RS66817B1 - Izociklosporin a za lokalno lečenje očnih bolesti - Google Patents

Description

Opis

OBLAST PREDMETNOG PRONALASKA

[0001] Predmetni pronalazak se odnosi na izociklosporin A, njegove soli i farmaceutske kompozicije za oftalmološku lokalnu primenu u prevenciji ili lečenju inflamatorne i/ili autoimune oftalmološke bolesti kod pojedinca.

STANJE TEHNIKE

[0002] Ciklosporin A je neutralni, lipofilni, ciklični undekapeptid dobijen iz gljivice Tolypocladium Inflatum, koji sadrži sedam N-metil aminokiselinskih ostataka i neobičnu aminokiselinu (4R)-4-([E]-2-butenil)-4-N-metil-(L)-treonin (MeBmt) na poziciji 1.

[0003] Ciklosporin je prvi put odobren za primenu kao imunosupresivni agens za sprečavanje odbacivanja transplantiranih organa.

[0004] U oftalmologiji, ciklosporin A je prvobitno ispitivan za administriranje nakon transplantacije grafta rožnjače ali se kasnije pokazao efikasnim takođe i kod brojnih inflamatornih bolesti oka, kao što su uveitis, vernalni keratokonjuktivitis (VKC), keratokonjunktivitis (AKC) i bolest suvog oka (DED - dry eye disease) (Feroze i sarad., J Ophthalmol 2019, 31: 182-190; Prabhu i sarad., British Journal of Ophthalmology 2016, 100: 345-347).

[0005] Zbog svoje hidrofobnosti, molekul je prvobitno administriran i za oftalmološke indikacije sistemskim putevima, kao što su intravenska injekcija ili oralno administriranje. Ovi putevi administriranja omogućili su postizanje terapijske koncentracije aktivne supstance u intraokularnim tečnostima (očna vodica ili staklasto telo) i ekstraokularnim organima ili aneksima (rožnjača, konjuktiva i suzne žlezde). Međutim, pojava ozbiljnih sistemskih neželjenih efekata, kao što su nefrotoksičnost i hipertenzija, podstakla je proučavanje formulacija pogodnih za lokalno administriranje molekula (Lallemand i sarad., European Journal of Pharmaceutics and Biopharmaceutics 2003, 56: 307-318; GB2224205A).

[0006] Razvoj formulacija kapi za oči ciklosporina A za oftalmološku lokalnu primenu otežan je zbog hidrofobnosti i izuzetno niske rastvorljivosti molekula u vodi (6.6 mg/ml), što ne dozvoljava pripremu formulacija na bazi uobičajeno korišćenih vodenih oftalmoloških nosača.

[0007] Ciklosporin A je prvobitno formulisan u obliku rastvora u rastvaračima na bazi ulja kao što su ricinusovo ulje ili kukuruzno ulje, ali su oni kasnije zamenjeni emulzijama ulja u vodi i rastvorima na bazi micela (de Oliveira i sarad., Clinical Ophthalmology 2019:131115-1122).

[0008] Međutim, utvrđeno je da neophodno prisustvo surfaktanta u ovim poslednjim formulacijama ima štetne efekte na rožnjaču i dovodi do zamućenog vida. Štaviše, iako emulzije imaju prednost brzog širenja po oku nakon primene, niska biodostupnost lipofilnih lekova iz emulzija i dalje ograničava količinu aktivnog principa dostupnog u već izazovnom vodenom očnom okruženju (Jerkins i sarad., Clinical Ophthalmology 2020:14481-489).

[0009] Slaba rastvorljivost ciklosporina i prisustvo surfaktanata koji imaju štetne efekte na rožnjaču u većini dostupnih oftalmoloških formulacija, ključna su ograničenja za upotrebu ciklosporina u kontekstu oftalmoloških tretmana, što je verovatno i razlog loše podnošljivosti i velike varijabilnosti u odgovoru prijavljenu u kliničkim studijama.

[0010] Izociklosporin A je izomer ciklosporina A koji se razlikuje od ovog drugog po tome što je ostatak (N-metil-(4R)-4-but-2E-en-1-il-4- metil-(L)treonil) na poziciji 1 povezan sa ostatkom na poziciji 11 preko 3'-O-atoma a ne preko N-atoma. Izociklosporin A je prvobitno opisan kao preuređeni proizvod razgradnje formiran kiselinskom obradom ciklosporina A. Izociklosporin A je opisan kao proizvod bez ikakve biološke aaktivnosti per se, i kada se sistemski administrira, veoma sporo se in vivo pretvara u odgovarajući aktivni oblik ciklosporina (WO1993017039A1, strana 5 i strana 15). Posebno je pokazano da molekul podleže kvantitativnoj konverziji u ciklosporin A pri pH vrednosti većoj od 5. Detaljno, brzina izomerizacije izociklosporina je maksimalna pri pH vrednosti između 8 i 10 (Oliyai R, Stella VJ, Pharm Res, 1992, maj;9(5):617-22), dok je najsporija brzina konverzije primećena u pH opsegu između 6 i 8. Posebno, pri pH vrednosti 7.4 konverzija je minimalna, sa poluživotom konverzije od 21.7 sati (videti Bundgaard i sarad., International Journal of Pharmaceutics, 82 (1992):85-90). Bundgaard i sarad. ne stavljaju na uvid javnosti ni kompoziciju koja sadrži izociklosporin A pogodnu za oftalmološko lokalno administriranje niti da je izociklosporin A pogodan za upotrebu u lečenju inflamatornih i/ili autoimunih oftalmoloških bolesti.

[0011] Zbog sposobnosti sporog pretvaranja u ciklosporin A i veće rastvorljivosti u vodi, izociklosporin A je predložen za upotrebu kao prolek ciklosporina A za oralno administriranje, kako bi se poboljšala stabilnost i izbegli neželjeni efekti povezani sa maksimalnim koncentracijama ciklosporina u krvi.

[0012] U tom smislu, WO 1993017039A1 opisuje soli izociklosporina dobijene adicijom kiselina, uključujući izociklosporin A, koje pružaju poboljšane galenske karakteristike, kao što su poboljšana rastvorljivost i stabilnost. Dokument stavlja na uvid javnosti da su ove soli posebno korisne kao pro-lekovi za oralno administriranje ciklosporina, jer, kad se administriraju oralno, oslobađaju aktivni molekul sporom brzinom, održavajući konstantne nivoe ciklosporina u krvi. Ovaj dokument ne stavlja na uvid javnosti niti sugeriše oftalmološku lokalnu primenu izociklosporina A.

[0013] US2019/194258A1 se odnosi na postupak kontrole nečistoća ciklosporina A u očnom gelu. Izociklosporin A je samo pomenut kao jedna od šest poznatih nečistoća, ali njegova upotreba za lečanje inflamatornih i/ili autoimunih oftalmoloških bolesti nije ni stavljena na uvid javnosti niti je predložena. Do sad se smatralo da lokalna oftalmološka primena izociklosporina A nije praktična zbog spore brzine konverzije molekula u tom okruženju.

[0014] U stvari, brzina interkonverzije izociklosporina A u ciklosporin A je toliko niska da se tokom vremena zadržavanja molekula na površini oka, ciklosporin A praktično ne formira. Kao što je gore pomenuto, opisano je da se pri pH vrednostima između 6 i 8 dešava najsporija konverzija, a posebno pri pH 7.4 vreme za 50% konverzije izociklosporina A u ciklosporin A je 21.7 sati (Bundgaard i sarad., International Journal of Pharmaceutics, 82 (1992): 85-90).

[0015] S obzirom na gore navedeno, prema saznanjima podnosioca zahteva, izociklosporin A nikada nije smatran izvodljivom alternativom ciklosporinu A za lokalne oftalmološke primene, jer se nije očekivalo da će imati bilo kakvu farmakološku aktivnost.

KRATAK OPIS PREDMETNOG PRONALASKA

[0016] Podnosilac zahteva je sada iznenađujuće otkrio da izociklosporin A, kada se administrira lokalno u oko, neočekivano pokazuje biološku aktivnost koja je nezavisna od njegove konverzije u ciklosporin A. Kao što je gore diskutovano, ovaj nalaz je potpuno nepredvidiv na osnovu literature koja ga prati.

[0017] Još više iznenađujuće, kao što je pokazano u eksperimentalnom delu in vivo testovima sprovedenim na relevantnom životinjskom modelu inflamatorne bolesti očne površine, podnosilac zahteva je primetio da lečenje izociklosporinom A pokazuje veću efikasnost na nekoliko farmakološki relevantnih parametera u poređenju sa ciklosporinom A.

[0018] Sadašnji pronalazači su takođe otkrili da je izociklosporin A u stanju da inhibira aktivnost jonskih kanala TRPV3 i TRPML2 koji su u literaturi opisani kao uključeni u simptomatologiju inflamatornih i alergijsih bolesti (Takahiro Yamada i sarad., Exp Eye Res. jan. 2010;90(1):121-129; MP Cuajungco i sarad., Pflugers Arch.2016 Feb;468(2):177-92; i Eva Plesch i sarad., eLife.

2018; 7: e39720). Štaviše, suprotno ciklosporinu A, izociklosporin A ne stimuliše hiperproliferaciju epitelnih ćelija izazvanu akivacijom TRPC4 kanala, što je neželjeno kod inflamatornih i alergijskih očnih bolesti. Shodno tome, prvi predmet predmetnog pronalaska je izociklosporin A ili njegova oftalmološki prihvatljiva so za oftalmološku lokalnu primenu u prevenciji ili lečenju inflamatorne i/ili autoimune oftalmološke bolesti.

[0019] Poželjno je da je navedena inflamatorna i/ili autoimuna oftalmološka bolest odabrana od inflamatornih i/ili autoimunih bolesti rožnjače i površine oka i inflamatornih bolesti ivica kapaka.

[0020] Drugi predmet predmetnog pronalaska je oftalmološka formulacija koja sadrži izociklosporin A ili njegovu oftalmološki prihvatljivu so i najmanje jedan oftalmološki prihvatljiv ekscipijens ili razblaživač za oftalmološku lokalnu primenu u prevenciji ili lečenju inflamatorne i/ili autoimune oftalmološke bolesti kod pojedinca.

OPIS SLIKA

[0021]

Slika 1 prikazuje procenat fluorescencije prijavljen kao srednja vrednost izmerenih vrednosti za svaku grupu 0, 9, 11, 17, 22 i 25 dana nakon tretmana skopolaminom, kao što je opisano u Primeru 1.

Slika 2 prikazuje mm sekrecije suza izmerene u tri eksperimentalne grupe 22 dana (gornji panel) 25 dana (donji panel) nakon tretmana skopolaminom, kao što je opisano u Primeru 1.

DETALJAN OPIS PREDMETNOG PRONALASKA

[0022] Prvi predmet predmetnog pronalaska je izociklosporin A ili njegova oftalmološki prihvatljiva so za oftamološku lokalnu primenu u prevenciji ili lečenju inflamatorne i/ili autoimune oftalmološke bolesti kod pojedinca.

[0023] Poželjno je, da je navedena inflamatorna i/ili autoimuna bolest odabrana od inflamatornih i/ili autoimunih bolesti rožnjače i površine oka i inflamatornih bolesti ivica kapaka.

[0024] Inflamatorne i/ili autoimune bolesti rožnjače i površine oka su bolesti koje karakteriše oštećenje epitela koji pokriva rožnjaču i konjuktivu izazvano lokalnim inflamatornim statusom.

[0025] Inflamatorne bolesti ivica kapaka su bolesti koje karakteriše uobičajena i perzistentna upala kapaka.

[0026] Posebno, prema predmetnom pronalasku, navedena oftalmološka inflamatorna i/ili autoimuna bolest odabrana od vernalnog keratokonjuktivitisa (VKC), atopijskog keratokonjunktivitisa (AKC), alergijskog konjuktivitisa, očne rozacee, uveitisa, bolesti suvog oka (DED), očnog cikatricijalnog pemfigoida (OCP), očne bolesti kalem-protiv-domaćina (GVHD), imunih ulkusa rožnjače, upaljenog pterigijuma i hroničnog blefaritisa.

[0027] Prema predmetnom pronalasku, navedeni izociklosporin A ili njegova so je za oftalmološku lokalnu primenu u prevenciji ili lečenju inflamatorne i/ili autoimune oftalmološke bolesti kod pojedinca, pri čemu se izociklosporin A ili njegova oftalmološki prihvatljiva so administrira lokalno u oko pomenutog pojedinca.

[0028] Prema predmetnom pronalasku, pojam "prevencija" odnosi se na delimičnu ili potpunu prevenciju poremećaja ili patološkog događaja, pre nego što se on uspostavi ili dogodi. Prema jednom tehničkom rešenju predmetnog pronalaska, prevencija je potpuna prevencija, pri čemu je poremećaj ili patološki događaj potpuno blokiran.

[0029] Prema alternativnom tehničkom rešenju predmetnog pronalaska, prevencija je delimična prevencija, pri čemu se razvoj poremećaja ili patološkog događaja odlaže i/ili se smanjuje njegova težina.

[0030] Prema predmetnom pronalasku, pojam "lečenje" odnosi se na potpuno preokretanje ili smanjenje težine ili progresije poremećaja ili patološkog događaja, nakon što je ovo već utvrđeno ili se već dogodilo.

[0031] Prema predmetnom pronalasku, pojam "pojedinac" odnosi se na ljudsko ili životinjsko biće, poželjno na ljudsko biće.

[0032] Poželjno je, da se izociklosporin A ili njegova oftalmološki prihvatljiva so koristi za oftalmološku lokalnu primenu u prevenciji ili lečenju inflamatorne i/ili autoimune oftalmološke bolesti kod pojedinca, pri čemu je navedena inflamatorna i/ili autoimuna oftalmološka bolest koja se može lečiti korišćenjem izociklosporina A ili njegove oftalmološki prihvatljive soli oftalmološka bolest koja pokazuje poboljšanje ili oporavak nakon lečenja kortizonom i sličnim kortikosteroidima.

[0033] Inflamatorne i/ili autoimune bolesti rožnjače i površine oka koje se mogu lečiti korišćenjem izociklosporina A ili njegove oftalmološki prihvatljive soli su poželjno odabrane iz grupe: vernalni keratokonjuktivitis (VKC), atopijski keratokonjunktivitis (AKC), alergijski konjuktivitis, očna rozacea, uveitis, bolest suvog oka (DED), očni cikatricijalni pemfigoid (OCP), očna bolest kalemprotiv-domaćina (GVHD) i imuni ulkusi rožnjače. Poželjno je da navedeni alergijski konjuktivitis bude sezonski ili višegodišnji alergijski konjuktivitis.

[0034] Inflamatorne bolesti ivica kapaka koje se mogu lečiti izociklosporinom A ili njegovom oftalmološki prihvatljivom solju su na primer upaljeni pterigijum i hronični blefaritis.

[0035] Prema predmetnom pronalasku, poželjno je da je navedeni izociklosporin A ili njegova oftalmološki prihvatljiva so za oftamološku lokalnu primenu u prevenciji i lečenju jedne, dve ili više gore navedenih inflamatornih i/ili autoimunih oftalmoloških bolesti.

[0036] Prema predmetnom pronalasku, navedeni izociklosporin A ili navedena so je za oftamološku lokalnu primenu u prevenciji ili lečenju inflamatorne i/ili autoimune oftalmološke bolesti kod pojedinca, pri čemu se izociklosporin A ili njegova oftalmološki prihvatljiva so primenjuju lokalno na očnu površinu oka pomenutog pojedinca ili na ivicu kapka.

[0037] Prema poželjnom tehničkom rešenju, navedeni izociklosporin A ili njegova navedena so je za oftalmološku lokalnu primenu u prevenciji ili lečenju inflamatorne i/ili autoimune oftalmološke bolesti kod pojedinca, pri čemu se izociklosporin A ili njegova oftalmološki prihvatljiva so primenjuju lokalno na očnu površinu oka pomenutog pojedinca pomoću oftalmološke tečne ili polutečne formulacije, kao što će biti opisano u nastavku.

[0038] Poželjno je da se navedeni izociklosporin A ili njegova navedena so za oftalmološku lokalnu primenu u prevenciji ili lečenju inflamatorne i/ili autoimune oftalmološke bolesti kod pojedinca, pri čemu se izociklosporin A ili njegova oftalmološki prihvatljiva so administriraju jednom, dva puta, tri puta, četiri puta, ili više puta, dnevno, u zavisnosti od medicinskih okolnosti i težine bolesti koja se leči.

[0039] Prema poželjnom tehničkom rešenju predmetnog pronalaska, navedena oftalmološki prihvatljiva so je so izociklosporina A dobijena adicijom kiseline.

[0040] Poželjno je da je navedena oftalmološki prihvatljiva so izociklosporina A odabrana od acetata, adipata, askorbata, benzoata, benzensulfonata, bikarbonata, bisulfata, butirata, kamforata, kamforsulfonata, citrata, cikloheksil sulfamata, etansulfonata, fumarata, glutamata, glikolata, hemisulfata, 2-hidroksietilsulfonata, heptanoata, heksanoata, hidrohlorida, hidrobromida, hidrojodida, hidroksimaleata, laktata, malata, maleata, metansulfonata, 2-nafthalensulfonata, nitrata, oksalata, pamoata, persulfata, fenilacetata, fosfata, difosfata, pikrata, pivalata, propionata, hinata, salicilata, stearata, sukcinata, sulfamata, sulfanilata, sulfata, tartarata, tozilata (ptoluensulfonata), trifluoroacetata i undekanoatnih soli izociklosporina A.

[0041] Poželjnije je da je navedena so hidrohlorid ili trifluoroacetatna so izociklosporina A.

[0042] Soli predmetnog pronalaska sa kiselinskom adicijom se poželjno formiraju na alfa-N atomu ostatka na poziciji 1 izociklosporina A.

[0043] Postupci dobijanja soli prema predmetnom pronalasku su dobro poznati i opisani, na primer, u patentnoj prijavi WO1993017039A1.

[0044] Drugi predmet predmetnog pronalaska je oftalmološka formulacija koja sadrži izociklosporin A ili njegovu oftalmološki prihvatljivu so, kako je gore definisano, kao aktivni sastojak i najmanje jedan oftalmološki prihvatljiv ekscipijens ili razblaživač, za oftalmološku lokalnu primenu u prevenciji ili lečenju inflamatorne i/ili autoimune oftalmološke bolesti kod pojedinca.

[0045] Prema poželjnom tehničkom rešenju, navedena oftalmološka formulacija je tečna oftalmološka formulacija, poželjno tečna formulacija kapi za oči.

[0046] Gore navedena tečna oftalmološka formulacija može biti monofazna tečna formulacija, poželjno rastvor, poželjnije vodeni rastvor ili dvofazna tečna formulacija, poželjno emulzija, poželjnije mikroemulzija.

[0047] Gore navedena tečna oftalmološka formulacija poželjno sadrži fiziološki rastvor kao nosač.

[0048] Prema drugom tehničkom rešenju, navedena oftalmološka formulacija je polučvrsta oftalmološka formulacija, poželjno krema, mast ili gel.

[0049] Prema još jednom poželjnom tehničkom rešenju, navedena oftalmološka formulacija je čvrsta oftalmološka formulacija pogodna za improvizovanu pripremu tečne ili polučvrste formulacije, kao što je gore opisano, dodatkom oftalmološki prihvatljivog razblaživača pre administriranja.

[0050] Poželjno je da navedena čvrsta oftalmološka formulacija bude u obliku praha, još poželjnije u obliku liofilizovanog praha.

[0051] Poželjno je da navedena tečna ili polučvrsta oftalmološka formulacija ima pH vrednost između 6 i 8, poželjnije između 6.4 i 7.8, još poželjnije između 6.5 i 7.5. U stvari, poznato je da je pod ovim uslovima, brzina interkonverzije izociklosporina A u ciklosporin A minimalna, čime se obezbeđuje stabilnost finalnog proizvoda (pri pH 7.4, 37°C, 50% konverzije traje 21.7 sati Bundgaard i sarad., International Journal of Pharmaceutics, 82 (1992):85-90). Poželjno je da navedena tečna ili polučvrsta oftalmološka formulacija sadrži pufer koji je u stanju da održi formulaciju na željenoj pH vrednosti.

[0052] Pufer je poželjno odabran iz grupe koja se sastoji od, ali bez ograničenja, acetatnih pufera, karbonatnih pufera, citratnih pufera, fosfatnih pufera i boratnih pufera. Kiseline ili baze se mogu po potrebi koristiti za podešavanje pH vrednosti ovih formulacija.

[0053] Poželjno je da oftalmološka formulacija prema predmetnom pronalasku takođe sadrži jedan ili više ekscipijenasa odabranih iz grupe oftalmološki prihvatljivih surfaktanata, konzervanasa, stabilizatora, regulatora toničnosti, modifikatora viskoznosti, antioksidanasa i helatnih agenasa.

[0054] Surfaktant(i) se mogu koristiti za pomoć u rastvaranju ekscipijensa ili aktivnog sredstva, dispergovanju čvrste ili tečne supstance u kompoziciji, poboljšanju vlaženja, modifikovanju veličine kapi, ili u brojne druge svrhe.

[0055] Poželjno je da surfaktanti sadržani u oftalmološkoj formulaciji prema predmetnom pronalasku budu odabrani iz grupe alkohola, amin oksida, blok polimera, karboksilovanog alkohola ili alkilfenol etoksilata, karboksilnih kiselina/masnih kiselina, etoksilovanih alkohola, etoksilovanih alkilfenola, etoksilovanih aril fenola, etoksilovanih masnih kiselina, etoksilovanih masnih estara ili ulja (životinjskih i biljnih), masnih estara, etoksilata metil estra masne kiseline, glicerol estara, glikol estara, deravita na bazi lanolina, lecitina i derivata lecitina, lignina i derivata lignina, metil estara, monoglicerida i derivata, polimernih surfaktanata, propoksilovanih i etoksilovanih masnih kiselina, alkil fenola, surfaktanata na bazi proteina, derivata sarkozina, derivata sorbitana, estara i derivate saharoze i glukoze. Poželjno je da su konzervansi sadržani u oftalmološkoj formulaciji prema predmetnom pronalasku odabrani od katjonskih konzervanasa, poželjno kvaternernih amonijumovih jedinjenja, poželjnije benzalkonijum hlorida ili polikvada; konzervanasa na bazi gvanidina, poželjno PHMB ili hlorheksidina; hlorobutanola; konzervanasa žive, poželjno odabranih od timerosala, fenil živinihacetata i fenilživinih nitrata; oksidujućih konzervanasa, poželjno stabilizovanih oksihloro kompleksa, još poželjnije stabilizovanih hlor dioksida, kao što je, na primer komercijalni proizvod Purite<®>; parabeni, kao što su metilparaben i polipropilparaben.

[0056] Prema jednom tehničkom rešenju, oftalmološka formulacija prema predmetnom pronalasku ne sadrži konzervanse.

[0057] Poželjno je da se regulatori toničnosti sadržani u oftalmološkoj formulaciji prema predmetnom pronalasku biraju od soli, poželjno natrijum hlorida, kalijum hlorida, magnezijum hlorida, kalcijum hlorida, sorbitola, trehaloze, manitola i glicerina.

[0058] Poželjno je da viskoznost, na sobnoj temperature, oftalmološke formulacije prema predmetnom pronalasku bude između 25 i 50 cps. Formulaciji se mogu dodati modifikatori viskoznosti da bi se postigao željeni viskozitet.

[0059] Poželjno je da modifikatori viskoznosti sadržani u oftalmološkoj tečnoj formulaciji prema predmetnom pronalasku budu odabrani iz grupe polivinil alkohola, poloksamera, hijaluronske kiseline, karbomera, akrilata, derivata celuloze, dekstrana, poliakrilnih kiselina, povidona, polietilen glikola, propilen glikola, hitozana, galen gume i ksantan gume. Poželjno je da su navedeni derivati celuloze odabrani iz grupe hidroksipropil metil celuloze, karboksimetil celuloze i hidroksietil celuloze.

[0060] Poželjno je da antioksidansi sadržani u oftalmološkoj formulaciji prema predmetnom pronalasku budu odabrani iz grupe citrata, L-metionina, cisteina, natrijum metabisulfita, natrijum tiosulfata, acetilcisteina, butilovanog hidroksianizola i butilovanog hidroksitoluena.

[0061] Poželjno je da helatni agens sadržan u oftalmološkoj formulaciji prema predmetnom pronalasku bude dinatrijum edetat.

[0062] Poželjno je da kada je navedena tečna oftalmološka formulacija emulzija, ona dodatno sadrži jedno ili više ulja.

[0063] Poželjno je da se navedena ulja odaberu iz grupe: anisovo ulje, ricinusovo ulje, ulje karanfilića, kasijino ulje, ulje cimeta, bademovo ulje, kukuruzno ulje, ulje arahisa, ulje semena pamuka, ulje šafrana, kukuruzno ulje, laneno ulje, ulje uljane repice, sojino ulje, maslinovo ulje, ulje kima, ulje ruzmarina, ulje kikirikija, ulje peperminta, suncokretovo ulje, ulje eukaliptusa i susamovo ulje.

[0064] Prema poželjnom tehničkom rešenju, formulacija prema predmetnom pronalasku ne sadrži etanol.

[0065] Oftalmološka formulacija prema predmetnom pronalasku može dalje da sadrži jedan ili više lekova koji se koriste za prevenciju ili lečenje inflamatornih i/ili autoimunih oftalmoloških bolesti i/ili ciklosporin.

[0066] Poželjno tehničko rešenje predmetnog pronalaska je gore navedena formulacija za oftamološku lokalnu primenu u prevenciji ili lečenju inflamatorne i/ili autoimune oftalmološke bolesti kod pojedinca odabrane iz gruped inflamatornih i/ili autoimunih bolesti rožnjače i površine oka i inflamatornih bolesti ivice kapka, kao što je gore definisano.

[0067] Inflamatorne i/ili autoimune bolesti rožnjače i površine oka koje se mogu lečiti korišćenjem izociklosporina A ili njegove oftalmološki prihvatljive soli su poželjno odabrane iz grupe vernalnog keratokonjuktivitisa (VKC), atopijskog keratokonjunktivitisa (AKC), alergijskog konjuktivitisa, očne rozacee, uveitisa, bolesti suvog oka (DED), očnog cikatricijalnog pemfigoida (OCP), očne bolesti kalem-protiv-domaćina (GVHD) i imunih ulkusa rožnjače.

[0068] Poželjno je da navedeni alergijski konjuktivitis bude sezonski ili višegodišnji alergijski konjuktivitis.

[0069] Inflamatorne bolesti ivica kapaka koje se mogu lečiti korišćenjem izociklosporina A ili njegove oftalmološki prihvatljive soli su upaljeni pterigijum i hronični blefaritis.

[0070] Prema predmetnom pronalasku, izociklosporin A ili njegova oftalmološki prihvatljiva so i/ili oftalmološka formulacija kao što je gore opisano su/je za oftamološku lokalnu primenu u prevenciji ili lečenju inflamatorne i/ili autoimune oftalmološke bolesti kod pojedinca, pri čemu se oni/on/ona mogu lokalno administrirati u oko radi prevencije i lečenja jedne, dve ili više gore navedenih inflamatornih i/ili autoimunih oftalmoloških bolesti.

[0071] Poželjno je da, navedeni izociklosporin A ili njegova navedena so, ili oftalmološka formulacija, bude za oftalmološku lokalnu primenu u prevenciji ili lečenju inflamatorne i/ili autoimune oftalmološke bolesti kod pojedinca, pri čemu se primenjuju lokalno na očnu površinu oka pomenutog pojedinca ili na ivicu kapka. Prema poželjnom tehničkom rešenju, navedeni izociklosporin A ili njegova navedena so je za oftamološku lokalnu primenu u prevenciji ili lečenju inflamatorne i/ili autoimune oftalmološke bolesti kod pojedinca, pri čemu se izociklosporin A ili njegova oftalmološki prihvatljiva so primenjuju lokalno na očnu površinu oka pomenutog pojedinca pomoću oftalmološke tečne ili polutečne formulacije.

[0072] Poželjno je da navedeni izociklosporin A ili njegova navedena so bude za oftamološku lokalnu primenu u prevenciji ili lečenju inflamatorne i/ili autoimune oftalmološke bolesti kod pojedinca, pri čemu se izociklosporin A ili njegova oftalmološki prihvatljiva so administrira jednom, dva puta, tri puta, četiri puta, ili višeputa dnevno, u zavisnosti od medicinskih okolnosti i težine bolesti koja se leči. Prema jednom tehničkom rešenju, izociklosporin A ili njegova oftalmološki prihvatljiva so i/ili oftalmološka formulacija kao što je gore opisano su/je za oftamološku lokalnu primenu u prevenciji ili lečenju inflamatorne i/ili autoimune oftalmološke bolesti kod pojedinca, pri čemu se oni/on/ona mogu lokalno administrirati u oko zajedno sa jednim ili više lekova koji se koriste za prevenciju ili lečenje inflamatornih i/ili autoimunih oftalmoloških bolesti.

[0073] Lekovi koji se obično koriste za lečenje inflamatornih i/ili autoimunih oftalmoloških bolesti su kortikosteroidi i drugi anti-inflamatorni, imunosupresivni i/ili imunomodulatorni lekovi poznati u oblasti.

[0074] U jednom tehničkom rešenju, izociklosporin A ili njegova oftalmološki prihvatljiva so i/ili oftalmološka formulacija kao što je gore opisano su/je za oftalmološku lokalnu primenu u prevenciji ili lečenju inflamatorne i/ili autoimune oftalmološke bolesti kod pojedinca, pri čemu se oni/on/ona mogu administrirati zajedno sa ciklosporinom.

[0075] Oftalmološko lokalno administriranje izociklosporina A ili njegove oftalmološki prihvatljive soli ili oftalmološke formulacije može se desiti pre, istovremeno ili posle administriranja jednog ili više lekova koji se uobičajeno koriste za lečenje inflamatornih i/ili autoimunih oftalmoloških bolesti.

[0076] Prema posebno poželjnom tehničkom rešenju, izociklosporin A ili njegova oftalmološki prihvatljiva so je za oftamološku lokalnu primenu u prevenciji ili lečenju inflamatorne i/ili autoimune oftalmološke bolesti kod pojedinca, pri čemu navedena inflamatorna i/ili autoimuna oftalmološka bolest koja se može lečiti korišćenjem izociklosporina A ili njegove oftalmološki prihvatljive soli i/ili njegove oftalmološke formulacije je oftalmološka bolest koja prikazuje poboljšanje ili oporavak nakon lečenja kortizonom i sličnim kortikosteroidima.

[0077] Stoga, prema ovom poželjnom tehničkom rešenju, izociklosporin A ili njegova oftalmološki prihvatljiva so ili oftalmološka formulacija koja sadrži izociklosporin A i najmanje jedan oftalmološki prihvatljiv ekscipijens ili razblaživač su za oftalmološku lokalnu primenu u prevenciji ili lečenju inflamatorne i/ili autoimune oftalmološke bolesti kod pojedinca, pri čemu se administriraju pre, istovremeno ili nakon lečenja kortizonom i sličnim kortikosteroidima.

EKSPERIMENTALNI DEO

Primer 1 - Bojenje rožnjače fluoresceinom

[0078] Efikasnost formulacije kapi za oči sa izociklosporinom A procenjena je na mišjem modelu oštećenja epitela rožnjače izazvanog skopolaminom.

[0079] Detaljno, 15 miševa (N=5 po grupi) su nasumično raspoređeni na početku u 3 grupe, a suvoća oka je indukovana tretmanom potkožnom injekcijom od 0.5 mg/0.2 ml skopolamin hidrobromida, kao što je prethodno opisano (Yeh S i sarad. Invest Ophthalmol Vis Sci, 2003, 44(1): 124-9).

[0080] Eksperimentalne grupe su se sastojale od kontrolne grupe, koja nije primila nikakav tretman kapima za oči ("CTRL" grupa) i dve grupe za tretman, jedna tretirana tradicionalnom oftalmološkom suspenzijom ciklosporin A trifluoroacetata, koja sadrži 0.05% ciklosporin A trifluoroacetata u fosfatnom puferu sa 2% Tween 80 ("Stara" grupa) i druga tretirana odgovarajućim oftalmološkim rastvorom izociklosporin A trifluoroacetata ("Nova" grupa) koji sadrži 0.05% izociklosporin A trifluoroacetata u fosfatnom puferu sa 2% Tween 80.

[0081] U grupama za tretman, svakom mišu je ubrizgano deset mikrolitara test formulacija tri puta dnevno u oba oka počevši 1. dana nakon prve injekcije skopolamina tokom 25 dana. Tretmani su bili kodirani, a raspodela grupa je bila slepa za tehničara koji je administrirao tretman i za istraživača koji je procenjivao ishod eksperimenta. Identifikacija grupe je otkrivana na kraju analize.

[0082] In vivo bojenje fluoresceinom je sprovedeno u svakoj grupi na dan 0, 9, 11, 17, 22 i 25 nakon tretmana skopolaminom kako bi se utvrdili eventualni defekti epitela rožnjače. Bojenje rožnjače fluoresceinom je vredan klinički alat za procenu vitalnosti epitela.

[0083] Digitalne slike su dobijene pod prorezom lampe sa kobaltno plavim svetlom pri uvećanju od 10X i analizirane poluautomatski na bojenje fluoresceinom pomoću softvera ImageJ.

[0084] Kao što je prikazano na Slica 1, manje oštećene epitela (što je pokazano bojenjem rožnjače fluoresceinom) primećeno je u grupi tretiranoj oftalmološkim rastvorom izociklosporina A (novo) u poređenju sa grupama tretiranim ciklosporinom A (staro) ili onim bez tretmana.

[0085] Zanimljivo je da je ovaj efekat bio veći u prvih 17 dana studije, dostižući statističku značajnost 9. dana, što ukazuje na direktan efekat formulacije izociklosporina na zarastanje epitela rožnjače koji nije povezan sa produženim podmazivanjem.

[0086] Lučenje suza je takođe mereno kod svih životinja modifikovanim Širmerovim testom 22. i 25. dana, kao što je opisano kod Rossi S. i sarad. Arch Ital Biol. Mar.2012;150(1):15-21.

[0087] Kao što se može videti na Slici 2, značajna razlika je takođe bila primećena između različitih tretiranih grupa u lučenju suza u obe vremenske tačke, sa značajno višim nivoima u grupi tretiranoj izociklosporinom.

[0088] Kod uzoraka životinja, takođe su procenjeni nivoi apsorbovanog ciklosporina i izociklosporina u očnim tkivima. Biopsije relevantnih tkiva su uzete u tri različita vremenska trenutka, tj.1. dana (5 min nakon prvog tretmana), 2. dana (5 min nakon prvog tretmana) i 7. dana (5 min nakon prvog tretmana) u podgrupi od 3 miša/grupi. Tkiva su centrifugirana, homogenizovana, liofilizovana. 1 mg liofilizovanog tkiva je ekstrahovano sa EtOAc (0.5 ml) na sobnoj temperature, a organski rastvor je analiziran pomoću HPLC-a da bi se procenila koncentracija u tkivu i relativna količina ciklosporina A i Izociklosporina A.

[0089] Hromatografski uslovi HPLC analize su navedeni u Tabeli A i Tabeli B ispod:

Tabela A

Tabela B: Mobilna faza (Gradijent)

[0090] Dobijeni podaci pokazuju veću biodistribuciju na površini oka i intraokularnim tkivima za izociklosporin A u poređenju sa ciklosporinom A (>10 puta) i značajno manju varijabilnost unutar različitih životinja sa istim tretmanom.

[0091] Srednje vrednosti nivoa (ng/mg) detektovane za izociklosporin A i ciklosporin A u rožnjači, konjuktivi i intraokularnim tkivima (sklera i uvea) su prikazane u Tabeli C ispod:

Tabela C biodistribucija izociklosporina A i ciklosporina A u rožnjači, konjuktivi i intraokularnim tkivima

[0092] Biodistribucija izociklosporina A i ciklosporina A u intraokularnim tkivima procenjena je na skleri i uvei koje nisu razdvojene nakon disekcije. Stoga se pojam "kombinovano" u Tabeli C iznad odnosi na procenu nivoa biodistribucije u skleri i uvei koje nisu razdvojene tokom disekcije.

[0093] Konverzija izociklosporina A u ciklosporin A u očnim tkivima tokom vremena takođe je merena i bila je minimalna, kako se i očekivalo, i nakon pojedinačne i nakon ponovljenih doza. Dobijeni podaci pokazuju da direktan efekat izociklosporina A jasno objašnjava primećenu efikasnost, čime se objašnjava novi i nezavisan mehanizam delovanja.

Primer 2 -antiinflamatorna svojstva lokalno primenjenih kapi za oči izociklosporina A kod pacovskog modela opekotine oka alkalijama

[0094] Formulacija izociklosporina A trifluoroacetata iz Primera 1 takođe je testirana na modelu akutne opekotine oka alkalijama kod pacova. Ovo je izazvano primenom diska filterpapira natopljenog sa 1N NaOH preko rožnjače tokom deset sekundi.

[0095] Eksperimentalne grupe (n=6 svaka) sastojale su se od kontrolne grupe, koja nije primala nikakav tretman kapima za oči ("CTRL" grupa) i grupe tretirane gore opisanim oftalmološkim rastvorom izociklosporina ("Nova" grupa), ukapavanjem deset mikrolitara test formulacije svakom mišu tri puta tokom 24 sata.

[0096] Inflamatorni infiltrat konjuktive je zatim izmeren na kraju tretmana.

[0097] Značajno smanjenje inflamatornog infiltrate je primećeno u tretiranoj grupi u poređenju sa netretiranom grupom, što dodatno potvrđuje aktivna antiinflamatorna svojstva lokalno primenjenih kapi za oči sa izociklosporinom. Štaviše, i kod ovih životinja je takođe procenjena, konverzija izociklosporina A u ciklosporin A, kao što je gore opisano, i nije primećena značajna interkonverzija ni na površini oka i/ili intraokularnim tkivima.

Primer 3 – Drajzerov test iritacije oka

[0098] Tipičan Drajzerov test iritacije oka sproveden je na na desnom oku 6 zdravih zečeva (3 po grupi) kako bi se uporedila tolerancija izociklosporina A u odnosu na lokalne oftalmološke formulacije ciklosporina A (Draize, J. H., i sarad., Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics (1944), 82: 377-390).

[0099] Ni u jednoj grupi nisu primećene reakcije u ponašanju poput trljanja očiju i znaci iritacije oka (tj. reakcija konjuktive, otok i/ili iscedak).

[0100] Međutim, pošto je kod životinja tretiranih ciklosporinom A primećena povećana frekvencija treptanja, sproveden je i metod namigivanja zečeva koju su opisali Li i sarad. (Li i sarad., Int. J Pharm, 2008; 363(1-2): 177-182): deset sekundi nakon administriranja kapi u oči, zabeležena je učestalost namigivanja zečeva tokom 2 minuta.

[0101] Učestalost je bila veća u grupi ciklosporina A (9±1) u poređenju sa grupom izociklosporina A (5±1), p<0.05.

Primer 4 - FLIPR test

[0102] Sposobnost izociklosporina A i ciklosporina A da regulišu aktivaciju jonskih kanala uključenih u brojne inflamatorne i/ili alergijske očne bolesti testirana je u FLIPR testu.

[0103] FLIPR test se koristi za skrining ciljanih jonskih kanala korišćenjem membranski propustljivih fluorescentnih boja. Konkretno, ciljani jonski kanali sa značajnom propustljivošću za Ca, proizvode povećanje intracelularnog kalcijuma koje se može meriti korišćenjem boja osetljivih na kalcijum (Michelle R. Arkin i sarad. FLIPR™ Assays for GPCR and Ion Kanal Targets. Assay Guidance Manual [Internet]. Bethesda (MD): Eli Lilly & Company and the National Center for Advancing Translational Sciences; 2004).

[0104] Detaljnije, gore opisane formulacije koje sadrže izociklosporin A ili ciklosporin A u koncentraciji od 30µM testirane su u FLIPR testu na njihovu sposobnost da aktiviraju ili inhibiraju jonske kanale TRPV3, TRPML2 ili TRPC4. TRPV3 je jonski kanal koji igra važnu ulogu u svrabu i upali, što su dva karakteristična aspekta bolesti površine oka kao što su VKC i AKC. TRPML2 je jonski kanal sa važnom ulogom u kontekstu imunog i inflamatornog odgovora.

[0105] TRPC4 je jonski kanal koji eksprimira epitel rožnjače i koji igra ulogu u proliferaciji i migraciji epitelnih ćelija.

[0106] Detaljnije, humane TRP ćelije su tripsinizirane, prebrojane i zasejane u crne ploče sa 96 bunarića sa providnim dnom pri gustini od 50,000 ćelija po bunariću i inkubirane preko noći. Sledećeg dana, medijum se uklanja sa ćelijskih ploča i dodaje se 25µl pufera za ispitivanje. Crveni membranski potencijal ili rastvor boje Kalcijum 5 (10µl) se dodaje u bunariće i inkubira na 37°C tokom 1 sata. TRPV3, TRPML2 i TRPC4 se testiraju korišćenjem boje za membranski potencijal.

[0107] Rastvor boje se pravi u puferu za ispitivanje. Razblaženja jedinjenja se izvode u 100% DMSO ili dH2O a zatim se prenose u srednja razblaženja (5% DMSO / pufer za ispitivanje ili 5% dH2O/ pufer za ispitivanje) na kratko vreme (<10 minuta) neposredno pre dodavanja na ćelijsku ploču.

[0108] Za testiranje agonista: Ploče se stavljaju u FLIPR, nakon inkubacije sa bojom, i fluorescencija se prati svakih 1.52 sekunde. Nakon 20 sekundi IzoCsA, CsA ili standardni agonist se dodaju u bunariće i fluorescencija se prati tokom 5 minuta na eks. /em. (talasne dužine ekscitacije / emisije): 488 nm /510-570 nm.

[0109] Za testiranje antagonista: izociklosporin A ili ciklosporin A je dodat, nakon inkubacije sa bojom, korišćenjem ručnog multikanala i inkubiran 10 minuta na sobnoj temperaturi. Ploče su stavljene u FLIPR i fluorescencija je praćena svakih 1.52 sekunde. Nakon 20 sekundi dodaje se 10µl odgovarajućeg standarda agonista i fluorescencija je praćena 5 minuta na eks./em: 488 nm /510-570 nm. Referentni agonisti i antagonisti su testirani u odnosu na svaki kanal kako bi se proverilo da li je vrednost unutar prihvatljivog opsega kako bi se validirali testovi. Procenjene su procentualne vrednosti aktivacije i inhibicije testiranog jedinjenja i referentnih jedinjenja.

[0110] Nije otkrivena značajna agonistička aktivnost dok je primećen izražen inhibitorni efekat izociklosporina A u poređenju sa ciklosporinom A. Rezultati testa inhibicije su prikazani u sledećim Tabelama 1-3.

[0111] Tabela 1 prikazuje procenat inhibicije TRPV3 izociklosporinom A, ciklosporinom A i referentnim jedinjenjima.

[0112] Kao što se može videti iz dole navedenih podataka, izociklosporin A (IzoCsA u tabeli) ima sposobnost da antagonizuje ovaj kanal više od 4 puta veću od ciklosporina A (CsA u tabeli).

Tabela 1- procenat inhibicije TRPV3

Gde 2-APB je 2-aminoetoksi difenil borat (agonist) i RR je rutenijum crveno (antagonist). Pošto je 2-APB referentni standardni agonist, tj. izaziva aktivaciju receptora da bi se proizveo biološki odgovor, njegov % inhibicije TRPV3-a se smatra jednakim 0%.

[0113] Tabela 2 prikazuje procenat inhibicije TRPML2-a izociklosporinom A, ciklosporinom A i referentnim jedinjenjem.

[0114] Kao što se može videti iz podataka ispod, izociklosporin A (Izo-CsA u tabeli) ima sposobnost da antagonizuje ovaj kanal više nego dvostruko u poređenju sa ciklosporinom A (CsA u tabeli).

Tabela 2 – procenat inhibicije TRPML2

Gde CaCl2je agonist i Gadolinijum Gd3 je antagonist.

[0115] Pošto CaCl2deluje kao agonist, tj. izaziva aktivaciju receptora da bi se proizveo biološki odgovor, njegov % inhibicije TRPML2 se smatra jednakim 0%.

[0116] TRPC4 je jonski kanal koga eksprimira epitel rožnjače i koji igra ulogu u proliferaciji i migraciji epitelnih ćelija (Hua Yang i sarad., J Biol Chem. 16. sep. 2005;280(37):32230-7). Vernalni keratokonjuktivitis (VKC) i atopijski keratokonjunktivitis (AKC) karakterišu se hiperproliferativnim fenomenima očne površine. Stoga, molekul koji može da podstakne rast i migraciju epitela kod ovih patologija može biti štetan.

[0117] Tabela 3 prikazuje procenat aktivacije TRPC4 izociklosporinom A, ciklosporinom A i referentnim jedinjenjima.

[0118] Iz dole navedenih podataka, može se videti da dok izociklosporin A (Izo-CsA u tabeli) nema nikakvog uticaja na aktivaciju ovog kanala, ciklosporin A (CsA u tabeli) deluje kao agonist i stoga ima neželjene nuspojave zbog svoje aktivacije.

Tabela 3 – procenat aktivacije TRPC4

U kome Englerin A je agonist i Gadolinijum GD3 je antagonist.

[0119] Pošto GD3 deluje kao antagonist, tj. izaziva inhibiciju receptora da bi se proizveo bioločki odgovor, njegov % aktivacije TRPC4 se smatra jednakim 0%.

Patentni zahtevi

Claims (13)

1. Izociklosporin A ili njegova oftalmološki prihvatljiva so za oftamološku lokalnu primenu u prevenciji ili lečenju inflamatorne i/ili autoimune oftalmološke bolesti kod pojedinca.

2. Izociklosporin A ili njegova oftalmološki prihvatljiva so za oftamološku lokalnu primenu prema patentnom zahtevu 1 pri čemu je navedena inflamatorna i/ili autoimuna oftalmološka bolest odabrana od inflamatorne i/ili autoimune bolesti rožnjače i površine oka i inflamatornih bolesti ivica kapaka.

3. Izociklosporin A ili njegova oftalmološki prihvatljiva so za oftamološku lokalnu primenu prema patentnom zahtevu 1 ili 2, pri čemu su navedene inflamatorne i/ili autoimune bolesti rožnjače i površine oka odabrane od vernalnog keratokonjuktivitisa (VKC), atopijskog keratokonjunktivitisa (AKC), alergijskog konjuktivitisa, očne rozacee, uveitisa, bolesti suvog oka (DED), očnog cikatricijalnog pemfigoida (OCP), očne bolesti kalem-protiv-domaćina (GVHD) i imunih ulkusa rožnjače.

4. Izociklosporin A ili njegova oftalmološki prihvatljiva so za oftamološku lokalnu primenu prema patentnom zahtevu 1 ili 2, pri čemu su navedene inflamatorne bolesti ivica kapaka odabrane od upaljenog pterigijuma i hroničnog blefaritisa.

5. Oftalmološki prihvatljiva so izociklosporina A za oftalmološku lokalnu primenu prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 4, pri čemu je navedena so odabrana iz grupe koja se sastoji od acetata, adipata, askorbata, benzoata, benzensulfonata, bikarbonata, bisulfata, butirata, kamforata, kamforsulfonata, citrata, cikloheksil sulfamata, etansulfonata, fumarata, glutamata, glikolata, hemisulfata, 2-hidroksietilsulfonata, heptanoata, heksanoata, hidrohlorida, hidrobromida, hidrojodida, hidroksimaleata, laktata, malata, maleata, metansulfonata, 2-naftalensulfonata, nitrata, oksalata, pamoata, persulfata, fenilacetata, fosfata, difosfata, pikrata, pivalata, propionata, hinata, salicilata, stearata, sukcinata, sulfamata, sulfanilata, sulfata, tartarata, tozilata (ptoluensulfonata), trifluoroacetata i undekanoatnih soli izociklosporina A.

6. Oftalmološka formulacija koja sadrži izociklosporin A ili njegovu oftalmološki prihvatljivu so i najmanje jedan oftalmološki prihvatljiv ekscipijens ili razblaživač za oftalmološku lokalnu primenu u prevenciji ili lečenju inflamatorne i/ili autoimune oftalmološke bolesti kod pojedinca.

7. Oftalmološka formulacija za oftalmološku lokalnu primenu prema patentnom zahtevu 6, koja je tečna oftalmološka formulacija, poželjno tečna formulacija kapi za oči.

8. Oftalmološka formulacija za oftalmološku lokalnu primenu prema patentnom zahtevu 6, koja je polučvrsta oftalmološka formulacija, poželjno krema, mast ili gel.

9. Oftalmološka formulacija za oftalmološku lokalnu primenu prema patentnom zahtevu 6, koja je čvrsta oftalmološka formulacija pogodna za improvizovanu pripremu tečne ili polučvrste oftalmološke formulacije prema patentnim zahtevima 7 ili 8, dodatkom oftalmološki prihvatljivog razblaživača pre administriranja.

10. Oftalmološka formulacija za oftalmološku lokalnu primenu prema bilo kom od patentnih zahteva 6 do 8, koja ima pH vrednost između 6 i 8, poželjno između 6.4 i 7.8, poželjnije između 6.5 i 7.5.

11. Oftalmološka formulacija za oftalmološku lokalnu primenu prema bilo kom od patentnih zahteva 6 do 10, pri čemu je navedena inflamatorna i/ili autoimuna oftalmološka bolest odabrana od inflamatornih i/ili autoimunih bolesti rožnjače i površine oka i inflamatornih bolesti ivice kapaka.

12. Oftalmološka formulacija za oftalmološku lokalnu primenu prema bilo kom od patentnih zahteva 6 do 10, koja dodatno sadrži najmanje jedan lek pogodan za lečenje inflamatornih i/ili autoimunih oftalmoloških bolesti, koja poželjno dodatno sadrži kortikosteroid.

13. Oftalmološka formulacija za oftalmološku lokalnu primenu prema bilo kom od patentnih zahteva 6 do 10 koja dodatno sadrži ciklosporin.