RS63014B1 - 1,3-tiazol-2-il supstituisani benzamidi - Google Patents

1,3-tiazol-2-il supstituisani benzamidi

Info

Publication number
RS63014B1
RS63014B1 RS20220250A RSP20220250A RS63014B1 RS 63014 B1 RS63014 B1 RS 63014B1 RS 20220250 A RS20220250 A RS 20220250A RS P20220250 A RSP20220250 A RS P20220250A RS 63014 B1 RS63014 B1 RS 63014B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
mmol
pain
methyl
thiazol
stirred
Prior art date
Application number
RS20220250A
Other languages
English (en)
Inventor
Adam Davenport
Nico Bräuer
Oliver Martin Fischer
Andrea Rotgeri
Antje Rottmann
Ioana Neagoe
Jens Nagel
Anne-Marie Godinho-Coelho
Jürgen Klar
Original Assignee
Bayer Ag
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=52015966&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RS63014(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Bayer Ag filed Critical Bayer Ag
Publication of RS63014B1 publication Critical patent/RS63014B1/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/433—Thidiazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4439—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. omeprazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/4965—Non-condensed pyrazines
    • A61K31/497—Non-condensed pyrazines containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/50—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines
    • A61K31/501—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/10—Drugs for disorders of the urinary system of the bladder
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A61P31/18—Antivirals for RNA viruses for HIV
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/08—Bridged systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D498/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D498/08—Bridged systems
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
    • Y02P20/00—Technologies relating to chemical industry
    • Y02P20/50—Improvements relating to the production of bulk chemicals
    • Y02P20/582—Recycling of unreacted starting or intermediate materials

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • AIDS & HIV (AREA)
  • Psychology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Thiazole And Isothizaole Compounds (AREA)

Description

Opis
[0001] Predmetni pronalazak se odnosi na jedinjenja 1,3-tiazol-2-il supstituisanog benzamida opšte formule (I) kako je ovde opisano i definisano, na farmaceutske kompozicije i kombinacije koje sadrže navedena jedinjenja i na upotrebu navedenih jedinjenja za proizvodnju farmaceutske kompozicije za lečenje ili profilaksu bolesti, posebno neurogenog poremećaja, kao jedinog agensa ili u kombinaciji sa drugim aktivnim sastojcima.
POZADINA PRONALASKA
[0002] Predmetni pronalazak se odnosi na hemijska jedinjenja koja inhibiraju P2X3 receptor. P2X purinoceptor 3 je protein koji je kod ljudi kodiran sa genom P2RX3 (Garda-Guzman M, Stuhmer W, Soto F (Sep 1997)." Molekularna karakterizacija i farmakološke karakteristike humanog P2X3 purinoceptora". Brain Res Mol Brain Res 47 (1-2): 59-66). Proizvod ovog gena pripada porodici purinoceptora za ATP. Ovaj receptor funkcioniše kao jonski kanal vezan za ligand i pretvara aktivaciju nociceptora izazvanu ATP-om.
[0003] P2X purinoreceptori su porodica jonskih kanala vezani za ligand koji se aktiviraju pomoću ATP. Do danas je klonirano sedam članova ove porodice, uključujući P2X1-7 [Burnstock 2013, front Cell Neurosci 7:227]. Ovi kanali mogu postojati kao homomeri i heteromeri [Saul 2013, front Cell Neurosci 7:250]. Purini, poput ATP, prepoznati su kao važni neurotransmiteri i delujući preko njihovih odgovarajućih receptora umešani su u različite fiziološke i patofiziološke uloge [Burnstock 1993, Drug Dev Res 28:196-206; Burnstock 2011, Prog Neurobiol 95:229-274; Jiang 2012, Cell Health Cytoskeleton 4:83-101].
[0004] Među članovima porodice P2X, posebno je receptor P2X3 prepoznat kao važan posrednik nocicepcije [Burnstock 2013, Eur J Pharmacol 716:24-40; North 2003, J Phyiol 554:301-308; Chizh 2000, Pharmacol Rev 53:553-568]. Uglavnom se eksprimira u dorzalnim korenskim ganglijima u podgrupi nociceptivnih senzornih neurona. Upale pojačana je ekspresija P2X3 receptora, a opisana je i aktivacija P2X3 receptora kako bi senzibiliziralo periferne nerve [Fabretti 2013, front Cell Neurosci 7:236].
[0005] Istaknuta uloga P2X3 receptora u nocicepciji je opisana u različitim životinjskim modelima, uključujući modele miša i pacova za akutni, hronični i inflamatorni bol. Miševi koji nokautiraju receptor P2X3 pokazuju smanjeni odgovor na bol [Cockaine 2000, Nature 407:1011-1015; Souslova 2000, Nature 407:1015-1017]. Pokazano je da antagonisti receptora P2X3 deluju anti-nociceptivno u različitim modelima bola i inflamatornog bola [Ford 2012, Purin Signal 8 (Suppl 1):S3-S26]. Pokazano je i da receptor P2X3 integriše različite nociceptivne stimuluse. Pokazalo se da hiperalgezija indukovana sa PGE2, ET-1 i dopaminom sva posreduje oslobađanjem ATP i aktivacijom P2X3 receptora [Prado 2013, Neuropharm 67:252-258; Joseph 2013, Neurosci 232C: 83-89].
[0006] Pored svoje istaknute uloge u nocicepciji i kod bolesti povezanih sa bolom koje obuhvataju i hronični i akutni bol, pokazano je da je receptor P2X3 uključen u genitourinarna, gastrointestinalna i respiratorna stanja i poremećaje, uključujući prekomerno aktivnu bešiku i hronični kašalj [Ford 2013, front Cell Neurosci 7:267; Burnstock 2014, Purin Signal 10(1):3-50]. U ova dva primera dolazi do oslobađanja ATP iz epitelnih ćelija, što zauzvrat aktivira P2X3 receptor i indukuje kontrakciju mišića bešike i pluća, što dovodi do prevremenog pražnjenja ili kašlja.
[0007] P2X3 podjedinice ne formiraju samo homotrimere već i heterotrimere sa P2X2 podjedinicama. P2X3 podjedinice i P2X2 podjedinice takođe se izražavaju na nervnim vlaknima koja nadražuju jezik, u njemu pupoljke za ukus [Kinnamon 2013, front Cell Neurosci 7:264]. U fiziološkom okruženju, receptori koji sadrže P2X3 i/ ili P2X2 podjedinice učestvuju u prenošenju ukusa sa jezika (gorkog, slatkog, slanog, umami i kiselog Nedavni podaci pokazuju da je blokiranje samo P2X3 homomernog receptora važno za postizanje antinociceptivne efikasnosti, neselektivna blokada oba i P2X3 homomernog i P2X2/3 heteromernog receptora dovodi do promena u percepciji ukusa što može ograničiti terapijsku upotrebu neselektivnih antagonista receptora P2X3 i P2X2/3 [Ford 2014, Purines 2014, knjiga sažetaka p15]. Stoga su jedinjenja koja razlikuju receptore P2X3 i P2X2/3 veoma poželjna.
[0008] Jedinjenja koja blokiraju i isključivo P2X3 podjedinicu koja sadrži jonski kanal (P2X3 homomer) kao i jonski kanal sastavljen od P2X2 i P2X3 podjedinica (P2X2/3 heterotrimer) nazivaju se neselektivni antagonisti P2X3 i P2X2/3 [Ford, Pain Manag 2012]. Klinička ispitivanja pokazala su da AF-219, antagonist P2X3, dovodi do poremećaja ukusa kod tretiranih subjekata utičući na osećaj ukusa jezikom [npr. Abdulqawi i dr, Lancet 2015; Strand i dr, 2015 ACR/ARMP Annual Meeting, rezime 2240]. Ovaj neželjeni efekat pripisan je blokadi P2X2/3 kanala, tj. heterotrimeru [A. Ford, London 2015 Pain Therapeutics Conference, kongresni izveštaj]. I P2X2 i P2X3 podjedinice su eksprimirane na senzornim nervnim vlaknima koja nadražuju jezik. Nokautirane životinje sa nedostatkom P2X2 i P2X3 podjedinica pokazuju smanjeni osećaj ukusa, pa čak i gubitak ukusa [Finger i dr, Science 2005], dok pojedinačna nokaut P2X3 podjedinica pokazuje blagu ili nikakvu promenu fenotipa u odnosu na ukus. Štaviše, opisane su 2 različite populacije neurona u kolenom ganglionu koji eksprimiraju ili P2X2 i P2X3 podjedinice ili samo P2X3 podjedinicu. U in vivo okruženju procenom preferencije ukusa prema veštačkom zaslađivaču pomoću likometra, primećeni su efekti na ukus samo pri vrlo visokim nivoima slobodne plazme (> 100 µM), što ukazuje da radije P2X2 i P2X3 podjedinice koje izražavaju populaciju igraju glavnu ulogu u ukusu od populacije koja izražava podjedinicu P2X3 [Vandenbeuch i dr, J Physiol. 2015]. Stoga, sa obzirom da modifikovana percepcija ukusa ima duboke efekte na kvalitet života pacijenata, smatra se da su P2X3-homomerni antagonisti selektivnih receptora superiorniji u odnosu na neselektivne antagoniste receptora i smatraju se rešenjem problema nedovoljne saglasnosti pacijenta tokom hroničnog lečenja, na šta ukazuju povećane stope osipanja tokom Phil-ovih ispitivanja [Strand i dr, 2015 ACR/ARMP Annual Meeting, rezime 2240 i A. Ford, London 2015 Pain Therapeutics Conference, kongresni izveštaj].
[0009] Jedinjenja derivata benzamida su otkrivena u stanju tehnike za lečenje ili profilaksu različitih bolesti:
WO2009/058298 i WO2009/058299 (Merck) otkrivaju nove antagoniste receptora tipa P2X3 koji imaju strukturu jezgra benzamida supstituisanu fenilnim ili piridilnim delom, ali ne i tiazolom, čineći navedena jedinjenja drugačijim od jedinjenja iz predmetnog pronalaska. WO2008/000645 (Roche) govori o jedinjenjima antagonistima receptora P2X3 i/ ili P2X2/3 korisnim za lečenje bolesti povezanih sa P2X purinergičkim receptorima. Prema opštoj formuli u patentnom zahtevu 1, benzamidna jedinjenja su supstituisana sa tetrazolom. Dalje, ona mogu imati supstituente poput fenila, piridinila, pirimidinila, piridazinila ili tiofenila. Međutim, nije otkriven supstituent tiazolil.
WO2009/077365, WO2009/077366, WO2009/077367 i WO2009/077371 (Roche) otkrivaju seriju derivata benzamida, bilo supstituisanih imidazolom, triazolom, pirazolom ili tetrazolom, za koje se navodi da su korisni za lečenje bolesti povezanih sa P2X purinergičkim receptorima, a tačnije na antagoniste receptora P2X3 i/ ili receptora P2X2/3. Prema opštoj formuli iz zahteva 1, benzamidna jedinjenja mogu imati dodatne supstituente R<6>, R<7>i R<8>koji su C1-C6-alkil, C1-C6-alkoksi, C1-C6-haloalkil, atomi halogena ili cijano. Međutim, etri supstituisani sa funkcionalnim grupama poput -C2-C6-alkil-OR<4>, -(CH2)q-(C3-C2-cikloalkil), -(CH2)q-(6- do 12-člani heterobicikloalkil), -(CH2)q-(4- do 7-člani heterocikloalkil), -(CH2)q-(5- do 10-člani heteroaril) ili -C2-C6-alkinil nisu otkriveni.
US20100152203 (Roche) otkriva supstituisane benzamide gde R<1>je tiadiazolil i R<2>je fenil, piridinil, pirimidinil, piridazinil, ili tiofenil kao jedinjenja korisna za lečenje bolesti povezanih sa P2X purinergičkih receptorima, a posebno se odnosi na antagoniste P2X3 receptora i/ ili P2X2/3 receptora koji su korisni za lečenje genitourinarnih bolesti, bola, inflamatornih, gastrointestinalnih i respiratornih bolesti, stanja i poremećaja. Tačnije, benzamidna jedinjenja mogu biti dodatno supstituisana sa C1-C6-alkil, C1-C6-alkoksi, C1-C6-haloalkil, atomima halogena ili cijano. Međutim, etri supstituisani sa funkcionalnim grupama kao što su -C2-C6-alkil-OR<4>, -(CH2)q-(C3-C7-cikloalkil), -(CH2)q-(6- do 12-člani heterobicikloalkil), -(CH2)q-(4-do 7-člani heterocikloalkil), -(CH2)q-(5- do 10-člani heteroaril) ili -C2-C6-alkinil nisu otkriveni. US20100324056 (Roche) otkriva supstituisane benzamide gde R<1>je fenil, tienil, pirimidinil, piridazinil, ili piridinil kao jedinjenja korisna za lečenje bolesti povezanih sa P2X purinergičkih receptorima, a posebno se odnosi na antagoniste P2X3 receptora i/ ili P2X2/3 receptora koji su korisni za lečenje genitourinarnih bolesti, bola, inflamatornih, gastrointestinalnih i respiratornih bolesti, stanja i poremećaja. Etri supstituisani sa funkcionalnim grupama kao što su - C2-C6-alkil-OR<4>, -(CH2)q-(C3-C7-cikloalkil), -(CH2)q-(6- do 12-člani heterobicikloalkil), -(CH2)q-(4- do 7-člani heterocikloalkil), -(CH2)q-(5- do 10-člani heteroaril) ili -C2-C6-alkinil nisu otkriveni.
US20100324069 (Genentech) otkriva oksazolonom i pirolidinonom supstituisane benzamide i njihovu upotrebu za profilaksu i/ili lečenje bolesti povezanih sa antagonistima P2X3 receptora i/ ili P2X2/3 receptora. Prema opštoj formuli u patentnom zahtevu 1 benzamidna jedinjenja su dodatno supstituisana piridinom ili fenilom. Grupe koje nose etar na strukturi jezgra benzamida nisu otkrivene.
WO2006119504 (Renovis) odnosi se na vezana heterociklična jedinjenja klase tetrahidronaftiridina i tetrahidropirido[4,3-d]pirimidina i na farmaceutske kompozicije koje sadrže takva jedinjenja.
WO2008123963 (Renovis) odnosi se na kondenzovana heterociklična jedinjenja klase tetrahidropirido[4,3-d]pirimidina i farmaceutske kompozicije koje sadrže takva jedinjenja.
Takođe su obezbeđene metode za sprečavanje i/ili lečenje stanja kod sisara, kao što su (ali nisu ograničene na) artritis, Parkinsonovu bolest, Alchajmerovu bolest, astmu, infarkt miokarda, sindrome bola (akutni i hronični ili neuropatski), neurodegenerativne poremećaje, šizofreniju, kognitivne poremećaje, anksioznost, depresiju, zapaljensku bolest creva i autoimune poremećaje, i promovisanje neuroprotekcije, korišćenjem kondenzovanih heterocikličnih jedinjenja i njihovih farmaceutskih kompozicija.
WO2008130481 (Renovis) otkriva 2-cijanofenil kondenzovana heterociklična jedinjenja klase tetrahidropirido [4,3-d]pirimidina i farmaceutske kompozicije koje sadrže takva jedinjenja. WO2010033168 (Renovis) otkriva seriju benzamida supstituisanih sa fenilom ili piridilom za koje se navodi da su korisni za lečenje bolesti povezanih sa P2X purinergičkim receptorima, i tačnije sa antagonistima P2X3 receptora i/ili P2X2/3 receptora. Međutim, benzamidi sa dodatnim etarskim grupama nisu otkriveni.
WO2009110985 (Renovis) odnosi se na fenil- i piridil-supstituisana benzamidna jedinjenja i farmaceutske smeše koje sadrže takva jedinjenja, ali ne i benzamide supstituisane tiazolom, čineći navedena jedinjenja različitim od jedinjenja iz predmetnog pronalaska.
WO2008/055840 (Roche) odnosi se na tiazolom- i oksazolom-supstituisane benzamide supstituisane sa R<2>koji je fenil, piridinil, pirimidinil, piridazinil ili tiofenil koji se može koristiti za lečenje bolesti povezanih sa P2X purinergičkim receptorima, i tačnije sa antagonistima P2X3 P2X3 i/ ili P2X2/3 receptora. Međutim, tiazolom supstituisani benzamidi imaju zapravo C1-C6-alkil, C1-C6-alkoksi, C1-C6-haloalkil, halo-C1-C6-alkoksi grupe, atome halogena ili cijano, ali etri supstituisani sa funkcionalnim grupama poput -C2-C6-alkil-OR<4>, -(CH2)q-(C3-C7-cikloalkil), -(CH2)q-(6- do 12-člani heterobicikloalkil), -(CH2)q-(4- do 7-člani heterocikloalkil), -(CH2)q-(5- do 10-člani heteroaril) ili -C2-C6-alkinil nisu otkriveni.
[0010] Dakle, stanje tehnike opisano u prethodnom tekstu ne opisuje specifična tiazol supstituisana jedinjenja benzamida opšte formule (I) prema predstavljenom pronalasku kao što su ovde definisana ili enantiomer, dijastereomer, racemat, hidrat, solvat, ili njihovu so, ili smešu istih, kako je ovde opisano i definisano i kako se u daljem tekstu naziva "jedinjenja iz ovog pronalaska", ili njihovu farmakološku aktivnost.
[0011] Sada je utvrđeno i ovo predstavlja osnovu ovog pronalaska, da navedena jedinjenja iz ovog pronalaska imaju iznenađujuća i korisna svojstva.
[0012] Konkretno, za pomenuta jedinjenja iz predmetnog pronalaska je iznenađujuće nađeno da efikasno inhibiraju P2X3 receptor i stoga se mogu koristiti za lečenje ili profilaksu sledećih bolesti:
• genitourinarnih, gastrointestinalnih, respiratornih i povezanih sa bolom bolesti, stanja i poremećaja;
• ginekoloških bolesti, uključujući dismenoreju (primarnu i sekundarnu dismenoreju), dispareuniju, endometriozu i adenomiozu; bola povezanog sa endometriozom; simptoma povezanih sa endometriozom, pri čemu su navedeni simptomi naročito dismenoreja, dispareunija, disurija ili dishezija; proliferacija povezana sa endometriozom; karlična preosetljivost;
• stanja bolesti urinarnog trakta povezanih sa opstrukcijom izlaza iz bešike; stanja urinarne inkontinencije, kao što su smanjeni kapacitet bešike, povećana učestalost mikcije, urgentna inkontinencija, stresna inkontinencija ili hiperreaktivnost bešike; benigna hipertrofija prostate; hiperplazija prostate; prostatitis; hiperrefleksija detruzora; prekomerno aktivna bešika i simptomi povezani sa prekomerno aktivnom bešikom, pri čemu su pomenuti simptomi naročito povećana učestalost mokrenja, nokturija, urinarna hitnost ili urgentna inkontinencija; karlična preosetljivost; uretritis; prostatitis; prostatodinija; cistitis, posebno intersticijski cistitis; idiopatska preosetljivost bešike [Ford 2014, purini 2014, knjiga sažetaka p15];
• sindromi bola (uključujući akutni, hronični, inflamatorni i neuropatski bol), po mogućnosti inflamatorni bol, bol u križima, hirurški bol, visceralni bol, zubni bol, parodontitis, predmenstrualni bol, bol povezan sa endometriozom, bol povezan sa fibrotičnim bolestima, centralni bol, bolove zbog sindroma pečenja usta, bolovi zbog opekotina, bolovi zbog migrene, klaster glavobolje, bolovi zbog povrede nerva, bolovi zbog neuritisa, neuralgije, bolovi zbog trovanja, bolovi zbog ishemijske povrede, bolovi zbog intersticijalnog cistitisa, bol zbog karcinoma, bol zbog virusnih, parazitskih ili bakterijskih infekcija, bol zbog traumatske povrede nerva, bol zbog post traumatskih povreda (uključujući prelome i sportske povrede), bol zbog trigeminalne neuralgije, bol povezan sa neuropatijom malih vlakana, bol povezan sa dijabetičnom neuropatijom, postherpetičnom neuralgijom, hroničnim bolovima u donjem delu leđa, bolovima u vratu, fantomskim bolovima udova, sindromom karličnog bola, hroničnim bolovima u karlici, neuromnim bolovima, sindromom složenog regionalnog bola, bol u vezi sa gastrointestinalnom distenzijom, hroničnim artritičnim bolom i srodnim neuralgijama i bol povezan sa rakom, bol rezistentan na morfijum, bol povezan sa hemoterapijom, neuropatija izazvana HIV-om i lečenjem HIV-a; i bol povezan sa bolestima ili poremećajima odabranim iz grupe koju čine hiperalgezija, alodinija, funkcionalni poremećaji creva (kao što je sindrom iritabilnog creva) i artritis (kao što je osteoartritis, reumatoidni artritis i ankilozirajući spondilitis);
• Epilepsija, parcijalni i generalizovani napadi;
• respiratorni poremećaji uključujući hronični opstruktivni plućni poremećaj (HOPB) [Ford 2013, European Respiratory Society Annual Congress 2013], astma [Ford 2014, 8th Pain&Migraine Therapeutics Summit], bronhospazam, plućna fibroza, akutni kašalj, hronični kašalj uključujući hronični idiopatski i hronični refraktorni kašalj; • gastrointestinalni poremećaji, uključujući sindrom iritabilnog creva (IBS), inflamatornu bolest creva (IBD), bilijarne kolike i druge bilijarne poremećaje, bubrežnu koliku, IBS sa dominantnom dijarejom, gastroezofagealni refluks, gastrointestinalnu distenziju, Kronovu bolest i slično;
• neurodegenerativni poremećaji poput Alchajmerove bolesti, multiple skleroze, Parkinsonove bolesti, ishemije mozga i traumatske povrede mozga;
• infarkt miokarda, poremećaji lipida;
• bolesti ili poremećaji povezani sa bolom odabrani iz grupe koju čine hiperalgezija, alodinija, funkcionalni poremećaji creva (kao što je sindrom iritabilnog creva), giht, artritis (poput osteoartritisa [Ford 2014, 8th Pain&Migraine Therapeutics Summit], reumatoidni artritis i ankilozirajući spondilitis), sindrom pečenja usta, opekotine, migrena ili klaster glavobolja, povreda nerva, traumatična povreda nerva, post traumatske povrede (uključujući prelome i sportske povrede), neuritis, neuralgije, trovanje, ishemijska povreda, intersticijski cistitis, rak, trigeminalna neuralgija, neuropatija malih vlakana, dijabetička neuropatija, hronični artritis i srodne neuralgije, neuropatija izazvana HIV-om i lečenjem HIV-a, pruritus; poremećeno zarastanje rana i bolesti skeleta poput degeneracije zglobova
• pruritus.
[0013] Jedinjenja iz ovog pronalaska pokazuju visoku inhibiciju P2X3 receptora i štaviše selektivnost nad P2X2/3 receptorom. Selektivna inhibicija P2X3 receptora preko P2X2/3 receptora znači najmanje 3 puta veću selektivnost u odnosu na P2X2/3 receptor. Poželjna jedinjenja iz ovog pronalaska pokazuju najmanje 10 puta veću selektivnost u odnosu na P2X2/3 receptor. Pored toga, poželjnija jedinjenja iz ovog pronalaska pokazuju još korisna svojstva koja su korisna za njihovu upotrebu kao lekovi, kao što su poželjni farmakokinetički profili koji pružaju pogodnu metaboličku stabilnost i oralnu bioraspoloživost. Pored toga, još poželjnija jedinjenja ovog pronalaska pokazuju dalja korisna svojstva koja su korisna za njihovu upotrebu kao lekovi, kao što su poželjni farmakokinetički profili koji pružaju odgovarajuću metaboličku stabilnost i oralnu bioraspoloživost, i najmanje jedno dodatno povoljno svojstvo odabrano od povoljnog kardiovaskularnog profila i odgovarajućeg profila inhibicije CYP.
REZIME PRONALASKA
[0014] Predmetni pronalazak pokriva jedinjenja opšte formule (I):
u kojoj
R<1>predstavlja C1-C4-alkil;
R<2>predstavlja - (CH2)q-morfolinil supstituisan sa R<c>,
R<3>predstavlja C1-C4-alkil;
R<c>predstavlja metil
A predstavlja CF3-pirimidinil;
q predstavlja ceo broj 1;
ili enantiomer, dijastereomer, racemat, hidrat, solvat, ili njihova so, ili smešu istih.
[0015] Ovaj pronalazak se dalje odnosi na jedinjenja opšte formule (Ia),
[0016] Ovaj pronalazak se dalje odnosi na farmaceutske kompozicije i kombinacije koje sadrže pomenuta jedinjenja, na korišćenje navedenih jedinjenja za proizvodnju leka za lečenje ili prevenciju bolesti ili poremećaja i za lečenje bolova koji su povezani sa takvim bolestima.
DETALJAN OPIS PRONALASKA
[0017] Termini pomenuti u ovom tekstu imaju poželjno sledeća značenja:
Termin "atom halogena", "halo-" ili "Hal-" treba razumeti kao atom fluora, hlora, broma ili joda, poželjno atom fluora ili hlora.
Pod terminom "alkil" podrazumeva se linearna ili razgranata, zasićena, monovalentna ugljovodonična grupa sa brojem atoma ugljenika kako je određeno i koja ima po pravilu, 1 do 4 za sve ostale alkilne supstituente, po mogućnosti 1 do 3, atoma ugljenika, kao primer i po želji metil, etil, propil, butil, izo-propil, izo-butil, sec-butil, tert-butil, grupa, ili njihov izomer. Naročito, navedena grupa ima 1, 2, 3 ili 4 atoma ugljenika ("C1-C4-alkil"), npr. grupa metil, etil, n-propil, n-butil, izo-propil, izo-butil, sec-butil, tert-butil, naročito 1, 2 ili 3 atoma ugljenika ("C1-C3-alkil"), npr. grupa metil, etil, n-propil- ili izo-propil, i još posebno 1 ili 2 atoma ugljenika ("C1-C2-alkil"), npr. grupa metil ili etil.
Termin "C1-C4-alkil, opciono supstituisan sa 1-5 atoma halogena", ili po analogiji "C1-C3-alkil, opciono supstituisan sa 1-5 atoma halogena" ili "C1-C2-alkil koji su opciono supstituisani sa 1-5 atoma halogena", treba razumeti kao linearnu ili razgranatu, zasićenu, monovalentnu ugljovodoničnu grupu u kojoj je izraz "C1-C4-alkil", "C1-C3-alkil" ili "C1-C2-alkil" definisan gore, i u kojoj je jedan ili više atoma vodonika zamenjen atomom halogena, koji su isti ili različiti, tj. jedan atom halogena je nezavisan od drugog. Konkretno, halogen je fluor ili hlor.
Termin "C1-C4-alkil, opciono supstituisan sa 1-5 atoma fluora", ili po analogiji "C1-C3-alkil, opciono supstituisan sa 1-5 atoma fluora" ili "C1-C2-alkil, opciono supstituisan sa 1-5 atoma fluora", treba razumeti kao linearnu ili razgranatu, zasićenu, monovalentnu ugljovodoničnu grupu u kojoj je izraz "C1-C4-alkil", "C1-C3-alkil" ili "C1-C2-alkil" definisan gore, i u kojoj je jedan ili više atoma vodonika zamenjen sa atomom fluora.
[0018] Pomenuti "C1-C4-alkil, opciono supstituisan sa 1-5 atoma fluora" ili grupa "C1-C4-alkil group, opciono supstituisana sa 1-5 atoma halogena" je, na primer,
-CH2CH2CH2CF3.
1
[0019] Slično, gore pomenuto se odnosi na "C1-C3-alkil, opciono supstituisan sa 1-5 atoma halogena", ili "C1-C2-alkil, opciono supstituisan sa 1-5 atoma halogena", ili "C1-C3-alkil, opciono supstituisan sa 1-5 atoma fluora", ili "C1-C2-alkil, opciono supstituisan sa 1-5 atoma fluora". Tako pomenuti "C1-C3-alkil opciono supstituisan sa 1-5 atoma halogena" ili "C1-C3-alkil opciono supstituisan sa 1-5 atoma fluora" je, na primer,
-CH2CH2CF3.
[0020] Pomenuti "C1-C2-alkil opciono supstituisan sa 1-5 atoma halogena" ili "C1-C2-alkil opciono supstituisan sa 1-5 atoma fluora" je, na primer,
-CF3, -CHF2, -CH2F, -CF2CF3, -CH2CHF2, ili -CH2CF3.
[0021] Termin "alkoksi" treba odnosi se na linearnu ili razgranatu, zasićenu, jednovalentnu, ugljovodoničnu grupu formule -O-alkil, u kojoj je izraz "alkil" definisan kao linearna ili razgranata, zasićena, monovalentna ugljovodonična grupa sa brojem atoma ugljenika kako je specificirano i koja po pravilu ima 1 do 3, poželjno 1 do 2 alkilna supstituenta, naročito poželjno 1 atom ugljenika. Konkretno, pomenuta grupa ima 1, 2 ili 3 atoma ugljenika ("C1-C3-alkoksi"), npr. metoksi, etoksi, n-propoksi ili izo-propoksi grupa, i još preciznije 1 ili 2 atoma ugljenika ("C1-C2-alkoksi"), npr. metoksi ili etoksi grupa.
[0022] Termin "C1-C3-alkoksi opciono supstituisan sa 1-5 atoma halogena" treba razumeti kao linearnu ili razgranatu, zasićenu, monovalentnu ugljovodoničnu grupu u kojoj je termin "C1-C3-alkoksi" definisan gore, i u kojoj je jedan ili više atoma vodonika zamenjen atomom halogena, koji su isti ili različiti, tj. jedan atom halogena je nezavisan od drugog. Konkretno, halogen je fluor ili hlor.
[0023] Pomenuta "C1-C3-alkoksi" grupa je opciono supstituisan sa 1 do 5 atoma fluora, na primer, -OCF3, -OCHF2, -OCH2F, -OCF2CF3, -OCH2CHF2, -OCH2CF3, -OCH2CH2CF3, ili -OCH2CF2CF3. Konkretno, pomenuta "C1-C3-alkoksi" grupa opciono supstituisana sa fluorom je -OCF3.
[0024] Termin "C2-C6-alkinil" treba razumeti kao linearnu ili razgranatu, monovalentnu ugljovodoničnu grupu koja sadrži jednu ili više trostrukih veza, poželjno jednu trostruku vezu, i koja sadrži 2, 3, 4, 5 ili 6 atoma ugljenika, naročito 3 ili 4 atoma ugljenika ("C3-C4-alkinil"). Pomenuta grupa C2-C6-alkinil je, na primer, etinil, prop-1-inil, prop-2-inil, but-1-inil, but-2-inil, but-3-inil, pent-1-inil, pent-2-inil, pent-3-inil, pent-4-inil, heks-1-inil, heks-2-inil, heks-3-inil, heks-4-inil, heks-5-inil, 1-metilprop-2-inil, 2-metilbut-3-inil, 1-metilbut-3-inil, 1-metilbut-2-inil, 3-metilbut-1-inil, 1-etilprop-2-inil, 3-metilpent-4-inil, 2-metilpent-4-inil, 1-metilpent-4-inil, 2-metilpent-3-inil, 1-metilpent-3-inil, 4-metilpent2-inil, 1-metil-pent-2-inil, 4-metilpent-1-inil, 3-metilpent-1-inil, 2-etilbut-3-inil, 1-etil-but-3-inil, 1-etilbut-2-inil, 1-propilprop-2-inil, 1-isopropilprop-2-inil, 2,2-di-metilbut-3-inil, 1,1-dimetilbut-3-inil, 1,1-dimetilbut-2-inil, ili 3,3-dimetil-but-1-inil grupa. Posebno, navedena alkinil grupa je prop-1-inil ili prop-2-inil.
[0025] Termin "cikloalkil" treba razumeti kao zasićeni, monovalentni, monociklični ugljovodonični prsten sa određenim brojem atoma ugljenika i koji po pravilu ima 3 do 7 ili 3 do 6 atoma ugljenika u prstenu, poželjno 3 do 4 atoma ugljenika u prstenu.
[0026] "C3-C7-cikloalkil" treba razumeti kao zasićeni, monovalentni, monociklični ugljovodonični prsten koji sadrži 3, 4, 5, 6 ili 7 atoma ugljenika. Pomenuta grupa C3-C7-cikloalkil je na primer ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil ili cikloheptilni prsten. Svaki vodonik cikloalkilnog ugljenika može biti zamenjen supstituentom kako je dalje specificirano. Naročito, pomenuti prsten sadrži 3, 4, 5 ili 6 atoma ugljenika ("C3-C6-cikloalkil"), poželjno 3 ili 4 atoma ugljenika ("C3-C4-cikloalkil") .
[0027] Pod pojmom "heterocikloalkil" treba razumeti zasićeni, monovalentni, monociklični ugljovodonični prsten sa određenim brojem atoma u prstenu u kome je jedan, dva ili tri atoma u prstenu ugljovodoničkog prstena zamenjen sa jednim, dva ili tri heteroatoma ili grupe koje sadrže heteroatom, nezavisno izabrane od O, S, S(=O), S(=O)2, ili N.
[0028] "4- do 6-člani heterocikloalkil" treba razumeti kao zasićeni, monovalentni, monociklični „heterocikloalkilni“ prsten kao što je definisan gore koji sadrži 4, 5, 6 ili 7 atoma u prstenu.
[0029] Slično, "4- do 6-člani heterocikloalkil" treba razumeti kao zasićeni, monovalentni, monociklični "heterocikloalkilni" prsten kao što je definisano gore koji sadrži 4, 5 ili 6 atoma u prstenu.
[0030] U slučaju R<2>u formuli (I) ili (Ia), pomenuti 4- do 7-člani heterocikloalkil ili 4- do 6-člani heterocikloalkil je, osim ako nije drugačije naznačeno, opciono supstituisan sa jednim ili više supstituenata koji su isti ili različiti, na bilo kom atomu ugljenika u prstenu i izabran iz grupe koju čine C1-C4alkil, i pri čemu je nezavisno bilo koji atom azota u prstenu, ako je prisutan u pomenutom 4- do 7-članom ili 4- do 6-članom heterocikloalkilu supstituisan sa R<c>; pri čemu je moguće da navedena 4- do 7-člana ili 4- do 6-člana heterocikloalkilna grupa bude vezana za ostatak molekula preko bilo kog atoma ugljenika ili, ako je prisutan, atoma azota. Shodno tome, bilo koji atom azota u prstenu ako je prisutan u pomenutoj 4- do 7-članoj ili 4- do 6-članoj heterocikloalkilnoj grupi je samo supstituisan sa R<c>, ako normalna valencija naznačenog atoma u postojećim okolnostima nije prekoračena.
[0031] Konkretno, pomenuti 4- do 7-člani heterocikloalkil može sadržati 3, 4, 5 ili 6 atoma ugljenika i jedan ili dva od gore navedenih heteroatoma ili grupa koje sadrže heteroatome pod uslovom da ukupan broj atoma u prstenu nije veći od 7, tačnije navedeni heterocikloalkil može sadržati 3, 4 ili 5 atoma ugljenika i jedan ili dva od gore pomenutih heteroatoma ili grupa koje sadrže heteroatome pod uslovom da ukupan broj atoma u prstenu nije veći od 6 ("4- do 6-člani heterocikloalkil").
[0032] Posebno, bez ograničavanja na to, pomenuti heterocikloalkil može biti 4-člani prsten, kao što je azetidinil, oksetanil, ili 5-člani prsten, kao što je tetrahidrofuranil, dioksolinil, pirolidinil, imidazolidinil, pirazolidinil, ili 6-člani prsten, kao što je tetrahidropiranil, piperidinil, morfolinil, ditianil, tiomorfolinil, piperazinil, ili 7-člani prsten, kao što je na primer diazepanil prsten.
[0033] Posebno, bez ograničenja na to, pomenuti heterocikloalkil može biti u poželjnijoj realizaciji (3R)-tetrahidrofuran-3-il, (3S)-tetrahidrofuran-3-il, 4-metilmorfolin-2-il, (2R)-4-metilmorfolin-2-il, (2S)-4-metilmorfolin-2-il, 4-metilmorfolin-3-il, (3R)-4-metilmorfolin-3-il, ili (3S)-4-metilmorfolin-3-il, najpoželjnije (2R)-4-metilmorfolin-2-il.
[0034] Termin "6- do 12-člani heterobicikloalkil" treba razumeti kao zasićeni, monovalentni biciklični ugljovodonični radikal u kome dva prstena dele jedan ili dva zajednička atoma u prstenu, i gde pomenuti biciklični ugljovodonični radikal sadrži 5, 6, 7, 8, 9 ili 10 atoma ugljenika i jedan, dva ili tri heteroatoma ili grupe koje sadrže heteroatom nezavisno odabrane
1
između O, S, S(=O), S(=O)2, ili N, pod uslovom da ukupan broj atoma u prstenu nije veći od 12. Pomenuti 6- do 12-člani heterobicikloalkil je, osim ako nije drugačije naznačeno, opciono supstituisan sa jednim ili više supstituenata, koji su isti ili različiti, na bilo kom atomu ugljenika u prstenu i izabran iz grupe koju čine C1-C4alkil, opciono supstituisan sa 1-5 atoma halogena koji su isti ili različiti, atom halogena, -NR<a>R<b>, COOR<5>i okso (=O); i pri čemu je nezavisno bilo koji atom azota u prstenu, ako je prisutan u pomenutom 6- do 12-članom heterobicikloalkilu, supstituisan sa R<c>; pri čemu je moguće da navedeni 6- do 12-člani heterobicikloalkil bude vezan za ostatak molekula preko bilo kog atoma ugljenika ili, ako je prisutan, preko atoma azota. Shodno tome, bilo koji atom azota u prstenu ako je prisutan u pomenutom 6- do 12-članom heterobicikloalkilu je supstituisan samo sa R<c>, ako normalna valencija naznačenog atoma u postojećim okolnostima nije prekoračena. Pomenuti 6- do 12-člani heterobicikloalkil je, na primer, azabiciklo[3.3.0]oktil, azabiciklo-[4.3.0]nonil, diazabiciklo[4.3.0]nonil, oksazabiciklo[4.3.0]nonil, tiazabiciklo-[4.3.0] nonil ili azabiciklo[4.4.0] decil.
[0035] Heterospirocikloalkil i premošćeni heterocikloalkil, kao što je definisano u nastavku, takođe su uključeni u obim ove definicije.
[0036] Termin "heterospirocikloalkil" treba razumeti kao zasićeni, monovalentni biciklični ugljovodonični radikal u kome dva prstena dele jedan zajednički atom u prstenu, i gde pomenuti biciklični ugljovodonični radikal sadrži 5, 6, 7, 8, 9 ili 10 atoma ugljenika i jedan, dva ili tri heteroatoma ili grupe koje sadrže heteroatom koje se nezavisno biraju između O, S, S(=O), S(=O)2, ili N, pod uslovom da ukupan broj atoma u prstenu nije veći od 12. Moguće je da navedeni heterospirocikloalkil bude vezan za ostatak molekula preko bilo kog atoma ugljenika ili, ako je prisutan, atoma azota. Pomenuti heterospirocikloalkil je, na primer, azaspiro[2.3]heksil, azaspiro[3.3]heptil, oksaazaspiro[3.3]heptil, tiaaza-spiro[3.3]heptil, oksaspiro[3.3]heptil, oksazaspiro[5.3]nonil, oksazaspiro[4.3]oktil, oksazaspiro[5.5]undecil, diazaspiro[3.3]heptil, tiazaspiro[3.3]heptil, tiazaspiro-[4.3]oktil, ili azaspiro[5.5]decil.
[0037] Termin "premošćeni heterocikloalkil" treba razumeti kao zasićeni, monovalentni biciklični ugljovodonični radikal u kome dva prstena dele dva zajednička atoma u prstenu koji nisu neposredno susedni, i gde pomenuti biciklični ugljovodonični radikal sadrži 5, 6, 7 , 8, 9 ili 10 atoma ugljenika i jedan, dva ili tri heteroatoma ili grupe koje sadrže heteroatom, nezavisno izabrane između O, S, S(=O), S(=O)2, ili N, pod uslovom da ukupan broj atoma u prstenu nije veći od 12. Moguće je da pomenuti premošćeni heterocikloalkil bude vezan za ostatak molekula preko bilo kog atoma ugljenika ili, ako je prisutan, atoma azota. Navedeni premošćeni heterocikloalkil je, na primer, azabiciklo[2.2.1]heptil, oksazabiciklo[2.2.1]heptil, tiazabicycio[2.2.1]heptil, diazabiciklo[2.2.1]heptil, azabiciklo[2.2.2]oktil, diazabiciklo[2.2.2]oktil, oksazabiciklo[2.2.2]oktil, tiaza-biciklo[2.2.2]oktil, azabiciklo[3.2.1]oktil, diazabiciklo[3.2.1]oktil, oksazabiciklo-[3.2.1]oktil, tiazabiciklo[3.2.1]oktil, azabiciklo[3.3.1]nonil, diazabiciklo[3.3.1]-nonil, oksazabiciklo[3.3.1]nonil, tiazabiciklo[3.3.1]nonil, azabiciklo[4.2.1]nonil, diazabiciklo[4.2.1]nonil, oksazabiciklo[4.2.1]nonil, tiazabiciklo[4.2.1]nonil, azabiciklo[3.3.2]decil, diazabiciklo[3.3.2]decil, oksazabiciklo[3.3.2]decil, tiazabiciklo[3.3.2]decil, ili azabiciklo[4.2.2]decil.
[0038] Pod terminom "heteroaril" se podrazumeva monovalentni, monociklični ili biciklični ugljovodonični prstenasti sistem sa najmanje jednim aromatičnim prstenom sa brojem atoma u sistemu prstena kako je specificirano i pri čemu jedan, dva ili tri atoma u prstenu monovalentnog, monocikličnog ili bicikličnog ugljovodoničnog prstenastog sistema je/su zamenjeni sa jednim, dva ili tri heteroatoma ili grupe koje sadrže heteroatom, nezavisno odabrane od O, S, S(=O), S(=O)2, ili N.
[0039] "5- do 10-člani heteroaril" se podrazumeva da znači heteroaril koji ima 5, 6, 7, 8, 9 ili 10 atoma u prstenu ("5- do 10-člani heteroaril") i pri čemu su jedan, dva ili tri atoma u prstenu monovalentnog, monocikličnog ili bicikličnog sistema ugljovodoničnih prstenova zamenjeni sa jednim, dva ili tri heteroatoma ili grupe koje sadrže heteroatom, nezavisno odabrane od O, S, S(=O), S(=O)2, ili N. Naročito, heteroaril se bira iz grupe koju čine tienil, furanil, pirolil, oksazolil, tiazolil, imidazolil, pirazolil, izoksazolil, izotiazolil, oksadiazolil, triazolil, tiadiazolil, tia-4H-pirazolil itd. i njihovi benzo derivati, kao što su, na primer, benzofuranil, benzotienil, benzoksazolil, benzizoksazolil, benzimidazolil, benzotriazolil, indazolil, indolil, izoindolil, itd.; ili piridinil, piridazinil, pirimidinil, pirazinil, triazinil, itd., i njihovi benzo derivati, kao što su, na primer, hinolinil, hinazolinil, izohinolinil, itd.; indolizinil, i njihovi benzo derivati; ili cinolinil, ftalazinil, hinazolinil, hinoksalinil, itd.
[0040] U slučaju R<2>formule (I) ili (Ia), pomenuti 5- do 10-člani heteroaril je, osim ako nije drugačije naznačeno, opciono supstituisan sa jednim ili više supstituenata koji su isti ili
1
različiti, i izabran iz grupe koju čine C1-C4-alkil, opciono supstituisan sa 1-5 atoma halogena koji su isti ili različiti, atom halogena, -NR<a>R<b>i -COOR<5>.
[0041] U slučaju A formule (I) ili (Ia), pomenuti 5- do 10-člani heteroaril je, osim ako nije drugačije naznačeno, opciono supstituisan sa jednim ili više supstituenata, koji su isti ili različiti, i izabran iz grupe koju čine atom halogena, C1-C3-alkil, i C1-C3-alkoksi, pri čemu su C1-C3-alkil i C1-C3-alkoksi opciono supstituisani sa 1-5 atoma halogena koji su isti ili različiti.
[0042] U slučaju A formule (I) ili (Ia), "5- ili 6-člani heteroaril" se podrazumeva kao heteroaril koji ima 5 ili 6 atoma u prstenu i pri čemu jedan, dva ili tri atoma u prstenu ugljovodonični prstenasti sistem su zamenjeni sa jednim, dva ili tri heteroatoma ili grupe koje sadrže heteroatom grupe koje se nezavisno biraju između O, S, S(=O), S(=O)2, ili N.
Pomenuti "5- ili 6-člani heteroaril" je, osim ako nije drugačije naznačeno, opciono supstituisan sa jednim ili više supstituenata, koji su isti ili različiti, i izabran iz grupe koju čine atom halogena, C1-C3-alkil, i C1-C3-alkoksi, pri čemu su C1-C3-alkil i C1-C3alkoksi opciono supstituisani sa 1-5 atoma halogena koji su isti ili različiti
[0043] 5-člana heteroarilna grupa je poželjno odabrana iz grupe koju čine tienil, furanil, pirolil, oksazolil, tiazolil, imidazolil, pirazolil, izoksazolil, izotiazolil, oksadiazolil, triazolil, tiadiazolil, tia-4H-pirazolil.
[0044] 6-člana heteroarilna grupa je poželjno izabrana iz grupe koju čine piridinil, piridazinil, pirimidinil, pirazinil, triazinil.
[0045] Konkretno, pomenuti 5- ili 6-člani heteroaril je, opciono supstituisan sa poželjno jednim ili dva supstituenta, koji su isti ili različiti, i izabrani između atoma fluora ili hlora, C1-C2-alkil, opciono supstituisan sa 1-5 atoma fluora, ili C1-C2-alkoksi, opciono supstituisan sa 1-5 atoma fluora.
[0046] Konkretno, pomenuti 5- ili 6-člani heteroaril je 6-člani heteroaril sa jednim ili dva atoma azota i opciono je supstituisan sa jednim ili dva supstituenta, koji su isti ili različiti, i izabrani iz grupe koju čine atom fluora ili hlora, C1-C2-alkil, opciono supstituisan sa 1-5 atoma fluora, ili C1-C2-alkoksi, opciono supstituisan sa 1-5 atoma fluora.
1
[0047] Poželjno pomenuti 6-člani heteroaril je CF3-pirimidinil, najpoželjnije 2-CF3-pirimidin-5-il. Takođe poželjan je CF3-piridazinil, najpoželjnije 6-CF3-piridazin-3-il.
[0048] Uopšteno, i ako nije drugačije navedeno, izraz "heteroaril" obuhvata sve moguće njegove izomerne oblike, npr. njegove pozicione izomere. Tako, za neki ilustrativni ne ograničavajući primer, izraz piridil obuhvata piridin-2-il, piridin-3-il, i piridin-4-il; ili termin pirimidinil includes pirimidin-2-il, pirimidin-4-il i pirimidin-5-il; ili termin piridazinil includes piridazin-3-il i piridazin-4-il; ili termin tiazolil obuhvata 1,3-tiazol-5-il, 1,3-tiazol-4-il i 1,3-tiazol-2-il.
[0049] Termin "C1-C4" koji se koristi u ovom tekstu se podrazumeva da znači grupu koja ima konačan broj atoma ugljenika od 1 do 4, tj.1, 2, 3 ili 4 atoma ugljenika, npr. u kontekstu definicije "C1-C4-alkil", se podrazumeva da znači alkilnu grupu koja ima konačan broj atoma ugljenika od 1 do 4, tj.1, 2, 3 ili 4 atoma ugljenika.
[0050] Termin "C2-C6" kako se koristi u ovom tekstu treba shvatiti kao grupu koja ima konačan broj atoma ugljenika od 2 do 6, tj.2, 3, 4, 5 ili 6 atoma ugljenika, npr. u kontekstu definicije "C2-C6-alkil", treba shvatiti kao alkilnu grupu koja ima konačan broj atoma ugljenika od 2 do 6, tj.2, 3, 4, 5 ili 6 atoma ugljenika. Dalje treba razumeti da se navedeni termin "C2-C6" treba tumačiti kao bilo koji pod raspon sadržan u njemu, npr. C2-C6, C3-C5, C3-C4, C2-C3, C2-C4, C2-C5; posebno C2-C3.
[0051] Termin "C1-C3" kako se koristi u kontekstu definicije "C1-C3-alkoksi" se podrazumeva da znači alkoksi grupu koja ima konačan broj atoma ugljenika od 1 do 3, tj.1, 2 ili 3 atoma ugljenika.
[0052] Isto se odnosi na druge pomenute "alkil", alkinil ili "alkoksi" kako je ovde pomenuto i kako to treba da razume stručna osoba.
[0053] Treba da se razume da dalje na primer izraz "C1-C6" treba tumačiti kao bilo koji podobim sadržan u njemu, npr. C1-C6, C2-C3, C2-C6, C3-C4, C1-C2, C1-C3, C1-C4, C1-C5; naročito C1-C2, C1-C3, C1-C4, C1-C5, C1-C6; tačnije C1-C4.
1
[0054] Slično tome, gore pomenuto se odnosi na "C1-C4-alkil", "C1-C3-alkil", "C1-C3-alkoksi", "C1-C2-alkil" ili "C1-C2-alkoksi" opciono supstituisan sa 1-5 halogena koji su isti ili različiti.
[0055] Slično, kako se ovde koristi, termin "C2-C6", kako se koristi u ovom tekstu, npr. u kontekstu definicija "C2-C6-alkinil", treba razumeti kao grupu alkinil koja ima konačan broj atoma ugljenika od 2 do 6, tj.2, 3, 4, 5, ili 6 atoma ugljenika. Dalje treba razumeti da se navedeni termin "C2-C6" treba tumačiti kao bilo koji pod raspon sadržan u njemu, npr. C2-C6, C3-C5, C3-C4, C2-C3, C2-C4, C2-C5; naročito C2-C3i C2-C4.
[0056] Dalje, kako se ovde koristi, termin "C3-C7", kako se koristi u ovom tekstu, treba razumeti kao grupu koja ima konačan broj atoma ugljenika od 3 do 7, tj.3, 4, 5, 6 ili 7 atoma ugljenika, npr. u kontekstu definicije "C3-C7-cikloalkil", treba razumeti da označava cikloalkilnu grupu koja ima konačan broj atoma ugljenika od 3 do 7, tj.3, 4, 5, 6 ili 7 atoma ugljenika. Dalje treba razumeti da se pomenuti termin "C3-C7" treba tumačiti kao bilo koji pod raspon sadržan u njemu, npr. C3-C6, C4-C5, C3-C5, C3-C4, C4-C6, C5-C7; naročito C3-C6.
[0057] Termin "supstituisan" označava da su jedan ili više vodonika na naznačenom atomu zamenjeni sa izborom iz naznačene grupe, pod uslovom da se ne prelazi normalna valenca naznačenog atoma pod postojećim okolnostima, i da supstitucija ima za rezultat stabilno jedinjenje. Kombinacije supstituenata i/ili promenljivih su dozvoljene samo ako takve kombinacije rezultiraju sa stabilnim jedinjenjima.
[0058] Termin "opciono supstituisan" znači da broj supstituenata može biti nula. Ako nije drugačije navedeno, opciono supstituisane grupe mogu biti supstituisane sa onoliko opcionih supstituenata koliko se može smestiti zamenom atoma vodonika sa supstituentom koji nije vodonik na bilo kom raspoloživom atomu ugljenika ili azota. Obično se broj opcionih supstituenata (kada su prisutni) kreće od 1 do 5, naročito od 1 do 3.
[0059] Kako se ovde koristi, izraz "jedan ili više", npr. u definiciji supstituenata jedinjenja opštih formula iz ovog pronalaska, podrazumeva se kao "jedan, dva, tri, četiri ili pet, posebno jedan, dva, tri ili četiri, tačnije jedan, dva ili tri, još preciznije jedan ili dva".
1
[0060] Pronalazak takođe obuhvata sve prikladne izotopske varijante jedinjenja pronalaska. Izotopska varijacija jedinjenja pronalaska je definisana kao ona u kojoj je najmanje jedan atom zamenjen sa atomom koji ima isti atomski broj, ali atomsku masu različitu od atomske mase koja se obično ili pretežno nalazi u prirodi. Primeri izotopa koji mogu biti ugrađeni u jedinjenja iz pronalaska obuhvataju izotope vodonika, ugljenika, azota, kiseonika, sumpora, fluora i hlora, kao što je<2>H (deuterijum),<3>H (tricijum),<11>C,<13>C,<14>C,<15>N,<17>O,<18>O,<33>S,<34>S,<35>S,<36>S,<18>F i<36>Cl, redom. Određene izotopske varijacije jedinjenja iz pronalaska, na primer, one u kojima je jedan ili više radioaktivni izotopa kao<3>H ili<14>C su obuhvaćene, su korisne u studijama ispitivanja tkivne distribucije leka i/ili supstrata. Tritirani i ugljenik-14, tj.,<14>C, izotopi su posebno poželjni zbog njihove jednostavnosti pripreme i otkrivanja. Dalje, supstitucija izotopima kao što je deuterijum može obezbediti određene terapeutske prednosti koje proističu iz veće metaboličke stabilnosti, na primer, povećanog in vivo poluvremena ili smanjenih zahteva za doziranjem i stoga može biti poželjna u nekim okolnostima. Izotopske varijacije jedinjenja iz ovog pronalaska mogu se generalno pripremiti konvencionalnim postupcima poznatim stručnjaku, kao što su ilustrativni postupci ili preparati opisani u primerima u daljem tekstu, koristeći odgovarajuće izotopske varijacije pogodnih reagensa.
[0061] Optički izomeri mogu biti dobijeni razlaganjem racemičnih smeša prema konvencionalnim postupcima, na primer, formiranjem dijastereoizomernih soli korišćenjem optički aktivne kiseline ili baze ili formiranjem kovalentnih dijastereomera. Primeri odgovarajućih kiselina su vinska, diacetilvinska, ditoluoilvinska i kamforsulfonska kiselina. Smeše dijastereoizomera mogu se razdvojiti u njihove pojedinačne dijastereomere na temelju njihovih fizičkih i/ili hemijskih razlika sa metodama poznatim u struci, na primer hromatografijom ili frakcionom kristalizacijom. Optički aktivne baze ili kiseline se zatim oslobađaju iz odvojenih dijastereomernih soli. Različit proces za razdvajanje optičkih izomera uključuje upotrebu hiralne hromatografije (npr., hiralne HPLC kolone), sa ili bez konvencionalne derivatizacije, optimalno odabrane da se maksimizuje razdvajanje enantiomera. Odgovarajuće hiralne HPLC kolone proizvodi Daicel, na primer, Chiracel OD i Chiracel OJ, između ostalog, sve se mogu rutinski birati. Takođe su korisna enzimska razdvajanja, sa ili bez derivatizacije. Optički aktivna jedinjenja iz ovog pronalaska se takođe mogu dobiti hiralnim sintezama koristeći optički aktivne polazne materijale.
[0062] Da bi se međusobno ograničili različiti tipovi izomera, upućuje se na odeljak E pravila IUPAC (Pure Appl Chem 45, 11-30, 1976).
1
[0063] Dalje, jedinjenja iz ovog pronalaska mogu postojati kao tautomeri.
[0064] Ovaj pronalazak obuhvata sve moguće tautomere jedinjenja iz ovog pronalaska kao pojedinačne tautomere ili kao bilo koju smešu pomenutih tautomera, u bilo kom odnosu.
[0065] Ovaj pronalazak se takođe odnosi na korisne oblike jedinjenja kao što je opisano ovde, kao što su hidrati, solvati, soli, naročito farmaceutski prihvatljive soli, i koprecipitati.
[0066] Kada se ovde koristi pluralni oblik reči jedinjenja, soli, polimorfi, hidrati, solvati i slično, podrazumeva se i jedno jedinjenje, so, polimorf, hidrat, solvat ili slično.
[0067] Pod „stabilnim jedinjenjem“ ili „stabilnom strukturom“ podrazumeva se jedinjenje koje je dovoljno robusno da preživi izolaciju do korisnog stepena čistoće iz reakcione smeše i formulaciju u efikasno terapijsko sredstvo.
[0068] Jedinjenja iz ovog pronalaska mogu postojati u vidu hidrata, ili kao solvat, pri čemu jedinjenja iz predmetnog pronalaska sadrže polarne rastvarače, naročito vodu, metanol ili etanol na primer kao strukturni element kristalne rešetke jedinjenja. Količina polarnih rastvarača, posebno vode, može postojati u stehiometrijskom ili nestehiometrijskom odnosu. U slučaju stehiometrijskih solvata, mogući su hidrati, hidrati, hemi-, (polu-), mono-, seskvi-, di-, tri-, tetra-, penta- itd. solvati ili hidrati. Predmetni pronalazak obuhvata sve takve hidrate ili solvate.
[0069] Dalje, jedinjenja predmetnog pronalaska mogu postojati u slobodnom obliku, npr. kao slobodna baza, ili kao slobodna kiselina, ili kao cviterjon, ili mogu postojati u obliku soli. Navedena so može biti bilo koja so, bilo organska ili neorganska adiciona so, naročito bilo koja farmaceutski prihvatljiva organska ili neorganska adiciona so, koja se uobičajeno koristi u farmaciji.
[0070] Termin "farmaceutski prihvatljiva so" se odnosi na relativno netoksične, neorganske ili organske kisele adicione soli jedinjenja iz ovog pronalaska. Na primer, videti S. M. Berge, i dr. "Pharmaceutical Salts," J. Pharm. Sci. 1977, 66, 1-19. Pogodna farmaceutski prihvatljiva so jedinjenja iz ovog pronalaska može biti, na primer, adiciona sol kiseline jedinjenja iz ovog
2
pronalaska koja ima atom azota, na primer u lancu ili prstenu, koja je dovoljno bazična, kao što je adiciona so kiseline sa neorganskom kiselinom, kao što je hlorovodonična, bromovodonična, jodovodonična, sumporna, bisulfurna, fosforna ili azotna kiselina, na primer, ili sa organskom kiselinom, kao što je mravlja, sirćetna, acetosirćetna, piruvična, trifluorosirćetna, propionska, maslena, heksanska, heptanska, undekanska, laurinska, benzojeva, salicilna, 2-(4-hidroksibenzoil)-benzojeva, kamforna, cimetna, ciklopentanpropionska, diglukonska, 3-hidroksi-2-naftonska, nikotinska, pamoična, pektinska, persulfurna, 3-fenilpropionska, pikrična, pivalna, 2-hidroksietansulfonatna, itakonska, sulfamska, trifluorometansulfonska, dodecilsulfurna, etansulfonska, benzensulfonska, paratoluensulfonska, metansulfonska, 2-naftalensulfonska, naftalindisulfonska, kamforsulfonska kiselina, limunska, vinska, stearinska, mlečna, oksalna, malonska, jantarna, jabučna, adipinska, alginska, maleinska, fumarna, D-glukonska, mandelinska, askorbinska, glukoheptanska, glicerofosforna, asparaginska, sulfosalicilna, hemisumporna, ili tiocijanska kiselina, na primer.
[0071] Dalje, druga pogodna farmaceutski prihvatljiva so jedinjenja iz ovog pronalaska, koja je dovoljno kisela, je so alkalnog metala, na primer natrijumova ili kalijumova so, so zemno alkalnog metala, na primer kalcijum ili magnezijum, amonijumova so ili so sa organskom bazom koja daje fiziološki prihvatljiv katjon, na primer so sa N-metil-glukaminom, dimetilglukaminom, etil-glukaminom, lizinom, dicikloheksilaminom, 1,6-heksadiaminom, etanolaminom, glukozaminom, sarkozinom, serinol, tris-hidroksi-metil-aminometan, aminopropandiolom, sovakovom-bazom, 1-amino-2,3,4-butantriolom. Pored toga, bazične grupe koje sadrže azot mogu se kvaternizovati sa sredstvima kao što su niži alkil halogenidi kao što su metil, etil, propil i butil hloridi, bromidi i jodidi; dialkil sulfati poput dimetila, dietila i dibutil sulfata; i diamil sulfati, halogenidi dugih lanaca kao što su decil, lauril, miristil i stearil hloridi, bromidi i jodidi, aralkil halogenidi poput benzila i fenetil bromida i drugi.
[0072] Stručnjaci u ovoj oblasti će dalje prepoznati da se adicione soli kiselina navedenih jedinjenja mogu dobiti reakcijom jedinjenja sa odgovarajućom neorganskom ili organskom kiselinom bilo kojim od brojnih poznatih postupaka. Alternativno, soli alkalnih i zemno alkalnih metala kiselih jedinjenja prema pronalasku se pripremaju reakcijom jedinjenja prema pronalasku sa odgovarajućom bazom kroz niz poznatih postupaka.
[0073] Predmetni pronalazak obuhvata sve moguće soli jedinjenja iz ovog pronalaska kao pojedinačne soli, ili kao bilo koju smešu pomenutih soli, u bilo kom odnosu.
[0074] Ako nije drugačije navedeno, jedinjenja iz ovog pronalaska se takođe odnose na enantiomere, dijastereomere, racemate, hidrate, solvate ili njihove soli, ili njihove smeše.
[0075] Kako se ovde koristi, termin "in vivo hidrolizirajući estar" podrazumeva se da znači in vivo hidrolizirajući estar jedinjenja iz ovog pronalaska koji sadrži karboksi ili hidroksi grupu, na primer, farmaceutski prihvatljiv estar koji se hidrolizuje u ljudskom ili životinjskom telu za proizvodnju matične kiseline ili alkohola. Prikladni farmaceutski prihvatljivi estri za karboksi obuhvataju na primer alkil, cikloalkil i opciono supstituisani fenilalkil, naročito benzil estre, C1-C6alkoksimetil estre, npr. metoksimetil, C1-C6alkanoiloksimetil estri, npr. pivaloiloksimetil, ftalidil estri, C3-C8cikloalkoksi-karboniloksi-C1-C6alkil estri, npr. 1-cikloheksilkarboniloksietil; 1,3-dioksolen-2-onilmetil estri, npr. 5-metil-1,3-dioksolen-2-onilmetil; i C1-C6-alkoksikarboniloksietil estri, npr. 1-metoksikarboniloksietil, i mogu se formirati u bilo kojoj karboksi grupi u jedinjenjima iz ovog pronalaska. In vivo hidrolizirajući estar jedinjenja iz ovog pronalaska koji sadrži hidroksi grupu obuhvata anorganske estre kao što su fosfatni estri i [alfa]-aciloksialkil etri i srodna jedinjenja koja se kao rezultat in vivo hidrolize estra raspadaju dajući matičnu hidroksi grupu. Primeri [alfa]-aciloksialkil etara obuhvataju acetoksimetoksi i 2,2-dimetilpropioniloksimetoksi. Izbor in vivo hidrolizirajućih grupa koje formiraju estar za hidroksi obuhvataju alkanoil, benzoil, fenilacetil i supstituisani benzoil i fenilacetil, alkoksikarbonil (da bi se dobili alkil karbonatni estri), dialkilkarbamoil i N-(dialkilaminoetil)-N-alkilkarbamoil (da bi se dobili karbamati), dialkilaminoacetil i karboksiacetil. Predmetni pronalazak pokriva sve takve estre.
[0076] Dalje, ovaj pronalazak obuhvata sve moguće kristalne oblike ili polimorfe jedinjenja iz ovog pronalaska, bilo kao pojedinačne polimorfe, bilo kao smešu više od jednog polimorfa, u bilo kom odnosu.
[0077] U skladu sa prvim aspektom, ovaj pronalazak pokriva jedinjenja opšte formule (Ia):
u kojoj A, R<1>, R<2>i R<3>imaju značenja kako su definisana u formuli (I), po mogućnosti R<3>predstavlja C1-C4-alkil, još poželjnije metil;
ili enantiomer, dijastereomer, racemat, hidrat, solvat, ili njihova so, ili njihova smeša.
[0078] Dodatno su poželjna jedinjenja opšte formule (I), gde
R<1>predstavlja C1-C4-alkil, po mogućnosti metil ili etil; i
u kojoj A, R<2>i R<3>imaju isto značenje kao što je definisano u opštoj formuli (I),
ili enantiomer, dijastereomer, racemat, hidrat, solvat, ili njihova so, ili njihova smeša.
[0079] Dodatno su poželjna jedinjenja opšte formule (Ia), gde
R<1>predstavlja C1-C4-alkil, po mogućnosti metil ili etil; i
u kojoj A, R<2>i R<3>imaju isto značenje kao što je definisano u opštoj formuli (Ia),
ili enantiomer, dijastereomer, racemat, hidrat, solvat, ili njihova so, ili njihova smeša.
[0080] Takođe su poželjna jedinjenja opšte formule (I), još poželjnije jedinjenja opšte formule (Ia), gde
R<3>predstavlja C1-C4- alkil, po mogućnosti metil; i
u kojoj R<1>, R<2>i A imaju isto značenje kao što je definisano u opštoj formuli (I),
ili enantiomer, dijastereomer, racemat, hidrat, solvat, ili njihova so, ili njihova smeša.
[0081] U još jednom poželjnom ostvarenju, pronalazak se odnosi na jedinjenja opšte formule (I), gde
R<2>predstavlja -(CH2)q-morfolinil, pri čemu je atom azota u prstenu supstituisan sa R<c>R<c>predstavlja metil;
q predstavlja ceo broj 1; i
u kojoj A, R<1>i R<3>imaju isto značenje kao što je definisano u opštoj formuli (I),
ili enantiomer, dijastereomer, racemat, hidrat, solvat, ili njihova so, ili njihova smeša.
[0082] U još jednom poželjnom ostvarenju, pronalazak se odnosi na jedinjenja opšte formule (Ia), gde
R<2>predstavlja -(CH2)q-morfolinil, pri čemu je atom azota u prstenu supstituisan sa R<c>R<c>predstavlja metil;
q predstavlja ceo broj 1; i
u kojoj A, R<1>i R<3>imaju isto značenje kao što je definisano u opštoj formuli (Ia),
2
ili enantiomer, dijastereomer, racemat, hidrat, solvat, ili njihova so, ili njihova smeša.
[0083] U drugom poželjnom ostvarenju, pronalazak se odnosi na jedinjenja opšte formule (I), gde
A predstavlja CF3-pirimidinil, poželjno 2-CF3-pirimidin-5-il; i
u kojoj R<1>, R<2>i R<3>imaju isto značenje kao što je definisano u opštoj formuli (I),
ili enantiomer, dijastereomer, racemat, hidrat, solvat, ili njihova so, ili njihova smeša.
[0084] U drugom poželjnom ostvarenju, pronalazak se odnosi na jedinjenja opšte formule (Ia), gde
A predstavlja CF3-pirimidinil, poželjno 2-CF3-pirimidin-5-il; i
u kojoj R<1>, R<2>i R<3>imaju isto značenje kao što je definisano u opštoj formuli (la),
ili enantiomer, dijastereomer, racemat, hidrat, solvat, ili njihova so, ili njihova smeša.
[0085] U još jednom poželjnom ostvarenju, pronalazak se odnosi na jedinjenja sa formulom (I), gde
R<2>predstavlja (4-metilmorfolin-2-il)metil, poželjno nesupstituisan [(2R)-4-metilmorfolin-2-il]metil, ili [(2S)-4-metilmorfolin-2-il]metil; i
u kojoj R<1>, A i R<3>imaju isto značenje kao što je definisano u opštoj formuli (I),
ili enantiomer, dijastereomer, racemat, hidrat, solvat, ili njihova so, ili njihova smeša.
[0086] U još jednom poželjnom ostvarenju, pronalazak se odnosi na jedinjenja sa formulom (Ia), gde
R<2>predstavlja (4-metilmorfolin-2-il)metil, poželjno nesupstituisan [(2R)-4-metilmorfolin-2-il]metil, ili [(2S)-4-metilmorfolin-2-il]metil; i
u kojoj R<1>, A i R<3>imaju isto značenje kao što je definisano u opštoj formuli (Ia),
ili enantiomer, dijastereomer, racemat, hidrat, solvat, ili njihova so, ili njihova smeša.
[0087] U još jednom poželjnom ostvarenju, pronalazak se odnosi na jedinjenja sa formulom (Ia), gde
R<2>predstavlja [(2R)-4-metilmorfolin-2-il]metil; i
u kojoj R<1>, A i R<3>imaju isto značenje kao što je definisano u opštoj formuli (I),
ili enantiomer, dijastereomer, racemat, hidrat, solvat, ili njihova so, ili njihova smeša.
[0088] U još jednom poželjnom ostvarenju, pronalazak se odnosi na jedinjenja sa formulom (Ia), gde
R<2>predstavlja [(2R)-4-metilmorfolin-2-il]metil; i
u kojoj R<1>, A i R<3>imaju isto značenje kao što je definisano u opštoj formuli (Ia), ili enantiomer, dijastereomer, racemat, hidrat, solvat, ili njihova so, ili njihova smeša.
[0089] Otkrivena su, sledeća jedinjenja, naime
3-{[(2R)-4-metilmorfolin-2-il]metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
3-{[(2S)-4-metilmorfolin-2-il]metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
3-{[4-metilmorfolin-2-il]metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin- 5-il]etil}benzamid, kao smeša dijastereoizomera
3-[[(3R)-4-metilmorfolin-3-il]metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
3-{[(3S)-4-metilmorfolin-3-il]metoksil-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil )pirimidin-5-il]etil}benzamid
3-{[(2R)-4-metilmorfolin-2-il]metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]etil}benzamid
3-[(3-fluoro-1-metilazetidin-3-il)metoksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
3-(5-etil-1,3-tiazol-2-il)-5-{[(2S)-4-metilmorfolin-2-il]metoksi}-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
3-(5-etil-1,3-tiazol-2-il)-5-{[(2R)-4-metilmorfolin-2-il]metoksi}-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
3-{[(2R)-4-metilmorfolin-2-il]metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1S)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
3-{[(2S)-4-metilmorfolin-2-il]metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1S)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid.
[0090] Takođe poželjna jedinjenja su, naime
3-(5-etil-1,3-tiazol-2-il)-5-{[(2R)-4-metilmorfolin-2-il]metoksi}-N-((1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil]benzamid;
2
3-{[(2R)-4-metilmorfolin-2-il]metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid.
[0091] Još poželjnije jedinjenje je 3-{[(2R)-4-metilmorfolin-2-il]metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}-benzamid.
[0092] Podrazumeva se da se ovaj pronalazak takođe odnosi na bilo koju kombinaciju poželjnih ostvarenja opisanih iznad.
[0093] Sinteza jedinjenja opšte formule (I)/ (Ia) iz ovog pronalaska
Jedinjenja opšte formule (I) sa značenjem za R<1>-R<3>i A kao što je definisano u opštoj formuli (I), mogu se sintetizovati u skladu sa opštim postupkom koji je prikazan u Šemi 1, polazeći od sintona po formuli (II ) odnosno (IV).
[0094] Analogno, jedinjenja opšte formule (Ia) sa značenjem za R<1>-R<3>i A kao što je definisano u opštoj formuli (Ia), mogu se sintetizovati u skladu sa opštim postupkom koji je prikazan u Šemi 1 polazeći od sintona po formuli (II) odnosno (IVa). Intermedijari prikazani na šemama 2 i 3 koji imaju estarski deo - C(O)OR' označavaju se redom kao metil, etil ili propil estar, (R': metil, etil, propil).
[0095] Karboksilna kiselina formule (II) može da reaguje sa aminom formule (III) postupcima poznatim stručnjacima iz date oblasti tehnike da bi se dobila jedinjenja opšte formule (I).
[0096] Reakcija se odvija tako što se, na primer, karboksilna kiselina formule (II) aktivira sa reagensima kao što su dicikloheksilkarbodiimid (DCC), 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimid (EDCI), N-hidroksibenzotriazol (HOBT), N-[(dimetilamino)-(3H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-3-iloksi)metiliden]-N-metilmetanaminijum heksafluorofosfat (HATU) ili propilfosfonski anhidrid (T3P). Na primer, reakcija sa HATU odvija se u inertnom rastvaraču, kao što je N,N-dimetilformamid, dihlorometan ili dimetil sulfoksid u prisustvu odgovarajućeg amina formule (III) i tercijarnog amina (kao što je trietilamin ili diizopropiletilamin) na temperaturama između -30°C i 60°C.
2
[0097] Takođe je moguće pretvoriti karboksilnu kiselinu formule (II) u odgovarajući hlorid karboksilne kiseline sa hloridom neorganske kiseline (kao što je fosfor pentahlorid, fosfor trihlorid ili tionil hlorid) i a zatim u ciljana jedinjenja opšte formule (I), u piridinu ili inertnom rastvaraču (kao što je N, N-dimetilformamid), u prisustvu odgovarajućeg amina formule (III) i tercijarnog amina (na primer trietilamina) na temperaturama između -30°C i 60°C.
[0098] U potpunoj analogiji, karboksilna kiselina formule (II) može da reaguje sa aminom formule (IIIa) postupcima koji su poznati onima koji su verzirani u stanju tehnike da bi se dobila jedinjenja opšte formule (Ia).
[0099] Na isti način, jedinjenja opšte formule (I) mogu se dobiti iz pinakol estra borne kiseline opšte formule (IV) pomoću reakcije sa bromo-tiazolima sa formulom (V) postupcima koji su poznati onima koji su verzirani u stanju tehnike u pogodnom rastvaraču (na primer N,N-dimetilformamid, tetrahidrofuran, 1,4-dioksan, dimetoksietan i opciono u vodi) i uz dodavanje baze (kao što je trietilamin, kalijum karbonat, cezijum karbonat) i smeši katalizatora-liganda, na primer paladijum(II) acetat/ trifenilfosfin, tetrakis-(trifenilfosfin)paladijum(0), bis(difenilfosfino)ferocendihloro-paladijum (II), na temperaturama između 10°C i 120°C.
[0100] Analogno, jedinjenja opšte formule (Ia) mogu se dobiti iz pinakol estra borne kiseline opšte formule (IVa) pomoću reakcije sa bromo-tiazolima sa formulom (V).
[0101] Karboksilne kiseline opšte formule (II) mogu se, na primer, dobiti iz estara sa formulom (VI) saponifikacijom estra u pogodnom rastvaraču ili smeši rastvarača (na primer metanol, etanol ili tetrahidrofuran) uz dodavanje vodenog rastvora hidroksida alkalnog metala, na primer natrijum hidroksida ili litijum hidroksida, na temperaturama između 10°C i 60°C (Šema 2).
[0102] Na isti način, karboksilne kiseline formula (XII) mogu se dobiti iz estara formule (X) (Šema 3), i karboksilne kiseline formule (XX) iz estara formule (XXI) (Šema 4).
[0103] Alternativno, karboksilne kiseline formule (II) mogu se dobiti iz nitrila sa formulom (XXXIV) hidrolizom nitrila u pogodnom rastvaraču ili smeši rastvarača (na primer dimetil sulfoksidu ili etanolu) uz dodavanje vodenog rastvora hidroksida alkalnih metala, na primer natrijum hidroksida, na temperaturama između 80°C i 130°C (Šema 5).
2
[0104] Jedinjenja opšte formule (VI) mogu se dobiti iz pinakol estra borne kiseline opšte formule (IX) pomoću reakcije sa bromo-tiazolima opšte formule (V) (Šema 2), analogno sintezi jedinjenja sa formulom (I) iz jedinjenja formule (IV).
[0105] Na isti način, jedinjenja formule (VII) mogu se dobiti iz boronskih pinakol estra formule (VIII) i bromo-tiazola formula (V) (Šema 2).
[0106] Alternativno, jedinjenja opšte formule (VI) mogu se dobiti iz fenola opšte formule (VII) pomoću reakcije sa elektrofilima R<2>-LG (LG: odlazeća grupa) opšte formule (XXIV) (Šema 2), postupcima koji su poznati onima koji su verzirani u stanju tehnike u pogodnom rastvaraču (na primer N,N-dimetilformamidu, acetonitrilu, acetonu, dimetil sulfoksidu) u prisustvu baze (na primer kalijum karbonat i cezijum karbonat) na temperaturama između 10°C i 120°C.
[0107] Pogodna odlazeća grupa može da obuhvata, na primer, hloro, bromo, jodo, metansulfoniloksi, p-toluensulfoniloksi, trifluorometansulfoniloksi ili nonafluorobutansulfoniloksi.
[0108] Dodatno, fenoli opšte formule (VII) mogu reagovati sa alkoholima R<2>-LG (LG: OH) da se dobiju jedinjenja opšte formule (VI) (Šema 2), postupcima koji su poznati onima koji su verzirani u stanju tehnike u pogodnom rastvaraču (na primer dihlorometan ili tetrahidrofuran) u prisustvu trifenilfosfina i diizopropil azodikarboksilata, na temperaturama između -20°C i 40°C.
[0109] Alternativno, jedinjenja opšte formule (VI) mogu se dobiti iz fenola opšte formule (VII) pomoću reakcije sa oksiranima opšte formule (XXV) (Šema 2) kao elektrofilima (pri čemu R", R''' može nezavisno da bude H ili C1-C4-alkil), postupcima koji su poznati onima koji su verzirani u stanju tehnike u pogodnom rastvaraču (na primer N,N-dimetilformamidu, acetonitrilu ili dimetil sulfoksidu) u prisustvu baze (na primer kalijum karbonat ili cezijum karbonat) na temperaturama između 10°C i 120°C.
[0110] Na isti način kao što je gore opisano, jedinjenja formule (X) mogu se dobiti iz estra 3-bromo-5-hidroksibenzojeve kiseline formule sa formulom (XXVI) i jedinjenja formule (XXIV) ili formula (XXV), redom (Šema 2).
2
[0111] Pored toga, jedinjenja formule (VI) se takođe dobiti iz aril bromida opšte formule (XXVIII) pomoću reakcije sa heteroaromatičnim alkoholom sa formulom (XXIV) (LG: OH, R<2>: 5-10-člani heteroaromatični sistem), postupcima koji su poznati onima koji su verzirani u stanju tehnike u pogodnom rastvaraču (na primer N-metil-2-pirolidinon) u prisustvu baze (na primer kalijum karbonat ili cezijum karbonat) i bakar(I) hlorid, zagrevanjem reakcione smeše u mikrotalasnoj pećnici, na temperaturama između 100°C i 220°C (Šema 2).
[0112] Posle obrade i prečišćavanja može se desiti da se sledeći opisani postupak dobije karboksilna kiselina opšte formule (II) umesto pre pomenutog estra formule (VI).
[0113] Jedinjenja opšte formule (XXXIV) mogu se dobiti iz aril fluorida sa formulom (XXXII) pomoću reakcije sa alkoholima R2-OH opšte formule (XXXIII) (Šema 5), postupcima koji su poznati onima koji su verzirani u stanju tehnike u pogodnom rastvaraču (na primer N,N-dimetilformamid) u prisustvu baze (na primer natrijum hidrid) na temperaturama između 10°C i 80°C.
[0114] Jedinjenja opšte formule (XXXII) mogu se dobiti iz pinakol estra borne kiseline opšte formule (XXXI) pomoću reakcije sa bromo-tiazolima sa formulom (V) (Šema 5), analogno sintezi jedinjenja sa formulom (I) iz jedinjenja formule (IV).
[0115] Jedinjenja opšte formule (IV) mogu se dobiti iz aril bromida opšte formule (XI) pomoću reakcije sa bis(pinakolato)diboranom (Šema 3) u pogodnom rastvaraču (na primer 1,4-dioksanu) u prisustvu kalijum acetata i katalizatora (na primer kompleksa 1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen-paladijum(II)-dihlorid dihlorometan ili [1,1 '-bis(difenilfosfino) ferocen]di-hloropaladijum(II)) na temperaturama između 60°C i 100°C.
[0116] Analogno, jedinjenja opšte formule (IVa) mogu se dobiti iz aril bromida opšte formule (XIa).
[0117] Na isti način, jedinjenja formule (IX) mogu se dobiti iz aril bromida opšte formule (X) i isto tako jedinjenja opšte formule (VIII) mogu se dobiti iz estra 3-bromo-5-hidroksibenzojeve kiseline sa formulom (XXVI) (Šema 2).
2
[0118] Slično tome, jedinjenja opšte formule (XXXI) mogu se dobiti iz aril bromida opšte formule (XXX) (Šema 5).
[0119] Jedinjenja opšte formule (XI) mogu se dobiti iz karboksilnih kiselina opšte formule (XII) pomoću reakcije sa aminima opšte formule (III) (Šema 3), analogno sintezi jedinjenja sa formulom (I) iz karboksilnih kiselina formule (II) i amina sa formulom (III).
[0120] Analogno, jedinjenja opšte formule (XIa) mogu se dobiti iz karboksilnih kiselina opšte formule (XII) pomoću reakcije sa aminima opšte formule (IIIa).
[0121] Jedinjenja opšte formule (XXVIII) mogu se dobiti iz aril bromida opšte formule (XXVII) pomoću reakcije sa tiazolima sa formulom (XXIX) (Met: npr. tributilstananil) postupcima koji su poznati onima koji su verzirani u stanju tehnike u pogodnom rastvaraču (na primer N,N-dimetilformamidu) i uz dodavanje baze (na primer kalijum karbonat ili cezijum karbonat) i smeše katalizator-ligand (na primer paladijum(II) acetat/ trifenilfosfin, tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0)) na temperaturama između 40°C i 120°C (Šema 2).
[0122] Amini opšte formule (IIIa) mogu se dobiti iz sulfinamida opšte formule (XIII) ili (XIV) postupcima koji su poznati onima koji su verzirani u stanju tehnike u pogodnom rastvaraču (na primer metanolu, 2-propanolu, dietil etru) i uz dodavanje kiseline (na primer hlorovodonične kiseline) u odgovarajućim koncentracijama (npr. 4M u dioksanu, 3M u 2-propanolu, 2M u dietil etru, 12M u vodi) na temperaturama između 0°C i 40°C (Šema 4). Amini opšte formule (IIIa) mogu se dobiti kao mono, bis ili tris so (na primer hlorovodonična / dihidrohlorovodonična so). Alternativno, aminska sol se može pretvoriti u slobodnu bazu postupcima koji su poznati onima koji su verzirani u stanju tehnike.
[0123] Amini opšte formule (III) i (IIIa) mogu se koristiti kao slobodna baza ili so nedefinisane stehiometrije prema, ali ne ograničavajući se, na ovde opisanom sintetičkom otkriću za dobijanje jedinjenja opšte formule (I)/ (Ia) i opšte formule (XI)/ (XIa).
[0124] Sulfinamidi opšte formule (XIII) mogu se dobiti iz ketona opšte formule (XVII) koji se konvertuju in situ u sulfinimide opšte formule (XV) postupcima koji su poznati onima koji su verzirani u stanju tehnike u pogodnom rastvaraču (na primer dietil etar, tetrahidrofuran) i uz dodavanje titanijum(IV) etoksida i (S)-2-tert-butilsulfinamida, na temperaturama između 10°C i 80°C. Sulfinimidi (XV) mogu se direktno konvertovati u sulfinamide sa formulom (XIII) postupcima koji su poznati onima koji su verzirani u stanju tehnike u pogodnom rastvaraču (na primer tetrahidrofuran) i uz dodavanje L-selektrida, na temperaturama između -80°C i -70°C (Šema 4).
[0125] Sulfinamidi opšte formule (XIV) mogu se dobiti iz aldehida opšte formule (XVIII) koji se konvertuju u sulfinimide opšte formule (XVI) postupcima koji su poznati onima koji su verzirani u stanju tehnike u pogodnom rastvaraču (na primer dihloroetan) i uz dodavanje bakar(II) sulfata i (R)-2-tert-butilsulfinamida, na temperaturama između 10°C i 80°C. Sulfinimidi (XVI) mogu da se konvertuju u sulfinamide sa formulom (XIV) postupcima koji su poznati onima koji su verzirani u stanju tehnike u pogodnom rastvaraču (na primer tetrahidrofuran, dietil etar) i dodavanje Grignardovog reagensa R<3>MgX (X: Cl, Br), na temperaturama između -70°C i -20°C (Šema 4).
[0126] Amini koji imaju stereohemiju suprotnu stereohemiji opisanoj za amine opšte formule (IIIa) mogu se sintetizovati na analogan način kao što je opisano za amine (IIIa) polazeći od ketona (XVII) i koristeći (R)-2-tert-butilsulfinamid umesto (S)-2-tert-butilsulfinamid. Na sličan način, polazeći od aldehida (XVIII) i koristeći (S)-2-tert-butilsulfinamid umesto (R)-2-tert-butilsulfinamida.
[0127] Ketoni opšte formule (XVII) mogu se dobiti iz Weinrebovih amida opšte formule (XIX) postupcima koji su poznati onima koji su verzirani u stanju tehnike u pogodnom rastvaraču (na primer tetrahidrofuranu, dietil etru, tert-butil metil etru ili toluenu) i uz dodavanje Grignardovog reagensa R<3>MgX (X: Cl, Br, I), na temperaturama između -20°C i 0°C (Šema 4).
[0128] Isto tako, ketoni opšte formule (XVII) mogu se dobiti from nitrila opšte formule (XXII) i Grignardovog reagensa R<3>MgX (X: Cl, Br, I).
[0129] Pored toga, ketoni opšte formule (XVII) mogu se dobiti iz halogenida opšte formule (XXIII) (Hal: Cl, Br) postupcima poznatim stručnjacima u oblasti u odgovarajućem rastvaraču (na primer N,N-dimetilformamidu), tributil(1-etoksi-vinil)stananu i katalizatoru (na primer dihlorobis(trifenilfosfin)-paladijum(II)), na temperaturama između 40°C i 100°C i naknadnim cepanjem intermedijernog enolnog etra pod kiselim uslovima (na primer vodeni rastvor
1
hlorovodonične kiseline), u pogodnom rastvaraču (na primer tetrahidrofuran) na temperaturama između 10°C i 40°C (Šema 4).
[0130] Weinrebovi amidi opšte formule (XIX) mogu se dobiti iz karboksilnih kiselina opšte formule (XX) i N-metoksimetanamin na analogan način kao što je opisano za amide sa formulom (I) iz karboksilnih kiselina sa formulom (II).
[0131] Aldehidi opšte formule (XVIII) mogu se dobiti iz amida sa formulom (XIX) redukcionim postupcima poznatim stručnjacima u pogodnom rastvaraču (na primer tetrahidrofuran) i redukcionom sredstvu (na primer litijum aluminijum hidrid) na temperaturama između -80°C i -70°C (Šema 4).
[0132] Bromo-tiazoli opšte formule (V) mogu se dobiti iz amino-tiazola formule (XXXV) sa postupcima poznatim stručnjacima u odgovarajućem reakcionom medijumu (na primer vodeni rastvor bromovodonične kiseline/ natrijum nitrit, bakar(II) bromid/ tert-butil nitrit) u acetonitrilu ili N,N-dimetilformamid na temperaturama između 0°C i 40°C (Šema 4).
[0133] Pored toga, jedinjenja opšte formule Ia, IIIa, IVa i XIa mogu se dobiti direktno iz njihovih racemičnih, odnosno dijastereoizomernih smeša opšte formule I, III, IV i XI razdvajanjem pomenutih smeša korišćenjem postupaka poznatih nekome ko je vešt u oblasti tehnike (npr. preparativnoj hiralnoj HPLC).
Šema 1
2
Šema 2
Šema 3
4
Šema 4
Eksperimentalni deo
[0134] Ovde opisani primeri eksperimenata služe za ilustraciju ovog pronalaska i pronalazak nije ograničen na date primere.
[0135] Sledeća tabela navodi skraćenice korišćene u ovom pasusu i u delu sa primerima.
Metode analize
[0136]
LC-MS, Metod A: Rutinska analiza velike propusnosti
LC-MS, Metod B: Rutinska analiza velike propusnosti
LC-MS, Metod C: Rutinska analiza velike propusnosti pri visokom pH
LC-MS, Analitički metod D:
LC-MS, Analitički metod E: visoki pH
4
LC-MS, Analitički metod F:
Analitička LCMS Metod 1, nizak pH:
[0137] Instrument: Waters Acquity UPLCMS SingleQuad; Kolona: Acquity UPLC BEH C18 1.7 50x2.1 mm; eluent A: voda 0.1 vol % mravlje kiseline (99%), eluent B: acetonitril; gradijent: 0-1.6 min 1-99% B, 1.6-2.0 min 99% B; protok 0.8 ml/min; temperatura: 60 °C; DAD skeniranje: 210-400 nm.
Analitička LCMS Metod 2, visok pH:
[0138] Instrument: Waters Acquity UPLCMS SingleQuad; Kolona: Acquity UPLC BEH C18 1.7 50x2.1 mm; eluent A: voda 0.2 vol % vodeni rastvor amonijaka (32%), eluent B: acetonitril; gradijent: 0-1.6 min 1-99% B, 1.6-2.0 min 99% B; protok 0.8 ml/min; temperatura: 60 °C; DAD skeniranje: 210-400 nm.
Metode hiralne analize:
Postupci analitičke hiralne HPLC
Metod A:
[0139] Instrument: Agilent HPLC 1260; Kolona: Chiralpak IE 3µ 100x4,6mm; Eluent A: tertbutil metil etar 0.1 Vol-% dietilamin (99%); Eluent B: etanol; izokratski: 95%A 5%D; protok 1.4 ml/min; temperatura: 25 °C; DAD 325 nm
Metod B:
[0140] Instrument: Agilent: 1260, Aurora SFC-Modul; kolona: Chiralpak IF 5µm 100x4.6mm; eluent A: CO2, eluent B: etanol; izokratski: 16%B; protok 4.0 ml/min; temperatura: 37.5°C; BPR: 100bar; MWD @ 254 nm
Metod C:
4
[0141] Instrument: Agilent HPLC 1260; kolona: Chiralpak IC 3µ 100x4,6mm; eluent A: heksan; eluent B: 2-propanol; izokratski: 70%A+30%B; protok 1.0 ml/min; temperatura: 25 °C; DAD @ 254 nm
Metod D:
[0142] Instrument: Agilent HPLC 1260; kolona: Chiralpak IC 3µ 100x4,6mm; eluent A: heksan 0.1 Vol-% dietilamin (99%); eluent B: etanol; izokratski: 80%A+20%B; protok 1.0 ml/min; temperatura: 25 °C; DAD 254 nm
Metod E:
[0143] Instrument: Agilent HPLC 1260; kolona: Chiralpak IC 3µ 100x4,6mm; eluent A: heksan 0.1 Vol-% dietilamin (99%); eluent B: etanol; izokratski: 50%A+50%B; protok 1.4 ml/min; temperatura: 25 °C; DAD 254 nm
Metod F:
[0144] Instrument: Agilent: 1260, Aurora SFC-Modul; kolona: LUNA HILIC 5µm 100x4.6mm; eluent A: CO2, eluent B: metanol 0.2 Vol-% dietilamin (99%); izokratski: 20%B; protok 4.0 ml/min; temperatura: 37.5°C; BPR: 100bar; MWD @ 254nm
Metod G:
[0145] Instrument: Agilent HPLC 1260; kolona: Chiralpak IF 3µ 100x4.6mm; Eluent A: voda, Eluent B: acetonitril; izokratski: 70%A 30%B; protok 1.4 ml/min; temperatura: 25 °C; MWD @ 220 nm
Metode prečišćavanja:
[0146] Biotage Isolera™ sistem hromatografije koji koristi prethodno upakovani silicijum dioksid i prethodno upakovane modifikovane patrone silicijum dioksida.
Preparativna HPLC, Metod A: Visok pH
[0147]
Preparativna HPLC, Metod B: Nizak pH
4 Metode preparativne HPLC
Preparativna HPLC, metod 1:
[0147] Sistem: Waters sistem automatskog prečišćavanja: Pumpa 2545, Menadžer uzoraka 2767, CFO, DAD 2996, ELSD 2424, SQD; Kolona: XBrigde C185µm 100x30 mm;
Rastvarač: A = H2O 0.1% Vol. mravlje kiseline (99%), B = acetonitril; Gradijent: 0-8 min 10-100% B, 8-10 min 100% B; protok: 50 mL/min; temperatura: sobna temperatura;
Rastvarač: Max. 250 mg / max.2.5 mL DMSO o. DMF; ubrizgavanje: 1 x 2.5 mL; Detekcija: DAD opseg skeniranja 210-400 nm; MS ESI+, ESI-, opseg skeniranja 160-1000 m/z.
Preparativna HPLC, metod 2:
[0148] Sistem: Waters sistem automatskog prečišćavanja: Pumpa 2545, Menadžer uzoraka 2767, CFO, DAD 2996, ELSD 2424, SQD; Kolona: XBrigde C185µm 100x30 mm;
Rastvarač: A = H2O 0.1% Vol. amonijaka (99%), B = acetonitril; Gradijent: 0-8 min 10-100% B, 8-10 min 100% B; protok: 50 mL/min; temperatura: sobna temperatura.; Rastvarač: Max. 250 mg / max.2.5 mL DMSO o. DMF; ubrizgavanje: 1 x 2.5 mL; Detekcija: DAD opseg skeniranja 210-400 nm; MS ESI+, ESI-, opseg skeniranja 160-1000 m/z.
Metode hiralnog prečišćavanja:
[0149]
4
Metode preparativne hiralne HPLC
Metod A:
[0149] Instrument: Labomatic HD5000, Labocord-5000; Gilson GX-241, Labcol Vario 4000; kolona: Chiralpak IE 5µ 250x30mm; eluent A: etanol 0.1 Vol-% dietilamin (99%); eluent B: tert.-butil metil etar; izokratski: 5%A+95%B; protok 50.0 ml/min; UV 325 nm
Metod B:
[0150] Instrument: Sepiatec: Prep SFC100; kolona: Chiralpak IF 5µm 250x30mm; eluent A: CO2, eluent B: etanol; izokratski: 16%B; protok 100.0 ml/min; temperatura: 40°C; BPR: 150bar; MWD @ 254 nm
Metod C:
4
[0151] Instrument: Agilent PrepHPLC 1200, kolona: Chiralpak IC 5µ 250x20mm; eluent A: heksan; eluent B: 2-propanol; izokratski: 70%A+30%B; protok 15.0 ml/min; UV @ 254 nm
Metod D:
[0152] Instrument: Labomatic HD5000, Labocord-5000; Gilson GX-241, Labcol Vario 4000, kolona: Chiralpak IC 5µ 250x30mm; eluent A: heksan 0.1 Vol-% dietilamin (99%); eluent B: etanol; izokratski: 80%A+20%B; protok 50.0 ml/min; UV 254 nm
Metod E:
[0153] Instrument: Labomatic HD5000, Labocord-5000; Gilson GX-241, Labcol Vario 4000, kolona: Chiralpak IC 5µ 250x30mm; eluent A: heksan 0.1 Vol-% dietilamin (99%); eluent B: etanol; izokratski: 70%A+30%B; protok 50.0 ml/min; UV 254 nm
Metod F:
[0154] Instrument: Sepiatec: Prep SFC100; kolona: LUNA HILIC 5µm 250x30mm; eluent A CO2, eluent B: metanol 0.5 Vol-% amonijaka (32%); izokratski: 20%B; protok 100.0 ml/min temperatura: 40°C; BPR: 90bar; MWD @ 254nm
PRIMERI
[0155] Hemijsko imenovanje primera i intermedijera je izvedeno korišćenjem softvera ACD kompanije ACD/LABS ili softvera Marvin kompanije ChemAkon.
[0156] Primeri koji ne spadaju u obim zahteva 1 nisu deo ovog pronalaska.
[0157] Vremena reakcije su ili eksplicitno navedena u protokolima eksperimentalnog odeljka, ili su reakcije vođene do završetka. Hemijske reakcije su nadgledane i njihov završetak je procenjen korišćenjem postupaka dobro poznatih stručnjaku, kao što je tankoslojna hromatografija, npr. na pločama presvučenim silika gelom ili LCMS metodama.
Intermedijer 1: Metil 3-bromo-5-hidroksibenzoat
4
[0158] Rastvor 3-bromo-5-hidroksibenzojeve kiseline (47.7 g, 0.22 mol) i acetil hlorida (31.5 mL, 0.44 mol) u metanolu (500 mL) je mešan pod refluksom tokom 16 h. TLC analiza je pokazala potpunu konverziju u jedan proizvod. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 49.9 g (98 % prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu beličastog praha, koji je korišćen bez daljeg prečišćavanja u sledećem koraku.
<1>H NMR (250 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 7.74 (t, J = 1.5 Hz, 1H), 7.46 (dd, J = 2.4, 1.3 Hz, 1H), 7.25 - 7.16 (m, 1H), 5.57 (s, 1H), 3.92 (s, 3H).
Intermedijer 2: Metil 3-hidroksi-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzoat
[0159] Metil 3-bromo-5-hidroksibenzoat (26 g, 112.5 mmol), bis(pinakolato)diboran (31.4 g, 123.8 mmol) i kalijum acetat (33.1 g, 337.6 mmol) su rastvoreni u 1,4-dioksanu (450 mL) i rastvor je degasiran sa strujom azota tokom 10 min. Dodat je Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2(4.6 g, 5.62 mmol) i dobijeni rastvor je degasiran strujom azota tokom daljih 5 min pre nego što je reakciona smeša mešana na 100 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je filtrirana kroz Celite® i koncentrovana u vakuumu dajući smeđu čvrstu supstancu. Sirovi materijal je prečišćen sa suvom fleš hromatografijom na silicijum dioksidu (eluiranje sa 0 - 25% EtOAc u heptanima). Frakcije koje sadrže proizvod su koncentrovane, materijal je suspendovan u heptanu i čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom da se dobije naslovno jedinjenje 30.1 g (96 % prinosa) u vidu krem praha.
[0160]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.04 (s, 1H), 7.60 (dd, J = 2.7, 1.5 Hz, 1H), 7.47 - 7.41 (m, 1H), 4.95 (s, 1H), 3.90 (s, 3H), 1.35 (s, 12H).
Intermedijer 3: Metil 3-hidroksi-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoat
[0161] Intermedijer 2 (1.0 g, 3.60 mmol) i 2-bromo-5-metil-1,3-tiazol (0.451 mL, 4.32 mmol) su rastvoreni u 1M vodenom rastvoru K2CO3(8.63 mL) i THF (58.7 mL). Rastvor je
4
degasiran sa mlazom azota tokom 10 minuta, dodat je [1,1'-Bis(difenilfosfino)ferocen] paladijum(II) dihlorid (395.3 mg, 0.539 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 90 °C tokom 17 h do završetka reakcije (praćeno pomoću TLC). Reakciona smeša je razblažena sa vodom (100 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni (iznad MgSO4) i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (eluiranje sa 12 - 80 % EtOAc u heptanu na 25 g prethodno upakovane kolone KP-SiO2) da se dobije 359.7 mg (40% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu beličastog praha.
[0162]<1>H NMR (250 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.06 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.67 - 7.62 (m, 1H), 7.54 (dd, J = 2.5, 1.4 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 5.84 (s, 2H), 3.93 (s, 3H), 2.53 (d, J = 1.1 Hz, 3H).
Intermedijer 3A: Metil 3-(5-etil-1,3-tiazol-2-il)-5-hidroksibenzoat
[0163] Smeša Intermedijera 2 (7.08 g, 25.5 mmol), 2-hloro-5-etil-1,3-tiazola (4.51 g, 30.5 mmol), [1,1,-Bis-(difenilfosfino)-ferocen]-paladijum(II) dihlorida (3.12 g, 3.82 mmol), i K2CO3(31 ml, 2.0 M, 61 mmol) u THF (420 mL) mešana je na refluksu do potpune konverzije. Rastvarač je uparen pod sniženim pritiskom, dodata je voda i smeša je ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani sa zasićenim vodenim rastvorom NaCl i upareni do suva pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent heksan / EtOAc) da se dobije 2.54 g (38% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0164]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 1.26 - 1.32 (m, 3 H) 2.89 (m, 2 H) 3.87 (s, 3 H) 7.39 (dd, 1 H) 7.52 (dd, 1 H) 7.66 (t, 1 H) 7.87 (t, 1 H) 10.24 (s, 1 H).
Intermedijer 3B: Metil 3-(5-hloro-1,3-tiazol-2-il)-5-hidroksibenzoat
[0165] Smeša Intermedijera 2 (30.1 g, 50 % čistoća, 54.2 mmol), 2-bromo-5-hloro-1,3-tiazola (14.0 g, 70.4 mmol), [1,1,-Bis-(difenilfosfino)-ferocen]-paladijum(II) dihlorida (6.63 g, 8.13 mmol), i K2CO3(65 mL, 2.0 M, 130 mmol) u THF (890 mL) mešana je na refluksu do potpune konverzije. Rastvarač je uparen pod sniženim pritiskom, dodata je voda i smeša je ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani sa zasićenim vodenim rastvorom NaCl i upareni do suva pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent heksan / EtOAc) da se dobije 5.21 g (34% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0166]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 3.85 - 3.90 (m, 3 H) 7.44 (dd, 1 H) 7.51 (dd, 1 H) 7.84 (t, 1 H) 7.99 (s, 1 H) 10.35 (br. s., 1 H).
Intermedijer 4A: Metil 3-(ciklopropilmetoksi)-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoat
[0167] Intermedijer 3 (500mg, 2.0 mmol), (bromometil)ciklopropan (331 uL, 3.41 mmol) i kalijum karbonat (554 mg, 4.01 mmol) su mešani u acetonitrilu na 100°C tokom 4h. Reakcija je ponovo tretirana sa (bromometil)ciklopropanom (331 uL, 3.41 mmol) i mešana na 100°C tokom još 4h. Reakciona smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (eluiranje sa 1 - 40 % EtOAc u heptanu na 50 g prethodno upakovane kolone HP-SiO2) da se dobije naslovno jedinjenje 498.4 mg (74 % prinosa) u vidu bledo žute polu-kristalne čvrste supstance.
[0168]<1>H NMR (250 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.10 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.73 - 7.64 (m, 1H), 7.59 (dd, J = 2.5, 1.4 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 3.92 (d, J = 6.9 Hz, 5H), 2.52 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 1.35 - 1.26 (m, 1H), 0.73 - 0.60 (m, 2H), 0.38 (q, J = 4.7 Hz, 2H).
[0169] LCMS (Analitički metod A): Rt = 1.48 min, MS (ESIpos): m/z = 304 (M+H)<+>.
Intermedijer 5A: 3-(Ciklopropilmetoksi)-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina
1
[0170] Intermedijer 4A (498.4 mg, 1.48 mMol) je rastvoren u MeOH (5 mL) i dodat je THF (5 mL). 1M LiOH (2.2 mL), i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2h. Dodato je još 1M LiOH (1 mL) i reakcija je mešana tokom 1h. Reakciona smeša je koncentrovana do suva, a ostatak je prebačen u vodu (5 mL) i ispran sa EtOAc (2 x 5 mL). Vodeni sloj je zakišeljen do pH 4 sa 1M HCl i ekstrahovan sa DCM (4 x 10 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni (MgSO4), filtrirani i koncentrovani da se dobije naslovno jedinjenje 389.5 mg (91 % prinosa) u vidu belog praha.
[0171]<1>H NMR (250 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.27 (s, 1H), 7.68 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.65 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 3.94 (d, J = 6.9 Hz, 2H), 2.54 (d, J = 1.0 Hz, 3H), 1.28 (d, J = 14.7 Hz, 1H), 0.68 (q, J = 6.1 Hz, 2H), 0.39 (q, J = 4.8 Hz, 2H).
[0172] LC-MS (Analitički metod A) Rt = 1.32 min, MS (ESIpos): m/z = 290 (M+H)<+>.
Intermedijer 6B: (3S)-Tetrahidrofuran-3-il 4-metilbenzensulfonat
[0173] Rastvor (3S)-tetrahidrofuran-3-ola (23.6.0 g, 268 mmol), TEA (56 ml, 402 mmol) i trimetilamin hidrohlorida (2.6 g, 27 mmol) je mešan u DCM (500 mL) i ohlađen na 0°C. U porcijama je dodat 4-metilbenzensulfonil hlorid (63.8 g, 335 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4h. TLC (50% EtOAc u heptanu) je pokazala potpunu potrošnju alkohola. Višak 4-metilbenzensulfonil hlorida je reagovao sa N,N-dimetiletan-1,2-diaminom (8.8 ml, 80 mmol). Sirova reakciona smeša je isprana sa 1 M HCl (2 x 500 mL) i organski deo je osušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom da se dobije naslovno jedinjenje 64.6 g (99 % prinosa) u vidu narandžastog viskoznog ulja.
2
[0174]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 7.79 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.35 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 5.11 (tt, J = 4.7, 2.3 Hz, 1H), 3.91 - 3.78 (m, 4H), 2.45 (s, 3H), 2.12 - 2.07 (m, 2H).
Intermedijer 7: Metil 3-bromo-5-[(3R)-tetrahidrofuran-3-iloksi]benzoat
[0175] Smeša Intermedijera 1 (15 g, 4.33 mmol), Intermedijera 6B (20.4 g, 84.4 mmol) i cezijum karbonata (42.3 g, 129.8 mmol) je mešana u acetonitrilu (250 mL) na 100°C preko noći. Ohlađena reakciona smeša je filtrirana kroz celite, isprana sa EtOAc i filtrat je uparen. Ostatak je rastvoren u EtOAc (200 mL), ispran sa vodom (2 x 200 mL), fiziološkim rastvorom (100 mL), osušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (eluiranje sa 1 - 50 % EtOAc u heptanu na 340 g prethodno upakovane kolone HP-SiO2) da se dobije naslovno jedinjenje 18.12 g (92 % prinosa) u vidu bezbojnog ulja.
[0176]<1>H NMR (250 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 7.77 (t, J = 1.5 Hz, 1H), 7.44 (dd, J = 2.4, 1.3 Hz, 1H), 7.23 - 7.19 (m, 1H), 4.96 (ddt, J = 6.2, 4.2, 2.0 Hz, 1H), 4.06 - 3.86 (m, 7H), 2.33 - 2.19 (m, 1H), 2.18 - 2.05 (m, 1H).
Intermedijer 8: Metil 3-[(3R)-tetrahidrofuran-3-il]oksi-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzoat
[0177] Intermedijer 7 (18.1 g, 59.8 mmol), bis(pinakolato)diboran (16.7 g, 65.7 mmol) i kalijum acetat (17.6 g, 179.3 mmol) su rastvoreni u 1,4-dioksanu (200 mL) i rastvor je degasiran sa strujom azota tokom 10 min. Dodat je Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2(2.4 g, 2.99 mmol) i dobijeni rastvor se degasira sa strujom azota tokom dodatnih 10 min pre nego što je reakciona smeša mešana na 100 °C tokom 2h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, zatim filtrirana kroz Celite® i koncentrovana u vakuumu tokom 2h u dajući smeđu čvrstu supstancu. Sirovi materijal je prečišćen sa suvom fleš hromatografijom na silicijum dioksidu (eluiranje sa 0 - 25 % EtOAc u heptanima). Materijal je dalje prečišćen suspendovanjem u heptanu da se dobije naslovno jedinjenje 16.57 g (80 % prinosa) u vidu beličaste čvrste supstance.
[0178]<1>H NMR (250 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.06 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 7.61 (dd, J = 2.7, 1.5 Hz, 1H), 7.54 - 7.45 (m, 1H), 5.03 (ddt, J = 6.4, 4.4, 2.0 Hz, 1H), 4.07 - 3.86 (m, 7H), 2.32 - 2.08 (m, 2H), 1.34 (s, 12H).
Intermedijer 4B: Metil 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3R)-tetrahidrofuran-3-iloksi]benzoat
[0179] Intermedijer 8 (5.2 g, 14.9 mmol), 2-bromo-5-metil-1,3-tiazol (1.87 mL, 17.9 mmol) i cezijum karbonat (12.2 g, 37.3 mmol) su rastvoreni u 4:11,4-dioksanu/vodi (75 mL). Rastvor je degasiran sa mlazom azota tokom 10 min. Dodat je tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0) (517.7 mg, 0.45 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 100 °C preko noći. Reakciona smeša je razblažena sa vodom (100 mL) i ekstrahovana sa DCM (2 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni (MgSO4), filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (eluiranje sa 1 - 40 % EtOAc u heptanu na 100 g koloni KP-SiO2) da se dobije naslovno jedinjenje 3.06 g (64 % prinosa) u vidu žute čvrste supstance.
[0180]<1>H NMR (250 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.11 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.67 - 7.63 (m, 1H), 7.55 (dd, J = 2.5, 1.4 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 5.07 (td, J = 4.1, 2.2 Hz, 1H), 4.11 - 3.86 (m, 7H), 2.53 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 2.35 - 2.09 (m, 2H).
[0181] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.34 min, MS (ESIpos): m/z = 320 (M+H)<+>.
4
Intermedijer 5B: 3-(5-Metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3R)-tetrahidrofuran-3-iloksi]benzoeva kiselina
[0182] Analogno za Intermedijer 5A, reakcija 8 g (25.0 mmol) Intermedijera 4B sa 1M litijum hidroksida (20 mL) dala je naslovno jedinjenje 5.83 g (76 % prinosa) u vidu belog praha.
[0183]<1>H NMR (250 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.30 (s, 1H), 7.69 - 7.56 (m, 3H), 5.08 (s, 1H), 4.12 - 3.87 (m, 4H), 2.54 (s, 3H), 2.39 - 2.11 (m, 2H).
[0184] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.16 min, MS (ESIpos): m/z = 305.9 (M+H)<+>.
Intermedijer 6C: (3R)-Tetrahidrofuran-3-il 4-metilbenzensulfonat
[0185] Rastvor (3R)-tetrahidrofuran-3-ol (18.0 g, 204 mmol), TEA (43 mL, 306 mmol) i trimetilamin hidrohlorid (1.95 g, 20 mmol) su mešani u DCM (625 mL) na sobnoj temperaturi.
4-Metilbenzensulfonil hlorid (42.8 g, 2255 mmol) dodat je i smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 20h. Višak 4-metilbenzensulfonil hlorida je reagovao sa N,N-dimetiletan-1,2-diaminom (26 ml, 245 mmol). Dodata je voda i sirova reakciona smeša je ekstrahovana tri puta sa DCM. Kombinovani organski delovi su koncentrovani pod sniženim pritiskom i prečišćeni hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent heksan/ EE) da se dobije 41 g (83 % prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0186]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.83 - 1.94 (m, 1 H) 2.08 (dtd, J=14.29, 8.32, 8.32, 6.08 Hz, 1 H) 2.43 (s, 3 H) 3.61 - 3.80 (m, 4 H) 5.12 (ddt, J=5.83, 3.87, 1.62, 1.62 Hz, 1 H) 7.49 (d, J=8.11 Hz, 2 H) 7.81 (d, J=8.36 Hz, 2 H).
Intermedijer 4C: Metil 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3S)-tetrahidrofuran-3-iloksi]benzoat
[0187] Intermedijer 3 (4.5 g, 18.2 mmol), Intermedijer 6C (5.3 g , 21.8 mmol) i cezijum karbonat (8.9 g, 27.3 mmol) su mešani u DMF (100 mL) na 90°C tokom 36h. Reakciona smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent heksan/ EE) da se dobije 3.9 g (67 % prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0188]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.96 - 2.05 (m, 1 H) 2.20 - 2.31 (m, 1 H) 3.74 - 3.82 (m, 1 H) 3.82 - 3.94 (m, 6 H) 5.19 - 5.26 (m, 1 H) 7.48 (dd, J=2.41, 1.39 Hz, 1 H) 7.61 (dd, J=2.28, 1.52 Hz, 1 H) 7.66 (d, J=1.27 Hz, 1 H) 8.00 (t, J=1.39 Hz, 1 H).
Intermedijer 5C: 3-(5-Metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3S)-tetrahidrofuran-3-iloksi]benzoeva kiselina
[0189] Intermedijer 4C (3.9 g, 12.2 mmol) je rastvoren u MeOH (200 mL). Dodato je 2M NaOH (30.5 mL), i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 dana. Reakciona smeša je neutralisana sa 2N HCl, vodena faza je ekstrahovana sa DCM i kombinovani organski slojevi su koncentrovani do suva pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 2.3 g (62 % prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0190]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.95 - 2.05 (m, 1 H) 2.19 - 2.30 (m, 1 H) 3.73 - 3.94 (m, 4 H) 5.20 (dd, J=5.96, 4.44 Hz, 1 H) 7.46 (dd, J=2.41, 1.39 Hz, 1 H) 7.58 (dd, J=2.41, 1.65 Hz, 1 H) 7.65 (d, J=1.27 Hz, 1 H) 7.98 (t, J=1.39 Hz, 1 H) 13.06 - 13.46 (m, 1 H).
Intermedijer 4D: 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-(prop-2-in-1-iloksi)benzoat
[0191] U rastvor Intermedijera 3 (300 mg, 1.203 mmol) u acetonu (15 mL) dodat je K2CO3(831.6 mg, 6.017 mmol) i 3-bromoprop-1-in (201.1 µL, 1.805 mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 2 h pod refluksom, zatim je ohlađena na sobnu temperaturu i uparena do suva. Sirovi materijal je prebačen u DCM i ispran sa 1M NaOH (aq) i slanim rastvorom. Organska faza je uparena do suva da bi se dobio tamno-žutosmeđi prah 489 mg (>100% prinosa). Prečišćavanjem sa Biotage Isolera ™ hromatografijom (na prethodno upakovanoj koloni od 10 g silicijum dioksida eluiranjem sa EtOAc/ heptanima 0 - 100%) dobijeno je naslovno jedinjenje 335 mg (97% prinosa) u vidu svetlo žutog praha.
[0192]<1>H NMR (250 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.16 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.74 (dd, J = 2.5, 1.6 Hz, 1H), 7.66 (dd, J = 2.6, 1.4 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 4.80 (d, J = 2.4 Hz, 2H), 3.94 (s, 3H), 2.55 (t, J = 2.4 Hz, 1H), 2.53 (d, J = 1.1 Hz, 3H).
Intermedijer 5D: 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-(prop-2-in-1-iloksi)benzoeva kiselina
[0193] Analogno za Intermedijer 5A, reakcija 300 mg (0.625 mmol) Intermedijera 4D sa 1M litijum hidroksida (0.9 mL) dala je 159 mg (89 % prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0194]<1>H NMR (250 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 8.07 - 7.94 (m, 1H), 7.74 - 7.60 (m, 2H), 7.56 (dd, J = 2.4, 1.3 Hz, 1H), 4.96 (d, J = 2.3 Hz, 2H), 3.63 (t, J = 2.3 Hz, 1H), 2.50 (s, 3H).
Intermedijer 4E: Metil 3-(but-2-in-1-iloksi)-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoat
[0195] U rastvor Intermedijera 3 (250 mg, 1.0 mmol) rastvoren u acetonu (10 mL) dodat je K2CO3(693 mg, 5.0 mmol) i 1-bromo-2-butin (175.4 µL, 2.0 mmol) i reakciona smeša je mešana tokom 2 h na 60°C u zatvorenoj epruveti. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, filtrirana i uparena do suva. Ostatak je prebačen u DCM i ispran sa vodom. Organska faza je osušena (iznad MgSO4) i uparena pod sniženim pritiskom dajući 300.9 mg (98 % prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu tamnog praha.
[0196]<1>H NMR (250 MHz, CDCl3) δ [ppm] 8.15 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.74 - 7.70 (m, 1H), 7.65 (dd, J = 2.5, 1.4 Hz, 1H), 7.54 - 7.50 (m, 1H), 4.75 (q, J = 2.3 Hz, 2H), 3.94 (s, 3H), 2.53 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 1.87 (t, J = 2.3 Hz, 3H).
[0197] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.43 min, MS (ESIpos): m/z = 302 (M+H)+.
Intermedijer 5E: 3-(But-2-in-1-iloksi)-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina
[0198] U rastvor Intermedijera 4E (300 mg, 1.00 mmol) u MeOH (5 mL) i THF (5 mL) dodat je 1M LiOH (2 mL) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Reakciona smeša je koncentrovana i ostatak je rastvoren u vodi (5 mL) i isprana sa EtOAc (5 mL). Vodeni sloj je zakišeljen do pH 4 sa 1M HCl i talog je sakupljen vakuumskom filtracijom i osušen u vakuumskoj peći da bi se dobilo 245.1 mg (85 % prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu belog praha.
[0199]<1>H NMR (250 MHz, DMSO-d6): δ 8.00 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.65 (q, J = 1.4 Hz, 2H), 7.54 (dd, J = 2.5, 1.3 Hz, 1H), 4.89 (d, J = 2.4 Hz, 2H), 1.84 (t, J = 2.3 Hz, 3H).
Intermedijer 4F: Metil 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-(oksetan-3-iloksi)benzoat
[0200] Intermedijer 3 (300 mg, 1.2 mmol), oksetan-3-il tozilat (357 mg, 1.56 mmol) i cezijum karbonat (588 mg, 1.81 mmol) su kombinovani u acetonitrilu (5 mL) i mešani na 100 °C u zatvorenoj epruveti tokom 6 h, zatim na 110 °C tokom 4 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i filtrirana kroz celit, isprana sa EtOAc. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom i prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (silika gel eluiranje sa heptanima - etil acetat 9:1 do 2:3) da se dobije 163.5 mg (43 % prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bezbojne gume.
[0201]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] = 8.12 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 7.51 (dd, J = 2.5, 1.6 Hz, 1H), 7.37 (dd, J = 2.5, 1.3 Hz, 1H), 5.33 (p, J = 5.6 Hz, 1H), 5.07 - 4.98 (m, 2H), 4.78 (dd, J = 7.9, 5.1 Hz, 2H), 3.94 (s, 3H), 2.53 (d, J = 1.1 Hz, 3H).
[0202] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.29 min, MS (ESIpos): m/z = 309.95 (M+H)<+>.
Intermedijer 5F: 3-(5-Metil-1,3-tiazol-2-il)-5-(oksetan-3-iloksi)benzoeva kiselina
[0203] Metil 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-(oksetan-3-iloksi)benzoat (163.5 mg, 0.52 mmol) je mešan u 1M LiOH (1 mL), THF (2 mL) i MeOH (2 mL) tokom 1h. Organski slojevi su uklonjeni pod sniženim pritiskom i ostatak je prebačen u vodu (5 mL) i zakišeljen do pH 3 sa 1 M HCl. Dobijeni talog je sakupljen vakuumskom filtracijom da bi se dobilo 151.8 mg (100 % prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu belog praha.
[0204]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] = 8.31 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.59 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 7.53 (dd, J = 2.4, 1.7 Hz, 1H), 7.42 (dd, J = 2.4, 1.3 Hz, 1H), 5.35 (p, J = 5.6 Hz, 1H), 5.05 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 4.80 (dd, J = 7.7, 5.1 Hz, 2H), 2.54 (d, J = 1.0 Hz, 3H).
[0205] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.12 min, MS (ESIpos): m/z = 219.95 (M+H)<+>.
Intermedijer 4G: Metil 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(2S)-tetrahidrofuran-2-ilmetoksi]benzoat
[0206] U rastvor Intermedijera 3 (500 mg, 2.0 mmol), (2S)-tetrahidrofuran-2-ilmetanola (245 mg, 2.4 mmol) i PPh3(789 mg, 3.0 mmol) u DCM (20 mL) dodat je DIAD (0.6 mL, 3.0 mmol) i dobijeni rastvor je mešan tokom 18h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana i prečišćena sa Biotage Isolera™ hromatografijom (silika gel, eluiranje sa 20 -60 % EtOAc u heptanima) da se dobije 550 mg (50 % prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bezbojne gume.
[0207]<1>H NMR (500 MHz, CDCl3): δ [ppm] 8.11 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.70 (dd, J = 2.5, 1.6 Hz, 1H), 7.61 (dd, J = 2.5, 1.4 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 4.36 - 4.23 (m, 1H), 4.12 - 4.03 (m, 2H), 3.99 - 3.91 (m, 4H), 3.88 - 3.81 (m, 1H), 2.52 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 2.13 - 2.05 (m, 1H), 2.03 - 1.89 (m, 2H), 1.84 - 1.74 (m, 1H).
[0208] LCMS (Analitički metod F): Rt = 3.64 min, MS (ESIpos); m/z = 33 (M+H)+.
Intermedijer 5G: 3-(5-Metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(2S)-tetrahidrofuran-2-ilmetoksi]benzoeva kiselina
[0209] Smeša metil 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(2S)-tetrahidrofuran-2-ilmetoksi]benzoata (600 mg, 1.83 mmol) i 1M LiOH (10 mL, 10 mmol) u THF (20 mL) je mešana na sobnoj temperaturi tokom 18h. Reakcija je neutralisana sa 1M HCl (10 mL) na 0°C, pre dodavanja 10 mL pufera (pH = 6.5). Vodena faza je ekstrahovana sa CHCl3/ iPrOH (1:1, 4 x 5 mL) i kombinovani organski sloj je osušen (iznad Na2SO4) i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (silika gel, eluiranje sa 50% EtOAc u heptanu i zatim 10% MeOH u DCM) da se dobije 520 mg (84 % prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu žute gume.
[0210]<1>H NMR (500 MHz, CDCl3): δ [ppm] 8.24 (s, 1H), 7.67 (s, 2H), 7.54 (s, 1H), 4.31 (s, 1H), 4.15 - 3.77 (m, 4H), 2.50 (s, 3H), 2.13 - 1.66 (m, 4H).
[0211] LCMS (Analitički metod A): Rt = 1.22min, MS (ESIpos); m/z = 391 (M+H)<+>.
Intermedijer 4H: Metil 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(2R)-tetrahidrofuran-2-ilmetoksi]benzoat
[0212] U suspenziju Intermedijera 3 (600 mg, 2.4 mmol) u DCM (10 mL) dodat je (2R)-tetrahidrofuran-2-ilmetanol (295 mg, 2.9 mmol) i trifenilfosfin (950 mg, 3.6 mmol). Dodat je DIAD (0.7 mL, 3.6 mmol) na ∼10°C i dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 20 sati. Reakciona smeša je koncentrovana i ostatak je rastvoren u THF (10 mL) i ponovno tretiran sa (2R)-tetrahidrofuran-2-ilmetanolom (150 mg, 1.4 mmol), trifenilfosfinom (475 mg,
1
1.8 mmol), DIAD (0.7 mL, 3.6 mmol) i dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 72 sata. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i ostatak je podeljen između vode (20 mL) i EtOAc (20 mL). Vodeni sloj je ponovo ekstrahovan sa EtOAc (2 x 20 mL) i kombinovane organske supstance su osušene (iznad MgSO4) i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (eluiranje sa 12 - 100 % EtOAc u heptanu na 55 g unapred pakovanoj koloni KP-NH SiO2) da se dobije 973 mg (55% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0213]<1>H NMR (250 MHz, CDCl3): δ [ppm] 8.11 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.76 - 7.67 (m, 1H), 7.66 - 7.58 (m, 1H), 7.52 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 4.37 - 4.25 (m, 1H), 4.19 - 4.04 (m, 3H), 3.93 (s, 4H), 3.91 - 3.81 (m, 2H), 3.80 - 3.67 (m, 2H), 2.52 (d, J = 1.0 Hz, 3H).
[0214] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.39, MS (ESIpos): m/z = 334.1 (M+H)+.
Intermedijer 5H: 3-(5-Metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[[(2R)-tetrahidrofuran-2-il]metoksi]benzoeva kiselina
[0215] U rastvor metil 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(2R)-tetrahidrofuran-2-ilmetoksi]benzoata (973.mg, -45% čistoća, 1.31 mmol) u THF (1.8 mL) i metanolu (1.3 mL) dodat je 1M LiOH (1.84 mL, 1.84 mmol) i rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 2h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se uklonili organski rastvarači, razblažena sa 1M NaOH (13 mL) i isprana sa etil acetatom (2 x 20 mL). Vodena faza je zakišeljena do pH 4 sa 1M HCl i dobijeni talog je sakupljen filtracijom, ispran sa vodom i osušen u vakuumskoj pećnici da bi se dobilo 258 mg (61 % prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu belog praha.
[0216]<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 13.27 (s, 0.5H), 8.05 - 7.91 (m, 1H), 7.69 -7.63 (m, 1H), 7.63 - 7.57 (m, 1H), 7.54 - 7.43 (m, 1H), 4.24 - 4.15 (m, 1H), 4.15 - 4.07 (m,
2
1H), 4.07 - 3.99 (m, 1H), 3.83 - 3.76 (m, 1H), 3.72 - 3.66 (m, 1H), 2.51 (s, 3H), 2.07 - 1.96 (m, 1H), 1.96 - 1.77 (m, 2H), 1.77 - 1.64 (m, 1H).
[0217] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.24 min, MS (ESIpos): m/z = 320 (M+H)<+>.
Intermedijer 4I: Metil 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3S)-tetrahidrofuran-3-ilmetoksi]benzoat
[0218] U suspenziju Intermedijera 3 (300 mg, 1.2mmol), (3R)-tetrahidrofuran-3-ilmetanola (185 mg, 1.8 mmol) i trifenilfosfina (475 mg, 1.8 mmol) u DCM (10 mL) dodat je DIAD (355 µl, 1.8 mmol) i dobijeni rastvor je mešan tokom vikenda (∼65 sati) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je isprana sa vodom (20 mL) i vodeni sloj je ponovo ekstrahovan sa DCM (2 x 20 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni (iznad MgSO4) i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (silika gel, eluiranje sa heptani-EtOAc, 1:0 do 35:65) da se dobije 700 mg (91 % prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0219]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] = 8.09 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.71 - 7.67 (m, 1H), 7.58 (dd, J = 2.5, 1.4 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 4.05 (dd, J = 8.9, 6.5 Hz, 1H), 4.02 - 3.97 (m, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.96 - 3.88 (m, 5H), 3.83 - 3.77 (m, 1H), 3.72 (dd, J = 8.9, 5.3 Hz, 1H), 2.77 (hept, J = 6.8, 6.2 Hz, 1H), 2.53 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 2.13 (dtd, J = 13.5, 8.1, 5.6 Hz, 1H), 1.76 (td, J = 12.7, 6.9 Hz, 1H).
Intermedijer 5I: 3-(5-Metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3S)-tetrahidrofuran-3-ilmetoksi]benzoeva kiselina
[0220] U rastvor metil 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3S)-tetrahidrofuran-3-ilmetoksi]benzoat (939mg, 1.41 mmol, -50 % čistoća) u THF (3 mL) dodat je 1M vodenog rastvora natrijum hidroksida (3 mL). Reakcija je snažno mešana tokom 18 h na sobnoj temperaturi, dodat je dodatni deo 1M vodenog rastvora natrijum hidroksida (1 mL) i reakciona smeša je snažno mešana tokom 4 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zakišeljena do pH 3 sa 1M HCl i ekstrahovana u EtOAc (3x 30 mL) i kombinovane organske materije su isprane sa 1M HCl (4 x 20 mL). Vodena faza je koncentrovana (do -20 mL) i ekstrahovana sa DCM (4 x 20 mL). Kombinovane DCM i EtOAc organske materije su osušene (iznad MgSO4) i koncentrovane da bi se dobilo 600 mg (86 % prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0221]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] = 8.22 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.69 (dd, J = 2.4, 1.3 Hz, 1H), 7.66 - 7.62 (m, 1H), 4.17 - 4.02 (m, 2H), 4.01 - 3.91 (m, 2H), 3.87 - 3.74 (m, OH), 2.86 - 2.75 (m, 1H), 2.58 (d, J = 0.8 Hz, OH), 2.23 - 2.12 (m, 2H), 2.07 (s, 1H), 1.86 - 1.76 (m, 1H).
[0222] LCMS (Analitički metod A) Rt= 1.20 min, MS (ESIpos) m/z = 320 (M+H)<+>.
Intermedijer 4J: Metil 3-(5-Metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[[(3R)-tetrahidrofuran-3-il]metoksi]benzoat
[0223] U mešani rastvor PPh3(552 mg, 2.11 mmol) i DIAD (415 µL, 2.11 mmol) u THF (8 mL) dodat je Intermedijer 3 (350 mg, 1.40 mmol) i (3S)-tetrahidrofuran-3-ilmetanol (215 mg, 2.11 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h zatim koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prebačen u DCM i ispran sa vodom, osušen (iznad Na2SO4) i koncentrovan u vakuumu da se dobije jantarno viskozno ulje. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (na KP-NH silika gel, eluiranje sa heptani-DCM, 1:0 do 7:3) da se dobije 566 mg (40 % prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu beličaste gume.
4
[0224]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] = 8.08 (s, 1H), 7.71 - 7.63 (m, 5H), 7.60 -7.50 (m, 4H), 7.46 (td, J = 7.7, 2.8 Hz, 4H), 4.07 - 3.87 (m, 7H), 3.79 (q, J = 7.7 Hz, 1H), 3.72 (dd, J = 8.9, 5.3 Hz, 1H), 2.83 - 2.70 (m, J = 7.2, 6.4 Hz, 1H), 2.52 (s, 3H), 2.13 (dtd, J = 13.6, 8.1, 5.6 Hz, 1H), 1.76 (dq, J = 12.9, 7.1 Hz, 1H), 1.36 - 1.17 (m, 3H), 0.87 (t, J = 7.0 Hz, 1H).
[0225] LCMS (Analitički metod A) Rt= 1.37 min, MS (ESIpos) m/z = 334 (M+H)<+>.
Intermedijer 5J: 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3R)-tetrahidrofuran-3-ilmetoksi]benzoeva kiselina
[0226] U rastvor metil 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3R)-tetrahidrofuran-3-ilmetoksi]benzoat (566 mg, 0.80 mmol, -50 % čistoća) u THF (1.2 mL) i metanol (0.5 mL) dodat je vodeni rastvor 1M litijum hidroksida (1.2 mL) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Reakciona smeša je razblažena sa vodom (3 mL) i isprana sa EtOAc (2 x 6 mL). Vodena faza je zakišeljena do pH ∼4 što dovodi do taloženja bele čvrste supstance. Filtracija je dala 264 mg (98 % prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bele čvrste supstance.
[0227] LCMS (Analitički metod A) Rt= 1.20 min, MS (ESIpos) m/z = 320 (M+H)<+>.
Intermedijer 4K: Metil 3-(5-Metil-1,3-tiazol-2-il)-5-tetrahidro-2H-piran-4-iloksi-benzoat
[0228] U rastvor Intermedijera 3 (700 mg, 2.81 mmol), tetrahidro-2H-piran-4-ola (0.386 mL, 3.65 mmol) i trifenilfosfina (957 mg, 3.65 mmol) u THF (10 mL) polako je dodat DIAD (0.724 mL, 3.65 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 19h. Reakciona smeša je razblažena sa vodom (20 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2 x 30 mL). Kombinovane organske faze su isprane sa fiziološkim rastvorom (10 mL), osušene (iznad Na2SO4) i koncentrovane u vakuumu. Dobijeni materijal je prečišćen hromatografijom primenom silika gela (gradijent: heksan/EE) da se dobije 571 mg (54 % prinosa) naslovnog jedinjenja kao žuto ulje. Nečiste frakcije iz hromatografije su ponovno prečišćene pod istim uslovima da bi se dobilo dodatnih 981 mg (25 % prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0229]<1>H NMR (500 MHz, CDCl3): δ 8.11 - 8.06 (m, 1H), 7.72 - 7.68 (m, 1H), 7.60 - 7.58 (m, 1H), 7.53 - 7.48 (m, 1H), 4.69 - 4.60 (m, 1H), 4.02 - 3.96 (m, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.66 - 3.57 (m, 2H), 2.53 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 2.10 - 2.00 (m, 2H), 1.87 - 1.77 (m, 2H).
Intermedijer 5K: 3-(5-Metil-1,3-tiazol-2-il)-5-tetrahidro-2H-piran-4-iloksi-benzoeva kiselina
[0230] U rastvor metil 3-(5-Metil-1,3-tiazol-2-il)-5-tetrahidro-2H-piran-4-iloksi-benzoata (565 mg, 1.49 mmol) u THF/MeOH (1:1, 6 mL) dodat je 1M LiOH (2.24 mL, 2.24 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3h. Reakciona smeša je podešena na pH∼3 sa 1 M HCl zatim je ekstrahovana sa EtOAc (2 x 15 mL). Kombinovane organske faze su isprane sa fiziološkim rastvorom (5 mL), osušene (korišćenjem Biotage faznog separatora) i koncentrovane u vakuumu da bi se dobilo 516 mg (90 % prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu beličaste čvrste supstance.
[0231]<1>H NMR (250 MHz, CDCl3): δ [ppm] 8.36 - 8.21 (m, 1H), 7.73 - 7.63 (m, 2H), 7.61 -7.57 (m, 1H), 4.75 - 4.58 (m, 1H), 4.08 - 3.94 (m, 2H), 3.71 - 3.54 (m, 2H), 2.54 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 2.17 - 1.99 (m, 2H), 1.94 - 1.73 (m, 2H).
[0232] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.16 min, MS (ESIpos): m/z = 320 (M+H)+.
Intermedijer 4L: Metil 3-(5-Metil-1,3-tiazol-2-il)-5-(tetrahidro-2H-piran-4-ilmetoksi)benzoat
[0233] U mešani rastvor Intermedijera 3 (250 mg, 1 mmol) i 4-(bromometil)tetrahidro-2H-pirana (449 mg, 2.51 mmol) u anhidrovanom MeCN (7 mL) dodat je dikalijum karbonat (347 mg, 2.51 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na 100°C, ohlađena do sobne temperature, filtrirana kroz Celite® i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Dobijeni materijal je prečišćen hromatografijom primenom silika gela (gradijent: heksan/EE) da se dobije 1.0 g (76 % prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bezbojnog ulja.
[0234]<1>H NMR (500 MHz, CDCl3): δ [ppm] 8.08 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.69 - 7.67 (m, 1H), 7.57 (dd, J = 2.5, 1.4 Hz, 1H), 7.53 - 7.51 (m, 1H), 4.05 - 4.00 (m, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.92 (d, J = 6.5 Hz, 2H), 3.49 - 3.42 (m, 2H), 2.53 - 2.52 (m, 3H), 2.14 - 2.03 (m, 1H), 1.80 - 1.75 (m, 2H), 1.53 - 1.43 (m, 2H).
[0235] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.45 min, MS (ESIpos): m/z = 348 (M+H)<+>.
Intermedijer 5L: 3-(5-Metil-1,3-tiazol-2-il)-5-(tetrahidro-2H-piran-4-ilmetoksi)benzoeva kiselina
[0236] U rastvor metil 3-(5-Metil-1,3-tiazol-2-il)-5-(tetrahidro-2H-piran-4-ilmetoksi)benzoata (1 g, 2.88 mmol) u THF (6 mL) i MeOH (6 mL) dodat je 1M LiOH (4.3 mL) na sobnoj temperaturi i dobijeni rastvor je mešan preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, ostatak je prebačen u vodu i zakišeljen do pH 4 sa 1M HCl što je rezultiralo stvaranjem taloga. Talog je sakupljen vakuumskom filtracijom, ispran sa etil acetatom i osušen u vakuumu da bi se dobilo 179 mg (16 % prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bele čvrste supstance. Filtrat je ponovo ekstrahovan sa IPA/Hloroform 50:50, kombinovani organski slojevi su isprani sa fiziološkim rastvorom i osušeni (iznad Na2SO4) i koncentrovani da bi se dobilo 302 mg (27 % prinosa) druge serije naslovnog jedinjenja u vidu bele čvrste supstance.
[0237]<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 7.97 (s, 1H), 7.66 - 7.64 (m, 1H), 7.62 -7.60 (m, 1H), 7.50 (s, 1H), 3.97 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 3.92 - 3.86 (m, 2H), 3.38 - 3.34 (m, 2H), 2.54 - 2.49 (m, 3H), 2.10 - 1.99 (m, 1H), 1.75 - 1.68 (m, 2H), 1.42 - 1.32 (m, 2H).
[0238] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.24 min, MS (ESIpos): m/z = 334 (M+H)<+>.
Intermedijer 5M: 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(2-metilpiridin-4-il)oksi]benzoeva kiselina
[0239] Smeša Intermedijera 3 (1.0 g, 3.81 mmol), 4-fluoro-2-metilpiridina (0.63 g, 5.71 mmol) i Cs2CO3(2.48 g, 7.6 mmol) u DMSO (10 mL) zagrevana je na 100 °C tokom 6h. Reakciona smeša je tretirana sa 1 M vodenog rastvora NaOH (5 mL) i mešana tokom 30 min. Rastvor je razblažen sa vodom (30 mL) i zakišeljen do pH 4 sa 1M vodenog rastvora HCl. Dodavanjem EtOAc (40 mL) formira se talog koji je sakupljen vakuumskom filtracijom da bi se dobilo 722 mg (56 % prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu narandžastog praha.
[0240]<1>H NMR (500 MHz, MeOH-d4): δ [ppm] = 8.39 (t, J = 1.5 Hz, 1H), 8.35 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.90 - 7.85 (m, 1H), 7.77 (dd, J = 2.3, 1.4 Hz, 1H), 7.58 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 6.98 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.93 (dd, J = 6.0, 2.5 Hz, 1H), 2.55 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 2.52 (s, 3H).
[0241] LCMS (Analitički metod A) Rt = 0.96 min, MS (ESIpos) m/z = 327 (M+H)<+>.
Intermedijer 9: Metil 3,5-dibromobenzoat
[0242] Rastvor 3,5-dibromobenzoeve kiseline (10.5 g, 37.5 mmol) i acetil hlorida (6.7 mL, 93.8 mmol) u metanolu (212 mL) je mešan pod refluksom tokom 17 h. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent heksan/ EE) da se dobije naslovno jedinjenje 11.0 g (99 % prinosa).
Intermedijer 10: Metil 3-bromo-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoat
[0243] Intermedijer 9 (3.5 g, 11.91 mmol) i 5-metil-2-(tributilstananil)-1,3-tiazol (4.62 g, 11.91 mmol) su rastvoreni u DMF (105 mL). Rastvor je degasiran sa mlazom azota tokom 10 minuta, dodat je tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0) (550 mg, 0.476 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 100 °C tokom 17 sati. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent heksan/ EE) dajući naslovljeno jedinjenje 1.72 g (42% prinosa).
[0244]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 2.53 (d, J=1.27 Hz, 3 H) 3.89 - 3.94 (m, 3 H) 7.71 (d, J=1.27 Hz, 1 H) 8.08 - 8.11 (m, 1 H) 8.27 (t, J=1.77 Hz, 1 H) 8.35 (t, J=1.52 Hz, 1 H).
Intermedijer 5N: 3-[(6-Metilpiridin-3-il)oksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina
[0245] Intermedijer 10 (1.29 g, 4.14 mmol), 5-hidroksi-2-metilpiridin (903 mg, 8.28 mmol), 2,2,6,6-tetrametilheptan-3,5-dion (0.11 ml, 0.83 mmol), Cu(I)Cl (165 mg, 1.65 mmol) i Cs2CO3(4.05 g, 12.4 mmol) u NMP (51 mL) su mešani na 220°C tokom 20 minuta korišćenjem mikrotalasne pećnice. Reakciona smeša je koncentrovana do suva pod sniženim pritiskom i sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent heksan/ EE) da se dobije 1.0 g (70 % čistoća, 52 % prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0246]<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 7.31 (d, 1 H) 7.45 (d, 1 H) 7.49 (m, 2 H) 7.58 (d, 1 H) 8.08 - 8.16 (m, 1 H) 8.31 (d, 1 H).
Intermedijer 4O: Metil 3-[(5-metil-1,3,4-tiadiazol-2-il)oksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoat
[0247] Rastvor Intermedijera 3 (250 mg, 1.0 mmol), 2-bromo-5-metil-1,3,4-tiadiazola (270 mg, 1.5 mmol) i cezijum karbonata (654 mg, 2.0 mmol) u DMF (5 mL) zagrevan je u zatvorenoj epruveti na 110 °C preko noći. Ohlađena reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i ostatak je podeljen između vode (10 mL) i DCM (10 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM (10 mL) i kombinovane organske materije su osušene (iznad MgSO4) i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (silika gel, eluiranje sa heptani - EtOAc, 4:1 do 3:7). Mešane frakcije su ponovno prečišćene sa Biotage Isolera™ hromatografijom (eluiranje sa heptani - EtOAc, 1:0 do 3:7). Čiste frakcije iz oba prečišćavanja se kombinuju i koncentruju dajući 204.9 mg (59 % prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu beličaste čvrste supstance.
[0248]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] = 8.39 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 8.09 (dd, J = 2.3, 1.7 Hz, 1H), 7.98 (dd, J = 2.4, 1.4 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 3.95 (s, 3H), 2.69 (s, 3H), 2.54 (d, J = 1.0 Hz, 3H).
[0249] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.33 min, MS (ESIpos) m/z = 348 (M+H)<+>.
Intermedijer 5O: 3-[(5-Metil-1,3,4-tiadiazol-2-il)oksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina
[0250] U mešani rastvor metil 3-[(5-metil-1,3,4-tiadiazol-2-il)oksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoat (204.9 mg, 0.59 mmol) u MeOH (2.5 mL) i THF (2.5 mL) dodat je 1M LiOH (2.5 mL). Posle 1h reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i ostatak je prebačen u vodu (5 mL) i ispran sa EtOAc (5 mL). Vodeni sloj je zakišeljen sa 1M HCl do pH ∼3 da bi se dobio beli talog koji je sakupljen vakuumskom filtracijom da bi se dobilo 128.6 mg (58 % prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu belog praha.
[0251]<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 8.29 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.69 (s, 1H), 2.64 (s, 3H), 2.52 (s, 3H).
[0252] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.15 minuta, MS (ESIpos) m/z = 334 (M+H)<+>.
Intermedijer 5P: 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-(1,3-tiazol-2-iloksi)benzoeva kiselina
[0253] Rastvor Intermedijera 3 (250 mg, 1.0 mmol), 2-bromotiazola (246.7 mg, 1.5 mmol) i cezijum karbonata (654 mg, 2.0 mmol) u DMF (5 mL) zagrevan je u zatvorenoj epruveti na 110 °C preko noći. Ohlađena reakciona smeša je tretirana sa 1M LiOH (2 mL) i mešana na 110 °C tokom 1h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i ostatak je
1
prebačen u vodu (10 mL) i ispran sa EtOAc (2 x 10 mL). Vodeni sloj je zakišeljen do pH 3 sa 1 M HCl i rastvor je ekstrahovan sa DCM (3 x 10 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni (iznad MgSO4) i koncentrovani pod sniženim pritiskom da se dobije 328.3 mg (86 % prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu smeđeg praha.
[0254]<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 8.26 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 8.08 - 8.05 (m, 1H), 7.86 (dd, J = 2.2, 1.4 Hz, 1H), 7.69 - 7.67 (m, 1H), 7.36 (d, J = 3.8 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 3.8 Hz, 1H), 2.52 (s, 3H).
[0255] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.23 min, MS (ESIpos) m/z = 319 (M+H)<+>.
Intermedijer 11: Metil 3-bromo-5-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)benzoat
[0256] Smeša Intermedijera 1 (1.92 g, 8.33 mmol), 2,2-dimetiloksirana (3 g, 41.5 mmol) i K2CO3(2.3 g, 16.6 mmol) u DMSO (23 mL) je mešana na 100°C tokom 17h. Reakciona smeša je filtrirana, isprana sa DCM. Organske materije su isprane sa vodom i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent heksan/ EE) da se dobije naslovno jedinjenje 2.1 g (87 % prinosa).
[0257]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.16 - 1.23 (m, 6 H) 3.80 (s, 2 H) 3.86 (s, 3 H) 4.66 (s, 1 H) 7.41 - 7.49 (m, 2 H) 7.62 (t, J=1.52 Hz, 1 H).
Intermedijer 12: 3-Bromo-5-(2-metoksi-2-metilpropoksi)benzoeva kiselina
[0258] 637 mg NaH (60%, 15.9 mmol) dodato je u rastvor Intermedijera 11 (1.92 g, 6.64 mmol) u THF (21 mL) na sobnoj temperaturi i mešano tokom 30 minuta pre dodavanja metil jodida
2
(1.24 ml, 19.9 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na 50 °C tokom 1 sat i na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je razblažena sa vodom i ekstrahovana tri puta sa DCM. Organske materije su koncentrovane pod sniženim pritiskom da se dobije naslovno jedinjenje (2.9 g, >100% prinosa) koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja u sledećem koraku.
Intermedijer 13: Metil 3-bromo-5-(2-metoksi-2-metilpropoksi)benzoat
[0259] Smeša sirovog Intermedijera 12 (2.9 g) i acetil hlorida (1.7 ml, 23.9 mmol) u MeOH (130 mL) su mešani na 90°C. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent heksan/ EE) da se dobije naslovno jedinjenje 1.66 g (79% prinosa u dva koraka od Intermedijera 11).
[0260]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.21 (s, 6 H) 3.15 (s, 3 H) 3.86 (s, 3 H) 3.94 (s, 2 H) 7.45 (dd, J=2.40, 1.39 Hz, 1 H) 7.49 (t, J=2.15 Hz, 1 H) 7.63 (t, J=1.52 Hz, 1 H).
Intermedijer 14Q: Metil 3-(2-metoksi-2-metilpropoksi)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzoat
[0261] Smeša Intermedijera 13 (1.66 g, 5.23 mmol), bis(pinakolato)diborana (3.32 g, 13.08 mmol), kalijum acetata (1.8 g, 18.3 mmol) i Pd(dppf)Cl2(383 mg, 0.52 mmol) u 1,4-dioksanu (100 mL) mešana je na 90 °C tokom 17 sati. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i koncentrovana u vakuumu. Preostala sirova reakciona smeša je ekstrahovana tri puta sa DCM i ponovo koncentrovana u vakuumu. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent heksan/ EE) da se dobije naslovno jedinjenje 1.2 g (63 % prinosa).
[0262]<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.22 (s, 6 H) 1.31 (s, 12 H) 3.16 (s, 3 H) 3.86 (s, 3 H) 3.92 (s, 2 H) 7.41 (d, J=2.07 Hz, 1 H) 7.56 (dd, J=2.64, 1.70 Hz, 1 H) 7.85 (s, 1 H).
Intermedijer 15Q: Metil 3-(5-hloro-1,3-tiazol-2-il)-5-(2-metoksi-2-metilpropoksi)benzoat
[0263] Intermedijer 14Q (1.15 g, 3.16 mmol), 2-bromo-5-hloro-1,3-tiazol (752 mg, 3.79 mmol) i Pd(dppf)Cl2(347 mg, 0.47 mmol) su rastvoreni u 1M K2CO3vodenom rastvoru (7.58 mL) i THF (100 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 dana i još jedan dan na 90 °C. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, preostali materijal je razblažen vodom i ekstrahovan tri puta sa DCM. Kombinovane organske materije su koncentrovane pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent heksan/ EE) dajući naslovljeno jedinjenje 790 mg (70% prinosa).
Intermedijer 5Q: 3-(5-Hloro-1,3-tiazol-2-il)-5-(2-metoksi-2-metilpropoksi)benzoeva kiselina
[0264] Intermedijer 15Q (790 mg, 2.22 mmol) je rastvoren u MeOH (40 mL). Dodato je 2M NaOH (5.55 mL), i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je neutralisana sa 2N HCl, vodena faza je ekstrahovana sa DCM i kombinovani organski slojevi su koncentrovani do suva pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 460 mg (56 % prinosa) naslovnog jedinjenja.
4
[0265]<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.22 - 1.25 (m, 6 H) 3.17 (s, 3 H) 3.99 (s, 2 H) 7.57 (dd, J=2.45, 1.32 Hz, 1 H) 7.62 - 7.66 (m, 1 H) 7.96 - 8.02 (m, 2 H) 13.22 - 13.43 (m, 1 H).
Intermedijer 16: Metil 3-bromo-5-(tetrahidro-2H-piran-4-ilmetoksi)benzoat
[0266] Intermedijer 1 (5.1 g, 22.1 mmol), 4-(bromometil)tetrahidro-2H-piran (4.35 g , 24.3 mmol) i cezijum karbonat (36 g, 110 mmol) su mešani u DMF (150 mL) na 120°C tokom 22h. Reakciona smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal (7.1 g) je sadržavao naslovno jedinjenje zajedno sa odgovarajućom karboksilnom kiselinom.
[0267] Ova smeša je mešana u metanolu (150 mL) i acetil hloridu (4.23 g, 53.9 mmol) na 90°C tokom 16 sati. Reakciona smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent heksan/ EE) dajući naslovljeno jedinjenje 6.02 g (83% prinosa).
[0268]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.26 - 1.39 (m, 2 H) 1.66 (dd, J=12.80, 1.90 Hz, 2 H) 1.94 - 2.06 (m, 1 H) 3.29 - 3.37 (m, 2 H) 3.85 - 3.90 (m, 5 H) 3.92 (d, J=6.34 Hz, 2 H) 7.42 (dd, J=2.41, 1.39 Hz, 1 H) 7.46 (t, J=2.15 Hz, 1 H) 7.62 (t, J=1.52 Hz, 1 H).
Intermedijer 14R: Metil 3-(tetrahidro-2H-piran-4-ilmetoksi)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzoat
[0269] Smeša Intermedijera 16 (6.2 g, 18.8 mmol), bis(pinakolato)diborana (11.96 g, 47.1 mmol), kalijum acetata (6.47 g, 65.9 mmol) i Pd(dppf)Cl2(1.38 g, 1.88 mmol) u 1,4-dioksanu (150 mL) je mešana na 90 °C tokom 17 sati. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i koncentrovana u vakuumu. Preostala sirova reakciona smeša je prečišćena hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent heksan/ EE) da se dobije naslovno jedinjenje 9.2 g (kvantitativni prinos).
[0270]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.29 - 1.41 (m, 14 H) 1.64 - 1.72 (m, 2 H) 1.93 - 2.06 (m, 1 H) 3.33 (d, J=1.52 Hz, 2 H) 3.84 - 3.94 (m, 7 H) 7.38 (dd, J=2.79, 0.76 Hz, 1 H) 7.53 - 7.55 (m, 1 H) 7.83 - 7.85 (m, 1 H).
Intermedijer 15R: Metil 3-(tetrahidro-2H-piran-4-ilmetoksi)-5-[5-(trifluorometil)-1,3-tiazol-2-il]benzoat
[0271] Intermedijer 14R (717 mg, 1.9 mmol), 2-bromo-5-(trifluorometil)-1,3-tiazol (531 mg, 2.29 mmol) i Pd(dppf)Cl2(209 mg, 0.29 mmol) su rastvoreni u 1M K2CO3vodenom rastvoru (4.5 mL) i THF (30 mL). Reakciona smeša je zagrevana na 120°C tokom 90 minuta u mikrotalasnoj pećnici. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, preostali materijal je razblažen sa vodom i ekstrahovan tri puta sa DCM. Kombinovane organske materije su koncentrovane pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent heksan/ EE) dajući naslovljeno jedinjenje u smeši sa nereagovanom boroničnom kiselinom (300 mg).
Intermedijer 5R: 3-(Tetrahidro-2H-piran-4-ilmetoksi)-5-[5-(trifluorometil)-1,3-tiazol-2-il]benzoeva kiselina
[0272] Intermedijer 15R (300 mg, 0.75 mmol) je rastvoren u MeOH (30 mL). Dodato je 2M NaOH (1.87 mL) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, neutralisana sa 2N HCl, vodena faza je ekstrahovana tri puta sa DCM i kombinovani organski slojevi su koncentrovani do suva pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 230 mg sirovog naslovnog jedinjenja (55% čistoća sa LCMS), koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
Intermedijer 15S: Metil 3-(5-ciklobutil-1,3-tiazol-2-il)-5-(tetrahidro-2H-piran-4-ilmetoksi)benzoat
[0273] Intermedijer 14R (667 mg, 1.77 mmol), 2-hloro-5-ciklobutil-1,3-tiazol (369 mg, 2.13 mmol) i Pd(dppf)Cl2(194 mg, 0.27 mmol) su rastvoreni u vodenom rastvoru 1M K2CO3(4.25 mL) i THF (28 mL). Reakciona smeša je mešana na 90°C preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, preostali materijal je razblažen sa vodom i ekstrahovan tri puta sa DCM. Kombinovane organske materije su koncentrovane pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent heksan/ EE) dajući naslovljeno jedinjenje 180 mg (26% prinosa).
[0274]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.33 - 1.43 (m, 2 H) 1.70 (dd, J=12.67, 1.77 Hz, 2 H) 1.85 - 1.95 (m, 1 H) 1.96 - 2.05 (m, 2 H) 2.15 (td, J=9.00, 2.53 Hz, 2 H) 2.40 - 2.46 (m, 2 H) 3.33 - 3.39 (m, 2 H) 3.76 - 3.84 (m, 1 H) 3.86 - 3.91 (m, 5 H) 3.97 (d, J=6.34 Hz, 2 H) 7.49 (dd, J=2.41, 1.39 Hz, 1 H) 7.63 (dd, J=2.28, 1.52 Hz, 1 H) 7.69 (d, J=0.76 Hz, 1 H) 8.00 (t, J=1.52 Hz, 1 H).
Intermedijer 5S: 3-(5-Ciklobutil-1,3-tiazol-2-il)-5-(tetrahidro-2H-piran-4-ilmetoksi)benzoeva kiselina
[0275] Intermedijer 15S (180 mg, 0.46 mmol) je rastvoren u MeOH (20 mL). Dodato je 2M NaOH (1.16 mL), i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, neutralisana sa 2N HCl, istaloženi čvrsti materijal je filtriran da bi se dobilo 160 mg (92% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0276]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.27 - 1.44 (m, 2 H) 1.62 - 1.74 (m, 2 H) 1.83 - 1.94 (m, 1 H) 1.95 - 2.07 (m, 2 H) 2.08 - 2.20 (m, 2 H) 2.38 - 2.45 (m, 2 H) 3.31 - 3.38 (m, 2 H) 3.81 (s, 1 H) 3.88 (dd, J=11.37, 2.78 Hz, 2 H) 3.96 (d, J=6.57 Hz, 2 H) 7.48 (dd, J=2.40, 1.39 Hz, 1 H) 7.61 (dd, J=2.40, 1.64 Hz, 1 H) 7.68 (d, J=0.76 Hz, 1 H) 7.98 (t, J=1.52 Hz, 1 H) 13.17 - 13.32 (m, 1 H).
Intermedijer 17A: (3S)-Tetrahidrofuran-3-ilmetil 4-metilbenzensulfonat
[0277] Rastvor (3R)-tetrahidrofuran-3-ilmetanola (3.0 g, 29.4 mmol), TEA (6.1 mL, 44 mmol) i trimetilamin hidrohlorida (281 mg, 2.9 mmol) je mešan u DCM (90 mL) na sobnoj temperaturi tokom 10 minuta i ohlađen na 0°C. Dodat je 4-metilbenzensulfonil hlorid (6.16 g, 32 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 17h. Smeša je tretirana sa N,N-dimetiletan-1,2-diaminom (3.8 mL, 35 mmol) i vodom. Vodeni sloj je ekstrahovan tri puta sa DCM. Kombinovani organski delovi su koncentrovani pod sniženim pritiskom i prečišćeni hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent heksan/ EE) da se dobije 6.45 g (86% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0278]<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.45 (td, J=13.09, 6.97 Hz, 1 H) 1.79 - 1.96 (m, 1 H) 1.83 - 1.83 (m, 1 H) 2.43 (s, 3 H) 3.27 - 3.36 (m, 1 H) 3.48 - 3.68 (m, 3 H) 3.88 - 4.01 (m, 2 H) 7.49 (d, J=7.91 Hz, 2 H) 7.75 - 7.84 (m, 2 H).
Intermedijer 18: Metil 3-bromo-5-[(3S)-tetrahidrofuran-3-ilmetoksi]benzoat
[0279] Intermedijer 1 (4.85 g, 21 mmol), Intermedijer 17A (6.45 g , 25.2 mmol) i cezijum karbonat (10.2 g, 31.5 mmol) su mešani u DMF (81 mL) na 50°C tokom 60h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, filtrirana i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovo naslovno jedinjenje (7.47 g) koje je korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Intermedijer 14T: Metil 3-[(3S)-tetrahidrofuran-3-ilmetoksi]-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzoat
[0280] Intermedijer 18 (7.47 g, 23.7 mmol), bis(pinakolato)diboran (15.05 g, 59.3 mmol), kalijum acetat (8.14 g, 83 mmol) i Pd(dppf)Cl2(1.73 g, 2.37 mmol) u 1,4-dioksanu (91 mL) su mešani na 90 °C tokom 80 sati. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i koncentrovana u vakuumu. Preostala sirova reakciona smeša je ekstrahovana sa DCM, isprana sa vodom i organska faza je koncentrovana u vakuumu. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent heksan/ EE) da se dobije naslovno jedinjenje 9.3 g (kvantitativni prinos).
[0281]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.31 (s, 12 H) 1.63 - 1.75 (m, 1 H) 1.95 - 2.07 (m, 1 H) 2.58 - 2.69 (m, 1 H) 3.54 (dd, J=8.59, 5.56 Hz, 1 H) 3.66 (d, J=6.82 Hz, 1 H) 3.72 -3.83 (m, 2 H) 3.86 (s, 3 H) 3.99 (dd, J=19.07, 7.20 Hz, 2 H) 7.39 (dd, J=2.78, 0.76 Hz, 1 H) 7.55 (dd, J=2.65, 1.64 Hz, 1 H) 7.83 - 7.87 (m, 1 H).
Intermedijer 15T: Metil 3-(5-ciklobutil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3S)-tetrahidrofuran-3-ilmetoksi]benzoat
[0282] Intermedijer 14T (1 g, 2.76 mmol), 2-hloro-5-ciklobutil-1,3-tiazol (623 mg, 3.59 mmol) i Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2(338 mg, 0.41 mmol) su rastvoreni u vodenom rastvoru 1M K2CO3(6.63 mL) i THF (45 mL). Reakciona smeša je zagrevana pod refluksom tokom 2 sata. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent heksan/ EE) dajući naslovljeno jedinjenje 770 mg (75% prinosa).
Intermedijer 5T: 3-(5-Ciklobutil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3S)-tetrahidrofuran-3-ilmetoksi]benzoeva kiselina
[0283] Intermedijer 15T (770 mg, 2.06 mmol) je rastvoren u MeOH (20 mL) i THF (20 mL). dodato je 2M NaOH (4.12 mL), i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Dodata je voda i vodena faza je podešena na pH 2 sa 2N HCl, ekstrahovana sa EE i organske materije su koncentrovane pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 765 mg (kvantitativni prinos) naslovnog jedinjenja koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
Intermedijer 15U: Metil 3-(5-etil-1,3-tiazol-2-il)-5-(tetrahidro-2H-piran-4-ilmetoksi)benzoat
[0284] Intermedijer 14R (1.05 g, 2.79 mmol), 2-hloro-5-etil-1,3-tiazol (495 mg, 3.34 mmol) i Pd(dppf)Cl2(306 mg, 0.42 mmol) su rastvoreni u vodenom rastvoru 1M K2CO3(6.6 mL) i THF (42 mL). Reakciona smeša je zagrevana na 120°C tokom 90 minuta u mikrotalasnoj pećnici. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, preostali materijal je razblažen sa vodom i ekstrahovan tri puta sa DCM. Kombinovane organske materije su koncentrovane pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent heksan/ EE) dajući naslovljeno jedinjenje 450 mg (44% prinosa).
Intermedijer 5U: 3-(5-Etil-1,3-tiazol-2-il)-5-(tetrahidro-2H-piran-4-ilmetoksi)benzoeva kiselina
[0285] Intermedijer 15U (450 mg, 1.25 mmol) je rastvoren u MeOH (50 mL). Dodato je 2M NaOH (3.1 mL), i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, neutralisana sa 2N HCl, smeša je ekstrahovana tri puta sa EE i kombinovane organske materije su koncentrovane pod sniženim pritiskom. Preostali materijal je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent heksan/ EE) da se dobije 50 mg (12% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0286]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.29 (t, J=7.45 Hz, 3 H) 1.31 - 1.43 (m, 2 H) 1.65 - 1.75 (m, 2 H) 1.97 - 2.08 (m, 1 H) 2.90 (d, J=7.58 Hz, 2 H) 3.31 - 3.38 (m, 2 H) 3.84 -3.92 (m, 2 H) 3.95 (d, J=6.32 Hz, 2 H) 7.50 (s, 1 H) 7.55 (s, 1 H) 7.66 (s, 1 H) 7.98 (s, 1 H).
Intermedijer 15V: Metil 3-(5-izopropil-1,3-tiazol-2-il)-5-(tetrahidro-2H-piran-4-ilmetoksi)benzoat
[0287] Intermedijer 14R (716 mg, 1.90 mmol), 2-hloro-5-(propan-2-il)-1,3-tiazol (370 mg, 2.28 mmol) i Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2(233 mg, 0.29 mmol) su rastvoreni u vodenom rastvoru 1M K2CO3(4.6 mL) i THF (28 mL). Reakciona smeša je zagrevana na 120°C tokom 90 minuta u mikrotalasnoj pećnici. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, preostali materijal je razblažen sa vodom i ekstrahovan tri puta sa DCM. Kombinovane organske
1
materije su koncentrovane pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent heksan/ EE) dajući naslovljeno jedinjenje 330 mg (46% prinosa).
Intermedijer 5V: 3-(5-Izopropil-1,3-tiazol-2-il)-5-(tetrahidro-2H-piran-4-ilmetoksi)benzoeva kiselina
[0288] Intermedijer 15V (330 mg, 0.88 mmol) je rastvoren u MeOH (50 mL). Dodato je 2M NaOH (2.2 mL), i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, neutralisana sa 2N HCl, smeša je ekstrahovana tri puta sa EE i kombinovane organske materije su koncentrovane pod sniženim pritiskom. Preostali materijal je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent heksan/ EE) da se dobije 140 mg (32% prinosa) naslovnog jedinjenja koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
Intermedijer 17B: Tetrahidro-2H-piran-4-il 4-metilbenzensulfonat
[0289] Rastvor tetrahidro-2H-piran-4-ola (25.0 g, 245 mmol), TEA (51 mL, 367 mmol) i trimetilamin hidrohlorida (2.34 g, 24.5 mmol) je mešan u DCM (750 mL) na sobnoj temperaturi tokom 10 minuta i ohlađen na 0°C. Dodat je 4-metilbenzensulfonil hlorid (51.3 g, 269 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 17h. Smeša je tretirana sa N,N-dimetiletan-1,2-diaminom (31.6 mL, 294 mmol) i vodom. Vodeni sloj je ekstrahovan tri puta sa DCM. Kombinovani organski delovi su koncentrovani pod sniženim pritiskom i prečišćeni hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent heksan/ EE) da se dobije 58.5 g (93% prinosa) naslovnog jedinjenja.
2
[0290]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.51 - 1.61 (m, 2 H) 1.74 (dq, J=13.04, 3.65 Hz, 2 H) 2.42 (s, 3 H) 3.39 (ddd, J=11.75, 8.97, 3.03 Hz, 2 H) 3.71 (dt, J=11.81, 4.71 Hz, 2 H) 4.69 (tt, J=8.65, 4.23 Hz, 1 H) 7.47 (d, J=8.08 Hz, 2 H) 7.81 (d, J=8.34 Hz, 2 H).
Intermedijer 14W: Metil 3-(tetrahidro-2H-piran-4-iloksi)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzoat
[0291] Intermedijer 24 (0.85 g, 2.7 mmol), bis(pinakolato)diboran (1.71 g, 6.74 mmol), kalijum acetat (0.93 g, 9.44 mmol) i Pd(dppf)Cl2(0.20 g, 0.27 mmol) u 1,4-dioksanu (50 mL) su mešani na 80 °C do potpune konverzije. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i koncentrovana u vakuumu. Preostala sirova reakciona smeša je ekstrahovana sa DCM, i organska faza je koncentrovana u vakuumu. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent heksan/ EE) da se dobije naslovno jedinjenje 1.06 g (kvantitativni prinos).
[0292]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.27 - 1.33 (m, 12 H) 1.60 (s, 2 H) 1.89 - 1.98 (m, 2 H) 3.51 (s, 2 H) 3.78 - 3.87 (m, 5 H) 4.66 - 4.74 (m, 1 H) 7.42 (dd, J=2.76, 0.75 Hz, 1 H) 7.58 (dd, J=2.51, 1.51 Hz, 1 H) 7.83 - 7.86 (m, 1 H).
Intermedijer 15W: Metil 3-(5-ciklobutil-1,3-tiazol-2-il)-5-(tetrahidro-2H-piran-4-iloksi)benzoat
[0293] Intermedijer 14W (500 mg, 1.38 mmol), 2-hloro-5-ciklobutil-1,3-tiazol (288 mg, 1.66 mmol), Pd(dppf)Cl2(151 mg, 0.21 mmol) su rastvoreni u vodenom rastvoru 1M K2CO3(3.3 mL) i THF (25 mL). Reakciona smeša je zagrevana na 90°C do potpune konverzije. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, preostali materijal je razblažen sa vodom i ekstrahovan tri puta sa DCM. Kombinovane organske materije su koncentrovane pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent heksan/ EE) dajući naslovljeno jedinjenje 320 mg (62% prinosa).
[0294]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.55 - 1.69 (m, 2 H) 1.91 (br. s., 1 H) 1.95 -2.04 (m, 3 H) 2.12 - 2.21 (m, 2 H) 2.43 (dt, J=8.27, 3.19 Hz, 2 H) 3.53 (ddd, J=11.68, 9.03, 3.03 Hz, 2 H) 3.81 - 3.91 (m, 6 H) 4.79 (s, 1 H) 7.53 (dd, J=2.40, 1.39 Hz, 1 H) 7.64 - 7.72 (m, 2 H) 8.00 (t, J=1.52 Hz, 1 H).
Intermedijer 5W: 3-(5-ciklobutil-1,3-tiazol-2-il)-5-(tetrahidro-2H-piran-4-iloksi)benzoeva kiselina
[0295] Intermedijer 15W (320 mg, 0.86 mmol) je rastvoren u MeOH. Dodato je 2M NaOH (2.1 mL), i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, podešena na pH 2 sa 2N HCl, ekstrahovana sa EE i koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 114 mg (37% prinosa) naslovnog jedinjenja, koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
Intermedijer 15X: Metil 3-(5-etil-1,3-tiazol-2-il)-5-(tetrahidro-2H-piran-4-iloksi)benzoat
4
[0296] Intermedijer 14W (500 mg, 1.38 mmol), 2-hloro-5-etil-1,3-tiazol (245 mg, 1.66 mmol) i Pd(dppf)Cl2(151 mg, 0.21 mmol) su rastvoreni u vodenom rastvoru 1M K2CO3(3.3 mL) i THF (25 mL). Reakciona smeša je zagrevana na 90°C do potpune konverzije. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, preostali materijal je razblažen sa vodom i ekstrahovan tri puta sa DCM. Kombinovane organske materije su koncentrovane pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent heksan/ EE) dajući naslovljeno jedinjenje 320 mg (62% prinosa).
Intermedijer 5X: 3-(5-Etil-1,3-tiazol-2-il)-5-(tetrahidro-2H-piran-4-iloksi)benzoeva kiselina
[0297] Intermedijer 15X (450 mg, 1.29 mmol) je rastvoren u MeOH. Dodato je 2M NaOH (2.59 mL), i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, podešena na pH 2 sa 2N HCl, ekstrahovana sa EE i koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 251 mg (58% prinosa) naslovnog jedinjenja, koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
Intermedijer 15Y: Metil 3-bromo-5-(2-metoksietoksi)benzoat
[0298] Smeša Intermedijera 1 (300 g, 1.3 mol), 2-bromoetil metil etra (330 g, 2.37 mol), K2CO3(330 g, 2.39 mol) i NaI (2 g) u acetonitrilu (2500 mL) je refluksovana tokom 12 h. Suspenzija je filtrirana, čvrsta supstanca je isprana sa acetonitrilom (1000 mL) i kombinovani filtrat je uparen pod sniženim pritiskom da bi se dobilo tamno ulje. Dodat je petrolej etar (2500 mL) i formirani rastvor je filtriran kroz sloj aluminijum oksida. Filtrat je uparen pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 250.3 g naslovnog jedinjenja (67 % prinosa).
[0299]<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 3.30 (s, 3 H) 3.61 - 3.69 (m, 2 H) 3.86 (s, 3 H) 4.14 - 4.24 (m, 2 H) 7.43 (dd, J=2.45, 1.32 Hz, 1 H) 7.48 (t, J=2.17 Hz, 1 H) 7.63 (t, J=1.51 Hz, 1 H).
Intermedijer 5Y: 3-Bromo-5-(2-metoksietoksi)benzoeva kiselina
[0300] Intermedijer 15Y (5.0 g, 17.3 mmol) je rastvoren u MeOH (52 mL). Dodato je 2M NaOH (17.3 mL), i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je podešena na pH 3 sa 1N HCl, ekstrahovana sa EE, osušena (Na2SO4) i koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 5.12 g (>100%) naslovnog jedinjenja, koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0301]<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 3.30 (s, 3 H) 3.65 (dd, J=5.27, 3.58 Hz, 2 H) 4.18 (dd, J=5.27, 3.58 Hz, 2 H) 7.39 - 7.45 (m, 2 H) 7.61 (t, J=1.51 Hz, 1 H) 13.26 - 13.53 (m, 1 H).
Intermedijer 19Z: Tert-butil 4-[3-(metoksikarbonil)-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)fenoksi]piperidin-1-karboksilat
[0302] Intermedijer 3 (500 mg, 2.0 mmol), tert-butil 4-hidroksipiperidin-1-karboksilat (807 mg, 4.0 mmol) i trifenilfosfin (2104 mg, 8.0 mmol) su kombinovani u THF i ohlađeni na 0 °C u ledenom kupatilu. U kapima je dodat DIAD (0.788 mL, 4.0 mmol) i reakciona smeša je mešana tokom 10 minuta pre zagrevanja na RT. Posle mešanja tokom 16 h reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu, prebačena u EtOAc (10 mL), isprana sa fiziološkim rastvorom (5 mL) i rastvorom amonijum hlorida (5 mL). Organska faza je odvojena, osušena (iznad MgSO4) i koncentrovana u vakuumu da bi se dobilo smeđe ulje. Prečišćavanje sa Biotage Isolera ™ hromatografijom (na prethodno upakovanoj koloni 50 g SiO2, eluiranje sa EtOAc u heptanu 0 - 100 %) dalo je 1000 mg (92 % prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bezbojnog ulja.
[0303]<1>H NMR (250 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] = 8.08 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.69 (dd, J = 2.4, 1.6 Hz, 1H), 7.58 (dd, J = 2.5, 1.4 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 4.62 (tt, J = 6.9, 3.5 Hz, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.77 - 3.62 (m, 2H), 3.47 - 3.31 (m, 2H), 2.52 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 2.03 - 1.88 (m, 3H), 1.87 - 1.55 (m, 5H), 1.48 (s, 9H).
[0304] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.65 min, MS (ESIpos): m/z = 433 (M+H)<+>.
Intermedijer 5Z: 3-{[1-(Tert-butoksikarbonil)piperidin-4-il]oksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina
[0305] U rastvor tert-butil 4-[3-(metoksikarbonil)-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)fenoksi]piperidin-1-karboksilata (1000 mg, 1.85 mmol) u THF (2.5 mL) dodat je 1M LiOH (2.7 mL) i dobijeni rastvor je mešan tokom 16 h na sobnoj temperaturi. Organski rastvarač je uklonjen u vakuumu i vodena faza je zakišeljena na pH ∼4 sa 1M HCl. Dobijeni talog je sakupljen filtracijom i uparen da bi se dobilo 682 mg (88 % prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bele čvrste supstance.
[0306] LCMS (Analitički metod A) Rt= 1.48 min, MS (ESIpos): m/z = 419 (M+H)<+>.
Intermedijer 19AA: Metil 3-[(3R)-1-metilpirolidin-3-il]oksi-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoat
[0307] U rastvor Intermedijera 3 (150 mg, 0.60 mmol), (3S)-1-metilpirolidin-3-ola (121 mg, 1.20 mmol) i trifenilfosfina (631 mg, 2.41 mmol) u THF (3 mL) na 0 °C dodat je u kapima DIAD (236 µL, 1.20 mmol). Rastvor je mešan još 5 minuta na 0 °C zatim je ostavljen da se zagreje do sobne temperature i mešan je sledećih 16 h. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu, prebačena u DCM i isprana sa fiziološkim rastvorom, zasićenom NaHCO3, osušena (iznad MgSO4) i koncentrovana u vakuumu da bi se dobilo smeđe ulje. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (na prethodno upakovanoj koloni KP-NH, eluiranje sa heptan-aceton 5:1 do 1:4) da se dobije 143 mg (54 % prinosa) naslovnog jedinjenja kao bisto ulje.
[0308]<1>H NMR (250 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] = 8.10 (t, J = 1.5 Hz, 1H), 7.62 (dd, J = 2.5, 1.6 Hz, 1H), 7.56 - 7.48 (m, 2H), 4.99 - 4.89 (m, 1H), 3.93 (s, 3H), 2.95 - 2.76 (m, 3H), 2.52 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 2.40 (s, 5H), 2.12 - 1.95 (m, 1H), 1.69 - 1.57 (m, 1H).
[0309] LCMS (Analitički metod A) Rt= 0.93 min, MS (ESIpos) m/z = 534 (M+H)<+>.
Intermedijer 19AB: Metil 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3S)-pirolidin-3-iloksi]benzoat
[0310] Na 0 °C u mešani rastvor Intermedijera 3 (150 mg, 0.60 mmol), tert-butil (3R)-3-hidroksipirolidin-1-karboksilata (225 mg, 1.20 mmol) i trifenilfosfina (63 mg, 2.40 mmol) u THF (3 mL) dodat je u kapima DIAD (236 µL, 1.20 mmol). Rastvor je mešan na 0 °C tokom 5 minuta zatim je ostavljen da se zagreje do sobne temperature i mešan je sledećih 16 h. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu, prebačena u DCM i isprana sa fiziološkim rastvorom, zasićenom NaHCO3, osušena (iznad Mg2SO4) i koncentrovana u vakuumu da bi se dobilo smeđe ulje. Prečišćavanje sa Biotage Isolera™ hromatografijom (prethodno upakovana patrona od 10 g, eluiranje sa heptan-EtOAc, 15:3 do 0:1) da bi se dobilo bezbojno ulje (620 mg). Ulje je rastvoreno u DCM (1 mL) i TFA (1 mL) i rastvor je mešan tokom 1 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu, prebačena u DCM (1 mL) i mešana 15 minuta u zasićenom natrijum bikarbonatu. Organska faza je sakupljena i osušena (iznad MgSO4) i koncentrovana u vakuumu da bi se dobilo 400 mg (34 % prinosa) naslovnog jedinjenja kao ulje boje ćilibara.
[0311]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] = 8.10 (t, J = 1.3 Hz, 1H), 7.73 - 7.65 (m, 1H), 7.65 - 7.57 (m, 2H), 3.94 (s, 3H), 2.54 (d, J = 1.0 Hz, 3H), 1.26 (s, 12H), 1.25 (s, 9H).
[0312] LCMS (Analitički metod A) Rt= 0.96, MS (ESIpos) m/z = 319 (M+H)<+>.
Intermedijer 20: Metil 3-{[(3S)-1-metilpirolidin-3-il]oksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoat
[0313] Metil 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3S)-pirolidin-3-iloksi]benzoat (420 mg, 0.40 mmol), formaldehid (37 % rastvor u vodi, 59 µL, 0.79 mmol) i mravlja kiselina (59 µL, 1.58 mmol) se kombinuju u THF-u i zagrevaju pod refluksom tokom 4 h. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu, prebačena u natrijum bikarbonat i ekstrahovana sa DCM. Organska faza je osušena (iznad MgSO4) i koncentrovana u vakuumu da bi se dobilo 65 mg (49 % prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0314]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] = 8.12 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.64 (dd, J = 2.4, 1.6 Hz, 1H), 7.55 (dd, J = 2.5, 1.4 Hz, 6H), 7.53 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 5.06 - 4.93 (m, 6H), 3.95 (s, 3H), 2.92 - 2.82 (m, 3H), 2.54 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 2.51 - 2.36 (m, 5H), 2.10 - 2.00 (m, 2H).
Intermedijer 21: Tert-butil 3-[3-(metoksikarbonil)-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)fenoksi]azetidin-1-karboksilat
[0315] Intermedijer 3 (300 mg, 1.20 mmol), tert-butil 3-{[(4-metilfenil)sulfonil]oksi} azetidin-1-karboksilat (511 mg, 1.80 mmol) i cezijum karbonat (780 mg, 2.39 mmol) su kombinovani u suvom dimetilformamidu (3 mL) u atmosferi azota i zagrevani su na 80 °C tokom 16 h. Reakciona smeša sobne temperature je sipana u fiziološki rastvor (3 mL) i ekstrahovana sa etil acetatom (10 mL). Organska faza je isprana sa fiziološkim rastvorom (3 mL), osušena (iznad MgSO4) i koncentrovana u vakuumu da bi se dobilo smeđe ulje. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (silika gel, eluiranje sa heptan - tertbutil metil etrom, 3:1 do 0:1) da se dobije 440 mg (81 % prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bezbojnog ulja koje kristališe pri stajanju.
[0316]<1>H NMR (250 MHz, CDCl3): δ [ppm] = 1.45 (s, 9H), 2.52 (d, 3H), 3.94 (s, 3H), 4.02 (dd, 2H), 4.36 (dd, 2H), 5.00 (tt, 1H), 7.41 (dd, 1H), 7.48 - 7.58 (m, 2H), 8.12 (t, 1H).
Intermedijer 22: Metil 3-(azetidin-3-iloksi)-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoat
[0317] Tert-butil 3-[3-(metoksikarbonil)-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)fenoksi]azetidin-1-karboksilat (440 mg, 0.98 mmol) je mešan u 4 M HCl u dioksanu (2.5 mL) tokom 2 h. Reakcija je koncentrovana do suva i dobijena čvrsta supstanca je rastvorena u zasićenom NaHCO3i ekstrahovana sa DCM/Metanol (9:1, 2 x 25 mL). Organska faza je osušena (iznad MgSO4) i koncentrovana do suva da bi se dobilo 259 mg (87 % prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0318] LCMS (Analitički metod A) Rt= 0.92 min, MS (ESIpos) m/z = 305 (M+H)<+>.
Intermedijer 23: Metil 3-[(1-metilazetidin-3-il)oksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoat
[0319] U rastvor metil 3-(azetidin-3-iloksi)-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoata (255 mg, 0.84 mmol) u DCE (0.5 mL) dodat je formaldehid (37 % vodenom rastvoru, 1 mL) i sirćetna kiselina (0.048 mL) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 30 minuta. Dodat je natrijum triacetoksiborohidrid (213 mg, 1.00 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom sledećih 16 h. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu i ostatak je načinjen baznim na pH 9 sa zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata i ekstrahovana u etil acetat. Organska faza je odvojena, osušena (iznad MgSO4) i koncentrovana u vakuumu da bi se dobilo smeđe ulje. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom da bi se dobilo 80 mg (29 % prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bezbojnog ulja.
[0320]<1>H NMR (500 MHz, MeOD): δ [ppm] = 2.53 (d, 3H), 3.27 - 3.31 (m, 2H), 3.83 - 3.90 (m, 2H), 3.93 (s, 3H), 4.92 (p, 1H), 7.44 (dd, 1H), 7.50 - 7.57 (m, 2H), 8.04 (t, 1H).
Intermedijer 24: Metil 3-bromo-5-(tetrahidro-2H-piran-4-iloksi)benzoat
[0321] Intermedijer 1 (1.5 g, 6.49 mmol), Intermedijer 17B (2.5 g, 9.74 mmol) i cezijum karbonat (3.17 g, 9.74 mmol) su mešani u DMF (25 mL) na sobnoj temperaturi do potpune konverzije. Reakciona smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom.
1
Preostali materijal je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent heksan/ EE) da se dobije naslovno jedinjenje, 0.85 g (42% prinosa).
[0322]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.59 (s, 2 H) 1.92 - 1.99 (m, 2 H) 3.49 (s, 2 H) 3.80 - 3.86 (m, 5 H) 4.65 - 4.81 (m, 1 H) 7.45 (dd, J=2.41, 1.39 Hz, 1 H) 7.52 - 7.54 (m, 1 H) 7.62 (t, J=1.52 Hz, 1 H).
Intermedijer 4AC: Metil 3-[(5-metil-1,3,4-tiadiazol-2-il)oksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoat
[0323] Rastvor Intermedijera 3 (250 mg, 1.0 mmol), 2-bromo-5-metil-1,3,4-tiadiazola (270 mg, 1.5 mmol) i cezijum karbonata (654 mg, 2.0 mmol) u DMF (5 mL) zagrevan je u mikrotalasnoj pećnici na 120 °C tokom 1h. Reakciona smeša je podeljena između fiziološkog rastvora (10 mL) i EtOAc (10 mL). Slojevi su odvojeni i vodeni sloj je ekstrahovan sa još EtOAc (2 x 10 mL). Spojene organske materije su isprane sa fiziološkim rastvorom (20 mL), osušene iznad MgSO4, filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (silika gel, eluiranje sa heptan-EtOAc, 4:1 do 1:4) da bi se dobilo 226.6 mg (65% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu žute gume.
[0324]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.39 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 8.09 (dd, J = 2.3, 1.7 Hz, 1H), 7.98 (dd, J = 2.4, 1.4 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 3.95 (s, 3H), 2.69 (s, 3H), 2.54 (d, J = 1.0 Hz, 3H).
[0325] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.23 min, MS (ESIpos): m/z = 347.9 (M+H)<+>.
Intermedijer 5AC: 3-[(5-Metil-1,3,4-tiadiazol-2-il)oksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina
2
[0326] Intermedijer 4AC (226 mg, 0.65 mmol) je mešan u MeOH (2.5 mL), THF (2.5 mL) i 1M LiOH (2.5 mL) tokom 1h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i ostatak je prebačen u vodu (5 mL) i ispran sa EtOAc (5 mL). Vodeni sloj je zakišeljen sa 1M HCl do pH ∼3 i formirani talog je sakupljen vakuumskom filtracijom da bi se dobilo 198.6 mg (92% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu beličastog praha.
[0327]<1>H NMR (250 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 8.30 (t, J = 1.5 Hz, 1H), 8.13 - 8.10 (m, 1H), 7.94 - 7.89 (m, 1H), 7.70 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 2.65 (s, 3H).
[0328] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.08 min, MS (ESIpos): m/z = 333.9 (M+H)<+>.
Intermedijer 4AD: Tert-butil 3-[3-(metoksikarbonil)-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)fenoksi]azetidin-1-karboksilat
[0329] Intermedijer 3 (300 mg, 1.20 mmol), tert-butil 3-{[(4-metilfenil)sulfonil]oksi} azetidin-1-karboksilat (443 mg, 1.56 mmol) i cezijum karbonat (784 mg, 2.04 mmol) su kombinovani u MeCN (5 mL) i zagrevani na 100 °C tokom 2 h. Hlađenjem do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc (5 mL) i filtrirana pre nego što je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (silika gel, eluiranje sa heptan-EtOAc, 1:0 do 3:2) da bi se dobilo 303.7 mg (57% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu beličaste čvrste supstance.
[0330]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.13 (t, J = 1.3 Hz, 1H), 7.57 - 7.55 (m, 1H), 7.53 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 7.42 (dd, J = 2.4, 1.3 Hz, 1H), 5.05 - 4.97 (m, 1H), 4.37 (dd, J = 10.0, 6.6 Hz, 2H), 4.03 (dd, J = 9.8, 3.9 Hz, 2H), 3.94 (s, 3H), 2.53 (d, J = 0.9 Hz, 3H), 1.45 (s, 9H).
[0331] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.37 min, MS (ESIpos): m/z = 405.05 (M+H)<+>.
Intermedijer 5AD: 3-{[1-(Tert-butoksikarbonil)azetidin-3-il]oksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina
[0332] Intermedijer 4AD (303 mg, 0.68 mmol) je rastvoren u MeOH (5 mL) i THF (5 mL). Dodato je 1M LiOH (2 mL), i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2h. Reakciona smeša je koncentrovana da se ukloni MeOH/THF, a ostatak je prebačen u vodu (5 mL) i ispran sa EtOAc (5 mL). Vodeni sloj je zakišeljen do pH 4 sa 1M HCl i rastvor je ekstrahovan sa DCM (3 x 5 mL) da bi se dobilo 205.6 mg (77% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu belog praha.
[0333]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.28 (s, 1H), 7.60 - 7.58 (m, 1H), 7.58 -7.57 (m, 1H), 7.46 (dd, J = 2.4, 1.3 Hz, 1H), 5.02 (ddd, J = 10.4, 6.3, 4.1 Hz, 1H), 4.39 (dd, J = 9.9, 6.5 Hz, 2H), 4.05 (dd, J = 9.8, 4.0 Hz, 2H), 2.58 - 2.49 (m, 3H), 1.46 (s, 9H).
[0334] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.19 min, MS (ESIpos): m/z = 391.00 (M+H)<+>.
Intermedijer 4AE: Tert-butil (3S)-3-[3-(metoksikarbonil)-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)fenoksi]pirolidin-1-karboksilat
4
[0335] U rastvor Intermedijera 3 (250 mg, 1.0 mmol), tert-butil (3R)-3-hidroksipirolidin-1-karboksilata (375 mg, 2 mmol) i trifenilfosfina (1.05 g, 4 mmol) u THF (5 mL) ohlađen na 0 °C dodat je u kapima DIAD (394 µL, 2 mmol). Rastvor je mešan na 0 °C tokom 5 minuta zatim je ostavljen da se zagreje do sobne temperature i mešan je sledećih 72 h. Reakciona smeša je zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom i sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (silika gel, eluiranje sa heptan-EtOAc, 20:1 do 2:3) da se dobije 745 mg (88% prinosa, 50 % čistoća) naslovnog jedinjenja u vidu bezbojne gume.
[0336]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d) δ [ppm] 8.11 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 5.04 (s, 1H), 3.94 (s, 3H), 3.68 (s, 3H), 3.30 (s, 1H), 2.53 (s, 3H), 2.26 -2.09 (m, 2H), 1.27 (s, 9H).
[0337] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.37 min, MS (ESIpos): m/z = 419.1 (M+H)<+>.
Intermedijer 5AE: 3-[(3S)-1-Tert-butoksikarbonilpirolidin-3-il]oksi-5-(5-metiltiazol-2-il)benzoeva kiselina
[0338] U rastvor Intermedijera 4AE (745 mg, 50 % čistoća, 0.89 mmol) rastvoren u THF (2 mL) i MeOH (5 mL) dodat je 1 M LiOH (2.5 mL) i dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Reakciona smeša je koncentrovana da se ukloni MeOH/THF, i ostatak je prebačen u vodu (5 mL) i ispran sa EtOAc (5 mL). Vodeni sloj je zakišeljen do pH 4 sa 1M HCl zatim je ekstrahovan sa DCM (3 x 10 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 296.3 mg (82% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu belog praha.
[0339]<1>H NMR (250 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 7.99 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.65 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.62 - 7.59 (m, 1H), 7.48 (dd, J = 2.5, 1.3 Hz, 1H), 5.19 (s, 1H), 3.51 (dd, J = 39.9, 10.7 Hz, 4H), 2.08 (s, 2H), 1.40 (s, 9H).
[0340] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.21 min, MS (ESIpos): m/z = 405.10 (M+H)<+>.
Intermedijer 4AF: tert-butil 3-[3-(metoksikarbonil)-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)fenoksi]piperidin-1-karboksilat
[0341] Intermedijer 3 (1.3 g, 3.65 mmol, 70 % čistoća), tert-butil 4-hidroksipiperidin-1-karboksilat (1.47 g, 7.3 mmol) i trifenilfosfin (3.8 g, 14.6 mmol) su kombinovani u THF (10 mL) i ohlađeni na 0 °C u ledenom kupatilu. U kapima je dodat DIAD (1.43 mL, 7.3 mmol) i reakciona smeša je mešana tokom 10 minuta zatim je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je sledećih 16 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, prebačena u DCM (20 mL) zatim isprana sa fiziološkim rastvorom (10 mL) i amonijum hloridom (10 mL). Organska faza je odvojena, osušena iznad MgSO4, filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (silika gel, eluiranje sa heptan-EtOAc, 1:0 do 0:1) da bi se dobilo 209 mg (15% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bezbojnog ulja.
[0342]<1>H NMR (250 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.10 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.72 - 7.63 (m, 1H), 7.62 - 7.56 (m, 1H), 7.51 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 4.52 - 4.32 (m, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.81 - 3.68 (m, 1H), 3.59 - 3.25 (m, 3H), 2.52 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 2.14 - 1.72 (m, 4H), 1.37 (s, 9H).
[0343] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.60 min, m/z = 433 (M+H)<+>.
Intermedijer 5AF: 3-{[1-(tert-butoksikarbonil)piperidin-3-il]oksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina
[0344] U rastvor Intermedijera 4AF (367 mg, 0.76 mmol, 90 % čistoća) u THF (2 mL) dodat je 1 M LiOH (1.1 mL) i reakciona smeša je mešana tokom 16 h na sobnoj temperaturi pre koncentrisanja pod sniženim pritiskom. Ostatak je prebačen u vodu (∼1 mL) i načinjen baznim do pH 4 sa 1 M HCl da se istaloži bela čvrsta supstanca koja je ekstrahovana sa EtOAc (2 x 5 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobila bezbojna guma koja je osušena zamrzavanjem da bi se dobilo 264 mg (77% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu belog praha.
[0345] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.39, MS (ESIpos) m/z = 419 (M+H)<+>.
Intermedijer 4AG: Metil 3-[(1-acetilpiperidin-4-il)oksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoat
[0346] U rastvor Intermedijera 3 (200 mg, 0.80 mmol), 1-(4-hidroksipiperidin-1-il)etanon (126 mg, 0.88 mmol) i trifenilfosfin (630 mg, 2.40 mmol) u THF (2 mL) ohlađen na 0 °C dodat je u kapima DIAD (0.3 mL, 1.53 mmol). Dobijeni rastvor je ostavljen da se zagreje do sobne temperature i mešan je tokom 16 h. LCMS analiza pokazala je potpunu konverziju u željeni proizvod, pa je smeša koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren u DCM (10 mL) i ispran sa NH4Cl (5 mL). Organska faza je odvojena, osušena iznad MgSO4, filtirirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (silika gel, eluiranje sa heptan-EtOAc, 1:4 do 0:1 praćeno sa EtOAc-MeOH, 1:0 do 20:3) da se dobije 182 mg (52% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu žute gume.
[0347]<1>H NMR (250 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.08 (t, 1H), 7.70 (dd, 1H), 7.58 (dd, 1H), 7.51 (d, 1H), 4.69 (tt, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.77 - 3.61 (m, 3H), 3.52 - 3.34 (m, 1H), 2.52 (d, 3H), 2.12 (s, 3H), 2.01 - 1.79 (m, 4H).
[0348] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.28 min, MS (ESIpos): m/z = 375.1 (M+H)<+>.
Intermedijer 5AG: 3-[(1-acetilpiperidin-4-il)oksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina
[0349] U rastvor Intermedijera 4AG (182 mg, 0.44 mmol, 90 % čistoća) u THF (1 mL) dodat je rastvor 1 M LiOH (0.65 mL) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h pre nego što je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prebačen u vodu (4 mL), zakišeljen do pH 4 sa 1 M rastvorom HCl zatim je ekstrahovan sa 1:1 IPA/hloroform (2 x 20 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 120 mg (76% prinosa) naslovnog jedinjenja kao bela čvrsta supstanca.
[0350]<1>H NMR (500 MHz, DMSO): δ [ppm] 7.96 (t, 1H), 7.65 - 7.63 (m, 2H), 7.53 (dd, 1H), 4.85 - 4.75 (m, 1H), 3.87 - 3.77 (m, 1H), 3.72 - 3.63 (m, 1H), 2.02 (s, 3H), 2.01 - 1.86 (m, 2H), 1.72 - 1.61 (m, 1H), 1.61 - 1.49 (m, 1H).
[0351] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.13 min, MS (ESIpos) m/z = 361 (M+H)<+>.
Intermedijer 4AH: Tert-butil 6-[3-(metoksikarbonil)-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)fenoksi]-2-azaspiro[3.3]heptan-2-karboksilat
[0352] Rastvor Intermedijera 3 (250 mg, 0.702 mmol, 70 % čistoća), tert-butil 6-hidroksi-2-azaspiro[3.3]heptan-2-karboksilata (225 mg, 1.06 mmol) i trifenilfosfina (735 mg, 2.80 mmol) u THF (3 mL) u atmosferi azota je ohlađen na 0 °C u ledenom kupatilu i dodat je u kapima DIAD (0.2 mL, 1.07 mmol). Dobijeni rastvor je ostavljen da se zagreje do sobne temperature i mešan je tokom 16 h. LCMS (Analitička metoda A) pokazala je približno 50 % konverzije u proizvod. Dodat je sledeći deo DIAD (0.1 mL, 0.54 mmol) i smeša je mešana sledećih 24 h. LCMS (Analitička metoda A) je i dalje pokazala nepotpunu konverziju, pa je dodat dodatni deo tert-butil 6-hidroksi-2-azaspiro[3.3]heptan-2-karboksilata (40 mg, 0.19 mmol) i DIAD (0.1 mL, 0.54 mmol) i mešan je sledećih 16 h. Smeša je zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom, i ostatak triturisan sa heptanom da se istaloži trifenilfosfin oksid koji je uklonjen filtracijom. Ostatak je koncentrovan pod sniženim pritiskom i ostatak je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (silika gel, eluiranje sa heptan-EtOAc, 4:1 do 2:3) da se dobije 250 mg (76% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bezbojne gume.
[0353]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.08 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.57 - 7.49 (m, 2H), 7.44 (dd, J = 2.4, 1.4 Hz, 1H), 4.69 (p, J = 6.6 Hz, 1H), 4.00 (s, 2H), 3.93 (d, J = 3.7 Hz, 5H), 2.81 - 2.73 (m, 2H), 2.52 (d, J = 1.0 Hz, 3H), 2.40 - 2.32 (m, 2H), 1.44 (s, 9H).
[0354] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.64 min, MS (ESIpos) 445 (M+H)<+>.
Intermedijer 5AH: 3-{[2-(tert-butoksikarbonil)-2-azaspiro[3.3]hept-6-il]oksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina
[0355] U rastvor Intermedijera 4AH (250 mg, 0.534 mmol, 95 % čistoća) u THF (1 mL) dodat je 1 M rastvora LiOH (0.8 mL) i dobijeni rastvor je mešan tokom 16 h pre koncentrisanja pod sniženim pritiskom. Ostatak je prebačen u vodu (1 mL) i zakišeljen do pH 5 sa 1 M HCl da se istaloži bela čvrsta supstanca koja je sakupljena filtracijom da bi se dobilo 160 mg (66% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu belog praha.
[0356]<1>H NMR (250 MHz, DMSO): δ [ppm] 7.96 (t, 1H), 7.64 (d, 1H), 7.54 - 7.44 (m, 1H), 7.37 (dd, 1H), 4.78 (q, 1H), 3.93 (s, 2H), 3.83 (s, 2H), 2.81 - 2.65 (m, 2H), 2.35 - 2.19 (m, 2H), 1.37 (s, 9H).
[0357] LCMS (MS17, 2min) Rt = 1.42 min, MS (ESIpos) m/z = 431 (M+H)<+>.
Intermedijer 47: Metil 3-({trans-3-[(tert-butoksikarbonil)amino]ciklobutil}oksi)-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoat
[0358] Intermedijer 3 (500 mg, 2.00 mmol), cis-tert-butil 3-hidroksiciklobutilkarbamat (488.2 mg, 2.6 mmol) i trifenilfosfin (2104 mg, 8.0 mmol) su kombinovani u THF (10 mL) i ohlađen na 0 °C. U kapima je dodat DIAD (0.79 mL, 4.0 mmol) i reakciona smeša je mešana tokom 10 min zatim je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je sledećih 96 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, i prečišćena sa Biotage Isolera™
1
hromatografijom (silika gel, eluiranje sa heptan-EtOAc, 9:1 do 3:7) da bi se dobilo 1.6 mg (74% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bezbojnog ulja.
[0359]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.09 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.54 (dd, J = 2.4, 1.6 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 7.44 (dd, J = 2.5, 1.4 Hz, 1H), 4.94 - 4.87 (m, 1H), 4.31 (s, 1H), 3.93 (s, 3H), 2.63 - 2.53 (m, 2H), 2.52 (d, J = 1.2 Hz, 3H), 2.48 - 2.39 (m, 2H), 1.45 (s, 9H).
[0360] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.53 min, MS (ESIpos): m/z = 419.05 (M+H)<+>.
Intermedijer 48: Metil 3-[(trans-3-aminociklobutil)oksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoat
[0361] Intermedijer 47 (1.6 g, 39 % čistoća, 1.5 mmol) je mešan u hlorovodoničnoj kiselini (4M u 1,4-dioksanu, 1.5 ml, 6.0 mmol) i DCM (10 mL) tokom 2 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i ostatak je prebačen u vodu (15 mL) i isprana sa EtOAc (2 x 15 mL). Vodeni sloj je načinjen baznim do pH 8 sa zasićenim rastvorom NaHCO3i smeša je ekstrahovana sa DCM (3 x 15 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je sipan u metanol u prethodno ispran uložak SCX-2, koji je ispran sa još metanola, praćeno sa 2M NH3u MeOH za eluiranje proizvoda. Materijal je dalje prečišćen prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (silika gel, eluiranje sa heptan-EtOAc, 1:3 do 0:1) dajući 477 mg (80% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0362]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.09 (t, J = 1.5 Hz, 1H), 7.55 (dd, J = 2.4, 1.6 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.46 (dd, J = 2.5, 1.4 Hz, 1H), 4.98 - 4.94 (m, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.82 (tt, J = 7.7, 5.2 Hz, 1H), 2.52 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 2.48 (ddt, J = 10.8, 7.2, 3.4 Hz, 2H), 2.30 - 2.19 (m, 2H).
1 1
[0363] LCMS (Analitički metod A) Rt = 0.95 min, MS (ESIpos): m/z = 319.0 (M+H)<+>.
Intermedijer 49: Metil 3-{[trans-3-(dimetilamino)ciklobutil]oksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoat
[0364] Intermedijer 48 (477 mg, 80% čistoća, 1.19 mmol) je rastvoren u metanolu (10 mL) i sirćetnoj kiselini (0.5 mL). Dodat je formaldehid (133 µl, 4.79 mmol) praćeno sa STAB (762 mg, 3.60 mmol), i reakcija je mešana tokom 2h. LCMS (Analitički metod A) pokazala je nepotpunu konverziju, pa je reakcija ponovo tretirana sa formaldehidom (133 µl, 4.79 mmol) praćeno sa STAB (762 mg, 3.60 mmol) i mešana tokom još 4h. LCMS (Analitički metod A) i dalje je pokazala nepotpunu konverziju, pa je reakcija ponovo ponovo tretirana sa formaldehidom (266 µl, 9.58 mmol) praćeno sa STAB (1.53 g, 7.2 mmol) i mešana tokom vikenda. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, i ostatak je prebačen u zasićenu NaHCO3(30 mL), i rastvor je ekstrahovan sa DCM (3 x 30 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 477.7 mg (92% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bezbojne gume.
[0365]<1>H NMR (250 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.09 (t, J = 1.5 Hz, 1H), 7.55 (dd, J = 2.5, 1.6 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.46 (dd, J = 2.5, 1.4 Hz, 1H), 4.87 (tt, J = 6.7, 3.5 Hz, 1H), 3.93 (s, 3H), 3.01 - 2.89 (m, 1H), 2.52 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 2.48 - 2.30 (m, 4H), 2.18 (s, 7H).
[0366] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.00 min, MS (ESIpos): m/z = 347.1 (M+H)<+>.
Intermedijer 5AI: 3-{[Trans-3-(dimetilamino)ciklobutil]oksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina
1 2
[0367] Intermedijer 49 (477 mg, 80 % čistoća, 1.1 mmol) je rastvoren u MeOH (5 mL) i THF (5 mL). Dodato je 1M LiOH (2 mL), i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2h. Reakciona smeša je koncentrovana da se ukloni MeOH/THF, i ostatak je prebačen u vodu (5 mL) i ispran sa EtOAc (5 mL). Vodeni sloj je zakišeljen do pH 6 sa 1M HCl i rastvor je ekstrahovan sa 1:1 IPA/hloroform (3 x 5 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je liofilizovan iz acetonitrila/vode da bi se dobilo 230 mg (57% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bele čvrste supstance.
[0368]<1>H NMR (500 MHz, DMSO): δ [ppm] 8.00 (s, 1H), 7.62 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 7.40 (s, 2H), 4.85 (s, 1H), 2.88 (p, J = 7.5 Hz, 1H), 2.43 - 2.33 (m, 2H), 2.24 - 2.16 (m, 2H), 2.10 (s, 6H). tiazol metil grupa zaklonjena rastvaračem.
[0369] LCMS (Analitički metod A) Rt = 0.92 min, MS (ESIpos): m/z = 333.0 (M+H)<+>.
Intermedijer 6AJ: Tert-butil-3-fluoro-4-{[(4-metilfenil)sulfonil]oksi}piperidin-1-karboksilat, kao smeša 2 trans izomera
[0370] Tert-butil 3-fluoro-4-hidroksipiperidin-1-karboksilat (750 mg, 3.42 mmol), trimetilamin (0.72 mL, 5.13 mmol) i trimetilamin hidrohlorid (33 mg, 0.34 mmol) su mešani u DCM (15 mL).4-Metilbenzensulfonil hlorid (815 mg, 4.28 mmol) dodat je. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4h. TLC (50% EtOAc u heptanu) pokazala je potpunu reakciju, pa je reakciona smeša tretirana sa N,N-dimetiletan-1,2-diaminom (225 µL, 2.05 mmol) da bi se utrošio nereagovani TsCl. Reakciona smeša je isprana sa 1 M HCl (2 x 5 mL) pre sušenja iznad MgSO4, filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen
1
sa Biotage Isolera™ hromatografijom (silika gel, eluiranje sa heptan-EtOAc, 10:1 do 1:1) da bi se dobilo 606.1 mg (47% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu belog praha.
[0371]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 7.86 - 7.78 (m, 2H), 7.35 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 4.71 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 4.58 (d, J = 48.3 Hz, 1H), 3.87 (d, J = 52.6 Hz, 2H), 3.34 (s, 2H), 2.45 (s, 3H), 2.08 (s, 1H), 1.76 - 1.67 (m, 1H), 1.44 (s, 9H).
Intermedijer 4AJ: Tert-butil-3-fluoro-4-[3-(metoksikarbonil)-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)fenoksi]piperidin-1-karboksilat, kao smeša 2 trans izomera
[0372] Intermedijer 3 (426 mg, 73% čistoća, 1.25 mmol), Intermedijer 6AJ (606 mg, 1.62 mmol) i cezijum karbonat (610 mg, 1.87 mmol) su kombinovani u acetonitrilu (5 mL) i mešani na 120 °C u mikrotalasnoj pećnici tokom 3 x 30 min. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i filtrirana kroz Celite® pre nego što je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (silika gel, eluiranje sa heptan-EtOAc, 1:0 do 2:3) da bi se dobilo 387.6 mg (57% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bezbojne gume.
[0373]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.12 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.74 (dd, J = 2.4, 1.6 Hz, 1H), 7.62 (dd, J = 2.5, 1.3 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 4.72 - 4.52 (m, 2H), 3.95 (s, 3H), 3.92 - 3.77 (m, 1H), 3.66 (s, 1H), 3.58 (s, 1H), 3.46 (s, 1H), 2.53 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 2.20 - 2.10 (m, 1H), 1.84 - 1.75 (m, 1H), 1.70 - 1.59 (m, 1H), 1.48 (s, 9H).
[0374] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.41 min, MS (ESIpos): m/z = 451.1 (M+H)<+>.
Intermedijer 5AJ: 3-{[-(tert-butoksikarbonil)-3-fluoropiperidin-4-il]oksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina, kao smeša stereoizomera
1 4
[0375] Intermedijer 4AJ (387mg, 83% čistoća, 0.71 mmol) je rastvoren u MeOH (5 mL) i THF (5 mL). 1M LiOH (2 mL) dodat je, i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2h. Reakciona smeša je koncentrovana da se ukloni MeOH/THF, i ostatak je prebačen u vodu (5 mL) i isprana sa EtOAc (5 mL). Vodeni sloj je zakišeljen do pH 4 sa 1M HCl, i ekstrahovan sa DCM (3 x 5 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (silika gel, eluiranje sa heptan-EtOAc, 1:0 do 2:3) da bi se dobilo 105.2 mg (34% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu belog praha.
[0376]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.27 - 8.21 (m, 1H), 7.80 - 7.74 (m, 1H), 7.70 - 7.64 (m, 1H), 7.56 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 4.62 (d, J = 22.8 Hz, 2H), 3.87 (d, J = 58.5 Hz, 1H), 3.61 (s, 2H), 3.45 (s, 1H), 2.54 (d, J = 1.0 Hz, 3H), 2.20 - 2.11 (m, 1H), 1.80 (s, 2H), 1.48 (s, 9H).
[0377] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.16 min, MS (ESIpos): m/z = 437.15 (M+H)<+>.
Intermedijer 5AK: 3-[(6-Metilpiridazin-3-il)oksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina
[0378] Rastvor Intermedijera 3 (130 mg, 0.52 mmol), 3-bromo-6-metil-piridazin (135 mg, 0.78 mmol) i cezijum karbonat (340 mg, 1.04 mmol) u DMF (2.5 mL) su grejani u mikrotalasnoj pećnici na 120°C tokom 45 minuta, zatim tokom sledećih 20 min na istoj temperaturi.
1
Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i ostatak je prebačen u metanol (5 mL) i tretiran sa 1M LiOH (2.5 mL). Posle 1.5h, reakcija je koncentrovana da bi se uklonili organski slojevi, pre nego što je razblažena vodom (10 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2 x 10 mL). Vodeni sloj je zakišeljen do ∼pH 4 sa 2M HCl, ekstrahovan sa DCM (3 x 10 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 143 mg (73% prinosa) naslovnog jedinjenja kao smeđa guma.
<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.48 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 8.00 - 7.96 (m, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.42 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.19 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 2.70 (d, J = 7.7 Hz, 3H), 2.53 (s, 3H).
[0379] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.01 min, MS (ESIpos): m/z = 328.05 (M+H)<+>.
Intermedijer 4AY: Metil 3-({1-[(tert-butoksikarbonil)amino]ciklopropil}metoksi)-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoat
[0380] Intermedijer 3 (400 mg, 1.6 mmol), tert-butil [1-(hidroksimetil)ciklopropil]karbamat (390.5 mg, 2.01 mmol) i trifenilfosfin (1683 mg, 6.4 mmol) su kombinovani u THF (10 mL) i ohlađeni na 0 °C u ledenom kupatilu. Kap po kap je dodat DIAD (0.63 mL, 3.2 mmol) i reakciona smeša je mešana tokom 10 min pre nego što je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je sledećih 96h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, i prečišćena sa Biotage Isolera™ hromatografijom (silika gel, eluiranje sa heptan-EtOAc, 1:0 do 1:1). Drugo prečišćavanje sa Biotage Isolera™ hromatografijom (silika gel, eluiranje sa heptan-EtOAc, 20:3) dalo je 208.9 mg (23% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bezbojnog ulja.
[0381] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.47 min, MS (ESIpos): m/z = 419 (M+H)<+>.
1
Intermedijer 5AY: 3-({1-[(Tert-butoksikarbonil)amino]ciklopropil}metoksi)-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina
[0382] Intermedijer 4AY (208.9 mg, 0.369 mmol) je mešan u metanolu (5 mL) i 1M LiOH (2.5 mL) tokom 1h. Organski slojevi su uklonjeni pod sniženim pritiskom, i ostatak je razblažen sa vodom (5 mL) i ekstrahovan sa EtOAc (5 mL). Vodena faza je zakišeljena do pH 2 sa 2M HCl, pre nego što je ekstrahovana sa DCM (2 x 5 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 48.1 mg (32% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bezbojne gume.
[0383]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.20 (s, 1H), 7.70 - 7.67 (m, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.57 - 7.53 (m, 1H), 5.19 (s, 1H), 4.09 (s, 2H), 2.53 (d, J = 0.9 Hz, 3H), 1.43 (s, 9H), 0.94 (d, J = 19.3 Hz, 4H).
[0384] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.31 min, MS (ESIpos): m/z = 405 (M+H)<+>.
Intermedijer 30: 3-Hidroksi-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina
[0385] U rastvor Intermedijera 3 (500 mg, 2.0 mmol) rastvoren u THF (5 mL) i MeOH (5 mL) dodat je 2M LiOH (2.5 mL, 5 mmol) i mešan na 50 °C tokom 2 h. Reakciona smeša je ohlađena i zatim koncentrovana da se ukloni MeOH/THF, a ostatak je prebačen u vodu (5 mL) i ispran sa EtOAc (5 mL). Vodeni sloj je zakišeljen do pH 4 sa 1M HCl i talog je sakupljen vakuumskom filtracijom i osušen u vakuumskoj pećnici da bi se dobilo 281.1 mg (59% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu beličastog praha.
1
[0386]<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 14.89 (s, 1H), 12.60 (t, J = 1.5 Hz, 1H), 12.38 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 12.27 - 12.22 (m, 1H), 12.14 (dd, J = 2.4, 1.4 Hz, 1H).
[0387] LCMS (Analitički metod A) Rt = 0.94 min, MS (ESIpos): m/z = 235.95 (M+H)<+>.
Intermedijer 32: 3-Hidroksi-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
[0388] Intermedijer 30 (486 mg, 1.86 mmol), Intermedijer VI (465.5 mg, 2.05 mmol) i DIPEA (1.30 mL, 7.44 mmol) su kombinovani u DMF (10 mL) i HATU (848.3 mg, 2.23 mmol) dodat je. Reakciona smeša je ostavljena da se meša preko noći na sobnoj temperaturi. Sirova reakcija je ugašena dodavanjem vode (∼15 mL). Dobijena emulzija je uparena do ulja koje slobodno teče. Dodata je voda (∼15 mL) i dobijeni talog je uklonjen filtracijom i ispran sa još alikvota vode, a zatim je ostavljen da se osuši na vazduhu da bi se dobilo 660 mg (82% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu beličastog praha.
[0389]<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] = 10.05 (s, 1H), 9.13 - 9.09 (m, 3H), 7.79 (t, J=1.4, 1H), 7.62 (d, J=1.2, 1H), 7.46 - 7.39 (m, 1H), 7.37 - 7.29 (m, 1H), 5.28 (m, 1H), 2.49 (s, 3H), 1.59 (d, J=7.1, 3H).
[0390] LCMS (Analitički metod F) Rt = 2.87 min, MS (ESIpos): m/z = 409.1 (M+H)<+>.
Intermedijer 63: 3-Hidroksibutan-2-il]oksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid, smeša 2 trans izomera
1
[0391] U rastvor 3-hidroksibutan-2-il]oksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeve kiseline (145 mg, 0.47 mmol), Intermedijera VI (129 mg, 0.57 mmol) i DIPEA (0.25 mL, 1.42 mmol) u DCM (2 mL) dodat je HATU (269 mg, 0.71 mmol). Smeša je mešana tokom 2 h na sobnoj temperaturi zatim je razblažena sa DCM i isprana sa vodom i zasićenim vodenim rastvorom amonijum hlorida. Organska faza je odvojena, osušena (MgSO4), filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (eluiranje sa 0 - 7 % MeOH u DCM na prethodno upakovanoj koloni KP-SiO2) da se dobije 222 mg (88% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0392]<1>H NMR (250 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.94 (s, 2H), 7.79 (s, 1H), 7.55 - 7.43 (m, 2H), 7.35 (s, 1H), 6.92 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 5.36 (m, 1H), 4.45 (dt, J = 6.4, 3.4 Hz, 1H), 4.04 (s, 1H), 2.79 (s, 6H), 2.53 (s, 3H), 1.71 (d, J = 7.1 Hz, 4H), 1.32 - 1.23 (m, 6H).
[0393] LCMS (Analitički metod D) Rt = 4.22 min, MS (ESIpos) m/z = 481 (M+H)<+>.
Intermedijer 76: 3-(5-Hloro-1,3-tiazol-2-il)-5-{[trans-3-hidroksibutan-2-il]oksi}benzoeva kiselina, kao smeša trans izomera
[0394] U rastvor metil 3-hidroksi-5-(5-hloro-1,3-tiazol-2-il)benzoata (500 mg, 1.67 mmol) i trans-2,3-epoksibutana (0.63 mL, 6.67 mmol) u DMSO (5 mL) dodat je cezijum karbonat (2.17 g, 6.67 mmol). Smeša je zagrevana na 100 °C tokom 16 h zatim je razblažena sa vodom (10 mL) i isprana sa EtOAc (10 mL). Vodeni sloj je zakišeljen sa konc. HCl i ekstrahovan u DCM (2 x 15 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (silika gel, eluiranje sa DCM/MeOH, 1:0 do 4:1) praćeno sa preparativnom HPLC (Metod B) da bi se dobilo 306 mg (56% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu beličaste čvrste supstance.
1
[0395]<1>H NMR (250 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 8.00 (s, 1H), 7.94 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.64 -7.60 (m, 1H), 7.55 (dd, J = 2.4, 1.4 Hz, 1H), 4.82 (s, 1H), 4.47 - 4.32 (m, 1H), 3.85 - 3.69 (m, 1H), 1.24 (d, J = 6.2 Hz, 3H), 1.14 (d, J = 6.4 Hz, 3H).
[0396] LCMS (Analitički metod D) Rt = 3.84 min, MS (ESIpos): m/z = 327.97 (M+H)<+>.
[0397] Smeša trans izomera se izdvaja korišćenjem hiralnog prečišćavanja (Metod 1) da se dobije Intermedijer 77 (Trans Izomer 1) i Intermedijer 78 (Trans Izomer 2)
[0398] Intermedijer 77: Trans Izomer 1; 3-(5-hloro-1,3-tiazol-2-il)-5-{[3-hidroksibutan-2-il]oksi}benzoeva kiselina
SFC hiralno prečišćavanje (Metod 1) na 296 mg Intermedijera 76 dalo je 98.4 mg naslovnog jedinjenja u vidu beličaste čvrste supstance.
SFC Hiralna analiza (Metod 1): 96.2% e.e. Rt = 2.71 min.
[0399]<1>H NMR (250 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 7.99 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 4.82 (s, 1H), 4.52 - 4.28 (m, 1H), 3.75 (s, 1H), 1.23 (d, J = 6.2 Hz, 3H), 1.13 (d, J = 6.4 Hz, 3H).
[0400] Intermedijer 78: Trans Izomer 2; 3-(5-hloro-1,3-tiazol-2-il)-5-{[3-hidroksibutan-2-il]oksi}benzoeva kiselina
SFC hiralno prečišćavanje (Metod 1) na 296 mg Intermedijera 76 dalo je 93.2 mg naslovnog jedinjenja u vidu beličaste čvrste supstance.
SFC Hiralna analiza (Metod 1): 97.2% e.e. Rt = 3.18 min.
[0401]<1>H NMR (250 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 8.00 (s, 1H), 7.97 - 7.88 (m, 1H), 7.64 - 7.59 (m, 1H), 7.56 - 7.51 (m, 1H), 4.83 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 4.49 - 4.33 (m, 1H), 3.85 - 3.70 (m, 1H), 1.23 (d, J = 6.2 Hz, 3H), 1.13 (d, J = 6.4 Hz, 3H).
Intermedijer 87: 3-Hidroksibutan-2-il]oksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina, kao smeša trans izomera
11
[0402] U rastvor Intermedijera 3 (300 mg, 0.88 mmol) i trans-2,3-epoksibutana (0.32 mL, 3.51 mmol) u DMSO (3 mL) dodat je cezijum karbonat (1145 mg, 3.51 mmol). Smeša je zagrevana na 100 °C tokom 16 h zatim je razblažena sa vodom (10 mL) i zakišeljena sa konc. HCl da se dobije beli talog koji je ekstrahovan u IPA/CHCl3 (1:3) (2 x 25 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen sa preparativnom HPLC (Metod B) da se dobije 500 mg (57% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu beličaste čvrste supstance.
[0403] Smeša trans izomera je odvojena hiralnim prečišćavanjem (Metod 1) da se dobije Intermedijer 88 (Trans Izomer 1) i Intermedijer 89 (Trans Izomer 2)
[0404] Intermedijer 88: Trans Izomer 1; 3-Hidroksibutan-2-il]oksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina
SFC hiralno prečišćavanje (Metod 1) na 298.2 mg Intermedijera 87 dalo je 183.6 mg naslovnog jedinjenja u vidu beličastog praha.
SFC Hiralna analiza (Metod 1): 100% e.e. Rt = 2.17 min.
[0405]<1>H NMR (250 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 7.96 - 7.92 (m, 1H), 7.66 - 7.59 (m, 2H), 7.51 - 7.47 (m, 1H), 4.43 - 4.32 (m, 2H), 3.82 - 3.71 (m, 1H), 1.24 (d, J = 6.2 Hz, 3H), 1.14 (d, J = 6.4 Hz, 3H).
[0406] Intermedijer 89: Trans Izomer 2; 3-Hidroksibutan-2-il]oksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina
SFC hiralno prečišćavanje (Metod 1) na 298.2 mg Intermedijera 89 dalo je 46.7 mg naslovnog jedinjenja u vidu beličastog praha.
SFC Hiralna analiza (Metod 1): 100% e.e. Rt = 2.41 min.
[0407]<1>H NMR (250 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 13.25 (s, 1H), 7.97 - 7.91 (m, 1H), 7.67 - 7.58 (m, 2H), 7.53 - 7.47 (m, 1H), 4.81 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 4.43 - 4.31 (m, 1H), 3.82 - 3.70 (m, 1H), 1.24 (d, J = 6.1 Hz, 3H), 1.14 (d, J = 6.4 Hz, 3H.
Intermedijer 92: 3-Hidroksibutan-2-il]oksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina, kao smeša cis izomera
[0408] U rastvor Intermedijera 3 (780 mg, 3.13 mmol) i cis-2,3-epoksibutana (1.09 mL, 12.5 mmol) u DMSO (10 mL) dodat je cezijum karbonat (4.08 g, 12.5 mmol). Smeša je zagrevana na 100 °C tokom 16 h zatim je razblažena sa vodom (30 mL) i zakišeljena do pH 4 sa 2N HCl da bi se dobio beli talog koji je ekstrahovan u IPA/CHCl3 (1:1) (30 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (eluiranje sa 0 - 80% EtOAc u heptanu na 50 g prethodno upakovane kolone KP-SiO2) da se dobije 565 mg (55% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu beličastog praha.
Intermedijer 25: 3-Fluoro-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzonitril
[0409] 3-Bromo-5-fluoro benzonitril (30 g, 150 mmol), bis(pinakolato)diboran (41.9 g, 0.15mol) i kalijum acetat (44.2 g, 0.45mol) su kombinovani u 1,4-dioksanu (300 mL) i degazirani sa N2tokom 10 minuta. Dodat je [1,1'-Bis(difenilfosfino)ferocen]paladijum(II) dihlorid (5.5 g, 7.5 mmol) i smeša je degazirana sa N2tokom sledećih 10 minuta pre zagrevanja na 100 °C pod atmosferom azota tokom 18 h. Smeša je filtrirana kroz Celite® i čvrste supstance su isprane sa etil acetatom. Filtrat je ispran sa fiziološkim rastvorom, organska faza odvojena, osušena iznad MgSO4, filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen filtracijom kroz čep silicijum dioksida, eluiranje sa EtOAc, a dobijeni filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 43.7 g (pretpostavljeni kvantitativni prinos, 84 % čistoća) naslovnog jedinjenja u vidu smeđeg ulja.
[0410]<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 1.31 (s, 12H), 7.65 - 7.72 (m, 1H), 7.79 - 7.83 (m, 1H), 8.00 (ddd, J = 8.8, 2.7, 1.4 Hz, 1H).
[0411] LCMS (Analitički metod A) Rt = 0.91 min.
Intermedijer 26: 3-Fluoro-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzonitril
[0412] Intermedijer 25 (15 g, 51 mmol), 2-bromo-5-metil-1,3-tiazol (5.9 mL, 56 mmol) i kalijum karbonat (17.6 g, 127.5 mmol) su rastvoreni u 4:11,4-dioksanu/vodi (200 mL). Rastvor je propuhan sa N2tokom 10 min. Dodat je tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0) (1.2 g, 1.0 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 80 °C tokom 16 h. Posle ovog vremena reakciona smeša je podeljena između vode i EtOAc. Organska faza je odvojena i vodena faza je ekstrahovana sa dodatnim EtOAc. Spojene organske materije su isprane sa fiziološkim rastvorom, osušene (MgSO4), filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (silika gel, eluiranje sa heptani-EtOAc, 1:0 do 4:1). Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i triturisane sa heptanom i talog je sakupljen i osušen vakuumskom filtracijom. Matična tečnost i mešane frakcije su kombinovane i koncentrovane. Ostatak je ponovno prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (silika gel, eluiranje sa heptan-EtOAc, 1:0 do 4:1). Dve šarže su kombinovane da bi se dobilo 7.06 g (59% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu belog praha.
[0413]<1>H NMR (250 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 7.96 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.86 (ddd, J = 9.2, 2.4, 1.6 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 7.35 (ddd, J = 7.7, 2.5, 1.3 Hz, 1H), 2.55 (d, J = 1.1 Hz, 3H).
[0414] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.26 min, MS (ESIpos): m/z = 218.85 (M+H)<+>.
11
Intermedijer 29: 3-(5-Etil-1,3-tiazol-2-il)-5-fluorobenzonitril
[0415] Intermedijer 26 (5 g, 17 mmol), 2-hloro-5-etil-1,3-tiazol (3 g, 20 mmol) i cezijum karbonat (14 g, 42.5 mmol) su rastvoreni u 4:11,4-dioksanu/vodi (50 mL). Rastvor je degasiran sa mlazom azota tokom 10 min. Tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0) (982 mg, 0.85 mmol) dodat je i reakciona smeša je mešana na 100 °C preko noći. Reakcija je razblažena sa vodom (20 mL) i ekstrahovana sa DCM (2 x 50 mL). Spojene organske materije su isprane sa fiziološkim rastvorom (30 mL), osušene preko anhidrovanog Na2SO4, filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (silika gel, eluiranje sa heptan-EtOAc, 1:0 do 3:1). Frakcije koje sadrže proizvod su koncentrovane i ostatak kristalizuje iz heptana da bi se dobilo 2.5 g (63% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bele kristalne čvrste supstance.
[0416]<1>H NMR (250 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 7.97 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 7.91 - 7.79 (m, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.35 (ddd, J = 7.7, 2.4, 1.3 Hz, 1H), 3.01 - 2.82 (m, 2H), 1.37 (t, J = 7.5 Hz, 3H).
[0417] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.34 min, MS (ESIpos): m/z = 232.9 (M+H)<+>.
Intermedijer 54: Tert-butil (3-endo)-3-hidroksi-8-azabiciklo[3.2.1]oktan-8-karboksilat
[0418] U rastvor (3-endo)-8-azabiciklo[3.2.1]oktan-3-ola (3 g, 23.6 mmol) i trietilamina (5.1 mL, 36.6 mmol) u DCM (30 mL) dodat je u porcijama di-tert-butil dikarbonat (10.3g, 47.2 mmol) i dobijena reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Reakciona smeša je razblažena sa vodom zatim je organski sloj odvojen i ispran sa zasićenom limunskom kiselinom (aq), vodom i fiziološkim rastvorom. Organski sloj je osušen iznad Na2SO4, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom zatim trituriran sa heptanom da bi se dobilo 4.16 g (77% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu beličaste kristalne čvrste supstance.
[0419]<1>H NMR (250 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 1.38 (s, 9H), 1.61 (d, J = 13.5 Hz, 2H), 1.70 - 1.96 (m, 4H), 2.12 (d, J = 6.7 Hz, 2H), 3.94 (d, J = 19.0 Hz, 3H), 4.56 (d, J = 2.3 Hz, 1H).
Intermedijer 27AL: Tert-butil (3-endo)-3-[3-cijano-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)fenoksi]-8-azabiciklo[3.2.1]oktan-8-karboksilat
[0420] U mešani rastvor Intermedijera 54 (1.56 g, 8.86 mmol) u suvom DMF (10 mL) dodat je NaH (60 % disperzija u mineralnom ulju, 274 mg, 6.85 mmol). Posle mešanja smeše tokom 15 min dodat je Intermedijer 26 (1.0 g, 4.58 mmol) u jednom delu. Dobijena smeša je mešana tokom 18 h. Posle ovog vremena reakciona smeša je ugašena sa fiziološkim rastvorom i ekstrahovana sa EtOAc. Organska faza je odvojena i isprana sa fiziološkim rastvorom, osušena iznad MgSO4, filtrirana i uparena pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (silika gel, eluiranje sa heptan-EtOAc, 1:0 do 1:1) da bi se dobilo 1.25 g (58% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0421]<1>H NMR (250 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 7.67 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.67 - 7.57 (m, 1H), 7.53 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.08 (dd, J = 2.4, 1.3 Hz, 1H), 4.72 (t, J = 4.7 Hz, 1H), 4.22 (s, 2H), 2.54 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 2.33 - 1.89 (m, 9H), 1.47 (d, J = 4.7 Hz, 9H).
[0422] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.49 min, MS (ESIpos) m/z = 426 (M+H)<+>.
Intermedijer 28AL: 3-{[(3-endo)-8-(tert-butoksikarbonil)-8-azabiciklo[3.2.1]okt-3-il]oksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina
11
[0423] U rastvor Intermedijera 27AL (1.25 g, 2.64 mmol) u DMSO (5 mL) dodato je 2 M NaOH (2 mL) i smeša je mešana na 110 °C tokom 3 h. Smeša je polako zakišeljena sa 2M HCl do pH ∼ 5 da se istaloži bela čvrsta supstanca koja je sakupljena filtracijom. Čvrste materije su osušene u vakuum pećnici, što je rezultiralo topljenjem jedinjenja, dajući 290 mg (53% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bezbojne gume. LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.32 min, MS (ESIpos) m/z = 445 (M+H)<+>.
Intermedijer 63: Tert-butil (3-ekso)-3-hidroksi-8-azabiciklo[3.2.1]oktan-8-karboksilat
[0424] U rastvor (3-ekso)-8-azabiciklo[3.2.1]oktan-3-ola (0.95 g, 7.5 mmol) i trietilamina (1.7 mL, 12.2 mmol) u DCM (10 mL) dodat je di-tert-butil dikarbonat (3.27 g, 15.0 mmol) u delovima i dobijena reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 h. Reakciona smeša je razblažena sa vodom, a zatim je organski sloj odvojen i ispran sa zasićenom limunskom kiselinom (aq), vodom i fiziološkim rastvorom. Organski sloj je osušen iznad MgSO4, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 1.65 g (97% prinosa) naslovnog jedinjenja kao beličasta čvrsta supstanca.
[0425]<1>H NMR (250 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 4.41 - 3.95 (m, 3H), 2.00 - 1.53 (m, 9H), 1.45 (s, 9H).
Intermedijer 27AM: Tert-butil (3-ekso)-3-[3-cijano-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)fenoksi]-8-azabiciklo[3.2.1]oktan-8-karboksilat
11
[0426] U mešani rastvor Intermedijera 63 (0.68 g, 2.98 mmol) u suvom DMF (10 mL) dodat je NaH (60 % disperzija u mineralnom ulju, 120 mg, 3.00 mmol). Posle mešanja smeše tokom 15 min dodat je u jednom delu Intermedijer 26 (0.5 g, 2.29 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 48 h. Reakciona smeša je sipana u fiziološki rastvor i ekstrahovana u EtOAc. Organski sloj je ispran sa fiziološkim rastvorom, odvojen, osušen iznad MgSO4, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo smeđe ulje. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (silika gel, eluiranje sa heptan-EtOAc, 1:0 do 0:1) da bi se dobilo 531 mg (54% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu beličastog praha.
[0427]<1>H NMR (250 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 7.71 (t, J = 1.4 Hz, 2H), 7.68 - 7.63 (m, 1H), 7.53 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.13 (dd, J = 2.4, 1.3 Hz, 1H), 4.75 (tt, J = 10.6, 5.9 Hz, 1H), 4.34 (s, 2H), 2.53 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 2.20 - 2.00 (m, 4H), 1.93 - 1.65 (m, 4H), 1.49 (s, 9H).
[0428] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.46 min, MS (ESIpos): m/z = 426.05 (M+H)<+>.
Intermedijer 28AM: 3-{[(3-ekso)-8-(tert-butoksikarbonil)-8-azabiciklo[3.2.1]okt-3-il]oksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina
[0429] U rastvor Intermedijera 27AL (1.25 g, 2.64 mmol) u DMSO (5 mL) dodato je 2 M vodeni rastvor natrijum hidroksida (2 mL) i smeša je mešana na 110 °C tokom 3 h. Smeša je polako zakišeljena sa 2 M vodenom rastvorom HCl do pH ∼ 5 da se istaloži bela čvrsta
11
supstanca koja je sakupljena filtracijom. Čvrste supstance su osušene u vakuumskoj pećnici da bi se dobilo 0.56 g (48% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu beličastog praha.
[0430] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.35 min, MS (ESIpos) m/z = 445 (M+H)<+>.
Intermedijer 27AN: 3-[(3-metiloksetan-3-il)oksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzonitril
[0431] U rastvor 3-metiloksetan-3-ol (121 mg, 1.37 mmol) u suvom DMF (2 mL) dodat je NaH (60 % disperzija u mineralnom ulju, 55 mg, 1.38 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h pre dodavanja Intermedijera 26 (200 mg, 0.92). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h zatim je podeljena između EtOAc i vode. Organska faza je odvojena i vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc. Spojene organske materije su isprane sa fiziološkim rastvorom, osušene iznad MgSO4, filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. TLC analiza (EtOAc-heptan, 1:1) ukazala je na nepotpunu potrošnju SM. Ostatak je rastvoren u DMF (1 mL) i dodat je prethodno mešanom rastvoru 3-metiloksetan-3-ola (121 mg, 1.37 mmol) i NaH (60 % disperzija u mineralnom ulju, 55 mg, 1.38 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći kada je TLC analiza pokazala potrošnju polaznog materijala. Smeša je podeljena između EtOAc i vode. Organska faza je odvojena i vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc. Spojene organske materije su isprane sa fiziološkim rastvorom, osušene iznad MgSO4, filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (silika gel, eluiranje sa heptan-EtOAc, 1:0 do 2:3) da se dobije 140 mg (51% prinosa) naslovnog jedinjenja kao smeđe ulje.
[0432]<1>H NMR (250 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 7.73 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.40 (dd, J = 2.4, 1.5 Hz, 1H), 6.86 (dd, J = 2.4, 1.3 Hz, 1H), 4.94 (d, J = 6.6 Hz, 2H), 4.64 (d, J = 7.3 Hz, 2H), 2.54 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 1.79 (s, 3H)
[0433] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.18 min, MS (ESIpos) m/z = 287 (M+H)<+>.
11
Intermedijer 28AN: 3-[(3-metiloksetan-3-il)oksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina
[0434] Intermedijer 27AN (140 mg, 0.46 mmol) je mešan u 2M NaOH (2.3 mL) i DMF (1 mL) na 110 °C tokom 14 h u zatvorenoj epruveti. THF je dodat za pomoć u rastvaranju i rezultujući rastvor je zagrevan tokom 16 sati na 110 °C u zatvorenoj epruveti. Dodat je sledeći deo 2 M rastvora NaOH (2 mL) i zagrevan na 110 °C tokom 3 h. Smeša je zakišeljena sa 2M HCl da bi se dobio beli talog koji je ekstrahovan u EtOAc. Organska faza je odvojena, osušena iznad MgSO4, filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 118 mg (75% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu belog praha.
[0435] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.05 min, MS (ESIpos) m/z = 306 (M+H)<+>.
Intermedijer 27AO: Tert-butil (3S)-3-[3-cijano-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)fenoksi]piperidin-1-karboksilat
[0436] U rastvor tert-butil (3S)-3-hidroksipiperidin-1-karboksilata (415 mg, 2.06 mmol) u suvom DMF (3 mL) dodat je NaH (60 % disperzija u mineralnom ulju, 88 mg, 2.2 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h pre dodavanja Intermedijera 26 (300 mg, 1.38 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h zatim je podeljena između EtOAc i vode. Organska faza je odvojena i vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc. Spojene organske materije su isprane sa fiziološkim rastvorom, osušene iznad MgSO4, filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (silika gel, eluiranje sa heptan-EtOAc, 4:1 do 1:4) da bi se dobilo 510 mg (93% prinosa) naslovnog jedinjenja.
11
[0437]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 7.72 - 7.68 (m, 1H), 7.68 - 7.63 (m, 1H), 7.53 - 7.49 (m, 1H), 7.16 - 7.12 (m, 1H), 4.36 (tt, J = 6.8, 3.3 Hz, 1H), 3.96 - 3.11 (m, 4H), 2.51 (s, 3H), 2.07 - 1.96 (m, 1H), 1.91 - 1.72 (m, 2H), 1.60 - 1.50 (m, 1H), 1.48 - 1.26 (m, 9H).
Intermedijer 57: 3-{[(3S)-1-metilpiperidin-3-il]oksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzonitril
[0438] U rastvor Intermedijera 27AO (510 mg, 1.28 mmol) u DCM (5 mL) dodata je TFA (0.5 mL, 6.49 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Smeša je razblažena sa DCM i sipana u zasićeni rastvor natrijum bikarbonata. Organska faza je odvojena, i vodena faza je ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Dobijene čvrste supstance su rastvorene u DCE (3 mL) zatim su dodani formaldehid, 37 % rastvor u vodi (1 mL, 1.08 mmol) i sirćetna kiselina (0.1 mL, 1.04 mmol). Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 15 min pre dodavanja STAB (540 mg, 2.55 mmol) u obrocima, koji je zatim mešan tokom 2 h. Reakciona smeša je razblažena sa DCM i sipana u zasićeni rastvor natrijum bikarbonata. Organska faza je odvojena i vodena faza je ekstrahovana sa dodatnim DCM. Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (silika gel, eluiranje sa heptan-TBME, 2:3 do 0:1) da se dobije 172 mg (43% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0439] LCMS (Analitički metod A) Rt = 0.85 min, MS (ESIpos) m/z = 314 (M+H)<+>.
Intermedijer 28AO: 3-{[(3S)-1-metilpiperidin-3-il]oksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina
12
[0440] Intermedijer 57 (172 mg, 0.55 mmol) i 2M NaOH (5.5 mL, 11.0 mmol) su grejani zajedno na 110 °C u zatvorenoj epruveti tokom 6 h. Hlađenjem do sobne temperature, smeša je zakišeljena do pH 11 i ekstrahovana sa IPA/CHCl3 (1:4) (3 x 15 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad MgSO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 130 mg (71% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu belog praha
LCMS (Analitički metod A) Rt = 0.80 min, MS (ESIpos) m/z = 333 (M+H)<+>.
Intermedijer 27AP: Tert-butil (3R)-3-[3-cijano-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)fenoksi]piperidin-1-karboksilat
[0441] U rastvor tert-butil (3S)-3-hidroksipiperidin-1-karboksilata (415 mg, 2.06 mmol) u suvom DMF (3 mL) dodat je NaH (60 % disperzija u mineralnom ulju, 88 mg, 2.2 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h pre dodavanja Intermedijera 26 (300 mg, 1.38 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h zatim je podeljena između EtOAc i vode. Organska faza je odvojena i vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc. Spojene organske materije su isprane sa fiziološkim rastvorom, osušene iznad MgSO4, filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (silika gel, eluiranje sa heptan-EtOAc, 4:1 do 1:4) da se dobije 452 mg (82% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0442]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 7.72 (t, J = 1.3 Hz, 1H), 7.70 - 7.65 (m, 1H), 7.55 - 7.50 (m, 1H), 7.18 - 7.13 (m, 1H), 4.38 (tt, J = 6.9, 3.4 Hz, 1H), 4.02 - 3.09 (m, 4H), 2.53 (d, J = 0.9 Hz, 3H), 2.11 - 1.97 (m, 1H), 1.95 - 1.71 (m, 2H), 1.61 - 1.30 (m, 10H).
[0443] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.38 min, MS (ESIpos) m/z = 400 (M+H)<+>.
Intermedijer 58: 3-{[(3R)-1-metilpiperidin-3-il]oksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzonitril
[0444] Intermedijer 27AP (452 mg, 1.28 mmol) u DCM (5 mL) dodata je TFA (0.4 mL, 5.19 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Smeša je razblažena sa DCM i sipana u zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata. Organska faza je odvojena, i vodena faza je ekstrahovana sa DCM. Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom.
Dobijene čvrste supstance su rastvorene u DCE (3 mL) zatim je dodat formaldehid, 37 % rastvor u vodi (0.4 mL, 5.33 mmol) i sirćetna kiselina (0.1 mL, 1.04 mmol). Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 15 min pre dodavanja STAB (480 mg, 2.27 mmol) u obrocima, koji je potom mešan tokom 2 h. Reakciona smeša je razblažena sa DCM i sipana u zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata. Organska faza je odvojena i vodena faza je ekstrahovana sa dodatnim DCM. Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (silika gel, eluiranje sa heptan-TBME, 2:3 do 0:1) da se dobije 183 mg (52% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0445] LCMS (Analitički metod A) Rt = 0.84 min, MS (ESIpos) m/z = 314 (M+H)<+>.
Intermedijer 28AP: 3-{[(3R)-1-metilpiperidin-3-il]oksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina
[0446] Intermedijer 58 (183 mg, 0.58 mmol) i 2 M NaOH (5.8 mL, 11.6 mmol) su grejani zajedno na 110 °C u zatvorenoj epruveti tokom 6 h. Posle hlađenja do sobne temperature smeša je zakišeljena do pH 11 i ekstrahovana sa IPA/CHCl3(1:4) (3 x 15 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 185 mg (95% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu belog praha.
[0447] LCMS (Analitički metod A) Rt = 0.81 min, MS (ESIpos) m/z = 333 (M+H)<+>.
Intermedijer 27AR: 3-[(3R)-1-Azabiciklo[2.2.2]okt-3-iloksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzonitril
[0448] U mešani rastvor (3R)-1-azabiciklo[2.2.2]oktan-3-ol hidrohlorida (0.29 g, 1.79 mmol) u suvom DMF (5 mL) dodat je NaH (60 % disperzija u mineralnom ulju, 137 mg, 3.44 mmol). Posle mešanja smeše tokom 15 min Intermedijer 26 (0.3 g, 1.38 mmol) dodat je u jednoj porciji. Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 18h. Reakciona smeša je sipana u fiziološki rastvor i ekstrahovana sa EtOAc. Organski sloj je ispran sa fiziološkim rastvorom, odvojen, osušen iznad MgSO4, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (silika gel, eluiranje sa heptan-EtOAc, 3:2 do 0:1 praćeno sa EtOAc-MeOH, 1:0 do 4:1) da bi se dobilo 258.8 mg (51% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu žute gume, koja je kristalizovala stajanjem.
12
[0449]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 7.70 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.64 (dd, J = 2.4, 1.6 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.11 (dd, J = 2.4, 1.3 Hz, 1H), 4.55 - 4.44 (m, 1H), 3.42 - 3.31 (m, 1H), 3.07 - 2.96 (m, 1H), 2.96 - 2.79 (m, 4H), 2.54 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 2.23 - 2.17 (m, 1H), 2.03 - 1.95 (m, 1H), 1.80 (ddt, J = 14.0, 9.3, 4.3 Hz, 1H), 1.67 - 1.58 (m, 1H), 1.50 -1.40 (m, 1H).
[0450] LCMS (Analitički metod A) Rt = 0.94 min, MS (ESIpos): m/z = 326 (M+H)<+>.
Intermedijer 28AR: 3-[(3R)-1-Azabiciklo[2.2.2]okt-3-iloksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina - mravlja kiselina
[0451] Intermedijer 27AR (258 mg, 0.7 mmol) je mešan u 2 M NaOH (3.5 mL) i DMSO (3.5 mL) na 110 °C tokom 3 h. Posle hlađenja do sobne temperature smeša je polako zakišeljena do pH ∼2, pre nego što je koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobio sirovi materijal u DMSO. Sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (Metod A). Frakcije koje sadrže proizvod su koncentrovane i ostatak je liofilizovan iz MeCN/vode da bi se dobilo 146.4 mg (53% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu beličastog praha.
[0452]<1>H NMR (250 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 8.21 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.64 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.55 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.48 (s, 1H), 4.71 (s, 1H), 3.44 (d, J = 13.1 Hz, 1H), 3.04 - 2.77 (m, 4H), 2.21 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 1.94 (s, 1H), 1.74 (s, 2H), 1.51 (s, 1H).
[0453] LCMS (Analitički metod A) Rt = 0.91 min, MS (ESIpos): m/z = 345 (M+H)<+>.
Intermedijer 27AS: 3-(1-Azabiciklo[2.2.2]okt-4-iloksi)-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzonitril
[0454] U mešani rastvor hinuklidin-4-ola (250 mg, 1.97 mmol) u suvom DMF (4 mL) dodat je NaH (60 % disperzija u mineralnom ulju, 78 mg, 1.95 mmol). Posle mešanja smeše tokom 15 min dodat je Intermedijer 26 (286 mg, 1.31 mmol) u jednoj porciji i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 24 h. Dodatni deo NaH NaH (78 mg, 1.95 mmol) dodat je zajedno sa DBU (1 mL) i na kraju Intermedijer 26 (286 mg, 1.31 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Reakciona smeša je ugašena sa zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata i ekstrahovana u EtOAc. Organska faza je odvojena, osušena iznad MgSO4, filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (Metod A). Frakcije koje sadrže proizvod su koncentrovane i ostatak je liofilizovan iz MeCN/vode da bi se dobilo 111 mg (26% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bež praha.
[0455]<1>H NMR (250 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 7.86 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.72 (t, J = 1.9 Hz, 1H), 7.58 - 7.49 (m, 1H), 7.25 - 7.21 (m, 1H), 3.11 - 2.97 (m, 6H), 2.53 (d, 3H), 1.90 - 1.76 (m, 6H).
[0456] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.00 min, MS (ESIpos) m/z = 326 (M+H)<+>.
Intermedijer 28AS: 3-(1-Azabiciklo[2.2.2]okt-4-iloksi)-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina
[0457] Intermedijer 27AS (111 mg, 0.34 mmol) je suspendovan u 2 M NaOH (2.5 mL) i zagrevan na 120 °C u zatvorenoj epruveti tokom 1 h da bi se dobio žuti rastvor. Smeša je
12
zakišeljena do pH 6 i koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 531 mg (>100% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bledo žute čvrste supstance. Sirovi materijal je korišćen u sledećem koraku bez prečišćavanja.
[0458] LCMS (Analitički metod A) Rt = 0.90 min, MS (ESIpos) m/z = 345 (M+H)<+>.
Intermedijer 65: Tert-butil-4-hidroksi-2-(trifluorometil)piperidin-1-karboksilat, kao smeša 2 cis izomera
[0459] Natrijum borohidrid (71 mg, 1.87 mmol) dodat je na -10 °C u rastvor 1-boc-2-trifluorometil-piperidin-4-ona (250 mg, 0.94 mmol) u MeOH (8 mL) i reakcija je mešana na -10 °C tokom 1h. Dodat je zasićen vodeni rastvor NH4Cl (3 mL), i dobijena smeša je ostavljena da se zagreje na sobnu temperaturu. MeOH je uklonjen pod sniženim pritiskom, i dobijeni vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM (4 x 5 mL). Spojene organske materije su isprane sa fiziološkim rastvorom, osušene iznad MgSO4, filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 247.6 mg (98% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bezbojnog ulja.
[0460]<1>H NMR (250 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 4.84 - 4.62 (m, 1H), 4.15 - 3.95 (m, 2H), 3.39 - 3.18 (m, 1H), 2.10 - 2.00 (m, 1H), 1.91 - 1.57 (m, 3H), 1.47 (s, 9H).
Intermedijer 27AT: Tert-butil -4-[3-cijano-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)fenoksi]-2-(trifluorometil)piperidin-1-karboksilat, kao smeša 2 cis izomera
12
[0461] U mešani rastvor Intermedijera 65 (125 mg, 0.467 mmol) u suvom DMF (2 mL) dodat je NaH (60 % disperzija u mineralnom ulju, 19 mg, 0.49 mmol) da se dobije beli talog. Posle mešanja smeše tokom 15 min dodat je Intermedijer 26 (85 mg, 0.39 mmol) kao jedna porcija. Dobijena smeša je mešana tokom na sobnoj temperaturi tokom 18h. Reakciona smeša je sipana u fiziološki rastvor i ekstrahovana u EtOAc. Organski sloj je ispran sa fiziološkim rastvorom, odvojen, osušen iznad MgSO4, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (silika gel, eluiranje sa heptan-EtOAc, 100:1 do 3:2) da bi se dobilo 111.1 mg (61% prinosa) naslovnog jedinjenja kao smeđa guma.
[0462]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 7.71 (t, J = 1.3 Hz, 1H), 7.68 - 7.65 (m, 1H), 7.54 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.14 (dd, J = 2.3, 1.3 Hz, 1H), 4.78 (s, 1H), 4.76 - 4.72 (m, 1H), 4.15 - 4.06 (m, 1H), 3.36 (s, 1H), 2.54 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 2.36 (d, J = 15.6 Hz, 1H), 2.13 -1.97 (m, 3H), 1.90 - 1.81 (m, 1H), 1.49 (s, 9H).
[0463] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.48 min, MS (ESIpos): m/z = 468 (M+H)<+>.
Intermedijer 28AT: 3-[[1-(tert-butoksikarbonil)-2-(trifluorometil)piperidin-4-il]oksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina, kao smeša 2 cis izomera
[0464] Intermedijer 27AT (111 mg, 0.22 mmol) je mešan u 2 M NaOH (1.5 mL) i DMSO (1.5 mL) na 130 °C tokom 3 h. Posle hlađenja do sobne temperature organski slojevi su uklonjeni pod sniženim pritiskom, zatim je ostatak razblažen sa vodom (3 mL) i polagano zakišeljen do pH ∼4 sa 1M HCl zatim je ekstrahovan sa EtOAc (3 x 10 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 104.8 mg (83% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bezbojne gume.
12
[0465]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d) δ 8.19 (t, J = 1.3 Hz, 1H), 7.73 - 7.68 (m, 1H), 7.62 - 7.59 (m, 1H), 7.56 (s, 1H), 4.85 - 4.70 (m, 2H), 4.07 (d, J = 19.4 Hz, 1H), 3.38 (s, 1H), 2.53 (d, J = 1.0 Hz, 3H), 2.38 (d, J = 15.5 Hz, 1H), 2.14 - 2.07 (m, 2H), 2.06 - 1.97 (m, 2H), 1.89 -1.80 (m, 1H), 1.49 (s, 9H).
[0466] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.34 min, MS (ESIpos): m/z = 487 (M+H)<+>.
Intermedijer 27AU: 3-[(3S)-1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-iloksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzonitril
[0467] (S)-Hinuklidin-3-ol (0.758 g, 5.96 mmol) je rastvoren u DMF (15 mL) na sobnoj temperaturi uz mešanje. Dodat je NaH, (60% disperzija u mineralnom ulju, 458 mg, 11.46 mmol) i smeša je ostavljena da se meša tokom 15 min. Dodat je Intermedijer 26 (1.0 g, 4.58 mmol), i smeša je ostavljena da se meša preko noći. Reakcija je ugašena sa vodom pre nego što je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (silika gel, eluiranje sa heptan-EtOAc, 1:0 do 0:1) da bi se dobilo 386 mg (23% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu beličastog praha.
[0468]<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 7.82 (t, J = 1.3, 1H), 7.67 (d, J = 1.2, 1H), 7.66 - 7.64 (m, 1H), 7.50 (dd, J = 2.3, 1.3, 1H), 4.65 (dd, J = 7.3, 3.3, 1H), 2.85 - 2.74 (m, 2H), 2.72 - 2.60 (m, 4H), 2.52 (d, J = 0.9, 3H), 2.08 (q, J = 2.9, 1H), 1.81 (dddt, J = 12.5, 10.0, 5.1, 2.9, 1H), 1.70 - 1.52 (m, 2H), 1.35 (dtd, J = 11.4, 8.1, 7.6, 2.9, 1H)
[0469] LCMS (Analitički metod F) Rt = 1.91 min, MS (ESIpos): m/z = 326 (M+H)<+>.
Intermedijer 28AU: 3-[(3S)-1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-iloksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina - hlornatrijum (1:3)
12
[0470] Intermedijer 27AU (386 mg, 1.04 mmol, 88 %) je rastvoren u EtOH (5 mL) u zatvorenoj epruveti na sobnoj temperaturi uz mešanje i dodato je 2M NaOH (1.57 mL, 3.13 mmol). Reakcija je mešana na 80 °C tokom 5h, praćeno sa 100 °C tokom 24h. Reakciona smeša je ugašena sa 2M HCl (1.57 mL, 3.13 mmol) pre nego što je koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 449 mg (83% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0471]<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 7.87 (s, 1H), 7.57 (d, J = 1.2, 1H), 7.45 - 7.42 (m, 1H), 7.33 - 7.30 (m, 1H), 4.52 - 4.44 (m, 1H), 3.26 - 3.18 (m, 1H), 2.84 - 2.59 (m, 5H), 2.49 (s, 3H), 2.05 (q, J = 3.0, 1H), 1.89 - 1.79 (m, 1H), 1.70 - 1.60 (m, 1H), 1.55 (dddd, J = 12.5, 8.9, 6.3, 2.8, 1H), 1.38 - 1.26 (m, 1H).
[0472] LCMS (Analitički metod A) Rt = 0.93 min, MS (ESIpos): m/z = 345 (M+H)<+>.
Intermedijer 27AV: 3-[(3R)-1-Azabiciklo[2.2.2]okt-3-iloksi]-5-(5-etil-1,3-tiazol-2-il)benzonitril
[0473] U mešani rastvor (3R)-1-azabiciklo[2.2.2]oktan-3-ol hidrohlorida (0.37 g, 2.24 mmol) u suvom DMF (5 mL) dodat je NaH (60 % disperzija u mineralnom ulju, 172 mg, 4.3 mmol). Posle mešanja smeše tokom 15 min Intermedijer 29 (0.4 g, 1.72 mmol) dodat je u jednoj porciji. Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je sipana u fiziološki rastvor i ekstrahovana u EtOAc. Organski sloj je ispran sa fiziološkim rastvorom, odvojen, osušen iznad MgSO4, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (silika gel, eluiranje sa DCM-
12
MeOH, 1:0 do 4:1) da bi se dobilo 374.9 mg (64% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu žute gume.
[0474]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 7.71 (t, J = 1.3 Hz, 1H), 7.64 (dd, J = 2.3, 1.6 Hz, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.11 (dd, J = 2.4, 1.3 Hz, 1H), 4.51 - 4.44 (m, 1H), 3.34 (ddd, J = 14.3, 7.9, 2.0 Hz, 1H), 3.04 - 2.76 (m, 7H), 2.19 (q, J = 3.1 Hz, 1H), 2.01 - 1.93 (m, 1H), 1.79 (ddt, J = 14.0, 9.6, 4.3 Hz, 1H), 1.60 (dtd, J = 13.4, 6.1, 3.0 Hz, 1H), 1.48 - 1.40 (m, 1H), 1.37 (t, J = 7.5 Hz, 3H).
[0475] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.03 min, MS (ESIpos): m/z = 340 (M+H)<+>.
Intermedijer 28AV: 3-[(3R)-1-Azabiciklo[2.2.2]okt-3-iloksi]-5-(5-etil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina - hlornatrijum (1:3)
[0476] Intermedijer 27AV (375 mg, 1.11 mmol) je rastvoren u EtOH (5 mL) i dodato je 2M NaOH (1.7 mL). Reakcije su mešane na 80 °C u zatvorenoj epruveti tokom 8 h. Reakcija je ugašena dodavanjem HCl (2M, 1.7 mL) i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 602 mg (kvantitativni prinos) naslovnog jedinjenja.
[0477]<1>H NMR (250 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 7.97 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.53 -7.44 (m, 2H), 4.81 - 4.69 (m, 1H), 3.56 - 3.38 (m, 2H), 3.04 - 2.80 (m, 6H), 2.28 - 2.15 (m, 1H), 2.13 - 1.92 (m, 1H), 1.87 - 1.68 (m, 2H), 1.62 - 1.42 (m, 1H), 1.28 (t, J = 7.5 Hz, 3H).
[0478] LCMS (Analitički metod A) Rt = 0.94 min, MS (ESIpos): m/z = 359 (M+H)<+>.
Intermedijer 27AW: 3-[(3S)-1-Azabiciklo[2.2.2]okt-3-iloksi]-5-(5-etil-1,3-tiazol-2-il)benzonitril
1
[0479] U mešani rastvor (3S)-1-azabiciklo[2.2.2]oktan-3-ola (0.29 g, 2.24 mmol) u suvom DMF (5 mL) dodat je NaH 60 % disperzija u mineralnom ulju (103 mg, 2.6 mmol). Posle mešanja smeše tokom 15 min dodat je u jednoj porciji Intermedijer 29 (0.4 g, 1.72 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je sipana u fiziološki rastvor i ekstrahovana u EtOAc. Organski sloj je ispran sa fiziološkim rastvorom, odvojen, osušen iznad MgSO4, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (silika gel, eluiranje sa DCM-MeOH, 1:0 do 4:1) da bi se dobilo 406 mg (69% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu žute gume.
[0480]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 7.71 (t, J = 1.3 Hz, 1H), 7.66 - 7.63 (m, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.11 (dd, J = 2.4, 1.3 Hz, 1H), 4.46 (dd, J = 7.3, 3.4 Hz, 1H), 3.33 (ddd, J = 14.4, 8.0, 2.0 Hz, 1H), 3.03 - 2.75 (m, 7H), 2.20 - 2.14 (m, 1H), 2.00 - 1.92 (m, 1H), 1.77 (ddt, J = 14.1, 9.9, 4.3 Hz, 1H), 1.64 - 1.55 (m, 1H), 1.46 - 1.40 (m, 1H), 1.37 (t, J = 7.5 Hz, 3H).
[0481] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.03 min, MS (ESIpos): m/z = 340 (M+H)<+>.
Intermedijer 28AW: 3-[(3S)-1-Azabiciklo[2.2.2]okt-3-iloksi]-5-(5-etil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina - hlornatrijum (1:3)
[0482] Intermedijer 27AW (365 mg, 1.08 mmol) je rastvoren u EtOH (5 mL) i dodato je 2M NaOH (1.6 mL). Reakcije su mešane na 80 °C u zatvorenoj epruveti tokom 8 h. Reakcija je ugašena dodavanjem HCl (2M, 1.6 mL) i koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 502 mg (86% prinosa) naslovnog jedinjenja.
1 1
[0483]<1>H NMR (250 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 7.97 (t, J = 1.3 Hz, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.57 -7.44 (m, 2H), 4.82 - 4.67 (m, 1H), 3.49 (dd, J = 13.6, 7.8 Hz, 1H), 3.08 - 2.79 (m, 7H), 2.28 -2.17 (m, 1H), 2.08 - 1.87 (m, 1H), 1.86 - 1.70 (m, 2H), 1.61 - 1.43 (m, 1H), 1.28 (t, J = 7.5 Hz, 3H).
[0484] LCMS (Analitički metod A) Rt = 0.95 min, MS (ESIpos): m/z = 359 (M+H)<+>.
Intermedijer 6AX: 2-metil-2-nitropropil 4-metilbenzensulfonat
[0485] 2-Metil-2-nitropropan-1-ol (0.5 g, 4.2 mmol), trietilamin (0.878 ml, 6.3 mmol) i trimetilamin hidrohlorid (40 mg, 0.42 mmol) su mešani u DCM (10 mL), i dodat je 4-metilbenzensulfonil hlorid (1.2 g, 6.3 mmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1.5 h. TLC (70% EtOAc u heptanu) je pokazala potpunu reakciju, pa je reakciona smeša tretirana sa N,N-dimetiletan-1,2-diaminom (0.28ml, 2.52mmol) da bi se potrošio nereagovani TsCl. Reakciona smeša je isprana sa 1 M HCl (10 mL) zatim sa vodom (10 mL) pre sušenja iznad MgSO4, filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 1.16 g (99% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu žute kristalne čvrste supstance.
[0486]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 7.77 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.37 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 4.28 (s, 2H), 2.47 (s, 3H), 1.60 (s, 6H).
Intermedijer 27AZ: Tert-butil 5-[3-cijano-5-(5-metiltiazol-2-il)fenoksi]-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilat
1 2
[0487] U mešani rastvor tert-butil 5-hidroksi-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilata (254 mg, 1.19 mmol) u suvom DMF (4 mL) dodat je NaH (60 %, 55 mg, 1.37 mmol). Posle mešanja smeše tokom 90 minuta, u reakciju je u jednoj porciji dodat Intermedijer 26 (200 mg, 0.92 mmol). Dobijena smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakcija je zaustavljena i sipana u fiziološki rastvor i ekstrahovana sa etil acetatom. Organski sloj je ispran sa fiziološkim rastvorom, odvojen, osušen iznad MgSO4, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (bazični silika gel, eluiranje sa heptan-EtOAc, 6:2 do 0:1 praćeno sa EtOAc-MeOH, 1:0 do 4:1) da bi se dobilo 388 mg (86% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu žute gume.
[0488]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 7.71 (s, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.54 (d, J = 1.1 Hz,1 H), 7.10 (s, 1H), 4.50 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 3.37 - 3.30 (m, 1H), 3.07 - 2.98 (m,1H), 2.54 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 1.87 (d, J = 10.0 Hz,1H), 1.72 - 1.59 (m, 5H), 1.47 (s, 9H).
[0489] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.47 min, MS (ESIpos): m/z =356 (M+H)<+>.
Intermedijer 28AZ: 3-[(2-tert-butoksikarbonil-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-5-il)oksi]-5-(5-metiltiazol-2-il)benzoeva kiselina
[0490] Mešani rastvor Intermedijera 27AZ (388 mg, 0.94 mmol) u 2M NaOH (4.71 mL) i DMSO (4.5 mL) je zagrevan na 110 °C tokom 3 sata. Posle hlađenja do sobne temperature smeša je polako zakišeljena do pH ∼2, pre nego što je osušena upotrebom genevac-a da bi se dobio sirovi materijal u zaostalom DMSO. Sirovi materijal je prebačen u minimalnu količinu MeOH i sol je uklonjena filtracijom. MeOH je uklonjen i materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (Metod B) da bi se dobilo 49 mg (12% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bezbojne gume.
[0491]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.24 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.65 - 7.58 (m, 3H),4.63 - 4.54 (m, 1H), 4.30 (d, J = 62.5 Hz, 1H), 3.36 - 3.30 (m, 1H), 3.08 (dd, J=54.7, 10.4
1
Hz, 1H), 2.82 - 2.78 (m, 1H), 2.54 (d, J= 1.1 Hz, 3H), 2.42 - 2.30 (m, 1H), 1.92 (d, J = 9.9 Hz, 1H), 1.74 - 1.66 (m, 2H),1.48 (s, 9H).
[0492] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.36 min, MS (ESIpos): m/z = 431 (M+H)<+>.
Intermedijer 27BA: 3-(5-metiltiazol-2-il)-5-[2-(1,2,4-triazol-1-il)etoksi]benzonitril
[0493] Pripremljen je rastvor 2-(1H-1,2,4-triazol-1-il)etanola (465 mg, 4.11 mmol) i suvog DMF (3 mL). Dodat je NaH (60 % u mineralnom ulju, 205 mg, 5.14 mmol), i rastvor je mešan tokom 90 minuta, posle čega je dodat Intermedijer 26 (747 mg, 3.42 mmol). Dobijena smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Potom je reakcionom rastvoru dodat fiziološki rastvor, a reakcioni rastvor je ekstrahovan sa etil acetatom. Rastvor je ispran sa vodom i organski sloj je odvojen i osušen iznad Na2SO4, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Biotage Isolera™ hromatografija (silika gel, eluiranje sa DCM-MeOH, 1:0 do 4:1) daje 604 mg (48% prinosa) naslovnog jedinjenja kao voštana čvrsta supstanca.
[0494]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.22 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.56 - 7.50 (m, 1H), 7.15 - 7.06 (m, 1H), 4.61 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 4.44 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 2.53 (s, 3H).
[0495] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.09 min, MS (ESIpos): m/z = 333.95 (M+H)<+>.
Intermedijer 28BA: 3-(5-metiltiazol-2-il)-5-[2-(1,2,4-triazol-1-il)etoksi]benzoeva kiselina - hlornatrijum (1:3)
1 4
[0496] Intermedijer 27BA (604 mg, 1.94 mmol) je rastvoren u EtOH (4 mL) i 2M NaOH (2.91 mL) dodat je. Reakcija je mešana u mikrotalasnoj pećnici na 130° C tokom 1 h. Po završetku, reakcija je ugašena sa 2M HCl (2.91 mL) i koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 572 mg (58% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0497]<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 8.60 (s, 1H), 8.41 (s, 2H), 7.98 (s, 1H), 7.92 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 4.60 (t, J = 5.0 Hz, 2H), 4.41 (t, J = 5.0 Hz, 2H).
[0498] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.00 min, MS (ESIpos): m/z = 333(M+H)<+>.
[0499] Intermedijer 27BC: tert-butil (4aS,7R,7aR)-7-[3-cijano-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)fenoksi]-oktahidrociklopenta[b]morfolin-4-karboksilat
[0500] U mešani rastvor tert-butil (4aS,7R,7aR)-7-hidroksi-oktahidrociklopenta[b]morfolin-4-karboksilata (215 mg, 0.88 mmol) u suvom DMF (3 mL) u balonu sa tri grla osušenom toplotnim pištoljem pod azotom, dodat je NaH 60 % disperzija u mineralnom ulju (37 mg, 0.92 mmol) i smeša je mešana tokom 15 minuta pre nego je u jednoj porciji dodat Intermedijer 26 (161 mg, 0.74 mmol).
Dobijena smeša je mešana na temperaturi okoline tokom 20 h. Reakciona smeša je sipana u vodu i ekstrahovana sa EtOAc (x 2). Kombinovani organski ekstrakti su osušeni iznad MgSO4,
1
filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (silika gel, eluiranje sa heptan/EtOAc, 1:0 do 3:2) da bi se dobilo 262 mg (68% prinosa) naslovnog jedinjenja kao smeđe ulje.
[0501]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 7.74 (t, J = 1.3 Hz, 1H), 7.70 - 7.66 (m, 1H), 7.53 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 7.19 (dd, J = 2.3, 1.3 Hz, 1H), 4.62 (ddd, J = 9.3, 7.9, 4.6 Hz, 1H), 4.03 (ddd, J = 11.6, 3.5, 1.5 Hz, 1H), 3.89 (d, J = 13.1 Hz, 1H), 3.69 (td, J = 11.8, 2.9 Hz, 1H), 3.58 (dd, J = 10.2, 7.8 Hz, 1H), 3.07 - 2.78 (m, 2H), 2.58 - 2.54 (m, 1H), 2.53 (d, J = 1.0 Hz, 3H), 2.32 (dq, J = 14.3, 9.3 Hz, 1H), 2.16 - 1.94 (m, 1H), 1.79 (ddd, J = 14.3, 10.6, 4.4 Hz, 1H), 1.47 (s, 9H).
[0502] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.43 min, MS (ESIpos): m/z = 442.0 (M+H)<+>.
Intermedijer 28BC: 3-{[(4aS,7R,7aR)-4-[(tert-butoksi)karbonil]-oktahidrociklopenta[b]morfolin-7-il]oksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina
[0503] Intermedijer 27BC (258 mg, 2.01 mmol) je mešan u 2 M NaOH (2.8 mL) i DMSO (2.8 mL) na 110 °C tokom 3 h. Smeša je polako zakišeljena do pH ∼4 sa 2 M HCl, pri čemu se formirao ružičasti talog. Ovo je filtrirano i osušeno pod vakuumskom filtracijom da bi se dobilo 155 mg (58% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bledo ružičaste čvrste supstance.
[0504]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.31 (s, 1H), 7.69 - 7.67 (m, 1H), 7.67 -7.63 (m, 1H), 7.58 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 4.68 (td, J = 9.0, 4.6 Hz, 1H), 4.09 - 3.99 (m, 1H), 3.90 (d, J = 13.3 Hz, 1H), 3.72 (td, J = 11.7, 2.8 Hz, 1H), 3.63 (dd, J = 10.1, 7.9 Hz, 1H), 3.05 - 2.89 (m, 2H), 2.53 (s, 3H), 2.52 - 2.49 (m, 1H), 2.36 (dq, J = 14.2, 9.1 Hz, 1H), 2.07 (dt, J = 22.4, 10.3 Hz, 1H), 1.84 - 1.74 (m, 1H), 1.47 (s, 9H).
1
[0505] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.28 min, MS (ESIpos): m/z = 461.1 (M+H)<+>.
Intermedijer 27BD: tert-butil (4aS,7S,7aR)-7-[3-cijano-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)fenoksi]-oktahidrociklopenta[b]morfolin-4-karboksilat
[0506] U mešani rastvor tert-butil (4aS,7S,7aR)-7-hidroksi-oktahidrociklopenta[b]morfolin-4-karboksilata (215 mg, 0.88 mmol) u suvom DMF (3 mL) u balonu sa tri grla osušenom toplotnim pištoljem pod azotom, dodat je NaH 60 % disperzija u mineralnom ulju (37 mg, 0.92 mmol) i smeša je mešana tokom 15 minuta pre nego je u jednoj porciji dodat Intermedijer 26 (161 mg, 0.74 mmol). Dobijena smeša je mešana na temperaturi okoline tokom 3.5 h. Reakciona smeša je sipana u vodu i ekstrahovana dva puta sa etil acetatom. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni iznad MgSO4, filtrirani, koncentrovani pod sniženim pritiskom i prečišćeni sa Biotage Isolera™ hromatografijom (silika gel, eluiranje sa heptan-EtOAc, 1:0 do 3:2) da bi se dobilo 338 mg (85% prinosa) naslovnog jedinjenja kao bledo ružičasta čvrsta supstanca.
[0507]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 7.73 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.69 - 7.64 (m, 1H), 7.52 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 7.19 (dd, J = 2.3, 1.3 Hz, 1H), 4.84 - 4.71 (m, 1H), 4.05 (ddd, J = 11.6, 3.4, 1.6 Hz, 1H), 3.86 (d, J = 13.5 Hz, 1H), 3.69 (td, J = 11.7, 2.8 Hz, 1H), 3.46 (td, J = 10.5, 6.8 Hz, 1H), 3.33 (dd, J = 10.5, 4.6 Hz, 1H), 3.00 (ddd, J = 13.6, 11.9, 3.6 Hz, 1H), 2.61 - 2.54 (m, 1H), 2.53 (d, J = 0.9 Hz, 3H), 2.32 - 2.20 (m, 1H), 1.88 - 1.72 (m, 2H), 1.47 (s, 9H).
[0508] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.40 min, MS (ESIpos): m/z = 442.0 (M+H)<+>.
Intermedijer 28BD: 3-{[(4aS,7S,7aR)-4-[(tert-butoksi)karbonil]-oktahidrociklopenta[b]morfolin-7-il]oksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina
1
[0509] Intermedijer 27BD (333 mg, 0.62 mmol) je rastvoren u EtOH (3 mL) i dodato je 2M NaOH (1.2 mL). Reakcija je mešana na 80 °C tokom 24 h. Reakcija je zaustavljena, ohlađena na sobnu temperaturu i etanol je uklonjen pod sniženim pritiskom. Dobijena smeša je zakišeljena na ∼pH 4 dodavanjem 2M HCl, u kom trenutku je nastao beli talog. Ovo je sakupljeno filtracijom, isprano sa vodom i osušeno u vakuumskoj peći da bi se dobilo 244 mg (77% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu beličaste čvrste supstance.
[0510]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.24 (s, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.63 (s, 1H), 4.93 (t, J = 5.4 Hz, 1H), 4.20 - 4.08 (m, 1H), 3.88 (d, J = 13.4 Hz, 1H), 3.78 - 3.68 (m, 1H), 3.52 (td, J = 10.5, 6.8 Hz, 1H), 3.38 (dd, J = 10.6, 4.8 Hz, 1H), 3.05 (td, J = 13.6, 3.6 Hz, 1H), 2.55 (s, 3H), 2.54 - 2.47 (m, 1H), 2.37 (dd, J = 20.9, 10.1 Hz, 1H), 1.90 - 1.70 (m, 2H), 1.47 (s, 9H).
[0511] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.26 min, MS (ESIpos): m/z = 461.1 (M+H)<+>.
Intermedijer 83: (2S)-2-[(benziloksi)metil]-1,4-dioksan
[0512] U rastvor (2R)-3-(benziloksi)propan-1,2-diola (2 g, 11 mmol) i tetra-n-butilamonijum bromida (0.71 g, 2.2 mmol) u dihloroetanu (52 mL) dodat je natrijum hidroksid (26.3 g, 0.66 mol) kao rastvor u vodi (25 mL). Reakciona smeša je zatim mešana na 50 °C tokom 16 h. Dodati su još dihloroetan (52 ml) i natrijum hidroksid (26.3 g, 0.66 mol) kao rastvor u vodi (25 mL) i reakciona smeša je mešana na 50 °C tokom sledećih 48 h. Reakciona smeša je filtrirana pod vakuumom, isprana sa etil acetatom. Filtrat je razblažen sa vodom i slojevi su odvojeni. Organski sloj je dalje ispran sa fiziološkim rastvorom fiziološkim rastvorom, sušen iznad Na2SO4, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen sa Biotage
1
Isolera™ hromatografijom (silika gel, eluiranje sa heptan-EtOAc, 1:0 do 1:1) da bi se dobilo 1.25 g (54% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bezbojnog ulja.
[0513]<1>H NMR (250 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 7.40 - 7.27 (m, 5H), 4.55 (s, 2H), 3.86 -3.57 (m, 6H), 3.52 - 3.37 (m, 3H).
Intermedijer 84: (2S)-1,4-dioksan-2-ilmetanol
[0514] U rastvor Intermedijera 83 (1.25 g, 4.74 mmol) u etanolu (20 mL) dodat je paladijum, 10 % na ugljeniku (192 mg) i reakciona smeša je mešana pod atmosferom vodonika tokom 18 h. Reakciona smeša je filtrirana kroz čep od Celita®, isprana sa EtOAc, i koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 630 mg (89% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bledo žutog ulja.
[0515]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 3.85 - 3.67 (m, 5H), 3.66 - 3.57 (m, 2H), 3.55 (dd, J = 11.7, 5.9 Hz, 1H), 3.46 (dd, J = 11.1, 10.0 Hz, 1H), 1.75 (s, 1H).
Intermedijer 27BE: 3-[(2R)-1,4-dioksan-2-ilmetoksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzonitril
[0516] U mešani rastvor Intermedijera 84 (250 mg, 1.76 mmol) u suvom DMF (7 mL) dodat je NaH 60 % disperzija u mineralnom ulju (88 mg, 2.20 mmol). Posle mešanja smeše tokom 15 minuta, dodat je u jednoj porciji Intermedijer 26 (385 mg, 1.76 mmol). Dobijena smeša je mešana na temperaturi okoline tokom 1.5 h. Reakciona smeša je zatim sipana u fiziološki rastvor i ekstrahovana u EtOAc. Organski sloj je ispran sa fiziološkim rastvorom, osušen iznad MgSO4, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (silika gel, eluiranje sa heptan-EtOAc, 1:0 do 20:9) da bi se dobilo 460 mg (82% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu beličaste čvrste supstance.
1
[0517]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 7.75 (s, 1H), 7.71 - 7.67 (m, 1H), 7.55 -7.49 (m, 1H), 7.18 (dd, J = 2.3, 1.2 Hz, 1H), 4.11 - 4.05 (m, 1H), 4.05 - 3.98 (m, 2H), 3.93 -3.85 (m, 2H), 3.82 (td, J = 11.7, 11.1, 2.6 Hz, 1H), 3.78 - 3.72 (m, 1H), 3.68 (td, J = 11.5, 3.2 Hz, 1H), 3.56 (dd, J = 11.4, 9.3 Hz, 1H), 2.54 (s, 3H)
[0518] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.17 min, MS (ESIpos): m/z = 317.0 (M+H)<+>.
Intermedijer 28BE: 3-[(2R)-1,4-dioksan-2-ilmetoksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina
[0519] Intermedijer 27BE (455 mg, 1.44 mmol) je rastvoren u EtOH (7 mL) i dodato je 2M NaOH (2.9 mL). Reakcija je mešana u mikrotalasnoj pećnici na 130 °C tokom 1 h. Reakcija je zaustavljena, ohlađena na sobnu temperaturu i etanol je uklonjen pod sniženim pritiskom. Dobijena smeša je zakišeljena do ∼pH 4 dodavanjem 2M HCl, u kom trenutku je nastao beli talog. Ovo je sakupljeno filtracijom, isprano sa vodom i osušeno u vakuumskoj peći preko noći da bi se dobilo 480 mg (99% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu beličaste čvrste supstance.
[0520]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d) δ 8.33 (s, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 4.17 - 4.10 (m, 1H), 4.09 - 4.00 (m, 2H), 3.97 - 3.86 (m, 2H), 3.83 (td, J = 11.7, 11.2, 2.5 Hz, 1H), 3.77 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 3.69 (td, J = 11.3, 3.0 Hz, 1H), 3.59 (t, J = 10.7 Hz, 1H), 2.54 (s, 3H).
[0521] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.05 min, MS (ESIpos): m/z = 336.0 (M+H)<+>.
Intermedijer 85: (2R)-2-[(benziloksi)metil]-1,4-dioksan
[0522] U rastvor (2S)-3-(benziloksi)propan-1,2-diola (0.8 g, 4.4 mmol) i tetra-n-butilamonijum bromida (283 mg, 0.88 mmol) u dihloroetanu (21 mL) dodat je natrijum hidroksid (10.5 g, 0.26
14
mol) kao rastvor u vodi (10 mL). Reakciona smeša je zatim mešana na 50 °C tokom 16 h. Dodato je još dihloroetana (21 mL) i natrijum hidroksida (10.5 g, 0.26 mol) kao rastvor u vodi (10 mL) i reakciona smeša je mešana na 50 °C tokom sledećih 48 h. Reakciona smeša je filtrirana pod vakuumom, isprana sa etil acetatom. Filtrat je razblažen sa vodom i slojevi su odvojeni. Organski sloj je dalje ispran sa fiziološkim rastvorom, osušen iznad Na2SO4, filtriran i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (silika gel, eluiranje sa heptan-EtOAc, 1:1 do 1:1) da bi se dobilo 560 mg (60% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bezbojnog ulja.
[0523]<1>H NMR (250 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 7.40 - 7.27 (m, 5H), 4.55 (s, 2H), 3.86 -3.60 (m, 6H), 3.52 - 3.38 (m, 3H).
Intermedijer 86: (2R)-1,4-Dioksan-2-ilmetanol
[0524] U rastvor Intermedijera 85 (560 mg, 2.47 mmol) u etanolu (10 mL) dodat je paladijum, 10 % na ugljeniku (100 mg) i reakciona smeša je mešana pod atmosferom vodonika tokom 18 h. Rastvor je filtriran kroz čep od Celita®, ispran sa EtOAc, i koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 260 mg (89% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bledo žutog ulja.
[0525]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 3.87 - 3.66 (m, 5H), 3.65 - 3.58 (m, 2H), 3.54 (dd, J = 11.7, 5.9 Hz, 1H), 3.46 (t, J = 10.6 Hz, 1H), 1.95 (s, 1H).
Intermedijer 27BF: 3-[(2S)-1,4-dioksan-2-ilmetoksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzonitril
[0526] U mešani rastvor Intermedijera 86 (250 mg, 2.12 mmol) u suvom DMF (7 mL) dodat je NaH 60 % disperzija u mineralnom ulju (88 mg, 2.20 mmol). Posle mešanja smeše tokom 15 min, dodat je u jednoj porciji Intermedijer 26 (385 mg, 1.76 mmol). Dobijena smeša je mešana na temperaturi okoline tokom 2.5 h. Reakciona smeša je zatim sipana u fiziološki rastvor i ekstrahovana u etil acetat. Organski sloj je ispran sa fiziološkim rastvorom, odvojen, osušene iznad MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (silika gel, eluiranje sa heptan-EtOAc, 1:0 do 20:9) da bi se dobilo 400 mg (72% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bledo žute čvrste supstance.
[0527]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 7.75 (s, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.18 (s, 1H), 4.11 - 4.05 (m, 1H), 4.05 - 3.98 (m, 2H), 3.92 - 3.86 (m, 2H), 3.82 (td, J = 11.7, 11.2, 2.6 Hz, 1H), 3.76 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 3.68 (td, J = 11.3, 3.2 Hz, 1H), 3.56 (dd, J = 11.4, 9.3 Hz, 1H), 2.54 (s, 3H).
[0528] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.17min, MS (ESIpos): m/z = 317.0 (M+H)<+>.
Intermedijer 28BF: 3-[(2S)-1,4-dioksan-2-ilmetoksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina
[0529] Intermedijer 27BF (395 mg, 1.25 mmol) je rastvoren u etanolu (6 mL) i dodato je 2M NaOH (2.5 mL). Reakcija je mešana u mikrotalasnoj pećnici na 130 °C tokom 2 h. Reakcija je zaustavljena, ohlađena na sobnu temperaturu i etanol je uklonjen pod sniženim pritiskom. Dobijena smeša je zakišeljena do ∼pH 4 dodavanjem 2M HCl, u kom trenutku je nastao beli talog. Ovo je sakupljeno filtracijom, isprano sa vodom i osušeno u vakuumskoj peći preko noći da bi se dobilo 380 mg (89% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu beličaste čvrste supstance.
[0530]<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 13.32 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.49 (s, 1H), 4.15 - 4.04 (m, 2H), 3.93 - 3.86 (m, 1H), 3.84 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 3.80 - 3.74 (m, 1H), 3.71 - 3.59 (m, 2H), 3.55 - 3.47 (m, 1H), 3.47 - 3.40 (m, 1H).
[0531] LCMS (Analitički metod A) Rt= 1.05 min, MS (ESIpos): m/z = 336.0 (M+H)<+>.
Intermedijer 34: tert-butil 3-[3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-({(1R)-1-[6-(trifluorometil)piridazin-3-il]etil}karbamoil)fenoksi]azetidin-1-karboksilat
[0532] U rastvor Intermedijera 5AD (185 mg, 0.47 mmol), Intermedijera XVIII (130 mg, 0.57 mmol) i DIPEA (248 µL, 1.42 mmol) u DCM (1 mL) dodat je HATU (270 mg, 0.71 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Dodat je DCM (1 mL) i sirovi reakcioni proizvod je ispran sa vodom (1 mL). Organska faza je odvojena, osušena iznad MgSO4, filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (silika gel, eluiranje sa heptan-EtOAc, 9:1 do 1:9) da se dobije 248 mg (63% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu žutog ulja.
[0533]<1>H NMR (250 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 7.91 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.57 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.42 (dd, J = 2.4, 1.4 Hz, 1H), 5.59 (m, 1H), 5.07 - 4.92 (m, 1H), 4.35 (dd, J = 9.7, 6.4 Hz, 2H), 4.01 (dd, J = 9.5, 3.7 Hz, 2H), 2.52 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 1.75 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 1.44 (s, 9H). LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.49 min, MS (ESIpos): m/z = 508.1 (M+H)<+>.
[0534] Analogno postupku opisanom za Intermedijer 34, sledeći Intermedijeri su pripremljeni upotrebom HATU i odgovarajuće karboksilne kiseline i aminom polaznih materijala.
14
14
Intermedijer 33: Tert-butil 3-[3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-({(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}karbamoil)fenoksi]azetidin-1-karboksilat
[0535] Intermedijer 5AD (205.6 mg, 0.527 mmol), Intermedijer VI (121 mg, 0.632 mmol) i DIPEA (367 µL, 2.1 mmol) su kombinovani u DCM (5 mL) i dodat je T3P (470 µL, 0.79 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h, a zatim isprana sa zasićenim NaHCO3(5 mL). Slojevi su odvojeni, i vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM (2 x 5 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (silika
14
gel, eluiranje sa heptan-EtOAc, 4:1 do 1:4) da bi se dobilo 226 mg (74% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bezbojne čvrste supstance.
[0536]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.94 (s, 2H), 7.90 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.40 (s, 1H), 7.22 (s, 1H), 6.69 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 5.36 (m, 1H), 4.98 (ddd, J = 10.4, 6.4, 4.0 Hz, 1H), 4.35 (dd, J = 9.6, 6.5 Hz, 2H), 4.00 (dd, J = 9.7, 3.7 Hz, 2H), 2.54 (s, 3H), 1.72 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 1.45 (s, 9H).
[0537] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.33 min, MS (ESIpos): m/z = 508 (M-tBu)<+>.
[0538] Analogno postupku opisanom za Intermedijer 33, sledeći Intermedijeri su pripremljeni upotrebom T3P i odgovarajuće karboksilne kiseline i aminom polaznih materijala.
14
14
14
Intermedijer 35: 3-(Azetidin-3-iloksi)-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-[(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil]benzamid
1
[0539] U rastvor Intermedijera 33 (226 mg, 0.40 mmol) rastvoren u DCM (5 mL) dodata je TFA (0.3 mL, 4.0 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi sve dok nije prestalo oslobađanje gasa. Reakciona smeša je neutralizovana sa zasićenim rastvorom NaHCO3, dajući precipitat. Ovo je sakupljeno filtracijom pod sniženim pritiskom i osušeno u vakuumskoj pećnici da bi se dobilo 188.7 mg (kvantitativni prinos) naslovnog jedinjenja u vidu belog praha.
[0540]<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 9.42 - 9.09 (m, 3H), 7.94 (s, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.42 (m, 2H), 5.30 (m, 1H), 5.17 - 4.92 (m, 1H), 4.03 - 3.76 (m, 2H), 3.62 - 3.51 (m, 2H), 1.62 (d, J = 7.1 Hz, 3H).
[0541] LCMS (Analitički metod A) Rt = 0.94 min, MS (ESIpos): m/z = 464.0 (M+H)<+>.
Intermedijer 36: 3-(azetidin-3-iloksi)-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[6-(trifluorometil)piridazin-3-il]etil}benzamid
[0542] U rastvor Intermedijera 34 (248 mg, 0.30 mmol, 68 % čistoća) u DCM (1 mL) dodata je TFA (0.1 mL) zatim je mešan tokom 4 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i ostatak je prebačen u vodu i načinjena baznom do pH ∼4 sa 10 M NaOH rastvora da bi se dobio beličasti talog koji je sakupljen filtracijom da bi se dobilo 81 mg (53% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu beličastog praha.
[0543]<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 9.35 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 8.24 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 8.06 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.43 (d, J = 11.9 Hz, 2H), 5.52 - 5.45
1 1
(m, 1H), 5.17 (q, J = 5.8 Hz, 1H), 3.92 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 3.65 - 3.61 (m, 2H), 1.66 (d, J = 7.1 Hz, 3H).
[0544] LCMS (Analitički metod A) Rt = 0.88 min, MS (ESIpos) m/z 464 (M+H<+>).
[0545] Analogno postupku opisanom za Intermedijer 36, sledeći Intermedijeri su pripremljeni upotrebom TFA i odgovarajućih N-Boc zaštićenih amin polaznih materijala.
1 2
1
14
1
Intermedijer 6AY: 1,1-Dioksidotetrahidro-2H-tiopiran-4-il 4-metilbenzensulfonat
[0546] Smeša tetrahidro-2H-tiopiran-4-ol 1,1-dioksida (660 mg, 4.39 mmol), 4-metilbenzensulfonil hlorida (922 mg, 4.83 mmol), TEA (920 µl, 6.6 mmol), trimetilamin hidrohlorida (42.0 mg, 439 µmol) u DCM (5.4 mL) je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije. Dodati su DCM i voda i slojevi su odvojeni. Organski sloj je uparen do suva pod sniženim pritiskom i ostatak je prečišćen sa hromatografijom na koloni da bi se dobilo 1.03 g (77% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0547]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 0.16 - 0.84 (m, 1 H) 1.99 - 2.18 (m, 4 H) 2.43 (s, 3 H) 3.01 - 3.24 (m, 4 H) 4.83 (dt, 1 H) 7.49 (d, 2 H) 7.85 (d, 2 H).
Intermedijer 4AZ: Metil 3-[(1,1-dioksidotetrahidro-2H-tiopiran-4-il)oksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoat
[0548] Smeša Intermedijera 3 (519 mg, 2.08 mmol), Intermedijera 6AY (951 mg, 3.13 mmol), Cs2CO3(1.02 g, 3.13 mmol) u DMF (15 mL) je mešana na 90 °C do potpune konverzije. Smeša je uparena do suva pod sniženim pritiskom i ostatak je prečišćen sa hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent heksan/ EE) da se dobije 680 mg (86% prinosa) naslovnog jedinjenja.
1
[0549] LCMS, metod 1, rt: 1.10 min, MS ES+ m/z = 382 (M+H)<+>.
Intermedijer 5AZ: 3-[(1,1-Dioksidotetrahidro-2H-tiopiran-4-il)oksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina
[0550] Smeša Intermedijera 4AZ (680 mg, 1.78 mmol), vodenog rastvora NaOH (356 mg, 8.91 mmol, 2M) i MeOH (50 mL) je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije
[0551] Rastvarač je uparen pod sniženim pritiskom i rastvor NaOH (2M) je dodat za podešavanje pH-vrednosti na pH= 6. Vodeni sloj je odvojen i organski sloj je uparen do suva pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen sa hromatografijom na koloni (silika gel) da se dobije 288 mg (44% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0552] LCMS, metod 1, rt: 0.92 min, MS ES+ m/z = 368 (M+H)<+>.
Intermedijer 4BA: Metil 3-(5-etil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3R)-tetrahidrofuran-3-iloksi]benzoat
[0553] Smeša Intermedijera 8 (950 mg, 2.73 mmol), 2-bromo-5-etil-1,3-tiazola (681 mg, 3.55 mmol), [1,1,-Bis-(difenilfosfino)-ferocen]-paladijum(II) dihlorida (334 mg, 409 µmol), i K2CO3(6.5 ml, 1.0 M, 6.5 mmol) u THF (45 mL) je mešana pod refluksom do potpune konverzije i uparena do suva pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen sa hromatografijom na koloni (silika gel, heksan/ EE/ MeOH gradijent) da se dobije 265 mg (29% prinosa) naslovnog jedinjenja.
1
[0555] LCMS, metod 1, rt: 1.33 min, MS ES+ m/z = 334 (M+H)<+>.
Intermedijer 5BA: 3-(5-Etil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3R)-tetrahidrofuran-3-iloksi]benzoeva kiselina
[0555] Rastvor Intermedijera 4BA (265 mg, 94 % čistoća, 780 µmol) u MeOH (5 mL), THF (5 mL) i vodeni rastvor NaOH (780 µl, 2.0 M, 1.6 mmol) je mešan na sobnoj temperaturi do potpune konverzije. Dodata je voda i pH-vrednost je podešena na pH: 2. Vodena faza je ekstrahovana sa EE, kombinovani organski slojevi osušeni sa Na2SO4, filtrirani i upareni do suva pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 252 mg (100% prinosa) naslovnog jedinjenja koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja. LCMS, metod 1, MS ES+ m/z = 320 (M+H)<+>.
Intermedijer 4BB: Metil 3-(5-ciklobutil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3R)-tetrahidrofuran-3-iloksi]benzoat
[0556] Smeša Intermedijera 8 (870 mg, 2.50 mmol), 2-hloro-5-ciklobutil-1,3-tiazola (564 mg, 3.25 mmol), [1,1,-Bis-(difenilfosfino)-ferocen]-paladijum(II) dihlorida (306 mg, 375 µmol) i K2CO3(6.0 ml, 1.0 M, 6.0 mmol) u THF (41 mL) je mešana pod refluksom do potpune konverzije i uparena do suva pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen sa hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent heksan/ EE) da se dobije 390 mg (43% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0557] LCMS, metod 1, rt: 1.46 min, MS ES+ m/z = 360 (M+H)<+>.
1
Intermedijer 5BB: 3-(5-Ciklobutil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3R)-tetrahidrofuran-3-iloksi]benzoeva kiselina
[0558] Rastvor Intermedijera 4BB (390 mg, 94 % čistoća, 1.02 mmol) u MeOH i vodeni rastvor NaOH (1.5 ml, 2.0 M, 3.1 mmol) je mešan na sobnoj temperaturi do potpune konverzije. Dodata je voda i pH vrednost podešena na pH: 2. Vodena faza je ekstrahovana sa EE, kombinovani organski slojevi osušeni sa Na2SO4, filtrirani i upareni do suva pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 334 mg (95%) naslovnog jedinjenja koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0559] LCMS, metod 1, rt: 1.23 min, MS ES+ m/z = 346 (M+H)<+>.
Intermedijer 4BC: Metil 3-[5-(propan-2-il)-1,3-tiazol-2-il]-5-[(3R)-tetrahidrofuran-3-iloksi]benzoat
[0560] Smeša Intermedijera 8 (870 mg, 2.50 mmol), 2-bromo-5-(propan-2-il)-1,3-tiazola (669 mg, 3.25 mmol), [1,1,-Bis-(difenilfosfino)-ferocen]-paladijum(II) dihlorida (306 mg, 375 µmol) i K2CO3(6.0 ml, 1.0 M, 6.0 mmol) u THF (41 mL) je mešana pod refluksom do potpune konverzije i uparena do suva pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen sa hromatografijom na koloni (silika gel, heksan/ EE/ MeOH gradijent) da se dobije 451 mg (52% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0561] LCMS, metod 1, rt: 1.41 min, MS ES+: MS ES+ m/z = 348 (M+H)<+>.
1
Intermedijer 5BC: 3-[5-(Propan-2-il)-1,3-tiazol-2-il]-5-[(3R)-tetrahidrofuran-3-iloksi]benzoeva kiselina
[0562] Rastvor Intermedijera 4BC (390 mg, 94 % čistoća, 1.06 mmol) u MeOH i vodeni rastvor NaOH (1.6 ml, 2.0 M, 3.2 mmol) je mešan na sobnoj temperaturi do potpune konverzije. Dodata je voda i pH vrednost podešena na pH: 2. Vodena faza je ekstrahovana sa EE, kombinovani organski slojevi osušeni sa Na2SO4, filtrirani i upareni do suva pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 400 mg naslovnog jedinjenja koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0563] LCMS, metod 1, rt: 1.17 min, MS ES+ m/z = 334 (M+H)<+>.
Intermedijer 6AZ: (3R)-Tetrahidrofuran-3-il 4-metilbenzensulfonat
[0564] Smeša (3R)-tetrahidrofuran-3-ola (18 g, 204 mmol), TEA (42.7 ml, 306 mmol), trimetilamin hidrohlorida (1.95 g, 20.4 mmol) u DCM (626 mL) je mešana na sobnoj temperaturi tokom 20 minuta. Dodat je 4-metilbenzensulfonil hlorid (42.8 g, 225 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije. Reakcionoj smeši je dodat N, N-dimetiletilendiamin (26.4 ml, 245 mmol) i mešan je tokom 30 minuta da se potroši nereagovani 4-metilbenzensulfonil hlorid. Dodata je voda i smeša je ekstrahovana sa DCM (3x). Kombinovani organski slojevi su upareni do suva pod sniženim pritiskom i ostatak je prečišćen sa hromatografijom na koloni (silika gel, heksan/ EE/ DCM/ MeOH gradijent) da se dobije 41.0 g (83% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0565]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.79 - 1.95 (m, 1 H) 2.08 (dtd, 1 H) 2.43 (s, 3 H) 3.57 - 3.81 (m, 4 H) 5.12 (ddt, 1 H) 7.49 (d, 2 H) 7.81 (d, 2 H).
1
Intermedijer 95: Metil 3-bromo-5-[(3S)-tetrahidrofuran-3-iloksi]benzoat
[0566] Smeša Intermedijera 1 (3.00 g, 13.0 mmol), Intermedijera 6AZ (4.72 g, 19.5 mmol) i Cs2CO3(6.35 g, 19.5 mmol) u DMF 25 ml je mešana na 80°C do potpune konverzije. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i čvrsta supstanca je filtrirana kroz Celite® i isprana sa DMF. Filtrat je uparen i ostatak je prečišćen sa hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent heksan/ EE) da se dobije 2.63 g (67% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0567] LCMS, metod 1, rt: 1.17 min, MS ES+ m/z = 301 (M+H)<+>.
Intermedijer 94: Metil 3-[(3S)-tetrahidrofuran-3-iloksi]-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzoat
[0568] Smeša Intermedijera 95 (2.63 g, 8.73 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil-2,2'-bi-1,3,2-dioksaborolana (5.54 g, 21.8 mmol), kalijum acetat a(3.00 g, 30.6 mmol) i [1,1,-Bis-(difenilfosfino)-ferocen]-paladijum(II) dihlorid a(638 mg, 873 µmol) u 1,4-dioksanu (50 mL) je mešana na 90 °C do potpune konverzije. Smeša je filtrirana kroz Celite® i filtrat je uparen do suva pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen sa hromatografijom na koloni (silika gel, heksan/ EE/ MeOH gradijent) da se dobije 4.36 g naslovnog jedinjenja.
[0569] LCMS, metod 1, rt: 1.31 min, MS ES+ m/z = 349 (M+H)<+>.
Intermedijer 4BD: Metil 3-(5-etil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3S)-tetrahidrofuran-3-iloksi]benzoat
1 1
[0570] Smeša Intermedijera 94 (1.00 g, 2.87 mmol), 2-bromo-5-etil-1,3-tiazola (662 mg, 3.45 mmol), [1,1,-Bis-(difenilfosfino)-ferocen]-paladijum(II) dihlorida (352 mg, 431 µmol) i K2CO3(6.9 ml, 1.0 M, 6.9 mmol) u THF (47 mL) je mešana pod refluksom do potpune konverzije i uparena do suva pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen sa hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent heksan/ EE) da se dobije 327 mg (34% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0571] LCMS, metod 1, rt: 1.33 min, MS ES+ m/z = 334 (M+H)<+>.
Intermedijer 5BD: 3-(5-Etil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3S)-tetrahidrofuran-3-iloksi]benzoeva kiselina
[0572] Rastvor Intermedijera 4BD (327 mg, 94 % čistoća, 922 µmol) u MeOH (8.5 mL), THF (8.5 mL) i vodeni rastvor NaOH (920 µl, 2.0 M, 1.8 mmol) je mešan na sobnoj temperaturi do potpune konverzije. Dodata je voda i pH vrednost podešena na pH: 2. Vodena faza je ekstrahovana sa EE, kombinovani organski slojevi osušeni sa Na2SO4, filtrirani i upareni do suva pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 299 mg naslovnog jedinjenja koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0573] LCMS, metod 1, rt: 1.10 min, MS ES+ m/z = 320 (M+H)<+>.
Intermedijer 4BE: Metil 3-(5-ciklobutil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3S)-tetrahidrofuran-3-iloksi]benzoat
1 2
[0574] Analogno konverziji Intermedijera 94 u Intermedijer 4BD, reakcija Intermedijera 94 (1.00 g, 2.87 mmol) sa 2-hloro-5-ciklobutil-1,3-tiazolom (648 mg, 3.73 mmol) dala je 410 mg (39% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0575] LCMS, metod 1, rt: 1.46 min, MS ES+ m/z = 360 (M+H)<+>.
Intermedijer 5BE: 3-(5-Ciklobutil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3S)-tetrahidrofuran-3-iloksi]benzoeva kiselina
[0576] Analogno konverziji Intermedijera 4BD u Intermedijer 5BD, saponifikacija Intermedijera 4BE (410 mg, 94 % čistoća, 1.07 mmol) dala je 413 mg naslovnog jedinjenja koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0577] LCMS, metod 1, rt: 1.22 min, MS ES+ m/z = 346 (M+H)<+>.
Intermedijer 4BF: Metil 3-[5-(propan-2-il)-1,3-tiazol-2-il]-5-[(3S)-tetrahidrofuran-3-iloksi]benzoat
[0578] Analogno konverziji Intermedijera 94 u Intermedijer 4BD, reakcija Intermedijera 94 (1.00 g, 2.87 mmol) sa 2-bromo-5-(propan-2-il)-1,3-tiazolom (710 mg, 3.45 mmol) dala je 374 mg (37% prinosa) naslovnog jedinjenja.
1
[0579] LCMS, metod 1, rt: 1.41 min, MS ES+ m/z = 348 (M+H)<+>.
Intermedijer 5BF: 3-[5-(Propan-2-il)-1,3-tiazol-2-il]-5-[(3S)-tetrahidrofuran-3-iloksi]benzoeva kiselina
[0580] Analogno konverziji Intermedijera 4BD u Intermedijer 5BD, saponifikacija Intermedijera 4BF (374 mg, 94 % čistoća, 1.01 mmol) dala je 333 mg (99% prinosa) naslovnog jedinjenja koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0581] LCMS, metod 1, rt: 1.17 min, MS ES+ m/z = 334 (M+H)<+>.
Intermedijer 4BG: Metil 3-(5-hloro-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3S)-tetrahidrofuran-3-iloksi]benzoat
[0582] Analogno konverziji Intermedijera 94 u Intermedijer 4BD, reakcija Intermedijera 94 (500 mg, 1.44 mmol) sa 2,5-dihloro-1,3-tiazolom (288 mg, 1.87 mmol) dala je 347 mg (71% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0583] LCMS, metod 1, rt: 1.36 min, MS ES+ m/z = 340 (M+H)<+>.
Intermedijer 5BG: 3-(5-Hloro-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3S)-tetrahidrofuran-3-iloksi]benzoeva kiselina
1 4
[0584] Analogno konverziji Intermedijera 4BD u Intermedijer 5BD, saponifikacija Intermedijera 4BG (347 mg, 1.02 mmol) dala je 300 mg (90% prinosa) naslovnog jedinjenja koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0585] LCMS, metod 1, rt: 1.12 min, MS ES+ m/z = 326 (M+H)<+>.
Intermedijer 4BH: Metil 3-(5-hloro-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3R)-tetrahidrofuran-3-iloksi]benzoat
[0586] Analogno konverziji Intermedijera 8 u Intermedijer 4BA, reakcija Intermedijera 8 (500 mg, 1.44 mmol) sa 2,5-dihloro-1,3-tiazolom (288 mg, 1.87 mmol) dala je 249 mg (51% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0587] LCMS, metod 1, rt: 1.36 min, MS ES+ m/z = 340 (M+H)<+>.
Intermedijer 5BH: 3-(5-Hloro-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3R)-tetrahidrofuran-3-iloksi]benzoeva kiselina
[0588] Analogno konverziji Intermedijera 4BA u Intermedijer 5BA, saponifikacija Intermedijera 4BH (239 mg, 703 µmol) dala je 282 mg naslovnog jedinjenja koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0589] LCMS, metod 1, rt: 1.11 min, MS ES+ m/z = 326 (M+H)<+>.
1
Intermedijer 4BI: Metil 3-(5-hloro-1,3-tiazol-2-il)-5-(tetrahidro-2H-piran-4-iloksi)benzoat
[0590] Analogno konverziji Intermedijera 94 u Intermedijer 4BD, reakcija Intermedijera 14W (500 mg, 1.38 mmol) sa 2,5-dihloro-1,3-tiazolom (255 mg, 1.66 mmol) dala je 380 mg (78% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0591] LCMS, metod 1, rt: 1.42 min, MS ES+ m/z = 354 (M+H)<+>.
Intermedijer 5BI: 3-(5-Hloro-1,3-tiazol-2-il)-5-(tetrahidro-2H-piran-4-iloksi)benzoeva kiselina
[0592] Analogno konverziji Intermedijera 4BD u Intermedijer 5BD, saponifikacija Intermedijera 4BI (300 mg, 848 µmol) dala je 353 mg naslovnog jedinjenja koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0593] LCMS, metod 1, rt: 1.17 min, MS ES+ m/z = 340 (M+H)<+>.
Intermedijer 6BA: (3R)-Tetrahidrofuran-3-ilmetil 4-metilbenzensulfonat
[0594] Analogno sintezi Intermedijera 6AZ, reakcija (3S)-tetrahidrofuran-3-ilmetanola (5.4 g, 52.87 mmol) sa 4-metilbenzensulfonil hloridom (11.09 g, 58.16 mmol) dala je 12.26 g (90% prinosa) naslovnog jedinjenja.
1
[0595] LCMS, metod 1, rt: 1.02 min, MS ES+ m/z = 257 (M+H)<+>.
Intermedijer 97: Metil 3-bromo-5-[(3R)-tetrahidrofuran-3-ilmetoksi]benzoat
[0596] Analogno sa reakcijom intermedijera 1 i 6AZ u Intermedijer 95, reakcija Intermedijera 1 (2.25 g, 9.75 mmol) sa Intermedijerom 6BA (3.0 g, 11.7 mmol) dala je 3.44 g naslovnog jedinjenja.
[0597] LCMS, metod 1, rt: 1.25 min, MS ES+ m/z = 317 (M+H)<+>.
Intermedijer 96: Metil 3-[(3R)-tetrahidrofuran-3-ilmetoksi]-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzoat
[0598] Analogno konverziji Intermedijera 95 u Intermedijer 94, reakcija Intermedijera 97 (4.11 g, 13.0 mmol) sa 4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil-2,2'-bi-1,3,2-dioksaborolanom (8.28 g, 32.6 mmol) dala je 5.16 g naslovnog jedinjenja.
[0599] LCMS, metod 1, rt: 1.43 min, MS ES+ m/z = 363 (M+H)<+>.
[0600]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.26 - 1.33 (m, 12 H) 1.61 - 1.74 (m, 1 H) 1.92 - 2.11 (m, 1 H) 2.56 - 2.75 (m, 1 H) 3.53 (dd, 1 H) 3.65 (d, 1 H) 3.71 - 3.82 (m, 2 H) 3.85 (s, 3 H) 3.96 (d, 1 H) 4.00 (d, 1 H) 7.38 (dd, 1 H) 7.54 (dd, 1 H) 7.84 (d, 1 H).
Intermedijer 4BJ: Metil 3-(5-etil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3R)-tetrahidrofuran-3-ilmetoksi]benzoat
1
[0601] Analogno konverziji Intermedijera 94 u Intermedijer 4BD, reakcija Intermedijera 96 (1.00 g, 2.76 mmol) sa 2-bromo-5-etil-1,3-tiazolom (583 mg, 3.04 mmol) dala je 493 mg (51% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0602] LCMS, metod 1, rt: 1.38 min, MS ES+ m/z = 348 (M+H)<+>.
Intermedijer 5BJ: 3-(5-Etil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3R)-tetrahidrofuran-3-ilmetoksi]benzoeva kiselina
[0603] Analogno konverziji Intermedijera 4BD u Intermedijer 5BD, saponifikacija Intermedijera 4BJ (490 mg, 94% čistoća, 1.33 mmol) dala je 448 mg naslovnog jedinjenja koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0604] LCMS, metod 1, rt: 1.15 min, MS ES+ m/z = 334 (M+H)<+>.
Intermedijer 4BK: Metil 3-[5-(propan-2-il)-1,3-tiazol-2-il]-5-[(3R)-tetrahidrofuran-3-ilmetoksi]benzoat
[0605] Analogno konverziji Intermedijera 94 u Intermedijer 4BD, reakcija Intermedijera 96 (1.00 g, 2.76 mmol) sa 2-bromo-5-(propan-2-il)-1,3-tiazolom (626 mg, 3.04 mmol) dala je 445 mg (45% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0606] LCMS, metod 1, rt: 1.46 min, MS ES+ m/z = 362 (M+H)<+>.
1
Intermedijer 5BK: 3-[5-(Propan-2-il)-1,3-tiazol-2-il]-5-[(3R)-tetrahidrofuran-3-ilmetoksi]benzoeva kiselina
[0607] Analogno konverziji Intermedijera 4BD u Intermedijer 5BD, saponifikacija Intermedijera 4BK (450 mg, 94 % čistoća, 1.17 mmol) dala je 400 mg (98% prinosa) naslovnog jedinjenja koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0608] LCMS, metod 1, rt: 1.23 min, MS ES+ m/z = 348 (M+H)<+>.
Intermedijer 6BB: (2R)-Tetrahidrofuran-2-ilmetil 4-metilbenzensulfonat
[0609] Analogno sintezi Intermedijera 6AZ, reakcija (2R)-tetrahidrofuran-2-ilmetanol (4.00 g, 39.2 mmol) sa 4-metilbenzensulfonil hloridom (8.21 g, 43.1 mmol) dala je 10.1 g naslovnog jedinjenja.
[0610] LCMS, metod 1, rt: 1.05 min, MS ES+ m/z = 257 (M+H)<+>.
Intermedijer 99: Metil 3-bromo-5-[(2R)-tetrahidrofuran-2-ilmetoksi]benzoat
[0611] Analogno sa reakcijom intermedijera 1 i 6AZ u Intermedijer 95, reakcija Intermedijera 1 (4.94 g, 21.4 mmol) sa Intermedijerom 6BB (6.58 g, 25.7 mmol) dala je 6.26 g (93% prinosa) naslovnog jedinjenja.
Intermedijer 98: Metil 3-[(2R)-tetrahidrofuran-2-ilmetoksi]-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzoat
1
[0612] Analogno konverziji Intermedijera 95 u Intermedijer 94, reakcija Intermedijera 99 (6.26 g, 19.9 mmol) sa 4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil-2,2'-bi-1,3,2-dioksaborolanom (12.6 g, 49.7 mmol) dala je 6.26 g (87% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0613]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.23 - 1.39 (m, 12 H) 1.66 - 1.77 (m, 1 H) 1.78 - 1.94 (m, 2 H) 1.94 - 2.04 (m, 1 H) 3.62 - 3.72 (m, 1 H) 3.73 - 3.82 (m, 1 H) 3.86 (s, 3 H) 3.94 - 4.08 (m, 2 H) 4.11 - 4.22 (m, 1 H) 7.39 (dd, 1 H) 7.55 (dd, 1 H) 7.81 - 7.89 (m, 1 H).
Intermedijer 4BL: Metil 3-(5-etil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(2R)-tetrahidrofuran-2-ilmetoksi]benzoat
[0614] Analogno konverziji Intermedijera 94 u Intermedijer 4BD, reakcija Intermedijera 98 (1.00 g, 2.76 mmol) sa 2-bromo-5-etil-1,3-tiazolom (583 mg, 3.04 mmol) dala je 182 mg (19% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0615] LCMS, metod 1, rt: 1.39 min, MS ES+ m/z = 348 (M+H)<+>.
Intermedijer 5BL: 3-(5-Etil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(2R)-tetrahidrofuran-2-ilmetoksi]benzoeva kiselina
1
[0616] Analogno konverziji Intermedijera 4BD u Intermedijer 5BD, saponifikacija Intermedijera 4BL (188 mg, 94 % čistoća, 509 µmol) dala je 185 mg naslovnog jedinjenja koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0617] LCMS, metod 1, rt: 1.17 min, MS ES+ m/z = 334 (M+H)<+>.
Intermedijer 4BM: Metil 3-(5-ciklobutil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(2R)-tetrahidrofuran-2-ilmetoksi]benzoat
[0618] Analogno konverziji Intermedijera 94 u Intermedijer 4BD, reakcija Intermedijera 98 (1.00 g, 2.76 mmol) sa 2-hloro-5-ciklobutil-1,3-tiazolom (527 mg, 3.04 mmol) dala je 329 mg (32% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0619] LCMS, metod 1, rt: 1.52 min, MS ES+ m/z = 374 (M+H)<+>.
Intermedijer 5BM: 3-(5-Ciklobutil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(2R)-tetrahidrofuran-2-ilmetoksi]benzoeva kiselina
[0620] Analogno konverziji Intermedijera 4BD u Intermedijer 5BD, saponifikacija Intermedijera 4BM (329 mg, 94 % čistoća, 828 µmol) dala je 316 mg naslovnog jedinjenja koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0621] LCMS, metod 1, rt: 1.30 min, MS ES+ m/z = 360 (M+H)<+>.
Intermedijer 4BN: Metil 3-[5-(propan-2-il)-1,3-tiazol-2-il]-5-[(2R)-tetrahidrofuran-2-ilmetoksi]benzoat
1 1
[0622] Analogno konverziji Intermedijera 94 u Intermedijer 4BD, reakcija Intermedijera 98 (1.00 g, 2.76 mmol) sa 2-bromo-5-(propan-2-il)-1,3-tiazolom (626 mg, 3.04 mmol) dala je 386 mg (39% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0623] LCMS, metod 1, rt: 1.47 min, MS ES+ m/z = 362 (M+H)<+>.
Intermedijer 5BN: 3-[5-(Propan-2-il)-1,3-tiazol-2-il]-5-[(2R)-tetrahidrofuran-2-ilmetoksi]benzoeva kiselina
[0624] Analogno konverziji Intermedijera 4BD u Intermedijer 5BD, saponifikacija Intermedijera 4BN (386 mg, 94 % čistoća, 1.00 mmol) dala je 401 mg naslovnog jedinjenja koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0625] LCMS, metod 1, rt: 1.26 min, MS ES+ m/z = 348 (M+H)<+>.
Intermedijer 101: Metil 3-bromo-5-[(3S)-tetrahidrofuran-3-ilmetoksi]benzoat
[0626] Analogno sa reakcijom intermedijera 1 i 6AZ u Intermedijer 95, reakcija Intermedijera 1 (4.85 g, 21.0 mmol) sa Intermedijerom 17A (6.45 g, 25.2 mmol) dala je 7.47 g naslovnog jedinjenja.
[0627] LCMS, metod 1, rt: 1.25 min, MS ES+ m/z = 315 (M+H)<+>.
1 2
Intermedijer 100: Metil 3-[(3S)-tetrahidrofuran-3-ilmetoksi]-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzoat
[0628] Analogno konverziji Intermedijera 95 u Intermedijer 94, reakcija Intermedijera 101 (7.47 g, 23.7 mmol) sa 4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil-2,2'-bi-1,3,2-dioksaborolanom (15.0 g, 59.3 mmol) dala je 9.27 g naslovnog jedinjenja.
[0629] LCMS, metod 1, rt: 1.36 min, MS ES+ m/z = 363 (M+H)<+>.
[0630]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.27 - 1.33 (m, 12 H) 1.63 - 1.78 (m, 1 H) 1.94 - 2.07 (m, 1 H) 2.56 - 2.72 (m, 1 H) 3.54 (dd, 1 H) 3.66 (d, 1 H) 3.73 - 3.83 (m, 2 H) 3.86 (s, 3 H) 3.99 (dd, 2 H) 7.39 (dd, 1 H) 7.55 (dd, 1 H) 7.81 - 7.89 (m, 1 H).
Intermedijer 4BO: Metil 3-(5-etil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3S)-tetrahidrofuran-3-ilmetoksi] benzoat
[0631] Analogno konverziji Intermedijera 94 u Intermedijer 4BD, reakcija Intermedijera 100 (1.00 g, 2.76 mmol) sa 2-bromo-5-etil-1,3-tiazolom (583 mg, 3.04 mmol) dala je 538 mg (56% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0632] LCMS, metod 1, rt: 1.38 min, MS ES+ m/z = 348 (M+H)<+>.
Intermedijer 5BO: 3-(5-Etil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3S)-tetrahidrofuran-3-ilmetoksi]benzoeva kiselina
1
[0633] Analogno konverziji Intermedijera 4BD u Intermedijer 5BD, saponifikacija Intermedijera 4BO (538 mg, 94 % čistoća, 1.46 mmol) dala je 525 mg naslovnog jedinjenja koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0634] LCMS, metod 1, rt: 1.15 min, MS ES+ m/z = 334 (M+H)<+>.
Intermedijer 4BP: Metil 3-[5-(propan-2-il)-1,3-tiazol-2-il]-5-[(3S)-tetrahidrofuran-3-ilmetoksi]benzoat
[0635] Analogno konverziji Intermedijera 94 u Intermedijer 4BD, reakcija Intermedijera 100 (1.00 g, 2.76 mmol) sa 2-bromo-5-(propan-2-il)-1,3-tiazolom (626 mg, 3.04 mmol) dala je 570 mg (57% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0636] LCMS, metod 1, rt: 1.46 min, MS ES+ m/z = 362 (M+H)<+>.
Intermedijer 5BP: 3-[5-(Propan-2-il)-1,3-tiazol-2-il]-5-[(3S)-tetrahidrofuran-3-ilmetoksi]benzoeva kiselina
[0637] Analogno konverziji Intermedijera 4BD u Intermedijer 5BD, saponifikacija Intermedijera 4BP (570 mg, 94 % čistoća, 1.48 mmol) dala je 534 mg naslovnog jedinjenja koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0638] LCMS, metod 1, rt: 1.22 min, MS ES+ m/z = 348 (M+H)<+>.
Intermedijer 4BQ: Metil 3-(5-hloro-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3S)-tetrahidrofuran-3-ilmetoksi] benzoat
1 4
[0639] Analogno konverziji Intermedijera 94 u Intermedijer 4BD, reakcija Intermedijera 100 (100 mg, 276 µmol) sa 2,5-dihloro-1,3-tiazolom (51.0 mg, 331 µmol) dala je 77.8 mg (80% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0640] LCMS, metod 1, rt: 1.42 min, MS ES+ m/z = 354 (M+H)<+>.
[0641]<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.71 (d, 1 H) 1.98 - 2.11 (m, 1 H) 2.61 - 2.75 (m, 1 H) 3.57 (dd, 1 H) 3.67 (td, 1 H) 3.73 - 3.85 (m, 2 H) 3.89 (s, 3 H) 3.98 - 4.05 (m, 1 H) 4.06 - 4.16 (m, 1 H) 7.55 (dd, 1 H) 7.64 (dd, 1 H) 7.96 - 8.06 (m, 2 H).
Intermedijer 5BQ: 3-(5-Hloro-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3S)-tetrahidrofuran-3-ilmetoksi]benzoeva kiselina
[0642] Analogno konverziji Intermedijera 4BD u Intermedijer 5BD, saponifikacija Intermedijera 4BQ (347 mg, 981 µmol) dala je 329 mg (99% prinosa) naslovnog jedinjenja koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0643] LCMS, metod 1, rt: 1.18 min, MS ES+ m/z = 340 (M+H)<+>.
Intermedijer 6BC: (2S)-Tetrahidrofuran-2-ilmetil 4-metilbenzensulfonat
[0644] Analogno sintezi Intermedijera 6AZ, reakcija (2S)-tetrahidrofuran-2-ilmetanola (3.00 g, 29.4 mmol) sa 4-metilbenzensulfonil hloridom (6.16 g, 32.3 mmol) dala je 6.22 g (83% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0645] LCMS, metod 1, rt: 1.06 min, MS ES+ m/z = 257 (M+H)<+>.
1
Intermedijer 103: Metil 3-bromo-5-[(2S)-tetrahidrofuran-2-ilmetoksi]benzoat
[0646] Analogno sa reakcijom intermedijera 1 i 6AZ u Intermedijer 95, reakcija Intermedijera 1 (4.94 g, 21.4 mmol) sa Intermedijerom 6BC (6.58 g, 25.7 mmol) dala je 4.08 g (61% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0647] LCMS, metod 1, rt: 1.26 min, MS ES+ m/z = 315 (M+H)<+>.
Intermedijer 102: Metil 3-[(2S)-tetrahidrofuran-2-ilmetoksi]-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzoat
[0648] Analogno konverziji Intermedijera 95 u Intermedijer 94, reakcija Intermedijera 103 (4.08 g, 12.9 mmol) sa 4,4,4’,4’,5,5,5’,5’-oktametil-2,2’-bi-1,3,2-dioksaborolanom (8.22 g, 32.4 mmol) dala je 6.62 g (80% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0649] LCMS, metod 1, rt: 1.40 min, MS ES- m/z = 641 (M-H)-.
Intermedijer 4BR: Metil 3-(5-etil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(2S)-tetrahidrofuran-2-ilmetoksi] benzoat
[0650] Analogno konverziji Intermedijera 94 u Intermedijer 4BD, reakcija Intermedijera 102 (1.00 g, 2.76 mmol) sa 2-bromo-5-etil-1,3-tiazolom (583 mg, 3.04 mmol) dala je 480 mg (50% prinosa) naslovnog jedinjenja.
1
[0651] LCMS, metod 1, rt: 1.40 min, MS ES+ m/z = 348 (M+H)<+>.
Intermedijer 5BR: 3-(5-Etil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(2S)-tetrahidrofuran-2-ilmetoksi]benzoeva kiselina
[0652] Analogno konverziji Intermedijera 4BD u Intermedijer 5BD, saponifikacija Intermedijera 4BR (480 mg, 94 % čistoća, 1.30 mmol) dala je 552 mg naslovnog jedinjenja koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0653] LCMS, metod 1, rt: 1.19 min, MS ES+ m/z = 334 (M+H)<+>.
Intermedijer 4BS: Metil 3-(5-ciklobutil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(2S)-tetrahidrofuran-2-ilmetoksi] benzoat
[0654] Analogno konverziji Intermedijera 94 u Intermedijer 4BD, reakcija Intermedijera 102 (1.00 g, 2.76 mmol) sa 2-hloro-5-ciklobutil-1,3-tiazolom (527 mg, 3.04 mmol) dala je 590 mg (58% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0655] LCMS, metod 1, rt: 1.52 min, MS ES+ m/z = 374 (M+H)<+>.
Intermedijer 5BS: 3-(5-Ciklobutil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(2S)-tetrahidrofuran-2-ilmetoksi]benzoeva kiselina
1
[0656] Analogno konverziji Intermedijera 4BD u Intermedijer 5BD, saponifikacija Intermedijera 4BS (594 mg, 94 % čistoća, 1.50 mmol) dala je 634 mg naslovnog jedinjenja koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0657] LCMS, metod 1, rt: 1.31 min, MS ES+ m/z = 360 (M+H)<+>.
Intermedijer 4BT: Metil 3-[5-(propan-2-il)-1,3-tiazol-2-il]-5-[(2S)-tetrahidrofuran-2-ilmetoksi]benzoat
[0658] Analogno konverziji Intermedijera 94 u Intermedijer 4BD, reakcija Intermedijera 102 (1.00 g, 2.76 mmol) sa 2-bromo-5-(propan-2-il)-1,3-tiazolom (626 mg, 3.04 mmol) dala je 485 mg (49% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0659] LCMS, metod 1, rt: 1.47 min, MS ES+ m/z = 362 (M+H)<+>.
Intermedijer 5BT: 3-[5-(Propan-2-il)-1,3-tiazol-2-il]-5-[(2S)-tetrahidrofuran-2-ilmetoksi]benzoeva kiselina
[0660] Analogno konverziji Intermedijera 4BD u Intermedijer 5BD, saponifikacija Intermedijera 4BT (490 mg, 94 % čistoća, 1.27 mmol) dala je 444 mg (100% prinosa) naslovnog jedinjenja koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0661] LCMS, metod 1, rt: 1.25 min, MS ES+ m/z = 348 (M+H)<+>.
Intermedijer 104: 1-(2,2,2-Trifluoroetil)piperidin-4-ol
1
[0662] Smeša 1-(2,2,2-trifluoroetil)piperidin-4-ona (2.40 g, 13.2 mmol), NaBH4(1.50 g, 39.7 mmol) u MeOH je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 sati. Dodat je zasićeni vodeni rastvor NaHCO3i vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM (3 x). Kombinovani organski slojevi su redukovani do suva pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 2.14 g (88% prinosa) koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
Intermedijer 6BD: 1-(2,2,2-Trifluoroetil)piperidin-4-il 4-metilbenzensulfonat
[0663] Analogno sintezi Intermedijera 6AZ, reakcija Intermedijera 104 (2.14 g, 11.7 mmol) sa 4-metilbenzensulfonil hloridom (2.45 g, 12.9 mmol) dala je 3.70 g (94% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0664]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.59 (m, 2 H) 1.65 - 1.79 (m, 2 H) 2.42 (s, 3 H) 2.70 (m, 2 H) 3.14 (q, J=10.31 Hz, 2 H) 4.52 (dt, 1 H) 7.47 (d, 2 H) 7.75 - 7.86 (m, 2 H).
[0665]
Intermedijer 4BU: Metil 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-{[1-(2,2,2-trifluoroetil)piperidin-4-il]oksi}benzoat
[0666] Analogno sa reakcijom intermedijera 3A sa 6AY u Intermedijer 4AZ, reakcija Intermedijera 3 (1.89 g, 7.59 mmol) sa Intermedijerom 6BD (3.7 g, 90% čistoća, 9.87 mmol) dala je 2.0 g (64% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0667]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.69 (d, 2 H) 1.93 (d, 2 H) 2.58 - 2.69 (m, 2 H) 2.78 - 2.92 (m, 2 H) 3.13 - 3.27 (m, 2 H) 3.89 (s, 3 H) 4.55 - 4.69 (m, 1 H) 7.51 (dd, 1 H) 7.61 - 7.69 (m, 2 H) 7.97 (t, 1 H).
1
Intermedijer 5BU: 3-(5-Metil-1,3-tiazol-2-il)-5-{[1-(2,2,2-trifluoroetil)piperidin-4-il]oksi}benzoeva kiselina
[0668] Analogno konverziji Intermedijera 4BD u Intermedijer 5BD, saponifikacija Intermedijera 4BU (2.0 g, 4.83 mmol) dala je 1.9 g (98% prinosa) naslovnog jedinjenja koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0669]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.58 - 1.77 (m, 2 H) 1.95 (dd, 2 H) 2.57 - 2.69 (m, 2 H) 2.76 - 2.94 (m, 2 H) 3.20 (q, 2 H) 4.46 - 4.67 (m, 1 H) 7.50 (dd, 1 H) 7.53 - 7.69 (m, 2 H) 7.95 (t, 1 H).
Intermedijer 105: 1-(2,2-Difluoroetil)piperidin-4-ol
[0670] Analogno sintezi Intermedijera 104, redukcija 1-(2,2-difluoroetil)piperidin-4-ona (2.70 g, 16.5 mmol) dala je 2.20 g (80% prinosa) naslovnog jedinjenja koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
Intermedijer 6BE: 1-(2,2-Difluoroetil)piperidin-4-il 4-metilbenzensulfonat
[0671] Analogno sintezi Intermedijera 6AZ, reakcija Intermedijera 105 (2.20 g, 13.3 mmol) sa 4-metilbenzensulfonil hloridom (2.79 g, 14.7 mmol) dala je 4.80 g naslovnog jedinjenja.
[0672] LCMS, metod 1, rt: 0.86 min, MS ES+ m/z = 320 (M+H)<+>.
Intermedijer 4BV: Metil 3-{[1-(2,2-difluoroetil)piperidin-4-il]oksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoat
1
[0673] Analogno sa reakcijom intermedijera 3A sa 6AY u Intermedijer 4AZ, reakcija Intermedijera 3 (2.25 g, 9.02 mmol) sa Intermedijerom 6BE (4.80 g, 90% čistoća, 13.5 mmol) dala je 2.1 g (59% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0674] LCMS, metod 1, rt: 0.94 min, MS ES+ m/z = 397 (M+H)<+>.
Intermedijer 5BV: 3-{[1-(2,2-Difluoroetil)piperidin-4-il]oksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina
[0675] Analogno konverziji Intermedijera 4BD u Intermedijer 5BD, saponifikacija Intermedijera 4BV (2.10 g, 5.30 mmol) dala je 600 mg (30% prinosa) naslovnog jedinjenja koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0676] LCMS, metod 1, rt: 0.76 i 0.83 min, MS ES+ m/z = 383 (M+H)<+>.
Intermedijer 6BF: (3-Metiloksetan-3-il)metil 4-metilbenzensulfonat
[0677] Analogno sintezi Intermedijera 6AZ, reakcija (3-metiloksetan-3-il)metanola (630 mg, 6.17 mmol) sa 4-metilbenzensulfonil hloridom (1.29 g, 6.79 mmol) dala je 1.20 g (76% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0678]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 1.13 - 1.23 (m, 3 H) 2.43 (s, 3 H) 4.11 (s, 2 H) 4.15 - 4.20 (m, 2 H) 4.22 - 4.28 (m, 2 H) 7.50 (d, 2 H) 7.77 - 7.86 (m, 2 H).
1 1
Intermedijer 4BW: Metil 3-[(3-metiloksetan-3-il)metoksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoat
[0679] Analogno sa reakcijom intermedijera 3A sa 6AY u Intermedijer 4AZ, reakcija Intermedijera 3 (200 mg, 802 µmol) sa Intermedijerom 6BF (308 mg, 1.20 mmol) dala je 80.0 mg (30% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0680] LCMS, metod 1, rt: 1.24 min, MS ES+ m/z = 334 (M+H)<+>.
Intermedijer 5BW: 3-[(3-Metiloksetan-3-il)metoksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina
[0681] Analogno konverziji Intermedijera 4BD u Intermedijer 5BD, saponifikacija Intermedijera 4BW (80.0 mg, 240 µmol) dala je 75.0 mg (98% prinosa) naslovnog jedinjenja koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0682] LCMS, metod 1, rt: 1.03 min, MS ES+ m/z = 320 (M+H)<+>.
Intermedijer 6BG: (2-Metiltetrahidrofuran-2-il)metil 4-metilbenzensulfonat, smeša dva enantiomera
[0683] Analogno sintezi Intermedijera 6AZ, reakcija racemičnog (2-metiltetrahidrofuran-2-il)metanola (944 mg, 8.13 mmol) sa 4-metilbenzensulfonil hloridom (1.70 g, 8.94 mmol) dala je 1.68 g (76% prinosa) naslovnog jedinjenja.
1 2
[0684]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 0.99 - 1.12 (s, 3 H) 1.47 - 1.65 (m, 1 H) 1.66 - 1.89 (m, 3 H) 2.37 - 2.47 (s, 3 H) 3.49 - 3.63 (m, 1 H) 3.63 - 3.74 (m, 1 H) 3.78 - 3.92 (m, 2 H) 7.49 (d, 2 H) 7.72 - 7.96 (d, 2 H).
Intermedijer 5BX: 3-[(2-Metiltetrahidrofuran-2-il)metoksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina, smeša dva enantiomera
[0685] Smeša Intermedijera 3 (400 mg, 1.60 mmol), Intermedijer 6BG (650 mg, 2.40 mmol) i Cs2CO3(783 mg, 2.40 mmol) u DMF (12 mL) je mešana na 90 °C tokom 3 dana. Smeša je filtrirana i filtrat je uparen do suva pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 2.34 g naslovnog jedinjenja koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0686] LCMS, metod 1, rt: 1.18 min, MS ES+ m/z = 334 (M+H)<+>.
Intermedijer 6BH: (3-Metiltetrahidrofuran-3-il]metil 4-metilbenzensulfonat, smeša dva enantiomera
[0687] Analogno sintezi Intermedijera 6AZ, reakcija racemičnog (3-metiltetrahidrofuran-3-il)metanola (1.00 g, 8.61 mmol) sa 4-metilbenzensulfonil hloridom (1.81 g, 9.47 mmol) dala je 2.00 g (82% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0688]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 0.93 - 1.05 (m, 3 H) 1.54 (ddd, 1 H) 1.69 (ddd, 1 H) 2.37 - 2.47 (m, 3 H) 3.22 (d1 H) 3.45 (d, 1 H) 3.59 - 3.73 (m, 2 H) 3.81 - 3.92 (m, 2 H) 7.50 (d, 2 H) 7.80 (d, 2 H).
Intermedijer 4BY: Metil 3-[(3-metiltetrahidrofuran-3-il)metoksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoat, smeša dva enantiomera
1
[0689] Analogno sa reakcijom intermedijera 3A sa 6AY u Intermedijer 4AZ, reakcija Intermedijera 3 (1.11 g, 4.44 mmol) sa Intermedijerom 6BH (2.00 g, 90% čistoća, 6.66 mmol) dala je 1.10 g (75% čistoća, 53% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0690] LCMS, metod 1, rt: 1.37 min, MS ES+ m/z = 348 (M+H)<+>.
Intermedijer 5BY: 3-[(3-Metiltetrahidrofuran-3-il)metoksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina, smeša dva enantiomera
[0691] Analogno konverziji Intermedijera 4BD u Intermedijer 5BD, saponifikacija Intermedijera 4BY (1.10 g, 3.17 mmol) dala je 700 mg (63% prinosa) naslovnog jedinjenja koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0692]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.21 (s, 3 H) 1.67 (ddd, 1 H) 1.86 - 2.01 (m, 1 H) 3.39 (d, 1 H) 3.71 (d, 1 H) 3.75 - 3.88 (m, 2 H) 3.90 - 4.03 (m, 2 H) 7.53 (dd, 1 H) 7.56 -7.67 (m, 2 H) 7.98 (t, 1 H).
Intermedijer 4BI: 1-Metil-6-oksopiperidin-3-il 4-metilbenzensulfonat, smeša dva enantiomera
[0693] Analogno sintezi Intermedijera 6AZ, reakcija racemičnog 5-hidroksi-1-metilpiperidin-2-ona (800 mg, 6.19 mmol) sa 4-metilbenzensulfonil hloridom (1.33 g, 6.81 mmol) dala je 1.33 g (76% prinosa) naslovnog jedinjenja.
1 4
[0694]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.74 - 1.87 (m, 1 H) 1.87 - 2.01 (m, 1 H) 2.15 - 2.25 (m, 2 H) 2.43 (s, 3 H) 2.71 (s, 3 H) 3.19 - 3.28 (m, 1 H) 3.53 (dd, 1 H) 4.88 - 5.02 (m, 1 H) 7.49 (d, 2 H) 7.79 - 7.91 (m, 2 H).
Intermedijer 4BZ: Metil 3-[(1-metil-6-oksopiperidin-3-il)oksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoat, smeša dva enantiomera
[0695] Analogno sa reakcijom intermedijera 3A sa 6AY u Intermedijer 4AZ, reakcija Intermedijera 3 (702 mg, 2.82 mmol) sa Intermedijerom 4BI (1.33 g, 90% čistoća, 4.22 mmol) dala je 350 mg (34% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0696]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 2.06 (br. s., 2 H) 2.20 - 2.30 (m, 1 H) 2.31 -2.42 (m, 1 H) 2.81 (s, 3 H) 3.41 - 3.46 (m, 1 H) 3.65 (m, 1 H) 3.89 (s, 3 H) 4.99 - 5.13 (m, 1 H) 7.57 (dd, 1 H) 7.63 - 7.74 (m, 2 H) 8.02 (t, 1 H).
Intermedijer 5BZ: 3-[(1-Metil-6-oksopiperidin-3-il)oksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina, smeša dva enantiomera
[0697] Analogno konverziji Intermedijera 4BD u Intermedijer 5BD, saponifikacija Intermedijera 4BZ (350 mg, 971 µmol) dala je 330 mg (98% prinosa) naslovnog jedinjenja koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0698]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 2.01 - 2.10 (m, 2 H) 2.21 - 2.31 (m, 1 H) 2.31 - 2.42 (m, 1 H) 2.79 - 2.84 (m, 3 H) 3.39 - 3.45 (m, 2 H) 3.66 (dd, 1 H) 5.05 (m, 1 H) 7.55 (dd, 1 H) 7.62 - 7.71 (m, 2 H) 8.00 (t, 1 H).
1
Intermedijer 4CA: Metil 3-[(2-hidroksiciklopentil)oksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoat, smeša dva trans stereoizomera
[0699] Smeša Intermedijera 3 (360 mg, 1.44 mmol), 6-oksabiciklo[3.1.0]heksana (182 mg, 2.17 mmol), KOtBu (16.2 mg, 144 µmol) u DMF (11 mL) je mešana na 130°C tokom 6 sati. ovoj smeši je dodana voda i DCM, i faze su odvojene. Organski sloj je ekstrahovan sa DCM (3 x). Kombinovani organski slojevi su upareni do suva i ostatak je prečišćen sa hromatografijom na koloni da bi se dobilo 800 mg naslovnog jedinjenja koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0700] LCMS, metod 1, rt: 1.21 min, MS ES+ m/z = 334 (M+H)<+>.
Intermedijer 5CA: 3-[(2-Hidroksiciklopentil)oksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina, smeša dva trans stereoizomera
[0701] Analogno konverziji Intermedijera 4BD u Intermedijer 5BD, saponifikacija Intermedijera 4CA (500 mg, 1.50 mmol) dala je 380 mg (79% prinosa) naslovnog jedinjenja koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
Intermedijer 5CB: 3-[(3-Hidroksibutan-2-il)oksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina, smeša dva trans stereoizomera
1
[0702] Intermedijer 3 (600 mg, 2.4 mmol) i cis-2,3-epoksibutan (840 µl, 9.6 mmol) u THF (18.0 mL) su tretirani sa NaOH (14.4 ml, 1.0 M, 14.4 mmol) i zagrevani pod refluksom tokom 72 sata. pH vrednost je podešena na pH: 5, reakciona smeša je ekstrahovana sa etil acetatom, kombinovani organski slojevi osušeni sa Na2SO4, filtrirani i upareni do suva pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 1.30 g naslovnog jedinjenja koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0703] LCMS, metod 1, rt: 0.97 min, MS ES+ m/z = 308 (M+H)<+>.
Intermedijer 4CC: Metil 3-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoat
[0704] Smeša Intermedijera 3 (221 mg, 887 µmol), 2,2-dimetiloksirana (320 mg, 4.43 mmol) i K2CO3(245 mg, 1.77 mmol) u DMSO (17 mL) je mešana tokom 3 sata na 130 °C. Smeša je uparena do suva pod sniženim pritiskom i prečišćena sa hromatografijom na koloni (silika gel) da se dobije 230 mg (81% prinosa) naslovnog jedinjenja.
Intermedijer 5CC: 3-(2-Hidroksi-2-metilpropoksi)-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina
Analogno konverziji Intermedijera 4BD u Intermedijer 5BD, saponifikacija Intermedijera 4CC (230 mg, 716 µmol) dala je 180 mg (82% prinosa) naslovnog jedinjenja koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
Intermedijer 106: Tert-butil 9-[3-cijano-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)fenoksi]-3-oksa-7-azabiciklo[3.3.1]nonan-7-karboksilat, smeša dva stereoizomera (sin/anti)
1
[0705] U rastvor tert-butil 9-hidroksi-3-oksa-7-azabiciklo[3.3.1]nonan-7-karboksilata (smeša dva stereoizomera (sin/anti), 900 mg, 3.70 mmol) u DMF (12 mL) dodat je NaH (148 mg, 60% čistoća, 3.70 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 sata. Dodat je Intermedijer 26 (621 mg, 2.85 mmol) i dobijena smeša je mešana tokom 17 sati na sobnoj temperaturi. Oprezno je dodavana voda, smeša je mešana tokom 30 minuta i ekstrahovana sa EE. Kombinovani organski slojevi su isprani sa vodom i zasićenim vodenim rastvorom NaCl, osušeni sa Na2SO4, filtrirani i upareni do suva pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen sa hromatografijom na koloni da bi se dobilo 665 mg (53% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0706] LCMS, metod 1, rt: 1.40 min, MS ES+ m/z = 442 (M+H)<+>.
Intermedijer 107: 3-{[7-(Tert-butoksikarbonil)-3-oksa-7-azabiciklo[3.3.1]non-9-il]oksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina, smeša dva stereoizomera (sin/anti)
[0707] U rastvor Intermedijera 106 (670 mg, 1.52 mmol) u DMSO (5 mL) dodat je natrijum hidroksid (7.6 ml, 2.0 M, 15 mmol) i smeša je mešana na 110 °C tokom 3 sata. Smeša je zakišeljena sa 2 M vodenog rastvora HCl- i pH vrednost podešena na pH: 5. rastvor je ekstrahovan sa EE, kombinovani organski slojevi osušeni sa Na2SO4, filtrirani i upareni do suva pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 808 mg naslovnog jedinjenja koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja. LCMS, metod 1, rt: 1.23 min, MS ES+ m/z = 461 (M+H)<+>.
Intermedijer 108: Tert-butil 9-[3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-({(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}karbamoil)fenoksi]-3-oksa-7-azabiciklo[3.3.1]nonan-7-karboksilat, smeša dva stereoizomera (sin/anti)
1
[0708] Smeša Intermedijera 107 (1.61 g, 3.50 mmol), Intermedijera VI (1:1) (1.11 g, 4.89 mmol), HATU (3.19 g, 8.39 mmol) i DIPEA (3.0 ml, 17 mmol) u DMF (160 mL) je mešan na temperaturi okoline tokom 12 sati. Reakciona smeša je uparena do suva pod sniženim pritiskom i ostatak je prečišćen sa hromatografijom na koloni (silika gel) da se dobije 1.35 g (58% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0709] LCMS, metod 1, rt: 1.38 min, MS ES+ m/z = 634 (M+H)<+>.
Intermedijer 109:3-(5-Metil-1,3-tiazol-2-il)-5-(3-oksa-7-azabiciklo[3.3.1]non-9-iloksi)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid, smeša dva stereoizomera (sin/anti)
[0710] Smeša Intermedijera 108 (1.32 g, 2.08 mmol) i TFA (3.2 ml, 42 mmol) u DCM (110 mL) je mešana na sobnoj temperaturi tokom 17 sati. Smeša je uparena do suva pod sniženim pritiskom i prečišćena sa hromatografijom na koloni da bi se dobilo (818 mg, 73% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0711] LCMS, metod 1, rt: 0.90 min, MS ES+ m/z = 534 (M+H)<+>.
[0712]<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.62 (d, 3 H) 2.11 - 2.19 (m, 1 H) 2.20 - 2.30 (m, 1 H) 3.38 - 3.49 (m, 2 H) 3.54 - 3.67 (m, 1 H) 3.83 - 3.94 (m, 2 H) 4.05 - 4.20 (m, 2 H) 4.96 - 5.13 (m, 1 H) 5.18 - 5.37 (m, 1 H) 7.66 (m, 3 H) 7.98 (s, 1 H) 9.12 (d, 2 H) 9.17 - 9.28 (m, 1 H).
1
Intermedijer 6CD: tert-butil (2S)-2-({[(4-metilfenil)sulfonil]oksi}metil) morfolin-4-karboksilat
[0713] U tert-butil (2S)-2-(hidroksimetil)morfolin-4-karboksilat (5 g, 23 mmol), TEA (4.8 mL, 34.5 mmol) i trimetilamin hidrohlorid (210 mg, 2.2 mmol) u DCM (60 mL) dodat je 4-metilbenzensulfonil hlorid (6.6 g, 34.5 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je tretirana sa N,N-dimetiletan-1,2-diaminom (1.5 mL, 13.8 mmol) da bi se utrošio nereagovani 4-metilbenzensulfonil hlorid. Reakciona smeša je isprana sa 1 M HCl i vodom. Organska frakcija je osušena (natrijum sulfat), filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 10.1 g (99 % prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu žutog ulja, koje postaje kruto prilikom stajanja.
[0714]<1>H NMR (250 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 1.38 (s, 9H), 2.43 (s, 3H), 2.55 - 2.71 (m, 1H), 2.71 - 2.89 (m, 1H), 3.24 - 3.41 (m, 1H), 3.52 (m, 1H), 3.59 - 3.84 (m, 3H), 3.92 - 4.14 (m, 2H), 7.49 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.79 (d, J = 8.3 Hz, 2H).
Intermedijer 110: (2R)-2-[(Benziloksi)metil]morfolin
[0715] U mešanu smešu (2R)-2-[(benziloksi)metil]oksirana (27.7 g, 0.17 mol) i NaOH (54.0 g, 1.3 mol) u vodi (130 mL) i MeOH (50 mL) dodat je u obrocima 2-aminoetil hidrogen sulfat (100 g, 0.7 mol). Po završenom dodavanju, reakciona smeša je mešana na 40 °C tokom 2 h. Hlađenjem, smeša je tretirana sa dodatnim delom NaOH (40.5 g, 1.0 mol), praćeno sa toluena (200 mL) i mešana na 65 °C preko noći. Smeša je ohlađena, razblažena toluenom i vodom. Sloj toluena je odvojen, a vodeni sloj ekstrahovan sa DCM (2 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su koncentrovani dajući naslovljeno jedinjenje, koje je korišćeno u sledećem koraku bez prečišćavanja.
1
Intermedijer 111: Tert-butil (2R)-2-[(benziloksi)metil]morfolin-4-karboksilat
[0716] Rastvor Intermedijera 110 u acetonu (400 mL) i vodi (120 mL) je ohlađen na 0 °C i dodat je kalijum karbonat (70 g, 0.5 mol) praćeno sa di-tert-butil dikarbonatom (44 g, 0.2 mol). Reakciona smeša je ostavljena da se zagreje na sobnu temperaturu i mešana je 18 h. Aceton je uklonjen pod sniženim pritiskom i vodeni rastvor je ekstrahovan dva puta sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su osušeni (MgSO4), filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (eluiranje sa 0 -25 % EtOAc u heptanu na prethodno upakovanoj koloni od 340 g silikagela) da se dobije 19.8 g (38% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bledo žutog ulja.
[0717]<1>H NMR (250 MHz, hloroform-d): δ [ppm] 7.39 - 7.27 (m, 5H), 4.56 (s, 2H), 4.03 -3.73 (m, 3H), 3.69 - 3.34 (m, 4H), 3.05 - 2.86 (m, 1H), 2.84 - 2.65 (m, 1H), 1.46 (s, 9H).
[0718] LC-MS (Metod A) Rt =1.27 min, MS (ESIpos): m/z = 252 (M-tBu)<+>.
Intermedijer 112: Tert-butil (2R)-2-(hidroksimetil)morfolin-4-karboksilat
[0719] Intermedijer 111 (19.8 g, 64.4 mmol) je mešan u atmosferi vodonika u prisustvu 10% Pd/C (1.98 g, 1.86 mmol) tokom 16 h. Katalizator je uklonjen vakuumskom filtracijom i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 13.98 g (100% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bezbojnog viskoznog ulja, koje je kristalisalo stajanjem.
[0720]<1>H NMR (250 MHz, hloroform-d): δ [ppm] 3.98 - 3.75 (m, 3H), 3.73 - 3.41 (m, 4H), 3.03 - 2.83 (m, 1H), 2.82 - 2.65 (m, 1H), 2.12 (t, J = 5.9 Hz, 1H), 1.45 (s, 9H).
Intermedijer 6CE: Tert-butil (2R)-2-({[(4-metilfenil)sulfonil]oksi}metil) morfolin-4-karboksilat
1 1
[0721] Intermedijer 112 (5.96 g, 27.4 mmol), trietilamin (5.74 mL, 41.1 mmol) i trimetilamin hidrohlorid (262mg, 2.74 mmol) su mešani u dihlorometanu (62 mL) zatim je dodat 4-toluensulfonil hlorid (7.85 g, 41.1 mmol). Reakcija je mešana na temperaturi okoline tokom 2 h, a zatim je tretirana sa N,N-dimetiletan-1,2-diaminom (1.81 mL, 16.5 mmol) da bi se potrošio nereagovani 4-toluensulfonil hlorid. Reakciona smeša je isprana sa 1 M HCl (2 x 100 mL) i vodom (50 mL). Organska frakcija je osušena (natrijum sulfat), filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom da se dobije naslovno jedinjenje (11.4g, 100% prinosa) u vidu žutog ulja.
[0722]<1>H NMR (500 MHz, hloroform-d): δ [ppm] 7.80 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.35 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 4.02 (qd, J = 10.6, 5.0 Hz, 2H), 3.94 - 3.74 (m, 3H), 3.67 - 3.55 (m, 1H), 3.46 (td, J = 11.6, 2.8 Hz, 1H), 2.98 - 2.81 (m, 1H), 2.75 - 2.57 (m, 1H), 2.45 (s, 3H), 1.45 (s, 9H).
[0723] LC-MS (Metod A) Rt = 1.28 min, MS (ESIpos): m/z= 394 (M+Na)<+>.
Intermedijer 4CF: Tert-butil 2-{[3-(metoksikarbonil)-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)fenoksi]metil}morfolin-4-karboksilat
[0724] Intermedijer 3 (300 mg, 1.2 mmol), tert-butil 2-({[(4-metilfenil)sulfonil]oksi}metil)morfolin-4-karboksilat (424.2 mg, 1.14 mmol) i cezijum karbonat (439.4 mg, 1.32 mmol) su mešani u acetonitrilu (5 mL) na 100 °C u zatvorenoj epruveti tokom 6 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i filtrirana kroz Celite®, isprana sa EtOAc. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom i prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (eluiranje sa 5 - 70 % EtOAc u heptanu na 25 g prethodno
1 2
upakovane kolone KP-SiO2) da se dobije 331.1 mg (70% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bezbojne gume.
[0725]<1>H NMR (250 MHz, hloroform-d): δ [ppm] 8.13 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.72 - 7.68 (m, 1H), 7.61 (dd, J = 2.5, 1.4 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 4.18 - 4.05 (m, 2H), 3.93 (s, 5H), 3.88 - 3.76 (m, 2H), 3.67 - 3.55 (m, 1H), 3.07 - 2.80 (m, 2H), 2.52 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 1.48 (s, 9H).
Intermedijer 4CE: Tert-butil (2R)-2-{[3-(metoksikarbonil)-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)fenoksi]metil}morfolin-4-karboksilat
[0726] Intermedijer 3 (23.17g, 70.6 mmol), Intermedijer 6CE (28.9 g, 77.7 mmol) i cezijum karbonat (34.52 g, 105.9 mmol) su kombinovani u acetonitrilu (300 mL) i mešani na 100 °C pod azotom tokom 2.5 h. Ohlađena reakciona smeša je filtrirana kroz Celite®, isprana sa EtOAc. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom i prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (eluiranje sa 0 - 50 % EtOAc u heptanu na 340 g prethodno upakovane kolone KP-SiO2) da se dobije 27.22 g (69% prinosa) naslovnog jedinjenja kao viskozno žuto ulje.
[0727]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.13 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.61 (dd, J = 2.4, 1.3 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 4.18 - 3.78 (m, 11H), 3.67 - 3.54 (m, 1H), 2.95 (m, 2H), 2.52 (d, J = 1.0 Hz, 3H), 1.48 (s, 9H).
[0728] LCMS (Metod A) Rt = 1.40 min, MS (ESIpos): m/z = 449 (M+H)<+>.
[0729] Analogno postupku opisanom za Intermedijer 4CE, sledeći Intermedijeri su pripremljeni koristeći odgovarajući polazne materijale fenol i tozilat.
1
14
Intermedijer 4CG: Tert-butil 4-{[3-(metoksikarbonil)-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)fenoksi]metil}piperidin-1-karboksilat
[0730] Intermedijer 3 (300 mg, 1.20 mmol),1-Boc-4-bromometilpiperidin (4.35 mg, 1.56 mmol) i cezijum karbonat (784 mg, 2.04 mmol) su kombinovani u MeCN (5 mL) i zagrevani na 100 °C tokom 6 h. Posle hlađenja na sobnu temperaturu reakciona smeša je razblažena sa EtOAc (5 mL), filtrirana i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (eluiranje sa 0 - 40 % EtOAc u heptanu na 25 g prethodno upakovane kolone KP-SiO2) da se dobije 272.2 mg (49% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bezbojne gume.
[0731]<1>H NMR (500 MHz, hloroform-d): δ [ppm] 8.08 (s, 1H), 7.69 (s, 1H), 7.58 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 4.24 - 4.09 (m, 2H), 3.94 (s, 3H), 3.92 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 2.84 - 2.71 (m, 2H), 2.53 (s, 3H), 2.03 - 1.95 (m, 1H), 1.84 (d, J = 11.5 Hz, 2H), 1.47 (s, 9H), 1.36 - 1.23 (m, 2H).
1
[0732] LC-MS (Metod A) Rt = 1.50 min, MS (ESIpos): m/z = 447 (M+H)<+>.
Intermedijer 4CL: Tert-butil 3-fluoro-3-{[3-(metoksikarbonil)-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)fenoksi]metil}azetidin-1-karboksilat
[0733] U mešani 0 °C rastvor Intermedijera 3 (300 mg, 1.201 mmol), tert-butil 3-fluoro-3-(hidroksimetil)azetidin-1-karboksilata (321 mg, 1.56 mmol) i trifenilfosfina (1.26 g, 4.81 mmol) u anhidrovanom THF (3 mL) u kapima je dodat DIAD (472 µL, 2.41 mmol). Posle 10 minuta reakciona smeša je zagrejana do sobne temperature i mešana tokom 16 h. Dodato je još DIAD (200 µL, 1.02 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 24 h. Dodato je još DIAD (200 µL, 1.02 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 70 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i prečišćena sa Biotage Isolera™ hromatografijom (eluiranje sa 0 - 100% gradijent EtOAc u heptanu na prethodno upakovanoj koloni KP-SiO2) da se dobije 1.43 g (41% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bezbojnog ulja. Materijal je korišćen bez daljeg prečišćavanja.
[0734] LC-MS (Metod A) Rt =1.37 min, MS (ESIpos): m/z = 437 (M+H)<+>.
Intermedijer 6CV: Tert-butil 3-({[(4-metilfenil)sulfonil]oksi}metil)azetidin-1-karboksilat
1
[0735] Smeša tert-butil 3-(hidroksimetil)azetidin-1-karboksilata (600 mg, 3.20 mmol), 4-metilbenzensulfonil hlorida (672 mg, 3.52 mmol), TEA (670 µL, 4.8 mmol), trimetilamonijum hidrohlorid a(30.6 mg, 320 µmol) u DCM (3.2 mL) je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije. Reakciona smeša je uparena do suva. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent heksan / EtOAc) da se dobije 800 mg (73% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0736]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 1.34 (s, 9H), 2.43 (s, 3H), 2.73 - 2.87 (m, 1H), 3.46 (br. s., 2H), 3.74 - 3.91 (m, 2H), 4.16 (d, 2H), 7.44 - 7.57 (m, 2H), 7.74 - 7.85 (m, 2H).
Intermedijer 4CV: Tert-butil 3-{[3-(metoksikarbonil)-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)fenoksi]metil}azetidin-1-karboksilat
[0737] Smeša Intermedijera 3 (389 mg, 1.56 mmol), Intermedijera 6CV (389 mg, 1.56 mmol) i Cs2CO3u DMF (11 mL) je mešana na 90 °C do potpune konverzije. DMF je uparen pod sniženim pritiskom, dodati su voda i DCM, i vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM. Kombinovane organske materije su isparene do suva. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent heksan / EtOAc) da se dobije 300 mg (46% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0738]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 1.38 - 1.44 (m, 9H), 2.90 - 3.05 (m, 1H), 3.66 - 3.80 (m, 2H), 3.89 (s, 3H), 3.93 - 4.04 (m, 2H), 4.26 (d, 2H), 7.52 (dd, 1H), 7.60 - 7.69 (m, 2H), 8.00 (t, 1H).
Intermedijer 149: N-[(2R)-1-(Benziloksi)-3-hidroksipropan-2-il]-2-hloroacetamid
[0739] (2R)-2-Amino-3-(benziloksi)propan-1-ol (5.00 g, 27.6 mmol) je rastvoren u acetonitrilu (87 mL) i MeOH (16 mL) i TEA (4.6 mL, 33 mmol) dodat je. Smeša je ohlađena na -10°C i
1
dodat je kap po kap rastvor hloroacetil hlorida (2.4 mL, 30 mmol) u acetonitrilu. Smeša je mešana tokom 20 sati na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uparen pod sniženim pritiskom i ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (gradijent EtOAc/ heksan) da se dobije 5.46 g (77% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0740]<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d): δ [ppm] 2.57 (br. s., 1 H) 3.51 - 3.71 (m, 3 H) 3.81 (dd, 1 H) 3.95 - 4.10 (m, 3 H) 4.42 - 4.52 (m, 2 H) 7.16 (d, 1 H) 7.21 - 7.35 (m, 5 H).
Intermedijer 150: (5S)-5-[(Benziloksi)metil]morfolin-3-on
[0741] U rastvor kalijum tert-butoksida (980 mg, 8.73 mmol) u 2-metilbutan-2-olu dodat je kap po kap rastvor Intermedijera 149 (2.25 g, 8.73 mmol) u 2-metilbutan-2-olu tokom 2 sata. Posle 12 sati, dodat je dodatan 1 ekvivalent kalijum tert-butoksida i reakciona smeša je mešana tokom 12 h. Rastvarač je destilovan pod sniženim pritiskom i ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (EtOAc/ EtOH gradijent) da se dobije 1.50 g (78% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0742]<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d): δ [ppm] 3.39 - 3.48 (m, 1 H) 3.56 (dd, 1 H) 3.63 (dd, 1 H) 3.70 - 3.81 (m, 1 H) 3.87 (dd, 1 H) 4.16 (d, 2 H) 4.55 (d, 2 H) 6.33 (br. s., 1 H) 7.29 - 7.42 (m, 5 H).
Intermedijer 151: (5S)-5-[(Benziloksi)metil]-4-metilmorfolin-3-on
[0743] Rastvor Intermedijera 150 (619 mg, 2.8 mmol) u THF (25 mL) dodat je kap po kap u suspenziju NaH (134 mg, 60%, 3.36 mmol) u THF (70 mL) na 0°C. Smeša je mešana tokom 30 minuta na sobnoj temperaturi zatim ohlađena na 0°C i dodat je Mel (870 µL, 14 mmol). Posle 15 minuta reakciona smeša je zagrejana do sobne temperature i mešana tokom 15 sati. Zasićeni vodeni rastvor NH4Cl (50 mL) dodat je na 0°C i rastvarač je uparen pod sniženim
1
pritiskom. Ostatak je razblažen sa vodom, ekstrahovan sa EtOAc i organski sloj je osušen iznad MgSO4. Rastvarač je destilovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 650 mg (99% prinosa) naslovnog jedinjenja, koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0744] LCMS, metod 1, rt: 0.90 min, MS ES+ m/z = 236 (M+H)<+>.
Intermedijer 152: (5S)-5-(Hidroksimetil)-4-metilmorfolin-3-on
[0745] Intermedijer 151 (617 mg, 2.62 mmol) je rastvoren u EtOH, dodat je Pd(OH)2(92 mg, 20 % na ugljeniku, 131 µmol) i mešan tokom 10 h u atmosferi vodonika. Dodato je još Pd(OH)2(0,025 eq.) i smeša je mešana tokom 3 h u atmosferi vodonika. Reakciona smeša je filtrirana kroz Celite® i isprana sa EtOH. Organska faza je koncentrovana do suva pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 398 mg (100% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0746]<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d): δ [ppm] 1.96 (t, 1 H) 3.06 (s, 3 H) 3.29 (td, 1 H) 3.79 - 3.96 (m, 3 H) 4.08 - 4.28 (m, 3H).
Intermedijer 6CX: [(3R)-4-Metil-5-oksomorfolin-3-il]metil 4-metilbenzensulfonat
[0747] Smeša Intermedijera 152 (322 mg, 2.22 mmol), TEA (460 µL, 3.3 mmol) i trimetilamin hidrohlorida u DCM je ohlađena na 0°C i mešana tokom 10 minuta. Dodat je u 3 porcije 4-metilbenzensulfonil hlorid (465 mg, 2.44 mmol) i rastvor je mešan na sobnoj temperaturi do potpune konverzije. Reakciona smeša je tretirana sa N,N-dimetiletilendiaminom (290 µL, 2.7 mmol) da bi se utrošio nereagovani 4-metilbenzensulfonil hlorid. Voda je dodata u reakcionu smešu i vodena faza je ekstrahovana sa DCM. Organska faza je koncentrovana do suva da bi se dobilo 505 mg (68% prinosa) naslovnog jedinjenja.
1
[0748]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 2.43 (s, 3 H) 2.81 (s, 3 H) 3.54 - 3.62 (m, 1 H) 3.75 (d, 2 H) 3.97 (s, 2 H) 4.15 - 4.25 (m, 2 H) 7.50 (d, 2 H) 7.82 (d, 2 H).
Intermedijer 4CX: Metil 3-{[(3R)-4-metil-5-oksomorfolin-3-il]metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoat
[0749] Smeša Intermedijera 3 (280 mg, 1.12 mmol), Intermedijera 6CX (505 mg, 1.69 mmol) i Cs2CO3(550 mg, 1.69 mmol) je mešana na 90 °C do potpune konverzije. DMF je uparen pod sniženim pritiskom, dodata je voda i DCM, a vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM (tri puta). Kombinovane organske materije su isparene do suva i sirovi materijal je prečišćen sa hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent heksan / EtOAc) da se dobije 530 mg naslovnog jedinjenja.
[0750] LCMS, metod 1, rt: 1.09 min, MS ES+ m/z = 377 (M+H)<+>.
Intermedijer 153: (5S)-5-(Hidroksimetil)morfolin-3-on
[0751] Intermedijer 150 (650 mg, 2.94 mmol) je rastvoren u MeOH (53 mL) i dodat je Pd(OH)2(103 mg, 20% na ugljeniku, 147 µmol) i mešan tokom 8 h u atmosferi vodonika. Smeša je filtrirana kroz Celite®, isprana sa EtOH i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 322 mg (74% prinosa) naslovnog jedinjenja, koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0752]<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d): δ [ppm] 2.88 (br. s., 1 H) 3.59 - 3.79 (m, 4 H) 3.82 - 3.97 (m, 1 H) 4.06 - 4.25 (m, 2 H) 7.18 (br. s., 1 H).
Intermedijer 6CY: [(3R)-5-Oksomorfolin-3-il]metil 4-metilbenzensulfonat
2
[0753] Smeša Intermedijera 153 (322 mg, 2.46 mmol), TEA (510 µL, 3.7 mmol) i trimetilamin hidrohlorida (23.5 mg, 246 µmol) u DCM (7.2 mL) je ohlađena na 0°C i mešana tokom 10 minuta. Dodat je u 3 porcije 4-metilbenzensulfonil hlorid (515 mg, 2.70 mmol) i rastvor je mešan na sobnoj temperaturi do potpune konverzije. Reakciona smeša je tretirana sa N,N-dimetiletilendiaminom (320 µL, 2.9 mmol) da bi se utrošio nereagovani 4-metilbenzensulfonil hlorid. Sirovoj smeši je dodata voda i sakupljena vodena faza je ekstrahovana sa DCM (tri puta). Kombinovani organski slojevi su koncentrovani do suva da bi se dobilo 526 mg (42% prinosa) naslovnog jedinjenja, koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0754] LCMS, metod 1, rt: 0.83 min, MS ES+ m/z = 286 (M+H)<+>.
Intermedijer 4CY: Metil 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-{[(3R)-5-oksomorfolin-3-il]metoksi}benzoat
[0755] Smeša Intermedijera 3 (306 mg, 1.23 mmol), Intermedijera 6CY (526 mg, 1.84 mmol) i Cs2CO3(601 mg, 1.84 mmol) u DMF (120 mL) je mešana na 90 °C do potpune konverzije. DMF je uparen pod sniženim pritiskom i ostatak je podeljen između vode i DCM. Vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM (tri puta) i kombinovani organski slojevi su upareni do suva. Prečišćavanje sa hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent EtOAc/ heksan) dalo je 834 mg naslovnog jedinjenja.
[0756] LCMS, metod 1, rt: 1.03 min, MS ES+ m/z = 363 (M+H)<+>.
Intermedijer 154: (2S)-3-[Benzil(metil)amino]propan-1,2-diol
2 1
[0757] Rastvor (2R)-oksiran-2-ilmetanola (4.71 g, 63.6 mmol) i N-metil-1-fenilmetanamina (7.9 mL, 61 mmol) u MeOH (350 mL) je zagrevan pod refluksom tokom 24 h, ohlađen na RT i uparen do suva pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 12.6 g naslovnog jedinjenja, koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0758] LCMS, metod 1, rt: 0.83 min, MS ES+ m/z = 196 (M+H)<+>.
Intermedijer 155: (2S)-3-(Metilamino)propan-1,2-diol
[0759] Smeša Intermedijera 154 (12.6 g, 64.5 mmol) i paladijuma na ugljeniku (4.12 g, 5%, 1.94 mmol) u MeOH (78 mL) se hidrogenuje na 5 bar tokom 18 h na 23°C. Smeša je filtrirana, isprana sa MeOH i filtrat je uparen do suva pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 6.07 g (76% prinosa) naslovnog jedinjenja, koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0760]<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d): δ [ppm] 2.45 (s, 3 H) 2.63 - 2.70 (m, 1 H) 2.71 - 2.77 (m, 1 H) 2.89 - 2.98 (m, 3 H) 3.54 - 3.62 (m, 1 H) 3.67 - 3.74 (m, 1 H) 3.79 (ddt, 1 H).
Intermedijer 156: (5S)-5-(Hidroksimetil)-3-metil-1,3-oksazolidin-2-on
[0761] U smešu Intermedijera 155 (3.25 g, 30.9 mmol) i dietil karbonata (22 mL, 190 mmol) dodat je kalijum tert-butoksid (173 mg, 1.55 mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 14h na 100°C i uparena do suva da bi se dobilo 1.44 g (31% prinosa) naslovnog jedinjenja, koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0762]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 2.72 (s, 3 H) 3.27 (dd, 1 H) 3.41 - 3.49 (m, 1 H) 3.53 (t, 2 H) 4.46 (ddd, 1 H) 5.09 (s, 1 H).
Intermedijer 6CZ: [(5S)-3-Metil-2-okso-1,3-oksazolidin-5-il]metil 4-metilbenzensulfonat
2 2
[0763] Smeša Intermedijera 156 (2.24 g, 17.1 mmol), TEA (3.6 mL, 26 mmol) i trimetilamin hidrohlorida (163 mg, 1.71 mmol) u DCM (50 mL) je mešana na 0°C tokom 10 minuta zatim je tretirana sa 4-metilbenzensulfonil hloridom u 3 porcije. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije. Reakciona smeša je tretirana sa N,N-dimetiletilendiaminom (2.2 mL, 20 mmol) da bi se utrošio nereagovani 4-metilbenzensulfonil hlorid. Dodata je voda, vodena faza je ekstrahovana sa DCM (tri puta) i kombinovani organski slojevi su koncentrovani do suva da bi se dobilo 4.67 g (91% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0764]<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d): δ [ppm] 2.47 (s, 3 H) 2.87 (s, 3 H) 3.44 (dd, 1 H) 3.65 (t, 1 H) 4.06 - 4.21 (m, 2 H) 4.61 - 4.73 (m, 1 H) 7.38 (d, 2 H) 7.76 - 7.86 (m, 2 H).
[0765] Analitička hiralna HPLC, metod G: vreme retencije: 5.04 min (78.4%) i 5.48 min (21.6%), ee-vrednost: 56.8%.
Intermedijer 4CZ: Metil 3-{[(5S)-3-metil-2-okso-1,3-oksazolidin-5-il]metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoat
[0766] Smeša Intermedijera 3 (582 mg, 2.34 mmol), Intermedijera 6CZ (1.00 g, 3.50 mmol) i Cs2CO3(1.14 g, 3.50 mmol) u DMF (17 mL) je mešana na 90 °C do potpune konverzije. DMF je uparen pod sniženim pritiskom i ostatak je prečišćen sa hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent EtOAc/ heksan) da se dobije 844 mg (94% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0767] LCMS, metod 1, rt: 1.07 min, MS ES+ m/z = 363 (M+H)<+>.
Intermedijer 157: (2R)-3-[Benzil(metil)amino]propan-1,2-diol
2
[0768] Rastvor (2S)-oksiran-2-ilmetanola (3.77 g, 50.9 mmol) i N-metil-1-fenilmetanamina (6.3 mL, 49 mmol) u MeOH (280 mL) je zagrevan pod refluksom tokom 24 h, ohlađen na RT i uparen do suva pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 9.72 g (98% prinosa) naslovnog jedinjenja, koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0769] LCMS, metod 1, rt: 0.86 min, MS ES+ m/z = 196 (M+H)<+>.
Intermedijer 158: (2R)-3-(Metilamino)propan-1,2-diol
[0770] Smeša Intermedijera 157 (9.72 g, 49.8 mmol) i paladijuma na ugljeniku ((3.18 g, 5%, 1.49 mmol) u MeOH (60 mL) se hidrogenuje na 5 bar tokom 18 h na 23°C. Smeša je filtrirana, isprana sa MeOH i filtrat je uparen do suva pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 5.35 g naslovnog jedinjenja, koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0771]<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d): δ [ppm] 2.43 - 2.47 (m, 3 H) 2.64 - 2.71 (m, 1 H) 2.72 - 2.79 (m, 1 H) 2.91 (br. s., 3 H) 3.57 - 3.63 (m, 1 H) 3.68 - 3.75 (m, 1 H) 3.76 - 3.83 (m, 1 H).
Intermedijer 159: (5R)-5-(Hidroksimetil)-3-metil-1,3-oksazolidin-2-on
[0772] U rastvor Intermedijera 158 (2.58 g, 24.5 mmol) u dietil karbonatu (18 mL, 150 mmol) dodat je kalijum tert-butoksid (138 mg, 1.23 mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 24h na 100°C i uparena do suva. Ostatak je prečišćen sa hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent EtOAc/ heksan) da se dobije 861 mg (27% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0773]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 2.72 (s, 3 H) 3.27 (dd, 1 H) 3.47 (dd, 1 H) 3.49 - 3.58 (m, 2 H) 4.40 - 4.51 (m, 1 H) 5.10 (t, 1 H).
Intermedijer 6DA: [(5R)-3-Metil-2-okso-1,3-oksazolidin-5-il]metil 4-metilbenzensulfonat
2 4
[0774] Smeša Intermedijera 159 (2.74 g, 20.9 mmol), TEA (4.4 mL, 31 mmol) i trimetilamin hidrohlorida (200 mg, 2.09 mmol) u DCM (61 mL) je ohlađena na 0°C i mešana tokom 10 minuta. Dodat je u 3 porcije 4-metilbenzensulfonil hlorid (4.38 g, 23.0 mmol) i rastvor je mešan na sobnoj temperaturi do potpune konverzije. Reakciona smeša je tretirana sa N,N-dimetiletilendiaminom (2.7 mL, 25 mmol) da bi se utrošio nereagovani 4-metilbenzensulfonil hlorid. Dodata je voda, vodena faza je ekstrahovana sa DCM (tri puta) i kombinovani organski slojevi su koncentrovani do suva da bi se dobilo 5.97 g (94% prinosa) naslovnog jedinjenja, koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0775]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 2.43 (s, 3 H) 2.66 - 2.73 (m, 3 H) 3.17 (dd, 1 H) 3.57 (t, 1 H) 4.09 - 4.17 (m, 1 H) 4.18 - 4.25 (m, 1 H) 4.69 (dt, 1 H) 7.47 - 7.55 (m, 2 H) 7.75 - 7.85 (m, 2 H).
[0776] Analitička hiralna HPLC, metod G: vreme retencije: 5.46 min (88.0%) i 5.05 min (12.0%), ee-vrednost: 76.0%.
Intermedijer 4DA: Metil 3-{[(5R)-3-metil-2-okso-1,3-oksazolidin-5-il]metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoat
[0777] Smeša Intermedijera 6DA (582 mg, 2.34 mmol), Intermedijer 3 (1.00 g, 3.50 mmol) i Cs2CO3(1.14 g, 3.50 mmol) u DMF (17 mL) je mešana na 90 °C do potpune konverzije. DMF je uparen pod sniženim pritiskom, dodati su voda i DCM i vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM (tri puta). Kombinovani organski slojevi su upareni do suva pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen sa hromatografijom na koloni (silika gel, EtOAc / heksan gradijent) da se dobije 609 mg (67% prinosa) naslovnog jedinjenja.
2
[0778]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ ppm 2.79 (s, 3 H) 3.33 (s, 2 H) 3.43 (dd, 1 H) 3.70 (t, 1 H) 3.89 (s, 3 H) 4.22 - 4.31 (m, 1 H) 4.32 - 4.40 (m, 1 H) 4.82 - 4.93 (m, 1 H) 7.53 (dd, 1 H) 7.66 (q, 2 H) 8.02 (t, 1 H).
Intermedijer 160: 2-Hloro-N-[(2R)-2,3-dihidroksipropil]-N-metilacetamid
[0779] U rastvor Intermedijera 158 (2.80 g, 26.6 mmol) u acetonitrilu (84 mL) i MeOH (16 mL) dodat je TEA (4.5 mL, 32 mmol) i smeša je ohlađena na -10° C. Rastvor hloroacetil hlorida (2.3 mL, 29 mmol) u acetonitrilu dodat je kap po kap i smeša mešana tokom 20 sati na sobnoj temperaturi. Reakcioni rastvarač je destilovan da bi se dobilo 4.53 g (94% prinosa) naslovnog jedinjenja, koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0780] LCMS, metod 1, rt: 0.45 min, MS ES+ m/z = 183 (M+H)<+>.
Intermedijer 161: (6R)-6-(Hidroksimetil)-4-metilmorfolin-3-on
[0781] U rastvor kalijum tert-butoksida (5.60 g, 49.9 mmol) u 2-metilbutan-2-olu dodat je kap po kap rastvor Intermedijera 160 (4.53 g, 24.9 mmol) u 2-metilbutan-2-olu tokom dva sata. Posle 4 sata konverzija je završena. Rastvarač je destilovan pod sniženim pritiskom i ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (EtOAc/ EtOH gradijent) da se dobije 4.63 g naslovnog jedinjenja.
[0782]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 2.85 (s, 3 H) 3.21 - 3.27 (m, 2 H) 3.37 - 3.54 (m, 2 H) 3.78 (dq, 1 H) 4.01 - 4.06 (m, 2 H) 4.91 (t, 1 H).
Intermedijer 6DB: [(2R)-4-Metil-5-oksomorfolin-2-il]metil 4-metilbenzensulfonat
2
[0783] Smeša Intermedijera 161 (4.63 g, 31.9 mmol), TEA (6.7 mL, 48 mmol) i trimetilamin hidrohlorida (305 mg, 3.19 mmol) u DCM (94 mL) je ohlađena na 0°C i mešana tokom 10 minuta. Posle toga dodat je u 3 porcije 4-metilbenzensulfonil hlorid (6.69 g, 35.1 mmol). Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi do potpune konverzije. Reakciona smeša je tretirana sa N,N-dimetiletilendiaminom (4.2 mL, 38 mmol) da bi se utrošio nereagovani 4-metilbenzensulfonil hlorid. Dodata je voda, vodena faza je ekstrahovana sa DCM (tri puta) i organski sloj je koncentrovan do suva da bi se dobilo 3.43 g (36% prinosa) naslovnog jedinjenja, koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0784] LCMS, metod 1, rt: 0.90 min, MS ES+ m/z = 300 (M+H)<+>.
Intermedijer 4DB: Metil 3-{[(2R)-4-metil-5-oksomorfolin-2-il]metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoat
[0785] Smeša Intermedijera 3 (1.90 g, 7.64 mmol), Intermedijera6DB (3.43 g, 11.5 mmol), i Cs2CO3 (3.73 g, 11.5 mmol) u DMF (56 mL) je mešana na 90 °C do potpune konverzije. DMF je uparen pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 2.76 g (96% prinosa) naslovnog jedinjenja, koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0786] LCMS, metod 1, rt: 1.06 min, MS ES+ m/z = 377 (M+H)<+>.
Intermedijer 162: 2-Hloro-N-[(2S)-2,3-dihidroksipropil]acetamid
2
[0787] (2S)-3-Aminopropan-1,2-diol (5.00 g, 54.9 mmol) je rastvoren u acetonitrilu (170 mL) i dodat je MeOH (32 mL) i TEA (9.2 mL, 66 mmol). Smeša je ohlađena na -10°C i rastvor hloroacetil hlorid (4.8 mL, 60 mmol) u acetonitrilu, dodat je kap po kap, a smeša je mešana tokom 21 sata na sobnoj temperaturi. Reakcioni rastvarač je destilovan pod sniženim pritiskom i preostali ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, EtOAc/ heksan/ MeOH gradijent) da se dobije 10.5 g naslovnog jedinjenja.
Intermedijer 163: (6S)-6-(Hidroksimetil)morfolin-3-on
[0788] Kalijum tert-butoksid (14.0 g, 125 mmol) je rastvoren u 2-metilbutan-2-olu. Rastvor Intermedijera 162 u 2-metilbutan-2-olu dodat je kap po kap tokom dva sata i reakciona smeša je mešana do potpune konverzije. Rastvarač je destilovan pod sniženim pritiskom i ostatak je prečišćen sa hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent EtOAc/ heksan) da se dobije 7.46 g (27% prinosa).
Intermedijer 6DC: [(2S)-5-Oksomorfolin-2-il]metil 4-metilbenzensulfonat
[0789] Smeša Intermedijera 163 (7.46 g, 56.9 mmol), TEA (12 mL, 85 mmol) i trimetilamin hidrohlorida (544 mg, 5.69 mmol) u DCM je ohlađena na 0°C i mešana tokom 10 minuta. Posle toga dodat je u 3 porcije 4-metilbenzensulfonil hlorid (11.9 g, 62.6 mmol). Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi do potpune konverzije. Reakciona smeša je tretirana sa N,N-dimetiletilendiaminom (7.5 mL, 68 mmol) da bi se utrošio nereagovani 4-metilbenzensulfonil hlorid. Dodata je voda, vodena faza je ekstrahovana sa DCM (tri puta) i organski sloj je koncentrovan do suva pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 5.23 g naslovnog jedinjenja, koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0790] LCMS, metod 1, rt: 0.86 min, MS ES+ m/z = 286 (M+H)<+>.
2
Intermedijer 4DC: Metil 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-{[(2S)-5-oksomorfolin-2-il]metoksi}benzoat
[0791] Smeša Intermedijera 3 (3.05 g, 12.2 mmol), Intermedijera 6DC (5.23 g, 18.3 mmol), i Cs2CO3(5.97 g, 18.3 mmol) u DMF (89 mL) je mešana na 90 °C do potpune konverzije. DMF je uparen i dodani su DCM i voda. Smeša je ekstrahovana sa DCM (tri puta), kombinovani organski slojevi su upareni do suva pod sniženim pritiskom i ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (EtOAc/ EtOH gradijent) da se dobije 2.14 g (48% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0792] LCMS, metod 1, rt: 1.00 min, MS ES+ m/z = 363 (M+H)<+>.
Intermedijer 164: 2-Hloro-N-[(2S)-2,3-dihidroksipropil]-N-metilacetamid
[0793] Intermedijer 155 je rastvoren u acetonitrilu (84 mL) i MeOH (16 mL) i dodat je TEA (4.5 mL, 32 mmol) i smeša je ohlađena na -10°C. Dodat je kap po kap rastvor hloroacetil hlorida (2.3 mL, 29 mmol) u acetonitrilu i smeša je mešana tokom 20 sati na sobnoj temperaturi. Rastvarač je destilovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 8.64 g naslovnog jedinjenja, koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
Intermedijer 165: (6S)-6-(Hidroksimetil)-4-metilmorfolin-3-on
2
[0794] Kalijum tert-butoksid (8.01 g, 71.4 mmol) je rastvoren u 2-metilbutan-2-olu. Rastvor Intermedijera 164 u 2-metilbutan-2-olu dodat je kap po kap tokom dva sata. Smeša je mešana preko noći i zatim je reakcioni rastvarač destilovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 3.63 g (53% prinosa) naslovnog jedinjenja, koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
Intermedijer 6DD: [(2S)-4-Metil-5-oksomorfolin-2-il]metil 4-metilbenzensulfonat
[0795] Smeša Intermedijera 165 (4.00 g, 27.6 mmol), TEA (5.8 mL, 41 mmol) i trimetilamin hidrohlorida (263 mg, 2.76 mmol) u DCM (81 mL) je ohlađena na 0°C i mešana tokom 10 minuta. Posle toga dodat je u 3 porcije 4-metilbenzensulfonil hlorid (5.78 g, 30.3 mmol). Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi do potpune konverzije. Reakciona smeša je tretirana sa N,N-dimetiletilendiaminom (3.6 mL, 33 mmol) da bi se utrošio nereagovani 4-metilbenzensulfonil hlorid. Dodata je voda, i vodena faza je ekstrahovana sa DCM (tri puta) i kombinovani organski slojevi su koncentrovani do suva. Ostatak je prečišćen sa hromatografijom na koloni (silika gel, EtOAc/ MeOH gradijent) da se dobije 2.55 g (31% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0796] LCMS, metod 1, rt: 0.90 min, MS ES+ m/z = 300 (M+H)<+>.
Intermedijer 4DD: Metil 3-{[(2S)-4-metil-5-oksomorfolin-2-il]metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoat
[0797] Smeša Intermedijera 3 (1.42 g, 5.68 mmol), Intermedijera 6DD (2.55 g, 8.52 mmol), i Cs2CO3(2.78 g, 8.52 mmol) u DMF (41 mL) je mešana na 90 °C do potpune konverzije. DMF je destilovan pod sniženim pritiskom i ostatak je prečišćen sa hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent EtOAc/ heksan) da se dobije 1.57 g (73% prinosa) naslovnog jedinjenja.
21
[0798] LCMS, metod 1, rt: 1.06 min, MS ES+ m/z = 377 (M+H)<+>.
Intermedijer 166: N-[(2S)-1-(Benziloksi)-3-hidroksipropan-2-il]-2-hloroacetamid
[0799] (2S)-2-Amino-3-(benziloksi)propan-1-ol (5.00 g, 27.6 mmol) je rastvoren u acetonitrilu (87 mL), dodati su MeOH (16 mL) i TEA (4.6 mL, 33 mmol). Smeša je ohlađena na -10°C i dodat je kap po kap rastvor hloroacetil hlorid (2.4 mL, 30 mmol) u acetonitrilu. Smeša je mešana tokom 20 sati na sobnoj temperaturi i reakcioni rastvarači su destilovani da bi se dobilo 10.91 g naslovnog jedinjenja, koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0800] LCMS, metod 1, rt: 0.83 min, MS ES+ m/z = 258 (M+H)<+>.
Intermedijer 167: (5R)-5-[(Benziloksi)metil]morfolin-3-on
[0801] Kalijum tert-butoksid (3.96 g, 35.3 mmol) je rastvoren u 2-metilbutan-2-olu. Rastvor Intermedijera 166 (5.68 g, 17.6 mmol) u 2-metilbutan-2-olu (160 mL ukupno) dodat je kap po kap tokom dva sata i smeša je mešana do potpune konverzije. Reakcioni rastvarač je destilovan pod sniženim pritiskom i ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (EtOAc/ EtOH gradijent) da se dobije 3.57 g (89% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0802]<1>H NMR (400 MHz, HLOROFORM-d): δ [ppm] 3.39 - 3.47 (m, 1 H) 3.56 (dd, 1 H) 3.63 (dd, 1 H) 3.71 - 3.81 (m, 1 H) 3.87 (dd, 1 H) 4.09 - 4.24 (m, 2 H) 4.49 - 4.60 (m, 2 H) 6.39 (br. s., 1 H) 7.29 - 7.43 (m, 5 H).
Intermedijer 168: (5R)-5-[(Benziloksi)metil]-4-metilmorfolin-3-on
[0803] Rastvor Intermedijera 167 (2.00 g, 9.04 mmol) u THF (25 mL) dodat je kap po kap u suspenziju NaH (434 mg, 60 % čistoća, 10.8 mmol) u THF (70 mL) na 0°C. Smeša je mešana tokom 30 minuta na sobnoj temperaturi. U smešu je dodat na 0°C Mel (2.8 mL, 45 mmol), i smeša je mešana tokom 15 sati na sobnoj temperaturi. Dodat je zasićeni vodeni rastvor (50 mL) NH4Cl na 0°C, i rastvarači su destilovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je razblažen sa vodom i ekstrahovan sa EtOAc (tri puta). Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad MgSO4i rastvarač je destilovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 1.78 g (78% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0804]<1>H NMR (500 MHz, HLOROFORM-d): δ [ppm] 3.03 (s, 3 H) 3.40 (ddd, 1 H) 3.62 -3.81 (m, 3 H) 4.03 - 4.24 (m, 3 H) 4.51 - 4.61 (m, 2 H) 7.29 - 7.41 (m, 5 H).
Intermedijer 169: (5R)-5-(Hidroksimetil)-4-metilmorfolin-3-on
[0805] Intermedijer 168 (1.78 g, 7.57 mmol) je rastvoren u MeOH (140 mL), dodat je Pd(OH)2(266 mg, 20% na ugljeniku, 378 µmol) i smeša je mešana tokom 10 sati u atmosferi vodonika. Dodato je još 0.0025 ekvivalenata katalizatora i smeša je mešana tokom još 3 sata u atmosferi vodonika. Reakciona smeša je filtrirana kroz Celite® i isprana sa EtOH i filtrat je uklonjen pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 1.12 g naslovnog jedinjenja, koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
Intermedijer 6DE: [(3S)-4-Metil-5-oksomorfolin-3-il]metil 4-metilbenzensulfonat
[0806] Smeša Intermedijera 169, TEA (1.6 mL, 12 mmol) i trimetilamin hidrohlorida (73.7 mg, 772 µmol) u DCM (23 mL) je ohlađena na 0°C i mešana tokom 10 minuta. Posle toga dodat je u 3 porcije 4-metilbenzensulfonil hlorid (1.62 g, 8.49 mmol). Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi do potpune konverzije. Reakciona smeša je tretirana sa N,Ndimetiletilendiaminom (1.0 mL, 9.3 mmol) da bi se utrošio nereagovani 4-metilbenzensulfonil hlorid. U smešu je dodata voda i faze su odvojene. Vodena faza je ekstrahovana sa DCM (tri puta) i kombinovani organski slojevi su koncentrovani do suva. Ostatak je prečišćen sa hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent EtOAc/ heksan) da se dobije 917 mg (40% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0807] LCMS, metod 1, rt: 0.89 min, MS ES+ m/z = 300 (M+H)<+>.
Intermedijer 4DE: Metil 3-{[(3S)-4-metil-5-oksomorfolin-3-il]metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoat
[0808] Smeša Intermedijera 3 (312 mg, 1.25 mmol), Intermedijera 6DE (450 mg, 1.50 mmol) i Cs2CO3(612 mg, 1.88 mmol) u DMF (6.3 mL) je mešana na 90°C do potpune konverzije. DMF je destilovan pod sniženim pritiskom, dodata je voda i DCM i slojevi su odvojeni. Vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM (tri puta) i kombinovani organski slojevi su upareni do suva. Ostatak je prečišćen sa hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent EtOAc/ heksan) da se dobije 294 mg (58% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0809]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 3.00 (s, 3 H) 3.71 - 3.79 (m, 1 H) 3.83 - 3.92 (m, 4 H) 4.01 (d, 1 H) 4.08 (d, 2 H) 4.29 (d, 1 H) 4.33 - 4.42 (m, 1 H) 7.57 (dd, 1 H) 7.66 (d, 1 H) 7.70 (dd, 1 H) 8.02 (t, 1 H).
Intermedijer 170: (5R)-5-(Hidroksimetil)morfolin-3-on
[0810] Intermedijer 167 je rastvoren u MeOH (120 mL), dodat je Pd(OH)2(244 mg, 20 % na ugljeniku, 348 µmol) mešan na 10 h u atmosferi vodonika. Dodato je još 0,025 ekvivalenata
21
katalizatora i smeša je mešana tokom još 3 sata. Reakciona smeša je filtrirana kroz Celite® i isprana sa EtOH. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 1.16 g naslovnog jedinjenja, koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
Intermedijer 6DF: [(3S)-5-Oksomorfolin-3-il]metil 4-metilbenzensulfonat
[0811] Smeša Intermedijera 170 (1.16 g, 8.85 mmol), TEA (1.8 mL, 13 mmol) i trimetilamin hidrohlorida (84.5 mg, 885 µmol) u DCM (26 mL) je ohlađena na 0°C i mešana tokom 10 minuta. Posle toga dodat je u 3 porcije 4-metilbenzensulfonil hlorid (1.86 g, 9.73 mmol). Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi do potpune konverzije. Reakciona smeša je tretirana sa N,N-dimetiletilendiaminom (1.2 mL, 11 mmol) da bi se utrošio nereagovani 4-metilbenzensulfonil hlorid. U smešu je dodata voda, slojevi su odvojeni i vodena faza je ekstrahovana sa DCM (tri puta). Kombinovani organski slojevi su koncentrovani do suva i ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (gradijent heksan/ EtOAc/ MeOH) da se dobije 1.06 g (42% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0812] LCMS, metod 1, rt: 0.83 min, MS ES+ m/z = 286 (M+H)<+>.
Intermedijer 4DF: Metil 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-{[(3S)-5-oksomorfolin-3-il]metoksi}benzoat
[0813] Smeša Intermedijera 3 (364 mg, 1.46 mmol), Intermedijera 6DF (500 mg, 1.75 mmol) i Cs2CO3(714 mg, 2.19 mmol) je mešana na 90°C do potpune konverzije. DMF je uparen pod sniženim pritiskom, dodata je voda i DCM i slojevi su odvojeni. Vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM (tri puta) i kombinovani organski slojevi su upareni do suva. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (gradijent heksan/ EtOAc/ MeOH) da se dobije 349 mg (59% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0814]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 3.76 (d, 1 H) 3.84 - 3.88 (m, 2 H) 3.89 (s, 3 H) 4.01 (s, 2 H) 4.08 (dd, 1 H) 4.20 (dd, 1 H) 7.55 (dd, 1 H) 7.63 - 7.72 (m, 2 H) 7.98 - 8.05 (m, 1 H) 8.30 (d, 1 H).
Intermedijer 6DJ: tert-Butil 1-({[(4-metilfenil)sulfonil]oksi}metil)-2-oksa-5-azabiciklo[2.2.1]heptan-5-karboksilat, kao smeša dva enantiomera
[0815] Smeša tert-butil 1-(hidroksimetil)-2-oksa-5-azabiciklo[2.2.1]heptan-5-karboksilat (1.00 g, 4.36 mmol), TEA (910 µL, 6.5 mmol) i trimetilamin hidrohlorid (41.7 mg, 436 µmol) u DCM (13 mL) je ohlađena na 0°C i mešana tokom 10 minuta. Posle toga dodat je u 3 porcije 4-metilbenzensulfonil hlorid (915 mg, 4.80 mmol) i rastvor je mešan na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je tretirana sa N,N-dimetiletilendiaminom (570 µL, 5.2 mmol) da bi se utrošio nereagovani 4-metilbenzensulfonil hlorid. U smešu je dodata voda, vodena faza je ekstrahovana sa DCM (tri puta) i kombinovani organski slojevi su koncentrovani do suva pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (gradijent heksan/ EtOAc/ MeOH) da se dobije 1.41 g (84% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0816]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 1.38 (d, 9 H) 1.63 - 1.82 (m, 2 H) 2.43 (s, 3 H) 3.04 - 3.24 (m, 2 H) 3.66 (s, 2 H) 4.37 (d, 3 H) 7.49 (d, 2 H) 7.75 - 7.85 (m, 2 H).
Intermedijer 4DG: tert-Butil 1-{[3-(metoksikarbonil)-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)fenoksi]metil}-2-oksa-5-azabiciklo[2.2.1]heptan-5-karboksilat, kao smeša dva enantiomera
21
[0817] Smeša Intermedijera 3 (450 mg, 1.81 mmol), Intermedijer 6DJ, Cs2CO3 (882 mg, 2.71 mmol) i DMF (10 mL) je mešana na 90°C do potpune konverzije. DMF je uparen pod sniženim pritiskom, ostatak je rastvoren u vodi i DCM i faze su odvojene. Vodeni sloj je ekstrahovan dva puta sa DCM. Kombinovani organski slojevi su upareni do suva pod sniženim pritiskom i ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (gradijent heksan/ EtOAc) da se dobije 635 mg (69% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0818]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 1.35 - 1.47 (m, 9 H) 1.84 - 1.96 (m, 2 H) 3.35 - 3.48 (m, 2 H) 3.70 - 3.79 (m, 1 H) 3.81 - 3.92 (m, 4 H) 4.34 - 4.57 (m, 3 H) 7.55 (dd, 1 H) 7.64 - 7.72 (m, 2 H) 8.01 (t, 1 H).
Intermedijer 171: Metil 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-(2-oksa-5-azabiciklo[2.2.1]hept-1-ilmetoksi)benzoat, kao smeša dva enantiomera
[0819] Smeša Intermedijera 4DG, TFA (4.4 mL, 57 mmol) i DCM (44 mL) je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije. Smeša je uparena do suva pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 530 mg naslovnog jedinjenja, koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0820]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 2.02 (m, 1 H) 2.12 (m, 1 H) 3.35 (t, 2 H) 3.85 - 3.93 (m, 4 H) 3.97 - 4.18 (m, 2 H) 4.45 (br. s., 1 H) 4.50 - 4.67 (m, 2 H) 7.56 (dd, 1 H) 7.64 - 7.76 (m, 2 H) 8.02 (t, 1 H).
21
Intermedijer 173: Metil 3-[(5-metil-2-oksa-5-azabiciklo[2.2.1]hept-1-il)metoksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoat, kao smeša dva enantiomera
[0821] Smeša Intermedijera 171 (257 mg, 712 µmol), formaldehida (530 µL, 37%, 7.1 mmol), sirćetne kiseline (410 µL, 100%, 7.1 mmol) i 1,2-dihloretana (6.1 mL) je mešana na sobnoj temperaturi tokom 30 minuta. Posle toga dodat je pažljivo natrijum triacetoksiborohidrid (3.0 mL, 2.1 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi. Dodate su dodatne količine formaldehida, sirćetne kiseline i natrijum triacetoksiborohidrida da bi reakcija bila završena. Dodat je zasićeni vodeni rastvor NaHCO3i vodeni sloj je ekstrahovan dva puta sa DCM. Kombinovani organski slojevi su upareni do suva pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (gradijent heksan/ EtOAc) da se dobije 100 mg (38% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0822]<1>H NMR (600 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 1.68 - 1.75 (m, 1 H) 1.84 - 1.92 (m, 1 H) 2.34 (s, 3 H) 2.90 - 2.97 (m, 1 H) 3.36 - 3.41 (m, 1 H) 3.62 - 3.68 (m, 1 H) 3.89 (s, 3 H) 3.96 - 4.01 (m, 1 H) 4.37 (s, 1 H) 4.41 (s, 1 H) 7.48 - 7.57 (m, 1 H) 7.66 (d, 2 H) 8.01 (s, 1 H).
Intermedijer 174: Metil 3-[(5-izopropil-2-oksa-5-azabiciklo[2.2.1]hept-1-il)metoksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoat, kao smeša dva enantiomera
21
[0823] Intermedijer 174 (150 mg, 54%) je sintetizovan iz Intermedijera 171 (250 mg, 694 µmol) i acetona (200 µL, 2.8 mmol) analogno konverziji Intermedijera 171 u Intermedijer 173.
[0824]<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 0.96 - 1.07 (m, 6 H) 1.70 - 1.85 (m, 2 H) 2.61 - 2.77 (m, 1 H) 3.05 - 3.20 (m, 1 H) 3.60 - 3.75 (m, 2 H) 3.89 (s, 3 H) 3.99 (d, 1 H) 4.30 - 4.47 (m, 2 H) 7.53 (dd, 1 H) 7.63 - 7.70 (m, 2 H) 8.00 (t, 1 H).
Intermedijer 5CF: 3-{[4-(Tert-butoksikarbonil)morfolin-2-il]metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina, kao smeša enantiomera
[0825] Intermedijer 4CF (331 mg, 0.59 mmol) je rastvoren u MeOH (5 mL) i THF (5 mL).1M LiOH (2 mL) dodat je i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Reakciona smeša je koncentrovana do suva, a ostatak je prebačen u vodu (5 mL) i ispran sa EtOAc (5 mL). Vodeni sloj je zakišeljen na pH 4 sa 1M HCl i ekstrahovan sa DCM (2 x 5 mL) i 1:1 IPA/CHCl3(2 x 5 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni (MgSO4), filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prebačen u MeCN/vodu i liofilizovan da bi se dobilo 231.2 mg (85% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu belog praha.
[0826]<1>H NMR (250 MHz, DMSO-d): δ [ppm] 7.99 (s, 1H), 7.67 - 7.63 (m, 1H), 7.63 - 7.59 (m, 1H), 7.53 - 7.48 (m, 1H), 4.24 - 4.07 (m, 2H), 3.99 - 3.81 (m, 2H), 3.79 - 3.65 (m, 2H), 3.53 - 3.40 (m, 1H), 3.00 - 2.79 (m, 2H), 1.41 (s, 9H).
[0827] LC-MS (Metod A) Rt = 1.36 min, MS (ESIpos): m/z = 435 (M+H)<+>.
Intermedijer 5CE: 3-{[(2R)-4-(tert-butoksikarbonil)morfolin-2-il]metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina
21
[0828] Intermedijer 4CE (27.2 g, 48.6 mmol) je rastvoren u THF (200 mL). Dodat je 1M LiOH (100 mL, 100 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Dodato je još THF (50 mL), 1M LiOH (50 mL, 50 mmol) i metanol (20 mL) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h. Reakciona smeša je koncentrovana da se ukloni MeOH/THF i vodeni sloj je ispran sa EtOAc. Vodeni sloj je zakišeljen na pH 4 sa koncentrovanom HCl i ekstrahovan sa DCM (3 x 100 mL). Kombinovane organske materije DCM i EtOAc se osušene (MgSO4), filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 28.21 g (94% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu žutog viskoznog ulja.
[0829]<1>H NMR (250 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.23 (s, 1H), 7.65 (s, 2H), 7.54 (s, 1H), 4.27 - 3.48 (m, 7H), 3.11 - 2.77 (m, 2H), 2.50 (s, 3H), 1.47 (s, 9H).
[0830] LCMS (Metod A) Rt = 1.23 min, MS (ESIpos): m/z = 435 (M+H)<+>.
[0831] Analogno postupku opisanom za Intermedijer 5CF, sledeći Intermedijeri su pripremljeni upotrebom odgovarajućeg estra polaznih materijala.
21
22
Intermedijer 5CV: 3-{[1-(tert-Butoksikarbonil)azetidin-3-il]metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina
[0832] Smeša Intermedijera 4CV (100 mg, 239 µmol), NaOH (600 µL, 2.0 M, 1.2 mmol) u MeOH (20 mL) je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije. MeOH je uparen i dodat je vodeni rastvor HCl (2N) i pH podešena na pH 4. Vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM. Kombinovane organske materije su isparene do suva da bi se dobilo 95 mg (98% prinosa) naslovnog jedinjenja, koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0833] LCMS, metod 1, rt: 1.28 min, MS ES+ m/z = 405 (M+H)<+>.
Intermedijer 5CX: 3-{[(3R)-4-Metil-5-oksomorfolin-3-il]metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina
[0834] U rastvor Intermedijera 4CX (530 mg, 1.41 mmol) u MeOH dodat je vodeni rastvor NaOH (1.8 mL, 2.0 M, 3.5 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i pH je podešen na pH: 5. Smeša je ekstrahovana tri puta sa EtOAc i kombinovani organski slojevi su upareni do suva da bi se dobilo 417 mg (82% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0835] LCMS, metod 1, rt: 0.90 min, MS ES+ m/z = 363 (M+H)<+>.
Intermedijer 5CY: 3-(5-Metil-1,3-tiazol-2-il)-5-{[(3R)-5-oksomorfolin-3-il]metoksi}benzoeva kiselina
[0836] U rastvor Intermedijera 4CY (834 mg, 50 % čistoća, 1.15 mmol) u MeOH dodat je vodeni rastvor NaOH (1.4 mL, 2.0 M, 2.9 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 15 h, dodato je još 1 mL vodenog rastvora NaOH (2.0 M) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i pH je podešen na pH: 5. Smeša je ekstrahovana tri puta sa EtOAc i kombinovani organski slojevi su upareni do suva da bi se dobilo 466 mg naslovnog jedinjenja, koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0837] LCMS, metod 1, rt: 0.84 min, MS ES+ m/z = 349 (M+H)<+>.
Intermedijer 5CZ: 3-{[(5S)-3-Metil-2-okso-1,3-oksazolidin-5-il]metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina
[0838] U smešu Intermedijera 4CZ u MeOH (15 mL) dodat je vodeni rastvor NaOH (2.9 mL, 2.0 M, 5.8 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije. Rastvarač
22
je uparen pod sniženim pritiskom i pH podešena na pH 5. Smeša je ekstrahovana tri puta sa EtOAc i organski sloj je uparen do suva da bi se dobilo 617 mg (83% prinosa) naslovnog jedinjenja, koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0839] LCMS, metod 1, rt: 0.93 min, MS ES+ m/z = 349 (M+H)<+>.
Intermedijer 5DA: 3-{[(5R)-3-Metil-2-okso-1,3-oksazolidin-5-il]metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina
[0840] U rastvor Intermedijera 4DA (609 mg, 1.68 mmol) u MeOH (6.4 mL) i THF (6.4 mL) dodat je vodeni rastvor NaOH (2.1 mL, 2.0 M, 4.2 mmol).
[0841] Smeša je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i pH je podešen na pH: 3. Zatim je smeša ekstrahovana tri puta sa EtOAc i organski slojevi su upareni do suva pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 518 mg (87% prinosa) naslovnog jedinjenja, koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0842]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 2.79 (s, 3 H) 3.43 (dd, 1 H) 3.70 (t, 1 H) 4.22 - 4.30 (m, 1 H) 4.31 - 4.38 (m, 1 H) 4.82 - 4.93 (m, 1 H) 7.53 (dd, 1 H) 7.60 - 7.69 (m, 2 H) 8.00 (t, 1 H) 13.00 - 13.56 (m, 1 H).
Intermedijer 5DB: 3-{[(2R)-4-Metil-5-oksomorfolin-2-il]metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-
2-il)benzoeva kiselina
[0843] U smešu Intermedijera 4DB u MeOH (28 mL) i THF (28 mL) dodat je vodeni rastvor NaOH (9.2 mL, 2.0 M, 18 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i pH je podešen na pH: 3. Smeša je ekstrahovana tri puta sa EtOAc, kombinovani organski slojevi su osušeni pod sniženim pritiskom i ostatak je prečišćen sa hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent EtOAc/ heksan) da se dobije 1.65 g (59% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0844] LCMS, metod 1, rt: 0.91 min, MS ES+ m/z = 363 (M+H)<+>.
Intermedijer 5DC: 3-(5-Metil-1,3-tiazol-2-il)-5-{[(2S)-5-oksomorfolin-2-il]metoksi}benzoeva kiselina
[0845] U smešu Intermedijera 4DC u MeOH (38 mL) i THF (38 mL) dodat je vodeni rastvor NaOH (7.4 mL, 2.0 M, 15 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije. Smeša je ekstrahovana sa EtOAc i faze su odvojene. Vodeni sloj je ekstrahovan tri puta sa EtOAc i kombinovani organski slojevi su upareni do suva pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 434 mg (21% prinosa) naslovnog jedinjenja
[0846] LCMS, metod 1, rt: 0.77 min, MS ES+ m/z = 349 (M+H)<+>.
Intermedijer 5DD: 3-{[(2S)-4-Metil-5-oksomorfolin-2-il]metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina
22
[0847] U rastvor Intermedijera 4DD (1.57 g, 4.17 mmol) u MeOH (10 mL) i THF (10 mL) dodat je vodeni rastvor NaOH (3.1 mL, 2.0 M, 6.3 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i ekstrahovana tri puta sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su upareni do suva pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 2.24 g naslovnog jedinjenja, koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0848] LCMS, metod 1, rt: 0.87 min, MS ES+ m/z = 363 (M+H)<+>.
Intermedijer 5DE: 3-{[(3S)-4-Metil-5-oksomorfolin-3-il]metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina
[0849] U smešu Intermedijera 4DE u MeOH dodat je vodeni rastvor NaOH (980 µL, 2.0 M, 2.0 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije. pH je podešena na pH: 5, reakciona smeša je ekstrahovana sa EtOAc, organski sojevi su osušeni sa Na2SO4i upareni do suva pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 315 mg naslovnog jedinjenja, koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0850] LCMS, metod 1, rt: 0.89 min, MS ES+ m/z = 363 (M+H)<+>.
Intermedijer 5DF: 3-(5-Metil-1,3-tiazol-2-il)-5-{[(3S)-5-oksomorfolin-3-il]metoksi}benzoeva kiselina
22
[0851] U smešu Intermedijera 4DF u MeOH dodat je vodeni rastvor NaOH (1.2 mL, 2.0 M, 2.4 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije. Vrednost pH je podešena na pH: 5, i reakciona smeša je ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su osušeni sa Na2SO4, filtrirani i upareni do suva pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 330 mg (98% prinosa) naslovnog jedinjenja, koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0852] LCMS, metod 1, rt: 0.84 min, MS ES+ m/z = 349 (M+H)<+>.
Intermedijer 172: 3-{[5-(tert-Butoksikarbonil)-2-oksa-5-azabiciklo[2.2.1]hept-1-il]metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina, kao smeša dva enantiomera
[0853] Smeša Intermedijera 4DG (630 mg, 1.37 mmol), vodenog rastvora NaOH (3.4 mL, 2.0 M, 6.8 mmol) i MeOH (20 mL) je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije.
[0854] MeOH je uparen pod sniženim pritiskom. Dodati su DCM i voda i pH vrednost je podešena na pH: 7 i faze su odvojene. Vodeni sloj je ekstrahovan dva puta sa DCM i kombinovani organski slojevi su upareni do suva da bi se dobilo 600 mg (98% prinosa) naslovnog jedinjenja, koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0855]<1>H NMR (600 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 1.36 - 1.49 (m, 9 H) 1.82 - 2.01 (m, 2 H) 3.32 - 3.47 (m, 2 H) 3.71 - 3.80 (m, 1 H) 3.81 - 3.92 (m, 1 H) 4.36 - 4.55 (m, 3 H) 7.54 (dd, 1 H) 7.65 (d, 2 H) 7.91 - 8.05 (m, 1 H) 12.94 - 13.73 (m, 1 H).
Intermedijer 175: 3-[(5-Metil-2-oksa-5-azabiciklo[2.2.1]hept-1-il)metoksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina, kao smeša dva enantiomera
22
[0856] Smeša Intermedijera 173 (100 mg, 267 µmol), vodenog rastvora NaOH (670 µL, 2.0 M, 1.3 mmol) u MeOH (10 mL) je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije. Rastvarač je uparen pod sniženim pritiskom, dodati su DCM i voda i pH vrednost je podešena na pH: 7. Vodeni sloj je sakupljen i uparen do suva da bi se dobilo 50 mg (52% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0857] LCMS, metod 1, rt: 0.68 min, MS ES+ m/z = 361 (M+H)<+>.
Intermedijer 176: 3-[(5-Izopropil-2-oksa-5-azabiciklo[2.2.1]hept-1-il)metoksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina, kao smeša dva enantiomera
[0858] Smeša Intermedijera 174 (150 mg, 373 µmol), vodenog rastvora NaOH (930 µL, 2.0 M, 1.9 mmol) u MeOH (10 mL) je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije. Rastvarač je uparen pod sniženim pritiskom, Dodati su DCM i voda i pH vrednost je podešena na pH: 7. Slojevi su odvojeni i vodeni sloj je ekstrahovan dva puta sa DCM. Kombinovani organski slojevi su upareni do suva i ostatak je prečišćen sa hromatografijom na koloni da bi se dobilo 70.0 mg (48% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0859] LCMS, metod 1, rt: 0.73 min, MS ES+ m/z = 389 (M+H)<+>.
Intermedijer 114: Tert-butil 2-{[3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-({(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}karbamoil)fenoksi]metil}morfolin-4-karboksilat, kao smeša dijastereoizomera.
22
[0860] U rastvor Intermedijera 5CF (497 mg, 0.995 mmol), Intermedijera VI (228 mg, 1.19 mmol), DIPEA (693 µL, 3.98 mmol) u DCM (10 mL) dodat je T3P (889 µL, 1.49 mmol, 50% rastvor u EtOAc) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Reakciona smeša je isprana sa zasićenom NaHCO3(5 mL). Organske materije su osušene (MgSO4), filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (eluiranje sa 30 - 80% EtOAc u heptanu na 25 g prethodno upakovane kolone KP-SiO2) da se dobije 520.4 mg (86% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bezbojne gume.
[0861]<1>H NMR (500 MHz, hloroform-d): δ [ppm] 8.94 (s, 2H), 7.89 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.56 (dd, J = 2.3, 1.4 Hz, 1H), 7.53 - 7.51 (m, 1H), 7.40 (s, 1H), 6.78 - 6.71 (m, 1H), 5.41 - 5.32 (m, 1H), 4.18 - 4.02 (m, 3H), 3.99 - 3.77 (m, 3H), 3.65 - 3.55 (m, 1H), 3.13 - 2.73 (m, 2H), 2.53 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 1.71 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 1.48 (s, 9H).
[0862] LC-MS (Metod A) Rt = 1.32 min, MS (ESIpos): m/z = 608 (M+H)<+>.
[0863] Analogno postupku opisanom za Intermedijer 114, sledeći Intermedijeri su pripremljeni upotrebom T3P i odgovarajuće karboksilne kiseline i primarnog amina polaznih materijala.
22
2
21
22
Intermedijer 123: Tert-butil (2S)-2-[[3-(5-hlorotiazol-2-il)-5-[[(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil]karbamoil]fenoksi]metil]morfolin-4-karboksilat
[0864] U rastvor Intermedijera 5CJ (150 mg, 0.31 mmol) i DIPEA (0.16 mL, 0.94 mmol) u DCM (5 mL) dodat je Intermedijer VI (86 mg, 0.38 mmol) praćeno sa HATU (121 mg, 0.94 mmol) i reakciona smeša je mešana na temperaturi okoline tokom 2 h. Reakciona smeša je isprana sa vodom (5 mL), osušena (MgSO4), filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovi ostatak koji je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (eluiranje sa 25 - 100% EtOAc u heptanu na 25 g prethodno upakovane kolone KP-SiO2) da se dobije 115 mg (56% prinosa) naslovnog jedinjenja kao čvrsta supstanca.
[0865]<1>H NMR (500 MHz, hloroform-d): δ [ppm] 8.94 (s, 2H), 7.83 (s, 1H), 7.67 (s, 1H), 7.61 - 7.49 (m, 1H), 7.42 (s, 1H), 6.62 (s, 1H), 5.36 (m, 1H), 4.20 - 4.01 (m, 3H), 4.00 - 3.83 (m, 2H), 3.86 - 3.74 (m, 1H), 3.60 (t, J = 10.7 Hz, 1H), 3.09 - 2.91 (m, 1H), 2.95 - 2.72 (m, 1H), 1.73 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 1.48 (s, 9H).
[0866] LC-MS (Metod A) Rt = 1.47 min, MS (ESIpos): m/z = 650 (M+H)<+>.
[0867] Analogno postupku opisanom za Intermedijer 123, sledeći Intermedijer je pripremljen upotrebom HATU i odgovarajuće karboksilne kiseline i primarnog amina polaznih materijala.
2
Intermedijer 148: Tert-butil 3-{[3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-({(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}karbamoil)fenoksi]metil}azetidin-1-karboksilat
[0868] Smeša Intermedijera 5CV (90.0 mg, 223 µmol), Intermedijera VI (53.2 mg, 234 µmol), HATU (118 mg, 312 µmol) i DIPEA (150 µL, 890 µmol) u DMF (3 mL) je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije. DMF je uparen pod sniženim pritiskom, dodati su voda i DCM, i vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM. Kombinovane organske materije su isparene do suva. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent heksan / EtOAc) da se dobije 90 mg (70% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0869] LCMS, metod 1, rt: 1.39 min, MS ES+ m/z = 578 (M+H)<+>.
2 4
Intermedijer 116: 3-(5-Metil-1,3-tiazol-2-il)-5-(piperidin-4-ilmetoksi)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
[0870] U rastvor Intermedijera 115 (206 mg, 0.34 mmol) rastvoren u DCM (5 mL) dodata je TFA (0.26 mL, 3.4 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Reakciona smeša je neutralizovana sa zasićenim rastvorom NaHCO3. Organska faza je odvojena i vodena faza je ekstrahovana sa DCM (2 x 5 mL). Kombinovane organske faze su osušene (MgSO4), filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Ostatak je liofilizovan iz MeCN/vode da bi se dobilo 173.6 mg (100% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu belog praha.
[0871]<1>H NMR (500 MHz, hloroform-d): δ [ppm] 8.98 (s, 2H), 7.83 (s, 1H), 7.55 - 7.44 (m, 2H), 7.38 (s, 1H), 5.47 - 5.31 (m, 1H), 3.99 - 3.81 (m, 2H), 3.47 (s, 2H), 2.91 (m, 2H), 2.56 -2.40 (m, 3H), 2.08 - 1.90 (m, 3H), 1.73 (m, 5H).
[0872] LC-MS (Metod A) Rt = 0.94 min, MS (ESIpos): m/z = 506 (M+H)<+>.
[0873] Analogno postupku opisanom za Intermedijer 116, sledeći Intermedijeri su pripremljeni upotrebom TFA i odgovarajućeg N-Boc zaštićenog polaznog materijala.
2
2
Intermedijer 126: [(3R)-4-Metilmorfolin-3-il]metanol
[0874] U rastvor tert-butil estra 3-hidroksimetil-morfolin-4-karboksilne kiseline (750 mg, 3.45 mmol) u anhidrovanom THF (16.5 mL) na 0 °C pod azotom dodat je rastvor LiAlH4(2.4 M u THF, 8.6 mL). Reakciona smeša je mešana tokom 20 minuta na 0 °C zatim zagrevana do sobne temperature i mešana još 2 sata. Reakciona smeša je ohlađena na 0 °C i ugašena dodavanjem kap po kap vode (1 mL), 15% vodenog rastvora NaOH (1 mL) i vode (3 mL). Neorganski
2
nusproizvodi su uklonjeni filtracijom kroz Celite®. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 475 mg (71% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bezbojnog ulja, koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0875]<1>H NMR (250 MHz, hloroform-d): δ [ppm] 3.87 - 3.73 (m, 3H), 3.64 - 3.51 (m, 2H), 3.40 (dd, J = 11.5, 1.7 Hz, 1H), 2.71 (dt, J = 11.5, 1.9 Hz, 1H), 2.41 (td, J = 11.4, 3.4 Hz, 1H), 2.33 (s, 3H), 2.25 - 2.15 (m, 1H).
[0876] Analogno postupku opisanom za Intermedijer 126, sledeći Intermedijer je pripremljen upotrebom LiAlH4i odgovarajućeg N-Boc zaštićenog polaznog materijala.
Intermedijer 130: tert-Butil-3-fluoro-3-(hidroksimetil)piperidin-1-karboksilat, kao smeša enantiomera
[0877] Rastvoru 0 °C 1-Boc-3-fluoropiperidin-3-karboksilne kiseline (750 mg, 3.03 mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuran (30 mL) u atmosferi azota dodat je kap po kap boran (1M u THF, 9.1 mL, 9.10 mmol) i dobivena reakciona smeša je zagrejana na RT i mešana tokom 18 h. Reakcija je ugašena pažljivim dodavanjem metanola i uparena pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren u etil acetatu i ispran sa zasićenim rastvorom natrijum hidrogen karbonata. Organski sloj je osušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Prečišćavanje sa Biotage Isolera™ hromatografijom (eluiranje sa 0 - 60% EtOAc u heptanu na 25 g prethodno upakovane kolone KP-SiO2) dalo je 650 mg (95% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bledo žutog viskoznog ulja, koje se očvrsne stojeći.
<1>H NMR (500 MHz, hloroform-d): δ [ppm] 4.00 - 2.86 (m, 6H), 1.95 - 1.85 (m, 1H), 1.84 -1.65 (m, 2H), 1.60 - 1.52 (m, 1H), 1.49 (s, 9H).
2
Intermedijer 27CQ: tert-Butil (2R)-2-{[3-cijano-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)fenoksi]metil}morfolin-4-karboksilat
[0878] U mešani rastvor Intermedijera 112 (896 mg, 4.12 mmol) u suvom DMF (7.5 mL) dodat je NaH 60% disperzija u mineralnom ulju (172 mg, 4.30 mmol). Posle mešanja smeše tokom 15 minuta dodat je Intermedijer 26 (750 mg, 3.44 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Reakciona smeša je sipana u fiziološki rastvor i ekstrahovana u EtOAc. Organski sloj je ispran sa fiziološkim rastvorom, osušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo smeđe ulje. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (eluiranje sa 5 - 60% EtOAc u heptanu na 50 g prethodno upakovane kolone KP-SiO2) da se dobije 870.9 mg (59% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bezbojne gume.
[0879]<1>H NMR (250 MHz, hloroform-d): δ [ppm] 7.75 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.71 - 7.68 (m, 1H), 7.54 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.19 (dd, J = 2.5, 1.3 Hz, 1H), 4.17- 3.74 (m, 6H), 3.67 - 3.54 (m, 1H), 3.10 - 2.77 (m, 2H), 2.54 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 1.48 (s, 9H).
[0880] LC-MS (Metod A) Rt = 1.33 min, MS (ESIpos): m/z = 416 (M+H)<+>.
[0881] Analogno postupku opisanom za Intermedijer 27CQ, sledeći Intermedijeri su pripremljeni upotrebom NaH i odgovarajućeg fluoro-benzonitrila i alkohola polaznih materijala.
2
24
[0882] Intermedijer 5CE se takođe može sintetizovati iz Intermedijera 27CQ kao što je ilustrovano dole.
Intermedijer 5CE: 3-{[(2R)-4-(Tert-butoksikarbonil)morfolin-2-il]metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina
[0883] Mešani rastvor Intermedijera 27CQ (0.87 g, 2.01 mmol), DMSO (10 mL) i 2 M vodenog rastvora natrijum hidroksida (10 mL) je zagrevan na 110 °C tokom 3 h. Posle hlađenja do sobne temperature smeša je polako zakišeljena do pH ∼4, razblažena sa vodom (10 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3 x 20 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani sa vodom (20 mL), fiziološkim rastvorom (20 mL), osušeni (MgSO4), filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 672.1 mg (77% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu pene.
[0884]<1>H NMR (500 MHz, hloroform-d): δ [ppm] 8.29 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.67 (dd, J = 2.4, 1.3 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 4.16 (dd, J = 9.9, 5.5 Hz, 1H), 4.10 (dd, J = 9.9, 4.5 Hz, 1H), 3.97 (d, J = 10.7 Hz, 1H), 3.94 - 3.80 (m, 2H), 3.66 - 3.57 (m, 1H), 3.10 -2.97 (m, 1H), 2.90 (s, 1H), 2.63 (s, 2H), 2.53 (d, J = 1.0 Hz, 3H), 1.49 (s, 9H).
[0885] LC-MS (Metod A) Rt = 1.20 min, MS (ESIpos): m/z = 435.55 (M+H)<+>.
Intermedijer 28CM: 3-{[(3R)-4-Metilmorfolin-3-il]metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina - hlornatrijum (1:3)
[0886] U rastvor Intermedijera 27CM (304 mg, 0.83 mmol) u etanolu (2 mL) dodato je 2 M vodenog rastvora natrijum hidroksida (1.24 mL) i dobijena smeša je zagrevana na 120 °C pod mikrotalasnim zračenjem tokom 30 minuta. Ohlađeni rastvor je razblažen sa vodom i ispran sa EtOAc. Vodena faza je odvojena, neutralisana sa 1 M HCl (0.88 mL) i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je dalje osušen u vakuumskoj peći do konstantne težine da bi se dobilo 381 mg (88% prinosa) naslovnog jedinjenja, koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.
[0887] LC-MS (Metod A) Rt = 0.80 min, MS (ESIpos) m/z = 349 (M+H)<+>.
Intermedijer 28CN: 3-{[(3S)-4-Metilmorfolin-3-il]metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina hidrohlorid (1:1)
24
[0888] U mešani rastvor Intermedijera 27CN (200 mg, 0.53 mmol) u DMSO (3 mL) dodat je 2 M vodeni rastvor natrijum hidroksida (3.5 mL) i dobijena smeša je zagrevana na 110 °C tokom 3 h. Posle hlađenja do sobne temperature smeša je polako zakišeljena do pH ∼2 sa HCl i koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovi materijal u DMSO.
Ostatak je podeljen između vode i hloroforma /izopropanola (1:1). Organski sloj je odvojen i vodeni sloj je ekstrahovan dva puta sa hloroformom/izopropanolom (1:1). Kombinovana organska frakcija je osušena (magnezijum sulfat), filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom. LC-MS (Metod A) je naznačila da je proizvod ostao u vodenoj fazi. Organski i vodeni slojevi su osušeni da bi se uklonilo zaostali DMSO, dajući 75 mg (36% prinosa) i 100 mg (49% prinosa, nije korigovano za sadržaj natrijum hlorida). Kombinovane frakcije su korišćene u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
[0889]<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 10.76 (s, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.74 (s, 1H), 7.72 - 7.57 (m, 2H), 7.61 (s, 1H), 4.52 (dd, J = 11.1, 2.9 Hz, 1H), 4.44 (dd, J = 11.3, 2.8 Hz, 1H), 4.15 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 4.02 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 3.86 - 3.79 (m, 1H), 3.78 - 3.68 (m, 2H), 3.29 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 2.92 (d, J = 3.1 Hz, 3H), 2.53 (s, 3H).
[0890] LC-MS (Metod A) Rt = 0.94 min, MS (ESIpos): m/z = 349 (M+H)<+>.
Intermedijer 28CP: 3-{[1-(Tert-butoksikarbonil)-3-fluoropiperidin-3-il]metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina, kao smeša enantiomera
[0891] U mešani rastvor Intermedijera 27CP (400 mg, 0.83 mmol) u etanolu (5 mL) dodat je 2M natrijum hidroksid (1.25 mL, 2.50 mmol) i smeša je zagrevana na 80 °C tokom 18 h u zatvorenoj epruveti. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i vodeni ostatak je ispran sa etil acetatom. Vodeni sloj je zakišeljen do pH 4 sa 2M HCl što je rezultiralo precipitacijom bele čvrste supstance koja je sakupljena filtracijom i osušena da bi se dobilo 310 mg (80% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu beličaste čvrste supstance.
[0892] LC-MS (Metod A) Rt = 1.26 min, MS (ESIpos): m/z = 451.6 (M+H)<+>.
Intermedijer 28CR: 3-{[(2S)-4-(Tert-butoksikarbonil)morfolin-2-il]metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina
[0893] Mešani rastvor Intermedijera 27CR (510 mg, 1.191 mmol) u EtOH (5 mL) i 2M NaOH (1.79 mL) je zagrevan na 130 °C tokom 3 sata pod mikrotalasnim zračenjem. Reakcija je ugašena dodavanjem HCl (2M, 1.79 mL) i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Beli ostatak je suspendovan u hloroformu, a neorganski materijal je uklonjen filtracijom. Filtrat je uparen pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 571 mg (79% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu belog praha.
[0894]<1>H NMR (500 MHz, hloroform-d): δ [ppm] 8.29 - 8.25 (m, 1H), 7.68 (s, 2H), 7.56 (d, 1H), 4.17 - 4.08 (m, 3H), 3.96 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 3.84 (br.s, 2H), 3.73 (q, J = 7.0 Hz, 1H), 3.65 - 3.58 (m, 2H), 2.52 (s, 3H), 1.48(s, 9H).
[0895] LC-MS (Metod A) Rt = 1.22 min, MS (ESIpos): m/z = 434.95 (M+H)<+>.
Intermedijer 28CS: 3-{[(2R)-1-(Tert-butoksikarbonil)pirolidin-2-il]metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina
[0896] Mešani rastvor Intermedijera 27CS (0.348 g, 0.76 mmol) u etanolu (2 mL) i 2 M vodenog rastvora NaOH (1.0 mL, 2 mmol) je zagrevana na 80 °C u zatvorenoj epruveti tokom 3 h. Dodan je sledeći deo 2M vodenog rastvora NaOH (1.0 mL, 2 mmol) i smeša je zagrevana
24
na 80 °C u zatvorenoj epruveti tokom 6 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i ostatak je prebačen u vodu i zakišeljen da bi se dobio beli talog koji je sakupljen filtracijom da bi se dobilo 00.31 g (81% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0897] LC-MS (Metod A) Rt = 1.34 min, MS (ESIpos) m/z = 419 (M+H)<+>.
Intermedijer 28CT: 3-{[(2S)-1-(Tert-butoksikarbonil)pirolidin-2-il]metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina
[0898] Mešani rastvor Intermedijera 27CT (0.318 g, 0.69 mmol) u etanolu (2 mL) i 2 M vodenog rastvora NaOH (1.0 mL, 2 mmol) je zagrevana na 80 °C u zatvorenoj epruveti tokom 3 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i ostatak je prebačen u vodu i zakišeljen da bi se dobio beli talog koji je sakupljen filtracijom da bi se dobilo 0.11 g (35% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0899] LC-MS (Metod A) Rt = 1.33 min, MS (ESIpos): m/z = 419 (M+H)<+>.
Intermedijer 28CU: 3-{[1-(Tert-butoksikarbonil)-4,4-difluoropiperidin-3-il]metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina, kao smeša enantiomera
24
[0900] Mešani rastvor Intermedijera 27CU (340 mg, 0.68 mmol) u etanolu (1 mL) i 2 M vodeni rastvor natrijum hidroksida (1 mL, 2 mmol) je zagrevan mikrotalasnim zračenjem 120 °C tokom 1 h. Reakciona smeša je zakišeljena sa koncentrovanom HCl da bi se dobio beli talog koji je ekstrahovan u etil acetat. Organska faza je odvojena, osušena (MgSO4), filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 199 mg (62% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[0901] LC-MS (Metod A) Rt = 1.31, MS (ESIpos): m/z = 469 (M+H)<+>.
Intermedijer 128: 3-[(3-Fluoroazetidin-3-il)metoksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzonitril
[0902] U rastvor Intermedijera 27CO (330 mg, 0.8 mmol) u DCM (10 mL) dodata je TFA (4 mL) i reakcija je mešana tokom 4 h na sobnoj temperaturi zatim neutralisana sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata. Organski sloj je odvojen i vodeni sloj je ekstrahovan sa 1:1 IPA/CHCl3(2 x 20 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni (MgSO4), filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 243.7 mg (95% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu beličastog praha.
[0903]<1>H NMR (250 MHz, Metanol-d4): δ [ppm] 7.85 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.83 - 7.79 (m, 1H), 7.62 - 7.59 (m, 1H), 7.46 (dd, J = 2.5, 1.3 Hz, 1H), 4.46 (d, J = 19.2 Hz, 2H), 4.16 - 3.94 (m, 4H), 2.55 (d, J = 1.1 Hz, 3H).
[0904] LC-MS (Metod A) Rt = 0.90 min, MS (ESIpos): m/z = 304 (M+H)<+>.
Intermedijer 129: 3-[(3-Fluoro-1-metilazetidin-3-il)metoksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzonitril
24
[0905] Intermedijer 128 (246 mg, 0.77 mmol), 37% rastvor formaldehida u vodi (289 µL, 3.86 mmol) i sirćetna kiselina (5 µL) su kombinovani u metanolu (10 mL) i dodat je natrijum triacetoksiborohidrid (491 mg, 2.82 mmol). Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 2 h pre uparavanja pod sniženim pritiskom. Ostatak je prebačen u zasićenu NaHCO3(5 mL) i ekstrahovan sa DCM (3 x 5 mL). Kombinovana organska faza je osušena (MgSO4), filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 222.6 mg (83% prinosa) naslovnog jedinjenja kao smeđa guma.
[0906]<1>H NMR (500 MHz, hloroform-d): δ [ppm] 7.76 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.73 (dd, J = 2.4, 1.5 Hz, 1H), 7.55 - 7.53 (m, 1H), 7.21 (dd, J = 2.5, 1.3 Hz, 1H), 4.37 (d, J = 23.0 Hz, 2H), 3.70 - 3.63 (m, 2H), 3.23 (dd, J = 21.6, 9.5 Hz, 2H), 2.54 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 2.45 (s, 3H).
[0907] LC-MS (Metod A) Rt = 0.86 min, MS (ESIpos): m/z = 318 (M+H)<+>.
[0908] Analogno postupku opisanom za Intermedijer 28CM, sledeći Intermedijer je pripremljen upotrebom NaOH i odgovarajućeg benzonitrila polaznog materijala.
24
Intermedijer 131: tert-Butil-3-fluoro-3-{[3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-({(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}karbamoil)fenoksi]metil}piperidin-1-karboksilat, kao smeša dijastereoizomera
[0909] U mešani rastvor Intermedijera 28CP (150 mg, 0.33 mmol), Intermedijera VI (91 mg, 0.40 mmol) i DIPEA (0.17 mL, 0.99 mmol) u dihlorometanu (4 mL) dodat je HATU (189 mg, 0.50 mmol) i reakciona smeša je mešana tokom 2 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je isprana sa vodom (5 mL), osušena (MgSO4), filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Prečišćavanje sa Biotage Isolera™ hromatografijom (eluiranje sa 25 - 90% EtOAc u heptanu na 25 g prethodno upakovane kolone KP-SiO2) dalo je 162 mg (74% prinosa) naslovnog jedinjenja kao belu čvrstu supstancu.
[0910]<1>H NMR (250 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 9.09 (s, 2H), 8.94 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 8.01 -7.84 (m, 1H), 7.67 - 7.57 (m, 2H), 7.57 - 7.53 (m, 1H), 5.33 (m, 1H), 4.35 - 4.16 (m, 2H), 4.12 - 3.95 (m, 1H), 3.85 - 3.64 (m, 1H), 3.46 - 3.16 (m, 1H), 1.94 - 1.87 (m, 1H), 1.81 - 1.49 (m, 6H), 1.40 (s, 9H).
[0911] LC-MS (Metod A) Rt = 1.44 min, MS (ESIpos) m/z = 624 (M+H)<+>.
[0912] Analogno postupku opisanom za Intermedijer 131, sledeći Intermedijeri su pripremljeni upotrebom HATU i odgovarajuće karboksilne kiseline i primarnog amina polaznih materijala.
24
2
Intermedijer 139: Tert-butil (2R)-2-{[3-({(1R)-1-[6-(difluorometil)piridin-3-il]etil}karbamoil)-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)fenoksi]metil}morfolin-4-karboksilat
[0913] U mešani rastvor Intermedijera 5CE (80 mg, 0.18 mmol), Intermedijera LIV (46 mg, 0.17 mmol) i DIPEA (0.15 mL, 0.88 mmol) u DCM (2 mL) dodat je T3P (50% rastvor u EtOAc, 0.21 mL, 0.35 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h zatim isprana sa zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata (3 mL). Vodena faza je ponovo ekstrahovana sa DCM (3 mL) i kombinovani organski slojevi su prošli kroz fazni separator i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (eluiranje sa 0 - 2% MeOH u DCM na 25 g prethodno upakovane kolone KP-SiO2) da se dobije 58 mg (53% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bezbojne gume.
[0914]<1>H NMR (500 MHz, hloroform-d): δ [ppm] 8.71 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.89 (s, 1H), 7.86 (dd, J = 8.1, 2.2 Hz, 1H), 7.63 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.58 - 7.54 (m, 1H), 7.53 - 7.51 (m, 1H),
2 1
7.42 (s, 1H), 6.81 - 6.46 (m, 2H), 5.46 - 5.32 (m, 1H), 4.22 - 3.75 (m, 6H), 3.69 - 3.51 (m, 1H), 3.07 - 2.78 (m, 2H), 2.53 (d, J = 1.0 Hz, 3H), 1.66 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 1.48 (s, 9H).
[0915] LC-MS (Metod A) Rt = 1.32 min, MS (ESIpos): m/z = 589 (M+H)<+>.
[0916] Analogno postupku opisanom za Intermedijer 139, sledeći Intermedijer je pripremljen upotrebom T3P i odgovarajuće karboksilne kiseline i primarnog amina polaznih materijala.
Intermedijer 138: 3-(5-Metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(2R)-morfolin-2-ilmetoksi]-N-{(1R)-1-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]etil}benzamid
[0917] U rastvor Intermedijera 137 (126 mg, 0.18 mmol) u dihlorometanu (5 mL) dodata je trifluorosirćetna kiselina (0.28 mL, 3.66 mmol) i reakciona smeša je mešana na temperaturi
2 2
okoline tokom 16 h. Reakciona smeša je propuštena kroz SCX patronu (ispiranje sa metanolom i eluiranje 7N amonijakom u metanolu) da se dobije 85 mg (92% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu staklene čvrste supstance.
[0918]<1>H NMR (250 MHz, hloroform-d): δ [ppm] 8.80 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 7.97 - 7.82 (m, 2H), 7.68 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.61 - 7.55 (m, 1H), 7.53 (d, 1H), 7.49 - 7.36 (m, 1H), 6.68 (d, J = 6.9 Hz, 1H), 5.40 (m, 1H), 4.21 - 3.82 (m, 4H), 3.73 (td, J = 11.0, 3.5 Hz, 1H), 3.15 - 2.64 (m, 4H), 2.55 (s, 3H), 1.69 (d, J = 7.1 Hz, 3H).
[0919] LC-MS (Metod A) Rt= 0.96 min, MS (ESIpos): m/z= 507 (M+H)<+>.
[0920] Analogno postupku opisanom za Intermedijer 138, sledeći Intermedijeri su pripremljeni upotrebom TFA i odgovarajućih N-Boc zaštićenih polaznih materijala.
2
24 Intermedijer 133: 3-(5-Metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(2R)-morfolin-2-ilmetoksi]benzoeva kiselina trifluoroacetat (1:1)
[0921] U rastvor Intermedijera 5CE (120 mg, 0.276 mmol) u DCM dodata je trifluorosirćetna kiselina (2 mL, 25.96 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 sat. Reakcija je zaustavljena i koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 200 mg (kvantitativni prinos; prisutna je zaostala TFA) naslovnog jedinjenja u vidu bledo žutog ulja.
[0922] LC-MS (Metod A) Rt=0.85 min, MS (ESIpos): M/Z= 335 [M+H]<+>.
Intermedijer 134: 3-{[(2R)-4-Metilmorfolin-2-il]metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeva kiselina
[0923] U rastvor Intermedijera 133 (200 mg, 0.45 mmol), formaldehida (37% u vodi, 167.1 µL, 2.23 mmol) i sirćetne kiseline (38.3 µL, 1.05 mmol) u MeOH (2 mL) dodat je STAB (283.6 mg, 1.34 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 sat. Rastvarač je uparen i dobijeni ostatak je načinjen baznim do pH 8-9 korišćenjem zasićenog NaHCO3i ekstrahovan u DCM (3 x 5 mL). Vodeni sloj je neutralisan kiselinom do pH 7 i koncentrovan pod sniženim pritiskom da se dobije naslovno jedinjenje 859 mg (kvantitativni prinos; prisutne su neorganske soli).
[0924]<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 7.92 - 7.91 (m, 1H), 7.57 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 7.47 (dd, 1H), 7.36 - 7.34 (m, 1H), 4.03 - 4.00 (m, 2H), 3.83 - 3.77 (m, 3H), 3.55 (td, J = 11.2, 8.8 Hz, 3H), 2.81 - 2.77 (m, 1H), 2.62 - 2.58 (m, 1H), 2.20 (s, 3H), 2.00 (td, 1H), 1.90 (t, J = 10.7 Hz, 1H).
2
[0925] LC-MS (Metod A) Rt = 0.93 min, MS (ESIpos): m/z = 349 (M+H)<+>.
Intermedijer 147: 3-{[3-Fluoro-1-metilpiperidin-3-il]metoksi}-5-(5-metil-1 ,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid, kao smeša dva dijastereoizomera
[0926] U rastvor Intermedijera 132 (55 mg, 0.1 mmol) u metanolu (1 mL) dodat je formaldehid (37% u vodi, 16 µL, 0.21 mmol) i sirćetna kiselina (6 µL, 0.1 mmol) i reakcija je mešana tokom 15 minuta na sobnoj temperaturi. Dodat je STAB (33 mg, 0.16 mmol) i reakcija je mešana tokom 1 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je propuštena kroz SCX patronu (ispiranje sa metanolom, eluiranje sa 7 N amonijakom u metanolu) i koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 52 mg (91% prinosa) naslovnog jedinjenja kao beličasto staklo.
[0927]<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 9.17 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 9.12 (s, 2H), 7.93 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 5.30 (m, 1H), 4.27 (d, J = 22.1 Hz, 2H), 2.62 -2.53 (m, 2H), 2.39 - 2.31 (m, 1H), 2.29 - 2.22 (m, 1H), 2.19 (s, 3H), 1.87 - 1.77 (m, 1H), 1.75 - 1.67 (m, 2H), 1.61 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 1.58 - 1.48 (m, 1H).
[0928] LC-MS (Analitički metod F) Rt = 2.19 min, MS (ESIpos): m/z = 538 (M+H)<+>.
Intermedijer I: Etil 2-(trifluorometil)pirimidin-5-karboksilat
[0929] Napomena: Reakcija je podeljena na dve šarže od 37.5g, i izolovani proizvod je spojen u jednu šaržu.
2
[0930] U rastvor etil 4-hloro-2-(trifluorometil)pirimidin-5-karboksilata (37.5 g, 142.9 mmol) u etanolu (750 mL) dodat je DIPEA (68 mL, 392.3 mmol), 10 % Pd/C (50 % vlažnosti, 3 g) i reakciona smeša je mešana pod atmosferom vodonika tokom 1 h. Reakciona smeša je filtrirana kroz filter papir od staklenih vlakana i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom dajući žutu čvrstu supstancu. Čvrsta supstanca je rastvorena u EtOAc (500 mL), isprana sa vodom (500 mL), 1M aq HCl (500 mL), zasićenim aq. NaHCO3(500 mL), osušena (iznad MgSO4), filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Bledo žuta čvrsta supstanca je triturisana sa heptanom i čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom. Filtrat je koncentrovan i triturisanje je ponovljeno sa heptanom. Matične tečnosti iz obe serije su kombinovane i prečišćene sa Biotage Isolera™ hromatografijom (eluiranje sa 1 - 30 % EtOAc u heptanu na 100 g koloni KP-SiO2). Frakcije koje sadrže proizvod su koncentrovane i ostatak triturisan sa heptanom. Sve čvrste supstance su kombinovane da bi se dobilo 56.8 g (90 % prinosa) naslovnog jedinjenja kao žuta čvrsta supstanca.
[0931]<1>H NMR (250 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 9.43 (s, 2H), 4.50 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 1.45 (t, J = 7.1 Hz, 3H).
[0932] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.24 min, MS (ESIpos): m/z = 220.9 (M+H)<+>.
Intermedijer II: 2-(Trifluorometil)pirimidin-5-karboksilna kiselina
[0933] U rastvor etil 2-(trifluorometil)pirimidin-5-karboksilata (56.8 g, 252.8 mmol) rastvoren u THF (500 mL) dodat je 1M aq. LiOH (380 mL, 379.3 mmol).
Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h, koncentrovana pod vakuumom da bi se uklonio organski rastvarač i preostali vodeni deo je zakišeljen do pH 1 sa konc. HCl. Dobijeni talog je sakupljen vakuumskom filtracijom da bi se dobilo 44.4 g (91 % prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu beličastog praha.
[0934]<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 9.44 (s, 2H).
[0935] LCMS (Analitički metod A) Rt = 0.81 min, MS (ESIneg): m/z = 190.9 (M)-.
2
Intermedijer III: N-Metoksi-N-metil-2-(trifluorometil)pirimidin-5-karboksamid
[0936] 2-(Trifluorometil)pirimidin-5-karboksilna kiselina (44.39 g, 231.1 mmol), metoksimetanin hidrohlorid (33.8 g, 346.6 mmol) i DIPEA (119.5 mL, 924.3 mmol) su kombinovani u DCM (750 mL) zatim je dodat HATU (105.4 g, 277.3 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Reakciona smeša je isprana sa vodom (3 x 300 mL), organska faza je sakupljena, osušena (iznad MgSO4), filtrirana i koncentrovana u vakuumu da bi se dobilo viskozno žuto ulje. Sirovi materijal je prečišćen sa suvom fleš hromatografijom (eluiranje sa 0 - 40 % EtOAc u heptanu) da se dobije 54.2 g (95% prinosa) naslovnog jedinjenja kao tečno svetlo žuto ulje.
[0937]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 9.22 (s, 2H), 3.61 (s, 3H), 3.43 (s, 3H).
[0938] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.03 min, MS (ESIpos): m/z = 235.9 (M+H)<+>.
Intermedijer IV: 1-[2-(Trifluorometil)pirimidin-5-il]etanon
[0939] N-Metoksi-N-metil-2-(trifluorometil)pirimidin-5-karboksamid (54.9 g, 218.9 mmol) je rastvoren u suvom THF (550 mL) i ohlađen na 0 °C u ledenom kupatilu. Dodat je kap po kap metil magnezijum bromid (1.4M u toluenu/THF, 188 mL, 262.7 mmol) tokom 30 minuta. reakcija je mešana sledećih 10 min na 0 °C, polako ugašena sa 1M HCl (260 mL) i mešana još 30 minuta pre ekstrakcije sa etil acetatom (300 mL). Organska faza je odvojena, osušena (iznad MgSO4), filtrirana i koncentrovana u vakuumu dajući žutu čvrstu supstancu. LCMS i<1>H NMR su pokazali prisustvo -20 mol% nehidrolizovanog intermedijera, pa je čvrsta supstanca mešana u smeši 2M HCl (200 mL) i DCM (200 mL) tokom 20 minuta. Slojevi su odvojeni i vodeni sloj je ekstrahovan sa još DCM (2 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni (iznad
2
MgSO4), filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 33.57 g (80 % prinosa) naslovnog jedinjenja kao žuta čvrsta supstanca.
[0940]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 9.36 (s, 2H), 2.72 (s, 3H).
[0941] LCMS (Analitički metod A) Rt = 0.99 min, MS (ESIpos): m/z = 191.0 (M+H)<+>.
Intermedijer V: (S)-2-Metil-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}propan-2-sulfinamid
[0942] U mešani rastvor 1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etanona (20.65 g, 107.5 mmol) i titanijum(IV) etoksida (69.4 mL, 215.1 mmol) u Et2O (1 L) dodat je (S)-2-t-butilsulfinamid (14.3 g, 118.3 mmol) i dobijeni rastvor je mešan pod refluksom preko noći u atmosferi azota. Reakciona smeša je ohlađena na -78 °C i dodat je kap po kap L-selektrid (118.3 mL, 1M sol. u THF) održavajući unutrašnju temperaturu ispod -70 °C. Reakcija je mešana na -78 °C tokom sledećih 2h, nakon čega je LCMS (Analitički metod A) pokazala zaostali iminski intermedijer. Reakciona smeša je ponovo tretirana sa L-selektridom (12 mL, 1M sol. u THF) i mešana tokom 1h. LCMS je pokazala potpunu konverziju imina. Reakcija je ugašena dodavanjem fiziološkog rastvora (500 mL) i zagrevana do sobne temperature. Suspenzija je filtrirana kroz čep celita, isprana sa EtOAc. Filtrat je ispran sa fiziološkim rastvorom (500 mL), i vodeni sloj je ponovo ekstrahovan sa EtOAc (2 x 300 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni (iznad MgSO4), filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je triturisan sa Et2O i dobijeni talog je sakupljen vakuumskom filtracijom da bi se dobilo 18.12 g (57 % prinosa) naslovnog jedinjenja kao beličasti prah.
[0943]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.88 (s, 2H), 4.75 (qd, J = 6.8, 3.1 Hz, 1H), 3.43 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 1.64 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.24 (s, 9H).
[0944] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.14 min, MS (ESIpos): m/z = 296.0 (M+H)<+>.
Intermedijer VI: (1R)-1-[2-(Trifluorometil)pirimidin-5-il]etan-1-amin hidrohlorid (1:1)
2
[0945] U rastvor (S)-2-metil-N-[(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil]propan-2-sulfinamida (14.37 g, 48.66 mmol) rastvoren u metanolu (140 mL) dodato je 4M HCl u dioksanu (120 mL) i dobijeni rastvor je mešan tokom 1 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu, dodat je dietil etar da se posle sakupljanja vakuumskom filtracijom istaloži naslovno jedinjenje 10.06 g (91% prinosa) u vidu beličaste čvrste supstance.
[0946]<1>H NMR (250 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 9.28 (s, 2H), 8.96 (s, 2H), 4.67 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 1.64 (d, J = 6.9 Hz, 3H).
[0947] Analitička HPLC: Kolona: Chiralpak AD-H 25cm; Mobilna faza: 90:10 Heptan: Etanol; Protok: 0.3ml/min; Detekcija: UV 254 nm.; dužina trajanja: 70mins; Rt = 49.44 min; 100% ee.
Intermedijer VII: (S)-2-Metil-N-[(1R)-1-(6-metilpiridin-3-il)etil]propan-2-sulfinamid
[0948] 1-(6-Metilpiridin-3-il)etan-1-on (1.6 g, 11.8 mmol) i (S)-tert-butilsulfinamid (1.4 g, 11.8 mmol) su rastvoreni u THF (20 mL). Dodat je Titanijum(IV) etoksid (koji sadrži 33% TiO2) (6.1 g, 17.8 mmol) i reakciona smeša je mešana na 80 °C tokom 2 sata. Reakciona smeša je ohlađena na -78 °C i dodat je kap po kap L-Selektrid (1M rastvor u THF, 11.8 mL, 11.8 mmol) tokom 30 minuta, održavajući unutrašnju reakcionu temperaturu ispod -70 °C. Reakciona smeša je mešana na -78 °C tokom 1 sat i zatim je ugašena sa MeOH (2 mL). Rastvor je ostavljen da se zagreje do sobne temperature i razblažen sa vodom (50 mL). Dobijena čvrsta supstanca je uklonjena vakuumskom filtracijom, sakupljen je filtrat i rastvarač je uklonjen u vakuumu. Ostatak je prebačen u fiziološki rastvor (40 mL) i ekstrahovan sa TBME (2 x 60 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni (iznad Na2SO4), filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (eluiranje sa 0 - 20 % MeOH u DCM) da se dobije 1.25 g (34 % prinosa) naslovnog jedinjenja.
2
[0949]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.46 (d, J = 2.2, 1H), 7.53 (dd, J = 8.0, 2.3, 1H), 7.13 (d, J = 8.0, 1H), 4.57 (qd, J = 6.7, 6.7, 6.7, 3.4, 1H), 2.55 (s, 3H), 1.54 (d, J = 6.7, 3H), 1.18 (s, 9H).
Intermedijer VIII: (1R)-1-(6-Metilpiridin-3-il)etanamin hidrohlorid
[0950] U rastvor (S)-2-metil-N-[(1R)-1-(6-metilpiridin-3-il)etil]propan-2-sulfinamida (1.25 g, 4.1 mmol) u 2-propanolu (5 mL) ohlađen na 0 °C u ledenom kupatilu dodato je 5M HCl u 2-propanolu (4 mL, 20 mmol). Smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je 1 sat. Primećeno je stvaranje belog taloga. Talog je sakupljen filtracijom i ispran sa sa TBME da bi se dobilo 616 mg (78 % prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bele čvrste supstance.
[0951]<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 8.98 (s, 3H), 8.85 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.47 (dd, J = 8.3, 2.0 Hz, 1H), 7.77 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.53 - 7.24 (m, 2H), 4.60 (s, 1H), 2.68 (s, 3H), 1.58 (d, J = 6.9 Hz, 3H).
Intermedijer IX: 1-(5-Metilpirazin-2-il)etanon:
[0952] 5-Metilpirazin-2-karbonitril (25.0 g, 210 mmol) je rastvoren u dietil etru (500 mL) i ohlađen na -15 °C. Ovome je dodat kap po kap metil magnezijum jodid (3M u THF, 84 mL, 241 mmol) tokom 1 sata i unutrašnja temperatura održavana ispod -10 °C. Mutni narandžasti talog nastao je tokom dodavanja reaktanta. Reakcija je ugašena polaganim sipanjem smeše u 1M aq. HCl (250 mL) i usitnjeni led. Smeša je zagrejana do sobne temperature i načinjena baznom sa zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3. Dodat je TBME (300 mL) i sakupljen je organski sloj. Vodeni sloj je ekstrahovan sa TBME (2 x 300 mL) i kombinovani organski slojevi su isprani sa fiziološkim rastvorom (300 mL), osušeni (iznad Na2SO4), filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 18.4 g (61% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu žute čvrste supstance.
2 1
[0953]<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 8.97 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 8.68 (s, 1H), 2.62 (s, 3H), 2.60 (s, 3H).
Intermedijer X: (S)-2-Metil-N-[(1R)-1-(5-metilpirazin-2-il)etil]propan-2-sulfinamid
[0954] 1-(5-Metilpirazin-2-il)etanon (27.2 g, 200 mmol), (S)-tert-butilsulfinamid (24.24 g, 200 mmol) i titanijum(IV) etoksid (102 g, 300 mmol; koji sadrži 33% TiO2) su zagrevani u THF (1000 mL) na 80 °C tokom 1 sata i zatim ohlađeni na sobnu temperaturu. TLC (EtOAc/aceton 1:1) pokazala je na potrošnju Intermedijera IX. Smeša je ohlađena na -78 °C i dodat je kap po kap L-Selektrid (1m u THF, 200 mL, 200 mmol) tokom 60 minuta uz održavanje unutrašnje temperature ispod w -70 °C. Smeša je mešana na -78 °C tokom 1 sata, zatim je ugašena dodavanjem kap po kap MeOH (50 mL) i zagrevana do sobne temperature. Po dodavanju vode (100 mL) formiran je beli talog koji je sakupljen filtracijom i ispran sa TBME (2 L).
[0955] Vodeni sloj filtrata je odvojen i ispran sa TBME (2 x 200 mL). Spojene organske materije su isprane sa fiziološkim rastvorom (100 mL), osušene (iznad Na2SO4), filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen suvom fleš hromatografijom (silika gel, eluiranje sa 0 - 60% aceton u EtOAc) da se dobije 35.8 g (49 % prinosa) naslovnog jedinjenja kao smeđe ulje.
[0956]<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 8.57 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 8.45 (s, 1H), 5.56 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 5.29 (s, 1H), 4.56 - 4.44 (m, 1H), 2.47 (s, 3H), 1.51 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 1.11 (s, 9H), 1.08 (s, 5H).
Intermedijer XI: (1R)-1-(5-Metilpirazin-2-il)etanamin dihidrohlorid
2 2
[0957] U rastvor (S)-2-metil-N-[(1R)-1-(5-metilpirazin-2-il)etil]propan-2-sulfinamida (35 g, 63.7 mmol) u 2-propanolu (200 mL) dodat je 5M HCl u 2-propanolu (65 mL, 325 mmol) na 0 °C. Smeša je zagrevana do sobne temperature, što je rezultiralo formiranjem taloga. Posle 1 sata mešanja talog je sakupljen filtracijom. Rekristalizacija iz vrućeg TBME (200 mL) dala je 19.8 g (78 % prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu svetlo smeđe čvrste supstance.
[0958]<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ [ppm]: 8.70 (s, 4H), 8.59 (s, 1H), 4.57 (dq, J = 12.2, 6.1 Hz, 1H), 2.52 (s, 3H), 1.53 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
Intermedijer XII: 6-Metilpiridazin-3-karbonitril
[0959] Rastvor 3-hloro-6-metilpiridazina (50 g, 389 mmol) u DMA (1250 mL) je 10 minuta degaziran pod azotom zatim su dodati cink (II) cijanid (27.4 g, 233 mmol), prah cinka (1017 mg, 15.6 mmol) i Pd(dppf)Cl2.DCM (12.7 g, 15.6 mmol). Smeša je zagrevana na 120°C preko noći. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, razblažena sa DCM (1 L) i filtrirana kroz Celite, isprana sa dodatnim DCM. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen suvom fleš hromatografijom na silicijum dioksidu (eluiranje sa TBME) da se dobije 34.9 g (75 % prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu beličaste čvrste supstance.
[0960]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 7.72 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 2.85 (s, 3H).
Intermedijer XIII: 1-(6-Metilpiridazin-3-il)etan-1-on
[0961] Rastvor 6-metilpiridazin-3-karbonitril (23.8 g, 200 mmol) u TBME (1.2 L) je mešan pod azotom i ohlađen na -15°C. Dodat je metil magnezijum jodid (3M u Et2O, 80 mL, 240 mmol) tokom -20 minuta, održavajući unutrašnju temperaturu ispod -15 °C. Reakciona smeša je mešana tokom 1.5h pre gašenja dodavanjem 2M HCl (120 mL). Smeša je zagrevana do sobne temperature, organski sloj je sakupljen, osušen (iznad Na2SO4), filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom dajući žutu čvrstu supstancu. Vodeni sloj je načinjen baznim do pH 8-
2
9 sa NaHCO3, ekstrahovan sa DCM (4 x 200 mL) i kombinovane organske materije su osušene (iznad Na2SO4), filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Dve šarže su kombinovane da bi se dobilo 26.2 g (67 % prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu žute čvrste supstance.
[0962]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.02 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 2.87 (s, 3H), 2.81 (s, 3H).
Intermedijer XIV: (S)-2-Metil-N-[(1R)-1-[6-metilpiridazin-3-il)etil] propan-2-sulfinamid
[0963] U mešani rastvor 1-(6-metilpiridazin-3-il)etan-1-ona (26.2 g sirov, 19.90 g ispravljene mase čistoće, 146.2 mmol) i titanijum(IV) etoksida (61.3 mL, 292.3 mmol) u suvom THF (600 mL) dodat je (S)-2-t-butilsulfinamid (17.71 g, 146.2 mmol) i dobijeni rastvor je mešan na 80°C tokom 60 min. Rastvor je ohlađen na -70°C i dodat je kap po kap L-Selektrid (1M u THF, 146.2 mL, 142 mmol), uz održavanje unutrašnje temperature ispod -72°C. Reakciona smeša je mešana na -78 °C tokom 30 minuta, ugašena polaganim dodavanjem metanola (30 mL) i ostavljena da se zagreje do sobne temperature. Dodati su etil acetat (800 ml) i voda (800 ml) što je rezultiralo taloženjem. Čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom, isprana sa etil acetatom (3 x 400 mL). Svaki 3 x -400 mL EtOAc filtrat je korišćen za povratno ekstrahovanje vodenog sloja. Kombinovani organski slojevi su osušeni (iznad Na2SO4), filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je delimično prečišćen suvom fleš hromatografijom na silicijum dioksidu (eluiranje sa EtOAc praćeno sa aceton). Ponovno prečišćavanje sa suvom fleš hromatografijom na silicijum dioksidu (eluiranje sa 50% aceton u EtOAc) dalo je 21.4 g (44 % prinosa) naslovnog jedinjenja vidu smeđeg viskoznog ulja.
[0964]<1>H NMR (250 MHz, Hloroform-d): δ 7.40 [ppm] (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.30 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 4.84 (p, J = 6.7 Hz, 1H), 3.97 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 3.71 (s, 1.3H), 2.70 (s, 3H), 1.68 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.22 (s, 6H), 1.20 (s, 9H).
Intermedijer XV: (1R)-1-(6-Metilpiridazin-3-il)etan-1-amin hidrohlorid
2 4
[0965] (S)-2-metil-N-[(1R)-1-(6-metilpiridazin-3-il)etil]propan-2-sulfinamid (21.3 g, 88.3 mmol) je rastvoren u metanolu (400 mL) i ohlađen na 0°C pre polaganog dodavanja 12M HCl u vodi (73.6 mL, 883 mmol). Reakcija je mešana na sobna temperatura tokom 1 sat pre uparavanja pod vakuumom. Ostatak je dva puta azeotropiran sa izopropanolom (100 mL) i triturisan sa toplim izopropanolom (100 mL). Posle hlađenja do sobne temperature, talog je sakupljen filtracijom i osušen pod vakuumom da bi se dobilo 11.8 g (55% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu beličastog praha.
[0966]<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 8.90 (s, 3H), 8.02 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.87 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.58 - 7.14 (m, 2H), 4.71 (dt, J = 12.4, 6.1 Hz, 1H), 2.71 (s, 3H), 1.58 (d, J = 6.9 Hz, 3H).
[0967] Analitička HPLC: Kolona: Chiralpak AD-H 25cm; Mobilna faza: 90:10 Heptan: Etanol 1% DEA; Protok: 1 ml/min; Detekcija: UV 254 nm.; dužina trajanja: 60 minuta; Rt = 28.64 min; 100% ee.
Intermedijer XVI: 1-[6-(Trifluorometil)piridazin-3-il]etanon
[0968] U degazirani rastvor 3-hloro-6-(trifluorometil)piridazina (17.26 g, 94.6 mmol) i tributil(1-etoksietenil)stanana (38.3 mL, 113.5 mmol) u DMF (400 mL) pod N2dodat je PdCl2(PPh3)2(0.66 g, 0.95 mmol). Reakcija je mešana na 100°C tokom 3h. Ohlađena reakciona smeša je razblažena sa dietil etrom (800 ml) i tretirana vodenim rastvorom KF (27 g KF u 800 mL vode). Smeša je snažno mešana tokom 1h pre filtriranja kroz celit. Filtrat je ispran sa zasićenim rastvorom NaHCO3(400 mL) i fiziološkim rastvorom (400 mL). Vodena faza je ponovo ekstrahovana sa EtOAc (500 mL) i kombinovane organske materije su osušene (iznad MgSO4) i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je suspendovan u THF (400 mL) i dodato je 2M HCl (400mL). Rastvor je mešan preko noći na sobnoj temperaturi pre nego što je koncentrovan da se ukloni THF i ekstrahovan sa DCM (3 x 500 mL). Kombinovani
2
organski slojevi su osušeni (iznad MgSO4) i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa suvom fleš hromatografijom na silicijum dioksidu (eluiranje sa DCM) da se dobije 11.2 g (61 % prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bele čvrste supstance.
[0969]<1>H NMR (500 MHz, CDCl3): δ [ppm] 8.32 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.00 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 2.95 (s, 3H).
[0970] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.01 min, MS (ESIpos): m/z = 190.9 (M+H)+.
Intermedijer XVII: (S)-2-Metil-N-[(1R)-1-[6-(trifluorometil)piridazin-3-il]etil]propan-2-sulfinamid
[0971] U mešani rastvor 1-[6-(trifluorometil)piridazin-3-il]etanona (1.27 g, 6.68 mmol) i titanijum (IV) etoksida (2.80 mL, 13.36 mmol) u suvom THF (27.5 mL) dodat je (S)-2-tbutilsulfinamid (0.81 g, 6.68 mmol) i dobijeni rastvor je mešan na 80°C tokom 60 minuta. Reakcija je ohlađena na ispod -70°C i kap po kap je dodat L-selektrid (1M, 6.7 mL), održavajući unutrašnju temperaturu ispod - 68°C. Posle završetka dodavanja, reakcija je mešana na ovoj temperaturi tokom sledećih 60 minuta pre nego što je ugašena dodavanjem metanola kap po kap (1.4 mL), praćeno sa EtOAc (40 mL) i vodom (40 mL). Organski sloj je sakupljen dekantiranjem i čvrsti ostatak je mešan sa EtOAc (30 mL). Organski sloj je sakupljen dekantiranjem i postupak je ponovljen tri puta. Kombinovani organski slojevi su osušeni (iznad Na2SO4), filtrirani, razblaženi sa heptanom (20 mL) i upareni na silicijum dioksidu (5 g). Materijal je prečišćen sa suvom fleš hromatografijom (eluiranje sa TBME, praćeno sa EtOAc zatim sa acetonom) da se dobije 1.09 g (51 % prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu beličastog praha.
[0972]<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ [ppm] = 7.81 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 5.01 (p, J = 6.7 Hz, 1H), 3.93 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 1.75 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 1.23 (s, 9H).
Intermedijer XVIII: (1R)-1-[6-(Trifluorometil)piridazin-3-il]etanamin hidrohlorid (1:1)
2
[0973] U rastvor (S)-2-metil-N-[(1R)-1-[6-(trifluorometil)piridazin-3-il]etil]propan-2-sulfinamida (998 mg, 3.38 mmol) u metanolu (12 mL) na 0°C dodata je koncentrovana HCl (12 M, 2.8 mL, 883 mmol) i reakcija je mešana tokom 1h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i azeotropirana izopropanolom (2 x 30 mL). Ostatak je triturisan sa suvim acetonom i talog je sakupljen vakuumskom filtracijom. Matična tečnost je koncentrovana, a ostatak triturisan sa EtOAc. Talog je sakupljen vakuumskom filtracijom i šarže su kombinovane da bi se dobilo 738 mg (89 % prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu beličastog praha.
[0974]<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 8.95 (s, 3H), 8.42 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 8.27 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.88 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 1.63 (d, J = 6.9 Hz, 3H).
Intermedijer XIX: Tert-butil [(2R)-1-(2-acetilhidrazinil)-1-oksopropan-2-il]karbamat
[0975] N-Boc-D-alanin (1 g, 5.29 mmol) je rastvoren u DCM (15 mL). Dodat je u jednoj porciji EEDQ (1.3 g, 5.29 mmol), praćeno sa sirćetnim hidrazidom (0.47 g, 6.34 mmol) i rastvor je mešan tokom 72h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i dobijeni ostatak prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (eluiranje sa 20 -100 % aceton u heptanu na 25 g prethodno upakovane kolone KP-SiO2) da se dobije 917.7 mg (71 % prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bele čvrste supstance.
[0976]<1>H NMR (500 MHz, CDCl3): δ [ppm] 8.95 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 5.06 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 4.30 (s, 1H), 2.06 (s, 3H), 1.45 (s, 9H), 1.40 (d, J = 7.2 Hz, 3H).
Intermedijer XX: Tert-butil [(1R)-1-(5-metil-1,3,4-tiadiazol-2-il)etil]karbamat
2
[0977] Tert-butil [(2R)-1-(2-acetilhidrazinil)-1-oksopropan-2-il]karbamat (917.7 mg, 3.74 mmol) je rastvoren u suvom THF (50 mL) i dodat je Lavessonov reagens (1.66 g, 4.12 mmol) u jednoj porciji. Dobijena suspenzija je zagrevana 2 sata pod refluksom i ostavljena da se ohladi do sobne temperature preko noći. Upareni sirovi ostatak je delimično prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (eluiranje sa 0 - 50 % EtOAc u heptanu na 25 g prethodno upakovane kolone Isolute Silika gel) da se dobije žuta guma. Prečišćavanje je izvedeno rastvaranjem u EtOAc (20 mL) i mešanjem sa ugljem za uklanjanje boje (2 x 4g) tokom 10 minuta. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 876.6 mg (96 % prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bistre gume koja je kristalisala stajanjem.
[0978]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ 5.32 - 5.04 (m, 2H), 2.75 (s, 3H), 1.65 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.45 (s, 9H).
[0979] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.04 min, MS (ESIpos): m/z = 244.0 (M+H)<+>.
Intermedijer XXI: (1R)-1-(5-Metil-1,3,4-tiadiazol-2-il)etanamin hidrohlorid
[0980] U rastvor na 0°C tert-butil [(1R)-1-(5-metil-1,3,4-tiadiazol-2-il)etil]karbamata (876.6 mg, 3.6 mmol) u MeOH (12 mL) dodato je 4 M HCl u dioksanu (9 mL, 36.0 mmol). Posle mešanja tokom 4h na sobnoj temperaturi rastvarač je uparen i ostatak triturisan iz Et2O. talog je sakupljen filtracijom i osušen u vakuum peći da bi se dobilo 565 mg (81 % prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bele čvrste supstance.
[0981]<1>H NMR (250 MHz, DMSO-d6): δ 7.21 (s, 3H), 4.77 - 4.63 (m, 1H), 2.71 (s, 3H), 1.51 (d, J = 6.7 Hz, 3H).
[0982] Analitička HPLC: Kolona: YMC Amy-C (150mm x 4.6mm, 5um); Mobilna faza: Heptan/Etanol (1:1) (DEA dodat je kao modifikator); Protok: 1 ml/min; Detekcija: UV 254 nm.; dužina trajanja: 10mins; Rt = 5.13 min; 92.1% ee.
2
Intermedijer XXII: 2-(Trifluorometil)pirimidin-5-karbaldehid
[0983] N-Metoksi-N-metil-2-(trifluorometil)pirimidin-5-karboksamid (1 g, 4.25 mmol) je rastvoren u anhidrovanom THF (25 mL) pod N2i ohlađen na -78°C. kap po kap je dodat litijumaluminijum-hidrid (1M u THF, 2.66 mL, 6.34 mmol) i reakcija je mešana tokom 30 minuta. Reakcija je ugašena dodavanjem vode (5 mL) i reakciona smeša ostavljena da se zagreje do sobne temperature. Dodati su EtOAc (10 mL) i 1M HCl (10 mL) i smeša je mešana tokom 30 minuta. Vodeni sloj je sakupljen i ekstrahovan sa EtOAc (10 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni (iznad MgSO4) i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 577.2 mg (77 % prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bezbojnog ulja.
[0984]<1>H NMR (250 MHz, CDCl3): δ [ppm] 10.26 (s, 1H), 9.35 (s, 2H).
Intermedijer XXIII: (R)-2-Metil-N-{(E)-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]metiliden}propan-2-sulfinamid
[0985] U rastvor 2-(trifluorometil)pirimidin-5-karbaldehida (0.58 g, 3.28 mmol) u DCE (10 mL) dodat je (R)-(+)-2-metil-2-propansulfinamid (0.44 g, 3.60 mmol) i bakar(II) sulfat (1.05 g, 6.55 mmol). Smeša je zagrevana na 50 °C i mešana preko noći. Reakciona smeša je ohlađena i filtrirana kroz Celite, te isprana sa DCM. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 697.8 mg (76 % prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu smeđe gume.
[0986]<1>H NMR (250 MHz, CDCl3): δ 9.30 (s, 2H), 8.73 (s, 1H), 1.30 (s, 9H).
Intermedijer XXIV: (R)-2-Metil-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]propil}propan-2-sulfinamid
2
[0987] U rastvor (R)-2-metil-N-{(E)-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]metiliden}propan-2-sulfinamida (697.8 mg, 2.5 mmol) u THF (10 mL) na - 70°C dodat je etilmagnezijum bromid (1M u THF, 2.75 mL, 2.75 mmol). Smeša je mešana na -70 °C tokom 15 minuta. Smeša je ugašena sa zasićenim NH4Cl i reakcija je ostavljena da se zagreje do sobne temperature. rastvor je ekstrahovan sa EtOAc (3 x 10 mL) i kombinovane organske materije su osušene (iznad MgSO4) i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (bazični silika gel, eluiranje sa 0 - 60 % EtOAc u heptanima) da se dobije 445.2 mg (52 % prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu žute gume.
[0988]<1>H NMR (500 MHz, CDCl3): δ [ppm] 8.87 (s, 2H), 4.42 (q, J = 6.2 Hz, 1H), 3.52 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 2.12 (tt, J = 14.0, 7.3 Hz, 1H), 1.89 (dp, J = 14.7, 7.4 Hz, 1H), 1.24 (s, 10H), 0.93 (t, J = 7.4 Hz, 3H).
[0989] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.19 min, MS (ESIpos): m/z = 310 (M+H)+.
Intermedijer XXV: (1R)-1-[2-(Trifluorometil)pirimidin-5-il]propan-1-amin hidrohlorid
[0990] U rastvor (R)-2-metil-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]propil}propan-2-sulfinamida (445.2 mg, 1.31 mmol) u dietil etru (5 mL) dodata je hlorovodonična kiselina (2M u Et2O), 3.3 mL, 6.6 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1h. Talog je sakupljen filtracijom i osušen i osušen u vakuumskoj peći da bi se dobilo 283.0 mg (89 % prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu žutog praha.
[0991]<1>H NMR (250 MHz, DMSO): δ [ppm] 9.26 (s, 2H), 8.81 (s, 3H), 4.45 (dd, J = 8.5, 6.4 Hz, 1H), 2.19 - 1.89 (m, 2H), 0.85 (t, J = 7.4 Hz, 3H).
2
Intermedijer XXVI: (R)-2-Metil-N-{(1S)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}propan-2-sulfinamid
[0992] U mešani rastvor 1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etanona (331 mg, 1.74 mmol) i titanijum (IV) etoksida (0.73 mL, 3.5 mmol) u THF (10 mL) dodat je (R)-2-t-butilsulfinamid (211 mg, 1.74 mmol) i dobijeni rastvor je mešan na 80°C tokom 45 minuta. Reakciona smeša je ohlađena na -78 °C i dodat je kap po kap L-selektrid (1.74 mL, 1M rastvor u THF) održavajući unutrašnju temperaturu ispod -70 °C. Reakcija je mešana na -78 °C tokom sledećih 30 minuta. Reakcija je ugašena dodavanjem MeOH (1 mL) i zagrejana do sobne temperature. Dodat je voda (50 mL) zatim EtOAc (100 mL) i smeša je filtrirana kroz filter papir od staklenih vlakana, isprana sa EtOAc (2 x 50 mL). Filtrat je odvojen i vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (2 x 50 mL). Kombinovane organske materije su osušene (iznad Na2SO4), filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (silika gel, eluiranje sa 0 - 10 % MeOH u EtOAc) praćeno sa trituracijom iz TBME da bi se dobilo 170 mg (28% prinosa) u vidu beličastog praha.
[0993]<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ [ppm] = 8.88 (s, 2H), 4.75 (qd, J = 6.8, 3.6 Hz, 1H), 3.48 - 3.38 (m, 1H), 1.68 - 1.62 (m, 3H), 1.24 (s, 9H).
Intermedijer XXVII: (1S)-1-[2-(Trifluorometil)pirimidin-5-il]etanamin hidrohlorid
[0994] (R)-2-Metil-N-[(1S)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil]propan-2-sulfinamid (0.17 g, 0.58 mmol) je rastvoren u metanolu (5 mL) i ohlađen na 0°C. Dodata je kap po kap koncentrovani vodeni rastvor HCl (0.55 mL) i reakcija je mešana na sobna temperatura tokom 1 sat pre nego što je koncentrovana pod vakuumom. Dobijeno žuto ulje je ultrazvučno obrađeno
2 1
sa dietil etrom, dajući belu čvrstu supstancu koja je sakupljena filtracijom da bi se dobilo 0.107 g (82 % prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bele čvrste supstance.
[0995]<1>H NMR (250 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] = 9.25 (s, 2H), 8.79 (s, 3H), 4.67 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 1.63 (d, J = 6.9 Hz, 3H).
[0996] Analitička HPLC: Kolona: Chiralpak AD-H 25cm; Mobilna faza: 90:10 Heptan: Etanol; Protok: 0.3ml/min; Detekcija: UV 254 nm.; dužina trajanja: 70mins; Rt = 37.79 min; 100% ee.
Intermedijer XXVIII: (1R)-1-(2-Metilpirimidin-5-il)etanamin
[0997] Intermedijer XXVIII je sintetizovan prateći opis u WO2008/130481.
Intermedijer XXXIX: 2-(Trifluorometil)pirimidin-5-karbonitril
[0998] Intermedijer II (1 g, 5.2 mmol), amonijum hlorid (0.56, 10.4 mmol) i trietilamin (1.45 mL, 10.4 mmol) su suspendovani u 1,4-dioksanu. Dodat je T3P (50 % u EtOAc, 7.3 mL, 12.5 mmol) i reakcija je mešana na 100 °C tokom 24 h. Reakcija je ponovo tretirana sa T3P (50 % u EtOAc, 3.65 mL, 6.25 mmol) i zagrevana tokom sledećih 6 h. Reakcija je ponovo tretirana sa amonijum hloridom (0.56, 10.4 mmol) i trietilaminom (1.45 mL, 10.4 mmol) i mešana na 100 °C tokom 18 h. Reakciona smeša je razblažena sa vodom (20 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3 x 20 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (silika gel, eluiranje sa heptan-EtOAc, 1:0 do 1:1) da bi se dobilo 642 mg (71% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bezbojnog ulja.
[0999]<1>H NMR (250 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 9.19 (s, 2H).
2 2
[1000] LCMS (Analitički metod A) Rt = 0.96 min.
Intermedijer XL: 1-[2-(Trifluorometil)pirimidin-5-il]metanamin hidrohlorid
[1001] U rastvor Intermedijera XXXIX (500 mg, 2.9 mmol) u etanolu (10 mL) dodato je 6 M hlorovodonične kiseline (1 mL), Pd/C (10 % tež.50 mg, 10 % tež.) i dobijena smeša je mešana u atmosferi vodonika na sobnoj temperaturi tokom 3 h. Katalizator je uklonjen filtracijom pod sniženim pritiskom i čvrste supstance su isprane sa MeOH. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom i ostatak trituriran sa Et2O da bi se dobilo 381.3 mg (50% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu beličastog praha.
[1002]<1>H NMR (250 MHz, DMSO): δ [ppm] 9.22 (s, 2H), 8.71 (s, 3H), 4.22 (s, 2H), sadrži 19 tež% NH4Cl.
Intermedijer XLI: 1-[6-(Trifluorometil)-3-piridil]etanon
[1003] 5-Bromo-2-(trifluorometil)piridin (10.0 g, 44.3 mmol), voda (40 mL), DMF (120 mL), kalijum karbonat (12.2 g, 88.5 mmol), bis(trifenilfosfin)paladijum(II) dihlorid (621 mg, 2 mol %) i tributil(1-etoksietenil)stanan (19.2 g, 53.1 mmol) su mešani i zagrevani na 110 °C pod azotom tokom 1.5 h. Reakciona smeša je ohlađena, razblažena sa dietil etrom (120 mL) i dodat je KF (12.8 g u 50 mL vode). Dobijena reakciona smeša je snažno mešana 1 sat pre filtriranja kroz Celite®. Organski sloj je zatim ispran sa zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3praćeno sa fiziološkim rastvorom i zatim je osušen iznad MgSO4, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prebačen u THF (200 mL) i 2M HCl (60 mL) i reakcija je mešana na temperaturi okoline tokom 40 minuta. Organski slojevi su uklonjeni pod sniženim pritiskom i vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM (3 x 50 mL). Organski slojevi su kombinovani, osušeni iznad MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi
2
materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (silika gel, eluiranje sa heptan-EtOAc, 1:0 do 10:1) da bi se dobilo 4.90 g (56% prinosa) u vidu bele kristalne čvrste supstance.
[1004]<1>H NMR (250 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 9.25 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 8.41 (dd, J = 8.2, 1.6 Hz, 1H), 7.82 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 2.70 (s, 3H).
[1005] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.15 min, MS (ESIpos): m/z = 190.0 (M+H)<+>.
Intermedijer XLII: 2-Metil-N-[(1R)-1-[6-(trifluorometil)-3-piridil]etil]propan-2-sulfinamid
[1006] U mešani rastvor Intermedijera XLI (5.44 g, 28.8 mmol) i titanijum(IV) etoksida (18.6 mL, 57.5 mmol) u dietil etru (120 mL) dodat je (S)-2-t-butilsulfinamid (3.85 g, 31.6 mmol) i dobijeni rastvor je mešan na refluksu pod azotom tokom 3 h. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i zatim na -78 °C i dodat je kap po kap litijum tri-s-butilborohidrid (1M u THF, 34.5 ml, 34.5 mmol). Reakcija je mešana na -78 °C tokom 30 minuta. Reakcija je ugašena dodavanjem fiziološkog rastvora (20 mL) i ostavljena je da se zagreje na sobnu temperaturu pre filtracije kroz čep od Celita® (isprana sa etil acetatom). Filtrat je ispran sa fiziološkim rastvorom (40 mL) i vodeni sloj je ekstrahovan jednom sa etil acetatom (40 mL). Organski slojevi su kombinovani, osušeni iznad MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je triturisan sa Et2O, i talog sakupljen sa vakuumskom filtracijom da bi se dobilo 5.15 g (61% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bele čvrste supstance.
[1007]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.71 (d, J = 1.6, 1H), 7.83 (dd, J = 8.1, 2.0, 1H), 7.66 (d, J = 8.1, 1H), 4.70 (qd, J = 6.7, 2.6, 1H), 3.44 - 3.39 (m, 1H), 1.58 (d, J = 6.8, 3H), 1.21 (s, 9H).
[1008] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.13 min, MS (ESIpos): m/z = 295.05 (M+H)<+>.
Intermedijer XLIII: (1R)-1-[6-(Trifluorometil)piridin-3-il]etanamin hidrohlorid
2 4
[1009] U rastvor Intermedijera XLII (5.15 g, 17.5 mmol) u 2-propanolu (20 mL) ohlađen na 0 °C u ledenom kupatilu, dodata je koncentrovana HCl (5 mL, 60 mmol). Smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i posle 20 minuta dodat je metanol (5 mL) da bi se poboljšala rastvorljivost. Reakcija je mešana tokom 3 sata. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom i ostatak je triturisan sa dietil etrom i sakupljen vakuumskom filtracijom da bi se dobilo 3.28 g (83% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu belog praha.
[1010]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.68 (s, 1H), 7.79 (dd, J=8.1, 2.1, 1H), 7.64 (d, J=8.1, 1H), 4.88 (s, 2H), 1.48 (d, J=6.7, 3H), 1.41 (s, 9H).
Intermedijer XLIV: Tert-butil {(1R)-1-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]etil}karbamat
[1011] U rastvor Intermedijera XLIII u DCM (40 mL) dodat je di-tert-butil dikarbonat (2.91 g, 13.3 mmol) i trietilamin (5.1 mL, 36.4 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 h pre nego što je isprana sa zasićenim rastvorom NH4Cl (40 mL). Vodena faza je ponovo ekstrahovana sa DCM (2 x 40 mL), i kombinovani organski slojevi su osušeni iznad MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 3.7 g (100% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu belog praha.
[1012] 1H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.68 (s, 1H), 7.79 (dd, J=8.1, 2.1, 1H), 7.64 (d, J=8.1, 1H), 4.88 (s, 2H), 1.48 (d, J=6.7, 3H), 1.41 (s, 9H).
[1013] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.37 min, MS (ESIpos): m/z = 290.95 (M+H)<+>.
Intermedijer XLVII: Etil (5-bromopirimidin-2-il)(difluoro)acetat
2
[1014] U smešu cinka u prahu (9.6 g, 147.4 mmol) u triglimu (100 mL) dodat je TMSBr (1.9 mL, 14.4 mmol) pod N2i reakcija je mešana pod refluksom tokom 90 minuta. Reakcija je ohlađena do sobne temperature, dodat je kap po kap etil bromo(difluoro)acetat (15.3 mL, 119.3 mmol), i smeša je mešana tokom 30 minuta pre hlađenja na -10 °C. Dodat je kap po kap 5-bromo-2-jodo-pirimidin (10 g, 35.1 mmol) u DMA (100 mL), zatim je reakcija ostavljena da se zagreje do sobne temperature. Dodat je bakar(I) bromid (21.1 g, 147.4 mmol) u porcijama tokom 40 minuta, zatim je reakcija mešana na sobnoj temperaturi tokom još 1 h. Reakciona smeša je polako sipana u ohlađenu smešu 10 % NaCl (100 mL), 5M HCl (100 mL) i toluena (200 mL), i mešana tokom 30 minuta. Smeša je filtrirana, i organski sloj je odvojen i osušen iznad MgSO4, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (silika gel, eluiranje sa heptan-EtOAc, 1:0 do 7:3) dajući 10.34 g (82% prinosa, 78 % čistoća) naslovnog jedinjenja u vidu bezbojnog ulja.
[1015]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.92 (s, 2H), 4.41 (qd, J = 7.1, 3.4 Hz, 2H), 1.34 (t, J = 7.1 Hz, 3H).
[1016] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.10 min, MS (ESIpos): m/z = 280.9 / 282.9 (M+H)<+>.
Intermedijer XLVIII: Etil (5-acetilpirimidin-2-il)(difluoro)acetat
[1017] U degazirani rastvor Intermedijera XLVII (4.5 g, 12.5 mmol) i tributil(1-etoksietenil)stanana (5.06 mL, 15.0 mmol) u suvom DMF (45 mL) pod N2dodat je PdCl2(PPh3)2(88 mg, 0.13 mmol). Reakcija je mešana na 100 °C tokom 3h. Reakciona smeša je razblažena sa etrom (90 mL) i tretirana sa vodenim rastvorom KF (7.26 mg KF u 90 ml vode). Smeša je snažno mešana tokom 1h pre filtriranja kroz filter papir od staklenih vlakana. Filtrat je ispran sa zasićenim rastvorom NaHCO3praćeno sa fiziološkim rastvorom. Vodeni rastvor je ekstrahovan sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je suspendovan u THF (90 mL) i dodato je 1M HCl (90 mL). Rastvor je mešan tokom 2 h na sobnoj temperaturi, pre nego što je koncentrovan da bi se uklonio THF, zatim je ekstrahovan sa DCM (3 x 90 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim
2
pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (silika gel, eluiranje sa heptan-EtOAc, 3:2 do 1:1) da bi se dobilo 1.37 g (45% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bezbojnog ulja.
[1018]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 9.32 (s, 2H), 4.41 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 2.70 (s, 3H), 1.35 (t, J = 7.1 Hz, 3H).
[1019] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.01 min, MS (ESIpos): m/z = 244.95 (M+H)<+>.
Intermedijer XLIX: 1-[2-(Difluorometil)pirimidin-5-il]etanon
[1020] Smeša Intermedijera XLVIII (1.05 g, 4.3 mmol), KF (1.25 g, 21.5 mmol) i vode (387.3 µL, 21.5 mmol) u DMF (20 mL) je mešana na 170 °C pod N2tokom 3 h, zatim je ohlađena na RT. Dodat je zasićeni rastvor NaHCO3(20 mL) i smeša je ekstrahovana sa Et2O (3 x 40 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (silika gel, eluiranje sa heptan-EtOAc, 3:2) da bi se dobilo 493 mg (67% prinosa) naslovnog jedinjenja kao žuto ulje koje je kristalisalo stajanjem.
[1021]<1>H NMR (250 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 9.33 (s, 2H), 6.71 (t, J = 54.2 Hz, 1H), 2.70 (s, 3H).
[1022] LCMS (Analitički metod A) Rt = 0.69 min, MS (ESIpos): m/z = 172.90 (M+H)<+>.
Intermedijer L: (S)-N-[(1R)-1-[2-(Difluorometil)pirimidin-5-il]etil]-2-metilpropan-2-sulfinamid
2
[1023] U mešani rastvor Intermedijera XLIX (492 mg, 2.86 mmol) i titanijum(IV) etoksida (1.84 mL, 3.14 mmol) u Et2O (20 mL) dodat je (S)-2-t-butilsulfinamid (381 mg, 3.14 mmol) i dobijeni rastvor je mešan pod refluksom tokom 2 h pod azotom. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i zatim na -78 °C i dodat je kap po kap L-selektrid (3.7 mL, 1M sol. u THF). Reakcija je mešana na -78 °C tokom sledećih 45 min, zatim je reakcija ugašena dodavanjem fiziološkog rastvora (5 mL), pre nego što je ostavljena da se zagreje do sobne temperature. Suspenzija je filtrirana kroz čep od Celite®, isprana sa EtOAc. Filtrat je ispran sa fiziološkim rastvorom (10 mL), i vodeni sloj je ponovo ekstrahovan sa EtOAc (2 x 10 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je triturisan sa dietil etrom da bi se dobilo 365.1 mg (45% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bele čvrste supstance.
[1024]<1>H NMR (250 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.84 (s, 2H), 6.67 (t, J = 54.5 Hz, 1H), 4.72 (qd, J = 6.7, 3.1 Hz, 1H), 3.41 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 1.63 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.23 (s, 9H).
[1025] LCMS (Analitički metod A) Rt = 0.90 min, MS (ESIpos): m/z = 277.95 (M+H)<+>.
Intermedijer LI: (1R)-1-[2-(Difluorometil)pirimidin-5-il]etanamin hidrohlorid
[1026] Intermedijer L (982 mg, 3.54 mmol) je mešan u 1 M HCl u etru (35 mL) tokom 4 h da se formira beli talog. Materijal je sakupljen filtracijom i osušen u vakuumskoj peći da bi se dobilo 780 mg (90% prinosa) u vidu žutog stakla.
[1027]<1>H NMR (250 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 9.17 (s, 2H), 8.87 (s, 2H), 7.01 (t, J = 53.9 Hz, 1H), 4.68 - 4.55 (m, 1H), 1.62 (d, J = 6.9 Hz, 3H).
Intermedijer LII: 1-[6-(Difluorometil)piridin-3-il]etanon
2
[1028] U degazirani rastvor 5-bromo-2-(difluorometil)piridina (1 g, 4.81 mmol) i tributil(1-etoksietenil)stanana (1.95 mL, 5.77 mmol) u DMF (20 mL) pod N2dodat je PdCl2(PPh3)2(34 mg, 0.05 mmol). Reakcija je mešana na 100 °C tokom 2.5 h. Reakciona smeša je razblažena sa etrom (40 mL) i tretirana sa vodenim rastvorom KF (1.4 g KF u 40 mL vode). Smeša je snažno mešana tokom 1 h pre filtriranja kroz Celite®. Filtrat je razblažen sa etil acetatom (50 mL), ispran sa zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata, zatim sa fiziološkim rastvorom, osušen iznad MgSO4, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je suspendovan u THF (20 mL) i dodato je 2M HCl (20 mL). Rastvor je snažno mešan tokom 15 minuta na sobnoj temperaturi pre koncentrovanja da se ukloni THF, zatim je ekstrahovan sa DCM (3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (silika gel, eluiranje sa heptan-EtOAc, 1:0 do 4:1) da bi se dobilo 730 mg (87% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bezbojnog ulja.
[1029]<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 9.20 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 8.47 (dd, J = 8.1, 2.1 Hz, 1H), 7.86 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.05 (t, J = 54.6 Hz, 1H), 2.67 (s, 3H).
[1030] LCMS (Analitički metod A) Rt = 0.94 min, MS (ESIpos): m/z = 171.9 (M+H)<+>.
Intermedijer LIII: (S)-N-[(1R)-1-[6-(Difluorometil)piridin-3-il]etil]-2-metilpropan-2-sulfinamid
[1031] U mešani rastvor Intermedijera LII (725 mg, 4.19 mmol) i titanijum(IV) etoksida (2.73 mL, 8.47 mmol) u dietil etru (40 mL) dodat je (S)-2-t-butilsulfinamid (565 mg, 8.47 mmol) i dobijeni rastvor je mešan pod refluksom tokom 20 h pod azotom. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature zatim još ohlađena na -78 °C i dodat je kap po kap L-selektrid (4.66 mL, 1M sol. u THF). Reakcija je mešana na -78 °C tokom sledećih 1 h zatim je ugašena dodavanjem fiziološkog rastvora (25 mL), pre nego što je ostavljena da se zagreje do sobne temperature. Suspenzija je filtrirana kroz čep od Celite®, isprana sa etil acetatom. Filtrat je ispran sa fiziološkim rastvorom (20 mL), i vodeni sloj je ponovo ekstrahovan sa EtOAc (30 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim
2
pritiskom. Sirova žuta čvrsta supstanca je triturisana sa dietil etrom da bi se dobilo 525 mg (44% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bele čvrste supstance.
[1032]<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 8.67 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.96 (dd, J = 8.1, 2.0 Hz, 1H), 7.67 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 6.93 (t, J = 55.0 Hz, 1H), 5.58 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 4.56 (m, 1H), 1.51 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.11 (s, 9H).
[1033] LCMS (Analitički metod A) Rt = 0.99 min, MS (ESIpos): m/z = 276.95 (M+H)<+>.
Intermedijer LIV: (1R)-1-[6-(Difluorometil)piridin-3-il]etanamin hidrohlorid
[1034] U rastvor Intermedijera LIII (517 mg, 2.23 mmol) u metanolu (2 mL) ohlađen na 0 °C u ledenom kupatilu, dodato je 5M HCl u 2-propanolu (1.87 mL, 9.35 mmol). Smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je tokom 1 sata. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom i ostatak trituriran u dietil etru da bi se dobilo 450 mg (97% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bele čvrste supstance.
[1035]<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 8.84 - 8.79 (m, 1H), 8.65 (s, 3H), 8.18 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.79 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 6.98 (t, J = 54.8 Hz, 1H), 4.57 (m, 1H), 1.57 (d, J = 6.9 Hz, 3H).
Intermedijer LV: Metil (2R)-2-(tert-butoksikarbonilamino)propanoat
[1036] U rastvor D-alanin metil estar hidrohlorida (5 g, 35.8 mmol) i natrijum hidrogen karbonata (9.0 g, 107 mmol) u vodi (100 mL) dodat je di-tert-butil dikarbonat (11.7 g, 53.7 mmol) i dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je ekstrahovana sa DCM (3 x 100 mL) i kombinovani organski slojevi su osušeni iznad MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi NMR je otkrio velike količine nereagovanog di-tert-butil dikarbonata, pa je materijal prenet u DCM (50 mL) i tretiran sa N,N-
2
dimetil etilendiaminom (5 mL), i mešan tokom 30 minuta. Rastvor je ispran sa 1M HCl (50 mL), osušen iznad MgSO4, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 5.35 g (73% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bezbojnog ulja.
[1037]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d) δ 5.04 (s, 1H), 4.31 (m, 1H), 3.73 (s, 3H), 1.44 (s, 9H), 1.37 (d, J = 7.2 Hz, 3H).
Intermedijer LVI: Tert-butil [(2R)-1-hidrazino-1-oksopropan-2-il]karbamat
[1038] U rastvor Intermedijera LV (5.35 g, 26.3 mmol) u etanolu (140 mL) dodat je hidrazin hidrat (19.8 mL) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 5 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i ostatak je triturisan sa heptanom. Dobijeni talog je sakupljen filtracijom i osušen u vakuumskoj pećnici da bi se dobilo 5.00 g (93% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu belog kristalnog praha.
[1039]<1>H NMR (250 MHz, DMSO): δ [ppm] 8.96 (s, 1H), 6.81 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 4.17 (s, 2H), 4.03 - 3.81 (m, 1H), 1.36 (s, 9H), 1.14 (d, J = 7.1 Hz, 3H).
Intermedijer LVII: Tert-butil {(2R)-1-okso-1-[2-(trifluoroacetil)hidrazino]propan-2-il}karbamat
[1040] U rastvor Intermedijera LVI (3.96 g, 19.5 mmol) i DIPEA (4.07 mL, 23.4 mmol) u MeCN (100 mL) na -45 °C pod N2dodat je anhidrid trifluorosirćetne kiseline (3.03 mL, 21.4 mmol). Reakcija je postepeno zagrevana na sobnu temperaturu i dalje mešana tokom 30 minuta. Rastvarač je uklonjen isparavanjem i ostatak je razdeljen između H2O (25 mL) i EtOAc (25 mL). Organska faza je odvojena i vodena faza je ponovo ekstrahovana sa EtOAc (25 mL). Kombinovane organske faze su isprane sa H2O (30 mL), fiziološkim rastvorom (30 mL), osušene iznad MgSO4i uparene, a ostatak je prečišćen sa fleš hromatografijom na koloni (silika gel, eluiranje sa heptan-EtOAc, 3:2) da bi se dobilo 4.30 g (69% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bele čvrste pene.
2 1
[1041]<1>H NMR (250 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 9.16 (s, 1H), 8.89 (s, 1H), 4.93 (s, 1H), 4.39 - 4.22 (m, 1H), 1.46 (s, 9H), 1.42 (d, J = 7.1 Hz, 3H).
[1042] LCMS (Analitički metod A) Rt = 0.90 min, MS (ESIpos): m/z = 321.95 (M+Na)<+>.
Intermedijer LVIII: Tert-butil {(1R)-1-[5-(trifluorometil)-1,3,4-tiadiazol-2-il]etil}karbamat
[1043] Intermedijer LVII (1.25 g, 4.18 mmol) je rastvoren u suvom THF (50 mL) i u jednoj porciji dodat je Lavessonov reagens (1.86 g, 4.6 mmol). Dobijena suspenzija je zatim zagrevana na refluksu tokom 2 h zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (eluiranje sa 10 - 25 % EtOAc u heptanu na predpakovanoj koloni KP-SiO2). Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i dekolorisane sa oko 5 g aktivnog uglja (mešanje tokom 1 h). Smeša je filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 0.63 g (51% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu belog praha.
[1044]<1>H NMR (250 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 5.30 - 5.21 (m, 1H), 5.17 (s, 1H), 1.74 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 1.46 (s, 9H).
[1045] LCMS (Analitički metod A) Rt = 1.18 min, MS (ESIpos): m/z = 241.85 (M+H)<+>.
Intermedijer LIX: (1R)-1-[5-(Trifluorometil)-1,3,4-tiadiazol-2-il]etanamin hidrohlorid
[1046] Intermedijer LVIII (571 mg, 1.92 mmol) je mešan u hlorovodoničnoj kiselini, 4M u 1,4-dioksanu (4.5 mL, 16 mmol) tokom 2 h. Rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom, i ostatak triturisan sa Et2O da bi se dobilo 384 mg (86% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu belog praha.
2 2
[1047]<1>H NMR (250 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 9.03 (s, 3H), 5.20 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 1.71 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
Primer 1: 3-(Ciklopropilmetoksi)-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
[1048]
[1049] U mešani rastvor Intermedijera 5A (46 mg, 0.16 mmol), Intermedijera VI (40.1 mg, 0.176 mmol), DIPEA (0.111 mL, 0.64 mmol) i DMAP (3.9 mg, 0.032 mmol) u DCM (2 mL) dodat je HATU (73.0 mg, 0.192 mmol) na sobnoj temperaturi. Posle mešanja tokom 2 h na sobnoj temperaturi, Reakciona smeša je isprana sa vodom (3 mL) i vodeni sloj je ponovo ekstrahovan sa DCM (2 x 3 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni (iznad MgSO4) i upareni pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen kristalizacijom iz acetonitrila da bi se dobilo 43.4 mg (59% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu belog praha.
[1050]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.93 (s, 2H), 7.84 (s, 1H), 7.55 - 7.53 (m, 1H), 7.53 - 7.51 (m, 1H), 7.42 - 7.35 (m, 1H), 6.62 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 5.36 (p, J = 7.1 Hz, 1H), 3.91 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 2.53 (s, 3H), 1.71 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 1.36 - 1.22 (m, 1H), 0.71 - 0.63 (m, 2H), 0.37 (q, J = 4.9 Hz, 2H).
[1051] Analitička LC-MS (Analitički metod D) 99% @ Rt = 4.57, MH+ = 463.
Primer 2: 3-(Ciklopropilmetoksi)-N-[(6-metilpiridazin-3-il)metil]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzamid
[1052]
2
[1053] Analogno sa Primerom 1, reakcija 50 mg Intermedijera 5A sa 22 mg (0.18 mmol) 1-(6-metilpiridazin-3-il)metanamina i naknadno prečišćavanje sa preparativnom HPLC (Metod A) dalo je 38.2 mg (59% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[1054]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 7.92 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.65 (m, J = 5.3 Hz, 1H), 7.62 (dd, J = 2.4, 1.5 Hz, 1H), 7.54 (d+s, J = 8.6 Hz, 2H), 7.47 (dd, J = 2.3, 1.5 Hz, 1H), 7.40 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 4.95 (d, J = 5.3 Hz, 2H), 3.95 (d, J = 6.9 Hz, 2H), 2.76 (s, 3H), 2.54 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 1.36 - 1.28 (m, 1H), 0.72 - 0.66 (m, 2H), 0.40 (q, J = 4.7 Hz, 2H).
[1055] Analitička LC-MS (Analitički metod F): 98.5% @ Rt = 2.90, MH+ = 395.
Primer 3: 3-(Ciklopropilmetoksi)-N-[(5-metilpirazin-2-il)metil]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzamid
[1056]
[1057] U suspenziju natrijum 3-(ciklopropilmetoksi)-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoata (50 mg, 0.16 mmol), 1-(5-metilpirazin-2-il)metanamina (22 mg, 0.18 mmol) i DMAP (4 mg, 0.03 mmol) u DCM (1 mL) dodat je DIPEA (84 µL, 0.48mmol) i HATU (73 mg , 0.19 mmol) i reakcija je mešana tokom 18 h. Reakciona smeša je razblažena sa DCM (4 mL) i isprana sa zasićenim vodenim NaHCO3(2 x 2 mL), fiziološkim rastvorom (2 mL), osušena (iznad MgSO4) i koncentrovana u vakuumu. Sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (Metod A) da se dobije 36 mg (55% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[1058]<1>H NMR (500 MHz, CDCl3): δ [ppm] = 8.57 - 8.51 (m, 1H), 8.40 (s, 1H), 7.87 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 7.58 - 7.55 (m, 1H), 7.50 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 7.44 - 7.41 (m, 1H), 7.29 (s, 1H), 4.76 (d, J = 5.2 Hz, 2H), 3.91 (d, J =6.9 Hz, 2H), 2.57 (s, 3H), 2.51 (d, J = 0.9 Hz, 3H), 1.29 (dqt, J = 9.5, 7.1, 4.8 Hz, 1H), 0.69 - 0.64 (m, 2H), 0.37 (q, J = 4.8 Hz, 2H).
[1059] LCMS (Analitički metod F) Rt = 3.19 min, MS (ESIpos) m/z = 395 (M+H)<+>.
2 4
Primer 4: 3-(Ciklopropilmetoksi)-N-[(1R)-1-(5-metilpirazin-2-il)etil]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzamid
[1060]
[1061] U suspenziju natrijum 3-(ciklopropilmetoksi)-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoata (50 mg, 0.16 mmol), (1R)-1-(5-metilpirazin-2-il)etanamin hidrohlorida (30 mg , 0.18 mmol) i DMAP (4 mg, 0.03 mmol) u DCM (1 mL) dodat je DIPEA (84 µL, 0.48 mmol) i HATU (73 mg, 0.19 mmol) i reakcija je mešana tokom 18 h. Reakciona smeša je razblažena sa DCM (4 mL) i isprana sa zasićenim vodenim NaHCO3(2 x 2 mL), fiziološkim rastvorom (2 mL), osušena (iznad MgSO4) i koncentrovana u vakuumu. Sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (Metod A) da se dobije 43mg (63% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[1062]<1>H NMR (500 MHz, CDCl3): δ [ppm] = 8.52 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 8.40 (s, 1H), 7.86 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 7.58 - 7.53 (m, 1H), 7.50 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 7.43 - 7.38 (m, 1H), 7.31 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 5.42 (p, J =6.9 Hz, 1H), 3.91 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 2.56 (s, 3H), 2.51 (d, J = 0.9 Hz, 3H), 1.59 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.34 - 1.24 (m, 1H), 0.68 - 0.63 (m, 2H), 0.36 (q, J = 4.8 Hz, 2H).
[1063] LCMS (Analitički metod F) Rt = 3.42 min, MS (ESIpos) m/z = 409 (M+H)<+>.
Primer 5: N-[1-(3-Hloro-5-fluoropiridin-2-il)etil]-3-(ciklopropilmetoksi)-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzamid
[1064]
2
[1065] U suspenziju natrijum 3-(ciklopropilmetoksi)-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoata (47.5 mg, 0.15 mmol), 1-(3-hloro-5-fluoropiridin-2-il)etanamin hidrohlorida (35 mg, 0.17 mmol) i DMAP (4 mg, 0.03 mmol) u DCM (1 mL) dodat je DIPEA (80 µL, 0.46mmol) i HATU (70 mg, 0.18 mmol) i reakcija je mešana tokom 2.5 h. Reakciona smeša je razblažena sa DCM (4 mL) i isprana sa zasićenim vodenim NaHCO3(2 x 2 mL), fiziološkim rastvorom (2 mL), osušena (iznad MgSO4) i koncentrovana u vakuumu. Sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (Metod A) zatim triturisan sa dietiletrom da bi se dobilo 31 mg (59% prinosa) naslovnog jedinjenja kao smeša dva enantiomera.
[1066]<1>H NMR (500 MHz, CDCl3): δ [ppm] = 8.39 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.90 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.64 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.58 (dd, J = 2.4, 1.5 Hz, 1H), 7.54 - 7.49 (m, 2H), 7.44 (dd, J = 2.4, 1.5 Hz, 1H), 5.76 (p, J = 6.6 Hz, 1H), 3.93 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 2.53 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 1.53 (d, J = 5.6 Hz, 3H), 1.30 (td, J = 7.9, 4.0 Hz, 1H), 0.71 - 0.64 (m, 2H), 0.38 (q, J = 4.8 Hz, 2H).
[1067] LCMS (Analitički metod F) Rt = 4.18 min, MS (ESIpos) m/z = 446 (M+H)<+>.
Primer 6: N-[1-(5-Hloro-3-fluoropiridin-2-il)etil]-3-(ciklopropilmetoksi)-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzamid
[1068]
[1069] U suspenziju natrijum 3-(ciklopropilmetoksi)-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoata (47.5 mg, 0.15 mmol), 1-(5-hloro-3-fluoropiridin-2-il)etanamin hidrohlorida (35 mg, 0.17 mmol) i DMAP (4 mg, 0.03 mmol) u DCM (1 mL) dodat je DIPEA (80 µL, 0.46mmol) i HATU (70 mg, 0.17 mmol) i reakcija je mešana tokom 2.5 h. Reakciona smeša je razblažena sa DCM (4 mL) i isprana sa zasićenim vodenim NaHCO3(2 x 2 mL), fiziološkim rastvorom (2 mL), osušena (iznad MgSO4) i koncentrovana u vakuumu. Sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (Metod A) zatim triturisan sa acetonitrilom da bi se dobilo 30 mg (43% prinosa) naslovnog jedinjenja kao smeša dva enantiomera.
2
[1070]<1>H NMR (500 MHz, CDCl3): δ [ppm] = 8.38 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.89 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.58 (dd, J = 2.4, 1.5 Hz, 1H), 7.57 - 7.51 (m, 2H), 7.47 (dd, J = 8.9, 2.0 Hz, 1H), 7.43 (dd, J = 2.4, 1.5 Hz, 1H), 5.70 -5.62 (m, 1H), 3.93 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 2.53 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 1.55 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 1.31 (ddd, J = 12.8, 8.0, 5.3 Hz, 1H), 0.70 - 0.64 (m, 2H), 0.38 (q, J = 4.7 Hz, 2H).
[1071] LCMS (Analitički metod F) Rt = 4.19 min, MS (ESIpos) m/z = 446 (M+H)<+>.
Primer 7: 3-(Ciklopropilmetoksi)-N-[(1R)-1-(5-metil-1,3,4-tiadiazol-2-il)etil]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzamid
[1072]
[1073] U rastvor 3-(ciklopropilmetoksi)-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeve kiseline (58 mg, 0.2 mmol), (1R)-1-(5-metil-1,3,4-tiadiazol-2-il)etanamin hidrohlorida (43 mg, 0.24 mmol) i DIPEA (0.174 mL, 1.0 mmol) u DCM (2 mL) dodat je T3P (0.23 mL, 0.4 mmol, 50 % rastvor u EtOAc) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Reakciona smeša isprana sa 2M NaOH (2 mL) i vodeni sloj je još ekstrahovan sa DCM (2 x 2 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni (iznad MgSO4) i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Materijal je triturisan iz Et2O da bi se dobilo 46.8 mg (54% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu belog praha.
[1074]<1>H NMR (500 MHz, CDCl3): δ [ppm] = 7.84 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.57 (dd, J = 2.4, 1.5 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.41 (dd, J = 2.3, 1.6 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 5.68 (p, J = 7.0 Hz, 1H), 3.92 (d, J = 6.9 Hz, 2H), 2.76 (s, 3H), 2.52 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 1.79 (d, J = 6.9 Hz, 3H), 1.35 - 1.24 (m, 1H), 0.70 - 0.63 (m, 2H), 0.37 (q, J = 4.7 Hz, 2H).
[1075] LCMS (Analitički metod F) Rt = 3.33 min, MS (ESIpos): m/z = 415 (M+H)<+>.
2
Primer 8: 3-(Ciklopropilmetoksi)-N-[(1R)-1-(6-metilpiridazin-3-il)etil]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzamid
[1076]
[1077] U rastvor 3-(ciklopropilmetoksi)-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeve kiseline (46 mg, 0.16 mmol), (1R)-1-(6-metilpiridazin-3-il)etanamin hidrohlorida (30.6 mg, 0.18 mmol), DIPEA (0.11 mL, 0.64 mmol) i DMAP (3.9 mg, 0.032 mmol) u DCM (2 mL) dodat je HATU (73.0 mg, 0.19 mmol) i reakcija je mešana tokom 2 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa vodom (3 mL) i vodeni sloj je ponovo ekstrahovan sa DCM (2 x 3 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni (iznad MgSO4) i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (Metod A) zatim je triturisan iz Et2O da bi se dobilo 29.7 mg (45% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu belog praha.
[1078]<1>H NMR (500 MHz, CDCl3): δ [ppm] = 7.90 - 7.86 (m, 1H), 7.73 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 7.60 - 7.57 (m, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.44 - 7.42 (m, 1H), 7.40 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 5.46 (p, J = 7.2 Hz, 1H), 3.92 (d, J = 6.9 Hz, 2H), 2.73 (s, 3H), 2.52 (s, 3H), 1.68 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.35 - 1.23 (m, 1H), 0.71 - 0.61 (m, 2H), 0.37 (q, J = 4.8 Hz, 2H).
[1079] LCMS (Analitički metod D) Rt = 3.96 min, MS (ESIpos) m/z = 409 (M+H)<+>.
Primer 9: 3-(Ciklopropilmetoksi)-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[6-(trifluorometil)piridazin-3-il]etil}benzamid
[1080]
2
[1081] U rastvor 3-(ciklopropilmetoksi)-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeve kiseline (60 mg, 0.21 mmol), (1R)-1-[6-(trifluorometil)piridazin-3-il]etanamin hidrohlorida (51 mg, 0.22 mmol) i DIPEA (144 µL, 0.83 mmol) u DCM (1 mL) dodat je HATU (95 mg, 0.25 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Smeša je razblažena sa DCM (1 mL) i isprana sa vodom (2 x 2 mL). Vodena faza je ponovo ekstrahovana sa DCM (2 mL) i kombinovane organske materije su osušene (iznad Na2SO4) i koncentrovane u vakuumu. Sirovi proizvod je prečišćen sa preparativnom HPLC (Metod A) da se dobije 61.2 mg (64% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu belog praha.
[1082]<1>H NMR (500 MHz, CDCl3): δ [ppm] = 7.88 (s, 1H), 7.82 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.74 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.59 - 7.54 (m, 1H), 7.51 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 7.48 - 7.38 (m, 2H), 5.60 (p, J = 7.0 Hz, 1H), 3.91 (d, J = 6.9 Hz, 2H), 2.52 (d, J = 0.9 Hz, 3H), 2.00 (s, 1H), 1.76 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 1.29 (dtd, J = 14.7, 7.4, 6.8, 4.7 Hz, 1H), 0.70 - 0.61 (m, 2H), 0.37 (q, J = 4.8 Hz, 2H).
[1083] LCMS (Analitički metod F) Rt = 3.84 min, MS (ESIpos) m/z = 463 (M+H)<+>.
Primer 10: 3-(Ciklopropilmetoksi)-N-[(1R)-1-(2-metilpirimidin-5-il)etil]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzamid
[1084]
[1085] U suspenziju natrijum 3-(ciklopropilmetoksi)-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoata (50 mg, 0.16 mmol), (1R)-1-(2-metilpirimidin-5-il)etanamina (24 mg, 0.18 mmol) i DMAP (4 mg, 0.03 mmol) u DCM (1 mL) dodat je DIPEA (85 µL, 0.48mmol) i HATU (73 mg, 0.19 mmol) i reakcija je mešana tokom 2 h. Reakciona smeša je razblažena sa DCM (4 mL), isprana sa zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(2x 2 mL), fiziološkim rastvorom (2 mL) i organska faza je osušena (iznad MgSO4) i koncentrovana u vakuumu da bi se dobilo 37.4 mg (56% prinosa) naslovnog jedinjenja.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ [ppm] = 8.69 (s, 2H), 7.85 (s, 1H), 7.56 - 7.48 (m, 2H), 7.39 (dd, J = 2.3, 1.6 Hz, 1H), 6.53 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 5.30 (p, J = 7.2 Hz, 1H), 3.91 (d, J = 6.9 Hz, 2H), 2.73 (s, 3H), 2.53 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 1.66 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 1.34 - 1.24 (m, 1H), 0.69 - 0.62 (m, 2H), 0.39 - 0.33 (m, 2H).
2
[1086] LCMS (Analitički metod F) Rt = 3.17 min, MS (ESIpos) m/z = 409 (M+H)<+>.
Primer 11: 3-(5-Metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3R)-tetrahidrofuran-3-iloksi]-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
[1087]
[1088] U rastvor 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3R)-tetrahidrofuran-3-iloksi]benzoeve kiseline, tj. Intermedijera 5B, (6.8 g, 22.3 mmol), Intermedijera VI (6.8 g, 26.7 mmol) i DIPEA (15.5 mL, 89.1 mmol) u DCM (100 mL) dodat je T3P (19.5 mL, 33.4 mmol, 50% u EtOAc) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Reakciona smeša je isprana sa 1M NaOH (100 mL) i vodeni sloj je ponovo ekstrahovan sa DCM (2 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni (iznad MgSO4) i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je triturisan sa Et2O da bi se dobilo 7.51 g (70% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu belog praha.
[1089]<1>H NMR (500 MHz, CDCl3): δ [ppm] = 8.93 (s, 2H), 7.85 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.53 -7.52 (m, 1H), 7.51 (dd, J = 2.4, 1.5 Hz, 1H), 7.36 (t, J = 2.4, 1.6 Hz, 1H), 6.64 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 5.36 (p, J = 7.1 Hz, 1H), 5.08 - 5.03 (m, 1H), 4.05 - 3.97 (m, 3H), 3.91 (td, J = 8.4, 4.3 Hz, 1H), 2.54 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 2.27 (dtd, J = 14.4, 8.4, 6.1 Hz, 1H), 2.20 - 2.12 (m, 1H), 1.72 (d, J = 7.2 Hz, 3H).
[1090] LCMS (Analitički metod D) Rt = 4.16 min, MS (ESIpos) m/z = 479 (M+H)<+>.
Primer 12: N-[(5-metilpirazin-2-il)metil]-3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3R)-tetrahidrofuran-3-iloksi]benzamid
[1091]
2
[1092] U rastvor 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3R)-tetrahidrofuran-3-iloksi]benzoeve kiseline (40 mg, 0.13 mmol), 1-(5-metilpirazin-2-il)metanamin dihidrohlorida (30.8 mg, 0.16 mmol) i DIPEA (91 µL, 0.52 mmol) u DCM (1 mL) dodat je HATU (74.7 mg, 0.20 mmol) i reakciona smeša je mešana tokom 2 h na sobnoj temperaturi. Smeša je razblažena sa DCM (1 mL), isprana sa vodom (2 x 1 mL), osušena (preko hidrofobnog frita) i koncentrovana u vakuumu da bi se dobilo žuto ulje. Sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (Metod A) da se dobije 35.1 mg (65% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu žute gume.
[1093]<1>H NMR (500 MHz, CDCl3): δ [ppm] = 8.58 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 8.44 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.58 (dd, J = 2.3, 1.5 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.44 (dd, J = 2.2, 1.5 Hz, 1H), 7.33 (s, 1H), 5.10 (ddt, J = 5.9, 4.0, 2.0 Hz, 1H), 4.79 (d, J = 5.1 Hz, 2H), 4.11 - 3.98 (m, 3H), 3.94 (td, J = 8.4, 4.3 Hz, 1H), 2.60 (s, 3H), 2.55 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 2.36 - 2.26 (m, 1H), 2.24 - 2.14 (m, 1H).
[1094] LCMS (Analitički metod D) Rt = 3.66 min, MS (ESIpos) m/z = 411 (M+H)<+>.
Primer 13: N-[1-(3-hloro-5-fluoropiridin-2-il)etil]-3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3R)-tetrahidrofuran-3-iloksi]benzamid
[1095]
[1096] Intermedijer 5B (70 mg, 0.23 mmol), (+/-) 1-(3-hloro-5-fluoropiridin-2-il)etanamin (44 mg, 0.25 mmol), DIPEA (119 mg, 0.92 mmol) i HATU (123 mg, 0.32 mmol) su rastvoreni u DMF (3.1 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije i
2 1
uparena do suva. Sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (metod 1, rt: 1.27 min) dajući naslovljeno jedinjenje 65 mg (60% prinosa) kao smešu dva dijastereoizomera.
[1097]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.49 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 1.95 - 2.05 (m, 1 H) 2.25 (d, J=7.86 Hz, 1 H) 3.73 - 3.95 (m, 4 H) 5.15 - 5.24 (m, 1 H) 5.54 (t, J=6.97 Hz, 1 H) 7.51 (d, J=1.52 Hz, 2 H) 7.64 (d, J=1.27 Hz, 1 H) 7.93 (q, J=1.27 Hz, 1 H) 8.09 (dd, J=8.49, 2.66 Hz, 1 H) 8.58 (d, J=2.53 Hz, 1 H) 9.08 (d, J=7.35 Hz, 1 H).
Primer 14: N-[1-(5-hloro-3-fluoropiridin-2-il)etil]-3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3R)-tetrahidrofuran-3-iloksi]benzamid
[1098]
[1099] Intermedijer 5B (74 mg, 0.24 mmol), (+/-) 1-(5-hloro-3-fluoropiridin-2-il)etanamin (47 mg, 0.27 mmol), DIPEA (126 mg, 0.97 mmol) i HATU (130 mg, 0.34 mmol) su rastvoreni u DMF (3.2 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije i uparena do suva. Sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (metod 1, rt: 1.27 min) dajući naslovljeno jedinjenje 65 mg (57% prinosa) kao smešu dva dijastereoizomera.
[1100]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.51 (d, J=7.10 Hz, 3 H) 1.94 - 2.05 (m, 1 H) 2.19 - 2.31 (m, 1 H) 3.73 - 3.95 (m, 4 H) 5.15 - 5.24 (m, 1 H) 5.42 (t, J=6.97 Hz, 1 H) 7.47 -7.54 (m, 2 H) 7.64 (d, J=1.27 Hz, 1 H) 7.90 - 7.96 (m, 1 H) 8.06 (dd, J=10.01, 1.90 Hz, 1 H) 8.49 (d, J=1.77 Hz, 1 H) 9.10 (d, J=7.10 Hz, 1 H).
Primer 15: N-[(1R)-1-(5-hloropiridin-2-il)etil]-3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3R)-tetrahidrofuran-3-iloksi]benzamid
[1101]
2 2
[1102] Intermedijer 5B (80 mg, 0.26 mmol), (1R)-1-(5-hloropiridin-2-il)etanamin hidrohlorid (56 mg, 0.29 mmol), DIPEA (135 mg, 1.05 mmol) i HATU (139 mg, 0.37 mmol) su rastvoreni u DMF (3.5 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije i uparena do suva. Sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (metod 1, rt: 1.21 min) dajući naslovljeno jedinjenje 60 mg (51% prinosa).
[1103]<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.52 (d, J=7.16 Hz, 3 H) 1.94 - 2.06 (m, 1 H) 2.26 (d, J=7.72 Hz, 1 H) 3.75 - 3.95 (m, 4 H) 5.15 - 5.26 (m, 2 H) 7.46 (d, J=8.48 Hz, 1 H) 7.53 (d, J=1.13 Hz, 2 H) 7.65 (d, J=1.32 Hz, 1 H) 7.90 (dd, J=8.48, 2.64 Hz, 1 H) 7.93 - 7.98 (m, 1 H) 8.58 (d, J=2.07 Hz, 1 H) 9.08 (d, J=7.54 Hz, 1 H).
Primer 16: N-[(1R)-1-(5-metilpirazin-2-il)etil]-3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3R)-tetrahidrofuran-3-iloksi]benzamid
[1104]
[1105] Intermedijer 5B (80 mg, 0.26 mmol), (1R)-1-(5-metilpirazin-2-il)etanamin (40 mg, 0.29 mmol), DIPEA (135 mg, 1.05 mmol) i HATU (139 mg, 0.37 mmol) su rastvoreni u DMF (3.5 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije i uparena do suva. Sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (metod 1, rt: 1.04 min) dajući naslovljeno jedinjenje 40 mg (35% prinosa).
[1106]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.54 (d, J=7.07 Hz, 3 H) 1.96 - 2.05 (m, 1 H) 2.20 - 2.31 (m, 1 H) 2.47 (s, 3 H) 3.75 - 3.94 (m, 4 H) 5.18 - 5.26 (m, 2 H) 7.52 (d, J=1.26 Hz,
2
2 H) 7.64 (d, J=1.26 Hz, 1 H) 7.94 (t, J=1.39 Hz, 1 H) 8.48 (d, J=1.01 Hz, 1 H) 8.56 (d, J=1.26 Hz, 1 H) 9.08 (d, J=7.58 Hz, 1 H).
Primer 17: N-[(6-metilpiridazin-3-il)metil]-3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3R)-tetrahidrofuran-3-iloksi]benzamid
[1107]
[1108] Intermedijer 5B (77 mg, 0.25 mmol), 1-(6-metilpiridazin-3-il)metanamin (34 mg, 0.28 mmol), DIPEA (130 mg, 1.0 mmol) i HATU (133 mg, 0.35 mmol) su rastvoreni u DMF (3.3 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije i uparena do suva. Sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (metod 1, rt: 0.91 min) dajući naslovljeno jedinjenje 50 mg (48% prinosa).
[1109]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 2.02 (d, J=6.84 Hz, 1 H) 2.26 (dd, J=13.43, 6.08 Hz, 1 H) 2.60 (s, 3 H) 3.73 - 3.95 (m, 4 H) 4.73 (d, J=5.83 Hz, 2 H) 5.14 - 5.23 (m, 1 H) 7.48 - 7.57 (m, 4 H) 7.64 (d, J=1.01 Hz, 1 H) 7.98 (t, J=1.39 Hz, 1 H) 9.39 (t, J=5.83 Hz, 1 H).
Primer 18: N-[(1R)-1-(6-metilpiridazin-3-il)etil]-3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3R)-tetrahidrofuran-3-iloksi]benzamid
[1110]
[1111] Intermedijer 5B (69 mg, 0.23 mmol), Intermedijer XV (43 mg, 0.25 mmol), DIPEA (117 mg, 0.9 mmol) i HATU (120 mg, 0.32 mmol) su rastvoreni u DMF (3 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije i uparena do suva. Sirovi
2 4
materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (metod 1, rt: 0.95 min) dajući naslovljeno jedinjenje 30 mg (31% prinosa).
[1112]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.58 (d, J=7.10 Hz, 3 H) 2.01 (d, J=6.59 Hz, 1 H) 2.20 - 2.31 (m, 1 H) 2.59 (s, 3 H) 3.74 - 3.95 (m, 4 H) 5.15 - 5.25 (m, 1 H) 5.36 (t, J=7.22 Hz, 1 H) 7.49 - 7.56 (m, 3 H) 7.56 - 7.67 (m, 2 H) 7.95 (t, J=1.39 Hz, 1 H) 9.14 (d, J=7.35 Hz, 1 H).
Primer 19: 3-(5-Metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3R)-tetrahidrofuran-3-iloksi]-N-{(1R)-1-[6-(trifluorometil)piridazin-3-il]etil}benzamid
[1113]
[1114] U rastvor 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3R)-tetrahidrofuran-3-iloksi]benzoeve kiseline (50 mg, 0.16 mmol), (1R)-1-[6-(trifluorometil)piridazin-3-il]etanamin hidrohlorida (48 mg, 0.21 mmol) i DIPEA (113 µL, 0.65 mmol) u DCM (1 mL) dodat je HATU (74 mg, 0.20 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h zatim je razblažena sa DCM (1 mL) i isprana sa vodom (2 x 2 mL). Vodena faza je ponovo ekstrahovana sa DCM (2 mL) i kombinovane organske materije su osušene (iznad Na2SO4) i koncentrovane u vakuumu. Sirovi proizvod je prečišćen sa preparativnom HPLC (Metod A) da se dobije 39.5 mg (51% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu belog praha.
[1115]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] = 7.88 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.82 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.74 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.54 (dd, J = 2.4, 1.5 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 1.2 Hz, 2H), 7.37 (dd, J = 2.3, 1.5 Hz, 1H), 5.60 (p, J = 7.0 Hz, 1H), 5.06 (ddt, J = 6.1, 4.0, 1.8 Hz, 1H), 4.06 - 3.95 (m, 3H), 3.91 (td, J = 8.4, 4.2 Hz, 1H), 2.52 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 2.26 (dtd, J = 14.4, 8.4, 6.1 Hz, 1H), 2.20 - 2.11 (m, 1H), 1.76 (d, J = 7.0 Hz, 3H).
[1116] LCMS (Analitički metod F) Rt = 3.32 min, MS (ESIpos) m/z = 479 (M+H)<+>.
2
Primer 20: N-[(1R)-1-(5-metil-1,3,4-tiadiazol-2-il)etil]-3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3R)-tetrahidrofuran-3-iloksi]benzamid
[1117]
[1118] U rastvor 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3R)-tetrahidrofuran-3-iloksi]benzoeve kiseline (61 mg, 0.2 mmol), (1R)-1-(5-metil-1,3,4-tiadiazol-2-il)etanamin hidrohlorida (43 mg, 0.24 mmol) i DIPEA (0.174 mL, 1.0 mmol) u DCM (2 mL) dodat je T3P (0.23 mL, 0.4 mmol, 50% u EtOAc) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2h. Reakciona smeša je isprana sa 2M NaOH (2 mL) i vodeni sloj je još ekstrahovan sa DCM (2 x 2 mL). Kombinovana organska faza je osušena (iznad MgSO4), uparena i dobijeni materijal se triturira iz Et2O da bi se dobilo 42.0 mg (49% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu belog praha.
[1119]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] = 7.85 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.55 (dd, J = 2.4, 1.5 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.39 (dd, J = 2.4, 1.5 Hz, 1H), 7.02 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 5.69 (p, J = 7.0 Hz, 1H), 5.08 (td, J = 4.2, 2.1 Hz, 1H), 4.07 - 3.97 (m, 3H), 3.92 (td, J = 8.4, 4.2 Hz, 1H), 2.76 (s, 3H), 2.53 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 2.28 (dtd, J = 14.4, 8.4, 6.1 Hz, 1H), 2.22 -2.14 (m, 1H), 1.80 (d, J = 7.0 Hz, 3H).
[1120] LCMS (Analitički metod F) Rt = 2.72 min, MS (ESIpos): m/z = 431 (M+H)<+>.
Primer 21: 3-(5-Metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3R)-tetrahidrofuran-3-iloksi]-N-{[6-(trifluorometil)piridazin-3-il]metil}benzamid
[1121]
2
[1122] U rastvor 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3R)-tetrahidrofuran-3-iloksi]benzoeve kiseline (40 mg, 0.13 mmol), 1-[6-(trifluorometil)piridazin-3-il]metanamin monohidrohlorida (31 mg, 0.14 mmol) i DIPEA (68 µL, 0.52 mmol) u DCM (1 mL) dodat je T3P (50 % rastvor u EtOAc, 117 µL, 0.20 mmol) i dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Reakciona smeša je razblažena sa DCM (1 mL), isprana sa vodom (1 mL), osušena (iznad MgSO4) i koncentrovana u vakuumu. Sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (Metod A) da se dobije 13 mg (21% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu belog praha.
[1123]<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ [ppm] = 7.88 (s, 1H), 7.82 (d, J = 2.2 Hz, 2H), 7.76 (t, J = 5.3 Hz, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.39 (s, 1H), 5.04 (d, J = 5.5 Hz, 3H), 4.04 - 3.95 (m, 3H), 3.90 (td, J = 8.4, 4.2 Hz, 1H), 2.50 (s, 3H), 2.30 - 2.20 (m, 1H), 2.19 - 2.10 (m, 1H).
[1124] LCMS (Analitički metod D) Rt = 4.05, m/z = 465 (M+H)<+>.
Primer 22: 3-(5-Metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3R)-tetrahidrofuran-3-iloksi]-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]propil}benzamid
[1125]
[1126] U rastvor 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3R)-tetrahidrofuran-3-iloksi]benzoeve kiseline (61 mg, 0.2 mmol), (1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]propan-1-amin hidrohlorida (58 mg, 0.24 mmol) i DIPEA (0.174 mL, 1.0 mmol) u DCM (2 mL) dodat je T3P (0.23 mL, 0.4 mmol, 50% u EtOAc) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4h. Reakciona smeša je isprana sa zasićenim rastvorom NaHCO3(2 mL) i vodeni sloj je još ekstrahovan sa DCM (2 x 2 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni (iznad MgSO4) i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (Metod A) i liofilizovan iz acetonitrila /vode da bi se dobilo 70.6 mg (72% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu belog praha.
[1127]<1>H NMR (500 MHz, CDCl3): δ [ppm] = 8.91 (s, 2H), 7.85 (s, 1H), 7.53 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 7.51 (dd, J = 2.3, 1.4 Hz, 1H), 7.36 - 7.34 (m, 1H), 6.62 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 5.10 (q, J =
2
7.3 Hz, 1H), 5.06 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 4.04 - 3.98 (m, 3H), 3.91 (td, J = 8.4, 4.3 Hz, 1H), 2.54 (d, J = 1.0 Hz, 3H), 2.32 - 2.23 (m, 1H), 2.20 - 2.11 (m, 1H), 2.10 - 1.96 (m, 2H), 1.08 (t, J = 7.4 Hz, 3H).
[1128] LCMS (Analitički metod F) Rt = 3.60 min, MS (ESIpos): m/z = 493.3(M+H)<+>.
Primer 23: N-[(1R)-1-(2-Metilpirimidin-5-il)etil]-3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3R)-tetrahidrofuran-3-iloksi]benzamid
[1129]
[1130] Intermedijer 5B (70 mg, 0.23 mmol), (1R)-1-(2-metilpirimidin-5-il)etanamin dihidrohlorid (53 mg, 0.25 mmol), DIPEA (119 mg, 0.92 mmol) i HATU (122 mg, 0.32 mmol) su rastvoreni u DMF (3.05 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije i uparena do suva. Sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (metod 1, rt: 0.97 min) dajući naslovljeno jedinjenje 45 mg (45% prinosa).
[1131]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.54 (d, J=7.07 Hz, 3 H) 1.96 - 2.05 (m, 1 H) 2.25 (s, 1 H) 2.59 (s, 3 H) 3.74 - 3.95 (m, 4 H) 5.12 - 5.23 (m, 2 H) 7.48 (dd, J=2.27, 1.52 Hz, 1 H) 7.50 - 7.53 (m, 1 H) 7.64 (d, J=1.26 Hz, 1 H) 7.91 (t, J=1.52 Hz, 1 H) 8.72 (s, 2 H) 9.04 (d, J=7.58 Hz, 1 H).
Primer 24: N-[(1R)-1-(6-Metilpiridin-3-il)etil]-3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3R)-tetrahidrofuran-3-iloksi]benzamid
[1132]
2
[1133] U rastvor 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3R)-tetrahidrofuran-3-iloksi]benzoeve kiseline (61mg, 0.2 mmol), (1R)-1-(6-metilpiridin-3-il)etanamina (33 mg, 0.24 mmol) i DIPEA (0.17 mL, 1.0 mmol) u DCM (2 mL) dodat je T3P (0.23 mL, 0.4 mmol, 50% u EtOAc) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2h. Reakciona smeša je isprana sa 2M NaOH (2 mL) i vodeni sloj je još ekstrahovan sa DCM (2 x 2 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni (iznad MgSO4) i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Materijal je triturisan iz Et2O da bi se dobilo 50.7 mg (60% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu beličastog praha.
[1134]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] = 8.55 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 7.81 (t, J = 1.3 Hz, 1H), 7.60 (dd, J = 8.0, 2.4 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.50 (dd, J = 2.4, 1.5 Hz, 1H), 7.37 (dd, J = 2.3, 1.5 Hz, 1H), 6.44 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 5.32 (p, J = 7.0 Hz, 1H), 5.09 - 5.03 (m, 1H), 4.06 - 3.96 (m, 3H), 3.91 (td, J = 8.4, 4.3 Hz, 1H), 2.55 (s, 3H), 2.53 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 2.32 - 2.22 (m, 1H), 2.19 - 2.12 (m, 1H), 1.63 (d, J = 7.0 Hz, 4H).
[1135] LCMS (Analitički metod D) Rt = 3.06, MS (ESIpos) m/z = 424 (M+H)<+>.
Primer 25: N-[(1R)-1-(6-Metilpiridazin-3-il)etil]-3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3S)-tetrahidrofuran-3-iloksi]benzamid
[1136]
[1137] Intermedijer 5C (240 mg, 0.79 mmol), Intermedijer XV (191 mg, 1.1 mmol), TEA (0.22 mL, 1.57 mmol) i HATU (329 mg, 0.87 mmol) su rastvoreni u DMF (12 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije i uparena do suva. Sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (Sistem: Labomatic Vario 2000, HPLC pumpa HD-3000; Kolona: Chromatex C1810µm 125x30 mm; protok: 150 ml/min; rastvarač: acetonitril/ voda; A= 85%, B= 15% do A= 0%, B= 100%; rt: 6.26 - 6.77 min) dajući naslovljeno jedinjenje 150 mg (44% prinosa).
2
[1138]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.59 (d, J=7.07 Hz, 3 H) 1.96 - 2.07 (m, 1 H) 2.20 - 2.31 (m, 1 H) 2.59 (s, 3 H) 3.75 - 3.95 (m, 4 H) 5.17 - 5.24 (m, 1 H) 5.37 (t, J=7.20 Hz, 1 H) 7.50 - 7.56 (m, 3 H) 7.57 - 7.62 (m, 1 H) 7.64 (d, J=1.26 Hz, 1 H) 7.95 (t, J=1.39 Hz, 1 H) 9.13 (d, J=7.58 Hz, 1 H).
Primer 26: 3-(5-Metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3S)-tetrahidrofuran-3-iloksi]-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
[1139]
[1140] Intermedijer 5C (230 mg, 0.75 mmol), (1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etan-1-amin dihidrohlorid (239 mg, 0.9 mmol), TEA (0.42 mL, 3.01 mmol) i HATU (430 mg, 1.13 mmol) su rastvoreni u DMF (6.9 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije i uparena do suva. Sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (Sistem: Labomatic Vario 2000, HPLC pumpa HD-3000; Kolona: Chromatex C18 10µm 125x30 mm; protok: 150 ml/min; rastvarač: acetonitril/ voda; A= 70%, B= 30% do A= 0%, B= 100%; rt: 6.46-7.42 min) dajući naslovljeno jedinjenje 205 mg (57% prinosa).
[1141]<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.61 (d, J=7.16 Hz, 3 H) 2.02 (d, J=6.03 Hz, 1 H) 2.19 - 2.33 (m, 1 H) 3.74 - 3.96 (m, 4 H) 5.15 - 5.36 (m, 2 H) 7.47 - 7.55 (m, 2 H) 7.65 (d, J=1.13 Hz, 1 H) 7.93 (s, 1 H) 9.09 - 9.20 (m, 3 H).
Primer 27: N-[(1R)-1-(5-Hloropiridin-2-il)etil]-3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3S)-tetrahidrofuran-3-iloksi]benzamid
[1142]
[1143] Intermedijer 5C (120 mg, 0.39 mmol), (1R)-1-(5-hloropiridin-2-il)etanamin hidrohlorid (106 mg, 0.55 mmol), TEA (0.16 mL, 1.18 mmol) i HATU (164 mg, 0.43 mmol) su rastvoreni u DMF (4.3 mL). Reakciona smeša je mešana na 60°C do potpune konverzije i uparena do suva. Sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (metod 1, rt: 1.22 min) dajući naslovljeno jedinjenje 100 mg (57% prinosa).
[1144]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.53 (d, J=7.10 Hz, 3 H) 1.97 - 2.07 (m, 1 H) 2.20 - 2.32 (m, 1 H) 3.76 - 3.95 (m, 4 H) 5.14 - 5.26 (m, 2 H) 7.47 (d, J=8.36 Hz, 1 H) 7.51 -7.56 (m, 2 H) 7.65 (d, J=1.27 Hz, 1 H) 7.91 (dd, J=8.62, 2.53 Hz, 1 H) 7.96 (t, J=1.39 Hz, 1 H) 8.58 (d, J=2.03 Hz, 1 H) 9.08 (d, J=7.60 Hz, 1 H).
Primer 28: N-[(1R)-1-(5-Metilpiridin-2-il)etil]-3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3S)-tetrahidrofuran-3-iloksi]benzamid
[1145]
[1146] Intermedijer 5C (120 mg, 0.39 mmol), (1R)-1-(5-metilpiridin-2-il)etanamin hidrohlorid (95 mg, 0.55 mmol), TEA (0.08 mL, 0.59 mmol) i HATU (164 mg, 0.43 mmol) su rastvoreni u DMF (3.9 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije i uparena do suva. Sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (metod 2, rt: 1.15 min) dajući naslovljeno jedinjenje 93 mg (56% prinosa).
[1147]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.50 (d, J=7.10 Hz, 3 H) 1.96 - 2.07 (m, 1 H) 2.20 - 2.31 (m, 4 H) 3.75 - 3.95 (m, 4 H) 5.12 - 5.24 (m, 2 H) 7.30 (d, J=7.86 Hz, 1 H) 7.49 -7.54 (m, 2 H) 7.55 - 7.60 (m, 1 H) 7.64 (d, J=1.27 Hz, 1 H) 7.95 (t, J=1.39 Hz, 1 H) 8.33 - 8.40 (m, 1 H) 9.00 (d, J=7.86 Hz, 1 H).
Primer 29: N-[(1R)-1-(5-Metilpirazin-2-il)etil]-3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3S)-tetrahidrofuran-3-iloksi]benzamid
[1148]
1
[1149] Intermedijer 5C (120 mg, 0.39 mmol), ((1R)-1-(5-metilpirazin-2-il)etanamin dihidrohlorid (116 mg, 0.55 mmol), TEA (0.16 mL, 1.18 mmol) i HATU (164 mg, 0.43 mmol) su rastvoreni u DMF (4.3 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije i uparena do suva. Sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (metod 2, rt: 1.04 min) dajući naslovljeno jedinjenje 50 mg (30% prinosa).
[1150]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.54 (d, J=7.10 Hz, 3 H) 1.97 - 2.06 (m, 1 H) 2.25 (s, 1 H) 2.47 (s, 3 H) 3.75 - 3.94 (m, 4 H) 5.17 - 5.28 (m, 2 H) 7.49 - 7.54 (m, 2 H) 7.64 (d, J=1.27 Hz, 1 H) 7.94 (t, J=1.52 Hz, 1 H) 8.49 (d, J=1.01 Hz, 1 H) 8.56 (d, J=1.27 Hz, 1 H) 9.09 (d, J=7.35 Hz, 1 H).
[1151] Analogno postupku opisanom za Primer 7 sledeći primer je pripremljen korišćenjem odgovarajuće karboksilne kiseline i amina kao polaznih materijala.
2
[1152] Analogno postupku opisanom za Primer 1 sledeći primeri su pripremljeni korišćenjem odgovarajuće karboksilne kiseline i amina kao polaznih materijala.
4
[1153] Analogno postupku opisanom za Primer 7 sledeći primeri su pripremljeni korišćenjem odgovarajuće karboksilne kiseline i amina kao polaznih materijala.
Primer 42: N-[(1R)-1-(5-Metilpirazin-2-il)etil]-3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-(oksetan-3-iloksi)benzamid
[1154]
[1155] Intermedijer 5F (81 mg, 0.28 mmol), (1R)-1-(5-metilpirazin-2-il)etanamin (44 mg, 0.32 mmol), DIPEA (144 mg, 1.11 mmol) i HATU (148 mg, 0.39 mmol) su rastvoreni u DMF (3.7 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije i uparena do suva. Sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (metod 1, rt: 1.00 min) dajući naslovljeno jedinjenje 20 mg (18% prinosa).
[1156]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.54 (d, J=7.07 Hz, 3 H) 2.48 (s, 3 H) 4.55-4.63 (m, 2 H) 4.95 (t, J=6.95 Hz, 2 H) 5.23 (s, 1 H) 5.46 (s, 1 H) 7.37 (t, J=1.52 Hz, 2 H) 7.65 (d, J=1.01 Hz, 1 H) 7.98 (t, J=1.39 Hz, 1 H) 8.49 (d, J=0.76 Hz, 1 H) 8.56 (d, J=1.26 Hz, 1 H) 9.10 (d, J=7.33 Hz, 1 H).
Primer 43: N-[(1R)-1-(2-Metilpirimidin-5-il)etil]-3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-(oksetan-3-iloksi)benzamid
[1157]
[1158] Intermedijer 5F (73 mg, 0.25 mmol), (1R)-1-(2-metilpirimidin-5-il)etanamin dihidrohlorid (58 mg, 0.28 mmol), DIPEA (0.17 ml, 1.0 mmol) i HATU (133 mg, 0.35 mmol) su rastvoreni u DMF (3.3 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije i uparena do suva. Sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (metod 1, rt: 0.93 min) dajući naslovljeno jedinjenje 48 mg (47% prinosa).
[1159]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.55 (d, J=7.10 Hz, 3 H) 2.59 (s, 3 H) 4.55-4.62 (m, 2 H) 4.91 - 4.99 (m, 2 H) 5.16 (t, J=7.22 Hz, 1 H) 5.41 - 5.50 (m, 1 H) 7.31
[1160] - 7.40 (m, 2 H) 7.65 (d, J=1.01 Hz, 1 H) 7.95 (t, J=1.39 Hz, 1 H) 8.72 (s, 2 H) 9.07 (d, J=7.35 Hz, 1 H).
Primer 44: N-[1-(5-Hloro-3-fluoropiridin-2-il)etil]-3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-(oksetan-3-iloksi)benzamid
[1161]
[1162] Intermedijer 5F (74 mg, 0.25 mmol), (+/-) 1-(5-hloro-3-fluoropiridin-2-il)etanamin (49 mg, 0.28 mmol), DIPEA (131 mg, 1.02 mmol) i HATU (136 mg, 0.36 mmol) su rastvoreni u DMF (3.4 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije i uparena do suva. Sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (metod 1, rt: 1.24 min) dajući naslovljeno jedinjenje 50 mg (43% prinosa).
[1163]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.52 (d, J=7.10 Hz, 3 H) 4.54 - 4.62 (m, 2 H) 4.95 (t, J=6.59 Hz, 2 H) 5.36 - 5.49 (m, 2 H) 7.33 - 7.39 (m, 2 H) 7.64 (d, J=1.27 Hz, 1 H) 7.96 (t, J=1.39 Hz, 1 H) 8.07 (dd, J=9.89, 2.03 Hz, 1 H) 8.50 (d, J=2.03 Hz, 1 H) 9.12 (d, J=7.10 Hz, 1 H).
Primer 45: N-[(6-Metilpiridazin-3-il)metil]-3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-(oksetan-3-iloksi)benzamid
[1164]
[1165] Intermedijer 5F (73 mg, 0.25 mmol), 1-(6-metilpiridazin-3-il)metanamin (34 mg, 0.27 mmol), DIPEA (129 mg, 1.0 mmol) i HATU (133 mg, 0.35 mmol) su rastvoreni u DMF (3.3 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije i uparena do suva. Sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (metod 1, rt: 0.87 min) dajući naslovljeno jedinjenje 40 mg (40% prinosa).
[1166]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 2.61 (s, 3 H) 4.59 (dd, J=7.86, 4.82 Hz, 2 H) 4.73 (d, J=5.83 Hz, 2 H) 4.96 (t, J=6.84 Hz, 2 H) 5.40 - 5.50 (m, 1 H) 7.36 (dd, J=2.28, 1.52 Hz, 1 H) 7.41 (dd, J=2.53, 1.52 Hz, 1 H) 7.57 (s, 2 H) 7.65 (d, J=1.27 Hz, 1 H) 8.01 (t, J=1.39 Hz, 1 H) 9.41 (t, J=5.96 Hz, 1 H).
Primer 46: N-[(1R)-1-(5-Hloropiridin-2-il)etil]-3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-(oksetan-3-iloksi)benzamid
[1167]
[1168] Intermedijer 5F (81 mg, 0.28 mmol), (1R)-1-(5-hloropilidin-2-il)etanamin hidrohlorid (59 mg, 0.31 mmol), DIPEA (144 mg, 1.11 mmol) i HATU (148 mg, 0.39 mmol) su rastvoreni u DMF (3.7 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije i uparena do suva. Sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (metod 2, rt: 1.17 min) dajući naslovljeno jedinjenje 20 mg (17% prinosa).
[1169]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.52 (d, J=7.10 Hz, 3 H) 4.59 (ddd, J=7.16, 4.63, 2.66 Hz, 2 H) 4.96 (t, J=6.59 Hz, 2 H) 5.19 (t, J=7.22 Hz, 1 H) 5.42 - 5.50 (m, 1 H) 7.36 - 7.41 (m, 2 H) 7.46 (d, J=8.62 Hz, 1 H) 7.65 (d, J=1.27 Hz, 1 H) 7.90 (dd, J=8.62, 2.53 Hz, 1 H) 7.99 (t, J=1.39 Hz, 1 H) 8.58 (d, J=2.03 Hz, 1 H) 9.09 (d, J=7.35 Hz, 1 H).
Primer 47: N-[(1R)-1-(6-Metilpiridazin-3-il)etil]-3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-(oksetan-3-iloksi)benzamid
[1170]
[1171] Intermedijer 5F (72 mg, 0.25 mmol), (1R)-1-(6-metilpiridazin-3-il)etanamin hidrohlorid (Intermedijer XV, 47 mg, 0.27 mmol), DIPEA (128 mg, 0.99 mmol) i HATU (132 mg, 0.35 mmol) su rastvoreni u DMF (3.3 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije i uparena do suva. Sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (metod 1, rt: 0.92 min) dajući naslovljeno jedinjenje 30 mg (30% prinosa).
[1172]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.59 (d, J=7.10 Hz, 3 H) 2.60 (s, 3 H) 4.59 (ddd, J=7.10, 4.44, 2.91 Hz, 2 H) 4.96 (t, J=6.72 Hz, 2 H) 5.36 (t, J=7.35 Hz, 1 H) 5.46 (t,
1
J=5.32 Hz, 1 H) 7.38 (d, J=1.52 Hz, 2 H) 7.51 - 7.56 (m, 1 H) 7.57 - 7.62 (m, 1 H) 7.65 (d, J=1.01 Hz, 1 H) 7.99 (t, J=1.27 Hz, 1 H) 9.16 (d, J=7.60 Hz, 1 H).
Primer 48: 3-(5-Metil-1,3-tiazol-2-il)-5-(oksetan-3-iloksi)-N-[(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
[1173]
[1174] Intermedijer 5F (76 mg, 0.26 mmol), Intermedijer VI (65 mg, 0.29 mmol), DIPEA (135 mg, 1.04 mmol) i HATU (139 mg, 0.36 mmol) su rastvoreni u DMF (3.5 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije i uparena do suva. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent heksan/ EE) dajući naslovljeno jedinjenje 80 mg (65% prinosa).
[1175]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.61 (d, J=7.10 Hz, 3 H) 4.54 - 4.62 (m, 2 H) 4.96 (t, J=6.59 Hz, 2 H) 5.29 (s, 1 H) 5.46 (t, J=4.94 Hz, 1 H) 7.37 (d, J=1.01 Hz, 2 H) 7.65 (d, J=1.01 Hz, 1 H) 7.96 (t, J=1.39 Hz, 1 H) 9.12 (s, 2 H) 9.18 (d, J=7.10 Hz, 1 H).
Primer 49: N-[1-(3-Hloro-5-fluoropiridin-2-il)etil]-3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-(oksetan-3-iloksi)benzamid
[1176]
[1177] Intermedijer 5F (79 mg, 0.27 mmol), (+/-) 1-(3-hloro-5-fluoropiridin-2-il)etanamin (52 mg, 0.30 mmol), DIPEA (140 mg, 1.08 mmol) i HATU (144 mg, 0.38 mmol) su rastvoreni u DMF (3.6 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije i
11
uparena do suva. Sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (metod 1, rt: 1.24 min) dajući naslovljeno jedinjenje 60 mg (50% prinosa).
[1178]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.49 (d, J=7.07 Hz, 3 H) 4.54 - 4.62 (m, 2 H) 4.95 (t, J=6.82 Hz, 2 H) 5.41 - 5.48 (m, 1 H) 5.53 (t, J=7.07 Hz, 1 H) 7.33 - 7.39 (m, 2 H) 7.64 (d, J=1.26 Hz, 1 H) 7.97 (t, J=1.52 Hz, 1 H) 8.09 (dd, J=8.59, 2.53 Hz, 1 H) 8.58 (d, J=2.78 Hz, 1 H) 9.09 (d, J=7.07 Hz, 1 H).
Primer 50: N-[(1R)-1-(5-Metil-1,3,4-tiadiazol-2-il)etil]-3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-(oksetan-3-iloksi)benzamid
[1179]
[1180] 3-(5-Metil-1,3-tiazol-2-il)-5-(oksetan-3-iloksi)benzoeva kiselina (58.3 mg, 0.2 mmol), (1R)-1-(5-metil-1,3,4-tiadiazol-2-il)etanamin hidrohlorid (43 mg, 0.24 mmol) i DIPEA (0.174 mL, 1.0 mmol) su rastvoreni u DCM (2 mL). Dodat je T3P (0.23 mL, 0.4 mmol, 50 % rastvor u EtOAc) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Reakciona smeša je isprana sa 2 M NaOH (2 mL) i vodeni sloj je još ekstrahovan sa DCM (2 x 2 mL). Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom na silika gelu (eluent: heptanaceton, 0 do 1:1) da se dobije 44.7 mg (54% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu belog praha.
<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] = 7.87 (t, J = 1.3 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 7.40 (dd, J = 2.4, 1.4 Hz, 1H), 7.22 (dd, J = 2.3, 1.5 Hz, 1H), 7.08 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 5.68 (p, J = 7.0 Hz, 1H), 5.33 (p, J = 5.5 Hz, 1H), 5.06 - 5.01 (m, 2H), 4.78 (dd, J = 7.4, 5.4 Hz, 2H), 2.77 (s, 3H), 2.53 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 1.79 (d, J = 6.9 Hz, 3H).
[1181] LCMS (Analitički metod D) Rt = 3.61 min, MS (ESIpos): m/z = 417 (M+H)<+>.
Primer 51: N-[(1R)-1-(6-metilpiridin-3-il)etil]-3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-(oksetan-3-iloksi)benzamid
[1182]
12
[1183] 3-(5-Metil-1,3-tiazol-2-il)-5-(oksetan-3-iloksi)benzoeva kiselina (210 mg, 0.72 mmol), (1R)-1-(6-metilpiridin-3-il)etanamin (37 mg, 0.27 mmol), DIPEA (191 µL, 1.1 mmol) i HATU (125 mg, 0.33 mmol) su rastvoreni u DCM (1 mL) i smeša je mašana na RT tokom 2 h. Reakciona smeša je razblažena sa DCM (1 mL), isprana sa vodom (1 mL), osušena (iznad Na2SO4) i koncentrovana u vakuumu. Sirovi materijal je prečišćen dva puta sa preparativnom HPLC (Metod A) da se dobije 16.8 mg (6% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu belog praha.
[1184]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] = 8.55 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 7.83 (t, J = 1.3 Hz, 1H), 7.59 (dd, J = 8.0, 2.4 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.36 (dd, J = 2.4, 1.4 Hz, 1H), 7.21 - 7.11 (m, 2H), 6.48 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 5.36 - 5.26 (m, 2H), 5.02 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 4.76 (t, J = 5.8 Hz, 2H), 2.54 (s, 3H), 2.53 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 1.63 (d, J = 7.0 Hz, 3H).
[1185] LCMS (Analitički metod F) Rt = 1.76 min, MS (ESIpos): m/z = 409 (M+H)<+>.
[1186] Analogno postupku opisanom za Primer 1 sledeći primer je pripremljen korišćenjem odgovarajuće karboksilne kiseline i amina kao polaznih materijala.
1
[1187] Analogno postupku opisanom za Primer 7 sledeći primer je pripremljen korišćenjem odgovarajuće karboksilne kiseline i amina kao polaznih materijala.
Primer 54: N-[(6-Metilpiridazin-3-il)metil]-3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(2S)-tetrahidrofuran-2-ilmetoksi]benzamid
[1188]
[1189] Smeša 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(2S)-tetrahidrofuran-2-ilmetoksi]benzoeva kiselina (100 mg, 0.313 mmol), (6-metilpiridazin-3-il)metanamin (46 mg, 0.376 mmol), HATU (142 mg, 0.376 mmol) i DIPEA (60 mg, 0.47 mmol) u DCM (4 mL) su mešani na sobnoj temperaturi tokom 4h. Rastvarač je uklonjen u vakuumu i ostatak prečišćen sa Biotage
14
Isolera™ hromatografijom (silicijum dioksid, eluiranje sa 100% EtOAc praćeno sa 1 - 6% MeOH u DCM) da se dobije 110 mg (79% prinosa) naslovnog jedinjenja kao beličasta guma.
[1190]<1>H NMR (500 MHz, CDCl3): δ [ppm] 7.89 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.76 (s, 1H), 7.63 - 7.55 (m, 1H), 7.50 - 7.42 (m, 3H), 7.31 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 4.89 (d, J = 5.3 Hz, 2H), 4.29 (qd, J = 6.8, 4.3 Hz, 1H), 4.04 (h, J = 5.8 Hz, 2H), 3.97 - 3.88 (m, 1H), 3.87 - 3.79 (m, 1H), 2.69 (s, 3H), 2.50 (d, J = 0.9 Hz, 3H), 2.07 (dtd, J = 12.4, 7.6, 5.5 Hz, 1H), 2.01 - 1.91 (m, 2H), 1.76 (dq, J = 12.2, 7.0 Hz, 1H).
[1191] LCMS (Analitički metod F) Rt = 2.53 min, MS (ESIpos): m/z = 424 (M+H)+.
Primer 55: N-[(5-Hloro-3-fluoropiridin-2-il)metil]-3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(2S)-tetrahidrofuran-2-ilmetoksi]benzamid
[1192]
[1193] Smeša 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(2S)-tetrahidrofuran-2-ilmetoksi]benzoeva kiselina (100 mg, 0.313 mmol), (5-hloro-3-fluoropiridin-2-il)metanamin hidrohlorid (74 mg, 0.376 mmol), HATU (143 mg, 0.376 mmol) i DIPEA (101 mg, 0.783 mmol) u DCM (4 mL) je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3h. Rastvarač je uklonjen u vakuumu i ostatak je prečišćen sa preparativnom HPLC (Metod A) da se dobije 95.2 mg (64% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu beličaste čvrste supstance.
[1194]<1>H NMR (500 MHz, CDCl3): δ [ppm] 8.39 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.92 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.63 (dd, J = 2.4, 1.5 Hz, 1H), 7.56 - 7.41 (m, 4H), 4.81 (dd, J = 4.7, 1.7 Hz, 2H), 4.32 (qd, J = 7.0, 3.9 Hz, 1H), 4.13 - 4.04 (m, 2H), 3.95 (dt, J = 8.2, 6.7 Hz, 1H), 3.89 - 3.83 (m, 1H), 2.53 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 2.14 - 2.06 (m, 1H), 2.03 - 1.91 (m, 2H), 1.77 (ddt, J = 12.2, 8.4, 7.1 Hz, 1H).
[1195] LCMS (Analitički metod F) Rt = 3.53min, MS (ESIpos): m/z = 461 (M+H)+.
1
Primer 56: N-[(5-Metilpirazin-2-il)metil]-3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(2S)-tetrahidrofuran-2-ilmetoksi]benzamid
[1196]
[1197] U mešani rastvor 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(2S)-tetrahidrofuran-2-ilmetoksi]benzoeve kiseline (49 mg, 0.15 mmol), 1-(5-metilpirazin-2-il)metanamin hidrohlorida (26.9 mg, 0.169 mmol), DIPEA (0.107 µL, 0.614 mmol) i DMAP (3.7 mg, 0.03 mmol) u DCM (2 mL) dodat je HATU (70.0 mg, 0.184 mmol) i reakcija je mešana tokom 1.5 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa vodom (3 mL) i vodeni sloj je ponovno ekstrahovan sa još DCM (2 x 3 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni (iznad MgSO4) i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (Metod A) da se dobije 39.8 mg (61% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bezbojnog stakla.
[1198]<1>H NMR (500 MHz, CDCl3): δ [ppm] 8.55 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 8.42 (s, 1H), 7.90 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.61 (dd, J = 2.4, 1.5 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.47 (dd, J = 2.4, 1.5 Hz, 1H), 7.25 - 7.21 (m, 1H), 4.77 (d, J = 5.2 Hz, 2H), 4.31 (qd, J = 6.9, 3.9 Hz, 1H), 4.11 (dd, J = 9.7, 3.9 Hz, 1H), 4.06 (dd, J = 9.7, 6.5 Hz, 1H), 3.95 (dt, J = 8.2, 6.7 Hz, 1H), 3.88 - 3.82 (m, 1H), 2.58 (s, 3H), 2.52 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 2.15-2.05 (m, 1H), 2.03 - 1.90 (m, 2H), 1.82 -1.72 (m, 1H).
[1199] LCMS (Analitički metod D) Rt = 3.79 min, MS (ESIpos): m/z = 425.1 (M<+>H)+.
Primer 57: N-[(1R)-1-(5-Metilpirazin-2-il)etil]-3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(2S)-tetrahidrofuran-2-ilmetoksi]benzamid
[1200]
1
[1201] U mešani rastvor 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(2S)-tetrahidrofuran-2-ilmetoksi]benzoeve kiseline (49 mg, 0.15 mmol), (1R)-1-(5-metilpirazin-2-il)etanamin hidrohlorida (29.3 mg, 0.169 mmol), DIPEA (0.107 µL, 0.614 mmol) i DMAP (3.7mg, 0.03 mmol) u DCM (2 mL) dodat je HATU (70.0 mg, 0.184 mmol) i reakcija je mešana tokom 1.5 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa vodom (3 mL) i vodeni sloj je ponovno ekstrahovan sa još DCM (2 x 3 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni (iznad MgSO4) i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (Metod A) da se dobije 29.7 mg (44% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu narandžastog stakla.
[1202]<1>H NMR (500 MHz, CDCl3): δ [ppm] 8.53 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 8.41 (s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.60 (dd, J = 2.4, 1.5 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.45 (dd, J = 2.4, 1.5 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 5.42 (p, J = 6.9 Hz, 1H), 4.31 (qd, J = 7.0, 3.9 Hz, 1H), 4.10 (dd, J = 9.7, 3.8 Hz, 1H), 4.05 (dd, J = 9.7, 6.6 Hz, 1H), 3.95 (dt, J = 8.3, 6.7 Hz, 1H), 3.88 - 3.83 (m, 1H), 2.57 (s, 3H), 2.53 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 2.09 (dtd, J = 12.4, 7.7, 7.2, 5.5 Hz, 1H), 1.97 (tq, J = 15.8, 6.0, 5.2 Hz, 2H), 1.76 (ddd, J = 15.6, 12.3, 7.1 Hz, 1H), 1.60 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
[1203] LCMS (Analitički metod F) Rt = 3.96 min, MS (ESIpos): m/z = 439.1 (M+H)+.
Primer 58: 3-(5-Metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(2S)-tetrahidrofuran-2-ilmetoksi]-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
[1204]
1
[1205] U mešani rastvor 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(2S)-tetrahidrofuran-2-ilmetoksi]benzoeve kiseline (49 mg, 0.15 mmol), Intermedijera VI (38.4 mg, 0.169 mmol), DIPEA (0.107 µL, 0.614 mmol) i DMAP (3.7mg, 0.03 mmol) u DCM (2 mL) dodat je HATU (70.0 mg, 0.184 mmol) i reakcija je mešana tokom 1.5 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa vodom (3 mL) i vodeni sloj je ponovno ekstrahovan sa još DCM (2 x 3 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni (iznad MgSO4) i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (Metod A). Materijal je dalje prečišćen trituracijom iz acetonitrila da bi se dobilo 17.5 mg (23% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu belog praha.
[1206]<1>H NMR (500 MHz, CDCl3): δ [ppm] 8.94 (s, 2H), 7.89 (s, 1H), 7.56 (dd, J = 2.4, 1.5 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.41 (dd, J = 2.3, 1.5 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 5.35 (p, J = 7.0 Hz, 1H), 4.30 (qd, J = 7.0, 3.7 Hz, 1H), 4.09 (dd, J = 9.7, 3.7 Hz, 1H), 4.02 (dd, J = 9.7, 6.6 Hz, 1H), 3.97 - 3.92 (m, 1H), 3.88 - 3.82 (m, 1H), 2.53 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 2.09 (dtd, J = 12.3, 7.6, 7.2, 5.4 Hz, 1H), 1.97 (qt, J = 12.1, 5.8 Hz, 2H), 1.79 - 1.74 (m, 1H), 1.72 (d, J = 7.2 Hz, 3H).
[1207] LCMS (Analitički metod F) Rt = 3.59 min, MS (ESIpos): m/z = 493.1 (M+H)+.
Primer 59: N-[(1R)-1-(6-Metilpiridazin-3-il)etil]-3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(2S)-tetrahidrofuran-2-ilmetoksi]benzamid
[1208]
[1209] U mešani rastvor 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(2S)-tetrahidrofuran-2-ilmetoksi]benzoeve kiseline (49 mg, 0.15 mmol), (1R)-1-(6-metilpiridazin-3-il)etanamin hidrohlorida (29.3 mg, 0.169 mmol), DIPEA (0.107 µL, 0.614 mmol) i DMAP (3.7mg, 0.03 mmol) u DCM (2 mL) dodat je HATU (70.0 mg, 0.184 mmol) i reakcija je mešana tokom 1.5 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa vodom (3 mL) i vodeni sloj je ponovno ekstrahovan sa još DCM (2 x 3 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni (iznad
1
MgSO4) i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (Metod A). Materijal je dalje prečišćen trituracijom iz acetonitrila da bi se dobilo 31.9 mg (47% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu belog praha.
[1210]<1>H NMR (500 MHz, CDCl3): δ [ppm] 7.90 (s, 1H), 7.71 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.63 - 7.60 (m, 1H), 7.51 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 7.46 - 7.43 (m, 1H), 7.40 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 5.46 (p, J = 6.9 Hz, 1H), 4.35 - 4.26 (m, 1H), 4.08 (qd, J = 9.7, 5.2 Hz, 2H), 4.00 - 3.91 (m, 1H), 3.88 - 3.79 (m, 1H), 2.72 (s, 3H), 2.52 (d, J = 0.8 Hz, 3H), 2.15 - 2.05 (m, 1H), 1.97 (qt, J = 12.3, 6.7 Hz, 2H), 1.85 - 1.74 (m, 1H), 1.68 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
[1211] LCMS (Analitički metod F) Rt = 2.67 min, MS (ESIpos): m/z = 439.1 (M+H)<+>.
Primer 60: 3-(5-Metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(2S)-tetrahidrofuran-2-ilmetoksi]-N-{(1R)-1-[6-(trifluorometil)piridazin-3-il]etil}benzamid
[1212]
[1213] U mešani rastvor 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(2S)-tetrahidrofuran-2-ilmetoksi]benzoeve kiseline (50 mg, 0.157 mmol), (1R)-1-[6-(trifluorometil)piridazin-3-il]etanamin hidrohlorida (39 mg, 0.171 mmol) i DIPEA (109 µL, 0.626 mmol) u DCM (1 mL) dodat je HATU (71 mg, 0.187 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Smeša je razblažena sa DCM (1 mL) i isprana sa vodom (2 x 2 mL). Vodena faza je ponovo ekstrahovana sa DCM (2 mL) i kombinovane organske materije su osušene (iznad Na2SO4) i koncentrovane u vakuumu. Sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (Metod A) da se dobije 34.7 mg (45% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu belog praha.
[1214]<1>H NMR (500 MHz, CDCl3): δ [ppm] 7.83 (s, 1H), 7.75 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.67 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.53 (dd, J = 2.4, 1.5 Hz, 1H), 7.45 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.42 - 7.34 (m, 2H), 5.53 (p, J = 7.0 Hz, 1H), 4.23 (qd, J = 6.9, 4.0 Hz, 1H), 4.05 - 3.94 (m, 2H), 3.92 - 3.83 (m,
1
1H), 3.82 - 3.74 (m, 1H), 2.45 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 2.07 - 1.97 (m, 1H), 1.93 - 1.84 (m, 2H), 1.76 - 1.65 (m, 4H).
[1215] LCMS (Analitički metod F) Rt = 3.50 min, MS (ESIpos): m/z = 493.1 (M+H)+.
Primer 61: N-[(1R)-1-(6-metilpiridazin-3-il)etil]-3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(2R)-tetrahidrofuran-2-ilmetoksi]benzamid
[1216]
[1217] U rastvor 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[[(2R)-tetrahidrofuran-2-il]metoksi]benzoeve kiseline (40 mg, 0.125 mmol), (1R)-1-(6-metilpiridazin-3-il)etanamin hidrohlorida (29 mg, 0.167 mmol) i DIPEA (87 µL, 0.499 mmol) u DCM (2 mL) dodat je HATU (60 mg, 0.158 mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 1 h na sobnoj temperaturi zatim je razblažena sa DCM (10 mL) i vodom (10 mL). Vodeni sloj je ponovo ekstrahovan sa DCM (10 mL) i kombinovani organski slojevi osušeni (iznad Na2SO4) i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (Metod A) da se dobije 45 mg (78% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bele pene.
[1218]<1>H NMR (500 MHz, CDCl3): δ [ppm] 7.88 (s, 1H), 7.76 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 7.62 - 7.57 (m, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.45 - 7.41 (m, 1H), 7.39 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 5.49 - 5.40 (m, 1H), 4.32 - 4.24 (m, 1H), 4.09 - 4.00 (m, 2H), 3.96 - 3.89 (m, 1H), 3.86 - 3.78 (m, 1H), 2.70 (s, 3H), 2.50 (s, 3H), 2.13 - 2.03 (m, 1H), 2.02-1.86 (m, 2H), 1.82 - 1.71 (m, 1H), 1.66 (d, J = 6.9 Hz, 3H).
[1219] LCMS (Analitički metod D) Rt = 3.66 min, MS (ESIpos): m/z = 439.1 (M+H)+.
Primer 62: N-[(6-Metilpiridazin-3-il)metil]-3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(2R)-tetrahidrofuran-2-ilmetoksi]benzamid
[1220]
2
[1221] U rastvor 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[[(2R)-tetrahidrofuran-2-il]metoksi]benzoeva kiselina (40 mg, 0.125 mmol), 1-(6-metilpiridazin-3-il)metanamin (25 mg, 0.203 mmol) i DIPEA (87 µL, 0.499 mmol) u DCM (2 mL) dodat je HATU (60 mg, 0.158 mmol). Reakcija je mešana tokom 16 sati na sobnoj temperaturi zatim je razblažena sa DCM (10 mL) i vodom (10 mL). Vodeni sloj je ponovo ekstrahovan sa DCM (10 mL) i kombinovani organski slojevi su osušeni (iznad Na2SO4) i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (Metod A) da se dobije 44 mg (79% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu žute čvrste supstance.
[1222]<1>H NMR (500 MHz, CDCl3): δ [ppm] 7.89 (s, 1H), 7.71 (t, J = 5.0 Hz, 1H), 7.62 - 7.58 (m, 1H), 7.51 - 7.43 (m, 3H), 7.31 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 4.90 (d, J = 5.3 Hz, 2H), 4.34 - 4.23 (m, 1H), 4.09 - 4.01 (m, 2H), 3.96 - 3.90 (m, 1H), 3.87 - 3.80 (m, 1H), 2.70 (s, 3H), 2.50 (s, 3H), 2.13 - 2.03 (m, 1H), 2.03 - 1.88 (m, 2H), 1.85 - 1.72 (m, 1H).
[1223] LCMS (Analitički metod F) Rt = 2.55 min, MS (ESIpos): m/z = 425.2 (M+H)+.
Primer 63: 3-(5-Metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(2R)-tetrahidrofuran-2-ilmetoksi]-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
[1224]
[1225] U rastvor 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[[(2R)-tetrahidrofuran-2-il]metoksi]benzoeve kiseline (40 mg, 0.125 mmol), Intermedijera VI (33 mg, 0.190 mmol) i DIPEA (87 µL, 0.499 mmol) u DCM (2 mL) dodat je HATU (60 mg, 0.158 mmol). Reakcija je mešana tokom 1 h na sobnoj temperaturi zatim je razblažena sa DCM (10 mL) i vodom (10 mL). Vodeni sloj je ponovo ekstrahovan sa DCM (10 mL) i kombinovani organski slojevi su osušeni (iznad Na2SO4)
21
i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (Metod A) da se dobije 42 mg (65% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bele čvrste supstance.
[1226]<1>H NMR (500 MHz, CDCl3): δ [ppm] 8.93 (s, 2H), 7.81 (s, 1H), 7.48 (s, 2H), 7.30 (s, 1H), 6.95 (s, 1H), 5.40 - 5.27 (m, 1H), 4.33 - 4.23 (m, 1H), 4.07 - 3.90 (m, 3H), 3.90 - 3.81 (m, 1H), 2.51 (s, 3H), 2.13 - 2.03 (m, 1H), 2.03 - 1.89 (m, J = 7.3, 6.6 Hz, 2H), 1.76 - 1.64 (m, 4H).
[1227] LCMS (Analitički metod F) Rt = 3.60 min, MS (ESIpos): m/z = 493.1 (M+H)+.
Primer 64: N-[(1R)-1-(5-metilpirazin-2-il)etil]-3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(2R)-tetrahidrofuran-2-ilmetoksi]benzamid
[1228]
[1229] U rastvor 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[[(2R)-tetrahidrofuran-2-il]metoksi]benzoeve kiseline (40 mg, 0.125 mmol), (1R)-1-(5-metilpirazin-2-il)etanamin hidrohlorida (33 mg, 0.190 mmol) i DIPEA (87 µL, 0.499 mmol) u DCM (2 mL) dodat je HATU (60 mg, 0.158 mmol). Reakcija je mešana tokom 1 h na sobnoj temperaturi zatim je razblažena sa DCM (10 mL) i vodom (10 mL). Vodeni sloj je ponovo ekstrahovan sa DCM (10 mL) i kombinovani organski slojevi su osušeni (iznad Na2SO4) i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (Metod A) da se dobije 49 mg (85% prinosa) naslovnog jedinjenja kao bež čvrsta supstanca.
[1230]<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.52 (s, 1H), 8.40 (s, 1H), 7.90 - 7.84 (m, 1H), 7.62-7.56 (m, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.46 - 7.41 (m, 1H), 7.30 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 5.42 (p, J = 6.9 Hz, 1H), 4.38 - 4.22 (m, 1H), 4.11 - 4.01 (m, 2H), 3.98 - 3.91 (m, 1H), 3.88-3.81 (m, 1H), 2.56 (s, 3H), 2.51 (s, 3H), 2.14 - 2.04 (m, 1H), 2.03 - 1.88 (m, 2H), 1.81 - 1.69 (m, 1H), 1.59 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
[1231] LCMS (Analitički metod F) Rt = 3.03 min, MS (ESIpos): m/z = 439.1 (M+H)+.
22
[1232] Analogno postupku opisanom za Primer 1 sledeći primeri su pripremljeni korišćenjem odgovarajuće karboksilne kiseline i amina kao polaznih materijala.
2
24
2
2
2
2
2
1
2
[1233] Analogno postupku opisanom za Primer 7 sledeći primeri su pripremljeni korišćenjem odgovarajuće karboksilne kiseline i amina kao polaznih materijala.
4
[1234] Analogno postupku opisanom za Primer 1 sledeći primeri su pripremljeni korišćenjem odgovarajuće karboksilne kiseline i amina kao polaznih materijala.
4
41
Primer 106: 3-[(2-metilpiridin-4-il)oksi]-N-[(1R)-1-(2-metilpirimidin-5-il)etil]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzamid
[1235]
42
3-Bromo-5-[(2-metilpiridin-4-il)oksi]benzoeva kiselina
[1236] Intermedijer 1 (2.3 g, 9.95 mmol), 4-bromo-2-metilpiridin (2.05 g, 11.95 mmol) i Cs2CO3(19.5 g, 59.7 mmol) u DMF (150 mL) su mešani na 120 °C tokom 48 sati. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, filtrirana i uparena do suva. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent heksan/ EE) dajući naslovljeno jedinjenje 1.1 g (36% prinosa).
3-Bromo-5-[(2-metilpiridin-4-il)oksi]-N-[(1R)-1-(2-metilpirimidin-5-il)etil]benzamid [1237] 3-Bromo-5-[(2-metilpiridin-4-il)oksi]benzoeva kiselina (273 mg, 0.89 mmol), (1R)-1-(2-metilpirimidin-5-il)etanamin dihidrohlorid (205 mg, 0.97 mmol), DIPEA (0.76 ml, 4.4 mmol) i HATU (371 mg, 0.97 mmol) su rastvoreni u DMF. Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Dodato je još (1R)-1-(2-metilpirimidin-5-il)etanamin dihidrohlorida (205 mg, 0.97 mmol), DIPEA (0.76 ml, 4.4 mmol) i HATU (371 mg, 0.97 mmol) i reakciona smeša je mešana na 60°C do potpune konverzije i uparena do suva. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent heksan/ EE) da bi se dobilo naslovljeno jedinjenje.
[1238]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.52 (d, J=7.07 Hz, 3 H) 2.43 (s, 3 H) 2.58 (s, 3 H) 5.13 (s, 1 H) 6.78 - 6.82 (m, 1 H) 6.87 (d, J=2.53 Hz, 1 H) 7.63 (t, J=1.39 Hz, 2 H) 7.99 (t, J=1.64 Hz, 1 H) 8.36 (d, J=5.56 Hz, 1 H) 8.69 (s, 2 H) 9.03 (d, J=7.33 Hz, 1 H).
(3-[(2-Metilpiridin-4-il)oksi]-5-{[(1R)-1-(2-metilpirimidin-5-il)etil]karbamoil}fenil)boronska kiselina
[1239] 3-Bromo-5-[(2-metilpiridin-4-il)oksi]-N-[(1R)-1-(2-metilpirimidin-5-il)etil]benzamid (0.97 g, 77% čistoća, 1.75 mmol), bis(pinakolato)diboran (1.11 g, 4.37 mmol) i kalijum acetat (0.58 g, 5.94 mmol) su rastvoreni u 1,4-dioksanu. Dodat je Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2(80 mg, 0.1 mmol) i reakciona smeša je mešana na 100 °C tokom 12 sati. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu i prečišćena sa hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent heksan/ EE) dajući naslovljeno jedinjenje 96 mg (14% prinosa).
4
3-[(2-Metilpiridin-4-il)oksi]-N-[(1R)-1-(2-metilpirimidin-5-il)etil]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzamid
[1240] (3-[(2-metilpiridin-4-il)oksi]-5-{[(1R)-1-(2-metilpirimidin-5-il)etil]karbamoil}fenil) boronska kiselina (96 mg, 0.24 mmol) i 2-bromo-5-metil-1,3-tiazol (65 mg, 0.37 mmol) su rastvoreni u 1M vodenom rastvoru K2CO3(0.59 mL) i THF (4 mL). Dodat je Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2(30 mg, 0.04 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na refluksu tokom 2 sata. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (metod 2, rt: 1.03 min) dajući naslovljeno jedinjenje 27 mg (25% prinosa).
[1241]<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.54 (d, J=7.16 Hz, 3 H) 2.43 (s, 3 H) 2.59 (s, 3 H) 5.17 (s, 1 H) 6.84 (dd, J=5.65, 2.45 Hz, 1 H) 6.91 (d, J=2.26 Hz, 1 H) 7.66 (d, J=1.13 Hz, 1 H) 7.71 - 7.78 (m, 2 H) 8.24 (s, 1 H) 8.37 (d, J=5.65 Hz, 1 H) 8.72 (s, 2 H) 9.14 (d, J=7.35 Hz, 1 H).
[1242] Analogno postupku opisanom za Primer 1 sledeći primer je pripremljen korišćenjem odgovarajuće karboksilne kiseline i amina kao polaznih materijala.
44
Primer 108: 3-[(6-Metilpiridin-3-il)oksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
[1243]
[1244] Intermedijer 5N (375 mg, 1.15 mmol), Intermedijer VI (242 mg, 1.26 mmol), DIPEA (0.8 ml, 4.6 mmol) i HATU (612 mg, 1.61 mmol) su rastvoreni u DMF (13.3 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije i uparena do suva. Sirovi materijal je ekstrahovan tri puta sa EE i ponovno uparen do suva. Preostali sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (metod 1, rt: 1.16 min) dajući naslovljeno jedinjenje 18.5 mg (3.2% prinosa).
[1245]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.61 (d, J=7.10 Hz, 3 H) 5.24 - 5.33 (m, 1 H) 7.35 (d, J=8.36 Hz, 1 H) 7.51 (dd, J=8.49, 2.91 Hz, 1 H) 7.60 (t, J=1.39 Hz, 2 H) 7.64 (d, J=1.27 Hz, 1 H) 8.12 (t, J=1.52 Hz, 1 H) 8.36 (d, J=2.53 Hz, 1 H) 9.11 (s, 2 H) 9.23 - 9.29 (m, 1 H).
[1246] Analogno postupku opisanom za Primer 7 sledeći primeri su pripremljeni korišćenjem odgovarajuće karboksilne kiseline i amina kao polaznih materijala.
4
4
4
Primer 115: N-[(1R)-1-(5-Hloropiridin-2-il)etil]-3-(5-hloro-1,3-tiazol-2-il)-5-(2-metoksi-2-metilpropoksi)benzamid
[1247]
[1248] Intermedijer 5Q (115 mg, 0.34 mmol), (1R)-1-(5-hloropiridin-2-il)etanamin dihidrohlorid (77 mg, 0.34 mmol), DIPEA (0.23 mL, 1.35 mmol) i HATU (179 mg, 0.47 mmol) su rastvoreni u DMF (2.5 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije i uparena do suva. Preostali sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (metod 1, rt: 1.44 min) dajući naslovljeno jedinjenje 81 mg (50% prinosa).
[1249]<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.25 (s, 6 H) 1.53 (d, J=6.97 Hz, 3 H) 3.18 (s, 3 H) 3.99 (s, 2 H) 5.19 (d, J=7.16 Hz, 1 H) 7.46 (d, J=8.29 Hz, 1 H) 7.56 - 7.61 (m, 1
[1250] H) 7.62 - 7.66 (m, 1 H) 7.90 (dd, J=8.48, 2.45 Hz, 1 H) 7.96 (t, J=1.41 Hz, 1 H) 8.01 (s, 1 H) 8.58 (d, J=2.07 Hz, 1 H) 9.10 (d, J=7.54 Hz, 1 H).
Primer 116: 3-(5-Hloro-1,3-tiazol-2-il)-5-(2-metoksi-2-metilpropoksi)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
[1251]
4
[1252] Intermedijer 5Q (115 mg, 0.34 mmol), Intermedijer VI (77 mg, 0.34 mmol), DIPEA (0.23 mL, 1.35 mmol) i HATU (179 mg, 0.47 mmol) su rastvoreni u DMF (2.5 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije i uparena do suva. Preostali sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (metod 1, rt: 1.41 min) dajući naslovljeno jedinjenje 97 mg (56% prinosa).
[1253]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.22 - 1.25 (m, 6 H) 1.61 (d, J=7.10 Hz, 3 H) 3.17 (s, 3 H) 3.99 (s, 2 H) 5.30 (s, 1 H) 7.57 - 7.63 (m, 2 H) 7.93 (t, J=1.39 Hz, 1 H) 8.01 (s, 1 H) 9.12 (s, 2 H) 9.18 (d, J=7.10 Hz, 1 H).
Primer 117: 3-(5-Hloro-1,3-tiazol-2-il)-5-(2-metoksi-2-metilpropoksi)-N-[(1R)-1-(5-metilpirazin-2-il)etil]benzamid
[1254]
[1255] Intermedijer 5Q (115 mg, 0.34 mmol), (1R)-1-(5-metilpirazin-2-il)etanamin hidrohlorid (58 mg, 0.34 mmol), DIPEA (0.23 mL, 1.35 mmol) i HATU (179 mg, 0.47 mmol) su rastvoreni u DMF (2.5 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije i uparena do suva. Preostali sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (metod 1, rt: 1.28 min) dajući naslovljeno jedinjenje 38 mg (23% prinosa).
[1256]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.23 - 1.25 (m, 6 H) 1.55 (d, J=7.10 Hz, 3 H) 2.47 (s, 3 H) 3.17 (s, 3 H) 3.99 (s, 2 H) 5.19 - 5.28 (m, 1 H) 7.56 - 7.59 (m, 1 H) 7.62 (d, J=1.52 Hz, 1 H) 7.95 (t, J=1.39 Hz, 1 H) 8.00 (s, 1 H) 8.49 (d, J=0.76 Hz, 1 H) 8.56 (d, J=1.52 Hz, 1 H) 9.08 - 9.14 (m, 1 H).
4
Primer 118: N-[(6-Metilpiridazin-3-il)metil]-3-(tetrahidro-2H-piran-4-ilmetoksi)-5-[5-(trifluorometil)-1,3-tiazol-2-il]benzamid
[1257]
[1258] Intermedijer 5R (55% čistoća, 110 mg, 0.156 mmol), 1-(6-metilpiridazin-3-il)metanamin (19 mg, 0.156 mmol), DIPEA (0.11 mL, 0.63 mmol) i HATU (83 mg, 0.22 mmol) su rastvoreni u DMF (2.5 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije i uparena do suva. Preostali sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (metod 1, rt: 1.19 min) dajući naslovljeno jedinjenje 14 mg (18% prinosa).
[1259]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.29 - 1.43 (m, 2 H) 1.70 (br. s., 2 H) 1.97-2.12 (m, 1 H) 2.60 (s, 3 H) 3.32 - 3.39 (m, 2 H) 3.89 (dd, J=11.12, 3.28 Hz, 2 H) 4.00 (d, J=6.32 Hz, 2 H) 4.74 (d, J=5.81 Hz, 2 H) 7.54 (s, 2 H) 7.62 - 7.74 (m, 2 H) 8.12 (t, J=1.39 Hz, 1 H) 8.51 - 8.64 (m, 1 H) 9.43 (s, 1 H).
Primer 119: 3-(5-Ciklobutil-1,3-tiazol-2-il)-N-[(6-metilpiridazin-3-il)metil]-5-(tetrahidro-2H-piran-4-ilmetoksi)benzamid
[1260]
[1261] Intermedijer 5S (53 mg, 0.14 mmol), 1-(6-metilpiridazin-3-il)metanamin (18 mg, 0.14 mmol), DIPEA (0.1 mL, 0.57 mmol) i HATU (76 mg, 0.2 mmol) su rastvoreni u DMF (2.5 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije i uparena do suva. Preostali sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (metod 1, rt: 1.22 min) dajući naslovljeno jedinjenje 31 mg (45% prinosa).
[1262]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.30 - 1.43 (m, 2 H) 1.66 - 1.74 (m, 2 H) 1.85-1.94 (m, 1 H) 1.96 - 2.07 (m, 2 H) 2.14 (d, J=2.53 Hz, 2 H) 2.43 (d, J=8.11 Hz, 2 H) 2.60 (s, 3 H) 3.35 (d, J=1.77 Hz, 2 H) 3.77 - 3.85 (m, 1 H) 3.86 - 3.92 (m, 2 H) 3.96 (d, J=6.59 Hz, 2 H) 4.73 (d, J=5.83 Hz, 2 H) 7.50 - 7.56 (m, 3 H) 7.56 - 7.59 (m, 1 H) 7.68 (d, J=0.76 Hz, 1 H) 7.99 (t, J=1.39 Hz, 1 H) 9.35 - 9.42 (m, 1 H).
Primer 120: 3-(5-Ciklobutil-1,3-tiazol-2-il)-5-(tetrahidro-2H-piran-4-ilmetoksi)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
[1263]
[1264] Intermedijer 5S (53 mg, 0.14 mmol), Intermedijer VI (27 mg, 0.14 mmol), DIPEA (0.1 mL, 0.57 mmol) i HATU (76 mg, 0.2 mmol) su rastvoreni u DMF (2.5 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije i uparena do suva. Preostali sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (metod 1, rt: 1.47 min) dajući naslovljeno jedinjenje 40 mg (52% prinosa).
[1265]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.31 - 1.44 (m, 2 H) 1.61 (d, J=7.07 Hz, 3 H) 1.67 - 1.75 (m, 2 H) 1.86 - 1.96 (m, 1 H) 1.97 - 2.08 (m, 2 H) 2.09 - 2.20 (m, 2 H) 2.39 - 2.47 (m, 2 H) 3.35 (d, J=1.77 Hz, 2 H) 3.77 - 3.85 (m, 1 H) 3.86 - 3.92 (m, 2 H) 3.97 (d, J=6.32 Hz, 2 H) 5.25 - 5.35 (m, 1 H) 7.49 - 7.53 (m, 1 H) 7.55 - 7.58 (m, 1 H) 7.68 (d, J=1.01 Hz, 1 H) 7.94 (t, J=1.39 Hz, 1 H) 9.12 (s, 2 H) 9.13 - 9.16 (m, 1 H).
Primer 121: 3-(5-Ciklobutil-1,3-tiazol-2-il)-N-[(1R)-1-(5-metilpirazin-2-il)etil]-5-[(3S)-tetrahidrofuran-3-ilmetoksi]benzamid
[1266]
[1267] Intermedijer 5T (150 mg, 0.42 mmol), (1R)-1-(5-metilpirazin-2-il)etanamin dihidrohlorid (105 mg, 0.5 mmol), TEA (0.09 mL, 0.63 mmol) i HATU (175 mg, 0.46 mmol) su rastvoreni u DMSO (4.2 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi do potpune
1
konverzije i uparena do suva. Preostali sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (metod 2, rt: 1.31 min) dajući naslovljeno jedinjenje 38 mg (19% prinosa).
[1268]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.55 (d, J=7.10 Hz, 3 H) 1.66 - 1.77 (m, 1 H) 1.84 - 1.95 (m, 1 H) 2.03 (dd, J=10.65, 9.38 Hz, 2 H) 2.10 - 2.21 (m, 2 H) 2.44 (dt, J=8.24, 3.11 Hz, 2 H) 2.47 - 2.49 (m, 3 H) 2.62 - 2.76 (m, 1 H) 3.58 (dd, J=8.62, 5.58 Hz, 1 H) 3.68 (d, J=7.10 Hz, 1 H) 3.75 - 3.88 (m, 3 H) 3.98 - 4.13 (m, 2 H) 5.24 (s, 1 H) 7.53 - 7.60 (m, 2 H) 7.68 (d, J=1.01 Hz, 1 H) 7.97 (t, J=1.39 Hz, 1 H) 8.49 (d, J=0.76 Hz, 1 H) 8.57 (d, J=1.52 Hz, 1 H) 9.09 (d, J=7.35 Hz, 1 H).
Primer 122: 3-(5-Ciklobutil-1,3-tiazol-2-il)-N-[(6-metilpiridazin-3-il)metil]-5-[(3S)-tetrahidrofuran-3-ilmetoksi]benzamid
[1269]
[1270] Intermedijer 5T (150 mg, 0.42 mmol), 1-(6-metilpiridazin-3-il)metanamin hidrohlorid (93 mg, 0.58 mmol), TEA (0.09 mL, 0.63 mmol) i HATU (175 mg, 0.46 mmol) su rastvoreni u DMF (4.5 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije i uparena do suva. Preostali sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (metod 2, rt: 1.19 min) dajući naslovljeno jedinjenje 13 mg (6% prinosa).
[1271]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.70 (dd, J=13.31, 5.96 Hz, 1 H) 1.84 - 1.95 (m, 1 H) 1.96 - 2.07 (m, 2 H) 2.09 - 2.20 (m, 2 H) 2.38 - 2.47 (m, 2 H) 2.60 (s, 3 H) 2.64 - 2.74 (m, 1 H) 3.57 (dd, J=8.62, 5.58 Hz, 1 H) 3.67 (q, J=7.69 Hz, 1 H) 3.74-3.85 (m, 3 H) 3.97 -4.12 (m, 2 H) 4.73 (d, J=5.83 Hz, 2 H) 7.51 - 7.59 (m, 4 H) 7.68 (s, 1 H) 7.99 (s, 1 H) 9.39 (t, J=5.83 Hz, 1 H).
Primer 123: 3-(5-Ciklobutil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3S)-tetrahidrofuran-3-ilmetoksi]-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
[1272]
2
[1273] Intermedijer 5T (150 mg, 0.42 mmol), Intermedijer VI (104 mg, 0.46 mmol), TEA (0.09 mL, 0.63 mmol) i HATU (175 mg, 0.46 mmol) su rastvoreni u DMSO (4.2 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije i uparena do suva. Preostali sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (metod 2, rt: 1.42 min) dajući naslovljeno jedinjenje 100 mg (45% prinosa).
[1274]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.61 (d, J=7.10 Hz, 3 H) 1.66 - 1.76 (m, 1 H) 1.84 - 1.94 (m, 1 H) 2.02 (td, J=9.06, 1.90 Hz, 2 H) 2.09 - 2.21 (m, 2 H) 2.38 - 2.48 (m, 2 H) 2.63 - 2.74 (m, 1 H) 3.57 (dd, J=8.62, 5.58 Hz, 1 H) 3.63 - 3.71 (m, 1 H) 3.74 - 3.85 (m, 3 H) 3.98 - 4.12 (m, 2 H) 5.30 (s, 1 H) 7.53 (dd, J=2.28, 1.52 Hz, 1 H) 7.57 (dd, J=2.28, 1.52 Hz, 1 H) 7.68 (d, J=1.01 Hz, 1 H) 7.95 (t, J=1.39 Hz, 1 H) 9.12 (s, 2 H) 9.16 (d, J=7.10 Hz, 1 H).
Primer 124: 3-(5-Ciklobutil-1,3-tiazol-2-il)-N-[(1R)-1-(2-metilpirimidin-5-il)etil]-5-(tetrahidro-2H-piran-4-ilmetoksi)benzamid
[1275]
[1276] Intermedijer 5S (53 mg, 0.14 mmol), (1R)-1-(2-metilpirimidin-5-il)etanamin (20 mg, 0.14 mmol), DIPEA (0.1 mL, 0.57 mmol) i HATU (76 mg, 0.2 mmol) su rastvoreni u DMF (2.5 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije i uparena do suva. Preostali sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (metod 1, rt: 1.28 min) dajući naslovljeno jedinjenje 21 mg (29% prinosa).
[1277]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.31 - 1.44 (m, 2 H) 1.55 (d, J=7.33 Hz, 3 H) 1.66 - 1.75 (m, 2 H) 1.86 - 1.96 (m, 1 H) 1.96 - 2.07 (m, 2 H) 2.15 (s, 2 H) 2.42 (s, 2 H) 2.59 (s, 3 H) 3.35 (d, J=1.77 Hz, 2 H) 3.77 - 3.85 (m, 1 H) 3.85 - 3.92 (m, 2 H) 3.96 (d, J=6.32 Hz, 2 H) 5.13 - 5.23 (m, 1 H) 7.48 - 7.51 (m, 1 H) 7.55 (dd, J=2.40, 1.64 Hz, 1 H) 7.68 (d, J=0.76 Hz, 1 H) 7.93 (t, J=1.52 Hz, 1 H) 8.72 (s, 2 H) 9.01-9.06 (m, 1 H).
Primer 125: 3-(5-Etil-1,3-tiazol-2-il)-N-[(1R)-1-(2-metilpirimidin-5-il)etil]-5-(tetrahidro-2H-piran-4-ilmetoksi)benzamid
[1278]
[1279] Intermedijer 5U (50 mg, 0.14 mmol), (1R)-1-(2-metilpirimidin-5-il)etanamin (20 mg, 0.14 mmol), DIPEA (0.1 mL, 0.58 mmol) i HATU (77 mg, 0.2 mmol) su rastvoreni u DMF (2.5 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije i uparena do suva. Preostali sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (metod 1, rt: 1.16 min) dajući naslovljeno jedinjenje 23 mg (34% prinosa).
[1280]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.29 (t, J=7.48 Hz, 3 H) 1.37 (dd, J=12.55, 4.18 Hz, 2 H) 1.55 (d, J=7.10 Hz, 3 H) 1.65 - 1.76 (m, 2 H) 1.96 - 2.10 (m, 1 H) 2.59 (s, 3 H) 2.84 - 2.95 (m, 2 H) 3.33 - 3.39 (m, 2 H) 3.89 (dd, J=11.15, 3.04 Hz, 2 H) 3.96 (d, J=6.34 Hz, 2 H) 5.17 (t, J=7.22 Hz, 1 H) 7.47 - 7.51 (m, 1 H) 7.53 - 7.56 (m, 1 H) 7.67 (s, 1 H) 7.91 (t, J=1.27 Hz, 1 H) 8.72 (s, 2 H) 9.04 (d, J=7.35 Hz, 1 H).
Primer 126: N-[(1R)-1-(2-Metilpirimidin-5-il)etil]-3-[5-(propan-2-il)-1,3-tiazol-2-il]-5-(tetrahidro-2H-piran-4-ilmetoksi)benzamid
[1281]
[1282] Intermedijer 5V (70 mg, 0.19 mmol), (1R)-1-(2-metilpirimidin-5-il)etanamin (27 mg, 0.19 mmol), DIPEA (0.14 mL, 0.78 mmol) i HATU (103 mg, 0.27 mmol) su rastvoreni u DMF (2.5 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije i uparena do suva. Preostali sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (metod 1, rt: 1.23 min) dajući naslovljeno jedinjenje 11 mg (11% prinosa).
4
[1283]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.33 (d, J=6.84 Hz, 6 H) 1.37 (d, J=8.62 Hz, 2 H) 1.55 (d, J=7.10 Hz, 3 H) 1.70 (d, J=10.65 Hz, 2 H) 1.97 - 2.10 (m, 1 H) 2.57-2.60 (m, 3 H) 3.24 - 3.30 (m, 1 H) 3.34 - 3.39 (m, 2 H) 3.89 (dd, J=11.41, 2.28 Hz, 2 H) 3.96 (d, J=6.34 Hz, 2 H) 5.10 - 5.23 (m, 1 H) 7.47 - 7.57 (m, 2 H) 7.68 (d, J=1.01 Hz, 1 H) 7.92 (t, J=1.27 Hz, 1 H) 8.72 (s, 2 H) 8.99 - 9.09 (m, 1 H).
Primer 127: 3-(5-Ciklobutil-1,3-tiazol-2-il)-N-[(1R)-1-(6-metilpiridazin-3-il)etil]-5-(tetrahidro-2H-piran-4-iloksi)benzamid
[1284]
[1285] Intermedijer 5W (57 mg, 0.16 mmol), (1R)-1-(6-metilpiridazin-3-il)etanamin dihidrohlorid (37 mg, 0.17 mmol), TEA (0.03 mL, 0.24 mmol) i HATU (66 mg, 0.17 mmol) su rastvoreni u DMSO (1.6 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije i uparena do suva. Preostali sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent heksan/ EE) dajući naslovljeno jedinjenje 27 mg (36% prinosa).
[1286]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.56 - 1.69 (m, 5 H) 1.85 - 1.94 (m, 1 H) 1.95-2.06 (m, 3 H) 2.09 - 2.21 (m, 2 H) 2.38 - 2.48 (m, 2 H) 2.59 (s, 3 H) 3.48 - 3.58 (m,
[1287] 2 H) 3.76 - 3.91 (m, 3 H) 4.76 (s, 1 H) 5.32 - 5.41 (m, 1 H) 7.50 - 7.62 (m, 4 H) 7.68 (d, J=0.76 Hz, 1 H) 7.96 (t, J=1.39 Hz, 1 H) 9.12 (d, J=7.33 Hz, 1 H).
Primer 128: 3-(5-Etil-1,3-tiazol-2-il)-N-[(1R)-1-(6-metilpiridazin-3-il)etil]-5-(tetrahidro-2H-piran-4-iloksi)benzamid
[1288]
[1289] Intermedijer 5X (62 mg, 0.19 mmol), (1R)-1-(6-metilpiridazin-3-il)etanamin dihidrohlorid (43 mg, 0.21 mmol), TEA (0.04 mL, 0.28 mmol) i HATU (78 mg, 0.21 mmol) su rastvoreni u DMSO (1.9 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije i uparena do suva. Preostali sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent heksan/ EE) dajući naslovljeno jedinjenje 12 mg (14% prinosa).
[1290]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.29 (t, J=7.48 Hz, 3 H) 1.55 - 1.69 (m, 5 H) 2.00 (d, J=11.15 Hz, 2 H) 2.59 (s, 3 H) 2.85 - 2.96 (m, 2 H) 3.48 - 3.58 (m, 2 H) 3.81
[1291] - 3.91 (m, 2 H) 4.76 (s, 1 H) 5.36 (t, J=7.22 Hz, 1 H) 7.50 - 7.62 (m, 4 H) 7.67 (s, 1 H) 7.92 - 7.97 (m, 1 H) 9.13 (d, J=7.60 Hz, 1 H).
Primer 129: 3-(5-Etil-1,3-tiazol-2-il)-5-(tetrahidro-2H-piran-4-iloksi)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
[1292]
[1293] Intermedijer 5X (62 mg, 0.19 mmol), Intermedijer VI (47 mg, 0.21 mmol), TEA (0.04 mL, 0.28 mmol) i HATU (78 mg, 0.21 mmol) su rastvoreni u DMSO (1.9 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije i uparena do suva. Preostali sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent heksan/ EE) dajući naslovljeno jedinjenje 15 mg (16% prinosa).
[1294]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.29 (t, J=7.48 Hz, 3 H) 1.57 - 1.68 (m, 5 H) 2.00 (dd, J=12.42, 2.53 Hz, 2 H) 2.90 (qd, J=7.48, 0.89 Hz, 2 H) 3.47 - 3.57 (m, 2 H) 3.81 -3.90 (m, 2 H) 4.71 - 4.81 (m, 1 H) 5.29 (t, J=7.10 Hz, 1 H) 7.54 (dd, J=2.28, 1.52 Hz, 1 H) 7.57 - 7.61 (m, 1 H) 7.68 (t, J=1.01 Hz, 1 H) 7.93 (t, J=1.39 Hz, 1 H) 9.12 (s, 2 H) 9.15 (d, J=7.10 Hz, 1 H).
Primer 130: N-[(1R)-1-(2-Metilpirimidin-5-il)etil]-3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3S)-tetrahidrofuran-3-iloksi]benzamid
[1295]
[1296] Intermedijer 5C (120 mg, 0.39 mmol), (1R)-1-(2-metilpirimidin-5-il)etanamin hidrohlorid (96 mg, 0.55 mmol), TEA (0.08 mL, 0.59 mmol) i HATU (1.79 g, 4.72 mmol) su rastvoreni u DMF (4.3 mL). Reakciona smeša je mešana na 60°C do potpune konverzije i uparena do suva. Sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (metod 1, rt: 0.98 min) dajući naslovljeno jedinjenje 87 mg (52% prinosa).
[1297]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.54 (d, J=7.10 Hz, 3 H) 1.95 - 2.05 (m, 1 H) 2.25 (s, 1 H) 2.59 (s, 3 H) 3.77 - 3.93 (m, 4 H) 5.12 - 5.23 (m, 2 H) 7.48 (dd, J=2.28, 1.52 Hz, 1 H) 7.50 - 7.53 (m, 1 H) 7.65 (d, J=1.01 Hz, 1 H) 7.91 (t, J=1.39 Hz, 1 H) 8.72 (s, 2 H) 9.05 (d, J=7.60 Hz, 1 H).
Primer 131: N-[(1R)-1-(5-metilpirazin-2-il)etil]-3-[(6-metilpiridin-3-il)oksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzamid
[1298]
[1299] Intermedijer 5N (375 mg, 1.15 mmol), (1R)-1-(5-metilpirazin-2-il)etanamin hidrohlorid (219 mg, 1.26 mmol), DIPEA (0.8 mL, 4.6 mmol) i HATU (612 mg, 1.61 mmol) su rastvoreni u DMF (13.3 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije i uparena do suva. Sirovi materijal je ekstrahovan tri puta sa EE i ponovo uparen do suva. Preostali sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (metod 1, rt: 0.97 min) dajući naslovljeno jedinjenje 13 mg (2.5% prinosa).
[1300]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.53 (d, J=7.07 Hz, 3 H) 2.47 (s, 3 H) 5.22 (s, 1 H) 7.37 (d, J=8.34 Hz, 1 H) 7.54 (d, J=2.78 Hz, 1 H) 7.58 - 7.65 (m, 3 H) 8.13 (t, J=1.39 Hz, 1 H) 8.38 (d, J=2.78 Hz, 1 H) 8.48 (s, 1 H) 8.55 (d, J=1.26 Hz, 1 H) 9.17 (d, J=7.58 Hz, 1 H).
Primer 132: N-[1-(3-Hloro-5-fluoropiridin-2-il)etil]-3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3S)-tetrahidrofuran-3-iloksi]benzamid
[1301]
[1302] Intermedijer 5C (120 mg, 0.39 mmol), (+/-) 1-(3-hloro-5-fluoropiridin-2-il)etanamin (96 mg, 0.55 mmol), TEA (0.08 mL, 0.59 mmol) i HATU (164 mg, 0.43 mmol) su rastvoreni u DMF (3.9 mL). Reakciona smeša je mešana na 60°C do potpune konverzije i uparena do suva. Sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (metod 1, rt: 1.28 min) dajući naslovljeno jedinjenje 95 mg (52% prinosa) kao smešu dva dijastereoizomera.
[1303]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.49 (d, J=6.84 Hz, 3 H) 1.95 - 2.05 (m, 1 H) 2.18 - 2.31 (m, 1 H) 3.75 - 3.94 (m, 4 H) 5.20 (d, J=1.52 Hz, 1 H) 5.54 (t, J=6.97 Hz,
[1304] 1 H) 7.51 (d, J=1.27 Hz, 2 H) 7.64 (d, J=1.27 Hz, 1 H) 7.93 (q, J=1.44 Hz, 1 H) 8.09 (dd, J=8.62, 2.53 Hz, 1 H) 8.58 (d, J=2.79 Hz, 1 H) 9.08 (d, J=7.10 Hz, 1 H).
Primer 133: N-[(6-Metilpiridazin-3-il)metil]-3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3S)-tetrahidrofuran-3-iloksi]benzamid
[1305]
[1306] Intermedijer 5C (120 mg, 0.39 mmol), 1-(6-metilpiridazin-3-il)metanamin hidrohlorid (88 mg, 0.55 mmol), TEA (0.08 mL, 0.59 mmol) i HATU (164 mg, 0.43 mmol) su rastvoreni u DMF (4.3 mL). Reakciona smeša je mešana na 60°C do potpune konverzije i uparena do suva. Sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (metod 1, rt: 0.91 min) dajući naslovljeno jedinjenje 70 mg (42% prinosa).
[1307]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 2.03 (br. s., 1 H) 2.21 - 2.31 (m, 1 H) 2.61 (s, 3 H) 3.77 - 3.94 (m, 4 H) 4.73 (d, J=5.83 Hz, 2 H) 5.16 - 5.23 (m, 1 H) 7.53 (dt, J=6.72, 2.09 Hz, 2 H) 7.57 (s, 2 H) 7.64 (d, J=1.27 Hz, 1 H) 7.98 (t, J=1.39 Hz, 1 H) 9.40 (t, J=5.83 Hz, 1 H).
Primer 134: N-[1-(5-Hloro-3-fluoropiridin-2-il)etil]-3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3S)-tetrahidrofuran-3-iloksi]benzamid
[1308]
[1309] Intermedijer 5C (120 mg, 0.39 mmol), (+/-) 1-(5-hloro-3-fluoropiridin-2-il)etanamin (96 mg, 0.55 mmol), TEA (0.08 mL, 0.59 mmol) i HATU (164 mg, 0.43 mmol) su rastvoreni u DMF (4.3 mL). Reakciona smeša je mešana na 60°C do potpune konverzije i uparena do suva. Sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (metod 1, rt: 1.28 min) dajući naslovljeno jedinjenje 75 mg (41% prinosa) kao smešu dva dijastereoizomera.
[1310]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.51 (d, J=7.10 Hz, 3 H) 1.94 - 2.05 (m, 1 H) 2.24 (s, 1 H) 3.77 - 3.93 (m, 4 H) 5.19 (d, J=1.52 Hz, 1 H) 5.42 (s, 1 H) 7.49 - 7.53 (m, 2 H) 7.64 (d, J=1.27 Hz, 1 H) 7.93 (q, J=1.27 Hz, 1 H) 8.06 (dd, J=9.89, 2.03 Hz, 1 H) 8.49 (d, J=1.52 Hz, 1 H) 9.10 (d, J=7.10 Hz, 1 H).
Primer 135: 3-(5-Ciklobutil-1,3-tiazol-2-il)-N-[(1R)-1-(6-metilpiridazin-3-il)etil]-5-[(3S)-tetrahidrofuran-3-ilmetoksi]benzamid
[1311]
[1312] Intermedijer 5T (150 mg, 0.42 mmol), (1R)-1-(6-metilpiridazin-3-il)etanamin dihidrohlorid (96 mg, 0.46 mmol), TEA (0.09 mL, 0.63 mmol) i HATU (175 mg, 0.46 mmol) su rastvoreni u DMSO (4.2 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije i uparena do suva. Preostali sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (metod 2, rt: 1.24 min) dajući naslovljeno jedinjenje 57 mg (29% prinosa).
[1313]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.59 (d, J=7.10 Hz, 3 H) 1.71 (d, J=7.60 Hz, 1 H) 1.91 (d, J=0.76 Hz, 1 H) 1.96 - 2.07 (m, 2 H) 2.09 - 2.20 (m, 2 H) 2.38 - 2.48 (m, 2 H) 2.59 (s, 3 H) 2.68 (d, J=6.84 Hz, 1 H) 3.58 (dd, J=8.62, 5.58 Hz, 1 H) 3.63-3.72 (m, 1 H) 3.74 - 3.88 (m, 3 H) 3.98 - 4.12 (m, 2 H) 5.37 (t, J=7.22 Hz, 1 H) 7.50 - 7.62 (m, 4 H) 7.68 (d, J=0.76 Hz, 1 H) 7.97 (t, J=1.39 Hz, 1 H) 9.14 (d, J=7.60 Hz, 1 H).
Primer 136: 3-(2-Metoksietoksi)-N-[(1R)-1-(2-metilpirimidin-5-il)etil]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzamid
[1314]
3-Bromo-5-(2-metoksietoksi)-N-[(1R)-1-(2-metilpirimidin-5-il)etil]benzamid
[1315] Intermedijer 5Y (5.12 g, 18.6 mmol), (1R)-1-(2-metilpirimidin-5-il)etanamin dihidrohlorid (5.08 g, 24.2 mmol), DIPEA (16.2 mL, 93 mmol) i HATU (7.78 g, 20.5 mmol) su rastvoreni u DMF (25 mL) na 60°C. Dodati su voda i EE, faze su odvojene, organska faza je isprana sa vodom, osušena (Na2SO4) i uparena do suva. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent heksan/ EE) dajući naslovljeno jedinjenje 5.45 g (74% prinosa).
[1316]<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.51 (d, J=7.16 Hz, 3 H) 2.59 (s, 3 H) 3.30 (s, 3 H) 3.61 - 3.69 (m, 2 H) 4.13 - 4.20 (m, 2 H) 5.12 (s, 1 H) 7.34 (s, 1 H) 7.43 (s, 1 H) 7.61 (s, 1 H) 8.69 (s, 2 H) 8.95 (d, J=7.16 Hz, 1 H).
3-(2-Metoksietoksi)-N-[(1R)-1-(2-metilpirimidin-5-il)etil-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzamid
[1317] 3-Bromo-5-(2-metoksietoksi)-N-[(1R)-1-(2-metilpirimidin-5-il)etil]benzamid (5.3 g, 13.4 mmol), bis(pinakolato)diboran (6.83 g, 26.9 mmol) i kalijum acetat (4.62 g, 47 mmol) su rastvoreni u 1,4-dioksanu i smeša je degazirana sa azotom tokom 20 minuta na sobnoj temperaturi. Dodat je Pd(dppf)Cl2(984 mg, 1.34 mmol) i reakciona smeša je degazirana tokom još 5 minuta i zatim je mešana na 90 °C tokom 16 sati. Reakciona smeša je raspodeljena između EE i vode. Vodena faza je ekstrahovana sa EE, kombinovane organske materije su osušene (Na2SO4) i koncentrovane u vakuumu. Prečišćavanjem sa hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent heksan/ EE) dobijeno je naslovno jedinjenje 2.51 g (42% prinosa).
3-(2-Metoksietoksi)-N-[(1R)-1-(2-metilpirimidin-5-il)etil-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzamid
[1318] 3-(2-Metoksietoksi)-N-[(1R)-1-(2-metilpirimidin-5-il)etil]-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzamid (150 mg, 0.34 mmol) i 2-bromo-5-metil-1,3-tiazol (91 mg, 0.51 mmol) su rastvoreni u 1M vodenom rastvoru K2CO3(0.84 mL) i THF. Dodat je Pd(dppf)Cl2·CH2Cl2(42 mg, 0.05 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na refluksu preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (Metod 1) dajući naslovljeno jedinjenje 80 mg (57% prinosa).
[1319]<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.54 (d, J=7.16 Hz, 3 H) 2.59 (s, 3 H) 3.32 (s, 3 H) 3.69 (dd, J=5.18, 3.67 Hz, 2 H) 4.19 - 4.25 (m, 2 H) 5.17 (t, J=7.16 Hz, 1 H) 7.50 - 7.56 (m, 2 H) 7.64 (d, J=1.32 Hz, 1 H) 7.91 (s, 1 H) 8.72 (s, 2 H) 9.05 (d, J=7.54 Hz, 1 H).
Primer 137: tert-Butil 4-[3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-({(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}karbamoil)fenoksi]piperidin-1-karboksilat
[1320]
1
[1321] U rastvor 3-{[1-(tert-butoksikarbonil)piperidin-4-il]oksil-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoeve kiseline (682 mg, 1.63 mmol), Intermedijera VI (408 mg, 1.79 mmol) i DIPEA (1.14 mL, 6.52 mmol) u DCM (6 mL) dodat je T3P (1.43 mL, 2.44 mmol) i dobijeni rastvor je mešan tokom 2 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena sa DCM (6 mL) i isprana sa natrijum bikarbonatom. Organska faza je odvojena, osušena (iznad MgSO4) i koncentrovana u vakuumu. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (prethodno upakovana SiO2kolona eluiranje sa EtOAc) da se dobije naslovno jedinjenje 130 mg (46% prinosa) u vidu bezbojnog ulja.
[1322]<1>H NMR (250 MHz, CDCl3): δ [ppm] = 8.93 (s, 2H), 7.83 (s, 1H), 7.58 - 7.47 (m, 2H), 7.44 - 7.34 (m, 1H), 6.83 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 5.35 (p, J = 8.0, 7.6 Hz, 1H), 4.59 (dt, J = 7.2, 3.6 Hz, 1H), 3.76 - 3.61 (m, 2H), 3.41 - 3.25 (m, 2H), 2.53 (d, J = 0.9 Hz, 3H), 2.01 - 1.85 (m, 2H), 1.82 - 1.70 (m, 5H), 1.46 (s, 9H).
[1323] LCMS (Analitički metod D) Rt = 5.13, MS (ESIpos) m/z = 592 (M+H)<+>.
Primer 138: 3-(5-Metil-1,3-tiazol-2-il)-5-(piperidin-4-iloksi)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
[1324]
[1325] U rastvor tert-butil 4-[3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-({(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}karbamoil)fenoksi]piperidin-1-karboksilata (100 mg, 0.169 mmol) u DCM (1 mL) dodata je TFA (0.13 mL, 1.69 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj
2
temperaturi sve dok nije prestalo oslobađanje gasa. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu i ostatak prebačen u DCM i neutralisan sa zasićenim rastvorom NaHCO3. Organska faza je odvojena, osušena (iznad MgSO4) i koncentrovana u vakuumu da se dobije naslovno jedinjenje 72 mg (85% prinosa) u vidu bele čvrste supstance.
[1326]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] = 8.95 (s, 2H), 7.89 (s, 1H), 7.57 - 7.53 (m, 2H), 7.52 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 7.42 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.00 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 5.37 (p, J = 7.1 Hz, 1H), 4.73 - 4.69 (m, 1H), 3.34 - 3.26 (m, 2H), 3.10 - 3.03 (m, 2H), 2.53 (d, J = 0.9 Hz, 3H), 2.19 - 2.12 (m, 4H), 2.03 - 1.97 (m, 2H), 1.72 (d, J = 7.1 Hz, 3H).
[1327] LCMS (Analitički metod D) Rt = 3.14, MS (ESIpos) m/z = 491 (M+H)<+>.
Primer 139: 3-[(1-Metilpiperidin-4-il)oksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
[1328]
[1329] U 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-(piperidin-4-iloksi)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid hidrohlorid (80 mg, 0.15 mmol) suspendovan u DCE (1 mL) dodat je 37 % rastvor u vodi formaldehida (0.045 mL, 0.61 mmol) i dobijena smeša je mešana tokom 30 minuta. Dodat je natrijum triacetoksiborohidrid (38 mg, 0.18 mmol) i reakciona smeša je mešana tokom 16 h. LCMS (Metod A) je ukazala na nereagovani polazni materijal. Reakcija je ponovno tretirana sa 37% rastvorom formaldehida (1 mL) i 3 kapi sirćetne kiseline i mešana tokom 30 minuta. Dodat je natrijum triacetoksiborohidrid (38 mg, 0.18 mmol) i smeša je mešana tokom 8 h. LCMS (Metod A) je ukazala na potpunu konverziju u proizvod. Organski rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom i preostali vodeni sloj je načinjen baznim do pH -8-9 i ekstrahovan u EtOAc (2 mL). Organska faza je odvojena, osušena (iznad MgSO4), koncentrovana i prečišćena sa preparativnom HPLC (Metod A) da se dobije naslovno jedinjenje 39.6 mg (52% prinosa) u vidu belog praha.
[1330]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] = 8.93 (s, 2H), 7.83 (s, 1H), 7.54 - 7.49 (m, 2H), 7.41 - 7.37 (m, 1H), 6.70 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 5.35 (p, J = 7.0 Hz, 1H), 4.48 - 4.43 (m, 1H), 2.74 - 2.63 (m, 2H), 2.53 (d, J = 0.9 Hz, 3H), 2.34 - 2.25 (m, 5H), 2.07 - 2.01 (m, 2H), 2.00 (s, 0H), 1.90 - 1.81 (m, 2H), 1.71 (d, J = 7.2 Hz, 3H).
[1331] LCMS (Analitički metod D) Rt = 3.23, MS (ESIpos) m/z = 506 (M+H)<+>.
Primer 140: 3-(5-Metil-1,3-tiazol-2-il)-5-{[1-(propan-2-il)piperidin-4-il]oksi}-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
[1332]
[1333] U mešani rastvor 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-(piperidin-4-iloksi)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid hidrohlorida (80 mg, 50% čistoća, 0.076 mmol) u DCE (1 mL) dodat je aceton (1 mL). Posle mešanja na sobnoj temperaturi tokom 30 minuta, dodat je STAB (20 mg, 0.094 mmol) i reakciona smeša je mešana tokom još 4 h. LCMS (Metod A) je ukazala -20% konverzije. Dodati su sledeći deo acetona (1 mL) i STAB (20 mg, 0.094 mmol) i reakciona smeša je mešana tokom 16 h na 40 °C. LCMS (Metod A) je ukazala -50% konverzije. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu i načinjena baznom sa 10 M NaOH da bi se dobio beli talog koji je ekstrahovan u EtOAc. Organska faza je koncentrovana u vakuumu i prečišćena sa preparativnom HPLC (Metod A) da se dobije naslovno jedinjenje 20 mg (49% prinosa) kao žutosmeđi prah.
[1334]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] = 8.93 (s, 2H), 7.82 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.53 - 7.49 (m, 2H), 7.41 - 7.36 (m, 1H), 6.76 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 5.35 (t, J = 7.0 Hz, 1H), 4.42 (dt, J = 7.9, 4.0 Hz, 1H), 2.81 - 2.70 (m, 3H), 2.52 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 2.40 (t, J = 8.9 Hz, 2H), 2.07 - 2.00 (m, 2H), 1.87 - 1.77 (m, 2H), 1.70 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 1.05 (d, J = 6.6 Hz, 6H).
[1335] LCMS (Analitički metod D) Rt = 3.36, MS (ESIpos) m/z = 534 (M+H)<+>.
4
Primer 141: 3-{[(3R)-1-Metilpirolidin-3-il]oksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
[1336]
[1337] U rastvor metil 3-{[(3R)-1-metilpirolidin-3-il]oksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoata (143 mg, 0.32 mmol) u THF (1 mL) dodat je 1M litijum hidroksid (0.48 mL) i mešan tokom 16 h na sobnoj temperaturi. Organski rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom i vodena faza je zakišeljena na pH 4 i zatim koncentrovana do suva. Reakcioni ostatak, [Intermedijer VI (88 mg, 0.39 mmol)] i DIPEA (0.23 mL, 1.29 mmol) su kombinovani u DCM (1 mL) i dodat je T3P (50% u EtOAc, 0.14 mL, 0.48 mmol), a dobijeni rastvor je mešan tokom 16 h na sobnoj temperaturi. Smeša je razblažena sa DCM (1 mL), isprana sa fiziološkim rastvorom (1 mL), osušena (iznad Na2SO4) i koncentrovana u vakuumu da bi se dobilo žuto ulje. Sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (Metod A) da se dobije naslovno jedinjenje 42 mg (26% prinosa) u vidu belog praha.
[1338]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] = 8.95 (s, 2H), 7.86 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.51 (dd, J = 2.4, 1.5 Hz, 1H), 7.37 - 7.34 (m, 1H), 7.28 (s, 1H), 6.74 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 5.37 (p, J = 7.0 Hz, 1H), 5.00 - 4.91 (m, 1H), 2.94-2.88 (m, 2H), 2.77 (dd, J = 10.7, 5.7 Hz, 1H), 2.55 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 2.45 - 2.35 (m, 5H), 2.07 - 1.98 (m, 1H), 1.72 (d, J = 7.2 Hz, 3H).
[1339] LCMS (Analitički metod D) Rt = 3.16, MS (ESIpos) m/z = 492 (M+H)<+>.
Primer 142: 3-{[(3S)-1-Metilpirolidin-3-il]oksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
[1340]
[1341] U metil 3-[[(3S)-1-metilpirolidin-3-il]oksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoat (64 mg, 0.19 mmol) u THF dodat je 1 M litijum hidroksid (0.3 mL) i dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 4 h. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu, ostatak je zakišeljen sa 2M HCl i koncentrovan do suva. Ostatak je rastvoren u DCM i dodati su Intermedijer VI (48 mg, 0.21 mmol), DIPEA (0.13 mL, 0.77 mmol) i HATU (110 mg, 0.29 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Reakciona smeša je razblažena sa DCM (1 mL), isprana sa vodom (1 mL) osušena (iznad MgSO4) i koncentrovana u vakuumu. Sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (Metod A) da se dobije naslovno jedinjenje 23.9 mg (25% prinosa) kao beličasta čvrsta supstanca.
[1342]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] = 8.93 (s, 2H), 7.86 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.49 (dd, J = 2.3, 1.5 Hz, 1H), 7.37 - 7.32 (m, 1H), 6.75 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 5.35 (p, J = 7.0 Hz, 1H), 4.97 - 4.90 (m, 1H), 2.93 - 2.84 (m, 2H), 2.75 (dd, J = 10.8, 5.7 Hz, 1H), 2.53 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 2.43 - 2.32 (m, 5H), 2.06-1.96 (m, 1H), 1.70 (d, J = 7.2 Hz, 3H).
[1343] LCMS (Analitički metod D) Rt = 3.18 min, MS (ESIpos) m/z = 492 (M+H)<+>.
Primer 143: 3-[(1-Metilazetidin-3-il)oksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
[1344]
[1345] U metil 3-[(1-metilazetidin-3-il)oksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)benzoat (80 mg, 0.25 mmol) u THF (1 mL) dodat je 1M rastvor litijum hidroksida (0.37 mL) i dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 3 h. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu i ostatak zakišeljen do pH 5 sa 1M HCl zatim koncentrovana do suva. Ostatak je rastvoren u DCM (1 mL) i dodati su Intermedijer VI (67 mg, 0.29 mmol), DIPEA (0.17 mL, 0.99 mmol) i HATU (140 mg, 0.37 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Smeša je razblažena sa DCM (1 mL), isprana sa vodom (1 mL), osušena (iznad MgSO4) i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen sa preparativnom HPLC (Metod A) da se dobije naslovno jedinjenje 41.3 mg (35% prinosa) u vidu belog praha.
[1346]<1>H NMR (500 MHz, CDCl3): δ [ppm] = 1.69 (d, 3H), 2.39 (s, 3H), 2.52 (d, 3H), 3.11 -3.18 (m, 2H), 3.78 - 3.85 (m, 2H), 4.82 (p, 1H), 5.34 (p, 1H), 6.87 (d, 1H), 7.20-7.25 (m, 1H), 7.37 (dd, 1H), 7.49 (d, 1H), 7.85 (s, 1H), 8.92 (s, 2H).
[1347] LCMS (Analitički metod F) Rt = 2.03 min, MS (ESIpos) m/z = 478 (M+H)<+>.
Primer 144: 3-(5-Metil-1,3-tiazol-2-il)-5-(prop-2-in-1-iloksi)-N-{(1S)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
[1348]
[1349] Intermedijer 5D (540 mg, 1.98 mmol), (1S)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etanamin (415 mg, 2.17 mmol), TEA (0.41 mL, 2.96 mmol) i HATU (826 mg, 2.17 mmol) su rastvoreni u DMSO (20 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije i uparena do suva. Preostali sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent heksan/ EE) dajući naslovljeno jedinjenje 600 mg (68% prinosa).
[1350]<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.61 (d, J=7.16 Hz, 3 H) 3.64 (t, J=2.35 Hz, 1 H) 4.95 (d, J=2.26 Hz, 2 H) 5.30 (t, J=7.06 Hz, 1 H) 7.53 - 7.58 (m, 1 H) 7.61 - 7.64 (m, 1H) 7.66 (d, J=1.13 Hz, 1 H) 7.97 (s, 1 H) 9.12 (s, 2 H) 9.19 (d, J=7.16 Hz, 1 H).
Primer 145: 3-(5-Metil-1,3-tiazol-2-il)-5-(tetrahidro-2H-piran-4-iloksi)-N-[(1S)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
[1351]
[1352] Intermedijer 5K (530 mg, 1.66 mmol), (1S)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etanamin (349 mg, 1.83 mmol), TEA (0.35 mL, 2.49 mmol) i HATU (694 mg, 1.83 mmol) su rastvoreni u DMSO (17 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije i uparena do suva. Preostali sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent heksan/ EE) dajući naslovljeno jedinjenje 600 mg (73% prinosa).
[1353]<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.54 - 1.70 (m, 5 H) 1.93 - 2.07 (m, 2 H) 3.46-3.59 (m, 2 H) 3.80 - 3.91 (m, 2 H) 4.69 - 4.82 (m, 1 H) 5.29 (t, J=7.06 Hz, 1 H) 7.51 - 7.55 (m, 1 H) 7.56 - 7.61 (m, 1 H) 7.64 (d, J=1.13 Hz, 1 H) 7.91 (t, J=1.32 Hz, 1 H) 9.12 (s, 2 H) 9.16 (d, J=7.16 Hz, 1 H).
[1354] Analogno postupku opisanom za Primer 1, sledeći primeri su pripremljeni korišćenjem HATU i odgovarajuće karboksilne kiseline i amina polaznih materijala.
1
2
4
[1355] Intermedijer 63 je formiran kao smeša dva trans izomera. Hiralno prečišćavanje (Metod 2) dalo je Primer 162 (Trans Izomer 1) i Primer 163 (Trans Izomer 2).
[1356] Primer 162: Trans Izomer 1; 3-{[3-hidroksibutan-2-il]oksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
Hiralno prečišćavanje (Metod 2) na 189 mg Intermedijera 63 dalo je 72 mg naslovnog jedinjenja.
[1357] SFC Hiralna analiza (Metod 2): 100% e.e., Rt = 1.25 min.
[1358]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.94 (s, 2H), 7.76 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.95 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 5.35 (m, 1H), 4.43 (qd, J = 6.2, 3.3 Hz, 1H), 4.02 (qd, J = 6.4, 3.3 Hz, 1H), 2.52 (s, 3H), 1.72 (s, 3H), 1.27 (d, J = 6.3 Hz, 3H), 1.25 (d, J = 6.5 Hz, 3H).
[1359] LCMS (Analitički metod D) Rt = 4.14 min, MS (ESIpos) m/z = 481 (M+H)<+>.
[1360] Primer 163: Trans Izomer 2; 3-{[3-hidroksibutan-2-il]oksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
Hiralno prečišćavanje (Metod 2) na 189 mg Intermedijera 63 dalo je 77.2 mg naslovnog jedinjenja.
[1361] SFC Hiralna analiza (Metod 2): 99.4% e.e., Rt = 1.42 min.
[1362]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.94 (s, 2H), 7.80 (s, 1H), 7.54 - 7.49 (m, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.38 - 7.33 (m, 1H), 6.82 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 5.35 (m, 1H), 4.47 (qd, J = 6.3, 3.3 Hz, 1H), 4.03 (qd, J = 6.4, 3.3 Hz, 1H), 2.53 (d, J = 0.9 Hz, 3H), 1.71 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 1.29 (d, J = 6.3 Hz, 3H), 1.27 (d, J = 6.5 Hz, 3H).
[1363] LCMS (Analitički metod D) Rt = 4.15 min, MS (ESIpos) m/z = 481 (M+H)<+>.
[1364] Analogno postupku opisanom za Primer 7, sledeći primeri su pripremljeni korišćenjem T3P i odgovarajuće karboksilne kiseline i amina polaznih materijala.
1
2
4
Primer 190: tert-Butil (3R)-3-[3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-({(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}karbamoil)fenoksi]piperidin-1-karboksilat, kao smeša dijastereoizomera
[1365]
[1366] U rastvor Intermedijera 5AF (200 mg, 0.44 mmol), Intermedijera VI (121 mg, 0.53 mmol) i DIPEA (0.231 mL, 1.33 mmol) u DCM (1 mL) dodat je T3P (50% rastvor u EtOAc, 0.198 mL, 0.66 mmol) i dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 16 h. LCMS analiza ukazala je na nepotpunu potrošnju polaznog materijala. Dodat je HATU (50 mg, 0.13 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h zatim je razblažena sa DCM (1 mL) i isprana sa vodom (1 mL). Organska faza je osušena (MgSO4), filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Prečišćavanje sa Biotage Isolera™ hromatografijom (eluiranje sa 0 - 80% EtOAc u heptanu na predpakovanoj koloni KP-SiO2) dalo je bezbojno ulje koje je liofilizovano da bi se dobilo 195 mg (71% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu belog praha.
[1367]<1>H NMR (250 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 9.08 (s, 2H), 8.92 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 7.94 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.65 - 7.47 (m, 3H), 5.33 (m, 1H), 4.53 (d, J = 3.1 Hz, 1H), 3.68 - 3.23 (m, 4H), 2.07 - 1.59 (m, 6H), 1.60 - 1.41 (m, 1H), 1.30 (d, J = 2.4 Hz, 9H). LCMS (Analitički metod F) Rt = 4.27 min, MS (ESIpos): m/z = 592 (M+H)<+>.
[1368] Analogno postupku opisanom za Primer 190, sledeći primeri su pripremljeni korišćenjem oba T3P i HATU sa odgovarajućom karboksilnom kiselinom i aminom polaznih materijala.
[1369] Primeri 193 do 200 su pripremljeni korišćenjem T3P i odgovarajuće karboksilne kiseline i amina polaznih materijala. Izomerne smeše su datim postupcima razdvojene u pojedinačne izomere.
Primer 193 (Enantiomer 1) i Primer 194 (Enantiomer 2): 3-(5-Metil-1,3-tiazol-2-il)-5-(oksetan-3-iloksi)-N-{1-[5-(trifluorometil)-1,3,4-tiadiazol-2-il]etil}benzamid, formiran kao smeša 2 enantiomera
[1370]
[1371] Intermedijer 5F (40 mg, 0.14 mmol), 1-[5-(trifluorometil)-1,3,4-tiadiazol-2-il]etanamin (38 mg, 0.17 mmol) i DIPEA (0.12 mL, 0.69 mmol) su rastvoreni u DCM (2 mL). Dodat je T3P (0.16 mL, 0.28 mmol, 50% u EtOAc) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2h. Reakciona smeša je isprana sa zasićenim NaHCO3(3 mL) i vodeni sloj je još ekstrahovan sa DCM (2 x 2 mL). Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (eluiranje sa 10 - 70% EtOAc u heptanu na 10 g prethodno upakovane kolone KP-SiO2) da se dobije 31 mg (48% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bezbojne gume.
[1372]<1>H NMR (500 MHz, CDCl3): δ [ppm] 7.88 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.40 (dd, J = 2.4, 1.4 Hz, 1H), 7.22 (dd, J = 2.4, 1.5 Hz, 1H), 6.93 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 5.74 (m, 1H), 5.34 (m, 1H), 5.07 - 5.02 (m, 2H), 4.78 (ddd, J = 7.4, 5.0, 2.8 Hz, 2H), 2.54 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 1.91 (d, J = 7.0 Hz, 3H).
[1373] LCMS (Analitički metod F) Rt = 3.37 min, MS (ESIpos): m/z = 471.1 (M+H)<+>.
Primer 193: Enantiomer 1; 3-(5-Metil-1,3-tiazol-2-il)-5-(oksetan-3-iloksi)-N-{1-[5-(trifluorometil)-1,3,4-tiadiazol-2-il]etil}benzamid
[1374] SFC hiralno prečišćavanje (Metod 3) je izvedeno na 28.7 mg smeše Enantiomera 1 (Primer 193) i Enantiomera 2 (Primer 194) da bi se dobilo 8.9 mg naslovnog jedinjenja.
[1375] SFC Hiralna analiza (Metod 3): 100% e.e. Rt = 2.21 min.
[1376]<1>H NMR (500 MHz, CDCl3): δ [ppm] 7.87 (s, 1H), 7.53 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 7.42 -7.39 (m, 1H), 7.23 - 7.21 (m, 1H), 6.87 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 5.78 - 5.71 (m, 1H), 5.34 (t, J = 5.4
1
Hz, 1H), 5.04 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 4.78 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 2.54 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 1.91 (d, J = 7.0 Hz, 3H).
[1377] LCMS (Analitički metod D) Rt = 4.39 min, MS (ESIpos): m/z = 471.1 (M+H)<+>.
Primer 194: Enantiomer 2; 3-(5-Metil-1,3-tiazol-2-il)-5-(oksetan-3-iloksi)-N-{1-[5-(trifluorometil)-1,3,4-tiadiazol-2-il]etil}benzamid
[1378] SFC hiralno prečišćavanje (Metod 3) je izvedeno na 28.7 mg smeše Enantiomera 1 (Primer 193) i Enantiomera 2 (Primer 194) da bi se dobilo 11.7 mg naslovnog jedinjenja.
[1379] SFC Hiralna analiza (Metod 3): 99.2% e.e. Rt = 2.53 min.
[1380]<1>H NMR (500 MHz, CDCl3): δ [ppm] 7.88 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.40 (s, 1H), 7.22 (s, 1H), 6.91 - 6.85 (m, 1H), 5.78 - 5.71 (m, 1H), 5.37 - 5.31 (m, 1H), 5.04 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 4.81 - 4.76 (m, 2H), 2.54 (s, 3H), 1.91 (d, J = 7.1 Hz, 3H).
[1381] LCMS (Analitički metod D) Rt = 4.40 min, MS (ESIpos): m/z = 471.0 (M+H)<+>.
Primer 195 (Enantiomer 1) i Primer 196 (Enantiomer 2): 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-(tetrahidro-2H-piran-4-iloksi)-N-{1-[5-(trifluorometil)-1,3,4-tiadiazol-2-il]etil}benzamid, formiran kao smeša 2 enantiomera
[1382]
[1383] Intermedijer 5K (96 mg, 0.3 mmol), 1-[5-(trifluorometil)-1,3,4-tiadiazol-2-il]etanamin (84 mg, 0.36 mmol) i DIPEA (0.261 mL, 1.5 mmol) su rastvoreni u DCM (3 mL). Dodat je T3P (0.35 mL, 0.6 mmol, 50% u EtOAc) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2h. Reakciona smeša je isprana sa zasićenim NaHCO3(3 mL) i vodeni sloj je još ekstrahovan sa DCM (2 x 2 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je triturisan sa Et2O da bi se dobilo 112 mg (75% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu belog praha.
2
[1384]<1>H NMR (500 MHz, CDCl3): δ [ppm] 7.84 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 7.60 - 7.57 (m, 1H), 7.53 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 7.45 - 7.42 (m, 1H), 6.89 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 5.74 (m, 1H), 4.65 (dq, J = 7.7, 3.8 Hz, 1H), 4.03 - 3.96 (m, 2H), 3.61 (ddd, J = 11.6, 8.3, 3.2 Hz, 2H), 2.54 (d, J = 1.0 Hz, 3H), 2.11 - 2.03 (m, 2H), 1.91 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 1.82 (dtd, J = 12.4, 8.1, 3.6 Hz, 2H).
[1385] LCMS (Analitički metod F) Rt = 3.64 min, MS (ESIpos): m/z = 499.1 (M+H)<+>.
[1386] Primer 195: Enantiomer 1; 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-(tetrahidro-2H-piran-4-iloksi)-N-{1-[5-(trifluorometil)-1,3,4-tiadiazol-2-il]etil}benzamid
SFC hiralno prečišćavanje (Metod 3) je izvedeno na 112 mg smeše Enantiomera 1 (Primer 195) i Enantiomera 2 (Primer 196) da bi se dobilo 47.8 mg naslovnog jedinjenja.
[1387] SFC Hiralna analiza (Metod 3): 100% e.e. Rt = 2.21 min.
[1388]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 7.84 (s, 1H), 7.60 - 7.57 (m, 1H), 7.53 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 7.45 - 7.41 (m, 1H), 6.87 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 5.74 (m, 1H), 4.70 - 4.61 (m, 1H), 4.03 - 3.96 (m, 2H), 3.61 (ddd, J = 11.6, 8.3, 3.2 Hz, 2H), 2.54 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 2.12 -2.03 (m, 2H), 1.91 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 1.86 - 1.77 (m, 2H).
[1389] LCMS (Analitički metod D) Rt = 4.62 min, MS (ESIpos): m/z = 499.1 (M+H)<+>.
[1390] Primer 196: Enantiomer 2; 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-(tetrahidro-2H-piran-4-iloksi)-N-{1-[5-(trifluorometil)-1,3,4-tiadiazol-2-il]etil}benzamid
SFC hiralno prečišćavanje (Metod 3) je izvedeno na 112 mg smeše Enantiomera 1 (Primer 195) i Enantiomera 2 (Primer 196) da bi se dobilo 49.6 mg naslovnog jedinjenja.
[1391] SFC Hiralna analiza (Metod 3): 100% e.e. Rt = 2.70 min.
[1392]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 7.85 (s, 1H), 7.59 - 7.57 (m, 1H), 7.53 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.45 - 7.42 (m, 1H), 6.89 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 5.74 (m, 1H), 4.71 - 4.62 (m, 1H), 4.04 - 3.94 (m, 2H), 3.61 (ddd, J = 11.7, 8.4, 3.2 Hz, 2H), 2.54 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 2.11 2.03 (m, 2H), 1.91 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 1.87 - 1.78 (m, 2H). LCMS (Analitički metod D) Rt = 4.62 min, MS (ESIpos): m/z = 499.2 (M+H)<+>.
Primer 197 (Dijastereoizomer 1) i Primer 198 (Dijastereoizomer 2): 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3R)-tetrahidrofuran-3-iloksi]-N-{1-[5-(trifluorometil)-1,3,4-tiadiazol-2-il]etil}benzamid, formiran kao smeša dva dijastereoizomera
[1393]
[1394] Intermedijer 5B (92 mg, 0.3 mmol), 1-[5-(trifluorometil)-1,3,4-tiadiazol-2-il]etanamin (84 mg, 0.36 mmol) i DIPEA (0.261 mL, 1.5 mmol) su rastvoreni u DCM (3 mL). Dodat je T3P (0.35 mL, 0.6 mmol, 50% u EtOAc) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2h. Reakciona smeša je isprana sa zasićenim NaHCO3(3 mL) i vodeni sloj je još ekstrahovan sa DCM (2 x 2 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (eluiranje sa 10 - 70% EtOAc u heptanu na 10 g prethodno upakovane kolone KP-SiO2) da se dobije 86.1 mg (59% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu belog praha.
[1395]<1>H NMR (500 MHz, CDCl3): δ [ppm] 7.86 (s, 1H), 7.54 (dd, J = 2.3, 1.5 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 7.39 (q, J = 2.2 Hz, 1H), 6.91 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 5.74 (m, 1H), 5.13 - 5.03 (m, 1H), 4.07 - 3.97 (m, 3H), 3.92 (td, J = 8.4, 4.2 Hz, 1H), 2.54 (d, J = 1.0 Hz, 3H), 2.34 - 2.23 (m, 1H), 2.23 - 2.14 (m, 1H), 1.91 (d, J = 7.0 Hz, 3H).
LCMS (Analitički metod F) Rt = 3.49min, MS (ESIpos): m/z = 485 (M+H)<+>.
Primer 197: Dijastereoizomer 1; 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3R)-tetrahidrofuran-3-iloksi]-N-[1-[5-(trifluorometil)-1,3,4-tiadiazol-2-il]etil}benzamid
[1396] SFC hiralno prečišćavanje (Metod 3) je izvedeno na 86 mg smeše Dijastereoizomera 1 (Primer 197) i Dijastereoizomera 2 (Primer 198) da bi se dobilo 34.6 mg naslovnog jedinjenja.
4
[1397] SFC Hiralna analiza (Metod 3): 100% e.e. Rt = 2.39 min.
[1398]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 7.87 (s, 1H), 7.60 - 7.50 (m, 2H), 7.40 (s, 1H), 6.88 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 5.78 - 5.70 (m, 1H), 5.10 - 5.06 (m, 1H), 4.06 - 3.98 (m, 3H), 3.93 (td, J = 8.4, 4.3 Hz, 1H), 2.54 (s, 3H), 2.29 (td, J = 14.4, 8.4 Hz, 1H), 2.21 - 2.14 (m, 1H), 1.91 (d, J = 7.0 Hz, 3H).
[1399] LCMS (Analitički metod D) Rt = 4.49 min, MS (ESIpos): m/z = 485 (M+H)<+>.
Primer 198: Dijastereoizomer 2; 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3R)-tetrahidrofuran-3-iloksi]-N-{1-[5-(trifluorometil)-1,3,4-tiadiazol-2-il]etil}benzamid
[1400] SFC hiralno prečišćavanje (Metod 3) je izvedeno na 86 mg smeše Dijastereoizomera 1 (Primer 197) i Dijastereoizomera 2 (Primer 198) da bi se dobilo 36.9 mg naslovnog jedinjenja.
[1401] SFC Hiralna analiza (Metod 3): 99.8% e.e. Rt = 2.75 min.
[1402]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 7.87 (s, 1H), 7.58 - 7.51 (m, 2H), 7.40 (s, 1H), 6.88 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 5.81 - 5.69 (m, 1H), 5.08 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 4.07 - 3.99 (m, 2H), 3.93 (td, J = 8.3, 4.2 Hz, 1H), 2.54 (s, 3H), 2.37 - 2.23 (m, 1H), 2.23 - 2.09 (m, 1H), 1.91 (d, J = 7.0 Hz, 3H).
[1403] LCMS (Analitički metod D) Rt = 4.49 min, MS (ESIpos): m/z = 485 (M+H)<+>.
Primer 199 (Dijastereoizomer 1) i Primer 200 (Dijastereoizomer 2): 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3S)-tetrahidrofuran-3-iloksi]-N-{1-[5-(trifluorometil)-1,3,4-tiadiazol-2-il]etil}benzamid, formiran kao smeša dva dijastereoizomera
[1404]
[1405] Intermedijer 5C (61 mg, 0.2 mmol), 1-[5-(trifluorometil)-1,3,4-tiadiazol-2-il]etanamin (56 mg, 0.24 mmol) i DIPEA (0.174 mL, 1 mmol) su rastvoreni u DCM (3 mL). Dodat je T3P (0.234 mL, 0.4 mmol, 50% u EtOAc) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2h. Reakciona smeša je isprana sa zasićenim NaHCO3(3 mL) i vodeni sloj je još ekstrahovan sa DCM (2 x 2 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (eluiranje sa 20 - 80% EtOAc u heptanu na 10 g prethodno upakovane kolone KP-SiO2) da se dobije 41.1 mg (42% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu beličaste čvrste supstance.
[1406]<1>H NMR (500 MHz, CDCl3): δ [ppm] 8.00 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.05 (s, 1H), 5.75 (m, 1H), 5.08 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 4.09 - 3.97 (m, 3H), 3.93 (td, J = 8.4, 4.3 Hz, 1H), 2.55 (d, J = 0.9 Hz, 3H), 2.30 (td, J = 14.3, 8.3 Hz, 1H), 2.24 - 2.13 (m, 1H), 1.92 (d, J = 7.0 Hz, 3H).
[1407] LCMS (Analitički metod D) Rt = 4.43 min, MS (ESIpos): m/z = 485.95 (M+H)<+>.
Primer 199: Dijastereoizomer 1; 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3S)-tetrahidrofuran-3-iloksi]-N-[1-[5-(trifluorometil)-1,3,4-tiadiazol-2-il]etil}benzamid
[1408] SFC hiralno prečišćavanje (Metod 3) je izvedeno na 41 mg smeše Dijastereoizomera 1 (Primer 199) i Dijastereoizomera 2 (Primer 200) da bi se dobilo 13.1 mg naslovnog jedinjenja.
[1409] SFC Hiralna analiza (Metod 3): 100% e.e. Rt = 1.74 min.
[1410]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 7.86 (s, 1H), 7.56 - 7.53 (m, 1H), 7.53 -7.52 (m, 1H), 7.41 - 7.38 (m, 1H), 6.90 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 5.74 (m, 1H), 5.10 - 5.05 (m, 1H), 4.07 - 3.98 (m, 3H), 3.93 (td, J = 8.4, 4.3 Hz, 1H), 2.54 (s, 3H), 2.33 - 2.25 (m, 1H), 2.21 - 2.14 (m, 1H), 1.91 (d, J = 7.0 Hz, 3H). LCMS (Analitički metod D) Rt = 4.45 min, MS (ESIpos): m/z = 485.05 (M+H)<+>.
Primer 200: Dijastereoizomer 2; 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(3S)-tetrahidrofuran-3-iloksi]-N-{1-[5-(trifluorometil)-1,3,4-tiadiazol-2-il]etil}benzamid
[1411] SFC hiralno prečišćavanje (Metod 3) je izvedeno na 41 mg smeše Dijastereoizomera 1 (Primer 199) i Dijastereoizomera 2 (Primer 200) da bi se dobilo 16.1 mg naslovnog jedinjenja.
[1412] SFC Hiralna analiza (Metod 3): 100% e.e. Rt = 2.81 min.
[1413]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 7.86 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.42 - 7.38 (m, 1H), 6.89 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 5.74 (m, 1H), 5.11 - 5.03 (m, 1H), 4.06 - 3.99 (m, 3H), 3.93 (td, J = 8.4, 4.3 Hz, 1H), 2.54 (s, 3H), 2.35 - 2.24 (m, 1H), 2.22 - 2.14 (m, 1H), 1.91 (d, J = 7.0 Hz, 3H).
[1414] LCMS (Analitički metod D) Rt = 4.45 min, MS (ESIpos): m/z = 485.0 (M+H)<+>.
Primer 201: 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-(piperidin-4-iloksi)-N-{(1R)-1-[6-(trifluorometil)piridazin-3-il]etil}benzamid
[1415]
[1416] U rastvor Intermedijera 41 (178 mg, 0.30 mmol) u DCM (5 mL) dodata je TFA (0.23 mL, 3.0 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Reakcija je ugašena sa 1M NaOH (5 mL), i slojevi su odvojeni. Vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM (2 x 5 mL), i kombinovani organski slojevi su osušeni iznad MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (silika gel, eluiranje sa heptani-EtOAc, 1:4 do 0:1 praćeno sa EtOAc-MeOH, 1:0 do 4:1). Frakcije koje sadrže proizvod su koncentrovane i ostatak je liofilizovan iz MeCN/vode da bi se dobilo 101.3 mg (69% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu belog praha.
[1417]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 7.86 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.82 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.74 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.58 (dd, J = 2.3, 1.5 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 7.43 - 7.40 (m, 1H), 5.60 (m, 1H), 4.53 (tt, J = 8.0, 3.8 Hz, 1H), 3.19 - 3.10 (m, 2H), 2.80 - 2.71 (m, 2H), 2.53 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 2.09 - 1.99 (m, 2H), 1.76 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 1.74 - 1.65 (m, 2H).
[1418] LCMS (Analitički metod F) Rt = 2.02 min, MS (ESIpos): m/z = 492.2 (M+H)<+>.
[1419] Analogno postupku opisanom za Primer 201, sledeći primeri su pripremljeni korišćenjem TFA i odgovarajućih N-Boc-zaštićenih amina polaznih materijala.
Primer 205 (Dijastereoizomer 1) i Primer 206 (Dijastereoizomer 2): 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-(piperidin-3-iloksi)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid, formiran kao smeša dva dijastereoizomera
[1420]
[1421] U rastvor Primera 190 (189 mg, 0.32 mmol) u DCM (1 mL) dodata je TFA (0.25 mL, 3.19 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i ostatak je prebačen u vodu (1 mL) i načinjen baznim do pH 12 sa 10 M rastvorom NaOH da bi se dobilo beli talog. Talog je rastvoren i ekstrahovan sa EtOAc (2 x 5 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 160 mg (kvantitativni prinos) naslovnog jedinjenja u vidu belog praha.
[1422]<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 9.17 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 9.11 (s, 2H), 7.91 (s, 1H), 7.64 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.59 - 7.55 (m, 1H), 7.54 - 7.50 (m, 1H), 5.29 (m, 1H), 4.48 (dt, J = 7.5, 3.9 Hz, 1H), 3.15 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 2.82 (dt, J = 11.8, 4.4 Hz, 1H), 2.62 (dt, J = 30.0, 8.9 Hz, 2H), 2.02 (s, 1H), 1.77 - 1.67 (m, 1H), 1.61 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 1.49 (ddt, J = 13.1, 9.3, 5.1 Hz, 1H).
[1423] Primer 205: Dijastereoizomer 1; 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-(piperidin-3-iloksi)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
HPLC hiralno prečišćavanje (Metod 4) je izvedeno na 60 mg smeše Dijastereoizomera 1 (Primer 205) i Dijastereoizomera 2 (Primer 206) da bi se dobilo 24.6 mg naslovnog jedinjenja.
[1424] HPLC Hiralna analiza (Metod 4): 100% e.e. Rt = 10.2 min.
[1425]<1>H NMR (500 MHz, DMSO): δ [ppm] 9.18 (d, 1H), 9.12 (s, 2H), 7.91 (t, 1H), 7.64 (d, 1H), 7.58 - 7.55 (m, 1H), 7.55 - 7.51 (m, 1H), 5.30 (m, 1H), 4.48 (tt, 1H), 3.18 - 3.11 (m, 1H), 2.85 - 2.77 (m, 1H), 2.67 - 2.54 (m, 2H), 2.06 - 1.99 (m, 1H), 1.75 - 1.69 (m, 1H), 1.64 - 1.44 (m, 5H).
[1426] LCMS (Analitički metod F) Rt = 2.08 min, MS (ESIpos): m/z = 492 (MH)<+>.
[1427] Primer 206: Dijastereoizomer 2; 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-(piperidin-3-iloksi)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
HPLC hiralno prečišćavanje (Metod 4) je izvedeno na 60 mg smeše Dijastereoizomera 1 (Primer 205) i Dijastereoizomera 2 (Primer 206) da bi se dobilo 24.6 mg naslovnog jedinjenja.
[1428] HPLC Hiralna analiza (Metod 4): 96% e.e. Rt = 12.4 min.
4
[1429]<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 9.17 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 9.11 (s, 2H), 7.90 (s, 1H), 7.64 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 7.57 - 7.54 (m, 2H), 7.54 - 7.50 (m, 1H), 5.29 (m, 1H), 4.42 (dt, J = 8.2, 4.2 Hz, 1H), 3.16 - 3.07 (m, 1H), 2.85 - 2.74 (m, 1H), 2.60 - 2.52 (m, 2H), 2.08 -2.00 (m, 1H), 1.74 - 1.65 (m, 1H), 1.64 - 1.41 (m, 5H).
[1430] LCMS (Analitički metod F) Rt = 2.08 min, MS (ESIpos): m/z = 492 (MH)<+>.
[1431] Intermedijer 67 je formiran kao smeša dva cis izomera. SFC hiralno prečišćavanje (Metod 5) obezbedilo je Primer 207 (Cis Izomer 1) i Primer 208 (Cis Izomer 2).
Primer 207: Cis Izomer 1; 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-{[2-(trifluorometil)piperidin-4-il]oksi}-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
[1432] SFC hiralno prečišćavanje (Metod 5) na 46.9 mg Intermedijera 67 dalo je 15.3 mg naslovnog jedinjenja.
[1433] SFC Hiralna analiza (Metod 2): 99.6% e.e., Rt = 1.66 min.
[1434]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.96 (s, 2H), 7.88 (s, 1H), 7.59 - 7.53 (m, 2H), 7.45 - 7.41 (m, 1H), 6.63 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 5.38 (m, 1H), 4.47 (ddd, J = 15.5, 11.0, 4.4 Hz, 1H), 3.36 - 3.23 (m, 2H), 2.80 (td, J = 12.6, 2.4 Hz, 1H), 2.57 (d, J = 1.0 Hz, 3H), 2.41 -2.33 (m, 1H), 2.27 - 2.18 (m, 1H), 1.75 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 1.68 - 1.60 (m, 3H).
[1435] LCMS (Analitički metod D) Rt = 3.69 min, MS (ESIpos): m/z = 560 (M+H)<+>.
Primer 208: Cis Izomer 2; 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-{[2-(trifluorometil)piperidin-4-il]oksi}-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
[1436] Hiralno prečišćavanje (Metod 5) na 46.9 mg Intermedijera 67 dalo je 14.1 mg naslovnog jedinjenja.
4 1
[1437] SFC Hiralna analiza (Metod 5): 99.6% e.e., Rt = 1.87 min.
[1438]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.94 (s, 2H), 7.85 (s, 1H), 7.55 - 7.51 (m, 2H), 7.44 - 7.38 (m, 1H), 6.61 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 5.35 (m, 1H), 4.48 - 4.38 (m, 1H), 3.32 -3.19 (m, 2H), 2.78 (td, J = 12.6, 2.3 Hz, 1H), 2.54 (d, J = 0.9 Hz, 3H), 2.35 - 2.29 (m, 1H), 2.23 - 2.15 (m, 1H), 1.72 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 1.67 - 1.59 (m, 3H).
[1439] LCMS (Analitički metod D) Rt = 3.70 min, MS (ESIpos): m/z = 560 (M+H)<+>.
Primer 209: 3-{[2-metil-2-azabiciklo[2.2.1]hept-5-il]oksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
[1440]
[1441] Intermedijer 74 (30 mg, 0.06 mmol), formaldehid (37% u vodi) (22.32 µL, 0.3 mmol) i sirćetna kiselina (5.12 µL, 0.09 mmol) su kombinovani u MeOH (2 mL) i dodat je STAB (37.88 mg, 0.18 mmol). Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 1 sata pre koncentrisanja pod sniženim pritiskom. Dobijeni ostatak je prebačen u zasićeni NaHCO3(5 mL) i ekstrahovan sa DCM (3 x 5 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani sa vodom i osušeni iznad MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (Metod A) i liofilizovan iz MeCN/vode da bi se dobilo 13.7 mg (44% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu belog praha.
[1442]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.93 (s, 2H), 7.82 (t, J = 1.3 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.49 - 7.47 (m, 1H), 7.37 - 7.35 (m, 1H), 6.60 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 5.36 (m, 1H), 4.38 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 3.21 (s, 1H), 2.84 (m, 1H), 2.60 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 2.53 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 2.43 - 2.37 (m, 1H), 2.33 (s, 3H), 2.15 - 2.09 (m, 1H), 1.77 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 1.71 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 1.48 (d, J = 13.8 Hz, 1H).
4 2
[1443] LCMS (Analitički metod F) Rt = 2.21 min, MS (ESIpos): m/z = 518.1 (M+H)<+>.
[1444] Analogno postupku opisanom za Primer 220/ Primer 221, sledeći primeri su pripremljeni korišćenjem STAB i odgovarajuće amina polaznih materijala.
4
44
4
4
4 Primer 220 (Dijastereoizomer 1) i Primer 221 (Dijastereoizomer 2): 3-[(1-metilpiperidin-3-il)oksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid, formiran kao smeša dva dijastereoizomera
[1445]
[1446] Intermedijer 40 (93 mg, 0.189 mmol), 37% rastvor formaldehida u vodi (0.07 mL, 0.946 mmol) i sirćetna kiselina (0.02 mL, 0.378 mmol) su kombinovani u metanolu (1 mL) i dodat je STAB (60 mg, 0.28 mmol) u porcijama. Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 2 h pre koncentrovanja pod sniženim pritiskom. Ostatak je prebačen u vodu (1 mL) i načinjen baznim do pH 5 sa 10 M rastvora natrijum hidroksida i ekstrahovan sa EtOAc. Organska faza je odvojena, osušena (MgSO4), filtrirana, uparena pod sniženim pritiskom i liofilizovana da bi se dobilo 59 mg (62% prinosa) naslovnog jedinjenja kao belu čvrstu supstancu.
[1447]<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 9.17 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 9.11 (s, 2H), 7.91 (s, 1H), 7.64 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.59 - 7.55 (m, 1H), 7.54 - 7.50 (m, 1H), 5.29 (m, 1H), 4.48 (dt, J = 7.5, 3.9 Hz, 1H), 3.15 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 2.82 (dt, J = 11.8, 4.4 Hz, 1H), 2.62 (dt, J = 30.0, 8.9 Hz, 2H), 2.02 (s, 1H), 1.77 - 1.67 (m, 1H), 1.61 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 1.49 (ddt, J = 13.1, 9.3, 5.1 Hz, 1H).
[1448] Primer 220: Dijastereoizomer 1; 3-[(1-metilpiperidin-3-il)oksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
SFC hiralno prečišćavanje (Metod 6) na 56 mg smeše Dijastereoizomera 1 (Primer 220) i Dijastereoizomera 2 (Primer 221) dalo je 29 mg naslovnog jedinjenja.
[1449] SFC Hiralna analiza (Metod 6): 99.8% e.e., Rt = 2.01 min.
4
[1450]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.93 (s, 2H), 7.86 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.57 (dd, J = 2.3, 1.5 Hz, 1H), 7.50 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.45 - 7.40 (m, 1H), 6.80 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 5.35 (m, 1H), 4.54 (dt, J = 7.2, 3.7 Hz, 1H), 2.78 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 2.52 (d, J = 1.1 Hz, 4H), 2.39 (s, 1H), 2.29 (s, 4H), 1.95 - 1.83 (m, 2H), 1.70 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 1.63 (dd, J = 10.6, 5.5 Hz, 2H).
[1451] LCMS (Analitički metod D) Rt = 3.16 min, MS (ESIpos): m/z = 506 (M+H)+.
[1452] Primer 221: Dijastereoizomer 2; 3-[(1-metilpiperidin-3-il)oksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
SFC hiralno prečišćavanje (Metod 6) na 56 mg smeše Dijastereoizomera 1 (Primer 220) i Dijastereoizomera 2 (Primer 221) dalo je 20.1 mg naslovnog jedinjenja.
[1453] SFC Hiralna analiza (Metod 6): 95.1% e.e., Rt = 2.19 min.
[1454]<1>H NMR (250 MHz, MeOD): δ [ppm] 9.01 (s, 2H), 7.91 (t, 1H), 7.67 - 7.59 (m, 1H), 7.54 (d, 1H), 7.51 - 7.45 (m, 1H), 5.34 (q, 1H), 4.64 - 4.53 (m, 1H), 2.90 (d, 1H), 2.67 - 2.29 (m, 9H), 2.06 - 1.82 (m, 2H), 1.75 - 1.57 (m, 5H).
[1455] LCMS (Analitički metod D) Rt = 3.15 min, MS (ESIpos): m/z = 506 (M+H)+.
Primer 222 (Cis Izomer 1) i Primer 223 (Cis Izomer 2): 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-{[1-metil-2-(trifluorometil)piperidin-4-il]oksi}-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid, formiran kao smeša cis-izomera
[1456]
[1457] Intermedijer 67 (50 mg, 0.09 mmol), 37% rastvor formaldehida u vodi (33 µL, 0.45 mmol) i sirćetna kiselina (5 µL) su kombinovani u metanolu (3 mL) i dodat je STAB (57 mg,
4
0.27 mmol) i reakcija je mešana tokom 2h. LCMS je pokazala nepotpunu konverziju. Reakciona smeša je ponovo tretirana sa 37% rastvorom formaldehida u vodi (33 µL, 0.45 mmol) i STAB (57 mg, 0.27 mmol) i mešana je sledećih 1h. Reakcija je zahtevala pet dodatnih ponovnih tretmana kako bi se dovela do kraja. Sirova reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, dobijeni ostatak je prebačen u zasićeni rastvor NaHCO3(2 mL) i ekstrahovan sa DCM (3 x 2 mL). Kombinovana organska faza je osušena (MgSO4), filtrirana, koncentrovana pod sniženim pritiskom i liofilizovana iz MeCN/vode da bi se dobilo 46.6 mg (86% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu belog praha.
[1458]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.93 (s, 2H), 7.85 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 7.55 - 7.49 (m, 2H), 7.39 (s, 1H), 6.61 (d, J = 4.7 Hz, 1H), 5.35 (m, 1H), 4.39 (dq, J = 9.9, 4.8, 4.2 Hz, 1H), 3.03 (dt, J = 12.2, 3.5 Hz, 1H), 2.80 - 2.71 (m, 1H), 2.56 - 2.50 (m, 3H), 2.45 (s, 3H), 2.41 (d, J = 12.6 Hz, 1H), 2.36 - 2.28 (m, 1H), 2.17 - 2.08 (m, 1H), 1.88 - 1.74 (m, 2H), 1.72 (d, J = 7.2 Hz, 3H).
[1459] LCMS (Analitički metod F) Rt = 3.31 min, MS (ESIpos): m/z = 574.1 (M+H)<+>.
Primer 222: Cis Izomer 1; 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-{[1-metil-2-(trifluorometil)piperidin-4-il]oksi}-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil} benzamid
[1460] SFC hiralno prečišćavanje (Metod 7) na smeši 43.9 mg Cis Izomera 1 (Primer 222) i Cis Izomera 2 (Primer 223) dalo je 11.7 mg naslovnog jedinjenja.
[1461] SFC Hiralna analiza (Metod 7): 98.2% e.e., Rt = 1.51 min
[1462]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.96 (s, 2H), 7.88 (s, 1H), 7.58 - 7.52 (m, 2H), 7.46 - 7.37 (m, 1H), 6.63 (d, J = 6.3 Hz, 1H), 5.38 (m, 1H), 4.49 - 4.35 (m, 1H), 3.09 -3.02 (m, 1H), 2.78 (s, 1H), 2.56 (d, J = 0.9 Hz, 3H), 2.47 (s, 3H), 2.46 - 2.40 (m, 1H), 2.35 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 2.14 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 1.89 - 1.76 (m, 2H), 1.75 (d, J = 7.2 Hz, 3H).
[1463] LCMS (Analitički metod D) Rt = 4.26 min, MS (ESIpos): m/z = 574 (M+H)<+>.
41
Primer 223: Cis Izomer 2; 3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-{[1-metil-2-(trifluorometil)piperidin-4-il]oksi}-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil} benzamid
[1464] SFC hiralno prečišćavanje (Metod 7) na smeši 43.9 mg Cis Izomera 1 (Primer 222) i Cis Izomera 2 (Primer 223) dalo je 9.5 mg naslovnog jedinjenja.
[1465] SFC Hiralna analiza (Metod 7): 98.6% e.e., Rt = 1.76 min
[1466]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.94 (s, 2H), 7.85 (s, 1H), 7.55 - 7.51 (m, 2H), 7.39 (s, 1H), 6.61 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 5.35 (m, 1H), 4.40 (dt, J = 10.5, 5.9 Hz, 1H), 3.06 - 3.00 (m, 1H), 2.82 - 2.68 (m, 1H), 2.54 (s, 3H), 2.45 (s, 3H), 2.41 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 2.31 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 2.13 (d, J = 13.4 Hz, 1H), 1.80 (p, J = 12.4 Hz, 2H), 1.72 (d, J = 7.2 Hz, 3H).
[1467] LCMS (Analitički metod D) Rt = 4.27 min, MS (ESIpos): m/z = 574 (M+H)<+>.
Primer 224: 3-(5-Metil-1,3-tiazol-2-il)-5-{[1-(propan-2-il)piperidin-4-il]oksi}-N-{(1R)-1-[6-(trifluorometil)piridazin-3-il]etil}benzamid
[1468]
[1469] Primer 201 (50 mg, 0.1 mmol) u DCE (1 mL), aceton (1 mL) i sirćetna kiselina (50 µL) su mešani na sobnoj temperaturi tokom 30 minuta. Dodat je STAB (65 mg, 0.3 mmol) i reakcija je mešana preko noći. Reakciona smeša je ponovno tretirana sa acetonom (1 mL) i STAB (65 mg, 0.3 mmol) i mešana preko noći. Reakcija je još ponovno tretirana sa acetonom (3 mL) i STAB (130 mg, 0.6 mmol) i mešana tokom 4 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i ostatak je prebačen u zasićeni NaHCO3(5 mL) i ekstrahovan sa DCM (3 x 5 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Jedinjenje je liofilizovano iz acetonitrila/vode da bi se dobilo 48.0 mg (88% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu belog praha.
[1470]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 7.87 - 7.84 (m, 1H), 7.82 (d, J=8.7, 1H), 7.74 (d, J=8.7, 1H), 7.57 (dd, J=2.3, 1.5, 1H), 7.53 - 7.51 (m, 1H), 7.44 (d, J=7.2, 1H), 7.41 (dd, J=2.3, 1.6, 1H), 5.64 - 5.55 (m, 1H), 4.51 - 4.42 (m, 1H), 2.84 - 2.72 (m, 3H), 2.53 (d, J=1.1, 3H), 2.50 - 2.38 (m, 2H), 2.11 - 1.99 (m, 2H), 1.91 - 1.80 (m, 2H), 1.76 (d, J=7.0, 3H), 1.07 (d, J=6.5, 6H).
[1471] LCMS (Analitički metod D) Rt = 3.22 min, MS (ESIpos): m/z = 534.2 (M+H)<+>.
[1472] Analogno postupku opisanom za Primer 224, sledeći primer je pripremljen korišćenjem STAB i odgovarajućeg ketona i amina polaznih materijala.
Primer 226: Metil 4-[3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-({(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}karbamoil)fenoksi]piperidin-1-karboksilat
[1473]
[1474] U rastvor Primera 138 (60 mg, 0.12 mmol) i DIPEA (0.11 mL, 0.61 mmol) u DCM (1 mL) dodat je metil karbonohloridat (0.028 mL, 0.37 mmol) i dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 3 h. Rastvor je razblažen sa DCM (5 mL) i ispran sa vodom (2 mL). Organska faza je osušena (MgSO4), filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom i sirovi materijal prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (na prethodno upakovanoj koloni KP-SiO2, eluiranje sa heptan-EtOAc). Prečišćeni materijal je liofilizovan iz MeCN/vode da bi se dobilo 53 mg (79% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu belog praha.
[1475]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.93 (s, 2H), 7.82 (s, 1H), 7.55 - 7.49 (m, 2H), 7.39 (s, 1H), 6.75 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 5.36 (m, 1H), 4.62 (tt, J = 6.9, 3.4 Hz, 1H), 3.76 -3.68 (m, 5H), 3.45 - 3.38 (m, 2H), 2.53 (s, 3H), 1.99 - 1.90 (m, 2H), 1.81 - 1.73 (m, 2H), 1.71 (d, J = 7.2 Hz, 3H).
[1476] LCMS (Analitički metod D) Rt = 4.53, MS (ESIpos) m/z = 550 (M+H)<+>.
Primer 227: Etil 4-[3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-({(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}karbamoil)fenoksi]piperidin-1-karboksilat
[1477]
[1478] U rastvor Primera 138 (60 mg, 0.12 mmol) i DIPEA (0.11 mL, 0.61 mmol) u DCM (1 mL) dodat je etil karbonohloridat (0.035 mL, 0.37 mmol) i dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 3 h. Rastvor je razblažen sa DCM (5 mL) i ispran sa vodom (2 mL).
41
Organska faza je osušena (MgSO4), filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom i sirovi materijal prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (na prethodno upakovanoj koloni KP-SiO2, eluiranje sa heptan-EtOAc). Prečišćeni materijal je liofilizovan iz MeCN/vode da bi se dobilo 53 mg (79% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu belog praha.
[1479]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.93 (s, 2H), 7.82 (t, J = 1.3 Hz, 1H), 7.53 (dd, J = 2.3, 1.5 Hz, 1H), 7.52 d, J = 1.1 Hz, 1H), 7.42 - 7.37 (m, 1H), 6.74 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 5.36 (m, 1H), 4.66 - 4.58 (m, 1H), 4.14 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 3.77 - 3.68 (m, 2H), 3.45 - 3.36 (m, 2H), 2.53 (d, J = 1.0 Hz, 3H), 1.99 - 1.90 (m, 2H), 1.81 - 1.73 (m, 2H), 1.71 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 1.27 (t, J = 7.1 Hz, 3H).
[1480] LCMS (Analitički metod D) Rt = 4.70, MS (ESIpos) m/z = 564 (M+H)<+>.
Primer 228: Etil (3S)-3-[3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-({(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}karbamoil)fenoksi]pirolidin-1-karboksilat
[1481]
[1482] U rastvor Primera 203 (40 mg, 0.08 mmol) i DIPEA (73 µL, 0.42 mmol) u DCM (1 mL) dodat je etil karbonohloridat (24 µL, 0.25 mmol) i dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 3 h. Rastvor je razblažen sa DCM (5 mL) i ispran sa vodom (2 mL). Organska faza je osušena (MgSO4), filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom i sirovi materijal prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (na prethodno upakovanoj koloni KP-SiO2, eluiranje sa heptan-EtOAc, 3:2 do 0:1). Prečišćeni materijal je liofilizovan iz MeCN/vode da bi se dobilo 32.5 mg (71% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu belog praha.
[1483]<1>H NMR (250 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.95 (s, 2H), 7.91 (s, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.52 - 7.48 (m, 1H), 7.37 (s, 1H), 6.75 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 5.44 - 5.25 (m, 1H), 5.03 (m, 1H), 4.23 - 4.07 (m, 2H), 3.65 (s, 4H), 2.54 (s, 3H), 2.21 (m, 2H), 1.73 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 1.26 (m, 3H).
[1484] LCMS (Analitički metod D) Rt = 4.52 min, MS (ESIpos): m/z = 550.15 (M+H)<+>.
Primer 229: 3-(5-Metil-1,3-tiazol-2-il)-5-{[1-(propan-2-il)azetidin-3-il]oksil-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
[1485]
[1486] Rastvor Intermedijera 35 (20 mg, 0.043 mmol), 2-bromopropana (6.1 µL, 0.065 mmol) i kalijum karbonata (11.9 mg, 0.086 mmol) u acetonitrilu (0.5 mL) zagrevan je u mikrotalasnoj pećnici na 60 °C tokom 10 minuta zatim na 100°C tokom 30 minuta. Reakcija je ponovo tretirana sa viškom 2-bromopropana (∼50 µL) i zagrevan na 100 °C tokom 2h. Reakciona smeša je filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom-TLC, eluiranje sa 1% NH3 u 5% MeOH u DCM. Materijal je zatim liofilizovan iz MeCN/vode da bi se dobilo 12.9 mg (59% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu belog praha.
[1487]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.95 (s, 2H), 7.88 (s, 1H), 7.52 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 7.46 - 7.40 (m, 1H), 7.31 (s, 1H), 6.81 (s, 1H), 5.37 (m, 1H), 5.02 - 4.89 (m, 1H), 3.99 (s, 2H), 3.29 (s, 2H), 2.58 (s, 1H), 2.53 (d, J = 1.0 Hz, 3H), 1.72 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 1.05 (d, J = 6.2 Hz, 6H).
[1488] LCMS (Analitički metod D) Rt = 3.34 min, MS (ESIpos): m/z = 506.1 (M+H)<+>.
[1489] Intermedijer 93 je formiran kao smeša cis-izomera. SFC hiralno prečišćavanje (Metod 10) dalo je Primer 230 (Cis Izomer 1) i Primer 231 (Cis Izomer 2).
41
[1490] Primer 230: Cis Izomer 1; 3-[(-3-hidroksibutan-2-il)oksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[6-(trifluorometil)piridazin-3-il]etil}benzamid
SFC hiralno prečišćavanje (Metod 10) na 243 mg Intermedijera 93 dalo je 45.8 mg naslovnog jedinjenja u vidu belog praha.
[1491] SFC Hiralna analiza (Metod 10): 100% e.e., Rt = 1.59 min
[1492]<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 9.27 (d, J=7.0, 1H), 8.24 (d, J=8.8, 1H), 8.03 (d, J=8.8, 1H), 7.96 - 7.89 (m, 1H), 7.64 (d, J=1.2, 1H), 7.59 - 7.52 (m, 2H), 5.54 - 5.41 (m, 1H), 4.85 (d, J=4.7, 1H), 4.50 - 4.36 (m, 1H), 3.84 - 3.71 (m, 1H), 2.54 - 2.51 (m, 3H), 1.65 (d, J=7.2, 3H), 1.21 (d, J=6.2, 3H), 1.12 (d, J=6.4, 3H).
[1493] LCMS (Analitički metod F) Rt = 3.11 min, MS (ESIpos): m/z = 481.1 (M+H)+.
[1494] Primer 231: Cis Izomer 2; 3-[(-3-hidroksibutan-2-il)oksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[6-(trifluorometil)piridazin-3-il]etil}benzamid
SFC hiralno prečišćavanje (Metod 10) na 243 mg Intermedijera 93 dalo je 43.8 mg naslovnog jedinjenja u vidu belog praha.
[1495] SFC Hiralna analiza (Metod 10): 100% e.e., Rt = 2.51 min
[1496]<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 9.27 (d, J=7.0, 1H), 8.24 (d, J=8.8, 1H), 8.03 (d, J=8.8, 1H), 7.95 - 7.90 (m, 1H), 7.64 (d, J=1.2, 1H), 7.59 - 7.52 (m, 2H), 5.52 - 5.45 (m, 1H), 4.84 (d, J=4.8, 1H), 4.47 - 4.39 (m, 1H), 3.83 - 3.75 (m, 1H), 2.54 - 2.51 (m, 3H), 1.65 (d, J=7.2, 3H), 1.22 (d, J=6.2, 3H), 1.11 (d, J=6.4, 3H).
[1497] LCMS (Analitički metod F) Rt = 3.10 min, MS (ESIpos): m/z = 481.1 (M+H)+.
Primer 232: 3-[(1,1-dioksidotetrahidro-2H-tiopiran-4-il)oksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
[1498]
41
[1499] Smeša Intermedijera 5AZ (158 mg, 430 µmol), Intermedijera VI (103 mg, 451 µmol), HATU (229 mg, 602 µmol) i DIPEA (300 µl, 1.7 mmol) u DMF (3.0 mL) je mešana na sobnoj temperaturi do potpune konverzije. Reakciona smeša je uparena do suva pod sniženim pritiskom i preostali materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC (metod 1) da se dobije 90 mg (39% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[1500] LCMS (metod 1): rt: 1.14 min, MS ES+ m/z = 541 (M+H)<+>.
[1501]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.62 (d, 3 H) 2.25 (d, 4 H) 3.08 - 3.32 (m, 4 H) 4.93 (br. s., 1 H) 5.30 (t, 1 H) 7.55 - 7.61 (m, 1 H) 7.63 - 7.74 (m, 2 H) 7.95 (s, 1 H) 9.05 -9.25 (m, 3 H).
[1502] Analogno postupku opisanom za pripremu Primera 232 pripremljeni su sledeći derivati:
41
41
41
42
42
42
42
42
42
42
4
41
42
4
44
4
4
4
4
4
44
44
44
44
44
Primer 329: 3-[(2-metiltetrahidrofuran-2-il)metoksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid, kao smeša dva dijastereoizomera [1503]
[1504] Primer 329 (69 mg) je pripremljen od Intermedijera 5BX analogno postupku opisanom za Primer 232.
[1505] LCMS (metod 1): rt: 1.30 min, MS ES+ m/z = 507 (M+H)<+>.
[1506]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.24 - 1.32 (s, 3 H) 1.61 (d, 3 H) 1.65 - 1.74 (m, 1 H) 1.93 (m, 3 H) 3.70 - 3.84 (m, 2 H) 3.95 (s, 2 H) 5.20 - 5.40 (m, 1 H) 7.49 - 7.59 (m, 2 H) 7.64 (d, 1 H) 7.92 (t, 1 H) 9.06 - 9.23 (m, 3 H).
[1507] Primer 329 (54.5 mg, 108 µmol) je razdvojen na dva dijastereoizomera preparativnom hiralnom HPLC (metod A, 54.5 mg u 2.5 ml etanola) da se dobije Primer 330 (Dijastereoizomer 1, 16 mg, rt: 5.6-7.4 min) i Primer 331 (Dijastereoizomer 2, 16 mg, rt: 8.0-10.1 min).
Primer 330 Dijastereoizomer 1; 3-[(2-metiltetrahidrofuran-2-il)metoksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-[(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
[1508] Analitička hiralna HPLC, metod A, rt: 2.61 min
[1509]<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.28 (s, 3 H) 1.61 (d, 3 H) 1.65 - 1.75 (m, 1 H) (m, 3 H) 3.70 - 3.85 (m, 2 H) 3.95 (d, 2 H) 5.30 (m, 1 H) 7.55 (m, 2 H) 7.64 (d, 1 H) 7.92 (t, 1 H) 9.07 - 9.23 (m, 3 H).
44
Primer 331 Dijastereoizomer 2; 3-[(2-metiltetrahidrofuran-2-il)metoksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
[1510] Analitička hiralna HPLC, metod A, rt: 3.16 min
[1511]<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.28 (s, 3 H) 1.61 (d, 3 H) 1.65 - 1.77 (m, 1 H) 1.93 (m, 3 H) 3.70 - 3.86 (m, 2 H) 3.95 (s, 2 H) 5.30 (m, 1 H) 7.55 (m, 2 H) 7.64 (d, 1 H) 7.92 (t, 1 H) 9.05 - 9.24 (m, 3 H).
Primer 332 3-[(3-metiltetrahidrofuran-3-il)metoksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid, kao smeša dva dijastereoizomera [1512]
[1513] Primer 332 (1070 mg) je pripremljen od Intermedijera 5BY analogno postupku opisanom za Primer 232.
[1514] LCMS (metod 1): rt: 1.32 min, MS ES+ m/z = 507 (M+H)<+>.
[1515]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.21 (s, 3 H) 1.55 - 1.74 (m, 4 H) 1.93 (m, 1 H) 3.39 (d, 1 H) 3.71 (d, 1 H) 3.74 - 3.88 (m, 2 H) 3.96 (s, 2 H) 5.30 (m, 1 H) 7.47 - 7.71 (m, 3 H) 7.92 (t, 1 H) 9.07 - 9.25 (m, 3 H).
[1516] Primer 332 (1000 mg, 1.97 mmol) je razdvojen na dva dijastereoizomera preparativnom hiralnom HPLC (metod B, 1000 mg u 7 ml DCM/ metanola (1:1)) da se dobije Primer 333 (Dijastereoizomer 1, 294 mg, rt: 6.0-8.0 min) i Primer 334 (Dijastereoizomer 2, 276 mg, rt: 9.0-10.0 min).
Primer 333 Dijastereoizomer 1; 3-[(3-metiltetrahidrofuran-3-il)metoksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
[1517] Analitička hiralna HPLC, metod B, rt: 2.89 min
44
[1518]<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.21 (s, 3 H) 1.61 (m, 4 H) 1.88 - 2.03 (m, 1 H) 3.39 (d, 1 H) 3.71 (d, 1 H) 3.81 (td, 2 H) 3.96 (s, 2 H) 5.30 (m, 1 H) 7.48 - 7.60 (m, 2 H) 7.64 (d, 1 H) 7.92 (t, 1 H) 9.04 - 9.24 (m, 3 H).
Primer 334 Dijastereoizomer 2; 3-[(3-metiltetrahidrofuran-3-il)metoksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
[1519] Analitička hiralna HPLC, metod B, rt: 4.26 min
[1520]<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.21 (s, 3 H) 1.51 - 1.74 (m, 4 H) 1.86 - 2.01 (m, 1 H) 3.39 (d, 1 H) 3.71 (d, 1 H) 3.80 (td, 2 H) 3.96 (s, 2 H) 5.30 (m, 1 H) 7.46 - 7.59 (m, 2 H) 7.64 (d, 1 H) 7.92 (t, 1 H) 9.06 - 9.25 (m, 3 H).
Primer 335 3-[(1-metil-6-oksopiperidin-3-il)oksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid, kao smeša dva dijastereoizomera [1521]
[1522] Primer 335 (760 mg) je pripremljen od Intermedijera 5BZ analogno postupku opisanom za Primer 232.
[1523] LCMS (metod 1): rt: 1.09 min, MS ES+ m/z = 520 (M+H)<+>.
[1524]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.60 (d, 3 H) 2.07 (m, 2 H) 2.18 - 2.43 (m, 2 H) 2.82 (s, 3 H) 3.37 - 3.51 (m, 1 H) 3.60 - 3.75 (m, 1 H) 4.96 - 5.13 (m, 1 H) 5.20 - 5.36 (m, 1 H) 7.52 - 7.70 (m, 3 H) 7.94 (t, 1 H) 9.04 - 9.23 (m, 3 H).
[1525] Primer 335 (700 mg, 1.35 mmol) je razdvojen na dva dijastereoizomera preparativnom hiralnom HPLC (metod E, 700 mg u 6 ml DCM/ metanola (1:1)) da se dobije Primer 336 (Dijastereoizomer 1, 150 mg, rt: 7.00-9.00 min) i Primer 337 (Dijastereoizomer 2, 140 mg, rt: 10.00-12.60 min).
4
Primer 336 Dijastereoizomer 1; 3-[(1-metil-6-oksopiperidin-3-il)oksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
[1526] Analitička hiralna HPLC, metod E, rt: 2.11 min
[1527]<1>H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.61 (d, 3 H) 2.07 (m, 2 H) 2.21 - 2.32 (m, 1 H) 2.33 - 2.43 (m, 1 H) 2.82 (s, 3 H) 3.39 - 3.50 (m, 1 H) 3.64 - 3.75 (m, 1 H) 5.05 (m, 1 H) 5.30 (m, 1 H) 7.56 - 7.72 (m, 3 H) 7.94 (s, 1 H) 9.06 - 9.23 (m, 3 H).
Primer 337 Dijastereoizomer 2; 3-[(1-metil-6-oksopiperidin-3-il)oksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
[1528] Analitička hiralna HPLC, metod E, rt: 2.88 min
[1529]<1>H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.61 (d, 3 H) 2.01 - 2.14 (m, 2 H) 2.21 - 2.30 (m, 1 H) 2.33 - 2.42 (m, 1 H) 2.82 (s, 3 H) 3.37 - 3.49 (m, 1 H) 3.63 - 3.74 (m, 1 H) 4.95 - 5.12 (m, 1 H) 5.22 - 5.37 (m, 1 H) 7.55 - 7.71 (m, 3 H) 7.94 (t, 1 H) 9.12 (s, 3 H).
Primer 338 3-[(3-hidroksibutan-2-il)oksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid, kao smeša cis izomera
[1530]
[1531] Primer 338 (154 mg) je pripremljen od Intermedijera 5CB analogno postupku opisanom za Primer 232.
[1532] LCMS (metod 1): rt: 1.18 min, MS ES+ m/z = 481 (M+H)<+>.
[1533]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.11 (d, 3 H) 1.21 (dd, 3 H) 1.61 (d, 3 H) 3.68 - 3.86 (m, 1 H) 4.34 - 4.48 (m, 1 H) 4.87 (dd, 1 H) 5.20 - 5.38 (m, 1 H) 7.53 (m, 2 H) 7.64 (d, 1 H) 7.89 (s, 1 H) 9.06 - 9.22 (m, 3 H).
4 1
[1534] Primer 338 (646 mg, 1.34 mmol) je razdvojen na dva dijastereoizomera preparativnom hiralnom HPLC (metod D, 646 mg u 5 ml DCM/ metanola (1:1)) da se dobije Primer 339 (Cis Izomer 1, 197 mg, rt: 9.7-10.8 min) i Primer 340 (Cis Izomer 2, 198 mg, rt: 11.7-13.4 min).
Primer 339 Cis Izomer 1; 3-[(3-hidroksibutan-2-il)oksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
[1535] Analitička hiralna HPLC, metod D, rt: 5.73 min
[1536]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) d [ppm] 1.09 - 1.12 (m, 6 H) 1.21 (d, 3 H) 1.61 (d, J=7.35 Hz, 3 H) 3.69 - 3.85 (m, 1 H) 4.43 (m, 1 H) 4.86 (d, 1 H) 5.29 (m, 1 H) 7.47 - 7.58 (m, 2 H) 7.64 (d, 1 H) 7.89 (t, 1 H) 9.05 - 9.22 (m, 3 H).
Primer 340 Cis Izomer 2; 3-[(3-hidroksibutan-2-il)oksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
[1537] Analitička hiralna HPLC, metod D, rt: 6.97 min
[1538]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.09 - 1.14 (m, 3 H) 1.20 (d, 3 H) 1.61 (d, 3 H) 3.64 - 3.87 (m, 1 H) 4.33 - 4.50 (m, 1 H) 4.87 (d, 1 H) 5.18 - 5.38 (m, 1 H) 7.53 (m, 2 H) 7.64 (d, 1 H) 7.89 (t1 H) 9.05 - 9.24 (m, 3 H).
Primer 341
3-[(7-metil-3-oksa-7-azabiciklo[3.3.1]non-9-il)oksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid, kao smeša dva stereoizomera
[1539]
[1540] Smeša Intermedijera 109 (100 mg, 187 µmol), formaldehida (140 µl, 37 % rastvor, 1.9 mmol), sirćetne kiseline (107 µl, 100 %, 1.9 mmol) u 1,2-dihloretanu (1.5 mL) je mešana na sobnoj temperaturi tokom 30 minuta. Dodat je natrijum triacetoksiborohidrid (113 mg, 1.9
4 2
mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 17 h. Dodat je zasićeni vodeni rastvor NaHCO3i vodeni sloj je ekstrahovan dva puta sa DCM. Kombinovani organski slojevi su upareni do suva pod sniženim pritiskom i ostatak je prečišćen sa hromatografijom na koloni da bi se dobilo 57 mg (55% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[1541] LCMS (metod 1): rt: 0.92 min, MS ES+ m/z = 548 (M+H)<+>.
[1542]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.61 (d, 6 H) 1.91 (br. s., 2 H) 1.96 - 2.05 (m, 2 H) 2.16 (s, 6 H) 2.55 - 2.64 (m, 2 H) 2.71 - 2.86 (m, 2 H) 2.96 - 3.09 (m, 2 H) 3.58 - 3.70 (m, 2 H) 3.72 - 3.86 (m, 2 H) 3.90 - 4.05 (m, 4 H) 4.58 - 4.69 (m, 1 H) 4.71 - 4.85 (m, 1 H) 5.20 -5.37 (m, 2 H) 7.51 - 7.69 (m, 6 H) 7.94 (s, 2 H) 9.12 (s, 4 H) 9.17 - 9.25 (m, 2 H).
[1543] Primer 341 (281 mg, 0.51 mmol) je odvojen na dva stereoizomera sa preparativnom HPLC (metod F, 281 mg u 4 ml DMSO) da se dobije Primer 342 (stereoizomer 1, 125 mg, rt: 7.0-8.0 min) i Primer 343 (stereoizomer 2, 100 mg, rt: 9.0-11.0 min).
Primer 342 Stereoizomer 1; 3-[(7-metil-3-oksa-7-azabiciklo[3.3.1]non-9-il)oksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid [1544] Analitička HPLC, metod F, rt: 2.38 min
[1545]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.61 (d, 3 H) 1.91 (br. s., 2 H) 2.17 (s, 3 H) 3.05 (d, 2 H) 3.65 (d, 2 H) 3.98 (d, 2 H) 4.63 (br. s., 1 H) 5.29 (m, 1 H) 7.51 - 7.70 (m, 3 H) 7.94 (t, 1 H) 9.12 (s, 2 H) 9.19 (d, 1 H).
Primer 343 Stereoizomer 2; 3-[(7-metil-3-oksa-7-azabiciklo[3.3.1]non-9-il)oksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid [1546] Analitička HPLC, metod F, rt: 2.89 min
[1547]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.62 (d, 3 H) 2.00 (br. s., 2 H) 2.14 (s, 3 H) 2.54 - 2.64 (m, 2 H) 2.69 - 2.82 (m, 2 H) 3.80 (m, 2 H) 3.95 (m, 2 H) 4.77 (br. s., 1 H) 5.21 -5.38 (m, 1 H) 7.49 - 7.72 (m, 3 H) 7.94 (t, 1 H) 9.13 (s, 2 H) 9.17 - 9.26 (m, 1 H).
4
Primer 344 3-[(7-izopropil-3-oksa-7-azabiciklo[3.3.1]non-9-il)oksi]-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid, kao smeša dva stereoizomera
[1548]
[1549] Primer 344 (66.7 mg) je pripremljen od Intermedijera 109 (100 mg, 187 µmol) analogno postupku opisanom za Primer 341.
[1550] LCMS (metod 1): rt: 0.95 min, MS ES+ m/z = 576 (M+H)<+>.
[1551]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 0.99 (m, 12 H) 1.61 (d, 6 H) 1.92 (br. s., 2 H) 1.96 - 2.05 (m, 2 H) 2.60 - 2.78 (m, 6 H) 2.93 - 3.08 (m, 2 H) 3.62 (m, 2 H) 3.80 (m, 2 H) 3.91 (m, 4 H) 4.54 - 4.67 (m, 1 H) 4.71 - 4.84 (m, 1 H) 5.29 (m, 2 H) 7.50 - 7.67 (m, 6 H) 7.93 (s, 2 H) 9.12 (s, 4 H) 9.17 - 9.30 (m, 2 H).
Primer 345 metil 9-[3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-({(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}karbamoil)fenoksi]-3-oksa-7-azabicycle[3.3.1]nonan-7-karboksilat, kao smeša dva stereoizomera
[1552]
[1553] U smešu Intermedijera 109 (100 mg, 187 µmol) i DIPEA (160 µl, 940 µmol) u DCM (4.6 mL) dodat je metil karbonohloridat (43 µl, 560 µmol), i smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 17 h. Dodati su voda i DCM, faze su odvojene i vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM. Kombinovani organski slojevi su osušeni sa Na2SO4, filtrirani i upareni do suva pod
4 4
sniženim pritiskom i ostatak je prečišćen sa hromatografijom na koloni da bi se dobilo 75 mg (68% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[1554] LCMS (metod 1): rt: 1.20 min, MS ES+ m/z = 592 (M+H)<+>.
[1555]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ [ppm] 1.61 (d, 6 H) 1.81 - 1.95 (m, 2 H) 1.99 (m, 2 H) 3.21 - 3.32 (m, 2 H) 3.35 - 3.46 (m, 2 H) 3.58 (d, 6 H) 3.64 - 3.81 (m, 4 H) 3.97 (m, 6 H) 4.16 - 4.43 (m, 2 H) 4.84 - 4.99 (m, 2 H) 5.21 - 5.37 (m, 2 H) 7.54 - 7.72 (m, 6 H) 7.95 (d, 2 H).
Primer 346: Tert-butil (2R)-2-{[3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-({(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}karbamoil)fenoksi]metil}morfolin-4-karboksilat [1556]
[1557] U rastvor Intermedijera 5CE (28.21 g, 45.4 mmol), Intermedijera VI (11.4 g, 50.0 mmol) i DIPEA (31.6 mL, 181.8 mmol) u etil acetatu (400 mL) dodat je T3P (32 mL, 54.5 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 15 h. Dodato je još Intermedijera VI (1 g, 4.55 mmol), DIPEA (3 mL, 17.7 mmol) i T3P (4 mL, 6.82 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h. Reakciona smeša je isprana sa zasićenim NaHCO3, fiziološkim rastvorom i organski sloj je osušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (eluiranje sa 0 -100% EtOAc u heptanu na predpakovanoj koloni KP-SiO2) da se dobije 14.8 g (49% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bele pene.
[1558]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.94 (s, 2H), 7.96 - 7.88 (m, 1H), 7.58 -7.53 (m, 1H), 7.54 - 7.52 (m, 1H), 7.42 - 7.39 (m, 1H), 6.79 (br s, 1H), 5.43 - 5.31 (m, 1H), 4.15 - 3.76 (m, 6H), 3.64 - 3.54 (m, 1H), 3.07 - 2.77 (m, 2H), 2.53 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 1.72 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 1.48 (s, 9H).
4
[1559] LCMS (Analitički metod F) Rt = 4.02 min, MS (ESIpos): m/z = 608 (M+H)<+>.
Primer 347: 3-(5-Metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(2R)-morfolin-2-ilmetoksi]-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
[1560]
[1561] U rastvor Primera 346 (14.7 g, 22.3 mmol) u DCM (100 mL) dodata je TFA (17.1 mL). Dobijeni rastvor je mešan tokom 16 sati na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je načinjena baznom sa 2M natrijum hidroksidom (100 mL) zatim zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata do pH 8. Organski sloj je odvojen i vodeni sloj je ekstrahovan sa još DCM. Spojene organske materije su isprane sa fiziološkim rastvorom, osušene (natrijum sulfat), filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 10.5 g (93% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bledo žute čvrste supstance. Grupni uzorak je korišćen za pripremu Primera 348 bez daljeg prečišćavanja.
[1562]<1>H NMR (250 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.96 (s, 2H), 7.83 - 7.79 (m, 1H), 7.47 (dd, J = 2.3, 1.5 Hz, 1H), 7.46 - 7.45 (m, 1H), 7.40 - 7.37 (m, 1H), 7.33 - 7.28 (m, 1H), 5.42 - 5.32 (m, 1H), 4.14 - 3.53 (m, 6H), 3.21 - 3.13 (m, 1H), 3.02 - 2.93 (m, 2H), 2.86 - 2.74 (m, 1H), 2.49 (d, J = 1.0 Hz, 3H), 1.70 (d, J = 7.2 Hz, 3H).
[1563] LCMS (Metod A) Rt = 1.04 min, MS (ESIpos): m/z = 508 (M+H)<+>.
[1564] Alikvot iz Primera 347 (150 mg) je dalje prečišćen sa SCX hromatografijom eluiranjem sa metanolom zatim sa 7N amonijakom u metanolu. Relevantne frakcije su koncentrovane pod sniženim pritiskom, a zatim liofilizovane iz acetonitrila/vode da bi se dobilo 145 mg naslovnog jedinjenja za profilisanje i hiralnu analizu.
[1565] HPLC Hiralna analiza (Metod 11): 99.3% e.e. Rt = 10.51 min.
4
[1566]<1>H NMR (250 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.94 (s, 2H), 7.94 - 7.80 (m, 1H), 7.55 (dd, J = 2.4, 1.5 Hz, 1H), 7.52 - 7.49 (m, 1H), 7.41 (dd, J = 2.3, 1.5 Hz, 1H), 6.78 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 5.47 - 5.27 (m, 1H), 4.16 - 3.64 (m, 5H), 3.13 - 2.69 (m, 4H), 2.52 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 1.71 (d, J = 7.1 Hz, 3H).
[1567] LCMS (Analitički metod F) Rt = 2.16 min, MS (ESIpos): m/z = 508 (M+H)<+>.
Primer 348: 3-{[(2R)-4-metilmorfolin-2-il]metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
[1568]
[1569] Primer 347 (10.3 g, 19.3 mmol), formaldehid (7.2 mL, 37% rastvor u vodi, 96.4 mmol) i sirćetna kiselina (1.10 mL) su kombinovani u metanolu (250 mL) i dodat je u porcijama STAB (12.3 g, 57.8 mmol). Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 2 h zatim koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je sipan u zasićeni rastvor NaHCO3(100 mL) i ekstrahovan sa DCM (3 x 100 mL). Kombinovana organska faza je osušena (MgSO4), filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (eluiranje sa 0 - 10% MeOH u DCM na 340 g prethodno upakovane kolone KP-SiO2). Relevantne frakcije su koncentrovane, a zatim liofilizovane iz acetonitrila/vode da bi se dobilo 6.75 g (67% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bele čvrste supstance.
[1570] HPLC Hiralna analiza (Metod 12): 100% e.e. Rt = 5.09 min.
[1571]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.93 (s, 2H), 7.87 - 7.85 (m, 1H), 7.57 (dd, J = 2.4, 1.4 Hz, 1H), 7.52 - 7.50 (m, 1H), 7.40 (dd, J = 2.3, 1.6 Hz, 1H), 6.67 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 5.42 - 5.29 (m, 1H), 4.12 (dd, J = 9.9, 6.1 Hz, 1H), 4.04 (dd, J = 9.9, 4.1 Hz, 1H), 4.00 -3.93 (m, 2H), 3.79 - 3.72 (m, 1H), 2.85 - 2.80 (m, 1H), 2.72 - 2.65 (m, 1H), 2.53 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 2.33 (s, 3H), 2.24 - 2.15 (m, 1H), 2.08 - 2.00 (m, 1H), 1.71 (d, J = 7.2 Hz, 3H).
4
[1572] LCMS (Analitički metod F) Rt = 2.15 min, MS (ESIpos) m/z = 522 (M+H)<+>.
Primer 349: Tert-butil (2S)-2-{[3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-({(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}karbamoil)fenoksi]metil}morfolin-4-karboksilat [1573]
[1574] Intermedijer 5CD (800 mg, 1.84 mmol), Intermedijer VI (460 mg, 2.02 mmol) i DIPEA (0.96 mL, 5.51 mmol) su kombinovani u DCM (7 mL) i dodat je HATU (1050 mg, 2.76 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h zatim je razblažena sa DCM i isprana sa vodom. Vodena faza je ekstrahovana sa još DCM i kombinovani organski slojevi su osušeni (MgSO4), filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (eluiranje sa 0 - 10% MeOH u DCM na 50 g prethodno upakovane kolone KP-SiO2kolona) da se dobije 1.6 g (100% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bezbojnog viskoznog ulja.
[1575]<1>H NMR (250 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.94 (s, 2H), 7.88 (s, 1H), 7.55 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 7.37 (s, 1H), 7.11 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 5.45 - 5.30 (m, 1H), 4.21 - 3.49 (m, 10H), 2.51 (d, J = 0.9 Hz, 3H), 1.71 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 1.47 (s, 9H).
[1576] LC-MS (Metod A) Rt = 1.32 min, MS (ESIpos) m/z = 608 (M+H)<+>.
Primer 350: 3-(5-Metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(2S)-morfolin-2-ilmetoksi]-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
[1577]
4
[1578] U rastvor Primera 349 (1.6 g, 1.98 mmol) u DCM (16 mL) dodata je TFA (3 mL). Dobijeni rastvor je mešan tokom 4 h na sobnoj temperaturi zatim je neutralisan sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata. Organski sloj je odvojen i vodeni sloj je ekstrahovan sa još DCM. Kombinovani organski slojevi su osušeni (MgSO4), filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 0.87 g (87% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bledo žute čvrste supstance.
[1579] HPLC Hiralna analiza (Metod 11): 100% e.e. Rt = 9.04 min.
[1580]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ 8.93 (s, 2H), 7.86 (s, 1H), 7.56 - 7.53 (m, 2H), 7.52 - 7.48 (m, 1H), 7.42 - 7.37 (m, 1H), 6.81 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 5.40 - 5.31 (m, 1H), 4.07 (dd, J = 9.9, 6.0 Hz, 1H), 4.01 (dd, J = 9.9, 4.2 Hz, 2H), 3.98 - 3.86 (m, 2H), 3.75 - 3.66 (m, 1H), 3.06 - 2.99 (m, 1H), 2.98 - 2.90 (m, 1H), 2.90 - 2.84 (m, 1H), 2.78 (dd, J = 11.9, 10.4 Hz, 1H), 2.52 (s, 3H), 1.71 (d, J = 7.2 Hz, 3H).
[1581] LCMS (Analitički metod F) Rt = 2.14 min, MS (ESIpos) m/z = 508 (M+H)<+>.
Primer 351: 3-{[(2S)-4-metilmorfolin-2-il]metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
[1582]
[1583] Primer 350 (238 mg, 0.47 mmol), formaldehid (37% vodenom rastvoru, 0.07 mL, 0.94 mmol) i sirćetna kiselina (0.03 mL, 0.47 mmol) u DCE (3 mL) su mešani tokom 15 minuta pre dodavanja STAB (149 mg, 0.70 mmol) u porcijama. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h zatim je razblažena sa DCM i isprana sa zasićenim vodenim rastvorom
4
natrijum bikarbonata. Organska faza je odvojena, osušena (MgSO4), filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa preparativnom HPLC visokog pH (Metod A) da se dobije 144 mg (59% prinosa) naslovnog jedinjenja, koje je liofilizovano u beli prah.
[1584] HPLC Hiralna analiza (Metod 12): 92.4% e.e. Rt = 4.5 min.
[1585]<1>H NMR (250 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.94 (s, 2H), 7.86 (s, 1H), 7.56 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.41 (s, 1H), 6.71 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 5.43 - 5.30 (m, 1H), 4.17 - 3.90 (m, 4H), 3.80 - 3.65 (m, 1H), 3.10 - 2.75 (m, 4H), 2.53 (d, J = 1.0 Hz, 3H), 1.72 (d, J = 7.1 Hz, 3H).
[1586] LC-MS (Analitički metod F) Rt = 2.06 min, MS (ESIpos) 522 (M+H)<+>.
[1587] Primer 347 i Primer 350 mogu se takođe pripremiti kao smeša dijastereoizomera (Primer 352) i naknadno odvojiti HPLC hiralnim prečišćavanjem (Metod 11).
Primer 352: 3-(5-Metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[morfolin-2-ilmetoksi]-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid, formiran kao smeša Primera 347 (Dijastereoizomer 1) i Primera 350 (Dijastereoizomer 2)
[1588]
[1589] U rastvor Intermedijera 114 (197 mg, 0.30 mmol) rastvoren u DCM (5 mL) dodata je TFA (0.5 mL, 6.0 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je neutralizovana sa zasićenim rastvorom NaHCO3. Organska faza je sakupljena i vodena faza je ekstrahovana sa DCM (2 x 5 mL). Kombinovane organske faze su osušene (MgSO4), filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 177.0 mg (100% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu pene.
4
[1590]<1>H NMR (500 MHz, CDCl3): δ [ppm] 8.91 - 8.87 (m, 2H), 7.74 - 7.69 (m, 1H), 7.40 -7.31 (m, 3H), 7.26 - 7.22 (m, 1H), 5.34 - 5.26 (m, 1H), 4.13 - 3.97 (m, 3H), 3.96 - 3.80 (m, 2H), 3.36 - 3.26 (m, 1H), 3.19 - 3.01 (m, 2H), 3.00 - 2.90 (m, 1H), 2.44 - 2.40 (m, 3H), 1.66 -1.62 (m, 3H).
[1591] LC-MS (Metod A) Rt = 0.98 min, MS (ESIpos): m/z = 508 (M+H)<+>.
Primer 347: 3-(5-Metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(2R)-morfolin-2-ilmetoksi]-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
[1592] HPLC hiralno prečišćavanje (Metod 11) je izvedeno na 60 mg primera 352 smeše dijastereoizomera da bi se dobilo 22 mg naslovnog jedinjenja.
[1593] HPLC Hiralna analiza (Metod 11): 95.4% e.e. Rt = 10.81 min.
[1594]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.92 (s, 2H), 7.85 (t, J = 1.3 Hz, 1H), 7.53 (dd, J = 2.3, 1.5 Hz, 2H), 7.50 - 7.48 (m, 1H), 7.40 - 7.35 (m, 1H), 6.90 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 5.39 - 5.29 (m, 1H), 4.06 (dd, J = 9.9, 6.1 Hz, 1H), 3.98 (dd, J = 9.9, 4.2 Hz, 3H), 3.96 - 3.91 (m, 1H), 3.91 - 3.85 (m, 1H), 3.73 - 3.64 (m, 1H), 3.04 - 2.97 (m, 1H), 2.96 - 2.82 (m, 2H), 2.76 (dd, J = 12.0, 10.4 Hz, 1H), 2.51 (d, J = 1.0 Hz, 3H), 1.68 (d, J = 7.2 Hz, 3H).
[1595] LCMS (Analitički metod F) Rt = 2.08 min, MS (ESIpos): m/z = 508 (M+H)<+>.
Primer 350: 3-(5-Metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[(2S)-morfolin-2-ilmetoksi]-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
[1596] HPLC hiralno prečišćavanje (Metod 11) je izvedeno na 60 mg primera 352 smeše dijastereoizomera da bi se dobilo 13.8 mg naslovnog jedinjenja.
[1597] HPLC Hiralna analiza (Metod 11): 100% e.e. Rt = 9.39 min.
[1598]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.93 (s, 2H), 7.87 - 7.83 (m, 1H), 7.52 (dd, J = 2.3, 1.5 Hz, 2H), 7.50 - 7.48 (m, 1H), 7.40 - 7.35 (m, 1H), 6.93 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 5.39 -5.30 (m, 1H), 4.06 (dd, J = 9.9, 6.0 Hz, 4H), 4.00 (dd, J = 9.9, 4.2 Hz, 1H), 3.97 - 3.92 (m, 1H), 3.92 - 3.86 (m, 1H), 3.74 - 3.65 (m, 1H), 3.05 - 2.98 (m, 1H), 2.97 - 2.83 (m, 2H), 2.77 (dd, J = 11.9, 10.5 Hz, 1H), 2.51 (d, J = 1.0 Hz, 3H), 1.69 (d, J = 7.2 Hz, 3H).
4 1
[1599] LCMS (Analitički metod F) Rt = 2.08 min, MS (ESIpos): m/z = 508 (M+H)<+>.
[1600] Primer 348 i Primer 351 mogu se takođe pripremiti kao smeša dijastereoizomera (Primer 353) i naknadno odvojiti sa HPLC hiralnim prečišćavanjem (Metod 12).
Primer 353: 3-{[4-metilmorfolin-2-il]metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid, formiran kao smeša Primera 348 (Dijastereoizomer 2) i Primera 351 (Dijastereoizomer 1)
[1601]
[1602] Smeša iz Primera 347 i Primera 350 (94.4 mg, 0.19 mmol), formaldehid (37% rastvor u vodi, 70 µL, 0.93 mmol) i sirćetna kiselina (100 µL) su kombinovani u metanolu (2 mL) i dodat je STAB (118 mg, 0.56 mmol). Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 2 h pre nego što je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je sipan u zasićeni rastvor NaHCO3(5 mL) zatim je ekstrahovan sa DCM (3 x 5 mL). Kombinovana organska faza je osušena (MgSO4), filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Jedinjenje je liofilizovano iz acetonitrila / vode da bi se dobilo 78.7 mg (81% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu belog praha.
[1603]<1>H NMR (500 MHz, CDCl3): δ [ppm] 8.93 (s, 2H), 7.88 - 7.84 (m, 1H), 7.57 (dd, J = 2.4, 1.4 Hz, 1H), 7.54 - 7.50 (m, 1H), 7.42 - 7.38 (m, 1H), 6.62 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 5.40 - 5.31 (m, 1H), 4.16 - 4.08 (m, 1H), 4.08 - 4.01 (m, 1H), 4.00 - 3.92 (m, 2H), 3.80 - 3.71 (m, 1H), 2.86 - 2.79 (m, 1H), 2.71 - 2.65 (m, 1H), 2.53 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 2.33 (s, 3H), 2.24 - 2.15 (m, 1H), 2.09 - 2.00 (m, 1H), 1.71 (d, J = 7.2 Hz, 3H).
[1604] LC-MS (Analitički metod D) Rt = 3.17 min, MS (ESIpos): m/z = 522 (M+H)<+>.
4 2
[1605] Primer 348: 3-{[(2R)-4-metilmorfolin-2-il]metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
HPLC hiralno prečišćavanje (Metod 12) je izvedeno na 52.4 mg primera 353 smeše dijastereoizomera da bi se dobilo 22.9 mg (44% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[1606] HPLC Hiralna analiza (Metod 11): 96.4% e.e. Rt = 5.15 min.
[1607]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.94 (s, 2H), 7.87 (s, 1H), 7.58 (dd, J = 2.4, 1.4 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 7.41 (s, 1H), 6.71 (s, 1H), 5.36 (m, 1H), 4.17 - 4.10 (m, 1H), 4.09 - 4.02 (m, 2H), 3.97 (dd, J = 11.6, 1.6 Hz, 1H), 3.82 (t, J = 11.0 Hz, 1H), 2.91 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 2.76 (d, J = 10.7 Hz, 1H), 2.53 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 2.39 (s, 3H), 2.28 (s, 1H), 2.14 (s, 1H), 1.72 (d, J = 7.2 Hz, 3H).
[1608] LCMS (Analitički metod F) Rt = 2.11 min, MS (ESIpos): m/z = 522 (M+H)<+>.
[1609] Primer 351: 3-{[(2S)-4-metilmorfolin-2-il]metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
HPLC hiralno prečišćavanje (Metod 12) je izvedeno na 52.4 mg primera 353 smeše dijastereoizomera da bi se dobilo 21.6 mg (41% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[1610] HPLC Hiralna analiza (Metod 11): 100% e.e. Rt = 4.58 min.
[1611]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.94 (s, 2H), 7.87 (s, 1H), 7.58 (dd, J = 2.3, 1.4 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 7.41 (s, 1H), 6.71 (s, 1H), 5.36 (m, 1H), 4.16 - 4.01 (m, 3H), 4.00 - 3.93 (m, 1H), 3.81 (t, J = 11.0 Hz, 1H), 2.91 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 2.76 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 2.53 (d, J = 1.0 Hz, 3H), 2.39 (s, 3H), 2.28 (s, 1H), 2.15 (s, 1H), 1.72 (d, J = 7.2 Hz, 3H).
[1612] LCMS (Analitički metod D) Rt = 3.31 min, MS (ESIpos): m/z = 522 (M+H)<+>.
[1613] Intermedijer 132 je formiran kao smeša dva dijastereoizomera. SFC hiralno prečišćavanje (Metod 13) dalo je Dijastereoizomer 1 (Primer 354) i Dijastereoizomer 2 (Primer 355).
4
[1614] Primer 354: Dijastereoizomer 1; 3-(Fluoropiperidin-3-il)metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
SFC hiralno prečišćavanje (Metod 13) na 55.2 mg Intermedijera 132 praćeno sa prečišćavanjem na SCX-2 patroni dalo je 14 mg naslovnog jedinjenja.
[1615] SFC Hiralna analiza (Metod 13): 100% e.e. Rt = 2.17 min.
[1616]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.97 (s, 2H), 7.84 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.44 (s, 1H), 7.02 (s, 1H), 5.36 (q, J = 7.0 Hz, 1H), 4.23 - 3.99 (m, 2H), 3.43 -3.22 (m, 1H), 3.09 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 2.95 (dd, J = 29.1, 13.9 Hz, 1H), 2.73 (s, 1H), 2.52 (s, 3H), 2.09 - 2.02 (m, 1H), 1.94 - 1.78 (m, 3H), 1.73 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 1.67 - 1.60 (m, 1H).
[1617] LCMS (Analitički metod F) Rt = 2.14 min, MS (ESIpos): m/z = 524.4 (M+H)<+>.
[1618] Primer 355: Dijastereoizomer 2; 3-(Fluoropiperidin-3-il)metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
SFC hiralno prečišćavanje (Metod 13) na 55.2 mg Intermedijera 132 praćeno sa prečišćavanjem na SCX-2 patroni dalo je 15 mg naslovnog jedinjenja.
[1619] SFC Hiralna analiza (Metod 13): 98.2% e.e. Rt = 3.26 min.
[1620]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.90 (s, 2H), 7.74 (s, 1H), 7.42 (s, 1H), 7.41 (s, 1H), 7.37 (s, 1H), 6.97 (s, 1H), 5.40 - 5.20 (m, 1H), 4.15 - 3.90 (m, 2H), 3.38 - 3.19 (m, 1H), 3.06 (d, J = 11.3 Hz, 1H), 2.88 (dd, J = 29.9, 13.7 Hz, 1H), 2.68 (t, J = 11.1 Hz, 1H), 2.43 (s, 3H), 2.05 - 1.90 (m, 2H), 1.87 - 1.73 (m, 2H), 1.65 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 1.60 - 1.55 (m, 1H).
4 4
[1621] LCMS (Analitički metod F) Rt = 2.12 min, MS (ESIpos): m/z = 524.4 (M+H)<+>.
[1622] Intermedijer 147 je formiran kao smeša dva dijastereoizomera. SFC hiralno prečišćavanje (Metod 14) dalo je Dijastereoizomer 1 (Primer 356) i Dijastereoizomer 2 (Primer 357).
Primer 356: Dijastereoizomer 1; 3-{[3-fluoro-1-metilpiperidin-3-il]metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
[1623] SFC hiralno prečišćavanje (Metod 14) na 46 mg Intermedijera 147 dalo je 11 mg naslovnog jedinjenja.
[1624] SFC Hiralna analiza (Metod 14): 100% e.e. Rt = 2.56 min.
[1625]<1>H NMR (500 MHz, Metanol-d4): δ [ppm] 9.02 (s, 2H), 7.95 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 5.34 (q, J = 7.1 Hz, 1H), 4.31 - 4.11 (m, 2H), 3.03 - 2.88 (m, 1H), 2.70 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 2.54 (s, 3H), 2.43 (dd, J = 26.8, 12.3 Hz, 1H), 2.31 (s, 3H), 2.22 (t, J = 10.6 Hz, 1H), 2.00 - 1.86 (m, 2H), 1.77 (d, J = 11.8 Hz, 1H), 1.70 (d, J = 7.1 Hz, 3H), 1.68 - 1.63 (m, 1H).
[1626] LCMS (Analitički metod F) Rt = 2.18 min, MS (ESIpos): m/z = 538 (M+H)<+>.
Primer 357: Dijastereoizomer 2; 3-{[3-fluoro-1-metilpiperidin-3-il]metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
[1627] SFC hiralno prečišćavanje (Metod 14) na 46 mg Intermedijera 147 praćeno sa prečišćavanjem na SCX-2 patroni dalo je 10 mg naslovnog jedinjenja.
[1628] SFC Hiralna analiza (Metod 14): 97.6% e.e. Rt = 3.06 min.
4
[1629]<1>H NMR (500 MHz, Metanol-d4): δ [ppm] 9.02 (s, 2H), 7.96 (s, 1H), 7.69 - 7.63 (m, 1H), 7.57 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 7.55 - 7.50 (m, 1H), 5.34 (q, J = 7.1 Hz, 1H), 4.34 - 4.06 (m, 2H), 3.09 (s, 1H), 2.80 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 2.61 - 2.47 (m, 4H), 2.39 (s, 3H), 2.32 (t, J = 10.1 Hz, 1H), 2.05 - 1.88 (m, 2H), 1.83 - 1.66 (m, 5H).
[1630] LCMS (Analitički metod F) Rt = 2.15 min, MS (ESIpos): m/z = 538.4 (M+H)<+>.
[1631] Analogno postupku opisanom za Primer 346, sledeći primeri su pripremljeni korišćenjem TFA i odgovarajućeg N-Boc zaštićenog amina polaznih materijala.
4
Primer 360: 3-{[(3R)-4-metilmorfolin-3-il]metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
[1632]
[1633] U mešani rastvor Intermedijera 28CM (129 mg, 0.37 mmol), Intermedijer VI (92.7 mg, 0.41 mmol) i DIPEA (128.98 µL, 0.74 mmol) u N,N-Dimetilformamidu (1 mL) na sobnoj temperaturi dodat je HATU (211.17 mg, 0.56 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Materijal je rastvoren u MeCN, vodi i DMSO i prečišćen sa preparativnom HPLC (Metod A). Čiste frakcije su uparene pre sušenja smrzavanjem da bi se dobilo 107 mg (54.9% prinosa) naslovnog jedinjenja kao bela flokulentna čvrsta supstanca.
[1634]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.93 (s, 2H), 7.86 (t, J = 1.3 Hz, 1H), 7.56 (dd, J = 2.4, 1.4 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.41 - 7.39 (m, 1H), 6.60 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 5.36 (m, 1H), 4.14 - 4.10 (m, 2H), 3.93 (dd, J = 11.2, 3.0 Hz, 1H), 3.83 (dt, J = 11.4, 2.8 Hz, 1H), 3.71 (td, J = 10.9, 2.5 Hz, 1H), 3.60 (dd, J = 11.3, 9.4 Hz, 1H), 2.77 (dt, J = 11.8, 2.5 Hz, 1H), 2.61 - 2.55 (m, 1H), 2.54 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 2.46 - 2.42 (m, 1H), 2.41 (s, 3H), 1.72 (d, J = 7.2 Hz, 3H).
[1635] LCMS (Analitički metod F) Rt = 2.09 min, MS (ESIpos): m/z = 522.1 (M+H)<+>.
[1636] Analogno postupku opisanom za Primer 360, sledeći primeri su pripremljeni korišćenjem HATU i odgovarajuće karboksilne kiseline i primarnog amina polaznog materijala.
4
4
4
Primer 366: 3-{[(2R)-4-metilmorfolin-2-il]metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]etil}benzamid
[1637]
[1638] U rastvor Intermedijera 138 (82 mg, 0.16 mmol) u metanolu (2 mL) dodat je formaldehid (37% vodenom rastvoru, 0.02 mL, 0.32 mmol) i sirćetna kiselina (0.009 mL, 0.16 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 15 minuta. Dodat je natrijum triacetoksiborohidrid (51 mg, 0.24 mmol) i reakcija je mešana tokom 1.5 sata. Reakciona smeša
4
je propuštena kroz SCX patronu (ispiranje sa metanolom, eluiranje sa 7 N amonijakom u metanolu) i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Dobijeni ostatak je triturisan sa vodom, filtriran i osušen u peći pod visokim vakuumom da bi se dobilo 37 mg (44% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu bež čvrste supstance.
[1639]<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 9.13 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 8.83 (s, 1H), 8.12 -8.05 (m, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.90 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.65 (s, 1H), 7.55 (s, 2H), 5.29 (m, 1H), 4.12 (d, J = 4.9 Hz, 2H), 3.83 (d, J = 10.4 Hz, 2H), 3.64 - 3.45 (m, 1H), 2.80 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 2.67 - 2.57 (m, 1H), 2.21 (s, 3H), 2.02 (td, J = 11.2, 3.0 Hz, 1H), 1.94 (t, J = 10.6 Hz, 1H), 1.57 (d, J = 7.1 Hz, 3H).
[1640] LCMS (Analitički metod F) Rt = 2.18 min, MS (ESIpos): m/z = 521.2 (M+H)<+>.
[1641] Analogno postupku opisanom za Primer 366, sledeći primeri su pripremljeni korišćenjem STAB i odgovarajućeg amina i aldehida ili ketona polaznih materijala.
4 1
42
4
44
4
4
4
4
[1642] Primer 383 je formiran kao smeša dva dijastereoizomera. SFC hiralno prečišćavanje (Metod 15) dalo je Dijastereoizomer 1 (Primer 384) i Dijastereoizomer 2 (Primer 385).
Primer 384: Dijastereoizomer 1; 3-{[4,4-difluoro-1-metilpiperidin-3-il]metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid [1643] SFC hiralno prečišćavanje (Metod 15) na 90.3 mg primera 383 dalo je 32.9 mg naslovnog jedinjenja kao belu čvrstu supstancu.
[1644] SFC Hiralna analiza (Metod 15): 99.2% e.e. Rt = 1.71 min.
[1645]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.94 (s, 2H), 7.84 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.54 (dd, J = 2.4, 1.4 Hz, 1H), 7.54 - 7.52 (m, 1H), 7.39 (dd, J = 2.3, 1.6 Hz, 1H), 6.58 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 5.37 (m, 1H), 4.39 (dd, J = 9.4, 3.8 Hz, 1H), 4.06 (t, J = 9.2 Hz, 1H), 3.03 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 2.79 - 2.72 (m, 1H), 2.65 - 2.56 (m, 1H), 2.54 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 2.41 - 2.31 (m, 4H), 2.31 - 2.20 (m, 1H), 2.14 - 2.00 (m, 2H), 1.72 (d, J = 7.2 Hz, 3H).
[1646] LC-MS (Analitički metod F) Rt = 2.32 min, MS (ESIpos): m/z = 556 (M+H)<+>.
Primer 385: Dijastereoizomer 2; 3-{[4,4-difluoro-1-metilpiperidin-3-il]metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
4
[1647] SFC hiralno prečišćavanje (Metod 15) na 90.3 mg primera 383 dalo je 27 mg naslovnog jedinjenja.
[1648] SFC Hiralna analiza (Metod 15): 99.9% e.e. Rt = 2.06 min.
[1649]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.94 (s, 2H), 7.84 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.55 (dd, J = 2.4, 1.4 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.39 (dd, J = 2.3, 1.6 Hz, 1H), 6.57 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 5.37 (m, 1H), 4.40 (dd, J = 9.4, 3.8 Hz, 1H), 4.06 (t, J = 9.2 Hz, 1H), 3.02 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 2.75 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 2.65 - 2.55 (m, 1H), 2.54 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 2.39 -2.31 (m, 4H), 2.26 (t, J = 10.1 Hz, 1H), 2.07 (m, 2H), 1.72 (d, J = 7.2 Hz, 3H).
[1650] LC-MS (Analitički metod F) Rt = 2.32 min, MS (ESIpos): m/z = 556 (M+H)<+>.
[1651] Analogno postupku opisanom za Primer 346, sledeći primeri su pripremljeni korišćenjem T3P i odgovarajuće karboksilne kiseline i primarnog amina polaznih materijala.
4
41
Primer 390: 3-{[(2R)-4-etilmorfolin-2-il]metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
[1652]
[1653] Rastvor Primera 347 (80 mg, 0.15 mmol), jodoetan (14.5 µL, 0.18 mmol) i kalijum karbonat (31 mg, 0.23 mmol) u acetonitrilu (2 mL) je mešan tokom 1 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim zagrevana na 80 °C mikrotalasnim zračenjem tokom 20 minuta. Reakcija je ponovo tretirana sa jodoetanom (14.5 µL, 0.18 mmol) i zagrevana na 80 °C mikrotalasnim zračenjem tokom sledećih 20 minuta. Reakciona smeša je filtrirana kroz Celite® i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa
4 2
preparativnom HPLC (Metod A) i liofilizovan iz MeCN/vode da bi se dobilo 40.4 mg (50% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu belog praha.
[1654]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.93 (s, 2H), 7.87 (t, J = 1.4 Hz, 1H), 7.57 (dd, J = 2.4, 1.5 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 7.41 (dd, J = 2.3, 1.6 Hz, 1H), 6.63 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 5.36 (m, 1H), 4.12 (dd, J = 9.9, 6.0 Hz, 1H), 4.05 (dd, J = 9.9, 4.1 Hz, 1H), 4.01 -3.94 (m, 2H), 3.76 (td, J = 11.4, 2.4 Hz, 1H), 2.91 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 2.77 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 2.53 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 2.46 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 2.17 (td, J = 11.4, 3.3 Hz, 1H), 2.03 (t, J = 10.7 Hz, 1H), 1.71 (d, J = 7.2 Hz, 3H), 1.11 (t, J = 7.2 Hz, 3H).
[1655] LCMS (Analitički metod F) Rt = 2.17 min, MS (ESIpos): m/z = 536 (M+H)<+>.
Primer 391: 3-{[(2R)-4-(2,2-difluoroetil)morfolin-2-il]metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
[1656]
[1657] Mešana smeša iz Primera 347 (100 mg, 0.19 mmol), 1,1-difluoro-2-jodoetan (20 µL, 0.21 mmol) i kalijum karbonat (40 mg, 0.29 mmol) u anhidrovanom acetonitrilu (3 mL) je zagrevana na 80 °C mikrotalasnim zračenjem tokom 20 minuta. Dodati su dodatni 1,1-difluoro-2-jodoetan (40 µL, 0.42 mmol) i kalijum karbonat (40 mg, 0.29 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 100 °C mikrotalasnim zračenjem tokom 20 minuta. Dodata je dodatna količina 1,1-difluoro-2-jodoetana (100 µL, 2.1 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 100 °C tokom 3 h mikrotalasnim zračenjem. Dalje je dodat 1,1-difluoro-2-jodoetan (100 µL, 2.1 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 100 °C tokom 2 h mikrotalasnim zračenjem. Reakciona smeša je filtrirana, koncentrovana pod sniženim pritiskom i prečišćena sa preparativnom HPLC (Metod B) zatim liofilizovana iz acetonitrila/vode da bi se dobilo 64 mg (58% prinosa) naslovnog jedinjenja kao belu čvrstu supstancu.
4
[1658]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.93 (s, 2H), 7.87 (s, 1H), 7.56 (dd, J = 2.3, 1.4 Hz, 1H), 7.52 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 7.43 - 7.35 (m, 1H), 6.62 (d, J = 6.3 Hz, 1H), 5.92 (t, J = 55.9 Hz, 1H), 5.36 (m, 1H), 4.11 (dd, J = 9.8, 5.7 Hz, 1H), 4.04 (dd, J = 9.8, 4.4 Hz, 1H), 4.01 - 3.96 (m, 1H), 3.96 - 3.92 (m, 1H), 3.81 - 3.72 (m, 1H), 2.94 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 2.84 - 2.74 (m, 3H), 2.53 (d, J = 0.9 Hz, 3H), 2.48 (td, J = 11.3, 2.7 Hz, 1H), 2.35 (t, J = 10.6 Hz, 1H), 1.71 (d, J = 7.2 Hz, 3H).
[1659] LC-MS (Analitički metod F) Rt = 3.24 min, MS (ESIpos): m/z = 572 (M+H)<+>.
Primer 392: Metil (2R)-2-{[3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-({(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}karbamoil)fenoksi]metil}morfolin-4-karboksilat [1660]
[1661] U rastvor Primera 347 (35 mg, 69.0 µmol) u DCM (1 mL) dodat je DIPEA (24 µL, 138 µmol) i metil hloroformat (8.0 µL, 103 µmol) na sobnoj temperaturi. Reakcija je mešana tokom 1 h zatim je razblažena sa DCM (3 mL) i isprana sa zasićenim NaHCO3(3 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM (2 x 3 mL). Kombinovani DCM slojevi su osušeni (MgSO4), filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen sa Biotage Isolera™ hromatografijom (eluiranje sa 0 - 20% MeOH u DCM na 10 g prethodno upakovane kolone KP-SiO2) i proizvod je liofilizovan iz MeCN/vode da bi se dobilo 31.8 mg (82% prinosa) naslovnog jedinjenja u vidu belog praha.
[1662]<1>H NMR (500 MHz, Hloroform-d): δ [ppm] 8.94 (s, 2H), 7.88 (s, 1H), 7.57 (dd, J = 2.4, 1.4 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 7.42 - 7.39 (m, 1H), 6.64 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 5.36 (m, 1H), 4.21 - 4.09 (m, 2H), 4.07 (dd, J = 9.9, 4.7 Hz, 1H), 4.02 - 3.87 (m, 2H), 3.86 - 3.78 (m, 1H), 3.74 (s, 3H), 3.61 (t, J = 11.6 Hz, 1H), 3.07 (s, 1H), 2.93 (s, 1H), 2.54 (d, J = 1.1 Hz, 3H), 1.72 (d, J = 7.2 Hz, 3H).
4 4
[1663] LCMS (Analitički metod D) Rt = 4.31 min, MS (ESIpos): m/z = 566 (M+H)<+>.
[1664] Analogno postupku opisanom za Primer 392, sledeći primer je pripremljen iz odgovarajućeg sekundarnog amina i hloroformata polaznih materijala.
Primer 394: 3-(Azetidin-3-ilmetoksi)-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
[1665]
[1666] Smeša Intermedijera 148 (90.0 mg, 156 µmol), TFA (60 µL, 780 µmol) u DCM je mešana na sobnoj temperaturi tokom 18 h. Smeša je uparena do suva i ostatak je prečišćen sa preparativnom HPLC (metod 1, LCMS, Rt: 0.85 min) da se dobije 15.0 mg (18% prinosa) naslovnog jedinjenja.
4
[1667]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 1.61 (d, 3 H) 3.10 - 3.21 (m, 1 H) 3.63 - 3.78 (m, 2 H) 3.93 (s, 2 H) 4.27 (d, 2 H) 5.19 - 5.39 (m, 1 H) 7.49 - 7.70 (m, 3 H) 7.88 - 7.99 (m, 1 H) 9.12 (s, 2 H) 9.20 - 9.33 (m, 1 H).
[1668] LCMS, metod 1, rt: 0.85 min, MS ES+ m/z = 478 (M+H)<+>.
Primer 395: 3-{[(3R)-4-metil-5-oksomorfolin-3-il]metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
[1669]
[1670] Smeša Intermedijera 5CX (417 mg, 1.15 mmol), Intermedijera VI (367 mg, 1.61 mmol), HATU (1.05 g, 2.76 mmol) i DIPEA (980 µL, 5.8 mmol) u DMF (52 mL) je mešana na 60°C tokom 12 h. Smeša je uparena do suva pod sniženim pritiskom i ostatak je prečišćen sa hromatografijom na koloni (silika gel, gradijent heksan/ EE) da se dobije 313 mg (49% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[1671]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 1.61 (d, 3 H) 3.01 (s, 3 H) 3.70 - 3.81 (m, 1 H) 3.89 (d, 1 H) 3.96 - 4.12 (m, 3 H) 4.22 - 4.41 (m, 2 H) 5.30 (s, 1 H) 7.50 - 7.70 (m, 3 H) 7.96 (t, 1 H) 9.06 - 9.27 (m, 3 H).
[1672] LCMS, metod 1, rt: 1.15 min, MS ES+ m/z = 536 (M+H)<+>.
[1673] Analogno postupku sinteze opisanom za Primer 395, sledeći primeri su pripremljeni od odgovarajućih polaznih materijala:
4
4
4
4
Primer 407: 3-(5-Metil-1,3-tiazol-2-il)-5-[2-oksa-5-azabiciklo[2.2.1]hept-1-ilmetoksi]-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid, kao smešu dva dijastereoizomera
[1674]
4
[1675] Smeša iz Primera 404 (610 mg, 984 µmol), TFA (5.0 mL, 65 mmol) u DCM (50 mL) je mešan do potpune konverzije. Smeša je uparena do suva pod sniženim pritiskom. Dodati su voda, zasićeni vodeni rastvor NaHCO3i DCM i faze su odvojene. Vodeni sloj je ekstrahovan dva puta sa DCM. Kombinovani organski slojevi su upareni do suva i prečišćeni sa preparativnom HPLC (metod 1, LCMS, Rt: 0.90 min) da se dobije 480.0 mg (94% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[1676]<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 1.61 (d, 3 H) 1.67 - 1.80 (m, 2 H) 2.92 -3.03 (m, 2 H) 3.62 - 3.84 (m, 3 H) 4.36 - 4.53 (m, 2 H) 5.30 (t, 1 H) 7.52 - 7.67 (m, 3 H) 7.93 (t, 1 H) 9.08 - 9.24 (m, 3 H).
[1677] LCMS, metod 1, rt: 0.88 min, MS ES+ m/z = 520 (M+H)<+>.
[1678] Analogno postupku sinteze opisanom za Primer 366, sledeći primeri su pripremljeni korišćenjem STAB i odgovarajućeg amina i aldehida ili ketona polaznih materijala i prečišćeni sa preparativnom HPLC (metod 1):
4 1
Primer 409: Metil 1-{[3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-({(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}karbamoil)fenoksi]metil}-2-oksa-5-azabiciklo[2.2.1]heptan-5-karboksilat, kao smeša dva dijastereoizomera
[1679]
[1680] U smešu iz Primera 407 (105 mg, 202 µmol), DIPEA (180 µL, 1.0 mmol) u DCM (5 mL) dodat je metil karbonohloridat (47 µL, 610 µmol), i smeša je mešana do potpune konverzije. Dodati su voda i DCM i slojevi su upareni. Vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM i kombinovani organski slojevi su upareni do suva. Ostatak je prečišćen sa preparativnom HPLC (metod 1, LCMS, Rt: 1.19 min) da se dobije 70.0 mg (60% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[1681]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 1.61 (d, 3 H) 1.92 (s, 2 H) 3.34 - 3.54 (m, 2 H) 3.61 (d, 3 H) 3.73 - 3.93 (m, 2 H) 4.39 - 4.61 (m, 3 H) 5.30 (s, 1 H) 7.53 - 7.70 (m, 3 H) 7.94 (t, 1 H) 9.07 - 9.26 (m, 3 H).
[1682] LCMS, metod 1, rt: 1.19 min, MS ES+ m/z = 578 (M+H)<+>.
Primer 410: Etil 1-{[3-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-5-({(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}karbamoil)fenoksi]metil}-2-oksa-5-azabiciklo[2.2.1]heptan-5-karboksilat, kao smeša dva dijastereoizomera
[1683]
4 2
[1684] U smešu primera 407 (50.0 mg, 96.2 µmol), DIPEA (84 µL, 480 µmol) u DCM (2.4 mL) dodat je etil karbonohloridat (31.3 mg, 289 µmol), i smeša je mešana do potpune konverzije. Dodati su voda i DCM i slojevi su upareni. Vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM i kombinovani organski slojevi su upareni do suva. Ostatak je prečišćen sa preparativnom HPLC (metod 1, LCMS, Rt: 1.25 min) da se dobije 40.0 mg (70% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[1685]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 1.19 (q, 3 H) 1.61 (d, 3 H) 1.91 (br. s., 2 H) 3.35 - 3.57 (m, 2 H) 3.71 - 3.91 (m, 2 H) 3.99 - 4.14 (m, 2 H) 4.38 - 4.58 (m, 3 H) 5.30 (s, 1 H) 7.51 - 7.71 (m, 3 H) 7.94 (t, 1 H) 9.07 - 9.24 (m, 3 H).
[1686] LCMS, metod 1, rt: 1.25 min, MS ES+ m/z = 592 (M+H)<+>.
Primer 411: 3-{[(2S)-4-etilmorfolin-2-il]metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid
[1687]
[1688] Primer 350 (50 mg, 0.10 mmol) je rastvoren u DCE (1 mL) na sobnoj temperaturi. Dodati su acetaldehid (55 µL) i sirćetna kiselina (5 µL) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 30 minuta. Dodat je STAB (63 mg, 0.30 mmol) i reakcija je mešana preko noći. Reakciona smeša je neutralizovana sa zasićenim NaHCO3(2 mL) i ekstrahovana sa DCM (2 x 2 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni preko magnezijum sulfata, filtrirani i upareni dajući sirovi proizvod. Prečišćavanje sa preparativnom HPLC (Metod A) uz dva ubrizgavanja dalo je 11 mg (20% prinosa) naslovnog jedinjenja.
[1689]<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ [ppm] 1.01 (t, J=7.2, 3H), 1.61 (d, J=7.1, 3H), 1.93 (t, J=10.6, 1H), 2.01 (td, J=11.3, 3.2, 1H), 2.35 (q, J=7.2, 2H), 2.51 (s, 3H), 2.66 - 2.74 (m, 1H), 2.85 - 2.92 (m, 1H), 3.55 (td, J=11.2, 2.4, 1H), 3.77 - 3.86 (m, 2H), 4.07 - 4.15 (m, 2H), 5.25 -5.34 (m, 1H), 7.54 (d, J=1.3, 2H), 7.64 (d, J=1.2, 1H), 7.92 (t, J=1.4, 1H), 9.12 (s, 2H), 9.15 (d, J=7.1, 1H).
4
[1690] LC-MS (Analitički metod A) Rt = 2.17 min, MS (ESIpos): m/z = 536.1 (M+H)<+>.
[1691] Analogno postupku opisanom za Primer 346, sledeći primer je pripremljen korišćenjem T3P i odgovarajuće karboksilne kiseline i primarnog amina polaznih materijala.
[1692] Analogno postupku opisanom za Primer 347, sledeći primeri su pripremljeni korišćenjem TFA i odgovarajućeg N-Boc zaštićenog amina polaznih materijala.
4 4
4
[1693] Analogno postupku opisanom za Primer 366, sledeći primeri su pripremljeni korišćenjem STAB i odgovarajućeg amina i aldehida ili ketona polaznih materijala.
4
4
Farmaceutske kompozicije jedinjenja prema pronalasku
[1694] Ovaj pronalazak se takođe odnosi na farmaceutske kompozicije koje sadrže jedno ili više jedinjenja iz ovog pronalaska. Ove smeše se mogu koristiti za postizanje željenog farmakološkog efekta davanjem pacijentu kome je to potrebno. Pacijent, u svrhu ovog pronalaska, je sisar, obuhvatajući čoveka, kome je potrebno lečenje za određeno stanje ili bolest. Prema tome, ovaj pronalazak obuhvata farmaceutske kompozicije koje se sastoje od farmaceutski prihvatljivog nosača i farmaceutski efikasne količine jedinjenja, ili njegove soli, iz prikazanog pronalaska. Farmaceutski prihvatljiv nosač je poželjno nosač koji je relativno netoksičan i neškodljiv za pacijenta u koncentracijama koje su u skladu sa efikasnom
4
aktivnošću aktivnog sastojka, tako da bilo koji neželjeni efekti koji se mogu pripisati nosaču ne umanjuju korisne efekte aktivnog sastojka. Farmaceutski efikasna količina jedinjenja je poželjno ona količina koja daje rezultat ili vrši uticaj na određeno stanje koje se leči. Jedinjenja predmetnog pronalaska mogu se primenjivati sa farmaceutski prihvatljivim nosačima dobro poznatim u tehnici, koristeći bilo koji efikasan oblik konvencionalne doze, obuhvatajući preparate sa trenutnim, usporenim i vremenskim oslobađanjem, oralno, parenteralno, lokalno, nazalno, oftalmološki, optički, sublingvalno, rektalno , vaginalno i slično..
[1695] Za oralnu primenu, jedinjenja se mogu formulisati u čvrste ili tečne preparate kao što su kapsule, tablete, tablete, pastile, rastopi, praškovi, rastvori, suspenzije ili emulzije i mogu se pripremiti prema postupcima poznatim u stanju tehnike za proizvodnju farmaceutskih kompozicija. Čvrsti jedinični oblici doziranja mogu biti kapsule koje mogu biti uobičajene želatine sa tvrdom ili mekom ljuskom, koje sadrže, na primer, surfaktante, lubrikante i inertna punila kao što su laktoza, saharoza, kalcijum fosfat i kukuruzni skrob.
[1696] U još jednoj realizaciji, jedinjenja iz ovog pronalaska mogu se tabletirati sa konvencionalnim bazama za tablete kao što su laktoza, saharoza i kukuruzni skrob u kombinaciji sa vezivnim sredstvima kao što su bagrem, kukuruzni skrob ili želatina, sredstvima za raspadanje namenjenim za pomoć pri raspadanju i rastvaranju tablete nakon primene kao što su krompirov skrob, alginska kiselina, kukuruzni skrob i guar guma, tragakant guma, bagrem, lubrikanti namenjeni poboljšanju protoka granulacije tablete i sprečavanju lepljenja materijala tablete na površini kalupa za tablete i sredstava za presovanje, na primer talk, stearinska kiselina ili magnezijum, kalcijum ili cink stearat, boje, agensi za bojenje i sredstva za aromatizaciju poput peperminta, ulja ozimice ili arome trešnje, koja su namenjena da poboljšaju estetske kvalitete tableta i učine ih prihvatljivijim za pacijenta. Pogodni ekscipijensi za upotrebu u oralnim tečnim doznim oblicima obuhvataju dikalcijum fosfat i razblaživače kao što su voda i alkoholi, na primer etanol, benzil alkohol i polietilenski alkoholi, bilo sa ili bez dodatka farmaceutski prihvatljivog surfaktanta, agensa za suspendovanje ili agensa za emulgovanje. Razni drugi materijali mogu biti prisutni kao obloge ili na drugi način modifikovati fizički oblik dozne jedinice. Na primer, tablete, pilule ili kapsule mogu biti obložene šelakom, šećerom ili oboje.
[1697] Disperzibilni praškovi i granule su pogodni za pripremu vodene suspenzije. Oni obezbeđuju aktivni sastojak u smeši sa sredstvom za raspršivanje ili vlaženje, sredstvom za
4
suspendovanje i jednim ili više konzervansa. Pogodna sredstva za raspršivanje ili vlaženje i suspendovanje su primeri gore pomenutih. Takođe mogu biti prisutni dodatni ekscipijensi, na primer oni gore opisani zaslađivači, arome i sredstva za bojenje.
[1698] Farmaceutske kompozicije ovog pronalaska mogu takođe biti u vidu emulzija ulje u vodi. Uljana faza može biti biljno ulje kao što je tečni parafin ili smeša biljnih ulja. Pogodni agensi za emulgovanje mogu biti (1) gume koje se prirodno javljaju kao što su akacijeva guma i tragakant guma, (2) fosfatidi koji se javljaju u prirodi, poput soje i lecitina, (3) estri ili delimični estri koji potiču od masnih kiselina i anhidrida heksitola, na primer sorbitan monooleat, (4) kondenzacioni proizvodi navedenih delimičnih estara sa etilen oksidom, na primer, polioksietilen sorbitan monooleat. Emulzije mogu takođe da sadrže zaslađivače i arome.
[1699] Uljaste suspenzije mogu se formulisati suspendovanjem aktivnog sastojka u biljnom ulju kao što je, na primer, ulje od kikirikija, maslinovo ulje, sezamovo ulje ili kokosovo ulje, ili u mineralnom ulju kao što je tečni parafin. Uljaste suspenzije mogu sadržavati sredstvo za zgušnjavanje kao što je, na primer, pčelinji vosak, tvrdi parafin ili cetil alkohol. Suspenzije mogu takođe da sadrže jedan ili više konzervansa, na primer, etil ili n-propil p-hidroksibenzoat; jedno ili više sredstava za bojenje; jednu ili više aroma; i jedan ili više zaslađivača kao što su saharoza ili saharin.
[1700] Sirupi i eliksiri mogu se formulisati sa sredstvima za zaslađivanje kao što su, na primer, glicerol, propilen glikol, sorbitol ili saharoza. Takve formulacije mogu takođe sadržavati demulcent i konzervans, kao što su metil i propil parabeni i agensi za aromatizaciju i agensi za bojenje.
[1701] Jedinjenja iz ovog pronalaska mogu se takođe primenjivati parenteralno, odnosno subkutano, intravenozno, intraokularno, intrasinovijalno, intramuskularno ili interperitonealno, kao injekcione doze jedinjenja u po mogućnosti fiziološki prihvatljivom razblaživaču sa farmaceutskim nosačem koji može biti sterilna tečnost ili smeša tečnosti kao što su voda, fiziološki rastvor, vodena dekstroza i srodni rastvori šećera, alkohol kao što je etanol, izopropanol ili heksadecil alkohol, glikoli kao što je propilen glikol ili polietilen glikol, glicerol ketali kao što je 2,2-dimetil-1,1-dioksolan-4-metanol, etri kao što je poli (etilen glikol) 400, ulje, masna kiselina, estar masne kiseline ili glicerid masne kiseline ili acetilirani glicerid masne kiseline, sa dodatkom ili bez dodatka farmaceutski prihvatljivog surfaktanta kao što je sapun ili deterdžent, sredstva za suspendovanje kao što su pektin, karbomeri, metilceluloza, hidroksipropilmetilceluloza ili karboksimetilceluloza, ili sredstva za emulgovanje i ostali farmaceutski adjuvanti.
Ilustracija ulja koja se mogu koristiti u parenteralnim formulacijama iz ovog pronalaska su ona naftnog, životinjskog, biljnog ili sintetičkog porekla, na primer, kikiriki ulje, sojino ulje, sezamovo ulje, ulje semena pamuka, kukuruzno ulje, maslinovo ulje, petrolatum i mineralno ulje. Pogodne masne kiseline obuhvataju oleinsku kiselinu, stearinsku kiselinu, izostearinsku kiselinu i miristinsku kiselinu. Pogodni estri masnih kiselina su, na primer, etil oleat i izopropil miristat. Pogodni sapuni obuhvataju soli alkalnih metala masnih kiselina, amonijuma i trietanolamina, a pogodni deterdženti obuhvataju katjonske deterdžente, na primer dimetil dialkil amonijum halogenide, alkil piridinijum halogenide i alkilamin acetate; anjonske deterdžente, na primer, alkil, aril i olefin sulfonati, alkil, olefin, etar, i monoglicerid sulfati, i sulfosukcinati; ne-jonske deterdžente, na primer, oksidi masnih amina, alkanolamidi masnih kiselina, i kopolimeri poli(oksietilen-oksipropilen) ili kopolimeri etilen oksida ili propilen oksida; i amfoterni deterdženti, na primer, alkil-beta-aminopropionati, i 2-alkilimidazolin kvartarne amonijumove soli, kao i njihove smeše.
[1702] Parenteralne kompozicije ovog pronalaska će obično sadržavati od oko 0.5% do oko 25% težinskih% aktivnog sastojka u rastvoru. Konzervansi i puferi se takođe mogu korisno koristiti. Da bi se umanjila ili eliminisala iritacija na mestu ubrizgavanja, takve smeše mogu sadržati ne-jonski surfaktant koji ima hidrofilno-lipofilnu ravnotežu (HLB) po mogućnosti od oko 12 do oko 17. surfaktanta u takvoj formulaciji je poželjno u rasponu od oko 5% do oko 15 težinskih % . Surfaktant može biti pojedinačna komponenta koja ima gore navedeni HLB ili može biti smeša dve ili više komponenti koja imaju željeni HLB.
[1703] Ilustrativni prikaz surfaktanata koje se koriste u parenteralnim formulacijama su klasa estara polietilen sorbitana masnih kiselina, na primer, sorbitan monooleat i adukti etilen oksida velike molekulske težine sa hidrofobnom bazom, nastali kondenzacijom propilen oksida sa propilen glikolom.
[1704] Farmaceutske kompozicije m mogu biti u vidu sterilnih vodenih suspenzija za injekcije. Takve suspenzije mogu se formulisati prema poznatim metodama, koristeći pogodna sredstva za dispergovanje ili vlaženje i suspenzivna sredstva, kao što su, na primer, natrijum karboksimetilceluloza, metilceluloza, hidroksilpropilmetil celuloza, natrijum alginat,
1
polivinilpirolidon, tragakant guma i akacija guma; agensi za dispergovanje ili vlaženje koji mogu biti prirodni fosfatid kao što je lecitin, proizvod kondenzacije alkilen oksida sa masnom kiselinom, na primer polioksietilen stearat, proizvod kondenzacije etilen oksida sa dugim lancem alifatskog alkohola, na primer, heptadeka-etilenoksicetanol, proizvod kondenzacije etilen oksida sa delimičnim estrom izvedenim iz masne kiseline i heksitol kao što je polioksietilen sorbitol monooleat, ili proizvod kondenzacije etilen oksida sa delimičnim estrom izvedenim iz masne kiseline i anhidrida heksitola, na primer polioksietilen sorbitan monooleat.
[1705] Sterilni injekcioni preparat takođe može biti sterilni injekcioni rastvor ili suspenzija u netoksičnom parenteralno prihvatljivom razblaživaču ili rastvaraču. Razblaživači i rastvarači koji se mogu koristiti su, na primer, voda, Ringerov rastvor, izotonični rastvori natrijum hlorida i izotonični rastvori glukoze. Pored toga, sterilna fiksna ulja se uobičajeno koriste kao rastvarači ili mediji za suspendovanje. U tu svrhu može se koristiti bilo koje blago, fiksirano ulje, obuhvatajući sintetičke mono- ili digliceride. Pored toga, u pripremi injekcija mogu se koristiti masne kiseline kao što je oleinska kiselina.
[1706] Kompozicija prema pronalasku takođe se može primeniti u vidu supozitorija za rektalnu primenu leka. Ove kompozicije se mogu pripremiti mešanjem leka sa odgovarajućim pomoćnim sastojkom koji ne iritira, koji je čvrst na uobičajenim temperaturama, ali tečan na rektalnoj temperaturi i zbog toga će se rastopiti u rektumu tako da oslobodi lek. Takvi materijali su, na primer, kakao buter i polietilen glikol.
[1707] Druga formulacija koja se koristi u postupcima prema ovom pronalasku koristi uređaje za transdermalno davanje ("flasteri"). Takvi transdermalni flasteri mogu se koristiti za obezbeđivanje kontinuirane ili ne kontinuirane infuzije jedinjenja iz ovog pronalaska u kontrolisanim količinama. Konstrukcija i upotreba transdermalnih flastera za isporuku farmaceutskih sredstava dobro je poznata u tehnici (videti, na primer, američki patent br.
5,023,252, objavljen 11. juna 1991, ovde uključen kao referenca). Takvi flasteri se mogu konstruisati za kontinuiranu, pulsirajuću ili isporuku farmaceutskih sredstava na zahtev.
[1708] Formulacije sa kontrolisanim oslobađanjem za parenteralnu primenu obuhvataju liposomske, polimerne mikrosfere i polimerne gel formulacije koje su poznate u tehnici.
2
[1709] Možda će biti poželjno ili neophodno uvesti farmaceutsku kompoziciju pacijentu putem mehaničkog uređaja za isporuku. Konstrukcija i upotreba mehaničkih uređaja za isporuku za davanje farmaceutskih sredstava dobro je poznata u tehnici. Direktne tehnike za, na primer, davanje leka direktno u mozak obično obuhvataju postavljanje katetera za isporuku leka u ventrikularni sistem pacijenta da bi se zaobišla krvno-moždana barijera. Jedan takav sistem za isporuku koji se može ugraditi, a koristi se za transport agenasa do određenih anatomskih delova tela, opisan je u američkom patentu br.5,011,472, objavljenom 30. aprila 1991.
[1710] Kompozicije prema pronalasku mogu takođe da sadrže druge konvencionalne farmaceutski prihvatljive sastojke za mešanje, koji se obično nazivaju nosači ili razblaživači, po potrebi ili ako se želi. Mogu se koristiti uobičajeni postupci za pripremu takvih kompozicija u odgovarajućim doznim oblicima. Takvi sastojci i postupci obuhvataju one opisane u sledećim referencama, od kojih je svaki ovde uključen referencom: Powell, M.F. i dr., "Compendium of Excipients for Parenteral Formulations" PDA Journal of Pharmaceutical Science & Technology 1998, 52(5), 238-311 ; Strickley, R.G "Parenteral Formulations of Small Molecule Therapeutics Marketed in the United States (1999)-Part-1" PDA Journal of Pharmaceutical Science & Technology 1999, 53(6), 324-349 ; i Nema, S. i dr., "Excipients i Their Use in Injectable Products" PDA Journal of Pharmaceutical Science & Technology 1997, 51(4), 166-171 .
[1711] Uobičajeni farmaceutski sastojci koji se mogu koristiti prema potrebi za formulisanje kompozicije prema predviđenom načinu primene obuhvataju:
sredstva za zakišeljavanje (primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na sirćetnu kiselinu, limunsku kiselinu, fumarnu kiselinu, hlorovodoničnu kiselinu, azotnu kiselinu);
alkalinizujuća sredstva (primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na rastvor amonijaka, amonijum karbonat, dietanolamin, monoetanolamin, kalijum hidroksid, natrijum borat, natrijum karbonat, natrijum hidroksid, trietanolamin, trolamin);
adsorbente (primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na celulozu u prahu i aktivni ugalj); aerosol propelante (primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na ugljen dioksid, CCl2F2, F2ClC-CClF2i CClF3);
agensi za istiskivanje vazduha (primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na azot i argon); antimikotični konzervansi (primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na benzoevu kiselinu, butilparaben, etilparaben, metilparaben, propilparaben, natrijum benzoat);
antimikrobne konzervanse (primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na benzalkonijum hlorid, benzetonijum hlorid, benzil alkohol, cetilpiridinijum hlorid, hlorobutanol, fenol, feniletil alkohol, fenilživa nitrat i timerosal);
antioksidante (primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na askorbinsku kiselinu, askorbil palmitat, butilirani hidroksianizol, butilirani hidroksitoluen, hipofosfornu kiselinu, monotioglicerol, propil galat, natrijum askorbat, natrijum bisulfit, natrijum formaldehid sulfoksilat, natrijum metabisulfit);
vezivne materijale (primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na blok polimere, prirodnu i sintetičku gumu, poliakrilate, poliuretane, silikone, polisiloksane i kopolimere stiren-butadien); puferska sredstva (primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na kalijum metafosfat, dikalijum fosfat, natrijum acetat, anhidrovani natrijum citrat i natrijum citrat dihidrat);
nosače (primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na bagremov sirup, aromatični sirup, aromatični eliksir, sirup od trešnje, kakao sirup, sirup od pomorandže, sirup, kukuruzno ulje, mineralno ulje, kikiriki ulje, sezamovo ulje, bakteriostatsku injekciju natrijum hlorida i bakteriostatsku vodu za injekciju);
helirajuća sredstva (primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na dinatrijum edetat i edetsku kiselinu);
bojila (primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na FD&C crveno br. 3, FD&C crveno br. 20, FD&C žuto br.6, FD&C plavo br.2, D&C zeleno br.5, D&C narandžasto br.5, D&C crveno br. 8, karamela i crveni železo oksid);
sredstva za bistrenje (primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na bentonit);
sredstva za emulgovanje (primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na bagrem, cetomakrogol, cetil alkohol, gliceril monostearat, lecitin, sorbitan monooleat, polioksietilen 50 monostearat); agensi za inkapsuliranje (primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na želatin i celulozni acetat ftalat);
arome (primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na anise ulje anisa, ulje cimeta, kakao, mentol, ulje pomorandže, ulje mente i vanilin);
ovlaživače (primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na glicerol, propilen glikol i sorbitol); sredstva za levigaciju (primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na mineralno ulje i glicerin); ulja (primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na kikiriki ulje, mineralno ulje, maslinovo ulje, kikiriki ulje, sezamovo ulje i biljno ulje);
baze za mast (primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na lanolin, hidrofilnu mast, polietilen glikol mast, petrolatum, hidrofilni petrolatum, belu mast, žutu mast i mast od ružine vode);
4
pojačivači penetracije (transdermalna isporuka) (primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na zasićene ili nezasićene masne alkohole, zasićene ili nezasićene masne estre, zasićene ili nezasićene dikarboksilne kiseline, esencijalna ulja, derivate fosfatidila, cefalin, terpene, amide, etre, ketone i ureje);
plastifikatore (primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na dietil ftalat i glicerol);
rastvarače (primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na etanol, kukuruzno ulje, ulje semena pamuka, glicerol, izopropanol, mineralno ulje, oleinsku kiselinu, ulje kikirikija, prečišćenu vodu, vodu za injekcije, sterilnu vodu za injekcije i sterilnu vodu za navodnjavanje);
sredstva za ukrućivanje (primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na cetil alkohol, vosak cetil estara, mikrokristalni vosak, parafin, stearil alkohol, beli vosak i žuti vosak);
baze za supozitorije (primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na kakao buter i polietilen glikole (smeše));
surfaktante (primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na benzalkonijum hlorid, nonoksinol 10, okstoksinol 9, polisorbat 80, natrijum lauril sulfat i sorbitan mono-palmitat);
sredstva za suspendovanje (primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na agar gumu, bentonit, karbomere, natrijum karboksimetilcelulozu, hidroksietil celulozu, hidroksipropil celulozu, hidroksipropil metilcelulozu, kaolin, metilcelulozu, tragakant gumu i veegum gumu);
zaslađivače (primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na aspartam, dekstrozu, glicerol, manitol, propilen glikol, natrijum saharin, sorbitol i saharozu);
sredstva protiv lepljenja tablete (primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na magnezijum stearat i talk);
vezivna sredstva za tablete (primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na bagrem, alginsku kiselinu, natrijum karboksimetilcelulozu, kompresibilni šećer, etilcelulozu, želatin, tečnu glukozu, metilcelulozu, umreženi polivinil pirolidon i preželatinizovani skrob);
razblaživači tableta i kapsula (primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na dvobazni kalcijum fosfat, kaolin, laktozu, manitol, mikrokristalnu celulozu, celulozu u prahu, istaloženi kalcijum karbonat, natrijum karbonat, natrijum fosfat, sorbitol i skrob);
sredstva za oblaganje tableta (primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na tečnu glukozu, hidroksietil celulozu, hidroksipropil celulozu, hidroksipropil metilcelulozu, metilcelulozu, etilcelulozu, celulozni acetat ftalat i šelak);
ekscipijenti za kompresiju tableta (primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na dvobazni kalcijum fosfat);
sredstva za dezintegraciju tableta (primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na, alginsku kiselinu, karboksimetilcelulozu kalcijum, mikrokristalnu celulozu, polakrilin kalijum, umreženi polivinilpirolidon, natrijum alginat, natrijum skrob glikolat i skrob);
sredstva za klizanje tableta (primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na koloidni silicijum dioksid, kukuruzni skrob i talk);
maziva za tablete (primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na kalcijum stearat, magnezijum stearat, mineralno ulje, stearinsku kiselinu i cink stearat);
sredstva za tablete/kapsule (primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na titanijum dioksid); sredstva za poliranje tableta (primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na karnuba vosak i beli vosak);
sredstva za zgušnjavanje (primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na pčelinji vosak, cetil alkohol i parafin);
sredstva za toničnost (primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na dekstrozu i natrijum hlorid); sredstva za povećanje viskoznosti (primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na alginsku kiselinu, bentonit, karbomer, natrijum karboksimetilcelulozu, metilcelulozu, polivinil pirolidon, natrijum alginat i tragakant gumu); i
sredstva za vlaženje (primeri obuhvataju, ali nisu ograničeni na heptadekaetilen oksicetanol, lecitine, sorbitol monooleat, polioksietilen sorbitol monooleat, i polioksietilen stearat).
Kombinovane terapije
[1712] Termin " kombinacija" u ovom pronalasku koristi se kao poznata stručnjacima u oblasti tehnike i može biti prisutna kao fiksna kombinacija, ne-fiksna kombinacija ili komplet delova.
[1713] "Fiksna kombinacija" u ovom pronalasku se koristi kao poznata stručnjacima i definiše se kao kombinacija u kojoj su pomenuti prvi aktivni sastojak i pomenuti drugi aktivni sastojak prisutni zajedno u jednoj jediničnoj dozi ili kao jedan entitet. Jedan primer "fiksne kombinacije" je farmaceutska kompozicija u kojoj su pomenuti prvi aktivni sastojak i pomenuti drugi aktivni sastojak prisutni u smeši za istovremeno davanje, kao što je formulacija. Sledeći primer "fiksne kombinacije" je farmaceutska kombinacija u kojoj su pomenuti prvi aktivni sastojak i pomenuti drugi aktivni sastojak prisutni u jednoj jedinici bez primese.
[1714] Ne-fiksna kombinacija ili „komplet delova“ u ovom pronalasku koristi se kao što je poznato stručnjacima i definiše se kao kombinacija u kojoj su navedeni prvi aktivni sastojak i pomenuti drugi aktivni sastojak prisutni u više od jedne jedinice. Jedan primer ne-fiksne kombinacije ili kompleta delova je kombinacija u kojoj su pomenuti prvi aktivni sastojak i pomenuti drugi aktivni sastojak prisutni odvojeno. Komponente ne-fiksne kombinacije ili kompleta delova mogu se primenjivati odvojeno, uzastopno, istovremeno, istovremeno ili hronološki u rasponu.
[1715] Jedinjenja iz ovog pronalaska mogu se primenjivati kao jedino farmaceutsko sredstvo ili u kombinaciji sa jednim ili više drugih farmaceutskih sredstava kada kombinacija ne izaziva neprihvatljive štetne efekte. Ovaj pronalazak se takođe odnosi na takve kombinacije.
[1716] Na primer, jedinjenja iz ovog pronalaska mogu se kombinovati sa poznatim hormonskim terapeutskim agensima.
[1717] Konkretno, jedinjenja iz ovog pronalaska mogu se primenjivati u kombinaciji ili u kombinaciji sa hormonskim kontraceptivima. Hormonski kontraceptivi mogu se primenjivati oralno, subkutano, transdermalno, intrauterino ili intravaginalno, na primer kao kombinovani oralni kontraceptivi (COC) ili samo progestin-tablete (POP) ili uređaji koji sadrže hormone poput implantata, flastera ili intravaginalnih prstenova.
[1718] Oralni kontraceptivi obuhvataju, ali se ne ograničavaju na pilule za kontrolu rađanja ili metodu kontrole rađanja koja obuhvata kombinaciju estrogena (estradiola) i progestogena (progestina). Estrogeni deo je u većini oralnih kontraceptiva etinil estradiol. Neki oralni kontraceptivi sadrže estradiol ili estradiol valerat.
[1719] Navedeni oralni kontraceptivi sadrže progestin noretinodrel, noretindron, noretindron acetat, etinodiol acetat, norgestrel, levonorgestrel, norgestimat, desogestrel, gestoden, drospirenon, dienogest ili nomegestrol acetat.
[1720] Tablete za kontrolu rađanja obuhvataju, na primer, ali nisu ograničene na Yasmin, Yaz, obe sadrže etinil estradiol i drospirenon; Microginon ili Miranova koje sadrže levonorgestrel i etinil estradiol; Marvelon koje sadrže etinil estradiol i desogestrel; Valette koje sadrže etinil estradiol i dienogest; Belara i Enriqa koje sadrže etinil estradiol i hlormadinonacetat; Qlaira koje sadrže estradiol valerat i dienogest kao aktivne sastojke; i Zoely koje sadrže estradiol i normegestrol.
[1721] POP su kontraceptivne pilule koje sadrže samo sintetičke progestogene (progestine) i ne sadrže estrogen. U kolokvijalnom su nazivu mini pilile.
[1722] POP obuhvataju, ali nisu ograničene na Cerazette koje sadrže desogestrel; Microlut koje sadrže levonorgestrel i Micronor koje sadrže noretindron.
[1723] Ostali oblici samo sa progestonom su intrauterini uređaji (IUD), na primer Mirena koji sadrže levonorgestrel ili injekcije, na primer Depo-Provera koji sadrže medroksiprogesteron acetat, ili implantati, na primer Implanon koji sadrže etonogestrel.
[1724] Ostali uređaji koji sadrže hormone sa kontraceptivnim efektom koji su pogodni za kombinaciju sa jedinjenjima iz ovog pronalaska su vaginalni prstenovi poput Nuvaring-a koji sadrže etinil estradiol i etonogestrel ili transdermalni sistemi poput kontraceptivnog flastera, na primer Ortho-Evra ili Apleek (Lisvy) koji sadrže etinil estradiol i gestoden.
[1725] Poželjna realizacija ovog pronalaska je primena jedinjenja opšte formule (I) u kombinaciji sa COC ili POP ili drugim oblicima koji sadrže samo progestin, kao i vaginalni prstenovi ili flasteri kao što je gore pomenuto.
[1726] Jedinjenja iz ovog pronalaska mogu se kombinovati sa terapijskim agensima ili aktivnim sastojcima, koji su već odobreni ili su još uvek u fazi razvoja za lečenje i/ili profilaksu bolesti koje su povezane sa P2X3 receptorima ili posredovane njima.
[1727] Za lečenje i/ili profilaksu bolesti urinarnog trakta, jedinjenja iz ovog pronalaska mogu se primenjivati u kombinaciji ili zajednički sa bilo kojom supstancom koja se može primeniti kao terapeutsko sredstvo u sledećim indikacijama:
stanja bolesti urinarnog trakta povezana sa opstrukcijom izlaza iz bešike; stanja urinarne inkontinencije, kao što su smanjeni kapacitet bešike, povećana učestalost mikcije, urgentna inkontinencija, stresna inkontinencija ili hiperreaktivnost bešike; benigna hipertrofija prostate; hiperplazija prostate; prostatitis; hiperrefleksija detruzora; prekomerno aktivna bešika i simptomi povezani sa prekomerno aktivnom bešikom, pri čemu su pomenuti simptomi naročito povećana učestalost mokrenja, nokturija, urinarna hitnost ili urgentna inkontinencija; karlična preosetljivost; uretritis; prostatitis; prostatodinija; cistitis, posebno intersticijski cistitis; idiopatska preosetljivost bešike.
[1728] Za lečenje i/ili profilaksu prekomerno aktivne bešike i simptoma povezanih sa prekomerno aktivnom bešikom, jedinjenja iz predmetnog pronalaska mogu se primenjivati u kombinaciji ili kao ko-medikament, nezavisno ili kao dodatak terapiji poput ishrane, načina života ili treninga bešike, sa antiholinergicima poput oksibutinina, tolterodina, propiverina, solifenacina, darifenacina, trospijuma, fesoterdina; β-3 agonisti poput mirabegrona; neurotoksini poput onabutolinumtoksina A; ili antidepresivi poput imipramina, duloksetina.
[1729] Za lečenje i/ili profilaksu intersticijalnog cistitisa, jedinjenja iz ovog pronalaska mogu se primenjivati u kombinaciji ili kao ko-medikament, nezavisno ili kao dodatak terapiji ponašanja poput ishrane, načina života ili treninga bešike, sa pentozanima poput elmirona; NSAIDS (ne-steroidni antiinflamatorni lekovi), ili neselektivnih NSAIDS kao ibuprofen, diklofenak, aspirin, naproksen, ketoprofen, indometacin; kao i selektivni Cox-2 NSAIDS poput parekoksiba, etorikoksiba, celekoksiba; antidepresivi poput amitriptilina, imipramina; ili antihistaminici poput loratadina.
[1730] Za lečenje i/ili profilaksu ginekoloških bolesti, jedinjenja iz ovog pronalaska mogu se primenjivati u kombinaciji ili kao ko-medikament sa bilo kojom supstancom koja se može primeniti kao terapeutsko sredstvo u sledećim indikacijama:
dismenoreja, obuhvatajući primarnu i sekundarnu dismenoreju; dispareunija; endometrioza; bol povezan sa endometriozom; simptomi povezani sa endometriozom, pri čemu su navedeni simptomi naročito dismenoreja, dispareunija, disurija ili dishezija.
[1731] Za lečenje i/ili profilaksu dismenoreje, obuhvatajući primarnu i sekundarnu dismenoreju; dispareunije; endometrioze i bola povezanog sa endometriozom, jedinjenja iz ovog pronalaska mogu se primenjivati u kombinaciji ili kao ko-medikament sa lekovima protiv bolova, naročito NSAID poput ibuprofena, diklofenaka, aspirina, naproksena, ketoprofena, indometacina; kao i Cox-2 selektivni NSAID poput parekoksiba, etorikoksiba, celekoksiba; ili u kombinaciji sa lečenjem za inhibiranje ovulacije, naročito oralni kontraceptivi, kao što je gore pomenuto ili kontraceptivni flasteri poput Ortho-Evra ili Apleek (Lisvy); ili sa progestogenima poput dienogesta (Visanne); ili sa analognim GnRH, naročito sa GnRH agonistima i antagonistima, na primer leuprorelin, nafarelin, goserelin, cetrorelik, abarelik, ganirelik, degarelik; ili sa androgenima: danazol.
[1732] Za lečenje i/ili profilaksu bolesti koje su povezane sa bolom ili sindromima bola, jedinjenja iz predmetnog pronalaska mogu se primenjivati u kombinaciji ili kao komedikament sa bilo kojom supstancom koja se može primeniti kao terapijsko sredstvo u sledećim indikacijama:
bolesti povezane sa bolom ili poremećaji kao što su hiperalgezija, alodinija, funkcionalni poremećaji creva (poput sindroma iritabilnog creva) i artritis (poput osteoartritisa, reumatoidnog artritisa i ankilozirajućeg spondilitisa), sindrom pečenja usta, opekotine, migrene ili klaster glavobolje, povreda nerva, traumatična povreda nerva, post traumatske povrede (obuhvatajući prelome i sportske povrede), neuritis, neuralgija, trovanje, ishemijska povreda, intersticijski cistitis, trigeminalna neuralgija, neuropatija sitnih vlakana, dijabetička neuropatija, hronični artritis i srodne neuralgije, neuropatija izazvana HIV-om lečenjem HIV-a.
[1733] Jedinjenja iz ovog pronalaska mogu se kombinovati sa drugim farmakološkim agensima i jedinjenjima koja su namenjena za lečenje inflamatornih bolesti, inflamatornih bolova ili opštih stanja bola.
[1734] Pored dobro poznatih lekova koji su već odobreni i na tržištu, jedinjenja iz predmetnog pronalaska mogu se primenjivati u kombinaciji sa inhibitorima PTGES (prostaglandin E sintaza), sa inhibitorima IRAK4 (kinaza 4 povezana sa receptorima za interleukin-1) i sa antagonistima prostanoidnog EP4 receptora (prostaglandin E2 receptor 4).
[1735] Konkretno, jedinjenja iz ovog pronalaska mogu se primenjivati u kombinaciji sa farmakološkim agensima za endometriozu, namenjenim lečenju inflamatornih bolesti, inflamatornog bola ili opštih stanja bolova i/ili ometanju endometriotske proliferacije i simptoma povezanih sa endometriozom, naime sa inhibitorima Aldo-keto-reduktaza1C3 (AKR1C3) i sa funkcionalnim blokirajućim antitelima prolaktinskog receptora.
[1736] Za lečenje i/ili profilaksu hroničnog kašlja i simptoma povezanih sa hroničnim kašljem, jedinjenja iz predmetnog pronalaska mogu se primenjivati u kombinaciji ili kao komedikament sa sredstvima za suzbijanje kašlja kao što su dekstrometorfan, benzonatat, kodein ili hidrokodon; sa inhalacionim agensima za lečenje eozinofilnog bronhitisa, HOBP ili astme poput budezonida, beklometazona, flutikazona, teofilina, ipatropijumbromida, montelukasta ili salbutamola; sa lekovima poput inhibitora protonske pumpe koji se koriste za lečenje refluksa kiseline, na primer omeprazol, esomeprazol, lansoprazol, ranitidin, famotidin, cimetidin; i
1
prokineticima kao što je metoklopramid; sa nazalnim ili lokalnim glukokortikoidima kao što su flutikazon ili mometazon ili triamcinolon; ili sa oralnim antihistaminicima poput loratadina, feksofenadina ili cetirizina.
[1737] Jedinjenja iz ovog pronalaska mogu se kombinovati sa drugim farmakološkim agensima i jedinjenjima koja su namenjena za lečenje, prevenciju ili lečenje karcinoma.
[1738] Konkretno, jedinjenja iz ovog pronalaska mogu se primenjivati u kombinaciji sa jedinjenjima iz grupe koja sadrži 1311-chTNT, abareliks, abirateron, aklarubicin, adotrastuzumab emtanzin, afatinib, aflibercept, aldesleukin, alemtuzumab, alendronsku kiselinu, alitretinoin, altretamin, amifostin, aminoglutetimid, heksil aminolevulinat, amrubicin, amsakrin, anastrozol, ancestim, anetol ditioletion, angiotenzin II, antitrombin III, aprepitant, arkitumomab, arglabin, arsenov trioksid, asparaginaza, aksitinib, azacitidin, baziliksimab, belotekan, bendamustin, belinostat, bevacizumab, beksaroten, bikalutamid, bisantren, bleomicin, bortezomib, buserelin, bosutinib, brentuksimab vedotin, busulfan, kabazitaksel, kabozantinib, kalcijum folinat, kalcijum levofolinat, kapecitabin, kapromab, karboplatin, karfilzomib, karmofur, karmustin, katumaksomab, celekoksib, celmoleukin, ceritinib, cetuksimab, hlorambucil, hlormadinon, hlormetin, cidofovir, cinakalcet, cisplatin, kladribin, klodronska kiselina, klofarabin, kopanlisib, krisantaspaza, ciklofosfamid, ciproteron, citarabin, dakarbazin, daktinomicin, darbepoetin alfa, dabrafenib, dasatinib, daunorubicin, decitabin, degareliks, denileukin diftitoks, denosumab, depreotid, dezlorelin, deksrazoksan, dibrospidijum hlorid, dianhidrogalaktitol, diklofenak, docetaksel, dolasetron, doksifluridin, doksorubicin, doksorubicin estron, dronabinol, ekulizumab, edrekolomab, eliptinijum acetat, eltrombopag, endostatin, enocitabin, enzalutamid, epirubicin, epitiostanol, epoetin alfa, epoetin beta, epoetin zeta, eptaplatin, eribulin, erlotinib, esomeprazol, estradiol, estramustin, etopozid, everolimus, eksemestan, fadrozol, fentanil, filgrastim, fluoksimesteron, floksuridin, fludarabin, fluorouracil, flutamid, folinska kiselina, formestan, fosaprepitant, fotemustin, fulvestrant, gadobutrol, gadoteridol, meglumin gadoterna kiselina, gadoversetamid, gadoksetinska kiselina, galijum nitrat, ganireliks, gefitinib, gemcitabin, gemtuzumab, glukarpidaza, glutoksim, GM-CSF, goserelin, granisetron, faktor stimulisanja kolonije granulocita, histamin dihidrohlorid, histrelin, hidroksikarbamid, seme I-125, lansoprazol, ibandronska kiselina, ibritumomab tiuksetan, ibrutinib, idarubicin, ifosfamid, imatinib, imikvimod, improsulfan, indisetron, inkadronska kiselina, ingenol mebutat, interferon alfa, interferon beta, interferon gama, jobitridol, jobengvan (1231), jomeprol, ipilimumab, irinotekan, itrakonazol, iksabepilon,
11
lanreotid, lapatinib, lazoholin, lenalidomid, lenograstim, lentinan, letrozol, leuprorelin, levamizol, levonorgestrel, levotiroksin natrijum, lizurid, lobaplatin, lomustin, lonidamin, masoprokol, medroksiprogesteron, megestrol, melarsoprol, melfalan, mepitiostan, merkaptopurin, mesna, metadon, metotreksat, metoksalen, metilaminolevulinat, metilprednizolon, metiltestosteron, metirozin, mifamurtid, miltefozin, miriplatin, mitobronitol, mitogvazon, mitolaktol, mitomicin, mitotan, mitoksantron, mogamulizumab, molgramostim, mopidamol, morfine hidrohlorid, morfine sulfat, nabilon, nabiksimols, nafarelin, nalokson pentazocin, naltrekson, nartograstim, nedaplatin, nelarabin, neridronska kiselina, nivolumab pentetreotid, nilotinib, nilutamid, nimorazol, nimotuzumab, nimustin, nitrakrin, nivolumab, obinutuzumab, oktreotid, ofatumumab, omacetaksin mepesukcinat, omeprazol, ondansetron, oprelvekin, orgotein, orilotimod, oksaliplatin, oksikodon, oksimetolon, ozogamicin, p53 genska terapija, paklitaksel, palifermin, seme paladijum-103, palonosetron, pamidronska kiselina, panitumumab, pantoprazol, pazopanib, pegaspargaza, PEG-epoetin beta (metoksi PEG-epoetin beta), pembrolizumab, pegfilgrastim, peginterferon alfa-2b, pemetreksed, pentazocin, pentostatin, peplomicin, perflubutan, perfosfamid, pertuzumab, picibanil, pilokarpin, pirarubicin, piksantron, pleriksafor, plikamicin, poliglusam, poliestradiol fosfat, polivinilpirolidon natrijum hijaluronat, polisaharid-K, pomalidomid, ponatinib, porfimer natrijum, pralatreksat, prednimustin, prednizon, prokarbazin, prokodazol, propranolol, kvinagolid, rabeprazol, rakotumomab, radium-223 hlorid, radotinib, raloksifen, raltitreksed, ramosetron, ramucirumab, ranimustin, rasburikaza, razoksan, refametinib, regorafenib, rizedronska kiselina, rhenium-186 etidronat, rituksimab, romidepsin, romiplostim, romurtid, roniciklib, samarijum (153Sm) leksidronam, sargramostim, satumomab, sekretin, sipuleucel-T, sizofiran, sobuzoksan, natrijum glicididazol, sorafenib, stanozolol, streptozocin, sunitinib, talaporfin, tamibaroten, tamoksifen, tapentadol, tasonermin, teceleukin, tehnecijum (99mTc) nofetumomab merpentan, 99mTc-HINIC-[Tyr3]-oktreotid, tegafur, tegafur gimeracil oteracil, temoporfin, temozolomid, temsirolimus, tenipozid, testosteron, tetrofosmin, talidomid, tiotepa, timalfasin, tirotropin alfa, tiogvanin, tocilizumab, topotekan, toremifen, tositumomab, trabektedin, tramadol, trastuzumab, trastuzumab emtanzin, treosulfan, tretinoin, trifluridin tipiracil, trilostan, triptorelin, trametinib, trofosfamid, trombopoietin, triptofan, ubenimeks, valatinib , valrubicin, vandetanib, vapreotid, vemurafenib, vinblastin, vinkristin, vindesin, vinflunin, vinorelbin, vismodegib, vorinostat, vorozol, itrijum -90 staklene mikrosfere, zinostatin, zinostatin stimalamer, zoledronska kiselina, zorubicin.
12
[1739] Dalje, jedinjenja predmetnog pronalaska mogu se kombinovati sa aktivnim sastojcima, koji su dobro poznati za lečenje bolova povezanih sa rakom i hroničnih bolova. Takve kombinacije obuhvataju, ali nisu ograničene na NSAID (bilo neselektivni NSAID poput ibuprofena, diklofenaka, aspirina, naproksena, ketoprofena i indometacina; i Cox-2 selektivne NSAID poput parekoksiba, etorikoksiba i celekoksiba), opiodi iz koraka II poput kodein fosfata, dekstropropoksifena, dihidrokodeina, tramadola), opiodi iz koraka III poput morfija, fentanila, buprenorfin, oksimorfon, oksikodon i hidromorfon; i drugi lekovi koji se koriste za lečenje bolova od raka poput steroida kao što su deksametazon i metilprednizolon; bisfosfonati poput etidronata, klodronata, alendronata, risedronata i zoledronata; triciklični antidepresivi poput amitriptilina, klomipramina, desipramina, imipramina i doksepina; antiaritmici klase I poput meksiletina i lidokaina; antikonvulzivi poput karbamazepina, gabapentina, okskarbazepina, fenitoina, pregabalina, topiramata, alprazolama, diazepama, flurazepama, pentobarbitala i fenobarbitala.
Metode lečenja
[1740] Predmetni pronalazak se odnosi na postupak za upotrebu jedinjenja iz ovog pronalaska i njihovih kompozicija za inhibiranje P2X3 receptora.
[1741] Predmetni pronalazak takođe obezbeđuje postupak za upotrebu jedinjenja iz ovog pronalaska i njihovih kompozicija za selektivno inhibiranje P2X3 receptora u odnosu na P2X2/3 receptor što znači bar 3-struku selektivnost u odnosu na P2X2/3 receptor.
[1742] Predmetni pronalazak takođe obezbeđuje postupak za upotrebu poželjnih jedinjenja iz ovog pronalaska i njihovih kompozicija za selektivno inhibiranje P2X3 receptora u odnosu na P2X2/3 receptor sa bar 10-strukom selektivnošću u odnosu na P2X2/3 receptor. Pored toga, ovaj pronalazak takođe obezbeđuje postupak za lečenje sisara, obuhvatajući ljudske poremećaje i bolesti, koristeći poželjnija jedinjenja iz ovog pronalaska koja pokazuju dalja korisna svojstva koja su korisna za njihovu upotrebu kao lekovi, kao što su poželjni farmakokinetički profili koji pružaju odgovarajuću metaboličku stabilnost i oralnu bioraspoloživost. Pored toga, obezbeđen je postupak lečenja sisara, obuhvatajući ljudske poremećaje i bolesti, koristeći još poželjnija jedinjenja predmetnog pronalaska koja pokazuju dalja korisna svojstva koja su korisna za njihovu upotrebu kao lekovi, kao što su poželjni farmakokinetički profili koji pružaju odgovarajuću metaboličku stabilnost i oralnu
1
bioraspoloživost, i najmanje jedno dodatno povoljno svojstvo izabrano iz povoljnog kardiovaskularnog profila i pogodnog CIP profila inhibicije.
[1743] Predmetni pronalazak se odnosi na postupak za upotrebu jedinjenja iz ovog pronalaska i njihovih kompozicija za lečenje sisara, obuhvatajući ljudske poremećaje i bolesti koje obuhvataju, ali nisu ograničene na:
genitourinarne, gastrointestinalne, respiratorne i bolom povezane bolesti, stanja i poremećaje;
ginekološke bolesti, obuhvatajući dismenoreju (primarnu i sekundarnu dismenoreju), dispareuniju, endometriozu i adenomiozu; bol povezan sa endometriozom; simptome povezane sa endometriozom, pri čemu su navedeni simptomi naročito dismenoreja, dispareunija, disurija ili dishezija; proliferacija povezana sa endometriozom; karlična preosetljivost;
stanja bolesti urinarnog trakta povezana sa opstrukcijom izlaza iz bešike; stanja urinarne inkontinencije, kao što su smanjeni kapacitet bešike, povećana učestalost mikcije, urgentna inkontinencija, stresna inkontinencija ili hiperreaktivnost bešike; benigna hipertrofija prostate; hiperplazija prostate; prostatitis; hiperrefleksija detruzora; prekomerno aktivna mokraćna bešika i simptomi povezani sa prekomerno aktivnom mokraćnom bešikom, pri čemu su pomenuti simptomi naročito povećana učestalost mokrenja, nokturija, urinarna hitnost ili urgentna inkontinencija; karlična preosetljivost; uretritis; prostatitis; prostatodinija; cistitis, posebno intersticijski cistitis; idiopatska preosetljivost bešike;
bol povezan sa rakom;
epilepsija, parcijalni i generalizovani napadi;
respiratorni poremećaji, obuhvatajući astmu, hroničnu opstruktivnu plućnu bolest, plućnu fibrozu, akutni kašalj, hronični kašalj, obuhvatajući hronični idiopatski i hronični refraktorni kašalj, bronhospazam;
gastrointestinalni poremećaji, obuhvatajući sindrom iritabilnog creva (IBS), inflamatornu bolest creva (IBD), bilijarne kolike i druge žučne poremećaje, bubrežnu koliku, IBS sa dominantnom dijarejom; gastroezofagealni refluks, gastrointestinalnu distenziju, Kronovu bolest i slično;
neurodegenerativni poremećaji poput Alchajmerove bolesti, multiple skleroze, Parkinsonove bolesti, ishemije mozga i traumatske povrede mozga;
pruritus.
14
[1744] Predmetni pronalazak se odnosi na postupak za upotrebu jedinjenja iz ovog pronalaska i njihovih kompozicija, za lečenje poremećaja i bolesti povezanih sa bolom kod sisara, obuhvatajući ljude, koje obuhvataju, ali nisu ograničene na
bolesti ili poremećaje povezane sa bolom odabrane iz grupe koju čine hiperalgezija, alodinija, funkcionalni poremećaji creva (kao što je sindrom iritabilnog creva), giht, artritis (poput osteoartritisa, reumatoidnog artritisa i ankilozirajućeg spondilitisa), sindrom pečenja usta, opekotine, migrena ili klaster glavobolje, povreda živaca, traumatska povreda nerva, post traumatske povrede (obuhvatajući prelome i sportske povrede), neuritis, neuralgije, trovanje, ishemijska povreda, intersticijski cistitis, rak, trigeminalna neuralgija, neuropatija malih vlakana, dijabetička neuropatija, hronični artritis i srodne neuralgije, HIV i neuropatija izazvana lečenjem HIV-a, pruritus; smanjeno zarastanje rana i bolesti skeleta poput degeneracije zglobova.
[1745] Predmetni pronalazak se odnosi na postupak za upotrebu jedinjenja iz ovog pronalaska i njihovih kompozicija, za lečenje sisara, obuhvatajući ljudske poremećaje i bolesti povezane sa bolom, ili sindrome bola koji su naročito:
sindromi bola (obuhvatajući akutni, hronični, inflamatorni i neuropatski bol), poželjno inflamatorni bol, bol u križima hirurški bol, visceralni bol, zubni bol, parodontitis, predmenstrualni bol, bol povezan sa endometriozom, bol povezan sa fibrotičnim bolestima, centralni bol, bolovi zbog sindroma pečenja usta, bol zbog opekotina, bol zbog migrene, klaster glavobolje, bol zbog povrede nerva, bol zbog neuritisa, neuralgije, bol zbog trovanja, bol zbog ishemijske povrede, bol zbog intersticijalnog cistitisa, bol zbog karcinoma, bol zbog virusnih, parazitskih ili bakterijskih infekcija, bol zbog traumatične povrede nerva, bol zbog posttraumatskih povreda (obuhvatajući prelome i sportske povrede), bol zbog trigeminalne neuralgije, bol povezan sa neuropatijom malih vlakana, bol povezan sa dijabetičnom neuropatijom, postherpetičnom neuralgijom, hronični bol u donjem delu leđa, bol u vratu, fantomski bol udova, sindromom karličnog bola, hronični bol u karlici, neurom, složeni regionalnim sindrom bola u vezi sa gastrointestinalnom distenzijom, hronični artritični bol i srodne neuralgije i bol povezan sa rakom, bola rezistentan na morfijum, bol povezan sa hemoterapijom, HIV-om i neuropatija izazvana HIV-om; i bol povezan sa bolestima ili poremećajima odabranim iz grupe koju čine hiperalgezija, alodinija, funkcionalni poremećaji creva (kao što je sindrom iritabilnog creva) i artritis (kao što je osteoartritis, reumatoidni artritis i ankilozirajući spondilitis).
1
[1746] Predmetni pronalazak se odnosi na postupak za upotrebu jedinjenja iz ovog pronalaska i njihovih kompozicija za lečenje upale, naročito neurogene upale. Termin "upala" podrazumeva se takođe da obuhvata bilo kakvu inflamatornu bolest, poremećaj ili stanje samo po sebi, bilo koje stanje sa kojim je povezana inflamatorna komponenta i/ili bilo koje stanje koje kao simptom karakteriše inflamacija, obuhvatajući, između ostalog, akutnu, hroničnu, ulcerativnu, specifičnu, alergijsku, infekciju patogenima, imune reakcije usled preosetljivosti, ulazak stranih tela, fizičku povredu i nekrotično zapaljenje i druge oblike upale poznate stručnjacima. Izraz, prema tome, takođe obuhvata, za potrebe ovog pronalaska, upalni bol, generalizovani bol i/ili groznicu. Predmetni pronalazak se odnosi na postupak za upotrebu jedinjenja iz ovog pronalaska i njihovih kompozicija za lečenje fibromijalgije, miofascijalnih poremećaja, virusnih infekcija (npr. influenca, prehlada, herpes zoster, hepatitis C i AIDS), bakterijskih infekcija, gljivičnih infekcija, hirurške ili stomatološke procedure, artritisa, osteoartritisa, juvenilnog artritisa, reumatoidnog artritisa, maloletničkog reumatoidnog artritisa, reumatske groznice, ankilozirajućeg spondilitisa, Hodgkinove bolesti, sistemskog eritematoznog lupusa, vaskulitisa, pankreatitisa, nefritisa, burzitisa, konjunktivitisa, iritisa, skleritisa, uveitisa, zarastanja rana, dermatitisa, ekcema, moždanog udara, autoimunih bolesti, alergijskih poremećaja, rinitisa, čireva, blagog do umereno aktivnog ulceroznog kolitisa, porodične adenomatozne polipoze, koronarne bolesti srca, sarkoidoze i bilo koja druge bolesti sa inflamatornom komponentom. Predmetni pronalazak se odnosi na postupak za upotrebu jedinjenja iz ovog pronalaska i njihovih kompozicija za lečenje sisara, obuhvatajući ljudske poremećaje i bolesti koje nisu povezane sa inflamatornim mehanizmima, kao što je smanjenje gubitka koštane mase kod subjekta. Bolesti koje se s tim u vezi mogu pomenuti obuhvataju osteoporozu, osteoartritis, Pagetovu bolest i/ili parodontalne bolesti.
[1747] Na temelju aktivnosti inhibicije receptora P2X3 jedinjenja iz ovog pronalaska, predmetni pronalazak se odnosi na postupak za upotrebu jedinjenja iz ovog pronalaska i njihovih kompozicija za lečenje bola, groznice i upale različitih stanja obuhvatajući reumatsku groznicu, simptome povezane sa gripom ili drugim virusnim infekcijama, prehladu, bol u križima i vratu, dismenoreju, glavobolju, migrenu (akutni i profilaktički tretman), zubobolju, uganuća, miozitis, neuralgiju, sinovitis, artritis, obuhvatajući reumatoidni artritis, juvenilni reumatoidni artritis, degenerativne bolesti zglobova (osteoartritis), akutni giht i ankilozirajući spondilitis, sindrome akutnog, subakutnog i hroničnog mišićno-skeletnog bola kao što su burzitis, opekotine, povrede i bol nakon hirurških i stomatoloških procedura (post-operativni bol), kao i preventivno lečenje hirurškog bola. Bol može biti blagi bol, umereni bol, jak bol,
1
mišićno-skeletni bol, složeni regionalni sindrom bola, neuropatski bol, bol u leđima, poput visceralnog bola, obuhvatajući akutni visceralni bol, neuropatije, akutne traume, stanja bola izazvana hemoterapijom, stanja polineuropatije (poput dijabetičke periferne neuropatije i/ili neuropatije izazvane hemoterapijom), stanja bolova kod autonomne neuropatije, lezije perifernog nervnog sistema (PNS) ili lezije centralnog nervnog sistema (CNS) ili stanja bolova u vezi sa bolestima, poliradikulopatije cervikalnog, lumbalnog ili tipa išijasa, sindrom kaude ekvine, sindrom piriformisa, paraplegija, kvadriplegija, stanja bola koja se odnose na različita stanja polineuritisa u temelju različitih infekcija, hemijske povrede, izlaganje zračenju, osnovna bolest ili stanja nedostataka (kao što su beriberi, nedostatak vitamina, hipotiroidizam, porfirija, rak, HIV, autoimune bolesti kao što su multipla skleroza i povreda kičmene moždine, fibromijalgija, povreda nerva, ishemija, neurodegeneracija, moždani udar, bol nakon moždanog udara, inflamatorni poremećaji, ezofagitis, gastroeozofagalni refluksni poremećaj (GERD), sindrom iritabilnog creva, inflamatorna bolest creva, prekomerna aktivnost bešike, karlična preosetljivost, urinarna inkontinencija, cistitis, bol u stomaku, čir na dvanaestopalačnom crevu, bol u mišićima, bol zbog kolika i preneseni bol. Predmetni pronalazak se odnosi na postupak za upotrebu jedinjenja iz ovog pronalaska i njihovih kompozicija za lečenje hemofilne artropatije i Parkinsonove bolesti.
[1748] Poželjna realizacija ovog pronalaska se odnosi na postupak za upotrebu jedinjenja iz ovog pronalaska i njihovih kompozicija, za lečenje ginekološke bolesti, po mogućnosti dismenoreje, dispareunije ili endometrioze, bola povezanog sa endometriozom ili drugih simptoma povezanih sa endometriozom, pri čemu su navedeni simptomi naročito dismenoreja, dispareunija, disurija ili dishezija.
[1749] Sledeća poželjna realizacija ovog pronalaska se odnosi na postupak za upotrebu jedinjenja iz ovog pronalaska i njihovih kompozicija, za lečenje bolesti urinarnog trakta, naročito prekomerno aktivne bešike ili cistitisa, poželjno intersticijskog cistitisa.
[1750] Sledeća poželjna realizacija ovog pronalaska se odnosi na postupak za upotrebu jedinjenja iz ovog pronalaska i njihovih kompozicija, za lečenje respiratornog poremećaja, po mogućnosti kašlja, naročito hroničnog kašlja.
1
[1751] Sledeća poželjna realizacija ovog pronalaska se odnosi na postupak za upotrebu jedinjenja iz ovog pronalaska i njihovih kompozicija, za lečenje artritisa, po mogućnosti reumatoidnog artritisa i ankilozirajućeg spondilitisa.
[1752] Ovi poremećaji su dobro okarakterisani kod ljudi, ali postoje i sa sličnom etiologijom kod drugih sisara, i mogu se lečiti administracijom farmaceutskih kompozicija iz ovog pronalaska.
[1753] Termin "lečenje" ili "tretman", kako je navedeno u ovom dokumentu, koristi se uobičajeno, na primer, upravljanje ili nega subjekta u svrhu borbe, ublažavanja, smanjenja, olakšavanja, poboljšanja stanja, bolesti ili poremećaja kao što je ginekološki bolest, bolest urinarnog trakta, respiratorni poremećaj ili artritis.
Doza i administracija
[1754] Na osnovu standardnih laboratorijskih tehnika poznatih za procenu jedinjenja korisnih za lečenje poremećaja i/ili bolesti koja su posredovana P2X3 receptorom, standardnim testovima toksičnosti i standardnim farmakološkim testovima za određivanje lečenja gore navedenih stanja u sisara, i upoređivanjem ovih rezultata sa rezultatima poznatih lekova koji se koriste za lečenje ovih stanja, efikasna doza jedinjenja ovog pronalaska može se lako odrediti za lečenje svake željene indikacije. Količina aktivnog sastojka koji se daje u lečenju jednog od ovih stanja može se široko razlikovati u zavisnosti od određenog jedinjenja i dozne jedinice koja se koristi, načina primene, perioda lečenja, starosti i pola pacijenta koji se leči, i prirode i obima lečenog stanja.
[1755] Ukupna količina aktivnog sastojka koji se daje obično će se kretati od oko 0.001 mg/kg do oko 200 mg/kg telesne težine dnevno, po mogućnosti od oko 0.01 mg/kg do oko 20 mg/kg telesne težine dnevno. Poželjna primena jedinjenja iz ovog pronalaska obuhvata, ali nije ograničena na 0.1 mg/kg do oko 10 mg/kg telesne težine dnevno. Klinički korisni rasponi doziranja kretaće se od jednog do tri puta dnevno do doziranja jednom u četiri nedelje. Pored toga, "period odmora od leka" u kom se pacijentu ne lek kroz određeni vremenski period, može biti koristan za ukupnu ravnotežu između farmakološkog efekta i podnošljivosti. Jedinična doza može sadržati od oko 0.5 mg do oko 1500 mg aktivnog sastojka, i može se primenjivati jedan ili više puta dnevno ili manje od jednom dnevno. Poželjna oralna jedinična doza za primenu jedinjenja iz ovog pronalaska obuhvata, ali nije ograničena na 0.1 mg/kg do oko 10
1
mg/kg telesne težine jedan do tri puta dnevno do jednom nedeljno. Prosečna dnevna doza za davanje injekcijama, obuhvatajući intravenske, intramuskularne, potkožne i parenteralne injekcije, i upotreba infuzionih tehnika biće poželjno od 0.01 do 200 mg/kg ukupne telesne težine. Prosečni dnevni rektalni režim doziranja po mogućnosti će biti od 0.01 do 200 mg/kg ukupne telesne težine. Prosečni dnevni režim vaginalnog doziranja po mogućnosti će biti od 0.01 do 200 mg/kg ukupne telesne težine. Prosečni dnevni režim topikalnog doziranja će poželjno biti od 0.1 do 200 mg primenjivan između jednog i četiri puta dnevno. Poželjno je da transdermalna koncentracija bude potrebna za održavanje dnevne doze od 0.01 do 200 mg/kg. Prosečni dnevni režim doziranja inhalacijom biće poželjno od 0.01 do 100 mg/kg ukupne telesne težine.
[1756] Naravno, specifični inicijalni i kontinuirani režim doziranja za svakog pacijenta variraće u zavisnosti od prirode i težine stanja koje određuje lekar dijagnostičar, aktivnosti određenog jedinjenja koje se koristi, starosti i opštem stanju pacijenta, vremenu primene, načinu primene, brzini izlučivanja leka, kombinaciji lekova i slično. Željeni način lečenja i broj doza jedinjenja iz predmetnog pronalaska ili njegove farmaceutski prihvatljive soli ili estra ili njihove smeše mogu da utvrde stručnjaci u praksi koristeći konvencionalne testove lečenja.
[1757] Po mogućnosti su bolesti lečene pomenutim postupkom ginekološki poremećaji, još poželjnije dismenoreja, dispareunija ili endometrioza, bol povezan sa endometriozom ili drugi simptomi povezani sa endometriozom, pri čemu su navedeni simptomi naročito dismenoreja, dispareunija, disurija ili dishezija. Sledeće bolesti koje se mogu lečiti navedenom metodom su osteoartritis, dijabetična neuropatija, sindrom pečenja usta, gastroezofagealni refluks, poremećaji migrene, hronični kašalj, astma, pruritus, bolest iritabilnog creva, prekomerna aktivnost mokraćne bešike, hiperplazija prostate, intersticijski cistitis.
[1758] Poželjno je da postupak za lečenje gore pomenutih bolesti nije ograničen na lečenje pomenute bolesti, već takođe obuhvata i lečenje bola povezanog sa navedenim bolestima.
[1759] Jedinjenja iz ovog pronalaska mogu se posebno koristiti u terapiji i prevenciji, tj. profilaksi, genitourinarnih, gastrointestinalnih, respiratornih ili bolesti povezanih sa bolom, stanjem ili poremećajem..
1
[1760] Metode ispitivanja određenog farmakološkog ili farmaceutskog svojstva dobro su poznate stručnjacima u ovoj oblasti.
[1761] Ovde opisani primeri eksperimentalnih ispitivanja služe za ilustraciju ovog pronalaska i pronalazak nije ograničen na date primere.
Biološka ispitivanja
[1762] Primeri su testirani u odabranim biološkim testovima jedan ili više puta. Ako nije drugačije naznačeno, kada se testiraju više puta, podaci se prikazuju ili kao prosečne vrednosti ili kao srednje vrednosti, gde
prosečna vrednost, koja se naziva i aritmetička srednja vrednost, predstavlja zbir dobijenih vrednosti podeljen brojem testiranih puta, i
srednja vrednost predstavlja srednji broj grupe vrednosti kada je rangirana u rastućem ili opadajućem redosledu. Ako je broj vrednosti u grupi podataka neparan, medijana je srednja vrednost. Ako je broj vrednosti u grupi podataka paran, medijana je aritmetička sredina dve srednje vrednosti.
[1763] Primeri su sintetizovani jedan ili više puta. Kada se sintetišu više puta, podaci iz bioloških testova predstavljaju prosečne vrednosti ili srednje vrednosti izračunate pomoću grupa podataka dobijenih ispitivanjem jedne ili više sintetičkih šarži.
Merenje unutarćelijskog kalcijuma za procenu aktivnosti antagonista na humanim P2X3 i humanim P2X2/3 receptorima
[1764] Čitač fluorescentnih ploča za snimanje (FLEX/FLIPR stanica; kompanija Molecular Devices) korišćen je za praćenje nivoa unutarćelijskog kalcijuma koristeći kalcijum-helirajuću boju Fluo-4 (molekularne sonde). Talasne dužine pobude i emisije koje se koriste za praćenje fluorescencije bile su 470-495 nm, odnosno 515-575 nm. Ćelije koje eksprimiraju purinergičke receptore P2X3 (ljudski) ili P2X2/3 (ljudski) postavljene su u gustini od 15,000 ćelija/bunariću u kolagenom obložene ploče sa 384-bunarića približno 20 sati pre početka ispitivanja. Na dan testa, dodato je 20 µl pufera (Henkov balansirani rastvor soli, 20 mM HEPES, 0.5 mM CaCl2, 0.5 mM MgCl2, 0.1% BSA, 5 mM probenecid, 10mM D-glukoza monohidrat, 2µM Fluo-4, i 5 jedinica/mL, heksokinaza, pH=7.4) i ćelije su bojene 90 min na 37°C. Supernatant boje je uklonjen i zamenjen sa 45µl probenecid pufera (Henkov balansirani rastvor soli, 20 mM HEPES, 0.5 mM CaCl2, 0.5 mM MgCl2, 0.1% BSA, 5 mM probenecid, 10 mM D-glukoza
2
monohidrat, pH=7.4). Testirano jedinjenje dodato je u zapremini od 5 µl i ostavljeno da se inkubira tokom 30 minuta na 37°C. Konačna koncentracija DMSO u testu je 1%. Dodat je agonist, α,B-Me-ATP, u zapremini od 20µl u koncentraciji koja predstavlja vrednost EC80. Fluorescencija je izmerena u intervalu od 90 sekundi u intervalima od 2 sekunde i analizirana na temelju povećanja vršnih relativnih fluorescentnih jedinica (RFU) u poređenju sa bazalnom fluorescencijom. Vršna fluorescencija je korišćena za određivanje odgovora na agonist dobijen pri svakoj koncentraciji testiranog jedinjenja sledećom jednačinom:
% Odgovora = 100* (RFU(testirano jedinjenje)– RFU(kontrola)/(RFU(DMSO)– RFU(kontrola)
[1765] Primeri su testirani u triplikatu po ploči i srednje vrednosti su ucrtane u Excel XLFit za određivanje IC50vrednosti na ljudskim P2X3 i ljudskim P2X2/3 receptorima, procenta maksimalne inhibicije i Hill koeficijenata.
21
22
2
24
2
2
2
2
2
1
2
Testovi rastvorljivosti
[1766] Rastvorljivost lekovite supstance u vodi je važan fizičko-hemijski parametar koji ima značajnu ulogu u različitim fizičkim i biološkim procesima. In vivo, neadekvatna rastvorljivost željene doze rezultira nepotpunom apsorpcijom oralno primenjenih lekova i uzrokuje nisku oralnu bioraspoloživost. Podaci o rastvorljivosti koriste se za procenu parametara apsorpcije, raspodele, metabolizma i eliminacije i za razvoj formulacija za sigurnosne testove, pretkliničku i ranu kliničku upotrebu.
Određivanje rastvorljivosti ispitnog jedinjenja u vodi (100 mmol u DMSO)
[1767] Test je izveden u formatu ploče sa 96 bunarića. Svaki bunarić je ispunjena sa pojedinačnim jedinjenjem.
[1768] Svi koraci pipetiranja izvedeni su korišćenjem robotske platforme.
4
[1769] 100 µl 10 mmolarnog rastvora ispitnog jedinjenja u DMSO koncentrovano je vakuumskim uparavanjem i rastvoreno u 10 µl DMSO da bi se dobio 100 mmolarni rastvor DMSO. Dodato je 990 µl 0.1 M fosfatnog pufera pH 6.5. Sadržaj DMSO iznosi 1%. Multi titarska ploča je stavljena na mućkalicu i mešana 24 sata na sobnoj temperaturi. 150 µl suspenzije je prebačeno na pločicu za filtriranje. Posle filtracije pomoću vakuumskog kolektora, filtrat je razblažen 1:400 i 1:8000. Druga mikro titarska ploča sa 20 µl 10 mM rastvora ispitnog jedinjenja u DMSO služila je za kalibraciju. Dve koncentracije (0.005 µM i 0.0025 µM) su pripremljene razblaživanjem u DMSO / vodi 1:1 i korišćene za kalibraciju. Filtrat i kalibracione ploče su kvantifikovani pomoću HPLC-MS/MS.
[1770] Hemikalije:
Priprema 0.1 M fosfatnog pufera pH 6.5:
61.86 g NaCl i 39.54 mg KH2PO4rastvoreni su u vodi i napunjeni do 1 l. Smeša je razblažena 1:10 sa vodom i pH je podešen na 6.5 sa NaOH.
Materijali: Millipore MultiScreenHTS-HV ploča 0.45 µm
[1771] Hromatografski uslovi su bili sledeći:
[1772] Područja ubrizgavanja uzoraka i kalibracije određena su upotrebom masene spektrometrije (AB Sciex Triple Quad 6500) softvera (AB SCIEX: Discovery Quant 2.1.3. i Analyst 1.6.1). Vrednost rastvorljivosti (u mg/l) izračunata je iz krive uzorka i kalibracione krive.
Test rastvorljivosti mućkanjem boce u ravnoteži
[1773] Termodinamička rastvorljivost određena je metodom mućkanjem boce u ravnoteži [Literatura: Edward H. Kerns i Li Di (2008) Solubility Methods in: Drug-like Properties: Concepts, Structure Design i Methods, p276-286. Burlington, MA: Academic Press].
[1774] Pripremljen je zasićeni rastvor ispitnog jedinjenja u 0.1 M fosfatnom puferu (pH 6.5) i rastvor je mešan tokom 24 sata da bi se postigla ravnoteža. Rastvor je centrifugiran da se ukloni ne rastvorena frakcija i koncentracija jedinjenja u rastvoru je određena HPLC-UV korišćenjem standardne kalibracione krive.
[1775] Da bi se pripremio uzorak, odmereno je 1.5 mg čvrstog jedinjenja u staklenoj bočici od 4 ml. Dodan je 1 ml 0.1 M fosfatnog pufera (pH 6.5). Suspenzija je stavljena na mešalicu i mešana 24 sata na sobnoj temperaturi. Rastvor je potom centrifugiran. Da bi se uzorak pripremio za standardnu kalibraciju, 0.6 mg čvrstog uzorka rastvoreno je u 19 ml acetonitrila /vode 1:1. Posle sonifikacije, rastvor je napunjen sa acetonitrilom/vodom 1:1 do 20 ml.
[1776] Uzorak i standardi su kvantifikovani pomoću HPLC uz UV detekciju. Za svaki uzorak napravljene su dve zapremine injekcije (5 i 50 µl) u tri primerka. Za standard su napravljene tri zapremine injekcije (5 µl, 10 µl i 20 µl).
Hemikalije
[1777] Priprema 0.1 M fosfatnog pufera pH 6.5:
61.86 g NaCl i 39.54 mg KH2PO4rastvoreni su u vodi i napunjeni do 1 l. Smeša je razblažena 1:10 sa vodom i pH je podešen na 6.5 sa NaOH.
[1778] Hromatografski uslovi su bili sledeći:
[1779] Područja ubrizgavanja uzoraka i standardne injekcije kao i proračun vrednosti rastvorljivosti (u mg/l) određeni su korišćenjem HPLC softvera (Waters Empower 2 FR).
Dvosmerni test permeabilnosti ćelija Caco-2
[1780] Caco-2 ćelije (nabavljene od DSMZ Braunschweig, Nemačka) zasejane su pri gustini od 4.5 x 10<4>ćelija po bunariću na insert pločama sa 24 bunarića, 0.4 µm veličina pora, i gajene su tokom 15 dana u modifikovanom Dulbecco Eagle medijumu dopunjenom sa 10% fetalnog goveđeg seruma, 1% GlutaMAX (100x, nabavljen od GIBCO), 100 U/ml penicilin, 100µg/ml streptomicin (nabavljen od GIBCO) i 1% ne-esencijalnih aminokiselina (100 x). Ćelije su održavane na 37 °C u vlažnoj atmosferi sa 5% CO2. Medijum se menjao svaka 2-3 dana. Pre pokretanja testa permeabilnosti, medijum za kulturu zamenjen je sa hepes-karbonatnim transportnim puferom bez seruma (pH 7.2). Testirana jedinjenja su rastvorena u DMSO i dodata u donatorsku komoru koja predstavlja ili apikalni ili bazolateralni odeljak u konačnoj koncentraciji od 2 µM. Pre i posle 2h inkubacije na 37 °C uzeti su uzorci iz oba odeljka (donatorska i prijemna komora). Analiza koncentracija jedinjenja je urađena posle taloženja sa metanolom. Analiza je izvršena tečnom hromatografijom pod visokim pritiskom i tandemskim spektrometrijskim masenim detektorom koristeći sistem tečne hromatografije Agilent 1200 i AB Sciex API4000 trostruki kvadrupolni maseni spektrometar primenom parametara koji su optimizovani za postizanje maksimalnog intenziteta signala odgovarajućeg ispitivanog jedinjenja. Permeabilnost (Papp) je izračunata u apikalnom prema bazolateralnom pravcu (A → B) i bazolateralnom prema apikalnom pravcu (B → A). Prividna permeabilnost izračunata je pomoću sledeće jednačine: Papp= (Vr/Po)·(1/S)·(P2/t) gde Vrje zapremina medija u prijemnoj komori; Poje izmerena površina vrha ispitivanog jedinjenja u donatorskoj komori pri t = 0 h; S površina monosloja; P2je izmerena površina vrha ispitivanog jedinjenja u akceptorskoj komori posle 2h inkubacije; i t je vreme inkubacije. Odnos izliva bazolateralnog (B) prema apikalnom (A) izračunat je deljenjem PappB-A sa PappA-B.
[1781] Dvosmerni test permeabilnosti ćelija Caco-2 je dobro uspostavljena metoda za predviđanje in vivo apsorpcije lekova preko zidova creva merenjem brzine transporta jedinjenja preko Caco-2 monosloja. Budući da diferencirane Caco-2 ćelije eksprimiraju funkcionalne efluks transportne proteine poput P-gp, one se takođe koriste za identifikaciju jedinjenja sa odgovornosti za izliv. Izliv iz creva može smanjiti sistemske koncentracije oralno doziranog jedinjenja u plazmi utičući na crevnu apsorpciju jedinjenja. Poželjni primeri ovog pronalaska pokazuju permeabilnost Papp A-B >50 nm/s i odnos izliva <5. Poželjniji primeri ovog pronalaska pokazuju permeabilnost Papp A-B >80 nm/s i odnos izliva <2.
Tabela 1: Dvosmerni test permeabilnosti ćelija Caco-2 testiranih jedinjenja
Testovi metaboličke stabilnosti in vitro
[1782] Određivanje in vitro metaboličke stabilnosti u mikrosomima (obuhvatajući izračun klirensa in vivo jetrene krvi (CL) i maksimalne oralne bioraspoloživosti (Fmax))
[1783] In vitro metabolička stabilnost ispitivanih jedinjenja određena je inkubacijom na 1 µM u suspenziji mikrosoma jetre u 100 mM fosfatnom puferu, pH 7.4 (NaH2PO4x H2O Na2HPO4x 2H2O) i kod koncentracije proteina od 0.5 mg/mL na 37° C. Mikrosomi su aktivirani dodavanjem smeše ko-faktora koja sadrži sadrži 8 mM glukoza-6-fosfat, 4 mM MgCl2; 0.5 mM NADP i 1 IU/ml G-6-P-dehidrogenaze u fosfatnom puferu, pH 7.4. Metabolički test je započet ubrzo nakon dodavanja testiranog jedinjenja u inkubaciju u konačnoj zapremini od 1 mL. Organski rastvarač u inkubacijama bio je ograničen na ≤0.01% dimetilsulfoksida (DMSO) i ≤1% acetonitrila. Tokom inkubacije, mikrosomske suspenzije su kontinuirano mućkane na 580 okr/min i uzimani su alikvoti na 2, 8, 16, 30, 45 i 60 min, kojima su odmah dodavane jednake količine hladnog metanola. Uzorci su zamrznuti na - 20 °C preko noći, zatim centrifugirani tokom 15 minuta na 3000 okr/min i supernatant je analiziran sa Agilent 1200 HPLC-sistemom sa LCMS/MS detekcijom.
[1784] Poluvreme raspada ispitivanog jedinjenja je određeno na temelju grafikona koncentracija-vreme. Iz vremena poluraspada (kel: nagib grafikona koncentracija-vreme; vreme poluraspada = ln2 / kel) izračunati su unutrašnji klirensi. Zajedno sa dodatnim parametrima protoka krvi u jetri, specifična masa jetre i sadržajem mikrosomalnih proteina izračunat je jetreni klirens in vivo (CL) i maksimalna oralna bioraspoloživost (Fmax) za različite vrste. Jetreni klirens in vivo (CLkrv) i maksimalna oralna bioraspoloživost (Fmax) izračunati su pomoću sledećih formula: CL'unutarnji [ml/(min*kg)] = kel [1/min] / ((mg protein / zapremina inkubacije [ml]) * fu,inc) * (mg protein / masa jetre [g]) * (specifična masa jetre [g jetre /kg telesne težine]); CLkrv dobro izmešana [L/(h*kg)] = (QH [L/(h*kg)] * fu,krv * CL'unutarnji [L/(h*kg)] ) / (QH [L/(h*kg)] fu,krv * CL'unutarnji [L/(h*kg)]); Fmax = 1-CLkrv / QH i koristeći sledeće vrednosti parametara: Protok krvi u jetri (QH)-1.32 L/h/kg (čovek), 2.1 L/h/kg (pas), 4.2 L/h/kg (rat); specifična masa jetre - 21 g/kg (čovek), 39 g/kg (pas), 32 g/kg (rat); sadržajem mikrosomalnih proteina - 40 mg/g.; fu,inc i fu, krv je uzeta kao 1.
Određivanje in vitro metaboličke stabilnosti u hepatocitima pacova (obuhvatajući izračun klirensa in vivo jetrene krvi (CL))
[1785] Hepatociti od pacova Han Wistar izolovani su metodom perfuzije u 2 koraka. Posle perfuzije, jetra je pažljivo uklonjena iz pacova: kapsula jetre je otvorena i hepatociti su nežno istreseni u Petrijevu posudu sa ledenim Villiamsovim medijumom E (WME). Dobijena ćelijska suspenzija je filtrirana kroz sterilnu gazu u 50 mL epruvetama i centrifugirana na 50 × g tokom 3 minuta na sobnoj temperaturi. Pelet sa ćelijama je ponovno suspendovan u 30 mL WME i centrifugiran kroz Percoll® gradijent 2 puta na 100 × g. Hepatociti su ponovo isprani sa WME i ponovno suspendovani u medijumu koji sadrži 5% FCS. Vijabilnost ćelija je određena isključivanjem tripan plave boje.
[1786] Za metabolički test stabilnosti ćelije jetre su distribuirane u WME koji sadrži 5% FCS u staklenim bočicama sa gustinom od 1.0 × 10<6>vitalnih ćelija/mL. Testirano jedinjenje je dodato do krajnje koncentracije od 1 µM. Tokom inkubacije, suspenzije hepatocita su kontinuirano mućkane na 580 okr/min i uzimani su alikvoti na 2, 8, 16, 30, 45 i 90 min, kojima su odmah dodavane jednake količine hladnog metanola. Uzorci su zamrznuti na -20 °C preko noći, zatim centrifugirani tokom 15 minuta na 3000 okr/min i supernatant je analiziran sa Agilent 1200 HPLC-sistemom sa LCMS/MS detekcijom.
[1787] Poluvreme raspada ispitivanog jedinjenja je određeno na temelju grafikona koncentracija-vreme. Iz vremena poluraspada (kel: nagib grafikona koncentracija-vreme; vreme poluraspada = ln2 / kel) izračunati su unutrašnji klirensi. Zajedno sa dodatnim parametrima protoka krvi u jetri, količini ćelija jetre in vivo i in vitro. Jetreni klirens in vivo (CLkrv) i maksimalna oralna bioraspoloživost (Fmax) su izračunati pomoću sledećih formula: CL'unutarnji [ml/(min*kg)] = kel [1/min] / ((broj ćelija / zapremina inkubacije [ml]) * fu,inc) * (broj ćelija / masa jetre [g]) * (specifična masa jetre [g jetre /kg telesne težine]); CLkrv dobro izmešana [L/(h*kg)] = (QH [L/(h*kg)] * fu,krv * CL'unutarnji [L/(h*kg)] ) / (QH [L/(h*kg)] fu,krv * CL'unutarnji [L/(h*kg)]); Fmax = 1-CLkrv / QH i koristeći sledeće vrednosti parametara: Protok krvi u jetri (QH) - 4.2 L/h/kg rat; specifična masa jetre - 32 g/kg telesne težine pacova; ćelije jetre in vivo- 1.1 x 108 ćelija/g jetre, ćelije jetre in vitro - 1.0 x 106/ml; fu,inc i fu,krv je uzeta kao 1.
Ispitivanje in vitro metaboličke stabilnosti u krio konzervisanim humanim hepatocitima (uključujući proračun hemijskog in vivo klirensa krvi (CL))
[1788] Kriokonzervisani hepatociti (npr. od Celsis InVitroTechnologies) su nakratko odmrznuti, isprani sa 45 mL prethodno zagrejanog in vitro GRO HT medijuma i centrifugirani tokom 5 minuta na 50xg. Pelet s ćelijama je ponovno suspendovan u 5 mL Krebs-Henseleit Buttera (KHB). Vijabilnost ćelija je određena isključivanjem tripan plave boje.
[1789] Za metabolički test stabilnosti ćelije jetre su distribuirane u Williamsovom mediju E (WME) koji sadrži 5% FCS u staklenim bočicama sa gustinom od 0.5 × 10<6>vitalnih ćelija/mL. Testirano jedinjenje je dodato do krajnje koncentracije od 1 µM. Tokom inkubacije, suspenzije hepatocita su kontinuirano mućkane na 580 okr/min i uzimani su alikvoti na 2, 8, 16, 30, 45 i 90 min, kojima su odmah dodavane jednake količine hladnog metanola. Uzorci su zamrznuti
4
na -20 °C preko noći, zatim centrifugirani tokom 15 minuta na 3000 okr/min i supernatant je analiziran sa Agilent 1200 HPLC-sistemom sa LCMS/MS detekcijom.
[1790] Vreme poluraspada ispitivanog jedinjenja je određeno na temelju krive koncentracijavreme. Iz vremena poluraspada (kel: nagib grafikona koncentracija-vreme; vreme poluraspada = ln2 / kel) izračunati su unutrašnji klirensi. Zajedno sa dodatnim parametrima protoka krvi u jetri, količini ćelija jetre in vivo i in vitro. Izračunat je jetreni klirens in vivo (CL) i maksimalna oralna bioraspoloživost (Fmax). Jetreni klirens in vivo (CLkrv) i maksimalna oralna bioraspoloživost (Fmax) su izračunati pomoću sledećih formula: CL'unutarnji [ml/(min*kg)] = kel [1/min] / ((broj ćelija / zapremina inkubacije [ml]) * fu,inc) * (broj ćelija / masa jetre [g]) * (specifična masa jetre [g jetre /kg telesne težine]); CLkrv dobro izmešana [L/(h*kg)] = (QH [L/(h*kg)] * fu,krv * CL'unutarnji [L/(h*kg)] ) / (QH [L/(h*kg)] fu,krv * CL'unutarnji [L/(h*kg)]); Fmax = 1-CLkrv / QH i koristeći sledeće vrednosti parametara: Protok krvi u jetri - 1.32 L/h/kg human; specifična masa jetre - 21 g/kg telesne težine pacova; ćelije jetre in vivo-1.1 x 108 ćelija/g jetre, ćelije jetre in vitro - 1.0 x 106/ml.; fu,inc i fu,krv je uzeta kao 1.
Testovi mikrozoma jetre i stabilnosti hepatocita
[1791] Metabolička nestabilnost je često glavni mehanizam klirensa ksenobiotika koji dovodi do visokog CL i niske bioraspoloživosti, što na kraju može rezultirati kratkim poluvremenom raspada i niskom izloženošću posle oralne primene. Stoga smanjenje osetljivosti na metaboličku razgradnju obično dovodi do povoljnijeg farmakokinetičkog profila. Kada se koriste mikrozomi jetre kao matrica inkubacije glavne faze I metaboličkih reakcija, opisane su tipične oksidoreduktivne reakcije enzima sa citokromom P450 i flavin mono-oksigenazama (FMO) i hidrolitičke reakcije esterazama/amidazama/epoksidhidrolazama. Kada se inkubacija ispitivanog jedinjenja izvodi u hepatocitnoj matrici, pokriveni su svi potencijalni metabolički procesi u jetri (faza I i faza II). Poželjni primeri ovog pronalaska pokazuju metaboličku stabilnost (navedenu kao Fmax) od ≥ 40% Fmax u mikrozomu ljudske jetre, kao i u preparatima hepatocita čoveka i pacova. Poželjniji primeri ovog pronalaska pokazuju metaboličku stabilnost (navedenu kao Fmax) od ≥ 50% Fmax u mikrozomu ljudske jetre kao i u preparatima hepatocita čoveka i pacova.
41
Tabela 2: In vitro vrednosti metaboličke stabilnosti ispitivanih jedinjenja
Test stabilnosti citozola ljudske jetre
[1792] Upotreba citozola ljudske jetre za procenu metaboličke stabilnosti novog kandidata za lek pokazuje efikasno njegovu osetljivost na oksidativnu biotransformaciju posredovanu sa ne-CIP. Ako je jedinjenje jak supstrat aldehid oksidaze ili ksantin oksidaze, metabolički klirens putem ovog puta može dovesti do niske bioraspoloživosti kod ljudi. Kako su oba enzima aktivna u ljudskom citozolu jetre, osetljivost ispitivanih jedinjenja na metabolizam posredovan aldehidom ili ksantin oksidazom može se predvideti i uporediti određivanjem obrtaja testiranog jedinjenja, kao i stvaranjem odgovarajućeg oksidovanog metabolita nakon inkubacije u ljudskom citozolu jetre. Poželjniji primeri ovog pronalaska imaju <15% obrtaja posle 4 sata inkubacije u preparatima citozola ljudske jetre.
[1793] Opis metode: Ljudski citozol jetre (udruženi, >30 muških i ženskih davalaca) inkubiran je sa pojedinačnim ispitivanim jedinjenjima kako bi se uporedio opseg iscrpljivanja ispitivanog jedinjenja i formiranje odgovarajućeg oksidovanog metabolita. Medijum za inkubaciju se sastojao od 50 mM kalijum-fosfatnog pufera (pH 7.4) i 1 mg/mL citozolnog proteina ljudske jetre. Korišćena je zapremina inkubacije od 1000 µL. Testirano jedinjenje je dodato iz matičnog rastvora u acetonitrilu u koncentraciji od 1 ili 10 µM u inkubaciji. Inkubacije su vršene na 37°C. Reakcije su zaustavljene na 0h i 4h nakon inkubacije dodavanjem 100 µL
42
acetonitrila u 250 µL smeše za inkubaciju. Istaloženi proteini su uklonjeni centrifugiranjem na približno 3000 okr/min. Supernatanti su čuvani na približno -20°C dok nisu analizirani. Određivanje iscrpljivanja ispitivanog jedinjenja i formiranje metabolita izvršeno je hromatografskim razdvajanjem (Aquity BEH300 C4 50x2.1mm, 1.7 µm, gradijent: 10 mM amonijum acetat/ acetonitril) i istovremenom UV i masenom spektrometrijskom detekcijom pomoću Accela UPLC pumpe i UV detektora povezanog sa LTQ-FT masenim spektrometrom (Thermo Fisher Scientific, Bremen, Nemačka).
[1794] Analiza podataka: osiromašenje testiranog jedinjenja i stvaranje odgovarajućih metabolita utvrđeni su smanjenjem ili povećanjem odgovarajuće površine pika na hromatogramu nakon UV detekcije na približno 300 nm 4 sata posle inkubacije u poređenju sa onim posle 0 sati nakon inkubacije. Identitet analita ispod pikova potvrđen je sa LC-MS/MS.
Tabela 3: Stabilnost ispitnog jedinjenja u ljudskom citozolu jetre
Testovi CYP inhibicije i pred inkubacione CYP inhibicije
[1795] Pokazalo se da je upotreba in vitro testova za procenu potencijala inhibicije novih kandidata za lekove ka metabolizmu posredovanom sa CYP efikasna kao deo strategije za smanjenje šansi za interakcije lekova sa lekovima koji se daju istovremeno. Utvrđena je inhibitorna snaga ispitivanog jedinjenja prema 5 izoformi humanog citokroma P450 (CYP1A2, 2C8, 2C9, 2D6, i 3A4). Poželjniji primeri iz ovog pronalaska imaju CYP inhibiciju IC50≥ 10 µM.
[1796] Za CYP3A4 vremenski zavisni inhibitorni potencijal takođe je testiran primenom 30 minuta vremena pred inkubacije ispitivanog jedinjenja u metabolički aktivnom sistemu
4
inkubacije. Ako se primeti vremenski zavisna inhibicija CYP3A4, ovo je nagoveštaj nepovratnog mehanizma aktivnosti inhibicije CYP3A4 ispitivanog jedinjenja. Poželjniji primeri iz ovog pronalaska imaju pred inkubacionu inhibiciju CYP IC50≥ 20 µM.
Opis metode testa inhibicije CYP
[1797] Mikrozomi ljudske jetre (udruženi,> 30 muških i ženskih davalaca) inkubirani su sa pojedinačnim selektivnim standardnim sondama CYP izoforme (fenacetin za CYP1A2, amodikin za CYP2C8, diklofenak za CYP2C9, dekstrometorfan za CYP2D6 i midazolam za CYP3A4) u odsustvu i prisustvu rastućih koncentracija ispitivanog jedinjenja kako bi se uporedio stepen stvaranja određenog metabolita. Pored toga, komplet za inkubaciju u odsustvu testiranog jedinjenja je korišćen kao negativna kontrola. Dalje, inhibitorna snaga standardnih inhibitora bila je uključena kao pozitivna kontrola (fluvoksamin za CYP1A2, montelukast za CYP2C8, sulfafenazol za CYP2C9, fluoksetin za CYP2D6, ketokonazol za CYP3A4 i mibefradil za CYP3A4-preinkubaciju). Uslovi inkubacije (koncentracija proteina i supstrata sonde, vreme inkubacije) su optimizovani s obzirom na linearnost i potrošnju metabolita. Medijum za inkubaciju se sastojao od 50 mM kalijum-fosfatnog pufera (pH 7.4) koji sadrži 1 mM EDTA, NADPH sistem za regeneraciju (1 mM NADP, 5 mM glukoza 6-fosfat, glukoza 6-fosfat dehidrogenazu (1.5 U/mL). Sekvencijalna razblaženja i inkubacije su izvedene na radnoj uređaju Genesis Workstation (Tecan, Crailsheim, FRG) u pločama sa 96-bunarića na 37 °C. Korišćena je konačna zapremina za inkubaciju od 200 µL. Reakcije su zaustavljene dodavanjem 100 µL acetonitrila koji sadrži odgovarajući unutrašnji standard. Istaloženi proteini su uklonjeni centrifugiranjem ploče sa bunarićima, supernatanti su kombinovani i analize su izvršene sa LC-MS/MS. LC-MS/MS kvantifikacija metabolita paracetamol (CYP1A2), desetilamodiakin (CYP2C8), 4-hidroksidiklofenak (CYP2C9), dekstrorfan (CYP2D6), i 1-hidroksimidazolam (CYP3A4) je izvedena sa sistemom PE SCIEX API 3000 LC/MS/MS (Applied Biosystems, MDS Sciex, Concord, Ontario, Kanada).
[1798] Analiza podataka: Aktivnosti posredovane sa CYP u prisustvu inhibitora izražene su u procentima od odgovarajućih kontrolnih vrednosti. Kriva sigmoidnog-oblika je opremljena sa podacima, a parametar inhibicije enzima IC50je izračunat korišćenjem nelinearne regresivne analize najmanjih kvadrata grafikona od procenta kontrolne aktivnosti u odnosu na koncentraciju testiranog inhibitora.
44
Tabela 4: Inhibitorni efekat ispitivanih jedinjenja na enzime CYP
Analiza elektrofiziologije hERG kanala sa patch-stezaljkom
[1799] Neispravnost rada srčanih jonskih kanala može, u nekim slučajevima, dovesti do srčanih aritmija. Stoga se preporučuje ispitivanje uticaja jedinjenja na srčane jonske kanale ili ili je obavezno (hERG) prema smernicama bezbednosne farmakologije. Kalijumski kanal hERG je najistaknutija meta za QT-produžavanje<2,3>izazvano lekovima, neželjena nuspojava koja može dovesti do aritmija tipa torsade de pointes opasnih po život.
[1800] Cilj ovog ispitivanja bio je da sa proceni da li ispitivano jedinjenje ima unutarnji efekat na hERG K<+>struju u stabilno transfekovanim HEK293 ćelijama. Testirano jedinjenje je ispitivano in vitro u koncentracijama od 0.1, 1 i 10 µmol/L (približno 5-6 minuta po koncentraciji).
<1>The ICH Steering Committee, Ne-klinička procena potencijala za odloženu ventrikularnu repolarizaciju (produženje QT intervala) od strane humanih farmaceutskih proizvoda, S7B, 10 Jun 2004
<2>Roden, DM., New England Journal of Medicine, 35010; 2004: 1013-1022.
<3>Netzer, R., Ebneth, A., Bischoff, U., Pongs, O., Drug Discovery Today, 2001, 6, 78-84.
4
[1801] Tehnika stezanja na napon celih ćelija (automatizovani 8-kanalni sistem: Patchliner, Nanion, Nemačka) korišćena je sa softverom PatchControlHT (Nanion) za kontrolu sistema Patchliner i za rukovanje prikupljanjem i analizom podataka. Kontrola stezanja na napon obezbeđeno je pomoću dva EPC-10 quadro pojačala pod kontrolom softvera PatchMasterPro (oba: HEKA Elektronik, Lambrecht, Nemačka) i sa NPC-16 sa čipovima srednjeg otpora (∼2 MW) (Nanion) koji služe kao ravan supstrat na sobnoj temperaturi. Unutrašnje repne struje posredovane hERG-om izazvane su hiperpolarizacionim naponskim koracima od 20 mV do -120 mV (trajanje 500 ms); potencijal držanja bio je -80 mV, potencijal aktivacije bio je 20 mV (trajanje 1000 ms), protokol stezanja se ponavljao svakih 12 s. Kompozicija vanćelijskog rastvora (u mmol/L): NaCl 140, KCl 4, CaCl22, MgCl21, glukoza 5, HEPES 10, pH 7.4 (NaOH); Kompozicija unutarćelijskog rastvora (u mmol/L): NaCl 10, KCl 50, KF 60, EGTA 20, HEPES 10, pH 7.2 (KOH). Efekti ispitivanog jedinjenja upoređivani su sa kontrolnim vrednostima proleka (tj. nije bilo prisutnog ispitivanog jedinjenja) i onima koje je indukovala pozitivna kontrola E-4031, snažni i selektivni blokator hERG K+ kanala (Sanguinetti MC, Jurkiewicz NK. Two components of cardiac delayed rectifier K+ current. Differential sensitivity to block by class III antiarrhythmic agents. J Gen Physiol 1990;96:195-215).
[1802] Izlaganje ćelija HEK293, stabilno transfektovanih sa hERG K<+>kanalom na testirano jedinjenje povezano je sa zavisnom o koncentraciji inhibicijom hERG-posredovane amplitude repne struje. Koncentracija (µM) testiranog jedinjenja koja je dostigla polu-maksimalne inhibitorne koncentracije (IC50) je korišćena da proceni da li testirano jedinjenje ima suštinski uticaj na hERG K+ struju. Poželjniji primeri iz ovog pronalaska imaju hERG IC50> 5µM.
CFA model pacova in vivo
[1803] Korišćeni su muški pacovi Sprague Dawley. Mehanička hiperalgezija je indukovana ubrizgavanjem 25 µl kompletnog Freundovog adjuvanta (CFA) u gazeću površinu jedne zadnje šape. Mehanička hiperalgezija je merena pomoću aparata za merenje pritiska (Ugo Basile, Gemonio, Italija). Ukratko, linearno rastući pritisak primenjivan je na površinu od ∼ 50 mm<2>gazeće strane zadnje šape sve dok nije primećen odgovor u ponašanju (povlačenje šape) ili sve dok pritisak nije dostigao 1000 gf. Pritisak na koji je nastupio odgovor u ponašanju zabeležen je kao „prag povlačenja šape“ (PWT). I CFA-ubrizgani i kontralateralni PWT su određeni za svakog pacova, u svakoj tretiranoj grupi i u svakoj vremenskoj tački studija. Ispitivanje mehaničke hiperalgezije izvršeno je pre ubrizgavanja CFA, 22 sata posle CFA tretmana (osnovno stanje pre leka) i 2, 4 i 6 sati posle doziranja jedinjenja. Jedinjenja su dozirana 24
4
sata posle ubrizgavanja CFA. Podaci su izraženi kao srednji PWT za svaku tretiranu grupu i u svakoj vremenskoj tački. Podaci su analizirani izvođenjem ponovljenih merenja sa dvosmernom ANOVA (vreme x tretman). Planirano poređenje sredstava (svako u odnosu na nosač) izvršeno je korišćenjem Dunnettovog post hoc testa, pod uslovom da je otkriven glavni efekat. Za vrednosti p manje od 0.05, smatralo se da su rezultati statistički značajni.
[1804] Pretklinički modeli in vivo efikasnosti, kao što je CFA in vivo model pacova, koriste se u otkrivanju lekova da bi se procenio odgovor na efikasnost i pokazalo poželjno trajanje delovanja novih kandidata za lek. Poželjniji primeri ovog pronalaska pokazuju CFA in vivo efikasnost u metodi „Praga povlačenja šape 6 sati nakon leka“ kada se dozira 3 mg/kg p.o.
Tabela 5: Podaci o PVT modelu CFA pacova in vivo za ispitivana jedinjenja
Tabela 6: Podaci o PVT modelu CFA pacova in vivo za Primer 348 pri nižoj dozi
4
Model CFA miša in vivo
[1805] Ženski miševi C57BL/6 korišćeni za procenu efekata antagonista receptora P2X3 na mehaničku hiperalgeziju izazvanu sa CFA. 30 µL kompletnog Freundovog adjuvanta (CFA, 1mg/mL) ubrizgano je u gazeću površinu jedne zadnje šape. Mehanička hiperalgezija merena je pomoću von Freiovih niti. Ukratko, von Freiove niti su korišćene da stimulišu zadnju šapu životinje i mereno je ponašanje u zavisnosti od jačine korišćene von Freiove niti. Jačina niti izražena je u [g] i prag je zabeležen kada je primećen odgovor životinje. Pragovi reakcije na injekcije CFA i kontralateralni odgovor određeni su za svakog miša i u svakoj grupi lečenja 72 sata posle ubrizgavanja CFA. Primena jedinjenja je urađena p.o. b.i.d., počev od jednog sata pre ubrizgavanja CFA. Podaci su izraženi kao srednji prag za svaku tretiranu grupu. Podaci su analizirani izvođenjem jednosmerne ANOVA u grupama sa različitim dozama. Planirano poređenje sredstava (svako u odnosu na nosač) izvršeno je korišćenjem Dunnettovog post hoc testa, pod uslovom da je otkriven glavni efekat. Za vrednosti p manje od 0.05, smatralo se da su rezultati statistički značajni.
Model dispareunije pacova
[1806] Dispareunija je hirurški indukovana kod ženki pacova Sprague Dawley rats by autotransplantacijom na trbušne arterije malih delova roga materice, koji prerastaju u vaskularizovane ciste. Visceromotorni odgovor (VMR) na vaginalnu distenziju korišćen je kod svesnih životinja kao objektivna mera vaginalne osetljivosti.
[1807] Ukratko, životinjama u fazi estrusa hirurški su implantirane biopsije levog roga materice (3 x 3 mm) oko naizmeničnih kaskadnih mezenteričnih arterija koje opskrbljuju tanko crevo (4 komada) i na zid distalnog debelog creva (2 komada). Da bi se izmerio VMR odgovor, 2 žičane elektrode presvučene Teflonom su ušivene u spoljni kosi trbušni mišić i supkutano tunelirane
4
da bi se eksteriorizovale na dnu vrata za budući pristup. Na dan procene VMR, podmazani mali balon (dužine 1 cm) ubačen je u srednji vaginalni kanal. Balonski kateter je pričvršćen za podnožje repa i povezan sa regulatorom volumena / uređajem za podešavanje vremena (infuziona pumpa) za rastezanje balona. Vaginalni balon je naduvan do intenziteta rastezanja (0.05 ml na svakih 20 sekundi) do maksimalne zapremine od 0.8 ml. Elektrode su povezane sa pojačalom (Animal Bio Amp, ADInstruments), i abdominalni elektromiografski signal je zabeležen pomoću sistema za prikupljanje podataka (PowerLab, ADInstruments) za off-line analizu pomoću softvera LabChart verzije 7. Broj kontrakcija trbušnog mišića prebrojan je ručno za svaki korak rastezanja od 0.1 ml, kao indeks vaginalnog bola.
[1808] Primer 11 ili ili nosač dozirani su oralno, dva puta dnevno (b.i.d.), tokom 2 uzastopne nedelje, od 4. nedelje do 5. nedelje nakon implantacije delova roga materice. Primer 11 doziran je 15 mg/kg b.i.d., i nosač (tween 80/0.5% karboksimetilceluloza u vodi (5/95, vol/vol)), doziran je 5 ml/kg b.i.d. VMR/vaginalno testiranje na rastezanje (na leku) i 6 sedmica (bez leka) nakon implantacije, kada su životinje bile u proestrus fazi.
Statistička analiza
[1809] Svi podaci su izraženi kao srednja vrednost ± standardna devijacija ( (s.d.), za broj (n) of izmerenih pacova po grupi. Analize su rađene pokretanjem softvera GraphPad Prism 6.03. Analizirana su dva (2) parametra za svaku životinju: 1) izračunat je kumulativni broj kontrakcija abdomena i ucrtan u odnosu na zapreminu vaginalne distenzije; 2) odgovarajuća površina ispod krive (AUC) izračunata je pomoću GraphPad Prism verzije 6.03. Grubbsov test je izveden na pojedinačnim vrednostima AUC kako bi se otkrila potencijalna odstupanja. Ponovljena merenja sa dvosmernom analizom varijanse (ANOVA) korišćena su za analizu kumulativnog broja kontrakcija (volumen rastezanja x tretman). Planirano poređenje sredstava (usklađena zapremina u odnosu na nosač) izvršeno je korišćenjem Bonferronijevog post hoc testa, pod uslovom da je otkriven glavni efekat Ne-parametarski Mann-Whitnijev t test korišćen je za poređenje AUC srednjih vrednosti u odnosu na nosač. Za vrednosti p manje od 0.05, rezultati su smatrani statistički značajnim.
Rezultati
[1810] U životinja tretiranih nosačem (5 ml/kg oralno, b.i.d.), kumulativni broj kontrakcija abdomena se povećavao u zavisnosti od rastezanja vagine, 5 i 6 sedmica posle implantacije delova roga materice, potvrđujući postojanje vaginalne hiperalgezije. Životinje tretirane sa
4
Primerom 11 (15 mg/kg oralno, b.i.d. tokom 2 sedmice) pokazale su smanjenu vaginalnu hiperalgeziju u poređenju sa životinjama tretiranim nosačem. Zapravo, primećeno je smanjenje kumulativnog broja kontrakcija abdomena kao odgovor na zapreminu distenzije, povezano sa značajnim smanjenjem odgovarajuće vrednosti AUC (videti tabelu dole). Ovo smanjenje vaginalne hiperalgezije primećeno je 5 sedmica nakon implantacije (p <0.05), dok su životinje još uvek bile na tretmanu, i 6 sedmica kasnije (p<0.01), dok su životinje bile bez tretmana lekom.
[1811] Efekat primera 11 na područja ispod krive (AUC, grafikon individualnog kumulativnog broja kontrakcija abdomena u odnosu na zatezanje vagine) 5 i 6 sedmica nakon implantacije delova roga materice. Podaci predstavljaju srednju vrednost ± s.d. (n u svakoj grupi). * p<0.05, ** p< 0.01 različito od grupe sa nosačem.
In vivo farmakokinetika kod pacova, pasa i majmuna
[1812] Za in vivo farmakokinetičke eksperimente, testirana jedinjenja su data muškim pacovima Wistar, psima pasmine bigl ili makaki majmunima intravenozno u dozama od 0.3 do 1 mg/kg i intragastralno u dozama od 0.5 do 10 mg/kg formulisanim u vidu rastvora koji koriste solubilizatore poput PEG400 u dobro podnošljivim količinama.
[1813] Kod pacova su takođe izvršene kasetne primene od do 3 jedinjenja data zajedno u malim dozama.
[1814] Za farmakokinetiku nakon intravenske primene data su jedinjenja muškim pacovima kao i.v. bolus i psima i majmunima kao kratkotrajna infuzija (15 min). Uzorci krvi uzimani su npr. na 2 min, 8 min, 15 min, 30 min, 45 min, 1 h, 2 h, 4 h, 6 h, 8 h i 24 h posle doziranja iz vratne vene (rat) ili potkožne vene (pas, majmun). Za farmakokinetiku nakon intragastralne primene, ispitivana jedinjenja su natašte data intragastralno pacovima, psima i majmunima. Uzimani su uzorci krvi, npr. na 5 min, 15 min, 30 min, 45 min, 1 h, 2 h, 4 h, 6 h, 8 h i 24 h posle doziranja. Krv je sakupljena u Litijum-Heparintubes (Monovetten®, Sarstedt) i centrifugirana tokom 15 minuta na 3000 okr/min. Alikvot od 100 µL iz supernatanta (plazme) je uzet i taložen dodavanjem 400 µL hladnog acetonitrila i zamrznut na -20°C preko noći. Uzorci su zatim odmrznuti i centrifugirani na 3000 okr/min, 4°C tokom 20 minuta. Alikvoti supernatanta su uzeti za analitička ispitivanja korišćenjem Agilent HPLC-sistema sa LCMS/MS detekcijom. Parametri PK izračunati su nekompartmentalnom analizom pomoću softvera za izračunavanje PK, (npr. Phoenix WinNonlin®, Certara USA, Inc.).
[1815] PK parametri izvedeni iz profila koncentracija-vreme posle i.v.: CLplazma (u L/kg/h): Ukupni klirens plazme ispitivanog jedinjenja izračunat dozom (u µg/kg) podeljen površinom ispod krive koncentracije-vreme od t=0h do beskonačnosti (ekstrapolirano) (AUCinf u µg*h/L); CLkrv: Ukupni klirens krvi ispitivanog jedinjenja: CLplazma*Cp/Cb (u L/kg/h) pri čemu je Cp/Cb odnos koncentracija ispitivanog jedinjenja u plazmi i krvi. PK parametri su direktno uzeti ili izračunati iz profila vreme-koncentracija posle i.g.: Cmax: Maksimalna koncentracija u plazmi (direktno uzeta iz profila u mg/L); Cmaxnorm: Cmax podeljen sa primenjenom dozom (u kg/L); Tmax: Vremenska tačka u kojoj je primećen Cmax (u h). Parametri izračunati iz oba, i.v. i i.g. profila koncentracija-vreme: AUCnorm: Površina ispod krive koncentracija-vreme od t = 0h do beskonačnosti (ekstrapolirano) podeljena sa primenjenom dozom (u kg*h/L); AUC(0-tlast)norm: Površina ispod krive koncentracija-vreme od t=0h do poslednje vremenske tačke za koju se koncentracije u plazmi mogu meriti podeljene primenjenom dozom (u kg*h/L); t1/2: terminalni poluživot (u h); F: oralna bioraspoloživost: AUCnorm posle intragastralne primene podeljen sa AUCnorm posle intravenske primene (u %).
[1816] Farmakokinetika opisuje vezu između doze i nevezane koncentracije leka na mestu dejstva i vremenskog toka koncentracije leka u telu. Odlaganje lekova je širok termin koji pokriva sve procese kojima telo obrađuje strane hemikalije (obuhvatajući lekove). To su apsorpcija, distribucija, metabolizam i izlučivanje (ADME).
[1817] Krajnji poluživot (t1/2) posle oralnog i intravenskog doziranja i bioraspoloživost (BA) su važne farmakokinetičke karakteristike lekova. Poželjni primeri ovog pronalaska pokazuju eliminacioni poluživot ≥ 6 sati i bioraspoloživost ≥ 50% kod pasa. Poželjniji primeri ovog pronalaska imaju eliminacioni poluživot ≥ 7 sati i bioraspoloživost ≥ 70% kod pasa.
1
Tabela 7: Farmakokinetičke karakteristike ispitivanih jedinjenja za pse
Ciklofosfamidom-indukovana hiperaktivnost bešike (pacovi)/ Ciklofosfamidomindukovan cistitis (pacovi)
[1818] Cilj ove studije je da se ispita efikasnost antagonista receptora P2X3 na prekomerno aktivnu bešiku, kao i na cistitis kod pacova tretiranih ciklofosfamidom.
[1819] Eksperimentalna postavka prilagođena je prethodnom opisanom protokolu (Lecci A i dr, Br J Pharmacol 130: 331-38, 2000).
[1820] Ukratko, ženke pacova Sprague Daley (∼ 200 g) smeštene su u normalnim uslovima za laboratorijske pacove u ciklusu svetlo: mrak od 12: 12 sati. Testirano jedinjenje se daje oralnim davanjem (30 mg/kg) jedan sat pre primene ciklofosfamida (100 mg/kg) iv injekcijom. Dodatnih 1.5 sata posle primene ciklofosfamid svaki pacov je prebačen u metabolički kavez i učestalost pražnjenja se beleži tokom sledećih 15 sati. Snima se mikcija/po satu i izračunava se AUC tokom faze platoa mikcije (4-10 sati posle prebacivanja u metaboličke kaveze) za svaku životinju sa programom GraphPad Prism 6.
2

Claims (17)

  1. Patentni zahtevi 1. Jedinjenje opšte formule (I):
  2. gde R<1>predstavlja C1-C4-alkil; R<2>predstavlja -(CH2)q-morfolinil supstituisan sa R<c>; R<3>predstavlja C1-C4-alkil; R<c>predstavlja metil; A predstavlja CF3-pirimidinil q predstavlja celi broj 1; ili enantiomer, dijastereomer, racemat, hidrat, solvat, ili njihova so, ili njihova smeša. 2. Jedinjenje prema zahtevu 1 opšte formule (Ia):
  3. 3. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1 do 2, naznačeno time što R<1>predstavlja metil ili etil.
  4. 4. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 2 do 3, naznačeno time što R<3>predstavlja metil.
  5. 5. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1 do 4, naznačeno time što A predstavlja 2-CF3-pirimidin-5-il.
  6. 6. Jedinjenje prema zahtevu 1, naznačeno time što R<2>predstavlja (4-metilmorfolin-2-il)metil.
  7. 7. Jedinjenje prema zahtevu 6, naznačeno time što R<2>predstavlja [(2R)-4-metilmorfolin-2-il]metil ili [(2S)-4-metil-morfolin-2-il]metil
  8. 8. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1 do 6, naznačeno time što R<2>predstavlja [(2R)-4-metilmorfolin-2-il]metil.
  9. 9. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1 do 7, naznačeno time što je 3-(5-etil-1,3-tiazol-2-il)-5-{[(2R)-4-metilmorfolin-2-il]metoksi}-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid; 3-{[(2R)-4-metilmorfolin-2-il]metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]etil}benzamid.
  10. 10. Jedinjenje prema zahtevu 9, naznačeno time što je 3-{[(2R)-4-metilmorfolin-2-il]metoksi}-5-(5-metil-1,3-tiazol-2-il)-N-{(1R)-1-[2-(trifluorometil)-pirimidin-5-il]etil}benzamid.
  11. 11. Farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1 do 10, ili enantiomer, dijastereomer, racemat, hidrat, solvat, njihova farmaceutski prihvatljiva so, ili njihova smeša, i farmaceutski prihvatljiv razblaživač ili nosač.
  12. 12. Upotreba jedinjenja prema bilo kom od zahteva 1 do 10, ili enantiomer, dijastereomer, racemat, hidrat, solvat, ili njihova farmaceutski prihvatljiva so, ili njihova smeša, za pripremu leka za profilaksu ili lečenje bolesti.
  13. 13. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1 do 10, ili enantiomer, dijastereomer, racemat, hidrat, solvat, ili njihova farmaceutski prihvatljiva so, ili njihova smeša, za upotrebu u lečenju bolesti. 4
  14. 14. Jedinjenje za upotrebu prema zahtevu 13, gde je bolest bolest izabrana iz grupe koja obuhvata genitourinarne, gastrointestinalne, respiratorne ili bolesti povezane sa bolom, stanjem ili poremećajem; ginekološke bolesti, obuhvatajući dismenoreju, dispareuniju i endometriozu; bol povezan sa endometriozom; simptome povezane sa endometriozom, pri čemu su navedeni simptomi dismenoreja, dispareunija, disurija ili dishezija; stanja bolesti urinarnog trakta povezana sa opstrukcijom izlaza iz bešike; stanja urinarne inkontinencije (smanjeni kapacitet bešike, povećana učestalost mikcije, urgentna inkontinencija, stresna inkontinencija ili hiperreaktivnost bešike); benigna hipertrofija prostate; hiperplazija prostate; prostatitis; hiperrefleksija detruzora; prekomerno aktivna bešika i simptomi povezani sa prekomerno aktivnom bešikom pri čemu su navedeni simptomi povećana frekvencija mokrenja, nokturija, urinarna hitnost ili urgentna inkontinencija; karlična preosetljivost; uretritis; prostatitis; prostatodinija; cistitis; idiopatska preosetljivost bešike; epilepsija; parcijalni i generalizovani napadi; respiratorni poremećaji, obuhvatajući hronični opstruktivni plućni poremećaj (HOBP), astmu, bronhospazam, hronični kašalj i slično; gastrointestinalni poremećaji, obuhvatajući sindrom iritabilnog creva (IBS), inflamatornu bolest creva (IBD), bilijarnu koliku i druge bilijarne poremećaje, bubrežnu koliku, IBS sa dominantnom dijarejom, gastroezofagealni refluks, gastrointestinalna distenzija, Crohnova bolest; Parkinsonova bolest; Alchajmerova bolest; infarkt miokarda; poremećaji lipida; i bolesti povezane sa bolom odabrane iz grupe koju čine hiperalgezija, alodinija, funkcionalni poremećaji creva (sindrom iritabilnog creva), artritis (osteoartritis, reumatoidni artritis), opekotine, migrena ili klaster glavobolje, povreda nerva, neuritis, neuralgije, trovanje, ishemijska povreda, intersticijski cistitis, traumatska povreda nerva, post-traumatske povrede (obuhvatajući prelome i sportske povrede), neuralgija trigeminusa, neuropatija malih vlakana, dijabetička neuropatija, hronični artritis i srodne neuralgije, HIV i neuropatiju izazvanu lečenjem HIV-a, pruritus.
  15. 15. Jedinjenje za upotrebu prema zahtevu 13, naznačeno time što je bolest povezana sa sindromima bola, koji obuhvataju akutni, hronični, inflamatorni i neuropatski bol.
  16. 16. Jedinjenje za upotrebu prema zahtevu 15, gde je sindrom bola izabran iz grupe inflamatornog bola, hirurškog bola, visceralnog bola, zubnog bola, predmenstrualnog bola, bola povezanog sa endometriozom, centralnog bola, bola zbog sindroma pečenja usta, bola zbog opekotina, bola zbog migrene, klaster glavobolja, bola zbog povrede nerva, bola zbog neuritisa, neuralgija, bola zbog trovanja, bola zbog ishemijske povrede, bola zbog intersticijalnog cistitisa, bola zbog raka, bola zbog virusne, parazitske ili bakterijske infekcije, bola zbog traumatske povrede nerva, bola zbog post-traumatskih povreda (uključujući prelome i sportske povrede), bola zbog trigeminalne neuralgije, bola povezanog sa neuropatijom malih vlakana, bola povezanog sa dijabetičnom neuropatijom, hroničnog bola u donjem delu leđa, fantomskog bola u udovima, sindroma bola u karlici, hroničnog bola u karlici, bola neuroma, kompleksnog regionalnog sindroma bola, bola povezanog sa gastrointestinalnom distenzijom, hroničnog artritičnog bola i srodnih neuralgija, i bola povezanog sa rakom, bola povezanog sa hemoterapijom, HIV-om i neuropatijom izazvanom lečenjem HIV-a; i bola povezanog sa bolestima ili poremećajima odabranim iz grupe koju čine hiperalgezija, alodinija, funkcionalni poremećaji creva (sindrom iritabilnog creva) i artritis (osteoartritis, reumatoidni artritis).
  17. 17. Jedinjenje za upotrebu prema zahtevu 14, naznačeno time što je bolest, bolest izabrana iz grupe ginekoloških bolesti, dismenoreje, dispareunije, endometrioze, bolova povezanih sa endometriozom, simptoma povezanih sa endometriozom, disurije ili dishezije. Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Beograd, Kneginje Ljubice 5
RS20220250A 2014-12-09 2015-12-07 1,3-tiazol-2-il supstituisani benzamidi RS63014B1 (sr)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP14196954 2014-12-09
EP19181710.5A EP3587417B9 (en) 2014-12-09 2015-12-07 1,3-thiazol-2-yl substituted benzamides

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS63014B1 true RS63014B1 (sr) 2022-04-29

Family

ID=52015966

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20211014A RS62227B1 (sr) 2014-12-09 2015-12-07 1,3-tiazol-2-il supstituisani benzamidi
RS20220250A RS63014B1 (sr) 2014-12-09 2015-12-07 1,3-tiazol-2-il supstituisani benzamidi

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20211014A RS62227B1 (sr) 2014-12-09 2015-12-07 1,3-tiazol-2-il supstituisani benzamidi

Country Status (42)

Country Link
US (5) US10174016B2 (sr)
EP (2) EP3230281B1 (sr)
JP (2) JP6544665B2 (sr)
KR (2) KR20230098368A (sr)
CN (2) CN107207507B (sr)
AR (2) AR102948A1 (sr)
AU (1) AU2015359626B2 (sr)
BR (1) BR112017012327B1 (sr)
CA (1) CA2969952A1 (sr)
CL (1) CL2017001488A1 (sr)
CO (1) CO2017005742A2 (sr)
CR (2) CR20210108A (sr)
CU (1) CU24411B1 (sr)
CY (2) CY1124486T1 (sr)
DK (2) DK3230281T3 (sr)
DO (2) DOP2017000137A (sr)
EA (2) EA034273B1 (sr)
EC (1) ECSP17036253A (sr)
ES (2) ES2882952T3 (sr)
HR (2) HRP20220371T1 (sr)
HU (2) HUE058009T2 (sr)
IL (6) IL252665B (sr)
JO (2) JOP20150301B1 (sr)
LT (2) LT3230281T (sr)
MA (2) MA50674B1 (sr)
MX (2) MX377651B (sr)
MY (1) MY192690A (sr)
NI (1) NI201700073A (sr)
NZ (1) NZ761161A (sr)
PE (2) PE20180227A1 (sr)
PH (1) PH12017501079A1 (sr)
PL (2) PL3587417T3 (sr)
PT (2) PT3587417T (sr)
RS (2) RS62227B1 (sr)
SG (2) SG10202012274RA (sr)
SI (2) SI3230281T1 (sr)
SV (1) SV2017005461A (sr)
TN (1) TN2017000244A1 (sr)
TW (2) TWI780562B (sr)
UA (1) UA120382C2 (sr)
UY (1) UY36422A (sr)
WO (1) WO2016091776A1 (sr)

Families Citing this family (33)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP3230281B1 (en) * 2014-12-09 2021-05-26 Bayer Aktiengesellschaft 1,3-thiazol-2-yl substituted benzamides
TWI794171B (zh) 2016-05-11 2023-03-01 美商滬亞生物國際有限公司 Ｈｄａｃ抑制劑與ｐｄ-ｌ１抑制劑之組合治療
TWI808055B (zh) 2016-05-11 2023-07-11 美商滬亞生物國際有限公司 Hdac 抑制劑與 pd-1 抑制劑之組合治療
CN106588785A (zh) * 2016-12-02 2017-04-26 山东吉田香料股份有限公司 一种乙酰基吡嗪的制备方法
US10111883B1 (en) * 2017-09-18 2018-10-30 Bellus Health Cough Inc. Selective P2X3 modulators
HU231206B1 (hu) 2017-12-15 2021-10-28 Richter Gedeon Nyrt. Triazolobenzazepinek
EA202092678A1 (ru) * 2018-05-15 2021-04-12 Байер Акциенгезельшафт 1,3-тиазол-2-ил-замещенные бензамиды для лечения заболеваний, ассоциированных с сенситизацией нервных волокон
EP3793553A1 (en) * 2018-05-15 2021-03-24 Bayer Aktiengesellschaft 1,3-thiazol-2-yl substituted benzamides for the treatment of diseases associated with nerve fiber sensitization
ES2963702T3 (es) 2018-10-05 2024-04-01 Shionogi & Co Medicina para tratar la tos crónica
IL282087B2 (en) * 2018-10-10 2025-11-01 Bellus Health Cough Inc 4-(imidazo[1,2-a]pyridin-3-yl)-benzamide derivatives for treating pruritus
JP7578602B2 (ja) * 2019-02-25 2024-11-06 グラクソスミスクライン、インテレクチュアル、プロパティー、（ナンバー３）、リミテッド Ｐ２ｘ３修飾薬での治療
KR20210149113A (ko) * 2019-04-05 2021-12-08 신젠타 크롭 프로텍션 아게 살충 활성 디아진-아미드 화합물
MX2021012290A (es) * 2019-04-11 2021-11-12 Syngenta Crop Protection Ag Compuestos de diazina-amida activos como pesticidas.
JP7797204B2 (ja) 2019-05-31 2026-01-13 キエシ・フアルマチエウテイチ・ソチエタ・ペル・アチオニ Ｐ２ｘ３阻害剤としてのピリドピリミジン誘導体
CA3139018A1 (en) 2019-05-31 2020-12-03 Chiesi Farmaceutici S.P.A. Amino quinazoline derivatives as p2x3 inhibitors
EP3757103A1 (en) 2019-06-27 2020-12-30 Bayer AG Analogues of 3-(5-methyl-1,3-thiazol-2-yl)-n-{(1r)-1-[2-(trifluoro-methyl)pyrimidin-5-yl]ethyl}benzamide for the treatment of neurogenic diseases
CN113082023B (zh) * 2019-12-23 2024-03-01 武汉朗来科技发展有限公司 P2x3抑制剂和p2x4抑制剂的药物组合及其应用
WO2021238834A1 (zh) * 2020-05-25 2021-12-02 中国医药研究开发中心有限公司 芳甲酰胺类化合物及其制备方法和医药用途
WO2022063205A1 (zh) * 2020-09-24 2022-03-31 中国医药研究开发中心有限公司 芳基甲酰胺类化合物及其制备方法和医药用途
CN114315818B (zh) * 2020-09-30 2026-04-28 武汉人福创新药物研发中心有限公司 苯甲酰胺类化合物及其用途
WO2022112490A1 (en) 2020-11-27 2022-06-02 Chiesi Farmaceutici S.P.A. Amino quinazoline derivatives as p2x3 inhibitors
JP2023550830A (ja) 2020-11-27 2023-12-05 キエシ・フアルマチエウテイチ・ソチエタ・ペル・アチオニ Ｐ２ｘ３阻害剤としての（アザ）キノリン４－アミン誘導体
CA3196335A1 (en) 2020-11-27 2022-06-02 Chiesi Farmaceutici S.P.A. Phthalazine derivatives as p2x3 inhibitors
CN114591317A (zh) * 2020-12-04 2022-06-07 武汉人福创新药物研发中心有限公司 P2x3抑制剂及其用途
WO2022253945A1 (en) 2021-06-04 2022-12-08 Bayer Aktiengesellschaft Pharmaceutical dosage forms comprising 3-(5-methyl-1,3-thiazol-2-yl)-5-[(3r)-tetrahydrofuran-3-yloxy]-n-{(1r)-1-[2-(trifluoromethyl)pyrimidin-5-yl]ethyl}-benzamide
WO2022253943A1 (en) 2021-06-04 2022-12-08 Bayer Aktiengesellschaft Crystalline forms of 3-(5-methyl-1,3-thiazol-2-yl)-5-[(3r)-tetrahydrofuran-3-yloxy]-n-{(1r)-1-[2-(trifluoro-methyl)pyrimidin-5-yl]ethyl}-benzamide
CN116396285A (zh) * 2022-01-04 2023-07-07 上海华汇拓医药科技有限公司 氘代四氢呋喃类化合物制备及其应用
US12024285B1 (en) 2022-03-10 2024-07-02 Skypad Tech, Inc. Modular mobility system including thrusters movably connected to a support structure
CN116891467A (zh) * 2022-03-29 2023-10-17 人福医药集团股份公司 一种p2x3抑制剂化合物及其盐、多晶型和用途
WO2024131948A1 (zh) * 2022-12-22 2024-06-27 人福医药集团股份公司 制备p2x3抑制剂的方法
AR132737A1 (es) 2023-05-22 2025-07-23 Chiesi Farm Spa Proceso e intermedios para la preparación de un inhibidor p2x3
CN117777048B (zh) * 2023-09-25 2024-09-20 上海科利生物医药有限公司 一种手性2-羟甲基吗啉-4-羧酸叔丁酯的制备方法
WO2025140586A1 (zh) * 2023-12-29 2025-07-03 人福医药集团股份公司 一种p2x3受体拮抗剂的固体分散体及其制备工艺

Family Cites Families (30)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MX2007013595A (es) 2005-05-04 2008-01-24 Renovis Inc Compuestos heterociclicos fusionados y composiciones y usos de estos.
EP2038264B1 (en) 2006-06-29 2016-10-26 F.Hoffmann-La Roche Ag Tetrazole-substituted arylamides
CN101528717B (zh) 2006-11-09 2013-04-24 弗·哈夫曼-拉罗切有限公司 噻唑和*唑-取代的芳基酰胺类化合物
US8501933B2 (en) * 2006-11-09 2013-08-06 Roche Palo Alto Llc Thiazole and oxazole-substituted arylamides as P2X3 and P2X2/3 antagonists
EP2136639B1 (en) 2007-04-02 2016-03-09 Evotec AG Pyrid-2-yl fused heterocyclic compounds, and compositions and uses thereof
PT2139334E (pt) 2007-04-17 2013-10-02 Evotec Ag Compostos heterocíclicos fusionados de 2-cianofenilo, e composições e utilizações dos mesmos
US20090099195A1 (en) 2007-05-08 2009-04-16 Astrazeneca Ab Therapeutic Compounds 570
US20090317360A1 (en) * 2007-06-12 2009-12-24 Genelabs Technologies, Inc. Anti-viral inhibitors and methods of use
CA2703915C (en) 2007-10-31 2015-02-24 Merck Sharp & Dohme Corp. P2x3 receptor antagonists for treatment of pain
JP2011502148A (ja) 2007-10-31 2011-01-20 メルク・シャープ・エンド・ドーム・コーポレイション 疼痛の治療用としてのｐ２ｘ３受容体アンタゴニスト
DK2234976T3 (da) 2007-12-17 2013-06-24 Hoffmann La Roche Nye pyrazol-substituerede arylamider
CA2708791C (en) 2007-12-17 2016-06-21 F. Hoffmann-La Roche Ag Imidazole-substituted arylamides and uses thereof as p2x receptor antagonists
WO2009077371A1 (en) 2007-12-17 2009-06-25 F. Hoffmann-La Roche Ag Tetrazole-substituted arylamide derivatives and their use as p2x3 and/or p2x2/3 purinergic receptor antagonists
ES2541662T3 (es) 2007-12-17 2015-07-23 F. Hoffmann-La Roche Ag Derivados arilamida sustituidos con triazol y utilización de los mismos como antagonistas de receptores purinérgicos P2X3 y/o P2X2/3
CA2715835C (en) 2008-02-29 2017-03-21 Renovis, Inc. Amide compounds, compositions and uses thereof
JP5608655B2 (ja) 2008-09-18 2014-10-15 エヴォテック アーゲー Ｐ２ｘ３受容体活性のモジュレーター
MX2011004570A (es) 2008-10-31 2011-06-17 Merck Sharp & Dohme Antagonistas del receptor p2x3 para el tratamiento del dolor.
WO2010069794A1 (en) 2008-12-16 2010-06-24 F. Hoffmann-La Roche Ag Thiadiazole-substituted arylamides
CN102438989B (zh) 2009-06-22 2015-05-27 霍夫曼-拉罗奇有限公司 噁唑酮和吡咯烷酮取代的芳基酰胺
SG177308A1 (en) 2009-06-22 2012-02-28 Hoffmann La Roche Novel biphenyl and phenyl-pyridine amides
AU2011205283B2 (en) 2010-01-13 2014-07-10 Tempero Pharmaceuticals, Inc. Compounds and methods
WO2013009810A1 (en) 2011-07-13 2013-01-17 Tempero Pharmaceuticals, Inc. Methods of treatment
US9562041B2 (en) * 2012-05-16 2017-02-07 Glaxosmithkline Llc Enhancer of zeste homolog 2 inhibitors
CA2884848C (en) 2012-09-28 2017-08-22 Pfizer Inc. Benzamide and heterobenzamide compounds
DK3381917T3 (da) 2013-01-31 2021-10-18 Bellus Health Cough Inc Imidazopyridinforbindelser og anvendelser deraf
US10183937B2 (en) * 2014-12-09 2019-01-22 Bayer Aktiengesellschaft 1,3-thiazol-2-yl substituted benzamides
EP3230281B1 (en) * 2014-12-09 2021-05-26 Bayer Aktiengesellschaft 1,3-thiazol-2-yl substituted benzamides
EA202092678A1 (ru) 2018-05-15 2021-04-12 Байер Акциенгезельшафт 1,3-тиазол-2-ил-замещенные бензамиды для лечения заболеваний, ассоциированных с сенситизацией нервных волокон
EP3793553A1 (en) 2018-05-15 2021-03-24 Bayer Aktiengesellschaft 1,3-thiazol-2-yl substituted benzamides for the treatment of diseases associated with nerve fiber sensitization
EP3757103A1 (en) 2019-06-27 2020-12-30 Bayer AG Analogues of 3-(5-methyl-1,3-thiazol-2-yl)-n-{(1r)-1-[2-(trifluoro-methyl)pyrimidin-5-yl]ethyl}benzamide for the treatment of neurogenic diseases

Also Published As

Publication number Publication date
UA120382C2 (uk) 2019-11-25
SG10202012274RA (en) 2021-01-28
CY1124486T1 (el) 2022-07-22
SI3587417T1 (sl) 2022-04-29
IL252665A0 (en) 2017-08-31
IL252665B (en) 2019-10-31
JOP20230073A1 (ar) 2016-06-09
PH12017501079A1 (en) 2017-10-18
EP3587417B1 (en) 2022-01-05
WO2016091776A1 (en) 2016-06-16
US10174016B2 (en) 2019-01-08
CU20170077A7 (es) 2017-11-07
US10202369B2 (en) 2019-02-12
TWI780562B (zh) 2022-10-11
TN2017000244A1 (en) 2018-10-19
US20180093980A1 (en) 2018-04-05
LT3587417T (lt) 2022-02-10
AU2015359626B2 (en) 2020-07-23
JP6647371B2 (ja) 2020-02-14
JP6544665B2 (ja) 2019-07-17
TW201629053A (zh) 2016-08-16
HUE058009T2 (hu) 2022-06-28
BR112017012327A2 (pt) 2018-02-27
BR112017012327A8 (pt) 2021-02-23
CR20170242A (es) 2018-02-02
EA034273B1 (ru) 2020-01-23
DOP2017000137A (es) 2017-07-31
IL269468A (en) 2019-11-28
AU2015359626A1 (en) 2017-06-29
MX2017007658A (es) 2018-08-01
NZ733108A (en) 2022-03-25
SV2017005461A (es) 2018-04-30
ECSP17036253A (es) 2017-06-30
US20230053411A1 (en) 2023-02-23
RS62227B1 (sr) 2021-09-30
TWI716371B (zh) 2021-01-21
IL269467B (en) 2020-08-31
JP2019059742A (ja) 2019-04-18
CL2017001488A1 (es) 2018-02-23
HRP20220371T1 (hr) 2022-05-13
DOP2018000182A (es) 2018-09-15
HUE055290T2 (hu) 2021-11-29
ES2882952T3 (es) 2021-12-03
MX2020005909A (es) 2021-10-28
BR112017012327B1 (pt) 2023-04-11
US20190185466A1 (en) 2019-06-20
MX387478B (es) 2025-03-18
UY36422A (es) 2016-06-30
CR20210108A (es) 2021-04-27
CN110256418A (zh) 2019-09-20
PL3230281T3 (pl) 2021-12-13
EA201791261A1 (ru) 2017-12-29
NZ761161A (en) 2024-04-26
EA201891120A1 (ru) 2018-10-31
IL269661A (en) 2019-11-28
CN107207507B (zh) 2020-11-06
MX377651B (es) 2025-03-11
EP3587417B9 (en) 2022-03-30
SI3230281T1 (sl) 2021-08-31
IL269467A (en) 2019-11-28
US20200131169A1 (en) 2020-04-30
MA50674A (fr) 2021-03-31
MA41135B1 (fr) 2021-10-29
US20180118731A1 (en) 2018-05-03
IL275183A (en) 2020-07-30
PE20180227A1 (es) 2018-01-31
MA50674B1 (fr) 2022-11-30
HRP20211002T1 (hr) 2021-09-17
PT3230281T (pt) 2021-08-19
CA2969952A1 (en) 2016-06-16
LT3230281T (lt) 2021-07-12
US11142523B2 (en) 2021-10-12
JOP20150301B1 (ar) 2023-09-17
IL269468B (en) 2020-06-30
IL283979B (en) 2022-04-01
KR20230098368A (ko) 2023-07-03
SG11201704717VA (en) 2017-08-30
EA032312B1 (ru) 2019-05-31
AR102948A1 (es) 2017-04-05
IL269661B (en) 2020-07-30
KR20170093203A (ko) 2017-08-14
PE20220253A1 (es) 2022-02-16
EP3230281A1 (en) 2017-10-18
AR119761A2 (es) 2022-01-12
EP3587417A1 (en) 2020-01-01
CU24411B1 (es) 2019-05-03
EP3230281B1 (en) 2021-05-26
NI201700073A (es) 2017-10-24
CN107207507A (zh) 2017-09-26
ES2908822T3 (es) 2022-05-04
DK3587417T3 (da) 2022-03-28
CY1125083T1 (el) 2023-06-09
TW202130637A (zh) 2021-08-16
CO2017005742A2 (es) 2017-09-20
MY192690A (en) 2022-09-01
US10472354B2 (en) 2019-11-12
KR102548799B1 (ko) 2023-06-27
IL283979A (en) 2021-07-29
DK3230281T3 (da) 2021-08-16
IL275183B (en) 2021-06-30
PT3587417T (pt) 2022-03-16
CN110256418B (zh) 2023-01-20
PL3587417T3 (pl) 2022-06-13
JP2017537122A (ja) 2017-12-14

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US11142523B2 (en) 1,3-thiazol-2-yl substituted benzamides
US10183937B2 (en) 1,3-thiazol-2-yl substituted benzamides
BR122021000921B1 (pt) Benzamidas substituídas por 1,3-tiazol-2-il, seu uso, e composição farmacêutica
HK40009971A (en) 1,3-thiazol-2-yl substituted benzamides
HK40009971B (en) 1,3-thiazol-2-yl substituted benzamides
HK1239691B (zh) 1，3‑噻唑‑2‑基取代的苯甲酰胺
HK1239691A1 (zh) 1，3-噻唑-2-基取代的苯甲酰胺