RS60669B1

RS60669B1 - Kombinacija inverznih agonista histamin-3 receptora sa inhibitorima acetilholinesteraze

Info

Publication number: RS60669B1
Application number: RS20200949A
Authority: RS
Inventors: Ramakrishna Nirogi; Anil Karbhari Shinde; Abdul Rasheed Mohammed; Pradeep Jayarajan; Gopinadh Bhyrapuneni; Venkateswarlu Jasti
Original assignee: Suven Life Sciences Ltd
Priority date: 2016-08-18
Filing date: 2017-08-14
Publication date: 2020-09-30
Also published as: MA45990B1; JP6734470B2; ZA201900467B; IL264406B; EA032957B1; HRP20201262T1; WO2018033847A1; CN109640975A; CN109640975B; SMT202000435T1; BR112019002645A2; US20190160075A1; EP3500253B1; LT3500253T; ES2810983T3; NZ750150A; MX2019001696A; ME03812B; CA3033039C; CA3033039A1

Description

Opis

OBLAST PRONALASKA

[0001] Predmetni opis odnosi se na inverzne agoniste histamin-3 receptora (H3R) ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so (soli) u kombinaciji sa ili kao dodatak inhibitorima acetilholinesteraze. Predmetni opis se dalje odnosi na upotrebu kombinacije i farmaceutske kompozicije koja sadrži pomenutu kombinaciju u tretmanu kognitivnih poremećaja.

OSNOVA PRONALASKA

[0002] Alzheimer-ova bolest (AD) je najčešći uzrok demencije širom sveta. Eksponencijalni rast broja slučajeva AD u prošlim i budućim projekcijama tokom nekoliko sledećih decenija predviđeno je da rezultuje u velikom pritisku na socijalne i zdravstvene sisteme razvijenih i ekonomija u razvoju. AD takođe nameće ogroman emocionalni i finansijski teret na porodicu pacijenta i društvo.

[0003] Trenutni spisak odobrenih lekova za kognitivno poboljšanje AD nije dugačak i istorijski je bio fokusiran na inhibitore acetilholinesteraze (donepezil, rivastigmin and galantamin). Ovi lekovi deluju preko inhibicije hidrolize acetilholina (ACh) u acetat i holin ciljnim dejstvom na enzim acetilholinesterazu (AChE). Povećanje ACh nivoa u sinapsi može stimulisati holinergičke receptore i promovisati funkcionisanje pamćenja. Iako inhibitori acetilholinesteraze (AChEIs) mogu privremeno odložiti napredovanje kognitivnog propadanja u AD, njihovi efekti su skromni. Kako je ACh prisutan i u centralnom i u perifernom nervnom sistemu, AChEIs proizvode nekoliko neželjenih sporednih efekata kao što su gastrointestinalni poremećaji, bradikardija i prekomerna salivacija koji su povezani sa dejstvom na periferne muskarinske holinergičke receptore (Expert Opinion on Drug Safety, 3, 2004, 425-440). Ograničenja klase lekova inhibitora AChE je da su slabo tolerisani, njihova efikasnost nije zadržana i zahtevaju konstantnu titraciju doze kako bolest napreduje (Cochrane Database Systematic Reviews, 2006, CD005593) što dovodi do značajne nekomplijanse pacijenta. Incidenca i težina ovih sporednih efekata se povećava sa količinom doze i generalno je više izražena na početku tretmana ili nakon povećanja doze. Stoga postoji neispunjena potreba za alternativnom terapijom za tretiranje kognitivnih poremećaja.

[0004] H3R je G protein-kuplovani receptor (GPCR), uglavnom eksprimiran u prednjem delu korteksa, hipokampusu i strijatumu. H3Rs funkcionišu i kao autoreceptori i heteroreceptori. On modulira sintezu i oslobađanje nekoliko neurotransmitera koji igraju važnu ulogu u kogniciji, raspoloženju i senzornom pragu. Preliminarni literaturni izveštaji sugerišu da H3R antagonisti/inverzni agonist može imati obećavajuću upotrebu u tretmanu različith poremećaja CNS-a uključujući AD, šizofreniju, hiperaktivni poremećaj sa nedostatkom pažnje (ADHD), epilepsiju, narkolepsiju, neuropatski bol i metaboličke poremećaje. Antagonizam ovog receptora sa nekoliko istraživanih jedinjenja je pokazao poboljšanje učenja i pamćenja u životinjskim modelima.

[0005] Patentne prijave, WO2015032966, WO2014136075 i US20150080379 opisuju kombinaciju H3R antagonista i inhibitora acetilholiesteraze u tretmanu AD. Dodatno Khan Nadia et al: "The dual-acting H3 receptor antagonist and AChE inhibitor UW-MD-71 dosedependently enhances memory retrieval and reverses dizocilpine-induced memory impairment in rats" Behavioural Brain Research. Vol 297, 20 October 2015 (2015-10-20), Pages 155-164, XP029331734, ISSN: 0166-4328 DOI: 10.1016/j.br.2015.10.022. Međutim, nijedna od ovih kombinacija nije odobrena za tretman AD.

[0006] Kako je tretman AD po prirodi hroničan, postoji očajnički neispunjena medicinska potreba za boljim i bezbednijim opcijama tretmana. Trenutno odobreni tretman AD uključuje upotrebu AChEI ili NMDA antagonista zasebno ili kombinacije AChEI i NMDA antagonista. Međutim, ostaje potreba za novim lekovima/kombinacijama za tretiranje pacijenata sa AD. Terapeutska strategija koje je sa nestrpljenjem tražena za AD pacijente je ciljano dejstvo na poboljšanje sa dodatkom postojećim terapijama koja bi donela dodatno olakšanje za pacijente, snizilo opterećenje negovatelja i dozvolilo da pacijent uživa bolji kvalitet života bez potrebe za institucionalnom negom i/ili hospitalizacijom.

[0007] Kako uzrok i razvoj demencije zavisi od različitih mehanizama, prednost može biti korišćenje kombinacije lekova koji rade po različitim mehanizmima za AD. Ovo može zauzvrat pomoći da se smanje sporedni efekti sa boljom komplajansom pacijenta i stoga se može primenjivati tokom dužeg perioda.

[0008] Jedinjenja prema predmetnom opisu su inverzni agonisti H3R sa visokim afinitetom i visokom selektivnošću u odnosu na blisko srodne subtipove receptora i poboljšavaju učenje i pamćenje kod životinja. Jedinjenja inverzni agonisti H3R pomenuti ovde su opisani u US9079888B2 (objavljena kao US2014/135304). Priprema ovih jedinjenja je data u pomenutom patentu.

[0009] Predmetni opis obezbeđuje inverzni agonist H3R ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so (soli), koji mogu poboljšati kognitivnu funkciju pacijenata na tretman sa inhibitorima acetilholinesteraze. Predmetni opis je zasnovan na nalazu da predmetna jedinjenja sa afinitetom inverznog agonista H3R poboljšavaju i takođe produžuju efekat inhibitora acetilholinesteraze. Kombinacija prema predmetnom pronalasku demonstrira sinergistički efekat u njenoj aktivnosti. Takva kombinovana primena inverznog agonista H3R i inhibitora acetilholinesteraze može rezultovati u korisnom efektu da se poboljaša terapijska efikasnost kod ljudi.

REZIME PRONALASKA

[0010] Cilj predmetnog opisa je da obezbedi poboljšanu kombinovanu terapiju za tretman kognitivnih poremećaja, kao što je Alzheimer-ova bolest, šizofrenija, Parkinson-onova bolest, demencija sa Lewy-telima, vaskularna demencija, frontotemporalna demencija, Down-ov sindrom ili Tourette-ov sindrom.

[0011] U prvom aspektu, predmetni opis se odnosi na kombinaciju inverznog agonista histamin-3 receptora i inhibitora acetilholinesteraze; gde je inverzni agonist histamin-3 receptora izabran od:

N-[4-(1-Ciklobutilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamida;

N-[4-(1-Ciklopropilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamida; i

N-[4-(1-Izopropilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamida;

ili njihove farmaceutski prihvatljive soli.

[0012] U sledećem aspektu, predmetni opis se odnosi na kombinaciju inverznog agonista histamin-3 receptora i inhibitora acetilholinesteraze; gde inverzni agonist histamin-3 receptora je N-[4-(1-Ciklobutilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamid ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.

[0013] U sledećem aspektu, predmetni opis se odnosi na kombinaciju inverznog agonista histamin-3 receptora i inhibitora acetilholinesteraze; gde inverzni agonist histamin-3 receptora je N-[4-(1-Ciklopropilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamid ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.

[0014] U sledećem aspektu, predmetni opis se odnosi na kombinaciju inverznog agonista histamin-3 receptora i inhibitora acetilholinesteraze; gde inverzni agonist histamin-3 receptora je N-[4-(1-Izopropilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamid ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.

[0015] U sledećem aspektu, predmetni opis se odnosi na kombinaciju inverznog agonista histamin-3 receptora i inhibitora acetilholinesteraze; gde inverzni agonist histamin-3 receptora je izabran od donepezila, galantamina i rivastigmina ili njihove farmaceutski prihvatljive soli.

[0016] U sledećem aspektu predmetni opis se odnosi na kombinaciju N-[4-(1-Ciklobutilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamida i donepezila ili njihove farmaceutski prihvatljive soli.

[0017] U sledećem aspektu predmetni opis se odnosi na kombinaciju N-[4-(1-Ciklopropilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamida i donepezila ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so.

[0018] U sledećem aspektu predmetni opis se odnosi na kombinaciju N-[4-(1-Izopropilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamida i donepezila ili njihove farmaceutski prihvatljive soli.

[0019] U sledećem aspektu predmetni opis se odnosi na pomenutu kombinaciju za upotrebu u tretmanu kognitivnih poremećaja.

[0020] U sledećem aspektu predmetni opis se odnosi na pomenutu kombinaciju za upotrebu u tretmanu kognitivnih poremećaja kao što je Alzheimer-ova bolest, šizofrenija, Parkinson-onova bolest, demencija sa Lewy-telima, vaskularna demencija, frontotemporalna demencija, Down-ov sindrom ili Tourette-ov sindrom.

[0021] U sledećem aspektu, predmetni opis odnosi se na inverzni agonist histamin-3 receptora za upotrebu u dodatnom tretmanu kognitivnih poremećaja kao što su Alzheimer-ova bolest, šizofrenija, Parkinson-onova bolest, demencija sa Lewy-telima, vaskularna demencija, frontotemporalna demencija, Down-ov sindrom ili Tourette-ov sindrom kod pacijenata na tretmanu sa inhibitorom acetilholinesteraze.

[0022] U sledećem aspektu, predmetni opis odnosi se na jedinjenje, N-[4-(1-Ciklobutilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamid ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so za upotrebu u dodatnom tretmanu kognitivnih poremećaja kao što su Alzheimer-ova bolest, šizofrenija, Parkinson-onova bolest, demencija sa Lewy-telima, vaskularna demencija, frontotemporalna demencija, Down-ov sindrom ili Tourette-ov sindrom kod pacijenata na tretmanu sa donepezilom.

[0023] U sledećem aspektu, predmetni opis odnosi se na jedinjenje, N-[4-(1-Ciklobutilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamid ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so za upotrebu u kombinaciji sa ili kao dodatak inhibitoru acetilholinesteraze za tretman kognitivnih poremećaja kao što su Alzheimer-ova bolest, šizofrenija, Parkinson-onova bolest, demencija sa Lewy-telima, vaskularna demencija, frontotemporalna demencija, Down-ov sindrom ili Tourette-ov sindrom.

[0024] U sledećem aspektu, predmetni opis se odnosi na upotrebu kombinacije inverznog agonista histamin-3 receptora i inhibitora acetilholinesteraze u tretmanu kognitivnih poremećaja kao što su Alzheimer-ova bolest, šizofrenija, Parkinson-onova bolest, demencija sa Lewy-telima, vaskularna demencija, frontotemporalna demencija, Down-ov sindrom ili Tourette-ov sindrom.

[0025] U sledećem aspektu, predmetni opis odnosi se na upotrebu kombinacije N-[4-(1-Ciklobutilpiperidin-4-‘iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamida i donepezila ili njihove farmaceutski prihvatljive soli u tretmanu kognitivnih poremećaja kao što su Alzheimer-ova bolest, šizofrenija, Parkinson-onova bolest, demencija sa Lewy-telima, vaskularna demencija, frontotemporalna demencija, Down-ov sindrom ili Tourette-ov sindrom.

[0026] U sledećem aspektu, predmetni opis odnosi se na farmaceutsku kompoziciju koja sadrži inverzni agonist histamin-3 receptora i inhibitor acetilholinesteraze i farmaceutski prihvatljive ekscipijente ili njihovu kombinaciju.

[0027] U sledećem aspektu, predmetni opis se odnosi na farmaceutsku kompoziciju koja sadrži N-[4-(1-Ciklobutilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamid i donepezil ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so i farmaceutski prihvatljive ekscipijente ili njihovu kombinaciju.

[0028] U sledećem aspektu, predmetni opis odnosi se farmaceutsku kompoziciju koja sadrži inverzni agonist histamin-3 receptora i inhibitor acetilholinesteraze ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so zajedno sa farmaceutski prihvatljivim ekscipijentima ili njihovom kombinacijom za upotrebu u tretmanu kognitivnih poremećaja kao što su Alzheimer-ova bolest, šizofrenija, Parkinson-onova bolest, demencija sa Lewy-telima, vaskularna demencija, frontotemporalna demencija, Down-ov sindrom ili Tourette-ov sindrom.

KRATAK OPIS DIJAGRAMA

[0029]

Slika 1a prikazuje rezultate efekta tretmana jedinjenjem 1 sa donepezilom na poboljšanje kognitivnih osobina korišćenjem modela zadatka sa prepoznavanjem objekta.

Figure 1b prikazuje rezultate efekta tretmana jedinjenjem 1 sa galantaminom na poboljšanje kognitivnih osobina korišćenjem modela zadatka sa prepoznavanjem objekta.

Figure 1c prikazuje rezultate efekta tretmana jedinjenjem 1 sa rivastigminom na poboljšanje kognitivnih osobina korišćenjem modela zadatka sa prepoznavanjem objekta.

Figure 2 prikazuje rezultate efekta tretmana jedinjenjem 3 sa donepezilom na poboljšanje kognitivnih osobina korišćenjem modela zadatka sa prepoznavanjem objekta.

Figure 3 prikazuje efekat tretmana jedinjenjem 1 sa donepezilom na ekstracelularne nivoe acetilholina u medijalnom prefrontalnom korteksu mužjaka Wistar pacova.

Figure 4 prikazuje efekte jedinjenja 1 u kombinaciji sa rivastigminom na ekstracelularne nivoe acetilholina u medijalnom prefrontalnom korteksu mužjaka Wistar pacova.

Figure 5 prikazuje efekte jedinjenja 2 u kombinaciji sa donepezilom na ekstracelularne nivoe acetilholina u medijalnom prefrontalnom korteksu mužjaka Wistar pacova.

Figure 6 prikazuje efekte jedinjenja 3 u kombinaciji sa rivastigminom na ekstracelularne nivoe acetilholina u medijalnom prefrontalnom korteksu mužjaka Wistar pacova.

Figure 7 prikazuje rezultate efekta kombinacije jedinjenja 11 i donepezila na stimulaciju evociranih teta nivoa u dorzalnom hipokampusu anesteziranih mužjaka Wistar pacova.

DETALJAN OPIS

[0030] Ukoliko nije drugačije naznačeno, sledeći termini korišćeni u specifikaciji i patentnim zahtevima imaju značenja data u nastavku:

Termin, "inverzni agonist histamin-3 receptora" kao što je ovde korišćeno odnosi se na ligand ili lek koji se vezuje sa konstitutivno aktivnim H3 receptorima, stabilizuje ih, i stoga smanjuje aktivnost (negativna unutrašnja aktivnost). On blokira ili inhibira funkciju / vezivanje agonista na H3 receptoru i izaziva farmakološki efekat suprotan agonistu receptora.

[0031] Primeri inverznog agonista histamin-3 receptora uključuju,

N-[4-(l-Ciklobutilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamid;

N-[4-(1-Ciklopropilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamid; i

N-[4-(1-Izopropilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamid;

ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so.

[0032]Primeri farmaceutski prihvatljive soli prethodno identifikovanih jedinjenja uključuju, ali nisu ograničeni na,

N-[4-(1-Ciklobutilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamid dihidrohlorid;

N-[4-(1-Ciklopropilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamid tartarat; i

N-[4-(1-Izopropilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamid tartarat.

[0033] Termin, "inhibitor acetilholinesteraze" kao što je ovde korišćeno je hemikalija ili lek koji inhibira enzim acetilholinesterazu u razlaganju acetilholina, čime se povećava i nivo i trajanje dejstva neurotransmitera acetilholina. Primeri inhibitora acetilholinesteraze su donepezil, rivastigmin i galantamin. Poželjno, inhibitor acetilholinesteraze je donepezil i rivastigmin. Poželjnije inhibitor acetilholinesteraze je donepezil.

[0034] Donepezil je lek odobren za tretman blage, umerene i teške demencije kod Alzheimer-ove bolesti. Donepezil je reverzibilni inhibitor enzima acetilholinesteraze i prodavan je pod zaštićenim nazivom Aricept® kao hidrohlorid so.

[0035] Rivastigmin je lek odobren za tretman blage, umerene i teške demencije kod Alzheimerove bolesti. Rivastigmin je reverzibilni inhibitor enzima acetilholinesteraze i prodavan je pod zaštićenim nazivom Exelon® i Exelon Patch® kao tartarat so.

[0036] Galantamin lek odobren za tretman blage, umerene i teške demencije kod Alzheimer-ove bolesti. Galantamin, reverzibilni, kompetitivni inhibitor acetilholinesteraze i prodavan je pod zaštićenim nazivom Razadyne® kao hidrobromidna so.

[0037] Izraz, "terapeutski efikasna količina" je definisana kao količina jedinjenja prema predmetnom opisu koja (i) tretira određenu bolest, stanje ili poremećaj, (ii) eliminiše jedan ili više simptoma određene bolesti, stanja ili poremećaja i (iii) odlaže pojavu jednog ili više simptoma određene bolesti, stanja il iporemećaja opisanih ovde.

[0038] Termin, "farmaceutski prihvatljiva so" kao što je ovde korišćeno odnosi se na soli aktivnog jedinjenja i pripremljene su reakcijom sa odgovarajućom organskom ili neorganskom kiselinom ili derivatom kiseline, u zavisnosti od određenih supstituenata koji se nalaze na jedinjenjima opisanim ovde.

[0039] Termin, "pacijent" kao što je ovde korišćeno odnosi se na životinju. Poželjno termin "pacijent" odnosi se na sisara. Termin sisar uključuje životinje kao što su miševi, pacovi, psi, zečevi, svinje, majmuni, konji i čovek. Poželjnije pacijent je čovek.

[0040] Termin, "Alzheimer-ova bolest" kao što je ovde korišćeno odnosi se na demenciju koja izaziva probleme sa pamćenjem, mišljenjem i ponašanjem. Alzheimer-ova bolest može biti blaga do umerena do teška Alzheimer-ova bolest.

[0041] Jedinjenje 1 kao što je ovde korišćeno je N-[4-(1-Ciklobutilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamid dihidrohlorid koje ima hemijsku strukturu,

[0042] Jedinjenje 2 kao što je ovde korišćeno je N-[4-(1-Ciklopropilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamid tartarat koji ima hemijsku strukturu,

[0043] Jedinjenje 3 kao što je ovde korišćeno je N-[4-(1-Izopropilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamid koje ima hemijsku strukturu,

[0044] Termin, "tretman ili tretiranje" kao što je ovde korišćeno odnosi se na bilo koji tretman bolesti kod sisara, uključujući: (a) usporavanje ili zaustavljanje razvoja kliničkih simptoma; i/ili (b) izazivanje regresije kliničkih simptoma.

[0045] Termin, "jedinjenje za upotrebu" kao što je ovde korišćeno obuhvata bilo koje jedno ili više od sledećeg: (1) upotreba jedinjenja, (3) upotreba u tretmanu, (4) upotreba za proizvodnju farmaceutske kompozicije / medikamenta za tretman / tretiranje ili sadrži primenu efikasne količine aktivnog jedinjenja na subjekta kome je to potrebno.

[0046] Termin, "kognitivni poremećaj" kao što je ovde korišćeno odnosi se na grupu mentalnih poremećaja koje prvenstveno utiču na učenje, pamćenje, percepciju i rešavanje probleme i uključuje amneziju, demenciju i delirijum. Kognitivni poremećaji mogu biti rezultat bolesti, poremećaja, oboljenja ili toksičnosti. Primeri kognitivnih poremećaja uključuju ali nisu ograničeni na, Alzheimer-ovu bolest, šizofreniju, Parkinson-ovu bolest, demenciju sa Lewy telima (LBD), vaskularnu demenciju, frontotemporalnu demenciju (FTD), Down-ov sindrom ili Tourette-ov sindrom. Poželjno, kognitivni poremećaj je Alzheimer-ova bolest.

[0047] Termin, "dodatak" ili "dodatni tretman" kao što je ovde korišćeno odnosi se na dodatni tretman pacijenta koji je već primio najmanje jednu drugu terapiju za kognitivne poremećaje. Lek korišćen kao dodatna terapija je primenjen na pacijenta da bi doveo do toga da primarni tretman bolje delovao.

Primeri izvođenja

[0048] Predmetni opis obuhvata sve kombinacije opisane ovde bez ograničenja, međutim, poželjni aspekti i elementi prema opisu su ovde razmatrani u obliku sledećih primera izvođenja.

[0049] U jednom primeru izvođenja, predmetni opis odnosi se na kombinaciju inverznog agonista histamin-3 receptora i inhibitor acetilholinesteraze; gde inverzni agonist histamin-3 receptora je N-[4-(1-Ciklobutilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamid dihidrohlorid.

[0050] U sledećem primeru izvođenja, predmetni opis odnosi se na kombinaciju inverznog agonista histamin-3 receptora i inhibitor acetilholinesteraze; gde inverzni agonist histamin-3 receptora je N-[4-(1-Ciklopropilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamid tartarat.

[0051] U sledećem primeru izvođenja, predmetni opis odnosi se na kombinaciju inverznog agonista histamin-3 receptora i inhibitora acetilholinesteraze; gde inverzni agonist histamin-3 receptora je N-[4-(1-Izopropilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamid tartarat.

[0052] U sledećem primeru izvođenja, predmetni opis odnosi se kombinaciju N-[4-(1-Ciklobutilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamida i rivastigmina ili njegove farmaceutski prihvatljive soli.

[0053] U sledećem primeru izvođenja, predmetni opis odnosi se kombinaciju N-[4-(1-Ciklobutilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamida i galantamina ili njegove farmaceutski prihvatljive soli.

[0054] U sledećem primeru izvođenja, predmetni opis odnosi se kombinaciju N-[4-(1-Ciklopropilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamida i rivastigmina ili njegove farmaceutski prihvatljive soli.

[0055] U sledećem primeru izvođenja, predmetni opis odnosi se kombinaciju N-[4-(1-Ciklopropilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamida i galantamina ili njegove farmaceutski prihvatljive soli.

[0056] U sledećem primeru izvođenja, predmetni opis odnosi se kombinaciju N-[4-(1-Izopropilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamida i rivastigmina ili njegove farmaceutski prihvatljive soli.

[0057] U sledećem primeru izvođenja, predmetni opis odnosi se kombinaciju N-[4-(1-Izopropilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamida i galantamina ili njegove farmaceutski prihvatljive soli.

[0058] U sledećem primeru izvođenja, predmetni opis odnosi se kombinaciju N-[4-(1-Ciklobutilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamid dihidrohlorida i donepezil hidrohlorida.

[0059] U sledećem primeru izvođenja, predmetni opis odnosi se kombinaciju N-[4-(1-Ciklobutilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamid dihidrohlorida i rivastigmin tartarata.

[0060] U sledećem primeru izvođenja, predmetni pronalazak odnosi se kombinaciju N-[4-(1-Ciklobutilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamid dihidrohlorida i galantamin hidrobromida.

[0061] U sledećem primeru izvođenja, predmetni opis odnosi se na kombinaciju N-[4-(1-Ciklopropilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamid tartarata i donepezil hidrohlorida.

[0062] U sledećem primeru izvođenja, predmetni opis odnosi se kombinaciju N-[4-(1-Ciklopropilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamid tartarata i rivastigmin tartarata.

[0063] U sledećem primeru izvođenja, predmetni pronalazak odnosi se kombinaciju N-[4-(1-Ciklopropilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamid tartarata i galantamin hidrobromida.

[0064] U sledećem primeru izvođenja, predmetni opis odnosi se kombinaciju N-[4-(1-Izopropilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamid tartarata i donepezil hidrohlorida.

[0065] U sledećem primeru izvođenja, predmetni opis odnosi se kombinaciju N-[4-(1-Izopropilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamid tartarata i rivastigmin tartarata.

[0066] U sledećem primeru izvođenja, predmetni opis odnosi se kombinaciju N-[4-(1-Izopropilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamid tartarata i galantamin hidrobromida.

[0067] U sledećem primeru izvođenja, predmetni opis obezbeđuje kombinaciju inverznog agonista histamin-3 receptora i inhibitora acetilholinesteraze koja je efikasnija od inverznog agonista histamin-3 receptora i inhibitora acetilholiesteraze zasebno.

[0068] U sledećem primeru izvođenja, predmetni opis obezbeđuje kombinaciju N-[4-(1-Ciklobutilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamid dihidrohlorida i donepezil hidrohlorida koja je efikasnija od N-[4-(1-Ciklobutilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamid dihidrohlorida i donepezil hidrohlorida zasebno.

[0069] U sledećem primeru izvođenja farmaceutski prihvatljiva so inverznog agonista histamin-3 receptora uključuje, ali nije ograničena na, dihidrohlorid so, oksalat so, sukcinat so, tartarat so i slično. Poželjno, farmaceutski prihvatljiva so je dihidrohlorid so i tartarat soli. Poželjnije, farmaceutski prihvatljiva so je dihidrohlorid so.

[0070] U sledećem primeru izvođenja, predmetni opis odnosi se kombinaciju N-[4-(1-Ciklobutilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamid dihidrohlorida i inhibitora acetilholinesteraze za upotrebu u tretmanu Alzheimer-ove bolesti.

[0071] U sledećem aspektu, predmetni opis odnosi se na N-[4-(1-Ciklobutilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamid ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so za upotrebu u dodatnom tretmanu Alzheimer-ove bolesti kod pacijenta na tretmanu sa inhibitorom acetilholinesteraze.

[0072] U sledećem aspektu, predmetni opis odnosi se na N-[4-(1-Ciklopropilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamid ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so za upotrebu u dodatnom tretmanu Alzheimer-ove bolesti kod pacijenta na tretmanu sa inhibitorom acetilholinesteraze.

[0073] U sledećem aspektu, predmetni opis odnosi se na N-[4-(1-Izopropilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamid ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so za upotrebu u dodatnom tretmanu Alzheimer-ove bolesti kod pacijenta na tretmanu sa inhibitorom acetilholinesteraze.

[0074] U sledećem primeru izvođenja, predmetni opis odnosi se na N-[4-(1-Ciklobutilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamid dihidrohlorid za upotrebu u dodatnom tretmanu Alzheimer-ove bolesti kod pacijenta na tretmanu sa donepezilom ili njegovom farmaceutski prihvatljivom soli.

[0075] U sledećem primeru izvođenja, predmetni opis odnosi se na N-[4-(1-Ciklopropilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamid tartarat za upotrebu u dodatnom tretmanu Alzheimer-ove bolesti kod pacijenta na tretmanu sa donepezilom ili njegovom farmaceutski prihvatljivom soli.

[0076] U sledećem primeru izvođenja, predmetni opis odnosi se na N-[4-(1-Izopropilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamid tartarat za upotrebu u dodatnom tretmanu Alzheimer-ove bolesti kod pacijenta na tretmanu sa donepezilom ili njegovom farmaceutski prihvatljivom soli.

[0077] U sledećem primeru izvođenja, predmetni opis odnosi se na upotrebu kombinacije inverznog agonista histamin-3 receptora i inhibitora acetilholinesteraze u proizvodnji medikamenta u tretmanu kognitivnih poremećaja.

[0078] U sledećem primeru izvođenja, predmetni opis odnosi se na upotrebu kombinacije inverznog agonista histamin-3 receptora i inhibitora acetilholinesteraze u proizvodnji medikamenta za tretman kognitivnih poremećaja izabranih od Alzheimer-ove bolesti, šizofrenije, Parkinson-onove bolesti, demencije sa Lewy-telima, vaskularne demencije, frontotemporalne demencije, Down-ovog sindroma ili Tourette-ovog sindroma.

[0079] U sledećem primeru izvođenja, predmetni opis odnosi se na upotrebu kombinacije inverznog agonista histamin-3 receptora i inhibitora acetilholinesteraze u proizvodnji medikamenta za tretman Alzheimer-ove bolesti.

[0080] U sledećem primeru izvođenja, predmetni opis odnosi se na upotrebu inverznog agonista histamin-3 receptora u proizvodnji medikamenta za tretman Alzheimer-ove bolesti u kombinaciji sa inhibitorom acetilholinesteraze.

[0081] U sledećem primeru izvođenja, predmetni opis odnosi se na upotrebu inverznog agonista histamin-3 receptora u proizvodnji medikamenta za tretman Alzheimer-ove bolesti kao dodatak inhibitoru acetilholinesteraze.

[0082] U sledećem primeru izvođenja, predmetni opis odnosi se na upotrebu N-[4-(1-Ciklobutilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamida ili njegove farmaceutski prihvatljive soli u proizvodnji medikamenta za tretman Alzheimer-ove bolesti u kombinaciji sa donepezilom ili njegovom farmaceutski prihvatljivom soli.

[0083] U sledećem primeru izvođenja, predmetni opis odnosi se na upotrebu N-[4-(1-Ciklobutilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamid dihidrohlorida u proizvodnji medikamenta za tretman Alzheimer-ove bolesti u kombinaciji sa donepezilom ili njegovom farmaceutski prihvatljivom soli.

[0084] U sledećem primeru izvođenja, predmetni opis odnosi se na upotrebu N-[4-(1-Ciklobutilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamid dihidrohlorida u proizvodnji medikamenta za tretman Alzheimer-ove bolesti u kombinaciji sa donepezil hidrohloridom.

[0085] U sledećem primeru izvođenja, predmetni opis odnosi se na kombinaciju za tretman Alzheimer-ove bolesti, gde Alzheimer-ova bolest je blaga Alzheimer-ova bolest.

[0086] U sledećem primeru izvođenja, predmetni pronalazak odnosi se na kombinaciju za tretman Alzheimer-ove bolesti, gde Alzheimer-ova bolest je umerena Alzheimer-ova bolest..

[0087] U sledećem primeru izvođenja, predmetni opis odnosi se na kombinaciju za tretman Alzheimer-ove bolesti, gde Alzheimer-ova bolest je teška Alzheimer-ova bolest..

[0088] U sledećem primeru izvođenja, predmetni opis odnosi se na kombinaciju gde aktivni sastojci mogu biti primenjeni na pacijenta istovremeno ili zasebno.

[0089] U sledećem aspektu, aktivni sastojci kombinacije iz predmetnog opisa su normalno primenjeni formulisanjem aktivnih sastojaka u farmaceutsku kompoziciju u skladu sa standardnom farmaceutskom praksom.

[0090] U sledećem aspektu, aktivni sastojci kombinacije iz predmetnog opisa mogu se primeniti oralnim, nazalnim, lokalnim, dermalnim ili parenteralnim putevima.

[0091] U sledećem aspektu, aktivni sastojci kombinacije prema predmetnom opisu mogu se primeniti istim ili različitim putem primene. Na primer, inverzni agonist histamin-3 receptora prema predmetnom opisu može se primeniti oralno i inhibitor acetilholinesteraze može se primeniti transdermalno.

[0092] Farmaceutske kompozicije prema predmetnom opisu mogu se formulisati na konvencionalni način korišćenjem jednog ili više farmaceutski prihvatljivih ekscipijenata. Farmaceutski prihvatljivi ekscipijenti su razblaživači, sredstva za raspadanje, vezujuća sredstva, lubrikanti, klizajuća sredstva, polimeri, sredstva za oblaganje, rastvarači, ko-rastvarači, konzervansi, ovlaživači, sredstvaza zgušnjavanje, sredstva protiv stvaranja pene, zaslađivači, aromatizeri, antioksidanti, boje, sredstvaza povećanje rastvorljivosti, plastifikatori, sredstva za disperziju i slično. Ekscipijenti su izabrani od mikrokristalne celuloze, manitola, laktoze, preželatiniziranog skroba, natrijum skrob glikolata, kukuruznog skroba ili njihvoih derivata, povidona, krospovidona, kalcijum stearata, gliceril monostearata, gliceril palmitostearata, talka, koloidnog silicijum dioksida, magnezijum stearata, natrijum lauril sulfata, natrijum stearil fumarata, cink stearata, stearinske kiseline ili hidrogenovanog biljnog ulja, gumi arabike, magnezijum oksida, glukoze, masti, voskova, prirodnih ili neisparljivih ulja, vode, fiziološkog rastvora natrijum hlorida ili alkohola, na primer, etanol, propanol ili glicerol, rastvora šećera, kao što su rastvori glukoze ili rastvori manitola i slično ili smeša različtih ekscipijenata.

[0093] U sledećem aspektu, aktivna jedinjenja prema opisu mogu se formulisati u obliku pilula, tableta, obloženih tableta, kapsula, praška, granula, peleta, flastera, implanata, filmova, tečnosti, polu-čvrstih supstanci, gelova, aerosola, emulzija, eliksira i slično. Takve faramceutske kompozicije i procesi za pripremu istih su dobro poznati u tehnici.

[0094] U sledećem aspektu, farmaceutska kompozicija prema predmetnom opisu sadrži 1 do 90 %, 5 do 75 % i 10 do 60 % po težini jedinjenja prema predmetnom opisu ili njegove farmaceutski prihvatljive soli. Količina aktivnih jedinjenja ili njihove farmaceutski prihvatljive soli u farmaceutskoj kompoziciji (kompozicijama) mogu biti u opsegu od oko 0.1 mg do oko 100 mg ili od oko 0.1 mg do oko 60 mg ili od oko 0.1 mg do oko 30 mg ili u bilo kom opsegu koji spada unutar šireg opsega od 0.1 mg do 100 mg.

[0095] U sledećem aspektu, farmaceutska kompozicija kombinacije prema predmetnom opisu mogu biti konvencionalne formulacije kao što su formulacije sa trenutnim oslobađanjem, formulacije sa modifikovanim oslobađanjem kao što su formulacije sa održavanim oslobađanjem, formulacije sa odloženim oslobađanjem i formulacije sa produženim oslobađanjem ili novi sistemi za isporuku kao što su oralne dezintegrišuće formulacije i transdermalni flasteri.

[0096] Doza aktivnih jedinjenja može varirati u zavisnosti od faktora kao što su starost i težina, priroda, put primene i težina bolesti koju treba tretirati i drugih takvih faktora. Stoga, bilo kakva referenca koja se tiče farmakološki efikasne količine jedinjenja 1, 2 i 3 odnosi se na prethodno pomenute faktore.

[0097] U sledećem aspektu, inverzni agonist histamin-3 receptora može biti ko-primenjen sa inhibitorom acetilholinesteraze sa dnevnom dozom od 0.1 mg to 100 mg; kao što je 0.1, 0.5, 0.75, 1, 1.5, 3, 5, 6, 10, 20, 25, 30, 50, 75 i 100 mg, poželjno sa dnevnom dozom od 0.1, 3, 5, 6, 10, 20, 25, 30 ili 50 mg i najpoželjnije sa dnevnom dozom od 0.5, 3, 5, 10 ili 20 mg.

[0098] U sledećem aspektu, inhibitor acetilholinesteraze može se ko-primeniti sa inverznim agonistom histamin-3 receptora sa dnevnom dozom od 1 mg do 30 mg; kao što je 1, 1.5, 2, 3, 4, 4.5, 5, 6, 8, 9.5,10, 12, 13, 13.3, 15, 16, 23, 24, 25 ili 30 mg, poželjno sa dnevnom dozom od 1, 1.5, 2, 3, 4, 4.5, 5, 6, 8, 9.5, 10, 12, 13, 13.3, 16, 23, 24, ili 25 mg i najpoželjnije sa dnevnom dozom od 1.5, 3, 4, 4.5, 5, 6, 8, 9.5, 10, 12, 13.3, 16, 23 ili 24 mg.

[0099] U sledećem aspektu, inhibitor acetilholinesteraze, donepezil može biti ko-primenjen sa inverznim agonistom histamin-3 receptora sa dnevnom dozom od 2 mg do 30 mg; kao što je 2, 5, 10, 15, 23, 25 ili 30 mg, poželjno sa dnevnom dozom od 2, 5, 10, 23 ili 25 mg i najpoželjnije sa dnevnom dozom od 5, 10 or 23 mg.

[0100] U sledećem aspektu, inhibitor acetilholinesteraze, rivastigmin može biti ko-primenjen sa inverznim agonistom histamin-3 receptora sa dnevnom dozom od 0.5 mg do 15 mg; kao što je 0.5, 1, 1.5, 3, 4.5, 5, 6, 9.5, 10, 13.3, 15 mg, poželjno sa dnevnom dozom od 1, 1.5, 3, 4.5, 5, 6, 9.5 ili 13.3 mg i najpoželjnije sa dnevnom dozom od 1.5, 3, 4.5, 6, 9.5 i 13.3 mg.

[0101] U sledećem aspektu, inhibitor acetilholinesteraze, galantamin može biti ko-primenjen sa inverznim agonistom histamin-3 receptora sa dnevnom dozom od 1 mg do 30 mg; kao što je 1, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 24 i 30 mg, poželjno 2, 4, 6, 8, 12, 16 i 24 mg i najpoželjnije sa dnevnom dozom od 4, 8, 12, 16 i 24 mg.

[0102] U sledećem aspektu, tretman sadrži primenu na pacijenta 0.1 mg do 100 mg N-[4-(1-Ciklobutilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamida ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, na dan.

[0103] U sledećem aspektu, tretman sadrži primenu na pacijenta 0.1 mg do 60 mg N-[4-(1-Ciklobutilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamida ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, na dan.

[0104] U sledećem aspektu, tretman sadrži primenu na pacijenta 0.1 mg do 30 mg N-[4-(1-Ciklobutilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamida ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, na dan.

[0105] U sledećem aspektu, tretman sadrži primenu na pacijenta 1 mg do 25 mg donepezila ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, na dan.

[0106] U sledećem aspektu, tretman sadrži primenu na pacijenta 5 mg do 25 mg donepezila ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, na dan.

[0107] U sledećem aspektu, tretman sadrži primenu na pacijenta 5, 10 ili 23 mg donepezila ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, na dan.

[0108] U sledećem aspektu, tretman sadrži primenu aktivnog jedinjenja na pacijenta jednom do tri puta na dan, jednom do tri puta nedeljno ili jednom do tri puta mesečno. Poželjno, tretman sadrži primenu jedinjenja na pacijenta jednom dnevno, dva puta dnevno, ili tri puta dnevno. Poželjnije, tretman sadrži primenu jedinjenja na pacijenta jednom dnevno.

Primeri

[0109] Primeri dati u nastavku su obezbeđeni samo kao ilustracija i stoga ih ne treba shvatiti kao ograničavajuće za obim pronalaska.

Skraćenice

[0110]

ANOVA : Analiza varijanse

AP : Anteriorno posteriorno

aCSF : Veštačka cerebrospinalna tečnost

CaCl2.2H2O : Kalcijum hlorid dihidrat

DV : Dorzalno ventralno

DTT : Ditiotreitol

EC50: Polovina maksimalne efikasne koncentracije

EDTA : Etilendiamintetrasirćetna kiselina

EEG : Elektroencefalogram

GDP : Guanozin difosfat

GPCR : G-Protein kuplovani receptor

HCl : Hlorovodonična kiselina

h : Čas (časovi)

HEPES : 4-(2-Hidroksietil)piperazin-1-etansulfonska kiselina

i.p. : Intraperitonealno

i.v. : Inravenski

KCl : Kalijum hlorid

Kb : Konstanta vezivanja

Ki : Konstanta inhibicije

LC-MS/MS : Tečna hromatografija-masena spektrometrija / masena spektrometrija mg : Miligram

MgCl2: Magnezijum hlorid

min : Minut (minuti)

ML : Medijalno lateralno

mM : Milimolarno

nmol/L : Nanomola po litru

NaCl : Natrijum hlorid

NaH2PO4.2H2O : Natrijum dihidrogen fosfat dihidrat

Na2HPO4.7H2O : Natrijum monohidrogen fosfat heptahidrat

NPO : Nucleus Pontis Oralis

nM : Nanomolarno

p.o. : Per oralno

s.c. : Potkožno

S.E.M. : Standardna greška srednje vrednosti

µM : Mikromolarno

θ : Teta

Primer 1:

Određivanje Kivrednosti na humanom i histamin-3 receptoru pacova

[0111] Test jedinjenja su procenjivana u skladu sa sledećim procedurama da bi se odredila Kivrednost na humanom i histamin-3 receptoru pacova.

Materijali i metode:

[0112] Izvor receptora: Fronatalni kompleks mozga pacova ili rekombinantna humana cDNK eksprimirana u CHO ćelijama

Radioligand: [3H] R-α-metilhistamin

Finalna koncentracija liganda: [3.0 nM]

Ne-specifična determinanta: R-α-metilhistamin (100 µM)

Referentno jedinjenje: R-α-metilhistamin

Pozitivna kontrola: R-α-metilhistamin

Uslovi inkubacije:

[0113] Rastuće koncentracije test jedinjenja ili standarda su inkubirane sa membranskim receptorima i radioligandom u 5 mM MgCl2i 50 mM TRIS-HCl (pH 7.4) 60 minuta na sobnoj temperaturi. Reakcija je završena brzom vakuum filtracijom na filterima od staklenih vlakana. Radioaktivnost zarobljena na filterima je određena i poređenja sa kontrolnim vrednostima da bi se procenile bilo koje interakcije test jedinjenja (ili više njih) sa ili kloniranim vezujućim mestom čoveka ili pacova.

Rezultati:

[0114]

Referenca:

[0115] Br J Pharmacol., 2008, 154(6): 1166-1181.

Primer 2:

Određivanje IC50vrednosti na histamin-3 receptoru

[0116] Test jedinjenja su procenjena u skladu sa sledećim procedurama da se odrede IC50vrednosti.

Materijal i metode:

[0117]

Izvor receptora: Humane rekombinantne (CHO-K1 ćelije)

Radioligand: [35S]-GTPγS

Finalna koncentracija liganda: [0.3 nM]

Referentno jedinjenje: Tioperamid

Pozitivna kontrola: Tioperamid

Uslovi inkubacije:

[0118] Rastuće koncentracije test jedinjenja i / ili vehikuluma su pre-inkubirane sa membranama (0.09 mg/mL) i 10 mM GDP u modifikovanom HEPES pH 7.4 puferu (20 mM HEPES, pH 7.4, 100 µM NaCl, 10 mM MgCl2, 1 mM DTT, 1 mM EDTA) 20 minuta i zatim su dodate SPA kuglice dodatnih 60 minuta na 30°C. Reakcija je inicirana sa 0.3 nM [35S]GTPγS dodatnih 30 minuta inkubacionog perioda. Test jedinjenje-indukovano povećanje [<35>S]GTPγS vezivanja od 50 procenata ili više (≥50 %) u odnosu na 3 µM R(-)-a-metilhistamin odgovor ukazuje moguću agonističku aktivnost histamin-3 receptora. Test jedinjenje indukovana inhibicija od 0.03 µM R(-)-a-metilhistamin-indukovanog povećanja [<35>S]GTPγS odgovora vezivanja od 50 procenata ili više (≥50 %) ukazuje na antagonističku aktivnost receptora. Ove studije su izvedene i podaci su analizirani u Eurofins Panlabs Taiwan Ltd, Taiwan korišćenjem standardnih tehnika vezivanja radioliganda kao što je opisano prethodno.

Rezultati:

[0119] Jedinjenje 1 pokazuje osobine slične inverznom agonistu u GTPyS analizi na humanom rekombinantnom histamin-3 receptoru sa IC50vrednošću od 20 nM.

Referenca:

[0120] J. Neurochem., 1998, 71(2): 808-816.

Primer 3:

Model zadatka sa prepoznavanjem objekta

[0121] Osobine kognitivnog poboljšanja jedinjenja prema predmetnom pronalasku procenjene su korišćenjem ovog modela.

[0122] Mužjaci Wistar pacova (8-10 nedelja stari) korišćeni su kao eksperimentalne životinje. Četiri životinje su smeštene u svaki kavez. Životinje su držane na 20 % deprivaciji hrane od dana pre eksperimenta. Voda je obezbeđena ad libitum tokom eksperimenta. Životinje su držane na 12 časovnom ciklusu svetlo/mrak u sobi sa kontrolisanom temperaturom i vlažnošću. Eksperiment je izveden u otvorenom polju napravljenom od akrila. Izvedena je habituacija pacova na individualne arene (otvoreno polje) u odsustvu bilo kakvih objekata na dan 1.

[0123] Pacovi su primili vehikulum, donepezil ili test jedinjenje i AChEI (donepezil, galantamin ili rivastigmin) na dan habituacije, pre testova familijarnosti (T1) i izbora (T2). Tokom faze familijarizacije (T1), pacovi su stavljeni individualno u areni 3 minuta, u kojima su dva identična objekta (a1i a2) pozicionirana 10 cm od zida. 24 časa nakon T1, procenjen je test za dugotrajnu memoriju. Isti pacovi su postavljeni u istu arenu u koju su postavljeni u T1testu. Tokom faze izbora (T2) pacovima je dozvoljeno da istražuju arenu 3 minuta u prisustvu kopije poznatog objekta (a3) i jednog novog objekta (b). Tokom T1i T2testa, istraživanja svakog objekta (definisano kao njuškanje, lizanje, žvakanje ili pomeranje vibrisa dok se nos usmerava ka objektu iz daljine manje od 1 cm) su zabeležena korišćenjem štoperice. T1je ukupno vreme potrošeno u istraživanju poznatih objekata (a1+ a2). T2je ukupno vreme potrošeno u istraživanju poznatog objekta i novog objekta (a3+b).

[0124] Test prepoznavanja objekta je izveden kao što je opisano u Behavioural Brain Research, 1988, 31, 47-59.

Rezultati:

[0125] Vehikulum ili test jedinjenje ili AChEI tretirane životinje potrošile su skoro isto vreme u istraživanju novih i poznatih objekata. Grupe tretirane sa kombinacijom test jedinjenja i AChEI (donepezil, galantamin ili rivastigmin) potrošile su značajno više vremena u istraživanju novih objekata i pravile su razliku između novog i poznatog objekta. Ovaj prokognitivni efekat sugeriše potencirajući efekat test jedinjenja u odnosu na prokognitivni efekat AChEI (donepezil, galantamin ili rivastigmin) zasebno. Rezultati ove studije su obezbeđeni na Slikama 1a, 1b, 1c i 2.

Primer 4:

Procena modulacije acetilholina u medijalnom prefrontalnom korteksu mužjaka Wistar pacova

[0126] Mužjaci Wistar pacova (240-300 g telesne težine) su stereotaksično implantirani sa kanilom sa vođicom za mikrodijalizu u medijalnom prefrontalnom korteksu (mPFC; AP: 3.2 mm, ML: -0.5 mm, DV: -3.0 mm) pod anestezijom sa izofluranom. Koordinate su uzete u skladu sa atlasom za mozak pacova (Paxinos and Watson 2004) sa referentnim tačkama uzetim iz bregme i vertikalno od lobanje. Pacovima je dozvoljeno da se individualno oporave četiri dana u Plexiglas činiji sa okruglim dnom sa slobodnim pristupom hrani i vodi.

[0127] Nakon oporavka od operacije od 4 dana, mužjaci Wistar pacova su povezani sa “dual quartz lined two-channel liquid swivel” (Instech, UK) na suprotnoj ruci kao polugi, što omogućava neograničene pokrete životinje. Šesnaest časova pre početka studije, preekvilibrisane sonde za mikrodijalizu (2 mm mebrana za dijalizu) su ubačene u mPFC preko vođice kanile. Na dan studije, sonda perfuzionisana sa veštačkom cerebrospinalnom tečnošću (aCSF; NaCl 147 mM, KCl 2.7 mM, MgCl21 mM, CaCl2.2H2O 1.2 mM, pH 7.4) održavana je na stopi od 1.5 mL/min i stabilizacionom periodu od 2 č. Pet bazalnih uzoraka je sakupljeno u 20 min intervalima pre tretmana sa test jedinjenjima (3 ili 10 mg/kg, p.o.) ili vehikulumom. Donepezil (1 mg/kg, s.c.) ili rivastigmin (0.5 mg/kg, s.c.) je primenjen 30 min nakon primene test jedinjenja. Uzorci dijalizata su sakupljeni u dodatnom periodu od 4 č nakon tretmana sa test jedinjenjima. Dijalizati su uskladišteni ispod -50 °C pre analize.

Kvantifikacija acetilholina

[0128] Koncentracije acetilholina u dijalizatima su kvantifikovane korišćenjem postupka zasnovanog na LC-MS/MS.

Statistička analiza:

[0129] Svi podaci mikrodijalize za acetilholin su plotovani kao procenat promene od srednje vrednosti bazalnih koncentracija dijalizata sa 100 % definisanim kao prosek pet pre-doznih vrednosti. Procenat promene nivoa acetilholina nakon tretmana sa kombinacijom poređeni su sa donepezilom ili rivastigminom korišćenjem dvofaktorske analize varijanse (vreme i tretman), praćeno sa Bonferroni post hoc testom. Vrednosti površine ispod krive (AUC) za procenat promene nivoa acetilholina su izračunate i statistička značajnost između srednje vrednosti AUC vrednosti nakon tretmana kombinacijom poređene su sa AUC vrednostim nakon tretmana sa donepezilom ili rivastigminom zasebno korišćenjem "t" testa za nezavisne uzorke. Statistička značajnost je smatrana na p vrednosti manjoj od 0.05. Nepravilno postavljanje sonde je smatrano kao kriterijum za odbacivanje podataka od životinje.

Referenca:

[0130] 1. Paxinos G. and Watson C. (2004) Rat brain in stereotaxic coordinates. Academic Press, New York.

Rezultati:

Jedinjenje 1

[0131] Postupak sa donepezilom doveo je do porasta u nivou bazalnog kortikalnog acetilholina i dostigao je maksimum od 933 ± 74 % u odnosu na osnovni nivo. Jedinjenje 1 u kombinaciji sa donepezilom proizvelo je značajan porast u nivou acetilholina i maksimalni nivo je porastao na 1676 ± 150 % u odnosu na nivo pre dodavanja (Slika 3(a)). Srednja vrednost površine ispod krive (AUC) izračunata posle kombinovanog tretmana sa jedinjenjem 1 i donepezilom bile su značajno veće u odnosu na sam donepezil (Slika 3(b)).

[0132] Postupak sa rivastigminom proizveo je porast u nivou bazalnog kortikalnog acetilholina i dostigao maksimum od 612 ± 104% u odnosu na osnovni nivo. Jedinjenje 1 u kombinaciji sa rivastigminom proizvelo je značajan porast u nivou acetilholina i maksimalni nivo je porastao 1276 ± 213% u odnosu na nivo pre dodavanja (Slika 4(a)). Srednje vrednosti površine ispod krive (AUC) izračunate posle kombinacije postupaka Jedinjenja 1 i rivastigmina bili su viši u odnosu na sam rivastagmin (Slika 4(b)).

Jedinjenje 2

[0133] Postupak sa donepezilom proizveo je porast u nivou bazalnog kortikalnog acetilholina i dostigao maksimum od 1459 ± 146 % u odnosu na osnovni nivo. Jedinjenje 2 u kombinacji sa donepezilom proizvelo je značajan porast u nivou acetilholina i maksimalni nivo dostigao je 3057 ± 468 % u odnosu na nivo pre dodavanja (Slika 5(a)). Srednje vrednosti površine ispod krive (AUC) izračunate posle kombinovanja Jedinjenja 2 i donepezila bile su značajno više u odnosu na sam donepezil (Slika 5b).

Jedinjenje 3

[0134] Postupak sa donepezilom proizveo je porast u nivou bazalnog kortikalnog acetilholina i dostigao maksimum od 1170 ± 161 % u odnosu na osnovni nivo. Jedinjenje 3 u kombinaciji sa donepezilom proizvelo je značajan porast u nivou acetilholina i maksimalni nivo je dostigao 1874 ± 184 % od nivoa pre dodavanja (Slika 6(a)). Srednje vrednosti površine ispod krive (AUC) izračunate posle kombinovanja postupaka Jedinjenja 3 i donepezila bile su značajno veće u odnosu na sam donepezil (Slika 6(b)).

Primer 5:

Procena teta modulacije u dorzalnom hipokampusu anesteziranih mužjaka Whistar pacova

[0135] Mužjaci Whistar pacova (240-320 g) su bili anestezirani sa intraperitonealnom primenom uretana (1.2 to 1.5 g/kg) za usađivanje katetera u levu femoralnu venu. Životinja je stavljena u stereotaksični ram za usađivanje elektrode (nerđajuća čelična žica, Plastics One) u dorzalni hipokampus (AP, -3.8 mm; ML, 2.2 mm; DV, -2.5 mm; Paksinos i Votson, 2004). Bipolarna stimulativna elektroda (nevezane žice od nerđajućeg čelika, odvojene za 0.75-1.0 mm na njihovim vrhovima, Plastics One) je ugrađena u Nucleus Pontis Oralis (NPO; AP, -7.8 mm; ML, 1.8 mm; DV, -6.0 mm; Paksinos i Votson, 2004). Zatim jedna elektroda je ugrađena u mali mozak koji je služio kao referenca. Hipokampusni θ ritam je pokrenut preko 6-s električne stimulacije (20-160 µA, 0.3-ms trajanje pulsa, 250 Hz) dostavljen do NPO pri brzini od 0.01 elektirčnih stimulacija/s sa Grass S88 stimulatorom i PSIU6 jedinicom za izolaciju stimulusa (Grass Medical Instruments, Quincy, MA). EEG je zabeležen pri brzini od 1000Hz koristeći Ponemah (verzija 5.2) softver i skladišten je za oflajn analizu koristeći NeuroScore (verzija 3.0).

Bazalni nivo amplitude je postignut koristeći struju neophodnu da iznese θ ritam do 50 % maksimalne amplitude pod kontrolnim uslovima. Posle perioda stabilizacije od jednog sata, osnovno snimanje je obavljeno za 30 minuta praćeno tretmanom vehikulumom ili Jedinjenjem 1 (1 mg/kg, i.v.). Donepezil (0.3 mg/kg, i.v.) je dat 30 minuta nakon tretmana Jedinjenjem 1 i snimanje je nastavljeno za jos jedan sat.

Statističke analize:

[0136] Snaga u θ ritmu frekvencije u periodu stimulacije tokom osnovnog perioda od 30 minuta je izračunata i % promena u ovim merama posle tretmana su izračunate. Upoređena je procentualna promena relativne teta snage nakon kombinovanog tretmana sa donepezilom koristeći dvofaktorsku analizu varijanse (vreme i tretman), praćena Bonferoni post hoc testom. Razmatran je statistički značaj p vrednosti manjih od 0.05.

Referenca:

[0137] 1. Paxinos G. and Watson C. (2004) Rat brain in stereotaxic coordinates. Academic Press, New York

Rezultati:

[0138] Tretman sa donepezilom proizveo je porast u hipokampalnoj teta snazi. Jedinjenje 1 u kombinaciji sa donepezilom proizvelo je značajan porast u nivou teta snage i maksimalni nivo dostigao je 163 ± 15 % u odnosu na nivo pre dodavanja (Figure 7(a)).

Srednje vrednosti površine ispod krive (AUC) izračunate posle tretmana jedinjenjem 1 i donepezilom bile su značajno više u odnosu na sam donepezil (Slika 7(b)).

Claims

Patentni zahtevi

1. Kombinacija koja sadrži inverzni agonist histamin-3 receptora i inhibitor acetilholinesteraze; naznačena time da je inverzni agonist histamin-3 receptora izabran iz grupe koja se sastoji od: N-[4-(1-Ciklobutilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamida;

N-[4-(1-Ciklopropilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamida; i

N-[4-(1-Izopropilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamida;

ili njihove farmaceutski prihvatljive soli.

2. Kombinacija prema patentnom zahtevu 1, naznačena time da je inhibitor acetilholinesteraze izabran iz grupe koja se sastoji od donepezila, rivastigmina i galantamina ili njihove farmaceutski prihvatljive soli.

3. Kombinacija prema patentnom zahtevu 1, naznačena time da inverzni agonist histamin-3 receptora je N-[4-(1-Ciklobutilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamid ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.

4. Kombinacija prema patentnom zahtevu 1 ili patentnom zahtevu 3, naznačena time da je farmaceutski prihvatljiva so inverznog agonista histamin-3 receptora izabrana od

N-[4-(1-Ciklobutilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamid dihidrohlorida;

N-[4-(1-Ciklopropilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamid tartarata; i

N-[4-(1-Izopropilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamid tartarata.

5. Kombinacija prema patentnom zahtevu 1, 3 ili 4, naznačena time da inverzni agonist histamin-3 receptora je N-[4-(1-Ciklobutilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamid dihidrohlorid.

6. Kombinacija prema patentnom zahtevu 1 ili patentnom zahtevu 2, naznačena time da inhibitor acetilholinesteraze je donepezil ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili pri čemu, inhibitor acetilholinesteraze je donepezil hidrohlorid.

7. Kombinacija koja sadrži N-[4-(1-Ciklobutilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamid dihidrohlorid i donepezil hidrohlorid.

8. Kombinacija prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 7, za upotrebu u tretmanu kognitivnih poremećaja kod pacijenta.

9. Kombinacija za upotrebu prema patentnom zahtevu 8, naznačeno time da je kognitivni poremećaj izabran od Alzheimer-ove bolesti, šizofrenije, Parkinson-onove bolesti, demencije sa Lewy-telima, vaskularne demencije, frontotemporalne demencije, Down-ovog sindroma ili Tourette-ovog sindroma.

10. Jedinjenje, N-[4-(1-Ciklobutilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il) acetamid ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za upotrebu u kombinaciji sa inhibitorom acetilholinesteraze za tretman Alzheimer-ove bolesti kod pacijenta.

11. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 10, kao dodatni tretman kod pacijenta na stabilnom tretmanu sa inhibitorom acetilholinesteraze.

12. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 10 ili patentnom zahtevu 11, naznačeno time da inhibitor acetilholinesteraze je izabran od donepezila, rivastigmina i galantamina ili njegove farmaceutski prihvatljive soli.

13. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 10 ili patentnom zahtevu 11,

(a) naznačeno time da tretman sadrži primenu na pacijenta 0.1 mg do 100 mg N-[4-(1-Ciklobutilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamida ili njegove farmaceutski prihvatljive soli na dan, ili

(b) time da tretman sadrži primenu na pacijenta 0.1 mg do 60 mg N-[4-(1-Ciklobutilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamid ili njegove farmaceutski prihvatljive soli na dan, ili (c) time da tretman sadrži primenu na pacijenta 0.1 mg do 30 mg N-[4-(1-Ciklobutilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamid ili njegove farmaceutski prihvatljive soli na dan; ili (d) time da tretman sadrži primenu na pacijenta 1 mg do 30 mg donepezila, ili farmaceutski prihvatljive soli na dan.

14. Farmaceutksa kompozicija koja sadrži kombinaciju prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 7, i farmaceutski prihvatljive ekscipijente ili njihovu kombinaciju.

15. Farmaceutska kompozicija prema patentnom zahtevu 14, za upotrebu u tretmanu kognitivnih poremećaja izabranih od Alzheimer-ove bolesti, šizofrenije, Parkinson-onove bolesti, demencije sa Lewy-telima, vaskularne demencije i frontotemporalne demencije.

16. Farmaceutska kompozicija prema patentnom zahtevu 14 ili patentnom zahtevu 15,

(a) naznačeno time da N-[4-(1-Ciklobutilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamid ili njegova farmaceutski prihvatljiva so su prisutni u količini od 0.1 mg do 100 mg, ili

(b) time da N-[4-(1-Ciklobutilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamid ili njegova farmaceutski prihvatljiva so su prisutni u količini od 0.1 mg do 60 mg, ili

(c) time da N-[4-(1-Ciklobutilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamid ili njegova farmaceutski prihvatljiva so su prisutni u količini od 0.1 mg to 30 mg; ili

(d) time da donepezil ili njegova farmaceutski prihvatljiva so su prisutni u količini od 2 mg do 30 mg.

17. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 10, naznačeno time da tretman sadrži primenu N-[4-(1-Ciklobutilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamida ili njegove farmaceutski prihvatljive soli na pacijenta oralnim, nazalnim, lokalnim, dermalnim ili parenteralnim putevima.

18. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 10, naznačeno time da tretman sadrži primenu N-[4-(1-Ciklobutilpiperidin-4-iloksi)fenil]-2-(morfolin-4-il)acetamida ili njegove farmaceutski prihvatljive soli na pacijenta jednom do tri puta na dan, jednom do tri puta nedeljno ili jednom do tri puta mesečno.