RS57566B2 - Lipopeptidne kompozicije i postupci povezani sa njima - Google Patents

Description

Opis

Oblast tehnike

[0001] Predmetni pronalazak se odnosi na poboljšane lipopeptidne kompozicije za rekonstituciju u tečnom razblaživaču za obrazovanje farmaceutske kompozicije za parenteralnu primenu, kao i na postupke za pravljenje čvrstih lipopeptidnih kompozicija. Poželjne poboljšane lipopeptidne kompozicije uključuju čvrste preparate daptomicina sa povećanom brzinom rekonstitucije u vodenim tečnostima i/ili povećanom hemijskom stabilnošću daptomicina.

Osnova pronalaska

[0002] Daptomicin je ciklični lipopeptidni antibiotik namenjen za lečenje komplikovanih infekcija kože i struktura kože i bakteremije, uključujući bakteremiju sa sumnjom na, ili dokazanim infektivnim endokarditisom. Daptomicin za injekcije može da bude primenjen intravenski za lečenje indikovanih infekcija izazvanih osetljivim sojevima više Gram-pozitivnih mikroorganizama uključujući meticilin-rezistentnu Staphylococcus aureus (MRSA). Daptomicin za injekcije (CUBICIN<®>, Cubist Farmaceutskas, Inc., Lexington, MA) se dostavlja kao liofilizovani prah koji se rekonstituiše i priprema kao farmaceutska kompozicija za parenteralnu primenu. Rekonstituisana kompozicija na bazi daptomicina može da bude pripremljena kao farmaceutska kompozicija za parenteralnu primenu, na primer kombinovanjem sa medicinski odgovarajućom količinom farmaceutskog razblaživača (npr., 0,9% vodeni rastvor natrijum hlorida). Razblaživač može da bude isti ili drugačiji. Parenteralna farmaceutska kompozicija koja uključuje daptomicin može da se primeni intravenskom infuzijom. Liofilizovanom prahu koji sadrži daptomicin može da bude potrebno 15-45 minuta da se rekonstituiše u farmaceutskom razblaživaču, u zavisnosti od postupka za rekonstituciju.

[0003] Daptomicin (Slika 1) može da se dobije iz proizvoda fermentacije mikroorganizma Streptomyces roseosporus uz snabdevanje n-dekanoinskom kiselinom. Baltz u Biotechnology of Antibiotics. 2nd Ed., ed. W. R. Strohl (New York: Marcel Dekker, Inc.), 1997, pp. 415-435. Početni pokušaji razdvajanja daptomicina od strukturno sličnih komponenata u proizvodu fermentacije vodili su identifikaciji drugih strukturno sličnih jedinjenja uključujući anhidrodaptomicin (Slika 2), beta-izomer daptomicina (Slika 3) i proizvod hidrolize laktona daptomicina (Slika 4). Anhidro-daptomicin (Slika 2) može da se obrazuje tokom sprovođenja tehnika za razdvajanje daptomicina od strukturno sličnih komponenata u proizvodu fermentacije. Rehidracija anhidro-sukcinimidnog oblika proizvodi drugi proizvod razgradnje koji sadrži βaspartil grupu i označen je kao β-izomerni oblik daptomicina (Slika 3). Kirsch et al. (Pharmaceutical Research, 6:387-393, 1989, „Kirsch“) opisuje anhidro-daptomicin i beta-izomer daptomicina proizveden tokom prečišćavanja daptomicina. Kirsch opisuje postupke za smanjenje nivoa anhidro-daptomicina i β-izomera putem podešavanja uslova pH i temperature. Međutim, Kirsch nije bio u mogućnosti da stabilizuje daptomicin i spreči pretvaranje daptomicina u anhidro-daptomicin i njegovu izomerizaciju u β-izomer nakon toga. Kirsch takođe nije bio u mogućnosti da spreči razgradnju daptomicina u druge degradacione proizvode koji nisu povezani sa anhidro-daptomicinom i β-izomerom.

[0004] SAD patent br. 6,696,412 opisuje nekoliko dodatnih jedinjenja prisutnih u proizvodu fermentacije iz koga se dobija daptomicin, i obezbeđuje postupke za prečišćavanje daptomicina do veće čistoće. Dodatna jedinjenja uključuju proizvod hidrolize laktona daptomicina, koji ima hemijsku strukturu datu na slici 4. Postupci za prečišćavanje daptomicina mogu da uključuju obrazovanje micela daptomicina, uklanjanje kontaminanata niske molekulske težine filtracijom, i prevođenje filtrata micela koje sadrže daptomicin u nemicelarno stanje praćeno anjonskom izmenom i dijafiltracijom sa reverznom osmozom da bi se dobio daptomicin visoke čistoće koji može da se liofilizuje.

[0005] US 2009/197799 i US 2002/111311 se odnose na kristalne oblike lipopeptida uključujući daptomicin.

[0006] US 2007/116729 se odnosi na postupke za pripremu liofilizata.

[0007] WO 01/53330 se odnosi na prečišćeni daptomicin i na farmaceutske kompozicije koje sadrže ovo jedinjenje.

[0008] WO 2009/144739 se odnosi na prečišćavanje daptomicina.

[0009] Debono et al., The Journal of Antibiotics, 1988, 41(8), 1093 se odnosi na liofilizaciju daptomicina.

[0010] Miao, Microbiology, 2005, 151(5), 1507 se odnosi na izdvajanje daptomicina iz fermentacionog bujona.

[0011] US 4,874,843 se odnosi na hromatografske postupke za prečišćavanje proizvoda fermentacije.

[0012] Jedna mera hemijske stabilnosti daptomicina u liofilizovanom prahu daptomicina je količina daptomicina (Slika 1) prisutna u rekonstituisanoj kompoziciji na bazi daptomicina u odnosu na količinu strukturno sličnih jedinjenja uključujući anhidro-daptomicin (Slika 2), betaizomer daptomicina (Slika 3) i proizvod hidrolize laktona daptomicina (Slika 4). Količina daptomicina u odnosu na količinu ovih strukturno sličnih jedinjenja može da se meri pomoću tečne hromatografije visokih performansi (HPLC) posle rekonstitucije u vodenom razblaživaču.

Čistoća daptomicina i količine strukturno sličnih jedinjenja (npr., slike 2-4) mogu da se odrede iz površina pikova dobijenih pomoću HPLC (npr., prema primeru 4 u ovom tekstu) da bi se dobila mera hemijske stabilnosti daptomicina u čvrstom obliku. Čistoća i hemijska stabilnost daptomicina može da se meri i u tečnoj rekonstituisanoj kompoziciji na bazi daptomicina tokom vremena, kao mera hemijske stabilnosti rekonstituisanog daptomicina u tečnom obliku.

[0013] Postoji potreba za čvrstom lipopeptidnom kompozicijom koja se brzo rekonstituiše (npr., za manje od oko 5 minuta) u farmaceutskom razblaživaču da bi se obrazovale rekonstituisane lipopeptidne kompozicije koje mogu da budu pripremljene kao farmaceutske kompozicije. Na primer, za rekonstituciju bočice od 500 mg liofilizovanog daptomicina za injekciju (CUBICIN®), liofilizovani prah se kombinuje sa 10 mL 0,9% vodenog rastvora natrijum hlorida, ostavlja da stoji 10 minuta (ili više) i zatim pažljivo okreće ili zavrti „nekoliko minuta“ da bi se obrazovala rekonstituisana kompozicija na bazi daptomicina pre pripreme parenteralne farmaceutske kompozicije na bazi daptomicina.

[0014] Takođe postoji potreba za čvrstim kompozicijama na bazi daptomicina sa poboljšanom hemijskom stabilnošću u čvrstom i/ili rekonstituisanom obliku (tj., veći ukupni procenat čistoće daptomicina tokom vremena), što donosi prednost dužeg roka trajanja, povećane tolerancije raznovrsnijih uslova skladištenja (npr., više temperature ili vlažnosti) i povećane hemijske stabilnosti posle rekonstitucije kao tečne formulacije za parenteralnu primenu.

Kratak opis pronalaska

[0015] Predmetni pronalazak se odnosi na čvrste lipopeptidne kompozicije za rekonstituciju u vodenom razblaživaču za obrazovanje farmaceutske kompozicije. Lipopeptidne kompozicije se pripremaju prevođenjem farmaceutski prihvatljivog vodenog rastvora koji uključuje lipopeptid u čvrstu lipopeptidnu kompoziciju (npr., liofilizacijom, sušenjem raspršivanjem ili slično).

[0016] Prema tome, pronalazak se odnosi na čvrstu kompoziciju daptomicina, pri čemu se navedena kompozicija priprema liofilizacijom tečnog vodenog rastvora daptomicina koji sadrži najmanje jedan ekscipijens koji je neredukujući šećer, pri čemu tečni vodeni rastvor daptomicina ima pH od 6,5 do 7,5.

[0017] Čvrsta lipopeptidna kompozicija može zatim da bude rekonstituisana u vodenom farmaceutski prihvatljivom razblaživaču za obrazovanje farmaceutskog proizvoda za parenteralnu primenu.

[0018] Vreme rekonstitucije čvrste lipopeptidne kompozicije u vodenom razblaživaču može da bude neočekivano smanjeno povećanjem pH vodenog rastvora lipopeptida (poželjno do pH od oko 6,5-7,5, najpoželjnije oko 7,0) pre liofilizacije rastvora za obrazovanje čvrste lipopeptidne kompozicije. Na primer, čvrste kompozicije na bazi daptomicina pripremljene liofilizacijom tečnih rastvora daptomicina (bez šećera ili glicina) na pH od oko 7,0 rekonstituišu se brže u 0,9% vodenom rastvoru natrijum hlorida, nego inače uporedive formulacije daptomicina, liofilizovane na pH od oko 4,7.

[0019] Brzina rekonstitucije određenih čvrstih lipopeptidnih kompozicija u vodenom razblaživaču ubrzana je i kombinovanjem lipopeptida sa glicinom ili šećerom (poželjno, neredukujućim šećerom) pre pretvaranja rastvora u čvrsti lipopeptid. Na primer, 500 mg liofilizovane farmaceutske kompozicije na bazi daptomicina u tabeli 6 obrazovane iz rastvora koji uključuju daptomicin i neredukujući šećer ili glicin na pH od oko 7,0 rekonstituisano je u 0,9% vodenom rastvoru natrijum hlorida za manje od 2 minuta, pri čemu je većina kompozicija rekonstituisana za manje od 1 minuta.

[0020] Čvrsti farmaceutski lipopeptidni preparati mogu da budu proizvod koji je dobijen sledećim postupkom: (a) obrazovanjem vodenog rastvora lipopeptida na pH iznad izoelektrične tačke lipopeptida (npr., iznad oko 3.8 za daptomicin); (b) rastvaranjem neredukujućeg šećera u vodenom rastvoru sa lipopeptidom da bi se obrazovala tečna lipopeptidna formulacija; (c) podešavanjem pH tečne lipopeptidne formulacije do oko 6,5 do 7,5; i (d) pretvaranjem tečne lipopeptidne formulacije u čvrstu farmaceutsku lipopeptidnu kompoziciju (npr., liofilizacijom). Na primer, liofilizovani lekoviti preparat daptomicina koji se rekonstituiše za manje od oko 2 minuta u razblaživaču 0,9% vodenom rastvoru natrijum hlorida može da se pripremi: (a) obrazovanjem vodenog rastvora daptomicina na pH od oko 4,5 – 5,0 (npr., pH od oko 4,7); (b) dodavanjem puferskog sredstva uključujući fosfat, citrat, maleat ili njihovu kombinaciju vodenom rastvoru daptomicina da bi se obrazovala puferisana formulacija daptomicina; (c) rastvaranjem jednog ili više šećera u puferisanoj formulaciji daptomicina za obrazovanje puferisane formulacije daptomicin-šećer koja sadrži oko 2,5% tež./zapr. do oko 25% tež./zapr. šećera (npr., oko 3%, 4%, 5%, 6%, 7%, 8%, 9%, 10%, 11%, 12%, 13%, 14%, 15%, 16%, 17%, 18%, 19%, 20%, 21%, 22%, 23%, ili 24%), pri čemu je šećer/šećeri odabran iz grupe koja se sastoji od trehaloze, saharoze, manitola i njihovih kombinacija; (d) podešavanjem pH puferisane formulacije daptomicin-šećer do pH od oko 6,5 do 7,5 (npr., 7,0); i (e) liofilizacijom puferisane formulacije daptomicin-šećer za obrazovanje čvrste farmaceutske kompozicije na bazi daptomicina. Poželjno, šećer(i) uključuju saharozu, saharozu i manitol, ili trehalozu.

[0021] Predmetni pronalazak takođe obezbeđuje kompozicije na bazi daptomicina sa poboljšanom hemijskom stabilnošću daptomicina, izmerenom kao najviši ukupni procenat čistoće daptomicina tokom vremena (određeno pomoću HPLC prema postupku iz primera 4). Iznenađujuće, daptomicin sadržan u čvrstim preparatima sa određenim poželjnim kompozicijama (npr., daptomicin kombinovan sa saharozom ili trehalozom) bio je hemijski stabilniji od daptomicina u čvrstim preparatima na bazi daptomicina bez šećera ili glicina. Hemijska stabilnost daptomicina u čvrstom obliku izmerena je poređenjem izmerenih ukupnih čistoća daptomicina u više čvrstih preparata na bazi daptomicina od kojih je svaki dobijen prema primeru 4. Viša hemijska stabilnost je izmerena kao više vrednosti uporednih merenja ukupne čistoće daptomicina između dva uzorka prema primeru 4. Na primer, hemijska stabilnost daptomicina merena u čvrstim kompozicijama na bazi daptomicina koje sadrže jedan ili više neredukujućih šećera kao što je saharoza, bila je neočekivano povećana za između 10% i više od 90% tokom perioda skladištenja od 6 meseci pre rekonstitucije u 0,9% vodenom rastvoru natrijum hlorida, (u poređenju sa hemijskom stabilnošću daptomicina izmerenom u čvrstim kompozicijama na bazi daptomicina bez bilo kog šećera).

[0022] Takođe iznenađujuće, veća hemijska stabilnost daptomicina je primećena tokom do 14 dana u rekonstituisanim tečnim rastvorima daptomicina na različitim temperaturama u preparatima na bazi daptomicina koji sadrže jedan ili više određenih neredukujućih šećera (npr., saharozu) u odnosu na uporedive formulacije daptomicina bez šećera ili glicina. Na primer, hemijska stabilnost daptomicina u rekonstituisanom rastvoru tokom 14 dana bila je takođe neočekivano povećana kod kompozicija koje sadrže daptomicin sa određenim neredukujućim šećerima (npr., saharozom).

[0023] Poželjni primeri čvrstih farmaceutskih preparata na bazi daptomicina uključuju oko 2,5% do 25,0% jednog ili više neredukujućih šećera. Drugi poželjni primeri čvrstih farmaceutskih preparata na bazi daptomicina uključuju oko 2,5% do 25,0% šećera izabranih iz grupe koja se sastoji od saharoze, manitola, i trehaloze. Naročito poželjni čvrsti farmaceutski preparati na bazi daptomicina sastoje se u suštini od daptomicina, saharoze, puferskog sredstva natrijum fosfata (npr., dibazni natrijum fosfat, Na2HPO4) i do oko 8% drugih materijala (npr., mereno preko površine pika dobijenog pomoću HPLC na 214 nm prema primeru 4).

[0024] Čvrsti farmaceutski preparati na bazi daptomicina mogu da se dobiju pretvaranjem vodenog rastvora koji uključuje daptomicin i neredukujući šećer (npr., 15-20% saharoze tež./zapr. u rastvoru) na pH iznad izoelektrične tačke daptomicina (npr., pH od oko 3.7 ili više). Poželjno, pH vodenog rastvora koji sadrži daptomicin i neredukujući šećer (npr., saharozu) je oko 4.5 - 8.0 (uključujući, npr., pH vrednosti od 4,5-7,5; 4,7-7,5; 5,0-7,5; 5,5-7,5; 4,7-7,0; 5,0-7,0; 5,5-7,0; 6,0-7,0 i 6,5-7,0 i vrednosti između njih) pri pretvaranju u čvrst farmaceutski preparat daptomicina (npr., prah). Poželjno, liofilizovani lekoviti preparat na bazi daptomicina koji ima vreme rekonstitucije od oko 2 minuta ili manje u vodenom razblaživaču priprema se: (a) obrazovanjem vodenog rastvora daptomicina na pH od oko 4,7 – 5,0; (b) dodavanjem puferskog sredstva uključujući fosfat, citrat, TRIS, maleat ili njihove kombinacije vodenom rastvoru daptomicina; (c) rastvaranjem neredukujućeg šećera, kao što je saharoza, u vodenom rastvoru sa daptomicinom za obrazovanje puferisane formulacije daptomicin-šećer; (d) podešavanjem pH puferisane formulacije daptomicin-šećer do oko 6,5 do 8,0 (uključujući, npr., pH vrednosti od 6,5-7,5; 6,5-7,0; 6,5; 7,0; 7,5; 8,0; 7,0-8,0; 7,0-7,5 i vrednosti između njih); i (e) liofilizacijom puferisane formulacije daptomicin-šećer da bi se obrazovao čvrsti farmaceutski preparat daptomicina.

[0025] Osim ako nije drugačije definisano, svi tehnički i naučni izrazi koji su ovde korišćeni imaju isto značenje kao što uobičajeno podrazumeva stručnjak u oblasti kojoj ovaj pronalazak pripada.

Kratak opis crteža

[0026]

Slika 1 je hemijska struktura daptomicina.

Slika 2 je hemijska struktura anhidro-daptomicina.

Slika 3 je hemijska struktura beta-izomera daptomicina.

Slika 4 je hemijska struktura proizvoda hidrolize laktona daptomicina.

Slika 5 je tabela 6 koja navodi primere poželjnih kompozicija na bazi daptomicina. Ove kompozicije su pripremljene kao tečni rastvori, zatim liofilizovane da bi se obezbedili čvrsti farmaceutski preparati na bazi daptomicina koji se rekonstituišu u vodenom farmaceutskom razblaživaču za manje od 2 minuta (uključujući kompozicije koji se rekonstituišu za manje od 1 minuta). U tabeli 6, „Vreme rekon.“ se odnosi na vreme potrebno da se oko 500 mg liofilizovane kompozicije daptomicina opisane u koloni „Formulacija (čvrsto stanje)“ rastvori u 10 mL 0,9% vodenog rastvora natrijum hlorida na sobnoj temperaturi (oko 25ºC).

Slika 6 je tabela 7 koja navodi primere drugih kompozicija na bazi daptomicina. Ove kompozicije su pripremljene kao tečni rastvori, zatim liofilizovane da bi se dobili čvrsti farmaceutski lipopeptidni preparati koji se rekonstituišu u vodenom farmaceutskom razblaživaču za 2 minuta ili više. U tabeli 7, „Vreme rekon.“ se odnosi na vreme potrebno da se oko 500 mg liofilizovanog rastvora daptomicina rastvori u 10 mL 0,9% vodenog rastvora natrijum hlorida na sobnoj temperaturi (oko 25ºC).

Slika 7 je tabela 8 koja navodi primere kompozicija daptomicina koje sadrže šećer.

Slika 8 je tabela 9 koja prikazuje procentualnu promenu ukupne čistoće daptomicina, izmerenu i izračunatu za različite formulacije daptomicina prema primeru 4.

Detaljan opis

Lipopeptidne kompozicije sa ubrzanom rekonstitucijom

[0027] Prema pronalasku, obezbeđeni su čvrsti farmaceutski lipopeptidni preparati koji imaju vreme rekonstitucije manje od 5 minuta u vodenom farmaceutskom razblaživaču. Na primer, 500 mg čvrstog farmaceutskog lipopeptidnog preparata na bazi daptomicina pripremljenog liofilizacijom rastvora daptomicina koji uključuje neredukujući(e) šećer(e) može da se rastvori u 10 mL 0,9% vodenog rastvora natrijum hlorida na sobnoj temperaturi (oko 25ºC) za 4 minuta ili manje (uključujući vremena rastvaranja od 4, 3, 2, 1 i manje od 1 minuta).

[0028] Neočekivano, određeni čvrsti farmaceutski lipopeptidni preparati dobijeni iz tečne lipopeptidne formulacije na pH od oko 7,0 rekonstituišu se u vodenom farmaceutskom razblaživaču većom brzinom od inače identičnih čvrstih farmaceutskih lipopeptidnih preparata dobijenih iz uporedne tečne lipopeptidne formulacije na nižem pH (npr., 4,7). Na primer, dva vodena rastvora daptomicina sa identičnim kompozicijama (bez šećera ili glicina) na pH vrednostima od 4,7 i 7,0 nakon liofilizacije obrazovala su prahove koji se rekonstituišu u razblaživaču 0,9% vodenom rastvoru natrijum hlorida za 5,0 minuta (za pH 4,7) u poređenju sa 1.4 minuta (za pH 7,0) (videti tabelu 6 i tabelu 7). Osim toga, dodavanje glicina ili šećera (poželjno, jednog ili više neredukujućih šećera) formulaciji daptomicina takođe je povećalo brzinu rekonstitucije rezultujućeg čvrstog farmaceutskog lipopeptidnog preparata.

[0029] Čvrsti farmaceutski lipopeptidni preparati koji imaju povećanu brzinu rekonstitucije mogu da se dobiju iz vodenog rastvora lipopeptida na pogodnom pH (npr., 4,7-7,0) i temperaturi (npr., 2-10ºC). Uopšteno, čvrsti farmaceutski lipopeptidni preparati mogu da se naprave od vodenog rastvora lipopeptida na pH iznad izoelektrične tačke lipopeptida. Poželjno, lipopeptid uključuje daptomicin (Slika 1). Poželjni postupci za pripremu čvrstih farmaceutskih preparata na bazi daptomicina opisani su u primeru 2a i 2b. Čvrsti farmaceutski preparati na bazi daptomicina mogu da budu pripremljeni iz vodenog rastvora daptomicina na pH iznad izoelektrične tačke daptomicina (npr., pH iznad oko 3,7 ili 3,8, uključujući pH vrednosti od 4.5, 4,7, i druge više pH vrednosti koje su ovde opisane) i na temperaturi od 2-10ºC. Daptomicin može da se dobije u zamrznutom rastvoru u sterilnoj vodi za injekcije (sWFI) u koncentraciji od 125-130 mg/mL, na pH 3,0 i naknadno podešenom pH do željenog pH dodavanjem natrijum hidroksida (npr., 3,0-10,0 N, uključujući 3,0 N i 10,0 N) na temperaturi od oko 2-10ºC. Vrednost pH može da se podesi, na primer, dodavanjem natrijum hidroksida, hlorovodonične kiseline, fosforne kiseline i/ili sirćetne kiseline.

[0030] Pufersko sredstvo se opciono dodaje vodenim lipopeptidnim rastvorima iznad pH od oko 4,7. Puferska sredstva mogu da uključuju, na primer, sredstva koja uključuju fosfatne, citratne, maleatne, ili karbonatne fragmente, ili njihove kombinacije, i farmaceutski pogodne protivjone. Količina puferskog sredstva može da se odabere na osnovu molarnog odnosa puferskog sredstva prema daptomicinu (npr., kao što je opisano u tabeli 6). Pufersko sredstvo može da se doda u anhidrovanom ili vodenom obliku. Specifični primeri puferskih sredstava su natrijumova ili kalijumova so fosforne kiseline, natrijumova ili kalijumova so borne kiseline, natrijumova ili kalijumova so limunske kiseline, natrijumova ili kalijumova so karbonske kiseline, natrijum fosfat (npr., dibazni natrijum fosfat), TRIS (tris(hidroksimetil)aminometan i so maleinske kiseline. U jednom aspektu pufersko sredstvo je odabrano od dibaznog natrijum fosfata (Na2HPO4), natrijum citrata, natrijum bikarbonata, histidin monohidrohlorida TRIS i maleata. Za vodene rastvore daptomicina, pufer poželjno uključuje oko 50 mM fosfatnog puferskog sredstva (npr., dibazni natrijum fosfat) dodatog vodenom rastvoru daptomicina na pH od oko 4,5-6,0 (poželjno na pH od oko 5,0). Vrednost pH kiselog vodenog lipopeptidnog rastvora (npr., pH oko 3,0) može da se podigne pre dodavanja puferskog sredstva dodavanjem 3N natrijum hidroksida u rashlađenim uslovima (2-10° C) pre dodavanja puferskog sredstva/sredstava.

[0031] Jedan ili više neredukujućih šećera mogu da se dodaju u vodeni lipopeptidni rastvor pre pretvaranja rastvora u farmaceutske lipopeptidne preparate (npr., liofilizacijom). Količina i način kombinovanja neredukujćeg(ih) šećera sa vodenim lipopeptidnim rastvorom su poželjno odabrani tako da obezbede tečni lipopeptidni rastvor kome može nakon toga da se podesi pH od oko 6,5 do 7,5 (npr., dodavanjem 3N natrijum hidroksida na oko 2-10ºC). Za tečnu formulaciju daptomicina, jedan ili više neredukujućih šećera se poželjno kombinuje mešanjem na pogodnoj temperaturi (npr., 2-10ºC). Šećer(i) su neredukujući šećeri, mada vodeni rastvori daptomicina mogu da budu pripremljeni sa trehalozom, saharozom, manitolom, i njihovim kombinacijama na pH od oko 5,0 ili više. Molarni odnos lipopeptida prema ukupnoj količini jednog ili više neredukujućih šećera može da se odabere tako da se dobije čvrsta kompozicije sa većim brzinama rekonstitucije u vodenim rastvaračima (kao što su, npr., kompozicije opisane u tabeli 6). Na primer, tečni rastvori daptomicin-neredukujući šećer poželjno uključuju daptomicin i saharozu u molarnom odnosu daptomicin:saharoza od [1,00:1,12] do oko [1,00:21,32].

[0032] Vrednost pH lipopeptidnih rastvora može da se podesi do oko 6,5 - 7,5 nakon kombinovanja lipopeptida, neredukujućeg(ih) šećera i puferskog sredstva/sredstava, ali pre pretvaranja tečnog lipopeptidnog rastvora u čvrsti farmaceutski preparat. Poželjno, lipopeptid uključuje daptomicin, i tečna formulacija daptomicina je podešena do pH od oko 6,5 - 7,0 i najpoželjnije do pH od oko 7,0, pre pretvaranja u čvrst oblik, ali posle dodavanja puferskog sredstva/sredstava i neredukujućeg(ih) šećera. Slika 5 (Tabela 6) opisuje primere poželjnih tečnih kompozicija na bazi daptomicina koje su liofilizovane da bi se dobili čvrsti farmaceutski lipopeptidni preparati koji se brzo rekonstituišu (rastvaraju) u vodenom razblaživaču. Za svaku od kompozicija koje sadrže glicin i neredukujući šećer u tabeli 6, 500 mg čvrste kompozicije daptomicin-šećer rastvorilo se u 0,9% vodenom rastvoru natrijum hlorida za manje od 1 minuta. Nasuprot tome, mnogi od čvrstih farmaceutskih preparata opisanih u tabeli 7 (Slika 3) dobijenih iz tečnih kompozicija na bazi daptomicina na pH od oko 4,7 imalo je duža vremena rekonstitucije od kompozicija u tabeli 6 (npr., za 500 mg čvrstih farmaceutskih kompozicija na bazi daptomicina opisanih u tabeli 7 trebalo je 2 minuta ili više za rekonstituciju u 10 mL razblaživača 0,9% vodenog rastvora natrijum hlorida na 25ºC).

[0033] Tečna lipopeptidna formulacija može da se pretvori u čvrstu farmaceutsku lipopeptidnu kompoziciju pogodnim postupkom, uključujući liofilizaciju, sušenje raspršivanjem ili sušenjem u fluidizovanom sloju. Primer 3 opisuje postupke liofilizacije korišćene za pretvaranje određenih tečnih formulacija daptomicina u tabeli 6, u čvrste farmaceutske preparate na bazi daptomicina, pre merenja vremena rekonstitucije koja su takođe data u tabeli 6. Čvrste kompozicije na bazi daptomicina mogu da predstavljaju liofilizovan, osušen zamrzavanjem, osušen raspršivanjem, osušen u fluidizovanom sloju, očvrsnut raspršivanjem, staložen ili kristalizovan prah ili amorfnu čvrstu supstancu. U jednom aspektu prah je liofilizovani, ili prah osušen raspršivanjem. U drugom aspektu pronalaska, prah je liofilizovani prah.

[0034] Molarni odnos daptomicina prema šećeru u čvrstom farmaceutskom preparatu daptomicina je poželjno u opsegu od oko [1:1,12] do oko [1:21,32]. Na primer, čvrsti farmaceutski preparat daptomicina može da uključuje saharozu sa molarnim odnosom daptomicina prema saharozi od oko [1:1,12] do oko [1:8,98], uključujući molarne odnose daptomicin:saharoza od [1:4,49] do [1:8,98], [1:6,73] do [1:8,98], [1:1,12], [1:1,344], [1:1,792], [1:2,24], [1:2,688], [1:3,136], [1:3,584], [1:4,032], [1:4,49], [1:4,928], [1:5,376], [1:5,824], [1:6,272], [1:6,73], [1:7,168], [1:7,616], [1:8,064], [1:8,512], ili [1:8,98]. U jednom aspektu, ekscipijens je manitol i molarni odnos daptomicina prema manitolu je oko [1:2,52] do oko [1:5,04]. U drugom aspektu molarni odnos daptomicina prema manitolu je [1:2,52], [1:3,36], [1:4,20] ili [1:5,04]. U sledećem aspektu ekscipijens je saharoza i molarni odnos daptomicina prema saharozi je oko [1:1,12] do oko [1:8,98]. U drugom aspektu molarni odnos daptomicina prema saharozi je [1:4,49] do oko [1:8,98]. U drugom aspektu molarni odnos daptomicina prema saharozi je oko [1:6,73] do oko [1:8,98]. U sledećem aspektu molarni odnos daptomicina prema saharozi je [1:1,12], [1:1,344], [1:1,792], [1:2,24], [1:2,688], [1:3,136], [1:3,584], [1:4,032], [1:4,49], [1:4,928], [1:5,376], [1:5,824], [1:6,272], [1:6,73], [1:7,168], [1:7,616], [1:8,064],

[1:8,512], ili [1:8,98]. U sledećem aspektu ekscipijens je trehaloza i molarni odnos daptomicina prema trehalozi je [1:2,13] do oko [1:21,32]. U drugom aspektu, molarni odnos daptomicina prema trehalozi je [1:2,13], [1:2,556], [1:3,408]. [1:4,26], [1:5,112], [1:5,964], [1:6,816], [1:7,668], [1:8,53], [1:9,372], [1:10,224], [1:11,076], [1:11,928], [1:12,78], [1:13,632], [1:14,484], [1:14,91], [1:15,336], [1:16,188], [1:17,04], [1:17,892], [1:18,744], [1:19,592], [1:20,448], ili [1:21,32].

[0035] Čvrsta farmaceutska lipopeptidna kompozicija može da bude rekonstituisana i kombinovana sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih razblaživača za dobijanje farmaceutske kompozicije za parenteralnu primenu. Odnos daptomicina u rekonstituisanoj tečnoj kompoziciji prema razblaživaču je poželjno između 25 mg/mL do 200 mg/mL. Na primer, liofilizovana kompozicija koja uključuje daptomicin može da bude rekonstituisana u bočici dodavanjem 0,9% vodenog rastvora natrijum hlorida u liofilizovanu kompoziciju. Rekonstituisani rastvor daptomicina može da se kombinuje sa medicinski odgovarajućim razblaživačem i primeni intravenski. Farmaceutski prihvatljiv razblaživač uključuje sterilnu vodu za injekcije (sWFI), 0,9% sterilni natrijum hlorid za injekcije (sSCl), bakteriostatsku vodu za injekcije (bWFI) i Ringerov rastvor. Dodatni primeri pogodnih razblaživača mogu da se nađu u Remington’s Pharmaceutical Sciences, 17th Ed., A.R Gennaro, Ed., Mack Publishing Co., Easton, PA 1985. Razblaživač može da bude sterilna voda za injekcije ili sterilni natrijum hlorid za injekcije. Poželjni razblaživači su sWFI ili Ringerov rastvor za injekcije sa laktatom. Poželjno, razblaživač se ne dodaje polako pri rotiranju pod uglom od 45 stepeni. Takođe poželjno, posle dodavanja razblaživača, sud koji sadrži daptomicin se ne ostavlja da miruje 10 minuta pre mućkanja.

[0036] Izborno, razblaživač dodatno uključuje farmaceutski prihvatljiv konzervans. U jednom aspektu konzervans je benzil alkohol, hlorobutanol, m-krezol, metilparaben, fenol, fenoksietanol, propilparaben, timerosal, fenilmerkuri-acetat, fenilmerkuri-nitrat, benzalkonijum hlorid, hlorokrezol, fenilmerkuri-soli i metilhidroksibenzoat.

[0037] Jedan postupak za rekonstituciju uključuje brzo dodavanje razblaživača u sud koji sadrži liofilizovanu kompoziciju daptomicina iz tabele 6, nakon čega se sud zavrti ako je potrebno. Razblaživač je poželjno sWFI ili sSCI. Na primer, razblaživač može da se dodaje tokom perioda od 1-60 sekundi, poželjnije 1-30 sekundi i najpoželjnije, razblaživač se dodaje za manje od 20 sekundi. Poželjno, težina daptomicina u kompoziciji prema zapremini razblaživača je u opsegu od 25 mg/mL do 200 mg/mL.

[0038] Parenteralna farmaceutska kompozicija koju čini daptomicin može da se primeni intravenskom infuzijom u skladu sa odobrenim indikacijama. Na primer, daptomicin za injekcije može da se primeni intravenski u 0,9% natrijum hloridu, jednom na svaka 24 časa, 7 do 14 dana, za lečenje komplikovanih infekcija kože i struktura kože.

Kompozicije sa povećanom hemijskom stabilnošću daptomicina

[0039] Neočekivano, kombinovanje daptomicina sa jednim ili više neredukujućih šećera (npr., saharoza, trehaloza, saharoza i manitol) u čvrstom farmaceutskom preparatu povećava hemijsku stabilnost daptomicina i u čvrstoj i u rekonstituisanoj tečnoj fazi. Hemijske stabilnosti daptomicina su merene upoređivanjem izmerenih vrednosti ukupne čistoće daptomicina u više čvrstih uzoraka uskladištenih tokom poznatih vremenskih perioda (npr., do 12 meseci) pod poznatim uslovima (npr., na konstantnim temperaturama). Ukupna čistoća daptomicina za svaki uzorak je merena tečnom hromatografijom visokih performansi (HPLC) (korišćenjem parametara u tabeli 3) prema primeru 4. Dodatno, količina daptomicina (Slika 1) u rekonstituisanom rastvoru daptomicina merena je u odnosu na količinu supstanci izabranih iz grupe koja se sastoji od anhidro-daptomicina (Slika 2), beta-izomera daptomicina (Slika 3) i proizvoda hidrolize laktona daptomicina (Slika 4). Slično, za određivanje hemijske stabilnosti daptomicina u rekonstituisanom rastvoru daptomicina, merenje pomoću HPLC i izračunavanje čistoće daptomicina u rekonstituisanom rastvoru daptomicina je ponavljano, prema primeru 4, u različitim vremenskim intervalima do 14 dana posle pripremanja rekonstituisanog rastvora daptomicina.

[0040] Čvrsti farmaceutski preparat daptomicina koji ima povećanu stabilnost daptomicina može da uključuje daptomicin i neredukujući šećer u količini koja je efikasna u povećanju ukupne stabilnosti daptomicina u čvrstom preparatu daptomicina, izmereno pomoću ukupne čistoće daptomicina prema primeru 4. U drugom aspektu, čvrsti farmaceutski preparat daptomicina koji ima povećanu stabilnost daptomicina može da uključuje daptomicin i neredukujući šećer u količini koja je efikasna u smanjenju količine supstanci izabranih iz grupe koja se sastoji od anhidro-daptomicina (Slika 2), beta-izomera daptomicina (Slika 3) i proizvoda hidrolize laktona daptomicina (Slika 4) u preparatu daptomicina (izmereno prema primeru 4) u čvrstom, i/ili u tečnom rekonstituisanom obliku, u poređenju sa stabilnošću preparata daptomicina bez glicina ili šećera.

[0041] Čvrsti farmaceutski preparat daptomicina koji ima povećanu stabilnost daptomicina može da uključuje daptomicin i šećer u količini koja je efikasna u povećanju hemijske stabilnosti daptomicina mereno promenama ukupne čistoće daptomicina u preparatu daptomicina kao čvrstom obliku, u poređenju sa preparatom daptomicina bez glicina ili šećera, pri čemu se čistoća daptomicina meri prema primeru 4.

[0042] Kao što je opisano u primeru 5, čvrste lipopeptidne kompozicije sa povećanom hemijskom stabilnošću lipopeptida uključuju neredukujući šećer (npr., kao što je saharoza ili trehaloza) ili kombinaciju neredukujućih šećera (npr., saharoze i trehaloze). Čistoća daptomicina u svakom čvrstom farmaceutskom preparatu daptomicina je merena posle rekonstitucije prema primeru 4 (ili je rekonstituisani rastvor bio zamrznut i čistoća daptomicina prema primeru 4 je kasnije određena nakon odmrzavanja rekonstituisanog rastvora). Čvrste farmaceutske formulacije daptomicina koje uključuju neredukujuće šećere mogu, nakon rekonstitucije, da imaju više daptomicina (Slika 1), u odnosu na supstance izabrane iz grupe koja se sastoji od anhidro-daptomicina (Slika 2), beta-izomera daptomicina (Slika 3) i proizvoda hidrolize laktona daptomicina (Slika 4). Poželjni čvrsti farmaceutski preparati na bazi daptomicina sa neredukujućim šećerom imaju povećanu čistoću daptomicina (i povećanu stabilnost u roku trajanja) tokom perioda od najmanje do 6 meseci u poređenju sa čvrstim preparatima na bazi daptomicina bez neredukujućeg šećera. Kao što je opisano u primeru 5, čvrsti preparati na bazi daptomicina su skladišteni u bočicama tokom različitih vremenskih perioda (npr., 1 mesec, 2 meseca, 3 meseca i 6 meseci) na različitim temperaturnim opsezima (npr., 2-8ºC, 25ºC i 40ºC), nakon čega je izvedena rekonstitucija čvrstog preparata praćena detekcijom količine daptomicina i supstanci koje su strukturno slične daptomicinu u rekonstituisanoj tečnoj kompoziciji kao što je opisano u primeru 4.

[0043] Kao što je opisano u primeru 6, daptomicin u rekonstituisanim tečnim farmaceutskim preparatima na bazi daptomicina koji sadrže neredukujući šećer(e) neočekivano je pokazao poboljšanu hemijsku stabilnost u odnosu na rekonstituisane preparate na bazi daptomicina bez bilo kog šećera. Povećana hemijska stabilnost u rekonstituisanim formulacijama daptomicina koje sadrže neredukujuće šećere merena je na osnovu razlika u izmerenim vrednostima ukupne čistoće daptomicina prema primeru 4, tokom do 14 dana, na uzorcima skladištenim na temperaturama od 5ºC, 25ºC i 40ºC. Na primer, čistoća daptomicina (izmerena i izračunata prema primeru 4) u rekonstituisanim preparatima na bazi daptomicina koji sadrže oko 15,0-20.0% saharoze skladištenim u frižideru (npr., 2-10ºC) neočekivano je veća u periodu do 14 dana, u poređenju sa rekonstituisanim formulacijama daptomicina bez bilo kog šećera. Rekonstituisani preparati na bazi daptomicina mogu da se kombinuju sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih razblaživača za dobijanje farmaceutske kompozicije za parenteralnu primenu (npr., obrazovane ili skladištene u sudovima za intravensku primenu kao što su kese ili špricevi).

[0044] Za ocenu hemijske stabilnosti daptomicina u rekonstituisanom rastvoru, čistoća daptomicina je merena u više vremenskih intervala posle rekonstitucije (ili odmrzavanja ako je zamrznuta), uključujući vremenske periode do 14 dana (3, 7 i 14 dana). Hemijska stabilnost daptomicina u rekonstituisanoj tečnoj kompoziciji je merena posle različitih perioda kao što je opisano u primeru 6, merenjem čistoće daptomicina prema primeru 4. Kompozicije sa povećanom hemijskom stabilnošću daptomicina imale su veće detektovane količine daptomicina, u odnosu na detektovane ukupne količine supstanci strukturno sličnih daptomicinu na slikama 2-4 (mereno postupkom iz primera 4), nego kompozicije sa nižom hemijskom stabilnošću daptomicina.

[0045] Čvrsti preparati na bazi daptomicina sa poboljšanom hemijskom stabilnošću (kao čvrste supstance i/ili u rekonstituisanim tečnostima) pripremljeni su kombinovanjem daptomicina sa neredukujućim šećerima koji uključuju saharozu i trehalozu i kombinacije neredukujućih šećera, kao što su saharoza i manitol.

[0046] U nekim primerima izvođenja čvrsti i tečni preparati na bazi daptomicina uključuju najmanje 92%, najmanje 93%, najmanje 94%, najmanje 95%, najmanje 96%, najmanje 97% ili najmanje 98% čistog daptomicina mereno kao u primeru 4. Poželjno, čvrsti farmaceutski preparati na bazi daptomicina se odlikuju time što najmanje 92%, najmanje 93%, najmanje 94%, najmanje 95%, najmanje 96%, najmanje 97% ili najmanje 98% od ukupne površine HPLC pika detektovanog na 214 nm prema tabeli 3 potiče od daptomicina u rekonstituisanom obliku čvrstog farmaceutskog preparata daptomicina prema postupku iz primera 4.

[0047] U nekim čvrstim farmaceutskim preparatima na bazi daptomicina, najmanje 92%, najmanje 93%, najmanje 94%, najmanje 95%, najmanje 96%, najmanje 97% ili najmanje 98% po težini preparata se sastoji od daptomicina i glicina ili jednog ili više neredukujućih šećera, pri čemu se farmaceutski preparat daptomicina odlikuje time što se oko 500 mg čvrstog farmaceutskog preparata daptomicina rastvara u oko 10 mL vodenog razblaživača (npr., 0,9% vodeni rastvor natrijum hlorida) za manje od oko 2 minuta.

[0048] Poželjni čvrsti preparat daptomicina koji ima poboljšanu rekonstituciju i povećanu stabilnost daptomicina u prahu i rekonstituisanim oblicima obuhvata čvrsti preparat daptomicina koji uključuje daptomicin, saharozu i fosfatno pufersko sredstvo; pri čemu

a. čvrsti preparat daptomicina uključuje najmanje 92% čistog daptomicina, izračunato pomoću odnosa apsorbance (površine ispod krive) na 214 nm za daptomicin, podeljene sa ukupnom površinom ispod krive izmerno pomoću tečne hromatografije visokih performansi (HPLC) rekonstituisanog rastvora daptomicina na 214 nm prema tabeli 3; i b. čvrsti preparat daptomicina može da se dobije:

i. obrazovanjem vodenog rastvora daptomicina koji uključuje 105 mg/mL (10,5% tež./zapr.) daptomicina, 7,1 mg/mL (50 mM) puferskog sredstva dibaznog natrijum fosfata i 150 mg/mL (15% tež./zapr.) saharoze na pH od oko 7,0; i ii. pretvaranjem vodene formulacije daptomicina u čvrsti preparat daptomicina.

[0049] Poželjni čvrsti preparati na bazi daptomicina se dobijaju iz rastvora daptomicina koji uključuju oko 2,5 - 25,0% tež./zapr. jednog ili više neredukujućih šećera (npr., saharoze, trehaloze i manitola), i opciono dodatno uključuju jedno ili više puferskih sredstava kao što je dibazni natrijum fosfat. Naročito poželjni čvrsti preparati na bazi daptomicina mogu da budu pripremljeni liofilizacijom ili sušenjem raspršivanjem tečnih rastvora koji sadrže daptomicin i saharozu (i opciono dodatno sadrže oko 50 mM dibaznog natrijum fosfata) na pH od oko 4,5 do 7,0 (uključujući, npr., pH vrednosti od 4,7 - 7,0).

[0050] Proizvodni artikli koji sadrže čvrsti preparat daptomicina su takođe obezbeđeni (npr., hermetički zatvorene bočice sa sredstvom za injektiranje vodenog razblaživača u bočicu, kao što je samo-zaptivna punktabilna membrana), kao i proizvode koji sadrže daptomicinski proizvod formulisan za parenteralnu primenu i koji uključuje čvrsti preparat daptomicina rastvoren u vodenom razblaživaču (npr., kesa ili špric prilagođen za intravensku primenu proizvoda na bazi daptomicina).

[0051] Poželjno, 500 mg čvrste farmaceutske kompozicije daptomicina rastvara se u 10 mL 0,9% vodenog rastvora natrijum hlorida za 1 minut, ili manje, na 25ºC. pH vodenog rastvora daptomicina može da se podesi na pH od najmanje 4,7 pre rastvaranja neredukujućeg šećera u vodenom rastvoru sa daptomicinom. Opciono, preparat daptomicina se priprema dodavanjem puferskog sredstva u vodeni rastvor daptomicina pre rastvaranja neredukujućeg šećera u vodenom rastvoru sa daptomicinom. Tečna formulacija daptomicina može da ima koncentraciju daptomicina od oko 105 mg/mL. Šećer u tečnoj formulaciji daptomicina može da bude izabran iz grupe koja se sastoji od trehaloze, saharoze, manitola, laktoze, maltoze, fruktoze, dekstroze i njihovih kombinacija. U jednom poželjnom primeru, 500 mg čvrste farmaceutske kompozicije daptomicina se rastvara u 10 mL 0,9% vodenog rastvora natrijum hlorida za 1 minut, ili manje, na 25ºC, i čvrsti farmaceutski preparat daptomicina se priprema:

a. obrazovanjem vodenog rastvora daptomicina na pH od oko 4,7 - 5,0;

b. dodavanjem puferskog sredstva koje sadrži fosfat, citrat, maleat ili njihovu kombinaciju vodenom rastvoru daptomicina;

c. rastvaranjem neredukujućeg šećera u vodenom rastvoru sa daptomicinom za obrazovanje puferisane formulacije daptomicin-šećer;

d. podešavanjem pH puferisane formulacije daptomicin-šećer do oko 7,0; i e. liofilizacijom puferisane formulacije daptomicin-šećer za obrazovanje čvrste farmaceutske kompozicije daptomicina.

[0052] Drugi primeri čvrstih farmaceutskih preparata na bazi daptomicina mogu da budu pripremljeni:

a. obrazovanjem vodenog rastvora daptomicina na pH od oko 4,7 - 5,0;

b. dodavanjem puferskog sredstva koje sadrži fosfat, citrat, maleat ili njihovu kombinaciju vodenom rastvoru daptomicina;

c. rastvaranjem šećera u vodenom rastvoru sa daptomicinom za obrazovanje formulacije daptomicin-šećer, pri čemu je šećer izabran iz grupe koja se sastoji od trehaloze, saharoze, manitola, i njihovih kombinacija;

d. podešavanjem pH formulacije daptomicin-šećer do oko 7,0; i

e. liofilizacijom formulacije daptomicin-šećer za obrazovanje čvrste farmaceutske kompozicije daptomicina.

[0053] Postupci proizvodnje liofilizovanog preparata leka na bazi daptomicina koji ima ubrzanu rekonstituciju u vodenom razblaživaču, 0,9% vodenom rastvoru natrijum hlorida mogu da uključuju sledeće korake:

1. a. obrazovanje vodenog rastvora daptomicina na pH od oko 4,7 - 5,0;

2. b. dodavanje puferskog sredstva koje sadrži fosfat, citrat, maleat ili njihovu kombinaciju vodenom rastvoru daptomicina;

3. c. rastvaranje šećera u vodenom rastvoru sa daptomicinom za obrazovanje puferisane formulacije daptomicin-šećer koja sadrži oko 2,5% do oko 25% šećera, pri čemu je šećer izabran iz grupe koja se sastoji od trehaloze, saharoze, manitola, i njihovih kombinacija; 4. d. podešavanje pH puferisane formulacije daptomicin-šećer do oko 6,5 do 7,5; i 5. e. liofilizacije puferisane formulacije daptomicin-šećer za obrazovanje čvrste farmaceutske kompozicije daptomicina.

[0054] Poželjno, 500 mg liofilizovane kompozicije daptomicina rastvara se u 10 mL 0,9% vodenog rastvora natrijum hlorida za 1 minut ili manje, na 25ºC. Puferisana formulacija daptomicin-šećer poželjno uključuje fosfat i oko 2,5% do oko 25% šećera.

Primeri

[0055] Sledeći primeri su ilustrativni za pronalazak u onoj meri u kojoj se odnosi na čvrstu kompoziciju daptomicina, pri čemu je pomenuta kompozicija pripremljena liofilizacijom vodenog tečnog rastvora daptomicina koji sadrži najmanje jedan ekscipijens koji je neredukujući šećer, pri čemu vodeni tečni rastvor daptomicina ima pH od 6,5 do 7,5.

[0056] Poboljšani čvrsti preparati daptomicina dobijeni su (a) obrazovanjem čvrstog farmaceutskog preparata od rastvora koji sadrži daptomicin i jedan ili više šećera ili glicin kao što je opisano u primerima 2a i 2b, i (b) pretvaranja rastvora daptomicina u čvrsti farmaceutski preparat (npr., liofilizacijom ili sušenjem raspršivanjem), kao što je opisano u primeru 3. Čvrsti farmaceutski preparat može kasnije da bude rekonstituisan dodavanjem vodenog razblaživača za rastvaranje čvrstog farmaceutskog preparata za oko 4 minuta ili manje. Poželjno, čvrsti farmaceutski preparati na bazi daptomicina rastvaraju se u vodenom razblaživaču za oko 1 minut ili manje na 25ºC (opciono uz blago mešanje).

[0057] Prema uputstvu za upotrebu za daptomicin za injekcije koji se prodaje pod zaštićenim znakom CUBICIN® (tj., daptomicin bez glicina ili šećera):

„Sadržaj bočice CUBICIN 500 mg treba da bude rekonstituisan upotrebom aseptične tehnike kao što sledi:

Napomena: Da bi se smanjilo stvaranje pene, IZBEGAVATI snažno mućkanje ili protresanje bočice tokom ili posle rekonstitucije.

1. 1. Ukloniti polipropilenski „flip-off“ poklopac sa bočice leka CUBICIN da bi se oslobodio centralni deo gumenog zapušača.

2. 2. Polako preneti 10 mL injekcionog 0,9% natrijum hlorida kroz centar gumenog zapušača u bočicu leka CUBICIN, usmeravajući iglu za prenošenje prema zidu bočice.

3. 3. Osigurati da celokupan proizvod CUBICIN bude nakvašen blagim rotiranjem bočice.

4. 4. Ostaviti proizvod da miruje 10 minuta.

5. 5. Pažljivo okretati ili zavrteti sadržaj bočice nekoliko minuta, po potrebi, da bi se dobio u potpunosti rekonstituisan rastvor.“

[0058] Nasuprot tome, poboljšani čvrsti preparati daptomicina rekonstituišu se brže u vodenom razblaživaču nego daptomicin bez šećera ili glicina. Naročito poželjni čvrsti preparati mogu da budu rekonstituisani u vodenom razblaživači za manje od 2 minuta na 25ºC, poželjnije za manje od oko 1 minuta na 25ºC. Tabela 6 (Slika 5) i tabela 5 (Slika 6) prikazuju vremena rekonstitucije za različite čvrste preparate na bazi daptomicina, dobijena merenjem vremena za rastvaranje 500 mg čvrstog preparata daptomicina u 10 mL razblaživača 0,9% vodenog rastvora natrijum hlorida na oko 25ºC.

[0059] Pored toga, primeri opisuju poboljšane čvrste preparate daptomicina koji obezbeđuju veću hemijsku stabilnost daptomicina u čvrstom obliku kao što je opisano u primeru 5 i u rekonstituisanom tečnom obliku kao što je opisano u primeru 6. Poboljšani preparati na bazi daptomicina mogu da uključuju više daptomicina u odnosu na supstance izabrane iz grupe koja se sastoji od anhidro-daptomicina (Slika 2), beta-izomera daptomicina (Slika 3) i proizvoda hidrolize laktona daptomicina (Slika 4), mereno metodom HPLC prema primeru 4. Poželjno, čvrsti preparat na bazi daptomicina dobija se pretvaranjem tečnog rastvora daptomicina u čvrsti oblik, zatim rekonstitucijom čvrstog oblika prema primeru 4, i merenjem ukupne površine HPLC pika na 214 nm prema parametrima HPLC u tabeli 3 u rekonstituisanoj tečnosti, čije najmanje 92% vrednosti potiče od daptomicina u rekonstituisanom rastvoru. Čvrsti preparat daptomicina može da se sastoji od daptomicina, jednog ili više šećera izabranih iz grupe koja se sastoji od saharoze, trehaloze i manitola, farmaceutski odgovarajućih soli (npr., natrijum hlorida), jednog ili više puferskih sredstava kao što je dibazni natrijum fosfat i materijala koji čine do 8% ukupne površine HPLC pika na 214 nm prema parametrima HPLC u tabeli 3 u rekonstituisanoj tečnosti obrazovanoj prema primeru 4.

[0060] Tabela 8 (Slika 7) opisuje različite farmaceutske kompozicije daptomicina. U tabeli 8, oznaka „Molarni odnos postojećih komponenata, respektivno“, odnosi se na molarni odnos daptomicina prema drugim komponentama navedenim kao [B], [C] i [D] (kada je prisutno), datim redosledom. Na primer, ako kompozicija sadrži daptomicin[A] i jedan ekscipijens [B], molarni odnos će biti izražen kao [A] :[B]. Ako kompozicija sadrži dva ekscipijensa [B] i [C], tada će molarni odnos biti izražen kao daptomicin[A] : ekscipijens[B]: ekscipijens[C] i tako dalje. Ako kompozicija sadrži daptomicin[A], i ekscipijens[B] i pufersko sredstvo [D], molarni odnos će biti izražen kao [A]:[B]:[D].

[0061] Tabela 6 (Slika 5) prikazuje primere kompozicija daptomicina koje se rekonstituišu u vodenom razblaživaču za manje od 2 minuta. Tabela 7 (Slika 6) obezbeđuje primere drugih kompozicija na bazi daptomicina koje se rekonstituišu u vodenom razblaživaču za oko 2 minuta ili više. Kompozicije na bazi daptomicina bez šećera ili glicina u tabeli 6 i tabeli 7 dobijene su ili postupkom A (Primer 1a) ili postupkom B (Primer 1b) praćenim liofilizacijom prema primeru 3. Kompozicije na bazi daptomicina sa šećerom ili glicinom u tabeli 6 i tabeli 7 dobijene su ili postupkom A (Primer 2a) ili postupkom B (Primer 2b) praćenim liofilizacijom prema primeru 3. Molarni odnosi u tabelama 6 i 7 su izračunati na osnovu molekulskih težina datih u tabeli 1.

Tabela 1: Molekulske težine daptomicina i ekscipijenasa

[0062] Predmetni pronalazak će se dodatno razumeti uzimajući u obzir sledeće primere.

Primer 1A: Uporedni preparativni postupak A (liofilizacija daptomicina na pH 4,7 bez šećera ili glicina)

[0063] Priprema uporedne formulacije daptomicina bez šećera ili glicina izvedena je pod uslovima hlađenja (2 - 10°C). Aktivni farmaceutski sastojak (API) daptomicin nabavljen je kao zamrznuta tečnost u u opsegu koncentracije od 125 - 130 mg/mL, pH 3,0. Priprema je počela dobijanjem tečnog API daptomicina (npr., odmrzavanjem smrznutog API daptomicina obezbeđenog na pH od oko 3,0) nakon čega je pH podešen na ciljni pH od oko 4,7 upotrebom 3N NaOH. Zbirni rastvor je dalje razblažen do ciljne koncentracije od 105 mg/mL sa sWFI i mešan da bi se osigurala homogenost rastvora (takođe na 2 - 10°C). Zbirni rastvor proizvoda je filtriran kroz filter od 0,2 µm i napunjen u bočice od 10 mL nakon čega je urađena liofilizacija prema aktuelnom liofilizacionom ciklusu kao što je navedeno u primeru 3. Formulacija leka je zatvorena zapušačima pod azotom i hermetički zatvorena.

Primer 1B: Uporedni preparativni postupak B (liofilizacija daptomicina na pH 7,0 bez šećera ili glicina)

[0064] Priprema zbirne formulacije je izvedena pod uslovima hlađenja (2 - 10°C). API daptomicina je nabavljen kao zamrznuta tečnost u opsegu koncentracije od 125 - 130 mg/mL, pH 3,0. Priprema zbirne formulacije je obuhvatala odmrzavanje API praćeno podešavanjem pH do ciljnog pH od 7,0 upotrebom 3N NaOH pod uslovima hlađenja (2 - 10°C), a nakon toga razblaživanjem do ciljne koncentracije od 105 mg/mL sa sWFI i mešanjem da bi se osigurala homogenost rastvora. Formulisani lek je filtriran kroz filter od 0,2 µm i napunjen u bočice od 10 mL nakon čega je urađena liofilizacija prema modifikovanom liofilizacionom ciklusu kao što je navedeno u primeru 3. Formulacija leka je zatvorena zapušačima pod azotom i hermetički zatvorena.

Primer 2A: Preparativni postupak A (liofilizacija na pH 4,7)

[0065] Priprema poboljšane formulacije daptomicina je izvedena pod uslovima hlađenja (2 -10°C). Aktivni farmaceutski sastojak (API) daptomicina nabavljen je kao zamrznuta tečnost u opsegu koncentracije od 125 - 130 mg/mL, pH 3,0. Priprema je počela dobijanjem tečnog API daptomicina (npr., odmrzavanjem smrznutog API daptomicina obezbeđenog na pH od oko 3,0) nakon čega je pH podešen na ciljni pH od oko 4,7 upotrebom 3N NaOH, a nakon toga je dodat šećer(i) (npr., saharoza). Zbirni rastvor je dalje razblažen do ciljne koncentracije od 105 mg/mL sa sWFI i mešan da bi se osigurala homogenost rastvora (takođe na 2 - 10°C). Zbirni rastvor proizvoda je filtriran kroz filter od 0,2 µm i napunjen u bočice od 10 mL nakon čega je urađena liofilizacija prema aktuelnom liofilizacionom ciklusu kao što je navedeno u primeru 3. Formulacija leka je zatvorena zapušačima pod azotom i hermetički zatvorena. Šećeri su dodati ili kao prah ili u pogodnom rastvoru, kao što je sWFI.

Primer 2B: Preparativni postupak B (liofilizacija na pH 7,0)

[0066] Priprema poboljšanih formulacija daptomicina je izvedena pod uslovima hlađenja (2 -10°C). API daptomicina je nabavljen kao zamrznuta tečnost u opsegu koncentracija od 125 - 130 mg/mL, pH 3,0. Priprema zbirne formulacije je obuhvatala odmrzavanje API praćeno podešavanjem pH na ciljni pH od 4,7 upotrebom 3N NaOH pod uslovima hlađenja (2 - 10°C), a nakon toga dodavanje puferskih sredstava (fosfat, citrat, itd.) uz naknadno dodavanje glicina ili šećera (saharoze, trehaloze, manitola). Kada su ekscipijensi (šećeri, puferska sredstva) u potpunosti rastvoreni, pH rastvora od 4,7 je podešen do 7,0 sa 3N NaOH i rastvor je razblažen do ciljne koncentracije od 105 mg/mL sa sWFI i mešan da se osigura homogenost rastvora. Formulisani lek je filtriran kroz filter od 0,2 µm i napunjen u bočice od 10 mL nakon čega je urađena liofilizacija prema modifikovanom liofilizacionom ciklusu kao što je navedeno u primeru 3. Formulacija leka je zatvorena zapušačima pod azotom i hermetički zatvorena.

Primer 3: Liofilizacija kompozicija pripremljenih postupcima A i B

[0067] Bočice sa proizvodom su smeštene u liofilizator na 5±4 °C i nasumično raspoređene na svakoj polici. Kompozicija je liofilizovana do suva, ponovo napunjena azotom i zatvorena zapušačima pod vakuumom. Kada je zatvaranje završeno, jedinica za liofilizaciju je dovedena na atmosferski pritisak, upotrebom filtriranog azota, i bočice proizvoda su izvađene da bi bile zatvorene aluminijumskim kapicama. Parametri ciklusa za različite formulacije su prikazani u tabeli 2.

Tabela 2: Rezime parametara liofilizacionih ciklusa za različite kompozicije

Primer 4. Merenje količine daptomicina i supstanci koje su strukturno slične daptomicinu

[0068] Osim ako nije drugačije naznačeno, količina daptomicina i tri jedinjenja koja su strukturno slična daptomicinu (slike 2-4) merena je upotrebom HPLC analize u vodenim rekonstituisanim tečnim rastvorima koji sadrže daptomicin, upotrebom instrumenta Agilent 1100 ili 1200 za tečnu hromatografiju visokih performansi sa detektorom ultraljubičastog (UV) zračenja. Površine pikova su merene upotrebom kompjuterskog programa Waters Empower 2 FR5 SPF build 2154. Osim ako nije drugačije naznačeno, procenat čistoće čvrstog preparata daptomicina određen je rekonstitucijom 500 mg čvrstog preparata daptomicina u 10 mL vodenog razblaživača za obrazovanje rekonstituisanog rastvora daptomicina, zatim merenjem apsorbance rekonstituisanog uzorka na 214 nm pomoću HPLC upotrebom HPLC parametara datih u tabeli 3. Procenat čistoće daptomicina u čvrstom preparatu daptomicina izračunat je pomoću odnosa apsorbance (površina ispod krive) na 214 nm za daptomicin podeljene ukupnom površinom ispod krive izmerenom pomoću HPLC rekonstituisanog rastvora daptomicina na 214 nm u skladu sa tabelom 3 i formulom datom u nastavku teksta. Za uzorak daptomicina sa 92% čistoće, 92% od ukupne površine pika svih pikova ≥ 0,05 površinskih % pripisano je daptomicinu.

[0069] Osim toga, količina tri supstance koje su strukturno slične daptomicinu može da bude detektovana pomoću HPLC na 214 nm prema tabeli 3: anhidro-daptomicina (Slika 2), betaizomera daptomicina (Slika 3) i proizvoda hidrolize laktona daptomicina (Slika 4). Osim ako nije drugačije naznačeno, količina ovih supstanci u čvrstim preparatima na bazi daptomicina meri se pomoću HPLC prema tabeli 3 nakon rekonstitucije 500 mg čvrstog preparata daptomicina u 10 mL vodenog razblaživača za obrazovanje rekonstituisanog rastvora daptomicina, merenjem apsorbance na 214 nm rekonstituisanog daptomicina HPLC metodom uz korišćenje parametara iz tabele 3.

Tabela 3

1. Sistem za dostavu rastvarača:

Modalitet: Izokratsko upumpavanje

Brzina protoka: 1,5 mL/min

Vreme analize: 75 minuta

2. Rastvarač A: 50% acetonitril u 0,45% NH4H2PO4na pH 3,25

Rastvarač B: 20% acetonitril u 0,45% NH4H2PO4na pH 3,25

Ciljni uslov je približno 45% rastvarača A i 55% rastvarača B da bi se daptomicin zadržao tokom 36,0 ± 1.5 minuta; međutim, odnos rastvarača može da se prilagodi tako da se postigne željeno retenciono vreme.

3. Hlađenje autodozatora: 5 (2 do 8) °C

4. Zapremina injektovanja: 20 µL

5. Kolona: IB-SIL (Phenomenex), C-8-HC, 5µ, 4,6 mm x 250 mm (ili ekvivalentna)

6. Pretkolona: IB-SIL (Phenomenex), C-8, 5µ, 4,6 mm x 30 mm (ili ekvivalentna)

7. Talasna dužina detekcije: 214 nm

8. Temperatura kolone: 25 (22 do 28) °C

9. Integracija: Kompjuterski sistem ili integrator, sposoban da meri površinu pika

[0070] Čistoća daptomicina je izračunata na osnovu podataka dobijenih HPLC metodom, kao što sledi:

• Površinski % pojedinačnih supstanci koje su strukturno slične daptomicinu izračunava se upotrebom sledeće jednačine:

Površinski % daptomicina i svih supstanci strukturno sličnih daptomicinu određen korišćenjem apsorbance na 214 nm

Izračunati površinu daptomicina i svih drugih pikova ≥ 0.05 površinskih %,

% površine = (Ai/ Atot) x 100%

u kojoj:

% površine = Površinski % pojedinačnog pika;

Ai= Pik pojedinačnog pika; i

Atot= ukupna površina pikova uzorka uključujući daptomicin.

• Površinski % ukupnih supstanci koje su strukturno slične daptomicinu izračunava se upotrebom sledeće jednačine:

Površinski % ukupnih supstanci koje su strukturno slične daptomicinu jednak je zbiru svih opisanih vrednosti površinskih % pojedinačnih supstanci (zbir svih nečistoća =/> 0,05%)

• *Izračunati % čistoće daptomicina u površinskim % upotrebom sledeće jednačine: ;;% Daptomicina = 100% - % ukupnih supstanci strukturno sličnih daptomicinu ;Primer 5. Merenje hemijske stabilnosti daptomicina u čvrstim farmaceutskim kompozicijama ;[0071] Ovaj primer pokazuje povećanu hemijsku stabilnost daptomicina u čvrstim farmaceutskim kompozicijama na bazi daptomicina u određenim poželjnim kompozicijama koje sadrže saharozu, manitol, trehalozu i glicin, u poređenju sa kompozicijama na bazi daptomicina bez šećera ili glicina i kompozicijama na bazi daptomicina sa određenim redukujućim šećerima. ;[0072] Hemijska stabilnost različitih čvrstih farmaceutskih kompozicija na bazi daptomicina procenjena je skladištenjem kompozicije u bočicama na različitim temperaturama (2-8ºC, 25ºC i 40ºC). Čvrste farmaceutske kompozicije na bazi daptomicina dobijene su liofilizacijom ili sušenjem raspršivanjem tečnih kompozicija pripremljenih prema primeru 2a (Postupak A, na pH 4,7) ili primeru 2b (Postupak B, na pH 7,0). Liofilizacija je sprovedena prema primeru 3. Količina daptomicina i tri daptomicinu-srodne nečistoće izmerena je upotrebom HPLC metoda prema primeru 4 u rekonstituisanim rastvorima obrazovanim rastvaranjem oko 500 mg čvrstih preparata na bazi daptomicina u 10 mL 0,9% vodenog rastvora natrijum hlorida. Ukupna čistoća daptomicina izračunata prema primeru 4 prikazana je grafički za merenja na 0, 1, 2, 3 i 6 meseci za bočice različitih čvrstih farmaceutskih kompozicija na bazi daptomicina skladištenih na 40ºC. Nagib linearne regresione krive koja je najbolje odgovarala grafiku ukupne čistoće daptomicina po mesecu izračunat je za svaku čvrstu farmaceutsku formulaciju daptomicina (nagib u % ukupne čistoće daptomicina/mesec). ;[0073] Podaci u tabeli 4 prikazuju odnos nagiba za svaki čvrsti preparat daptomicina normalizovan na nagib dobijen iz rekonstituisanog čvrstog daptomicina za injekcije, koji ne sadrži saharozu. Uzimajući u obzir tabelu 4, odnosi u koloni A dobijeni su za čvrste preparate pripremljene prema postupku A u primeru 2a (tj., dobijeni za rastvore koji sadrže daptomicin na pH od 4,7), dok su odnosi u koloni B dobijeni za čvrste preparate pripremljene prema postupku B u primeru 2b (tj., dobijeni za rastvore koji sadrže daptomicin na pH od 7,0 koji dodatno sadrže 50 mM puferskog sredstva natrijum fosfata). Odnosi označeni sa „*“ su za čvrste preparate na bazi daptomicina početno pretvorene u čvrste oblike sušenjem raspršivanjem; svi drugi uzorci su dobijeni iz čvrstih preparata na bazi daptomicina koji su početno pretvoreni u čvrsto stanje liofilizacijom (Primer 3). Unosi sa „NT“ u tabeli 4 nisu ispitivani. Svi količnici u tabeli 4 dobijeni su linearnom regresijom izmerenih vrednosti ukupne čistoće daptomicina (Slika 1) u odnosu na supstance koje su strukturno slične daptomicinu prikazane na slikama 2-4 na 0 (tj., posle obrazovanja čvrstog materijala), 1 mesec, 2 meseca, 3 meseca i 6 meseci skladištenja na 40ºC, pri čemu je količina daptomicina i supstanci koje su strukturno slične daptomicinu detektovana i izračunata prema primeru 4. Količnici u tabeli 4 predstavljaju promenu u stopi ukupne čistoće daptomicina u odnosu na daptomicin za injekcije (normalizovanu na 1,00 za preparativni postupak A i preparativni postupak B). Količnici ispod 1,00 predstavljaju smanjene brzine redukcije ukupne čistoće daptomicina, ili povećanu hemijsku stabilnost daptomicina u formulaciji u odnosu na hemijsku stabilnost daptomicina u odsustvu saharoze u proizvodu daptomicinu za injekcije. Prema tome, što je niži količnik u tabeli 4, to je daptomicin u odgovarajućoj formulaciji stabilniji u odnosu na supstance koje su strukturno slične daptomicinu na slikama 2-4.

TABELA 4: Količnik % promene ukupne čistoće daptomicina na mesečnom nivou u odnosu na daptomicin za injekcije (6 meseci)

[0074] Podaci u tabeli 4 pokazuju da je daptomicin u čvrstoj farmaceutskoj kompoziciji daptomicina koja sadrži 15,0% saharoze pokazao povećanje hemijske stabilnosti daptomicina od oko 84% u poređenju sa daptomicinom za injekcije u formulacijama pripremljenim prema postupku A (Primer 2a), i povećanje hemijske stabilnosti daptomicina od oko 96% u poređenju sa daptomicinom za injekcije u formulacijama pripremljenim prema postupku B (Primer 2b). Slično, čvrsta farmaceutska kompozicija na bazi daptomicina koja sadrži 20.0% saharoze pokazala je povećanje hemijske stabilnosti daptomicina u odnosu na daptomicin bez saharoze (tj., daptomicin za injekcije) od oko 78% (Postupak A) i 87% (Postupak B). Prema tome, kombinovanje 15-20% saharoze sa liofilizovanom kompozicijom daptomicina povećalo je hemijsku stabilnost daptomicina za najmanje 78%, i jednako 96%. Nasuprot tome, tabela 4 takođe pokazuje da je daptomicin bio oko 2-9 puta manje stabilan u formulacijama koje sadrže daptomicin i laktozu, maltozu, fruktozu, i/ili dekstrozu. Tabela 4 stoga pokazuje da je daptomicin pripremljen prema postupcima primera 2a i 2b (Postupci A odnosno B) stabilizovan kada se kombinuje sa neredukujućim šećerima ili glicinom (u odnosu na daptomicin bez šećera ili glicina), dok je daptomicin bio manje stabilan u formulacijama koje sadrže redukujuće šećere.

[0075] Slika 8 je tabela 9 koja prikazuje procentnu promenu ukupne čistoće daptomicina, izmerenu i izračunatu za različite formulacije daptomicina prema primeru 4. Navođenje „PO4“ u tabeli 9 odnosi se na formulacije koje sadrže pufersko sredstvo dibazni natrijum fosfat. Navođenje „pH“ vrednosti u tabeli 9 odnosi se na pH na kome je formulacija pripremana (tj., pH rastvora formulacije daptomicina koji je liofilizovan za obrazovanje čvrstih formulacija daptomicina koje su ispitivane da bi se dobili podaci u tabeli 9). NT = nije ispitivano.

[0076] Da bi se dobili podaci u tabeli 9, svaka čvrsta formulacija daptomicina je skladištena na 40ºC tokom različitih perioda vremena (1, 2, 3, ili 6 meseci), pre rekonstitucije čvrste formulacije daptomicina i merenja čistoće daptomicina prema postupku iz primera 4.

[0077] Tabela 9 pokazuje količnik stabilnosti daptomicina, izračunat kao što sledi:

1. Pripremiti kontrolni uzorak (komercijalni proizvod daptomicin za injekcije, bez šećera ili glicina) pripremljen prema primeru 1b i izmeriti prema primeru 4 ukupni procenat čistoće daptomicina za kontrolni uzorak posle formulacije

2. Izmeriti ukupni procenat čistoće daptomicina za kontrolni uzorak prema primeru 4 posle skladištenja kontrolnog uzorka tokom datog perioda vremena na 40ºC i oduzeti ukupni procenat čistoće daptomicina posle skladištenja za taj period vremena od ukupnog procenta čistoće daptomicina posle formulacije, da bi se dobio ukupni procentni gubitak čistoće za kontrolu;

3. Izmeriti ukupni procenat čistoće daptomicina za svaku formulaciju prema primeru 4 posle skladištenja formulacije tokom datog perioda vremena na 40ºC (npr., 1 mesec, 2 meseca, itd.) i oduzeti ukupni procenat čistoće posle skladištenja za taj period vremena od ukupnog procenta čistoće daptomicina kontrolnog uzorka posle formulacije, da bi se dobio ukupni procentni gubitak čistoće formulacije daptomicina;

4. Izračunati količnik stabilnosti daptomicina na 40ºC deljenjem ukupnog procentnog gubitka čistoće formulacije daptomicina, dobijenog za svaku formulaciju nakon istog perioda vremena skladištenja (iz koraka 3), sa ukupnim procentnim gubitkom čistoće kontrole (iz koraka 2) posle datog perioda vremena skladištenja:

Ukupni procentni gubitak čistoće formulacije daptomicina izmeren prema koraku 3

Količnik stabilnosti daptomicina = Ukupni procentni gubitak čistoće kontrole daptomicina izmeren prema koraku 2

Koraci 2-4 se ponavljaju za izračunavanje svakog količnika stabilnosti daptomicina. Količnik stabilnosti daptomicina se izračunava sa posebnim kontrolnim uzorkom koji je bio skladišten tokom istog perioda vremena kao formulacija. Na primer, vrednosti količnika stabilnosti daptomicina izračunate za formulaciju posle 1 meseca skladištenja na 40ºC dobijeni su deljenjem vrednosti iz koraka 3 za formulaciju sa vrednošću dobijenom u koraku 2 za kontrolu koja je skladištena 1 mesec na 40ºC (tj., tokom istog perioda skladištenja i na istim uslovima skladištenja kao formulacija ispitana u koraku 3). Slično, vrednosti količnika stabilnosti daptomicina na 2 meseca bile bi izračunate sa kontrolnim uzorkom koji je skladišten 2 meseca pod istim uslovima kao formulacija korišćena u koraku 3.

[0078] Vrednosti količnika stabilnosti daptomicina manje od 1,000 u tabeli 9 ukazuju na to da odgovarajuća formulacija ima višu hemijsku stabilnost daptomicina izmerenu kao veći ukupni procenat čistoće daptomicina (izmereno prema primeru 4) u uzorku formulacije, nego u kontrolnom uzorku daptomicina bez šećera ili glicina (pripremljenom prema koraku 1 iznad), posle odgovarajućeg perioda skladištenja na 40ºC. Poželjne kompozicije imaju količnike stabilnosti daptomicina manje od 0,800, poželjnije manje od 0,500, i najpoželjnije količnike stabilnosti daptomicina manje od 0,300.

[0079] Podaci u tabeli 9 pokazuju da je daptomicin uopšteno imao veću hemijsku stabilnost (kao što je izmereno poboljšanom čistoćom daptomicina prema primeru 4 posle rekonstitucije u vodenom razblaživaču) kada su u pitanju kompozicije na bazi daptomicina koje sadrže neredukujući šećer pripremljene na pH 7,0 sa puferskim sredstvom, nego daptomicin bez šećera. Primetno, formulacije koje sadrže 15% saharoze pripremljene prema postupku A (Primer 2a) ili postupku B (Primer 2b) imale su veoma visoke nivoe hemijske stabilnosti daptomicina među ispitivanim uzorcima, i značajno više nivoe hemijske stabilnosti daptomicina tokom 12 meseci nego što je zapaženo kod daptomicina uporedne formulacije 0 bez šećera ili glicina. Formulacije saharoza-manitol takođe su obezbedile poboljšanje hemijske stabilnosti daptomicina u odnosu na uporednu formulaciju daptomicina 0 bez šećera ili glicina. Na primer, 10% saharoze/3% manitola, 10% saharoze/6% manitola, i 15% saharoze/6% manitola, sve pripremljeno prema postupku A (Primer 2a), obezbedilo je značajno poboljšanu stabilnost daptomicina, nasuprot formulacije sa 15% saharoze/6% manitola pripremljene prema postupku A (Primer 2a). Formulacija sa 5% glicina pripremljena prema postupku B (Primer 2b) takođe je obezbedila značajnu stabilizaciju daptomicina, dok je odgovarajući preparat sa 5% glicina iz postupka A (Primer 2a) bio manje stabilan od daptomicina bez šećera ili glicina (Formulacija 0). Sve formulacije daptomicina u tabeli 9 koje sadrže saharozu pokazale su povećanu hemijsku stabilnost daptomicina u poređenju sa daptomicinom bez šećera ili glicina u uporednoj formulaciji 0 (mereno kao u primeru 4).

Primer 6. Merenje hemijske stabilnosti daptomicina u tečnim rekonstituisanim farmaceutskim kompozicijama

[0080] Ovaj primer pokazuje povećanu hemijsku stabilnost daptomicina u rekonstituisanim farmaceutskim kompozicijama na bazi daptomicina u kompozicijama koje sadrže saharozu u poređenju sa uporednim kompozicijama bez saharoze.

[0081] Hemijska stabilnost različitih tečnih farmaceutskih kompozicija na bazi daptomicina procenjivana je skladištenjem kompozicije u bočicama na različitim temperaturama (5ºC i 40ºC). Tečne rekonstituisane farmaceutske kompozicije na bazi daptomicina dobijene su rekonstitucijom oko 500 mg čvrstih preparata na bazi daptomicina u 10 mL sWFI. Svaki čvrsti preparat daptomicina bio je dobijen liofilizacijom ili sušenjem raspršivanjem tečnih kompozicija pripremljenih prema primeru 1 (Postupak A, na pH 4,7) ili primeru 2 (Postupak B, na pH 7,0). Liofilizacija je izvedena prema primeru 3. Količina daptomicina i daptomicinu-srodnih nečistoća izmerena je korišćenjem HPLC metode prema primeru 4 u rekonstituisanim rastvorima obrazovanim rastvaranjem. Izmeren je i izračunat % daptomicina prema primeru 4, za izmerene vrednosti na 0, 3, 7 i 14 dana za bočice različitih čvrstih farmaceutskih kompozicija na bazi daptomicina skladištene na 5ºC ili 40ºC.

[0082] Podaci u tabeli 5 pokazuju količinu % daptomicina pri svakom merenju normalizovanu na % daptomicina dobijen iz rekonstituisanog čvrstog daptomicina za injekcije, koji ne sadrži saharozu. Uzimajući u obzir tabelu 5, svaki uzorak je rekonstituisan iz čvrste farmaceutske kompozicije daptomicina pripremljene postupkom A u primeru 1 (tj., dobijene iz rastvora koji sadrže daptomicin na pH od 4,7) ili postupkom B u primeru 2 (tj., dobijene iz rastvora koji sadrže daptomicin na pH od 7,0 koji dodatno sadrže pufersko sredstvo 50 mM natrijum fosfat), kao što je naznačeno u koloni „Postupak“. Temperatura u stepenima C rekonstituisane tečnosti naznačena je pod „Temp (ºC)“. Brojevi ispod 1,000 u tabeli 5 označavaju niži % čistoće daptomicina nego kod daptomicina za injekcije na 0 dana za datu temperaturu. Svi unosi su normalizovani na merenje za daptomicin za injekcije na odgovarajućoj temperaturi (npr., sva merenja izvedena na 5ºC su normalizovana na % daptomicina izmeren za daptomicin za injekcije na 5ºC). Prema tome, što je broj u tabeli 5 bliži 1,000, to je daptomicin u rekonstituisanom tečnom obliku u odgovarajućoj formulaciji stabilniji u odnosu na supstance koje su strukturno slične daptomicinu na slikama 2-4.

TABELA 5: % Daptomicin meren u rekonstituisanom rastvoru

[0083] Podaci u tabeli 5 pokazuju da je ukupan % daptomicina u tečnoj rekonstituisanoj farmaceutskoj kompoziciji daptomicina koja sadrži 15,0% saharoze bio značajno stabilniji nego daptomicin za injekcije (bez saharoze) na 25ºC posle 14 dana (0,9184 za formulaciju sa saharozom u poređenju sa 0,7410 za formulaciju daptomicina za injekcije bez saharoze). Ovo predstavlja povećanje od oko 23% hemijske stabilnosti daptomicina u rekonstituisanom rastvoru u prisustvu rekonstituisane kompozicije koja se suštinski sastoji od daptomicina, oko 15% saharoze, i 50 mM natrijum fosfata. Prema tome, formulacija daptomicina sa 15,0% saharoze pokazala je iznenađujuće poboljšanu hemijsku stabilnost daptomicina na sobnoj temperaturi i poboljšan rok trajanja posle rekonstitucije.

Claims (12)

Patentni zahtevi

1. Čvrsta kompozicija daptomicina, naznačena time što je navedena kompozicija pripremljena liofilizacijom tečnog vodenog rastvora daptomicina koji sadrži najmanje jedan ekscipijens koji je neredukujući šećer, pri čemu tečni vodeni rastvor daptomicina ima pH od 6,5 do 7,5.

2. Čvrsta kompozicija daptomicina prema patentnom zahtevu 1, naznačena time što molarni odnos daptomicina prema šećeru iznosi 1:1,12 do 1:21,32.

3. Čvrsta kompozicija daptomicina prema patentnom zahtevu 1 ili 2, naznačena time što je šećer odabran od trehaloze, saharoze i manitola.

4. Čvrsta kompozicija daptomicina prema patentnom zahtevu 1, naznačena time što čvrsta kompozicija daptomicina sadrži daptomicin i trehalozu.

5. Čvrsta kompozicija daptomicina prema patentnom zahtevu 4, naznačena time što molarni odnos daptomicina prema trehalozi iznosi 1:2,13 do 1:21,32.

6. Čvrsta kompozicija daptomicina prema patentnom zahtevu 1, naznačena time što čvrsta kompozicija daptomicina sadrži daptomicin i saharozu.

7. Čvrsta kompozicija daptomicina prema patentnom zahtevu 6, naznačena time što molarni odnos daptomicina prema saharozi iznosi 1:1,12 do 1:8,98.

8. Čvrsta kompozicija daptomicina prema patentnom zahtevu 1, naznačena time što čvrsta kompozicija daptomicina sadrži daptomicin i manitol.

9. Čvrsta kompozicija daptomicina prema patentnom zahtevu 8, naznačena time što molarni odnos daptomicina prema manitolu iznosi 1:2,52 do 1:5,04.

10. Čvrsta kompozicija daptomicina prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 9, naznačena time što tečni rastvor daptomicina ima pH vrednost od 7,0.

11. Čvrsta kompozicija daptomicina prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 10, naznačena time što tečni rastvor daptomicina sadrži pufersko sredstvo natrijum fosfat.

12. Čvrsta kompozicija daptomicina prema patentnom zahtevu 11, naznačena time što tečni rastvor daptomicina sadrži dibazni natrijum fosfat.