RS64655B1

RS64655B1 - Derivati 2,3-dihidro-1h-pirolo[3,4-c]piridin-1-ona kao hpk1 inhibitori za tretman kancera

Info

Publication number: RS64655B1
Application number: RS20230847A
Authority: RS
Inventors: Rebecca Anne Gallego; Sajiv Krishnan Nair; Robert Steven Kania; Omar Khaled Ahmad; Ted William Johnson; Jamison Bryce Tuttle; Mehran Jalaie; Michele Ann Mctigue; Dahui Zhou; Bel Matthew L Del; Ru Zhou; Mingying He; Anne-Marie Dechert Schmitt
Original assignee: Pfizer
Priority date: 2018-11-15
Filing date: 2019-11-12
Publication date: 2023-10-31
Also published as: US11142525B2; BR112021008991A2; JP7118267B2; DOP2021000088A; CR20210251A; HUE063367T2; ZA202103099B; ES2958948T3; PL3880676T3; PE20211868A1; IL283149A; UY38471A; MX2021005754A; EP3880676A1; LT3880676T; TW202031657A; CL2021001190A1; EP3880676B1; GEP20227434B; DK3880676T3

Description

Opis

Polje pronalaska

[0001] Ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja Formula I, II, ili III i njihove farmaceutski prihvatljive soli, na farmaceutske kompozicije koje uključuju ova jedinjenja i soli i na jedinjenja za upotrebu u postupcima medicinskog tretmana. Sve reference u ovom opisu u vezi sa postupcima medicinskog tretmana treba razumeti i kao reference u vezi sa jedinjenjima iz ovog pronalaska za upotrebu u postupcima medicinskog tretmana a ne kao deo pronalaska za koji se traži zaštita. Jedinjenja, soli i kompozicije iz ovog pronalaska su korisne za lečenje ili poboljšanje nenormalnih proliferativnih poremećaja ćelija, kao što je kancer.

Osnova

[0002] Hematopoietična progenitor kinaza 1 (HPK1), takođe poznata kao mitogen aktivirana protein kinaza kinaza kinaza kinaza 1 (MAP4K1), je član familije serin-treonin kinaza sličnih Ste20 sisara koje deluju preko JNK i ERK puteva signalizacije. HPK1 se uglavnom ekspresuje u hematopoietičnim organima i ćelijama (na primer, T-ćelije, B-ćelije i dendritične ćelije), što ukazuje na potencijalnu uključenost HPK1 u regulaciji signalizacije u hematopoietičnim lozama, uključujući limfocite. (Shui i saradnici, "Hematoppietic progenitor kinaza 1 negatively regulates T cell receptor signaling and T cel-mediated immune responses", Nature Immunology 8, 84-91 (2006)). Na primer, nakon aktivacije receptora T-ćelija (TCR), HPK1 kinaza se upotrebi u plazmi membrane što dovodi do potpune aktivacije kinaze. Ova potpuna aktivacija kinaze dovodi do HPK1 fosforilacije adaptor proteina SLP76 što na kraju dovodi do destabilizacije TCR signalizacije kompleksa koji ometa nizvodne događaje signalizacije mitogen-aktivirane protein (MAP) kinaze neophodne za aktivaciju i proliferaciju T-ćelija. (Hernandez i saradnici, "The kinaza activity of hematopoietic progenitor kinaza 1 is esential for regulation of T cell function", Open Cell Reports 25, 80-94, October 2, 2018). Takođe je pokazano da HPK1 kinaza negativno reguliše signalizaciju T-ćelija putem PGE2 receptora na način zavistan od PKA. Osim toga, zabeleženo je da HPK1 kinaza igra uloge u: i) aktivaciji-indukovanih ćelija smrti (AICD) i JNK aktivaciji; ii) regulaciji antigen-1 (LFA-1) integrina povezanog sa funkcijom leukocita aktivacijom na T-ćelijama direktnom kompeticijom sa adhezijom i degranulacijom promotivnim adaptornim proteinom (ADAP) za vezivanje SLP76 SH2-domena; i iii) retulaciji aktivacije preko signalizacije nuklearnog faktora κB (NF-κB) interakcijom sa IKK-α i -β. Studije su takođe pokazale da HPK1 negativno reguliše signalizaciju puteva MAP kinaze i Ap-1 transkripciju u t-ćelijama. (Hernandez i saradnici 2018).

[0003] WO 2018/167147 A1 otkriva derivate 1H-pirolo[2,3-b]piridina kao HPK1 inhibitore za tretman kancera.

[0004] Do danas sprovedena istraživanja na HPK1 kinazama pokazuju da HPK1 igra ulogu u pojačavanju odgovora t-ćelija i povećanju anti-tumornog imuniteta.

Kratak sadržaj

[0005] Ovaj pronalazak obezbeđuje, delimično, jedinjenja Formula I, II i III i njihove farmaceutski prihvatljive soli. Ova jedinjenja mogu da inhibiraju aktivnost HPK1 kinaze i na taj način sprovode biološke funkcije. Takođe su obezbeđene farmaceutske kompozicije i medikamenti koji uključuju jedinjenja ili soli iz pronalaska, same ili u kombinaciji sa drugim antikancerogenim terapeutskim sredstvima ili palijativnim sredstvima.

[0006] Ovaj pronalazak takođe delom obezbeđuje postupke za izradu jedinjenja ili farmaceutski prihvatljivih soli i kompozicija iz pronalaska i postupke za njihovu upotrebu.

[0007] U jednom ostvarenju, pronalazak obezbeđuje jedinjenje Formule I:

ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, pri čemu:

R<1>je izabran iz grupe koja sadrži vodonik, halogen, (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi, halo(C1-C6)alkoksi, -N(R<6>)(R<7>) i (C3-C6)cikloalkil grupu, pri čemu su navedene (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil i (C3-C6)cikloalkil grupe opciono supstituisane sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, hidroksi, cijano, (C1-C6)alkil i (C1-C6)alkoksi grupu;

R<6>i R<7>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži vodonik i (C1-C6)alkil grupu, pri čemu je navedena (C1-C6)alkil grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, (C1-C6)alkoksi, cijano i hidroksi grupu, ili R<6>i R<7>uzeti zajedno sa azotom za koji su vezani formiraju (4- do 8-člani)heterocikloalkil koji je opciono supstituisan sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi i halo(C1-C6)alkoksi grupu, pri čemu su navedene (C1-C6)alkil i halo(C1-C6)alkil grupe opciono supstituisane sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, hidroksi, cijano, (C1-C6)alkil i (C1-C6)alkoksi grupu;

R<1a>je izabran iz grupe koja sadrži vodonik i halogen;

R<2>je:

i) -(CH2)mN(R<8>)(R<9>), gde je m ceo broj izabran od 0, 1, 2, ili 3 a svaki R<8>i R<9>je nezavisno izabran iz grupe koja sadrži vodonik i (C1-C6)alkil grupu, pri čemu je navedena (C1-C6)alkil grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, (C1-C6)alkoksi, cijano i hidroksi grupu, ili R<8>i R<9>uzeti zajedno sa azotom za koji su vezani formiraju (4- do 6-člani)heterocikloalkil koji je opciono supstituisan sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, hidroksi, (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi i halo(C1-C6)alkoksi grupu, pri čemu su (C1-C6)alkil i halo(C1-C6)alkil grupa opciono supstituisane sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, hidroksi, cijano i (C1-C6)alkoksi grupu;

ii) (C1-C6)alkil grupa, pri čemu je (C1-C6)alkil grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, (C1-C6)alkoksi, -N(R<6>)(R<7>), cijano i hidroksi grupu, pri čemu je svaki R<6>i R<7>nezavisno izabran iz grupe koja sadrži vodonik i (C1-C6)alkil grupu; ili

iii) (4- do 6-člani)heterocikloalkil, pri čemu je navedeni heterocikloalkil opciono supstituisan sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, hidroksi, cijano, (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi i halo(C1-C6)alkoksi grupu, pri čemu su navedena (C1-C6)alkil i halo(C1-C6)alkil grupa opciono supstituisane sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, hidroksi, cijano i (C1-C6)alkoksi grupu;

R<3>je izabran iz grupe koja sadrži vodonik, halogen, hidroksi, (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi i halo(C1-C6)alkoksi grupu;

X je ugljenik ili azot;

R<4>je (4- do 6-člani)heterocikloalkil ili (5- do 10-člani)heteroaril, pri čemu su (4- do 6-člani)heterocikloalkil i (5- do 10-člani)heteroaril opciono supstituisani sa 1 do 3 supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, cijano, okso, hidroksi, -N(R<10>)(R<11>), (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi, halo(C1-C6)alkoksi i -(CH2)n(C3-C6)cikloalkil grupu, pri čemu su navedene (C1-C6)alkil i halo(C1-C6)alkil grupe opciono supstituisane sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, hidroksi, cijano i (C1-C6)alkoksi grupu i gde je n ceo broj izabran od 0, 1, ili 2; i gde je svaki R<10>i R<11>nezavisno izabran iz grupe koja sadrži vodonik i (C1-C6)alkil grupu, pri čemu je navedena (C1-C6)alkil grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen i hidroksi grupu; R<5>je izabran iz grupe koja sadrži vodonik, halogen, hidroksi, (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi i halo(C1-C6)alkoksi grupu; i

a je ceo broj izabran od 0 ili 1, pod uslovom da kada je X azot a je 0.

[0008] U narednom ostvarenju, pronalazak obezbeđuje farmaceutsku kompoziciju koja uključuje jedinjenje bilo koje od ovde opisanih formula, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so i farmaceutski prihvatljiv nosač ili ekscipijent. U nekim ostvarenjima, farmaceutska kompozicija uključuje dva ili više farmaceutski prihvatljivih nosača i/ili ekscipijenata.

[0009] Pronalazak takođe obezbeđuje terapeutske postupke i upotrebe koje uključuju primenu jedinjenja iz pronalaska, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli.

[0010] U narednom ostvarenju, pronalazak obezbeđuje postupak za tretman nenormalnog rasta ćelija, preciznije kancera, kod subjekta kome je to potrebno, a koji uključuje primenu na subjektu terapeutski efektivne količine jedinjenja iz pronalaska, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli. Jedinjenja iz pronalaska mogu da se primene kao pojedinačna sredstva ili mogu da se primene u kombinaciji sa drugim anti-kancerogenim terapeutskim sredstvima, ili preciznije, sa odgovarajućim sredstvima za standardnu terapiju za odgovarajući kancer.

[0011] U još jednom ostvarenju, pronalazak obezbeđuje postupak za tretman nenormalnog rasta ćelija, preciznije kancera, kod subjekta kome je to potrebno, koji uključuje primenu na subjektu određene količine jedinjenja iz pronalaska ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, u kombinaciji sa određenom količinom dodatnog anti-kancerogenog terapeutskog sredstva, pri čemu su ove količine zajedno efektivne za lečenje navedenog nenormalnog rasta ćelija.

[0012] U narednom ostvarenju, pronalazak se odnosi na jedinjenje iz pronalaska, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, za upotrebu kao medikamenta, preciznije, medikamenta za tretman kancera.

[0013] U narednom ostvarenju, pronalazak se odnosi na jedinjenje iz pronalaska, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, za upotrebu u tretmanu nenormalnog rasta ćelija, preciznije kancera, u subjektu.

[0014] U još jednom ostvarenju, pronalazak obezbeđuje upotrebu jedinjenja iz pronalaska, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, za tretman nenormalnog rasta ćelija, preciznije kancera, u subjektu.

[0015] U narednom ostvarenju, pronalazak se odnosi na farmaceutsku kompoziciju za upotrebu u tretmanu nenormalnog rasta ćelija u subjektu kome je to potrebno, pri čemu kompozicija uključuje jedinjenje iz pronalaska, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so i farmaceutski prihvatljiv nosač ili ekscipijent.

[0016] U čak još jednom ostvarenju, pronalazak obezbeđuje upotrebu bilo kog jedinjenja formule koja je ovde opisana, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, za izradu medikamenta za tretman nenormalnog rasta ćelija kod subjekta.

[0017] U čestim ostvarenjima prethodno navedenih jedinjenja, postupaka i upotreba, nenormalan rast ćelija je kancer.

[0018] U nekim ostvarenjima, postupci i navedene upotrebe za rezultat imaju jedan ili više od sledećih efekata: (1) inhibiciju proliferacije ćelija kancera; (2) inhibiciju invazivnosti ćelija kancera; (3) indukciju apoptoza ćelija kancera; (4) inhibiciju metastaza ćelija kancera; (5) inhibiciju angiogeneza; (6) pojačavanje odgovora T-ćelija; ili (7) povećanje anti-tumorne aktivnosti.

[0019] U narednom ostvarenju, pronalazak obezbeđuje postupak za tretman HPK1-zavisnih poremećaja i povećanje imunog odgovora kod subjekta, uključujući primenu jedinjenja iz pronalaska ili njegove farmaceutski prihvatljive soli na subjektu u količini koja je efektivna za lečenje tog poremećaja, preciznije kancera. U nekim ostvarenjima, poremećaj je kancer koji se karakteriše pojačavanjem ili prekomernom ekspresijom HPK1 kinaze.

[0020] U nekim ostvarenjima, ovde opisani postupci i upotrebe dalje uključuju primenu na subjektu određene količine dodatnog antikancerogenog terapeutskog sredstva ili palijativnog sredstva, pri čemu su ove količine zajedno efektivne u lečenju navedenog nenormalnog rasta ćelija. Svako od ostvarenja za niže opisana jedinjenja iz ovog pronalaska može da se kombinuje sa jednim ili više drugih ostvarenja jedinjenja iz ovog pronalaska koja su ovde opisana a koja nisu nekonzistentna sa ostvarenjem(ima) sa kojim se kombinuju.

[0021] Treba razumeti da su je prethodno dat opšti opis i niže dat detaljan opis samo primeri i objašnjenja i nisu ograničavajući za pronalazak za koji se traži zaštita.

[0022] Pored toga, svako niže dato ostvarenje koje opisuje pronalazak u ovom okviru predviđa farmaceutski prihvatljive soli jedinjenja iz pronalaska. U skladu sa tim, "njegova farmaceutski prihvatljiva so" je nezaobilazno u opisu svih ovde opisanih jedinjenja.

Detaljan opis

Definicije i Primeri

[0023] Ovaj pronalazak može mnogo lakše da se razume upućivanjem na sledeći detaljan opis preferiranih ostvarenja iz pronalaska i Primera koji su ovde uključeni. Treba razumeti da terminlologija koja se ovde koristi ima za cilj samo da se opišu specifična ostvarenja a bez namere da ograničava. Dalje treba razumeti da ukoliko ovde nije posebno definisano, ovde korišćena terminologija ima svoja uobičajena značenja poznata u relevantnoj tehnici.

[0024] Kako se ovde koristi, jednina za neodređeni član "a", "an" i "the" uključuje i množine ukoliko nije drugačije navedeno. Na primer, supstituent uključuje jedan ili više supstituenata.

[0025] Naziv "približno" se odnosi na relativni termin koji označava aproksimaciju od plus ili minus 10% od nominalne vrednosti na koju se odnosi, u jednom ostvarenju, do plus ili minus 5% u narednom ostvarenju, do plus ili minus 2%. Za polje ovog otkrića, ovaj nivo aproksimacije je odgovarajući osim ako je izričito navedeno da vrednost zahteva uži opseg.

[0026] Kako se ovde koristi, naziv "n-člani" gde je n ceo broj koji obično opisuje broj atoma u ostatku koji formiraju prsten gde je broj atoma koji formiraju prsten. Na primer, piridin je primer 6-članog heteroaril prstena a tiofen je primer 5-članog heteroaril prstena.

[0027] Na različitim mestima u ovoj specifikaciji, supstituenti jedinjenja iz pronalaska su otkriveni u grupama ili u opsezima. Posebno je predviđeno da pronalazak uključuje svaku i sve pojedinačne kombinacije članova ovakvih grupa i opsega. Na primer, naziv "C1-6alkil" je posebno predviđen da uključi C1alkil (metil), C2alkil (etil), C3alkil, C4alkil, C5alkil i C6alkil. Za naredni primer, naziv "5- do 6-člana heteroaril grupa" je posebno predviđen da uključi bilo koju 5- do 6-članu heteroaril grupu.

[0028] Kako se ovde koristi, "HPK1 antagonist" ili "HPK1 inhibitor" je molekula koja redukuje, inhibira ili na drugi način umanjuje jednu ili više bioloških aktivnosti HPK1 (na primer, aktivnost serin/treonin kinaze, regrutovanje u TCR kompleks nakon aktivacije TCR, interakciju sa proteinom vezujućeg partnera, kao što je SLP76). Antagonizam koji koristi HPK1 antagonist ne mora obavezno da ukaže na potpunu eliminaciju HPK1 aktivnosti. Umesto toga, aktivnost može da bude smanjena za statistički značajnu vrednost. Na primer, jedinjenje iz ovog pronalaska može da smanji HPK1 aktivnost za najmanje približno 2.5% do približno 100%, od približno 10% do približno 90%, od približno 20% do približno 70%, od približno 30% do približno 60%, od približno 40% do približno 50% u poređenju sa odgovarajućom kontrolom. U nekim ostvarenjima, HPK1 antagonist smanjuje, inhibira ili na drugi način umanjuje aktivnost serin/treonin kinaze HPK1. U nekim od ovih ostavrenja, HPK1 antagonist smanjuje, inhibira ili na drugi način inhibira HPK1-posredovanu fosforilaciju SLP76 i/ili Gads. Ovde otkrivena jedinjenja se direktno vezuju za HPK1 i inhibiraju aktivnost njegove kinaze.

[0029] Ovde opisani pronalazak može pogodno da se primenjuje bez prisustva bilo kog elementa(ata) koji nisu ovde posebno otkriveni. Prema tome, na primer, u svakom ovde prisutnom slučaju, bilo koji od naziva "uključujući", "u osnovi se sastoji od" i "sastoji od" može da bude zamenjen sa jednim od druga dva naziva.

[0030] Naziv "(C1-C6)alkil", kako se ovde koristi, se odnosi na zasićenu alkil grupu račvastog ili ravnog lanca koja se sastoji od 1 do 6 atoma ugljenika, kao što su, ali bez ograničenja na, metil, etil, n-propil, izopropil, n-butil, sec-butil, izobutil, terc-butil, n-pentil, izopentil, neopentil i n-heksil. (C1-C6)alkil može da bude opciono supstituisana, pri čemu je jedan ili više atoma vodonika zamenjeno sa supstituentom izabranim iz grupe koja se sastoji od halogena, cijano, hidroksi, -SF5, nitro, -(C1-C6)alkoksi i -N(R<6>)(R<7>), gde su svaki R<6>i R<7>nezavisno izabrani od vodonika i (C1-C6)alkil grupe. Na primer, (C1-C6)alkil ostatak može da bude supstituisan sa jednim ili više atoma halogena da formira "halo(C1-C6)alkil" grupu. Reprezentativni primeri halo(C1-C6)alkil grupe uključuju, ali se ne ograničavaju samo na, fluorometil, 2-fluoroetil, difluorometil, trifluorometil i pentafluoroetil. Drugi reprezentativni primeri supstituisane (C1-C6)alkil grupe uključuju, ali bez ograničenja na, cijanobutil i etoksietil grupu.

[0031] Naziv "halo(C1-C6)alkil" kako se ovde koristi, se odnosi na (C1-C6)alkil grupu kako je prethodno definisano pri čemu je alkil grupa supstituisana sa jednim ili više atoma halogena. Na primer, halo(C1-C6)alkil može da bude izabran od fluorometil, fluoroetil, difluorometil, difluoroetil, trifluorometil, trifluoroetil grupe.

[0032] Naziv "( C2-C6)alkenil" se odnosi na alifatični ugljovodonik koji ima od 2 do 6 atoma ugljenika i koji ima najmanje jednu ugljenik-ugljenik dvostruku vezu, uključujući grupe ravnog lanca ili račvastog lanca koji imaju najmanje jednu ugljenik-ugljenik dvostruku vezu. Reprezentativni primeri uključuju, ali se ne ograničavaju samo na, etenil, 1-propenil, 2-propenil (alil), izopropenil, 2-metil-1-propenil, 1-butenil, 2-butenil i slično. Kada jedinjenja iz pronalaska sadrže (C2-C6)alkenil grupu, jedinjenje može da egzistira kao čist E (entgegen) oblik, čist Z (zusammen) oblik, ili bilo koja njihova smeša. (C2-C6)alkenil grupa može da bude opciono supstituisana pri čemu je jedan ili više atoma vodonika zamenjeno sa supstituentom izabranim iz grupe koja sadrži halogen, cijano, hidroksi, -SF5, nitro, -(C1-C6)alkoksi i -N(R<6>)(R<7>), pri čemu su R<6>i R<7>svaki nezavisno izabrani od vodonika i (C1-C6)alkil grupe.

[0033] Naziv "(C2-C6)alkinil" se odnosi na alifatični ugljovodonik koji ima dva do šest atoma vodonika i najmanje jednu ugljenik-ugljenik trostruku vezu, uključujući ravne lance i račvaste lance koji imaju najmanje jednu ugljenik-ugljenik trostruku vezu. Reprezentativni primeri uključuju, ali se ne ograničavaju samo na, etinil, propinil, butinil, pentinil i heksinil. (C2-C6)alkinil grupa može opciono da bude supstituisana pri čemu je jedan ili više atoma vodonika zamenjeno sa supstituentom izabranim iz grupe koja sadrži halogen, cijano, hidroksi, -SF5, nitro, -(C1-C6)alkoksi i -N(R<6>)(R<7>), gde su R<6>i R<7>svaki nezavisno izabrani od vodonika i (C1-C6)alkil grupe.

[0034] Naziv "(C1-C6)alkoksi" kako se ovde koristi, se odnosi na (C1-C6)alkil grupu, kako je prethodno definisano, vezanu za ostatak osnovne molekule preko atoma kiseonika.

Reprezentativni primeri (C1-C6)alkoksi grupe uključuju, ali se ne ograničavaju samo na, metoksi, etoksi, propoksi, 2-propoksi, butoksi, terc-butoksi, pentiloksi i heksiloksi. (C1-C6)alkoksi grupa može da bude opciono supstituisana pri čemu je jedan ili više atoma vodonika zamenjeno sa supstituentom izabranim iz grupe koja sadrži halogen, cijano, hidroksi, -SF5, nitro, -(C1-C6)alkoksi i -N(R<6>)(R<7>), pri čemu su svaki R<6>i R<7>nezavisno izabrani od vodonika i (C1-C6)alkil grupe. Na primer, (C1-C6)alkoksi može da bude supstituisana sa jednim ili više atoma halogena da formira "halo(C1-C6)alkoksi" grupu.

Reprezentativni primeri halo(C1-C6)alkoksi grupe uključuju, ali se ne ograničavaju samo na, fluorometoksi, difluorometoksi, 2-fluoroetoksi, trifluorometoksi i pentafluoroetoksi.

[0035] Naziv "halo(C1-C6)alkoksi" kako se ovde koristi, se odnosi na (C1-C6)alkoksi grupu kako je prethodno definisano pri čemu je alkoksi grupa supstituisana sa jednim ili više atoma halogena. Na primer, halo(C1-C6)alkoksi grupa može da bude izabrana od fluorometoksi, fluoroetoksi, difluorometoksi, difluoroetoksi, trifluorometoksi, trifluoroetoksi grupe.

[0036] Naziv "(C1-C6)alkitio", kako se ovde koristi, se odnosi na (C1-C6)alkil grupu, kako je prethodno definisano vezanu za ostatak osnovne molekule preko atoma sumpora.

Reprezentativni primeri (C1-C6)alkiltio grupe uključuju, ali se ne ograničavaju samo na, metiltio, etiltio, propiltio i slično. (C1-C6)alkitio grupa može da bude opciono supstituisana pri čemu je jedan ili više atoma vodonika zamenjeno sa supstituentom izabranim iz grupe koja sadrži halogen, cijano, hidroksi, -SF5, nitro, -(C1-C6)alkoksi i -N(R<6>)(R<7>), pri čemu su svaki R<6>i R<7>nezavisno izabrani od vodonika i (C1-C6)alkil grupe.

[0037] Kako se ovde koristi, naziv "(C3-C6)cikloalkil" se odnosi na karbociklični supstituent dobijen uklanjanjem vodonika iz zasićene karbociklične molekule koja ima od 3 do 6 atoma ugljenika. "Cikloalkil’ može da bude monociklični prsten čiji primeri uključuju ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil i cikloheksil. (C3-C6)cikloalkil može da bude opciono supstituisan pri čemu je jedan ili više atoma vodonika zamenjeno sa supstituentom izabranim iz grupe koja sadrži halogen, cijano, hidroksi, -SF5, nitro, -(C1-C6)alkoksi i -N(R<6>)(R<7>), pri čemu su svaki R<6>i R<7>nezavisno izabrani od vodonika i (C1-C6)alkil grupe.

[0038] "Heterocikloalkil," kako se ovde koristi, se odnosi na cikloalkil kako je prethodno definisano, pri čemu je najmanje jedan od atoma ugljenika u prstenu zamenjen sa heteroatomom izabranim od azota, kiseonika ili sumpora. Naziv "(4- do 6-člani)heterocikloalkil" označava da heterocikloalkil supstituent sadrži ukupno od 4 do 6 atoma prstena, od kojih je najmanje jedan heteroatom. Naziv "(4- do 8-člani)heterocikloalkil" označava heterocikloalkil supstituent koji sadrži ukupno 4 do 8 atoma prstena, od kojih je najmanje jedan heteroatom. "(6-člani)heterocikloalkil" označava heterocikloalkil supstituent koji sadrži ukupno 6 atoma prstena, od kojih je najmanje jedan heteroatom. "(5-člani)heterocikloalkil" označava heterocikloalkil supstituent koji sadrži ukupno 5 atoma prstena, od kojih je najmanje jedan heteroatom. Heterocikloalkil supstituent može da bude vezan preko atoma azota koji ima odgovarajuću valencu, ili preko atoma ugljenika prstena. Heterocikloalkil ostatak može opciono da bude supstituisan sa jednim ili više supstituenata na atomu azota koji ima odgovarajuću valencu, ili preko bilo kog raspoloživog atoma ugljenika.

[0039] Primeri heterocikloalkil prstena uključuju, ali se ne ograničavaju samo na, azetidinil, dihidrofuranil, dihidrotiofenil, tetrahidrotiofenil, tetrahidrofuranil, tetrahidro-triazinil, tetrahidropirazolil, tetrahidrooksazinil, tetrahidropirimidinil, imidazolidinil, pirolidinil, piperidinil, piperazinil, oksazolidinil, tiazolidinil, pirazolidinil, tiomorfolinil, tetrahidropiranil, tetrahidrotiazinil, tetrahidrotiadiazinil, tetrahidrooksazolil, morfolinil, oksetanil, tetrahidrodiazinil, oksazinil, oksatiazinil. Naredni primeri heterocikloalkil prstena uključuju tetrahidrofuran-2-il, tetrahidrofuran-3-il, imidazolidin-1-il, imidazolidin-2-il, imidazolidin-4-il, pirolidin-1-il, pirolidin-2-il, pirolidin-3-il, piperidin-1-il, piperidin-2-il, piperidin-3-il, piperidin-4-il, piperazin-1-il, piperazin-2-il, 1,3-oksazolidin-3-il, izotiazolidinil, 1,3-tiazolidin-3-il, 1,2-pirazolidin-2-il, 1,2-tetrahidrotiazin-2-il, 1,3-tiazinan-3-il, 1,2-tetrahidrodiazin-2-il, 1,3-tetrahidrodiazin-1-il, 1,4-oksazin-4-il, 2-okso-piperidinil (na primer, 2-okso-piperidin-1-il), azabiciklo[2.2.1]heptil i slično. Jedan specifičan primer heterocikloalkila je 2-okso-1,3-oksazolidin-3-il. Heterocikloalkil može da bude opciono supstituisan pri čemu je jedan ili više atoma vodonika zamenjeno sa supstituentom izabranim iz grupe koja sadrži halogen, cijano, hidroksi, -SF5, nitro, -(C1-C6)alkoksi i -N(R<6>)(R<7>), pri čemu su svaki R<6>i R<7>nezavisno izabrani od vodonika i (C1-C6)alkil grupe.

[0040] "(C6-C10)aril" se odnosi na monocikličnu grupu sa svim ugljenicima ili na policikličnu aromatičnu grupu spojenih prstenova koja ima konjugovani pi-elektron sistem koji sadrži od 6 do 10 atoma ugljenika, kao što su fenil ili naftil.

[0041] Kako se ovde koristi, naziv "heteroaril" se odnosi na aromatični karbociklični sistem koji sadrži jedan, dva, tri ili četiri heteroatoma nezavisno izabrana od kiseonika, azot ai sumpora i koji ima jedan, dva ili tri prstena pri čemu ovi prstenovi mogu da budu kondenzovani a pri čemu je kondenzovani prethodno definisan. "(5- do 10-člani) heteroaril" prsten se odnosi na heteroaril prsten koji ima od 5 do 10 atoma prstena od kojih je najmanje jedan od atoma prstena azot, a preostali atomi prstena su nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži ugljenik, kiseonik, sumpor i azot. "(5- do 6-člani) heteroaril" prsten se odnosi na heteroaril prsten koji ima od 5 do 6 atoma prstena od kojih je najmanje jedan od atoma prstena azot a preostali atomi prstena su nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži ugljenik, kiseonik, sumpor i azot. Primeri heteroarila uključuju, ali se ne ograničavaju samo na, imidazolil, pirazolil, pirimidinil, piridazinil, tiazolil, triazolil (na primer, 1,2,3-triazol ili 1,2,4-triazol), pirazinil, oksazolil, tiadiazolil, piridinil, imidazopiridinil, triazolopiridinil, dihidropirolotriazolil i oksadiazolil. Konkretniji primeri heteroarila ukjučuju imidazolil, 1H-pirazolil, tiadiazolil, ili triazolil.

[0042] Treba da se razume da heteroaril može opciono da bude kondenzovan sa cikloalkil grupom, ili sa heterocikloalkil grupom, kako je ovde definisano.

[0043] Heteroaril supstituent može da bude vezan preko atoma azota koji ima odgovarajuću valencu ili preko bilo kog atoma ugljenika. Heteroaril ostatak može da bude opciono supstituisan sa jednim ili više supstituenata na atomu azota koji ima odgovarajuću valencu ili na bilo kom odgovarajućem atomu ugljenika. (5- do 6-člani)heteroaril može da bude opciono supstituisan pri čemu je jedan ili više atoma vodonika zamenjeno sa supstituentom izabranim iz grupe koja sadrži halogen, cijano, hidroksi, -SF5, nitro, -(C1-C6)alkoksi i -N(R<6>)(R<7>), pri čemu su svaki R<6>i R<7>nezavisno izabrani od vodonika i (C1-C6)alkil grupe. Supstituent može da bude vezan za heteroaril ostatak na bilo kom odgovarajućem atomu ugljenika ili za heteroatom kada je heteroatom azot koji ima odgovarajuću valencu.

"halo" ili "halogen", kako se ovde koristi, se odnosi na atom hlora, fluora, broma ili joda. "hidroksi" ili "hidroksil", kako se ovde koristi, označava -OH grupu.

"cijano", kako se ovde koristi, označava -CN grupu, koja takođe može da bude opisana:

"nitro", kako se ovde koristi, označava - NO2grupu.

[0044] "Opciono supstituisan", kako se ovde koristi, označava da je supstitucija opciona i prema tome uključuje i nesupstituisane i supstituisane atome i ostatke. "Supstituisan" atom ili ostatak ukazuje da bilo koji vodonik na označenom atomu ili ostatku može da bude zamenjen sa izabranom iz naznačene grupe supstituenata (do i uključujući da je svaki atom vodonika na označenom atomu ili ostatku zamenjen sa izborom iz naznačene grupe supstituenata), pod uslovom da normalna valenca označenog atoma ili ostatka nije premašena i da su rezultati supstitucije stabilno jedinjenje. Na primer, ukoliko je metil grupa (to jest, - CH3) opciono supstituisana, tada do 3 atoma vodonika na atomu ugljenika može da bude zamenjeno sa grupama supstituenata.

[0045] "Pacijent" ili "subjekt" se odnosi na toplokrvne životinje kao što su, na primer, svinje, goveda, pilići, konji, hrčci, miševi, pacovi, gerbili, mačke, zečevi, psi, majmuni, šimpanze i ljudi.

[0046] "Farmaceutski prihvatljiv" pokazuje da supstanca ili kompozicija mora da bude kompatibilna, hemijski i/ili toksikološki, sa drugim sastojcima koji čine formulaciju i/ili sa sisarom koji će da bude tretiran sa njom.

[0047] Naziv "terapeutski efektivna količina" kako se ovde koristi se odnosi na količinu jedinjenja koje se primenjuje a koja će da ublaži do neke mere jedan ili više simptoma poremećaja koji se tretira. U vezi sa tretmanom poremećaja posrednovanog HPK1 kinazom (na primer, kancer), terapeutski efektivna količina se odnosi na onu količinu koja može da utiče na ublažavanje do izvesne mere (ili, na primer, eliminaciju) jednog ili više simptoma povezanih sa poremećajem posredovanog HPK1 kinazom. Na primer, terapeutski efektivna količina se odnosi na takvu količinu koja može da dovede do (1) smanjenja veličine tumora, (2) inhibicije (to jest, usporavanja do određene mere, poželjno je zaustavljanja) metastaza tumora, (3) inhibicije do određene mere (to jest, usporavanja do određene mere, poželjno je zaustavljanja) rasta tumora ili invazije tumora, i/ili (4) ublažavanja do izvesne mere (ili, poželjno je, eliminacije) jednog ili više znakova ili simptoma povezanih sa kancerom.

[0048] Naziv "lečenje", kako se ovde koristi, ukoliko nije drugačije navedeno, označava poništavanje, ublažavanje, inhibiciju napredovanja, ili prevenciju poremećaja ili stanja na koje se ovaj izraz primenjuje, ili jednog ili više simptoma ovog poremećaja ili stanja. Naziv "tretman", kako se ovde koristi, ukoliko nije drugačije navedeno, se odnosi na čin "lečenja" kako je "lečenje" ovde definisano. Naziv "lečenje" takođe uključuje adjuvantni i neadjuvantni tretman subjekta.

[0049] "Izomer" označava "stereoizomer" i "geometrijski izomer" kako je niže definisano.

[0050] "Stereoizomer" se odnosi na jedinjenja koja poseduju jedan ili više asimetričnih centara, od kojih svaki može da egzistira u R ili S konfiguraciji. Stereoizomeri uključuju sve diastereomerne, enantiomerne i epimerne oblike kao i njihove racemate i smeše.

[0051] "Geometrijski izomer" se odnosi na jedinjenja koja mogu da egzistiraju u cis, trans, anti, entgegen (E) i zusammen (Z) oblicima kao i njihove smeše.

[0052] Kako se ovde koristi, ukoliko nije drugačije navedeno, tačka vezivanja supstituenta može da bude na bilo kom pogodnom položaju supstituenta. Na primer, piridinil (ili piridil) može da bude 2-piridinil (ili piridin-2-il), 3-piridinil (ili piridin-3-il), ili 4-piridinil (ili piridin-4-il).

[0053] Kada je supstituisani ili opciono supstituisani ostatak opisan bez označavanja atoma preko koga je ovaj ostatak vezan za supstituent, tada supstituent može da bude vezan preko bilo kog odgovarajućeg atoma u tom ostatku. Na primer u opciono supstituisanom (5- do 10-članom) heteroarilu, supstituent na heteroarilu može da bude vezan za bilo koji atom ugljenika na heteroaril delu ili na heteroatomu heteroarila, gde to valenca dozvoljava.

Kombinacije supstituenata i/ili promenljivih su dozvoljene samo ukoliko ovakve kombinacije za rezultat imaju stabilna jedinjenja.

[0054] Ova specifikacija koristi nazive "supstituent," "radikal," i "grupa" kao sinonime.

[0055] Ukoliko su supstituenti opisani kao "nezavisno izabrani" iz grupe, svaki izabrani supstituent je izabran nezavisno od bilo kog drugog. Prema tome, svaki supstituent može da bude identičan sa ili različit od drugog supstituenta(ata).

Jedinjenja

[0056] Jedinjenja Formule I, kako je prethodno opisano, sadrže azalaktam (2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on) jezgro pri čemu je pirolo prsten vezan preko svog atoma azota za 6-člani heteroaril (piridin ili pirimidin) koji je supstituisan sa R<4>i opciono R<5>substituentom.

[0057] U jednom ostvarenju, u Formuli I kako je prethodno opisano, R<1>je -N(R<6>)(R<7>) a R<6>i R<7>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja se sastoji od vodonika i (C1-C6)alkil grupe, pri čemu je (C1-C6)alkil grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 halogena.

[0058] U narednom ostvarenju, R<1>je -N(R<6>) (R<7>) a R<6>i R<7>su svaki metil grupa.

[0059] U narednom ostvarenju, R<1>je -N(R<6>)(R<7>) a R<6>i R<7>su svaki etil grupa.

[0060] U narednom ostvarenju, R<1>je -N(R<6>)(R<7>) a jedan od R<6>i R<7>je vodonik a drugi je metil grupa.

[0061] U narednom ostvarenju, R<1>je -N(R<6>)(R<7>) a jedan od R<6>i R<7>je metil grupa a drugi je etil grupa.

[0062] U čak još jednom ostvarenju, R<1>je -N(R<6>)(R<7>) a R<6>i R<7>uzeti zajedno sa azotom za koji su vezani formiraju (4- do 8-člani)heterocikloalkil koji je opciono supstituisan sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi i halo(C1-C6)alkoksi grupu. Kada R<6>i R<7>uzeti zajedno formiraju (4- do 8-člani)heterocikloalkil, heterocikloalkil može da bude izabran iz grupe koja sadrži azetidinil, pirolidinil i azabiciklo[2.2.1]heptil.

[0063] U nekim ostvarenjima, R<1>je azetidinil opciono supstituisan sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi i halo(C1C6)alkoksi grupu.

[0064] U nekim ostvarenjima, R<1>je pirolidinil opciono supstituisan sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi i halo(C1-C6)alkoksi grupu.

[0065] U nekim drugim ostvarenjima, R<1>je (C3-C6)cikloalkil, pri čemu je (C3-C6)cikloalkil opciono supstituisan sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, hidroksi, (C1-C6)alkil i (C1-C6)alkoksi grupu. Kada je R<1>(C3-C6)cikloalkil, (C3-C6)cikloalkil je ciklopropil grupa.

[0066] U čak još jednom ostvarenju, R<1>je (C1-C6)alkil izabran iz grupe koja sadrži metil, etil, propil, izopropil, butil i terc-butil grupu.

[0067] U narednom ostvarenju, R<1>je vodonik.

[0068] Podrazumeva se da bilo koja od prethodno pomenutih podgrupa (ostvarenja) za R<1>može da se kombinuje zajedno sa bilo kojom od podgrupa za R<1a>, R<2>, R<3>, R<4>, R<5>, a i X kako je opisano prethodno i u daljem tekstu.

[0069] U narednom ostvarenju, u Formuli I kako je prethodno opisano, R<2>je -(CH2)mN(R<8>)(R<9>), pri čemu je m = 1 a jedan od R<8>i R<9>je vodonik a drugi je metil grupa.

[0070] U narednom ostvarenju, R<2>je -(CH2)mN(R<8>)(R<9>), pri čemu je m = 1 a R<8>i R<9>su oba vodonik.

[0071] U nekim drugim ostvarenjima, R<2>je (4- do 6-člani)heterocikloalkil a heterocikloalkil je azetidinil.

[0072] Podrazumeva se da bilo koja od prethodno pomenutih podgrupa (ostvarenja) za R<2>može da se kombinuje zajedno sa bilo kojom od podgrupa za R<1>, R<1a>, R<3>, R<4>, R<5>, a i X kako je opisano prethodno i u daljem tekstu.

[0073] U narednom ostvarenju, u Formuli I kako je prethodno opisano, R<3>je vodonik.

[0074] U čak još jednom ostvarenju, u Formuli I kako je prethodno opisano, R<4>je (5- do 6-člani)heteroaril opciono supstituisan sa 1 do 3 supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, cijano, hidroksi, -N(R<10>)(R<11>), (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi, halo(C1-C6)alkoksi i -(CH2)n(C3-C6)cikloalkil, pri čemu je n ceo broj izabran od 0, 1, ili 2; i pri čemu su R<10>i R<11>svaki nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži vodonik i (C1-C6)alkil grupu, gde je navedena (C1-C6)alkil grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen i hidroksi grupu. Kada je R<4>(5- do 6-člani)heteroaril, heteroaril može da bude 1, 2, 3-triazolil, 1, 2, 4-triazolil ili pirazolil.

[0075] U narednom ostvarenju, R<4>je (4- do 6-člani)heterocikloalkil opciono supstituisan sa 1 do 3 supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, cijano, okso, hidroksi, -N(R<10>)(R<11>), (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi, halo(C1-C6)alkoksi i -(CH2)n(C3-C6)cikloalkil, pri čemu je n ceo broj izabran od 0, 1, ili 2; i gde su R<10>i R<11>svaki nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži vodonik i (C1-C6)alkil grupu, pri čemu je (C1-C6)alkil grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen i hidroksi grupu. Kada je R<4>(4- do 6-člani)heterocikloalkil, heterocikloalkil može da bude oksazolidinil opciono supstituisan sa okso substituentom.

[0076] Podrazumeva se da bilo koja od prethodno pomenutih podgrupa (ostvarenja) za R<4>može da se kombinuje zajedno sa bilo kojom od podgrupa za R<1>, R<1a>, R<2>, R<3>, R<5>, a i X kako je opisano prethodno i u daljem tekstu.

[0077] U čak još jednom ostvarenju, u Formuli I kako je prethodno opisano, X je azot i a je 0.

[0078] U narednom ostvarenju, X je ugljenik, a je 1 i R<5>je vodonik ili halogen. Kada je R<5>halogen, R<5>može da bude atom fluora.

[0079] Podrazumeva se da bilo koja od prethodno pomenutih podgrupa (ostvarenja) za X može da se kombinuje zajedno sa bilo kojom od podgrupa za R<1>, R<1a>, R<2>, R<3>, R<4>, R<5>i a, kako je opisano prethodno i u daljem tekstu.

[0080] U narednim ostvarenjima, pronalazak obezbeđuje jedinjenje Formule I, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, pri čemu:

R<1a>je H;

R<1>je (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, -N(R<6>)(R<7>) i (C3-C4)cikloalkil grupa, pri čemu je (C3-C4)cikloalkil grupa opciono supstituisana sa jednom (C1-C6)alkil grupom;

R<6>i R<7>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži vodonik i (C1-C6)alkil grupu, ili su R<6>i R<7>uzeti zajedno sa azotom za koji su vezani da formiraju (4- do 8-člani)heterocikloalkil koji je opciono supstituisan sa jednom do tri (C1-C6)alkil ili halo(C1-C6)alkil grupe;

R<2>je -(CH2)mN(R<8>)(R<9>) pri čemu je m = 1 a R<8>i R<9>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži vodonik i (C1-C6)alkil grupu;

R<3>je H;

X je ugljenik;

R<5>je vodonik;

a je 1; i

R<4>je (5-člani)heterocikloalkil ili (5-člani)heteroaril, svaki opciono supstituisan sa 1 do 3 supstituenta izabrana od okso, (C1-C6)alkil grupe opciono supstituisane sa hidroksi grupom, halo(C1-C6)alkil i -(CH2)n(C3-C6)cikloalkil grupe pri čemu je n = 0 ili 1.

[0081] U narednom ostvarenju, pronalazak obezbeđuje jedinjenje Formule I,

ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, pri čemu:

R<6>i R<7>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži vodonik i (C1-C6)alkil grupu, pri čemu je (C1-C6)alkil grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, (C1-C6)alkoksi, cijano i hidroksi grupu, ili R<6>i R<7>uzeti zajedno sa azotom za koji su vezani formiraju (4- do 8-člani)heterocikloalkil koji je opciono supstituisan sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi i halo(C1-C6)alkoksi grupu, pri čemu su navedene (C1-C6)alkil i halo(C1-C6)alkil grupe opciono supstituisane sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, hidroksi, cijano, (C1-C6)alkil i (C1-C6)alkoksi grupu;

R<1a>je H;

R<2>je CH2N(R<8>)(R<9>), gde su svaki R<8>i R<9>nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži vodonik i (C1-C6)alkil grupu, pri čemu je navedena (C1-C6)alkil grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen,(C1-C6)alkoksi, cijano i hidroksi grupu, ili R<8>i R<9>uzeti zajedno sa azotom za koji su vezani formiraju (4- do 6-člani)heterocikloalkil koji je opciono supstituisan sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, hidroksi, (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi i halo(C1-C6)alkoksi grupu, pri čemu su navedene (C1-C6)alkil i halo(C1-C6)alkil grupe opciono supstituisane sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, hidroksi, cijano i (C1-C6)alkoksi grupu; i R<3>je H;

X je ugljenik;

R<5>je vodonik;

a je 1; i

R<4>je (4- do 6-člani)heterocikloalkil ili (5- do 10-člani)heteroaril, pri čemu su navedeni (4- do 6-člani)heterocikloalkil i (5- do 10-člani)heteroaril opciono supstituisani sa 1 do 3 supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, cijano, okso, hidroksi, -N(R<10>)(R<11>), (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi, halo(C1-C6)alkoksi i -(CH2)n(C3-C6)cikloalkil grupu, pri čemu su navedena (C1-C6)alkil i halo(C1-C6)alkil grupa opciono supstituisane sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, hidroksi, cijano i (C1-C6)alkoksi grupu i gde je n ceo broj izabran od 0, 1, ili 2; i pri čemu je R<10>i R<11>svaki nezavisno izabran iz grupe koja sadrži vodonik i (C1-C6)alkil grupu, gde je navedena (C1-C6)alkil grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen i hidroksi grupu.

[0082] U narednom ostvarenju, pronalazak obezbeđuje jedinjenje Formule I, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, pri čemu:

R<1>je izabran iz grupe koja sadrži (C1-C4)alkil, CF3, -N(R<6>)(R<7>) i (C3-C4)cikloalkil grupu, gde je (C3-C4)cikloalkil grupa opciono supstituisana sa jednom CH3grupom;

R<6>i R<7>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži vodonik i (C1-C3)alkil grupu, ili R<6>i R<7>uzeti zajedno sa azotom za koji su vezani formiraju (4- do 5-člani)heterocikloalkil koji je opciono supstituisan sa jedan do dva CH3supstituenta;

R<2>je CH2N(R<8>)(R<9>), gde je R<8>vodonik a R<9>je izabran iz grupe koja sadrži vodonik i CH3; i R<4>je (5-člani)heterocikloalkil ili (5-člani)heteroaril, pri čemu je (5-člani)heterocikloalkil 1,3-oksazolidin-3-il a navedeni (5-člani)heteroaril je 1H-pirazolil ili triazolil, svaki opciono supstituisan sa 1 do 2 supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži okso, (C1-C5)alkil, halo(C1-C5)alkil i -CH2-ciklopropil grupu.

[0083] U narednom ostvarenju, pronalazak obezbeđuje jedinjenje Formule I, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, pri čemu:

R<1>je izabran iz grupe koja sadrži (C1-C4)alkil, CF3, -N(R<6>)(R<7>) i (C3-C4)cikloalkil grupu, pri čemu je (C3-C4)cikloalkil grupa opciono supstituisana sa jednom CH3grupom;

R<2>je CH2N(R<8>)(R<9>), gde je R<8>vodonik a R<9>je izabran iz grupe koja sadrži vodonik i CH3grupu; i

R<4>je (5-člani)heterocikloalkil ili (5-člani)heteroaril, pri čemu je navedeni (5-člani)heterocikloalkil 2-okso-1,3-oksazolidin-3-il, opciono supstituisan sa 1 CH3, CH2F, CHF2, ili CF3a navedeni (5-člani)heteroaril je 1H-pirazolil ili triazolil, opciono supstituisan sa 1 do 2 supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži (C1-C5)alkil, halo(C1-C5)alkil i -CH2-ciklopropil grupu.

[0084] U narednom ostvarenju, pronalazak obezbeđuje jedinjenje Formule I, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, pri čemu je R<1>-N(R<6>)(R<7>), gde su R<6>i R<7>svaki nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži vodonik i (C1-C3)alkil grupu.

[0085] U narednom ostvarenju, pronalazak obezbeđuje jedinjenje Formule I, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, gde je R<1>-N(R<6>)(R<7>), pri čemu su R<6>i R<7>uzeti zajedno sa azotom za koji su vezani da formiraju (4- do 5-člani)heterocikloalkil koji je azetidinil ili pirolidinil a navedeni heterocikloalkil je opciono supstituisan sa jedan do dva CH3supstituenta.

[0086] U narednom ostvarenju, pronalazak obezbeđuje jedinjenje Formule I, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, pri čemu:

R<1>je izabran iz grupe koja sadrži -N(R<6>)(R<7>) i (C3-C4)cikloalkil grupu, pri čemu je navedena (C3-C4)cikloalkil grupa opciono supstituisana sa jednom CH3grupom;

R<6>i R<7>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži vodonik i (C1-C3)alkil grupu, ili R<6>i R<7>uzeti zajedno sa azotom za koji su vezani formiraju (4- do 5-člani)heterocikloalkil koji je opciono supstituisan sa jedan do dva supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži CH3, ili halo(C1)alkil;

R<2>je -CH2N(R<8>)(R<9>), gde su R<8>i R<9>svaki nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži vodonik i CH3grupu; i

R<4>je (5-člani)heterocikloalkil ili (5-člani)heteroaril, pri čemu je (5-člani)heterocikloalkil 2okso-1,3-oksazolidin-3-il, opciono supstituisan sa 1 supstituentom izabranim iz grupe koja sadrži CH3, CHF2- i CH2F a navedeni (5-člani)heteroaril je imidazolil, 1H-pirazolil, tiadiazolil, ili triazolil, opciono supstituisan sa 1 do 2 supstituenta nezavisno izabrana iz grupe koja sadrži (C1-C5)alkil, halo(C1-C6)alkil i -(C4-C5)cikloalkil grupu, pri čemu je (C1-C5)alkil grupa opciono supstituisana sa jednom hidroksi grupom.

[0087] U narednom ostvarenju, pronalazak obezbeđuje jedinjenje Formule I, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, pri čemu:

R<1>je -N(R<6>)(R<7>);

R<6>i R<7>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži vodonik i (C1-C3)alkil grupu, ili R<6>i R<7>uzeti zajedno sa azotom za koji su vezani formiraju pirolidin-1-il, opciono supstituisan sa 1 do 2 CH3grupe;

R<4>je triazol-3-il, supstituisan sa 1 do 2 supstituenta nezavisno izabrana iz grupe koja sadrži CH3-, CH3-CH2- i CH3-CH2-CH2-.

[0088] Jedinjenja iz pronalaska koja se odnose na jedinjenje Formule I, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, pri čemu:

R<1a>je H;

R<3>je H;

a je 1;

X je ugljenik; i

R<5>je vodonik; obezbeđuju strukturu predstavljenu sa

a pri čemu su R<1>, R<2>i R<4>kako je prethodno definisano.

[0089] U narednom ostvarenju, ovaj pronalazak se odnosi na bilo koje ili na više od narednih jedinjenja:

6-(dimetilamino)-4-[(metilamino)metil]-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

4-[(metilamino)metil]-6-[metil(propan-2-il)amino]-2-[6-(4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

4-[(metilamino)metil]-6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]-2-[6-(4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

4-[(metilamino)metil]-2-[6-(5-metil-4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

4-[(metilamino)metil]-6-[metil(propan-2-il)amino]-2-[6-(5-metil-4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

4-(aminometil)-2-[6-(4-etil-5-metil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-6-[(2S)-2-metilpirolidin-1-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so.

[0090] U narednom ostvarenju, ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja Formule II

ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so, pri čemu:

R<1>je izabran iz grupe koja sadrži vodonik, halogen, (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi, halo(C1-C6)alkoksi, -N(R<6>)(R<7>) i (C3-C6)cikloalkil grupu, pri čemu je navedena (C3-C6)cikloalkil grupa opciono supstituisana sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, hidroksi, (C1-C6)alkil i (C1-C6)alkoksi grupu;

R<6>i R<7>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži vodonik i (C1-C6)alkil grupu, pri čemu je (C1-C6)alkil grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen i hidroksi grupu, ili R<6>i R<7>uzeti zajedno sa azotom za koji su vezani formiraju (4- do 8-člani)heterocikloalkil koji je opciono supstituisan sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi i halo(C1-C6)alkoksi grupu;

R<2>je:

i) -(CH2)mN(R<8>)(R<9>), gde je m ceo broj izabran od 0, 1, 2, ili 3 a R<8>i R<9>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži vodonik i (C1-C6)alkil grupu, pri čemu je navedena (C1-C6)alkil grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen i hidroksi grupu, ili R<8>i R<9>uzeti zajedno sa azotom za koji su vezani formiraju (4- do 6-člani)heterocikloalkil koji je opciono supstituisan sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi i halo(C1-C6)alkoksi grupu; ili

ii) (4- do 6-člani)heterocikloalkil, pri čemu je navedeni heterocikloalkil opciono supstituisan sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi i halo(C1-C6)alkoksi grupu;

R<5>je izabran iz grupe koja sadrži vodonik, halogen, hidroksi, (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi i halo(C1-C6)alkoksi grupu; i

R<12>je izabran iz grupe koja sadrži (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil i -(CH2)n(C3-C6)cikloalkil grupu, gde je

n ceo broj 0 ili 1.

[0091] U narednom ostvarenju, u Formuli II kako je prethodno opisano, R<1>je -N(R<6>)(R<7>) a R<6>i R<7>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži vodonik i (C1-C6)alkil grupu, pri čemu je navedena (C1-C6)alkil grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 halogena.

[0092] U narednom ostvarenju Formule II, R<1>je -N(R<6>)(R<7>) a (R<6>) i (R<7>) su svaki nezavisno metil grupa.

[0093] U narednom ostvarenju Formule II, R<1>je -N(R<6>)(R<7>) a (R<6>) i (R<7>) su svaki nezavisno etil grupa.

[0094] U narednom ostvarenju Formule II, R<1>je -N(R<6>)(R<7>) a jedan od (R<6>) i (R<7>) je vodonik a drugi je metil grupa.

[0095] U narednom ostvarenju Formule II, R<1>je -N(R<6>)(R<7>) a jedan od (R<6>) i (R<7>) je metil a drugi je etil grupa.

[0096] U čak još jednom ostvarenju Formule II, R<1>je -N(R<6>)(R<7>) a R<6>i R<7>uzeti zajedno sa azotom za koji su vezani formiraju (4- do 8-člani)heterocikloalkil koji je opciono supstituisan sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi i halo(C1-C6)alkoksi grupu. Kada R<6>i R<7>uzeti zajedno formiraju (4-do 8-člani)heterocikloalkil, heterocikloalkil može da bude izabran iz grupe koja sadrži azetidinil, pirolidinil i azabiciklo[2.2.1]heptil.

[0097] U nekim ostvarenjima Formule II, R<1>je azetidinil opciono supstituisan sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi i halo(C1-C6)alkoksi grupu.

[0098] U nekim ostvarenjima Formule II, R<1>je pirolidinil opciono supstituisan sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi i halo(C1-C6)alkoksi grupu.

[0099] U nekim drugim ostvarenjima Formule II, R<1>je (C3-C6)cikloalkil grupa, pri čemu je navedena (C3-C6)cikloalkil grupa opciono supstituisana sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, hidroksi, (C1-C6)alkil i (C1-C6)alkoksi grupu. Kada je R<1>(C3-C6)cikloalkil, (C3-C6)cikloalkil je ciklopropil.

[0100] U čak još jednom ostvarenju Formule II, R<1>je (C1-C6)alkil grupa izabrana iz grupe koja sadrži metil, etil, propil, izopropil, butil i terc-butil grupu.

[0101] U narednom ostvarenju Formule II, R<1>je vodonik.

[0102] Podrazumeva se da bilo koja od prethodno pomenutih podgrupa (ostvarenja Formule II) za R<1>može da se kombinuje zajedno sa bilo kojom od podgrupa za R<2>, R<5>i R<12>kako je opisano prethodno i u daljem tekstu za Formulu II.

[0103] U narednom ostvarenju, u Formuli II kako je prethodno opisano, R<2>je -(CH2)mN(R<8>)(R<9>), gde je m 1 a jedan od (R<8>) i (R<9>) je vodonik a drugi je metil grupa.

[0104] U narednom ostvarenju Formule II, R<2>je -(CH2)mN(R<8>)(R<9>), gde je m = 1 a (R<8>) i (R<9>) su oba vodonik.

[0105] U nekim drugim ostvarenjima Formule II, R<2>je (4- do 6-člani)heterocikloalkil a heterocikloalkil je azetidinil.

[0106] Podrazumeva se da bilo koja od prethodno pomenutih podgrupa (ostvarenja Formule II) za R<2>može da se kombinuje zajedno sa bilo kojom od podgrupa za R<1>, R<5>i R<12>kako je opisano prethodno i u daljem tekstu za Formulu II.

[0107] U narednom ostvarenju, u Formuli II kako je prethodno opisano, R<12>je (C1-C6)alkil grupa izabrana iz grupe koja sadrži etil, etil, propil, propil, izopropil, butil i terc-butil grupu.

[0108] U narednom ostvarenju Formule II, R<12>je halo(C1-C6)alkil grupa izabrana iz grupe koja sadrži fluorometil, fluoroetil, difluorometil, difluoroetil, trifluorometil, triflourobutanil i trifluoropentanil.

[0109] U čak još jednom ostvarenju Formule II, R<12>je -(CH2)n(C3-C6)cikloalkil grupa, gde je n = 1 a (C3-C6)cikloalkil je ciklopropil grupa.

[0110] U nekim ostvarenjima, jedinjenje Formule II ima apsolutnu stereohemiju kako je pokazano u Formuli II-A ili II-B:

ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu su R<1>, R<2>, R<5>i R<12>kako je definisano za Formulu II.

[0111] Svako od ovde opisanih ostvarenja u vezi sa Formulom II je takođe primenljivo na jedinjenja Formula II-A i II-B

[0112] U narednom ostvarenju, ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja Formule III

ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so, pri čemu:

R<6>i R<7>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži vodonik i (C1-C6)alkil grupu, pri čemu je navedena (C1-C6)alkil grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen i hidroksi grupu, ili R<6>i R<7>uzeti zajedno sa azotom za koji su vezani formiraju (4- do 8-člani)heterocikloalkil koji je opciono supstituisan sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi i halo(C1-C6)alkoksi grupu;

R<2>je:

i) -(CH2)mN(R<8>)(R<9>), pri čemu je m ceo broj izabran od 0, 1, 2, ili 3 a R<8>i R<9>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži vodonik i (C1-C6)alkil grupu, pri čemu je navedena (C1-C6)alkil grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen i hidroksi grupu, ili R<8>i R<9>uzeti zajedno sa azotom za koji su vezani formiraju (4- do 6-člani)heterocikloalkil koji je opciono supstituisan sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi i halo(C1-C6)alkoksi grupu; ili

R<12>je izabran iz grupe koja sadrži (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil i -(CH2)n(C3-C6)cikloalkil grupu.

[0113] U narednom ostvarenju, u Formuli III kako je prethodno opisano, R<1>je -N(R<6>)(R<7>) a R<6>i R<7>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži vodonik i (C1-C6)alkil grupu, pri čemu je navedena (C1-C6)alkil grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 halogena.

[0114] U narednom ostvarenju Formule III, R<1>je -N(R<6>)(R<7>) a R<6>i R<7>su svaki metil grupa.

[0115] U narednom ostvarenju Formule III, R<1>je -N(R<6>)(R<7>) a R<6>i R<7>su svaki etil grupa.

[0116] U narednom ostvarenju Formule III, R<1>je -N(R<6>)(R<7>) a jedan od R<6>i R<7>je vodonik a drugi je metil grupa.

[0117] U narednom ostvarenju Formule III, R<1>je -N(R<6>)(R<7>) a jedan od R<6>i R<7>je metil a drugi je etil grupa.

[0118] U čak još jednom ostvarenju Formule III, R<1>je -N(R<6>)(R<7>) a R<6>i R<7>uzeti zajedno sa azotom za koji su vezani formiraju (4- do 8-člani)heterocikloalkil koji je opciono supstituisan sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi i halo(C1-C6)alkoksi grupu. Kada R<6>i R<7>uzeti zajedno formiraju (4-do 8-člani)heterocikloalkil, heterocikloalkil može da bude izabran iz grupe koja sadrži azetidinil, pirolidinil i azabiciklo[2.2.1]heptil.

[0119] U nekim ostvarenjima Formule III, R<1>je azetidinil opciono supstituisan sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi i halo(C1-C6)alkoksi grupu.

[0120] U nekim ostvarenjima Formule III, R<1>je pirolidinil opciono supstituisan sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi i halo(C1-C6)alkoksi grupu.

[0121] U nekim drugim ostvarenjima Formule III, R<1>je (C3-C6)cikloalkil grupa, pri čemu je navedena (C3-C6)cikloalkil grupa opciono supstituisana sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, hidroksi, (C1-C6)alkil i (C1-C6)alkoksi grupu. Kada je R<1>(C3-C6)cikloalkil, (C3-C6)cikloalkil je ciklopropil grupa.

[0122] U čak još jednom ostvarenju Formule III, R<1>je (C1-C6)alkil grupa izabrana iz grupe koja sadrži metil, etil, propil, izopropil, butil i terc-butil grupu.

[0123] U narednom ostvarenju Formule III, R<1>je vodonik.

[0124] Podrazumeva se da bilo koja od prethodno pomenutih podgrupa (ostvarenja Formule III) za R<1>može da se kombinuje zajedno sa bilo kojom od podgrupa za R<2>, R<5>i R<12>kako je opisano prethodno i u daljem tekstu za Formulu III.

[0125] U narednom ostvarenju, u Formuli III kako je prethodno opisano, R<2>je -(CH2)mN(R<8>)(R<9>), gde je m = 1 a jedan od (R<8>) i (R<9>) je vodonik a drugi je metil grupa.

[0126] U narednom ostvarenju Formule III, R<2>je -(CH2)mN(R<8>)(R<9>), gde je m = 1 a R<8>i R<9>su oba vodonik.

[0127] U nekim drugim ostvarenjima Formule III, R<2>je (4- do 6-člani)heterocikloalkil i heterocikloalkil je azetidinil.

[0128] Podrazumeva se da bilo koja od prethodno pomenutih podgrupa (ostvarenja Formule III) za R<2>može da se kombinuje zajedno sa bilo kojom od podgrupa za R<1>, R<5>i R<12>kako je opisano prethodno i u daljem tekstu za Formulu III.

[0129] U narednom ostvarenju, u Formuli III kako je prethodno opisano, R<12>je (C1-C6)alkil grupa izabrana iz grupe koja sadrži etil, etil, propil, propil, izopropil, butil i terc-butil grupu.

[0130] U narednom ostvarenju Formule III, R<12>je halo(C1-C6)alkil grupa izabrana iz grupe koja sadrži fluorometil, fluoroetil, difluorometil, difluoroetil, trifluorometil, triflourobutanil i trifluoropentanil grupu.

[0131] U čak još jednom ostvarenju Formule III, R<12>je -(CH2)n(C3-C6)cikloalkil grupa, gde je n = 1 a (C3-C6)cikloalkil je ciklopropil grupa.

[0132] U nekim ostvarenjima, jedinjenje Formule III ima apsolutnu stereohemiju kako je pokazano u Formuli III-A ili III-B:

ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu su R<1>, R<2>, R<5>i R<12>kako je definisano za Formulu III.

[0133] Svako od ovde opisanih ostvarenja u vezi sa Formulom III je takođe primenljivo na jedinjenja Formula III-A i III-B.

[0134] U još jednom aspektu, pronalazak obezbeđuje jedinjenje izabrano iz grupe koja sadrži:

4-[(metilamino)metil]-6-(pirolidin-1-il)-2-(6-{4-[(2S)-4,4,4-trifluorobutan-2-il]-4H-1,2,4-triazol-3-il}piridin-2-il)-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

6-(dimetilamino)-4-[(metilamino)metil]-2-(6-{4-[(2S)-4,4,4-trifluorobutan-2-il]-4H-1,2,4-triazol-3-il}piridin-2-il)-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

2-{6-[4-(ciklopropilmetil)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-6-(dimetilamino)-4-[(metilamino)metil]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

2-(6-{4-[(2S)-butan-2-il]-4H-1,2,4-triazol-3-il}piridin-2-il)-6-(dimetilamino)-4-[(metilamino)metil]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

6-(dimetilamino)-2-[6-(4-etil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-4-[(metilamino)metil]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

6-(dimetilamino)-4-[(metilamino)metil]-2-{6-[(4S)-4-metil-2-okso-1,3-oksazolidin-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

4-(aminometil)-2-{6-[4-(ciklopropilmetil)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-6-(dimetilamino)-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

4-(aminometil)-6-(dimetilamino)-2-{6-[5-(propan-2-il)-1H-pirazol-4-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

4-[(metilamino)metil]-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

4-(aminometil)-6-(dimetilamino)-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

4-(aminometil)-6-(dimetilamino)-2-(6-{4-[(2S)-4,4,4-trifluorobutan-2-il]-4H-1,2,4-triazol-3-il}piridin-2-il)-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

6-(dimetilamino)-4-[(metilamino)metil]-2-(6-{4-[(3S)-1,1,1-trifluoropentan-3-il]-4H-1,2,4-triazol-3-il}piridin-2-il)-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

6-(dimetilamino)-2-{5-fluoro-6-[5-(propan-2-il)-1H-pirazol-4-il]piridin-2-il}-4-[(metilamino)metil]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

6-(azetidin-1-il)-4-[(metilamino)metil]-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

4-(aminometil)-6-[(2R,4R)-2,4-dimetilazetidin-1-il]-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

6-[(1s,4s)-7-azabiciklo[2.2.1]hept-7-il]-4-[(metilamino)metil]-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

4-(aminometil)-6-ciklopropil-2-{6-[(4S)-4-metil-2-okso-1,3-oksazolidin-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

6-[(2R,5S)-2,5-dimetilpirolidin-1-il]-4-[(metilamino)metil]-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

6-(dietilamino)-2-[6-(4-etil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-4-[(metilamino)metil]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

6-[(2R,4R)-2,4-dimetilazetidin-1-il]-4-[(metilamino)metil]-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

4-(aminometil)-6-(dimetilamino)-2-{6-[(4S)-4-metil-2-okso-1,3-oksazolidin-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

4-(aminometil)-6-ciklopropil-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

6-(azetidin-1-il)-4-[(metilamino)metil]-2-{6-[(4S)-4-metil-2-okso-1,3-oksazolidin-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

4-(aminometil)-6-[(2R,4S)-2,4-dimetilazetidin-1-il]-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

4-(aminometil)-6-(dimetilamino)-2-{6-[5-(propan-2-il)-1H-1,2,3-triazol-1-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

4-[(metilamino)metil]-6-(propan-2-il)-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

6-ciklopropil-4-[(metilamino)metil]-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

4-(aminometil)-6-[(2R,4R)-2,4-dimetilazetidin-1-il]-2-{6-[(4S)-4-metil-2-okso-1,3-oksazolidin-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

6-ciklopropil-4-[(metilamino)metil]-2-{6-[(4S)-4-metil-2-okso-1,3-oksazolidin-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

4-(aminometil)-6-(dietilamino)-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

4-(aminometil)-2-{6-[(4S)-4-metil-2-okso-1,3-oksazolidin-3-il]piridin-2-il}-6-(propan-2-il)-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

6-(dietilamino)-4-[(metilamino)metil]-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

4-(aminometil)-6-(azetidin-1-il)-2-{6-[(4S)-4-metil-2-okso-1,3-oksazolidin-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

6-[(2R,5R)-2,5-dimetilpirolidin-1-il]-4-[(metilamino)metil]-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

4-(aminometil)-6-(1-metilciklopropil)-2-{6-[(4S)-4-metil-2-okso-1,3-oksazolidin-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

4-[(metilamino)metil]-6-(1-metilciklopropil)-2-{6-[(4S)-4-metil-2-okso-1,3-oksazolidin-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

6-[etil(metil)amino]-4-[(metilamino)metil]-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

6-(dimetilamino)-2-{6-[(4R)-4-(fluorometil)-2-okso-1,3-oksazolidin-3-il]piridin-2-il}-4-[(metilamino)metil]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

6-metil-4-[(metilamino)metil]-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

6-(dimetilamino)-4-[(metilamino)metil]-2-[6-(4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

4-[(metilamino)metil]-6-(1-metilciklopropil)-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

4-[(metilamino)metil]-6-[metil(propan-2-il)amino]-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

2-{6-[(4R)-4-(difluorometil)-2-okso-1,3-oksazolidin-3-il]piridin-2-il}-6-(dimetilamino)-4-[(metilamino)metil]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

6-terc-butil-4-[(metilamino)metil]-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

4-(aminometil)-6-terc-butil-2-{6-[(4S)-4-metil-2-okso-1,3-oksazolidin-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

6-terc-butil-4-[(metilamino)metil]-2-{6-[(4S)-4-metil-2-okso-1,3-oksazolidin-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

6-amino-4-[(metilamino)metil]-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

6-terc-butil-4-[(metilamino)metil]-2-(6-{4-[(3S)-1,1,1-trifluoropentan-3-il]-4H-1,2,4-triazol-3-il}piridin-2-il)-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

4-[(metilamino)metil]-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-6-(trifluorometil)-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

6-[(2R,4S)-2,4-dimetilazetidin-1-il]-4-[(metilamino)metil]-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on;

ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so.

[0135] U još jednom aspektu, pronalazak obezbeđuje jedinjenje izabrano iz grupe koja sadrži jedinjenja navedena u Tabeli 1, uključujući Primere 1 i 53, ili njihove farmaceutski prihvatljive soli. U još jednom aspektu, pronalazak obezbeđuje jedinjenje izabrano iz grupe koja sadrži jedinjenja navedena u ovde datim Primerima 1 do 53, ili njihove farmaceutski prihvatljive soli. U još jednom aspektu, pronalazak se odnosi na bilo koje ili na više jedinjenja koja su ovde pokazana, ili na njihove farmaceutski prihvatljive soli.

[0136] Jedinjenja iz pronalaska su optimizovana za selektivnost protiv HPK1 kinaze.

[0137] "Farmaceutska kompozicija" se odnosi na smešu jednog ili više ovde opisanih jedinjenja, ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, solvata, hidrata ili njihovog proleka kao aktivnog sastojka i najmanje jednog farmaceutski prihvatljivog nosača ili ekscipijenta. U nekim ostvarenjima, farmaceutska kompozicija uključuje dva ili više farmaceutski prihvatljivih nosača i/ili ekscipijenata. U drugim ostvarenjima, farmaceutska kompozicija dalje uključuje jedno dodatno antikancerogeno terapeutsko sredstvo.

[0138] U narednom ostvarenju, pronalazak obezbeđuje farmaceutsku kompoziciju koja uključuje jedinjenje jedne od ovde opisanih formula, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so i farmaceutski prihvatljiv nosač ili ekscipijent. U nekim ostvarenjima, farmaceutska kompozicija uključuje dva ili više farmaceutski prihvatljivih nosača i/ili ekscipijenata.

[0139] U nekim ostvarenjima, farmaceutska kompozicija dalje uključuje najmanje jedno dodatno anti-kancerogeno terapeutsko sredstvo ili palijativno sredstvo. U nekim ovakvim ostvarenjima, najmanje jedno dodatno sredstvo je anti-kancerogeno terapeutsko sredstvo kako je niže opisano. U nekim ovakvim ostvarenjima, kombinacija obezbeđuje aditivni, više od aditivnog ili sintergistički anti-kancerogeni efekat.

[0140] U jednom ostvarenju, pronalazak obezbeđuje postupak za tretman nenormalnog rasta ćelija u subjektu kome je to potrebno, uključujući primenu na subjektu terapeutski efektivne količine jedinjenja iz pronalaska ili njegove farmaceutski prihvatljive soli.

[0141] U narednom ostvarenju, pronalazak obezbeđuje postupak za tretman nenormalnog rasta ćelija u subjektu kome je to potrebno, uključujući primenu na subjektu neke količine jedinjenja iz pronalaska ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, u kombinaciji sa nekom količinom dodatnog farmaceutskog sredstva (na primer, antikancerogenog terapeutskog sredstva), pri čemu su ove količine zajedno efektivne u lečenju navedenog nenormalnog rasta ćelija.

[0142] U čestim ostvarenjima ovde navedenih postupaka, nenormalan rast ćelija je kancer.

Jedinjenja iz pronalaska mogu da se primene kao pojedinačna sredstva, ili mogu da se primene u kombinaciji sa drugim antikancerogenim terapeutskim sredstvima, posebno standardnim sredstvima koja su odgovarajuća za određeni kancer.

[0143] U nekim ostvarenjima, postupci obezbeđuju rezultat u jednom ili više od sledećih efekata: (1) inhibiciji proliferacije ćelija kancera; (2) inhibiciji invaznivnosti ćelija kancera; (3) indukciji apoptoza ćelija kancera; (4) inhibiciji metastaza ćelija kancera; (5) inhibiciji angiogeneza; (6) pojačavanju odgovora T-ćelija; ili (7) pojačavanju anti-tumorne aktivnosti.

[0144] U još jednom aspektu, pronalazak obezbeđuje postupak za tretman poremećaja posredovanog aktivnošću HPK1 kinaze, u subjektu, kao što su neki kanceri, uključujući primenu na subjektu jedinjenja iz pronalaska ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, u količini koja je efektivna za lečenje navedenog poremećaja.

[0145] Ukoliko nije drugačije navedeno, sve reference koje se ovde odnose na inventivna jedinjenja uključuju reference za njihove soli, solvate, hidrate i komplekse i na solvate, hidrate i komplekse njihovih soli, uključujući polimorfe, stereoizomere i njihove izotopno obeležene verzije.

[0146] Jedinjenja iz pronalaska mogu da egzistiraju u obliku farmaceutski prihvatljivih soli kao što su, na primer, soli nastale dodatkom kiseline ili soli nastale dodatkom baze jedinjenja jedne od formula koje su ovde date. Kako se ovde koristi, naziv "farmaceutski prihvatljiva so" se odnosi na one soli koje zadržavaju biološku efikasnost i karakteristike osnovnog jedinjenja. Izraz "farmaceutski prihvatljiva so(li)", kako se ovde koristi, ukoliko nije drugačije navedeno, uključuje soli kiselih ili baznih grupa koje mogu da budu prisutne u jedinjenjima formula kako je ovde otkriveno.

[0147] Na primer, jedinjenja iz pronalaska koja su prirodno bazna su sposobna da formiraju veliki broj različitih soli sa različitim neorganskim i organskim kiselinama. Mada ovakve soli moraju da budu farmaceutski prihvatljive za primenu na životinjama, u praksi je često poželjno da se iz reaktivne smeše prvo izdvoji jedinjenje iz ovog pronalaska kao farmaceutski neprihvatljiva so, nakon toga se jednostavno ponovo konvertuje u slobodnu bazu jedinjenja tretmanom sa alkalnim reagensom a zatim se slobodna baza naknadno konvertuje u farmaceutski prihvatljivu so dodatkom kiseline. Soli nastale dodatkom kiseline u bazna jedinjenja iz ovog pronalaska mogu da se izrade tretiranjem baznog jedinjenja sa u potpunosti ekvivalentnom količinom izabrane mineralne ili organske kiseline u vodenom medijumu rastvarača ili u pogodnom organskom rastvaraču kao što su metanol ili etanol. Nakon evaporacije rastvarača, dobija se tražena čvrsta so.Tražena kisela so može takođe da precipitira iz rastvora slobodne baze u organkom rastvaraču dodavanjem u rastvor odgovarajuće mineralne ili organske kiseline.

[0148] Kiseline koje mogu da se koriste za izradu farmaceutski prihvatljivih soli nastalih dodatkom kiseline u ovakva bazna jedinjenja su one koje formiraju netoksične soli dodatkom kiseline, to jest, soli koje sadrže farmakološki prihvatljive anjone kao što su hidrohlorid, hidrobromid, hidrojodid, nitrat, sulfat, bisulfat, fosfat, kiseli fosfat, izonikotinat, acetat, laktat, salicilat, citrat, kiseli citrat, tartarat, pantotenat, bitartarat, askorbat, sukcinat, maleat, gentisinat, fumarat, glukonat, glukuronat, saharat, format, benzoat, glutamat, metansulfonat, etansulfonat, benzensulfonat, p-toluensulfonat i pamoat [to jest, 1,1’-metilen-bis-(2-hidroksi-3-naftoat)].

[0149] Primeri soli uključuju, ali se ne ograničavaju samo na, acetatne, akrilatne, benzensulfonatne, benzoatne (kao što su hlorbenzoat, metilbenzoat, dinitrobenzoat, hidroksibenzoat i metoksibenzoat), bikarbonatne, bisulfatne, bisulfitne, bitartaratne, boratne, bromidne, butin-1,4-dioatne, kalcijum edetatne, kamsilatne, karbonatne, hloridne, kaproatne, kaprilatne, klavulanatne, citratne, dekanoatne, dihidrohloridne, dihidrogenfosfatne, edetatne, edisilatne, estolatne, esilatne, etil-sukcinatne, formatne, fumaratne, gluceptatne, glukonatne, glutamanet, glikolatne, glikolilarsanilatne, heptanoatne, heksin-1,6-dioatne, heksilresorcinatne, hidrabaminne, hidrobromidne, hidrohloridne, γ-hidroksibutiratne, jodidne, izobutiratne, izotionatne, laktatne, laktobionatne, lauratne, malatne, maleatne, malonatne, mandelatne, mesilatne, metafosfatne, metan-sulfonatne, metilsulfatne, monohidrogenfosfatne, mukatne, napsilatne, naftalen-1-sulfonatne, naftalen-2-sulfonatne, nitratne, oleatne, oksalatne, pamoatne (embonatne), palmitatne, pantotenatne, fenilacetatne, fenilbutiratne, fenilpropionatne, ftalatne, fosfat/difosfatne, poligalakturonatne, propansulfonatne, propionatne, propiolatne, pirofosfatne, pirosulfatne, salicilatne, stearatne, subacetatne, suberatne, sukcinatne, sulfatne, sulfonatne, sulfitne, tanatne, tartaratne, teoklatne, tosilatne, trietiodatne i valeratne soli.

[0150] Ilustrativni primeri odgovarajućih soli uključuju organske soli dobijene od amino kiselina, kao što su glicin i arginin, amonijaka, primarnih, sekundarnih i tercijernih amina i cikličnih amina kao što su piperidin, morfolin i piperazin i neorganske soli dobijene od natrijuma, kalcijuma, kalijuma, magnezijuma, mangana, gvožđa, bakra, cinka, aluminijuma i litijuma.

[0151] Jedinjenja iz pronalaska koja uključuju bazni ostatak, kao što je amino grupa, mogu da formiraju farmaceutski prihvatljive soli sa različitim amino kiselinama, pored kiselina koje su prethodno navedene.

[0152] Ona jedinjenja iz pronalaska koja su po prirodi kisela su sposobna da formiraju bazne soli sa različitim farmakološki prihvatljivim katjonima. Primeri ovakvih soli uključuju soli alkalnih metala ili zemno-alkalnih metala a posebno soli natrijuma i kalijuma. Sve ove soli se izrađuju uobičajenim tehnikama. Hemijske baze koje se koriste kao reagensi za izradu farmaceutski prihvatljivih baznih soli iz ovog pronalaska su one koje formiraju ne-toksične bazne soli sa ovde datim kiselim jedinjenjima. Ove soli mogu da se izrade bilo kojim odgovarajućim postupkom, na primer, tretmanom slobodne kiseline sa neorganskom ili organskom bazom kao što su amin (primarni, sekundarni ili tercijerni), hidroksid alkalnog metala ili hidroksid zemno-alkalnog metala ili slično. Ove soli mogu takođe da se izrade tretiranjem odgovarajućih kiselih jedinjenja sa vodenim rastvorom koji sadrži tražene farmakološki prihvatljive katjone, a nakon toga evaporacijom nastalog rastvora do sušenja, poželjno je pod sniženim pritiskom. Alternativno, mogu takođe da se izrade mešanjem zajedno slabih alkanolnih rastvora kiselih jedinjenja i alkoksida željenog alkalnog metala, a nakon toga evaporacijom dobijenog rastvora do sušenja na isti način kao prethodno. U svakom slučaju, poželjna je primena stehiometrijskih količina reagenasa kako bi se osigurala kompletnost reakcije i maksimalan prinos željenog finalnog produkta.

[0153] Hemijske baze koje mogu da se koriste kao reagensi za izradu farmaceutski prihvatljivih baznih soli jedinjenja iz pronalaska koja su po prirodi kisela su one koje formiraju netoksične bazne soli sa ovim jedinjenjima. Ovakve netoksične bazne soli uključuju, ali se ne organičavaju samo na, one dobijene od takvih farmakološki prihvatljivih katjona kao što su katjoni alkalnog metala (na primer, kalijuma i natrijuma) i katjoni zemno alkalnog metala (na primer, kalcijuma i magnezijuma), amonijaka ili soli nastale dodatkom amina rastvorljivih u vodi kao što su N-metilglukamin-(meglumin) i niži alkanolamonijum i druge bazne soli farmaceutski prihvatljivih organskih amina.

[0154] Takođe mogu da se formiraju hemisoli kiselina i baza, na primer, hemisulfatne i hemikalcijumove soli.

[0155] Za pregled odgovarajućih soli, videti Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection and Use by Stahl and Wermuth (Wiley-VCH, 2002). Postupci za izradu farmaceutski prihvatljivih soli jedinjenja iz pronalaska su poznati stručnjaku sa iskustvom u tehnici.

[0156] Soli iz ovog pronalaska mogu da se izrade u skladu sa postupcima poznatim stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Farmaceutski prihvatljiva so inventivnih jedinjenja može lako da se izradi mešanjem zajedno rastvora jedinjenja i željene kiseline ili baze, po potrebi. So može da precipitira iz rastvora i da se sakupi filtriranjem ili može da se obnovi evaporacijom rastvarača. Stepen jonizacije soli može da varira od potpuno jonizovane do skoro nejonizovane.

[0157] Stručnjaku sa iskustvom u tehnici će da bude jasno da jedinjenja iz pronalaska u obliku slobodne baze koja imaju baznu funkcionalnu grupu mogu da se konvertuju u soli dodatkom kiseline tretiranjem sa stehiometrijskim viškom odgovarajuće kiseline. Soli jedinjenja iz pronalaska nastale dodatkom kiseline mogu da se rekonvertuju u odgovarajuću slobodnu bazu tretiranjem sa stehiometrijskim viškom pogodne baze kao što su kalijum karbonat ili natrijum hidroksid, obično u prisustvu vodenog rastvarača i na temperaturi od između približno 0° C i 100° C. Oblik slobodne baze može da se izoluje uobičajenim načinima kao što je ekstrakcija sa organskim rastvaračem. Pored toga, soli jedinjenja iz pronalaska nastale dodatkom kiseline mogu da se zamene korišćenjem prednosti različitih rastvorljivosti soli, isparljivosti ili kiselosti kiselina ili tretiranjem sa odgovarajuće naeletriksanom smolom jonskih izmenjivača. Na primer, izmena može da se izvrši reakcijom soli jedinjenja iz pronalaska sa blagim stehiometrijskim viškom kiseline manje pK nego kisele komponente početne soli. Ova konverzija se obično izvodi na temperaturi između približno 0°C i tačke ključanja rastvarača koji je korišćen kao medijum za proceduru. Slične promene su moguće sa solima nastalim dodatkom baze, obično posredstvom oblika slobodne baze.

[0158] Jedinjenja iz pronalaska mogu da egzistiraju i u nesolvatisanim i solvatisanim oblicima. Kada je rastvarač ili voda čvrsto vezan, kompleks će da ima dobro definisanu stehiometriju nezavisno od vlažnosti. Međutim, kada je rastvarač ili voda slabo vezan, kao u kanalnim solvatima i hikroskopnim jedinjenjima, sadržaj vode/rastvarača će da zavisi od vlažnosti i uslova sušenja. U ovim slučajevima, nestehiometrija će da bude norma. Naziv ’solvat’ se ovde koristi da opiše molekularni kompleks koji uključuje jedinjenje iz pronalaska i jednu ili više molekula farmaceutski prihvatljivog rastvarača, na primer, etanola. Naziv ’hidrat’ se koristi kada je rastvarač voda. Farmaceutski prihvatljivi solvati u skladu sa pronalaskom uključuju hidrate i solvate, pri čemu rastvarač za kristalizaciju može da bude izotopno supstituisan, na primer D2O, d6-aceton, d6-DMSO.

[0159] Takođe su okvirom pronalaska uključeni kompleksi kao što su klatrati, kompleksi inkluzije lek-domaćin pri čemu, za razliku od prethodno pomenutih solvata, lek i domaćin su prisutni u stehiometrijskim ili ne-stehiometrijskim količinama. Takođe su uključeni kompleksi leka koji sadrže dve ili više organskih i/ili neorganskih komponenti koje mogu da budu u stehiometrijskim i ne-stehiometrijskim količinama. Nastali kompleksi mogu da budu jonizovani, delimično jonizovani ili nejonizovani. Za pregled ovakvih kompleksa videti J Pharm Sci, 64 (8), 1269-1288 by Haleblian (August 1975), otkriće koje je ovde uključeno kao referenca u celosti.

[0160] Pronalazak se takođe odnosi na prolekove jedinjenja ovde datih formula. Prema tome, neki derivati jedinjenja iz pronalaska koji sami mogu da imaju malu ili su bez farmakološke aktivnosti mogu, kada se primene na pacijentu, da se konvertuju u inventivna jedinjenja, na primer, hidrolitičkim cepanjem. Ovakvi derivati su označeni kao ’prolekovi’. Dodatne informacije o upotrebi prolekova mogu da se nađu u ’Pro-drugs as Novel Delivery Systems, Vol. 14, ACS Symposium Series (T Higuchi and W Stella) i ’Bioreversible Carriers in Drug Design’, Pergamon Press, 1987 (ed. E B Roche, American Pharmaceutical Association), otkriće koje je ovde uključeno kao referenca u celosti.

[0161] Prolekovi mogu da se produkuju, na primer, zamenom odgovarajućih funkcionalnih grupa prisutnih u inventivnim jedinjenjima sa nekim ostacima poznatim stručnjaku sa iskustvom u tehnici kao ’pro-ostaci’ kako je opisano, na primer, in "Design of Prodrugs" od H Bundgaard (Elsevier, 1985). Strukturno nedefinisani prolekovi nisu deo pronalaska za koji se traži zaštita.

[0162] Neki neograničavajući primeri prolekova uključuju:

(i) kada jedinjenje sadrži karboksilnu kiselu grupu (-COOH), njegov estar, na primer, zamenom vodonika sa (C1-C8)alkil grupom;

(ii) kada jedinjenje sadrži alkoholnu funkcionalnu grupu (-OH), njegov etar, na primer, zamenom vodonika sa (C1-C6)alkanoiloksimetil grupom, ili sa fosfatnom etarskom grupom; i (iii) kada jedinjenje sadrži primarnu ili sekundarnu amino funkcionalnu grupu (-NH2ili -NHR gde R ≠ H), njegov amid, na primer, zamenom jednog ili oba vodonika sa pogodnom metabolički labilnom grupom kao što su amid, karbamat, urea, fosfonat, sulfonat, itd.

[0163] Naredni primeri zamenjenih grupa u skladu sa narednim primerima i primerima drugih tipova proleka mogu da se nađu u prethodno pomenutim referencama.

[0164] Konačno, neka inventivna jedinjenja mogu sama da deluju kao prolekovi drugih inventivnih jedinjenja.

[0165] Jedinjenja ovde datih formula mogu da imaju asimetrične atome ugljenika. Ugljenikugljenik veze jedinjenja iz pronalaska mogu ovde da budu označene korišćenjem pune linije ( ), punog klina ( ), ili isprekidanog klina ( ). Upotreba pune linije za označavanje veza za asimetrične atome ugljenika treba da ukaže da su uključeni svi mogući stereoizomeri (na primer specifični enantiomeri, racematne smeše, itd.) za taj atom ugljenika. Upotreba ili punog ili isprekidanog klina za označavanje veza za asimetrične atome ugljenika treba da ukaže da treba da bude uključen samo pokazani stereoizomer. Moguće je da jedinjenja iz pronalaska mogu da sadrže više od jednog asimetričnog atoma ugljenika. U tim jedinjenjima upotreba pune linije za opis veza za asimetrične atome ugljenika treba da pokaže da svi mogući stereoizomeri treba da budu uključeni i vezani za stereocentar. Na primer, ukoliko nije drugačije navedeno, to ukazuje da jedinjenja iz pronalaska mogu da egzistiraju kao enantiomeri i diastereomeri ili kao njihovi racemati i smeše. Upotreba pune linije za opis veza za jedan ili više asimetričnih atoma ugljenika u jedinjenju iz pronalaska i upotreba punog ili isprekidanog klina za opis veza za druge asimetrične atome ugljenika u istom jedinjenju treba da pokaže da je prisutna smeša diastereomera.

[0166] Jedinjenja iz pronalaska koja imaju asimetrične centre mogu da egzistiraju kao stereoizomeri, kao što su racemati, enantiomeri ili diastereomeri.

[0167] Stereoizomeri jedinjenja ovde datih formula mogu da uključe cis i trans izomere, optičke izomere kao što su su (R) i (S) enantiomeri, diastereomere, geometrijske izomere, rotacione izomere, atropizomere, konformacione izomere i tautomere jedinjenja iz pronalaska, uključujući jedinjenja koja ispoljavaju više od jednog tipa izomerizma; i njihove smeše (kao što su racemati i diastereomerni parovi).

[0168] Takođe su uključene soli nastale dodatkom kiseline ili nastale dodatkom baze, pri čemu je kaunterjon optički aktivan, na primer, d-laktat ili l-lizin, ili racemat, na primer, dltartarat ili dl-arginin.

[0169] Kada bilo koji racemat kristališe, mogući su kristali dve različite vrste. Prvi tip je racematno jedinjenje (pravi racemat) prethodno pomenut pri čemu se produkuje jedan homogeni oblik kristala koji sadrži oba enantiomera u ekvimolarnim količinama. Drugi tip je racematna smeša ili konglomerat pri čemu su produkovana dva oblika kristala u ekvimolarnim količinama od kojih svaki uključuje jedan enantiomer.

[0170] Jedinjenja iz pronalaska mogu da ispolje fenomen tautomerizma i struktornog izomerizma. Na primer, jedinjenja mogu da egzistiraju u više tautomernih oblika, uključujući oblik enola i imina i oblik keto i enamina i njihove geometrijske izomerizme i smeše. Svio ovakvi tautomerni oblici su obuhvaćeni okvirom jedinjenja iz pronalaska. Tautomeri egzistiraju kao smeše tautomernog seta u rastvoru. U čvrstom obliku, obično je predominantan jedan tautomer. Čak i kada može da se opiše jedan tautomer, ovaj pronalazak uključuje sve tautomere jedinjenja ovde datih formula.

[0171] Pored toga, neka jedinjenja iz pronalaska mogu da formiraju atropizomere (na primer, supstituisane biarile). Atropizomeri su konformacioni stereoizomeri koji se javljaju kada je sprečena ili značajno usporena rotacija oko jedne veze u molekuli, kao rezultat sterne interakcije sa drugim delovima molekule a supstituenti na oba kraja pojedinačne veze su nesimetrični. Interkonverzija atropizomera je dovoljno spora da omogući razdvajanje i izolaciju pod prethodno određenim uslovima. Energetska barijera za termalnu racemizaciju može da se odredi sternim ometanjem slobodne rotacije jedne ili više veza koje formiraju asimetrične ose.

[0172] Kada jedinjenje iz pronalaska sadrži alkenil ili alkenilen grupu, mogući su geometrijski cis/trans (ili Z/E) izomeri. Cis/trans izomeri mogu da se razdvoje uobičajenim tehnikama dobro poznatim stručnjaku sa iskustvom u tehnici, na primer, hromatografijom i frakcionom kristalizacijom.

[0173] Uobičajene tehnike za izradu/izolovanje pojedinačnih enantiomera uključuju asimetrične sinteze iz pogodnog optički čistog prekursora ili rezoluciju racemata (ili racemata soli ili derivata) koristeći, na primer, asimetričnu visoko efikasnu tečnu hromatografiju (HPLC) ili kritičnu hromatografiju fluida (SFC).

[0174] Alternativno, racemat (ili racematni prekursor) može da reaguje sa odgovarajućim optički aktivnim jedinjenjem, na primer, alkoholom, ili, u slučaju kad jedinjenje sadrži kiseli ili bazni ostatak, sa kiselinom ili bazom kao što su vinska kiselina ili 1-feniletilamin. Nastala diastereomerna smeša može da se razdvoji hromatografijom i/ili frakcionom kristalizacijom a jedan ili oba od diastereoizomera konvertuju u odgovarajući čist enantiomer(e) načinima dobro poznatim stručnjaku sa iskustvom u tehnici.

[0175] Asimetrična jedinjenja iz pronalaska (i njihov asimetrični prekursor) mogu da se dobiju u enantiomerno-obogaćenom obliku koristeći hromatografiju, obično HPLC, na asimetičrnoj smoli sa mobilnom fazom koja se sastoji od ugljovodonika, obično heptana ili heksana i koja sadrži od 0 do 50% izopropanol, obično od 2 do 20% i od 0 do 5% alkilamina, obično 0.1% dietilamina. Koncentracijom eluata se dobija obogaćena smeša.

[0176] Stereoizomerni konglomerati mogu da se razdvoje uobičajenim tehnikama poznatim stručnjaku sa iskustvom u tehnici, videti, na primer, "Stereochemistry of Organic Compounds" by E L Eliel (Wiley, New York, 1994), otkrivanje koje je ovde uključeno kao referenca u celosti.

[0177] Ovde opisana enantiomerno čista jedinjenja mogu da se opišu u smislu enantiomernog viška (ee), što ukazuje na stepen do koga uzorak sadrži jedan enantiomer u većoj količini nego drugi. Racematna smeša ima ee od 0%, dok pojedinačno potpuno čist enantiomer ima ee od 100%. Slično tome, diastereomerna čistoća može da se opiše u smislu diastereomernog viška (de).

[0178] Ovaj pronalazak takođe uključuje izotopno obeležena jedinjenja, koja su identična sa onima navedenim u jednoj od datih formula, ali je činjenica da je jedan ili više atoma zamenjeno sa atomom koji ima atomsku masu ili maseni broj različit od atomske mase ili masenog broja koji se obično nalazi u prirodu.

[0179] Izotopno obeležena jedinjenja iz pronalaska mogu generalno da se izrade uobičajenim tehnikama poznatim stručnjaku sa iskustvom u tehnici ili procesima koji su analogni sa ovde opisanim procesima, koristeći odgovarajući izotopno obeleženi reagens umesto neobeleženog reagensa koji se uobičajeno koristi.

[0180] Primeri izotopa koji mogu da budu inkorporirani u jedinjenja iz pronalaska uključuju izotope vodonika, ugljenika, azota, kiseonika, fosfora, fluora i hlora, kao što su, ali bez ograničenja na,<2>H,<3>H,<13>C,<14>C,<15>N,<18>O,<17>O,<31>P,<32>P,<35>S,<18>F i<36>Cl. Neka izotopnoobeležena jedinjenja iz pronalaska, na primer, ona u kojima su inkorporirani radioaktivni izotopi kao što su<3>H i<14>C su korisna u ispitivanjima distribucije leka i/ili substrata tkiva. Tricijum, to jest,<3>H i ugljenik-14, to jest,<14>C, izotopi su posebno poželjni zbog svoje lake izrade i detektabilnosti. Osim toga, supstitucijom sa težim izotopima, kao što je deuterijum, to jest,<2>H, mogu da se dobiju neke terapeutske prednosti nastale iz veće metaboličke stabilnosti, na primer povećanim in vivo polu-životom ili smanjenom zahtevanom dozom i stoga mogu da budu poželjni u nekim okolnostima. Izotopno obeležena jedinjenja iz pronalaska mogu generalno da se izrade po procedurama otkrivenim u niže datim Šemama i/ili u Primerima i Izradama, supstitucijom izotopno obeleženog reagensa umesto ne-izotopno obeleženog reagensa.

[0181] Jedinjenja iz pronalaska namenjena za farmaceutsku upotrebu mogu da se primene kao kristalni ili amorfni produkti ili njihove smeše. Ona mogu da se dobiju, na primer, kao čvrste čestice, praškovi ili filmovi postupcima kao što su precipitacija, kristalizacija, sušenje zamrzavanjem, sušenje raspršivanjem ili sušenje evaporacijom. U ovu svrhu može da se koristi sušenje mikrotalasima ili radio frekvencijom.

Terapeutski postupci i upotrebe

[0182] Pronalazak dalje obezbeđuje terapeutske postupke i upotrebe koji uključuju primenu jedinjenja iz pronalaska, ili njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, samih ili u kombinaciji sa drugim terapeutskim sredstvima ili palijativnim sredstvima.

[0183] U jednom ostvarenju, pronalazak obezbeđuje postupak za tretman nenormalnog rasta ćelija u subjektu koji uključuje primenu na subjektu terapeutski efektivne količine jedinjenja iz pronalaska ili njegove farmaceutski prihvatljive soli. U čestim ostvarenjima, nenormalni rast ćelija je kancer.

[0184] U narednom ostvarenju, pronalazak obezbeđuje postupak za tretman kancera u subjektu koji uključuje primenu na subjektu neke količine jedinjenja iz pronalaska ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, u kombinaciji sa količinom dodatnog anti-kancerogenog terapeutskog sredstva, pri čemu su količine zajedno efektivne u lečenju navedenog kancera.

[0185] Jedinjenja iz pronalaska uključuju jedinjenja bilo koje od ovde opisanih formula, ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so.

[0186] U čak narednom ostvarenju, pronalazak obezbeđuje postupak za inhibiciju proliferacije ćelija kancera u subjektu, uključujući primenu na subjektu jedinjenja iz pronalaska, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, u količini efektivnoj da inhibira proliferaciju ćelija.

[0187] U narednom ostvarenju, pronalazak obezbeđuje postupak za inhibiciju invaznivnosti ćelija kancera u subjektu, uključujući primenu na subjektu jedinjenja iz pronalaska, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, u količini efektivnoj da inhibira invazivnost ćelija.

[0188] U narednom ostvarenju, pronalazak obezbeđuje postupak za indukciju apoptoze ćelija kancera u subjektu, uključujući primenu na subjektu jedinjenja iz pronalaska, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, u količini efektivnoj da indukuje apoptoze.

[0189] Ovde otkrivena jedinjenja nalaze upotrebu u inhibiciji aktivnosti HPK1 kinaze. HPK1, takođe označena kao mitogenom aktivirani protein kinaza kinaza kinaza kinaza 1 ili MAP4K1, je član germinalnog centra kinaza subfamilije serin/treonin kinaza povezanih sa Ste20. HPK1 kinaza funkcioniše kao MAP4K fosforilacijom i aktivacijom MAP3K proteina, uključujući MEKKI, MLK3 i TAK1, što dovodi do aktivacije MAPK Jnk.

[0190] HPK1 polinukleotidi i polipeptidi su poznati u tehnici (Hu i saradnici (1996) Genes Dev. 10: 2251-2264, koji je ovde uključen u reference u celosti). HPK1 polipeptidi uključuju različite konzervisane strukturne motife. HPK1 polipeptidi uključuju amino-terminus domena kinaze slične Ste20 koji obuhvata ostatke amino kiselina 17-293, što uključuje ATP – mesto vezivanja za ostatke amino kiselina 23-46. Domen kinaze je praćen sa četiri pro linerich (PR) motifa koji služe kao mesto vezivanja za proteine koji sadrže SH3, kao što su CrkL, Grb2, HIP-55, Gads, Nek i Crk. Četiri PR motifa obuhvataju ostatke amino kiselina 308-407, 394-402, 432-443 i 468-477, tim redom. HPK1 postaje fosforilisan i aktiviran u odgovoru na TCR ili BCR stimulaciju. TCR- i BCR- indukovana fosforilacija tirozina na položaju 381, smeštenom između PR1 i PR<2>, posreduje u vezivanju sa SLP-76 u T ćelijama ili BLNK u B ćelijama preko SLP-76 ili BLNK SH2 domena i potreban je za aktivaciju kinaze. Domen citron homologa nađen u C-terminusu HPK1, aproksimativno obuhvata ostatke 495-800, može da deluje kao regulatorni domen i može da bude uključen u makromolekularne interakcije.

[0191] Ovde otkrivena jedinjenja se vezuju direktno za HPK1 i inhibiraju aktivnost njegove kinaze. U nekim ostvarenjima, ovde otkrivena jedinjenja smanjuju, inhibiraju ili na drugi način umanjuju HPK1-posredovanu fosforilaciju SLP76 i/ili Gads. Ovde otkrivena jedinjenja mogu ili ne moraju da budu specifični HPK1 inhibitori. Specifični HPK1 inhibitor smanjuje biološku aktivnost HPK1 u količini koja je statistički veća nego što je inhibitorni efekat inhibitora na bilo koji drugi protein (na primer, druge serin/treonin kinaze). U nekim ostvarenjima, ovde otkrivena jedinjenja posebno inhibiraju aktivnost serin/treonin kinaze iz HPK1.

[0192] Ovde otkrivena jedinjenja mogu da se koriste u postupku za inhibiciju HPK1. Ovakvi postupci uključuju dovođenje u kontakt HPK1 sa efektivnom količinom ovde otkrivenog jedinjenja. Naziv "dovođenje u kontakt" označava dovođenje jedinjenja jedinjenje dovoljno blizu izolovanog HPK1 enzima ili ćelija koje ekspresuju HPK1 (na primer, T ćelije, B ćelije, dendrične ćelije) tako da je jedinjenje sposobno da se veže za i inhibira aktivnost HPK1. Jedinjenje može da bude u kontaktu sa HPK1 in vitro ili in vivo primenom jedinjenja na subjektu.

[0193] Bilo koji postupak poznat u tehnici za merenje aktivnosti kinaze HPK1 može da se koristi za određivanje da li je HPK1 inhibirana, uključujući in vitro ispitivanja kinaze, imunoblote sa antitelima specifičnim za fosforilaciju ciljanu ka HPK1, kao što su SLP76 i Gads, ili merenjem opadajućeg biološkog efekta aktivnosti HPK1 kinaze, kao što je regrutovanje 14-3-3 proteina u fosforilisanim SLP7 i Gads, oslobađanje SLP76-Gads-14-3-3 kompleksa iz mikroklastera koji sadrže LAT ili aktivacijom T ili B ćelija.

[0194] Ovde otkrivena jedinjenja mogu da se koriste za lečenje HPK1-zavisnih poremećaja (na primer, kancera). Kako se ovde koristi, "HPK1-zavisni poremećaj" je patološko stanje u kome je aktivnost HPK1 neophodna za generisanje ili održavanje patološkog stanja.

[0195] Ovde otkrivena jedinjenja su takođe našla primenu u pojačavanju imunog odgovora u subjektu kome je to potrebno. Ovakvi postupci uključuju primenu efektivne količine ovde otkrivenog jedinjenja (to jest, jedinjenja Formule I, II, ili III ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, proleka, metabolita ili derivata). Naziv "pojačavanje imunog odgovora" se odnosi na poboljšanje bilo kakvog imunogeničnog odgovora na antigen. Ne-ograničavajući primeri poboljšanja imunogeničnog odgovora na antigen uključuju pojačano sazrevanje ili migraciju dendričnih ćelija, pojačanu aktivaciju T ćelija (na primer, CD4 T ćelije, CD8 T ćelije), povećanu proliferaciju T ćelija (na primer, CD4 T ćelija, CD8 T ćelija), pojačanu proliferaciju B ćelija, povećano preživaljavanje T ćelija i/ili B ćelija, poboljašanu prezentaciju antigena sa antigen prezentujućim ćelijama (na primer, dendrićne ćelije), poboljšan klirens antigena, povećana produkcija citokina preko T ćelija (na primer, interleukin-2), povećana rezistencija na prostaglandin E2-indukovanu imunosupresiju i pojačana prajming i/ili citolitička aktivnost CD8 T ćelije. U nekim ostvarenjima, CD8 T ćelije u subjektu imaju pojačan prajming, aktivaciju, proliferaciju i/ili citolitičku aktivnost u odnosu na pre primene jedinjenja Formule I, II, III ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, proleka, metabolita ili derivata. U nekim ostvarenjima, prajming CD8 T ćelije se karakterišu povećanom ekspresijom CD44 i/ili pojačanom citolitičkom aktivnošću u CD8 T ćelijama. U nekim ostvarenjima, aktivacija CD8 T ćelija se karakteriše povećanom frekvencijom γ-IFN+ CD8 T ćelija. U nekim ostvarenjima, CD8 T ćelija je antigen-specifična T-ćelija.

[0196] U nekim ostvarenjima, antigen prezentujuće ćelije u subjektu imaju pojačano sazrevanje i aktivaciju u odnosu na pre primene jedinjenja formule I, II, III ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, proleka, metabolita ili derivata. U nekim ostvarenjima, antigen prezentujuće ćelije su dendrične ćelije. U nekim ostvarenjima, sazrevanje antigen prezentujućih ćelija se karakteriše povećanom frekvencijom CD83+ dendričnih ćelija. U nekim ostvarenjima, aktivacija antigen prezentujućih ćelija se karakteriše povećanom ekspresijom CD80 i CD86 na dendričnim ćelijama.

[0197] U nekim ostvarenjima, vrednosti citokina IL-10 i/ili hemokina IL-8, humanog homologa murina KC u serumu, u subjektu su smanjene u odnosu na pre primene jedinjenja Formule I, II, III ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, proleka, metabolita ili derivata.

[0198] Angažovanje TCR dovodi do aktivacije HPK1, koja funkcioniše kao negativni regulator puteva TCR-indukovanog AP-1 odgovora. Veruje se da HPK1 negativno reguliše aktivaciju T ćelija smanjenjem perzistencije signalizacije mikroklastera fosforilacijom SLP76 za Ser376 (Di Bartolo i saradnici (2007) JEM 204:681-691) i Gads za Thr254, što dovodi do regrutovnja 14-3-3 proteina koji se vezuju za fosforilisane SLP76 i Gads, oslobađajući SLP76-Gads-14-3-3 kompleks iz mikroklastera koji sadrži LAT, što dovodi do disfunkcije T ćelija, uključujući anergiju i iscrpljenost (Lasserre i saradnici (2011) J Cell Biol 195(5):839-853). Naziv "disfunkcija" u kontekstu imune disfunkcije, se odnosi na stanje smanjenog imunog odgovora na antigensku stimulaciju. Naziv uključuje uobičajene elemente i iscrpljenosti i/ili anergije u kojima može da dođe do prepoznavanja antigena, ali je imuni odgovor koji je usledio neefikasan za kontrolu infekcije ili rasta tumora.

[0199] Naziv "disfunkcionalan", kako se ovde koristi, takođe uključuje refraktorno ili neodgovorno prepoznavanje antigena, konkretno, oštećeni kapacitet prevođenja prepoznavanja antigena u opadajuće efektorske funkcije T-ćelija, kao što su proliferacija, produkcija citokina (na primer, IL-2, gama-IFN) i/ili ubijanje ciljnih ćelija.

[0200] Naziv "anergija" se odnosi na stanje nereagovanja na stimulaciju antigenom kao rezultat nekompletnih ili nedovoljnih signala isporučenih preko receptora T-ćelija {na primer povećanje intercelularnog Ca u odsustvu ras-aktivacije). Anergija T ćelija može takođe da nastane nakon stimulacije sa antigenom u odsustvu ko-stimulacije, što dovodi da ćelije postanu refraktorne na naknadnu aktivaciju antigenom čak i u kontekstu ko-stimulacija. Stanje nemogućnosti odgovora se može često prevazići prisustvom interleukina-2. Anergične T ćelije se ne podvrgavaju klonalnoj ekspanziji i/ili sticanju efektorske funkcije.

[0201] Naziv "iscrpljenost" se odnosi na iscrpljenost T ćelija kao stanja disfunkcije T ćelija koje nastaje iz trajne TCR signalizacije koja se javlja u toku brojnih hroničnih infekcija i kancera. Razlikuje se od anergije po tome što nastaje ne kroz nepotpunu ili manjkavu signalizaciju, već iz kontinuirane signalizacije. Definiše se kao slaba efektorska funkcija, kontinuirana ekspresija inhibitornih receptora i transkripciono stanje različito od funkcionalnog efektora ili memorije T ćelija. Iscrpljenost sprečava optimalnu kontrolu infekcije i tumora. Iscrpljenost može da dovede i do ekstrinzične negativne regulacije puteva (na primer, imunoregulatorni citokini) kao i do negativne regulacije (kostimulatorno) puteva intrinzičnih ćelija (PD-1, B7-H3, B7-H4, itd.).

[0202] "Pojačavanje funkcije T ćelija" označava indukciju, izazov ili stimulaciju T ćelija da imaju kontinuiranu ili pojačanu biološku funkciju, ili da se obnove ili reaktiviraju iscrpljene ili inaktivirane T ćelije. Primeri pojačavanja funkcije T ćelija uključuju: povećanu sekreciju citokina (na primer, gama-interferona, IL-2, IL-12 i TNFa), povećanu proliferaciju, povećanu mogućnost odgovora na antigen (na primer, virus, patogen ili klirens tumora) u odnosu na ove vrednosti pre intervencije i povećanu produkciju efektorskih granula od strane CD8 T ćelija, kao što je granzim B.

[0203] U skladu sa tim, ovde otkrivena jedinjenja Formule I, II, III ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, prolekovi, metaboliti ili derivati su korisni u lečenju disfunkcionalnih poremećaja T ćelija. "Disfunkcionalni poremećaj T ćelija" je poremećaj ili stanje T ćelija koje se karakteriše smanjenjem mogućnosti odgovora na stimulaciju antigenom. U posebnom ostvarenju, disfunkcionalni poremećaj T ćelija je poremećaj koji je specifično povezan sa povećanjem aktivnosti kinaze iz HPK1. U narednom ostvarenju, disfunkcionalni poremećaj T ćelija je onaj u kome su T ćelije anergične ili imaju smanjenu sposobnost da luče citokine, proliferate ili vrše citolitičku aktivnost. U specifičnom aspektu, smanjenje sposobnosti odgovora dovodi do neefikasne kontrole patogena ili ekspresije imunogena u tumoru. Primeri disfunkcionalnih poremećaja T ćelija se karakterišu disfunkcijom T ćelija koja uključuje nerešenu akutnu infekciju, hroničnu infekciju i imunitet tumora.

[0204] Prema tome, ovde otkrivena jedinjenja mogu da se koriste u lečenju stanja u kojima je poželjna pojačana imunogeničnost, kao što je povećanje imunogeničnosti tumora za tretman kancera. "Imunogeničnost" se odnosi na sposobnost genične pomoći u klirensu ćelija tumora preko imunog odgovora.

[0205] "Imunitet tumora" se odnosi na proces u kome tumori izbegavaju imuno prepoznavanje i klirens. Prema tome, kao terapeutski koncept, imunitet tumora se "tretira" kada je ovakvo izbegavanje umanjeno a tumori su prepoznati i napadnuti imunim sistemom. Primeri prepoznavanja tumora uključuju vezivanje tumora, smanjenje tumora i klirens tumora.

[0206] U jednom aspektu, ovde je dat postupak za lečenje kancera u subjektu kome je to potrebno a koji uključuje primenu na subjektu efektivne količine jedinjenja Formule I, II, III ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, proleka, metabolita ili derivata. U nekim ostvarenjima, subjekt ima melanom. Melanom može da bude u ranoj fazi ili kasnoj fazi. U nekim ostvarenjima, subjekt ima kolorektalni kancer. Kolorektalni kancer može da bude u ranoj fazi ili kasnoj fazi. U nekim ostvarenjima, subjekt ima kancer ne-malih ćelija pluća. Kancer ne-malih ćelija pluća može da bude u ranoj fazi ili u kasnoj fazi. U nekim ostvarenjima, subjekt ima kancer pankreasa. Kancer pankreasa može da bude u ranoj fazi ili u kasnoj fazi. U nekim ostvarenjima, subjekt ima hematološki malignitet. Hematološki malignitet može da bude u ranoj fazi ili u kasnoj fazi. U nekim ostvarenjima, subjekt ima kancer jajnika. Kancer jajnika može da bude u ranoj fazi ili u kasnoj fazi. U nekim ostvarenjima, subjekt ima kancer dojke. Kancer dojke može da bude u ranoj fazi ili u kasnoj fazi. U nekim ostvarenjima, subjekt ima karcinom renalnih ćelija. Karcinom reanlih ćelija može da bude u ranoj fazi ili u kasnoj fazi. U nekim ostvarenjima, kancer ima povećane vrednosti infiltracije T ćelija.

[0207] U nekim ostvarenjima, tretman dovodi do kontinuiranog odgovora u subjektu nakon prestanka tretmana. "Kontinuirani odgovor" se odnosi na kontinuirani efekat redukcije rasta tumora nakon prestanka tretmana. Na primer, veličina tumora može da ostane ista ili manja u poređenju sa veličinom na početku faze primene.

[0208] Ovde otkriveni postupci tretmana mogu da dovedu do parcijalnog ili potpunog odgovora. Kako se ovde koristi, "potpuni odgovor" ili "CR" se odnosi na nestanak svih ciljanih lezija; "parcijalni odgovor" ili "PR" se odnosi na najmanje 30 procenata smanjenja u zbiru najvećih dijametara (SLD) ciljanih lezija, uzimajući kao referencu početne SLD; a "stabilna bolest" ili "SD" se odnosi ni na dovoljno smanjenje ciljanih lezija da se kvalifikuju za PR, niti na dovoljno povećanje da se kvalifikuje za PD, uzimajući kao referencu najmanji SLD od početka tretmana. Kako se ovde koristi, "ukupan stepen odgovora" (ORR) se odnosi na zbir stepena potpunog odgovora (CR) i stepena parcijalnog odgovora (PR).

[0209] Ovde otkriveni postupci tretmana mogu da dovedu do porasta preživljavanja bez progresije i ukupnog preživljavanja subjekta koji je primio HPK1 antagonist. Kako se ovde koristi, "preživljavanje bez progresije" (PFS) se odnosi na dužinu vremena u toku trajanja i nakon tretmana za koje vreme se bolest koja je tretirana (na primer kancer) ne pogoršava. Preživljavanje bez progresije može da uključi vreme za koje pacijent doživljava potpuni odgovor ili delimični odgovor kao i vreme za koje su pacijenti imali stabilnu bolest.

[0210] Kako se ovde koristi, "ukupno preživaljavanje" se odnosi na procenat subjekata u grupi koji će verovatno biti živi nakon određenog vremena.

[0211] U čestim ostvarenjima ovde datih postupaka, nenormalan rast ćelija je kancer koji karakteriše pojačavanje ili prekomerna ekspresija HPK1 kinaze. U nekim ostvarenjima ovde datih postupaka, identifikovan je subjekt koji ima kancer karakterističan po pojačavanju ili prekomernoj ekspresiji HPK1 kinaze.

[0212] U čestim ostvarenjima ovde datih postupaka, nenormalan rast ćelija je kancer pri čemu je kancer izabran iz grupe koja sadrži kancer dojke, kancer jajnika, kancer bešike, kancer materice, kancer prostate, kancer pluća (uključujući NSCLC, SCLC, karcinom skvamoznih ćelija ili adenokarcinom), kancer jednjaka, kancer glave i vrata, kancer kolorektuma, kancer bubrega (uključujući RCC), kancer jetre (uključujući HCC), kancer pankreasa, kancer stomaka (to jest želuca) i kancer tiroidee. U daljim ostvarenjima ovde datih postupaka, kancer je izabran iz grupe koja sadrži kancer dojke, kancer jajnika, kancer bešike, kancer materice, kancer prostate, kancer pluća, kancer jednjaka, kancer jetre, kancer pankreasa i kancer želuca. U nekim ovakvim ostvarenjima, kancer se karakteriše pojačavnjem ili prekomernom ekspresijom HPK1 kinaze.

[0213] U nekim ostvarenjima, kancer je izabran iz grupe koja sadrži kancer dojke i kancer jajnika. U nekim ovakvim ostvarenjima, kancer je kancer dojke ili kancer jajnika koji karakteriše pojačavanje ili prekomerna ekspresija HPK1 kinaze. U nekim ovakvim ostvarenjima kancer je (a) kancer dojke ili kancer jajnika i (b) karakteriše se pojačavanjem ili prekomernom ekspresijom HPK1 kinaze.

[0214] U nekim ostvarenjima, kancer je kancer jajnika. U nekim ovakvim ostvarenjima, kancer jajnika se karakteriše pojačavanjem ili prekomernom ekspresijom HPK1 kinaze.

[0215] U drugim ostvarenjima, kancer je kancer dojke, uključujući, na primer, ER-pozitivni/HR pozitivni kancer dojke, HER2-negativni kancer dojke; ER-pozitivni/HR-pozitivni kancer dojke, HER2- pozitivni kancer dojke; trostruko negativni kancer dojke (TNBC); ili inflamatorni kancer dojke. U nekim ostvarenjima, kancer dojke je endokrini rezistentni kancer dojke, trastuzumab rezistentni kancer dojke, ili kancer dojke koji pokazuje primarnu ili stečenu rezistenciju na inhibiciju CDK4/CDK6. U nekim ostvarenjima, kancer dojke je uznapredovani ili metastazičini kancer dojke. U nekim ostvarenjima svakog od navedenih, kancer dojke se karakteriše pojačavanjem ili prekomernom ekspresijom HPK1 kinaze.

[0216] U nekim ostvarenjima, jedinjenje iz pronalaska se primenjuje kao prva linija terapije. U drugim ostvarenjima, jedinjenje iz pronalaska se primenjuje kao druga (ili kasnija) linija terapije. U nekim ostvarenjima, jedinjenje iz pronalaska se primenjuje kao druga (ili kasnija) linija terapije nakon tretmana sa endokrinim terapeutskim sredstvom i/ili CDK4/CDK6 inhibitorom. U nekim ostvarenjima, jedinjenje iz pronalaska se primenjuje kao druga (ili kasnija) linija terapije nakon tretmana sa endokrinim terapeutskim sredstvom. U nekim ostvarenjima, jedinjenje iz pronalaska se primenjuje kao druga (ili kasnija) linija terapije nakon tretmana sa CDK4/CDK6 inhibitorom. U nekim ostvarenjima, jedinjenje iz pronalaska se primenjuje kao druga (ili kasnija) linija terapije nakon tretmana sa jednim ili više hemoterapijskih režima na primer, uključujući taksane ili platina sredstva. U nekim ostvarenjima, jedinjenje iz pronalaska se primenjuje kao druga (ili kasnija) linija terapije nakon tretmana sa HER2 ciljanim sredstvima, na primer, trastuzumabom.

[0217] U ovoj aplikaciji se nazivi "nenormalni rast ćelija" i "hiperproliferativni poremećaj" koriste kao sinonimi.

[0218] "Nenormalni rast ćelija", kako se ovde koristi, ukoliko nije drugačije navedeno, se odnosi na rast ćelija koji je nezavistan od normalnih regulatornih mehanizama (na primer, gubitak kontaktne inhibicije). Nenormalan rast ćelija može da bude benigni (ne kancerogeni), ili maligni (kancerogeni).

[0219] Nenormalni rast ćelija uključuje nenormalni rast: (1) ćelija tumora (tumora) koje pokazuju povećanu ekspresiju HPK1 kinaze; (2) tumora koji se razmnožavaju poremećenom HPK1 kinazom; (3) tumora koje karakteriše pojačana ili prekomerna ekspresija HPK1 kinaze i (4) tumora koji su rezistentni na endokrinu terapiju, HER2 antagoniste ili CDK4/6 inhibiciju.

[0220] Naziv "dodatno antikancerogeno terapeutsko sredstvo" kako se ovde koristi označava bilo koje ili više terapeutskih sredstava, različitih od jedinjenja iz pronalaska, koje se ili koje može da se koristi u tretmanu kancera, kao što su sredstva dobijena iz sledećih klasa: inhibitori mitoze, sredstva za alkilaciju, antimetaboliti, antitumorni antibiotici, inhibitori topoizomeraze I i II, biljni alkaloidi, hormonska sredstva i antagonisti, inhibitori faktora rasta, zračenje, inhibitori protein tirozin kinaza i/ili serin/treonin kinaza, inhibitori ćelijskog ciklusa, modifikatori biološkog odgovora, inhibitori enzima, antisens oligonukleotidi ili derivati oligonukleotida, citotoksična i imuno-onkološka sredstva.

[0221] Kako se ovde koristi "kancer" se odnosi na bilo koji malignitet i/ili invazivni rast ili tumor izazvan nenormalnim rastom ćelija. Kancer uključuje solidne tumore nazvane po tipu ćelija koje ih formiraju, kancer krvi, kosne srži ili limfnog sistema. Primeri čvrstih tumora uključuju sarkome i karcinome. Kancer krvi uključuje, ali bez ograničenja na, leukemiju, limfomu i mijelomu. Kancer takođe ukjučuje primarni kancer koji potiče sa specifičnog mesta u organizmu, metastatički kancer koji se širi od mesta na kome je počeo do drugih delova organizma, recidiv originalnog primarnog kancera nakon remisije i drugi primarni kancer koji je novi primarni kancer kod osobe sa istorijom prethodnog kancera različitog tipa od ovog drugog.

[0222] U nekim ostvarenjima ovde datih postupaka, kancer je izabran iz grupe koja se sastoji od kancera dojke, kancera jajnika, kancera bešike, kancera materice, kancera prostate, kancera pluća, kancera jednjaka, kancera jetre, kancera pankreasa i kancera želuca. U nekim ovakvim ostvarenjima, kancer se karakteriše pojačanom ili prekomernom ekspresijom HPK1 kinaze.

Dozni oblici i režimi

[0223] Primena jedinjenja iz ovog pronalaska može da se izvrši bilo kojim postupkom koji omogućava oslobađanje jedinjenja na mestu delovanja. Ovi postupci uključuju oralne puteve, intraduodenalne puteve, parenteralne injekcije (uključujući intravenski, subkutano, intramuskularno, intravaskularno ili infuzijom), topičnu i rektalnu primenu.

[0224] Dozni režimi mogu da budu podešeni tako da obezbede optimum željenog odgovora. Na primer, može da se primeni pojedinačni bolus, može da se primeni više podeljenih doza u toku vremena ili doza može proporcionalno da se smanji ili poveća po potrebi u zavisnosti od terapeutske situacije. Posebna je prednost da se formuliše parenteralna kompozicija u jediničnom doznom obliku zbog lake primene i ujednačenosti doze. Jedinični dozni oblik, kako se ovde koristi, se odnosi na fizički odvojene jedinice pogodne za jedno doziranje na sisaru koji se tretira, pri čemu svaka jedinica sadrži prethodno određenu količinu aktivnog jedinjenja izračunatu da produkuje željeni terapeutski efekat zajedno sa potrebnim farmaceutskim nosačem. Specifikacija za jedinične dozne oblike pronalaska je određena i direktno zavisi od (a) pojedinačnih karakteristika hemoterapeutskog sredstva i određenog terapeutskog ili profilaktičkog efekta koji treba da se dostigne i (b) ograničenja svojstvena tehnici uklapanja takvih aktivnih jedinjenje u osetljivi tretman pojedinaca.

[0225] Prema tome, stručnjak sa iskustvom će razumeti, na osnovu ovde datog otkrića, da su doza i režim doziranja podešeni u skladu sa postupcima dobro poznatim u terapeutskim tehnikama. To jest, može lako da se utvrdi maksimalna doza koja se toleriše a takođe može da se odredi efektivna količina koja obezbeđuje merljivu terapeutsku korist za pacijenta, kao i vremenski zahtev za primenu svakog sredstva da bi se obezbedila merljiva terapeutska korist za pacijenta. U skladu sa tim, mada su neke doze i režimi primene ovde dati kao primeri, ovi primeri ni na koji način ne ograničavaju dozu i režim primene koji mogu da se primene na pacijentu u realizaciji ovog pronalaska.

[0226] Treba napomenuti da vrednosti doza mogu da variraju u zavisnosti od tipa i ozbiljnosti stanja koje se tretira i može da uključi jednu ili više doza. Takođe treba razumeti da za svaki određeni subjekt treba podesiti specifični režim doziranja u toku vremena u skladu sa pojedinačnom potrebom i profesionalnom procenom osobe koja primenjuje ili nadgleda primenu kompozicija a ovde navedeni opsezi doza su samo kao primeri i ne treba da ograniče okvir ili primenu kompozicije za koju se traži zaštita. Na primer, doze mogu da se odrede na bazi farmakokinetičkih ili farmakodinamičkih parametara koji mogu da uključe kliničke efekte kao što su toksični efekti i/ili laboratorijske vrednosti. Prema tome, ovaj pronalazak obuhvata povećanje doze za pacijenta kako je odredio stručnjak sa iskustvom. Određivanje odgovarajućih doza i režima za primenu hemoterapeutskog sredstva je dobro poznato u relevantnoj tehnici i treba razumeti da je u nadležnosti stručnjaka sa iskustvom koji je jednom upoznat sa ovde otkrivenim znanjem.

[0227] Količina jedinjenja iz pronalaska koja se primenjuje će da zavisi od subjekta koji se tretira, ozbiljnosti poremećaja ili stanja, opsega primene, dispozicije jedinjenja i odluke ordinirajućeg lekara. Međutim, efektivna doza je u rasponu od približno 0.001 do približno 100 mg po kg telesne težine dnevno, poželjno je približno 1 do približno 35 mg/kg/dan, u jednoj ili podeljenim dozama. Za čoveka težine 70 kg, ova količina bi bila približno 0.05 do približno 7 g/dan, poželjno je približno 0.1 do približno 2.5 g/dan. U nekim slučajevima, vrednosti doze ispod donje granice prethodno pomenutog opsega mogu da budu više nego adekvatne, dok u drugim slučajevima mogu da se primene čak i veće doze bez izazivanja štetnih neželjenih efekata, pod uslovom da su ove veće doze prvo podeljene u nekoliko manjih doza za primenu u toku dana.

Formulacije i načini primene

[0228] Kako se ovde koristi, "farmaceutski prihvatljivi nosač" se odnosi na nosač ili razblkaživač koji ne izaziva značajnu iritaciju organizma i ne poništava biološku aktivnost i karakteristike primenjenog jedinjenja.

[0229] Farmaceutski prihvatljiv nosač može da uključi bilo koji uobičajeni farmaceutski nosač ili ekscipijent. Izbor nosača i/ili ekscipijenta će u velikoj meri da zavisi od faktora kao što su izabrani način primene, uticaj nosača ili ekscipijenta na rastvorljivost i stabilnost i priroda doznog oblika.

[0230] Pogodni farmaceutski nosači uključuju inertne razblaživače ili punioce, vodu i različite organske rastvarače (kao što su hidrati i solvati). Farmaceutske kompozicije mogu, ukoliko je potrebno, da sadrže dodatne sastojke kao što su pojačivači ukusa, vezivna sredstva, ekscipijenti i slično. Tako za oralnu primenu, tablete sadrže različite ekscipijente kao što je citratna kiselina koja može da se koristi zajedno sa različitim sredstvima za raspadanje, kao što su skrob, alginatna kiselina i neki kompleksi silikata i sa vezujućim sredstvima kao što su saharoza, želatin i akacija. Primeri, bez ograničenja, ekscipijenata uključuju kalcijum karbonat, kalcijum fosfat, različite šećere i tipove skroba, derivate celuloze, želatin, biljna ulja i polietilen glikole. Pored toga, u cilju tabletiranja su često korisna lubrikantna sredstva kao što su magnezijum stearat, natrijum lauril sulfat i talk. Čvrste kompozicije sličnog tipa mogu takođe da se koriste u mekim i čvrstim punjenim želatinskim kapsulama. Ne-ograničavajući primeri materijala prema tome uključuju laktozu ili mlečni šećer i polietilen glikole velike molekulske težine. Kada se za oralnu primenu žele vodene suspenzije ili eliksiri, aktivno jedinjenje u njima može da se kombinuje sa različitim sredstvima za zaslađivanje ili korigovanje ukusa, sredstvima za bojenje ili bojama i ukoliko se želi, sredstvima za emulgovanje ili sredstvima za suspendovanje zajedno sa razblaživačima kao što su voda, etanol, propilen glikol, glicerin ili njihove kombinacije.

[0231] Farmaceutska kompozicija može, na primer, da bude u obliku pogodnom za oralnu primenu kao što su tablete, kapsule, pilule, praškovi, formulacije za kontinuirano oslobađanje, rastvori suspenzije, za parenteralne injekcije kao sterilni rastvor, suspenzija ili emulzija, za topičnu primenu kao masti ili kreme ili za rektalnu primenu kao supozitorije.

[0232] Primeri oblika za parenteralnu primenu uključuju rastvore ili suspenzije aktivnih jedinjenja u sterilnim vodenim rastvorima, na primer, vodenom rastvoru propilen glikola ili rastvoru dekstroze. Ovi dozni oblici mogu po potrebi da budu odgovarajuće puferovani.

[0233] Farmaceutska kompozicija može da bude u jediničnim doznim oblicima pogodnim za jednu primenu preciznih doza.

[0234] Farmaceutske kompozicije pogodne za oslobađanje jedinjenja iz pronalaska i postupci za njihovu izradu su lako dostupni stručnjaku sa iskustvom u tehnici. Ovakve kompozicije i postupci za njihovu izradu mogu da se nađu, na primer, u ’Remington’s Pharmaceutical Sciences’, 19th Edition (Mack Publishing Company, 1995), otkriće koje je ovde uključeno kao referenca u celosti.

[0235] Jedinjenja iz pronalaska mogu da se primene oralno. Oralna primena može da uključi gutanje, tako da jedinjenje ulazi u gastrointestinalni trakt, ili može da bude bukalna ili sublingvalna primena kojom jedinjenje direktno iz usta ulazi u krvotok.

[0236] Formulacije pogodne za oralnu primenu uključuju čvrste formulacije kao što su tablete, kapsule koje sadrže partikulate, tečnosti ili praškove, lozenge (uključujući punjene tečnošću), gume za žvakanje, multi- i nano-partikulate, gele, čvrste rastvore, lipozome, filmove (uključujući muko-adhezivne), ovule, sprejove i tečne formulacije.

[0237] Tečne formulacije uključuju suspenzije, rastvore, sirupe i eliksire. Ovakve formulacije mogu da se koriste kao punioci u mekim ili čvrstim kapsulama i obično uključuju nosač, na primer, vodu, etanol, polietilen glikol, propilen glikol, metilcelulozu ili pogodno ulje i jedno ili više sredstava za emulgovanje i/ili sredstava za suspendovanje. Tečne formulacije mogu takođe da se izrade rekonstitucijom čvrstog sadržaja, na primer, iz saheta.

[0238] Jedinjenja iz pronalaska mogu takođe da se koriste u brzo rastvorljivim, brzo raspadajućim doznim oblicima kao što su oni opisani u Expert Opinion in Therapeutic Patents, 11 (6), 981-986 by Liang od Chen (2001), otkriće koje je ovde uključeno kao referenca u celosti.

[0239] Za dozne oblike tableta, u zavisnosti od doze, lek može da čini od 1 mt% do 80 mt% doznog oblika, još preciznije od 5 mt% do 60 mt% doznog oblika. Pored leka, tablete generalno sadrže sredstvo za raspadanaje. U primere sredstava za raspadanje spadaju natrijum skrob glikolat, natrijum karboksimetil celuloza, kalcijum karboksimetil celuloza, kroskarmeloza natrijum, krospovidon, polivinilpirolidon, metil celuloza, mikrokristalna celuloza, nižim alkilom supstituisana hidroksipropil celuloza, skrob, preželatinizirani skrob i natrijum alginat. Generalno, sredstvo za raspadanje će da čini od 1 mt% do 25 mt%, preferirano od 5 mt% do 20 mt% doznog oblika.

[0240] Vezivna sredstva se generalno koriste da pojačaju kohezivni kvalitet u formulaciji tablete. Odgovarajuća vezivna sredstva uključuju mikrokristalnu celulozu, želatin, šećere, polietilen glikol, prirodne i sintetičke gume, polivinilpirolidon, preželatinizirani skrob, hidroksipropil celulozu i hidroksipropil metilcelulozu. Tablete mogu takođe da sadrže razblaživače, kao što su laktoza (monohidratna, sušena raspršivanjem, anhidrovana i slično), manitol, ksilitol, dekstroza, saharoza, sorbitol, mikrokristalna celuloza, skrob i dibazni kalcijum fosfat dihidrat.

[0241] Tablete mogu takođe opciono da uključe površinski aktivna sredstva, kao što su natrijum lauril sulfat i polisorbat 80 i glidanse kao što su silicijum dioksid i talk. Kada su prisutna, površinski aktivna sredstva su obično u količinama od 0.2 mt% do 5 mt% tablete a glidansi obično od 0.2 mt% do 1 mt% tablete.

[0242] Tablete takođe generalno sadrže lubrikanse kao što su magnezijum stearat, kalcijum stearat, cink stearat, natrijum stearil fumarat i smeše magnezijum stearata sa natrijum lauril sulfatom. Lubrikansi su generalno prisutni u količinama od 0.25 mt% do 10 mt%, preferirano od 0.5 mt% do 3 mt% tablete.

[0243] U druge uobičajene sastojke spadaju antioksidansi, sredstva za bojenje, sredstva za korigovanje ukusa, konzervansi i sredstva za maskiranje ukusa.

[0244] Primer su tablete koje sadrže do približno 80 mt% lek, od približno 10 mt% do približno 90 mt% vezivno sredstvo, od približno 0 mt% do približno 85 mt% razblaživač, od približno 2 mt% do približno 10 mt% sredstvo za raspadanje i od približno 0.25 mt% do približno 10 mt% lubrikans.

[0245] Tabletna mešavina može da se komprimuje direktno ili valjcima da se formiraju tablete. Tabletna mešavina ili delovi mešavine mogu pre tabletiranja alternativno da budu granulisani vlažnom, suvom granulacijom ili granulacijom topljenjem, da se zgusnu topljenjem ili ekstrudiraju. Finalna formulacija može da uključi jedan ili više slojeva i može da bude obložena ili neobložena ili enkapsulirana.

[0246] Formulacija tableta je detaljno diskutovana u "Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets, Vol. 1", by H. Lieberman and L. Lachman, Marcel Dekker, N.Y., N.Y., 1980 (ISBN 0-8247-6918-X), otkriće koje je ovde uključeno kao referenca u celosti.

[0247] Čvrste formulacije za oralnu primenu mogu da budu formulisane za trenutno i/ili modifikovano oslobađanje. Formulacije sa modifikovanim oslobađanjem uključuju odloženo-, kontinuirano-, pulsirano-, kontrolisano-, ciljano i programirano oslobađanje.

[0248] Odgovarajuće formulacije sa modifikovanim oslobađanjem su opisane u U.S. Patentu broj 6,106,864. Detalji drugih pogodnih tehnologija za oslobađanje kao što su visoko energetske disperzije i osmotske i obložene partikule mogu da se nađu u Verma i saradnici, Pharmaceutical Technology On-line, 25(2), 1-14 (2001). Upotreba guma za žvakanje za postizanje kontrolisanog oslobađanje je opisana u WO 00/35298. Otkriće koje je ovde uključeno kao referenca u celosti.

Parenteralna primena

[0249] Jedinjenja iz pronalaska mogu takođe da se primene direktno u krvotok, u mišić ili u unutrašnji organ. Odgovarajući načini parenteralne primene uključuju intravenski, intraarterijalno, intraperitonealno, intratekalno, intraventrikularno, intrauretralno, intrasternalno, intrakranijalno, intramuskularno i subkutano. Pogodni uređaji za parenteralnu primenu uključuju injektore sa iglom (uključujući mikro igle), injektore bez igle i infuzione tehnike.

[0250] Parenteralne formulacije su obično vodeni rastvori koji mogu da sadrže ekscipijente kao što su soli, ugljeni hidrati i sredstva za puferovanje (preferirano je do pH od 3 do 9), ali, za neke aplikacije, mogu da budu mnogo pogodnije formulacije kao sterilan nevodeni rastvor ili kao suvi oblik za upotrebu u konjukciji sa pogodnim vehikulumom kao što je sterilna, apirogena voda

[0251] Izrada parenteralnih formulacija pod sterilnim uslovima, na primer, liofilizacijom, može lako da se izvrši po standardnim farmaceutskim tehnikama koje su dobro poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici.

[0252] Rastvorljivost jedinjenja iz pronalaska korišćenih u izradi parenteralnih rastvora može da se poveća upotrebom odgovarajućih tehnika formulisanja, kao što je inkorporiranje sredstava za povećanje rastvorljivosti.

[0253] Formulacije za parenteralnu primenu mogu da budu formulisane za trenutno i/ili modifikovano oslobađanje. U formulacije sa modifikovanim oslobađanjem spadaju odloženo-, kontinuirano-, pulsirano-, kontrolisano-, ciljano- i programirano oslobađanje. Tako jedinjenja iz pronalaska mogu da budu formulisana kao čvrsta, polu-čvrsta ili tiksotropna tečnost za primenu u obliku implantir4anog depoa obezbeđujući modifikovano oslobađanje aktivnog jedinjenja. Primeri ovakvih formulacija uključuju stentove obložene lekom i PGLA mikrosfere.

[0254] Jedinjenja iz pronalaska mogu takođe da se primene topično na kožu ili mukozu, to jest, dermalno ili transdermalno. Uobičajene formulacije za ovu svrhu uključuju gele, hidrogele, losione, rastvore, kreme, masti, praškove za posipanje, prelive, pene, filmove, flastere, pločice, implante, sunđere, gaze, zavoje i mikroemulzije. Takođe mogu da se koriste lipozomi. U uobičajene nosače spadaju alkohol, voda, mineralno ulje, parafin, beli vazelin, glicerin, polietilen glikol i propilen glikol. Mogu da budu inkorporirani pojačivači penetracije, videti, na primer, J Pharm Sci, 88 (10), 955-958 by Finnin i Morgan (October 1999). Drugi načini topične primene uključuju oslobađanje elektroporacijom, jontoforezu, fonoforezu, sonoforezu i injekcije sa mikro iglom ili bez igle (na primer, Powderject™, Bioject™, itd.). Otkrića ovih referenci su ovde inkorporirana kao referenca u celini.

[0255] Formulacije za topičnu primenu mogu da budu formulisane za trenutno i/ili modifikovano oslobađanje. Formulacije za modifikovano oslobađanje uključuju odloženo-, kontinuirano-, pulsirano-, kontrolisano-, ciljano- i programirano oslobađanje.

[0256] Jedinjenja iz pronalaska mogu takođe da se primene intranazalno ili inhalacijom, obično u obliku suvog praška (ili sama ili kao smeša, na primer, u suvoj mešavini sa laktozom, ili kao smeša čestica komponenti, na primer, smeša sa fosfolipidima kao što je fosfatidilholin) iz inhalera suvog praška ili kao aerosol sprej iz kontejnera pod pritiskom, pumpe, spreja, atomizera (preferirano atomizera koji koristi elektrohidrodinamiku za produkciju fine magle), ili nebulizera, sa ili bez upotrebe pogodnog propelanta kao što su 1,1,1,2-tetrafluoroetan ili 1,1,1,2,3,3,3- heptafluoropropan. Za intranazalnu upotrebu, prašak može da uključi bioadhezivno sredstvo, na primer, citozan ili ciklodekstrin.

[0257] Kontejner pod pritiskom, pumpa, sprej, atomizer ili nebulizer sadrži rastvor ili suspenziju jedinjenja iz pronalaska uključujući, na primer, etanol, razblaženi etanol ili pogodno alternativno sredstvo za disperziju, solubilizaciju ili pojačavanje oslobađanja aktivnog sredstva, propelant(e) kao rastvarač i opciono, surfaktant, kao što su sorbitan trioleat, oleinska kiselina ili oligolaktatna kiselina.

[0258] Pre upotrebe u formulaciji suvog praška ili suspenzije, lekoviti produkt se mikronizira do veličine pogodne za oslobađanje inhalacijom (obično manje od 5 mikrona). Ovo može da se postigne bilo kojim odgovarajućim postupkom usitnjavanja, kao što su spiralno mlazno mlevenje, mlevenje slojem fluidnog mlaza, obradom superkritičnog fluida da se formiraju nanočestice, homogenizacijom pod visokim pritiskom ili sušenjem raspršivanjem.

[0259] Kapsule (izrađene, na primer, od želatina ili HPMC), blisteri i kartridži za upotrebu u inhaleru ili insuflatoru mogu da se formulišu tako da sadrže praškastu mešavinu jedinjenja iz pronalaska, odgovarajuće praškaste baze kao što su laktoza ili skrob i modifikator performansi kao što su l-leucin, manitol ili magnezijum stearat. Laktoza može da bude anhidrovana ili u obliku monohidrata, poželjno je ovo drugo. Drugi pogodni ekscipijenti uključuju dekstran, glukozu, maltozu, sorbitol, ksilitol, fruktozu, saharozu i trehalozu.

[0260] Pogodne formulacije u obliku rastvora za upotrebu u atomizeru koje koriste elektrohidrodinamiku za produkciju fine magle mogu da sadrže od 1µg do 20mg jedinjenja iz pronalaska po aktivaciji a zapremina aktivacije može da varira od 1 µL do 100µL. Uobičajena formulacija uključuje jedinjenje iz pronalaska, propilen glikol, sterilnu vodu, etanol i natrijum hlorid. Alternativni rastvarači koji mogu da se koriste umesto propilen glikola uključuju glicerol i polietilen glikol.

[0261] Pogodna aromatična sredstva, kao što su mentol i levomentol, ili zaslađivači kao što su saharin ili saharin natrijum, mogu da se dodaju u ove formulacije iz pronalaska namenjene za primenu inhalacijom/intranazalno.

[0262] Formulacije za inhalacionu/intranazalnu primenu mogu da se formulišu da budu za trenutno i/ili modifikovano oslobađanje koristeći, na primer, poli(DL-laktat-koglikolnu kiselinu (PGLA). Formulacije sa modifikovanim oslobađanjem uključuju odloženo-, kontinuirano-, pulsirano-, kontrolisano-, ciljano- i programirano oslobađanje.

[0263] U slučaju inhalera i aerosola suvog praška, dozna jedinica je određena pomoću ventila koji oslobađa odmerenu količinu. Jedinice u skladu sa pronalaskom su obično osmišljene da oslobode odmerenu dozu ili "puf’ koji sadrži željenu količinu jedinjenja iz pronalaska.

Ukupna dnevna doza može da se primeni u jednoj dozi, mnogo češće, kao podeljena doza u toku dana.

[0264] Jedinjenja iz pronalaska mogu da se primene rektalno ili vaginalno, na primer, u obliku supozitorija, pesara ili enema. Kakao buter je tradicionalna podloga za supozitorije ali i različite alternative mogu da se koriste kao odgovarajuće.

[0265] Formulacije za rektalnu/vaginalnu primenu mogu da se formulišu tako da budu za trenutno i/ili modifikovano oslobađanje. Formulacije sa modifikovanim oslobađanjem uključuju odloženo-, kontinuirano-, pulsirano-, kontrolisano-, ciljano- i programirano oslobađanje.

[0266] Jedinjenja iz pronalaska mogu takođe da se primene direktno u oko ili uvo, obično u obliku kapi mikronizirane suspenzije ili rastvora u izotoničnom, pH podešenom sterilnom rastvoru soli. Druge formulacije pogodne za okularnu i auralnu primenu uključuju masti, biodegradabilne (na primer, absorbilne gel sunđere, kolagen) i ne-biodegradabilne (na primer, silikon) implante, pločice, sočiva i partikulate ili vezikularne sisteme kao što su niozomi ili lipozomi. Polimer kao što su unakrsno vezana poliakrilna kiselina, polivinilalkohol, hijaluronska kiselina, celulozni polimer, na primer, hidroksipropilmetilceluloza, hidroksietilceluloza, ili metil celuloza, ili heteropolisaharidni polimer, na primer, gelan guma, mogu da budu inkorporirani zajedno sa konzervansom, kao što je benzalkonijum hlorid.

Ovakve formulacije mogu takođe da se oslobode jontoforezom.

[0267] Formulacije za okularnu/auralnu primenu mogu da budu formulisane tako da budu za trenutno i/ili modifikovano oslobađanje. Formulacije za modifikovano oslobađanje uključuju odloženo-, kontinuirano-, pulsirano-, kontrolisano-, ciljano- i programirano oslobađanje.

Druge tehnologije

[0268] Jedinjenja iz pronalaska mogu da se kombinuju sa rastvorljivim makromolekularnim entitetima, kao što su ciklodekstrin i njegovi pogodni derivati ili polimeri koji sadrže polietilen glikol, u cilju poboljšanja njihove rastvorljivosti, brzine rastvaranja, maskiranja ukusa, bioraspoloživosti i/ili stabilnosti, za upotrebu u bilo kom od prethodno pomenutih načina primene.

[0269] Nađeno je da su kompleksi lek-ciklodekstrin, na primer, generalno korisni za najveći broj doznih oblika i načina primene. Mogu da se koriste i inkluzioni i ne-inkluzioni kompleksi. Kao alternativa direktnom kompleksiranju sa lekom, ciklodekstrin može da se koristi kao pomoćni aditiv, to jest, kao nosač, razblaživač ili solubilizator. Najčešće korišćeni za ovu svrhu su alfa-, beta- i gama-ciklodekstrini, čiji primeri mogu da se nađu u PCT publikacijama broj WO 91/11172, WO 94/02518 i WO 98/55148, otkrića koja su ovde inkorporirana kao referenca u celini.

Doze

[0270] Primenjena količina aktivnog jedinjena će da zavisi od subjekta koji se tretira, ozbiljnosti poremećaja ili stanja, brzine primene, dispozicije jedinjenja i odluke ordinirajućeg lekara. Međutim, efektivna doza je obično u rasponu od približno 0.001 do približno 100 mg po kg telesne težine po danu, poželjno je približno 0.01 do približno 35 mg/kg/dan, u jednoj ili podeljenim dozama. Za osobu težine 70 kg, to bi bila količina od približno 0.07 do približno 7000 mg/dan, poželjno je približno 0.7 do približno 2500 mg/dan. U nekim slučajevima, vrednosti doze ispod donje granice prethodno pomenutog opsega mogu da budu više nego adekvatne, dok u drugim slučajevima mogu da se koriste čak i veće doze bez izazivanja bilo kakvog štetnog neželjenog efekta, pri čemu su ove veće doze obično podeljene u više manjih doza za primenu u toku dana.

Delovi kita

[0271] U meri u kojoj je to poželjno za primenu kombinacije aktivnih jedinjenja, na primer, u cilju lečenja određene bolesti ili stanja, okvirom ovog pronalaska je obuhvaćeno da se dve ili više farmaceutskih kompozicija, od kojih najmanje jedna sadrži jedinjenje u skladu sa pronalaskom, mogu uobičajeno kombinovati u obliku kita pogodnog za ko-primenu kompozicija. Ovakav kit iz pronalaska uključuje dve ili više odvojene farmaceutske kompozicije od kojih najmanje jedna sadrži jedinjenje iz pronalaska i način za odvojeno čuvanje ovih kompozicija kao što su kontejner, podeljena boca ili podeljeni paket folije. Primer ovakvog kita je poznato blister pakovanje koje se koristi za pakovanje tableta, kapsula i slično.

[0272] Kit iz pronalaska je posebno pogodan za primenu različitih doznih oblika, na primer, oralnih i parenteralnih, za primenu odvojenih kompozicija u različitim intervalima doziranja ili za titraciju odvojenih kompozicija jedne od drugih. Da pomogne u razumevanju, kit obično uključuje uputstvo za primenu a može da sadrži i podsetnik.

Kombinovana terapija

[0273] Kako se ovde koristi, naziv "kombinovana terapija" se odnosi na primenu jedinjenja iz pronalaska zajedno sa najmanje jednim dodatnim farmaceutskim ili medicinskim sredstvom (na primer, anti-kancerogenim sredstvom), ili odvojeno ili istovremeno.

[0274] Kako je prethodno navedeno, jedinjenja iz pronalaska mogu da se koroste u kombinaciji sa jednim ili više dodatnih anti-kancerogenih sredstava. Efikasnost jedinjenja iz pronalaska u nekim tumorima može da se poveća kombinacijom sa drugim odobrenim ili eksperimentalnim terapijama kancera, na primer, zračenjem, hirurgijom, hemoterapeutskim sredstvima, ciljanim terapijama, sredstvima koja inhibiraju druge puteve signalizacije koji su neregulisani u tumorima i drugim sredstvima za povećanje imuniteta, kao što su PD-1 antagonisti i slično.

[0275] Kada se koristi kombinovana terapija, jedno ili više dodatnih anti-kancerogenih sredstava mogu da se primene odvojeno ili istovremeno sa jedinjenjem iz pronalaska. U jednom ostvarenju, dodatno anti-kancerogeno sredstvo se primenjuje na sisaru (na primer, ljudima) pre primene jdinjenja i pronalaska. U narednom ostvarenju, dodatno antikancerogeno sredstvo se primenjuje na sisaru nakon primene jedinjenja iz pronalaska. U narednom ostvarenju, dodatno anti-kancerogeno sredstvo se primenjuje na sisaru (na primer, ljudima) istovremeno sa primenom jedinjenja iz pronalaska.

[0276] Pronalazak se takođe odnosi na farmaceutsku kompoziciju za tretman nenormalnog rasta ćelija kod sisara, uključujući ljude, što obuhvata količinu jedinjenja iz pronalaska, kako je prethodno definisano (uključujući hidrate, solvate i polimorfe tog jedinjenja ili njihove farmaceutski prihvatljive soli) u kombinaciji sa jednim ili više (poželjno je jedan do tri) antikancerogenih terapeutskih sredstava.

[0277] U posebnim ostvarenjima, jedinjenje iz pronalaska može da se primeni u kombinaciji sa jednim ili više: ciljanim sredstvima, kao što su inhibitori PI3 kinaze, mTOR, PARP, IDO, TDO, ALK, ROS, MEK, VEGF, FLT3, AXL, ROR2, EGFR, FGFR, Src/Abl, RTK/Ras, Myc, Raf, PDGF, AKT, c-Kit, erbB, CDK4/CDK6, CDK5, CDK7, CDK9, SMO, CXCR4, HER2, GLS1, EZH2 ili Hsp90, ili imunomodularnim sredstvima, kao što su PD-1 ili PD-L1 antagonisti, OX40 agonisti ili 4-1BB agonisti.

[0278] U drugim ostvarenjima, jedinjenje iz pronalaska može da se primeni u kombinaciji sa standardnim sredstvom na lečenje, kao što su tamoksifen, docetaksel, paklitaksel, cisplatin, kapecetabin, gemcitabin, vinorelbin, eksemestan, letrozol, fulvestrant, anastrozol ili trastuzumab.

Postupci sinteze

[0279] Jedinjenja Formula I, II i III mogu da se izrade po niže opisanim postupcima, zajedno sa postupcima sinteza poznatih u tehnici organske hemije, ili modifikacijama i transfomacijama koje su dobro poznate stručnjaku sa uobičajenim iskustvom u tehnici. Ovde korišćeni početni materijali su komercijalno raspoloživi ili mogu da se izrade uobičajenim postupcima poznatim u tehnici [kao što su postupci otkriveni u standardnim referentnim knjigama kao što su Compendium of Organic Synthetic Methods, Vol. I-XIII (published by Wiley-Interscience)]. U poželjnije postupke, ali bez ograničenja na, spadaju postupci koji su niže opisani.

[0280] U toku bilo koje od narednih sekvenci sinteza može da bude neophodno i/ili poželjno da se zaštite osetljive ili reaktivne grupe na bilo kojoj od razmatranih molekula. To može da se postigne pomoću uobičajenih zaštitnih grupa, kao što su one opisane u T. W. Greene, Protective Groups in Organic Chemistry, John Wiley & Sons, 1981; T. W. Greene and P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Chemistry, John Wiley & Sons, 1991; i T. W. Greene i P. G. M. Wuts, Protective Groups in Organic Chemistry, John Wiley & Sons, 1999, koje su ovde inkorporirane u reference.

[0281] Jedinjenja Formula I, II i III ili njihove farmaceutske prihvatljive soli, mogu da se izrade u skladu sa Šemama reakcija koje su ovde niže diskutovane. Ukoliko nije drugačije navedeno, suptituenti u Šemama su definisani kao prethodno. Stručnjak sa uobičajenim iskustvom u tehnici će prepoznati da je R<13>supstituent koji se javlja za R<4>. Ne-ograničavajući primeri za R<13>uključuju (C1-C6)alkil grupu opciono supstituisanu sa hidroksi, halo(C1-C6)alkil i -(CH2)n(C3-C6)cikloalkil grupom pri čemu je n = 0 ili 1. Ne-ograničavajući primeri (C1-C6)alkil grupe za R<13>u niže datim šemama uključuju CH3-, CH3-CH2- i CH3-CH2-CH2-grupu.

[0282] Izdvajanje i prečišćavanje produkata je izvršeno standardnim procedurama koje su poznate hemičaru sa uobičajenim iskustvom.

[0283] Stručnjaku sa iskustvom u tehnici će da bude jasno da su različiti simboli, superskripti i subskripti korišćeni u šemama, postupcima i primerim upotrebljeni radi pogodnosti predstavljanja i/ili odražavaju redosled u kojem su uvedeni u šeme i nisu namenjeni da nužno odgovaraju simbolima, superskriptima ili subskriptima u priloženim zahtevima. Pored toga, stručnjak sa iskustvom u tehnici će da prepozna da će u mnogim situacijama ova jedinjenja biti smeše ili enantiomeri koji mogu da se razdvoje u različitim fazama šema sinteze koristeći uobičajene tehnike kao što su, ali bez ograničenja na, kristalizacija, normalno fazna hromatografija, reverzno fazna hromatografija i asimetrična hromatografija, da se dobiju pojedinačni enantiomeri. Šeme predstavljaju postupke korisne za sintezu jedinjenja iz ovog pronalaska. One ni na koji način ne ogrančavaju okvir pronalaska.

[0284] Jedinjenja iz pronalaska su izrađena u skladu sa ovde datim primernim procedurama i modifikacijama poznatim stručnjaku sa iskustvom u tehnici.

[0285] Naredne skraćenice su korišćene za sve Primere: "Ac" označava acetili, "AcO" ili "OAc" označava acetoksi, "ACN" označava acetonitril, "aq" označava vodeni, "atm" označava atmosferu(e) "BOC", "Boc" ili "boc" označava N-terc-butoksikarbonil, "Bn" označava benzil, "Bu" označava butil, "nBu" označava normalni-butil, "tBu" označava tercbutil, "DBU" označava 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en, "Cbz" označava benziloksikarbonil, "DCM" (CH2Cl2) označava metilen hlorid, "de" označava diastereomerni višak, "DEA" označava dietilamin, "DIPEA" označava diizopropil etil amin, "DMA" označava N,N-dimetilacetamid, "DME" označava 1,2-dimetoksietan, "DMF" označava N,N-dimetilformamid, "DMSO" označava dimetilsulfoksid, "EDTA" označava etilendiamintetrasirćetnu kiselinu, "ee" označava enantiomerni višak, "Et" označava etil, "EtOAc" označava etil acetat, "EtOH" označava etanol, "HOAc" ili "AcOH" označava sirćetnu kiselinu, "i-Pr" ili "iPr" označava izopropil, "IPA" označava izopropil alkohol, "LAH" označava litijum aluminijum hidrid, "LHMDS" označava litijum heksametildisilazid (litijum bis(trimetilsilil)amid), "mCPBA" označava meta-hlorperoksi-benzoevu kiselinu, "Me" označava metil, "MeOH" označava metanol, "MS" označava masenu spektrometriju, "MTBE" označava metil terc-butil etar, "NCS" označava N- hlorsukcinimid, "Ph" označava fenil, "TBHP" označava terc-butil hidroperoksid, "TBME" označava terc-butil metil etar, "TFA" označava trifluorosirćetnu kiselinu, "THF" označava tetrahidrofuran, "SFC" označava superkritičnu tečnu hromatografiju, "TLC" označava hromatografiju na tankom sloju, "Rf" označava faktor zadržavanja, "~" označava približno, "rt" označava vreme zadržavanja, "h" označava sate, "min" označava minute, "equiv" označava ekvivalente, "sat." označava zasićeni.

Izrada sintetičkih međuproizvoda

Međuproizvod 1: 2-bromo-6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin

Faza 1: 6-bromopiridin-2-karbohidrazid (1a)

[0286]

[0287] U rastvor metil 6-bromo-2-piridinkarboksilata (16.0 g, 74.0 mmol) u metanolu (120 mL) se doda hidrazin monohidrat (5.23 g, 88.8 mmol, 85%) i smeša se meša 16 sati na temperaturi sredine. Dobijeni rastvor se koncentruje do približno pola zapremine i nakon toga triturira dodavanjem 40 mL metil terc-butil etra i mešanjem u toku 10 minuta. Dobijena bela čvrsta supstanca se filtrira i suši pod vakuumom da se dobije naslovljeno jedinjenje (15 g, 94%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.82 (br. s., 1H), 8.13 (dd, J=0.9, 7.5 Hz, 1H), 7.76 -7.71 (m, 1H), 7.64 (dd, J=0.9, 8.0 Hz, 1H), 4.08 (br. s., 2H). m/z (ESI) za (C6H6BrN3O) 217.5 (M+H)<+>

Faza 2: N’-[(6-bromopiridin-2-il)karbonil]-N,N-dimetilhidrazonformamid (1b)

[0288]

[0289] Rastvor 6-bromopiridin-2-karbohidrazida (1a) (15.0 g, 69.4 mmol) u dimetil formamid dimetil acetalu (80 mL) se meša 16 sati na 80 °C. Dobijena smeša se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije ostatak. U ovaj ostatak se doda metil terc-butil etar (60 mL) i meša 40 min, a dobijena žuta čvrsta supstanca se filtrira i suši da se dobije naslovljeno jedinjenje (16 g, 85 %).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.74 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 8.01 -7.97 (m, 1H), 7.91 (t, J=7.7 Hz, 1H), 7.80 (dd, J=1.0, 7.8 Hz, 1H), 2.84 (s, 6H). m/z (ESI) za (C9H11BrN4O) 272.7 (M+H)<+>

Faza 3: 2-bromo-6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin (Međuproizvod 1)

[0290]

eđuproizvod 1

[0291] N’-[(6-bromopiridin-2-il)karbonil]-N,N-dimetilhidrazonformamid (1b) (16.0 g, 59.0 mmol) i izo-propilamin (12.0 g, 200 mmol) se rastvore u sirćetnoj kiselini (33 mL) i acetonitrilu (130 mL). Nakon ašto se uoči smanjenje razvoja dima, dobijeni rastvor se meša 16 sati na 95 °C. Reaktivna smeša se kombinuje sa narednom serijom iz ove reakcije (5 g scale) i koncentruje pod vakuumom. Dobijeni materijal se razblaži sa vodom (130 mL) i pH podesi na = 7 sa 1N vodenim rastvorom natrijum hidroksida (120 mL). Dobijena smeša se nakon toga ekstrahuje sa etil acetatom (2 x 150 mL) i kombinovani organski sloj se ispere sa vodom (2 x 130 mL) i koncentruje pod vakuumom. Sirovi produkt se prečisti koristeći hromatografiju na koloni (0-100% etil acetat u petrol etru) da se dobije naslovljeno jedinjenje kao žuta čvrsta supstanca (16.9 g, prosečan prinos 82%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.42 -8.34 (m, 1H), 8.28 (d, J=7.8 Hz, 1H), 7.69 (t, J=7.8 Hz, 1H), 7.52 (d, J=7.8 Hz, 1H), 5.57 (spt, J=6.7 Hz, 1H), 1.56 (d, J=6.5 Hz, 6H). m/z (ESI) za (C10H11BrN4) 268.8 (M+H)<+>

Međuproizvod 2: terc-butil ((6-hlor-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il)metil)(metil)karbamat

Faza 1: 4-hlor-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on (2a)

[0292]

[0293] N-bromosukcinimid (5.43 g, 30.5 mmol) i azobisizobutironitril (453 mg, 2.76 mmol) se dodaju u rastvor metil 2-hlor-3-metilpiridin-4-karboksilata (5.12 g, 27.61 mmol) u ugljenik tetrahloridu (35 mL, 0.8 M). Dobijena smeša se zagreva 18 h na 80 °C. Smeša se ohladi na sobnu temperaturu, filtrira i čvrsta supstanca se ispere sa ugljen tetrahloridom (10 mL). Filtrat se razblaži sa DCM (100 mL) i ispere sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (100 mL). Vodeni sloj se ekstrahuje sa DCM (100 mL). Kombinovani organski slojevi se suše preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtriraju i koncentruju da se dobije bledo smeđe ulje, koje se rastvori u 7 N rastvoru amonijaka u metanolu (39 mL, 276 mmol). Reakcija se ostavi da se meša 3 h na sobnoj temperaturi. Rastvarač se ukloni pod sniženim pritiskom. Ostatak se rastvori u DCM (100 mL) i ispere sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (100 mL). Vodeni sloj se ekstrahuje sa DCM (100 mL). Kombinovani organski sloj se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrira i koncentruje da se dobije naslovljeno jedinjenje kao beličasta čvrsta supstanca (4.58 g, 98%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.62 (d, J=4.89 Hz, 1H), 7.75 (d, J=5.01 Hz, 1H), 6.70 (br. s., 1H), 4.54 (s, 2H). m/z (APCl+) za (C7H5ClN2O) 168.7 (M+H)<+>

Faza 2: metil 1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-karboksilat (2b)

[0294]

[0295] U rezervoar reaktora zapremine 100 mL se stavi 4-hlor-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on (2a) (787 mg, 4.67 mmol), metanol (30 mL), kalijum acetat (913 mg, 9.30 mol) i paladijum-tetrakis(trifenilfosfin) (168 mg, 0.145 mmol). Posuda je bila pod pritiskom ugljen monoksid gasa (4 bar) i reakcija se zagreva 4 h na 100 °C. Dobijena smeša se filtrira i dobijena čvrsta supstanca ispere sa metanolom. Čvrsta supstanca se nakon toga sakupi i suši da se dobije naslovljeno jedinjenje kao smeđa čvrsta supstanca (744 mg, 83%) koja se koristi bez prečišćavanja.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.13 (s, 1H), 8.87 (d, J=4.77 Hz, 1H), 7.93 (d, J=4.77 Hz, 1H), 4.71 (s, 2H), 3.93 (s, 3H). m/z (APCl+) za (C9H8N2O3)193.0 (M+H)<+>

Faza 3: 2-(terc-butil) 4-metil 1-okso-1,3-dihidro-2H-pirolo[3,4-c]piridin-2,4-dikarboksilat (2c)

[0296]

[0297] Trietilamin (0.81 mL, 5.81 mmol), di-terc-butil dikarbonat (1.07 g, 4.65 mmol) i 4-dimetilamin piridin (48.3 mg, 0.387 mmol) se dodaju u suspenziju metil 1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-karboksilata (2b) (744 mg, 3.87 mmol) u DCM (4.0 mL, 1 M). Smeša se meša 4 h na sobnoj temperaturi. Reakcija se razblaži sa vodom (30 mL) i ekstrahuje sa DCM (2 x 30 mL). Kombinovani organski sloj se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrira i koncentruje. Sirovi materijal se prečisti koristeći hromatografiju na koloni (30-100% etil acetat u heptanu) da se dobije naslovljeno jedinjenje kao bledo žuta čvrsta supstanca (74 mg, 66%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.98 (d, J=4.89 Hz, 1H), 8.02 (d, J=4.89 Hz, 1H), 5.21 (s, 2H), 4.11 (s, 3H), 1.65 (s, 9H). m/z (APCl+) za (C14H16N2O5) 293.3 (M+H)<+>

Faza 4: 2-(terc-Butoksikarbonil)-4-(metoksikarbonil)-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin 5-oksid (2d)

[0298]

[0299] Urea-vodonik peroksid (1.14 g, 12.1 mmol) se doda u rastvor 2-(terc-butil) 4-metil 1-okso-1,3-dihidro-2H-pirolo[3,4-c]piridin-2,4-dikarboksilata 2c (1.68 g, 5.76 mmol) u acetonitrilu (38 mL, 0.15 M). Smeša se ohladi na 0 °C, nakon toga se u kapima doda trifluoroacetatni anhidrid (1.6 mL, 11.5 mmol). Dobijena smeša se meša na 0 °C i nakon toga ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu i meša 2 h. Smeša se neutrališe sa 10% vodenim rastvorom natrijum tiosulfata (80 mL) i ekstrahuje sa DCM (2 x 80 mL). Kombinovani organski sloj se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrira i koncentruje da se dobije naslovljeno jedinjenje kao bela čvrsta supstanca (2.23 g, 125% -80% čisto težinski). m/z (APCl+) za (C14H16N2O6) 308.9 (M+H)<+>

Faza 5: 2-(terc-butil) 4-metil 6-hlor-1-okso-1,3-dihidro-2H-pirolo[3,4-c]piridin-2,4-dikarboksilat (2e)

[0300]

[0301] 2,6-lutidin (0.34 mL, 2.90 mmol) se na 0 °C doda u rastvor 2-(terc-butoksikarbonil)-4-(metoksikarbonil)-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin 5-oksida (2d) (1.05 g, 2.90 mmol) u DCM (29 mL, 0.1 M), nakon toga se dodaju fosfor(V)oksihlorid (0.54 mL, 5.79 mmol) i DMF (0.14 mL, 1.74 mmol). Dobijena smeša se meša na 0 °C a nakon toga ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu. Nakon 2 h, LCMS pokazuje samo početni materijal i dodaju se fosfor(V)oksihlorid (0.32 mL, 3.47 mmol) i DMF (0.14 mL, 1.74 mmol) i reakcija i smeša se ostave da se mešaju 18 h na sobnoj temperaturi. Reakcija se neutrališe sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (100 mL) i ekstrahuje sa DCM (2 x 100 mL).

Kombinovani organski sloj se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrira i koncentruje. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom na koloni (30-100% etil acetat u heptanu) da se dobije naslovljeno jedinjenje kao bela čvrsta supstanca (722 mg, 76%). (<1>H NMR pokazuje da sadrži približno 8% metil 6-hlor-2-formil-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-karboksilata).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.92 (s, 1 H) 5.07 (s, 2 H) 4.00 (s, 3 H) 1.55 (s, 9 H).m/z (APCl+) za (C14H15ClN2O5) 328.9 (M+H)<+>

Faza 6: metil 6-hlor-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-karboksilat (2f)

[0302]

[0303] Rastvor 4 N HCl u dioksanu (7.0 mL, 29.0 mmol) se doda u rastvor 2-(terc-butil) 4-metil 6-hlor-1-okso-1,3-dihidro-2H-pirolo[3,4-c]piridin-2,4-dikarboksilata (2e) (722 mg, 2.21 mmol) u DCM (20 mL) i metanolu (5 mL). Smeša se meša 3 h na sobnoj temperaturi. Isparivi materijal se ukloni pod sniženim pritiskom i dobijeni materijal se azeotropira sa toluenom a nakon toga dalje koncentruje pod vakuumom da se dobije naslovljeno jedinjenje kao beličasta čvrsta supstanca (520 mg, 90%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.28 (s, 1 H) 8.04 (s, 1 H) 4.68 (s, 2 H) 3.94 (s, 3 H). m/z (APCl+) za (C9H7ClN2O3) 226.90 (M+H)<+>

Faza 7: 6-hlor-4-(hidroksimetil)-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on (2g)

[0304]

[0305] 2.0 M rastvor litijum borohidrida u THF (8.8 mL, 17.7 mmol) se na 0 °C doda u suspenziju metil 6- hlor-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-karboksilata (2f) (1.0 g, 3.80 mmol) u THF (60 mL, 0.074 M). Smeša se meša 1 h na 0 °C, a nakon toga se neutrališe sa 1N vodenim rastvorom HCl (0.5 mL). Smeša se razblaži sa vodom (100 mL) i ekstrahuje sa 20% izopropanola u DCM (4 x 100 mL). Kombinovani organski sloj se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrira i koncentruje da se dobije naslovljeno jedinjenje kao bela čvrsta supstanca (795 mg, 91%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.05 (br. s., 1 H) 7.60 (s, 1 H) 5.59 (t, J=5.93 Hz, 1 H) 4.72 (d, J=5.75 Hz, 2 H) 4.56 (s, 2 H). m/z (APCl+) za (C8H7ClN2O2) 199.0 (M+H)<+>

Faza 8: terc-butil ((6-hlor-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il)metil)(metil)karbamat (Međuproizvod 2)

[0306]

eđuproizvod 2

[0307] Metansulfonil hlorid (0.04 mL, 0.483 mmol) se na 0 °C doda u suspenziju 6-hlor-4-(hidroksimetil)-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-ona (2g) (48.0 mg, 0.240 mmol) u DCM (6.0 mL, 0.02 M). Dobijena smeša se meša 30 min na 0 °C. Doda se 2 M rastvor metilamina u THF (1.21 mL, 2.42 mmol) i smeša se meša 2 h na sobnoj temperaturi. Isparivi materijal se ukloni pod sniženim pritiskom i ostatak se prenese u DCM (6 mL). Dodaju se di-terc-butil dikarbonat (66.6 mg, 0.290 mmol) i trietilamin (0.10 mL, 0.725 mmol) i smeša se meša 3 h na sobnoj temperaturi. Reakcija se razblaži sa vodom (20 mL) i ekstrahuje sa DCM (2 x 20 mL). Kombinovani organski sloj se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrira i koncentruje. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom na koloni (50-100% etil acetat u heptanu) da se dobije naslovljeno jedinjenje kao beličasta čvrsta supstanca (40 mg, 53%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.72 (s, 1H), 4.68 (s, 2H), 4.54 (br. s., 2H), 2.94 (s, 3H), 1.50 (br. s., 9H). m/z (APCl+) za (C14H18ClNO3) 312.0 (M+H)<+>.

Međuproizvod 3: terc-butil ((6-(dimetilamino)-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il)metil)(metil)karbamat

Faza 1: metil 6-(dimetilamino)-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-karboksilat (3a)

[0308]

[0309] Smeša dimetilamin hidrohlorida (30.8 mg, 0.377 mmol), trietilamina (0.14 mL, 1.03 mmol) i metil 6-hlor-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-karboksilata 2f (77.7 mg, 0.34 mmol) u DMF (2 mL) se zagreje na 80 °C. Nakon 24 h mešanja na toj temperaturi, reakcija nije završena. Dodaju se dimetilamin hidrohlorid (30.8 mg, 0.377 mmol) i trimetilamin (0.14 mL, 1.03 mmol) i smeša se ostavi 24 h da se meša na 80 °C. Isparivi materijal se ukloni pod sniženim pritiskom. Ostatak se prenese u vodu (10 mL) i ekstrahuje sa DCM (2 x 10 mL). Kombinovani organski sloj se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrira i koncentruje. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom na koloni (0-10% metanol u DCM) da se dobije naslovljeno jedinjenje kao bledo smeđe ulje (35 mg, 43%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.17 (s, 1 H) 4.71 (s, 2 H) 4.06 (s, 3 H) 3.22 (s, 6 H). m/z (APCl+) za (C11H13N3O3) 236.0 (M+H)<+>

Faza 2: 6-(dimetilamino)-4-(hidroksimetil)-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on (3b)

[0310]

[0311] Litijum borhidrid (0.27 mL, 0.536 mmol, 2.0 M rastvor u THF) se na 0 °C doda u rastvor metil 6-(dimetilamino)-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-karboksilata (3a) (35 mg, 0.130 mmol) u THF (5.0 mL, 0.03 M). Dobijena smeša se meša na 0 °C a nakon toga ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu i meša 18 h. Smeša se neutrališe sa vodom (15 mL) i ekstrahuje sa 10% metanola u DCM (2 x 15 mL). Kombinovani organski slojevi se suše preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtriraju i koncentruju da se dobije naslovljeno jedinjenje kao beličasta čvrsta supstanca (24 mg, 78%) koja se koristi bez prečišćavanja. m/z (APCl+) za (C10H13N3O2) 208.1 (M+H)<+>

Faza 3: terc-butil ((6-(dimetilamino)-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il)metil)(metil)karbamat (Međuproizvod 3)

[0312]

uproizvod 3

[0313] U rastvor 6-(dimetilamino)-4-(hidroksimetil)-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-ona (3b) (24 mg, 0.120 mmol) u DCM (16.0 mL) se na 0 °C dodaju trietilamin (0.08 mL, 0.579 mmol) i metansulfonil hlorid (0.02 mL, 0.232 mmol). Smeša se meša 30 min na 0 °C, doda se 1 M rastvor metilamina u THF (1.2 mL, 1.16 mmol) i reakcija se meša 2 h na sobnoj temperaturi. Isparivi materijal se ukloni pod sniženim pritiskom. Ostatak se prenese u DCM (10 mL) i dodaju se trietilamin (0.08 mL, 0.579 mmol) i di-terc-butil dikarbonat (39.1 mg, 0.174 mmol). Dobijena smeša se meša 18 h na sobnoj temperaturi. Smeša se neutrališe sa vodom (15 mL) i ekstrahuje sa 10% metanola u DCM (2 x 15 mL). Kombinovani organski sloj se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrira i koncentruje. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom na koloni (0-10% metanol u DCM) da se dobije naslovljeno jedinjenje kao bela pena (17 mg, 46%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 6.83 (s, 1H), 6.61 -6.44 (m, 1H), 4.50 (br s, 2H), 4.41 - 4.31 (m, 2H), 3.12 (s, 6H), 2.97 - 2.89 (m, 3H), 1.51 -1.39 (s, 9H). m/z (APCl+) za (C16H24N4O3) 321.0 (M+H)<+>.

[0314] Alternativno, Međuproizvod 3 se izrađuje kako sledi:

Faza 1: 2-hlor-6-(dimetilamino)-N,N-dimetilpiridin-4-karboksamid (3c)

[0315]

[0316] U bocu okruglog dna zapremine 3.0 L napunjenu sa metil 2,6-dihlorpiridin-4-karboksilatom (58.0 g, 281 mmol) se na 0-10 °C u atmosferi N2doda N,N-dimetilamin (38.1 g, 845 mmol). Doda se THF (200 mL). U toku 3 h se dodaje rastvor i-PrMgCl (2.0 M u THF, 352 mL, 704 mmol), održavajući temperaturu reakcije na 0-10 °C. Reakcija se meša još 10 min na 0 °C i nakon toga 18 h na 25 °C. LCMS analiza pokazuje da je početni materijal utrošen uz formiranje mase željenog proizvoda. Reakcija se ohladi u ledenom kupatilu i neutrališe dodavanjem hladnog zasićenog vodenog rastvora NH4Cl (500 mL), održavajući temperaturu reakcije na <20 °C. Doda se EtOAc (500 mL) i slojevi se razdvoje. Vodeni sloj se ekstrahuje sa EtOAc (500 mL). Kombinovane organske supstance se isperu sa slanim rastvorom, suše preko Na2SO4, filtriraju i koncentruju. Dobijeno ulje se prenese u heptan (200 mL) i koncentruje na rotacionom evaporatoru dok se ne formira čvrsta supstanca. Suspenzija se meša 0.5 h i čvrste supstance se sakupe filtriranjem. Filter pogača se ispere sa heksanima (3x50 mL). Filter pogača se razmuti u 1:20 EtOAc/petrol etar (100 mL) i čvrste supstance se sakupe filtriranjem. Filter pogača se ispere sa 1:20 EtOAc/petrol etar (3x30 mL) i nakon toga suši pod vakuumom da se dobije 2-hlor-6-(dimetilamino)-N,N-dimetilpiridin-4- karboksamid (51 g, 80% prinos) kao svetlo-žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 6.49 (d, J=0.7 Hz, 1H), 6.35 (d, J=0.9 Hz, 1H), 3.13 - 3.09 (m, 9H), 2.98 (s, 3H); m/z (ESI+) za (C10H14ClN3O), 227.9 (M+H)<+>.

Faza 2: 2-hlor-6-(dimetilamino)-3-formil-N,N-dimetilpiridin-4-karboksamid (3d)

[0317]

[0318] Ova transformacija se izvodi u dve paralelne reakcije. U bocu okruglog dna koja sadrži DMF (250 mL), se uz mešanje, na 15-25 °C doda POCl3(85.9 g, 560 mmol). Smeša se meša 15 min na 15-25 °C i nakon toga se doda 2- hlor-6-(dimetilamino)-N,N-dimetilpiridin-4-karboksamid (25.5 g, 112 mmol). Smeša se meša 16 h na 50 °C. LCMS analiza pokazuje da je početni materijal utrošen uz formiranje mase željenog proizvoda. Dve reakcije se kombinuju i nakon toga neutrališu sporim ulivanjem u hladan zasićeni vodeni rastvor Na2CO3, održavajući pH ~9. Smeša se ekstrahuje sa EtOAc (4x1.0 L). Kombinovane organske supstance se isperu sa slanim rastvorom (5x600 mL), suše preko Na2SO4, filtriraju i koncentruju. Sirovi produkt se kombinuje sa dve dodatne reakcije izvedene na identičan način sa 7.5 g i 5.0 g 2-hlor-6-(dimetilamino)-N,N-dimetilpiridin-4-karboksamida. Materijal se prenese u EtOAc (200 mL) i prevede u žitku masu u toku 20 min. Suspenzija se filtrira. Filter pogača se ispere sa EtOAc (2x50 mL). Filter pogača se razmuti u 1:1 petrol etar/EtOAc (80 mL) u toku 20 min.

Suspenzija se filtrira i filter pogača se ispere sa 1:1 petrol etar/EtOAc (60 mL). Filter pogača se suši pod vakuumom. Kombinovani filtrat se koncentruje do sušenja. Ostatak se razmuti sa 1:1 petrol etar/EtOAc (100 mL) u toku 30 min. Suspenzija se filtrira i filter pogača se ispere sa 1:1 petrol etar/EtOAc (2x50 mL) i suši pod vakuumom. Kombinovane suve čvrste supstance se razmute u petrol etru (200 mL) u toku 10 min i čvrste supstance se sakupe filtriranjem. Filter pogača se ispere sa petrol etrom (100 mL) i nakon toga koncentruje pod vakuumom. Kombinovani filtrat se koncentruje pod vakuumom do ~50 mL i nakon toga ostavi da stoji 2 d. Dobijene čvrste supstance se sakupe filtriranjem i filter pogača se ispere sa 3:2 petrol etar/EtOAc (2x50 mL). Čvrste supstance se kombinuju da se dobije 2-hlor-6-(dimetilamino)-3-formil-N,N-dimetilpiridin-4-karboksamid (52 g, 73% prinos) kao žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.21 (d, J=0.6 Hz, 1H), 6.28 (d, J=0.6 Hz, 1H), 3.19 (s, 6H), 3.13 (s, 3H), 2.77 (s, 3H); m/z (ESI+) za (C11H14ClN3O2), 255.9 (M+H)<+>.

Faza 3: terc-butil {[6-(dimetilamino)-4-(dimetilkarbamoil)-3-formilpiridin-2-il]metil}metilkarbamat (3e)

[0320] Smeša terc-butil dimetilkarbamata (3.41 g, 23.5 mmol) i N,N,N,N-tetrametilendiamina (3.27 g, 28.2 mmol) u 135 mL THF se ohladi do -55 °C u atmosferi N2. Polako se dodaje rastvor s-BuLi (1.4 M u cikloheksanu, 20.1 mL, 28.2 mmoL) održavajući temperaturu rastvora <-52 °C (unutrašnja). Smeša se meša još 30 min na -55 °C i nakon toga tretira sa rastvorom ZnCl2(1.9 M rastvor u 2-metiltetrahidrofuranu, 14.8 mL, 28.2 mmol), održavajući temperaturu reakcije na <-52 °C. Rastvor se meša dodatnih 40 min na -55 °C i nakon toga zagreje na sobnu temperaturu da se dobije rastvor {[(tercbutoksikarbonil)(metil)amino]metil}(hlorid)cinka (c = 0.195 M). Deo prethodno formiranog rastvora cinkata (90.2 mL, 17.6 mmoL) se prenese u bocu okruglog dna zapremine 250 mL prethodno osušene u šećnici u atmosferi N2i koncentruje do sušenja da se dobije bela pena. Boca se ponovo napuni sa N2. Posebna boca se napuni sa 2-hlor-6-(dimetilamino)-3-formil-N,N-dimetilpiridin-4-karboksamidom (3.0 g, 10 mmol), PdCl2(dppf) (0.858 g, 1.17 mmol), 1,4-dioksanom (50 mL) i H2O (0.159 g, 8.8 mmol). Suspenzija se pomoću kanile prenese u bocu koja sadrži cinkat i nakon toga smeša se meša 80 min na 80 °C. LCMS pokazuje formiranje mase željenog proizvoda sa malo preostalog početnog materijala. Doda se još alikvot {[(terc-butoksikarbonil)(metil)amino]metil}(hlorid)cink rastvora (2.0 mL) i smeša se meša 20 min na 80 °C. Nije uočena dodatna konverzija. Reakcija se ohladi do 0 °C i neutrališe dodavanjem zasićenog vodenog rastvora NH4Cl (10 mL) i H2O (20 mL). Smeša se meša 20 min na 0 °C i nakon toga filtrira kroz celite ploču. Filtrat se ekstrahuje sa EtOAc (4x). Kombinovane organske supstance se suše preko Na2SO4, filtriraju i koncentruju. Ostatak se prečisti fleš hromatografijom (80 g SiO2, 0-100% EtOAc/heptan). Dobijena bela pena se triturira sa MTBE i koncentruje pod vakuumom da se dobije terc-butil {[6-(dimetilamino)-4-(dimetilkarbamoil)-3-formilpiridin-2-il]metil}metilkarbamat (3.8 g, 95% prinos) kao svetložuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.84 (d, J=6.8 Hz, 1H), 6.45 (s, 1H), 4.71 (s, 2H), 3.15 (s, 6H), 2.99 (s, 3H), 2.90 (s, 3H), 2.75 (s, 3H), 1.33 (d, J=69.8 Hz, 9H); m/z (ESI+) za (C18H28N4O4), 365.3 (M+H)<+>.

Faza 4: terc-butil {[6-(dimetilamino)-4-(dimetilkarbamoil)-3-{(E)-[(2-metilpropan-2-sulfinil)imino]metil}piridin-2-il]metil}metilkarbamat (3f)

[0321]

[0322] U rastvor terc-butil {[6-(dimetilamino)-4-(dimetilkarbamoil)-3-formilpiridin-2-il]metil}metilkarbamata (3.0 g, 8.0 mmol) i (R)-(+)-2-metil-2-propansulfinamida (1.2 g, 9.88 mmol) u THF (40 mL) se doda titanijum(IV) etoksid (5.63 g, 24.7 mmol). Smeša se meša na 50 °C u toku noći. Reakcija se ohladi na sobnu temperaturu, razblaži sa DCM (50 mL) i neutrališe dodavanjem zasićenog vodenog rastvora NaHCO3(20 mL). Rastvor

se energično meša 20 min i nakon toga filtrira kroz celite ploču. Celite se ispere sa DCM (3x). Kombinovani filtrat se suši preko Na2SO4, filtrira i koncentruje. Ostatak se prečisti fleš hromatografijom (80 g SiO2, 0-100% EtOAc/heptan) da se dobije terc-butil {[6-(dimetilamino)-4-(dimetilkarbamoil)-3-{(E)-[(2-metil-propan-2-sulfinil)imino]metil}piridin-2-il]metil}metilkarbamat (3.89 g, 97% prinos) kao bezbojna pena.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.39 (s, 1H), 6.46 (s, 1H), 4.77 - 4.55 (m, 2H), 3.12 (s, 6H), 2.95 (s, 3H), 2.93 (s, 3H), 2.74 (s, 3H), 1.41 (s, 4H), 1.20 (s, 5H), 1.12 (s, 9H); m/z (ESI+) za (C22H37N5O4S), 468.4 (M+H)<+>

Faza 5: terc-butil {[6-(dimetilamino)-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il]metil}metilkarbamat

[0323]

eđuproizvod 3

[0324] U bocu okruglog dna napunjenu sa terc-butil {[6-(dimetilamino)-4-(dimetilkarbamoil)-3-{(E)-[(2-metilpropan-2-sulfinil)imino]metil}piridin-2-il]metil}metilkarbamatom (3.89, 8.32 mmol) se u atmosferi N2doda THF (42 mL). Smeša se ohladi do 0 °C i nakon toga tretira sa rastvorom LiBH4(2.0 M u THF, 4.37 mL, 8.73 mmol). Smeša se meša 1 h na 0 °C i nakon toga se doda rastvor NaOMe (25% u MeOH, 17.1 mL, 74.9 mmol) na istoj temperaturi.

Reakcija se ostavi da se polako zagreje na sobnu temperaturu i meša 16 h. LCMS analiza je pokazala da je početni materijal utrošen uz formiranje mase željenog proizvoda. Smeša se razblaži sa DCM i ispere sa zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl i slanim rastvorom. Organski sloj se suši preko Na2SO4, filtrira i koncentruje. Ostatak se prečisti fleš hromatografijom (80 g SiO2, 0-100% EtOAc/heptani) da se dobije Međuproizvod 3 (1.7 g, 64% prinos) kao bezbojna pena.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.68 (s, 1H), 6.68 (s, 1H), 4.42 (s, 2H), 4.23 (s, 2H), 3.06 (s, 6H), 2.86 (s, 3H), 1.36 (m, 9H); LCMS m/z (ESI+) za (C16H24N4O3), 321.2 (M+H)<+>.

Međuproizvod 4: 2-bromo-6-(5-metil-1,3,4-oksadiazol-2-il)piridin

[0325]

Faza 1: N’-acetili-6-bromopiridin-2-karbohidrazid (4a)

[0326]

[0327] U rastvor 6-bromopiridin-2-karbohidrazida (1a) (1.5 g, 6.94 mmol) u DCM (23 mL) se na 0 °C dodaju TEA (1.4 mL, 10.4 mmol) i acetili hlorid (0.56 mL, 7.8 mmol). Dobijeni rastvor se meša 58 h na 20 °C. Reakcija se koncentruje do sušenja i ostatak se prečisti fleš hromatografijom (SiO2, 0-100% etil acetat/petrol etar) da se dobije N’-acetili-6-bromopiridin-2-karbohidrazid kao bela čvrsta supstanca (1.0 g, 56%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.41 (d, J=1.6 Hz, 1H), 10.02 (d, J=1.6 Hz, 1H), 8.04 (dd, J=7.5, 1.2 Hz, 1H), 7.97 (t, J=7.7 Hz, 1H), 7.91 (dd, J=7.9, 1.2 Hz, 1H), 1.92 (s, 3H); m/z (ESI) za (C8H8BrN3O2), 257.9 (M+H)<+>.

Faza 2: 2-bromo-6-(5-metil-1,3,4-oksadiazol-2-il)piridin

[0328]

Međuproizvod 4

[0329] U rastvor N’-acetili-6-bromopiridin-2-karbohidrazida (4a) (240 mg, 0.93 mmol) u DCM (6 mL) i MeCN (6 mL) se dodaju TEA (0.78 mL, 5.6 mmol) i p-toluensulfonil hlorid (195 mg, 1.0 mmol). Dobijeni rastvor se meša 5 h na 20 °C. Reakcija se koncentruje pod vakuumom i dobijeni materijal se prečisti fleš hromatografijom (SiO2, 0-10% metanol/DCM) da se dobije 2-bromo-6-(5-metil-1 ,3,4-oksadiazol-2-il)piridin kao bela čvrsta supstanca (80 mg, 36%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.18 (d, J=7.6 Hz, 1H), 8.00 (t, J=7.8 Hz, 1H), 7.90 (d, J=8.0 Hz, 1H), 2.63 (s, 3H); m/z (ESI) za (C8H6BrN3O), 241.5 (M+H)<+>.

Međuproizvod 5: 2-bromo-6-(1,3,4-oksadiazol-2-il)piridin

[0330]

[0331] Rastvor 6-bromopiridin-2-karbohidrazina (1a) (1.0 g, 4.63 mmol) u HC(OEt)3(4.0 mL) se meša 18 h na 120 °C. Reakcija se ohladi na sobnu temperaturu i doda se HC(OEt)3(4.0 mL). Reakcija se ostavi da se meša 3 h na 140 °C, a nakon toga 16 h na 135 °C, 16 h na 150 °C i 19 h na 135 °C. LCMS analiza pokazuje minimalni preostali početni materijal uz formiranje mase željenog proizvoda. Reakcija se koncentruje do sušenja. Ostatak se prečisti fleš hromatografijom (SiO2, 1:10 EtOAc/petrol etar) da se dobije Međuproizvod 5 (400 mg, 38% prinos) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.46 (s, 1H), 8.23 (d, J=7.5 Hz, 1H), 8.05 - 7.98 (m, 1H), 7.92 (d, J=8.0 Hz, 1H); m/z (ESI) za (C7H4BrN3O), 225.8, 227.8 (M+H)<+>.

Međuproizvod 6: 2-bromo-6-(1,3,4-tiadiazol-2-il)piridin

[0332]

Faza 1: 6-bromo-N’-formilpiridin-2-karbohidrazid (6a)

[0333]

[0334] Čista mravlja kiselina (3.2 g, 69.4 mmol) se u atmosferi N2doda u Ac2O (5.9 g, 57.9 mmol). Smeša se meša 1 h na 60 °C i nakon toga ohladi na sobnu temperaturu. Doda se THF (20.0 mL). Rastvor se na 0 °C prenese u rastvor 6-bromopiridin-2-karbohidrazida (1a) (5.0 g, 23.1 mmol) u THF (40 mL). Smeša se meša 3 h na 15 °C. LCMS analiza pokazuje da je početni materijal utrošen uz formiranje mase željenog proizvoda. Reakcija se koncentruje do sušenja. Ostatak se razmuti sa DCM (50 mL) a čvrste supstance se sakupe filtriranjem. Filter pogača se ispere sa DCM (50 mL) i suši pod vakuumom da se dobije 6-bromo-N’-formilpiridin-2-karbohidrazid (6a) (3.7 g, 65% prinos) kao bela čvrsta supstanca.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.17 (s, 2H), 8.13 - 8.00 (m, 2H), 7.98 - 7.90 (m, 1H), 7.86 (dd, J=7.9, 1.0 Hz, 1H); m/z (ESI) za (C7H6BrN3O2), 245.7 (M+H)<+>.

Faza 2: 2-bromo-6-(1,3,4-tiadiazol-2-il)piridin

[0335]

Međuproizvod 6

[0336] U rastvor 6-bromo-N’-formilpiridin-2-karbohidrazida (6a) (4.2 g, 17.4 mmol) u ksilenima (420 mL) se doda fosfor pentasulfid (2.3 g, 10.4 mmol). Smeša se meša 45 min na 140 °C. LCMS analiza pokazuje da je početni materijal utrošen uz formiranje mase željenog proizvoda. Reakcija se koncentruje do sušenja. Ostatak se prečisti fleš hromatografijom (SiO2, 1:1 petrol etar/EtOAc). Produkt se ponovo prečisti fleš hromatografijom (SiO2, 1:3 EtOAc/petrol etar) da se dobije Međuproizvod 6 (587 mg, 14% prinos) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.75 (s, 1H), 8.32 (dd, J=7.7, 0.9 Hz, 1H), 8.03 -7.97 (m, 1H), 7.86 (dd, J=7.9, 0.9 Hz, 1H).; m/z (ESI) za (C7H4BrN3S), 243.8 (M+H)<+>.

Međuproizvod 7: terc-butil [(6-hlor-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il)metil]karbamat

[0337]

Faza 1: (6-hlor-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il)metil metansulfonat (7a)

[0338]

[0339] Rastvor 6-hlor-4-(hidroksimetil)-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-ona (2.0 g, 10.1 mmol) i TEA (3.1 mg, 30.2 mmol) u THF (50.0 mL) se u atmosferi N2ohladi na 0 °C i nakon toga u kapima tretira sa MsCl (1.73 g, 15.1 mmol). Smeša se meša 2 h na 0 °C. LCMS analiza je pokazala da je početni materijal utrošen. Reakcija se razblaži sa EtOAc (150 mL). Smeša se ispere sa H2O (50 mL), zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(50 mL) i slanim rastvorom (2x50 mL), suši preko Na2SO4, filtrira i koncentruje da se dobije (6-hlor-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il)metil metansulfonat (2.0 g, 72% prinos) kao siva čvrsta supstanca. m/z (ESI+) za (C9H9ClN2O4S), 276.9 (M+H)<+>.

Faza 2: 4-(azidometil)-6-hlor-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on (7b)

[0340]

[0341] Rastvor (6-hlor-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il)metil metansulfonata (2.0 g, 7.23 mmol), 18-crown-6 (191 mg, 0.723 mmol) i NaN3(705 mg, 10.8 mmol) u MeCN (70 mL) se meša 20 h na 10 °C. LMCS analiza pokazuje da je početni materijal utrošen uz formiranje mase željenog proizvoda. Reakcija se razblaži sa H2O (50 mL) i ekstrahuje sa EtOAc (2x50 mL). Kombinovane organske supstance se isperu sa slanim rastvorom (50 mL), suše preko Na2SO4, filtriraju i koncentruju da se dobije 4-(azidometil)-6-hlor-2,3-dihidro-1Hpirolo[3,4-c]piridin-1-on (1.62 g, >99% prinos) kao bledo smeđa čvrsta supstanca. m/z (ESI+) za (C8H6ClN5O), 223.7 (M+H)<+>.

Faza 3: 4-(aminometil)-6-hlor-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on (7c)

[0342]

[0343] Rastvor 4-(azidometil)-6-hlor-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-ona (1.62 g, 7.23 mmol) i PPh3(2.84 mg, 10.8 mmol) u smeši THF (40.0 mL) i H2O (4.0 mL) se meša 6 h na 20 °C. LCMS analiza pokazuje da je početni materijal utrošen. Doda se rastvor HCl (4.0 M u EtOAc, 50 mL) i smeša se ekstrahuje sa H2O (2x30 mL). Kombinovani vodeni slojevi se zaalkališe sa čvrstim NaHCO3do pH ~8 da se dobije vodeni rastvor 4-(aminometil)-6-hlor-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-ona (c ~ 0.12 M, 60 mL), koji se direktno koristni u sledećoj fazi.

Faza 4: terc-butil [(6-hlor-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il)metil]karbamat

[0344]

proizvod 7

[0345] U rastvor 4-(aminometil)-6-hlor-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-ona (0.12 M rastvor u vodenom rastvoru NaHCO3, 25 mL) se dodaju TEA (620 mg, 6.03 mmol) i DCM (10 mL). Smeša se ohladi na 10 °C i doda se Boc2O (790 mg, 3.62 mmol). Smeša se meša 1.5 h na 15 °C. LCMS analiza pokazuje da je početni materijal utrošen uz formiranje mase željenog proizvoda. Smeša se razblaži sa DCM (50 mL) i ispere sa H2O (25 mL). Organski sloj se suši preko Na2SO4, filtrira i koncentruje. Ostatak se razblaži sa DCM (5 mL). Doda se petrol etar (15 mL) i smeša se meša 15 min na 10 °C da se dobije suspenzija. Čvrste supstance se sakupe filtriranjem i filter pogača se suši pod vakuumom da se dobije Međuproizvod 7 (809 mg, 90% prinos) kao beličasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.08 (s, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.50 (br. t, J=6.0 Hz, 1H), 4.46 (s, 2H), 4.34 (d, J=6.0 Hz, 2H), 1.40 (s, 9H); m/z (ESI+) za (C13H16ClN3O3), 197.9 (M-Boc+H)<+>.

Međuproizvod 8: terc-butil metil{[6-(1-metilciklopropil)-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il]metil}karbamat

[0346]

Faza 1: etil 3-cijano-2-hidroksi-6-(1-metilciklopropil)piridin-4-karboksilat (8a)

[0347]

[0348] Smeša 2-cijanoacetamida (10.0 g, 119 mmol) i TEA (12.0 g, 119 mmol) u EtOH (50 mL) se zagreje na 65 °C (unutrašnja) dok se ne rastvore čvrste supstance i nakon toga se doda etil 3-(1-metilciklopropil)-3-oksopropanoat (24.6 g, 124 mmol). Smeša se meša 2 h na 65 °C. TLC analiza (1:10 EtOAc/petrol etar) pokazuje da je početni materijal utrošen. Reakcija se ohladi na 10 °C. Dobijeni precipitat se sakupi filtriranjem. Filter pogača se ispere sa MTBE (3x10 mL) i suši pod vakuumom. Filtrat se koncentruje do sušenja. Ostatak se razblaži sa EtOH (10 mL) i doda se MTBE (30 mL). Dobijene čvrste supstance se sakupe filtriranjem. Filter pogača se ispere sa EtOH (5 mL) i MTBE (2x10 mL) i suši pod vakuumom. Čvrste supstance se kombinuju da se dobije etil 3-cijano-2-hidroksi-6-(1-metilciklopropil)piridin-4-karboksilat (25.0 g , 85% prinos) kao žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.74 (br. s, 1H), 6.63 (br. s, 1H), 4.36 (q, J=7.1 Hz, 2H), 1.45 - 1.27 (m, 6H), 1.16 - 1.06 (m, 2H), 0.92 - 0.75 (m, 2H).

Faza 2: etil 2-hlor-3-cijano-6-(1-metilciklopropil)piridin-4-karboksilat (8b)

[0349]

[0350] U rastvor etil 3-cijano-2-hidroksi-6-(1-metilciklopropil)piridin-4-karboksilata (24.0 g, 97.5 mmol) u MeCN (487 mL) se u kapima na 30 °C doda POCl3(74.7 g, 487 mmol). Smeša se meša 60 h na 65 °C. TLC analiza (EtOAc) pokazuje da je početni materijal utrošen.

Rastvor se koncentruje da se ukloni preostali POCl3. Ostatak se sipa na led i zaalkališe sa NaHCO3do pH ~ 8. Smeša se ekstrahuje sa EtOAc (2x100 mL). Kombinovane organske supstance se suše preko Na2SO4, filtriraju i koncentruju. Ostatak se prečisti fleš hromatografijom (1:10 EtOAc/petrol etar) da se dobije etil 2-hlor-3-cijano-6-(1-metilciklopropil)piridin-4-karboksilat (21.9 g, 85% prinos) kao svetlo žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 7.79 (s, 1H), 4.50 (q, J=7.2 Hz, 2H), 1.55 (s, 3H), 1.50 - 1.40 (m, 5H), 1.03 (q, J=3.9 Hz, 2H); m/z (ESI+) za (C13H13ClN2O2), 264.9 (M+H)<+>.

Faza 3: 4-hlor-6-(1-metilciklopropil)-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on (8c)

[0351]

[0352] U rastvor etil 2-hlor-3-cijano-6-(1-metilciklopropil)piridin-4-karboksilata (2.5 g, 9.44 mmol) u EtOH (500 mL) se doda Raney Ni (2.0 g 34.1 mmol). Crna smeša se meša 48 h na 30 °C u atmosferi H2pod pritiskom od 30 psi. TLC analiza (1:10 EtOAc/petrol etar) pokazuje da je početni materijal utrošen. Smeša se filtrira kroz celite ploču. Filter pogača se ispere sa MeOH (250 mL). Kombinovani filtrat se koncentruje do sušenja. Ostatak se razmuti u EtOAc (5 mL) u toku 20 min i suspenzija se filtrira. Filter pogača se ispere sa EtOAc (2 mL) i suši pod vakuumom da se dobije 4-hlor-6-(1-metilciklopropil)-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on (1.1 g, 52% prinos) kao siva čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ7.66 (br. s, 1H), 7.23 - 7.05 (m, 1H), 4.56 - 4.34 (m, 2H), 1.55 (br. s, 3H), 1.39 - 1.11 (m, 2H), 0.99 - 0.66 (m, 2H); m/z (ESI+) za (C11H11ClN2O), 222.8 (M+H)<+>.

Faza 4: terc-butil metil{[6-(1-metilciklopropil)-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il]metil}karbamat

[0353]

roizvod 8

[0354] Smeša 4-hlor-6-(1-metilciklopropil)-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-ona (1.0 g, 4.49 mmol), natrijum [(terc-butoksikarbonil)(metil)amino]acetata (1.9 g, 8.98 mmol), NiCl2·dimetoksietana (197 mg, 0.898 mmol), piridin-2-il-N-cijanoamidina (131 mg, 0.898 mmol) i iridijum(III) bis[2-(2,4-difluorofenil)-5-metilpiridin-N,C20]-4,40-di-terc-butil-2,20-bipiridin heksafluorofosfata (22.8 mg, 0.0225 mmol) u DMF (135 mL) se izdvoji i napuni sa N2(3x). Smeša se ozrači sa dve ljubičaste LED trake od 72 W uz protok (8 mL/min) na temperaturi sredine u toku 7 h uz hlađenje ventilatorom. Smeša se dalje ozrači sa 72 W ljubičastom LED trakom uz protok tokom 16 h uz hlađenje ventilatorom. Reaktivna smeša se koncentruje do sušenja. Ostatak se prečisti fleš hromatografijom (5 g SiO2, 30-80% EtOAc/petrol etar) da se dobije Međuproizvod 8 (856 mg, 58% prinos) kao beličasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.86 (br. s, 1H), 7.45 (s, 1H), 4.59 - 4.40 (m, 2H), 4.35 (s, 2H), 2.84 (s, 3H), 1.52 (s, 3H), 1.47 - 1.31 (m, 5H), 1.31 - 1.10 (m, 6H), 0.86 -0.81 (m, 2H); m/z (ESI+) za (C18H25N3O3), 332.1 (M+H)<+>.

Međuproizvod 9: 4-hlor-6-[etil(metil)amino]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on

[0355]

Faza 1: etil 2-hlor-6-[etil(metil)amino]piridin-4-karboksilat (9a)

[0356]

[0357] Rastvor etil 2,6-dihlorpiridin-4-karboksilata (1.61 g, 7.34 mmol) i N-metiletanamina (1.30 g, 22.0 mmol) u DMF (3.0 mL) se meša 3 h na 80 °C. LCMS analiza pokazuje da je početni materijal utrošen. Reakcija se koncentruje do sušenja. Ostatak se prečisti fleš hromatografijom (12 g SiO2, 0-100% EtOAc/heptan) da se dobije etil 2-hlor-6-[etil(metil)amino]piridin-4-karboksilat (1.65 g, 93% prinos) kao bezbojno ulje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.03 (d, J=0.9 Hz, 1H), 6.96 (d, J=0.9 Hz, 1H), 4.39 (q, J=7.1 Hz, 2H), 3.61 (q, J=7.1 Hz, 2H), 3.09 (s, 3H), 1.41 (t, J=7.2 Hz, 3H), 1.19 (t, J=7.1 Hz, 3H); m/z (APCl+) za (C11H15ClN2O2), 243.1 (M+H)<+>.

Faza 2: etil 2-hlor-6-[etil(metil)amino]-3-formilpiridin-4-karboksilat (9b)

[0359] U DMF (508 mg, 6.95 mmol) se u atmosferi N2doda POCl3(800 mg, 5.22 mmol). Smeša se meša 20 min na sobnoj temperaturi i nakon toga se doda rastvor etil 2-hlor-6-[etil(metil)amino]piridin-4-karboksilata (1.65 g, 6.39 mmol) u DCM (25.5 mL). Smeša se meša 20 h pod refluksom u atmosferi N2. Smeša se ohladi na sobnu temperaturu i neutrališe sporim sipanjem u zasićeni vodeni rastvor NaHCO3(100 mL). Smeša se meša 10 min i nakon toga ekstrahuje sa EtOAc (2x80 mL). Kombinovane organske supstance se suše preko Na2SO4, filtriraju i koncentruju. Ostatak se prečisti fleš hromatografijom (24 g SiO2, 0-100% EtOAc/heptan) da se dobije etil 2-hlor-6-[etil(metil)amino]-3-formilpiridin-4-karboksilat (1.51 g, 82% prinos) kao bledo-žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.17 (s, 1H) 6.37 (s, 1H) 4.43 (q, J=7.09 Hz, 2H) 3.67 (br. d, J=4.03 Hz, 2H) 3.16 (d, J=9.29 Hz, 3H) 1.39 (t, J=7.15 Hz, 3H) 1.23 (t, J=7.09 Hz, 3H); m/z (APCl+) za (C12H15ClN2O3), 271.1 (M+H)<+>.

Faza 3: 4-hlor-6-[etil(metil)amino]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on

[0360]

uproizvod 9

[0361] Smeša etil 2-hlor-6-[etil(metil)amino]-3-formilpiridin-4-karboksilata (1.33 g, 4.91 mmol) i rastvora NH3(7.0 N u MeOH, 7.01 mL, 49.1 mmol) se meša 1 h na sobnoj temperaturi. Smeša se koncentruje do sušenja. Ostatak se rastvori u DCM (10.0 mL) i dodaju se TFA (5.59 g, 49.1 mmol) i Et3SiH (1.14 g, 1.57 mmol). Smeša se meša 90 min na sobnoj temperaturi. Reakcija se koncentruje do sušenja. Ostatak se rastvori u DCM (100 mL) i ispere sa zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3. Vodeni sloj se ekstrahuje sa DCM. Kombinovane organske supstance se suše preko Na2SO4, filtriraju i koncentruju da se dobije Međuproizvod 9 (823 mg, 74% prinos) kao žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 6.82 (s, 1H) 6.41 (br. s, 1H) 4.37 (s, 2H) 3.63 (q, J=7.09 Hz, 2H) 3.10 (s, 3H) 1.19 (t, J=7.09 Hz, 3H); m/z (APCl+) za (C10H12ClN3O), 226.1 (M+H)<+>.

Međuproizvod 10: 4-hlor-6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on

[0362]

Faza 1: {2-hlor-6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]piridin-4-il}(piperidin-1-il)metanon (10a)

[0363]

[0364] Rastvor (2,6-dihlorpiridin-4-il)(piperidin-1-il)metanona (600 mg, 2.32 mmol) i (2R)-2-metilpirolidina (591 mg, 6.95 mmol) u DMF (1.5 mL) se meša 16 h na 100 °C. LCMS analiza pokazuje da je početni materijal utrošen uz formiranje mase željenog proizvoda. Reakcija se ohladi na sobnu temperaturu, razblaži sa H2O i ekstrahuje sa DCM (3x). Kombinovani organski slojevi se suše preko Na2SO4, filtriraju i koncentruju. Ostatak se prečisti fleš hromatografijom (24 g SiO2, 0-20% EtOAc/heptan) da se dobije {2-hlor-6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]piridin-4-il}(piperidin-1-il)metanon (664 mg, 93% prinos).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 6.44 (d, J=1.0 Hz, 1H), 6.21 (d, J=1.0 Hz, 1H), 4.12 (q, J=7.1 Hz, 1H), 3.72 - 3.62 (m, 2H), 3.54 (ddd, J=10.5, 7.6, 2.9 Hz, 1H), 3.40 - 3.28 (m, 2H), 2.10 - 2.04 (m, 2H), 1.75 - 1.62 (m, 4H), 1.26 (t, J=7.2 Hz, 1H), 1.21 (d, J=6.3 Hz, 2H); m/z (APCl+) za (C16H22ClN3O), 308.2 (M+H)<+>.

Faza 2: 2-hlor-6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]-4-(piperidin-1-karbonil)piridin-3-karbaldehid (10b)

[0365]

[0366] U rastvor DMF (473 mg, 6.47 mmol) u DCM (3.0 mL) se doda POCl3(992 mg, 6.47 mmol). Smeša se meša 10 min i nakon toga se doda rastvor {2-hlor-6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]piridin-4-il}(piperidin-1-il)metanona (664 mg, 2.16 mmol) u DCM (3.0 mL). Smeša se meša pod refluksom 15 h. LCMS analiza pokazuje da je početni materijal utrošen uz formiranje mase željenog proizvoda. Reakcija se koncentruje do sušenja i polako sipa u zasićeni vodeni rastvor NaHCO3(30 mL). Smeša se ekstrahuje sa DCM (3x30 mL).

Kombinovane organske supstance se suše preko Na2SO4, filtriraju i koncentruju. Ostatak se prečisti fleš hromatografijom (24 g SiO2, 0-40% EtOAc/heptan) da se dobije 2-hlor-6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]-4-(piperidin-1-karbonil)piridin-3-karbaldehid (568 mg, 78 % prinos).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.07 (s, 1H), 5.99 (s, 1H), 4.13 - 4.65 (m, 1H), 3.68 - 3.83 (m, 1H), 3.55 - 3.68 (m, 2H), 3.35 - 3.55 (m, 1H), 2.98 - 3.20 (m, 2H), 1.88 - 2.17 (m, 3H), 1.71 - 1.83 (m, 2H), 1.55 - 1.67 (m, 3H), 1.46 - 1.55 (m, 1H), 1.31 - 1.42 (m, 1H), 1.17 - 1.26 (m, 3H); m/z (APCl+) za (C17H22ClN3O2), 336.1 (M+H)<+>.

Faza 3: N-[(E)-{2-hlor-6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]-4-(piperidin-1-karbonil)piridin-3-il}metiliden]-2-metil-propan-2-sulfinamid (10c)

[0367]

[0368] Smeša 2-hlor-6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]-4-(piperidin-1-karbonil)piridin-3-karbaldehida (432 mg, 1.29 mmol), (R)-(+)-2-metil-2-propansulfinamida (187 mg, 1.54 mmol) i titanijum(IV) etoksida (880 mg, 3.86 mmol) u THF (10.0 mL) se meša 16 h na 45 °C. LCMS analiza pokazuje da je preostalo ~25% početnog materijala. Dodaju se nove serije (R)-(+)-2-metil-2-propansulfinamida (62.4 mg, 0.515 mmol) i titanijum(IV) etoksida (293 mg, 1.29 mmol) i smeša se meša 16 h na 50 °C. LCMS analiza pokazuje da je početni materijal utrošen. Reakcija se ohladi na sobnu temperaturu. Smeša se razblaži sa DCM i ispere sa NaHCO3i slanim rastvorom. Organski sloj se suši preko Na2SO4, filtrira i koncentruje da se dobije N-[(E)-{2-hlor-6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]-4-(piperidin-1-karbonil)piridin-3-il}metiliden]-2-metilpropan-2-sulfinamid (495 mg, 88% prinos) kao bela guma, koja se dalje koristi bez naknadnog prečišćavanja. m/z (APCl+) za (C21H31ClN4O2S), 440.2 (M+H)<+>.

Faza 4: 4-hlor-6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on

[0369]

đuproizvod 10

[0370] Rastvor N-[(E)-{2-hlor-6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]-4-(piperidin-1-karbonil)piridin-3-il}metiliden]-2-metilpropan-2-sulfinamida (495 mg, 1.13 mmol) u THF (15.0 mL) se ohladi na 0 °C i nakon toga se doda rastvor LiBH4(2.0 M u THF, 620 mL, 1.24 mmol). Smeša se meša 2 h na 0 °C i nakon toga se doda rastvor NaOMe (25% u MeOH, 2.5 mL, 10.1 mmol). Reakcija se ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu i zatim meša 16 h. Reakcija se razblaži sa DCM (60 mL) i ispere sa zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl (60 mL) i slanim rastvorom (60 mL). Organski sloj se suši preko Na2SO4, filtrira i koncentruje. Ostatak se prečisti fleš hromatografijom (24 g SiO2, 50-100% EtOAc/heptan) da se dobije Međuproizvod 10 (199 mg, 70% prinos) kao bezbojna pena.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 6.68 (s, 1H), 6.45 (s, 1H), 4.35 (s, 2H), 4.21 - 4.14 (m, 1H), 3.58 (ddd, J=10.5, 7.6, 2.8 Hz, 1H), 3.39 (q, J=8.9 Hz, 1H), 2.13 - 1.97 (m, 2H), 1.75 (dt, J=5.2, 2.6 Hz, 1H), 1.23 (d, J=6.3 Hz, 3H). Pretpostavlja se da je jedan atom vodonika zaklonjen vodenim pikom; m/z (APCl+) za (C12H14ClN3O), 252.3 (M+H)<+>.

Međuproizvod 11: 4-hlor-6-[metil(propan-2-il)amino]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on

[0371]

Faza 1: 2-hlor-N,N-dimetil-6-[metil(propan-2-il)amino]piridin-4-karboksamid (11a)

[0372]

[0373] Smeša 2,6-dihlor-N,N-dimetilpiridin-4-karboksamida (30.0 g, 137 mmol) i N-metilpropan-2-amina (50.1 g, 685 mmol) u MeCN (120 mL) se podeli između tri zatvorene reaktivne posude i svaka se meša 60 h na 100 °C. LCMS analiza pokazuje da je početni materijal utrošen uz formiranje mase željenog proizvoda. Reaktivne smeše se kombinuju i koncentruju do sušenja. Ostatak se prečisti fleš hromatografijom (SiO2, 1:1 EtOAc/petrol etar) da se dobije 2-hlor-N,N-dimetil-6-[metil(propan-2-il)amino]piridin-4-karboksamid (30.5 g, 87% prinos) kao žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 6.45 (d, J=0.9 Hz, 1H), 6.31 (d, J=1.0 Hz, 1H), 4.82 (p, J=6.8 Hz, 1H), 3.08 (s, 3H), 2.97 (s, 3H), 2.83 (s, 3H), 1.16 (d, J=6.7 Hz, 6H); m/z (ESI+) za (C12H18ClN3O), 255.9 (M+H)<+>.

Faza 2: 2-hlor-3-formil-N,N-dimetil-6-[metil(propan-2-il)amino]piridin-4-karboksamid (11b)

[0374]

[0375] U rastvor DMF (21.9 g, 299 mmol) u DCE (120 mL) se u kapima na 5-15 °C doda POCl3(45.9 g, 299 mmol). Smeša se meša 15 min na sobnoj temperaturi i doda se 2-hlor-N,N-dimetil-6-[metil(propan-2-il)amino]piridin-4-karboksamid (25.5 g, 99.7 mmol). Reakcija se meša 16 h na 65 °C. LCMS analiza pokazuje da je početni materijal utrošen uz formiranje mase željenog proizvoda. Reakcija se ohladi na sobnu temperaturu i doda u kapima u zasićeni vodeni rastvor Na2CO3(900 mL). Smeša se ekstrahuje sa DCM (2x300 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (5x500 mL), suše preko Na2SO4, filtriraju i koncentruju. Ostatak se prečisti fleš hromatografijom (SiO2, 1:1 EtOAc/petrol etar) da se dobije 2-hlor-3-formil-N,N-dimetil-6-[metil(propan-2-il)amino]piridin-4-karboksamid (23.7 g, 84% prinos) kao smeđa čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.19 (s, 1H), 6.25 (br. s, 1H), 3.12 (s, 3H), 3.02 - 2.85 (m, 3H), 2.77 (s, 3H), 1.22 (br. d, J=6.5 Hz, 6H); m/z (ESI+) za (C13H18ClN3O2), 283.9 (M+H)<+>.

Faza 3: 2-hlor-N,N-dimetil-3-{(E)-[(2-metilpropan-2-sulfinil)imino]metil}-6-[metil(propan-2-il)amino]piridin-4-karboksamid (11c)

[0376]

[0377] Smeša 2-hlor-3-formil-N,N-dimetil-6-[metil(propan-2-il)amino]piridin-4-karboksamida (23.7 g, 83.5 mmol), (R)-(+)-2-metil-2-propansulfinamida (12.1 g, 100 mmol) i titanijum(IV) etoksida (38.1 g, 167 mmol) u THF (250 mL) se meša 20 h na 50 °C. LMCS analiza pokazuje da je početni materijal utrošen uz formiranje mase željenog proizvoda.

Reakcija se koncentruje do sušenja. Ostatak se meša sa zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(300 mL) u toku 30 min. Smeša se filtrira. Filter pogača se ispere sa H2O (3x80 mL) i petrol etrom (3x50 mL) i suši pod vakuumom da se dobije 2-hlor-N,N-dimetil-3-{(E)-[(2-metilpropan-2-sulfinil)imino]metil)-6-[metil(propan-2-il)amino]piridin-4-karboksamid (32.3 g, >99% prinos) kao žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.07 (s, 1H), 6.74 (s, 1H), 5.36 - 5.10 (m, 1H), 3.30 (s, 3H), 3.26 (s, 3H), 3.10 (s, 3H), 1.54 (d, J=6.7 Hz, 6H), 1.49 (s, 9H); m/z (ESI+) za (C17H27ClN4O2S), 387.2 (M+H)<+>.

Faza 4: 4-hlor-6-[metil(propan-2-il)amino]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on

[0378]

uproizvod 11

[0379] Rastvor 2-hlor-N,N-dimetil-3-{(E)-[(2-metilpropan-2-sulfinil)imino]metil}-6-[metil(propan-2-il)amino]piridin-4-karboksamida (32.3 g, 83.5 mmol) u THF (200 mL) se ohladi na 0 °C i doda se LiBH4(1.82 g, 83.5 mmol). Smeša se meša na sobnoj temperaturi 1 h. LCMS analiza pokazuje da je početni materijal utrošen. Doda se NaOMe (165 g, 919 mmol) i smeša se meša 16 h na sobnoj temperaturi. Reaktivna smeša se filtrira i filter pogača ispere sa EtOAc (3x200 mL). Kombinovani filtrat se koncentruje do sušenja. Ostatak se rastvori u DCM (300 mL) i ispere sa H2O (500 mL). Vodeni sloj se ekstrahuje sa DCM (2x300 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (500 mL), suše preko Na2SO4, filtriraju i koncentruju. Čvrsta supstanca se razmuti u smeši DCM (50 mL) i petrol etra (120 mL) u toku 30 min. Čvrste supstance se sakupe filtriranjem. Filter pogača se suši pod vakuumom da se dobije Međuproizvod 11 (11.3 g, 56% prinos) kao beličasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 7.19 (s, 1H), 6.79 (s, 1H), 4.82 (p, J=6.7 Hz, 1H), 4.35 (d, J=1.2 Hz, 2H), 2.88 (s, 3H), 1.18 (d, J=6.7 Hz, 6H); m/z (ESI+) za (C11H14ClN3O), 239.9 (M+H)<+>.

Međuproizvod 12: 2-bromo-6-(4-etil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin

[0380]

[0381] Boca se napuni sa N’-[(6-bromopiridin-2-il)karbonil]-N,N dimetilhidrazonformamidom (2.0 g, 7.4 mmol), etilaminom (0.5 mL, 333 mg, 7.4 mmol), sirćetnom kiselinom (3 mL) i MeCN (15 mL, 0.5 M). Rastvor se zagreva 16 h na 95 °C. Reakcija se razblaži sa EtOAc (10 mL) i H2O (10 mL). Dodaje se čvrsti K2CO3sve dok pH vodenog sloja ne bude ~pH 8. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ekstrahuje sa EtOAc (3x30 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (30 mL), suše preko Na2SO4, filtriraju i koncentruju do sušenja. Ostatak se razmuti sa EtOAc (0.3 mL) i petrol etrom (3 mL) u toku 5 min. Čvrste supstance se sakupe filtriranjem da se dobije Međuproizvod 12 (1.5 g, 80%) kao bledo-žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.75 (s, 1H), 8.19 (dd, J=7.7, 0.9 Hz, 1H), 7.99 - 7.90 (m, 1H), 7.79 (dd, J=8.0, 0.9 Hz, 1H), 4.47 (q, J=7.2 Hz, 2H), 1.38 (t, J=7.2 Hz, 3H); m/z (APCl+) za (C9H9BrN4), 252.7 (M+H)<+>.

Međuproizvod 13: 2-bromo-6-(4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin

[0382]

[0383] Smeša N’-[(6-bromopiridin-2-il)karbonil]-N,N-dimetilhidrazonformamida (1b) (29.0 g, 106.8 mmol) i propan-1-amina (31.6 g, 534 mmoL) u MeCN (440 mL) i sirćetnoj kiselini (110 mL) se meša 16 h na 95 °C. LCMS analiza pokazuje da je početni materijal utrošen uz formiranje mase željenog proizvoda. Reakcija se koncentruje do sušenja. Ostatak se potopi u H2O (50 mL) i zaalkališe do pH ~9 sa 1 N rastvorom NaOH (~500 mL). Smeša se ekstrahuje sa EtOAc (3x150 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (150 mL), suše preko Na2SO4, filtriraju i koncentruju. Ostatak se razmuti sa EtOAc (50 mL) u toku 10 min i čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem. Filter pogača se ispere sa petrol etrom (2x50 mL) i suši pod vakuumom da se dobije Međuproizvod 13 (21.0 g, 74% prinos) kao žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.74 (s, 1H), 8.20 (dd, J=0.7, 7.8 Hz, 1H), 7.98 - 7.91 (m, 1H), 7.78 (dd, J=0.7, 8.0 Hz, 1H), 4.45 - 4.36 (m, 2H), 1.77 (sxt, J=7.4 Hz, 2H), 0.87 (t, J=7.4 Hz, 3H); m/z (ESI+) za (C10H11BrN4), 266.7 (M+H)<+>.

Međuproizvod 14: 2-bromo-6-[4-(pentan-3-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin

[0384]

[0385] Smeša N’-[(6-bromopiridin-2-il)karbonil]-N,N-dimetilhidrazonformamida (1b) (3.10 g, 11.4 mmol) i pentan-3-amina (2.99 g, 34.4 mmoL) u MeCN (24 mL) i sirćetnoj kiselini (6 mL) se meša 16 h na 95 °C. LCMS analiza pokazuje da je početni materijal utrošen uz formiranje tražene mase proizvoda. Rastvor se koncentruje do sušenja. Ostatak se potopi u EtOAc (100 mL) i ispere sa zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(50 mL). Organski sloj se suši preko Na2SO4, filtrira i koncentruje. Ostatak se prečisti fleš hromatografijom (SiO2, 1:1 DCM/EtOAc) da se dobije Međuproizvod 14 (2.3 g, 68% prinos) kao bela čvrsta supstanca.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.92 (s, 1H), 8.16 (d, J=7.7 Hz, 1H), 7.98 - 7.92 (m, 1H), 7.78 (d, J=7.9 Hz, 1H), 5.01 (tt, J=8.5, 5.8 Hz, 1H), 1.85 (ddt, J=14.1, 8.5, 7.2 Hz, 4H), 0.73 (t, J=7.4 Hz, 6H); m/z (ESI+) za (C12H15BrN4), 295.0 (M+H)<+>.

Međuproizvod 15: 2-bromo-6-{4-[(2S)-butan-2-il]-4H-1,2,4-triazol-3-il}piridin

[0387] Smeša N’-[(6-bromopiridin-2-il)karbonil]-N,N-dimetilhidrazonformamida (1b) (4.40 g, 16.2 mmol) i (2S)-butan-2-amina (1.25 g, 17.0 mmoL) u MeCN (100 mL) i sirćetnoj kiselini (25 mL) se meša 16 h na 90 °C. LCMS pokazuje da je početni materijal utrošen. Rastvor se koncentruje do sušenja. Ostatak se podeli između EtOAc (50 mL) i Na2CO3(50 mL). Organski sloj se ispere sa slanim rastvorom (2x30 mL), suši preko Na2SO4, filtrira i koncentruje. Ostatak se prečisti fleš hromatografijom (120 g SiO2, 1-5% MeOH/EtOAc) da se dobije Međuproizvod 15 (3.0 g , 66% prinos) kao svetlo žuto ulje.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 8.33 (s, 1H), 8.30 (dd, J=7.8, 0.9 Hz, 1H), 7.72 - 7.67 (m, 1H), 7.53 (dd, J=7.9, 0.9 Hz, 1H), 5.42 (h, J=6.9 Hz, 1H), 1.87 (ddq, J=30.1, 14.1, 7.2 Hz, 2H), 1.56 (d, J=6.9 Hz, 3H), 0.94 (t, J=7.4 Hz, 3H); m/z (ESI+) za (C11H13BrN4), 282.8 (M+H)<+>.

Međuproizvod 16: 6-(4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-amin

[0388]

Faza 1: 6-aminopiridin-2-karbohidrazid (16a)

[0389]

[0390] U rastvor metil 6-aminopiridin-2-karboksilata (100 g, 657 mmol) u MeOH (1.0 L) se doda N2H4·H2O (69.7 g, 1.18 mol). Smeša se meša 5 h pod refluksom. Formirane su značajne količine belog taloga. TLC analiza (1:10 MeOH/DCM) pokazuje da je početni materijal utrošen. Reaktivna smeša se filtrira. Filter pogača se ispere sa EtOAc (3x100 mL) i suši pod vakuumom da se dobije 6-aminopiridin-2-karbohidrazid (95.4 g, 95% prinos) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.11 (s, 1H), 7.53 - 7.46 (m, 1H), 7.08 (dd, J=7.3, 0.9 Hz, 1H), 6.58 (dd, J=8.4, 0.9 Hz, 1H), 6.06 (s, 2H), 4.45 (d, J=4.7 Hz, 2H); m/z (ESI) za (C6H8N4O), 152.8 (M+H)<+>.

Faza 2: N’-(6-{(2E)-2-[(dimetilamino)metiliden]hidrazinkarbonil}piridin-2-il)-N,N-dimetilmetanimidamid (16b)

[0391]

[0392] Smeša 6-aminopiridin-2-karbohidrazida (95.4 g, 627 mmol) u N,N-dimetildimetoksimetilaminu (500 mL) se meša 18 h pod refluksom. TLC analiza (1:10 MeOH/DCM) pokazuje da je početni materijal utrošen. Reakcija se koncentruje do sušenja. Ostatak se razmuti u smeši EtOAc (100 mL) i petrol etra (200 mL) na 15 °C u toku 5 min. Čvrste supstance se sakupe filtriranjem i filter pogača se suši pod vakuumom da se dobije N’-(6-{(2E)-2-[(dimetilamino)metiliden]hidrazinkarbonil}piridin-2-il)-N,N-dimetilmetanimidamid (156 g, 95% prinos) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 9.94 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 7.77 (dd, J=7.4, 0.9 Hz, 1H), 7.69 -7.62 (m, 1H), 7.03 (dd, J=8.1, 0.9 Hz, 1H), 3.11 (s, 3H), 3.10 (s, 3H), 2.95 (s, 6H); m/z (ESI) za (C12H18N6O), 263.0 (M+H)<+>.

Faza 3: 6-(4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-amin

[0393]

đuproizvod 16

[0394] U rastvor N’-(6-{(2E)-2-[(dimetilamino)metiliden]hidrazinkarbonil}piridin-2-il)-N,N-dimetilmetanimidamida (100 g, 381 mmol) u PhMe (800 mL) se dodaju propan-1-amin (113 g, 1.91 mol) i sirćetna kiselina (160 g, 2.67 mol). Smeša se meša 24 h na 90-100 °C (unutrašnja). LCMS analiza pokazuje da je početni materijal utrošen. Reakcija se ohladi na sobnu temperaturu. Smeša se podesi na pH ~10-11 dodavanjem 50% vodenog rastvora NaOH i nakon toga ispere sa H2O. Vodeni sloj se ekstrahuje sa 5:1 DCM/THF (3x). Kombinovani organski slojevi se koncentruju do sušenja. Ostatak se koncentruje sa EtOAc (3x). Čvrste supstance se razmute u 1:2 EtOAc/heptani u toku 30 min. Čvrste supstance se sakupe filtriranjem. Filter pogača se suši pod vakuumom da se dobije Međuproizvod 16 (25.6 g, 76% prinos) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.57 (s, 1H), 7.53 -7.47 (m, 1H), 7.22 (d, J=7.0 Hz, 1H), 6.52 (d, J=8.0 Hz, 1H), 6.15 (s, 2H), 4.48 (t, J=7.2 Hz, 2H), 1.67 (h, J=7.4 Hz, 2H), 0.81 (t, J=7.4 Hz, 3H); m/z (ESI) za (C10H13N5), 204.2 (M+H)<+>.

Međuproizvod 17: 2-bromo-6-(5-metil-4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin

[0395]

[0396] Ova transformacija se vrši u 5 paralelnih serija. Piridin (20.0 mL) se ohladi u ledenom kupatilu do 0 °C. Po redu se dodaju TFA (950 mg, 8.33 mmol), propan-1-amin (1.48 g, 25.0 mmol) i 2-bromo-6-(5-metil-1,3,4-oksadiazol-2-il)piridin (Međuproizvod 4) (2.00 g, 8.33 mmol). Smeša se zatvori i meša 3.5 dana na 100 °C uz dodavanje još propan-1-amina (1.48 g, 25.0 mmol) u reakciju nakon 1.5 i 2.5 d, tim redom. LCMS analiza pokazuje da je početni materijal utrošen uz formiranje željene mase proizvoda. Paralelne reakcije se kombinuju i koncentruju do sušenja. Ostatak se prečisti fleš hromatografijom (SiO2, 0-100% EtOAc/ petrol etar). Željene frakcije se ponovo prečiste preparativnom HPLC sa YMC Triart C18 kolonom (250x50 mm, 7 µm veličina čestice), koja se eluira sa 30-70% MeCN/H2O (+0.225% mravlja kiselina) uz brzinu protoka od 25 mL/min. Željene frakcije se zaalkališu dodavanjem zasićenog vodenog rastvora NaHCO3do pH ~8. Rastvor se koncentruje da se ukloni MeCN i nakon toga ekstrahuje sa DCM (3x50 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom, suše preko Na2SO4, filtriraju i koncentruju da se dobije Međuproizvod 17 (6.11 g, 52% prinos) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.31 - 8.24 (m, 1H), 7.70 - 7.63 (m, 1H), 7.51 - 7.47 (m, 1H), 4.40 - 4.32 (m, 2H), 2.53 (s, 3H), 1.86 - 1.74 (m, 2H), 1.00 (td, J=7.4, 2.9 Hz, 3H). m/z (ESI+) za (C11H13BrN4), 282.9 (M+H)<+>.

Međuproizvod 18: 2-bromo-6-(4,5-dietil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin

[0397]

Faza 1: 6-bromo-N’-propanoilpiridin-2-karbohidrazid

[0398]

[0399] U izmešanu smešu 6-bromopiridin-2-karbohidrazida (Međuproizvod 1a) (3.00 g, 13.9 mmol) u DCM (46.3 mL) se na 0 °C dodaju TEA (2.11 g, 20.8 mmol) i propanoil hlorid (1.35 g, 15.7 mmol). Smeša se meša 20 min na 0 °C i nakon toga 16 h na 20 °C. TLC analiza (1:1 EtOAc/petrol etar) pokazuje da je preostao početni materijal. Smeša se ohladi na 0 °C i dodaju se nove količine TEA (2.11 g, 20.8 mmol) i propanoil hlorida (1.45 g, 15.7 mmol). Smeša se meša 20 min na 0 °C i nakon toga 16 h na 20 °C. TLC analiza (1:1 EtOAc/petrol etar) pokazuje da je početni materijal utrošen. Reakcija se neutrališe dodavanjem H2O (60 mL) i ekstrahuje sa DCM (2x30 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (80 mL), suše preko Na2SO4, filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se razmuti sa EtOAc (10 mL) i petrol etrom (30 mL) u toku 10 min na 20 °C. Čvrste supstance se sakupe filtriranjem i suše pod vakuumom da se dobije 6-bromo-N’-propanoilpiridin-2-karbohidrazid (3.0 g, 79% prinos) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.96 (br.d, J=5.4 Hz, 1H), 8.36 (br.d, J=5.4 Hz, 1H), 8.10 (dd, J=7.5, 1.0 Hz, 1H), 7.47 - 7.70 (m, 1H), 7.65 (dd, J=7.9, 1.1 Hz, 1H), 2.38 (q, J=7.6 Hz, 2H), 1.25 (t, J=7.6 Hz, 3H).

Faza 2: 2-bromo-6-(5-etil-1,3,4-oksadiazol-2-il)piridin

[0400]

[0401] U izmešani rastvor 6-bromo-N’-propanoilpiridin-2-karbohidrazida (3.00 g, 11.0 mmol) u DCM (50.0 mL) i MeCN (50.0 mL) se dodaju TEA (6.69 g, 66.2 mmol) i p-toluensulfonil hlorid (2.31 g, 12.1 mmol). Smeša se meša 60 h na temperaturi sredine. TLC analiza (EtOAc) pokazuje da je početni materijal utrošen. Smeša se koncentruje do sušenja. Ostatak se rastvori u H2O (50 mL) i ekstrahuje sa DCM (2x30 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (50 mL), suše preko Na2SO4, filtriraju i koncentruju. Sirovi materijal se razmuti sa EtOAc (3 mL) i petrol etrom (6 mL) na temperaturi sredine u toku 30 min. Čvrste supstance se sakupe filtriranjem i suše pod vakuumom da se dobije 2-bromo-6-(5-etil-1,3,4-oksadiazol-2-il)piridin (1.34 g, 48% prinos) kao žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.21 (dd, J=7.6, 1.0 Hz, 1H), 7.80 - 7.68 (m, 1H), 7.64 (dd, J=8.0, 0.9 Hz, 1H), 3.00 (q, J=7.6 Hz, 2H), 1.46 (t, J=7.6 Hz, 3H). m/z (ESI+) za (C9H8BrN3O), 256.0 (M+H)<+>.

Faza 3: 2-bromo-6-(4,5-dietil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin

[0402]

Međuproizvod 18

[0403] Piridin (8.0 mL) se ohladi u ledenom kupatilu na 0 °C. Po redu se dodaju TFA (301 mg, 2.64 mmol), 2-bromo-6-(5-etil-1,3,4- oksadiazol-2-il)piridin (670 mg, 2.64 mmol) i etilamin (476 mg, 10.5 mmol). Smeša se meša 20 h na 95 °C i nakon toga 7 h na 100 °C. Reakcija se koncentruje do sušenja. Ostatak se prečisti fleš hromatografijom (SiO2, 1:10 MeOH/EtOAc) da se dobije Međuproizvod 18 (500 mg, 67% prinos) kao žuta guma.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.28 (dd, J=7.8, 0.9 Hz, 1H), 7.71 - 7.62 (m, 1H), 7.61 - 7.37 (m, 1H), 4.47 (q, J=7.1 Hz, 2H), 2.84 (q, J=7.6 Hz, 2H), 1.57 - 1.34 (m, 6H). m/z (ESI+) za (C11H13BrN4), 280.7 (M+H)<+>.

Međuproizvod 19: terc-butil metil({6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)karbamat

[0404]

Faza 1: terc-butil ({3-formil-6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]-4-(piperidin-1-karbonil)piridin-2-il}metil)metilkarbamat

[0405]

[0406] U rastvor 2-hlor-6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]-4-(piperidin-1-karbonil)piridin-3-karbaldehida (Međuproizvod 10b) (600 mg, 1.79 mmol) i PdCl2(dppf) (261 mg, 0.357 mmol) u 1,4-dioksanu (25.0 mL) se u mehurićima uvodi N2u toku 5 min i nakon toga se rastvor zagreje na 80 °C. Doda se rastvor {[(tercbutoksikarbonil)(metil)amino]metil}(hlorid)cinka (0.158 M u THF, 39.6 mL) na 80 °C i smeša se meša još 35 min na istoj temperaturi. LCMS analiza pokazuje da je početni materijal utrošen uz formiranje mase željenog proizvoda. Smeša se ohladi na 30 °C i filtrira kroz celite. Filter pogača se ispere sa DCM (5x10 mL) i filtrat se koncentruje do sušenja. Ostatak se kombinuje sa sirovim materijalom dobijenim u paralelnoj reakciji izvedenoj na identičan način sa 100 mg 2-hlor-6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]-4-(piperidin-1-karbonil)piridin-3-karbaldehida. Smeša se prečisti fleš hromatografijom (SiO2, 1:1 EtOAc/petrol etar) da se dobije terc-butil ({3-formil-6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]-4-(piperidin-1-karbonil)piridin-2-il}metil)metilkarbamat (900 mg, 97% prinos) kao žuta guma.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.84 (s, 1H), 6.40 - 6.06 (m, 1H), 4.91 - 4.45 (m, 2H), 4.52 - 3.92 (m, 1H), 3.69 - 3.47 (m, 3H), 3.21 - 3.00 (m, 2H), 2.98 - 2.84 (m, 3H), 2.22 - 1.82 (m, 3H), 1.83 - 1.66 (m, 1H), 1.59 (s, 4H), 1.41 (s, 7H), 1.19 (d, J=18.2 Hz, 8H). m/z (ESI+) za (C24H36N4O4), 445.4 (M+H)<+>.

Faza 2: terc-butil metil{[3-{(E)-[(2-metilpropan-2-sulfinil)imino]metil}-6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]-4-(piperidin-1-karbonil)piridin-2-il]metil}karbamat

[0407]

[0408] Smeša terc-butil ({3-formil-6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]-4-(piperidin-1-karbonil)piridin-2-il}metil)metilkarbamata (1.40 g, 3.15 mmol), titanijum(IV) etoksida (1.44 g, 6.30 mmol) i (S)-(-)-2-metil-2-propansulfinamida (573 mg, 4.72 mmol) u THF (50.0 mL) se meša 18 h na 50 °C. Dodaju se nove serije titanijum(IV) etoksida (359 mg, 1.57 mmol) i (S)-(-)-2-metil-2-propansulfinamida (115 mg, 0.945 mmol) i smeša se meša još 20 h na 50 °C. LCMS analiza pokazuje da je početni materijal utrošen uz formiranje mase željenog proizvoda. Reakcija se neutrališe sa zasićenim vodenim rastvorom Na2CO3(150 mL) i razblaži sa DCM (100 mL). Smeša se filtrira kroz celite i slojevi se razdvoje. Vodeni sloj se ekstrahuje sa DCM (100 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (150 mL), suše preko Na2SO4, filtriraju i koncentruju da se dobije terc-butil metil{[3-{(E)-[(2-metilpropan-2-sulfinil)imino]metil}-6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]-4-(piperidin-1-karbonil)piridin-2-il]metil}karbamat (1.7 g, >99% prinos) kao žuta čvrsta supstanca. m/z (ESI+) za (C28H45N5O4S), 548.5 (M+H)<+>.

Faza 3: terc-butil metil({6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)karbamat

[0409]

đuproizvod 19

[0410] U rastvor terc-butil metil{[3-{(E)-[(2-metilpropan-2-sulfinil)imino]metil}-6-[(2R)-2-metilpirolidin-il]-4-(piperidin-1-karbonil)piridin-2-il]metil}karbamata (1.72 g.3.41 mmol) u THF (20.0 mL) se na 0 °C doda LiBH4(68.6 mg, 3.15 mmol). Reakcija se meša 1 h na 0 °C. TLC analiza pokazuje da je početni materijal utrošen. Smeša se zagreje na temperaturu sredine i doda se rastvor NaOMe (30% u MeOH, 6.24 g, 34.6 mmol). Smeša se meša 16 h. LCMS analiza pokazuje formiranje mase željenog proizvoda. Reakcija se koncentruje do sušenja. Ostatak se rastvori u EtOAc (40 mL) i ispere sa H2O (40 mL). Vodeni sloj se ekstrahuje sa EtOAc (30 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (60 mL), suše preko Na2SO4, filtriraju i koncentruju. Ostatak se prečisti fleš hromatografijom (SiO2, EtOAc) da se dobije Međuproizvod 19 (750 mg, 66% prinos) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.04 - 6.79 (m, 1H), 6.68 (s, 1H), 4.56 - 4.43 (m, 2H), 4.43 - 4.33 (m, 2H), 4.27 - 4.16 (m, 1H), 3.58 (ddd, J=2.5, 7.3, 10.0 Hz, 1H), 3.45 - 3.30 (m, 1H), 3.01 - 2.91 (m, 3H), 2.17 - 1.96 (m, 3H), 1.80 - 1.72 (m, 1H), 1.53 -1.37 (m, 9H), 1.26 - 1.23 (m, 3H); m/z (ESI+) za (C19H28N4O3), 361.2 (M+H)<+>.

Međuproizvod 20: (4R)-3-(6-bromopiridin-2-il)-4-(fluorometil)-1,3-oksazolidin-2-on

[0411]

Faza 1: metil (4R)-2-okso-3-(trifenilmetil)-1,3-oksazolidin-4-karboksilat

[0412]

[0413] Rastvor metil N-(trifenilmetil)-D-serinata (90.0 g, 249 mmol) i TEA (69.8 g, 690 mmol) u PhMe (1.8 L) se u kapima u atmosferi N2dodaje u rastvor trifozgena (69.8 g, 41.5 mmol) u PhMe (300 mL), održavajući temperaturu na -5 - 10 °C (unutrašnja). Smeša se meša 30 min na temperaturi sredine. TLC analiza (1:2 EtOAc/petrol etar) pokazuje da je početni materijal utrošen. Reakcija se neutrališe dodavanjem 1 N rastvora HCl (600 mL) u kapima i smeša se meša 10 min. Slojevi se razdvoje. Vodeni sloj se zaalkališe do pH ~8-9 dodavanjem 2 N rastvora NaOH i nakon toga ekstrahuje sa DCM/PhMe (1:5, 1.5 L). Kombinovani organski slojevi se isperu sa zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(500 mL) i slanim rastvorom (500 mL), suše preko Na2SO4, filtriraju i koncentruju. Čvrste supstance se razmute u smeši EtOAc/petrol etar (1:3, 400 mL) na sobnoj temperaturi u toku 30 min. Čvrste supstance se sakupe filtriranjem i suše pod vakuumom da se dobije metil (4R)-2-okso-3-(trifenilmetil)-1,3-oksazolidin-4-karboksilat (71 g, 74% prinos) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.38 - 7.27 (m, 15H), 4.61 - 4.50 (m, 1H), 4.50 - 4.38 (m, 1H), 4.21 (dd, J=3.3, 8.9 Hz, 1H), 3.49 (s, 3H).

Faza 2: (4S)-4-(hidroksimetil)-3-(trifenilmetil)-1,3-oksazolidin-2-on

[0414]

[0415] Rastvor metil (4R)-2-okso-3-(trifenilmetil)-1,3-oksazolidin-4-karboksilata (158 g, 409 mmol) u THF (2.4 L) se ohladi na -65 °C (unutrašnja) i u porcijama se doda LiAlH4(18.6 g, 490 mmol), održavajući temperaturu ispod -60 °C (unutrašnja). Smeša se meša na -10 °C (unutrašnja) u toku 1.5 h. TLC analiza (1:2 EtOAc/petrol etar) pokazuje da je početni materijal utrošen. Smeša se neutrališe pažljivim dodavanjem Na2SO4•10H2O sve dok ne prestane emisija gasa. Suspenzija se filtrira kroz celite ploču. Filter pogača se suspenduje u EtOAc (500 mL), meša 10 min i nakon toga filtrira. Ovaj postupak se ponovi 3x.

Kombinovani filtrat se koncentruje do sušenja. Ostatak se prečisti fleš hromatografijom (660 g SiO2, 0-80% EtOAc/petrol etar) da se dobije (4S)-4-(hidroksimetil)-3-(trifenilmetil)-1,3-oksazolidin-2-on (29.9 g, 20% prinos) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.31 - 7.10 (m, 15H), 4.36 - 4.12 (m, 2H), 3.73 - 3.58 (m, 1H), 3.22 - 2.94 (m, 2H).

Faza 3: (4R)-4-(fluorometil)-3-(trifenilmetil)-1,3-oksazolidin-2-on

[0417] Rastvor (4S)-4-(hidroksimetil)-3-(trifenilmetil)-1,3-oksazolidin-2-ona (29.9 g, 83.3 mmol) i TEA (75.9 g, 750 mmol) u MeCN (400 mL) se ohladi u vodenom kupatilu sa ledom na 0 °C (unutrašnja) i polako se dodaje nonafluorobutansulfonil fluorid (75.5 g, 250 mmol), održavajući temperaturu reakcije na 5-10 °C (unutrašnja). Rastvor se meša 5 min na 0 °C (unutrašnja). TLC analiza (1:2 EtOAc/petrol etar) pokazuje da je početni materijal utrošen. Dodaje se trietilamin trihidrofluorid (40.3 g, 250 mmol) u kapima i rastvor se meša 2 h na 5-10 °C (unutrašnja). Smeša se podeli između EtOAc (200 mL) i H2O (200 mL). Vodena faza se ekstrahuje sa EtOAc (200 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(200 mL) i slanim rastvorom (200 mL), suše preko Na2SO4, filtriraju i koncentruju. Ostatak se razmuti sa petrol etrom (200 mL) i EtOAc (100 mL) u toku 2 h na temperaturi sredine a čvrste supstance se sakupe filtriranjem. Filtrat se koncentruje do sušenja i prečisti fleš hromatografijom (80 g SiO2, 30-50% EtOAc/petrol etar). Željene frakcije se koncentruju do sušenja i kombinuju sa prethodno izdvojenom filter pogačom da se dobije (4R)-4-(fluorometil)-3-(trifenilmetil)-1,3-oksazolidin-2-on (26.7 g, 89% prinos) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.39 - 7.22 (m, 15H), 4.54 - 4.46 (m, 1H), 4.41 - 4.35 (m, 1H), 4.08 - 3.82 (m, 3H);<19>F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -231.64 (s, 1F). Faza 4: (4R)-4-(fluorometil)-1,3-oksazolidin-2-on

[0418]

[0419] Suspenzija (4R)-4-(fluorometil)-3-(trifenilmetil)-1,3-oksazolidin-2-ona (26.7 g, 74.0 mmol) u DCM (90.0 mL) se ohladi na 0 °C (unutrašnja) i u kapima tretira sa TFA (90.0 mL). Reakcija se meša 1.5 h na sobnoj temperaturi. LCMS analiza pokazuje da je početni materijal utrošen. Smeša se koncentruje do sušenja. Ostatak se rastvori u DCM (200 mL) i rastvor se ohladi na 0 °C (unutrašnja) u kupatilu sa vodom i ledom. Smeša se zaalkališe sa koncentrovanim vodenim rastvorom NH4OH do pH ~9, održavajući unutrašnju temperaturu na 5-15 °C (unutrašnja). Smeša se suši preko Na2SO4, filtrira i koncentruje kroz celite ploču. Filter pogača se ispere sa DCM. Kombinovani filtrat se koncentruje do sušenja. Ostatak se prečisti fleš hromatografijom (80 g SiO2, EtOAc) da se dobije (4R)-4-(fluorometil)-3-(trifenilmetil)-1,3-oksazolidin-2-on (3.86 g, 44% prinos) kao bledo žuto ulje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 6.41 (br s, 1H), 4.57 - 4.44 (m, 2H), 4.42 - 4.31 (m, 1H), 4.29 - 4.23 (m, 1H), 4.22 - 4.10 (m, 1H);<19>F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -229.49 (s, 1F).

Faza 5: (4R)-3-(6-bromopiridin-2-il)-4-(fluorometil)-1,3-oksazolidin-2-on

[0420]

eđuproizvod 20

[0421] U smešu (4R)-4-(fluorometil)-3-(trifenilmetil)-1,3-oksazolidin-2-ona (4.70 g, 39.5 mmol), 2,6-dibromopiridina (14.5 g, 61.2 mmol) i Cs2CO3(32.1 g, 98.7 mmol) u 1,4-dioksanu (250.0 mL) se u mehurićima uvodi N2u toku 2 min. Dodaju se Pd(OAc)2(886 mg, 3.95 mmol) i ksantfos (2.74 g, 4.74 mmol) i u smešu se u mehurićima uvodi N2. Smeša se meša 3 h na 80 °C, ohladi na sobnu temperaturu i filtrira. Filter pogača se ispere sa EtOAc (5x30 mL). Kombinovani filtrat se koncentruje do sušenja. Ostatak se prečisti fleš hromatografijom (330 g SiO2, 0-30% EtOAc/petrol etar) da se dobije Međuproizvod 20 (3.72 g, 34% prinos) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.21 (dd, J=8.3, 0.7 Hz, 1H), 7.75 - 7.49 (m, 1H), 7.26 (dd, J=7.6, 0.7 Hz, 1H), 5.12 - 4.98 (m, 1H), 4.96 - 4.61 (m, 2H), 4.60 - 4.48 (m, 2H);<19>F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -237.04; m/z (ESI+) za (C9H8BrFN2O2), 276.7 (M+H)<+>; [α] D<30>= 97.3° (c = 1.0, MeOH).

Primeri

Opšti postupci

[0422] Ukoliko nije drugačije navedeno, promenljive u Šemama imaju ista značenja kako je ovde definisano. Ovde pomenuti amini mogu da grade zaštićene amine koji se oslobađaju pod standardnim uslovima poznatim u tehnici.

Postupak A

[0423]

[0424] Postupak A se odnosi na jednu sintetičku sekvencu za izradu jedinjenja Formule I, kako je prethodno opisano. Prema Postupku A, u prvoj fazi brominacijom jedinjenja formule A-1 (na primer, etil 2-hlor-3-metilizonikotinat) (J. Med. Chem., 47(25), 6363-6372; 2004) koristeći N-bromosukcinimid se dobija jedinjenje formule A-2. U toku ove faze, R<3>supstituent može da bude predstavljen istom grupom koja je poželjna u finalnom produktu, Formule I, ili njegove zaštićene varijacije. U narednoj fazi, jedinjenje formule A-2 je podvrgnuto amonolizi sa amonijakom da se formira 4-hlor-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on, jedinjenje formule A-3. Jedinjenje formule A-3 se nakon toga podvrgava karbonilaciji hlorida koristeći ugljen monoksid i metanol uz paladijum katalizator a nakon toga zaštitom da se dobije estar formule A-4. U narednoj fazi, formiranjem N-oksida jedinjenja formule A-4 pod standardnim uslovima (urea vodonik peroksid) a nakon toga hlorinacijom jedinjenja formule A-5 koristeći fosfor oksihlorid dobija se hlorid formule A-6.

Nakon toga, deprotekcijom karbamate zaštitne grupe u formuli A-6 a nakon toga reakcijom hlorida sa R<1>(na primer, aminom) se dobije jedinjenje formule A-7 (na primer, aminopiridin). U toku ove faze, R<1>supstituent bi trebalo da bude predstavljen istom grupom koja se želi u finalnom produktu, Formuli I, ili njenom zaštićenom varijacijom. U narednoj fazi, redukcijom estarske funkcionalne grupe u formuli A-7 se dobija alkohol formule A-8.

Aktivacijom alkoholne funkcionalne grupe formule A-8, kao što je mesilat (A-9, Y= OSO2CH3) a nakon toga ili

i) azidacijom (A-9, Y= N3) i redukcijom azidne funkcionalne grupe pod standardnim uslovima da se dobiju primarni amini (formula A-9, Y= NH2); ili

ii) direktnom izmenom mesilata (formula A-9, Y= OSO2CH3) sa primarnim aminima da se dobiju odgovarajući sekundarni amini (formula A-9, Y= N(R<8>)(R<9>), R<8>i R<9>= H i/ili alkil grupa) se dobija jedinjenje formule A-9.

[0425] Zaštitom amino funkcionalne grupe kao što je odgovarajući terc-butil karbamat, formule A-9 (Y= N(R<8>)Boc, R<8>= H ili alkil grupa) a nakon toga udvajanjem sa brom piridinom formule A-10 uz paladijum ili bakar katalizu se dobijaju zaštićeni pirolo[3,4-c]piridin-1-oni (R<2>=CH2N(R<8>)Boc, R<8>= H ili alkil grupa). U toku ove faze, R<4>i (R<5>)asupstituenti formule A-10 bi trebalo da budu predstavljeni istom grupom koja se želi u finalnom produktu, Formuli I, ili njenom zaštićenom varijantom. Nakon toga, deprotekcijom karbamatne zaštitne grupe pod standardnim uslovima se dobijaju pirolo[3,4-c]piridin-1-oni Formule I (R<2>=CH2N(R<8>)(R<9>), R<8>i R<9>= H i/ili alkil grupa).

Postupak B

[0426]

[0427] Postupak B se odnosi na jednu sintetičku sekvencu za izradu jedinjenja Formule II, kako je prethodno opisano. Prema Postupku B, u prvoj fazi se benziliskom brominacijom jedinjenja formule B-1 (na primer, etil 2-hlor-3-metilizonikotinat) (J. of Med. Chem., 47(25), 6363-6372; 2004) koristeći N-bromosukcinimid dobija jedinjenje formule B-2. U narednoj fazi, jedinjenje formule B-2 se podvrgava amonolizi sa amonijakom da se formira 4-hlor- 2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on, jedinjenje formule B-3. Jedinjenje formule B-3 se nakon toga podvrgava karbonilaciji hlorida pomoću ugljen monoksiida i metanola uz paladijum katalizator a nakon toga zaštitom da se dobije estar formule B-4. U narednoj fazi, formiranjem N-oksida jedinjenja formule B-4 pod standardnim uslovima (urea, vodonik peroksid) a nakon toga hlorinacijom jedinjenja formule B-5 koristeći fosforoksihlorid se dobija hlorid formule B-6. Nakon toga, deprotekcijom karbamatne zaštitne grupe jedinjenja formule B-6 a zatim reakcijom hlorida sa R<1>(na primer aminom) se dobija jedinjenje formule B-7. U toku ove faze, R<1>supstituent treba da bude predstavljen istom grupom koji se želi u finalnom proizvodu, Formuli II, ili njenom zaštićenom varijantom. U narednoj fazi, redukcijom estarske funkcionalne grupe u formuli B-7 se dobija alkohol, jedinjenje formule B-8.

Aktivacijom alkoholne funkcionalne grupe formule B-8, kao što je mesilat (B-9, Y= OSO2CH3) a nakon toga ili:

i) azidacijom (B-9, Y= N3) i redukcijom azidne funkcionalne grupe pod standardnim uslovima za dobijanje primarnih amina (formula B-9, Y= NH2); ili

ii) direktnom zamenom mesilata (formula B-9, Y= OSO2CH3) sa primarnim aminima da se dobiju odgovarajući sekundarni amini (formula B-9, Y= N(R<8>)(R<9>), R<8>i R<9>= H i/ili alkil grupa) se dobija jedinjenje formule B-9.

[0428] Zaštitom amino funkcionalne grupe, kao što je odgovarajući terc-butil karbamat, u formuli B-9 (Y= N(R<8>)Boc, R<8>= H ili alkil grupa) a nakon toga udvajanjem sa bromo piridinom formule B-10 uz paladijum ili bakar katalizu se dobijaju zaštićeni pirolo[3,4-c]piridin-1-oni (R<2>=CH2N(R<8>)Boc, R<8>= H i/ili alkil grupa). U toku ove faze, R<5>i R<12>supstituenti formule B-10 treba da budu predstavljeni istom grupom kako se želi u finalnom produktu, Formula II, ili njenom zaštićenom varijantom.

[0429] Nakon toga se deprotekcijom karbamatne zaštitne grupe pod standardnim uslovima dobijaju pirolo[3,4-c]piridin-1-oni Formuli II (R<2>=CH2N(R<8>)(R<9>), R<8>i R<9>= H i/ili alkil grupa).

[0430] Izrada jedinjenja formule B-10 može da se izvrši hidrazinolizom bromopiridin estra formule B-11 (J. of Med. Chem., 60(2), 722-748; 2017) da se formira jedinjenje formule B-12. U toku ove faze, R<5>supstituent formule B-11 bi trebalo da bude predstavljen istom grupom koja se želi u finalnom produktu, Formula II, ili njenom zaštićenom varijantom. Nakon toga se reakcijom hidrazida formule B-12 sa dimetilformamid dimetil acetalom dobija jedinjenje formule B-13. Kondenzacijom jedinjenja formule B-13 sa aminom (na primer, R<12>-NH2) se dobija triazol formule B-10. U toku ove faze, R<12>supstituent amina treba da budu predstavljen istom grupom kako se želi u finalnom produktu, Formula II, ili njenom zaštićenom varijantom.

Postupak C

[0431]

[0432] Postupak C se odnosi na drugu sinetitčku sekvencu za izradu jedinjenja Formule II, kako je prethodno opisano. U odnosu na Postupak C, u prvoj fazi, redukcijom estarske funkcionalne grupe jedinjenja formule B-6 se dobija alkoholno jedinjenje formule C-1. Nakon toga, aktivacijom alkoholne funkcionalne grupe formule C-1 kao što je mesilat (C-2, Y= OSO2CH3) a nakon toga ili:

i) azidacijom (C-2, Y= N3) i redukcijom azidne funkcionalne grupe pod standardnim uslovima za dobijanje primarnih amina (formula C-2, Y= NH2); ili

ii) direktnom zamenom mesilata (formula C-2, Y= OSO2CH3) sa primarnim aminima za dobijanje odgovarajućih sekundarnih amina (formula C-2, Y= N(R<8>)(R<9>), R<8>i R<9>= H i/ili alkil grupa) se dobija jedinjenje formule C-2.

[0433] Zaštitom amino funkcionalne grupe kao što je odgovarajući terc-butil karbamat se dobija C-2 (Y= N(R<8>)Boc, R<8>= H ili alkil grupa) a nakon toga udvajanjem sa bromo piridinom formule B-10 uz paladijum ili bakar katalizu se dobijaju zaštićeni pirolo[3,4-c]piridin-1-oni formule C-3 (R<2>=CH2N(R<8>)Boc, R<8>= H ili alkil grupa). U toku ove faze, R<5>i R<12>supstituenti formule B-10 treba da budu predstavljeni istom grupom kako se želi u finalnom produktu, Formula II, ili njenom zaštićenom varijantom. Nakon toga, unakrsnim udvajanjem formule C-3 posredstvom paladijuma ili bakra ili sa aminima, zaštićenim aminima ili alkil trifluoroboratima/boratnim kiselinama/boronatima/cinkatima ili elkenil bor estrima, a nakon toga redukcijom ili ciklopropanacijom a zatim deprotekcijom karbamatne zaštitne grupe se dobijaju pirolo[3,4-c]piridin-1-oni Formuli II (R<2>=CH2N(R<8>)(R<9>), R<8>i R<9>= H i/ili alkil grupa, R<1>supstituenti treba da budu predstavljeni istom grupom kako se želi u finalnom produktu, Formula II, ili njenom zaštićenom varijantom).

Postupak D

[0434]

[0435] Postupak D se odnosi na sintetičku sekvencu za izradu jedinjenja Formule III, kako je prethodno opisano. Prema Postupku D, u prvoj fazi, udvajanjem 2,6-dibromopiridina formule D-1 sa oksazolidinonom formule D-2 uz paladijum katalizator se dobija bromopiridin formule D-3. U toku ove faze, R<5>supstituent formule D- 1 i R<12>supstituent formule D-2 treba da budu predstavljeni istom grupom kako se želi u finalnom produktu, Formula III, ili njenom zaštićenom varijantom. Nakon toga, udvajanjem jedinjenja formule D-3 sa jedinjenjem formule B-9 (Y= N(R<8>)Boc, R<8>= H ili alkil grupa) uz paladijum ili bakar katalizu se dobijaju zaštićeni pirolo[3,4-c]piridin-1-oni (R<2>=CH2N(R<8>) Boc, R<8>= H ili alkil grupa, R<1>supstituent treba da bude predstavljen istom grupom kako se želi u finalnom produktu, Formula III, ili njenom zaštićenom varijantom). U narednoj fazi, deprotekcijom karbamatne zaštitne grupe pod standardnim uslovima se dobijaju pirolo[3,4-c]piridin-1-oni Formule III (R<2>=CH2N(R<8>)(R<9>)Boc, R<8>i R<9>= H i/ili alkil grupa).

Postupak E

[0436]

[0437] Postupak E se odnosi na sintetičku sekvencu za izradu jedinjenja Formule E-4, kako je prethodno opisano. Prema Postupku E, u prvoj fazi, zaštitom jedinjenja formule E-1 (na primer 4-bromo-5-izopropil-1H-pirazol), sa tetrahidropiranil (THP) grupom) se dobija pirazol formule E-2. U toku ove faze, R<12>supstituent formule E-1 treba da bude predstavljen istom grupom kako se želi u finalnom produktu, Formula E-4, ili njenom zaštićenom varijantom. Nakon toga se formula E-2 udvaja sa 2,6-dibromopiridinom formule D-1 (na primer, R<5>=H ili F) da se dobije bromopiridin formule E-3. U toku ove faze, R<5>supstituent formule D-1 treba da bude predstavljen istom grupom kako se želi u finalnom produktu, formula E-4, ili njenom zaštićenom varijantom. U narednoj fazi, udvajanjem formule E-3 sa jedinjenjem formule B-9 (Y= N(R<8>)Boc, R<8>= H ili alkil grupa) uz paladijum ili bakar katalizu se dobijaju zaštićeni pirolo[3,4-c]piridin-1-oni formule E-4 (R<2>= CH2N(R<8>)Boc, R<8>= H ili alkil grupa). U toku ove faze, R<1>supstituent formule B-9 i R<5>supstituent formule E-3 treba da budu predstavljeni istom grupom kako se želi u finalnom produktu, Formula E-4, ili njenom zaštićenom varijantom. Nakon toga, deprotekcijom zaštićenog pirolo[3,4-c]piridin-1-ona pod standardnim uslovima se dobijaju pirolo[3,4-c]piridin-1-oni Formule E-4 (R<2>= CH2N(R<8>)(R<9>), R<8>i R<9>= H i/ili alkil grupa).

Postupak F

[0438]

[0439] Postupak F se odnosi na sintetičku sekvencu za izradu jedinjenja Formule F-3, kako je prethodno opisano. Prema Postupku F, u prvoj fazi, udvajanjem jedinjenja formule B-3 pod uslovima fotoredoks katalize (Zuo i saradnici, “Merging photoredox with nickel catalysis: Coupling of α-karboksil sp3-karbons with aril halides”, Science 2014,345, 437-440) koristeći sarkozin (F-1) kao izvor aminoalkil radikala se dobija pirolo[3,4-c]piridin-1-on formule F-2. Nakon toga, udvajanjem jedinjenja formule F-2 sa bromo piridin jedinjenjem formule B-10 uz paladijum ili bakar katalizu dobija zaštićeni pirolo[3,4-c]piridin-1-on formule F-3 (R<8>=Boc). U toku ove faze, R<5>i R<12>supstituenti formule B-10 treba da budu predstavljeni istom grupom kako se želi u finalnom produktu, Formula F-3, ili njenom zaštićenom varijantom. U narednoj fazi, deprotekcijom karbamatne zaštitne grupe pod standardnim uslovima se dobija pirolo[3,4-c]piridin-1-on formule F-3 gde je R<8>= H.

Postupak G

[0440]

[0441] Postupak G se odnosi na narednu sintetičku sekvencu za izradu jedinjenja Formula II, kako je prethodno opisano. Prema Postupku G, u prvoj fazi, reakcijom supstitucije nukleofilnog radikala jedinjenja formule G-1 (na primer, metil 3-metilizonikotinat) sa karboksilnom kiselinom (na primer, R1CO2H) pod uslovima oksidativne dekarboksilacije sa srebro nitratom i nekim oksidacionim sredstvom (amonijum persulfat) dobija se estar formule G-2. U toku ove faze, R<1>supstituent karboksilne kiseline treba da bude predstavljen istom grupom kako se želi u finalnom produktu, Formula II, ili njenom zaštićenom varijantom. Nakon toga, brominacijom sa N-bromosukcinimidom se dobija bromid formule G-3. U narednoj fazi, amonolizom bromida formule G-3 sa amonijumom se dobija 2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on formule G-4. Nakon toga, supstitucijom dekarboksilativnog radikala sa N-Boc zaštićenom amino kiselinom, pod oksidativnim uslovima, se dobija benzilni amin formule B-9 (Y=N(R<8>)Boc, R<8>= H ili alkil). U narednoj fazi, udvajanjem sa bromo piridinom formule B-10 uz paladijum ili bakar katalizu se dobijaju zaštićeni pirolo[3,4-c]piridin-1-oni Formule II (R<2>=CH2N(R<8>)Boc, R<8>= H ili alkil grupa). Nakon toga, deprotekcijom karbamatne zaštitne grupe pod standardnim uslovima se dobijaju pirolo[3,4-c]piridin-1-oni Formule II (R<2>= CH2N(R<8>)(R<9>), R<8>i R<9>= H i/ili alkil grupa).

Postupak H

[0442]

[0443] Postupak H se odnosi na sintetičku sekvencu za izradu jedinjenja Formule III, kako je prethodno opisano. Prema Postupku H, u prvoj fazi, oksazolidin formule H-2 je izrađen ciklizacijom metil tricil-D-serinata formule H-1 pomoću trifozgena. Nakon toga se redukcijom estra formule H-2 dobija alkohol formule H-3. U narednoj fazi se ili:

(i) deoksifluorinacijom jedinjenja formule H-3 dobija jedinjenje formule H-4 (W = flouroalkil, na primer, CH2F), ili

(ii) oksidacijom alkohola formule H-3 do aldehida formule H-4 (W = CHO) a nakon toga difluorometilacijom dobija jedinjenje formule H-4 (W = CHF2).

[0444] Nakon toga, deprotekcijom N-tricil grupe formule H-4 a nakon toga udvajanjem odgovarajućeg oksazolidinona formule H-5 sa 2,6-dibromopiridinom formule D-1 se dobija bromo piridin formule D-3. U toku ove faze, R<5>supstituent formule D-1 i R<12>supstituent formule H-5 treba da budu predstavljeni istom grupom kako se želi u finalnom produktu, Formula III, ili njenom zaštićenom varijantom. Nakon toga, udvajanjem jedinjenja formule D-3 sa jedinjenjem formule B-9 (R<1>supstituent treba da bude predstavljen istom grupom kako se želi u finalnom produktu, Formula III, ili njenom zaštićenom varijantom, Y = N(R<8>)Boc, R<8>= H ili alkil grupa) uz paladijum ili bakar katalizu se dobija zaštićeni pirolo[3,4-c]piridin-1-on Formule III (R<2>= CH2N(R<8>)Boc, R<8>= H ili alkil grupa, R<12>= CH2F ili CHF2). U finalnoj fazi, deprotekcijom karbamatne zaštitne grupe pod standardnim uslovima se dobija pirolo[3,4-c]piridin-1-on Formule III (R<2>= CH2N(R<8>)(R<9>), R<8>i R<9>= H i/ili alkil grupa).

Postupak I

[0445]

[0446] Postupak I se odnosi na sintetičku sekvencu za izradu jedinjenja Formule I-5, kako je prethodno opisano. Prema Postupku I, u prvoj fazi, hidrazinolizom 2-bromo-6-fluoropiridina formule I-1 se dobija jedinjenje formule I-2. U narednoj fazi diazotizacijom hidrazina formule I-2 se dobija azid formule I-3. Nakon toga, cikloadicijom azida formule I-3 sa alkinom se dobija 1,2,3-triazol formule I-4. U toku ove faze, R<12>supstituent alkina treba da bude predstavljen istom grupom kako se želi u finalnom produktu, Formula I-5, ili njenom zaštićenom varijantom. U narednoj fazi, udvajanjem jedinjenja formule I-4 sa B-9 (Y=N(R<8>)Boc, R<8>= H ili alkil grupa, R<1>supstituent treba da bude predstavljen istom grupom kako se želi u finalnom produktu, Formula I-5, ili njenom zaštićenom varijantom) pod katalizom paladijumom se dobija zaštićeni pirolo[3,4-c]piridin-1-on Formule I-5. Nakon toga, deprotekcijom karbamatne zaštitne grupe pod standardnim uslovima se dobija pirolo[3,4-c]piridin-1-on Formule I-5 (R<2>= CH2N(R<8>)(R<9>), R<8>i R<9>= H i/ili alkil grupa).

Postupak J

[0448] Postupak J se odnosi na narednu sintetičku sekvencu za izradu jedinjenja Formule III, kako je prethodno opisano. Prema Postupku J, u prvoj fazi, hidroksimetilacijom posredstvom radikala jedinjenja formule G-4 upotrebom metanola i amonijum persulfata se dobija jedinjenje formule B-9 (Y = OH). U toku ove faze, R<1>supstituent formule G-4 treba da bude predstavljen istom grupom kako se želi u finalnom produktu, Formula III, ili njenom zaštićenom varijantom. Nakon toga, aktivacijom alkoholne funkcionalne grupe kao što je mesilat (B-9, Y= OSO2CH3) a nakon toga azidacijom (B-9, Y= N3) i redukcijom azidne funkcionalne grupe pod standardnim uslovima se dobijaju primarni amini (B-9, Y= NH2). U narednoj fazi, zaštitom amino funkcionalne grupe kao što je odgovarajući terc-butil karbamat se dobija B-9 (Y= N(R<8>)Boc, R<8>= H). Nakon toga, udvajanjem jedinjenja formule D-3 sa B-9 uz paladijum ili bakar katalizu se dobija zaštićeni pirolo[3,4-c]piridin-1-on Formule III (R<2>= CH2N(R<8>)Boc, R<8>= H, R<12>supstituent treba da bude predstavljen istom grupom kako se želi u finalnom produktu, Formula III, ili njenom zaštićenom varijantom). U finalnoj fazi, deprotekcijom karbamatne zaštitne grupe pod standardnim uslovima se dobija pirolo[3,4-c]piridin-1-on Formule III (R<2>= CH2N(R<8>)(R<9>), R<8>i R<9>= H).

Postupak K

[0449]

[0450] Postupak K se odnosi na narednu sintetičku sekvencu za izradu jedinjenja Formule III, kako je prethodno opisano. Prema Postupku K, u prvoj fazi, kondenzacijom 2-cijanoacetamida formule K-1 sa oksalat estrom formule K-2 se dobija hidroksi piridin formule K-3 (Z = OH). U toku ove faze, R<1>supstituent formule K-2 treba da bude predstavljen istom grupom kako se želi u finalnom produktu, Formula III, ili njenom zaštićenom varijantom. U narednoj fazi, hlorinacijom pod standardnim uslovima (POCl3) se dobija hlorpiridin formule K-3 (Z = Cl). Nakon toga, udvajanjem hlorpiridina formule K-3 (Z = Cl) pod uslovima fotoredoks katalize (Zuo i saradnici, “Merging photoredox with nickel catalysis: Coupling of α-karboksil sp3-karbons with aril halides”, Science 2014,345, 437-440) koristeći sarkozin kao izvor aminoalkil radikala, dobija se benzil amin formule K-4 Y = N(CH3)Boc)]. U narednoj fazi, redukcijom cijano grupe i istovremenom ciklizacijom se dobija 2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on formule B-9 (Y = N(CH3)Boc). Nakon toga, udvajanjem jedinjenja formule D-3 sa B-9 (Y = N(CH3)Boc) uz paladijum ili bakar katalizu se dobija zaštićeni pirolo[3,4-c]piridin-1-on Formule III (R<2>= CH2N(CH3)Boc, R<5>i R<12>supstituenti treba da budu predstavljeni istom grupom kako se želi u finalnom produktu, Formula III, ili njenom zaštićenom varijantom). U finalnoj fazi, deprotekcijom karbamat zaštitne grupe pod standardnim uslovima se dobija pirolo[3,4-c]piridin-1-on Formule III (R<2>= CH2N(CH3)H.

Postupak L

[0451]

[0452] Postupak L se odnosi na sintetičku sekvencu za izradu jedinjenja Formule L-5, kako je prethodno opisano. Prema Postupku L, u prvoj fazi, zaštitom laktama formule F-2 sa karbamatnom zaštitnom grupom koristeći di-terc-butil dikarbonat i 4-dimetilaminopiridin se dobija jedinjenje formule L-1. Nakon toga, trifluorometilacijomn jedinjenja formule L-1 koristeći cink trifluorometansulfinat i terc-butil hidroperoksid se dobija smeša 6-(trifluorometil)-1,3-dihidro-2H-pirolo[3,4-c]piridina formule L-2 i 7-(trifluorometil)-1,3-dihidro-2H-pirolo[3,4-c]piridina formule L-3. Nakon razdvajanja hromatografijom na koloni, opštom deprotekcijom karbamatnih zaštitnih grupa formule L-2 pod kiselim uslovima (TFA) a nakon toga selektivnom zaštitom benzil amin funkcionalne grupe sa karbamatnom zaštitnom grupom, koristeći di-terc-butil dikarbonat i trimetilamin se dobija trifluorometil laktam formule L-4. U narednoj fazi, udvajanjem jedinjenja formule L-4 sa jedinjenjem formule B-10 pod katalizom paladijumom se dobija zaštićeni pirolo[3,4-c]piridin-1-on Formule L-5 (R<8>= Boc). U toku ove faze, R<5>i R<12>supstituenti formule B-10 treba da budu predstavljeni istom grupom kako se želi u finalnom produktu, Formula L-5, ili njenom zaštićenom varijantom. U finalnoj fazi, deprotekcijom karbamatne zaštitne grupe pod standardnim uslovima se dobija pirolo[3,4-c]piridin-1-on Formule L-5 (R<8>= H).

Postupak M

[0453]

[0454] Postupak M se odnosi na narednu sintetičku sekvencu za izradu jedinjenja Formule III, kako je prethodno opisano. Prema Postupku M, u prvoj fazi, udvajanjem jedinjenja formule D-3 sa jedinjenjem formule C- 2 (Y = N(R<8>)Boc, R<8>= H ili alkil grupa) uz paladijum ili bakar katalizu se dobija zaštićeni pirolo[3,4-c]piridin-1-on formule M-1 (R<2>= CH2N(R<8>)Boc, R<8>= H ili alkil grupa). U toku ove faze, R<5>i R<12>supstituenti formule D-3 treba da budu predstavljeni istom grupom kako se želi u finalnom produktu, Formula III ili njenom zaštićenom varijantom. Nakon toga, unakrsnim udvajanjem posredstvom paladijuma ili bakra formule M-1 ili sa aminima, zaštićenim aminima ili alkil grifluoroboratima/boratnim kiselinama/boronatima/cinkatima ili alkenil boratnim estrima, a nakon toga redukcijom ili ciklopropanacijom a zatim deprotekcijom karbamatne zaštitne grupe se dobija pirolo[3,4-c]piridin-1-on Formule III gde R<1>supstituent treba da bude predstavljen istom grupom kako se želi u finalnom produktu, Formule III, ili njenom zaštićenom varijantom (R<2>= CH2N(R<8>)(R<9>), R<8>i R<9>= H i/ili alkil grupa).

Postupak N

[0455]

[0456] Postupak N se odnosi na narednu sintetičku sekvencu za izradu jedinjenja Formule III, kako je prethodno opisano. Prema Postupku N, u prvoj fazi, unakrsnim udvajanjem posredstvom paladijuma ili bakra jedinjenja formule C-2 (Y = N(R<8>)Boc, R = H ili alkil grupa) i/ili amina, zaštićenih amina ili alkil trifluoroborata/boratnih kiselina/boronata/cinkata ili alkenil boratnih estara a nakon toga redukcijom ili ciklopropanacijom se dobija jedinjenje formule B-9. U toku ove faze, R<1>supstituent formule B-9 treba da bude predstavljen istom grupom kako se želi u finalnom produktu Formula III, ili njenom zaštićenom varijantom. U narednoj fazi, udvajanjem jedinjenja formule D-3 sa jedinjenjem formule B-9 uz paladijum ili bakar katalizu a nakon toga deprotekcijom karbamatne zaštitne grupe se dobija pirolo[3,4-c]piridin-1-on Formule III (R<2>= CH2N(R<8>)(R<9>), R<8>i R<9>= H i/ili alkil grupa). U toku ove faze, R<5>i R<12>supstituenti formule D-3 treba da budu predstavljeni istom grupom kako se želi u finalnom produktu, Formula III, ili njenom zaštićenom varijantom.

Postupak O

[0457]

[0458] Postupak O se odnosi na narednu sintetičku sekvencu za izradu jedinjenja Formule II, kako je prethodno opisano. Prema Postupku O, u prvoj fazi, unakrsnim udvajanjem ili nukleofilnom aromatičnom supstitucijom između potrebnih partnera za udvajanje ili amina (ili njegove zaštićene verzije) i dihlorpiridina formule O-1 (V = N(CH3)2ili OH ili piperidin ili Ome) se dobija O-2 (R<1>= NR<6>R<7>ili alkil grupa). Formilacijom O-2 se nakon toga dobija aldehid O-3. Nakon toga se kondenzacijom sa Ellman-ovim sulfonamidom dobija jedinjenje formule O-4. zatim se redukcijom dobija jedinjenje formule O-5. Karbonilacijom hlorida formule O-5 upotrebom ugljen monoksida i metanola pod uslovima paladijum katalize dobija se estar formule O-6. Redukcijom estra formule O-6 se dobija benzil alkohol B-9 (Y = OH). Aktivacijom alkoholne funkcionalne grupe se dobija mesilat (B-9, Y= OSO2CH3). U narednoj fazi ili:

i) azidacijom (B-9, Y= N3) i redukcijom azidne funkcionalne grupe pod standardnim uslovima da se dobiju primarni amini (formula B-9, Y= NH2); ili

[0459] Zaštitom amino funkcionalne grupe, kao što je odgovarajući terc-butil karbamat, B-9 (Y= N(R<8>)Boc), a nakon toga udvajanjem sa bromopiridin triazolom B-10 uz paladijum ili bakar katalizu se dobijaju zaštićeni pirolo[3,4-c]piridin-1-oni Formule II (R<2>=CH2N(R<8>)Boc, R<8>= H ili alkil grupa, R<1>= N(R<6>)(R<7>) ili alkil grupa). U ovoj fazi, R<12>supstituent formule B-10 treba da bude predstavljen istom grupom kako se želi u finalnom produktu, Formule II, ili njenom zaštićenom varijantom. Cepanjem zaštitne grupe(a) pod standardnim uslovima se dobijaju pirolo[3,4-c]piridin-1-oni Formule II (R<2>=CH2N(R<8>)(R<9>), R<1>= N(R<6>)(R<7>) ili alkil grupa).

Postupak P

[0460]

[0461] Postupak P se odnosi na narednu sintetičku sekvencu za izradu jedinjenja Formula II, kako je prethodno opisano u prvoj fazi jedinjenja formule O-3 (V = N(CH3)2ili OH ili piperidin ili OMe ili Oet ili OiPr) ili

i) dekarboksilativnim fotoredoks udvajanjem posredstvom iridijuma sa potrebnom karboksilnom kiselinom da se dobije jedinjenje formule P-1 (Y = N(R<8>)Boc); ili

ii) Negishi udvajanjem sa potrebnim aminoalkilcinkatom da se dobije jedinjenje formule P-1 (Y = N(R<8>)Boc); ili

iii) Suzuki unakrsnim udvajanjem sa potrebnom trifluoroboratnom solju, boratnom kiselinom ili boratnim estrom da se dobije jedinjenje formule P-1 (Y = N(R<8>)Boc)

[0462] Nakon toga se kondenzacijom sa Ellman-ovim sulfonamidom i redukcijom dobija jedinjenje formule B-9. Udvajanjem sa bromopiridin triazolom B-10 uz paladijum ili bakar katalizu se dobija zaštićeni pirolo[3,4-c]piridin-1-on Formule II (R<2>=CH2N(R<8>)Boc). U ovoj fazi R<12>supstituent formule B-10 treba da bude predstavljen istom grupom kako se želi u finalnom produktu, Formula II, ili njenom zaštićenom varijantom. Cepanjem zaštitne grupe(a) pod standardnim uslovima se dobija pirolo[3,4-c]piridin-1-on Formula II (R<2>=CH2N(R<8>)(R<9>)).

Postupak Q

[0463]

[0464] Postupak Q se odnosi na narednu sintetičku sekvencu za izradu jedinjenja Formule II, kako je prethodno opisano. U prvoj fazi, reduktivnom aminacijom ili alkilacijom amina formule Q-1 se dobija pirolo[3,4-c]piridin-1-on Formule II (R<2>=CH2N(R<8>)(R<9>)). U ovoj fazi R<5>, R<12>i R<1>supstituenti formule Q-1 treba da budu predstavljeni istom grupom kako se želi u finalnom produktu, Formula II.

Postupak R

[0465]

[0466] Postupak R se odnosi na narednu sintetičku sekvencu za izradu jedinjenja Formule II, kako je prethodno opisano. U prvoj fazi, reduktivnom aminacijom jedinjenja formule O-3 sa ekvivalentnom količinom aminijaka ili alternativno sa Ellman-ovim sulfonamidom se dobija jedinjenje formule O-5. U ovoj fazi, R<1>supstituent formule O-3 treba da bude predstavljen istom grupom kako se želi u finalnom produktu, Formula II, ili njenom zaštićenom varijantom. Udvajanjem sa bromopiridin triazolom B-10 uz paladijum ili bakar katalizu se dobija jedinjenje formule R-1. U ovoj fazi, R<12>supstituent formule B-10 treba da bude predstavljen istom grupom kako se želi u finalnom produktu, Formula II, ili njenom zaštićenom varijantom. Suzuki unakrsnim udvajanjem sa odgovarajućim trifluoroboratom a nakon toga deprotekcijom zaštitne grupe(a) pod standardnim uslovima se dobija pirolo[3,4-c]piridin-1-on Formule II (R<2>=CH2N(R<8>)(R<9>)).

Postupak S

[0467]

[0468] Postupak S se odnosi na narednu sintetičku sekvencu za izradu jedinjenja Formule II, kako je prethodno opisano. U prvoj fazi, redukcijom nitrila jedinjenja formule K-3 (Z=Cl) posredstvom nikla se dobija jedinjenje formule O-5. U ovoj fazi, R<1>supstituent formule K-3 treba da bude predstavljen istom grupom kako se želi u finalnom produktu, Formula II, ili njenom zaštićenom varijantom. U narednoj fazi ili

i) dekarboksilativnim fotoredoks unakrsnim udvajanjem jedinjenja formule O-5 sa potrebnom kiselinom posredstvom nikla, se dobija jedinjenje formule B-9 (Y = N(R<8>)Boc); ili ii) karbonilacijom hlorida formule O-5 koristeći ugljen monoksid i metanol uz paladijum katalizator se dobija estar koji se nakon toga redukuje (B-9, Y = OH) i aktivira kao mesilat (B-9, Y= OSO2CH3). U narednoj fazi ili

a. direktnom zamenom mesilata sa primarnim aminima se dobijaju odgovarajući sekundarni amini formule B-9 (Y= N(R<8>)(R<9>)); ili

b. azidacijom (B-9, Y= N3) i redukcijom azidne funkcionalne grupe pod standardnim uslovima se dobija primarni amin formule B-9 (Y= NH2).

[0469] Udvajanjem jedinjenja formule B-9 sa bromopiridin triazolom B-10 uz paladijum ili bakar katalizu a nakon toga cepanjem zaštitne grupe(a) pod standardnim uslovima se dobija pirolo[3,4-c]piridin-1-on Formule II.

Postupak T

[0470]

[0471] Postupak T se odnosi na narednu sintetičku sekvencu za izradu jedinjenja Formule III, kako je prethodno opisano. U prvoj fazi, jedinjenje formule B-9 (Y= N(R<8>)Boc, R<1>je kako je predstavljeno u jedinjenju Formule III ili njegova zaštićena verzija), se podvrgne udvajanju sa paladijumom bakrom-posredovanog udvajanja sa jedinjenjem formule bromopiridina D-3 (izrađen kako je opisano u postupku H) da se dobije pirolo[3,4-c]piridin-1-on Formule III (R<2>=CH2N(R<8>)Boc). Cepanjem zaštitne grupe(a) pod standardnim uslovima se dobija pirolo[3,4-c]piridin-1-on Formule III (R<2>=CH2N(R<8>)(R<9>)).

Postupak U

[0472]

[0473] Postupak U se odnosi na sintetičku sekvencu za izradu jedinjenja Formule U-4, kako je prethodno opisano. U prvoj fazi, jedinjenje formule B-12 se podvrgne reakciji sa odgovarajućim acil hloridom da se dobije jedinjenje formule U-1. U ovoj fazi, R<13>supstituent acil hlorida je kako je predstavljen u finalnom produktu, Formula U-4, ili njegova zaštićena verzija. Ciklizacijom jedinjenja formule U-1 se dobija jedinjenje formule U-2. Brompiridin formule U-2 (na primer međuproizvod 4) se podvrgava udvajanju sa jedinjenjem formule B-9 uz paladijum ili bakar katalizu da se dobije jedinjenje formule U-3 (Y=N(R<8>)Boc). U ovoj fazi R<5>supstituent U-2 i R<1>supstituent B-9 treba da budu predstavljeni istom grupom kako se želi u finalnom produktu, Formula U-4, ili njenom zaštićenom varijantom. Jedinjenje formule U-3 se podvrgava reakciji sa potrebnim aminom da se dobije jedinjenje zaštićenog pirolo[3,4-c]piridin-1-ona U-4. Cepanjem zaštitne grupe(a) pod standardnim uslovima se dobija pirolo[3,4-c]piridin-1-on Formule U-4 (R<2>=CH2N(R<8>)(R<9>)).

Postupak V

[0474]

[0475] Postupak V se odnosi na sintetičku sekvencu za izradu jedinjenja Formule V-5, kako je prethodno opisano. U prvoj fazi, alkilacijom imidazola formule V-1 se dobija jedinjenje formule V-2 gde R<12>supstituent treba da bude predstavljen istom grupom kako se želi u finalnom produktu, Formula V-5, ili njenom zaštićenom varijantom. Udvajanjem paladijumom posredovanim udvajanjem jedinjenja formule V-2 sa jedinjenjem formule V-3 se dobija jedinjenje formule V-4. U ovoj fazi R<5>supstituent V-3 treba da bude predstavljen istom grupom kako se želi u finalnom produktu, Formula V-5, ili njenom zaštićenom varijantom. Udvajanjem jedinjenja formule V-4 sa jedinjenjem formule B-9 uz paladijum ili bakar katalizu se dobija zaštićeni pirolo[3,4-c]piridin-1-on Formule V-5 (R<2>=CH2N(R<8>)Boc). U ovoj fazi, R<1>supstituent B-9 treba da bude predstavljen istom grupom kako se želi u finalnom produktu, Formula V-5, ili njenom zaštićenom varijantom. Cepanjem zaštitne grupe(a) pod standardnim uslovima se dobija pirolo[3,4-c]piridin-1-on Formule V-5 (R<2>=CH2N(R<8>)(R<9>)).

Postupak W

[0476]

[0477] Postupak W se odnosi na narednu sintetičku sekvencu za izradu jedinjenja Formule II, kako je prethodno opisano. U prvoj fazi, niklom posredovanim fotoredoks unakrsnim udvajanjem jedinjenja formule C-2 (Y=N(R<8>)Boc) i W-1 se dobija jedinjenje formule B-9. U ovoj fazi R<1>supstituent W-1 treba da bude predstavljen istom grupom kako se želi u finalnom produktu, Formula II, ili njenom zaštićenom varijantom. Jedinjenje formule B-9 se podvrgne udvajanju sa jedinjenjem formule B-10 uz paladijum ili bakar katalizu a nakon toga cepanjem zaštitne grupe(a) pod standardnim uslovima se dobija pirolo[3,4-c]piridin-1-on Formule II (R<2>=CH2N(R<8>)(R<9>)). U ovoj fazi R<5>i R<12>supstituenti B-10 treba da budu predstavljeni istom grupom kako se želi u finalnom produktu, Formula II, ili njenom zaštićenom varijantom.

Postupak AA

[0478]

[0479] Postupak AA se odnosi na narednu sintetičku sekvencu za izradu jedinjenja Formule II, kako je prethodno opisano. U prvoj fazi, jedinjenje formule O-3 (V = piperidin, dimetilamin, OH, Ome, Oet, OiPr) se podvrgne reduktivnoj aminaciji sa piridin aminom formule AA-1 da se dobije jedinjenje formule AA-2. U ovoj fazi R<1>supstituent O-3 i R<5>i R<12>supstituenti formule AA-1 treba da budu predstavljeni istom grupom kako se želi u finalnom produktu, Formula II, ili njihovom zaštićenom varijantom. Nakon toga, paladijumom posredovanim unakrsnim udvajanjem formule AA-2 sa trifluoroboratima ili cinkatima formule AA-3 a nakon toga cepanjem zaštitne grupe(a) pod standardnim uslovima se dobija pirolo[3,4-c]piridin-1-on Formule II. U ovoj fazi R<2>supstituent treba da bude predstavljen istom grupom kako se želi u finalnom produktu, Formula II, ili njenom zaštićenom varijantom.

[0480] Jedinjenje formule B-10 se podvrgne udvajanju sa terc-butil karbamatom uz paladijum katalizator a nakon toga cepanju karbamatne zaštitne grupe pod standardnim uslovima da se dobije amino piridin formule AA-1.

Postupak AB

[0481]

[0482] Postupak AB se odnosi na narednu sintetičku sekvencu za izradu jedinjenja Formule U-4, kako je prethodno opisano. U prvoj fazi, udvajanjem jedinjenja formule O-5 sa bromopiridinom formule U-2 uz paladijum ili bakar katalizu se dobija jedinjenje formule R-1.

U ovoj fazi R<1>supstituent formule O-5 i R<5>i R<13>supstituenti formule U-2 treba da budu predstavljeni istom grupom kako se želi u finalnom produktu, Formula U-4, ili njihovom zaštićenom varijantom. Suzuki unakrsnim udvajanjem sa odgovarajućim trifluoroboratom ili Negishi unakrsnim udvajanjem sa potrebnim aminoalkil cinkatom a nakon toga deprotekcijom zaštitne grupe(a) pod standardnim uslovima se dobija pirolo[3,4-c]piridin-1-on Formule U-4 (R<2>=CH2N(R<8>)(R<9>)).

Postupak AC

[0483]

[0484] Postupak AC se odnosi na narednu sintetičku sekvencu za izradu jedinjenja Formule U-4, kako je prethodno opisano. U prvoj fazi, bromopiridin formule U-2 (na primer međuproizvod 4) se podvrgne udvajanju sa jedinjenjem formule C-2 uz paladijum ili bakar katalizu da se dobije jedinjenje formule AC-1 (Y=N(R<8>)Boc). U ovoj fazi R<5>i R<13>supstituenti U-2 treba da budu predstavljeni istom grupom kako se želi u finalnom produktu, Formula U-4, ili njenom zaštićenom varijantom. Jedinjenje formule AC-1 se podvrgne paladijum posredovanom udvajanju sa potrebnim amin ili boratnim estrom ili boratnom kiselinom ili tetrafluoroboratnom solju da se dobije jedinjenje formule U-3. U ovoj fazi, R<1>supstituent U-3 treba da bude predstavljen istom grupom kako se želi u finalnom produktu, Formula U-4, ili njenom zaštićenom varijantom. Reakcijom jedinjenja formule U-3 sa potrebnim aminom se dobija jedinjenje zaaštićenog pirolo[3,4-c]piridin-1-ona Formule U-4. Cepanjem zaštitne grupe(a) pod standardnim uslovima se dobija pirolo[3,4-c]piridin-1-on Formule U-4 (R<2>=CH2N(R<8>)(R<9>)).

Postupak AD

[0485]

[0486] Postupak AD se odnosi na narednu sintetičku sekvencu za izradu jedinjenja Formule U-4, kako je prethodno opisano. U prvoj fazi, bromopiridin formule U-2 (na primer međuproizvod 4) se podvrgne reakciji sa potrebnim aminom da se dobije jedinjenje formule X-3. U ovoj fazi R<5>i R<12>supstituenti U-2 treba da budu predstavljeni istom grupom kako se želi u finalnom produktu, Formula U-4, ili njenom zaštićenom varijantom. Udvajanjem jedinjenja formule X-3 sa jedinjenjem formule B-9 uz paladijum ili bakar katalizu se dobija jedinjenje Formule U-4 (Y=N(R<8>)Boc). U ovoj fazi, R<1>supstituent B-9 treba da bude predstavljen istom grupom kako se želi u finalnom produktu, Formula U-4, ili njenom zaštićenom varijantom. Cepanjem zaštitne grupe(a) pod standardnim uslovima se dobija pirolo[3,4-c]piridin-1-on Formule U-4 (R<2>=CH2N(R<8>)(R<9>)).

Postupak AE

[0487]

[0488] Postupak AE se odnosi na narednu sintetičku sekvencu za izradu jedinjenja Formule U-4, kako je prethodno opisano. U prvoj fazi, reakcijom jedinjenja formule AC-1 (Y=N(RB)Boc) sa potrebnim aminom se dobija jedinjenje formule AE-1. U ovoj fazi, R<5>i R<12>supstituenti treba da budu predstavljeni istom grupom kako se želi u finalnom produktu, Formula U-4, ili njenom zaštićenom varijantom. Jedinjenje formule AE-1 se podvrgne paladijum-posredovanom udvajanju sa potrebnim aminom ili boratnim estrom ili boratnom kiselinom ili tetrafluoroboratnom solju da se dobije jedinjenje zaštićenog pirolo[3,4-c]piridin-1-ona Formula U-4. Cepanjem zaštitne grupe(a) pod standardnim uslovima se dobija pirolo[3,4-c]piridin-1-on Formule U-4 (R<2>=CH2N(R<8>)(R<9>)).

Postupak AF

[0489]

[0490] Postupak AF se odnosi na narednu sintetičku sekvencu za izradu jedinjenja Formule U-4, kako je prethodno opisano. U prvoj fazi, udvajanjem jedinjenja formule O-5 sa bromopiridinom X-3 uz paladijum ili bakar katalizu se dobija jedinjenje formule AF-1. U ovoj fazi R<1>supstituent formule O-5 i R<5>, R<12>i R<13>supstituent(i) formule X-3 treba da budu predstavljeni istom grupom kako se želi u finalnom produktu, Formula U-4, ili njenom zaštićenom varijantom. Suzuki unakrsnim udvajanjem sa odgovarajućim trifluoroboratom ili Negishi unakrsnim udvajanjem sa odgovarajućim aminoalkil cinkatom a nakon toga deprotekcijom zaštitne grupe(a) pod standardnim uslovima se dobija pirolo[3,4-c]piridin-1-on Formule U-4 (R<2>=CH2N(R<8>)(R<9>)).

Postupak AG

[0491]

[0492] Postupak AG se odnosi na sintetičku sekvencu za izradu jedinjenja Formule AG-2, kako je prethodno opisano. U prvoj fazi, udvajanjem jedinjenja formule B-9 sa bromopiridinom AG-1 (pr. Q = O, Međuproizvod 5 ili Q = S, Međuproizvod 6) uz paladijum ili bakar katalizu se dobija jedinjenje formule AH-2. U ovoj fazi R<1>supstituent formule B-9 treba da bude predstavljen istom grupom kako se želi u finalnom produktu, Formula AG-2, ili njenom zaštićenom varijantom. Cepanjem zaštitne grupe(a) pod standardnim uslovima se dobija pirolo[3,4-c]piridin-1-on Formule AG-2 (R<2>=CH2N(R<8>)(R<9>)).

Postupak AH

[0494] Postupak AH se odnosi na narednu sintetičku sekvencu za izradu jedinjenja Formule II, kako je prethodno opisano. U prvoj fazi, R<1>supstituent formule O-5 treba da bude predstavljen istom grupom kako se želi u finalnom produktu, Formula II, ili njenom zaštićenom varijantom ili

i. Nikl-posredovanim dekarboksilativnim unakrsnim udvajanjem jedinjenja formule O-5 sa potrebnom kiselinom se dobija jedinjenje formule B-9 (Y = N(R<8>)Boc); ili

ii. Suzuki ili Molander unakrsnim udvajanjem sa postrebnom boratnom kiselom, boratnim estrom ili trifluoroboratnom solju se dobija jedinjenje formule B-9 (Y = N(R<8>)Boc); ili iii. Negishi unakrsnim udvajanjem sa postrebnim aminoalkil cinkatom se dobija jedinjenje formule B-9 (Y = N(R<8>)Boc); ili

iv. Karbonilacijom hlorida formule O-5, koristeći ugljen monoksid i metanol pod paladijum katalizom, se dobija estar koji se nakon toga redukuje (B-9, Y = OH) i aktivira kao mesilat (B-9, Y= OSO2CH3). U narednoj fazi ili

a. direktnom zamenom mesilata sa potrebnim primarnim aminom da se dobije odgovarajući sekundarni amin formule B-9, (Y= N(R<8>)(R<9>)); ili

b. azidacijom (B-9, Y= N3) i redukcijom azidne funkcionalne grupe pod standardnim uslovima da se dobije primarni amin formule B-9 (Y= NH2).

[0495] Udvajanjem jedinjenja formule B-9 sa bromopiridin triazolom B-10 uz paladijum ili bakar katalizu a nakon toga cepanjem zaštitne grupe(a) pod standardnim uslovima se dobija pirolo[3,4-c]piridin-1-on Formule II.

Postupak AI

[0497] Postupak AI se odnosi na narednu sintetičku sekvencu za izradu jedinjenja Formule U-4, kako je prethodno opisano. U prvoj fazi, bromopiridin formule X-3 se podvrgne udvajanju sa jedinjenjem formule C-2 (Y=N(R<8>)Boc) uz paladijum ili bakar katalizu. U ovoj fazi, R<5>, R<12>i R<13>supstituenti X-3 treba da budu predstavljeni istom grupom kako se želi u finalnom produktu, Formula U-4, ili njenom zaštićenom varijantom. Jedinjenje formule AI-1 se podvrgne paladijum-posredovanom udvajanju sa potrebnim aminom ili boratnim estrom ili tetrafluoroboratnom solju da se dobije jedinjenje Formule U-4. U ovoj fazi, R<1>supstituent treba da bude predstavljen istom grupom kako se želi u finalnom produktu, Formula U-4, ili njenom zaštićenom varijantom. Cepanjem zaštitne grupe(a) pod standardnim uslovima se dobija pirolo[3,4-c]piridin-1-on Formule U-4 (R<2>=CH2N(R<8>)(R<9>)).

Postupak AJ

[0498]

[0499] Postupak AJ se odnosi na narednu sintetičku sekvencu za izradu jedinjenja Formule II, kako je prethodno opisano. U prvoj fazi, jedinjenje formule B-9 se podvrgne udvajanju sa bromopiridinom formule B-11 uz paladijum ili bakar katalizu da se dobije jedinjenje formule AJ-1. U ovoj fazi R<1>supstituent B-9 i R<5>supstituent B-11 treba da budu predstavljeni istom grupom kako se želi u finalnom produktu, Formula II, ili njenom zaštićenom varijantom. Hidrazinolizom jedinjenja formule AJ-1 se dobija jedinjenje formule AJ-2. Nakon toga, hidrazin formule AJ-2 se podvrgne reakciji sa dimetilformamid dimetil acetalom da se dobije jedinjenje formule AJ-3. Kondenzacijom jedinjenja formule AJ-3 sa odgovarajućim aminom (na primer, R<12>-NH2) a nakon toga cepanjem zaštitne grupe(a) pod standardnim uslovima se dobija pirolo[3,4-c]piridin-1-on Formule U-3 (R<2>=CH2N(R<8>)(R<9>)). U toku ove faze, R<12>supstituent amina treba da bude predstavljen istom grupom kako se želi u finalnom produktu, Formula II, ili njenom zaštićenom varijantom.

Postupak AK

[0500]

[0501] Postupak AK se odnosi na narednu sintetičku sekvencu za izradu jedinjenja Formule II, kako je prethodno opisano. U Postupku AK, jedinjenje formule P-1 se podvrgne reduktivnoj aminaciji sa piridin aminom formule AA-1 a nakon toga cepanjem zaštitnih grupa se dobija jedinjenje Formule II. U ovoj fazi R<1>supstituent P-1 i R<5>i R<12>supstituenti formule AA-1 treba da budu predstavljeni istom grupom kako se želi u finalnom produktu, Formula II, ili njenom zaštićenom varijantom.

Reprezentativni primeri

Primer 1: 6-(dimetilamino)-4-[(metilamino)metil]-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3il]piridin-2-il}-2,3-di-hidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on

[0502]

Faza 1: terc-butil [(6-hlor-1-okso-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il)metil]metilkarbamat

[0503]

[0504] Mikrotalasna bočica se napuni sa terc-butil [(6-hlor-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il)metil]metilkarbamatom (224 mg, 0.72 mmol), 2-bromo-6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridinom (192 mg, 0.72 mmol), kalijum karbonatom (218 mg, 1.6 mmol), 2-(dimetilamino)etilaminom (0.04 mL, 0.36 mmol), bakar jodidom (34 mg, 0.18 mmol) i acetonitrilom (3 mL, 0.2 M). Reakcija se zatvori i zagreva 90 minuta u mikrotalasnoj pećnici na 120 °C. Smeša se neutrališe sa vodom i ekstrahuje sa DCM. Organski sloj se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrira i koncentruje. Dobijeni ostatak se prečisti koristeći fleš hromatografiju (0-10% metanola u 1:1 DCM/etil acetat) da se dobije naslovljeno jedinjenje kao beličasta čvrsta supstanca (210 mg, 59%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.74 (d, J=8.44 Hz, 1 H) 8.63 - 8.72 (m, 1 H) 8.19 (s, 1 H) 8.01 (t, J=8.01 Hz, 1 H) 7.80 (s, 1 H) 5.65 - 5.86 (m, 1 H) 5.26 (br.s., 2 H) 4.63 (br. s., 2 H) 3.04 (s, 3 H) 1.72 (d, J=5.26 Hz, 6 H) 1.40 (br. s., 9 H). m/z (APCl+) za (C24H28ClN7O3) 497.9 (M+H)<+>.

Faza 2: terc-butil {[6-(dimetilamino)-1-okso-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il]metil}metilkarbamat

[0505]

[0506] Boca se napuni sa terc-butil [(6-hlor-1-okso-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il)metil]metilkarbamatom (50 mg, 0.10 mmol), cezijum karbonatom (98.1 mg, 0.30 mmol), 2 M rastvorom dimetilamina u THF (0.11 mL, 0.21 mmol), 1,4-dioksanom (3 mL) i (2-dicikloheksilfosfino-2’,6’-diizopropoksi-1,1’-bifenil)[2-(2’-amino-1,1’-bifenil)]paladijum(II) metansulfonatom (8.4 mg, 0.01 mmol).

Reakcija se zagreje na 100 °C u atmosferi azota i ostavi da se meša 16 sati. Sirova smeša se kombinuje sa drugom sirovom serijom iz ove reakcije (210 mg skala). Kombinovani materijal se filtrira i ispere sa 1:10 metanol/DCM (30 mL). Filtrat se koncentruje da se dobije smeđa čvrsta supstanca, koja se prečisti hromatografijom na koloni (20:1 DCM/metanol) da se dobije naslovljeno jedinjenje kao žuta čvrsta supstanca (160 mg, prosečan prinos 61%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.72 (d, J=8.3 Hz, 1H), 8.40 (s, 1H), 8.09 (br s, 1H), 7.98 - 7.90 (m, 1H), 6.89 (s, 1H), 5.81 - 5.41 (m, 1H), 5.14 - 4.90 (m, 2H), 4.49 (s, 2H), 3.16 (s, 6H), 3.02 (s, 3H), 1.72 - 1.62 (m, 6H), 1.46 - 1.29 (m, 9H) m/z (APCl+) za (C26H34N8O3) 507.3 (M+H)<+>.

Faza 3: 6-(dimetilamino)-4-[(metilamino)metil]-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on

[0507]

[0508] Boca se napuni sa terc-butil {[6-(dimetilamino)-1-okso-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il]metil}metilkarbamatom (43 mg, 0.09 mmol) i etil acetatom (2 mL). Rastvor se ohladi na 5 °C i doda se 4 M rastvor HCl u etil acetatu (5 mL). Reakcija se ostavi da se zagreje na 20 °C i meša 1 sat kada reaktivna smeša postaje suspenzija. Suspenzija se filtrira i čvrste supstance se sakupe da se dobije naslovljeno jedinjenje kao žuta čvrsta supstanca (35 mg, 93%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.27 (br s, 2H), 9.20 (s, 1H), 8.66 (d, J=8.3 Hz, 1H), 8.15 (t, J=8.0 Hz, 1H), 7.96 (d, J=7.5 Hz, 1H), 6.95 (s, 1H), 5.48 (quin, J=6.8 Hz, 1H), 5.17 (s, 2H), 4.32 (br t, J=5.6 Hz, 2H), 3.18 (s, 6H), 2.73 (t, J=5.4 Hz, 3H), 1.61 (d, J=6.8 Hz, 6H). m/z (APCl+) za (C21H26N8O) 429.1 (M+Na)<+>.

Primer 2: 6-(azetidin-1-il)-4-[(metilamino)metil]-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on

[0509]

rimer 2

Faza 1: terc-butil {[6-(azetidin-1-il)-1-okso-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il]metil}metilkarbamat

[0510]

[0511] Boca se napuni sa terc-butil [(6-hlor-1-okso-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il)metil]metilkarbamatom (70.0 mg, 0.14 mmol), azetidin hidrohloridom (39 mg, 0.42 mmol), cezijum karbonatom (210 mg, 0.65 mmol), (2-dicikloheksilfosfino-2’,6’-diizopropoksi-1,1’-bifenil)[2-(2’-amino-1,1’-bifenil)]paladijum(II) metansulfonatom (11.8 mg, 0.014 mmol) i 1,4-dioksanom (2.8 mL, 0.05 M). Reakcija se zagreva 18 sati na 100 °C kada se dodaju nove količine azetidina (39 mg, 0.42 mmol) i (2-dicikloheksilfosfino-2’,6’-diizopropoksi-1,1’-bifenil)[2-(2’-amino-1,1’-bifenil)]paladijum(II) metansulfonata (11.8 mg, 0.014 mmol) i reakcija se zagreva 24 sata na 110 °C. Reaktivna smeša se koncentruje pod vakuumom i prečisti hromatografijom na koloni (0-10% metanola u 1:1 DCM/etil acetat) da se dobije naslovljeno jedinjenje kao beličasta čvrsta supstanca (45 mg, 62%). m/z (APCl+) za (C27H34N8O3) 519.95 (M+H)<+>.

Faza 2: 6-(azetidin-1-il)-4-[(metilamino)metil]-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on

[0512]

[0513] Boca se napuni sa terc-butil {[6-(azetidin-1-il)-1-okso-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il]metil}metilkarbamatom (45 mg, 0.09 mmol) i DCM (3 mL, 0.03 M). Doda se trifluorosirćetna kiselina (0.8 mL, 10 mmol) i reakcija se ostavi da se meša 2 sata na sobnoj temperaturi. Reakcija se azeotropira sa toluenom (2x) i dobijeni ostatak se prečisti pomoću SFC (HA-morfin 60 Å 5µm, 150 x 21.2 mm kolona na 40°C), eluira sa gradijentom 12-30% MeOH u CO2povećanja u toku 7 min. Pritisak se održava na 120 bara uz brzinu protoka od 85 mL/min, što se prati pomoću UV 224 nm) da se dobije naslovljeno jedinjenje (17 mg, 48%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.83 - 8.93 (m, 1 H) 8.50 - 8.62 (m, 1 H) 7.97 - 8.08 (m, 1 H) 7.83 - 7.93 (m, 1 H) 6.36 - 6.55 (m, 1 H) 5.51 (dt, J=13.42, 6.68 Hz, 1 H), 5.06 - 5.18 (m, 2 H) 3.87 - 3.98 (m, 4 H) 3.66 - 3.81 (m, 2 H) 2.24 - 2.32 (m, 5 H) 1.51 (d, J=6.60 Hz, 6 H). m/z (APCl+) za (C22H26N8O) 420.0 (M+H)<+>.

Primer 3: 6-[(2R,4R)-2,4-dimetilazetidin-1-il]-4-[(metilamino)metil]-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on

[0514]

mer 3

Faza 1: terc-butil [(6-[(2R,4R)-2,4-dimetilazetidin-1-il]-1-okso-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazo1-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il)metil]metilkarbamat

[0515]

[0516] Boca se napuni sa terc-butil [(6-hlor-1-okso-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il)metil]metilkarbamatom (100 mg, 0.20 mmol), (2R,4R)-2,4-dimetilazetidin hidrohloridom (45.6 mg, 0.40 mmol) i 1,4-dioksanom (4 mL, 0.05 M). Doda se cezijum karbonat (196 mg, 0.60 mmol) a nakon toga (2-dicikloheksilfosfino-2’,6’-diizopropoksi-1,1’-bifenil)[2-(2’-amino-1,1’-bifenil)]paladijum(II) metansulfonat (16.8 mg, 0.02 mmol). Reakcija se zagreva 16 sati na 100 °C u atmosferi azota. Smeša se razblaži sa etil acetatom (50 mL) i ispere sa slanim rastvorom (3 x 30 mL).

Organski sloj se suši preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrira i koncentruje pod vakuumom da se dobije ostatak koji se prečisti preparativnom TLC (silika gel, 1:4 petrol etar/etil acetat, dva puta) da se dobije naslovljeno jedinjenje kao beličasta čvrsta supstanca (40 mg, 36%). TLC Rf = 0.3 (EtOAc, UV vizuelizacija).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.95 (s, 1H), 8.60 (d, J=8.31 Hz, 1H), 8.05-8.15 (m, 1H), 7.88-7.97 (m, 1H), 6.53 (s, 1H), 5.51 (br s, 1H), 5.06 (br d, J=19.32 Hz, 2H), 4.32-4.53 (m, 4H), 3.57 (s, 1H),

2.94 (s, 3H), 2.08 (br t, J=6.36 Hz, 2H), 1.56-1.70 (m, 6H), 1.37 (br s, 11H), 1.09-1.28 (m, 6H). m/z za (C29H38N8O3) 569.4 (M+Na)<+>.

Faza 2: 6-[(2R,4R)-2,4-dimetilazetidin-1-il]-4-[(metilamino)metil]-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on

[0517]

[0518] Boca se napuni sa terc-butil [(6-[(2R,4R)-2,4-dimetilazetidin-1-il]-1-okso-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4- triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il)metil]metilkarbamatom (40 mg, 0.07 mmol) i DCM (3 mL, 0.02) i ohladi na ispod 10 °C. se U kapima se dodaje trifluorosirćetna kiselina (0.06 mL, 0.73 mmol) i reakcija ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu. Nakon 2 sata mešanja reakcija se doda u ledeno hladnu vodu (20 mL). Dodaje se čvrsti natrijum bikarbonat dok se rastvor ne podesi na pH = 9. Vodeni sloj se ekstrahuje sa DCM (3 x 20 mL). Kombinovani organski sloj se suši preko natrijum sulfata, filtrira i koncentruje pod vakuumom. Dobijeni ostatak se prečisti hromatografijom (0-10% metanol u DCM) da se dobije naslovljeno jedinjenje kao žuta čvrsta supstanca (20 mg, 61 %).

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.83 - 8.93 (m, 1 H) 8.50 - 8.62 (m, 1 H) 7.97 - 8.08 (m, 1 H) 7.83 - 7.93 (m, 1 H) 6.36 - 6.55 (m, 1 H) 5.51(dt, J=13.42, 6.68 Hz, 1 H) 5.06 - 5.18 (m, 2 H) 3.87 - 3.98 (m, 4 H) 3.66 - 3.81 (m, 2 H) 2.24 - 2.32 (m, 6 H) 1.51 (d, J=6.60 Hz, 6 H). m/z (APCl+) za (C24H30N8O) 447.2 (M+H)<+>.

Primer 4: 6-(dietilamino)-4-[(metilamino)metil]-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on

[0519]

mer 4

Faza 1: terc-butil {[6-(dietilamino)-1-okso-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il]metil}metilkarbamat

[0520]

[0521] Boca se napuni sa terc-butil [(6-hlor-1-okso-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il)metil]metilkarbamatom (100 mg, 0.20 mmol), dietil aminom (0.04 mL, 0.40 mmol), cezijum karbonatom (229 mg, 0.70 mmol) i 1,4-dioksanom (4 mL, 0.05 M). Doda se (2-dicikloheksilfosfino-2’,6’-diizopropoksi- 1,1’-bifenil)[2-(2’-amino-1,1’-bifenil)]paladijum(II) metansulfonat (16.8 mg, 0.02 mmol).

Reakcija se degasira sa azot gasom (tri puta) i zagreva 16 sati na 100 °C kada se dodaju dietil amin (0.04 mL, 0.40 mmol) i (2-dicikloheksilfosfino-2’,6’-diizopropoksi-1,1’-bifenil)[2-(2’-amino-1,1’-bifenil)]paladijum(II) metansulfonat (16.8 mg, 0.02 mmol). Reakcija se degasira sa azot gasom (tri puta) i zagreva 16 sati na 100 °C. Smeša se sipa u vodu (15 mL) i ekstrahuje sa etil acetatom (2 x 10 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (15 mL), suše preko natrijum sulfata, filtriraju i koncentruju pod vakuumom da se dobije sirovo jedinjenje kao žuta guma (100 mg). Sirovi materijal se prečisti preparativnom TLC (20:1 etil acetat/metanol, Rf = 0.5 u etil acetatu, UV vizuelizacija) da se dobije žuta čvrsta supstanca (60 mg). Jedinjenje se dalje prečisti preparativnom HPLC koristeći vodu (0.04% NH3H2O 10 mM NH4HCO3) kao mobilnu fazu na Waters Xbridge Prep PBD C18 150*30 10 µm koloni. Ovako se dobija naslovljeno jedinjenje kao žuta čvrsta supstanca (40 mg, 37%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.74 (d, J=7.8 Hz, 1H), 8.42 (s, 1H), 8.15 - 8.06 (m, 1H), 7.98 - 7.93 (m, 1H), 6.85 (s, 1H), 5.78 - 5.45 (m, 1H), 5.09 (br s, 2H), 4.48 (s, 2H), 3.60 (q, J=7.1 Hz, 4H), 3.08 - 3.02 (m, 3H), 1.74 - 1.66 (m, 6H), 1.46 - 1.30 (m, 9H), 1.23 (t, J=7.0 Hz, 6H). m/z (APCl+) za (C28H38N8O3) 535.4 (M+H)<+>.

Faza 2: 6-(dietilamino)-4-[(metilamino)metil]-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on

[0522]

[0523] Boca se napuni sa terc-butil {[6-(dietilamino)-1-okso-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il]metil}metilkarbamatom (40 mg, 0.075 mmol) i etil acetatom (5 mL, 0.02 M) i ohladi na 0 °C. U kapima se dodaje 4 M rastvor hlorovodonične kiseline u etil acetatu (5 mL, 20 mmol). Rastvor se ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu i meša 1 sat. Doda se metanol (3 mL) i reakcija se meša 1 sat i smeša se koncentruje pod vakuumom. Dobijeni ostatak se liofilizira 16 sati da se dobije naslovljeno jedinjenje kao žuta čvrsta supstanca (28 mg, 79%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.76 (br s, 1H), 9.60 (br s, 2H), 8.69 (brd, J=8.2 Hz, 1H), 8.18 (br t, J=7.6 Hz, 1H), 7.98 (br d, J=7.2 Hz, 1H), 6.85 (s, 1H), 5.65 - 5.48 (m, 1H), 5.22 (br s, 2H), 4.25 (br s, 2H), 3.63 (br d, J=6.6 Hz, 4H), 2.77 - 2.58 (m, 3H), 1.65 (br d, J=6.1 Hz, 6H), 1.15 (br t, J=6.5 Hz, 6H)].m/z (APCl+) za (C23H30N8O) 435.3 (M+H)<+>.

Primer 5: 6-ciklopropil-4-[(metilamino)metil]-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazo1-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on

[0524]

rimer 5

Faza 1: terc-butil [(6-ciklopropil-1-okso-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il)metil]metilkarbamat

[0525]

[0526] Boca se napuni sa terc-butil [(6-hlor-1-okso-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il)metil]metilkarbamatom (100 mg, 0.20 mmol), kalijum ciklopropiltrifluoroboratom (59.4 mg, 0.40 mmol), paladijum acetatom (9.0 mg, 0.04 mmol), di(1-adamantil)-n-butilfosfinom (21.6 mg, 0.06 mmol), cezijum karbonatom (196 mg, 0.60 mmol), vodom (0.25 mL) i toluenom (2.5 mL, 0.08 M). Reakcija se zagreva 20 sati na 110 °C, kada se reakcija razblaži sa etil acetatom (50 mL). Rastvor se ispere sa slanim rastvorom (3 x 30 mL), suši preko natrijum sulfata, filtrira i koncentruje. Dobijeni ostatak se prečisti hromatografijom na koloni (0-5% metanol u DCM) da se dobije naslovljeno jedinjenje kao beličasta čvrsta supstanca (80 mg, 79%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.95 (s, 1H), 8.62 (d, J=7.95 Hz, 1H), 8.12 (t, J=8.07 Hz, 1H), 7.95 (d, J=7.46 Hz, 1H), 7.67 (s, 1H), 5.50 (br s, 1H), 5.20(br s, 2H), 4.55 (s, 2H), 2.90 (s, 3H), 2.26-2.35 (m, 1H), 1.58 (br s, 6H), 1.18-1.45 (m, 9H), 0.93-1.05 (m, 4H)). m/z (APCl+) za (C27H33N7O3) 404.2 (M+H)<+>.

Faza 2: 6-ciklopropil-4-[(metilamino)metil]-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on

[0527]

[0528] Boca se napuni sa terc-butil [(6-ciklopropil-1-okso-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il)metil]metilkarbamatom (80 mg, 0.16 mmol) i DCM (3 mL, 0.5 M). Rastvor se ohladi na ispod 10 °C i u kapima se dodaje TFA (0.12 mL, 1.6 mmol). Reakcija se ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu i meša 2 sata. Rastvor se razblaži sa ledenom vodom (20 mL) i dodaje se čvrsti natrijum bikarbonat sve dok vodeni sloj ne dostigne ~ pH 9. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ekstrahuje sa DCM (3 x 20 mL). Kombinovani organski sloj se ispere sa slanim rastvorom, suši preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrira i koncentruje pod vakuumom da se dobije sirovi ostatak. Ovaj materijal se prečisti hromatografijom na koloni (0-10% metanol u DCM) da se dobije naslovljeno jedinjenje kao beličasta čvrsta supstanca (30 mg, 47%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.96 (s, 1H), 8.63 (d, J=8.31 Hz, 1H), 8.11 (t, J=8.01 Hz, 1H), 7.94-8.00 (m, 1H), 7.60 (s, 1H), 5.58 (quin, J=6.76 Hz, 1H), 5.28 (s, 2H), 3.93 (s, 2H), 2.35 (s, 3H), 2.25-2.32 (m, 1H), 1.59 (d, J=6.72 Hz, 6H), 0.97-1.04 (m, 4H). m/z (APCl+) za (C22H25N7O) 404.2 (M+H)<+>.

Primer 6: 4-[(metilamino)metil]-6-[metil(propan-2-il)amino]-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on

[0529]

r 6

Faza 1: terc-butilmetil[(6-[metil(propan-2-il)amino]-1-okso-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}- 2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il)metil]karbamat

[0530]

[0531] Boca se napuni sa terc-butil [(6-hlor-1-okso-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il)metil]metilkarbamatom (96 mg, 0.19 mmol), N-metilizopropilaminom (0.1 mL, 0.96 mmol), cezijum karbonatom (188 mg, 0.58 mmol), (2-dicikloheksilfosfino-2’,6’-diizopropoksi-1,1’-bifenil)[2-(2’- amino-1,1’-bifenil)]paladijum(II) metansulfonatom (16 mg, 0.019 mmol) i 1,4-dioksanom (3.9 mL). Reakcija se zagreva 18 sati na 100 °C. Smeša se ohladi na sobnu temperaturu, filtrira kroz ploču Celite® i ispere sa 10% metanolom u DCM. Filtrat se koncentruje pod vakuumom i dobijeni materijal se prečisti hromatografijom na koloni (0-10% metanol u 1:1 smeši DCM/etil acetat) da se dobije naslovljeno jedinjenje kao bela čvrsta supstanca (60 mg, 58%). m/z (APCl+) za (C28H38N8O3) 535.3 (M+H)<+>.

Faza 2: 4-[(metilamino)metil]-6-[metil(propan-2-il)amino]-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}- 2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on

[0532]

[0533] Boca se napuni sa terc-butil metil[(6-[metil(propan-2-il)amino]-1-okso-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4- triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il)metil]karbamatom (60 mg, 0.11 mmol) i DCM (6 mL). Doda se 4 N rastvor vodonik hlorida u 1,4-dioksanu (2 mL, 8.0 mmol) i rastvor se ostavi da se meša 1 sat na sobnoj temperaturi. Rastvor se delimično koncentruje pod vakuumom i nakon toga azeotropira sa toluenom (2x). Dobijeni materijal se prečisti koristeći SFC (DCPak SFC-B 150 x 21.2 mm, 5 µm kolonu na 40 °C, uz eluiranje sa gradijentom 15-35% metanol u ugljen dioksidu uz porast u toku 7 min, uz pritisak od 120 bara sa brzinom protoka od 85 mL/min) da se dobije naslovljeno jedinjenje kao čvrsta supstanca (28.9 mg, 59%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.95 (s, 1 H) 8.63 (d, J=7.95 Hz, 1 H) 8.10 (t, J=8.01 Hz, 1 H) 7.95 (d, J=7.21 Hz, 1 H) 6.81 (s, 1 H) 5.54 (dt, J=13.36, 6.71 Hz, 1 H) 5.15 (s, 2 H) 4.89 - 5.05 (m, 1 H) 3.98 (s, 2 H) 2.89 (s, 3 H) 2.48 (s, 3 H) 1.59 (d, J=6.72 Hz, 6 H) 1.16 (d, J=6.72 Hz, 6H).m/z (APCl+) za (C23H30N8O) 435.0 (M+H)<+>

Primer 7: 4-[(metilamino)metil]-6-(1-metilciklopropil)-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on

[0534]

imer 7

Faza 1: 4-[(metilamino)metil]-6-(1-metilciklopropil)-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on

[0535]

[0536] Boca se napuni sa terc-butil [(6-hlor-1-okso-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il)metil]metilkarbamatom (88 mg, 0.18 mmol), 4,4,5,5-tetrametil-2-(1-metilciklopropil)-1,3,2-dioksaborolanom (43 mg, 0.26 mmol), paladijum acetatom (7.9 mg, 0.035 mmol), di(1-adamantil)-n-butil-fosfinom (19 mg, 0.053 mmol), cezijum karbonatom (172 mg, 0.53 mmol), toluenom (4 mL) i vodom (0.4 mL).

Smeša se degasira 8 minuta sa azotom, nakon toga zagreva 4 sata na 110 °C. Reaktivna smeša se filtrira kroz ploču Celite® i koncentruje pod vakuumom. Dobijeni materijal se prečisti hromatografijom na koloni (0-80% etil acetat u heptanu) da se dobije svetlo žuta čvrsta supstanca (96 mg), koja se direktno prenese u narednu fazu. Boca se napuni sa izdvojenom čvrstom supstancom, DCM (2 mL) i trifluorosirćetnom kiselinom (0.4 mL). Reakcija se ostavi da se meša 2 sata na sobnoj temperaturi. Smeša se koncentruje i prečisti reverzno-faznom HPLC (5-100% mobilna faze B u mobilnoj fazi A, mobilna faza A: 0.05% TFA u vodi (v/v), mobilna faza B: 0.05% TFA u acetonitrilu (v/v), Waters Sunfire C1819x100, 5 µm kolona, brzina protoka: 25 mL/min) da se dobije naslovljeno jedinjenje kao čvrsta supstanca (94 mg, 90% preko 2 faze).<1>H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 8.95 (s, 1 H) 8.63 (d, J=8.44 Hz, 1 H) 8.14 (t, J=7.98 Hz, 1 H) 7.95 (d, J=7.70 Hz, 1 H) 7.71 (s, 1 H) 5.43 (quin, J=6.60 Hz, 1 H) 5.23 (s, 2 H) 4.48 (s, 2 H) 2.77 (s, 3 H) 1.57 - 1.62 (m, 9 H) 1.42 - 1.47 (m, 2 H) 0.92 - 0.97 (m, 2 H). m/z (APCl+) za (C23H27N7O) 418.2 (M+H)<+>.

Primer 8: 6-[(2R,5R)-2,5-dimetilpirolidin-1-il]-4-[(metilamino)metil]-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on

[0537]

Faza 1: terc-butil [(6-[(2R,5R)-2,5-dimetilpirolidin-1-il]-1-okso-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il)metil]metilkarbamat

[0538]

[0539] Boca se napuni sa terc-butil [(6-hlor-1-okso-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il)metil]metilkarbamatom (100 mg, 0.20 mmol), (2R,5R)-2,5-dimetilpirolidin HCl solju (55 mg, 0.40 mmol), cezijum karbonatom (196 mg, 0.60 mmol), 1,4-dioksanom (3 mL) i (2-dicikloheksilfosfino-2’,6’-diizopropoksi-1,1’-bifenil)[2-(2’-amino-1,1’-bifenil)]paladijum(II) metansulfonatom (17 mg, 0.02 mmol).

Atmosfera se izmeni azot gasom i reakcija se zagreva 40 sati na 100 °C. Smeša se ohladi na sobnu temperaturu i razblaži sa DCM (50 mL). Rastvor se ispere sa slanim rastvorom (30 mL), suši preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrira i koncentruje da se dobije žuta guma. Sirovi materijal se prečisti preparativnom TLC (1:4 petrol etar/etil acetat) da se dobije naslovljeno jedinjenje kao svetlo zelena čvrsta supstanca (10 mg, 9%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.73 (d, J=8.2 Hz, 1H), 8.43 (s, 1H), 8.11 (br s, 1H), 8.00 - 7.90 (m, 1H), 6.76 (s, 1H), 5.82 - 5.47 (m, 1H), 5.15 -4.93 (m, 2H), 4.63 - 4.40 (m, 2H), 3.05 (br s, 3H), 2.30 (br s, 2H), 1.73 - 1.66 (m, 8H), 1.45 - 1.30 (m, 11H), 1.21 (d, J=6.1 Hz, 6H). m/z (APCl+) za (C30H40N8O3) 561.4 (M+H)<+>.

Faza 2: 6-[(2R,5R)-2,5-dimetilpirolidin-1-il]-4-[(metilamino)metil]-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on

[0540]

[0541] Boca se napuni sa terc-butil [(6-[(2R,5R)-2,5-dimetilpirolidin-1-il]-1-okso-2-{6-[4-(propan-2-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il)metil]metilkarbamatom (10 mg, 0.018 mmol) i DCM (3 mL) i ohladi na 0 °C. U kapima se dodaje trifluorosirćetna kiselina (0.2 mL). Rastvor se ostavi da se zagreje na 25 °C i meša 3 sata. Smeša se razblaži sa ledenom vodom (10 mL) i pH podesi na pH = 9 dodavanjem čvrstog natrijum karbonata. Slojevi se razdvoje a vodeni sloj se ekstrahuje sa DCM (3 x 20 mL). Kombinovani organski sloj se ispere sa slanim rastvorom (2 x 30 mL), suši preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrira i koncentruje da se dobije naslovljeno jedinjenje kao žuta čvrsta supstanca (8 mg, 97%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.96 (s, 1H), 8.62 (d, J=7.9 Hz, 1H), 8.14 - 8.06 (m, 1H), 7.95 (d, J=7.1 Hz, 1H), 6.64 (s, 1H), 5.55 (td, J=6.7, 13.3 Hz,1H), 5.21 - 5.08 (m, 2H), 4.27 (br s, 1H), 3.95 - 3.85 (m, 2H), 2.43 (s, 3H), 2.23 (br s, 2H), 1.65 (br d, J=5.5 Hz, 2H), 1.58 (d, J=6.7 Hz, 6H), 1.36 - 1.28 (m,2H), 1.17 - 1.07 (m, 6H). m/z (APCl+) za (C25H32N8O) 483.3 (M+Na)<+>.

Primer 9: 6-(dietilamino)-2-[6-(4-etil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-4-[(metilamino)metil]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on

[0542]

imer 9

Faza 1: 2-bromo-6-(4-etil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin

[0543]

[0544] Boca se napuni sa N’-[(6-bromopiridin-2-il)karbonil]-N,N-dimetilhidrazonformamidom (2.0 g, 7.4 mmol), etilaminom (0.5 mL, 333 mg, 7.4 mmol), sirćetnom kiselinom (3 mL) i acetonitrilom (15 mL, 0.5 M). Rastvor se zagreva 16 sati na 95 °C. Reakcija se razblaži sa etil acetatom (10 mL) i vodom (10 mL). Dodaje se čvrsti kalijum karbonat dok pH vodenog sloja ne bude ~ pH 8. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ekstrahuje sa etil acetatom (3 x 30 mL). Kombinovani organski sloj se ispere sa slanim rastvorom (30 mL), suši preko natrijum sulfata, filtrira i koncentruje da se dobije sirovi produkt (1.8 g) kao žuta čvrsta supstanca. Sirovi materijal se razblaži sa etil acetatom (0.3 mL) i petrol etrom (3 mL), meša 5 minuta i filtrira. Ovako se dobija naslovljeno jedinjenje kao bledo žuta čvrsta supstanca (1.5 g, 80%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.32 (d, J=7.8 Hz, 1H), 8.24 (s, 1H), 7.70 (t, J=7.8 Hz, 1H), 7.54 (d, J=7.8 Hz, 1H), 4.59 (q, J=7.3 Hz, 2H), 1.52 (t, J=7.2 Hz, 3H). m/z (APCl+) za (C9H9BrN4), 252.7 (M+H)<+>.

Faza 2: terc-butil ({6-hlor-2-[6-(4-etil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)metilkarbamat

[0545]

[0546] Boca se napuni sa terc-butil ((6-hlor-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il)metil)(metil)karbamatom (100 mg, 0.32 mmol), 2-bromo-6-(4-etil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridinom (97.4 mg, 0.39 mmol), bakar jodidom (15.3 mg, 0.08 mmol), kalijum karbonatom (97.5 mg, 0.71 mmol) i acetonitrilom (5 mL, 0.06 M). Kroz rastvor se 5 minuta propuštaju mehurići azot gasa, boca zatvori i zagreva 1.5 sat na 120 °C. Reakcija se ohladi na sobnu temperaturu i razblaži sa DCM (100 mL). Rastvor se ispere sa slanim rastvorom (20 mL), suši preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrira i koncentruje da se dobije žuta guma (200 mg). Sirovi materijal se prečisti hromatografijom na koloni (10:1 DCM/MeOH) da se dobije naslovljeno jedinjenje kao bela čvrsta supstanca (120 mg, 77%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.69 (d, J=8.5 Hz, 1H), 8.28 (s, 1H), 8.17 (brd, J=6.8 Hz, 1H), 7.97 (t, J=8.0 Hz, 1H), 7.79 (s, 1H), 5.24 (br s, 2H), 4.72 (br s, 2H), 4.68 - 4.63 (m, 2H), 2.98 (s, 3H), 1.47 - 1.28 (m, 12H). m/z (APCl+) za (C23H26ClN7O) 484.1 (M+H)<+>.

Faza 3: terc-butil ({6-(dietilamino)-2-[6-(4-etil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)metilkarbamat

[0548] Boca se napuni sa terc-butil ({6-hlor-2-[6-(4-etil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)metilkarbamatom (120 mg, 0.25 mmol), cezijum karbonatom (242 mg, 0.74 mmol), dietilaminom (0.05 mL, 0.52 mmol) i 1,4-dioksanom (4 mL, 0.06 M). Doda se (2-dicikloheksilfosfino-2’,6’-diizopropoksi-1,1’-bifenil)[2-(2’-amino-1,1’-bifenil)]paladijum(II) metansulfonat (20.7 mg, 0.025 mmol) i reaktivna smeša se zagreva 16 sati na 100 °C u atmosferi azota. Reaktivna smeša se razblaži sa etil acetatom (50 mL) i ispere sa slanim rastvorom (3 x 30 mL). Organski sloj se suši preko natrijum sulfata, filtrira i koncentruje da se dobije sirovi ostatak. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom na koloni (10:1 DCM/metanol) da se dobije naslovljeno jedinjenje (60 mg, 46%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.78 - 8.69 (m, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.17 - 8.08 (m, 1H), 7.93 (t, J=7.9 Hz, 1H), 6.83 (s, 1H), 5.10 - 4.92 (m, 2H), 4.72 (br s, 2H), 4.50 (br s, 2H), 3.59 (q, J=7.3 Hz, 4H), 2.99 (br s, 3H), 1.46 - 1.31 (m, 11H), 1.21 (t, J=7.0 Hz, 6H). m/z (APCl+) za (C27H36N8O3) 521.3 (M+H)<+>.

Faza 4: 6-(dietilamino)-2-[6-(4-etil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-4-[(metilamino)metil]-2,3-dihidro-1/7-pirolo[3,4-c]piridin-1-on

[0549]

[0550] Boca se napuni sa terc-butil ({6-(dietilamino)-2-[6-(4-etil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)metilkarbamatom (60 mg, 0.12 mmol) i etil acetatom (2 mL, 0.06 M) i reakcija se ohladi na ispod 5 °C. Doda se 4 M rastvor hlorovodonične kiseline u etil acetatu (5 mL, 20 mmol) i reakcija se ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu i meša 1 sat. Reakcija se koncentruje da se dobije žuta čvrsta supstanca. Sirovi materijal se prečisti preparativnom HPLC koristeći vodu (0.05% HCl)/acetonitril na PhenomenexSynergi C18 150 * 30 mm *4 µm koloni da se dobije naslovljeno jedinjenje kao žuta čvrsta supstanca (30 mg, 57%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.28 (brd, J=5.8 Hz, 2H), 9.10 (s, 1H), 8.66 (d, J=8.3 Hz, 1H), 8.15 (t, J=8.0 Hz, 1H), 8.02 (d, J=7.5 Hz, 1H), 6.87 (s, 1H), 5.17 (s, 2H), 4.67 (q, J=7.0 Hz, 2H), 4.32 (t, J=5.8 Hz, 2H), 3.65 (q, J=6.8 Hz, 4H), 2.73 (t, J=5.3 Hz, 3H), 1.52 (t, J=7.2 Hz, 3H), 1.16 (t, J=6.9 Hz, 6H).m/z (APCl+) za (C22H28N8O) 442.9 (M+Na)<+>.

[0551] Naredna jedinjenja iz pronalaska su izrađena modifikacijama postupaka koji su ovde navedeni kao primer. Izuzev kada je drugačije navedeno, sva jedinjenja koja imaju asimetrične centre su izrađena i/ili izolovana kao pojedinačni enantiomer koji ima poznatu relativnu konfiguraciju. Jedinjenja označena kao "nepoznata apsolutna stereohemija" su obično izrađena od racematnih međuproizvoda i razdvojena u pojedinačne enantiomere odgovarajućim asimetričnim preparativnom SFC postupkom pre karakterizacije i testiranja. Kada je apsolutna stereohemija nepoznata za par enantiomera, stereohemija predstavljena u Tabeli 1 je označena na bazi signala optičke rotacije ([α]D<20>) i relativne biološke aktivnosti, analogno sa jedinjenjima koji imaju poznatu apsolutnu konfiguraciju. Jedinjenja označena "poznata apsolutna stereohemija" se obično izrađuju od asimetričnih međuproizvoda koji imaju poznatu stereohemiju.

[0552] Izabrana jedinjenja i njihovi odgovarajući rezultati karakterizacije su predstavljeni u niže datoj Tabeli 1, pri čemu je postupka korišćen za izradu jedinjenja dat u zagradi ispod broja primera:

Tabela 1

n l

Primer 46: 6-(dimetilamino)-4-[(metilamino)metil]-2-[6-(4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on

[0553]

Faza 1: terc-butil ({6-(dimetilamino)-1-okso-2-[6-(4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)metilkarbamat

[0554]

[0555] Smeša Međuproizvoda 3 (1.33 g, 4.15 mmol), Međuproizvoda 13 (1.16 g, 4.36 mmol), Pd2(dba)3(380 mg, 0.415 mmol), ksantfosa (480 g, 0.830 mmol) i K3PO4(2.64 g, 12.5 mmoL) u 1,4-dioksanu (46 mL) se degasira 5 min sa N2i meša 16 h na 85 °C. Reakcija se analizira pomoću LCMS, koja pokazuje da je početni materijal utrošen. Smeša se ohladi na sobnu temperaturu, filtrira kroz ploču Celite® i koncentruje pod vakuumom. Ostatak se razmuti sa EtOAc (15 mL) u toku 10 min a čvrste supstance se sakupe filtriranjem. Filter pogača se ispere sa EtOAc (4x) i nakon toga suši pod vakuumom. Ostatak se prečisti fleš hromatografijom (40 g SiO2, 0-100% EtOAc/heptan a nakon toga 10% MeOH/EtOAc) da se dobije svetlo-žuta čvrsta supstanca. Materijal se rastvori u 1:9 EtOH/DCM i tretira sa Ultrapure Si-Thio SiO2(1.59 g). Smeša se meša 2 h i filtrira. Filter pogača se ispere sa 1:9 EtOH/DCM i kombinovani filtrat se koncentruje pod vakuumom. Ostatak se rastvori u 1:9 EtOH/DCM i tretira sa Ultra-pure Si-Thio SiO2(1.32 g). Smeša se meša 3 h i nakon toga filtrira. Filter pogača se ispere sa 1:9 EtOH/DCM i kombinovani filtrat se koncentruje.

Ostatak se rastvori u 1:9 EtOH i tretira sa Ultra-pure Si-Thio SiO2(1.22 g). Smeša se meša 16 h i nakon toga filtrira. Filter pogača se ispere sa 1:9 EtOH/DCM. Kombinovani filtrat se koncentruje do sušenja da se dobije terc-butil ({6-(dimetilamino)-1-okso-2-[6-(4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)metilkarbamat (2.08 g, 95% prinos) kao svetlo-žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.74 (s, 1H), 8.61 (d, J=8.4 Hz, 1H), 8.09 (t, J=8.0 Hz, 1H), 7.97 (d, J=7.6 Hz, 1H), 6.82 (s, 1H), 5.05 (d, J=11.7 Hz, 2H), 4.56 (s, 2H), 4.52 - 4.46 (m, 2H), 3.09 (s, 6H), 2.92 (s, 3H), 1.88 -1.76 (m, 2H), 1.40 - 1.19 (m, 9H), 0.87 (t, J=7.4 Hz, 3H); LCMS m/z (ESI+) za (C26H34N8O3), 507.4 (M+H)<+>.

Alternativna Faza 1: terc-butil ({6-(dimetilamino)-1-okso-2-[6-(4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)metilkarbamat

[0556] U rastvor terc-butil {[6-(dimetilamino)-4-(dimetilkarbamoil)-3-formilpiridin-2-il]metil}metilkarbamata (3e) (500 mg, 1.37 mmol) i 6-(4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-amina (Međuproizvod 16) (293 mg, 1.44 mmol) u MeOH (9.1 mL) se doda dekaboran (62.0 mg, 0.508 mmol). Smeša se meša 16 h na sobnoj temperaturi i nakon toga se doda rastvor NaOMe (25% u MeOH, 5.02 mL, 22.0 mmol). Smeša se meša 2 h na 65

°C, da se dobije žuta suspenzija. Doda se nova količina NaOMe (0.5 M u MeOH, 13.7 mL, 6.86 mmol) i smeša se meša 3 h na 65 °C. Reakcija se ohladi na sobnu temperaturu i žuta čvrste susptanca se sakupi filtriranjem. Filter pogača se ispere sa H2O (2x3 mL) i suši pod vakuumom da se dobije terc-butil ({6-(dimetil-amino)-1-okso-2-[6-(4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)metil-karbamat (518 mg, 75% prinos) kao svetlo žuta čvrsta supstanca. LCMS m/z (ESI+) za (C26H34N8O3), 507.5 (M+H)<+>.

Faza 2: 6-(dimetilamino)-4-[(metilamino)metil]-2-[6-(4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on

[0557]

[0558] U suspenziju terc-butil ({6-(dimetilamino)-1-okso-2-[6-(4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)metilkarbamata (1.96 g, 3.87 mmol) u MeOH (20 mL) se polako, na 0 °C, dodaje rastvor HCl (4.0 M u 1,4-dioksanu, 19.3 mL, 77.4 mmoL). Smeša se meša 3 h na 0 °C i nakon toga ostavi da se polako zagreje na sobnu temperaturu. Smeša se meša 16 h na sobnoj temperaturi. Reakcija se koncentruje do sušenja. Čvrste supstance se rastvore u 1:9 MeOH/DCM (80 mL), ohlade do 0 °C i nakon toga mešaju 20 min sa zasićenim vodenim rastvorom Na2CO3(25 mL). Smeša se razdvoji. Vodeni sloj se ekstrahuje sa 1:19 MeOH/DCM (3x50 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa H2O (2x30 mL), suše preko Na2SO4, filtriraju i koncentruju. Čvrste supstance se razmute u EtOAc na 40 °C u toku 40 min. Čvrste supstance se sakupe filtriranjem. Filter pogača se ispere sa EtOAc i nakon toga suši 16 h u vakuumskoj pećnici na 30 °C da se dobije 6-(dimetilamino)-4-[(metilamino)metil]-2-[6-(4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on (1.42 g, 90% prinos) kao žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.73 (s, 1H), 8.62 (dd, J=8.4, 1.0 Hz, 1H), 8.11 - 8.04 (m, 1H), 8.00 (dd, J=7.7, 1.0 Hz, 1H), 6.78 (s, 1H), 5.14 (s, 2H), 4.57 (dd, J=7.9, 6.5 Hz, 2H), 3.80 (s, 2H), 3.09 (s, 6H), 2.35 (s, 3H), 1.88 (h, J=7.4 Hz, 2H), 0.93 (t, J=7.4 Hz, 3H); LCMS m/z (ESI+) za (C21H26N8O), 407.3 (M+H)<+>.

Primer 55: 4-[(metilamino)metil]-6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]-2-[6-(4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]- 2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on

[0559]

Faza 1: terc-butil ({6-hlor-1-okso-2-[6-(4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin- 4-il)metil)metilkarbamat

[0560]

[0561] U rastvor Međuproizvoda 2 (430 mg, 1.38 mmol), Međuproizvoda 13 (368 mg, 1.38 mmol), K2CO3(419 mg, 3.03 mmol) i N,N-dimetiletilendiamina (60.7 mg, 0.690 mmol) u MeCN (10.0 mL) se doda CuI (65.7 mg, 0.345 mmol). U smešu se u mehurićima uvodi N2u toku 5 min i nakon toga se smeša meša 1.5 h na 120 °C uz zračenje mikrotalasima. LCMS analiza pokazuje da je početni materijal utrošen. Reakcija se ohladi na sobnu temperaturu i doda se H2O (10 mL). Smeša se meša 15 min i nakon toga filtrira. Filter pogača se ispere sa H2O (3x3 mL) i suši pod vakuumom. Ostatak se prečisti fleš hromatografijom (12 g SiO2, EtOAc) da se dobije terc-butil ({6- hlor-1-okso-2-[6-(4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)metil-karbamat (430 mg, 63% prinos) kao žuto staklo.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 8.68 (d, J=8.4 Hz, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.14 (s, 1H), 8.02 - 7.92 (m, 1H), 7.78 (s, 1H), 5.14 (s, 2H), 4.76 - 4.50 (m, 4H), 2.97 (s, 3H), 1.97 1.80 (m, 2H), 1.37 (s, 9H), 0.94 (s, 3H); m/z (ESI+) za (C24H28ClN7O3), 498.2 (M+H)<+>.

Faza 2: terc-butil metil({6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]-1-okso-2-[6-(4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)karbamat

[0562]

[0563] U rastvor terc-butil ({6-hlor-1-okso-2-[6-(4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)metilkarbamata (200 mg, 0.402 mmol) i Cs2CO3(720 mg, 2.21 mmol) u 1,4-dioksanu (5.0 mL) se u mehurićima uvodi argon u toku 3 min i doda se RuPhos Pd G3 (33.6 mg, 0.0402 mmol). Smeša se 3 min prska sa argonom i doda se (2R)-2-metilpirolidin (171 mg, 2.01 mml). Smeša se meša 18 h na 100 °C. LCMS analiza pokazuje da je početni materijal utrošen. Smeša se filtrira i filter pogača se ispere sa DCM (2x10 mL). Kombinovani filtrat se koncentruje do sušenja. Ostatak se prečisti fleš hromatografijom (8 g SiO2, EtOAc) da se dobije terc-butil metil({6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]-1-okso-2-[6-(4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)karbamat (210 mg, 96% prinos) kao žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.82 - 8.62 (m, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.17 - 8.09 (m, 1H), 7.97 - 7.89 (m, 1H), 6.74 (s, 1H), 5.13 - 4.85 (m, 2H), 4.76 - 4.58 (m, 2H), 4.64 - 4.42 (m, 2H), 4.35 - 4.19 (m, 1H), 3.84 - 3.73 (m, 2H), 3.67 - 3.57 (m, 1H), 3.46 - 3.31 (m, 1H), 3.01 (br. s, 3H), 2.19 - 2.08 (m, 2H), 1.99 - 1.90 (m, 1H), 1.81 - 1.74 (m, 1H), 1.48 - 1.31 (m, 9H), 1.27 (d, J=6.1 Hz, 3H), 0.98 (t, J=6.3 Hz, 3H); m/z (ESI+) za (C29H38N8O3), 547.4 (M+H)<+>.

Faza 3: 4-[(metilamino)metil]-6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]-2-[6-(4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on hidrohloridna so

[0565] U rastvor terc-butil metil({6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]-1-okso-2-[6-(4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)karbamata (210 mg, 0.384 mmol) u DCM (5.0 mL) se na 0 °C doda rastvor HCl (1.0 M u EtOAc, 5.0 mL). Smeša se meša 4 h na 20 °C da se dobije suspenzija. LCMS analiza pokazuje da je početni materijal utrošen. Suspenzija se filtrira. Filter pogača se ispere sa DCM (5 mL) i suši pod vakuumom. Materijal se rastvori u H2O (30 mL) i suši liofilizacijom da se dobije 4-[(metilamino)metil]-6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]-2-[6-(4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on, izdvojen kao hidrohlorid (170 mg, 92% prinos) kao žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 8.68 (s, 1H), 8.53 (dt, J=6.2, 2.9 Hz, 1H), 8.04 - 7.98 (m, 1H), 7.94 (dd, J=8.0, 2.8 Hz, 1H), 6.53 (s, 1H), 5.06 - 4.98 (m, 2H), 4.56 - 4.48 (m, 2H), 3.84 (2H zaklonjen pikom rastvarača), 3.28 (d, J=9.3 Hz, 1H), 2.46 - 2.34 (m, 3H), 2.09 - 1.96 (m, 2H), 1.96 - 1.89 (m, 1H), 1.88 - 1.74 (m, 4H), 1.74 - 1.63 (m, 1H), 1.15 (d, J=6.1 Hz, 3H), 0.90 (t, J=7.4 Hz, 3H); m/z (ESI+) za (C24H30N8O), 447.1 (M+H)<+>.

Primer 56: 4-(aminometil)-6-[etil(metil)amino]-2-[6-(4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on hidrohlorid

[0566]

Faza 1: terc-butil ({6-hlor-1-okso-2-[6-(4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin- 4-il}metil)karbamat

[0567]

[0568] U rastvor Međuproizvoda 7 (300 mg, 1.01 mmol), Međuproizvoda 13 (306 mg, 2.22 mmol), N,N-dimetiletilendiamina (44.4 mg, 0.504 mmol) i K2CO3(306 mg, 2.22 mmol) u MeCN (10.0 mL) se doda CuI (48.0 mg, 0.252 mmol) i smeša se prska sa argonom 5 min. Smeša se meša 1.5 h na 120 °C uz zračenje mikrotalasima. TLC analiza je pokazala da je početni materijal utrošen. Reakcija se ohladi na sobnu temperaturu i doda se H2O (80 mL). Smeša se filtrira i filter pogača se ispere sa H2O (3x5 mL) i suši pod vakuumom da se dobije terc-butil ({6-hlor-1-okso-2-[6-(4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)karbamat (290 mg, 60% prinos) kao smeđa čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.78 (s, 1H), 8.59 (d, J=8.3 Hz, 1H), 8.18 - 8.07 (m, 1H), 8.01 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.55 (t, J=5.9 Hz, 1H), 5.26 (s, 2H), 4.58 (t, J=7.1 Hz, 2H), 4.39 (d, J=5.9 Hz, 2H), 1.83 (q, J=7.4 Hz, 2H), 1.35 (s, 9H), 0.86 (t, J=7.3 Hz, 3H); m/z (ESI+) za (C23H26ClN7O3), 484.2 (M+H)<+>.

Faza 2: terc-butil ({6-[etil(metil)amino]-1-okso-2-[6-(4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)karbamat

[0569]

[0570] Rastvor terc-butil ({6-hlor-1-okso-2-[6-(4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)karbamata (290 mg, 0.599 mmol) i Cs2CO3(586 mg, 1.8 mmol) u 1,4-dioksanu (10.0 mL) se 3 min prska sa argonom i doda se RuPhos Pd G3 (50.1, 0.0599 mmol). Smeša se prska 3 min sa argonom i doda se N-metiletanamin (70.8 mg, 1.2 mmol). Smeša se meša 18 h na 100 °C u atmosferi Ar. LCMS analiza pokazuje da je početni materijal utrošen. Reakcija se koncentruje do sušenja a ostatak se prečisti preparativnom TLC (SiO2, 1:20 MeOH/EtOAc) da se dobije terc-butil ({6-[etil(metil)amino]-1-okso-2-[6-(4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)karbamat (90 mg, 30% prinos) kao žuta čvrsta supstanca. m/z (ESI+) za (C26H34N8O3), 507.3 (M+H)<+>.

Faza 3: 4-(aminometil)-6-[etil(metil)amino]-2-[6-(4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on hidrohlorid

[0571]

[0572] U rastvor terc-butil ({6-[etil(metil)amino]-1-okso-2-[6-(4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)karbamata (90 mg, 0.18 mmol) u EtOAc (5.0 mL) se na 0 °C doda rastvor HCl (4.0 M u EtOAc, 3.0 mL). Smeša se meša 20 h na 15 °C. LCMS analiza pokazuje da je početni materijal utrošen. Reakcija se koncentruje do sušenja. Ostatak se prečisti preparativnom HPLC sa YMC-Actus Triart C-18 kolonom (150x30 mm, 5 µm veličina čestice), koja se eluira sa 11-51% MeCN/H2O (+0.05% HCl) uz brzinu protoka od 30 mL/min da se dobije 4-(aminometil)-6-[etil(metil)amino]-2-[6-(4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on, izolovan u obliku hidrohlorida (37 mg, 47% prinos) kao žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.97 (s, 1H), 8.65 (d, J=8.4 Hz, 1H), 8.48 (s, 3H), 8.16 - 8.09 (m, 1H), 8.02 (d, J=7.6 Hz, 1H), 6.88 (s, 1H), 5.14 (s, 2H), 4.59 (t, J=7.3 Hz, 2H), 4.22 (d, J=6.1 Hz, 2H), 3.71 (q, J=7.1 Hz, 2H), 3.11 (s, 3H), 1.89 (q, J=7.3 Hz, 2H), 1.11 (t, J=6.9 Hz, 3H), 0.94 (t, J=7.4 Hz, 3H); m/z (ESI+) za (C21H26N8O), 407.3 (M+H)<+>.

Primer 57: 4-[(metilamino)metil]-6-(1-metilciklopropil)-2-{6-[4-(pentan-3-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on

[0573]

Faza 1: terc-butilmetil{[6-(1-metilciklopropil)-1-okso-2-{6-[4-(pentan-3-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il]metil}karbamat

[0574]

[0575] U smešu Međuproizvoda 8 (100 mg, 0.302 mmol), Međuproizvoda 14 (89.1 mg, 0.302 mmol) i K3PO4(192 mg, 0.905 mmol) u 1,4-dioksanu (5.0 mL) se u atmosferi N2dodaju Pd2(dba)3(27.6 mg, 0.0302 mmol) i ksantfos (34.9 mg, 0.0603 mmol). U smešu se u mehurićima uvodi N2u toku dva minuta. Smeša se meša 18 h na 85 °C. LCMS analiza pokazuje da je početni materijal utrošen. Reakcija se razblaži sa H2O (1.5 mL) i ekstrahuje sa EtOAc (2x10 mL). Kombinovane organske supstance se suše preko Na2SO4, filtriraju i koncentruju. Ostatak se prečisti preparativnom TLC (SiO2, 1:30 MeOH/EtOAc) da se dobije terc-butil metil{[6-(1-metilciklopropil)-1-okso-2-{6-[4-(pentan-3-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il]metil}karbamat (100 mg, 61 % prinos) kao svetlo-žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.92 (s, 1H), 8.61 (d, J=8.4 Hz, 1H), 8.14 - 8.06 (m, 1H), 7.93 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.58 (s, 1H), 5.17 (d, J=23.7 Hz, 2H), 4.53 (s, 2H), 2.92 (s, 3H), 1.99 - 1.83 (m, 1H), 1.54 (s, 3H), 1.38 (s, 5H), 1.23 (s, 4H), 1.18 (s, 4H), 0.91 - 0.82 (m, 4H), 0.78 (t, J=7.4 Hz, 6H); m/z (ESI+) za (C30H39N7O3), 546.5 (M+H)<+>.

Faza 2: 4-[(metilamino)metil]-6-(1-metilciklopropil)-2-{6-[4-(pentan-3-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on

[0576]

[0577] Rastvor terc-butilmetil{[6-(1-metilciklopropil)-1-okso-2-{6-[4-(pentan-3-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il]metil}karbamata (100 mg, 0.183 mmol) u DCM (3.0 mL) se ohladi na 0 °C i u kapima se dodaje TFA (1.0 mL). Smeša se meša 4 h na sobnoj temperaturi. LCMS analiza pokazuje da je početni materijal utrošen. Smeša se koncentruje. Ostatak se rastvori u DCM (50 mL) i ispere sa zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(20 mL) i slanim rastvorom (20 mL). Organski sloj se suši preko Na2SO4, filtrira i koncentruje. Čvrste supstance se suše liofilizacijom da se dobije 4-[(metilamino)metil]-6-(1-metilciklopropil)-2-{6-[4-(pentan-3-il)-4H-1,2,4-triazol-3-il]piridin-2-il}-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on (33 mg, 40% prinos) kao beličasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.93 (s, 1H), 8.65 (d, J=8.4 Hz, 1H), 8.14 - 8.06 (m, 1H), 7.96 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.57 (s, 1H), 5.43 (td, J=8.7, 4.3 Hz, 1H), 5.26 (s, 2H), 3.91 (s, 2H), 2.34 (s, 4H), 1.99 - 1.86 (m, J=6.7 Hz, 4H), 1.56 (s, 3H), 1.25 (p, J=3.5 Hz, 2H), 0.87 (q, J=3.6 Hz, 2H), 0.83 (s, 6H); m/z (ESI+) za (C25H31N7O), 446.5 (M+H)<+>.

Primer 58: 2-(6-{4-[(2S)-butan-2-il]-4H-1,2,4-triazol-3-il}piridin-2-il)-4-[(metilamino)metil]-6-(1-metilciklopropil)-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on

[0578]

[0579] Smeša Međuproizvoda 8 (68.4 mg, 0.206 mmol), Međuproizvoda 15 (58.0 mg, 0.210 mmol), K2CO3(71.3 mg, 0.516 mmol), N,N-dimetiletilendiamina (8.61 mg, 0.0977 mmol) i CuI (9.3 mg, 0.0488 mmol) se meša 90 min na 120 °C uz zračenje mikrotalasima. LCMS analiza pokazuje da je početni materijal utrošen. Smeša se ohladi na sobnu temperaturu i filtrira kroz Celite®. Filter pogača se ispere sa 10% MeOH/DCM i kombinovani filtrat se koncentruje do sušenja. Ostatak se rastvori u DCM (2.0 mL) i doda se TFA (1.0 mL). Smeša se meša 2 h na sobnoj temperaturi. Reakcija se koncentruje do sušenja. Ostatak se prečisti preparativnom SFC sa ZymorSPHERE HADP kolonom (4.6x150 mm, 5 µm veličina čestice), koja se eluira sa 5-50% MeOH/CO2uz brzinu protoka od 4.0 mL/min da se dobije (57.6 mg, 65% prinos) kao čvrsta supstanca.<1>H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 8.92 (s, 1H), 8.61 (d, J=8.0 Hz, 1H), 8.15 - 8.07 (m, 1H), 7.93 (d, J=7.2 Hz, 1H), 7.66 (s, 1H), 5.31 (p, J=7.2 Hz, 1H), 5.25 - 5.17 (m, 2H), 4.35 (s, 2H), 2.68 (s, 3H), 1.92 (ddp, J=36.2, 14.6, 7.4 Hz, 2H), 1.57 (d, J=8.2 Hz, 6H), 1.42 - 1.37 (m, 2H), 0.91 (d, J=5.4 Hz, 2H), 0.82 (t, J=7.3 Hz, 3H); m/z (ESI+) za (C24H29N7O), 432.2 (M+H)<+>.

Primer 59: 6-[etil(metil)amino]-4-[(metilamino)metil]-2-[6-(4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on

[0580]

Faza 1: terc-butil ({6-hlor-1-okso-2-[6-(4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin- 4-il}metil)metilkarbamat

[0581]

[0582] U rastvor Međuproizvoda 2 (200 mg, 0.642 mmol), Međuproizvoda 13 (180 mg, 0.674 mmol), K2CO3(195 mg, 1.41 mmol) i N,N-dimetiletilendiamina (28.3 mg, 0.321 mmol) u MeCN (7.0 mL) se doda CuI (30.5 mg, 0.160 mmol). Smeša se prska 5 min sa argonom i nakon toga meša 1.5 h na 120 °C uz zračenje mikrotalasima. LCMS analiza pokazuje da je početni materijal utrošen. Smeša se razblaži sa H2O (30 mL). Dobijeni precipitat se sakupi filtriranjem. Filter pogača se meša u EtOAc (100 mL) i filtrira da se uklone nerastvorne čvrste supstance. Filtrat se koncentruje do sušenja da se dobije terc-butil ({6-hlor-1-okso-2-[6-(4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)metilkarbamat (270 mg, 85% prinos) kao siva čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.78 (s, 1H), 8.60 (d, J=8.3 Hz, 1H), 8.17 - 8.10 (m, 1H), 8.00 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.87 (s, 1H), 5.21 (s, 2H), 4.66 (s, 2H), 4.60 - 4.54 (m, 2H), 2.93 (s, 3H), 1.81 (s, 2H), 1.37 (s, 5H), 1.24 (s, 4H), 0.86 (t, J=7.3 Hz, 3H); m/z (ESI+) za (C24H28ClN7O3), 498.2 (M+H)<+>.

Faza 2: terc-butil ({6-[etil(metil)amino]-1-okso-2-[6-(4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)metilkarbamat

[0584] Smeša terc-butil ({6-hlor-1-okso-2-[6-(4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)metilkarbamata (270 mg, 0.542 mmol), N-metiletanamina (64.1 mg, 1.08 mmol) i Cs2CO3(530 mg, 1.63 mmol) u 1,4-dioksanu (8.0 mL) se prska 3 min sa argonom i doda se RuPhos Pd G3 (45.4 mg, 0.542 mmol). Smeša se dodatna 3 min prska sa argonom i nakon toga meša 18 h na 100 °C. LCMS analiza pokazuje da je početni materijal utrošen. Smeša se razblaži sa H2O (50 mL) i ekstrahuje sa EtOAc (2x50 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom, suše preko Na2SO4, filtriraju i koncentruju. Ostatak se prečisti preparativnom TLC (1:20 MeOH/EtOAc) da se dobije terc-butil ({6-[etil(metil)amino]-1-okso-2-[6-(4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)metilkarbamat (99 mg, 35% prinos) kao smeđa čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.76 (s, 1H), 8.62 (d, J=8.4 Hz, 1H), 8.12 - 8.06 (m, 1H), 7.98 (d, J=7.6 Hz, 1H), 6.78 (s, 1H), 5.09 - 5.00 (m, 2H), 4.57 (s, 2H), 4.49 (s, 2H), 3.68 - 3.60 (m, 2H), 3.05 (s, 3H), 2.94 (s, 3H), 1.90 - 1.77 (m, 2H), 1.38 (s, 4H), 1.23 (s, 5H), 1.07 (d, J=7.9 Hz, 3H), 0.89 (t, J=7.5 Hz, 3H); m/z (ESI+) za (C27H36N8O3), 521.4 (M+H)<+>.

Faza 3: 6-[etil(metil)amino]-4-[(metilamino)metil]-2-[6-(4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on, hidrohlorid

[0585]

[0586] Rastvor terc-butil ({6-[etil(metil)amino]-1-okso-2-[6-(4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)metilkarbamata (99 mg, 0.19 mmol) u DCM (20 mL) se ohladi na 0 °C i u kapima tretira sa rastvorom HCl (4.0 M u EtOAc, 5.0 mL). Reakcija se meša 2 d na sobnoj temperaturi. LCMS pokazuje da je početni materijal utrošen. Smeša se koncentruje do sušenja. Ostatak se prečisti preparativnom HPLC sa YMC-Actus Triart C18 kolonom (150x30 mm, 5 µm veličina čestice), koja se eluira sa 12-52% MeCN/H2O (+0.05% HCl) uz brzinu protoka od 30 mL/min da se dobije 6-[etil(metil)amino]-4-[(metilamino)metil]-2-[6-(4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on, izolovan u obliku hidrohlorida (62.2 mg, 72% prinos) kao žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.15 (d, J=8.2 Hz, 2H), 8.85 (s, 1H), 8.65 (d, J=8.2 Hz, 1H), 8.16 - 8.10 (m, 1H), 8.04 - 7.98 (m, 1H), 6.92 (s, 1H), 5.13 (s, 2H), 4.58 (t, J=7.2 Hz, 2H), 4.33 (t, J=5.9 Hz, 2H), 3.72 (q, J=7.0 Hz, 2H), 3.12 (s, 3H), 2.73 (t, J=5.4 Hz, 3H), 1.87 (h, J=7.4 Hz, 2H), 1.12 (t, J=7.0 Hz, 3H), 0.93 (t, J=7.4 Hz, 3H); m/z ( ESI+) za (C22H28N8O), 421.2 (M+H)<+>.

Primer 60: 4-(aminometil)-6-[etil(metil)amino]-2-[6-(4-etil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on

[0587]

Faza 1: 4-hlor-6-[etil(metil)amino]-2-[6-(4-etil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on

[0589] Smeša 4-hlor-6-[etil(metil)amino]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-ona (Međuproizvod 9) (123 mg, 0.487 mmol), Međuproizvoda 12 (110 mg, 0.487 mmol), K2CO3(196 mg, 1.42 mmol), N,N-dimetiletilendiamina (28.4 mg, 0.322 mmol) i CuI (30.7 mg, 0.161 mmol) u MeCN (4.0 mL) se meša 90 min na 120 °C uz zračenje mikrotalasima. LCMS analiza pokazuje da je početni materijal utrošen. Smeša se filtrira kroz Celite®. Filter pogača se ispere sa 10% MeOH/DCM i kombinovani filtrat se koncentruje do sušenja.

Ostatak se prečisti fleš hromatografijom (12 g SiO2, 0-10% MeOH/DCM) da se dobije 4-hlor-6-[etil(metil)amino]-2-[6-(4-etil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on (173 mg, 89% prinos) kao žuta čvrsta supstanca. m/z (APCl+) za (C19H20ClN7O), 398.2 (M+H)<+>.

Faza 2: 4-(aminometil)-6-[etil(metil)amino]-2-[6-(4-etil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on

[0590]

[0591] Smeša 4-hlor-6-[etil(metil)amino]-2-[6-(4-etil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-ona (172 mg, 0.432 mmol), kalijum N-Bocaminometiltrifluoroborata (205 mg, 0.865 mmol), K2CO3(299 mg, 2.16 mmol), cataCXium A (31.0 mg, 0.0865 mmol), Pd(OAc)2(19.4 mg, 0.0865 mmol) i tetraetilamonijum tetrafluoroborata (93.8 mg, 0.432 mmol) u t-AmOH (4.0 mL) i H2O (0.4 mL) se meša 20 h na 110 °C u atmosferi N2. LCMS analiza pokazuje da je početni materijal utrošen. Smeša se ohladi na sobnu temperaturu, razblaži sa H2O (10 mL) i ekstrahuje sa DCM (2x10 mL). Kombinovani organski slojevi se suše preko Na2SO4, filtriraju i koncentruju. Ostatak se prenese u DCM (2.0 mL) i tretira sa TFA (1.0 mL). Smeša se meša 2 h i nakon toga koncentruje do sušenja. Ostatak se prečisti preparativnom SFC sa Princeton SFC HA-morfin kolonom (150x4.6 mm, 5 µm veličina čestice), koja se eluira sa 5-50% MeOH/CO2uz brzinu protoka od 4.0 mL/min da se dobije 4-(aminometil)-6-[etil(metil)amino]-2-[6-(4-etil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on (114.4 mg, 67% prinos) kao čvrsta supstanca.<1>H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 8.75 (s, 1H), 8.60 (d, J=8.4 Hz, 1H), 8.32 (s, 3H), 8.12 - 8.06 (m, 1H), 7.98 (d, J=7.6 Hz, 1H), 6.87 (s, 1H), 5.11 (s, 2H), 4.61 (q, J=7.2 Hz, 2H), 4.26 (s, 2H), 3.70 (q, J=7.0 Hz, 2H), 3.11 (s, 3H), 1.47 (t, J=7.1 Hz, 3H), 1.12 (t, J=7.0 Hz, 3H); m/z (APCl+) za (C20H24N8O), 393.0 (M+H)<+>.

Primer 61: 4-(aminometil)-2-[6-(4-etil-5-metil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on

[0592]

Faza 1: 4-hlor-2-[6-(5-metil-1 ,3,4-oksadiazol-2-il)piridin-2-il]-6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on

[0593]

[0594] Smeša Međuproizvoda 10 (142 mg, 0.593 mmol), Međuproizvoda 4 (120 mg, 0.477 mmol), K2CO3(145 mg, 1.05 mmol), CuI (22.7 mg, 0.119 mmol) i N,N-dimetiletilendiamina (21.0 mg, 0.238 mmol) u MeCN (3.0 mL) se meša 90 min na 120 °C uz zračenje mikrotalasima. LCMS analiza pokazuje da je početni materijal utrošen. Smeša se koncentruje do sušenja i ostatak se prečisti fleš hromatografijom (SiO2, 1:1 EtOAc/DCM) da se dobije 4-hlor-2-[6-(5-metil-1,3,4-oksadiazol-2-il)piridin-2-il]-6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on (162 mg, 83% prinos) kao bledo-žuta pena.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.79 (d, J=8.07 Hz, 1H), 7.91 - 8.08 (m, 2H), 6.76 (s, 1H), 5.13 (s, 2H), 4.23 (quin, J=5.84 Hz, 1H), 3.59 - 3.70 (m, 1H), 3.36 - 3.50 (m, 1H), 2.73 (s, 3H), 2.10 - 2.29 (m, 2H) 1.97 - 2.09 (m, 1H), 1.74 - 1.86 (m, 1H) 1.28 (d, J=6.36 Hz, 3H); m/z (APCl+) for (C20H19ClN6O2), 411.0 (M+H)<+>.

Faza 2: terc-butil ({2-[6-(5-metil-1,3,4-oksadiazol-2-il)piridin-2-il]-6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)karbamat

[0595]

[0596] Smeša 4-hlor-2-[6-(5-metil-1,3,4-oksadiazol-2-il)piridin-2-il]-6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-ona (160 mg, 0.389 mmol), kalijum N-Bocaminometiltrifluoroborata (369 mg, 1.56 mmol), cataCXium (27.9 mg, 0.0779 mmol), Pd(OAc)2(17.5 mg, 0.0779 mmol) i tetraetilamonijum tetrafluoroborata (84.5 mg, 0.389 mmol) u t-BuOH (6.0 mL) i H2O (0.6 mL) se meša 18 h na 110 °C. LCMS pokazuje da je početni materijal utrošen. Reakcija se ohladi na sobnu temperaturu, razblaži sa H2O (10 mL) i ekstrahuje sa DCM (2x10 mL). Kombinovani organski slojevi se suše preko Na2SO4, filtriraju i koncentruju. Ostatak se prečisti fleš hromatografijom (12 g SiO2, 30-100% EtOAc/heptan) da se dobije terc-butil ({2-[6-(5-metil-1,3,4-oksadiazol-2-il)piridin-2-il]-6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)karbamat (182 mg, 92% prinos) kao bela čvrsta supstanca. m/z (APCl+) za (C26H31N7O4), 506.2 (M+H)<+>.

Faza 3: 4-(aminometil)-2-[6-(4-etil-5-metil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on

[0597]

[0598] Smeša terc-butil ({2-[6-(5-metil-1,3,4-oksadiazol-2-il)piridin-2-il]-6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)karbamata (84 mg, 0.17 mmol), etilamin hidrohlorida (279 mg, 3.42 mmol) i TEA (353 mg, 3.49 mmol) u NMP (1.0 mL) se meša 18 h na 140 °C. LCMS analiza pokazuje da je početni materijal utrošen. Reakcija se ohladi na sobnu temperaturu, razblaži sa H2O (20 mL) i ekstrahuje sa EtOAc (20 mL). Organski sloj se suši preko Na2SO4, filtrira i koncentruje. Ostatak se prečisti fleš hromatografijom (0-10% MeOH/DCM). Željene frakcije se koncentruju do sušenja. Ostatak se rastvori u DCM (5.0 mL) i tretira sa rastvorom HCl (4.0 N u 1,4-dioksanu, 1.0 mL). Smeša se meša 4 h i nakon toga koncentruje do sušenja. Ostatak se prečisti preparativnom HPLC na Phenemonex Gemini NX C18 koloni (150x21.2 mm, 5 µm veličina čestice), koja se eluira sa 30-100% MeCN/H2O (+10 mM NH4OAc) uz brzinu protoka od 40 mL/min da se dobije terc-butil ({2-[6-(5-metil-1,3,4-oksadiazol-2-il)piridin-2-il]-6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)karbamat (24.0 mg, 33% prinos) kao čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.59 (dd, J=8.3, 0.9 Hz, 1H), 8.08 - 8.01 (m, 1H), 7.96 (dd, J=7.7, 1.0 Hz, 1H), 6.60 (s, 1H), 5.19 (s, 2H), 4.56 (q, J=7.1 Hz, 2H), 4.31 - 4.20 (m, 1H), 3.91 (s, 2H), 3.53 - 3.43 (4H zaklonjen pikom rastvarača), 3.21 (s, 3H), 2.15 - 2.03 (m, 2H), 1.45 (t, J=7.1 Hz, 3H), 1.24 (d, J=6.2 Hz, 3H); m/z (APCl+) za (C23H28N8O), 433.3 (M+H)<+>.

Primer 62: 4-[(metilamino)metil]-2-[6-(5-metil-4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on

[0599]

Faza 1: terc-butil ({6-hlor-2-[6-(5-metil-1,3,4-oksadiazol-2-il)piridin-2-il]-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin- 4-il)metil)metilkarbamat

[0600]

[0601] Smeša Međuproizvoda 2 (200 mg, 0.642 mmol), Međuproizvoda 4 (154 mg, 0.642 mmol), K2CO3(195 mg, 1.41 mmol), CuI (30.5 mg, 0.160 mmol) i N,N-dimetiletilendiamina (28.3 mg, 0.321 mmol) u MeCN (2.0 mL) se prska 5 min N2i nakon toga meša 100 min na 120 °C uz zračenje mikrotalasima. LCMS analiza pokazuje da je početni materijal utrošen. Smeša se filtrira kroz ploču Celite® i filtrat se koncentruje do sušenja. Ostatak se prečisti fleš hromatografijom (SiO2, 0-70% [8:1:1 EtOAc/MeOH/DCM]/heptan) da se dobije terc-butil ({6-hlor-2-[6-(5-metil-1,3,4-oksadiazol-2-il)piridin-2-il]-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)metilkarbamat (217 mg, 72% prinos) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.68 (d, J=8.5 Hz, 1H), 8.22 - 8.14 (m, 1H), 8.00 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.87 (s, 1H), 5.21 (s, 2H), 4.71 (s, 2H), 3.29 (s, 3H), 2.64 (s, 3H), 1.43 (s, 4H), 1.36 (s, 5H); m/z (ESI+) za (C22H23ClN6O4), 471.3 (M+H)<+>.

Faza 2: terc-butil ({6-hlor-2-[6-(5-metil-4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)metilkarbamat

[0602]

[0603] Ova reakcija se izvodi u dve paralelne serije. U smešu terc-butil ({6-hlor-2-[6-(5-metil-1,3,4-oksadiazol-2-il)piridin-2-il]-1-okso-2,3-dihidro-1/7-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)metilkarbamata (100 mg, 0.212 mmol) i sirćetne kiseline (31.9 mg, 0.531 mmol) u MeCN (2.5 mL) se dodaju N-propilamin hidrohlorid (203 mg, 2.12 mmol) i TEA (215 mg, 2.12 mmol). Reakcija se meša 16 h na 100 °C. Smeša se koncentruje do sušenja.

Kombinovani sirovi ostaci reakcije se prečiste fleš hromatografijom (12 g SiO2, 40-100% EtOAc/heptan, nakon toga 10% MeOH/EtOAc) da se dobije terc-butil ({6-hlor-2-[6-(5-metil-4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)metilkarbamat (68.4 mg, 31% prinos) kao beličasta pena.<1>H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 8.59 (d, J=8.4 Hz, 1H), 8.15 - 8.09 (m, 1H), 7.96 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.87 (s, 1H), 5.26 - 5.15 (m, 2H), 4.65 (s, 2H), 4.53 - 4.45 (m, 2H), 2.93 (s, 3H), 2.49 (s, 3H), 1.77 - 1.68 (m, 2H), 1.37 (s, 5H), 1.23 (s, 4H), 0.86 (t, J=7.4 Hz, 3H); m/z (ESI+) za (C25H30ClN7O3), 512.3 (M+H)<+>.

Faza 3: 4-[(metilamino)metil]-2-[6-(5-metil-4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-6[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on, trifluoroacetat

[0604]

[0605] Smeša terc-butil ({6-hlor-2-[6-(5-metil-4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)metilkarbamata (50.0 mg, 0.098 mmol), (2R)-2-metilpirolidina (41.6 mg, 0.488 mmol), Cs2CO3(95.5 mg, 0.293 mmol) i RuPhos-Pd G3 (12.3 mg, 0.0146 mmol) se prska 5 min sa N2i nakon toga meša 18 h na 100 °C. Smeša se ohladi na sobnu temperaturu i filtrira kroz Celite®. Filter pogača se ispere sa 10% MeOH/EtOAc. Kombinovani filtrat se koncentruje do sušenja. Ostatak se rastvori u DCM (1.5 mL) i doda se TFA (0.6 mL). Smeša se meša 30 min i nakon toga koncentruje do sušenja. Ostatak se prečisti preparativnom HPLC sa Waters Sunfire C-18 kolonom (19x100 mm, 5 µm veličina čestice), koja se eluira sa 5-100% MeCN/H2O (+0.05% TFA) uz brzinu protoka od 25 mL/min da se dobije 4-[(metilamino)metil]-2-[6-(5-metil-4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on, izdvojen u obliku trifluoroacetatne soli (38 mg, 68% prinos) kao čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.85 (s, 3H), 8.63 (d, J=8.4 Hz, 1H), 8.16 - 8.06 (m, 1H), 7.96 (d, J=7.6 Hz, 1H), 6.75 (s, 1H), 5.10 (s, 2H), 4.44 (dd, J=8.6, 6.6 Hz, 2H), 4.38 - 4.31 (m, 3H), 3.65 (t, J=9.0 Hz, 1H), 2.81 - 2.73 (m, 3H), 2.54 (s, 3H), 2.16 - 1.96 (m, 4H), 1.85 - 1.71 (m, 3H), 1.20 (d, J=6.2 Hz, 3H), 0.93 (t, J=7.4 Hz, 3H); m/z (ESI+) za (C25H32N8O), 461.7 (M+H)<+>. [α]<D>22= -53.3° (c= 0.5, MeOH).

Primer 63: 4-[(metilamino)metil]-6-[metil(propan-2-il)amino]-2-[6-(4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on

[0606]

Faza 1: metil6-[metil(propan-2-il)amino]-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-karboksilat

[0607]

[0608] Smeša Međuproizvoda 11 (11.3 g, 47.1 mmol), PdCl2(dppf) (2.16 g, 2.95 mmol) i TEA (14.3 g, 141 mmol) u MeOH (200 mL) se meša 40 h na 80 °C u atmosferi CO pod pritiskom od 50 psi. TLC analiza (1:1 EtOAc/petrol etar) pokazuje da je početni materijal utrošen. Reakcija se koncentruje do sušenja. Ostatak se rastvori u H2O (200 mL) i ekstrahuje sa DCM (2x150 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (200 mL), suše preko Na2SO4, filtriraju i koncentruju. Ostatak se razmuti u DCM (50 mL) u toku 30 min. Čvrste supstance se sakupe filtriranjem. Filter pogača se ispere sa petrol etrom (3x5 mL) i suši pod vakuumom. Filtrat se prečisti fleš hromatografijom (SiO2, 40-70 % EtOAc/DCM). Željene frakcije se koncentruju do sušenja i kombinuju sa gore datom filter pogačom da se dobije metil 6-[metil(propan-2-il)amino]-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-karboksilat (12.3 g, 99% prinos) kao žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.12 (s, 1H), 6.79 (s, 1H), 4.89 (p, J=6.6 Hz, 1H), 4.68 (d, J=1.1 Hz, 2H), 3.97 (s, 3H), 2.96 (s, 3H), 1.21 (d, J=6.7 Hz, 6H); m/z (ESI+) za (C13H17N3O3), 263.9 (M+H)<+>.

Faza 2: 4-(hidroksimetil)-6-[metil(propan-2-il)amino]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on

[0610] U smešu metil 6-[metil(propan-2-il)amino]-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-karboksilata (1.0 g, 3.80 mmol) u THF (60 mL) se u kapima na 0 °C dodaje rastvor LiAlH4(2.5 M u THF, 1.67 mL, 4.18 mmol). Smeša se meša 1 h na 0 °C i nakon toga 16 h na 20 °C. TLC analiza (1:1 EtOAc/petrol etar) pokazuje da je početni materijal utrošen. Smeša se neutrališe dodavanjem 20% vodenog rastvora NaOH (0.5 mL). U smešu se doda Na2SO4(4 g). Smeša se meša 30 min i nakon toga filtrira. Filtrat se koncentruje do sušenja da se dobije 4-(hidroksimetil)-6-[metil(propan-2-il)amino]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on (890 mg, >99% prinos) kao žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.04 (s, 1H), 6.82 (s, 1H), 4.85 (p, J=6.6 Hz, 1H), 4.67 (d, J=4.7 Hz, 2H), 4.33 (s, 2H), 4.09 (t, J=4.6 Hz, 1H), 2.92 (s, 3H), 1.20 (d, J=6.7 Hz, 6H); m/z (ESI+) za (C12H17N3O2), 236.0 (M+H)<+>.

Faza 3: {6-[metil(propan-2-il)amino]-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil metansulfonat

[0611]

[0612] U smešu 4-(hidroksimetil)-6-[metil(propan-2-il)amino]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-ona (890 mg, 3.78 mmol) i TEA (957 mg, 9.46 mmol) u THF (20.0 mL) se u kapima na 0 °C u atmosferi N2dodaje MsCl (953 mg, 8.23 mmol). Smeša se meša na 0 °C. LCMS analiza pokazuje da je početni materijal utrošen. Reakcija se razblaži sa zasićenim vodenim rastvorom Na2CO3(30 mL) i ekstrahuje sa EtOAc (2x20 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (30 mL), suše preko Na2SO4, filtriraju i koncentruju da se dobije {6-[metil(propan-2-il)amino]-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil metansulfonat (1.2 g, >99% prinos) kao žuta čvrsta supstanca, koja se dalje koristi bez dodatnog prečišćavanja. m/z (ESI+) za (C13H19N3O4S), 314.0 (M+H)<+>.

Faza 4: 4-[(metilamino)metil]-6-[metil(propan-2-il)amino]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on

[0613]

[0614] U smešu {6-[metil(propan-2-il)amino]-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil metansulfonata (1.18 g, 3.78 mmol) u THF (20.0 mL) se doda rastvor metilamina (2.0 M u THF, 37.8 mL, 75.6 mmol). Smeša se meša 1 h. LCMS analiza pokazuje da je početni materijal utrošen. Smeša se koncentruje do sušenja da se dobije 4-[(metilamino)metil]-6-[metil(propan-2-il)amino]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on (940 mg, >99% prinos) kao smeđa čvrsta supstanca, koja se dalje koristi bez naknadnog prečišavanja. m/z (ESI+) za (C13H20N4O), 249.0 (M+H)<+>.

Faza 5: terc-butil metil({6-[metil(propan-2-il)amino]-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)karbamat

[0615]

[0616] U rastvor 4-[(metilamino)metil]-6-[metil(propan-2-il)amino]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-ona (940 mg, 11.4 mmol) i TEA (1.15 g, 11.4 mmol) u DCM (20.0 mL) se doda Boc2O (1.65 mg, 7.57 mmol). Smeša se meša 30 min. LCMS analiza pokazuje da je početni materijal utrošen. Reakcija se koncentruje do sušenja. Ostatak se prečisti fleš hromatografijom (SiO2, EtOAc) da se dobije terc-butil metil({6-[metil(propan-2-il)amino]-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)karbamat (600 mg, 46% prinos) kao žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 6.81 (s, 1H), 6.57 - 6.42 (m, 1H), 4.91 (p, J=6.6 Hz, 1H), 4.48 (s, 2H), 4.35 (d, J=12.4 Hz, 2H), 2.92 (s, 3H), 2.88 (s, 3H), 1.48 (s, 5H), 1.41 (s, 4H), 1.17 (d, J=6.7 Hz, 6H); m/z (ESI+) za (C18H28N4O3), 349.2 (M+H)<+>.

Faza 6: terc-butil metil({6-[metil(propan-2-il)amino]-1-okso-2-[6-(4-propil-4H-1,2,4-triazot-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)karbamat

[0617]

[0618] U smešu terc-butil metil({6-[metil(propan-2-il)amino]-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)karbamata (80 mg, 0.23 mmol), Međuproizvoda 13 (64.4 mg, 0.24 mmol) i K3PO4(146 mg, 0.69 mmol) u 1,4-dioksanu (3.0 mL) se dodaju Pd2(dba)3(21.0 mg, 0.023 mmol) i ksantfos (26.6 mg, 0.046 mmol). Smeša se prska 2 min sa N2i nakon toga meša 18 h na 85 °C. LCMS analiza je pokazala da je početni materijal utrošen. Reakcija se koncentruje do sušenja. Ostatak se prečisti fleš hromatografijom (SiO2, 1:10 MeOH/EtOAc) da se dobije terc-butil metil({6-[metil(propan-2-il)amino]-1-okso-2-[6-(4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)karbamat (90 mg, 73% prinos) kao smeđa čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.71 (d, J=8.4 Hz, 1H), 8.23 (s, 1H), 8.14 - 8.06 (m, 1H), 7.96 - 7.87 (m, 1H), 6.86 (s, 1H), 5.04 (s, 1H), 5.00 - 4.90 (m, 2H), 4.68 - 4.57 (m, 2H), 4.51 (s, 2H), 3.03 - 2.93 (m, 3H), 2.92 (s, 3H), 1.90 (s, 2H), 1.41 (s, 5H), 1.33 (s, 4H), 1.20 (d, J=6.7 Hz, 6H), 0.98 - 0.91 (m, 3H); m/z (ESI+) za (C28H38N8O3), 535.4 (M+H)<+>.

Faza 7: 4-[(metilamino)metil]-6-[metil(propan-2-il)amino]-2-[6-(4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on, hidrohlorid

[0619]

[0620] U rastvor terc-butil metil({6-[metil(propan-2-il)amino]-1-okso-2-[6-(4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)karbamata (90 mg, 0.17 mmol) u EtOAc (5.0 mL) se na 0 °C doda rastvor HCl (4.0 M u EtOAc, 2.0 mL). Smeša se meša 4 h na sobnoj temperaturi. LCMS analiza pokazuje da je početni materijal utrošen. Reakcija se koncentruje pod vakuumom i nakon toga suši liofilizacijom da se dobije 4-[(metilamino)metil]-6-[metil(propan-2-il)amino]-2-[6-(4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on, izdvojen u obliku hidrohlorida (62.9 mg, 79% prinos) kao žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.21 (s, 1H), 8.65 (dd, J=8.4, 0.9 Hz, 1H), 8.17 - 8.10 (m, 1H), 7.99 (dd, J=7.6, 0.9 Hz, 1H), 6.88 (s, 1H), 5.10 (s, 2H), 5.05 - 4.92 (m, 1H), 4.60 (dd, J=8.1, 6.4 Hz, 2H), 4.31 (s, 2H), 2.90 (s, 3H), 2.71 (s, 3H), 1.88 (h, J=7.3 Hz, 2H), 1.14 (d, J=6.6 Hz, 6H), 0.92 (t, J=7.4 Hz, 3H); m/z (ESI+) za (C23H30N8O), 435.3 (M+H)<+>.

Primer 64: 4-[(metilamino)metil]-6-[metil(propan-2-il)amino]-2-[6-(5-metil-4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on

[0621]

Faza 1: terc-butil metil({6-[metil(propan-2-il)amino]-2-[6-(5-metil-4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)karbamat

[0622]

[0623] U smešu terc-butil metil({6-[metil(propan-2-il)amino]-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)karbamata (videti sintezu u Primeru 63) (200 mg, 0.574 mmol), Međuproizvoda 17 (169 mg, 0.603 mmol) i K3PO4(366 mg, 1.72 mmol) u 1,4-dioksanu (10.0 mL) se u atmosferi N2dodaju Pd2(dba)3(52.6 mg, 0.0574 mmol) i ksantfos (66.4 mg, 0.115 mmol). Smeša se zatvori i meša 18 h na 85 °C. TLC analiza (EtOAc) pokazuje da je početni materijal utrošen. Reakcija se koncentruje do sušenja i ostatak se prečisti fleš hromatografijom (SiO2, 1:20 MeOH/EtOAc). Naredne faze se izvrše uzastopno pet puta: ostatak se rastvori u 1:10 MeOH/EtOAc (30 mL) i doda se Ultra-pure Si-Thio SiO2(1 g). Smeša se meša 30 min na 50 °C. Smeša se filtrira i filter pogača se ispere sa 1:10 MeOH/EtOAc (3x30 mL). Filtrat se koncentruje do sušenja. Dobijeni ostatak se prečisti fleš hromatografijom (SiO2, 1:10 Me-OH/EtOAc) da se dobije terc-butil metil({6-[metil(propan-2-il)amino]-2-[6-(5-metil-4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)karbamat (250 mg, 79% prinos) kao žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.68 (d, J=9.4 Hz, 1H), 8.04 (d, J=7.7 Hz, 1H), 7.94 - 7.85 (m, 1H), 6.86 (s, 1H), 5.02 (s, 1H), 4.94 (d, J=9.4 Hz, 2H), 4.53 (s, 3H), 3.01 - 2.94 (m, 4H), 2.92 (s, 3H), 2.55 (s, 3H), 1.75 (s, 2H), 1.47 - 1.27 (m, 9H), 1.20 (d, J=6.7 Hz, 6H), 0.90 (t, J=7.3 Hz, 3H); LCMS m/z (ESI+) za (C29H40N8O3), 549.6 (M+H)<+>.

Faza 2: 4-[(metilamino)metil]-6-[metil(propan-2-il)amino]-2-[6-(5-metil-4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on, hidrohlorid

[0625] Rastvor terc-butil metil({6-[metil(propan-2-il)amino]-2-[6-(5-metil-4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)karbamata (250 mg, 0.456 mmol) u EtOAc (5.0 mL) se ohladi na 0 °C i tretira sa rastvorom HCl (4.0 N u EtOAc, 3.0 mL). Smeša se meša 1 h na 25 °C. LCMS pokazuje da je početni materijal utrošen. Smeša se koncentruje do sušenja. Ostatak se prečisti preparativnom HPLC sa Phenomenex Gemini-NX kolonom (150x30 mm, 5 µm veličina čestice), koja se eluira sa 19-39% MeCN/H2O (+0.05% HCl) uz brzinu protoka od 30 mL/min da se dobije 4-[(metilamino)metil]-6-[metil(propan-2-il)amino]-2-[6-(5-metil-4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on, izdvojen u obliku hidrohloridne soli (140 mg, 63% prinos) kao žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.30 (s, 2H), 8.71 (d, J=8.5 Hz, 1H), 8.21 -8.14 (m, 1H), 7.98 (d, J=7.6 Hz, 1H), 6.92 (s, 1H), 5.15 (s, 2H), 5.11 -4.98 (m, 1H), 4.58 - 4.48 (m, 2H), 4.30 (t, J=5.8 Hz, 2H), 2.93 (s, 3H), 2.71 (t, J=5.4 Hz, 3H), 2.67 (s, 3H), 1.87 (p, J=7.5 Hz, 2H), 1.17 (d, J=6.6 Hz, 6H), 0.97 (t, J=7.4 Hz, 3H); LCMS m/z (ESI+) za (C24H32N8O), 449.2 (M+H)<+>.

[0626] Alternativno, Primer 64 se takođe izrađuje kako sledi:

[0627] U smešu terc-butil metil({6-[metil(propan-2-il)amino]-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)karbamata (videti sintezu u Primeru 63) (7000 mg, 20.09 mmol), Međuproizvoda 17 (5650, 20.1 mmol) i K3PO4(12800 mg, 60.3 mmol) u 1,4-dioksanu (70 mL) se u atmosferi N2dodaju Pd2(dba)3(1840 mg, 2.01 mmol) i ksantfos (2320 mg, 4.02 mmol). Smeša se zatvori i meša 18 h na 85 °C. TLC analiza (EtOAc) pokazuje da je početni materijal utrošen. Reaktivna smeša se filtrira kroz ploču Celite® i filter pogača se ispere sa EtOAc (250 mL). Filtrat se koncentruje do ostatka koji se triturira sa 35 mL 60:40 smešom EtOAc:H2O. Suspenzija se nakon toga filtrira i filter pogača se suši pod vakuumom da se dobije terc-butil metil({6-[metil(propan-2-il)amino]-2-[6-(5-metil-4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)karbamat (10400 mg, 94% prinos) kao žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.68 (d, J=9.4 Hz, 1H), 8.04 (d, J=7.7 Hz, 1H), 7.94 - 7.85 (m, 1H), 6.86 (s, 1H), 5.02 (s, 1H), 4.94 (d, J=9.4 Hz, 2H), 4.53 (s, 3H), 3.01 - 2.94 (m, 4H), 2.92 (s, 3H), 2.55 (s, 3H), 1.75 (s, 2H), 1.47 - 1.27 (m, 9H), 1.20 (d, J=6.7 Hz, 6H), 0.90 (t, J=7.3 Hz, 3H); LCMS m/z (ESI+) za (C29H40N8O3), 549.3 (M+H)<+>.

Faza 2: 4-[(metilamino)metil]-6-[metil(propan-2-il)amino]-2-[6-(5-metil-4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on

[0628] Rastvor terc-butil metil({6-[metil(propan-2-il)amino]-2-[6-(5-metil-4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)karbamata (10400 mg, 18.95 mmol) u EtOAc (15.0 mL) i MeOH (5 mL) se ohladi na 0 °C i tretira sa rastvorom HCl (4.0 N u EtOAc, 100 mL). Smeša se meša 4 h na 25 °C. TLC (EtOAc, 254 nM, UV) pokazuje da je početni materijal utrošen. Reaktivna smeša se filtrira i koncentruje do ostatka koji se rastvori u vodi (200 mL) i ekstrahuje sa EtOAc (150 mL). U vodeni sloj se doda DCM (250 mL) i nakon toga se dodaje čvrsti NaHCO3dok se pH smeše ne podesi na ~8. Slojevi se razdvoje i vodeni sloj se ekstrahuje sa DCM (2x100 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (150 mL), suše preko natrijum sulfata, filtriraju i koncentruju do ostatka. Ostatak se triturira sa 22 mL 10:1 smeše EtOAc:MeCN i suspenzija se filtrira, a filter pogača se suši pod vakuumom da se dobije 4-[(metilamino)metil]-6-[metil(propan-2-il)amino]-2-[6-(5-metil-4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on (5.59 g, 66% prinos) kao žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400MHz, CDCl3) δ 8.73 (d, J=8.5 Hz, 1H), 8.13 (d, J=7.8 Hz, 1H), 7.92 (t, J=8.0 Hz, 1H), 6.88 (s, 1H), 5.05 (s, 2H), 4.98 - 4.92 (m, 1H), 4.53 - 4.45 (m, 2H), 3.88 (s, 2H), 2.95 (s, 3H), 2.58 (s, 3H), 2.55 (s, 3H), 1.91 - 1.85 (m, 2H), 1.23 (d, J=6.8 Hz, 6H), 1.04 (t, J=7.4 Hz, 3H); LCMS m/z (ESI+) za (C24H32N8O), 449.2 (M+H)<+>.

Primer 65: 2-[6-(4-ciklobutil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-4-[(metilamino)metil]-6-(1-metilciklopropil)-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on

Faza 1: metil 6-[4-{[(terc-butoksikarbonil)(metil)amino]metil}-6-(1-metilciklopropil)-1-okso-1,3-dihidro-2H-pirolo[3,4-c]piridin-2-il]piridin-2-karboksilat

[0630]

[0631] U smešu Međuproizvoda 8 (1.50 g, 4.53 mmol), metil 6-bromopiridin-2-karboksilata (1.17 g, 5.43 mmol) i K3PO4(2.88 g, 13.6 mmol) u 1,4-dioksanu (50.0 mL) se u atmosferi N2dodaju Pd2(dba)3(414 mg, 0.453 mmol) i ksantfos (524 mg, 0.905 mmol). Smeša se prska 2 min sa N2i nakon toga zatvori i meša 5 h na 85 °C. LCMS analiza pokazuje da je početni materijal utrošen. Reakcija se razblaži sa H2O (50 mL) i ekstrahuje sa EtOAc (3x50 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (50 mL), suše preko Na2SO4, filtriraju i koncentruju. Ostatak se prečisti fleš hromatografijom (SiO2, 1:3 EtOAc/petrol etar) da se dobije metil 6-[4-{[(terc-butoksikarbonil)(metil)amino]metil}-6-(1-metilciklopropil)-1-okso-1,3-dihidro-2H-pirolo[3,4-c]piridin-2-il]piridin-2-karboksilat (1.89 g, 89% prinos) kao smeđa čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.95 - 8.61 (m, 1H), 7.96 - 7.83 (m, 2H), 7.78 - 7.62 (m, 1H), 5.18 (s, 2H), 4.64 (d, J=10.3 Hz, 2H), 3.99 (s, 3H), 2.96 (s, 3H), 1.58 (s, 3H), 1.53 - 1.41 (m, 9H), 1.33 (q, J=3.7 Hz, 2H), 0.95 - 0.77 (m, 2H); LCMS m/z (ESI+) za (C25H30N4O5), 467.4 (M+H)<+>.

Faza 2: terc-butil ({2-[6-(hidrazinkarbonil)piridin-2-il]-6-(1-metilciklopropil)-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)metilkarbamat

[0632]

[0633] U suspenziju metil 6-[4-{[(terc-butoksikarbonil)(metil)amino]metil}-6-(1-metilciklopropil)-1-okso-1,3-dihidro-2H-pirolo[3,4-c]piridin-2-il]piridin-2-karboksilata (1.89 g, 4.05 mmol) u MeOH (50.0 mL) se doda hidrazin monohidrat (715 mg, 12.1 mmol). Smeša se meša 3 h. TLC analiza (1:3 EtOAc/petrol etar) pokazuje da je početni materijal utrošen. Reakcija se koncentruje do sušenja da se dobije terc-butil ({2-[6-(hidrazinkarbonil)piridin-2-il]-6-(1-metilciklopropil)-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)metilkarbamat (1.74 g, 92% prinos) kao žuta čvrsta supstanca, koja se dalje koristi bez naknadnog prečišavanja.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.09 - 9.54 (m, 1H), 8.73 - 8.52 (m, 1H), 8.17 - 7.98 (m, 1H), 7.82 (d, J=7.4 Hz, 1H), 7.56 (s, 1H), 5.29 (d, J=8.3 Hz, 2H), 4.81 - 4.07 (m, 4H), 2.93 (s, 3H), 1.55 (s, 3H), 1.44 (br. s, 4H), 1.28 - 1.15 (m, 7H), 0.94 - 0.70 (m, 2H); LCMS m/z (ESI+) za (C24H30N6O4), 467.3 (M+H)<+>.

Faza 3: terc-butil {[2-(6-{(2E)-2-[(dimetilamino)metiliden]hidrazinkarbonil)piridin-2-il)-6-(1-metilciklopropil)-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il]metil}metilkarbamat

[0634]

[0635] Rastvor terc-butil ({2-[6-(hidrazinkarbonil)piridin-2-il]-6-(1-metilciklopropil)-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)metilkarbamata (1.74 g, 3.84 mmol) u N,N-dimetildimetoksimetilaminu (40.0 mL) se meša 6 h na 80 °C. TLC analiza (1:10 MeOH/EtOAc) pokazuje da je početni materijal utrošen. Smeša se koncentruje do sušenja. Ostatak se razmuti sa TBME (40 mL) u toku 20 min. Čvrste supstance se sakupe filtriranjem i suše pod vakuumom da se dobije terc-butil {[2-(6-{(2E)-2-(dimetilamino)metiliden]hidrazinkarbonil}piridin-2-il)-6-(1-metilciklopropil)-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il]metil}metilkarbamat (1.76 g, 88% prinos) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.77 - 10.44 (m, 1H), 8.82 - 8.34 (m, 1H), 8.25 - 7.98 (m, 2H), 7.82 (d, J=7.5 Hz, 1H), 7.58 (s, 1H), 5.30 (br. d, J=11.0 Hz, 2H), 4.66 (s, 2H), 2.92 (s, 3H), 2.91 (s, 6H), 1.56 (s, 3H), 1.43 (s, 4H), 1.25 (d, J=6.9 Hz, 5H), 1.11 (s, 2H), 0.93 - 0.73 (m, 2H); LCMS m/z (ESI+) za (C27H35N7O4), 522.4 (M+H)<+>.

Faza 4: terc-butil ({2-[6-(4-ciklobutil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-6-(1-metilciklopropil)-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)metilkarbamat

[0636]

[0637] U suspenziju terc-butil {[2-(6-{(2E)-2-[(dimetilamino)metiliden]hidrazinkarbonil}piridin-2-il)-6-(1-metilciklopropil)-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il]metil}metilkarbamata (180 mg, 0.345 mmol) u MeCN (2.0 mL) se dodaju ciklobutanamin (61.4 mg, 0.863 mmol) i sirćetna kiselina (0.4 mL). Smeša se meša 3 h na 95 °C. TLC analiza (1:10 MeOH/EtOAc) pokazuje da je početni materijal utrošen. Rastvor se koncentruje do sušenja. Ostatak se rastvori u H2O (20 mL) i ekstrahuje sa EtOAc (3x20 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (30 mL), suše preko Na2SO4, filtriraju i koncentruju. Ostatak se prečisti fleš hromatografijom (SiO2, 1:10 MeOH/EtOAc) da se dobije terc-butil ({2-[6-(4-ciklobutil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-6-(1-metilciklopropil)-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)metilkarbamat (104 mg, 57% prinos) kao belo staklo.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.05 (br. s, 1H), 8.62 (br. d, J=8.3 Hz, 1H), 8.19 - 8.01 (m, 1H), 7.91 (br. s, J=7.5 Hz, 1H), 7.61 (s, 1H), 5.74 - 5.55 (m, 1H), 5.25 (s, 2H), 4.61 (s, 2H), 2.97 - 2.88 (m, 3H), 1.93 - 1.75 (m, 2H), 1.57 (s, 3H), 1.47 - 1.10 (m, 15H), 0.94 - 0.73 (m, 2H); LCMS m/z (ESI+) za (C29H35N7O3), 530.3 (M+H)<+>.

Faza 5: 2-[6-(4-ciklobutil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-4-[(metilamino)metil]-6-(1-metilciklopropil)-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on

[0638]

[0639] Rastvor terc-butil ({2-[6-(4-ciklobutil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-6-(1-metilciklopropil)-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)metilkarbamata (104 mg, 0.196 mmol) u DCM (5.0 mL) se ohladi na 0 °C i tretira sa TFA (3.0 mL). Smeša se meša 2 h na 15 °C. LCMS analiza pokazuje da je početni materijal utrošen. Smeša se koncentruje do sušenja. Ostatak se rastvori u H2O (20 mL) i zaalkališe sa zasićenim vodenim rastvorom Na2CO3(~3 mL) do pH~9. Smeša se ekstrahuje sa DCM (2x20 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (2x15 mL), suše preko Na2SO4, filtriraju i koncentruju. Ostatak se prečisti preparativnom HPLC sa Agela DuraShell C18 kolonom (150x25 mm, 5 µm veličina čestice), koja se eluira sa 33-63% MeCN/H2O (+0.04% NH4OH, 10 mM NH4HCO3) uz brzinu protoka od 2 mL/min. Željene frakcije se ponovo prečiste preparativnom HPLC sa Phenomenex Gemini NX kolonom (150x30 mm, 5 µm veličina čestice), koja se eluira sa 36-76% MeCN/H2O (+0.05% NH4OH) uz brzinu protoka od 30 mL/min da se dobije Primer 65 (15.4 mg, 18% prinos) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.09 (s, 1H), 8.64 (d, J=8.3 Hz, 1H), 8.24 - 8.01 (m, 1H), 7.94 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.57 (s, 1H), 5.74 (p, J=8.6 Hz, 1H), 5.35 (s, 2H), 3.94 (s, 2H), 2.61 - 2.54 (m, 2H), 2.48 - 2.42 (m, 2H), 2.35 (s, 3H), 1.98 - 1.78 (m, 2H), 1.56 (s, 3H), 1.38 - 1.09 (m, 2H), 1.06 - 0.66 (m, 2H); LCMS m/z (ESI+) za (C24H27N7O), 430.2 (M+H)<+>.

Primer 66: 2-[6-(4,5-dietil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-4-[(metilamino)metil]-6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on

[0640]

Faza 1: terc-butil ({2-[6-(4,5-dietil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)metilkarbamat

[0641]

[0642] U rastvor Međuproizvoda 19 (80.0 mg, 0.222 mmol), Međuproizvoda 18 (93.6 mg, 0.333 mmol) i K3PO4(141 mg, 0.666 mmol) u 1,4-dioksanu (5.0 mL) se u atmosferi N2dodaju Pd2(dba)3(20.3 mg, 0.0223 mmol) i ksantfos (25.7 mg, 0.0444 mmol). Smeša se prska 2 min sa N2i nakon toga zatvori i meša 18 h na 85 °C. TLC analiza (EtOAc) pokazuje da je početni materijal utrošen. Smeša se koncentruje do sušenja. Ostatak se prečisti fleš hromatografijom (SiO2, 1:10 MeOH/EtOAc) da se dobije terc-butil ({2-[6-(4, 5-dietil-4H-1,2,4-triazol-3-il) piridin-2-il]-6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]-1-okso-2,3-dihidro-1Hpirolo[3,4-c]piridin- 4-il}metil)metilkarbamat (120 mg, >99% prinos) kao žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.69 (br. d, J=8.3 Hz, 1H), 8.09 (br. d, J=7.5 Hz, 1H), 7.97 - 7.73 (m, 1H), 6.72 (s, 1H), 5.14 - 4.90 (m, 2H), 4.73 - 4.43 (m, 5H), 4.31 -4.16 (m, 1H), 3.70 - 3.52 (m, 2H), 3.44 - 3.29 (m, 2H), 2.99 (br. s, 3H), 2.92 - 2.77 (m, 2H), 2.20 - 1.96 (m, 3H), 1.80 - 1.70 (m, 1H), 1.62 (s, 9H), 1.43 - 1.38 (m, 3H), 1.32 - 1.11 (m, 3H). LCMS m/z (ESI+) za (C30H40N8O3), 561.4 (M+H)<+>.

Faza 2: 2-[6-(4,5-dietil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-4-[(metilamino)metil]-6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on, hidrohlorid

[0643]

[0644] Suspenzija terc-butil ({2-[6-(4,5-dietil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)metilkarbamata (120 mg, 0.222 mmol) u EtOAc (10.0 mL) se ohladi na 0 °C i tretira sa rastvorom HCl (4.0 N u EtOAc, 5.0 mL). Smeša se meša 2 h. LCMS analiza pokazuje da je početni materijal utrošen. Smeša se koncentruje do sušenja. Ostatak se prečisti preparativnom HPLC sa Phenomenex Gemini-NX kolonom (150x30 mm, 5 µm veličina čestice), koja se eluira sa 12-42% MeCN/H2O (+0.05% HCl) uz brzinu protoka od 30 mL/min da se dobije 2-[6-(4,5-dietil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-4-[(metilamino)metil]-6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on, izdvojen u obliku hidrohloridne soli (72.0 mg, 66% prinos) kao žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.65 - 9.29 (m, 2H), 8.73 (d, J=8.4 Hz, 1H), 8.33 - 8.13 (m, 1H), 8.02 (d, J=7.6 Hz, 1H), 6.75 (s, 1H), 5.21 (s, 2H), 4.66 (q, J=7.1 Hz, 2H), 4.42 - 4.28 (m, 3H), 3.65 (t, J=8.7 Hz, 1H), 3.50 - 3.30 (m, 1H), 3.10 (q, J=7.5 Hz, 2H), 2.72 (t, J=5.3 Hz, 3H), 2.21 - 1.93 (m, 3H), 1.81 - 1.64 (m, 1H), 1.51 (t, J=7.1 Hz, 3H), 1.43 (t, J=7.5 Hz, 3H), 1.21 (d, J=6.2 Hz, 3H); LCMS m/z (ESI+) za (C25H32N8O), 461.3 (M+H)<+>.

Primer 67: 2-[6-(4,5-dietil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-4-[(metilamino)metil]-6-[metil(propan-2-il)amino]-2,3-dihidro-1/7-pirolo[3,4-c]piridin-1-on

[0645]

Faza 1: terc-butil ({2-[6-(4,5-dietil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-6-[metil(propan-2-il)amino]-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)metilkarbamat

[0646]

[0647] U rastvor terc-butil metil({6-[metil(propan-2-il)amino]-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)karbamata (videti sintezu u Primeru 63) (100 mg, 0.287 mmol), Međuproizvoda 18 (80.7 mg, 0.287 mmol) i K3PO4(183 mg, 0.861 mmol) u 1,4-dioksanu (5.0 mL) se u atmosferi N2dodaju Pd2(dba)3(26.3 mg, 0.0287 mmol) i ksantfos (33.2 mg, 0.0574 mmol). Smeša se prska 2 min sa N2, zatvori i meša 18 h na 85 °C. LCMS analiza pokazuje da je početni materijal utrošen. Smeša se filtrira kroz Celite®. Filter pogača se ispere sa EtOAc (100 mL). Kombinovani filtrat se koncentruje do sušenja i prečisti preparativnom TLC (EtOAc) da se dobije terc-butil ({2-[6-(4,5-dietil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-6-[metil(propan-2-il)amino]-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)metilkarbamat (120 mg, 76% prinos) kao žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.70 (d, J=8.2 Hz, 1H), 8.10 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.99 - 7.80 (m, 1H), 6.89 (s, 1H), 5.12 - 5.01 (m, 1H), 4.98 - 4.84 (m, 2H), 4.71 - 4.62 (m, 2H), 4.58 - 4.26 (m, 2H), 3.04 - 2.96 (m, 3H), 2.94 (s, 3H), 2.89 (q, J=7.5 Hz, 2H), 1.51 (t, J=7.5 Hz, 3H), 1.45 - 1.34 (m, 12H), 1.23 (s, 3H), 1.21 (s, 3H). LCMS m/z (ESI+) za (C29H40N8O3), 549.2 (M+H)<+>.

Faza 2: 2-[6-(4,5-dietil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-4-[(metilamino)metil]-6-[metil(propan-2-il)amino]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on, hidrohlorid

[0648]

[0649] Rastvor terc-butil ({2-[6-(4,5-dietil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-6-[metil(propan-2-il)amino]-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il}metil)metilkarbamata (120 mg, 0.219 mmol) u EtOAc (1.0 mL) se ohladi na 0 °C i u kapima tretira sa rastvorom HCl (4.0 N u EtOAc, 5.0 mL). Smeša se meša 2 h na sobnoj temperaturi. LCMS analiza pokazuje da je početni materijal utrošen. Dobijene čvrste supstance se sakupe filtriranjem. Filter pogača se suši pod vakuumom da se dobije 2-[6-(4,5-dietil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-4-[(metilamino)metil]-6-[metil(propan-2-il)amino]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on, izdvojen u obliku hidrohloridne soli (95 mg, 90% prinos) kao žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.23 (br. s, 2H), 8.67 (d, J=8.4 Hz, 1H), 8.19 - 8.09 (m, 1H), 7.99 (d, J=7.7 Hz, 1H), 6.92 (s, 1H), 5.16 (s, 2H), 5.11 - 4.97 (m, 1H), 4.57 (q, J=6.4 Hz, 2H), 4.33 (t, J=6.0 Hz, 2H), 3.01 - 2.88 (m, 5H), 2.72 (t, J=5.4 Hz, 3H), 1.45 (t, J=7.1 Hz, 3H), 1.39 (t, J=7.5 Hz, 3H), 1.18 (s, 3H), 1.16 (s, 3H); LCMS m/z (ESI+) za (C24H32N8O), 449.2 (M+H)<+>.

Primer 68: 4-(aminometil)-2-{6-[(4R)-4-(fluorometil)-2-okso-1,3-oksazolidin-3-il]piridin-2-il}-6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on

[0650]

Faza 1: terc-butil [(6-hlor-2-{6-[(4R)-4-(fluorometil)-2-okso-1,3-oksazolidin-3-il]piridin-2-il}-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il)metil]karbamat

[0651]

[0652] U rastvor Međuproizvoda 20 (462 mg, 1.68 mmol), Međuproizvoda 7 (500 mg, 1.68 mmol), K2CO3(511 mg, 3.69 mmol) i N,N-dimetiletilendiamina (74.0 mg, 0.840 mmol) se doda CuI (80.0 mg, 0.420 mmol). Smeša se prska 5 min sa N2i nakon toga meša 1.5 h na 120 °C uz zračenje mikrotalasima. LCMS analiza pokazuje da je početni materijal utrošen. Smeša se razblaži sa H2O (8 mL) i MeCN (1 mL) i dobijene čvrste supstance se sakupe filtriranjem. Filter pogača se ispere sa H2O (3x2 mL) i MeCN (4x1 mL) i suši pod vakuumom da se dobije terc-butil [(6-hlor-2-{6-[(4R)-4-(fluorometil)-2-okso-1,3-oksazolidin-3-il]piridin-2-il}-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il)metil]karbamat (595 mg, 72% prinos) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.22 (d, J=7.9 Hz, 1H), 8.03 - 7.97 (m, 1H), 7.92 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.80 (s, 1H), 7.54 (t, J=6.2 Hz, 1H), 5.31 - 5.00 (m, 4H), 4.87 -4.71 (m, 1H), 4.65 (t, J=8.9 Hz, 1H), 4.59 - 4.50 (m, 1H), 4.41 (d, J=6.0 Hz, 2H), 1.39 (s, 9H);<19>F NMR (376 MHz, DMSO-d6) δ -238.40 (s, 1F); m/z (ESI+) za (C22H23ClFN5O5), 436.1 (M-tBu+H)<+>.

Faza 2: terc-butil [(2-{6-[(4R)-4-(fluorometil)-2-okso-1,3-oksazolidin-3-il]piridin-2-il}-6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il)metil]karbamat

[0654] Rastvor terc-butil [(6-hlor-2-{6-[(4R)-4-(fluorometil)-2-okso-1,3-oksazolidin-3-il]piridin-2-il}-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il)metil]karbamata (595 mg, 1.21 mmol), (2R)-2-metilpirolidina (294 mg, 2.42 mmol) i Cs2CO3(2.36 g, 7.26 mmol) u 1,4-dioksanu se prska 3 min sa argonom i doda se RuPhos Pd G3 (101 mg, 0.121 mmol). Smeša se prska 3 min sa argonom, zatvori i meša 16 h na 100 °C. LCMS analiza pokazuje da je početni materijal utrošen. Smeša se filtrira i filter pogača ispere sa EtOAc (2x10 mL).

Kombinovani filtrat se koncentruje do sušenja. Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom (8 g SiO2, 1:1 EtOAc/petrol etar). Željene frakcije se koncentruju do sušenja. Ostatak se razmuti sa smešom EtOAc/petrol etar (2:1, 10 mL) u toku 5 min na sobnoj temperaturi i čvrste supstance se sakupe filtriranjem. Filter pogača se ispere sa smešom EtOAc/petrol etar (2:1, 3x10 mL) i suši pod vakuumom. Čvrste supstance se rastvore u MeOH/EtOAc (1:10, 30 mL). Doda se ultra-pure Si-Thio SiO2(1 g) i smeša se meša 30 min na 50 °C. Smeša se filtrira i filter pogača se ispere sa MeOH/EtOAc (1:10, 3x30 mL). Filtrat se koncentruje do sušenja. Tretman sa Ultra-pure Si-Thio SiO2se ponovi na identičan način (4x). Sirovi materijal se prečisti fleš hromatografijom (SiO2, 1:10 MeOH/EtOAc) da se dobije terc-butil [(2-{6-[(4R)-4-(fluorometil)-2-okso-1,3-oksazolidin-3-il]piridin-2-il}-6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin- 4-il)metil]karbamat (330 mg, 51 % prinos) kao žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.23 (d, J=8.0 Hz, 1H), 8.01 - 7.91 (m, 1H), 7.87 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.25 (t, J=6.0 Hz, 1H), 6.56 (s, 1H), 5.20 -4.90 (m, 4H), 4.79 (dd, J=45.8, 10.0 Hz, 1H), 4.64 (t, J=8.9 Hz, 1H), 4.57 - 4.48 (m, 1H), 4.26 (dd, J=6.0, 2.0 Hz, 2H), 4.21 (t, J=6.2 Hz, 1H), 3.58 - 3.50 (m, 1H), 3.33 - 3.29 (m, 1H), 2.10 - 2.01 (m, 2H), 1.97 - 1.87 (m, 1H), 1.73 - 1.58 (m, 1H), 1.39 (s, 9H), 1.20 (d, J=5.4 Hz, 3H);<19>F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -238.33 (s, 1F); m/z (ESI+) za (C27H33FN6O5), 541.3 (M+H)<+>.

Faza 3: 4-(aminometil)-2-{6-[(4R)-4-(fluorometil)-2-okso-1,3-oksazolidin-3-il]piridin-2-il}-6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on, hidrohlorid

[0655]

[0656] Rastvor terc-butil [(2-{6-[(4R)-4-(fluorometil)-2-okso-1,3-oksazolidin-3-il]piridin-2-il}-6-[(2R)-2-metil-pirolidin-1-il]-1-okso-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-4-il)metil]karbamata (300 mg, 0.610 mmol) u EtOAc (5.0 mL) i MeOH (10.0 mL) se ohladi na 0 °C i tretira sa rastvorom HCl (4.0 N u EtOAc, 5.0 mL). Reakcija se meša 9 h na sobnoj temperaturi. LCMS analiza pokazuje da je početni materijal utrošen. Smeša se koncentruje do sušenja. Čvrste supstance se rastvore u H2O (25 mL) i isperu sa EtOAc (20 mL). Vodeni sloj se koncentruje do sušenja. Ostatak se prečisti preparativnom HPLC sa Phenomenex Gemini-NX kolonom (150x30 mm, 5 µm veličina čestice), koja se eluira sa 24-44% MeCN/H2O (+0.05% HCl) uz brzinu protoka od 30 mL/min da se dobije 4-(aminometil)-2-{6-[(4R)-4-(fluorometil)-2-okso-1,3-oksazolidin-3-il]piridin-2-il}-6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on, izdvojen u obliku hidrohloridne soli (200 mg, 69% prinos) kao žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.53 (br. s, 3H), 8.24 (d, J=8.0 Hz, 1H), 8.08 - 7.94 (m, 1H), 7.89 (d, J=8.0 Hz, 1H), 6.69 (s, 1H), 5.21 - 4.99 (m, 4H), 4.74 (br. d, J=9.8 Hz, 1H), 4.64 (t, J=8.9 Hz, 1H), 4.52 (dd, J=3.3, 8.5 Hz, 1H), 4.39 - 4.29 (m, 1H), 4.25-4.15 (m, 2H), 3.63 (br. t, J=8.7 Hz, 1H), 3.47 -3.34 (m, 1H), 2.14 - 1.94 (m, 3H), 1.77 - 1.68 (m, 1H), 1.20 (d, J=6.0 Hz, 3H);<19>F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -238.09 (s, 1F); m/z (ESI+) za (C22H25FN6O3), 441.3 (M+H)<+>.

[0657] Druga jedinjenja iz pronalaska u Tabelama 1A i 1B su izrađena modifikacijama postupaka koji su ovde dati kao primeri. Upotreba ili 1 u strukturi i ξ unutar naziva identifikuje asimetrični centar koji je razdvojen na dva odvojena enantiomera, ali specifični enantiomer nije potvrđen; pun ili isprekidani klin je pokazan u strukturi ali stvarni enantiomer može da bude drugi enantiomer. Ovde su označeni kao "nepoznata apsolutna stereohemija " i uključuju optičku rotaciju. Jedinjenja označena kao "poznata apsolutna stereohemija" su obično izrađena od međuproizvoda koji imaju poznatu stereohemiju.

[0658] Jedinjenja i njihovi odgovarajući odgovarajući rezultati karakterizacije prikazani su u Tabeli 1A u nastavku, pri čemu je postupak korišćen za izradu jedinjenja dat u zagradi ispod broja primera:

Tabela 1A

nastavla se

n l

Tabela 1B

n l

(nastavlja se)

Biološka ispitivanja i rezultati

Biohemijsko ispitivanje HPK1 enzima

[0659] Inhibicija HPK1 enzima je merena korišćenjem mikrofluidnog testa promene pokretljivosti (MSA). Reakcije su izvedene u pločama sa 96 udubljenja zapremine 50 µL u kojima se nalaze 0.5 nM humani rekombinantni HPK1 cele dužine, 3 µM fosfoakceptor peptida, 5FAM-AKRRRLSSLRA-COOH (CPC Scientific, Sunnyvale, CA), test jedinjenje (11-doza trostrukih serijskih razblaženja, 2% DMSO finalno) ili samo DMSO, 0.002% Tween-20, 1 mM DTT i 2.5 mM MgCl2u 50 mM MOPS (3-(N-morfolino)propansulfonska kiselina), pH 7.8, pufer i reakcije se započinju dodavanjem 75 µM ATP i ostave 20 min da preinkubiraju. Reakcije se izvode 60 min na 37 °C, zaustave dodavanjem 50 µL 0.015 M EDTA, pH 8 a stepen reakcija (-15-20% konverzije bez inhibitora) je određen nakon elektroforetskog razdvajanja fluorescentno obeleženog peptid supstrata i fosforilisanog produkta na LabChip EZ Reader II (PerkinElmer, Inc., Waltham, MA).

[0660] Inhibicija HPK1 je takođe merena koristeći fluorescenciju na bazi postupka helatnopojačane fluorescencije (CHEF) (1), koristeći patentirani fluorescentni peptidni supstrat u kome je cistein ostatak alkilisan sa derivatom na bazi sulfonamido oksina da se dobije amino kiselina sa C-Sox (CSx) završetkom. Analiza se izvodi slično kako je opisano za prethodno navedeni MSA postupak, ali korišćenjem 3 µM Ac-[CSx]HSLPRFNR-amidnog peptidnog supstrata (takođe poznat kao AQT0178 kada je nabavljen od AssayQuant Technologies Inc., Hopkinton, MA) i 45 µM ATP. Početne brzine reakcija su određene praćenjem fluorescencije peptida (λex= 360 nm, λem= 500 nm) 15 min na 30 °C u Tecan M1000 čitaču ploča (Tecan Group Ltd., Männedorf, Zürich, Switzerland). Vrednosti konstante inhibicije (Ki) su izračunate na bazi % konverzije (MSA postupak) ili inicijalnih vrednosti na bazi fluorescencije (CHEF postupak) korišćenjem Morrizon-ove jednačine (2) za inhibiciju kompetitivnog čvrstog vezivanja koristeći postupak ne-linearne regresije i eksperimentalno izmerene ATP Km(29 µM sa MSA i 19 µM za CHEF, tim redom). Iz kinetičkih i kristalografskih studija je pokazano da su inhibitori ATP-kompetitivni. HPK1 protein je proizveden “in house” i prethodno aktiviran auto fosforilacijom enzima sa MgATP kako je opisano u delu "izrada rekombinantnog autofosforilisanog HPK1 cele dužine".

Ispitivanje na bazi ćelija

Ispitivanje homogene vremenski razdvojene fluorescencije fosfo-SLP-76 (Ser376) (HTRF)

[0661] Jurkat ćelije se zaseju u količini od 90,000 ćelija/udubljenje u 90uL RPMI1640 medijumu za rast koji sadrži 10% FBS i inkubiraju na 37°C sa 5% CO2u toku noći. Narednog dana, jedinjenja se serijski razblaže od 10mM najveće doze za krivu od 11 tačaka trostrukog razblaženja u DMSO. Jedinjenja su među-razblažena 1:100 u medijumu za rast pre razblaženja 1:10 na ćelijama za finalnu koncentracijau 10 µM do 0.1nM u 0.1% DMSO. Nakon 30 minuta pre tretmana sa jedinjenjima, ćelije se stimulišu korišćenjem 200µg/mL F(ab)2 kompleksovanog anti-CD3 (klon UCTH1) u toku 15 min na 37°C sa 5% CO2.

Stimulacija se prekida sa ledeno hladnim PBS i ćelije se sakupe centrifugiranjem pre liziranja u Cisbio liza puferu (Cisbio, Bedford, MA). Lizati se prenesu u bele ploče male zapremine u kojima se nalazi anti-fosfo-SLP-76-Cryptate plus anti-fosfo-SLP-76-d2 HTRF antitela i inkubiraju u toku noći na sobnoj temperaturi zaštićene od svetlosti u skladu sa protokolom proizvođača (Cisbio, Bedford, MA). HTRF se meri na Perkin Elmer Envision a IC50vrednosti se izračunavaju izradom krive koncentracija-odgovor korišćenjem četvoroparametarske nelinearne regresione analize.

[0662] Rezultati biološke aktivnosti izabranih jedinjenja u HPK1 testovima promene mobilnosti i testovima fosfo-SLP-76 (Ser376) homogene vremenski razdvojene fluorescencije (HTRF) su dobijeni i dati u Tabeli 2 kao IC50(µM).

Tabela 2.

n l

[0663] Rezultati biološke aktivnosti u HPK1 testovima promene mobilnosti i testovima fosfo-SLP-76 (Ser376) homogene vremenski razdvojene fluorescencije (HTRF) su dati u Tabeli 3 za Primere 55 do 68.

Tabela 3

n l

[0664] U Tabelama 3 do 5, ND označava da nije određeno, sa NA (nije prihvatljivo) u koloni za broj ponavljanja.

[0665] Rezultati biološke aktivnosti u HPK1 testovima promene mobilnosti i testovima fosfo-SLP-76 (Ser376) homogene vremenski razdvojene fluorescencije (HTRF) su dati u Tabeli 4 za Primere iz Tabele 1A.

Tabela 4

n l

[0666] Rezultati biološke aktivnosti u HPK1 testovima promene mobilnosti i testovima fosfo-SLP-76 (Ser376) homogene vremenski razdvojene fluorescencije (HTRF) su dati u Tabeli 5 za Primere iz Tabele 1B.

Tabela 5

n l

Claims

Patentni zahtevi 1. Jedinjenje Formule I:

ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što R<1>je izabran iz grupe koja sadrži vodonik, halogen, (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi, halo(C1-C6)alkoksi, -N(R<6>)(R<7>) i (C3-C6)cikloalkil grupu, pri čemu su navedene (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil i (C3-C6)cikloalkil grupe opciono supstituisane sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, hidroksi, cijano, (C1-C6)alkil i (C1-C6)alkoksi grupu; R<6>i R<7>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži vodonik i (C1-C6)alkil grupu, pri čemu je navedena (C1-C6)alkil grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, (C1-C6)alkoksi, cijano i hidroksi grupu, ili R<6>i R<7>uzeti zajedno sa azotom za koji su vezani formiraju (4- do 8-člani)heterocikloalkil koji je opciono supstituisan sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi i halo(C1-C6)alkoksi grupu, pri čemu su navedene (C1-C6)alkil i halo(C1-C6)alkil grupe opciono supstituisane sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, hidroksi, cijano, (C1-C6)alkil i (C1-C6)alkoksi grupu; R<1a>je izabran iz grupe koja sadrži vodonik i halogen; R<2>je: i) -(CH2)mN(R<8>)(R<9>), gde je m ceo broj izabran od 0, 1, 2, ili 3 a svaki R<8>i R<9>je nezavisno izabran iz grupe koja sadrži vodonik i (C1-C6)alkil grupu, pri čemu je navedena (C1-C6)alkil grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, (C1-C6)alkoksi, cijano i hidroksi grupu, ili R<8>i R<9>uzeti zajedno sa azotom za koji su vezani formiraju (4- do 6-člani)heterocikloalkil koji je opciono supstituisan sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, hidroksi, (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi i halo(C1-C6)alkoksi grupu, pri čemu su navedene (C1-C6)alkil i halo(C1-C6)alkil grupe opciono supstituisane sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, hidroksi, cijano i (C1-C6)alkoksi grupu; ii) (C1-C6)alkil grupa, pri čemu je navedena (C1-C6)alkil grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, (C1-C6)alkoksi, -N(R<6>)(R<7>), cijano i hidroksi grupu, pri čemu je svaki R<6>i R<7>nezavisno izabran iz grupe koja sadrži vodonik i (C1-C6)alkil grupu; ili iii) (4- do 6-člani)heterocikloalkil, pri čemu je navedeni heterocikloalkil opciono supstituisan sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, hidroksi, cijano, (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi i halo(C1-C6)alkoksi grupu, pri čemu su navedene (C1-C6)alkil i halo(C1-C6)alkil grupe opciono supstituisane sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, hidroksi, cijano i (C1-C6)alkoksi grupu; R<3>je izabran iz grupe koja sadrži vodonik, halogen, hidroksi, (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi i halo(C1-C6)alkoksi grupu; X je ugljenik ili azot; R<4>je (4- do 6-člani)heterocikloalkil ili (5- do 10-člani)heteroaril, pri čemu su navedeni (4- do 6-člani)heterocikloalkil i (5- do 10-člani)heteroaril opciono supstituisani sa 1 do 3 supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, cijano, okso, hidroksi, -N(R<10>)(R<11>), (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi, halo(C1-C6)alkoksi i -(CH2)n(C3-C6)cikloalkil grupu, pri čemu su navedene (C1-C6)alkil i halo(C1-C6)alkil grupe opciono supstituisane sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, hidroksi, cijano i (C1-C6)alkoksi grupu i gde je n ceo broj izabran od 0, 1, ili 2; i gde je svaki R<10>i R<11>nezavisno izabran iz grupe koja sadrži vodonik i (C1-C6)alkil grupu, pri čemu je navedena (C1-C6)alkil grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen i hidroksi grupu; R<5>je izabran iz grupe koja sadrži vodonik, halogen, hidroksi, (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi i halo(C1-C6)alkoksi grupu; i a je ceo broj izabran od 0 ili 1, pod uslovom da kada je X azot a je 0.
2. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 1, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je R<1>-N(R<6>)(R<7>) a R<6>i R<7>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži vodonik i (C1-C6)alkil grupu, pri čemu je (C1-C6)alkil grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 halogena.
3. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 2, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što su R<6>i R<7>svaki metil grupa.
4. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 1, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je R<1>-N(R<6>)(R<7>) a R<6>i R<7>uzeti zajedno sa azotom za koji su vezani formiraju (4- do 8-člani)heterocikloalkil koji je opciono supstituisan sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi i halo(C1-C6)alkoksi grupu.
5. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 4, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je R<1>azetidinil opciono supstituisan sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi i halo(C1-C6) alkoksi grupu.
6. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 4, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je R<1>pirolidinil opciono supstituisan sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi i halo(C1-C6) alkoksi grupu.
7. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 1, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je R<1>(C3-C6)cikloalkil, pri čemu je (C3-C6)cikloalkil grupa opciono supstituisana sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, hidroksi, (C1-C6)alkil i (C1-C6)alkoksi grupu.
8. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 7, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je navedeni (C3-C6)cikloalkil ciklopropil grupa.
9. Jedinjenje u skladu sa bilo kojim od prethodnih patentnih zahteva, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je R<3>vodonik.
10. Jedinjenje u skladu sa bilo kojim od prethodnih patentnih zahteva, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je R<4>(5- do 6-člani)heteroaril opciono supstituisan sa 1 do 3 supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, cijano, hidroksi, -N(R<10>)(R<11>), (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi, halo(C1-C6)alkoksi i -(CH2)n(C3-C6)cikloalkil grupu, gde je n ceo broj izabran od 0, 1, ili 2; i gde je svaki R<10>i R<11>nezavisno izabran iz grupe koja sadrži vodonik i (C1-C6)alkil grupu, pri čemu je navedena (C1-C6)alkil grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen i hidroksi grupu.
11. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 10, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je (5- do 6-člani)heteroaril 1, 2, 3-triazolil, 1, 2, 4-triazolil ili pirazolil.
12. Jedinjenje u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 1-11, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je X ugljenik i 1 a R<5>je vodonik ili halogen.
13. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 12, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je R<5>halogen a halogen je fluor.
14. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 1 Formule II

ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što: R<1>je izabran iz grupe koja sadrži vodonik, halogen, (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi, halo(C1-C6)alkoksi, -N(R<6>)(R<7>) i (C3-C6)cikloalkil grupu, pri čemu je navedena (C3-C6)cikloalkil grupa opciono supstituisana sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, hidroksi, (C1-C6)alkil i (C1-C6)alkoksi grupu; R<6>i R<7>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži vodonik i (C1-C6)alkil grupu, pri čemu je (C1-C6)alkil grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen i hidroksi grupu, ili R<6>i R<7>uzeti zajedno sa azotom za koji su vezani formiraju (4- do 8-člani)heterocikloalkil koji je opciono supstituisan sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi i halo(C1-C6)alkoksi grupu; R<2>je: i) -(CH2)mN(R<8>)(R<9>), gde je m ceo broj izabran od 0, 1, 2, ili 3 a R<8>i R<9>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži vodonik i (C1-C6)alkil grupu, pri čemu je navedena (C1-C6)alkil grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen i hidroksi grupu, ili R<8>i R<9>uzeti zajedno sa azotom za koji su vezani formiraju (4- do 6-člani)heterocikloalkil koji je opciono supstituisan sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi i halo(C1-C6)alkoksi grupu; ili ii) (4- do 6-člani)heterocikloalkil, pri čemu je navedeni heterocikloalkil opciono supstituisan sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi i halo(C1-C6)alkoksi grupu; R<5>je izabran iz grupe koja sadrži vodonik, halogen, hidroksi, (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi i halo(C1-C6)alkoksi grupu; i R<12>je izabran iz grupe koja sadrži (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil i -(CH2)n(C3-C6)cikloalkil grupu, gde je n ceo broj 0 ili 1.
15. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 14, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je R<1>-N(R<6>)(R<7>) a R<6>i R<7>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži vodonik i (C1-C6)alkil grupu, pri čemu je navedena (C1-C6)alkil grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 halogena.
16. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 15, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što su svaki R<6>i R<7>metil grupa.
17. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 15, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je jedan od R<6>i R<7>vodonik a drugi je metil grupa.
18. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 15, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je jedan od R<6>i R<7>metil grupa a drugi je etil grupa.
19. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 14, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je R<1>-N(R<6>)(R<7>) a R<6>i R<7>uzeti zajedno sa azotom za koji su vezani formiraju (4- do 8-člani)heterocikloalkil koji je opciono supstituisan sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi i halo(C1-C6)alkoksi grupu.
20. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 19, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je R<1>azetidinil opciono supstituisan sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi i halo(C1-C6) alkoksi grupu.
21. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 19, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je R<1>pirolidinil opciono supstituisan sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi i halo(C1-C6)alkoksi grupu.
22. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 1 Formule III

ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što: R<1>je izabran iz grupe koja sadrži vodonik, halogen, (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi, halo(C1-C6)alkoksi, -N(R<6>)(R<7>) i (C3-C6)cikloalkil grupu, pri čemu je navedena (C3-C6)cikloalkil grupa opciono supstituisana sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, hidroksi, (C1-C6)alkil i (C1-C6)alkoksi grupu; R<6>i R<7>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži vodonik i (C1-C6)alkil grupu, pri čemu je navedena (C1-C6)alkil grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen i hidroksi grupu, ili R<6>i R<7>uzeti zajedno sa azotom za koji su vezani formiraju (4- do 8-člani)heterocikloalkil koji je opciono supstituisan sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi i halo(C1-C6)alkoksi grupu; R<2>je: i) -(CH2)mN(R<8>)(R<9>), pri čemu je m ceo broj izabran od 0, 1, 2, ili 3 a R<8>i R<9>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži vodonik i (C1-C6)alkil grupu, pri čemu je navedena (C1-C6)alkil grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen i hidroksi grupu, ili R<8>i R<9>uzeti zajedno sa azotom za koji su vezani formiraju (4- do 6-člani)heterocikloalkil koji je opciono supstituisan sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi i halo(C1-C6)alkoksi grupu; ili ii) (4- do 6-člani)heterocikloalkil, pri čemu je navedeni heterocikloalkil opciono supstituisan sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi i halo(C1-C6)alkoksi grupu; R<5>je izabran iz grupe koja sadrži vodonik, halogen, hidroksi, (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi i halo(C1-C6)alkoksi grupu; i R<12>je izabran iz grupe koja sadrži (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil i -(CH2)n(C3-C6)cikloalkil grupu, gde je n ceo broj 0 ili 1.
23. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 22, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je R<1>-N(R<6>)(R<7>) a R<6>i R<7>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži vodonik i (C1-C6)alkil grupu, gde je navedena (C1-C6)alkil grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 halogena.
24. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 22, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je R<1>-N(R<6>)(R<7>) a R<6>i R<7>uzeti zajedno sa azotom za koji su vezani formiraju (4- do 8-člani)heterocikloalkil koji je opciono supstituisan sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi i halo(C1-C6)alkoksi grupu.
25. Jedinjenje u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 22-24, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je R<2>-(CH2)mN(R<8>)(R<9>), m je 1, jedan od R<8>i R<9>je vodonik a drugi je metil grupa.
26. Jedinjenje u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 22-25, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je R<12>(C1-C6)alkil grupa izabrana iz grupe koja sadrži etil, propil, izopropil, butil i terc-butil grupu.
27. Jedinjenje u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 22-25, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je R<12>halo(C1-C6)alkil grupa izabrana iz grupe koja sadrži fluorometil, fluoroetil, difluorometil, difluoroetil, trifluorometil, triflourobutanil i trifluoropentanil grupu.
28. Jedinjenje Formule I u skladu sa patentnim zahtevom 1

ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što: R<1>je izabran iz grupe koja sadrži vodonik, halogen, (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi, halo(C1-C6)alkoksi, -N(R<6>)(R<7>) i (C3-C6)cikloalkil grupu, pri čemu su navedene (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil i (C3-C6)cikloalkil grupe opciono supstituisane sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, hidroksi, cijano, (C1-C6)alkil i (C1-C6)alkoksi grupu; R<6>i R<7>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži vodonik i (C1-C6)alkil grupu, pri čemu je navedena (C1-C6)alkil grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, (C1-C6)alkoksi, cijano i hidroksi grupu, ili R<6>i R<7>uzeti zajedno sa azotom za koji su vezani formiraju (4- do 8-člani)heterocikloalkil koji je opciono supstituisan sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi i halo(C1-C6)alkoksi grupu, pri čemu su navedene (C1-C6)alkil i halo(C1-C6)alkil grupe opciono supstituisane sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, hidroksi, cijano, (C1-C6)alkil i (C1-C6)alkoksi grupu; R<1a>je H; R<2>je CH2N(R<8>)(R<9>), gde su svaki R<8>i R<9>nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži vodonik i (C1-C6)alkil grupu, pri čemu je navedena (C1-C6)alkil grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, (C1-C6)alkoksi, cijano i hidroksi grupu, ili R<8>i R<9>uzeti zajedno sa azotom za koji su vezani formiraju (4- do 6-člani)heterocikloalkil koji je opciono supstituisan sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, hidroksi, (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi i halo(C1-C6)alkoksi grupu, pri čemu su navedene (C1-C6)alkil i halo(C1-C6)alkil grupe opciono supstituisane sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, hidroksi, cijano i (C1-C6)alkoksi grupu; i R<3>je H; X je ugljenik; R<5>je vodonik; a je 1; i R<4>je (4- do 6-člani)heterocikloalkil ili (5- do 10-člani)heteroaril, pri čemu su navedeni (4- do 6-člani)heterocikloalkil i (5- do 10-člani)heteroaril opciono supstituisani sa 1 do 3 supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, cijano, okso, hidroksi, -N(R<10>)(R<11>), (C1-C6)alkil, halo(C1-C6)alkil, (C1-C6)alkoksi, halo(C1-C6)alkoksi i -(CH2)n(C3-C6)cikloalkil grupu, pri čemu su navedena (C1-C6)alkil i halo(C1-C6)alkil grupa opciono supstituisane sa jedan do tri supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen, hidroksi, cijano i (C1-C6)alkoksi grupu i gde je n ceo broj izabran od 0, 1, ili 2; i pri čemu su R<10>i R<11>svaki nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži vodonik i (C1-C6)alkil grupu, gde je navedena (C1-C6)alkil grupa opciono supstituisana sa 1 do 3 supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži halogen i hidroksi grupu.
29. Jedinjenje iz patentnog zahteva 28, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što: R<1>je izabran iz grupe koja sadrži (C1-C4)alkil, CF3, -N(R<6>)(R<7>) i (C3-C4)cikloalkil grupu, pri čemu je navedena (C3-C4)cikloalkil grupa opciono supstituisana sa jednom CH3grupom; R<6>i R<7>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži vodonik i (C1-C3)alkil grupu, ili R<6>i R<7>uzeti zajedno sa azotom za koji su vezani formiraju (4- do 5-člani)heterocikloalkil koji je opciono supstituisan sa jedan do dva CH3supstituenta; R<2>je CH2N(R<8>)(R<9>), gde je R<8>vodonik a R<9>je izabran iz grupe koja sadrži vodonik i CH3grupu; i R<4>je (5-člani)heterocikloalkil ili (5-člani)heteroaril, pri čemu je navedeni (5-člani)heterocikloalkil 1,3-oksazolidin-3-il a navedeni (5-člani)heteroaril je 1H-pirazolil ili triazolil, svaki opciono supstituisan sa 1 do 2 supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži okso, (C1-C5)alkil, halo(C1-C5)alkil i -CH2-ciklopropil grupu.
30. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 28, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što: R<1>je izabran iz grupe koja sadrži (C1-C4)alkil, CF3, -N(R<6>)(R<7>) i (C3-C4)cikloalkil grupu, pri čemu je navedena (C3-C4)cikloalkil grupa opciono supstituisana sa jednom CH3grupom; R<6>i R<7>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži vodonik i (C1-C3)alkil grupu, ili R<6>i R<7>uzeti zajedno sa azotom za koji su vezani formiraju (4- do 5-člani)heterocikloalkil koji je opciono supstituisan sa jedan do dva CH3supstituenta; R<2>je CH2N(R<8>)(R<9>), gde je R<8>vodonik a R<9>je izabran iz grupe koja sadrži vodonik i CH3grupu; i R<4>je (5-člani)heterocikloalkil ili (5-člani)heteroaril, pri čemu je navedeni (5-člani)heterocikloalkil 2-okso-1,3-oksazolidin-3-il, opciono supstituisan sa 1 CH3, CH2F, CHF2, ili CF3grupom a navedeni (5-člani)heteroaril je 1H-pirazolil ili triazolil, opciono supstituisan sa 1 do 2 supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži (C1-C5)alkil, halo(C1-C5)alkil i -CH2-ciklopropil grupu.
31. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 28, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što: R<1>je izabran iz grupe koja sadrži -N(R<6>)(R<7>) i (C3-C4)cikloalkil grupu, pri čemu je navedeni (C3-C4)cikloalkil opciono supstituisan sa jednom CH3grupom; R<6>i R<7>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži vodonik i (C1-C3)alkil grupu, ili R<6>i R<7>uzeti zajedno sa azotom za koji su vezani formiraju (4- do 5-člani)heterocikloalkil koji je opciono supstituisan sa jedan do dva supstituenta izabrana iz grupe koja sadrži (CH3, ili halo(C1)alkil grupu; R<2>je -CH2N(R<8>)(R<9>), gde su svaki R<8>i R<9>nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži vodonik i CH3grupu; i R<4>je (5-člani)heterocikloalkil ili (5-člani)heteroaril, pri čemu je navedeni (5-člani)heterocikloalkil 2-okso-1,3-oksazolidin-3-il, opciono supstituisan sa 1 supstituentom izabranim iz grupe koja sadrži CH3, CHF2- i CH2F grupu a navedeni (5-člani)heteroaril je imidazolil, 1H-pirazolil, tiadiazolil ili triazolil, opciono supstituisan sa 1 do 2 supstituenta nezavisno izabrana iz grupe koja sadrži (C1-C5)alkil, halo(C1-C6)alkil i -(C4-C5)cikloalkil grupu, pri čemu je navedena (C1-C5)alkil grupa opciono supstituisana sa jednom hidroksi grupom.
32. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 28, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što: R<1>je -N(R<6>)(R<7>); R<6>i R<7>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži vodonik i (C1-C3)alkil grupu, ili R<6>i R<7>uzeti zajedno sa azotom za koji su vezani formiraju pirolidin-1-il, opciono supstituisan sa 1 do 2 CH3grupe; R<2>je -CH2N(R<8>)(R<9>), gde je svaki R<8>i R<9>nezavisno izabran iz grupe koja sadrži vodonik i CH3grupu; i R<4>je triazol-3-il, supstituisan sa 1 do 2 supstituenta nezavisno izabrana iz grupe koja sadrži CH3-, CH3-CH2- i CH3-CH2-CH2- grupu.
33. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 1, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je jedinjenje izabrano iz grupe koja sadrži 4-[(metilamino)metil]-6-[metil(propan-2-il)amino]-2-[6-(4-propil-4H-1,2,4-triazol-3il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on; 4-[(metilamino)metil]-6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]-2-[6-(4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on; 4-[(metilamino)metil]-2-[6-(5-metil-4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on; 4-[(metilamino)metil]-6-[metil(propan-2-il)amino]-2-[6-(5-metil-4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on; i 4-(aminometil)-2-[6-(4-etil-5-metil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-6-[(2S)-2-metilpirolidin-1-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on.
34. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 33, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je jedinjenje 4-[(metilamino)metil]-6-[metil(propan-2-il)amino]-2-[6-(4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on.
35. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 33, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je jedinjenje 4-[(metilamino)metil]-6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]-2-[6-(4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on.
36. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 33, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je jedinjenje 4-[(metilamino)metil]-2-[6-(5-metil-4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-6-[(2R)-2-metilpirolidin-1-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on
37. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 33, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je jedinjenje 4-[(metilamino)metil]-6-[metil(propan-2-il)amino]-2-[6-(5-metil-4-propil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-2,3-dihidro- 1/7-pirolo[3,4-c]piridin-1-on.
38. Jedinjenje u skladu sa patentnim zahtevom 33, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je jedinjenje 4-(aminometil)-2-[6-(4-etil-5-metil-4H-1,2,4-triazol-3-il)piridin-2-il]-6-[(2S)-2-metilpirolidin-1-il]-2,3-dihidro-1H-pirolo[3,4-c]piridin-1-on.
39. Farmaceutska kompozicija naznačena time što uključuje jedinjenje u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 1 do 38, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so i farmaceutski prihvatljiv nosač ili ekscipijent.
40. Jedinjenje u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 1 do 38, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je za upotrebu kao medikament.
41. Jedinjenje u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 1 do 38, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što je za upotrebu u tretmanu nenormalnog rasta ćelija kod sisara.
42. Jedinjenje ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu u skladu sa patentnim zahtevom 41, naznačeno time što je nenormalan rast ćelija kancer.
43. Kombinacija jedinjenja u skladu sa bilo kojim od patentnih zahteva 1 do 38, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli i dodatnog antikancerogenog terapeutskog sredstva ili palijativnog sredstva. Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Kneginje Ljubice 5, 11000 Beograd 279