RS61256B1 - Piridinil derivati, farmaceutske kompozicije i njihova primena kao aoc3 inhibitori - Google Patents

Description

Oblast pronalaska

Ovaj pronalazak se odnosi na nova jedinjenja, naročito piridinil derivate, na postupke za dobijanje takvih jedinjenja, na njihovu primenu kao AOC3 inhibitori, na njihovu primenu u terapeutskim postupcima, naročito u lečenju oboljenja i stanja posredovana sa AOC3 inhibitorima, i na farmaceutske kompozicije koje ih sadrže.

Stanje tehnike

Enzimska aktivnost AOC3 (amin oksidaze, koji sadrži 3 bakra; vaskularni adhezion protein 1) je već opisan 1967 kao monoaminska oksidazna aktivnost u plazmi pacijenata sa hroničnim oboljenjem jetre (Gressner, A. M. et al., 1982, J. Clin. Chem. Clin. Biochem. 20: 509-514; McEwen, C. M., Jr. et al.,1967, J. Lab Clin. Med. 70: 36-47). AOC3 ima dva bliska homologna gena u ljudskom genomu: AOC1 koji odgovara diamin oksidazi (Chassande, O. et al., 1994, J. Biol. Chem.269: 14484-14489) i AOC2, SSAO sa specifičnom ekspresijom u retini (Imamura, Y. et al., 1997, Genomics 40: 277-283). AOC4 je sekvenca koja ne vodi do funkcionalne proizvodnje gena kod ljudi usled unutrašnjeg stop-kodona (Schwelberger, H. G., 2007, J. Neural Transm.114: 757-762).

Enzim sadrži oksidizovani 2,4,5-trihidroksi-fenilalaninhinon (TPQ) i jon bakra na aktivnoj strani. Ovaj karakteristični katalitički centar klasifikuje semi-karbazid-senzitivnu amino oksidazu (SSAO, amin koji sadrži bakar:kiseonik oksido-reduktaza (deaminacija)): Membranski protein tipa II pripada porodici bakra koji sadrži amin oksidaze, zajedno sa nekoliko drugih diamina i lizil oksidaza. Međutim, kasniji enzimi se mogu razlikovati od AOC3 po tome što preferiraju diamine i nisku osetljivost na inhibiciju semikarbazida (Dunkel, P. et al., 2008, Curr. Med. Chem.15: 1827-1839). S druge strane, monoamino oksidaze sadrže u svom reaktivnom centru kofaktor flavin adenin dinukleotid (FAD) kofaktor poput monoamin oksidaze A (MAO-A) i monoamin oksidaze B (MAO-B) i prema tome slede drugačiju reakcionu šemu.

AOC3 katalizuje dvostepeni reakcioni mehanizam za oksidativno deaminiranje primarnih alifatskih i aromatičnih amina. U prvoj reakciji primarni amin formira Schiff-bazu sa TPQ aldehidom. Ova kovalentna veza se hidrolizuje, oslobađajući aldehidni proizvod i supstituisani TPQ ostatak u aktivnom mestu. U prisustvu oksigena, TPQ se oksiduje pod stvaranjem amonijaka i peroksida uz pomoć jona bakra (Mure, M. et al., 2002, Biochemistry 41: 9269-9278). Opisano je nekoliko supstrata AOC3, poput fizioloških amina metilamin, dopamin ili aminoaceton, čiji su proizvodi oksidacije povezani sa kardiovaskularnim patologijama (Yu, P. H. et al.,1993, Diabetes 42: 594-603). Sintetički amini su za svoj preokret optimizovani AOC3 poput derivata benzilamina (Yraola, F. et al., 2006, J. Med. Chem. 49: 6197-6208), C-Naphthalen-1-methilamine (Marti, L. et al., 2004, J. Med. Chem.

47: 4865-4874) ili luciferin derivata (Valley, M. P. et al., 2006, Anal. Biochem.359: 238-246). Kasniji supstrat se može koristiti za osetljivo otkrivanje aktivnosti AOC3 u plazmi, tkivu ili za biohemijsku karakterizaciju enzima.

U patofiziološkim uslovima visoke aktivnosti AOC3, proizvodi aldehida su visoko reaktivni, što dovodi do naprednih krajnjih proizvoda glikozilacije (Mathys, K. C. et al., 2002, Biochem. Biophys. Res. Commun. 297: 863-869) koji se smatraju markerima i pokretačima zapaljenskih mehanizama povezanih sa dijabetesom.

Dalje, nusproizvod hidrogen peroksida tkivo oseća kao nosilac inflamacije. Ovaj proizvod reakcije je u stanju da aktivira endotelijum i pospešuje aktivaciju leukocita.

Vezivanje i modifikacija Siglec-10 kao membranski vezanog supstrata pruža mehaničko razumevanje kako enzimska reakcija može pokrenuti transmigraciju leukocita kroz aktivirani endotel. Vezivanje Siglec-10 za AOC3 prikazano je u nekoliko testova adhezije i dovelo je do povećane proizvodnje hidrogen peroksida (Kivi, E. et al., 2009, Blood 114: 5385-5392). Vezivanje aktiviranih leukocita za dimerni, vanćelijski AOC3 putem Siglec-10 generiše privremenu vezu sa aktiviranim endotelom. Zbog toga se smanjuje brzina kotrljanja leukocita, što povećava transmigraciju leukocita u intersticijum upaljenih tkiva. Dalje, očuvani RGD-motiv na površini AOC3 argumentuje svoju adhezivnu ulogu: Brisanje ove sekvence smanjilo je regrutovanje leukocita (Salmi, M. et al., 2000, Circ. Res.86: 1245-1251), verovatno usled nedostatka integrin ȕ1 vezujuće aktivnosti (Aspinall, A. I. et al., 2010, Hepatology 51: 2030-2039).

Ovo otkriće korelira sa fenotipom AOC3 nokautiranih miševa koji imaju smanjeni kapacitet migracije leukocita i limfocita (Stolen, C. M. et al., 2005, Immunity.22: 105-115) u limfoidne organe i masnom tkivu (Bour, S. et al., 2009, Am. J. Pathol.174: 1075-1083).

AOC3 aktivnost se može naći u većini tkiva i uglavnom je iskazana u endotelijalnim ćelijama, glatkim mišićnim ćelijama i adipocitima (Boomsma, F. et al.,2000, Comp Biochem. Physiol C. Toksicol. Pharmacol. 126: 69-78; O'Sullivan, J. et al.,2004, Neurotoksicology 25: 303-315).

Kod ljudi, u odnosu na miševe, AOC3 aktivnost je konstitutivan u sinusoidnim endotelijalnim ćelijama jetre (McNab, G. et al., 1996, Gastroenterology 110: 522-528) i mRNA ekspresija je dalje preregulisana pod uslovima inflamacije u ovom tkivu (Lalor, P. F. et al., 2002, Immunol. Cell Biol.80: 52-64); Bonder, C. S. et al., 2005, Immunity.23: 153-163). AOC3 ne samo da postoji kao membranski protein, ali takođe se može naći kao rastvorljiva aktivnost plazme verovatno usled metaloproteaznog posredovanog postupka prosipanja (Abella, A. et al., 2004, Diabetologia 47: 429-438); Boomsma, F. et al., 2005, Diabetologia 48: 1002-1007; Stolen, C. M. et al., 2004, Circ. Res.95: 50-57)). Povišeni nivoi rastvorljivog AOC3 primećeni su kod dijabetesa (Li, H. Y. et al., 2009, Clin. Chim. Acta 404: 149-153), gojaznosti (Meszaros, Z. et al., 1999, Metabolism 48: 113-117; Weiss, H. G. et al., 2003, Metabolism 52: 688-692), kongestivnog zastoja srca (Boomsma, F. et al., 1997, Cardiovasc. Res. 33: 387-391), poslednji stadijum bolesti bubrega (Kurkijarvi, R. et al., 2001, Eur. J. Immunol.31: 2876-2884) i inflamatorna bolest jetre (Kurkijarvi, R. et al., 1998, J. Immunol. 161: 1549-1557). Za kasnije, nivoi aktivnosti AOC3 u plazmi povezani su sa fibrozom jetre i služe kao prediktor kod pacijenata sa NAFLD (Weston, C. J. et al., 2011, J. Neural Transm.118: 1055-1064). Nakon transplantacije cirotične jetre, visoki nivoi AOC3 u plazmi vratili su se na normalne vrednosti, što govori da je jetra glavni izvor aktivnosti AOC3 u plazmi u ovom patološkom stanju (Boomsma, F. et al., 2003, Biochim. Biophys. Acta 1647: 48-54).

Uloga AOC3 u aktivaciji upale putem stvaranja peroksida i regrutovanju leukocita kako bi se aktivirao endotelijum čini ga atraktivnom metom za lečenje inflamacijskih komponenti kod nekoliko bolesti. Stoga su razna mala molekularna jedinjenja i antitela testirana na različitim životinjskim modelima bolesti. Među njima, inhibicija AOC3 pokazala je blagotvorne efekte na modelima karcinoma melanoma i limfoma (Marttila-Ichihara, F. et al., 2010, J. Immunol.

184: 3164-3173), inflamacija akutnog i hroničnog zgloba (Tabi, T. et al., 2013, J. Neural Transm.120: 963-967) ili pluća (Foot, J. S. et al., 2013, J. Pharmacol. Exp. Ther.347: 365-374), dijabetični edem makule (Inoue, T. et al., 2013,Bioorg. Med. Chem. 21: 1219-1233), fibroza bubrega (Wong, M. et al., 2014, Am. J. Physiol Renal Physiol 307: F908-F916), odbacivanje alografta jetre (Martelius, T. et al., 2004, Am. J. Pathol. 165: 1993-2001) i bezalkoholna bolest jetre.

Razvoj selektivnog, moćnog i dobro podnošljivog inhibitora AOC3 bio bi stoga koristan za lečenje odgovarajućih ljudskih bolesti.

Inhibitori AOC3 su poznati u tehnici, na primer, jedinjenja otkrivena u EP 2695881 koja odgovaraju WO 2012/124696. Derivati piridinila predmetnog pronalaska mogu pružiti nekoliko prednosti, kao što su povećana potencija, smanjeno vezivanje za proteine u plazmi, poboljšani profil enzima CIP (citokrom P450) i visoka metabolička stabilnost, visoka hemijska stabilnost, poboljšana distribucija tkiva, poboljšani profil neželjenih efekata i / ili podnošljivost i kao posledica niska toksičnost, smanjen rizik od izazivanja neželjenih događaja ili neželjenih sporednih efekata i povećana rastvorljivost. Derivati piridinila predmetnog pronalaska pokazuju povećanu selektivnost prema AOC1. Ekspresija AOC1 i enzimska aktivnost uglavnom se nalaze u crevima, placenti i bubrezima. Enzim katalizuje oksidaciju primarnih amina izvedenih iz ishrane i štiti individum od kardiometaboličkih efekata histamina, putrescina, triptamina i kadaverina. Inhibicija AOC1 može dovesti do oštećenja tolerancije na progutani histamin, što rezultira povećanim nivoom histamina u plazmi i tkivu, što može prouzrokovati neželjene događaje ili neželjene neželjene efekte poput smanjenog arterijskog pritiska i kompenzaciju povećanim pulsom, tahikardijom, glavoboljom, ispiranjem, urtikarijom, pruritus, bronhospazam i srčani zastoj (Maintz L. and Novak N.2007. Am. J. Clin. Nutr.85:1185-96). Posledica inhibicije AOC1 u kombinaciji sa unosom histamina prikazana je u eksperimentima sa svinjama: Nakon primene AOC1-inhibitora aminogvanidina (100 mg/kg) i gavaže histamina (2 mg/kg) životinje su povisile nivo histamina u krvi praćene sa padom krvnog pritiska, povećanim pulsom, crvenilom, povraćanjem i smrću (3 od 15 životinja) (Sattler J.1988. Agents and Actions, 23: 361-365) pod eksperimentalnim uslovima. Netolerancija na histamin kod ljudi bila je povezana sa mutacijama u promotorskom regionu AOC1, što je dovelo do smanjene ekspresije mRNK i aktivnosti AOC1 u plazmi (Maintz et al.

2011. Allergy 66: 893–902).

Cilj predmetnog pronalaska

Cilj predmetnog pronalaska jeste da se obezbede nova jedinjenja, naročito novi derivati piridinila, koji su aktivni u odnosu na AOC3.

Dalji cilj predemtnog pronaalska jeste da se obezbede nova jedinjenja, naročito nivu derivati piridinila, koji imaju inhibitornu efikasnost na AOC3 in vitro i / ili in vivo i poseduju pogodne farmakološke i farmakokinetičke osobine za njihovu primenu kao medikamenti.

Dalji cilj predmetnog pronalaska jeste da se obezbede efikasni inhibitori AOC3, posebno za lečenje različitih bolesti, na primer NASH (bezalkoholni steatohepatitis), plućna fibroza, retinopatija i nefropatija.

Dalji cilj predmetnog pronalaska jeste da se obezbede efikasni inhibitori AOC3 za lečenje metaboličkih bolesti kao što je NASH (bezalkoholni steatohepatitis), plućna fibroza, retinopatija i nefropatija.

Dalji cilj predmetnog pronalaska jeste da se obezbedi farmaceutska kompozicija koja sadrži bar jedno jedinjenje prema pronalasku.

Dalji cilj predmetnog pronalaska jeste da se obezbedi kombinacija najmanje jednog jedinjenja prema pronalasku sa jednim ili više dodatnih terapijskih agenasa.

Dalji cilj predmetnog pronalaska jeste da se obezbede metode za sintezu novih jedinjenja, naročito derivata piridinila.

Dalji cilj predmetnog pronalaska jeste da se obezbede početna i / ili intermedijerna jedinjenja pogodna u postupcima za sintezu novih jedinjenja.

Dalji ciljevi predmetnog pronalaska postaju očigledni stručnjaku u ovoj oblasti prethodno opisanim tekstom, kao i sledećim i primerima.

Predmet pronalaska

Unutar obima predmetnog pronalaska sada je iznenađujuće pronađeno da nova jedinjenja opšte formule (I), kako su u daljem tekstu opisana, pokazuju inhibitornu aktivnost u odnosu na AOC3.

Prema drugom aspektu predmetnog pronalaska pronađeno je da nova jedinjenja opšte formule (I) kao što je ovde opisano pokazuju inhibitornu aktivnost u odnosu na AOC3.

U prvom aspektu predmetni pronalazak obezbeđuje jedinjenje opšte formule

gde

A je odabran između grupe A-G1 koja se sastoji od: N i CH;

R<1>je odabran između grupe R<1>-G1 koja se sastoji od:

C1-6-alkil, C3-6-cikloalkil, heterociklil, -O-R<2>, -S-R<2>, -NH-R<2>i -N(R<2>)2,

Gde svaki R<2>je nezavisno odabran između grupe R<2>-G1 koja se sastoji od C1-

6-alkil, C3-6-cikloalkil, heterociklil, -(C1-2-alkil)-(C3-6-cikloalkil), -(C1-2-alkil)-heterociklil, -(C1-2-alkil)-aril, -(C1-2-alkil)-heteroaril i –(C1-2-alkil)-CŁCH;

gde svaki heterociklil R<1>i R<2>je 4- do 7-člana zasićena karbociklična grupa, u kojoj 1 ili 2 CH2-ostatka su nezavisno jedan od drugog zamenjeni sa atomom ili grupom odabranom između NH, O, S, -S(=O)-, -S(=O)2- ili –C(=O)-; i

gde svaki aril je odabran između grupe koja se sastoji od fenil i naftil; i

gde svaki heteroaril je 5- ili 6-člani heteroaromatični prsten koji sadrži 1, 2 ili 3 heteroatoma nezavisno odabrana između =N-, -NH-, -O- i –S-, gde u heteroaromatičnim grupama koje sadrže –CH=N- jedinicu, ova grupa je opciono zamenjena sa–NH-C(=O)-; i

gde svaka alkil, cikloalkil, heterociklil, aril ili heteroaril grupa R<1>i R<2>je opciono nezavisno supstituisana sa jednom ili više F, Cl, CN, OH, C1-3-alkil, -O-(C1-3-alkil), –C(=O)—(C1-3-alkil) i –C(=O)—(C3-7-cikloalkil);

gde svaki od gore navedenih alkil i –O-alkil grupa može biti linearno ili razgranato i opciono su supstituisani sa jednim ili više F;

njegovi tautomeri ili stereoizomeri,

ili njegove soli,

ili njegov solvat ili hidrat.

U drugom aspektu predmenti pronalazak se odnosi na postupke za dobijanje jedinjenja opšte formule (I) i novih intermedijernnih jedinjenja u ovim postupcima.

Dalji aspekt pronalaska odnosi se na sol jedinjenja opšte formule (I) prema ovom pronalasku, posebno na njihovu farmaceutski prihvatljivu so.

U daljem aspektu, ovaj pronalazak se odnosi na farmaceutsku kompoziciju, koja sadrži jedno ili više jedinjenja opšte formule (I) ili jednu ili više njihovih farmaceutski prihvatljivih soli prema pronalasku, opciono zajedno sa jednim ili više inertnih nosača i / ili razblaživača.

U daljem aspektu, ovaj pronalazak se odnosi na postupak za lečenje bolesti ili stanja koja su posredovana inhibiranjem aktivnosti AOC3 kod pacijenta kome je to potrebno, naznačena vreme što se jedinjenje opšte formule (I) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so daje pacijentima.

Prema drugom aspektu pronalaska, obezbeđen je postupak za lečenje NASH (bezalkoholni steatohepatitis), plućne fibroze, retinopatije ili nefropatije kod pacijenta kome je to potrebno, naznačeno vreme što se jedinjenje opšte formule (I) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so daje pacijentu.

Prema drugom aspektu pronalaska, predviđena je upotreba jedinjenja opšte formule (I) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli za proizvodnju medikamenta za terapijski postupak kako je gore opisano ili u daljem tekstu.

Prema drugom aspektu pronalaska, obezbeđeno je jedinjenje opšte formule (I) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za upotrebu u terapijskoj metodi kako je gore opisano ili u daljem tekstu.

U daljem aspektu, ovaj pronalazak se odnosi na postupak za lečenje bolesti ili stanja posredovanih inhibicijom AOC3 kod pacijenta koji uključuje korak primene na pacijenta kome je potrebno takvo lečenje terapeutski efikasne količine jedinjenja opšte formule (I) ili njegove farmaceutski prihvatljive so u kombinaciji sa terapeutski efikasnom količinom jednog ili više dodatnih terapijskih agenasa.

U daljem aspektu, ovaj pronalazak se odnosi na upotrebu jedinjenja opšte formule (I) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli u kombinaciji sa jednim ili više dodatnih terapeutskih agenasa za lečenje ili prevenciju bolesti ili stanja koja su posredovana inhibicijom AOC3.

U daljem aspektu, ovaj pronalazak se odnosi na farmaceutsku kompoziciju koja sadrži jedinjenje opšte formule (I) ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so i jedno ili više dodatnih terapijskih agenasa, opciono zajedno sa jednim ili više inertnih nosača i / ili razblaživača. Ostali aspekti pronalaska postaju očigledni stručnjaku u ovoj oblasti iz opisa i eksperimentalnog dela kako su prethodno opisani i dalje opisani.

Detaljan Opis

Ukoliko nije drugačije naznačeno, grupe, ostaci, i supstituenti, naročito A, R<1>i R<2>, su definisani kao gore i u nastavku. Ako se ostaci, supstituenti ili grupe javljaju nekoliko puta u jedinjenju, kao na primer R<2>, mogu imati isto ili različito značenje. U nastavku će se dati neka poželjna značenja pojedinačnih grupa i supstituenata jedinjenja prema pronalasku. Svaka od ovih definicija može se međusobno kombinovati.

A:

A-G1:

Grupa A je poželjno odabrana između grupe A-G1 kao što je napred definisano.

A-G2:

U drugom rešenju grupa A je odabrana između grupe A-G2 koja se sastoji od N.

A-G3:

U drugom rešenju grupa A je odabrana između grupe A-G3 koja se sastoji od CH.

R<1>:

R<1>-G1:

Grupa R<1>je poželjno odabrana između grupe R<1>-G1 kao što je napred definisano.

R<1>-G2:

U jednom rešenju grupa R<1>je odabrana između grupe R<1>-G2 koja se sastoji od:

C1-4-alkil, C3-5-cikloalkil, heterociklil, -O-R<2>, -S-R<2>, -NH-R<2>and -N(R<2>)2;

Gde svaki heterociklil je 4- do 6-člana zasićena kabrociklična grupa, u kojoj 1 ili 2 CH2-ostatka su zamenjena sa heteroatomom odabranim između NH, O ili S; i gde svaka alkil, cikloalkil ili heterociklil grupa je opciono nezavisno supstituisana sa 1 do 5 F i / ili 1 do 3 supstituenta nezavisno izabrani između grupe koja se sastoji od Cl, CN, OH, C1-2-alkil, -O-(C1-2-alkil), –C(=O)-(C1-2-alkil) i –C(=O)-(C3-4-cikloalkil).

R<1>-G3:

U drugom rešenju grupa R<1>je odabrana između grupe R<1>-G3 koaj se sastoji od:

C1-3-alkil, C3-4-cikloalkil, heterociklil, -O-R<2>, -S-R<2>, -NH-R<2>i -N(R<2>)2;

gde svaki heterociklil je odabran između grupe koja se sastoji od azetidinil, piperidinil, piperazinil, tetrahidrofuranil, tetrahidropiranil i morfolinil; i

gde svaka alkil, cikloalkil ili heterociklil grupa je opciono nezavisno supstituisana sa 1 do 3 F i / ili jednim sup odabran from the grupe consisting of CN, OH, CH3, -O-CH3, – C(=O)-CH3and –C(=O)-ciklopropil.

R<1>-G4:

In another embodiment the grupe R<1>is odabran from the grupe R<1>-G4 consisting of:

C1-2-alkil, C3-4-cikloalkil, heterociklil, -O-R<2>, -NH-R<2>and -N(R<2>)2;

gde svaki heterociklil je odabran između grupe koja se sastoji od azetidinil, piperidinil, tetrahidrofuranil, tetrahidropiranil i morfolinil; i

gde svaka alkil, cikloalkil ili heterociklil grupa je opciono nezavisno supstituisana sa 1 do 3 F ili jednim supstituentom odabranim između grupe koja se sastoji od CN, OH, CH3, -O-CH3, –C(=O)-CH3i –C(=O)-ciklopropil.

R<1>-G5:

U drugom rešenju grupa R<1>je odabrana između grupe R<1>-G5 koja se sastoji od: ciklopropil, heterociklil i -O-R<2>;

gde svaki heterociklil je odabran između grupe koja se sastoji od azetidinil, piperidinil, tetrahidrofuranil, tetrahidropiranil i morfolinil; i

gde svaka heterociklil grupa je opciono nezavisno supstituisana sa jednim substituentom odabranim između grupe koja se sastoji od F, CN, OH, CH3, -O-CH3.

1

R<1>-G6:

U drugom rešenju grupa R<1>je odabrana između grupe R<1>-G6 koja se sastoji od:

a) CH3;

b) –O-C1-4-alkil opciono susptituisan sa 1-3 F ili jednim –OCH3;

c) –O-C2-4-alkil terminal susptituisan sa –CŁCH;

d) –S-CH3;

e) ciklopropil;

f) –NH-(C1-3-alkil) i –N(CH3)(C1-3-alkil), gde svaka alkil grupa je opciono supstituisana sa 1-3 F ili jednim –OCH3;

g) azetidinil, tetrahidropiranil i morfolinil, svaki opciono susptituisan sa –OCH3;

h) tetrahidrofuraniloksi;

i) –O-CH2-R<3>,

gde R<3>je C3-4-cikloalkil opciono supstituisan sa 1 ili 2 supstituenta nezavisno odabrani između grupe koja se sastoji od F i CN;

tetrahidropiranil;

piperidinil opciono susptituisan sa –C(=O)-CH3ili –C(=O)—ciklopropil; izoksazolil, tiazolil ili tiadiazolil;

j) –O-CH(CH3)-oksazolil;

k) –N(R<N>)-R<4>,

gde R<N>je H ili CH3,i

R<4>je tetrahidrofuranil, tetrahidropiranil ili –(CH2)-izoksazolil.

R<1>-G7:

U drugom rešenju grupa R<1>je odabrana između grupe R<1>-G7 koja se sastoji od:

R<2>:

R<2>-G1:

Grupa R<2>je poželjno odabrana između grupe R<2>-G1 kao što je napred definisano.

R<2>-G2:

U jednom rešenju grupa R<2>je odabrana između grupe R<2>-G2 koja se sastoji od

C1-4-alkil, C3-5-cikloalkil, heterociklil, -(C1-2-alkil)-(C3-5-cikloalkil), -(C1-2-alkil)-heterociklil, -(C1-2-alkil)-aril, -(C1-2-alkil)-heteroaril i –(C1-2-alkil)-CŁCH;

gde svaki heterociklil je 4- do 6-člana zasićena karbociklična grupa, u kojoj 1 ili 2 CH2-ostatka su zamenjena sa heteroatomom odabranim između NH, O ili S; i

gde svaki aril je odabran između grupe koja se sastoji od fenila i naftila; i

gde svaki heteroaril je 5- ili 6-člani heteroaromatični prsten koji sadrži 1, 2 ili 3 heteroatoma nezavisno odabrani između =N-, -NH-, -O- i –S-; i

gde svaka alkil, cikloalkil, heterociklil, aril ili heteroaril grupa je opciono nezavisno supstituisana sa jednim ili više F, Cl, CN, OH, C1-2-alkil, -O-(C1-2-alkil), –C(=O)-(C1-2-alkil) i –C(=O)-(C3-7-cikloalkil).

R<2>-G3:

U drugom rešenju grupa R<2>je odabrana između grupe R<2>-G3 koja se sastoji od

C1-4-alkil, C3-4-cikloalkil, heterociklil, -(C1-2-alkil)-(C3-4-cikloalkil), -(C1-2-alkil)-heterociklil, -(C1-2-alkil)-fenil, -(C1-2-alkil)-heteroaril i –(C1-2-alkil)-CŁCH;

gde svaki heterociklil je odabran između grupe koja se sastoji od azetidinil, tetrahidrofuranil, tetrahidrofuranil i piperidinil; i

gde svaki heteroaril je odabran između grupe koja se sastoji od izoksazolil, tiazolil i tiadiazolil; i

gde svaka alkil, cikloalkil, heterociklil, aril iliheteroaril grupa je opciono nezavisno supstituisana sa jednim ili više F, CN, OH, CH3, -OCH3, –C(=O)—CH3i –C(=O)— ciklopropil.

R<2>-G4:

U drugom rešenju grupa R<2>je odabrana između grupe R<2>-G4 koja se sastoji od

C1-4-alkil, -CH2-(C3-4-cikloalkil), -CH2-heterociklil, -CH2-heteroaril i –CH2-CH2-CŁCH;

gde svaki heterociklil je odabran između grupe koja se sastoji od tetrahidrofuranil i piperidinil; i

gde svaki heteroaril je odabran između grupe koja se sastoji od izoksazolil, tiazolil i tiadiazolil; i

gde svaka alkil, cikloalkil, heterociklil, aril ili heteroaril grupa je opciono nezavisno supstituisana s jednim ili više F, CN, CH3, -OCH3, –C(=O)—CH3i –C(=O)—ciklopropil.

R<2>-G5:

U drugom rešenju grupa R<2>je odabrana između grupe R<2>-G5 koja se sastoji od

C1-4-alkil, -CH2-(C3-4-cikloalkil), -CH2-heteroaril i –CH2-CH2-CŁCH;

1

gde svaki heteroaril je odabran između grupe koja se sastoji od izoksazolil, tiazolil i tiadiazolil; i

gde svaka alkil, cikloalkil, aril ili heteroaril grupa je opciono nezavisno supstituisana sa jednim ili više F, CN i -OCH3.

Primeri poželjnih subgenerističkih rešenja prema predmetnom pronalasku prikazani su u sledećoj tabeli, gde je svaki supstituent grupe svakog rešenja definisan prema definicijama navedenim gore:

1

Sledeća poželjna rešenja jedinjenja formule (I) su opisana korišćenjem generičkih formula (I.1) do (I.2), gde su svi njihovi tautomeri i stereoizomeri, solvati, hidrati i njihove soli, posebno njihove farmaceutski prihvatljive soli, obuhvaćeni.

gde u gore navedenoj formuli (I.1) do (I.2), grupa R<1>je kao što je napred navedena.

Poželjno rešenje predmetnog pronalaska se odnosi na jedinjenja formule

gde

1

R<1>je odabran između grupe koja se sastoji od ciklopropil, heterociklil i -O-R<2>;

gde R<2>je odabran između grupe koja se sastoji od C1-6-alkil, -(C1-2-alkil)-(C3-6-cikloalkil), --(C1-2-alkil)-heteroaril i –(C1-2-alkil)-CŁCH;

gde svaki heterociklil je odabran između grupe koja se sastoji od azetidinil, piperidinil, tetrahidrofuranil, tetrahidropiranil i morfolinil; i

gde svaka heterociklil grupa je opciono nezavisno supstituisana sa jednim supstituentom odabranim između grupe koja se sastoji od F, CN, OH, CH3, -O-CH3; i

gde svaki heteroaril je odabran između grupe koja se sastoji od izoksazolil, tiazolil i tiadiazolil; i

gde svaka alkil, cikloalkil, heterociklil, ili heteroaril grupa je opciono nezavisno supstituisana sa jednim ili više F, CN, CH3,

ciklopropil;

ili njegove so, poželjno njegova farmaceutski prihvatljiva so.

Drugo poželjno rešenje predmetnog pronalaska se odnosi na jedinjenja formule (I.1), gde

R<1>je odabran između grupe koja se sastoji od ciklopropil, heterociklil i -O-R<2>;

gde R<2>je odabran između grupe koja se sastoji od C1-4-alkil, -CH2-(C3-4-cikloalkil), -CH2-heteroaril i –CH2-CH2-CŁCH;

gde svaki heteroaril je odabran između grupe koja se sastoji od izoksazolil, tiazolil i tiadiazolil; i

gde svaka alkil, cikloalkil, aril ili heteroaril grupa je opciono nezavisno supstituisana sa jednim ili više F, CN i -OCH3.

gde svaki heterociklil je odabran između grupe koja se sastoji od azetidinil, piperidinil, tetrahidrofuranil, tetrahidropiranil i morfolinil; i

1

gde svaka heterociklil grupa je opciono nezavisno supstituisana sa jednim supstituentom odabranim između grupe koja se sastoji od F, CN, OH, CH3, -O-CH3;

ili njegove so, poželjno njegova farmaceutski prihvatljiva so.

Poželjna jedinjenja pronalaska obuhvataju:

1

,

ili njegove so, poželjno njegova farmaceutski prihvatljiva so.

Naročito poželjna jedinjenja, uključujući njihove tautomere i stereoizomere, njihove soli ili bilo kakve solvate ili hidrate, opisana su u eksperimentalnom delu u daljem tekstu.

Jedinjenja prema pronalasku mogu se dobiti korišćenjem metoda sinteze koje su poznate stručnjaku i opisane u literaturi o organskoj sintezi. Poželjno je da se jedinjenja dobijaju analogno postupcima pripreme koji su u nastavku detaljnije objašnjeni, posebno kao što je opisano u eksperimentalnom delu.

Izrazi i definicije

Izrazi koji ovde nisu posebno definisani treba dati značenja koja bi im dao stručnjak u tehnici u pogledu otkrivanja i konteksta. Međutim, kako se koristi u opisu, ukoliko nije drugačije naznačeno, sledeći izrazi imaju naznačeno značenje i pridržavaju se sledećih konvencija.

Izrazi "jedinjenje(a) prema ovom pronalasku", "jedinjenje (a) formule (I)", "jedinjenje (a) pronalaska" i slično označavaju jedinjenja formule (I) prema predstavljenom pronalazak, uključujući njihove tautomere, stereoizomere i njihove smeše i njihove soli, posebno njihove farmaceutski prihvatljive soli, i solvate i hidrate takvih jedinjenja, uključujući solvate i hidrate takvih tautomera, stereoizomera i njihovih soli.

Izraz "lečenje" i "koji se leči" obuhvataju i preventivni, tj. profilaktički, ili terapijski, tj. kurativni i / ili palijativni tretman. Prema tome, izrazi "lečenje" i "koji se leči" obuhvataju terapijsko lečenje pacijenata koji su već razvili navedeno stanje, posebno u manifestnom obliku.

Terapijsko lečenje može biti simptomatsko lečenje u cilju ublažavanja simptoma specifične indikacije ili uzročnog lečenja kako bi se preokrenuli ili delimično preokrenuli uslovi indikacije ili zaustavilo ili usporilo napredovanje bolesti. Prema tome, kompozicije i postupci predmetnohg pronalaska mogu se koristiti, na primer, kao terapijsko lečenje tokom određenog vremenskog perioda, kao i za hroničnu terapiju. Pored toga, izrazi "lečenje" i "koji se leči" obuhvataju profilaktičko lečenje, tj. lečenje pacijenata sa rizikom da razviju prethodno pomenuto stanje, smanjujući na taj način navedeni rizik.

1

Kada se ovaj pronalazak odnosi na pacijente kojima je potrebno lečenje, odnosi se prvenstveno na lečenje sisara, naročito ljudi.

Izraz "terapeutski efikasna količina" označava količinu jedinjenja predmetnog pronalaska koja (i) leči ili sprečava određenu bolest ili stanje, (ii) umanjuje, poboljšava ili uklanja jedan ili više simptoma određene bolesti ili stanja, ili (iii) sprečava ili odlaže pojavu jednog ili više simptoma određene bolesti ili stanja koji su ovde opisani.

Izrazi "modulisani" ili "koji moduliraju", ili "modulirajući(e)", kako se ovde koriste, ukoliko nije drugačije naznačeno, odnose se na inhibiciju AOC3 sa jednim ili više jedinjenja predmetnog pronalaska.

Izrazi „posredovano“ ili „koji posreduje“ ili „posrednički“, kako su ovde upotrebljeni, ukoliko nije drugačije naznačeno, odnose se na (i) lečenje, uključujući prevenciju određene bolesti ili stanja, (ii) slabljenje, ublažavanje ili uklanjanje jednog ili više simptoma određene bolesti ili stanja, ili (iii) sprečavanje ili odlaganje početka jednog ili više ovde opisanih simptoma određene bolesti ili stanja.

Izraz "supstituisana", kako se ovde koristi, znači da je bilo koji ili više vodonika na naznačenom atomu, radikalu ili delu zamenjen izborom iz naznačenih grupa, pod uslovom da normalna valenca atoma nije prekoračena i da supstitucija rezultira prihvatljivo stabilno jedinjenje.

U grupama, radikalima ili ostacima definisanim u nastavku, broj atoma ugljenika je često naveden pre grupa, na primer, C1-6-alkil označava alkil grupu ili radikal koji ima 1 do 6 atoma ugljenika. Uopšteno, za grupe koje se sastoje od dve ili više podgrupa, poslednja imenovana podgrupa je tačka vezivanja radikala, na primer, supstituent "aril-C1-3-alkil-" označava aril grupu koja je vezana za C1-3-alkil-grupu, od kojih je poslednji vezan za jezgro ili za grupe za koje je vezan supstituent.

U slučaju da je jedinjenje prikazanog pronalaska prikazano u obliku hemijskog naziva i kao formula u slučaju bilo kakvih odstupanja, formula će prevladati.

Zvezdica se može koristiti u pod-formulama da označi vezu koja je vezana za jezgro molekula kao što je definisano.

2

Numeracija atoma supstituenta počinje sa atomom koji je najbliži jezgru ili grupama za koje je supstituent vezan.

Na primer, izraz “3-karboksipropil-grupa” predstavlja sledeći supstituent:

gde karboksi grupa je vezana za treći atom ugljenika propil grupe. Izraz “1-metilpropil-“, “2,2-dimetilpropil-“ ili “ciklopropilmetil-“ grupa predstavlja seldeće grupe:

Zvezdica se može koristiti u pod-formulama da označi vezu koja je povezana za jezgro molekula kao što je definisano.

U definiciji grupe izraz "gde svaka X, Y i Z grupa je opciono supstituisana sa" i slično označava da svaka grupa X, svaka grupa Y i svaka grupa Z ili svaka kao odvojena grupa ili svaka kao deo obrazovane grupe može biti supstituisana kao što je definisano. Na primer, definicija "R<ex>označava H, C1-3-alkil, C3-6-cikloalkil, C3-6-cikloalkil-C1-3-alkil ili C1-3-alkil-O-, gde svaka alkil grupa je opciono supstituisana sa jednim ili više L<ex>." Ili slično označava da u svakoj od prethodno navedenih grupa koje sadrže izraz alkil, odn. u svakoj od grupa C1-3-alkil, C3-6-cikloalkil-C1-3-alkil i C1-3-alkil-O-, alkil ostatak može biti supstituisana sa L<ex>kao što je definisano.

U nastavku izraz biciklični uključuje spirociklični.

Osim ako nije posebno naznačeno, u celom opisu i priloženim zahtevima, data hemijska formula ili naziv obuhvataće tautomere i sve stereo, optičke i geometrijske izomere (npr. enantiomere, dijastereomere, E / Z izomere itd.) i njihove racemate, kao i njihove smeše u različitim proporcijama odvojenih enantiomera, smeša diastereomera ili smeša bilo kog od prethodno navedenih oblika gde takvi izomeri i enantiomeri postoje, kao i soli, uključujući njihove farmaceutski prihvatljive soli i njihove solvate, kao što su na primer hidrati, uključujući solvate slobodnih jedinjenja ili solvate soli jedinjenja.

Fraza "farmaceutski prihvatljiva" ovde je uključena da se odnosi na ona jedinjenja, materijale, kompozicije i / ili dozne oblike koji su, u okviru zdrave medicinske procene, pogodne za primenu u kontaktu sa tkivima ljudi i životinja bez prkeomerne toksičnosti, iritacije, alergijskog odgovora, ili drugih poblema ili komplikacija, i srazmerno razumnom odnosu koristi / rizika.

Kao što se koristi ovde, „farmaceutski prihvatljive soli“ se odnose na derivate otkrivenih jedinjenja, gde je matično jedinjenje modifikovano pravljenjem njegovih kiselinskih ili baznih soli. Primeri farmaceutski prihvatljivih soli uključuju, ali nisu ograničeni na, soli mineralnih ili organskih kiselina osnovnih ostataka kao što su amini; alkalne ili organske soli kiselih ostataka kao što su karboksilne kiseline; i slično.

Farmaceutski prihvatljive soli predmetnog pronalaska mogu se sintetizovati iz matičnog jedinjenja koje sadrži bazni ili kiseli deo uobičajenim hemijskim metodama. Uopšteno, takve soli se mogu dobiti reakcijom slobodne kiseline ili baznih oblika ovih jedinjenja sa dovoljnom količinom odgovarajuće baze ili kiseline u vodi ili u organskom razblaživaču poput etra, etil acetata, etanola, izopropanola ili acetonitrila, ili njihova smeša.

Soli drugih kiselina od gore pomenutih, koje su na primer korisne za prečišćavanje ili izolaciju jedinjenja predmetnog pronalaska, takođe čine deo pronalaska.

Izraz halogen uopšteno označava fluor, hlor, brom i jod.

Izraz gde n je ceo broj od 1 do n, ili sam ili u kombinaciji sa drugim radikalom označava aciklični, zasićeni, razgranati ili linearni ugljovodonični radikal sa 1 do n C atoma. Na primer izraz C1-5-alkil obuhvata radikale H3C-, H3C-CH2-, H3C-CH2-CH2-, H3C-CH(CH3)-, H3C-CH2-CH2-CH2-, H3C-CH2-CH(CH3)-, H3C-CH(CH3)-CH2-, H3C-C(CH3)2-, H3C-CH2-CH2-CH2-CH2-, H3C-CH2-CH2-CH(CH3)-, H3C-CH2-CH(CH3)-CH2-, H3C-CH(CH3)-CH2-CH2-, H3C-CH2-C(CH3)2-, H3C-C(CH3)2-CH2-, H3C-CH(CH3)-CH(CH3)- i H3C-CH2-CH(CH2CH3)-.

Izraz gde n je ceo broj od 4 do n, ili sami ili u kombinaciji sa drugim radikalom označava ciklični, zasićeni, nerazgranati ugljovodonični radikal sa 3 do n C atoma. Ciklična grupa može biti mono-, bi-, tri- ili spirociklični, najpoželjnije monociklični. Primeri takvih cikloalkil grupa uključuju ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil, cikloheptil, ciklooktil, ciklononil, ciklododecil, biciklo[3.2.1.]oktil, spiro[4.5]decil, norpinil, norbonil, norkaril, adamantil, itd.

Mnogi od gore navedenih termina mogu se više puta koristiti u definiciji formule ili grupe, a u svakom slučaju imaju jedno od gore navedenih značenja, nezavisno jedno od drugog.

Sve grupe i supstituenti kako su ovde definisani ranije i u daljem tekstu mogu biti supstituisani sa jednim ili više F atoma.

Farmakološka Aktivnost

Aktivnost jedinjenja pronalaska mogu biti demonstrirana korišćenjem sledeće AOC3 analize:

AOC3 biohemijska analiza

MAO-Glo™ Analiza (komercijalno dostupan iz PROMEGA, #V1402) obezbeđuje senzitivni postupak za merenje aktivnosti monoamin oksidaze (MAO) (Valley, M. P. et al., 2006, Anal. Biochem. 359: 238-246) iz različitih tkiva, biotečnosti ili rekombinantnih eksprimiranih ili prečišćenih enzima. Kao supstrat derivat iz beetle luciferin ((4S)-4,5-dihidro-2-(6-hidroksibenzotiazolil)-4-tiazole-karboksilna kiselina) je korišćen, koji je oksidisan na primarnom aminskom ostatku. Nakon spontane eliminacije i katalizovane reakcije esteraze, promet luciferina od strane luciferaze beleži se kao signal aktivnosti AOC3.

Za određivanje aktivnosti AOC3 ili potencije inhibicije jedinjenja, inhibitori jedinjenja se rastvaraju u DMSO i reakcionim puferom prilagođavaju odgovarajućoj probnoj koncentraciji (50 mM HEPES, 5 mM KCl, 2 mM CaCl2, 1.4 mM MgCl2, 120 mM NaCl, 0.001% (v/v) Tween 20, 100 µM TCEP, pH 7.4). Alikvot 3 µL rastvorenog jedinjenja je dodat u ploču sa 384 bunarčLća (Optiplate, PS, flat bottom, white, PERKIN ELMER, #6007290) sa finalnom DMSO koncentracijom od 6.6%. Rekombinantne CHO ćelije, koje iskazuju ljudski (1500 ćelija / bunarčLću), mišji (1000 ćelija / bunarčLću) ili pacovski (500 ćelija / bunarčLću) AOC3 enzim su razblaženi u reakcionom puferu i dodat u zapremini od 15 µL u bunarčLće. Posle inkubacije od 20 minuta na 37°C, 2 µL of MAO supstrata (rastvoren u DMSO na 16 mM, podešen da analizira koncentraciju u reakcionom puferu do finalne analize koncentracije od 20 µM) je ododat i dalje inkubiran 60 minuta na 37°C. Preokret supstrata je određen dodavanjem 20 µL detekcione smeše koja je generisana dodatkom rekonstituisanog pufera sa esterazom (PROMEGA, #V1402) u luciferin detekcioni reagens (PROMEGA, #V1402). Posle inkubacionog perioda od 20 minuta, luminescentni signal je izmeren sa Envision 2104 Multilabel ýitačem (PERKIN ELMER).

2

Alternativne analize za određivanje enzimske aktivnosti AOC3 bi bile ekstrakcija<14>C-označenog benzilamin proizvoda reakcije ili reakcija Amplex Red Monoamin Oksidaze (Molecular Probes, Netherlands) kao što je opisano u Gella et al. (Gella, A. et al., 2013, J. Neural Transm.120: 1015-1018).

Jedinjenja opšte formule (I) prema pronalasku na primer imaju IC50vrednosti ispod 5000 nM, naročito ispod 1000 nM, poželjno ispod 300 nM, najpoželjnije ispod 100 nM.

AOC1 biohemijska analiza

The Amplex® Red Analiza (dostupna iz Thermo Fisher Scientific) obezbeđuje senzitivni postupak za detekciju H2O2generisan tokom enzimskih reakcija kao što je oksidacija amina katalizovana sa AOC1. Reagens analize je obojeni supstrat (N-acetil-3,7-dihidroksifenoksazin) koji reaguje u 1:1 stehiometriji sa vodonik peroksidom (H2O2) kako bi se dobio fluorescentno obojeni resorufin (7-hidroksifenoksazin-3-on, maksimum pobude / emisije = 570 / 585 nm).

Za određivanje aktivnosti AOC1 ili jačine inhibicije jedinjenja AOC1, inhibitori jedinjenja su rastvoreni u DMSO i podešeni na respektivnu koncentraciju analize sa reakcionim puferom (100 mM natrijum fosfat, 0.05% Pluronic F-127 (#P3000MP Sigma-Aldrich), pH 7.4). Alikvot od 3 µL razblaženog jedinjenja je dodat u ploču sa 384 bunarčLća (Optiplate, PS, flat bottom F, black, PERKIN ELMER, #6007270) u DMSO koncentraciji od 6.6%.

Alikvot enzima AOC1 (#8297-AO-010, R&D Systems) je otopljen na ledu, razblažen u reakcionom puferu i dodat u zapremini od 7 µL u bunarčLće kakob i se dobila finalana koncentracija analize od 1 ng/well. Posle inkubacije inhibitora i enzima tokom 30 minuta na 37°C, enzimska reakcija započinje dodavanjem 10 µL Amplex® Red reakcione smeše (finalna koncentracija analize: 100 mM natrijum fosfat, 120 µM Amplex® Red reagens (#A22177 Molecular Probes), 1.5 U/mL Horseradish Peroksidaza (#P8375 Sigma-Aldrich), 200 µM putrescin (#P7505 Sigma-Alrdich), 0.05% Pluronic F-127 (#P3000MP Sigma-Aldrich), pH 7.4, 37°C).

Posle inkubacije tokom 30 minuta na 37 °C, obrt supstrata se određuje direktno (ili nakon dodavanja viška inhibitora amin-oksidaze) pomoću fluorescentnog čitača (Ex 540nm/Em 590nm) kao što je Envision 2104 Multilabel ýitač (PERKIN ELMER).

U sledećoj tabeli aktivnost izražena kao IC50(nM) jedinjenja prema pronalasku je predstavljena gde IC50vrednosti su određene u analizi AOC3 i AOC1 kao što je opisano ovde ranije. Izraz "Primer" odnosi se na broj primera prema sledećem eksperimentalnom delu.

Tabela 1: Biloški podaci jedinjenja predmetnog pronalaska kao što je odbijeno u analizama AOC3 i AOC1.

2

Ekspresija AOC1 i enzimska aktivnost uglavnom se nalaze u crevima, placenti i bubrezima. Enzim katalizuje oksidaciju primarnih amina izvedenih iz ishrane i štiti individuum od kardiometaboličkih efekata histamina, putrescina, triptamina i kadaverina. Inhibicija AOC1 može dovesti do oštećenja tolerancije na progutani histamin, što rezultira povećanim nivoom histamina u plazmi i tkivu, što može prouzrokovati neželjene događaje ili neželjene štetne efekte poput smanjenog arterijskog pritiska i kompenzaciju povećanim pulsom, tahikardijom, glavoboljom, ispiranjem, urtikariom, pruritus, bronhospazam i srčani zastoj (Maintz L. and Novak N.2007. Am. J. Clin. Nutr.85:1185-96). Posledica inhibicije AOC1 u kombinaciji sa unosom histamina pokazana je u eksperimentima sa svinjama: Nakon injekcije AOC1 inhibitora aminogvanidina (100 mg/kg) i gavaže histamina (2 mg/kg) životinje su osetile povišeni nivo histamina u krvi praćeno sa padom krvnog pritiska, povećanim pulsom, crvenilom, povraćanjem i smrti (3 od 15 životinja) (Sattler J.1988. Agents and Actions, 23: 361-365) pod eksperimentalnim uslovima. Netolerancija na histamin kod ljudi bila je povezana sa mutacijama u promotorskom regionu AOC1, što je dovelo do smanjene ekspresije mRNK i aktivnosti AOC1 u plazmi (Maintz et al.2011. Allergy 66: 893–902).

Stoga je cilj pronalaska bio da obezbedi jedinjenja sa niskom aktivnošću na AOC1, kako bi se izbegli takvi neželjeni sporedni efekti.

Stoga, AOC1 aktivnost je izmerena, i, iznenađujuće, je otkriveno da jedinjenja piridinil predemtnog pronalaska pokazuju visoku selektivnost prema AOC1.

Sada je otkriveno da su, iznenađujuće, jedinjenja prema predmetnom pronalasku selektivnija prema AOC1 od odgovarajućih jedinjenja iz stanja tehnike, kako je opisano u EP 2695881, odn. zamena fluoro-supstituisanog fenilnog ostatka (uz guanidinska funkcija) piridinil ostatkom rezultira u jedinjenjima sa vrlo povećanom selektivnošću prema AOC1, bez uticaja na aktivnost prema AOC3. Selektivnost prema AOC1 testirana je prema analizi AOC1 kako je gore opisano.

Tabela 2: Biološki podaci određenih jedinjenja iz EP 2695881 (odgovara WO 2012/124696) kao što je dobijeno u AOC3 i AOC1 analizi kao to je opisano gore i poređenje sa odgovarajućim jedinjenjima pronalaska.

2

2

S obzirom na svoju sposobnost da inhibiraju AOC3, jedinjenja opšte formule (I) prema pronalasku i njihove odgovarajuće soli su pogodna za lečenje, uključujući preventivno lečenje svih onih bolesti ili stanja koja mogu biti pogođena ili koja su posredovana inhibicijom AOC3 aktivnosti.

Shodno tome, ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenje opšte formule (I) kao medikament.

Dalje, ovaj pronalazak se odnosi na upotrebu jedinjenja opšte formule (I) za lečenje i / ili prevenciju bolesti ili stanja koja su posredovana inhibicijom AOC3 kod pacijenta, poželjno kod čoveka.

U još jednom aspektu, ovaj pronalazak se odnosi na postupak za lečenje, uključujući sprečavanje bolesti ili stanja posredovanih inhibicijom AOC3 kod sisara, što uključuje korak davanja pacijentu, poželjno čoveku, kome je potrebno takvo lečenje, terapeutski efikasne količine jedinjenja predmetnog pronalaska, ili njegove farmaceutske kompozicije.

Bolesti i stanja posredovana inhibitorima AOC3 obuhvataju NASH (bezalkoholni steatohepatitis), plućnu fibrozu, retinopatiju ili nefropatiju.

Prema jednom aspektu, jedinjenja predmetnog pronalaska su posebno pogodna za lečenje inflamatornih bolesti, kao što su vaskularne inflamatorne bolesti, artritis, akutna i hronična upala zglobova; ekcemi, kao što su atopijski ekcem, ulcerativna psorijaza i reumatoidna psorijaza; bol, posebno mišićno-skeletni ili nociceptivni bol; inflamatorna bolest creva, naročito neinfektivna inflamatorna bolest creva; Multipla skleroza; skleroderma, plućne

2

bolesti kao što su respiratorni distres sindrom, astma, plućna fibroza, iodiopatska plućna fibroza (IPF), hronična opstruktivna plućna bolest (HOBP) i idiopatska inflamatorna bolest; nefropatija, dijabetična proteinurija, fibroza bubrega; dijabetička retinopatija ili dijabetični edem kao što je makularni dijabetični edem; rak, posebno melanom i limfom; hepatocelularni karcinom, nespecifikovani kolitis, reumatoidna Crohnova bolest kolitis; bolesti žučnog trakta, primarni bilijarni holangitis, primarni sklerozirajući holangitis, bezalkoholni steatohepatitis (NASH), bezalkoholna masna bolest jetre (NAFLD), alkoholna bolest jetre, fibroza jetre, ciroza jetre; ulcerativna reperfuzijska povreda, cerebralna ishemija i odbacivanje transplantata.

Prema drugom aspektu, jedinjenja predmetnog pronalaska su posebno pogodna za lečenje inflamatornih bolesti, kao što su vaskularne inflamatorne bolesti, artritis i inflamatorna bolest creva, naročito neinfektivna inflamatorna bolest creva; plućna fibroza i iodiopatska plućna fibroza; dijabetička retinopatija ili dijabetični edem kao što je makularni dijabetični edem; nespecifikovani kolitis, reumatoidna Crohnova bolest kolitis; bolesti žučnog trakta, primarni žučni holangitis, primarni sklerozirajući holangitis, bezalkoholni steatohepatitis (NASH), bezalkoholna masna bolest jetre (NAFLD), alkoholna bolest jetre, fibroza jetre i ciroza jetre.

Raspon doza jedinjenja opšte formule (I) primenjivih dnevno je obično od 0.001 do 10 mg po kg telesne težine pacijenta, poželjno od 0.01 do 8 mg po kg telesne težine pacijenta. Svaka dozna jedinica može povoljno da sadrži 0.1 do 1000 mg aktivne supstance, poželjno sadrži između 0.5 do 500 mg aktivne supstance.

Stvarna terapeutski efikasna količina ili terapijska doza će naravno zavisiti od faktora poznatih stručnjacima, kao što su starost i težina pacijenta, način primene i težina bolesti. U svakom slučaju, kombinacija će se primenjivati u dozama i na način koji omogućava isporuku terapeutski efikasne količine na osnovu jedinstvenog stanja pacijenta.

Fartmaceutske Kompozicije

Pogodni preparati za primenu jedinjenja formule (I) biće očigledni stručnjacima u ovoj oblasti i uključuju, na primer, tablete, pilule, kapsule, supozitorije, pastile, obložne tablete, rastvore, sirupe, eliksire, kesice, injekcije, inhalatore i prah itd. Sadržaj farmaceutski aktivnog(ih) jedinjenja(a) je povoljno u opsegu od 0.1 do 90 mas.%, na primer od 1 do 70 mas.% kompozicije u celini.

2

Pogodne tablete se mogu dobiti, na primer, mešanjem jednog ili više jedinjenja prema formuli (I) sa poznatim ekscipijentima, na primer inertnim razblaživačima, nosačima, dezintegrantima, adjuvansima, površinskim aktivnim supstancama, vezivnim supstancama i / ili lubrikantima. Tablete se takođe mogu sastojati od nekoliko slojeva.

Kombinovano Lečenje

Jedinjenja pronalaska mogu se dalje kombinovati sa jednim ili više, poželjno jednim dodatnim terapeutskim agensom. Prema jednom rešenju, dodatni terapeutskih agens je odabran iz grupe terapijskih agenasa korisnih u lečenju bolesti ili stanja povezanih sa metaboličkim sindromom, dijabetesom, gojaznošću, kardiovaskularnim bolestima, NASH (bezalkoholni steatohepatitis), plućna fibroza, retinopatija i / ili nefropatija.

Prema tome, jedinjenje pronalasku može se kombinovati sa jednim ili više dodatnih terapeutskih agenasa odabran iz grupe koja se sastoji od agenasa protiv gojaznosti (uključujući sredstva za suzbijanje apetita), agenasa koji snižavaju glukozu u krvi, agenasa protiv dijabetesa, agenasa za lečenje dislipidemija, kao što je npr. agensi za snižavanje lipida, antihipertenzivi, antiaterosklerotični agensi, antiinflamatorni aktivni sastojci, antifibrotični agensi, agensi za lečenje malignih tumora, antitrombotični agensi, antiangiogenezni agensi, agensi za lečenje srčane insuficijencije lečenje komplikacija izazvanih dijabetesom ili povezanih sa dijabetesom.

Poželjno, jedinjenja predmetnog pronalaska i / ili farmaceutske kompozicije koje sadrže jedinjenje predmetnog pronalaska, opciono u kombinaciji sa jednim ili više dodatnih terapijskih agenasa, daju se zajedno sa vežbanjem i / ili dijetom.

Prema tome, u drugom aspektu, ovaj pronalazak se odnosi na upotrebu jedinjenja prema pronalasku u kombinaciji sa jednim ili više dodatnih terapijskih agenasa opisanih ranije i dalje za lečenje ili prevenciju bolesti ili stanja koja mogu biti pogođena ili koja su posredovana inhibicija AOC3, naročito bolesti ili stanja kako su prethodno opisani i dalje.

U još jednom aspektu, predmetni pronalazak se odnosi na postupak za lečenje, uključujući sprečavanje bolesti ili stanja posredovanih inhibicijom AOC3 kod pacijenta, koji uključuje korak davanja pacijentu, poželjno čoveku, kome je takvo lečenje potrebno terapeutski efikasne količine jedinjenja predmetnog pronalaska u kombinaciji sa terapeutski efikasnom količinom jednog ili više dodatnih terapijskih agenasa opisanih ovde ranije i dalje.

Upotreba jedinjenja prema pronalasku u kombinaciji sa dodatnim terapijskim agensom može se odvijati istovremeno ili u postepenim vremenima.

Jedinjenje prema pronalasku i jedno ili više dodatnih terapijskih agenasa mogu biti prisutni zajedno u jednoj formulaciji, na primer tableti ili kapsuli, ili odvojeno u dve identične ili različite formulacije, na primer kao takozvani komplet delova.

Prema tome, u drugom aspektu, ovaj pronalazak se odnosi na farmaceutsku kompoziciju koja sadrži jedinjenje prema pronalasku i jedno ili više dodatnih terapijskih agenasa opisanih ovde ranije i u daljem tekstu, opciono sa jednim ili više inertnih nosača i / ili razblaživača.

Šeme Sinteze

Tipični postupci pripreme jedinjenja pronalaska opisani su u eksperimentalnom delu.

Moćni inhibitorni efekat jedinjenja pronalasku može se utvrditi in vitro ispitivanjima enzima, kao što je opisano u eksperimentalnom delu.

Jedinjenja predmetnog pronalaska mogu takođe da budu dobijena postupcima koji su poznati u tehnici uključujući ona opisana u nastavku i uključujući varijacije u okviru stanja tehnike.

Šema 1:

1-1 1-2 1-3 (I)

Jedinjenja opšte formule I, gde A i R<1>su kao što je ranije definisano, se mogu dobiti preko postupka koji je naznačen u Šemi 1 koristeći jedinjenje opšte formule a 1-1, gde X je halogen, sa bornom kiselinom ili odgovarajući pinacolat 1-2, u prisustvu paladijum katalizatora i liganda i baze u odgovarajućim rastvaračima kao što je dioksan na temperaturi između 0°C i 150°C (Suzuki-coupling, Chem. Rev., 1995, 95 (7), 2457). Reakcija benzil alkohola opšte formule 1-3, gde A i R<1>su kao što je ranije definisano, u cilju da se dobije jedinjenje opšte formule I, gde A i R<1>su kao što je ranije definissano, može se postiči putem acilacije sa CDI praćeno sa reakcijom sa guanidin soli u odgovarajućem rastvaraču kao što je DMF. Ako je razumno, reakciona sekvenca za dobijanje jedinjenja opšte formule I takođe se može obrnuti.

1

Šema 2:

Intermedijeri opšte formule 1-3, gde A i R<1>su kao što je ranije definisano, mogu se dobiti putem postupka koji je naznačen u Šemi 2 koristeći jedinjenje opšte formule 2-1, gde A je kao što je ranije definisano i X je pogodna odlazeća grupa, kao što je halogen ili S(=O)Me, i PG je pogodna zaštitna grupa, kao što je Si<t>BuMe2, i nukleofil u prisustvu baze kao što je NaH, DIPEA ili DBU u odgovarajućim rastvaračima kao što je THF i DCM na temperaturi između 0°C i 150°C. Kako bi se dobio benzil alkoholni intermedijer 1-3 gde A i R<1>su kao što je ranije definisano, zaštitna grupa mora da se ukloni koristeći pogodne uslove, na primer TBAF ili TFA u THF za Si<t>BuMe2grupe. U određenim slučajevima, acilguanidinski ostatak takođe može biti uključen kao zaštitna grupa i jedinjenja opšte formule I mogu direktno da se dobiju u jednom koraku iz odgovarajućeg intermedijera 2-1.

Šema 3:

3-1 3-2 1-2

Intermedijeri opšte formule 1-2, gde A i R<1>su kao što je ranije definisano, se mogu dobiti putem postupaka naznačenih u Šemi 3 koristeći jedinjenje opšte formule 3-1, gde A je kao što je ranije definisano i X i Y su halogen i R<1>-H je nukleofil u prisustvu baze kao što je DIPEA u odgovarajućim rastvaračima kao što je acetonitril na temperaturi između 0°C i 150°C. Alternativno, cink-reagensi i Negishi-uslovi kuplovanja (Handbook of Organopalladium Chemistry for Organic Synthesis, (ed. Negishi, E.-I.), 1, 229-247, (John Wiley & Sons Inc., New York, 2002) mogu se koristiti. Kako bi se dobila borna kiselina ili odgovarajući intermedijer pinakol estra 1-2 gde A i R<1>su kao što je ranije definisano Suzuki-Miyaura Borilacija (J. Am. Chem. Soc., 2002, 124, 8001) ili halogen-metal razmena praćena sa reakcijom sa pogodnim elektrofilom, koristeći reagens kao što je n-BuLi and B(O<i>Pr)3, mogu se koristiti.

2

Šema 4:

4-1 4-2 1-2

Alternativno, reakcija jedinjenja opšte formule 4-1, gde A je kao što je ranije definisano i X je halogen i R<1>-H je nukleofil u prisustvu baze kao što je K2CO3u odgovarajućim rastvaračima kao što je acetonitril na temperaturi između 0°C i 150°C dajući intermedijer 4-2, gde A i R<1>su kao što je ranije definisano. Da bi se dobila borna kiselina intermedijer pinakol estra 1-2 gde A i R<1>su kao što je ranije definisano, Ir-katalizovana reakcija kao što je opisano od strane Hartwig et al (J. Am. Chem. Soc., 2014, 136 (11), 4287) može se koristiti (šema 4).

Šema 5:

5-1 1-2

Alternativno, reakcija jedinjenja opšte formule 5-1, gde A je kao što je ranije opisano i X je halogen i R<1>-H je nukleofil u prisustvu baze kao što je NEt3u odgovarajućim rastvaračima kao što je dioksan na temperaturi između 0<°>C i 150°C može se koristiti kako bi se dobio intermedijer 1-2, gde A i R<1>su kao što je ranije definisano (šema 5).

Prikazani sintetički putevi mogu se oslanjati na upotrebu zaštitnih grupa. Na primer, prisutne reaktivne grupe, kao što su hidroksi, karbonil, karboksi, amino, alkilamino ili imino, mogu biti zaštićene tokom reakcije konvencionalnim zaštitnim grupama koje se ponovo cepaju nakon reakcije. Pogodne zaštitne grupe za odgovarajuće funkcije i njihovo uklanjanje dobro su poznate stručnjaku i opisane su u literaturi o organskoj sintezi.

Jedinjenja opšte formule I mogu se razdvojiti u njihove enantiomere i / ili dijastereomere kao što je prethodno pomenuto. Tako se, na primer, cis/trans smeše mogu razdvojiti u svoje cis, a trans izomeri i racemska jedinjenja mogu se razdvojiti u njihove enantiomere.

Cis/trans smeše se mogu ponovo rastvoriti, na primer, hromatografijom u njihove cis i trans izomere. Jedinjenja opšte formule I koja se javljaju kao racemati mogu se postupcima poznatim per se razdvojiti u njihove optičke antipode, a diastereomerne smeše jedinjenja opšte formule I mogu se razgraditi u njihove dijastereomere koristeći prednosti njihovih različitih fizičko-hemijskih svojstava upotrebom metoda per se, npr. hromatografija i / ili frakciona kristalizacija; ako su posle dobijena jedinjenja racemati, oni se mogu razdvojiti u enantiomere kao što je gore pomenuto.

Racemati se poželjno razdvajaju hromatografijom na koloni na hiralnim fazama ili kristalizacijom iz optički aktivnog rastvarača ili reakcijom sa optički aktivnom supstancom koja sa racemskim jedinjenjem formira soli ili derivate kao što su estri ili amidi. Soli se mogu formirati sa enantiomerno čistim kiselinama za osnovna jedinjenja i sa enantiomerno čistim bazama za kisela jedinjenja. Dijastereomerni derivati nastaju sa enantiomerno čistim pomoćnim jedinjenjima, npr. kiseline, njihovi aktivirani derivati ili alkoholi. Odvajanje tako dobijene diastereomerne smeše soli ili derivata može se postići iskorišćavanjem njihovih različitih fizičko-hemijskih svojstava, npr. razlike u rastvorljivosti; slobodni antipodi se mogu osloboditi iz čistih diastereomernih soli ili derivata dejstvom pogodnih sredstava. Optički aktivne kiseline koje se obično koriste u takve svrhe, kao i optički aktivni alkoholi koji se mogu primeniti kao pomoćni ostaci poznati su stručnjacima u ovoj oblasti.

Kao što je gore pomenuto, jedinjenja formule I mogu se pretvoriti u soli, naročito za farmaceutsku upotrebu, u farmaceutski prihvatljive soli. Kako se ovde koristi, „farmaceutski prihvatljive soli“ odnose se na derivate otkrivenih jedinjenja, gde je matično jedinjenje modifikovano pravljenjem njihovih kiselinskih ili baznih soli.

Eksperimentalni Deo

Primeri koji slede namenjeni su ilustraciji predmetnog pronalaska bez ograničenja. Izrazi "temperatura okoline" i "sobna temperatura" koriste se naizmenično i označavaju temperaturu od oko 20 °C.

Dalje opisana jedinjenja su okarakterisana kroz karakterističnu masu nakon jonizacije u masenom spektrometru i njihovog vremena zadržavanja na analitičkoj HPLC.

4

Lista Skraćenica

ACN Acetonitril

aq. Vodeni

°C Stepen Celzijus

CDI Di(imidazol-1-il)metanon

DA Diodni niz

DCM Dihlorometan

DBU 1,8-Diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en

DIPEA N-etil-N-izopropil-propan-2-amin

DMF N,N-dimetilformamid

eq Ekvivalent

ESI-MS Elektrosprejna jonizacijska masena spektrometrija EtOAc/ EE Etil acetat

FC Brza hromatografija, SiO2se koristi akonisu dati ostali podaci GP Opšta procedura

h Sat

HPLC Tečna hromatografija visoke performanse

KOAc Kalijum aceta

K2CO3Kalijum karbonat

L Litar

MeOH Metanol

min Minut

ml Mililitar

mp Tačka topljenja

MS Maseni spektrum

NaH Natrijum hidrid

NaHCO3Natrijum bikarbonat

n.d. Nije određen

Pd(PPh3)4Tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0)

Pd(dppf)Cl2[1,1-Bis(difenilfosfino)ferocen]dihloropaladijum(II)

RT Sobna temperatura (oko 20°C)

RtVreme retencije

TBAF Tetrabutilamonijum fluorid

TF / TFA Trifluorosirćetna kiselina

THF Tetrahidrofuran

TLC Hromatografija tankog sloja na SiO2

XPhos Pd G2 Hloro(2-dicikloheksilfosfino-2,4,6-triizopropil-1,1-bifenil)[2-(2-amino-1,1-bifenil)]paladijum(II)

HPLC-A: Agilent 1200 sa DA- i MS-Detek tor, Sunfire C18_3.0x30 mm, 2.5 µm (Waters), 60°C

HPLC-B: Waters Acquity sa DA- i MS-Detektor, Sunfire C18_2.1 x 30 mm, 2.5 µm (Waters), 60°C

HPLC-C: Agilent 1200 sa DA- i MS-detektor, XBridge C18_3.0x30 mm, 2.5 µm (Waters), 60°C

HPLC-D: Waters Acquity sa DA- i MS-Detektor, XBridge BEH C18_2.1 x 30 mm, 1.7 µm (Waters), 60°C

HPLC-E: Agilent 1100 sa DA- i MS-detektor, Sunfire C18_3.0x30 mm, 2.5 µm (Waters), 60°C

HPLC-F: Waters Acquity sa QDa-Detektor, Sunfire C18_3.0 x 30 mm, 2.5 µm (Waters), 60°C

HPLC-G: Waters Acquity sa QDa-Detektor, Sunfire C18_3.0 x 30 mm, 2.5 µm (Waters), 60°C

HPLC-H: Waters Acquity sa QDa-Detektor, Sunfire C18_3.0 x 30 mm, 2.5 µm (Waters), 40°C

I.1 5-[6-(terc-Butil-dimetil-silaniloksimetil)-piridin-2-il]-2-metansulfinil-pirimidin

Smeši 10.00 g (53.19 mmol) 2-bromo-6-(hidroksimetil)piridina, 8.69 g (127.65 mmol) imidazola i DMF 10.42 g (69.14 mmol) terc-butil-hloro-dimetil-silana su dodati i smeša je mešana na RT preko noći. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana sa vodom, osušena i uparena. Sirovi proizvod je prečišćen sa FC dajući prinos od 16 g 2-bromo-6-(tercbutil-dimetil-silaniloksimetil)-piridina.

Smeši 1.04 g (3.24 mmol) 2-bromo-6-(terc-butil-dimetil-silaniloksimetil)-piridina, 662 mg (3.89 mmol) (2-metilsulfanilpirimidin-5-il)borne kiseline, 4.3 ml (8.6 mmol) 2 M Na2CO3sol. u H2O i dioksan, 265 mg (0.325 mmol) Pd(dppf)Cl2* DCM je dodato i reakciona smeša je mešana na 90°C preko noći. Reakciona smeša je razblažena sa vodom i ekstrakovana sa EtOAc.

Organske faze su udružene i isprane sa vodom i slanim rastvorom, osušene sa MgSO4i uparene. Sirovi proizvod je prečišćen sa FC dajući prinos od 1.05 g terc-butil-dimetil-[[6-(2-metilsulfanilpirimidin-5-il)-2-piridil] metoksi] silana.

Smeši 2.00 g (5.76 mmol) terc-butil-dimetil-[[6-(2-metilsulfanilpirimidin-5-il)-2-piridil] metoksi] silana i DCM je ohlađena na ledenom kupatilu i 1.32 g (5.76 mmol) 75% 3-hlorobenzenkarboperokso kiseline je polako dodavano i smeša je mešana na 0°C 1 h i na RT 2 h. Reakciona smeša je razblažena sa DCM i isprana sa zasićenim NaHCO3rastvorom i vodom, osušena sa Na2SO4i uparena.

Prinos: 2.03 g (97%), ESI-MS: m/z = 364 (M+H)<+>, Rt(HPLC): 1.19 min (HPLC-A)

I.2 terc-butil-[[6-(2-hloropirimidin-5-il)-2-piridil]metoksi]-dimetil-silan

Smeša 0.6 g (2 mmol) (6-bromo-2-piridil)metoksi-terc-butil-dimetil-silana (vide supra) i THF je ohlađena do -70°C i 0.9 ml 2.3 M rastvora n-heksil litijuma u heksanu (2.1 mmol) je dodato, praćeno sa 2.0 ml 1 M rastvora ZnCl2u dietil etru (2.0 mmol). Smeša je ostavljena da dostigne RT i mešana 30 min. Potom je dodato 0.1 g (0.1 mmol) Pd(PPh3)4i 0.2 g (1 mmol) 2-hloro-5-jodopirimidina u THF. Smeša je mešana na RT preko noći, razblažena sa zas. NaHCO3-rastvorom i ekstrakovana sa EtOAc. Organske faze su udružene, osušene i uparene, a ostatak je prečišćen sa FC na aluminijum oksidu.

Prinos: 0.1 g (30%), ESI-MS: m/z = 336/338 (M+H)<+>, Rt(HPLC): 1.33 min (HPLC-A)

I.3 [6-(6-fluoro-3-piridil)-2-piridil]metil N-karbamimidoilkarbamat

Smeša 0.4 g (1.47 mmol) intermedijera III.1, 0.23 g (1.6 mmol) (6-fluoro-3-piridil) borne kiseline, 4 ml 1M K3PO4-rastvora u vodi (4 mmol) i 0.12 g (0.14 mmol) XPhos Pd G2 u diojksanu su zagrevani do 90°C 2 h, potom ohlađeno do RT, razblaženi sa vodom i ekstrakovani sa EtOAc. Organske faze su udružene, isprane sa vodom i slanim raszvorom, osušene i uparene. Ostatak je trituriran sa etron i filtriran.

Prinos: 0.22 g (52%), ESI-MS: m/z = 290 (M+H)<+>, Rt(HPLC): 0.37 min (HPLC-B)

Sledeći Intermedijeri se mogu dobiti prema datim referencama.

III.1(6-bromo-2-piridil)metil N-karbamimidoilkarbamat

Smeši 3.0 g (16.0 mmol) (6-bromo-2-piridil)metanola i DMF 3.9 g (24.1 mmol) CDI je dodato i smeša je mešana na RT 2h. Potom je dodato 5.8 g (32.0 mmol) guanidin karbonata i reakciona smeša je mešana na RT preko noći, potom razblažena sa vodom i ohlađena na ledenom kupatilu. Posle 1h talog je filtriran, ispran sa vodom i osušen.

Prinos: 3.7 g (85%), ESI-MS: m/z = 273 (M+H)<+>, Rt(HPLC): 0.70 min (HPLC-C), mp=168-172°C.

IV.12-(3-metoksiazetidin-1-il)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il) pirimidin

Smeša 1.4 g (10.92 mmol) 3-metoksi-azetidin hidrohlorida, 2.9 g (12.10 mmol) 2-hloro-5-jodo-pirimidina, 3.0 ml (17.61 mmol) DIPEA i ACN su zagrevano do 50°C preko noći.

Rastvarač je uparen i sirovi proizvod je prečišćen sa FC dajući prinos od 2.8 g 5-jdo-2-(3-metoksiazetidin-1-il)pirimidina.

Smeša 0.5 g (1.72 mmol) 5-jodo-2-(3-metoksiazetidin-1-il)pirimidina, 0.6 g (2.23 mmol) bis(pinakolato)diborona, 0.5 g (5.30 mmol) KOAc, 71 mg (0.087 mmol) Pd(dppf)Cl2* DCM i dioksana je zagrevana do 100°C preko noći. Posle hlađenja do RT, reakciona smeša je filtrirana kroz pogaču Celit i uparen. Sirovi proizvod je prečišćen sa FC.

Prinos: 300 mg (84%), ESI-MS: m/z = 210 (M+H)<+>, Rt(HPLC): 0.25 min (HPLC-D)

4

IV.2 (2,2-Difluoro-propil)-[5-(4,4,5,5-tetrametil-[1,3,2]dioksaborolan-2-il)-pirimidin-2-il]-amin

Smeša 70 mg (0.29 mmol) 2-hloro-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)pirimidina, 42 mg (0.32 mmol) 2,2-difluoro-propilamin hidrohlorida, 0.13 ml (0.93 mmol) trietilamina i dioksana je zagrevana do 90°C 1 h. Posle hlađenja do RT reakciona smeša je razblažena sa vodenim NaCl rastvorom. Talog je filtriran, ispran sa vodom i osušen.

Prinos: 110 mg (126%), ESI-MS: m/z = 218 (M+H)<+>, Rt(HPLC): 0.30 min (HPLC-B)

IV.3 N,N-dimetil-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)pirimidin-2-amin

<CH3>H3CN O

NB<CH>3

CH N O3H3C

CH3

Smeša 22.5 ml (45.5 mmol) rastvora dimetilamina u THF, 3.0 g (15.5 mmol) 2-hloro-5-bromo-pirimidina i ACN su mešani na RT 1h. Rastvarač je uparen, dodata je voda i smeša je ekstrakovana sa EtOAc. Organske faze su udrzžene, osušene i uparene kakob i se dobio prinos od 3.2 g 5-bromo-N,N-dimetil-pirimidin-2-amina.

Smeša 0.5 g (2.48 mmol) 5-bromo-N,N-dimetil-pirimidin-2-amina, 0.8 g (3.24 mmol) bis(pinacolato)diborona, 0.6 g (6.38 mmol) KOAc, 0.2 g (0.25 mmol) Pd(dppf)Cl2 * DCM i dioksana je zagrevana do 100°C 4.5 h. Posle hlađenja do RT, reakciona smeša je filtrirna kroz pogaču Celit i uparena, voda je dodata is meša je ekstrakovana sa EtOAc. Organske faze su udružene, osušene i uparene. Sirovi proizvod je prečišćen sa FC.

Prinos: 0.6 g (96%), ESI-MS: m/z = 250 (M+H)<+>, Rt(HPLC): 0.22 min (HPLC-A)

IV.4 2-tetrahidropiran-4-il-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il) pirimidin

Smeša 1.0 g (3.5 mmol) 5-bromo-2-jodo-pirimidina, 0.2 g (0.18 mmol) Pd(PPh3)4i THF je ohlađena do 0°C i dodato je 14 ml (7.0 mmol) 0.5 M rastvora jodo (tetrahidropiran-4-il)cinka. Smeša je ostavljena da dostigne RT i mešana preko noći. Potom je dodatno dodat Pd(PPh3)4i 5 ml (2.5 mmol) 0.5 M rastvora jodo (tetrahidropiran-4-il)cinka i smeša je mešana na RT 4 h, razblaćena sa zas. NaHCO3-rastvorom i EtOAc, filtrirana kroz celit i ekstrakovana sa EtOAc. Organske faze su udružene, isprane sa vodom i slanim rastvorom, osušene i uparene, a ostatak je prečišćen sa FC dajući prinos od 0.41 g 5-bromo-2-tetrahidropiran-4-ilpirimidina.

Smeša 0.4 g (2.48 mmol) 5-bromo-2-tetrahidropiran-4-il-pirimidina, 0.54 g (2.14 mmol) bis(pinacolato)diborona, 0.49 g (4.94 mmol) KOAc, 0.07 g (0.25 mmol) Pd(dppf)Cl2i dioksana je zagrevana do 90°C 1.5 h. Posle hlađenja do RT, reakciona smeša je razblažena sa vodom i ekstrakovana sa EtOAc. Organske faze su udružene, isprane sa vodom i slanim rastvorom i osušene. Ugalj je dodat, smeša je fitlrirana kroz Celit i uparena.

Prinos: 0.4 g (84%), ESI-MS: m/z = 291 (M+H)<+>, Rt(HPLC): 0.30 min (HPLC-B)

IV.5 2-propoksi-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)pirimidin

Smeša 1.0 g (5.2 mmol) 2-hloro-5-bromo-pirimidina, 1.4 g (10.3 mmol) K2CO3i 10 ml npropanola je mešana na RT 48 h. Reakciona smeša je razblažena sa vodom i EtOAc.

Organska faza je isprana sa slanim rastvorom, osušena i uparena dajući prinos od 1.2 g 5-bromo-2-propoksi-pirimidina.

Smeša 0.5 g (2.00 mmol) 5-bromo-2-propoksi-pirimidina, 0.6 g (2.20 mmol) bis(pinakolato)diborona, 0.4 g (4.00 mmol) KOAc, 0.2 g (0.20 mmol) Pd(dppf)Cl2* DCM i dioksana je zagrevana do 100°C 2 h. Posle hlađenja do RT, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i filtrirana kroz Celit. Filtrat je uparen i ostatak je prečišćen sa FC.

Prinos: 0.5 g (85%), Rt(HPLC): 0.74 min (HPLC-A)

IV.6 2-(2,2-difluoropropoksi)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il) pirimidin

Smeša 9.7 g (100.6 mmol) 2,2-difluoropropan-1-ola i THF jeohlađena do 0°C i 4.1 g (92.9 mmol) 60% NaH je dodato u malim porcijama. Reakciona smeša je ostavljena da dostigne RT i mešana 1h, potom ohlađena do 0°C i dodato je 15.0 g (77.4 mmol) 2-hloro-5-bromopirimidina u THF. Reakciona smeša je mešana 2 h na RT i potom razblažena sa vodom i EtOAc. Organska faza je osušena i uparena. Ostatak je prečišćen sa FC dajući prinos od 17.3 g 5-bromo-2-(2,2-difluoropropoksi)pirimidina.

Smeša 9.5 g (37.5 mmol) 5-bromo-2-(2,2-difluoropropoksi)pirimidina, 12.4 g (48.8 mmol) bis(pinakolato)diborona, 9.6 g (95.5 mmol) KOAc, 0.9 g (1.1 mmol) Pd(dppf)Cl2* DCM i dioksana je zagrevana do 100°C 5 h. Posle hlađenja do RTreakciona smeša je razblažena sa vodom i EtOAc. Organska faza, ugalj, NaSO4i silika gel je dodata i smeša je filtrirana kroz celit. Filtrat je uparen i ostatak je trituriran sa petrol etrom, filtriran i osušen.

Prinos: 9.5 g (84%), ESI-MS: m/z = 301 (M+H)<+>, Rt(HPLC): 0.41 min (HPLC-B)

IV.7 3-[[5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)pirimidin-2-il] oksimetil] izoksazol

Smeša 10.0 g (100.9 mmol) izoksazol-3-ilmetanola i THF je ohlađena do 0°C i 4.0 g (100.9 mmol) 60% NaH su dodati u malim porcijama. Reakciona smeša je mešana 45 min, i potom je dodato 16.4 g (84.6 mmol) 2-hloro-5-bromo-pirimidina u DMF. Reakcina smeša je mešana 45 min na RT, potom ohlađena do 0°C i razblažena sa vodom. Talog je filtriran, ispran sa vodom i osušen dajući prinos od 20.1 g 3-[(5-bromopirimidin-2-il)oksimetil]izoksazola.

Smeša 20.1 g (78.5 mmol) 3-[(5-bromopirimidin-2-il)oksimetil]izoksazola, 26.2 g (102.1 mmol) bis(pinakolato)diborona, 20.0 g (204.2 mmol) KOAc, 1.6 g (2.0 mmol) Pd(dppf)Cl2* DCM i dioksana je zagrevana do 100°C 30 min. Posle hlađenja do RT, reakciona smeša je razblažena sa vodom i ekstrakovana sa EtOAc. Organske faze su udružene, dodat je ugalj i smeša je filtrirana. Filtrat je uparen i ostatak je trituriran sa n-heptanom, filtriran i osušen.

Prinos: 17.5 g (74%), ESI-MS: m/z = 304 (M+H)<+>, Rt(HPLC): 0.61 min (HPLC-A)

IV.8 [2-[(1-fluorociklopropil)metoksi]pirimidin-5-il]borna kiselina

Smeša 391 mg (4.3 mmol) (1-fluorociklopropil)metanola i THF je ohlađena do 0°C i 174 mg (4.3 mmol) 60% NaH je dodato u malim porcijama. Reakciona smeša je mešana 30 min, i potom je dodato 700 mg (3.6 mmol) 2-hloro-5-bromo-pirimidina u DMF. Reakciona smeša je

4

mešana 30 min na RT, potom razblažena sa vodom i ekstrakovana sa DCM. Organske faze su udružene, osušene i uparene dajući 856 mg 5-bromo-2-[(1-fluorociklopropil)metoksi]pirimidina.

Smeša 428 mg (1.7 mmol) 5-bromo-2-[(1-fluorociklopropil)metoksi]-pirimidina, 578 mg (2.3 mmol) bis(pinakolato)diborona, 442 mg (4.5 mmol) KOAc, 142 g (0.2 mmol) Pd(dppf)Cl2* DCM i dioksana je zagrevana do 100°C 1 h. Posle hlađenja do RT, reakciona semša je razblažena sa vodom i ekstrakovana sa EtOAc. Organske faze su udružene, osušene i uparene.

Prinos : 370 mg, ESI-MS: m/z = 213 (M+H)<+>, Rt(HPLC): 0.71 min (HPLC-A)

IV.95-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-2-(4,4,4-trifluorobutoksi) pirimidin

Smeša 3.5 g (27.5 mmol) 4,4,4-trifluorobutan-1-ola, 4.8 g (25.0 mmol) 2-hloro-5-bromopirimidina, 12.2 g (37.5 mmol) Cs2CO3je mešana 2h na RT, potom zagrevana do 50°C 8 h i potom ohlađena do RT i mešana preko noći. Smeša je razblažena sa vodom ohlađenom ledom i talog je filtriran i ispran sa vodom, potom rastvoren u EtOAc, ispran sa slanim rastvorom, osušen i uparen. Ostatak je trituriran sa heptanom na 0°C filtriran i osušen, dajući ostatak od 5.0 g 5-bromo-2-(4,4,4-trifluorobutoksi)pirimidina.

Smeša 3.0 g (10.5 mmol) 5-bromo-2-(4,4,4-trifluorobutoksi)pirimidina, 3.5 g (13.7 mmol) bis(pinacolato)diborona, 2.7 g (27.4 mmol) KOAc, 0.3 g (0.3 mmol) Pd(dppf)Cl2* DCM i dioksana je zagrevana do 100°C 5 h. Posle hlađenja do RT, reakciona smeša je razblažena sa vodom i EtOAc. Organskoj fazi, dodat je ugalj i NaSO4i smeša je fitlrirana kroz celit. Filtrat je uparen i ostatak je trituriran sa petrol etrom, filtriran i osušen.

Prinos: 3.0 g (86%), Rt(HPLC): 0.85 min (HPLC-A)

Sledeći Intermedijeri su dobijeni na sličan način kao što je opisano za IV.3 (A), IV.2 (B), IV.6 (C) dati u kolini GP. Detalji su dati u komentaru kolonske sinteze, vreme retncije i masa (ESI-MS m/z M+H<+>) kojis u određeni sa HPLC-MS su dati u kolonama MS i Rt.

Sledeći Intermedijeri su komercijalno dostupni ili se mogu dobiti prema datim referencama.

4

Opšta Procedura A.1

1<st>korak supstitucija (S):1.0 eq intermedijer I daje eq intermedijer IV i 3 eq DBU u DCM su dodati. Smeša je držana na datoj temperaturi za dato vreme.

2<nd>korak uklanjanje zaštite (D): 40 eq TFA su dodati i smeša je držana na datoj temperaturi za dato vreme, potom upareni i prečišćeni sa HPLC.

3<rd>korak acilguanidin formacija (A): Smeši od 1.0 eq benzil alkoholnog intermedijera i DMF 2.0 eq CDI je dodat i rekaciona smeša je mešana preko noći. Potom 2.0 eq guanidin karbonata su dodati i smeša je mešana na RT za dato vreme. Reakciona semša je razblažena sa MeOH, DMF i acidifikovana sa TFA, filtrirana i prečišćena sa HPLC.

Opšta Procedura A.2

1<st>korak supstitucija (S): Smeša od 1.1 eq alkohola ili intermedijera II i THF 1.1 eq 60% NaH je dodato i smeša je mešana 10 min.1.0 eq iintermedijera I je dodato i smeša je držana na datoj temperaturi za dato vreme, potom razblažena sa vodom i ekstrakovana sa EtOAc. Organske faze su udružene, isprane sa vodom i slanim rastvorom i uparene.

2<nd>korak uklanjanje zaštite (D): Intermedijer iz koraka 1 je rastvoren u THF i 1.5 eq TBAF u THF je dodat i smeša je držana na datoj temperaturi za dato vreme, potom razblažena sa vodom i ekstrakovana sa EtOAc. Organske faze su udružene, isprane sa vodom i slanimrastvorom i uparene.

3<rd>korak acilguanidin formacija (A): Smeši od 1.0 eq benzil alkoholnog intermedijera iz koraka 2 i DMF 1.5 eq CDI je dodat i reakciona smeša je mešana 1h na RT. Potom 2.0 eq

4

guanidin karbonata je dodato i smeša je mešana na RT za dato vreme. Reakciona semša je acidifikovana sa TFA, filtrirana i prečišćena sa HPLC.

Opšta Procedura A.3

Smeša od 5.0 eq nukleofila i THF je ohlađena do 0°C i dodato je 3 eq 60% NaH, potom zagrejana do RT i dodato je 1.0 eq intermedijera III rastvorenog u DMF i smeša je držana na datoj temperaturi za dato vreme. Reakciona semša je koncentrovana i razblažena sa vodom. Talog je filtriran, ispran i osušen. Alternativno sirovi proizvod je prečišćen sa HPLC posle koncentrovanja.

Opšta Procedura B.1

1<st>korak kuplovanja (C):1.0 eq intermedijer I, 1.0 eq intermedijer IV i 2.0 eq 2M Na2CO3rastvora 0.10 eq bis(trifenilfosfin)paladijum(II)hlorid u dioksanu su zagrevani do date temperature za dato vreme. Rezultujući benzil alkoholni intermedijer je prečišćen sa FC ili HPLC.

2<nd>korak acilguanidin formacije (A): Smeši 1.0 eq benzil alkoholnog intermedijera i DMF 1.5 eq CDI je dodat i reakciona smeša je mešana 2 h na RT. Potom 2.0 eq guanidin karbonata su dodati i smeša je mešana na RT za dato vreme. Reakciona semša je razblažena sa MeOH, DMF i acidifiikovana sa TFA, filtrirana i prečišćena sa HPLC.

Opšta Procedura B.2

1.0 eq intermedijera III 1.1 eq intermedijera IV i 3.5 eq K3PO40.1 eq XPhos Pd G2 u dioksanu su zagrevani na datoj temperaturi za dato vreme. Reakciona semša je filtrirana kroz Thiol-MP SPE ketridž i prečišćena sa HPLC.

Opšta Procedura B.3

1.0 eq intermedijera III 1.5 eq intermedijera IV i 3.0 eq K3PO40.05 eq XPhos Pd G2 u dioksan/vodi (ca.5:1) su zagrevani do date temperature za dato vreme. Reakciona smeša je prečišćena sa HPLC.

Sledeći primeri u Tabeli 3 (brojevi primera su datu u koloni #) su dobijeni prema opštim procedurama A ili B i opisani su u nastavku. Detalji za opšte procedure su dati u komentaru kolonske sinteze, vreme retencije i masa (ESI-MS m/z M+H<+>) koji su određeni sa HPLC-MS su dati u kolonama RT i MS.

4

Tabela 3

4

4

1

2

Primer 03: [6-(2-ciklopropilpirimidin-5-il)-2-piridil]metil N-karbamimidoilkarbamat

Smeša 1.0 eq intermedijera III.1, 1.1 eq intermedijera IV.53, 3.0 eq K3PO4i 0.07 eq XPhos Pd G2 u dioksanu/vodi (ca.5:1) je zagrevana do 100°C na 2 h. Posle hlađenja do RT rastvarač je uparen i sipan u smešu MeOH i DCM, filtriran kroz PL-tiol ketridž i uparen. Sirovi proizvod je prečišećn sa HPLC.

ESI-MS: m/z = 313 (M+H)<+>, Rt(HPLC): 0.39 min (HPLC-B)

Primer 07: [6-(2-propoksipirimidin-5-il)-2-piridil]metil N-karbamimidoilkarbamate

Blag tok argona je propušten kroz smešu 1.0 eq intermedijera III.1, 1.1 eq intermedijera IV.5 i 2.5 eq K3PO4u dioksanu/vodi (ca.5:1). Potom su dodati 0.1 eq XPhos Pd G2 i smeša je zagrevana do 100°C na 1 h. Posle hlađenja do RT rastvarač je uparen i sirovi proizvod je prečišećn sa FC.

ESI-MS: m/z = 331 (M+H)<+>, Rt(HPLC): 0.81 min (HPLC-A)

Primer 08: [6-(2-but-3-inoksipirimidin-5-il)-2-piridil]metil N-karbamimidoilkarbamat

3.0 eq DBU su dodati smeši 3.0 eq 3-butin-1-ol i DCM. Posle 1 h na RT, 1.0 eq intermedijera I.1 u DCM je dodat i smeša je mešana na RT na 3 h, potom razblažena sa DCM i isrpana sa NaHCO3rastvorom i slnim rastvorom, osušena i uparena. Dajući proizvod sirovog terc-butil-[[6-(2-but-3-inoksipirimidin-5-il)-2-piridil]metoksi]-dimetil-silana (ESI-MS: m/z = 370 (M+H)<+>, Rt(HPLC): 1.26 min (HPLC-C)). THF i 1.5 eq TBAF su dodati i smeša je mešana na RT 20 min. Rastvarač je uparen i ostatk je prečišćen sa FC, dajući proizvod [6-(2-but-3-

4

inoksipirimidin-5-il)-2-piridil]metanol (ESI-MS: m/z = 256 (M+H)<+>, Rt(HPLC): 0.80 min (HPLC-C)).

Smeši 1.0 eq [6-(2-but-3-inoksipirimidin-5-il)-2-piridil]metanola i DMF, dodat je 1.5 eq CDI i smeša je mešana 2 h na RT, potom su dodati 2.0 eq guanidin karbonata i mešanje je nastavljeno preko noći i potom razblaženo sa vodom. Talog je filtriran i osušen, trituriran sa etrom i filtriran, potom sa MeOH i filtriran i osušen.

ESI-MS: m/z = 341 (M+H)<+>, Rt(HPLC): 0.79 min (HPLC-C)

Primer 17: [6-[2-[(1-fluorociklopropil)metoksi]pirimidin-5-il]-2-piridil]metil N-karbamimidoilkarbamat

Blag tok argona je propušten kroz smešu 1.0 eq intermedijera III.1, 1.11 eq intermedijera IV.8 and 2.0 eq K3PO4u dioksanu/vodi (ca.5:1). Potom je dodat 0.1 eq XPhos Pd G2 i smeša je zagrevana do 100°C 30 min. Posle hlađenja do RT reakciona smeša je razblažena sa vodom i ekstrakovana sa EtOAc. Organske faze su udružene, osušene i uparene i sivori proizvod je prečišćen sa FC.

ESI-MS: m/z = 361 (M+H)<+>, Rt(HPLC): 0.75 min (HPLC-A)

Primer 20: [6-[2-(2,2-difluoropropoksi)pirimidin-5-il]-2-piridil]metil N-karbam imidoilkarbamat

Smeša 1.0 eq (6-bromo-2-piridil)metanola, 1.1 eq intermedijera IV.6 i 2.5 eq K3PO4u dioksanu/vodi (ca.5:1) i 0.05 eq XPhos Pd G2 je zagrevana do 100°C na 1 h. Posle hlađenja do RT organske faze su odvojene i uparene. Rezultujući sirovi proizvod je prečišćen sa FC, dajući [6-[2-(2,2-difluoropropoksi)pirimidin-5-il]-2-piridil]metanola (ESI-MS: m/z = 282 (M+H)<+>, Rt(HPLC): 0.85 min (HPLC-A)).

Smeši 1.0 eq [6-[2-(2,2-difluoropropoksi)pirimidin-5-il]-2-piridil]metanola i DMF, dodat je 1.5 eq CDI i smeša je mešana 2 h na RT, potom su dodata 2.0 eq guanidin karbonata i mešanje je nastavljeno preko noći i potom razblažena sa vodom ohlađenom ledom. Talog je filtriran i ponovo kristalisan iz 95% EtOH, filtriran i osušen.

ESI-MS: m/z = 367 (M+H)<+>, Rt(HPLC): 0.80 min (HPLC-A), mp: 195°C, Rf(TLC): 0.20 (DCM/MeOH/NH4OH 9:1:0.01)

Primer 24: [6-[2-(izoksazol-3-ilmetoksi)pirimidin-5-il]-2-piridil]metil N-karbam imidoilkarbamat

Smeša 1.0 eq intermedijera III.1, 1.10 eq intermedijera IV.7, 2.0 eq K3PO4i 0.1 eq XPhos Pd G2 u dioksanu/vodi (ca.5:1) je zagrevana do 100°C 30 min. Posle hlađenja do RT reakciona smeša je razblažena sa vodom i ekstrakovana sa EtOAc. Organske faze su udružene, osušene i uparene i sirovi proizvod je prečišćen sa FC, potom trituriran sa etrom, filtriran i osušen.

ESI-MS: m/z = 370 (M+H)<+>, Rt(HPLC): 0.75 min (HPLC-C), mp: 183°C, Rf(TLC): 0.18 (DCM/MeOH 9:1)

Primer 26: [6-[2-[[(1R)-2,2-difluorociklopropil]metoksi]pirimidin-5-il]-2-piridil] metil N-karbamimidoilkarbamat

3.0 eq DBU su dodata u smešu od 3.0 eq [(1R)-2,2-difluorociklopropil]metanola i DCM. Posle 1.5 h na RT, 1.0 eq intermedijera I.1 je dodat i smeša je mešana na RT preko noći.

Intermedijer terc-butil-[[6-[2-[[(1R)-2,2-difluorociklopropil]-metoksi] pirimidin-5-il]-2-piridil]metoksi]-dimetil-silan (ESI-MS: m/z = 408 (M+H)<+>, Rt(HPLC): 1.33 min (HPLC-A)) nije izolovan.45 eq TFA su dodati u reakcionu smešu i mešanje je nastavljeno još 2 h na RT. Rastvarač je uparen i ostatak je prečišćen sa HPLC, dajući proizvod [6-[2-[[(1R)-2,2-difluorociklopropil]metoksi]-pirimidin-5-il]-2-piridil]metanol (ESI-MS: m/z = 294 (M+H)<+>, Rt(HPLC): 0.86 min (HPLC-A)).

U smešu 1.0 eq [6-[2-[[(1R)-2,2-difluorociklopropil]metoksi]pirimidin-5-il]-2-piridil] metanola i DMF, dodato je 1.44 eq CDI i smeša je mešana na RT preko noći, potom su dodati 1.44 eq guanidin karbonata i mešanje je nastavljeno još 3h. Reakciona semša je razblažena sa vodom i mešana 2 h. Talog je filtriran i osušen.

ESI-MS: m/z = 379 (M+H)<+>, Rt(HPLC): 0.82 min (HPLC-A) mp: 193-196°C, Rf(TLC): 0.30 (DCM/MeOH/NH4OH 9:1:0.01)

Primer 36: [6-[2-(4,4,4-trifluorobutoksi)pirimidin-5-il]-2-piridil]metil N-karbamimidoilkarbamate

Smeša 1.0 eq (6-bromo-2-piridil)metanola, 1.1 eq intermedijera IV.9 i 2.0 eq K3PO4u dioksanu/vodi (ca.5:1) i 0.04 eq XPhos Pd G2 je zagrevana do 100°C 1 h. Posle hlađenja do RT smeša je razblažena sa vodom ohlađenom medom i ekstrakovana sa EtOAc. Organske faze su udružene sa slanim rastvorom, osušene i uparene. Rezultujući sirovi proizvod je prečišćen sa FC, [6-[2-(4,4,4-trifluorobutoksi)pirimidin-5-il]-2-piridil]metanol (ESI-MS: m/z = 314 (M+H)<+>, Rt(HPLC): 0.91 min (HPLC-A)).

Smeši 1.0 eq [6-[2-(4,4,4-trifluorobutoksi)pirimidin-5-il]-2-piridil]metanola i DMF, dodato je 1.5 eq CDI i smeša je mešana 2 h na RT, potom su dodati 2.0 eq guanidin karbonata i mešanje je naszavljeno još 4 h i potom razblažena sa vodom ohlađenom ledom. Talog je filtriran i osušen.

ESI-MS: m/z = 399 (M+H)<+>, Rt(HPLC): 0.85 min (HPLC-A), mp: 194-197°C, Rf(TLC): 0.35 (DCM/MeOH/NH4OH 9:1:0.01)

Claims (21)

1. Patentni zahtevi 1. Jedinjenje formule (I)

   gde A je N ili CH; R<1>je odabran između grupe koja se sastoji od C1-6-alkil, C3-6-cikloalkil, heterociklil, -O-R<2>, -S-R<2>, -NH-R<2>and -N(R<2>)2, gde svaki R<2>je nezavisno odabran između grupe koja se sastoji od C1-6-alkil, C3-6-cikloalkil, heterociklil, -(C1-2-alkil)-(C3-6-cikloalkil), -(C1-2-alkil)-heterociklil, -(C1-2-alkil)-aril, -(C1-2-alkil)-heteroaril i –(C1-2-alkil)-CŁCH; gde svaki heterociklil iz R<1>i R<2>je 4- do 7-člana zasićena karbociklična grupa, gde su 1 ili 2 CH2-ostaci nezavisni jedan od drugog zamenjeni sa atomom ili grupom odabranom između grupe koja se sastoji od NH, O, S, -S(=O)-, -S(=O)2- i –C(=O)-; i gde svaki aril je odabran između grupe koja se sastoji od fenila i naftila; i gde svaki heteroaril je 5- ili 6-člani heteroaromatični prsten koji sadrži 1, 2 ili 3 heteroatoma nezavisno odabrani između grupe koja se sastoji od =N-, -NH-, -O- i –S-, gde heteroaromatične grupe sadrže–CH=N-jedinicu, ova grupa je opciono zamenjena sa –NH-C(=O)-; i gde svaka od alkil, cikloalkil, heterociklil, aril heteroaril grupa iz R<1>i R<2>je opciono nezavisno supstituisana sa jednim ili više supstituenata nezavisno odabrana između grupe koja se sastoji od F, Cl, CN, OH, C1- 3-alkil, -O-(C1-3-alkil), –C(=O)-(C1-3-alkil) i –C(=O)-(C3-7-cikloalkil); gde svaka od gore navedenih alkil grupa može biti linearna ili razgranata i opciono je supstituisana sa jednom ili više F; ili njegove soli.
2. 2. Jedinjenje formule (I) prema zahtevu 1, gde R<1>je C1-4-alkil, C3-5-cikloalkil, heterociklil, -O-R<2>, -S-R<2>, -NH-R<2>ili -N(R<2>)2; gde svaki heterociklil je 4- do 6-člana zasićena karbociklična grupa, gde 1 ili 2 CH2-ostataka su zamenjena sa heteroatomom odabranim između grupe koja se sastoji od NH, O i S; i gde svaka od alkil, cikloalkil i heterociklil grupa je opciono nezavisno supstituisana sa 1 do 5 F i / ili 1 do 3 supstituenta nezavisno odabrani između grupe koja se sastoji od Cl, CN, OH, C1-2-alkil, -O-(C1-2-alkil), –C(=O)-(C1-2-alkil) i –C(=O)-(C3-4-cikloalkil); i gde R<2>je definisan u zahtevu 1; ili njegova so.
3. 3. Jedinjenje formule (I) prema zahtevu 2, gde R<1>je C1-2-alkil, C3-4-cikloalkil, heterociklil, -O-R<2>, -NH-R<2>ili -N(R<2>)2; gde svaki heterociklil je odabran između grupe koja se sastoji od azetidinil, piperidinil, tetrahidrofuranil, tetrahidropiranil i morfolinil; i gde svaka od alkil, cikloalkil i heterociklil grupa je opciono nezavisno supstituisana sa 1 do 3 F ili jedan supstituent odabran između grupe koja se sastoji od CN, OH, CH3, -O-CH3, –C(=O)-CH3i –C(=O)-ciklopropil; i gde R<2>je definisan u zahtevu 1; ili njegova so.
4. 4. Jedinjenje formule (I) prema bilo kom od zahteva 1 do 3, gde R<2>je odabran između grupe koja se sastoji od C1-4-alkil, C3-5-cikloalkil, heterociklil, -(C1-2-alkil)-(C3-5-cikloalkil), -(C1-2-alkil)-heterociklil, -(C1-2-alkil)-aril, -(C1-2-alkil)-heteroaril i -(C1-2-alkil)-CŁCH; gde svaki heterociklil je 4- do 6-člana zasićena karbociklična grupa, gde 1 ili 2 CH2-ostatka su zamenjeni sa heteroatomom odbaranim između grupe koja se sastoji od NH, O i S; i gde svaki aril je odabran između grupe koja se sastoji od fenila i naftila; i gde svaki heteroaril je 5- ili 6-člani heteroaromatični prsten koji sadrži 1, 2 ili 3 heteroatoma nezavisno odabrani između grupe koja se sastoji od =N-, -NH-, -O- i –S-; i gde svaka od alkil, cikloalkil, heterociklil, aril i heteroaril grupa je opciono nezavisno supstituisana sa jednim ili više supstituenata nezavisno odabrani između grupe koja se sastoji od F, Cl, CN, OH, C1-2-alkil, -O-(C1-2-alkil), –C(=O)-(C1-2-alkil) i –C(=O)-(C3-7-cikloalkil); ili njegova so.
5. 5. Jedinjenje formule (I) prema bilo kom od zahteva 1 do 3, gde R<2>je odabran između grupe koja se sastoji od: C1-4-alkil, -CH2-(C3-4-cikloalkil), -CH2-heterociklil, -CH2-heteroaril i – CH2-CH2-CŁCH; gde svaki heterociklil je odabran između grupe koja se sastoji od tetrahidrofuranila i piperidinila; i gde svaki heteroaril je odabran između grupe koja se sastoji od izoksazolila, tiazolila i tiadiazolila; i gde svaka od alkil, cikloalkil, heterociklil, aril i heteroaril grupa je opciono nezavisno supstituisana sa jednim ili više supstituenata nezavisno odabrani između grupe koja se sastoji od F, CN, CH3, -OCH3, -C(=O)-CH3i –C(=O)-ciklopropil; ili njegova so.
6. 6. Jedinjenje formule (I) prema bilo kom od zahteva 1 do 5, gde A je N; Ili njegova so.
7. 7. Jedinjenje formule (I) prema zahtevu 1, gde A je N; i R<1>je odabran između grupe koja se sastoji od ciklopropil, heterociklil i -O-R<2>; gde R<2>je odabran između grupe koja se sastoji od C1-6-alkil, -(C1-2-alkil)-(C3-6-cikloalkil), -(C1-2-alkil)-heteroaril i –(C1-2-alkil)-CŁCH; gde svaki heterociklil je odabran između grupe koja se sastoji od azetidinil, piperidinil, tetrahidrofuranil, tetrahidropiranil i morfolinil; i gde svaka heterociklil grupa je opciono nezavisno supstituisana sa jednim supstituentom odabranim između grupe koja se sastoji od F, CN, OH, CH3i -O-CH3; i gde svaki heteroaril je odabran između grupe koja se sastoji od izoksazolil, tiazolil i tiadiazolil; i gde svaka alkil, cikloalkil, heterociklil i heteroaril grupa je opciono nezavisno supstituisana sa jednim ili više supstituenata nezavisno odabrani između grupe koja se sastoji od F, CN, CH3, -OCH3, –C(=O)-CH3i –C(=O)-ciklopropil; gde svaka od gore navedenih alkil grupa može biti linearna ili razgranata i opciono je supstutisana sa jednim ili više F; ili njegova so.
8. 8. Jedinjenje formule (I) prema zahtevu 1, gde A je N; 1 R<1>je odabran između grupe koja se sastoji od ciklopropil, heterociklil i -O-R<2>; gde R<2>je odabran između grupe koja se sastoji od C1-4-alkil, -CH2-(C3-4-cikloalkil), -CH2-heteroaril i –CH2-CH2-CŁCH; gde svaki heteroaril je odabran između grupe koja se sastoji od izoksazolil, tiazolil i tiadiazolil; gde svaka od alkil, cikloalkil, aril i heteroaril grupa je opciono nezavisno supstituisana sa jednim ili više supstituenata odabranim između grupe koja se sastoji od F, CN i -OCH3; gde svaki heterociklil je odabran između grupe koja se sastoji od azetidinil, piperidinil, tetrahidrofuranil, tetrahidropiranil i morfolinil; i gde svaka heterociklil grupa je opciono nezavisno supstituisana sa jednim supstituentom odabranim između grupe koja se sastoji od F, CN, OH, CH3i -O-CH3; ili njegova so.
9. 9. Jedinjenje formule (I) prema zahtevu 1 odabrano između grupe koja se sastoji od:

   2

   , Ili njegova so.
10. 10. Jedinjenje formule (I) prema zahtevu 9 koje ima strukturu:
11. 11. Jedinjenje formule (I) prema zahtevu 9 koje ima strukturu:
12. 12. Jedinjenje formule (I) prema zahtevu 9 koje ima strukturu:
13. . 13. Jedinjenje formule (I) prema zahtevu 9 koje ima strukturu:
14. 14. Jedinjenje formule (I) prema zahtevu 9 koje ima strukturu:

    .
15. 15. Jedinjenje formule (I) prema zahtevu 9 koje ima strukturu:

    .
16. 16. Farmaceutski prihvatljiva so jedinjenja prema bilo kom od zahteva 1 do 15. 4
17. 17. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1 do 15 ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za primenu kao medikament.
18. 18. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1 do 15 ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za primenu u lečenju NASH (ne-alkoholnog steatohepatitisa), pulmonarne fibroze, hronične opstruktivne bolesti pluća (COPD), retinopatije ili nefropatije.
19. 19. Jedinjenje za primenu prema zahtevu 18, gde retinopatija je dijabetska retinopatija.
20. 20. Farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1 do 15 ili njegova farmaceutski prihvatljivu so, opciono zajedno sa jednim ili više inertnih nosača i/ili razblaživača.
21. 21. Farmaceutska kompozicija koja sadrži jedno ili više jedinjenja prema bilo kom od zahteva 1 do 15 ili njegova farmaceutski prihvatljivu so, i jedan ili više dodatnih terapeutski agenasa, opciono zajedno sa jednim ili više inertnih nosača i/ili razblaživača. Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Beograd, Kneginje Ljubice 5