RS65627B1

RS65627B1 - Intralezijsko davanje pd-1 inhibitora za lečenje kancera kože

Info

Publication number: RS65627B1
Application number: RS20240682A
Authority: RS
Inventors: Matthew G Fury; Israel Lowy
Original assignee: Regeneron Pharma
Priority date: 2018-11-14
Filing date: 2019-11-13
Publication date: 2024-07-31
Also published as: EP3880186A1; CN113038939A; JP7513604B2; EP4382168A3; HUE067601T2; SI3880186T1; DK3880186T3; WO2020102375A1; LT3880186T; PT3880186T; HRP20240825T1; FI3880186T3; EP4382168A2; PL3880186T3; JP2024123216A; US20210388091A1; ES2980363T3; JP2022513029A; EP3880186B1; US20260042841A1

Description

Opis

OBLAST PRONALASKA

[0001] Predmetni opis se odnosi na postupke za lečenje ili inhibiranje rasta tumora, što uključuje biranje pacijenta sa kancerom kože i intralezijsko davanje u tumor pacijenta terapijski efektivne količine inhibitora programirane smrti 1 (PD-1).

STANJE TEHNIKE

[0002] Kancer kože je najčešći kancer u Sjedinjenim Državama (Guy et al., Am. J. Prev. Med. 48:183-87, 2015). Procenjeno je da je u 2012. u Sjedinjenim Državama dijagnostifikovano 5,4 miliona slučajeva nemelanomskog kancera kože, uključujući karcinom bazalnih ćelija i karcinom skvamoznih ćelija (Rogers et al., JAMA Dermatol., 151(10):1081-86, 2015). Kutani karcinom skvamoznih ćelija (CSCC – cutaneous squamous cell carcinoma) je drugi najčešći maglinitet u Sjedinjenim Državama, posle kacrinoma bazalnih ćelija (BCC – basal cell carcinoma) (Karia et al., J. Am. Acad. Dermatol.68:957-66, 2013). Hronično izlaganje suncu je dominantan faktor rizika za nemelanomske kancere kože.

[0003] CSCC je maligna proliferacija epidermalnih keratinocita sa invazijom dermisa i razlikuje se od neinvazivnih prekursorskih lezija kao što su aktinske keratoze (Fernandez et al., Immunol Allergy Clin North Am 37(2):315-27, 2017). Incidencija širom sveta veoma varira, sa najvećom incidencijom u Australiji, a najmanjom u delovima Afrike (Lomas et al., Br J Dermatol, 166(5):1069-80, 2012). Precizna incidencija CSCC-a nije poznata jer nije uključena u većinu registara kancera. Međutim, incidencija CSCC-a se povećala tokom poslednjih decenija prema procenama koje ne uključuju pacijente sa samo neinvazivnim prekursorskim lezijama (Lomas et al., Br J Dermatol, 166(5):1069-80, 2012) (Que et al., J Am Acad Dermatol, 78(2):237-47, 2018) (Rogers et al., Arch Dermatol, 146(3):283-87, 2010).

[0004] Faktori rizika za CSCC uključuju izlaganje UV zračenju, starije doba i imunosupresiju (Alam et al., New Engl. J. Med.344:975-83, 2001; Madan, Lancet 375:673-85, 2010). Premda velika većina pojedinaca sa dijagnozom CSCC-a ili BCC-a ima veoma povoljne prognoze, CSCC ima veću sklonost ka agresivnim rekurencijama nego BCC. Takođe, pojedinci sa dijagnozom CSCC-a, za razliku od onih sa dijagnozom BCC-a, imaju veću smrtnost u poređenju sa kontrolnim grupama poređenim po starosti (Rees et al., Int. J. Cancer 137:878-84, 2015).

[0005] Hirurška resekcija je središnji deo kliničkog upravljanja CSCC-om ili BCC-om. Primarni cilj je kompletna resekcija kancera, a prihvatljiv kozmetički ishod je sekundarni cilj. Faktori povezani sa lošom prognozom kod CSCC-a uključuju veličinu tumora > 2 cm, dubinu tumora > 2mm, perineuralnu invaziju, imunosupresiju domaćina i rekurentne lezije. Međutim, neki pacijenti koji razviju uznapredovali CSCC, koji obuhvata i lokalno uznapredovali i metastatični CSCC, nisu kandidati za operaciju. Nekim takvim pacijentima se može davati postoperativna terapija zračenjem ili hemoterapija, ali može se desiti da to nisu privlačne opcije zbog zabrinutosti za bezbednost i tolerabilnost.

[0006] Kancerizacija polja kao višestrukih kanceroznih lezija na mestima izloženim UV zračenju, karakteristika je mnogih pacijenata sa CSCC. Uz to, rekurentni CSCC povećava rizik od naknadnih rekurencija. U jednoj institucionalnoj retrospektivnoj studiji 212 pacijenata, rekurentni CSCC-i imaju dvostruku verovatnoću da se ponovo pojave nakon ekscizione operacije u poređenju sa primarnim CSCC-ima (Harris et al., Otolaryngol Head Neck Surg, 156(5):863-69, 2017). Višestruke operacije tokom vremena mogu dovesti do disfiguracije i hirurškog zamora – tj. fizičkog i emocionalnog slabljenja do koga dolazi zbog niza hirurških procedura. Takođe, CSCC u podlokacijama glave i vrata, kao što su uho, slepoočnica i usna, povezani su sa lošijim kliničkim ishodima (Brantsch et al., Lancet Oncol 9(8):713-20, 2008; Harris et al., Otolaryngol Head Neck Surg, 156(5):863-69, 2017; Thompson et al., JAMA Dermatol 2016; 152(4):419-28, 2016).

[0007] Najčešći klinički podtip BCC-a je nodularni BCC. Manje uobičajeni klinički podtipovi su površinski, morfeični (fibrozirajući) i fibroepitelni. Većina pacijenata se leči operacijom, ali kod malog procenta pacijenata javljaju se rekurentne lezije ili se razvija neresektivna lokalno uznapredovala ili metastatska bolest. Prepoznavanje onkogenske uloge G-proteinskog receptora Smoothened (SMO) u BCC-u dovelo je do razvijanja vismodegiba i sonidegiba, oralno raspoloživih inhibitora SMO-a, na koje se generalno poziva kao na Hedgehog inhibitore (HHI). Pored neželjenih nuspojava HHI-a, ustanovljeno je da za pacijente sa napretkom na jednom HHI-u (vismodegib), naredno lečenje drugim HHI-em (sonedegib) nije dovelo do inhibicije tumora (Danial et al., Clin. Cancer Res.22:1325-29, 2016).

[0008] Stoga, ostaje potreba za obezbeđivanjem bezbednih i efikasnih terapija za kancer kože, kao što su CSCC i BCC, naročito kancer kože koji se vratio uprkos prethodnim operacijama.

[0009] Dalje, za malu frakciju pacijenata sa CSCC-om smatra se da imaju visoko rizičan CSCC, kao što je ocenjeno pomoću više faktora, uključujući stadijume kancera prema Američkom udruženom komitetu za rak (eng. American Joint Committee on Cancer), 8. izdanje (AJCC, 2017), imunološki status, limfovaskularnu invaziju, razmeru nodalne uključenosti, prisustvo ekstrakapsularne ekstenzije i istoriju lečenja. Postoperativna radioterapija se preporučuje u visokorizičnim slučajevima (Bichakjian et al., J Natl Compr Canc Netw, 16(6):742-74, 2018) (Stratigos, Eur J Cancer, 51(14):1989-2007, 2015). Međutim, visokorizični pacijenti mogu imati relaps sa lokoregionalnom rekurencijom ili udaljenim metastazama (Porceddu et al., J Clin Oncol, 36(13):1275-83, 2018). Prema tome, postoji nezadovoljena potreba za smanjenjem rizika od rekurencija CSCC-a, naročito kod visokorizičnih pacijenata.

[0010] Uz to, poznato je da su primaoci transplantata pod većim rizikom od CSCC-a nego od bilo kog drugog tipa tumora (Euvard et al., New Engl. J. Med., 348(17) :1681-91, 2003). CSCC takođe ima agresivniji klinički tok kod pacijenata sa transplantatom u poređenju sa imunokompetentnim pacijentima sa CSCC-om (Manyam et al., Cancer, 123(11):2054-60, 2017). Sistemsko davanje PD-1 inhibitora kod pacijenata sa transplantatom nosi visok rizik od odbacivanja alografta ili povrede (Lipson et al., New Engl. J. Med., 374(9):896-98, 2016; Aguirre et al., The Oncologist, 24:394-401, Nov. 9, 2018; Starke et al., Kidney Int., 78(1):38-47, 2010). Prema tome, postoji nezadovoljena potreba za efikasnim lečenjem kancera kože, kao što je CSCC, kod pacijenata sa transplantatom pri čemu se izbegava ili smanjuje rizik povezan sa njim.

[0011] WO 2018/106862 opisuje antitela koja se specifično vezuju za CTLA-4 (npr., humani CTLA-4) i antagonizuju funkciju CTLA-4. Hooren et al (2016), European Journal of Immunology, 47, 385-393 opisuje lokalnu inhibiciju kontrolne tačke CTLA-4 kao monoterapiju ili u kombinaciji sa anti-PD1. US 2018/243413 opisuje intralezijski dinitrohlobenzen i povezana jedinjenja koja se daju zajedno sa inhibitorima kontrolne tačke za lečenje kancera. Midgen et al (2018) The New England Journal of Medicine, 379, 341-351 opisuje blokadu sa cemiplimabom kod uznapredovalog kutanog kancera skvamoznih ćelija.

SUŠTINA PRONALASKA

[0012] Predmetni pronalazak obezbeđuje farmaceutsku kompoziciju koja sadrži terapijski efektivnu količinu inhibitora programirane smrti 1 (PD-1) za upotrebu u postupku lečenja ili inhibiranja rasta tumora, pri čemu postupak obuhvata: biranje pacijenta sa kancerom kože, i intralezijsko davanje u tumor pacijenta jedne ili više doza farmaceutske kompozicije, gde PD-1 inhibitor jeste anti-PD-1 antitelo ili njegov fragment koji vezuje antigen koji sadrži tri regiona koji određuju komplementarnost (CDRs – complementarity determining regions) (HCDR1, HCDR2 i HCDR3) sadržana unutar varijabilnog regiona teškog lanca (HCVR) koji sadrži aminokiselinsku sekvencu iz SEQ ID NO: 1 i tri CDR-a (LCDR1, LCDR2 i LCDR3) sadržana unutar varijabilnog regiona lakog lanca (LCVR) koji sadrži aminokiselinsku sekvencu iz SEQ ID NO: 2. U jednom izvođenju, kancer kože je kutani karcinom skvamoznih ćelija (CSCC), karcinom bazalnih ćelija (BCC), karcinom Merkelovih ćelija, ili melanom. U drugom izvođenju, kancer kože je CSCC. U sledećem izvođenju, pacijent je imao prethodno lečenje za kancer. U sledećem izvođenju, prethodno lečenje uključuje operaciju, radijaciju, hemoterapiju, lečenje PD-1 inhibitorom, i/ili druge anti-tumorske terapije. U sledećem izvođenju, pacijent je pod rizikom od rekurencije. U sledećem izvođenju, pacijent ima prethodnu istoriju rekurencije nakon operacije. U sledećem izvođenju, pacijent sa kancerom kože je prethodno primio transplantat organa ili tkiva.

[0013] U sledećem izvođenju, svaka doza PD-1 inhibitora uključuje jedno ili više intralezijskih ubrizgavanja farmaceutske kompozicije u tumor. U sledećem izvođenju, najmanje dva intralezijska ubrizgavanja se daju u različite lokacije tumora. U sledećem izvođenju, dva do pet intralezijskih ubrizgavanja se daju u dve to pet lokacija tumora. U sledećem izvođenju, najmanje jedno intralezijsko ubrizgavanje se daje u gornju polovinu tumora. U sledećem izvođenju, najmanje jedno intralezijsko ubrizgavanje se daje u kožu koja prekriva tumor. U sledećem izvođenju, najmanje jedno intralezijsko ubrizgavanje se daje u gornju periferiju tumora, uz dodirnu površinu sa kožom normalnog izgleda. U sledećem izvođenju, prečnik površine tumora je najmanje 1 cm. U sledećem izvođenju, prečnik površine tumora je oko 2 cm.

[0014] U sledećem izvođenju, svaka doza se daje jednom dnevno, jednom u dva dana, jednom u tri dana, jednom u četiri dana, jednom u pet dana, jednom u šest dana, jednom nedeljno ili dva puta nedeljno. U sledećem izvođenju, svaka doza uključuje 5 mg do 200 mg PD-1 inhibitora. U sledećem izvođenju, svaka doza uključuje 5 mg, 15 mg, ili 44 mg PD-1 inhibitora

[0015] U sledećem izvođenju, davanje PD-1 inhibitora promoviše regresiju tumora, smanjuje opterećenje ćelijama tumora, smanjuje tumorsko opterećenje, i/ili sprečava rekurenciju tumora kod pacijenta. U jednom izvođenju, davanje PD-1 inhibitora smanjuje ili eliminiše potrebu za operacijom. U drugom izvođenju, intralezijsko davanje PD-1 inhibitora promoviše najmanje oko 10% više regresije tumora nego intravensko davanje PD-1 inhibitora. U sledećem izvođenju, intralezijsko davanje PD-1 inhibitora dovodi do manje incidencije neželjenih događaja, manje ozbiljnosti neželjenih događaja, i/ili manje toksičnosti nego intravensko davanje PD-1 inhibitora.

[0016] U sledećem izvođenju, postupak dalje uključuje hirurško uklanjanje tumora nakon koraka (b). U sledećem izvođenju, postupak dalje uključuje davanje drugog terapijskog sredstva ili terapije koja se bira od operacije, zračenja, hemoterapije, kortikosteroida, anti-inflamatornog leka, i/ili njihove kombinacije. U jednom izvođenju, PD-1 inhibitor se daje pre drugog terapijskog sredstva ili terapije. U jednom izvođenju, PD-1 inhibitor se daje nakon drugog terapijskog sredstva ili terapije.

[0017] U drugom izvođenju, PD-1 inhibitor je anti-PD-1 antitelo ili njegov fragment koji vezuje antigen, koji uključuje varijabilni region teškog lanca (HCVR) koji uključuje aminokiselinsku sekvencu iz SEQ ID NO: 1 i a varijabilni region lakog lanca (LCVR) koji uključuje aminokiselinsku sekvencu iz SEQ ID NO: 2. U sledećem izvođenju, HCVR uključuje tri regiona koja određuju komplementarnost (CDR-ovi) (HCDR1, HCDR2 i HCDR3) teškog lanca i LCVR uključuje tri CDR-a (LCDR1, LCDR2 i LCDR3) lakog lanca, gde: HCDR1 ima aminokiselinsku sekvencu iz SEQ ID NO: 3; HCDR2 ima aminokiselinsku sekvencu iz SEQ ID NO: 4; HCDR3 ima aminokiselinsku sekvencu iz SEQ ID NO: 5; LCDR1 ima aminokiselinsku sekvencu iz SEQ ID NO: 6; LCDR2 ima aminokiselinsku sekvencu iz SEQ ID NO: 7; i LCDR3 ima aminokiselinsku sekvencu iz SEQ ID NO: 8. U sledećem izvođenju, anti-PD-1 antitelo ili njegov fragment koji vezuje antigen uključuje par HCVR/LCVR sekvenci iz SEQ ID NOs: 1/2. U sledećem izvođenju, anti-PD-1 antitelo uključuje teški lanac i laki lanac, gde teški lanac ima aminokiselinsku sekvencu iz SEQ ID NO: 9. U sledećem izvođenju, anti-PD-1 antitelo uključuje teški lanac i laki lanac, gde laki lanac ima aminokiselinsku sekvencu iz SEQ ID NO: 10. U sledećem izvođenju, anti-PD-1 antitelo uključuje teški lanac i laki lanac, gde teški lanac ima aminokiselinsku sekvencu iz SEQ ID NO: 9 i laki lanac ima aminokiselinsku sekvencu iz SEQ ID NO: 10.

[0018] U sledećem izvođenju, PD-1 inhibitor je cemiplimab ili njegov bioekvivalent.

SAŽET OPIS SLIKA NACRTA

[0019]

Slika 1 prikazuje dijagram koji u glavnim crtama predstavlja studiju opisanu u Primeru 1.

Slika 2A prikazuje fotografiju prvog primera pacijenta sa CSCC-om pre lečenja; i

Slika 2B prikazuje fotografiju prvog primera pacijenta nakon intralezijskog davanja anti-PD-1 antitela cemiplimaba.

Slika 3A prikazuje fotografiju drugog primera pacijenta sa CSCC-om pre lečenja; i

Slika 3B prikazuje fotografiju drugog primera pacijenta nakon intralezijskog davanja anti-PD-1 antitela cemiplimaba.

DETALJAN OPIS

[0020] Treba razumeti da predmetni opis nije ograničen na opisane posebne postupke i eksperimentalne uslove, budući da takvi postupci i uslovi mogu varirati. Takođe treba razumeti da terminologija koja se upotrebljava ovde služi samo za svrhe opisivanja posebnih izvođenja i nije predviđeno da bude ograničavajuća, a da će obim predmetnog opisa biti ograničen samo priloženim patentnim zahtevima.

[0021] Osim ako nije definisano drugačije, svi tehnički i naučni termini koji se upotrebljavaju ovde imaju isto značenje kao ono koje se uobičajeno razume od strane lica obične stručnosti u oblasti tehnike kojoj pripada opisani pronalazak. Kako se upotrebljava ovde, termin „oko“, kada se upotrebljava u pozivanju na posebno navedenu numeričku vrednost, znači da vrednost može varirati od navedene vrednosti za ne više od 1%. Na primer, kako se upotrebljava ovde, izraz „oko 100“ uključuje 99 i 101 i sve vrednosti između (npr., 99,1, 99,2, 99,3, 99,4, itd.).

[0022] Premda se bilo koji postupak i materijali slični onima koji su opisani ovde mogu upotrebljavati u praksi prema predmetnom opisu, sada će biti opisani poželjni postupci i materijali.

Postupci lečenja ili inhibiranja rasta tumora

[0023] Predmetni opis uključuje postupke za lečenje ili inhibiranje rasta kancera kože koji obuhvataju intralezijsko davanje u tumorsku leziju kancera kože subjekta kome je to potrebno terapijski efektivne količine PD-1 inhibitora (npr., antitela ili njegovog fragmenta koji vezuje antigen koji specifično vezuje PD-1, PD-L1, i/ili PD-L2, ili bilo koji drugi „PD-1 inhibitor“ kao što je opisano ovde). U predmetnom opisu, obezbeđena su pozivanja posebno na anti-PD-1 antitela da bi se ilustrovao reprezentativni PD-1 inhibitor, i ona ne ograničavaju obim opisa. U nekim aspektima, postupci uključuju intralezijsko davanje PD-1 inhibitora u tumorsku leziju kancera kože subjekta kome je to potrebno, gde subjekat opciono može biti primalac transplantata. Predmetni pronalazak obezbeđuje farmaceutsku kompoziciju koja sadrži terapijski efektivnu količinu PD-1 inhibitora kao što je definisano u patentnim zahtevima za upotrebu u postupku lečenja ili inhibiranja rasta tumora, što obuhvata biranje pacijenta sa kancerom kože i intralezijsko davanje u tumor pacijenta jedne ili više doza farmaceutske kompozicije.

[0024] Intralezijsko davanje, kao što je opisano ovde, obezbeđuje nekoliko prednosti u lečenju kancera kože. Na primer, intralezijsko davanje obezbeđuje poboljšano lokalizovano lečenje koje uvodi PD-1 inhibitor (kao što je anti-PD-1 antitelo) direktno u tumorsku leziju subjekta, čime se omogućuje efikasno davanje ihibitora u većoj koncentraciji specifično na mestu davanja. Takvo lokalizovano lečenje obezbeđuje dalju prednost tako što se lečeni subjekat štiti od sistemskog izlaganja PD-1 inhibitorima i bilo kakvim toksičnim ili sporednim efektima povezanim sa njima. Uz to, intralezijsko davanje PD-1 inhibitora (kao što je anti-PD-1 antitelo) indukuje odgovore imunološke memorije koji povoljno smanjuju rizik od rekurencije tumorskih lezija kod lečenog subjekta. Drugim rečima, nakon davanja anti-PD-1 antitela, naredne doze anti-PD-1 antitela proizvode brže i efikasnije odgovore kod subjekta, obezbeđujući koristi dugograjnog, specifičnog za antigen, zaštitnog imuniteta, na koji se često poziva kao na imunološku memoriju. Još jedna prednost intralezijskog davanja PD-1 inhibitora jeste eliminisanje potrebe za operacijom, koja je često bolna i disfigurišuća procedura, posebno u slučajevima kada bi inače bile potrebne ponovljene operacije (koje izazivaju dalju disfiguraciju).

[0025] Dalje, intralezijsko davanje PD-1 inhibitora (kao što je anti-PD-1 antitelo) obezbeđuje dodatnu korist za lečenje kancera kože kod pacijenta koji je takođe primalac transplantata organa ili tkiva zato što bi se tako izbegli neželjeni događaji povezani sa sistemskim davanjem (npr., intravenskom infuzijom). To je posebno značajna prednost zato što je primalac transplantata organa i tkiva pod većim rizikom od kancera kože usled produžene imunske supresije nakon transplantacije organa. Stoga se incidencija neželjenih događaja, kao što su odbacivanje alografta ili povreda, u populaciji pacijenata znatno smanjuje intralezijskim (umesto sistemskim) davanjem PD-1 inhibitora, kao što je anti-PD-1 antitelo.

[0026] Kako se upotrebljava ovde, izraz „intralezijsko davanje“ se odnosi na direktnu isporuku PD-1 inhibitora (npr., anti-PD-1 antitela) perkutano u tumorsku leziju kancera kože i takođe uključuje direktnu isporuku PD-1 inhibitora intradermalno u kožu koja prekriva tumorsku leziju kancera kože. U mnogim izvođenjima, termini „intralezijsko davanje“ i „intralezijsko ubrizgavanje“ upotrebljavaju se naizmenično.

[0027] Kako se upotrebljavaju ovde, termini „lečenje“, „lečiti“, ili slično, označavaju olakšavanje ili smanjivanje ozbiljnosti najmanje jednog simptoma ili indikacije, da bi se uklonio uzrok simptoma na privremenoj ili trajnoj osnovi, da bi se odložio ili inhibirao rast tumora, da bi se smanjilo opterećenje ćelijama tumora ili tumorsko opterećenje, da bi se promovisala regresija tumora, da bi se izazvalo skupljanje tumora, nekroza i/ili nestajanje, da bi se sprečila rekurencija tumora, da bi se sprečile ili inhibirale metastaze, da bi se inhibirao metastatski rast tumora, da bi se eliminisala potreba za operacijom, i/ili povećalo trajanje preživljavanja subjekta. U mnogim izvođenjima, termin „tumor“, „lezija“, „tumorska lezija“, „kancer“ i „malignitet“ upotrebljavaju se naizmenično i odnose se na jedan ili više porasta.

[0028] U nekim izvođenjima, kancer kože je kutani karcinom skvamoznih ćelija (CSCC), karcinom bazalnih ćelija (BCC), karcinom Merkelovih ćelija, ili melanom. U nekim izvođenjima, kancer kože je karcinom skvamoznih ćelija glave i vrata. U nekim izvođenjima, kancer kože je metastatski, resektabilan, neresektabilan, rekurentan, ili lokalno uznapredovao. U nekim izvođenjima, kancer kože je CSCC, uključujući, ali bez ograničavanja na njih, metastatski CSCC, lokalno uznapredovali CSCC, resektabilni CSCC, neresektabilni CSCC, ili rekurentni CSCC. U jednom izvođenju, kancer kože je CSCC koji je resektabilan i rekurentan. U jednom izvođenju, kancer kože je uznapredovali CSCC.

[0029] Kako se upotrebljava ovde, termin „rekurentni“ se odnosi na česte ili ponovljene dijagnoze kancera kože (npr., CSCC) kod pacijenta ili često ili ponovljeno javljanje pojedinačne tumorske lezije (lezija), kao što su primarne tumorske lezije i/ili nove tumorske lezije koje mogu predstavljati rekurenciju prethodne tumorske lazije. U određenim izvođenjima, intralezijsko davanje PD-1 inhibitora inhibira rekurenciju tumorskih lezija kod pacijenata sa CSCC-om.

[0030] Kako se upotrebljava ovde, termin „rekurencija“ se definiše kao pojavljivanje jedne ili više novih lezija kancera kože (npr., CSCC-a) koje su lokalne, regionalne, ili udaljene. U mnogim slučajevima, nove lezije u koži su novi primarni tumori usled polja kancerizacije od hroničnog oštećenja kože posredovanog UV zračenjem (Christensen, F1000Res, 7, 2018). U pogledu CSCC-a, lokalna ili regionalna (lokoregionalna) rekurencija se definiše bilo kojim od sledećih mesta rekurencije bolesti: (a) za HN CSCC, nodalna ili rekurencija u mekom tkivu iznad klavikule; (b) za ne-HN CSCC, rekurencija unutar prvog drenažnog nodalnog basena (ili mekog tkiva povezanog unutar prvog drenažnog nodalnog basena) resektovanog tumora; (c) in-tranzitne metastaze, definisane kao kožne ili supkutane metastaze koje su > 2 cm od primarne lezije, ali nisu van regionalnog nodalnog basena. Udaljena rekurencija se definiše bilo kojim od sledećih mesta rekurencije bolesti: (a) za HN CSCC, nodalna rekurencija ispod klavikule; (d) za ne-HN CSCC, rekurencija van prvog drenažnog nodalnog basena resektovanog tumorskog ležišta. Rekurencija u 2 nodalna basena smatraće se udaljenom rekurencijom, čak i ako je susedna (tj., 2 medijastinalna nodalna basena, 2 pelvična nodalna basena); (e) rekurencija je u ne-nodalnom tkivu (uključujući, ali bez ograničavanja na njih, pluća, jetru, kosti, mozak); (f) epidermotropne metastaze, definisane kao udaljena lezija (lezije) u dermisu bez epidermalne zahvaćenosti.

[0031] Kako se upotrebljava ovde, izraz „subjekat kome je to potrebno“ označava humanog ili ne-humanog sisara koji pokazuje jedan ili više simptoma ili indikacija kancera kože, i/ili koji je dobio dijagnozu sa kancerom kože, uključujući solidni tumor i kome je potrebno lečenje za isti. U mnogim izvođenjima, termin „subjekat“ i „pacijent“ se upotrebljavaju naizmenično. Izraz uključuje subjekte sa primarnim, uspostavljenim, ili rekurentnim tumorskim lezijama. U specifičnim izvođenjima, izraz uključuje humane subjekte koji imaju i/ili kojima je potrebno lečenje za solidni tumor. Izraz takođe uključuje subjekte sa primarnim ili metastatskim tumorima (uznapredovali maligniteti). U određenim izvođenjima, izraz uključuje pacijente sa solidnim tumorom koji je otporan ili refraktoran na prethodnu terapiju ili se neadekvatno kontroliše prethodnom terapijom (npr., operacijom ili lečenjem sa anti-kancernim sredstvom kao što je karboplatin ili docetaksel). U određenim izvođenjima, izraz uključuje pacijente sa tumorskim lezijama koje su lečene jednom ili većim brojem linija prethodne terapije (npr., hirurški uklonjene), ali koje su se zatim ponovo pojavile. U određenim izvođenjima, izraz uključuje subjekte sa tumorskim lezijama kancera kože koji nisu kandidati za kurativnu operaciju ili kurativno zračenje, ili za koje je konvencionalna anti-kancerna terapija nepreporučljiva, na primer, zbog toksičnih sporednih efekata. U drugim izvođenjima, izraz uključuje subjekte sa tumorskim lezijama kancera kože za koje se planira hirurško uklanjanje. U sledećim izvođenjima, izraz uključuje subjekte za koje je rizik rekurencije visok zbog prethodne istorije rekurencije nakon operacije.

[0032] U određenim izvođenjima, postupci se upotrebljavaju kod subjekta sa solidnim tumorom. Kako se upotrebljava ovde, termin „solidni tumor“ se odnosi na abnormalnu masu tkiva koja obično ne sadrži ciste ili tečna područja. Solidni tumori mogu biti benigni (nisu kancer) ili maligni (kancer). Za svrhe predmetnog opisa, termin „solidni tumor“ označava maligne solidne tumore. Termin uključuje različite tipove solidnih tumora nazvanih po tipu ćelija koje ih formiraju, naime sarkome, karcinome i limfome. U izvesnim izvođenjima, termin „solidni tumor“ obuhvata više od jedne tumorske lezije, pri čemu su one lokalizovane odvojeno jedna od druge, npr., 2 ili više, 5 ili više, 10 ili više, 15 ili više, 20 ili više, 25 ili više lezija kod subjekta kome je potrebno lečenje. U određenim izvođenjima, više od jedne lezije locirano je distalno jedna od druge.

[0033] U određenim izvođenjima, postupci uključuju davanje terapijski efektivne količine anti-PD-1 antitela u kombinaciji sa anti-tumorskom terapijom. Kako se upotrebljava ovde, izraz „u kombinaciji sa“ znači da se PD-1 inhibitor daje pre, nakon, ili istovremeno sa anti-tumorskom terapijom. Anti-tumorska terapija uključuje, ali nije ograničena na njih, konvencionalne anti-tumorske terapije kao što su hemoterapija, zračenje, operacija, ili kao što je opisano ovde na drugim mestima. U jednom izvođenju, anti-tumorska terapija obuhvata operaciju.

[0034] U određenim izvođenjima, postupci obuhvataju biranje subjekta sa tumorskim lezijama kancera kože i davanje jedne ili više doza anti-PD-1 antitela intralezijski u jednu ili više lokacija lezije. U nekim izvođenjima, PD-1 inhibitor se intralezijski daje u 2, 3, 4, 5, 6, ili 7 lokacija u jednoj leziji kancera kože. U nekim izvođenjima, PD-1 inhibitor se može intralezijski davati u 2 do 5 lokacija u leziji. U nekim izvođenjima, najmanje jedna lokacija je gornja (prednja) polovina lezije. U nekim izvođenjima, najmanje jedna lokacija je unutar najgušćeg dela gornje polovine tumorske lezije. U nekim izvođenjima, najmanje jedna lokacija je koža koja prekriva tumorsku leziju. U nekim izvođenjima, najmanje jedna lokacija je gornja (prednja) periferija tumora blizu ili uz dodirnu površinu sa kožom normalnog izgleda.

[0035] U određenim izvođenjima, jedna ili više doza PD-1 inhibitora se intralezijski daje u tumorsku leziju koja ima površinski prečnik od najmanje 1 cm. U određenim izvođenjima, lezija ima površinski prečnik koji nije veći od 2 cm. U jednom izvođenju, tumorska lezija ima površinski prečnik od 1,0 cm do 2,0 cm. U drugim izvođenjima, tumorska lezija ima najmanje 1 cm u svakom od najdužih okomitih površinskih prečnika lezije. U drugim izvođenjima, tumorska lezija ima ne više od 2 cm u svakom od najdužih okomitih površinskih prečnika lezije. U drugom izvođenju, tumorska lezija ima 1,0 cm do 2,0 cm u svakom od najdužih okomitih površinskih prečnika lezije.

[0036] U nekim izvođenjima, postupci indukuju odgovore imunološke memorije koji smanjuju rizik od rekurencije tumorske lezije kod subjekta. U jednom izvođenju, intralezijsko davanje subjektu kome je to potrebno terapijski efektivne količine PD-1 inhibitora dovodi do regresije tumora i eliminiše potrebu za operacijom.

[0037] U određenim izvođenjima, postupci obuhvataju intralezijsko davanje terapijski efektivne količine anti-PD-1 antitela, kao što je definisano u patentnim zahtevima, subjektu sa uznapredovalim solidnim tumorom, kao što je CSCC. U određenim izvođenjima, uznapredovali solidni tumor je indolentan ili agresivan. U određenim izvođenjima, subjekat ne reaguje na prethodnu terapiju ili operaciju, ili je nakon njih imao relaps (npr., iskusio je rekurentnu leziju).

[0038] Postupci, prema određenim izvođenjima, mogu uključivati intralezijsko davanje subjektu terapijski efektivne količine anti-PD-1 antitela u kombinaciji sa dodatnim terapijskim sredstvom ili terapijskim režimom ili procedurom. Dodatno terapijsko sredstvo ili terapijski režim ili procedura mogu se davati radi povećanja anti-tumorske efikasnosti, radi smanjenja toksičnih efekata jedne ili više terapije i/ili radi smanjenja doze jedne ili više terapija. U različitim izvođenjima, dodatno terapijsko sredstvo ili terapijski režim ili procedura mogu uključivati jedno ili više od sledećih: hemoterapiju, ciklofosfamid, operaciju, vakcinu protiv kancera, inhibitor liganda 1 programirane smrti (PD-L1) (npr., anti-PD-L1 antitelo), inhibitor gena za aktivaciju limfocita 3 (LAG3) (npr., anti-LAG3 antitelo), inhibitor citotoksičnog proteina povezanog sa T-limfocitom 4 (CTLA-4) (npr., ipilimumab), agonist receptora faktora nekroze glukokortikoidno indukovanog tumora (GITR) (npr., anti-GITR antitelo), -3 (TIM3) inhibitor koji sadrži imunoglobulin T ćelija i mucin, inhibitor atenuatora trake T-limfocita (BTLA), inhibitor T-ćelijskog imunoreceptora sa Ig i ITIM domenima (TIGIT), CD47 inhibitor, inhibitor indoleamin-2,3-dioksigenaze (IDO), antagonist vaskularnog endotelnog faktora rasta (VEGF), inhibitor angiopoietina-2 (Ang2), inhibitor transformišućeg faktora rasta beta (TGFβ), inhibitor receptora epidermalnog faktora rasta (EGFR), antitelo za antigen specifičan za tumor [npr., CA9, CA125, antigen povezan sa melanomom 3 (MAGE3), karcinoembrionski antigen (CEA), vimentin, tumor-M2-PK, antigen specifičan za prostatu (PSA), mucin-1, MART-1, i CA19-9], anti-CD3/anti-CD20 bispecifično antitelo, vakcinu (npr., Bacillus Calmette-Guerin), faktor stimulacije kolonije granulocitnih makrofaga, citotoksin, hemoterapijsko sredstvo, IL-6R inhibitor, IL-4R inhibitor, IL-10 inhibitor, citokin kao što su IL-2, IL-7, IL-21 i IL-15, anti-inflamatorni lek kao što je kortikosteroid, nesteroidni anti-inflamatorni lek (NSAID), i dijetetski suplement kao što je antioksidans. U određenim izvođenjima, anti-PD-1 antitelo se može davati u kombinaciji sa terapijom koja uključuje hemoterapijsko sredstvo i/ili operaciju.

[0039] U određenim izvođenjima, intralezijsko davanje subjektu sa lezijom kancera kože i kome je to potrebno terapijski efektivne količine anti-PD-1 antitela dovodi do povećane inhibicije rasta tumora – npr., veće regresije tumora kod lečenog subjekta. U određenim izvođenjima, intralezijsko davanje PD-1 inhibitora promoviše najmanje oko 10%, oko 20%, oko 30%, oko 40%, oko 50%, oko 60%, oko 70% ili oko 80% više regresije tumora kod lečenog subjekta u poređenju sa nelečenim subjektom ili sa subjektom koji je lečen PD-1 inhibitorom putem davanja koje nije intralezijsko (npr., sistemskim putem davanja kao što je intravenska infuzija).

[0040] U određenim izvođenjima, intralezijsko davanje subjektu sa lezijom kancera kože i kome je to potrebno terapijski efektivne količine anti-PD-1 antitela dovodi do povećane regresije tumora, skupljanja i/ili nestajanja tumora. U jednom izvođenju, intralezijsko davanje dovodi do regresije tumora ili skupljanja tumora tako da se potreba za operacijom smanjuje ili eliminiše.

[0041] U određenim izvođenjima, intralezijsko davanje PD-1 inhibitora dovodi do odlaganja rasta i razvijanja tumora, npr., rast tumora se može odložiti oko 3 dana, više od 3 dana, oko 7 dana, više od 7 dana, više od 15 dana, više od 1 meseca, više od 3 meseca, više od 6 meseci, više od 1 godine, više od 2 godine, ili više od 3 godine kod lečenog subjekta u poređenju sa nelečenim subjektom ili subjektom koji je lečen PD-1 ihibitorom putem davanja koje nije intralezijsko (npr., sistemskim putem davanja kao što je intravenska infuzija).

[0042] U određenim izvođenjima, intralezijsko davanje subjektu sa lezijom kancera kože i kome je to potrebno terapijski efektivne količine anti-PD-1 antitela dovodi do smanjene incidencije neželjenih događaja, smanjene ozbiljnosti neželjenih događaja, i/ili smanjene toksičnosti kod lečenog subjekta u poređenju sa nelečenim subjektom ili subjektom koji je lečen PD-1 inhibitorom putem davanja koje nije intralezijsko (npr., sistemskim putem davanja kao što je intravenska infuzija).

[0043] U određenim izvođenjima, intralezijsko davanje subjektu sa lezijom kancera kože i kome je to potrebno terapijski efektivne količine anti-PD-1 antitela sprečava rekurenciju tumora i/ili povećava trajanje preživljavanja subjekta, npr., povećava trajanje preživljavanja za više od 15 dana, više od 1 meseca, više od 3 meseca, više od 6 meseci, više od 12 meseci, više od 18 meseci, više od 24 meseca, više od 36 meseci, ili više od 48 meseci u poređenju sa nelečenim subjektom ili subjektom koji je lečen anti-PD-1 antitelom putem davanja koje nije intralezijsko (npr., intravenskom infuzijom).

[0044] U određenim izvođenjima, intalezijsko davanje subjektu sa lezijom kancera kože i kome je to potrebno terapijski efektivne količine anti-PD-1 antitela dovodi do potpunog nestanka svih dokaza tumorskih ćelija („potpuni odgovor“), dovodi do najmanje 30% ili više smanjenja u tumorskim ćelijama ili veličini tumora („delimični odgovor“), ili dovodi do potpunog ili delimičnog nestanka tumorskih ćelija/lezija uključujući nove merljive lezije. Smanjenje tumora se može meriti bilo kojim postupcima poznatim u oblasti tehnike, npr., rendgenski, pozitronskom emisionom tomografijom (PET), kompjuterizovanom tomografijom (CT), oslikavanjem magnetnom rezonancom (MRI – magnetic resonance imaging), citološki, histološki, ili molekularnim genetičkim analizama.

[0045] U određenim izvođenjima, intralezijsko davanje subjektu sa lezijom kancera kože i kome je to potrebno terapijski efektivne količine anti-PD-1 antitela dovodi do povećanog celokupnog preživljavanja (OS – overall survival) ili preživljavanja bez progresije (PFS – progression-free survival) kod subjekta u poređenju sa subjektom kome je davana ’standardna’ (SOC – standard-of-care) terapija (npr., hemoterapija, operacija ili zračenje). U određenim izvođenjima, PFS se povećava za najmanje jedan mesec, najmanje 2 meseca, najmanje 3 meseca, najmanje 4 meseca, najmanje 5 meseci, najmanje 6 meseci, najmanje 7 meseci, najmanje 8 meseci, najmanje 9 meseci, najmanje 10 meseci, najmanje 11 meseci, najmanje 1 godinu, najmanje 2 godine, ili najmanje 3 godine u poređenju sa subjektom kome je davana bilo koja ili više SOC terapija. U određenim izvođenjima, OS se povećava za najmanje jedan mesec, najmanje 2 meseca, najmanje 3 meseca, najmanje 4 meseca, najmanje 5 meseci, najmanje 6 meseci, najmanje 7 meseci, najmanje 8 meseci, najmanje 9 meseci, najmanje 10 meseci, najmanje 11 meseci, najmanje 1 godinu, najmanje 2 godine, ili najmanje 3 godine u poređenju sa subjektom kome je davana bilo koja ili više SOC terapija.

[0046] U određenim izvođenjima, intralezijsko davanje terapijski efektivne količine anti-PD-1 antitela subjektu sa kancerom kože pri čemu je subjekt primio transplantat, kao što je transplantat solidnog organa ili tkiva, povoljno izbegava neželjene događaje povezane sa sistemskim davanjem PD-1 inhibitora primaocu transplantata. U takvim izvođenjima, intralezijsko davanje subjektu koji je primalac transplantata dovodi do najmanje oko 10%, oko 20%, oko 30%, oko 40%, oko 50%, oko 60%, oko 70%, oko 80%, ili oko 90% niže incidencije neželjenih događaja u poređenju sa subjektom koji je primalac transplantata i koji prima PD-1 inhibitor drugim putem – npr., sistemskim putem davanja kao što je intravenska infuzija. Kod te populacije pacijenata mogu se, prema tome, izbeći neograničavajući primeri neželjenih događaja, uključujući odbacivanje alografta i povredu.

PD-1 inhibitori

[0047] Postupci opisani ovde uključuju davanje terapijski efektivne količine PD-1 inhibitora. Kako se upotrebljava ovde, „PD-1 inhibitor“ se odnosi na bilo koji molekul koji je u stanju da inhibira, blokira, ukida ili ometa aktivnost ili ekspresiju PD-1. U nekim aspektima opisa, PD-1 inhibitor može biti antitelo, jedinjenje malih molekula, nukleinska kiselina, polipeptid, ili njegov funkcionalni fragment ili varijata. Neograničavajući primeri pogodnih antitela PD-1 inhibitora uključuju anti-PD-1 antitela i njihove fragmente koji vezuju antigen, anti-PD-L1 antitela i njihove fragmente koji vezuju antigen, i anti-PD-L2 antitela i njihove fragmente koji vezuju antigen. Drugi neograničavajući primeri pogodnih PD-1 inhibitora uključuju RNKi molekule kao što su anti-PD-1 RNKi molekuli, anti-PD-L1 RNKi, i anti-PD-L2 RNKi, antisens molekule kao što su anti-PD-1 antisens RNK, anti-PD-L1 antisens RNK, i anti-PD-L2 antisens RNK, i dominantne negativne proteine kao što su dominantni negativni PD-1 protein, dominantni negativni PD-L1 protein, i dominantni negativni PD-L2 protein. Neki primeri prethodno pomenutih PD-1 inhibitora opisani su u npr., US 9308236, US 10011656, i US 20170290808. U pronalasku, PD-1 inhibitor je antitelo ili njegov fragment koji vezuje antigen kao što je definisano u patentnim zahtevima.

[0048] Kako se upotrebljava ovde, termin „antitelo“ se odnosi na molekule imunoglobulina koji sadrže četiri polipeptidna lanca, dva teška (H) lanca i dva laka (L) lanca koji su međusobno povezani disulfidnim vezama, kao i njihove multimere (npr., IgM). U tipičnom antitelu, svaki teški lanac sadrži varijabilni region teškog lanca (skraćeno ovde kao HCVR ili VH) i konstantni region teškog lanca. Konstantni region teškog lanca sadrži tri domena, CH1, CH2 i CH3. Svaki laki lanac sadrži varijabilni region lakog lanca (skraćeno ovde kao LCVR ili VL) i konstantni region lakog lanca. Konstantni region lakog lanca sadrži jedan domen (CL1). VHi VLregioni se mogu dalje podeliti u regione hipervarijabilnosti, koji se nazivaju regioni koji određuju komplementarnost (CDR-ovi), isprekidani regionima koji su konzervisaniji, koji se nazivaju okvirnim regionima (FR). Svaki VHi VLje sastavljen od tri CDR-a i četiri FR-a, raspoređena od amino-terminusa do karboksi-terminusa po sledećem redosledu: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4. U različitim izvođenjima pronalaska, FR-ovi anti-PD-1 antitela (ili njegovog dela koji vezuje antigen) mogu biti identični sa humanim germinativnim sekvencama, ili mogu biti prirodno ili veštački modifikovani. Aminokiselinska konsenzusna sekvenca se može definisati na osnovu uporedne analize dva ili više CDR-ova. Termin „antitelo“, kako se upotrebljava ovde, takođe uključuje fragmente koji vezuju antigen punih molekula antitela.

[0049] Kako se upotrebljavaju ovde, termini „deo koji vezuje antigen“ antitela, „fragment koji vezuje antigen“ antitela, i slično, uključuju bilo koji prirodni, koji se može dobiti enzimski, sintetički, ili genski modifikovani polipeptid ili glikoprotein koji specifično vezuje antigen da bi se formirao kompleks. Fragmenti antitela koji vezuju antigen mogu se izvesti, npr., iz punih molekula antitela upotrebljavajući bilo koje pogodne standardne tehnike kao što su proteolitička digestija ili rekombinantne tehnike genetičkog inženjeringa koje uključuju manipulaciju i ekspresiju varijabilnih i opciono konstantnih domena antitela koje kodira DNK. Takva DNK je poznata i/ili je lako dostupna iz, npr., komercijalnih izvora, DNK biblioteka (uključujući, npr., biblioteke faga-antitela), ili se može sintetisati. DNK se može sekvencirati i manipulisati hemijski ili pomoću tehnika molekularne biologije, na primer, da bi se aranžirao jedan ili više varijabilnih i/ili konstantnih domena u pogodnu konfiguraciju, ili da bi se uveli kodoni, kreirali cisteinski ostaci, modifikovale, dodale ili deletirale aminokiseline, itd.

[0050] Neograničavajući primeri fragmenata koji vezuju antigen uključuju: (i) Fab fragmente; (ii) F(ab’)2 fragmente; (iii) Fd fragmente; (iv) Fv fragmente; (v) jednolančane Fv (scFv) molekule; (vi) dAb fragmente; i (vii) minimalne jedinice za prepoznavanje koje se sastoje od aminokiselinskih ostataka koji podražavaju hipervarijabilni region antitela (npr., izolovani region koji određuje komplementarnost (CDR) kao što je CDR3 peptid), ili ograničeni FR3-CDR3-FR4 peptid. Drugi modifikovani molekuli, kao što su antitela specifična za domen, antitela sa jednim domenom, anitela sa deletiranim domenom, himerna antitela, CDR-graftovana antitela, diatela, triatela, tetratela, minitela, nanotela (npr. monovalentna nanotela, bivalentna nanotela, itd.), mali modularni imunofarmaceutici (SMIPs), i varijabilni IgNAR domeni ajkule, takođe su obuhvaćeni u izrazu „fragment koji vezuje antigen“, kako se upotrebljava ovde.

[0051] Fragment antitela koji vezuje antigen tipično će sadržati najmanje jedan verijabilni domen. Varijabilni domen može biti bilo koje veličine ili aminokiselinske kompozicije i generalno će sadržati najmanje jedan CDR koji je susedan sa ili u okviru sa jednom ili više okvirnih sekvenci. U fragmentima koji vezuju antigen koji imaju VHdomen povezan sa VLdomenom, VHi VLdomeni mogu biti postavljeni jedan u odnosu na drugi u bilo kom pogodnom rasporedu. Na primer, varijabilni region može biti dimerni i sadržati VH-VH, VH-VLor VL-VLdimere. Alternativno, fragment antitela koji vezuje antigen može sadržati monomerni VHili VLdomen.

[0052] U izvesnim aspektima, fragment antitela koji vezuje antigen može sadržati najmanje jedan varijabilni domen kovalentno povezan sa najmanje jednim konstantnim domenom. Neograničavajući primeri konfiguracija varijabilnih i konstantnih domena koji se mogu naći unutar fragmenta antitela koji vezuje antigen prema predmetnom opisu uključuju: (i) VH-CH1; (ii) VH-CH2; (iii) VH-CH3; (iv) VH-CH1-CH2; (v) VH-CH1-CH2-CH3; (vi) VH-CH2-CH3; (vii) VH-CL; (viii) VL-CH1; (ix) VL-CH2; (x) VL-CH3; (xi) VL-CH1-CH2; (xii) VL-CH1-CH2-CH3; (xiii) VL-CH2-CH3; i (xiv) VL-CL. U bilo kojoj konfiguraciji varijabilnih i konstantnih domena, uključujući bilo koji od primera konfiguracija navedenih iznad, varijabilni i konstantni domeni mogu biti bilo direktno povezani jedan sa drugim ili mogu biti povezani celim ili delimičnim zglobnim ili linker regionom. Zglobni region se može sastojati od najmanje 2 (npr., 5, 10, 15, 20, 40, 60 ili više) aminokiselina što dovodi do fleksibilnog ili polufleksibilnog povezivanja između susednih varijabilnih i/ili konstantnih domena u jednom polipeptidnom molekulu. Povrh toga, fragment antitela koji vezuje antigen prema predmetnom opisu može sadržati homodimer ili heterodimer (ili drugi multimer) bilo koje od konfiguracija varijabilnog i konstantnog domena navedenih iznad, koji su u nekovalentnoj vezi jedan sa drugim i/ili sa jednim ili više monomerskih VHili VLdomena (npr., pomoću disulfidne veze (veza)).

[0053] Antitela koja se upotrebljavaju u postupcima opisanim ovde mogu biti humana antitela. Kako se upotrebljava ovde, termin „humano antitelo“ se odnosi na antitela koja imaju varijabilne i konstantne regione izvedene iz humanih germinativnih imunoglobulinskih sekvenci. Humana antitela prema predmetnom opisu mogu, i pored toga, uključivati aminokiselinske ostatke koji nisu kodirani humanim germinativnim imunoglobulinskim sekvencama (npr., mutacijama uvedenim nasumičnom ili mutagenezom specifičnom za mesto in vitro ili somatskom mutacijom in vivo), na primer u CDR-ovima i posebno CDR3. Međutim, termin „humano antitelo“, kako se upotrebljava ovde, nije predviđeno da uključuje antitela u kojima su CDR sekvence izvedene iz germinativne linije drugih sisarskih vrsta, kao što je miš, graftovane na humane okvirne sekvence.

[0054] Antitela koja se upotrebljavaju u postupcima opisanim ovde mogu biti rekombinantna humana antitela. Kako se upotrebljava ovde, termin „rekombinantno humano antitelo“ uključuje sva humana antitela koja su pripremljena, eksprimovana, kreirana ili izolovana rekombinantnim sredstvima, kao što su antitela eksprimovana pomoću rekombinantnog ekspresionog vektora transfektovanog na ćeliju domaćina (dalje opisano ispod), antitela izolovana iz biblioteke rekombinantnih, kombinatornih humanih antitela (dalje opisano ispod), antitela izolovana iz životinje (npr., miša) koja su transgenska za humane imunoglobulinske gene [videti npr., Taylor et al. (1992) Nucl. Acids Res. 20:6287-6295] ili antitela pripremljena, eksprimovana, kreirana ili izolovana bilo kojim drugim sredstvom koje uključuje spajanje sekvence humanog imunoglobulinskog gena sa drugim DNK sekvencama. Takva rekombinantna humana antitela imaju varijabilne i konstantne regione izvedene iz humanih germinativnih imunoglobulinskih sekvenci. U određenim izvođenjima, međutim, takva rekombinantna humana antitela podvrgavaju se mutagenezi in vitro (ili, kada se životinjske transgenske upotrebljavaju za humane Ig sekvence, somatskoj mutagenezi in vivo) i tako aminokiselinske sekvence VHi VLregiona rekombinantnih antitela jesu sekvence koje, dok se izvode iz humanih germinativnih VHi VLsekvenci i povezane su sa njima, mogu ne postojati prirodno unutar germinativnog repertoara humanih antitela in vivo.

Anti-PD-1 antitela i njihovi fragmenti koji vezuju antigen

[0055] PD-1 inhibitori koji se upotrebljavaju u pronalasku jesu antitela ili njihovi fragmenti koji vezuju antigen koji specifično vezuju PD-1. Termin „specifično vezuje“, ili slično, znači da antitelo ili njegov fragment koji vezuje antigen formira kompleks sa antigenom koji je relativno stabilan pod fiziološkim uslovima. Postupci za određivanje da li se antitelo specifično vezuje za antigen dobro su poznati u oblasti tehnike i uključuju, na primer, ravnotežnu dijalizu, površinsku plazmonsku rezonanciju, i slično. Na primer, antitelo koje „specifično vezuje“ PD-1, oanko kako se upotrebljava u kontekstu predmetnog opisa, uključuje antitela koja vezuju PD-1 ili njegov deo sa KDod manje od oko 500 nM, manje od oko 300 nM, manje od oko 200 nM, manje od oko 100 nM, manje od oko 90 nM, manje od oko 80 nM, manje od oko 70 nM, manje od oko 60 nM, manje od oko 50 nM, manje od oko 40 nM, manje od oko 30 nM, manje od oko 20 nM, manje od oko 10 nM, manje od oko 5 nM, manje od oko 4 nM, manje od oko 3 nM, manje od oko 2 nM, manje od oko 1 nM ili manje od oko 0.5 nM, kako je izmereno u testu površinske plazmonske rezonancije. Izolovano antitelo koje specifično vezuje humani PD-1 može, međutim, imati unakrsnu reaktivnost sa drugim antigenima, kao što su PD-1 molekuli iz drugih (ne-humanih) vrsta.

[0056] Prema određenim primerima aspekata opisa, anti-PD-1 antitelo, ili njegov fragment koji vezuje antigen, sadrži varijabilni region teškog lanca (HCVR), varijabilni region lakog lanca (LCVR), i/ili regione koji određuju komplementarnost (CDR-ovi) koji sadrže aminokiselinske sekvence bilo kog od anti-PD-1 antitela izloženih u US Patentu Br.9,987,500. Anti-PD-1 antitelo ili njegov fragment koji vezuje antigen upotrebljeni u kontekstu predmetnog pronalaska sadrže regione koji određuju komplementarnost teškog lanca (HCDR-ovi) varijabilnog regiona teškog lanca (HCVR) koji sadrži aminokiselinske sekvence iz SEQ ID NO: 1 i regione koji određuju komplementarnost lakog lanca (LCDR-ovi) varijabilnog regiona lakog lanca (LCVR) koji sadrži aminokiselinsku sekvencu iz SEQ ID NO: 2. Prema određenim izvođenjima, anti-PD-1 antitelo ili njegov fragment koji vezuje antigen sadrži tri HCDR-a (HCDR1, HCDR2 i HCDR3) i tri LCDR-a (LCDR1, LCDR2 i LCDR3), pri čemu HCDR1 sadrži aminokiselinsku sekvencu iz SEQ ID NO: 3; HCDR2 sadrži aminokiselinsku sekvencu iz SEQ ID NO: 4; HCDR3 sadrži aminokiselinsku sekvencu iz SEQ ID NO: 5; LCDR1 sadrži aminokiselinsku sekvencu iz SEQ ID NO: 6; LCDR2 sadrži aminokiselinsku sekvencu iz SEQ ID NO: 7; i LCDR3 sadrži aminokiselinsku sekvencu iz SEQ ID NO: 8. U još nekim sledećim izvođenjima, anti-PD-1 antitelo ili njegov fragment koji vezuje antigen sadrži HCVR koji sadrži SEQ ID NO: 1 i LCVR koji sadrži SEQ ID NO: 2. U određenim izvođenjima, postupci prema predmetnom opisu obuhvataju upotrebu anti-PD-1 antitela, pri čemu antitelo sadrži teški lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu iz SEQ ID NO: 9. U nekim izvođenjima, anti-PD-1 antitelo sadrži laki lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu iz SEQ ID NO: 10. Primer antitela koje sadrži teški lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu iz SEQ ID NO: 9 i laki lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu iz SEQ ID NO: 10 jeste potpuno humano anti-PD-1 antitelo poznato kao cemiplimab (takođe poznato kao REGN2810).

[0057] Prema određenim primerima izvođenja, postupci obuhvataju upotrebu REGN2810, ili njegovog bioekvivalenta. Kako se upotrebljava ovde, termin „bioekvivalent“ se odnosi na anti-PD-1 antitela ili proteine koji vezuju PD-1 ili njihove fragmente koji su farmaceutski ekvivalenti ili farmaceutske alternative čija brzina i/ili razmera apsorpcije ne pokazuje značajnu razliku u odnosu na one referentnog antitela (npr., REGN2810) kada se daju u istoj molarnoj dozi pod sličnim eksperimentalnim uslovima, bilo u jednoj dozi ili višestrukoj dozi. U kontekstu predmetnog opisa, termin „bioekvivalent“ uključuje proteine koji vezuju antigen koji vezuju PD-1 i nemaju klinički značajne razlike u odnosu na REGN2810 u pogledu bezbednosti, čistoće i/ili potencije.

[0058] Prema određenim izvođenjima, anti-humani PD-1, ili njegov fragment koji vezuje antigen, sadrži HCVR koji ima 90%, 95%, 98% ili 99% identiteta sekvence sa SEQ ID NO: 1.

[0059] Prema određenim izvođenjima, anti-humani PD-1, ili njegov fragment koji vezuje antigen, sadrži LCVR koji ima 90%, 95%, 98% ili 99% identiteta sekvence sa SEQ ID NO: 2.

[0060] Prema određenim izvođenjima, anti-humani PD-1, ili njegov fragment koji vezuje antigen, sadrži HCVR koji sadrži aminokiselinsku sekvencu iz SEQ ID NO: 1 koja ima ne više od 5 aminokiselinskih supstitucija. Prema određenim izvođenjima, anti-humani PD-1, ili njegov fragment koji vezuje antigen, sadrži LCVR koji sadrži aminokiselinsku sekvencu iz SEQ ID NO: 2 koja ima ne više od 2 aminokiselinske supstitucije.

[0061] Identitet sekvence se može meriti postupcima poznatim u oblasti tehnike (npr., GAP, BESTFIT, i BLAST).

[0062] Predmetni opis takođe uključuje upotrebu anti-PD-1 antitela u postupcima za lečenje kancera kože, pri čemu anti-PD-1 antitela sadrže varijante bilo koje od HCVR, LCVR i/ili CDR aminokiselinskih sekvenci opisanih ovde koja imaju jednu ili više konzervativnih aminokiselinskih supstitucija. Na primer, predmetni opis uključuje upotrebu anti-PD-1 antitela koja imaju HCVR, LCVR i/ili CDR aminokiselinske sekvence sa, npr., 10 ili manje, 8 ili manje, 6 ili manje, 4 ili manje, itd. konzervativnih aminokiselinskih supstitucija u odnosu na bilo koju od HCVR, LCVR i/ili CDR aminokiselinskih sekvenci opisanih ovde.

[0063] Druga anti-PD-1 antitela koja se mogu upotrebljavati u kontekstu postupaka prema predmetnom opisu uključuju, npr., antitela na koja se poziva i koja su poznata u oblasti tehnike kao nivolumab, pembrolizumab, MEDI0608, pidilizumab, BI 754091, spartalizumab (takođe poznat kao PDR001), camrelizumab (takođe poznat kao SHR-1210), JNJ-63723283, MCLA-134, ili bilo koje od anti-PD-1 antitela izloženih u US Patentima Br. 6808710, 7488802, 8008449, 8168757, 8354509, 8609089, 8686119, 8779105, 8900587, i 9987500, i u patentnim objavama WO2006/121168, WO2009/114335.

[0064] Anti-PD-1 antitela koja se upotrebljavaju u kontekstu postupaka iz predmetnog opisa mogu imati pH-zavisne karakteristike vezivanja. Na primer, anti-PD-1 antitelo za upotrebu u postupcima iz predmetnog opisa mogu pokazivati smanjeno vezivanje za PD-1 pri kiseloj pH u poređenju sa neutralnom pH. Alternativno, anti-PD-1 antitetlo prema pronalasku može pokazivati poboljšano vezivanje za svoj antigen pri kiseloj pH u poređenju sa neutralnom pH. Izraz „kisela pH“ uključuje pH vrednosti koje su manje od oko 6,2, npr., oko 6,0, 5,95, 5,9, 5,85, 5,8, 5,75, 5,7, 5,65, 5,6, 5,55, 5,5, 5,45, 5,4, 5,35, 5,3, 5,25, 5,2, 5,15, 5,1, 5,05, 5,0, ili manje. Kako se upotrebljava ovde, izraz „neutralna pH“ označava pH od oko 7,0 do oko 7,4. Izraz „neutralna pH“ uključuje pH vrednosti od oko 7,0, 7,05, 7,1, 7,15, 7,2, 7,25, 7,3, 7,35, i 7,4.

[0065] U određenim slučajevima, „smanjeno vezivanje za PD-1 pri kiseloj pH u poređenju sa neutralnom pH“ izražava se u smislu odnosa KD vrednosti antitela koje se vezuje za PD-1 pri kiseloj pH prema KD vrednosti antitela koje se vezuje za PD-1 pri neutralnoj pH (ili obratno). Na primer, može se smatrati da antitelo ili njegov fragment koji vezuje antigen pokazuju „smanjeno vezivanje za PD-1 pri kiseloj pH u poređenju sa neutralnom pH“ za svrhe predmetnog opisa ako antitelo ili njegov fragment koji vezuje antigen pokazuju kiseli/neutralni KDodnos od oko 3,0 ili veći. U određenim primerima izvođenja, kiseli/neutralni KDodnos za antitelo ili fragment koji vezuje antigen prema predmetnom opisu može biti oko 3,0, 3,5, 4,0, 4,5, 5,0, 5,5, 6,0, 6,5, 7,0, 7,5, 8,0, 8,5, 9,0, 9,5, 10,0, 10,5, 11,0, 11,5, 12,0, 12,5, 13,0, 13,5, 14,0, 14,5, 15,0, 20,0, 25,0, 30,0, 40,0, 50,0, 60,0, 70,0, 100,0, ili veći.

[0066] Antitela sa pH-zavisnim karakteristikama vezivanja mogu se dobiti, npr., skriningom populacije antitela za smanjeno (ili poboljšano) vezivanje za određeni antigen pri kiseloj pH u poređenju sa neutralnom pH. Uz to, modifikacije domena koji vezuje antigen na aminokiselinskom nivou mogu proizvesti antitela sa pH-zavisnim karakteristikama vezivanja. Na primer, supstituisanjem jedne ili više aminokiselina iz domena koji vezuje antigen (npr., unutar CDR-a) histidinskim ostatkom, može se dobiti antitelo sa smanjenim vezivanjem antigena pri kiseloj pH u odnosu na neutralnu pH. Kako se upotrebljava ovde, izraz „kisela pH“ označava pH od 6,0 ili manje.

Anti-PD-L1 antitela i njegovi fragmenti koji vezuju antigen

[0067] U nekim aspektima opisa, PD-1 inhibitori koji se upotrebljavaju u postupcima opisanim ovde jesu antitela ili njegovi fragmenti koji vezuju antigen koji specifično vezuju PD-L1. Na primer, antitelo koje „specifično vezuje“ PD-L1, kako se upotrebljava u kontekstu predmetnog opisa, uključuje antitela koja

-8

vezuju PD-L1 ili njegov deo sa KD od oko 1310 M ili manje (npr., manji KD označava bliskije vezivanje). „Visokoafinitetno“ anti-PD-L1 antitelo se odnosi na ona mAb koja imaju afinitet vezivanja za PD-L1, izražen -8 -9 -10 -11 -12 kao KDod najmanje 10 M, poželjno 10 M, poželjnije 10 M, još poželjnije 10 M, još poželjnije 10 M,

™

kako je izmereno pomoću površinske plazmonske rezonancije, npr., BIACORE ili ELISA testom sa afinetetom prema rastvoru. Izolovano antitelo koje specifično vezuje humani PD-L1 može, međutim, imati unakrsnu reaktivnost sa drugim antigenima, kao što su PD-L1 molekuli iz drugih (ne-humanih) vrsta.

[0068] Prema određenim primerima aspekata opisa, anti-PD-L1 antitelo, ili njegov fragment koji vezuje antigen, sadrži varijabilni region teškog lanca (HCVR), varijabilni region lakog lanca (LCVR), i/ili regione koji određuju komplementarnost (CDR-ovi) koji sadrže aminokiselinske sekvence bilo kojih anti-PD-L1 antitela izloženih u US Patentu Br. 9,938,345. U određenim primerima aspekata, anti-PD-L1 antitelo ili njegov fragment koji vezuje antigen, koji se mogu upoterbljavati u kontekstu predmetnog opisa, sadrže regione koji određuju komplementarnost teškog lanca (HCDR-ovi) varijabilnog regiona teškog lanca (HCVR) i regione koji određuju komplementarnost lakog lanca (LCDR-ovi) varijabilnog regiona lakog lanca (LCVR), pri čemu HCVR i LCVR sadrže aminokiselinske sekvence anti-PDL1 antitela označenog kao H2M8314N u US Patentu Br. 9,938,345. Prema određenim aspektima, anti-PD-L1 antitelo ili njegov fragment koji vezuje antigen sadrže tri HCDR-a (HCDR1, HCDR2 i HCDR3) i tri LCDR-a (LCDR1, LCDR2 i LCDR3), pri čemu HCDR1, HCDR2, HCDR3, LCDR1, LCDR2 i LCDR3 sadrže aminokiselinske sekvence anti-PD-L1 antitela označenog kao H2M8314N u US Patentu Br.9,938,345. U još nekim apektima, anti-PD-L1 antitelo ili njegov fragment koji vezuje antigen sadrže HCVR i LCVR koji sadrže aminokiselinske sekvence anti-PD-L1 antitela označenog kao H2M8314N u US Patentu Br.9,938,345.

[0069] U određenim aspektima, postupci iz predmetnog opisa obuhvataju upotrebu anti-PD-L1 antitela, pri čemu antitelo sadrži teški lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu teškog lanca iz anti-PD-L1 antitela označenog kao H2M8314N u US Patentu Br.9,938,345. U nekim aspektima, anti-PD-1 antitelo sadrži laki lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu lakog lanca iz anti-PD-L1 antitela označenog kao H2M8314N u US Patentu Br.9,938,345.

[0070] Prema određenim aspektima predmetnog opisa, anti-humani PD-L1, ili njegov fragment koji vezuje antigen, sadrži LCVR koji ima 90%, 95%, 98% ili 99% identiteta sekvence sa LCVR aminokiselinskom sekvencom iz anti-PD-L1 antitela označenog kao H2M8314N u US Patentu Br.9,938,345.

[0071] Prema određenim aspektima predmetnog opisa, anti-humani PD-L1, ili njegov fragment koji vezuje antigen, sadrži HCVR koji sadrži aminokiselinsku sekvencu iz anti-PD-L1 antitela označenog kao H2M8314N u US Patentu Br. 9,938,345, koje ima ne više od 5 aminokiselinskih supstitucija. Prema određenim aspektima predmetnog opisa, anti-humani PD-L1, ili njegov fragment koji vezuje antigen, sadrži LCVR koji sadrži aminokiselinsku sekvencu iz anti-PD-L1 antitela označenog kao H2M8314N u US Patentu Br.

9,938,345, koje ima ne više od 2 aminokiselinske supstitucije.

[0072] Identitet sekvence se može meriti postupcima poznatim u oblasti tehnike (npr., GAP, BESTFIT i BLAST).

[0073] Predmetni opis takođe uključuje upotrebu anti-PD-L1 antitela u postupcima za lečenje kancera kože, pri čemu anti-PD-L1 antitela sadrže varijante bilo kojih od HCVR, LCVR i/ili CDR aminokiselinskih sekvenci opisanih ovde koje imaju jednu ili više konzervativnih aminokiselinskih supstitucija. Na primer, predmetni opis uključuje upotrebu anti-PD-L1 antitela koja imaju HCVR, LCVR i/ili CDR aminokiselinske sekvence sa, npr., 10 ili manje, 8 ili manje, 6 ili manje, 4 ili manje, itd. konzervativnih aminokiselinskih supstitucija u odnosu na bilo koje od HCVR, LCVR i/ili CDR aminokiselinskih sekvenci opisanih ovde.

[0074] Druga anti-PD-L1 antitela koja se mogu upotrebljavati u kontekstu postupaka iz predmetnog opisa uključuju, npr., antitela na koja se poziva i koja su poznata u oblasti tehnike kao MDX-1105, atezolizumab ™ ™ ™

(TECENTRIQ ), durvalumab (IMFINZI ), avelumab (BAVENCIO ), LY3300054, FAZ053, STI-1014, CX-072, KN035 (Zhang et al., Cell Discovery, 3, 170004 (March 2017)), CK-301 (Gorelik et al., American Association for Cancer Research Annual Meeting (AACR), 2016-04-04 Abstract 4606), ili bilo koje od drugih anti-PD-L1 antitela izloženih u patentnim objavama US7943743, US8217149, US9402899, US9624298, US 9938345, WO 2007/005874, WO 2010/077634, WO 2013/181452, WO 2013/181634, WO 2016/149201, WO 2017/034916, ili EP3177649.

Farmaceutske kompozicije i davanje

[0075] PD-1 inhibitori opisani ovde mogu se uključiti u farmaceutsku kompoziciju, koja se može formulisati sa pogodnim nosačima, pomoćnim sredstvima, puferima, i drugim sredstvima koja obezbeđuju pogodan prenos, isporuku, toleranciju, i slično. Mnoštvo pogodnih formulacija može se pronaći u zbirci formula poznatoj svim farmaceutskim hemičarima: Remington’s Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Company, Easton, PA. Te formulacije uključuju, na primer, prahove, paste, masti, želee, voskove, ulja,

™

lipide, vezikule koje sadrže lipide (katjonske ili anjonske) (kao što je LIPOFECTIN ), DNK konjugate, anhidrovane apsorpcione paste, emulzije ulje u vodi i voda u ulju, emulzije carbowax (polietilen glikoli različitih molekulskih masa), polučvrste gelove, i polučvrste smeše koje sadrže carbowax. Videti takođe Powell et al., „Compendium of excipients for parenteral formulations“ PDA, J Pharm Sci Technol 52:238-311 (1998).

[0076] Poznati su različiti sistemi isporuke i mogu se upotrebljavati za davanje farmaceutske kompozicije prema pronalasku, npr., inkapsulacija u lipozomima, mikročestice, mikrokapsule, rekombinantne ćelije sposobne za eksprimovanje mutantnih virusa, endocitoza posredovana receptorom. Videti, npr., Wu et al., J. Biol. Chem.262: 4429-32 (1987).

[0077] Farmaceutska kompozicija koja sadrži PD-1 inhibitor opisan ovde pogodna je za intralezijsko davanje, koje uključuje davanje direktno u leziju kancera kože i davanje u kožu koja prekriva leziju kancera kože. Farmaceutska kompozicija može se isporučivati supkutanim ubrizgavanjem pomoću standardne igle i šprica.

[0078] Formulacije farmaceutske kompozicije koje se mogu ubrizgavati mogu se pripremati poznatim postupcima. Na primer, formulacija koja se može ubrizgavati može se pripremati, npr., rastvaranjem, suspendovanjem ili emulgovanjem antitela ili njegove soli opisane iznad u sterilnom vodenom medijumu ili uljanom medijumu koji se uobičajeno upotrebljava za ubrizgavanja. Kao vodeni medijum za ubrizgavanja, postoje, na primer, fiziološki rastvor, izotonični rastvor koji sadrži glukozu i druga pomoćna sredstva, itd., koji se mogu upotrebljavati u kombinaciji sa odgovarajućim sredstvom za rastvaranje kao što je alkohol (npr., etanol), polialkohol (npr., propilen glikol, polietilen glikol), nejonski surfaktant [npr., polisorbat 80, HCO-50 (polioksietilen (50 mol) adukt hidrogenizovanog ricinusovog ulja)], itd. Kao uljani medijum, koriste se, npr., susamovo ulje, sojino ulje, itd., koja se mogu upotrebljavati u kombinaciji sa sredstvom za rastvaranje kao što je benzil benzoat, benzil alkohol, itd. Tako pripremljena formulacija koja se može ubrizgavati poželjno se puni u odgovarajuću ampulu za ubrizgavanje. U nekim izvođenjima, formulacija koja se može ubrizgavati može biti u obliku rastvora za intralezijsko ubrizgavanje koji uključuje koncentraciju PD-1 inhibitora i jednog ili više rastvarača (npr., destilovane vode, fiziološkog rastvora, itd.).

[0079] U određenim izvođenjima, predmetni opis obezbeđuje farmaceutsku kompoziciju ili formulaciju koja sadrži terapijsku količinu anti-PD-1 antitela i farmaceutski prihvatljiv nosač. U određenim izvođenjima, predmetni opis obezbeđuje anti-PD-1 antitelo formulisano u farmaceutskoj kompoziciji za davanje intralezijskim ubrizgavanjem.

[0080] Primeri farmaceutskih kompozicija koje sadrže anti-PD-1 antitelo koje se može upotrebljavati u kontekstu predmetnog opisa opisani su, npr., u US 2019/0040137.

Režimi davanja

[0081] U određenim izvođenjima, postupci uključuju intralezijsko davanje u tumor subjekta kome je to potrebno terapijski efektivne količine anti-PD-1 antitela u višestrukim dozama, npr., kao deo specifičnog terapijskog doznog režima. Na primer, iznad pomenuti terapijski dozni režim može obuhvatati davanje subjektu jedne ili više doza PD-1 inhibitora sa učestalošću od oko jednom dnevno, jednom na svaka dva dana, jednom na svaka tri dana, jednom na svaka četiri dana, jednom na svakih pet dana, jednom na svakih šest dana, jednom sedmično, jednom na svake dve sedmice, jednom na svake tri sedmice, jednom na svake četiri sedmice, jednom na svakih pet sedmica, jednom na svakih šest sedmica, jednom na svakih osam sedmica, jednom na svakih dvanaest sedmica, jednom mesečno, jednom na svaka dva meseca, jednom na svaka tri meseca, jednom na svaka četiri meseca, dva puta dnevno, dva puta na svaka dva dana, dva puta na svaka tri dana, dva puta na svaka četiri dana, dva puta na svakih pet dana, dva puta na svakih šest dana, dva puta sedmično, dva puta na svake dve sedmice, dva puta na svake tri sedmice, dva puta na svake četiri sedmice, dva puta na svakih pet sedmica, dva puta na svakih šest sedmica, dva puta na svakih osam sedmica, dva puta na svakih dvanaest sedmica, dva puta mesečno, dva puta na svaka dva meseca, dva puta na svaka tri meseca, dva puta na svaka četiri meseca, tri puta dnevno, tri puta na svaka dva dana, tri puta na svaka tri dana, tri puta na svaka četiri dana, tri puta na svakih pet dana, tri puta na svakih šest dana, tri puta sedmično, tri puta na svake dve sedmice, tri puta na svake tri sedmice, tri puta na svake četiri sedmice, tri puta na svakih pet sedmica, tri puta na svakih šest sedmica, tri puta na svakih osam sedmica, tri puta na svakih dvanaest sedmica, tri puta mesečno, tri puta na svaka dva meseca, tri puta na svaka tri meseca, tri puta na svaka četiri meseca ili manje učestalo ili po potrebi dokle god se postiže terapijski odgovor. U jednom izvođenju, jedna ili više doza anti-PD-1 antitela se daje jednom sedmično.

[0082] U određenim izvođenjima, jedna ili više doza se daje u najmanje jednom ciklusu lečenja. Postupci, prema ovom aspektu, obuhvataju davanje subjektu kome je to potrebno najmanje jednog ciklusa lečenja koji obuhvata davanje 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 ili više doza anti-PD-1 antitela. U jednom izvođenju, ciklus lečenja obuhvata 3 doze PD-1 inhibitora. U jednom izvođenju, ciklus lečenja obuhvata 12 doza PD-1 inhibitora. U jednom izvođenju, ciklus lečenja obuhvata 24 doze PD-1 inhibitora. U jednom izvođenju, ciklus lečenja obuhvata 3 doze PD-1 inhibitora, pri čemu se svaka doza daje dve sedmice nakon neposredno prethodne doze. U jednom izvođenju, ciklus lečenja obuhvata 10 doza PD-1 inhibitora, pri čemu se svaka doza daje jednu sedmicu nakon neposredno prethodne doze. U jednom izvođenju, ciklus lečenja obuhvata 12 doza PD-1 inhibitora, pri čemu se svaka doza daje jednu sedmicu nakon neposredno prethodne doze.

[0083] U jednom izvođenju, sve doze koje se daju u ciklusu lečenja sadrže istu količinu PD-1 inhibitora. U drugom izvođenju, ciklus lečenja obuhvata davanje najmanje dve doze koje sadrže različite količine PD-1 inhibitora. U jednom izvođenju, prva doza u ciklusu lečenja sadrži veću količinu PD-1 inhibitora nego naredne doze u ciklusu lečenja. U jednom izvođenju, prva doza u ciklusu lečenja sadrži manju količinu PD-1 inhibitora nego naredne doze u ciklusu lečenja.

[0084] U jednom izvođenju, ciklus lečenja se ponavlja. U nekim izvođenjima, ciklus lečenja se ponavlja 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, ili više puta.

[0085] U određenim izvođenjima, doza PD-1 inhibitora se daje subjektu u jednoj seansi ili poseti pacijenta. U određenim izvođenjima, davanje doze uključuje intralezijsko davanje jednog ili više ubrizgavanja anti-PD-1 antitela u jednu ili više lokacija tumorske lezije. Neke ili sve lokacije tumorske lezije mogu biti iste ili različite jedna od druge. U jednom izvođenju, davanje doze uključuje davanje 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 ili više ubrizgavanja anti-PD-1 antitela u 1, 2, 3, 4, 5, 6, ili 7 lokacija tumorske lezije. U jednom izvođenju, 2 do 5 ubrizgavanja anti-PD-1 antitela se daje u 2 do 5 lokacija tumorske lezije subjekta. U nekim izvođenjima, lokacija tumorske lezije uključuje, ali nije ograničena na njih, gornju (prednju) polovinu lezije, najgušći deo gornje polovine lezije, kožu koja prekriva tumorsku leziju, i/ili gornju (prednju) periferiju tumora blizu ili pored dodirne površine sa kožom normalnog izgleda.

[0086] U nekim izvođenjima, davanje doze koje obuhvata intralezijsko davanje 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 ili više ubrizgavanja anti-PD-1 antitela završava se tokom manje od 10 minuta, na primer 1 do 6 minuta, 2 do 5 minuta, ili 2 do 3 minuta, kako je izmereno od početka prvog datog ubrizgavanja obuhvaćenog u dozi do kraja poslednjeg datog ubrizgavanja obuhvaćenog u dozi. Na primer, u jednom neograničavajućem primeru izvođenja, ukupno vreme za intralezijsko davanje PD-1 inhibitora (kao što je anti-PD-1 antitelo), mereno od početka prvog davanja do kraja poslednjeg davanja, jeste oko 2 do 5 minuta. U određenim izvođenjima, jedno ili više ubrizgavanja anti-PD-1 antitela se intralezijski daje subjektu kome je to potrebno tokom vremenskog perioda od 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, ili 10 minuta.

[0087] Kako se upotrebljavaju ovde, termini „početni“, „drugi“, „treći“, i tako dalje odnose se na vremenske sekvence davanja. Prema tome, „početna doza“ je doza koja se daje na početku režima lečenja (ona se takođe naziva „osnovna doza“); „druga doza“ je doza koja se daje nakon početne doze; i „treća doza“ je doza koja se daje nakon druge doze. Početna, druga i treća doza sve mogu sadržati istu količinu PD-1 inhibitora (anti-PD-1 antitela). U određenim izvođenjima, međutim, količine sadržane u početnoj, drugoj i/ili trećoj dozi međusobno variraju (npr., podešene su naviše ili naniže po potrebi) tokom kursa lečenja. U određenim izvođenjima, jedna ili više (npr., 1, 2, 3, 4, ili 5) doza se daju na početku režima lečenja kao „udarne doze“, za kojima slede naredne doze koje se daju na manje učestaloj osnovi (npr., „doze održavanja“). Na primer, anti-PD-1 antitelo se može davati pacijentu sa kancerom u udarnoj dozi od oko 1 mg/kg do oko 3 mg/kg, za čim sledi jedna ili više doza održavanja od oko 0,1 mg/kg do oko 20 mg/kg pacijentove telesne mase.

[0088] U jednom primeru izvođenja, svaka druga i/ili treća doza se daje 1⁄2 do 4 sedmice ili više (npr., 1⁄2, 1, 11⁄2, 2, 21⁄2, 3, 31⁄2, 4, ili više sedmica) nakon neposredno prethodne doze. Fraza „neposredno prethodna doza“, kako se upotrebljava ovde, označava, u nizu višestrukih davanja, dozu anti-PD-1 antitela koje se daje subjektu pre davanja sledeće doze u nizu bez interventnih doza.

[0089] Slično, „početni ciklus lečenja“ je ciklus lečenja koji se daje na početku režima lečenja; „drugi ciklus lečenja“ je ciklus lečenja koji se daje nakon početnog ciklusa lečenja; i „treći ciklus lečenja“ je ciklus lečenja koji se daje nakon drugog ciklusa lečenja. U kontekstu predmetnog opisa, ciklusi lečenja mogu biti isti ili međusobno različiti.

Doziranje

[0090] U određenim izvođenjima, svaka doza PD-1 inhibitora sadrži 0,1, 1, 0,3, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 ili 10 mg/kg pacijentove telesne mase. U određenim izvođenjima, svaka doza sadrži 5–500 mg PD-1 inhibitora, na primer 5, 10, 15, 20, 25, 40, 45, 50, 60, 70, 80, 90, 100 mg ili više PD-1 inhibitora. U jednom izvođenju, PD-1 inhibitor je REGN2810 (cemiplimab).

[0091] Količina PD-1 inhibitora koji se intralezijski daje subjektu prema postupcima opisanim ovde jeste, generalno, terapijski efektivna količina. Kako se upotrebljava ovde, termin „terapijski efektivna količina“ označava količinu PD-1 inhibitora koja dovodi do jednog ili više od: (a) smanjenja ozbiljnosti ili trajanja simptoma ili indikacije kancera kože – npr. tumorske lezije; (b) inhibicije rasta tumora, ili povećanja u nekrozi tumora, skupljanju tumora i/ili nestanku tumora; (c) odlaganja u rastu i razvoju tumora; (d) inhibicije tumorskih metastaza; (e) prevencije rekurencije rasta tumora; (f) povećanja u preživaljavanju subjekta sa kancerom; i/ili (g) smanjenja u upotrebi ili potrebi za uobičajenom anti-kancernom terapijom (npr., eliminisanja potrebe za operacijom ili smanjene ili eliminisanje upotrebe hemoterapijskih ili citotoksičnih sredstava) u poređenju sa nelečenim subjektom ili subjektom koji je lečen PD-1 inhibitorom putem davanja koje nije intralezijsko (npr., intravenskom infuzijom).

[0092] U slučaju PD-1 inhibitora (npr., anti-PD-1 antitela), terapijski efektivna količina može biti od oko 5 mg do oko 500 mg, od oko 10 mg do oko 450 mg, od oko 50 mg do oko 400 mg, od oko 75 mg do oko 350 mg, ili od oko 100 mg do oko 300 mg antitela. Na primer, u različitim izvođenjima, količina PD-1 inhibitora je oko 5 mg, oko 10 mg, oko 15 mg, oko 20 mg, oko 30 mg, oko 40 mg, oko 50 mg, oko 60 mg, oko 70 mg, oko 80 mg, oko 90 mg, oko 100 mg, oko 110 mg, oko 120 mg, oko 130 mg, oko 140 mg, oko 150 mg, oko 160 mg, oko 170 mg, oko 180 mg, oko 190 mg, oko 200 mg, oko 210 mg, oko 220 mg, oko 230 mg, oko 240 mg, oko 250 mg, oko 260 mg, oko 270 mg, oko 280 mg, oko 290 mg, oko 300 mg, oko 310 mg, oko 320 mg, oko 330 mg, oko 340 mg, oko 350 mg, oko 360 mg, oko 370 mg, oko 380 mg, oko 390 mg, oko 400 mg, oko 410 mg, oko 420 mg, oko 430 mg, oko 440 mg, oko 450 mg, oko 460 mg, oko 470 mg, oko 480 mg, oko 490 mg, oko 500 mg, oko 510 mg, oko 520 mg, oko 530 mg, oko 540 mg, oko 550 mg, oko 560 mg, oko 570 mg, oko 580 mg, oko 590 mg, ili oko 600 mg, PD-1 inhibitora.

[0093] U jednom izvođenju, terapijski efektivna količina od 5 mg PD-1 inhibitora (anti-PD-1 antitela) daje se intralezijski prema postupcima opisanim ovde. U drugom izvođenju, terapijski efektivna količina od 15 mg PD-1 inhibitora (anti-PD-1 antitela) daje se intralezijski prema postupcima opisanim ovde. U sledećem izvođenju, terapijski efektivna količina od 44 mg PD-1 inhibitora (anti-PD-1 antitela) daje se intralezijski prema postupcima opisanim ovde.

[0094] Količina PD-1 inhibitora sadržana u pojedinačnoj dozi može se izraziti u miligramima antitela po kilogramu telesne mase subjekta (tj., mg/kg). U određenim izvođenjima, PD-1 inhibitor koji se upotrebljava u postupcima opisanim ovde može se davati subjektu u dozi od oko 0,0001 do oko 100 mg/kg telesne mase subjekta. U određenim izvođenjima, anti-PD-1 antitelo se može davati u dozi od oko 0,1 mg/kg do oko 20 mg/kg pacijentove telesne mase. U određenim izvođenjima, postupci obuhvataju davanje PD-1 inhibitora (anti-PD-1 antitela) u dozi od oko 1 mg/kg, 3 mg/kg, 5 mg/kg ili 10 mg/kg pacijentove telesne mase.

[0095] U određenim izvođenjima, količina pojedinačne doze PD-1 inhibitora (anti-PD-1 antitela) koja se intralezijski daje pacijentu može biti manja od terapijski efektivne količine, tj., subterapijska doza. Na primer, ako terapijski efektivna količina PD-1 inhibitora sadrži 3 mg/kg, subterapijska doza sadrži količinu manju od 3 mg/kg, npr., 2 mg/kg, 1,5 mg/kg, 1 mg/kg, 0,5 mg/kg ili 0,3 mg/kg. Kako je definisano ovde, „subterapijska doza“ se odnosi na količinu PD-1 inhibitora koja sama po sebi ne dovodi do terapijskog efekta. Međutim, u određenim izvođenjima, višestruke subterapijske doze PD-1 inhibitora se daju da bi kolektivno postigle terapijski efekat kod subjekta.

[0096] U određenim izvođenjima, svaka doza sadrži 0,1–10 mg/kg (npr., 0,3 mg/kg, 1 mg/kg, 3 mg/kg, ili 10 mg/kg) telesne mase subjekta. U određenim drugim izvođenjima, svaka doza sadrži 5–600 mg PD-1 inhibitora (anti-PD-1 antitela), npr., 5 mg, 10 mg, 15 mg, 20 mg, 25 mg, 30 mg, 40 mg, 45 mg, 50 mg, 100 mg, 150 mg, 200 mg, 250 mg, 300 mg, 350 mg, 400 mg, ili 500 mg PD-1 inhibitora.

PRIMERI

[0097] Prikazana tehnologija je dalje opisana posredstvom sledećih primera. Upotreba tih i drugih primera bilo gde u specifikaciji je samo ilustrativna, i ni na koji način ne ograničava obim i značenje pronalaska ili bilo kog primera forme. Isto tako, pronalazak nije ograničen na bilo koja posebna poželjna izvođenja opisana ovde. Zaista, modifikacije i varijacije pronalaska mogu biti očigledne stručnjacima u oblasti tehnike nakon čitanja ove specifikacije. Pronalazak stoga treba da bude ograničen samo u smislu patentnih zahteva, zajedno sa punim obimom ekvivalenata na koja patentni zahtevi polažu prava. Takođe, dok su ulagani napori da se osigura tačnost u pogledu upotrebljenih brojeva (npr., količina, temperature, itd.), neke eksperimentalne greške i odstupanja treba uzeti u obzir. Osim ako nije naznačeno drugačije, delovi su delovi mase, molekulska masa je prosečna molekulska masa, temperatura je u stepenima Celzijusa, i pritisak je na ili blizu atmosferskog.

Primer 1: Kliničko ispitivanje anti-PD-1 antitela davanog intralezijski kod pacijenata sa rekurentnim kutanim karcinomom skvamoznih ćelija (CSCC)

[0098] Ova studija je otvorena studija faze 1 (sa proširenjima kohorte), sa jednom grupom i sa povećanjem doze, za evaluaciju bezbednosti, tolerabilnosti, farmakokinetike (PK – pharmacokinetics) i antitumorske efikasnosti sedmičnih intralezijskih ubrizgavanja anti-PD-1 antitela kod pacijenata sa resektabilnim CSCC-om, tipom tumora koji je visoko imunoreaktivan.

[0099] Primer anti-PD-1 antitela upotrebljenog u ovoj studiji je REGN2810 (takođe poznato kao cemiplimab, ili H4H7798N kao što je opisano u US9987500), koje je potpuno humano monoklonsko anti-PD-1 antitelo koje sadrži teški lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu iz SEQ ID NO: 9 i laki lanac koji sadrži aminokiselinsku sekvencu iz SEQ ID NO: 10; par HCVR/LCVR aminokiselinskih sekvenci koji sadrži SEQ ID NOs: 1 /2; i CDR sekvence teškog i lakog lanca koje sadrže SEQ ID NOs: 3 -8.

Ciljevi studije

[0100] Primarni cilj studije je karakterisanje bezbednosti i tolerabilnosti REGN2810 ubrizganog intralezijski kod pacijenata sa rekurentnim CSCC-om.

[0101] Sekundarni ciljevi studije uključuju: (1) opisivanje objektivne brzine odgovora (ORR – objective response rate) u indeks lezijama CSCC-a posle intralezijskih ubrizgavanja REGN2810; (2) opisivanje brzine patološkog potpunog odgovora (CR) u indeks lezijama CSCC-a posle intralezijskih ubrizgavanja REGN2810; (3) opisivanje brzine glavnog patološkog odgovora u indeks lezijama CSCC-a posle intralezijskih ubrizgavanja REGN2810; (4) evaluiranje sistemskog izlaganja REGN2810 posle intralezijskih ubrizgavanja REGN2810; (5) ocenjivanje imunogenosti REGN2810; i (6) ocenjivanje doze REGN2810.

Trajanje studije

[0102] Trajanje studije za svakog pacijenta je približno 7 meseci, uključujući skrining (28 dana), period lečenja (12 sedmica), hiruršku resekciju u poseti na kraju lečenja (sedmica 13), i period praćenja od 90 dana nakon lečenja. (Videti Sliku 1). Studija obuhvata opciju za produženo lečenje (do 12 dodatnih sedmica) prema slučaju pojedinačnog pacijenta kada je lečenje preko 12 sedmica klinički odgovarajuće. Kraj studije je definisan kao poslednja poseta poslednjeg pacijenta.

[0103] U ovoj studiji, očekuje se da će se, nakon intralezijskog davanja, maksimalne koncentracije REGN2810 u serumu pojaviti više od 24 sata nakon intralezijske doze, što zahteva uzorkovanje posle 1.

dana da bi se dobio kompletan PK profil. Uzorci za analizu koncentracije leka biće sakupljani od svih pacijenata pre doze i u nekoliko vremenskih tačaka nakon prve doze. Ovaj raspored uzorkovanja olakšaće određivanje profila koncentracija-vreme nakon poslednje doze tokom celog perioda praćenja (da bi se opisala eliminacija REGN2810).

Studijska populacija

[0104] Ova studija evaluira intralezijski REGN2810 kod pacijenata sa CSCC-om za koji je planirano hirurško uklanjanje, ali za koje je rizik od rekurencije visok usled prethodne istorije rekurencije nakon operacije. Jedna od koristi intralezijskog REGN2810 je smanjen rizik od naknadnih rekurencija usled sposobnosti PD-1 inhibicije da indukuje imunološku memoriju protiv CSCC-a.

[0105] Studijska populacija uključuje muške i ženske pacijente od 18 godina ili starije u vreme pristanka, koji imaju rekurentni CSCC i imaju najmanje 1 resektabilnu leziju koja je ≥ 1,0 cm i ≤ 2,0 cm. Lezija u koju je ubrizgano REGN2810 naziva se „indeks lezija“.

[0106] Kriterijumi za uključivanje: Pacijent mora zadovoljavati sledeće kriterijume da bi bio podoban za uključivanje u studiju: (1) istorija rekurentnog resektabilnog CSCC-a koja zadovoljava bilo koji od sledećih uslova: (a) najmanje 1 prethodni CSCC na glavi i vratu, koji je hirurški uklonjen u periodu od 3 godine pre datuma pristanka, sada sa rekurentnim CSCC u području glave i vrata, koji će biti indeks lezija za studiju i koji je ≥ 1,0 cm i ≤ 2,0 cm (najduži prečnik); (b) najmanje 2 prethodna CSCC-a trupa ili ekstremiteta, koja su hirurški uklonjena u periodu od 3 godine pre datuma pristanka, sada sa rekurentnim CSCC-om trupa ili ekstremiteta, koji će biti indeks lezija za studiju (bilo koja anatomska lokacija) i koji je ≥ 1,0 cm i ≤ 2,0 cm (najduži prečnik); (2) merljiva bolest (tj., najmanje 1 lezija koja je najmanje 1 cm u oba najduža okomita prečnika) u indeks leziji; (3) status performansi prema Istočnoj kooperativnoj onkološkoj grupi (ECOG – Eastern Cooperative Oncology Group) ≤ 1 (Oken et al., Am J Clin Oncol 1982; 5(6):649-55); (4) ≥ 18 godina starosti; (5) Funkcija jetre: (a) ukupni bilirubin ≤ 1,5 x gornja granica normale (ULN – upper limit of normal), (b) alanin aminotransferaza (ALT) ≤ 3 x ULN, (c) aspartat aminotransferaza (AST) ≤ 3 x ULN, (c) alkalna fosfataza (ALP) ≤ 2,5 x ULN; (6) Renalna funkcija: serumski kreatinin ≤ 1,5 x ULN ili procenjeni klirens kreatinina (CrCI) > 30 mL/min; (7) Funkcija koštane srži: (a) hemoglobin ≥ 9,0 g/dL, (b) apsolutni broj 9 9

neutrofila (ANC) ≥ 1,5310 /L, (c) broj trombocita ≥ 75310 /L; (8) voljni i sposobni da se pridržavaju poseta klinici i procedura koje se tiču studije; (9) obezbeđivanje informisanog pristanka potpisanog i datiranog od strane pacijenta u studiji.

[0107] Kriterijumi za isključivanje: Pacijent koji zadovoljava bilo koji od sledećih kriterijuma biće isključen iz studije: (1) tekući ili nedavni (u periodu od 5 godina) dokaz značajne autoimunske bolesti koja je zahtevala lečenje sistemskim imunosupresivnim terapijama, što može nagoveštavati rizik od irAE-ova (ne isključujući: vitiligo, astmu u detinjstvu koja je razrešena, dijabetes tipa 1, rezidualni hipotiroidizam koji je zahtevao hormonsku zamenu, ili psorijazu koja ne zahteva sistemsko lečenje); (2) prethodno lečenje sredstvom koje blokira PD-1/PD-L1 put; (3) prethodno lečenje drugim sistemskim imunomodulatornim sredstvom koje je bilo: (a) u periodu od manje od 4 sedmice (28 dana) od datuma upisa, (b) povezano sa irAE-ima koji su bili ≥ 1. stepen u periodu od 90 dana pre upisa, ili (c) povezano sa toksičnošću koja je dovela do prekida u davanju imunomodulatornog sredstva; (4) poznata istorija metastaze (metastaza) u mozgu od CSCC-a; (5) imunosupresivne doze kortikosteroida (>10 mg prednizona dnevno ili ekvivalenta) u periodu od 4 sedmice pre prve doze REGN2810 (nisu isključeni: pacijenti koji zahtevaju kratak kurs steroida); (6) istorija neinfektivnog penumonitisa u periodu od poslednjih 5 godina; (7) bilo koje antikancerno lečenje, istraživačko ili standardno, u periodu od 30 dana od početnog davanja REGN2810 ili koje je planirano da se desi tokom perioda studije (nisu isključeni: pacijenti koji primaju bisfosfonate ili denosumab; operacija u periodu od 30 dana od planiranog početnog lečenja REGN2810); (8) istorija dokumentovanih alergijskih reakcija ili akutne reakcije hiperosetljivosti koje se pripisuju lečenjima sa antitelima; (9) nekontrolisana infekcija humanim virusom imunodeficijencije (HIV) (detektabilno virusno opterećenje ili broj CD4 ispod 350 bez obzira na antivirusno lečenje), hepatitisom B (HBsAg , koji ima serumski virus hepatitisa B koji se može detektovati lančanom reakcijom DNK polimeraze [PCR] bez obzira na antivirusnu terapiju za hepatitis B), ili infekcija hepatitisom C (pozitivni na antitelo za virus hepatitisa C [HCV Ab ] koji ima HCV RNK detektabilnu PCR-om); ili druge nekontrolisane infekcije; (10) istovremeni malignitet koji nije CSCC i/ili istorija maligniteta koji nije CSCC u periodu od 3 godine od datuma prve planirane doze REGN2810, osim tumorā sa zanemarljivim rizikom od metastaza ili smrti, kao što su adekvatno lečeni BCC kože, karcinom in situ cerviksa, ili duktalni karcinom dojke in situ, ili niskorizični adenokarcinom prostate u ranom stadijumu (T1-T2aN0M0 i Gleason skor ≤ 6 i PSA ≤ 10 ng/mL) za koji plan upravljanja jeste aktivni nadzor, ili adenokarcinom prostate sa samo biohemijskom rekurencijom sa dokumentovanim vremenom udvostručavanja PSA od > 12 meseci za koji plan upravljanja jeste aktivni nadzor (D’Amico et al., JAMA 2005; 294(4):440-7) (Pham et al., J Urol 2016; 196(2):392-8); (11) akutni ili hronični psihijatrijski problemi zbog kojih je pacijent nepodoban za učešće; (12) pacijenti sa istorijom transplantacije čvrstog organa; (13) medicinski komorbiditet, nalaz fizičkog pregleda, ili metabolička disfunkcija, ili klinička labortorijska abnormalnost, zbog kojih je pacijent nepodesan za učešće u kliničkom ispitivanju zbog visokih bezbednosnih rizika i/ili potencijalnog uticaja na interpretaciju rezultata studije; (14) M1 ili N1, N2 (a, b, ili c), ili N3 CSCC. Pacijenti sa istorijom metastatskog CSCC-a (udaljenog ili nodalnog) isključuju se osim ako interval bez bolesti nije najmanje 3 godine; (15) pacijent se isključuje ako je indeks lezija u suvoj crvenoj usni (vermilion), oralnoj šupljini, nazalnoj sluzokoži, ili anogenitalnom području; (16) pacijenti na kumadinu (varfarin), zbog potencijalnog povećanog rizika od krvarenja koji je kod pacijenata na kumadinu povezan sa operacijom; (17) pacijent sa indeks lezijom ili ne-indeks lezijom koja je veća od 2,0 cm u prečniku, koja se ne može hirurški ukloniti tokom perioda skrininga; (18) trudnice ili dojilje; (19) seksualno aktivni muškarci i žene u reproduktivnom periodu koji ne žele da primenjuju visoko efikasnu kontracepciju pre početne doze/početka prvog lečenja, tokom studije, i tokom najmanje 6 meseci nakon poslednje doze.

Varijable u studiji

[0108] Primarni ciljevi za ovu studiju uključuju: incidenciju, prirodu i ozbiljnost toksičnosti koje ograničavaju dozu (DLTs – dose limiting toxicities), ako postoje, i neželjenih događaja izazvanih lečenjem (TEAEs – treatment-emergent adverse events), koji su stepenovani prema Zajedničkim terminološkim kriterijumima za neželjene događaje Nacionalnog instituta za kancer (NCI CTCAE – National Cancer Institute-Common Terminology Criteria for Adverse Events) v5, od prve doze do 28. dana; incidenciju i ozbiljnost TEAE-ova, stepenovane prema NCI CTCAE v5, tokom perioda lečenja i sve do 90 dana nakon poslednje doze; i incidenciju i ozbiljnost reakcija na mestu ubrizgavanja (ISRs – Injection Site Reactions) od prve doze do 90 dana nakon poslednje doze.

[0109] Sekundarni ciljevi za ovu studiju uključuju: ORR, određenu pomoću modifikovanih kriterijuma SZO (WHO – World Health Organization) (opisani ispod) na kraju lečenja (85. dan za pacijente koji su dovršili planirani kurs lečenja od 12 sedmica); brzinu patološkog kompletnog odgovora u vreme operacije; brzinu glavnog patološkog odgovora u vreme operacije (ili biopsije na kraju lečenja, za pacijente koji odbijaju operaciju); koncentraciju REGN2810 u serumu tokom vremena od prve doze sve do 90 dana nakon poslednje doze; incidenciju titara antitela na lek (ADA – anti-drug antibody) za REGN2810; i izbor preporučene doze REGN2810 za dalju studiju zasnovanu na kliničkim i PK posmatranjima.

[0110] Dodatni ciljevi za ovu studiju uključuju: ORR, u ne-indeks lezijama, određenu pomoću modifikovanih kriterijuma SZO na kraju lečenja (85. dan za pacijente koji dovršavaju planirani kurs lečenja od 12 sedmica).

[0111] Varijable efikasnosti za ovu studiju uključuju: patološki CR, evaluiran hirurškim uklanjanjem lečenog područja na kraju lečenja i definisan kao histološka potvrda nerezidualnog maligniteta u tkivu iz hirurške resekcije; glavni patološki odgovor, definisan kao histološka potvrda od ne više od 10% viabilnih tumorskih ćelija iz resekcije (ili bez rezidualnog maligniteta u incizionim (eng. punch) biopsijama ili kod pacijenata koji se ne podvrgavaju operaciji); i ORR, definisanu kao procenat učesnika sa delimičnim odgovorom (PR – partial response) ili potpunim odgovorom (CR – complete response) na osnovu dvodimenzionalnih merenja lezije na digitalnim medicinskim fotografijama prema modifikovanim kriterijumima SZO.

[0112] PK varijable za ovu studiju uključuju koncentracije REGN2810 u serumu tokom vremena. ADA varijable za ovu studiju uključuju ADA status, titar i vremensku tačku/posetu.

Dizajn studije

[0113] U ovoj studiji, svaki pacijent prima jednom sedmično (QW) 250 mL intralezijskih ubrizgavanja REGN2810 u dodeljenom doznom nivou tokom 12 sedmica pre zakazane operacije. Tri dozne kohorte prate dizajn ekskalacije doze 3 3. Slika 1 obezbeđuje generalni dijagram toka studije. Približno 36 pacijenata biće uvršteno u studiju, uključujući 6 pacijenata po doznom nivou po dizajnu 3 3.

[0114] Tri dozne kohorte REGN2810 dobijaju intralezijski QW u sledećim doznim nivoima: planirani dozni nivo 1 (početna doza) je 5 mg sedmično; planirani dozni nivo 2 je 15 mg sedmično; i planirani dozni nivo 3 je približno 44 mg (43,75 mg) sedmično. Zapremina ubrizgavanja od 250 ml konstantna je u svakom doznom nivou. Dozni nivoi se postižu razblaživanjem REGN2810 (koji je obezbeđen kao tečnost u sterilnim, jednokratnim fiolama u koncentraciji od 175 mg/ml) u puferu.

Procedure i ocenjivanja

[0115] Procedure skrininga uključuju: informisani pristanak, uključivanje/isključivanje, medicinsku istoriju, demografske podatke, virusnu serologiju, koagulaciju, analizu urina, lokalnu patološku potvrdu CSCC-a, ECOG, rendgensko snimanje grudnog koša, prepisivanje lečenja.

[0116] Procedura lečenja je intralezijsko davanje REGN2810.

[0117] Procedure efikasnosti uključuju: digitalnu medicinsku fotografiju i hiruršku resekciju.

[0118] Bezbednosne procedure uključuju: ocenjivanje vitalnih znakova, fizički pregled, elektrokardiogram (EKG), praćenje neželjenih događaja (AE – adverse event), istovremene medikamente i procedure.

[0119] Procedure laboratorijskog testiranja uključuju: hematologiju, hemiju krvi, test trudnoće (samo žene), testove funkcije tiroide.

[0120] Koncentracije PK/leka: uzorci PK biće sakupljeni radi ocenjivanja koncentracija REGN2810 u serumu.

[0121] ADA: Uzorci seruma biće sakupljeni radi ocenjivanjā imunogenosti na REGN2810.

Istovremeni medikamenti i procedure

[0122] Zabranjeni medikamenti i procedure: Tokom učešća u studiji, pacijent ne sme primati bilo šta od sledećeg, od vremena informisanog pristanka do kraja perioda praćenja, osim ako drugačije nije specifikovano ispod: (a) Standardno ili istraživačko sredstvo za lečenje tumora drugačije od REGN2810, sa izuzetkom dozvoljenih medikamenata navedenih ispod, (b) Sredstva koja blokiraju PD-1/PD-L1 puteve, (c) Hirurške procedure koje nisu povezane sa studijom, osim u hitnom slučaju ili osim ako nije dato odobrenje, (d) Terapija zračenjem.

[0123] Dozvoljeni medikamenti i procedure: Sledeći medikamenti i procedure su dozvoljeni, pod sledećim uslovima: (a) bilo koji medikament potreban za lečenje AE i/ili irAE, uključujući sistemske kortikosteroide, (b) sistemski kortikosteroidi za fiziološko zamenjivanje (čak i ako >10 mg/dan ekvivalenata prednizona), (c) kratak kurs kortikosteroida za profilaksu ili za lečenje ne-autoimunskih stanja, (d) bisfosfonati i denosumab, (e) fiziološke zamenske doze sistemskih kortikosteroida, čak i ako >10 mg/dan ekvivalenata prednizona, (f) oralna kontraceptivna sredstva, terapija hormonske zamene, ili druga terapija održavanja se može nastaviti, (g) acetaminofen u dozama ≤2 g/dan, (h) hirurška resekcija ne-indeks lezija, ako je klinički indikovano, (i) drugi medikamenti i procedure mogu biti dozvoljeni prema slučaju.

Intralezijsko davanje REGN2810

[0124] Indeks lezija (lezija izabrana za ubrizgavanje) imaće površinski prečnik od najmanje 1 cm na površini kože (maks. prečnik, 2,0 cm). Intralezijsko davanje REGN2810 se izvodi pod direktnom vizuelizacijom. Ne upotrebljava se nikakvo radiološko navođenje (tj., ultrazvuk). Sledeći tipovi lezija se ne biraju za ubrizgavanje: krte ili nekrotične lezije, lezije koje su hemoragične, lezije unutar 2,0 cm u oku, ili anogenitalne lezije. Indeks leziju treba očistiti alkoholom ili betadinom. Najmanje 5 minuta (ali ne više od 30 minuta) pre planiranog ubrizgavanja REGN2810, na indeks leziju se može naneti lokalna lidokainska mast. Lečenje sa 250 mL REGN2810 se može isporučiti pomoću šprica ≤1 ml, poželjno pomoću igle promera 30.

[0125] REGN2810 se ubrizgava tangencijalno u gornju (prednju) polovinu indeks lezije u 2 do 5 lokacija. Donja polovina indeks lezije se ne podvrgava ubrizgavanju da bi se smanjio gubitak proizvoda leka iz lezije usled curenja iz donjeg dela tumora. Najmanje 1 ubrizgavanje treba davati intradermalno u kožu koja prekriva tumor (ili unutar najgušćeg dela gornje polovine tumora), i najmanje 1 ubrizgavanje treba davati u gornju (prednju) periferiju tumora blizu dodirne površine sa kožom normalnog izgleda. Ukupno vreme ubrizgavanja za sva ubrizgavanja treba da bude 2 do 3 minuta. Ubrizgavanje treba davati veoma polako kako bi se izbeglo curenje proučavanog leka iz tkiva u koje je ubrizgan. Labava ili krta područja tumora ne bi trebalo podvrgavati ubrizgavanju zbog mogućeg curenja proučavanog leka.

[0126] 30 ± 10 minuta nakon ubrizgavanja, lezija se ispituje na bilo kakve znakove ISR. Vitalni znaci se beleže 30 ± 10 minuta nakon ubrizgavanja, i indeks lezija se pokriva neokluzivnim zavojem.

Upravljanje Sistemskim reakcijama hipersenzitivnosti (SHRs)

[0127] SHR-i se definišu kako sledi: tipični simptomi mogu uključivati groznicu, jezu, tegobe, crvenilo kože, dispneju, bol u leđima, abdominalni bol, i mučninu; reakcija se obično javlja bilo tokom ubrizgavanja ili u bilo koje vreme do kraja sledećeg dana (u odsustvu alternativnog objašnjenja); vitalni znaci mogu biti značajni za hipotenziju i/ili tahikardiju.

[0128] Za pacijente koji doživljavaju SHR-e 1. ili 2. stepena (videti Tabelu 1), preporučuju se sledeći profilaktički medikamenti najmanje 30 minuta pre narednih ubrizgavanja REGN2810: difenhidramin 50 mg (ili ekvivalent) i/ili acetaminofen/paracetamol 325 mg do 1000 mg. Za pacijente koji doživljavaju SHR-e 2. stepena, mogu se upotrebljavati kortikosteroidi (sve do 25 mg hidrokortizona ili ekvivalenta).

Tabela 1: Sistem stepenovanja za AE-ove koji nisu navedeni u NCI-CTCAE

Upravljanje reakcijama na mestu ubrizgavanja (ISR-i)

[0129] ISR-i (ISRs – Injection Site Reactions) se definišu kao inflamacija u tkivu u koje je ubrizgan proučavani lek ili oštećenje okolnog tkiva.

[0130] Za pacijente koji doživljavaju ISR-e 1. ili 2. stepena (videti Tabelu 2), preporučuju se sledeći profilaktički medikamenti najmanje 30 minuta pre narednih ubrizgavanja REGN2810: difenhidramin 50 mg (ili ekvivalent) i/ili acetaminofen/paracetamol 325 mg do 1000 mg.

Tabela 2: Kriterijumi ozbiljnosti za ISR-e

Modifikovani kriterijumi SZO

[0131] Eksterno vidljiva komponenta ciljne lezije (lezija) biće merena pomoću dvodimenzionalnih kriterijuma SZO kao zbir proizvoda (pojedinačnih ciljnih lezija) u najdužoj dimenziji i okomitoj drugoj najdužoj dimenziji – u svakom ocenjivanju tumora, i biće dokumentovana pomoću standardizovane digitalne fotografije. U odsustvu suštinske promene u geometriji lezije, merenja u narednoj poseti trebalo bi izvesti u istim osama i na fotografije sa komentarima iz prethodne posete trebalo bi se pozivati kao na početnu tačku za identifikovanje ose za merenje kada se prave naredna ocenjivanja.

[0132] Kriterijumi kliničkog odgovora za eksterno vidljivi tumor (tumore) zahtevaju dvodimenzionalna merenja prema kriterijumima SZO, i jesu kako sledi: (a) Potpuni odgovor eksterno vidljive bolesti (vCR): cela ciljna lezija (lezije) nije više vidljiva, održano tokom najmanje 4 sedmice, (b) Delimični odgovor eksterno vidljive bolesti (vPR): smanjenje od 50% (kriterijumi SZO) ili veće u zbiru proizvoda okomitih najdužih dimenzija ciljne lezije (lezija), održano tokom najmanje 4 sedmice, (c) Stabilna eksterno vidljiva bolest (vSD): ne zadovoljava kriterijume za vCR, vPR, ili progresivnu bolest, (d) Progresija vidljive bolesti (vPD): povećanje od ≥25% (kriterijumi SZO) u zbiru proizvoda okomitih najdužih dimenzija ciljne lezije (lezija).

[0133] Nove lezije: Nova kutana lezija konzistentna sa CSCC-om smatraće se kliničkom progresijom bolesti (cPD) ako je lezija ≥ 10 mm u oba maksimalna okomita prečnika i prethodno nije bila prisutna, osim ako biopsija ne potvrdi da nije konzistentna sa CSCC-om.

Rezultati

[0134] Očekuje se da intralezijsko davanje REGN2810 dovodi do poboljšane regresije tumora kao i povećane bezbednosti kod pacijenata sa CSCC-om. Očekuje se da pacijenti sa CSCC-om lečeni intralezijskim davanjem REGN2810 pokazuju znatno smanjenu ili nultu incidenciju neželjenih događaja i/ili toksičnosti usled upotrebe lokalizovanog lečenja umesto sistemskog izlaganja dejstvu REGN2810. Takođe se očekuje da intralezijsko davanje REGN2810 indukuje imunološku memoriju, i tako smanji ili eliminiše rekurenciju tumorskih lezija kod lečenih pacijenata. Uz to, očekuje se da intralezijsko davanje REGN2810 eliminiše potrebu za operacijom kod lečenih pacijenata sa CSCC-om.

[0135] Do danas, pacijenti su upisani na prvi dozni nivo (5 mg REGN2810 sedmično). Svi pacijenti su dovršili period praćenja DLT-a bez bilo kakvih DLT-ova. Rezultati pokazuju regresiju tumora kod pacijenata sa CSCC-om kojima je davano 5 mg cemiplimaba intralezijski. Slike 2 i 3 prikazuju fotografije dva primera pacijenata koji su pokazali skupljanje tumora nakon intralezijskog davanja cemiplimaba. Upisivanje na drugi dozni novo je u toku.

SEQUENCE LISTING

<110> Regeneron Pharmaceuticals, Inc.

<120> Administration of PD-1 Inhibitors for Treating Skin Cancer <130> 179227.01102 / 10511-WO

<150> 62/767,218

<151> 2018-11-14

<150> 62/811,827

<151> 2019-02-28

<160> 10

<170> FastSEQ for Windows Version 4.0

<210> 1

<211> 117

<212> PRT

<213> Artificial Sequence

<220>

<223> R2810 HCVR

<400> 1

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Val Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Phe 20 25 30

Gly Met Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Gly Ile Ser Gly Gly Gly Arg Asp Thr Tyr Phe Ala Asp Ser Val 50 55 60

Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Gly Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Val Lys Trp Gly Asn Ile Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu 100 105 110

Val Thr Val Ser Ser

115

<210> 2

<211> 107

<212> PRT

<213> Artificial Sequence

<220>

<223> R2810 LCVR

<400> 2

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15

Asp Ser Ile Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Leu Ser Ile Asn Thr Phe 20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Asn Leu Leu Ile 35 40 45

Tyr Ala Ala Ser Ser Leu His Gly Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Arg Thr Leu Gln Pro 65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Ser Asn Thr Pro Phe 85 90 95

Thr Phe Gly Pro Gly Thr Val Val Asp Phe Arg

100 105

<210> 3

<211> 8

<212> PRT

<213> Artificial Sequence

<220>

<223> R2810 HCDR1

<400> 3

Gly Phe Thr Phe Ser Asn Phe Gly

1 5

<210> 4

<211> 8

<212> PRT

<213> Artificial Sequence

<220>

<223> R2810 HCDR2

<400> 4

Ile Ser Gly Gly Gly Arg Asp Thr

1 5

<210> 5

<211> 10

<212> PRT

<213> Artificial Sequence

<220>

<223> R2810 HCDR3

<400> 5

Val Lys Trp Gly Asn Ile Tyr Phe Asp Tyr

1 5 10

<212> PRT

<213> Artificial Sequence

<220>

<223> R2810 LCDR1

<400> 6

Leu Ser Ile Asn Thr Phe

1 5

<210> 7

<211> 3

<212> PRT

<213> Artificial Sequence

<220>

<223> R2810 LCDR2

<400> 7

Ala Ala Ser

1

<210> 8

<211> 9

<212> PRT

<213> Artificial Sequence

<220>

<223> R2810 LCDR3

<400> 8

Gln Gln Ser Ser Asn Thr Pro Phe Thr

1 5

<210> 9

<211> 444

<212> PRT

<213> Artificial Sequence

<220>

<223> R2810 HC

<400> 9

Glu Val Gln Leu Leu Glu Ser Gly Gly Val Leu Val Gln Pro Gly Gly 1 5 10 15

Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Asn Phe 20 25 30

Gly Met Thr Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45

Ser Gly Ile Ser Gly Gly Gly Arg Asp Thr Tyr Phe Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ser Lys Asn Thr Leu Tyr 65 70 75 80

Leu Gln Met Asn Ser Leu Lys Gly Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95

Val Lys Trp Gly Asn Ile Tyr Phe Asp Tyr Trp Gly Gln Gly Thr Leu 100 105 110

Val Thr Val Ser Ser Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu 115 120 125

Ala Pro Cys Ser Arg Ser Thr Ser Glu Ser Thr Ala Ala Leu Gly Cys 130 135 140

Leu Val Lys Asp Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser 145 150 155 160

Gly Ala Leu Thr Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser 165 170 175

Ser Gly Leu Tyr Ser Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser 180 185 190

Leu Gly Thr Lys Thr Tyr Thr Cys Asn Val Asp His Lys Pro Ser Asn 195 200 205

Thr Lys Val Asp Lys Arg Val Glu Ser Lys Tyr Gly Pro Pro Cys Pro 210 215 220

Pro Cys Pro Ala Pro Glu Phe Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe 225 230 235 240

Pro Pro Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met Ile Ser Arg Thr Pro Glu Val 245 250 255

Thr Cys Val Val Val Asp Val Ser Gln Glu Asp Pro Glu Val Gln Phe 260 265 270

Asn Trp Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Ala Lys Thr Lys Pro 275 280 285

Arg Glu Glu Gln Phe Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr 290 295 300

Val Leu His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val 305 310 315 320

Ser Asn Lys Gly Leu Pro Ser Ser Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala 325 330 335

Lys Gly Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Gln 340 345 350

Glu Glu Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly 355 360 365

Phe Tyr Pro Ser Asp Ile Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro 370 375 380

Glu Asn Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser 385 390 395 400

Phe Phe Leu Tyr Ser Arg Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Glu 405 410 415

Gly Asn Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His 420 425 430

Tyr Thr Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Leu Gly Lys

435 440

<210> 10

<211> 214

<212> PRT

<213> Artificial Sequence

<223> R2810 LC

<400> 10

Asp Ile Gln Met Thr Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15

Asp Ser Ile Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Leu Ser Ile Asn Thr Phe 20 25 30

Leu Asn Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Lys Ala Pro Asn Leu Leu Ile 35 40 45

Tyr Ala Ala Ser Ser Leu His Gly Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60

Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Arg Thr Leu Gln Pro 65 70 75 80

Glu Asp Phe Ala Thr Tyr Tyr Cys Gln Gln Ser Ser Asn Thr Pro Phe 85 90 95

Thr Phe Gly Pro Gly Thr Val Val Asp Phe Arg Arg Thr Val Ala Ala 100 105 110

Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln Leu Lys Ser Gly 115 120 125

Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Arg Glu Ala 130 135 140

Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser Gly Asn Ser Gln 145 150 155 160

Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Leu Ser 165 170 175

Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys His Lys Val Tyr 180 185 190

Ala Cys Glu Val Thr His Gln Gly Leu Ser Ser Pro Val Thr Lys Ser 195 200 205

Phe Asn Arg Gly Glu Cys

210

Claims

Patentni zahtevi

1. Farmaceutska kompozicija koja sadrži terapijski efektivnu količinu inhibitora programirane smrti 1 (PD-1) za upotrebu u postupku lečenja ili inhibiranja rasta tumora, koji obuhvata:

(a) biranje pacijenta sa kancerom kože; i

(b) intralezijsko davanje u tumor pacijenta jedne ili više doza farmaceutske kompozicije;

gde PD-1 inhibitor jeste anti-PD-1 antitelo ili njegov fragment koji vezuje antigen koji sadrži tri regiona koji određuju komplementarnost (CDR-ovi) (HCDR1, HCDR2, i HCDR3) sadržana unutar varijabilnog regiona teškog lanca (HCVR) koji sadrži aminokiselinsku sekvencu iz SEQ ID NO: 1 i tri CDR-a (LCDR1, LCDR2, i LCDR3) sadržana unutar varijabilnog regiona lakog lanca (LCVR) koji sadrži aminokiselinsku sekvencu iz SEQ ID NO: 2.

2. Farmaceutska kompozicija za upotrebu prema patentnom zahtevu 1, gde:

(a) kancer kože jeste karcinom skvamoznih ćelija kože (CSCC), karcinom bazalnih ćelija (BCC), karcinom Merkelovih ćelija, ili melanom;

(b) kancer kože jeste CSCC; ili

(c) kancer kože jeste rekurentni resektabilni CSCC.

3. Farmaceutska kompozicija za upotrebu prema patentnom zahtevu 1 ili patentnom zahtevu 2, gde:

(a) pacijent je imao prethodno lečenje za kancer; opciono gde prethodno lečenje obuhvata operaciju, zračenje, hemoterapiju, lečenje PD-1 inhibitorom, i/ili drugu anti-tumorsku terapiju; (b) pacijent je pod rizikom od rekurencije;

(c) pacijent ima prethodnu istoriju rekurencije nakon operacije; i/ili

(d) pacijent je prethodno primio transplantat organa ili tkiva.

4. Farmaceutska kompozicija za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 1–3, gde svaka doza PD-1 inhibitora obuhvata jedno ili više intralezijskih ubrizgavanja farmaceutske kompozicije u tumor; opciono gde:

(a) najmanje dva intralezijska ubrizgavanja se daju u različite lokacije tumora;

(b) dva do pet intralezijskih ubrizgavanja daju se u dve do pet lokacija tumora;

(c) najmanje jedno intralezijsko ubrizgavanje se daje u gornju polovinu tumora;

(d) najmanje jedno intralezijsko ubrizgavanje se daje u kožu koja prekriva tumor; i/ili

(e) najmanje jedno intralezijsko ubrizgavanje se daje u gornju periferiju tumora, uz dodirnu površinu sa kožom normalnog izgleda.

5. Farmaceutska kompozicija za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 1–4, gde:

(a) tumor ima prečnik površine od najmanje 1 cm; i/ili

(b) tumor ima prečnik površine od ne više od 2 cm.

6. Farmaceutska kompozicija za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 1–5, gde se svaka doza daje jednom dnevno, jednom u dva dana, jednom u tri dana, jednom u četiri dana, jednom u pet dana, jednom u šest dana, jednom sedmično ili dva puta sedmično.

7. Farmaceutska kompozicija za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 1–6, gde:

(a) svaka doza sadrži 5 mg do 200 mg PD-1 inhibitora; i/ili

(b) svaka doza sadrži 5 mg, 15 mg, ili 44 mg PD-1 inhibitora.

8. Farmaceutska kompozicija za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 1–7, gde:

(a) davanje PD-1 inhibitora promoviše regresiju tumora, smanjuje opterećenje ćelijama tumora, smanjuje, i/ili sprečava rekurenciju tumora kod pacijenta;

(b) davanje PD-1 inhibitora promoviše najmanje oko 10% više regresije tumora nego intravensko davanje PD-1 inhibitora; i/ili

(c) davanje PD-1 inhibitora dovodi do manje incidencije neželjenih događaja, manje ozbiljnosti neželjenih događaja, i/ili manje toksičnosti nego intravensko davanje PD-1 inhibitora.

9. Farmaceutska kompozicija za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 1–8, koja dalje obuhvata:

(a) hirurško uklanjanje tumora nakon koraka (b); i/ili

(b) davanje drugog terapijskog sredstva ili terapije koji se biraju od operacije, zračenja, hemoterapije, kortikosteroida, anti-zapaljenskog leka, i/ili njihove kombinacije; opciono gde se daje PD-1 inhibitor:

(i) pre drugog terapijskog sredstva ili terapije; ili

(ii) nakon drugog terapijskog sredstva ili terapije.

10. Farmaceutska kompozicija za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 1–9, gde:

(a) HCDR1 ima aminokiselinsku sekvencu iz SEQ ID NO: 3; HCDR2 ima aminokiselinsku sekvencu iz SEQ ID NO: 4; HCDR3 ima aminokiselinsku sekvencu iz SEQ ID NO: 5; LCDR1 ima aminokiselinsku sekvencu iz SEQ ID NO: 6; LCDR2 ima aminokiselinsku sekvencu iz SEQ ID NO: 7; i LCDR3 ima aminokiselinsku sekvencu iz SEQ ID NO: 8; i/ili

(b) anti-PD-1 antitelo ili njegov fragment koji vezuje antigen sadrži par HCVR/LCVR sekvenci iz SEQ ID NOs: 1/2.

11. Farmaceutska kompozicija za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 1–10, gde anti-PD-1 antitelo sadrži teški lanac i laki lanac, gde:

(a) teški lanac ima aminokiselinsku sekvencu iz SEQ ID NO: 9;

(b) laki lanac ima aminokiselinsku sekvencu iz SEQ ID NO: 10; ili

(c) teški lanac ima aminokiselinsku sekvencu iz SEQ ID NO: 9 i laki lanac ima aminokiselinsku sekvencu iz SEQ ID NO: 10.

12. Farmaceutska kompozicija za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 1–11, gde PD-1 inhibitor jeste cemiplimab ili njegov bioekvivalent.