ES2654364T3 - Derivados de dolastatina 10 y auristatinas - Google Patents

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Abstract

Compuesto de la fórmula (I) siguiente: **(Ver fórmula)** en la que: - R1 >= OH y R2 >= metilo, o - R1 >= H y R2 >= COOH, COOMe o tiazol-2-ilo, - R3 es un grupo alquilo (C1-C6), y - R4 es un grupo fenil-alquilo (C1-C2) sustituido por un grupo seleccionado de entre grupos OH y NR9R10 con R9 y R10 cada uno independientemente entre sí representando H o un grupo alquilo (C1-C6), en el que el grupo fenil-alquilo (C1-C2) está unido al resto de la mólecula mediante su fracción alquilo (C1-C2), o una sal, hidrato o solvato farmacéuticamente aceptables del mismo.

Description

imagen1
DESCRIPCIÓN
Derivados de dolastatina 10 y auristatinas.
5 El objeto de la presente invención se refiere a nuevos derivados de dolastatina 10 y auristatinas, a sus métodos de producción, a composiciones farmacéuticas que los contienen y a la utilización de los mismos como especialidad farmacéutica, en particular en el tratamiento del cáncer.
La dolastatina 10 (D10) es un derivado peptídico citotóxico aislado de un molusco marino (Dolabella auricularia)
10 cuya configuración absoluta se determinó y se confirmó posteriormente después de la síntesis total del producto (Pettit G. R. J. Am. Chem. Soc. 1987, 109, 6883; Pettit G. R. J. Am. Chem. Soc. 1987, 109, 7581; Pettit, G. R. Heterocycles 1989, 28, 553; Pettit, G. R. J. Am. Chem. Soc. 1989, 111, 5015; Pettit, G. R. J. Am. Chem. Soc. 1991, 113, 6692). La D10 está formada por 5 unidades llamadas dolavalina (Dov), valina (Val), dolaisoleucina (Dil), Dolaproína (Dap) y dolafenina (Doe). Un cierto número de análogos de este compuesto han sido
15 sintetizados mediante la modificación de la naturaleza de sus aminoácidos componentes (Pettit G. R. J. Med. Chem. 1990, 33, 3133; Miyazaki K. Peptide Chemistry 1993, 31, 85; Miyazaki K. Chem. Pham. Bull. 1995, 43, 1706). Las modificaciones de la parte C-terminal (extremo derecho) también se han realizado y han dado lugar a numerosos derivados, que incluyen auristatina E o F (Pettit G. R. Anticancer Drug Design, 1998, 13, 243; Pettit
G. R. Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 1998, 2961). 20
imagen2
Dolastatina 10
imagen3
Auristatina E
imagen4
Auristatina F
30 La presente invención se ha centrado en la modificación de la parte N-terminal (extremo izquierdo) de los derivados de dolastatina 10 y auristatinas E y F. Los pocos ejemplos publicados en la literatura sobre las modificaciones realizadas en esta posición han dado lugar a pérdidas de la actividad (Miyazaki K. Chem. Pham. Bull. 1995, 43, 1706) o son menos activas que los compuestos de la presente invención (ver los documentos WO 2012/041805 y WO 2012/123423 que divulgan unos derivados con un sustituyente carboxilo en lugar de un sustituyente hidroxilo o amino como en la presente invención). Los compuestos descritos en la presente
imagen5
5 invención difieren de la técnica anterior a través de sus estructuras químicas originales y también a través de su propiedad biológica notable que es totalmente inesperada, considerando los elementos publicados en la literatura. Estas actividades notables resultan en la elaboración de estos compuestos adecuados para la utilización en el tratamiento del cáncer.
10 Además, estos compuestos tienen la ventaja de ser tanto activos como agentes citotóxicos y más solubles que los compuestos parentales.
Por lo tanto, el objeto de la presente invención es un compuesto de la siguiente fórmula (I):
imagen6
en la que:
20 -R1 = OH y R2 = metilo, o
-R1 = H y R2 = COOH, COOMe o tiazol-2-ilo,
-R3 es un grupo alquilo (C1-C6), y 25
-R4 es un grupo aril-alquilo (C1-C2) sustituido por un grupo (preferentemente en la parte arilo) seleccionado de entre grupos OH y NR9R10 con R9 y R10 cada uno independientemente entre sí representando H o un grupo alquilo (C1-C6) (tal como metilo), en el que el grupo aril-alquilo (C1-C2) es un grupo fenil-alquilo (C1-C2) unido al resto de la mólecula mediante su fracción alquilo (C1-C2), o una sal, hidrato o solvato
30 farmacéuticamente aceptables del mismo.
Los radicales R2 a R4, y en particular R4, pueden ser grupos quirales y pueden estar en la forma de sus diferentes estereoisómeros y, opcionalmente, en la forma de una mezcla de estereoisómeros.
35 Por «estereoisómero», en el contexto de la presente invención, se hace referencia a un isómero geométrico o un isómero óptico.
Los isómeros geométricos son resultado de la diferente posición de los sustituyentes en un enlace doble que, por lo tanto, puede presentar una configuración Z o E.
40 Los isómeros ópticos son resultado, en particular, de la diferente posición en el espacio de los sustituyentes en un átomo de carbono que comprende 4 sustituyentes diferentes. Este átomo de carbono forma entonces un centro quiral o asimétrico. Los isómeros ópticos comprenden diastereoisómeros y enantiómeros. Los isómeros ópticos que son imágenes en espejo, pero que no se pueden superponer son llamados «enantiómeros». Los
45 isómeros ópticos que no son imágenes en espejo que se pueden superponer son llamados «diastereoisómeros».
Una mezcla que contiene cantidades iguales de dos formas enantioméricas individuales de quiralidad opuesta se denomina una «mezcla racémica».
50 En la presente invención por «farmacéuticamente aceptable» se hace referencia al que se puede utilizar en la preparación de una composición farmacéutica que es generalmente, segura, no tóxica y ni biológicamente ni de otro modo indeseable, y que es aceptable para uso veterinario así como para la utilización farmacéutica en
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humanos.
Mediante «sal, hidrato o solvato farmacéuticamente aceptable» de un compuesto se hace referencia a una sal, hidrato o solvato que es farmacéuticamente aceptable, como se define en la presente memoria y que tiene la 5 actividad farmacológica deseada del compuesto parental.
Las sales farmacéuticamente aceptables comprenden en particular:
(1) las sales de adición de un ácido farmacéuticamente aceptable formado por ácidos inorgánicos farmacéuticamente aceptables tales como ácido clorhídrico, bromhídrico, fosfórico, sulfúrico y ácidos similares; o formadas con ácidos orgánicos farmacéuticamente aceptables tales como ácido acético, trifluoroacético, propiónico, succínico, fumárico, málico, tartárico, cítrico, ascórbico, maleico, glutámico, benzoico, salicílico, toluensulfónico, metansulfónico, esteárico, láctico y ácidos similares; y
15 (2) las sales de adición de una base farmacéuticamente aceptable formadas cuando un protón ácido presente en el compuesto parenteral, se reemplaza ya sea por un ion metálico, por ejemplo, un ion de metal alcalino, un ion de metal alcalino-térreo o un ion de aluminio; o coordinado con una base orgánica farmacéuticamente aceptable tal como lisina, arginina y similares; o con una base inorgánica farmacéuticamente aceptable tal como hidróxido de sodio, potasa, hidróxido de calcio y similares.
Estas sales se pueden preparar a partir de los compuestos de la invención que contienen una función base o ácido, y los ácidos o bases correspondientes usando métodos químicos convencionales.
Los compuestos de fórmula (I) de la invención están preferentemente en forma de sal, y en particular, una sal de 25 adición ácida farmacéuticamente aceptable.
Preferentemente, los compuestos de fórmula (I) según la presente invención están en la forma de una sal de adición ácida farmacéuticamente aceptable, posiblemente, siendo el ácido trifluoroacético, ácido acético o ácido clorhídrico por ejemplo, y en particular el ácido trifluoroacético.
Los solvatos comprenden los solvatos convencionales obtenidos en la última etapa de preparación de los compuestos de la invención debido a la presencia de disolvente, el disolvente posiblemente siendo etanol por ejemplo.
35 Mediante «alquilo» en la presente invención se hace referencia a una cadena de hidrocarburo, lineal o ramificada, saturada. Por ejemplo, se pueden mencionar los grupos metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, sec-butilo, terc-butilo, pentilo o hexilo.
Mediante «alquilo (Cx-Cy)» en el contexto de la presente invención, se hace referencia a una cadena de alquilo tal como se ha definido anteriormente, que comprende de x a y átomos de carbono. Por lo tanto, un grupo alquilo de (C1-C6) es una cadena de alquilo que presenta de 1 a 6 átomos de carbono.
Mediante «arilo» en el contexto de la presente invención se hace referencia a un grupo hidrocarburo aromático que presenta preferentemente de 6 a 10 átomos de carbono y puede comprender uno o dos anillos fusionados.
45 Por ejemplo, se puede mencionar un fenilo o un naftilo. Ventajosamente es un fenilo.
Mediante «aril-alquilo (C1-C2)» en el contexto de la presente invención se hace referencia a un grupo arilo tal como se ha definido anteriormente unido al resto de la molécula mediante un grupo alquilo tal como se ha definido anteriormente y que comprende 1 o 2 átomos de carbono. La fracción arilo es una fracción fenilo. El grupo alquilo (C1-C2) es ventajosamente un grupo bencilo o fenetilo.
Entre los compuestos de la invención, una clase particularmente apreciada de compuestos corresponde a los compuestos de fórmula (I) en la que R1 es OH y R2 representa un grupo metilo.
55 Otra clase particularmente apreciada de los compuestos corresponde a los compuestos de fórmula (I) en la que R1 es hidrógeno y R2 es un grupo tiazol-2-ilo.
Otra clase de compuestos particularmente apreciados corresponde a los compuestos de fórmula (I) en la que R1 es hidrógeno y R2 es COOMe.
Otra clase de compuestos particularmente apreciados corresponde a los compuestos de fórmula (I) en la que R1 es hidrógeno y R2 es un grupo COOH.
Por lo tanto los compuestos de la invención son ventajosamente compuestos de fórmula (I) en los que: 65 -R1= OH y R2= Me (metilo) o
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-R1 = H y R2 = COOH, COOMe o tiazol-2-ilo. Preferentemente, R1 es H y R2 es COOH o COOMe.
5 Según una primera forma de realización preferida, R1 es H y R2 es COOH. Según una segunda forma de realización preferida, R1 es H y R2 es COOMe. R3 particularmente representa un grupo metilo.
10 R4 representa un grupo aril-alquilo (C1-C2) sustituido por un grupo seleccionado de entre OH y NR9R10, y siendo particularmente NR9R10.
R4 representa ventajosamente un grupo aril-alquilo (C1-C2) sustituido por un grupo en la fracción arilo 15 seleccionado de entre OH y NR9R10, y siendo particularmente NR9R10. El grupo arilo es un grupo fenilo. Por lo tanto R4 representa un fenil-alquilo (C1-C2) sustituido por un grupo (preferentemente en la fracción fenilo) 20 seleccionado de entre OH y NR9R10, y siendo particularmente NR9R10. R4 puede presentar entonces la siguiente fórmula:
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25
en la que X0 representa OH o NR9R10, en particular, NR9R10, y m representa un número entero comprendido entre 1 o 2.
30
Según una forma de realización preferida, R4 presenta la fórmula siguiente:
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con X0 y m como se ha definido previamente, y en particular con X0 = NR9R10 y m = 1 o 2. 35 R4 puede ser en particular seleccionado de entre:
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40 Ventajosamente, el compuesto de fórmula (I) se selecciona de entre los compuestos 11-15, 19-20, 23-24, 27-29, 49-51 Y 61-64 descritos en los ejemplos a continuación.
Un objeto adicional de la presente invención es un compuesto formal (I) tal como se ha definido anteriormente 45 para su utilización como especialidad farmacéutica, en particular para el tratamiento o la prevención del cáncer o trastornos proliferativos benignos.
La presente invención también se refiere a la utilización de un compuesto de fórmula (I) tal como se ha definido anteriormente para la producción de una especialidad farmacéutica, particularmente destinada al tratamiento o a
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la prevención del cáncer o trastornos proliferativos benignos.
El cáncer que se debe tratar o prevenir es más particularmente el cáncer de pulmón, páncreas, piel, cabeza, cuello, útero, ovarios, ano, estómago, colon, mama, esófago, intestino delgado, glándula tiroides, sistema 5 linfático, próstata, riñón, o vejiga, o una leucemia aguda o crónica, o una combinación de dos o más de estos tipos de cáncer.
Por trastornos proliferativos benignos se entienden trastornos proliferativos que no pueden dar lugar a metástasis
o que aún no han progresado hacia un cáncer (tumores precancerosos).
Un objeto adicional de la presente invención es una composición farmacéutica que comprende un compuesto de fórmula (I) tal como se ha definido anteriormente y por lo menos un excipiente farmacéuticamente aceptable.
El principio activo se puede administrar en formas de administración unitarias, en una mezcla con vehículos
15 farmacéuticos convencionales, a los animales o a los seres humanos. Las formas de administración unitarias adecuadas comprenden las formas por vía oral, las formas para administración sublingual o bucal, las formas para administración por vía parenteral (subcutánea, intradérmica, intramuscular o intravenosa), las formas para administración tópica (sobre la piel y mucosa, incluyendo la administración intranasal e intraocular) y las formas de administración rectal.
Dichas composiciones pueden estar en la forma de un sólido, líquido, emulsión, loción o crema.
Como las composiciones sólidas, para administración oral, se pueden utilizar comprimidos, píldoras, polvos (cápsulas de gelatina dura o blanda) o gránulos. En estas composiciones, el principio activo de la invención se
25 mezcla con uno o más diluyentes inertes, tales como almidón, celulosa, sacarosa, lactosa o sílice, en una corriente de argón. Estas composiciones también pueden comprender sustancias distintas de los diluyentes, por ejemplo uno o más lubricantes tales como estearato de magnesio o talco, un agente colorante, un revestimiento (grageas) o un barniz.
Como las composiciones líquidas para administración oral, se pueden utilizar soluciones, suspensiones, emulsiones, jarabes y elixires que son farmacéuticamente aceptables y contienen diluyentes inertes tales como agua, etanol, glicerol, aceites vegetales o aceite de parafina. Estas composiciones pueden comprender sustancias distintas a los diluyentes; por ejemplo productos humectantes, edulcorantes, espesantes, aromatizantes o estabilizantes.
35 Las composiciones estériles para administración parenteral pueden ser preferentemente soluciones acuosas o no acuosas, suspensiones o emulsiones. Como disolvente o vehículo, se puede utilizar agua, propilenglicol, un polietilenglicol, aceites vegetales, en particular aceite de oliva, ésteres orgánicos inyectables, por ejemplo, oleato de etilo u otros disolventes orgánicos adecuados. Estas composiciones también pueden contener adyuvantes, en particular agentes humectantes, isotónicos, emulsionantes, dispersantes y agentes estabilizantes. La esterilización se puede realizar de varias maneras, por ejemplo mediante la filtración para esterilizar, mediante la incorporación de agentes esterilizantes dentro de la composición, mediante la radiación o calentamiento. También se pueden preparar en la forma de composiciones sólidas estériles que pueden disolverse en el momento de la utilización en agua estéril o en cualquier otro medio estéril inyectable.
45 Las composiciones para administración rectal son los supositorios o las cápsulas rectales que, además del principio activo, contienen excipientes tales como manteca de cacao, glicéridos semisintéticos o polietilenglicoles.
Las composiciones para administración tópica pueden ser, por ejemplo, cremas, lociones, colirios, colutorios, gotas nasales o aerosoles.
Las dosis dependen del efecto deseado, de la duración del tratamiento y de la vía de administración utilizada. En general, el médico determinará la dosis adecuada en relación con la edad, el peso y todos los demás factores propios del sujeto que debe ser tratado.
55 Otro principio activo puede estar contenido en las composiciones farmacéuticas según la presente invención. En particular, puede ser un agente anticanceroso, y en particular un agente anticanceroso citotóxico tal como navelbina, vinflunina, taxol, taxotere, 5-fluorouracilo, metotrexato, doxorrubicina, camptotecina, gemcitabina, etopósido, cis-platino o carmustina (también llamada BCNU); o un agente anticanceroso hormonal tal como tamoxifeno o medroxiprogesterona.
El tratamiento con radiación (rayos X o rayos gamma) también se puede asociar con la administración de un compuesto de la presente invención. Dicha radiación se puede administrar utilizando una fuente externa o mediante la implantación de fuentes radiactivas internas por minuto.
65 La presente invención también se refiere a la preparación de los compuestos de fórmula (I) según la invención utilizando los métodos generales descritos en los siguientes esquemas de síntesis, opcionalmente suplementados por cualquier operación estándar cuando sea necesario como se describe en la bibliografía o como es bien conocido por los expertos en la materia, o como se describe en los ejemplos en la parte experimental de la presente memoria.
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El esquema 1 ilustra el primer método general que se puede utilizar para preparar los compuestos de fórmula (I). En las fórmulas generales anteriores, R1, R2, y R3 son tal como se ha definido anteriormente, R4a representa un 10 grupo R4 tal como se ha definido anteriormente, opcionalmente en forma protegida y G es un grupo protector.
La primera etapa consiste en la condensación del compuesto (II), protegido en su función amina por un grupo protector G, con el compuesto (III). X puede representar un grupo saliente tal como un átomo de cloro. En este caso, la primera etapa consiste en la reacción entre un cloruro ácido y una amina. Esta reacción puede llevarse a 15 cabo usando métodos y técnicas bien conocidas por los expertos en la materia. En un método particularmente apreciado, las dos entidades se hacen reaccionar en la presencia de una base orgánica o inorgánica, por ejemplo Et3N, iPr2NEt, piridina, NaH, Cs2CO3, K2CO3 en un disolvente tal como THF, diclorometano, DMF, DMSO, a una temperatura en particular entre -20°C y 100°C. X también puede ser un hidroxilo (OH). En este caso, la primera etapa es una reacción de condensación entre el ácido carboxílico (II) y la amina (III). Esta 20 reacción se puede llevar a cabo siguiendo los métodos y técnicas bien conocidas por el experto en la materia en la materia. En un método particularmente apreciado, estas dos entidades se hacen reaccionar en presencia de un agente de acoplamiento tal como 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etil-carbodiimida (EDC), 3-hidroxi-1,2,3benzotriazin-4(3H)-ona, una amina terciaria tal como diisopropiletilamina, en un disolvente aprótico polar tal como diclorometano o DMF, a una temperatura en particular entre -15°C y 40°C. En otro método particularmente 25 apreciado, estas dos entidades se hacen reaccionar en presencia de fosforocianidato de dietilo (DEPC), una amina terciaria tal como trietilamina, en un disolvente aprótico polar tal como diclorometano o DMF, a una temperatura entre -15°C y 40°C. Otro método particularmente apreciado consiste en hacer que estas dos entidades reaccionen en presencia de O-(7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil-uroniumhexafluorofosfato (HATU), una amina terciaria tal como diisopropiletilamina, en un disolvente aprótico polar tal como diclorometano
30 o DMF, a una temperatura de entre -15°C y 100°C.
Después de la desprotección del producto intermedio utilizando las técnicas bien conocidas por el experto en la materia («Protective Groups in Organic Synthesis», T.W. Greene, John Wiley & Sons, 2006 y «Protecting Groups», P.J. Kocienski, Thieme Verlag, 1994), el compuesto (IV) se puede condensar con el compuesto (V) 35 siguiendo los métodos y técnicas descritos anteriormente para producir el compuesto (VI) después de una etapa de desprotección. Posteriormente, este compuesto puede, después de la condensación con el producto intermedio (VII) y la desprotección opcional, llevar a la formación de los compuestos de fórmula (I). El compuesto
(VI) también se puede acoplar con un compuesto (VII’) en el que R'3 es un precursor de R3, en particular un
grupo R3 protegido por un grupo protector. El acoplamiento seguido por la desprotección del grupo R'3 para 40 conducir a R3 puede llevarse a cabo siguiendo los mismos procedimientos como se describieron anteriormente.
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El esquema 2 ilustra el segundo método general que se puede utilizar para preparar los compuestos de fórmula (I). En las fórmulas generales anteriores R1, R2, y R3 son tal como se definieron anteriormente, R4a representa un 5 grupo R4 tal como se ha definido anteriormente, opcionalmente en forma protegida, R4b es un precursor de un grupo R4 y G es un grupo protector.
En la primera etapa, el compuesto (IX) protegido en su función amina por un grupo protector G se condensa con el compuesto (VI). X puede representar un grupo residual, por ejemplo, un átomo de cloro. En este caso, la
10 primera etapa consiste en la reacción entre un cloruro ácido y una amina. Esta reacción se puede realizar utilizando métodos y técnicas bien conocidas por el experto en la materia. En un método particularmente apreciado las dos entidades se hacen reaccionar en presencia de una base orgánica o inorgánica tal como Et3N, iPr2NEt, piridina, NaH, Cs2CO3, K2CO3 en un disolvente tal como THF, diclorometano, DMF, DMSO a una temperatura en particular entre -20° y 100°C. X también puede representar un grupo hidroxilo. En este caso, la
15 primera etapa es una reacción de condensación entre el ácido carboxílico (IX) y la amina (VI). Esta reacción puede llevarse a cabo siguiendo los métodos y técnicas bien conocidos por un experto en la materia. En un método particularmente apreciado, las dos entidades se hacen reaccionar en presencia de 1-(3dimetilaminopropil)-3-etil-carbodiimida (EDC), 3-hidroxi-1,2,3-benzotriazin-4(3H)-ona, una amina terciaria tal como diisopropiletilamina, en un disolvente aprótico polar tal como diclorometano o DMF, a una temperatura en
20 particular entre -15°C y 40°C. En otro método particularmente apreciado, estas dos entidades se hacen reaccionar en presencia de fosforocianidato de dietilo (DEPC), una amina terciaria tal como trietilamina, en un disolvente aprótico polar tal como diclorometano o DMF, a una temperatura en particular entre -15°C y 40°C.
Después de la desprotección del producto intermedio, usando técnicas bien conocidas por un experto en la
25 materia, el compuesto obtenido (VIII) puede conducir a los compuestos de fórmula (I) después de la reacción con R4Y. En este caso, Y es un grupo saliente tal como Cl, Br, I, OSO2CH3, OSO2CF3 u O-Tosilo. La reacción se lleva a cabo en presencia de una base orgánica o inorgánica tal como Et3N, iPr2NEt, NaH, Cs2CO3, K2CO3, en un disolvente anhidro polar tal como diclorometano, THF, DMF, DMSO a una temperatura en particular entre -20° y 100°C. En otro método particularmente apreciado, el compuesto (VIII) se hace reaccionar con un aldehído de
30 fórmula R4b-CHO en la que R4b corresponde a un precursor de R4. En este caso, la reacción es una aminación reductiva en presencia de un agente reductor tal como NaBH4, NaBH3CN, NaBH(OAc)3, en un disolvente polar tal como 1,2-dicloroetano, diclorometano, THF, DMF, MeOH, en la presencia opcional de isopropóxido de titanio (IV), a un pH que puede ser controlado por la adición de un ácido tal como ácido acético a una temperatura en particular entre -20°C y 100°C.
35 En los esquemas de síntesis anteriores, un compuesto de fórmula (I) puede conducir a otro compuesto de fórmula (I) después de una etapa de reacción adicional, tal como saponificación por ejemplo, usando métodos bien conocidos por un experto en la materia mediante los cuales un grupo R2 que representa un éster, preferentemente un éster de metilo, se cambia a un grupo R2 que representa un ácido carboxílico.
40 Si se desea aislar un compuesto de fórmula (I) que contiene al menos una función base en el estado de una sal de adición ácida, esto es posible mediante el tratamiento de la base libre del compuesto de fórmula (I) (que contienen al menos una función base) con un ácido adecuado, preferentemente en cantidad equivalente. El ácido adecuado puede ser en particular ácido trifluoroacético.
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Por tanto, un objeto adicional de la presente invención es un primer método para preparar un compuesto de fórmula (I), que comprende una reacción de condensación entre un compuesto de fórmula (VI):
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en el que R1 y R2 son tal como se ha definido anteriormente, y un compuesto de la siguiente fórmula (VII):
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en el que R3 es tal como se ha definido anteriormente, R4a corresponde a un grupo R4 tal como se ha definido anteriormente, opcionalmente en forma protegida, y X es OH o Cl.
15 Cuando X = OH, la reacción de acoplamiento se puede realizar bajo condiciones de acoplamiento de péptidos bien conocidas por un experto en la materia.
Dicho acoplamiento del péptido puede llevarse a cabo en presencia de un agente de acoplamiento tal como
20 diisopropilcarbodiimida(DIC), diciclohexilcarbodiimida (DCC), clorhidrato de 1-(3-dimetilaminopropil)-3etilcarbodiimida (EDC), carbonildiimidazol (CDI), hexafluorofosfato de 2-(1H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3tetrametiluronio (HBTU), tetrafluoroborato de 2-(1H-benzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametiluronio (TBTU), hexafluorofosfato de O-(7-azobenzotriazol-1-ilo)-1,1,3,3-tetrametiluronio (HATU), fosforocianidato de dietilo (DEPC) o hexafluorofosfato de (benzotriazol-1-iloxi) tripirrolodinofosfonio (PyBOP), opcionalmente asociado con
25 un auxiliar de acoplamiento tal como N-hidroxi succinimida (NHS), N-hidroxi benzotriazol (HOBt), 3,4-dihidro-3hidroxi-4-oxo-1,2,3-benzotriazol (HOOBt), 1-hidroxi-7-azabenzotriazol (HAt), N-hidroxisilfosuccinimida (sulfo NHS) o dimetilaminopiridina (DMAP). Preferentemente, el agente de acoplamiento es HATU o DEPC.
La reacción también se puede realizar en presencia de una base tal como DIEA (diisopropiletilamina). 30 En particular, el acoplamiento peptídico se realiza en presencia de HATU o DEPC y DIEA.
Dicha reacción se puede llevar a cabo en un disolvente aprótico polar tal como diclorometano (DCM) o dimetilformamida (DMF), en particular a una temperatura de entre -15°C y 40°C. 35 Cuando X = Cl, la reacción de condensación se llevará a cabo en presencia de una base que puede ser orgánica
o inorgánica, tal como Et3N, iPr2NEt, piridina, NaH, Cs2CO3 o K2CO3.
La reacción se puede llevar a cabo en un disolvente tal como tetrahidrofurano (THF), diclorometano (DCM), 40 dimetilformamida (DMF), o dimetilsulfóxido (DMSO), en particular a una temperatura de entre -20° y 100°C.
Los compuestos de fórmulas (VI) y (VII) se pueden preparar siguiendo los protocolos de síntesis descritos en la parte experimental a continuación o siguiendo las técnicas conocidas por un experto en la materia.
45 Un objeto adicional de la presente invención es un segundo método para preparar un compuesto de fórmula (I) que comprende una reacción de sustitución entre un compuesto de la siguiente fórmula (VIII):
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en el que R1, R2 y R3 son como se ha definido anteriormente, y un compuesto de la siguiente fórmula (X):
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en el que R4a es un grupo R4 tal como se ha definido anteriormente, opcionalmente en forma protegida, e Y es un 10 grupo saliente tal como Cl, Br, I, OSO2CH3, OSO2CF3 u O-Tosilo.
La reacción de sustitución se lleva a cabo en particular en presencia de una base que puede ser orgánica o inorgánica, tal como Et3N, iPr2NEt, NaH, Cs2CO3, o K2CO3.
15 Esta reacción puede llevarse a cabo en un disolvente polar, preferentemente anhidro, tal como DCM, THF, DMF
o DMSO, en particular, a una temperatura de entre -20° y 100°C.
Los compuestos de fórmulas (VIII) y (X) se pueden preparar siguiendo los protocolos de síntesis descritos en la parte experimental a continuación o usando las técnicas conocidas por un experto en la materia.
20 Un objeto adicional de la presente invención es un tercer método para preparar un compuesto de fórmula (I) en la que R4 es un grupo -CH2R4b con R4b representando un fenilo o un grupo fenil-alquilo (C1) sustituido por un grupo (preferentemente en la fracción fenilo) seleccionado de entre unos grupos OH y NR9R10,
25 que comprende una reacción de aminación reductiva entre un compuesto de la siguiente fórmula (VIII):
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en el que R1, R2 y R3 son tal como se ha definido anteriormente, y un compuesto de la siguiente fórmula (XI):
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35 en el que R4b es tal como se ha definido anteriormente.
La reacción de aminación reductiva se puede llevar a cabo en presencia de un agente reductor tal como NaBH4, NaBH3CN o NaBH(OAc)3 y opcionalmente isopropóxido de titanio (IV).
40 El pH se puede controlar mediante la adición de un ácido tal como ácido acético, en particular, para alcanzar un pH de entre 4 y 5.
Esta reacción puede llevarse a cabo en un disolvente polar tal como DCE (1,2-dicloroetano), DCM, THF, DMF o metanol, en particular, a una temperatura de entre -20° y 100°C. 45 Los compuestos de fórmulas (VIII) y (XI) se pueden preparar siguiendo los protocolos de síntesis descritos en la
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parte experimental a continuación o utilizando las técnicas conocidas por un experto en la materia.
El compuesto obtenido después de la etapa de condensación/sustitución/aminación reductuora de uno de los tres métodos anteriormente se puede someter a las etapas adicionales de desprotección, particularmente en relación con los sustituyentes R2 y R4 y las etapas de funcionalización opcionalmente adicionales utilizando los métodos bien conocidos por el experto en la materia.
Cuando R2 representa un grupo COOH, la etapa de condensación/sustitución/aminación reductora anteriormente mencionada se puede realizar a partir de un compuesto de fórmula (VI) con un grupo R2 que representa una función COO-éster (alquilo de (C1-C6)), a continuación esta función éster posiblemente se saponifica para producir un compuesto de fórmula (I) con R2 = COOH.
Cuando el grupo R4 comprende una función NH, ésta se puede proteger antes de realizar la reacción de condensación/sustitución/aminación reductiva mediante la sustitución del átomo de nitrógeno por un grupo Nprotector tal como un grupo Boc o Fmoc.
Mediante «grupo protector» en la presente invención se hace referencia un grupo que bloquea selectivamente un sitio reactivo en un compuesto multifuncional, de tal manera que una reacción química selectivamente se puede llevar a cabo en otro sitio reactivo no protegido en el sentido convencionalmente asociado con éste en la síntesis química.
Mediante «grupo protector de N» en la presente invención se hace referencia a cualquier sustituyente que protege el grupo NH contra las reacciones indeseables tal como los grupos N-protectores descritos en Greene, «Protective Groups In Organic Synthesis», (John Wiley & Sons, Nueva York (1981)) y Harrison et al. «Compendium of Synthetic Organic Methods», Vols. 1 a 8 (J. Wiley & Sons, 1971 a 1996). Los grupos Nprotectores comprenden carbamatos, amidas, derivados N-alquilados, derivados de amino acetal, derivados de N-bencilo, derivados de imina, derivados de enamina y derivados de N-heteroátomo. Los grupos N-protectores pueden ser formilo; un arilo, tal como un fenilo, opcionalmente sustituido con uno o varios grupos metoxi, tal como p-metoxifenilo (PMP); un aril-alquilo de (C1-C6), tal como un bencilo, la porción arilo siendo opcionalmente sustituida con uno o varios grupos metoxi, tales como bencilo (Bn), p-metoxibencilo (PMB) o 3,4-dimetoxibencilo (DMPM); -CO-RGP1 tal como acetilo (Ac), pivaloilo (Piv o Pv), benzoilo (Bz) o p-metoxibencilcarbonilo (Moz); -CO2-RGP1 tal como tbutiloxicarbonilo (Boc), tricloroetoxicarbonilo (TROC), aliloxicarbonilo (Alloc), benciloxicarbonilo (Cbz o Z) o 9-fluorenilmetiloxicarbonilo (Fmoc); -SO2-RGP1 tal como fenilsulfonilo, tosilo (Ts o Tos) o 2-nitrobencensulfonilo (también llamado nosilo -Nos o Ns); y los similares,
con RGP1 representando un alquilo de (C1-C6) opcionalmente sustituido con uno o varios átomos de halógeno tal como F o Cl; un alquenilo de (C2-C6) tal como un alilo; un arilo, tal como un fenilo, opcionalmente sustituido con uno o varios grupos seleccionados de entre OMe (metoxi) y NO2 (nitro); un aril-alquilo de (C1-C6), tal como un bencilo, la porción arilo siendo opcionalmente sustituida con uno o varios grupos metoxi; o un grupo 9fluorenilmetilo.
En particular, el grupo N-protector comprende formilo, acetilo, benzoílo, pivaloílo, fenilsulfonilo, bencilo (Bn), tbutiloxicarbonilo (Boc), benciloxicarbonilo (Cbz), p-metoxibenciloxicarbonilo, p-nitrobencil-oxicarbonilo, tricloroetoxicarbonilo (TROC), aliloxicarbonilo (Alloc), 9-fluorenilmetiloxicarbonilo (Fmoc), trifluoro-acetilo, carbamatos de bencilo (sustituidos o no) y similares. Este puede ser, en particular, un grupo Boc o Fmoc.
La protección de la función amina NH por un grupo Boc o Fmoc y su posterior desprotección, después de la reacción de condensación/sustitución/aminación reductiva, son bien conocidas por el experto en la materia y se describen en particular en la parte experimental a continuación.
El compuesto de fórmula (I) obtenido con uno de los tres métodos anteriormente mencionados también puede ser salificado mediante la adición de una base o ácido farmacéuticamente aceptable, en particular un ácido farmacéuticamente aceptable tal como ácido trifluoroacético. Dicha etapa se puede realizar opcionalmente al mismo tiempo que otra etapa de reacción, en particular, al mismo tiempo que una etapa de desprotección cuando se debe realizar en un medio ácido, por ejemplo.
El compuesto obtenido con uno de estos tres métodos, opcionalmente después de la(s) etapa(s) adicional(es) para la desprotección, funcionalización y/o salificación, se puede separar del medio de reacción usando métodos bien conocidos por el experto en la materia, tales como mediante extracción, evaporación del disolvente o por precipitación y filtración.
Si es necesario el compuesto también se puede purificar, utilizando técnicas bien conocidas por el experto en la materia, por ejemplo, mediante recristalización si el compuesto es cristalino, mediante destilación, por cromatografía en columna de gel de sílice o cromatografía líquida de alto rendimiento (HPLC).
Los siguientes ejemplos ilustran la invención sin limitar el alcance de la misma.
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Ejemplos
I -Síntesis de los compuestos de la invención 5 Las siguientes abreviaturas se utilizan en los siguientes ejemplos:
ac. acuoso ee exceso enantiomérico
10 equiv equivalente ESI ionización por electroaspersión LC/MS cromatografía líquida acoplada a espectrometría de masas HPLC cromatografía líquida de alto rendimiento RMN resonancia magnética nuclear
15 sat. saturado UV ultravioleta
Ejemplo de referencia 1
20 (S)-2-((S)-2-((3-aminopropil)(metil)amino)-3-metilbutanamido)-N-((3R,4S,5S)-3-metoxi-1-((S)-2-((1R,2R)-1metoxi-2-metil-3-oxo-3-(((S)-2-fenil-1-(tiazol-2-il)etil)amino)propil)pirrolidin-1-il)-5-metil-1-oxoheptan-4-il)-N,3dimetilbutanamida, ácido bis trifluoroacético
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Ejemplo 1A: (4R,5S)-4-metil-5-fenil-3-propanoil-1,3-oxazolidin-2-ona
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30 (4R,5S)-4-metil-5-fenil-1,3-oxazolidin-2-ona (5,8 g, 32,7 mmoles, 1,00 equiv) se disolvió en tetrahidrofurano (THF, 120 ml) en una atmósfera inerte. La mezcla se enfrió a -78°C y se añadió n-butil-litio (14,4 ml) gota a gota. Después de agitación durante 30 minutos a -78°C, se añadió cloruro de propanoilo (5,7 ml). La agitación continuó durante 30 minutos a -78°C y a continuación durante la noche a temperatura ambiente. A continuación la mezcla de reacción se concentró, se redisolvió en 200 ml de agua. El pH de la solución se ajustó a 7 con solución
35 acuosa saturada de bicarbonato de sodio. Esta fase acuosa se extrajo 3 veces con 100 ml de acetato de etilo (EtOAc). Las fases orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron para producir 6,8 g (89%) del compuesto 1A en forma de un aceite de color amarillo.
Ejemplo 1B: terc-butil (2S)-2-[(1R,2R)-1-hidroxi-2-metil-3-[(4R,5S)-4-metil-2-oxo-5-fenil-1,3-oxazolidin-3-il]40 3-oxopropil]pirrolidin-1-carboxilato
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5
15
25
35
45
El compuesto 1A (17,6 g, 75,45 mmoles, 1,00 equiv) se disolvió en diclorometano (DCM, 286 ml) en una atmósfera inerte. Esta solución se enfrió con un baño de hielo. Se añadieron trietilamina (TEA, 12,1 ml, 1,15 equiv) y Bu2BOTf (78,3 ml, 1,04 equiv) gota a gota mientras se mantenía la temperatura de la mezcla de reacción inferior a 2°C. La agitación continuó a 0°C durante 45 minutos, después de lo cual la reacción se enfrió a -78°C. Se añadió gota a gota una solución de terc-butil (2S)-2-formilpirrolidin-1-carboxilato (8,5 g, 42,66 mmoles, 0,57 equiv) en DCM (42 ml). La agitación continuó durante 2 horas a -78°C, a continuación 1 hora a 0°C y finalmente 1 hora a temperatura ambiente. La reacción se neutralizó con 72 ml de regulador de pH de fosfato (pH = 7,2 -7,4) y 214 ml de metanol, y se enfrió a 0°C. Se añadió gota a gota una solución de peróxido de hidrógeno al 30% en metanol (257 ml) mientras se mantenía la temperatura por debajo de 10°C. La agitación continuó durante 1 hora a 0°C. La reacción se neutralizó con 142 ml de agua, después se concentró bajo presión reducida. La solución acuosa resultante se extrajo 3 veces con 200 ml de EtOAc. Las fases orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron. El residuo se purificó en una columna de sílice con una mezcla de EtOAc y éter de petróleo (EtOAc:PE = 1:8) para producir 13,16 g (40%) del compuesto 1B en forma de un aceite incoloro.
Ejemplo 1C: Ácido (2R,3R)-3-[(2S)-1-[(terc-butoxi)carbonil]pirrolidin-2-il]-3-hidroxi-2-metilpropanoico
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El compuesto 1B (13,16 g, 30,43 mmoles, 1,00 equiv) se disolvió en THF (460 ml) en presencia de peróxido de hidrógeno (30% en agua, 15,7 ml), después se enfrió con un baño de hielo. Se añadió gota a gota una solución acuosa de hidróxido de litio (0,4 mol/l, 152,1 ml) mientras se mantenía la temperatura de reacción por debajo de 4°C. La mezcla de reacción se agitó 2,5 horas a 0°C. Se añadió gota a gota una solución acuosa de Na2SO3 (1 mol/l, 167,3 ml) mientras se mantenía la temperatura a 0°C. La mezcla de reacción se agitó 14 horas a temperatura ambiente, después se neutralizó con 150 ml de solución fría saturada de bicarbonato de sodio y se lavó 3 veces con 50 ml de DCM. El pH de la solución acuosa se ajustó a 2-3 con una solución acuosa 1 M de KHSO4. Esta solución acuosa se extrajo 3 veces con 100 ml de EtOAc. Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron una vez con solución saturada de NaCl, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron para producir 7,31 g (88%) del compuesto 1C en forma de un aceite incoloro.
Ejemplo 1D: Ácido (2R,3R)-3-[(2S)-1-[(terc-butoxi)carbonil]pirrolidin-2-il]-3-metoxi-2-metilpropanoico
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El compuesto 1C (7,31 g, 26,74 mmoles, 1,00 equiv) se disolvió en una atmósfera inerte en THF (135 ml) en presencia de yodometano (25,3 ml). El medio de reacción se enfrió con un baño de hielo después de lo cual se añadió NaH (60% en aceite, 4,28 g) en porciones. La reacción se dejó bajo agitación 3 días a 0°C y después se neutralizó con 100 ml de solución acuosa saturada de bicarbonato de sodio y se lavó 3 veces con 50 ml de éter. El pH de la solución acuosa se ajustó a 3 con solución acuosa de KHSO4 1M. Esta solución acuosa se extrajo 3 veces con 100 ml de EtOAc. Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron una vez con 100 ml de Na2S2O3 (5% en agua), una vez con solución saturada de NaCl, después se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron para producir 5,5 g (72%) del compuesto 1D en forma de un aceite incoloro.
Ejemplo 1E: N-metoxi-N-metil-2-fenilacetamida
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El ácido 2-fenilacético (16,2 g, 118,99 mmoles, 1,00 equiv) se disolvió en dimetilformamida (DMF, 130 ml) después se enfrió a -10°C. Se añadieron dietil fosforocianidato (DEPC, 19,2 ml), clorhidrato de metoxi(metil)amina (12,92 g, 133,20 mmoles, 1,12 equiv) y trietilamina (33,6 ml). La mezcla de reacción se agitó 30 minutos a -10°C y después 2,5 horas a temperatura ambiente. A continuación, se extrajo dos veces con 1 litro de EtOAc. Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron dos veces con 500 ml de NaHCO3 (sat.), una vez con 400 ml de agua, después se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron. El residuo se purificó en una columna de sílice con una mezcla de EtOAc y PE (1:100 a 1:3) para producir 20,2 g (95%) del compuesto 1E en forma de un aceite de color amarillo.
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Ejemplo 1F: 2-fenil-1-(1,3-tiazol-2-il)etan-1-ona
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Se disolvió tetrametiletilendiamina (TMEDA, 27,2 ml) en 300 ml de THF en una atmósfera inerte, después se
10 enfrió a -78°C antes de la adición, gota a gota, de n-BuLi (67,6 ml, 2,5 M). Se añadió 2-bromo-1,3-tiazol (15,2 ml) gota a gota y la agitación continuó durante 30 minutos a -78°C. El compuesto 1E (25 g, 139,50 mmoles, 1,00 equiv) disuelto en THF (100 ml) se añadió gota a gota. La agitación continuó durante 30 minutos a -78°C y a continuación 2 horas a -10°C. La reacción se neutralizó con 500 ml de KHSO4 (sat.), después se extrajo 3 veces con 1 litro de EtOAc. Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron dos veces con 400 ml de agua y dos veces
15 con 700 ml de NaCl (sat.), después se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron. El residuo se purificó en una columna de sílice con una mezcla de EtOAc y PE (1:100 a 1:10) para producir 25 g (88%) del compuesto 1F en forma de un aceite de color amarillo.
Ejemplo 1G: (1R)-2-fenil-1-(1,3-tiazol-2-il)etan-1-ol
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En una atmósfera inerte, se añadió gota a gota una solución del compuesto 1F (15 g, 73,8 mmoles, 1,00 equiv.) en éter (300 ml) a (+)-B-clorodiisopinocanfeilborano ((+)-Ipc2BCl, 110,8 ml). La mezcla de reacción se agitó 24
25 horas a 0°C, después se neutralizó con 300 ml de una mezcla (1:1) de NaOH (10% en agua) y H2O2 (30% en agua), y finalmente se extrajo tres veces con 500 ml de EtOAc. Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron dos veces con 300 ml de K2CO3 (sat.) y una vez con 500 ml de NaCl (sat.), después se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron. El residuo se purificó en una columna de sílice con una mezcla de EtOAc y PE (1:20 a 1:2) para producir 6,3 g (42%) del compuesto 1G en forma de un sólido de color blanco.
30
Ejemplo 1H: 2-[(1S)-1-azido-2-feniletil]-1,3-tiazol
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35 El compuesto 1G (6 g, 29,23 mmoles, 1,00 equiv.) se disolvió en una atmósfera inerte en THF (150 ml) en presencia de trifenilfosfina (13 g, 49,56 mmoles, 1,70 equiv.), después se enfrió a 0°C. Se añadió gota a gota azodicarboxilato de dietilo (DEAD, 7,6 ml), seguido de difenilfosforilazida (DPPA, 11 ml), el baño frío se retiró y la solución se dejó bajo agitación 48 horas a temperatura ambiente. El medio se concentró a presión reducida. El residuo se purificó en una columna de sílice con una mezcla de EtOAc y PE (1:100 a 1:30) para producir 8 g del
40 compuesto 1H parcialmente purificado en forma de un aceite de color amarillo. El compuesto 1H se utiliza como tal en la etapa siguiente.
Ejemplo 1I: terc-butil N-[(1S)-2-fenil-1-(1,3-tiazol-2-il)etil]carbamato
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El compuesto 1H (6,5 g, 28,2 mmoles, 1,00 equiv) se disolvió en una atmósfera inerte en THF (100 ml) en presencia de trifenilfosfina (6,5 g, 33,9 mmoles, 1,20 equiv.), y se calentó a 50°C durante 2 horas. A continuación se añadió amoníaco (70 ml) y continuó el calentamiento durante 3 horas. La reacción se enfrió, se neutralizó con
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500 ml de agua, a continuación se extrajo 3 veces con 500 ml de EtOAc. Las fases orgánicas se combinaron y se extrajeron dos veces con 500 ml de HCl 1N. Las fases acuosas se combinaron, se llevaron a pH 8-9 mediante la adición de una solución de hidróxido de sodio (10% en agua), después se extrajeron 3 veces con 500 ml de DCM. Las fases orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron para 5 producir 4,8 g (83%) de (1S)-2-fenil-1-(1,3-tiazol-2-il)etan-1-amina en forma de un aceite de color amarillo. A continuación, este compuesto se protegió con un grupo Boc ((terc-butoxi)carbonilo) para que se pudiera purificar. Se disolvió en una atmósfera inerte en 1,4-dioxano (40 ml), después se enfrió a 0°C. (Boc)2O (10,26 g, 47,01 mmoles, 2,00 equiv), se diluyó en 20 ml de 1,4-dioxano añadido gota a gota. El baño frío se retiró y la solución se dejó bajo agitación durante la noche a temperatura ambiente antes de ser neutralizada con 300 ml de
10 agua y se extrajo dos veces con 500 ml de EtOAc. Las fases orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron. El residuo se purificó en una columna de sílice con una mezcla de EtOAc y PE (1:100 a 1:20, ee = 93%). A continuación, se recristalizó en una mezcla de hexano/acetona (~5-10/l, 1 g/10 ml) para producir 6 g (84%) del compuesto 1I en forma de un sólido de color blanco (ee > 99%).
15 Ejemplo 1J: terc-butilo (2S)-2-[(1R,2R)-1-metoxi-2-metil-2-[[(1S)-2-fenil-1-(1,3-tiazol-2il)etil]carbamoil]etil]pirrolidin-1-carboxilato
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20 El compuesto 1I (3 g, 9,86 mmoles, 1,00 equiv) se disolvió en una atmósfera inerte en 10 ml de DCM. Se añadió ácido trifluoroacético (TFA, 10 ml) y la solución se dejó bajo agitación durante la noche a temperatura ambiente, después se concentró a presión reducida para producir 2,0 g (64%) de (1S)-2-fenil-1-(1,3-tiazol-2-il)etan-1-amina; ácido trifluoroacético en forma de un aceite de color amarillo. Este producto intermedio se volvió a disolver en 20 ml de DCM después de lo cual, se añadieron el compuesto 1D (1,8 g, 6,26 mmoles, 1,05 equiv), DEPC (1,1 g,
25 6,75 mmoles, 1,13 equiv) y diisopropiletilamina (DIEA, 1,64 g, 12,71 mmoles, 2,13 equiv). La mezcla de reacción se dejó bajo agitación durante la noche a temperatura ambiente, después se concentró a presión reducida. El residuo se purificó en una columna de sílice con una mezcla de EtOAc y PE (1:100 a 1:3) para producir 2,3 g (81%) del compuesto 1J en forma de un sólido de color amarillo pálido.
30 Ejemplo 1K: (2R,3R)-3-metoxi-2-metil-N-[(1S)-2-fenil-1-(1,3-tiazol-2-il)etil]-3-[(2S)-pirrolidin-2il]propanamida; ácido trifluoroacético
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35 El compuesto 1J (2,25 g, 4,75 mmoles, 1,00 equiv) se disolvió en una atmósfera inerte en 10 ml de DCM. Se añadió TFA (10 ml) y la solución se dejó bajo agitación durante la noche a temperatura ambiente, después se concentró a presión reducida para producir 2,18 g (94%) del compuesto 1K en forma de un aceite de color amarillo.
40 Ejemplo 1L: Ácido (2S,3S)-2-(bencilamino)-3-metilpentanoico
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El ácido (2S,3S)-2-amino-3-metilpentanoico (98,4 g, 750 mmoles, 1,00 equiv) se añadió a temperatura ambiente
45 y en porciones a una solución de hidróxido de sodio 2 N (375 ml). El benzaldehído (79,7 g, 751,02 mmoles, 1,00 equiv) se añadió rápidamente y la solución resultante se agitó 30 minutos. Se añadió borohidruro de sodio (10,9 g, 288,17 mmoles, 0,38 equiv) en pequeñas porciones, mientras se mantenía la temperatura entre 5 y 15°C. La
agitación continuó durante 4 horas a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se diluyó con 200 ml de agua, a continuación se lavó dos veces con 200 ml de EtOAc. El pH de la solución acuosa se ajustó a 7 con una solución de ácido clorhídrico 2N. El precipitado formado se recogió por filtración y produjo 149,2 g (90%) del compuesto 1L en forma de un sólido de color blanco.
Ejemplo 1M: Ácido (2S,3S)-2-[bencil(metil)amino]-3-metilpentanoico
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10 El compuesto 1L (25 g, 112,97 mmoles, 1,00 equiv) se disolvió en una atmósfera inerte en ácido fórmico (31,2 g) en presencia de formaldehído (36,5% en agua, 22,3 g). La solución se agitó 3 horas a 90°C y después se concentró a presión reducida. El residuo se trituró en 250 ml de acetona, después se concentró. Esta operación de trituración/evaporación se repitió dos veces con 500 ml de acetona para producir 21,6 g (81%) del compuesto 1M en forma de un sólido de color blanco.
15
Ejemplo 1N: (2S,3S)-2-[bencil(metil)amino]-3-metilpentan-1-ol
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20 El LiAlH4 (0,36 g) se suspendió en 10 ml de THF en una atmósfera inerte a 0°C. El compuesto 1M (1,5 g, 6,37 mmoles, 1,00 equiv) se añadió en pequeñas porciones mientras se mantenía la temperatura entre 0 y 10°C. La mezcla de reacción se agitó 2 horas a 65°C, después se enfrió de nuevo a 0°C antes de ser neutralizada con adiciones sucesivas de 360 μl de agua, 1 ml de hidróxido de sodio al 15% y 360 μl de agua. Las sales de aluminio que se precipitaron se separaron por filtración. El filtrado se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se
25 concentró. El residuo se purificó en una columna de sílice con una mezcla de EtOAc y PE (1:50) para producir 820 mg (58%) del compuesto 1N en forma de un aceite de color amarillo pálido.
Ejemplo 1O: (2S,3S)-2-[bencil(metil)amino]-3-metilpentanal
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El cloruro de oxalilo (0,4 ml) se disolvió en DCM (15 ml) en una atmósfera inerte. La solución se enfrió a -70°C y
se añadió gota a gota una solución de dimetilsulfóxido (DMSO (0,5 ml) en DCM (10 ml) durante 15 minutos. La
mezcla de reacción se agitó 30 minutos, después de lo cual se añadió gota a gota una solución del compuesto 35 1N (820 mg, 3,70 mmoles, 1,00 equiv) en DCM (10 ml) durante 15 minutos. La mezcla de reacción se agitó otros
30 minutos a baja temperatura, a continuación, se añadió lentamente trietilamina (2,5 ml). La mezcla de reacción
se agitó 1 hora a -50°C, el baño frío se retiró y la reacción se neutralizó con 25 ml de agua al tiempo que se
permitía que la temperatura volviera a la normalidad. La solución se lavó una vez con 30 ml de solución acuosa
saturada de NaCl, a continuación, se secó sobre sulfato sódico, se filtró y se concentró. El residuo se purificó en 40 una columna de sílice con una mezcla de EtOAc y PE (1:200) para producir 0,42 g (52%) del compuesto 1O en
forma de un aceite de color amarillo.
Ejemplo 1P: (2S,3S)-N-bencil-1,1-dimetoxi-N,3-dimetilpentan-2-amina
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El compuesto 1O (4,7 g, 21,43 mmoles, 1,00 equiv) se disolvió en 20 ml de metanol a 0°C. Se añadió gota a gota ácido sulfúrico concentrado (4,3 ml) y continuó la agitación durante 30 minutos a 0°C. Se añadió trimetil
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ortoformiato (21,4 ml), el baño frío se retiró y el medio de reacción se dejó bajo agitación durante 3 horas a temperatura ambiente. El medio de reacción se diluyó con 200 ml de EtOAc, se lavó sucesivamente con 100 ml de Na2CO3 al 10% y 200 ml de NaCl saturado, después se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró bajo presión reducida para producir 3,4 g (60%) del compuesto 1P en forma de un aceite de color amarillo pálido.
Ejemplo 1Q: [[1-(terc-butoxi)etenil]oxi](terc-butil) dimetilsilano
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10 Se disolvió diisopropilamina (20 g, 186,71 mmoles, 1,08 equiv) en 170 ml de THF en una atmósfera inerte y se enfrió a -78°C. Se añadió nBuLi (2,4 M, 78,8 ml) gota a gota y la solución se agitó 30 minutos a baja temperatura (para producir LDA-diisopropilamida de litio) antes de añadir acetato de terc-butilo (20 g, 172,18 mmoles, 1,00 equiv). La mezcla de reacción se agitó 20 minutos a -78°C antes de añadir hexametilfosforamida (HMPA, 25,8 ml) y una solución de terc-butildimetilclorosilano (TBDMSCl, 28 g, 185,80 mmoles, 1,08 equiv) en 35 ml de
15 THF. La agitación continuó durante 20 minutos adicionales a baja temperatura, y a continuación se retiró el baño frío. La solución se concentró bajo presión reducida. El residuo se volvió a disolver en 100 ml de agua y se extrajo 3 veces con 100 ml de PE. Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron una vez con 500 ml de solución acuosa saturada de NaCl, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron. El residuo se purificó por destilación para producir 16,6 g (83%) del compuesto 1Q en forma de un aceite incoloro.
20
Ejemplo 1R: terc-butil (3R,4S,5S)-4-[bencil(metil)amino]-3-metoxi-5-metil heptanoato
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25 El compuesto 1P (2,0 g, 7,54 mmoles, 1,00 equiv) y el compuesto 1Q (2,6 g, 11,28 mmoles, 1,50 equiv) se disolvieron en 33 ml de DCM en una atmósfera inerte. La solución se enfrió a 0°C. El DMF (1,2 g) se añadió gota a gota junto con una solución de BF3-Et2O (2,1 g) en 7,5 ml de DCM. La agitación continuó durante 24 horas a 0°C. El medio de reacción se lavó una vez con 30 ml de carbonato de sodio (10%) y dos veces con 50 ml de solución acuosa saturada de NaCl, después se secó sobre sulfato de sodio, se filtró y se concentró. El residuo se
30 purificó en una columna de sílice con una mezcla de EtOAc y PE (1:100) para producir 1,82 g (91%) del compuesto 1R en forma de un aceite de color amarillo.
Ejemplo 1S: clorhidrato de (3R,4S,5S)-3-metoxi-5-metil-4-(metilamino)heptanoato
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El compuesto 1R (2,4 g, 6,87 mmoles, 1,00 equiv) se disolvió en una atmósfera inerte en 35 ml de etanol en presencia de Pd/C (0,12 g) y ácido clorhídrico concentrado (0,63 ml). La atmósfera de nitrógeno se reemplazó por una atmósfera de hidrógeno y el medio de reacción se dejó bajo agitación 18 horas a temperatura ambiente.
40 El medio de reacción se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se trituró en 50 ml de hexano y se eliminó el sobrenadante que, después de secar bajo presión reducida, produjo 1,66 g (82%) del compuesto 1S en la forma de un sólido de color blanco.
Ejemplo 1T: terc-butil (3R,4S,5S)-4-[(2S)-2-[[(benciloxi)carbonil]amino]-N,3-dimetilbutanamido]-3-metoxi45 5-metiloheptanoato
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El ácido (2S)-2-[[(benciloxi)carbonil]amino]-3-metilbutanoico (15 g, 0,40 mmoles, 1,00 equiv) se disolvió en
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300 ml de DCM en presencia de DIEA (38,3 ml) y hexafluorofosfato de bromotripirrolidinofosfonio (PyBrOP, 32,3 g). La solución se agitó 30 minutos a temperatura ambiente antes de la adición del compuesto 1S (15,99 g, 0,42 mmoles, 1,07 equiv). El medio de reacción se agitó 2 horas y a continuación se concentró. El residuo se purificó en fase inversa (C18) con una mezcla de acetonitrilo (ACN) y agua (30:70 a 100:0 por 40 minutos) para producir 17 g (58%) del compuesto 1T en forma de un aceite líquido incoloro.
Ejemplo 1U: terc-butil (3R,4S,5S)-4-[(2S)-2-amino-N,3-dimetilbutanamido]-3-metoxi-5-metilheptanoato
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10 El compuesto 1T (76 mg, 0,15 mmoles, 1,00 equiv) se disolvió en una atmósfera inerte en 10 ml de etanol en presencia de Pd/C (0,05 g). La atmósfera de nitrógeno se reemplazó por una atmósfera de hidrógeno y la reacción se agitó 2 horas a temperatura ambiente. El medio de reacción se filtró y se concentró bajo presión reducida para producir 64 mg del compuesto 1U en forma de un aceite incoloro.
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Ejemplo 1V: (3R,4S,5S)-4-[(2S)-2-[[(9H-fluoren-9-ilmetoxi)carbonil]amino-N,3-dimetilbutanamido]-3-metoxi5-metilheptanoato
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20 El compuesto 1U (18,19 g, 50,74 mmoles, 1,00 equiv) se disolvió en 400 ml de una mezcla de 1,4-dioxano/agua
(1:1) en presencia de bicarbonato de sodio (12,78 g, 152 mmoles, 3,00 equiv) y cloroformiato de 9H-fluoren-9ilmetilo (Fmoc-Cl, 19,69 g, 76 mmoles, 150 equiv), a continuación se agitó 2 horas a temperatura ambiente. El medio de reacción se diluyó entonces con 500 ml de agua y se extrajo 3 veces con 200 ml de EtOAc. Las fases
25 orgánicas se combinaron, se lavaron una vez con 200 ml de solución acuosa saturada de NaCl, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron para producir 40 g del compuesto 1V parcialmente purificado en forma de un aceite de color amarillo pálido.
Ejemplo 1W: Ácido (3R,4S,5S)-4-[(2S)-2-[[(9H-fluoren-9-ilmetoxi)carbonil]amino]-N,3-dimetilbutanamido]30 3-metoxi-5-metilheptanoico
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El compuesto 1V (40 g, 68,88 mmoles, 1,00 equiv) se disolvió en una atmósfera neutra en 600 ml de DCM. Se
35 añadió TFA (300 ml). La solución se agitó 2 horas a temperatura ambiente, después se concentró a presión reducida. El residuo se purificó en una columna de sílice con una mezcla de metanol y DCM (1:10) para producir 23,6 g (65%) del compuesto 1W en forma de un aceite incoloro.
Ejemplo 1X: 9H-fluoren-9-ilmetil N-[(1S)-1-[[(3R,4S,5S)-3-metoxi-1-[(2S)-2-[(1R,2R)-1-metoxi-2-metil-2
40 [[(1S)-2-fenil-1-(1,3-tiazol-2-il)etil]carbamoil]etil]pirrolidin-1-il]-5-metil-1-oxoheptan-4-il](metil)carbamoil]-2metilpropil]carbamato
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imagen53
El compuesto 1W (2,53 g, 4,82 mmoles, 1,08 equiv) se disolvió en 20 ml de DCM en presencia del compuesto 1K (2,18 g, 4,47 mmoles, 1,00 equiv), DEPC (875 mg, 5,37 mmoles, 1,20 equiv) y DIEA (1,25 g, 9,67 mmoles, 2,16 equiv). La mezcla de reacción se dejó bajo agitación durante la noche a temperatura ambiente, después se lavó sucesivamente con 50 ml de solución saturada de KHSO4 y 100 ml de agua, se secó sobre sulfato de sodio, se
5 filtró y se concentró. El residuo se purificó en una columna de sílice con una mezcla de metanol y DCM (1:200 a 1:40) para producir 2,8 g (71%) del compuesto 1X en forma de un sólido de color amarillo pálido.
Ejemplo 1Y: (2S)-2-amino-N-[(3R,5S)-3-metoxi-1-[(2S)-2-[(1R,2R)-1-metoxi-2-metil-2-[[(1S)-2-fenil-1-(1,3tiazol-2-il)etil]carbamoil]etil]pirrolidin-1-il]-5-metil-1-oxoheptan-4-il]-N,3-dimetilbutanamida
10
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El compuesto 1X (2,8 g, 3,18 mmoles, 1,00 equiv) se disolvió en acetonitrilo (ACN, 12 ml) en presencia de piperidina (3 ml) y se dejó bajo agitación 18 horas a temperatura ambiente. La reacción se neutralizó con 50 ml
15 de agua, después se extrajo dos veces con 100 ml de DCM. Las fases orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron. El residuo se purificó en una columna de sílice con una mezcla de metanol y DCM (1:100 a 1:40) para producir 1,2 g (57%) del compuesto 1Y en forma de un sólido de color amarillo.
20 Ejemplo 1ZA: Ácido (2S)-2-[[(terc-butoxi)carbonil](metil)amino]-3-metil butanoico
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El ácido (2S)-2-[[(terc-butoxi)carbonil]amino]-3-metilbutanoico (63 g, 289,97 mmoles, 1,00 equiv) se disolvió en
25 una atmósfera inerte en THF (1000 ml) en presencia de yodometano (181 ml). La solución se enfrió a 0°C antes de añadir hidruro de sodio (116 g, 4,83 moles, 16,67 equiv) en pequeñas porciones. La mezcla de reacción se agitó durante 1,5 horas a 0°C, el baño frío se retiró y la agitación continuó durante 18 horas. La reacción se neutralizó con 200 ml de agua y después se concentró a presión reducida. La fase acuosa residual se diluyó con 4 litros de agua, se lavó una vez con 200 ml de EtOAc y su pH se ajustó entre 3 y 4 con una solución de ácido
30 clorhídrico 1N. La mezcla obtenida se extrajo 3 veces con 1,2 l de EtOAc. Las fases orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron para producir 60 g (89%) del compuesto 1ZA en forma de un aceite de color amarillo.
Ejemplo 1ZB: bencil (2S)-2-[[(terc-butoxi)carbonil](metil)amino]-3-metilbutanoato
35
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El compuesto 1ZA (47 g, 203,21 mmoles, 1,00 equiv) se disolvió en DMF (600 ml) en presencia de Li2CO3 (15,8 g, 213,83 mmoles, 1,05 equiv). La solución se enfrió a 0°C y después se añadió gota a gota bromuro de bencilo
40 (BnBr 57,9 g, 338,53 mmoles, 1,67 equiv). La mezcla de reacción se dejó bajo agitación durante la noche antes de ser neutralizada con 400 ml de agua y se filtró. La solución obtenida se extrajo dos veces con 500 ml de EtOAc. Las fases orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron. El residuo se purificó en una columna de sílice con una mezcla de EtOAc y PE (1:100 a 1:20) para producir 22,5 g (34%) del compuesto 1ZB en forma de un aceite de color amarillo.
45
Ejemplo 1ZC: clorhidrato de bencil (2S)-3-metil-2-(metilamino) butanoato
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El compuesto 1ZB (22,5 g, 70,00 mmoles, 1,00 equiv) se disolvió en 150 ml de DCM. Se burbujeó ácido clorhídrico gaseoso. La reacción se agitó 1 hora a temperatura ambiente y después se concentró a presión reducida para producir 17 g (94%) del compuesto 1ZC en forma de un sólido de color amarillo.
Ejemplo 1ZD: terc-butil N-(3,3-dietoxipropil)carbamato
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10 La 3,3-dietoxipropan-1-amina (6 g, 40,76 mmoles, 1,00 equiv) se disolvió en 1,4-dioxano (30 ml) en presencia de TEA (4,45 g, 43,98 mmoles, 1,08 equiv), a continuación se enfrió hasta 0°C. (Boc)2O (9,6 g, 43,99 mmoles, 1,08 equiv) diluido en 20 ml de 1,4-dioxano se añadió gota a gota. La solución se agitó 2 horas a 0°C, a continuación durante la noche a temperatura ambiente antes de ser neutralizada con 10 ml de agua. El pH se ajustó a 5 con
15 HC1 (1%). La solución se extrajo 3 veces con 50 ml de EtOAc. Las fases orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron para producir 8,21 g (81%) del compuesto 1ZD en forma de un aceite de color amarillo pálido.
Ejemplo 1Z: terc-butil N-(3-oxopropil)carbamato
20
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El compuesto 1ZD (8,20 g, 33,15 mmoles, 1,00 equiv) se disolvió en 18,75 ml de ácido acético y se dejó en agitación durante la noche a temperatura ambiente. El medio de reacción se extrajo 3 veces con 30 ml de EtOAc.
25 Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron 3 veces con 30 ml de solución saturada de NaCl, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron para producir 5 g (87%) del compuesto 1ZE en forma de un aceite de color rojo oscuro.
Ejemplo 1ZF: Ácido (2S)-2-[(3-[[(terc-butoxi)carbonil]amino]propil)(metil)amino]-3-metilbutanoico
30
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El compuesto 1ZE (2,4 g, 13,86 mmoles, 1,00 equiv) se disolvió en 50 ml de THF en presencia del compuesto 1ZC (3,56 g, 13,81 mmoles, 1,00 equiv) y DIEA (9,16 ml, 4,00 equiv). La mezcla de reacción se agitó 30 minutos 35 a temperatura ambiente antes de añadir triacetoxiborohidruro de sodio (5,87 g, 27,70 mmoles, 2,00 equiv). La agitación continuó durante una noche, después la reacción se neutralizó con 100 ml de agua y se extrajo 3 veces con 50 ml de EtOAc. Las fases orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron. El residuo se purificó parcialmente en una columna de sílice con una mezcla de EtOAc y PE (1:4). El producto bruto obtenido se volvió a disolver en 20 ml de metanol en presencia de Pd/C (1,2 g) y se hidrogenó
40 durante 20 minutos a temperatura y presión normal. El medio de reacción se filtró y se concentró bajo presión reducida para producir 200 mg (5%) del compuesto 1ZF en forma de un sólido de color blanco.
Ejemplo 1ZG: terc-butil N-(3-[[(1S)-1-[[(1S)-1-[[(3R,4S,5S)-3-metoxi-1-[(2S)-2-[(1R,2R)-1-metoxi-2-metil-2[[(1S)-2-fenil-1-(1,3-tiazol-2-il)etil]carbamoil]til]pirrolidin-1-il]-5-metil-1-oxoheptan-4-il](metil)carbamoil]-245 metilpropil]carbamoil]-2-metilpropil](metil)amino]propil)carbamato
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El compuesto 1Y (50 mg, 0,08 mmoles, 1,00 equiv) se disolvió en 2 ml de DMF en presencia del compuesto 1ZF (26,2 mg, 0,09 mmoles, 1,20 equiv), DIEA (37,7 ml) y hexafluorofosfato de O-(7-azabenzotriazo-1-il)-N,N,N',N’
5 tetrametiluronio (HATU, 43,3 mg, 0,11 mmoles, 1,50 equiv). La reacción se dejó bajo agitación durante la noche a temperatura ambiente, después se diluyó con 10 ml de agua y se extrajo 3 veces con 5 ml de EtOAc. Las fases orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron para producir 100 mg del compuesto 1ZG en forma de un aceite incoloro parcialmente purificado.
10 Ejemplo 1: El compuesto 1ZG (90 mg, 0,10 mmoles, 1,00 equiv) se disolvió en una atmósfera neutra en 2 ml de DCM y la solución se enfrió con un baño de hielo. Se añadió TFA (1 ml) y la reacción se agitó durante 2 horas a temperatura ambiente, después se concentró a presión reducida. El residuo se purificó por HPLC preparativa (columna Pre-HPLC-001 SHIMADZU, SunFire Prep C18 OBD, 5 μm, 19 x 150 mm; fase de elución: agua/ACN con pH regulado con 0,05% de TFA; gradiente de 18% a 31% de ACN durante 7 minutos y a continuación de
15 31% a 100% de ACN durante 2 minutos; Detector UV Waters 2489 a 254 nm y 220 nm). El compuesto 1 se obtuvo con un rendimiento del 25% (23 mg) en forma de un sólido de color blanco.
LC/MS/UV (columna Atlantis T3, 3 μm, 4,6 x 100 mm; 35°C; 1 ml/min, de 30% a 60% de ACN en agua (acetato de amonio 20 mM durante 6 minutos); ESI (C44H73N7O6S, masa exacta 827,53) m/z: 829 (MH+), 5,84 min (93,7%,
20 254 nm).
1H RMN (300 MHz, CD3OD, ppm): δ (Presencia de rotámeros) 7,85-7,80 (m, 1H); 7,69-7,66 (m, 1H), 7,40-7,10 (m, 5H), 5,80-5,63 (m, 1H), 4,80-4,65 (m, 2H), 4,22-4,00 (m, 1H), 3,89-0,74 (m, 58H).
25 Ejemplo de referencia 2
(S)-2-((S)-2-(((2-aminopiridin-4-il)metil)(metil)amino)-3-metilbutanamido)-N-((3R,4S,5S)-1-((S)-2-((1R,2R)-3(((1S,2R)-1-hidroxi-1-fenilpropan-2-il)amino)-1-metoxi-2-metil-3-oxopropil)pirrolidin-1-il)-3-metoxi-5-metil1-oxoheptan-4-il)-N,3-dimetilbutanamida, ácido trifluoroacético
30
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Ejemplo 2A: terc-butil (S)-2-((1R,2R)-3-(((1S,2R)-1-hidroxi-1-fenilpropan-2-il)amino)-1-metoxi-2-metil-3oxopropil)pirrolidin-1-carboxilato
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El compuesto 1D (2,5 g, 8,70 mmoles, 1,00 equiv) y (1S,2R)-2-amino-1-fenilpropan-1-ol (1,315 g, 8,70 mmoles, 1,00 equiv) se disolvieron en una atmósfera inerte en DMF (35 ml). La solución se enfrió a 0°C y a continuación 40 se añadieron gota a gota DEPC (1,39 ml) y TEA (1,82 ml). La mezcla de reacción se agitó 2 horas a 0°C, a
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continuación 4 horas a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se diluyó con 200 ml de agua y se extrajo tres veces con 50 ml de EtOAc. Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron una vez con 50 ml de KHSO4 (1 mol/l), una vez con 50 ml de NaHCO3 (sat.), una vez con 50 ml de NaCl (sat.), después se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron a presión reducida para producir 3,6 g (98%) del compuesto 2A en forma de un sólido de color amarillo.
Ejemplo 2B: (2R,3R)-N-((1S,2R)-1-hidroxi-1-fenilpropan-2-il)-3-metoxi-2-metil-3-((S)-pirrolidin-2il)propanamida-2,2,2-trifluoroacetato
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El compuesto 2A (2,7 g, 6,42 mmoles, 1,00 equiv) se disolvió en una atmósfera inerte en DCM (40 ml), después se enfrió a 0°C. Se añadió TFA (25 ml) y la solución se agitó durante 2 horas a 0°C. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida para producir 4,4 g del compuesto 2B en forma de un aceite de color amarillo.
Ejemplo 2C: (9H-fluoren-9-il)metil ((S)-1-(((3R,4S,5S)-1-((S)-2-((1R,2R)-3-(((1S,2R)-1-hidroxi-1-fenilpropan-2il)amino)-1-metoxi-2-metil-3-oxopropil)pirrolidin-1-il)-3-metoxi-5-metil-1-oxoheptan-4-il)(metil)amino)-3metil-1-oxobutan-2-il)carbamato
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Los compuestos 2B (4,4 g, 10,13 mmoles, 1,00 equiv) y 1W (5,31 g, 10,12 mmoles, 1,00 equiv) se disolvieron en una atmósfera inerte en DCM (45 ml). La solución se enfrió a 0°C, a continuación se añadieron gota a gota DEPC (1,62 ml) y DIEA (8,4 ml). La mezcla de reacción se agitó durante 2 horas a 0°C y después a temperatura
25 ambiente durante la noche. La mezcla de reacción se diluyó con 100 ml de agua y se extrajo tres veces con 50 ml de DCM. Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron una vez con 50 ml de KHSO4 (1 mol/l), una vez con 50 ml de NaHCO3 (sat.), una vez con 50 ml de NaCl (sat.), después se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron a presión para producir 3,3 g (39%) del compuesto 2C en forma de un sólido de color amarillo.
30 Ejemplo 2D: (S)-2-amino-N-((3R,4S,5S)-1-((S)-2-((1R,2R)-3-(((1S,2R)-1-hidroxi-1-fenilpropan-2-il)amino)-1metoxi-2-metil-3-oxopropil)pirrolidin-1-il)-3-metoxi-5-metil-1-oxoheptan-4-il)-N,3-dimetilbutanamida
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35 El compuesto 2C (300 mg, 0,36 mmoles, 1,00 eq.) se disolvió en una atmósfera inerte en ACN (2 ml) y piperidina (0,5 ml). La solución se dejó bajo agitación a temperatura ambiente durante la noche y después se evaporó hasta sequedad a presión reducida. El residuo se purificó en una columna de sílice con una mezcla de DCM y MeOH
(1:100) para producir 150 mg (68%) del compuesto 2D en forma de un sólido de color blanco. 40
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Ejemplo 2E: metil 2-((terc-butoxicarbonil)amino)isonicotinato
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5 El metil 2-aminopiridin-4-carboxilato (2 g, 13,14 mmoles, 1,00 equiv) se disolvió en terc-butanol (20 ml) después de lo cual se añadió di-terc-butil dicarbonato (4,02 g, 18,42 mmoles, 1,40 equiv) (20 ml). La mezcla de reacción se agitó a 60°C durante la noche, después la reacción se detuvo mediante la adición de una solución acuosa de NaHCO3 1M (50 ml). El sólido se recuperó por filtración, se lavó con 50 ml de EtOH, a continuación se secó in vacuo para producir 2,5 g (75%) del compuesto 2E en forma de un sólido de color blanco.
10
Ejemplo 2F: terc-butil (4-(hidroximetil)piridin-2-il)carbamato
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15 El compuesto 2E (2,5 g, 9,91 mmoles, 1,00 equiv) y CaCl2 (1,65 g) se disolvieron en EtOH (30 ml). La solución se enfrió a 0°C, a continuación se añadió gradualmente NaBH4 (1,13 g, 29,87 mmoles, 3,01 equiv). La solución se dejó bajo agitación durante la noche a temperatura ambiente, después la reacción se detuvo con la adición de agua (50 ml). La mezcla se extrajo tres veces con 20 ml de EtOAc. Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron dos veces con 20 ml de NaCl (sat.) y a continuación se secaron sobre sulfato sódico, se filtraron y se
20 concentraron bajo presión reducida para producir 2,0 g (90%) del compuesto 2F en forma de un sólido incoloro.
Ejemplo 2G: terc-butil (4-formilpiridin-2-il)carbamato
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25 El compuesto 2F (2,5 g, 11,15 mmoles, 1,00 equiv) se disolvió en DCE (25 ml) y después se añadieron 19,4 g (223,14 mmoles, 20,02 equiv) de MnO2. La mezcla se dejó bajo agitación durante la noche a 70°C, después los sólidos se retiraron por filtración. El filtrado se evaporó hasta sequedad para producir 1,4 g (57%) del compuesto 2G en forma de un sólido de color blanco.
30
Ejemplo 2H: bencil (S)-2-(((2-((terc-butoxicarbonil)amino)piridin-4-il)metil)(metil)amino)-3-metilbutanoato
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35 El compuesto 2G (2,3 g, 10,35 mmoles, 1,00 equiv) se disolvió en 25 ml de THF en presencia del compuesto 1ZC (2,93 g, 11,37 mmoles, 1,10 equiv), DIEA (5,39 g, 41,71 mmoles, 4,03 equiv) y NaBH(OAc)3 (4,39 g, 20,71 mmoles, 2,00 equiv). La mezcla de reacción se agitó durante 6 horas a temperatura ambiente y a continuación se neutralizó con 60 ml de NaHCO3 (sat.) y se extrajo 3 veces con 20 ml de AcOEt. Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron dos veces con 20 ml de NaCl (sat.), se secaron sobre sulfato de sodio, se
40 filtraron y se concentraron. El residuo se purificó en una columna de sílice con una mezcla de EtOAc y PE (1:15) para producir 2,7 g (61%) del compuesto 2H en forma de un sólido de color blanco.
Ejemplo 2I: Ácido (S)-2-(((2-((terc-butoxicarbonil)amino)piridin-4-il)metil)(metil)amino)-3-metilbutanoico
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El compuesto 2H (500 mg, 1,17 mmoles, 1,00 equiv) se disolvió en 10 ml de AcOEt y 2 ml de metanol en presencia de Pd/C (250 mg), y se hidrogenó durante 3 horas a temperatura ambiente y presión atmosférica. El
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medio de reacción se filtró y se concentró bajo presión reducida para producir 254 mg (64%) del compuesto 2I en forma de un sólido incoloro
Ejemplo 2J: terc-butil (4-((3S,6S,9S,10R)-9-((S)-sec-butil)-10-(2-((S)-2-((1R,2R)-3-(((1S,2R)-1-hidroxi-1fenilpropan-2-il)amino)-1-metoxi-2-metil-3-oxopropil)pirrolidin-1-il)-2-oxoetil)-3,6-diisopropil-2,8-dimetil4,7-dioxo-11-oxa-2,5,8-triazadodecil)piridin-2-il)carbamato
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10 El compuesto 2J se preparó de forma similar al compuesto 1ZG a partir de la amina 2D (85,2 mg, 0,14 mmoles, 1,50 equiv), el ácido 2I (31,7 mg, 0,09 mmoles, 1,00 equiv), HATU (42,9 mg, 0,11 mmoles, 1,20 equiv) y DIEA (36,7 mg, 0,28 mmoles, 3,02 equiv) en DMF (3 ml). Después de evaporación hasta sequedad, se obtuvieron 100 mg del producto bruto en forma de un sólido de color blanco.
15 Ejemplo 2: El compuesto 2J (100 mg, 0,11 mmoles, 1,00 equiv) se disolvió en 2 ml de DCM y 1 ml de TFA. La reacción se agitó durante 1 hora a temperatura ambiente, después se concentró a presión reducida. El residuo (80 mg) se purificó por HPLC preparativa (columna Pre-HPLC-001 SHIMADZU, SunFire Prep C18 OBD, 5 μm, 19 x 150 mm; fase de elución: agua/ACN con pH regulado con 0,05% de TFA; gradiente de 20% a 40% de ACN durante 10 minutos y a continuación de 40% a 100% de ACN durante 2 minutos; Detector UV Waters 2489 a 254
20 nm y 220 nm). El compuesto 2 se obtuvo con un rendimiento del 6% (6,3 mg) en forma de un sólido de color blanco.
LC/MS/UV (columna Ascentis Express C18, 2,7 μm, 4,6 x 100 mm; 40°C; 1,8 ml/min, de 10% a 95% de ACN en agua (0,05% de TFA) durante 6 minutos); ESI (C45H73N7O7, masa exacta 823,56) m/z: 824,5 (MH+) y 412,9
25 (M.2H+/2, 100%), 3,21 min (99,2%, 210 nm)
1H RMN (400 MHz, CD3OD, ppm): δ (Presencia de rotámeros) 7,81-7,79 (m, 1H); 7,39-7,29 (m, 5H); 6,61-6,59 (m, 2H); 4,84-4,52 (m, 1H); 4,32-4,02 (m, 1H); 3,90-2,98 (m, 10H); 2,90-2,78 (m, 1H); 2,55-0,81 (m, 39H).
30 Ejemplo de referencia 3
metil ((S)-2-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((S)-N,3-dimetil-2-((S)-3-metil-2-(metil(piridin-4ilmetil)amino)butanamido)butanamido)-3-metoxi-5-metilheptanoil)pirrolidin-2-il)-3-metoxi-2metilpropanamido)-3-fenilpropanoato, ácido trifluoroacético
35
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Ejemplo 3A: terc-butil (S)-2-((1R,2R)-1-metoxi-3-(((S)-1-metoxi-1-oxo-3-fenilpropan-2-il)amino)-2-metil-3oxopropil)pirrolidin-1-carboxilato
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El compuesto 1D (3 g, 10,44 mmoles, 1,00 equiv) y metil (S)-2-amino-3-fenilpropanoato (2,25 g, 12,55 mmoles, 1,20 equiv) se disolvieron en una atmósfera inerte en DMF (40 ml). La solución se enfrió a 0°C y a continuación se añadieron gota a gota DEPC (1,67 ml, 1,05 equiv) y TEA (3,64 ml, 2,50 equiv). La mezcla de reacción se agitó
5 2 horas a 0°C y después a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción se diluyó con 100 ml de agua y se extrajo tres veces con 50 ml de EtOAc. Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron una vez con 100 ml de KHSO4 (1 mol/l), una vez con 100 ml de NaHCO3 (sat.), una vez con 100 ml de NaCl (sat.), después se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron a presión para producir 4 g (85%) del compuesto 3A en forma de un aceite incoloro.
10
Ejemplo 3B: 2,2,2-trifluoroacetato de metil (S)-2-((2R,3R)-3-metoxi-2-metil-3-((S)-pirrolidin-2
il)propanamido)-3-fenilpropanoato
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15 El compuesto 3A (5 g, 11,15 mmoles, 1,00 equiv) se disolvió en una atmósfera inerte en DCM (40 ml). Se añadió TFA (25 ml) y la solución se agitó durante 2 horas. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida para producir 8 g del compuesto 3B en forma de un aceite de color amarillo.
20 Ejemplo 3C: metil (S)-2-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((S)-2-((((9H-fluoren-9-il)metoxi)carbonil)amino)-N,3dimetilbutanamido)-3-metoxi-5-metilheptanoil)pirrolidin-2-il)-3-metoxi-2-metilpropanamido)-3fenilpropanoato
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25 Los compuestos 3B (8,03 g, 17,36 mmoles, 1,00 equiv) y 1W (9,1 g, 17,34 mmoles, 1,00 equiv) se disolvieron en una atmósfera inerte en DCM (80 ml). La solución se enfrió a 0°C y a continuación se añadieron gota a gota DEPC (2,8 ml) y DIEA (12 ml). La mezcla de reacción se agitó durante 2 horas a 0°C y después a temperatura ambiente durante la noche. La mezcla de reacción se diluyó con 200 ml de agua y se extrajo tres veces con
30 50 ml de DCM. Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron una vez con 50 ml de KHSO4 (1 mol/l), una vez con 50 ml de NaHCO3 (sat.), una vez con 50 ml de NaCl (sat.), después se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron a presión reducida para producir 5 g (34%) del compuesto 3C en forma de un sólido de color amarillo.
35 Ejemplo 3D: metil (S)-2-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((S)-2-amino-N,3-dimetilbutanamido)-3-metoxi-5metilheptanoil)pirrolidin-2-il)-3-metoxi-2-metilpropanamido)-3-fenilpropanoato
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40 El compuesto 3C (5,5 g, 6,43 mmoles, 1,00 equiv) se disolvió en una atmósfera inerte en una solución de fluoruro de tetrabutilamonio (TBAF, 2,61 g, 9,98 mmoles, 1,55 equiv) en DMF (100 ml). La solución se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas y después se diluyó con 100 ml de agua y se extrajo tres veces con 50 ml de EtOAc. Las fases orgánicas se combinaron, a continuación se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida para producir 3,3 g (81%) del compuesto 3D en forma de un sólido de color amarillo.
imagen82
Ejemplo 3E: bencil (S)-3-metil-2-(metil(piridin-4-ilmetil)amino)butanoato
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La piridina-4-carbaldehído (1 g, 9,34 mmoles, 1,00 equiv) se disolvió en 10 ml de 1,2-dicloroetano (DCE) en presencia del compuesto 1ZC (2,9 g, 11,25 mmoles, 1,21 equiv) e isopropóxido de titanio (IV) (4,19 ml, 1,40 equiv). La mezcla se agitó a temperatura ambiente durante 30 minutos y después se añadieron 2,77 g de
10 NaBH(OAc)3 (13,07 mmoles, 1,40 equiv). El medio de reacción se dejó bajo agitación durante la noche y a continuación se neutralizó con 100 ml de agua y la mezcla se extrajo 3 veces con 50 ml de AcOEt. Las fases orgánicas se combinaron y se evaporaron hasta sequedad. El residuo se purificó en una columna de sílice con una mezcla de EtOAc y PE (1:20) para producir 1,3 g (45%) del compuesto 3E en forma de un aceite incoloro.
15 Ejemplo 3F: Ácido (S)-3-metil-2-(metil(piridin-4-ilmetil)amino)butanoico
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El compuesto 3E (800 mg, 2,56 mmoles, 1,00 equiv) se disolvió en 30 ml de AcOEt en presencia de Pd/C (300
20 mg) y se hidrogenó durante 3 horas a temperatura ambiente y presión atmosférica. El medio de reacción se filtró y se concentró bajo presión reducida. El residuo se purificó en una columna de sílice con una mezcla de DCM y MeOH (100:1 a 5:1) para producir 100 mg (18%) del compuesto 3F en forma de un sólido de color blanco.
Ejemplo 3: Los compuestos 3D (50 mg, 0,08 mmoles, 1,00 equiv) y 3F (26,34 mg, 0,12 mmoles, 1,50 equiv) se
25 disolvieron en 3 ml de DCM. La solución se enfrió a 0°C y a continuación se añadieron 0,018 ml de DEPC y 0,0392 ml de DIEA. La reacción se agitó a 0°C durante 2 horas y después a temperatura ambiente durante la noche. El medio de reacción se concentró a presión reducida y el residuo (70 mg) se purificó por HPLC preparativa (Pre-HPLC-001 SHIMADZU, columna SunFire Prep C18 OBD, 5 μm, 19 x 150 mm; fase de elución: agua/ACN con pH regulado con 0,05% de TFA; gradiente de 20% a 40% de ACN durante 10 minutos y a
30 continuación de 40% a 100% de ACN durante 2 minutos; Detector UV Waters 2545 a 254 nm y 220 nm). El compuesto 3 se obtuvo con un rendimiento del 27% (20 mg) en forma de un sólido de color blanco.
LC/MS/UV (columna Ascentis Express C18, 2,7 μm, 4,6 x 100 mm; 40°C; 1,5 ml/min, del 10% al 95% de ACN en agua (TFA al 0,05%) durante 8 minutos); ESI (C46H72N6O8, masa exacta 836,5) m/z: 837,5 (MH+) y 419,4
35 (M.2H+/2 (100%)), 7,04 min (90,0%, 210 nm)
1H RMN (400 MHz, CD3OD, ppm): δ (Presencia de rotámeros) 8,76-8,74 (m, 2H); 8,53-8,48 (m, 0,4H, NHCO intercambio incompleto); 8,29-8,15 (m, 0,8H, NHCO intercambio incompleto); 8,01 (s, 2H), 7,31-7,22 (m, 5H), 4,88-4,68 (m, 3H); 4,31-4,07 (m, 2H); 3,94-2,90 (m, 18H); 2,55-0,86 (m, 38H).
40
Ejemplo de referencia 4
Ácido (S)-2-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((S)-N,3-dimetil-2-((S)-3-metil-2-(metil(piridin-4ilmetil)amino)butanamido)butanamido)-3-metoxi-5-metilheptanoil)pirrolidin-2-il)-3-metoxi-2
45 metilpropanamido)-3-fenilpropanoico, ácido trifluoroacético
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Ejemplo 4: El compuesto 3 (100 mg, 0,11 mmoles, 1,00 equiv) se disolvió en una mezcla de agua (5 ml), ACN (5 ml) y piperidina (2,5 ml). La mezcla de reacción se dejó bajo agitación durante la noche y después se concentró a presión reducida. El residuo se purificó por HPLC preparativa (Pre-HPLC-001 SHIMADZU, columna
5 SunFire Prep C18 OBD, 5 μm, 19 x 150 mm; fase de elución: agua/ACN con pH regulado con TFA al 0,05%; gradiente de 20% a 40% de ACN durante 10 minutos y a continuación de 40% a 100% de ACN durante 2 minutos; Detector UV Waters 2545 a 254 nm y 220 nm), para producir 20 mg (20%) del compuesto 4 en forma de un sólido de color blanco.
10 LC/MS/UV (columna Ascentis Express C18, 2,7 μm, 4,6 x 100 mm; 40°C; 1,5 ml/min, de 10% a 95% de ACN en agua (TFA al 0,05%) por 8 minutos); ESI (C45H70N6O8, masa exacta 822,5) m/z: 823,5 (MH+) y 412,4 (M.2H+/2, 100%), 6,84 min (89,1%, 210 nm).
1H RMN (400 MHz, CD3OD, ppm): δ (Presencia de rotámeros) 8,79-8,78 (m, 2H); 8,09 (m, 2H); 7,30-7,21 (m, 15 5H); 4,80-4,80 (m, 1H), 4,36-0,87 (m, 58H).
Ejemplo de referencia 6
metil (S)-2-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((S)-2-((S)-2-((3-aminopropil)(metil)amino)-3-metilbutanamido)
20 N,3-dimetilbutanamido)-3-metoxi-5-metilheptanoil)pirrolidin-2-il)-3-metoxi-2-metilpropanamido)-3fenilpropanoato, ácido bis trifluoroacético
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25 Ejemplo 6A: metil (2S)-2-[(2R)-2-[(R)-[(2S)-1-[(3R,4S,5S)-4-[(2S)-2-[(2S)-2-[(3-[[(tercbutoxi)carbonil]amino]propil)(metil)amino]-3-metilbutanamido]-N,3-dimetilbutanamido]-3-metoxi-5metilheptanoil]pirrolidin-2-il](metoxi)metil]propanamido]-3-fenilpropanoato
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30 El compuesto 3D (157,5 mg, 0,25 mmoles, 1,00 equiv) se disolvió a 0°C en una atmósfera inerte, en 3 ml de DCM en presencia de ácido carboxílico 1ZF (78,7 mg, 0,27 mmoles, 1,10 equiv), DEPC (46 μl) y DIEA (124 μl). La mezcla de reacción se agitó 2 horas a baja temperatura y a continuación se retiró el baño frío y la agitación continuó durante 4 horas. A continuación, se concentró bajo presión reducida para producir 200 mg del
35 compuesto 6A en forma de un aceite bruto de color amarillo. Se utilizó como tal en la etapa siguiente.
Ejemplo 6: El compuesto 6A (200 mg, 0,22 mmoles, 1,00 equiv) se disolvió en una atmósfera inerte a 0°C en 2 ml de DCM. Se añadió TFA (1 ml) gota a gota y el baño frío se retiró. La mezcla de reacción se agitó 1 hora a temperatura ambiente y después se concentró a presión reducida. El residuo se purificó por HPLC preparativa
40 (Pre-HPLC-001 SHIMADZU, columna SunFire Prep C18 OBD, 5 μm, 19 x 150 mm; fase de elución: agua/ACN con pH regulado con TFA al 0,05%; gradiente de 20% a 40% de ACN durante 10 minutos y a continuación de 40% a 100% de ACN durante 2 minutos; detector UV Waters 2489 a 254 nm y 220 nm), para producir 60 mg (26%, rendimiento en 2 etapas) del compuesto 6 en forma de un sólido de color blanco.
45 LC/MS/UV (Zorbax Eclipse Plus C8, 3,5 μm, 4,6 x 150 mm; 1 ml/min, 40°C, de 30 a 80% de metanol en agua (H3PO4 al 0,1%) durante 18 minutos); ESI (C43H74N608, masa exacta 802,56) m/z: 804 (MH+); 11,50 min (91,5%, 210 nm).
1H RMN (300 MHz, CD3OD, ppm): δ (Presencia de rotámeros) 8,52 (d, 0,3H, NHCO intercambio incompleto); 50 8,25 (d, 0,5H, NHCO intercambio incompleto); 7,30-7,22 (m, 5H); 4,9-4,6 (m, 3H); 4,2-4,0 (m, 1H); 4,0-0,86 (m, 61H).
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Ejemplo de referencia 7
Ácido (S)-2-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((S)-2-((S)-2-((3-aminopropil)(metil)amino)-3-metilbutanamido)N,3-dimetilbutanamido)-3-metoxi-5-metilheptanoil)pirrolidin-2-il)-3-metoxi-2-metilpropanamido)-3fenilpropanoico, ácido bis trifluoroacético
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10 Ejemplo 7: El compuesto 6 (70 mg, 0,08 mmoles, 1,00 equiv) se disolvió en una mezcla de agua (5 ml), ACN (2,5 ml) y piperidina (5 ml). La mezcla de reacción se dejó bajo agitación durante la noche a temperatura ambiente, después se concentró a presión reducida. El residuo se purificó por HPLC preparativa (Pre-HPLC-001 SHIMADZU, columna SunFire Prep C18 OBD, 5 μm, 19 x 150 mm; fase de elución: agua/ACN con pH regulado
15 con TFA al 0,05%; gradiente de 20% a 40% de ACN durante 10 minutos y a continuación de 40% a 100% de ACN durante 2 minutos; Detector UV Waters 2489 a 254 nm y 220 nm), para producir 14,6 mg (21%) del compuesto 7 en forma de un sólido de color blanco.
LC/MS/UV (Ascentis Express C18, 2,7 μm, 4,6 x 100 mm; 1,5 ml/min, 40°C, de 0 a 80% de metanol en agua 20 (TFA al 0,05%) durante 8 minutos); ESI (C42H72N6O8, masa exacta 788,54) m/z: 790 (MH+), 5,71 min (96,83%, 210 nm).
1H RMN (300 MHz, CD3OD, ppm): δ (Presencia de rotámeros) 8,42 (d, 0,3H, NHCO intercambio incompleto); 8,15 (d, 0,2H, NHCO intercambio incompleto); 7,31-7,21 (m, 5H); 4,9-4,6 (m, 3H); 4,25-4,0 (m, 1H); 4,0-0,86 (m, 25 59H).
Ejemplo 11
(S)-N-((3R,4S,5S)-3-metoxi-1-((S)-2-((1R,2R)-1-metoxi-2-metil-3-oxo-3-(((S)-2-fenil-1-(tiazol-230 il)etil)amino)propil)pirrolidin-1-il)-5-metil-1-oxoheptan-4-il)-N,3-dimetil-2-((S)-3-metil-2-(metil(4(metilamino)fenetil)amino)butanamido)butanamida, ácido trifluoroacético
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35 Ejemplo 11A: terc-butil N-[4-(2-hidroxietil)fenil] carbamato El compuesto 11A se obtuvo con un rendimiento del 75% después de la reacción a temperatura ambiente del 2(4-aminofenil)etanol con BOC2O en THF. 40 Ejemplo 11B: terc-butil N-[4-(2-oxoetil)fenil]carbamato
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El compuesto 11A (2,5 g, 10,5 mmoles, 1,00 equiv) se disolvió en 25 ml de DCM y a continuación se enfrió a -78°C. Una solución de Dess-Martin periodinano (DMP, 6,71 g, 15,8 mmoles, 1,5 equiv) en DCM (10 ml) se 5 añadió gota a gota. El baño frío se retiró y la agitación continuó durante 1 hora a temperatura ambiente. La reacción se neutralizó con 60 ml de una mezcla 50/50 de solución acuosa de bicarbonato de sodio saturado y solución acuosa saturada de Na2S2O3. La solución resultante se extrajo 3 veces con 30 ml de EtOAc. Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron dos veces con solución acuosa saturada de NaCl, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó sobre gel de sílice
10 (EtOAc/PE 1/15) para producir 1,0 g (40%) del compuesto 11B en forma de un sólido de color amarillo pálido.
Ejemplo 11C: bencil (2S)-2-[[2-(4-[[(terc-butoxi)carbonil]amino]fenil)etil](metil)amino]-3-metilbutanoato.
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15 El compuesto 1ZC (3,5 g, 13,6 mmoles, 1,1 equiv) se disolvió en THF (30 ml) en presencia de DIEA (6,4 g, 49,7 mmoles, 4,0 equiv), aldehído 11B (2,9 g, 12,3 mmoles, 1,0 equiv) y triacetoxiborohidruro sódico (5,23 g, 49,7 mmoles, 2,0 equiv). La mezcla de reacción se dejó bajo agitación durante la noche a temperatura ambiente, a continuación se neutralizó con 60 ml de solución saturada de bicarbonato de sodio. La solución resultante se
20 extrajo 3 veces con 30 ml de EtOAc. Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron dos veces con solución acuosa saturada de NaCl, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó sobre gel de sílice (EtOAc/PE 1:20) para producir 3,7 g (68%) del compuesto 11C en forma de un aceite de color amarillo.
25 Ejemplo 11D: Ácido (2S)-2-[[2-(4-[[(terc-butoxi)carbonil]amino]fenil)etil](metil)amino]-3-metilbutanoico
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El compuesto 11C (2 g, 4,5 mmoles, 1 equiv) se disolvió en 10 ml de metanol en presencia de Pd/C (2 g) y se 30 hidrogenó durante 2 horas a temperatura y presión normal. El medio de reacción se filtró y se concentró bajo presión reducida para producir 1,2 g (75%) del compuesto 11D en forma de un aceite de color amarillo.
Ejemplo 11E: Ácido (2S)-2-[[2-(4-[[(terc-butoxi)carbonil](metil)amino]fenil)etil](metil)amino]-3metilbutanoico
35
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El compuesto 11D (1,2 g, 3,4 mmoles, 1,00 equiv) se disolvió en una atmósfera inerte en THF (20 ml). El medio de reacción se enfrió con un baño de hielo después de lo cual se añadió NaH (60% en aceite, 549 mg,
40 13,7 mmoles, 4,0 equiv) en porciones, seguido de yodometano (4,9 g, 34 mmoles, 10 equiv). La reacción se dejó bajo agitación durante la noche a temperatura ambiente, después se neutralizó con agua y se lavó con 100 ml de EtOAc. El pH de la solución acuosa se ajustó a 6-7 con HCl 1N. Esta solución acuosa se extrajo 3 veces con 100 ml de EtOAc. Las fases orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron para producir 800 mg (64%) del compuesto 11E en forma de un sólido de color amarillo.
45 Ejemplo 11F: terc-butil N-[4-(2-[[(1S)-1-[[(1S)-1-[[(3R,4S,5S)-3-metoxi-1-[(2S)-2-[(1R,2R)-1-metoxi-2-metil-2[[(1S)-2-fenil-1-(1,3-tiazol-2-il)etil]carbamoil]etil]pirrolidin-1-il]-5-metil-1-oxoheptan-4-il](metil)carbamoil]-2metilpropil]carbamoil]-2-metilpropil](metil)amino]etil)fenil]-N-metilcarbamato
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El compuesto 11F se preparó de manera similar al compuesto 6A a partir de la amina 1Y (150 mg, 0,22 mmoles, 1,2 equiv) y el ácido 11E (70 mg, 0,19 mmoles, 1,0 equiv). Después de la purificación sobre gel de sílice 5 (EtOAc/PE 1:1) se obtuvieron 100 mg (52%) del producto deseado en forma de un sólido de color amarillo pálido.
Ejemplo 11: El compuesto 11 se preparó de la misma manera que para el compuesto 1 a partir del producto intermedio 11F (100 mg, 0,1 mmoles). El residuo se purificó por HPLC preparativa (Pre-HPLC-001 SHIMADZU, columna SunFire Prep C18 OBD, 5 μm, 19 x 150 mm; fase de elución: agua/ACN con pH regulado con TFA al
10 0,05%; gradiente de 20% a 40% de ACN durante 10 minutos y a continuación de 40% a 100% de ACN durante 2 minutos; detector UV Waters 2489 a 254 nm y 220 nm). El compuesto 11 se obtuvo con un rendimiento del 39% (39,7 mg) en forma de un sólido de color blanco.
LC/MS/UV (Eclipse Plus C8, 3,5 μm, 4,6 x 150 mm; 1 ml/min, 40°C, de 50 a 95% de metanol en agua (TFA al 15 0,05%) durante 18 minutos); ESI (C50H77N7O6S, masa exacta 903,57) m/z: 904,5 (MH+), 7,53 min (93,68%, 254 nm).
1H RMN (300 MHz, CD3OD, ppm): δ (Presencia de rotámeros) 8,84 (d, 0,5H, NHCO intercambio incompleto); 8,78,5 (m, 0,9H, NHCO intercambio incompleto); 7,76-7,73 (m, 1H); 7,55-7,4 (m, 1H); 7,28-7,22 (m, 7H); 7,08-7,05 20 (m, 2H); 5,51-5,72 (m, 1H); 4,9-4,80 (m, 2H); 4,3-0,7 (m, 60H).
Ejemplo 12
Metil (S)-2-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((S)-N,3-dimetil-2-((S)-3-metil-2-(metil(4-(metilamino)fenetil)25 amino)butanamido)butanamido)-3-metoxi-5-metilheptanoil)pirrolidin-2-il)-3-metoxi-2-metilpropanamido)3-fenilpropanoato, ácido trifluoroacético
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30 Ejemplo 12: De la misma manera que para las fases finales en la síntesis del compuesto 1, el compuesto 12 se preparó en dos etapas a partir de la amina 3D (118 mg, 0,19 mmoles) y el ácido 11E (82 mg, 0,22 mmoles). El residuo final se purificó por HPLC preparativa (Pre-HPLC-001 SHIMADZU, columna SunFire Prep C18 OBD, 5 μm, 19 x 150 mm; fase de elución: agua/ACN con pH regulado con TFA al 0,05%; gradiente de 20% a 40% de ACN durante 10 minutos y a continuación de 40% a 100% de ACN durante 2 minutos; Detector UV Waters 2489
35 a 254 nm y 220 nm). El compuesto 12 se obtuvo con un rendimiento del 7% (13,7 mg) en forma de un sólido de color blanco.
LC/MS/UV (Eclipse Plus C8, 3,5 μm, 4,6 x 150 mm; 1 ml/min, 40°C, de 40 a 95% de metanol en agua (TFA al 0,05%) por 18 minutos); ESI (C49H78N6O8, masa exacta 878,59) m/z: 879,7 (MH+), 10,07 min (90,6%, 254 nm).
40 1H: RMN (300 MHz, CD3OD, ppm): δ (Presencia de rotámeros) 7,40 (se, 2H); 7,38-7,22 (m, 7H); 4,95-4,7 (m, 3H); 4,2-4,0 (m, 1H); 3,9-0,86 (m, 62H).
Ejemplo 13
45 Ácido (S)-2-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((S)-N,3-dimetil-2-((S)-3-metil-2-(metil(4(metilamino)fenetil)amino)butanamido)butanamido)-3-metoxi-5-metilheptanoil)pirrolidin-2-il)-3-metoxi-2metilpropanamido)-3-fenilpropanoico, ácido trifluoroacético
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5 12 (100 mg, 0,10 mmoles). El residuo se purificó por HPLC preparativa (Pre-HPLC-001 SHIMADZU, columna SunFire Prep C18 OBD, 5 μm, 19 x 150 mm; fase de elución: agua/ACN con pH regulado con TFA al 0,05%; gradiente de 20% a 40% de ACN durante 10 minutos y a continuación de 40% a 100% de ACN durante 2 minutos; detector UV Waters 2489 a 254 nm y 220 nm). El compuesto 13 se obtuvo con un rendimiento del 20% (20 mg) en forma de un sólido de color blanco.
10 LC/MS/UV (Ascentis Express C18, 2,7 μm, 4,6 x 100 mm; 1,5 ml/min, 40°C, de 10 a 95% de metanol en agua (TFA al 0,05%) durante 8 minutos); ESI (C48H76N6O8, masa exacta 864,57) m/z: 865,6 (MH+), 6,05 min (90,9%, 210 nm).
15 1H RMN: (300 MHz, CD3OD, ppm): δ (Presencia de rotámeros) 7,32-7,19 (m, 9H); 4,9-4,65 (m, 3H); 4,2-4,0 (m, 1H); 3,9 a 0,86 (m, 59H).
Ejemplo 14
20 (S)-2-((S)-2-((3-aminobencil)(metil)amino)-3-metilbutanamido)-N-((3R,4S,5S)-3-metoxi-1-((S)-2-((1R,2R)-1metoxi-2-metil-3-oxo-3-(((S)-2-fenil-1-(tiazol-2-il)etil)amino)propil)pirrolidin-1-il)-5-metil-1-oxoheptan-4-il)N,3-dimetilbutanamida, ácido trifluoroacético
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Ejemplo 14A: terc-butil (3-(hidroximetil)fenil)carbamato
imagen100
30 Se disuelve (3-aminofenil)metanol (3 g, 24,36 mmoles, 1,00 equiv) en THF (60 ml) después de lo cual se añadió di-terc-butil dicarbonato (6,38 g, 29,23 mmoles, 1,20 equiv). La mezcla de reacción se dejó bajo agitación durante la noche a temperatura ambiente y después se diluyó la reacción mediante la adición de 200 ml de agua. El producto se extrajo 3 veces con 100 ml de AcOEt y las fases orgánicas se recombinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron a presión reducida para producir el producto bruto (13,85 g del
35 compuesto 14A) en forma de un aceite de color amarillo.
Ejemplo 14B: terc-butil(3-formilfenil)carbamato
imagen101
imagen102
El compuesto 14A (13,8 g, 61,81 mmoles, 1,00 equiv) se disolvió en DCE (400 ml) y a continuación se añadió MnO2 (54 g, 621,14 mmoles, 10,05 equiv). La mezcla se dejó en agitación a temperatura ambiente durante 3 días después de lo cual los sólidos se separaron por filtración. El filtrado se evaporó hasta sequedad y el residuo se purificó en una columna de sílice con una mezcla de EtOAc y PE (1:30) para producir 3 g (22%) del compuesto 14B en forma de un sólido de color blanco.
Ejemplo 14C: bencil (S)-2-((3-((terc-butoxicarbonil)amino)bencil)(metil)amino)-3-metilbutanoato
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El compuesto 14B (1 g, 4,52 mmoles, 1,00 equiv) se disolvió en 20 ml de THF en presencia del compuesto 1ZC (1,16 g, 4,50 mmoles, 1,00 equiv), DIEA (3 ml) y NaBH(OAc)3 (1,92 g, 9,06 mmoles, 2,01 equiv). La mezcla de reacción se dejó bajo agitación durante la noche a temperatura ambiente y después se neutralizó con 100 ml de
15 agua y se extrajo 3 veces con 50 ml de AcOEt. Las fases orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron. El residuo se purificó en una columna de sílice con una mezcla de EtOAc y PE (1:50) para producir 1,9 g (99%) del compuesto 14C en forma de un sólido de color blanco.
Ejemplo 14D: Ácido (S)-2-((3-((terc-butoxicarbonil)amino)bencil)(metil)amino)-3-metilbutanoico
20
imagen104
El compuesto 14C (1 g, 2,34 mmoles, 1,00 equiv) se disolvió en 30 ml de AcOEt y 4 ml de metanol en presencia de Pd/C (400 mg) y se hidrogenó durante 1 hora a temperatura ambiente y presión atmosférica. El medio de 25 reacción se filtró y se concentró bajo presión reducida para producir 680 mg (86%) del compuesto 14D en forma de un sólido de color blanco.
Ejemplo 14E: terc-butil (3-((3S,6S,9S,10R)-9-((S)-sec-butil)-3,6-diisopropil-10-(2-((S)-2-((1R,2R)-1-metoxi-2metil-3-oxo-3-(((S)-2-fenil-1-(tiazol-2-il)etil)amino)propil)pirrolidin-1-il)-2-oxoetil)-2,8-dimetil-4,7-dioxo-1130 oxa-2,5,8-triazadodecil)fenil)carbamato
imagen105
El compuesto 14E se sintetizó de la misma manera que para el compuesto 3 a partir de la amina 1Y (100 mg,
35 0,15 mmoles, 1,00 equiv), el ácido 14D (102,27 mg, 0,30 mmoles, 2,00 equiv), DEPC (0,053 ml) y DIEA (0,046 ml) en DCM (3 ml). El producto bruto (80 mg) se purificó en una columna de sílice con una mezcla de EtOAc y PE (1:1) para producir 100 mg (67%) del compuesto 14E en forma de un sólido de color amarillo pálido.
Ejemplo 14: El compuesto 14 se sintetizó de la misma manera que para el compuesto 2 a partir del producto
40 intermedio 14E (100 mg, 0,10 mmoles, 1,00 equiv). El producto bruto (80 mg) se purificó por HPLC preparativa (Pre-HPLC-001 SHIMADZU, columna SunFire Prep C18 OBD, 5 μm, 19 x 150 mm; fase de elución: agua/ACN con pH regulado con TFA al 0,05%; gradiente de 20% a 40% de ACN durante 10 minutos y a continuación de 40% a 100% de ACN durante 2 minutos; Detector UV Waters 2545 a 254 nm y 220 nm). El compuesto 14 se obtuvo con un rendimiento del 10% (10 mg) en forma de un sólido de color blanco.
45 LC/MS/UV (columna Eclipse Plus C8, 3,5 μm, 4,6 x 150 mm; 40°C; 1,0 ml/min, de 40% a 95% de MeOH en agua (TFA al 0,05%) durante 18 minutos); ESI (C48H73N7O6S, masa exacta 875,5) m/z: 876,5 (MH+) y 438,9 (M.2H+/2, 100%), 11,35 min (95,6%, 210 nm).
imagen106
5 1H RMN (400 MHz, CD3OD, ppm): δ (Presencia de rotámeros) 8,92-8,86 (m, 0,4H, NH intercambio incompleto); 8,70-8,54 (m, 0,6H, NH intercambio incompleto); 7,88-7,78 (m, 1H); 7,60-7,50 (m, 1H); 7,45-6,97 (m, 9H); 5,805,65 (m, 1H); 4,85-4,70 (m, 1H); 4,40-0,80 (m, 56H).
Ejemplo 15
10 metil (S)-2-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((S)-2-((S)-2-((3-aminobencil)(metil)amino)-3-metilbutanamido)N,3-dimetilbutanamido)-3-metoxi-5-metilheptanoil)pirrolidin-2-il)-3-metoxi-2-metilpropanamido)-3fenilpropanoato, ácido trifluoroacético
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Ejemplo 15A: metil (S)-2-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((S)-2-((S)-2-((3-((tercbutoxicarbonil)amino)bencil)(metil)amino)-3-metilbutanamido)-N,3-dimetil-butan-amido)-3-metoxi-5metilheptanoil)pirrolidin-2-il)-3-metoxi-2-metilpropanamido)-3-fenilpropanoato
imagen108
El compuesto 15A se sintetizó de la misma manera que para el compuesto 3 a partir de la amina 3D (200 mg, 0,32 mmoles, 1,00 equiv), el ácido 14D (212,6 mg, 0,63 mmoles, 2,00 equiv), DEPC (0,1103 ml) y DIEA
25 (0,157 ml, 3,00 equiv) en DCM (5 ml). El producto bruto se purificó sobre una columna de sílice con una mezcla de EtOAc y PE (1:1) para producir 200 mg (67%) del compuesto 15A en forma de un sólido de color amarillo.
Ejemplo 15: El compuesto 15 se sintetizó de la misma manera que para el compuesto 2 a partir del producto intermedio 15A (200 mg, 0,21 mmoles, 1,00 equiv). El producto bruto se purificó por HPLC preparativa (Pre
30 HPLC-001 SHIMADZU, columna SunFire Prep C18 OBD, 5 μm, 19 x 150 mm; fase de elución: agua/ACN con pH regulado con TFA al 0,05%; gradiente de 20% a 40% ACN durante 10 minutos y a continuación de 40% a 100% de ACN durante 2 minutos; Detector UV Waters 2545 a 254 nm y 220 nm). El compuesto 15 se obtuvo con un rendimiento del 19% (38,6 mg) en forma de un sólido de color blanco.
35 LC/MS/UV (columna Ascentis Express C18, 2,7 μm, 4,6 x 100 mm; 40°C; 1,5 ml/min, de 10% a 95% de MeOH en agua (TFA al 0,05%) durante 8 minutos); ESI (C47H74N6O8, masa exacta 850,5) m/z: 851,5 (MH+) y 426,4 (M.2H+/2, 100%), 6,61 min (91,1%, 210 nm).
1H RMN (400 MHz, CD3OD, ppm): δ (Presencia de rotámeros) 7,53-7,42 (m, 1H); 7,35-7,18 (m, 8H); 4,88-4,79 40 (m, 2H); 4,42-4,00 (m, 3H); 3,93-2,71 (m, 22H); 2,61-0,81 (m, 33H).
Ejemplos 16 al 20
imagen109
Los compuestos 16 a 20 se prepararon de la misma manera que para el compuesto 1, a partir de las aminas 1Y y 1ZC y los aldehídos correspondientes.
5 El carbonato de terc-butil 4-formilfenilo involucrado en la preparación del compuesto 19 se preparó en una sola etapa de la siguiente manera: 4-hidroxibenzaldehído (2,5 g, 20,5 mmoles, 1,0 equiv) se disolvió en una atmósfera inerte en THF (20 ml) en la presencia de 18-corona-6 (0,25 g) y carbonato de potasio (5 g). La mezcla de reacción se enfrió a 0°C y a continuación se añadió el dicarbonato de di-terc-butilo (5,8 g, 26,58 mmoles, 1,30
10 equiv). La agitación continuó durante 1 hora a baja temperatura, después de lo cual la reacción se neutralizó con 30 ml de agua. La solución resultante se extrajo tres veces con 200 ml de EtOAc. Las fases orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo se purificó sobre gel de sílice (EtOAc/PE 1:10) y produjo 4,2 g (92%) de carbonato de terc-butil 4formilfenilo en forma de un sólido de color amarillo pálido.
15 El 4-nitrobenzaldehido involucrado en la preparación del compuesto 20 era comercial.
La síntesis del compuesto 20 se completó mediante la reducción del grupo nitro. Esto se realizó como se expone a continuación: (2S)-N-[(3R,4S,5S)-1-[(2S)-2-[(1R,2R)-2-[[(1S,2R)-1-hidroxi-1-fenilpropan-2-il]carbamoil]-1
20 metoxi-2-metiletil]pirrolidin-1-il]-3-metoxi-5-metil-1-oxoheptan-4-il]-N,3-dimetil-2-[(2S)-3-metil-2-[metil[(4nitrofenil)metil]amino]butanamido]butanamida (40 mg, 0,05 mmoles, 1,0 equiv) se disolvió en 15 ml de etanol. Se añadió cloruro de estaño dihidratado (II) (317 mg, 1,4 mmoles, 30 equiv) y la solución se dejó bajo agitación durante 3 días a temperatura ambiente. La reacción se neutralizó con 50 ml de agua, a continuación se extrajo tres veces con 50 ml de EtOAc. Las fases orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio anhidro,
25 se filtraron y se concentraron bajo presión reducida para producir el compuesto 20 en estado bruto.
Nº
Nombre x R Pureza* Cantidad
19
(S)-2-((S)-2-((4-hidroxibencil)(metil)amino)-3metilbutanamido)-N-((3R,4S,5S)-3-metoxi-1((S)-2-((1R,2R)-1-metoxi-2-metil-3-oxo-3-(((S)-2fenil-1-(tiazol-2-il)etil)amino)propil)pirrolidin-1-il)5-metil-1-oxoheptan-4-il)-N,3dimetilbutanamida,ácido trifluoroacético 1 imagen110 93,2% 21,6 mg
20
(S)-2-((S)-2-((4-aminobencil)(metil)amino)-3metilbutanamido)-N-((3R,4S,5S)-3-metoxi-1((S)-2-((1R,2R)-1-metoxi-2-metil-3-oxo-3-(((S)-2fenil-1-(tiazol-2-il)etil)amino)propil)pirrolidin-1-il)5-metil-1-oxoheptan-4-il)-N,3dimetilbutanamida,ácido trifluoroacético 1 imagen111 96,7% 21,1 mg
* Los compuestos se purificaron por HPLC preparativa (Pre-HPLC-001 SHIMADZU, columna SunFire Prep C18 OBD, 5 μm, 19 x 150 mm; Fase de elución: agua/ACN con pH regulado con TFA al 0,05%; gradiente de 20% a
30 40% de ACN durante 10 minutos y a continuación de 40% a 100% de ACN durante 2 minutos; Detector UV Waters 2489 a 254 nm y 220 nm), para producir las sales de TFA correspondiente en forma de sólidos de color blanco.
Caracterización de los productos finales: Compuesto 19 LC/MS/UV ESI: (C48H72N6O7S, masa exacta 876,52) m/z
35 877 (MH+), 439 [100%, (M.2H+)/2]; UV: RT = 1,76 min (93,2%, 220 nm). Compuesto 20 1H RMN: (400 MHz, CD3OD, ppm): δ (Presencia de rotámeros) 7,85-7,80 (m, 1H); 7,6-7,5 (m, 1H); 7,4-7,15 (m, 5H); 7,1-7,05 (m, 2H); 6,73-6,70 (m, 2H); 5,8-5,55 (m, 1H); 5,0-4,7 (m, 2H); 4,25-4,05 (m, 1H); 4,0-0,8 (m, 54H). LC/MS/UV ESI: (C48H73N7O7S, masa exacta 875,53) m/z 876 (MH+), 439 [75%, (M.2H+)/2]; UV: RT = 4,83 min (96,8%, 254 nm). 1H RMN (400 MHz, CD3OD, ppm): δ (Presencia de rotámeros) 7,85-7,80 (m, 1H); 7,6-7,5 (m, 1H); 7,4-7,1 (m,
40 7H); 6,76-6,72 (m, 2H); 5,8-5,55 (m, 1H); 4,9-4,65 (m, 2H); 4,25-4,05 (m, 1H); 4,0-0,8 (m, 54H).
imagen112
imagen113
Los compuestos 23 y 24 se prepararon de la misma manera que para los compuestos 19 y 20, reemplazando a la amina 1Y por la amina 2D.
Nº
Nombre x R Pureza* Cantidad
23
(S)-N-((3R,4S,5S)-1-((S)-2-((1R,2R)3-(((1S,2R)-1-hidroxi-1-fenilpropan-2il)amino)-1-metoxi-2-metil-3oxopropil)pirrolidin-1-il)-3-metoxi-5metil-1-oxoheptan-4-il)-2-((S)-2-((4hidroxibencil)(metil)amino)-3metilbutanamido)-N,3dimetilbutanamida, ácido trifluoroacético 1 imagen114 98,5% 5,8 mg
24
(S)-2-((S)-2-((4aminobencil)(metil)amino)-3-metilbutanamido)-N-((3R,4S,5S)-1((S)-2-((1R,2R)-3-(((1S,2R)-1-hidroxi1-fenilpropan-2-il)amino)-1-metoxi-2metil-3-oxopropil)pirrolidin-1-il)-3metoxi-5-metil-1-oxoheptan-4-il)-N,3dimetilbutanamida, ácido trifluoroacético 1 imagen115 99,1% 6,9 mg
* Los compuestos se purificaron por HPLC preparativa (Pre-HPLC-001 SHIMADZU, columna SunFire Prep C18
10 OBD, 5 μm, 19 x 150 mm; fase de elución: agua/ACN con pH regulado con TFA al 0,05%; gradiente de 20% a 40% de ACN durante 10 minutos y a continuación de 40% a 100% de ACN durante 2 minutos; Detector UV Waters 2489 a 254 nm y 220 nm), para producir las sales de TFA correspondiente en forma de sólidos de color blanco.
15 Caracterización de los productos finales: Compuesto 23 LC/MS/UV (ESI) (C46H73N5O8, masa exacta 823,55) m/z 824 (MH+), 846 (MNa+), 413 (100%, (M.2H+)/2); UV: 4,76 min (98,5%, 215 nm). 1H RMN (400 MHz, CDCl3, ppm): δ (Presencia de rotámeros) 7,5-7,2 (m, 5H); 7,9-7,75 (m, 2H); 5,5-5,3 (m, 1H); 4,9-4,6 (m, 2H); 4,55-4,15 (m, 4H); 4,0-0,8 (m, 55H). Compuesto 24 LC/MS/UV (ESI) (C46H74N6O7, masa exacta 822,56) m/z 823 (MH+), 845 (MNa+), 861 (MK+); UV: 3,68 min (99,15%, 254 nm). 1H RMN (400 MHz, CD3OD, ppm): δ (Presencia de rotámeros) 8,0
20 7,7 (m, 0,5H, NHCO intercambio incompleto); 7,5-7,0 (m, 7H); 6,75-6,65 (m, 2H); 4,85-4,5 (m, 2H); 4,4-4,05 (m, 2H); 4,0-0,8 (m, 56H).
Ejemplo 27
25 metil (S)-2-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((S)-2-((S)-2-((4-hidroxifenetil)(metil)amino)-3-metilbutanamido)N,3-dimetilbutanamido)-3-metoxi-5-metilheptanoil)pirrolidin-2-il)-3-metoxi-2-metilpropanamido)-3fenilpropanoato, ácido trifluoroacético
imagen116
5 y DIEA (0,055 ml, 3,00 equiv) en DCM (3 ml). El producto en bruto se purificó por HPLC preparativa (Pre-HPLC001 SHIMADZU, columna SunFire Prep C18 OBD, 5 μm, 19 x 150 mm; fase de elución: agua/ACN con pH regulado con TFA al 0,05%; gradiente de 20% a 45% de ACN durante 10 minutos y a continuación de 40% a 100% de ACN durante 2 minutos; Detector UV Waters 2545 a 254 nm y 220 nm). El compuesto 27 se obtuvo con un rendimiento del 3% (2,9 mg) en forma de un sólido de color blanco.
10 LC/MS/UV (columna Eclipse Plus C8, 3,5 μm, 4,6 x 150 mm; 40°C; 1,5 ml/min, de 10% a 95% de MeOH en agua (TFA al 0,05%) durante 8 minutos); ESI (C48H75N5O9, masa exacta 866,56) m/z: 866,5 (MH+) y 433,9 (M.2H+/2, 100%), 6,61 min (89,1%, 210 nm).
15 1H RMN (400 MHz, CD3OD, ppm): δ (Presencia de rotámeros) 8,70-8,49 (m, 0,9H, NH/OH intercambio incompleto); 8,30-8,22 (m, 0,3H, NH intercambio incompleto); 7,36-7,02 (m, 7H); 6,86-6,62 (m, 2H); 4,82-4,69 (m, 2H); 4,20-4,03 (m, 1H); 3,91-3,33 (m, 12H); 3,30-2,90 (m, 17H); 2,55-0,80 (m, 35H).
Ejemplo 28
20 (S)-2-((S)-2-((3-aminobencil)(metil)amino)-3-metilbutanamido)-N-((3R,4S,5S)-1-((S)-2-((1R,2R)-3-(((1S,2R)-1hidroxi-1-fenilpropan-2-il)amino)-1-metoxi-2-metil-3-oxopropil)pirrolidin-1-il)-3-metoxi-5-metil-1oxoheptan-4-il)-N,3-dimetilbutanamida, ácido trifluoroacético
imagen117
Ejemplo 28A: terc-butil (3-((3S,6S,9S,10R)-9-((S)-sec-butil)-10-(2-((S)-2-((1R,2R)-3-(((1S,2R)-1-hidroxi-1fenilpropan-2-il)amino)-1-metoxi-2-metil-oxopropil)pirrolidin-1-il)-2-oxoetil)-3,6-diisopropil-2,8-dimetil-4,7dioxo-11-oxa-2,5,8-triazadodecil)fenil)carbamato
imagen118
El compuesto 28A se preparó de la misma manera que para el compuesto 3 a partir de la amina 2D (100 mg, 0,17 mmoles, 1,00 equiv), el ácido 14D (111,25 mg, 0,33 mmoles, 2,00 equiv), DEPC (0,058 ml) y DIEA (0,05 ml) 35 en DCM (3 ml). El residuo se purificó en una columna de sílice con una mezcla de EtOAc y hexano (1:1) para
imagen119
Ejemplo 28: El compuesto 28 se sintetizó de la misma manera que para el compuesto 2 a partir del producto intermedio 28A (100 mg, 0,11 mmoles, 1,00 equiv). El producto bruto (80 mg) se purificó por HPLC preparativa
5 (Pre-HPLC-001 SHIMADZU, columna SunFire Prep C18 OBD, 5 μm, 19 x 150 mm; fase de elución: agua/ACN con pH regulado con TFA al 0,05%; gradiente de 20% a 40% de ACN durante 10 minutos y a continuación de 40% a 100% de ACN durante 2 minutos; Detector UV Waters 2545 a 254 nm y 220 nm). El compuesto 28 se obtuvo con un rendimiento del 20% (20 mg) en forma de un sólido de color blanco.
10 LC/MS/UV (columna Ascentis Express C18, 2,7 μm, 4,6 x 100 mm; 40°C; 1,5 ml/min, de 10% a 95% de MeOH en agua (TFA al 0,05%) durante 8 minutos); ESI (C46H74N6O7, masa exacta 822,56) m/z: 823,5 (MH+) y 412,4 (M.2H+/2, 100%), 12,45 min (87,2%, 210 nm).
1H RMN: (400 MHz, CD3OD, ppm): δ (Presencia de rotámeros) 7,47-7,20 (m, 5H); 7,10-7,01 (m, 1H); 6,80-6,56
15 (m, 3H); 4,82-4,52 (m, 3H); 4,33-4,03 (m, 2H); 3,91-3,82 (m, 0,5H); 3,75-3,35 (m, 9,5H); 3,28-3,10 (m, 2H); 2,792,90 (m, 1H); 2,60-2,40 (m, 2H); 2,30-0,80 (m, 40H).
Ejemplo 29
20 Ácido (S)-2-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((S)-2-((S)-2-((3-aminobencil)(metil)amino)-3-metilbutanamido)N,3-dimetilbutanamido)-3-metoxi-5-metilheptanoil)pirrolidin-2-il)-3-metoxi-2-metilpropanamido)-3fenilpropanoico, ácido trifluoroacético
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25 Ejemplo 29: El compuesto 15 (100 mg, 0,10 mmoles, 1,00 equiv) se disolvió en una mezcla de agua (5 ml), ACN (5 ml) y piperidina (2,5 ml). La mezcla de reacción se dejó bajo agitación durante la noche a temperatura ambiente y después se concentró a presión reducida. El residuo se purificó por HPLC preparativa (Pre-HPLC001 SHIMADZU, columna SunFire Prep C18 OBD, 5 μm, 19 x 150 mm; fase de elución: agua/ACN con pH
30 regulado con TFA al 0,05%; gradiente de 20% a 40% de ACN durante 10 minutos y a continuación de 40% a 100% de ACN durante 2 minutos; Detector UV Waters 2545 a 254 nm y 220 nm), para producir 20 mg (20%) del compuesto 29 en forma de un sólido de color blanco.
LC/MS/UV (columna Eclipse Plus C8, 3,5 μm, 4,6 x 150 mm; 40°C; 1,0 ml/min, de 40% a 95% de MeOH en agua 35 (TFA al 0,05%) durante 18 minutos); ESI (C46H72N6O8, masa exacta 836,54) m/z: 837,5 (MH+) y 419,4 (M.2H+/2, 100%), 10,61 min (92,5%, 210 nm).
1H RMN: (400 MHz, CD3OD, ppm): δ (Presencia de rotámeros) 7,38-7,15 (m, 6H); 7,00-6,99 (m, 3H); 4,85-4,68 (m, 2H); 4,37-3,38 (m, 11H); 3,31-2,70 (m, 8H); 2,60-0,82 (m, 35H). 40
Ejemplo 49
(S)-2-((S)-2-((4-hidroxifenetil)(metil)amino)-3-metilbutanamido)-N-((3R,4S,5S)-3-metoxi-1-((S)-2-((1R,2R)-1metoxi-2-metil-3-oxo-3-(((S)-2-fenil-1-(tiazol-2-il)etil)amino)propil)pirrolidin-1-il)-5-metil-1-oxoheptan-4-il)45 N,3-dimetilbutanamida, ácido trifluoroacético
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Ejemplo 49A: 2-(4-hidroxifenil)acetaldehído
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5 Se disolvió 4-(2-hidroxietil)fenol (4 g, 28,95 mmoles, 1,00 equiv) en DMSO (32 ml) y a continuación se añadió TEA (8,8 ml, 2,20 equiv.) gota a gota. Se agregó una solución de SO3·Py (10 g, 2,20 equiv) en DMSO (36 ml) y la mezcla se dejó bajo agitación durante la noche a temperatura ambiente. La mezcla de reacción se neutralizó con 250 ml de agua y se extrajo 3 veces con 100 ml de AcOEt. Las fases orgánicas se combinaron, se lavaron 5
10 veces con agua (100 ml), después dos veces con 150 ml de NaCl (sat.), se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron. El residuo se purificó sobre gel de sílice (EtOAc/PE (1:10) para producir 1 g (25%) del compuesto 49A en forma de un aceite incoloro.
Ejemplo 49B: bencil (S)-2-((4-hidroxifenetil)(metil)amino)-3-metilbutanoato
15
imagen124
El compuesto 49B se sintetizó de la misma manera que para el compuesto 14C a partir de la amina 1ZC (1,5 g, 5,82 mmoles, 0,99 equiv), el aldehído 49A (800 mg, 5,88 mmoles, 1,00 equiv), NaBH(OAc)3 (2,7 g,
20 12,74 mmoles, 2,17 equiv) y DIEA (4,23 ml) en THF (25 ml). La mezcla de reacción se neutralizó con 50 ml de agua y se extrajo 3 veces con 50 ml de AcOEt. Las fases orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron. El residuo se purificó sobre gel de sílice (EtOAc/PE (1:10) para producir 600 mg (37%) del compuesto 49B en forma de un sólido de color blanco.
25 Ejemplo 49C: Ácido (S)-2-((4-hidroxifenetil)(metil)amino)-3-metilbutanoico
imagen125
El compuesto 49B (0,5 g, 1,46 mmoles, 1,00 equiv) se disolvió en 40 ml de MeOH en presencia de Pd/C (250
30 mg) y se hidrogenó durante 3 horas a temperatura ambiente y presión atmosférica. El medio de reacción se filtró y se concentró bajo presión reducida para producir 0,4 g del compuesto 49C en forma de un sólido de color blanco.
Ejemplo 49: El compuesto 49 se sintetizó de la misma manera que para el compuesto 3 a partir de la amina 1Y
35 (53,4 mg, 0,08 mmoles, 2,00 equiv), el ácido 49C (70 mg, 0,28 mmoles, 1,00 equiv), DEPC (0,032 ml, 2,00 equiv) y DIEA (0,053 ml, 3,00 equiv) en DCM (3 ml). El residuo se purificó por HPLC preparativa (Pre-HPLC-001 SHIMADZU, columna Atlantis Prep OBD T3, 5 μm, 19 x 150 mm; fase de elución: agua/ACN con pH regulado con TFA al 0,05%; gradiente de 20% a 45% de ACN durante 10 minutos y a continuación de 45% a 100% de ACN durante 2 minutos; Detector UV Waters 2545 a 254 nm y 220 nm), para producir 3 mg (1%) del compuesto
40 49 en forma de un sólido de color blanco.
LC/MS/UV (columna Ascentis Express C18, 2,7 μm, 4,6 x 100 mm; 40°C; 1,5 ml/min, de 10% a 95% de MeOH en agua (TFA al 0,05%) durante 8 minutos); ESI (C49H74N6O7S, masa exacta 890,5) m/z: 891,5 (MH+) y 446,4 (M.2H+/2, 100%), 6,69 min (100%, 210 nm).
45 1H RMN: (400 MHz, CD3OD, ppm): δ (Presencia de rotámeros) 8,92-8,87 (m, 0,5H, NHCO, intercambio incompleto), 8,70-8,63 (m, 0,4H, NHCO, intercambio incompleto), 8,85-8,77 (m, 1H), 7,59-7,51 (m, 1H), 7,35-7,03 (m, 7H), 6,82-6,71 (m, 2H), 5,77-5,58 (m, 1H), 5,81-5,70 (m, 1H), 4,21-0,80 (m, 58H).
50 Ejemplo 50
Ácido (S)-2-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((S)-2-((S)-2-((4-hidroxifenetil)(metil)amino)-3-metilbutanamido)N,3-dimetilbutanamido)-3-metoxi-5-metilheptanoil)pirrolidin-2-il)-3-metoxi-2-metilpropanamido)-3fenilpropanoico, ácido trifluoroacético
imagen126
imagen127
5 Ejemplo 50: El compuesto 50 se preparó de la misma manera que para el compuesto 4, a partir del compuesto 27 (100 mg, 0,10 mmoles, 1,00 equiv). El residuo se purificó por HPLC preparativa (Pre-HPLC-001 SHIMADZU, columna Atlantis Prep OBD T3, 5 μm, 19 x 150 mm; fase de elución: agua/ACN con pH regulado con TFA al 0,05%; gradiente de 20% a 40% de ACN durante 10 minutos y a continuación de 40% a 100% de ACN durante 2 minutos; Detector UV Waters 2545 a 254 nm y 220 nm), para producir 10,7 mg (11%) del compuesto 50 en forma
10 de un sólido de color blanco.
LC/MS/UV (columna Ascentis Express C18, 2,7 μm, 4,6 x 100 mm; 40°C; 1,5 ml/min, de 10% a 95% de MeOH en agua (TFA al 0,05%) durante 8 minutos); ESI (C47H73N5O9, masa exacta 851,5) m/z: 852,5 (MH+) y 426,8 (M.2H+/2, 100%), 6,46 min (91,7%, 210 nm).
15 1H RMN: (400 MHz, CD3OD, ppm): δ (Presencia de rotámeros) 7,34-7,15 (m, 5H); 7,15-7,04 (se, 2H), 6,82-6,83 (m, 2H), 4,83-4,70 (m, 1H), 4,21-4,00 (m, 1H), 3,90-3,80 (m, 1H), 3,74-3,62 (m, 1H), 3,57-2,86 (m, 20H), 2,560,80 (m, 36H).
20 Ejemplo 51
metil (S)-2-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((S)-2-((S)-2-((4-hidroxibencil)(metil)amino)-3-metilbutanamido)N,3-dimetilbutanamido)-3-metoxi-5-metilheptanoil)pirrolidin-2-il)-3-metoxi-2-metilpropanamido)-3fenilpropanoato, ácido trifluoroacético
25
imagen128
Ejemplo 51A: terc-butil (4-formilfenil)carbonato
imagen129
30
Se disuelve 4-hidroxibenzaldehído (3,0 g, 24 mmoles) en 30 ml de DCM en presencia de 4-DMAP (300 mg, 2,46 mmoles, 0,1 equiv.) y di-terc-butilo dicarbonato (5,35 g, 24 mmoles, 1,0 equiv.) y se agitó 1 hora a temperatura ambiente. Después, la solución se diluyó con 200 ml de agua y se extrajo 3 veces con 100 ml de
35 DCM. Las fases orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida para producir 5 g (92%) del compuesto 51A en forma de un sólido de color blanco.
Ejemplo 51B: bencil (S)-2-((4-((terc-butoxicarbonil)oxi)bencil)(metil)amino-3-metilbutanoato
imagen130
El compuesto 51A (220 mg, 0,99 mmoles) se disolvió en 5 ml de THF en presencia del compuesto 1ZC (255 mg, 0,99 mmoles, 1,0 equiv.), NaBH(OAc)3 (420 mg, 2 mmoles, 2,0 equiv.) y DIEA (654 μl) y se agitó durante la
5 noche a temperatura ambiente. Después, la solución se diluyó con 100 ml de agua y se extrajo 3 veces con 50 ml de EtOAc. Las fases orgánicas se combinaron, se secaron sobre sulfato de sodio, se filtraron y se concentraron bajo presión reducida. El residuo se purificó en una columna de sílice con una mezcla de EtOAc y PE (1:100) para producir 200 mg (47%) del compuesto 51B en forma de un sólido de color blanco.
10 Ejemplo 51C: Ácido (S)-2-((4-((terc-butoxicarbonil)oxi)bencil)(metil)amino)-3-metil butanoico
imagen131
El compuesto 51C se preparó por hidrogenación del compuesto 51B (200 mg), siguiendo el protocolo utilizado 15 para la preparación del compuesto 3F.
Ejemplo 51D: metil(S)-2-((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((S)-2-((S)-2-((4-((tercbutoxicarbonil)oxi)bencil)(metil)amino)-3-metilbutanamido)-N,3-dimetilbutanamido)-3-metoxi-5metilheptanoil)pirrolidin-2-il)-3-metoxi-2-metilpropanamido)-3-fenilpropanoato
20
imagen132
El compuesto 51D se preparó mediante el acoplamiento del compuesto 51C con la amina 3D, siguiendo el protocolo utilizado para la preparación del compuesto 3 para obtener el producto deseado en forma de aceite de
25 color amarillo con un rendimiento del 60%.
Ejemplo 51: El compuesto 51D (80 mg, 0,08 mmoles) se disolvió en 1 ml de DCM en presencia de 0,5 ml de TFA, se agitó 2 horas a temperatura ambiente y después se concentró a presión reducida. El residuo se purificó por HPLC preparativa (Pre-HPLC-010, columna SunFire Prep C18 OBD, 5 μm, 19 x 150 mm; fase de elución:
30 agua/ACN con pH regulado con TFA al 0,05%; gradiente de 23% a 40% de ACN durante 10 minutos y a continuación de 40% a 95% de ACN durante 2 minutos; detector UV Waters 2489 a 254 nm y 220 nm). El compuesto 51 se obtuvo con un rendimiento del 24% (20 mg) en forma de un sólido de color blanco.
LC/MS/UV (Zorbax SB-Aq, 1,8 μm, 4,6 x 100 mm; MeOH al 2% en agua (TFA al 0,05%) durante 1 minuto y a
35 continuación de 2% a 95% de MeOH durante 13 minutos); ESI (C47H73N5O9, masa exacta 851,54) m/z: 874,5 (MNa+), 426,9 (M.2H+/2); 12,48 min (96%, 210 nm).
1H RMN: (300 MHz, CD3OD, ppm): δ (Presencia de rotámeros) 8,1-8,6 (m, 0,9H, NHCO intercambio incompleto); 7,29-7,27 (m, 2H), 7,25-6,86 (m, 5H), 6,84-6,83 (m, 2H), 4,83-4,72 (m, 3H), 4,26-0,82 (m, 58H).
40 Ejemplo 61
(S)-2-((S)-2-((4-aminofenetil)(metil)amino)-3-metilbutanamido)-N-((3R,4S,5S)-3-metoxi-1-((S)-2-((1R,2R)-1metoxi-2-metil-3-oxo-3-(((S)-2-fenil-1-(tiazol-2-il)etil)amino)propil)pirrolidin-1-il)-5-metil-1-oxoheptan-4-il)
45 N,3-dimetilbutanamida
imagen133
Ejemplo 61A: diclorhidrato de N-(4-aminofenetil)-N-metil-L-valina
imagen134
El compuesto 11D (962 mg, 2,75 mmoles) se disolvió en 10 ml de una solución comercialmente disponible de HCl en propan-2-ol (5 -6 M), y se agitó a temperatura ambiente durante 2 horas. El análisis por TLC indicó el consumo completo del material de partida. El disolvente se evaporó a presión reducida, y el sólido amarillo
10 resultante se trituró con Et2O (2 x 10 ml). El producto se secó bajo vacío para proporcionar el compuesto 61A como un sólido amarillo (322 mg, 47%).
Ejemplo 61: El ácido carboxílico 61A (73 mg, 0,23 mmoles, 1 eq) y amina 1Y (150 mg, 0,23 mmoles, 1 eq) se disolvieron en DMF seco (2 ml). Se añadieron DIEA (158 μl, 0,90 mmoles, 4 eq.) y DECP (51 μl, 0,34 mmoles,
15 1,5 eq.) y la reacción se agitó durante 4 horas a temperatura ambiente. El análisis por LC-MS mostró el consumo completo del material de partida. El disolvente se evaporó a presión reducida, y el residuo se purificó por cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice (DCM/MeOH) para proporcionar el compuesto 61 como un sólido de color amarillo claro (83 mg, 40%).
20 1H RMN: (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ (Presencia de rotámeros), 8,86 (d, 0,5H, NHCO); 8,65 (d, 0,5H, NHCO), 8,11-8,05 (m, 1H, NHCO), 7,80 (d, 0,5H, tiazol), 7,78 (d, 0,5H, tiazol), 7,65 (d, 0,5H, tiazol), 7,63 (d, 0,5H, tiazol), 7,32-7,12 (m, 5H), 6,83 (d, J= 8,3 Hz, 2H), 6,45 (d, J= 8,3 Hz, 2H), 5,56-5,49 (m, 0,5H), 5,42-5,35 (m, 0,5H), 4,78 (s, 2H, NH2), 4,74-4,46 (m, 2H), 4,01-0,66 (m, 57H).
25 HPLC (XBridge Shield C18, 3,5 μm, 4,6 x 50 mm; 3,5 ml/min, 40°C, de 0 a 95% de MeCN en agua (TFA al 0,1%) durante 2,25 minutos y a continuación 95% de MeCN durante 0,5 minutos, Tr = 1,31 min (96,5%, 220 nm).
m/z (Q-TOF ESI+) 890,5558 (2%, MH+, C49H76N7O6S requiere 890,5572), 445,7834 (100%, (MH2)2+, C49H77N7O6S requiere 445,7823).
30 Ejemplo 62
Metil ((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((S)-2-((S)-2-((4-aminofenetil)(metil)amino)-3-metilbutanamido)-N,3dimetilbutanamido)-3-metoxi-5-metilheptanoil)pirrolidin-2-il)-3-metoxi-2-metilpropanoil)-L-fenilalaninato
35
imagen135
imagen136
de sílice (DCM/MeOH) para proporcionar el compuesto 62 como un sólido de color amarillento (82 mg, 45%).
1H RMN: (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ (Presencia de rotámeros), 8,50 (d, J= 8,3, 0,5H, NHCO); 8,27 (d, J= 8,0, 0,5H, NHCO), 8,15-8,04 (m, 1H, NHCO), 7,27-7,13 (m, 5H), 6,86-6,79 (m, 2H), 6,48-6,42 (m, 2H), 4,78 (s, 2H, 5 NH2), 4,74-4,44 (m, 3H), 4,01-3,72 (m, 1,5H), 3,66 (s, 1,5H, CO2Me), 3,63 (s, 1,5H, CO2Me), 3,57-0,65 (m, 55,5H).
HPLC (XBridge Shield C18, 3,5 μm, 4,6 x 50 mm; 3,5 ml/min, 40°C, de 0 a 95% de MeCN en agua (TFA al 0,1%) durante 2,25 minutos y a continuación MeCN al 95% durante 0,5 minutos, Tr = 1,29 min (95,3%, 220 nm).
10 m/z (Q-TOF ESI+) 865,5800 (2%, MH+, C48H77N6O8 requiere 865,5797), 433,2937 (100%, (MH2)2+, C48H78N6O8requires 433,2935).
Ejemplo 63
15 ((2R,3R)-3-((S)-1-((3R,4S,5S)-4-((S)-2-((S)-2-((4-aminofenetil)(metil)amino)-3-metilbutanamido)-N,3dimetilbutanamido)-3-metoxi-5-metilheptanoil)pirrolidin-2-il)-3-metoxi-2-metilpropanoil)-L-fenilalanina2,2,2-trifluoroacetato
imagen137
25 residuo se purificó por HPLC preparativa (columna SunFire Prep C18 OBD, 5 μm, 19 x 150 mm; fase móvil: agua/MeCN con pH regulado con TFA al 0,1%; gradiente de 20% a 40% de MeCN durante 10 minutos, a continuación, del 40% al 100% de MeCN durante 2 minutos; Detector UV Waters 2545 a 254 nm y 220 nm). El compuesto 63 se obtuvo como un sólido blanco (14 mg, 66%).
30 1H RMN: (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ (Presencia de rotámeros), 12,7 (s(br), 1H, CO2H), 9,58 (m(br), 1H); 9,048,89 (m, 1H), 8,41 (d, 0,6H, NHCO), 8,15 (d, 0,4H, NHCO), 7,27-7,13 (m, 5H), 7,13-6,99 (m(br), 2H), 6,90-6,64 (s(br), 2H), 4,77-3,40 (m, 10H), 3,34-2,75 (m, 20H), 2,34-1,94 (m, 4H), 1,90-0,7 (m, 25H).
HPLC (XBridge Shield C18, 3,5 μm, 4,6 x 50 mm; 3,5 ml/min, 40°C, de 0 a 95% de MeCN en agua (TFA de 35 0,1%) durante 2,25 minutos y a continuación 95% de MeCN durante 0,5 minutos, Tr = 1,24 min (100%, 220 nm).
m/z (Q-TOF ESI+) 851,5641 (6%, MH+, C47H75N6O8 requiere 851,5641), 426,2854 (100%, (MH2)2+, C47H76N6O8 requiere 426,2857).
40 Ejemplo 64
(S)-2-((S)-2-((4-aminofenetil)(metil)amino)-3-metilbutanamido)-N-((3R,4S,5S)-1-((S)-2-((1R,2R)-3-(((1S,2R)-1hidroxi-1-fenilpropan-2-il)amino)-1-metoxi-2-metil-3-oxopropil)pirrolidin-1-il)-3-metoxi-5-metil-1oxoheptan-4-il)-N,3-dimetilbutanamida
45
imagen138
El compuesto 64 se preparó de la misma manera que para el compuesto 61, utilizando ácido carboxílico 61A (93 mg, 0,29 mmoles, 1 eq.), amina 2D (174 mg, 0,29 mmoles, 1 eq.), DIEA (100 μl, 0,58 mmoles, 2 eq.) y DECP (66 5 μl, 0,43 mmoles, 1,5 eq.). El producto bruto se purificó por cromatografía ultrarrápida sobre gel de sílice (DCM/MeOH) para proporcionar el compuesto 64 como un sólido de color blanquecino (51 mg, 21%).
1H RMN: (500 MHz, DMSO-d6, ppm): δ (Presencia de rotámeros), 9,61 (m(br), 1H); 9,05-8,89 (m, 1H), 7,93 (d, 0,6H, NHCO), 7,64 (d, 0,4H, NHCO), 7,36-6,98 (m, 7H), 6,92-6,70 (m(br), 2H), 5,45 (s(br), 1H), 4,80-4,41 (m,
10 3H), 4,06-3,44 (m, 4H), 3,37-2,79 (m, 18H), 2,45-2,21 (m, 3H), 2,17-0,70 (m, 35H).
HPLC (XBridge Shield C18, 3,5 μm, 4,6 x 50 mm; 3,5 ml/min, 40°C, de 0 a 95% de MeCN en agua (TFA al 0,1%) durante 2,25 minutos y a continuación 95% de MeCN durante 0,5 minutos, Tr = 1,20 min (100%, 220 nm).
15 m/z (Q-TOF ESI+) 837,5826 (33%, MH+, C47H77N6O7 requiere 837,5848), 419,2956 (100%, (MH2)2+, C47H76N6O8 requiere 419,2961).
II -La actividad biológica de los compuestos de la invención
20 Método:
Cultivo de células. Las células A549 (células no pequeñas de cáncer de pulmón -ATCC CCL-185) y MDA-MB231 (adenocarcinoma de mama -ATCC HTB-26) se cultivaron en medio esencial mínimo de Eagle (MEM) con 5% de suero de ternera fetal (FCS) y medio Eagle modificado por Dulbecco (DMEM) con 10% de FCS,
25 respectivamente. Las células MCF7 (carcinoma ductal de mama -ATCC HTB-22) y SN-12C (carcinoma de riñón -ATCC) se mantuvieron en medio RPMI1640 (sin rojo fenol para las células MCF7) que contenía 10% de FCS. Todos los medios fueron suplementados con fungizona (1,25 μg/ml) y penicilina-estreptomicina (100 U/100 μg/ml). Las células se cultivaron bajo condiciones estándar en una incubadora a 37°C, 5% de CO2 y 95% de humedad atmosférica.
30 Actividad antiproliferativa en 4 estirpes celulares tumorales. Los compuestos según la invención se investigaron para su actividad antiproliferativa utilizando un ensayo de proliferación ATPlite (Perkin Elmer, Villebon sur Yvette, Francia) en un amplio panel de 4 estirpes celulares. Las células se sembraron en placas de 96 pocillos (103 células/pocillo para A549, 2·103 para MCF7, MDA-MB-231 y SN12C) al día 0 a una concentración para asegurar
35 que las células permanecieran en fase de crecimiento celular logarítmico a lo largo del período de tratamiento de fármacos de 72 h. Después de un período de incubación de 24 horas, todas las células se trataron con diluciones seriadas de los compuestos ensayados (11 μl de una solución 10X en DMSO al 1% -6 pocillos/condición). Para evitar la adherencia de los compuestos sobre las puntas, las puntas se cambiaron entre dos diluciones consecutivas. Las células se colocaron entonces en una incubadora a 37°C y 5% de CO2. Al día 4, la viabilidad
40 celular se evaluó mediante la dosificación de la ATP liberada por las células viables. Se analizó el número de células viables en comparación con el número de células tratadas con el disolvente. Se determinaron los valores de EC50 con el análisis de ajuste de curva (modelo de regresión no lineal con una respuesta de dosis sigmoidal, coeficiente de pendiente variable de Hill), realizado con el algoritmo proporcionado por el software GraphPad (GraphPad Software Inc., CA, EUA).
45 Resultados:
Diversos compuestos:
50 Los diversos compuestos según la invención se sometieron a ensayo para determinar su actividad antiproliferativa sobre la estirpe celular MDA-MB-231 siguiendo el método anteriormente descrito. Las actividades medidas dieron valores de EC50 < 0,1 μΜ.
Los pocos ejemplos siguientes, seleccionados de entre los compuestos según la invención, ilustran sus
imagen139
propiedades antiproliferativas completamente excepcionales: Ejemplo 12: EC50 = 5,80x10-10 M; Ejemplo 13: EC50 = 7,95x10-8 M; Ejemplo 15: EC50 = 1,70x10-10 M; Ejemplo
27: EC50 = 1,20x10-10 M.
5 Diversas estirpes celulares:
El compuesto 15 se sometió a ensayo en diferentes estirpes celulares (A549, MDA-MB-231, MCF-7, SN12C) siguiendo el método anteriormente descrito. Las actividades medidas proporcionaron valores de EC50 <0,1 μΜ. 10
EC50 (M)
A549 MDA-MB-231 MCF-7 SN12C
Compuesto 15
1,45x10-10 1,70x10-10 7,15x10-10 2,18x10-10
Ejemplos comparativos:
La sustitución en el anillo fenilo (amino/hidroxilo v. carboxilo) se estudió en los ejemplos comparativos a
15 continuación que muestran la mejora de la actividad antiproliferativa de los fármacos según la invención que comprende un sustituyente amino o hidroxilo en comparación con un fármaco que comprende un sustituyente carboxilo según la técnica anterior (documentos WO 2012/041805 y WO 2012/123423).
N°
Estructura EC50 (M)
A549
MDA-MB-231
12
1,48x10-10 5,80x10-10
15
1,45x10-10 1,70x10-10
27
8,60x10-11 1,20x10-10
Ejemplo comparativo
3,76x10-9 2,29x10-9
13
2,71x10-8 7,95x10-8
Ejemplo comparativo
imagen140 4,03x10-7 9,75x10-7

Claims (12)

  1. imagen1
    REIVINDICACIONES
    1. Compuesto de la fórmula (I) siguiente:
    imagen2
    en la que:
    -R1 = OH y R2= metilo, o 10 -R1 = H y R2 = COOH, COOMe o tiazol-2-ilo,
    -R3 es un grupo alquilo (C1-C6), y
    -R4 es un grupo fenil-alquilo (C1-C2) sustituido por un grupo seleccionado de entre grupos OH y NR9R10 con 15 R9 y R10 cada uno independientemente entre sí representando H o un grupo alquilo (C1-C6), en el que el
    grupo fenil-alquilo (C1-C2) está unido al resto de la mólecula mediante su fracción alquilo (C1-C2),
    o una sal, hidrato o solvato farmacéuticamente aceptables del mismo.
    20 2. Compuesto según la reivindicación 1, caracterizado por que R1 representa H y R2 representa COOH o COOMe.
  2. 3. Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 y 2, caracterizado por que R3 representa un grupo
    metilo. 25
  3. 4. Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, caracterizado por que R4 representa un grupo fenil-alquilo (C1-C2) sustituido por un grupo en la fracción fenilo seleccionado de entre OH y NR9R10.
  4. 5. Compuesto según la reivindicación 4, caracterizado por que R4 representa un grupo fenil-alquilo (C1-C2) 30 sustituido por un grupo NR9R10 en la fracción fenilo.
  5. 6. Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, caracterizado por que R4 presenta la fórmula siguiente:
    35
    imagen3
    en el que X0 representa OH o NR9R10 y m es 1 o 2.
    40 7. Compuesto según la reivindicación 6, caracterizado por que X0 es NR9R10.
  6. 8. Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, caracterizado por que R4 presenta la fórmula siguiente:
    imagen4
    en el que X0 representa NR9R10 y m representa 1 o 2. 9. Compuesto según la reivindicación 1, seleccionado de entre:
    imagen5
    imagen6
    imagen7
    imagen8
    imagen9
    y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos tales como las sales formadas con ácido 5 trifluoroacético.
  7. 10. Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9 para su utilización como una especialidad farmacéutica.
    10 11. Compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9 para su utilización como especialidad farmacéutica destinada al tratamiento del cáncer o de trastornos proliferativos benignos.
  8. 12. Composición farmacéutica que comprende un compuesto de fórmula (I) según cualquiera de las
    reivindicaciones 1 a 9 y por lo menos un excipiente farmacéuticamente aceptable. 15
  9. 13. Composición farmacéutica según la reivindicación 12, que comprende además otro principio activo, seleccionado ventajosamente de entre los agentes anticancerosos, que comprenden en particular agentes anticancerosos citotóxicos tales como navelbina, vinflunina, taxol, taxoter, 5-fluorouracilo, metotrexato, doxorrubicina, camptotecina, gemcitabina, etopósido, cisplatino o carmustina; y agentes anticancerosos
    20 hormonales tales como el tamoxifeno o la medroxiprogesterona.
  10. 14. Procedimiento para preparar un compuesto de fórmula (I) según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, que comprende una reacción de condensación entre un compuesto de la fórmula (VI) siguiente:
    imagen10
    en la que R1 y R2 son como se ha definido en la reivindicación 1, y un compuesto de la fórmula (VII) siguiente:
    imagen11
    en la que R3 es como se ha definido en la reivindicación 1, R4a representa un grupo R4 como se ha definido en la reivindicación 1, opcionalmente en forma protegida, y X es OH o Cl.
  11. 15. Procedimiento para preparar un compuesto de fórmula (I) según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, que comprende una reacción de sustitución entre un compuesto de la fórmula (VIII) siguiente:
    imagen12
    10 en la que R1, R2, y R3 son como se ha definido en la reivindicación 1, y un compuesto de la fórmula (X) siguiente:
    15 R4a-Y (X) en la que R4a representa un grupo R4 como se ha definido en la reivindicación 1, opcionalmente en forma protegida, e
    20 Y es un grupo saliente tal como Cl, Br, I, OSO2CH3, OSO2CF3 u O-Tosilo.
  12. 16. Procedimiento para preparar un compuesto de fórmula (I) según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, en el que R4 representa un grupo -CH2R4b con R4b representando un grupo fenilo o fenilo-metilo sustituido por un grupo seleccionado de entre los grupos OH y NR9R10,
    25 que comprende una reacción de aminación reductiva entre un compuesto de la fórmula (VIII) siguiente:
    imagen13
    30 en la que R1, R2 y R3 son como se ha definido en la reivindicación 1, y un compuesto de la fórmula (XI) siguiente: R4b-CHO (XI)
    35
    en la que R4b es como se ha definido anteriormente.
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Families Citing this family (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR3005051A1 (fr) * 2013-04-25 2014-10-31 Pf Medicament Derives de la dolastatine 10 et d'auristatines
CN106470708B (zh) * 2014-04-25 2019-12-31 皮埃尔法布雷医药公司 抗体-药物-缀合物和其用于治疗癌症的用途
EP3134124B1 (en) 2014-04-25 2019-02-20 Pierre Fabre Medicament Igf-1r antibody-drug-conjugate and its use for the treatment of cancer
EP3160513B1 (en) 2014-06-30 2020-02-12 Glykos Finland Oy Saccharide derivative of a toxic payload and antibody conjugates thereof
EP3954394A1 (en) 2015-06-19 2022-02-16 Centurion BioPharma Corporation Delivery systems for controlled drug release
JP2019510000A (ja) * 2016-02-26 2019-04-11 ジエンス ヘンルイ メデイシンカンパニー リミテッドＪｉａｎｇｓｕ Ｈｅｎｇｒｕｉ Ｍｅｄｉｃｉｎｅ Ｃｏ．，Ｌｔｄ． 新規トキシン及びその中間体の製造方法
WO2017170637A1 (ja) * 2016-03-29 2017-10-05 東レ株式会社 ペプチド誘導体及びその用途
CN105968038A (zh) * 2016-05-09 2016-09-28 湖北华世通生物医药科技有限公司 二肽类化合物的盐酸盐及其制备方法
CN106432318A (zh) * 2016-08-18 2017-02-22 重庆大学 一种芳炔前体的设计，合成，及在合成多取代芳烃的应用
CN107325033A (zh) * 2017-06-23 2017-11-07 华东师范大学 一种高立体选择性合成海兔毒素Dap片段的方法
DK3717503T3 (da) * 2017-11-30 2024-01-22 Ladrx Corp Albumin-bindende prodrugs af auristatin E derivater
AU2019350536B2 (en) 2018-09-27 2026-04-23 Pierre Fabre Medicament Sulfomaleimide-based linkers and corresponding conjugates
CN110724337B (zh) * 2019-10-16 2022-04-05 江苏德威新材料股份有限公司 一种硅烷交联型阻燃半导电聚烯烃护套材料及其制备方法和应用
EP4400121A1 (en) 2021-09-03 2024-07-17 Toray Industries, Inc. Pharmaceutical composition for treating and/or preventing cancer
WO2024213080A1 (zh) 2023-04-12 2024-10-17 荣昌生物制药(烟台)股份有限公司 一种甲基奥瑞他汀e化合物的制备及纯化方法
WO2024245227A1 (zh) * 2023-06-02 2024-12-05 荣昌生物制药(烟台)股份有限公司 一种甲基奥瑞他汀e化合物中间体的制备及纯化方法
CN118165066B (zh) * 2024-02-26 2025-03-21 复旦大学 一种含氟多肽及其制备方法和应用

Family Cites Families (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP3469580B2 (ja) * 1993-10-01 2003-11-25 帝国臓器製薬株式会社 新規なペプチド誘導体
US6884869B2 (en) * 2001-04-30 2005-04-26 Seattle Genetics, Inc. Pentapeptide compounds and uses related thereto
JP5171621B2 (ja) * 2005-07-07 2013-03-27 シアトル ジェネティックス， インコーポレイテッド フェニルアラニン側鎖修飾をｃ末端に有するモノメチルバリン化合物
KR101674097B1 (ko) * 2008-04-11 2016-11-08 시애틀 지네틱스, 인크. 췌장, 난소 및 다른 암의 검출 및 치료
CA2754531A1 (en) * 2009-03-06 2010-09-30 Seattle Genetics, Inc. Antibody drug conjugates (adc) that bind to 24p4c12 proteins
CA2801971C (en) * 2010-06-10 2018-07-24 Hans-Georg Lerchen Novel auristatin derivatives and their use
ES2553874T3 (es) * 2010-09-29 2015-12-14 Seattle Genetics, Inc. N-Carboxialquil-auristatinas y su uso
CA2930801C (en) * 2010-11-05 2019-05-28 Rinat Neuroscience Corporation Engineered polypeptide conjugates and methods for making thereof using transglutaminase
CA2829736C (en) * 2011-03-16 2020-07-21 Seattle Genetics, Inc. N-carboxyalkylauristatins and use thereof
EP3501546A3 (de) * 2011-04-21 2019-09-18 Seattle Genetics, Inc. Cystein-wirkstoff konjugate und ihre verwendung
EP2714685B1 (en) * 2011-05-27 2016-10-19 Ambrx, Inc. Compositions containing, methods involving, and uses of non-natural amino acid linked dolastatin derivatives
CN103717595A (zh) * 2011-05-27 2014-04-09 Ambrx公司 含有非天然氨基酸连接的海兔毒素衍生物的组合物、涉及该海兔毒素衍生物的方法及其用途
MX363116B (es) * 2012-06-07 2019-03-11 Ambrx Inc Conjugados anticuerpo-farmaco de antigeno de membrana especifico de prostata.
EP4406612A3 (en) * 2012-06-19 2024-10-16 Ambrx, Inc. Anti-cd70 antibody drug conjugates
US20150314007A1 (en) * 2012-12-21 2015-11-05 Glykos Finland Oy Linker-payload molecule conjugates
FR3005051A1 (fr) * 2013-04-25 2014-10-31 Pf Medicament Derives de la dolastatine 10 et d'auristatines
CN106470708B (zh) * 2014-04-25 2019-12-31 皮埃尔法布雷医药公司 抗体-药物-缀合物和其用于治疗癌症的用途

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