RS56717B1 - Derivati dolastatina 10 i auristatina - Google Patents

Derivati dolastatina 10 i auristatina

Info

Publication number
RS56717B1
RS56717B1 RS20171344A RSP20171344A RS56717B1 RS 56717 B1 RS56717 B1 RS 56717B1 RS 20171344 A RS20171344 A RS 20171344A RS P20171344 A RSP20171344 A RS P20171344A RS 56717 B1 RS56717 B1 RS 56717B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
compound
mmol
methyl
group
phenyl
Prior art date
Application number
RS20171344A
Other languages
English (en)
Inventor
Michel Perez
Ian Rilatt
Marie Lamothe
Original Assignee
Pf Medicament
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Pf Medicament filed Critical Pf Medicament
Publication of RS56717B1 publication Critical patent/RS56717B1/sr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/08—Peptides having 5 to 11 amino acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/08—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon radicals, substituted by hetero atoms, attached to ring carbon atoms
    • C07D207/09—Radicals substituted by nitrogen atoms, not forming part of a nitro radical
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/16—Amides, e.g. hydroxamic acids
    • A61K31/17—Amides, e.g. hydroxamic acids having the group >N—C(O)—N< or >N—C(S)—N<, e.g. urea, thiourea, carmustine
    • A61K31/175—Amides, e.g. hydroxamic acids having the group >N—C(O)—N< or >N—C(S)—N<, e.g. urea, thiourea, carmustine having the group, >N—C(O)—N=N— or, e.g. carbonohydrazides, carbazones, semicarbazides, semicarbazones; Thioanalogues thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/337—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having four-membered rings, e.g. taxol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/401—Proline; Derivatives thereof, e.g. captopril
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/4025—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. cromakalim
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/425—Thiazoles
    • A61K31/427—Thiazoles not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4439—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. omeprazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/4738—Quinolines; Isoquinolines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/4745—Quinolines; Isoquinolines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems condensed with ring systems having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. phenantrolines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/475—Quinolines; Isoquinolines having an indole ring, e.g. yohimbine, reserpine, strychnine, vinblastine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/513—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim having oxo groups directly attached to the heterocyclic ring, e.g. cytosine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7028—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages
    • A61K31/7034—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin
    • A61K31/704—Compounds having saccharide radicals attached to non-saccharide compounds by glycosidic linkages attached to a carbocyclic compound, e.g. phloridzin attached to a condensed carbocyclic ring system, e.g. sennosides, thiocolchicosides, escin, daunorubicin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7048—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having oxygen as a ring hetero atom, e.g. leucoglucosan, hesperidin, erythromycin, nystatin, digitoxin or digoxin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A61K31/7068—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines having oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. cytidine, cytidylic acid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K33/00—Medicinal preparations containing inorganic active ingredients
    • A61K33/24—Heavy metals; Compounds thereof
    • A61K33/243—Platinum; Compounds thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/05—Dipeptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/04—Peptides having up to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • A61K38/07—Tetrapeptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/04—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/08—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having no double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hydrocarbon radicals, substituted by hetero atoms, attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/02—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link
    • C07K5/0205—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing at least one abnormal peptide link containing the structure -NH-(X)3-C(=0)-, e.g. statine or derivatives thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06008—Dipeptides with the first amino acid being neutral
    • C07K5/06017—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic
    • C07K5/06034—Dipeptides with the first amino acid being neutral and aliphatic the side chain containing 2 to 4 carbon atoms
    • C07K5/06043—Leu-amino acid
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K7/00—Peptides having 5 to 20 amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K7/02—Linear peptides containing at least one abnormal peptide link

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
  • Inorganic Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Description

Opis
[0001] Predmet ovog pronalaska se odnosi na nove derivate dolastatina 10 i auristatina, metode njhove proizvodnje, farmaceutske sastave koji sadrže iste i njihovu upotrebu kao medicinskih proizvoda, posebno u lečenju kancera.
[0002] Dolastatin 10 (D10) je citotoksičan peptidni derivat izolovan iz morskog mekušca (Dolabella auricularia), čija je apsolutna konfiguracija određena, a kasnije potvrđena posle potpune sinteze proizvoda (Pettit G. R. J. Am. Chem. Soc. 1987, 109, 6883; Pettit G. R. J. Am. Chem. Soc. 1987, 109, 7581; Pettit, G. R. Heterocycles 1989, 28, 553; Pettit, G. R. J. Am. Chem. Soc. 1989,111, 5015; Pettit G. R. J. Am. Chem. Soc. 1991, 113, 6692). D10 je sačinjen od 5 jedinica zvanih dolavalin (Dov), valin (Val), dolaizoleucin (Dil), dolaproin (Dap) i dolafenin (Doe). Određen broj analoga ovog jedinjenja je sintetisan modifikovanjem prirode njegovih aminokiselinskih komponenata (Pettit G. R. J. Med. Chem. 1990, 33, 3133; Miyazaki K. Peptide Chemistry 1993, 31, 85; Miyazaki K. Chem. Pham. Bull. 1995, 43, 1706). Napravljene su i modifikacije C-terminalnog dela (desni kraj) i dovele su do brojnih derivata koji uključuju auristatin E ili F (Pettit G. R. Antikancer Drug Design, 1998, 13, 243; Pettit G. R. Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 1998, 2961).
[0003] Ovaj pronalazak je fokusiran na modifikaciju N-terminalnog dela (levi kraj) derivata dolastatina 10 i auristatina E i F. Svega nekoliko primera objavljenih u literaturi o modifikacijama napravljenim na ovoj poziciji je dovelo do gubitka aktivnosti (Miyazaki K. Chem. Pham. Bull. 1995, 43, 1706) ili do manje aktivnih jedinjenja nego što su ona iz ovog pronalaska (videti WO 2012/041805 i WO 2012/123423 koji otkrivaju derivate sa karboksilnim supstituentom umesto hidroksil ili amino supstituenta, kao u ovom pronalasku). Jedinjenja opisana u ovom pronalasku se razlikuju od postojećih po svojim originalnim hemijskim strukturama, a i po svom izvanrednom biološkom svojstvu, koje je potpuno neočekivano, imajući u vidu elemente objavljene u literaturi. Ove izvanredne aktivnosti su dovele do toga da su ova jedinjenja pogodna za upotrebu u lečenju kancera.
[0004] Pored toga, ova jedinjenja imaju prednost da su i aktivna kao citotoksični agensi i rastvorljivija od roditeljskih jedinjenja.
[0005] Predmet ovog pronalaska je, prema tome, jedinjenje sledeće formule (I):
gde:
- R1= OH, a R2= metil, ili
- R1= H, a R2= COOH, COOMe ili tiazol-2-il,
- R3je (C1-C6)alkil grupa, a
- R4je aril-(Cl-2)alkil grupa supstituisana jednom grupom (poželjno u aril delu) odabranom od OH i NR9R10grupa sa R9 iR10od kojih svaki nezavisno od onog drugog predstavlja H ili (C1-C6)alkil grupu (kao što je metil), gde je aril-(C1-2)alkil grupa fenil-(C1-C2)alkil grupa vezana za ostatak molekula preko svoje (C1-C2)alkil grupe, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, hidrat ili solvat.
[0006] Radikali R2do R4, a naročito R4, mogu biti hiralne grupe i mogu biti u vidu svojih različitih stereoizomera i opciono u vidu smese stereoizomera.
[0007] Pod ”stereoizomerom”, u značenju u ovom pronalasku, se misli na geometrijski izomer ili na optički izomer.
[0008] Geometrijski izomeri su rezultat različitih položaja supstituenata na dvoguboj vezi koja, prema tome, može imati Z ili E konfiguraciju.
[0009] Optički izomeri su naročito rezultat različitih položaja u prostoru supstituenata na ugljenikovom atomu koji sadrži 4 različita supstituenta. Ovaj ugljenikov atom zatim formira hiralni ili asimetričan centar. Optički izomeri obuhvataju diastereoizomere i enantiomere. Optički izomeri koji su jedan drugom slike u ogledalu, ali koji se ne mogu preklopiti se zovu ”enantiomeri”. Optički izomeri koji nisu jedan drugom slike u ogledalu i koji se ne mogu preklopiti se zovu ”dijastereoizomeri”.
[0010] Smesa koja sadrži jednake količine dve pojedinačne enantiomerne forme suprotne hiralnosti se zove ”racemska smesa”.
[0011] U ovom pronalasku pod ”farmaceutski prihvatljiv” se podrazumeva onaj koji se može koristiti u pravljenju farmaceutskog sastava koji je generalno bezbedan, netoksičan i nije ni biološki niti na bilo koji drugi način nepoželjan i koji je prihvatljiv za veterinarsku upotrebu, kao i za farmaceutsku upotrebu za ljude.
[0012] Pod ”farmaceutski prihvatljiva so, hidrat ili solvat” jedinjenja se misli na so, hidrat ili solvat koji je farmaceutski prihvatljiv kao što je ovde definisano i koji ima željenu farmakološku aktivnost ishodnog jedinjenja.
[0013] Farmaceutski prihvatljive soli poželjno sadrže:
(1) adicione soli farmaceutski prihvatljive kiseline obrazovane sa farmaceutski prihvatljivim neorganskim kiselinama kao što je hlorovodonična, bromovodonična, fosforna, sumporna i slične kiseline; ili obrazovane sa farmaceutski prihvatljivim organskim kiselinama kao što je sirćetna, trifluorosirćetna, propionska, ćilibarna, fumarna, hidroksićilibarna, vinska, limunska, askorbinska, maleinska, glutaminska, benzojeva, salicilna, toluensulfonska, metansulfonska, stearinska, mlečna i slične kiseline i
(2) adicione soli farmaceutski prihvatljive baze obrazovane kad se proton kiseline prisutan u roditeljskom jedinjenju zameni metalnim jonom npr. alkalnim metalnim jonom, zemnoalkalnim metalnim jonom ili aluminijumovim jonom; ili kad se koordinaciono veže sa farmaceutski prihvatljivom organskom bazom kao što je lizin, arginin i slično; ili sa farmaceutski prihvatljivom neorganskom bazom kao što je natrijum hidroksid, potaša, kalcijum hidroksid i slično.
[0014] Ove soli se mogu dobijati iz jedinjenja iz ovog pronalaska koja sadrže baznu ili kiselu funkcionalnu grupu i odgovarajućih kiselina ili baza pomoću konvencionalnih hemijskih metoda.
[0015] Jedinjenja formule (I) iz ovog pronalaska su poželjno u obliku soli, a naročito farmaceutski prihvatljive kisele adicione soli.
[0016] Poželjno, jedinjenja formule (I) prema ovom pronalasku su u obliku farmaceutski prihvatljive kisele adicione soli, gde je kiselina, po mogućnosti, trifluorosirćetna kiselina, sirćetna kiselina ili hlorovodonična kiselina, na primer, a naročito trifluorosirćetna kiselina.
[0017] Solvati obuhvataju konvencionalne solvate dobijene u poslednjem koraku dobijanja jedinjenja iz ovog pronalaska zahvaljujući prisustvu rastvarača, gde je rastvarač, po mogućnosti, etanol, na primer.
[0018] Pod ”alkil” se u ovom pronalasku misli na linearan ili razgranat, zasićen ugljovodonični lanac. Na primer, može se pomenuti metil, etil, propil, izopropil, butil, izobutil, sec-butil, terc-butil, pentil ili heksil grupa.
[0019] Pod ”(Cx-Cy)alkil” u značenju iz ovog pronalaska se misli na alkilni lanac kao što je definisan gore koji sadrži x do y ugljenikovih atoma. Prema tome, (C1-C6)alkil grupa je alkilni lanac koji ma 1 do 6 ugljenikovih atoma.
[0020] Pod ”aril” u značenju iz ovog pronalaska se misli na aromatičnu ugljovodoničnu grupu koja poželjno ima 6 do 10 ugljenikovih atoma i koja je u stanju da sadrži jedan ili dva fuzionisana prstena. Na primer, može se navesti fenil ili naftil. Poželjno je da bude fenil.
[0021] Pod ”aril-(C1-2)alkil” u značenju iz ovog pronalaska se misli na aril grupu kao što je definisana gore, vezanu za ostatak molekula preko alkil grupe kao što je definisana gore i koja sadrži 1 ili 2 ugljenikova atoma. Aril grupa je fenil grupa. Poželjno je da (C1-2)alkil grupa bude benzil ili fenetil grupa.
[0022] Među jedinjenjima iz ovog pronalaska, jedna posebno cenjena klasa jedinjenja odgovara jedinjenjima formule (I) u kojima je R1OH, a R2predstavlja metil.
[0023] Još jedna posebno cenjena klasa jedinjenja odgovara jedinjenjima formule (I) u kojima je R1vodonik, a R2je tiazol-2-il grupa.
[0024] Još jedna posebno cenjena klasa jedinjenja odgovara jedinjenjima formule (I) u kojima je R1vodonik, a R2je COOMe.
[0025] Još jedna posebno cenjena klasa jedinjenja odgovara jedinjenjima formule (I) u kojima je R1vodonik, a R2je COOH grupa.
[0026] Prema tome, jedinjenja iz ovog pronalaska su jedinjenja formule (I) u kojima:
- R1=OH i R2=Me (metil), ili
- R1=H i R2=COOH, COOMe ili tiazol-2-il.
[0027] Poželjno, R1je H, a R2je COOH ili COOMe.
[0028] Prema prvom poželjnom obliku, R1je H, a R2je COOH.
[0029] Prema drugom poželjnom obliku, R1je H, a R2je COOMe.
[0030] R3naročito predstavlja metil grupu.
[0031] R4predstavlja aril-(C1-C2)alkil grupu, supstituisanu jednom grupom odabranom od OH i NR9R10, naročito NR9R10.
[0032] R4poželjno predstavlja aril-(C1-C2)alkil grupu supstituisanu jednom grupom na aril grupi odabranom od OH i NR9R10, a naročito NR9R10.
[0033] Aril grupa je fenil grupa.
[0034] Prema tome, R4predstavlja fenil-(C1-C2)alkil supstituisan jednom grupom (poželjno na fenil grupi) odabranom od OH i NR9R10, a naročito NR9R10.
[0035] R4može, prema tome, da ima sledeću formulu:
gde X0predstavlja OH ili NR9R10, posebno NR9R10, a m predstavlja ceo broj 1 ili 2.
[0036] Prema jednom poželjnom obliku, R4ima sledeću formulu:
Gde su X0i m kao što su prethodno definisani, a naročito gde je X0=NR9R10, a m=1 ili 2.
[0037] R4može posebno da bude odabran od:
[0038] Poželjno je da jedinjenje formule (I) bude odabrano od jedinjenja 11-15, 19-20, 23-24, 27-29, 49-51 i 61-64, opisanih u primerima niže.
[0039] Dalje, predmet ovog pronalaska je jedinjenje formule (I) kao što je definisano gore za upotrebu kao medicinski proizvod, naročito za lečenje ili prevenciju kancera ili benignih proliferativnih poremećaja.
[0040] Ovaj pronalazak se takođe odnosi na upotrebu jedinjenja formule (I) kao što je definisano gore za proizvodnju medicinskih proizvoda, naročito namenjenih za lečenje ili prevenciju kancera ili benignih proliferativnih poremećaja.
[0041] Kancer koji se tretira ili prevenira je još konkretnije kancer pluća, pankreasa, kože, glave, vrata, materice, jajnika, anusa, stomaka, kolona, dojke, ezofagusa, tankog creva, tiroidne žlezde, limfnog sistema, prostate, bubrega, ili bešike, ili akutne ili hronične leukemije, ili kombinacije dva ili više ovih kancera.
[0042] Pod benignim proliferativnim poremećajima se misli na proliferativne poremećaje koji ne mogu da daju metastaze ili koji još nisu progredirali do kancera (pre-kancerozni tumori).
[0043] Još jedan predmet ovog pronalaska je farmaceutski sastav koji obuhvata jedinjenje formule (I) kao što je definisano gore i bar jedan farmaceutski prihvatljiv ekscipijent.
[0044] Aktivni sastojak se može administrirati u jediničnim formama administracije, u smesi sa konventionalnim farmaceutskim nosačima, životinjama ili ljudskim bićima. Pogodne jedinične forme administracije obuhvataju forme za oralni put, forme za sublingvalnu ili bukalnu administraciju, forme za administraciju parenteralnim putem (subkutano, intradermalno, intramuskularno ili intravenozno), forme za topičku administraciju (na kožu i sluzokožu, uključujući intranazalnu i intraokularnu administraciju) i forme za rektalnu administraciju.
[0045] Takvi sastavi mogu da budu u čvrstoj i tečnoj formi, formi emulzije, losiona ili kreme.
[0046] Kao čvrsti sastavi za oralnu administraciju, mogu se koristiti tablete, pilule, prahovi (tvrde ili meke želatinske kapsule) ili granule. U ovim sastavima, aktivan sastojak iz ovog pronalaska se meša sa jednim ili više inertnih razblaživača kao što je skrob, celuloza, saharoza, laktoza ili silicijum dioksid, u struji argona. Ovi sastavi mogu da sadrže i supstance koje nisu razblaživači, na primer, jedan ili više lubrikanata kao što je magnezijum stearat ili talk, sredstvo za bojenje, oblaganje (obložene tablete) ili lak.
[0047] Kao tečni sastavi za oralnu administraciju, mogu se koristiti rastvori, suspenzije, emulzije, sirupi i eliksiri koji su farmaceutski prihvatljivi i sadrže inertne razblaživače kao što je voda, etanol, glicerol, biljna ulja ili parafinsko ulje. Ovi sastavi mogu da sadrže supstance koje nisu razblaživači, na primer, proizvode za kvašenje, zaslađivanje, zgušnjavanje, dodatak ukusa ili stabilizatore.
[0048] Sterilni sastavi za parenteralnu administraciju mogu poželjno biti vodeni ili nevodeni rastvori, suspenzije ili emulzije. Kao rastvarač ili nosač, može se koristiti voda, propileneglikol, polietilenglikol, biljna ulja, naročito maslinovo ulje, injektabilni organski estri, npr. etil oleat ili drugi pogodni organski rastvarači. Ovi sastavi mogu da sadrže i adjuvante, naročito agense za kvašenje, izotoničnost, emulzifikatore, disperziona sredstva i stabilizatore. Sterilizacija se može sprovesti na nekoliko načina, na primer, sanitarnim filtriranjem, ugradnjom sterilizacionih sredstava u sastav, zračenjem ili zagrevanjem. Oni se mogu praviti i u formi čvrstih sterilnih sastava koji se mogu rastvoriti u vreme upotrebe u sterilisanoj vodi ili bilo kom drugom any other injektabilnom sterilnom medijumu.
[0049] Sastavi za rektalnu administraciju su supozitorije ili rektalne kapsule koje, pored aktivnog sastojka, sadrže ekscipijente kao što je kako puter, polusintetički gliceridi ili polietileneglikoli.
[0050] Sastavi za topičku administraciju mogu, na primer, biti kreme, losioni, kapi za oči, tečnost za ispiranje usta, kapi za nos ili sprejevi.
[0051] Doze zavise od željenog efekta, od dužine lečenja i načina administracije koji se koristi. U opštem slučaju, lekar će odrediti pogodnu dozu s obzirom na starost, težinu i sve druge faktore specifične za subjekta koji se tretira.
[0052] Drugi aktivni sastojak se može sadržati u farmaceutskim sastavima prema ovom pronalasku. Konkretno, to može biti antikancerozni agens, a naročito citotoksičan antikancerozni agens kao što je navelbin, vinflunin, taksol, taksotera, 5-fluorouracil, metotreksat, doksorabicin, kamptotecin, gemcitabin, etopozid, cis-platina ili karmustin (takođe zvan BCNU); ili hormonsko antikancerozno sredstvo kao što je tamoksifen ili medroksiprogesteron.
[0053] Tretman zračenjem (X-zracima ili gama zracima) može takođe biti pridruženo administriranju jedinjenja iz ovog pronalaska. Takvo zračenje može biti dato upotrebom spoljnog izvora ili implantiranjem minijaturnih radioaktivnih izvora.
[0054] Ovaj pronalazak se takođe odnosi na dobijanje jedinjenja formule (I) u skladu sa pronalaskom korišćenjem opštih metoda opisanih u sledećim šemama sinteze, po potrebi opciono obogaćenih bilo kojom standardnom operacijom koja je opisana u literaturi ili koja je dobro poznata stručnjacima, ili opisana u primerima, u njihovom eksperimentalnom delu.
Šema 1
[0055] Šema 1 ilustruje prvi opšti metod koji se može koristiti za dobijanje jedinjenja formule (I). U gornjim opštim formulama, R1, R2i R3su kao što su prethodno definisani, R4apredstavlja R4grupu kao što je prethodno definisana, opciono u zaštićenom obliku, a G je zaštitna grupa.
[0056] Prvi korak se sastoji od kondenzacije jedinjenja (II), zaštićenog na svojoj amino grupi zaštitnom grupom G, sa jedinjenjem (III). X može da predstavlja odlazeću grupu kao što je hlor. U ovom slučaju, prvi korak se sastoji od reakcije između kiselog hlorida i amina. Ova reakcija se može voditi primenom metoda i tehnika dobro poznatih stručnjacima. U jednom naročito poželjnom metodu, izazove se reakcija ova dva entiteta u prisustvu organske ili neorganske baze, npr., Et3N, iPr2NEt, piridina, NaH, Cs2CO3, K2CO3u rastvaraču kao što je THF, dihlormetan, DMF, DMSO, naročito na temperaturi između -20°C i 100°C. X može da bude i hidroksil (OH). U tom slučaju, prvi korak je reakcija kondenzacije između karboksilne kiseline (II) i amina (III). Ova reakcija se može vršiti sledećim metodama i tehnikama dobro poznatim stručnjaku. U jednom naročito poželjnom metodu, izazove se reakcija ova dva entiteta u prisustvu agensa za kuplovanje, kao što je 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilkarbodiimid (EDC), 3-hidroksi-1,2,3-benzotriazin-4(3H)-on, tercijarni amin kao što je diizopropiletilamin, u polarnom aprotičnom rastvaraču kao što je dihlormetan ili DMF, naročito na temperaturi između - 15°C i 40°C. U jednom drugom naročito poželjnom metodu, izazove se reakcija ova dva entiteta u prisustvu dietil fosforocijanidata (DEPC), tercijarnog amina kao što je trietilamin, u polarnom aprotičnom rastvaraču kao što je dihlormetan ili DMF, naročito na temperaturi između -15°C i 40°C. Jedan drugi naročito poželjan metod se sastoji od izazivanja reakcije ova dva entiteta u prisustvu O-(7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil-uronijumheksafluorofosfata (HATU), tercijarnog amina kao što je diizopropiletilamin, u polarnom aprotičnom rastvaraču kao što je dihlormetan ili DMF, na temperaturi između -15°C i 100°C.
[0057] Posle skidanja zaštite sa intermedijera primenom tehnika dobro poznatih stručnjacima (« Protective Groups u Organic Synthesis », T.W. Gre. e.ne, John Wiley & Sons, 2006 i «Protecting Groups », P.J. Kocienski, Thieme Verlag, 1994), jedinjenje (IV) se može kondenzovati sa jedinjenjem (V) sledeći metode i tehnike opisane gore da bi se dobilo jedinjenje (VI) posle koraka skidanja zaštite. Ovo jedinjenje može zatim, posle kondenzovanja sa intermedijerom (VII) i opcionog skidanja zaštite, dovesti do formiranja jedinjenja formule (I). Jedinjenje (VI) se može i kuplovati sa jedinjenjem (VII’), u kom je R’3prekursor R3, naročito R3grupe zaštićene zaštitnom grupom. Kuplovanje, a zatim skidanje zaštite sa grupe R’3, da bi se došlo do R3, se može vršiti sledeći iste procedure kao što su prethodno opisane.
Šema 2
[0058] Šema 2 ilustruje drugi opšti metod koji se može koristiti da bi se dobilo jedinjenje formule (I). U gornjim opštim formulama, R1, R2i R3su kao što su prethodno definisani, R4apredstavlja R4grupu kao što je prethodno definisana opciono u zaštićenom obliku, R4bje prekursor R4grupe, a G je zaštitna grupa.
[0059] U prvom koraku, jedinjenje (IX), zaštićeno na svojoj amino grupi zaštitnom grupom G, se kondenzuje sa jedinjenjem (VI). X može da predstavlja odlazeću grupu, npr., hlor. U tom slučaju, prvi korak se sastoji od reakcije između kiselog hlorida i amina. Ova reakcija se može vršiti primenom metoda i tehnika dobro poznatih stručnjacima. U jednom naročito poželjnom metodu, izazove se reakcija ova dva entiteta u prisustvu organske ili inorganske baze kao što je Et3N, iPr2NEt, piridin, NaH, Cs2CO3, K2CO3u rastvaraču kao što je THF, dihlormetan, DMF, DMSO naročito na temperaturi između -20° i 100°C. X može da predstavlja i hidroksil. U ovom slučaju, prvi korak je reakcija kondenzovanja između karboksilne kiseline (IX) i amina (VI). Ova reakcija se može voditi sledeći metode i tehnike dobro poznate stručnjacima. U jednom naročito poželjnom metodu, izazove se reakcija ova dva entiteta u prisustvu 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilkarbodiimida (EDC), 3-hidroksi-1,2,3-benzotriazin-4(3H)-ona, tercijarnog amina kao što je diizopropiletilamin, u polarnom aprotičnom rastvaraču kao što je dihlormetan ili DMF, naročito na temperaturi između -15°C i 40°C. U jednom drugom naročito poželjnom metodu, izazove se reakcija ova dva entiteta u prisustvu dietil fosforocijanidata (DEPC), tercijarnog amina kao što je trietilamin, u polarnom aprotičnom rastvaraču kao što je dihlormetan ili DMF, naročito na temperaturi između -15°C i 40°C.
[0060] Posle skidanja zaštite sa intermedijera, primenom tehnika dobro poznatih stručnjacima, dobijeno jedinjenje (VIII) može dovesti do jedinjenja formule (I), posle reakcije sa R4Y. U ovom slučaju, Y je odlazeća grupa kao što je Cl, Br, I, OSO2CH3, OSO2CF3ili O-tosil. Reakcija se vodi u prisustvu organske ili inorganske baze kao što je Et3N, iPr2NEt, NaH, Cs2CO3, K2CO3, u polarnom anhidrovanom rastvaraču kao što je dihlormetan, THF, DMF, DMSO, naročito na temperaturi između -20° i 100°C. U jednom drugom naročito poželjnom metodu, izazove se reakcija jedinjenja (VIII) sa aldehidom formule R4b-CHO, gde R4bodgovara prekursoru R4. U ovom slučaju, reakcija je reduktivna aminacija u prisustvu reduktivnog sredstva kao što je NaBH4, NaBH3CN, NaBH(OAc)3, u polarnom rastvaraču kao što je 1,2-dihloretan, dihlormetan, THF, DMF, MeOH, opciono u prisustvu titanijum izopropoksida (IV), na pH koji se može kontrolisati dodavanjem kiseline kao što je sirćetna kiselina, naročito na temperaturi između -20°C i 100°C.
[0061] U navedenim šemama sinteze, jedinjenje formule (I) može dovesti do jednog drugog jedinjenja formule (I) posle dodatnog reakcionog koraka kao što je saponifikacija, na primer, primenom metoda dobro poznatih stručnjacima gde se R2grupa koja predstavlja estar, poželjno metil estar, zamenjuje R2grupom koja predstavlja karboksilnu kiselinu.
[0062] Ako se želi izolovati jedinjenje formule (I) koje sadrži bar jednu baznu funkcionalnu grupu u vidu kisele adicione soli, to je moguće tretiranjem slobodne baze jedinjenja formule (I) (koje sadrži bar jednu baznu grupu) pogodnom kiselinom, poželjno u ekvivalentnoj količini. Pogodna kiselina može konkretno da bude trifluorsirćetna kiselina.
[0063] Još jedan predmet ovog pronalaska je, prema tome, prvi metod za dobijanje jedinjenja formule (I), koji obuhvata reakciju kondenzovanja jedinjenja sledeće formule (VI):
gde su R1i R2kao što su prethodno definisani,
i jedinjenja sledeće formule (VII):
gde je R3kao što je prethodno definisano, R4aodgovara R4grupi kao što je prethodno definisano, opciono u zaštićenom obliku, a X je OH ili Cl.
[0064] Kad je X = OH, reakcija kuplovanja se može sprovoditi u uslovima za peptidno kuplovanje dobro poznatim stručnjacima.
[0065] Navedeno peptidno kuplovanje se može sprovoditi u prisustvu sredstva za kuplovanje kao što je diizopropilkarbodiimid (DIC), dicikloheksilkarbodiimid (DCC), 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilkarbodiimid hidrohlorid (EDC), karbonildiimidazol(CDI), 2-(1H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronijum heksafluorofosfat (HBTU), 2-(1H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronijum tetrafluoroborat (TBTU), O-(7-azobenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronijum heksafluorofosfat (HATU), dietil fosforocijanidat (DEPC) ili (benzotriazol-1-iloksi) tripirolodinofosfonijum heksafluorofosfat (PyBOP), kome je opciono pridruženo pomoćno sredstvo za kuplovanje kao što je N-hidroksi sukcinimid (NHS), N-hidroksi benzotriazol (HOBt), 3,4-dihidro-3-hidroksi-4-okso-1,2,3-benzotriazol (HOOBt), 1-hidroksi-7-azabenzotriazol (HAt), N-hidroksisulfosukcinimid (sulfo NHS) ili dimetil aminopiridin (DMAP). Poželjno je da sredstvo za kuplovanje bude HATU ili DEPC.
[0066] Rreakcija se može sprovoditi i u prisustvu baze kao što je DIEA (diizopropiletilamin).
[0067] Naročito, peptidno kuplovanje se sprovodi u prisustvu HATU ili DEPC i DIEA.
[0068] Navedena reakcija se može sprovoditi u polarnom aprotičnom rastvaraču kao što je dihlormetan (DCM) ili dimetilformamid (DMF), naročito na temperaturi između -15°C i 40°C.
[0069] Kad je X = Cl, reakcija kondenzovanja će biti vršena u prisustvu baze koja može biti organska ili inorganska, kao što je Et3N, iPr2NEt, piridin, NaH, Cs2CO3, ili K2CO3.
[0070] Reakcija se može sprovoditi u rastvaraču kao što je tetrahidrofuran (THF), dihlormetan (DCM), dimetilformamid (DMF), ili dimetilsulfoksid (DMSO), naročito na temperaturi između -20° i 100°C.
[0071] Jedinjenja formula (VI) i (VII) se mogu dobiti sledeći protokole za sintezu opisane u eksperimentalnom delu niže ili sledeći tehnike poznate stručnjacima.
[0072] Još jedan predmet ovog pronalaska je drugi metod za dobijanje jedinjenja formule (I) koji obuhvata reakciju supstitucije između jedinjenja sledeće formule (VIII):
gde su R1, R2i R3kao što su prethodno definisani,
i jedinjenja sledeće formule (X):
R4a-Y (X)
gde je R4aR4grupa kao što je prethodno definisana, opciono u zaštićenom obliku, a Y je odlazeća grupa kao što je Cl, Br, I, OSO2CH3, OSO2CF3ili O-tosil.
[0073] Reakcija supstitucije će se naročito voditi u prisustvu baze koja može biti organska ili inorganska, kao što je Et3N, iPr2NEt, NaH, Cs2CO3, ili K2CO3.
[0074] Ova reakcija se može izvoditi u polarnom rastvaraču, poželjno anhidrovanom, kao što je DCM, THF, DMF ili DMSO, naročito na temperaturi između -20° i 100°C.
[0075] Jedinjenja formula (VIII) i (X) se mogu dobijati sledeći protokole za sintezu opisane u eksperimentalnom delu niže ili primenom tehnika poznatih stručnjacima.
[0076] Dalji predmet ovog pronalaska je treći metod za dobijanje jedinjenja formule (I), u kom je R4-CH2R4bgrupa, gde je R4b, koji predstavlja fenil ili fenil-(C1)alkil grupu supstituisanu jednom grupom (poželjno na fenil grupi), odabrano od OH i NR9R10grupa, Koji obuhvata reakciju reduktivne aminacije između jedinjenja sledeće formule (VIII):
gde su R1, R2i R3kao što su prethodno definisani
i jedinjenja sledeće formule (XI):
R4b-CHO (XI)
Gde je R4bkao što je definisan gore.
[0077] Reakcija reduktivne aminacije se može sprovoditi u prisustvu reduktivnog sredstva kao što je NaBH4, NaBH3CN ili NaBH(OAc)3i opciono titanijum izopropoksida (IV).
[0078] pH se može kontrolisati dodavanjem kiseline kao što je sirćetna kiselina, naročito da bi se dostigao pH između 4 i 5.
[0079] Ova reakcija može da se vrši u polarnom rastvaraču kao što je DCE (1,2-dihloretan), DCM, THF, DMF ili metanol, naročito na temperaturi između -20° i 100°C.
[0080] Jedinjenja formula (VIII) i (XI) se mogu dobijati sledeći protokole za sintezu opisane u eksperimentalnom delu niže ili primenom tehnika poznatih stručnjacima.
[0081] Jedinjenje dobijeno u koraku kondenzovanja/supstitucije/reduktivne aminacije u jednom od tri gornja metoda se može podvrgnuti dodatnim koracima skidanja zaštite, naročito u vezi supstituenata R2i R4i opciono dodatnim koracima funkcionalizacije upotrebom metoda dobro poznatih stručnjacima.
[0082] Kad R2predstavlja COOH grupu, korak kondenzovanja/supstitucije/reduktivne aminacije pomenut gore, može da se vrši iz jedinjenja formule (VI) sa R2grupom koja predstavlja COO-((C1-C6)alkil) estarsku funkcionalnu grupu, gde ova estarska grupa zatim može da se saponifikuje da bi se dobilo jedinjenje formule (I) sa R2= COOH.
[0083] Kad R4grupa sadrži NH funkcionalnu grupu, ova se može zaštititi pre sprovođenja reakcije kondenzovanja/supstitucije/reduktivne aminacije supstituisanjem azotovog atoma N-zaštitnom grupom kao što je Boc ili Fmoc grupa.
[0084] Pod ”zaštitna grupa” u ovom pronalasku se misli na grupu koja selektivno blokira reaktivno mesto u multifunkcionalnom jedinjenju, tako da se hemijska reakcija može selektivno odvijati na drugom nezaštićenom reaktivnom mestu u značenju konvencionalno vezanom sa tim u hemijskoj sintezi.
[0085] Pod ”N-zaštitna grupa” u ovom pronalasku se misli na bilo koji supstituent koji štiti NH grupu od neželjenih reakcija, kao što su N-zaštitne grupe opisane u Gre. e.ne ”Protective Groups u Organic Synthesis”, (John Wiley & Sons, New York (1981)) i Harrison et al. ”Compendium of Synthetic Organic Methods”, Vol.1 do 8 (J. Wiley & sons, 1971 do 1996). N-zaštitne grupe obuhvataju karbamate, amide, N-alkilovane derivate, amino acetatne derivate, N-benzil derivate, imin derivate, enamin derivate i N-heteroatom derivate. N-zaštitne grupe mogu biti formil; aril, kao što je fenil, opciono supstituisan jednim ili sa nekoliko metoksi grupa, kao što je p-metoksifenil (PMP); aril-(C1-C6)alkil, kao što je benzil, gde je aril grupa opciono supstituisana jednom ili sa nekoliko metoksi grupa, kao što je benzil (Bn), p-metoksibenzil (PMB) ili 3,4-dimetoksibenzil (DMPM); -CO-RGP1kao što je acetil (Ac), pivaloil (Piv ili Pv), benzoil (Bz) ili p-metoksibenzilkarbonil (Moz); -CO2-RGP1kao što je tbutiloksikarbonil (Boc), trihloretoksikarbonil (TROC), aliloksikarbonil (Alloc), benziloksikarbonil (Cbz ili Z) ili 9-fluorenilmetiloksikarbonil (Fmoc); -SO2-RGP1kao što je fenilsulfonil, tosil (Ts ili Tos) ili 2-nitrobenzensulfonil (takođe zvan nozil - Nos ili Ns); i slično, gde je RGP1, koji predstavlja (C1-C6)alkil, opciono supstituisan jednim ili sa nekoliko atoma halogena kao što je F ili Cl; (C2-C6)alkenil kao što je alil; aril, kao što je fenil, opciono supstituisan jednom ili sa nekoliko grupa odabranih od OMe (metoksi) i NO2(nitro); aril-(C1-C6)alkil, kao što je benzil, gde je aril grupa opciono supstituisana jednom ili sa nekoliko metoksi grupa; ili 9-fluorenilmetil grupa.
[0086] Naročito, N-zaštitna grupa obuhvata formil, acetil, benzoil, pivaloil, fenilsulfonil, benzil (Bn), tbutiloksikarbonil (Boc), benziloksikarbonil (Cbz), p-metoksibenziloksikarbonil, p-nitrobenzil-oksikarbonil, trichloroetoksi karbonil (TROC), aliloksikarbonil (Alloc), 9-fluorenilmetiloksikarbonil (Fmoc), trifluoro-acetil, benzil karbamate (supstituisane ili ne) i slično. Posebno to može biti Boc ili Fmoc grupa.
[0087] Zaštita NH amin funkcionalne grupe Boc ili Fmoc grupom i njeno kasnije skidanje zaštite, posle reakcije kondenzovanja/supstitucije/reduktivne aminacije, su dobro poznati stručnjacima i opisani su posebno u eksperimentalnom delu niže.
[0088] Jedinjenje formule (I) dobijeno jednim od tri metoda pomenutim gore se takođe može salinizovati dodavanjem farmaceutski prihvatljive baze ili kiseline, naročito farmaceutski prihvatljive kiseline kao što je trifluorosirćetna kiselina. Navedeni korak se može opciono izvoditi u isto veme sa nekim drugim korakom reakcije, naročito u isto veme sa korakom skidanja zaštite, kad se ovo mora izvoditi u kiselom medijumu, na primer.
[0089] Jedinjenje dobijeno jednim od tri metoda, opciono posle dodatnog(-ih) koraka za skidanje zaštite, funkcionalizaciju i/ili salinizaciju, se može izdvojiti iz reakcionog medijuma pomoću metoda dobro poznatih stručnjacima, kao što je ekstrakcija, uparavanje rastvarača ili precipitacija i filtracija.
[0090] Jedinjenje may also be prečišćen if necessary using tehnike dobro poznatih stručnjacima, npr., by recrystallization if the jedinjenje is crystalline, by distillation, by silica gel kolona hromatografijom ili high performance liquid hromatografijom (HPLC).
[0091] Sledeći primeri ilustruju ovaj pronalazak.
PRIMERI
I - Sinteza jedinjenja iz ovog pronalaska
[0092] U sledećim primerima korišćene su sledeće skraćenice:
aq. vodeni
e. e. enantiomerna čistoća,
ekv ekvivalent
ESI jonizacija elektrosprejem
LC/MS tečna hromatografija kuplovana sa masenom spektrometrijom
HPLC tečna hromatografija visokih performansi
NMR nuklearna magnetna rezonanca
sat. zasićen
UV ultraljubičast
Referentni primer 1
(S)-2-((S)-2-((3-aminopropil)(metil)amino)-3-metilbutanamido)-N-((3R,4S,5S)-3-metoksi-1-((S)-2-((1R,2R)-1-metoksi-2-metil-3-okso-3-(((S)-2-fenil-1-(tiazol-2-il)etil)amino)propil)pirolidin-1-il)-5-metil-1-oksoheptan-4-il)-N,3-dimetilbutanamid, bis trifluorosirćetna kiselina
[0093]
Primer 1A: (4R, 5S)-4-metil-5-fenil-3-propanoil-1,3-oksazolidin-2-on
[0094]
[0095] (4R, 5S)-4-metil-5-fenil-1,3-oksazolidin-2-on (5,8 g, 32,7 mmol, 1,00 ekv) je rastvoren u tetrahidrofuranu (THF, 120 mL) u inertnoj atmosferi. Smesa je ohlađena do -78°C i n-butilitijum (14,4 mL) je dodat kap po kap. Posle 30 minuta mućkanja na -78°C, dodat je propanoil hlorid (5,7 mL). Mućkanje je nastavljeno još 30 minuta na -78°C, a zatim preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smesa je koncentrovana, zatim ponovo rastvorena u 200 mL vode. pH rastvora je podešen na 7 zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata. Ova vodena faza je ekstrahovana 3 puta sa 100 mL etil acetata (EtOAc).
Organske faze su kombinovane, osušene preko natrijum sulfata, profiltrirane i koncentrovane da bi dale 6,8 g (89 %) jedinjenja 1A u vidu žutog ulja.
Primer 1B: terc-butil (2S)-2-[(1R,2R)-1-hidroksi-2-metil-3-[(4R,5S)-4-metil-2-okso-5-fenil-1,3-oksazolidin-3-il]-3- oksopropil]pirolidin-1-karboksilat
[0096]
[0097] Jedinjenje 1A (17,6 g, 75,45 mmol, 1,00 ekv) je rastvoreno u dihlormetanu (DCM, 286 mL) u inertnoj atmosferi. Ovaj rastvor je ohlađen na ledenom kupatilu. Trietilamin (TEA, 12,1 mL, 1,15 ekv) i Bu2BOTf (78,3 mL, 1,04 ekv) su dodati kap po kap uz držanje temperature reakcione smese ispod 2°C. Mućkanje je nastavljeno na 0°C 45 minuta, posle čega je reakcija ohlađena do -78°C. Rastvor terc-butil (2S)-2-formilpirolidin-1-karboksilata (8,5 g, 42,66 mmol, 0,57 ekv) u DCM (42 mL) je dodat kap po kap. Mućkanje je nastavljeno još 2 sata na -78°C, zatim 1 sat na 0°C i konačno 1 sat na sobnoj temperaturi. Reakcija je neutralisana pomoću 72 mL fosfatnog pufera (pH = 7,2 - 7,4) i 214 mL metanola i ohlađena do 0°C. Rastvor 30 %-nog vodonik peroksida u metanolu (257 mL) je dodat kap po kap uz držanje temperature ispod 10°C. Mućkanje je nastavljeno još 1 sat na 0°C. Reakcija je neutralisana pomoću 142 mL vode, zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. Dobijen vodeni rastvor je ekstrahovan 3 puta pomoću 200 mL EtOAc. Organske faze su kombinovane, osušene preko natrijum sulfata, profiltrirane i koncentrovane. Ostatak je prečišćen na koloni od silika gela smesom EtOAc i petrolej etra (EtOAc:PE = 1:8) da bi dao 13,16 g (40 %) jedinjenja 1B u vidu bezbojnog ulja.
Primer 1C: (2R,3R)-3-[(2S)-1-[(terc-butoksi)karbonil]pirolidin-2-il]-3-hidroksi-2-metilpropanoinska kiselina
[0098]
[0099] Jedinjenje 1B (13,16 g, 30,43 mmol, 1,00 ekv) je rastvoreno u THF (460 mL) u prisustvu vodonik peroksida (30 % u vodi, 15,7 mL), zatim ohlađeno na ledenom kupatilu. Vodeni rastvor litijum hidroksida (0,4 mol/L, 152,1 mL) je dodat kap po kap uz držanje temperature reakcije ispod 4°C. Reakciona smesa je mućkana 2,5 sata na 0°C. Vodeni rastvor Na2SO3(1 mol/L, 167,3 mL) je dodat kap po kap uz držanje temperature na 0°C. Reakciona smesa je mućkana 14 sati na sobnoj temperaturi, zatim neutralisana pomoću 150 mL hladnog zasićenog rastvora natrijum bikarbonata i oprana 3 puta pomoću 50 mL DCM. pH vodenog rastvora je podešen na 2-3 pomoću 1M vodenog rastvora KHSO4. Ovaj vodeni rastvor je ekstrahovan 3 puta pomoću 100 mL EtOAc. Organske faze su kombinovane, oprane jednom zasićenim rastvorom NaCl, osušene preko natrijum sulfata, profiltrirane i koncentrovane da bi dale 7,31 g (88 %) jedinjenja 1C u vidu bezbojnog ulja.
Primer 1D: (2R,3R)-3-[(2S)-1-[(terc-butoksi)karbonil]pirolidin-2-il]-3-metoksi-2-metilpropanoinska kiselina
[0100]
[0101] Jedinjenje 1C (7,31 g, 26,74 mmol, 1,00 ekv) je rastvoreno u inertnoj atmosferi u THF (135 mL) u prisustvu jodometana (25,3 mL). Reakcioni medijum je ohlađen na ledenom kupatilu posle čega je NaH (60 % u ulju, 4,28 g) dodat deo po deo. Reakcija je ostavljena 3 dana na 0°C uz mućkanje, a zatim neutralisana pomoću 100 mL zasićenog vodenog rastvora natrijum bikarbonata i oprana 3 puta pomoću 50 mL etra. pH vodenog rastvora je podešen na 3 pomoću 1M vodenog rastvora KHSO4. Ovaj vodeni rastvor je ekstrahovan 3 puta pomoću 100 mL EtOAc. Organske faze su kombinovane, oprane jednom pomoću 100 mL Na2S2O3(5 % u vodi), jednom pomoću zasićenog rastvora NaCl, zatim osušene preko natrijum sulfata, profiltrirane i koncentrovane da bi dale 5,5 g (72 %) jedinjenja 1D u vidu bezbojnog ulja.
Primer 1E: N-metoksi-N-metil-2-fenilacetamid
[0102]
[0103] 2-fenilsirćetna kiselina (16,2 g, 118,99 mmol, 1,00 ekv) je rastvorena u dimetilformamidu (DMF, 130 mL) zatim ohlađena do -10°C. Dodati su dietil fosforocijanidat (DEPC, 19,2 mL), metoksi(metil)amin hidrohlorid (12,92 g, 133,20 mmol, 1,12 ekv) i trietilamin (33,6 mL). Reakciona smesa je mućkana 30 minuta na -10°C, zatim 2,5 sata na sobnoj temperaturi. Zatim je ekstrahovana dva puta pomoću 1 litra EtOAc. Organske faze su kombinovane, oprane dva puta pomoću 500 mL NaHCO3(sat.), jednom pomoću 400 mL vode, zatim osušene preko natrijum sulfata, profiltrirane i koncentrovane. Ostatak je prečišćen na koloni od silika gela smesom EtOAc i PE (1:100 do 1:3) da bi dao 20,2 g (95 %) jedinjenja 1E u vidu žutog ulja.
Primer 1F: 2-fenil-1-(1,3-tiazol-2-il)etan-1-on
[0104]
[0105] Tetrametiletilenediamin (TMEDA, 27,2 mL) je rastvoren u THF 300 mL) u inertnoj atmosferi, zatim ohlađen do -78°C pre dodavanja kap po kap nBuLi (67,6 mL, 2,5 M). 2-bromo-1,3-tiazol (15,2 mL) je dodat kap po kap i mućkanje je nastavljeno 30 minuta na -78°C. Jedinjenje 1E (25 g, 139,50 mmol, 1,00 ekv) rastvoreno u THF (100 mL) je dodato kap po kap. Mućkanje je nastavljeno još 30 minuta na -78°C, a zatim 2 sata na -10°C. Reakcija je neutralisana pomoću 500 mL KHSO4 (sat.), zatim ekstrahovana 3 puta pomoću 1 litra EtOAc. Organske faze su kombinovane, oprane dva puta pomoću 400 mL vode i dva puta pomoću 700 mL NaCl (sat.), zatim osušene preko natrijum sulfata, profiltrirane i koncentrovane. Ostatak je prečišćen na koloni od silika gela smesom EtOAc i PE (1:100 do 1:10) da bi dao 25 g (88 %) jedinjenja 1F u vidu žutog ulja.
Primer 1G: (1R)-2-fenil-1-(1,3-tiazol-2-il)etan-1-ol
[0106]
[0107] U inertnoj atmosferi, rastvor jedinjenja 1F (15 g, 73,8 mmol, 1,00 ekv.) u etru (300 mL) je dodat kap po kap u (+)-B-hloro diizopinokamfilboran ((+)-Ipc2BCl, 110,8 mL). Reakciona smesa je mućkana 24 sata na 0°C, zatim neutralisana pomoću 300 mL (1:1) smese NaOH (10 % u vodi) i H2O2(30 % u vodi) i konačno ekstrahovana tri puta pomoću 500 mL EtOAc. Organske faze su kombinovane, oprane dva puta pomoću 300 mL of K2CO3(sat.) i jednom pomoću 500 mL NaCl (sat.), zatim osušene preko natrijum sulfata, profiltrirane i koncentrovane. Ostatak je prečišćen na koloni od silika gela smesom EtOAc i PE (1:20 do 1:2) da bi dao 6,3 g (42 %) jedinjenja 1G u vidu bele čvrste supstance.
Primer 1H: 2-[(1S)-1-azido-2-feniletil]-1,3-tiazol
[0108]
[0109] Jedinjenje 1G (6 g, 29,23 mmol, 1,00 ekv.) je rastvoreno u inertnoj atmosferi u THF (150 mL) u prisustvu trifenilfosfina (13 g, 49,56 mmol, 1,70 ekv.), zatim ohlađeno do 0°C. Dietilazodikarboksilat (DEAD, 7,6 mL) je dodat kap po kap, a zatim difenilfosforilazid (DPPA, 11 mL), a onda je hladno kupatilo sklonjeno i rastvor je ostavljen uz mućkanje 48 sati na sobnoj temperaturi. Medijum je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen na koloni od silika gela smesom EtOAc i PE (1:100 do 1:30) da bi dao 8 g delimično prečišćenog jedinjenja 1H u vidu žutog ulja. Jedinjenje 1H je korišćeno kao takvo u sledećem koraku.
Primer 1I: terc-butil N-[(1S)-2-fenil-1-(1,3-tiazol-2-il)etil] karbamat
[0110]
[0111] Jedinjenje 1H (6,5 g, 28,2 mmol, 1,00 ekv) je rastvoreno u inertnoj atmosferi u THF (100 mL) u prisustvu trifenilfosfina (6,5 g, 33,9 mmol, 1,20 ekv.) i zagrevano do 50°C 2 sata. Zatim je dodat amonijak (70 mL) i zagrevanje je nastavljeno još 3 sata. Reakcija je ohlađena, neutralisana pomoću 500 mL vode, zatim ekstrahovana 3 puta pomoću 500 mL EtOAc. Organske faze su kombinovane i ekstrahovane dva puta pomoću 500 mL 1N HCl. Vodene faze su kombinovane, dovedene do pH 8-9 dodavanjem rastvora natrijum hidroksida (10 % u vodi), zatim ekstrahovane 3 puta pomoću 500 mL DCM. Organske faze su kombinovane, osušene preko natrijum sulfata, profiltrirane i koncentrovane da bi dale 4,8 g (83 %) (1S)-2-fenil-1-(1,3-tiazol-2-il)etan-1-amin u vidu žutog ulja. Ovo jedinjenje je zatim zaštićeno Boc grupom ((terc-butoksi)karbonil) da bi moglo da se prečišti. Rastvoreno je u inertnoj atmosferi u 1,4-dioksanu (40 mL), zatim ohlađeno do 0°C. (Boc)2O (10,26 g, 47,01 mmol, 2,00 ekv), razblažen u 20 mL 1,4-dioksana, je dodat kap po kap. Hladno kupatilo je sklonjeno i rastvor je ostavljen uz mućkanje preko noći na sobnoj temperaturi pre nego što je neutralisan pomoću 300 mL vode i ekstrahovan dva puta pomoću 500 mL EtOAc. Organske faze su kombinovane, osušene preko natrijum sulfata, profiltrirane i koncentrovane. Ostatak je prečišćen na koloni od silika gela smesom EtOAc i PE (1:100 do 1:20, e. e. = 93 %). Onda je rekristalisan u smesi heksan/aceton (∼ 5-10 / 1, 1g / 10 mL) da bi dao 6 g (84 %) jedinjenja 1I u vidu bele čvrste supstance (e. e. > 99 %).
Primer 1J: terc-butil (2S)-2-[(1R,2R)-1-metoksi-2-metil-2-[[(1S)-2-fenil-1-((1,3-tiazol-2-il)etil]karbamoil] etil]pirolidin-1-karboksilat
[0112]
[0113] Jedinjenje 1I (3 g, 9,86 mmol, 1,00 ekv) je rastvoreno u inertnoj atmosferi u 10 mL DCM. Dodata je trifluorosirćetna kiselina (TFA, 10 mL) i rastvor je ostavljen uz mućkanje preko noći na sobnoj temperaturi, zatim koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi dao 2,0 g (64 %) (1S)-2-fenil-1-(1,3-tiazol-2-il)etan-1-amin; trifluorosirćetne kiseline u vidu žutog ulja. Ovaj intermedijer je ponovo rastvoren u 20 mL DCM posle čega su dodati jedinjenje 1D (1,8 g, 6,26 mmol, 1,05 ekv), DEPC (1,1 g, 6,75 mmol, 1,13 ekv) i diizopropiletilamin (DIEA, 1,64 g, 12,71 mmol, 2,13 ekv). Reakciona smesa je ostavljena uz mućkanje preko noći na sobnoj temperaturi, zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen na koloni od silika gela smesom EtOAc i PE (1:100 do 1:3) da bi dao 2,3 g (81 %) jedinjenja 1J u vidu bledožute čvrste supstance.
Primer 1K: (2R,3R)-3-metoksi-2-metil-N-[(1S)-2-fenil-1-(1,3-tiazol-2-il)etil]-3-[(2S)-pirolidin-2-il]propanamid; trifluorsirćetna kiselina
[0114]
[0115] Jedinjenje 1J (2,25 g, 4,75 mmol, 1,00 ekv) je rastvoreno u inertnoj atmosferi u 10 mL DCM. TFA (10 mL) je dodat i rastvor je ostavljen uz mućkanje preko noći na sobnoj temperaturi, zatim koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi dao 2,18 g (94 %) jedinjenja 1K u vidu žutog ulja.
Primer 1L: (2S,3S)-2-(benzilamino)-3-metilpentanoinska kiselina
[0116]
[0117] (2S,3S)-2-amino-3-metilpentanoinska kiselina (98,4 g, 750 mmol, 1,00 ekv) je dodata na sobnoj temperaturi, deo po deo, u 2N rastvor natrijum hidroksida (375 mL). Benzaldehid (79,7 g, 751,02 mmol, 1,00 ekv) je brzo dodat i dobijeni rastvor je mućkan 30 minuta. Natrijum borohidrid (10,9 g, 288,17 mmol, 0,38 ekv) je dodat u malim porcijama, uz držanje temperature između 5 i 15°C. Mućkanje je nastavljeno 4 sata na sobnoj temperaturi. Reakciona smesa je razblažena pomoću 200 mL vode, zatim oprana dva puta pomoću 200 mL EtOAc. pH vodenog rastvora je podešen na 7 pomoću 2N rastvora hlorovodonične kiseline. Dobijeni precipitat je sakupljen filtriranjem i dao je 149,2 g (90 %) jedinjenja 1L u vidu bele čvrste supstance.
Primer 1M: (2S,3S)-2-[benzil(metil)amino]-3-metilpentanoinska kiselina
[0118]
[0119] Jedinjenje 1L (25 g, 112,97 mmol, 1,00 ekv) je rastvoreno u inertnoj atmosferi u mravljoj kiselini (31,2 g) u prisustvu formaldehida (36,5 % u vodi, 22,3 g). Rastvor je mućkan 3 sata na 90°C, a zatim koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je triturisan u 250 mL acetona, a zatim koncentrovan. Ova operacija triturisanja/uparavanja je ponovljena dva puta pomoću 500 mL acetona da bi se dobilo 21,6 g (81 %) jedinjenja 1M u vidu bele čvrste supstance.
Primer 1N: (2S,3S)-2-[benzil(metil)amino]-3-metilpentan-1-ol
[0120]
[0121] LiAlH4(0,36 g) je suspendovan u 10 mL THF u inertnoj atmosferi na 0°C. Jedinjenje 1M (1,5 g, 6,37 mmol, 1,00 ekv) je dodato u malim porcijama uz držanje temperature između 0 i 10°C. Reakciona smesa je mućkana 2 sata na 65°C, a zatim ponovo ohlađena do 0°C pre nego što je neutralisana sukcesivnim dodavanjima 360 mL vode, 1 mL 15 % natrijum hidroksida i 360 mL vode. Aluminijumove soli koje su precipitirale su uklonjene filtriranjem. Filtrat je osušen preko natrijum sulfata, profiltriran i koncentrovan. Ostatak je prečišćen na koloni od silika gela smesom EtOAc i PE (1:50) da bi dao 820 mg (58 %) jedinjenja 1N u vidu bledožutog ulja.
Primer 1O: (2S,3S)-2-[benzil(metil)amino]-3-metilpentanat
[0122]
[0123] Oksalil hlorid (0,4 mL) je rastvoren u DCM (15 mL) u inertnoj atmosferi. Rastvor je ohlađen do -70°C i rastvor dimetilsulfoksida (DMSO (0,5 mL) u DCM (10 mL) je dodavan kap po kap tokom 15 minuta. Reakciona smesa je mućkana 30 minuta, posle čega je rastvor jedinjenja 1N (820 mg, 3,70 mmol, 1,00 ekv) u DCM (10 mL) dodavan kap po kap tokom 15 minuta. Reakciona smesa je mućkana još 30 minuta na niskoj temperaturi, a zatim je polako dodat trietilamin (2,5 mL). Reakciona smesa je mućkana 1 sat na -50°C, hladno kupatilo je onda sklonjeno i reakcija je neutralisana pomoću 25 mL vode dozvoljavajući temperaturi da se vrati na normalnu. Rastvor je opran jednom pomoću 30 mL zasićenog vodenog rastvora NaCl, zatim je osušen preko natrijum sulfata, profiltriran i koncentrovan. Ostatak je prečišćen na koloni od silika gela smesom EtOAc i PE (1:200) da bi dao 0,42 g (52 %) jedinjenja 1O u vidu žutog ulja.
Primer 1P: (2S,3S)-N-benzil-1,1-dimetoksi-N,3-dimetilpentan-2-amin
[0124]
[0125] Jedinjenje 1O (4,7 g, 21,43 mmol, 1,00 ekv) je rastvoreno u 20 mL metanola na 0°C. Koncentrovana sumporna kiselina (4,3 mL) je dodata kap po kap i mućkanje je nastavljeno još 30 minuta na 0°C. Dodat je trimetil ortoformijat (21,4 mL), hladno kupatilo je sklonjeno i reakcioni medijum je ostavljen uz mućkanje 3 sata na sobnoj temperaturi. Reakcioni medijum je razblažen pomoću 200 mL EtOAc, sukcesivno opran pomoću 100 mL 10 % Na2CO3i 200 mL zasićenog rastvora NaCl, zatim osušen preko natrijum sulfata, profiltriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi dao 3,4 g (60 %) jedinjenja 1P u vidu bledožutog ulja.
Primer 1Q: [[1-(terc-butoksi)etenil]oksi](terc-butil)dimetilsilan
[0126]
[0127] Diizopropilamin (20 g, 186,71 m mol, 1,08 ekv) je rastvoren u 170 mL THF u inertnoj atmosferi i ohlađen do -78°C. nBuLi (2,4 M, 78,8 mL) je dodat kap po kap i rastvor je mućkan 30 minuta na niskoj temperaturi (da bi dao LDA-litijum diizopropilamid) pre dodavanja terc-butil acetata (20 g, 172,18 mmol, 1,00 ekv). Reakciona smesa je mućkana 20 minuta na -78°C pre dodavanja heksametilfosforamida (HMPA, 25,8 mL) i rastvora tercbutildimetilhlorosilana (TBDMSCl, 28 g, 185,80 mmol, 1,08 ekv) u 35 mL THF. Mućkanje je nastavljeno 20 dodatnih minuta na niskoj temperaturi i hladno kupatilo je onda sklonjeno. Rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je ponovo rastvoren u 100 mL vode i ekstrahovan 3 puta pomoću 100 mL PE. Organske faze su kombinovane, oprane jednom pomoću 500 mL zasićenog vodenog rastvora NaCl, osušene preko natrijum sulfata, profiltrirane i koncentrovane. Ostatak je prečišćen destilacijom da bi dao 16,6 g (83 %) jedinjenja 1Q u vidu bezbojnog ulja.
Primer 1R: terc-butil (3R,4S,5S)-4-[benzil(metil)amino]-3-metoksi-5-metil heptanoat
[0128]
[0129] Jedinjenje 1P (2,0 g, 7,54 mmol, 1,00 ekv) i jedinjenje 1Q (2,6 g, 11,28 mmol, 1,50 ekv) su rastvoreni u 33 mL DCM u inertnoj atmosferi. Rastvor je ohlađen do 0°C. DMF (1,2 g) je dodat kap po kap zajedno sa rastvorom BF3-Et2O (2,1 g) u 7,5 mL DCM. Mućkanje je nastavljeno još 24 sata na 0°C. Reakcioni medijum je opran jednom pomoću 30 mL natrijum karbonata (10 %) i dva puta pomoću 50 mL zasićenog vodenog rastvora NaCl, zatim osušen preko natrijum sulfata, profiltriran i koncentrovan. Ostatak je prečišćen na koloni od silika gela smesom EtOAc i PE (1:100) da bi dao 1,82 g (91 %) jedinjenja 1R u vidu žutog ulja.
Primer 1S: (3R,4S,5S)-3-metoksi-5-metil-4-(metilamino)heptanoat hidrohlorid
[0130]
[0131] Jedinjenje 1R (2,4 g, 6,87 mmol, 1,00 ekv) je rastvoreno u inertnoj atmosferi u 35 mL etanola u prisustvu Pd/C (0,12 g) i koncentrovane hlorovodonične kiseline (0,63 mL). Atmosfera azota je zamenjena atmosferom vodonika i reakcioni medijum je ostavljen uz mućkanje 18 sati na sobnoj temperaturi. Reakcioni medijum je profiltriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je triturisan u 50 mL heksana i supernatant je uklonjen, koji je, posle sušenja pod sniženim pritiskom, dao 1,66 g (82 %) jedinjenja 1S u vidu bele čvrste supstance.
Primer 1T: terc-butil (3R,4S,5S)-4-[(2S)-2-[[(benziloksi)karbonil]amino]-N,3-dimetilbutanamido]-3-metoksi-5-metilheptanoat
[0132]
[0133] (2S)-2-[[(benziloksi)karbonil]amino]-3-metilbutanonska kiselina (15 g, 0,40 mmol, 1,00 ekv) je rastvorena u 300 mL DCM u prisustvu DIEA (38,3 mL) i bromotripirolidinofosfonijum heksafluorofosfata (PyBrOP, 32,3g). Rastvor je mućkan 30 minuta na sobnoj temperaturi pre dodavanja jedinjenja 1S (15,99g, 0,42 mmol, 1,07 ekv). Reakcioni medijum je mućkan 2 sata, a zatim koncentrovan. Ostatak je prečišćen u reverznoj fazi (C18) pomoću smese acetonitrila (ACN) i vode (30:70 do 100:0 u 40 minuta) da bi dao 17 g (58 %) jedinjenja 1T u vidu bezbojnog ulja.
Primer 1U: Terc-butil (3R,4S,5S)-4-[(2S)-2-amino-N,3-dimetilbutanamido]-3-metoksi-5-metilheptanoat
[0134]
[0135] Jedinjenje 1T (76 mg, 0,15 mmol, 1,00 ekv) je rastvoreno u inertnoj atmosferi u 10 mL etanola u prisustvu Pd/C (0,05 g). Atmosfera azota je zamenjena atmosferom vodonika i reakcija je mućkana 2 sata na sobnoj temperaturi. Reakcioni medijum je profiltriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi dao 64 mg jedinjenja 1U u vidu bezbojnog ulja.
Primer 1V: (3R,4S,5S)-4-[(2S)-2-[[(9H-fluoren-9-ilmetoksi)karbonil] amino]-N,3-dimetilbutanamido]-3-metoksi-5-metilheptanoat
[0136]
[0137] Jedinjenje 1U (18,19 g, 50,74 mmol, 1,00 ekv) je rastvoreno u 400 mL smese 1,4-dioksan/voda (1:1) u prisustvu natrijum bikarbonata (12,78 g, 152 mmol, 3,00 ekv) i 9H-fluoren-9-ilmetil hloroformijata (Fmoc-Cl, 19,69 g, 76 mmol, 1,50 ekv), a zatim mućkano 2 sata na sobnoj temperaturi. Reakcioni medijum je zatim razblažen pomoću 500 mL vode i ekstrahovan 3 puta pomoću 200 mL EtOAc. Organske faze su kombinovane, oprane jednom pomoću 200 mL zasićenog vodenog rastvora NaCl, osušene preko natrijum sulfata, profiltrirane i koncentrovane da bi dale 40 g delimično prečišćenog jedinjenja 1V u vidu bledožutog ulja.
Primer 1W: (3R,4S,5S)-4-[(2S)-2-[[(9H-fluoren-9-ilmetoksi)karbonil] amino]-N,3-dimetilbutanamido]-3-metoksi-5-metilheptanonska kiselina
[0138]
[0139] Jedinjenje 1V (40 g, 68,88 mmol, 1,00 ekv) je rastvoreno u neutralnoj atmosferi u 600 mL DCM. Dodat je TFA (300 mL). Rastvor je mućkan 2 sata na sobnoj temperaturi, a zatim koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen na koloni od silika gela smesom metanola i DCM (1:10) da bi dao 23,6 g (65 %) jedinjenja 1W u vidu bezbojnog ulja.
Primer 1X: 9H-fluoren-9-ilmetil N-[(1S)-1-[[(3R,4S,5S)-3-metoksi-1-[(2S)-2-[(1R,2R)-1-metoksi-2-metil-2-[[(1S)-2-fenil-1-(1,3-tiazol-2-il)etil]karbamoil]etil]pirolidin-1-il]-5-metil-1-oksoheptan-4-il](metil) karbamoil]-2-metilpropil]karbamat
[0140]
[0141] Jedinjenje 1W (2,53 g, 4,82 mmol, 1,08 ekv) je rastvoreno u 20 mL DCM u prisustvu jedinjenja 1K (2,18 g, 4,47 mmol, 1,00 ekv), DEPC (875 mg, 5,37 mmol, 1,20 ekv) i DIEA (1,25 g, 9,67 mmol, 2,16 ekv). Reakciona smesa je ostavljena uz mućkanje preko noći na sobnoj temperaturi, zatim sukcesivno oprana pomoću 50 mL zasićenog KHSO4i 100 mL vode, osušena preko natrijum sulfata, profiltrirana i koncentrovana. Ostatak je prečišćen na koloni od silika gela smesom metanola i DCM (1:200 do 1:40) da bi dao 2,8 g (71 %) jedinjenja 1X u vidu bledožute čvrste supstance.
Primer 1Y: (2S)-2-amino-N-[(3R,5S)-3-metoksi-1-[(2S)-2-[(1R,2R)-1-metoksi-2-metil-2-[[(1S)-2-fenil-1-(1,3-tiazol-2-il)etil] karbamoil] etil] pirolidin-1-il]-5-metil-1-oksoheptan-4-il]-N,3-dimetilbutanamid
[0142]
[0143] Jedinjenje 1X (2,8 g, 3,18 mmol, 1,00 ekv) je rastvoreno u acetonitrilu (ACN, 12 mL) u prisustvu piperidina (3 mL) i ostavljeno je uz mućkanje 18 sati na sobnoj temperaturi. Reakcija je neutralisana pomoću 50 mL vode, zatim ekstrahovana dva puta pomoću 100 mL DCM. Organske faze su kombinovane, osušene preko natrijum sulfata, profiltrirane i koncentrovane. Ostatak je prečišćen na koloni od silika gela smesom metanola i DCM (1:100 do 1:40) da bi dao 1,2 g (57 %) jedinjenja 1Y u vidu žute čvrste supstance.
Primer 1ZA: (2S)-2-[[(terc-butoksi)karbonil](metil)amino]-3-metil butanonska kiselina
[0145] (2S)-2-[[(terc-butoksi)karbonil]amino]-3-metilbutanonska kiselina (63 g, 289,97 mmol, 1,00 ekv) je rastvorena u inertnoj atmosferi u THF (1000 mL) u prisustvu jodometana (181 mL). Rastvor je ohlađen do 0°C pre dodavanja natrijum hidrida (116 g, 4,83 mol, 16,67 ekv) u malim porcijama. Reakciona smesa je mućkana 1,5 sat na 0°C, hladno kupatilo je onda sklonjeno i mućkanje je nastavljeno još 18 sati. Reakcija je neutralisana pomoću 200 mL vode, a zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. Preostala vodena faza je razblažena pomoću 4 litra vode, oprana jednom pomoću 200 mL EtOAc i njen pH je podešen na između 3 i 4 pomoću 1N rastvora hlorovodonične kiseline. Dobijena smesa je ekstrahovana 3 puta pomoću 1,2 L EtOAc. Organske faze su kombinovane, osušene preko natrijum sulfata, profiltrirane i koncentrovane da bi dale 60 g (89 %) jedinjenja 1ZA u vidu žutog ulja.
Primer 1ZB: benzil (2S)-2-[[(terc-butoksi)karbonil](metil)amino]-3-metil butanoat
[0146]
[0147] Jedinjenje 1ZA (47 g, 203,21 mmol, 1,00 ekv) je rastvoreno u DMF (600 mL) u prisustvu Li2CO3(15,8 g, 213,83 mmol, 1,05 ekv). Rastvor je ohlađen do 0°C, a zatim je benzil bromid (BnBr 57,9 g, 338,53 mmol, 1,67 ekv) dodat kap po kap. Reakciona smesa je ostavljena uz mućkanje preko noći pre nego što je neutralisana pomoću 400 mL vode i profiltrirana. Dobijeni rastvor je ekstrahovan dva puta pomoću 500 mL EtOAc. Organske faze su kombinovane, osušene preko natrijum sulfata, profiltrirane i koncentrovane. Ostatak je prečišćen na koloni od silika gela smesom EtOAc i PE (1:100 do 1:20) da bi dao 22,5 g (34 %) jedinjenja 1ZB u vidu žutog ulja.
Primer 1ZC: benzil (2S)-3-metil-2-(metilamino)butanoat hidrohlorid
[0148]
[0149] Jedinjenje 1ZB (22,5 g, 70,00 mmol, 1,00 ekv) je rastvoreno u 150 mL DCM i barbotirano hlorovodonikom. Reakcija je mućkana 1 sat na sobnoj temperaturi, a zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi dala 17 g (94 %) jedinjenja 1ZC u vidu žute čvrste supstance.
Primer 1ZD: terc-butil N-(3,3-dietoksipropil)karbamat
[0151] 3,3-dietoksipropan-1-amin (6 g, 40,76 mmol, 1,00 ekv) je rastvoren u 1,4-dioksanu (30 mL) u prisustvu TEA (4,45 g, 43,98 mmol, 1,08 ekv), a zatim ohlađen do 0°C. (Boc)2O (9,6 g, 43,99 mmol, 1,08 ekv) razblažen u 20 mL 1,4-dioksana, je dodat kap po kap. Rastvor je mućkan 2 sata na 0°C, a zatim preko noći na sobnoj temperaturi pre nego što je neutralisan pomoću 10 mL vode. pH je podešen na 5 pomoću HCl (1 %). Rastvor je ekstrahovan 3 puta pomoću 50 mL EtOAc. Organske faze su kombinovane, osušene preko natrijum sulfata, profiltrirane i koncentrovane da bi dale 8,21 g (81 %) jedinjenja 1ZD u vidu bledožutog ulja.
Primer 1Z: terc-butil N-(3-oksopropil) karbamat
[0152]
[0153] Jedinjenje 1ZD (8,20 g, 33,15 mmol, 1,00 ekv) je rastvoreno u 18,75 mL sirćetne kiseline i ostavljeno uz mućkanje preko noći na sobnoj temperaturi. Reakcioni medijum je zatim ekstrahovan 3 puta pomoću 30 mL EtOAc. Organske faze su kombinovane, oprane 3 puta pomoću 30 mL zasićenog rastvora NaCl, osušene preko natrijum sulfata, profiltrirane i koncentrovane da bi dale 5 g (87 %) jedinjenja 1ZE u vidu tamnocrvenog ulja.
Primer 1ZF: (2S)-2-[(3-[[(terc-butoksi)karbonil]amino]propil)(metil) amino]-3-metilbutanonska kiselina
[0154]
[0155] Jedinjenje 1ZE (2,4 g, 13,86 mmol, 1,00 ekv) je rastvoreno u 50 mL THF u prisustvu jedinjenja 1ZC (3,56 g, 13,81 mmol, 1,00 ekv) i DIEA (9,16 mL, 4,00 ekv). Reakciona smesa je mućkana 30 minuta na sobnoj temperaturi pre dodavanja natrijum triacetoksiborohidrida (5,87 g, 27,70 mmol, 2,00 ekv). Mućkanje je nastavljeno preko noći, zatim je reakcija neutralisana pomoću 100 mL vode i ekstrahovana 3 puta pomoću 50 mL EtOAc. Organske faze su kombinovane, osušene preko natrijum sulfata, profiltrirane i koncentrovane. Ostatak je delimično prečišćen na koloni od silika gela smesom EtOAc i PE (1:4). Dobijeni sirovi proizvod je ponovo rastvoren u 20 mL metanola u prisustvu Pd/C (1,2 g) i hidrogenizovan 20 minuta na normalnoj temperaturi i pritisku. Reakcioni medijum je profiltriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi dao 200 mg (5 %) jedinjenja 1ZF u vidu bele čvrste supstance.
Primer 1ZG: terc-butil N-(3-[[(1S)-1-[[(1S)-1-[[(3R,4S,5S)-3-metoksi-1-[(2S)-2-[(1R,2R)-1-metoksi-2-metil-2-[[(1S)-2-fenil-1-(1,3-tiazol-2-il)etil] karbamoil]til]pirolidin-1-il]-5-metil-1-oksoheptan-4il](metil) karbamoil]-2-metilpropil]karbamoil]-2-metilpropil](metil)amino]propil) karbamat
[0156]
[0157] Jedinjenje 1Y (50 mg, 0,08 mmol, 1,00 ekv) je rastvoreno u 2 mL DMF u prisustvu jedinjenja 1ZF (26,2 mg, 0,09 mmol, 1,20 ekv), DIEA (37,7 mL) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N’,N’-tetrametiluronijum heksafluorofosfat (HATU, 43,3 mg, 0,11 mmol, 1,50 ekv). Reakcija je ostavljena uz mućkanje preko noći na sobnoj temperaturi, zatim razblažena pomoću 10 mL vode i ekstrahovana 3 puta pomoću 5 mL EtOAc. Organske faze su kombinovane, osušene preko natrijum sulfata, profiltrirane i koncentrovane da bi dale 100 mg jedinjenja 1ZG u vidu delimično prečišćenog bezbojnog ulja.
[0158] Primer 1: Jedinjenje 1ZG (90 mg, 0,10 mmol, 1,00 ekv) je rastvoreno u neutralnoj atmosferi u 2 mL DCM i rastvor je ohlađen na ledenom kupatilu. Dodat je TFA (1 mL) i reakcija je mućkana 2 sata na sobnoj temperaturi, a zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću preparativne HPLC (Pre-HPLC-001 SHIMADZU, SunFire Prep C18 OBD kolona, 5 mm, 19 x 150 mm; Eluirajuća faza: voda / ACN puferisan pomoću 0,05 % TFA; Gradijent 18 % do 31 % ACN za 7 minuta, zatim 31 % do 100 % ACN za 2 minuta; Waters 2489 UV detektor na 254 nm i 220 nm). Jedinjenje 1 je dobijeno sa prinosom od 25 % (23 mg) u vidu bele čvrste supstance.
[0159] LC/MS/UV (Atlantis T3 kolona, 3 mm, 4,6 x 100 mm; 35°C; 1 mL / min, 30 % do 60 % ACN u vodi (20 mM amonijum acetat za 6 minuta); ESI (C44H73N7O6S, tačna masa 827,53) m/z: 829 (MH<+>), 5,84 min (93,7 %, 254 nm).
[0160]<1>H NMR (300MHz, CD3OD, ppm): δ (prisustvo rotamera) 7,85 - 7,80 (m, 1H); 7,69 -7,66 (m, 1H), 7,40 - 7,10 (m, 5H), 5,80 - 5,63 (m, 1H), 4,80 - 4,65 (m, 2H), 4,22 -4,00 (m, 1H), 3,89 - 0,74 (m, 58H).
Referentni primer 2
(S)-2-((S)-2-(((2-aminopiridin-4-il)metil)(metil)amino)-3-metilbutanamido)-N-((3R,4S,5S)-1-((S)-2-((1R,2R)-3-(((1S,2R)-1-hidroksi-1-fenilpropan-2-il)amino)-1-metoksi-2-metil-3-oksopropil)pirolidin-1-il)-3-metoksi-5-metil-1-oksoheptan-4-il)-N,3-dimetilbutanamid, trifluorsirćetna kiselina
Primer 2A: Terc-butil (S)-2-((1R,2R)-3-(((1S,2R)-1-hidroksi-1-fenilpropan-2-il)amino)-1-metoksi-2-metil-3-oksopropil)pirolidin-1-karboksilat
[0162]
[0163] Jedinjenje 1D (2,5 g, 8,70 mmol, 1,00 ekv) i (1S,2R)-2-amino-1-fenilpropan-1-ol (1,315 g, 8,70 mmol, 1,00 ekv) su rastvoreni u inertnoj atmosferi u DMF (35 mL). Rastvor je ohlađen do 0 °C, a zatim su DEPC (1,39 mL) i TEA (1,82 mL) dodati kap po kap. Reakciona smesa je mućkana 2 sata na 0 °C, a zatim 4 sata na sobnoj temperaturi. Reakciona smesa je razblažena pomoću 200 mL vode i ekstrahovana tri puta pomoću 50 mL EtOAc. Organske faze su kombinovane, oprane jednom pomoću 50 mL KHSO4(1 mol/L), jednom pomoću 50 mL NaHCO3(sat.), jednom pomoću 50 mL NaCl (sat.), zatim osušene preko natrijum sulfata, profiltrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom da bi dale 3,6 g (98 %) jedinjenja 2A u vidu žute čvrste supstance.
Primer 2B: (2R,3R)-N-((1S,2R)-1-hidroksi-1-fenilpropan-2-il)-3-metoksi-2-metil-3-((S)-pirolidin-2-il)propanamid2,2,2-trifluoroacetat
[0164]
[0165] Jedinjenje 2A (2,7 g, 6,42 mmol, 1,00 ekv) je rastvoreno u inertnoj atmosferi u DCM (40 mL), a zatim ohlađeno do 0 °C. Dodat je TFA (25 mL) i rastvor je mućkan 2 sata na 0 °C. Reakciona smesa je koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi dala 4,4 g jedinjenja 2B u vidu žutog ulja.
Primer 2C: (9H-fluoren-9-il)metil ((S)-1-(((3R,4S,SS)-1-((S)-2-((1R,2R)-3-(((1S,2R)-1-hidroksi-1-fenilpropan-2-il)amino)-1-metoksi-2-metil-3-oksopropil) pirolidin-1-il)-3-metoksi-5-metil-1-oksoheptan-4-il) (metil)amino)-3-metil-1-oksobutan-2-il)karbamat
[0166]
[0167] Jedinjenja 2B (4,4 g, 10,13 mmol, 1,00 ekv) i 1W (5,31 g, 10,12 mmol, 1,00 ekv) su rastvorena u inertnoj atmosferi u DCM (45 mL). Rastvor je ohlađen do 0°C, a zatim su DEPC (1,62 mL) i DIEA (8,4 mL) dodati kap po kap. Reakciona smesa je mućkana 2 sata na 0 °C, a zatim na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smesa je razblažena pomoću 100 mL vode i ekstrahovana tri puta pomoću 50 mL DCM. Organske faze su kombinovane, oprane jednom pomoću 50 mL KHSO4 (1 mol/L), jednom pomoću 50 mL NaHCO3 (sat.), jednom pomoću 50 mL NaCl (sat.), a zatim osušene preko natrijum sulfata, profiltrirane i koncentrovane pod pritiskom da bi dale 3,3 g (39 %) jedinjenja 2C u vidu žute čvrste supstance.
Primer 2D: (S)-2-amino-N-((3R,4S,5S)-1-((S)-2-((1R,2R)-3-(((1S,2R)-1-hidroksi-1-fenilpropan-2-il)amino)-1-metoksi-2-metil-3-oksopropil)pirolidin-1-il)-3-metoksi-5-metil-1-oksoheptan-4-il)-N,3-dimetilbutanamid
[0168]
[0169] Jedinjenje 2C (300 mg, 0,36 mmol, 1,00 eq.) je rastvoreno u inertnoj atmosferi u ACN (2 mL) i piperidinu (0,5 mL). Rastvor je ostavljen uz mućkanje na sobnoj temperaturi preko noći, a zatim uparen do suvog pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen na koloni od silika gela smesom DCM i MeOH (1:100) da bi dao 150 mg (68 %) jedinjenja 2D u vidu bele čvrste supstance.
Primer 2E: metil 2-((terc-butoksikarbonil)amino)izonikotinat
[0171] Metil 2-aminopiridin-4-karboksilat (2 g, 13,14 mmol, 1,00 ekv) je rastvoren u tercbutanolu (20 mL), posle čega je dodat di-terc-butil dikarbonat (4,02 g, 18,42 mmol, 1,40 ekv). Reakciona smesa je mućkana na 60°C preko noći, a zatim je reakcija zaustavljena dodavanjem 1M vodenog rastvora NaHCO3(50 mL). Talog je pokupljen filtriranjem, opran pomoću 50 mL EtOH, a zatim osušen na vakuumu da bi dao 2,5 g (75 %) jedinjenja 2E u vidu bele čvrste supstance.
Primer 2F: terc-butil (4-(hidroksimetil)piridin-2-il)karbamat
[0172]
[0173] Jedinjenje 2E (2,5 g, 9,91 mmol, 1,00 ekv) i CaCl2(1,65 g) su rastvoreni u EtOH (30 mL). Rastvor je ohlađen do 0°C, a zatim je postepeno dodat NaBH4(1,13 g, 29,87 mmol, 3,01 ekv). Rastvor je ostavljen uz mućkanje preko noći na sobnoj temperaturi, a zatim je reakcija zaustavljena dodavanjem vode (50 mL). Smesa je ekstrahovana tri puta pomoću 20 mL EtOAc. Organske faze su kombinovane, oprane dva puta pomoću 20 mL NaCl (sat.), a zatim osušene preko natrijum sulfata, profiltrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom da bi dale 2,0 g (90 %) jedinjenja 2F u vidu bezbojne čvrste supstance.
Primer 2G: terc-butil (4-formilpiridin-2-il)karbamat
[0174]
[0175] Jedinjenje 2F (2,5 g, 11,15 mmol, 1,00 ekv) je rastvoreno u DCE (25 mL), a zatim je dodato 19,4 g (223,14 mmol, 20,02 ekv) MnO2. Smesa je ostavljena uz mućkanje preko noći na 70 °C, a zatim su talozi uklonjeni filtriranjem. Filtrat je uparen do suvog da bi dao 1,4 g (57 %) jedinjenja 2G u vidu bele čvrste supstance.
Primer 2H: benzil (S)-2-(((2-((terc-butoksikarbonil)amino)piridin-4-il) metil) (metil)amino)-3-metilbutanoat
[0177] Jedinjenje 2G (2,3 g, 10,35 mmol, 1,00 ekv) je rastvoreno u 25 mL THF u prisustvu jedinjenja 1ZC (2,93 g, 11,37 mmol, 1,10 ekv), DIEA (5,39 g, 41,71 mmol, 4,03 ekv) i NaBH(OAC)3(4,39 g, 20,71 mmol, 2,00 ekv). Reakciona smesa je mućkana 6 sati na sobnoj temperaturi, a zatim neutralisana pomoću 60 mL NaHCO3 (sat.) i ekstrahovana 3 puta pomoću 20 mL AcOEt. Organske faze su kombinovane, oprane dva puta pomoću 20 mL NaCl (sat.), osušene preko natrijum sulfata, profiltrirane i koncentrovane. Ostatak je prečišćen na koloni od silika gela smesom EtOAc i PE (1:15) da bi dao 2,7 g (61 %) jedinjenja 2H u vidu bele čvrste supstance.
Primer 2I: (S)-2-(((2-((terc-butoksikarbonil)amino)piridin-4-il)metil) (metil)amino)-3-metilbutanonska kiselina
[0178]
[0179] Jedinjenje 2H (500 mg, 1,17 mmol, 1,00 ekv) je rastvoreno u 10 mL AcOEt i 2 mL metanola u prisustvu Pd/C (250 mg), i hidrogenizovano 3 sata na sobnoj temperaturi i atmosferskom pritisku. Reakcioni medijum je profiltriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi dao 254 mg (64 %) jedinjenja 2I u vidu bezbojne čvrste supstance.
Primer 2J: terc-butil (4-((3S,6S,9S,10R)-9-((S)-sec-butil)-10-(2-((S)-2-((1R,2R)-3-(((1S,2R)-1-hidroksi-1-fenilpropan-2-il)amino)-1-metoksi-2-metil-3-oksopropil)pirolidin-1-il)-2-okso etil)-3,6-diizopropil-2,8-dimetil-4,7-diokso-11-oksa-2,5,8-triazadodecil)piridin-2-il) karbamat
[0180]
[0181] Jedinjenje 2J je dobijeno na sličan način kao jedinjenje 1ZG od amina 2D (85,2 mg, 0,14 mmol, 1,50 ekv), kiseline 2I (31,7 mg, 0,09 mmol, 1,00 ekv), HATU (42,9 mg, 0,11 mmol, 1,20 ekv) i DIEA (36,7 mg, 0,28 mmol, 3,02 ekv) u DMF (3 mL). Posle uparavanja do suvog, 100 mg sirovog proizvoda je dobijeno u vidu bele čvrste supstance.
[0182] Primer 2: Jedinjenje 2J (100 mg, 0,11 mmol, 1,00 ekv) je rastvoreno u 2 mL DCM i 1 mL TFA. Reakcija je mućkana 1 sat na sobnoj temperaturi, a zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak (80 mg) je prečišćen pomoću preparativne HPLC (Pre-HPLC-001 SHIMADZU, SunFire Prep C18 OBD kolona, 5 mm, 19 x 150 mm; Eluirajuća faza: voda / ACN puferisan pomoću 0,05 % TFA; gradijent od 20 % do 40 % ACN za 10 minuta, a zatim 40 % do 100 % ACN za 2 minuta; Waters 2489 UV detektor na 254 nm i 220 nm). Jedinjenje 2 je dobijeno sa prinosom od 6 % (6,3 mg) u vidu bele čvrste supstance.
[0183] LC/MS/UV (Ascentis Express C18 kolona, 2,7 mm, 4,6 x 100 mm; 40°C; 1,8mL/min, od 10 % do 95 % ACN u vodi (0,05 % TFA) za 6 minuta); ESI (C45H73N7O7, tačna masa 823,56) m/z: 824,5 (MH<+>) i 412,9 (M,2H<+>/2, 100 %), 3,21 min (99,2 %, 210 nm).
[0184]<1>H NMR (400MHz, CDsOD, ppm): δ (prisustvo rotamera) 7,81 - 7,79 (m, 1H); 7,39 -7,29 (m, 5H); 6,61 - 6,59 (m, 2H); 4,84 - 4,52 (m, 1H); 4,32 - 4,02 (m, 1H); 3,90 - 2,98 (m, 10H); 2,90 - 2,78 (m, 1H); 2,55 - 0,81 (m, 39H).
Referentni primer 3
Metil ((S)-2-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((S)-N,3-dimetil-2-((S)-3-metil-2-(metil(piridin-4-ilmetil)amino)butanamido)butanamido)-3-metoksi-5-etilheptanoil)pirolidin-2-il)-3-metoksi-2-metilpropanamido)-3-fenilpropanoat, trifluorsirćetna kiselina
[0185]
Primer 3A: Terc-butil (S)-2-((1R,2R)-1-metoksi-3-(((S)-1-metoksi-1-okso-3-fenilpropan-2-il)amino)-2-metil-3-oksopropil)pirolidin-1-karboksilat
[0186]
[0187] Jedinjenje 1D (3 g, 10,44 mmol, 1,00 ekv) i metil (S)-2-amino-3-fenilpropanoat (2,25 g, 12,55 mmol, 1,20 ekv) su rastvoreni u inertnoj atmosferi u DMF (40 mL). Rastvor je ohlađen do 0 °C, a zatim su DEPC (1,67 mL, 1,05 ekv) i TEA (3,64 mL, 2,50 ekv) dodati kap po kap. Reakciona smesa je mućkana 2 sata na 0 °C zatim na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smesa je razblažena pomoću 100 mL vode i ekstrahovana tri puta pomoću 50 mL EtOAc. Organske faze su kombinovane, oprane jednom pomoću 100 mL KHSO4(1 mol/L), jednom pomoću 100 mL NaHCO3(sat.), jednom pomoću 100 mL NaCl (sat.), a zatim osušene preko natrijum sulfata, profiltrirane i koncentrovane pod pritiskom da bi dale 4 g (85 %) jedinjenja 3A u vidu bezbojnog ulja.
Primer 3B: 2,2,2-trifluoroacetat metil (S)-2-((2R,3R)-3-metoksi-2-metil-3-((S)-pirolidin-2-il)propanamido)-3-fenilpropanoata
[0188]
[0189] Jedinjenje 3A (5 g, 11,15 mmol, 1,00 ekv) je rastvoreno u inertnoj atmosferi u DCM (40 mL). Dodat je TFA (25 mL) i rastvor je mućkan 2 sata. Reakciona smesa je koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi dala 8 g jedinjenja 3B u vidu žutog ulja.
Primer 3C: Metil (S)-2-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((S)-2-((((9H-fluoren-9-il)metoksi)karbonil)amino)-N,3-dimetilbutanamido)-3-metoksi-5-metil heptanoil)pirolidin-2-il)-3-metoksi-2-metilpropanamido)-3-fenilpropanoat
[0190]
[0191] Jedinjenja 3B (8,03 g, 17,36 mmol, 1,00 ekv) i 1W (9,1 g, 17,34 mmol, 1,00 ekv) su rastvorena u inertnoj atmosferi u DCM (80 mL). Rastvor je ohlađen do 0 °C, a zatim su DEPC (2,8 mL) i DIEA (12 mL) dodati kap po kap. Reakciona smesa je mućkana 2 sata na 0 °C, a zatim na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smesa je razblažena pomoću 200 mL vode i ekstrahovana tri puta pomoću 50 mL DCM. Organske faze su kombinovane, oprane jednom pomoću 50 mL KHSO4(1 mol/L), jednom pomoću 50 mL NaHCO3(sat.), jednom pomoću 50 mL NaCl (sat.), zatim osušene preko natrijum sulfata, profiltrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom da bi dale 5 g (34 %) jedinjenja 3C u vidu žute čvrste supstance.
Primer 3D: metil (S)-2-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((S)-2-amino-N,3-dimetilbutanamido)-3-metoksi-5-metilheptanoil)pirolidin-2-il)-3-metoksi-2-metilpropanamido)-3-fenilpropanoat
[0192]
[0193] Jedinjenje 3C (5,5 g, 6,43 mmol, 1,00 ekv) je rastvoreno u inertnoj atmosferi u rastvoru tetrabutilamonijum fluorida (TBAF, 2,61 g, 9,98 mmol, 1,55 ekv) u DMF (100 mL). Rastvor je mućkan na sobnoj temperaturi 2 sata, a zatim razblažen pomoću 100 mL vode i ekstrahovan tri puta pomoću 50 mL EtOAc. Organske faze su kombinovane, a zatim osušene preko natrijum sulfata, profiltrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom da bi dale 3,3 g (81 %) jedinjenja 3D u vidu žute čvrste supstance.
Primer 3E: benzil (S)-3-metil-2-(metil(piridin-4-ilmetil)amino) butanoat
[0194]
[0195] Piridin-4-karbaldehid (1 g, 9,34 mmol, 1,00 ekv) je rastvoren u 10 mL 1,2-dihloroetana (DCE) u prisustvu jedinjenja 1ZC (2,9 g, 11,25 mmol, 1,21 ekv) i titanijum izopropoksida (IV) (4,19 mL, 1,40 ekv). Smesa je mućkana na sobnoj temperaturi 30 minuta, a zatim je dodato 2,77 g NaBH(OAc)3(13,07 mmol, 1,40 ekv). Reakcioni medijum je ostavljen uz mućkanje preko noći. a zatim neutralisan pomoću 100 mL vode i smesa je ekstrahovana 3 puta pomoću 50 mL AcOEt. Organske faze su kombinovane i uparene do suvog. Ostatak je prečišćen na koloni od silika gela smesom EtOAc i PE (1:20) da bi dao 1,3 g (45 %) jedinjenja 3E u vidu bezbojnog ulja.
Primer 3F: (S)-3-metil-2-(metil(piridin-4-ilmetil)amino)butanonska kiselina
[0196]
[0197] Jedinjenje 3E (800 mg, 2,56 mmol, 1,00 ekv) je rastvoreno u 30 mL AcOEt u prisustvu Pd/C (300 mg) i hidrogenizovano 3 sata na sobnoj temperaturi i atmosferskom pritisku. Reakcioni medijum je profiltriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen na koloni od silika gela smesom DCM i MeOH (100:1 do 5:1) da bi dao 100 mg (18 %) jedinjenja 3F u vidu bele čvrste supstance.
[0198] Primer 3: Jedinjenja 3D (50 mg, 0,08 mmol, 1,00 ekv) i 3F (26,34 mg, 0,12 mmol, 1,50 ekv) su rastvorena u 3 mL DCM. Rastvor je ohlađen do 0 °C, a zatim je dodato 0,018 mL DEPC i 0,0392 mL DIEA. Reakcija je mućkana na 0°C 2 sata, a zatim na sobnoj temperaturi preko noći. Reakcioni medijum je koncentrovan pod sniženim pritiskom i ostatak (70 mg) je prečišćen pomoću preparativne HPLC (Pre-HPLC-001 SHIMADZU, SunFire Prep C18 OBD kolona, 5 mm, 19 x 150 mm; eluent: voda / ACN puferisan pomoću 0,05 % TFA; gradijent od 20 % do 40 % ACN za 10 minuta, a zatim 40 % do 100 % ACN za 2 minuta; Waters 2545 UV detektor na 254 nm i 220 nm). Jedinjenje 3 je dobijeno sa prinosom od 27 % (20 mg) u vidu bele čvrste supstance.
[0199] LC/MS/UV (Ascentis Express C18 kolona, 2,7 mm, 4,6 x 100 mm; 40°C; 1,5 mL/min, 10 % do 95 % ACN u vodi (0,05 % TFA) za 8 minuta); ESI (C46H72N6O8, tačna masa 836,5) m/z: 837,5 (MH<+>) i 419,4 (M,2H<+>/2 (100 %)), 7,04 min (90,0 %, 210 nm).
[0200]<1>H NMR (400MHz, CD3OD, ppm): δ (prisustvo rotamera) 8,76 - 8,74 (m, 2H); 8,53 -8,48 (m, 0,4H, NHCO nekompletna izmena); 8,29 - 8,15 (m, 0,8H, NHCO nekompletna izmena); 8,01 (s, 2H), 7,31 - 7,22 (m, 5H), 4,88 - 4,68 (m, 3H); 4,31 - 4,07 (m, 2H); 3,94 -2,90 (m, 18H); 2,55 - 0,86 (m, 38H).
Referentni primer 4
(S)-2-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((S)-N,3-dimetil-2-((S)-3-metil-2-(metil(piridin-4-ilmetil)amino)butanamido)butanamido)-3-metoksi-5-metilheptanoil)pirolidin-2-il)-3-metoksi-2-metilpropanamido)-3-fenilpropanoinska kiselina, trifluorosirćetna kiselina
[0201]
[0202] Primer 4: Jedinjenje 3 (100 mg, 0,11 mmol, 1,00 ekv) je rastvoreno u smesi vode (5 mL), ACN (5 mL) i piperidina (2,5 mL). Reakciona smesa je ostavljena uz mućkanje preko noći, a zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću preparativne HPLC (Pre-HPLC-001 SHIMADZU, SunFire Prep C18 OBD kolona, 5 mm, 19 x 150 mm; eluirajuća faza: voda / ACN puferisan pomoću 0,05 % TFA; gradijent od 20 % do 40 % ACN za 10 minuta, a zatim 40 % do 100 % ACN za 2 minuta; Waters 2545 UV detektor na 254 nm i 220 nm), da bi dao 20 mg (20 %) jedinjenja 4 u vidu bele čvrste supstance.
[0203] LC/MS/UV (Ascentis Express C18 kolona, 2,7 mm, 4,6 x 100 mm; 40°C; 1,5 mL/min, 10 % do 95 % ACN u vodi (0,05 % TFA) za 8 minuta); ESI (C45H70N6O8, tačna masa 822,5) m/z: 823,5 (MH<+>) i 412,4 (M,2H<+>/2, 100 %), 6,84 min (89,1 %, 210 nm).
[0204]<1>H NMR (400MHz, CD3OD, ppm): δ (prisustvo rotamera) 8,79 - 8,78 (m, 2H); 8,09 (m, 2H); 7,30 - 7,21 (m, 5H); 4,80 - 4,80 (m, 1H), 4,36 - 0,87 (m, 58H).
Referentni primer 6
Metil (S)-2-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((S)-2-((S)-2-((3-aminopropil) (metil)amino)-3-metilbutanamido)-N,3-dimetilbutanamido)-3-metoksi-5-metilheptanoil)pirolidin-2-il)-3-metoksi-2-metilpropanamido)-3-fenilpropanoat, bis trifluorosirćetna kiselina
[0205]
Primer 6A: Metil (2S)-2-[(2R)-2-[(R)-[(2S)-1-[(3R,4S,5S)-4-[(2S)-2-[(2S)-2-[(3-[[(tercbutoksi)karbonil]amino]propil)(metil)amino]-3-metil butanamido]-N,3-dimetilbutanamido]-3-metoksi-5-metilheptanoil]pirolidin-2-il](metoksi)metil] propanamido]-3-fenilpropanoat
[0206]
Jedinjenje 3D (157,5 mg, 0,25 mmol, 1,00 ekv) je rastvoreno na 0°C u inertnoj atmosferi u 3 mL DCM u prisustvu karboksilne kiseline 1ZF (78,7 mg, 0,27 mmol, 1,10 ekv), DEPC (46 ml) i DIEA (124 ml). Reakciona smesa je mućkana 2 sata na niskoj temperaturi, a onda je sklonjeno hladno kupatilo i mućkanje je nastavljeno još 4 sata. Smesa je zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi dala 200 mg jedinjenja 6A u vidu sirovog žutog ulja. On je korišćen kao takav u sledećem koraku.
[0207] Primer 6: Jedinjenje 6A (200 mg, 0,22 mmol, 1,00 ekv) je rastvoreno u inertnoj atmosferi na 0°C u 2 mL DCM. TFA (1 mL) je dodat kap po kap i hladno kupatilo je sklonjeno. Reakciona smesa je mućkana 1 sat na sobnoj temperaturi, a zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću preparativne HPLC (Pre-HPLC-001 SHIMADZU, SunFire Prep C18 OBD kolona, 5 mm, 19 x 150 mm; eluirajuća faza: voda / ACN puferisan pomoću 0,05 % TFA; gradijent od 20 % do 40 % ACN za 10 minuta, a zatim 40 % do 100 % ACN za 2 minuta; Waters 2489 UV detektor na 254 nm i 220 nm), da bi dao 60 mg (26 %, prinos u 2 koraka) jedinjenja 6 u vidu bele čvrste supstance.
[0208] LC/MS/UV (Zorbax Eclipse Plus C8, 3,5 mm, 4,6 x 150 mm; 1 mL/min, 40°C, 30 do 80 % metanola u vodi (0,1 % H3PO4) za 18 minuta); ESI (C43H74N6O8, tačna masa 802,56) m/z: 804 (MH<+>); 11,50 min (91,5 %, 210 nm).
[0209]<1>H NMR (300MHz, CD3OD, ppm): δ (prisustvo rotamera) 8,52 (d, 0,3H, NHCO nekompletna izmena); 8,25 (d, 0,5H, NHCO nekompletna izmena); 7,30-7,22 (m, 5H); 4,9-4,6 (m, 3H); 4,2-4,0 (m, 1H); 4,0-0,86 (m, 61H).
Referentni primer 7
(S)-2-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((S)-2-((S)-2-((3-aminopropil) (metil)amino)-3-metilbutanamido)-N,3-dimetilbutanamido)-3-metoksi-5-metilheptanoil) pirolidin-2-il)-3-metoksi-2-metilpropanamido)-3-fenilpropanoinska kiselina, bis trifluorosirćetna kiselina
[0210]
[0211] Primer 7: Jedinjenje 6 (70 mg, 0,08 mmol, 1,00 ekv) je rastvoreno u smesi vode (5 mL), ACN (2,5 mL) i piperidina (5 mL). Reakciona smesa je ostavljena uz mućkanje preko noći na sobnoj temperaturi, a zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću preparativne HPLC (Pre-HPLC-001 SHIMADZU, SunFire Prep C18 OBD kolona, 5 mm, 19 x 150 mm; eluirajuća faza: voda / ACN puferisan pomoću 0,05 % TFA; gradijent od 20 % do 40 % ACN za 10 minuta, a zatim 40 % do 100 % ACN za 2 minuta; UV Waters 2489 UV detektor na 254 nm i 220 nm), da bi dao 14,6 mg (21 %) jedinjenja 7 u vidu bele čvrste supstance.
[0212] LC/MS/UV (Ascentis Express C18, 2,7 mm, 4,6 x 100 mm; 1,5 mL/min, 40°C, 0 do 80 % metanola u vodi (0,05 % TFA) za 8 minuta); ESI (C42H72N6O8, tačna masa 788,54) m/z: 790 (MH<+>), 5,71 min (96,83 %, 210 nm).
[0213]<1>H NMR (300MHz, CD3OD, ppm): δ (prisustvo rotamera) 8,42 (d, 0,3H, NHCO nekompletna izmena); 8,15 (d, 0,2H, NHCO nekompletna izmena); 7,31-7,21 (m, 5H); 4,9-4,6 (m, 3H); 4,25-4,0 (m, 1H); 4,0-0,86 (m, 59H).
Primer 11
(S)-N-((3R,4S,5S)-3-metoksi-1-((S)-2-((1R,2R)-1-metoksi-2-metil-3-okso-3-(((S)-2-fenil-1-(tiazol-2-il)etil)amino)propil)pirolidin-1-il)-5-metil-1-oksoheptan-4-il)-N,3-dimetil-2-((S)-3-metil-2-(metil(4-(metilamino)fenetil)amino) butanamido)butanamid, trifluorosirćetna kiselina
[0214]
Primer 11A: terc-butil N-[4-(2-hidroksietil)fenil]karbamat
[0215] Jedinjenje 11A je dobijeno sa prinosom od 75 % posle reakcije 2-(4-aminofenil)etanola sa BOC2O u THF na sobnoj temperaturi.
Primer 11B: terc-butil N-[4-(2-oksoetil)fenil]karbamat
[0216]
[0217] Jedinjenje 11A (2,5 g, 10,5 mmol, 1,00 ekv) je rastvoreno u 25 mL DCM, a zatim ohlađeno do -78°C. Dess-Martin Periodinane rastvor (DMP, 6,71 g, 15,8 mmol, 1,5 ekv) u DCM (10 mL) je dodat kap po kap. Hladno kupatilo je sklonjeno i mućkanje je nastavljeno 1 sat na sobnoj temperaturi. Reakcija je neutralisana pomoću 60 mL 50/50 smese zasićenog rastvora natrijum bikarbonata i zasićenog vodenog rastvora Na2S2O3. Dobijeni rastvor je ekstrahovan 3 puta pomoću 30 mL EtOAc. Organske faze su kombinovane, oprane dva puta pomoću zasićenog vodenog rastvora NaCl, osušene preko anhidrovanog natrijum sulfata, profiltrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen na silika gelu (EtOAc/PE 1/15) da bi dao 1,0 g (40 %) jedinjenja 11B u vidu bledožute čvrste supstance. Primer 11C: benzil (2S)-2-[[2-(4-[[(terc-butoksi)karbonil]amino]fenil) etil](metil)amino]-3-metilbutanoat
[0219] Jedinjenje 1ZC (3,5 g, 13,6 mmol, 1,1 ekv) je rastvoreno u THF (30 mL) u prisustvu DIEA (6,4 g, 49,7 mmol, 4,0 ekv), aldehida 11B (2,9 g, 12,3 mmol, 1,0 ekv) i natrijum triacetoksiborohidrida (5,23 g, 49,7 mmol, 2,0 ekv). Reakciona smesa je ostavljena uz mućkanje preko noći na sobnoj temperaturi, a zatim neutralisana pomoću 60 mL zasićenog rastvora natrijum bikarbonata. Dobijeni rastvor je ekstrahovan 3 puta pomoću 30 mL EtOAc. Organske faze su kombinovane, oprane dva puta pomoću zasićenog vodenog rastvora NaCl, osušen preko anhidrovanog natrijum sulfata, profiltriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen na silika gelu (EtOAc/PE 1:20) da bi dao 3,7 g (68 %) jedinjenja 11C u vidu žutog ulja.
Primer 11D: (2S)-2-[[2-(4-[[(terc-butoksi)karbonil]amino]fenil)etil] (metil)amino]-3-metilbutanonska kiselina
[0220]
[0221] Jedinjenje 11C (2 g, 4,5 mmol, 1 ekv) je rastvoreno u 10 mL metanola u prisustvu Pd/C (2 g) i hidrogenizovano 2 sata na normalnoj temperaturi i pritisku. Reakcioni medijum je profiltriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi dao 1,2 g (75 %) jedinjenja 11D u vidu žutog ulja.
Primer 11E: (2S)-2-[[2-(4-[[(terc-butoksi)karbonil](metil)amino]fenil) etil](metil) amino]-3-metilbutanonska kiselina
[0222]
[0223] Jedinjenje 11D (1,2 g, 3,4 mmol, 1,00 ekv) je rastvoreno u inertnoj atmosferi u THF (20 mL). Reakcioni medijum je ohlađen na ledenom kupatilu posle čega je NaH (60 % u ulju, 549 mg, 13,7 mmol, 4,0 ekv) dodat deo po deo, a zatim i jodometan (4,9 g, 34 mmol, 10 ekv). Reakcija je ostavljena uz mućkanje preko noći na sobnoj teperaturi, a zatim neutralisana vodom i oprana pomoću 100 mL EtOAc. pH vodenog rastvora je podešen na 6-7 pomoću 1N HCl. Ovaj vodeni rastvor je ekstrahovan 3 puta pomoću 100 mL EtOAc. Organske faze su kombinovane, osušene preko natrijum sulfata, profiltrirane i koncentrovane da bi dale 800 mg (64 %) jedinjenja 11E u vidu žute čvrste supstance.
Primer 11F: terc-butil N-[4-(2-[[(1S)-1-[[(1S)-1-[[(3R,4S,5S)-3-metoksi-1-[(2S)-2-[(1R,2R)-1-metoksi-2-metil-2-[[(1S)-2-fenil-1-(1,3-tiazol-2-il) etil]karbamoil]etil]pirolidin-1-il]-5-metil-1-oksoheptan-4-il] (metil)karbamoil]-2-metilpropil]karbamoil]-2-metilpropil](metil)amino] etil)fenil]-N-metil karbamat
[0224]
[0225] Jedinjenje 11F je dobijeno na sličan način kao jedinjenje 6A, iz amina 1Y (150 mg, 0,22 mmol, 1,2 ekv) i kiseline 11E (70 mg, 0,19 mmol, 1,0 ekv). Posle prečišćavnja na silika gelu (EtOAc/PE 1:1), 100 mg (52 %) željenog proizvoda je dobijeno u vidu bledožute čvrste supstance.
[0226] Primer 11: Jedinjenje 11 je dobijeno na isti način kao jedinjenje 1 iz intermedijera 11F (100 mg, 0,1 mmol). Ostatak je prečišćen pomoću preparativne HPLC (Pre-HPLC-001 SHIMADZU, SunFire Prep C18 OBD kolona, 5 mm, 19 x 150 mm; eluent: voda / ACN puferisan pomoću 0,05 % TFA; gradijent od 20 % do 40 % CAN za 10 minuta, a zatim 40 % do 100 % ACN za 2 minuta; Waters 2489 UV detektor na 254 nm i 220 nm). Jedinjenje 11 je dobijeno sa prinosom od 39 % (39,7 mg) u vidu bele čvrste supstance.
[0227] LC/MS/UV (Eclipse Plus C8, 3,5 mm, 4,6 x 150 mm; 1 mL/min, 40°C, 50 do 95 % metanola u vodi (0,05 % TFA) za 18 minuta); ESI (C50H77N7O6S, tačna masa 903,57) m/z: 904,5 (MH<+>), 7,53 min (93,68 %, 254 nm).
[0228]<1>H NMR (300MHz, CD3OD, ppm): δ (prisustvo rotamera) 8,84 (d, 0,5H, NHCO nekompletna izmena); 8,7-8,5 (m, 0,9H, NHCO nekompletna izmena); 7,76-7,73 (m, 1H); 7,55 – 7,4 (m, 1H); 7,28-7,22 (m, 7H); 7,08-7,05 (m, 2H); 5,51-5,72 (m, 1H); 4,9-4,80 (m, 2H); 4,3-0,7 (m, 60H).
Primer 12
Metil (S)-2-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((S)-N,3-dimetil-2-((S)-3-metil-2-(metil(4-(metilamino)fenetil)amino)butanamido)butanamido)-3-metoksi-5-metilheptanoil)pirolidin-2-il)-3-metoksi-2-metilpropanamido)-3- fenilpropanoat, trifluorosirćetna kiselina
[0230] Primer 12: Na isti način kao u krajnjim fazama u sintezi jedinjenja 1, jedinjenje 12 je dobijeno u dva koraka iz amina 3D (118 mg, 0,19 mmol) i kiseline 11E (82 mg, 0,22 mmol). Krajnji ostatak je prečišćen pomoću preparativne HPLC (Pre-HPLC-001 SHIMADZU, SunFire Prep C18 OBD kolona, 5 mm, 19 x 150 mm; eluent: voda / ACN puferisan pomoću 0,05 % TFA; gradijent od 20 % do 40 % ACN za 10 minuta, a zatim 40 % do 100 % ACN za 2 minuta; Waters 2489 UV detektor na 254 nm i 220 nm). Jedinjenje 12 je dobijeno sa prinosom od 7 % (13,7 mg) u vidu bele čvrste supstance.
[0231] LC/MS/UV (Eclipse Plus C8, 3,5 mm, 4,6 x 150 mm; 1 mL/min, 40°C, 40 do 95 % metanol u vodi (0,05 % TFA) za 18 minuta); ESI (C49H78N6O8, tačna masa 878,59) m/z: 879,7 (MH<+>), 10,07 min (90,6 %, 254 nm).
[0232]<1>H:NMR (300MHz, CD3OD, ppm): δ (prisustvo rotamera) 7,40 (se, 2H); 7,38-7,22 (m, 7H); 4,95-4,7 (m, 3H); 4,2-4,0 (m, 1H); 3,9-0,86 (m, 62H).
Primer 13
(S)-2-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((S)-N,3-dimetil-2-((S)-3-metil-2-(metil(4-(metilamino)fenetil)amino)butanamido)butanamido)-3-metoksi-5-metil heptanoil)pirolidin-2-il)-3-metoksi-2-metilpropanamido)-3-fenilpropanoinska kiselina, trifluorosirćetna kiselina
[0233]
[0234] Primer 13: Jedinjenje 13 je dobijeno na isti način kao jedinjenje 7 iz jedinjenja 12 (100 mg, 0,10 mmol). Ostatak je prečišćen pomoću preparativne HPLC (Pre-HPLC-001 SHIMADZU, SunFire Prep C18 OBD kolona, 5 mm, 19 x 150 mm; eluent: voda / ACN puferisan pomoću 0,05 % TFA; gradijent od 20 % do 40 % ACN za 10 minuta, a zatim 40 % do 100 % ACN za 2 minuta; Waters 2489 UV detektor na 254 nm i 220 nm). Jedinjenje 13 je dobijeno sa prinosom od 20 % (20 mg) u vidu bele čvrste supstance.
[0235] LC/MS/UV (Ascentis Express C18, 2,7 mm, 4,6 x 100 mm; 1,5 mL/min, 40°C, 10 do 95 % metanola u vodi (0,05 % TFA) za 8 minuta); ESI (C48H76N6O8, tačna masa 864,57) m/z: 865,6 (MH<+>), 6,05 min (90,9 %, 210 nm).
[0236]<1>H NMR: (300MHz, CD3OD, ppm): δ (prisustvo rotamera) 7,32-7,19 (m, 9H); 4,9-4,65 (m, 3H); 4,2-4,0 (m, 1H); 3,9-0,86 (m, 59H).
Primer 14
(S)-2-((S)-2-((3-aminobenzil)(metil)amino)-3-metilbutanamido)-N-((3R,4S,5S)-3-metoksi-1-((S)-2-((1R,2R)-1-metoksi-2-metil-3-okso-3-(((S)-2-fenil-1-(tiazol-2-il)etil)amino)propil)pirolidin-1-il)-5-metil-1-oksoheptan-4-il)-N,3-dimetilbutanamid, trifluorosirćetna kiselina
[0237]
Primer 14A: Terc-butil (3-(hidroksimetil)fenil) karbamat
[0238]
[0239] (3-aminofenil)metanol (3 g, 24,36 mmol, 1,00 ekv) je rastvoren u THF (60 mL) posle čega je dodat di-terc-butil dikarbonat (6,38 g, 29,23 mmol, 1,20 ekv). Reakciona smesa je ostavljena uz mućkanje preko noći na sobnoj temperaturi i reakcija je zatim razblažena dodavanjem 200 mL vode. Proizvod je ekstrahovan 3 puta pomoću 100 mL AcOEt i organske faze su zatim rekombinovane, osušene preko natrijum sulfata, profiltrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom da bi dale sirov proizvod (13,85 g jedinjenja 14A) u vidu žutog ulja.
Primer 14B: Terc-butil (3-formilfenil)karbamat
[0241] Jedinjenje 14A (13,8 g, 61,81 mmol, 1,00 ekv) je rastvoreno u DCE (400 mL), a zatim je dodat MnO2(54 g, 621,14 mmol, 10,05 ekv). Smesa je ostavljena uz mućkanje na sobnoj temperaturi 3 dana, posle čega su čvrste supstance uklonjene filtriranjem. Filtrat je uparen do suvog i ostatak je prečišćen na koloni od silika gela smesom EtOAc i PE (1:30) da bi dao 3 g (22 %) jedinjenja 14B u vidu bele čvrste supstance.
Primer 14C: Benzil (S)-2-((3-((terc-butoksikarbonil)amino)benzil) (metil) amino)-3-metilbutanoat
[0242]
[0243] Jedinjenje 14B (1 g, 4,52 mmol, 1,00 ekv) je rastvoreno u 20 mL THF u prisustvu jedinjenja 1ZC (1,16 g, 4,50 mmol, 1,00 ekv), DIEA (3 mL) i NaBH(OAc)3(1,92 g, 9,06 mmol, 2,01 ekv). Reakciona smesa je ostavljena uz mućkanje preko noći na sobnoj temperaturi, a zatim neutralisana pomoću 100 mL vode i ekstrahovana 3 puta pomoću 50 mL AcOEt. Organske faze su kombinovane, osušene preko natrijum sulfata, profiltrirane i koncentrovane. Ostatak je prečišćen na koloni od silika gela smesom EtOAc i PE (1:50) da bi dao 1,9 g (99 %) jedinjenja 14C u vidu bele čvrste supstance.
Primer 14D: (S)-2-((3-((terc-butoksikarbonil)amino)benzil)(metil)amino)-3-metilbutanonska kiselina
[0244]
[0245] Jedinjenje 14C (1 g, 2,34 mmol, 1,00 ekv) je rastvoreno u 30 mL AcOEt i 4 mL metanola u prisustvu Pd/C (400 mg) i hidrogenizovano 1 sat na sobnoj temperaturi i atmosferskom pritisku. Reakcioni medijum je profiltriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi dao 680 mg (86 %) jedinjenja 14D u vidu bele čvrste supstance.
Primer 14E: Terc-butil (3-((3S,6S,9S,10R)-9-((S)-sec-butil)-3,6-diizopropil-10-(2-((S)-2-((1R,2R)-1-metoksi-2-metil-3-okso-3-(((S)-2-fenil-1-(tiazol-2-il) etil)amino)propil)pirolidin-1-il)-2-oksoetil)-2,8-dimetil-4,7-diokso-11-oksa-2,5,8-triazadodecil)fenil) karbamat
[0246]
[0247] Jedinjenje 14E je sintetisano na isti način kao jedinjenje 3 iz amina 1Y (100 mg, 0,15 mmol, 1,00 ekv), kiseline 14D (102,27 mg, 0,30 mmol, 2,00 ekv), DEPC (0,053 mL) i DIEA (0,046 mL) u DCM (3 mL). Sirovi proizvod (80 mg) je prečišćen na koloni od silika gela smesom EtOAc i PE (1:1) da bi dao 100 mg (67 %) jedinjenja 14E u vidu bledožute čvrste supstance.
[0248] Primer 14: Jedinjenje 14 je sintetisano na isti način kao jedinjenje 2, iz intermedijera 14E (100 mg, 0,10 mmol, 1,00 ekv). Sirov proizvod (80 mg) je prečišćen pomoću preparativne HPLC (Pre-HPLC-001 SHIMADZU, SunFire Prep C18 OBD kolona, 5 mm, 19 x 150 mm; eluent: voda / ACN puferisan pomoću 0,05 % TFA; gradijent od 20 % do 40 % ACN za 10 minuta, a zatim 40 % do 100 % ACN za 2 minuta; Waters 2545 UV detektor na 254 nm i 220 nm). Jedinjenje 14 je dobijeno sa prinosom od 10 % (10 mg) u vidu bele čvrste supstance.
[0249] LC/MS/UV (Eclipse plus C8 kolona, 3,5 mm, 4,6 x 150 mm; 40°C; 1,0 mL / min, 40 % do 95 % MeOH u vodi (0,05 % TFA) za 18 minuta); ESI (C48H73N7O6S, tačna masa 875,5) m/z: 876,5 (MH<+>) i 438,9 (M,2H<+>/2, 100 %), 11,35 min (95,6 %, 210 nm).
[0250]<1>H NMR (400MHz, CD3OD, ppm): δ (prisustvo rotamera) 8,92 - 8,86 (m, 0,4H, NH nekompletna izmena); 8,70 - 8,54 (m, 0,6H, NH nekompletna izmena); 7,88 - 7,78 (m, 1H); 7,60 - 7,50 (m, 1H); 7,45 - 6,97 (m, 9H); 5,80 - 5,65 (m, 1H); 4,85 - 4,70 (m, 1H); 4,40 - 0,80 (m, 56H).
Primer 15
Metil (S)-2-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((S)-2-((S)-2-((3-aminobenzil) (metil)amino)-3-metilbutanamido)-N,3-dimetilbutanamido)-3-metoksi-5-metilheptanoil)pirolidin-2-il)-3-metoksi-2-metilpropanamido)-3-fenilpropanoat, trifluorosirćetna kiselina
Primer 15A: Metil (S)-2-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,SS)-4-((S)-2-((S)-2-((3-((tercbutoksikarbonil)amino) benzil)(metil)amino)-3-metilbutanamido)-N, 3-dimetilbutanamido)-3-metoksi-5-metilheptanoil)pirolidin-2-il)-3-metoksi-2-metilpropanamido)-3-fenilpropanoat
[0252]
[0253] Jedinjenje 15A je sintetisano na isti način kao jedinjenje 3, iz amina 3D (200 mg, 0,32 mmol, 1,00 ekv), kiseline 14D (212,6 mg, 0,63 mmol, 2,00 ekv), DEPC (0,1103 mL) i DIEA (0,157 mL, 3,00 ekv) u DCM (5 mL). Sirov proizvod je prečišćen na koloni od silika gela smesom EtOAc i PE (1:1) da bi dao 200 mg (67 %) jedinjenja 15A u vidu žute čvrste supstance.
[0254] Primer 15: Jedinjenje 15 je sintetisano na isti način kao jedinjenje 2, iz intermedijera 15A (200 mg, 0,21 mmol, 1,00 ekv). Sirov proizvod je prečišćen pomoću preparativne HPLC (Pre-HPLC-001 SHIMADZU, SunFire Prep C18 OBD kolona, 5 mm, 19 x 150 mm; eluent: voda / ACN puferisan pomoću 0,05 % TFA; gradijent od 20 % do 40 % ACN za 10 minuta zatim 40 % do 100 % ACN za 2 minuta; Waters UV detektor 2545 na 254 nm i 220 nm). Jedinjenje 15 je dobijeno sa prinosom od 19 % (38,6 mg) u vidu bele čvrste supstance.
[0255] LC/MS/UV (Ascentis Express C18 kolona, 2,7 mm, 4,6 x 100 mm; 40°C; 1,5 mL/min, 10 % do 95 % MeOH u vodi (0,05 % TFA) za 8 minuta); ESI (C47H74N6O8, tačna masa 850,5) m/z: 851,5 (MH<+>) i 426,4 (M,2H<+>/2, 100 %), 6,61 min (91,1 %, 210 nm).
[0256]<1>H NMR (400MHz, CD3OD, ppm): δ (prisustvo rotamera) 7,53 - 7,42 (m, 1H); 7,35 -7,18 (m, 8H); 4,88 - 4,79 (m, 2H); 4,42 - 4,00 (m, 3H); 3,93 - 2,71 (m, 22H); 2,61 - 0,81 (m, 33H).
Primeri 19 i 20
[0258] Jedinjenja 19 i 20 su dobijena na isti način kao jedinjenje 1, iz amina 1Y i 1ZC i odgovarajućih aldehida.
[0259] Terc-butil 4-formilfenil karbonat uključen u dobijanje jedinjenja 19 je dobijen u jednom koraku na sledeći način: 4-hidroksibenzaldehid (2,5 g, 20,5 mmol, 1,0 ekv) je rastvoren u inertnoj atmosferi u THF (20 mL) u prisustvu 18-kruna-6 (0,25 g) i kalijum karbonata (5 g). Reakciona smesa je ohlađena do 0°C, a zatim je dodat di-terc-butil dikarbonat (5,8 g, 26,58 mmol, 1,30 ekv). Mućkanje je nastavljeno još 1 sat na niskoj temperaturi posle čega je reakcija neutralisana sa 30 mL vode. Dobijeni rastvor je ekstrahovan tri puta pomoću 200 mL EtOAc. Organske faze su kombinovane, osušene preko anhidrovanog natrijum sulfata, profiltrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen na silika gelu (EtOAc/PE 1:10) i dao je prinos od 4,2 g (92 %) terc-butil 4-formilfenil karbonata u vidu bledožute čvrste supstance.
[0260] 4-nitrobenzaldehid uključen u dobijanje jedinjenja 20 je komercijalan.
[0261] Sinteza jedinjenja 20 je urađena redukcijom nitro grupe. Ovo je izvedeno na sledeći način: (2S)-N-[(3R,4S,5S)-1-[(2S)-2-[(1R,2R)-2-[[(1S,2R)-1-hidroksi-1-fenilpropan-2-il]karbamoil]-1-metoksi-2-metiletilpirolidin-1-il]-3-metoksi-5-metil-1-oksoheptan-4-il]-N,3-dimetil-2-[(2S)-3-metil-2-[metil[(4-nitrofenil)metil]amino]butanamido]butanamid (40 mg, 0,05 mmol, 1,0 ekv) je rastvoren u 15 mL etanola. Dodat je dehidrirani kalaj hlorid (II) (317 mg, 1,4 mmol, 30 ekv) i rastvor je ostavljen uz mućkanje 3 dana na sobnoj temperaturi. Reakcija je neutralisana sa 50 mL vode, zatim ekstrahovana tri puta pomoću 50 mL EtOAc. Organske faze su kombinovane, osušene preko anhidrovanog natrijum sulfata, profiltrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom da bi dale jedinjenje 20 u sirovom stanju.
[0262] Karakterizacija krajnjih proizvoda: jedinjenje 19 LC/MS/UV ESI: (C48H72N6O7S, tačna masa 876,52) m/z 877 (MH<+>), 439 [100 %, (M,2H<+>)/2]; UV: RT = 1,76 min (93,2 %, 220 nm). Jedinjenje 20<1>H NMR: (400MHz, CD3OD, ppm): δ (prisustvo rotamera) 7,85-7,80 (m, 1H); 7,6-7,5 (m, 1H); 7,4-7,15 (m, 5H); 7,1-7,05 (m, 2H); 6,73-6,70 (m, 2H); 5,8-5,55 (m, 1H); 5,0-4,7 (m, 2H); 4,25-4,05 (m, 1H); 4,0-0,8 (m, 54H). LC/MS/UV ESI: (C48H73N7O7S, tačna masa 875,53) m/z 876 (MH<+>), 439 [75 %, (M,2H<+>)/2]; UV: RT = 4,83 min (96,8 %, 254 nm).1H NMR (400MHz, CD3OD, ppm): δ (prisustvo rotamera) 7,85-7,80 (m, 1H); 7,6-7,5 (m, 1H); 7,4-7,1 (m, 7H); 6,76-6,72 (m, 2H); 5,8-5,55 (m, 1H); 4,9-4,65 (m, 2H); 4,25-4,05 (m, 1H); 4,0-0,8 (m, 54H).
Primeri 23 i 24
[0263]
[0264] Jedinjenja 23 i 24 su dobijena na isti način kao jedinjenja 19 i 20, zamenivši amin 1Y aminom 2D.
[0265] Karakterizacija krajnjih proizvoda: jedinjenje 23 LC/MS/UV (ESI) (C46H73N5O8, tačna masa 823,55) m/z 824 (MH<+>), 846 (MNa+), 413 (100 %, (M,2H<+>)/2); UV: 4,76 min (98,5 %, 215 nm).<1>H NMR (400MHz, CDCl3, ppm): δ (prisustvo rotamera) 7,5-7,2 (m, 5H); 7,9-7,75 (m, 2H); 5,5-5,3 (m, 1H); 4,9-4,6 (m, 2H); 4,55-4,15 (m, 4H); 4,0-0,8 (m, 55H). Jedinjenje 24 LC/MS/UV (ESI) (C46H74N6O7, tačna masa 822,56) m/z 823 (MH<+>), 845 (MNa<+>), 861 (MK<+>); UV: 3,68 min (99,15 %, 254 nm).<1>H NMR (400MHz, CD3OD, ppm): δ (prisustvo rotamera) 8,0-7,7 (m, 0,5H, NHCO nekompletna izmena); 7,5-7,0 (m, 7H); 6,75-6,65 (m, 2H); 4,85-4,5 (m, 2H); 4,4-4,05 (m, 2H); 4,0-0,8 (m, 56H).
Primer 27
Metil (S)-2-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((S)-2-((S)-2-((4-hidroksifenetil)(metil)amino)-3-metilbutanamido)-N,3-dimetilbutanamido)-3-metoksi-5-metilheptanoil)pirolidin-2-il)-3-metoksi-2-metilpropanamido)-3-fenilpropanoat, trifluorosirćetna kiselina
[0266]
[0267] Primer 27: Jedinjenje 27 je dobijeno na isti način kao jedinjenje 3 iz amina 3D (70 mg, 0,11 mmol, 1,00 ekv), kiseline 49C (55,5 mg, 0,22 mmol, 2,00 ekv), DEPC (0,034 mL, 2,00 ekv) i DIEA (0,055 mL, 3,00 ekv) u DCM (3 mL). Sirov proizvod je prečišćen pomoću preparativne HPLC (Pre-HPLC-001 SHIMADZU, SunFire Prep C18 OBD kolona, 5 mm, 19 x 150 mm; eluent: voda / ACN puferisan pomoću 0,05 % TFA; gradijent od 20 % do 45 % ACN za 10 minuta, a zatim 40 % do 100 % ACN za 2 minuta; Waters 2545 UV detektor na 254 nm i 220 nm). Jedinjenje 27 je dobijeno sa prinosom od 3 % (2,9 mg) u vidu bele čvrste supstance.
[0268] LC/MS/UV (Eclipse Plus C8 kolona, 3,5 mm, 4,6 x 150 mm; 40°C; 1,5 mL/min, 10 % do 95 % MeOH u vodi (0,05 % TFA) za 8 minuta); ESI (C48H75N5O9, tačna masa 866,56) m/z: 866,5 (MH<+>) i 433,9 (M,2H<+>/2, 100 %), 6,61 min (89,1 %, 210 nm).
[0269]<1>H NMR (400MHz, CD3OD, ppm): δ (prisustvo rotamera) 8,70 - 8,49 (m, 0,9 H, NH/OH nekompletna izmena); 8,30 - 8,22 (m, 0,3H, NH nekompletna izmena); 7,36 - 7,02 (m, 7H); 6,86 - 6,62 (m, 2H); 4,82 - 4,69 (m, 2H); 4,20 - 4,03 (m, 1H); 3,91 - 3,33 (m, 12H); 3,30 - 2,90 (m, 17H); 2,55 - 0,80 (m, 35H).
Primer 28
(S)-2-((S)-2-((3-aminobenzil)(metil)amino)-3-metilbutanamido)-N-((3R,4S,5S)-1-((S)-2-((1R,2R)-3-(((1S,2R)-1-hidroksi-1-fenilpropan-2-il)amino)-1-metoksi-2-metil-3-oksopropil)pirolidin-1-il)-3-metoksi-5-metil-1-oksoheptan-4-il)-N,3-dimetilbutanamid, trifluorosirćetna kiselina
Primer 28A: Terc-butil (3-((3S,6S,9S,10R)-9-((S)-sec-butil)-10-(2-((S)-2-((1R,2R)-3-(((1S,2R)-1-hidroksi-1-fenilpropan-2-il)amino)-1-metoksi-2-metil-3-oksopropil)pirolidin-1-il)-2-oksoetil)-3,6-diizopropil-2,8-dimetil-4,7-diokso-11-oksa-2,5,8-triazadodecil)fenil)karbamat
[0271]
[0272] Jedinjenje 28A je dobijeno na isti način kao jedinjenje 3, iz amina 2D (100 mg, 0,17 mmol, 1,00 ekv), kiseline 14D (111,25 mg, 0,33 mmol, 2,00 ekv), DEPC (0,058 mL) i DIEA (0,05 mL) u DCM (3 mL). Ostatak je prečišćen na koloni od silika gela smesom EtOAc i heksana (1:1) da bi dao 100 mg (66 %) jedinjenja 28A u vidu bele čvrste supstance.
[0273] Primer 28: Jedinjenje 28 je sintetisano na isti način kao jedinjenje 2, iz intermedijera 28A (100 mg, 0,11 mmol, 1,00 ekv). Sirov proizvod (80 mg) je prečišćen pomoću preparativne HPLC (Pre-HPLC-001 SHIMADZU, SunFire Prep C18 OBD kolona, 5 mm, 19 x 150 mm; eluent: voda / ACN puferisan pomoću 0,05 % TFA; gradijent od 20 % do 40 % ACN za 10 minuta, a zatim 40 % do 100 % ACN za 2 minuta; Waters 2545 UV detektor na 254 nm i 220 nm). Jedinjenje 28 je dobijeno sa prinosom od 20 % (20 mg) u vidu bele čvrste supstance.
[0274] LC/MS/UV (Ascentis Express C18 kolona, 2,7 mm, 4,6 x 100 mm; 40°C; 1,5 mL/min, 10 % do 95 % MeOH u vodi (0,05 % TFA) za 8 minuta); ESI (C46H74N6O7, tačna masa 822,56) m/z: 823,5 (MH<+>) i 412,4 (M,2H<+>/2, 100 %), 12,45 min (87,2 %, 210 nm).
[0275]<1>H NMR: (400MHz, CD3OD, ppm): δ (prisustvo rotamera) 7,47 - 7,20 (m, 5H); 7,10 -7,01 (m, 1H); 6,80 - 6,56 (m, 3H); 4,82 - 4,52 (m, 3H); 4,33 - 4,03 (m, 2H); 3,91 - 3,82 (m, 0,5H); 3,75 - 3,35 (m, 9,5H); 3,28 - 3,10 (m, 2H); 2,79 - 2,90 (m, 1H); 2,60 - 2,40 (m, 2H); 2,30 - 0,80 (m, 40H).
Primer 29
(S)-2-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((S)-2-((S)-2-((3-aminobenzil) (metil)amino)-3-metilbutanamido)-N,3-dimetilbutanamido)-3-metoksi-5-metilheptanoil)pirolidin-2-il)-3-metoksi-2-metilpropanamido)-3-fenilpropanoinskaa kiselina, trifluorosirćetna kiselina
[0276]
[0277] Primer 29: Jedinjenje 15 (100 mg, 0,10 mmol, 1,00 ekv) je rastvoreno u smesi vode (5 mL), ACN (5 mL) i piperidina (2,5 mL). Reakciona smesa je ostavljena uz mućkanje preko noći na sobnoj temperaturi i zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću preparativne HPLC (Pre-HPLC-001 SHIMADZU, SunFire Prep C18 OBD kolona, 5 mm, 19 x 150 mm; eluent: voda / ACN puferisan pomoću 0,05 % TFA; gradijent od 20 % do 40 % ACN za 10 minuta, a zatim 40 % do 100 % ACN za 2 minuta; Waters 2545 UV detektor na 254 nm i 220 nm), da bi dao 20 mg (20 %) jedinjenja 29 u vidu bele čvrste supstance.
[0278] LC/MS/UV (Eclipse Plus C8 kolona, 3,5 mm, 4,6 x 150 mm; 40°C; 1,0 mL/min, 40 % do 95 % MeOH u vodi (0,05 % TFA) za 18 minuta); ESI (C46H72N6O8, tačna masa 836,54) m/z: 837,5 (MH<+>) i 419,4 (M,2H<+>/2, 100 %), 10,61 min (92,5 %, 210 nm).
[0279]<1>H NMR: (400MHz, CD3OD, ppm): δ (prisustvo rotamera) 7,38 - 7,15 (m, 6H); 7,00 -6,99 (m, 3H); 4,85 - 4,68 (m, 2H); 4,37 - 3,38 (m, 11H); 3,31 - 2,70 (m, 8H); 2,60 - 0,82 (m, 35H).
Primer 49
(S)-2-((S)-2-((4-hidroksifenetil)(mthyl)amino)-3-metilbutanamido)-N-((3R,4S,5S)-3-mthoksi-1-((S)-2-((1R,2R)-1-metoksi-2-metil-3-okso-3-(((S)-2-fenil-1-(tiazol-2-il)etil)amino)propil)pirolidin-1-il)-5-metil-1-oksoheptan-4-il)-N,3-dimetilbutanamid, trifluorosirćetna kiselina
[0280]
Primer 49A: 2-(4-hidroksifenil)acetaldehid
[0281]
[0282] 4-(2-hidroksietil)fenol (4 g, 28,95 mmol, 1,00 ekv) je rastvoren u DMSO (32 mL), a zatim je dodat TEA (8,8 mL, 2,20 ekv) kap po kap. Dodat je rastvor SO3.Py (10 g, 2,20 ekv) u DMSO (36 mL) i smesa je ostavljena uz mućkanje preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smesa je neutralisana pomoću 250 mL vode i ekstrahovana 3 puta pomoću 100 mL AcOEt. Organske faze su kombinovane, oprane 5 puta vodom (100 mL) zatim dva puta pomoću 150 mL NaCl (sat.), osušene preko natrijum sulfata, profiltrirane i koncentrovane. Ostatak je prečišćen na silika gelu (EtOAc/PE (1:10) da bi dao 1 g (25 %) jedinjenja 49A u vidu bezbojnog ulja.
Primer 49B: benzil (S)-2-((4-hidroksifenetil)(metil)amino)-3-metil butanoat
[0283]
[0284] Jedinjenje 49B je sintetisano na isti način kao jedinjenje 14C, iz amina 1ZC (1,5 g, 5,82 mmol, 0,99 ekv), aldehida 49A (800 mg, 5,88 mmol, 1,00 ekv), NaBH(OAc)3(2,7 g, 12,74 mmol, 2,17 ekv) i DIEA (4,23 mL) u THF (25 mL). Reakciona smesa je neutralisana pomoću 50 mL vode i ekstrahovana 3 puta pomoću 50 mL AcOEt. Organske faze su kombinovane, osušene preko natrijum sulfata, profiltrirane i koncentrovane. Ostatak je prečišćen na silika gelu (EtOAc/PE (1:10) da bi dao 600 mg (37 %) jedinjenja 49B u vidu bele čvrste supstance.
Primer 49C: (S)-2-((4-hidroksifenetil)(metil)amino)-3-metilbutanonska kiselina
[0285]
[0286] Jedinjenje 49B (0,5 g, 1,46 mmol, 1,00 ekv) je rastvoreno u 40 mL MeOH u prisustvu Pd/C (250 mg) i hidrogenizovano 3 sata na sobnoj temperaturi i atmosferskom pritisku. Reakcioni medijum je profiltriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi dao 0,4 g jedinjenja 49C u vidu bele čvrste supstance.
[0287] Primer 49: Jedinjenje 49 je sintetisano na isti način kao jedinjenje 3, iz amina 1Y (53,4 mg, 0,08 mmol, 2,00 ekv), kiseline 49C (70 mg, 0,28 mmol, 1,00 ekv), DEPC (0,032 mL, 2,00 ekv) i DIEA (0,053 mL, 3,00 ekv) u DCM (3 mL). Ostatak je prečišćen pomoću preparativne HPLC (Pre-HPLC-001 SHIMADZU, Atlantis Prep OBD T3 kolona, 5 mm, 19 x 150 mm; eluent: voda / ACN puferisan pomoću 0,05 % TFA; gradijent od 20 % do 45 % ACN za 10 minuta, a zatim 45 % do 100 % ACN za 2 minuta; Waters 2545 UV detektor na 254 nm i 220 nm), da bi dao 3 mg (1 %) jedinjenja 49 u vidu bele čvrste supstance.
[0288] LC/MS/UV (Ascentis Express C18 kolona, 2,7 mm, 4,6 x 100 mm; 40°C; 1,5 mL/min, 10 % do 95 % MeOH u vodi (0,05 % TFA) za 8 minuta); ESI (C49H74N6O7S tačna masa 890,5) m/z: 891,5 (MH<+>) i 446,4 (M,2H<+>/2, 100 %), 6,69 min (100 %, 210 nm).
[0289]<1>H NMR: (400MHz, CD3OD, ppm): δ (prisustvo rotamera) 8,92 - 8,87 (m, 0,5 H, NHCO, nekompletna izmena), 8,70 - 8,63 (m, 0,4 H, NHCO, nekompletna izmena), 8,85 -8,77 (m, 1H), 7,59 - 7,51 (m, 1H), 7,35 - 7,03 (m, 7H), 6,82 - 6,71 (m, 2H), 5,77 - 5,58 (m, 1H), 5,81 - 5,70 (m, 1H), 4,21 - 0,80 (m, 58H).
Primer 50
(S)-2-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((S)-2-((S)-2-((4-hidroksifenetil)(metil)amino)-3-metilbutanamido)-N,3-dimetilbutanamido)-3-metoksi-5-metilheptanoil)pirolidin-2-il)-3-metoksi-2-metilpropanamido)-3-fenilpropanoinskaa kiselina, trifluorosirćetna kiselina
[0290]
[0291] Primer 50: Jedinjenje 50 je dobijeno na isti način kao jedinjenje 4, iz jedinjenja 27 (100 mg, 0,10 mmol, 1,00 ekv). Ostatak je prečišćen pomoću preparativne HPLC (Pre-HPLC-001 SHIMADZU, Atlantis Prep OBD T3 kolona, 5 mm, 19 x 150 mm; eluent: voda / ACN puferisan pomoću 0,05 % TFA; gradijent od 20 % do 40 % ACN za 10 minuta, a zatim 40 % do 100 % ACN za 2 minuta; Waters 2545 UV detektor na 254 nm i 220 nm), da bi dao 10,7 mg (11 %) jedinjenja 50 u vidu bele čvrste supstance.
[0292] LC/MS/UV (Ascentis Express C18 kolona, 2,7 mm, 4,6 x 100 mm; 40°C; 1,5 mL/min, 10 % do 95 % MeOH u vodi (0,05 % TFA) za 8 minuta); ESI (C47H73N5O9, tačna masa 851,5) m/z: 852,5 (MH<+>) i 426,8 (M,2H<+>/2, 100 %), 6,46 min (91,7 %, 210 nm).
[0293]<1>H NMR: (400MHz, CD3OD, ppm): δ (prisustvo rotamera) 7,34 - 7,15 (m, 5H); 7,15 -7,04 (se, 2H), 6,82 - 6,83 (m, 2H), 4,83 - 4,70 (m, 1H), 4,21 - 4,00 (m, 1H), 3,90 - 3,80 (m, 1H), 3,74 - 3,62 (m, 1H), 3,57 - 2,86 (m, 20H), 2,56 - 0,80 (m, 36H).
Primer 51
Metil (S)-2-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((S)-2-((S)-2-((4-hidroksibenzil)(metil)amino)-3-metilbutanamido)-N,3-dimetilbutanamido)-3-metoksi-5-metilheptanoil)pirolidin-2-il)-3-metoksi-2-metilpropanamido)-3- fenilpropanoat, trifluorosirćetna kiselina
[0294]
Primer 51A: Terc-butil (4-formilfenil)karbonat
[0295]
[0296] 4-hidroksibenzaldehid (3,0 g, 24 mmol) je rastvoren u 30 mL DCM u prisustvu 4-DMAP (300 mg, 2,46 mmol, 0,1 ekv.) i di-terc-butil dikarbonata (5,35 g, 24 mmol, 1,0 ekv.) i mućkan 1 sat na sobnoj temperaturi. Rastvor je zatim razblažen pomoću 200 mL vode i ekstrahovan 3 puta pomoću 100 mL DCM. Organske faze su kombinovane, osušene preko natrijum sulfata, profiltrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom da bi dale 5 g (92 %) jedinjenja 51A u vidu bele čvrste supstance.
Primer 51B: benzil (S)-2((4-((terc-butoksikarbonil)oksi)benzil)(metil) amino)-3-metilbutanoat
[0297]
[0298] Jedinjenje 51A (220 mg, 0,99 mmol) je rastvoreno u 5 mL THF u prisustvu jedinjenja 1ZC (255 mg, 0,99 mmol, 1,0 ekv.), NaBH(OAc)3(420 mg, 2 mmol, 2,0 ekv.) i DIEA (654 ml) i mućkano preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvor je zatim razblažen pomoću 100 mL vode i ekstrahovan 3 puta pomoću 50 mL EtOAc. Organske faze su kombinovane, osušene preko natrijum sulfata, profiltrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen na koloni od silika gela sa smesom EtOAc i PE (1:100) da bi dao 200 mg (47 %) jedinjenja 51B u vidu bele čvrste supstance.
Primer 51C: (S)-2-((4-((terc-butoksikarbonil)oksi)benzil)(metil)amino)-3-metil butanonska kiselina
[0299]
[0300] Jedinjenje 51C je dobijeno hidrogenizacijom jedinjenja 51B (200 mg), sledeći protokol koji je korišćen za dobijanje jedinjenja 3F.
Primer 51D: Metil (S)-2-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((S)-2-((S)-2-((4-((tercbutoksikarbonil)oksi)benzil)(metil)amino)-3-metilbutanamido)-N,3-dimetilbutanamido)-3-metoksi-5-metilheptanoil)pirolidin-2-il)-3-metoksi-2-metilpropanamido)-3-fenilpropanoat
[0301]
[0302] Jedinjenje 51D je dobijeno kuplovanjem jedinjenja 51C sa aminom 3D, sledeći protokol koji je korišćen za dobijanje jedinjenja 3 da bi se dobio željeni proizvod u vidu žutog ulja sa prinosom od 60%.
[0303] Primer 51: Jedinjenje 51D (80 mg, 0,08 mmol) je rastvoreno u 1 mL DCM u prisustvu 0,5 mL TFA, mućkano 2 sata na sobnoj temperaturi, a zatim koncentrovano pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću preparativne HPLC (Pre-HPLC-010, SunFire Prep C18 OBD kolona, 5 mm, 19 x 150 mm; eluent: voda / ACN puferisan pomoću 0,05 % TFA; gradijent od 23 % do 40 % ACN za 10 minuta, a zatim 40 % do 95 % ACN za 2 minuta; Waters 2489 UV detektor na 254 nm i 220 nm). Jedinjenje 51 je dobijeno sa prinosom od 24 % (20 mg) u vidu bele čvrste supstance.
[0304] LC/MS/UV (Zorbax SB-Aq, 1,8 mm, 4,6 x 100 mm; 2 % MeOH u vodi (0,05 % TFA) 1 minut, a zatim 2 % do 95 % MeOH za 13 minuta); ESI (C47H73N5O9, tačna masa 851,54) m/z: 874,5 (MNa<+>), 426,9 (M,2H<+>/2); 12,48 min (96 %, 210 nm).
[0305]<1>H NMR: (300MHz, CD3OD, ppm): δ (prisustvo rotamera) 8,1 - 8,6 (m, 0,9H, NHCO nekompletna izmena); 7,29 - 7,27 (m, 2H), 7,25 - 6,86 (m, 5H), 6,84 - 6,83 (m, 2H), 4,83 -4,72 (m, 3H), 4,26 - 0,82 (m, 58H).
Primer 61
(S)-2-((S)-2-((4-aminofenetil)(metil)amino)-3-metilbutanamido)-N-((3R,4S,5S)-3-metoksi-1-((S)-2-((lR,2R)-1-metoksi-2-metil-3-okso-3-(((S)-2-fenil-1-(tiazol-2-il)etil)amino)propil)pirolidin-1-il)-5-metil-1-oksoheptan-4-il)-N,3-dimetilbutanamid
[0306]
Primer 61A: N-(4-aminofenetil)-N-metil-L-valin dihidrohlorid
[0307]
Jedinjenje 11D (962 mg, 2,75 mmol) je rastvoreno u 10 ml komercijalno dostupnog rastvora HCl u propan-2-olu (5 - 6 M), i mešano na sobnoj temperaturi 2 sata. TLC analiza je ukazala na potpuni utrošak početnog materijala. Rastvarač je uparen pod sniženim pritiskom i dobijena žuta čvrsta supstanca je triturisana pomoću Et2O (2 x 10 ml). Proizvod je osušen na vakuumu da bi dao jedinjenje 61A u vidu žute čvrste supstance (322 mg, 47 %).
[0308] Primer 61: Karboksilna kiselina 61A (73 mg, 0,23 mmol, 1 eq.) i amin 1Y (150 mg, 0,23 mmol, 1 eq.) su rastvoreni u suvom DMF (2 ml). Dodati su DIEA (158 ml, 0,90 mmol, 4 eq.) i DECP (51 ml, 0,34 mmol, 1,5 eq.) i reakcija je mešana 4 sata na sobnoj temperaturi. Analiza pomoću LC-MS je pokazala potpun utrošak početnog materijala. Rastvarač je uparen pod sniženim pritiskom i ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu (DCM/MeOH) da bi dao jedinjenje 61 u vidu svetložute čvrste supstance (83 mg, 40 %).
[0309]<1>H NMR: (500MHz, DMSO-d6, ppm): δ (prisustvo rotamera), 8,86 (d, 0,5H, NHCO); 8,65 (d, 0,5H, NHCO), 8,11-8,05 (m, 1H, NHCO), 7,80 (d, 0,5H, tiazol), 7,78 (d, 0,5H, tiazol), 7,65 (d, 0,5H, tiazol), 7,63 (d, 0,5H, tiazol), 7,32 - 7,12 (m, 5H), 6,83 (d, J=8,3 Hz, 2H), 6,45 (d, J=8,3 Hz, 2H), 5,56 - 5,49 (m, 0,5 H), 5,42 - 5,35 (m, 0,5H), 4,78 (s, 2H, NH2), 4,74 - 4,46 (m, 2H), 4,01 - 0,66 (m, 57H).
[0310] HPLC (Xbridge Shield C18, 3,5 mm, 4,6 x 50 mm; 3,5 ml/min, 40°C, 0 do 95 % MeCN u vodi (0,1 % TFA) za 2,25 minuta, a zatim 95 % MeCN za 0,5 minuta, Tr = 1,31 min (96,5 %, 220 nm).
[0311] m/z (Q-TOF ESI<+>) 890,5558 (2%, MH<+>, C49H76N7O6S zahteva 890,5572), 445,7834 (100 %, (MH2)<2+>, C49H77N7O6S zahteva 445,7823).
Primer 62
Metil ((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((S)-2-((S)-2-((4-aminofenetil)(metil)amino)-3-metilbutanamido)-N,3-dimetilbutanamido)-3-metoksi-5-metilheptanoil)pirolidin-2-il)-3-metoksi-2-metilpropanoil)-Lfenilalaninat
[0312]
[0313] Primer 62: Jedinjenje 62 je dobijeno na isti način kao jedinjenje 61, upotrebom karboksilne kiseline 61A (69 mg, 0,21 mmol, 1 eq.), amina 3D (135 mg, 0,21 mmol, 1 eq.), DIEA (75 ml, 0,43 mmol, 2 eq.) i DECP (49 ml, 0,32 mmol, 1,5 eq.). Sirov proizvod je prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu (DCM/MeOH) da bi dao jedinjenje 62 u vidu žućkaste čvrste supstance (82 mg, 45 %).
[0314]<1>H NMR: (500MHz, DMSO-d6, ppm): δ (prisustvo rotamera), 8,50 (d, J=8,3, 0,5H, NHCO); 8,27 (d, J=8,0, 0,5H, NHCO), 8,15-8,04 (m, 1H, NHCO), 7,27 - 7,13 (m, 5H), 6,86 -6,79 (m, 2H), 6,48 - 6,42 (m, 2H), 4,78 (s, 2H, NH2), 4,74 - 4,44 (m, 3H), 4,01 - 3,72 (m, 1,5H), 3,66 (s, 1,5H, CO2Me) 3,63 (s, 1,5H, CO2Me) 3,57 - 0,65 (m, 55,5H).
[0315] HPLC (Xbridge Shield C18, 3,5 mm, 4,6 x 50 mm; 3,5 ml/min, 40°C, 0 do 95 % MeCN u vodi (0,1 % TFA) za 2,25 minuta, a zatim 95 % MeCN za 0,5 minuta, Tr = 1,29 min (95,3 %, 220 nm).
[0316] m/z (Q-TOF ESI<+>) 865,5800 (2%, MH<+>, C48H77N6O8zahteva 865,5797), 433,2937 (100 %, (MH2)<2+>, C48H78N6O8zahteva 433,2935).
Primer 63
((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((S)-2-((S)-2-((4-aminofenetil)(metil)amino)-3-metilbutanamido)-N,3-dimetilbutanamido)-3-metoksi-5-metilheptanoil)pirolidin-2-il)-3-metoksi-2-metilpropanoil)-L-fenilalanin 2,2,2-trifluoroacetat
[0317]
[0318] Primer 63: Jedinjenje 62 (23 mg, 0,03 mmol) je rastvoreno u smesi vode (1 ml) i acetonitrila (1 ml). Dodat je piperidin (0,75 ml) i smesa je mešana na sobnoj temperaturi 5 sati. TLC analiza je pokazala potpuni utrošak početnog materijala. Rastvarač je uparen pod sniženim pritiskom i ostatak je prečišćen pomoću preparativne HPLC (SunFire Prep kolona C18 OBD, 5 mm, 19 x 150 mm; Mobilna faza: voda/MeCN puferisan pomoću 0,1 % TFA; gradijent od 20 % do 40 % MeCN za 10 minuta, a zatim od 40 % do 100 % MeCN za 2 minuta; detektor UV Waters 2545 na 254 nm et 220 nm). Jedinjenje 63 je dobijeno u vidu bele čvrste supstance (14 mg, 66 %).
[0319]<1>H NMR: (500MHz, DMSO-d6, ppm): δ (prisustvo rotamera), 12,7 (s(br), 1H, CO2H), 9,58 (m(br), 1H); 9,04 - 8,89 (m, 1H), 8,41 (d, 0,6H, NHCO), 8,15 (d, 0,4H, NHCO), 7,27 -7,13 (m, 5H), 7,13 - 6,99 (m(br), 2H), 6,90 - 6,64 (s(br), 2H), 4,77 - 3,40 (m, 10H), 3,34 -2,75 (m, 20H), 2,34 - 1,94 (m, 4H), 1,90 - 0,7 (m, 25H). HPLC (Xbridge Shield C18, 3,5 mm, 4,6 x 50 mm ; 3,5 ml/min, 40°C, 0 do 95 % MeCN u vodi (0,1 % TFA) za 2,25 minuta, a zatim 95 % MeCN za 0,5 minuta, Tr = 1,24 min (100 %, 220 nm).
[0320] m/z (Q-TOF ESI<+>) 851,5641 (6%, MH<+>, C47H75N6O8zahteva 851,5641), 426,2854 (100 %, (MH2)<2+>, C47H76N6O8zahteva 426,2857).
Primer 64
(S)-2-((S)-2-((4-aminofenetil)(metil)amino)-3-metilbutanamido)-N-((3R,4S,5S)-1-((S)-2-((1R,2R)-3-(((1S,2R)-1-hidroksi-1-fenilpropan-2-il)amino)-1-metoksi-2-metil-3-oksopropil)pirolidin-1-il)-3-metoksi-5-metil-1-oksoheptan-4-il)-N,3-dimetilbutanamid
[0321]
[0322] Jedinjenje 64 je dobijeno na isti način kao jedinjenje 61, upotrebom karboksilne kiseline 61A (93 mg, 0,29 mmol, 1 ekv), amina 2D (174 mg, 0,29 mmol, 1 ekv), DIEA (100 ml, 0,58 mmol, 2 eq.) i DECP (66 ml, 0,43 mmol, 1,5 ekv). Sirov proizvod je prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu (DCM/MeOH) da bi dao jedinjenje 64 u vidu zagasitobele čvrste supstance (51 mg, 21 %).
[0323]<1>H NMR: (500MHz, DMSO-d6, ppm): δ (prisustvo rotamera), 9,61 (m(br), 1H); 9,05 -8,89 (m, 1H), 7,93 (d, 0,6H, NHCO), 7,64 (d, 0,4H, NHCO), 7,36 - 6,98 (m, 7H), 6,92 - 6,70 (m(br), 2H), 5,45 (s(br), 1H), 4,80 - 4,41 (m, 3H), 4,06 - 3,44 (m, 4H), 3,37 - 2,79 (m, 18H), 2,45 - 2,21 (m, 3H), 2,17 - 0,70 (m, 35H).
[0324] HPLC (Xbridge Shield C18, 3,5 mm, 4,6 x 50 mm ; 3,5 ml/min, 40°C, 0 do 95 % MeCN u vodi (0,1 % TFA) za 2,25 minuta, a zatim 95 % MeCN za 0,5 minuta, Tr = 1,20 min (100 %, 220 nm).
[0325] m/z (Q-TOF ESI<+>) 837,5826 (33%, MH<+>, C47H77N6O7zahteva 837,5848), 419,2956 (100 %, (MH2)<2+>, C47H76N6O8zahteva 419,2961).
II – Biološka aktivnost jedinjenja iz ovog pronalaska
Metod:
[0326] Ćelijska kultura. A549 (nemikrocelularni karcinom pluća - ATCC CCL-185) i MDA-MB-231 (adenokarcinom dojke - ATCC HTB-26) ćelije su gajene u Minimum Essential Medium Eagle (MEM) sa 5% fetalnim junećim serumom (FCS) i Dulbecco-ovim modifikovanim Eagle Medium (DMEM) sa 10% FCS, respektivno. MCF7 (duktalni karcinom dojke - ATCC HTB-22) i SN-12C (karcinom bubrega - ATCC) ćelije su održavane u RPMI1640 medijumu (bez fenol crvenog za MCF7 ćelije) koji sadrži 10% FCS. Svi medijumi su obogaćeni fungizonom (1,25 mg/mL) i penicilin-streptomicinom (100 U / 100 mg/mL). Ćelije su gajene u standardnim uslovima u inkubatoru na 37°C, 5% CO2i 95% atmosferskoj vlažnosti.
[0327] Antiproliferativna aktivnost u 4 tumorske ćelijske linije. Ispitivana je antiproliferativna aktivnost jedinjenja prema pronalasku pomoću ATPlite eseja za proliferaciju (Perkin Elmer, Villebon sur Yvette, France) na obuhvatnom panelu sa 4 ćelijske linije. Ćelije su zasejne u ploče sa 96 ležišta (10<3>ćelija/ležište za A549, 2x103 za MCF7, MDA-MB-231 i SN12C) nultog dana u koncentraciji koja osigurava da ćelije ostanu u logaritamskoj fazi rasta tokom celog perioda tretiranja lekom od 72 h. Posle inkubacionog perioda od 24h, sve ćelije su tretirane serijskim razblaženjima testiranih jedinjenja (11mL 10X rastvora u 1% DMSO - 6 ležišta/ uslov). Da bi se izbeglo lepljenje jedinjenja na nastavke, nastavci su menjani između svaka dva uzastopna razblaženja. Ćelije su zatim stavljene u inkubator na 37°C sa 5% CO2. Četvrtog dan 4, procenjivana je vijabilnost ćelija doziranjem ATP oslobođenog od strane vijabilnih ćelija. Broj vijabilnih ćelija je analiziran u poređenju sa brojem ćelija tretiranih rastvaračem. EC50vrednosti su određivane analizom fitovanja krive (model nelinearne regresije sa sigmoidnim odgovorom na dozu, varijabilnim koeficijentom nagiba), izvedenom pomoću algoritma od GraphPad Software (GraphPad Software Inc., CA, USA).
Rezultati:
Različita jedinjenja:
[0328] Različita jedinjenja prema pronalasku su testirana da bi se odredila njihovo antiproliferativno dejstvo na MDA-MB-231 ćelijsku liniju, sledeći gore opisani metod. Merene aktivnosti su pokazale vrednosti od EC50< 0,1 mM.
[0329] Nekoliko sledećih primera, odabranih među jedinjenjima prema pronalasku ilustruju njihova potpuno izvanredna antiproliferativna svojstva:
Primer 12: EC50= 5,80x10-10 M; Primer 13: EC -8
50= 7,95x10 M; Primer 15: EC50= 1,70x10<-10>M; Primer 27: EC 0
50= 1,20x10-1 M.
Različite ćelijske linije:
[0330] Jedinjenje 15 je testirano na različitim ćelijskim linijama (A549, MDA-MB-231, MCF-7, SN12C) sledeći gore opisani metod. Merene aktivnosti su pokazale vrednosti od EC50< 0,1mM.
Komparativni primeri:
[0331] Supstitucija na fenilnom prstenu (amino/hidroksil v. karboksil) je proučavana u komparativnim primerima niže i pokazala je poboljšanu antiproliferativnu aktivnost lekova prema pronalasku koji sadrže amino ili hidroksil supstituent, za razliku od leka poznatog od ranije koji sadrži karboksil supstituent (WO 2012/041805 i WO 2012/123423).

Claims (16)

  1. PATENTNI ZAHTEVI 1. Jedinjenje sledeće formule (I):
    gde: - je R1= OH, a R2= metil, ili je R1= H, a R2= COOH, COOMe ili tiazol-2-il, - R3je (C1-C6)alkil grupa, a - R4je fenil-(C1-C2)alkil grupa supstituisana jednom grupom odabranom od OH i NR9R10grupa, gde R9i R10, svaki nezavisno od onog drugog, može da predstavlja H ili (C1-C6)alkil grupu, gde je fenil-(C1-C2)alkil grupa vezana za ostatak molekula preko svoje (C1-C2)alkil grupe, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, hidrat ili solvat.
  2. 2. Jedinjenje prema zahtevu 1, naznačeno time što R1predstavlja H, a R2predstavlja COOH ili COOMe.
  3. 3. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1 i 2, koje se odlikuje time što R3predstavlja metil grupu.
  4. 4. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1 do 3, naznačeno time što R4predstavlja fenil-(C1-C2)alkil grupu supstituisanu jednom grupom na fenil grupi odabranom od OH i NR9R10.
  5. 5. Jedinjenje prema zahtevu 4, naznačeno time što R4predstavlja fenil-(C1-C2)alkil grupu supstituisanu jednom NR9R10grupom na fenil grupi.
  6. 6. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1 to 3, naznačeno time što R4ima sledeću formulu:
    gde X0predstavlja OH ili NR9R10, a m je 1 ili 2.
  7. 7. Jedinjenje prema zahtevu 6, naznačeno time što je X0NR9R10.
  8. 8. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1 to 3, naznačeno time što R4ima sledeću formulu:
    gde X0predstavlja NR9R10, a m predstavlja 1 ili 2.
  9. 9. Jedinjenje prema zahtevu 1, odabrano među:
    i njegove farmaceutski prihvatljive soli, kao što su soli obrazovane sa trifluorosirćetnom kiselinom.
  10. 10. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1 do 9 za upotrebu kao medicinski proizvod.
  11. 11. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1 do 9 za upotrebu kao medicinski proizvod namenjen za lečenje kancera ili benignih proliferativnih poremećaja.
  12. 12. Farmaceutski sastav koji obuhvata jedinjenje formule (I) prema bilo kom od zahteva 1 do 9 i bar jedan farmaceutski prihvatljiv ekscipijent.
  13. 13. Farmaceutski sastav prema zahtevu 12, koji obuhvata još jedan aktivan sastojak, poželjno odabran među antikanceroznim agensima, naročito koji obuhvata citotoksičan antikancerozni agens kao što je navelbin, vinflunin, taksol, taksotera, 5-fluorouracil, metotreksat, doksorabicin, kamptotecin, gemcitabin, etopozid, cis-platina ili karmustin; i hormonske antikancerozne agense kao što je tamoksifen ili medroksiprogesteron.
  14. 14. Metod za dobijanje jedinjenja formule (I) prema bilo kom od zahteva 1 do 9 koji obuhvata reakciju kondenzacije između jedinjenja sledeće formule (VI):
    gde su R1i R2kao što su definisani u zahtevu 1 i jedinjenje sledeće formule (VII):
    gde je R3kao što je definisano u zahtevu 1, R4apredstavlja R4grupu kao što je definisana u zahtevu 1, opciono u zaštićenoj formi, a X je OH ili Cl.
  15. 15. Metod za dobijanje jedinjenja formule (I) prema bilo kom od zahteva 1 do 9 koji obuhvata reakciju supstitucije između jedinjenja sledeće formule (VIII):
    gde su R1, R2i R3kao što su definisani u zahtevu 1 i jedinjenja sledeće formule (X): R4a-Y (X) gde R4apredstavlja R4grupu kao što je definisana u zahtevu 1, opciono u zaštićenoj formi, a Y je odlazeća grupa kao što je Cl, Br, I, OSO2CH3, OSO2CF3ili O-tosil.
  16. 16. Metod za dobijanje jedinjenja formule (I) prema bilo kom od zahteva 1 do 9, gde R4predstavlja -CH2R4bgrupu gde R4bpredstavlja fenil ili fenil-metil grupu supstituisanu jednom grupom odabranom od OH i NR9R10grupe, koji obuhvata reakciju reduktivne aminacije između jedinjenja sledeće formule (VIII):
    gde su R1, R2i R3kao što su definisani u zahtevu 1 i jedinjenja sledeće formule (XI): R4b-CHO (XI) gde je R4bkao što je prethodno definisano. Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Beograd, Kneginje Ljubice 5
RS20171344A 2013-04-25 2014-04-25 Derivati dolastatina 10 i auristatina RS56717B1 (sr)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR1353793A FR3005051A1 (fr) 2013-04-25 2013-04-25 Derives de la dolastatine 10 et d'auristatines
EP14720946.4A EP2989088B1 (en) 2013-04-25 2014-04-25 Derivatives of dolastatin 10 and auristatins
PCT/EP2014/058427 WO2014174064A1 (en) 2013-04-25 2014-04-25 Derivatives of dolastatin 10 and auristatins

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS56717B1 true RS56717B1 (sr) 2018-03-30

Family

ID=48782433

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20171344A RS56717B1 (sr) 2013-04-25 2014-04-25 Derivati dolastatina 10 i auristatina
RS20181410A RS58161B1 (sr) 2013-04-25 2014-04-25 Derivati dolastatina 10 i auristatina

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20181410A RS58161B1 (sr) 2013-04-25 2014-04-25 Derivati dolastatina 10 i auristatina

Country Status (32)

Country Link
US (7) US20160068566A1 (sr)
EP (4) EP2989086B1 (sr)
JP (3) JP6017728B2 (sr)
KR (4) KR102368136B1 (sr)
CN (3) CN105143199A (sr)
AU (3) AU2014259431B2 (sr)
BR (3) BR112015026565A2 (sr)
CA (4) CA2910176C (sr)
CY (2) CY1119677T1 (sr)
DK (3) DK2989086T3 (sr)
ES (3) ES2654364T3 (sr)
FR (1) FR3005051A1 (sr)
HK (1) HK1215580A1 (sr)
HR (2) HRP20181890T1 (sr)
HU (3) HUE035180T2 (sr)
IL (1) IL242184A (sr)
LT (2) LT2989086T (sr)
MA (1) MA38583B1 (sr)
MX (3) MX2015014831A (sr)
MY (1) MY177702A (sr)
NO (1) NO2989088T3 (sr)
NZ (1) NZ714203A (sr)
PL (3) PL2989088T3 (sr)
PT (2) PT2989086T (sr)
RS (2) RS56717B1 (sr)
RU (3) RU2015147447A (sr)
SA (1) SA515370043B1 (sr)
SI (2) SI2989088T1 (sr)
TN (2) TN2015000445A1 (sr)
UA (1) UA115806C2 (sr)
WO (3) WO2014174062A1 (sr)
ZA (1) ZA201508545B (sr)

Families Citing this family (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR3005051A1 (fr) * 2013-04-25 2014-10-31 Pf Medicament Derives de la dolastatine 10 et d'auristatines
MX378281B (es) * 2014-04-25 2025-03-10 Pf Medicament Conjugado farmaco-anticuerpo y su uso para el tratamiento contra el cancer.
MA39909B1 (fr) 2014-04-25 2019-05-31 Pf Medicament Conjugué anticorps de l'igf-1r-médicament et son utilisation pour le traitement du cancer
US10973920B2 (en) 2014-06-30 2021-04-13 Glykos Finland Oy Saccharide derivative of a toxic payload and antibody conjugates thereof
US11384104B2 (en) 2015-06-19 2022-07-12 Centurion Biopharma Corporation Delivery systems for controlled drug release
JP2019510000A (ja) * 2016-02-26 2019-04-11 ジエンス ヘンルイ メデイシンカンパニー リミテッドＪｉａｎｇｓｕ Ｈｅｎｇｒｕｉ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｃｏ．，Ｌｔｄ． 新規トキシン及びその中間体の製造方法
ES2948846T3 (es) * 2016-03-29 2023-09-20 Toray Industries Derivado peptídico y uso del mismo
CN105968038A (zh) * 2016-05-09 2016-09-28 湖北华世通生物医药科技有限公司 二肽类化合物的盐酸盐及其制备方法
CN106432318A (zh) * 2016-08-18 2017-02-22 重庆大学 一种芳炔前体的设计，合成，及在合成多取代芳烃的应用
CN107325033A (zh) * 2017-06-23 2017-11-07 华东师范大学 一种高立体选择性合成海兔毒素Dap片段的方法
BR112020009836A2 (pt) * 2017-11-30 2020-10-13 Centurion Biopharma Corporation pró-drogas de ligação a albumina de derivados de auristatina e
CN113453724B (zh) 2018-09-27 2025-02-25 皮埃尔法布雷医药公司 基于磺酰基马来酰亚胺的连接子和相应的偶联物
CN110724337B (zh) * 2019-10-16 2022-04-05 江苏德威新材料股份有限公司 一种硅烷交联型阻燃半导电聚烯烃护套材料及其制备方法和应用
CA3230737A1 (en) 2021-09-03 2023-03-09 Toray Industries, Inc. Pharmaceutical composition for cancer treatment and/or prevention
KR20250143351A (ko) 2023-04-12 2025-10-01 레메젠 코, 리미티드 모노메틸 아우리스타틴 e 화합물의 제조 및 정제 방법
WO2024230625A1 (zh) * 2023-05-06 2024-11-14 荣昌生物制药(烟台)股份有限公司 一种奥瑞他汀衍生物中间体的制备方法
CN121241045A (zh) * 2023-06-02 2025-12-30 荣昌生物制药(烟台)股份有限公司 一种甲基奥瑞他汀e化合物中间体的制备及纯化方法
CN118165066B (zh) * 2024-02-26 2025-03-21 复旦大学 一种含氟多肽及其制备方法和应用

Family Cites Families (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP0731106B1 (en) * 1993-10-01 2004-11-17 Teikoku Hormone Mfg. Co., Ltd. Dolastatin derivatives
US6884869B2 (en) * 2001-04-30 2005-04-26 Seattle Genetics, Inc. Pentapeptide compounds and uses related thereto
ES2708763T3 (es) * 2005-07-07 2019-04-11 Seattle Genetics Inc Compuestos de monometilvalina que tienen modificaciones de la cadena lateral de fenilalanina en el extremo C
ES2588194T3 (es) * 2008-04-11 2016-10-31 Seattle Genetics, Inc. Detección y tratamiento de cáncer pancreático, de ovario y otros cánceres
WO2010111018A1 (en) * 2009-03-06 2010-09-30 Agensys, Inc. Antibody drug conjugates (adc) that bind to 24p4c12 proteins
CN103200950B (zh) * 2010-06-10 2016-03-16 西雅图基因公司 新颖的耳他汀衍生物及其用途
US8987209B2 (en) * 2010-09-29 2015-03-24 Seattle Genetics, Inc. N-carboxyalkyl-auristatin and the use thereof
CA2813411C (en) * 2010-11-05 2016-08-02 Rinat Neuroscience Corporation Engineered polypeptide conjugates and methods for making thereof using transglutaminase
ES2543888T3 (es) * 2011-03-16 2015-08-25 Seattle Genetics, Inc. N-carboxialquil-auristatinas y su utilización
SG194567A1 (en) * 2011-04-21 2013-12-30 Seattle Genetics Inc Novel binder-drug conjugates (adcs) and their use
DK2714685T3 (en) * 2011-05-27 2017-01-09 Ambrx Inc FORMATIONS CONTAINING, METHODS INVOLVING, AND USES OF NON-NATURAL AMINO ACID BOUND dolastatin
KR20200128601A (ko) * 2011-05-27 2020-11-13 암브룩스, 인코포레이티드 비-천연 아미노산 연결된 돌라스타틴 유도체를 함유하는 조성물, 이를 수반하는 방법, 및 용도
EP3536700A1 (en) * 2012-06-07 2019-09-11 Ambrx, Inc. Prostate-specific membrane antigen antibody drug conjugates
CN111499684B (zh) * 2012-06-19 2024-10-22 Ambrx公司 抗cd70抗体药物结合物
US20150314007A1 (en) * 2012-12-21 2015-11-05 Glykos Finland Oy Linker-payload molecule conjugates
FR3005051A1 (fr) * 2013-04-25 2014-10-31 Pf Medicament Derives de la dolastatine 10 et d'auristatines
MX378281B (es) * 2014-04-25 2025-03-10 Pf Medicament Conjugado farmaco-anticuerpo y su uso para el tratamiento contra el cancer.

Also Published As

Publication number Publication date
WO2014174062A1 (en) 2014-10-30
HK1215867A1 (zh) 2016-09-23
BR112015026478A2 (pt) 2017-07-25
PL3388427T3 (pl) 2022-05-09
CA2910178A1 (en) 2014-10-30
AU2014259431A1 (en) 2015-12-03
CN105143199A (zh) 2015-12-09
MX345126B (es) 2017-01-17
ES2654364T3 (es) 2018-02-13
AU2014259427A1 (en) 2015-11-19
AU2014259431B2 (en) 2017-02-02
EP3388427A1 (en) 2018-10-17
US20230002316A1 (en) 2023-01-05
MA38583A1 (fr) 2018-07-31
EP2989086B1 (en) 2018-08-22
ZA201508545B (en) 2017-07-26
TN2015000439A1 (en) 2017-01-03
DK3388427T3 (da) 2022-03-07
UA115806C2 (uk) 2017-12-26
US20210107868A1 (en) 2021-04-15
CN105377834A (zh) 2016-03-02
JP2016520041A (ja) 2016-07-11
AU2014259427B2 (en) 2018-04-05
NO2989088T3 (sr) 2018-02-24
MY177702A (en) 2020-09-23
HUE058167T2 (hu) 2022-07-28
LT2989086T (lt) 2018-11-26
DK2989088T3 (en) 2017-12-18
HK1215580A1 (zh) 2016-09-02
HRP20171977T1 (hr) 2018-02-09
PT2989088T (pt) 2018-01-03
ES2908224T3 (es) 2022-04-28
CA2910176C (en) 2021-11-09
HUE035180T2 (hu) 2018-05-02
RU2015147447A (ru) 2017-05-31
BR112015026410A2 (pt) 2017-07-25
MX372911B (es) 2020-04-27
KR20210046871A (ko) 2021-04-28
KR20160003735A (ko) 2016-01-11
RS58161B1 (sr) 2019-03-29
WO2014174060A1 (en) 2014-10-30
SI2989088T1 (en) 2018-02-28
RU2662951C2 (ru) 2018-07-31
MX2015014746A (es) 2016-03-04
CA3130994A1 (en) 2014-10-30
DK2989086T3 (en) 2018-11-12
KR102389167B1 (ko) 2022-04-20
PL2989086T3 (pl) 2019-02-28
JP6017728B2 (ja) 2016-11-02
CY1120863T1 (el) 2019-12-11
US20160068567A1 (en) 2016-03-10
US20200010414A1 (en) 2020-01-09
CN105377834B (zh) 2018-04-20
EP2989088A1 (en) 2016-03-02
US20160083420A1 (en) 2016-03-24
SA515370043B1 (ar) 2018-01-24
MX2015014941A (es) 2016-03-07
FR3005051A1 (fr) 2014-10-31
PL2989088T3 (pl) 2018-03-30
CY1119677T1 (el) 2018-04-04
EP3388427B1 (en) 2022-01-19
WO2014174064A1 (en) 2014-10-30
KR102368136B1 (ko) 2022-02-25
CN105408318A (zh) 2016-03-16
JP6606489B2 (ja) 2019-11-13
JP2016519114A (ja) 2016-06-30
PT2989086T (pt) 2018-11-29
EP2989086A1 (en) 2016-03-02
HRP20181890T1 (hr) 2019-01-11
KR20160003734A (ko) 2016-01-11
MX2015014831A (es) 2016-08-03
BR112015026565A2 (pt) 2017-07-25
RU2015146957A (ru) 2017-05-31
EP2989088B1 (en) 2017-09-27
TN2015000445A1 (en) 2017-04-06
SI2989086T1 (sl) 2018-12-31
CA2910176A1 (en) 2014-10-30
IL242184A (en) 2017-09-28
LT2989088T (lt) 2018-01-10
EP2989087A1 (en) 2016-03-02
ES2693368T3 (es) 2018-12-11
AU2014259429A1 (en) 2015-11-12
KR101640361B1 (ko) 2016-07-15
RU2015149527A (ru) 2017-05-29
CA2909126A1 (en) 2014-10-30
US20180222858A1 (en) 2018-08-09
US20160068566A1 (en) 2016-03-10
NZ714203A (en) 2020-05-29
KR20160003003A (ko) 2016-01-08
JP2016519115A (ja) 2016-06-30
HUE040431T2 (hu) 2019-03-28
MA38583B1 (fr) 2018-11-30
BR112015026410B1 (pt) 2022-06-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DK2989088T3 (en) DERIVATIVES OF DOLASTATIN 10 AND AURISTATINES
OA17576A (en) Derivatives of dolastatin 10 and auristatins.
HK1215867B (en) Derivatives of dolastatin 10 and auristatins
OA17575A (en) Derivatives of dolastatin 10 and auristatins.