoji od kiseonika, sumpora, uključujući sulfoksid i sulfon, i/ili atoma azota, koji mogu da budu kvaternizovani. Termin "heterociklo" je određen tako da uključuje ciklične ureido grupe kao što je 2-imidazolidinon i ciklične amidne grupe kao što je β-laktam, γ-laktam, δ-laktam i ε-laktam. Termin "heterociklo" je određen tako da takođe uključuje grupe koje imaju spojene izborno supstituisane aril grupe, npr., indolinil. U jednom primeru izvođenja, heterociklo grupa je odabrana od 5- ili 6-člane ciklične grupe koja sadrži jedan prsten i jedan ili dva atoma kiseonika i/ili azota. Heterociklo može da bude izborno vezan za ostatak molekula preko atoma ugljenika ili azota. Neograničavajući primeri heterociklo grupa uključuju 2-imidazolidinon, piperidinil, morfolinil, piperazinil, pirolidinil i indolinil.
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "izborno supstituisani heterociklo", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, znači da je prethodno definisani heterociklo ili nesupstituisan ili supstituisan sa jednim do četiri supstituenta nezavisno odabrana od halo, nitro, cijano, hidroksi, amino, alkilamino, dialkilamino, haloalkil, hidroksialkil, alkoksi, haloalkoksi, ariloksi, aralkiloksi, alkiltio, karboksamido, sulfonamido, alkilkarbonil, arilkarbonil, alkilsulfonil, arilsulfonil, ureido, guanidino, karboksi, karboksialkil, alkil, cikloalkil, alkenil, alkinil, aril, heteroaril, heterociklo, alkoksialkil, (amino)alkil, hidroksialkilamino, (alkilamino)alkil, (dialkilamino)alkil, (cijano)alkil, (karboksamido)alkil, merkaptoalkil, (heterociklo)alkil, (heteroaril)alkil grupe, i slično. Do supstitucije može da dođe na bilo kom dostupnom atomu ugljenika ili azota, i može da se obrazuje spirocikl. Neograničavajući primeri izborno supstituisanih heterociklo grupa uključuju:
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "amino", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, odnosi se na —NH2.
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "alkilamino", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, odnosi se na —NHR<15>, u kojoj R<15>predstavlja alkil.
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "dialkilamino", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, odnosi se na —NR<16a>R<16b>, u kojoj su R<16a>i R<16b>nezavisno jedan od drugog alkil ili R16a i R16b zajedno obrazuju 3- do 8-članu izborno supstituisanu heterociklo grupu.
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "hidroksialkilamino", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, odnosi se na —NHR<17>, u kojoj R<17>predstavlja hidroksialkil.
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "arilamino", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, odnosi se na —NR<18a>R<18b>, u kojoj R<18a>predstavlja izborno supstituisani aril i R18b je vodonik ili alkil.
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "cikloalkilamino", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, odnosi se na —NR<19a>R<19b>, u kojoj R<19a>predstavlja izborno supstituisani cikloalkil i R19b predstavlja vodonik ili alkil.
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "heteroarilamino", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, odnosi se na —NR<20a>R<20b>u kojoj R<20a>predstavlja izborno supstituisani heteroaril i R20b predstavlja vodonik ili alkil.
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "heterocikloamino", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, odnosi se na —NR<21a>R<21b>u kojoj R<21a>predstavlja izborno supstituisani heterociklo i R21b predstavlja vodonik ili alkil.
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "(amino)alkil", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, odnosi se na alkil grupu supstituisanu amino grupom. Neograničavajući primeri amino alkil grupa uključuju —CH2CH2NH2, —CH2CH2CH2NH2, —CH2CH2CH2CH2NH2i slično.
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "diaminoalkil", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, odnosi se na alkil grupu supstituisanu sa dve amino grupe. Neograničavajući primer diaminoalkila uključuje —CH2CH(NH2)CH2CH2NH2.
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "(alkilamino)alkil", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, odnosi se na alkil grupu supstituisanu alkilamino grupom. Neograničavajući primer (alkilamino)alkil grupe je —CH2CH2N(H)CH3.
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "(dialkilamino)alkil", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, odnosi se na alkil grupu supstituisanu dialkilamino grupom. Neograničavajući primer (dialkilamino)alkil grupe je —CH2CH2N(CH3)2.
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "(cijano)alkil", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, odnosi se na alkil grupu supstituisanu sa jednim ili više cijano, npr., —CN, grupa. Neograničavajući primeri (cijano)alkil grupa uključuju — CH2CH2CN, —CH2CH2CH2CN i —CH2CH2CH2CH2CN.
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "karboksamido", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, odnosi se na radikal formule —C(═O)NR<24a>R<24b>, u kojoj R24a i R24b predstavljaju svaki nezavisno vodonik, izborno supstituisani alkil, izborno supstituisani aril, ili izborno supstituisani heteroaril, ili R24a i R24b uzeti zajedno sa azotom za koji su vezani obrazuju 3- do 8-članu heterociklo grupu. U jednom primeru izvođenja, R<24a>i R24b su svaki nezavisno vodonik ili izborno supstituisani alkil. Neograničavajući primeri karboksamido grupa uključuju —CONH2, —CON(H)CH3, CON(CH3)2i CON(H)Ph.
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "(karboksamido)alkil", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, odnosi se na alkil grupu sa karboksamido grupom. Neograničavajući primeri (karboksamido)alkil grupa uključuju —CH2CONH2, —C(H)CH3— CONH2i —CH2CON(H)CH3.
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "sulfonamido", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, odnosi se na radikal formule —SO2NR23aR23b, u kojoj R23a i R23b predstavljaju nezavisno jedan od drugog vodonik, izborno supstituisani alkil, ili izborno supstituisani aril, ili R23a i R23b uzeti zajedno sa azotom za koji su vezani obrazuju 3-do 8-članu heterociklo grupu. Neograničavajući primeri sulfonamido grupa uključuju — SO2NH2, —SO2N(H)CH3i —SO2N(H)Ph.
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "alkilkarbonil", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, odnosi se na karbonil grupu, tj., —C(═O)—, supstituisanu alkil grupom. Neograničavajući primer alkilkarbonil grupe predstavlja — COCH3.
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "arilkarbonil", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, odnosi se na karbonil grupu, tj., —C(═O)—, supstituisanu izborno supstituisanom aril grupom. Neograničavajući primer arilkarbonil grupe je —COPh.
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "alkilsulfonil", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, odnosi se na sulfonil grupu, tj., —SO2—, supstituisanu bilo kojom od prethodno pomenutih izborno supstituisanih alkil grupa. Neograničavajući primer alkilsulfonil grupe predstavlja —SO2CH3.
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "arilsulfonil", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, odnosi se na sulfonil grupu, tj., —SO2—, supstituisanu bilo kojom od prethodno pomenutih izborno supstituisanih aril grupa. Neograničavajući primer arilsulfonil grupe je —SO2Ph.
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "merkaptoalkil", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, odnosi se na bilo koju od prethodno pomenutih alkil grupa supstituisanih —SH grupom.
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "karboksi", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, odnosi se na radikal formule —COOH.
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "karboksialkil", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, odnosi se na bilo koju od prethodno pomenutih alkil grupa supstituisanih sa —COOH. Neograničavajući primer karboksialkil grupe je — CH2CO2H.
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "alkoksikarbonil", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, odnosi se na karbonil grupu, tj., —C(═O)—, supstituisanu alkoksi grupom. Neograničavajući primeri alkoksikarbonil grupa su —CO2Me i —CO2Et.
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "aralkil", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, odnosi se na alkil grupu supstituisanu sa jednom, dve, ili tri izborno supstituisane aril grupe. U jednom primeru izvođenja, aralkil grupa je C1-4alkil grupa supstituisana sa jednom izborno supstituisanom aril grupom. Neograničavajući primeri aralkil grupa uključuju benzil, fenetil, —CHPh2i —CH(4-F-Ph)2.
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "ureido", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, odnosi se na radikal formule —NR<22a>—C(═O)—NR<22b>R<22c>, u kojoj R22a predstavlja vodonik, alkil, ili izborno supstituisani aril, i R22b i R22c predstavljaju nezavisno jedan od drugog vodonik, alkil, ili izborno supstituisani aril, ili R22b i R22c uzeti zajedno sa azotom za koji su vezani obrazuju 4- do 8-članu heterociklo grupu. Neograničavajući primeri ureido grupa uključuju —NH—C(C═O)—NH2i —NH— C(C═O)—NHCH3.
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "guanidino", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, odnosi se na radikal formule —NR<25a>—C(═NR<26>)—NR<25b>R<25c>, u kojoj su R25a, R25b i R25c svaki nezavisno vodonik, alkil, ili izborno supstituisani aril, i R26 je vodonik, alkil, cijano, alkilsulfonil, alkilkarbonil, karboksamido, ili sulfonamido. Neograničavajući primeri guanidino grupa uključuju —NH—C(C═NH)—NH2, —NH— C(C═NCN)—NH2, —NH—C(C═NH)—NHCH3i slično.
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "azido", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, odnosi se na radikal formule —N3.
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "(heterociklo)alkil", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, odnosi se na alkil grupu supstituisanu sa jednom, dve, ili tri izborno supstituisane heterociklo grupe. U jednom primeru izvođenja, (heterociklo)alkil je C1-4alkil grupa supstituisana sa jednom izborno supstituisanom heterociklo grupom. Neograničavajući primeri (heterociklo)alkil grupa uključuju:
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "(heteroaril)alkil" kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, odnosi se na alkil grupu supstituisanu sa jednom, dve, ili tri izborno supstituisane heteroaril grupe. U jednom primeru izvođenja, (heteroaril)alkil grupa je C1-4alkil grupa supstituisana sa jednom izborno supstituisanom heteroaril grupom. Neograničavajući primeri (heteroaril)alkil grupa uključuju:
U svrhu predmetnog pronalaska, termin "alkilkarbonilamino", kako se ovde koristi samostalno ili kao deo druge grupe, odnosi se na alkilkarbonil grupu vezanu za amino grupu. Neograničavajući primer alkilkarbonilamino grupe predstavlja —NHCOCH3.
Predmetni pronalazak obuhvata prolekove bilo kog od opisanih jedinjenja. Kako se ovde koristi, prolekovima se smatraju bilo koji kovalentno vezani nosači koji oslobađaju aktivni matični lek in vivo. Uopšteno, takvi prolekovi će biti funkcionalni derivati jedinjenja pronalaska koji se lako mogu prevesti in vivo, npr., metabolisanjem, u traženo jedinjenje pronalaska. Uobičajeni postupci za izbor i pripremu pogodnih derivata - prolekova su opisani u, na primer, Design of Prodrugs, H. Bundgaard ed., Elsevier (1985); "Drug and Enzyme Targeting, Part A," K. Widder et al. eds., Vol. 112 in Methods in Enzymology, Academic Press (1985); Bundgaard, "Design and Application of Prodrugs," poglavlje 5 (pp. 113-191) u A Textbook of Drug Design and Development, P. Krogsgaard-Larsen and H. Bundgaard eds., Harwood Academic Publishers (1991); Bundgaard et al., Adv. Drug Delivery Revs.8:1-38 (1992); Bundgaard et al., J. Pharmaceut. Sci.77:285 (1988); i Kakeya et al., Chem. Pharm. Bull.32:692 (1984). Neograničavajući primeri prolekova uključuju estre ili amide jedinjenja pronalaska koji imaju hidroksialkil ili aminoalkil grupu kao supstituent, i oni mogu da budu pripremljeni u reakciji takvog matičnog jedinjenja sa anhidridima kao što je sukcinski anhidrid.
Predmetni pronalazak obuhvata bilo koje od jedinjenja pronalaska koje je izotopski obeleženo (tj., radioaktivno obeleženo) tako što ima jedan ili više atoma zamenjenih atomom koji ima drugačiju atomsku masu ili maseni broj. Primeri izotopa koji mogu da budu ugrađeni u opisana jedinjenja uključuju izotope vodonika, ugljenika, azota, kiseonika, fosfora, fluora i hlora, kao što su<2>H,<3>H,<11>C,<13>C,<14>C,<15>N,<18>O,<17>O,<31>P,<32>P,<35>S,<18>F i<36>Cl, redom, npr., 3H, 11C i 14C. Izotopski obeležena jedinjenja pronalaska mogu da se pripreme pomoću postupaka poznatih u stanju tehnike.
Predmetni pronalazak obuhvata radioaktivno obeležena jedinjenja pronalaska sa 3H, 11C, ili 14C i i upotrebu bilo kog od takvih jedinjenja kao radioliganda zbog njihove sposobnosti da se vežu za natrijumski kanal. Na primer, jedna upotreba obeleženih jedinjenja predmetnog pronalaska je karakterizacija specifičnog vezivanja za receptor. Druga upotreba obeleženog jedinjenja pronalaska predstavlja alternativu ispitivanju na životinjama u cilju procene odnosa između strukture i aktivnosti. Na primer, test za receptor može da bude izveden sa fiksiranom koncentracijom obeleženog jedinjenja pronalaska i rastućim koncentracijama ispitivanog jedinjenja u kompetitivnom testu. Na primer, jedinjenje pronalaska sa tricijumom može da se pripremi uvođenjem tricijuma u određeno jedinjenje, na primer, katalitičkom dehalogenacijom sa tricijumom. Ovaj postupak može da uključuje reakciju pogodnog halogenom-supstituisanog prekursora jedinjenja sa gasom tricijumom u prisustvu pogodnog katalizatora, na primer, Pd/C, u prisustvu ili odsustvu baze. Drugi pogodni postupci za pripremu tricijumovanih jedinjenja mogu da se nađu kod Filer, Isotopes in the Physical and Biomedical Sciences, Vol.1, Labeled Compounds (Part A), poglavlje 6 (1987). Jedinjenja obeležena sa<14>C mogu da budu pripremljena uključivanjem polaznih materijala koji sadrže<14>C ugljenik.
Neka od jedinjenja pronalaska mogu da sadrže jedan ili više asimetričnih centara i tako mogu da dovedu do pojave enantiomera, diastereomera i drugih stereoizomernih oblika. Predmetni pronalazak ima za cilj da obuhvati upotrebu svih takvih mogućih oblika, kao i njihove racemske i razložene racemske oblike i njihove smeše. Pojedinačni enantiomeri mogu da se razdvoje prema postupcima poznatim u stanju tehnike s obzirom na predmetni pronalazak. Kada ovde opisana jedinjenja sadrže olefinske dvogube veze ili druge centre geometrijske asimetrije, i osim ako nije drugačije naznačeno, namera je da ona uključuju oba E i Z geometrijska izomera. Namera je da svi tautomeri budu takođe obuhvaćeni predmetnim pronalaskom.
Kako se ovde koristi, termin "stereoizomeri" je uopšteni termin za sve izomere individualnih molekula koji se razlikuju samo u orijentaciji svojih atoma u prostoru. To uključuje enantiomere i izomere jedinjenja sa više od jednog hiralnog centra koji nisu jedan drugom slike u ogledalu (diastereomeri).
Termin "hiralni centar" se odnosi na atom ugljenika za koji su vezane četiri različite grupe.
Termini "enantiomer" i "enantiomerni" se odnose na molekul koji ne može da se preklopi sa svojom slikom u ogledalu i stoga je optički aktivan pri čemu enantiomer rotira ravan polarizovane svetlosti u jednom smeru, a jedinjenje koje je njegova slika u ogledalu rotira ravan polarizovane svetlosti u suprotnom smeru.
Termin "racemski" se odnosi na smešu jednakih delova enantiomera i ta smeša je optički neaktivna.
Termin "razlaganje" se odnosi na izdvajanje, ili koncentrovanje ili osiromašivanje jednog od dva enantiomerna oblika molekula.
Termini "a" i "an" se odnose na jedan ili više.
Termin "lečiti", "lečenje" ili "tretman" je određen tako da obuhvata primenu jedinjenja predmetnog pronalaska na ispitanika u cilju poboljšanja ili izlečenja, uključujući preventivni i palijativni tretman. U jednom primeru izvođenja, termin "lečiti", "lečenje" ili "tretman" ima za cilj da obuhvati primenu jedinjenja predmetnog pronalaska na ispitanika u cilju poboljšanja ili izlečenja.
Termin "oko", kako se ovde koristi, u vezi sa izmerenom količinom, odnosi se na normalne varijacije u toj izmerenoj količini, kao što je očekivano od strane stručnjaka koji obavlja merenje i primenjuje nivo pažnje srazmeran cilju merenja i preciznosti merne opreme.
Predmetni pronalazak obuhvata pripremu i upotrebu soli jedinjenja pronalaska, uključujući netoksične farmaceutski prihvatljive soli. Primeri farmaceutski prihvatljivih adicionih soli uključuju neorganske i organske kisele adicione soli i bazne soli. Farmaceutski prihvatljive soli uključuju, ali bez ograničenja, soli metala kao što je natrijumova so, kalijumova so, cezijumova so i slično; soli zemnoalkalnih metala kao što je kalcijumova so, magnezijumova so i slično; soli organskih amina kao što je so trietilamina, so piridina, so pikolina, so etanolamina, so trietanolamina, so dicikloheksilamina, so N,N′dibenziletilendiamina i slično; neorganske kisele soli, kao što je hidrohlorid, hidrobromid, fosfat, sulfat i slično; organske kisele soli kao što je citrat, laktat, tartrat, maleat, fumarat, mandelat, acetat, dihloroacetat, trifluoroacetat, oksalat, format i slično; sulfonate kao što je metansulfonat, benzensulfonat, p-toluensulfonat i slično; i soli aminokiselina kao što je arginat, asparginat, glutamat i slično.
Kisele adicione soli mogu da se obrazuju mešanjem rastvora određenog jedinjenja pronalaska sa rastvorom farmaceutski prihvatljive netoksične kiseline kao što je hlorovodonična kiselina, fumarna kiselina, maleinska kiselina, ćilibarna kiselina, sirćetna kiselina, limunska kiselina, vinska kiselina, ugljena kiselina, fosforna kiselina, oksalna kiselina, dihlorsirćetna kiselina, ili slično. Bazne soli mogu da se obrazuju mešanjem rastvora određenog jedinjenja pronalaska sa rastvorom farmaceutski prihvatljive netoksične baze kao što je natrijum hidroksid, kalijum hidroksid, holin hidroksid, natrijum karbonat i slično.
Predmetni pronalazak obuhvata pripremu i upotrebu solvata jedinjenja pronalaska. Solvati obično ne menjaju značajno fiziološku aktivnost ili toksičnost jedinjenja, i kao takvi mogu da deluju kao farmakološki ekvivalenti. Termin "solvat", kako se ovde koristi, predstavlja kombinaciju, fizičku asocijaciju i/ili solvataciju jedinjenja predmetnog pronalaska sa molekulom rastvarača kao što je, npr. disolvat, monosolvat ili hemisolvat, gde je odnos molekula rastvarača prema jedinjenju predmetnog pronalaska oko 2:1, oko 1:1 ili oko 1:2, navedenim redom. Ova fizička asocijacija uključuje različite stepene jonske i kovalentne veze, uključujući vodoničnu vezu. U određenim slučajevima, solvat može da bude izolovan, kao kada je jedan ili više molekula rastvarača obuhvaćeno kristalnom rešetkom kristalne čvrste supstance. Stoga, "solvat" obuhvata i fazu rastvora i solvate koji mogu da se izoluju. Jedinjenja pronalaska mogu da budu prisutna u solvatisanim oblicima sa farmaceutski prihvatljivim rastvaračem, kao što je voda, metanol, etanol, i slično, i namera je da pronalazak uključuje i solvatisane i nesolvatisane oblike jedinjenja pronalaska. Jedna vrsta solvata je hidrat. "Hidrat" se odnosi na posebnu potgrupu solvata u kojoj je molekul rastvarača voda. Solvati uobičajeno mogu da deluju kao farmakološki ekvivalenti. Priprema solvata je poznata u struci. Videti, na primer, M. Caira et al, J. Pharmaceut. Sci., 93(3):601-611 (2004), gde je opisana priprema solvata flukonazola sa etil acetatom i sa vodom. Slična priprema solvata, hemisolvata, hidrata, i slično je opisana kod E. C. van Tonder et al., AAPS Pharm. Sci. Tech., 5(1):Ĉlanak 12 (2004), i A. L. Bingham et al., Chem. Commun. 603-604 (2001). Uobičajeni, neograničavajući, postupak pripreme solvata bi uključivao rastvaranje jedinjenja pronalaska u željenom rastvaraču (organskom, vodi, ili njihovoj smeši) na temperaturama iznad 20°C do oko 25°C, zatim hlađenje rastvora brzinom dovoljnom da se obrazuju kristali, i izdvajanje kristala poznatim postupcima, npr., filtracijom. Analitičke tehnike kao što je infrcrvena spektroskopija mogu da se upotrebe za potvrđivanje prisustva rastvarača u kristalu solvata.
Kako su jedinjenja pronalaska blokatori natrijumskih (Na+) kanala, brojne bolesti i stanja posredovana ulaskom jona natrijuma mogu da se leče korišćenjem ovih jedinjenja. Predmetni pronalazak je stoga uopšteno usmeren na postupak za lečenje poremećaja koji reaguju na blokiranje natrijumskih kanala kod životinje koja pati od, ili je u riziku da pati od, pomenutog poremećaja, pomenuti postupak obuhvata primenu na životinju efikasne količine jednog ili više jedinjenja pronalaska.
Predmetni pronalazak je dalje usmeren na postupak modulacije natrijumskih kanala kod životinje kojoj je to potrebno, pomenuti postupak obuhvata primenu na životinju najmanje jednog jedinjenja pronalaska u količini koja je efikasna u modulaciji.
Specifičnije, predmetni pronalazak obezbeđuje postupak lečenja moždanog udara, oštećenja neurona usled povrede glave, epilepsije, gubitka neurona nakon globalne i fokalne ishemije, bola (npr., akutnog bola, hroničnog bola, koji uključuje, ali nije ograničen na neuropatski bol, postoperativni bol i inflamatorni bol, ili hirurški bol), neurodegenerativnog poremećaja (npr., Alchajmerova bolest, amiotrofična lateralna skleroza (ALS), ili Parkinsonova bolest), migrene, manične depresije, tinitusa, miotonije, poremećaja pokreta, ili srčane aritmije, ili obezbeđivanje lokalne anestezije. U jednom primeru izvođenja, pronalazak obezbeđuje postupak za lečenje bola. U drugom primeru izvođenja, vrsta bola je hronični bol. U drugom primeru izvođenja, vrsta bola je neuropatski bol. U drugom primeru izvođenja, vrsta bola je postoperativni bol. U drugom primeru izvođenja, vrsta bola je inflamatorni bol. U drugom primeru izvođenja, vrsta bola je hirurški bol. U drugom primeru izvođenja, vrsta bola je akutni bol. U drugom primeru izvođenja, lečenje bola (npr., hroničnog bola, kao što je neuropatski bol, postoperativni bol, ili inflamatorni bol, akutni bol ili hirurški bol) je preventivno. U drugom primeru izvođenja, lečenje bola je palijativno. U svakom slučaju, takav postupak lečenja zahteva primenu količine jedinjenja pronalaska koja je terapijski efikasna za postizanje tretmana, na životinju kojoj je takav tretman potreban. U jednom primeru izvođenja, količina takvog jedinjenja je količina koja je efikasna u blokiranju natrijumskih kanala in vitro. U jednom primeru izvođenja, količina takvog jedinjenja je količina koja je efikasna u blokiranju natrijumskih kanala in vivo.
Hronični bol uključuje, ali nije ograničen na, inflamatorni bol, postoperativni bol, bol usled kancera, bol usled osteoartritisa povezan sa metastatskim kancerom, trigeminalnu neuralgiju, akutnu herpetičnu i postherpetičnu neuralgiju, dijabetičku neuropatiju, kauzalgiju, avulziju brahijalnog pleksusa, okcipitalnu neuralgiju, refleksnu simpatetičku distrofiju, fibromijalgiju, giht, bol u fantomskom ekstremitetu, bol pečenja, i druge oblike neuralgijskih, neuropatskih i idiopatskih bolnih sindroma.
Hronični somatski bol uopšteno nastaje kao rezultat inflamatornih odgovora na povredu tkiva kao što je uklještenje nerva, hirurški postupci, kancer ili artritis (Brower, Nature Biotechnology 18:387-391 (2000)).
Inflamatorni proces predstavlja složeni niz biohemijskih i ćelijskih događaja koji se aktiviraju kao odgovor na povredu tkiva ili prisustvo stranih supstanci (Levine, Inflammatory Pain, U: Textbook of Pain, Wall and Melzack eds., 3rd ed., 1994). Inflamacija se često odvija na mestu povrede tkiva, ili tamo gde se nalazi strana materija, i doprinosi procesu oporavka tkiva i isceljenju. Glavni znaci inflamacije uključuju eritem (crvenilo), toplotu, edem (oticanje), bol i gubitak funkcije (ibid.). Većina pacijenata sa inflamatornim bolom ne doživljava bol neprekidno, već doživi pojačani bol pri pomeranju ili dodirivanju mesta zahvaćenog inflamacijom. Inflamatorni bol uključuje, ali nije ograničen na, bol povezan sa osteoartritisom i reumatoidnim artritisom.
Hronični neuropatski bol predstavlja heterogena stanja bolesti sa nejasnom etiologijom. Kod hroničnog neuropatskog bola, bol može da bude posredovan višestrukim mehanizmima. Ova vrsta bola uopšteno potiče od povrede tkiva perifernog ili centralnog nervnog sistema. Sindromi uključuju bol povezan sa povredom kičmene moždine, multiple sklerozu, postherpetičnu neuralgiju, trigeminalnu neuralgiju, fantomski bol, kauzalgiju, i refleksnu simpatetičku distrofiju i bol u krstima. Hronični bol je drugačiji od akutnog bola po tome što pacijenti pate od abnormalnih bolnih senzacija koje mogu da se opišu kao spontani bol, neprekidni osećaj površinskog pečenja i/ili duboki tupi bol. Bol može da bude izazvan hiperalgezijom povezanom sa toplotom, hladnoćom i mehaničkom hiperalgezijom ili alodinijom povezanom sa toplotom, hladnoćom ili mehaničkom alodinijom.
Neuropatski bol može da bude izazvan povredom ili infekcijom perifernih senzornih nerava. On uključuje, ali nije ograničen na bol od povrede perifernog nerva, infekcije herpes virusom, dijabetesa, kauzalgije, pleksusne avulzije, neuroma, amputacije ekstremiteta i vaskulitisa. Neuropatski bol je takođe izazvan oštećenjem nerva zbog hroničnog alkoholizma, infekcije humanim virusom imunodeficijencije, hipotiroidizmom, uremijom, ili nedostatkom vitamina. Moždani udar (kičme ili mozga) i povreda kičmene moždine takođe mogu da izazovu neuropatski bol. Neuropatski bol povezan sa kancerom je posledica sabijanja susednih nerava, mozga, ili kičmene moždine prilikom rasta tumora. Osim toga, lečenje kancera, uključujući hemoterapiju i radioterapiju, može takođe da izazove oštećenje nerva.
Neuropatski bol uključuje, ali nije ograničen na bol izazvan povredom nerva kao što je, na primer, bol od koga pate dijabetičari.
Predmetni pronalazak je takođe usmeren na upotrebu jedinjenja pronalaska u proizvodnji leka za lečenje poremećaja koji reaguje na blokiranje natrijumskih kanala (npr., bilo kog od gore navedenih poremećaja) kod životinje koja pati od pomenutog poremećaja.
Opšta sinteza jedinjenja
Jedinjenja pronalaska se pripremaju korišćenjem postupaka poznatim stručnjacima u ovoj oblasti uzevši u obzir ovaj pronalazak. Na primer, jedinjenja formule II mogu da se pripreme prema Opštoj šemi 1.
Ukratko, 2,6-dihloropirimidin-4-karbonil hlorid (jedinjenje A) reaguje sa aminom, HNR1R2 , da bi se dobio 2,6-dihloropirimidin-4-karboksamid, jedinjenje B. Jedinjenje B reaguje sa R4Z—H, npr., (S)-metil 2-aminopropanoatom, (S)-2-aminopropanamidom, (S)-metil 3-amino-2-hidroksipropanoatom, (S)-etil 2-hidroksipropanoatom, da bi se dobilo jedinjenje C. Jedinjenje C reaguje sa dioksaborolanom (jedinjenje D) da bi se dobilo jedinjenje koje ima formulu II u kojoj W1 i W2 predstavljaju N i W3 predstavlja CH. Jedinjenja formule II u kojoj W1 i W3 predstavljaju N i W2 predstavlja CH se pripremaju na sličan način počevši od 4,6-dihloropirimidin-2-karbonil hlorida, i jedinjenja formule II u kojoj W2 i W3 predstavljaju N i W1 predstavlja CH se pripremaju na sličan način počevši od 2,4-dihloropirimidin-6-karbonil hlorida. Jedinjenja formule II u kojoj je A2 izborno supstituisani cikloalkil ili izborno supstituisani cikloalkenil se pripremaju na sličan način počevši od odgovarajućeg dioksaborolana, npr.,
Jedinjenja formule VIII mogu da se pripreme prema Opštoj šemi 2:
Ukratko, jedinjenje C (videti Opštu šemu 1) reaguje sa jedinjenjem E da bi se dobilo jedinjenje koje ima formulu VIII u kojoj W1 i W2 predstavljaju N i W3 predstavlja CH.
Jedinjenja formule IX mogu da se pripreme prema Opštoj šemi 3:
Ukratko, jedinjenje C (videti Opštu šemu 1) reaguje sa A<1>OH da bi se dobilo jedinjenje koje ima formulu IX u kojoj W1 i W2 predstavljaju N, W3predstavlja CH, i X predstavlja O.
Ispitivanje jedinjenja
Aktivnost jedinjenja pronalaska kao blokatora natrijumskog kanala je procenjena testovima za pokretanje natrijuma i/ili elektrofiziološkim testovima. Jedan aspekt predmetnog pronalaska se zasniva na upotrebi jedinjenja pronalaska kao blokatora natrijumskog kanala. Na osnovu ovog svojstva, jedinjenja pronalaska se smatraju korisnim za lečenje stanja ili poremećaja koji reaguju na blokiranje natrijumskih jonskih kanala, npr., moždanog udara, oštećenja neurona usled povrede glave, epilepsije, konvulzija, generalizovane epilepsije sa febrilnim konvulzijama, ozbiljne mioklonične epilepsije u ranom detinjstvu, gubitka neurona nakon globalne i fokalne ishemije, migrene, familijarne primarne eritromelalgije, paroksizmalnog ekstremnog poremećaja bola, cerebelarne atrofije, ataksije, distonije, tremora, mentalne retardacije, autizma, neurodegenerativnog poremećaja (npr., Alchajmerove bolesti, amiotrofične lateralne skleroze (ALS), ili Parkinsonove bolesti), manične depresije, tinitusa, miotonije, poremećaja pokreta, srčane aritmije, ili obezbeđivanje lokalne anestezije. Očekuje se takođe da će jedinjenja pronalaska biti efikasna u lečenju bola, npr., akutnog bola, hroničnog bola, koji uključuje, ali bez ograničenja neuropatski bol, postoperativni bol i inflamatorni bol, ili hirurški bol.
Još specifičnije, predmetni pronalazak je usmeren na jedinjenja pronalaska koja su blokatori natrijumskih kanala. Prema predmetnom pronalasku, ova jedinjenja koja imaju korisna svojstva blokiranja natrijumskog kanala ispoljavaju IC50za Nav1.1, Nav1.2, Nav1.3, Nav1.4, Nav1.5, Nav1.6, Nav1.7, Nav1.8, i/ili Nav1.9 od oko 100 μM ili manje, npr., oko 50 μM ili manje, oko 25 μM ili manje, oko 10 μM ili manje, oko 5 μM ili manje, ili oko 1 μM ili manje, u testovima za pokretanje natrijuma i/ili elektrofiziološkim testovima. U izvesnim primerima izvođenja, jedinjenja pronalaska ispoljavaju IC50za Nav1.7 od 100 μM ili manje, oko 50 μM ili manje, oko 25 μM ili manje, oko 10 μM ili manje, oko 5 μM ili manje, oko 1 μM ili manje, oko 0.5 μM ili manje, oko 0.1 μM ili manje, oko 0.05 μM ili manje, ili oko 0.01 μM ili manje. Aktivnost jedinjenja pronalaska u blokiranju Na<+>kanala može da se ispita korišćenjem postupaka poznatih u stanju tehnike i pomoću fluorescentnog snimanja i elektrofizioloških in vitro testova i/ili in vivo testova koji slede.
U jednom primeru izvođenja, jedinjenja pronalaska pokazuju da suštinski ne prolaze kroz krvno-moždanu barijeru CNS-a kod sisara. Takva jedinjenja se nazivaju "periferno ograničena" kako bi se naglasila njihova tkivna selektivnost za PNS u odnosu na CNS.
U jednom primeru izvođenja, odnos koncentracija periferno ograničenog jedinjenja pronalaska u PNS:CNS je oko 5:1, oko 10:1, oko 20:1, oko 30:1; oko 50:1; oko 100:1, oko 250:1, oko 500:1, oko 1000:1, oko 5.000:1, oko 10.000:1, ili više. Sposobnost prodiranja jedinjenja pronalaska u centralni nervni sistem može da se ispita korišćenjem in vitro i in vivo postupaka poznatih u stanju tehnike.
Protokoli In Vitro testova
FLIPR® testovi
Rekombinantna Nav1.7 ćelijska linija: In vitro testovi su izvedeni u rekombinantnoj ćelijskoj liniji koja eksprimira cDNK koja kodira alfa subjedinicu (Nav1.7, SCN9a, PN1, NE) humanog Nav1.7 (Pristupni br. NM—002977). Ćelijsku liniju su obezbedili istraživači sa Univerziteta Jejl (Cummins et al, J. Neurosci.18(23): 9607-9619 (1998)). Za dominantnu selekciju klonova koji eksprimiraju Nav1.7, ekspresioni plazmid je koeksprimirao gen za rezistenciju na neomicin. Ćelijska linija je konstruisana u ćelijskoj liniji humanog embrionalnog bubrega, HEK293, pod uticajem glavnog kasnog promotora CMV, i stabilni klonovi su selektovani primenom kloniranja graničnim razblaženjem i selekcijom antibiotikom upotrebom analoga neomicina, G418. Rekombinantne beta i gama subjedinice nisu uvođene u ovu ćelijsku liniju. Dodatne ćelijske linije koje eksprimiraju rekombinantni Nav1.7 kloniran iz drugih vrsta, sam, ili u kombinaciji sa različitim beta subjedinicama, gama subjedinicama ili šaperonima, mogu isto tako da se koriste.
Nerekombinantne ćelijske linije koje eksprimiraju prirodni Nav1.7: Alternativno, in vitro testovi mogu da se izvedu u ćelijskoj liniji koja eksprimira prirodni, nerekombinantni Nav1.7, kao što je hibridna ćelijska linija ND7/23 koja predstavlja hibrid mišjeg neuroblastoma ND7 i ganglija dorzalnog korena pacova (DRG), dostupna u Evropskoj kolekciji ćelijskih kultura (Kat br. 92090903, Salisbury, Wiltshire, Velika Britanija). Testovi takođe mogu da budu izvedeni u drugim ćelijskim linijama koje eksprimiraju prirodni, nerekombinantni Nav1.7, različitih vrsta, ili u kulturama svežih ili konzervisanih senzornih neurona, kao što su ćelije ganglije dorzalnog korena (DRG), izolovane iz različitih vrsta. Primarni skrining ili inverzni skrining drugih voltažno-zavisnih natrijumskih kanala može takođe da se izvede, i ćelijske linije mogu da se konstruišu korišćenjem postupaka poznatih u stanju tehnike, nabave kod saradnika ili iz komercijalnih ustanova, i one mogu da eksprimiraju rekombinantne ili prirodne kanale. Primarni inverzni skrining je opisan za jedan od natrijumskih kanala centralnog nervnog sistema, Nav1.2 (rBIIa), eksprimiran u HEK293 ćelijama-domaćinima (Ilyin et al., Br. J. Pharmacol. 144:801-812 (2005)). Izrada farmakološkog profila za ove inverzne skrininge je sprovedena pod uslovima sličnim onim za primarne ili alternativne testove za Nav1.7 opisane dalje u tekstu.
Održavanje ćelija: Osim ako nije drugačije naznačeno, reagensi za ćelijske kulture su nabavljeni od Mediatech of Herndon, VA. Rekombinantne Nav1.7/HEK293 ćelije su rutinski gajene u medijumu za rast koji se sastoji od Dulbecco-vog minimalnog esencijalnog medijuma koji sadrži 10%-tni fetalni goveđi serum (FBS, Hyclone, Thermo Fisher Scientific, Logan, UT), 100 U/mL penicilina, 100 μg/mL streptomicina, 2-4 mM L-glutamina i 500 mg/mL G418. Za prirodne, nerekombinantne ćelijske linije, selektivni antibiotik je izostavljen, i dodatne formulacije medijuma mogu da se primene po potrebni.
Pufer za test: Pufer za test je formulisan uklanjanjem 120 mL sveže, sterilne dH2O (Mediatech, Herndon, VA) iz boce od 1 L i dodavanjem 100 mL 10x HBSS koji ne sadrži Ca++ ili Mg++ (Gibco, Invitrogen, Grand Island, NY), nakon čega je dodato 20 mL 1.0 M Hepes, pH 7.3 (Fisher Scientific, BP299-100). Finalni pufer se sastojao od 20 mM Hepes, pH 7.3, 1.261 mM CaCl2, 0.493 mM MgCl2, 0.407 mM Mg(SO)4, 5.33 mM KCl, 0.441 mM KH2PO4, 137 mM NaCl, 0.336 mM Na2HPO4i 0.556 mM D-glukoze (Hanks et al., Proc. Soc. Exp. Biol. Med.71:196 (1949)), i ova jednostavna formulacija je uobičajeno predstavljala osnovni pufer tokom testa (tj., za sve korake ispiranja i dodavanja).
CoroNa™ Green AM Na<+>boja za primarni test fluorescencije: Fluorescentni indikator korišćen u primarnom testu fluorescencije bio je verzija boje CoroNa™ Green (Invitrogen, Molecular Probes, Eugene, OR) koja prolazi kroz ćelijsku membranu, i koja emituje svetlost u fluorescentnom opsegu (Harootunian et al., J. Biol. Chem. 264(32):19458-19467 (1989)). Intenzitet emisije, ali ne i opseg talasne dužine, povećava se kada je boja izložena Na<+>jonima, koje ona može da veže sa delimičnom selektivnošću. U ćelije koje eksprimiraju Nav1.7 ili druge natrijumske kanale, ubačena je boja CoroNa™ Green neposredno pre testa fluorescencije, i zatim, nakon stimulacije agonistom, pokretanje Na+ jona je detektovano kao protok Na+ jona iz vanćelijskog fluida u citoplazmu kroz pore aktiviranih natrijumskih kanala. Boja je skladištena u mraku u vidu lifilizovanog praha, a zatim je alikvot rastvoren neposredno pre postupka ubacivanja boje u ćelije, prema uputstvima proizvođača do koncentracije stok rastvora od 10 mM, u DMSO. On je zatim razblažen puferom za test do 4x koncentrovanog radnog rastvora, tako da je finalna koncentracija boje u puferu za bojenje ćelija bila 5 μM.
Boja osetljiva na membranski potencijal za alternativne testove fluorescencije: Fluorescentni indikator koji može da se koristi u alternativnim testovima fluorescencije je plava verzija boje osetljive na membranski potencijal (MDS, Molecular Devices, Sunnyvale, CA), boje koja detektuje promene u molekulima koje prate promene membranskog potencijala. Povećanje fluorescencije se očekuje ako stimulacija agonistom izazove promene membranskog potencijala. Ćelije koje eksprimiraju Nav1.7 ili druge natrijumske kanale se inkubiraju sa bojom osetljivom na membranski potencijal 30-60 minuta pre testa flurescencije. U slučaju verzije testa sa pre-stimulacijom KCl-om, boja i sve druge komponente se ispiraju neposredno pre testa, i boja se zatim zamenjuje. U verziji bez prestimulacije KCl-om, boja ostaje na ćelijama i ona se ne ispira niti zamenjuje. Boja se skladišti u mraku kao liofilizovani prah, i zatim se alikvot rastvara u puferu za test da bi se dobio 20x koncentrovani stok rastvor koji može da se koristi u toku nekoliko nedelja.
Agonisti: U testovima fluorescije korišćena su dva agonista u kombinaciji, naime 1) veratridin; i 2) otrov žute škorpije, Leiurus quinquestriatus hebraeus. Veratridin je mali molekul alkaloida koji olakšava „hvatanje" kanala u otvorenom stanju inhibicijom inaktivacije, a otrov škorpije je prirodni preparat koji uključuje peptidne toksine selektivne za različite podsetove voltažno-zavisnih natrijumskih kanala. Ovi toksini škorpije inhibiraju brzu inaktivaciju njihovih istorodnih ciljanih kanala. Stok rastvori agonista su pripremljeni u koncentraciji od 40 mM u DMSO (veratridin) i 1 mg/mL u dH2O (otrov škorpije), i zatim razblaženi da bi se napravio 4x ili 2x stok (zavisno od određenog testa) u puferu za test, finalne koncentracije od 100 μM (veratridin) i 10 μg/mL (otrov škorpije). Oba agonista su nabavljena od Sigma Aldrich, St. Louis, MO.
Jedinjenja koja se ispituju: Jedinjenja koja se ispituju su rastvorena u DMSO da bi se dobili stok rastvori koncentracije 10 mM. Stok rastvori su dalje razblaženi korišćenjem DMSO u koracima serijskog razblaženja od 1:3 sa 10 tačaka (10.000 μM, 3.333 μM, 1.111 μM, 370 μM, 123 μM, 41 μM, 14 μM, 4.6 μM, 1.5 μM i 0.5 μM). Stok rastvori su dalje razblaženi u puferu za test (1:125) kao 4x serijska razblaženja stoka sa DMSO koncentracije 0.8% (finalna [DMSO], u testu, kao komponente jedinjenja = 0.2%), tako da su finalne koncentracije jedinjenja u testu bile 20 μM, 6.7 μM, 2.2 μM, 0.74 μM, 0.25 μM i 0.08 μM, 0.03 μM, 0.01 μM, 0.003 μM i 0.001 μM. Ako je određena komponenta u testu ispoljila naročitu jačinu, tada je kriva koncentracije podešavana, npr., na 10 puta niže koncentracije, u cilju izvođenja ispitivanja doza-odgovor u relevantnijem opsegu koncentracija. Razblaženja jedinjenja su dodavana tokom koraka ubacivanja boje i koraka pre-stimulacije, i zatim ponovo tokom testa fluorescencije, rano u kinetičkom očitavanju. Razblaženja jedinjenja su dodavana u duple redove duž 80 bunarčića u sredini ploče od 96 bunarčića, dok su u potpunosti stimulisane i u potpunosti inhibirane kontrole (pozitivne i negativne) smeštene u gornja 4 bočna bunarčića i donja 4 bočna bunarčića, redom, sa leve i desne strane ploče za test.
Analiza podataka: Podaci su analizirani prema postupcima poznatim stručnjaku u ovoj oblasti ili korišćenjem GraphPad<®>Prism programa, verzije 4.0 ili novije (dostupne kod GraphPad Software, San Diego, CA) za određivanje vrednosti IC50za ispitivane objekte. Najmanje jedno standardno referentno jedinjenje je procenjivano tokom svakog eksperimenta.
FLIPR® ili FLIPRTETRA® test sa natrijumskom bojom sa KCl i pre-inkubacijom ispitivanog jedinjenja: Ćelije su pripremljene zasejavanjem rekombinantnih HEK293 ćelija ili drugih ćelija-domaćina koje eksprimiraju ili rekombinantnu ili nerekombinantnu, prirodnu, alfa subjedinicu Nav1.7, samu ili u kombinaciji sa različirim beta i gama subjedinicama pri gustini od ~40,000 ćelija/bunarčiću u crnu ploču sa 96 bunarčića providnog dna obloženu sa PDL. Test može da se prilagodi za format od 384 bunarčića ili 1.536 bunarčića, po želji, korišćenjem proporcionalno manje ćelija i manje medijuma. Ploča je zatim inkubirana u medijumu za rast, sa ili bez selektivnog antibiotika, preko noći na 37°C sa 5% CO2, 95% vlažnosti, u pripremi za test. Za inverzne skrininge drugih voltažno-zavisnih natrijumskih kanala, postupak je bio veoma sličan, mada optimalne gustine ćelija, medijum i sledeće komponente testa mogu da budu precizno podešene prema određenoj ćelijskoj liniji ili izoformi.
Sledećeg dana, na početku testa, medijum je odliven iz ćelija lupkanjem i bunarčići su isprani jednom sa 50 μl/bunarčiću pufera za test (1x Hank-ov balansirani slani rastvor bez natrijum bikarbonata ili fenol crvenog, 20 mM Hepes, pH 7.3) i zatim pre-inkubirani sa ispitivanim jedinjenjima, CoroNa™ Green AM natrijumskom bojom (za ispunjavanje ćelija) i KCl za repolarizaciju i sinhronizaciju kanala u čitavoj populaciji ćelija. Za ovaj korak ubacivanja boje i prestimulacije, komponente su dodate kao što sledi, odmah nakon koraka ispiranja: 1) prvo, razblaženja jedinjenja i kontrole su dodate kao 4x koncentrati u puferu za test u količini od 50 μL/bunarčiću; 2) CoroNa™ Green AM boja je razblažena iz stok rastvora do 20 μM u puferu za test (4x koncentrat) i dodata u ploču u količini od 50 μL /bunarčiću; i 3) konačno, rastvor od 180 mM KCl (2x) je pripremljen razblaživanjem 2M stok rastvora u puferu za test i ćelijama je dodato 100 μl/bunarčiću rastvora. Ćelije su inkubirane na 25°C u mraku 30 minuta pre nego što je njihova fluorescencija izmerena.
Iz ploča koje sadrže ćelije ispunjene bojom su zatim lupkanjem uklonjene preinkubacione komponente i ploče su isprane jednom sa 100 μL/bunarčiću pufera za test. Alikvoti od 100 μL/bunarčiću pufera za test su ponovo dodati u ploču, i „real-time" test je započet. Fluorescencija ćelija je merena korišćenjem fluorescentnog čitača ploča (FLIPRTETRA® ili FLIPR384®, MDS, Molecular Devices, Sunnyvale, CA). Uzorci su pobuđeni laserom ili izvorom svetlosti PMT (talasna dužina pobuđivanja = 470-495 nM) i emisija je filtrirana (talasna dužina emisije = 515-575 nM). Dodavanja jedinjenja i aktivatora kanala u ovom testu srednje-do-visoke propusne moći zasnovanom na ćelijama, izvedena su na fluorescentnom čitaču ploča i rezultati (izraženi kao relativne jedinice fluorescencije) su zabeleženi snimcima sa kamere na svakih 1-3 sekunde, zatim prikazani u realnom vremenu i sačuvani. Uopšteno, polazna linija je postavljena na 15 sekundi, sa snimcima kamere zabeleženim na svakih 1.5 sekundu, zatim su dodata ispitivana jedinjenja, i postavljena je druga polazna linija na 120 sekundi, sa snimcima kamere zabeleženim na svake 3 sekunde; i konačno, dodat je rastvor agonista (koji sadrži veratridin i otrov škorpije). Amplituda povećanja fluorescencije, koja nastaje kao rezultat vezivanja Na<+>jona za boju CoroNa™ Green, zabeležena je ~180 sekundi nakon toga. Rezultati su izraženi u relativnim jedinicama fluorescencije (RFU) i mogu da se odrede korišćenjem maksimalnog signala tokom drugog dela stimulacije; ili maksimuma od koga je oduzet minimum tokom celog perioda stimulacije agonistom; ili određivanjem cele površine ispod krive za čitav period stimulacije.
Test može takođe da bude izveden i kao skrining test sa ispitivanim jedinjenjima prisutnim u standardnim količinama (npr., 10 μM) u samo jednom ili dva bunarčića ploče sa više bunarčića, u toku primarnog skrininga. Pogoci u ovom skriningu su obično iscrpnije okarakterisani (višestruka ponavljanja), podvrgavanjem testu doza-odgovor ili kompetitivnim testovima i ispitivani inverznim skriningom za druge voltažno-zavisne natrijumske kanale ili druge biološki relevantne ciljne molekule.
FLIPR® ili FLIPRTETRA® test membranskog potencijala sa KCl i preinkubacijom sa ispitivanim jedinjenjem: Ćelije se pripremaju zasejavanjem rekombinantnih HEK293 ćelija ili drugih ćelija-domaćina koje eksprimiraju ili rekombinantnu ili nerekombinantnu, prirodnu, alfa subjedinicu Nav1.7, samu ili u kombinaciji sa različitim beta i gama subjedinicama, pri gustini od ~40,000 ćelija/bunarčiću u crnu ploču sa 96 bunarčića providnog dna obloženu sa PDL. Test može da se prilagodi za format od 384 bunarčića ili 1.536 bunarčića, po želji, korišćenjem proporcionalno manje ćelija i medijuma. Ploča se zatim inkubira u medijumu za rast, sa ili bez selektivnog antibiotika, preko noći na 37°C sa 5% CO2, 95% vlažnosti, u pripremi za test (videti, npr., Benjamin et. al., J. Biomol. Screen 10(4):365-373 (2005)). Za skrininge i inverzne skrininge drugih voltažno-zavisnih natrijumskih kanala, postupak je sličan, mada optimalne gustine ćelija, medijum i sledeće komponente testa mogu da budu precizno podešene prema određenoj ćelijskoj liniji ili izoformi natrijumskog kanala koji se ispituje.
Sledećeg dana, na početku testa, medijum se odlije lupkanjem iz ćelija i bunarčići se isperu jednom sa 50 μl/bunarčiću pufera za test (1x Hank-ov balansirani slani rastvor bez natrijum bikarbonata ili fenol crvenog, 20 mM Hepes, pH 7.3) i zatim pre-inkubiraju sa ispitivanim jedinjenjima, sa bojom osetljivom na membranski potencijal (za ispunjavanje ćelija) i sa KCl za repolarizaciju i sinhronizaciju kanala u čitavoj populaciji ćelija. Za ovaj korak ubacivanja boje i pre-stimulacije, komponente se dodju kao što sledi, odmah nakon koraka ispiranja: 1) prvo, razblaženja jedinjenja i kontrole se dodju kao 4x koncentrati u puferu za test u količini od 50 μL/bunarčiću; 2) boja osetljiva na promenu membranskog potencijala se razblažuje iz stok rastvora u puferu za test (4x koncentrat) i dodaje u ploču u količini od 50 μL /bunarčiću; i 3) konačno, rastvor od 180 mM KCl (2x) se priprema razblaživanjem 2M stok rastvora u puferu za test i ćelijama se dodaje 100 μl/bunarčiću rastvora. Ćelije se inkubiraju na 37°C u mraku 30-60 minuta pre nego što se njihova fluorescencija izmeri.
Iz ploča koje sadrže ćelije ispunjene bojom se zatim lupkanjem uklone preinkubacione komponente i ploče se isperu jednom sa 50 μL/bunarčiću pufera za test. Alikvoti od 50 μL/bunarčiću pufera za test se ponovo dodaju u ploču, i započinje se „real-time" test. Fluorescencija ćelija se meri korišćenjem fluorescentnog čitača ploča (FLIPR<TETRA®>ili FLIPR384®, MDS, Molecular Devices, Sunnyvale, CA). Uzorci se pobuđuju laserom ili izvorom svetlosti PMT (talasna dužina pobuđivanja = 510-545 nM) i emisije se filtriraju (talasna dužina emisije = 565-625 nM). Dodavanje jedinjenja (prvo) i aktivatora kanala (drugo) u ovom testu se izvodi na fluorescentnom čitaču ploča i rezultati, izraženi kao relativne jedinice fluorescencije (RFU), beleže snimcima kamere na svakih 1-3 sekunde, zatim prikazuju u realnom vremenu i skladište. Uopšteno, polazna linija se postavlja na 15 sekundi, sa snimcima kamere zabeleženim na svakih 1.5 sekundu, zatim se dodaju ispitivana jedinjenja, i postavlja druga polazna linija na 120 sekundi, sa snimcima kamere zabeleženim na svake 3 sekunde; i konačno se dodaje rastvor agonista (koji sadrži veratridin i otrov škorpije). Amplituda povećanja fluorescencije, koja nastaje kao rezultat detektovanja promene membranskog potencijala, zabeležava se ~120 sekundi nakon toga. Rezultati se izražavaju u relativnim jedinicama fluorescencije (RFU) i mogu da se odrede korišćenjem maksimalnog signala tokom drugog dela stimulacije; ili maksimuma od koga je oduzet minimum tokom celog perioda stimulacije; ili određivanjem površine ispod krive za čitav period stimulacije.
Test može takođe da bude izveden i kao skrining test sa ispitivanim jedinjenjima prisutnim u standardnim količinama (npr., 10 μM) u samo jednom ili dva bunarčića ploče sa više bunarčića, u toku primarnog skrininga. Pogoci u ovom skriningu se obično iscrpnije okarakterišu (višestruka ponavljanja), podvrgavanjem testu doza-odgovor ili kompetitivnim testovima i ispituju inverznim skriningom za druge voltažno-zavisne natrijumske kanale ili druge biološki relevantne ciljne molekule.
FLIPR® ili FLIPRTETRA® test sa natrijumskom bojom bez KCl i preinkubacije sa ispitivanim jedinjenjem: Ćelije se pripremaju zasejavanjem rekombinantnih HEK293 ćelija ili drugih ćelija-domaćina koje eksprimiraju ili rekombinantnu ili nerekombinantnu, prirodnu, alfa subjedinicu Nav1.7, samu ili u kombinaciji sa različirim beta i gama subjedinicama pri gustini od ~40,000 ćelija/bunarčiću u crnu ploču sa 96 bunarčića providnog dna obloženu sa PDL. Test može da se prilagodi za format od 384 bunarčića ili 1.536 bunarčića, po želji, korišćenjem proporcionalno manje ćelija i medijuma. Ploča se zatim inkubira u medijumu za rast, sa ili bez selektivnog antibiotika, preko noći na 37°C sa 5% CO2, 95% vlažnosti, u pripremi za test. Za inverzne skrininge drugih voltažno-zavisnih natrijumskih kanala, postupak je veoma sličan, mada optimalne gustine ćelija, medijum i sledeće komponente testa mogu da se podese prema određenoj ćelijskoj liniji ili izoformi.
Sledećeg dana, na početku testa, medijum se odliva lupkanjem iz ćelija i bunarčići se ispraju jednom sa 50 μl/bunarčiću pufera za test (1x Hank-ov balansirani slani rastvor bez natrijum bikarbonata ili fenol crvenog, 20 mM Hepes, pH 7.3). Boja osetljiva na membranski potencijal se zatim dodaje u svaki bunarčić ploče sa 96 bunarčića (50 μl /bunarčiću), iz sveže razblaženog uzorka stoka (sada 4x koncentrovana) u puferu za test. Ćelije se inkubiraju na 37°C u mraku u toku 30-60 minuta pre nego što se njihova fluorescencija izmeri.
U ovom standardnom testu za membranski potencijal, ploča sa 96 bunarčića koja sadrži ćelije ispunjene bojom se zatim postavi direktno na čitač ploča bez aspiriranja rastvora boje i bez bilo kog daljeg ispiranja ćelija. Fluorescencija ćelija se meri korišćenjem fluorescentnog čitača ploča (FLIPR<TETRA®>ili FLIPR384<®>, MDS, Molecular Devices, Sunnyvale, CA). Uzorci se pobuđuju laserom ili izvorom svetlosti PMT (talasna dužina pobuđivanja = 510-545 nM) i emisije se filtriraju (talasna dužina emisije = 565-625 nM). Dodavanja jedinjenja (prvo, 50 μl /bunarčiću iz 4x stok ploče), i zatim aktivatora kanala (drugo, 100 μl/bunarčiću iz 2x stok rastvora) u ovom kinetičkom testu se izvode na fluorescentnom čitaču ploča i rezultati, izraženi kao relativne jedinice fluorescencije (RFU), se beleže snimcima kamere na svakih 1-3 sekunde, zatim prikazuju u realnom vremenu i skladište. Uopšteno, polazna linija se postavlja na 15 sekundi, sa snimcima kamere zabeleženim na svakih 1.5 sekundu, zatim se dodaju ispitivana jedinjenja, i postavlja se druga polazna linija na 120 sekundi, sa snimcima kamere zabeleženim na svake 3 sekunde; i konačno, dodaje se rastvor agonista (koji sadrži veratridin i otrov škorpije). Amplituda povećanja fluorescencije, koja nastaje kao rezultat detektovanja promene membranskog potencijala, zabeleži se ~120 sekundi nakon toga. Rezultati se izražavaju u relativnim jedinicama fluorescencije (RFU) i mogu da se odrede korišćenjem maksimalnog signala tokom drugog dela stimulacije; ili maksimuma od koga je oduzet minimum tokom celog perioda stimulacije; ili određivanjem površine ispod krive za čitav period stimulacije.
Test takođe može da bude izveden i kao skrining test, sa ispitivanim jedinjenjima prisutnim u standardnim količinama (npr., 10 μM) u samo jednom ili dva bunarčića ploče sa više bunarčića, u toku primarnog skrininga. Pogoci u ovom skriningu se obično iscrpnije okarakterišu (višestruka ponavljanja), podvrgavanjem analizi doza-odgovor ili kompetitivnim testovima i ispituju inverznim skriningom za druge voltažno-zavisne natrijumske kanale ili druge biološki relevantne ciljne molekule.
Elektrofiziološki test
Ćelije: HEK-293 ćelije koje eksprimiraju hNav1.7 su zasejane u posudu za kulturu ćelija prečnika 35 mm obloženu sa poly-D-lizinom u standardnom medijumu za kulturu DMEM (Mediatech, Inc., Herndon, VA) i inkubirane u inkubatoru sa 5% CO2na 37°C. Kultura ćelija je korišćena otprilike 12-48 h nakon zasejavanja.
Elektrofiziologija: Na dan eksperimenta, sud prečnika 35 mm je postavljen na nosač invertnog mikroskopa opremljenog sistemom za perfuziju koji neprekidno snabdeva posudu za kulturu svežim medijumom za praćenje. Sistem za superfuziju pokretan gravitacijom je korišćen za primenu ispitivanih rastvora direktno na ćelije koje se procenjuju. Sistem se sastoji od niza staklenih pipeta povezanih sa uređajem za horizontalno pomeranje sa motorom. Izlaz injektora je bio namešten u položaj na približno 100 μm od ćelija koje se ispituju.
Struje cele ćelije su zabeležene korišćenjem konfiguracije za merenje na nivou cele ćelije metodom nametnute voltaže na deliću membrane, korišćenjem pojačivača Axopatch 200B (Axon Instruments, Foster City CA), 1322A A/D pretvarača (Axon Instruments) i pClamp softvera (v. 8; Axon Instruments) i podaci sačuvani na personalnom računaru. Obrazovani su spojevi sa otporom reda veličine gigaoma i konfiguracija za merenje na nivou cele ćelije je uspostavljena u modu nametnute voltaže, i struje kroz membranu stvorene pomoću hNav1.7 su zabeležene u neprekidnom (gap-free) modu. Borosilikatne staklene pipete imaju vrednosti otpora između 1.5 i 2.0 MΩ kada su napunjene rastvorom za pipete i serijski otpor (<5 MΩ) je bio kompenzovan 75-80%. Signali su uzorkovani na 50 kHz i niskopropusno filtrirani na 3 kHz.
Protokoli za voltažu: Nakon uspostavljanja konfiguracije za merenje na nivou cele ćelije u modu nametnute voltaže, pokrenuta su dva protokola za voltažu da bi se ustanovio: 1) nametnuti potencijal; i 2) potencijal na kome se obavlja ispitivanje za svaku ćeliju.
Blokada u stanju mirovanja: Da bi se odredio membranski potencijal na kome je većina kanala u stanju mirovanja, pokrenut je standardni protokol prebacivanja u inaktivno stanje mirovanja (SSIN) korišćenjem pre-impulsa od 100 ms i koraka depolarizacije od 10 mV. Nametnuti potencijal za ispitivanje blokade u stanju mirovanja (Vh1) bio je 20 mV hiperpolarizovaniji od prvog potencijala na kome je inaktivacija primećena u inaktivacionom protokolu.
Od ovog nametnutog potencijala pokrenut je standardni I-V protokol je da bi se odredio potencijal na kome se izaziva maksimalna struja (Imax). Taj potencijal je predstavljao potencijal na kome se obavlja ispitivanje (Vt).
Protokol za ispitivanje jedinjenja je predstavljao niz depolarizacija u trajanju od 10 ms, od Vh1(određenog pomoću SSIN) do Vt (određenog pomoću I-V protokola), ponavljanih svakih 10-15 sekundi. Nakon što je stabilan osnovni nivo uspostavljen, primenjena je visoka koncentracija ispitivanog jedinjenja (najviša koncentracija koju dozvoljava rastvorljivost ili ona koja obezbeđuje ~50% blokade) i procenjena blokada struje. Uklanjanje jedinjenja je postignuto superfuzijom kontrolnim rastvorom onda, kada je zapažena blokada u stanju mirovanja. Frakcioni odgovor je izračunat kao što sledi:
FR=I(nakon primene leka)/I(kontrola),
gde je I pik amplitude struje i korišćen je za procenu disocijacione konstante blokade u stanju mirovanja, Kr:
Kr=[lek]*{FR/(1−FR)},
gde [lek] predstavlja koncentraciju leka.
Blokada inaktivisanih kanala: Za procenu blokade inaktivisanih kanala, nametnuti potencijal je bio depolarišući tako da je amplituda struje bila snižena 20-50%, kada je dat impuls istog Vt kao prethodno. Veličina ove depolarizacije zavisi od početne amplitude struje i brzine gubitka struje zbog spore inaktivacije. Ovo je bio drugi nametnuti potencijal (Vh2). Smanjenje struje je beleženo da bi se odredila frakcija raspoloživih kanala na ovom potencijalu (h).
h=I@Vh2/Imax.
Na onom naponu membrane srazmerni deo kanala je u inaktivisanom stanju, i stoga inhibicija blokatorom uključuje interakciju i sa kanalima u mirovanju i sa inaktiviranim kanalima.
Da bi se odredila potentnost ispitivanog jedinjenja na inaktiviranim kanalima, izazvane su serije struja pomoću napona u koracima od 10 ms, od Vh2do Vtna svakih 10-15 sekundi. Nakon uspostavljanja stabilnog osnovnog nivoa, primenjene su niske koncentracije jedinjenja. Moguće je da je potrebno primeniti višestruke kumulativne koncentracije da bi se utvrdilo koja koncentracija će blokirati između 40-60% struje. Da bi se ponovo uspostavio osnovni nivo, preduzeto je ispiranje. Frakcioni odgovori su mereni u odnosu na projektovani osnovni nivo da bi se odredila vrednost Kapp.
Kapp=[lek]*{FR/(1−FR)},
gde [lek] predstavlja koncentraciju leka.
Ova vrednost Kapp, zajedno sa izračunatim vrdnostima Kri h, korišćena je za izračunavanje afiniteta jedinjenja prema inaktiviranim kanalima (Ki) primenom sledeće jednačine:
Ki=(1−h)/((1/Kapp)−(h/Kr)).
Rastvori i hemikalije: Za elektrofiziološke zapise spoljašnji rastvor je bio ili standardni, DMEM obogaćen dodatkom 10 mM HEPES (pH vrednost je podešena na 7.34 pomoću NaOH i osmolaritet je podešen na 320) ili Tyrodes slani rastvor (Sigma, SAD) obogaćenog dodatkom 10 mM HEPES (pH vrednost je podešena na 7.4 pomoću NaOH; osmolaritet = 320). Unutrašnji rastvor u pipeti je sadržao (u mM): NaCl (10), CsF (140), CaCl2(1), MgCl2(5), EGTA (11), HEPES (10: pH 7.4, 305 mOsm). Jedinjenja su bila pripremljena prvo kao serije stok rastvora u DMSO i zatim rastvorena u spoljašnjem rastvoru; sadržaj DMSO u finalnim razblaženjima nije prelazio 0.3%. U ovoj koncentraciji, DMSO nije uticao na struje natrijuma. Rastvor vehikuluma korišćen za uspostavljanje osnovnog nivoa je takođe sadržao 0.3% DMSO.
Analiza podataka: Podaci su analizirani bez povezivanja na internet, korišćenjem softvera Clampfit (pClamp, v. 8; Axon Instruments) i grafički prikazani korišćenjem softvera GraphPad Prizm (v.4.0 ili novija).
In Vivo testovi za bol
Moguće je ispitati antinociceptivnu aktivnost jedinjenja pronalaska u formalinskom modelu kao što je opisano kod Hunskaar et al., J. Neurosci. Methods 14: 69-76 (1985). Mužjaci miševa Swiss Webster NIH (20-30 g; Harlan, San Diego, CA) mogu da se koriste u svim eksperimentima. Hrana se ukida na dan eksperimenta. Miševi se smeštaju u posude od pleksiglasa u toku najmanje 1 časa da bi se aklimatizovali na okolinu. Nakon perioda aklimatizacije, miševima se meri težina i daje im se ili jedinjenje koje se ispituje primenjeno i.p. ili p.o., ili odgovarajuća zapremina vehikuluma (na primer, 10% Tween-80 ili 0.9% fiziološki rastvor, i drugi farmaceutski prihvatljivi vehikulumi) kao kontrola. Petnaest minuta nakon davanja doze i.p. putem, i 30 minuta nakon davanja doze p.o. putem, miševima se ubrizga formalin (20 μL 5%-tni rastvor formaldehida u fiziološkom rastvoru) u dorzalnu površinu zadnje desne šape. Miševi se premeštaju u posude od pleksiglasa i prati se koliko vremena provode ližući ili grizući šapu u koju je izvršeno ubrizgavanje. Periodi lizanja i griženja se beleže u intervalima od 5 minuta u toku 1 časa nakon ubrizgavana formalina. Svi eksperimenti se rade „na slepo" tokom ciklusa svetla. Rana faza odgovora na formalin se meri kao lizanje/griženje između 0-5 minuta, a kasna faza se meri od 15-50 minuta. Razlike između grupa tretiranih vehikulumom i grupa tretiranih lekom mogu da se analiziraju pomoću analize varijanse sa jednim faktorom (ANOVA). P vrednost <0.05 se smatra značajnom. Jedinjenja se smatraju efikasnim u lečenju akutnog i hroničnog bola ako ispoljavaju aktivnost blokiranja obe, i rane i druge faze aktivnosti lizanja šape izazvane formalinom.
In Vivo testovi za inflamatorni ili neuropatski bol
Životinje u testu: Svaki eksperiment koristi pacove težine između 200-260 g na početku eksperimenta. Pacovi se grupno smeštaju i imaju slobodan pristup hrani i vodi sve vreme, osim pre oralne primene ispitivanog jedinjenja kada se hrana uklanja tokom 16 časova pre davanja doze. Kontrolna grupa čini grupu za poređenje sa pacovima tretiranim jedinjenjem pronalaska. Na kontrolnu grupu se primenjuje nosač koji je korišćen za ispitivano jedinjenje. Zapremina nosača primenjenog na kontrolnu grupu je ista kao zapremina nosača i ispitivanog jedinjenja primenjenog na ispitivanu grupu.
Inflamatorni bol: Za procenu delovanja jedinjenja pronalaska na lečenje inflamatornog bola koristi se model inflamatornog bola sa Frojndovim kompletnim adjuvansom ("FCA"). Inflamacija indukovana sa FCA zadnje šape pacova je povezana sa razvojem perzistentne inflamatorne mehaničke i termičke hiperalgezije i obezbeđuje pouzdano predviđanje antihiperalgezijskog delovanja klinički korisnih analgetskih lekova (Bartho et al., Naunyn-Schmiedeberg's Archives of Pharmacol. 342:666-670 (1990)). U levu zadnju šapu svake životinje primenjuje se 50 μL 50% FCA putem injekcije u taban.24 časa nakon ubrizgavanja, procenjuje se odgovor životinje na štetni mehanički nadražaj određivanjem praga povlačenja šape (PWT), ili na štetni termički nadražaj određivanjem kašnjenja povlačenja šape (PWL), kao što je opisano dalje u tekstu. Pacovima se zatim ubrizgava jedna injekcija bilo ispitivanog jedinjenja ili 30 mg/kg jedinjenja koje predstavlja pozitivnu kontrolu (npr., indometacin). Odgovori na štetne mehaničke ili termičke nadražaje se zatim određuju 1, 3, 5 i 24 časa nakon primene (prim.). Procenat poništavanja hiperalgezije za svaku životinju se definiše kao:
Neuropatski bol: Za procenu dejstava ispitivanih jedinjenja na lečenje neuropatskog bola mogu da se koriste Seltzer-ov model ili Chung-ov model.
U Seltzer-ovom modelu, model neuropatskog bola koji potiče od parcijalnog podvezivanja išijadičnog nerva se koristi za proizvodnju neuropatske hiperalgezije kod pacova (Seltzer et al., Pain 43:205-218 (1990)). Delimično podvezivanje levog išijadičnog nerva se izvodi pod anestezijom inhalacijom smeše izofluran/O2. Nakon uvođenja u anesteziju, leva butina pacova se brije i išijadični nerv izvlači na nivou gornjeg dela butine kroz mali otvor i pažljivo čisti od okolnog vezivnog tkiva na mestu blizu trohantera, odmah iza tačke u kojoj se zadnji nerv bicepsa i polužilastog mišića grana sa zajedničkog išijadičnog nerva. U nerv se umeće šav od svile 7-0 pomoću zakrivljene, obrnuto sečene mini-igle 3/8 i čvrsto podvezuje tako da se dorzalni deo 1/3 do 1⁄2 debljine nerva drži u ligaturi. Rana se zatvara jednim mišićnim šavom (4-0 najlon (Vicryl)) i lepkom za tkivo Vetbond. Nakon operacije, ozleđena oblast se napraši antibiotskim prahom. Prividno tretirani pacovi podležu istom hirurškom postupku osim manipulacije išijadičnim nervom. Nakon operacije, životinjama se meri težina i stavljaju se na toplu podlogu dok se ne oporave od anestezije. Ţivotinje se zatim vraćaju u njihove kaveze do početka ispitivanja ponašanja. Procenjuje se odgovor životinja na štetne mehaničke nadražaje određivanjem PWT, kao što je opisano dalje u tekstu, pre operacije (osnovni nivo), zatim neposredno pre, i 1, 3 i 5 časova nakon primene leka, za zadnju šapu životinje. Procenat poništavanja neuropatske hiperalgezije se definiše kao:
U Chung-ovom modelu, koristi se podvezivanje spinalnog nerva (SNL) kao model neuropatskog bola za izazivanje mehaničke hiperalgezije, termičke hiperalgezije, i taktilne alodinije kod pacova. Operacija se izvodi pod anestezijom inhalacijom smeše izofluran/O2. Nakon uvođenja u anesteziju napravi se rez od 3 cm i levi paraspinalni mišići odvoje od trnastog nastavka na nivoima L4-S2. L6poprečni nastavak se pažljivo ukloni pomoću malog instrumenta ronžera da bi se vizuelno identifikovali spinalni nervi L4-L6. Levi L5(ili L5i L6) spinalni nerv(i) se izoluje(u) i čvrsto podveže(u) svilenom niti. Potvrđuje se potpuna hemostaza i rana zašiva korišćenjem neapsorbujućih šavova, kao što su najlonski šavovi ili spajalice od nerđajućeg čelika. Prividno tretirani pacovi podležu istom hirurškom postupku osim manipulacije spinalnim nervom(ima). Nakon operacije, životinjama se meri težina, ubrizgava im se subkutana (s.c.) injekcija fiziološkog rastvora ili Ringerovog laktata, ozleđena oblast se napraši antibiotskim prahom i životinje se drže na toploj podlozi dok se ne oporave od anestezije. Ţivotinje se zatim vraćaju u njihove kaveze do početka ispitivanja ponašanja. Procenjuje se odgovor životinja na štetne mehaničke nadražaje određivanjem PWT, kao što je opisano dalje u tekstu, pre operacije (osnovni nivo), zatim odmah pre i 1, 3 i 5 časova nakon primene jedinjenja pronalaska, za zadnju levu šapu životinje. Takođe se može proceniti odgovor životinja na štetne termičke nadražaje ili na taktilnu alodiniju, kao što je opisano dalje u tekstu. Chung-ov model neuropatskog bola je opisan kod Kim et al., Pain 50(3):355-363 (1992).
Taktilna alodinija: Osetljivost na neškodljive mehaničke nadražaje može da se meri kod životinja da bi se procenila taktilna alodinija. Pacovi se premeste u uzdignut kavez za ispitivanje sa podom od žičane mreže i ostave da se prilagode pet do deset minuta. Nizovi Von Frejovih monofilamenata se primenjuju na površinu tabana zadnje šape da bi se odredio prag povlačenja šape životinje. Prvi korišćeni filament ima težinu izvijanja od 9.1 gms (.96 log vrednost) i primenjuje se do pet puta da bi se videlo da li izaziva odgovor povlačenja šape. Ako životinja odgovara trzanjem, tada se sledeće najlakše vlakno u nizu primenjuje do pet puta da bi se videlo da li izaziva odgovor. Postupak se ponavlja sa sledećim lakšim vlaknima dok odgovor ne izostane i identitet najlakšeg vlakna koje izaziva odgovor se zabeleži. Ukoliko životinja ne daje odgovor povlačenja šape za početno vlakno od 9.1 gms, tada se primenjuje sledeće vlakno veće težine, dok vlakno ne izazove odgovor i identitet vlakna se zabeleži. Za svaku životinju, izvode se tri merenja za svaku vremensku tačku da bi se odredio prosečan prag povlačenja šape. Ispitivanje može da se izvede pre, i 1, 2, 4 i 24 časa nakon primene leka.
Mehanička hiperalgezija: Reprezentativna jedinjenja pronalaska su ispitana u modelu mehaničke hiperalgezije indukovane ligacijom spinalnog nerva kod pacova. Osetljivost na štetne mehaničke nadražaje je bila merena kod životinja korišćenjem testa pritiska na šapu da bi se procenila mehanička hiperalgezija. Kod pacova, pragovi povlačenja zadnje šape ("PWT"), mereni u gramima, kao odgovor na štetne mehaničke nadražaje bili su određeni korišćenjem analgezimetra (Model 7200, komercijalno dostupnog kod Ugo Basile iz Italije), kao što je opisao Stein (Biochemistry & Behavior 31: 451-455 (1988)). Šapa pacova je postavljena na malu platformu, i primenjena je težina koja postepeno raste do najviše vrednosti od 250 grama. Kao krajnja tačka je uzeta težina na kojoj je šapa potpuno povučena. PWT je bio određen jednom za svakog pacova u svakoj vremenskoj tački. PWT može da se meri samo u povređenoj šapi, ili i u povređenoj i u nepovređenoj šapi. Pacovi su ispitani pre operacije da bi se odredio osnovni nivo PWT, ili normalni PWT. Pacovi su ispitani ponovo 2 do 3 nedelje nakon operacije, pre, i u različitim vremenskim tačkama posle (npr. 1, 3, 5 i 24 časa) primene leka. Povećanje PWT nakon primene leka ukazuje na to da ispitivano jedinjenje smanjuje mehaničku hiperalgeziju.
Primeri jedinjenja br. 84, 98 i 99 su smanjili mehaničku hiperalgeziju indukovanu sa SNL kod pacova kada su primenjeni oralno u dozi od 100 mg/kg (vehikulum: 0.5% metil celuloza) jedan čas pre ispitivanja.
In vivo test za antikonvulzivnu aktivnost
Moguće je ispitati in vivo antikonvulzivnu aktivnost jedinjenja pronalaska nakon i.v. primene, p.o. primene, ili i.p. injekcije korišćenjem bilo kog od brojnih antikonvulzivnih ispitivanja kod miševa, uključujući test indukcije konvulzija maksimalnim elektrošokom (MES). Konvulzije maksimalnim elektrošokom se indukuju kod mužjaka NSA miševa teških između 15-20 g i mužjaka Sprague-Dawley pacova teških između 200-225 g, primenom struje (za miševe: 50 mA, 60 impulsa/sec, širina impulsa 0.8 msec, trajanje 1 sec, jednosmerna struja; za pacove: 99 mA, 125 impulsa/sec, širina impulsa 0.8 msec, trajanje 2 sec, jednosmerna struja), korišćenjem uređaja Ugo Basile ECT (Model 7801). Miševi se sputaju stezanjem opuštene kože na njihovoj zadnjoj strani, i kornealne elektrode obložene fiziološkim rastvorom se lagano drže na dve rožnjače. Pacovima je dozvoljeno da se slobodno kreću na radnom stolu i koriste se elektrode u vidu štipaljke za uho. Primeni se struja i životinje se posmatraju tokom perioda od 30 sekundi za pojavu toničnog odgovora ekstenzora zadnjih udova. Toničke konvulzije se definišu kao opružanje zadnjeg ekstremiteta za više od 90 u odnosu na ravan tela. Rezultati mogu da se razmatraju kao kvantni odgovor.
Farmaceutske kompozicije
Jedinjenja pronalaska mogu da se primene na sisara u obliku sirove hemikalije, bez bilo kojih drugih komponenti. Jedinjenja pronalaska takođe mogu da se primene na sisara kao deo farmaceutske kompozicije koja sadrži jedinjenje kombinovano sa pogodnim farmaceutski prihvatljivim nosačem. Takav nosač može da bude izabran od farmaceutski prihvatljivih ekscipijenasa i pomoćnih supstanci.
Farmaceutske kompozicije u okviru obima predmetnog pronalaska uključuju sve kompozicije u kojima je jedinjenje pronalaska kombinovano sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih nosača. U jednom primeru izvođenja, jedinjenje pronalaska je prisutno u kompoziciji u količini koja je efikasna za postizanje terapijske svrhe koja mu je namenjena.
Dok individualne potrebe mogu da se razlikuju, određivanje optimalnih opsega efikasnih količina svakog jedinjenja pripada znanju u ovoj oblasti. Tipično, jedinjenje pronalaska može da se primeni na sisara, npr., čoveka, oralno u dozi od oko 0.0025 do oko 1500 mg po kilogramu telesne težine sisara, ili kao ekvivalentna količina farmaceutski prihvatljive soli, proleka, ili solvata pomenutog jedinjenja, dnevno, za lečenje određenog poremećaja. Korisna oralna doza jedinjenja pronalaska primenjena na sisara je od oko 0.0025 do oko 50 mg po kilogramu telesne težine sisara, ili ekvivalentna količina farmaceutski prihvatljive soli, proleka, ili solvata pomenutog jedinjenja. Za intramuskularnu injekciju, doza tipično iznosi oko polovine oralne doze.
Oralna dozna jedinica može da sadrži od oko 0.01 mg do oko 1 g jedinjenja pronalaska, npr., oko 0.01 mg do oko 500 mg, oko 0.01 mg do oko 250 mg, oko 0.01 mg do oko 100 mg, 0.01 mg do oko 50 mg, npr., oko 0.1 mg do oko 10 mg, jedinjenja. Dozna jedinica može da se primeni jednom ili više puta dnevno, npr., kao jedna ili više tableta ili kapsula, od kojih svaka sadrži od oko 0.01 mg do oko 1 g jedinjenja, ili ekvivalentnu količinu farmaceutski prihvatljive soli, proleka ili solvata pomenutog jedinjenja.
Farmaceutska kompozicija predmetnog pronalaska može da se primeni na bilo koju životinju koja može da oseti povoljne efekte jedinjenja pronalaska. Najistaknutiji među takvim životinjama su sisari, npr., ljudi i domaće životinje, mada nije predviđeno da pronalazak bude time ograničen.
Farmaceutska kompozicija predmetnog pronalaska može da se primeni na bilo koji način kojim se postiže svrha koja joj je namenjena. Na primer, primena može da bude oralnim, parenteralnim, subkutanim, intravenskim, intramuskularnim, intraperitonealnim, transdermalnim, intranazalnim, transmukoznim, rektalnim, intravaginalnim ili bukalnim putem, ili inhalacijom. Primenjena doza i način primene će se razlikovati, zavisno od okolnosti u vezi sa određenim ispitanikom, i uzimajući u obzir činioce kao što su starost, pol, zdravstveno stanje, i težina primaoca, stanje ili poremećaj koji se leči, vrsta istovremenog tretmana, ukoliko je prisutan, učestalost tretmana, i priroda željenih efekata.
U jednom primeru izvođenja, farmaceutska kompozicija predmetnog pronalaska može da se primeni oralno i formulisana je u obliku tableta, dražeja, kapsula ili tečnog oralnog preparata. U jednom primeru izvođenja, oralna formulacija sadrži ekstrudirane višečestične sisteme koji sadrže jedinjenje pronalaska.
Alternativno, farmaceutska kompozicija predmetnog pronalaska može da se primeni rektalno, i formulisana je u obliku supozitorija.
Alternativno, farmaceutska kompozicija predmetnog pronalaska može da se primeni injekcijom.
Alternativno, farmaceutska kompozicija predmetnog pronalaska može da se primeni transdermalno.
Alternativno, farmaceutska kompozicija predmetnog pronalaska može da se primeni putem inhalacije ili intranazalnom ili transmukoznom primenom.
Alternativno, farmaceutska kompozicija predmetnog pronalaska može da se primeni intravaginalnim putem.
Farmaceutska kompozicija predmetnog pronalaska može da sadrži od oko 0.01 do 99 težinskih procenata, i poželjno od oko 0.25 do 75 težinskih procenata, aktivnog(ih) jedinjenja.
Postupak predmetnog pronalaska, kao što je postupak za lečenje poremećaja koji reaguje na blokadu natrijumskih kanala kod životinje kojoj je to potrebno, može dalje da obuhvata primenu drugog terapijskog sredstva na životinju u kombinaciji sa jedinjenjem pronalaska. U jednom primeru izvođenja, drugo terapijsko sredstvo se primenjuje u efikasnoj količini.
Efikasne količine drugog terapijskog sredstva su poznate stručnjacima u ovoj oblasti. Međutim, u delokrugu stručnjaka je da odredi optimalni opseg efikasne količine drugog terapijskog sredstva.
Jedinjenja pronalaska (tj., prvo terapijsko sredstvo) i drugo terapijsko sredstvo mogu da deluju aditivno ili, u jednom primeru izvođenja, sinergistički. Alternativno, drugo terapijsko sredstvo može da se koristi za lečenje poremećaja ili stanja koje je različito od poremećaja ili stanja za koje se primenjuje prvo terapijsko sredstvo, i taj poremećaj ili stanje može, i ne mora, da bude stanje ili poremećaj kako je ovde definisano. U jednom primeru izvođenja, jedinjenje pronalaska se primenjuje istovremeno sa drugim terapijskim sredstvom; na primer, može da se primeni pojedinačna kompozicija koja sadrži i efikasnu količinu jedinjenja pronalaska i efikasnu količinu drugog terapijskog sredstva. Prema tome, predmetni pronalazak dalje obezbeđuje farmaceutsku kompoziciju koja sadrži kombinaciju jedinjenja pronalaska, drugo terapijsko sredstvo, i farmaceutski prihvatljiv nosač. Alternativno, prva farmaceutska kompozicija koja sadrži efikasnu količinu jedinjenja pronalaska i druga farmaceutska kompozicija koja sadrži efikasnu količinu drugog terapijskog sredstva mogu istovremeno da se primene. U drugom primeru izvođenja, efikasna količina jedinjenja pronalaska se primenjuje pre ili posle primene efikasne količine drugog terapijskog sredstva. U ovom primeru izvođenja, jedinjenje pronalaska se primenjuje dok drugo terapijsko sredstvo ispoljava svoje terapijsko dejstvo, ili se drugo terapijsko sredstvo primenjuje dok jedinjenje pronalaska ispoljava svoje terapijsko dejstvo u lečenju poremećaja ili stanja.
Drugo terapijsko sredstvo može da bude opioidni agonist, neopioidni analgetik, nesteroidno antiinflamatorno sredstvo, sredstvo protiv migrene, inhibitor Cox-II, βadrenergički blokator, antikonvulzivno sredstvo, antidepresiv, antikancersko sredstvo, sredstvo za lečenje poremećaja zavisnosti, sredstvo za lečenje Parkinsonove bolesti i parkinsonizma, sredstvo za lečenje anksioznosti, sredstvo za lečenje epilepsije, sredstvo za lečenje konvulzija, sredstvo za lečenje moždanog udara, sredstvo za lečenje stanja svraba, sredstvo za lečenje psihoze, sredstvo za lečenje ALS, sredstvo za lečenje kognitivnog poremećaja, sredstvo za lečenje migrene, sredstvo za lečenje povraćanja, sredstvo za lečenje diskinezije, ili sredstvo za lečenje depresije, ili njihovih kombinacija.
Primeri korisnih opioidnih agonista uključuju, ali bez ograničenja, alfentanil, alilprodin, alfaprodin, anileridin, benzilmorfin, bezitramid, buprenorfin, butorfanol, klonitazen, kodein, dezomorfin, dekstromoramid, dezocin, diampromid, diamorfon, dihidrokodein, dihidromorfin, dimenoksadol, dimefeptanol, dimetiltiambuten, dioksafetil butirat, dipipanon, eptazocin, etoheptazin, etilmetiltiambuten, etilmorfin, etonitazen, fentanil, heroin, hidrokodon, hidromorfon, hidroksipetidin, izometadon, ketobemidon, levorfanol, levofenacilmorfan, lofentanil, meperidin, meptazinol, metazocin, metadon, metopon, morfin, mirofin, nalbufin, narcein, nikomorfin, norlevorfanol, normetadon, nalorfin, normorfin, norpipanon, opijum, oksikodon, oksimorfon, papaveretum, pentazocin, fenadokson, fenomorfan, fenazocin, fenoperidin, piminodin, piritramid, proheptazin, promedol, properidin, propiram, propoksifen, sufentanil, tilidin, tramadol, njihove farmaceutski prihvatljive soli, i njihove smeše.
U izvesnim primerima izvođenja, opioidni agonist je odabran od kodeina, hidromorfona, hidrokodona, oksikodona, dihidrokodeina, dihidromorfina, morfina, tramadola, oksimorfona, njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, i njihovih smeša.
Primeri korisnih neopioidnih analgetika uključuju nesteroidna antiinflamatorna sredstva, kao što je aspirin, ibuprofen, diklofenak, naproksen, benoksaprofen, flurbiprofen, fenoprofen, flubufen, ketoprofen, indoprofen, piroprofen, karprofen, oksaprozin, pramoprofen, muroprofen, trioksaprofen, suprofen, aminoprofen, tiaprofenska kiselina, fluprofen, bukloksična kiselina, indometacin, sulindak, tolmetin, zomepirak, tiopinak, zidometacin, acemetacin, fentiazak, klidanak, okspinak, mefenaminska kiselina, meklofenaminska kiselina, flufenaminska kiselina, nifluminska kiselina, tolfenaminska kiselina, diflurisal, flufenisal, piroksikam, sudoksikam, izoksikam, i njihove farmaceutski prihvatljive soli, i njihove smeše. Primeri drugih pogodnih neopioidnih analgetika uključuju sledeće, neograničavajuće, hemijske klase analgetika, antipiretika, nesteroidnih antiinflamatornih lekova: derivate salicilne kiseline, uključujući aspirin, natrijum salicilat, holin magnezijum trisalicilat, salsalat, diflunisal, salicilsalicilnu kiselinu, sulfasalazin i olsalazin; derivate para aminofenola uključujući acetaminofen i fenacetin; indol i inden sirćetne kiseline, uključujući indometacin, sulindak i etodolak; heteroaril sirćetne kiseline, uključujući tolmetin, diklofenak i ketorolak; antranilne kiseline (fenamate), uključujući mefenaminsku kiselinu i meklofenaminsku kiselinu; enolne kiseline, uključujući oksikame (piroksikam, tenoksikam) i pirazolidindione (fenilbutazon, oksifentartazon); i alkanone, uključujući nabumeton. Za detaljninji opis nesteroidnih antiinflamatornih lekova (NSAIDs), videti Paul A. Insel, Analgesic Antipiretic and Antiinflammatory Agents and Drugs Employed in the Treatment of Gout, u Goodman & Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics 617-57 (Perry B. Molinhoff and Raymond W. Ruddon eds., 9th ed 1996) i Glen R. Hanson, Analgesic, Antipiretic and Anti Inflammatory Drugs u Remington: The Science and Practice of Pharmacy Vol. II 1196-1221 (A. R. Gennaro ed.19th ed. 1995) koji su ovde inkorporirani u celosti po referenci. Pogodni Cox-II inhibitori i inhibitori 5-lipoksigenaze, kao i njihove kombinacije, su opisani u U.S. Pat. br 6,136,839, koja je ovde inkorporirana u celosti po referenci. Primeri korisnih inhibitora Cox II uključuju, ali bez ograničenja, rofekoksib i celekoksib.
Primeri korisnih sredstava protiv migrene uključuju, ali bez ograničenja, alpiroprid, bromokriptin, dihidroergotamin, dolasetron, ergokornin, ergokorninin, ergokriptin, ergonovin, ergot, ergotamin, flumedrokson acetat, fonazin, ketanserin, lizurid, lomerizin, metilergonovin, metizergid, metoprolol, naratriptan, oksetoron, pizotilin, propranolol, risperidon, rizatriptan, sumatriptan, timolol, trazodon, zolmitriptan, i njihove smeše.
Primeri korisnih β-adrenergičkih blokatora uključuju, ali bez ograničenja, acebutolol, alprenolol, amosulabol, arotinolol, atenolol, befunolol, betaksolol, bevantolol, bisoprolol, bopindolol, bukumolol, bufetolol, bufuralol, bunitrolol, bupranolol, butidrin hidrohlorid, butofilolol, karazolol, karteolol, karvedilol, celiprolol, cetamolol, kloranolol, dilevalol, epanolol, esmolol, indenolol, labetalol, levobunolol, mepindolol, metipranolol, metoprolol, moprolol, nadolol, nadoksolol, nebivalol, nifenalol, nipradilol, oksprenolol, penbutolol, pindolol, praktolol, pronetalol, propranolol, sotalol, sulfinalol, talinolol, tertatolol, tilisolol, timolol, toliprolol i ksibenolol.
Primeri korisnih antikonvulzivnih sredstava uključuju, ali bez ograničenja, acetilfeneturid, albutoin, aloksidon, aminoglutetimid, 4-amino-3-hidroksibuternu kiselinu, atrolaktamid, beklamid, buramat, kalcijum bromid, karbamazepin, cinromid, klometiazol, klonazepam, decimemid, dietadion, dimetadion, doksenitroin, eterobarb, etadion, etosuksimid, etotoin, felbamat, fluorezon, gabapentin, 5-hidroksitriptofan, lamotrigin, magnezijum bromid, magnezijum sulfat, mefenitoin, mefobarbital, metarbital, metetoin, metsuksimid, 5-metil-5-(3-fenantril)-hidantoin, 3-metil-5-fenilhidantoin, narkobarbital, nimetazepam, nitrazepam, okskarbazepin, parametadion, fenacemid, fenetarbital, feneturid, fenobarbital, fensuksimid, fenilmetilbarbiturna kiselina, fenitoin, fetenilat natrijum, kalijum bromid, pregabalin, primidon, progabid, natrijum bromid, solanum, stroncijum bromid, suklofenid, sultiam, tetrantoin, tiagabin, topiramat, trimetadion, valproična kiselina, valpromid, vigabatrin i zonisamid.
Primeri korisnih antidepresiva uključuju, ali bez ograničenja, binedalin, karoksazon, citalopram, (S)-citalopram, dimetazan, fenkamin, indalpin, indeloksazin hidroholorid, nefopam, nomifensin, oksitriptan, oksipertin, paroksetin, sertralin, tiazesim, trazodon, benmoksin, iproklozid, iproniazid, izokarboksazid, nialamid, oktamoksin, fenelzin, kotinin, roliciprin, rolipram, maprotilin, metralindol, mianserin, mirtazepin, adinazolam, amitriptilin, amitriptilinoksid, amoksapin, butriptilin, klomipramin, demeksiptilin, dezipramin, dibenzepin, dimetakrin, dotiepin, doksepin, fluacizin, imipramin, imipramin N-oksid, iprindol, lofepramin, melitracen, metapramin, nortriptilin, noksiptilin, opipramol, pizotilin, propizepin, protriptilin, hinupramin, tianeptin, trimipramin, adrafinil, benaktizin, bupropion, butacetin, dioksadrol, duloksetin, etoperidon, febarbamat, femoksetin, fenpentadiol, fluoksetin, fluvoksamin, hematoporfirin, hipericin, levofacetoperan, medifoksamin, milnacipran, minaprin, moklobemid, nefazodon, oksaflozan, piberalin, prolintan, pirisukcideanol, ritanserin, roksindol, rubidijum hlorid, sulpirid, tandospiron, tozalinon, tofenacin, toloksaton, tranilcipromin, L-triptofan, venlafaksin, viloksazin i zimeldin.
Primeri korisnih antikancerskih sredstava uključuju, ali bez ograničenja, acivicin, aklarubicin, akodazol hidrohlorid, akronin, adozelesin, aldesleukin, altretamin, ambomicin, ametantron acetat, aminoglutetimid, amsakrin, anastrozol, antramicin, asparaginazu, asperlin, azacitidin, azetepa, azotomicin, batimastat, benzodepa, bikalutamid, bisantren hidrohlorid, bisnafid dimesilat, bizelesin, bleomicin sulfat, brekvinar natrijum, bropirimin, busulfan, kaktinomicin, kalusteron, karacemid, karbetimer, karboplatin, karmustin, karubicin hidrohlorid, karzelesin, cedefingol, hlorambucil, cirolemicin i cisplatin.
Terapijska sredstva korisna za lečenje poremećaja zavisnosti uključuju, ali bez ograničenja, metadon, dezipramin, amantadin, fluoksetin, buprenorfin, agonist opijata, 3-fenoksipiridin, ili antagonist serotonina.
Primeri korisnih terapijskih sredstava za lečenje Parkinsonove bolesti i parkinsonizma uključuju, ali bez ograničenja, karbidopu/levodopu, pergolid, bromokriptin, ropinirol, pramipeksol, entakapon, tolkapon, selegilin, amantadin i triheksifenidil hidrohlorid.
Primeri korisnih terapijskih sredstava za lečenje anksioznosti uključuju, ali bez ograničenja, benzodiazepine, kao što je alprazolam, brotizolam, hlordiazepoksid, klobazam, klonazepam, klorazepat, demoksepam, diazepam, estazolam, flumazenil, flurazepam, halazepam, lorazepam, midazolam, nitrazepam, nordazepam, oksazepam, prazepam, kvazepam, temazepam i triazolam; nebenzodiazepinska sredstva, kao što je buspiron, gepiron, ipsapiron, tiospiron, zolpikon, zolpidem i zaleplon; sredstva za smirenje, kao što su barbiturati, npr., amobarbital, aprobarbital, butabarbital, butalbital, mefobarbital, metoheksital, pentobarbital, fenobarbital, sekobarbital i tiopental; i propandiol karbamate, kao što su meprobamat i tibamat.
Primeri korisnih terapijskih sredstava za lečenje epilepsije ili konvulzija uključuju, ali bez ograničenja, karbamazepin, etosuksimid, gabapentin, lamotrigin, fenobarbital, fenitoin, primidon, valproičnu kiselinu, trimetadion, benzodiazepine, gama-vinil GABA, acetazolamid i felbamat.
Primeri korisnih terapijskih sredstava za lečenje moždanog udara uključuju, ali bez ograničenja, antikoagulanse kao što je heparin, sredstva koja razbijaju ugruške kao što je streptokinaza ili tkivni aktivator plazminogena, sredstva koja smanjuju otok kao što je manitol ili kortikosteroidi i acetilsalicilna kiselina.
Primeri korisnih terapijskih sredstava za lečenje stanja svraba uključuju, ali bez ograničenja, naltrekson; nalmefen; danazol; triciklična jedinjenja kao što je amitriptilin, imipramin i doksepin; antidepresive kao što su oni navedeni dalje u tekstu; mentol; kamfor; fenol; pramoksin; kapsaicin; katran; steroide; i antihistaminike.
Primeri korisnih terapijskih sredstava za lečenje psihoze uključuju, ali bez ograničenja, fenotiazine kao što je hlorpromazin hidrohlorid, mesoridazin besilat i toridazin hidrohlorid; tioksantene kao što je hlorprotiksen i tiotiksen hidrohlorid; klozapin; risperidon; olanzapin; kvetiapin; kvetiapin fumarat; haloperidol; haloperidol dekanoat; loksapin sukcinat; molindon hidrohlorid; pimozid; i ziprasidon.
Primeri korisnih terapijskih sredstava za lečenje ALS uključuju, ali bez ograničenja, baklofen, neurotrofne faktore, riluzol, tizanidin, benzodiazepine kao što je klonazepan i dantrolen.
Primeri korisnih terapijskih sredstava za lečenje kognitivnih poremećaja uključuju, ali bez ograničenja, sredstva za lečenje demencije kao što je takrin; donepezil; ibuprofen; antipsihotične lekove kao što su tioridazin i haloperidol; i antidepresive kao što su oni navedeni dalje u tekstu.
Primeri korisnih terapijskih sredstava za lečenje migrene uključuju, ali bez ograničenja, sumatriptan; metizergid; ergotamin; kofein; i beta-blokatore kao što je propranolol, verapamil i divalproeks.
Primeri korisnih terapijskih sredstava za lečenje povraćanja uključuju, ali bez ograničenja, antagoniste 5-HT3 receptora kao što je ondansetron, dolasetron, granisetron, i tropisetron; antagoniste dopaminskog receptora kao što je prohlorperazin, tietilperazin, hlorpromazin, metoklopramid i domperidon; glukokortikoide kao što je deksametazon; i benzodiazepine kao što je lorazepam i alprazolam.
Primeri korisnih terapijskih sredstava za lečenje diskinezije uključuju, ali bez ograničenja, rezerpin i tetrabenazin.
Primeri korisnih terapijskih sredstava za lečenje depresije uključuju, ali bez ograničenja, triciklične antidepresive kao što je amitriptilin, amoksapin, bupropion, klomipramin, desipramin, doksepin, imipramin, maprotilin, nefazodon, nortriptilin, protriptilin, trazodon, trimipramin i venlafaksin; selektivne inhibitore resorpcije serotonina kao što je citalopram, (S)-citalopram, fluoksetin, fluvoksamin, paroksetin i setralin; inhibitore monoamin oksidaze kao što je izokarboksazid, pargilin, fenelzin i tranilcipromin; i psihostimulanse kao što je dekstroamfetamin i metilfenidat.
Farmaceutska kompozicija predmetnog pronalaska se proizvodi na način koji će biti sam po sebi poznat uzimajući u obzir ovaj pronalazak, na primer, uobičajenim mešanjem, granulacijom, pravljenjem dražeja, rastvaranjem, ekstruzijom, ili postupcima liofilizacije. Stoga, farmaceutske kompozicije za oralnu upotrebu mogu da se dobiju kombinovanjem aktivnog jedinjenja sa čvrstim ekscipijensima, izborno mlevenjem dobijene smeše i obradom smeše granula, nakon dodavanja pogodnih pomoćnih supstanci, ako je poželjno ili neophodno, da bi se dobila jezgra tableta ili dražeja.
Pogodni ekscipijensi uključuju punioce kao što su saharidi (na primer, laktoza, saharoza, manitol ili sorbitol), celulozne preparate, kalcijum fosfate (na primer, trikalcijum fosfat ili kalcijum hidrogen fosfat), kao i vezivna sredstva kao što je skrobna pasta (korišćenjem, na primer, kukuruznog skroba, pšeničnog skroba, pirinčanog skroba ili krompirovog skroba), želatin, tragakant, metil celuloza, hidroksipropil-metilceluloza, natrijum karboksi-metilceluloza, i/ili polivinil pirolidon. Ako je poželjno, jedno ili više sredstava za raspadanje može da se doda, kao što su prethodno pomenuti skrobovi i takođe karboksimetilskrob, unakrsno vezani polivinil pirolidon, agar, ili alginska kiselina ili njena so, kao što je natrijum alginat.
Pomoćna sredstva su tipično sredstva za podešavanje protočnosti i lubrikansi kao što je, na primer, silika, talk, stearinska kiselina ili njene soli (npr., magnezijum stearat ili kalcijum stearat), i polietilen glikol. Jezgra dražeja su obložena pogodnim prevlakama koje su otporne na želučane sokove. U ovu svrhu mogu da se koriste koncentrovani rastvori saharida koji mogu izborno da sadrže gumarabiku, talk, polivinil pirolidon, polietilen glikol i/ili titanijum dioksid, rastvori laka i pogodni organski rastvarači ili smeše rastvarača. Da bi se proizvele prevlake otporne na želučane sokove mogu da se koriste rastvori pogodnih celuloznih preparata, kao što je acetilceluloza ftalat ili hidroksipropilmetil-celuloza ftalat. Boje ili pigmenti mogu da se dodaju prevlakama za tablete ili dražeje, na primer, zbog identifikacije ili da bi se okarakterisale kombinacije doza aktivnog jedinjenja.
Primeri drugih farmaceutskih preparata koji mogu da se koriste oralno uključuju dvodelne kapsule napravljene od želatina, ili meke, zatvorene kapsule napravljene od želatina i plastifikatora kao što je glicerol ili sorbitol. Dvodelne kapsule mogu da sadrže jedinjenje u obliku granula, koje može da bude pomešano sa puniocima kao što je laktoza, vezivnim sredstvima kao što su skrobovi, i/ili lubrikansima kao što je talk ili magnezijum stearat i, izborno, stabilizatorima, ili u obliku multičestičnih ekstrudata. U mekim kapsulama, aktivna jedinjenja su poželjno rastvorena ili suspendovana u pogodnim tečnostima, kao što su masna ulja ili tečni parafin. Uz to, mogu da se dodaju stabilizatori.
Mogući farmaceutski preparati za rektalnu primenu uključuju, na primer, supozitorije, koje se sastoje od kombinacije jednog ili više aktivnih jedinjenja sa bazom za supozitorije. Pogodne baze za supozitorije uključuju prirodne i sintetičke trigliceride, i parafinske ugljovodonike, između ostalog. Takođe je moguće koristiti želatinske rektalne kapsule koje se sastoje od kombinacije aktivnog jedinjenja sa materijalom baze kao što je, na primer, tečni triglicerid, polietilen glikol, ili parafinski ugljovodonik.
Pogodne formulacije za parenteralnu primenu uključuju vodene rastvore aktivnog jedinjenja u obliku rastvorljivom u vodi kao što je, na primer, so rastvorljiva u vodi, alkalni rastvor, ili kiseli rastvor. Alternativno, suspenzija aktivnog jedinjenja može da bude pripremljena kao uljana suspenzija. Pogodni lipofilni rastvarači ili vehikulumi za takvu suspenziju mogu da uključuju masna ulja (na primer, susamovo ulje), sintetičke estre masnih kiselina (na primer, etil oleat), trigliceride, ili polietilen glikol kao što je polietilen glikol-400 (PEG-400). Vodena suspenzija može da sadrži jednu ili više supstanci da bi se povećala viskoznost suspenzije, uključujući, na primer, natrijum karboksimetil-celulozu, sorbitol, i/ili dekstran. Suspenzija može izborno da sadrži stabilizatore.
Sledeći primeri jedinjenja, kompozicija i postupaka predmetnog pronalaska su ilustrativni, ali nisu ograničavajući. Pogodne modifikacije i adaptacije različitih uslova i parametara se obično sreću u kliničkoj terapiji i koje su očigledne stručnjacima u pogledu ovog otkrića su u duhu i obimu ovog pronalaska.
PRIMERI
Za primere koji nisu sadržani u priloženim patentnim zahtevima se ne traži zaštita.
PRIMER 1
Priprema 2-fluoro-6-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenoksi)piridina Šema 1
Hermetički zatvorena staklena posuda pod pritiskom koja sadrži smešu 2,6-difluoropiridina (2.1 g, 18 mmol, Aldrich), 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenola (4 g, 18 mmol), i Cs2CO3(7 g, 21 mmol, Aldrich) u DMF (25 mL) je zagrevana na 80°C u toku 4 časa. Nakon hlađenja do sobne temperature, smeša je razblažena zasićenim slanim rastvorom (200 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2 x 200 mL). Spojeni organski slojevi su sušeni preko Na2SO4, filtrirani i koncentrovani na rotacionom isparivaču. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na silika gelu (0-10% EtOAc u heksanu) da bi se dobio 2-fluoro-6-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenoksi)piridin kao viskozna tečnost (3.6 g, 63%).1H NMR (400 MHz, CDCl3): 7.87 (2H, d, J=8.8 Hz), 7.76 (1H, q, J=7.6 Hz), 7.15 (2H, d, J=8.8 Hz), 6.73 (1H, dd, J=1.6, 8 Hz), 6.63 (1H, dd, J=2.8, 8 Hz), 1.37 (12H, s). LC/MS: m/z=316 [M+H]+ . Ukoliko nije drugačije naznačeno svi ovde saopšteni hemijski pomaci 1H NMR se označavaju prema delta (δ) skali.
Sledeći dioksaborolani su pripremljeni na sličan način:
5-fluoro-2-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenoksi)piridin:
1H NMR (400 MHz, CDCl3): 8.02 (1H, m), 7.85 (2H, m), 7.42 (1H, m), 7.1 (2H, m), 6.9 (1H, m), 1.32 (12H, s). LC/MS: m/z=316 [M+H]+ .
5-hloro-2-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenoksi)piridin:
1H NMR (400 MHz, CDCl3): 8.06 (1H, d, J=2.8 Hz), 7.78 (2H, d, J=8.4 Hz), 7.56 (1H, dd, J=2.8, 8.8 Hz), 7.04 (2H, d, J=8.4 Hz), 6.81 (1H, d, J=8.8 Hz), 1.27 (12H, s). LC/MS: m/z=322 [M+H]+ .
2-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenoksi)-6-(trifluorometil)piridin:
1H NMR (400 MHz, CDCl3): 7.87 (2H, d, J=8.8 Hz), 7.85 (1H, q, J=7.6 Hz), 7.41 (1H, d, J=7.6 Hz), 7.19 (2H, m), 7.05 (1H, d, J=8 Hz), 1.38 (12H, s). LC/MS: m/z=366 [M+H]+ .
2-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenoksi)-4-(trifluorometil)piridin:
1H NMR (400 MHz, CDCl3): 8.35 (1H, d, J=5.2 Hz), 7.90 (2H, m), 7.22 (1H, m), 7.16 (3H, m), 1.37 (12H, s). LC/MS: m/z=366 [M+H]+ .
2-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenoksi)-3-(trifluorometil)piridin:
1H NMR (400 MHz, CDCl3): 8.30 (1H, d, J=4.8 Hz), 8.01 (1H, d, J=8 Hz), 7.90 (2H, d, J=8.4 Hz), 7.18 (2H, d, J=8.4 Hz), 7.11 (1H, dd, J=4.8, 7.2 Hz), 1.37 (12H, s). LC/MS: m/z=366 [M+H]+ .
5-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenoksi)-2-(trifluorometil)piridin:
1H NMR (400 MHz, CDCl3): 8.51 (1H, d, J=2.4 Hz), 7.88 (2H, d, J=8.8 Hz), 7.65 (1H, d, J=8.4 Hz), 7.37 (1H, dd, J=2.8, 8.8 Hz), 7.08 (2H, d, J=8.4 Hz), 1.38 (12H, s). LC/MS: m/z=388 [M+H]+ .
PRIMER 2
Priprema (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida (jedinjenje br.1)
Šema 2
2,6-dihloropirimidin-4-karbonil hlorid:
Smeša mono hidrata orotične kiseline (34.828 g, 200.0 mmol), fosfor oksihlorida (100 mL, 1092 mmol) i 20 kapi DMF je zagrevana na 110°C preko noći. Posle hlađenja, tamna smeša je razblažena sa 500 mL heksana i snažno mešana. Sloj heksana je odliven i brzo ispran vodom (1 x 100 mL), zatim zasićenim slanim rastvorom (1 x 100 mL) i osušen preko MgSO4. Organski slojevi su filtrirani i pažljivo su isparavani u vakuumu da bi se dobio 2,6-dihloropirimidin-4-karbonil hlorid kao svetložuta tečnost (26.13 g, 123.6 mmol, prinos 62%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3): 7.93 (1H, s).
Šema 3
2,6-dihloropirimidin-4-karboksamid:
Rastvoru 2,6-dihloropirimidin-4-karbonil hlorida (26.13 g, 123.6 mmol) u Et2O (500 mL) dodata je smeša 0.5M amonijaka u dioksanu (250 mL, 125 mmol) i iPr2NEt (22 mL, 126 mmol) ukapavanjem tokom približno 50 minuta. Nakon mešanja preko noći reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu do ostatka i podvrgnuta hromatografiji na silika gelu sa 10-50% EtOAc u heksanima. Frakcije proizvoda su isparavane u vakuumu, i dobijeni čvrsti ostatak je triturisan sa 10 mL 10% EtOAc/heksani i filtriran da bi se dobio 2,6-dihloropirimidin-4-karboksamid kao kristalni čvrsti ostatak narandžaste boje (9.743 g, 50.74 mmol, prinos 41%). LC/MS: m/z=192.2 [M+H]+ , 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.40 (1H, br s), 8.16 (1H, br s), 8.10 (1H, s).
Šema 4
(S)-metil 2-((6-karbamoil-2-hloropirimidin-4-il)amino)propanoat (A) i (S)-metil 2((4-karbamoil-6-hloropirimidin-2-il)amino)propanoat (B):
Smeši 2,6-dihloropirimidin-4-karboksamida (4.800 g, 25.00 mmol) u acetonitrilu (100 mL) dodat je (S)-metil 2-aminopropanoat hidrohlorid (3.565 g, 25.54 mmol) i iPr2NEt (9.60 mL, 55.11 mmol). Smeša je zagrevana na 50°C preko noći, zatim koncentrovana u vakuumu. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu sa 20-60% acetona u heksanima. Hromatografijom su dobijena dva izomera. Prvi izomer za eluiranje je bio (S)-metil 2-((6-karbamoil-2-hloropirimidin-4-il)amino)propanoat (A), a drugi izomer za eluiranje je bio (S)-metil 2-((4-karbamoil-6-hloropirimidin-2-il)amino)propanoat (B). Odgovarajuće frakcije proizvoda su odvojeno isparavane u vakuumu da bi se dobio (S)-metil 2-((6-karbamoil-2-hloropirimidin-4-il)amino)propanoat (A) u vidu bledožuto-mrkog praha (5.133 g, 19.84 mmol, prinos 79%). LC/MS: m/z=259.2 [M+H]+ i (S)-metil 2-((4-karbamoil-6-hloropirimidin-2-il)amino)propanoat (B) u vidu žuto-mrkog praha (0.652 g, 2.52 mmol, prinos 10%). LC/MS: m/z=259.2 [M+H]+ .
Šema 5
(S)-metil 2-((6-karbamoil-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-il)amino)propanoat: Suspenziji (S)-metil 2-((6-karbamoil-2-hloropirimidin-4-il)amino)propanoata (5.133 g, 19.84 mmol) u dioksanu (100 mL) dodat je 2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan (6.858 g, 21.83 mmol), 2M vodeni rastvor Na2CO3(19.9 mL, 39.8 mmol) i PdCl2(dppf) (0.809 g, 0.99 mmol). Reakciona posuda je isprana argonom, hermetički zatvorena i zagrevana na 100°C preko noći. Posle hlađenja, reakciona smeša je razblažena sa 500 mL EtOAc i isprana zasićenim slanim rastvorom (3 x 100 mL). Organski sloj je osušen preko Na2SO4, filtriran i podvrgnut hromatografiji na silika gelu sa 20-60% acetona u heksanima. Frakcije proizvoda su izdvojene i isparavane u vakuumu da bi se dobio proizvod (S)-metil 2-((6-karbamoil-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-il)amino)propanoat u vidu žuto-narandžaste čvrste supstance (4.128 g, 10.05 mmol, prinos 51%). LC/MS: m/z=411.2 [M+H]+ .
Šema 6
(S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamid:
Rastvor (S)-metil 2-((6-karbamoil-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-il)amino)propanoata (4.128 g, 10.05 mmol) u 7M amonijaku u metanolu (100 mL, 700 mmol) je zagrevan u hermetički zatvorenoj epruveti tokom 3 dana na 50°C. Posle hlađenja, reakciona smeša je isparavana u vakuumu. Ostatak je triturisan sa 150 mL metanola i filtriran da bi se dobila prva serija proizvoda. Filtrat je isparavan i podvrgnut hromatografiji na silika gelu sa 50-100% acetona u heksanima. Frakcije proizvoda su izdvojene i isparavane u vakuumu. Ovaj ostatak je triturisan sa 40 mL metanola i filtriran da bi se dobila druga serija proizvoda. Prva i druga serija proizvoda su spojene i još jednom triturisane sa 10 mL metanola, filtrirane i osušene pod vakuumom na 50°C da bi se dobio (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamid (Primer 1) kao bledožuto-mrko-sivi prah (2.620 g, 6.63 mmol, prinos 66%). LC/MS: m/z=396.2 [M+H]+ , 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.54 (2H, d, J=8.8 Hz), 8.27 (1H, s), 7.95 (1H, d, J=6.4 Hz), 7.74 (1H, s), 7.53 (1H, s), 7.31-7.24 (2H, m), 7.19-7.13 (2H, m), 7.08 (1H, s), 7.04-6.97 (3H, m), 4.60-4.51 (1H, m), 1.36 (3H, d, J=7.0 Hz).
PRIMER 3
Priprema 6-(2-karbamoilpiperazin-1-il)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida (jedinjenje br.27)
Šema 7
Suspenziji poput mlečne terc-butil 3-karbamoil-4-(6-karbamoil-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-il)piperazin-1-karboksilata (0.363 g, 0.677 mmol) u dioksanu (10 mL) dodata je 4M HCl u dioksanu (2 mL, 8 mmol). Nakon mešanja tokom 3 dana reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu. Ĉvrsti ostatak je raspodeljen između 10 mL EtOAc i 2 mL 2M vodenog rastvora Na2CO3. Smeša je razblažena sa 25 mL EtOAc, 8 mL vode i 25 mL zasićenog slanog rastvora. Organski sloj je izdvojen i vodeni sloj je ekstrahovan četiri puta sa 25 mL EtOAc. Spojeni organski slojevi su sušeni preko MgSO4, filtrirani, i isparavani u vakuumu. Ostatak je triturisan sa 2 mL 1:1 EtOAc / heksana, filtriran, i ispran jednom sa 2 mL 1:1 EtOAc / heksana. Ĉvrsti ostatak je sušen pod vakuumom na 40°C da bi se dobio proizvod 6-(2-karbamoilpiperazin-1-il)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamid kao bledožuto-mrki prah (0.212 g, 0.486 mmol, prinos 72%).
1H NMR (400 MHz, CD3OD): 8.50 (2H, d, J=9.0 Hz), 7.36 (1H, s), 7.19-7.08 (4H, m), 7.03 (2H, d, J=9.0 Hz), 5.32 (1H, br s), 4.14 (1H, br s), 3.62-3.47 (2H, m), 3.19-3.12 (1H, m), 3.08 (1H, dd, J=13.4 Hz, 5.0 Hz), 2.87 (1H, dt, J=12.7 Hz, 3.5 Hz). LC/MS: m/z=437.1 [M+H]+ .
PRIMER 4
Priprema (S)-2-((6-karbamoil-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-il)amino)propanske kiseline (jedinjenje br.28)
Šema 8
Rastvoru (S)-metil 2-((6-karbamoil-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-il)amino)propanoata (0.123 g, 0.300 mmol) u 5:1 THF / voda (5 mL) dodat je LiOH·H2O (0.025 g, 0.60 mmol). Nakon mešanja u trajanju od 3 dana, reakcija je ugašena sa 1N vodenim rastvorom HCl (0.60 mL). Smeša je isparavana u vakuumu a zatim podvrgnuta hromatografiji upotrebom reverzno-fazne HPLC sa gradijentom 40-100% acetonitrila u vodi (+0.1% TFA). Frakcije proizvoda su sakupljene i koncentrovane da bi se dobila suspenzija čvrste supstance. Posle hlađenja, talog čvrste supstance je filtriran, ispran vodom i osušen pod vakuumom na 50°C da bi se dobila (S)-2-((6-karbamoil-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-il)amino)propanska kiselina kao beli prah (0.049 g, 0.12 mmol, prinos 41%).1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 12.57 (1H, s), 8.50 (2H, d, J=8.8 Hz), 8.29 (1H, s), 8.12 (1H, d, J=6.1 Hz), 7.76 (1H, s), 7.31-7.24 (2H, m), 7.18-7.12 (2H, m), 7.07 (1H, s), 7.03 (2H, d, J=8.8 Hz), 4.56 (1H, m), 1.44 (3H, d, J=7.5 Hz). LC/MS: m/z=397.1 [M+H]+ .
PRIMER 5
Priprema (S)-6-(2-karboksipirolidin-1-il)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksilne kiseline (A) (jedinjenje br.29)
i
(S)-1-(6-karbamoil-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-il)pirolidin-2-karboksilne kiseline (B) (jedinjenje br.30)
Šema 9
Smeši (S)-metil 1-(6-karbamoil-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-il)pirolidin-2-karboksilata (0.439 g, 1.01 mmol) u 5:1 THF / voda (10 mL) dodat je LiOH·H2O (0.084 g, 2.00 mmol). Nakon mešanja u trajanju od 3 dana reakcija je ugašena sa 1N vodenim rastvorom HCl (2.00 mL). Smeša je isparavana u vakuumu, a zatim podvrgnuta hromatografiji korišćenjem reverzno-fazne HPCL sa gradijentom 40-100% acetonitrila u vodi (+0.1% TFA). Prvi proizvod za eluiranje bio je (S)-6-(2-karboksipirolidin-1-il)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksilna kiselina (A) praćena (S)-1-(6-karbamoil-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-il)pirolidin-2-karboksilnom kiselinom (B). Frakcije proizvoda za svaki proizvod posebno su sakupljene i koncentrovane da bi se dobile suspenzije čvrstih supstanci. Talozi čvrstih supstanci su filtrirani, isprani vodom, i osušeni pod vakuumom na 50°C da bi se dobila (S)-6-(2-karboksipirolidin-1-il)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksilna kiselina (A) kao svetložuto-mrki prah (0.170 g, 0.402 mmol, prinos 40%) i (S)-1-(6-karbamoil-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-il)pirolidin-2-karboksilna kiselina (B) kao beličasti prah (0.125 g, 0.296 g, prinos 29%). (S)-6-(2-karboksipirolidin-1-il)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksilna kiselina (A): 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): Postoji u obliku rotamera u odnosu ~80:20: 13.71-12.30 (2H, br m), 8.43 (0.4H, d, J=8.8 Hz), 8.37 (1.6H, d, J=8.8 Hz), 7.32-7.24 (2H, m), 7.20-7.13 (2H, m), 7.09-6.99 (2.8H, m), 6.79 (0.2H, s), 4.62-4.55 (1H, m), 3.87-3.48 (2H, m), 2.38-2.29 (1H, m), 2.24-1.98 (3H, m). LC/MS: m/z=424.1 [M+H]+ . (S)-1-(6-karbamoil-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-il)pirolidin-2-karboksilna kiselina (B): 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): Postoji u obliku rotamera u odnosu ~80:20: 13.05 (0.2H, br s), 12.60 (0.8H, br s), 8.57 (0.4H, d, J=8.8 Hz), 8.51 (1.6H, d, J=8.8 Hz), 8.35 (1H, s), 7.81 (1H, s), 7.32-7.24 (2H, m), 7.20-7.13 (2H, m), 7.08-6.97 (2.8H, m), 6.79 (0.2H, s), 4.62-4.52 (1H, m), 3.86-3.72 (0.4H, m), 3.66-3.55 (1.6H, m), 2.40-2.28 (1H, m), 2.22-1.95 (3H, m). LC/MS: m/z=423.1 [M+H]+ .
PRIMER 6
Priprema soli trifluoroacetatne kiseline S)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)-6-((1-metoksi-1-oksopropan-2-il)amino)pirimidin-4-karboksilne kiseline
Šema 10
terc-butil 2,6-dihloropirimidin-4-karboksilat:
Rastvoru 2,6-dihloropirimidin-4-karbonil hlorida (1.026 g, 4.85 mmol) u DCM (25 mL) dodat je iPr2NEt (1.01 mL, 5.80 mmol) i t-butanol (0.51 mL, 5.3 mmol). Smeša je mešana preko noći, zatim je dodat piridin (0.39 mL, 4.8 mmol) i mešanje nastavljeno u toku još jedne noći. Reakciona smeša je isparavana u vakuumu i dobijeni ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu sa 0-40% EtOAc u heksanima. Frakcije proizvoda su isparavane u vakuumu da bi se dobio terc-butil 2,6-dihloropirimidin-4-karboksilat kao žuto-narandžasta čvrsta supstanca slična vosku (0.310 g, 1.24 mmol, prinos 26%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.15 (1H, s), 1.56 (9H, s). LC/MS: m/z=271.1 [M+Na]+ .
Šema 11
(S)-terc-butil 2-hloro-6-((1-metoksi-1-oksopropan-2-il)amino)pirimidin-4-karboksilat: Smeši terc-butil 2,6-dihloropirimidin-4-karboksilata (0.310 g, 1.24 mmol) u acetonitrilu (5 mL) dodat je (S)-metil 2-aminopropanoat hidrohlorid (0.177 g, 1.27 mmol) i iPr2NEt (0.48 mL, 2.8 mmol). Smeša je zagrevana na 50°C preko noći, a zatim koncentrovana u vakuumu. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu sa 10-50% EtOAc u heksanima. Frakcije proizvoda su isparavane u vakuumu da bi se dobio (S)-terc-butil 2-hloro-6-((1-metoksi-1-oksopropan-2-il)amino)pirimidin-4-karboksilat kao bezbojno staklo (0.347 g, 1.10 mmol, prinos 89%).1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.70 (1H, d, J=6.8 Hz), 7.12 (1H, s), 4.56-4.47 (1H, m), 3.65 (3H, s), 1.53 (9H, s), 1.39 (3H, d, J=7.2 Hz). LC/MS: m/z=316.2 [M+H]+ .
Šema 12
(S)-terc-butil 2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)-6-(1-metoksi-1-oksopropan-2-il)amino)pirimidin-4-karboksilat (jedinjenje br.32):
Smeši (S)-terc-butil 2-hloro-6-((1-metoksi-1-oksopropan-2-il)amino)pirimidin-4-karboksilata (0.347 g, 1.10 mmol) u dioksanu (10 mL) dodat je 2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan (0.348 g, 1.11 mmol), 2M vodeni rastvor Na2CO3(1.10 mL, 2.20 mmol) i PdCl2(dppf) (0.050 g, 0.061 mmol). Reakciona posuda je isprana argonom, hermetički zatvorena, i zagrevana na 80°C u trajanju od 2 dana. Posle hlađenja, reakciona smeša je isparavana u vakuumu i ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu sa 10-40% EtOAc u heksanima. Frakcije proizvoda su isparavane u vakuumu da bi se dobio (S)-tercbutil 2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)-6-((1-metoksi-1-oksopropan-2-il)amino)pirimidin-4-karboksilat kao beličasta pena (0.316 g, 0.676 mmol, prinos 61%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.31-8.25 (3H, m), 7.32-7.24 (2H, m), 7.19-7.14 (2H, m), 7.06 (2H, d, J=9.0 Hz), 7.04 (1H, s), 4.60-4.51 (1H, m), 3.63 (3H, s), 1.56 (9H, s), 1.44 (3H, d, J=7.2 Hz). LC/MS: m/z=468.2 [M+H]+ .
Šema 13
So trifluoroacetatne kiseline (S)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)-6-((1-metoksi-1-oksopropan-2-il)amino) pirimidin-4-karboksilne kiseline (jedinjenje br.33):
Rastvoru (S)-terc-butil 2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)-6-((1-metoksi-1-oksopropan-2-il)amino)pirimidin-4-karboksilata (0.312 g, 0.667 mmol) u DCM (10 mL) dodata je TFA (5 mL, 67 mmol). Nakon mešanja u trajanju od 3 dana, reakciona smeša je isparavana u vakuumu i ostatak je triturisan sa heksanima, filtriran i osušen pod strujom azota da bi se dobila (S)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)-6-((1-metoksi-1-oksopropan-2-il)amino)pirimidin-4-karboksilna kiselina kao so trifluoroacetatne kiseline u vidu praha krem boje (0.326 g, 0.620 mmol, 93%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.36-8.26 (3H, m), 7.32-7.24 (2H, m), 7.20-7.13 (2H, m), 7.10-7.03 (3H, m), 4.60-4.52 (1H, m), 3.64 (3H, s), 1.45 (3H, d, J=7.2 Hz). LC/MS: m/z=412.1 [M+H]+ .
PRIMER 7
Priprema (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksilne kiseline (jedinjenje br.35)
Šema 14
(S)-terc-butil 6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-hloropirimidin-4-karboksilat: Rastvoru terc-butil 2,6-dihloropirimidin-4-karboksilata (0.626 g, 2.51 mmol) u acetonitrilu (10 mL) dodat je (S)-2-aminopropanamid hidrohlorid (0.319 g, 2.56 mmol) i iPr2NEt (0.96 mL, 5.5 mmol). Smeša je zagrevana na 50°C u trajanju od 6 časova, a zatim koncentrovana u vakuumu. Ostatak je podvrgnut hromatografiji preko silika gela korišćenjem 50-100% EtOAc u heksanima. Frakcije proizvoda su isparavane u vakuumu da bi se dobio (S)-terc-butil 6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-hloropirimidin-4-karboksilat kao beličasta pena (0.628 g, 2.09 mmol, prinos 83%). LC/MS: m/z=301.2 [M+H]<+>.
Šema 15
(S)-terc-butil 6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksilat (jedinjenje br.34):
Smeši (S)-terc-butil 6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-hloropirimidin-4-karboksilata (0.628 g, 2.09 mmol) u dioksanu (10 mL) dodat je 2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan (0.791 g, 2.52 mmol), 2M vodeni rastvor Na2CO3(2.1 mL, 4.2 mmol) i PdCl2(dppf) (0.087 g, 0.11 mmol). Reakciona posuda je isprana argonom, hermetički zatvorena i zagrevana na 80°C preko noći. Posle hlađenja, reakciona smeša je isparavana u vakuumu i ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu sa 50-90% EtOAc u heksanima. Frakcije proizvoda su isparavane u vakuumu da bi se dobio ostatak koji je triturisan sa 5 mL 1:1 EtOAc / heksana. Ĉvrsti ostatak je otfiltriran, ispran dva puta sa 2 mL 1:1 EtOAc / heksana, i osušen pod vakuumom da bi se dobio (S)-terc-butil 6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)-amino)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksilat kao prah krem boje (0.537 g, 1.19 mmol, prinos 57%).1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.36 (2H, d, J=9.0 Hz), 7.97 (1H, d, J=6.6 Hz), 7.54 (1H, s), 7.31-7.24 (2H, m), 7.19-7.13 (2H, m), 7.09-6.99 (4H, m), 4.59-4.50 (1H, m), 1.55 (9H, s), 1.36 (3H, d, J=7.0 Hz). LC/MS: m/z=453.3 [M+H]+ .
Šema 16
(S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksilna kiselina:
Suspenziji (S)-terc-butil 6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)-amino)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksilata (0.426 g, 0.941 mmol) u DCM (10 mL) dodata je TFA (5 mL, 67 mmol). Nakon mešanja preko noći, reakciona smeša je isparavana u vakuumu i ostatak je triturisan sa 3 mL acetonitrila, filtriran, ispran jednom sa 1 mL acetonitrila i osušen pod vakuumom na 40°C da bi se dobila (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksilna kiselina kao beličasti prah (0.343 g, 0.865 mmol, prinos 92%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.40 (2H, d, J=8.8 Hz), 8.05 (1H, d, J=6.6 Hz), 7.56 (1H, s), 7.32-7.24 (2H, m), 7.19-7.14 (2H, m), 7.11 (1H, s), 7.07-7.01 (3H, m), 4.61-4.52 (1H, m), 1.37 (3H, d, J=7.0 Hz). LC/MS: m/z=397.1 [M+H]+ .
PRIMER 8
Priprema (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(4-(trifluorometil)fenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida (jedinjenje br. 14) Šema 17
(S)-metil 2-hloro-6-((1-metoksi-1-oksopropan-2-il)amino)pirimidin-4-karboksilat: Smeši metil 2,6-dihloropirimidin-4-karboksilata (5.175 g, 25.00 mmol) u acetonitrilu (100 mL) dodat je (S)-metil 2-aminopropanoat hidrohlorid (3.497 g, 25.05 mmol) i iPr2NEt (9.6 mL, 55.1 mmol). Smeša je zagrevana na 50°C preko noći, a zatim koncentrovana u vakuumu. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu sa 30-70% EtOAc u heksanima. Frakcije proizvoda su isparavane u vakuumu da bi se dobio (S)-metil 2-hloro-6-((1-metoksi-1-oksopropan-2-il)amino)pirimidin-4-karboksilat kao gusto žuto-narandžasto ulje (4.194 g, 15.33 mmol, prinos 61%). LC/MS: m/z=274.2 [M+H]+ .
Šema 18
(S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-hloropirimidin-4-karboksamid:
Rastvor (S)-metil 2-hloro-6-((1-metoksi-1-oksopropan-2-il)amino)pirimidin-4-karboksilata (3.719 g, 13.59 mmol) u 7M amonijaku u metanolu (20 mL, 140 mmol) je zagrevan u hermetički zatvorenoj epruveti tokom 3 dana na 50°C. Posle hlađenja, staloženi čvrsti ostatak je otfiltriran i ispran sa MeOH (2 x 5 mL), a zatim osušen pod vakuumom na 40°C da bi se dobio (S)-6-(1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-hloropirimidin-4-karboksamid kao bledo žuti prah (2.946 g, 12.09 mmol, prinos 89%). LC/MS: m/z=244.2 [M+H]+ .
Šema 19
(S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(4-(trifluorometil)fenoksi)fenil) pirimidin-4-karboksamid:
Suspenziji (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-hloropirimidin-4-karboksamida (0.244 g, 1.00 mmol) u dioksanu (5.0 mL) je dodat 4,4,5,5-tetrametil-2-(4-(4-(trifluorometil)fenoksi)fenil)-1,3,2-dioksaborolan (0.403 g, 1.11 mmol), 2M vodeni rastvor Na2CO3(1.0 mL, 2.0 mmol) i PdCl2(dppf) (0.044 g, 0.054 mmol). Reakciona posuda je isprana argonom, hermetički zatvorena, i zagrevana na 100°C preko noći. Posle hlađenja, reakciona smeša je isparavana u vakuumu i statak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu sa 50-100% acetona u heksanima. Frakcije proizvoda su isparavane u vakuumu i dobijeni čvrsti ostatak je triturisan sa 2 mL MeOH, filtriran, i osušen pod vakuumom na 42°C da bi se dobio (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(4-(trifluorometil)fenoksi)fenil) pirimidin-4-karboksamid kao prah krem boje (0.283 g, 0.635 mmol, prinos 64%).1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.61 (2H, d, J=8.8 Hz), 8.31 (1H, s), 7.98 (1H, d, J=6.4 Hz), 7.80-7.73 (3H, m), 7.55 (1H, s), 7.25-7.16 (4H, m), 7.11 (1H, s), 7.01 (1H, s), 4.62-4.53 (1H, m), 1.37 (3H, d, J=7.0 Hz). LC/MS: m/z=446.1 [M+H]+ .
PRIMER 9
Priprema (S)-6-((1-karboksietil)amino)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksilna kiselina (jedinjenje br.40)
Šema 20
(S)-metil 2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)-6-((1-metoksi-1-oksopropan-2-il)amino) pirimidin-4-karboksilat (jedinjenje br.39):
Smeši (S)-metil 2-hloro-6-((1-metoksi-1-oksopropan-2-il)amino)pirimidin-4-karboksilata (4.826 g, 17.63 mmol) u dioksanu (100 mL) dodat je 2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan (6.651 g, 21.17 mmol), 2M vodeni rastvor Na2CO3(17.6 mL, 35.2 mmol) i PdCl2(dppf) (0.727 g, 0.89 mmol). Posuda je isprana argonom, hermetički zatvorena, i zagrevana u uljanom kupatilu na 100°C u trajanju od 30 minuta. Posuda je pukla. Onoliko reakcione smeše koliko je moguće je raspodeljeno između metanola i heksana. Heksani su uklonjeni i metanolski sloj je ispran drugi put. Metanolska frakcija je isparavana u vakuumu i podvrgnuta hromatografiji na silika gelu sa 20-60% EtOAc u heksanima. Frakcije proizvoda su izdvojene i isparavane u vakuumu i podvrgnute hromatografiji drugi put na silika gelu sa 10-50% EtOAc u heksanima. Frakcije proizvoda su isparavane u vakuumu i dobijeni čvrsti ostatak je triturisan sa 2 mL MeOH, filtriran, ispran jednom sa 1 mL MeOH, i osušen pod vakuumom na 40°C da bi se dobio (S)-metil 2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)-6-((1-metoksi-1-oksopropan-2-il)amino)pirimidin-4-karboksilat kao žuti prah (0.140 g, 0.329 mmol, prinos 2%).1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.34-8.25 (3H, m), 7.31-7.24 (2H, m), 7.19-7.14 (2H, m), 7.10 (1H, s), 7.06 (2H, d, J=8.8 Hz), 4.60-4.52 (1H, m), 3.89 (3H, s), 3.64 (3H, s), 1.45 (3H, d, J=7.2 Hz). LC/MS: m/z=426.1 [M+H]+ .
Šema 21
(S)-6-((1-karboksietil)amino)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksilna kiselina:
Rastvoru (S)-metil 2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)-6-(1-metoksi-1-oksopropan-2-il)amino)pirimidin-4-karboksilata (0.125 g, 0.294 mmol) u 5:1 THF / voda (5 mL) dodavan je LiOH·H2O (0.030 g, 0.71 mmol) u porcijama u toku 2 dana. Nakon poslednjeg dodavanja, reakciona smeša je mešana 2 časa, a zatim razblažena sa 5 mL vode i neutralisana sa 0.70 mL 1N vodenog rastvora HCl. Dobijeni čvrsti ostatak je filtriran, osušen pod vakuumom na 40°C, triturisan sa 2 mL 20% EtOAc u heksanima, zatim sa heksanima, filtriran, i osušen pod vakuumom na 40°C da bi se dobila (S)-6-((1-karboksietil)amino)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksilna kiselina u vidu bledožuto-mrkog praha (0.094 g, 0.24 mmol, 81%).1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 13.21 (1H, br s), 12.63 (1H, br s), 8.37 (2H, d, J=9.0 Hz), 8.16 (1H, d, J=6.6 Hz), 7.31-7.24 (2H, m), 7.19-7.13 (2H, m), 7.08 (1H, s), 7.05 (2H, d, J=9.0 Hz), 4.57-4.47 (1H, m), 1.44 (3H, d, J=7.2 Hz). LC/MS: m/z=398.0 [M+H]+ .
PRIMER 10
Priprema 2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)-6-(3-(hidroksimetil)morfolino) pirimidin-4-karboksamida (jedinjenje br.41)
Šema 22
2-hloro-6-(3-(hidroksimetil)morfolino)pirimidin-4-karboksamid:
Smeši 2,6-dihloropirimidin-4-karboksamida (0.384 g, 2.00 mmol) u acetonitrilu (10 mL) dodat je morfolin-3-ilmetanol hidrohlorid (0.310 g, 2.02 mmol) i iPr2NEt (0.77 mL, 4.4 mmol). Smeša je zagrevana na 50°C preko noći, zatim koncentrovana u vakuumu. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu sa 25-75% acetona u heksanima. Frakcije proizvoda su isparavane u vakuumu da bi se dobio 2-hloro-6-(3-(hidroksimetil)morfolino)pirimidin-4-karboksamid kao bledožuto-mrka čvrsta supstanca (0.501 g, 1.84 mmol, prinos 92%). LC/MS: m/z=273.2 [M+H]+ .
Šema 23
2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)-6-(3-(hidroksimetil)morfolino)pirimidin-4-karboksamid: Smeši 2-hloro-6-(3-(hidroksimetil)morfolino)pirimidin-4-karboksamida (0.501 g, 1.84 mmol) u dioksanu (10 mL) dodat je 2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan (0.637 g, 2.03 mmol), 2M vodeni rastvor Na2CO3(1.8 mL, 3.6 mmol), i PdCl2(dppf) (0.078 g, 0.096 mmol). Reakciona posuda je isprana argonom, hermetički zatvorena, i zagrevana na 100°C preko noći. Posle hlađenja, reakciona smeša je isparavana u vakuumu i ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu sa 25-75% acetona u heksanima. Frakcije proizvoda koje su bile u čistom izomernom obliku u manje od 97% su isparavane u vakuumu i dobijeni čvrsti ostatak je triturisan sa 3 mL acetona, filtriran i ispran sa 1 mL acetona. Ovaj čvrsti ostatak je zatim spojen sa frakcijama dobijenim hromatografijom koje su bile u čistom izomernom obliku u više od 97%. Ovaj spojeni materijal je triturisan sa 5 mL acetona, filtriran, i ispran jednom sa 5 mL acetona. Ĉvrsti ostatak je osušen pod vakuumom na 40°C da bi se dobio 2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)-6-(3-(hidroksimetil)morfolino)pirimidin-4-karboksamid kao beličasti prah (0.384 g, 0.905 mmol, prinos 49%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.54 (2H, d, J=8.8 Hz), 8.35 (1H, s), 7.80 (1H, s), 7.31-7.24 (2H, m), 7.22 (1H, s), 7.19-7.13 (2H, m), 7.04 (2H, d, J=9.0 Hz), 4.99 (1H, t, J=5.7 Hz), 4.60 (1H, veoma široko s), 4.14 (1H, veoma široko s), 4.04 (1H, d, J=11.4 Hz), 3.94 (1H, dd, J=11.6 Hz, 3.5 Hz), 3.76-3.68 (1H, m), 3.59-3.43 (3H, m), 3.25-3.13 (1H, m). LC/MS: m/z=425.1 [M+H]+ .
PRIMER 11
Priprema 2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)-6-(2-(hidroksimetil)piperazin-1-il)pirimidin-4-karboksamida (jedinjenje br.48)
Šema 24
Rastvoru terc-butil 4-(6-karbamoil-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-il)-3-(hidroksimetil)piperazin-1-karboksilata (0.848 g, 1.62 mmol) u dioksanu (25 mL) je dodato 4M HCl u dioksanu (5 mL, 20 mmol). Nakon mešanja preko noći reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu. Ostatak je triturisan sa 10 mL acetonitrila, filtriran, i ispran sa 10 mL acetonitrila. Ĉvrsti ostatak je zatim sukcesivno suspendovan i filtriran tri puta iz toplog acetonitrila. Ĉvrsti ostatak je zatim raspodeljen između 10 mL EtOAc i 2 mL 2M vodenog rastvora Na2CO3. Smeša je razblažena sa 50 mL EtOAc i 25 mL vode, organski sloj je uklonjen i vodena emulzija je isprana još jednom sa 50 mL EtOAc. Vodena emulzija je otfiltrirana i isprana vodom. Dobijeni čvrsti ostatak poput testa je triturisan sa 2 mL acetonitrila, filtriran, ispran jednom sa 1 mL acetonitrila, i osušen pod vakuumom da bi se dobio 2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)-6-(2-(hidroksimetil)piperazin-1-il)pirimidin-4-karboksamid u vidu bledožuto-mrkog praha (0.198 g, 0.468 mmol, prinos 29%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.52 (2H, d, J=8.8 Hz), 8.32 (1H, s), 7.78 (1H, s), 7.31-7.24 (2H, m), 7.22-7.12 (3H, m), 7.04 (2H, d, J=8.8 Hz), 4.85 (1H, s), 4.79-4.60 (1H, veoma široko s), 3.83-3.74 (1H, m), 3.56 (1H, br s), 3.17-3.09 (1H, m), 3.05-2.94 (2H, m), 2.73-2.65 (1H, m), 2.63-2.54 (1H, m), 2.49-2.32 (2H, m). LC/MS: m/z=424.2 [M+H]+ .
PRIMER 12
Priprema 6-(3,4-dihidroksipirolidin-1-il)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida (jedinjenje br.49)
Šema 25
6-(6-oksa-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-il)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamid:
Suspenziji 6-(2,5-dihidro-1H-pirol-1-il)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida (0.333 g, 0.885 mmol) u DCM (25 mL) dodat je mCPBA (0.201 g, 0.897 mmol, 77% čvrste supstance). Posle 2 časa, dodato je još mCPBA (0.198 g, 0.883 mmol, 77% čvrste supstance). Posle mešanja preko noći, dodato je još mCPBA (0.202 g, 0.901 mmol, 77% čvrste supstance) i reakciona smeša je zagrevana do refluksa. Nakon 5 časova, dodato je još mCPBA (0.200 g, 0.892 mmol, 77% čvrste supstance). Posle 2 časa, dodato je još mCPBA (0.202 g, 0.901 mmol, 77% čvrste supstance) i refluksovanje je nastavljeno preko noći. Kada se ohladila, reakciona smeša je razblažena sa 100 mL DCM, isprana dva puta sa 25 mL zasićenog vodenog rastvora NaHCO3, i jednom sa 25 mL zasićenog slanog rastvora. Organski slojevi su sušeni preko MgSO4, filtrirani, i isparavani do dobijanja ostatka. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu sa 25-75% acetona u heksanima. Frakcije proizvoda su isparavane u vakuumu i dobijeni čvrsti ostatak je triturisan sa 1 mL acetona, filtriran, ispran jednom sa 0.5 mL acetona i osušen pod vakuumom na 40°C da bi se dobio 6-(6-oksa-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-il)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamid u vidu beličastog praha (0.052 g, 0.13 mmol, prinos 15%). LC/MS: m/z=393.2 [M+H]<+>.
Šema 26
(racemski, trans diol)
6-(3,4-dihidroksipirolidin-1-il)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamid: Suspenziji 6-(6-oksa-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-il)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil) pirimidin-4-karboksamida (0.050 g, 0.13 mmol) u THF (5 mL) i vodi (1 mL), dodat je 60%-tni rastvor HClO4(0.1 mL). Nakon mešanja preko noći, reakciona smeša je zagrevana na 50°C u trajanju od 2 dana. Nakon što se reakcija ohladila, ugašena je dodatkom čvrstog NaHCO3i isparavana u vakuumu. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu sa 50-100% acetona u heksanima. Frakcije proizvoda su isparavane i dobijeni ostatak je rastvoren u 1 mL acetonitrila uz zagrevanje. Nakon hlađenja obrazovao se čvrsti ostatak. Ĉvrsti ostatak je filtriran i ispran jednom sa 1 mL acetonitrila. Preostali čvrsti ostatak je suspendovan u 1 mL toplog acetonitrila, filtriran i osušen na vazduhu da bi se dobio 6-(3,4-dihidroksipirolidin-1-il)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamid u vidu sitnog kristalnog praha (0.009 g, 0.02 mmol, 17%).1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.55 (2H, d, J=8.8 Hz), 8.34 (1H, d, J=2.4 Hz), 7.88 (1H, d, J=2.4 Hz), 7.31-7.24 (2H, m), 7.19-7.13 (2H, m), 7.05 (2H, d, J=9.0 Hz), 6.90 (1H, s), 5.29 (1H, d, J=3.7 Hz), 5.22 (1H, d, J=3.3 Hz), 4.14-4.10 (1H, m), 4.09-4.05 (1H, m), 3.76-3.63 (3H, m), 3.35-3.30 (1H, m). LC/MS: m/z=411.1 [M+H]+ .
PRIMER 13
Priprema (S)-6-((3-amino-2-hidroksi-3-oksopropil)amino)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida (jedinjenje br. 50)
Šema 27
(S)-metil 3-amino-2-hidroksipropanoat hidrohlorid:
Ledom ohlađenoj suspenziji (S)-3-amino-2-hidroksipropanske kiseline (0.904 g) u MeOH (15 mL) dodat je SOCl2(2.0 mL, 27 mmol) tokom ~2.5 minuta. Posle dodavanja, reakciona smeša je ostavljena da se ugreje do sobne temperature. Nakon mešanja preko noći, reakciona smeša je isparavana u vakuumu. Dodat je MeOH i smeša je isparavana u vakuumu drugi put da bi se dobio proizvod (S)-metil 3-amino-2-hidroksipropanoat hidrohlorid u vidu bezbojnog ulja. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.16 (3H, s), 6.36 (1H, s), 4.38 (1H, br d, J=8.3 Hz), 3.68 (3H, s), 3.10 (1H, dd, J=12.9 Hz, 3.7 Hz), 2.90 (1H, dd, J=12.9 Hz, 8.6 Hz).
Šema 28
(S)-metil 3-((6-karbamoil-2-hloropirimidin-4-il)amino)-2-hidroksipropanoat:
Smeši (S)-metil 3-amino-2-hidroksipropanoat hidrohlorida (0.333 g, 2.14 mmol) u acetonitrilu (10 mL) dodat je 2,6-dihloropirimidin-4-karboksamid (0.385 g, 2.01 mmol) i iPr2NEt (0.77 mL, 4.4 mmol). Smeša je zagrevana na 50°C preko noći a zatim ohlađena. Staložena čvrsta supstanca je otfiltrirana, isprana jednom sa 2 mL acetonitrila, i osušena na vazduhu da bi se dobio (S)-metil 3-((6-karbamoil-2-hloropirimidin-4-il)amino)-2-hidroksipropanoat kao prah u bledoj boji breskve (0.421 g, 1.53 mmol, prinos 76%). LC/MS: m/z=275.1 [M+H]+ .
Šema 29
(S)-6-((3-amino-2-hidroksi-3-oksopropil)amino)-2-hloropirimidin-4-karboksamid: Smeša (S)-metil 3-((6-karbamoil-2-hloropirimidin-4-il)amino)-2-hidroksipropanoata (0.421 g, 1.53 mmol) i 7M amonijaka u MeOH (10 mL, 70 mmol) je zagrevana u hermetički zatvorenoj epruveti na 50°C preko noći. Staložena čvrsta supstanca je otfiltrirana iz tople reakcione smeše, isprana jednom sa 5 mL MeOH, i osušena na vazduhu da bi se dobio (S)-6-((3-amino-2-hidroksi-3-oksopropil)amino)-2-hloropirimidin-4-karboksamid kao svetložutomrki prah (0.372 g, 1.43 mmol, prinos 94%). LC/MS: m/z=260.1 [M+H]+ .
Šema 30
(S)-6-((3-amino-2-hidroksi-3-oksopropil)amino)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil) pirimidin-4-karboksamid:
Smeši (S)-6-((3-amino-2-hidroksi-3-oksopropil)amino)-2-hloropirimidin-4-karboksamida (0.372 g, 1.43 mmol) u dioksanu (10 mL) je dodat 2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan (0.494 g, 1.57 mmol), 2M vodeni rastvor Na2CO3(1.45 mL, 2.90 mmol), i PdCl2(dppf) (0.063 g, 0.077 mmol). Reakciona posuda je isprana argonom, hermetički zatvorena, i zagrevana na 100°C preko noći. Posle hlađenja, reakciona smeša je isparavana u vakuumu i ostatak je triturisan sa 25 mL acetona. Nerastvorni čvrsti ostatak je otfiltriran i ispran sukcesivno sa vodom, MeOH, 1N vodenim rastvorom HCl, vodom i MeOH. Ĉvrsti ostatak je zatim rastvoren u 3 mL DMSO uz zagrevanje i razblažen sa 15 mL MeOH. Stajanjem se u rastvoru nataložila čvrsta supstanca koja je filtrirana i isprana dva puta sa 5 mL MeOH i jednom sa 2:1 acetonitrilom / DMSO. Preostala čvrsta supstanca je prečišćena reverzno-faznom hromatografijom korišćenjem gradijenta 40-70% acetonitrila u vodi (+0.1% TFA). Frakcije proizvoda su sakupljene i liofilizovane da bi se dobio (S)-6-(3-amino-2-hidroksi-3-oksopropil)amino)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamid kao prah krem boje (0.115 g, 0.280 mmol, prinos 20%).1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.54 (2H, d, J=8.1 Hz), 8.26 (1H, s), 7.91-7.84 (1H, m), 7.73 (1H, s), 7.33-7.23 (4H, m), 7.19-7.13 (2H, m), 7.08-7.01 (3H, m), 5.78 (1H, br s), 4.14-4.07 (1H, m), 3.92-3.83 (1H, m), 3.53-3.45 (1H, m). LC/MS: m/z=412.0 [M+H]+ .
PRIMER 14
Priprema (S)-3-((6-karbamoil-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-il)amino)-2-hidroksipropanske kiseline (jedinjenje br.51)
Šema 31
Smeši (S)-metil 3-((6-karbamoil-2-hloropirimidin-4-il)amino)-2-hidroksipropanoata (0.408 g, 1.49 mmol) u dioksanu (10 mL) dodat je 2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan (0.517 g, 1.65 mmol), 2M vodeni rastvor Na2CO3(1.50 mL, 3.00 mmol) i PdCl2(dppf) (0.066 g, 0.081 mmol). Reakciona posuda je isprana argonom, hermetički zatvorena i zagrevana na 100°C preko noći. Posle hlađenja, reakciona smeša je razblažena acetonom i odlivena. Nerastvorljivom ostatku je dodata voda da bi se dobila suspenzija. Ĉvrsti ostatak je filtriran, ispran sukcesivno sa vodom, acetonom, 1N vodenim rastvorom HCl, a zatim sa MeOH. Ĉvrsti ostatak je osušen pod vakuumom na 40°C da bi se dobio proizvod (S)-3-((6-karbamoil-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-il)amino)-2-hidroksipropanska kiselina kao svetložuto-mrki prah (0.053 g, 0.13 mmol, prinos 9%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 12.61 (1H, s), 8.53 (2H, d, J=8.3 Hz), 8.27 (1H, s), 7.99-7.93 (1H, s), 7.73 (1H, s), 7.31-7.24 (2H, m), 7.19-7.13 (2H, m), 7.08-7.01 (3H, m), 5.60 (1H, s), 4.26 (1H, s), 3.90-3.80 (1H, s), 3.64-3.54 (1H, m). LC/MS: m/z=413.1 [M+H]+ .
PRIMER 15
Priprema 6-(N-(2,3-dihidroksipropil)metilsulfonamido)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida (jedinjenje br.53)
Šema 32
N-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metil)metansulfonamid:
Rastvoru (2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metanamina (4.616 g, 35.19 mmol) u dietiletru (100 mL) dodat je piridin (2.90 mL, 35.9 mmol). Rastvor metansulfonil hlorida (2.75 mL, 35.4 mmol) u dietiletru (50 mL) je dodavan rastvoru amina tokom 30 minuta.
Nakon mešanja u trajanju od 2 časa, reakciona smeša je isprana jednom sa 25 mL vode, zatim dva puta sa 25 mL zasićenog slanog rastvora. Organski sloj je odvojen, osušen preko MgSO4, filtriran, i isparavan do dobijanja ostatka. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu sa 0-100% EtOAc u heksanima. Frakcije proizvoda su isparavane u vakuumu da bi se dobio N-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metil)metansulfonamid u vidu gotovo bezbojnog ulja (0.875 g, 4.18 mmol, prinos 12%).1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 7.17 (1H, t, J=6.4 Hz), 4.13-4.06 (1H, m), 3.98 (1H, dd, J=8.3 Hz, 6.4 Hz), 3.66 (1H, dd, J=8.3 Hz, 5.7 Hz), 3.09-2.98 (2H, m), 2.91 (3H, s), 1.33 (3H, s), 1.26 (3H, s).
Šema 33
metil 2-hloro-6-(N-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metil)metilsulfonamido) pirimidin-4-karboksilat:
Rastvoru N-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metil)metan sulfonamida (0.875 g, 4.18 mmol) u DMF (25 mL) dodat je 60% NaH u mineralnom ulju (0.193 g, 4.83 mmol). Posle 10 minuta dodat je metil 2,6-dihloropirimidin-4-karboksilat (0.871 g, 4.21 mmol). Nakon mešanja tokom 30 minuta, reakciona smeša je razblažena sa 100 mL vode i ekstrahovana tri puta sa 50 mL EtOAc. Spojeni organski slojevi su isprani jednom sa 25 mL zasićenog slanog rastvora, osušeni preko MgSO4, filtrirani, i isparavani do dobijanja ostatka. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu sa 30-60% EtOAc u heksanima. Frakcije proizvoda su koncentrovane u vakuumu. Nakon stajanja preko noći obrazovao se kristalni čvrsti ostatak. Ĉvrsti ostatak je odliven i osušen pod vakuumom da bi se dobio metil 2-hloro-6-(N-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metil)metilsulfonamido)pirimidin-4-karboksilat kao prah krem boje (0.911 g, 2.40 mmol, prinos 57%). LC/MS: m/z=380.2 [M+H]+ .
Šema 34
2-hloro-6-(N-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metil)metilsulfonamido) pirimidin-4-karboksamid:
Smeši metil 2-hloro-6-(N-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metil)metilsulfonamido) pirimidin-4-karboksilata (0.911 g, 2.40 mmol) u MeOH (10 mL) dodat je 7M amonijak u MeOH (10 mL, 70 mmol). U početku je smeša bila u obliku suspenzije, potom rastvorena, i zatim se staložila. Posle 3 časa čvrsti ostatak je filtriran, ispran jednom sa 5 mL MeOH i osušen na vazduhu da bi se dobio proizvod 2-hloro-6-(N-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metil)metilsulfonamido)pirimidin-4-karboksamid u vidu belog praha (0.715 g, 1.96 mmol, prinos 82%). LC/MS: m/z=365.2 [M+H]+ .
Šema 35
6-(N-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metil)metilsulfonamido)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br. 52):
Smeši 2-hloro-6-(N-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metil)metilsulfonamido) pirimidin-4-karboksamida (0.365 g, 1.00 mmol) u dioksanu (5 mL) dodat je 2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan (0.379 g, 1.21 mmol), 2M vodeni rastvor Na2CO3(1.0 mL, 2.0 mmol), i PdCl2(dppf) (0.046 g, 0.056 mmol). Reakciona posuda je isprana argonom, hermetički zatvorena, i zagrevana na 80°C preko noći. Posle hlađenja, reakciona smeša je isparavana u vakuumu do ostatka. Ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu sa 30-80% EtOAc u heksanima. Frakcije proizvoda su isparavane do dobijanja ostatka i ostatak je triturisan sa 5 mL 1:1 EtOAc / heksana. Ĉvrsti ostatak je otfiltriran, ispran dva puta sa 1 mL 1:1 EtOAc / heksana, i osušen pod vakuumom na 40°C da bi se dobio 6-(N-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metil)metilsulfonamido)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)
pirimidin-4-karboksamid u vidu žuto-mrko-narandžastog praha (0.416 g, 0.805 mmol, prinos 80%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.61-8.55 (3H, m), 8.01 (1H, s), 7.94-7.91 (1H, m), 7.33-7.26 (2H, m), 7.23-7.17 (2H, m), 7.10 (2H, d, J=9.0 Hz), 4.44-4.37 (1H, m), 4.35-4.28 (1H, m), 4.22-4.15 (1H, m), 4.07 (1H, dd, J=8.8 Hz, 6.6 Hz), 3.81 (1H, dd, J=8.6 Hz, 5.3 Hz), 3.52 (3H, s), 1.35 (3H, s), 1.23 (3H, s). LC/MS: m/z=517.2 [M+H]+ .
Šema 36
6-(N-(2,3-dihidroksipropil)metilsulfonamido)-2-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamid:
Suspenziji 6-(N-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metil)metil sulfonamido)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida (0.308 g, 0.596 g) u 85:15 DCM / MeOH (5 mL) dodata je 4M HCl u dioksanu (1.0 mL). Posle 1 časa, dodata je voda (0.5 mL) i obrazovao se čvrsti ostatak. Posle 1 časa, čvrsti ostatak je filtriran i ispran sukcesivno dva puta sa 2 mL DCM, dva puta sa 1 mL MeOH, jednom sa 3 mL MeOH, i dva puta sa 1 mL DCM. Ĉvrsti ostatak je osušen pod vakuumom na 40°C da bi se dobio 6-(N-(2,3-dihidroksipropil)metilsulfonamido)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamid kao beli prah (0.200 g, 0.420 mmol, prinos 70%).1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.63-8.54 (3H, m), 8.01 (1H, s), 7.84 (1H, s), 7.33-7.26 (2H, m), 7.23-7.17 (2H, m), 7.09 (2H, d, J=8.8 Hz), 5.08 (1H, d, J=5.5 Hz), 4.80 (1H, t, J=5.7 Hz), 4.31-4.24 (1H, m), 4.05-3.96 (1H, m), 3.86-3.77 (1H, m), 3.54 (3H, s), 3.45-3.35 (2H, m). LC/MS: m/z=477.1 [M+H]+ .
PRIMER 16
Priprema (S)-2-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-6-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida (jedinjenje br.54; referentno jedinjenje)
Šema 37
(S)-metil 2-((4-karbamoil-6-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-2-il)amino)propanoat: Smeši (S)-metil 2-((4-karbamoil-6-hloropirimidin-2-il)amino)propanoata (0.642 g, 2.48 mmol) u dioksanu (12.5 mL) dodat je 2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan (0.861 g, 2.74 mmol), 2M vodeni rastvor Na2CO3(2.50 mL, 5.00 mmol), i PdCl2(dppf) (0.105 g, 0.129 mmol). Reakciona posuda je isprana argonom, hermetički zatvorena, i zagrevana na 80°C u trajanju od 5 časova. Posle hlađenja, reakciona smeša je isparavana u vakuumu i ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu sa 20-60% acetona u heksanima. Frakcije proizvoda su isparavane u vakuumu da bi se dobio (S)-metil 2-((4-karbamoil-6-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-2-il)amino)propanoat u vidu žuto-mrko-žutog stakla (0.911 g, 2.22 mmol, prinos 89%). LC/MS: m/z=411.2 [M+H]+ .
Šema 38
(S)-2-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-6-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamid:
Rastvor (S)-metil 2-((4-karbamoil-6-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-2-il)amino)propanoata (0.911 g, 2.22 mmol) u 7M amonijaku u metanolu (20 mL, 140 mmol) je zagrevan u hermetički zatvorenoj epruveti tokom 4 dana na 50°C. Posle hlađenja, reakciona smeša je isparavana u vakuumu i ostatak podvrgnut hromatografiji na silika gelu sa 50-100% acetona u heksanima. Frakcije proizvoda su isparavane u vakuumu i dobijeni čvrsti ostatak je triturisan sa 10 mL 1:1 acetona / heksana. Ĉvrsti ostatak je filtriran, ispran jednom sa 5 mL 1:1 acetona / heksana, i osušen pod vakuumom na 40°C da bi se dobio (S)-2-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-6-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamid u vidu belog praha (0.713 g, 1.80 mmol, prinos 81%).1H NMR (400 MHz, CD3OD): 8.20 (2H, d, J=8.8 Hz), 7.76 (1H, s), 7.21-7.08 (4H, m), 7.06 (2H, d, J=8.8 Hz), 4.47 (1H, br s), 1.54 (3H, d, J=7.2 Hz). LC/MS: m/z=396.1 [M+H]+ .
PRIMER 17
Priprema (S)-4-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-6-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-2-karboksamida (jedinjenje br.55; referentno jedinjenje)
Šema 39
Metil 4-hloro-6-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-2-karboksilat:
Smeši 4,6-dihloropirimidin-2-karboksilne kiseline (1.931 g, 10.01 mmol) u dioksanu (50 mL) dodat je 2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan (3.459 g, 11.01 mmol), 2M vodeni rastvor Na2CO3(10.0 mL, 20.0 mmol), i PdCl2(dppf) (0.413 g, 0.506 mmol). Reakciona posuda je isprana argonom, hermetički zatvorena, i zagrevana na 100°C tokom 5 časova. Posle hlađenja, reakciona smeša je raspodeljena između 100 mL EtOAc i 50 mL vode. Došlo je do obrazovanja izvesne količina čvrste supstance i ona je otfiltrirana. Organski slojevi su razdvojeni i isprani još jednom sa 25 mL zasićenog slanog rastvora što je dovelo do obrazovanja još čvrste supstance. Organski sloj i filtrirani čvrsti ostaci su ponovo spojeni i isparavani u vakuumu. Ovom ostatku je dodat MeOH (100 mL) i koncentrovana H2SO4(1 mL). Smeša je zagrevana na refluksu u toku 2 časa, zatim je ohlađena i ugašena dodatkom čvrstog NaHCO3. Smeša je isparavana u vakuumu i ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu sa 5-30% EtOAc / heksana. Frakcije proizvoda su isparavane i ostatak je triturisan sa 10 mL 1:1 EtOAc / heksana. Ĉvrsti ostatak je filtriran, ispran dva puta sa 2 mL 1:1 EtOAc / heksana i osušen na vazduhu da bi se dobio metil 4-hloro-6-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-2-karboksilat u vidu belog praha (1.240 g, 3.46 mmol, prinos 35%). LC/MS: m/z=359.2 [M+H]+ .
Šema 40
(S)-metil 4-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)-6-((1-metoksi-1-oksopropan-2-il)amino)pirimidin-2-karboksilat:
Suspenziji metil 4-hloro-6-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-2-karboksilata (0.719 g, 2.00 mmol) u acetonitrilu (10 mL) dodat je (S)-metil 2-aminopropanoat hidrohlorid (0.310 g, 2.22 mmol) i iPr2NEt (0.77 mL, 4.4 mmol). Smeša je zagrevana na 50°C tokom 2 časa, a zatim na 80°C tokom 6 dana. Smeša je isparavana u vakuumu i ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu sa 20-60% EtOAc / heksana. Frakcije proizvoda su isparavane u vakuumu da bi se dobio (S)-metil 4-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)-6-((1-metoksi-1-oksopropan-2-il)amino)pirimidin-2-karboksilat u vidu bledožuto-mrkog ulja (0.479 g, 1.13 mmol, prinos 56%). LC/MS: m/z=426.2 [M+H]+ .
Šema 41
(S)-4-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-6-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-2-karboksamid:
Rastvor (S)-metil 4-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)-6-((1-metoksi-1-oksopropan-2-il)amino)pirimidin-2-karboksilata (0.479 g, 1.13 mmol) u 7M amonijaku u metanolu (70 mmol) je zagrevan u hermetički zatvorenoj epruveti preko noći na 50°C. Posle hlađenja, reakciona smeša je isparavana u vakuumu. Ostatak je triturisan sa 5 mL 1:1 acetona / heksana, filtriran, ispran jednom sa 5 mL 1:1 acetona / heksana i osušen pod vakuumom na 40°C da bi se dobio (S)-4-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-6-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-2-karboksamid u vidu belog praha (0.344 g, 0.870 mmol, prinos 77%).1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.08 (2H, br d, J=6.6 Hz), 8.01 (1H, s), 7.77 (1H, br d, J=6.8 Hz), 7.66 (1H, s), 7.55 (1H, s), 7.32-7.24 (2H, m), 7.21-7.14 (2H, m), 7.13-7.04 (4H, m), 4.69-4.58 (1H, m), 1.33 (3H, d, J=6.8 Hz). LC/MS: m/z=396.1 [M+H]+ .
PRIMER 18
Priprema (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)oksi)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida (jedinjenje br.56)
Šema 42
(S)-Etil 2-((6-karbamoil-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-il)oksi)propanoat: Rastvoru 2,6-dihloropirimidin-4-karboksamida (0.385 g, 2.01 mmol) u THF (10 mL) dodat je (S)-etil 2-hidroksipropanoat (0.26 mL, 2.3 mmol). Smeša je ohlađena u kupatilu sa smešom suvog leda i acetona i dodat je 60% NaH u mineralnom ulju (0.094 g, 2.4 mmol). Reakciona smeša je ostavljena da se polako zagreje i posle 2 časa je ugašena sa 2 mL 10% rastvorom limunske kiseline. Reakciona smeša je raspodeljena između 50 mL EtOAc i 25 mL zasićenog slanog rastvora i organska frakcija je osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je rastvoren u dioksanu (10 mL) i dodati su 2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan (0.691 g, 2.20 mmol), 2M vodeni rastvor Na2CO3(2.0 mL, 4.0 mmol), i PdCl2(dppf) (0.091 g, 0.11 mmol). Reakciona posuda je isprana argonom, hermetički zatvorena, i zagrevana na 100°C preko noći. Posle hlađenja, reakciona smeša je isparavana u vakuumu i ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu sa 10-50% acetona u heksanima. Frakcije proizvoda su isparavane u vakuumu da bi se dobio (S)-etil 2-((6-karbamoil-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-il)oksi)propanoat u vidu bledožuto-mrkog ulja (0.762 g, 1.79 mmol, prinos 90%). LC/MS: m/z=426.2 [M+H]<+>.
Šema 43
(S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)oksi)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamid:
Rastvor (S)-etil 2-((6-karbamoil-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-il)oksi)propanoata (0.762 g, 1.79 mmol) u 7M amonijaku u metanolu (10 mL, 70 mmol) je zagrevan u hermetički zatvorenoj epruveti preko noći na 50°C. Posle hlađenja, reakciona smeša je isparavana u vakuumu i ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu sa 25-100% acetona u heksanima. Frakcije proizvoda su isparavane u vakuumu i ostatak je triturisan sa 5 mL MeOH. Ĉvrsti ostatak je filtriran i ponovo ispran sa 2 mL MeOH. Filtrat MeOH i ispirci su isparavani u vakuumu i triturisani sa 2 mL MeOH, filtrirani, i ponovo isprani sa 1 mL MeOH. Prva i druga serija čvrste supstance su spojene i osušene pod vakuumom na 40°C da bi se dobio (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)oksi)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamid kao beli prah (0.220 g, 0.555 mmol, prinos 31%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.59 (2H, d, J=8.8 Hz), 8.50 (1H, s), 7.96 (1H, s), 7.69 (1H, s), 7.33-7.25 (2H, m), 7.24 (1H, s), 7.23-7.15 (3H, m), 7.06 (2H, d, J=8.8 Hz), 5.36 (1H, q, J=6.8 Hz), 1.52 (3H, d, J=7.0 Hz). LC/MS: m/z=397.0 [M+H]+ .
PRIMER 19
Priprema (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-((4-trifluorometil)piridin-2-il)oksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida (jedinjenje br.57)
Šema 44
Hermetički zatvorena staklena bočica koja sadrži smešu 2-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenoksi)-4-(trifluorometil)piridina (182 mg, 0.5 mmol), amida 6-(1-karbamoil-etilamino)-2-hloro-pirimidin-4-karboksilne kiseline (122 mg, 0.5 mmol), PdCl2(PPh3)2(28 mg, 0.04 mmol, Aldrich), Cs2CO3(325 mg, 1 mmol, Aldrich) u smeši rastvarača etilen glikol dimetil etra (1 mL), vode (1 mL) i etanola (0.5 mL) je zagrevana na 100°C u trajanju od 2 časa. Posle hlađenja do sobne temperature, smeša je razblažena zasićenim slanim rastvorom (2 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2 x 25 mL). Spojeni organski slojevi su sušeni preko Na2SO4, filtrirani i koncentrovani na rotacionom isparivaču. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na silika gelu (0-10% MeOH/CH2Cl2) da bi se dobio (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(4-trifluorometil)piridin-2-il)oksi)fenil)pirimidin-4-karboksamid kao bela čvrsta supstanca, koja je dalje triturisana metanolom i osušena pod vakuumom (59 mg, 26%).1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.60 (2H, d, J=8.8 Hz), 8.44 (1H, d, J=5.2 Hz), 8.32 (1H, br), 7.98 (1H, d, J=6.8 Hz), 7.74 (1H, bs), 7.57-7.52 (3H, m), 7.27 (2H, d, J=6.4 Hz), 7.13 (1H, s), 7.02 (1H, bs), 4.59 (1H, m), 1.38 (3H, d, J=7.2 Hz). LC/MS: m/z=447 [M+H]+ .
PRIMER 20
Priprema amida 6-((S)-1-karbamoil-etilamino)-2-(4-hidroksi-fenil)-pirimidin-4-karboksilne kiseline (jedinjenje br.65; referentno jedinjenje)
Šema 45
Posuda okruglog dna zapremine 100 mL je napunjena sa 4-hidroksifenil boronskom kiselinom (1 g, 7.25 mmol), amidom 6-((S)-1-karbamoil-etilamino)-2-hloro-pirimidin-4-karboksilne kiseline (7.25 mmol, 1.76 g), PdCl2(PPh3)2(Aldrich, 0.5 mmol, 0.3562 g), Na2CO3(7.25 mL, 2M vodeni rastvor) i dioksanom (5 mL). Posuda je pročišćena azotom i zagrevana do 100°C u trajanju od 16 časova kada je reakcija završena. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je suspendovan u 50% MeOH u DCM, filtriran na vakuumu, i filter kolač je odbačen. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom i suspendovan u DCM, mešan tokom jednog časa, i filtriran pomoću vakuum filtracije da bi se obezbedilo jedinjenje iz naslova u vidu svetlosmeđeg praha (2 g, 91%).<1>H NMR (CD3OD) 8.25-8.09 (m, 2H), 7.09-6.92 (m, 1H), 6.82-6.70 (m, 2H), 4.62-4.40 (m, 1H), 1.49-1.31 (m, 3H). LC/MS: m/z 301[M+H]+ .
PRIMER 21
Priprema amida 6-((S)-1-karbamoil-etilamino)-2-[4-(4-cijano-fenoksi)-fenil]-pirimidin-4-karboksilne kiseline (jedinjenje br.66)
Šema 46
Bočica od 50 mL sa zatvaračem sa navojem sa septumom je napunjena sa amidom 6-((S)-1-karbamoil-etilamino)-2-(4-hidroksi-fenil)-pirimidin-4-karboksilne kiseline (100 mg, 0.3 mmol), 4-fluorobenzo-nitrilom (40 mg, 0.3 mmol), kalijum karbonatom (92 mg, 0.7 mmol) i N,N-dimetilformamidom (5 mL). Posuda je pročišćena azotom i zagrevana do 100°C u trajanju od 16 časova nakon čega je reakcija završena. Smeša je zatim razblažena sa 20 mL vode i ekstrahovana sa 2 x 20 mL EtOAc. Spojeni organski slojevi su sušeni preko natrijum sulfata i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u 20% metanola/hloroforma i propušten kroz kratak čep od silika gela. Frakcije koje sadrže željeni materijal su koncentrovane i suspendovane u rastvoru od 20% EtOAc/heksana. Suspenzija je filtrirana pomoću vakuuma i ostavljeno je da vazduh prelazi preko filter kolača tokom jednog časa. Filter kolač je zatim prebačen u scintilacionu bočicu, sprašen, i zagrevan pod vakuumom tokom jednog časa da bi se obezbedilo naslovno jedinjenje u vidu bele čvrste supstance (44 mg, 33%). 1H NMR (DMSO-d6): 8.66-8.59 (m, 2H), 8.35-8.28 (s, 1H), 8.02-7.95 (m, 1H), 7.91-7.84 (m, 2H), 7.79-7.70 (s, 1H), 7.59-7.51 (s, 1H), 7.25-7.15 (m, 4H), 7.14-7.08 (s, 1H), 7.05-6.97 (s, 1H), 4.64-4.49 (m, 1H), 1.43-1.31 (m, 3H). LC/MS: m/z 402[M+H]+ .
PRIMER 22
Priprema (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(2-(2-aminopiridin-4-il)-4-hlorofenoksi)pirimidin-4-karboksamida (jedinjenje br.67; referentno jedinjenje)
Šema 47
2-(2-aminopiridin-4-il)-4-hlorofenol:
Smeša 4-hloro-2-aminopiridina (1.28 g, 10 mmol), boronske kiseline (1.72 g, 10 mmol), Na2CO3(3.18 g, 30 mmol) i Pd(PPh3)2Cl2u DME/EtOH/H2O (4 mL/2 mL/4 mL) je pročišćena sa Ar u trajanju od jednog minuta, zatim mešana na 100°C tokom 14 časova. Reakciona smeša je ohlađena do 0°C, njena pH vrednost je podešena na 5 korišćenjem 6N HCl, i razblažena sa EtOAc. Organski sloj je izdvojen, osušen preko MgSO4 i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je podvrgnut „flash" hromatografiji na silika gelu upotrebom dihlorometana/metanola kao eluenta da bi se dobio 2-(2-aminopiridin-4-il)-4-hlorofenol u vidu žućkaste čvrste supstance (1.8 g, prinos 82%). LC/MS: m/z=221 [M+H]<+>, (m/z+H) 221.
Šema 48
(S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(2-(2-aminopiridin-4-il)-4-hlorofenoksi)pirimidin-4-karboksamid:
Smeša 2-(2-aminopiridin-4-il)-4-hlorofenola (110 mg, 0.5 mmol), (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-hloropirimidin-4-karboksamida (122 mg, 0.5 mmol), CuI (10 mg, 0.05 mmol) i Cs2CO3(191 mg, 0.5 mmol) u DMF (3 mL) je mešana na 120°C tokom 4 časa. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, obrađena sa dihlorometanom i podvrgnuta „flash" hromatografiji (DCM/metanol) da bi se dobio (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(2-(2-aminopiridin-4-il)-4-hlorofenoksi)pirimidin-4-karboksamid kao bela čvrsta supstanca (189 mg, prinos 85%).<1>H NMR (CD3OD): 7.82-8.05 (1H, br), 7.6 (2H, m), 7.40 (2H, m), 6.80 (1H, m), 6.60 (2H, m), 4.23-4.10 (1H, m), 1.35 (3′-1, d, J=7.0 Hz). LC/MS: m/z=428 [M+H]+ .
PRIMER 23
Priprema 2-(piridazin-4-il)-4-(trifluorometil)fenola
Šema 49
Rastvoru 2-jodo-4-trifluorometilfenola (2.6 g, 9.0 mmol) u DMF dodat je 4-(tributilstanil)pirazin (3.5 g, 9.49 mmol) i CsF (2.73 g, 18 mmol). Reakciona smeša je mešana 5 minuta, a zatim su dodati Pd(PPh3)4(0.52 g, 0.45 mmol) i CuI (178 mg, 0.94 mmol). Nakon pročišćavanja sa Ar tokom 1 minuta, smeša je mešana pod Ar u trajanju od 14 časova na 45°C. Reakciona smeša je obrađena sa EtOAc. Uklanjanjem EtOAc praćenim „flash" hromatografijom na silika gelu korišćenjem dihlorometana/metanola kao eluenta, dobijen je 2-(piridazin-4-il)-4-(trifluorometil)fenol kao blago roze čvrsta supstanca (1.08 g, prinos 50%). LC/MS: m/z=241 [M+H]+ .
PRIMER 24
Priprema (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(2-(4-fluorofenoksi)piridin-4-il)pirimidin-4-karboksamida (jedinjenje br.68)
Šema 50
Smeša (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(2-fluoropiridin-4-il)pirimidin-4-karboksamida (60 mg, 0.2 mmol), 4-fluorofenola (40 mg, 0.2 mmol) i Cs2CO3(76 mg, 0.2 mmol) u DMF (1 mL) je stavljena u reakcionu bočicu za mikrotalasnu pećnicu i zagrevana u mikrotalasnoj pećnici na 160°C tokom 20 minuta. Reakciona smeša je obrađena sa DCM, zatim osušena i isparavana. Ostatak je podvrgnut C18 „flash" hromatografiji korišćenjem acetonitrila/H2O/0.1 TFA kao eluenta i neutralisan da bi se dobio (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(2-(4-fluorofenoksi)piridin-4-il)pirimidin-4-karboksamid kao bela čvrsta supstanca (40 mg, prinos 50%).<1>H NMR (CD3OD): 7.90-8.21 (3H, m), 6.90-7.2 (5H, m), 4.4 (1H, m), 1.35 (3H, d, J=7.0 Hz). LC/MS: m/z=398 [M+H]+ .
PRIMER 25
Priprema (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(6-(4-fluorofenoksi)piridin-3-il)pirimidin-4-karboksamida (jedinjenje br.69)
Šema 51
2-(4-fluoro-fenoksi)-5-jodo-piridin:
Smeša 4-fluorofenola (1.12 g, 10 mmol), 2-bromo-5-jodopiridina (2.84 g, 10 mmol) i Cs2CO3(3.83 g, 10 mmol) u DMF je mešana na 120°C tokom 4 časa. Reakciona smeša je obrađena sa EtOAc da bi se dobio 2-(4-fluoro-fenoksi)-5-jodo-piridin koji je upotrebljen za sledeći korak bez dodatnog prečišćavanja (sirovi prinos 100%, žućkasta čvrsta supstanca). LC/MS: m/z=317 [M+H]+ .
Šema 52
2-(4-fluoro-fenoksi)-5-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-piridin:
Smeša 2-(4-fluoro-fenoksi)-5-jodo-piridina (6.75 g, 21.3 mmol), pinakol diborana (5.42 g, 21.3 mmol), KOAc (6.26 g, 64 mmol) i Pd(dppf)Cl2(0.82 g, 1 mmol) u dioksanima je pročišćavana sa Ar tokom 2 minuta. Smeša je mešana pod Ar u trajanju od 14 časova i obrađena sa EtOAc. Uklanjanjem EtOAc praćenim „flash" hromatografijom na silika gelu (heksani/EtOAc) dobijen je 2-(4-fluoro-fenoksi)-5-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-piridin kao bezbojna čvrsta supstanca (4.5 g, prinos 67%). LC/MS: m/z=317 [M+H]<+>
Šema 53
(S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(6-(4-fluorofenoksi)piridin-3-il)pirimidin-4-karboksamid:
Smeša 2-(4-fluorofenoksi)-5-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)piridina (158 mg, 0.5 mmol), (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-hloropirimidin-4-karboksamida (121 mg, 0.5 mmol), Na2CO3(2 M, 1 mL, 2 mmol) i Pd(PPh3)2Cl2(20 mg, 0.025 mmol) u DME/EtOH/H2O (2 mL/1 mL/2 mL) je pročišćavana sa Ar tokom jednog minuta, zatim mešana na 100°C u trajanju od 14 časova. Reakciona smeša je zatim obrađena sa DCM. DCM je izdvojen, osušen preko MgSO4, i uklonjen pod vakuumom. Ostatak je podvrgnut „flash" hromatografiji na silika gelu upotrebom dihlorometana/metanola kao eluenta da bi se dobio (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(6-(4-fluorofenoksi)piridin-3-il)pirimidin-4-karboksamid u vidu sive čvrste supstance (100 mg, prinos 50%).1H NMR (DMSO-d6): 9.3 (1H, s), 8.9 (1H, m), 8.3 (1H, s), 8.05 (1H, m), 7.75 (1H, s), 7.5 (1H, s), 7.2-7.4 (4H, m), 6.95-7.15 (2H, m), 6.80 (1H, s), 4.5 (1H, m), 1.35 (3H, d, J=7.0 Hz). LC/MS: m/z=398 [M+H]+ .
PRIMER 26
Priprema (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(4-fluorofenil)piperazin-1-il)pirimidin-4-karboksamida (jedinjenje br.70; referentno jedinjenje)
Šema 54
Smeša 1-(4-fluorofenil)piperazina (112 mg, 0.62 mmol), (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-hloropirimidin-4-karboksamida (150 mg, 0.62 mmol) i Cs2CO3(235 mg, 0.62 mmol) u DMF (3.0 mL) je mešana na 100°C u trajanju od 14 časova. Reakciona smeša je obrađena sa EtOAc i prečišćena pomoću „flash" hromatografije na silika gelu (DCM/metanol) da bi se dobio (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(4-fluorofenil)piperazin-1-il)pirimidin-4-karboksamid u vidu bele čvrste supstance (193 mg, 80%). 1H NMR (CD3OD): 6.90-7.1 (4H, m), 6.55 (1H, s), 4.3 (1H, m), 3.98 (4H, m), 3.10 (4H, m), 1.40 (3H, d, J=7.0 Hz). LC/MS: m/z=388 [M+H]+ .
PRIMER 27
Priprema (S)-6-(2-karbamoilpirolidin-1-il)-2-(4-(4-hloro-2-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida (jedinjenje br.78)
Šema 55
(S)-metil 6-(2-karbamoilpirolidin-1-il)-2-hloropirimidin-4-karboksilat:
Smeši metil 2,6-dihloropirimidin-4-karboksilata (2.074 g, 10.02 mmol) u acetonitrilu (50 mL) dodat je (S)-pirolidin-2-karboksamid (1.150 g, 10.07 mmol) i iPr2NEt (1.92 mL, 11.02 mmol). Smeša je zagrevana na 50°C preko noći i zatim filtrirana dok je još bila topla. Filter kolač je ispran acetonitrilom (1 x 10 mL), zatim osušen pod vakuumom na 40°C da bi se dobila prva serija (S)-metil 6-(2-karbamoilpirolidin-1-il)-2-hloropirimidin-4-karboksilata u vidu čvrste supstance žutomrke boje (0.671 g, 2.36 mmol, prinos 24%). Filtrat i ispirci su isparavani u vakuumu i triturisani toplim acetonitrilom (10 mL). Ĉvrsti ostatak je filtriran, ispran acetonitrilom (2 x 5 mL), i osušen pod vakuumom na 40°C da bi se dobila druga serija (S)-metil 6-(2-karbamoilpirolidin-1-il)-2-hloropirimidin-4-karboksilata u vidu čvrste supstance (0.849 g, 2.98 mmol, prinos 30%). LC/MS: m/z=285.1 [M+H]+ .
Šema 56
(S)-6-(2-karbamoilpirolidin-1-il)-2-hloropirimidin-4-karboksamid
Smeša (S)-metil 6-(2-karbamoilpirolidin-1-il)-2-hloropirimidin-4-karboksilata (0.849 g, 2.98 mmol) u 7M amonijaku u MeOH (5.0 mL) je mešana na sobnoj temperaturi preko noći i zatim filtrirana. Filter kolač je ispran metanolom (1 x 2 mL)) i osušen pod vakuumom na 40°C da bi se dobio (S)-6-(2-karbamoilpirolidin-1-il)-2-hloropirimidin-4-karboksamid kao beli prah (0.611 g, 2.27 mmol, prinos 76%). LC/MS: m/z=270.2 [M+H]+ .
Šema 57
(S)-6-(2-karbamoilpirolidin-1-il)-2-(4-(4-hloro-2-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamid:
Smeši (S)-6-(2-karbamoilpirolidin-1-il)-2-hloropirimidin-4-karboksamida (0.272 g, 1.01 mmol) u dioksanu (5 mL) dodat je 2-(4-(4-hloro-2-fluorofenoksi)fenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan (0.387 g, 1.11 mmol), 2M vodeni rastvor Na2CO3(1.0 mL, 2.0 mmol) i PdCl2(dppf) (0.044 g, 0.054 mmol). Reakciona posuda je isprana argonom, hermetički zatvorena, i zagrevana na 100°C preko noći. Posle hlađenja, reakciona smeša je isparavana u vakuumu i ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu sa 25-100% acetona u heksanima. Frakcije proizvoda su isparavane u vakuumu i ostatak je dalje podvrgnut hromatografiji korišćenjem reverzno-fazne hromatografije sa gradijentom 40-70% acetonitrila u vodi (+0.1% TFA). Frakcije proizvoda su sakupljene i liofilizovane. Ostatak je triturisan sa acetonitrilom (3 mL). Ĉvrsti ostatak je otfiltriran, ispran acetonitrilom (1 x 1 mL), i osušen pod vakuumom na 40°C da bi se dobio (S)-6-(2-karbamoilpirolidin-1-il)-2-(4-(4-hloro-2-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamid u vidu beličastog praha (0.152 g, 0.333 mmol, prinos 33%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): Postoji u obliku rotamera u odnosu ~70:30: 8.60-8.52 (2H, m), 8.35 (1H, s), 7.80 (1H, s), 7.73-7.67 (1.3H, m), 7.51 (0.7H, s), 7.38-7.28 (2H, m), 7.23 (0.3H, s), 7.09 (0.6H, d, J=8.3 Hz), 7.04 (1.4H, d, J=8.8 Hz), 7.00-6.94 (1.4H, m), 6.77 (0.3H, s), 4.58-4.52 (0.7H, m), 4.33-4.27 (0.3H, m), 3.90-3.81 (0.3H, m), 3.79-3.70 (0.3H, m), 3.70-3.62 (0.7H, m), 3.56-3.47 (0.7H, m), 2.38-2.17 (1H, m), 2.11-1.91 (3H, m). LC/MS: m/z=456.1 [M+H]+ .
PRIMER 28
Priprema 6-((3S,4S)-3,4-dihidroksipirolidin-1-il)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida (jedinjenje br.79)
Šema 58
Metil 2-hloro-6-((3S,4S)-3,4-dihidroksipirolidin-1-il)pirimidin-4-karboksilat:
Smeša (3S,4S)-pirolidin-3,4-diol hidrohlorida (0.773 g, 5.54 mmol), metil 2,6-dihloropirimidin-4-karboksilata (1.038 g, 5.01 mmol) i iPr2NEt (2.00 mL, 11.5 mmol) u acetonitrilu (25 mL) je zagrevana na 50°C tokom 3 časa. Reakciona smeša je isparavana u vakuumu i ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu sa 25-75% acetona u heksanima. Frakcije proizvoda su isparavane u vakuumu da bi se dobio metil 2-hloro-6-((3S,4S)-3,4-dihidroksipirolidin-1-il)pirimidin-4-karboksilat u vidu svetložuto-mrkog praha (1.132 g, 4.14 mmol, prinos 83%). LC/MS: m/z=274.2 [M+H]+ .
Šema 59
2-Hloro-6-((3S,4S)-3,4-dihidroksipirolidin-1-il)pirimidin-4-karboksamid:
Rastvor metil 2-hloro-6-((3S,4S)-3,4-dihidroksipirolidin-1-il)pirimidin-4-karboksilata (1.132 g, 4.14 mmol) u 7M amonijaku u MeOH (12 mL) je ostavljen na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je isparavana u vakuumu i ostatak je apsorbovan u EtOAc (10 mL). Ostatak se prvo rastvorio, a zatim se brzo staložila čvrsta supstanca. Posle ponovnog hlađenja do sobne temperature, staložena čvrsta supstanca je otfiltrirana i zatim osušena pod vakuumom na 40°C da bi se dobio 2-hloro-6-((3S,4S)-3,4-dihidroksipirolidin-1-il)pirimidin-4-karboksamid u vidu žuto-mrkog praha (0.969 g, 3.75 mmol, prinos 91%). LC/MS: m/z=259.2 [M+H]+ .
Šema 60
6-((3S,4S)-3,4-dihidroksipirolidin-1-il)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamid:
Smeši 2-hloro-6-((3S,4S)-3,4-dihidroksipirolidin-1-il)pirimidin-4-karboksamida (0.261 g, 1.01 mmol) u dioksanu (5 mL) je dodat 2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan (0.349 g, 1.11 mmol), 2M vodeni rastvor Na2CO3(1.0 mL, 2.0 mmol) i PdCl2(dppf) (0.045 g, 0.055 mmol). Reakciona posuda je isprana argonom, hermetički zatvorena, i zagrevana na 100°C preko noći. Posle hlađenja, reakciona smeša je isparavana u vakuumu i ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu sa 50-100% acetona u heksanima. Frakcije proizvoda su isparavane u vakuumu i ostatak je triturisan sa acetonitrilom (2 mL). Ĉvrsti ostatak je filtriran, ispran acetonitrilom (1 x 1 mL), i osušen pod vakuumom na 40°C da bi se dobio 6-((3S,4S)-3,4-dihidroksipirolidin-1-il)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamid kao prah krem boje (0.307 g, 0.748 mmol, prinos 74%).1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.55 (2H, d, J=8.6 Hz), 8.33 (1H, s), 7.79 (1H, s), 7.32-7.24 (2H, m), 7.20-7.13 (2H, m), 7.05 (2H, d, J=8.8 Hz), 6.90 (1H, s), 5.29 (1H, d, J=3.3 Hz), 5.21 (1H, d, J=3.3 Hz), 4.15-4.09 (1H, m), 4.09-4.05 (1H, m), 3.77-3.62 (3H, m), 3.35-3.30 (1H, m). LC/MS: m/z=411.1 [M+H]+ .
PRIMER 29
Priprema 6-(2-karbamoil-4-metilpiperazin-1-il)-2-(4-(4-(trifluorometil)fenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida (jedinjenje br. 81) Šema 61
1-terc-butil 3-metil 4-(2-hloro-6-(metoksikarbonil)pirimidin-4-il)piperazin-1,3-dikarboksilat:
Smeša 1-terc-butil 3-metil piperazin-1,3-dikarboksilata (5.133 g, 21.01 mmol), metil 2,6-dihloropirimidin-4-karboksilata (4.354 g, 21.03 mmol) i iPr2NEt (4.0 mL, 23.0 mmol) u acetonitrilu (50 mL) je zagrevana na 50°C tokom 4 časa. Posle hlađenja, reakciona smeša je isparavana u vakuumu i ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu sa 20-70% EtOAc u heksanima. Frakcije proizvoda su isparavane u vakuumu da bi se dobio 1-terc-butil 3-metil 4-(2-hloro-6-(metoksikarbonil)pirimidin-4-il)piperazin-1,3-dikarboksilat u vidu vrlo bledo žutog praha (6.626 g, 15.97 mmol, prinos 76%). LC/MS: m/z=415.2 [M+H]<+>.
Šema 62
terc-Butil 3-karbamoil-4-(6-karbamoil-2-hloropirimidin-4-il)piperazin-1-karboksilat: Smeša 1-terc-butil 3-metil 4-(2-hloro-6-(metoksikarbonil)pirimidin-4-il)piperazin-1,3-dikarboksilata (6.626 g, 15.97 mmol) u 7M amonijaku u MeOH (25 mL, 175 mmol) je zagrevana u hermetički zatvorenoj epruveti na 50°C tokom 3 dana. Reakciona smeša je isparavana u vakuumu i podvrgnuta hromatografiji na silika gelu sa 25-75% acetona u heksanima. Frakcije proizvoda su isparavane u vakuumu da bi se dobio proizvod terc-butil 3-karbamoil-4-(6-karbamoil-2-hloropirimidin-4-il)piperazin-1-karboksilat kao prah krem boje (4.744 g, 12.33 mmol, prinos 77%). LC/MS: m/z=385.0 [M+H]+ .
Šema 63
6-(2-Karbamoil-4-metilpiperazin-1-il)-2-hloropirimidin-4-karboksamid:
Rastvoru terc-butil 3-karbamoil-4-(6-karbamoil-2-hloropirimidin-4-il)piperazin-1-karboksilata (4.744 g, 12.33 mmol) u dioksanu (25 mL) je dodata 4M HCl u dioksanu (5.0 mL, 20.0 mmol). Nakon mešanja preko noći reakciona smeša je razblažena sa dodatnim dioksanom (25 mL) i sa 4M HCl u dioksanu (5.0 mL, 20.0 mmol). Posle 5 časova, dodat je MeOH (10 mL). Nakon mešanja preko noći dodato je još MeOH (10 mL). Nakon mešanja tokom još jedne noći, reakciona smeša je isparavana u vakuumu da bi se dobio sirovi 6-(2-karbamoilpiperazin-1-il)-2-hloropirimidin-4-karboksamid hidrohlorid. Sirova hidrohloridna so je suspendovana u THF (50 mL). Ovome je dodat iPr2NEt (7.10 mL, 40.8 mmol) i metil jodid (0.85 mL, 13.7 mmol). Posuda sa reakcionom smešom je hermetički zatvorena i zagrevana na 70°C tokom 5 časova. Reakciona smeša je ohlađena i raspodeljena između EtOAc (100 mL) i vode (50 mL). Organske frakcije su izdvojene i sačuvane. 1N vodeni rastvor NaOH je dodat vodenom sloju koji je zatim ekstrahovan sa EtOAc (100 mL). Ove organske frakcije su takođe izdvojene i sačuvane. Još jednom, 1N vodeni rastvor NaOH je dodat vodenom sloju koji je zatim ekstrahovan sa EtOAc (100 mL). Organske frakcije su izdvojene i spojene sa drugim serijama organskih ekstrakata. Spojeni organski ekstrakti su sušeni preko Na2SO4, filtrirani, i isparavani u vakuumu. Ĉvrsti ostatak je triturisan sa MeOH (5 mL), filtriran i ispran MeOH (1 x 2 mL). Ĉvrsti ostatak je osušen pod vakuumom na 40°C da bi se dobio 6-(2-karbamoil-4-metilpiperazin-1-il)-2-hloropirimidin-4-karboksamid kao prah krem boje (0.924 g, 3.09 mmol, prinos 25%). LC/MS: m/z=299.1 [M+H]+ .
Šema 64
6-(2-Karbamoil-4-metilpiperazin-1-il)-2-(4-(4-(trifluorometil)fenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamid:
Smeši 6-(2-karbamoil-4-metilpiperazin-1-il)-2-hloropirimidin-4-karboksamida (0.300 g, 1.00 mmol) u dioksanu (5 mL) je dodat 4,4,5,5-tetrametil-2-(4-(4-(trifluorometil)fenoksi)fenil)-1,3,2-dioksaborolan (0.404 g, 1.11 mmol), 2M vodeni rastvor Na2CO3(1.0 mL, 2.0 mmol) i PdCl2(dppf) (0.046 g, 0.056 mmol). Reakciona posuda je isprana argonom, hermetički zatvorena i zagrevana na 100°C preko noći. Posle hlađenja, reakciona smeša je isparavana u vakuumu i ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu sa 0-20% MeOH u acetonu. Frakcije proizvoda su isparavane u vakuumu i ostatak je triturisan sa 1:1 acetonitrilom/MeOH (5 mL). Ĉvrsti ostatak je filtriran, ispran sa MeOH (1 x 1 mL) i acetonitrilom (1 x 1 mL). Dodatna serija materijala je dobijena isparavanjem filtrata, trituracijom ostatka sa 1:1 acetonitrilom / MeOH (2 mL) i ispiranjem čvrstog ostatka sa MeOH (1 x 0.5 mL) zatim acetonitrilom (1 x 0.5 mL). Spojene čvrste supstance su osušene pod vakuumom na 40°C da bi se dobio 6-(2-karbamoil-4-metilpiperazin-1-il)-2-(4-(4-(trifluorometil)fenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamid u vidu vrlo bledožuto-mrkog praha (0.271 g, 0.541 mmol, prinos 54%).1H NMR (400 MHz, CD3OD): 8.57 (2H, d, J=9.0 Hz), 7.71 (2H, d, J=8.6 Hz), 7.39 (1H, s), 7.21 (2H, d, J=8.6 Hz), 7.16 (2H, d, J=9.0 Hz), 5.68-5.23 (1H, br), 4.49-3.93 (1H, br), 3.65-3.54 (1H, m), 3.51-3.43 (1H, m), 3.00-2.93 (1H, m), 2.40 (1H, dd, J=12.1 Hz, 4.6 Hz), 2.34 (3H, s), 2.21 (1H, dt, J=11.8 Hz, 3.5 Hz). LC/MS: m/z=501.1 [M+H]+ .
PRIMER 30
Priprema (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(4-(trifluorometoksi)fenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida (jedinjenje br.84)
Šema 65
4-(4-(trifluorometoksi)fenoksi)anilin:
U posudi sa okruglim dnom zapremine 150 mL rastvoreno je 10.26 g 4-trifluorometoksifenola (57.6 mmol) i 1 ekvivalent 4-fluoronitrobenzena (8.1 g, 57.6 mmol) u 50 mL DMF. Zatim su rastvoru dodata 2 ekvivalenta kalijum karbonata (15.9 g, 115.2 mmol) i smeša je zagrevana do 100°C 16 časova. Kada je reakcija završena, talog je sakupljen vakuumskom filtracijom i ispran etil acetatom. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom do ostatka i zatim razblažen sa 200 mL etil acetata. Organski sloj je ispran sa 2 x 200 mL vode, osušen preko natrijum sulfata i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je propušten kroz kratki čep od silika gela korišćenjem 100% etil acetata kao eluenta. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Primenom metode LC/MS pokazano je prisustvo jedinjenja 30-1.
U posudi sa okruglim dnom zapremine 500 mL, jedinjenje 30-1 je rastvoreno u 100 mL MeOH. Rastvoru je dodato 50 mg 10% Pd/C i rastvor je ohlađen u kupatilu sa mešavinom zasićenog slanog rastvora i leda. Ĉvrsti NaBH4(4 g) je dodat u porcijama, uz održavanje temperature ispod 20°C u kupatilu za hlađenje sa mešavinom zasićenog slanog rastvora i leda. Pomoću metoda LC/MS i TLC pokazano je da je reakcija završena nakon dodavanja NaBH4. Reakciona smeša je filtrirana kroz čep od celita i filtrat je ispran sa MeOH. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom i tamno smeđi 4-(4-(trifluorometoksi)fenoksi)anilin je korišćen u obliku u kome je dobijen za sledeću reakciju.
Šema 66
1-jodo-4-(4-(trifluorometoksi)fenoksi)benzen:
U posudi sa okruglim dnom zapremine 300 mL rastvoreno je 6.92 g (25.63 mmol) 4-(4-(trifluorometoksi)fenoksi)anilina u 40 mL DME i ohlađeno do 0°C u kupatilu sa mešavinom zasićenog slanog rastvora i leda. Korišćenjem levka za ukapavanje, 10 ekvivalenata vodenog rastvora H2SO4(10N vodeni rastvor) je polako dodato rastvoru DME, pri čemu je odmah nastala suspenzija soli. Suspenzija je mešana na 0°C tokom 10 minuta. Zatim je rastvor 1.5 ekvivalenta natrijum nitrita (2.65 g, 38.45 mmol) u 20 mL vode polako ukapan u suspenziju uz održavanje temperature ispod 5°C. Posle dodavanja natrijum nitrita, smeša je mešana na 0°C 30 minuta. Zatim je vodeni rastvor od 3 ekvivalenta natrijum jodida polako ukapan u smešu. Primenom metode LC/MS pokazano je da je reakcija završena. Reakciona smeša je razblažena sa 400 mL EtOAc i isprana sa 700 mL vode i zatim 700 mL 1M natrijum bisulfita. Organski sloj je osušen preko natrijum sulfata i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je zatim podvrgnut „combiflash" hromatografiji korišćenjem kolone silika gela od 330 grama i gradijenta EtOAc (najviše 15%) u heksanu da bi se dobilo 6.53 g 1-jodo-4-(4-(trifluorometoksi)-fenoksi)benzena (67%, bela čvrsta supstanca). m/z 380, 1H NMR (CHCl3): 7.67-7.61 (m, 2H), 7.23-7.16 (m, 2H), 7.04-6.97 (m, 2H), 6.81-6.75 (m, 2H).
Šema 67
4,4,5,5-tetrametil-2-(4-(4-(trifluorometoksi)fenoksi)fenil)-1,3,2-dioksaborolan:
U posudi sa okruglim dnom zapremine 100 mL rastvoren je 1-jodo-4-(4-(trifluorometoksi)-fenoksi)benzen (2.53 g, 6.66 mmol) u 10 mL DMF i obrađen sa 1.1 ekvivalenata bis-borolana (1.86 g, 7.3 mmol), 3 ekvivalenta kalijum acetata (1.96 g, 19.98 mmol) i 0.07 ekvivalenata PdCl2dppf*CH2Cl2(381 mg, 0.466 mmol). Posuda je pročišćena azotom i zagrevana 10 časova na 90°C, nakon čega je reakcija završena. Reakciona smeša je razblažena sa 300 mL EtOAc i filtrirana vakuumom. Filtrat je ispran sa 2 x 300 mL vode. Organski sloj je osušen preko natrijum sulfata i koncentrovan. Ostatak je podvrgnut „combiflash" hromatografiji korišćenjem kolone silika gela od 330 grama i gradijenta etil acetata (najviše 5%) u heksanu da bi se dobilo 905 mg (prinos 36%) 4,4,5,5-tetrametil-2-(4-(4-(trifluorometoksi)fenoksi)fenil)-1,3,2-dioksaborolana u vidu svetlo smeđeg ulja. m/z 380, 1H NMR (CHCl3): 7.83-7.77 (m, 2H), 7.22-7.15 (m, 2H), 7.05-6.95 (m, 4H), 1.36-1.32 (s, 12H).
Šema 68
(S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(4-(trifluorometoksi)fenoksi)fenil) pirimidin-4-karboksamid:
Bočica od 50 mL sa zatvaračem sa navojem sa septumom je napunjena sa 200 mg 4,4,5,5-tetrametil-2-(4-(4-(trifluorometoksi)fenoksi)fenil)-1,3,2-dioksaborolana, 1 ekvivalentom (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-hloropirimidin-4-karboksamida (129 mg, 0.53 mmol), 1.5 mL 2M vodenog rastvora Na2CO3, 0.07 ekvivalenata PdCl2(PPh3)2(28 mg, 0.04 mmol) i 8 mL dioksana. Bočica je pročišćena azotom i zagrevana do 100°C tokom 6 časova, nakon čega je reakcija završena. Smeša je razblažena sa 100 mL EtOAc i isprana dva puta sa 100 mL vode. Organski sloj je osušen preko natrijum sulfata i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je podvrgnut „combiflash" hromatografiji korišćenjem kolone silika gela od 40 grama sa gradijentom EtOAc (najviše 100%) u heksanu da bi se dobilo 76 mg (prinos 31%) (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(4-(trifluorometoksi)fenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida u vidu bele čvrste supstance. m/z 461, 1H NMR (CD3OD): 8.56-8.49 (m, 2H), 7.35-7.27 (m, 2H), 7.17-7.11 (m, 3H), 7.09-7.02 (m, 2H), 4.64-4.49 (m, 1H), 4.56-1.49 (m, 3H).
PRIMER 31
Priprema (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(benzo[d][1,3]dioksol-5-iloksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida (jedinjenje br. 85)
Šema 69
4-(benzo[d][1,3]dioksol-5-iloksi)anilin:
U posudi sa okruglim dnom zapremine 150 mL rastvoreno je 7.95 g sesamola (57.6 mmol) i 1 ekvivalent 4-fluoronitrobenzena (8.1 g, 57.6 mmol)) u 50 mL DMF. Rastvoru su zatim dodata 2 ekvivalenata kalijum karbonata (15.9 g, 115.2 mmol) i smeša je zagrevana do 100°C tokom 16 časova. Kada je reakcija završena, talog je sakupljen vakuumskom filtracijom i ispran etil acetatom. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom do ostatka i zatim razblažen sa 200 mL etil acetata. Organski sloj je ispran sa 2 x 200 mL vode, osušen preko natrijum sulfata, i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je propušten kroz kratak čep od silika gela korišćenjem 100% etil acetata kao eluenta. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom. U posudi sa okruglim dnom zapremine 500 mL, dobijeni ostatak je rastvoren u 100 mL MeOH. Rastvoru je dodato 50 mg 10% Pd/C i rastvor je ohlađen u kupatilu sa mešavinom zasićenog slanog rastvora i leda. Ĉvrsti NaBH4(4 g) je dodat u porcijama uz održavanje temperature ispod 20°C u kupatilu sa mešavinom zasićenog slanog rastvora i leda. Pomoću metoda LC/MS i TLC pokazano je da je reakcija završena nakon dodavanja NaBH4. Reakciona smeša je filtrirana kroz čep od celita i filtrat je ispran sa MeOH. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom i tamnosmeđi ostatak je korišćen bez prečišćavanja za sledeću reakciju.
Šema 70
5-(4-jodofenoksi)benzo[d][1,3]dioksol:
U posudi sa okruglim dnom zapremine 300 mL, rastvoreno je 5.28 g (22.96 mmol) 4-(benzo[d][1,3]dioksol-5-iloksi)anilina u 40 mL DME i ohlađeno do 0°C u kupatilu sa mešavinom zasićenog slanog rastvora i leda. Korišćenjem levka za ukapavanje, 10 ekvivalenata vodenog rastvora H2SO4(10N vodeni rastvor) je polako dodato rastvoru DME, pri čemu je odmah nastala suspenzija soli. Suspenzija je mešana na 0°C tokom 10 minuta. Zatim, rastvor 1.5 ekvivalenta natrijum nitrita (2.38 g, 34.45 mmol) u 20 mL vode je polako ukapan u suspenziju uz održavanje temperature ispod 5°C. Posle dodavanja natrijum nitrita, smeša je mešana na 0°C 30 minuta. Zatim je 30 mL vodenog rastvora natrijum jodida (10.32 g, 68.88 mmol) polako ukapano u smešu. Primenom metode LC/MS pokazano je da je reakcija završena. Reakciona smeša je razblažena sa 400 mL EtOAc i isprana sa 700 mL vode i zatim 700 mL 1M natrijum bisulfita. Organski sloj je osušen preko natrijum sulfata i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je zatim podvrgnut „combiflash" hromatografiji korišćenjem kolone silika gela od 330 grama i gradijenta EtOAc (najviše 15%) u heksanu da bi se dobilo 6 g 5-(4-jodofenoksi)benzo[d][1,3]dioksola (77%, svetlo smeđe ulje). m/z 340, 1H NMR (CHCl3): 7.61-7.54 (m, 2H), 6.79-6.68 (m, 3H), 6.58-6.53 (m, 1H), 6.51-6.45 (m, 1H), 6.00-5.96 (s, 2H).
Šema 71
2-(4-(benzo[d][1,3]dioksol-5-iloksi)fenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan: U posudi sa okruglim dnom zapremine 100 mL, rastvoren je 5-(4-jodofenoksi)benzo[d][1,3]dioksol (3 g, 8.82 mmol) u 10 mL DMF i obrađen sa 1.1 ekvivalenata bis-borolana (2.46 g, 9.7 mmol), 3 ekvivalenta kalijum acetata (2.6 g, 26.46 mmol) i 0.07 ekvivalenata PdCl2dppf*CH2Cl2(503 mg, 0.616 mmol). Posuda je pročišćena azotom i zagrevana 10 časova na 90°C, nakon čega je reakcija završena. Reakciona smeša je razblažena sa 300 mL EtOAc i filtrirana. Filtrat je ispran sa 2 x 300 mL vode. Organski sloj je osušen preko natrijum sulfata i koncentrovan. Ostatak je podvrgnut „combiflash" hromatografiji korišćenjem kolone silika gela od 330 grama i gradijenta etil acetata (najviše 5%) u heksanu da bi se dobilo 905 mg (prinos 30%) 2-(4-(benzo[d][1,3]dioksol-5-iloksi)fenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolana u vidu svetlosmeđeg ulja. m/z 340,<1>H NMR (CHCl3): 7.78-7.71 (m, 2H), 6.96-6.89 (m, 2H), 6.79-6.72 (m, 1H), 6.60-6.55 (m, 1H), 6.53-6.47 (m, 1H), 5.60-5.95 (s, 2H), 1.36-1.29 (s, 12H).
Šema 72
(S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(benzo[d][1,3]dioksol-5-iloksi)fenil)pirimidin-4-karboksamid:
Bočica od 50 mL sa zatvaračem sa navojem sa septumom je napunjena sa 200 mg 2-(4-(benzo[d][1,3]dioksol-5-iloksi)fenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolana, 1 ekvivalentom (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-hloropirimidin-4-karboksamida (1.53 mg, 0.59 mmol), 1.5 mL 2M vodenog rastvora Na2CO3, 0.07 ekvivalenata PdCl2(PPh3)2(28 mg, 0.04 mmol) i 8 mL dioksana. Bočica je pročišćena azotom i zagrevana do 100°C tokom 6 časova, nakon čega je reakcija završena. Smeša je razblažena sa 100 mL EtOAc i isprana dva puta sa 100 mL vode. Organski sloj je osušen preko natrijum sulfata i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je podvrgnut „combiflash" hromatografiji korišćenjem kolone silika gela od 40 grama sa gradijentom EtOAc (najviše 100% ) u heksanu da bi se dobilo 108 mg (prinos 43%) S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(benzo[d][1,3]dioksol-5-iloksi)fenil) pirimidin-4-karboksamida u vidu bele čvrste supstance. m/z 421, 1H NMR (CD3OD): 8.51-8.41 (m, 2H), 7.14-7.07 (s, 1H), 7.01-6.93 (m, 2H), 6.86-6.78 (m, 1H), 6.64-6.60 (m, 1H), 6.57-6.50 (m, 1H), 6.01-5.95 (s, 2H), 4.61-4.49 (m, 1H), 1.56-1.48 (m, 3H).
PRIMER 32
Priprema (S)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)-6-((1-((2-hidroksietil)amino)-1-oksopropan-2-il)amino)pirimidin-4-karboksamida (jedinjenje br. 94)
Šema 73
Jedinjenje 32-1 (273 mg, 1 mmol) je suspendovano u 5 mL 7N NH3u metanolu i mešano na sobnoj temperaturi 14 časova. Rastvarač je uklonjen i preostala čvrsta supstanca je isprana hladnim metanolom. Ĉvrsti ostatak je osušen da bi se dobilo čisto jedinjenje 32-2 u vidu bele čvrste supstance (240 mg, prinos 93%). LC/MS: m/z=259 [M+H]<+>.
Šema 74
Smeša 2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolana (314 mg, 1 mmol), jedinjenja 32-2 (258 mg, 1 mmol), Pd(dppf)Cl2(42 mg, 0.05 mmol), Na2CO3(318 mg, 3 mmol) u DME/EtOH/H2O (4 mL/2 mL/4 mL) je pročišćena argonom tokom 1 minuta i zatim zagrevana na 100°C pod atmosferom argona 14 časova. Smeša je ohlađena u ledenom kupatilu i njena pH vrednost je podešena na 5 korišćenjem 6N HCl, a zatim je smeša ekstenzivno ekstrahovana sa DCM. Slojevi koji sadrže DCM su spojeni i osušeni preko MgSO4. Ostatak dobijen uklanjanjem DCM je iskorišćen za sledeći korak bez prečišćavanja. Prinos sirove supstance 100%. (LC/MS: m/z=397 [M+H]+ .
Šema 75
Smeši jedinjenja 32-3 (277 mg, 0.7 mmol) i EDC (192 mg, 0.84 mmol) u DCM (4 mL) na sobnoj temperaturi dodat je DIEA (0.24 mL, 1.4 mmol). Posle 2 minuta, dodat je 2-aminoetanol (0.042 mL, 8.4 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 14 časova. Reakciona smeša je obrađena sa EtOAc. Sirovi proizvod je podvrgnut „flash" hromatografiji na koloni (DCM/MeOH) da bi se dobio (S)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)-6-((1-((2-hidroksietil)amino)-1-oksopropan-2-il)amino)pirimidin-4-karboksamid u vidu bele čvrste supstance (184 mg, 60%).1H NMR (CD3OD): 8.40 (m, 2H), 6.95-7.20 (m, 7H), 4.50 (m, 1H), 3.40-3.55 (m, 2H), 3.20 (m, 2H), 1.50 (d, J=7.20 Hz, 3H). LC/MS: m/z=440 [M+H]+ .
PRIMER 33
Priprema (S)-6-(1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(4-fluorofenoksi)-3-(hidroksimetil)fenil)pirimidin-4-karboksamida (jedinjenje br.97)
Šema 76
Smeši (4-fluoro-3-metoksikarbonilfenil)boronske kiseline (jedinjenje 33-1) (198 mg, 1 mmol), jedinjenja 33-2 (243 mg, 1 mmol), PdCl2(PPh3)2(56 mg, 0.08 mmol) i Cs2CO3(652 mg, 2 mmol) u bočici je dodat DME (2 mL), H2O (2 mL) i etil alkohol (1 mL). Bočica je zatim preplavljena argonom, hermetički zatvorena, i zagrevana na 80°C tokom 3 časa. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je zakišeljena do pH 1.3 razblaženim vodenim rastvorom HCl. Talog koji se obrazovao je sakupljen, ispran vodom, i sušen na 50°C pod vakuumom 12 časova da bi se dobilo jedinjenje 3. Smeši jedinjenja 33-3, HOBT (1 mmol), N-(3-dimetilaminopropil)-N′-etilkarbodiimd HCl (191 mg, 1 mmol) i protonskog sunđera (214 mg, 1 mmol) u CH2Cl2(5 mL) na sobnoj temperaturi, dodat je MeOH (41 μL, 1 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 časa. Dobijena smeša je sipana na kolonu silika gela i prečišćena putem hromatografije sa gradijentom od 0 do 20% EtOAc u heksanu da bi se dobilo jedinjenje 33-4 (120 mg, 0.33 mmol). Smeši jedinjenja 33-4 (120 mg, 0.33 mmol), 4-fluorofenola (37 mg, 0.33 mmol) i Cs2CO3(108 mg, 0.33 mmol) dodat je DMF(1 mL). Smeša je zagrevana na 65°C četiri dana. Posle hlađenja do sobne temperature smeša je prečišćena hromatografijom na silika gelu sa 0 do 10% MeOH u CH2Cl2da bi se dobio (S)-metil 5-(4-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-6-karbamoilpirimidin-2-il)-2-(4-fluorofenoksi)benzoat (60 mg, 0.13 mmol). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.92 (1H, d, J=2.4 Hz), 8.72 (1H, d, J=8.4 Hz), 8.32 (1H, s), 8.05 (1H, d, J=7.2 Hz), 7.80 (1H, s), 7.59 (1H, s), 7.28 (2H, m), 7.15 (1H, s), 7.11 (2H, m), 7.03 (2H, m), 4.56 (1H, m), 3.82 (3H, s), 1.42 (3H, d, J=6.8 Hz). LC/MS: m/z=454[M+H]+ .
Rastvoru (S)-metil 5-(4-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-6-karbamoilpirimidin-2-il)-2-(4-fluorofenoksi)benzoata (50 mg, 0.11 mmol) u etil alkoholu (1 mL) na sobnoj temperaturi dodat je NaBH4(21 mg, 0.55 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 časa i ugašena dodatkom MeOH. Smeša je sipana na silika gel i prečišćena hromatografijom sa 0 do 20% MeOH u CH2CH2da bi se dobio (S)-6-(1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(4-fluorofenoksi)-3-(hidroksimetil)fenil)pirimidin-4-karboksamid (30 mg, 0.07 mmol) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.57 (1H, d, J=2 Hz), 8.27 (1H, dd, J=2.4, 8.8 Hz), 7.05-6.94 (5H, m), 6.70 (1H, d, J=8.4 Hz), 4.68 (2H, s), 4.50 (1H, s), 1.42 (3H, d, J=7.2 Hz). LC/MS: m/z=426 [M+H]+ .
PRIMER 34
Jedinjenja PRIMERA 34 su pripremljena korišćenjem postupaka opisanih u PRIMERIMA 1-33.
6-((2-amino-2-oksoetil)amino)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.2):
LC/MS: m/z=382.2 [M+H]+ , 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.52 (2H, d, J=9.0 Hz), 8.28 (1H, s), 8.05 (1H, d, J=5.7 Hz), 7.75 (1H, s), 7.50 (1H, s), 7.31-7.24 (2H, m), 7.19-7.13 (2H, m), 7.09 (1H, s), 7.07 (1H, s), 7.03 (2H, d, J=8.8 Hz), 4.01 (2H, d, J=5.3 Hz).
(S)-6-((1-amino-4-metil-1-oksopentan-2-il)amino)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil) pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.3)
LC/MS: m/z=438.2 [M+H]+ , 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.55 (2H, d, J=8.8 Hz), 8.26 (1H, s), 7.88 (1H, d, J=7.5 Hz), 7.73 (1H, s), 7.56 (1H, s), 7.31-7.24 (2H, m), 7.19-7.13 (2H, m), 7.08 (1H, s), 7.04-6.98 (3H, m), 4.65-4.57 (1H, m), 1.78-1.66 (1H, m), 1.63-1.54 (2H, m), 0.94 (3H, d, J=6.6 Hz), 0.88 (3H, d, J=6.6 Hz).
(S)-6-((1-amino-3-hidroksi-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil) pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.4)
LC/MS: m/z=412.2 [M+H]+ , 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.53 (2H, d, J=8.6 Hz), 8.27 (1H, s), 7.89 (1H, d, J=7.0 Hz), 7.74 (1H, s), 7.49 (1H, s), 7.31-7.24 (2H, m), 7.19-7.13 (3H, m), 7.10 (1H, s), 7.02 (2H, d, J=8.8 Hz), 5.00 (1H, t, J=5.3 Hz), 4.69-4.62 (1H, m), 3.73 (2H, t, J=5.7 Hz).
(S)-6-(2-karbamoilpirolidin-1-il)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.5)
LC/MS: m/z=422.2 [M+H]+ , 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): Postoji u obliku vrsta u odnosu ~70:30 8.60-8.51 (2H, m), 8.35 (1H, s), 7.80 (1H, s), 7.72 (0.3H, s), 7.52 (0.7H, s), 7.33-7.22 (2.3H, m), 7.20-7.13 (2H, m), 7.08-6.95 (3.4H, m), 6.77 (0.3H, s), 4.59-4.52 (0.7H, m), 4.33-4.27 (0.3H, m), 3.91-3.82 (0.3H, m), 3.80-3.71 (0.3H, m), 3.70-3.62 (0.7H, m), 3.56-3.46 (0.7H, m), 2.28-2.17 (0.7H, m), 2.11-1.91 (3.3H, m).
(S)-6-((1-amino-3-(1-metil-1H-imidazol-4-il)-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br. 6)
LC/MS: m/z=476.2 [M+H]+ , 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.55 (2H, d, J=8.6 Hz), 8.27 (1H, s), 7.95 (1H, d, J=7.0 Hz), 7.73 (1H, s), 7.63-7.57 (2H, m), 7.32-7.25 (2H, m), 7.19-7.14 (2H, m), 7.06 (1H, s), 7.05 (1H, s), 7.01 (2H, d, J=8.8 Hz), 6.94 (1H, s), 4.83-4.76 (1H, m), 3.57 (3H, s), 3.03-2.96 (1H, m), 2.91-2.83 (1H, m).
(S)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)-6-(2-oksopirolidin-3-il)amino)pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.7)
LC/MS: m/z=408.2 [M+H]+ , 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.52 (2H, d, J=8.8 Hz), 8.29 (1H, s), 8.08 (1H, d, J=7.0 Hz), 7.96 (1H, s), 7.76 (1H, s), 7.32-7.24 (2H, m), 7.20-7.13 (2H, m), 7.05 (1H, s), 7.03 (2H, d, J=8.8 Hz), 4.77-4.67 (1H, m), 3.33-3.23 (2H, m), 2.58-2.43 (1H, m, preklapa se sa pikom DMSO), 2.06-1.92 (1H, m).
6-((1-karbamoilciklopropil)amino)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.8)
LC/MS: m/z=408.2 [M+H]+ , 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): Postoji u obliku konformera u odnosu ~1:1: 8.51 (2H, d, J=9.0 Hz), 8.39-8.23 (2H, m), 7.84 (0.5H, s), 7.75 (0.5H, s), 7.46 (0.5H, s), 7.34-7.23 (2.5H, m), 7.21-7.12 (2.5H, s), 7.04 (2H, d, J=8.8 Hz), 7.01 (0.5H, s), 6.98-6.90 (1H, m), 1.43 (2H, br s), 1.09-0.90 (2H, m).
6-((1-karbamoilciklobutil)amino)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.9)
LC/MS: m/z=422.2 [M+H]+ , 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.47 (2H, d, J=8.8 Hz), 8.35-8.25 (2H, m), 7.74 (1H, s), 7.31-7.23 (2H, m), 7.19-7.11 (2H, m), 7.06 (2H, s vidljivo), 6.99 (2H, d, J=8.8 Hz), 6.73 (1H, s), 2.72-2.62 (2H, m), 2.17-2.07 (2H, m), 1.96-1.85 (2H, m).
6-((1-amino-2-metil-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.10)
LC/MS: m/z=410.2 [M+H]+ , 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.49 (2H, d, J=8.8 Hz), 8.27 (1H, s), 7.86 (1H, s), 7.72 (1H, s), 7.31-7.24 (2H, m), 7.19-7.11 (3H, m), 7.06 (1H, s), 6.99 (2H, d, J=8.8 Hz), 6.78 (1H, s), 1.48 (6H, s).
(S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(4-cijano-3-(trifluorometil)fenoksi) fenil)pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.11)
LC/MS: m/z=471.1 [M+H]+ , 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.66 (2H, d, J=8.8 Hz), 8.34 (1H, s), 8.17 (1H, d, J=8.8 Hz), 8.01 (1H, d, J=6.6 Hz), 7.76 (1H, s), 7.61 (1H, d, J=2.2 Hz), 7.56 (1H, s), 7.41 (1H, dd, J=8.6, 2.4 Hz), 7.30 (2H, d, J=8.8 Hz), 7.31 (1H, s), 7.02 (1H, s), 4.63-4.54 (1H, m), 1.38 (3H, d, J=7.0 Hz).
(S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(3-cijano-4-(trifluorometil)fenoksi) fenil)pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.12)
LC/MS: m/z=471.1 [M+H]+ , 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.65 (2H, d, J=8.8 Hz), 8.33 (1H, s), 8.04-7.97 (2H, m), 7.92 (1H, d, J=2.2 Hz), 7.75 (1H, s), 7.55 (1H, s), 7.46 (1H, dd, J=8.8, 1.8 Hz), 7.27 (2H, d, J=8.8 Hz), 7.12 (1H, s), 7.01 (1H, s), 4.62-4.53 (1H, m), 1.38 (3H, d, J=7.0 Hz).
(S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-((5-(trifluorometil)piridin-2-il)oksi) fenil)pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.13)
LC/MS: m/z=447.1 [M+H]+ , 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.63-8.58 (3H, m), 8.33 (1H, s), 8.27 (1H, dd, J=8.8, 2.6 Hz), 7.99 (1H, J=6.6 Hz), 7.75 (1H, s), 7.56 (1H, s), 7.32-7.26 (3H, m), 7.12 (1H, s), 7.02 (1H, s), 4.63-4.54 (1H, m), 1.38 (3H, d, J=7.0 Hz).
(S)-metil 1-(6-karbamoil-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-il)pirolidin-2-karboksilat (jedinjenje br.15)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): Postoji u obliku rotamera u odnosu ~90:10: 8.57 (0.2H, d, J=7.9 Hz), 8.45 (1.8H, d, J=8.8 Hz), 8.36 (1H, s), 7.82 (1H, s), 7.32-7.24 (2H, m), 7.20-7.14 (2H, m), 7.07-7.01 (2.9H, m), 6.77 (0.1H, s), 4.76-4.70 (0.1H, m), 4.66-4.61 (0.9H, m), 3.72-3.57 (5H, m), 2.40-2.30 (1H, m), 2.12-1.97 (3H, m). LC/MS: m/z=437.2 [M+H]+ .
(S)-etil 1-(6-karbamoil-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-il) indolin-2-karboksilat (jedinjenje br.16)
1H NMR (400 MHz, CD3OD): 8.55-8.50 (2H, m), 8.03 (1H, br s), 7.65 (1H, br s), 7.37-7.30 (2H, m), 7.22-7.11 (4H, m), 7.10-7.07 (3H, m), 5.37 (1H, dd, J=11.0 Hz, 3.7 Hz), 4.27-4.18 (2H, m), 3.72 (1H, dd, J=16.2 Hz, 11.4 Hz), 3.31-3.24 (1H, m), 1.24 (3H, t, J=7.0 Hz). LC/MS: m/z=499.1 [M+H]+ .
Etil 1-((6-karbamoil-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-il)amino) ciklopropankarboksilat (jedinjenje br.17)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.54-8.40 (3H, m), 8.39-8.29 (1H, m), 7.87-7.75 (1H, m), 7.32-7.24 (2H, m), 7.21-7.13 (2H, m), 7.07-6.99 (2.7H, m), 6.90 (0.3H, s), 4.13-3.99 (2H, m), 1.62-1.50 (2H, m), 1.30-1.05 (3H, m), 1.04-0.98 (2H, m). LC/MS: m/z=437.1 [M+H]+ . metil 2-((6-karbamoil-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-il)amino)-2-metilpropanoat (jedinjenje br.18)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.43 (2H, d, J=9.0 Hz), 8.29 (1H, s), 8.19 (1H, s), 7.75 (1H, s), 7.32-7.24 (2H, m), 7.20-7.14 (2H, m), 7.05-7.00 (3H, m), 3.50 (3H, s), 1.53 (6H, s). LC/MS: m/z=425.2 [M+H]+ .
6-((3-amino-3-oksopropil)amino)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.19)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.53 (2H, d, J=8.6 Hz), 8.25 (1H, s), 7.90-7.84 (1H, m), 7.72 (1H, s), 7.36 (1H, s), 7.31-7.24 (2H, m), 7.19-7.12 (2H, m), 7.04 (2H, d, J=8.8 Hz), 6.98 (1H, s), 6.87 (1H, s), 3.70-3.59 (2H, m), 2.72 (2H, t, J=6.6 Hz). LC/MS: m/z=396.1 [M+H]+ .
(S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)(metil)amino)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil) pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.20)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.56 (2H, d, J=9.0 Hz), 8.35 (1H, d, J=2.2 Hz), 7.80 (1H, d, J=2.2 Hz), 7.40 (1H, br s), 7.31-7.24 (2H, m), 7.19-7.13 (2H, m), 7.11 (1H, s), 7.07 (1H, br s), 7.03 (2H, d, J=8.8 Hz), 5.39 (1H, br s), 3.05 (3H, br s), 1.40 (3H, d, J=7.2 Hz). LC/MS: m/z=410.1 [M+H]+ .
(R)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.21)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.54 (2H, d, J=8.8 Hz), 8.27 (1H, s), 7.94 (1H, d, J=6.4 Hz), 7.73 (1H, s), 7.53 (1H, s), 7.32-7.24 (2H, m), 7.20-7.12 (2H, m), 7.08 (1H, s), 7.06-6.97 (3H, m), 4.61-4.50 (1H, m), 1.36 (3H, d, J=7.0 Hz). LC/MS: m/z=396.1 [M+H]+ .
6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.22)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.54 (2H, d, J=8.8 Hz), 8.27 (1H, s), 7.95 (1H, d, J=5.9 Hz), 7.74 (1H, s), 7.53 (1H, s), 7.32-7.23 (2H, m), 7.19-7.12 (2H, m), 7.08 (1H, s), 7.05-6.97 (3H, m), 4.60-4.51 (1H, m), 1.36 (3H, d, J=7.2 Hz). LC/MS: m/z=396.1 [M+H]+ .
6-((4-amino-4-oksobutan-2-il)amino)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.23)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.52 (2H, d, J=8.8 Hz), 8.25 (1H, s), 7.75-7.66 (2H, m), 7.36 (1H, s), 7.31-7.24 (2H, m), 7.19-7.12 (2H, m), 7.04 (2H, d, J=9.0 Hz), 6.95 (1H, s), 6.85 (1H, s), 4.63-4.51 (1H, m), 2.48-2.42 (1H, m), 2.29-2.20 (1H, m), 1.21 (3H, d, J=6.4 Hz). LC/MS: m/z=410.1 [M+H]+ .
6-(3-karbamoilpiperidin-1-il)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.24)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.52 (2H, d, J=8.6 Hz), 8.33 (1H, s), 7.79 (1H, s), 7.45 (1H, s), 7.32-7.21 (3H, m), 7.19-7.12 (2H, m), 7.05 (2H, d, J=8.8 Hz), 6.93 (1H, s), 4.45 (2H, br s), 3.19-3.00 (2H, m), 2.39-2.29 (1H, m), 1.97-1.88 (1H, m), 1.83-1.62 (2H, m), 1.51-1.37 (1H, m). LC/MS: m/z=436.2 [M+H]+ .
4-(6-karbamoil-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-il)morfolin-3-karboksamid (jedinjenje br.25)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.54 (2H, d, J=8.1 Hz), 8.37 (1H, s), 7.82 (1H, s), 7.58 (1H, s), 7.32-7.20 (3H, m), 7.20-7.13 (3H, m), 7.04 (2H, d, J=8.3 Hz), 5.25 (0.5H, br s), 4.62 (0.5H, br s), 4.34 (1H, d, J=12.0 Hz), 4.00-4.93 (1H, m), 3.84 (1H, br s), 3.74 (1H, dd, J=11.8 Hz, 3.9 Hz), 3.59-3.45 (2H, m). LC/MS: m/z=438.1 [M+H]+ .
4-(6-karbamoil-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-il)morfolin-2-karboksamid (jedinjenje br.26)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.53 (2H, d, J=9.0 Hz), 8.37 (1H, s), 7.83 (1H, s), 7.44 (1H, s), 7.40 (1H, s), 7.31-7.24 (2H, m), 7.23 (1H, s), 7.19-7.13 (2H, m), 7.07 (2H, d, J=8.8 Hz), 4.60 (1H, veoma široko s), 4.28 (1H, br s), 4.05-3.98 (2H, m), 3.66 (1H, dt, J=11.2 Hz, 2.6 Hz), 3.30-3.20 (1H, m), 3.19-3.05 (1H, m). LC/MS: m/z=438.1 [M+H]+ .
(S)-1-(6-karbamoil-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-il)indolin-2-karboksilna kiselina (jedinjenje br.31)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 13.29 (1H, br s), 8.61 (2H, d, J=9.0 Hz), 8.49 (1H, s), 7.95 (1H, s), 7.38-7.26 (5H, m), 7.25-7.16 (2.5H, m), 7.16-7.08 (2.5H, m), 7.08-7.02 (1H, m), 5.32 (1H, dd, J=11.2 Hz, 3.1 Hz), 3.69 (1H, dd, J=16.7 Hz, 11.2 Hz), 3.25 (1H, d, J=17.1 Hz). LC/MS: m/z=471.3 [M±H]<+>.
(S)-1-(6-karbamoil-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-il)indolin-2-karboksamid (jedinjenje br.36)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.6 (2H, d, J=9.0 Hz), 8.47 (1H, s), 7.93 (1H, s), 7.88 (1H, s), 7.42-7.25 (6H, m), 7.25-7.16 (2.5H, m), 7.16-7.06 (2.5H, m), 7.03 (1H, t, J=7.2 Hz), 5.12 (1H, br d, J=8.6 Hz), 3.72-3.61 (1H, m), 3.16-6.08 (1H, m). LC/MS: m/z=470.2 [M+H]+ .
(S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-((5-cijanopiridin-2-il)oksi)fenil) pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.37)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.68 (1H, d, J=2.0 Hz), 8.61 (2H, d, J=8.8 Hz), 8.35 (1H, dd, J=8.8 Hz, 2.4 Hz), 8.32 (1H, s), 7.99 (1H, d, J=6.6 Hz), 7.75 (1H, s), 7.56 (1H, s), 7.32-7.26 (3H, m), 7.12 (1H, s), 7.01 (1H, s), 4.63-4.54 (1H, m), 1.38 (3H, d, J=7.0 Hz). LC/MS: m/z=404.1 [M+H]+ .
(S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(5-hloro-2-fluorofenoksi)fenil) pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.38)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.56 (2H, d, J=8.8 Hz), 8.28 (1H, s), 7.96 (1H, d, J=6.1 Hz), 7.74 (1H, s), 7.56-7.47 (2H, m), 7.38-7.33 (2H, m), 7.12-7.06 (3H, m), 6.99 (1H, s), 4.60-4.51 (1H, m), 1.37 (3H, d, J=7.0 Hz). LC/MS: m/z=430.0 [M+H]+ .
(S)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)-6-(1-hidroksipropan-2-il)amino) pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.42)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.51 (2H, d, J=8.1 Hz), 8.25 (1H, s), 7.72 (1H, s), 7.66-7.59 (1H, m), 7.32-7.23 (2H, m), 7.19-7.12 (2H, m), 7.04 (2H, d, J=8.1 Hz), 6.98 (1H, s), 4.84-4.77 (1H, m), 4.34-4.23 (1H, m), 3.57-3.47 (1H, m), 3.44-3.36 (1H, m), 1.18 (3H, d, J=6.6 Hz). LC/MS: m/z=383.2 [M+H]+ .
(S)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)-6-(2-(hidroksimetil)pirolidin-1-il)pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.43)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.58-8.52 (2H, m), 8.33 (1H, s), 7.79 (1H, s), 7.33-7.25 (2H, m), 7.21-7.13 (2H, m), 7.11 (0.4H, br s), 7.07-7.02 (2H, m), 6.98 (0.6H, br s), 5.02 (0.4H, br s), 4.82 (0.6H, br s), 4.39 (0.6H, br s), 3.98 (0.4H, br s), 3.73 (1H, br s), 3.68-3.39 (2H, m), 3.41-3.30 (1H, m), 2.14-1.89 (4H, m). LC/MS: m/z=409.2 [M+H]+ .
2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)-6-((2-hidroksi-2-metilpropil)amino) pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.44)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.51 (2H, d, J=9.0 Hz), 8.24 (1H, s), 7.76-7.69 (2H, m), 7.31-7.24 (2H, m), 7.18-7.12 (2H, m), 7.11 (1H, s), 7.04 (2H, d, J=9.0 Hz), 4.61 (1H, s), 3.48 (2H, d, J=5.7 Hz), 1.14 (6H, s). LC/MS: m/z=397.2 [M+H]+ .
2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)-6-(((1-hidroksicikloheksil)metil)amino) pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.45)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.51 (2H, d, J=8.8 Hz), 8.24 (1H, s), 7.74-7.67 (2H, m), 7.31-7.24 (2H, m), 7.19-7.13 (2H, m), 7.11 (1H, s), 7.04 (2H, d, J=9.0 Hz), 4.39 (1H, s), 3.51 (2H, d, J=5.7 Hz), 1.62-1.33 (9H, m), 1.26-1.14 (1H, m). LC/MS: m/z=437.3 [M+H]+ .
(S)-6-((2,3-dihidroksipropil)amino)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.46)
1H NMR (400 MHz, CD3OD): 8.50 (2H, d, J=8.8 Hz), 7.21-7.08 (5H, m), 7.05 (2H, d, J=9.0 Hz), 3.99-3.90 (1H, m), 3.86-3.75 (1H, m), 3.66-3.55 (3H, m). LC/MS: m/z=399.1 [M+H]+ .
6-((1,3-dihidroksipropan-2-il)amino)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.47)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.52 (2H, d, J=8.8 Hz), 8.25 (1H, s), 7.71 (1H, s), 7.61 (1H, d, J=7.7 Hz), 7.32-7.24 (2H, m), 7.20-7.12 (2H, m), 7.08-7.01 (3H, m), 4.84-4.70 (2H, m), 4.32-4.21 (1H, m), 3.62-3.51 (4H, m). LC/MS: m/z=399.1 [M+H]+ .
(S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-((3-trifluorometil)piridin-2-il)oksi)fenil)pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.58)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.59 (2H, d, J=8.8 Hz), 8.42 (1H, d, J=4.8 Hz), 8.32 (1H, br), 8.30 (1H, bs), 7.98 (1H, d, J=6.8 Hz), 7.74 (1H, bs), 7.56 (1H, bs), 7.38 (1H, dd, J=5.6, 6.8 Hz), 7.24 (2H, d, J=8.8 Hz), 7.13 (1H, s), 7.02 (1H, bs), 4.59 (1H, m), 1.38 (3H, d, J=7.2 Hz). LC/MS: m/z=447 [M+H]+ .
(S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-((6-trifluorometil)piridin-2-il)oksi)fenil)pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.59)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.62 (2H, d, J=8.8 Hz), 8.34 (1H, br), 8.10 (1H, t, J=8 Hz), 7.98 (1H, d, J=6.8 Hz), 7.74 (1H, bs), 7.68 (1H, d, J=7.2 Hz) 7.57 (1H, bs), 7.40 (1H, d, J=8.4 Hz), 7.28 (2H, d, J=8.8 Hz), 7.13 (1H, s), 7.02 (1H, bs), 4.59 (1H, m), 1.38 (3H, d, J=7.2 Hz). LC/MS: m/z=447 [M+H]+ .
(S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-((6-trifluorometil)piridin-3-il)oksi)fenil)pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.60)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.64 (2H, d, J=8.8 Hz), 8.62 (1H, d, J=2.8 Hz), 8.33 (1H, br), 7.99 (1H, d, J=6.8 Hz), 7.93 (1H, d, J=8.8 Hz), 7.76 (1H, bs), 7.64 (1H, dd, J=8, 2.4 Hz) 7.55 (1H, bs), 7.27 (2H, d, J=8.8 Hz), 7.13 (1H, s), 7.02 (1H, bs), 4.59 (1H, m), 1.38 (3H, d, J=7.2 Hz). LC/MS: m/z=447 [M+H]+ .
(S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-((6-fluoropiridin-2-il)oksi)fenil) pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.61)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.60 (2H, d, J=8.8 Hz), 8.32 (1H, br), 8.05 (1H, q, J=8.4 Hz), 7.99 (1H, d, J=7.6 Hz), 7.75 (1H, bs), 7.55 (1H, bs), 7.25 (2H, d, J=8.8 Hz), 7.13 (1H, s), 7.02 (1H, bs), 7.00 (1H, dd, J=7.6, 1.2 Hz), 6.93 (1H, dd, J=8, 2.4 Hz), 4.59 (1H, m), 1.38 (3H, d, J=7.2 Hz). LC/MS: m/z=397 [M+H]+ .
(S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-((5-fluoropiridin-2-il)oksi)fenil) pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.62)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.57 (2H, d, J=8.8 Hz), 8.30 (1H, br), 8.20 (1H, d, J=3.2 Hz), 7.97 (1H, d, J=6.4 Hz), 7.87 (1H, dt, J=2.8, 7.6 Hz), 7.75 (1H, bs), 7.55 (1H, bs), 7.19 (1H, d, J=8.8 Hz), 7.18 (2H, d, J=8.8 Hz), 7.11 (1H, s), 7.02 (1H, bs), 4.59 (1H, m), 1.38 (3H, d, J=7.2 Hz). LC/MS: m/z=397 [M+H]+ .
(S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-((5-hloropiridin-2-il)oksi)fenil) pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.63)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.57 (2H, d, J=8.8 Hz), 8.31 (1H, br), 8.25 (1H, d, J=2.8 Hz), 8.00 (1H, dd, J=8.8, 2.8 Hz), 7.97 (1H, d, J=6.4 Hz), 7.74 (1H, bs), 7.55 (1H, bs), 7.21 (2H, d, J=8.8 Hz), 7.16 (1H, d, J=8.8 Hz), 7.11 (1H, s), 7.02 (1H, bs), 4.59 (1H, m), 1.38 (3H, d, J=7.2 Hz). LC/MS: m/z=413 [M+H]+ .
(S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(4-hloro-2-fluorofenoksi)fenil) pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.64)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.55 (2H, d, J=8.8 Hz), 8.28 (1H, br), 7.96 (1H, d, J=6.0 Hz), 7.74 (1H, bs), 7.69 (1H, dd, J=11, 2.0 Hz), 7.54 (1H, bs), 7.35 (1H, dt, J=8.4, 2.4 Hz), 7.30 (1H, t, J=8.8 Hz), 7.09 (1H, bs), 7.05 (2H, d, J=8.8 Hz), 7.00 (1H, bs), 4.57 (1H, m), 1.38 (3H, d, J=7.2 Hz). LC/MS: m/z=430 [M+H]+ .
(S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(bis(4-fluorofenil)metil)piperazin-1-il)pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.71; referentno jedinjenje)
1H NMR (CD3OD): 7.20-7.4 (4H, m), 6.85-6.95 (4H, m), 6.40 (1H, s), 4.2 (2H, m), 3.65-3.79 (4H, m), 2.15-2.35 (4H, m), 1.40 (3H, d, J=7.0 Hz). LC/MS: m/z=496 [M+H]+ .
(S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(2-(piridazin-4-il)-4-(trifluorometil)fenoksi) pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.72; referentno jedinjenje)
1H NMR (CD3OD): 9.09-9.51 (2H, m), 7.82-8.05 (3H, m), 7.4 (1H, m), 6.80 (1H, s), 4.0 (1H, m), 1.35 (3H, d, J=7.0 Hz). LC/MS: m/z=448 [M+H]+ .
(S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(1,3-dihidrospiro[inden-2,4′-piperidin]-1′-il)pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.73; referentno jedinjenje)
1H NMR (CD3OD): 6.95-7.20 (m, 4H), 6.35 (1H, s), 4.6 (2H, m), 4.2 (1H, m), 2.95 (2H, m), 2.88 (m, 2H), 2.10 (2H, m), 1.70 (2H, m), 1.40 (2H, m), 1.28 (3H, d, J=7.0 Hz). LC/MS: m/z=395 [M+H]+ .
6-(3-karbamoilpiperazin-1-il)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.74)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.53 (2H, d, J=9.0 Hz), 8.34 (1H, d, J=2.0 Hz), 7.80 (1H, d, J=2.2 Hz), 7.45 (1H, s), 7.31-7.24 (2H, m), 7.24-7.20 (2H, m), 7.19-7.12 (2H, m), 7.05 (2H, d. J=9.0 Hz), 5.02-3.71 (2H, br), 3.27 (3H, br s), 3.02-2.94 (1H, br m), 2.78-2.65 (2H, br m). LC/MS: m/z=437.1 [M+H]+ .
(S)-2-(4-(4-hloro-2-fluorofenoksi)fenil)-6-((2-oksopirolidin-3-il)amino) pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.75)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.52 (2H, d, J=9.0 Hz), 8.29 (1H, s), 8.09 (1H, d, J=7.2 Hz), 7.96 (1H, s), 7.75 (1H, s), 7.70 (1H, dd, J=11.0 Hz, 2.2 Hz), 7.38-7.28 (2H, m), 7.09-7.03 (3H, m), 4.75 (1H, m), 3.32-3.23 (2H, m), 2.57-2.46 (1H, m, preklapa se sa pikom DMSO), 2.06-1.93 (1H, m). LC/MS: m/z=442.0 [M+H]+ .
(S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)oksi)-2-(4-(4-(trifluorometoksi)fenoksi)fenil) pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.76)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.62 (2H, d, J=9.0 Hz), 8.51 (1H, s), 7.97 (1H, s), 7.70 (1H, s), 7.47-7.42 (2H, m), 7.26 (1H, s), 7.25-7.19 (3H, m), 7.14 (2H, d, J=9.0 Hz), 5.38 (1H, q, J=6.8 Hz), 1.53 (3H, d, J=6.8 Hz). LC/MS: m/z=463.0 [M+H]+ .
(S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)oksi)-2-(4-(4-cijanofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.77)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.67 (2H, d, J=9.0 Hz), 8.55 (1H, s), 7.98 (1H, s), 7.89 (2H, d, J=9.0 Hz), 7.71 (1H, s), 7.28 (1H, s), 7.25 (2H, d, J=8.8 Hz), 7.24-7.19 (3H, m), 5.39 (1H, q, J=6.8 Hz), 1.53 (3H, d, J=6.8 Hz). LC/MS: m/z=404.1 [M+H]+ .
6-((3R,4R)-3,4-dihidroksipirolidin-1-il)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.80)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.55 (2H, d, J=9.0 Hz), 8.33 (1H, d, J=2.2 Hz), 7.79 (1H, d, J=2.2 Hz), 7.31-7.24 (2H, m), 7.19-7.13 (2H, m), 7.05 (2H, d, J=9.0 Hz), 6.90 (1H, s), 5.29 (1H, d, J=3.5 Hz), 5.21 (1H, d, J=3.5 Hz), 4.14-4.09 (1H, m), 4.09-4.04 (1H, m), 3.76-3.62 (3H, m), 3.35-3.30 (1H, m). LC/MS: m/z=411.1 [M+H]+ .
6-(2-karbamoil-4-metilpiperazin-1-il)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.82)
1H NMR (400 MHz, CD3OD): 8.49 (2H, d, J=8.8 Hz), 7.37 (1H, s), 7.19-7.08 (4H, m), 7.03 (2H, d, J=9.0 Hz), 5.65-5.24 (1H, br), 4.48-3.95 (1H, br), 3.64-3.53 (1H, m), 3.50-3.42 (1H, m), 2.99-2.92 (1H, m), 2.40 (1H, dd, J=12.1 Hz, 4.8 Hz), 2.33 (3H, s), 2.20 (1H, dt, J=11.6 Hz, 3.5 Hz). LC/MS: m/z=451.2 [M+H]+ .
6-(2-karbamoil-4-metilpiperazin-1-il)-2-(4-(4-hloro-2-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.83)
1H NMR (400 MHz, CD3OD): 8.50 (2H, d, J=9.0 Hz), 7.42 (1H, dd, J=10.5 Hz, 2.4 Hz), 7.37 (1H, s), 7.29-7.18 (2H, m), 7.04 (2H, d, J=8.8 Hz), 5.64-5.22 (1H, br), 4.50-3.92 (1H, br), 3.65-3.53 (1H, m), 3.50-3.41 (1H, m), 2.99-2.92 (1H, m), 2.40 (1H, dd, J=11.8 Hz, 4.8 Hz), 2.33 (3H, s), 2.20 (1H, dt, J=11.6 Hz, 3.5 Hz). LC/MS: m/z=485.1 [M+H]+ .
6-(2-karbamoilpiperazin-1-il)-2-(4-(4-(trifluorometil)fenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.86)
1H NMR (CD3OD): 8.45 (m, 2H), 7.55 (m, 2H); 7.25 (s, 1H), 6.95-7.15 (m, 4H), 5.20 (m, 1H), 4.10 (m, 1H), 3.30-3.50 (m, 2H), 2.85-3.0 (m, 2H), 2.70 (m, 1H). LC/MS: m/z=487 [M+H]+ .
(S)-6-(2-karbamoilpirolidin-1-il)-2-(4-(5-hloro-2-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.87)
1H NMR (CD3OD): 8.40 (m, 2H), 6.75-7.20 (m, 6H), 4.55 (m, 1H), 3.30-3.70 (m, 2H), 1.95-2.35 (m, 4H). LC/MS: m/z=456 [M+H]
(S)-6-(2-karbamoilpirolidin-1-il)-2-(4-((5-(trifluorometil)piridin-2-il)oksi)fenil) pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.88)
1H NMR (CD3OD): 8.49 (m, 2H), 8.30 (s, 1H), 8.15 (m, 1H), 6.95-7.20 (m, 3H), 4.55 (m, 1H), 3.40-3.60 (m, 2H), 1.90-2.40 (m, 4H). LC/MS: m/z=473 [M+H]+ .
(S)-6-(2-karbamoilpirolidin-1-il)-2-(4-(4-cijanofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.89)
1H NMR (CD3OD): 8.49 (m, 2H), 7.65 (m, 2H), 7.05 (m, 5H), 4.55 (m, 1H), 3.30-3.70 (m, 2H), 1.90-2.40 (m, 4H). LC/MS: m/z=429 [M+H]+ .
(S)-2-(4-(benzo[d][1,3]dioksol-5-iloksi)fenil)-6-(2-karbamoilpirolidin-1-il)pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.90)
1H NMR (CD3OD): 8.40 (m, 2H), 6.60-7.05 (m, 4H), 6.30-6.60 (m, 2H), 5.90 (s, 2H), 4.50 (m, 1H), 3.30-3.70 (m, 2H), 1.90-2.40 (m, 4H). LC/MS: m/z=448 [M+H]+ .
(S)-6-(2-karbamoilpirolidin-1-il)-2-(4-(4-(trifluorometil)fenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.91)
1H NMR (CD3OD): 8.45 (m, 2H), 7.50 (m, 2H), 6.90-7.05 (m, 4H), 4.60 (m, 1H), 3.40-3.70 (m, 2H), 1.90-2.40 (m, 4H). LC/MS: m/z=472[M+H]+ .
(S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)oksi)-2-(4-(4-hloro-2-fluorofenoksi)fenil) pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.92)
1H NMR (CD3OD): 8.45 (m, 2H), 7.25-7.35 (m, 2H), 7.05-7.15 (m, 2H), 6.85-6.95 (m, 2H), 5.40 (m, 1H), 1.50 (d, J=7.20 Hz, 3H). LC/MS: m/z=431 [M+H]+ .
(S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)oksi)-2-(4-(5-hloro-2-fluorofenoksi)fenil) pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.93)
1H NMR (CD3OD): 8.45 (m, 2H), 7.30 (s, 1H), 7.05-7.20 (m, 3H), 6.85-6.95 (m 2H), 5.40 (m, 1H), 1.50 (d, J=7.20 Hz, 3H). LC/MS: m/z=431 [M+H]+ .
(S)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)-6-((1-morfolino-1-oksopropan-2-il)amino)pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.95)
1H NMR (CD3OD): 8.40 (m, 2H), 6.95-7.20 (m, 7H), 5.15 (m, 1H), 3.45-3.85 (m, 8H), 1.50 (d, J=7.20 Hz, 3H). LC/MS: m/z=466 [M+H]+ .
(S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)oksi)-2-(4-(4-(trifluorometilmetil)fenoksi)fenil) pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.98)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.66 (2H, d, J=9.2 Hz), 8.54 (1H, s), 7.98 (1H, s), 7.79 (2H, d, J=8.4 Hz), 7.71 (1H, s), 7.28 (1H, s), 7.27-7.20 (5H, m), 5.39 (1H, m), 1.54 (3H, d, J=6.8 Hz). LC/MS: m/z=447[M+H]+ .
(S)-6-((2-oksopirolidin-3-il)amino)-2-(4-((5-(trifluorometil)piridin-2-il)oksi)fenil) pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br.99)
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.62-8.56 (3H, m), 8.33 (1H, s), 8.27 (1H, dd, J=8.8 Hz, 2.4 Hz), 8.12 (1H, d, J=6.8 Hz), 7.98 (1H, s), 7.76 (1H, s), 7.33-7.26 (3H, m), 7.09 (1H, s), 4.82-4.71 (1H, m), 3.35-3.25 (2H, m), 2.61-2.49 (1H, m, overlaps with DMSO peak), 2.07-1.94 (1H, m). LC/MS: m/z=459.1 [M+H]+ .
PRIMER 35
Priprema 6-(((S)-1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(4-(trifluorometil)fenoksi) cikloheks-1-en-1-il)pirimidin-4-karboksamida (jedinjenje br. 103)
Šema 77
Sinteza 1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-ola (jedinjenje 35-1)
NaBH4(370 mg, 10 mmol) u 5 mL H2O je polako dodat u 10 mL rastvora 1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-ona u MeOH (1.56 g, 10 mmol) na 0°C. Nakon dodavanja, metanol je uklonjen i ostatak je ekstrahovan sa EtOAc (2 x 20 mL). Sloj EtOAc je sušen preko MgSO4, filtriran, i isparavan da bi se dobio 1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-ol (jedinjenje 35-1), koji je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja (1.56 g, prinos 100%).
Šema 78
Sinteza 4-(4-(trifluorometil)fenoksi)cikloheksanona (jedinjenje 35-3)
NaH (200 mg, 5 mmol) je dodat toluenskom rastvoru 1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-ola (jedinjenje 35-1) (730 mg, 5 mmol) na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je mešana na 60°C tokom 0.5 časova i zatim ohlađena do sobne temperature. Dodat je rastvor 1-fluoro-4-(trifluorometil)benzena (jedinjenje 35-2) (820 mg, 5 mmol) u DMF i reakciona smeša je zagrevana na 160°C tokom 1.5 časova u mikrotalasnoj pećnici (Biotage initiator). Reakciona smeša je zatim ohlađena do sobne temperature i ekstrahovana sa EtOAc (2 x 20 mL). Sirovi proizvod je obrađen sa TFA/DCM/H2O (2 mL/4 mL/0.6 mL) na sobnoj temperaturi u trajanju od 2 časa i zatim ekstrahovan sa EtOAc (2 x 20 mL). EtOAc je uklonjen i ostatak je podvrgnut „flash" hromatografiji na silika gelu korišćenjem EtOAc/heksani kao eluenta da bi se dobio 4-(4-(trifluorometil)fenoksi)cikloheksanon (jedinjenje 35-3) u vidu bezbojnog ulja (0.52 g, prinos 40%). LC/MS: m/z=259 [M+H]+ .
Šema 79
Sinteza 4-(4-(trifluorometil)fenoksi)cikloheks-1-en-1-il 1,1,2,2,3,3,4,4,4-nonafluorobutan-1-sulfonata (jedinjenje 35-4)
Rastvor LHDMS (1M u THF, 2.2 mmol, 2.2 mL) je dodat u kapima rastvoru 4-(4-(trifluorometil)fenoksi)cikloheksanona (jedinjenje 35-3) (0.52 g, 2 mmol) u THF na −78°C pod argonom, i smeša je mešana 1 čas nakon što je dodavanje završeno. Dodat je CF3(CF2)3SO2F (0.35 mL, 2 mmol) u kapima, i reakciona smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature u toku 2 časa. THF je uklonjen i dobijeni ostatak je podvrgnut „flash" hromatografiji na koloni korišćenjem EtOAc/heksani kao eluenta da bi se dobio 4-(4(trifluorometil)fenoksi)cikloheks-1-en-1-il 1,1,2,2,3,3,4,4,4-nonafluorobutan-1-sulfonat (jedinjenje 35-4) kao žuto ulje (0.8 g, prinos 74%).
Šema 80
Sinteza 4,4,5,5-tetrametil-2-(4-(4-(trifluorometil)fenoksi)cikloheks-1-en-1-il)-1,3,2-dioksaborolana (jedinjenje 35-5)
Smeša 4-(4-(trifluorometil)fenoksi)cikloheks-1-en-1-il 1,1,2,2,3,3,4,4,4-nonafluorobutan-1-sulfonata (jedinjenje 35-4) (0.8 g, 1.48 mmol), pinakol diborana (0.38 g, 1.48 mmol), KOAc (0.44 g, 4.5 mmol), i Pd(dppf)Cl2(60 mg, 0.07 mmol) je suspendovana u dioksanima (10 mL) i zagrevana do 70°C tokom 3 časa. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, ekstrahovana sa EtOAc (2 x 20 mL), i osušena preko MgSO4. Uklanjanje EtOAc je dalo 4,4,5,5-tetrametil-2-(4-(4-(trifluorometil)fenoksi)cikloheks-1-en-1-il)-1,3,2-dioksaborolan (jedinjenje 35-5), koje je korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja (0.5 g, prinos sirovog jedinjenja 94%).
Šema 81
Sinteza 6-(((S)-1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(4-(trifluorometil)fenoksi) cikloheks-1-en-1-il)pirimidin-4-karboksamida (jedinjenje br.103)
Smeša jedinjenja borata 35-5, (257 mg, 0.7 mmol), (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-hloropirimidin-4-karboksamida (jedinjenje 35-6) (170 mg, 0.7 mmol), Pd(PPh3)2C12 (27 mg, 0.04 mmol) i Na2CO3(2 M u H2O, 0.7 mL) je suspendovana u DME/EtOH (2 mL/1 mL). Smeša je pročišćena sa N2, zagrevana na 100°C tokom 14 časova, i zatim ohlađena do sobne temperature. Smeša je ekstrahovana sa EtOAc (2 x 20 mL) i sušena preko MgSO4. Nakon uklanjanja etil acetata na rotacionom isparivaču, ostatak je podvrgnut „flash" hromatografiji korišćenjem DCM/MeOH kao eluenta da bi se dobio 6-(((S)-1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(4-(trifluorometil)fenoksi)cikloheks-1-en-1-il)pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br. 103) u vidu bele čvrste supstance (50 mg).<1>H NMR (CD3OD) δ 7.50-7.60 (m, 2H), 7.20 (s, 1H), 6.95-7.15 (m, 3H), 4.80 (m, 1H), 4.40 (m, 1H), 2.60-2.90 (m, 3H), 2.40-2.50 (m, 1H), 1.95-2.15 (m, 2H), 1.50 (d, 3H). LC/MS: m/z=450[M+H]+ .
PRIMER 36
Priprema 6-(((S)-2-oksopirolidin-3-il)oksi)-2-(4-(4-(trifluorometil)fenoksi)cikloheks-1-en-1-il)pirimidin-4-karboksamida
Šema 82
6-(((S)-2-oksopirolidin-3-il)oksi)-2-(4-(4-(trifluorometil)fenoksi)cikloheks-1-en-1-il)pirimidin-4-karboksamid je pripremljen korišćenjem postupaka opisanih u PRIMERU 35. 1H NMR (CD3OD) δ 7.35-7.45 (m, 2H), 7.22 (s, 1H), 7.15 (s, 1H), 6.95-7.10 (m, 2H), 5.65 (m, 1h), 4.70 (m, 1H), 3.20-3.35 (m, 2H), 2.60-2.80 (m, 4H), 2.35-2.40 (m, 1H), 1.85-2.15 (m, 3H). LC/MS: m/z=463 [M+H]+ .
PRIMER 37
Priprema (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(4-cijanofenoksi)piperidin-1-il)pirimidin-4-karboksamida (jedinjenje br.100)
Šema 83
Sinteza (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-hidroksipiperidin-1-il)pirimidin-4-karboksamida (jedinjenje 37-7)
Smeša (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-hloropirimidin-4-karboksamida (jedinjenje 37-6) (243 mg, 1 mmol), 4-hidroksilpiperidina (101 mg, 1 mmol) i TEA (0.17 mL, 1.2 mmol) je rastvorena in acetonitrilu (5 mL) i mešana na 70°C tokom 1 časa, ekstrahovana sa EtOAc (2 x 20 ml), i osušena preko MgSO4. Etil acetat je uklonjen na rotacionom isparivaču i sirovi (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-hidroksipiperidin-1-il)pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje 37-7) je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Šema 84
Sinteza (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(4-cijanofenoksi)piperidin-1-il)pirimidin-4-karboksamida (jedinjenje br.100)
Smeša 4-fluorobenzonitrila (121 mg, 1 mmol), jedinjenja 37-7 (308 mg, 1 mmol) i Cs2CO3(326 mg, 1 mmol) u DMF (2 mL) je zagrevana na 160°C u mikrotalasnoj pećnici (Biotage initiator) 20 minuta. Smeša je ekstrahovana sa EtOAc (2 x 20 mL) i sušena preko MgSO4. Nakon uklanjanja etil acetata na rotacionom isparivaču dobijeni ostatak je podvrgnut „flash" hromatografiji korišćenjem DCM/MeOH kao eluenta da bi se dobio S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(4-cijanofenoksi)piperidin-1-il)pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br. 100) kao bela čvrsta supstanca (150 mg).<1>H NMR (CD3OD) δ 7.55-7.65 (m, 2H), 7.12 (m, 2H), 6.40 (s, 1H), 4.80 (m, 1H), 4.30 (m, 1H), 3.95 (m, 2H), 3.68 (m, 2H), 1.98 (m, 2H), 1.75 (m, 2H), 1.40 (d, 3H). LC/MS: m/z=410 [M+H]+ .
PRIMER 38
Priprema (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(3-(4-(trifluorometoksi)fenil)azetidin-1-il)pirimidin-4-karboksamida (jedinjenje br.101)
Šema 85
Sinteza 3-(4-(trifluorometoksi)fenil)azetidina (jedinjenje 38-10)
Smeša fenolnog jedinjenja 38-8 (356 mg, 2 mmol), jedinjenja jodida 389 (564 mg, 2 mmol), Cs2CO3(652 mg, 2 mmol) i CuI (100 mg, 0.5 mmol) u DMF (3 mL) je zatvorena u bočici za mikrotalasnu pećnicu i mešana na 160°C u mikrotalasnoj pećnici (Biotage initiator) 20 minuta. Posle hlađenja do sobne temperature, smeša je ekstrahovana sa EtOAc (2 x 20 mL) i sušena preko MgSO4. EtOAc je uklonjen na rotacionom isparivaču i dobijeni ostatak je rastvoren u TFA/DCM (5 mL/5 mL) i mešan na sobnoj temperaturi 1 čas. Smeša je ekstrahovana sa EtOAc (2 x 20 mL) i osušena preko MgSO4. Nakon uklanjanja etil acetata na rotacionom isparivaču, sirovi 3-(4-(trifluorometoksi)fenil)azetidin (jedinjenje 38-10) je korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. LC/MS: m/z=218 [M+H]<+>.
Šema 86
Sinteza (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(3-(4-(trifluorometoksi)fenil) azetidin-1-il)pirimidin-4-karboksamida (jedinjenje br.101)
Smeša (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-hloropirimidin-4-karboksamida (jedinjenje 37-6) (243 mg, 1 mmol), 3-(4-(trifluorometoksi)fenil)azetidina (1 mmol) i K2CO3(138 mg, 1 mmol) je rastvorena u DMF (3 mL), mešana na 80°C u trajanju od 14 časova, i zatim ohlađena do sobne temperature. Smeša je ekstrahovana sa EtOAc (2 x 20 mL) i sušena preko MgSO4. Nakon uklanjanja etil acetata na rotacionom isparivaču dobijeni ostatak je podvrgnut „flash" hromatografiji korišćenjem DCM/MeOH kao eluenta da bi se dobio (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(3-(4-(trifluorometoksi)fenil)azetidin-1-il)pirimidin-4-karboksamid (jedinjenje br. 101) kao bela čvrsta supstanca (150 mg).<1>H NMR (CD3OD) δ 7.12 (m, 2H), 6.80 (m, 2H), 6.42 (s, 1H), 5.05 (m, 1H), 3.90-4.45 (m, 5H), 1.35 (d, 3H). LC/MS: m/z=425 [M+H]+ .
PRIMER 39
Aktivnost blokiranja natrijumskog kanala za reprezentativna jedinjenja pronalaska je ispitana FLIPR®, FLIPRTETRA®, i/ili elektrofiziološkim (EP) testovima, što je detaljno opisano u prethodnom tekstu. Reprezentativne vrednosti su prikazane u TABELI 4.
TABELA 4
Procena jedinjenja kao blokatora natrijumskog kanala (Nav)
Sada kada je pronalazak u potpunosti opisan, onima sa uobičajenim poznavanjem tehnike će biti jasno da isto može da se izvede u širokom i ekvivalentnom opsegu uslova, formulacija i drugih parametara bez uticaja na obim pronalaska ili bilo koji njegov primer izvođenja.
Drugi primeri izvođenja pronalaska biće očigledni stručnjacima sa iskustvom u tehnici iz razmatranja specifikacije i praktičnog dela pronalaska koji je ovde opisan. Namera je da se specifikacija i primeri smatraju samo primerom, sa pravim obimom pronalaska naznačenim patentnim zahtevima koji slede.

Claims (15)

  1. NOVI PATENTNI ZAHTEVI 1. Jedinjenje koje ima formulu I:
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili solvat, naznačeno time što: W1 i W2 predstavljaju N i W3 predstavlja CR3; ili A1 predstavlja supstituisani piridil koji ima jedan ili dva supstituenta, ili supstituisani fenil koji ima jedan, dva ili tri supstituenta; pri čemu je piridil supstituisan sa jednim ili dva supstituenta nezavisno izabrana od halo, nitro, cijano, hidroksi, amino, alkilamino, dialkilamino, haloalkil, hidroksialkil, alkoksi, haloalkoksi, ariloksi, aralkiloksi, alkiltio, karboksamido, sulfonamido, alkilkarbonil, arilkarbonil, alkilsulfonil, arilsulfonil, ureido, guanidino, karboksi, karboksialkil, alkil, cikloalkil, alkenil, alkinil, aril, heteroaril, heterociklo, alkoksialkil, (amino)alkil, hidroksialkilamino, (alkilamino)alkil, (dialkilamino)alkil, (cijano)alkil, (karboksamido)alkil, merkaptoalkil, (heterociklo)alkil i (heteroaril)alkil grupe; pri čemu je fenil supstituisan sa jednim, dva ili tri supstituenta nezavisno izabrana od halo, nitro, cijano, hidroksi, amino, alkilamino, dialkilamino, haloalkil, hidroksialkil, alkoksi, haloalkoksi, ariloksi, aralkiloksi, alkiltio, karboksamido, sulfonamido, alkilkarbonil, arilkarbonil, alkilsulfonil, arilsulfonil, ureido, guanidino, karboksi, karboksialkil, alkil, cikloalkil, alkenil, alkinil, aril, heteroaril, heterociklo, alkoksialkil, (amino)alkil, hidroksialkilamino, (alkilamino)alkil, (dialkilamino)alkil, (cijano)alkil, (karboksamido)alkil, merkaptoalkil, (heterociklo)alkil ili (heteroaril)alkil grupe; X predstavlja –O-; A2 je izabran iz grupe koja se sastoji od: a) izborno supstituisanog arila; b) izborno supstituisanog heteroarila; c) izborno supstituisanog heterociklo; i d) izborno supstituisanog cikloalkila; E je izabran iz grupe koja se sastoji od: a) hidroksi; b) alkoksi; i c) —NR<1>R<2>grupe; R1 je izabran iz grupe koja se sastoji od: a) vodonika; b) alkila; c) aralkila; d) (heterociklo)alkila; e) (heteroaril)alkila; f) (amino)alkila; g) (alkilamino)alkila; h) (dialkilamino)alkila; i) (karboksamido)alkila; j) (cijano)alkila; k) alkoksialkila; l) hidroksialkila; i m) heteroalkila; R2 je izabran iz grupe koja se sastoji od vodonika i alkila; ili R1 i R2 uzeti zajedno sa atomom azota za koji su vezani obrazuju 3- do 8-članu izborno supstituisanu heterociklo grupu; R3 je vodonik; Z je izabran iz grupe koja se sastoji od —NR<5>— i —O—; R4 je izabran iz grupe koja se sastoji od:
    c) hidroksialkila; d) hidroksi(cikloalkil)alkila; i e) (heterociklo)alkila; svaki R10a, R10b, R10c i R10d je nezavisno izabran iz grupe koja se sastoji od: a) vodonika; b) hidroksi; c) izborno supstituisanog alkila; d) aralkila; e) (heterociklo)alkila; f) (heteroaril)alkila; g) (amino)alkila; h) (alkilamino)alkila; i) (dialkilamino)alkila; j) (karboksamido)alkila; k) (cijano)alkila; l) alkoksialkila; m) hidroksialkila; n) heteroalkila; o) izborno supstituisanog cikloalkila; p) izborno supstituisanog arila; q) izborno supstituisanog heterociklo; i r) izborno supstituisanog heteroarila; ili R10a i R10b uzeti zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani obrazuju 3- do 8-člani izborno supstituisani cikloalkil ili 3- do 8-članu izborno supstituisanu heterociklo grupu; r je 1, 2, ili 3; s je 1, 2, ili 3; R11 je izabran iz grupe koja se sastoji od: a) hidroksi; b) alkoksi; i c) —NR<1a>R<2a>grupe; R1a je izabran iz grupe koja se sastoji od: a) vodonika; b) alkila; c) aralkila; d) (heterociklo)alkila; e) (heteroaril)alkila; f) (amino)alkila; g) (alkilamino)alkila; h) (dialkilamino)alkila; i) (karboksamido)alkila; j) (cijano)alkila; k) alkoksialkila; l) hidroksialkila; i m) heteroalkila; R2a je izabran iz grupe koja se sastoji od vodonika i alkila; ili R1a i R2a uzeti zajedno sa atomom azota za koji su vezani obrazuju 3- do 8-članu izborno supstituisanu heterociklo grupu; R12 je izabran iz grupe koja se sastoji od: a) vodonika; b) izborno supstituisanog alkila; c) (amino)alkila; d) (alkilamino)alkila; e) (dialkilamino)alkila; f) (karboksamido)alkila; g) (cijano)alkila; h) alkoksialkila; i) hidroksialkila; i j) heteroalkila; R5 je izabran iz grupe koja se sastoji od: a) vodonika b) alkila; c) hidroksialkila; i d) alkilsulfonila; ili R4 i R5 uzeti zajedno sa atomom azota za koji su vezani obrazuju 3- do 8-članu izborno supstituisanu heterociklo grupu; pri čemu je izborno supstituisani alkil ili nesupstituisan ili supstituisan sa jednim, dva ili tri supstituenta nezavisno izabrana od nitro, haloalkoksi, ariloksi, aralkiloksi, alkiltio, sulfonamido, alkilkarbonil, arilkarbonil, alkilsulfonil, arilsulfonil, ureido, guanidino, karboksi, karboksialkil i cikloalkil grupe; pri čemu je izborno supstituisani aril ili nesupstituisan ili supstituisan sa jednim do pet supstituenata nezavisno izabranih od halo, nitro, cijano, hidroksi, amino, alkilamino, dialkilamino, haloalkil, hidroksialkil, alkoksi, haloalkoksi, ariloksi, aralkiloksi, alkiltio, karboksamido, sulfonamido, alkilkarbonil, arilkarbonil, alkilsulfonil, arilsulfonil, ureido, guanidino, karboksi, karboksialkil, alkil, cikloalkil, alkenil, alkinil, aril, heteroaril, heterociklo, alkoksialkil, (amino)alkil, hidroksialkilamino, (alkilamino)alkil, (dialkilamino)alkil, (cijano)alkil, (karboksamido)alkil, merkaptoalkil, (heterociklo)alkil, ili (heteroaril)alkil grupe; pri čemu je izborno supstituisani heteroaril ili nesupstituisan ili supstituisan sa jednim do četiri supstituenta nezavisno izabrana od halo, nitro, cijano, hidroksi, amino, alkilamino, dialkilamino, haloalkil, hidroksialkil, alkoksi, haloalkoksi, ariloksi, aralkiloksi, alkiltio, karboksamido, sulfonamido, alkilkarbonil, arilkarbonil, alkilsulfonil, arilsulfonil, ureido, guanidino, karboksi, karboksialkil, alkil, cikloalkil, alkenil, alkinil, aril, heteroaril, heterociklo, alkoksialkil, (amino)alkil, hidroksialkilamino, (alkilamino)alkil, (dialkilamino)alkil, (cijano)alkil, (karboksamido)alkil, merkaptoalkil, (heterociklo)alkil i (heteroaril)alkil grupe; pri čemu je izborno supstituisani cikloalkil ili nesupstituisan ili supstituisan sa jednim, dva ili tri supstituenta nezavisno izabrana od halo, nitro, cijano, hidroksi, amino, alkilamino, dialkilamino, haloalkil, hidroksialkil, alkoksi, haloalkoksi, ariloksi, aralkiloksi, alkiltio, karboksamido, sulfonamido, alkilkarbonil, arilkarbonil, alkilsulfonil, arilsulfonil, ureido, guanidino, karboksi, karboksialkil, alkil, cikloalkil, alkenil, alkinil, aril, heteroaril, heterociklo, alkoksialkil, (amino)alkil, hidroksialkilamino, (alkilamino)alkil, (dialkilamino)alkil, (cijano)alkil, (karboksamido)alkil, merkaptoalkil, (heterociklo)alkil i (heteroaril)alkil grupe; pri čemu je izborno supstituisana heterociklo grupa ili nesupstituisana ili supstituisana sa jednim do četiri supstituenta nezavisno izabrana od halo, nitro, cijano, hidroksi, amino, alkilamino, dialkilamino, haloalkil, hidroksialkil, alkoksi, haloalkoksi, ariloksi, aralkiloksi, alkiltio, karboksamido, sulfonamido, alkilkarbonil, arilkarbonil, alkilsulfonil, arilsulfonil, ureido, guanidino, karboksi, karboksialkil, alkil, cikloalkil, alkenil, alkinil, aril, heteroaril, heterociklo, alkoksialkil, (amino)alkil, hidroksialkilamino, (alkilamino)alkil, (dialkilamino)alkil, (cijano)alkil, (karboksamido)alkil, merkaptoalkil, (heterociklo)alkil i (heteroaril)alkil grupe; pod uslovom da, kada R4 i R5 uzeti zajedno sa atomom azota za koji su vezani obrazuju 3- do 8-članu izborno supstituisanu heterociklo grupu, tada je R<1>izabran iz grupe koja se sastoji od: a) vodonika; b) (heterociklo)alkila; c) (heteroaril)alkila; d) (amino)alkila; e) (alkilamino)alkila; f) (dialkilamino)alkila; g) (karboksamido)alkila; h) (cijano)alkila; i) alkoksialkila; j) hidroksialkila; i k) heteroalkila.
  2. 2. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1 koje ima formulu II:
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili solvat, naznačeno time što: R6a i R6b su nezavisno izabrani iz grupe koja se sastoji od: a) vodonika; b) halo; c) nitro; d) cijano; e) hidroksi; f) amino; g) alkilamino; h) dialkilamino; i) haloalkila; j) hidroksialkila; k) alkoksi; l) haloalkoksi; m) karboksi; i n) alkoksikarbonila.
  3. 3. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1-2 koje ima formulu IV:
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili solvat.
  4. 4. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1 koje ima formulu VII:
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili solvat.
  5. 5. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1-4, naznačeno time što Z predstavlja i) –NR<5>- ili ii) –O-, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili solvat.
  6. 6. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1-5, naznačeno time što: R4 je izabran iz grupe koja se sastoji od:
    b) hidroksialkila; i c) hidroksi(cikloalkil)alkila; R10a je izabran iz grupe koja se sastoji od: a) vodonika; b) hidroksi, c) izborno supstituisanog alkila; d) aralkila; e) (heteroaril)alkila; f) (amino)alkila; g) (alkilamino)alkila; h) (dialkilamino)alkila; i) (karboksamido)alkila; k) alkoksialkila; i l) hidroksialkila; R10b je izabran iz grupe koja se sastoji od vodonika i alkila; ili R10a i R10b uzeti zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani obrazuju 3- do 6-člani cikloalkil; r je 1 ili 2; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili solvat.
  7. 7. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1-5, naznačeno time što R<4>i R<5>uzeti zajedno sa atomom azota za koji su vezani obrazuju 5- do 6-članu izborno supstituisanu heterociklo grupu, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili solvat i, pri čemu je poželjno pomenuta izborno supstituisana 5- do 6-člana heterociklo grupa izabrana iz grupe koja se sastoji od:
    pri čemu: R13a, R13b, R13c, R13d, R13e i R13f su nezavisno izabrani iz grupe koja se sastoji od: a) vodonika; b) hidroksi; c) hidroksialkila; d) karboksi; e) alkoksikarbonila; i f) karboksamido grupe; Y je izabran iz grupe koja se sastoji od O, S i NR14; i R14 je izabran iz grupe koja se sastoji od vodonika i alkila, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili solvat.
  8. 8. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1-5, naznačeno time što i) R4 predstavlja:
    R11 predstavlja –NR<1a>R<2a>, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili solvat, ili ii) R4 predstavlja:
    R10a i R10b uzeti zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani obrazuju 3- do 6-članu cikloalkil grupu; i R11 predstavlja –NR<1a>R<2a>, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili solvat, ili iii) R4 je izabran iz grupe koja se sastoji od:
    R10a je izabran iz grupe koja se sastoji od vodonika ili alkila; i R10b je izabran iz grupe koja se sastoji od: a) vodonika; b) hidroksi; i c) alkil grupe, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili solvat; ili iv) R4 predstavlja hidroksialkil ili hidroksi(cikloalkil)alkil, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili solvat, i pri čemu je poželjno pomenuta hidroksialkil ili hidroksi(cikloalkil)alkil grupa izabrana iz grupe koja se sastoji od:
  9. 9. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1-8, naznačeno time što je A<1>izabran iz grupe koja se sastoji od supstituisanog fenila koji ima jedan ili dva supstituenta i supstituisanog piridila koji ima jedan supstituent, pri čemu je svaki supstituent nezavisno izabran iz grupe koja se sastoji od halo, cijano, hidroksi, amino, haloalkil, alkoksi, haloalkoksi i alkil grupe.
  10. 10. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1-9, naznačeno time što E predstavlja –NH2, i W1 i W2 su N i W3 je CH; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili solvat.
  11. 11. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 4 koje ima formulu XIV ili formulu XV:
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili solvat, naznačeno time što poželjno: W1 i W2 predstavljaju N i W3 predstavlja CH; A1 je supstituisani piridil koji ima jedan ili dva supstituenta, ili supstituisani fenil koji ima jedan, dva ili tri supstituenta; i Z je –NH-, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili solvat, i pri čemu je poželjnije A<1>izabran iz grupe koja se sastoji od supstituisanog fenila koji ima jedan ili dva supstituenta i supstituisanog piridila koji ima jedan supstituent, pri čemu je svaki supstituent nezavisno izabran iz grupe koja se sastoji od halo, cijano, hidroksi, amino, haloalkil, alkoksi, haloalkoksi i alkil grupe.
  12. 12. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1 izabrano iz grupe koja se sastoji od: (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; 6-((2-amino-2-oksoetil)amino)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; (S)-6-((1-amino-4-metil-1-oksopentan-2-il)amino)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; (S)-6-((1-amino-3-hidroksi-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; (S)-6-(2-karbamoilpirolidin-1-il)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; (S)-6-((1-amino-3-(1-metil-1H-imidazol-4-il)-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; (S)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)-6-((2-oksopirolidin-3-il)amino)pirimidin-4-karboksamida; 6-((1-karbamoilciklopropil)amino)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; 6-((1-karbamoilciklobutil)amino)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; 6-((1-amino-2-metil-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(4-cijano-3-(trifluorometil)fenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(3-cijano-4-(trifluorometil)fenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-((5-(trifluorometil)piridin-2-il)oksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(4-(trifluorometil)fenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; (S)-metil 1-(6-karbamoil-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-il)pirolidin-2-karboksilata; (S)-etil 1-(6-karbamoil-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-il)indolin-2-karboksilata; etil 1-((6-karbamoil-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-il)amino) ciklopropankarboksilata; metil 2-((6-karbamoil-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-il)amino)-2-metilpropanoata; 6-((3-amino-3-oksopropil)amino)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)(metil)amino)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; (R)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; 6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; 6-((4-amino-4-oksobutan-2-il)amino)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; 6-(3-karbamoilpiperidin-1-il)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; 4-(6-karbamoil-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-il)morfolin-3-karboksamida; 4-(6-karbamoil-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-il)morfolin-2-karboksamida; 6-(2-karbamoilpiperazin-1-il)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; (S)-2-((6-karbamoil-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-il)amino)propanske kiseline; (S)-6-(2-karboksipirolidin-1-il)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksilne kiseline; (S)-1-(6-karbamoil-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-il)pirolidin-2-karboksilne kiseline; (S)-1-(6-karbamoil-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-il)indolin-2-karboksilne kiseline; (S)-terc-butil 2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)-6-((1-metoksi-1-oksopropan-2-il)amino) pirimidin-4-karboksilata; (S)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)-6-((1-metoksi-1-oksopropan-2-il)amino) pirimidin-4-karboksilne kiseline; (S)-terc-butil 6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksilata; (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksilne kiseline; (S)-1-(6-karbamoil-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-il)indolin-2-karboksamida; (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-((5-cijanopiridin-2-il)oksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(5-hloro-2-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; (S)-metil 2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)-6-((1-metoksi-1-oksopropan-2-il)amino) pirimidin-4-karboksilata; (S)-6-((1-karboksietil)amino)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksilne kiseline; 2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)-6-(3-(hidroksimetil)morfolino)pirimidin-4-karboksamida; (S)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)-6-((1-hidroksipropan-2-il)amino)pirimidin-4-karboksamida; (S)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)-6-(2-(hidroksimetil)pirolidin-1-il)pirimidin-4-karboksamida; 2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)-6-((2-hidroksi-2-metilpropil)amino)pirimidin-4-karboksamida; 2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)-6-(((1-hidroksicikloheksil)metil)amino)pirimidin-4-karboksamida; (S)-6-((2,3-dihidroksipropil)amino)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; 6-((1,3-dihidroksipropan-2-il)amino)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; 2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)-6-(2-(hidroksimetil)piperazin-1-il)pirimidin-4-karboksamida; 6-(3,4-dihidroksipirolidin-1-il)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; (S)-6-((3-amino-2-hidroksi-3-oksopropil)amino)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; (S)-3-((6-karbamoil-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-il)amino)-2-hidroksipropanske kiseline; 6-(N-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metil)metilsulfonamido)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; 6-(N-(2,3-dihidroksipropil)metilsulfonamido)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)oksi)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-((4-trifluorometil)piridin-2-il)oksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-((3-trifluorometil)piridin-2-il)oksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-((6-trifluorometil)piridin-2-il)oksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-((6-trifluorometil)piridin-3-il)oksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-((6-fluoropiridin-2-il)oksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-((5-fluoropiridin-2-il)oksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-((5-hloropiridin-2-il)oksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; amida 6-((S)-1-karbamoil-etilamino)-2-[4-(4-cijano-fenoksi)-fenil]-pirimidin-4-karboksilne kiseline; (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(2-(4-fluorofenoksi)piridin-4-il)pirimidin-4-karboksamida; (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(6-(4-fluorofenoksi)piridin-3-il)pirimidin-4-karboksamida; 6-(3-karbamoilpiperazin-1-il)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; (S)-2-(4-(4-hloro-2-fluorofenoksi)fenil)-6-((2-oksopirolidin-3-il)amino)pirimidin-4-karboksamida; (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)oksi)-2-(4-(4-(trifluorometoksi)fenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)oksi)-2-(4-(4-cijanofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; (S)-6-(2-karbamoilpirolidin-1-il)-2-(4-(4-hloro-2-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; 6-((3S,4S)-3,4-dihidroksipirolidin-1-il)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; 6-((3R,4R)-3,4-dihidroksipirolidin-1-il)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; 6-(2-karbamoil-4-metilpiperazin-1-il)-2-(4-(4-(trifluorometil)fenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; 6-(2-karbamoil-4-metilpiperazin-1-il)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; 6-(2-karbamoil-4-metilpiperazin-1-il)-2-(4-(4-hloro-2-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(4-(trifluorometoksi)fenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(benzo[d][1,3]dioksol-5-iloksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; 6-(2-karbamoilpiperazin-1-il)-2-(4-(4-(trifluorometil)fenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; (S)-6-(2-karbamoilpirolidin-1-il)-2-(4-(5-hloro-2-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; (S)-6-(2-karbamoilpirolidin-1-il)-2-(4-((5-(trifluorometil)piridin-2-il)oksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; (S)-6-(2-karbamoilpirolidin-1-il)-2-(4-(4-cijanofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; (S)-2-(4-(benzo[d][1,3]dioksol-5-iloksi)fenil)-6-(2-karbamoilpirolidin-1-il)pirimidin-4-karboksamida; (S)-6-(2-karbamoilpirolidin-1-il)-2-(4-(4-(trifluorometil)fenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)oksi)-2-(4-(5-hloro-2-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)oksi)-2-(4-(4-hloro-2-fluorofenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; (S)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)-6-((1-((2-hidroksietil)amino)-1-oksopropan-2-il)amino)pirimidin-4-karboksamida; (S)-2-(4-(4-fluorofenoksi)fenil)-6-((1-morfolino-1-oksopropan-2-il)amino) pirimidin-4-karboksamida; (S)-metil 5-(4-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-6-karbamoilpirimidin-2-il)-2-(4-fluorofenoksi)benzoata; (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(4-fluorofenoksi)-3-(hidroksimetil)fenil)pirimidin-4-karboksamida; (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)oksi)-2-(4-(4-(trifluorometil)fenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; (S)-6-((2-oksopirolidin-3-il)amino)-2-(4-((5-(trifluorometil)piridin-2-il)oksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(4-cijanofenoksi)piperidin-1-il)pirimidin-4-karboksamida; (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(3-(4-(trifluorometoksi)fenoksi)azetidin-1-il)pirimidin-4-karboksamida; 6-(((S)-2-oksopirolidin-3-il)oksi)-2-(4-(4-(trifluorometil)fenoksi)cikloheks-1-en-1-il)pirimidin-4-karboksamida; i 6-(((S)-1-amino-1-oksopropan-2-il)amino)-2-(4-(4-(trifluorometil)fenoksi)cikloheks-1-en-1-il)pirimidin-4-karboksamida, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat, i poželjno je izabrano iz grupe koja se sastoji od: (S)-6-((1-amino-1-oksopropan-2-il)oksi)-2-(4-(4-(trifluorometil)fenoksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida; i (S)-6-((2-oksopirolidin-3-il)amino)-2-(4-((5-(trifluorometil)piridin-2-il)oksi)fenil)pirimidin-4-karboksamida, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili solvat.
  13. 13. Farmaceutska kompozicija, koja sadrži jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1-12, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, ili solvat, i farmaceutski prihvatljiv nosač.
  14. 14. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1-12, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili solvat, za upotrebu u lečenju moždanog udara, oštećenja neurona usled povrede glave, epilepsije, konvulzija, gubitka neurona nakon globalne i fokalne ishemije, bola, migrene, primarne eritromelalgije, paroksizmalnog ekstremnog poremećaja bola, cerebelarne atrofije, ataksije, mentalne retardacije, neurodegenerativnog poremećaja, manične depresije, tinitusa, miotonije, poremećaja pokreta, ili srčane aritmije, ili obezbeđivanje lokalne anestezije kod sisara, koje obuhvata primenu efikasne količine pomenutog jedinjenja na sisaru kome je takvo lečenje potrebno, i naznačeno time što je poželjno pomenuta upotreba za lečenje bola, i naznačeno time što je čak poželjnije i) pomenuta upotreba za preventivno i palijativno lečenje bola; ili ii) pomenuti bol izabran iz grupe koja se sastoji od hroničnog bola, inflamatornog bola, neuropatskog bola, akutnog bola i hirurškog bola.
  15. 15. Upotreba jedinjenja prema bilo kom od patentnih zahteva 1-12, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, ili solvata, u proizvodnji leka za lečenje moždanog udara, oštećenja neurona usled povrede glave, epilepsije, konvulzija, gubitka neurona nakon globalne i fokalne ishemije, bola, migrene, primarne eritromelalgije, paroksizmalnog ekstremnog poremećaja bola, cerebelarne atrofije, ataksije, mentalne retardacije, neurodegenerativnog poremećaja, manične depresije, tinitusa, miotonije, poremećaja pokreta, ili srčane aritmije, ili obezbeđivanje lokalne anestezije kod sisara, koje obuhvata primenu efikasne količine pomenutog jedinjenja i, naznačena time što je poželjno pomenuta upotreba za lečenje bola, i naznačena time što je čak poželjnije i) pomenuta upotreba za preventivno i palijativno lečenje bola, ili ii) pomenuti bol izabran iz grupe koja se sastoji od hroničnog bola, inflamatornog bola, neuropatskog bola, akutnog bola i hirurškog bola.
RS20170917A 2011-09-02 2012-08-31 Pirimidini kao blokatori natrijumskog kanala RS56342B1 (sr)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201161530678P 2011-09-02 2011-09-02
US201261651611P 2012-05-25 2012-05-25
EP12770217.3A EP2753606B1 (en) 2011-09-02 2012-08-31 Pyrimidines as sodium channel blockers
PCT/IB2012/001871 WO2013030665A1 (en) 2011-09-02 2012-08-31 Pyrimidines as sodium channel blockers

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS56342B1 true RS56342B1 (sr) 2017-12-29

Family

ID=47010645

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20170917A RS56342B1 (sr) 2011-09-02 2012-08-31 Pirimidini kao blokatori natrijumskog kanala

Country Status (20)

Country Link
US (4) US9163008B2 (sr)
EP (2) EP3255041A1 (sr)
JP (2) JP5941546B2 (sr)
AR (1) AR088029A1 (sr)
AU (1) AU2012300567B2 (sr)
CA (1) CA2846463C (sr)
CY (1) CY1119327T1 (sr)
DK (1) DK2753606T3 (sr)
ES (1) ES2643235T3 (sr)
HR (1) HRP20171389T1 (sr)
HU (1) HUE034925T2 (sr)
LT (1) LT2753606T (sr)
ME (1) ME02873B (sr)
PL (1) PL2753606T3 (sr)
PT (1) PT2753606T (sr)
RS (1) RS56342B1 (sr)
SI (1) SI2753606T1 (sr)
SM (1) SMT201700440T1 (sr)
TW (1) TW201331186A (sr)
WO (1) WO2013030665A1 (sr)

Families Citing this family (38)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2582666B1 (en) 2010-06-16 2014-08-13 Purdue Pharma L.P. Aryl substituted indoles and their use as blockers of sodium channels
JP2013531687A (ja) 2010-07-16 2013-08-08 パーデュー、ファーマ、リミテッド、パートナーシップ ナトリウムチャネル遮断剤としてのピリジン化合物
AU2011303597A1 (en) 2010-09-17 2013-04-11 Purdue Pharma L.P. Pyridine compounds and the uses thereof
KR20130095772A (ko) 2010-10-05 2013-08-28 퍼듀 퍼머 엘피 나트륨 채널 차단제로서 퀴나졸린 화합물
EP2655330B1 (en) 2010-12-22 2016-02-10 Purdue Pharma LP Substituted pyridines as sodium channel blockers
EP3255041A1 (en) 2011-09-02 2017-12-13 Purdue Pharma L.P. Pyrimidines as sodium channel blockers
WO2013064883A1 (en) 2011-10-31 2013-05-10 Purdue Pharma L.P. Heteroaryl compounds as sodium channel blockers
WO2013064884A1 (en) 2011-10-31 2013-05-10 Purdue Pharma L.P. Quaternized amines as sodium channel blockers
US9133131B2 (en) 2011-11-15 2015-09-15 Purdue Pharma L.P. Pyrimidine diol amides as sodium channel blockers
WO2013136170A1 (en) 2012-03-16 2013-09-19 Purdue Pharma L.P. Substituted pyridines as sodium channel blockers
EP2917182B1 (en) 2012-11-09 2018-01-03 Purdue Pharma LP Benzomorphan analogs and the use thereof
EP2935257B1 (en) 2012-12-20 2018-02-07 Purdue Pharma LP Cyclic sulfonamides as sodium channel blockers
WO2014135955A1 (en) * 2013-03-04 2014-09-12 Purdue Pharma L.P. Pyrimidine carboxamides as sodium channel blockers
US9120786B2 (en) 2013-03-04 2015-09-01 Purdue Pharma, L.P. Triazine carboxamides as sodium channel blockers
CA2939549C (en) * 2013-03-15 2020-08-18 Purdue Pharma L.P. Carboxamide derivatives and use thereof
DK3013813T3 (da) * 2013-06-27 2019-06-03 Pfizer Heteroaromatiske forbindelser og anvendelse deraf som dopamin-d1-ligander
CN105612152A (zh) 2013-08-26 2016-05-25 普渡制药公司 氮杂螺[4.5]癸烷衍生物及其用途
US9359330B2 (en) * 2013-08-26 2016-06-07 Purdue Pharma L.P. Substituted piperidines as sodium channel blockers
BR112016008632A8 (pt) * 2013-10-21 2020-03-17 Merck Patent Gmbh compostos de heteroarila como inibidores de btk, seus usos, e composição farmacêutica
US9828348B2 (en) 2013-11-08 2017-11-28 Purdue Pharma L.P. Benzimidazole derivatives and use thereof
US9340504B2 (en) 2013-11-21 2016-05-17 Purdue Pharma L.P. Pyridine and piperidine derivatives as novel sodium channel blockers
CA2931550C (en) 2013-12-13 2023-09-26 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Prodrugs of pyridone amides useful as modulators of sodium channels
US9745287B2 (en) 2013-12-20 2017-08-29 Purdue Pharma L.P. Pyrimidines and use thereof
JP6337124B2 (ja) * 2013-12-23 2018-06-06 パーデュー、ファーマ、リミテッド、パートナーシップ インダゾール及びその使用
US9695144B2 (en) 2013-12-23 2017-07-04 Purdue Pharma L.P. Dibenzazepine derivatives and use thereof
EP3089978B1 (en) 2013-12-30 2018-08-29 Purdue Pharma L.P. Pyridone-sulfone morphinan analogs as opioid receptor ligands
JP6526023B2 (ja) 2014-01-24 2019-06-05 パーデュー、ファーマ、リミテッド、パートナーシップ ピリジン類及びピリミジン類並びにその使用
AU2015217185B2 (en) 2014-02-12 2018-04-05 Purdue Pharma L.P. Isoquinoline derivatives and use thereof
US10730866B2 (en) 2014-04-07 2020-08-04 Purdue Pharma L.P. Indole derivatives and use thereof
CA2948144A1 (en) 2014-05-06 2015-11-12 Purdue Pharma L.P. Benzomorphan analogs and use thereof
WO2015192039A1 (en) 2014-06-13 2015-12-17 Purdue Pharma L.P. Heterocyclic morphinan derivatives and use thereof
MA40171A (fr) 2014-06-13 2017-04-19 Purdue Pharma Lp Dérivés d'azamophinan et leur utilisation
BR112017017619A2 (pt) * 2015-02-19 2018-05-08 Purdue Pharma Lp métodos e composições para diminuir esvaziamento gástrico
WO2018125716A1 (en) 2017-01-02 2018-07-05 Purdue Pharma L.P. Morphinan derivatives and use thereof
EP3625214B1 (en) 2017-05-16 2022-07-06 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Deuterated pyridone amides and prodrugs thereof as modulators of sodium channels
JP7114394B2 (ja) * 2017-08-18 2022-08-08 住友化学株式会社 化合物、レジスト組成物及びレジストパターンの製造方法
US11529337B2 (en) 2018-02-12 2022-12-20 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Method of treating pain
EP4149510A4 (en) 2020-05-11 2024-05-22 Oregon Health & Science University INTERMEDIATES AND SYNTHESIS FOR ENDOCHINE-LIKE QUINOLONE COMPOUNDS

Family Cites Families (75)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
NL260746A (sr) * 1960-02-02
ES2247604T3 (es) 1995-06-12 2006-03-01 G.D. SEARLE &amp; CO. Composiciones que comprenden un inhibidor de ciclooxigenasa-2 y un inhibidor de 5-lipoxigenasa.
US5739127A (en) * 1996-11-08 1998-04-14 Bayer Aktiengesellschaft 2,4'-bridged bis-2,4-diaminoquinazolines
NZ500590A (en) 1997-04-22 2001-11-30 Cocensys Inc Carbocyclic and heterocyclic substituted semicarbazones and thiosemicarbazones and the use thereof
EP1032377B1 (en) 1997-11-21 2010-11-17 Purdue Neuroscience Company Substituted 2-aminoacetamides and the use thereof
US6281211B1 (en) 1999-02-04 2001-08-28 Euro-Celtique S.A. Substituted semicarbazides and the use thereof
TW502019B (en) 1999-03-26 2002-09-11 Cocensys Inc Aryl substituted pyrazoles, imidazoles, oxazoles, thiazoles and pyrroles, and the use thereof
DK1169060T3 (da) 1999-04-09 2006-01-16 Euro Celtique Sa Natriumkanalblokkerpræparater og anvendelse deraf
AR029489A1 (es) 2000-03-10 2003-07-02 Euro Celtique Sa Piridinas, pirimidinas, pirazinas, triazinas sustituidas por arilo, composiciones farmaceuticas y el uso de las mismas para la manufactura de un medicamento
AU4589701A (en) 2000-03-24 2001-10-08 Cocensys Inc Aryl substituted pyrazoles, triazoles and tetrazoles, and the use thereof
AU4961001A (en) 2000-03-31 2001-10-15 Cocensys Inc Aminopyridines and their use as anticonvulsants and sodium channel blockers
IL159765A0 (en) 2001-07-16 2004-06-20 Euro Celtique Sa Aryl substituted thiazolidinone derivatives and pharmaceutical compositions containing the same
AR037233A1 (es) 2001-09-07 2004-11-03 Euro Celtique Sa Piridinas aril sustituidas, composiciones farmaceuticas y el uso de dichos compuestos para la elaboracion de un medicamento
AR036873A1 (es) 2001-09-07 2004-10-13 Euro Celtique Sa Piridinas aril sustituidas a, composiciones farmaceuticas y el uso de las mismas para la preparacion de un medicamento
ATE355064T1 (de) * 2001-10-26 2006-03-15 Angeletti P Ist Richerche Bio Dihydroxypyrimidin-carbonsäueramid-hemmer der hiv-integrase
TWI329105B (en) * 2002-02-01 2010-08-21 Rigel Pharmaceuticals Inc 2,4-pyrimidinediamine compounds and their uses
MXPA04008901A (es) 2002-03-13 2004-11-26 Euro Celtique Sa Pirimidinas arilo sustituidas y el uso de las mismas.
WO2003080060A1 (en) * 2002-03-20 2003-10-02 Schering Aktiengesellschaft Substituted piperazine antithrombotic pai-1 inhibitors
US6675042B2 (en) 2002-04-15 2004-01-06 Charles D. Swerdlow Defibrillation shock strength determination technology
US20040097569A1 (en) 2002-07-31 2004-05-20 Euro-Celtique S.A. Aryl substituted hydantoin compounds and their use as sodium channel blockers
CA2492305A1 (en) 2002-07-31 2004-02-05 Euro-Celtique S.A. Aryl substituted benzimidazoles and their use as sodium channel blockers
US20040152696A1 (en) 2002-08-01 2004-08-05 Euro-Celtique S.A. 2-substituted bicyclic benzoheterocyclic compounds and their use as sodium channel blockers
EA013811B1 (ru) * 2002-11-21 2010-08-30 Новартис Вэксинес Энд Дайэгностикс, Инк. 2,4,6-тризамещённые пиримидины, являющиеся ингибиторами фосфотидилинозитол(pi)-3-киназы, и их применение при лечении рака
EP1571146A4 (en) * 2002-12-10 2010-09-01 Ono Pharmaceutical Co NITROGENIC HETEROCYCLIC COMPOUNDS AND THEIR MEDICAL USE
JP2006521357A (ja) 2003-03-24 2006-09-21 メルク　エンド　カムパニー　インコーポレーテッド ナトリウムチャンネル遮断薬としてのビアリール置換６員複素環化合物
EP1644338A1 (en) * 2003-04-01 2006-04-12 Aponetics AG 2, 4, 6-trisubstituted pyrimidine derivatives useful for the treatment of neoplastic and autoimmune diseases
WO2005014849A2 (en) 2003-07-03 2005-02-17 Euro-Celtique, S.A. Genes associated with responses to neuropathic pain
TWI355894B (en) 2003-12-19 2012-01-11 Du Pont Herbicidal pyrimidines
WO2005113514A2 (en) 2004-05-07 2005-12-01 Janssen Pharmaceutica, N.V. Substituted pyrimidines as inhibitors of bacterial type iii protein secretion systems
EP1652831A4 (en) 2004-06-25 2009-07-01 Ibiden Co Ltd PROCESS FOR PRODUCING POROUS BODIES, POROUS BODIES, AND ALVEOLAR STRUCTURAL BODY
TW200616974A (en) 2004-07-01 2006-06-01 Astrazeneca Ab Chemical compounds
US7767680B2 (en) * 2004-11-03 2010-08-03 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Ion channel modulators and methods of use
TW200640877A (en) * 2005-04-28 2006-12-01 Actelion Pharmaceuticals Ltd Pyrimidine derivatives
EP1891018B1 (en) 2005-05-24 2011-11-16 Vertex Pharmaceuticals, Inc. Modulators of atp-binding cassette transporters
CA2617042A1 (en) * 2005-07-29 2007-02-01 Takeda Pharmaceutical Company Limited Spiro-cyclic compound
WO2007089382A2 (en) 2006-01-03 2007-08-09 Pharmagic, Inc. Nanofactory compositions and methods of making and using nanofactories
EP1979325A1 (en) * 2006-01-11 2008-10-15 AstraZeneca AB Morpholino pyrimidine derivatives and their use in therapy
AU2007287428B2 (en) * 2006-08-24 2011-08-11 Astrazeneca Ab Morpholino pyrimidine derivatives useful in the treatment of proliferative disorders
EP2146981A1 (en) * 2007-04-12 2010-01-27 F. Hoffmann-Roche AG Pharmaceutical compounds
BRPI0814503A2 (pt) 2007-07-09 2017-05-16 Astrazeneca Ab composto, uso de um composto, métodos para produzir um efeito anti-proliferativo em um animal de sangue quente, e para tratar uma doença, e, composição farmacêutica
WO2009066084A1 (en) * 2007-11-21 2009-05-28 F. Hoffmann-La Roche Ag 2 -morpholinopyrimidines and their use as pi3 kinase inhibitors
US20120108565A1 (en) * 2008-07-30 2012-05-03 Lalima Sharma Pyrrole carboxylic acid derivatives as antibacterial agents
EP2342191B1 (en) * 2008-09-10 2013-03-20 Mitsubishi Tanabe Pharma Corporation Aromatic nitrogen-containing 6-membered ring compounds and their use
AR079543A1 (es) 2009-12-22 2012-02-01 Organon Nv Derivados de amino-heteroarilo
BR112012015827A2 (pt) * 2009-12-28 2016-12-06 Dcb Usa Llc novos compostos de pirimidina como inibidores de mtor e p13k
WO2011103196A1 (en) * 2010-02-17 2011-08-25 Amgen Inc. Aryl carboxamide derivatives as sodium channel inhibitors for treatment of pain
EP2382865A1 (de) 2010-04-28 2011-11-02 Bayer CropScience AG Synergistische Wirkstoffkombinationen
WO2011141474A1 (en) * 2010-05-12 2011-11-17 Boehringer Ingelheim International Gmbh Novel ccr2 receptor antagonists, method for producing the same, and use thereof as medicaments
EP2582666B1 (en) 2010-06-16 2014-08-13 Purdue Pharma L.P. Aryl substituted indoles and their use as blockers of sodium channels
JP2013531687A (ja) 2010-07-16 2013-08-08 パーデュー、ファーマ、リミテッド、パートナーシップ ナトリウムチャネル遮断剤としてのピリジン化合物
AU2011303597A1 (en) 2010-09-17 2013-04-11 Purdue Pharma L.P. Pyridine compounds and the uses thereof
KR20130095772A (ko) 2010-10-05 2013-08-28 퍼듀 퍼머 엘피 나트륨 채널 차단제로서 퀴나졸린 화합물
GB201112607D0 (en) * 2011-07-22 2011-09-07 Glaxo Group Ltd Novel compounds
PE20140146A1 (es) * 2010-11-19 2014-02-06 Incyte Corp Derivados de pirrolopiridina y pirrolopirimidina sustituidos con ciclobutilo como inhibidores de jak
EP2655330B1 (en) 2010-12-22 2016-02-10 Purdue Pharma LP Substituted pyridines as sodium channel blockers
EP2731941B1 (en) * 2011-07-15 2019-05-08 Boehringer Ingelheim International GmbH Novel and selective ccr2 antagonists
EP3255041A1 (en) * 2011-09-02 2017-12-13 Purdue Pharma L.P. Pyrimidines as sodium channel blockers
WO2013064884A1 (en) 2011-10-31 2013-05-10 Purdue Pharma L.P. Quaternized amines as sodium channel blockers
WO2013064883A1 (en) 2011-10-31 2013-05-10 Purdue Pharma L.P. Heteroaryl compounds as sodium channel blockers
US9133131B2 (en) 2011-11-15 2015-09-15 Purdue Pharma L.P. Pyrimidine diol amides as sodium channel blockers
WO2013136170A1 (en) 2012-03-16 2013-09-19 Purdue Pharma L.P. Substituted pyridines as sodium channel blockers
US9718865B2 (en) 2012-07-27 2017-08-01 Purdue Pharma L.P. Sodium channel blocking peptides and the use thereof
EP2935257B1 (en) 2012-12-20 2018-02-07 Purdue Pharma LP Cyclic sulfonamides as sodium channel blockers
WO2014135955A1 (en) 2013-03-04 2014-09-12 Purdue Pharma L.P. Pyrimidine carboxamides as sodium channel blockers
US9120786B2 (en) 2013-03-04 2015-09-01 Purdue Pharma, L.P. Triazine carboxamides as sodium channel blockers
US9346802B2 (en) * 2013-03-15 2016-05-24 Epizyme, Inc. CARM1 inhibitors and uses thereof
CA2903813C (en) * 2013-03-15 2023-08-29 Epizyme, Inc. Carm1 inhibitors and uses thereof
CA2939549C (en) * 2013-03-15 2020-08-18 Purdue Pharma L.P. Carboxamide derivatives and use thereof
CN105612152A (zh) 2013-08-26 2016-05-25 普渡制药公司 氮杂螺[4.5]癸烷衍生物及其用途
US9359330B2 (en) 2013-08-26 2016-06-07 Purdue Pharma L.P. Substituted piperidines as sodium channel blockers
US9340504B2 (en) 2013-11-21 2016-05-17 Purdue Pharma L.P. Pyridine and piperidine derivatives as novel sodium channel blockers
US9745287B2 (en) 2013-12-20 2017-08-29 Purdue Pharma L.P. Pyrimidines and use thereof
JP6337124B2 (ja) * 2013-12-23 2018-06-06 パーデュー、ファーマ、リミテッド、パートナーシップ インダゾール及びその使用
US10730866B2 (en) 2014-04-07 2020-08-04 Purdue Pharma L.P. Indole derivatives and use thereof
BR112017017619A2 (pt) 2015-02-19 2018-05-08 Purdue Pharma Lp métodos e composições para diminuir esvaziamento gástrico

Also Published As

Publication number Publication date
EP3255041A1 (en) 2017-12-13
AU2012300567B2 (en) 2016-03-10
SI2753606T1 (sl) 2017-10-30
US10774050B2 (en) 2020-09-15
JP5941546B2 (ja) 2016-06-29
US20140303139A1 (en) 2014-10-09
SMT201700440T1 (it) 2017-11-15
LT2753606T (lt) 2017-09-25
CY1119327T1 (el) 2018-02-14
JP2016175940A (ja) 2016-10-06
ES2643235T3 (es) 2017-11-21
US10059675B2 (en) 2018-08-28
PT2753606T (pt) 2017-10-02
ME02873B (me) 2018-04-20
US20160024022A1 (en) 2016-01-28
TW201331186A (zh) 2013-08-01
DK2753606T3 (en) 2017-10-02
US20170298027A1 (en) 2017-10-19
HUE034925T2 (en) 2018-03-28
CA2846463A1 (en) 2013-03-07
AR088029A1 (es) 2014-05-07
US9656968B2 (en) 2017-05-23
HRP20171389T1 (hr) 2017-11-03
EP2753606A1 (en) 2014-07-16
AU2012300567A1 (en) 2013-05-02
JP6239688B2 (ja) 2017-11-29
EP2753606B1 (en) 2017-07-05
US20190002412A1 (en) 2019-01-03
PL2753606T3 (pl) 2018-02-28
JP2014525431A (ja) 2014-09-29
US9163008B2 (en) 2015-10-20
WO2013030665A1 (en) 2013-03-07
CA2846463C (en) 2017-10-24

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US10774050B2 (en) Pyrimidines as sodium channel blockers
EP2616441B1 (en) Pyridine compounds and the uses thereof
EP2655330B1 (en) Substituted pyridines as sodium channel blockers
US9539253B2 (en) Pyrimidine diol amides as sodium channel blockers
US20150133500A1 (en) Benzimidazole derivatives and use thereof
WO2013136170A1 (en) Substituted pyridines as sodium channel blockers