RS58716B1 - Nova anti-cd38 antitela za tretman raka - Google Patents

Nova anti-cd38 antitela za tretman raka

Info

Publication number
RS58716B1
RS58716B1 RS20190583A RSP20190583A RS58716B1 RS 58716 B1 RS58716 B1 RS 58716B1 RS 20190583 A RS20190583 A RS 20190583A RS P20190583 A RSP20190583 A RS P20190583A RS 58716 B1 RS58716 B1 RS 58716B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
bis
benzodiazepine
methyl
pyrrolo
tetrahydro
Prior art date
Application number
RS20190583A
Other languages
English (en)
Inventor
Peter U Park
Laura M Bartle
Anna Skaletskaya
Viktor S Golmakher
Daniel Tavares
Jutta Deckert
Vincent Mikol
VéRONIQUE BLANC
Original Assignee
Sanofi Sa
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=37831721&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RS58716(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Sanofi Sa filed Critical Sanofi Sa
Publication of RS58716B1 publication Critical patent/RS58716B1/sr

Links

Classifications

    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/575—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
    • G01N33/57505—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer of the blood, e.g. leukaemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/39558—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against tumor tissues, cells, antigens
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
    • A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
    • A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
    • A61K47/68033—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates the drug being a maytansine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
    • A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
    • A61K47/68035—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates the drug being a pyrrolobenzodiazepine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6851—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell
    • A61K47/6867—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a determinant of a tumour cell the tumour determinant being from a cell of a blood cancer
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/04—Antipruritics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P21/00—Drugs for disorders of the muscular or neuromuscular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/28—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants
    • C07K16/2896—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against receptors, cell surface antigens or cell surface determinants against molecules with a "CD"-designation, not provided for elsewhere
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/46—Hybrid immunoglobulins
    • C07K16/461—Igs containing Ig-regions, -domains or -residues form different species
    • C07K16/462—Igs containing a variable region (Fv) from one specie and a constant region (Fc) from another
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
    • C12N15/62—DNA sequences coding for fusion proteins
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
    • G01N33/575—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer
    • G01N33/5758—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for cancer involving compounds serving as markers for tumours, cancers or neoplasias, e.g. cellular determinants, receptors, heat shock/stress proteins, A-protein, oligosaccharides or metabolites
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/34—Identification of a linear epitope shorter than 20 amino acid residues or of a conformational epitope defined by amino acid residues
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C07K2317/732—Antibody-dependent cellular cytotoxicity [ADCC]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/73—Inducing cell death, e.g. apoptosis, necrosis or inhibition of cell proliferation
    • C07K2317/734—Complement-dependent cytotoxicity [CDC]
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/90—Enzymes; Proenzymes
    • G01N2333/914—Hydrolases (3)
    • G01N2333/924—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2)

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)

Description

Opis
STANJE TEHNIKE
[0001] CD38 je 45 kD transmembranski glikoprotein tipa II sa dugim C-terminalnim ekstracelularnim domenom i kratkim N-terminalnim citoplazmatskim domenom. CD38 protein je bifunkcionalni ektoenzim koji može katalizovati konverziju NAD<+>u cikličnu ADP-ribozu (cADPR), i takođe hidrolizuje cADPR u ADP-ribozu. Tokom ontogeneze, CD38 se pojavljuje na CD34<+>posvećenim matičnim ćelijama i progenitori limfoidnih, eritroidnih i mijeloidnih ćelija. Eksprimiranje CD38 se uglavnom zadržava u limfoidnoj liniji sa različitim nivoima eksprimiranja u različitim fazama razvoja T i B ćelija.
[0002] CD38 je regulisan u mnogim hematopoeitskim malignitetima i u ćelijskim linijama izvedenim iz različitih hematopoetskih maligniteta, uključujući ne-Hodgkin-ov limfom (NHL), Burkitt-ov limfom (BL), multipli mijelom (MM), B hroničnu limfocitnu leukemiju (B-CLL), B i T akutnu limfocitnu leukemiju (ALL), limfom T ćelija (TCL), akutnu mijeloidnu leukemiju (AML), leukemiju dlakavih ćelija (HCL), Hodgkin-ov limfom (HL) i hroničnu mijeloidnu leukemiju (CML). S druge strane, najprimitivnije pluripotentne matične ćelije hematopoetskog sistema su CD38-. Eksprimiranje CD38 kod hematopoetskih maligniteta i njihova korelacija sa progresijom bolesti čini CD38 atraktivnom metom za terapiju antitelima.
[0003] Prijavljeno je da je CD38 uključen u Ca<2+>mobilizaciju (M. Morra i dr., 1998, FASEB J., 12: 581-592; M. T. Zilber i dr., 2000, Proc Natl Acad Sci U S A, 97: 2840-2845) i u transdukciji signala putem fosforilacije tirozina brojnih signalnih molekula, uključujući fosfolipazu C-γ, ZAP-70, syk i c-cbl, u limfoidnim i mijeloidnim ćelijama ili ćelijskim linijama (A. Funaro i dr., 1993, Eur J Immunol, 23: 2407-2411; M. Morra i dr., 1998, FASEB J., 12: 581-592; A. Funaro i dr., 1990, J Immunol, 145: 2390-2396; M. Zubiaur i dr., 1997, J Immunol, 159: 193-205; S. Deaglio i dr., 2003, Blood 102: 2146-2155; E. Todisco i dr., 2000, Blood, 95: 535-542; M. Konopleva i dr., 1998, J Immunol, 161: 4702-4708; M. T. Zilber i dr., 2000, Proc Natl Acad Sci USA, 97: 2840-2845; A. Kitanaka i dr., 1997, J Immunol, 159: 184-192; A. Kitanaka i dr., 1999, J Immunol, 162: 1952-1958; R. Mallone i dr., 2001, Int Immunol, 13: 397-409). Na osnovu ovih zapažanja, CD38 je predložen kao važan signalni molekul u sazrevanju i aktivaciji limfoidnih i mijeloidnih ćelija tokom njihovog normalnog razvoja.
[0004] Tačna uloga CD38 u transdukciji signala i hematopoezi još uvek nije jasna, pogotovo zato što je većina ovih studija transdukcije signala koristila ćelijske linije koje ektopično prekomerno eksprimiraju CD38 i anti-CD38 monoklonskih antitela, koji su nefiziološki ligandi. Budući da CD38 protein ima enzimsku aktivnost koja proizvodi cADPR, molekul koji može izazvati Ca<2+>mobilizaciju (H. C. Lee i dr., 1989, J Biol Chem, 264: 1608-1615; H. C. Lee and R. Aarhus, 1991, Cell Regul, 2: 203-209), predloženo je da CD38 ligacija monoklonskim antitelima aktivira Ca<2+>mobilizaciju i transdukciju signala u limfocitima povećanjem proizvodnje cADPR (H. C. Lee i dr., 1997, Adv Exp Med Biol, 419: 411-419). Suprotno ovoj hipotezi, analiza skraćivanja i mutacije tačke CD38 proteina pokazala je da ni njego citoplazmatski rep ni njegova enzimska aktivnost nisu neophodni za signalizaciju posredovanu anti-CD38 antitelima (A. Kitanaka i dr., 1999, J Immunol, 162: 1952-1958; F. E. Lund i dr., 1999, J Immunol, 162: 2693-2702; S. Hoshino i dr., 1997, J Immunol, 158, 741-747).
[0005] Najbolji dokaz za funkciju CD38 dolazi od CD38-/<->knockout miševa, koji imaju defekt u svom urođenom imunitetu i smanjeni humoralni odgovor koji je zavisan od T-ćelija usled defekta migracije dendritskih ćelija (S. Partida-Sanchez i dr., 2004, Immunity, 20: 279-291; S. Partida-Sanchez i dr., 2001, Nat Med, 7: 1209-1216). Ipak, nije jasno da li je funkcija CD38 kod miševa identična sa funkcijom kod ljudi, jer se oblik eksprimiranja CD38 tokom hematopoeze značajno razlikuje između ljudi i miševa: a) za razliku od nezrelih matičnih ćelija progenitora kod ljudi, slične matične ćelije miševa eksprimiraju visok nivo CD38 (T. D. Randall i dr., 1996, Blood, 87: 4057-4067; R. N. Dagher i dr., 1998, Biol Blood Marrow Transplant, 4: 69-74), b) dok se tokom razvoja ljudskih B ćelija, visoki nivoi eksprimiranja CD38 nalaze u ćelijama B germinalnog centra i ćelijama plazme (F. M. Uckun, 1990, Blood, 76: 1908-1923; M. Kumagai i dr., 1995, J Exp Med, 181: 1101-1110), kod miševa, nivoi eksprimiranja CD38 u odgovarajućim ćelijama su niski (A. M. Oliver i dr., 1997, J Immunol, 158: 1108-1115; A. Ridderstad and D. M. Tarlinton 1998, J Immunol, 160: 4688-4695).
[0006] U literaturi je opisano nekoliko anti-ljudskih CD38 antitela sa različitim proliferativnim svojstvima na različitim tumorskim ćelijama i ćelijskim linijama. Na primer, himerno OKT10 antitelo sa mišjim Fab i ljudskim IgG1 Fc veoma efikasno posreduje ćelijski posredovanu citotoksičnost zavisnu od antitela (ADCC) protiv ćelije limfoma u prisustvu mononuklearnih efektorskih ćelija periferne krvi, bilo od MM pacijenata ili normalnih pojedinaca (F. K. Stevenson i dr.1991, Blood, 77: 1071-1079). Pokazano je da humanizovana verzija CDR-graftovanog anti-CD38 antitela AT13/5 ima jaku ADCC aktivnost protiv CD38-pozitivnih ćelijskih linija (US 09/797,941 A1). Pokazano je da ljudska monoklonska anti-CD38 antitela posreduju u in vitro ubijanju CD38-pozitivnih ćelijskih linija pomoću ADCC i/ili citotoksičnosti zavisne od komplemenata (CDC) (WO2005/103083, WO2006/099875), i da odloži rast tumora u SCID miševima koji nose MM ćelijsku liniju RPMI-8226 (WO2005/103083 A2). S druge strane, nekoliko anti-CD38 antitela, IB4, SUN-4B7 i OKT10, ali ne i IB6, AT1, ili AT2, izazvali su proliferaciju mononuklearnih ćelija periferne krvi (PBMC) od normalnih individua (C. M. Ausiello i dr.2000, Tissue Antigens, 56: 539-547).
[0007] Pokazalo se da su neka antitela iz stanja tehnike sposobna da aktiviraju apoptozu u CD38<+>B-ćelijama. Međutim, ona to mogu učiniti samo u prisustvu stromalnih ćelija ili citokina izvedenih iz stroma. Prijavljeno je da agonističko anti-CD38 antitelo (IB4) sprečava apoptozu B ćelija ljudskog germinalnog centra (GC) (S. Zupo i dr.1994, Eur J Immunol, 24: 1218-1222), i da izaziva proliferaciju KG-1 i HL-60 AML ćelija (M. Konopleva i dr.1998, J Immunol, 161: 4702-4708), ali izaziva apoptozu u Jurkat T limfoblastičnim ćelijama (MM. Morra i dr.1998, FASEB J, 12: 581-592). Još jedno anti-CD38 antitelo T16 izazvalo je apoptozu nezrelih limfoidnih ćelija i leukemijskih limfoblastnih ćelija od ALL pacijenta (M. Kumagai i dr.1995, J Exp Med, 181: 1101-1110), i leukemičnih mijeloblast ćelija od AML pacijenata (E. Todisco i dr.2000, Blood, 95: 535-542), ali je T16 izazvao apoptozu samo u prisustvu stromalnih ćelija ili citokina izvedenih iz stroma (IL-7, IL-3, faktor matičnih ćelija).
[0008] S druge strane, neka antitela iz stanja tehnike izazivaju apoptozu nakon unakrsnog vezivanja, ali su potpuno lišena bilo kakve apoptotske aktivnosti kada su inkubirana sama (WO 2006/099875).
[0009] Pošto je CD38 atraktivna meta za terapiju antitela za različite hematopoetske malignitete, mi smo generisali i pregledali veliki broj anti-ljudskih CD38 antitela za visoku potenciju u sledeće tri citotoksične aktivnosti protiv CD38-pozitivnih malignih hematopoetskih ćelija: izazivanje apoptoze, ADCC, i CDC. Predmetni pronalazak opisuje nova anti-CD38 antitela sposobna za ubijanje CD38<+>ćelije pomoću tri različita citotoksična mehanizma: izazivanje apoptoze, ADCC i CDC. Zanimljivo, predmetni pronalazak otkriva prva anti-CD38 antitela koja su u stanju da direktno izazovu apoptozu CD38.+ ćelija, čak i bez prisustva stromalnih ćelija ili citokina izvedenih iz stroma.
SAŽETAK PRONALASKA
[0010] Cilj predmetnog pronalaska je da pruži antitela koja specifično vezuju CD38 i koja su sposobna da ubiju CD38<+>ćelije apoptozom. Dok su neka antitela iz stanja tehnike sposobna da pokrenu apoptozu samo kada su unakrsno povezana, ali su inače lišena bilo kakve apoptotičke aktivnosti, antitela predmetnog pronalaska su sposobna da izazovu apoptotičku smrt ćelija CD38<+>ćelija čak i kada su inkubirane same. Zanimljivo, antitela prema pronalasku su prva anti-CD38 antitela za koja je dokazano da ubijaju CD38<+>B ćelije sa sva tri različita mehanizma: apoptoza, ADCC i CDC. U sledećoj varijanti pronalaska, navedena antitela su sposobna da ubiju CD38<+>B ćelije apoptozom, čak i u odsustvu stromalnih ćelija ili citokina izvedenih iz stroma.
[0011] Antitela predmetnog pronalaska su sposobna naročito da ubijaju maligne CD38<+>B ćelije, uključujući ćelije limfoma, ćelije leukemije i ćelije multiplog mijeloma. U nekim otelotvorenjima, CD38<+>B ćelija je NHL, BL, MM, B-CLL, ALL, TCL, AML, HCL, HL ili CML ćelija.
[0012] U jednom aspektu pronalaska, antitela prema pronalasku su sposobna da ubiju najmanje 24% Daudi ćelija limfoma i/ili najmanje 7% Ramos ćelija limfoma i/ili 11% MOLP-8 ćelija multiplog mijeloma i/ili 36% SU-DHL-8 ćelija limfoma i/ili 62% DND-41 ćelija leukemije i/ili 27% NU-DUL-1 ćelija limfoma i/ili 9% JVM-13 ćelija leukemije i/ili 4% HC-1 ćelija leukemije apoptozom u odsustvu stromalnih ćelija ili citokina izvedenih iz stroma.
[0013] Antitela prema pronalasku mogu biti poliklonska ili monoklonska. Poželjna su monoklonska anti-CD38 antitela. Predmetni pronalazak pruža mišja antitela izabrana od 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31 i 38SB39, koji su ovde u potpunosti karakterisana u odnosu na aminokiselinske sekvence i njihove varijabilne regione lakog i teškog lanca, cDNK sekvence gena za varijabilne regione lakog i teškog lanca, identifikaciju njihovih CDR (regioni koji određuju komplementarnost), identifikaciju njihovih površinskih aminokiselina, i načine za njihovo eksprimiranje u rekombinantnom obliku.
[0014] Predmetni pronalazak uključuje himerne verzije mišjeg anti-CD38 monoklonskog antitela izabranog od 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31 i 38SB39. Takođe su obelodanjene obnovljene ili humanizovane verzije 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31 i 38SB39 antitela, gde su površinski izloženi ostaci okvira varijabilnog regiona antitela, ili njihovi fragmenti koji se vezuju za epitop, zamenjeni i lakim i teškim lancima koji su slični poznatim površinama ljudskih antitela. Ovde opisana humanizovana antitela i njihovi fragmenti koji se vezuju za epitop imaju poboljšana svojstva po tome što su kod ljudi kojima se primenjuju manje imunogeni (ili potpuno neimunogeni) nego mišje verzije. Prema tome, različite verzije humanizovanih 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31 i 38SB39 antitela, i njihovi fragmenti koji se vezuju za epitop, specifično prepoznaju CD38, dok nisu imunogeni za čoveka.
[0015] Humanizovane verzije 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31 i 38SB39 antitela su ovde u potpunosti okarakterisane imajući u vidu njihove odgovarajuće aminokiselinske sekvence i varijabilne regione lakog i teškog lanca, DNK sekvence gena za varijabilne regione lakog i teškog lanca, identifikaciju regiona za određivanje komplementarnosti (CDR), identifikaciju njihovih površinskih aminokiselinskih ostataka okvira varijabilnog regiona i obelodanjivanje načina za njihovo eksprimiranje u rekombinantnom obliku.
[0016] Ovo obelodanjenje takođe razmatra upotrebu konjugata između citotoksičnih konjugata koji sadrže (1) agens za vezivanje ćelija koje prepoznaje i vezuje CD38, i (2) citotoksični agens. U citotoksičnim konjugatima, agens za vezivanje ćelija ima visoki afinitet za CD38 i citotoksični agens ima visok stepen citotoksičnosti za ćelije koje eksprimiraju CD38, tako da citotoksični konjugati predmetnog pronalaska formiraju efikasne agense za ubijanje.
[0017] Poželjno, agens za vezivanje ćelija je anti-CD38 antitelo (npr., 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31 i 38SB39) ili njegov fragment za vezivanje epitopa, poželjnije humanizovano anti-CD38 antitelo (npr., 38SB13, 38SB18.38SB19, 38SB30, 38SB31 i 38SB39) ili njegov fragment za vezivanje epitopa, gde je citotoksični agens kovalentno vezan, direktno ili preko razdvojivog ili ne-razdvojivog veznika, na antitelo ili njegov fragment za vezivanje epitopa. U poželjnijim otelotvorenjima, agens za vezivanje ćelija je humanizovano 38SB19 antitelo i citotoksični agens je taksol, maitansinoid, derivat tomaimicina, derivat leptomicina, CC-1065 ili analog CC-1065.
[0018] Još poželjnije, agens za vezivanje ćelija je humanizovano anti-CD3838SB19 antitelo i citotoksični agens je jedinjenje maitansina, kao što je DM1 ili DM4.
[0019] Predmetni pronalazak takođe obuhvata upotrebu fragmenata anti-CD38 antitela koji zadržavaju sposobnost vezivanja CD38. U drugom aspektu obelodanjenja, razmatra se upotreba funkcionalnih ekvivalenata anti-CD38 antitela.
[0020] Predmetni pronalazak takođe uključuje postupak za inhibiciju rasta ćelije koja eksprimira CD38. U poželjnim otelotvorenjima, postupak za inhibiciju rasta ćelije koja eksprimira CD38 odvija se in vivo i dovodi do smrti ćelije, mada su in vitro i ex vivo primene takođe uključene.
[0021] Predmetni pronalazak takođe pruža terapeutski sastav koji sadrži anti-CD38 antitelo ili anti-CD38 antitelo-citotoksični agens konjugat, i farmaceutski prihvatljiv nosač ili ekscipijente. U nekim otelotvorenjima, terapeutski sastav sadrži drugi terapeutski agens. Ovaj drugi terapeutski agens može biti izabran iz grupe koju čine antagonist faktora epidermalnog rasta (EGF), faktora rasta fibroblasta (FGF), faktora rasta hepatocita (HGF), faktora tkiva (TF), proteina C, proteina S, faktora rasta izvedenog iz trombocita (PDGF), heregulina, makrofagom stimulišućeg proteina (MSP) ili vaskularnog endotelnog faktora rasta (VEGF), ili antagonist receptora faktora epidermalnog rasta (EGF), faktora rasta fibroblasta (FGF), faktora rasta hepatocita (HGF), faktora tkiva (TF), proteina C, proteina S, faktora rasta izvedenog iz trombocita (PDGF), heregulina, makrofagom stimulišućeg proteina (MSP) ili vaskularnog endotelnog faktora rasta (VEGF), uključujući HER2 receptor, HER3 receptora, c-MET, i druge receptore tirozin kinaza. U poželjnom otelotvorenju, dodatni terapeutski agens je antitelo usmereno na klastere diferencijacije antigena izabrane iz grupe koja uključuje CD3, CD14, CD19, CD20, CD22, CD25, CD28, CD30, CD33, CD36, CD40, CD44, CD52, CD55, CD59, CD56, CD70, CD79, CD80, CD103, CD134, CD137, CD138, i CD152. Ovaj drugi terapeutski agens može takođe biti izabran iz grupe hemoterapeutskih ili imunomodulatornih agenasa.
[0022] Predmetni pronalazak dalje obuhvata antitelo ili konjugat pronalaska za upotrebu u tretmanu pacijenta koji ima rak ili upalnu bolest, uključujući autoimuno oboljenje, upotrebom terapeutskog sastava. U nekim otelotvorenjima, rak je izabran iz grupe koja se sastoji od NHL, BL, MM, B-CLL, ALL, TCL, AML, HCL, HL i CML. U još jednom otelotvorenju, autoimuna bolest je izabrana iz grupe koju čine sistemski eritematozni lupus, multipla skleroza, reumatoidni artritis, Kronova bolest, ulcerativni kolitis, gastritis, Hashimoto-v tiroiditis, ankilozantni spondilitis, krioglobulinemični vaskulitis, hronični fokalni encefalitis, bulozni pemfigoid, hemofilija A, membranoproliferativni glomerulnefritis, Sjogren-ov sindrom, odrasli i juvenilni dermatomiozitis, odrasli polimiozitis, hronična urtikarija, primarna bilijarna ciroza, idiopatska trombocitopenična purpura, neuromijelitis optika, Gravesova distireoidna bolest, bulozni pemfigoid, membranoproliferativni glonerulonefritis, Chrug-Strauss sindrom, i astma. U poželjnim otelotvorenjima, citotoksični konjugat sadrži anti-CD38 antitelo i citotoksični agens. U još poželjnijim otelotvorenjima, citotoksični konjugat sadrži humanizovano 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31 i 38SB39 antitelo-DM1 konjugat, humanizovano 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31, i 38SB39 antitelo-DM4 ili humanizovano 38SB13, 38SB1838SB19, 38SB30, 38SB31 i 38SB39 antitelo-taksan konjugat, i konjugat se primenjuje zajedno sa farmaceutski prihvatljivim nosačem ili ekscipijentima.
[0023] U ovom obelodanjenju, anti-CD38 antitela se koriste za detektovanje CD38 proteina u biološkom uzorku. U poželjnom otelotvorenju, navedena antitela se koriste za određivanje nivoa CD38 u tumorskom tkivu.
[0024] Predmetni pronalazak takođe uključuje komplet koji sadrži anti-CD38 antitelo ili anti-CD38 antitelo-citotoksični agens konjugat i uputstvo za upotrebu. U poželjnim otelotvorenjima, anti-CD38 antitela su humanizovana 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31 i 38SB39 antitela, citotoksični agens je jedinjenje maitansina, kao što je DM1 ili DM4, derivat tomaimicina, derivat leptomicina, ili taksana, i uputstva su za upotrebu konjugata u tretmanu pacijenta koji ima rak. Komplet može takođe da sadrži komponente neophodne za dobijanje farmaceutski prihvatljive formulacije, kao što je razblaživač ako je konjugat u liofilizovanom stanju ili koncentrovanom obliku, i za primenu formulacije.
KRATAK OPIS SLIKA
[0025]
Slika 1A prikazuje FACS analizu specifičnog vezivanja pročišćenih mišjih anti-CD38 antitela, 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38 za 300-19 ćelije koje eksprimiraju ljudske CD38 i CD38-pozitivne Ramos ćelije limfoma.
Slika 1B prikazuje FACS analizu specifičnog vezivanja pročišćenih mišjih anti-CD38 antitela, 38SB30, 38SB31, 38SB39 i kontrolnog anti-CD38 antitela AT13/5 za 300-19 ćelije koje eksprimiraju ljudske CD38 i CD38-pozitivne Ramos ćelije limfoma.
Slika 2 prikazuje krive titracije vezivanja 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31 i 38SB39 koje su uspostavljene sa Ramos ćelijama.
Slika 3 prikazuje FACS tačkaste dijagrame (FL4-H; TO-PRO-3 bojenje; y-osa i FL1-H;
Annexin V-FITC bojenje; x-osa) Ramos ćelija koje prolaze apoptozu nakon inkubacije sa 38SB13, 38SB19, ili AT13/5 (10 nM) tokom 24 sata.
Slika 4A prikazuje prosečne procente Ramos ćelija koje podležu apoptozi posle 24-časovne inkubacije sa 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31, 38SB39, 38SB7, 38SB23, IB4, AT13/5, OKT10 ili SUN-4B7. Iscrtan je prosečan procenat Annexin V-pozitivnih ćelija (yosa; uključuje i TO-PRO-3 pozitivne i negativne ćelije) iz duplikata uzoraka.
Slika 4B prikazuje prosečne procente Daudi ćelija koje podležu apoptozi nakon 24-časovne inkubacije sa istim setom antitela kao na Slici 4A.
Slika 4C prikazuje prosečne procente Molp-8 ćelija koje podležu apoptozi posle 24-časovne inkubacije sa istim setom antitela kao na Slici 4A.
Slika 5A prikazuje dijagram ljudskog vektora eksprimiranja koji se koristi za eksprimiranje hu38SB19-LC.
Slika 5B prikazuje dijagram ljudskog vektora eksprimiranja koji se koristi za eksprimiranje hu38SB19-HC.
Slika 5C prikazuje dijagram ljudskog vektora eksprimiranja koji se koristi za eksprimiranje i hu38SB19LC i hu38SB19HC.
Slika 6A prikazuje ADCC aktivnosti posredovane ch38SB13, ch38SB18 i ch38SB19 antitelima, prema Ramos ćelijama.
Slika 6B prikazuje ADCC aktivnosti posredovane ch38SB30, ch38SB31 i ch38SB39 antitelima prema Ramos ćelijama.
Slika 7 A) pokazuje ADCC aktivnosti posredovane ch38SB18, ch38SB19, ch38SB31 antitelima, i ne-vezujućim himernim ljudskim IgG1 kontrolnim antitelom prema LP-1 ćelijama multiplog mijeloma.
Slika 7B) upoređuje aktivnosti ADCC posredovane ch38SB19 antitelima i mišjim 38SB19 prema Daudi ćelijama.
Slika 8A pokazuje ADCC aktivnosti posredovane ch38SB19 antitelom i nevezujućim himernim ljudskim IgG1 kontrolnim antitelom prema NALM-6 B-ALL ćelijama.
Slika 8B prikazuje aktivnosti ADCC posredovane ch38SB19 antitelom i ne-vezujućim himernim ljudskim IgG1 kontrolnim antitelom prema MOLT-4 T-ALL ćelijama.
Slika 9A prikazuje CDC aktivnosti posredovane ch38SB13, ch38SB18, ch38SB19, ch38SB30 i ch38SB39 antitelima prema Raji-IMG ćelijama.
Slika 9B prikazuje CDC aktivnosti posredovane ch38SB19 i ch38SB31 antitelima prema Raji-IMG ćelijama.
Slika 10 prikazuje CDC aktivnosti posredovane ch38SB18, ch38SB19, ch38SB31 antitelima i ne-vezujućim himernim ljudskim IgG1 kontrolnim antitelom prema LP-1 ćelijama multiplog mijeloma.
Slika 11A prikazuje CDC aktivnosti posredovane ch38SB13, cch38SB19 i ch38SB39 antitelima prema Daudi ćelijama.
1
Slika 11B prikazuje CDC aktivnosti posredovane ch38SB18 i ch38SB30 antitelima prema Daudi ćelijama.
Slika 11C prikazuje CDC aktivnosti posredovane ch38SB19 i ch38SB31 antitelima prema Daudi ćelijama
Slika 12A prikazuje krive titracije vezivanja ch38SB19, hu38SB19 v1.00 i hu38SB19 v1.20 za vezivanje za Ramos ćelije.
Slika 12B prikazuje krive vezivanja koje upoređuju ch38SB19, hu38SB19 v1.00 i hu38SB19 v1.00 za njihovu sposobnost da se nadmeću sa vezivanjem biotinilovanog mišjeg 38SB19 antitela za Ramos ćelije.
Slika 13 prikazuje prosečne procente Daudi ćelija koje podležu apoptozi nakon 24 sata inkubacije sa ch38SB19, hu38SB19 v1.00, ili hu38SB19 v1.20 antitelom.
Slika 14 prikazuje ADCC aktivnosti posredovane ch38SB19, hu38SB19 v1.00, hu38SB19 v1.20 antitelima, i ne-vezujućim himernim ljudskim IgG1 kontrolnim antitelom prema LP-1 ćelijama multiplog mijeloma.
Slika 15A prikazuje CDC aktivnosti posredovane ch38SB19, hu38SB19 v1.00, i hu38SB19 v1.20 antitelima prema Raji-IMG ćelijama limfoma.
Slika 15B prikazuje CDC aktivnosti posredovane ch38SB19, hu38SB19 v1.00 i hu38SB19 v1.20 antitelima prema LP-1 ćelijama multiplog mijeloma.
Slika 15C prikazuje CDC aktivnosti posredovane ch38SB19, hu38SB19 v1.00 i hu38SB19 v1.20 antitelima prema DND-41 T-ćelijskim akutnim ćelijama limfoblastične leukemije.
Slika 16 prikazuje prosečne procente Annexin V pozitivnih ćelija posle 24 sata inkubacije sa hu38SB19 v1.00 antitelima za SU-DHL-8 difuzne velike B ćelijske ćelije limfoma, NU-DUL-1 B ćelijske ćelije limfoma, DND-41 T-ćelijske akutne ćelije limfoblastične leukemije, JVM-13 B-ćelijske ćelije hronične limfocitne leukemije i HC-1 dlakave ćelije leukemije.
Slika 17 prikazuje procenat preživljavanja SCID miševa koji nose utvrđene diseminirane ljudske Ramos tumore. Miševi su tretirani sa mišjim 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31, ili 38SB39 antitelom ili PBS kao što je naznačeno.
Slika 18 prikazuje procenat preživljavanja SCID miševa koji nose utvrđene diseminirane ljudske Daudi tumore. Miševi su tretirani sa hu38SB19 ili mu38SB19 antitelom ili PBS kao što je naznačeno.
Slika 19 prikazuje srednju zapreminu tumora SCID miševa koji nose NCI-H929 tumore multiplog mijeloma ksenografta. Miševi su tretirani sa hu38SB19, ne-vezujućim kontrolnim IgG1 antitelom ili PBS kao što je naznačeno.
Slika 20 prikazuje prosečnu zapreminu tumora SCID miševa koji nose MOLP-8 ksenograft tumore multiplog mijeloma. Miševi su tretirani sa hu38SB19, mu38SB19, ne-vezujućim kontrolnim IgG1 antitelom ili PBS kao što je naznačeno.
DETALJAN OPIS PRONALASKA
[0026] Ovde su pružena nova antitela sposobna za specifično vezivanje CD38. Posebno, predmetni pronalazači su otkrili nova antitela koja se specifično vezuju za CD38 na površini ćelije i ubijaju CD38<+>ćelije apoptozom, citotoksičnošću zavisnom od antitela (ADCC) i citotoksičnošću zavisnom od komplementa (CDC). Pronalazak, prema tome, pruža prva anti-CD38 antitela sposobna za ubijanje CD38<+>ćelija sa tri različita mehanizma.
[0027] Antitela sposobna da vezuju CD38 i pokreću apoptotičnu smrt ćelija kod CD38<+>ćelija su prethodno opisana (M. Kumagai i dr., 1995, J Exp Med, 181: 1101-1110; E. Todisco i dr.
2000, Blood, 95: 535-542), ali antitela prema pronalasku su prva za koja je demonstrirana apoptotička aktivnost u odsustvu stromalnih ćelija ili citokina izvedenih iz stroma. Izraz „stroma“, kad se ovde koristi, odnosi se na nemaligno potporno tkivo tumora koje uključuje vezivno tkivo, krvne sudove i upalne ćelije. Stromalne ćelije proizvode faktore rasta i druge supstance, uključujući citokine, koje mogu da utiču na ponašanje ćelija raka. Izraz „citokin“, kad se ovde koristi, odnosi se na male izlučene proteine (npr. IL-1, IL-2, IL-4, IL-5, i IL-6, IFNg, IL-3, IL-7 i GM-CSF) koji posreduju i regulišu imunitet, upalu i hematopoezu. Ovde je pokazano da antitela iz prethodnog stanja tehnike nisu u stanju da pokrenu apoptotičku smrt ćelija u odsustvu stromalnih ćelija ili citokina izvedenih iz stroma. Nasuprot tome, anti-CD38 antitela prema pronalasku se pojavljuju pod istim uslovima snažne apoptotičke aktivnosti.
[0028] U drugom aspektu, antitela prema pronalasku su sposobna da vezuju CD38 protein sa kDod 3 x 10<-9>M ili niže.
[0029] Izraz „CD38“, kad se ovde koristi, odnosi se na transmembranski protein tipa II, koji sadrži, na primer, aminokiselinsku sekvencu kao u Genbank pristupnom broju NP_001766. „CD38<+>ćelija“ je ćelija koja eksprimira CD38 protein. Poželjno, CD38<+>ćelija je ćelija sisara.
[0030] CD38<+>ćelija je poželjno maligna ćelija. CD38<+>ćelija može biti B ćelija. Poželjno, CD38<+>ćelija je tumorska ćelija izvedena iz hemapoetske malignosti. U poželjnom otelotvorenju, CD38<+>ćelija je ćelija limfoma, ćelija leukemije ili ćelija multiplog mijeloma. U sledećem poželjnom otelotvorenju, CD38<+>ćelija je NHL, BL, MM, B-CLL, ALL, TCL, AML, HCL, HL ili CML ćelija.
[0031] Prema tome, u jednom otelotvorenju, predmetni pronalazak pruža anti-CD38 antitela sposobna da ubiju najmanje 24% Daudi ćelija limfoma u odsustvu stromalnih ćelija ili citokina izvedenih iz stroma. U još jednom otelotvorenju, anti-CD38 antitela prema pronalasku su sposobna da ubiju najmanje 7% Ramos ćelija limfoma u odsustvu stromalnih ćelija ili citokina izvedenih iz stroma. U još jednom otelotvorenju, anti-CD38 antitela prema pronalasku su sposobna da ubiju najmanje 11% MOLP-8 ćelija multiplog mijeloma u odsustvu stromalnih ćelija ili citokina izvedenih iz stroma. U još jednom otelotvorenju, anti-CD38 antitela prema pronalasku su sposobna da ubiju najmanje 36% SU-DHL-8 ćelija limfoma u odsustvu stromalnih ćelija ili citokina izvedenih iz stroma. U još jednom otelotvorenju, anti-CD38 antitela prema pronalasku su sposobna da ubiju najmanje 27% NU-DUL-1 ćelija limfoma u odsustvu stromalnih ćelija ili citokina izvedenih iz stroma. U još jednom otelotvorenju, anti-CD38 antitela prema pronalasku su sposobna da ubiju najmanje 62% DNK-41 ćelija leukemije u odsustvu stromalnih ćelija ili citokina izvedenih iz stroma. U još jednom otelotvorenju, anti-CD38 antitela prema pronalasku su sposobna da ubiju najmanje 9% JVM-13 ćelija leukemije u odsustvu stromalnih ćelija ili citokina izvedenih iz stroma. U još jednom otelotvorenju, anti-CD38 antitela prema pronalasku su sposobna da ubiju najmanje 4% HC-1 ćelija leukemije u odsustvu stromalnih ćelija ili citokina izvedenih iz stroma.
1
ANTITELA
[0032] Izraz „antitelo“ se ovde koristi u najširem smislu i specifično obuhvata monoklonska antitela (uključujući monoklonska antitela pune dužine) bilo kog izotipa kao što su IgG, IgM, IgA, IgD i IgE, poliklonska antitela, multispecifična antitela, himerna antitela i fragmenti antitela. Antitelo reaktivno sa specifičnim antigenom može biti generisano rekombinantnim postupcima kao što je selekcija biblioteka rekombinantnih antitela u fagima ili sličnim vektorima, ili imunizacijom životinje sa antigenom ili nukleinskom kiselinom koja kodira antigen.
[0033] Tipično IgG antitelo se sastoji od dva identična teška lanca i dva identična laka lanca koja su spojena disulfidnim vezama. Svaki teški i laki lanac sadrži konstantan region i varijabilni region. Svaki varijabilni region sadrži tri segmenta nazvana „regioni koji određuju komplementarnost“ („CDR“) ili „hipervarijabilni regioni“, koji su primarno odgovorni za vezivanje epitopa antigena. Oni se obično nazivaju CDR1, CDR2 i CDR3, numerisani sekvencijalno od N-terminusa. Više konzervirani delovi varijabilnih regiona nazivaju se „okvirni regioni“.
[0034] Kad se ovde koristi, „VH“ ili „VH“ se odnosi na varijabilni region teškog lanca imunoglobulina antitela, uključujući teški lanac Fv, scFv, dsFv, Fab, Fa 'ili F(ab')2 fragmenta. „VL“ ili „VL“ se odnosi na varijabilni region lakog lanca imunoglobulina antitela, uključujući laki lanac Fv, scFv, dsFv, Fab, Fab' ili F(ab')2 fragmenta.
[0035] „Poliklonsko antitelo“ je antitelo koje je proizvedeno između ili u prisustvu jednog ili više drugih, ne-identičnih antitela. Generalno, poliklonska antitela se proizvode iz B-limfocita u prisustvu nekoliko drugih B-limfocita koji proizvode ne-identična antitela. Obično, poliklonska antitela se dobijaju direktno od imunizovane životinje.
[0036] „Monoklonsko antitelo“, kad se ovde koristi, je antitelo dobijeno iz populacije u suštini homogenih antitela, tj. antitela koja formiraju ovu populaciju su u suštini identična osim za moguće prirodne mutacije koje mogu biti prisutne u manjim količinama. Ova antitela su usmerena protiv jednog epitopa i stoga su veoma specifična.
[0037] „Epitop“ je mesto na antigenu na kom se antitelo vezuje. Ako je antigen polimer, kao što su protein ili polisaharid, epitop može biti formiran od strane susednih ostataka ili pomoću ne-susednih ostataka koji se dovode u neposrednu blizinu preklapanjem antigenskog polimera. U proteinima, epitopi formirani od susednih aminokiselina su tipično zadržani pri izlaganju denaturirajućim rastvaračima, dok su epitopi formirani od ne-susednih aminokiselina tipično izgubljeni pod navedenom izloženošću.
[0038] Kad se ovde koristi, izraz „KD“ odnosi se na konstantu disocijacije određene interakcije antitela/antigena.
[0039] Predmetni pronalazak se izvodi iz novih mišjih anti-CD38 antitela, ovde 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31, i 38SB39 koji su potpuno okarakterisani u odnosu na aminokiselinske sekvence i lakih i teških lanaca, identifikacije CDR, identifikacije površinskih aminokiselina, i načina za njihovo eksprimiranje u rekombinantnom obliku.
Primarne aminokiseline i DNK sekvence antitela 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31, i 38SB39 laki i teški lanci, kao i humanizovane verzije, su ovde opisani.
[0040] Hibridomske ćelijske linije koje proizvode 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31 i 38SB39 mišja anti-CD38 antitela su deponovane u American Type Culture Collection (10801 Universiti Bid, Manassas, VA, 20110-2209, USA), 21. juna 2006, pod prijemnim brojevima PTA-7667, PTA-7669, PTA-7670, PTA-7666, PTA-7668 i PTA-7671.
[0041] Predmetno obelodanjenje nije ograničeno na antitela i fragmente koji sadrže ove sekvence. Tako su prikazana antitela i fragmenti antitela koji se mogu razlikovati od 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31 i 38SB39 antitela ili humanizovanih derivata u sekvencama amino kiselina skele, CDR, lak lanac i teški lanac.
[0042] Predmetni pronalazak pruža antitela ili njihov fragment koji se vezuje za epitop koji sadrži jedan ili više CDR koji imaju aminokiselinsku sekvencu izabranu iz grupe koja se sastoji od SEQ ID NO: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35 i 36. Kao što je obelodanjeno, antitela sadrže najmanje jedan teški lanac i najmanje jedan laki lanac, i navedeni teški lanac sadrži tri sekvencijalna CDR koji imaju aminokiselinske sekvence izabrane iz grupe koja se sastoji od SEQ ID NO: 1, 2, 3, 7, 8, 9, 13, 14, 15, 19, 20, 21, 25, 26, 27, 31, 32 i 33, i navedeni laki lanac sadrži tri sekvencijalna CDR koji imaju sekvence amino kiselina izabrane iz grupe koja
1
se sastoji od SEQ ID NO: 4, 5, 6, 10, 11, 12, 16, 17, 18, 22, 23, 24, 28, 29, 30, 34, 35 i 36.
[0043] Poželjno, antitela iz obelodanjenja sadrže tri CDR koji imaju aminokiselinske sekvence izabrane iz grupe SEQ ID NO: 13, 14, 15, 16, 17 i 18. U sledećem poželjnijem otelotvorenju, pruženo je 38SB19 antitelo, koji sadrži najmanje jedan teški lanac i najmanje jedan laki lanac, i navedeni teški lanac sadrži tri sekvencijalna CDR koji imaju aminokiselinske sekvence koje se sastoje od SEQ ID NO: 13, 14 i 15, i navedeni laki lanac sadrži tri sekvencijalna CDR koji imaju aminokiselinske sekvence koje se sastoje od SEQ ID NO: 16, 17 i 18.
[0044] Poželjno, anti-CD38 antitela iz obelodanjenja sadrže VLkoji ima aminokiselinsku sekvencu SEQ ID NO: 42. Još poželjnije, pruženo je 38SB19 antitelo koje sadrži VLkoji ima aminokiselinsku sekvencu koja se sastoji od SEQ ID NO: 42.
[0045] Takođe su pružena antitela koja sadrže VHkoji imaju aminokiselinsku sekvencu SEQ ID NO: 54. Poželjno, pruženo je 38SB19 antitelo koje sadrži VHkoji ima aminokiselinsku sekvencu koja se sastoji od SEQ ID NO: 54.
HIMERNA I HUMANIZOVANA 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31, I 38SB39 ANTITELA
[0046] Kad se ovde koristi, „himerno antitelo“ je antitelo u kom je konstantni region, ili njegov deo, promenjen, zamenjen ili razmenjen, tako da je varijabilni region povezan sa konstantnim regionom različitih vrsta, ili pripada drugoj klasi ili podklasi antitela. „Himerno antitelo“ se takođe odnosi na antitelo u kom je varijabilni region, ili njegov deo, promenjen, zamenjen ili razmenjen, tako da je konstantni region povezan sa varijabilnim regionom različitih vrsta, ili pripada drugoj klasi ili podklasi antitela. Postupci za proizvodnju himernih antitela su poznati u struci. Pogledati, npr. Morrison, 1985, Science, 229: 1202; Oi i dr., 1986, BioTechniques, 4: 214; Gillies i dr., 1989, J. Immunol. Methods, 125: 191-202; U.S. Pat. Nos.
5,807,715; 4,816,567; i 4,816,397.
[0047] U jednom otelotvorenju pronalaska, pružene su himerne verzije 38SB19. Posebno, navedene himerne verzije sadrže najmanje jedan ljudski konstantni region. U poželjnijem otelotvorenju, ovaj ljudski konstantni region je ljudski IgG1/Kappa konstantni region.
1
[0048] Izraz „humanizovano antitelo“, kad se ovde koristi, odnosi se na himerno antitelo koje sadrži minimalnu sekvencu izvedenu iz ne-ljudskog imunoglobulina. Cilj humanizacije je smanjenje imunogeničnosti ksenogenskog antitela, kao što je mišje antitelo, za uvođenje u čoveka, uz održavanje potpunog afiniteta vezivanja antigena i specifičnosti antitela.
Humanizovana antitela, ili antitela prilagođena tako da ne budu odbačena od strane drugih sisara, mogu biti proizvedena korišćenjem nekoliko tehnologija kao što su obnavljanje i CDR presađivanje. Kad se ovde koristi, tehnologija obnavljanja koristi kombinaciju molekularnog modeliranja, statističke analize i mutageneze kako bi se promenile ne-CDR površine varijabilnih regiona antitela, tako da podsećaju na površine poznatih antitela ciljanog domaćina. Tehnologija CDR presađivanja uključuje zamenu regiona za određivanje komplementarnosti, na primer, mišjeg antitela, u ljudski okvirni domen, npr. pogledati WO 92/22653. Humanizovana himerna antitela poželjno imaju konstantne regione i varijabilne regione koji nisu regioni za određivanje komplementarnosti (CDR) izvedeni suštinski ili isključivo iz odgovarajućih regiona ljudskog antitela i CDR izvedeni suštinski ili isključivo od sisara koji nije čovek.
[0049] Strategije i postupci za obnavljanje antitela, i drugi postupci za smanjenje imunogenosti antitela unutar različitih domaćina, obelodanjeni su u US Patent 5,639,641. Ukratko, u poželjnom postupku, (1) generišu se poziciona poravnanja grupe varijabilnih regiona teškog i lakog lanca antitela kako bi se dobila grupa položaja izloženih površini varijabilnog regiona teškog i lakog lanca, gde su položaji poravnanja za sve varijabilne regione na najmanje oko 98% identični; (2) skup aminokiselinskih ostataka na površini izloženog varijabilnog regiona teškog i lakog lanca je definisan za glodarsko antitelo (ili njegov fragment); (3) identifikovan je niz teških i lakih lanaca varijabilnog regiona, površinski izloženih aminokiselinskih ostataka koji su najviše identični skupu površinski izloženih aminokiselinskih ostataka glodara; (4) skup teških i lakih lanaca varijabilnog regiona, površinski izloženih aminokiselinskih ostataka definisanih u koraku (2) je supstituisan sa skupom teških i lakih lanaca varijabilnih regiona okvira izloženih aminokiselinskih ostataka identifikovanih u koraku (3), osim za one aminokiselinske ostatke koji su unutar 5 Å od bilo kog atoma bilo kog ostatka regiona za određivanje komplementarnosti glodarskog antitela; i (5) dobija se humanizovano glodarsko antitelo koje ima specifičnost vezivanja.
[0050] Antitela se mogu humanizovati korišćenjem raznih drugih tehnika, uključujući CDR-
1
presađivanje (EP 0239 400; WO 91/09967; U.S. Pat. Nos.5,530,101; i 5,585,089), furniranje ili obnavljanje (EP 0592 106; EP 0519 596; Padlan E. A., 1991, Molecular Immunology 28(4/5): 489-498; Studnicka G. M. i dr., 1994, Protein Engineering, 7(6): 805-814; Roguska M.A. i dr., 1994, PNAS, 91: 969-973) i zamenu lanaca (U.S. Pat. No.5,565,332). Ljudska antitela mogu biti napravljena različitim postupcima poznatim u struci, uključujući postupke prikazivanja faga. Takođe pogledati U.S. Pat. Nos.4,444,887, 4,716,111, 5,545,806, i 5,814,318; i publikacije međunarodnih patentnih prijava pod brojevima WO 98/46645, WO 98/50433, WO 98/24893, WO 98/16654, WO 96/34096, WO 96/33735, i WO 91/10741.
[0051] Predmetni pronalazak pruža humanizovana antitela koja prepoznaju CD38 i ubijaju CD38<+>ćelije pomoću apoptoze, ADCC i CDC. U daljem otelotvorenju, humanizovana antitela, ili njihovi fragmenti koji se vezuju za epitop, prema pronalasku mogu da ubijaju navedene CD38<+>ćelije apoptozom čak i u odsustvu stromalnih ćelija ili citokina izvedenih iz stroma.
[0052] Poželjno otelotvorenje takvog humanizovanog antitela je humanizovano 38SB19 antitelo.
[0053] U poželjnijim otelotvorenjima, pružene su obnavljane ili humanizovane verzije 38SB19 antitela gde su površinski izloženi ostaci antitela ili njegovih fragmenata zamenjeni u lakim i teškim lancima kako bi više nalikovali poznatim površinama ljudskog antitela.
Humanizovana 38SB19 antitela predmetnog pronalaska imaju poboljšana svojstva. Na primer, humanizovana antitela 38SB19, ili njihovi fragmenti koji vezuju epitop, specifično prepoznaju CD38 protein. Humanizovana antitela 38SB19 imaju dodatnu sposobnost da ubijaju CD38<+>ćelije pomoću apoptoze, ADCC i CDC.
[0054] Humanizovane verzije 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31 i 38SB39 antitela su takođe ovde u potpunosti okarakterisane uzimajući u obzir njihove odgovarajuće aminokiselinske sekvence varijabilnih regiona lakog i teškog lanca, DNK sekvence gena za varijabilne regione teškog i lakog lanca, identifikaciju CDR, identifikaciju njihovih aminokiselina na površini i obelodanjivanje načina za njihovo eksprimiranje u rekombinantnom obliku.
[0055] CDR od 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31 i 38SB39 antitela su
1
identifikovani modelovanjem i predviđene su njihove molekularne strukture. Opet, dok su CDRs važni za prepoznavanje epitopa, oni nisu esencijalni za antitela i fragmente pronalaska. Shodno tome, pružena su antitela i fragmenti koji imaju poboljšana svojstva dobijena, na primer, afinitetnim sazrevanjem antitela.
[0056] Sekvence varijabilnih regiona teškog lanca i lakog lanca 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31 i 38SB39 antitela, kao i sekvence njihovih CDR nisu poznate od ranije i navedene su u ovoj prijavi. Takve informacije se mogu koristiti za proizvodnju humanizovanih verzija 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31 i 38SB39 antitela. Ova humanizovana anti-CD38 antitela ili njihovi derivati mogu se takođe koristiti kao agens za vezivanje ćelija.
[0057] Prema tome, u jednom otelotvorenju, ovo obelodanjenje pruža humanizovanu verziju 38SB19, koja sadrži najmanje jedan teški lanac i najmanje jedan laki lanac, gde pomenuti teški lanac sadrži tri sekvencijalna regiona za određivanje komplementarnosti koji imaju aminokiselinske sekvence predstavljene sa SEQ ID NO: 13, 14 i 15, i gde navedeni laki lanac sadrži tri sekvencijalna regiona za određivanje komplementarnosti koji imaju sekvence amino kiselina predstavljene sa SEQ ID NO: 16, 17 i 18.
[0058] U poželjnom otelotvorenju, pruženo je humanizovano 38SB19 antitelo koje sadrži VHkoji ima aminokiselinsku sekvencu predstavljenu sa SEQ ID NO: 66.
[0059] U još jednom otelotvorenju pruženo je humanizovano 38SB19 antitelo koje sadrži VLkoji ima aminokiselinsku sekvencu izabranu iz grupe SEQ ID NO: 62 i 64.
[0060] Humanizovana 38SB19 antitela koja su ovde opisana mogu takođe da uključe supstitucije u lakim i/ili teškim lancima aminokiselinskih ostataka na jednom ili više položaju definisanom sivim ostacima u Tabelama 1A i 1B, koji predstavljaju ostatke mišjeg površinskog okvira koji su promenjeni od originalnog mišjeg ostatka do odgovarajućeg ostatak površinskog okvira u ljudskom antitelu, 28E4. Ostaci sa zvezdicom (*) u Tabeli 1B odgovaraju povratnim mišjim mutacijama u humanizovanoj varijanti teškog lanca 38SB19 (SEQ ID NO: 65). Ostaci za povratne mutacije su proksimalni u odnosu na CDR i izabrani su kako je opisano u U.S. patent No.5,639,641 ili analogno odabiru ostataka koji su u prethodnim naporima humanizacije doveli do smanjenja afiniteta vezivanja antigena
1
(Roguska i dr., 1996, U.S. patent application publications 2003/0235582 i 2005/0118183).
[0061] Slično tome, humanizovana 38SB13, 38SB18, 38SB30, 38SB31 i 38SB39 antitela, i njihovi fragmenti koji vezuju epitop, mogu takođe uključivati supstituciju u lakim i/ili teškim lancima aminokiselinskih ostataka.
POLINUKLEOTIDI, VEKTORI I ĆELIJE DOMAĆINI
[0062] Pružene su nukleinske kiseline koje kodiraju anti-CD38 antitela prema pronalasku. U jednom otelotvorenju, molekul nukleinske kiseline kodira teški i/ili laki lanac anti-CD38 imunoglobulina. U poželjnom otelotvorenju, jedna nukleinska kiselina kodira teški lanac anti-CD38 imunoglobulina, i drugi molekul nukleinske kiseline kodira laki lanac anti-CD38 imunoglobulina.
[0063] Kako je obelodanjeno, pruženi su polinukleotidi koji kodiraju polipeptide koji imaju aminokiselinsku sekvencu izabranu iz grupe koju čine SEQ ID NO: 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 30, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 38, 40, 42, 44, 46, 48, 50, 52, 54, 56, 58, 60, 62, 64, 66, 68, 70 i 72. Poželjno je da je polinukleotid pronalaska izabran iz grupe koju čine SEQ ID NO: 37, 39, 41, 43, 45, 47, 49, 51, 53, 55, 57, 59, 61, 63, 65, 67, 69 i 71.
[0064] Pronalazak pruža vektore koji sadrže polinukleotide pronalaska. U jednom otelotvorenju, vektor sadrži polinukleotid koji kodira teški lanac anti-CD38 imunoglobulina. U još jednom otelotvorenju, navedeni polinukleotid kodira laki lanac anti-CD38 imunoglobulina. Pronalazak takođe pruža vektore koji sadrže polinukleotidne molekule koji kodiraju, fuzione proteine, modifikovana antitela, fragmente antitela i njihove sonde.
[0065] Kako bi se eksprimirao teški i/ili laki lanac anti-CD38 antitela prema pronalasku, polinukleotidi koji kodiraju pomenute teške i/ili lake lance ubacuju se u vektore eksprimiranja tako da su geni operativno povezani sa transkripcionim i translacionim sekvencama. Vektori eksprimiranja uključuju plazmide, YAC, kosmide, retroviruse, EBV-izvedene epizome, i sve druge vektore za koje će stručnjak znati da su pogodni za pružanje eksprimiranja pomenutih teških i/ili lakih lanaca. Stručnjak će shvatiti da se polinukleotidi koji kodiraju teške i lake lance mogu klonirati u različite vektore ili u isti vektor. U poželjnom otelotvorenju, navedeni
2
polinukleotidi su klonirani u istom vektoru.
[0066] Polinukleotidi predmetnog pronalaska i vektori koji sadrže ove molekule mogu se koristiti za transformaciju pogodne ćelije domaćina sisara. Transformacija može biti bilo kojim poznatim postupkom za uvođenje polinukleotida u ćeliju domaćina. Takvi postupci su dobro poznati stručnjaku u ovoj oblasti, i obuhvataju transformaciju posredovanu dekstranom, taloženje kalcijum fosfata, transfekciju posredovanu polibrenom, fuziju protoplasta, elektroporaciju, inkapsulaciju polinukleotida u lipozome, biolističku injekciju i direktnu mikroinjekciju DNK u jezgra.
FRAGMENTI ANTITELA
[0067] Kad se ovde koristi, „fragmenti antitela“ uključuje bilo koji deo antitela koji zadržava sposobnost vezivanja za epitop koji prepoznaje antitelo pune dužine, koji se generalno naziva „fragmenti koji vezuju epitop“. Primeri fragmenata antitela uključuju, ali nisu ograničeni na, Fab, Fab' i F(ab')2, Fd, jednolančane Fv (scFv), jednolančana antitela, disulfidno povezane Fv (dsFv) i fragmente koji sadrže bilo VL ili VH region. Fragmenti koji vezuju epitop, uključujući jednolančana antitela, mogu sadržati varijabilni region sami ili u kombinaciji sa celinom ili delom sledećeg: domeni zglobnog regiona, CH1, CH2 i CH3 domeni.
[0068] Takvi fragmenti mogu sadržati jedan ili oba Fab fragmenta ili F(ab')2 fragment.
Poželjno, fragmenti antitela sadrže svih šest CDR od celog antitela, mada su fragmenti koji sadrže manje od svih takvih regiona, kao što su tri, četiri ili pet CDR, takođe funkcionalni. Dalje, fragmenti mogu biti, ili mogu da kombinuju članove bilo koje od sledećih klasa imunoglobulina: IgG, IgM, IgA, IgD ili IgE, i njihove podklase.
[0069] Fab i F(ab')2 fragmenti mogu biti proizvedeni proteolitičkim cepanjem, koristeći enzime kao što su papain (Fab fragmenti) ili pepsin (F(ab')2 fragmenti).
[0070] „Jednolančani FV“ („scFvs“) su fragmenti koji se vezuju za epitop i sadrže najmanje jedan fragment varijabilnog regiona teškog lanca antitela (VH) vezan za najmanje jedan fragment varijabilnog regiona lakog lanca antitela (VL). Veznik može biti kratak, fleksibilan peptid odabran da osigura da je se trodimenzionalno preklapanje VLi VHregiona javlja kada su povezani tako da održavaju specifičnost vezivanja ciljanog molekula celog antitela iz kog je izveden fragment jednolančanog antitela. Karboksilni kraj VLili VHsekvence može biti kovalentno vezan veznikom za kraj aminokiseline komplementarne VLili VHsekvence.
[0071] Fragmenti jednolančanih antitela sadrže aminokiselinske sekvence koje imaju barem jedan od varijabilnog ili regiona za određivanje komplementarnsti (CDR) celih antitela opisanih u ovoj specifikaciji, ali nemaju neke ili sve konstantne domene tih antitela. Ovi konstantni domeni nisu neophodni za vezivanje antigena, ali čine glavni deo strukture celih antitela. Jednolančani fragmenti antitela mogu stoga prevazići neke od problema koji su povezani sa upotrebom antitela koja sadrže deo ili sve konstantne domene. Na primer, fragmenti jednolančanih antitela imaju tendenciju da budu slobodni od neželjenih interakcija između bioloških molekula i konstantnog regiona teškog lanca ili druge neželjene biološke aktivnosti. Dodatno, fragmenti jednolančanih antitela su znatno manji od celih antitela i zbog toga mogu imati veću kapilarnu permeabilnost od celih antitela, omogućavajući fragmentima jednolančanih antitela da se efikasnije lokalizuju i vezuju za ciljana mesta za vezivanje antigena. Takođe, fragmenti antitela se mogu proizvesti u relativno velikoj razmeri u prokariotskim ćelijama, čime se olakšava njihova proizvodnja. Osim toga, relativno mala veličina fragmenata jednolančanih antitela čini ih manje verovatnim da izazovu imuni odgovor kod primaoca nego celokupna antitela.
[0072] Fragmenti jednolančanih antitela mogu biti generisani molekulskim kloniranjem, bibliotekom prikaza fag antitela ili sličnim tehnikama koje su dobro poznate stručnjacima. Ovi proteini se mogu proizvesti, na primer, u eukariotskim ćelijama ili prokariotskim ćelijama, uključujući bakterije. Fragmenti koji se vezuju za epitop mogu takođe biti generisani korišćenjem različitih postupaka prikazivanja faga poznatih u struci. U postupcima prikazivanja faga, funkcionalni domeni antitela su prikazani na površini čestica faga koje nose polinukleotidne sekvence koje ih kodiraju. Naročito, takav fag se može koristiti za prikazivanje epitop-vezujućih domena eksprimiranih iz repertoara ili kombinatorne biblioteke antitela (npr., ljudska ili mišja). Fag koji eksprimira epitop-vezujući domen koji vezuje antigen od interesa može biti izabran ili identifikovan sa antigenom, npr., upotrebom označenog antigena vezanog ili uhvaćenog na čvrstu površinu ili kuglicu. Fagi koji se koristi u ovim postupcima su tipično filamentni fagi uključujući fd i M13 domene za vezivanje eksprimirane iz faga sa Fab, Fv ili disulfid-stabilizovanim domenima Fv antitela rekombinantno fuzionisanim za bilo fag gen III ili protein gena VIII.
[0073] Primeri postupaka prikazivanja faga koje se mogu koristiti za pravljenje epitopavezujućih fragmenata predmetnog pronalaska uključuju one opisane u Brinkman i dr., 1995, J. Immunol. Methods, 182: 41-50; Ames i dr., 1995, J. Immunol. Methods, 184: 177-186;
Kettleborough i dr., 1994, Eur. J. Immunol., 24: 952-958; Persic i dr., 1997, Gene, 187: 9-18; Burton i dr., 1994, Advances in Immunology, 57: 191-280; WO/1992/001047; WO 90/02809; WO 91/10737; WO 92/01047; WO 92/18619; WO 93/11236; WO 95/15982; WO 95/20401; i U.S. Pat. Nos.5,698,426; 5,223,409; 5,403,484; 5,580,717; 5,427,908; 5,750,753; 5,821,047; 5,571,698; 5,427,908; 5,516,637; 5,780,225; 5,658,727; 5,733,743 i 5,969,108.
[0074] Nakon selekcije faga, regioni faga koji kodiraju fragmente mogu se izolovati i upotrebiti za generisanje epitop-vezujućih fragmenata preko eksprimiranja u izabranom domaćinu, uključujući ćelije sisara, ćelije insekata, biljne ćelije, kvasce i bakterije, koristeći tehnologiju rekombinantne DNK, kao što je detaljno opisano u nastavku. Na primer, tehnike za rekombinantno dobijanje Fab, Fab' i F(ab')2 fragmenata mogu se takođe koristiti upotrebom postupaka koji su poznati u struci, kao što su oni opisani u WO 92/22324;
Mullinax i dr., 1992, BioTechniques, 12(6): 864-869; Sawai i dr., 1995, AJRI, 34: 26-34; i Better i dr., 1988, Science, 240:1041-1043. Primeri tehnika koje se mogu koristiti za proizvodnju jednolančanih Fv i antitela obuhvataju one opisane u U.S. Pat. Nos. 4,946,778 and 5,258,498; Huston i dr., 1991, Methods in Enzymology, 203: 46-88; Shu i dr., 1993, PNAS, 90: 7995-7999; Skerra i dr., 1988, Science, 240:1038-1040.
[0075] Predmetni pronalazak takođe obuhvata citotoksične konjugate. Ovi citotoksični konjugati sadrže dve primarne komponente, agens za vezivanje ćelija i citotoksični agens.
[0076] Kad se ovde koristi, izraz „agens za vezivanje ćelija“ se odnosi na agens koji specifično prepoznaje i vezuje proteine CD38 na površini ćelije. U jednom otelotvorenju, agens za vezivanje ćelija specifično prepoznaje CD38 tako da omogućava konjugatima da deluju na ciljani način sa malim sporednim efektima koji su rezultat nespecifičnog vezivanja.
[0077] U još jednom otelotvorenju, agens za vezivanje ćelija prema predmetnom pronalasku takođe specifično prepoznaje CD38 protein tako da konjugati budu u dodiru sa ciljanom ćelijom tokom dovoljnog vremenskog perioda da omoguće da citotoksični deo leka konjugata deluje na ćeliju i/ili da se omogući konjugatima dovoljno vremena da se internalizuju od strane ćelije.
2
[0078] U poželjnom otelotvorenju, citotoksični konjugati sadrže anti-CD38 antitelo prema ovom pronalasku kao agens za vezivanje ćelija.38SB19 antitelo je u stanju da specifično prepoznaje CD38 i usmerava citotoksični agens na abnormalnu ćeliju ili tkivo, kao što su ćelije raka, na ciljani način.
[0079] Druga komponenta citotoksičnih konjugata predmetnog pronalaska je citotoksični agens. Izraz „citotoksični agens“, kad se ovde koristi, odnosi se na supstancu koja smanjuje ili blokira funkciju ili rast ćelija i/ili izaziva uništenje ćelija.
[0080] U poželjnim otelotvorenjima, citotoksični agens je mali lek, prolek, taksoid, maitansinoid kao DM1 ili DM4, derivat tomaimicina, derivat leptomicina, CC-1065 ili analog CC-1065. U poželjnim otelotvorenjima, agensi za vezivanje ćelija prema predmetnom pronalasku su kovalentno vezana, direktno ili preko razdvojivog ili nerazdvojivog veznika, na citotoksični agens.
[0081] Agensi za vezivanje ćelija, citotoksični agensi i veznici su detaljnije razmatrani u daljem tekstu.
AGENTI ZA VEZIVANJE ĆELIJA
[0082] Efikasnost jedinjenja predmetnog pronalaska kao terapeutskih agenasa zavisi od pažljivog izbora odgovarajućeg agenasa za vezivanje ćelija. Agensi za vezivanje ćelija mogu biti bilo koje vrste koja je trenutno poznata, ili koja će postati poznata, i uključuju peptide i ne-peptide. Agens za vezivanje ćelija može biti bilo koje jedinjenje koje može vezati ćeliju, bilo na specifičan ili nespecifičan način. Generalno, to mogu biti antitela (posebno monoklonska antitela), limfokini, hormoni, faktori rasta, vitamini, molekuli za transport hranljivih materija (kao što je transferin), ili bilo koji drugi molekul ili supstanca koja vezuje ćelije.
[0083] Specifičniji primeri sredstava za vezivanje ćelija koji se mogu koristiti uključuju:
1. a) poliklonska antitela;
2. b) monoklonska antitela;
3. c) fragmente antitela kao što su Fab, Fab' i F (ab') 2, Fv (Parham, 1983, J. Immunol., 131: 2895-2902; Spring i dr., 1974, J. Immunol., 113: 470-478; Nisonoff i dr., 1960, Arch. Biochem. Biophys., 89: 230-244);
[0084] Posebno, anti-CD38 monoklonsko antitelo izabrano od 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31 i 38SB39 može da se koristi kao agens za vezivanje ćelija. Slično tome, navedeni agens za vezivanje ćelija može biti himerna verzija jednog od 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31 i 38SB39 monoklonskih antitela. Poželjno, humanizovano anti-CD38 antitelo se koristi kao agens za vezivanje ćelija. Još poželjnije je da je humanizovano anti-CD38 antitelo izabrano od humanizovanih ili obnavljanih 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31 i 38SB39 antitela.
CITOTOKSIČNI AGENSI
[0085] U još jednom otelotvorenju, humanizovano antitelo može biti konjugovano sa lekom, kao što je maitansinoid, kako bi se formirao prolek koji ima specifičnu citotoksičnost prema ćelijama koje eksprimiraju antigen, ciljanjem leka na CD38 protein. Citotoksični konjugati koji sadrže takva antitela i mali, visoko toksični lek (npr. maitansinoidi, taksani, derivati tomaimicina, derivati leptomicina i analozi CC-1065) mogu se koristiti kao terapeutici za tretmane tumora, kao što su limfom, leukemija i višestruki mijelom.
[0086] Citotoksični agens koji se koristi u citotoksičnom konjugatu predmetnog pronalaska može biti bilo koje jedinjenje koje rezultuje smrću ćelije, ili indukuje ćelijsku smrt, ili na neki način smanjuje održivost ćelija. Poželjni citotoksični agensi uključuju, na primer, maitansinoide i analoge maitansinoida, taksoide, derivate tomaimicina, derivate leptomicina, CC-1065 i CC-1065 analoge, dolastatin i analoge dolastatina, kako je definisano u nastavku. Ovi citotoksični agensi su konjugovani sa antitelima, fragmentima antitela, funkcionalnim ekvivalentima, poboljšanim antitelima i njihovim analozima kako je ovde opisano.
[0087] Citotoksični konjugati se mogu dobiti in vitro postupcima. U cilju povezivanja leka ili proleka sa antitelom, koristi se vezujuća grupa. Pogodne vezujućeg dela su dobro poznate u struci i uključuju disulfidne grupe, tioetarske grupe, grupe koje su labilne u kiselini, fotolabilne grupe, grupe koje su labilne na peptidaze i grupe koje su labilne na esterazu. Poželjne vezujućeg dela su disulfidne grupe i tioetarske grupe. Na primer, konjugati se mogu konstruisati korišćenjem reakcije razmene disulfida ili formiranjem tioetarske veze između antitela i leka ili proleka.
2
MAITANSINOIDI
[0088] Među citotoksičnim agensima koji se mogu koristiti u ovom pronalasku za formiranje citotoksičnog konjugata, su maitansinoidi i analozi maitansinoida. Primeri pogodnih maitansinoida uključuju maitansinol i analoge maitansinola. Maitansinoidi su lekovi koji inhibiraju formiranje mikrotubula i koji su visoko toksični za ćelije sisara.
[0089] Primeri pogodnih analoga maitansinola obuhvataju one koji imaju modifikovani aromatski prsten i one koji imaju modifikacije na drugim položajima. Takvi pogodni maitansinoidi su obelodanjeni u U.S. Patent Nos.4,424,219; 4,256,746; 4,294,757; 4,307,016; 4,313,946; 4,315,929; 4,331,598; 4,361,650; 4,362,663; 4,364,866; 4,450,254; 4,322,348; 4,371,533; 6,333,410; 5,475,092; 5,585,499; i 5,846,545.
[0090] Specifični primeri pogodnih analoga maitansinola koji imaju modifikovani aromatski prsten uključuju:
1. (1) C-19-dehloro (U.S. Pat. No.4,256,746) (pripremljen redukcijom LAH ansamitocina P2);
2. (2) C-20-hidroksi (ili C-20-demetil) /-C-19-dehloro (U.S. Pat. Nos.4,361,650 i 4,307,016) (pripremljen demetilacijom pomoću Streptomyces ili Actinomyces ili dehlorinacijom upotrebom LAH); i
3. (3) C-20-demetoksi, C-20-aciloksi (-OCOR), /- dehloro (U.S. Pat. No.4,294,757) (pripremljen acilacijom pomoću acil hlorida).
[0091] Specifični primeri pogodnih analoga maitansinola koji imaju modifikacije drugih položaja uključuju:
1. (1) C-9-SH (U.S. Pat. No.4,424,219) (pripremljen reakcijom maitansinola sa H2S ili P2S5);
2. (2) C-14-alkoksimetil (demetoksi/CH2OR) (U.S. Pat. No.4,331,598);
3. (3) C-14-hidroksimetil ili aciloksimetil (CH2OH ili CH2OAc) (U.S. Pat. No.
4,450,254) (pripremljen od Nocardia);
4. (4) C-15-hidroksi/aciloksi (U.S. Pat. No.4,364,866) (pripremljen konverzijom maitansinola pomoću Streptomyces);
5. (5) C-15-metoksi (U.S. Pat. Nos. 4,313,946 i 4,315,929) (izolovan iz Trewia nudiflora);
2
6. (6) C-18-N-demetil (U.S. Pat. Nos. 4,362,663 i 4,322,348) (pripremljen demetilacijom maitansinola pomoću Streptomyces); i
7. (7) 4,5-deoki (U.S. Pat. No.4,371,533) (pripremljen titanijum trihlorid/LAH redukcijom maitansinola).
[0092] U poželjnom otelotvorenju, citotoksični konjugati predmetnog pronalaska koriste maitansinoid (DM1) koji sadrži tiol, formalno nazvan N2'-deacetil-N2'-(3-merkapto-1-oksopropil)-maitansin, kao citotoksični agens. DM1 je predstavljen sledećom strukturnom formulom (I):
[0093] U sledećem poželjnom otelotvorenju, citotoksični konjugati predmetnog pronalaska koriste maitansinoid N2'-deacetil-N-2 '(4-metil-4-merkapto-1-oksopentil)-maitansin koji sadrži tiol kao citotoksični agens. DM4 je predstavljen sledećom strukturnom formulom (II):
[0094] U daljim varijantama pronalaska, mogu se koristiti drugi maitansini, uključujući maitansinoide koji sadrže tiol i disulfid koji nose mono ili di-alkil supstituciju na atomu ugljenika koji nosi atom sumpora. Oni uključuju maitansinoid koji ima na C-3, C-14 hidroksimetil, C-15 hidroksi, ili C-20 desmetil, acilovani aminokiselinski bočni lanac sa acil grupom koja nosi ometenu sulfhidrilnu grupu, gde atom ugljenika acil grupa koja nosi tiol funkcionalnu grupu ima jedan ili dva supstituenta, i pomenuti supstituenti su CH3, C2H5,
2
ravan ili razgranat alkil ili alkenil koji ima od 1 do 10 atoma ugljenika, ciklični alkil ili alkenil koji ima od 3 do 10 atoma ugljenika, fenil, supstituisani fenil, ili heterociklični aromatski ili heterocikloalkilni radikal, i dalje, gde jedan od supstituenata može biti H, i gde acil grupa ima dužinu ravnog lanca od najmanje tri atoma ugljenika između karbonil funkcionalne grupe i atoma sumpora.
[0095] Takvi dodatni maitansini uključuju jedinjenja predstavljena formulom (III):
gde:
Y' predstavlja (CR7R8)l(CR9=CR10)p(C≡C)qAr(CR5R6)mDu(CR11=CR12)r(C≡C)sBt(CR3R4)nCR1R2SZ,
gde:
R1i R2su svaki nezavisno CH3, C2H5, ravni alkil ili alkenil koji ima od 1 do 10 atoma ugljenika, razgranati ili ciklični alkil ili alkenil koji ima od 3 do 10 atoma ugljenika, fenil, supstituisani fenil ili heterociklični aromatik ili heterocikloalkil radikal, i dodatno R2može biti H;
A, B, D su cikloalkil ili cikloalkenil koji imaju 3 -10 atoma ugljenika, prost ili supstituisani aril ili heterociklični aromatik ili heterocikloalkil radikal;
R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9, R11, i R12su svaki nezavisno H, CH3, C2H5, ravni alkil ili alkenil koji ima od 1 do 10 atoma ugljenika, razgranati ili ciklični alkil ili alkenil koji ima od 3 do 10 atoma ugljenika, fenil, supstituisani fenil ili heterociklični aromatik ili heterocikloalkil radikal;
2
l, m, n, o, p, q, r, s, i t su svaki nezavisno 0 ili ceo broj od 1 do 5, uz uslov da barem dva od l, m, n, o, p, q, r, s i t ni u jednom trenutku nisu nula; i
Z je H, SR ili -COR, gde je R ravni alkil ili alkenil koji ima od 1 do 10 atoma ugljenika, razgranati ili ciklični alkil ili alkenil koji ima od 3 do 10 atoma ugljenika, ili prost ili supstituisani aril ili heterociklični aromatik ili heterocikloalkil radikal.
[0096] Poželjna otelotvorenja formule (III) uključuju jedinjenja formule (III) gde:
R1je H, R2je metil i Z je H.
R1i R2su metil i Z je H.
R1je H, R2je metil, i Z je -SCH3.
R1i R2su metil, i Z je -SCH3.
[0097] Takvi dodatni maitansini takođe uključuju jedinjenja predstavljena formulom (IV-L), (IV-D), ili (IV-D,L):
gde:
Y predstavlja (CR7R8)l(CR5R6)m(CR3R4)nCR1R2SZ,
gde:
R1i R2su svaki nezavisno CH3, C2H5, ravni alkil ili alkenil koji ima od 1 do 10 atoma ugljenika, razgranati ili ciklični alkil ili alkenil koji ima od 3 do 10 atoma ugljenika, fenil, supstituisani fenil, ili heterociklični aromatik ili heterocikloalkil radikal, i dodatno R2može biti H;
R3, R4, R5, R6, R7i R8su svaki nezavisno H, CH3, C2H5, ravni alkil ili alkenil koji ima od 1 do 10 atoma ugljenika, razgranati ili ciklični alkil ili alkenil koji ima od 3 do 10 atoma ugljenika, fenil, supstituisani fenil, ili heterociklični aromatik ili heterocikloalkil radikal;
2
l, m i n su svaki nezavisno ceo broj od 1 do 5, i dodatno n može biti 0;
Z je H, SR ili -COR gde je R ravni ili razgranati alkil ili alkenil koji ima od 1 do 10 atoma ugljenika, ciklični alkil ili alkenil koji ima od 3 do 10 atoma ugljenika, ili prost ili supstituisani aril ili heterociklični aromatik ili heterocikloalkil radikal; i
May predstavlja maitansinoid koji nosi bočni lanac na C-3, C-14 hidroksimetilu, C-15 hidroksi ili C-20 desmetilu.
[0098] Poželjna otelotvorenja formula (IV-L), (IV-D) i (IV-D,L) uključuju jedinjenja formula (IV-L), (IV-D) i (IV-D,L) gde:
R1je H, R2je metil, R5, R6, R7, i R8su svaki H, l i m su svaki 1, n je 0, i Z je H.
R1i R2su metil, R5, R6, R7, R8su svaki H, l i m su 1, n je 0, i Z je H.
R1je H, R2je metil, R5, R6, R7, R8su svaki H, l i m su svaki 1, n je 0, i Z je - SCH3.
R1i R2su metil, R5, R6, R7, R8su svaki H, l i m su 1, n je 0, i Z je -SCH3.
[0099] Poželjni citotoksični agens je predstavljen formulom (IV-L).
[0100] Takvi dodatni maitansini takođe uključuju jedinjenja predstavljena formulom (V):
gde:
Y predstavlja (CR7R8)l(CR5R6)m(CR3R4)nCR1R2SZ,
gde:
R1i R2su svaki nezavisno CH3, C2H5, ravni alkil ili alkenil koji ima od 1 do 10 atoma ugljenika, razgranati ili ciklični alkil ili alkenil koji ima od 3 do 10 atoma ugljenika, fenil, supstituisani fenil ili heterociklični aromatik ili heterocikloalkil radikal, i dodatno R2može biti H;
R3, R4, R5, R6, R7, i R8su svaki nezavisno H, CH3, C2H5, ravni alkil ili alkenil koji ima od 1 do 10 atoma ugljenika, razgranati ili ciklični alkil ili alkenil koji ima od 3 do 10 atoma ugljenika, fenil, supstituisani fenil, ili heterociklični aromatik ili heterocikloalkil radikal; l, m i n su svaki nezavisno ceo broj od 1 do 5, i dodatno n može biti 0; i
Z je H, SR ili -COR, gde je R ravni alkil ili alkenil koji ima od 1 do 10 atoma ugljenika, razgranati ili ciklični alkil ili alkenil koji ima od 3 do 10 atoma ugljenika, ili prost ili supstituisani aril ili heterociklični aromatik ili heterocikloalkil radikal.
[0101] Poželjna otelotvorenja formule (V) uključuju jedinjenja formule (V) gde:
R1je H, R2je metil, R5, R6, R7, i R8su svaki H; l i m su svaki 1; n je 0; i Z je H.
R1i R2su metil, R5, R6, R7, i R8su svaki H, l i m su 1; n je 0; i Z je H.
R1je H, R2je metil, R5, R6, R7, i R8su svaki H, l i m su svaki 1, n je 0, i Z je -SCH3.
R1i R2su metil, R5, R6, R7, i R8su svaki H, l i m su 1, n je 0, i Z je - SCH3.
[0102] Takvi dodatni maitansini dalje uključuju jedinjenja predstavljena formulom (VI-L), (VI-D), ili (VI-D,L):
gde:
Y2predstavlja (CR7R8)l(CR5R6)m(CR3R4)nCR1R2SZ2,
gde:
R1i R2su svaki nezavisno CH3, C2H5, ravni alkil ili alkenil koji ima od 1 do 10 atoma ugljenika, razgranati ili ciklični alkil ili alkenil koji ima od 3 do 10 atoma ugljenika, fenil, supstituisani fenil ili heterociklični aromatik ili heterocikloalkil radikal, i dodatno R2može biti H;
1
R3, R4, R5, R6, R7i R8su svaki nezavisno H, CH3, C2H5, ravni ciklični alkil ili alkenil koji ima od 1 do 10 atoma ugljenika, razgranati ili ciklični alkil ili alkenil koji ima od 3 do 10 atoma ugljenika, fenil, supstituisani fenil ili heterociklični aromatik ili heterocikloalkil radikal;
l, m i n su svaki nezavisno ceo broj od 1 do 5, i dodatno n može biti 0;
Z2je SR ili COR, gde je R ravni alkil ili alkenil koji ima od 1 do 10 atoma ugljenika, razgranati ili ciklični alkil ili alkenil koji ima od 3 do 10 atoma ugljenika, ili prost ili supstituisani aril ili heterociklični aromatik ili heterocikloalkil radikal; i
May je maitansinoid.
[0103] Takvi dodatni maitansini takođe uključuju jedinjenja predstavljena formulom (VII):
gde:
Y2' predstavlja
(CR7R8)l(CR9=CR10)p(C≡C)qAr(CR5R6)mDu(CR11=CR12)r(C≡C)sBt(CR3R4)nCR1R2SZ2,
gde:
R1i R2su svaki nezavisno CH3, C2H5, ravni razgranati ili alkil ili alkenil koji ima od 1 do 10 atoma ugljenika, ciklični alkil ili alkenil koji ima od 3 do 10 atoma ugljenika, fenil, supstituisani fenil ili heterociklični aromatik ili heterocikloalkil radikal, i dodatno R2može
2
biti H;
A, B, i D each independently je cikloalkil ili cikloalkenil koji imaju 3 do 10 atoma ugljenika, prost ili supstituisani aril, ili heterociklični aromatik ili heterocikloalkil radikal;
R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9, R11, i R12su svaki nezavisno H, CH3, C2H5, ravni alkil ili alkenil koji ima od 1 do 10 atoma ugljenika, razgranati ili ciklični alkil ili alkenil koji ima od 3 do 10 atoma ugljenika, fenil, supstituisani fenil ili heterociklični aromatik ili heterocikloalkil radikal;
l, m, n, o, p, q, r, s, i t su svaki nezavisno 0 ili ceo broj od 1 do 5, uz uslov da barem dva od l, m, n, o, p, q, r, s i t ni u jednom trenutku nisu nula; i
Z2je SR ili -COR, gde je R ravni alkil ili alkenil koji ima od 1 do 10 atoma ugljenika, razgranati ili ciklični alkil ili alkenil koji ima od 3 - 10 atoma ugljenika, ili prost ili supstituisani aril ili heterociklični aromatik ili heterocikloalkil radikal.
[0104] Poželjna otelotvorenja formule (VII) uključuju jedinjenja formule (VII) gde: R1je H i R2je metil.
[0105] Gore pomenuti maitansinoidi mogu biti konjugovani sa anti-CD38 antitelom 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31, ili 38SB39 ili njegovim homologom ili fragmentom, gde je antitelo vezano za maitansinoid upotrebom tiolne ili disulfidne funkcionalnosti koja je prisutna na acilnoj grupi bočnog lanca acilovane aminokiseline koja se nalazi na C-3, C-14 hidroksimetilu, C-15 hidroksi ili C-20 desmetilu maitansinoida, i gde acil grupa acilovanog bočnog lanca amino kiseline ima svoju tiolnu ili disulfidnu funkcionalnost lociranu na atomu ugljenika koji ima jedan ili dva supstituenta, i pomenuti supstituenti su CH3, C2H5, ravni alkil ili alkenil koji ima od 1 do 10 atoma ugljenika, razgranati ili ciklični alkil ili alkenil koji ima od 3 do 10 atoma ugljenika, fenil, supstituisani fenil ili heterociklični aromatski ili heterocikloalkil radikal, i pored toga jedan od supstituenata može biti H, i gde acilna grupa ima dužinu ravnog lanca od najmanje tri atoma ugljenika između karbonil funkcionalne grupe i atoma sumpora.
[0106] Poželjni konjugat predmetnog pronalaska je onaj koji sadrži anti-CD38 38SB19 antitelo konjugovano sa maitansinoidom formule (VIII):
gde:
Y1' predstavlja (CR7R8)l(CR9=CR10)p(C≡C)qAr(CR5R6)mDu(CR11=CR12)r(C≡C)sBt(CR3R4)nCR1R2S-, gde:
A, B, i D, svaki je nezavisno cikloalkil ili cikloalkenil koji imaju 3 -10 atoma ugljenika, prost ili supstituisani aril, ili heterociklični aromatik ili heterocikloalkil radikal;
R3, R4, R5, R6, R7, R8, R9, R11, i R12su svaki nezavisno H, CH3, C2H5, ravni alkil ili alkenil koji ima od 1 do 10 atoma ugljenika, razgranati ili ciklični alkil ili alkenil koji ima od 3 do 10 atoma ugljenika, fenil, supstituisani fenil ili heterociklični aromatik ili heterocikloalkil radikal; i
l, m, n, o, p, q, r, s, i t su svaki nezavisno 0 ili ceo broj od 1 do 5, uz uslov da barem dva od l, m, n, o, p, q, r, s i t nisu ne-nula ni u jednom trenutku.
[0107] Poželjno, R1je H i R2je metil ili R1i R2su metil.
[0108] Još poželjniji konjugat predmetnog pronalaska je onaj koji obuhvata anti-CD38 38SB19 antitelo konjugovano sa maitansinoidom formule (IX-L), (IX-D), ili (IX-D,L):
4
gde:
Y1predstavlja (CR7R8)l(CR5R6)m(CR3R4)nCR1R2S-,
gde:
R1i R2su svaki nezavisno CH3, C2H5, ravni alkil ili alkenil koji ima od 1 do 10 atoma ugljenika, razgranati ili ciklični alkil ili alkenil koji ima od 3 do 10 atoma ugljenika, fenil, supstituisani fenil, heterociklični aromatik ili heterocikloalkil radikal, i dodatno R2može biti H;
R3, R4, R5, R6, R7i R8su svaki nezavisno H, CH3, C2H5, ravni alkil ili alkenil koji ima od 1 do 10 atoma ugljenika, razgranati ili ciklični alkil ili alkenil koji ima od 3 do 10 atoma ugljenika, fenil, supstituisani fenil ili heterociklični aromatik ili heterocikloalkil radikal;
I, m i n su svaki nezavisno ceo broj od 1 do 5, i dodatno n može biti 0; i
May predstavlja maitansinol koji nosi bočni lanac na C-3, C-14 hidroksimetilu, C-15 hidroksi ili C-20 desmetilu.
[0109] Poželjna otelotvorenja formula (IX-L), (IX-D) i (IX-D,L) uključuju jedinjenja formula (IX-L), (IX-D) i (IX-D,L) gde:
R1je H i R2je metil ili R1i R2su metil,
R1je H, R2je metil, R5, R6, R7i R8su svaki H; l i m su svaki 1; n je 0,
R1i R2su metil; R5, R6, R7i R8su svaki H; l i m su 1; n je 0.
[0110] Poželjni citotoksični agens je predstavljen formulom (IX-L).
[0111] Sledeći poželjni konjugat predmetnog pronalaska je onaj koji sadrži anti-CD38 38SB19 antitelo konjugovano sa maitansinoidom formule (X):
gde su supstituenti kako je definisano za formulu (IX) iznad.
[0112] Posebno su poželjna bilo koja od gore opisanih jedinjenja,, gde R1je H, R2je metil, R5, R6, R7i R8su svaki H, l i m su svaki 1, i n je 0.
[0113] Dalje su posebno poželjna bilo koja od gore opisanih jedinjenja, gde R1i R2su metil, R5, R6, R7, R8su svaki H, l i m su 1, i n je 0
[0114] Dalje, poželjan je L-aminoacil stereoizomer.
[0115] Svaki od maitansinoida koji je obrađen u podnetoj patentnoj prijavi SAD pod brojem 10/849,136, koja je podneta 20. maja 2004. može se takođe koristiti u citotoksičnom konjugatu predmetnog pronalaska.
VEZUJUĆE GRUPE KOJE SADRŽE DISULFID
[0116] Kako bi se povezao maitansinoid sa agensom za vezivanje ćelija, kao što je 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31, ili 38SB39 antitelo, maitansinoid sadrži vezujući deo. Vezujući deo sadrži hemijsku vezu koja omogućava oslobađanje potpuno aktivnih maitansinoida na određenom mestu. Pogodne hemijske veze su dobro poznate u struci i obuhvataju disulfidne veze, kisele labilne veze, foto-labilne veze, peptidazne labilne veze i esterski labilne veze. Poželjne su disulfidne veze.
[0117] Vezujući deo takođe sadrži reaktivnu hemijsku grupu. Reaktivna hemijska grupa može biti kovalentno vezana za maitansinoid preko vezujućeg dela disulfidne veze.
[0118] Posebno poželjne reaktivne hemijske grupe su N-sukcinimidil estri i N-sulfosukcinimidil estri.
[0119] Posebno poželjni maitansinoidi koji sadrže vezujući deo koji sadrži reaktivnu hemijsku grupu su C-3 estri maitansinola i njegovi analozi, gde veezujući deo sadrži disulfidnu vezu i hemijski reaktivna grupa sadrži N-sukcinimidil ili N-sulfosukcinimidil estar.
[0120] Mnogi položaji na maitansinoidima mogu da posluže kao položaj za hemijsko povezivanje vezujućeg dela. Na primer, korisni su C-3 položaj koja ima hidroksilnu grupu, C-14 položaj modifikovan sa hidroksimetilom, C-15 položaj modifikovan sa hidroksi i C-20 položaj koja ima hidroksilnu grupu. Međutim, poželjan je C-3 položaj, i C-3 položaj maitansinola je naročito poželjan.
[0121] Dok je sinteza estara maitansinola koji ima vezujući deo opisana u smislu vezujućih delova koji sadrže disulfidne veze, stručnjak u ovoj oblasti će razumeti da povezivanje delova sa drugim hemijskim vezama (kao što je opisano gore) takođe može da se koristi sa predmetnim pronalaskom, kao i drugim maitansinoidima. Specifični primeri drugih hemijskih veza uključuju labilne kiseline, foto-labilne veze, labilne veze peptidaze i labilne veze esteraze. Obelodanjenje U.S. Patent No.5,208,020 govori o proizvodnji maitansinoida koji nose takve veze.
[0122] Sinteza maitansinoida i derivata maitansinoida sa disulfidnim delom koji nosi reaktivnu grupu opisana je u U.S. Patent Nos. 6, 441,163 i 6,333,410, i U.S. Prijava br.
10/161,651.
[0123] Maitansinoidi koji sadrže reaktivne grupe, kao što je DM1, reaguju sa antitelom, kao što je 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31, ili 38SB39 antitelo, kako bi se proizveli citotoksični konjugati. Ovi konjugati se mogu prečistiti pomoću HPLC ili gel-filtracijom.
[0124] Nekoliko odličnih šema za proizvodnju takvih konjugata antitelo-maitansinoid su date u U.S. Patent No.6,333,410, i U.S. Prijave br.09/867,598, 10/161,651 i 10/024,290.
[0125] Uopšteno, rastvor antitela u vodenom puferu može biti inkubiran sa molarnim viškom maitansinoida koji imaju disulfidnu grupu koja nosi reaktivnu grupu. Reakciona smeša se može prekinuti dodavanjem viška amina (kao što je etanolamin, taurin, itd.). Konjugat maitansinoid-antitelo može se zatim prečistiti gel-filtracijom.
[0126] Broj molekula maitansinoida vezanih za molekul antitela može se odrediti merenjem spektrofotometrijskog odnosa apsorbancije na 252 nm i 280 nm. Poželjno je prosečno 1-10 molekula maitansinoida/molekula antitela.
[0127] Konjugati antitela sa maitansinoidnim lekovima mogu se proceniti u pogledu svoje sposobnosti da suzbiju proliferaciju različitih neželjenih ćelijskih linija in vitro. Na primer, ćelijske linije kao što je ćelijska linija ljudskog limfoma Daudi, ćelijska linija ljudskog limfoma Ramos, ćelijska linija ljudskog multiplog mijeloma MOLP-8 i linija ljudske T akutne limfocitne leukemije MOLT-4 mogu se lako koristiti za procenu citotoksičnost ovih jedinjenja. Ćelije koje se procenjuju mogu biti izložene jedinjenjima 24 sata i preživeli fragmenti ćelija mereni su direktnim testovima poznatim postupcima. IC50 vrednosti mogu se zatim izračunati iz rezultata ispitivanja.
VEZUJUĆE GRUPE KOJE SADRŽE PEG
[0128] Maitansinoidi se takođe mogu vezati za agense za vezivanje ćelija upotrebom PEG vezujućih grupa, kao što je navedeno u tekstu U.S. Prijava br.10/024,290. Ove PEG vezujuće grupe su rastvorljive u vodi i u ne-vodenim rastvaračima, i mogu se koristiti za povezivanje jednog ili više citotoksičnih agenasa sa agensom za vezivanje ćelija. Primerne PEG vezujuće grupe uključuju heterobifunkcionalne PEG veznike koji se vezuju za citotoksične agense i agense za vezivanje ćelija na suprotnim krajevima veznika kroz funkcionalnu sulfhidrilnu ili disulfidnu grupu na jednom kraju i aktivni estar na drugom kraju.
[0129] Kao opšti primer sinteze citotoksičnog konjugata koji koristi PEG vezujuću grupu, ponovo se navodi U.S. Prijava br.10/024,290 za određene detalje. Sinteza počinje reakcijom jednog ili više citotoksičnih agenasa koji nose reaktivni PEG deo sa agensom koji vezuje ćelije, što dovodi do zamene terminalno aktivnog estra svakog reaktivnog PEG ostatka sa aminokiselinskim ostatkom agensa za vezivanje ćelija, kako bi se dobio citotoksični konjugat koji sadrži jedan ili više citotoksičnih agenasa kovalentno vezanih za agens za vezivanje ćelija preko PEG vezujuće grupe.
TAKSANI
[0130] Citotoksični agens koji se koristi u citotoksičnim konjugatima u skladu sa ovim pronalaskom može takođe biti taksan ili njegov derivat.
[0131] Taksani su porodica jedinjenja koja uključuje paklitaksel (Taksol), citotoksični prirodni proizvod i docetaksel (Taksoter), polu-sintetički derivat, dva jedinjenja koja se široko koriste u tretmanu raka. Taksani su mitotski vretenasti otrovi koji inhibiraju depolimerizaciju tubulina, što dovodi do smrti ćelija. Dok su docetaksel i paklitaksel korisni agensi u tretmanu raka, njihova antitumorska aktivnost je ograničena zbog njihove nespecifične toksičnosti prema normalnim ćelijama. Dalje, jedinjenja kao što su paklitaksel i docetaksel nisu dovoljno snažna kako bi se mogla koristiti u konjugatima agenasa za vezivanje ćelija.
[0132] Poželjni taksan za upotrebu u pripremi citotoksičnih konjugata je taksan formule (XI):
[0133] Postupci za sintezu taksana koji se mogu koristiti u citotoksičnim konjugatima predmetnog pronalaska, zajedno sa postupcima za konjugovanje taksana do sredstava za vezivanje ćelija kao što su antitela, opisani su detaljno u U.S. Patent Nos.5,416,064, 5,475,092, 6,340,701, 6,372,738 i 6,436,931, i u U.S. Prijave br.10/024,290, 10/144,042, 10/207,814, 10/210,112 i 10/369,563.
DERIVATI TOMAIMICINA
[0134] Citotoksičnost prema predmetnom pronalasku može takođe biti derivat tomaimicina. Derivati tomaimicina su pirolo[1,4]benzodiazepini (PBD), poznata klasa jedinjenja koja vrše svoja biološka svojstva kovalentnim vezivanjem za N2 gvanina u maloj brazdi DNK. PBD uključuju veliki broj veznika manjih brazdi kao što su antramicin, neotramicin i DC-81.
[0135] Novi derivati tomaimicina koji zadržavaju visoku citotoksičnost i koji se mogu efikasno vezati za agense za vezivanje ćelija opisani su u Međunarodna prijava br.
PCT/IB2007/000142. Kompleksi agens za vezivanje ćelija-derivat tomaimicina dozvoljavaju da se celokupna mera citotoksičnog dejstva derivata tomaimicina primeni na usmereni način samo protiv neželjenih ćelija, čime se izbegavaju sporedni efekti usled oštećenja neciljanih zdravih ćelija.
[0136] Citotoksični agens prema predmetnom pronalasku sadrži jedan ili više derivata tomaimicina, vezanih za agens za vezivanje ćelija, kao što je 38SB19 antitelo, preko vezujuće grupe. Vezujuća grupa je deo hemijskog dela koji je kovalentno vezan za derivat tomaimicina pomoću konvencionalnih postupaka. U poželjnom otelotvorenju, hemijski deo može biti kovalentno vezan za derivat tomaimicina preko disulfidne veze.
[0137] Derivati tomaimicina korisni u ovom pronalasku imaju formulu (XII) prikazanu u nastavku:
gde
---- predstavlja opcionu jednostruku vezu;
---- predstavlja bilo jednostruku vezu ili dvostruku vezu;
uz uslov da kada ---- predstavlja jednostruku vezu, U i U', isti ili različiti, nezavisno predstavljaju H, i W i W', isti ili različiti, su nezavisno izabrani iz grupe koju čine OH, etar kao što je -OR, ester (npr. acetat), kao što je -OCOR, karbonat kao što je -OCOOR, karbamat kao što je - OCONRR', ciklični karbamat, tako da su N10 i C11 deo cikla, urea kao što je -NRCONRR', tiokarbamat kao što je -OCSNHR, ciklični tiokarbamat tako da su N10 i C11 deo cikla, -SH, sulfid kao što je -SR, sulfoksid kao što je -SOR, sulfon kao što je -SOOR, sulfonat kao što je -SO3 -, sulfonamid kao što je -NRSOOR, amin kao što je -NRR', opciono ciklični amin tako da su N10 i C11 deo cikla, derivat hidroksilamina kao što je -NROR', amid kao što je -NRCOR, azido kao što je -N3, cijano, halo, trialkil ili triarilfosfonium,
4
aminokiselina-izvedena group; Poželjno W i W' su isti ili različiti i su OH, Ome, Oet, NHCONH2, SMe;
i kada ---- predstavlja dvostruku vezu, U i U' su odsutni i W i W' predstavljaju H;
▪ R1, R2, R1', R2' su isti ili različiti i nezavisno izabrani od Halida ili Alkila opciono supstituisanog sa jednim ili više Hal, CN, NRR', CF3, ili, Aril, Het, S(O)qR, ili R1 i R2 i R1' i R2' zajedno formiraju dvostruku vezu koja sadrži grupu =B i =B', respektivno.
[0138] Poželjno, R1 i R2 i R1' i R2' zajedno formiraju dvostruku vezu koja sadrži grupu =B i =B' respektivno.
▪ B i B' su isti ili različiti i nezavisno izabrani od Alkenila koji je opciono supstituisan sa jednim ili više Hal, CN, NRR', CF3, ili, Aril, Het, S(O)qR ili B i B' predstavlja atom kiseonika.
Poželjno, B=B'.
[0139] Poželjnije, B=B'= =CH2ili =CH-CH3,
▪ X, X' su isti ili različiti i nezavisno izabrani od jednog ili više -O-, -NR-, -(C=O)-, -S(O)q-.
Poželjno, X=X'.
[0140] Poželjnije, X=X'=O.
▪ A, A' su isti ili različiti i nezavisno izabrani od Alkila ili Alkenila koji opciono sadrže atom kiseonika, azota ili sumpora, od kojih je svaki opciono supstituisan sa jednim ili više Hal, CN, NRR', CF3, ili, S(O)qR, Aril, Het, Alkil, Alkenil.
Poželjno, A=A'.
[0141] Poželjnije, A=A'=ravni nesupstituisani alkil.
▪ Y, Y' su isti ili različiti i nezavisno izabrani od H, ili;
Poželjno, Y=Y'.
[0142] Poželjnije, Y=Y'=OAlkil, još poželjnije OMetil.
▪ T je -NR-, -O-, -S(O)q-, ili 4 do 10-očlani aril, cikloalkil, heterociklični ili heteroaril, od kojih je svaki opciono supstituisan sa jednim ili više Hal, CN, NRR', CF3, R, ili, S(O)qR, i/ili veznik(s), ili razgranati Alkil, opciono supstituisan sa jednim ili više Hal, CN, NRR', CF3, ili, S(O)qR i/ili veznik(s), ili ravni Alkil supstituisan sa jednim ili više Hal, CN, NRR', CF3, ili, S(O)qR i/ili veznik(s).
[0143] Poželjno, T je 4 do 10-očlani aril ili heteroaril, još poželjnije fenil ili piridil, opciono supstituisan sa jednim ili više veznika.
[0144] Navedeni veznik sadrži vezujuću grupu. Pogodne vezujuće grupe su dobro poznate u struci i uključuju tiol, sulfid, disulfidne grupe, tioetarske grupe, grupe koje su labilne u kiselini, foto-labilne grupe, grupe koje su labilne na peptidaze i grupe koje su labilne na esterazu. Poželjne su disulfidne grupe i tioetarske grupe.
[0145] Kada je vezujuća grupa grupa koja sadrži tiol, sulfid (ili takozvani tioeter -S-) ili disulfid (-SS-), bočni lanac koji nosi tiol, sulfidnu ili disulfidnu grupu može biti ravan ili razgranat, aromatičan ili heterocikličan. Stručnjak može lako da identifikuje pogodne bočne lance.
[0146] Poželjno, navedeni veznik ima formulu:
-G-D-(Z)p-S-Z'
gde
G je jednostruka ili dvostruka veza, -O-, -S- ili -NR-;
D je jednostruka veza OR-E-, -E-NR-, -E-NR-F-, -E-O-, -E-O-F-, -E-NR-CO-, -E-NR-CO-F-, -E-CO-, -CO-E-, -E-CO-F, -E-S-, -E-S-F-, -E-NR-C-S-, `-E-NR-CS-F-;
gde E i F su isti ili različiti i nezavisno su izabrani od ravnog ili razgranatog -(OCH2CH2)iAlkil(OCH2CH2)j-, -Alkil(OCH2CH2)i-Alkil-, -(OCH2CH2)i-, -(OCH2CH2)iCikloalkil(OCH2CH2)j-, -(OCH2CH2)iHeterociklični(OCH2CH2)j-, (OCH2CH2)iAril(OCH2CH2)j-, -(OCH2CH2)iHeteroaril(OCH2CH2)j-, -Alkil-(OCH2CH2)iAlkil(OCH2CH2)j-, -Alkil-(OCH2CH2)i-, -Alkil-(OCH2CH2)iCikloalkil(OCH2CH2)j-, -Alkil(OCH2CH2)iHeterociklični(OCH2CH2)j-, -Alkil-(OCH2CH2)iAril(OCH2CH2)j-, -Alkil(OCH2CH2)iHeteroaril(OCH2CH2)j-, -cikloalkil-Alkil-, -Alkil-cikloalkil-, -Heterociklični-Alkil-, -Alkil-Heterociklični-, -AlkilAril-, -Aril-Alkil-, -Alkil-Heteroaril-, -Heteroaril-Alkil-;
gde su i i j, isti ili različiti celi brojevi i nezavisno su izabrani od 0, 1 do 2000;
Z je ravni ili razgranati -Alkil-;
p je 0 ili 1;
Z' predstavlja H, tiol zaštitnu grupu kao što je COR, R20 ili SR20, gde R20 predstavlja H, metil, Alkil, opciono supstituisani cikloalkil, aril, heteroaril ili heterociklični, uz uslov da kada Z' je H, navedeno jedinjenje je u ravnoteži sa odgovarajućim jedinjenjem formiranim intramolekularnom ciklizacijom što rezultuje dodavanjem tiol grupe -SH na iminsku vezu -NH= jednog od PBD delova.
▪ n, n', isto ili različito su 0 ili 1.
▪ q je 0, 1 ili 2.
▪ R, R' su isti ili različiti i nezavisno su izabrani od H, Alkil, Aril, od kojih je svaki opciono supstituisan sa Hal, CN, NRR', CF3, R, ili, S(O)qR, Aril, Het;
ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, hidrati, ili hidratisane soli, ili polimorfne kristalne strukture ovih jedinjenja ili njihovi optički izomeri, racemati, dijastereomeri ili enantiomeri.
[0147] Jedinjenja opšte formule (XII) koja imaju geometrijske i stereoizomere su takođe deo pronalaska.
[0148] Poznato je da je dvostruka veza N-10, C-11 derivata tomaimicina formule (XII) lako konvertibilna na reverzibilni način u odgovarajuće adicione imine u prisustvu vode, alkohola, tiola, primarnog ili sekundarnog amina, urea i drugih nukleofila. Ovaj proces je reverzibilan i
4
može lako regenerisati odgovarajuće derivate tomaimicina u prisustvu agensa za dehidrataciju, u neprotonskom organskom organu, u vakuumu ili na visokim temperaturama (Z. Tozuka, 1983, J. Antibiotics, 36: 276).
[0149] Prema tome, reverzibilni derivati derivata tomaimicina opšte formule (XIII) mogu se takođe koristiti u ovom pronalasku:
gde su A, X, Y, n, T, A', X', Y', n', R1, R2, R1', R2' definisani kao u formuli (XII) i W, W' su isti ili različiti i su izabran su iz grupe koju čine OH, etar kao što je -OR, ester (npr. acetat), kao što je -OCOR, -COOR, karbonat kao što je -OCOOR, karbamat kao što je -OCONRR', ciklični karbamat, tako da su N10 i C11 deo cikla, urea kao što je -NRCONRR', tiokarbamat kao što je -OCSNHR, ciklični tiokarbamat tako da su N10 i C11 deo cikla, -SH, sulfid kao što je -SR, sulfoksid kao što je -SOR, sulfon kao što je - SOOR, sulfonat kao što je -SO3-, sulfonamid kao što je -NRSOOR, amin kao što je -NRR', opciono ciklični amin tako da su N10 i C11 deo cikla, hidroksilamin derivat kao što je -NROR', amid kao što je -NRCOR, -NRCONRR', azido kao što je -N3, cijano, halo, trialkil ili triarilfosfonium, aminokiselinaizvedena grupa. Poželjno, W i W' su isti ili različiti i oni su OH, Ome, Oet, NHCONH2, SMe.
[0150] Jedinjenja formule (XIII) se stoga mogu smatrati solvatima, uključujući vodu kada je rastvarač voda; ovi solvati mogu biti posebno korisni.
[0151] U poželjnom otelotvorenju, derivati tomaimicina pronalaska su izabrani iz grupe koju čine:
8,8'-[1,3-benzendiilbis(metilenoksi)]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-metoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on]
8,8'-[5-metoksi-1,3-benzendiilbis(metilenoksi)]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-metoksi-1,2,3,11atetrahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on]
8,8'-[1,5-pentandiilbis(oksi)]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-metoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on]
8,8'-[1,4-butanediilbis(oksi)]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-metoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on]
8,8'-[3-metil-1,5-pentandiilbis(oksi)]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-metoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on]
8,8'-[2,6-piridinediilbis(oksi)]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-metoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on]
8,8'-[4-(3-terc-butoksikarbonilaminopropiloksi)-2,6-piridinediilbis-(metilenoksi)]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-metoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] 8,8'-[5-(3-aminopropiloksi)-1,3-benzendiilbis(metilenoksi)]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-metoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on]
8,8'-[5-(N-metil-3-terc-butoksikarbonilaminopropil)-1,3-benzendiilbis-(metilenoksi)]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-metoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] 8,8'-{5-[3-(4-metil-4-metildisulfanil-pentanoilamino)propiloksi]-1,3-benzendiilbis(metilenoksi)}-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-metoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on]
8,8'-[5-acetiltiometil-1,3-benzendiilbis(metilenoksi)]-bis[(S)-2-metilen-7-metoksi-1,2,3,11atetrahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on]
bis-{2-[(S)-2-metilen-7-metoksi-5-okso-1,3,,11a-tetrahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-8-iloksi]-etil}-karbaminska kiselina terc-butil ester
8,8'-[3-(2-acetiltioetil)-1,5-pentandiilbis(oksi)]-bis[(S)-2-metilen-7-metoksi-1,2,3,11atetrahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on]
8,8'-[5-(N-4-mercapto-4,4-dimetilbutanoil)amino-1,3-benzendiilbis(metilenoksi)]-bis[7-metoksi-2-metilen-1,2,3,11a-tetrahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on]
8,8'-[5-(N-4-metilditio-4,4-dimetilbutanoil)-amino-1,3-benzendiilbis(metilenoksi)]-bis[7-metoksi-2-metilen-1,2,3,11a-tetrahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on]
8,8'-[5-(N-metil-N-(2-mercapto-2,2-dimetiletil)amino-1,3-benzendiil(metilenoksi)]-bis[7-metoksi-2-metilen-1,2,3,11a-tetrahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on]
8,8'-[5-(N-metil-N-(2-metilditio-2,2-dimetiletil)amino-1,3-benzendiil(metilenoksi)]-bis[7-metoksi-2-metilen-1,2,3,11a-tetrahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on]
8,8'-[(4-(2-(4-mercapto-4-metil)-pentanamido-etoksi)-piridin-2,6-dimetil)-dioksi]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-dimetoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] 8,8'-[(1-(2-(4-metil-4-metildisulfanil)-pentanamido-etoksi)-benzen-3,5-dimetil)-dioksi]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-dimetoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] 8,8'-[(4-(3-(4-metil-4-metildisulfanil)-pentanamido-propoksi)-piridin-2,6-dimetil)-dioksi]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-dimetoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-pirolo[2,1-c][1,4] benzodiazepin-5-on]
4
8,8'-[(4-(4-(4-metil-4-metildisulfanil)-pentanamido-butoksi)-piridin-2,6-dimetil)-dioksi]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-dimetoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] 8,8'-[(4-(3-[4-(4-metil-4-metildisulfanil-pentanoil)-piperazin-1-il]-propil)-piridin-2,6-dimetil)-dioksi]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-dimetoksi-1,2,3,11a-tetrahidropirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on]
8,8'-[(1-(3-[4-(4-metil-4-metildisulfanil-pentanoil)-piperazin-1-il]-propil)-benzen-3,5-dimetil)-dioksi]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-dimetoksi-1,2,3,11a-tetrahidropirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on]
8,8'-[(4-(2-{2-[2-(4-metil-4-metildisulfanil-pentanoilamino)-etoksi]-etoksi}-etoksi)-piridin-2,6-dimetil)-dioksi]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-dimetoksi-1,2,3,11a-tetrahidropirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on]
8,8'-[(1-(2-{2-[2-(2-{2-[2-(4-metil-4-metildisulfanil-pentanoilamino)-etoksi]-etoksi}-etoksi)-etoksi]-etoksi}-etoksi)-benzen-3,5-dimetil)-dioksi]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-dimetoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on]
8,8'-[(1-(2-{2-[2-(4-metil-4-metildisulfanil-pentanoilamino)-etoksi]-etoksi}-etoksi)-benzen-3,5-dimetil)-dioksi]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-dimetoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on]
8,8'-[(4-(2-{2-[2-(2-{2-[2-(4-metil-4-metildisulfanil-pentanoilamino)-etoksi]-etoksi}-etoksi)-etoksi]-etoksi}-etoksi)-piridin-2,6-dimetil)-dioksi]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-dimetoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on]
8,8'-[(1-(2-[metil-(2-metil-2-metildisulfanil-propil)-amino]-etoksi)-benzen-3,5-dimetil)-dioksi]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-dimetoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on]
8,8'-[(4-(3-[metil-(4-metil-4-metildisulfanil-pentanoil)-amino]-propil)-piridin-2,6-dimetil)-dioksi]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-dimetoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on]
8,8'-[(4-(3-[metil-(2-metil-2-metildisulfanil-propil)-amino]-propil)-piridin-2,6-dimetil)-dioksi]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-dimetoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on]
8,8'-[(1-(4-metil-4-metildisulfanil)-pentanamido)-benzen-3,5-dimetil)-dioksi]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-dimetoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on]
kao i odgovarajući derivati merkapta, ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, hidrati, ili hidratisane soli, ili polimorfne kristalne strukture ovih jedinjenja ili njihovi optički izomeri, racemati, dijastereomeri ili enantiomeri.
4
[0152] Poželjna jedinjenja imaju sledeće formule:
ili
gde su X, X', A, A', Y, Y', T, n, n' kako je definisano iznad.
[0153] Jedinjenja formule (XII) mogu biti pripremljena na brojne načine koji su dobro poznati stručnjacima. Jedinjenja se mogu sintetisati, na primer, primenom ili adaptacijom postupaka koji su opisani u daljem tekstu, ili njihovim varijacijama, kao što je procenjeno od strane stručnjaka. Odgovarajuće modifikacije i supstitucije će biti lako uočljive i dobro poznate ili lako dostupne iz naučne literature stručnjaku u ovoj oblasti. Konkretno, takvi postupci se mogu naći u R.C. Larock, Comprehensive Organic Transformations, Wiley-VCH Publishers, 1999.
[0154] Postupci za sintezu derivata tomaimicina koji se mogu koristiti u pronalasku su opisani u Međunarodna prijava br. PCT/IB2007/000142. Jedinjenja predmetnog pronalaska mogu biti pripremljena različitim putevima sinteze. Reagensi i polazni materijali su komercijalno dostupni, ili se lako sintetišu dobro poznatim tehnikama od strane stručnjaka u ovoj oblasti (pogledati, na primer, WO 00/12508, WO 00/12507, WO 2005/040170, WO 2005/085260, FR1516743, M. Mori i dr., 1986, Tetrahedron, 42: 3793-3806).
[0155] Konjugovani molekuli pronalaska mogu biti formirani korišćenjem bilo koje tehnike. Derivati tomaimicina predmetnog pronalaska mogu biti povezani sa antitelom ili drugim agensom za vezivanje ćelija preko povezivača koji je labilan na kiselinu, ili pomoću fotolabilnog veznika. Derivati se mogu kondenzovati sa peptidom koji ima pogodnu sekvencu i zatim vezati za agens za vezivanje ćelija kako bi se dobio veznik koji je labilan na peptidazu. Konjugati se mogu pripremiti tako da sadrže primarnu hidroksilnu grupu, koja može biti sukcinilovana i povezana sa agensom za vezivanje ćelija kako bi se proizveo konjugat koji se može razdvojiti intracelularnim esterazama kako bi se oslobodio slobodni derivat. Poželjno, derivati su sintetizovani tako da sadrže slobodnu ili zaštićenu tiolnu grupu, i onda je jedan ili
4
više derivata koji sadrže disulfid ili tiol svaki kovalentno vezan za agens za vezivanje ćelija preko disulfidne veze ili tioetarske veze.
[0156] Brojni postupci konjugacije razmatraju se u USP 5,416,064 i USP 5,475,092. Derivati tomaimicina mogu se modifikovati kako bi se dobila slobodna amino grupa i zatim vezala za antitelo ili drugo agens za vezivanje ćelija preko kiselinski labilnog veznika ili foto-labilnog veznika. Derivati tomaimicina sa slobodnom amino ili karboksilnom grupom mogu biti kondenzovani sa peptidom i zatim povezani sa agensom za vezivanje ćelija kako bi se proizveo labilni peptidazni veznik. Derivati tomaimicina sa slobodnom hidroksilnom grupom na vezniku mogu biti sukcinilovani i vezani za agens za vezivanje ćelija kako bi se proizveo konjugat koji se može razdvojiti intracelularnim esterazama radi oslobađanja slobodnog leka. Najpoželjnije, derivati tomaimicina se tretiraju kako bi se dobila slobodna ili zaštićena tiol grupa, i zatim se dimeri tomaimicina koji sadrže disulfid ili tiol vezuju za agens za vezivanje ćelija preko disulfidnih veza.
[0157] Poželjno, konjugati monoklonskih antitela ili agenasa za vezivanje ćelija derivata tomaimicina su oni koji su spojeni preko disulfidne veze, kao što je gore razmotreno, koji su sposobni da isporuče derivate tomaimicina. Takvi konjugati vezivanja ćelija su pripremljeni poznatim postupcima kao što su modifikovanje monoklonskih antitela sa sukcinimidil piridilditiopropionatom (SPDP) (Carlsson i dr., 1978, Biochem. J., 173: 723-737). Dobijena tiopiridil grupa je zatim zamenjena tretmanom sa derivatima tomaimicin koji sadrže tiol kako bi se proizveli disulfidno povezani konjugati. Alternativno, u slučaju arilditio derivata tomaimicina, formiranje konjugata za vezivanje ćelija vrši se direktnim istiskivanjem aril-tiola derivata tomaimicina pomoću sulfhidrilnih grupa koje su prethodno uvedene u molekule antitela. Konjugati koji sadrže 1 do 10 lekova derivata tomaimicina, koji su povezani preko disulfidnog mosta, lako se dobijaju bilo kojim postupkom.
[0158] Specifičnije, rastvor ditio-nitropiridil modifikovanog antitela u koncentraciji od 2,5 mg/ml u 0,05 M kalijum fosfatnom puferu, pri pH 7,5 koji sadrži 2 mM EDTA tretira se sa derivatom tomaimicina koji sadrži tiol (1,3 mol ekv./ditiopiridil grupa). Oslobađanje tionitropiridina iz modifikovanog antitela se prati spektrofotometrijski na 325 nm i završava se za oko 16 sati. Konjugat derivata antitela i tomaimicina se prečišćava i uklanja se nereagovan lek i drugi materijali niske molekulske mase gel filtracijom kroz kolonu od Sephadex G-25 ili Sephacryl S300. Broj delova derivata tomaimicina vezanih za molekul antitela može se
4
odrediti merenjem odnosa apsorbancije na 230 nm i 275 nm. Prosek od 1-10 molekula derivata tomaimicina/molekula antitela može se povezati preko disulfidnih veza ovim postupkom.
[0159] Efekat konjugacije na afinitet vezivanja prema ćelijama koje eksprimiraju antigen može se odrediti upotrebom postupaka prethodno opisanih kod Liu i dr., 1996, Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A., 93: 8618-8623. Citotoksičnost derivata tomaimicina i njihovih konjugata antitela na ćelijske linije može se meriti povratnom ekstrapolacijom kriva ćelijske proliferacije kao što je opisano u Goldmacher i dr., 1985, J. Immunol., 135: 3648-3651. Citotoksičnost ovih jedinjenja prema adherentnim ćelijskim linijama može se odrediti klonogenim testovima kao što je opisano kod Goldmacher i dr., 1986, J. Cell Biol., 102: 1312-1319.
DERIVATI LEPTOMICINA
[0160] Citotoksičnost prema ovom pronalasku može takođe da bude derivat leptomicina. Prema ovom pronalasku, „derivati leptomicina“ se odnose na članove porodice leptomicina kao što je definisano kod Kalesse i dr. (2002, Synthesis 8: 981-1003), i uključuju: leptomicine, kao što su leptomicin A i leptomicin B, kalistatine, ratjadone kao što su ratjadon A i ratjadon B, anguinomicine kao što su anguinomicini A, B, C, D, kasusamicini, leptolstatin, leptofuranine, kao što su leptofuranin A, B Derivati leptomicina A i B su poželjni.
[0161] Specifičnije, derivati pronalaska imaju formulu (I):
gde
Ra i Ra' su H ili -Alk; poželjno Ra je -Alk, poželjno metil i Ra' je H ;
R17 je alkil opciono supstituisan sa OR, CN, Nr', perfluoroalkilom; poželjno, R17 je alkil, još poželjnije metil ili etil;
4
R9 je alkil opciono supstituisan sa OR, CN, Nr', perfluoroalkilom; poželjno, R9 je alkil, još poželjnije metil;
X je -O- ili -NR-; poželjno, X je -NR-;
Y je -U-, -NR-U-, -O-U-, -NR-CO-U-, -U-NR-CO-, -U-CO-, -CO-U- ;
poželjno, kada X je -O-, Y je -U-, -NR-U-, -U-NR-CO-;
gde U je izabran od ravnog ili razgranatog -Alk-, -Alk(OCH2CH2)m-, -(OCH2CH2)m-Alk-, -Alk(OCH2CH2)m-Alk-, -(OCH2CH2)m-, -cikloalkil-, -Heterociklični-, -cikloalkil-Alk-, -Alkcikloalkil-, -Heterociklični-Alk-, -Alk-Heterociklični-;
gde m je ceo broj izabran od 1 do 2000;
poželjno, U je ravni ili razgranati -Alk-,
Z je -Alk-;
n je 0 ili 1; poželjno n je 0;
T predstavlja H, tiol zaštitnu grupu kao što je Ac, R1ili SR1, gde R1predstavlja H, metil, Alk, cikloalkil, opciono supstituisani aril ili heterociklični, ili T predstavlja
gde:
Ra, Ra', R17, R9, X, Y, Z, n su kako je definisano iznad;
poželjno, T je H ili SR1, gde R1predstavlja Alk, još poželjnije metil;
R, R' isti ili različiti su H ili alkil;
Alk predstavlja ravni ili razgranati alkil; poželjno Alk predstavlja (-(CH2-q(CH3)q)p-gde p predstavlja ceo broj od 1 do 10; i q predstavlja ceo broj od 0 do 2; poželjno, Alk predstavlja (CH2)- ou -C(CH3)2-.
ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, hidrati, ili hidratisane soli, ili polimorfne kristalne strukture ovih jedinjenja ili njihovi optički izomeri, racemati, dijastereomeri ili enantiomeri.
[0162] Poželjna jedinjenja mogu biti izabrana iz grupe koju čine:
(2-Metilsulfanil-etil)-amid od (2E, 10E, 12E, 16Z, 18E)-(R)-6-hidroksi-3,5, 7,9,11,15,17-heptametil-19-((2S,3S)-3-metil-6-okso-3,6-dihidro-2H-piran-2-il)-8-okso-nonadeka-2,10,12,16,18-pentaenoinska kiselina
Bis-[(2-merkaptoetil)-amid od (2E,10E,12E,16Z,18E)-(R)-6-hidroksi-3,5, 7,9,11,15,17-heptametil-19-((2S,3S)-3-metil-6-okso-3,6-dihidro-2H-piran-2-il)-8-okso-nonadeka-2,10,12,16,18-pentaenoinska kiselina]
(2-merkapto-etil)-amid od (2E,10E,12E,16Z,18E)-(R)-6-hidroksi-3,5,7,9,11, 15,17-heptametil-19-((2S,3S)-3-metil-6-okso-3,6-dihidro-2H-piran-2-il)-8-okso-nonadeka-2,10,12,16,18-pentaenoinska kiselina
(2-Metildisulfanil-etil)-amid od (2E, 10E, 12E, 16Z, 18E)-(R)-6-hidroksi-3,5, 7,9,11,15,17-heptametil-19-((2S,3S)-3-metil-6-okso-3,6-dihidro-2H-piran-2-il)-8-okso-nonadeka-2,10,12,16,18-pentaenoinska kiselina
(2-Metil-2-metildisulfanil-propil)-amid od (2E, 10E, 12E, 16Z, 18E)-(R)-6-hidroksi-3,5,7,9,11,15,17-heptametil-19-((2S,3S)-3-metil-6-okso-3,6-dihidro-2H-piran-2-il)-8-oksononadeka-2,10,12,16,18-pentaenoinska kiselina
(2-merkapto-2-metil-propil)-amid od (2E,10E,12E,16Z,18E)-(R)-6-hidroksi-3,5,7,9,11,15,17-heptametil-19-((2S,3S)-3-metil-6-okso-3,6-dihidro-2H-piran-2-il)-8-okso-nonadeka-2,10,12,16,18-pentaenoinska kiselina
ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, hidrati, ili hidratisane soli, ili polimorfne kristalne strukture ovih jedinjenja ili njihovi optički izomeri, racemati, dijastereomeri ili enantiomeri.
1
[0163] Kako bi se derivat povezao sa agensom koji se vezuje za ćelije, derivat mora da sadrži deo (vezujuću grupu) koji omogućava da se derivati povežu sa agensom za vezivanje ćelija preko veze kao što je disulfidna veza, sulfid (ili nazvan ovde tioeter), kiselinsko-labilnu grupu, foto-abilnu grupu, peptidazno-labilnu grupu, ili esterazno-labilnu grupu. Derivati se pripremaju tako da sadrže deo koji je potreban za vezivanje derivata leptomicina za agens za vezivanje ćelija preko, na primer, disulfidne veze, tioetarske veze, kiselinsko-labilne grupe, foto-labilne grupe, peptidazno-labilne grupe, ili esterazno-labilne grupe. Kako bi se dalje povećala rastvorljivost u vodenim rastvorima, vezujuća grupa može da sadrži polietilen glikol razmaknicu. Poželjno je da se koristi sulfidna ili disulfidna veza, jer redukciono okruženje ciljane ćelije dovodi do odvajanja sulfida ili disulfida i oslobađanja derivata sa povezanim povećanjem citotoksičnosti.
[0164] Jedinjenja predmetnog pronalaska mogu biti pripremljena različitim putevima sinteze. Reagensi i polazni materijali su komercijalno dostupni ili se lako sintetišu dobro poznatim tehnikama od strane uobičajenog stručnjaka. Postupci za sintezu derivata leptomicina koji se mogu koristiti u citotoksičnim konjugatima predmetnog pronalaska, zajedno sa postupcima za konjugaciju navedenih derivata leptomicina sa agensima za vezivanje ćelija kao što su antitela, detaljno su opisani u Evropskoj prijavi patentabr.06290948,6.
CC-1065 ANALOZI
[0165] Citotoksični agens koji se koristi u citotoksičnim konjugatima u skladu sa ovim pronalaskom može takođe biti CC-1065 ili njegov derivat.
[0166] CC-1065 je snažan anti-tumorski antibiotik izolovan iz kulture Streptomyces zelensis. CC-1065 je oko 1000 puta jači in vitro nego lekovi protiv raka koji se obično koriste, kao što su doksorubicin, metotreksat i vinkristin (B.K. Bhuyan i dr., 1982, Cancer Res., 42, 3532-3537). CC-1065 i njegovi analozi su obelodanjeni u U.S. Patent Nos.6,372,738, 6,340,701, 5,846,545 i 5,585,499.
[0167] Citotoksična potencija CC-1065 je u korelaciji sa njegovom alkilacionom aktivnošću i njenom DNK-vezujućom ili DNK-interkalacionom aktivnosti. Ove dve aktivnosti se nalaze u odvojenim delovima molekula. Prema tome, aktivnost alkilovanja je sadržana u podjedinici ciklopropapiroloindola (CPI), i aktivnost vezivanja DNK leži u dve piroloindolske
2
podjedinice.
[0168] Iako CC-1065 ima određene atraktivne karakteristike kao citotoksični agens, on ima ograničenja u terapijskoj upotrebi. Primena CC-1065 miševima je izazvala odloženu hepatotoksičnost koja je dovela do smrtnosti na dan 50 nakon jedne intravenske doze od 12,5 µg/kg (V. L. Reynolds i dr., 1986, J. Antibiotics, XXIX: 319-334). Ovo je podstaklo napore da se razviju analozi koji ne izazivaju odloženu toksičnost, i opisana je sinteza jednostavnijih analoga modelovanih na CC-1065 (M.A. Warpehoski i dr., 1988, J. Med. Chem., 31: 590-603).
[0169] U drugom nizu analoga, CPI grupa je zamenjena sa ciklopropabenzindol (CBI) delom (D.L. Boger i dr., 1990, J. Org. Chem., 55: 5823-5833; D.L. Boger i dr., 1991, BioOrg. Med. Chem. Lett., 1: 115-120). Ova jedinjenja održavaju visok nivo in vitro potentnosti roditeljskog leka, bez izazivanja odložene toksičnosti kod miševa. Kao i CC-1065, ova jedinjenja su alkilirajući agensi koji se vezuju za manji kanal DNK na kovalentan način da izazovu ćelijsku smrt. Međutim, klinička procena najperspektivnijih analoga, Adozelesina i Carzelesina, dovela je do razočaravajućih rezultata (B.F. Foster i dr., 1996, Investigational New Drugs, 13: 321-326; I. Wolff i dr., 1996, Clin. Cancer Res., 2: 1717-1723). Ovi lekovi pokazuju slab terapijski efekat zbog svoje visoke sistemske toksičnosti.
[0170] Terapeutska efikasnost CC-1065 analoga može se značajno poboljšati promenom in vivo distribucija kroz ciljanu isporuku na mesto tumora, što dovodi do niže toksičnosti za neciljana tkiva, i samim tim, niže sistemske toksičnosti. Kako bi se postigao ovaj cilj, opisani su konjugati analoga i derivata CC-1065 sa agensima koji vezuju ćelije koji specifično ciljaju tumorske ćelije (US Patents; 5,475,092; 5,585,499; 5,846,545). Ovi konjugati tipično pokazuju visoku ciljano specifičnu citotoksičnost in vitro, i izuzetnu anti-tumorsku aktivnost u modelima ksenografta ljudskog tumora kod miševa (R.V. J. Chari i dr., 1995, Cancer Res., 55: 4079-4084).
[0171] Nedavno su opisani prolekovi CC-1065 analoga sa povećanom rastvorljivošću u vodenoj sredini (Evropska prijava patenta br.06290379,4). U ovim prolekovima, fenolna grupa alkilujućeg dela molekula je zaštićena sa funkcionalnošću koja čini lek stabilnim prilikom skladištenja u kiselom vodenom rastvoru, i daje povećanu rastvorljivost u vodi leku u poređenju sa nezaštićenim analogom. Zaštitna grupa se lako cepa in vivo pri fiziološkom pH kako bi se dobio odgovarajući aktivni lek. U prolekovima opisanim u EP 06290379,4, fenolni supstituent je zaštićen kao sulfonska kiselina koja sadrži fenil karbamat koji poseduje punjenje na fiziološkom pH, i tako ima povećanu rastvorljivost u vodi. Kako bi se dodatno povećala rastvorljivost u vodi, može se uvesti opciona polietilen glikol razmaknica u veznik između podjedinice indolila i razdvojive veze kao što je disulfidna grupa. Uvođenje ove razmaknice ne menja potenciju leka.
[0172] Postupci za sintezu CC-1065 analoga koji se mogu koristiti u citotoksičnim konjugatima predmetnog pronalaska, zajedno sa postupcima za konjugaciju analoga u agensima za vezivanje ćelija kao što su antitela, detaljno su opisani u EP 06290379,4) i U.S. Patent Nos.5,475,092, 5,846,545, 5,585,499, 6,534,660 i 6,586,618, i u U.S. Prijave br.
10/116,053 i 10/265,452.
DRUGI LEKOVI
[0173] Lekovi kao metotreksat, daunorubicin, doksorubicin, vinkristin, vinblastin, melfalan, mitomicin C, hlorambucil, kalicheamicin, tubulizin i analozi tubulizina, duokarmicin i analozi duokarmicina, dolastatin i analozi dolastatina su takođe pogodni za dobijanje konjugata predmetnog pronalaska. Molekuli leka se takođe mogu vezati za molekule antitela preko posredničkog molekula nosača kao što je serumski albumin. Doxarubicin i Danorubicin jedinjenja, kao što je opisano, na primer, u U.S. Serijski br.09/740991, takođe mogu biti korisni citotoksični agensi.
TERAPEUTSKI SASTAV
[0174] Pronalazak se takođe odnosi na terapeutski sastav za tretmane hiperproliferativnog poremećaja ili upalne bolesti ili autoimune bolesti kod sisara, koji sadrži terapeutski efikasnu količinu jedinjenja pronalaska i farmaceutski prihvatljiv nosač. U jednom otelotvorenju navedeni farmaceutski sastav je za tretmane raka, uključujući (ali ne ograničavajući se na) B-ćelijski limfom i multipli mijelom.
[0175] Predmetni pronalazak pruža farmaceutske sastave koji sadrže:
a) efikasnu količinu antitela ili konjugata antitela predmetnog pronalaska, i;
b) farmaceutski prihvatljiv nosač, koji može biti inertan ili fiziološki aktivan.
4
[0176] Kad se ovde koristi, „farmaceutski prihvatljivi nosači“ uključuju bilo koji i sve rastvarače, disperzione medijume, premaze, antibakterijske i antifungalne agense, i slično, koji su fiziološki kompatibilni. Primeri pogodnih nosača, razblaživača i/ili ekscipijenata uključuju jedno ili više od vode, slanog rastvora, fosfatnog pufera, dekstroze, glicerola, etanola i slično, kao i njihove kombinacije. U mnogim slučajevima, poželjno je u sastav uključiti izotonične agense, kao što su šećeri, polialkoholi ili natrijum hlorid. Naročito, relevantni primeri pogodnog nosača obuhvataju: (1) Dulbecco-ov fosfatni pufer sa slanim rastvorom, pH 7,4, koji sadrži ili ne sadrži oko 1 mg/ml do 25 mg/ml ljudskog serumskog albumina, (2) 0,9% fiziološki rastvor (0,9% w/v natrijum hlorida (NaCl)), i (3) 5% (w/v) dekstroze; i može takođe da sadrži antioksidant kao što je triptamin i agens za stabilizaciju kao što je Tween 20.
[0177] Sastavi ovde mogu takođe da sadrže dodatni terapeutski agens, kao što je neophodno za određeni poremećaj koji se tretira. Poželjno, antitelo ili konjugat antitela predmetnog pronalaska, i dopunsko aktivno jedinjenje će imati komplementarne aktivnosti, koje ne utiču negativno jedna na drugu. U poželjnom otelotvorenju, dodatni terapeutski agens je antagonist faktora epidermalnog rasta (EGF), faktora rasta fibroblasta (FGF), faktora rasta hepatocita (HGF), faktora tkiva (TF), proteina C, proteina S, faktora rasta izvedenog iz trombocita (PDGF), heregulina, makrofagom stimulišućeg proteina (MSP) ili vaskularnog endotelnog faktora rasta (VEGF), ili antagonist receptora faktora epidermalnog rasta (EGF), faktora rasta fibroblasta (FGF), faktora rasta hepatocita (HGF), faktora tkiva (TF), proteina C, proteina S, faktora rasta izvedenog iz trombocita (PDGF), heregulina, makrofagom stimulišućeg proteina (MSP) ili vaskularnog endotelnog faktora rasta (VEGF), uključujući HER2 receptor, HER3 receptora, c-MET, i druge receptore tirozin kinaza. U poželjnom otelotvorenju, dodatni terapeutski agens je antitelo usmereno na klastere antigena diferencijacije (CD), uključujući CD3, CD14, CD19, CD20, CD22, CD25, CD28, CD30, CD33, CD36, CD40, CD44, CD52, CD55, CD59, CD56, CD70, CD79, CD80, CD103, CD134, CD137, CD138, i CD152. U poželjnom otelotvorenju, dodatni terapeutski agens je hemoterapijski ili imunomodulatorni agens.
[0178] Sastavi pronalaska mogu biti u različitim oblicima. Oni uključuju, na primer, tečne, polučvrste i čvrste oblike doziranja, ali poželjan oblik zavisi od nameravanog načina primene i terapijske primene. Tipični poželjni sastavi su u obliku injektabilnih ili infuzibilnih rastvora. Poželjan način primene je parenteralni (npr. intravenozno, intramuskularno, intraperinonealno, subkutano). U poželjnom otelotvorenju, sastavi pronalaska se daju intravenski kao bolus ili kontinuiranom infuzijom tokom određenog vremenskog perioda. U sledećem poželjnom otelotvorenju, oni se injektiraju intramuskularnim, subkutanim, intraartikularnim, intrasinovijalnim, intratumoralnim, peritumoralnim, intralesionalnim ili perilezionim putevima, kako bi se ostvarili lokalni i sistemski terapeutski efekti.
[0179] Sterilni sastavi za parenteralnu primenu mogu da se pripreme uključivanjem antitela ili konjugata antitela predmetnog pronalaska u potrebnoj količini u odgovarajući rastvarač, nakon čega sledi sterilizacija mikrofiltracijom. Kao rastvarač ili nosač, mogu se koristiti voda, slani rastvor, fosfatno puferisani rastvor soli, dekstroza, glicerol, etanol i slično, kao i njihove kombinacije. U mnogim slučajevima, poželjno je u sastav uključiti izotonične agense, kao što su šećeri, polialkoholi ili natrijum hlorid. Ovi sastavi mogu takođe da sadrže adjuvanse, naročito agense za vlaženje, izotonizaciju, emulgovanje, dispergovanje i stabilizaciju. Sterilni sastava za parenteralnu primenu mogu takođe biti pripremljeni u obliku sterilnih čvrstih sastava koji se mogu rastvoriti za vreme upotrebe u sterilnoj vodi ili bilo kom drugom injektabilnom sterilnom medijumu.
[0180] Antitelo ili konjugat antitela prema predmetnom pronalasku mogu se takođe primeniti oralno. Kao čvrsti sastava za oralno davanje mogu se koristiti tablete, pilule, prašci (želatinske kapsule, kesice) ili granule. U ovim sastavima, aktivni sastojak prema pronalasku je pomešan sa jednim ili više inertnih razblaživača, kao što su skrob, celuloza, saharoza, laktoza ili silicijum, pod protokom argona. Ovi sastavi mogu takođe da sadrže supstance koje nisu rastvarači, na primer jedan ili više lubrikanata kao što su magnezijum stearat ili talk, boja, obloga (tableta obložena šećerom) ili glazura.
[0181] Kao tečni sastavi za oralnu primenu, mogu se koristiti farmaceutski prihvatljivi rastvori, suspenzije, emulzije, sirupi i eliksiri koji sadrže inertne razblaživače kao što su voda, etanol, glicerol, biljna ulja ili parafinsko ulje. Ovi sastavi mogu da sadrže supstance koje nisu rastvarači, na primer, agense za vlaženje, zaslađivanje, zgušnjavanje, arome ili stabilizovanje.
[0182] Doze zavise od željenog efekta, trajanja tretmana i puta primene; one su obično između 5 mg i 1000 mg dnevno oralno za odrasle osobe sa jediničnim dozama u rasponu od 1 mg do 250 mg aktivne supstance. Generalno, lekar će odrediti odgovarajuću dozu u zavisnosti od starosti, težine i svih drugih faktora specifičnih za pacijent koji se leči.
TERAPIJSKI POSTUPCI UPOTREBE
[0183] Ovde je opisan postupak za ubijanje CD38<+>ćelije primenom pacijentu kom je to potrebno, antitela koje vezuje navedeni CD38 i koje je u stanju da ubije pomenute CD38<+>ćelije pomoću apoptoze, ADCC i/ili CDC. Bilo koji tip antitela ili citotoksičnih konjugata pronalaska mogu se koristiti terapeutski. Pronalazak tako obuhvata upotrebu anti-CD38 monoklonskih antitela ili njihovih citotoksičnih konjugata kao lekova.
[0184] U poželjnom otelotvorenju, antitela ili citotoksični konjugati pronalaska se koriste za tretmane hiperproliferativnog poremećaja ili upalne bolesti ili autoimune bolesti kod sisara. U poželjnijem otelotvorenju, jedan od gore opisanih farmaceutskih sastava, koji sadrži antitelo ili citotoksični konjugat pronalaska, koristi se za tretman hiperproliferativnog poremećaja kod sisara. U jednom otelotvorenju, poremećaj je rak. Konkretno, rak je metastatski rak.
[0185] Prema tome, farmaceutski sastavi pronalaska su korisni u tretmanu ili prevenciji raznih vrsta raka, uključujući (ali ne ograničavajući se na) B-ćelijski limfom i multipli mijelomu. Druge bolesti uključuju sledeće: rak, uključujući onaj bešike, dojke, debelog creva, bubrega, jetre, pluća, jajnika, pankreasa, stomaka, grlića materice, štitne žlezde i kože; uključujući rak skvamoznih ćelija; hematopoetske tumori limfoidne linije, uključujući leukemiju, akutnu limfocitnu leukemiju, akutnu limfoblastičnu leukemiju, B-ćelijski limfom, T-ćelijski limfom, Burkitt-ov limfom; hematopoetske tumore mijeloidne linije, uključujući akutne i hronične mijelogene leukemije i promijelocitnu leukemiju; tumore mezenhimalnog porekla, uključujući fibrosarkom i rabdomiosarkom; druge tumore, uključujući melanom, seminom, tetratokarcinom, neuroblastom i gliom; tumore centralnog i perifernog nervnog sistema, uključujući astrocitom, neuroblastom, gliom i švanom; tumore mezenhimalnog porekla, uključujući fibrosarkom, rabdomiosarkom i osteosarkom; i druge tumori, uključujući melanom, kserodermni pigmentosum, keratoaktantom, seminom, folikularni rak tiroidne žlezde i teratokarcinom, i druge vrste raka koje još nisu otkrivene, a u kojima je eksprimiran CD38. Drugi poremećaj su NHL, BL, MM, B-CLL, ALL, TCL, AML, HCL, HL, ili CML, u kojima se eksprimira CD38, i drugi rakovi koji još nisu otkriveni, a u kojima je pretežno eksprimiran CD38. Autoimune bolesti uključuju eritematozni lupus, reumatoidni artritis, multiplu sklerozu, Crohn-ovu bolest, ulcerativni kolitis, gastritis, Hashimoto-v tireoiditis, ankilozantni spondilitis, krioglobulinemični vaskulitis povezan sa hepatitisom C, hronični fokalni encefalitis, bulozni pemfigoid, hemofiliju A, membranoproliferativni glomerulnefritis, Sjogren-ov sindrom, odrasli i juvenilni dermatomiozitis, polimiozitis odraslih, hroničnu urtikariju, primarnu bilijarnu cirozu, idiopatsku trombocitopeničnu purpuru, neuromielitis optica, Graves-ovu bolest distiroida, bulozni pemfigoid, membranoproliferativni glonerulonefritis, Churg-Straussov sindrom i astmu. Drugi poremećaji uključuju, na primer, odbacivanje transplanata, kao što je odbacivanje transplanata bubrega, odbacivanje transplantacije jetre, odbacivanje transplanata pluća, odbacivanje srčanog transplanata i odbacivanje transplanata koštane srži; bolest graft protiv domaćina; virusne infekcije, kao što su mV infekcija, HIV infekcija, AIDS, itd.; i parazitne infekcije, kao što su giardijaza, amoebijaza, šistosomijaza i drugi, kao što je određeno od strane običnog stručnjaka.
[0186] Slično tome, predmetno obelodanjenje pruža postupak za inhibiciju rasta izabranih populacija ćelija, koji se sastoji od dovođenja u dodir ciljanih ćelija ili tkiva koja sadrže ciljane ćelije, sa efikasnom količinom antitela ili konjugata antitela predmetnog pronalaska, ili antitela ili terapeutskog agensa koji sadrže citotoksični konjugat, bilo sam ili u kombinaciji sa drugim citotoksičnim ili terapeutskim agensima. U poželjnom otelotvorenju, dodatni terapeutski agens je antagonist faktora epidermalnog rasta (EGF), faktora rasta fibroblasta (FGF), faktora rasta hepatocita (HGF), faktora tkiva (TF), proteina C, proteina S, faktora rasta izvedenog iz trombocita (PDGF), heregulina, makrofagom stimulišućeg proteina (MSP) ili vaskularnog endotelnog faktora rasta (VEGF), ili antagonist receptora faktora epidermalnog rasta (EGF), faktora rasta fibroblasta (FGF), faktora rasta hepatocita (HGF), faktora tkiva (TF), proteina C, proteina S, faktora rasta izvedenog iz trombocita (PDGF), heregulina, makrofagom stimulišućeg proteina (MSP) ili vaskularnog endotelnog faktora rasta (VEGF), uključujući HER2 receptor, HER3 receptora, c-MET, i druge receptore tirozin kinaza. U poželjnom otelotvorenju, dodatni terapeutski agens je antitelo usmereno na klastere diferencijacije antigena izabrane iz grupe koja uključuje CD3, CD14, CD19, CD20, CD22, CD25, CD28, CD30, CD33, CD36, CD40, CD44, CD52, CD55, CD59, CD56, CD70, CD79, CD80, CD103, CD134, CD137, CD138, i CD152. U poželjnom otelotvorenju, dodatni terapeutski agens je hemoterapijski ili imunomodulatorni agens.
[0187] Postupak za inhibiciju rasta izabranih populacija ćelija može se praktikovati in vitro, in vivo, ili ex vivo. Kad se ovde koristi, „inhibiranje rasta“ označava usporavanje rasta ćelija, smanjenje ćelijske vitalnosti, izazivanje smrti ćelije, liziranje ćelije i izazivanje ćelijske smrti, bilo u kratkom ili dugom vremenskom periodu.
[0188] Primeri in vitro upotrebe uključuju tretmane autologne koštane srži pre njihove transplantacije u istog pacijenta kako bi se ubile obolele ili maligne ćelije; tretman koštane srži pre njene transplantacije kako bi se ubile kompetentne T ćelije i sprečila bolest graft protiv domaćina (GVHD); tretmane ćelijskih kultura kako bi se ubile sve ćelije osim za željene varijante koje ne eksprimiraju ciljani antigen; ili ubiti varijante koje eksprimiraju neželjeni antigen.
[0189] Stanja nekliničke in vitro upotrebe lako određuje običan stručnjak.
[0190] Primeri kliničke ex vivo primene su da se uklone tumorske ćelije ili limfoidne ćelije iz koštane srži pre autologne transplantacije pri tretmanu raka ili u tretmanu autoimunih bolesti, ili da se uklone T ćelije i druge limfoidne ćelije iz autologne ili alogenične koštane srži ili tkiva pre transplantaciju kako bi se sprečila bolest grafta protiv domaćina (GVHD). Tretman se može obaviti na sledeći način. Koštana srž sakupljena je od pacijenta ili drugog pojedinca, i zatim inkubirana u medijumu koji sadrži serum na koji je dodat citotoksični agens iz pronalaska. Koncentracije se kreću od oko 10 uM do 1 pM, tokom oko 30 minuta do oko 48 sati na oko 37°C. Tačne uslove koncentracije i vremena inkubacije, tj. doze, lako određuje običan stručnjak. Nakon inkubacije, ćelije koštane srži se ispiraju sa medijumom koji sadrži serum i vraćaju se pacijentu putem i.v. infuzije prema poznatim postupcima. U okolnostima kada pacijent dobija drugi tretman, kao što je tok ablativne hemoterapije ili zračenje celog tela između vremena prikupljanja koštane srži i reinfuzije tretiranih ćelija, tretirane ćelije koštane srži se čuvaju zamrznute u tečnom azotu koristeći standardnu medicinsku opremu.
[0191] Za kliničku upotrebu in vivo, antitelo ili citotoksični konjugat pronalaska će biti dostavljeni kao rastvori koji su testirani na sterilnost i na nivoe endotoksina. Primeri pogodnih protokola za primenu citotoksičnih konjugata su sledeći. Konjugati se daju nedeljno tokom 4 nedelje kao i.v. bolus svake nedelje. Doze bolusa se daju u 50 do 100 ml normalnog fiziološkog rastvora u koji se može dodati 5 do 10 ml ljudskog serumskog albumina.
Doziranje će biti 10 µg do 100 mg po primeni, i.v. (raspon od 100 ng do 1 mg/kg dnevno). Još poželjnije, doze će biti u rasponu od 50 µg do 30 mg. Najpoželjnije, doze će biti u rasponu od 1 mg do 20 mg. Posle četiri nedelje tretmana, pacijent može nastaviti da prima tretmane na nedeljnoj osnovi. Specifične kliničke protokole u vezi sa načinom davanja, ekscipijensima, diluentima, dozama, vremenima, itd., može odrediti stručnjak u ovoj oblasti, kao što klinička situacija zahteva.
DIJAGNOSTIKA
[0192] Obelodanjena antitela se takođe mogu koristiti za detektovanje CD38 u biološkom uzorku in vitro ili in vivo. Poželjno je da se anti-CD38 antitela kako su obelodanjena koriste in vitro kako bi se odredio nivo CD38 u tkivu ili u ćelijama izvedenim iz tkiva. Poželjno, tkivo je bolesno tkivo. Još poželjnije, tkivo je tumor ili njegova biopsija. Još poželjnije, tkivo ili njegova biopsija se prvo iseku iz pacijenta, i nivoi CD38 u tkivu ili biopsija se zatim mogu odrediti u imunotestu sa antitelima ili fragmentima antitela iz obelodanjenja. Predmetni pronalazak dalje pruža određivanje nivoa CD38 na uzorku tkiva ili njegove biopsije, koji može biti zamrznut ili fiksiran. Isti postupak se može koristiti za određivanje drugih svojstava proteina CD38, kao što su njegovi nivoi na površini ćelija, ili njegova lokalizacija u ćelijama.
[0193] Gore opisani postupak može da se koristi za dijagnostikovanje raka kod pacijenta za koga je poznato, ili za kog se sumnja da ima rak, gde je nivo CD38 izmeren u navedenom pacijentu upoređen sa nivoom normalnog referentnog pacijenta ili standardom. Pomenuti postupak se zatim može koristiti za određivanje da li tumor eksprimira CD38, što može sugerisati da će tumor dobro reagovati na tretman sa antitelima, fragmentima antitela ili konjugatima antitela predmetnog pronalaska. Poželjno, tumor je NHL, BL, MM, B-CLL, ALL, TCL, AML, HCL, HL, ili CML, u kojima se eksprimira CD38, i drugi rakovi koji još nisu otkriveni, a u kojima je pretežno eksprimiran CD38.
[0194] Predmetni pronalazak dalje pruža monoklonska antitela, humanizovana antitela i njihove fragmente koji se vezuju za epitop koji su dalje označeni za upotrebu u istraživačkim ili dijagnostičkim primenama. U poželjnim otelotvorenjima, oznaka je radioaktivna oznaka, fluorofor, hromofor, sredstvo za prikazivanje ili jon metala.
[0195] Takođe je opisan postupak za dijagnostiku u kom se navedena označena antitela ili njihovi fragmenti koji se vezuju za epitop primenjuju kod pacijenta za koga se sumnja da ima rak ili upalnu bolest ili autoimunu bolest, i distribucija oznake unutar tela pacijenta je merena ili nadgledana.
KOMPLET
[0196] Predmetni pronalazak takođe obuhvata komplete, npr., koji sadrže opisani citotoksični konjugat i uputstva za upotrebu citotoksičnog konjugata za ubijanje određenih tipova ćelija. Instrukcije mogu uključivati uputstva za korišćenje citotoksičnih konjugata in vitro, in vivo ili ex vivo.
[0197] Tipično, komplet će imati odeljak koji sadrži citotoksični konjugat. Citotoksični konjugat može biti u liofilizovanom obliku, u tečnom obliku, ili u nekom drugom obliku koji se može uključiti u komplet. Komplet takođe može da sadrži dodatne elemente potrebne za izvođenje postupka opisanog u uputstvima u kompletu, kao što je sterilisani rastvor za rekonstituisanje liofilizovanog praha, dodatne agense za kombinovanje sa citotoksičnim konjugatom pre davanja pacijentu, i agense koji pomažu u primenu konjugata pacijentu.
PRIMERI
[0198] Pronalazak je sada opisan pozivanjem na sledeće primere, koji su samo ilustrativni i nisu namenjeni da ograniče predmetni pronalazak.
Primer 1
Mišja CD38 antitela
[0199] 300-19 ćelije, pre-B ćelijska linija izvedena od Balb/c miša (M. G. Reth i dr.1985, Nature, 317: 353-355), koja stabilno eksprimira visok nivo ljudskog CD38, korišćena je za imunizaciju Balb/c VAF miševa. Miševi su subkutano imunizovani sa oko 5x10<6>CD38-eksprimirajućih 300-19 ćelija po mišu svake 2-3 nedelje standardnim imunizacionim protokolima koji se koriste u ImmunoGen, Inc. Imunizovani miševi su pojačani drugom dozom antigena tri dana pre nego što su žrtvovani za stvaranje hibridoma. Slezina od miševa je sakupljena u skladu sa standardnim životinjskim protokolima i učvršćena je između dva sterilna, zamrznuta mikroskopska slajda kako bi se dobila suspenzija jedne ćelije u RPMI-1640 medijumu. Ćelije slezine su peletirane, isprane i fuzionisane sa P3X63Ag8.653 ćelijama mišjeg mijeloma (J. F. Kearney i dr.1979, J Immunol, 123: 1548-1550) upotrebom polietilen glikola-1500 (Roche 783641). Fuzionisane ćelije su resuspendovane u RPMI-1640 selekcionom medijumu koji sadrži hipoksantin-aminopterin-timidin (HAT) (Sigma H-0262) i izabrane za rast u 96-komoričnim pločama sa ravnim dnom (Corning-Costar 3596, 200 µL ćelijske suspenzije po komorici) na 37°C (5% CO2). Posle 5 dana inkubacije, 100 µL
1
supernatanta kulture je uklonjeno iz svake komorice i zamenjeno sa 100 µL RPMI-1640 medijuma koji sadrži dodatak hipoksantin-timidina (HT) (Sigma H-0137). Inkubacija na 37°C (5% CO2) je nastavljena sve dok klonovi hidridoma nisu bili spremni za skrining antitela. Mogu se koristiti i druge tehnike imunizacije i proizvodnje hibridoma, uključujući one opisane kod J. Langone and H. Vunakis (Eds., Methods in Enzymology, Vol.121, „Immunochemical Techniques, Part I“; Academic Press, Florida) i E. Harlow and D. Lane („Antibodies: A Laboratory Manual“; 1988; Cold Spring Harbor Laboratory Press, New York).
[0200] Fluorescentno aktiviranim sortiranjem ćelija (FACS) korišćenjem Becton Dickinson FACSCalibur ili FACSArray mašine, supernatanti kulture iz hibridoma su pregledani (sa FITC ili PE-konjugovanim anti-mišjim IgG antiserumom) za lučenje mišjih monoklonskih antitela koja se vezuju za CD38-eksprimirajuće 300-19 ćelija, ali ne i za roditeljske 300-19 ćelije. Klonovi hibridoma koji su testirani pozitivno su subklonirani, i izotip svakog izlučenog anti-CD38 antitela je identifikovan korišćenjem komercijalnih izotopnih reagensa (Roche 1493027). Ukupno 29 antitela koja su bila pozitivna na CD38 vezivanje su pročišćena Protein A ili G hromatografijom koristeći standardni protokol, i zatim su dalje karakterisana.
Primer 2
Karakterizacija vezivanja anti-CD38 antitela
[0201] FACS histogrami koji pokazuju vezivanje anti-CD38 antitela, 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31 i 38SB39, za CD38-eksprimirajuće 300-19 ćelije i odsustvo vezivanja za roditeljske 300-19 ćelije su prikazani na Slici.1. 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31, ili 38SB39 antitelo (10 nM) je inkubirano tokom 3 sata sa CD38-eksprimirajućim 300-19 ćelijama ili roditeljskim 300-19 ćelijama (1-2 x10<5>ćelija po uzorku) u 100 µL ledeno hladnog RPMI-1640 medijuma dopunjenog sa 2% normalnog kozjeg seruma. Zatim, ćelije su peletirane, isprane i inkubirane tokom 1 sata na ledu sa FITC-konjugovanim kozjim anti-mišjim IgG-antitelom (Jackson Laboratory, 100 µL, 6 µg/mL u hladnom RPMI-1640 medijumu dopunjenom sa 2% normalnog kozjeg seruma). Ćelije su ponovo peletirane, isprane, resuspendovane u 200 µL PBS koji sadrži 1% formaldehida, i analizirane korišćenjem FACSCalibur protočnog citometra sa CellQuest softverom (BD Biosciences).
2
[0202] FACS histogrami CD38-eksprimirajućih 300-19 ćelija inkubiranih sa 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31, ili 38SB39 pokazali su snažan pomak fluorescencije, u poređenju sa onim odgovarajuće negativne kontrole (ćelije inkubirane samo sa FITC konjugovanim, kozjim anti-mišjim IgG-antitelom) (Slika 1). Takođe, nije detektovana značajna promena fluorescencije kada su roditeljske 300-19 ćelije inkubirane sa bilo kojim od ovih antitela. Slični rezultati su dobijeni kada je upotrebljeno anti-CD38 antitelo pozitivne kontrole, AT13/5 (Serotec, MCA1019).
[0203] Takođe je primećena jaka promena fluorescencije kada su Ramos (ATCC CRL 1596) ćelije limfoma inkubirane sa 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31, ili 38SB39 (Slika 1). Vrednosti za očigledne konstante disocijacije (KD) od 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31 i 38SB39 za vezivanje za Ramos ćelije procenjene su iz krive analize FACS prikazane na Slici 2, korišćenjem postupka neravne regresije za krive sigmoidalne doze (GraphPad Prizm, verzija 4, softver, San Diego, CA). Vrednosti su sledeće: 0,10 nM, 0,10 nM, 0,12 nM, 0,16 nM, 0,11 nM i 3,03 nM, respektivno.
Primer 3
Izazivanje apoptoze Ramos i Daudi ćelija limfoma, pomoću 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31, i 38SB39 antitela
[0204] Anti-CD38 antitela, 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31 i 38SB39, izazvala su apoptozu Ramos i Daudi (ATCC CCL-213) ćelijskih linija limfoma i MOLP-8 ćelijsku liniju multiplog mijeloma (DSMZ ACC 569). Stepen apoptoze je meren FACS analizom nakon bojenja sa FITC konjugatima aneksina V (Biosource PHN1018) i sa TO-PRO-3 (Invitrogen T3605). Annexin V vezuje fosfatidilserin na spoljašnjoj strani, ali ne na unutrašnjost dvosloja ćelijske membrane netaknutih ćelija. Kod zdravih, normalnih ćelija, fosfatidilserin se eksprimira na unutrašnjoj strani membranskog dvosloja, i prelaz fosfatidilserina iz unutrašnjeg u spoljašnji list plazma membrane je jedan od najranijih detektabilnih signala apoptoze. Vezivanje aneksina V je tako signal za indukciju apoptoze. TO-PRO-3 je monomerna cijaninska nukleinska kiselina koja može prodreti samo u plazmatsku membranu kada se probije integritet membrane, što se dešava u kasnijim fazama apoptoze.
[0205] Eksponencijalno rastuće ćelije su postavljene na oko 2 x 10<5>ćelija/mL u pločama sa 24 komorice u RMPI-1640 medijumu dopunjenom sa 10% fetalnog telećeg seruma (FBS), 2mM L-glutamina, i 50 µg/mL gentamicina (označen u nastavku kao kompletan RMPI-1640 medijum). Ćelije su generalno uzgajane u kompletnom RMPI-1640 medijumu, ukoliko nije drugačije navedeno. Ćelije su inkubirane sa anti-CD38 antitelima (10 nM) tokom 24 sata na 37°C u vlažnoj atmosferi koja sadrži 5% CO2. Ćelije su zatim peletirane, isprane dva puta sa 500 µL PBS, resuspendovane u 100 µL vezujućeg pufera (datog u Annexin V-FITC kompletu), koje sadrže 5 µL Annexin V-FITC, i inkubirane su tokom 15 minuta na ledu. Zatim, 400 µL vezujućeg pufera i TO-PRO-3 (do konačne koncentracije od 1 uM) je dodato u mešavinu, i fluorescencija povezana sa ćelijama FITC i TO-PRO-3 je odmah izmerena pomoću FACS. Za svaki uzorak prikupljeno je četiri hiljade događaja. Tačkasti dijagrami za TO-PRO-3 fluorescenciju (FL4-H; y-osa) i Annexin V-FITC fluorescenciju (FL1-H; x-osa) su generisani korišćenjem softvera CellQuest.
[0206] Rezultati su prikazani na Slikama 3 i 4. Slika 3 daje primer takvog tačkastog dijagrama za Daudi ćelije nakon 24-časovne inkubacije sa različitim anti-CD38 antitelima. Prosečni procenti Annexin V-pozitivnih ćelija (obuhvataju i TO-PRO-3 pozitivne i negativne ćelije) iz duplikata uzoraka su određeni iz ovih dijagrama i prikazani su na Slici 4. Neočekivano, 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31 i 38SB39 su pokazali snažne apoptotske aktivnosti. Više od 30% Daudi ćelija koje su bile izložene bilo kom od ovih antitela su bile Annexin V-pozitivne, u poređenju sa samo oko 6% netretiranih ćelija (Slike 3 i 4A).38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31 i 38SB39 su pokazali najmanje 2,4-puta jaču apoptotičku aktivnost (24% nakon oduzimanja kontrolne vrednosti koja nije tretirana) nego mišja CD38 antitela iz prethodnog stanja tehnike testirani pri istoj koncentraciji od 10 nM, (AT13/5, OKT10, IB4 i SUN-4B7, manje od 10% Annexin V-pozitivne nakon oduzimanja ne-tretirane kontrolne vrednosti) i dva druga anti-CD38 antitela stvorena u našoj laboratoriji, (38SB7 i 38SB23, ne više od ne-tretirane kontrole, tj. oko 6% Annexin V-pozitivnih) (Slika 4A).
AT13/5 je kupljen od Serotec (MCA1019), i OKT10 je proizveden i pročišćen iz hibridoma (ATCC CRL-8022). IB4 i SUN-4B7 su bili poklon od strane profesoraF. Malavasi, University of Turin, Italy. Slično tome, 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31, i 38SB39 anti-CD38 antitela su pokazala najmanje 3,5-struko jaču pro-apoptotičku aktivnost na drugoj limfomskoj ćelijskoj liniji, Ramos (7% ili više Annexin V-pozitivnih nakon oduzimanja od netretirane kontrolne vrednosti) nego bilo koja mišja CD38 antitela iz prethodnog stanja tehnike, AT13/5, OKT10, IB4 i SUN-4B7, ili dva druga nova anti-CD38 antitela, 38SB7 i
4
38SB23 (manje od 2% Annexin V-pozitivnih nakon oduzimanja netretirane kontrolne vrednosti) (Slika 4B). Konačno, anti-CD3838SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31 i 38SB39 antitela pokazuju jaku pro-apoptotičku aktivnost na MOLP-8 ćelijskoj liniji multiplog mijeloma (Slika 4C). Približno 50% MOLP-8 ćelija koje su tretirane ovim antitelima su bile Annexin V-pozitivne, u poređenju sa oko 39% netretiranih ćelija. Nasuprot tome, tretman sa bilo kojim od mišjih CD38 antitela iz prethodnog stanja tehnike, AT13/5, OKT10, IB4, i SUN-4B7, ili sa dva druga nova anti-CD38 antitela, 38SB7 i 38SB23 nije rezultovao povećanjem dela apoptotskih ćelija.
Primer 4
Kloniranje i sekvenciranje lakih i teških lanaca anti-CD38 antitela
[0207] 38SB19 antitelo.
RNK preparat iz hibridomskih ćelija koje proizvode 38SB19 antitelo
[0208] Preparati ukupne RNK su dobijeni od 5 x 10<6>hibridoma ćelija, koje proizvode 38SB19 antitelo, koristeći Qiagen RNeasy miniprep komplet. Ukratko, RNeasy ćelije su peletirane i resuspendovane u 350 µL RLT pufera (koji sadrži 1% β-merkaptoetanola).
[0209] Suspenzija je homogenizovana propuštanjem kroz 21,5 iglu i špricu približno 10 do 20 puta ili dok više nije bila viskozna. Etanol (350 µL 70% vodenog etanola) je dodat u homogenat, koji je dobro pomešan. Rastvor je prebačen u kolonu za centrifugiranje, stavljen u epruvetu za sakupljanje od 2 mL i centrifugiran na> 8000 x g tokom 15 sekundi. Kolona je isprana dva puta sa 500 µL RPE pufera, zatim prebačena u svežu epruvetu i eluirana sa 30 µL vode bez RNaze i jednominutnim centrifugiranjem. Eluat (30 µL) je stavljen nazad na kolonu za drugo jednominutno ispiranje centrifugiranjem. Alikvot od 30 µL eluata je razblažen sa vodom i korišćen za merenje UV apsorpcije na 260 nm za RNK kvantifikaciju.
Priprema cDNK sa reakcijom reverzne transkriptaze (RT)
[0210] Varijabilni region cDNK 38SB19 antitela je generisan od ukupne RNK koristeći Invitrogen Superscriptll komplet. Protokoli kompleta su pažljivo praćeni, koristeći do 5 µg ukupne RNK iz Qianeasy miniprep. Ukratko, RNK, 1 µL nasumičnih prajmera i 1 µL dNTP mešavine su dovedeni do 12 µL sa sterilnom destilovanom vodom bez RNaze i inkubirani na 65°C tokom 5 minuta. Smeša je zatim stavljena na led najmanje 1 minut. Sledećih 4 µL od 5 x pufera za reakciju, 2 µL 0,1 M DTT, i 1 µL RNaseOUT su dodati i smeša je inkubirana na 25°C tokom 2 minuta u m Research termalnom cikleru. Termalni cikler je pauziran tako da se može dodati 1 µL Superscriptll enzima i zatim ponovo pokrenuti dodatnih 10 minuta na 25°C pre prebacivanja na 55°C tokom 50 minuta. Reakcija je inaktivirana toplotom zagrevanjem na 70°C tokom 15 min i RNK je uklonjena dodavanjem 1 µL RNaze H i inkubacijom na 37°C tokom 20 minuta.
Degeneracija PCR reakcija
[0211] Postupak za prvu degenerisanu PCR reakciju na cDNK izvedenom iz hibridoma ćelija zasnovan je na postupcima opisanim kod Wang i dr. (2000) i Co i dr.(1992). Prajmeri za ovu rundu (Tabela 2) sadrže restrikciona mesta da se olakša kloniranje u pBluescriptll plazmide.
[0212] Komponente PCR reakcije (Tabela 3) su pomešane na ledu u tankoslojnim PCR epruvetama i zatim prebačene u m istraživački termalni cikler, prethodno zagrejane i pauzirane na 94°C.
[0213] Reakcije su izvedene koristeći program izveden od Wanga i dr, 2000 kao što sledi: Naziv: Wang45
94° C 3:00 minuta
94° C 0:15 sekundi
45° C 1:00 minuta
72° C 2:00 minuta
Goto 229 puta
72° C 6:00 minuta
4° C do kraja
kraj
[0214] PCR reakcione smeše su zatim puštene na 1% nisko rastopljenom agaroznom gelu, 300 do 400 bp traka su izrezane, pročišćene pomoću Zymo DNK mini kolone, i poslate Agencourt biosciences za sekvenciranje. Odgovarajući 5' i 3' PCR prajmeri su korišćeni kao prajmeri za sekvenciranje kako bi se generisali varijabilni regioni cDNK 38SB19 iz oba pravca.
Kloniranje 5' završne sekvence
[0215] Pošto degenerisani prajmeri korišćeni za kloniranje cDNK sekvenci varijabilnog regiona lakog lanca i teškog lanca 38SB19 menja 5' kraj sekvence, potrebni su dodatni napori sekvenciranja da se dešifruju kompletne sekvence. Preliminarna cDNK sekvenca iz gore opisanih postupaka je korišćena za pretraživanje NCBI IgBlast mesta (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/igblast/) za sekvence mišjih germlinjskih sekvenci iz kojih je izvedena sekvenca 38SB19. PCR prajmeri su dizajnirani (Tabela 3) da se kaleme sa liderskom sekvencom mišjeg antitela tako da nova PCR reakcija može dati kompletan varijabilni cDNK region, nepromenjen sa PCR prajmerima. PCR reakcije, pročišćavanje trake i sekvenciranje su izvedene kao što je gore opisano.
Peptidna analiza za potvrdu sekvence
[0216] Informacije o cDNK sekvenci za varijabilni region su kombinovane sa germlinijskom sekvencom konstantnog regiona kako bi se dobile cDNK sekvence antitela pune dužine. Molekulske težine teškog lanca i lakog lanca su zatim izračunate i upoređene sa molekulskim težinama dobijenim LC/MS analizama mišjeg 38SB19 antitela.
[0217] Tabela 4 daje izračunatu masu iz cDNK sekvenci za 38SB19 LC i HC zajedno sa vrednostima izmerenim sa LC/MS. Merenja molekulske težine su u skladu sa cDNK sekvencama i za laki i za teški lanac 38SB19.
Primer 5
Rekombinantno eksprimiranje hu38SB19 antitela
[0218] Sekvence varijabilnog regiona za hu38SB19 su kodon-optimizovane i sintetizovane od strane Blue Heron Biotechnology. Sekvence su okružene restrikcionim enzimskim mestima za kloniranje u okviru sa odgovarajućim konstantnim sekvencama i kod jednolančanih i kod tandem dvolančanih sisarskih eksprimirajućih plazmida. Varijabilni region lakog lanca je kloniran u EcoRI i BsiWI mestima i kod ps38SB19LCZv1.0 plazmida i kod ps38SB19v1.00 plazmida (Slike 5A i 5C). Varijabilni region teškog lanca je kloniran u HindIII i Apa1 mesta i kod ps38SB19LCZv1.0 plazmida i kod ps38SB19v1.00 plazmida (Slike 5B i 5C). Ovi plazmidi se mogu koristiti za eksprimiranje hu38SB19 u bilo prelaznim ili stabilnim transfekcijama u ćelijama sisara. Slični konstrukti vektora eksprimiranja su korišćeni za proizvodnju drugih himernih i humanizovanih antitela.
[0219] Prolazne transfekcije za eksprimiranje hu38SB19 u HEK-293T ćelijama izvršene su korišćenjem CaPO4reagenasa od BD biosciences. Isporučeni protokoli su neznatno modifikovani za poboljšanje prinosa eksprimiranja. Ukratko, 2 x 10<6>HEK-293T ćelije su nanesene na pločice sa 10 cm kulture tkiva obložene polietileniminom (PEI) 24 sata pre transfekcije. Transfekcija je počela ispiranjem ćelija sa PBS i zamenom medijuma sa 10 mL DMEM (Invitrogen) sa 1% Ultra Low IgG FBS (Hyclone). Rastvor A (10 µg DNK, 86,8 µL Ca<2+>rastvor, i do 500 µL sa H2O) se dodaje kapanjem u rastvor B dok se meša. Smeša je inkubirana na sobnoj temperaturi u trajanju od 1 minuta i 1 mL smeše je dodato kapanjem na svaku ploču od 10 cm. Približno 16 sati posle transfekcije, medijum je zamenjen sa 10 mL svežeg DMEM sa 1% Ultra Low IgG FBS. Približno 24 sata kasnije, dodato je 2 mM natrijum butirata na svaku ploču od 10 cm. Transfekcija je sakupljena 4 dana kasnije.
[0220] Supernatant je pripremljen za afinitetnu hromatografiju proteina A dodavanjem 1/10 zapremine 1 M Tris/HCI pufera, pH 8,0. pH-prilagođen supernatant filtriran je kroz filtersku membranu od 0,22 um i nanesen na Proteina A Sepharose kolonu (HiTrap Protein A HP, 1 mL, Amersham Biosciences) uravnotežen sa puferom za vezivanje (PBS, pH 7,3). Q-Sepharose predkolona (10 mL) je bila povezana uzvodno od Protein A kolone tokom punjenja uzorka da se smanji kontaminacija iz ćelijskog materijala kao što je DNK. Nakon punjenja uzorka, predkolona je uklonjena i orijentacija Protein A kolone je obrnuta za ispiranje i eluiranje. Kolona je isprana sa vezujućim puferom dok se ne dobije stabilna osnovna linija bez apsorbancije na 280 nm. Antitelo je eluirano sa 0,1 M puferom sirćetne kiseline koja je sadržala 0,15 M NaCl, pH 2,8, koristeći brzinu protoka od 0,5 mL/min. Fragmenti od približno 0,25 mL su sakupljeni i neutralizovani dodavanjem 1/10 zapremine 1M Tris/HCI, pH 8,0. Fragmenti vrha su dijalizirani preko noći dva puta protiv PBS i pročišćeno antitelo je kvantifikovano apsorbancijom na OD280. Humanizovana i himerna antitela se takođe mogu prečistiti korišćenjem Protein G kolone sa malo drugačijim postupcima.
[0221] Sva opisana himerna i humanizovana anti-CD38 antitela su eksprimirana i pročišćena u sličnim procedurama kao što je gore opisano.
Primer 6
Aktivnosti ćelijski posredovane citotoksičnosti zavisne od atitela (ADCC) himernih anti-CD38 antitela.
[0222] Pošto se pokazalo da neka anti-CD38 antitela imaju ADCC i/ili CDC aktivnost kao himerna ili humanizovana antitela sa ljudskim IgG1 konstantnim regionima (J. H. Ellis i dr.
1995, J Immunol, 155: 925-937; F. K. Stevenson i dr.1991, Blood, 77: 1071-1079; WO 2005/103083), himerne verzije 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31 i 38SB39, koje se sastoje od mišjih varijabilnih regiona i ljudskog IgG1/IgKappa konstantnog regiona, napravljene su i testirane za ADCC i/ili CDC aktivnosti.
[0223] Ch38SB13, ch38SB18, ch38SB19, ch38SB30, ch38SB31 i ch38SB39 su prvo testirani za ADCC, koristeći Ramos ćelije kao ciljane ćelije i ljudske prirodne ubice (NK) kao efektorske ćelije. Test laktat dehidrogenaze (LDH) je korišćen za merenje ćelijske lize (R. L. Shields etal., 2001, J Biol Chem, 276: 6591-6604).
[0224] NK ćelije su prvo izolovane iz ljudske krvi (od normalnog donora, nabavljene od Research Blood Components, Inc., Brighton, MA) korišćenjem modifikovanog protokola za NK Isolation Kit II (Miltenyi Biotech). Krv je razblažena 2-3 puta sa Hank's Balanced Salt Solution (HBSS). Dvadeset pet mL razblažene krvi je pažljivo nanošeno u slojevima preko 25 mL Ficoll Paque u 50 mL kupastoj epruveti i centrifugirano na 400 g 45 min na 19°C.
Mononuklearne ćelije periferne krvi (PBMC) su sakupljene iz interfejsa, prebačene u novu kupastu epruvetu od 50 mL i isprane jednom sa HBSS. PBMC su resuspendovani u 2 mL NK-izolacionog pufera, i zatim je u suspenziju ćelija dodato 500 µL koktela za biotin-antitelo (iz NK-izolacionog kompleta, 130-091-152, Miltenyi Biotech). Biotin-antitelo koktel sadrži biotinilovana antitela koja se vezuju za limfocite, izuzev NK ćelija. Smeša je inkubirana na 4°C tokom 10 min, i zatim je dodato 1,5 mL NK izolacionog pufera (PBS, 0,1% BSA, 1 mM EDTA) i 1 mL Anti-Biotin Micro Beads. Smeša ćelija-antitelo je inkubirana još 15 min na 4°C. Zatim, ćelije su isprane jednom sa 50 mL NK izolacionog pufera i resuspendovane u 3 mL NK-izolacionog pufera. Zatim, MACS LS kolona (na MACS separatoru, Miltenyi Biotech) je prethodno isprana sa 3 mL NK-izolacionog pufera. Zatim je ćelijska suspenzija nanesena na kolonu LS. Efluent (fragment sa neoznačenim ćelijama) je sakupljen u novu kupastu epruvetu od 50 mL. Kolona je isprana 3 puta sa 3 mL NK-izolacionog pufera. Ceo efluent je sakupljen u istu epruvetu i ispran jednom sa 50 mL NK-izolacionog pufera. NK ćelije su stavljene u 30 mL RPMI-1640 dopunjenog sa 5% fetalnog telećeg seruma, 50 µg/mL gentamicina.
[0225] Različite koncentracije ch38SB13, ch38SB18, ch38SB19, ch38SB30, ch38SB31 i ch38SB39 antitela u RPMI-1640 medijumu dopunjenom sa 0,1% BSA, 20 mM HEPES, pH 7,4, i 50 µg/mL gentamicina (označeno kao RHBP medijum) su alikvotirane (50 µL/komorica) u okruglu ploču sa 96 komorica. Ciljane Ramos ćelije su resuspendovane na 10<6>ćelija/mL u RHBP medijumu i dodate se u svaku komoricu (100 µL/komorica) koja sadrži razblaženja antitela. Ploča koja je sadržala ciljane ćelije i razblaženja antitela inkubirana je 30 minuta na 37°C. NK ćelije (50 µL/komorica) se zatim dodaju u komorice koje sadrže ciljane ćelije tipično u odnosu 1 ciljana ćelija na 3-6 NK ćelija. RHBP medijum (50 µL/komorica) je dodat u kontrolne komorice sa NK ćelijama. Takođe, 20 µL Triton X-100 rastvora (RPMI-1640 medijum, 10% Triton X-100) je dodato u 3 komorice koje sadrže samo ciljane ćelije bez antitela, kako bi se odredilo maksimalno moguće oslobađanje LDH. Smeše su inkubirane na 37°C tokom 4 sata, zatim centrifugirane tokom 10 minuta na 1200 rpm, i 100 µL supernatanta je pažljivo prebačeno na novu ploču sa ravnim dnom sa 96 komorica. Reakciona smeša LDH (100 µL/komorica) iz kompleta za detekciju citotoksičnosti (Roche 1644 793) je dodata u svaku komoricu i inkubirana na sobnoj temperaturi tokom 5-30 minuta. Optička gustina uzoraka je merena na 490 nm (OD490). Procenat specifične lize svakog uzorka je određen pripisivanjem 100% lize OD490vrednosti uzoraka tretiranih sa Triton X-100 i 0% lize na OD490vrednost netretiranog kontrolnog uzorka koji sadrži samo ciljane ćelije. Uzorci koji sadrže samo NK ćelije daju zanemarljiva OD490čitanja.
[0226] Kada su testirani sa Ramos ciljanim ćelijama i NK efektorskim ćelijama, himerna anti-CD38 antitela su pokazala veoma snažne ADCC aktivnosti (Slika 6). EC50Vrednosti su procenjene postupkom ne-linearne regresije sa sigmoidnim krivama doznog odgovora i utvrđeno je da su kako sledi: 0,0013 µg/mL za ch38SB13, 0,0013 µg/mL za ch38SB18, 0,0018 µg/mL za ch38SB19, 0,0022 µg/mL za ch38SB30, 0,0012 µg/mL za ch38SB31, 0,1132 µg/mL za ch38SB39. Himerna anti-CD38 antitela su takođe pokazala snažnu aktivnost ADCC na LP-1 (DSMZ ACC 41) ćelije multiplog mijeloma (EC50vrednosti: 0,00056 µg/mL za ch38SB18; 0,00034 µg/mL za ch38SB19; 0,00024 µg/mL za ch38SB31) (Slika 7A).
Ch38SB19 takođe efikasno ubija Daudi ćelije limfoma (Slika 7B), NALM-6 B-ALL ćelije (DSMZ ACC 128) (Slika 8A) i MOLT-4 T-ALL ćelije (ATTC CRL-1582) (Slika 8B) ADCC, sugerišući da anti-CD38 antitela sa neuobičajeno jakom apoptotičnom aktivnošću takođe imaju snažnu ADCC aktivnost protiv različitih tumorskih ćelija izvedenih iz različitih hematopoetskih maligniteta. Takođe, ne-vezujuće IgG1 kontrolno antitelo (rituksimab, Biogenldec) (Slike 7A, 8A i 8B) ili mu38SB19 (Slika 7B) u istom eksperimentu nisu imali značajnu ADCC aktivnost.
Primer 7
CDC aktivnosti himernih anti-CD38 antitela.
[0227] CDC aktivnosti ch38SB13, ch38SB18, ch38SB19, ch38SB30, ch38SB31 i ch38SB39 su merene na osnovu postupka modifikovanog od (H. Gazzano-Santoro i dr.1997, J. Immunol Methods, 202: 163-171). Ljudski komplement je bio liofiliziran ljudski komplementni serum (Sigma-Aldrich S1764) koji je rekonstituisan sa sterilnom pročišćenom vodom kako je naznačeno od strane proizvođača i zatim razblažen pet puta sa RHBP medijumom neposredno pre eksperimenta. Ciljane ćelije suspendovane pri 10<6>ćelija/mL u RHBP medijumu su alikvotirane u komorice ravnog dna ploče za kulturu tkiva sa 96 komorica (50 µL/komorica). Zatim je dodato 50 µL različitih koncentracija (od 10 nM do 0,001 nM) anti-CD38 antitela u RHBP medijumu (jedno antitelo po uzorku), koje je praćeno sa 50 µL/komorica komplementnog rastvora. Ploča je zatim inkubirana tokom 2 sata na 37°C u vlažnoj atmosferi koja sadrži 5% CO2, nakon čega je u svaku komoricu dodato 50 µL 40% Alamar Blue reagensa (Biosource DAL1100) razblaženog u RHBP (10% finalno) kako bi se izmerila vitalnost ćelija. Alamar Blue prati kapacitet redukovanja vitalnih ćelija. Ploča je inkubirana tokom 5-18 sati na 37°C pre merenja fluorescencije (u relativnim jedinicama fluorescencije, RFU) na 540/590 nm. Procenat specifične vitalnosti ćelija za svaki uzorak je određen tako što je prvo korigovao eksperimentalne vrednosti za pozadinsku fluorescenciju tako što je od RFU vrednosti za svaki uzorak oduzeta RFU vrednost (komorice samo sa medijumom, bez ćelija), i zatim, deljenjem korigovanih RFU vrednosti sa korigovanim vrednostima RFU netretiranih uzoraka ćelija.
[0228] Kada su CDC aktivnosti himernih anti-CD38 uzoraka antitela testirane sa Raji-IMG
1
ćelijama korišćenjem ljudskog komplementa u konačnom razblaženju od 5%, himerna anti-CD38 antitela su pokazala veoma jake CDC aktivnosti (Slika 9). Raji-IMG su ćelije izvedene iz Raji ćelija (ATCC CCL-86) i eksprimiraju niže nivoe inhibitora komplementa membrane CD55 i CD59. EC50vrednosti su procenjene ne-linearnom regresijom od krive sigmoidnog doznog odgovora prikazane na Slici 8, i kako sledi su: 0,005 µg/mL za ch38SB13, 0,0101 µg/mL za ch38SB18, 0,028 µg/mL za ch38SB19, 0,020 µg/mL za ch38SB19, 0,020 µg/ml za ch38SB30, 0,010 µg/mL za ch38SB31, i 0,400 µg/mL za ch38SB39. Himerna anti-CD38 antitela su takođe pokazala jaku CDC aktivnost prema LP-1 ćelijama multiplog mijeloma (EC50vrednost: 0,032 µg/mL za ch38SB18; 0,030 µg/mL za ch38SB19; 0,043 µg/mL za ch38SB31), dok nevezujući himerni kontrolni IgG1 (rituksimab, Biogenldec) nije imao nikakvu CDC aktivnost (Slika 10). Kada su himerna CD38 antitela testirana na Daudi ćelijama limfoma, različita anti-CD38 antitela su se razlikovala u svojim CDC aktivnostima (Slika 11). Dok je specifična vitalnost Daudi ćelija bila manja od 15% nakon njihove inkubacije sa 1,25 µg/mL ch38SB19 u prisustvu komplementa, došlo je do samo marginalnog smanjenja specifične vitalnosti ovih ćelija nakon njihove inkubacije sa ch38SB18 ili ch38SB39 (1,25 µg/mL ili višom koncentracijom) u prisustvu komplementa (specifična održivost je bila 85% i 91%, respektivno). Takođe, primećeno je samo umereno smanjenje specifične vitalnosti kada su Daudi ćelije inkubirane sa 1,25 µg/mL ili višom koncentracijom ch38SB13, ch38SB30 i ch38SB31 u prisustvu komplementa (specifična vitalnost je bila 65%, 45%, i 53%, respektivno).
Primer 8
Afinitet vezivanja i aktivnosti apoptoze, ADCC i CDC humanizovanih anti-CD38 antitela.
[0229] Dve verzije humanizovanog 38SB19 (hu38SB19 v1.00 i v1.20) i himernog 38SB19 pokazale su slične afinitete vezivanja kada su testirane sa Ramos ćelijama sa KDvrednostima od 0,23 nM, 0,25 nM, i 0,18 nM, respektivno (Slika 12A). Afiniteti vezivanja himernih i humanizovanih 38SB19 antitela su takođe upoređeni u testu kompetitivnog vezivanja, gde se meri njihova sposobnost da se takmiče sa vezivanjem biotinilovanog mišjeg 38SB19 antitela. Biotin-označeno mišje 38SB19 antitelo (3 x 10<-10>M) je pomešano sa različitim koncentracijama ch38SB19, hu38SB19 v1.00, ili hu38SB19 v1.20. Mešavina antitela je inkubirana sa Ramos ćelijama, i količina biotinilovanog mišjeg 38SB19 vezanog za ćelije je
2
merena sa FITC-konjugovanim streptavidinom pomoću FACS analize. Hu38SB19 v1.00, hu38SB19 v1.20, i ch38SB19 su se nadmetali za vezivanje biotinilovanog mišjeg 38SB19 podjednako dobro (Slika 12B), ponovo ukazujući da humanizacija nije uticala na afinitet vezivanja. Kada su ch38SB19, hu38SB19 v1.00 i hu38SB19 v1.20 (10<-8>do 10<-11>M) upoređeni za svoju sposobnost da izazovu apoptozu Daudi ćelija, oni su pokazali slične apoptotičke aktivnosti (Slika 13). Štaviše, hu38SB19 v1.00 i v1.20 su takođe pokazali sličan ADCC kao ch38SB19 u LP-1 ćelijama (Slika 14) i slične CDC potencije kao ch38SB19 u Raji-IMG i LP-1 ćelijama (Slika 15). Hu38SB19 v1.00 je takođe pokazao sličnu CDC aktivnost kao ch38SB19 u ćelijskoj liniji T-ćelijske akutne limfoblastične leukemije DNK-41 (DSMZ 525) (Slika 15). Hu38SB19 v1.00 je dalje testiran za svoju sposobnost da indukuje apoptozu u raznolikom setu ćelijskih linija (Slika 16). Tretman sa hu38SB19 v1.00 (10-8 M) je rezultovao dramatičnim povećanjem Annexin V-pozitivnih ćelija u ćelijskim linijama B ćelijskih limfoma SU-DHL-8 (DSMZ ACC 573) (od 7% u netretiranoj kontroli do 97% u ćelijama tretiranim sa hu38SB19) i NU-DUL -1 (DSMZ ACC 579) (od 10% u netretiranoj kontroli do 37% u ćelijama tretiranim sa hu38SB19) i T-ALL ćelijskoj liniji DND-41 (od 7% u netretiranoj kontroli do 69% u ćelijama tretiranim sa hu38SB19). Pored toga, tretman sa hu38SB19 v1.00 (10-8 M) povećao je udeo Annexin V-pozitivnih pozitivnih ćelija u ćelijskoj liniji B-ćelijske limfocitne leukemije JVM-13 (DSMZ ACC 19) (sa 8% u netretiranoj kontroli na 17% u ćelijama tretiranim sa hu38SB19) i ćelijskoj liniji leukemije dlakavih ćelija HC-1 (DSMZ ACC 301) (od 6% u netretiranoj kontroli do 10% u ćelijama tretiranim sa hu38SB19).
[0230] Slično, dve verzije humanizovanog 38SB31 (hu38SB31 v1,1 i v1.2) i himernog 38SB31 pokazale su slične afinitete vezivanja kada su testirane sa Ramos ćelijama sa KDvrednostima od 0,13 nM, 0,11 nM i 0,12 nM, respektivno. Afiniteti vezivanja himernih i humanizovanih 38SB31 antitela su takođe upoređeni u testu kompetitivnog vezivanja, kao što je gore opisano i izvedeni jednako dobro. Hu38SB31v1.1 je dalje testiran za svoju sposobnost da indukuje apoptozu u nekoliko ćelijskih linija. Humanizovano antitelo pokazalo je slične apoptotičke aktivnosti kao ch38SB31 prema Ramos, Daudi, Molp-8 i SU-DHL-8 ćelijama. Štaviše, hu38SB31 v1.1 je takođe pokazao slične aktivnosti ADCC i CDC kao ch38SB31 u ovim ćelijskim linijama.
Primer 9
In vivo efikasnost 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31 i 38SB39.
[0231] In vivo anti-tumorske aktivnosti 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31 i 38SB39 su ispitivane u modelu preživljavanja ljudskog ksenograft tumora kod imunodeficijencijskih miševa (ženke CB.17 SCID) ustanovljenih sa Ramos ćelijama limfoma. Ženke CB.17 SCID miševa su inokulirane sa 2 x 106 Ramos ćelija u 0,1 mL medijuma bez seruma kroz lateralnu venu repa. Sedam dana nakon inokulacije ćelija tumora, miševi su nasumično podeljeni u sedam grupa na osnovu telesne težine. Bilo je 10 miševa po grupi, osim za grupu tretiranu sa 38SB31, koja je imala 6 miševa, i grupu tretiranu sa 38SB39, koja je imala 8 miševa. Antitela su primenjivana miševima intravenozno pri dozi od 40 mg/kg, dva puta nedeljno, u tri uzastopne nedelje, počevši sedam dana posle inokulacije ćelija. Miševi su žrtvovani ako su jedna ili obe zadnje noge paralizovane, ako je gubitak telesne težine bio veće od 20% od vrednosti pre tretmana, ili ako je životinja bila previše bolesna da bi došla do hrane i vode. Tretman sa 38SB13, 38SB18, 38SB19, 38SB30, 38SB31, ili 38SB39 značajno je produžio preživljavanje miševa u poređenju sa onim kod miševa tretiranih sa PBS (Slika 17). Medijana preživljavanja miševa tretiranih sa PBS bila je 22 dana, i grupa tretiranih antitelima bila je od 28 do 33 dana.
[0232] In vivo anti-tumorske aktivnosti mu38SB19 i hu38SB19 su dalje istraživane u dodatnim ljudskim modelima ksenografta tumora kod imunodeficijencijskih miševa. Za model preživljavanja Daudi limfoma, SCID miševi su inokulirani sa 5 x 10<6>Daudi ćelija u 0,1 mL medijuma bez seruma kroz lateralnu venu repa. Studija je izvedena kao što je gore opisano. Tretman sa mu38SB19 ili hu38SB19 značajno je produžio preživljavanje miševa u poređenju sa onim kod miševa tretiranih sa PBS (Slika 18). Medijana preživljavanja miševa tretiranih sa PBS bila je 22 dana, i grupa tretiranih antitelima bila je 47 dana.
[0233] Za NCI-H929 model multiplog mijeloma, SCID miševi su inokulirani subkutano sa 10<7>ćelija. Kada su tumori bili palpabilni na dan 6, životinje su nasumično podeljene u grupe od 10 prema telesnoj težini i započeto je tretiranje antitelima. Antitelo hu38SB19 ili nevezujuće himerno IgG1 kontrolno antitelo (rituksimab, Biogenldec) primenjivano je miševima intravenozno u dozi od 40 mg/kg, dva puta nedeljno, u tri uzastopne nedelje.
Zapremina tumora je praćena i životinje su žrtvovane ako su tumori dostigli 2000 mm<3>veličine ili su postali nekrotični. Grupa tretirana sa PBS dostigla je srednju zapreminu tumora od 1000 mmm<3>na dan 89, himerna IgG1 kontrolna grupa antitela na dan 84 (Slika 19).
Tretman sa hu38SB19 potpuno je sprečio rast tumora kod svih 10 životinja. Nasuprot tome, samo dve životinje u grupi tretiranoj sa PBS i tri životinje sa himernim IgG1 kontrolnim
4
antitelom su pokazale regresiju tumora.
[0234] Za model MOLP-8 multiplog mijeloma, SCID miševi su inokulirani subkutano sa 10<7>ćelija. Kada su tumori bili palpabilni na dan 4, životinje su nasumično podeljene u grupe od 10 prema telesnoj težini i započeto je tretiranje antitelima. Antitela hu38SB19 i mu38SB19 ili himerno IgG1 kontrolno antitelo su primenjivani miševima intravenozno u dozi od 40 mg/kg, dva puta nedeljno, u tri uzastopne nedelje. Zapremina tumora je praćena i životinje su žrtvovane ako su tumori dostigli 2000 mm<3>veličine ili su postali nekrotični. Grupa tretirana sa PBS dostigla je srednju zapreminu tumora od 500 mmm3 na dan 22, himerna IgG1 kontrolna grupa antitela na dan 23 (Slika 20). Nijedan od tumora u ovim grupama nije regresovan. Nasuprot tome, tretman sa hu38SB19 ili mu38SB19 je doveo do regresije tumora kod 8 od 10 ili 6 od 10 životinja, respektivno.
TABELE
[0235]
Tabela 2.
Table 3:
Table 4:
Table 5:
1
2
4
1
2
4
1
11
12
1
14
1
1
1

Claims (23)

  1. Patentni zahtevi 1. Antitelo koje se specifično vezuje za CD38, gde: i. navedeno antitelo je sposobno da ubije CD38<+>ćelije putem apoptoze, citotoksičnosti posredovane antitelom (ADCC) i citotoksičnosti koja je zavisna od komplementa (CDC); ii. navedeno antitelo sadrži najmanje jedan teški lanac, najmanje jedan laki lanac i najmanje jedan ljudski konstantni region; iii. navedeni teški lanac sadrži varijabilni region koji ima aminokiselinsku sekvencu SEQ ID NO. 66; i iv. navedeni laki lanac sadrži varijabilni region koji ima aminokiselinsku sekvencu SEQ ID NO. 62.
  2. 2. Antitelo prema patentnom zahtevu 1, gde je navedeno antitelo sposobno da ubije navedene CD38<+>ćelije apoptozom u odsustvu stromalnih ćelija ili citokina izvedenih iz stroma.
  3. 3. Antitelo prema patentnom zahtevu 1 ili 2, gde je pomenuta CD38<+>ćelija ćelija limfoma, ćelija leukemije ili ćelija multiplog mijeloma.
  4. 4. Antitelo prema patentnom zahtevu 3, gde je navedena CD38<+>ćelija ćelija ne-Hodgkin-ovog limfoma (NHL), ćelija Burkitt-ovog limfoma (BL), ćelija multiplog mijeloma (MM), ćelija B hronične limfocitne leukemije (B-CLL), ćelija B i T akutne limfocitne leukemije (ALL), ćelija T ćelijskog limfoma (TCL), ćelija akutne mijeloidne leukemije (AML), ćelija leukemije dlakavih ćelija (HCL), ćelija Hodgkin-ovog limfoma (HL) ili ćelija hronične mijeloidne leukemije (CML).
  5. 5. Antitelo prema patentnom zahtevu 1, gde je: • navedeno antitelo sposobno da ubije najmanje 24% Daudi ćelija limfoma apoptozom u odsustvu stromalnih ćelija ili citokina izvedenih iz stroma; i/ili • navedeno antitelo sposobno da ubije više od 7% Ramos ćelija limfoma apoptozom u odsustvu stromalnih ćelija ili citokina izvedenih iz stroma; i/ili • navedeno antitelo sposobno da ubije više od 11% MOLP-8 ćelija multiplog mijeloma apoptozom u odsustvu stromalnih ćelija ili citokina izvedenih iz stroma; i/ili • navedeno antitelo sposobno da ubije više od 36% SU-DHL-8 ćelija limfoma apoptozom u odsustvu stromalnih ćelija ili citokina izvedenih iz stroma; i/ili • navedeno antitelo sposobno da ubije više od 62% DND-41 ćelija leukemije apoptozom u odsustvu stromalnih ćelija ili citokina izvedenih iz stroma; i/ili • navedeno antitelo sposobno da ubije više od 27% NU-DUL-1 ćelija limfoma apoptozom u odsustvu stromalnih ćelija ili citokina izvedenih iz stroma; i/ili • navedeno antitelo sposobno da ubije više od 9% JVM-13 ćelija leukemije apoptozom u odsustvu stromalnih ćelija ili citokina izvedenih iz stroma; i/ili • navedeno antitelo sposobno da ubije više od 4% HC-1 ćelija leukemije apoptozom u odsustvu stromalnih ćelija ili citokina izvedenih iz stroma.
  6. 6. Antitelo prema bilo kom od prethodnih patentnih zahteva, gde se navedeno antitelo vezuje za CD38 sa KDod 3 x 10<-9>M ili niže.
  7. 7. Antitelo prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 6, gde je navedeno antitelo humanizovano ili obnavljano antitelo.
  8. 8. Antitelo prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 7, gde je navedeni ljudski konstantni region ljudski IgG1/Kappa konstantni region.
  9. 9. Konjugat koji sadrži antitelo prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 8 povezano sa citotoksičnim agensom.
  10. 10. Konjugat prema patentnom zahtevu 9, gde je navedeno citotoksični agens izabran iz grupe koju čine maitansinoid, mali lek, derivat tomaimicina, derivat leptomicina, prolek, taksoid, CC-1065 i analog CC-1065.
  11. 11. Konjugat prema patentnom zahtevu 10, gde: • navedeni citotoksični agens je maitansin DM1 formule: 1
    ili • navedeni citotoksični agens je maitansin DM4 formule:
    ili ∘ 8,8'-[1,3-benzendiilbis(metilenoksi)]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-metoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[5-metoksi-1,3-benzendiilbis(metilenoksi)]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-metoksi-1,2,3,11atetrahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[1,5-pentandiilbis(oksi)]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-metoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-5H-piroio[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[1,4-butanediilbis(oksi)]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-metoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[3-metil-1,5-pentandiilbis(oksi)]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-metoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[2,6-piridinediilbis(oksi)]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-metoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[4-(3-terc-butoksikarbonilaminopropiloksi)-2,6-piridinediilbis-(metilenoksi)]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-metoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[5-(3-aminopropiloksi)-1,3-benzendiilbis(metilenoksi)]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-metoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[5-(N-metil-3-terc-butoksikarbonilaminopropil)-1,3-benzendiilbis-(metilenoksi)]- 11 bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-metoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-{5-[3-(4-metil-4-metildisulfanil-pentanoilamino)propiloksi]-1,3-benzendiilbis(metilenoksi)}-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-metoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[5-acetiltiometil-1,3-benzendiilbis(metilenoksi)]-bis[(S)-2-metilen-7-metoksi-1,2,3,11atetrahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ bis-[2-[(S)-2-metilen-7-metoksi-5-okso-1,3,,11a-tetrahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-8-iloksi]-etil}-karbaminska kiselina terc-butil ester ∘ 8,8'-[3-(2-acetiltioetil)-1,5-pentandiilbis(oksi)]-bis[(S)-2-metilen-7-metoksi-1,2,3,11atetrahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[5-(N-4-merkapto-4,4-dimetilbutanoil)amino-1,3-benzendiilbis(metilenoksi)]-bis[7-metoksi-2-metilen-1,2,3,11a-tetrahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[5-(N-4-metilditio-4,4-dimetilbutanoil)-amino-1,3-benzendiilbis(metilenoksi)]-bis[7-metoksi-2-metilen-1,2,3,11a-tetrahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[5-(N-metil-N-(2-merkapto-2,2-dimetiletil)amino-1,3-benzendiil(metilenoksi)]-bis[7-metoksi-2-metilen-1,2,3,11a-tetrahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[5-(N-metil-N-(2-metilditio-2,2-dimetiletil)amino-1,3-benzendiil(metilenoksi)]-bis[7-metoksi-2-metilen-1,2,3,11a-tetrahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[(4-(2-(4-merkapto-4-metil)-pentanamido-etoksi)-piridin-2,6-dimetil)-dioksi]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-dimetoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[(1-(2-(4-metil-4-metildisulfanil)-pentanamido-etoksi)-benzen-3,5-dimetil)-dioksi]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-dimetoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[(4-(3-(4-metil-4-metildisulfanil)-pentanamido-propoksi)-piridin-2,6-dimetil)-dioksi]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-dimetoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[(4-(4-(4-metil-4-metildisulfanil)-pentanamido-butoksi)-piridin-2,6-dimetil)-dioksi]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-dimetoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[(4-(3-[4-(4-metil-4-metildisulfanil-pentanoil)-piperazin-1-il]-propil)-piridin-2,6-dimetil)-dioksi]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-dimetoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[(1-(3-[4-(4-metil-4-metildisulfanil-pentanoil)-piperazin-1-il]-propil)-benzen-3,5-dimetil)-dioksi]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-dimetoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[(4-(2-{2-[2-(4-metil-4-metildisulfanil-pentanoilamino)-etoksi]-etoksi}-etoksi)-piridin-2,6-dimetil)-dioksi]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-dimetoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[(1-(2-{2-[2-(2-{2-[2-(4-metil-4-metildisulfanil-pentanoilamino)-etoksi]-etoksi}-etoksi)-etoksi]-etoksi}-etoksi)-benzen-3,5-dimetil)-dioksi]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-dimetoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[(1-(2-f2-[2-(4-metil-4-metildisulfanil-pentanoilamino)-etoksi]-etoksi}-etoksi)-benzen-3,5-dimetil)-dioksi]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-dimetoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[(4-(2-{2-[2-(2-{2-[2-(4-metil-4-metildisulfanil-pentanoilamino)-etoksi]-etoksi}-etoksi)-etoksi]-etoksi}-etoksi)-piridin-2,6-dimetil)-dioksi]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-dimetoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[(1-(2-[metil-(2-metil-2-metildisulfanil-propil)-amino]-etoksi)-benzen-3,5-dimetil)-dioksi]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-dimetoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[(4-(3-[metil-(4-metil-4-metildisulfanil-pentanoil)-amino]-propil)-piridin-2,6-dimetil)-dioksi]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-dimetoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[(4-(3-[metil-(2-metil-2-metildisulfanil-propil)-amino]-propil)-piridin-2,6-dimetil)-dioksi]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-dimetoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[(1-(4-metil-4-metildisulfanil)-pentanamido)-benzen-3,5-dimetil)-dioksi]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-dimetoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on], ili • navedeni citotoksični agens je derivat leptomicina izabran iz grupe koju čine: ∘ (2-Metilsulfanil-etil)-amid od (2E,10E,12E,16Z,18E)-(R)-6-hidroksi-3,5, 7,9,11,15,17-heptametil-19-((2S,3S)-3-metil-6-okso-3,6-dihidro-2H-piran-2-il)-8-okso-nonadeka-2,10,12,16,18-pentaenoinska kiselina ∘ Bis-[(2-merkaptoetil)-amid od (2E,10E,12E,16Z,18E)-(R)-6-hidroksi-3,5,7,9, 11,15,17-heptametil-19-((2S,3S)-3-metil-6-okso-3,6-dihidro-2H-piran-2-il)-8-okso-nonadeka-2,10,12,16,18-pentaenoinska kiselina] ∘ (2-merkapto-etil)-amid od (2E,10E,12E,16Z,18E)-(R)-6-hidroksi-3,5,7,9,11, 15,17-heptametil-19-((2S,3S)-3-metil-6-okso-3,6-dihidro-2H-piran-2-il)-8-okso-nonadeka-2,10,12,16,18-pentaenoinska kiselina ∘ (2-Metildisulfanil-etil)-amid od (2E,10E,12E,16Z,18E)-(R)-6-hidroksi-3,5,7,9,11,15,17-heptametil-19-((2S,3S)-3-metil-6-okso-3,6-dihidro-2H-piran-2-il)-8-okso-nonadeka-2,10,12,16,18-pentaenoinska kiselina ∘ (2-Metil-2-metildisulfanil-propil)-amid od (2E,10E,12E,16Z,18E)-(R)-6-hidroksi-3,5,7,9,11,15,17-heptametil-19-((2S,3S)-3-metil-6-okso-3,6-dihidro-2H-piran-2-il)-8-oksononadeka-2,10,12,16,18-pentaenoinska kiselina ∘ (2-merkapto-2-metil-propil)-amid od (2E,10E,12E,16Z,18E)-(R)-6-hidroksi-3,5,7,9,11,15,17-heptametil-19-((2S,3S)-3-metil-6-okso-3,6-dihidro-2H-piran-2-il)-8-oksononadeka-2,10,12,16,18-pentaenoinska kiselina. 12.navedeni citotoksični agens je derivat leptomicina izabran iz grupe koju čine: ∘ 8,8'-[1,3-benzendiilbis(metilenoksi)]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-metoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[5-metoksi-1,3-benzendiilbis(metilenoksi)]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-metoksi-1,2,3,11atetrahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[1,5-pentandiilbis(oksi)]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-metoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-5H-piroio[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[1,4-butanediilbis(oksi)]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-metoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[3-metil-1,5-pentandiilbis(oksi)]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-metoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[2,6-piridinediilbis(oksi)]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-metoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[4-(3-terc-butoksikarbonilaminopropiloksi)-2,6-piridinediilbis-(metilenoksi)]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-metoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[5-(3-aminopropiloksi)-1,3-benzendiilbis(metilenoksi)]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-metoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[5-(N-metil-3-terc-butoksikarbonilaminopropil)-1,3-benzendiilbis-(metilenoksi)]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-metoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-{5-[3-(4-metil-4-metildisulfanil-pentanoilamino)propiloksi]-1,3-benzendiilbis(metilenoksi)}-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-metoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] 11 ∘ 8,8'-[5-acetiltiometil-1,3-benzendiilbis(metilenoksi)]-bis[(S)-2-metilen-7-metoksi-1,2,3,11atetrahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ bis-[2-[(S)-2-metilen-7-metoksi-5-okso-1,3,,11a-tetrahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-8-iloksi]-etil}-karbaminska kiselina terc-butil ester ∘ 8,8'-[3-(2-acetiltioetil)-1,5-pentandiilbis(oksi)]-bis[(S)-2-metilen-7-metoksi-1,2,3,11atetrahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[5-(N-4-merkapto-4,4-dimetilbutanoil)amino-1,3-benzendiilbis(metilenoksi)]-bis[7-metoksi-2-metilen-1,2,3,11a-tetrahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[5-(N-4-metilditio-4,4-dimetilbutanoil)-amino-1,3-benzendiilbis(metilenoksi)]-bis[7-metoksi-2-metilen-1,2,3,11a-tetrahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[5-(N-metil-N-(2-merkapto-2,2-dimetiletil)amino-1,3-benzendiil(metilenoksi)]-bis[7-metoksi-2-metilen-1,2,3,11a-tetrahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[5-(N-metil-N-(2-metilditio-2,2-dimetiletil)amino-1,3-benzendiil(metilenoksi)]-bis[7-metoksi-2-metilen-1,2,3,11a-tetrahidro-5H-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[(4-(2-(4-merkapto-4-metil)-pentanamido-etoksi)-piridin-2,6-dimetil)-dioksi]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-dimetoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[(1-(2-(4-metil-4-metildisulfanil)-pentanamido-etoksi)-benzen-3,5-dimetil)-dioksi]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-dimetoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[(4-(3-(4-metil-4-metildisulfanil)-pentanamido-propoksi)-piridin-2,6-dimetil)-dioksi]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-dimetoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[(4-(4-(4-metil-4-metildisulfanil)-pentanamido-butoksi)-piridin-2,6-dimetil)-dioksi]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-dimetoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[(4-(3-[4-(4-metil-4-metildisulfanil-pentanoil)-piperazin-1-il]-propil)-piridin-2,6-dimetil)-dioksi]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-dimetoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[(1-(3-[4-(4-metil-4-metildisulfanil-pentanoil)-piperazin-1-il]-propil)-benzen-3,5-dimetil)-dioksi]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-dimetoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[(4-(2-{2-[2-(4-metil-4-metildisulfanil-pentanoilamino)-etoksi]-etoksi}-etoksi)-piridin-2,6-dimetil)-dioksi]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-dimetoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[(1-(2-{2-[2-(2-{2-[2-(4-metil-4-metildisulfanil-pentanoilamino)-etoksi]-etoksi}-etoksi)-etoksi]-etoksi}-etoksi)-benzen-3,5-dimetil)-dioksi]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7dimetoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[(1-(2-f2-[2-(4-metil-4-metildisulfanil-pentanoilamino)-etoksi]-etoksi}-etoksi)-benzen-3,5-dimetil)-dioksi]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-dimetoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[(4-(2-{2-[2-(2-{2-[2-(4-metil-4-metildisulfanil-pentanoilamino)-etoksi]-etoksi}-etoksi)-etoksi]-etoksi}-etoksi)-piridin-2,6-dimetil)-dioksi]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-dimetoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[(1-(2-[metil-(2-metil-2-metildisulfanil-propil)-amino]-etoksi)-benzen-3,5-dimetil)-dioksi]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-dimetoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[(4-(3-[metil-(4-metil-4-metildisulfanil-pentanoil)-amino]-propil)-piridin-2,6-dimetil)-dioksi]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-dimetoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[(4-(3-[metil-(2-metil-2-metildisulfanil-propil)-amino]-propil)-piridin-2,6-dimetil)-dioksi]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-dimetoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on] ∘ 8,8'-[(1-(4-metil-4-metildisulfanil)-pentanamido)-benzen-3,5-dimetil)-dioksi]-bis[(S)-2-et-(E)-iliden-7-dimetoksi-1,2,3,11a-tetrahidro-pirolo[2,1-c][1,4]benzodiazepin-5-on], ili • navedeni citotoksični agens je derivat leptomicina izabran iz grupe koju čine: ∘ (2-Metilsulfanil-etil)-amid od (2E,10E,12E,16Z,18E)-(R)-6-hidroksi-3,5, 7,9,11,15,17-heptametil-19-((2S,3S)-3-metil-6-okso-3,6-dihidro-2H-piran-2-il)-8-okso-nonadeka-2,10,12,16,18-pentaenoinska kiselina ∘ Bis-[(2-merkaptoetil)-amid od (2E,10E,12E,16Z,18E)-(R)-6-hidroksi-3,5,7,9, 11,15,17-heptametil-19-((2S,3S)-3-metil-6-okso-3,6-dihidro-2H-piran-2-il)-8-okso-nonadeka-2,10,12,16,18-pentaenoinska kiselina] ∘ (2-merkapto-etil)-amid od (2E,10E,12E,16Z,18E)-(R)-6-hidroksi-3,5,7,9,11, 15,17-heptametil-19-((2S,3S)-3-metil-6-okso-3,6-dihidro-2H-piran-2-il)-8-okso-nonadeka-2,10,12,16,18-pentaenoinska kiselina ∘ (2-Metildisulfanil-etil)-amid od (2E,10E,12E,16Z,18E)-(R)-6-hidroksi-3,5,7,9,11,15,17-heptametil-19-((2S,3S)-3-metil-6-okso-3,6-dihidro-2H-piran-2-il)-8-okso-nonadeka-2,10,12,16,18-pentaenoinska kiselina ∘ (2-Metil-2-metildisulfanil-propil)-amid od (2E,10E,12E,16Z,18E)-(R)-6-hidroksi-3,5,7,9,11,15,17-heptametil-19-((2S,3S)-3-metil-6-okso-3,6-dihidro-2H-piran-2-il)-8-okso- 11 nonadeka-2,10,12,16,18-pentaenoinska kiselina ∘ (2-merkapto-2-metil-propil)-amid od (2E,10E,12E,16Z,18E)-(R)-6-hidroksi-3,5,7,9,11,15,17-heptametil-19-((2S,3S)-3-metil-6-okso-3,6-dihidro-2H-piran-2-il)-8-oksononadeka-2,10,12,16,18-pentaenoinska kiselina.
  12. 12. Antitelo prema bilo kom od patentnih zahteva 1-8, ili konjugat prema bilo kom od patentnih zahteva 9-11, za upotrebu kao lek.
  13. 13. Farmaceutski sastav koja sadrži antitelo prema bilo kom od patentnih zahteva 1-8, ili konjugat prema bilo kom od patentnih zahteva 9-11, i farmaceutski prihvatljiv nosač ili ekscipijenti.
  14. 14. Farmaceutski sastav prema patentnom zahtevu 13, gde navedeni sastav sadrži dodatni terapeutski agens.
  15. 15. Farmaceutski sastav prema patentnom zahtevu 14, gde je dodatni terapeutski agens antagonist faktora epidermalnog rasta (EGF), faktora rasta fibroblasta (FGF), faktora rasta hepatocita (HGF), faktora tkiva (TF), proteina C, proteina S, faktora rasta izvedenog iz trombocita (PDGF), heregulina, makrofagom stimulišućeg proteina (MSP) ili vaskularnog endotelnog faktora rasta (VEGF), ili antagonist receptora faktora epidermalnog rasta (EGF), faktora rasta fibroblasta (FGF), faktora rasta hepatocita (HGF), faktora tkiva (TF), proteina C, proteina S, faktora rasta izvedenog iz trombocita (PDGF), heregulina, makrofagom stimulišućeg proteina (MSP) ili vaskularnog endotelnog faktora rasta (VEGF), uključujući HER2 receptor, HER3 receptora, c-MET, i druge receptore tirozin kinaza. U poželjnom otelotvorenju, dodatni terapeutski agens je antitelo usmereno na klastere diferencijacije antigena izabrane iz grupe koja uključuje CD3, CD14, CD19, CD20, CD22, CD25, CD28, CD30, CD33, CD36, CD40, CD44, CD52, CD55, CD59, CD56, CD70, CD79, CD80, CD103, CD134, CD137, CD138, i CD152.
  16. 16. Antitelo prema bilo kom od patentnih zahteva 1-8, ili konjugat prema bilo kom od patentnih zahteva 9-11, za upotrebu u tretmanu raka ili autoimune bolesti.
  17. 17. Antitelo ili konjugat za upotrebu u skladu sa patentnim zahtevom 16, gde je navedeni rak multipli mijelom. 11
  18. 18. Antitelo ili konjugat za upotrebu u skladu sa patentnim zahtevom 16, gde je navedeni rak B-ćelijski limfom.
  19. 19. Antitelo ili konjugat za upotrebu u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 16 do 18, gde tretman dalje obuhvata upotrebu dodatnog terapeutskog agensa u istom ili različitom sastavu.
  20. 20. Antitelo ili konjugat za upotrebu u skladu sa patentnim zahtevom 19, gde je dodatni terapeutski agens antagonist faktora rasta fibroblasta (FGF), faktora rasta hepatocita (HGF), faktora tkiva (TF), proteina C, proteina S, faktora rasta izvedenog iz trombocita (PDGF), heregulina, makrofagom stimulišućeg proteina (MSP) ili vaskularnog endotelnog faktora rasta (VEGF), ili antagonist receptora faktora epidermalnog rasta (EGF), faktora rasta fibroblasta (FGF), faktora rasta hepatocita (HGF), faktora tkiva (TF), proteina C, proteina S, faktora rasta izvedenog iz trombocita (PDGF), heregulina, makrofagom stimulišućeg proteina (MSP) ili vaskularnog endotelnog faktora rasta (VEGF), uključujući HER2 receptor, HER3 receptora, c-MET, i druge receptore tirozin kinaza. U poželjnom otelotvorenju, dodatni terapeutski agens je antitelo usmereno na klastere diferencijacije antigena izabrane iz grupe koja uključuje CD3, CD14, CD19, CD20, CD22, CD25, CD28, CD30, CD33, CD36, CD40, CD44, CD52, CD55, CD59, CD56, CD70, CD79, CD80, CD103, CD134, CD137, CD138, i CD152
  21. 21. Polinukleotid u kome: • navedeni polinukleotid kodira antitelo kako je definisano u bilo kom od patentnih zahteva 1-8; ili • navedeni polinukleotid kodira teški lanac i laki lanac antitela kao što je definisano u bilo kom od patentnih zahteva 1-8.
  22. 22. Rekombinantni vektor koji sadrži polinukleotid prema patentnom zahtevu 21.
  23. 23. Ćelija domaćin koja sadrži vektor prema patentnom zahtevu 22. 11
RS20190583A 2006-10-19 2007-10-16 Nova anti-cd38 antitela za tretman raka RS58716B1 (sr)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP06291628A EP1914242A1 (en) 2006-10-19 2006-10-19 Novel anti-CD38 antibodies for the treatment of cancer
EP07859236.7A EP2076540B1 (en) 2006-10-19 2007-10-16 Novel anti-cd38 antibodies for the treatment of cancer
PCT/IB2007/004172 WO2008047242A2 (en) 2006-10-19 2007-10-16 Novel anti-cd38 antibodies for the treatment of cancer

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS58716B1 true RS58716B1 (sr) 2019-06-28

Family

ID=37831721

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20190583A RS58716B1 (sr) 2006-10-19 2007-10-16 Nova anti-cd38 antitela za tretman raka

Country Status (44)

Country Link
US (6) US8153765B2 (sr)
EP (4) EP1914242A1 (sr)
JP (2) JP5607364B2 (sr)
KR (5) KR101800328B1 (sr)
CN (1) CN101616933B (sr)
AR (1) AR063488A1 (sr)
AU (1) AU2007311511C1 (sr)
BR (1) BRPI0718130B1 (sr)
CA (2) CA2663209C (sr)
CL (3) CL2007002995A1 (sr)
CO (1) CO6190555A2 (sr)
CR (1) CR10679A (sr)
CY (2) CY1122302T1 (sr)
DK (1) DK2076540T3 (sr)
DO (1) DOP2017000177A (sr)
EA (1) EA025215B1 (sr)
ES (1) ES2726754T3 (sr)
FR (1) FR20C1061I2 (sr)
GT (1) GT200900079A (sr)
HR (1) HRP20190742T1 (sr)
HU (2) HUE043351T2 (sr)
IL (1) IL197217B (sr)
LT (2) LT2076540T (sr)
MA (1) MA30895B1 (sr)
ME (1) MEP10609A (sr)
MX (1) MX2009004050A (sr)
MY (1) MY159374A (sr)
NL (1) NL301077I2 (sr)
NO (3) NO345911B1 (sr)
NZ (1) NZ575188A (sr)
PE (1) PE20081171A1 (sr)
PH (1) PH12012502467A1 (sr)
PL (1) PL2076540T3 (sr)
PT (1) PT2076540T (sr)
RS (1) RS58716B1 (sr)
SG (4) SG173345A1 (sr)
SI (1) SI2076540T1 (sr)
SV (1) SV2009003203A (sr)
TN (1) TN2009000058A1 (sr)
TW (4) TWI609884B (sr)
UA (1) UA114879C2 (sr)
UY (1) UY30655A1 (sr)
WO (1) WO2008047242A2 (sr)
ZA (1) ZA200901395B (sr)

Families Citing this family (351)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MXPA06008700A (es) 2004-02-06 2007-01-19 Morphosys Ag Anticuerpos anti-cd38 humanos y usos para los mismos.
US9200061B2 (en) * 2004-02-06 2015-12-01 Morpho Sys AG Generation and profiling of fully human HuCAL gold®-derived therapeutic antibodies specific for human CD3i
WO2006122355A1 (en) * 2005-05-16 2006-11-23 Qrsciences Pty Ltd A system and method for improving the analysis of chemical substances using nqr
EP1933857A2 (en) 2005-09-07 2008-06-25 Jennerex Biotherapeutics ULC Systemic treatment of metastatic and/or systemically-disseminated cancers using gm-csf-expressing poxviruses
CN101287764B (zh) 2005-10-12 2013-11-13 莫佛塞斯公司 特异性针对人CD38的完全人HuCAL GOLD-衍生治疗抗体的生成和鉴定
EP1914242A1 (en) * 2006-10-19 2008-04-23 Sanofi-Aventis Novel anti-CD38 antibodies for the treatment of cancer
US7259237B1 (en) 2006-12-29 2007-08-21 Miller Kent D Pan-antiviral peptides
PT2019104E (pt) 2007-07-19 2013-12-03 Sanofi Sa Agentes citotóxicos compreendendo novos derivados de tomaimicina e sua utilização terapêutica
PA8849001A1 (es) * 2008-11-21 2010-06-28 Lilly Co Eli Anticuerpos de c-met
EP2191840A1 (en) * 2008-11-28 2010-06-02 Sanofi-Aventis Antitumor combinations containing antibodies recognizing specifically CD38 and melphalan
EP2191842A1 (en) * 2008-11-28 2010-06-02 Sanofi-Aventis Antitumor combinations containing antibodies recognizing specifically CD38 and cytarabine
EP2191843A1 (en) * 2008-11-28 2010-06-02 Sanofi-Aventis Antitumor combinations containing antibodies recognizing specifically CD38 and cyclophosphamide
EP2191841A1 (en) * 2008-11-28 2010-06-02 Sanofi-Aventis Antitumor combinations containing antibodies recognizing specifically CD38 and vincristine
FR2947269B1 (fr) 2009-06-29 2013-01-18 Sanofi Aventis Nouveaux composes anticancereux
FR2949469A1 (fr) * 2009-08-25 2011-03-04 Sanofi Aventis Derives anticancereux, leur preparation et leur application en therapeutique
KR101838472B1 (ko) 2009-09-14 2018-03-15 신라젠(주) 종양 용해 백시니아 바이러스 병용 암 치료요법
UY32913A (es) 2009-10-02 2011-04-29 Sanofi Aventis Nuevos maitansinoides y el uso de dichos maitansinoides para preparar conjugados con un anticuero
PH12012501157A1 (en) 2009-12-22 2012-10-29 Roche Glycart Ag Anti-her3 antibodies and uses thereof
MX2012007379A (es) 2009-12-23 2012-08-31 Genentech Inc Anticuerpos anti-bv8 y usos de los mismos.
US9220743B2 (en) 2010-01-22 2015-12-29 Nuovo Biologics, Llc Pan-antiviral peptides for protein kinase inhibition
MX368648B (es) 2010-04-15 2019-10-09 Seattle Genetics Inc Pirrolobenzodiazepinas usadas para tratar enfermedades proliferativas.
CN103068405A (zh) 2010-04-15 2013-04-24 西雅图基因公司 靶向吡咯并苯并二氮杂卓结合物
EP2580243B1 (en) 2010-06-09 2019-10-16 Genmab A/S Antibodies against human cd38
FR2963007B1 (fr) 2010-07-26 2013-04-05 Sanofi Aventis Derives anticancereux, leur preparation et leur application therapeutique
US8877899B2 (en) 2010-09-27 2014-11-04 Morphosys Ag Anti-CD38 antibody and lenalidomide or bortezomib for the treatment of multipe myeloma and NHL
UA112170C2 (uk) 2010-12-10 2016-08-10 Санофі Протипухлинна комбінація, що містить антитіло, яке специфічно розпізнає cd38, і бортезоміб
JOP20210044A1 (ar) * 2010-12-30 2017-06-16 Takeda Pharmaceuticals Co الأجسام المضادة لـ cd38
US9919047B2 (en) * 2011-01-04 2018-03-20 Sillajen, Inc. Generation of antibodies to tumor antigens and generation of tumor specific complement dependent cytotoxicity by administration of oncolytic vaccinia virus
EA033468B1 (ru) 2011-03-29 2019-10-31 Immunogen Inc Способы получения конъюгата "антитело-майтансиноид"
WO2012135517A2 (en) 2011-03-29 2012-10-04 Immunogen, Inc. Preparation of maytansinoid antibody conjugates by a one-step process
SG194567A1 (en) 2011-04-21 2013-12-30 Seattle Genetics Inc Novel binder-drug conjugates (adcs) and their use
KR102037432B1 (ko) * 2011-04-29 2019-11-27 아펙시젠, 인코포레이티드 항-cd40 항체 및 사용 방법
HUE048876T2 (hu) 2011-05-09 2020-08-28 Mayo Found Medical Education & Res Rákos megbetegedések kezelése
JP6400470B2 (ja) 2011-05-16 2018-10-03 ジェネロン（シャンハイ）コーポレイション リミテッド 多重特異性Ｆａｂ融合タンパク質および使用法
US9399641B2 (en) 2011-09-20 2016-07-26 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepines as unsymmetrical dimeric PBD compounds for inclusion in targeted conjugates
US12466897B2 (en) 2011-10-10 2025-11-11 Xencor, Inc. Heterodimeric human IgG1 polypeptides with isoelectric point modifications
CA2850373C (en) 2011-10-14 2019-07-16 Seattle Genetics, Inc. Pyrrolobenzodiazepines and targeted conjugates
CA2850375C (en) 2011-10-14 2019-07-02 Seattle Genetics, Inc. Pyrrolobenzodiazepines and targeted conjugates
AU2012322934B2 (en) 2011-10-14 2016-09-08 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepines
CA2850264C (en) 2011-10-14 2019-11-05 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepines
CN104203982B (zh) 2011-10-28 2018-08-31 特瓦制药澳大利亚私人有限公司 多肽构建体及其用途
WO2013075740A1 (en) * 2011-11-23 2013-05-30 Sanofi Antibody purification method
AU2013216863B2 (en) * 2012-02-10 2018-09-06 Seagen Inc. Detection and treatment of CD30+ cancers
AR090549A1 (es) 2012-03-30 2014-11-19 Genentech Inc Anticuerpos anti-lgr5 e inmunoconjugados
KR20150006000A (ko) 2012-05-01 2015-01-15 제넨테크, 인크. 항-pmel17 항체 및 면역접합체
BR112015000437A2 (pt) 2012-07-09 2017-06-27 Genentech Inc imunoconjugados, formulação farmacêutica, métodos de tratamento e de inbir a proliferação de uma célula
KR20150027829A (ko) 2012-07-09 2015-03-12 제넨테크, 인크. 항-cd22 항체를 포함하는 면역접합체
BR112015002193A2 (pt) 2012-08-02 2017-07-04 Genentech Inc anticorpos anti-etbr e imunoconjugados
HRP20171964T1 (hr) 2012-09-25 2018-02-23 Morphosys Ag Kombinacije i njihova upotreba
US10413606B2 (en) 2012-10-01 2019-09-17 Mayo Foundation For Medical Education And Research Methods for treating cancer with nanoparticle complexes of albumin-bound paclitaxel and anti-VEGF antibodies
EP2904089A4 (en) 2012-10-04 2016-05-25 Immunogen Inc USE OF A PVDF MEMBRANE FOR PURIFYING CELL BINDING AGENT-CYTOTOXIC AGENT CONJUGATES
BR112015008238A2 (pt) 2012-10-12 2017-11-28 Adc Therapeutics Sarl conjugados de pirrolbenzodiazepina-anticorpo anti-cd22
KR101995620B1 (ko) 2012-10-12 2019-07-03 에이디씨 테라퓨틱스 에스에이 피롤로벤조디아제핀-항체 컨주게이트
PT2906248T (pt) 2012-10-12 2019-03-04 Medimmune Ltd Pirrolobenzodiazepinas e conjugados das mesmas
WO2014057114A1 (en) 2012-10-12 2014-04-17 Adc Therapeutics Sàrl Pyrrolobenzodiazepine-anti-psma antibody conjugates
EP2906297B1 (en) 2012-10-12 2017-12-06 ADC Therapeutics SA Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
EP2906249B1 (en) 2012-10-12 2018-06-27 MedImmune Limited Synthesis and intermediates of pyrrolobenzodiazepine derivatives for conjugation
DK2839860T3 (da) 2012-10-12 2019-06-17 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepiner og konjugater deraf
DK2906298T3 (en) 2012-10-12 2018-12-17 Adc Therapeutics Sa Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
PT2906253T (pt) 2012-10-12 2018-11-05 Medimmune Ltd Conjugados de anticorpo anti-psma de pirrolobenzodiazepina
CA2888763A1 (en) 2012-10-30 2014-05-08 Apexigen, Inc. Anti-cd40 antibodies and methods of use
US9486547B2 (en) 2012-11-05 2016-11-08 Morphosys Ag Radiolabelled antibody and uses thereof
KR102167228B1 (ko) 2012-11-05 2020-10-19 피에르 파브르 메디카먼트 새로운 항원 결합 단백질들 및 암의 치료를 위한 어드레싱 산물로서 그들의 용도
UA118255C2 (uk) * 2012-12-07 2018-12-26 Санофі Композиція, яка містить антитіло до cd38 і леналідомід
US10342869B2 (en) 2012-12-07 2019-07-09 The Regents Of The University Of California Compositions comprising anti-CD38 antibodies and lenalidomide
MX363787B (es) 2013-03-13 2019-04-03 Medimmune Ltd Pirrolobenzodiazepinas y conjugados de los mismos.
SG10201913777XA (en) * 2013-03-13 2020-03-30 Sanofi Sa Compositions comprising anti-cd38 antibodies and carfilzomib
KR102066318B1 (ko) 2013-03-13 2020-01-14 메디뮨 리미티드 피롤로벤조디아제핀 및 그의 컨쥬게이트
US9562099B2 (en) 2013-03-14 2017-02-07 Genentech, Inc. Anti-B7-H4 antibodies and immunoconjugates
MX2015010777A (es) 2013-03-14 2016-04-25 Genentech Inc Anticuerpos e inmunoconjugados anti-b7-h4.
US10858417B2 (en) 2013-03-15 2020-12-08 Xencor, Inc. Heterodimeric proteins
CA2909952C (en) * 2013-04-29 2021-10-12 Teva Pharmaceuticals Australia Pty Ltd. Anti-cd38 antibodies and fusions to attenuated interferon alpha-2b
US9963515B2 (en) 2013-04-29 2018-05-08 Teva Pharmaceuticals Australia Pty Ltd. Anti-CD38 antibodies and fusions to attenuated interferon alpha-2B
DK2994485T3 (en) * 2013-05-06 2018-04-23 Sanofi Sa CONTINUOUS MULTIPLE STEP PROCEDURE FOR PURIFICATION OF ANTIBODIES
BR112016002829A2 (pt) 2013-08-12 2017-09-19 Genentech Inc Composto e processo para preparar o composto de conjugado anticorpo-¿droga, composição farmacêutica, método de tratamento do câncer, kit para o tratamento do câncer, intermediário ligante¿-droga, porção e composto de porção droga de dímero cbi
BR112016004450A2 (pt) 2013-09-17 2017-10-17 Genentech Inc métodos para tratar uma doença, para aumentar a eficácia de um tratamento, para adiar e/ou prevenir desenvolvimento da reincidência e/ou resistência de uma doença, para aumentar a sensibilidade a um inibidor, para estender o período de sensibilidade a um inibidor e para estender a duração de resposta a um inibidor
US10010624B2 (en) 2013-10-11 2018-07-03 Medimmune Limited Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
GB201317981D0 (en) 2013-10-11 2013-11-27 Spirogen Sarl Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
WO2015052535A1 (en) 2013-10-11 2015-04-16 Spirogen Sàrl Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
GB201317982D0 (en) 2013-10-11 2013-11-27 Spirogen Sarl Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
WO2015052534A1 (en) 2013-10-11 2015-04-16 Spirogen Sàrl Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
CN103513040B (zh) * 2013-10-16 2015-03-11 常晓天 蛋白cd38在制备类风湿性关节炎诊断标记物中的应用
MX373301B (es) * 2013-10-31 2020-04-24 Sanofi Sa Anticuerpos anti-cd38 específicos para usarse para tratar cánceres humanos.
AP2016009222A0 (en) 2013-11-04 2016-05-31 Glenmark Pharmaceuticals Sa Production of t cell retargeting hetero-dimeric immunoglobulins
AR098743A1 (es) 2013-12-13 2016-06-08 Genentech Inc Anticuerpos e inmunoconjugados anti-cd33
JP6980384B2 (ja) 2013-12-16 2021-12-15 ジェネンテック， インコーポレイテッド １−（クロロメチル）−２，３−ジヒドロ−１ｈ−ベンゾ［ｅ］インドール二量体抗体−薬物コンジュゲート化合物、並びに使用及び処置の方法
AU2014372833B2 (en) 2013-12-23 2019-08-22 Bayer Pharma Aktiengesellschaft Antibody drug conjugates (ADCs) with kinesin spindel protein (KSP)
JP2017506640A (ja) * 2014-02-14 2017-03-09 セントローズ， エルエルシー 細胞外標的化薬物共役体
DK3105317T3 (en) 2014-02-14 2019-01-14 Cellectis Immunotherapy cells that are genetically engineered to target antigen on both immune cells and pathological cells
US9732154B2 (en) 2014-02-28 2017-08-15 Janssen Biotech, Inc. Anti-CD38 antibodies for treatment of acute lymphoblastic leukemia
US9603927B2 (en) 2014-02-28 2017-03-28 Janssen Biotech, Inc. Combination therapies with anti-CD38 antibodies
PL3122781T3 (pl) * 2014-03-28 2020-06-15 Xencor, Inc. Dwuswoiste przeciwciała, które wiążą się z CD38 i CD3
UA119352C2 (uk) 2014-05-01 2019-06-10 Тева Фармасьютикалз Острейліа Пті Лтд Комбінація леналідоміду або помалідоміду і конструкції анти-cd38 антитіло-атенуйований інтерферон альфа-2b та спосіб лікування суб'єкта, який має cd38-експресуючу пухлину
JP2017522861A (ja) 2014-05-22 2017-08-17 ジェネンテック， インコーポレイテッド 抗ｇｐｃ３抗体及びイムノコンジュゲート
EP3154586B1 (en) 2014-06-13 2020-05-27 Mayo Foundation for Medical Education and Research Treating lymphomas
EP3154581B1 (en) 2014-06-16 2019-02-20 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Blocking cd38 using anti-cd38 f(ab')2 to protect nk cells
WO2015195555A1 (en) 2014-06-16 2015-12-23 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health & Human Services Blocking cd38 using anti-cd38 antibody conjugated to protein g to protect nk cells
US10213513B2 (en) 2014-06-16 2019-02-26 Mayo Foundation For Medical Education And Research Treating myelomas
US9212225B1 (en) * 2014-07-01 2015-12-15 Amphivena Therapeutics, Inc. Bispecific CD33 and CD3 binding proteins
US10738278B2 (en) 2014-07-15 2020-08-11 Juno Therapeutics, Inc. Engineered cells for adoptive cell therapy
US10617757B2 (en) 2014-08-08 2020-04-14 The Regents Of The University Of California Methods for treating multiple myeloma
DK3186284T3 (da) 2014-08-28 2022-05-09 Bioatla Inc Betinget aktive kimæriske antigenreceptorer til modificerede t-celler
WO2016040294A2 (en) * 2014-09-09 2016-03-17 Janssen Biotech, Inc. Combination therapies with anti-cd38 antibodies
GB201416112D0 (en) 2014-09-12 2014-10-29 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
JP2017531620A (ja) 2014-09-12 2017-10-26 ジェネンテック， インコーポレイテッド システイン操作抗体及びコンジュゲート
SI3191135T1 (sl) 2014-09-12 2021-01-29 Genentech, Inc. Anti-HER2 protitelesa in imunokonjugati
MA40579A (fr) 2014-09-12 2016-03-17 Genentech Inc Anticorps anti-cll-1 et immunoconjugués
TW201625689A (zh) 2014-09-12 2016-07-16 建南德克公司 抗－ｂ７－ｈ４抗體及免疫結合物
KR20250007689A (ko) * 2014-09-16 2025-01-14 이나뜨 파르마 에스.에이. 림프구에서의 억제 경로의 중화
CA2957148A1 (en) 2014-09-17 2016-03-24 Genentech, Inc. Immunoconjugates comprising anti-her2 antibodies and pyrrolobenzodiazepines
CN107073132B (zh) 2014-10-06 2021-08-27 梅约医学教育与研究基金会 载体-抗体组合物及其制备和使用方法
PE20170908A1 (es) 2014-10-29 2017-07-12 Teva Pharmaceuticals Australia Pty Ltd VARIANTES DE INTERFERON a2b
MA40894A (fr) * 2014-11-04 2017-09-12 Glenmark Pharmaceuticals Sa Immunoglobulines hétéro-dimères reciblant des lymphocytes t cd3/cd38 et leurs procédés de production
US11773166B2 (en) 2014-11-04 2023-10-03 Ichnos Sciences SA CD3/CD38 T cell retargeting hetero-dimeric immunoglobulins and methods of their production
CA2966932A1 (en) 2014-11-19 2016-05-26 Immunogen, Inc. Process for preparing cell-binding agent-cytotoxic agent conjugates
CN107148285B (zh) 2014-11-25 2022-01-04 Adc治疗股份有限公司 吡咯并苯并二氮杂䓬-抗体缀合物
JP6696982B2 (ja) 2014-11-26 2020-05-20 ゼンコー・インコーポレイテッドＸｅｎｃｏｒ、 Ｉｎｃ． Ｃｄ３および腫瘍抗原に結合するヘテロ二量体抗体
US10259887B2 (en) 2014-11-26 2019-04-16 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind CD3 and tumor antigens
HK1245171A1 (zh) 2014-11-26 2018-08-24 Xencor, Inc. 结合cd3和cd38的异二聚体抗体
PE20171094A1 (es) * 2014-12-04 2017-08-07 Janssen Biotech Inc Anticuerpos anti-cd38 para el tratamiento de la leucemia linfoblastica aguda
GB201506389D0 (en) * 2015-04-15 2015-05-27 Berkel Patricius H C Van And Howard Philip W Site-specific antibody-drug conjugates
GB201506411D0 (en) 2015-04-15 2015-05-27 Bergenbio As Humanized anti-axl antibodies
GB201506402D0 (en) 2015-04-15 2015-05-27 Berkel Patricius H C Van And Howard Philip W Site-specific antibody-drug conjugates
EP3292152A1 (en) 2015-05-07 2018-03-14 Agenus Inc. Anti-ox40 antibodies and methods of use thereof
US10533057B2 (en) 2015-05-13 2020-01-14 Morphosys Ag Treatment for multiple myeloma (MM)
CR20170526A (es) 2015-05-20 2018-04-03 Janssen Biotech Inc ANTICUERPOS ANTI-CD38 PARA EL TRATAMIENTO DE AMILOIDOSIS DE CADENA LIGERA y OTRAS ENFERMEDADES MALIGNAS HEMATOLÓGICAS POSITIVAS PARA CD38
AU2016271111B2 (en) 2015-05-29 2022-04-28 Bristol-Myers Squibb Company Antibodies against OX40 and uses thereof
CN114656573B (zh) 2015-05-30 2024-09-27 分子模板公司 去免疫化的志贺毒素a亚基支架和包含它们的细胞靶向分子
SG11201710639YA (en) 2015-06-22 2018-01-30 Bayer Pharma AG Antibody drug conjugates (adcs) and antibody prodrug conjugates (apdcs) with enzymatically cleavable groups
CN107708734B (zh) * 2015-06-22 2022-01-11 詹森生物科技公司 用抗cd38抗体和生存素抑制剂联合治疗血红素恶性肿瘤
US20170044265A1 (en) 2015-06-24 2017-02-16 Janssen Biotech, Inc. Immune Modulation and Treatment of Solid Tumors with Antibodies that Specifically Bind CD38
EP3313441B1 (en) 2015-06-24 2024-02-21 Janssen Biotech, Inc. Immune modulation and treatment of solid tumors with antibodies that specifically bind cd38
MA42895A (fr) 2015-07-15 2018-05-23 Juno Therapeutics Inc Cellules modifiées pour thérapie cellulaire adoptive
TW201707725A (zh) 2015-08-18 2017-03-01 美國馬友醫藥教育研究基金會 載體－抗體組合物及其製造及使用方法
US10746739B2 (en) * 2015-09-14 2020-08-18 Leukemia Therapeutics, LLC Identification of novel diagnostics and therapeutics by modulating RhoH
EP4477269A3 (en) 2015-09-20 2025-03-19 The United States of America, as Represented By the Secretary, Department of Health and Human Services Monoclonal antibodies specific for fibroblast growth factor receptor 4 (fgfr4) and methods of their use
TW201713360A (en) 2015-10-06 2017-04-16 Mayo Foundation Methods of treating cancer using compositions of antibodies and carrier proteins
WO2017060322A2 (en) 2015-10-10 2017-04-13 Bayer Pharma Aktiengesellschaft Ptefb-inhibitor-adc
MA43354A (fr) 2015-10-16 2018-08-22 Genentech Inc Conjugués médicamenteux à pont disulfure encombré
JP7027321B2 (ja) 2015-11-03 2022-03-01 ヤンセン バイオテツク，インコーポレーテツド 抗ｃｄ３８抗体の皮下製剤及びその使用
US10781261B2 (en) 2015-11-03 2020-09-22 Janssen Biotech, Inc. Subcutaneous formulations of anti-CD38 antibodies and their uses
CN105837688B (zh) * 2015-11-20 2019-02-26 北京大学深圳研究生院 单域抗体及其编码基因，免疫毒素及其编码基因、制备方法、表达载体、应用，及宿主细胞
WO2017096179A1 (en) 2015-12-02 2017-06-08 Agenus Inc. Antibodies and methods of use thereof
WO2017120501A1 (en) 2016-01-07 2017-07-13 Mayo Foundation For Medical Education And Research Methods of treating cancer with interferon
WO2017120557A1 (en) * 2016-01-09 2017-07-13 Arbele Limited Cadherin-17 specific antibodies and cytotoxic cells for cancer treatment
GB201601431D0 (en) 2016-01-26 2016-03-09 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepines
TW201731532A (zh) 2016-02-05 2017-09-16 伊繆諾金公司 用於製備細胞結合劑-細胞毒性劑結合物之有效方法
GB201602359D0 (en) 2016-02-10 2016-03-23 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepine Conjugates
GB201602356D0 (en) 2016-02-10 2016-03-23 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepine Conjugates
US11351254B2 (en) 2016-02-12 2022-06-07 Mayo Foundation For Medical Education And Research Hematologic cancer treatments
CN108699161B (zh) 2016-03-04 2022-06-03 莫佛塞斯公司 多发性骨髓瘤中m-蛋白应答的临床评估
WO2017157305A1 (en) 2016-03-15 2017-09-21 Generon (Shanghai) Corporation Ltd. Multispecific fab fusion proteins and use thereof
EP3432928A4 (en) 2016-03-21 2019-11-20 Mayo Foundation for Medical Education and Research PROCESS FOR IMPROVING THE THERAPEUTIC INDEX FOR CHEMOTHERAPEUTIC
WO2017165440A1 (en) 2016-03-21 2017-09-28 Mayo Foundation For Medical Education And Research Methods for reducing toxicity of a chemotherapeutic drug
SG10202008909VA (en) 2016-03-24 2020-10-29 Bayer Pharma AG Prodrugs of cytotoxic active agents having enzymatically cleavable groups
US10618969B2 (en) 2016-04-06 2020-04-14 Mayo Foundation For Medical Education And Research Carrier-binding agent compositions and methods of making and using the same
EP4656204A3 (en) 2016-04-15 2026-06-03 BioAtla, Inc. Anti-axl antibodies, antibody fragments and their immunoconjugates and uses thereof
GB201607478D0 (en) 2016-04-29 2016-06-15 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepine Conjugates
WO2017196847A1 (en) 2016-05-10 2017-11-16 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Variable new antigen receptor (vnar) antibodies and antibody conjugates targeting tumor and viral antigens
EP4122958A1 (en) 2016-05-13 2023-01-25 BioAtla, Inc. Anti-ror2 antibodies, antibody fragments, their immunoconjugates and uses thereof
CN109313200B (zh) 2016-05-27 2022-10-04 豪夫迈·罗氏有限公司 用于表征位点特异性抗体-药物缀合物的生物分析性方法
WO2017214182A1 (en) 2016-06-07 2017-12-14 The United States Of America. As Represented By The Secretary, Department Of Health & Human Services Fully human antibody targeting pdi for cancer immunotherapy
WO2017216028A1 (en) 2016-06-15 2017-12-21 Bayer Pharma Aktiengesellschaft Specific antibody-drug-conjugates (adcs) with ksp inhibitors and anti-cd123-antibodies
RU2019102008A (ru) 2016-06-28 2020-07-28 Ксенкор, Инк. Гетеродимерные антитела, которые связывают рецептор соматостатина 2-го типа
WO2018002181A1 (en) 2016-06-28 2018-01-04 Umc Utrecht Holding B.V. TREATMENT OF IgE-MEDIATED DISEASES WITH ANTIBODIES THAT SPECIFICALLY BIND CD38
MA45674A (fr) 2016-07-15 2019-05-22 Takeda Pharmaceuticals Co Méthodes et matériaux permettant d'évaluer une réponse à des traitements de déplétion de plasmoblastes et de plasmocytes
JP7241677B2 (ja) 2016-07-19 2023-03-17 テバ・ファーマシューティカルズ・オーストラリア・ピーティワイ・リミテッド 抗ｃｄ４７併用療法
US10478497B2 (en) * 2016-07-20 2019-11-19 Hybrigenics S.A. Combinations of inecalcitol with an anti-CD38 agent and their uses for treating cancer
AU2017305170A1 (en) 2016-08-02 2019-02-14 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Monoclonal antibodies targeting glypican-2 (GPC2) and use thereof
WO2018031662A1 (en) 2016-08-11 2018-02-15 Genentech, Inc. Pyrrolobenzodiazepine prodrugs and antibody conjugates thereof
CN109843336A (zh) 2016-09-01 2019-06-04 梅约医学教育与研究基金会 用于靶向t细胞癌症的方法和组合物
CN109890419A (zh) 2016-09-01 2019-06-14 梅约医学教育与研究基金会 用于治疗癌症的载体-pd-l1结合剂组合物
US11590098B2 (en) 2016-09-06 2023-02-28 Mayo Foundation For Medical Education And Research Methods of treating triple-negative breast cancer using compositions of antibodies and carrier proteins
AU2017324947A1 (en) 2016-09-06 2019-03-28 Mayo Foundation For Medical Education And Research Paclitaxel-albumin-binding agent compositions and methods for using and making the same
CN109843924A (zh) 2016-09-06 2019-06-04 梅约医学教育与研究基金会 治疗表达pd-l1的癌症的方法
GB201617466D0 (en) 2016-10-14 2016-11-30 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepine conjugates
TWI788307B (zh) * 2016-10-31 2023-01-01 美商艾歐凡斯生物治療公司 用於擴增腫瘤浸潤性淋巴細胞之工程化人造抗原呈現細胞
CA3041340A1 (en) 2016-11-09 2018-05-17 Agenus Inc. Anti-ox40 antibodies, anti-gitr antibodies, and methods of use thereof
CA3036983A1 (en) 2016-11-21 2018-05-24 Cureab Gmbh Anti-gp73 antibodies and immunoconjugates
EP3559038B1 (en) 2016-12-21 2022-12-14 The United States of America as represented by The Secretary Department of Health and Human Services Human monoclonal antibodies specific for flt3 and uses thereof
US12059472B2 (en) 2016-12-21 2024-08-13 Bayer Aktiengesellschaft Prodrugs of cytotoxic active agents having enzymatically cleavable groups
AU2017380871C1 (en) 2016-12-21 2025-05-15 Bayer Aktiengesellschaft Antibody drug conjugates (ADCs) having enzymatically cleavable groups
US11433140B2 (en) 2016-12-21 2022-09-06 Bayer Pharma Aktiengesellschaft Specific antibody drug conjugates (ADCs) having KSP inhibitors
WO2018133139A1 (zh) 2017-01-21 2018-07-26 宁波知明生物科技有限公司 芍药苷-6'-o-苯磺酸酯在治疗干燥综合征的应用
RS61795B1 (sr) 2017-02-08 2021-06-30 Adc Therapeutics Sa Konjugati pirolobenzodiazepin antitela
GB201702031D0 (en) 2017-02-08 2017-03-22 Medlmmune Ltd Pyrrolobenzodiazepine-antibody conjugates
SMT202200490T1 (it) 2017-04-18 2023-01-13 Medimmune Ltd Coniugati di pirrolobenzodiazepina
WO2018193102A1 (en) 2017-04-20 2018-10-25 Adc Therapeutics Sa Combination therapy with an anti-axl antibody-drug conjugate
US11389480B2 (en) 2017-05-19 2022-07-19 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Human monoclonal antibody targeting TNFR2 for cancer immunotherapy
KR102770106B1 (ko) 2017-06-08 2025-02-21 블랙 벨트 테라퓨틱스 리미티드 Cd38 조정 항체
US11780930B2 (en) 2017-06-08 2023-10-10 Black Belt Therapeutics Limited CD38 modulating antibody
KR102442736B1 (ko) 2017-06-14 2022-09-16 에이디씨 테라퓨틱스 에스에이 항-cd19 adc의 투여를 위한 투약량 체제
CN110997902B (zh) 2017-06-20 2021-11-30 居里研究所 Suv39h1缺陷的免疫细胞
JP7359700B2 (ja) * 2017-06-20 2023-10-11 ソレント・セラピューティクス・インコーポレイテッド Ｃｄ３８抗体薬物コンジュゲート
WO2019005208A1 (en) 2017-06-30 2019-01-03 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services ANTIBODIES TO HUMAN MESOTHELIN AND USES IN ANTICANCER THERAPY
WO2019006280A1 (en) 2017-06-30 2019-01-03 Lentigen Technology, Inc. HUMAN MONOCLONAL ANTIBODIES SPECIFIC TO CD33 AND METHODS OF USE
EP3434692A1 (en) * 2017-07-24 2019-01-30 Encefa Compounds which specifically binds to cd38 for use in the treatment of neurodegenerative diseases
EP3661557B1 (en) 2017-07-31 2025-09-03 Actinium Pharmaceuticals, Inc. Treatments for a hematological malignancy
BR112020002636A2 (pt) * 2017-08-10 2020-07-28 Grifols Diagnostic Solutions Inc. composições, métodos e/ou kits que compreendem um domínio extracelular recombinante de cd38 humano
JP7299873B2 (ja) * 2017-08-16 2023-06-28 ブラック ベルト セラピューティクス リミテッド Ｃｄ３８抗体
WO2019035938A1 (en) 2017-08-16 2019-02-21 Elstar Therapeutics, Inc. MULTISPECIFIC MOLECULES BINDING TO BCMA AND USES THEREOF
AU2018316521B2 (en) 2017-08-16 2025-01-30 Black Belt Therapeutics Limited CD38 modulating antibody
SI3668874T1 (sl) 2017-08-18 2022-04-29 Medimmune Limited Pirolobenzodiazepinski konjugati
US20200207867A1 (en) 2017-09-13 2020-07-02 Teneobio, Inc. Heavy chain antibodies binding to ectoenzymes
EP3692066A2 (en) * 2017-09-14 2020-08-12 GlaxoSmithKline Intellectual Property Development Limited Combination treatment for cancer
CA3177215C (en) 2017-09-29 2026-06-09 Daiichi Sankyo Company, Limited Antibody-pyrrolobenzodiazepine derivative conjugate
IL320863A (en) * 2017-10-02 2025-07-01 Visterra Inc Antibodies to CD138 and their uses
CN111788225B (zh) * 2017-10-10 2025-02-18 赛诺菲 抗cd38抗体及与抗cd3和抗cd28抗体的组合
US11618787B2 (en) 2017-10-31 2023-04-04 Janssen Biotech, Inc. Methods of treating high risk multiple myeloma
MA49911A (fr) 2017-11-01 2020-06-24 Juno Therapeutics Inc Anticorps et récepteurs antigéniques chimériques spécifiques de l'antigene de maturation des lymphocytes b
JP7357626B2 (ja) 2017-11-01 2023-10-06 ジュノー セラピューティクス インコーポレイテッド 操作された細胞の治療用組成物を生成するためのプロセス
WO2019089848A1 (en) 2017-11-01 2019-05-09 Juno Therapeutics, Inc. Methods associated with tumor burden for assessing response to a cell therapy
US11066475B2 (en) 2017-11-01 2021-07-20 Juno Therapeutics, Inc. Chimeric antigen receptors specific for B-cell maturation antigen and encoding polynucleotides
CA3080509A1 (en) 2017-11-01 2019-05-09 Juno Therapeutics, Inc. Process for producing a t cell composition
WO2019089858A2 (en) 2017-11-01 2019-05-09 Juno Therapeutics, Inc. Methods of assessing or monitoring a response to a cell therapy
WO2019094931A1 (en) * 2017-11-10 2019-05-16 Actinium Pharmaceuticals, Inc. Combination therapy for treatment of a hematological disease
AU2018379091A1 (en) 2017-12-08 2020-06-25 Juno Therapeutics, Inc. Serum-free media formulation for culturing cells and methods of use thereof
BR112020011223A2 (pt) 2017-12-08 2020-11-17 Juno Therapeutics Inc marcadores fenotípicos para terapia celular e mé-todos relacionados
CN119193493A (zh) 2017-12-08 2024-12-27 朱诺治疗学股份有限公司 生产工程化t细胞组合物的过程
MX2020007429A (es) 2018-01-12 2020-10-15 Takeda Pharmaceuticals Co Dosificacion subcutanea de anticuerpos anti grupo de diferenciacion 38 (cd38).
WO2019143948A1 (en) 2018-01-18 2019-07-25 Fred Hutchinson Cancer Research Center Altering inflammatory states of immune cells in vivo by modulating cellular activation states
AU2019216269B2 (en) 2018-01-30 2025-05-01 Cellectis Combination comprising allogeneic immune cells deficient for an antigen present on both T-cells and pathological cells and therapeutic antibody against said antigen
CN110144008B (zh) * 2018-02-12 2021-03-19 杭州尚健生物技术有限公司 Cd38蛋白抗体及其应用
GB201803342D0 (en) 2018-03-01 2018-04-18 Medimmune Ltd Methods
MX2020009326A (es) * 2018-03-08 2020-10-08 Phanes Therapeutics Inc Anticuerpos anti-claudina 18.2 y usos de los mismos.
EP3546475A1 (en) 2018-03-27 2019-10-02 Sanofi Full flow-through process for purifying recombinant proteins
CN112469477A (zh) 2018-04-04 2021-03-09 Xencor股份有限公司 与成纤维细胞活化蛋白结合的异源二聚体抗体
GB201806022D0 (en) 2018-04-12 2018-05-30 Medimmune Ltd Pyrrolobenzodiazepines and conjugates thereof
US12048745B2 (en) 2018-05-01 2024-07-30 Augusta University Research Institute, Inc. Methods for detecting and reversing immune therapy resistance
WO2019220368A1 (en) * 2018-05-16 2019-11-21 Janssen Biotech, Inc. Bcma/cd3 and gprdc5d/cd3 bispecific antibodies for use in cancer therapy
CN108752475B (zh) * 2018-06-14 2021-07-30 北京智仁美博生物科技有限公司 抗人cd38抗体及其用途
BR112021000065A2 (pt) 2018-07-10 2021-04-06 Sanofi Terapias de combinação contra câncer direcionando cd38 e tgf-beta
JP7459043B2 (ja) 2018-07-12 2024-04-01 ザ ユナイテッド ステイツ オブ アメリカ， アズ リプレゼンテッド バイ ザ セクレタリー， デパートメント オブ ヘルス アンド ヒューマン サービシーズ 親和性成熟ｃｄ２２特異的モノクローナル抗体およびその使用
EP3820900A1 (en) 2018-07-13 2021-05-19 Genmab A/S Variants of cd38 antibody and uses thereof
MA53123A (fr) 2018-07-13 2021-05-19 Genmab As Thérapie à médiation par trogocytose utilisant des anticorps cd38
CA3106544A1 (en) 2018-08-08 2020-02-13 Mitchell Ho High affinity monoclonal antibodies targeting glypican-2 and uses thereof
CN112805378A (zh) 2018-08-09 2021-05-14 朱诺治疗学股份有限公司 用于评估整合核酸的方法
CA3110837A1 (en) 2018-08-28 2020-03-05 Vor Biopharma Inc. Genetically engineered hematopoietic stem cells and uses thereof
EP3847196A4 (en) 2018-09-07 2023-01-04 ITabMed (HK) Limited BISPECIFIC ANTIGEN BINDING PROTEINS AND USES THEREOF
CN112513087B (zh) 2018-09-11 2023-01-24 江苏恒瑞医药股份有限公司 抗cd38抗体、其抗原结合片段及医药用途
CN109293773B (zh) * 2018-09-25 2020-09-04 上海邦耀生物科技有限公司 靶向cd38蛋白的抗体、嵌合抗原受体和药物
CN109265551B (zh) * 2018-09-25 2020-09-15 华东师范大学 Cd38抗体、嵌合抗原受体和药物
MA53920A (fr) 2018-10-17 2021-09-15 Janssen Biotech Inc Procédé de fourniture d'administration sous-cutanée d'anticorps anti-cd38
WO2020087065A1 (en) 2018-10-26 2020-04-30 Teneobio, Inc. Heavy chain antibodies binding to cd38
CN119569895A (zh) 2018-11-01 2025-03-07 朱诺治疗学股份有限公司 G蛋白偶合受体c类5族成员d(gprc5d)特异性嵌合抗原受体
US12473345B2 (en) 2018-11-01 2025-11-18 Juno Therapeutics, Inc. Methods for treatment using chimeric antigen receptors specific for B-cell maturation antigen
CN113015805B (zh) 2018-11-13 2024-12-03 詹森生物科技公司 抗cd38抗体产生期间的痕量金属的控制
MX2021007047A (es) 2018-12-14 2021-10-26 Morphosys Ag Formulaciones de anticuerpos.
WO2020132810A1 (en) 2018-12-24 2020-07-02 Generon (Shanghai) Corporation Ltd. Multispecific antigen binding proteins capable of binding cd19 and cd3, and use thereof
AU2020206308B2 (en) 2019-01-08 2026-02-05 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Cross-species single domain antibodies targeting mesothelin for treating solid tumors
WO2020154150A1 (en) 2019-01-22 2020-07-30 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services High affinity monoclonal antibodies targeting glypican-1 and methods of use
TWI870378B (zh) 2019-01-28 2025-01-21 大陸商沐特圖公司 Ｃｄ４４特異性抗體
IL285110B2 (en) 2019-01-28 2025-11-01 Sanofi Sa Methods of treating multiple myeloma
CN113710706A (zh) 2019-02-27 2021-11-26 豪夫迈·罗氏有限公司 用于抗tigit抗体和抗cd20抗体或抗cd38抗体治疗的给药
CN113631560B (zh) 2019-03-15 2025-02-18 麦迪穆有限责任公司 氮杂环丁烷并苯并二氮杂䓬二聚体和用于治疗癌症的包含它们的缀合物
TWI924633B (zh) 2019-03-15 2026-05-11 德商莫菲西斯公司 用於治療自體抗體介導的自體免疫疾病的抗-cd38 抗體及其醫藥組成物
SG11202111602YA (en) * 2019-04-23 2021-11-29 Sanofi Sa Anti-cd38 antibodies and formulations
CA3136737A1 (en) 2019-05-01 2020-11-05 Juno Therapeutics, Inc. Cells expressing a recombinant receptor from a modified tgfbr2 locus, related polynucleotides and methods
SG11202111372VA (en) 2019-05-01 2021-11-29 Juno Therapeutics Inc Cells expressing a chimeric receptor from a modified cd247 locus, related polynucleotides and methods
CN120501855A (zh) 2019-05-14 2025-08-19 赛诺菲-安万特美国有限责任公司 给予抗cd38抗体以治疗多发性骨髓瘤的方法
US11655302B2 (en) 2019-06-10 2023-05-23 Sanofi Anti-CD38 antibodies and formulations
BR112021025421A2 (pt) 2019-06-17 2022-02-01 Visterra Inc Moléculas de anticorpo humanizado para cd138 e os usos dos mesmos
AU2020307667A1 (en) 2019-06-27 2022-01-20 Crispr Therapeutics Ag Use of chimeric antigen receptor T cells and NK cell inhibitors for treating cancer
BR112021026832A2 (pt) 2019-07-02 2022-05-10 Hutchinson Fred Cancer Res Vetores ad35 recombinantes e aprimoramentos da terapia gênica relacionada
EP4003407A1 (en) 2019-07-23 2022-06-01 Mnemo Therapeutics Immune cells defective for suv39h1
CN112538114B (zh) * 2019-09-20 2025-05-02 上海普铭生物科技有限公司 抗人cd38抗体及其应用
WO2021081133A1 (en) * 2019-10-21 2021-04-29 Purdue Research Foundation Engineered natural killer cells and methods for using the same in immunotherapy and autophagy inhibition techniques
CA3156761A1 (en) 2019-10-22 2021-04-29 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services High affinity nanobodies targeting b7h3 (cd276) for treating multiple solid tumors
IL292458A (en) 2019-11-06 2022-06-01 Genentech Inc Diagnostic and treatment methods for the treatment of hematological cancer
GB201916150D0 (en) 2019-11-06 2019-12-18 Univ Of Ireland Galway Treatment of multiple myeloma
CN112876563B (zh) * 2019-11-29 2022-08-16 康诺亚生物医药科技（成都）有限公司 药物组合物及其制备方法和应用
AU2020397170A1 (en) 2019-12-05 2022-07-21 Sanofi-Aventis U.S. Llc Formulations of anti-CD38 antibodies for subcutaneous administration
TWI887310B (zh) * 2019-12-06 2025-06-21 美商賽諾菲 安萬特美國有限責任公司 艾薩妥昔單抗用於治療復發性和/或難治性多發性骨髓瘤的用途
EP4041769A1 (en) 2019-12-12 2022-08-17 The United States of America, as represented by the Secretary, Department of Health and Human Services Antibody-drug conjugates specific for cd276 and uses thereof
BR112022011824A2 (pt) 2019-12-18 2022-08-30 Teneofour Inc Anticorpos de cadeia pesada que se ligam a cd38
MX2022008050A (es) 2020-01-16 2022-07-27 Genmab As Formulaciones de anticuerpos anti cumulo de diferenciacion 38 (cd38) y usos de las mismas.
IL297147B1 (en) 2020-04-10 2026-05-01 Juno Therapeutics Inc Methods and uses related to engineered cell therapy with a chimeric antigen receptor directed against a B-cell maturation antigen
CA3176425A1 (en) * 2020-04-24 2021-10-28 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Anti-cd19 antibodies and uses thereof
KR20230024283A (ko) 2020-05-13 2023-02-20 주노 쎄러퓨티크스 인코퍼레이티드 임상 반응과 관련된 특징을 식별하는 방법 및 이의 용도
WO2021231976A1 (en) 2020-05-14 2021-11-18 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind prostate specific membrane antigen (psma) and cd3
EP4149632A1 (en) 2020-05-14 2023-03-22 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind msln and cd3
EP4171616A1 (en) 2020-06-26 2023-05-03 Juno Therapeutics GmbH Engineered t cells conditionally expressing a recombinant receptor, related polynucleotides and methods
EP4171585A1 (en) 2020-06-26 2023-05-03 CRISPR Therapeutics AG Allogeneic cell therapy of b cell malignancies using genetically engineered t cells targeting cd19
CN111808193B (zh) * 2020-06-30 2022-04-05 源道隆（苏州）医学科技有限公司 可结合人cd38的纳米抗体及其应用
JP7886313B2 (ja) 2020-07-30 2026-07-07 アンスティテュ・クリー Ｓｏｃｓ１に欠陥のある免疫細胞
CN114075283A (zh) * 2020-08-12 2022-02-22 三生国健药业（上海）股份有限公司 结合人cd38的抗体、其制备方法和用途
CN114075285B (zh) * 2020-08-20 2023-05-30 瑞阳(苏州)生物科技有限公司 抗人cd38人源化单克隆抗体及其应用
WO2022056489A1 (en) 2020-09-14 2022-03-17 Vor Biopharma, Inc. Compositions and methods for cd38 modification
WO2022093745A1 (en) 2020-10-26 2022-05-05 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Single domain antibodies targeting sars coronavirus spike protein and uses thereof
CN112300281B (zh) * 2020-10-29 2021-06-11 杭州爱唯生命科技有限公司 含有nk细胞的药物组合物及其治疗癌症的用途
IL302640A (en) 2020-11-03 2023-07-01 Sanofi Aventis Us Llc Use of isatuximab for the treatment of multiple myeloma
JP2023549780A (ja) 2020-11-04 2023-11-29 ジュノー セラピューティクス インコーポレイテッド 改変されたインバリアントｃｄ３免疫グロブリンスーパーファミリー鎖遺伝子座からキメラ受容体を発現する細胞ならびに関連するポリヌクレオチドおよび方法
EP4251282A1 (en) 2020-11-27 2023-10-04 Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale (INSERM) Methods for diagnosis and monitoring of toxic epidermal necrolysis
JP2024508207A (ja) 2020-12-02 2024-02-26 ブイアイビー ブイゼットダブリュ がんに対する組み合わせ治療におけるｌｔｂｒアゴニスト
WO2022137186A1 (en) 2020-12-23 2022-06-30 Crispr Therapeutics Ag Cancer treatment using cd38 inhibitor and/or lenalidomide and t-cells expressing a chimeric antigen receptor
EP4277930A1 (en) 2021-01-14 2023-11-22 MorphoSys AG Anti-cd38 antibodies and their uses
AU2022218137A1 (en) 2021-02-03 2023-08-24 Mozart Therapeutics, Inc. Binding agents and methods of using the same
US20220275090A1 (en) 2021-02-22 2022-09-01 Janssen Biotech, Inc. Combination Therapies with Anti-CD38 Antibodies and PARP or Adenosine Receptor Inhibitors
TW202302642A (zh) 2021-03-01 2023-01-16 德商莫菲西斯公司 用於治療抗體介導移植物排斥用途之抗ｃｄ３８抗體
KR20230165771A (ko) 2021-03-03 2023-12-05 주노 쎄러퓨티크스 인코퍼레이티드 T 세포 요법 및 dgk 억제제의 조합
EP4305067A1 (en) 2021-03-09 2024-01-17 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind cd3 and cldn6
US11859012B2 (en) 2021-03-10 2024-01-02 Xencor, Inc. Heterodimeric antibodies that bind CD3 and GPC3
WO2022232612A1 (en) 2021-04-29 2022-11-03 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Lassa virus-specific nanobodies and methods of their use
CN117916256A (zh) 2021-05-06 2024-04-19 朱诺治疗学有限公司 用于刺激和转导t细胞的方法
US20240269282A1 (en) 2021-05-10 2024-08-15 Institut Curie Methods for the Treatment of Cancer, Inflammatory Diseases and Autoimmune Diseases
US20220387488A1 (en) 2021-05-12 2022-12-08 Crispr Therapeutics Ag Genetically engineered immune cells targeting cd70 for use in treating hematopoietic malignancies
US20220378829A1 (en) 2021-05-12 2022-12-01 Crispr Therapeutics Ag Genetically engineered immune cells targeting cd70 for use in treating solid tumors
CN113244175B (zh) * 2021-05-22 2022-11-04 苏州大学 一种免疫囊泡美登素偶联物及其制备方法与应用
US20250304915A1 (en) 2021-05-25 2025-10-02 Institut Curie Myeloid Cells Overexpressing BCL2
CA3216228A1 (en) 2021-06-09 2022-12-15 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Cross species single domain antibodies targeting pd-l1 for treating solid tumors
CN113278075B (zh) * 2021-06-18 2021-12-14 芜湖森爱驰生物科技有限公司 一种炎症检测试剂盒
WO2022271987A1 (en) 2021-06-23 2022-12-29 TeneoFour, Inc. Anti-cd38 antibodies and epitopes of same
TW202321303A (zh) 2021-07-19 2023-06-01 德商莫菲西斯公司 抗pla2r自體抗體媒介膜性腎病變之治療
EP4376869A1 (en) 2021-07-28 2024-06-05 Genentech, Inc. Il15/il15r alpha heterodimeric fc-fusion proteins for the treatment of blood cancers
WO2023056403A1 (en) 2021-09-30 2023-04-06 Genentech, Inc. Methods for treatment of hematologic cancers using anti-tigit antibodies, anti-cd38 antibodies, and pd-1 axis binding antagonists
CN113896802A (zh) * 2021-10-09 2022-01-07 宜明昂科生物医药技术（上海）有限公司 靶向cd47和cd38的重组融合蛋白及其制备和用途
WO2023076876A1 (en) 2021-10-26 2023-05-04 Mozart Therapeutics, Inc. Modulation of immune responses to viral vectors
US20230134748A1 (en) 2021-11-03 2023-05-04 Janssen Biotech, Inc. Corticosteriod Reduction in Treatment with Anti-CD38 Antibody
EP4426437A4 (en) 2021-11-03 2025-09-17 Janssen Biotech Inc METHODS FOR TREATING CANCER AND ENHANCING THE EFFICACY OF BISPECIFIC BCMAXCD3 ANTIBODIES
CN113912727B (zh) * 2021-11-16 2023-05-02 福州迈新生物技术开发有限公司 抗cd38蛋白单克隆抗体、细胞系及其制备方法和应用
JP2025501272A (ja) 2021-12-28 2025-01-17 ムネモ・セラピューティクス 不活性化されたｓｕｖ３９ｈ１及び改変ｔｃｒを有する免疫細胞
CN114457017B (zh) * 2022-01-19 2023-10-17 四川大学华西第二医院 一种小鼠成纤维细胞肿瘤细胞株HXLyAF-KBM及其应用
KR20240137075A (ko) 2022-01-28 2024-09-19 주노 쎄러퓨티크스 인코퍼레이티드 세포 조성물의 제조 방법
WO2023144303A1 (en) 2022-01-31 2023-08-03 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Cd38 as a biomarker and biotarget in t-cell lymphomas
CA3252736A1 (en) 2022-02-18 2023-08-24 Rakuten Medical, Inc. Anti-PD-L1 (Programmed Death-Ligand 1) Antibody Molecules, Coding Polynucleotides, and Methods of Use
KR20250029015A (ko) 2022-03-07 2025-03-04 사노피-아벤티스 유.에스. 엘엘씨 다발성 골수종의 치료를 위한, 다른 제제와 조합된 이사툭시맙의 용도
EP4499677A1 (en) 2022-03-31 2025-02-05 Institut Curie Modified rela protein for inducing interferon expression and engineered immune cells with improved interferon expression
PE20242350A1 (es) 2022-05-03 2024-12-16 Genentech Inc Anticuerpos anti-ly6e, inmunoconjugados y usos de estos
US20250297282A1 (en) 2022-05-05 2025-09-25 Juno Therapeutics Gmbh Viral-binding protein and related reagents, articles, and methods of use
US20250302954A1 (en) 2022-05-11 2025-10-02 Celgene Corporation Methods to overcome drug resistance by re-sensitizing cancer cells to treatment with a prior therapy via treatment with a t cell therapy
US20250345432A1 (en) 2022-05-25 2025-11-13 Celgene Corporation Method for predicting response to a t cell therapy
WO2023230581A1 (en) 2022-05-25 2023-11-30 Celgene Corporation Methods of manufacturing t cell therapies
EP4536278A4 (en) 2022-06-07 2026-08-12 Actinium Pharmaceuticals Inc CHELETARIANS AND BIFUNCTIONAL CONJUGATES
WO2024040151A1 (en) 2022-08-18 2024-02-22 Pfizer Inc. Sirp alpha fusion protein and anti-cd38 antibody combination therapies
KR20250061756A (ko) 2022-09-08 2025-05-08 주노 쎄러퓨티크스 인코퍼레이티드 T 세포 요법과 연속적 또는 간헐적 dgk 억제제 투여의 조합
TW202423970A (zh) 2022-10-10 2024-06-16 瑞士商赫孚孟拉羅股份公司 Ｇｐｒｃ５ｄ ｔｃｂ及ｃｄ３８抗體之組合療法
US20250382378A1 (en) 2022-10-31 2025-12-18 Genmab A/S Cd38 antibodies and uses thereof
IL320562A (en) 2022-11-02 2025-07-01 Janssen Biotech Inc Cancer treatment methods
WO2024100604A1 (en) 2022-11-09 2024-05-16 Juno Therapeutics Gmbh Methods for manufacturing engineered immune cells
CN121100267A (zh) 2022-12-09 2025-12-09 朱诺治疗学股份有限公司 使用全息成像预测细胞表型的机器学习方法
US20260232729A1 (en) 2023-02-03 2026-08-13 C3S2 Gmbh Methods for non-viral manufacturing of engineered immune cells
WO2025019228A1 (en) 2023-07-20 2025-01-23 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Fully human monoclonal antibodies and chimeric antigen receptors against cd276 for the treatment of solid tumors
EP4509142A1 (en) 2023-08-16 2025-02-19 Ona Therapeutics S.L. Fgfr4 as target in cancer treatment
AU2024392986A1 (en) 2023-12-06 2026-07-16 Sanofi-Aventis U.S. Llc Use of anti-cd38 antibody in the treatment of new diagnosed multiple myeloma
AU2025218272A1 (en) 2024-02-07 2026-06-25 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Monoclonal antibodies that bind the juxta-membrane region of mesothelin and uses thereof
WO2025231372A2 (en) 2024-05-03 2025-11-06 Janssen Biotech, Inc. Methods for treating multiple myeloma with car-t cells and bispecific antibodies
WO2025245526A1 (en) * 2024-05-24 2025-11-27 Research Institute At Nationwide Children's Hospital Cd-38 protein binding compositions and methods related thereto
US20260070998A1 (en) 2024-09-10 2026-03-12 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating multiple myeloma with bcma inhibitors in combination with cd38 inhibitors
WO2026093520A1 (en) 2024-10-31 2026-05-07 Institut Curie Short-csf1-associated extracellular vesicles and uses thereof
WO2026133125A1 (en) 2024-12-16 2026-06-25 Janssen Biotech, Inc. T cell-specific promoters and methods of use
WO2026165109A1 (en) 2025-01-28 2026-08-06 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Tem8 monoclonal antibodies and their use

Family Cites Families (128)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2429001A (en) 1946-12-28 1947-10-14 Axel H Stone Artificial hand
US2429004A (en) 1947-02-20 1947-10-14 Wachsman Michael Fabric contacting circuit closer for knitting machines
FR1516743A (fr) 1966-04-01 1968-02-05 Rhone Poulenc Sa Nouvel antibiotique et son procédé de préparation par culture de streptomyces croceus
US4307016A (en) 1978-03-24 1981-12-22 Takeda Chemical Industries, Ltd. Demethyl maytansinoids
US4256746A (en) 1978-11-14 1981-03-17 Takeda Chemical Industries Dechloromaytansinoids, their pharmaceutical compositions and method of use
JPS55102583A (en) 1979-01-31 1980-08-05 Takeda Chem Ind Ltd 20-acyloxy-20-demethylmaytansinoid compound
JPS55162791A (en) 1979-06-05 1980-12-18 Takeda Chem Ind Ltd Antibiotic c-15003pnd and its preparation
JPS5645483A (en) 1979-09-19 1981-04-25 Takeda Chem Ind Ltd C-15003phm and its preparation
EP0028683A1 (en) 1979-09-21 1981-05-20 Takeda Chemical Industries, Ltd. Antibiotic C-15003 PHO and production thereof
JPS5645485A (en) 1979-09-21 1981-04-25 Takeda Chem Ind Ltd Production of c-15003pnd
US4444887A (en) 1979-12-10 1984-04-24 Sloan-Kettering Institute Process for making human antibody producing B-lymphocytes
WO1982001188A1 (en) 1980-10-08 1982-04-15 Takeda Chemical Industries Ltd 4,5-deoxymaytansinoide compounds and process for preparing same
US4450254A (en) 1980-11-03 1984-05-22 Standard Oil Company Impact improvement of high nitrile resins
US4315929A (en) 1981-01-27 1982-02-16 The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture Method of controlling the European corn borer with trewiasine
US4313946A (en) 1981-01-27 1982-02-02 The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture Chemotherapeutically active maytansinoids from Trewia nudiflora
JPS57192389A (en) 1981-05-20 1982-11-26 Takeda Chem Ind Ltd Novel maytansinoid
US4716111A (en) 1982-08-11 1987-12-29 Trustees Of Boston University Process for producing human antibodies
GB8308235D0 (en) 1983-03-25 1983-05-05 Celltech Ltd Polypeptides
US4816567A (en) 1983-04-08 1989-03-28 Genentech, Inc. Recombinant immunoglobin preparations
US5807715A (en) 1984-08-27 1998-09-15 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Methods and transformed mammalian lymphocyte cells for producing functional antigen-binding protein including chimeric immunoglobulin
GB8607679D0 (en) 1986-03-27 1986-04-30 Winter G P Recombinant dna product
US4946778A (en) 1987-09-21 1990-08-07 Genex Corporation Single polypeptide chain binding molecules
US5258498A (en) 1987-05-21 1993-11-02 Creative Biomolecules, Inc. Polypeptide linkers for production of biosynthetic proteins
IL89489A0 (en) 1988-03-09 1989-09-10 Hybritech Inc Chimeric antibodies directed against human carcinoembryonic antigen
KR900700134A (ko) 1988-04-15 1990-08-11 원본미기재 Il-2 수용체-특이적 키메릭 항체
ATE119198T1 (de) 1988-04-16 1995-03-15 Celltech Ltd Verfahren zur herstellung von proteinen mittels rekombinanter dna.
US5223409A (en) 1988-09-02 1993-06-29 Protein Engineering Corp. Directed evolution of novel binding proteins
DE68927933T2 (de) 1988-09-02 1997-08-14 Dyax Corp Herstellung und auswahl von rekombinantproteinen mit verschiedenen bindestellen
US5530101A (en) 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
US5208020A (en) 1989-10-25 1993-05-04 Immunogen Inc. Cytotoxic agents comprising maytansinoids and their therapeutic use
GB8928874D0 (en) 1989-12-21 1990-02-28 Celltech Ltd Humanised antibodies
US5780225A (en) 1990-01-12 1998-07-14 Stratagene Method for generating libaries of antibody genes comprising amplification of diverse antibody DNAs and methods for using these libraries for the production of diverse antigen combining molecules
AU7247191A (en) 1990-01-11 1991-08-05 Molecular Affinities Corporation Production of antibodies using gene libraries
EP1690935A3 (en) 1990-01-12 2008-07-30 Abgenix, Inc. Generation of xenogeneic antibodies
US5427908A (en) 1990-05-01 1995-06-27 Affymax Technologies N.V. Recombinant library screening methods
GB9015198D0 (en) 1990-07-10 1990-08-29 Brien Caroline J O Binding substance
US5545806A (en) 1990-08-29 1996-08-13 Genpharm International, Inc. Ransgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US5814318A (en) 1990-08-29 1998-09-29 Genpharm International Inc. Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US5698426A (en) 1990-09-28 1997-12-16 Ixsys, Incorporated Surface expression libraries of heteromeric receptors
DE69129154T2 (de) 1990-12-03 1998-08-20 Genentech, Inc., South San Francisco, Calif. Verfahren zur anreicherung von proteinvarianten mit geänderten bindungseigenschaften
PT100379B (pt) 1991-04-10 1999-01-29 Scripps Research Inst Bibliotecas de receptores heterodimericos usando fagomideos
DE69233482T2 (de) 1991-05-17 2006-01-12 Merck & Co., Inc. Verfahren zur Verminderung der Immunogenität der variablen Antikörperdomänen
EP0590058B1 (en) 1991-06-14 2003-11-26 Genentech, Inc. HUMANIZED Heregulin ANTIBODy
JPH07503124A (ja) 1991-06-14 1995-04-06 ゾーマ・コーポレーション 微生物によって生産される抗体断片とそれらの複合体
ES2136092T3 (es) 1991-09-23 1999-11-16 Medical Res Council Procedimientos para la produccion de anticuerpos humanizados.
PT1024191E (pt) 1991-12-02 2008-12-22 Medical Res Council Produção de auto-anticorpos a partir de reportórios de segmentos de anticorpo e exibidos em fagos
US5733743A (en) 1992-03-24 1998-03-31 Cambridge Antibody Technology Limited Methods for producing members of specific binding pairs
EP0563475B1 (en) 1992-03-25 2000-05-31 Immunogen Inc Cell binding agent conjugates of derivatives of CC-1065
AU4025193A (en) 1992-04-08 1993-11-18 Cetus Oncology Corporation Humanized C-erbB-2 specific antibodies
CA2119128C (en) * 1992-07-16 2000-05-30 Lynn M. Rose Alleviation of symptoms associated with inflammatory disease states
US5639641A (en) 1992-09-09 1997-06-17 Immunogen Inc. Resurfacing of rodent antibodies
JPH09506262A (ja) 1993-12-08 1997-06-24 ジェンザイム・コーポレイション 特異的抗体の製造方法
ES2201097T3 (es) 1994-01-31 2004-03-16 Trustees Of Boston University Bibliotecas de anticuerpos policlonales.
US5516637A (en) 1994-06-10 1996-05-14 Dade International Inc. Method involving display of protein binding pairs on the surface of bacterial pili and bacteriophage
GB9424449D0 (en) * 1994-12-02 1995-01-18 Wellcome Found Antibodies
CA2219361C (en) 1995-04-27 2012-02-28 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
WO1996034096A1 (en) 1995-04-28 1996-10-31 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
JP2978435B2 (ja) 1996-01-24 1999-11-15 チッソ株式会社 アクリロキシプロピルシランの製造方法
US5916771A (en) 1996-10-11 1999-06-29 Abgenix, Inc. Production of a multimeric protein by cell fusion method
EP1972194A1 (en) 1996-12-03 2008-09-24 Amgen Fremont Inc. Transgenic mammals having human ig loci including plural vh and vk regions and antibodies produced therefrom
JP3876002B2 (ja) 1997-04-14 2007-01-31 ミクロメート・アクチエンゲゼルシャフト 抗ヒト抗原受容体を産生するための斬新な方法およびそれらの使用
US6235883B1 (en) 1997-05-05 2001-05-22 Abgenix, Inc. Human monoclonal antibodies to epidermal growth factor receptor
JP4334141B2 (ja) 1998-04-20 2009-09-30 グリカート バイオテクノロジー アクチェンゲゼルシャフト 抗体依存性細胞傷害性を改善するための抗体のグリコシル化操作
ES2260570T3 (es) 1998-08-27 2006-11-01 Spirogen Limited Pirrolobenziodiazepinas dimericas.
GB9818731D0 (en) 1998-08-27 1998-10-21 Univ Portsmouth Compounds
US7223397B1 (en) 1999-01-07 2007-05-29 Research Development Foundation Potentiation of anti-CD38-Immunotoxin cytotoxicity
HK1049997B (en) 1999-11-24 2007-02-23 Immunogen, Inc. Cytotoxic agents comprising taxanes and their therapeutic use
AU767394C (en) 1999-12-29 2005-04-21 Immunogen, Inc. Cytotoxic agents comprising modified doxorubicins and daunorubicins and their therapeutic use
AU2001266604A1 (en) * 2000-05-26 2001-12-11 Smith Kline Beecham Corporation Anti-rank ligand monoclonal antibodies useful in treatment of rank ligand mediated disorders
GB0013810D0 (en) * 2000-06-06 2000-07-26 Celltech Chiroscience Ltd Biological products
US6333410B1 (en) 2000-08-18 2001-12-25 Immunogen, Inc. Process for the preparation and purification of thiol-containing maytansinoids
CN103333860B (zh) 2000-10-06 2015-07-08 协和发酵麒麟株式会社 产生抗体组合物的细胞
US6441163B1 (en) 2001-05-31 2002-08-27 Immunogen, Inc. Methods for preparation of cytotoxic conjugates of maytansinoids and cell binding agents
US6716821B2 (en) 2001-12-21 2004-04-06 Immunogen Inc. Cytotoxic agents bearing a reactive polyethylene glycol moiety, cytotoxic conjugates comprising polyethylene glycol linking groups, and methods of making and using the same
US20040132101A1 (en) 2002-09-27 2004-07-08 Xencor Optimized Fc variants and methods for their generation
AU2003217912A1 (en) 2002-03-01 2003-09-16 Xencor Antibody optimization
US6534660B1 (en) 2002-04-05 2003-03-18 Immunogen, Inc. CC-1065 analog synthesis
US6756397B2 (en) 2002-04-05 2004-06-29 Immunogen, Inc. Prodrugs of CC-1065 analogs
EP1498491A4 (en) 2002-04-09 2006-12-13 Kyowa Hakko Kogyo Kk METHOD FOR INCREASING THE ACTIVITY OF AN ANTIBODY COMPOSITION FOR BINDING TO THE FC GAMMA RECEPTOR IIIA
EP1498490A4 (en) 2002-04-09 2006-11-29 Kyowa Hakko Kogyo Kk PROCESS FOR PREPARING ANTIBODY COMPOSITION
US6596757B1 (en) 2002-05-14 2003-07-22 Immunogen Inc. Cytotoxic agents comprising polyethylene glycol-containing taxanes and their therapeutic use
US7538195B2 (en) 2002-06-14 2009-05-26 Immunogen Inc. Anti-IGF-I receptor antibody
CA2832136C (en) 2002-09-27 2015-11-17 Xencor Optimized fc variants and methods for their generation
US7541440B2 (en) * 2002-09-30 2009-06-02 Immunomedics, Inc. Chimeric, human and humanized anti-granulocyte antibodies and methods of use
DK1578446T3 (en) 2002-11-07 2015-06-29 Immunogen Inc ANTI-CD33 ANTIBODIES AND PROCEDURES FOR TREATING ACUTE MYELOID LEUKEMIA BY USING IT
WO2004043989A2 (en) * 2002-11-07 2004-05-27 Medarex, Inc. Human monoclonal antibodies to heparanase
US7276497B2 (en) 2003-05-20 2007-10-02 Immunogen Inc. Cytotoxic agents comprising new maytansinoids
WO2005014649A2 (en) * 2003-08-08 2005-02-17 Pharmacia Corporation Method for the preparation of molecules having antibody activity
US20050208627A1 (en) * 2003-09-18 2005-09-22 Bowdish Katherine S Elicitation of antibodies to self peptides in mice by immunization with dendritic cells
JPWO2005035741A1 (ja) 2003-10-09 2006-12-21 協和醗酵工業株式会社 ゲノムが改変された細胞
AU2004284075A1 (en) 2003-10-22 2005-05-06 Government Of The United States Of America, Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Pyrrolobenzodiazepine derivatives, compositions comprising the same and methods related thereto
WO2005056766A2 (en) * 2003-12-04 2005-06-23 Medimmune, Inc. TARGETED DRUG DELIVERY USING EphA2 OR Eph4 BINDING MOIETIES
EP2915820A1 (en) * 2004-02-06 2015-09-09 MorphoSys AG Anti-CD38 human antibodies and uses therefor
EP1723152B1 (en) 2004-03-09 2015-02-11 Spirogen Sàrl Pyrrolobenzodiazepines
WO2005100402A1 (en) * 2004-04-13 2005-10-27 F.Hoffmann-La Roche Ag Anti-p-selectin antibodies
EP1740946B1 (en) * 2004-04-20 2013-11-06 Genmab A/S Human monoclonal antibodies against cd20
AR049390A1 (es) * 2004-06-09 2006-07-26 Wyeth Corp Anticuerpos contra la interleuquina-13 humana y usos de los mismos
CA2571404A1 (en) * 2004-06-21 2005-12-29 Washington University Antibodies against west nile virus and therapeutic and prophylactic uses thereof
EP3342782B1 (en) 2004-07-15 2022-08-17 Xencor, Inc. Optimized fc variants
ES2381557T3 (es) * 2004-08-03 2012-05-29 Innate Pharma Métodos terapéuticos y de diagnóstico y composiciones para determinar 4IG-B7-H3 y su receptor homólogo en las células NK
US20060223147A1 (en) 2004-08-05 2006-10-05 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd., Process for producing glycoprotein composition
WO2006047350A2 (en) 2004-10-21 2006-05-04 Xencor, Inc. IgG IMMUNOGLOBULIN VARIANTS WITH OPTIMIZED EFFECTOR FUNCTION
US20060257396A1 (en) * 2004-12-15 2006-11-16 Jacobsen Jack S Abeta antibodies for use in improving cognition
PT1853718E (pt) * 2005-02-15 2015-11-12 Univ Duke Anticorpos anti-cd19 e usos em oncologia
EP2551282A3 (en) * 2005-03-23 2013-02-13 Genmab A/S Antibodies against CD38 for treatment of multiple myeloma
AU2006230413B8 (en) 2005-03-31 2011-01-20 Xencor, Inc Fc variants with optimized properties
TW200745162A (en) * 2005-05-24 2007-12-16 Morphosys Ag Generation and profiling of fully human hucal gold-derived therapeutic antibodies specific for human CD38
DE102005030112A1 (de) 2005-06-28 2007-01-18 Patent-Treuhand-Gesellschaft für elektrische Glühlampen mbH Lötzusatzwerkstoff
DK1931709T3 (en) 2005-10-03 2017-03-13 Xencor Inc FC VARIETIES WITH OPTIMIZED FC RECEPTOR BINDING PROPERTIES
DK1813614T3 (da) 2006-01-25 2012-01-23 Sanofi Sa Cytotoksiske midler, der omfatter nye tomaymycinderivater
EP1864682A1 (en) * 2006-06-09 2007-12-12 Sanofi-Aventis Leptomycin derivatives
EP1914242A1 (en) * 2006-10-19 2008-04-23 Sanofi-Aventis Novel anti-CD38 antibodies for the treatment of cancer
CN102159243B (zh) * 2008-07-21 2015-08-19 免疫医疗公司 用于改良的治疗特征的抗体的结构变体
US8877899B2 (en) * 2010-09-27 2014-11-04 Morphosys Ag Anti-CD38 antibody and lenalidomide or bortezomib for the treatment of multipe myeloma and NHL
JOP20210044A1 (ar) * 2010-12-30 2017-06-16 Takeda Pharmaceuticals Co الأجسام المضادة لـ cd38
CN104203982B (zh) * 2011-10-28 2018-08-31 特瓦制药澳大利亚私人有限公司 多肽构建体及其用途
JP2015510200A (ja) 2012-02-20 2015-04-02 ノウリ コリア インコーポレイテッドＫｎｏｗｒｅ Ｋｏｒｅａ Ｉｎｃ． 知識ユニットに基づいて教育サービスを提供するための方法、システム、およびコンピュータ読み取り可能な記録媒体
US10342869B2 (en) * 2012-12-07 2019-07-09 The Regents Of The University Of California Compositions comprising anti-CD38 antibodies and lenalidomide
WO2016040294A2 (en) * 2014-09-09 2016-03-17 Janssen Biotech, Inc. Combination therapies with anti-cd38 antibodies
PE20171094A1 (es) * 2014-12-04 2017-08-07 Janssen Biotech Inc Anticuerpos anti-cd38 para el tratamiento de la leucemia linfoblastica aguda
EP3243138A4 (en) * 2015-01-06 2018-07-25 Hewlett-Packard Development Company, L.P. Adapter to concatenate connectors
CR20170526A (es) * 2015-05-20 2018-04-03 Janssen Biotech Inc ANTICUERPOS ANTI-CD38 PARA EL TRATAMIENTO DE AMILOIDOSIS DE CADENA LIGERA y OTRAS ENFERMEDADES MALIGNAS HEMATOLÓGICAS POSITIVAS PARA CD38
CN107708734B (zh) * 2015-06-22 2022-01-11 詹森生物科技公司 用抗cd38抗体和生存素抑制剂联合治疗血红素恶性肿瘤
US20170044265A1 (en) * 2015-06-24 2017-02-16 Janssen Biotech, Inc. Immune Modulation and Treatment of Solid Tumors with Antibodies that Specifically Bind CD38
US10781261B2 (en) * 2015-11-03 2020-09-22 Janssen Biotech, Inc. Subcutaneous formulations of anti-CD38 antibodies and their uses
JP7027321B2 (ja) * 2015-11-03 2022-03-01 ヤンセン バイオテツク，インコーポレーテツド 抗ｃｄ３８抗体の皮下製剤及びその使用
CN111788225B (zh) * 2017-10-10 2025-02-18 赛诺菲 抗cd38抗体及与抗cd3和抗cd28抗体的组合
US11605302B2 (en) 2020-11-10 2023-03-14 Rockwell Collins, Inc. Time-critical obstacle avoidance path planning in uncertain environments

Also Published As

Publication number Publication date
US20200408765A1 (en) 2020-12-31
ME00614B (me) 2011-12-20
UA114879C2 (uk) 2017-08-28
TW201630938A (zh) 2016-09-01
LT2076540T (lt) 2019-06-10
EA200970393A1 (ru) 2009-12-30
NL301077I2 (nl) 2021-02-03
BRPI0718130B1 (pt) 2022-05-03
CY2020039I1 (el) 2021-03-12
NL301077I1 (sr) 2020-12-02
KR20170129960A (ko) 2017-11-27
DOP2017000177A (es) 2017-09-15
TW201518322A (zh) 2015-05-16
AR063488A1 (es) 2009-01-28
EA025215B1 (ru) 2016-12-30
FR20C1061I1 (sr) 2021-01-22
JP2014221761A (ja) 2014-11-27
WO2008047242A3 (en) 2008-06-26
NO348288B1 (no) 2024-11-11
EP3498735A1 (en) 2019-06-19
NO20211026A1 (no) 2009-05-13
US20120156218A1 (en) 2012-06-21
AU2007311511B9 (en) 2020-11-12
US20170343550A1 (en) 2017-11-30
ES2726754T3 (es) 2019-10-09
US20090304710A1 (en) 2009-12-10
HK1139956A1 (en) 2010-09-30
WO2008047242A2 (en) 2008-04-24
EP2076540A2 (en) 2009-07-08
MY159374A (en) 2016-12-30
US20110262454A1 (en) 2011-10-27
EP3909980A1 (en) 2021-11-17
EP2076540B1 (en) 2019-02-27
FR20C1061I2 (fr) 2022-02-11
AU2007311511B2 (en) 2013-08-22
TWI538917B (zh) 2016-06-21
CN101616933A (zh) 2009-12-30
CR10679A (es) 2009-06-24
CL2012002012A1 (es) 2012-11-05
CN101616933B (zh) 2015-06-10
KR20090078330A (ko) 2009-07-17
CL2017001580A1 (es) 2018-03-02
JP5607364B2 (ja) 2014-10-15
JP6121366B2 (ja) 2017-04-26
CL2007002995A1 (es) 2008-05-16
IL197217A0 (en) 2011-08-01
PL2076540T3 (pl) 2019-08-30
SI2076540T1 (sl) 2019-06-28
CA2663209C (en) 2018-02-13
SG10201501733QA (en) 2015-04-29
KR101800328B1 (ko) 2017-11-22
WO2008047242A9 (en) 2009-02-05
TWI609884B (zh) 2018-01-01
KR20150119976A (ko) 2015-10-26
TN2009000058A1 (en) 2010-08-19
CA2663209A1 (en) 2008-04-24
TW201734053A (zh) 2017-10-01
CA2989609A1 (en) 2008-04-24
US20250216392A1 (en) 2025-07-03
AU2007311511A1 (en) 2008-04-24
SG10202012950TA (en) 2021-02-25
EP1914242A1 (en) 2008-04-23
HUS2000048I1 (hu) 2020-12-28
NO20091712L (no) 2009-05-13
PT2076540T (pt) 2019-06-06
CY2020039I2 (el) 2021-05-05
KR101534452B1 (ko) 2015-07-06
WO2008047242A8 (en) 2009-08-06
NO2021044I1 (no) 2021-10-13
ZA200901395B (en) 2010-06-30
GT200900079A (es) 2010-07-09
DK2076540T3 (da) 2019-05-13
SV2009003203A (es) 2009-10-27
JP2010506582A (ja) 2010-03-04
KR20150023010A (ko) 2015-03-04
KR20140105035A (ko) 2014-08-29
PE20081171A1 (es) 2008-09-26
IL197217B (en) 2019-12-31
MA30895B1 (fr) 2009-11-02
SG173345A1 (en) 2011-08-29
US8153765B2 (en) 2012-04-10
NO345911B1 (no) 2021-10-11
AU2007311511C1 (en) 2021-11-04
KR101852317B1 (ko) 2018-04-25
NZ575188A (en) 2012-07-27
HRP20190742T1 (hr) 2019-06-14
MX2009004050A (es) 2009-04-28
MEP10609A (hr) 2011-12-20
TWI609885B (zh) 2018-01-01
SG174777A1 (en) 2011-10-28
HUE043351T2 (hu) 2019-08-28
CY1122302T1 (el) 2021-01-27
LTC2076540I2 (lt) 2023-11-10
CO6190555A2 (es) 2010-08-19
UY30655A1 (es) 2008-05-31
LTPA2020536I1 (lt) 2020-12-28
BRPI0718130A2 (pt) 2013-11-05
TW200823236A (en) 2008-06-01
PH12012502467A1 (en) 2013-06-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US20250216392A1 (en) Novel anti-cd38 antibodies for the treatment of cancer
AU2020264364B2 (en) Novel anti-cd38 antibodies for the treatment of cancer
HK40064519A (en) Novel anti-cd38 antibodies for the treatment of cancer
HK1139956B (en) Novel anti-cd38 antibodies for the treatment of cancer