RS62873B1

RS62873B1 - Farmaceutski sastav karbetocina

Info

Publication number: RS62873B1
Application number: RS20220052A
Authority: RS
Inventors: Anders Nilsson; Mattias Malm; Kazimierz Wisniewski; Britta Siekmann
Original assignee: Ferring Bv
Priority date: 2010-09-30
Filing date: 2011-09-29
Publication date: 2022-02-28
Also published as: CY1124924T1; IL225238B; RU2737264C2; ES2905561T3; RU2016143751A; HUE034367T2; EP4374878A2; WO2012042371A3; HRP20211969T1; EP3246018A1; PL2621468T3; ES3027637T3; IL245328B; US20170106043A1; TWI650134B; JO3400B1; PL3246018T3; CN107080832A; TW201729797A; TWI532507B

Description

Opis

[0001] Predmetni pronalazak se odnosi na farmaceutske sastave, na primer farmaceutske sastave za tretman postporođajnog krvarenja (PPK) ili druge medicinske primene. Posebno se odnosi na farmaceutske sastave koje imaju poboljšanu stabilnost, na primer na sobnoj ili temperaturi okruženja.

[0002] Postporođajno krvarenje (PPK) je jedan od vodećih uzroka mortaliteta i teškog morbiditeta uzrokovanog trudnoćom u zemljama u razvoju, kao i u industrijalizovanom svetu. To stanje je potencijalno opasno po život, što pokazuje oko 140.000 smrtnih slučajeva godišnje, jedan na svaka četiri minuta, velikom većinom među ženama koje nemaju pristup adekvatnoj akušerskoj zdravstvenoj zaštiti. Iako je problem brojčano važan, nisu svi regioni industrijalizovanog sveta na sličan način pogođeni, i u Evropi stope smrtnosti povezane sa krvarenjem kod majki znatno variraju od zemlje do zemlje. Istraživanje zasnovano na populaciji u 11 regiona u evropskim zemljama pokazalo je da su se stope teških krvarenja kretale od 0,1% do 0,9% trudnoća (MOMS-B grupa, 1999). Postoje dobri razlozi da se veruje da razlike u kliničkoj praksi mogu biti od velike važnosti za razlike u morbiditetu/smrtnosti. U Ujedinjenom Kraljevstvu, Confidential Enquiry into Maternal Deaths, koja pokriva godine 1994-1996, pokazala je da nakon što su preduzete mere u svim porodilištima da se utvrde smernice za tretman treće faze i postporođajnog krvarenja, nije bilo smrtnih slučajeva od krvarenja kod nekomplikovanih vaginalnih porođaja (Department of Health i dr, 1998). Ovo dostignuće podržava pretpostavku da klinički tretman ima ključnu ulogu u prevenciji teškog krvarenja kod majke.

[0003] PPK je teško upravljati jer je procena gubitka krvi u jedinici za porođaj nepouzdana. Često se deluje kao odgovor na razvoj pokazatelja kod majke kao što su hipotenzija ili malaksalost, pre nego na osnovu procenjenog gubitka krvi. Odloženo delovanje je odgovorno za mnoge slučajeve teškog krvarenja, i može biti potrebna hitna operacija jer bi vreme provedeno koristeći druge postupke tretmana bilo opasno za pacijentkinju. Ova razmatranja govore u prilog primeni prakse rutinske profilaktičke primene uterotonika na sve porodilje. Razlog za takvu praksu je uvećan činjenicom da je atonija materice najznačajniji faktor koji doprinosi PPK. Atonija materice je gubitak tonusa u muskulaturi materice. Normalno, kontrakcija mišića materice kompresuje sudove i smanjuje protok. Ovo povećava verovatnoću koagulacije i sprečava krvarenje. Dakle, nedostatak kontrakcije mišića materice može izazvati akutno krvarenje. Klinički, 75-80% postporođajnih krvarenja je posledica atonije materice.

[0004] Recenzije su pokazale ubedljive dokaze u prilog rutinskoj profilaktičkoj primeni uterotonika, bilo u izolaciji ili kao deo entiteta Aktivnog upravljanja trećim stadijumom porođaja (AMTSL); AMTSL se obično definiše kao intervencija sa tri komponente: profilaktička primena uterotonika, rano stezanje pupčane vrpce i kontrolisana trakcija pupčane vrpce. Dalje, pokazalo se da je AMTSL podjednako efikasan kod žena pod „niskim i visokim rizikom“. Danas je upotreba uterotonika kao profilakse u svim vaginalnim bolničkim porođajima kako bi se sprečila teška krvarenja rutinski klinički tretman u većini Evrope, i praksa je u porastu na globalnom nivou.

[0005] Trenutno dostupni uterotonični lekovi su oksitocin, ergometrin, Syntometrine<®>(kombinacija oksitocina i ergometrina) i misoprostol. Međutim, oni nisu bez nedostataka. Mizoprostol se primenjuje oralno ili vaginalno i manje je efikasan od injekcijskih uterotonika; generalno se preporučuje da se ne koristi tamo gde su dostupni uterotonici za injekcije. Syntometrine<®>je licenciran u samo nekoliko zemalja u Evropi. Možda je efikasniji od samog oksitocina, ali je povezan sa više neželjenih efekata, posebno mučninom i povraćanjem. Dalje, nije pogodan za upotrebu kod žena sa hipertenzijom, preeklampsijom i srčanim oboljenjima, čime se smanjuje njegova pogodnost za rutinsku profilaktičku upotrebu. Sam oksitocin ima nedostatak kratkog poluživota. Iako se ovo može zaobići primenom kontinuirane intravenske infuzije kako bi se pružila trajna uterotonična aktivnost, ovo je manje zgodno od jedne injekcije. Ako se primenjuje kao pojedinačna bolusna doza, bilo kao intravenska ili intramuskularna injekcija, potrebno je pažljivo praćenje tonusa materice i može biti potreban dodatni uterotonični lek zbog kratkog poluživota.

[0006] Karbetocin [(1-desamino-1-monokarba-2(O-metil)-tirozin)oksitocin] je dugodelujući sintetički analog oksitocina, sa agonističkim delovanjem. Karbetocin (PABAL<®>, DURATOCIN<®>) trenutno je odobren za prevenciju atonije materice nakon porođaja bebe carskim rezom pod epiduralnom ili spinalnom anestezijom. U sadašnjoj tržišnoj upotrebi, intravenska primena karbetocina pruža poluživot eliminacije od približno 40 minuta, što je 4 do 10 puta duže od prijavljenog poluživota oksitocina (4 do 10 minuta). Međutim, upotrebom intramuskularne injekcije, karbetocin dostiže maksimalnu koncentraciju u plazmi za manje od trideset minuta i ima bioraspoloživost od 80% (W Rath, European Journal of Obstetrics and Gynaecology and Reproductive Biology 147 (2009) 15-20). Dakle, karbetocin ima potencijal da bude skoro idealan lek za rutinsku profilaksu postporođajnog krvarenja, koji se nudi u svim bolničkim vaginalnim porođajima, jer je pogodan i za intramuskularnu injekciju i za intravensku primenu, nudeći pogodnost i jednostavnu primenu; ima brz početak delovanja; ima dugotrajno dejstvo, posebno u poređenju sa oksitocinom; retko je povezan sa neželjenim reakcijama na lek; i ima odličnu podnošljivost. U objavljenim kliničkim ispitivanjima, karbetocin je pokazao efikasnost sličnu kao oksitocin i Syntometrine<®>ili čak trend ka boljoj efikasnosti, prikazan na nekoliko ishoda: gubitak krvi (izmeren ili procenjen), incidenca gubitka krvi > 500 ml, dodatna upotreba uterotoničnih lekova ili totalne uterotonične intervencije. Stoga bi karbetocin trebalo da ponudi poboljšanje u odnosu na trenutno dostupne opcije za prevenciju atonije materice i prekomernog krvarenja nakon vaginalnog porođaja. U poređenju sa oksitocinom, njegova prednost je prvenstveno u tome što bi zamenio potrebu za kontinuiranom infuzijom ili dodatnom uterotoničnom intervencijom. U praksi, karbetocin ima potencijal da zameni 2-4 sata rutinske terapije infuzijom nakon porođaja i/ili da poboljša ishod u odnosu na bolus injekciju oksitocina. Dalje, svako smanjenje dodatnih intervencija predstavlja povoljan farmakoekonomski slučaj za upotrebu karbetocina. U poređenju sa Syntometrine<®>, njegova prednost je pre svega bolja podnošljivost i sigurnost i nedostatak važnih kontraindikacija. U oba slučaja, karbetocin je prikladniji za rutinsku profilaktičku upotrebu i verovatno će olakšati primenu.

[0007] Trenutna formulacija karbetocina (PABAL<®>100 mikrograma/mL rastvora za injekcije, Ferring Pharmaceuticals Limited) nije stabilna na sobnoj temperaturi (RT) i zahteva skladištenje u frižideru na temperaturi od 2-8 ºC. Stoga postoji potreba za formulacijom karbetocina koja je stabilna na sobnoj temperaturi (na primer na 25ºC i 60% relativne vlažnosti) do dve godine, što omogućava, na primer, upotrebu u vozilima hitne pomoći. Ovo bi pružilo prednost u klimatskoj zoni I/II. Što je još važnije, postoji potreba za formulacijom koja se može čuvati nehlađena u klimatskim zonama III/IV (visoka temperatura, npr. tropski regioni) – što ispunjava zahteve za stabilnost temperature i vlažnosti za ove zone, na primer, dokumentovana dugotrajna termička stabilnost na 30ºC i relativnoj vlažnosti do 75%. Koristi se terminologija klimatskih zona od FDA i EMEA, koja poznata je stručnjacima. Dakle, klimatska zona I je umerena klima; klimatska zona II je suptropska i mediteranska klima; klimatska zona III je vruća i suva; a klimatska zona IV je vruća i vlažna.

[0008] WO 2008/150303 opisuje postupke i sastave koje sadrže oksitocin ili analog oksitocina, kao što je karbetocin.

[0009] U skladu sa predmetnim pronalaskom pružen je tečni sastav (npr. tečni farmaceutski sastav) koji sadrži karbetocin ili njegovu farmaceutski aktivnu so; gde pH sastava iznosi od 5,26 do 5,65, na primer od 5,4 do 5,65.

[0010] Poželjno, sastav je vodeni sastav (npr. vodeni farmaceutski sastav) koji sadrži karbetocin ili njegovu farmaceutski aktivnu so; gde pH sastava iznosi od 5,26 do 5,65, na primer od 5,4 do 5,65. Razumeće se da je sastav pronalaska poželjno vodeni rastvor. Iako je voda (npr. voda za injekcije ili WFI) poželjni rastvarač, mogu se koristiti i drugi rastvarači (mešavine vode sa drugim farmaceutski prihvatljivim rastvaračima, farmaceutski prihvatljivim alkoholima, itd.).

[0011] Podnosioci zahteva su utvrdili (Primeri 1 do 3) da se sastav, npr. farmaceutski sastav, koji sadrži karbetocin ili njegovu farmaceutski aktivnu so, i koji ima pH unutar definisanog specifičnog pH raspona, može se čuvati na sobnoj temperaturi (npr. na 25ºC i 60% relativnoj vlažnosti) tokom dugačkog perioda (npr. do 2 godine). Sastav takođe može imati dugoročnu temperaturnu stabilnost na 30ºC i 40ºC i relativnoj vlažnosti do 75%, i stoga može biti pogodan za upotrebu u zonama III/IV zona bez potrebe za hlađenjem.

[0012] Sastav može da sadrži puferski agens, na primer farmaceutski prihvatljiv puferski agens. Ovde, izraz puferski agens je agens koji je sposoban da dovede kiseli ili bazni rastvor u određeno pH stanje, i zatim spreči promenu iz tog stanja; drugim rečima, puferski agens je agens koji se dodaje u već kiseli ili bazni rastvor kako bi se modifikovao pH i zatim održao pH na modifikovanom nivou. Generalno, puferski agens je slaba kiselina ili slaba baza koja bi bila sadržana u puferskom rastvoru i bila bi odgovorna za dejstvo pufera koje se vidi u ovim rastvorima. Puferski agens može biti, na primer, sirćetna kiselina, adipinska kiselina, limunska kiselina, maleinska kiselina, sukcinska kiselina ili fosfat (npr. natrijum fosfat, npr. natrijum fosfat dvobazni dihidrat). Poželjno, puferski agens je sukcinska kiselina. Sastav može da sadrži jedan agens za puferisanje (tj. ne uključuje dva ili više puferskih agenasa). Sastav može da sadrži dva ili više puferskih agenasa (npr. limunsku kiselinu i (npr. natrijum) fosfat).

[0013] U drugom aspektu, sastav može da sadrži puferski rastvor. Ovde, izraz pufer ili puferski rastvor označava rastvor koji uključuje mešavinu slabe kiseline i njene konjugovane baze ili slabe baze i njene konjugovane kiseline, koja ima svojstvo da se pH rastvora veoma malo menja kada se dodaje mala količina jake kiseline ili baze, tako da se održava pH pufera (rastvora). Pufer (rastvor) može biti, na primer, citratni pufer (rastvor), koji sadrži limunsku kiselinu i citrat (npr. natrijum citrat); sukcinatni pufer (rastvor) koji sadrži sukcinsku kiselinu i sukcinat (npr. natrijum sukcinat), acetatni pufer (rastvor) koji sadrži sirćetnu kiselinu i acetat (npr. natrijum acetat); citranit/fosfatni pufer (rastvor) koji sadrži limunsku kiselinu i fosfat; ili fosfatni pufer (rastvor) koji sadrži npr. (mononatrijum) fosfat i njegovu konjugovana baza (dinatrijum fosfat). Poželjni pufer je sukcinatni pufer. Sastav može da sadrži jedan pufer (tj. ne uključuje dva ili više pufera). Sastav može uključivati dva ili više pufera.

[0014] Podnosioci zahteva su otkrili da uključivanje agensa za puferisanje u vidu sukcinske kiseline (ili upotreba sukcinatnog pufera) može da pruži efektivnu stabilnost na sobnoj temperaturi (npr. na 25ºC i 60% relativne vlažnosti) uz moguće pružanje dodatnih prednosti -na primer, upotreba puferskog agensa u vidu sukcinske kiseline ili sukcinatnog pufera mogu doprineti smanjenju reakcija na mestu injekcije i povezanog bola u poređenju sa drugim puferisanim formulacijama.

[0015] Koncentracija karbetocina u tečnosti (sastav, npr. vodeni sastav) može iznositi od 0,01 do 55 mg/mL, na primer 0,01 do 50 mg/mL, na primer 0,01 do 10 mg/mL, na primer 0,01 do 1,5 mg/mL, poželjno 0,05 do 0,5 mg/mL, na primer 0,1 mg/mL. Koncentracija karbetocina u tečnosti (sastav, npr. vodeni sastav) može iznositi, na primer, 1 mg/mL, 10 mg/mL, 50 mg/mL itd.

[0016] Sastavi pronalaska mogu dalje da sadrže antioksidans. Antioksidans može biti bilo koji antioksidans koji se obično koristi u struci, na primer bilo koji antioksidans odobren za upotrebu kao farmaceutski ekscipijens. Na primer, antioksidans može biti metionin, EDTA, butilovani hidroksi toluen, natrijum metabisulfit itd. Poželjno je da je antioksidans prisutan u količini od 0,01% do 10% (tež./zap.), na primer 0,05% do 5% (tež./zap.), najpoželjnije 0,08% do 1% (tež./zap.). Poželjno, antioksidans je metionin, EDTA ili kombinacija metionina i EDTA. Na primer, antioksidans može biti metionin i prisutan u količini od 0,1% tež./zap. (ili 1 mg/mL - pogledati Primer 2).

[0017] Sastav može dalje da sadrži agens za izotoničnost. Agensi za izotoničnost, na primer manitol ili NaCl, su dobro poznati u struci. Poželjno, agens za izotoničnost je prisutan u količini koja je dovoljna da pruži izotonični sastav (rastvor), na primer u količini od 0,01% do 10% (tež./zap.). Poželjno agens za izotoničnost je manitol. Ako je agens za izotoničnost manitol, on može biti prisutan u količini od 0,5% do 7,5% (tež./zap.), poželjnije 4,0% do 5,5% (tež./zap.), na primer 5,0% (tež./zap.). Ako je agens za izotoničnost manitol, on može biti prisutan u količini od 0,05% do 7,5% (tež./zap.). Ako je agens za izotoničnost NaCl, on može biti prisutan u količini od 0,05% do 1,2% (tež./zap.), poželjnije 0,08% do 1% (tež./zap.), na primer 0,9% (tež./zap.). Agens za izotoničnost može biti prisutan u količini od 0,1 do 100 mg/mL, na primer 0,5 do 7 mg/mL, na primer 1 do 5 mg/mL. Na primer, ako je agens za izotoničnost manitol, on može biti prisutan u količini od 5 do 75 mg/mL, na primer 40 do 55 mg/mL (pogledati, na primer, Tabelu 3a). Ako je agens za izotoničnost NaCl, on može biti prisutan u količini od 0,5 do 12 mg/mL, na primer 8 do 10 mg/mL (pogledati npr. Tabelu 3b), na primer 7,5 mg/mL (pogledati Primer 6).

[0018] Sastav može biti za bilo koji način primene leka, npr. oralno, rektalno, bukalno, nazalno, vaginalno, transdermalno (npr. tehnologija flastera); parenteralno, intravenozno, intramuskularno ili potkožnom injekcijom; intracisternalno, intravaginalno, intraperitonealno, lokalno (praškovi, masti ili kapi) ili kao bukalni ili nazalni sprej. Poželjno sastav jeste sastav za injekcije ili formulacija za injekcije. Formulacije za injekcije se mogu isporučiti u bilo kom pogodnom kontejneru, npr. ampula, bočica, napunjeni špric, uređaj za injekcije (npr. uređaj za injekciju za jednokratnu upotrebu kao što je onaj koji se prodaje pod oznakom Uniject by Becton Dickinson), injekcioni kertridž, ampula, (više)dozna olovka i slično.

Poželjno je da je sastav za intramuskularnu primenu (npr. intramuskularna injekcija) ili intravensku primenu (npr. IV injekcija).

[0019] Sastav može uključiti pojačivač, ekscipijens koji povećava efektivnu dozu (npr.

povećava efektivnu dozu nakon nazalne primene). Pojačivač može biti bilo koji pojačivač koji se obično koristi u struci, na primer bilo koji pojačivač odobren za upotrebu kao farmaceutski ekscipijens. Pojačivač može biti, na primer, metil-β-ciklodekstrin, polisorbat 80, karboksimetilceluloza ili hidroksipropilmetilceluloza.

[0020] Sastavi pronalaska mogu biti za upotrebu u (ili u proizvodnji lekova za) tretman ili prevenciju atonije materice. Sastavi mogu biti za upotrebu u tretmanu ili prevenciji atonije materice nakon vaginalnog porođaja. Sastavi mogu biti za upotrebu u tretmanu ili prevenciji atonije materice nakon porođaja carskim rezom, na primer porođaj carskim rezom pod epiduralnom ili spinalnom anestezijom. Sastavi mogu biti za upotrebu u tretmanu ili prevenciji atonije materice, na primer kod pacijenata koji su pod rizikom od razvoja PPK. Sastavi mogu biti za upotrebu u (ili u proizvodnji lekova za) tretman ili prevenciju krvarenja (npr. prekomerno krvarenje) nakon vaginalnog porođaja. Sastavi pronalaska mogu biti za upotrebu kao uteronske formulacije. Sastavi pronalaska mogu biti za (npr. rutinsku) primenu nakon vaginalnog porođaja.

[0021] U skladu sa predmetnim pronalaskom u daljem aspektu pružen je postupak tretmana ili prevencije atonije materice (na primer, nakon vaginalnog porođaja ili porođaja carskim rezom, ili kod pacijentkinje koja je pod rizikom od razvoja PPK) ili postupak tretmana ili prevencije prekomernog krvarenja nakon vaginalnog porođaja koji obuhvata, korak primene pacijentkinji, koja ima potrebu za tim, sastava kao što je navedeno iznad.

[0022] Poželjno je da sastavi pronalaska ne uključuju jedinjenje kvaternarnog amina, kao što je benzalkonijum hlorid. Poželjno je da sastavi pronalaska ne uključuju parahidroksibenzoatni konzervans, ili kombinaciju parahidroksibenzoatnog konzervansa sa ko-rastvaračem. Poželjno je da sastavi pronalaska imaju sadržaj dvovalentnih metalnih jona manji od 2 mM, na primer 0,195 mM ili manje, na primer 0,1 nM ili manje. Poželjno je da sastavi pronalaska ne uključuju solubilizator. Poželjno je da sastavi pronalaska ne uključuju metil-β-ciklodekstrin.

[0023] U skladu sa predmetnim pronalaskom u daljem aspektu, pružen je postupak tretmana ili prevencije atonije materice [na primer, tretman ili prevencija atonije materice nakon vaginalnog porođaja, tretman ili prevencija atonije materice nakon porođaja carskim rezom, na primer porođaj carskim rezom pod epiduralnom ili spinalnom anestezijom, ili tretman ili prevencija atonije materice kod pacijenata kod kojih postoji rizik od razvoja PPK], ili postupkom tretmana ili prevencije krvarenja (npr. prekomerno krvarenje) nakon vaginalnog porođaja, koji obuhvata: primenu pacijentkinji, koja ima potrebu za tim, tečnog (npr. vodenog) farmaceutskog sastava koji sadrži karbetocin ili njegovu farmaceutski aktivnu so; gde pH sastava iznosi od 5,26 do 5,65, na primer od 5,4 do 5,65.

[0024] U skladu sa predmetnim pronalaskom u daljem aspektu, pružen je komplet delova koji sadrži: tečan (npr. vodni) farmaceutski sastav koji sadrži karbetocin ili njegovu farmaceutski aktivnu so gde pH sastava iznosi od 5,26 do 5,65; i kontejner [npr. ampula, bočica, napunjeni špric, injekcioni uređaj (npr. uređaj za jednokratnu upotrebu kao što je onaj koji se prodaje pod oznakom Uniject by Becton Dickinson), injekcioni kertridž, ampula, višedozna olovka] za sastav, opciono sa posebnim sredstvima za injekciju (npr. ako je potrebno za primenu), opciono sa uputstvima za primenu sastava. pH sastava može iznositi od 5,4 do 5,65.

[0025] U skladu sa predmetnim pronalaskom u daljem aspektu, pružen je komplet delova koji sadrži: tečan (npr. vodeni) farmaceutski sastav koji sadrži karbetocin ili njegovu farmaceutski aktivnu so i opciono antioksidans, gde pH sastava iznosi od 5,26 do 5,65; i kontejner (npr. bočica, napunjeni špric, uređaj za injekciju [npr. napunjeni injekcioni uređaj za jednokratnu upotrebu kao što je onaj koji se prodaje pod oznakom Uniject by Becton Dickinson), injekcioni kertridž, ampula, olovka za više doza] za sastav, opciono sa odvojenim sredstvima za injekciju (npr. ako je potrebno za primenu), opciono sa uputstvima za primenu sastava. pH sastava može iznositi od 5,4 do 5,65.

[0026] Prema daljem aspektu, pružen je postupak tretmana ili prevencije kompromitovanih stanja laktacije, poremećaja indukcije porođaja, stanja atonije materice, prekomernog krvarenja, upale, bola, bola u stomaku, bola u leđima, muške i ženske seksualne disfunkcije, sindroma iritabilnog creva (IBS), konstipacije, gastrointestinalne opstrukcije, autizama, stresa, anksioznosti, depresije, poremećaja anksioznosti, hirurškog gubitka krvi, krvarenja nakon porođaja, zarastanja rana, infekcije, mastitisa, oštećenja placente tokom porođaja, osteoporoze i postupak za dijagnozu raka i placentne insuficijencije, koji obuhvata: primenu pacijentkinji, koja ima potrebu za tim, tečnog (npr. vodenog) farmaceutskog sastava pronalaska.

Detaljan opis pronalaska i obelodanjenja

[0027] Predmetni pronalazak i obelodanjenje će sada biti ilustrovani pozivanjem na priložene slike gde:

Slika 1 prikazuje UPLC hromatogram mešavine nečistoća karbetocina i proizvoda razgradnje;

Slika 1a prikazuje hemijske formule karbetocina i proizvoda razgradnje;

Slika 2 prikazuje je sadržaj proizvoda razgradnje (hidrolize) [Gly<9>OH]karbetocin (pogledati Sliku 1a) u uzorcima za ispitivanje antioksidansa kao funkciju vremena (konstantan pH);

Slika 3 prikazuje sadržaj proizvoda razgradnje (oksidacije) sulfoksid II karbetocina (pogledati Sliku 1a) u uzorcima za ispitivanje antioksidansa kao funkciju vremena (konstantan pH);

Slika 4 prikazuje pojedinačne proizvode razgradnje pri različitim pH (pH studija, konstantni antioksidans);

Slika 5 prikazuje zbir proizvoda razgradnje pri različitim pH (pH studija, konstantni antioksidans);

Slika 6 prikazuje stabilnost FE 202767 u odabranim puferima; i

Slika 7 prikazuje zbir nečistoća različitih formulacija karbetocina nakon 12 meseci na 40°C i 75% relativnoj vlažnosti (R.H.), kao što je opisano u Eksperimentu 3A.

ANALITIČKI POSTUPAK

[0028] Ovo je analitički postupak za primere karbetocina (Primeri 1 do 6), u nastavku.

[0029] Svi rastvori su analizirani na sistemu Waters Acquity UPLC (tečna hromatografija ultra visokog pritiska) korišćenjem izokratskih uslova. Mobilna faza bila je 20% acetonitril (JT Baker, Ultra Gradient Grade) u 5 mM nepuferisanom amonijum acetatu (Fluka, Ultra ≥ 99,0%). Kolona je bila Waters Acquity UPLC BEH Shield RP18, 2,1 * 100 mm, 1,7 µm (protok: 0,5 ml/min, temperatura kolone: 50°C). Zapremina injekcije iznosila je 20 µl.

Detektovanje je izvedeno UV na 220 nm. Različite nečistoće su procenjene kao % ukupne površine.

[0030] Slika 1 prikazuje hromatogram mešavine nečistoća karbetocina i njegovih proizvoda razgradnje. Rastvor je sadržao karbetocin, proizvode hidrolize [Gly<9>OH], [Asp<5>] i [Glu<4>]karbetocin, proizvode oksidacije sulfoksid I i sulfoksid II-karbetocin, proizvode alkalne razgradnje [β Asp<5>] i [D-Asn<5>]karbetocin i nečistoće [D-Cis<6>]karbetocina povezane sa sintezom. Hemijske formule karbetocina i proizvoda razgradnje (proizvodi hidrolize,

1

proizvodi oksidacije i proizvodi alkalne razgradnje) prikazani su na Slici 1a. Nomenklatura tipa „[Glu<4>]karbetocin“ je dobro poznata u struci. Rezolucije između svih pikova iznosile su ≥ 2.0.

Primer 1: Studija antioksidansa formulacije (konstantan pH)

[0031] 5,0 grama D(-)-manitola (Ph Eur, Prolabo) rastvoreno je u 1000 ml milliQ-vode. Ovaj rastvor je prilagođen sa sirćetnom kiselinom (Ph.Eur., Merck) pri pH 5,2. Ovaj rastvor je zatim podeljen na četiri alikvota od 200 ml. U alikvot 1, dodato je 0,2 grama EDTA dinatrijum, dihidrat (Fluka) i rastvoreno je. U alikvot 2, dodato je 1,0 grama L-metionina (Sigma, neživotinjski izvor) i rastvoreno je. U alikvot 3, dodato je 0,2 grama EDTA dinatrijuma, dihidrata i 1,0 g L-metionina i rastvoreno je. Ništa nije dodato alikvotu 4. pH alikvota 1-3 je prilagođen sirćetnom kiselinom pri pH 5,2 ± 0,1.1 mg karbetocina (Polypeptide Laboratories) je prebačen u četiri volumetrijske boce od 10 ml. Alikvoti 1-4 su korišćeni za rastvaranje supstance i za razblaživanje do zapremine (0,1 mg/ml karbetocina). Rastvori su prebačeni u boce sa plavim poklopcem od 25 ml i stavljeni u kabinet pri 40°C i 75% relativne vlažnosti. Uzorak trenutne PABAL<®>formulacije, pH 3,9 (izmereno), stavljen je u isti kabinet radi poređenja.

[0032] Rastvori su analizirani posle 2, 6, 12, 22 i 33 nedelja na 40°C. Utvrđeno je da su najveće nečistoće ove studije proizvod hidrolize [Gly<9>OH]karbetocin i proizvod oksidacije [sulfoksid II] karbetocin. pH u ovoj studiji (pH 5,2) nije bio dovoljno visok da započne bilo kakvu alkalnu degradaciju karbetocina. % sadržaja (tež./tež.) glavne nečistoće nastale hidrolizom, [Gly<9>OH]karbetocina, i oksidacijom, sulfoksid II-karbetocina, prikazani su na Slikama 2 i 3. Specifikacija proizvoda dozvoljena za svaku nečistoću je takođe prikazana na svakoj slici kao referenca. Tako se na Slici 2 može videti da ako se koncentracija [Gly<9>OH] karbetocina povećava iznad 1,5% uzorak je „van specifikacije“, odnosno uzorak se razgradio tako da više nije pogodan za primenu.

[0033] Kao što je prikazano na Slici 2, studija antioksidansa (konstantni pH) pokazala je da formiranje proizvoda hidrolize, uglavnom [Gly<9>OH]karbetocina, bilo je veoma brzo u trenutnoj PABAL formulaciji (pH 3,9). S obzirom na sadržaj [Gly<9>OH]karbetocina predmetna formulacija se brzo našla van specifikacije (>1,5%), posle 6 nedelja na 40°C. Sve formulacije sa pH 5,2 bile su znatno ispod granice specifikacije nakon 33 nedelje na 40°C (0,4-0,6%), što ukazuje da su ove formulacije stabilne najmanje 6 meseci na 40°C i 75% relativne vlažnosti, što opšte prihvaćeno ukazuje na verovatnu stabilnost tokom najmanje 24 meseca na 25°C i 60% relativne vlažnosti (tj. stabilna formulacija na sobnoj temperaturi) Rezultati se odnose na sva tri proizvoda hidrolize. Na Slici 3, pokazalo se da je dodatak antioksidansa veoma efikasan u usporavanju oksidacije karbetocina, uprkos povećanom pH formulacija. Formulacija sa pH 5,2 koja nije sadržala nikakve aditive je bila van specifikacije (>0,8%) u pogledu sadržaja sulfoksid II-karbetocina nakon približno 20 nedelja na 40°C. Formulacije koje sadrže metionin ili EDTA bile su znatno ispod granice specifikacije posle 33 nedelje (0,2-0,4%). Formulacija koja sadrži kombinaciju EDTA i metionina uopšte nije pokazala povećanje proizvoda oksidacije, u poređenju sa nivoima pronađenim u seriji supstance. Zbog niskog pH, predmetna formulacija nije bila sklona degradaciji oksidacijom (pH 3,9). Rezultati su prikazani u numeričkom obliku u narednoj tabeli (Tabela 1).

Tabela 1 Pojedinačni i zbir proizvoda razgradnje (%) nakon 33 nedelje na 40°C (konstantan pH).

Primer 2: pH studija formulacije (konstantni antioksidans)

[0034] 1,2 grama sukcinske kiseline (Sigma-Aldrich, ≥ 99%) i 1,0 g L-metionina (Sigma, neživotinjski izvor) rastvoreni su u 1000 ml milliQ vode (10 mM). Ovaj rastvor je prilagođen, u alikvotima, sa razblaženim NaOH (Ph.Eur., Merck) pri pH 4,0, 4,5, 5,2, 5,65, 6,1, 6,5 i 7,0.

55 mg karbetocina (Polypeptide Laboratories) je rastvoreno u 50 ml milliQ vode (1,1 mg/ml).

1,0 ml rastvora karbetocina (1,1 mg/ml) je pomešano sa 10 ml svakog pufera (0,1 mg/ml karbetocina). U svaki rastvor je dodato 0,55 g manitola (5%) i rastvoreno. Rastvori su prebačeni u staklene bočice od 15 ml sa poklopcem na navoj i smešteni u kabinet pri 40°C na 75% relativne vlažnosti.

[0035] Rastvori su analizirani posle 12 i 52 nedelja na 40°C. Sadržaj pojedinačnih proizvoda razgradnje i zbir proizvoda razgradnje prikazan je u Tabelama 2a i 2b i na Slikama 4 i 5. Tabela 2a Pojedinačni i zbir proizvoda razgradnje (%) pri različitim pH nakon 12 nedelja na 40°C (pH studija, konstantan antioksidans).

Tabela 2b Pojedinačni i zbir proizvoda razgradnje (%) pri različitim pH nakon 52 nedelje na 40°C (pH studija, konstantan antioksidans).

1

[0036] Kao što je objašnjeno u nastavku u vezi sa Primerom 3a, ograničenje specifikacije za zbir nečistoća (za trenutnu PABAL<®>formulaciju) je ≤ 5%. Kao što se može videti u Tabeli 2b („Zbir“), Uzorci sa pH 5,2 i 5,65 (primeri pronalaska) su i dalje unutar specifikacije nakon 52 nedelje (1 godina) na 40°C, dok su svi ostali uzorci van specifikacije nakon 52 nedelje (1 godina) na 40°C.

[0037] Rezultati pH studije (slike 4, 5) potvrdili su zapažanja studije antioksidansa.

Formiranje proizvoda hidrolize ([Gly<9>OH], [Asp<5>] i [Glu<4>]karbetocin) je efikasno smanjeno povećanjem pH sa pH 4,0 na oko pH 5,65. Pri višim pH vrednostima (pH 6,1 - 7,0) ponovo je povećan sadržaj proizvoda hidrolize. Potvrđena je i efikasnost antioksidansa u koncentraciji od oko 1 mg/ml (u studiji antioksidansa koncentracija antioksidansa iznosila je 5 mg/ml). Međutim, ako je oksidacija ograničena u leku ili rastvoru leka (npr. ako lek ili rastvor leka nisu skloni oksidaciji), količina antioksidansa može biti smanjena ili upotreba antioksidansa možda neće biti neophodna. Zbog antioksidansa, oksidacija karbetocina je bila zanemarljiva, bez obzira pri pH. Umesto toga, gornja pH granica optimizovane formulacije bila je ograničena alkalnom razgradnjom karbetocina. Glavna nečistoća alkalnom degradacijom bila je [D-Asn<5>]karbetocin, koji se brzo povećavao pri pH vrednostima iznad pH 6,1. Takođe je primećeno stvaranje dve druge manje nečistoće pri visokom pH, [β Asp<5>]karbetocin i jedna nepoznata nečistoća koja eluira rano u hromatogramu (tR: 2,0 min).

[0038] U-oblik krive pH u odnosu na zbir proizvoda razgradnje ilustruje plato stabilnosti karbetocina pri pH 5,0 - 6,0. Utvrđeno je da pri pH 5,2 zbir proizvoda razgradnje iznosi samo 16% zbira proizvoda razgradnje pri pH 4,0 (predmetna formulacija). Utvrđeno je da je optimalni pH negde između pH 5,1 do 6, na primer između oko pH 5,2 i 5,65.

[0039] Primeri 1 i 2 daju veoma jaku indikaciju da su formulacije pronalaska stabilne na sobnoj temperaturi do dve godine.

Primer 3: Studija formulacije agenasa izotoničnosti, NaCl naspram manitola, na 30°C, 40°C

[0040] 4,22 grama monohidrata limunske kiseline (Merck, pro analysi) rastvoreno je u 2000 ml milliQ vode (20 mM). Ovaj rastvor je podeljen na desi drikvota od 200 ml.1,8 g natrijum hlorida (Merck, pro analysi) dodato je u pet tikvica, u ostalih pet boca je dodato 10 g manitola (VWR, Ph Eur). Prema eksperimentalnom dizajnu, dodato je 0,2, 0,6 ili 1,0 g L-metionina (Sigma, neživotinjski izvor) i pH je prilagođen sa 1% NaOH (Merck, pro analysi) pri pH 5,2, 5,65 ili 6,1, pogledati Tabele 3a i 3b.2 mg karbetocina (Polypeptide Laboratories,) je prebačeno u dvanaest volumetrijskih boca od 20 ml i supstanca je rastvorena u svakom puferu (0,1 mg/ml karbetocina). Uzorci koji sadrže 3 mg/ml metionina su pripremljeni u duplikatu, pogledati Tabele 3a i 3b.

[0041] Dva mL svakog rastvora je prebačeno u LC-bočice i stavljeno u kabinet pri 30°C/75% RH. Preostali rastvori su prebačeni u boce sa plavim poklopcem od 25 ml i stavljeni u kabinet pri 40°C/75% R.H. Nivo nečistoća nakon 25 nedelja pri 30°C/75% R.H prikazan je u narednim Tabelama 3a i 3b.

Tabela 3a

1

Tabela 3b (NaCl)

1

[0042] Tabela 3a i Tabela 3b pokazuju da postoji vrlo mala degradacija u svim uzorcima. Ovaj nivo razgradnje odgovara onom koji se vidi nakon 6 nedelja na 40°C.

[0043] Rezultati pokazuju da će najbolji uzorci verovatno biti stabilni 5 godina na 30°C. Kao što se vidi u Tabeli 3a, redovi 5 i 8, rezultati za uzorak 2 metionina 3mg/mL, pH 5,65 pokazuju da će ovaj uzorak ostati u specifikaciji duže od 4 godine na 30°C i 75% relativne vlažnosti. Ovo se zasniva, kao što je dobro poznato u struci, na linearnoj ekstrapolaciji povećanja nečistoće tokom vremena kako bi se odredilo kada bi količina nečistoće bila dovoljno visoka da formulacija bude „van specifikacije“ (OOS). Takođe je utvrđeno da je optimalni pH na 30°C viši nego na 40°C (rezultati nisu prikazani). Razlike su male, ali pH

1

5,65 je malo bolji od pH 5,2 na 30°C (obrnuto na 40°C). Ovi rezultati pokazuju da postoji dobra margina za dobijanje stabilne formulacije za klimatske zone III/IV.

[0044] Podnosioci zahteva su otkrili da povećanje metionina dovodi do više degradacije, uglavnom povećanjem [BetaAsp5 ]karbetocina. Čini se da je koncentracija od oko 1 mg/ml dovoljna da pruži efikasnu stabilizaciju bez značajne degradacije.

Eksperiment 3a - stabilnost karbetocina pri različitim pH vrednostima i upotrebom različitih antioksidanasa

[0045] Ova studija je osmišljena da pruži širu sliku stabilnosti karbetocina pri različitim pH i upotrebom različitih antioksidanasa.

[0046] 1,2 grama sukcinske kiseline (Sigma-Aldrich, ≥ 99%) rastvoreno je u 1000 ml milliQ vode (10 mM). Ovaj rastvor je prilagođen, u alikvotima, sa razblaženim NaOH (Ph.Eur., Merck) pri pH 4,0, 4,5, 5,2, 5,65, 6,1, 6,5 i 7,0.55 mg karbetocina (Polypeptide Laboratories, Strazbur) je rastvoreno u 50 ml milliQ vode (1,1 mg/ml). 1,0 ml rastvora karbetocina (1,1 mg/ml) je pomešano sa 10 ml svakog pufera (0,1 mg/ml karbetocina). U svaki rastvor je dodato 0,55 g manitola (5%) i rastvoren je. Rastvori su prebačeni u staklene bočice od 15 ml sa poklopcem na navoj i stavljeni u kabinet pri 40°C/75% relativne vlažnosti.

[0047] Isti postupak je ponovljen; sa izuzetkom što je 1,0 g L-metionina (Sigma, neživotinjski izvor) dodato u 1000 ml milliQ vode, dajući duplikate uzoraka koji sadrže 1 mg/ml metionina na svim pH nivoima. Rastvori su prebačeni u staklene bočice od 15 ml sa poklopcem na navoj i stavljeni u kabinet pri 40°C/75% relativne vlažnosti.

[0048] Puferi pri pH 5,65, 6,1 i 6,5 su takođe podeljeni u alikvote u koje je dodat EDTA dinatrijum, dihidrat (Fluka). Ovi uzorci su čuvani na 40°C/75% 12 meseci pre analize.

[0049] Zbir nečistoća nakon 12 meseci na 40°C/75% R.H prikazan je na Slici 7. Slika takođe pokazuje „graničnu vrednost“, iznad koje je zbir nečistoća takav da je formulacija van specifikacije.

[0050] Sve formulacije sa pH 5,2 i pH 5,65 bile su unutar specifikacije nakon 12 meseci na 40°C/75% R.H.

1

[0051] Pozitivan efekat metionina bio je vidljiv i u ovoj studiji. Svi uzorci koji sadrže metionin pokazali su veoma niske količine oksidacionih proizvoda, bez obzira na sastav i pH. Ovo ukazuje na uključivanje metionina u robusnu formulaciju, gde (na primer) sadržaj metalnih jona u aktivnom sastojku karbetocinu, koji može da varira u zavisnosti od proizvodne serije i koji, ako je visok, može dovesti do povećane oksidacije, neće biti kontrolisan parametar.

[0052] Najstabilnija formulacija je bila formulacija sa pH 5,2 koja sadrži 1 mg/ml metionina (rezultati nisu prikazani). Parametar koji je bio najbliži granici specifikacije nakon 12 meseci na 40°C/75% R.H. bio je zbir nečistoća (Slika 7). Granica specifikacije za zbir nečistoća (za trenutnu PABAL<®>formulaciju) je ≤ 5% (tj.5,5%). Može se pretpostaviti da je degradacija linearna tokom vremena, i stoga se može izračunati da bi formulacija sa pH 5,2 koja sadrži 1 mg/ml metionina bila van specifikacije nakon približno 80 nedelja na 40°C/75% relativne vlažnosti, na osnovu specifikacije za trenutnu PABAL<®>formulaciju.

[0053] Uobičajeni vodič, podržan Arenijusovom jednačinom, je da se brzina većine hemijskih reakcija udvostručuje za svakih 10°C povećanja temperature. Ako ovaj odnos primenimo na formulaciju sa pH 5,2 koja sadrži 1 mg/ml metionina, procenjeni vek trajanja nove formulacije biće 160 nedelja na 30°C, odnosno nešto više od 3 godine, ponovo na osnovu specifikacije za trenutnu PABAL<®>formulaciju. Ovo je verovatno potcenjivanje, pošto je prijavljeni „zbir nečistoća“ u ovom eksperimentu uključivao svaki vrh na baznoj liniji, uključujući nečistoće povezane sa sintezom i vrhove ispod granice izveštavanja (<0,05%). Nečistoće povezane sa sintezom se uglavnom sastoje od [DCys<6>] i [desGln<4>]karbetocin, koji se ne povećavaju tokom skladištenja. Serija supstance je sadržala 0,9% nečistoća prema dobavljaču. Stoga je verovatno kako bi se vek trajanja od više od 3 godine na 30°C/75% R.H. dostigao za ovu formulaciju.

Primer 4 - Formulacija u sukcinatnom puferu

[0054] Naredna priprema i dekantiranje su obavljeni u farmaceutskoj prostoriji u uslovima bez zagađivača.47 grama manitola, 1,2 grama puferskog agensa sukcinske kiseline i 1,0 g L-metionina rastvoreno je u oko 900 ml milliQ vode (10 mM). pH rastvora je prilagođen sa 5M NaOH pri pH 5,4. Rastvor je prebačen u volumetrijsku bocu od 1000 ml i razblažen do zapremine sa WFI.

[0055] 50 mg karbetocina (Polypeptide Laboratories) je prebačeno u volumetrijsku bocu od

1

500 ml i rastvoreno je i razblaženo do zapremine sa manitol/sukcinska kiselina/metionin puferom pH 5,4. Rastvor je filtriran kroz filter od 0,22 µm i napunjen u staklene bočice sa gumenim čepovima (1,1 ml po bočici). Svaka bočica je uključivala vodeni sastav koji sadrži karbetocin (0,1 mg/mL), i pH sastava iznosio je 5,4 (tj. od 5,0 do 6,0). Vodeni sastav je takođe uključivao sukcinatni pufer (agens za puferisanje sukcinske kiseline), metionin (antioksidans) i manitol (izotonični agens). U daljem primeru (Primer 4A, nije prikazan) rastvor je napravljen isto kao u Primeru 4 i dodat je EDTA (0,1% tež./zap.). Utvrđeno je da osmolalnost rastvora u Primerima 4 i 4A iznosi 300 ± 20 mOsmol/kg.

[0056] Formulacija iz Primera 4 (i ona iz Primera 4A) je pogodna za injekciju pacijentkinji sa atonijom materice.

Primer 5 - Formulacija u sukcinatnom puferu

[0057] Naredna priprema i dekantiranje su obavljeni u farmaceutskoj prostoriji u uslovima bez zagađivača. 1,2 grama puferskog agensa sukcinske kiseline (Sigma-Aldrich, ≥ 99%) i 1,0 g L-metionina (Sigma, neživotinjski izvor) rastvoreno je u 1000 ml milliQ vode (10 mM) kako bi se dobio sukcinatni pufer pH vrednosti 5,4, pH se prilagođava na ovu vrednost sa NaOH rastvorom.

[0058] 0,55 g manitola (5%) je rastvoreno u 10 ml sukcinatnog pufera. Metionin 0,5% (tež./zap.) je dodat u rastvor i rastvoren je. Karbetocin (Polypeptide Laboratories) je rastvoren u rastvoru tako da je koncentracija karbetocina iznosila 0,1 mg/mL, i pH je prilagođen na 5,4 korišćenjem rastvora NaOH. Rastvor je podeljen u količine od 1 mL i zatvoren u ampule. Svaka ampula je uključivala vodenu sastav koja sadrži karbetocin (0,1 mg/mL), i pH sastava iznosio je 5,4 (tj. od 5,0 do 6,0). Vodeni sastav je takođe uključivao sukcinatni pufer (agens za puferisanje sukcinske kiseline), metionin (antioksidans) i manitol (izotonični agens). Razumeće se da se sastav može napraviti sa vodom za injekcije (WFI). Formulacija Primera 5 je pogodna za injekciju pacijentkinji sa atonijom materice.

Primer 6 - Formulacija sa citratni/fosfatnim puferom

[0059] Formulacija data u narednoj tabeli je napravljena postupcima sličnim onim navedenim u Primerima 4 i 5 iznad.

Tabela 4

2

[0060] Sastav je pogodan za nazalnu primenu.

[0061] Opciono, antioksidans (npr. metionin u koncentraciji od 1,0 mg/mL može biti uključen u formulaciju). Antioksidans može biti bilo koji antioksidans koji se obično koristi u struci.

[0062] Opciono, sastav može uključivati pojačivač. Pojačivač može biti bilo koji pojačivač koji se obično koristi u struci, na primer bilo koji pojačivač odobren za upotrebu kao farmaceutski ekscipijens. Pojačivač može biti, na primer, metil-β-ciklodekstrin, polisorbat 80, karboksimetilceluloza ili hidroksipropilmetilceluloza.

Uporedni primer 7 - stabilnost FE 202767 u citratnim i citrat-fosfatnim puferima (pH 5,0, 5,5 i 6,0) na 40ºC tokom perioda od šest meseci.

Materijali i postupci

[0063] FE 202767 (Ferring) je sintetisan postupkom navedenim u WO2009/122285. FE 202767 je rastvoren u koncentraciji od 0,2 mg/ml ili u 25 mM citratnom puferu (izotoničan do fiziološkog rastvora) ili 25 mM citrat-fosfatnom puferu (izotoničan sa fiziološkim rastvorom) pri promenljivom pH (pH 5,0, 5,5, 6,0), postupcima poznatim u struci. Rastvori su inkubirani na 40ºC tokom 176 dana, i uzorci su uzeti na dane 0, 15, 30, 84 i 176.

[0064] Uzorci su procenjeni pomoću HPLC kako bi se odredila netaknutog netaknutog peptida preostalog u različitim vremenskim tačkama, postupcima dobro poznatim u struci, upoređujući % površine vrha netaknutog peptida na dan uzorkovanja naspram % površine na dan 0.

[0065] HPLC postupak koristio je Agilent 1200 instrument. Mobilne faze gde HPLC Puferi A (A= 0,01% TFA u vodi) i B (B = 0,01% TFA u [70% zap./zap. acetonitrila i 30% zap./zap. vode]) sa gradijentom 15% B tokom 1 minuta, zatim 15 do 95% B tokom 30 minuta, zatim 95 do 100% B tokom 3 minuta, zatim 100% B tokom 5 minuta i 100% B do 15% B tokom 1 minuta pri brzini protoka od 0,3 mL/min. Phenomenex MAX-RP C18, 2,0 x 150 mm, 4 µm, 80 A kolona je bila na temperaturi 40°C sa UV detektovanjem na 210 nm. Zapremina injekcije iznosila je 10 µL.

[0066] Rezultati su prikazani u narednoj Tabeli 5 i na priloženoj Slici 6. U Tabeli 5 i na Slici 6, CP50 je citratni fosfatni pufer pri pH 5,0; CP55 je citratni fosfatni pufer pri pH 5,5; i CP60 je citratni fosfatni pufer pri pH 6,0; CT50 je citratni fosfatni pufer pri pH 5,0; CT55 je citratni fosfatni pufer pri pH 5,5; i CT60 je citratni fosfatni pufer pri pH 6,0.

Tabela 5. % Preostali netaknuti peptidi (normalizovan za dan 0)

Zaključak

[0067] FE 202767 je pokazao dobru stabilnost u citrat-fosfatnim puferima u testiranom pH rasponu (pH 5,0, 5,5 i 6,0), sa > 95% preostalog nakon 176 dana u svakom stanju. Takođe je bio veoma stabilan (>95% preostalih) u citratnom puferu pri pH 5,0 i 5,5; međutim, došlo je do značajne degradacije nakon 176 dana u pH 6,0 citratnom puferu.

[0068] Generalno, očekuje se da formulacija pogodna za nazalnu primenu ima pH između 5,0 i 6,0, uključujući minimalni broj reagensa (npr. bez antioksidansa). Takođe je poželjno da formulacija bude stabilna na sobnoj temperaturi. Primer 7 pokazuje da formulacije u skladu sa redovima iznad mogu biti pogodne za nazalnu primenu, jer imaju odgovarajući pH i stabilne su na sobnoj temperaturi bez potrebe za antioksidansima ili drugim aditivima koji mogu negativno uticati na nazalnu mukozu.

Uporedni primer 8 - stabilnost FE 202767 u različitim puferima na 40ºC tokom jednog i tri meseca.

Materijali i postupci

[0069] Postupak je bio sličan Primeru 7. FE 202767 (Ferring) je sintetisan postupkom navedenim u WO2009/122285. FE 202767 je rastvoren u koncentraciji od 0,2 mg/ml ili u 25 mM citratnom puferu (limunska kiselina/Na citrat), 10 mM acetatnom puferu (sirćetni acetat/Na acetat) ili 10 mM sukcinatnom puferu (1 mM sukcinska kiselina NaOH do relevantnog pH) pri promenljivom pH (pH 5,0, 5,2, 5,5, 5,65, 5,8, 6,0), postupcima poznatim u struci. Kao što je navedeno u tabeli u nastavku, različiti uzorci su takođe uključivali agens za izotoničnost (NaCl, 7 mg/mL ili manitol 47 mg/mL) kako bi se postigla izotoničnost. Neki od uzoraka su uključivali oksidans (metionin 1 mg/mL, EDTA 1 mg/mL ili kombinacija EDTA 1 mg/mL i metionin 1 mg/mL). Svaka formulacija (pogledati tabelu u nastavku) je napunjena u 10R staklenu bočicu zapečaćenu gumenim čepom i aluminijumskim poklopcem.

[0070] Rastvori su inkubirani na 40ºC pri 75% relativne vlažnosti, sa uzorcima uzetim na dan 30 (1 mesec) i dan 90 (3 meseca).

[0071] Uzorci su procenjeni pomoću HPLC kako bi se odredila količina netaknutog peptida preostalog u različitim vremenskim tačkama, postupcima dobro poznatim u struci, upoređujući % površine vrha netaknutog peptida na dan uzorkovanja naspram % površine na Dan 0.

[0072] HPLC postupak koristio Agilent 1100 instrument. Mobilne faze gde HPLC Puferi A (A= 0,1% TFA u vodi) i B (B = 0,1% TFA u acetonitrilu) sa gradijentom 20 do 30% B za 40 minuta, zatim 30 do 60% B tokom 15 minuta, zatim 60 do 20% B tokom 1 minuta, i zatim 20 % B tokom 10 minuta pri brzini protoka od 0,5 mL/min. Zorbax 300SB C18, 3,0 x 150 mm, 3,5 µm, 300 A kolona je bila na temperaturi 25 sa UV detektovanjem na 214 nm. Zapremina injekcije iznosila je 15 µL

2

[0073] Rezultati su prikazani u narednoj tabeli.

Tabela 6

Zaključak

[0074] FE 202767 je pokazao dobru stabilnost u citratnim i acetatnim puferima u pH rasponu testiranom nakon 30 dana u svakom stanju. Takođe je bio veoma stabilan u sukcinatnom puferu pri pH 5,0 do 5,65; međutim, došlo je do značajne degradacije nakon 30 dana u nekim uzorcima sukcinata pH 6,0 (uzorak 20, 22). Činilo se da je prisustvo ili odsustvo antioksidansa nevažno u vremenskom okviru od 30 dana.

[0075] FE 202767 je takođe pokazao dobru stabilnost u citratnim i acetatnim puferima u pH rasponu testiranom nakon 90 dana u svakom stanju, gde su najbolji rezultati prikazani na gornjem kraju pH raspona (npr. između pH 5,5 i 6, pogledati uzorke 1 do 6). Takođe je bio stabilan u sukcinatnom puferu pri pH 5,0 do 5,65 nakon 90 dana. Rezultati za 30 i 90 dana za uzorke 21 i 22 ukazuju na mešanje u analizi.

[0076] Opet, prisustvo ili odsustvo antioksidansa se činilo nevažnim u vremenskom okviru od 90 dana.

[0077] Rezultati pokazuju da je NaCl bolji agens za izotoničnost od manitola.

[0078] Kao što je navedeno iznad, očekuje se da formulacija pogodna za nazalnu primenu ima pH između 5,0 i 6,0, uključujući minimalni broj reagensa (npr. bez antioksidansa).

2

Takođe je poželjno da formulacija bude stabilna na sobnoj temperaturi. Primer 8 pokazuje da formulacije u skladu sa redovima iznad mogu biti pogodne za nazalnu primenu, jer imaju odgovarajući pH i stabilne su na sobnoj temperaturi bez zahteva za antioksidansima ili drugim aditivima koji mogu negativno uticati na nazalnu mukozu.

Uporedni primer 9 - Formulacija FE 202767 sa citratni/fosfatnim puferom

[0079] FE 202767 (Ferring) je sintetisan postupkom navedenim u WO2009/122285.

Formulacija data u narednoj tabeli je napravljena postupcima sličnim onim navedenim u Primerima 4 i 5 iznad.

Tabela 7

[0080] Sastav je pogodan za nazalnu primenu.

[0081] Opciono, antioksidans (npr. metionin u koncentraciji od 1,0 mg/mL može biti uključen u formulaciju).

2

Claims

Patentni zahtevi

1. Tečni sastav koji sadrži karbetocin ili njegovu farmaceutski aktivnu so; gde pH sastava iznosi od 5,26 do 5,65.

2. Sastav prema patentnom zahtevu 1, gde je sastav vodeni sastav.

3. Sastav prema bilo kom od prethodnih patentnih zahteva, koji sadrži puferski agens, na primer sukcinsku kiselinu.

4. Sastav prema bilo kom od prethodnih patentnih zahteva, koji sadrži pufer, na primer sukcinatni ili citratni/fosfatni pufer.

5. Sastav prema bilo kom patentnom zahtevu 3 ili 4, gde je prisutan samo jedan pufer ili puferski agens.

6. Sastav prema bilo kom od prethodnih patentnih zahteva, gde koncentracija karbetocina iznosi od 0,01 do 55 mg/mL, na primer od 0,01 do 10 mg/mL, na primer od 0,01 do 1,5 mg/mL.

7. Sastav prema bilo kom od prethodnih patentnih zahteva, koji dalje sadrži antioksidans.

8. Sastav prema patentnom zahtevu 7, gde antioksidans jeste metionin, EDTA ili kombinacija metionina i EDTA.

9. Sastav prema bilo kom od prethodnih patentnih zahteva, koji dalje sadrži agens za izotoničnost.

10. Sastav prema patentnom zahtevu 3, gde farmaceutsko jedinjenje jeste karbetocin, a puferski agens je sukcinska kiselina.

11. Sastav prema bilo kom patentnom zahtevu 1 do 10 za upotrebu u tretmanu ili prevenciji atonije materice, na primer nakon vaginalnog porođaja, porođaja carskim rezom, ili za upotrebu u tretmanu ili prevenciji atonije materice kod pacijentkinje koja je pod rizikom od razvoja PPK; i/ili za upotrebu u tretmanu ili prevenciji prekomernog krvarenja nakon

2

vaginalnog porođaja.

12. Komplet delova koji sadrži: tečan (npr. vodeni) farmaceutski sastav koji sadrži karbetocin ili njegovu farmaceutski aktivnu so, gde pH sastava iznosi od 5,26 do 5,65; i kontejner za sastav, opciono sa odvojenim sredstvima za injekcije; opciono dalje sadrži agens za izotoničnost, na primer NaCl.

13. Komplet delova koji sadrži: tečan farmaceutski sastav koji sadrži karbetocin ili njegovu so, i opciono antioksidans, gde pH sastava iznosi od 5,26 do 5,65; i kontejner za sastav.

14. Sastav prema bilo kom patentnom zahtevu od 1 do 10 za upotrebu u proizvodnji leka za tretman ili prevenciju atonije materice, na primer nakon vaginalnog porođaja, porođaja carskim rezom, ili za upotrebu u proizvodnji leka za tretman ili prevenciju atonije materice kod pacijentkinja koje su pod rizikom od razvoja PPK; i/ili za upotrebu u proizvodnji leka za tretman ili prevenciju prekomernog krvarenja nakon vaginalnog porođaja.