RS66841B1 - Jedinjenja za ciljanje brm i povezane metode upotrebe - Google Patents

Jedinjenja za ciljanje brm i povezane metode upotrebe

Info

Publication number
RS66841B1
RS66841B1 RS20250498A RSP20250498A RS66841B1 RS 66841 B1 RS66841 B1 RS 66841B1 RS 20250498 A RS20250498 A RS 20250498A RS P20250498 A RSP20250498 A RS P20250498A RS 66841 B1 RS66841 B1 RS 66841B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
optionally substituted
ulm
group
8alkyl
alkyl
Prior art date
Application number
RS20250498A
Other languages
English (en)
Inventor
Andrew P Crew
Jing Wang
Michael Berlin
Peter DRAGOVICH
Huifen Chen
Leanna Staben
Original Assignee
Arvinas Operations Inc
Genentech Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Arvinas Operations Inc, Genentech Inc filed Critical Arvinas Operations Inc
Publication of RS66841B1 publication Critical patent/RS66841B1/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/425—Thiazoles
    • A61K31/427—Thiazoles not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/50—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines
    • A61K31/501—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/08—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing oxygen, e.g. ethers, acetals, ketones, quinones, aldehydes, peroxides
    • A61K47/10—Alcohols; Phenols; Salts thereof, e.g. glycerol; Polyethylene glycols [PEG]; Poloxamers; PEG/POE alkyl ethers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/16—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite containing nitrogen, e.g. nitro-, nitroso-, azo-compounds, nitriles, cyanates
    • A61K47/18—Amines; Amides; Ureas; Quaternary ammonium compounds; Amino acids; Oligopeptides having up to five amino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/22—Heterocyclic compounds, e.g. ascorbic acid, tocopherol or pyrrolidones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
    • A61K47/545—Heterocyclic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/54—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound
    • A61K47/55—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an organic compound the modifying agent being also a pharmacologically or therapeutically active agent, i.e. the entire conjugate being a codrug
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/10—Spiro-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/08—Bridged systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D498/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D498/10—Spiro-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K5/00—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof
    • C07K5/04—Peptides containing up to four amino acids in a fully defined sequence; Derivatives thereof containing only normal peptide links
    • C07K5/06—Dipeptides
    • C07K5/06139—Dipeptides with the first amino acid being heterocyclic
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Description

OPIS
Upućivanje na povezane aplikacije
Ova prijava zahteva koristi od američke privremene patentne prijave serijskog broja 62/651,186, podnete: 01. aprila 2018. godine, pod naslovom: JEDINJENJA ZA CILJANJE BRM I POVEZANE METODE UPOTREBE, i američke privremene patentne prijave, serijski broj 62/797.754, podnete: 28. januara 2019. godine, pod naslovom: JEDINJENJA ZA CILJANJE BRM I POVEZANE METODE UPOTREBE.
Oblast pronalaska
Pronalazak je prikazan u priloženim skupu zahteva.
Opis pruža bifunkcionalna jedinjenja koja sadrže deo za vezivanje ciljnog proteina i deo koji veže E3 ubikvitin ligazu i povezane metode upotrebe. Bifunkcionalna jedinjenja su korisna kao modulatori ciljane ubikvitinacije, posebno u pogledu nefermentabilnog regulatora hromatina vezanog za prekidač/saharozu (SWI/SNF), povezan sa matricom, aktivno-zavisnim regulatorom hromatina, potporodicom A, članom 2 (SMARCA2) (tj. BRAHMA ili BRM), koji su razgrađeni i/ili na drugi način inhibirani bifunkcionalnim jedinjenjima.
Osnova pronalaska
Većina lekova malih molekula vezuje enzime ili receptore u uskim i dobro definisanim džepovima. S druge strane, interakcije protein-protein je notorno teško ciljati pomoću malih molekula zbog njihovih velikih kontaktnih površina i uključenih plitkih žlebova ili ravnih interfejsa. E3 ubikvitin ligaze (kojih su stotine poznate kod ljudi) daju specifičnost supstrata za ubikvitinaciju i stoga su atraktivnije terapijske mete od opštih inhibitora proteasoma zbog njihove specifičnosti za određene proteinske supstrate. Razvoj liganda E3 ligaza pokazao se izazovnim, delimično zbog činjenice da moraju poremetiti interakcije protein-protein. Međutim, nedavni razvoj je obezbedio specifične ligande koji se vezuju za ove ligaze. Na primer, od otkrića nutlina, prvih inhibitora E3 ligaze malih molekula, prijavljena su dodatna jedinjenja koja ciljaju E3 ligaze, ali polje ostaje nerazvijeno. Na primer, od otkrića Nutlinsa, prvog malog molekula E3 ligaze miša inhibitora dvostruke minute 2 homologa (MDM2), prijavljena su dodatna jedinjenja koja ciljaju MDM2 (tj. humane dvostruke minute 2 ili HDM2) E3 ligaze (J. Di, et al. Current Cancer Drug Targets (2011), 11(8), 987-994).
Jedna E3 ligaza sa uzbudljivim terapijskim potencijalom je von Hippel-Lindau (VHL) tumorski supresor, podjedinica za prepoznavanje supstrata kompleksa E3 ligaze VCB, koji se takođe sastoji od elongina B i C, Cul2 i Rbx1. Primarni supstrat VHL je faktor inducibilan hipoksijom 1α (HIF-1α), transkripcijski faktor koji pojačava gene kao što su proangiogeni faktor rasta VEGF i citokin eritropoetin indukujući crvena krvna zrnca kao odgovor na nizak nivo kiseonika. Generisani su prvi ligandi malih molekula Von Hippel Lindau (VHL) na podjedinicu za prepoznavanje supstrata E3 ligaze, a dobijene su kristalne strukture koje potvrđuju da jedinjenje oponaša način vezivanja transkripcionog faktora HIF-1α, glavnog supstrata VHL.
Bifunkcionalna jedinjenja kao što su ona koja su opisana u američkim publikacijama za prijavu patenata 2015-0291562 i 2014-0356322, funkcionišu da regrutuju endogene proteine u E3 ubikviuin ligazu radi razgradnje. Konkretno, publikacije opisuju bifunkcionalna ili proteolizna jedinjenja koja ciljaju himerna (PROTAC) jedinjenja, koja pronalaze korisnost kao modulatori ciljane ubikvitinacije različitih polipeptida i drugih proteina, koji se zatim razgrađuju i/ili na drugi način inhibiraju bifunkcionalnim jedinjenjima.
Prekidač/saharoza koja se ne fermentira (SWI/SNF) je kompleks sa više podjedinica koji modulira hromatsku strukturu kroz aktivnost dve međusobno isključive katalitičke podjedinice helikaze/ATPaze povezane sa SWI/SNF, povezane sa matricom, regulatora hromatina zavisnog od aktina, potporodice A, član 2 (SMARCA2, BRAHMA ili BRM) i SWI/SNF, povezan sa matricom, Regulator hromatina zavisan od aktina, potporodica A, član 4 (SMARCA4 ili BRG1). Jezgro i regulatorne podjedinice spajaju hidrolizu ATP-a sa poremećajem kontakata histon-DNK, obezbeđujući tako pristupne tačke faktorima transkripcije i srodnim elementima DNK koji olakšavaju aktivaciju i represiju gena.
Mutacije u genima koji kodiraju dvadeset kanonskih SWI/SNF podjedinica primećene su kod skoro 20% svih karcinoma sa najvećom frenkventnošću mutacija uočenih kod rabdoidnih tumora, ženskih karcinoma (uključujući jajnika, materice, cerikalni i endometrijski), adenokarcinom pluća, adenokarcinom želuca, melanom, karcinom jednjaka i feanalnih bistrih ćelija. Uprkos visokom stepenu homologije i njihovim pretpostavljenim preklapajućim funkcijama, prijavljeno je da SMARCA2 i SMARCA4 imaju različite uloge vezano za rak. Na primer, SMARCA4 je često mutiran u primarnim tumorima, dok je inaktivacija SMARCA2 retka u razvoju tumora. U stvari, pokazalo se da su brojne vrste raka povezane sa SMARCA4 (npr. karcinomi koji imaju mutaciju SmarCA4 ili nedostatak SmarCA4, kao što je nedostatak ekspresije), uključujući, na primer, rak pluća (kao što je rak pluća ne-malih ćelija).
SMARCA2 je demonstriran kao jedan od najboljih esencijalnih gena u ćelijskim linijama raka povezanim sa SMARCA4 ili mutantnim ćelijskim linijama raka. To je zato što populacije pacijenata ili ćelije sa nedostatkom SMARCA4 zavise isključivo od aktivnosti SMARCA2 - tj. Postoji veća inkorporacija SMARCA2 u kompleks kako bi se nadoknadio nedostatak SMARCA4. Prema tome, SMARCA2 može biti ciljan kod raka povezanog sa SMARCA4 i nedostatnim karcinomima. Istovremena pojava nedostatka ekspresije dva (ili više) gena koja dovodi do ćelijske smrti poznata je kao sintetička smrtnost. Shodno tome, sintetička smrtnost se može iskoristiti u lečenju određenih karcinoma povezanih sa SMARCA2/SMARCA4.
Postoji stalna potreba za efikasnim lečenjem bolesti koje se mogu lečiti inhibicijom ili razgradnjom SMARCA2 (tj. BRAHMA ili BRM). Međutim, nespecifični efekti i nemogućnost ciljanja i modulacije SMARCA2 ostaju prepreka razvoju efikasnih tretmana. Kao takvi, terapijski agensi malih molekula koji ciljaju SMARCA2 i koji koriste ili potenciraju specifičnost VHL-a supstrata bili bi veoma korisni.
Rezime
Pronalazak je prikazan u priloženim skupu zahteva. Svi primeri, aspekti, otelotvorenja ili otkrića koja se ne odražavaju u priloženom skupu zahteva nisu u skladu sa pronalaskom i prisutni su samo u svrhu ilustracije.
Ovde su opisana bifunkcionalna jedinjenja koja služe za regrutovanje endogenih proteina u E3 ubikvitin ligazu za razgradnju i metode upotrebe istih. Konkretno, otkrivena su bifunkcionalna ili proteolizna jedinjenja koja ciljaju himerna (PROTAC) jedinjenja, koja pronalaze korisnost kao modulatori ciljane ubikvitinacije različitih polipeptida i drugih proteina, koji se zatim razgrađuju i/ili na drugi način inhibiraju bifunkcionalnim jedinjenjima kako je ovde opisano. Prednost ovde navedenih jedinjenja je što je moguć širok spektar farmakoloških aktivnosti, u skladu sa razgradom/inhibicijom ciljanih polipeptida iz praktično bilo koje klase proteina ili porodice. Pored toga, opis pruža metode korišćenja efikasne količine jedinjenja kako je ovde opisano za lečenje ili ublažavanje bolesti, kao što je rak, na primer, rak povezan sa SMARCA4, kao što je rak pluća ili rak pluća ne-malih ćelija.
Ovde se predstavljaju bifunkcionalna ili PROTAC jedinjenja, koja sadrže deo koji veže E3 ubikvitin ligazu (tj. ligand za E3 ubkvitin ligazu ili „ULM“ grupu), i deo koji vezuje ciljni protein (tj. ligand koji cilja protein/polipeptid ili „PTM“ grupu) tako da se ciljni protein/polipeptid postavlja u blizini ubikvitina ligaza da utiče na degradaciju (i inhibiciju) tog proteina. U poželjnom otelotvorenju, ULM (modulator ubikvitinacione ligaze) može biti Von Hippel-Lindau E3 ubikvitin ligaza (VHL) vezujući deo (VLM). Na primer, struktura bifunkcionalnog jedinjenja može se prikazati kao:
Odgovarajući položaji PTM i ULM delova, kao i njihov broj, kako je ovde ilustrovano, dati su samo kao primer i nisu namenjeni ograničavanju jedinjenja na bilo koji način. Kao što bi osoba vešta u struci razumela, bifunkcionalna jedinjenja kako su ovde opisana mogu se sintetizovati tako da se broj i položaj odgovarajućih funkcionalnih delova mogu menjati po želji.
U određenim otelotvorenjima, bifunkcionalno jedinjenje dalje sadrži hemijski linker („L“). U ovom primeru struktura bifunkcionalnog jedinjenja može se prikazati kao:
gde je PTM deo koji cilja protein/polipeptid, L je linker, na primer, veza ili hemijska grupa koja povezuje PTM sa ULM, a ULM je Von Hippel-Lindau E3 ubikvitin ligaza (VHL) vezujući deo (VLM).
Na primer, struktura bifunkcionalnog jedinjenja može se prikazati kao:
pri čemu: PTM je deo koji cilja protein/polipeptid; „L“ je linker (npr. veza ili hemijska grupa linkera) koji spaja PTM i VLM, naznačen time što je VLM Von Hippel-Lindau E3 ubikvitin ligaza vezujući deo koji se vezuje za VHL E3 ligazu.
U određenim otelotvorenjima, jedinjenja kako su ovde opisana sadrže više nezavisno odabranih ULM-a, više PTM-a, više hemijskih veza ili njihovu kombinaciju.
U dodatnim otelotvorenjima, VLM može biti hidroksiprolin ili njegov derivat. Štaviše, drugi predviđeni VLM-ovi uključeni su u publikaciju američke patentne prijave br.
2014/03022523.
U određenim otelotvorenjima, „L“ je linker. U dodatnim otelotvorenjima, linker „L“ je konektor sa linearnim atomskim brojem ne-vodonika u opsegu od 1 do 20. Konektor „L“ može da sadrži, ali ne ograničava se na funkcionalne grupe kao što su eter, amid, alkan, alken, alkin, keton, hidroksil, karboksilna kiselina, tioeter, sulfoksid i sulfon. Linker može sadržati aromatične, heteroaromatične, ciklične, biciklične i triciklične delove. Zamena sa halogenom, kao što su Cl, F, Br i I može biti uključena u linker. U slučaju supstitucije fluora mogu se uključiti pojedinačni ili višestruki fluori.
U određenim otelotvorenjima, VLM je derivat trans-3-hidroksiprolina, gde su i azot i karboksilna kiselina u trans-3-hidroksiprolinu funkcionalizovane kao amidi.
U dodatnom aspektu, opis pruža terapijske kompozicije koje sadrže efektivnu količinu jedinjenja kako je ovde opisano ili njegov oblik soli i farmaceutski prihvatljiv nosač. Terapijske kompozicije moduliraju razgradnju i/ili inhibiciju proteina kod pacijenta ili subjekta, na primer, životinje kao što je čovek, i mogu se koristiti za lečenje ili ublažavanje stanja bolesti ili stanja koja su modulirana kroz degradirani/inhibirani protein. U određenim otelotvorenjima, terapijske kompozicije kao što su ovde opisane mogu se koristiti za postizanje razgradnje proteina od interesa za lečenje ili ublažavanje bolesti, na primer, raka (uključujući najmanje jedan karcinom povezan sa SWI/SNF, rak sa SMARCA4 mutacijom, rak sa nedostatkom SMARCA4 ili njihova kombinacija), kao što je rak pluća (npr. karcinom pluća ne-malih ćelija). Ovde se podučava metoda ubikvitinacije/razgradnje ciljnog proteina u ćeliji. Metoda može da obuhvati davanje bifunkcionalnog jedinjenja kako je ovde opisano koje sadrži VLM, poželjno povezan preko linkerskog dela, kao što je ovde drugačije opisano, naznačen time što je VLM povezan sa PTM preko linkera kako bi ciljao protein za razgradnju. Razgradnja ciljnog proteina će se desiti kada se ciljni protein postavi u blizini E3 ubikvitin ligaze, što rezultira razgradacijama/inhibicijom efekata ciljnog proteina i kontrolom nivoa proteina. Kontrola nivoa proteina može obezbediti lečenje stanja ili bolesti, koje se modulira kroz ciljni protein snižavanjem nivoa tog proteina u ćelijama pacijenta.
U drugom aspektu, opis pruža metode za lečenje ili ublažavanje bolesti, poremećaja ili simptoma kod subjekta ili pacijenta, na primer, životinje kao što je čovek, uključujući davanje subjektu kojem je potrebno, kompoziciju koja sadrži efektivnu količinu, npr. terapijski efikasnu količinu, jedinjenja kako je ovde opisano ili njegovog oblika soli, i farmaceutski prihvatljivog nosača, naznačeno time što je kompozicija efikasna za lečenje ili ublažavanje bolesti ili poremećaja ili simptoma kod subjekta.
U drugom aspektu, opis pruža metode za identifikaciju efekata razgradnje proteina od interesa u biološkom sistemu koristeći jedinjenja koja se ovde predstavljaju.
Kratak opis slika
Pronalazak je prikazan u priloženim skupu zahteva. Svi primeri, aspekti, otelotvorenja ili otkrića koja se ne odražavaju u priloženom skupu zahteva nisu u skladu sa pronalaskom i prisutni su samo u svrhu ilustracije. Prateći crteži, koji su ugrađeni u specifikaciju i čine deo nje, ilustruju ovaj predmetni pronalazak i zajedno sa opisom služe za objašnjenje principa pronalaska. Crteži služe samo u svrhu ilustrovanja otelotvorenja pronalaska i ne trebaju se tumačiti kao ograničavanje pronalaska kako je navedeno u priloženim zahtevima. Dalji predmeti, karakteristike i prednosti pronalaska postaće očigledni iz sledećeg detaljnog opisa uzetog zajedno sa pratećim slikama koje prikazuju ilustrativna otelotvorenja pronalaska navedena u priloženom skupu zahteva, u kojima:
Slike 1A i 1B. Ilustracija opšteg principa za PROTAC funkciju. (A) Primeri PROTAC-a sadrže deo ciljanja proteina (PTM; tamno osenčeni pravougaonik), deo koji veže ubikvitin ligazu (ULM; blago osenčeni trougao) i opciono vezni deo (L; crna linija) koji spaja ili veže PTM za ULM. (B) Ilustruje funkcionalnu upotrebu PROTAC-a kako je ovde opisano. Ukratko, ULM prepoznaje i vezuje se za specifičnu E3 ubikvitin ligazu, a PTM vezuje i regrutuje ciljni protein dovodeći ga u neposrednu blizinu E3 ubikvitin ligaze. Tipično, E3 ubikvitin ligaza je kompleksirana sa E2 ubikvitin konjugujućim proteinom, i samostalno ili preko E2 proteina katalizuje vezivanje ubikvitina (tamni krugovi) za lizin na ciljnom proteinu preko izopeptidne veze. Poliubikvitinirani protein (krajnje desno) je zatim ciljan na razgradnju proteosomskom mašinerijom ćelije.
Detaljan opis
Pronalazak je prikazan u priloženim skupu zahteva. Svi primeri, aspekti, otelotvorenja ili otkrića ovdje opisana, koja se ne odražavaju u priloženom skupu zahteva nisu u skladu sa pronalaskom i prisutni su samo u svrhu ilustracije.
Sledi detaljan opis dat kako bi se pomoglo onima koji su vešti u praksi u praktikovanju ovog otkrića.
Ovde su opisane kompozicije i metode koje se odnose na iznenađujuće i neočekivano otkriće da protein E3 ubikvitin ligaze (npr. Von Hippel-Lindau E3 ubikvitin ligaza (VHL)) ubikvitinira ciljni protein nakon što se on i ciljni protein postave u blizini bifunkcionalnim ili himernim konstruktom koji vezuje protein E3 ubikvitin ligaze i ciljni protein. Shodno tome, ovo oktriće obezbeđuje takva jedinjenja i kompozicije koje sadrže deo vezanja E3 ubikvintin ligaze („ULM“) povezan sa proteinskim ciljnim vezivnim delom („PTM“), što rezultira ubikvitinacijom izabranog ciljnog proteina, što dovodi do razgradnje ciljnog proteina proteasomom (vidi sliku 1). Ovo otkriće takođe pruža biblioteku kompozicija i njihovu upotrebu.
U određenim aspektima, ovo otkriće obezbeđuje jedinjenja koja sadrže ligand, na primer, ligand malog molekula (tj. Ima molekulsku težinu ispod 2.000, 1.000, 500 ili 200 daltona), koji je sposoban da se veže za ubikvitin ligazu, kao što je VHL. Jedinjenja takođe sadrže deo koji je sposoban da se veže za ciljni protein, tako što se ciljni protein postavlja u blizini ubikvitin ligaze da bi uticao na degradaciju (i/ili inhibiciju) tog proteina. Mali molekul može značiti, pored gore navedenog, da molekul nije peptidil, odnosno da se generalno ne smatra peptidom, na primer, sadrži manje od 4, 3 ili 2 aminokiseline. U skladu sa ovim opisom, molekul PTM, ULM ili PROTAC može biti mali molekul.
Ukoliko nije drugačije definisano, svi tehnički i naučni izrazi koji se ovde koriste imaju isto značenje koje je poznato stručnom licu u oblasti kojoj pripada ovo otkriće. Terminologija koja se koristi u opisu služi samo za opisivanje određenih otelotvorenja i nije namijenjena ograničavanju otkrića.
Kada je predviđen opseg vrednosti, podrazumeva se da svaka intervenciona vrednost, do desetine jedinice donje granice, osim ako kontekst jasno ne nalaže drugačije (kao što je u slučaju grupe koja sadrži određeni broj atoma ugljenika, u kojem slučaju je dat svaki broj atoma ugljenika koji spada u opseg), između gornje i donje granice tog opsega i bilo koje druge navedene ili intervenirajuće vrednosti u navedenom opsegu obuhvaćena je u okviru otkrića. Gornja i donja granica ovih manjih raspona mogu nezavisno biti uključene u manje opsege, takođe su obuhvaćene u okviru otkrića, podložno bilo kojoj posebno isključenoj granici u navedenom opsegu. Tamo gde navedeni opseg uključuje jedno ili oba ograničenja, opsezi koji isključuju oba uključena ograničenja takođe su uključeni u otkriće.
Sledeći termini se koriste za opisivanje ovog otkrića. U slučajevima kada termin ovde nije posebno definisan, tom terminu se daje umetničko prepoznato značenje od strane osoba običnih veština koje taj termin primenjuju u kontekstu njegove upotrebe u opisivanju ovog otkrića.
U zahtevima, kao i u gore navedenoj specifikaciji, sve prelazne fraze kao što su „sastoji se od“, „uključujući“, „nosi“, „ima“, „sadrži“, „uključuje“, „drži“, „sastavljeno od“ i slično treba shvatiti kao otvorene, odnosno da znače uključivanje, ali ne ograničavanje. Samo prelazni izrazi „koji se sastoje od“ i „koji se u suštini sastoje od“ biće zatvorene ili polutvorene prelazne fraze, respektivno, kako je navedeno u Priručniku o postupcima ispitivanja patenata Patentnog zavoda Sjedinjenih Država, odeljak 2111.03.
Kao što se ovde koristi u specifikaciji i u zahtevima, izraz „najmanje jedan“, u odnosu na listu jednog ili više elemenata, treba razumeti kao najmanje jedan element izabran od bilo kog ili više elemenata na listi elemenata, ali ne nužno uključujući najmanje jedan od svakog elementa posebno navedenog u listi elemenata i ne isključujući bilo kakve kombinacije elemenata u listi elemenata. Ova definicija takođe omogućava da elementi mogu opciono biti prisutni osim elemenata posebno identifikovanih u listi elemenata na koje se odnosi fraza „najmanje jedan“, bilo da su povezani ili nepovezani sa tim specifično identifikovanim elementima. Dakle, kao neograničavajući primer, „najmanje jedan A i B“ (ili, ekvivalentno, „najmanje jedan A ili B“, ili, ekvivalentno „najmanje jedan A i/ili B“) može da se odnosi, u jednom otelotvorenju, na najmanje jedan, opciono uključujući više od jednog, A, bez prisutnog B (i opciono uključujući elemente koji nisu B); u drugom otelotvorenju, na bar jedan, opciono uključujući više od jednog, B, bez prisutnog A (i opciono uključujući elemente koji nisu A); u još jednom otelotvorenju, najmanje jednom, opciono uključujući više od jednog, A, i najmanje jedan, opciono uključujući više od jednog, B (i opciono uključujući i druge elemente); itd.
Takođe treba shvatiti da, u određenim ovde opisanim metodama koje uključuju više od jednog koraka ili delova, redosled koraka ili delova metode nije nužno ograničen na redosled kojim se recituju koraci ili delovi metode, osim ako kontekst ne ukazuje drugačije.
Termini „istovremena primena“ i „istovremeno primenjivanje“ ili „kombinovana terapija“ odnose se i na istovremenu primenu (primena dva ili više terapijskih sredstava istovremeno) i vremenski različitu primenu (primena jednog ili više terapijskih sredstava u isto vreme različito od primene dodatnog terapijskog sredstva ili sredstava), sve dok su terapijski agensi prisutni kod pacijenta u određenoj meri, poželjno u efektivnim količinama, u isto vreme. U određenim poželjnim aspektima, jedno ili više prisutnih jedinjenja opisanih ovde se istovremeno primenjuju u kombinaciji sa najmanje jednim dodatnim bioaktivnim agensom, posebno uključujući sredstvo protiv raka. U posebno poželjnim aspektima, istovremena primena jedinjenja rezultira sinergističkom aktivnošću i/ili terapijom, uključujući antikancerogenu aktivnost.
Izraz „jedinjenje“, kako se ovde koristi, osim ako nije drugačije naznačeno, odnosi se na bilo koje specifično hemijsko jedinjenje objavljeno ovde i uključuje tautomere, regioizomere, geometrijske izomere i, gde je primenljivo, stereoizomere, uključujući optičke izomere (enantiomere) i druge stereoizomere (dijastereomere), kao i farmaceutski prihvatljive soli i derivate, uključujući predlekove i/ili deuterirane oblike tamo gde je primenljivo u kontekstu. Razmatrani deuterirani mali molekuli su oni u kojima je jedan ili više atoma vodonika sadržanih u molekulu leka zamenjeno deuterijumom.
U okviru svoje upotrebe u kontekstu, termin jedinjenje se generalno odnosi na jedno jedinjenje, ali može uključivati i druga jedinjenja kao što su stereoizomeri, regioizomeri i/ili optički izomeri (uključujući racemične smeše), kao i specifične enantiomere ili enantiomerno obogaćene smeše otkrivenih jedinjenja. Termin se takođe odnosi, u kontekstu na predlekovne oblike jedinjenja koja su modifikovana kako bi se olakšala primena i isporuka jedinjenja na mesto aktivnosti. Primećeno je da su u opisivanju sadašnjih jedinjenja opisani, između ostalog, brojni supstituenti i promenljive povezane sa istim. Osobe obične veštine podrazumevaju da su molekuli koji su ovde opisani stabilna jedinjenja kao što je ovde generalno opisano. Kada je veza prikazana, i dvostruka i pojedinačna veza su predstavljene ili shvaćene u kontekstu prikazanog jedinjenja i dobro poznatih pravila za valentne interakcije.
Izraz „ubikvitin ligaza“ odnosi se na porodicu proteina koji olakšavaju prenos ubikvitina na određeni supstratni protein, ciljajući protein supstrata za razgradnju. Na primer, protein E3 ubikvitin ligaze koji sam ili u kombinaciji sa E2 ubikvitin konjugujućim enzimom izaziva vezivanje ubikvitina za lizin na ciljnom proteinu, a zatim cilja specifične proteinske supstrate za razgradnju proteasomom. Dakle, E3 ubikvitin ligaza sama ili u kompleksu sa enzimom za konjugaciju E2 ubikvitina odgovorna je za prenos ubikvitina na ciljane proteine. Generalno, ubikvitin ligaza je uključena u poliubikvitinaciju tako da je drugi ubikvitin vezan za prvi; treći je vezan za drugi, i tako dalje. Poliubikvitinacija označava proteine za razgradnju proteasomom. Međutim, postoje neki događaji ubikvitinacije koji su ograničeni na mono-ubikvitinaciju, u kojoj ubikvitin ligaza dodaje samo jedan ubikvitin molekulu supstrata. Monoubikvitinirani proteini nisu ciljani na proteasom radi razgradnje, već se umesto toga mogu promeniti u svojoj ćelijskoj lokaciji ili funkciji, na primer, vezivanjem drugih proteina koji imaju domene sposobne da vežu ubikvitin. Dalje komplikujući stvari, različiti lizini na ubikvitinu mogu biti ciljani pomoću E3 da bi se napravili lanci. Najčešći lizin je Lys48 na lancu ubikvitina. Ovo je lizin koji se koristi za pravljenje poliubikvitina, koji prepoznaje proteasom. Kao što se ovde koristi, izraz „alkil“, sam po sebi ili kao deo drugog supstituenta, znači, osim ako nije drugačije navedeno, radikal ugljovodonika ravnog ili razgranatog lanca, koji ima označen broj atoma ugljenika (tj. C1-8znači jedan do osam ugljenika). Bez određenog broja atoma ugljenika, pretpostavlja se da ovde navedena alkilna grupa ima jedan do dvanaest ugljenika, jedan do osam ugljenika, jedan do šest ugljenika ili jedan do četiri ugljenika. Primeri alkil grupa uključuju metil, etil, n-propil, izo-propil, n-butil, t-butil, izobutil, sek-butil, n-pentil, n-heksil, n-heptil, n-oktil i slično. Alkil grupe mogu biti opciono zamenjene kako je ovde navedeno. U nekim otelotvorenjima, alkil grupa je C1-6alkil; u nekim otelotvorenjima, to je C1-4alkil.
Izraz „opciono supstituisan“, kako se koristi u kombinaciji sa supstituentom definisanim ovde, znači da supstituent može, ali nije obavezno da bude, zamenjen jednom ili više pogodnih funkcionalnih grupa ili drugih supstituenata kako je ovde navedeno. Na primer, supstituent može biti opciono supstituisan sa jednim ili više: halo, cijano, C1-6alkil, C3-
6cikloalkil, C2-6alkenil, C2-6alkinil, halo(C1-6)alkil, C1-6alkoksi, halo(C1-6alkoksi), C1-
6alkiltio, C1-6alkilamino, NH2, NH(C1-6alkil), N(C1-6alkil)2, NH(C1-6alkoksi), N(C1-
6alkoksi)2, - C(O)NHC1-6alkil, -C(O)N(C1-6alkil)2, -C(O)NH2, -C(O)C1-6alkil, -C(O)2C1-
6alkil, - NHCO(C1-6alkil), -N(C1-6alkil)CO(C1-6alkil), -S(O)C1-6alkil, -S(O)2C1-6alkil, okso, fenil, benzil, piridinil, pirrazolil, tiazolil, izotiazolil ili druge 5 do 6 članske heteroarilne grupe. U nekim otelotvorenjima, svaki od gore navedenih opcionalnih supstituenata je opciono zamenjen jednom ili dve grupe.
Izraz „cikloalkil“ kako se ovde koristi odnosi se na C3-12cikličnu alkilnu grupu i uključuje premošćene i spirocikle (npr. adamantin). Primeri cikloalkil grupa uključuju ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheptil, cikloheksil, cikloheptil, ciklohektil, ciklooktil, biciklo[2.2.1]heptanil, biciklo[3.1.1]heptanil, biciklo[4.1.0]heptanil, spiro[3.3]heptanil i spiro[3.4]oktanil. U nekim otelotvorenjima, cikloalkil grupa je C3-6cikloalkil.
Izraz „akenil“ kako se ovde koristi odnosi se na C2-12alkil grupu u kojoj su najmanje dva atoma ugljenika sp2 hibridizovana i formiraju dvostruku vezu ugljenik-ugljenik između njih. Ovde navedena alkenilna grupa može sadržati više od jedne dvostruke veze ugljenikugljenik, ali jedna je poželjna. Alkilni deo alkenil grupe koji je ovde dat može biti zamenjen kao što je gore navedeno. U nekim otelotvorenjima, alkenil grupa je C2-6alkenil.
Izraz „akinil“ kako se ovde koristi odnosi se na C2-12alkil grupu u kojoj su najmanje dva atoma ugljenika sp hibridizovana i formiraju trostruku vezu ugljenik-ugljenik između njih. Ovde navedena alkinilna grupa može sadržati više od jedne trostruke veze ugljenikugljenik, ali jedna je poželjna. Alkilni deo alkinil grupe koji je ovde dat može biti zamenjen kao što je gore navedeno. U nekim otelotvorenjima, alkinil grupa je C2-6alkinil.
Termini „alkoksi“, „alkilamino“ i „alkiltio“ koriste se u svom konvencionalnom smislu i odnose se na one alkil grupe vezane za ostatak molekula preko atoma kiseonika („oksi“), amino grupe („amino“) ili tio grupe. Izraz „alkilamino“ uključuje monodialkilamino grupe, alkilni delovi mogu biti isti ili različiti.
Termini „halo“ sami po sebi ili kao deo drugog supstituenta znače, osim ako nije drugačije navedeno, atom fluora, hlora, broma ili joda, ali poželjno fluor ili hlor.
Izraz „halo (C1-xalkil)“ odnosi se na alkil koji ima 1-x atome ugljenika i koji je zamenjen jednom ili više (npr.1, 2, 3, 4, 5 ili 6) halo grupa. Na primer, termin uključuje alkil grupu koja ima 1-6 atoma ugljenika koja je supstituisana jednom ili više halo grupa. Neograničavajući primeri termina halo (C1-C6alkil) uključuju fluorometil, difluorometil, trifluorometil, hlorometil i 2,2,2-trifluoroetil.
Izraz „halo (C1-xalkoksi)“ odnosi se na alkoksi grupu koja ima 1-x atome ugljenika i koja je zamenjena jednom ili više (npr. 1, 2, 3, 4, 5 ili 6) halo grupa. Na primer, termin uključuje alkoksi grupu koja ima 1-6 atoma ugljenika koja je supstituisana jednom ili više halo grupa. Neograničavajući primeri termina halo (C1-C6alkil) uključuju fluorometoksi, difluorometoksi, trifluorometoksi, hlorometoksi i 2,2,2-trifluoroetoksi.
Termin „heteroalkil“ se odnosi na alkil grupu pravog ili razgranatog lanca, npr. koja ima od 2 do 14 ugljenika, kao što je 2 do 10 ugljenika u lancu, od kojih je jedan ili više zamenjen heteroatomom izabranim iz S, O, P i N. Primeri heteroalkila uključuju alkil etre, sekundarne i tercijarne alkil amine, alkil amide, alkil sulfide i slično. Grupa može biti terminalna grupa ili premošćujuća grupa. Kao što se ovde koristi, referenca na normalni lanac kada se koristi u kontekstu premošćujuće grupe odnosi se na direktan lanac atoma koji povezuje dva terminalna položaja premošćujuće grupe.
Izraz „aril“ kako se ovde koristi odnosi se na jedan aromatični prsten sa svim ugljenikom ili višestruko kondenzovani sistem ugljeničnih prstenova gde je najmanje jedan od prstenova aromatičan. Na primer, u određenim otelotvorenjima, aril grupa ima 6 do 12 atoma ugljenika. Aril sadrži fenil radikal. Aril takođe uključuje sisteme višestrukih kondenzovanih prstenova (npr. sistemi prstenova koji se sastoje od 2, 3 ili 4 prstena) koji imaju oko 9 do 12 atoma ugljenika u kojima je najmanje jedan prsten aromatičan i naznačeno time što drugi prstenovi mogu biti aromatični ili nearomatični. Takvi sistemi višestrukih kondenzovanih prstenova su opciono supstituisani sa jednom ili više (npr. 1, 2 ili 3) okso grupa na bilo kom karbocikličnom delu sistema višestrukih kondenzovanih prstenova. Prstenovi sistema višestrukih kondenzovanih prstenova mogu se međusobno povezati putem kondenzovanih, spiro i premošćenih veza kada to dozvoljavaju zahtevi valence. Podrazumeva se da tačka vezivanja sistema višestrukih kondenzovanih prstenova, kao što je gore definisano, može biti na bilo kojoj poziciji sistema prstenova, uključujući aromatični ili karbociklični deo prstena. Neograničavajući primeri aril grupa uključuju, ali nisu ograničeni na, fenil, indenil, naftil, 1, 2, 3, 4-tetrahidronaftil i slično.
Termin „heteroaril“, kako se ovde koristi, odnosi se na jedan aromatični prsten koji ima najmanje jedan atom osim ugljenika u prstenu, naznačen time što je atom odabran iz grupe koju čine kiseonik, azot i sumpor; „heteroaril“ takođe uključuje sisteme višestrukih kondenzovanih prstenova koji imaju najmanje jedan takav aromatični prsten, gde su sistemi višestrukih kondenzovanih prstenova detaljnije opisani u nastavku. Stoga, „heteroaril“ uključuje jednostavne aromatične prstenove od oko 1 do 6 atoma ugljenika i oko 1-4 heteroatoma izabrana iz grupe koju čine kiseonik, azot i sumpor. Atomi sumpora i azota takođe mogu biti prisutni u oksidovanom obliku pod uslovom da je prsten aromatični. Primeri heteroarilnih sistema prstenova uključuju, ali ne ograničavaju se na piridil, pirimidinil, oksazolil ili furil. „Heteroaril“ takođe uključuje sisteme višestrukih kondenzovanih prstenova (npr. sistemi prstenova koji se sastoje od 2, 3 ili 4 prstena) naznačeno time što je heteroaril grupa, kao što je gore definisano, kondenzovana sa jednim ili više prstenova izabranih od heteroarila (da bi se formirao, na primer, naftiridinil kao što je 1,8-naftiridinil), heterocikla (da bi se formirao, na primer, 1, 2, 3, 4-tetrahidronaftiridinil kao što je 1,2,3,4-tetrahidro-1,8-naftiridinil), karbocikla (da bi se formirao, na primer, 5,6,7,8-tetrahidrohinolil) i arila (da bi se formirao, na primer, indazolil) da bi se formirao sistem višestrukih kondenzovanih prstenova. Stoga, heteroaril (jednostavni aromatični prsten ili sistem višestrukih kondenzovanih prstenova) ima od 1 do 20 atoma ugljenika i oko 1-6 heteroatoma u heteroaril prstenu. Heteroaril (jedan aromatični prsten ili višestruki kondenzovani prstenasti sistem) takođe može imati oko 5 do 12 ili oko 5 do 10 članova unutar heteroarilnog prstena. Sistemi višestrukih kondenzovanih prstenova mogu se opciono supstituisati sa jednom ili više (npr. 1, 2, 3 ili 4) okso grupa na karbocikličnim ili heterocikličnim delovima kondenzovanog prstena. Prstenovi sistema višestrukih kondenzovanih prstenova mogu se međusobno povezati putem kondenzovanih, spiro i premošćenih veza kada to dozvoljavaju zahtevi valence. Podrazumeva se da pojedinačni prstenovi sistema višestrukih kondenzovanih prstenova mogu biti povezani po bilo kom redosledu u odnosu jedan na drugi. Takođe se podrazumeva da tačka vezivanja sistema višestrukih kondenzovanih prstenova (kao što je gore definisano za heteroaril) može biti na bilo kojoj poziciji sistema višestrukih kondenzovanih prstenova, uključujući heteroarilni, heterociklični, arilni ili karbociklični deo sistema višestrukih kondenzovanih prstenova. Takođe se podrazumeva da tačka vezivanja za heteroarilni ili heteroarilni sistem višestrukih kondenzovanih prstenova može biti na bilo kom pogodnom atomu heteroarilnog ili heteroarilnog sistema višestrukih kondenzovanih prstenova, uključujući atom ugljenika i heteroatom (npr. azot). Primeri heteroarila uključuju, ali ne ograničavaju se na piridil, pirolil, pirazinil, pirimidinil, piridazinil, pirazolil, tienil, indolil, imidazolil, oksazolil, izoksazolil, tiazolil, furil, oksadiazolil, tiadiazolil, hinolil, izohinolil, benzotiazolil, benzotiazolil, benzoksazolil, indazolil, hinoksalil, hinazolil, 5,6,7,8-tetrahidroizohinolinil benzofuranil, benzimidazolil, tianafenil, pirolo[2,3-b]piridinil, hinazolinil-4(3H)-on, triazolil, 4,5,6,7-tetrahidro-1H-indazol i 3b,4,4a,5-tetrahidro-1H-ciklopropa[3,4]ciklopenta[1,2-c]pirazol. U jednom otelotvorenju termin „heteroaril“ odnosi se na jedan aromatični prsten koji sadrži najmanje jedan heteroatom. Na primer, termin uključuje 5-člane i 6-člane monociklične aromatične prstenove koji uključuju jedan ili više heteroatoma. Neograničavajući primeri heteroarila uključuju, ali nisu ograničeni na piridil, furil, tiazol, pirimidin, oksazol i tiadiazol.
Termin „heterociklil“ ili „heterociklus“, kako se ovde koristi, odnosi se na jedan zasićeni ili delimično nezasićeni prsten koji ima najmanje jedan atom osim ugljenika u prstenu, naznačeno time što je atom izabran iz grupe koja se sastoji od kiseonika, azota i sumpora; termin takođe uključuje višestruke kondenzovane sisteme prstenova koji imaju najmanje jedan takav zasićeni ili delimično nezasićeni prsten, a koji su višestruki kondenzovani sistemi prstenova detaljnije opisani u nastavku. Dakle, termin uključuje pojedinačne zasićene ili delimično nezasićene prstenove (npr. 3, 4, 5, 6 ili 7-člani prstenovi) od oko 1 do 6 atoma ugljenika i od oko 1 do 3 heteroatoma u prstenu izabrana iz grupe koju čine kiseonik, azot i sumpor. Prsten može biti suptitusan sa jednom ili više (npr. 1, 2 ili 3) okso grupa, a atomi sumpora i azota takođe mogu biti prisutni u svojim oksidovanim oblicima. Primeri heterociklila uključuju, ali nisu ograničeni na azetidinil, tetrahidrofuranil i piperidinil. Izraz „heterocikl“ takođe uključuje više kondenzovanih prstenastih sistema (npr. sistemi prstena koji sadrže 2, 3 ili 4 prstena) naznačen time što jedan heterociklički prsten (kako je gore definisano) može kondenzovati sa jednom ili više grupa izabranih iz heterociklusa (da bi se formirao na primer 1,8-dekahidronaptiridinil), karbocikli (da bi se formirao na primer dekahidrokinolil) i arili za formiranje sistem višestrukih kondenzovanih prstenova. Stoga, heterocikl (jedan zasićeni ili jedan delimično nezasićeni prsten ili višestruki kondenzovani sistem prstenova) ima oko 2-20 atoma ugljenika i 1-6 heteroatoma unutar heterocikličnog prstena. Takvi sistemi višestrukih kondenzovanih prstenova mogu se opciono supstituisati sa jednom ili više (npr. 1, 2, 3 ili 4) okso grupa na karbocikličnim ili heterocikličnim delovima višestrukih kondenzovanog prstena. Prstenovi sistema višestrukih kondenzovanih prstenova mogu se međusobno povezati putem kondenzovanih, spiro i premošćenih veza kada to dozvoljavaju zahtevi valence. Podrazumeva se da pojedinačni prstenovi sistema višestrukih kondenzovanih prstenova mogu biti povezani po bilo kom redosledu u odnosu jedan na drugi. Shodno tome, heterocikl (jedan zasićeni ili jedan delimično nezasićeni prsten ili višestruki kondenzovani prstenasti sistem) ima oko 3-20 atoma, uključujući oko 1-6 heteroatoma unutar sistema heterociklnog prstena. Takođe se podrazumeva da tačka vezivanja sistema višestrukih kondenzovanih prstenova (kao što je gore definisano za heterocikl ) može biti na bilo kojoj poziciji sistema višestrukih kondenzovanih prstenova, uključujući heterociklični, arilni ili karbociklični deo sistema prstenova. Takođe se podrazumeva da tačka vezivanja za heterocikl ili heterocikličnisistem višestrukih kondenzovanih prstenova može biti na bilo kom pogodnom atomu heterocikl ili heterocikličnisistema višestrukih kondenzovanih prstenova, uključujući atom ugljenika i heteroatom (npr. azot). U jednom otelotvorenju termin heterocikl uključuje heterocikl C2-20. U jednom otelotvorenju termin heterocikl uključuje heterocikl C2-7. U jednom otelotvorenju termin heterocikl uključuje heterocikl C2-5. U jednom otelotvorenju termin heterocikl uključuje heterocikl C2-4. Primeri heterociklila uključuju, ali nisu ograničeni na aziridinil, azetidinil, pirolidinil, piperidinil, homopiperidinil, morfolinil, tiomorfolinil, piperazinil, tetrahidrofuranil, dihidrooksazolil, tetrahidropiranil, tetrahidrotiopiranil, 1,2,3,4-tetrahidrohinolil, benzoksazinil, dihidrooksazolil, hromanil, 1,2-dihidropiridinil, 2,3-dihidrobenzofuranil, 1,3-benzodioksolil, 1,4-benzodioksanil, spiro[ciklopropan-1,1'-izoindolinil]-3'-on, izoindolinil-1-on, 2-oksa-6-azaspiro[3,3]heptanil, imidazolidin-2-on N-metilpiperidin, imidazolidin, pirazolidin, butirolaktam, valerolaktam, imidazolidinon, hidantoin, dioksolan, ftalimid, 1,4-dioksan, tiomorfolin, tiomorfolin-S-oksid, tiomorfolin-S,S-oksid, piran, 3-pirolin, tiopiran, piron, tetrhidrotiofen, hinuklidin, tropan, 2-azaspiro[3,3]heptan, (1R,5S)-3-azabiciklo[3,2,1]oktan, (1s,4s)-2-azabiciklo[2,2,2]oktan, (1R,4R)-2-oksa-5-azabiciklo[2,2,2]oktan i pirolidin-2-on. U jednom otelotvorenju termin „heterocikl“ odnosi se na monociklični, zasićeni ili delimično nezasićeni, 3-8 člani prsten koji ima najmanje jedan heteroatom. Na primer, termin uključuje monociklični, zasićeni ili delimično nezasićeni, 4, 5, 6 ili 7 člani prsten koji ima najmanje jedan heteroatom. Neograničavajući primeri heterociklusa uključuju aziridin, azetidin, pirolidin, piperidin, piperidin, piperazin, oksiran, morfolin i tiomorfolin. Izraz „9- ili 10-člani heterocikl“ kako se ovde koristi odnosi se na delimično nezasićeni ili aromatični spojeni biciklični prstenasti sistem koji ima najmanje jedan heteroatom. Na primer, termin 9- ili 10-člani heterocikl uključuje biciklični prstenasti sistem koji ima benzo prsten spojen sa 5-članskim ili 6-članim zasićenim, delimično nezasićenim ili aromatičnim prstenom koji sadrži jedan ili više heteroatoma.
Kao što se ovde koristi, termin „heteroatom“ podrazumeva da uključuje kiseonik (O), azot (N), sumpor (S) i silicijum (Si). Azot i sumpor mogu biti u oksidovanom obliku kada je to izvodljivo.
Kao što se ovde koristi, termin „hiralni“ se odnosi na molekule koji imaju svojstvo nemogućnosti preklapanja sa likom partnera u ogledalu, dok se termin „ahiralni“ odnosi na molekule koji mogu da se preklope sa likom partnera u ogledalu.
Kao što se ovde koristi, izraz „stereoizomeri“ se odnosi na jedinjenja koja imaju identičan hemijski sastav, ali se razlikuju u pogledu rasporeda atoma ili grupa u prostoru. Kao što se ovde koristi, ukrštena linija „ “ označava smešu stereoizomera E i Z.
Kako se ovde koristi, talasasta linija „ “ ili isprekidana linija „----“ koja preseca vezu u hemijskoj strukturi označava tačku vezivanja veze koju talasasta veza preseca u hemijskoj strukturi sa ostatkom molekula.
„Dijastereomer“ se odnosi na stereoizomer sa dva ili više centara hiralnosti čiji molekuli uzajamno nisu kao likovi u ogledalu. Dijastereomeri imaju različita fizička svojstva, npr. tačke topljenja, tačke ključanja, spektralne osobine i reaktivnosti. Smeše dijastereomera se mogu odvojiti analitičkim postupcima visoke rezolucije, kao što su elektroforeza i hromatografija.
„Enantiomeri“ se odnose na dva stereoizomera jedinjenja koji nisu međusobno preklopivi kao likovi u ogledalu.
Ovde korišćene stereohemijske definicije i konvencije uopšteno slede S. P. Parker, Ed., McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms (1984) McGraw-Hill Book Company, New York i Eliel, E. and Wilen, S., "Stereochemistry of Organic Compounds", John Wiley & Sons, Inc., New York, 1994. Jedinjenja iz ovog pronalaska mogu da sadrže asimetrične ili hiralne centre, i zbog toga postoje u različitim stereoizomernim oblicima. Namera je da svi stereoizomerni oblici jedinjenja iz ovog pronalaska, uključujući, ali ne ograničavajući se na dijastereomere, enantiomere i atropizomere, kao i njihove smeše, poput racemskih smeša, čine deo predmetnog pronalaska. Mnoga organska jedinjenja postoje u optički aktivnim oblicima, tj. imaju sposobnost rotacije ravni svetlosti polarizovane u ravni. Kod opisivanja optički aktivnog jedinjenja, prefiksi D i L, ili R i S, koriste se za označavanje apsolutne konfiguracije molekula oko njegovog hiralnog centra (ili centara). Prefiksi d i I ili (+) i (-) koriste se da označe znak rotacije u ravni polarizovane svetlosti od strane jedinjenja, naznačeno time što (-) ili 1 označava da je jedinjenje levorotatorno. Jedinjenje sa prefiksom (+) ili d je dekstrorotatorno. Za datu hemijsku strukturu, ovi stereoizomeri su identični osim što su likovi u ogledalu jedan drugog. Specifični stereoizomer se takođe može nazvati enantiomerom, a smeša takvih izomera često se naziva enantiomerna smeša. Smeša enantiomera u odnosu 50:50 se naziva racemska smeša ili racemat, a može se pojaviti tamo gde nije bilo stereoselekcije ili stereospecifičnosti u hemijskoj reakciji ili procesu. Izrazi „racemska smeša“ i „racemat“ se odnose na ekvimolarnu smešu dve enantiomerne vrste lišene optičke aktivnosti.
Kada se veza u formuli jedinjenja ovde izvuče na nestereohemijski način (npr. ravna), atom na koji je veza vezana uključuje sve stereohemijske mogućnosti. Kada se veza u formuli jedinjenja ovde izvuče na definisan stereohemijski način (npr. podebljana, podebljana trouglasta, isprekidana ili isprekidana trouglasta), treba shvatiti da je atom za koji je stereohemijska veza vezana obogaćen prikazanim apsolutnim stereoizomerom, osim ako nije drugačije naznačeno. U jednom otelotvorenju, jedinjenje može biti najmanje 51% prikazanog apsolutnog stereoizomera. U drugom otelotvorenju, jedinjenje može biti najmanje 80% prikazanog apsolutnog stereoizomera. U drugom otelotvorenju, jedinjenje može biti najmanje 90% prikazanog apsolutnog stereoizomera. U drugom otelotvorenju, jedinjenje može biti najmanje 95% prikazanog apsolutnog stereoizomera. U drugom otelotvorenju, jedinjenje može biti najmanje 97% prikazanog apsolutnog stereoizomera. U drugom otelotvorenju, jedinjenje može biti najmanje 98% prikazanog apsolutnog stereoizomera. U drugom otelotvorenju, jedinjenje može biti najmanje 99% prikazanog apsolutnog stereoizomera.
Kao što se ovde koristi, termin „tautomer“ ili „tautomerni oblik“ se odnosi na strukturne izomere različitih energija koji mogu da prelaze jedni u druge putem niske energetske barijere. Na primer, protonski tautomeri (takođe poznati i kao prototropni tautomeri) uključuju interkonverzije preko migracije protona, kao što su keto-enolne i iminenamin izomerizacije. Valentni tautomeri uključuju interkonverzije preko reorganizacije nekih od vezujućih elektrona.
Kao što se ovde koristi, termin „solvat“ se odnosi na udruživanje ili kompleks jednog ili više molekula rastvarača i jedinjenja iz ovog pronalaska. Primeri rastvarača koji formiraju solvate uključuju, ali ne se ograničavaju na vodu, izopropanol, etanol, metanol, DMSO, etilacetat, sirćetnu kiselinu i etanolamin. Termin „hidrat“ se odnosi na kompleks gde je molekul rastvarača voda.
Kao što se ovde koristi, termin „zaštitna grupa“ se odnosi na supstituent koji se obično koristi za blokiranje ili zaštitu određene funkcionalne grupe na jedinjenju. Na primer, „aminozaštitna grupa“ je supstituent vezan za amino grupu koji blokira ili štiti amino funkcionalnost u jedinjenju. Pogodne amino-zaštitne grupe uključuju acetil, trifluoracetil, t-butoksikarbonil (BOC), benziloksikarbonil (CBZ) i 9-fluorenil metilenoksikarbonil (Fmoc). Slično tome, „hidroksi-zaštitna grupa“ se odnosi na supstituent hidroksi grupe koji blokira ili štiti hidroksi funkcionalnost. Odgovarajuće zaštitne grupe uključuju acetil i silil. „Karboksi-zaštitna grupa“ se odnosi na supstituent karboksi grupe koji blokira ili štiti karboksi funkcionalnost. Uobičajene karboksi-zaštitne grupe uključuju fenilsulfoniletil, cijanoetil, 2-(trimetilsilil)etil, 2-(trimetilsilil)etoksimetil, 2-(p-toluensulfonil)etil, 2-(p-nitrofenilsulfenil)etil, 2-(difenilfosfino)-etil, nitroetil i slično. Za opšti opis zaštitnih grupa i njihovu upotrebu, pogledajte P.G.M. Wuts and T.W. Greene, Greene's Protective Groups in Organic Synthesis 4th edition, Wiley-Interscience, New York, 2006.
Kao što se ovde koristi, termin „farmaceutski prihvatljive soli“ treba da obuhvati soli aktivnih jedinjenja koja se pripremaju sa relativno netoksičnim kiselinama ili bazama, u zavisnosti od određenih supstituenata koji se nalaze na ovde opisanim jedinjenjima. Kada jedinjenja iz predmetnog pronalaska sadrže relativno kisele funkcionalnosti, bazne adicione soli se mogu dobiti kontaktom neutralnog oblika takvih jedinjenja sa dovoljnom količinom željene baze, bilo čiste ili u odgovarajućem inertnom rastvaraču. Primeri soli dobijenih iz farmaceutski prihvatljivih neorganskih baza uključuju aluminijum, amonijum, kalcijum, bakar, gvožđe, gvožđe, litijum, magnezijum, dvovalentni mangan, četvorovalentni mangan, kalijum, natrijum, cink i slično. Soli dobijene iz farmaceutski prihvatljivih organskih baza uključuju soli primarnih, sekundarnih i tercijarnih amina, uključujući supstituisane amine, ciklične amine, amine koji se nalaze u prirodi i slično, kao što su arginin, betain, kofein, holin, N,N'-dibenzil etilendiamin, dietilamin, 2-dietilaminoetanol, 2-dimetilaminoetanol, etanolamin, etilendiamin, N-etilmorfolin, N-etilpiperidin, glukamin, glukozamin, histidin, hidrabamin, izopropilamin, lizin, metilglukamin, morfolin, piperazin, piperidin, poliaminske smole, prokain, purini, teobromin, trietilamin, trimetilamin, tripropilamin, trometamin i slično. Kada jedinjenja predmetnog pronalaska sadrže relativno bazne funkcionalnosti, kisele adicione soli se mogu dobiti kontaktom neutralnog oblika takvih jedinjenja sa dovoljnom količinom željene kiseline, bilo čiste ili u odgovarajućem inertnom rastvaraču. Primeri farmaceutski prihvatljivih kiselih adicionih soli uključuju one koje su dobijene iz neorganskih kiselina, kao što su hlorovodonična, bromovodonična, azotna, ugljena, monohidrogenkarbonska, fosforna, monohidrogenfosforna, dihidrogenfosforna, sumporna, monohidrogensumporna, jodovodična ili fosforna kiselina i slično, kao i soli dobijene iz relativno netoksičnih organskih kiselina kao što su sirćetna, propionska, izobuterna, malonska, benzojeva, sukcinska, suberinska, fumarna, mandelinska, ftalna, benzensulfonska, p-tolilsulfonska, limunska, vinska, metansulfonska i slično. Takođe su uključene soli aminokiselina kao što je arginat i slično, soli organskih kiselina kao što su glukuronske ili galaktunorske kiseline i slično (videti, na primer, Berge, S. M., et al., "Pharmaceutical Salts", Journal of Pharmaceutical Science, 1977, 66, 1-19). Određena specifična jedinjenja iz predmetnog pronalaska sadrže i bazne i kisele funkcionalnosti koje omogućavaju da se jedinjenja pretvore u bazne ili kisele adicione soli.
Neutralni oblici jedinjenja mogu se regenerisati kontaktom soli sa bazom ili kiselinom i izolacijom polaznog jedinjenja na konvencionalan način. Polazni oblik jedinjenja se razlikuje od različitih oblika soli u određenim fizičkim svojstvima, kao što je rastvorljivost u polarnim rastvaračima, inače su soli ekvivalentne polaznom obliku jedinjenja za potrebe predmetnog pronalaska.
Pored navedenih oblika soli, jedinjenja mogu biti u obliku proleka. U smislu ovog dokumenta, izraz „prolek“ se odnosi na ona jedinjenja koja se lako podvrgavaju hemijskim promenama u fiziološkim uslovima da bi se dobila jedinjenja predmetnog pronalaska. Pored toga, prolekovi se mogu konvertovati u jedinjenja predmetnog pronalaska hemijskim ili biohemijskim postupcima u ex vivo okruženju. Na primer, prolekovi se mogu polako konvertovati u jedinjenja predmetnog pronalaska kada se stavljaju u rezervoar transdermalnog flastera sa pogodnim enzimom ili hemijskim reagensom.
Prolekovi mogu uključivati jedinjenja u kojima je aminokiselinski ostatak, ili polipeptidni lanac s dva ili više (npr. dva, tri ili četiri) aminokiselinskih ostataka, kovalentno spojen preko amidne ili estarske veze za slobodnu amino, hidroksi ili karboksilnu grupu jedinjenja predmetnog pronalaska. Ostaci aminokiselina uključuju, bez ograničenja, 20 prirodnih aminokiselina koje su obično označene troslovnim simbolima i uključuju fosfoserin, fosfotreonin, fosfotirozin, 4-hidroksiprolin, hidroksilzin, demozin, izodemozin, gama-karboksiglutamat, hipurinsku kiselinu, oktahidroindol-2-karboksilna kiselinu, statin, 1,2,3,4-tetrahidroizohinolin-3-karboksilnu kiselinu, penicilamin, ornitin, 3-metilhistidin, norvalin, beta-alanin, gama-aminobuternu kiselinu, citrulin, homocistein, homoserin, metilalanin, para-benzoilfenilalanin, fenilglicin, propargilglicin, sarkozin, metionin sulfon i tercbutilglicin.
Dodatne vrste prolekova su, na primer, slobodna karboksilna grupa jedinjenja pronalaska može biti derivatizovana kao amid ili alkil-estar. Kao još jedan primer, jedinjenja ovog pronalaska koja sadrže slobodne hidroksi grupe mogu biti derivatizovana kao prolekovi pretvaranjem hidroksi grupe u grupu kao što je, bez ograničenja, fosfatni ester, hemisukcinat, dimetilaminoacetat ili fosforiloksimetiloksikarbonil grupa, kao što je navedeno u Fleisher, D. et al., (1996) Improved oral drug delivery: solubility limitations overcome by the use of prodrugs Advanced Drug Delivery Reviews, 19:115. Karbamatni prolekovi hidroksi i amino grupa takođe postoje, kao i karbonatni prolekovi, sulfonatni estri i sulfatni estari hidroksi grupa. Derivatizacija hidroksi grupa kao (aciloksi)metil i (aciloksi)etil etri, naznačeno time što acil grupa može biti alkil-estar opciono supstituisan grupama koje uključuju, bez ograničenja, etarske, amino i karboksilne grupe, ili kada je acil grupa aminokiselinski estar kao što je gore opisano, takođe su mogući. Prolekovi ovog tipa opisani su u J. Med. Chem., (1996), 39:10. Konkretniji primeri uključuju zamenu atoma vodonika alkoholne grupe grupom kao što je (C1-6)alkanoiloksimetil, 1-((C1-6)alkanoiloksi)etil, 1-metil-1-((C1-
6)alkanoiloksi)etil, (C1-6)alkoksikarboniloksimetil, N-(C1-6)alkoksikarbonilaminometil, sukcinoil, (C1-6)alkanoil, alfa-amino(C1-4)alkanoil, arilacil i alfa-aminoacil, ili alfa-aminoacilalfa-aminoacil, gde je svaka alfa-aminoacil grupa nezavisno odabrana od prirodnih L-aminokiselina, P(O)(OH)2, -P(O)(O(C1-6)alkil)2ili glikozila (radikal koji nastaje uklanjanjem hidroksilne grupe hemiacetalnog oblika ugljenog hidrata).
Za dodatne primere derivata prolekova, videti, na primer, a) Design of Prodrugs, edited by H. Bundgaard, (Elsevier, 1985) and Methods in Enzymology, Vol. 42, p. 309-396, edited by K. Widder, et al. (Academic Press, 1985); b) A Textbook of Drug Design and Development, edited by Krogsgaard-Larsen and H. Bundgaard, Chapter 5 "Design and Application of Prodrugs," by H. Bundgaard p. 113-191 (1991); c) H. Bundgaard, Advanced Drug Delivery Reviews, 8:1-38 (1992); d) H. Bundgaard, et al., Journal of Pharmaceutical Sciences, 77:285 (1988); i e) N. Kakeya, et al., Chem. Pharm. Bull., 32:692 (1984).
Pored toga, mogu postojati metaboliti jedinjenja pronalaska. U smislu ovog dokumenta, „metabolit“ se odnosi na proizvod koji nastaje metabolizmom određenog jedinjenja ili njegove soli u organizmu. Takvi proizvodi mogu rezultirati, na primer, oksidacijom, redukcijom, hidrolizom, amidacijom, deamidacijom, esterifikacijom, deesterifikacijom, enzimatskim cepanjem i slično, primenjenog jedinjenja.
Produkti metabolizma tipično se identifikuju pripremom radioaktivnog (npr,<14>C ili<3>H) izotopa jedinjenja pronalaska, parenteralnom primenom u dozi koja se može detektovati (npr. veća od oko 0,5 mg/kg) na životinje, kao što su pacov, miš, zamorac, majmun, ili čovek, omogućavajući dovoljno vremena da dođe do metabolizma (tipično oko 30 sekundi do 30 sati) i izolujući njegove proizvode konverzije iz urina, krvi ili drugih bioloških uzoraka. Ovi proizvodi se lako izoluju jer su obeleženi (drugi su izolovani upotrebom antitela sposobnih za vezivanje epitopa koji prežive u metabolitu). Strukture metabolita se određuju na konvencionalan način, npr. pomoću MS, LC/MS ili NMR analize. Generalno, analiza metabolita se vrši na isti način kao i konvencionalne studije metabolizma lekova, dobro poznat stručnjacima. Produkti metabolizma, sve dok se inače ne nalaze in vivo, korisni su u dijagnostičkim testovima za terapijsko doziranje jedinjenja pronalaska.
Izraz „pacijent“ ili „subjekt“ koristi se u celoj specifikaciji za opisivanje životinje, poželjno čoveka ili pripitomljene životinje, kojoj je obezbeđen tretman, uključujući profilaktički tretman, sa kompozicijama prema ovom otkriću. Za lečenje onih infekcija, stanja ili stanja bolesti koja su specifična za određenu životinju kao što je ljudski pacijent, termin pacijent odnosi se na tu specifičnu životinju, uključujući pripitomljenu životinju kao što je pas ili mačka ili domaću životinju kao što su konj, krava, ovca itd. Generalno, u ovom otkriću, termin pacijent se odnosi na ljudskog pacijenta osim ako nije drugačije navedeno ili implicirano iz konteksta upotrebe termina.
Termin „efikasan“ koristi se za opisivanje količine jedinjenja, sastava ili komponente koja, kada se koristi u kontekstu predviđene upotrebe, daje željeni rezultat. Termin efektivni podrazumeva sve ostale efektivne količine ili efektivne termine koncentracije, koji su drugačije opisani ili korišćeni u ovoj aplikaciji.
Jedinjenja i kompozicije
određenim dodatnim otelotvorenjima, jedinjenje koje sadrži više ULM-a dalje sadrži više PTM-a. U dodatnim otelotvorenjima, PTM-ovi su isti ili, opciono, različiti. U daljim otelotvorenjima, gde su PTM različiti, odgovarajući PTM mogu vezati istu proteinsku metu ili se specifično vezati za drugu proteinsku metu.
U određenim otelotvorenjima, jedinjenje može da sadrži više ULM-a i/ili više ULM-a. U daljim otelotvorenjima, jedinjenje koje sadrži najmanje dva različita ULM-a, više ULM-a i/ili više ULM-a dalje sadrži najmanje jedan PTM spojen sa ULM ili ULM' direktno ili preko hemijskog linkera ili oboje. U bilo kojem od ovde opisanih otelotvorenja, jedinjenje koje sadrži najmanje dva različita ULM-a može dalje da sadrži više PTM-a. U dodatnim otelotvorenjima, PTM-ovi su isti ili, opciono, različiti. U daljim otelotvorenjima, gde su PTM različiti odgovarajući PTM mogu vezati istu proteinsku metu ili se specifično vezati za drugu proteinsku metu.
U dodatnim otelotvorenjima, opis daje jedinjenja koja su ovde opisana, uključujući njihove enantiomere, dijastereomere, solvate i polimorfe, uključujući njihove farmaceutski prihvatljive oblike soli, npr. kisele i bazne oblike soli.
Primeri VLM-ova
U određenim otelotvorenjima jedinjenja, kako je ovde opisano, uključuju sredstvo za vezivanje E3 ubikvitin ligaze, npr. Von Hippel-Lindau E3 ubikvitin ligaze. U određenim otelotvorenjima ULM je VLM i sadrži hemijsku strukturu izabranu iz grupe ULM-a:
pri čemu:
isprekidana linija označava pričvršćivanje najmanje jednog PTM-a, drugog ULM-a ili VLM-a (tj. VLM') ili hemijskog linkera koji spaja najmanje jedan PTM, ULM' ili VLM’ na drugi kraj linkera;
X<1>i X<2>formule ULM-a su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži vezu, O, NR<Y3>, CR<Y3>R<Y4>, C=O, C=S, SO i SO2;
R<Y3>, RY4formule ULM-a su svaki nezavisno izabrani iz grupe H, linearnog ili razgranatog C1-6alkila, opciono supstituisanog sa 1 ili više halo, opciono supstituisanog C1-
6alkoksilom (npr. opciono supstituisanim sa 0-3 RPgrupama);
R<P>formule ULM-a je 0, 1, 2 ili 3 grupe, svaka nezavisno izabrana iz grupe H, halo, -OH, C1-3alkil, C = O, alkil, alkoksi ili njihove kombinacije;
W<3>formule ULM-a je izabran iz grupe opciono supstituisanog T, opciono supstituisanog -T-N (R<1a>R<1b>)X<3>, opciono supstituisanog -T-N(R<1a>R<1b>), opciono supstituisanog -T-Heteroarila, opciono supstituisanog T-biheteroarila, opciono supstituisanog -T-heterociklila, opciono supstituisanog -T-bitocikla Heterociklil, opciono supstituisani -NR<1>-T-aril, opciono supstituisani -NR<1>-T-Heteroaril ili opciono supstituisani -NR<1>-T-heterociklil;
X<3>formule ULM-a je C=O, R<1>, R<1a>, R<1b>;
svaka od R<1>, R<1a>, R<1b>je nezavisno izabrana iz grupe koja se sastoji od H, linearne ili razgranate C1-C6alkilne grupe opciono supstituisane sa 1 ili više halo ili -OH grupa, R<Y3>C=O, R<Y3>C=S, R<Y3>SO, R<Y3>SO2, N(R<Y3>R<Y4>)C=O, N(R<Y3>R<Y4>)C=S, N(R<Y3>R<Y4>)SO i N(R<Y3>R<Y4>)SO2;
T formule ULM-a je izabran iz grupe opciono supstituisane alkilne, -(CH2)n- grupe, -(CH2)n-O-C1-C6alkil koji je opciono substitituiran, linearan, razgranat ili -(CH2)n- O-heterociklil koji je opciono supstituisan, naznačeno time što je svaka od metilenskih grupa opciono supstituisana jednom ili dva supstituenta izabrana iz grupe halogena, metil, linearnog ili razgranatog C1-C6alkilna grupa opciono supstituisana sa 1 ili više halogenih ili -OH grupa, bočni lanac aminokiselina opciono supstituisani ili opciono supstituisani heterociklil;
W<4>formule ULM-a je opciono supstituisani -NR1-T-aril naznačeno time što aril grupa može biti opciono supstituisana sa 5-6-članom heteroarilom ili opciono supstituisanim arilom, opciono supstituisanom -NR1-T-heteroarilnom grupom, naznačeno time što je heteroaril opciono supstituisan sa opciono supstituisanim arilom ili opciono supstituisanim arilom -NR1-T-heterociklil, gde je -NR1 kovalentno vezan za X<2>, a R<1>je H ili CH3, poželjno H.
U određenim otelotvorenjima, R<P>je modifikovan da formira predlek, uključujući i estersku ili etarsku vezu.
U bilo kojem od ovde opisanih otelotvorenja, T se bira iz grupe opciono supstituisane alkil, -(CH2)n- grupe, naznačeno time što je svaka od metilenskih grupa opciono supstituisana sa jednim ili dva supstituenta izabrana iz grupe halogena, metila, opciono supstituisanog alkoksi, linearne ili razgranate C1-C6alkilne grupe opciono supstituisane sa 1 ili više halogena, C(O) NR<1>R<1a>ili NR<1>R<1a>ili R<1>i R<1a>su spojeni da bi se formirale opciono supstituisane heterocicilne ili -OH grupe ili bočni lanac aminokiselina opciono supstituisani; a n je 0 do 6, često 0, 1, 2 ili 3, poželjno 0 ili 1.
U određenim otelotvorenjima, W<4>formule ULM-a je
naznačeno time što su R14a, R14b, svaki nezavisno izabrani iz grupe H, haloalkil (npr. fluoroalkil), opciono supstituisani alkil, opciono supstituisani alkoksi, opciono supstituisani hidroksil alkil, opciono supstituisani alkil-heterocikloalkil, opciono supstituisani alkoksilheterocikloalkil, opciono supstituisani alkoksi-heterocikloalkil kloalkil, COR26, CONR27aR27b, NHCOR26, ili NHCH3COR26; i drugi od R14aa R14bje H; ili R14a, R14b, zajedno sa atomomugljenika na koji su vezani, formiraju opciono supstituisani 3 do 5 člani cikloalkil, heterocikloalkil, spirocikloalkil ili spiroheterociklil, naznačeno time što spiroheterociklil nije epoksid ili aziridin.
U bilo kojem od otelotvorenja, W<5>formule ULM-a je izabran iz grupe opciono supstituisanog fenila, opciono supstituisanog naftila ili opciono supstituisanog 5-10 članog heteroarila,
R15formule ULM-a je izabran iz grupe H, halogen, CN, OH, NO2, N R14aR14b, OR14a, CONR14aR14b, NR14aCOR14b, SO2NR14aR14b, NR14aSO2R14b, opciono supstituisani alkil, opciono supstituisani haloalkil, opciono supstituisani haloalkoksi, opciono supstituisani aril, opciono supstituisani heteroaril, opciono supstituisani cikloalkil ili opciono supstituisani heterociklil;
U dodatnim otelotvorenjima, W<4>supstituenti za upotrebu u ovom otkriću takođe uključuju posebno (i bez ograničenja na otkriveno specifično jedinjenje) supstituente W<4>koji se nalaze u identifikovanim jedinjenjima koja su ovde otkrivena. Svaki od ovih W<4>supstituenata može se koristiti zajedno sa bilo kojim brojem W<3>supstituenata koji su takođe ovde otkriveni.
U određenim dodatnim otelotvorenjima, ULM-a, opciono je supstituisan sa 0-3 R<P>grupama u pirolidinskom delu. Svaki R<P>je nezavisno H, halo, -OH, C1-3alkil, C=O.
U bilo kojem od ovde opisanih otelotvorenja, W<3>, W<4>formule ULM-a mogu se nezavisno kovalentno spojiti na linker koji je pričvršćen za jednu ili više PTM grupa.
i naznačeno time što isprekidana linija označava mesto vezivanja najmanje jednog PTM-a, drugog ULM-a (ULM') ili hemijskog veznog dela koji spaja najmanje jedan PTM ili ULM' ili oba za ULM.
U određenim otelotvorenjima, ULM je VHL i predstavljen je strukturom:
pri čemu:
W<3>formule ULM-a je izabran iz grupe opciono supstituisanog arila, opciono supstituisanog heteroarila, ili
R9i R10formule ULM-b su nezavisno vodonik, opciono supstituisani alkil, opciono supstituisani cikloalkil, opciono supstituisani hidroksialkil, opciono supstituisani heteroaril ili haloalkil, ili R9, R10, a atom ugljenika na koji su vezani formira opciono supstituisani cikloalkil;
R11formule ULM-b je izabran iz grupe opciono supstituisanog heterociklila, opciono supstituisanog alkoksi, opciono supstituisanog heteroarila, opciono supstituisanog arila,
R12formule ULM-b je izabran iz grupe H ili opciono supstituisanog alkila;
R13formule ULM-b je izabran iz grupe H, opciono supstituisanog alkilkarbonila, opciono supstituisanog alkilkarbonila, opciono supstituisanog (cikloalkil) alkilkarbonila, opciono supstituisanog aralkilkarbonila, opciono supstituisanog (heterociklil) karbonila ili opciono supstituisanog aralkilila;
R14a, R14bformule ULM-b, svaki je nezavisno izabran iz grupe H, haloalkil (npr. fluoroalkil), opciono supstituisani alkil, opciono supstituisani alkoksi, aminometil, alkilaminometil, alkoksimetil, opciono supstituisani hidroksil alkil, opciono supstituisani alkilamin, opciono supstituisani heterolkil, opciono supstituisani alkil-heterocikloalkil, opciono supstituisani alkoksi-heterocikloalkil, CONR27aR27b, CH2NHCOR26, ili (CH2)N(CH3)COR26; a drugi od R14ai R14bje H; ili R14a, R14b, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, formiraju opciono supstituisani cikloalkil od 3 do 6 članova, heterocikloalki, spirocikloalkil ili spiroheterociklil, naznačeno time što spiroheterociriklil nije epoksid ili azirikil din;
W<5>formule ULM-b je izabran iz grupe fenila, naftila ili 5-10 članog heteroarila, R15formule ULM-b je izabran iz grupe H, halogen, CN, OH, NO2, NR27aR27b, OR27a, CONR27aR27b, NR27aCOR27b, SO2NR27aR27b, NR27aSO2R27b, opciono supstituisani alkil, opciono supstituisani haloalkil, opciono supstituisani haloalkoksi, opciono supstituisani aril, opciono supstituisani heteroaril, opciono supstituisani cikloalkil ili opciono supstituisani heterociklil;
svaki R16formule ULM-b je nezavisno izabran iz grupe halo, CN, opciono supstituisanog alkila, opciono supstituisanog haloalkila, hidroksi ili opciono supstituisanog haloalkoksi;
o Formule ULM-b je 0, 1, 2, 3 ili 4;
R18formule ULM-b je nezavisno izabran iz grupe H, halo, opciono supstituisanog alkoksi, cijana, opciono supstituisanog alkila, haloalkila, haloalkoksi ili linkera;
svaki R26je nezavisno izabran od H, opciono supstituisanog alkila ili NR27aR27b; svaki R27ai R27bsu nezavisno H, opciono supstituisani alkil, ili R27ai R27bzajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4-6 člani heterociklil;
i
p formule ULM-b je 0, 1, 2, 3 ili 4, i naznačeno time što isprekidana linija označava mesto vezivanja najmanje jednog PTM-a, drugog ULM-a (ULM') ili hemijskog veznog dela koji spaja najmanje jedan PTM ili ULM' ili oba za ULM.
U određenim otelotvorenjima, R15formule ULM-b je
gde je R17H, halo, opciono supstituisani C3-6cikloalkil, opciono supstituisani C1-6alkil, opciono supstituisani C1-6alkenil i C1-6haloalkil; a Xa je S ili O.
U određenim otelotvorenjima, R17formule ULM-b je izabran iz grupe metil, etil, izopropil i ciklopropil.
U određenim dodatnim otelotvorenjima, R15formule ULM-b je izabran iz grupe koja se sastoji od:
U određenim otelotvorenjima, R11formule ULM-b je izabran iz grupe koja se sastoji od:
U određenim otelotvorenjima, R14a, R14bformule ULM-b, su svaki nezavisno izabrani iz grupe H, opciono supstituisani haloalkil, opciono supstituisani alkil, opciono supstituisani alkoksi, opciono supstituisani hidroksil alkil, opciono supstituisani alkil-heterocikloalkil, opciono supstituisani alkokol i-heterocikloalkil, CH2OR30, CH2NHR30, CH2NCH3R30, CONR27aR27b, CH2CONR27aR27b, CH2NHCOR26, ili CH2NCH3COR26; a drugi od R14ai R14bje H; ili R14a, R14b, zajedno sa atomom ugljenika na koji su vezani, formiraju opciono supstituisani 3- do 6-člani cikloalkil, heterocikloalkil, cikloalkil ili spiroheterociklil, naznačeno time štospiroheterociklil nije epoksid ili aziridin, već je pomenuti spirocikloalkil ili sam spiroheterocikloalkil opciono supstituisan alkilom, haloalkilom ili -COR33gde je R33alkil ili haloalkil,
naznačeno time što je R30izabran od H, alkil, alkinilalkil, cikloalkil, heterocikloalkil, cikloalkilalkil, heterocikloalkilalkil, arilalkil ili heteroarilalkil dalje opciono supstituisani; R26i R27su kao što je gore opisano.
U određenim otelotvorenjima, R15formule ULM-b je izabran iz H, halogen, CN, OH, NO2, NR27aR27b, OR27a, CONR27aR27b, NR27aCOR27b, SO2NR27aR27b, NR27aSO2R27b, opciono supstituisani alkil, opciono supstituisani fluoroalkil (npr. alkil), opciono supstituisani haloalkoksi, opciono supstituisani aril, opciono supstituisani heteroaril, opciono supstituisani cikloalkil, ili opciono supstituisani heterociklil, naznačeno time što opcionalna supstitucija pomenutog aril, heteroaril, cikloalkil i heterocikloalkil uključuje CH2OR30, CH2NHR30, CH2NCH3R30, CONR27aR27b, CH2CONR27aR27b, CH2NHCOR26, CH2NCH3COR26ili
naznačeno time što su R26, R27, R30i R14akao što je gore opisano.
U određenim otelotvorenjima, formule ULM-b, su svaki nezavisno izabrani iz grupe H, opciono supstituisanog haloalkila, opciono supstituisanog alkila, CH2OR30, CH2NHR30, CH2NCH3R30, CONR27aR27b, CH2CONR27aR27b, CH2NHCOR26, ili CH2NCH3COR26; a drugi od R14aand R14bje H; ili R14a, R14b, zajedno sa atomom ugljenika na koji su vezani, formiraju opciono supstituisani 3- do 6-člani spirocikloalkil ili spiroheterociklil, naznačeno time što spiroheterociklil nije epoksid ili aziridin, navedeni spiroalkil ili spiroheterocikloalkil sam kil je opciono supstituisan sa alkilom, haloalkilom ili -COR33gde je R33alkil ili haloalkil, naznačeno time što je R30izabrani od H, alkil, alkinilalkil, cikloalkil, heterocikloalkil, cikloalkilalkil, heterocikloalkilalkil, heterocikloalkilal, arilalkil ili heteroarilalkil dalje opciono supstituisani;
R15formule ULM-b je izabran iz H, halogen, CN, OH, NO2, NR27aR27b, OR27a, CONR27aR27b, NR27aCOR27b, SO2NR27aR27b, NR27aSO2R27b, opciono supstituisani alkil, opciono supstituisani haloalkil, opciono supstituisani aralkoksi opciono supstituisani heteroaril, opciono supstituisani cikloalkil, ili opciono supstituisani heterociklil, naznačeno time što opcionalna supstitucija navedenog arila, heteroarila, cikloalkila i heterocikloalkila uključuje CH2OR30, CH2NHR30, CH2NCH3R30, CONR27aR27b, CH2CONR27aR27b,
CH
2NHCOR26, CH2NCH3COR26ili naznačeno time što su R26, R27, R30and R14akao što je gore opisano.
U određenim otelotvorenjima, ULM ima hemijsku strukturu izabranu iz grupe:
pri čemu:
R1formula ULM-c, ULM-d i ULM-e je H, etil, izopropil, terc-butil, sec-butil, ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil ili cikloheksil; opciono supstituisani alkil, opciono supstituisani cikloalkil, opciono supstituisani hidroksialkil, opciono supstituisani heteroaril ili haloalkil;
R14aformula ULM-c, ULM-d i ULM-e je H, haloalkil, opciono supstituisani alkil, metil, fluorometil, hidroksimetil, etil, izopropil ili ciklopropil;
R15formula ULM-c, ULM-d i ULM-e je izabran iz grupe koju čine H, halogen, CN, OH, NO2, opciono supstituisani heteroaril, opciono supstituisani aril; opciono supstituisani alkil, opciono supstituisani haloalkil, opciono supstituisani haloalkoksi, opciono supstituisani cikloalkil, ili opciono supstituisani heterociklil;
X formula ULM-c, ULM-d i ULM-e je C, CH2, ili C=O
R3formula ULM-c, ULM-d i ULM-e je odsutan ili je opciono supstituisani 5 ili 6-člani heteroaril; i
isprekidana linija označava mesto vezivanja najmanje jednog PTM-a, drugog ULM-a (ULM') ili hemijskog veznog dela koji spaja najmanje jedan PTM ili ULM 'ili oba za ULM.
U određenim otelotvorenjima, ULM obuhvata grupu prema hemijskoj strukturi:
pri čemu:
R14aformule ULM-f je H, haloalkil, opciono supstituisani alkil, metil, fluorometil, hidroksimetil, etil, izopropil ili ciklopropil;
R9formule ULM-f je H;
R10formule ULM-f je H, etil, izopropil, terc-butil, sek-butil, ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil ili cikloheksil;
R11formule ULM-f je
ili opciono supstituisani heteroaril;
p formule ULM-f je 0, 1, 2, 3 ili 4;
svaki R18formule ULM-f je nezavisno halo, opciono supstituisani alkoksi, cijano, opciono supstituisani alkil, haloalkil, haloalkoksi ili linker;
R12formule ULM-f je H, C=O;
R13formule ULM-f je H, opciono supstituisani alkil, opciono supstituisani alkilkarbonil, opciono supstituisani (cikloalkil) alkilkarbonil, opciono supstituisani aralkilkarbonil, opciono supstituisani arilkarbonil, opciono supstituisani (heterociklil) karbonil, ili opciono supstituisani aralkil,
R15formule ULM-f je izabran iz grupe koju čine H, halogen, Cl, CN, OH, NO2, opciono supstituisani haloalkil, opciono supstituisani heteroaril, opciono supstituisani aril;
naznačeno time što isprekidana linija formule ULM-f označava mesto vezivanja najmanje jednog PTM, drugog ULM-a (ULM') ili hemijskog veznog dela koji spaja najmanje jedan PTM ili ULM' ili oba za ULM.
U određenim otelotvorenjima, ULM je izabran iz sledećih struktura:
naznačen time što n predstavlja 0 ili 1.
U određenim otelotvorenjima, ULM je izabran iz sledećih struktura:
naznačen time što je fenilni prsten u ULM-a1 preko ULM-a15, ULM-b1 preko ULM-b12, ULM-c1 preko ULM-c15 i ULM-d1 kroz ULM-d9 opciono supstituisan fluorom, nižim alkilnim i alkoksi grupama, i naznačeno time što isprekidana linija označava mesto vezivanja najmanje jednog PTM-a, drugog ULM (ULM') ili hemijskog pokretača povezivanje najmanje jednog PTM ili ULM' ili oba sa ULM-a.
U jednom otelotvorenju, fenilni prsten u ULM-a1 preko ULM-a15, ULM-b1 preko ULM-b12, ULM-c1 preko ULM-c15 i ULM-d1 kroz ULM-d9 može se funkcionalizovati kao estar da bi postao deo predleka.
U određenim otelotvorenjima, hidroksilna grupa na pirolidinskom prstenu ULM-a1 preko ULM-a15, ULM-b1 preko ULM-b12, ULM-c1 preko ULM-c15 i ULM-d1 preko ULM-d9, respektivno, sadrži deo proleka povezan sa esterom.
U bilo kom od ovde opisanih aspekata ili otelotvorenja, ULM i tamo gde su prisutni, ULM', su svaki nezavisno grupa prema hemijskoj strukturi:
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu:
R<1'>ULM-g je opciono supstituisana C1-C6alkil grupa, opciono supstituisana -(CH2)nOH, opciono supstituisana -(CH2)nSH, opciono supstituisana (CH2)n-O-(C1-C6)alkil grupa, opciono supstituisana (CH2)n-WCOCW-(C0-C6)alkil grupa koja sadrži epoksidni deo WCOCW gde je svaki W nezavisno H ili C1-C3alkil grupa, opciono supstituisan -(CH2)nCOOH, opciono supstituisan - (CH2)nC(O)-(C1-C6alkil), opciono supstituisan -(CH2)nNHC(O)-R", opciono supstituisan -(CH2)nC(O)-N(R")2, opciono supstituisan -(CH2)nOC(O)-N(R")2, - (CH2O)nH, opciono supstituisan -(CH2)nOC(O)-(C1-C6alkil), opciono supstituisan -(CH2)nC(O)-O-(C1-C6alkil), opciono supstituisan -(CH2O)nCOOH, opciono supstituisan -(OCH2)nO-(C1-C6alkil), opciono supstituisan - (CH2O)nC(O)-(C1-C6alkil), opciono supstituisan -(OCH2)nNHC(O)-R", opciono supstituisan -(CH2O)nC(O)-N(R")2, -(CH2CH2O)nH, opciono supstituisan -(CH2CH2O)nCOOH, opciono supstituisan -(OCH2CH2)nO-(C1-C6alkil), opciono supstituisan -(CH2CH2O)nC(O)-(C1-C6alkil), opciono supstituisan -(OCH2CH2)nNHC(O)-R", opciono supstituisan -(CH2CH2O)nC(O)-N(R")2, opciono supstituisan -SO2RS, opciono supstituisan S(O)RS, NO2, CN ili halogen (F, Cl, Br, I, poželjno F ili Cl);
svaki R" ULM-g je nezavisno H ili C1-C6alkil grupa koja može biti opciono supstituisana sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halogene grupe (poželjno fluor);
RSULM-g je C1-C6alkil grupa, opciono supstituisana aril, heteroaril ili heterocicilna grupa ili a -(CH2)mN(R")2grupa;
X i X' ULM-g su svaki nezavisno C=O, C=S, -S(O), S(O)2, (poželjno je da su X i X' oba C=O);
R<2'>ULM-g je opciono supstituisana -(CH2)n-(C=O)u(NR")v(SO2)walkilna grupa, opciono supstituisana -(CH2)n-(C=O)u(NR")v(SO2)wNR1NR2Ngrupa, opciono supstituisan -(CH2)n-(C=O)u(NR")v(SO2)w-Aril, opciono supstituisan -(CH2)n-(C=O)u(NR")v(SO2)w-Heteroaril, opciono supstituisan -(CH2)n-(C=O)vNR" (SO2)wHeterociklil, opciono supstituisan -NR"-(CH2)n-C(O)u(NR")v(SO2)w-alkil, opciono supstituisan -NR"-(CH2)n-C(O)u(NR")v(SO2)w-NR1NR2N, opciono supstituisan -NR"-(CH2)n-C(O)u(NR")v(SO2)w-NR"C(O)R1N, opciono supstituisan -NR"-(CH2)n-(C=O)u(NR")v(SO2)w-Aril, opciono supstituisan-NR"-(CH2)n-(C=O)u(NR")v(SO2)w-Heteroaril ili opciono supstituisan -NR"-(CH2)n-(C=O)vNR"(SO2)w-Heterociklil, opciono supstituisana -X<R2'>-alkil grupa; opciono supstituisana -X<R2'>- Aril grupa; opciono supstituisana -X<R2'>- Heteroaril grupa; opciono supstituisana -X<R2'>- Heterociklil grupa;
R<3'>od ULM-g je opciono supsituisana alkil grupa, opciono supsituisan -(CH2)n-(O)u(NR")v(SO2)w-alkil, opciono supsituisan -(CH2)n-C(O)u(NR")v(SO2)w-NR1NR2N, opciono supsituisan -(CH2)n-C(O)u(NR")v(SO2)w-NR"C(O)R1N, opciono supsituisan -(CH2)n-C(O)u(NR")v(SO2)w-C(O)(R")2, opciono supsituisan -(CH2)n-C(O)u(NR")v(SO2)w-Aril, opciono supsituisan -(CH2)n-C(O)u(NR")y(SO2)w-Heteroaril, opciono supsituisan -(CH2)n-C(O)u(NR")v(SO2)w-Heterociklil, opciono supsituisan -NR"-(CH2)n-C(O)u(NR")v(SO2)w-alkil, opciono supsituisan -NR"-(CH2)n-C(O)u(NR")v(SO2)w-NR1NR2N, opciono supsituisan -NR"-(CH2)n-C(O)u(NR")v(SO2)w-NR"C(O)R1N, opciono supsituisan -NR"-(CH2)n-C(O)u(NR")v(SO2)w-Aril, opciono supsituisan -NR"-(CH2)n-C(O)u(NR")v(SO2)w-Heteroaril, opciono supsituisan -NR<1>-(CH2)n-C(O)u(NR")v(SO2)w-Heterociklil, opciono supsituisan -O(CH2)n-(C=O)u(NR")v(SO2)w-alkil, opciono supsituisan -O-(CH2)n-(C=O)u(NR")v(SO2)w-NR1NR2N, opciono supsituisan -O-(CH2)n-(C=O)u(NR")v(SO2)w-NR"C(O)R1N, opciono supsituisan -O-(CH2)n-(C=O)u(NR")v(SO2)w-Aril, opciono supsituisan -O-(CH2)n-(C=O)u(NR")v(SO2)w-Heteroaril ili opciono supsituisan -O-(CH2)n-(C=O)u(NR")v(SO2)w-Heterociklil; -(CH2)n-(V)n'-(CH2)n-(V)n'-alkil grupa, opciono supsituisana -(CH2)n-(V)n'-(CH2)n-(V)n'-Aril grupa, opciono supsituisana -(CH2)n-(V)n'-(CH2)n-(V)n'-Heteroaril groupa, opciono supsituisana -(CH2)n-(V)n'-(CH2)n-(V)n'-Heterociklil grupa, opciono supsituisana -(CH2)n-N(R1')(C=O)m'-(V)n'-alkil grupa, opciono supsituisana -(CH2)n-N(R1')(C=O)m'-(V)n'-Aril grupa, opciono supsituisan -(CH2)n-N(R1')(C=O)m'-(V)n'-Heteroaril grupa, opciono supsituisan -(CH2)n-N(R1')(C=O)m'-(V)n'-Heterociklil grupa, opciono supsituisan -X<R3'>- alkil grupa; opciono supsituisan -X<R3'>- Aril grupa; opciono supsituisan -X<R3'>- Heteroaril grupa; opciono supsituisan -X<R3'>-Heterociklil grupa;
R1Ni R2NULM-g su svaki nezavisno H, C1-C6alkil koji je opciono supstituisan sa jednom ili dve hidroksilne grupe i do tri halogene grupe ili opciono supstituisanom -(CH2)n-Aryl, -(CH2)n-heteroaril ili -(CH2)n-heterociklilnom grupom;
V od ULM-g je O, S ili NR1;
svaki R1'ULM-g je nezavisno H ili C1-C3alkilna grupa;
X<R2'>and X<R3'>ULM-g su svaki nezavisno opciono supstituisani -CH2)n-, - CH2)n-CH(Xv)=CH(Xv)-(cis ili trans), -CH2)n-CH≡CH-, -(CH2CH2O)n- or a C3-C6cikloalkilna grupa, gde je XvH, halo ili C1-C3alkil grupa koja je opciono supstituisana;
svaki m od ULM-g je nezavisno 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6;
svaki m' od ULM-g je nezavisno 0 ili 1;
svaki n od ULM-g je nezavisno 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6;
svaki n' od ULM-g je nezavisno 0 ili 1;
svaki u od ULM-g je nezavisno 0 ili 1;
svaki v od ULM-g je nezavisno 0 ili 1;
svaki w od ULM-g je nezavisno 0 ili 1; i
bilo koji jedan ili više R<1'>, R<2'>, R<3'>, X i X' ULM-g je opciono modifikovan da bude kovalentno vezan za PTM grupu preko grupe linkera kada PTM nije ULM', ili kada je PTM ULM', bilo koji ili više R<1'>, R<2'>, R<3'>, X i X' svakog od ULM' i ULM' opciono se modifikuju da bi bili kovalentno vezani jedni za druge direktno ili preko povezujuće grupe, ili farmaceutski prihvatljive soli, stereoizomera, solvata ili polimorfa.
U bilo kom od ovde opisanih aspekata ili otelotvorenja, ULM i kada su prisutni, ULM', su svaki nezavisno grupa prema hemijskoj strukturi:
pri čemu:
svaki od R<1'>, R<2'>i R<3'>ULM-h su isti kao gore i X je C=O, C=S, -S(O) grupa ili S(O)2grupa, poželjnije C=O grupa, i
bilo koji jedan ili više R<1'>, R<2'>i R<3'>ULM-h su opciono modifikovani da vežu grupu linkera za koju je dalje kovalentno vezana za PTM grupu kada PTM nije ULM', ili kada je PTM ULM', bilo koji jedan ili više R<1'>, R<2'>, R<3'>svakog od ULM i ULM' su opciono modifikovani da budu kovalentno vezani za svaki drugi direktno ili preko povezujuće grupe, ili
farmaceutski prihvatljiva so, enantiomer, dijastereomer, solvat ili njegov polimorf. U bilo kom od ovde opisanih aspekata ili otelotvorenja, ULM i kada su prisutni, ULM', su nezavisni prema hemijskoj strukturi:
pri čemu:
bilo koji jedan ili više R<1'>, R<2'>i R<3'>ULM-i su opciono modifikovani da vežu grupu linkera za koju je dalje kovalentno vezana za PTM grupu kada PTM nije ULM', ili kada je PTM ULM', bilo koji jedan ili više R<1'>, R<2'>, R<3'>svakog od ULM i ULM' su opciono modifikovani da budu kovalentno vezani za svaki drugi direktno ili preko povezujuće grupe, ili
farmaceutski prihvatljiva so, enantiomer, dijastereomer, solvat ili njegov polimorf. U daljim poželjnim aspektima otkrića, R<1'>ULM-g kroz ULM-i je poželjno hidroksilna grupa ili grupa koja se može metabolizirati u hidroksilnu ili karboksilnu grupu, tako da jedinjenje predstavlja oblik predleka aktivnog jedinjenja. Primer poželjnih R<1'>grupa uključuju, na primer, -(CH2)nOH, (CH2)n-O-(C1-C6)alkil grupu, -(CH2)nCOOH, -(CH2O)nH, opciono supstituisan -(CH2)nOC(O)-(C1-C6alkil), ili opciono supstituisan -(CH2)nC(O)-O-(C1-C6alkyl), naznačen time što je n 0 ili 1. Tamo gde je R<1'>ili sadrži grupu karboksilne kiseline, hidroksilnu grupu ili aminsku grupu, hidroksilna grupa, grupa karboksilne kiseline ili amin (od kojih svaka može biti opciono supstituisana), mogu se dalje hemijski modifikovati kako bi se obezbedila kovalentna veza sa vezujućom grupom za koju je vezana PTM grupa (uključujući ULM grupu);
X i X', gde su prisutni, ULM-g i ULM-h su poželjno C=O, C=S, -S(O) grupa ili S(O)2grupa, poželjnije C=O grupa;
R<2'>od ULM-g do ULM-i je poželjno opciono supstituisani -NH-T-aril, opciono supstituisani -N(CH3)-T-aril, opciono supstituisana -NH-T-heteroaril grupa, opciono supstituisani -N(CH3)-T-heteroaril, opciono supstituisani -NH-T-heterociklil, ili opciono supstituisani -N(CH3)-T-Heterociklil poželjno H i T opciono supstituisana -(CH2)n- grupa, naznačeno time što svaka od metilenskih grupa može biti opciono supstituisana sa jednim ili dva supstituenta, poželjno izabrani iz halogena, bočnog lanca aminokiselina kako je ovde drugačije opisano ili C1-C3alkil grupe, poželjno jedna ili dve metilne grupe, koje mogu biti opciono supstituisane; i n je 0 do 6, često 0, 1, 2 ili 3, poželjno 0 ili 1. Alternativno, T može biti i a -(CH2O)n- grupa, a -(OCH2)n- grupa, a - (CH2CH2O)n- grupa, a -(OCH2CH2)n- grupa, od kojih su sve grupe opciono zamenjene.
Poželjne arilne grupe za R<2'>ULM-g do ULM-i uključuju opciono supstituisane fenilne ili naftilne grupe, po mogućstvu fenilne grupe, naznačeno time što je fenilna ili naftilna grupa povezana sa PTM-om (uključujući ULM' grupu) putem linkerke grupe i/ili opciono supstituisana halogenom (poželjno F ili Cl), aminom, monoalkil- ili dialkil-aminom (poželjno dimetilaminom), F, Cl, OH, COOH, C1-C6alkilom poželjno CH3, CF3, OMe, OCF3, NO2ili CN grupom (svaka od kojih može biti supstituisana u orto-, meta- i/ili para- pozicijama fenilnog prstena, poželjno para-poziciji), opciono supstituisanom fenilnom grupom (gde je i sama fenilna grupa opciono povezana sa PTM grupom, uključujući ULM', putem linkerke grupe) i/ili opciono supstituisana sa najmanje jednom od sledećih grupa: F, Cl, OH, COOH, CH3, CF3, OMe, OCF3, NO2, ili CN (u orto-, meta- i/ili para- pozicijama fenilnog prstena, poželjno para-), naftilnom grupom koja može biti opciono supstituisana, opciono supstituisanim heteroarilom, po mogućstvu opciono supstituisanim izoksazolom uključujući metil-supstituisani izoksazol, opciono supstituisanim oksazolom uključujući metilsupstituisani oksazol, opciono supstituisanim tiazolom uključujući metil-supstituisani tiazol, opciono supstituisanim izotiazolom uključujući metil-supstituisani izotiazol, opciono supstituisanim pirolom uključujući metil-supstituisani pirol, opciono supstituisanim imidazolom uključujući metilimidazol, opciono supstituisanim benzimidazolom ili metoksibenzilimidazolom, opciono supstituisanim oksiimidazolom ili metiloksiimidazolom, opciono supstituisanom diazolnom grupom uključujući metildiazolnu grupu, opciono supstituisanom triazolnom grupom uključujući metil-supstituisanu triazolnu grupu, opciono supstituisanom piridinskom grupom uključujući halogen- (poželjno F) ili metil-supstituisanu piridinsku grupu ili oksapiridinsku grupu (gde je piridinska grupa povezana sa fenilnom grupom putem kiseonika), opciono supstituisanim furanom, opciono supstituisanim benzofuranom, opciono supstituisanim dihidrobenzofuranom, opciono supstituisanim indolom, indolizinom ili azaindolizinom (2-, 3- ili 4-azaindolizinom), opciono supstituisanom hinolinskom grupom, opciono supstituisanom grupom prema hemijskoj strukturi:
pri čemu:
S<c>od ULM-g do ULM-i je CHR<SS>, NR<URE>ili O;
R<HET>od ULM-g do ULM-i je H, CN, NO2, halo (poželjno Cl ili F), opciono supstituisani C1-C6alkil (poželjno supstituisani sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halo grupe (npr. CF3), opciono supstituisani O(C1-C6alkil) (poželjno supstituisani sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halo grupe) ili opciono supstituisana acetilenska grupa -C≡C-Ragde je RaH ili a C1-C6alkil grupa (poželjno C1-C3alkil);
R<SS>od ULM-g do ULM-i je H, CN, NO2, halo (poželjno F ili Cl), opciono supstituisani C1-C6alkil (poželjno supstituisani sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halo grupe), opciono supstituisani O-(C1-C6alkil) (poželjno supstituisani sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halo grupe) ili opciono supstituisani halo -C(O)(C1-C6alkil) (poželjno supstituisan sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halo grupe);
R<URE>od ULM-g do ULM-i je H, a C1-C6alkil (poželjno H ili C1-C3alkil) ili a -C(O)(C1-C6alkil) od kojih je svaka grupa opciono supstituisana sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halogene, poželjno fluor grupe, ili opciono supstituisana fenil grupa, opciono supstituisana heteroaristična ili opciono supstituisani heterociklil, poželjno na primer piperidin, morfolin, pirolidin, tetrahidrofuran);
R<PRO>od ULM-g do ULM-i je H, opciono supstituisana C1-C6alkil ili opciono supstituisana aril (fenil ili naftil), heteroaril ili heterociklilna grupa izabrana iz grupe koja se sastoji od oksazola, izoksazola, tiazola, izotiazola, imidazola, diazola, oksimidazola, pirolidina, furana, diazola furan, tetrahidrofuran, tien, dihidrotien, tetrahidrotien, piridin, piperidin, piperazin, morfolin, kinolin, (svaki poželjno supstituisan sa C1-C3alkil grupom, poželjno metil ili halo grupa, poželjno F ili Cl), benzofuran, indol, indolizin, azaindolizin;
R<PRO1>i R<PRO2>ULM-g kroz ULM-i su svaki nezavisno H, opciono supstituisana C1-C3alkilna grupa ili zajedno čine keto grupu; i
svaki n od ULM-g do ULM-i je nezavisno 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6 (poželjno 0 ili 1), ili opciono supstituisani heterociklil, poželjno tetrahidrofuran, tetrahidrotien, piperidin, piperazin ili morfolin (svaka od njih grupa kada je supstituisana, poželjno je supstituisana metilom ili halom (F, Br, Cl), od kojih svaka grupa može biti opciono vezan za PTM grupu (uključujući ULM' grupu) preko grupe za povezivanje.
U određenim poželjnim aspektima, od ULM-g do ULM-i je
grupa,
gde su R<PRO>i n od ULM-g do ULM-i isti kao gore.
Poželjne heteroarilne grupe za R<2'>ULM-g do ULM-i uključuju opciono supstituisani kinolin (koji može biti vezan za farmakofor ili supstituisan na bilo kom atomu ugljenika unutar hinolinskog prstena), opciono supstituisani indol, opciono supstituisani indolizin, opciono supstituisani benzofuran, uključujući opciono supstituisani benzofuran, opciono supstituisani izoksuran opciono supstituisani tiazol, opciono supstituisani izotiazol, opciono supstituisani tiofen, opciono supstituisani piridin (2-, 3 ili 4-piridin), opciono supstituisani imidazol, opciono supstituisani pirol, opciono supstituisani diazol, opciono supstituisani triazol, tetrazol, opciono supstituisani oksimidazol ili grupa prema hemijskoj strukturi:
pri čemu:
S<c>od ULM-g do ULM-i je CHR<SS>, NR<URE>ili O;
R<HET>ULM-g do ULM-i je H, CN, NO2, halo (poželjno Cl ili F), opciono supstituisani C1-C6alkil (poželjno supstituisani sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halo grupe (npr. CF3), opciono supstituisani O(C1-C6alkil) (poželjno supstituisani sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halo grupe) ili opciono supstituisana acetilenska grupa -C≡C-Ragde je Raod ULM-g do ULM-i H ili a C1-C6alkil grupa (poželjno C1-C3alkil);
R<SS>od ULM-g do ULM-i je H, CN, NO2, halo (poželjno F ili Cl), opciono supstituisani C1-C6alkil (poželjno supstituisani sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halo grupe), opciono supstituisani O-(C1-C6alkil) (poželjno supstituisani sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halo grupe) ili opciono supstituisani halo -C(O)(C1-C6alkil) (poželjno supstituisan sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halo grupe);
R<URE>od ULM-g do ULM-i je H, C1-C6alkil (poželjno H ili C1-C3alkil) ili a -C(O)(C1-C6alkyl), od kojih je svaka grupa opciono supstituisana sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halogene, poželjno fluorne grupe, ili opciono supstituisanim heterociklilom, na primer piperom idin, morfolin, pirolidin, tetrahidrofuran, tetrahidrotiofen, piperidin, piperazin, od kojih je svaki opciono supstituisan, i
Y<C>od ULM-g do ULM-i je N ili C-R<YC>, gde je R<YC>H, OH, CN, NO2, halo (poželjno Cl ili F), opciono supstituisani C1-C6alkil (poželjno supstituisani sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halo grupe (npr. CF3), opciono supstituisani O(C1-C6alkil) (poželjno supstituisani sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halo grupe) ili opciono supstituisana acetilenska grupa -C≡C-Ragde je RaH ili C1-C6alkilna grupa (poželjno C1-C3alkil), od kojih svaka grupa može biti opciono povezana sa PTM grupom (uključujući ULM' grupu) preko grupe linkera.
Preferirane heterociklilheterocicilne grupe za R<2'>od ULM-g do ULM-i uključuju tetrahidrofuran, tetrahidrotien, tetrahidrokinolin, piperidin, piperazin, pirolidin, morfolin, oksan ili tian, od kojih svaka grupa može biti opciono supstituisana, ili grupu prema hemijskoj strukturi:
grupa, naznačena time što:
R<PRO>od ULM-g do ULM-i je H, opciono supstituisani C1-C6alkil ili opciono supstituisani aril, heteroaril ili heterociklilna grupa;
R<PRO1>i R<PRO2>ULM-g kroz ULM-i su svaki nezavisno H, opciono supstituisana C1-C3alkilna grupa ili zajedno čine keto grupu i
svaki n od ULM-g do ULM-i je nezavisno 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6 (često 0 ili 1), od kojih svaka grupa može biti opciono povezana sa PTM grupom (uključujući ULM' grupu) preko grupe linkera.
Preferirani supstituenti R<2'>od ULM-g do ULM-i takođe uključuju specifično (i bez ograničenja na otkriveno specifično jedinjenje) supstituente R<2'>koji se nalaze u identifikovanim jedinjenjima koja su ovde otkrivena (što uključuje specifična jedinjenja koja su otkrivena u ovoj specifikaciji, i slike koje su ovde priložene). Svaki od ovih R<2'>supstituenata može se koristiti zajedno sa bilo kojim brojem R<3'>supstituenata koji su takođe ovde otkriveni.
R<3'>od ULM-g do ULM-i je poželjno opciono supstituisani -NH-T-aril, opciono supstituisani -N(C1-C3alkil)-T-aril, opciono supstituisana -NH-T-heteroaril grupa, opciono supstituisani -N(C1-C3alkyl)-T-heteroaril, opciono supstituisani -NH-T-heterocklil, ili opciono supstituisani -N(C1-C3alkyl)-T-heterociklil, gde je T opciono supstituisana -(CH2)ngrupa, naznačeno time što svaka metilenska grupa može biti opciono supstituisana sa jednim ili dva supstituenta, poželjno izabranih iz halogena, C1-C3alkil grupe ili bočnog lanca aminokiseline kako je ovde drugačije opisano, poželjno metil, koji može biti opciono supstituisan; i n je 0 do 6, često 0, 1, 2, ili 3 poželjno 0 ili 1. Alternativno, T može biti i -(CH2O)n- grupa, - (OCH2)n- grupa, -(CH2CH2O)n- grupa, -(OCH2CH2)n- grupa, od kojih je svaka grupa opciono suptituisana.
Preferirane aril grupe za R<3'>ULM-g kroz ULM-i uključuju opciono supstituisane fenil ili naftil grupe, poželjno fenil grupe, naznačeno time što je fenil ili naftil grupa opciono povezana sa PTM grupom (uključujući ULM’ grupu) preko grupe linker i/ili opciono supstituisana halogenom (poželjno F ili Cl), aminom, monoalkil- ili dialkil aminom (poželjno, dimetilamin), amido grupa (poželjno - (CH2)m-NR1C(O)R2grupa gde su m, R1i R2isti kao gore), halo (često F ili Cl), OH, CH3, CF3, OMe, OCF3, NO2, ,CN ili S(O)2RSgrupa (RSje C1-C6alkilna grupa, opciono supstituisana aril, heteroaril ili heterociklilna grupa ili (CH2)m(R")2 grupa), svaki od njih može biti supstituisan u orto-, meta- i/ili para- položajima fenilnog prstena, poželjno para-), ili aril (poželjno fenil) , Heteroaril ili Heterociklil. Poželjno je pomenuta supstituentna fenilna grupa opciono supstituisana fenil grupa (tj. Sama supstituentna fenilna grupa je poželjno supstituisana sa najmanje jednim od F, Cl, OH, SH, COOH, CH3, CF3, OMe, OCF3, NO2, CN ili grupa linker na koju je vezana PTM grupa (uključujući ULM 'grupu), naznačeno time što se supstitucija javlja u orto-, meta- i/ili parapoložaji fenilnog prstena, poželjno para-), naftil grupa, koja može biti opciono supstituisana uključujući kako je gore opisano, opciono supstituisani heteroaril (poželjno opciono supstituisani izoksazol uključujući metilsupstituisani izoksazol, opciono supstituisani oksazol uključujući metilsupstituisani oksazol, opciono supstituisani tiazol uključujući metilsupstituisani pirol, opciono supstituisani imidazol uključujući metilimidazol, benzilimidazol ili metoksibenzilimidazol, ksimidazol ili metiloksimidazol, opciono supstituisana grupa diazola, uključujući metildiazolnu grupu, opciono supstituisana triazolna grupa, uključujući metilsupstituisanu triazolnu grupu, piridinsku grupu, uključujući halo-(poželjno F) ili metilsupstituovanu piridinsku grupu ili oksapiridinsku grupu (gde je piridinska grupa povezana sa fenilnom grupom kiseonikom) ili opciono supstituisani heterociklil (tetrahidrofuran, tetrahidrotiofen, pirolidin, piperidin, morfolin, piperazin, tetrahidrokinolin, oksan ili tian. Svaka od aril, heteroaril ili heterociklilnih grupa može biti opciono povezana sa PTM grupom (uključujući ULM' grupu) preko grupe linkera.
Poželjne heteroarilne grupe za R<3'>ULM-g do ULM-i uključuju opciono supstituisanu hinolinsku grupu (koja može biti vezana za farmakofor ili supstituisana na bilo koji ugljenikov atom unutar hinolinskog prstena), opciono supstituisani indol (uključujući dihidroindol), opciono supstituisani indolizin, opciono supstituisani azaindolizin (2-, 3- ili 4-azaindolizin), opciono supstituisani benzimidazol, benzodiazol, benzoksifuran, opciono supstituisani imidazol, opciono supstituisani izoksazol, opciono supstituisani oksazol (poželjno metil-supstituisan), opciono supstituisani diazol, opciono supstituisani triazol, tetrazol, opciono supstituisani benzofuran, opciono supstituisani tiofen, opciono supstituisani tiazol (poželjno metil- i/ili tiol-supstituisan), opciono supstituisani izotiazol, opciono supstituisani triazol (poželjno 1,2,3-triazol supstituisan metil grupom, triizopropilsilil grupom, opciono supstituisanom -(CH2)m-O-C1-C6alkil grupom ili opciono supstituisanom -(CH2)m-C(O)-O-C1-C6alkil grupom), opciono supstituisanu piridinsku grupu (2-, 3- ili 4-piridin) ili grupu prema hemijskoj strukturi:
pri čemu:
S<c>od ULM-g do ULM-i je CHR<SS>, NK<URE>ili O;
R<HET>od ULM-g do ULM-i je H, CN, NO2, halo (poželjno Cl ili F), opciono supstituisani C1-C6alkil (poželjno supstituisani sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halo grupe (npr. CF3), opciono supstituisani O(C1-C6alkil) (poželjno supstituisani sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halo grupe) ili opciono supstituisana acetilenska grupa -C≡C-Ragde je RaH ili a C1-C6alkil grupa (poželjno C1-C3alkil);
R<SS>od ULM-g do ULM-i je H, CN, NO2, halo (poželjno F ili Cl), opciono supstituisani C1-C6alkil (poželjno supstituisani sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halo grupe), opciono supstituisani O-(C1-C6alkil) (poželjno supstituisani sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halo grupe) ili opciono supstituisani halo -C(O)(C1-C6alkil) (poželjno supstituisan sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halo grupe);
R<URE>od ULM-g do ULM-i je H, C1-C6alkil (poželjno H ili C1-C3alkil) ili a -C(O)(C1-C6alkyl), od kojih je svaka grupa opciono supstituisana sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halogene, poželjno fluorne grupe, ili opciono supstituisanim heterociklilom, na primer piperom idin, morfolin, pirolidin, tetrahidrofuran, tetrahidrotiofen, piperidin, piperazin, od kojih je svaki opciono supstituisan, i
Y<C>od ULM-G do ULM-i je N ili C-R<YC>, naznačen time što je R<YC>H, OH, CN, NO2, halo (poželjno Cl ili F), opciono supstituisani C1-C6alkil (poželjno supstituisani sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halo grupe (npr. CF3), opciono supstituisani O(C1-C6alkil) (poželjno supstituisani sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halo grupe) ili opciono supstituisana acetilenska grupa -C≡C-Ragde je RaH ili a C1-C6alkil grupa (poželjno C1-C3alkil). Svaka od navedenih heteroarilnih grupa može biti opciono povezana sa PTM grupom (uključujući ULM' grupu) preko grupe linkera.
Preferirane heterocicilne grupe za R<3'>od ULM-g do ULM-i uključuju tetrahidrokinolin, piperidin, piperazin, pirolidin, morfolin, tetrahidrofuran, tetrahidrotiofen, oksan i tian, od kojih svaka grupa može biti opciono supstituisana ili grupa prema hemijskoj strukturi:
grupa, naznačena time što:
R<PRO>od ULM-g do ULM-i je H, opciono supstituisana C1-C6alkil ili opciono supstituisana aril (fenil ili naftil), heteroaril ili heterociklilna grupa izabrana iz grupe koja se sastoji od oksazola, izoksazola, tiazola, izotiazola, imidazola, diazola, oksimidazola, pirolidina, furana, diazola furan, tetrahidrofuran, tien, dihidrotien, tetrahidrotien, piridin, piperidin, piperazin, morfolin, kinolin, (svaki poželjno supstituisan sa C1-C3alkil grupom, poželjno metil ili halo grupa, poželjno F ili Cl), benzofuran, indol, indolizin, azaindolizin;
R<PRO1>i R<PRO2>od ULM-g do ULM-i su svaki nezavisno H, opciono supstituisana C1-C3alkilna grupa ili zajedno formiraju keto grupu, i
svaki n od ULM-g do ULM-i je 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6 (poželjno 0 ili 1), naznačeno time što svaka od navedenih heterociklilnih grupa može biti opciono povezana sa PTM grupom (uključujući ULM 'grupu) preko grupe linkera.
Preferirani supstituenti R<3'>od ULM-g do ULM-i takođe uključuju specifično (i bez ograničenja na otkriveno specifično jedinjenje) supstituente R<3'>koji se nalaze u identifikovanim jedinjenjima koja su ovde otkrivena (što uključuje specifična jedinjenja koja su otkrivena u ovoj specifikaciji, i slike koje su ovde priložene). Svaki od ovih R<3'>supstituenata može se koristiti zajedno sa bilo kojim brojem supstituenata R<2'>, koji su takođe ovde otkriveni.
U određenim alternativnim poželjnim otelotvorenjima, R<2’>od ULM-g do ULM-i je opciono supstituisana -NR1-X<R2'>-alkil grupa, -NR1-X<R2'>-Aril grupa; opciono supstituisana -NR1-X<R2'>-HET, opciono supstituisana -NR1-X<R2'>-aril-HET ili opciono supstituisana --NR1-X<R2'>-HET-aril,
pri čemu:
R1od ULM-g do ULM-i je H ili C1-C3alkilna grupa (poželjno H);
X<R2'>od ULM-g do ULM-i je opciono supstituisani -CH2)n- , -CH2)n-CH(Xv)=CH(Xv)-(cis ili trans), -(CH2)n-CH≡CH-, -(CH2CH2O)n- ili C3-C6cikloalkilna grupa; i
Xvod ULM-g do ULM-I je H, halo ili C1-C3alkilna grupa koja je opciono supstituisana sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halogene grupe;
Alkil od ULM-g do ULM-i je opciono supstituisana C1-C10alkil grupa (poželjno C1-C6alkil) grupa (u određenim poželjnim otelotvorenjima, alkil grupa je završena sa halo grupom, često Cl ili Br);
Aril od ULM-g do ULM-i je opciono supstituisana fenil ili naftil grupa (poželjno, fenilna grupa); i
HET od ULM-g do ULM-i je opciono supstituisani oksazol, izoksazol, tiazol, izotiazol, imidazol, diazol, oksimidazol, pirrol, pirolidin, furan, dihidrofuran, tien, dihidrotien, piridin, piperidin, piperazin, morfolin, benzofuran, inofuran, dol, indolizin, azaindolizin, kinolin (kada je supstituisan, svaki poželjno supstituisan sa C1-C3alkil grupom, poželjno metil ili halo grupom, poželjno F ili Cl) ili grupa prema hemijskoj strukturi:
S<c>od ULM-g do ULM-i je CHR<SS>, NR<URE>ili O;
R<HET>od ULM-g do ULM-i je H, CN, NO2, halo (poželjno Cl ili F), opciono supstituisani C1-C6alkil (poželjno supstituisani sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halo grupe (npr. CF3), opciono supstituisani O(C1-C6alkil) (poželjno supstituisani sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halo grupe) ili opciono supstituisana acetilenska grupa -C≡C-Ragde je RaH ili a C1-C6alkil grupa (poželjno C1-C3alkil);
R<SS>od ULM-g do ULM-i je H, CN, NO2, halo (poželjno F ili Cl), opciono supstituisani C1-C6alkil (poželjno supstituisani sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halo grupe), opciono supstituisani O-(C1-C6alkil) (poželjno supstituisani sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halo grupe) ili opciono supstituisani halo -C(O)(C1-C6alkil) (poželjno supstituisan sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halo grupe);
R<URE>od ULM-g do ULM-i je H, C1-C6alkil (poželjno H ili C1-C3alkil) ili a -C(O)(C1-C6alkyl), od kojih je svaka grupa opciono supstituisana sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halogene, poželjno fluorne grupe, ili opciono supstituisanim heterociklilom, na primer piperom idin, morfolin, pirolidin, tetrahidrofuran, tetrahidrotiofen, piperidin, piperazin, od kojih je svaki opciono supstituisan;
Y<C>od ULM-G do ULM-i je N ili C-R<YC>, naznačen time što je R<YC>H, OH, CN, NO2, halo (poželjno Cl ili F), opciono supstituisani C1-C6alkil (poželjno supstituisani sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halo grupe (npr. CF3), opciono supstituisani O(C1-C6alkil) (poželjno supstituisani sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halo grupe) ili opciono supstituisana acetilenska grupa -C≡C-Ragde je RaH ili a C1-C6alkil grupa (poželjno C1-C3alkil);
R<PRO>od ULM-g do ULM-i je H, opciono supstituisana C1-C6alkil ili opciono supstituisana aril (fenil ili naftil), heteroaril ili heterociklilna grupa izabrana iz grupe koja se sastoji od oksazola, izoksazola, tiazola, izotiazola, imidazola, diazola, oksimidazola, pirolidina, furana, diazola furan, tetrahidrofuran, tien, dihidrotien, tetrahidrotien, piridin, piperidin, piperazin, morfolin, kinolin, (svaki poželjno supstituisan sa C1-C3alkil grupom, poželjno metil ili halo grupa, poželjno F ili Cl), benzofuran, indol, indolizin, azaindolizin;
R<PRO1>i R<PRO2>od ULM-g do ULM-i su svaki nezavisno H, opciono supstituisana C1-C3alkilna grupa ili zajedno formiraju keto grupu, i
svaki n od ULM-g do ULM-i je nezavisno 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6 (poželjno 0 ili 1).
Svaka od navedenih grupa može biti opciono povezana sa PTM grupom (uključujući ULM grupu) preko grupe linkera.
U određenim alternativnim poželjnim otelotvorenjima ovog otkrića, R<3'>od ULM-g do ULM-i je opciono supstituisana -(CH2)n-(V)n'-(CH2)n-(V)n'-R<S3’>grupa, opciono supstituisana -(CH2)n-N(R1')(C=O)m'-(V)n'-R<S3'>grupa, opciono supstituisana - X<R3'>-alkil grupa, opciono supstituisana X<R3'>-Aril grupa; opciono supstituisana -X<R3'>-HET grupa, opciono supstituisana -X<R3'>-aril-HET grupa ili opciono supstituisana - X<R3'>-HET-aril grupa,
pri čemu:
R<S3'>je opciono supstituisana alkil grupa (C1-C10, poželjno C1-C6alkil), opciono supstituisana aril grupa ili HET grupa;
R1'je H ili C1-C3alkil grupa (poželjno H);
V je O, S ili NR1';
X<R3'>je -(CH2)n-, -(CH2CH2O)n-, -CH2)n-CH(Xv)=CH(Xv)- (cis ili trans), -CH2)n-CH≡CH-, ili C3-C6cikloalkil grupa, sve opciono supstituisane;
Xvje H, halo ili C1-C3alkil grupa koja je opciono supstituisana sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halogene grupe;
Alkil je opciono supstituisana C1-C10alkilna (poželjno C1-C6alkil) grupa (u određenim poželjnim otelotvorenjima, alkilna grupa je završena halo grupom, često Cl ili Br);
Aril je opciono supstituisana fenil ili naftil grupa (poželjno, fenilna grupa); i HET je opciono supstituisani oksazol, izoksazol, tiazol, izotiazol, imidazol, diazol, oksiimidazol, pirol, pirolidin, furan, dihidrofuran, tetrahidrofuran, tien, dihidrotien, tetrahidrotien, piridin, piperidin, piperazin, morfolin, benzofuran, indol, indolizin, azaindolizin, hinolin (kada je supstituisan, poželjno sa C1-C3alkil grupom, po mogućstvu metil, ili halogenom, po mogućstvu F ili Cl), ili grupa prema hemijskoj strukturi:
S<c>od ULM-g do ULM-i je CHR<SS>, NR<URE>ili O;
R<HET>od ULM-g do ULM-i je H, CN, NO2, halo (poželjno Cl ili F), opciono supstituisani C1-C6alkil (poželjno supstituisani sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halo grupe (npr. CF3), opciono supstituisani O(C1-C6alkil) (poželjno supstituisani sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halo grupe) ili opciono supstituisana acetilenska grupa -C≡C-Ragde je RaH ili a C1-C6alkil grupa (poželjno C1-C3alkil);
R<SS>od ULM-g do ULM-i je H, CN, NO2, halo (poželjno F ili Cl), opciono supstituisani C1-C6alkil (poželjno supstituisani sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halo grupe), opciono supstituisani O-(C1-C6alkil) (poželjno supstituisani sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halo grupe) ili opciono supstituisani halo -C(O)(C1-C6alkil) (poželjno supstituisan sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halo grupe);
R<URE>od ULM-g do ULM-i je H, C1-C6alkil (poželjno H ili C1-C3alkil) ili a -C(O)(C0-C6alkyl), od kojih je svaka grupa opciono supstituisana sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halogene, poželjno fluorne grupe, ili opciono supstituisanim heterociklilom, na primer piperom idin, morfolin, pirolidin, tetrahidrofuran, tetrahidrotiofen, piperidin, piperazin, od kojih je svaki opciono supstituisan;
Y<C>od ULM-G do ULM-i je N ili C-R<YC>, naznačen time što je R<YC>H, OH, CN, NO2, halo (poželjno Cl ili F), opciono supstituisani C1-C6alkil (poželjno supstituisani sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halo grupe (npr. CF3), opciono supstituisani O(C1-C6alkil) (poželjno supstituisani sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halo grupe) ili opciono supstituisana acetilenska grupa -C≡C-Ragde je RaH ili a C1-C6alkil grupa (poželjno C1-C3alkil);
R<PRO>od ULM-g do ULM-i je H, opciono supstituisana C1-C6alkil ili opciono supstituisana aril (fenil ili naftil), heteroaril ili heterociklilna grupa izabrana iz grupe koja se sastoji od oksazola, izoksazola, tiazola, izotiazola, imidazola, diazola, oksimidazola, pirolidina, furana, diazola furan, tetrahidrofuran, tien, dihidrotien, tetrahidrotien, piridin, piperidin, piperazin, morfolin, kinolin, (svaki poželjno supstituisan sa C1-C3alkil grupom, poželjno metil ili halo grupa, poželjno F ili Cl), benzofuran, indol, indolizin, azaindolizin;
R<PRO1>i R<PRO2>od ULM-g do ULM-i su svaki nezavisno H, opciono supstituisana C1-C3alkilna grupa ili zajedno formiraju keto grupu;
svaki n od ULM-g do ULM-i je nezavisno 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6 (poželjno 0 ili 1); svaki m' od ULM-g do ULM-i je 0 ili 1; i
svaki n' od ULM-g do ULM-i je 0 ili 1;
naznačeno time što je svako od navedenih jedinjenja, poželjno na alkil, aril ili Het grupama, opciono povezano sa PTM grupom (uključujući ULM' grupu) preko linkera.
U alternativnim otelotvorenjima, R<3>' od ULM-g do ULM-i je -(CH2)n-Aryl, -(CH2CH2O)n-Aryl, -(CH2)n-HET ili -(CH2CH2O)n-HET,
pri čemu:
navedeni aril od ULM-g do ULM-i je fenil koji je opciono supstituisan sa jednim ili dva supstituenta, naznačeno time što je navedeni supstituenti poželjno izabrani iz -(CH2)nOH, C1-C6alkila koji je dalje opciono supstituisan sa CN, halo (do tri halo grupe), OH, -(CH2)nO(C1-C6)alkila, amina, mono- ili di-(C1-C6alkil) amina naznačeno time što je alkilna grupa na aminu opciono supstituisana sa 1 ili 2 hidroksilne grupe ili do tri halo (poželjno F, Cl) grupe, ili
navedena aril grupa od ULM-g do ULM-i je supstituisana sa -(CH2)nOH, -(CH2)n-O-(C1-C6)alkilom, -(CH2)n-O-(CH2)n-(C1-C6)alkilom, -(CH2)n-C(O)(C0-C6) alkilom, -(CH2)n-C(O)O(C0-C6)alkilom, -(CH2)n-OC(O)(C0-C6)alkilom, aminom, mono- ili di-(C1-C6alkil) aminom naznačeno time što je alkil grupa na aminu opciono supstituisana sa 1 ili 2 hidroksilne grupe ili do tri halo (poželjno F, Cl) grupe, CN, NO2, opciono supstituisana -(CH2)n-(V)m'-CH2)n-(V)m'-(C1-C6)alkil grupom, -(V)m'-(CH2CH2O)n-R<PEG>grupom gde je V O, S ili NR1', R1' e H ili C1-C3alkil grupa (poželjno H) i R<PEG>je H ili C1-C6alkil grupa koja je opciono supstituisana (uključujući opciono supstituisanje karboksilnom grupom), ili navedena arilna grupa ULM-g do ULM-i je opciono supstituisana heterocikličnim prstenom, uključujući heteroaril, izabranim iz grupe koju čine oksazol, izoksazol, tiazol, izotiazol, imidazol, diazol, oksiimidazol, pirol, pirolidin, furan, dihidrofuran, tetrahidrofuran, tien, dihidrotien, tetrahidrotien, piridin, piperidin, piperazin, morfolin, hinolin, benzofuran, indol, indolizin, azaindolizin (naznačeno time što je svaka od navedenih supstituisana po mogućstvu C1-C3alkil grupom, po mogućstvu metil, ili halogenom, po mogućstvu F ili Cl), ili grupa prema hemijskoj strukturi:
S<c>od ULM-g do ULM-i je CHR<SS>, NR<URE>ili O;
R<HET>od ULM-g do ULM-i je H, CN, NO2, halo (poželjno Cl ili F), opciono supstituisani C1-C6alkil (poželjno supstituisani sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halo grupe (npr. CF3), opciono supstituisani O(C1-C6alkil) (poželjno supstituisani sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halo grupe) ili opciono supstituisana acetilenska grupa -C≡C-Ragde je RaH ili a C1-C6alkil grupa (poželjno C1-C3alkil);
R<SS>od ULM-g do ULM-i je H, CN, NO2, halo (poželjno F ili Cl), opciono supstituisani C1-C6alkil (poželjno supstituisani sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halo grupe), opciono supstituisani O-(C1-C6alkil) (poželjno supstituisani sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halo grupe) ili opciono supstituisani halo -C(O)(C1-C6alkil) (poželjno supstituisan sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halo grupe);
R<URE>od ULM-g do ULM-i je H, C1-C6alkil (poželjno H ili C1-C3alkil) ili a -C(O)(C0-C6alkyl), od kojih je svaka grupa opciono supstituisana sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halogene, poželjno fluorne grupe, ili opciono supstituisanim heterociklilom, na primer piperom idin, morfolin, pirolidin, tetrahidrofuran, tetrahidrotiofen, piperidin, piperazin, od kojih je svaki opciono supstituisan;
Y<C>od ULM-G do ULM-i je N ili C-R<YC>, naznačen time što je R<YC>H, OH, CN, NO2, halo (poželjno Cl ili F), opciono supstituisani C1-C6alkil (poželjno supstituisani sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halo grupe (npr. CF3), opciono supstituisani O(C1-C6alkil) (poželjno supstituisani sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halo grupe) ili opciono supstituisana acetilenska grupa -C≡C-Ragde je RaH ili a C1-C6alkil grupa (poželjno C1-C3alkil);
R<PRO>od ULM-g do ULM-i je H, opciono supstituisana C1-C6alkil ili opciono supstituisana aril (fenil ili naftil), heteroaril ili heterociklilna grupa izabrana iz grupe koja se sastoji od oksazola, izoksazola, tiazola, izotiazola, imidazola, diazola, oksimidazola, pirolidina, furana, diazola furan, tetrahidrofuran, tien, dihidrotien, tetrahidrotien, piridin, piperidin, piperazin, morfolin, kinolin, (svaki poželjno supstituisan sa C1-C3alkil grupom, poželjno metil ili halo grupa, poželjno F ili Cl), benzofuran, indol, indolizin, azaindolizin;
R<PRO1>i R<PRO2>od ULM-g do ULM-i su svaki nezavisno H, opciono supstituisana C1-C3alkilna grupa ili zajedno formiraju keto grupu;
HET ULM-g do ULM-i je po mogućstvu oksazol, izoksazol, tiazol, izotiazol, imidazol, diazol, oksiimidazol, pirol, pirolidin, furan, dihidrofuran, tetrahidrofuran, tien, dihidrotien, tetrahidrotien, piridin, piperidin, piperazin, morfolin, hinolin (svaki po mogućstvu supstituisan C1-C3alkil grupom, po mogućstvu metil ili halogenom, po mogućstvu F ili Cl), benzofuran, indol, indolizin, azaindolizin, ili grupa prema hemijskoj strukturi:
S<c>od ULM-g do ULM-i je CHR<SS>, NR<URE>ili O;
R<HET>od ULM-g do ULM-i je H, CN, NO2, halo (poželjno Cl ili F), opciono supstituisani C1-C6alkil (poželjno supstituisani sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halo grupe (npr. CF3), opciono supstituisani O(C1-C6alkil) (poželjno supstituisani sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halo grupe) ili opciono supstituisana acetilenska grupa -C≡C-Ragde je RaH ili a C1-C6alkil grupa (poželjno C1-C3alkil);
R<SS>od ULM-g do ULM-i je H, CN, NO2, halo (poželjno F ili Cl), opciono supstituisani C1-C6alkil (poželjno supstituisani sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halo grupe), opciono supstituisani O-(C1-C6alkil) (poželjno supstituisani sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halo grupe) ili opciono supstituisani halo -C(O)(C1-C6alkil) (poželjno supstituisan sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halo grupe);
R<URE>od ULM-g do ULM-i je H, C1-C6alkil (poželjno H ili C1-C3alkil) ili a -C(O)(C0-C6alkyl), od kojih je svaka grupa opciono supstituisana sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halogene, poželjno fluorne grupe, ili opciono supstituisanim heterociklilom, na primer piperom idin, morfolin, pirolidin, tetrahidrofuran, tetrahidrotiofen, piperidin, piperazin, od kojih je svaki opciono supstituisan;
Y<C>od ULM-G do ULM-i je N ili C-R<YC>, naznačen time što je R<YC>H, OH, CN, NO2, halo (poželjno Cl ili F), opciono supstituisani C1-C6alkil (poželjno supstituisani sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halo grupe (npr. CF3), opciono supstituisani O(C1-C6alkil) (poželjno supstituisani sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halo grupe) ili opciono supstituisana acetilenska grupa -C≡C-Ragde je RaH ili a C1-C6alkil grupa (poželjno C1-C3alkil);
R<PRO>od ULM-g do ULM-i je H, opciono supstituisani C1-C6alkil ili opciono supstituisani aril, heteroaril ili heterociklilna grupa;
R<PRO1>i R<PRO2>od ULM-g do ULM-i su svaki nezavisno H, opciono supstituisana C1-C3alkilna grupa ili zajedno formiraju keto grupu;
svaki m' od ULM-g do ULM-i je nezavisno 0 ili 1; i
svaki n od ULM-g do ULM-i je nezavisno 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6 (poželjno 0 ili 1),
naznačeno time što je svako od navedenih jedinjenja, poželjno na navedene aril ili HET grupe, opciono povezano sa PTM grupom (uključujući ULM' grupu) preko grupe linkera.
U dodatnim otelotvorenjima, poželjna jedinjenja uključuju ona prema hemijskoj strukturi:
pri čemu:
R<1'>ULM-i je OH ili grupa koja se metaboliše kod pacijenta ili je podložna OH;
R<2'>ULM-i je -NH-CH2-aril-HET (poželjno, fenil povezan direktno sa metil supstituisanim tiazolom);
R<3'>ULM-i je -CHR<CR3'>-NH-C(O)-R<3P1>grupa ili -CHR<CR3'>-R<3P2>grupa ;
R<CR3'>ULM-i je C1-C4alkilna grupa, poželjno metil, izopropil ili terc-butil;
R<3P1>ULM-i je C1-C3alkil (poželjno metil), opciono supstituisana oksetanska grupa (poželjno metil supstituisana, -(CH2)nOCH3grupom gde je n 1 ili 2 (poželjno 2), ili
grupa (grupa etil etra je poželjno meta-supstituisana na fenilnom delu), morfolino grupa (povezana sa karbonilom na položaju 2 ili 3;
R<3P2>ULM-i je
grupa;
Aril ULM-i je fenil;
HET ULM-i je opciono supstituisani tiazol ili izotiazol; i R<HET>ULM-i je H ili halo grupa (poželjno H);
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, stereoizomer, solvat ili polimorf, naznačeno timeš to je svako od navedenih jedinjenja opciono povezano sa PTM grupom (uključujući ULM grupu) preko grupe povezivanja.
U određenim aspektima, bifunkcionalna jedinjenja koja sadrže E3 ubikvitin ligazu vezujući deo (ULM), naznačeno time što je ULM grupa prema hemijskoj strukturi:
pri čemu:
svaki R5i R6ULM-j je nezavisno OH, SH, ili opciono supstituisani alkil ili R5, R6, a atom ugljenika na koji su vezani formira karbonil;
R7ULM-j je H ili opciono supstituisani alkil;
E ULM-j je veza, C=O ili C=S;
G ULM-j je veza, opciono supstituisani alkil, -COOH ili C = J;
J ULM-j je O ili N-R8;
R8ULM-J je H, CN, opciono supstituisani alkil ili opciono supstituisani alkoksi;
M ULM-j je opciono supstituisani aril, opciono supstituisani heteroaril, opciono supstituisani heterociklil ili
svaki R9i R10ULM-j je nezavisno H; opciono supstituisani alkil, opciono supstituisani cikloalkil, opciono supstituisani hidroksialkil, opciono supstituisani tioalkil, ULM povezan disulfidnom vezom, opciono supstituisani heteroaril, ili haloalkil; ili R9, R10i ugljenikov atom za koji su vezani formiraju opciono supstituisani cikloalkil;
R11ULM-j je opciono supstituisani heterociklil, opciono supstituisani alkoksi, opciono supstituisani heteroaril, opciono supstituisani aril, ili
R12ULM-j je H ili opciono supstituisani alkil;
R13ULM-j je H, opciono supstituisani alkil, opciono supstituisani alkilkarbonil, opciono supstituisani (cikloalkil) alkilkarbonil, opciono supstituisani aralkilkarbonil, opciono supstituisani (heterociklil) karbonil, ili opciono supstituisani aralkil; opciono supstituisani (oksoalkil) karbamat,
svaki R14ULM-j je nezavisno H, haloalkil, opciono supstituisani cikloalkil, opciono supstituisani alkil, azetidin, opciono supstituisani alkoksi ili opciono supstituisani heterociklil; R15ULM-j je H, CN, opciono supstituisani heteroaril, haloalkil, opciono supstituisani aril, opciono supstituisani alkoksi ili opciono supstituisani heterociklil;
svaki R16ULM-j je nezavisno halo, opciono supstituisani alkil, opciono supstituisani haloalkil, opciono supstituisani CN ili opciono supstituisani haloalkoksi;
svaki R25ULM-j je nezavisno H ili opciono supstituisani alkil; ili se obe R25grupe mogu uzeti zajedno da bi se formirala okso ili opciono supstituisana cikloalkil grupa;
R23ULM-j je H ili OH;
Z1, Z2, Z3i Z4ULM-j su nezavisno C ili N; i
o ULM-j je 0, 1, 2, 3 ili 4, ili farmaceutski prihvatljiva so, stereoizomer, solvat ili njegov polimorf.
U određenim otelotvorenjima, gde je G ULM-j C=J, J je O, R7je H, svaki R14je H, a o je 0.
U određenim otelotvorenjima, gde je G ULM-J C=J, J je O, R7je H, svaki R14je H, R15je opciono supstituisan heteroaril, a o je 0. U drugim slučajevima, E je C=O, a M je
U određenim otelotvorenjima, gde je E ULM-j C=O, R11je opciono supstituisani heterociklil ili
U određenim otelotvorenjima, gde je E ULM-j C=O, M je
svaki R18je nezavisno H, halo, opciono supstituisani alkoksi, cijano, opciono supstituisani alkil, haloalkil ili haloalkoksi; a p je 0, 1, 2, 3 ili 4.
U određenim otelotvorenjima, svaki R14je nezavisno supstituisan sa najmanje jednim H, hidroksil, halo, amin, amid, alkoksi, alkil, haloalkil ili heterociklik.
U određenim otelotvorenjima, R15ULM-j je grupa prema
CN, ili haloalkil, i svaki R18je nezavisno H, halo, opciono supstituisani alkoksi, cijano, aminoalkil, amidoalkil, opciono supstituisani alkil, haloalkil ili haloalkoksi; a p je 0, 1, 2, 3 ili 4.
U određenim otelotvorenjima, ULM i tamo gde su prisutni, ULM', su svaki nezavisno grupa prema hemijskoj strukturi:
pri čemu:
G ULM-k je C=J, J je O;
R7ULM-k je H;
svaki R14ULM-k je nezavisno H, amid, alkil, npr. metil, opciono supstituisan sa jednom ili više C1-C6 alkil grupa ili C(O)NR'R";
R'and R“ su svaki nezavisno H, opciono supstituisani alkil ili cikloalkil;
o ULM-k je 0;
R15ULM-k je definisano kao gore za ULM-j;.
R16ULM-k je definisano kao gore za ULM-j; i
R17ULM-k je H, halo, opciono supstituisani cikloalkil, opciono supstituisani alkil, opciono supstituisani alkenil i haloalkil.
U drugim slučajevima, R17ULM-j je alkil (npr. metil) ili cikloalkil (npr. ciklopropil). U drugim otelotvorenjima, ULM i tamo gde su prisutni, ULM', su svaka nezavisno grupa prema hemijskoj strukturi:
pri čemu:
G ULM-k je C=J, J je O;
R7ULM-k je H;
svaki R14ULM-k je H;
o ULM-k je 0; i
R15ULM-k je izabran od grupe koja se sastoji od opciono supstituisanih:
gde je R30ULM-k H ili opciono supstituisani alkil.
U drugim otelotvorenjima, ULM i tamo gde su prisutni, ULM', su svaka nezavisno grupa prema hemijskoj strukturi:
i
R11ULM-k je izabran od grupe koja se sastoji od opciono supstituisanih:
U drugim otelotvorenjima, jedinjenje hemijske strukture,
q ULM-k je 1 ili 2;
R20ULM-k je H, opciono supstituisani alkil, opciono supstituisani cikloalkil, opciono supstituisani aril, ili
R21ULM-k je H ili opciono supstituisani alkil; i
R22ULM-k je H, opciono supstituisani alkil, opciono supstituisani alkoksi ili haloalkil.
U bilo kojem ovde opisanom otelotvorenju, R11ULM-j ili ULM-k je izabran iz grupe koja se sastoji od:
U određenim otelotvorenjima, R11ULM-j ili ULM-k je izabran iz grupe koja se sastoji od:
U određenim otelotvorenjima, ULM (ili kada je prisutan ULM') je grupa prema hemijskoj strukturi:
pri čemu:
X ULM-1 je O ili S;
Y ULM-1 je H, metil ili etil;
R17ULM-l je H, metil, etil, hidoksimetil ili ciklopropil;
M UlM-l je opciono supstituisani aril, opciono supstituisani heteroaril, ili
R9ULM-1 je H;
R10ULM-l je H, opciono supstituisani alkil, opciono supstituisani haloalkil, opciono supstituisani heteroaril, opciono supstituisani aril, opciono supstituisani hidroksialkil, opciono supstituisani tioalkil ili cikloalkil;
R11 ULM-l je opciono supstituisani heteroaromatski, opciono supstituisani heterociklil, opciono supstituisani aril ili
R12ULM-1 je H ili opciono supstituisani alkil; i
R13ULM-l je H, opciono supstituisani alkil, opciono supstituisani alkilkarbonil, opciono supstituisani (cikloalkil) alkilkarbonil, opciono supstituisani aralkilkarbonil, opciono supstituisani (heterociklil) karbonil, ili opciono supstituisani aralkil; opciono supstituisani (oksoalkil) karbamat.
U nekim otelotvorenjima, ULM i tamo gde su prisutni, ULM', su svaki nezavisno grupa prema hemijskoj strukturi:
pri čemu:
I ULM-m je H, metiol ili etil
R9ULM-m je H;
R10je izopropil, terc-butil, sek-butil, ciklopentil ili cikloheksil;
R11ULM-m je opciono supstituisani amid, opciono supstituisani izoindolinon, opciono supstituisani izooksazol, opciono supstituisani heterociklili.
U drugim poželjnim otelotvorenjima otkrića, ULM i tamo gde su prisutni, ULM', su svaka nezavisno grupa prema hemijskoj strukturi:
pri čemu:
R17ULM-n je metil, etil ili ciklopropil; i
R9, R10i R11ULM-n su gore definisani. U drugim slučajevima, R9je H; i
R10ULM-N je H, alkil ili cikloalkil (poželjno izopropil, terc-butil, sek-butil, ciklopentil ili cikloheksil).
U drugim poželjnim otelotvorenjima otkrića, ULM i tamo gde su prisutni, ULM', su svaka nezavisno grupa prema hemijskoj strukturi:
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu:
R1je H, opciono supstituisani alkil ili opciono supstituisani cikloalkil;
R3je opciono supstituisani 5-6-člani heteroaril;
W<5>je opciono supstituisani fenil, opciono supstituisani naftil ili opciono supstituisani piridinil;
jedan od R14ai R14bje H, opciono supstituisani alkil, opciono supstituisani haloalkil (npr. fluoroalkil), opciono supstituisani alkoksi, opciono supstituisani hidroksialkil, opciono supstituisani alkilamin, opciono supstituisani heteroalkil, opciono supstituisani alkilheterocikloalkil, opciono supstituisani alkoksi-heterocikloalkil, COR26, CONR27aR27b, NHCOR26ili NHCH3COR26; a drugi od R14ai R14bje H; ili R14a, R14b, zajedno sa ugljenikovim atomom za koji su vezani, formiraju opciono supstituisani cikloalkil, heterocikloalkil, spirocikloalkil ili spiroheterociklični prsten sa 3 do 6 članova, naznačeno time što spiroheterociklični prsten nije epoksid niti aziridin;
R15je CN, opciono supstituisani fluoroalkil,
(npr.,
supstituisani alkil ili fluoroalkil, ili
svaki R16je nezavisno izabran od halo, CN, opciono supstituisanog alkila, opciono supstituisanog haloalkila, hidroksi ili haloalkoksija;
svaki R26je nezavisno H, opciono supstituisani alkil ili NR27aR27b;
svaki R27ai R27bsu nezavisno H, opciono supstituisani alkil, opciono supstituisani cikloalkil, ili R27ai R27bzajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4-6 člani heterociklil;
svaki R28je nezavisno H, halogen, CN, opciono supstituisani aminoalkil, opciono supstituisani amidoalkil, opciono supstituisani haloalkil, opciono supstituisani alkil, opciono supstituisani alkilamin, opciono supstituisani hidroksialkil, amin, opciono supstituisani alkil, ili opciono supstituisani cikloalkil;
o je 0, 1 ili 2; i
p je 0, 1, 2, 3 ili 4.
U bilo kom od ovde opisanih aspekata ili otelotvorenja, ULM je formule:
pri čemu:
svaki od X<4>, X<5>i X<6>je izabran iz CH i N, naznačeno time što ne više od 2 je N;
R<1>je C1-6 alkil;
R<3>je isti kao što je definisano za ULM-o i ULM-p
jedan od R14ai R14bje H, opciono supstituisani alkil, opciono supstituisani haloalkil, opciono supstituisani alkoksi, opciono supstituisani hidroksialkil, opciono supstituisani alkilamin, opciono supstituisani heteroalkil, opciono supstituisani alkil-heterocikloalkil, opciono supstituisani alkoksi-heterocikloalkil, COR<26>, CONR<27a>R<27b>, NHCOR<26>ili NHCH3COR<26>; a drugi od R<14a>i R<14b>je H; ili R<14a>i R<14b>, zajedno sa ugljenikovim atomom za koji su vezani, formiraju opciono supstituisani cikloalkil, heterocikloalkil, spirocikloalkil ili spiroheterociklični prsten sa 3 do 5 članova, naznačeno time što spiroheterociklični prsten nije epoksid niti aziridin;
svaki R27ai R27bje nezavisno H C1-6alkil ili ciklolkil;
q je 1, 2, 3 ili 4;
R<15>je opciono zamenjen
ili CN;
R<28>je H, metil, CH2N(Me)2, CH2OH, CH2O(C1-4alkil), CH2NHC(O)C1-4alkil, NH2,
R<28C>je H, metil, fluoro ili hloro; i
R<16>je H, C1-4alkil, fluoro, hloro, CN ili C1-4alkoksi.
U bilo kom aspektu ili otelotvorenju opisanom ovde, R<14a>i R<14b>su izabrani iz: H, C1-
4alkila, C1-4cikloalkila, C1-4haloalkila, C1-4hidroksialkila, C1-4alkiloksialkila, C1-4alkila-NR27aR27bi CONR27aR27b.
U bilo kom aspektu ili otelotvorenju opisanom ovde, najmanje jedan od R<14a>i R<14b>je H (npr. i R<14a>i R<14b>su H).
U bilo kom aspektu ili otelotvorenju opisanom ovde, bar jedan od R<14a>i R<14b>je opciono supstituisani alkil, opciono supstituisani haloalkil, opciono supstituisani alkoksi, opciono supstituisani hidroksialkil, opciono supstituisani alkilamin, opciono supstituisani heteroalkil, opciono supstituisani alkil-heterocikloalkil, opciono supstituisani alkoksiheterocikloalkil, COR<26>, CONR<27a>R<27b>, NHCOR<26>ili NHCH3COR<26>. Alternativno, u bilo kom aspektu ili otelotvorenju opisanom ovde, jedan od R<14a>i R<14b>je opciono supstituisani alkil, opciono supstituisani haloalkil, opciono supstituisani alkoksi, opciono supstituisani hidroksialkil, opciono supstituisani alkilamin, opciono supstituisani heteroalkil, opciono supstituisani alkil-heterocikloalkil, opciono supstituisani alkoksi-heterocikloalkil, COR<26>, CONR<27a>R<27b>, NHCOR<26>ili NHCH3COR<26>; a drugi R<14a>i R<14b>je H.
U bilo kom aspektu ili otelotvorenju opisanoj ovde, R<14a>i R<14b>zajedno sa atomom
ugljenika na koji su vezani obli kuju gde je R<23>izabran od H, C1-4alkila, -C(O)C1-
4alkila.
U drugim poželjnim otelotvorenjima otkrića, ULM i tamo gde su prisutni, ULM', su svaka nezavisno grupa prema hemijskoj strukturi:
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu:
X je CH ili N; a
R1, R3, R14a, R14bi R15ULM-q i ULM-r su isti kao što je navedeno za ULM-o i ULM-p.
U bilo kom od ovde opisanih aspekata ili otelotvorenja, ULM (ili kada je prisutan, ULM') kako je ovde opisano može biti farmaceutski prihvatljiva so, enantiomer, dijastereomer, solvat ili njegov polimorf. Pored toga, u bilo kom od ovde opisanih aspekata ili otelotvorenja, ULM (ili kada je prisutan, ULM') kako je ovde opisano može biti povezan sa PTM direktno putem veze ili hemijskog linkera.
U određenim aspektima otkrića, ULM deo se bira iz grupe koja se sastoji od:
naznačeno time što VLM može biti povezan sa PTM putem linkera, kako je ovde opisano, na bilo kojoj odgovarajućoj lokaciji, uključujući, na primer, aril, heteroar, fenil ili fenil indolne grupe, opciono preko bilo koje odgovarajuće funkcionalne grupe, kao što su amin, ester, eter, alkil ili alkoksi.
Primeri linkera
U određenim otelotvorenjima, jedinjenja kako su ovde opisana uključuju sredstva za hemijsko spajanje PTM-a sa ULM, na primer, jedan ili više PTM-a hemijski povezanih ili povezanih sa jednim ili više ULM-a (npr. bar jedan od VLM) putem hemijskog linkera (L). U određenim otelotvorenjima, grupa linkera L je grupa koja sadrži jednu ili više kovalentno povezanih strukturnih jedinica (npr. -A<L>1...(A<L>)q- or -(A<L>)q-), naznačeno time što je A<L>1grupa povezana sa PTM, a (A<L>)qje grupa povezana sa ULM.
U bilo kom aspektu ili otelotvorenju opisanom ovde, veza (L) na ULM (npr. VLM, ILM, CLM ili MLM) veza ili spojnica je stabilna L-ULM veza. Na primer, u bilo kom aspektu ili otelotvorenju opisanom ovde, kada su linker (L) i ULM povezani preko heteroatoma, svaki naredni heteroatom, ako je prisutan, je odvojen sa najmanje jednim atomom ugljenika (npr. -CH2-), kao što je acetalna ili aminalna grupa. Kao dalji primer, u bilo kom aspektu ili otelotvorenju opisanom ovde, kada su linker (L) i ULM povezani preko heteroatoma, heteroatom nije deo estra.
U bilo kom aspektu ili otelotvorenju opisanom ovde, grupa linkera L je veza ili hemijska grupa linkera predstavljena formulom -(A<L>)q-, naznačeno time što je A hemijski deo, a q je ceo broj od 1-100, i naznačeno time što je L kovalentno vezan za PTM i ULM, i obezbeđuje dovoljno vezivanje PTM za proteinski cilj i ULM za E3 ubikvtin ligazu da bi se dobio rezultat ubikvitinacije ciljnog proteina.
U bilo kom aspektu ili otelotvorenju opisanom ovde, grupa linkera L je -(A<L>)q-, naznačeno time što:
(A<L>)qje grupa koja je povezana sa najmanje jednim od ULM (kao što je VLM), PTM deo ili njihovu kombinaciju;
q linkera je ceo broj veći ili jednak 1;
svaki A<L>je nezavisno izabran iz grupe koju čine: veza, CR<L1>R<L2>, O, S, SO, SO2, NR<L3>, SO2NR<L3>, SONR<L3>, CONR<L3>, NR<L3>CONR<L4>, NR<L3>SO2NR<L4>, CO, CR<L1>=CR<L2>, C≡C, SiR<L1>R<L2>, P(O)R<L1>, P(O)OR<L1>, NR<L3>C(=NCN)NR<L4>, NR<L3>C(=NCN), NR<L3>C(=CNO2)NR<L4>, C3-11cikloalkil opciono supstituisan sa 0-6 R<L1>i/ili R<L2>grupa, C5-13spirocikloalkil opciono supstituisan sa 0-9 R<L1>i/ili R<L2>grupa, C3-11heterociklični prsten opciono supstituisan sa 0-6 R<L1>i/ili R<L2>grupa, C5-13spiroheterociklični prsten opciono supstituisan sa 0-8 R<L1>i/ili R<L2>grupa, aril opciono supstituisan sa 0-6 R<L1>i/ili R<L2>grupa, heteroaril opciono supstituisan sa 0-6 R<L1>i/ili R<L2>grupa, naznačeno time što su R<L1>ili R<L2>, svaki nezavisno, opciono povezani sa drugim grupama da formiraju cikloalkilni i/ili heterociklični fragment, opciono supstituisan sa 0-4 R<L5>grupa; i
R<L1>, R<L2>, R<L3>, R<L4>i R<L5>su svi nezavisno, H, halo, C1-8alkil, OC1-8alkil, SC1-8alkil, NHC1-8alkil, N(C1-8alkyl)2, C3-11cikloalkil, aril, heteroaril, C3-11heterociklil, OC1-8cikloalkil, SC1-8cikloalkil, NHC1-8cikloalkil, N(C1-8cikloalkil)2, N(C1-8cikloalkil)(C1-8alkil), OH, NH2, SH, SO2C1-8alkil, P(O)(OC1-8alkil)(C1-8alkil), P(O)(OC1-8alkil)2, CC-C1-8alkil, CCH, CH=CH(C1-8alkil), C(C1-8alkil)=CH(C1-8alkil), C(C1-8alkil)=C(C1-8alkil)2, Si(OH)3, Si(C1-
8alkil)3, Si(OH)(C1-8alkil)2, COC1-8alkil, CO2H, halogen, CN, CF3, CHF2, CH2F, NO2, SF5, SO2NHC1-8alkil, SO2N(C1-8alkil)2, SONHC1-8alkil, SON(C1-8alkil)2, CONHC1-8alkil, CON(C1-8alkil)2, N(C1-8alkil)CONH(C1-8alkil), N(C1-8alkil)CON(C1-8alkil)2, NHCONH(C1-
8alkil), NHCON(C1-8alkil)2, NHCONH2, N(C1-8alkil)SO2NH(C1-8alkil), N(C1-8alkil) SO2N(C1-
8alkil)2, NH SO2NH(C1-8alkil), NH SO2N(C1-8alkil)2, NH SO2NH2.
U određenim otelotvorenjima, q linkera je ceo broj veći ili jednak 0. U određenim otelotvorenjima, q je ceo broj veći ili jednak 1.
U određenim otelotvorenjima, na primer, gde je q linkera veći od 2, (A<L>)qje grupa koja je sa A<L>1i (A<L>)qnaznačeno time što jedinice A<L>spajaju PTM sa ULM.
U određenim otelotvorenjima, na primer, gde je q linkera 2, (A<L>)qje grupa koja je povezana sa A<L>1i sa ULM ili PTM.
U određenim otelotvorenjima, na primer, gde je q linkera 1, struktura grupe linkera L je --A<L>1-, a A<L>1je grupa koja je povezana sa ULM delom i PTM delom.
U određenim otelotvorenjima, jedinica A<L>linkera (L) obuhvata grupu predstavljenu opštom strukturom izabranom iz grupe koja se sastoji od:
-NR(CH2)n-(niži alkil)-, -NR(CH2)n-(niži alkoksil)-, -NR(CH2)n-(niži alkoksil)-OCH2-, -NR(CH2)n-(niži alkoksil)-(niži alkil)-OCH2-, -NR(CH2)n-(cikloalkil)-(niži alkil)-OCH2-, -NR(CH2)n-(hetero cikloalkil)-, -NR(CH2CH2O)n-(niži alkil)-O-CH2-, -NR(CH2CH2O)n-(hetero cikloalkil)-O-CH2-, -NR(CH2CH2O)n-Aryl-O-CH2-, -NR(CH2CH2O)n-(hetero aril)-O-CH2-, -NR(CH2CH2O)n-(ciklo alkil)-O-(hetero aril)-O-CH2-, -NR(CH2CH2O)n-(ciklo alkil)-O-Aryl-O-CH2-, - NR(CH2CH2O)n-(niži alkil)-NH-Aryl-O-CH2-, -NR(CH2CH2O)n-(niži alkil)-O-Aryl-CH2, -NR(CH2CH2O)n-cikloalkil-O-Aril-, -NR(CH2CH2O)n-cikloalkil-O-(heteroaril)l-, -NR(CH2CH2)n-(cikloalkil)-O-(heterociklil)-CH2, -NR(CH2CH2)n-(heterociklil)-(heterociklil)-CH2, -N(R1R2)-(heterociklil)-CH2; gde
n linkera može biti od 0 do 10;
R linkera može biti H, niži alkil;
R1 i R2 linkera mogu formirati prsten sa spojnim N.
U određenim otelotvorenjima, jedinica A<L>linkera (L) obuhvata grupu predstavljenu opštom strukturom izabranom iz grupe koja se sastoji od:
-N(R)-(CH2)m-O(CH2)n-O(CH2)o-O(CH2)p-O(CH2)q-O(CH2)r-OCH2-,
-O-(CH2)m-O(CH2)n-O(CH2)o-O(CH2)p-O(CH2)q-O(CH2)r-OCH2-,
-O-(CH2)m-O(CH2)n-O(CH2)o-O(CH2)p-O(CH2)q-O(CH2)r-O-;
-N(R)-(CH2)m-O(CH2)n-O(CH2)o-O(CH2)p-O(CH2)q-O(CH2)r-O-;
-(CH2)m-O(CH2)n-O(CH2)o-O(CH2)p-O(CH2)q-O(CH2)r-O-;
pri čemu,
m, n, o, p, q i r linkera su nezavisno 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, , 17, 18, 19, 20;
kada je broj nula, nema N-O ili O-O veze
R linkera je H, metil i etil;
X linkera je H i F
gde svaki n i m linkera mogu samostalno biti 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6.
U bilo kom aspektu ili otelotvorenju opisanom ovde, jedinica A<L>linkera (L) je izabrana iz grupe koja se sastoji od:
naznačeno time što su svaki m i n nezavisno izabrani od 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6.
U bilo kom aspektu ili otelotvorenju opisanom ovde, jedinica A<L>linkera (L) je izabrana iz grupe koja se sastoji od:
naznačeno time što je svaki m, n, o, p, q, r i s nezavisno 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, ili 20.
U bilo kom aspektu ili otelotvorenju opisanom ovde, jedinica A<L>linkera (L) je izabrana iz grupe koja se sastoji od:
naznačeno time što su m, n, o, p, q, r, s i t nezavisno izabrani od celih brojeva 0, 1, 2, 3 i 4.
U bilo kom aspektu ili otelotvorenju opisanom ovde, linker (L) je izabran iz grupe koja se sastoji od:
U dodatnim otelotvorenjima, linker (L) sadrži strukturu izabranu između, ali ne ograničavajući se na strukturu prikazanu ispod, gde isprekidana linija označava tačku vezivanja za delove PTM ili ULM:
pri čemu:
W<L1>i W<L2>su svaki nezavisno odsutni, 4-8-člani prsten sa 0-4 heteroatoma, opciono supstituisan sa R<Q>, svaki R<Q>je nezavisno H, halo, OH, CN, CF3, opciono supstituisani linearni ili razgranati C1-C6alkil, opciono supstituisan linearni ili razgranati C1-C6alkoksi, ili 2 R<Q>grupe uzete zajedno sa atomom na koji su vezani, formiraju sistem prstenova sa 4-8 članova sadrži 0-4 heteroatoma;
Y<L1>je svaka nezavisna veza, C1-C6alkil (linearni, razgranati, opciono supstituisani) i opciono jedan ili više C atoma zamenjeni su O; ili C1-C6alkoksi (linearni, razgranati, opciono supstituisani);
n je 0-10; i
označava tačku vezivanja za PTM ili ULM delove.
U dodatnim otelotvorenjima, linker (L) sadrži strukturu izabranu između, ali ne ograničavajući se na strukturu prikazanu ispod, gde isprekidana linija označava tačku vezivanja za delove PTM ili ULM:
pri čemu:
W<L1>i W<L2>su svaki nezavisno odsutni, aril, heteroaril, ciklični, heterociklični, C1-6alkil naznačeno time što je opciono jedan ili više C atoma zamenjen sa O ili N, C1-6alkenil naznačeno time što je opciono jedan ili više C atoma zamenjen sa O, C1-6alkilnil naznačeno time što je opciono jedan ili više C atoma zamenjen sa O, biciklični, biaril, biheteroaril ili biheterociklični, svaki opciono supstituisan sa R<Q>, naznačeno time što je svaki R<Q>nezavisno H, halogen, OH, CN, CF3, hidroksil, nitro, C≡CH, C2-6alkenil, C2-6alkilnil, opciono supstituisani linearni ili razgranati C1–C6alkil, opciono supstituisani linearni ili razgranati C1-C6alkoksi, opciono supstituisani OC1-3alkil (npr. opciono supstituisan sa 1 ili više -F), OH, NH2, NR<Y1>R<Y2>, CN, ili 2 R<Q>grupe koje zajedno sa atomom za koji su vezane formiraju prstenasti sistem sa 4–8 članova koji sadrži 0–4 heteroatoma;
Y<L1>je svaka nezavisno veza, NR<YL1>, O, S, NR<YL2>, CR<YL1>R<YL2>, C=O, C=S, SO, SO2, C1-C6alkil (linearno, razgranato, opciono supstituisano) i opciono jedan ili više C atoma zamenjuje se sa O; C1-C6alkoksi (linearno, razgranato, opciono supstituisano);
Q<L>je 3-6 člani aliciklični ili aromatični prsten sa 0-4 heteroatoma, opciono premošćen, opciono supstituisan sa 0-6 R<Q>, svaki R<Q>je nezavisno H, linearni ili razgranati C1-6alkil opciono supstituisani sa 1 ili više halo ili C1-6alkoksil, ili 2 R<Q>grupe uzete zajedno sa atomom za koji su vezani, formiraju 3-8 članski prstenasti sistem koji sadrži 0-2);
RI<L1>, RI<L2>su svaki nezavisno H, OH, C1-6alkil (linearni, razgranati, opciono supstituisani sa 1 ili više halo, C1-6alkoksil), ili R<1>, R<2>zajedno sa atomom na koji su vezani, formiraju 3-8-člani prstenasti sistem koji sadrži 0-2 heteroatoma);
n je 0-10; i
označava tačku vezivanja za PTM ili ULM delove.
U dodatnim otelotvorenjima, grupa linkera je opciono supstituisani (poli)etilenglikol koji ima između 1 i oko 100 jedinica etilen glikola, između oko 1 i oko 50 jedinica etilen glikola, između 1 i oko 25 jedinica etilen glikola, između oko 1 i 10 jedinica etilen glikola, između 1 i oko 8 jedinica etilen glikola i 1 i 6 jedinica etilen glikola, između 2 i 4 etilen glikol jedinice ilen glikola, ili opciono supstituisane alkil grupe interdispergirane sa opciono supstituisanim, O, N, S, P ili Si atomima. U određenim otelotvorenjima, linker je supstituisan sa aril, fenil, benzil, alkil, alkilen ili heterociklilnom grupom. U određenim otelotvorenjima, linker može biti asimetričan ili simetričan.
U bilo kojem od otelotvorenjima ovde opisanih jedinjenja, grupa linkera može biti bilo koji odgovarajući deo kako je ovde opisano. U jednom otelotvorenju, linker je supstituisana ili nesupstituisana polietilen glikolna grupa veličine od oko 1 do oko 12 jedinica etilen glikola, između 1 i oko 10 jedinica etilen glikola, oko 2 oko 6 jedinica etilen glikola, između oko 2 i 5 jedinica etilen glikola, između oko 2 i 4 jedinice etilen glikola.
U drugom otelotvorenju, ovo otkriće je usmereno na jedinjenje koje sadrži PTM grupu kao što je gore opisano, koje se vezuje za ciljni protein ili polipeptid (npr. SMARCA2, BRAHMA ili BRM), koje je ubikvitinirano ubikvitin ligazom i hemijski je direktno povezano sa ULM grupom ili preko linkerskog dela L, ili PTM je alternativno ULM' grupa koja je takođe ubikvitirana deo vezivanja kvitin ligaze, koji može biti isti ili različit od ULM grupe kao što je gore opisano i direktno je povezan sa ULM grupom direktno ili preko linkerskog dela; i L je povezujući deo kao što je gore opisano koji može biti prisutan ili odsutan i koji hemijski (kovalentno) povezuje ULM sa PTM, ili farmaceutski prihvatljivu so, enantiomer, stereoizomer, solvat ili njegov polimorf.
U određenim otelotvorenjima, grupa linkera L je grupa koja obuhvata jednu ili više kovalentno povezanih strukturnih jedinica nezavisno izabranih iz grupe koja se sastoji od:
X je izabran iz grupe koja se sastoji od O, N, S, S(O) i SO2; n je ceo broj od 1 do 5; R<L1>je vodonik ili alkil,
je mono- ili biciklični aril ili heteroaril opciono supstituisan sa 1-3 supstituenta izabranih iz alkila, halogena, haloalkila, hidroksi, alkoksi ili cijana;
je mono- ili biciklični cikloalkil ili heterociklil opciono supstituisan sa 1-3 supstituenta izabranih iz alkil, halogena, haloalkila, hidroksi, alkoksi ili cijana; a fragment fenilnog prstena može biti opciono supstituisan sa 1, 2 ili 3 supstituenta izabrana iz groua koji se sastoji od alkil, halogena, haloksi, ciksi i ano. U jednom otelotvorenju, grupa linkera L sadrži do 10 kovalentno povezanih strukturnih jedinica, kao što je gore opisano.
Iako ULM grupa i PTM grupa mogu biti kovalentno povezane sa grupom linker kroz bilo koju grupu koja je odgovarajuća i stabilna hemiji linkera, u poželjnim aspektima sadašnje dislcosure, linker je nezavisno kovalentno vezan za ULM grupu i PTM grupu poželjno kroz amid, ester, tioester, keto grupu, karbamat (uretan), ugljen ili eter, svaki od njih koje grupe se mogu ubaciti bilo gde u ULM grupi i PTM grupi da bi se obezbedilo maksimalno vezivanje ULM grupe na ubikvitin ligazu i PTM grupe na metu protein koji treba razgraditi. (Primećeno je da u određenim aspektima gde je PTM grupa ULM grupa, ciljni protein za razgradnju može biti sama ubikvitin ligaza). U određenim poželjnim aspektima, linker može biti povezan sa opciono supstituisanom alkilnom, alkilenskom, alkenilnom ili alkinilnom grupom, arilnom grupom ili heterocicilnom grupom na ULM i/ili PTM grupama.
Primeri PTM-ova
U bilo kom aspektu ili otelotvorenju ovog otkrića, PTM grupa je deo, koji se vezuje za ciljne proteine, kao što su promenljiva/saharoza koja se ne fermentira (SWI/SNF), povezan sa matrikom, regulator hromatina zavisan od aktina, podfamilija A, član 2 (SMARCA2) ili BRM. Dakle, u bilo kom aspektu ili otelotvorenjima opisanim ovde, PTM grupa je bilo koji deo koji se specifično vezuje za SMARCA2 ili BRM protein (vezuje se za ciljni protein SMARCA2, BRAHMA ili BRM).
U određenim otelotvorenjima, jedinjenja kako su ovde opisana uključuju sredstvo za vezivanje ciljnog proteina, npr. Brm. Kao takvo, u određenim aspektima, otkriće obezbeđuje bifunkcionalno jedinjenje koje ima sredstvo za vezivanje Brm, i sredstvo za vezivanje VHL i sredstvo za hemijsko spajanje sredstava za vezivanje Brm sa sredstvima za vezivanje VHL.
Kompozicije opisane u nastavku ilustruju neke od članova delova vezanja ciljnih proteina malih molekula. Takvi delovi za vezivanje ciljnih proteina malih molekula takođe uključuju farmaceutski prihvatljive soli, enantiomere, solvate i polimorfe ovih kompozicija, kao i druge male molekule koji mogu ciljati SMARCA2. Ovi vezivni delovi su povezani sa vezujućim delom ubikvitin ligaze, poželjno preko linkera kako bi se predstavio ciljni protein (za koji je vezan proteinski ciljni deo) u blizini ubikvitin ligaze za ubikvitinaciju i razgradnju. Bilo koji protein (npr. SMARCA2, BRAHMA ili BRM), koji se može vezati za ciljni deo proteina ili PTM grupu i delovao ili je razgrađen ubikvitin ligazom, je ciljni protein prema ovom otkriću.
Ovo otkriće se može koristiti za lečenje brojnih stanja i/ili stanja bolesti; uključujući svako stanje bolesti i/ili stanje u kojem su proteini neregulisani (npr. nedostatak/mutacija SMARCA4) i gde bi pacijent imao koristi od razgradnje i/ili inhibicije proteina, kao što su SMARCA2, BRAHMA ili BRM.
U dodatnom aspektu, opis pruža terapijske kompozicije koje sadrže efektivnu količinu jedinjenja kako je ovde opisano ili njegov oblik soli, i farmaceutski prihvatljiv nosač, aditiv ili pomoćnu supstancu, i opciono dodatno bioaktivno sredstvo. Terapijske kompozicije moduliraju razgradnju i proteina kod pacijenta ili subjekta, na primer, životinje kao što je čovek, i mogu se koristiti za lečenje ili ublažavanje stanja bolesti ili stanja koja su modulirana kroz degradirani protein. U određenim otelotvorenjima, terapijske kompozicije kao što su ovde opisane mogu se koristiti za postizanje razgradnje proteina od interesa za lečenje ili ublažavanje bolesti, na primer, rak kao što je bar jedan od karcinoma povezanih sa SVI/SNF, rak povezan sa SMARCA4 mutacijom, rak sa nedostatkom SMARCA4 ili rak sa smanjenom ekspresijom SMARCA4 u odnosu na normalnu ekspresiju SMARCA4 (npr. ekspresija nemutiranog SMARCA4 ili SMARCA4 u slično smeštenoj nekanceroznoj ćeliji sa divljim tipom SMARCA4), uključujući rak pluća ili rak pluća nemalih ćelija. U bilo kom aspektu ili otelotvorenju opisanom ovde, bolest je najmanje jedan od karcinoma povezanih sa SWI/SNF, rak sa SMARCA4 mutacijom, rak sa nedostatkom SMARCA4ili njihova kombinacija, koji može biti rak pluća ili rak pluća ne-malih ćelija.
U određenim dodatnim otelotvorenjima, terapijske kompozicije kao što su ovde opisane mogu se koristiti za provođenje razgradnje proteina od interesa za lečenje ili ublažavanje bolesti, na primer, rak kao što je bar jedan od karcinoma povezanih sa SWI/SNF, rak povezan sa SMARCA2 ili karcinom sa normalnom ili prekomernom ekspresijom SMARCA2.
U alternativnim aspektima, ovo otkriće se odnosi na metod lečenja stanja bolesti ili ublažavanja simptoma bolesti ili stanja kod subjekta kome je to potrebno razgradnjom proteina ili polipeptida kroz koji se stanje ili stanje bolesti modulira obuhvata davanje navedenom pacijentu ili subjektu efektivne količine, npr. terapeutski efikasne količine, najmanje jednog jedinjenja kako je gore opisano, opciono u kombinaciji sa farmaceutski prihvatljivim nosačem aditiva, ili pomoćna supstanca, a po želji dodatna bioaktivno sredstvo, naznačeno time što je kompozicija efikasna za lečenje ili ublažavanje bolesti ili poremećaja ili simptoma kod subjekta. Metoda prema ovom otkriću može se koristiti za lečenje velikog broja stanja bolesti ili stanja uključujući rak, zahvaljujući primeni efektivnih količina najmanje jednog jedinjenja opisanog ovde. Stanje ili stanje bolesti može biti bolest uzrokovana mikrobnim agensom ili drugim egzogenim agensom kao što su virus, bakterije, gljivice, protozoe ili drugi mikrob ili može biti stanje bolesti, koje je uzrokovano prekomernom ekspresijom proteina, što dovodi do stanja bolesti i/ili stanja.
U drugom aspektu, opis pruža metode za identifikaciju efekata razgradnje proteina od interesa u biološkom sistemu koristeći jedinjenja prema ovom otkriću.
Termin „ciljni protein“ se koristi za opisivanje proteina ili polipeptida, koji je cilj za vezivanje za jedinjenje u skladu sa sadašnjim otkrićem i razgradnjom ubikvitin ligazom u nastavku. Takvi delovi za vezivanje ciljnih proteina malih molekula takođe uključuju farmaceutski prihvatljive soli, enantiomere, solvate i polimorfe ovih kompozicija, kao i druge male molekule koji mogu ciljati protein od interesa. Ovi vezivni delovi povezani su sa najmanje jednom ULM grupom (npr. VLM) kroz najmanje jednu grupu linkera L.
Proteinski cilj se može koristiti u ekranima koji identifikuju jedinjenja koja se vezuju za protein i inkorporacijom dela u jedinjenja prema sadašnjem otkriću, nivo aktivnosti proteina može biti promenjen za terapeutski krajnji rezultat.
Termin „proteinski ciljni deo“ ili PTM koristi se za opisivanje malog molekula koji se vezuje za ciljni protein ili drugi protein ili polipeptid od interesa, kao što su SMARCA2 ili BRM, i stavlja/predstavlja taj protein ili polipeptid u blizini ubikvitin ligaze tako da može doći do razgradnje proteina ili polipeptida ubikvitin ligazom. Kompozicije opisane u nastavku predstavljaju primer nekih članova ciljnih proteina malih molekula. Pronalazak je prikazan u priloženim skupu zahteva. Svi primeri, aspekti, otelotvorenja ili otkrića koja se ne odražavaju u priloženom skupu zahteva nisu u skladu sa pronalaskom i prisutni su samo u svrhu ilustracije.
Opciono, ovde opisani PTM može imati hemijsku strukturu predstavljenu:
pri čemu:
WPTM1je opciono supstituisani 5-6-člani aril ili heteroarilni prsten (npr. 5-6 člana aril ili heteroaril supstituisani sa 0, 1, 2 ili 3 supstituenta izabrani iz hidroksi, halogena, alkoksi, alkil, haloalkil, fosfata, amino, alkilamina, cijana ili njihove kombinacije);
WPTM2je opciono supstituisani 5-6-člani aril ili heteroarilni prsten (npr. 5-6 člani aril ili heteroaril supstituisani sa 0, 1, 2 ili 3 supstituenta izabrani iz hidroksi, halogena, alkoksi, alkil, haloalkil, amino, alkilamino i cijana);
WPTM3je opciono supstituisani 5-6-člani aril ili heteroarilni prsten (npr. 5-6 člani aril ili heteroaril supstituisani sa 0, 1, 2 ili 3 supstituenta izabrani iz hidroksi, halogena, alkoksi, alkil, haloalkil, amino, alkilamina i cijana), ili opciono supstituisani 4-9 alkil ili heterocikl, kao opciono supstituisani premošćeni bicikloalkil i premošćeni biheterocicilni prstenovi (npr.
4-9 cikloalkil ili heterociklil supstituisani sa 0, 1 ili 2 supstituenta izabrani iz hidroksi, halogena, alkoksi, alkil, haloalkil, amino, alkilamina i ciano);
WPTM5je odsutan (tako da je WPTM3povezan direktno sa L (linker) ili ULM) ili opciono supstituisani alkil, opciono supstituisani 5-6-člani cikloalkil, heterocikl, aril ili heteroarilni prsten (npr.5-6 člani cikloalkil, heterocikl, aril ili heteroaril supstituentirani sa 0, 1 ili 2 supstituenata izabranih iz hidroksi, halogen, alkoksi, alkil, haloalkil, amino, alkilamino i cijano); i
je tačka vezivanja za, linker, ULM grupu, ULM' grupu, VLM grupu, VLM’ grupu. WPTM5može biti piperidin.
WPTM1može da sadrži supstituciju fosfata.
PTM PROTAC-a je predstavljen formulom I, naznačeno time što je najmanje jedan od:
WPTM1je opciono supstituisani fenil ili piridil (npr. supstituisan kako je ovde opisano, kao što je fenil supstituisan hidroksi ili fosfatnim supstituentom sa ili bez dodatnog opcionog supstituenta izabranog kako je ovde opisano, na primer, supstituisano sa 0, 1, 2 ili 3 supstituenta izabranih iz hidroksi, halogena, alkoksi, alkil, amino, alkilamino, cijano ili njihova kombinacija);
WPTM2je opciono supstituisani 6-člani heteroarilni prsten (npr. supstituisan kako je ovde opisano, kao što je piridazin supstituisan amino grupom);
WPTM3je opciono supstituisani 5-6-člani heteroaril (npr. pirazol, pirol, imidazol, oksazol, oksadiazol ili triazol);
WPTM5 je onako kako je opisano u bilo kom aspektu ili otelotvorenju opisanom ovde (npr. WPTM5može biti odsutan ili piridinski prsten); ili
kombinacija istih.
Na primer, u PTM-u formule I, WPTM3može biti pirazol ili 6-8-člani heterociklil (npr. piperazin ili diazabiciklooktan).
PTM može imati hemijsku strukturu predstavljenu:
pri čemu:
WPTM1, WPTM2, i WPTM5su opisani u bilo kom drugom aspektu ili izvedbi opisanom ovde (npr. WPTM5može ili ne mora biti prisutan, tako da WPTM4 može biti direktno povezan sa L (linker) ili ULM);
WPTM4je opciono zamena 5-7 cikloalkil ili heterociklila (npr. 5-7 cikloalkil ili heterociklila supstituisanih sa 0, 1, 2 ili 3 supstituenta izabranih iz hidroksi, halogena, alkoksi, alkil, haloalkil, amino, alkilamina i cijana) koji je spojen sa WPTM2prstenom; i
je tačka vezivanja za, linker, ULM grupu, ULM' grupu, VLM grupu, VLM’ grupu. PTM se opciono može predstaviti formulom II, gde su WPTM1, WPTM2i WPTM5kako je ovde opisano, a WPTM4je piperazinski prsten. Na primer, WPTM2 iWPTM4Formule II uzeti zajedno mogu da čine dihidropirazino[2,3-e]piridazin kao što je prikazano:
PTM može imati hemijsku strukturu predstavljenu:
pri čemu:
WPTM1i WPTM2su opisani u bilo kom aspektu ili izvedbi opisanom ovde;
WPTM6i WPTM7su nezavisno opciono 4-7 člani cikloalkilni ili heterociklični prstenovi (npr. svaki je nezavisno 4-7 člani cikloalkilni ili heterociklični prsten supstituisan sa 0, 1 ili 2 supstituenta izabranih iz hidroksi, halogena, alkoksi, alkila, haloalkila, amino, alkilamino i ciano grupa), a prstenovi WPTM6i WPTM7su međusobno fuzionisani ili povezani preko spiro veze; i
je tačka vezivanja za, linker, ULM grupu, ULM' grupu, VLM grupu, VLM’ grupu. PTM ovog otkrića može imati hemijsku strukturu predstavljenu formulom III, naznačeno time što su WPTM1i WPTM2nezavisno izabrani kako je opisano u bilo kom aspektu ili otelotvorenju opisanom ovde (npr. WPTM1je fenil supstituentan hidroksi supstituentom sa ili bez dodatnog opcionog supstituenta izabranog kako je ovde opisano, WPTM2je piridazin supstituisan amino grupom), i WPTM6i WPTM7su spirociklični prstenasti sistem, na primer, spirociklički prsten izabran iz:
PTM se po želji može redstavljati:
naznačeno time što su WPTM1, WPTM2i WPTM5kako je opisano u bilo kom drugom aspektu ili otelotvorenju opisanom ovde.
PTM može opciono imati hemijsku strukturu predstavljenu formulom IV, naznačeno time što najmanje jedan od:
WPTM1je fenil supstituisan hidroksi ili fosfatnim supstituentom sa ili bez dodatnog opcionog supstituenta izabranog kako je ovde opisano;
WPTM2je piridazin supstituisan amino grupom;
WPTM5je odsutan, prsten pirazola ili piridinski prsten; ili
kombinacija istih.
PTM se po želji može predstavljati:
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu:
WPTM3je odsutan ili je opciono supstituisani 5-6-člani heteroaril, opciono supstituisani 4-9 cikloalkil ili heterocicilni prsten, opciono supstituisani premošćeni bicikloalkil i premošćeni biheterocicilni prsten; i
WPTM5je opciono supstituisani 5-6-člani heteroaril ili aril, na primer, piridin ili piridazin.
PTM se po želji može predstavljati:
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu:
WPTM3je opciono supstituisani 5-6-člani heteroaril, opciono supstituisani 4-9 cikloalkilni ili heterocicilni prsten, opciono supstituisani premošćeni bicikloalkil i premošćeni biheterocicilni prsten;
WPTM5je opciono supstituisani 5-6-člani heteroaril ili aril, npr. piridin ili piridazin; Rv je 0, 1, 2 ili 3 supstituenta nezavisno izabrana od hidroksi, halogena, alkoksi, alkil, haloalkil, fosfata, amino, alkilamina, cijana ili njihove kombinacije.
Hidroksilna grupa može opciono biti modifikovana fosfatnom grupom (tj. fosfoesterskom grupom).
PTM može opciono imati hemijsku strukturu predstavljenu:
WPTM1i WPTM2su opisani u bilo kom drugom aspektu ili izvedbi opisanom ovde (npr. WPTM5može ili ne mora biti prisutan, tako da WPTM4 može biti direktno povezan sa L (linker) ili ULM);
WPTM3je opciono supstituisani 5-7 cikloalkil ili heterociklil (npr. 5-7 cikloalkil ili heterociklil supstituisani sa 0, 1, 2 ili 3 supstituenta izabrani iz hidroksi, halogena, alkoksi, alkil, haloalkil, amino, alkilamino i cijano) koji je spojen sa WPTM2prstenom; WPTM4je opciono supstituisani 5-7-člani aril ili heteroarilni prsten (npr. 5-6 člani aril ili heteroaril supstituisan sa 0, 1, 2 ili 3 supstituenta izabrani iz hidroksi, halogena, alkoksi, alkil, haloalkil, amino, alkilamino i cijano), ili opciono supstituisani 4-9 cikloalkil ili heterociklil, kao što je opciono supstituisani premošćeni bicikloalkil i premošteni biheterocicilni prstenovi (npr. 4-9 cikloalkil ili heterociklil supstituisani sa 0, 1 ili 2 supstituenta izabranih iz hidroksi, halogena, alkoksi, alkil, haloalkil, amino, alkilamina i cijana);
WPTM5je odsutan (tako da je WPTM3povezan direktno sa L (linker) ili ULM) ili opciono supstituisani alkil, opciono supstituisani 5-6-člani cikloalkil, heterocikl, aril ili heteroarilni prsten (npr. 5-6 člani cikloalkil, heterocikl, aril ili heteroaril supstituentirani sa 0, 1 ili 2 supstituenata izabranih iz hidroksi, halogen, alkoksi, alkil, haloalkil, amino, alkilamino i cijano), na primer, opciono supstituisani prsten pirazola ili piridinski prsten; i
je tačka vezivanja za, linker, ULM grupu, ULM' grupu, VLM grupu, VLM’ grupu. PTM se po želji može izabrati između:
PTM se po želji može izabrati između:
PTM se po želji može izabrati iz grupe koja se sastoji od:
Ovde opisane kompozicije predstavljaju primer nekih članova ovih tipova delova za vezivanje ciljnih proteina malih molekula. Takvi delovi za vezivanje ciljnih proteina malih molekula takođe uključuju farmaceutski prihvatljive soli, enantiomere, solvate i polimorfe ovih kompozicija, kao i druge male molekule koji mogu ciljati protein od interesa.
Terapeutske kompozicije
Farmaceutske kompozicije koje sadrže kombinacije efektivne količine najmanje jednog bifunkcionalnog jedinjenja kako je ovde opisano, i jednog ili više jedinjenja opisanih ovde, sve u efektivnim količinama, u kombinaciji sa farmaceutski efikasnom količinom nosača, aditiva ili pomoćne supstance, predstavljaju dalji aspekt ovog otkrića.
Ovo otkriće uključuje, gde je primenljivo, kompozicije koje sadrže farmaceutski prihvatljive soli, posebno soli za dodavanje kiselina ili baza jedinjenja kako je ovde opisano. Kiseline koje se koriste za pripremu farmaceutski prihvatljivih soli za dodatak kiseline gore pomenutih baznih jedinjenja korisnih prema ovom aspektu su one koje formiraju netoksične soli za dodavanje kiselina, tj. soli koje sadrže farmakološki prihvatljive anione, kao što su hidrohlorid, hidrobromid, hidrojodid, nitrat, sulfat, bisulfat, fosfat, kiseli fosfat, acetat, laktat, citrat, tartrat, bitartrat, sukcinat, maleat, fumarat, glukonat, saharat, benzoat, metanesulfonat, etanesulfonat, benzensulfonat, p- soli toluensulfonata i pamoata [tj. 1,1'-metilen-bis-(2-hidroksi-3 naftoat)], između brojnih drugih.
Farmaceutski prihvatljive soli za dodavanje baze takođe se mogu koristiti za proizvodnju farmaceutski prihvatljivih oblika soli jedinjenja ili derivata prema ovom otkriću. Hemijske baze koje se mogu koristiti kao reagensi za pripremu farmaceutski prihvatljivih baznih soli prisutnih jedinjenja koja su kisele prirode su one koje formiraju netoksične bazne soli sa takvim jedinjenjima. Takve netoksične bazne soli uključuju, ali nisu ograničene na one izvedene iz takvih farmakološki prihvatljivih kationa kao što su kationi alkalnih metala (npr. Kalijum i natrijum) i kationi alkalnih metala (npr. kalcijum, cink i magnezijum), amonijum ili rastvorljive soli amina rastvorljive u vodi kao što su N-metilglukamin-(meglumin), i niži alkanolamonijum i druge bazne soli farmaceutski prihvatljivih organskih amina, između ostalog.
Jedinjenja koja su ovde opisana mogu se, u skladu sa otkrićem, davati u pojedinačnim ili podeljenim dozama oralnim, parenteralnim ili lokalnim putem. Primena aktivnog jedinjenja može se kretati od kontinuirane (intravensko kapanje) do nekoliko oralnih primena dnevno (na primer, Q.I.D.) i može uključivati oralnu, lokalnu, parenteralnu, intramuskularnu, intravensku, subkutanu, transdermalnu (što može uključivati sredstvo za poboljšanje penetracije), bukalnu, sublingvalnu i supozitorijsku primenu, između ostalih načina primene. Enterično obložene oralne tablete se takođe mogu koristiti za poboljšanje bioraspoloživosti jedinjenja iz oralnog načina primene. Najefikasniji oblik doziranja zavisiće od farmakokinetike određenog izabranog agensa, kao i od težine bolesti kod pacijenta. Takođe se može koristiti primena jedinjenja prema sadašnjem otkriću kao sprejevi, magle ili aerosoli za intranazalnu, intratrahealnu ili plućnu primenu. Ovo otkriće je stoga takođe usmereno na farmaceutske kompozicije koje sadrže efektivnu količinu jedinjenja kako je ovde opisano, opciono u kombinaciji sa farmaceutski prihvatljivim nosačem, aditivom ili pomoćnom supstancom. Jedinjenja prema ovom otkriću mogu se primenjivati u oblicima trenutnog oslobađanja, srednjeg oslobađanja ili trajnog ili kontrolisanog oslobađanja. Oblici sa održivim ili kontrolisanim oslobađanjem poželjno se daju oralno, ali i u supozitorijima i transdermalnim ili drugim lokalnim oblicima. Intramuskularne injekcije u liposomskom obliku takođe se mogu koristiti za kontrolu ili održavanje oslobađanja jedinjenja na mestu ubrizgavanja.
Kompozicije kako su ovde opisane mogu se formulisati na konvencionalan način koristeći jedan ili više farmaceutski prihvatljivih nosača i takođe se mogu primenjivati u formulacijama sa kontrolisanim oslobađanjem. Farmaceutski prihvatljivi nosači koji se mogu koristiti u ovim farmaceutskim kompozicijama uključuju, ali nisu ograničeni na, izmenjivače jona, glinicu, aluminijum stearat, lecitin, serumske proteine, kao što su humani serumski albumin, puferske supstance kao što su fosfati, glicin, sorbinska kiselina, kalijum sorbat, delimične gliceridne smeše zasićenih biljnih masnih kiselina, voda, soli ili elektroliti, kao što su prolamin sulfat, dinatrijum hidrogen fosfat, kalijum hidrogen fosfat, natrijum hlorid, soli cinka, koloidni silicijum dioksid, magnezijum trisilikat, polivinil pirolidon, supstance na bazi celuloze, polietilen glikol, natrijum karboksimetilceluloza, poliakrilati, voskovi, polietilenpolioksipropilenski blok polimeri, polietilen glikol i vunena mast.
Kompozicije kako su ovde opisane mogu se davati oralno, parenteralno, inhalacionim sprejom, lokalno, rektalno, nazalno, bukalno, vaginalno ili preko implantiranog rezervoara. Izraz „parenteralni“ kako se ovde koristi uključuje subkutane, intravenske, intramuskularne, intraartikularne, intrasinovijalne, intrasternalne, intratekalne, intrahepatične, intralezijske i intrakranijalne tehnike injekcije ili infuzije. Poželjno je da se kompozicije daju oralno, intraperitonealno ili intravenozno.
Sterilni injekcioni oblici kompozicija kao što je ovde opisano mogu biti vodena ili uljna suspenzija. Ove suspenzije se mogu formulisati u skladu sa tehnikama poznatim u oblasti koristeći odgovarajuća sredstva za raspršivanje ili vlaženje i sredstva za suspenziju. Sterilna injekciona priprema takođe može biti sterilni injekcioni rastvor ili suspenzija u netoksičnom, parenteralno prihvatljivom razređivaču ili rastvaraču, na primer kao rastvor u 1, 3-butandiolu. Među prihvatljivim nosačima i rastvaračima koji se mogu koristiti su voda, Ringerov rastvor i izotonični rastvor natrijum hlorida. Pored toga, sterilna fiksna ulja se mogu uobičajeno koristiti kao rastvarač ili suspendujući medijum. U tu svrhu se može koristiti bilo koje blago masno ulje, uključujući sintetičke mono- ili digliceride. Masne kiseline, kao što su oleinska kiselina i njeni derivati glicerida, korisne su u pripremi injekcija, kao i prirodna farmaceutski prihvatljiva ulja, kao što su maslinovo ulje ili ricinusovo ulje, posebno u njihovim polioksietiliranim verzijama. Ovi uljni rastvori ili suspenzije takođe mogu sadržati alkoholni razblaživač ili disperzant dugog lanca, kao što je Ph Helv ili sličan alkohol.
Farmaceutske kompozicije kako su ovde opisane mogu se oralno primenjivati u bilo kom oralno prihvatljivom obliku doziranja, uključujući, ali ne ograničavajući se na, kapsule, tablete, vodene suspenzije ili rastvore. U slučaju tableta za oralnu upotrebu, nosači koji se obično koriste uključuju laktozu i kukuruzni skrob. Obično se dodaju i sredstva za podmazivanje, kao što je magnezijum stearat. Za oralnu primenu u obliku kapsula, korisni razblaživači uključuju laktozu i sušeni kukuruzni skrob. Kada su za oralnu upotrebu potrebne vodene suspenzije, aktivni sastojak se kombinuje sa emulgatornim i suspendujućim agensima. Po želji se mogu dodati i određena sredstva za zaslađivanje, aromatizaciju ili bojenje.
Alternativno, farmaceutske kompozicije kako su ovde opisane mogu se davati u obliku supozitorija za rektalnu primenu. One se mogu pripremiti mešanjem agensa sa odgovarajućim neiritirajućim pomoćnim sredstvom koje je čvrsto na sobnoj temperaturi, ali tečno na rektalnoj temperaturi i stoga će se otopiti u rektumu kako bi oslobodilo lek. Takvi materijali uključuju kakao maslac, pčelinji vosak i polietilen glikole.
Farmaceutske kompozicije kao što je ovde opisano takođe se mogu primenjivati lokalno. Pogodne topikalne formulacije se lako pripremaju za svako od ovih područja ili organa. Lokalna primena za donji crevni trakt može se izvršiti u formulaciji rektalnih supozitorija (vidi gore) ili u odgovarajućoj formulaciji klistira. Takođe se mogu koristiti aktuelno prihvatljivi transdermalni flasteri.
Za lokalnu primenu, farmaceutske kompozicije se mogu formulisati u odgovarajućoj masti koja sadrži aktivnu komponentu suspendovanu ili rastvorenu u jednom ili više nosača. Nosači za lokalnu primenu jedinjenja ovog otkrića uključuju, ali nisu ograničeni na, mineralno ulje, tečni vazelin, beli vazelin, propilen glikol, polioksietilen, polioksipropilen jedinjenje, emulgirajući vosak i vodu. U određenim poželjnim aspektima otkrića, jedinjenja se mogu obložiti na stent koji treba hirurški implantirati pacijentu kako bi se inhibirala ili smanjila verovatnoća pojave okluzije u stentu kod pacijenta.
Alternativno, farmaceutske kompozicije se mogu formulisati u odgovarajućem losionu ili kremi koja sadrži aktivne komponente suspendovane ili rastvorene u jednom ili više farmaceutski prihvatljivih nosača. Pogodni nosači uključuju, ali nisu ograničeni na, mineralno ulje, sorbitan monostearat, polisorbat 60, vosak cetil estera, cetearil alkohol, 2-oktildodekanol, benzil alkohol i vodu.
Za oftalmološku upotrebu, farmaceutske kompozicije se mogu formulisati kao mikronizovane suspenzije u izotoničnom sterilnom fiziološkom rastvoru prilagođenom pH, ili, poželjno, kao rastvori u izotoničnom sterilnom fiziološkom rastvoru prilagođenom pH, bilo sa našim bez konzervansa kao što je benzilalkonijum hlorid. Alternativno, za oftalmološku upotrebu, farmaceutske kompozicije se mogu formulisati u masti kao što je vazelin.
Farmaceutske kompozicije kao što je ovde opisano takođe se mogu primenjivati nosnim aerosolom ili inhalacijom. Takve kompozicije se pripremaju prema tehnikama poznatim u umetnosti farmaceutske formulacije i mogu se pripremiti kao rastvori u fiziološkom rastvoru, koristeći benzil alkohol ili druge pogodne konzervanse, promotore apsorpcije za poboljšanje bioraspoloživosti, fluorougljenike i/ili druga konvencionalna sredstva za rastvaranje ili disperziju.
Količina jedinjenja u farmaceutskoj formulaciji opisanoj ovde koja se može kombinovati sa pomoćnim materijama radi dobijanja pojedinačnog oblika doze varira u zavisnosti od domaćina, bolesti koja se leči i konkretnog načina primene. Poželjno je da kompozicije budu formulisane tako da sadrže između oko 0,05 miligrama do oko 750 miligrama ili više, poželjnije oko 1 miligram do oko 600 miligrama, a još poželjnije oko 10 miligrama do oko 500 miligrama aktivnog sastojka, samostalno ili u kombinaciji sa najmanje jednim drugim jedinjenjem prema ovom otkriću.
Takođe treba razumeti da će specifična doza i režim lečenja za bilo kog pojedinačnog pacijenta zavisiti od niza faktora, uključujući aktivnost konkretnog jedinjenja koje se primenjuje, starost, telesnu težinu, opšte zdravstveno stanje, pol, ishranu, vreme primene, brzinu izlučivanja, kombinaciju lekova, procenu lekara koji sprovodi lečenje, kao i težinu konkretne bolesti ili stanja koje se leči.
Pacijent ili subjekt kome je potrebna terapija korišćenjem jedinjenja prema ovde opisanim metodama može se lečiti davanjem pacijentu (subjektu) efektivne količine jedinjenja prema ovom otkriću, uključujući farmaceutski prihvatljive soli, solvate ili polimorfe, po želji u farmaceutski prihvatljivom nosaču ili razređivaču, bilo samostalno, ili u kombinaciji sa drugim poznatim terapijskim agensima kako su ovde drugačije identifikovani.
Ova jedinjenja se mogu primenjivati bilo kojim odgovarajućim putem, na primer, oralno, parenteralno, intravenozno, intradermalno, subkutano ili lokalno, uključujući transdermalno, u tečnom, kremastom, gelu ili čvrstom obliku, ili u obliku aerosola.
Aktivno jedinjenje je uključeno u farmaceutski prihvatljiv nosač ili razblaživač u količini dovoljnoj da pacijentu isporuči terapeutski efikasnu količinu za željenu indikaciju, bez izazivanja ozbiljnih toksičnih efekata kod lečenog pacijenta. Poželjna doza aktivnog jedinjenja za sve ovde pomenute uslove je u rasponu od oko 10 ng/kg do 300 mg/kg, poželjno 0,1 do 100 mg/kg dnevno, općenito 0,5 do oko 25 mg po kilogramu telesne težine primaoca/pacijenta dnevno. Tipična topikalna doza kreće se od 0,01-5% težina/težina u odgovarajućem nosaču.
Jedinjenje se prikladno primenjuje u bilo kom odgovarajućem obliku jedinice doziranja, uključujući, ali ne ograničavajući se na onu koja sadrži manje od 1 mg, 1 mg do 3000 mg, poželjno 5 do 500 mg aktivnog sastojka po jedinici doznog oblika. Oralna doza od oko 25-250 mg je često pogodna.
Aktivni sastojak se poželjno primenjuje da bi se postigle vršne koncentracije aktivnog jedinjenja u plazmi od oko 0,00001-30 mM, poželjno oko 0,1-30 µM. Ovo se može postići, na primer, intravenskom injekcijom rastvora ili formulacije aktivnog sastojka, opciono u fiziološkom rastvoru ili vodenom medijumu ili primenom kao bolus aktivnog sastojka. Oralna primena je takođe pogodna za stvaranje efikasnih koncentracija aktivnog agensa u plazmi.
Koncentracija aktivnog jedinjenja u sastavu leka zavisiće od apsorpcije, distribucije, inaktivacije i brzine izlučivanja leka, kao i od drugih faktora poznatih onima koji su veštine u ovoj oblasti. Treba napomenuti da će vrednosti doze takođe varirati u zavisnosti od težine stanja koje treba ublažiti. Dalje treba razumeti da za bilo koji određeni subjekt specifični režimi doziranja treba prilagođavati tokom vremena u skladu sa individualnim potrebama i profesionalnom prosudbom osobe koja primenjuje ili nadgleda primenu kompozicija, te da su ovde navedeni opsezi koncentracija samo primerni i nemaju za cilj ograničavanje obim ili prakse zahtevane kompozicije. Aktivni sastojak se može primeniti odjednom ili se može podeliti u niz manjih doza koje se daju u različitim vremenskim intervalima.
Oralne kompozicije obično uključuju inertni razblaživač ili jestivi nosač. Mogu biti zatvorene u želatinske kapsule ili komprimovane u tablete. U svrhu oralne terapijske primene, aktivno jedinjenje ili njegov derivat predleka mogu se ugraditi sa pomoćnim supstancama i koristiti u obliku tableta, trocha ili kapsula. Farmaceutski kompatibilna vezivna sredstva i/ili pomoćni materijali mogu biti uključeni kao deo kompozicije.
Tablete, pilule, kapsule, troše i slično mogu sadržati bilo koji od sledećih sastojaka ili jedinjenja slične prirode: vezivo kao što je mikrokristalna celuloza, gumeni tragakant ili želatina; pomoćno sredstvo kao što je skrob ili laktoza, sredstvo za disperziju kao što je alginska kiselina, Primogel ili kukuruzni skrob; mazivo kao što je magnezijum stearat ili steroti; glidant kao što je koloidni silicijum dioksid; sredstvo za poboljšanje kao što su saharoza ili saharin; ili sredstvo za aromu kao što su pepermint, metil salicilat ili aroma narandže. Kada je oblik jedinice za doziranje kapsula, može da sadrži, pored materijala gore navedenog tipa, tečni nosač kao što je masno ulje. Pored toga, oblici jedinice za doziranje mogu da sadrže razne druge materijale koji modifikuju fizički oblik jedinice doziranja, na primer, premaze šećera, šelaka ili enteričkih sredstava.
Aktivno jedinjenje ili njegova farmaceutski prihvatljiva sol može se davati kao komponenta eliksira, suspenzije, sirupa, vafla, žvakaće gume ili slično. Sirup može sadržati, pored aktivnih jedinjenja, saharozu kao sredstvo za zaslađivanje i određene konzervanse, boje i boje i arome.
Aktivno jedinjenje ili njegove farmaceutski prihvatljive soli takođe se mogu mešati sa drugim aktivnim materijalima koji ne narušavaju željeno delovanje, ili sa materijalima koji dopunjuju željeno delovanje, kao što su sredstva protiv raka, uključujući pembrolizumab, između ostalog. U određenim poželjnim aspektima otkrića, jedno ili više jedinjenja prema ovom otkriću primenjuju se zajedno sa drugim bioaktivnim agensom, kao što je sredstvo protiv raka ili sredstvo za lečenje, uključujući antibiotik, kako je ovde drugačije opisano.
Rastvori ili suspenzije koje se koriste za parenteralnu, intradermalnu, potkožnu ili lokalnu primenu mogu uključivati sledeće komponente: sterilni razblaživač kao što je voda za injekcije, fiziološki rastvor, fiksna ulja, polietilen glikoli, glicerin, propilen glikol ili drugi sintetički rastvarači; antibakterijska sredstva kao što su benzil alkohol ili metil parabeni; antioksidanti kao što su askorbinska kiselina ili natrijum bisulfit; heletaminski agensi kao što su etilendiamin sirćetna kiselina; puferi kao što su acetati, citrati ili fosfati i agensi za podešavanje toničnosti kao što su natrijum hlorid ili dekstroza. Roditeljski preparat može biti zatvoren u ampule, špriceve za jednokratnu upotrebu ili bočice sa više doza od stakla ili plastike.
Ako se primenjuje intravenozno, poželjni nosači su fiziološki rastvor ili fiziološki rastvor puferiran fosfatom (PBS).
U jednom otelotvorenju, aktivna jedinjenja se pripremaju sa nosačima koji će zaštititi jedinjenje od brze eliminacije iz tela, kao što je formulacija sa kontrolisanim oslobađanjem, uključujući implantate i mikrokapsulirane sisteme isporuke. Mogu se koristiti biorazgradivi, biokompatibilni polimeri, kao što su etilen vinil acetat, polianhidridi, poliglikolna kiselina, kolagen, poliortoestri i polimlečna kiselina. Metode pripreme takvih formulacija biće očigledne onima koji su vešti u ovoj oblasti.
Liposomske suspenzije takođe mogu biti farmaceutski prihvatljivi nosači. Oni se mogu pripremiti prema metodama poznatim onima koji su vešti u ovoj oblasti, na primer, kako je opisano u američkom pat. br. 4,522,811. Na primer, formulacije liposoma mogu se pripremiti rastvaranjem odgovarajućih lipida (kao što su stearoil fosfatidil etanolamin, stearoil fosfatidil holin, arahadoil fosfatidil holin i holesterol) u neorganskom rastvaraču koji se zatim isparava, ostavljajući iza sebe tanak film osušenog lipida na površini posude. Zatim se u posudu unosi vodeni rastvor aktivnog jedinjenja. Kontejner se zatim ručno okreće kako bi se oslobodio lipidni materijal sa strana posude i raspršili lipidni agregati, čime se formira liposomska suspenzija.
Terapija
Terapeutske kompozicije koje sadrže efektivnu količinu jedinjenja kako je ovde opisano ili njegov oblik soli i farmaceutski prihvatljiv nosač su terapeutske korisnosti. Terapeutske kompozicije moduliraju razgradnju proteina kod pacijenta ili subjekta, na primer, životinje kao što je čovek, i mogu se koristiti za lečenje ili ublažavanje stanja bolesti ili stanja koja se moduliraju kroz razgrađeni protein.
Izrazi „lečenje“, „tretiranje“ i „tretman“ itd., kako se ovde koriste, odnose se na svaku akciju koja pruža korist pacijentu za koju se sadašnja jedinjenja mogu primeniti, uključujući lečenje bilo kog stanja bolesti ili stanja koje je modulirano kroz protein za koji se vezuju sadašnja jedinjenja. Stanja ili stanja bolesti, uključujući rak kao što je rak pluća, uključujući rak pluća sa malim ćelijama, koji se mogu lečiti upotrebom jedinjenja u skladu sa ovim otkrićem navedeni su gore.
Opis otkriva terapijske kompozicije kako je ovde opisano za uticaj na razgradnju proteina od interesa za upotrebu u lečenju ili ublažavanju bolesti, na primer, raka. U određenim dodatnim otelotvorenjima, bolest je multipli mijelom. Kao takav, u drugom aspektu, opis pruža metodu ubikvitinizacije/razgradnje ciljnog proteina u ćeliji. Tretman može uključivati primenu bifunkcionalnog jedinjenja kako je ovde opisano koje sadrži, na primer, ULM i PTM, poželjno povezane preko linkerskog dela, kako je ovde drugačije opisano, gde je ULM spojen sa PTM i gde ULM prepoznaje protein ubikvitinskog puta (npr. Ubikvitin ligaza, kao što je VHL E3 ubikvitin ligaza) i PTM prepoznaje ciljni protein tako da će doći do razgradnje ciljnog proteina kada se ciljni protein postavi u blizini ubikvitin ligaze, što rezultira razgradacijama/inhibicijom efekti ciljnog proteina i kontrola nivoa proteina. Kontrola nivoa proteina koju pružaju jedinjenja navedena u priloženom skupu tvrdnji korisna je za lečenje stanja ili stanja bolesti, koje se modulira kroz ciljni protein snižavanjem nivoa tog proteina u ćeliji, npr. Ćeliji pacijenta. Tretman može uključivati davanje efektivne količine jedinjenja kako je ovde opisano, opciono uključujući faramaceutički prihvatljivu pomoćnu supstancu, nosač, adjuvans, drugo bioaktivno sredstvo ili njihovu kombinaciju.
Takođe su otkrivena jedinjenja za lečenje ili ublažavanje bolesti, poremećaja ili simptoma kod subjekta ili pacijenta, na primer, životinje kao što je čovek, za davanje subjektu kome je to potrebno kompozicije koja sadrži efektivnu količinu, npr. terapeutski efikasnu količinu, jedinjenja kako je ovde opisano ili njegovog oblika soli, i farmaceutski prihvatljive pomoćne supstance, nosača, adjuvansa, drugog bioaktivnog sredstva ili njihove kombinacije, gde kompozicija je efikasna za lečenje ili ublažavanje bolesti ili poremećaja ili simptoma u temi.
Takođe su otkrivene metode za identifikaciju efekata razgradnje proteina od interesa u biološkom sistemu korišćenjem ovde opisanih jedinjenja.
Takođe je otkriven tretman ljudskog pacijenta kome je potrebno stanje bolesti ili stanje modulirano kroz protein gde će razgradnja tog proteina proizvesti terapeutski efekat kod pacijenta, a tretman obuhvata davanje pacijentu kome je potrebna efektivna količina jedinjenja kako je navedeno u priloženom skupu zahteva, opciono u kombinaciji sa drugim bioaktivnim agensom. Stanje ili stanje bolesti može biti bolest uzrokovana mikrobnim agensom ili drugim egzogenim agensom kao što su virus, bakterije, gljivice, protozoe ili drugi mikrob ili može biti stanje bolesti, koje je uzrokovano prekomernom ekspresijom proteina, što dovodi do stanja bolesti i/ili stanja
Termin „stanje ili stanje bolesti“ koristi se za opisivanje bilo kog stanja bolesti ili stanja u kojem dolazi do disregulacije proteina (tj. Količina proteina izraženih kod pacijenta je povišena) i gde razgradnja jednog ili više proteina kod pacijenta može pružiti korisnu terapiju ili ublažavanje simptoma pacijentu kome je to potrebno. U određenim slučajevima, stanje ili stanje bolesti mogu se izlečiti.
Stanja bolesti ili stanja koja se mogu lečiti upotrebom jedinjenja prema ovom otkriću uključuju, na primer, astmu, autoimune bolesti kao što su multipla skleroza, različiti karcinomi, ciliopatije, rascjep nepca, dijabetes, srčane bolesti, hipertenzija, upalna bolest creva, mentalna retardacija, poremećaj raspoloženja, gojaznost, refrakciona greška, neplodnost, Angelmanov sindrom, Canavanova bolest, celijakija, Charcot-Marie-Tooth bolest, cistična fibroza, Duchenova Mišićna distrofija, hemohromatoza, hemofilija, Klinefelterov sindrom, neurofibromatoza, Fenilketonurija, policistična bolest bubrega, (PKD1) ili 4 (PKD2) Prader-Villi sindrom, bolest srpastih ćelija, Tai-Sachsova bolest, Turnerov sindrom.
Termin „neoplazija“ ili „rak“ koristi se u celoj specifikaciji da bi se odnosio na patološki proces koji rezultira formiranjem i rastom kancerozne ili maligne neoplazme, tj. Abnormalnog tkiva koje raste ćelijskom proliferacijom, često brže nego što je normalno i nastavlja da raste nakon prestanka stimulusa koji su pokrenuli novi rast. Maligne neoplazme pokazuju delimičan ili potpuni nedostatak strukturne organizacije i funkcionalne koordinacije sa normalnim tkivom i većina napada okolna tkiva, metastazira na nekoliko mesta i verovatno će se ponoviti nakon pokušaja uklanjanja i izazvati smrt pacijenta ako se adekvatno ne leči. Kao što se ovde koristi, termin neoplazija koristi se za opisivanje svih stanja kancerogenih bolesti i obuhvata ili obuhvata patološki proces povezan sa malignim hematogenim, ascitnim i solidnim tumorima. Primeri karcinoma koji se mogu lečiti sadašnjim jedinjenjima samostalno ili u kombinaciji sa najmanje jednim dodatnim agensom protiv raka uključuju karcinom pločastih ćelija, karcinom bazalnih ćelija, adenokarcinom, hepatocelularni karcinom i karcinome bubrežnih ćelija, rak mokraćne bešike, creva, creva, grlića, debelog creva, jednjaka, glave, bubrega, pluća, vrata, jajnika, pankreasa, prostate i želuca; maligne leukemije; limfomi, posebno Burkittov limfom i ne-Hodgkinov limfom; benigni i maligni melanomi; mijeloproliferativne bolesti; sarkomi, uključujući Evingov sarkom, hemangiosarkom, Kaposijev sarkom, liposarkom, miosarkome, periferni neuroepiteliom, sinovijalni sarkom, gliome, astrocitome, oligodendrogliome, ependimom, gliobastome, neuroblastome, ganglioneurome, gangliogliome, meduloblastome, tumori epifiznih ćelija, meningiomi, meningealni sarkomi, neurofibromi i švanomi; rak creva, rak dojke, rak prostate, rak grlića materice, rak pluća, rak jajnika, rak testisa, rak štitne žlezde, astrocitom, rak jednjaka, rak pankreasa, želudac rak, rak jetre, rak debelog creva, melanom; karcinosarkom, Hodgkinova bolest, Vilmsov tumor i teratokarcinomi. Dodatni karcinomi koji se mogu lečiti jedinjenjima prema ovom otkriću uključuju, na primer, T-liniju Akutnu limfoblastičnu leukemiju (T-ALL), limfoblastni limfom T-linije (T-LL), periferni T-ćelijski limfom, leukemiju T-ćelija odraslih, Pre-B ALL, Pre-B limfomi, veliki B-ćelijski limfom, Burkitsov limfom, B-ćelijski ALL, Philadelphia hromozom pozitivan ALL i Philadelphia hromozom pozitivan CML.
Termin „bioaktivno sredstvo“ koristi se za opisivanje agensa, osim jedinjenja prema ovom otkriću, koje se koristi u kombinaciji sa sadašnjim jedinjenjima kao sredstvo sa biološkom aktivnošću da pomogne u sprovođenju predviđene terapije, inhibicije i/ili prevencije/profilakse za koju se koriste sadašnja jedinjenja. Preferirani bioaktivni agensi za upotrebu ovde uključuju one agense koji imaju farmakološku aktivnost sličnu onoj za koju se koriste ili primenjuju prisutna jedinjenja i uključuju, na primer, sredstva protiv raka, antivirusna sredstva, posebno uključujući sredstva protiv HIV i anti-HCV sredstva, antimikrobna sredstva, antifungalna sredstva itd.
Termin „dodatno sredstvo protiv raka“ koristi se za opisivanje agensa protiv raka, koje se može kombinovati sa jedinjenjima prema sadašnjem otkriću za lečenje raka. Ovi agensi uključuju, na primer, everolimus, trabektedin, abraxane, TLK 286, AV-299, DN-101, pazopanib, GSK690693, RTA 744, ON 0910.Na, AZD 6244 (ARRY-142886), AMN-107, TKI-258, GSK461364, AZD 1152, enzastaurin, vandetanib, ARQ-197, MK-0457, MLN8054, PHA-739358, R-763, AT-9263, FLT-3 inhibitor, VEGFR inhibitor, EGFR TK inhibitor, inhibitor aurora kinaze, PIK-1 modulator, Bcl-2 inhibitor, HDAC inhibitor, c-MET inhibitor, PARP inhibitor, Cdk inhibitor, EGFR TK inhibitor, IGFR-TK inhibitor, anti-HGF antitelo, PI3 kinaza inhibitor, AKT inhibitor, mTORC1/2 inhibitor, JAK/STAT inhibitor, checkpoint-1 ili 2 inhibitor, inhibitor fokalne adhezijske kinaze, inhibitor Map kinaza kinaze (mek), VEGF trap antitelo, pemetreksed, erlotinib, dasatinib, nilotinib, decatanib, panitumumab, amrubicin, oregovomab, Lep-etu, nolatreksed, azd2171, batabulin, ofatumumab, zanolimumab, edotekarin, tetrandrin, rubitekan, tesmilifen, oblimersen, ticilimumab, ipilimumab, gossypol, Bio 111, 131-I-TM-601, ALT-110, BIO 140, CC 8490, cilengitid, gimatekan, IL13-PE38QQR, INO 1001, IPdR1KRX-0402, lukanthon, LY317615, neuradiab, vitespan, Rta 744, Sdx 102, talampanel, atrasentan, Xr 311, romidepsin, ADS-100380, sunitinib, 5-fluorouracil, vorinostat, etopozid, gemcitabin, doksorubicin, liposomalni doksorubicin, 5'-deoksi-5-fluorouridin, vinkristin, temozolomid, ZK-304709, seliciklib; PD0325901, AZD-6244, kapecitabin, L-glutaminska kiselina, N-[4-[2-(2-amino-4,7-dihidro-4-okso-1H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-5-il)etil]benzol]-disodium so, heptahidrat, kamptotecin, PEG-obeležen irinotekan, tamoksifen, toremifen citrat, anastrazol, eksemestan, letrozol, DES (dietilstilbestrol), estradiol, estrogen, konjugovani estrogen, bevacizumab, IMC-1C11, CHIR-258; 3-[5-(metilsulfonilpiperadinmetil)-indolil-kinolon, vatalanib, AG-013736, AVE-0005, goserelin acetat, leuprolid acetat, triptorelin pamoiat, medroksiprogesteron acetat, hidroksiprogesteron kaproat, megestrol acetat, raloksifen, bikalutamid, flutamid, nilutamid, megestrol acetat, CP-724714; TAK-165, HKI-272, erlotinib, lapatinib, kanertinib, ABX-EGF antitelo, erbitux, EKB-569, PKI-166, GW-572016, Ionafarnib, BMS-214662, tipifarnib; amifostin, NVP-LAQ824, suberoil anilid hidroksaminska kiselina, valproična kiselina, trihostatin A, FK-228, SU11248, sorafenib, KRN951, aminoglutetimid, arnsakrin, anagrelid, L-asparaginaza, Bacillus Calmette-Guerin (BCG) vakcina, adriamicin, bleomicin, buserelin, busulfan, karboplatin, karmustin, hlorambucil, cisplatin, kladribin, klodronat, ciproteron, citarabin, dakarbazin, daktinomicin, daunorubicin, dietilstilbestrol, epirubicin, fludarabin, fludrokortizon, fluoksimesteron, flutamid, gleevec, gemcitabin, hidroksiurea, idarubicin, ifosfamid, imatinib, leuprolid, levamisol, lomustin, mehloretamin, melfalan, 6-merkaptopurin, mesna, metotreksat, mitomicin, mitotan, mitoksantron, nilutamid, oktreotid, oksaliplatin, pamidronat, pentostatin, plicamicin, porfimer, prokarbazin, raltitreksed, rituksimab, streptozocin, tenipozid, testosteron, talidomid, tioguanin, tiotepa, tretinoin, vindesin, 13-cisretinoična kiselina, fenilalanin mustard, uracil mustard, estramustin, altretamin, floksuridin, 5-deoksiuridin, citozin arabinozid, 6-merkaptopurin, deoksikoformicin, kalcitriol, valrubicin, mitramicin, vinblastin, vinorelbina, topotekan, razoksin, marimastat, COL-3, neovastat, BMS-275291, skvalamin, endostatin, SU5416, SU6668, EMD121974, interleukin-12, IM862, angiostatin, vitaksin, droloxifen, idoksifen, spironolakton, finasterid, cimetidin, trastuzumab, denileukin diftitoksin, gefitinib, bortezomib, paklitaksel, paklitaksel bez kremofora, docetaksel, epotilon B, BMS- 247550, BMS-310705, droloxifen, 4-hidroksitamoksifen, pipendoksifen, ERA-923, arzoksifen, fulvestrant, akolbifen, lasofoksifen, idoksifen, TSE-424, HMR-3339, ZK186619, topotekan, PTK787/ZK 222584, VX-745, PD 184352, rapamicin, 40-O-(2-hidroksietil)-rapamicin, temsirolimus, AP-23573, RAD001, ABT-578, BC-210, LY294002, LY292223, LY292696, LY293684, LY293646, wortmannin, ZM336372, L-779,450, PEG-filgrastim, darbepoetin, eritropoetin, faktor stimulacije kolonija granulocita, zolendronat, prednizon, cetuksimab, faktor stimulacije kolonija granulocita i makrofaga, histrelin, pegilirani interferon alfa-2a, interferon alfa-2a, pegilirani interferon alfa-2b, interferon alfa-2b, azacitidin, PEG-L-asparaginaza, lenalidomid, gemtuzumab, hidrokortizon, interleukin-11, deksrazoksan, alemtuzumab, all-trans retinoična kiselina, ketokonazol, interleukin-2, megestrol, imunoglobulin, azotni mustard, metilprednizolon, ibritumomab tiuksetan, androgeni, decitabin, heksametilmelamin, beksaroten, tositumomab, arsen-trioksid, kortizon, editronat, mitotan, ciklosporin, liposomalni daunorubicin, Edwina-asparaginaza, stroncijum 89, casopitant, netupitant, NK-1 receptor antagonist, palonosetron, aprepitant, difenhidramin, hidroksizin, metoklopramid, lorazepam, alprazolam, haloperidol, droperidol, dronabinol, deksametazon, metilprednizolon, proklorperazin, granisetron, ondansetron, dolasetron, tropisetron, pegfilgrastim, eritropoetin, epoetin alfa, darbepoetin alfa i njihove smeše.
Termin „anti-HIV agens“ ili „dodatni anti-HIV agens“ obuhvata, na primer, inhibitore reverzne transkriptaze nukleozida (NRTI), druge nenukleozidne inhibitore reverzne transkriptaze (tj. one koji nisu deo ove objave), inhibitore proteaze, inhibitore fuzije, između ostalog, naznačeno time što primeri jedinjenja mogu uključivati, na primer: 3TC (lamivudin), AZT (zidovudin), (–)-FTC, ddI (didanozin), ddC (zalcitabin), abakavir (ABC), tenofovir (PMPA), D-D4FC (Reverset), D4T (stavudin), Racivir, L-FddC, L-FD4C, NVP (nevirapin), DLV (delavirdin), EFV (efavirenz), SQVM (mesilat saquinavira), RTV (ritonavir), IDV (indinavir), SQV (saquinavir), NFV (nelfinavir), APV (amprenavir), LPV (lopinavir), inhibitore fuzije kao što su T20 i drugi, fuseon i njihove smeše, uključujući anti-HIV jedinjenja koja se trenutno nalaze u kliničkim ispitivanjima ili su u fazi razvoja.
Drugi anti-HIV agensi koji se mogu koristiti u zajedničkoj primeni sa jedinjenjima prema ovoj objavi uključuju, na primer, druge NNRTI (tj. druge nenukleozidne inhibitore reverzne transkriptaze koji nisu deo ove objave), koji se mogu izabrati iz grupe koju čine: nevirapin (BI-R6-587), delavirdin (U-90152S/T), efavirenz (DMP-266), UC-781 (N-[4-hloro-3-(3-metil-2-buteniloksi)fenil]-2metil3-furankarbotiamid), etravirin (TMC125), trovirdin (Ly300046.HCl), MKC-442 (emivirin, koaktinon), HI-236, HI-240, HI-280, HI-281, rilpivirin (TMC-278), MSC-127, HBY 097, DMP266, bajkalin (TJN-151) ADAM-II (metil 3',3'-dihloro-4',4"-dimetoksi-5',5"-bis(metoksikarbonil)-6,6-difenilheksenat), metil 3-bromo-5-(1-5-bromo-4-metoksi-3-(metoksikarbonil)fenil)hept-1-enil)-2-metoksibenzoat
(alkenildiarilmetanski analog, Adam analog), (5-hloro-3-(fenilsulfinil)-2'-indolkarboksamid), AAP-BHAP (U-104489 ili PNU-104489), kapravirin (AG-1549, S-1153), ateviridin (U-87201E), aurin trikarboksilna kiselina (SD-095345), 1-[(6-cijano-2-indolil)karbonil]-4-[3-(izopropilamino)-2-piridinil]piperazin, 1-[5-[[N-(metil)metilsulfonilamino]-2-indolilkarbonil]-4-[3-(izopropilamino)-2-piridinil]piperazin, 1-[3-(etilamino)-2-[piridinil]-4-[(5-hidroksi-2-indolil)karbonil]piperazin, 1-[(6-formil-2-indolil)karbonil]-4-[3-(izopropilamino)-2-piridinil]piperazin, 1-[[5-(metilsulfoniloksi)-2-indolil)karbonil]-4-[3-(izopropilamino)-2-piridinil]piperazin, U88204E, Bis(2-nitrofenil)sulfon (NSC 633001), kalanolid A (NSC675451), kalanolid B, 6-benzil-5-metil-2-(cikloheksiloksi)pirimidin-4-on (DABO-546), DPC 961, E-EBU, E-EBU-dm, E-EPSeU, E-EPU, foskarnet (Foscavir), HEPT (1-[(2-hidroksietoksi)metil]-6-(feniltio)timidin), HEPT-M (1-[(2-hidroksietoksi)metil]-6-(3metilfenil)tio)timidin), HEPT-S (1-[(2-hidroksietoksi)metil]-6-(feniltio)-2-tiotiimidin), inofilum P, L-737,126, mišelamin A (NSC650898), mišelamin B (NSC649324), mišelamin F, 6-(3,5-dimetilbenzil)-1-[(2-hidroksietoksi)metil]-5-izopropiluracil, 6-(3,5-dimetilbenzil)-1-(etiloksimetil)-5-izopropiluracil, NPPS, E-BPTU (NSC 648400), oltipraz (4-metil-5-(pirazinil)-3H-1,2-ditiol-3-tion), N-{2-(2-hloro-6-fluorfenetil]-N'-(2-tiazolil)tiourea (PETT Cl, F derivat), N-{2-(2,6-difluorfenetil]-N'-[2-(5-bromopiridil)]tiourea {PETT derivat), N-{2-(2,6-difluorfenetil]-N'-[2-(5-metilpiridil)]tiourea {PETT piridil derivat), N-[2-(3-fluorofuranil)etil]-N'-[2-(5-hloropiridil)]tiourea, N-[2-(2-fluoro-6-etoksifenetil)]-N'-[2-(5-bromopiridil)]tiourea, N-(2-fenetil)-N'-(2-tiazolil)tiourea (LY-73497), L-697,639, L-697,593, L-697,661, 3-[2-(4,7-difluorbenzoksazol-2-il)etil}-5-etil-6-metil(piridin-2(1H)-tion) (2-piridon derivat), 3-[[(2-metoksi-5,6-dimetil-3-piridil)metil]amin]-5-etil-6-metil(piridin-2(1H)-tion, R82150, R82913, R87232, R88703, R89439 (lovirid), R90385, S-2720, suramin natrijum, TBZ (tiazolobenzimidazol, NSC 625487), tiazoloizoindol-5-on, (+)(R)-9b-(3,5-dimetilfenil-2,3-dihidrotiazolo[2,3-a]izoindol-5(9bH)-on, tivirapin (R86183), UC-38 i UC-84, i drugi.
Termin „farmaceutski prihvatljiva so“ koristi se u celoj specifikaciji da bi se opisao, gde je primenljivo, oblik soli jednog ili više ovde opisanih jedinjenja koja su predstavljena da povećaju rastvorljivost jedinjenja u gasnim sokovima gastrointestinalnog trakta pacijenta kako bi se promovisalo rastvaranje i bioraspoloživost jedinjenja. Farmaceutski prihvatljive soli uključuju one dobijene iz farmaceutski prihvatljivih neorganskih ili organskih baza i kiselina, gde je primenljivo. Pogodne soli uključuju one dobijene iz alkalnih metala kao što su kalijum i natrijum, zemnoalkalne metale kao što su soli kalcijuma, magnezijuma i amonijuma, među brojnim drugim kiselinama i bazama dobro poznatim u farmaceutskoj umetnosti. Natrijumske i kalijumove soli su posebno poželjne kao soli za neutralizaciju fosfata prema ovom otkriću.
Termin „farmaceutski prihvatljiv derivat“ koristi se u celoj specifikaciji za opisivanje bilo kog farmaceutski prihvatljivog oblika predleka (kao što je ester, amidna druga grupa proleka), koji nakon primene pacijentu direktno ili indirektno obezbeđuje prisutno jedinjenje ili aktivni metabolit ovog jedinjenja.
Opšti sintetički pristupi
Sintetičkoj realizaciji i optimizaciji bifunkcionalnih molekula kako je ovde opisano može se pristupiti postupno ili modularno. Na primer, identifikacija jedinjenja koja se vezuju za ciljne molekule može uključivati kampanje skrininga velike ili srednje propusnosti ako odmah nisu dostupni odgovarajući ligandi. Nije neobično da početni ligandi zahtevaju iterativni ciklus dizajna i optimizacije kako bi se poboljšali suboptimalni aspekti kao što su identifikovani podacima iz odgovarajućih in vitro i farmakoloških i/ili ADMET testova. Deo kampanje optimizacije/SAR bio bi ispitivanje položaja liganda koji su tolerantni na supstituciju i koji bi mogli biti pogodna mesta na koja bi se mogla pričvrstiti hemija linkera koja je prethodno pomenuta ovde. Tamo gde su dostupni kristalografski ili NMR strukturni podaci, oni se mogu koristiti za fokusiranje takvog sintetičkog napora.
Na vrlo analogan način mogu se identifikovati i optimizovati ligandi za E3 ligazu, tj. ULM-ovi/VLM-ovi.
Sa PTM-ovima i ULM-ovima (npr. VLM-ovima) u ruci, neko vešt u ovoj oblasti može koristiti poznate sintetičke metode za njihovu kombinaciju sa ili bez povezujućeg dela. Delovi povezivanja mogu se sintetizovati sa nizom kompozicija, dužina i fleksibilnosti i funkcionalizovati tako da se PTM i ULM grupe mogu sekvencijalno pričvrstiti na distalne krajeve linkera. Tako se biblioteka bifunkcionalnih molekula može realizovati i profilisati u in vitro i in vivo farmakološkim i ADMET/PK studijama. Kao i kod PTM i ULM grupa, konačni bifunkcionalni molekuli mogu biti podložni iterativnim ciklusima dizajna i optimizacije kako bi se identifikovali molekuli sa poželjnim svojstvima.
U nekim slučajevima može biti potrebna zaštita grupnih strategija i/ili funkcionalnih grupnih interkonverzija (FGI) kako bi se olakšala priprema željenih materijala. Takvi hemijski procesi su dobro poznati sintetičkom organskom hemičaru i mnogi od njih se mogu naći u tekstovima kao što su "Greene's Protective Groups in Organic Synthesis" Peter G. M. Wuts and Theodora W. Greene (Wiley), and "Organic Synthesis: The Disconnection Approach" Stuart Warren and Paul Wyatt (Wiley).
Skraćenice:
ACN: acetonitril
ADDP: 1,1'-(azodikarbonil)dipiperidin
BAST: N,N-bis(2-metoksietil)aminosumpor-trifluorid
BPO: benzoil peroksid
Cbz: Karbonilbeziloksi
DAST: dietilaminosumpor-trifluorid
DBE: 1,2-dibromoetan
DCM: dihlorometan
DEAD: dietil azodikarboksilat
DIAD: diizopropil azodikarboksilat
DIBAL: disiobutilaluminijum hidrid
DIEA ili DIPEA: dizopropiletilamin
DMA: N,N-dimetilacetamid
DMF: N,N-dimetilformamid
DMP: Dess-Martin periodinan
EA: etil-acetat
EDCI: 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)karbodiimid
HBTU: N,N,N'N'-tetrametil-O-(1H-benzotriazol-1-il)uronijum heksafluorofosfat HMDS: bis9trimetilsilil)amin
HMPA: heksametilfosforamid
LDA: litijum-dizopropilamid
MCPBA: meta-hloroperoksibenzojeva kiselina
MsCl: metansulfonil-hlorid
M.W: mikrotalasno zračenje
NBS: N-bromsukcinimid
NMP: N-metilpirolidon
PCC: piridinijum-hlorohromat
Pd-118 ili Pd(dtpf)Cl2: 1,1'-bis(di-terc-butilfosfino)ferocen dihloropaladijum Pd(dppf)Cl2: 1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen dihloropaladijum
Pd(dba)2: bis(dibenzilidenaceton)paladijum
Pd2(dba)3: tris(dibenzilidenaceton)dipaladijum
PPTS: piridinijum p-toluensulfonat
PTSA: p-toluensulfonska kiselina
RuPhos-Pd-G3: XPhos-Pd-G3: [(2-dicikloheksilfosfino-2',6'-diizopropoksi-1,1'-bifenil)-2-(2'-amino-1,1'-bifenil)] paladijum(II) metansulfonat
RuPhos-Pd-G2: Hloro[(2-dicikloheksilfosfino-2',6'-diizopropoksi-1,1'-bifenil)-2-(2'-amino-1,1'-bifenil)] paladijum(II)
SFC: hromatografija superkritičnom fluidnom fazom
t-BuXPhos-Pd-G3: [(2-di-terc-butilfosfino-2',4',6'-triizopropil-1,1'-bifenil)-2-(2'-amino-1,1'-bifenil)] paladijum(II) metansulfonat
TEA: trimetilamin
TFA: trifluorsirćetna kiselina
TLC: tankoslojna hromatografija
TMP: 2,2,6,6-tetrametilpiperidin
TEMPO: 2,2,6,6-tetrametilpiperidin-N-oksid
TosCl / TsCl: p-toluensulfonil hlorid
TsOH: p-toluensulfonska kiselina
XantPhos: 4,5-bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilksanten
XPhos: 2-dicikloheksilfosfino-2',4',6'-triizopropilbifenil
XPhos-Pd-G3: [(2-dicikloheksilfosfino-2',4',6'-triizopropil-1,1'-bifenil)-2-(2'-amino-1,1'-bifenil)] paladijum(II) metansulfonat
12354-85-7: bis(pentametilciklopentadienil)rodijum dihlorid
Šema 1
Kao što je prikazano u šemi 1, jedinjenje koje ima deo WPTM5sadrži povezujuću grupu L koja uključuje nukleofilnu grupu, kao što je amino grupa. Nakon reakcije sa jedinjenjem koje ima dobru napuštajuću grupu LG (na primer, perfluorosulfonilna grupa C4F9SO3-), formira se proizvod spajanja. Proizvod spajanja reaguje sa monozaštićenim molekulom amina WPTM3, u uslovima katalizovanim paladijumom da bi se pričvrstio fragment WPTM3. Nakon deprotekcije amina, reaktivniji atom halogena izabran iz Z' i Z" u WPTMS-WPTM3prolazi kroz nukleofilnu supstituciju slobodnom amino grupom da bi se formirao WPTM5-WPTM3-WPTM2, koji zatim reaguje sa WPTM2bornom kiselinom da bi obezbedio PTM vezivnu grupu uključujući fragment WPTM5-WPTM3-WPTM2-WPTM1. Nakon hidrolize estara katalizovane bazno, rezultujuća kiselina je povezana sa ULM delom koji nosi amino grupu da bi se kombinovali delovi vezivanja PTM i ULM u jednom molekulu.
Šema 2
Kao što je prikazano u šemi 2, Mitsunobu reakcija između dela R3koji sadrži hidroksil i monozaštićenog diola, uključujući povezujuću grupu L, rezultira proizvodom spajanja. Nakon O-deprotekcije, slobodna hidroksilna grupa se aktivira, na primer kao sulfonat, i naknadno se pomera sa delom WPTM5-WPTM3-WPTM2-WPTM1koji nosi amino grupu na WPTM5. Nakon hidrolize estera, rezultujuća kiselina se spaja sa ULM delom koji nosi amino grupu da bi se kombinovali delovi vezivanja PTM i ULM u jednom molekulu.
Šema 3
Kao što je prikazano u šemi 3, vinilna grupa se prvo uvodi u bis-halogenirani derivat WPTM2. Dobijeni proizvod se zatim podvrgava Heckovoj reakciji spajanja katalizovanoj paladijem sa halogeniranim delom WPTM2koji nosi povezujuću grupu L koja uključuje opciono zaštićenu amino grupu. Da bi se uveo deo WPTM1, halogenidni deo WPTM2-WPTM5je povezan sa odgovarajućom bornom kiselinom u Suzukijevim uslovima, a rezultujući amin reaguje sa aldehidom koji sadrži ULM kako bi se dobio proizvod spajanja PTM-ULM.
Šema 4
Šema 4 ilustruje primerne reakcije spajanja koje se koriste za povezivanje PTM-vezujućeg dela WPTM5-WPTM3-WPTM2-WPTM1sa delom koji sadrži ULM. Takve reakcije mogu uključivati reduktivnu aminaciju korišćenjem natrijum cijanoborohidrida kao redukcionog sredstva ili reakcije kondenzacionog spajanja između karboksilne kiseline i diamina. Osoba obične veštine u ovoj oblasti mogla bi da odabere odgovarajuće reagense i uslove za izvršenje željenih transformacija.
Šema 5
Kao što je prikazano u šemi 5, reakcija tipa Mitsunobu između delova R3i WPTM5koji sadrže hidroksil rezultira proizvodom spajanja . Atom halogena na WPTM5se zatim pomera monozaštićenim diaminom WPTM3u uslovima Suzukija ili Bučvalda. Nakon deprotekcije druge amino grupe, reaktivniji atom halogena vezan za deo WPTM2se pomera da bi se formirao fragment WPTMS-WPTM3-WPTM2. Dobijeni monohalid se zatim reaguje sa odgovarajućom bornom kiselinom u Suzukijevim uslovima kako bi se dobio deo vezanja WPTM5-WPTM3-WPTM2-WPTM2. Nakon hidrolize estera, rezultujuća kiselina se zatim spaja sa ULM delom koji nosi amino grupu da bi se kombinovali delovi vezivanja PTM i ULM u jednom molekulu.
Šema 6
Kao što je prikazano u šemi 6, ULM deo koji sadrži acetal može biti podvrgnut kiselinski katalizovanoj hidrolizi u dovoljno blagim uslovima da bi se formirao aldehid, koji zatim reaguje sa WPTM5-WPTM3-WPTM2-WPTM2fragmentom koji ima link koji sadrži amino grupu L' pod uslovima reduktivne aminacije da bi se formirao proizvod spajanja PTM-ULM. Osoba obične veštine u ovoj oblasti mogla bi da odabere odgovarajuće reagense i uslove za izvršenje željenih transformacija.
Šema 7
Kao što je prikazano u šemi 7, reakcija tipa Mitsunobu između delova R3koji sadrže hidroksil i monozaštićenog fluoriranog diola obezbeđuje intermedijer koji sadrži fluor. Nakon O-deprotekcije, slobodna hidroksilna grupa se aktivira (na primer kao sulfonat) i naknadno pomera sa delom WPTM5-WPTM3-WPTM2-WPTM1koji nosi amino grupu na WPTM5. Nakon hidrolize estera, rezultujuća kiselina se spaja sa ULM delom koji nosi amino grupu da bi se kombinovali delovi vezivanja PTM i ULM u jednom molekulu.
Šema 8
Kao što je prikazano u šemi 8, nukleofilno pomeranje odlazeće grupe u L'-OLG sa esterom koji sadrži hidroksilnu grupu, uključujući R3, rezultira proizvodom spajanja koji kombinuje linkere L' i L". Naknadna bazična hidroliza i spajanje rezultujuće kiseline sa ULM delom koji nosi amino grupu obezbeđuje ULM fragment na koji su vezane dve sekvencijalne grupe za povezivanje L' i L". N-dezaštita amino grupe L' praćena reduktivnom aminacijom sa WPTM5-WPTM3-WPTM2-WPTM1-L'" aldehidom ili kondenzacijom sa WPTM5-WPTM3-WPTM2-WPTM1-L'" karboksilnom kiselinom pruža PTM-ULM proizvod spajanja.
Šema 9
Kao što je prikazano u Šemi 9, nukleofilno pomeranje atoma fluora u delu WPTM5sa jedinjenjem koje sadrži hidroksilnu grupu koje ima R3obezbeđuje WPTM5-L-R3halogenid, koji je spojen pod Suzukijevim ili Buchvaldovim uslovima sa monozaštićenim diaminom WPTM5. Nakon deprotekcije druge amino grupe, deo WPTM3-WPTM5-L-R3zatim reaguje sa bishalogenisanim WPTM2nukleofilnom aromatičnom supstitucijom da bi se obezbedio monohalid. Naknadna Suzukijeva reakcija sa odgovarajućom bornom kiselinom obezbeđuje WPTM1-WPTM2-WPTM3-WPTM5-L-R3estar. Osnovna hidroliza i spajanje sa ULM delom koji nosi amino grupu obezbeđuje PTM-ULM proizvod spajanja.
Jedan od mogućih pristupa sintezi primernih jedinjenja ovog otkrića je praćenje opšte sintetičke rute detaljno opisane u donjoj šemi:
Jedan vešt u umetnosti ceni da se modifikovani pristup može koristiti za pričvršćivanje PTM-ova putem različitih hemijskih veza. Na primer, u slučajevima kada je VPTM5povezan sa L preko CH2grupe (X = CH2u gornjoj šemi) može se zamisliti pristup opisan u donjoj šemi:
Alternativno, ako WPTM5nije prisutan, PTM primernog jedinjenja predstavljenog Formulom I može se sintetizovati prema opštoj šemi ispod:
Osoba vešta u oblasti će ceniti da se opšti pristupi opisani ovde mogu modifikovati kako bi se prilagodili specifičnoj prirodi WPTM1, WPTM2, WPTM3, WPTM4, WPTM5, WPTM6i WPTM7prstenova. Na primer, primerna jedinjenja predstavljena Formulom II mogu se pripremiti kako je opisano u opštoj sintetičkoj šemi ispod gde bi neko vešt u ovoj oblasti prepoznao da mogu biti potrebni dodatni koraci zaštite/dezaštite, zavisno od specifične hemijske prirode primernog jedinjenja:
Opciono, gde X predstavlja NH, primerno jedinjenje se može pripremiti prema jednoj od dve šeme prikazane u nastavku, u zavisnosti od toga da li je prisutan WPTM5:
Primer PTM predstavljen opštom formulom III može se pripremiti po opštem pristupu opisanom za jedinjenja Formule I kada WPMT5nije prisutan.
Primjer PTM predstavljen opštom formulom IV može se pripremiti prema sledećoj opštoj šemi:
Primer sinteze primernog jedinjenja 11
Korak 1
Smeši terc-butil 2-(2-(2-hidroksietoksi)etoksi)acetata (1,5 g, 6,8 mmol) i TEA (2,07 g, 20,5 mmol) u DCM-u (5 mL) dodat je TsCl (1,95 g, 10,23 mmol) na 0 °C. Dobijena smeša je zagrejana na sobnu temperaturu i mešana 3 sata. Rastvor je neutralisan vodom (20 mL) i ekstrahovan DCM-om. Organska faza je isprana slanim rastvorom (20 mL × 2). Organska
2H), 7.28 (m, 1H), 6.95 (d, J = 7.6 Hz 2H), 4.69 (d, J = 9.6 Hz 1H), 4.44-4.57 (m, 6H), 4.25-4.35 (m, 1H), 3.60-3.99 (m, 11H), 2.46 (s, 3H), 2.23 (m, 1H), 2.08 (m, 1H), 1.01 (s, 9H).
Primerno jedinjenje 5 je pripremljeno korišćenjem procedura analognih onima koje su opisane iznad za primerno jedinjenje 11, kao i procedura poznatih i priznatih među stručnjacima u oblasti, u skladu sa šemom u nastavku:
Procedurama opisanim za primerno jedinjenje 11 i primerno jedinjenje 5 pripremljena su: primerno jedinjenje 1, primerno jedinjenje 2, primerno jedinjenje 3, primerno jedinjenje 4.
Primerna sinteza primerenog jedinjenja 9
Korak 1
atmosferom tokom 4 sata. pH rastvora je podešen na 5 pomoću 1N HCl. Smeša je filtrirana, a filtrat koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobila sirova 17-((4-((1R,5S)-3-(3-amino-6-(2-hidroksifenil)piridazin-4-il)-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il)piridin-2-il)oksi)-3,6,9,12,15-pentaoksaheptadekanojeva kiselina (300 mg), koja je korišćena u narednom koraku bez dodatnog prečišćavanja.
Korak 7
Rastvoru sirove 17-((4-((1R,5S)-3-(3-amino-6-(2-hydroxyphenyl)pyridazin-4-yl)-3,8-diazabicyclo[3.2.1]octan-8-yl)pyridin-2-yl)oxy)-3,6,9,12,15-pentaoxaheptadecanoic acid (80 mg, 0,12 mmol) i (2S,4R)-1-((S)-2-amino-3,3-dimethylbutanoyl)-4-hydroxy-N-(4-(4-methylthiazol-5-yl)benzyl)pyrrolidine-2-carboxamide (108 mg, 0,24 mmol) u DMF-u (5 mL) dodati su DIPEA (124 mg, 0,96 mmol) i HATU (92 mg, 0,24 mmol) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 30 minuta. Smeša je ekstrahovana etilacetatom (50 mL). Organska faza je isprana vodom (8 mL) i slanim rastvorom (8 mL). Organski sloj je osušen (Na₂SO₄), filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen preparativnom TLC (6% MeOH u DCM-u) da bi se dobio (2S,4R)-1-((S)-20-((4-((1R,5S)-3-(3-amino-6-(2-hydroxyphenyl)pyridazin-4-yl)-3,8-diazabicyclo[3.2.1]octan-8-yl)pyridin-2-yl)oxy)-2-(terc-butyl)-4-oxo-6,9,12,15,18-pentaoxa-3-azaicosanoyl)-4-hydroxy-N-(4-(4-methylthiazol-5-yl)benzyl)pyrrolidine-2-carboxamide (20 mg, 0,018 mmol, 15,0% prinos).
<1>H NMR (400 MHz, MeOD): δ 8.74 (s, 1H), 7.68-7.66 (m, 2H), 7.34-7.28 (m, 5H), 7.18-7.10 (m, 1H), 6.80-6.78 (m, 2H), 6.43-6.40 (m, 1H), 6.10 (s, 1H), 4.60-4.20 (m, 9H), 3.92-3.89 (m, 2H), 3.80-3.64 (m, 4H), 3.71-3.45 (m, 16H), 3.10-3.00 (m, 1H), 3.00-2.90 (m, 2H), 2.37-2.34 (m, 1H), 2.35 (s, 3H), 2.18-1.99 (m, 6H), 0.92 (s, 9H).
Koristeći analogne procedure, pripremljena su primerna jedinjenja 7, 8, 10 i 35.
Primerna sinteza primerenog jedinjenja 6
Korak 1
na sobnoj temperaturi 1 sat. Smeša je podeljena između EtOAc-a (100 mL) i vode (10 mL). Organska faza je isprana slanim rastvorom (10 mL). Kombinovane organske faze su osušene (Na₂SO₄), filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu da bi se dobio 3,6,9,12,15-pentaoksaheptadekan-1,17-dil bis(4-metilbenzensulfonat) (6,0 g, 10,2 mmol, prinos 72%).
Korak 2
Rastvoru 3,6,9,12,15-pentaoksaheptadekan-1,17-dil bis(4-metilbenzensulfonata) (3,5 g, 5,93 mmol) u bezvodnom DMF-u (20 mL) dodati su 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol (1,15 g, 5,93 mmol) i Cs₂CO₃ (3,87 g, 11,86 mmol). Reakciona smeša je mešana na 75°C tokom 0,5 sata. Smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i podeljena između EtOAc-a (200 mL) i vode (20 mL). Organska faza je isprana slanim rastvorom (20 mL). Kombinovane organske faze su osušene (Na₂SO₄), filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu da bi se dobio 17-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-il)-3,6,9,12,15-pentaoksaheptadekil 4-metilbenzensulfonat (0,6 g, 0,98 mmol, prinos 16,5%).
Korak 3
Rastvoru 17-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-il)-3,6,9,12,15-pentaoksaheptadekil 4-metilbenzensulfonata (0,3 g, 0,49 mmol) i (2S,4R)-4-hidroksi-N-(2-hidroksi-4-(4-metiltiazol-5-il)benzil)-1-((S)-3-metil-2-(1-oksoizoindolin-2-il)butanoil)pirrolidin-2-karboksamida (268 mg, 0,49 mmol) u DMF-u (5 mL) dodat je K₂CO₃ (135 mg, 0,98 mmol). Smeša je mešana na 80 °C pod azotovom atmosferom tokom 2 sata. Smeša je ekstrahovana etil-acetatom (80 mL). Organska faza je isprana vodom (10 mL) i slanim rastvorom (10 mL). Organski sloj je osušen (Na₂SO₄), filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu da bi se dobila smeša (2S,4R)-4-hidroksi-1-((S)-3-metil-2-(1-oksoizoindolin-2-il)butanoil)-N-(4-(4-metiltiazol-5-il)-2-((17-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-il)-3,6,9,12,15-pentaoksaheptadeksil)oksi)benzil)pirrolidin-2-karboksamida i (1-(17-(2-(((2S,4R)-4-hidroksi-1-((S)-3-metil-2-(1-oksoizoindolin-2-il)butanoil)pirrolidin-2-karboksamido)metil)-5-(4-metiltiazol-5-il)fenoksi)-3,6,9,12,15-pentaoksaheptadeksil)-1H-pirazol-4-il)boronske kiseline (270 mg, 0,27 mmol, prinos 56%).
Korak 4
Rastvoru smeše (2S,4R)-4-hidroksi-1-((S)-3-metil-2-(1-oksoizoindolin-2-il)butanoil)-N-(4-(4-metiltiazol-5-il)-2-((17-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-il)-3,6,9,12,15-pentaoksaheptadeksil)oksi)benzil)pirrolidin-2-karboksamida i (1-(17-(2-(((2S,4R)-4-hidroksi-1-((S)-3-metil-2-(1-oksoizoindolin-2-il)butanoil)pirrolidin-2-karboksamido)metil)-5-(4-metiltiazol-5-il)fenoksi)-3,6,9,12,15-pentaoksaheptadeksil)-1H-pirazol-4-il)boronske kiseline (270 mg, 0,27 mmol) i 5-bromo-6-hloropiridazin-3-amina (85 mg, 0,41 mmol) u dioksanu (20 mL) i vodi (2 mL) dodati su cezijev karbonat (220 mg, 0,68 mmol), PdCl₂(dppf) (40 mg, 0,054 mmol) i t-Bu₃PHBF₄ (31 mg, 0,11 mmol). Rastvor je mešan na 100 °C pod azotovom atmosferom tokom 4 sata. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu da bi se dobio (2S,4R)-N-(2-((17-(4-(3-amino-6-hloropiridazin-4-il)-1H-pirazol-1-il)-3,6,9,12,15-pentaoksaheptadeksil)oksi)-4-(4-metiltiazol-5-il)benzil)-4-hidroksi-1-((S)-3-metil-2-(1-oksoizoindolin-2-il)butanoil)pirrolidin-2-karboksamid (175 mg, 0,18 mmol, prinos 67%).
Korak 5
Rastvoru (2S,4R)-N-(2-((17-(4-(3-amino-6-hloropiridazin-4-il)-1H-pirazol-1-il)-3,6,9,12,15-pentaoksaheptadeksil)oksi)-4-(4-metiltiazol-5-il)benzil)-4-hidroksi-1-((S)-3-metil-2-(1-oksoizoindolin-2-il)butanoil)pirrolidin-2-karboksamida (175 mg, 0,18 mmol) i (2-hidroksifenil)boronske kiseline (32 mg, 0,23 mmol) u dioksanu (15 mL) i vodi (1,5 mL) dodati su cezijev karbonat (176 mg, 0,54 mmol), PdCl₂(dppf) (53 mg, 0,072 mmol) i t-Bu₃PHBF₄ (42 mg, 0,144 mmol). Rastvor je mešan na 100 °C pod azotovom atmosferom tokom 4 sata. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu da bi se dobio (2S,4R)-N-(2-((17-(4-(3-amino-6-(2-hidroksifenil)piridazin-4-il)-1H-pirazol-1-il)-3,6,9,12,15-pentaoksaheptadeksil)oksi)-4-(4-metiltiazol-5-il)benzil)-4-hidroksi-1-((S)-3-metil-2-(1-oksoizoindolin-2-il)butanoil)pirrolidin-2-karboksamid (24 mg, 0,023 mmol, prinos 13%).
<1>HNMR (400 MHz, MeOD): δ 8.84 (s, 1H), 8.28 (s, 1H), 8.05 (d, J = 12.4 Hz, 2H), 7.38-7.81 (m, 6H), 7.36-7.37 (m, 1H), 6.98-7.00(m, 2H), 6.92 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 4.37-4.59 (m, 9H), 4.15-4.16 (m, 2H), 3.83-3.96 (m, 6H), 3.46-3.56 (m, 16H), 2.46 (s, 3H), 2.44-2.45 (m, 1H), 2.21-2.22 (m, 1H), 2.09-2.10 (m, 1H), 1.03 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 0.82 (d, J = 6.4 Hz, 3H).
Koristeći procedure analogne onima opisanim za primerno jedinjenje 20, pripremljena su primerna jedinjenja 12, 13 i 21.
Primerna sinteza primerenog jedinjenja 14
Korak 1
U okruglu bočicu zapremine 250 mL unet je rastvor 4-(tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazola (1,5 g, 7,73 mmol, 1,00 ekv) u dioksanu/vodi (1:1) (60 mL), 4-bromo-6-hloropiridazin-3-amina (1,7 g, 8,16 mmol, 1,20 ekv), Pd(PPh₃)₄ (800 mg, 0,69 mmol, 0,10 ekv) i kalijum-karbonata (2,9 g, 20,98 mmol, 3,00 ekv). Dobijeni rastvor je mešan preko noći na 100 °C u uljanoj kupki. Ostatak je nanesen na kolonu sa silika-gelom uz upotrebu dihlorometana/metanola (10:1). Na taj način je dobijeno 1,0 g (66%) jedinjenja 6-hlor-4-(1H-pirazol-4-il)piridazin-3-amin kao bela čvrsta supstanca.
Korak 2
U zaptivenu bočicu zapremine 10 mL unet je rastvor 6-hlor-4-(1H-pirazol-4-il)piridazin-3-amina (390 mg, 1,99 mmol, 1,00 ekv) u dioksanu (4 mL), [2-(metoksimetoksi)fenil]boronske kiseline (546 mg, 3,00 mmol, 1,50 ekv), Pd(PPh₃)₄ (300 mg, 0,26 mmol, 0,20 ekv) i rastvora kalijum-karbonata (552 mg, 3,99 mmol, 2,00 ekv) u vodi (2 mL). Dobijeni rastvor je mešan 12 sati na 100 °C u uljanoj kupki. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je nanesen na kolonu sa silika-gelom uz upotrebu dihlorometana/metanola (10:1). Na taj način je dobijeno 120 mg (20%) jedinjenja 6-[2-(metoksimetoksi)fenil]-4-(1H-pirazol-4-il)piridazin-3-amin kao žute čvrste supstance.
Korak 3
U okruglu bočicu zapremine 50 mL unet je rastvor 6-[2-(metoksimetoksi)fenil]-4-(1H-pirazol-4-il)piridazin-3-amina (100 mg, 0,34 mmol, 1,00 ekv) u N,N-dimetilformamidu (10 mL), 2-[2-(2-[[(4-metilbenzen)sulfonil]oksi)etoksi]etoksi]etan-1-ola (100 mg, 0,33 mmol, 1,00 ekv), i kalijum-karbonata (91 mg, 0,66 mmol, 2,00 ekv). Dobijeni rastvor je mešan 12 sati na 70 °C u uljanoj kupki. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil-acetatom (20 mL × 3), a organske faze su spojene i koncentrovane pod vakuumom. Ostatak je nanesen na kolonu sa silika-gelom uz upotrebu dihlorometana/metanola (10:1). Dobijeno je 100 mg (69%) jedinjenja 2-[2-[2-(4-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-1H-pirazol-1-il)etoksi]etoksi]etan-1-ol kao žute uljane supstance.
Korak 4
U okruglu bočicu zapremine 100 mL unet je rastvor jedinjenja 2-[2-[2-(4-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-1H-pirazol-1-il)etoksi]etoksi]etan-1-ol (100 mg, 0,23 mmol, 1,00 ekv) u dihlorometanu (20 mL), 4-toluensulfonil-hlorida (66,0 mg, 0,35 mmol, 1,50 ekv), trietilamina (47 mg, 0,46 mmol, 2,00 ekv) i 4-dimetilaminopiridina (10 mg, 0,08 mmol, 0,30 ekv). Dobijeni rastvor je mešan 16 sati na sobnoj temperaturi. Rastvor je potom ekstrahovan etil-acetatom (20 mL × 3), a organske faze su spojene i koncentrovane pod vakuumom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela uz eluiranje dihlormetanom/metanolom (10:1). Dobijeno je 100 mg (74%) jedinjenja 2-[2-[2-(4-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-1H-pirazol-1-il)etoksi]etoksi]etil 4-metilbenzen-1-sulfonat kao žute uljane supstance.
Korak 5
U okruglu bočicu zapremine 50 mL unet je rastvor jedinjenja 2-[2-[2-(4-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-1H-pirazol-1-il)etoksi]etoksi]etil 4-metilbenzen-1sulfonat (120 mg, 0,2 mmol, 1,00 ekv) u N,N-dimetilformamidu (5 mL), (2S,4R)-4-hidroksi-1-[2-(3-hidroksi-1,2-oksazol-5-il)-3-metilbutanoil]-N-[[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]metil]pirrolidin-2-karboksamida (130 mg, 0,2 mmol, 1,00 ekv) [pripremljenog prema opisu Qian, Y. et al. u Qian, Y. et al. in WO 2017/030814], (100 mg, 0,4 mmol, 2.00 ekviv). Dobijeni rastvor je mešan 12 sati na 70 °C. Zatim je ekstrahovan etil-acetatom (20 mL × 3), a organske faze su spojene i koncentrovane pod vakuumom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela uz eluiranje dihlormetanom/metanolom (10:1). Dobijeno je 90 mg jedinjenja (2S,4R)-1-[2-[3-(2-[2-[2-(4-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-1H-pirazol-1-il)etoksi]etoksi]etoksi)-1,2-oksazol-5-il]-3-metilbutanoil]-4-hidroksi-N-[[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]metil]pirrolidin-2-karboksamid kao bezbojna uljana supstanca.
Korak 6
U okruglu bočicu zapremine 50 mL unet je rastvor jedinjenja (2S,4R)-1-[2-[3-(2-[2-[2-(4-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-1H-pirazol-1-il)etoksi]etoksi]etoksi)-1,2-oksazol-5-il]-3-metilbutanoil]-4-hidroksi-N-[[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]metil]pirrolidin-2-karboksamid (90,0 mg, 0,10 mmol, 1,00 ekv) u i-propanolu (2 mL) i tetrahidrofuranu (2 mL), a zatim je dodat rastvor koncentrovane hlorovodonične kiseline (12N, 2 mL). Dobijeni rastvor je mešan 1 sat na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Sirovi proizvod je pročišćen pripremnom HPLC hromatografijom sa sledećim uslovima: Kolona: XBridge C18 OBD Prep Column, 100 Å, 5 µm, 19 mm × 250 mm; mobilna faza A: voda (0,1% FA), mobilna faza B: ACN; protok: 20 ml/min; gradijent: 32% B do 41% B za 8 minuta; 254 nm; Rt: 70 min. Dobijeno je 56 mg (65%) jedinjenja (2S,4R)-1-[2-(3-[2-[2-(2-[4-[3-amino-6-(2-hidroksifenil)piridazin-4-il]-1H-pirazol-1-il]etoksi)etoksi]etoksi]-1,2-oksazol-5-il)-3-metilbutanoil]-4-hidroksi-N-[[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]metil]pirrolidin-2-karboksamid kao bela čvrsta supstanca.
Proizvod je prečišćen hiralnom preparativnom HPLC metodom pod sledećim uslovima: kolona, CHIRAL ART celuloza-SB, 2*25 cm,5 um; mobilna faza, Heks--HPLC i etanol-HPLC (zadržavanje 50% etanola--HPLC tokom 24 min); detektor, UV 220/254 nm. Dobijeno je 17.8 mg (34%) jedinjenja (2S,4R)-1-[(2S)-2-(3-[2-[2-(2-[4-[3-amino-6-(2-hidroksifenil)piridazin-4-il]-1H-pirazol-1-il]etoksi]etoksi]etoksi]-1,2-oksazol-5-il)-3-metilbutanoil]-4-hidroksi-N-[[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]metil]pirrolidin-2-karboksamid kao bela čvrsta supstanca [¹H NMR (300 MHz, CD3OD): δ 8.82 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 8.29 -8.18 (m, 1H), 8.11-7.89 (m, 2H), 7.80 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.48-7.41 (m, 1H), 7.37-7.30 (m, 3H), 7.30 - 7.19 (m, 1H), 6.95-6.83 (m, 2H), 5.89 (s, 1H), 4.59- 4.41 (m, 2H), 4.40-4.30 (m, 4H), 4.27- 4.11 (m, 2H), 3.86 (q, J = 5.3 Hz, 2H), 3.75- 3.59 (m, 6H), 3.56 (s, 3H), 2.42 (d, J = 5.0 Hz, 3H), 2.36 - 2.10 (m, 2H), 2.04-2.01 (m, J = 13.1, 8.1, 4.7 Hz, 1H), 1.26 (s, 1H), 0.99 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 0.83 (d, J = 6.8 Hz, 3H)] i 24.4 mg (47%) jedinjenja (2S,4R)-1-[(2R)-2-(3-[2-[2-(2-[4-[3-amino-6-(2-hidroksifenil)piridazin-4-il]-1H-pirazol-1-il]etoksi]etoksi]etoksi]-1,2-oksazol-5-il)-3-metilbutanoil]-4-hidroksi-N-[[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]metil]pirrolidin-2-karboksamid [¹H NMR (300 MHz, CD3OD): δ 8.82 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 8.26 (dd, J = 3.1, 0.8 Hz, 1H), 8.10 -7.96 (m, 2H), 7.86 -7.75 (m, 1H), 7.45-7.30 (m, 4H), 7.25-7.22 (m, 1H), 6.96-6.84 (m, 2H), 5.88 (s, 1H), 4.70- 4.42 (m, 3H), 4.41- 4.33 (m, 3H), 4.28 - 4.17 (m, 2H), 3.87 (t, J = 5.0 Hz, 3H), 3.85 -3.63 (m, 2H), 3.59-3.57 (m, 6H), 2.41 (d, J = 12.2 Hz, 3H), 2.38-2.33(m, 1H), 2.25-2.12 (m, 1H), 2.06-2.02 (m, 1H), 1.26 (s, 1H), 0.97 (dd, J = 6.6, 1.8 Hz, 3H), 0.80 (dd, J = 6.6, 1.8 Hz, 3H)] kao bela čvrsta supstanca.
Primerna jedinjenja 16, 17, 18 i 19 pripremljena su korišćenjem procedura opisanih iznad za primerno jedinjenje 14 i primerno jedinjenje 15.
Primerna sinteza primerenog jedinjenja 22
Korak 1
U okruglu bočicu zapremine 250 mL uneto je (Z)-4-(benziloksi)-N-hidroksibutkarbonimidoil-hlorid (8,7 g, 38,21 mmol, 1,00 ekv), but-3-in-1-ol (3,3 g, 47,08 mmol, 1,23 ekv), etil-acetat (70 mL), voda (70 mL) i natrijum-bikarbonat (4,0 g, 47,61 mmol,
(75%) jedinjenja 2-[3-(3-hidroksipropil)-1,2-oksazol-5-il]-3-metilbutanoične kiseline kao žute uljane supstance.
Korak 7
U okruglu bočicu zapremine 100 mL uneto je 2-[3-(3-hidroksipropil)-1,2-oksazol-5-il]-3-metilbutanoična kiselina (800 mg, 3,52 mmol, 1,00 ekv), (2S,4R)-4-hidroksi-N-[[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]metil]pirrolidin-2-karboksamid-hlorid (1,24 g, 3,50 mmol, 1,00 ekv), N,N-dimetilformamid (15 mL), N-etil-N-izopropilpropan-2-amin (1,82 g, 14,08 mmol, 4,00 ekv) i T3P (1,77 g, 1,20 ekv). Dobijeni rastvor je mešan 2 sati na sobnoj temperaturi. Reakcija je zatim ugašena vodom. Rastvor je ekstrahovan etil-acetatom i ispiran zasićenim rastvorom natrijum-hlorida. Smeša je osušena bezvodnim natrijum-sulfatom i koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela uz eluiranje dihlormetanom/metanolom (5:1). Skupljene frakcije su kombinovane i koncentrovane pod vakuumom. Dobijeno je 870 mg (53%) jedinjenja (2S,4R)-4-hidroksi-1-[[3-(3-hidroksipropil)-1,2-oksazol-5-il]karbonil]-N-[[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]metil]pirrolidin-2-karboksamida kao žuta čvrsta supstanca.
Korak 8
U okruglu bočicu zapremine 50 mL uneto je (2S,4R)-4-hidroksi-1-[2-[3-(3-hidroksipropil)-1,2-oksazol-5-il]-3-metilbutanoil]-N-[[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]metil]pirrolidin-2-karboksamid (870 mg, 1,65 mmol, 1,00 ekv), dihlorometan (10 mL), 4-metilbenzen-1-sulfonil-hlorid (377 mg, 1,98 mmol, 1,20 ekv), trietilamin (334,0 mg, 3,30 mmol, 2,00 ekv) i 4-dimetilaminopiridin (40 mg, 0,33 mmol, 0,20 ekv). Dobijeni rastvor je mešan 4 sati na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je ekstrahovan dihlorometanom i ispiran vodom i zasićenim rastvorom natrijum-hlorida. Smeša je osušena bezvodnim
vodom. Smeša je osušena bezvodnim natrijum-sulfatom i koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela uz eluiranje dihlormetanom/metanolom (12:1). Skupljene frakcije su kombinovane i koncentrovane pod vakuumom. Dobijeno je 72 mg (36%) jedinjenja 2-[2-[3-(5-[1-[(2S,4R)-4-hidroksi-2-([[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]metil]karbamoil)pirrolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il]-1,2-oksazol-3-il)propoksi]etoksi]etil 4-metilbenzen-1-sulfonat kao žute uljane supstance.
Korak 11
U okruglu bočicu zapremine 50 mL uneto je 2-[2-[3-(5-[1-[(2S,4R)-4-hidroksi-2-([[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]metil]karbamoil)pirrolidin-1-il]-3-metil-1-oksobutan-2-il]-1,2-oksazol-3-il)propoksi]etoksi]etil 4-metilbenzen-1-sulfonat (70 mg, 0,09 mmol, 1,00 ekv), 6-[2-(metoksimetoksi)fenil]-4-(1H-pirazol-4-il)piridazin-3-amin (27 mg, 0,09 mmol, 1,00 ekv), acetonitril (2 mL) i kalijum-karbonat (38 mg, 0,27 mmol, 3,00 ekv). Dobijeni rastvor je mešan preko noći na 80 °C, zatim ekstrahovan etil-acetatom i ispiran vodom. Smeša je osušena bezvodnim natrijum-sulfatom i koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je nanesen na kolonu sa silika-gelom uz upotrebu dihlorometana/metanola (10:1). Skupljene frakcije su kombinovane i koncentrovane pod vakuumom. Dobijeno je 30 mg (37%) jedinjenja (2S,4R)-1-[2-[3-(3-[2-[2-(4-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-1H-pirazol-1-il)etoksi]etoksi]propil)-1,2-oksazol-5-il]-3-metilbutanoil]-4-hidroksi-N-[[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]metil]pirrolidin-2-karboksamid kao žute uljane supstance.
Korak 12
U okruglu bočicu zapremine 50 mL uneto je (2S,4R)-1-[2-[3-(3-[2-[2-(4-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-1H-pirazol-1-il)etoksi]etoksi]propil)-1,2-oksazol-5-il]-3-metilbutanoil]-4-hidroksi-N-[[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]metil]pirrolidin-2-karboksamid (27,0 mg, 0,03 mmol, 1,00 ekv), metanol (2 mL) i vodeni rastvor hlorovodonične kiseline (aq) (0,5 mL). Dobijeni rastvor je mešan preko noći na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je razređen vodom. pH vrednost rastvora je podešena na 8 pomoću natrijum-karbonata. Rastvor je ekstrahovan etil-acetatom i ispiran vodom. Smeša je osušena bezvodnim natrijum-sulfatom i koncentrovana pod vakuumom. Sirovi proizvod je pročišćen pripremnom HPLC hromatografijom sa sledećim uslovima: Kolona: XBridge Shield RP18 OBD, 5 µm, 19 × 150 mm; mobilna faza A: voda (0,05% NH₃·H₂O); mobilna faza B: acetonitril; protok: 20 ml/min; gradijent: 34% B do 47% B u 8 min; 220 nm. Dobijeno je 7,6 mg (30%) jedinjenja (2S,4R)-1-[2-(3-[3-[2-(2-[4-[3-amino-6-(2-hidroksifenil)piridazin-4-il]-1H-pirazol-1-il]etoksi)etoksi]propil]-1,2-oksazol-5-il)-3-metilbutanoil]-4-hidroksi-N-[[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]metil]pirrolidin-2-karboksamid kao bele čvrste supstance.
<1>H-NMR: (400 MHz, CD3OD ) δ8.89-8.83 (m, 1H), 8.31-8.26 (m, 1H), 8.08-8.03 (m, 2H), 7.85-7.81 (m, 1H), 7.46-7.21 (m, 5H), 6.96-6.87 (m, 2H), 6.15 (s, 1H), 4.52-4.44 (m, 5H), 4.41-4.31 (m, 3H), 3.91-3.80 (m, 2H), 3.72-3.65 (m, 1H), 3.61-3.35 (m, 6H), 2.62-2.51 (m, 2H), 2.45-2.33 (m, 3H), 2.22-2.15 (m, 1H), 2.10-2.01 (m, 1H), 1.84-1.72 (m, 2H), 1.30-1.24 (m, 1H), 1.03-0.97 (m, 3H), 0.91-0.75 (m, 3H).
Primerna sinteza primernog jedinjenja 23 i primernog jedinjenja 24
U okruglu bočicu zapremine 25 mL uneto je (2S,4R)-1-[2-[3-(3-[2-[2-(2-[4-[3-amino-6-(2-hidroksifenil)piridazin-4-il]-1H-pirazol-1-il]etoksi)etoksi]etoksi]propil)-1,2-oksazol-5-il]-3-metilbutanoil]-4-hidroksi-N-[[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]metil]pirrolidin-2-karboksamid (87 mg, 0,10 mmol, 1,00 ekv) [pripremljeno kao što je opisano za primerno jedinjenje 22] i metanol (10 mL). Dobijeni rastvor je mešan 1 sat na 25 °C. Sirovi proizvod je prečišćen Chiral-Prep-HPLC metodom pod sledećim uslovima: Kolona, CHIRALPAK ID-3; mobilna faza: MtBE (0,1% DEA):EtOH = 80:20; dimenzije: 0,46 × 10 cm; 3 µm; detektor: UV – 254 nm. Dobijeno je 17 mg (20%) jedinjenja (2S,4R)-1-[(2S)-2-[3-(3-[2-[2-(2-[4-[3-amino-6-(2-hidroksifenil)piridazin-4-il]-1H-pirazol-1-il]etoksi)etoksi]etoksi]propil)-1,2-oksazol-5-il]-3-metilbutanoil]-4-hidroksi-N-[[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]metil]pirrolidin-2-karboksamid kao čvrsta materija bledo bele boje [<1>H NMR (300 MHz, CD3OD, ppm ): δ 8.83 (s, 1H), 8.33 (s, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.70-7.67 (d, J=9Hz, 1H), 7.48-7.45 (d, J=9Hz, 1H), 7.37-7.32 (m, 4H), 7.00-6.97 (m, 2H), 6.19 (s, 1H), 4.61-4.58 (m, 1H), 4.50-4.38 (m, 5H), 3.91-3.86 (m, 3H), 3.60-3.51 (m, 8H), 3.50-3.43 (m, 2H), 3.40-3.34 (m, 2H), 2.57-2.52 (m, 2H), 2.46-2.43 (m, 4H), 2.30-2.23 (m, 1H), 2.10-2.04 (m, 1H), 1.73-1.69 (m, 2H), 1.07-1.05 (d, J=6.6Hz, 3H), 0.88-0.86 (d, J=6.9Hz, 3H)] i 21 mg (24%) (2S,4R)-1-[(2R)-2-[3-(3-[2-[2-(2-[4-[3-amino-6-(2-hidroksifenil)piridazin-4-il]-1H-pirazol-1-il]etoksi)etoksi]etoksi]propil)-1,2-oksazol-5-il]-3-metilbutanoil]-4-hidroksi-N-[[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]metil]pirrolidin-2-karboksamid kao bela čvrsta supstanca [<1>H NMR (300 MHz, CD3OD, ppm): δ 8.88 (s, 1H), 8.37 (s, 1H), 8.31 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.69-7.67 (d, J=8.1Hz, ppm), 7.43-7.39 (m, 5H), 7.03-6.99 (m, 2H), 6.21-6.00 (m, 1H), 4.53-4.48 (m, 3H), 4.44-4.40 (m, 3H), 3.92-3.89 (m, 3H), 3.79-3.76 (m, 1H), 3.62-3.54 (m, 7H), 3.50-3.48 (m, 2H), 3.42-3.40 (m, 2H), 2.64-2.61 (m, 2H), 2.46-2.44 (m, 4H), 2.26-2.18 (m, 1H), 2.13-2.04 (m, 1H), 1.82-1.78 (m, 2H), 1.05-1.02 (d, J=6.6Hz, 3H), 0.85-0.82 (d, J=6.9Hz, 3H).
Primeri jedinjenja 25 i 26 pripremljeni su korišćenjem postupaka analognih onima opisanim gore za primerna jedinjenja 22, 23 i 24.
Primerna sinteza primerenog jedinjenja 27
Korak 1
U okruglu bočicu zapremine 50 mL uneto je 2-[2-(2-hidroksietoksi)etoksi]etan-1-ol (257 mg, 1,71 mmol, 3,00 ekv) i N,N-dimetilformamid (5 mL). Zatim je dodat natrijumhidrid (34 mg, 1,42 mmol, 1,50 ekv) na 0 °C tokom 10 minuta. Na to je dodat 4-bromo-2-fluorpiridin (100 mg, 0,57 mmol, 1,00 ekv). Dobijeni rastvor je mešan 3 sati na sobnoj temperaturi. Reakcija je prekinuta dodatkom 5 mL smeše vode i leda. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil-acetatom, a organski slojevi su spojeni. Dobijena smeša je isprana zasićenim rastvorom natrijum-hlorida. Smeša je osušena preko bezvodnog natrijum-sulfata. Ostatak je nanesen na kolonu silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:1). Skupljene frakcije su kombinovane i koncentrovane pod vakuumom. Dobijeno je 90 mg (52%) jedinjenja 2-(2-[2-[(4-bromopiridin-2-il)oksi]etoksi]etoksi)etan-1-ol kao svetložuta tečnost.
Korak 2
U okruglu bočicu zapremine 50 mL, pročišćenu i održavanu pod inertnom atmosferom azota, uneto je 2-(2-[2-[(4-bromopiridin-2-il)oksi]etoksi]etoksi)etan-1-ol (500 mg, 1,63 mmol, 1,00 ekv), terc-butil 3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-karboksilat (347 mg, 1,64 mmol, 1,00 ekv), Cs₂CO₃ (1599 mg, 4,91 mmol, 3,00 ekv), toluen (8 mL) i Ruphos (69 mg, 0,05 ekv). Dobijeni rastvor je mešan 5 sati na 100 °C u uljanoj kupki. Reakcija je prekinuta dodatkom 10 mL vode. Dobijeni rastvor je ekstrahovan dihlorometanom/metanolom, a organske faze su spojene. Dobijena smeša je isprana zasićenim rastvorom natrijum-hlorida. Smeša je osušena preko bezvodnog natrijum-sulfata. Ostatak je nanet na kolonu silika gela uz eluiranje dihlormetanom/metanolom (10:1). Skupljene frakcije su kombinovane i koncentrovane pod vakuumom. Dobijeno je 419 mg (59%) jedinjenja terc-butil 8-(2-[2-[2-(2
U mikrovalnu cev zapremine 10 mL, pročišćenu i održavanu pod azotom, uneto je 2-[2-[2-([4-[3-(3-amino-6-hloropiridazin-4-il)-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il]piridin-2-il]oksi)etoksi]etoksi]etan-1-ol (295 mg, 0,63 mmol, 1,00 ekv), [2-(metoksimetoksi)fenil]boronska kiselina (223 mg, 1,23 mmol, 2,00 ekv), kalijum-karbonat (254 mg, 1,84 mmol, 3,00 ekv), dioksan (4 mL), voda (1 mL), Pd(PPh₃)₄ (70 mg, 0,06 mmol, 0,10 ekv). Reakcioni rastvor je mešan preko noći na 100 °C. Reakcija je zatim prekinuta dodatkom vode. Dobijeni rastvor je ekstrahovan dihlorometanom/metanolom, a organske faze su spojene. Dobijena smeša je isprana zasićenim rastvorom natrijum-hlorida. Smeša je osušena preko bezvodnog natrijum-sulfata. Ostatak je nanet na kolonu silika gela uz eluiranje dihlormetanom/metanolom (10:1). Skupljene frakcije su kombinovane i koncentrovane pod vakuumom. Dobijeno je 221 mg (61%) jedinjenja 2-[2-(2-[[4-(3-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il)piridin-2-il]oksi]etoksi)etoksi]etan-1-ol kao žuta čvrsta supstanca.
Korak 6
U okruglu bočicu zapremine 50 mL uneto je 2-[2-(2-[[4-(3-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il)piridin-2-il]oksi]etoksi)etoksi]etan-1-ol (100 mg, 0,18 mmol, 1,00 ekv), TsCl (50 mg, 0,26 mmol, 1,50 ekv), dihlorometan (5 mL), trietilamin (0,3 mL), 4-dimetilaminopiridin (2 mg, 0,02 mmol, 0,10 ekv). Dobijeni rastvor je mešan 2 sati na sobnoj temperaturi. Reakcija je zatim prekinuta dodatkom vode. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil-acetatom i organske faze su spojene. Smeša je oprana zasićenim rastvorom natrijum-hlorida. Smeša je osušena preko bezvodnog natrijum-sulfata. Ostatak je nanet na kolonu silika gela uz eluiranje dihlormetanom/metanolom (10:1). Skupljene frakcije su kombinovane i koncentrovane pod vakuumom. Dobijeno je 97 mg (76%) jedinjenja 2-[2-(2-[[4-(3-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il)piridin-2-il]oksi]etoksi)etoksi]etil 4-metilbenzen-1-sulfonat kao žuta čvrsta supstanca.
Korak 7
U okruglu bočicu zapremine 50 mL uneto je 2-[2-(2-[[4-(3-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il)piridin-2-il]oksi]etoksi)etoksi]etil 4-metilbenzen-1-sulfonat (87 mg, 0,12 mmol, 1,00 ekv), N,N-dimetilformamid (54 mg, 0,75 mmol, 1,00 ekv), (2S,4R)-4-hidroksi-1-[2-(3-hidroksi-1,2-oksazol-5-il)-3-metilbutanoil]-N-[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]metilpirrolidin-2-karboksamid (79 mg, 0,16 mmol, 2,00 ekv), Cs₂CO₃ (5 g, 15,35 mmol, 127,15 ekv). Dobijeni rastvor je mešan 4 sati na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je ekstrahovan smešom dihlorometan/metanol, a organske faze su spojene. Smeša je oprana zasićenim rastvorom natrijum-hlorida. Smeša je osušena preko bezvodnog natrijum-sulfata. Ostatak je nanet na kolonu silika gela uz eluiranje dihlormetanom/metanolom (5:1). Skupljene frakcije su kombinovane i koncentrovane pod vakuumom. Dobijeno je 124 mg (99%) jedinjenja (2S,4R)-1-[2-(3-[2-[2-(2-[[4-(3-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il)piridin-2-il]oksi]etoksi)etoksi]etoksi]-1,2-oksazol-5-il)-3-metilbutanoil]-4-hidroksi-N-[[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]metil]pirrolidin-2-karboksamid kao žuta čvrsta supstanca.
Korak 8
Primeri jedinjenja 29 i 30 pripremljeni su korišćenjem postupaka analognih onima opisanim za primerna jedinjenja 27 i 28.
Primerna sinteza primerenog jedinjenja 31
Korak 1
U okruglu bočicu zapremine 50 mL dodato je 2-(oksan-2-iloksi)etan-1-ol (4,5 g, 30,78 mmol, 1,00 ekv), tetrahidrofuran (10 mL), rastvor terc-BuOK (3,6 g, 32,08 mmol, 2,00 ekv) u tetrahidrofuranu (60 mL). Nakon toga je dodat 3-bromoprop-1-in (2,61 mL, 1,00 ekv) kap po kap uz mešanje na 0°C. Dobijeni rastvor je mešan preko noći na sobnoj temperaturi. Reakcija je zatim prekinuta dodatkom vode/leda. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil acetatom, a organski slojevi su spojeni. Smeša je oprana zasićenim rastvorom natrijum-hlorida. Smeša je osušena preko bezvodnog natrijum-sulfata. Ostatak je nanet na kolonu silika gela pomoću elucije etil acetatom/petrol etrom (1:5). Skupljene frakcije su kombinovane i koncentrovane pod vakuumom. Dobijeno je 2,8 g (49%) jedinjenja 2-[2-(prop-2-in-1-iloksi)etoksi]oksan kao žuta uljasta supstanca.
Korak 2
U mikrotalasnu cev zapremine 10 mL, ispranu i održavanu pod inertnom atmosferom azota, dodato je 2-[2-(prop-2-in-1-iloksi)etoksi]oksan (2,8 g, 15,20 mmol, 1,00 ekv), ZrCp₂HCl (390 mg, 0,10 ekv), trietilamin (153 mg, 1,52 mmol, 0,10 ekv), pinakolboran (2,5 mL). Dobijeni rastvor je mešan preko noći na 68 °C u uljanoj kupki. Reakcija je zatim prekinuta dodatkom NH₄Cl. Smeša je ohlađena na 0 °C pomoću kupke sa vodom i ledom. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil-acetatom i organske faze su spojene. Smeša je oprana zasićenim rastvorom natrijum-hlorida. Smeša je osušena preko bezvodnog natrijum-sulfata. Ostatak je nanet na kolonu silika gela pomoću elucije etil acetatom/petrol etrom (1:5). Skupljene frakcije su kombinovane i koncentrovane pod vakuumom. Dobijeno je 3,01 g (63%) jedinjenja 4,4,5,5-tetrametil-2-[(1E)-3-[2-(oksan-2-iloksi)etoksi]prop-1-en-1-il]-1,3,2-dioksaborolan kao žuta tečnost.
Korak 3
U mikrotalasnu cev zapremine 10 mL, ispranu i održavanu pod inertnom atmosferom azota, dodato je 4,4,5,5-tetrametil-2-[(1E)-3-[2-(oksan-2-iloksi)etoksi]prop-1-en-1-il]-1,3,2-dioksaborolan (1 g, 3,20 mmol, 1,00 ekv), Pd(PPh₃)₄ (800 mg, 0,69 mmol, 1,00 ekv), kalijumkarbonat (8 g, 57,88 mmol, 18,07 ekv), dioksan (2 g), terc-butil 8-(2-bromopiridin-4-il)-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-karboksilat (902 mg, 2,45 mmol, 3,00 ekv), voda (252 mg, 0,10 ekv). Dobijeni rastvor je mešan preko noći na 100 °C u uljanoj kupki. Reakcija je zatim prekinuta dodatkom vode. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil acetatom, a organski slojevi su spojeni. Dobijena smeša je isprana zasićenim rastvorom natrijum-hlorida. Smeša je osušena preko bezvodnog natrijum-sulfata. Ostatak je nanet na kolonu silika gela uz eluiranje dihlormetanom/metanolom (10:1). Skupljene frakcije su kombinovane i koncentrovane pod vakuumom. Dobijeno je 639 mg (42%) jedinjenja terc-butil 8-[2-[(1E)-3-[2-(oksan-2-iloksi)etoksi]prop-1-en-1-il]piridin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-karboksilat kao žuta uljasta supstanca.
Korak 4
U okruglu bočicu zapremine 50 mL dodato je terc-butil 8-[2-[(1E)-3-[2-(oksan-2-iloksi)etoksi]prop-1-en-1-il]piridin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-karboksilat (639 mg, 1,35 mmol, 1,00 ekv), palladijum na ugljeniku (200 mg) i metanol (15 mL), a smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi pod vodonikovom atmosferom. Čvrsta faza je filtrirana, a filtrat koncentrovan. Dobijeno je 639 mg (100%) jedinjenja terc-butil 8-(2-[3-[2-(oksan-2-iloksi)etoksi]propil]piridin-4-il)-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-karboksilat kao žuta uljasta supstanca.
Korak 5
U okruglu bočicu zapremine 50 mL dodato je terc-butil 8-(2-[3-[2-(oksan-2-iloksi)etoksi]propil]piridin-4-il)-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-karboksilat (639 mg, 1,34 mmol, 1,00 ekv), metanol (15 mL), i kroz rastvor je propuštan gasoviti hlorovodonik. Dobijeni rastvor je mešan 3 sati na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Dobijeno je 387 mg (100%) jedinjenja 2-[3-(4-[3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il]piridin-2-il)propoksi]etan-1-ol kao žuta uljasta supstanca.
Korak 6
U mikrotalasnu cev zapremine 10 mL dodato je 2-[3-(4-[3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il]piridin-2-il)propoksi]etan-1-ol (387 mg, 1,85 mmol, 1,00 ekv), 4-bromo-6-hloropiridazin-3-amin (1,54 g, 7,39 mmol, 4,00 ekv), DMSO (8 mL), DIEA (1,53 mL, 5,00 ekv). Reakciona smeša je zračena mikrotalasima 3 sata na 130 °C. Reakcija je zatim prekinuta dodatkom vode. Dobijeni rastvor je ekstrahovan sa dihlorometan/MeOH = 10:1, a vodene frakcije su objedinjene i koncentrisane pod vakuumom. Ostatak je nanesen na kolonu sa silika-gelom uz upotrebu dihlorometana/metanola (7:3). Skupljene frakcije su kombinovane i koncentrovane pod vakuumom. Dobijeno je 519 mg (67%) jedinjenja 2-(3-[4-[3-(3-amino-6-hloropiridazin-4-il)-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il]piridin-2-il]propoksi)etan-1-ol kao žuta uljasta supstanca.
Korak 7
U bočicu zapremine 50 mL, ispranu i održavanu pod inertnom atmosferom azota, dodato je 2-(3-[4-[3-(3-amino-6-hloropiridazin-4-il)-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il]piridin-2-il]propoksi)etan-1-ol (650 mg, 1,55 mmol, 1,00 ekv), [2-(metoksimetoksi)fenil]boronska kiselina (566 mg, 3,11 mmol, 2,00 ekv), dioksan (8 mL), voda (2 mL), kalijum-karbonat (644 mg, 4,66 mmol, 3,00 ekv), Pd(PPh₃)₄ (180 mg, 0,16 mmol, 0,10 ekv). Dobijeni rastvor je mešan 3 sati na 100 °C u uljanoj kupki. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je primenjen na kolonu sa silika-gelom, eluiran smešom metanol/H2O (85:15). Skupljene frakcije su kombinovane i koncentrovane pod vakuumom. Dobijeno je 400 mg (50%) jedinjenja 2-[3-[4-(3-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il)piridin-2-il]propoksi]etan-1-ol kao žuta uljasta supstanca.
Korak 8
U okruglu bočicu zapremine 50 mL dodato je 2-[3-[4-(3-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il)piridin-2-il]propoksi]etan-1-ol (400 mg, 0,77 mmol, 1,00 ekv), dihlorometan (15 mL), TsCl (219 mg, 1,15 mmol, 1,50 ekv), trietilamin (155 mg, 1,53 mmol, 2,00 ekv), 4-dimetilaminopiridin (9,4 mg, 0,08 mmol, 0,10 ekv). Dobijeni rastvor je mešan preko noći na sobnoj temperaturi. Reakcija je zatim prekinuta dodatkom vode. Rastvor je ekstrahovan dihlorometanom, a organske faze su spojene. Smeša je oprana zasićenim rastvorom natrijum-hlorida. Smeša je osušena preko bezvodnog natrijum-sulfata. Ostatak je nanet na kolonu silika gela uz eluiranje dihlormetanom/metanolom (10:1). Skupljene frakcije su kombinovane i koncentrovane pod vakuumom. Dobijeno je 330 mg (64%) jedinjenja 2-[3-[4-(3-[3-amino-6-[2(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il)piridin-2-il]propoksi]etil 4-metilbenzen-1-sulfonat kao žuta čvrsta supstanca.
Korak 9
U okruglu bočicu zapremine 50 mL, ispranu i održavanu pod inertnom atmosferom azota, dodato je metil 2-(6-hloropiridin-3-il)acetat (500 mg, 2,69 mmol, 1,00 ekv), terc-butil piperazin-1-karboksilat (502 mg, 2,70 mmol, 1,00 ekv), Cs₂CO₃ (2,63 g, 8,07 mmol, 3,00 ekv), toluen (10 mL), RuPhosPd (115 mg, 0,05 ekv). Dobijeni rastvor je mešan preko noći na 100 °C u uljanoj kupki. Reakcija je zatim prekinuta dodatkom vode. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil-acetatom, a organski slojevi su spojeni. Smeša je oprana zasićenim rastvorom natrijum-hlorida. Smeša je osušena preko bezvodnog natrijum-sulfata. Ostatak je nanet na kolonu silika gela pomoću elucije etil acetatom/petrol etrom (1:1). Skupljene frakcije su kombinovane i koncentrovane pod vakuumom. Dobijeno je 319 mg (35%) jedinjenja tercbutil 4-[5-(2-metoksi-2-oksoetil)piridin-2-il]piperazin-1-karboksilat kao žuta čvrsta supstanca.
Korak 10
U okruglu bočicu zapremine 50 mL dodato je terc-butil 4-[5-(2-metoksi-2-oksoetil)piridin-2-il]piperazin-1-karboksilat (319 mg, 0,95 mmol, 1,00 ekv), dihlorometan (8 mL), trifluorsirćetna kiselina (2 mL). Dobijeni rastvor je mešan 2 h na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Dobijeno je 223 mg (100%) jedinjenja metil 2-[6-(piperazin-1-il)piridin-3-il]acetat kao žuta uljasta supstanca.
Korak 11
U okruglu bočicu zapremine 50 mL dodato je metil 2-[6-(piperazin-1-il)piridin-3-il]acetat (101 mg, 0,43 mmol, 1,00 ekv), 2-[3-[4-(3-[3-amino-6-[2(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il)piridin-2-il]propoksi]etil 4-metilbenzen-1-sulfonat (320 mg, 0,47 mmol, 1,10 ekv), acetonitril (4 mL), kalijum-karbonat (298 mg, 2,16 mmol, 5,00 ekv), NaI (193 mg, 3,00 ekv). Dobijeni rastvor je mešan preko noći na 60 °C. Nastala smeša je koncentrovana pod vakumom. Ostatak je podeljen između dihlorometana i vode, organski sloj je odvojen i ispiran zasićenim slanim rastvorom. Smeša je osušena preko bezvodnog natrijum-sulfata. Ostatak je nanet na kolonu silika gela uz eluiranje dihlormetanom/metanolom (5:1). Skupljene frakcije su kombinovane i koncentrovane pod vakuumom. Dobijeno je 94 mg (30%) jedinjenja metil 2-[6-[4-(2-[3-[4-(3-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il)piridin-2-il]propoksi]etil)piperazin-1-il]piridin-3-il]acetat kao žuta čvrsta supstanca.
Korak 12
U okruglu bočicu zapremine 50 mL dodato je metil 2-[6-[4-(2-[3-[4-(3-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il)piridin-2-il]propoksi]etil)piperazin-1-il]piridin-3-il]acetat (94 mg, 0,13 mmol, 1,00 ekv), metanol (5 mL), voda (2 mL) i LiOH (15 mg, 0,64 mmol, 5,00 ekv). Dobijeni rastvor je mešan 2 dana na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Rastvor je mešan 7 sati na sobnoj temperaturi, zatim razblažen sa 10 mL vode. Rastvor je ekstrahovan dihlorometanom, a vodeni slojevi su kombinovani i koncentrovani pod vakumom. Ostatak je rastvoren u 10 mL metanola. Čvrste supstance su filtrirane. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Dobijeno je 72 mg (78%) jedinjenja 2-[6-[4-(2-[3-[4-(3-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il)piridin-2-il]propoksi]etil)piperazin-1-il]piridin-3-il]sirćetna kiselina kao žuta čvrsta supstanca.
2-[6-[4-(2-[3-[4-(3-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il)piridin-2-il]propoksi]etil)piperazin-1-il]piridin-3-il]sirćetna kiselina je konvertovana u krajnje jedinjenje, (2S,4R)-1-((2S)-2-(2-(6-(4-(2-(3-(4-(3-(3-amino-6-(2-hidroksifenil)piridazin-4-il)-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il)piridin-2-il)propoksi)etil)piperazin-1-il)piridin-3-il)acetamido)-3,3-dimetilbutanoil)-4-hidroksi-N-(4-(4-metiltiazol-5-il)benzil)pirrolidin-2-karboksamid, prema šemi ispod i koristeći procedure opisane ranije za prethodne primere.
Primerno jedinjenje 50 je pripremljeno korišćenjem procedura opisanih za primerno jedinjenje 31.
Primerna sinteza primerenog jedinjenja 32
Korak 1
U bočicu zapremine 250 mL sa tri grla, koja je prethodno pročišćena i održavana pod inertnom atmosferom azota, dodata je rastvor 2-[2-(2-hidroksietoksi)etoksi]etan-1-ola (10,0 g, 66,59 mmol, 1,00 ekv) u dihlorometanu (100 mL), (dietiloksonio)trifluoroborata (1,9 g, 13,33 mmol, 0,20 ekv) i etil 2-diazoacetata (3,8 g, 0,50 ekv). Dobijeni rastvor je mešan 3 sati na sobnoj temperaturi. Reakcija je zatim prekinuta dodatkom vode. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil-acetatom, a organski slojevi su spojeni. Dobijena smeša je isprana slanim rastvorom. Smeša je osušena preko bezvodnog natrijum-sulfata. Ostatak je nanesen na kolonu silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:1). Skupljene frakcije su kombinovane i koncentrovane pod vakuumom. Dobijeno je 3,6 g (23%) etil 2-[2-[2-(2-hidroksietoksi)etoksi]etoksi]acetata kao žute uljane tečnosti.
Korak 2
U bočicu zapremine 50 mL, prečišćenu i održavanu pod inertnom atmosferom azota, dodata je rastvor etil 2-[2-[2-(2-hidroksietoksi)etoksi]etoksi]acetata (1,0 g, 4,23 mmol, 1,00 ekv) u dihlorometanu (20 mL), 4-metilbenzen-1-sulfonil hlorida (970 mg, 5,09 mmol, 1,20 ekv), trietilamina (860,0 mg, 8,50 mmol, 2,00 ekv). Dobijeni rastvor je mešan 5 sati na sobnoj temperaturi. Reakcija je zatim prekinuta dodatkom vode. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etilacetatom, a organski slojevi su spojeni. Dobijena smeša je isprana slanim rastvorom. Smeša je osušena preko bezvodnog natrijum-sulfata. Ostatak je nanesen na kolonu silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:1). Skupljene frakcije su kombinovane i koncentrovane pod vakuumom. Dobijeno je 1,1 g (65%) etil 2-[2-[2-(2-[[(4-metilbenzen)sulfonil]oksi]etoksi)etoksi]etoksi]acetata kao žute uljane tečnosti.
Korak 3
U bočicu zapremine 50 mL, prečišćenu i održavanu pod inertnom atmosferom azota, dodata je rastvor etil 2-[2-[2-(2-[[(4-metilbenzen)sulfonil]oksi]etoksi)etoksi]etoksi]acetata (1,0 g, 2,56 mmol, 1,20 ekv) u N,N-dimetilformamidu (20 mL), 6-bromopiridin-2-ola (370 mg, 2,13 mmol, 1,00 ekv), Cs2CO3 (2,1 g, 6,45 mmol, 3,00 ekv). Reakcioni rastvor je mešan 12 sati na 80°C. Reakcija je zatim prekinuta dodatkom vode. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil-acetatom i organske faze su spojene. Dobijena smeša je isprana slanim rastvorom. Smeša je osušena preko bezvodnog natrijum-sulfata. Ostatak je nanesen na kolonu silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:1). Skupljene frakcije su kombinovane i koncentrovane pod vakuumom. Dobijeno je 800 mg (96%) etil 1-(6-bromopiridin-2-il)-1,4,7,10-tetraoksadodekan-12-oata kao žuta čvrsta supstanca.
Etil 1-(6-bromopiridin-2-il)-1,4,7,10-tetraoksadodekan-12-oat je konvertovan u krajnje jedinjenje, (2S,4R)-1-[(2S)-2-(1-[6-[(1R,4R)-5-[3-amino-6-(2-hidroksifenil)pyridazin-4-il]-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il]piridin-2-il]-1,4,7,10-tetraoksadodekan-12-amido)-3,3-dimetilbutanoil]-4-hidroksi-N-[[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]metil]pirolidin-2-karboksamid, prema šemi ispod i korišćenjem procedura analognih onima opisanim za prethodne primere.
Primerna sinteza primerenog jedinjenja 33
Korak 1
U bočicu zapremine 250 mL dodato je 1-bromo-4-etilbenzen (5,5 g, 29,8 mmol, 1,0 ekv), (100 mL), AIBN (490 mg, 3,0 mmol, 0,1 ekv), N-bromosukcinimid (5,34 g, 30,0 mmol, 1,0 ekv). Dobijeni rastvor je mešan 3 sati na 90 °C. Smeša je zatim koncentrovana pod vakuumom. Dobijeno je 5,4 g (68%) 1-bromo-4-(1-bromoetil)benzena kao žute uljane tečnosti.
Korak 2
U bočicu zapremine 100 mL dodato je 6-[2-(metoksimetoksi)fenil]-4-(1H-pirazol-4-il)piridazin-3-amin (300 mg, 1,0 mmol, 1,0 ekv), N,N-dimetilformamid (5,0 mL), 1-bromo-4-(1-bromoetil)benzen (400,0 mg, 1,5 mmol, 1,5 ekv), kalijum-karbonat (414 mg, 3,0 mmol, 3,0 ekv). Dobijeni rastvor je mešan 3 sata na 60°C. Reakcija je zatim zaustavljena dodatkom 10 mL vode. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil-acetatom (3 × 20,0 mL), a organski slojevi su spojeni i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silicijum-dioksidu koristeći eluente diklormetan/metanol (1:10). Dobijeno je 300 mg (62%) jedinjenja 4-[1-[1-(4-bromofenil)etil]-1H-pirazol-4-il]-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-3-amin kao braon čvrsta supstanca.
Korak 3
U bočicu zapremine 250 mL dodati su prop-2-in-1-ol (10 g, 178,4 mmol, 1,0 ekv), tetrahidrofuran (100,0 mL), natrijum-hidrid (6,4 g, 266,7 mmol, 0,9 ekv) i terc-butil 2-bromoacetat (28 g, 143,6 mmol, 0,8 ekv). Dobijeni rastvor je mešan 3 sati na sobnoj temperaturi. Reakcija je zatim zaustavljena dodatkom 20 mL vodenog rastvora amonijumhlorida. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil-acetatom (3 × 30 mL), a organski slojevi su spojeni i koncentrovani pod vakuumom. Dobijeno je 24,0 g (90%) terc-butil 2-(prop-2-in-1-iloksi)acetata kao žute čvrste supstance.
Korak 4
U bočicu zapremine 250 mL dodat je terc-butil 2-(prop-2-in-1-iloksi)acetat (6,6 g, 38,8 mmol, 1,0 ekv), trietilamin (400,0 mg, 3,9 mmol, 0,1 ekv), pinakolboran (20,0 mL), ZrCp₂HCl (1 g, 0,1 ekv). Reakcioni rastvor je mešan 12 minuta na 60°C. Reakcija je zatim zaustavljena dodatkom 10 mL leda/vode. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil-acetatom (3 × 30 mL), a organski slojevi su spojeni. Ostatak je nanet na kolonu silika gela pomoću elucije etil acetatom/petrol etrom (1:5). Dobijeno je 5,0 g (43%) terc-butil 2-[[(2E)-3-(tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)prop-2-en-1-il]oksi]acetata kao žuto ulje.
Korak 5
U zaptivenu cev zapremine 10 mL dodat je 4-[1-[1-(4-bromofenil)etil]-1H-pirazol-4-il]-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-3-amin (300 mg, 0,6 mmol, 1,0 ekv), terc-butil 2-[[(2E)-3-(tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)prop-2-en-1-il]oksi]acetat (279 mg, 0,9 mmol, 1,5 ekv), Pd(PPh₃)₄ (72 mg, 0,06 mmol, 0,1 ekv), kalijum-karbonat (259 mg, 1,9 mmol, 3,0 ekv), dioksan (4,0 mL) i H₂O (1,0 mL). Dobijeni rastvor je mešan 5 sati na 90 °C. Smeša je zatim koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela uz eluiranje dihlormetanom/metanolom (10:1). Dobijeno je 200 mg (56%) terc-butil 2-[[(2E)-3-[4-[1-(4-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-1H-pirazol-1-il)etil]fenil]prop-2-en-1-il]oksi]acetata kao žuta čvrsta supstanca.
Korak 6
U okruglu bočicu zapremine 100 mL dodat je terc-butil 2-[[(2E)-3-[4-[1-(4-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-1H-pirazol-1-il)etil]fenil]prop-2-en-1-il]oksi]acetat (93 mg, 0,2 mmol, 1,0 ekv), metanol (5,0 mL), paladijum na ugljeniku (100 mg). Dobijeni rastvor je mešan pod vodonikovom atmosferom 1 sat na sobnoj temperaturi. Čvrste supstance su filtrirane. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Dobijeno je 56 mg (60%) terc-butil 2-(3-[4-[1-(4-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-1H-pirazol-1-il)etil]fenil]propoksi)acetata kao žuta čvrsta supstanca.
Korak 7
U okruglu bočicu zapremine 100 mL dodat je terc-butil 2-(3-[4-[1-(4-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-1H-pirazol-1-il)etil]fenil]propoksi)acetat (56 mg, 0,1 mmol, 1,0 ekv), dihlorometan (10,0 mg), trifluorsirćetna kiselina (5 mL). Dobijeni rastvor je mešan 2 sati na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Dobijeno je 45 mg (90%) 2-(3-[4-[1-(4-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-1H-pirazol-1-il)etil]fenil]propoksi)sirćetne kiseline kao braon čvrste supstance.
Korak 8
U okruglu bočicu zapremine 25 mL dodat je 2-[3-[4-(1-[4-[3-amino-6-(2-hidroksifenil)piridazin-4-il]-1H-pirazol-1-il]etil)fenil]propoksi]sirćetna kiselina (26 mg, 0,06 mmol, 1,0 ekv), N,N-dimetilformamid (5 mL), (2S,4R)-1-[(2S)-2-amino-3,3-dimetilbutanoil]-4-hidroksi-N-[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]metilpirolidin-2-karboksamid (30 mg, 0,07 mmol, 1,2 ekv), DIEA (21 mg, 0,2 mmol, 3,0 ekv), T3P (53 mg, 1,2 ekv). Dobijeni rastvor je mešan 1 sat na sobnoj temperaturi. Reakcija je prekinuta dodatkom 0,5 mL vode. Čvrste supstance su filtrirane. Sirovi proizvod (5 mL) je prečišćen pomoću preparativne HPLC pod sledećim uslovima: Kolona, XBridge Prep C18 OBD, 150 mm, 5 µm; mobilna faza: voda (10 mmol/L amonijum-bikarbonat) i acetonitril (od 45,0% ACN do 52,0% u roku od 7 min); detektor: UV 254/220 nm. Dobijeno je 6 mg (12%) jedinjenja (2S,4R)-1-[(2S)-2-(2-[3-[4-(1-[4-[3-amino-6-(2-hidroksifenil)piridazin-4-il]-1H-pirazol-1-il]etil)fenil]propoksi]acetamido)-3,3-dimetilbutanoil]-4-hidroksi-N-[[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]metil]pirolidin-2-karboksamida kao siva čvrsta supstanca.
<1>H NMR (300 MHz, Metanol-d4) δ 8.79 (s, 1H), 8.35-8.23 (m, 1H), 8.09-7.97 (m, 2H), 7.80 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.43-7.37 (m, 2H), 7.31 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.24 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.20 (s, 4H), 6.89 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 5.64 - 5.52 (m, 1H), 4.66 (s, 1H), 4.60 - 4.44 (m, 3H), 4.27 (d, J = 15.5 Hz, 1H), 3.92 (d, J = 4.6 Hz, 2H), 3.88 - 3.74 (m, 2H), 3.52 (d, J = 6.2 Hz, 2H), 2.71 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 2.37 (s, 3H), 2.18 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 2.07 (dd, J = 9.4, 4.2 Hz, 1H), 1.89 (dd, J = 7.3, 1.2 Hz, 6H), 1.26 (s, 1H), 1.10-0.95 (d, J = 1.6 Hz, 9H), 0.95-0.90 (m, 1H).
Primerna sinteza primerenog jedinjenja 34
Primerno jedinjenje 34 pripremljeno je prema šemi ispod koristeći procedure opisane za druge primere iznad, kao i procedure poznate i prihvaćene stručnjacima iz ove oblasti.
Primerena sinteza primernih jedinjenja 36 i 37
Primerni jedinjenja 36 i 37 pripremljena su prema šemi ispod koristeći procedure opisane za druge primere iznad, kao i procedure poznate i prihvaćene stručnjacima iz ove oblasti.
Primerena sinteza primernih jedinjenja 38 i 39
Korak 1
U okruglu bočicu zapremine 500 mL dodat je 2-(piperazin-1-il)etan-1-ol (26,0 g, 199,7 mmol, 1,0 ekv), dihlorometan (200,0 mL), trietilamin (40,4 g, 399,3 mmol, 2,0 ekv), benzil-karbonohloridat (40,8 g, 239,2 mmol, 1,2 ekv). Dobijena smeša je mešana 2 sata na 0°C. Reakcija je zatim prekinuta dodatkom 10 mL vode. Nakon toga, smeša je ekstrahovana dihlorometanom (3 × 100 mL), a organski slojevi su spojeni i koncentrisani pod vakuumom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela uz eluiranje dihlormetanom/metanolom (10:1). Dobijeno je 22 g (42%) benzil-4-(2-hidroksietil)piperazin-1-karboksilata kao žute uljane supstance.
Korak 2
U okruglu bočicu zapremine 100 mL dodat je benzil-4-(2-hidroksietil)piperazin-1-karboksilat (5,3 g, 20,1 mmol, 1,0 ekv) i N,N-dimetilformamid (30,0 mL). Zatim je dodat natrijum-hidrid (1,6 g, 66,7 mmol, 1,2 ekv) u toku 5 minuta. Nakon toga je dodat 4-bromo-2-fluorpiridin (3,9 g, 22,2 mmol, 1,1 ekv) u toku 20 minuta. Smeša je mešana 4 sata na 0°C. Reakcija je zatim prekinuta dodatkom 10 mL amonijum-hloridnog vodenog rastvora. Smeša je ekstrahovana etil-acetatom (3 × 50 mL), a organski slojevi su spojeni i koncentrisani pod vakuumom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela uz eluiranje dihlormetanom/metanolom (10:1). Dobijeno je 5,2 g (62%) benzil-4-[2-[(4-bromopiridin-2-il)oksi]etil]piperazin-1-karboksilata kao žute uljane supstance.
Korak 3
U okruglu bočicu zapremine 250 mL, ispranu i održavanu pod inertnom atmosferom azota, dodata je smeša benzil-4-[2-[(4-bromopiridin-2-il)oksi]etil]piperazin-1-karboksilata (2,1 g, 5,0 mmol, 1,0 ekv), RuphosPd II (775,0 mg, 1,0 mmol, 0,2 ekv) i Cs₂CO₃ (4,89 g, 15,0
U okruglu bočicu zapremine 100 mL dodato je: benzil 4-[2-([4-[3-(3-amino-6-hloropiridazin-4-il)-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktano-8-il]piridin-2-il]oksi)etil]piperazin-1-karboksilat (390 mg, 0,7 mmol, 1,0 ekv), dioksan (8,0 mL), voda (2,0 mL), kalijum-karbonat (279 mg, 2,0 mmol, 3,0 ekv), [2-(metoksimetoksi)fenil]boronska kiselina (184,0 mg, 1,0 mmol, 1,50 ekv), Pd(PPh₃)₄ (78 mg, 0,07 mmol, 0,1 ekv). Reakcioni rastvor je mešan 2 sata na 100°C. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil acetatom (3 × 20 mL), a organski slojevi su spojeni i koncentrisani pod vakuumom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela uz eluiranje dihlormetanom/metanolom (10:1). Dobijeno je 120 mg (26%) benzil 4-(2-[[4-(3-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktano-8-il)piridin-2-il]oksi]etil)piperazin-1-karboksilata kao braon čvrsta supstanca.
Korak 7
Rastvor benzil 4-(2-[[4-(3-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktano-8-il)piridin-2-il]oksi]etil)piperazin-1-karboksilata (200 mg, 0,29 mmol, 1,00 ekv) u 10 mL izopropanola dodat je u okruglu bočicu zapremine 100 mL pod azotom, nakon čega je dodat hidroksid paladijuma (100 mg, 0,71 mmol, 2,42 ekv). Bočica je evakuisana i ispirana vodonikom. Dobijeni rastvor je mešan 12 sati na sobnoj temperaturi. Čvrste supstance su filtrirane. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Dobijeno je 70 mg (44%) jedinjenja 6-[2-(metoksimetoksi)fenil]-4-(8-[2-[2-(piperazin-1-il)etoksi]piridin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktano-3-il)piridazin-3-amina kao braon ulje.
Korak 8
U okruglu bočicu zapremine 100 mL dodato je: 4-(tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol (1,9 g, 10,0 mmol, 1,00 ekv), N,N-dimetilformamid (30 mL), etil 2-bromo-3-metilbutanoat (2,1 g, 10,0 mmol, 1,0 ekv) i cezijum-karbonat (10,0 g, 30,7 mmol, 3,0 ekv). Dobijeni rastvor je mešan 12 sata na 90°C. Reakcija je zatim zaustavljena dodatkom 10 mL vode. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil acetatom (3 × 20 mL), organski slojevi su spojeni i koncentrisani pod vakuumom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela pomoću elucije etil acetatom/petrol etrom (1:6). Dobijeno je 3,3 g (93%) etil 3-metil-2-[4-(tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-il]butanoata kao bela čvrsta supstanca.
Korak 9
U okruglu bočicu zapremine 250 mL dodato je: etil 3-metil-2-[4-(tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-il]butanoat (3,0 g, 9,3 mmol, 1,0 ekv), tetrahidrofuran (30 mL), voda (30 mL) i natrijum-perborat (3,5 g, 23,3 mmol, 2,5 ekv). Dobijeni rastvor je mešan 12 sati na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Rastvor je ekstrahovan etil acetatom (3 × 20 mL), organski slojevi su spojeni i koncentrisani pod vakuumom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela pomoću elucije etil acetatom/petrol etrom (1:1). Dobijeno je 1740 mg (88%) etil 2-(4-hidroksi-1H-pirazol-1-il)-3-metilbutanoata kao bela čvrsta supstanca.
Korak 10
U okruglu bočicu zapremine 50 mL dodato je: etil 2-(4-hidroksi-1H-pirazol-1-il)-3-metilbutanoat (3,5 g, 16,5 mmol, 1,0 ekv), metanol (10 mL), voda (10 mL) i natrijumhidroksid (2,7 g, 67,5 mmol, 4,0 ekv). Dobijeni rastvor je mešan 12 sati na sobnoj temperaturi. pH vrednost rastvora je podešena na 2 pomoću 2M HCl. Sirovi proizvod je pročišćen pripremnom HPLC hromatografijom sa sledećim uslovima: Kolona, XBridge Shield RP18 OBD Column, 19 × 150 mm, 5 μm; mobilna faza: voda (0,1% FA) i acetonitril (0,0% acetonitrila do 4,0% za 2 min, do 20,0% za 8 min); detektor: UV 254 nm. Dobijeno je 1,5 g (49%) 2-(4-hidroksi-1H-pirazol-1-il)-3-metilbutanoične kiseline kao belo ulje.
Korak 11
U okruglu bočicu zapremine 100 mL dodato je: 2-(4-hidroksi-1H-pirazol-1-il)-3-metilbutanoična kiselina (500 mg, 2,7 mmol, 1,0 ekv), N,N-dimetilformamid (20 mL), (2S,4R)-4-hidroksi-N-[(1S)-1-[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]etil]pirolidin-2-karboksamidhidrohlorid (900 mg, 2,5 mmol, 0,9 ekv), DIEA (1,1 g, 8,5 mmol, 3,0 ekv), T3P (2,6 g, 1,5 ekv). Dobijeni rastvor je mešan 1 sat na sobnoj temperaturi. Reakcija je prekinuta dodatkom 5 mL vode. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil-acetatom (30 mL × 3), a organske faze su spojene i koncentrovane pod vakuumom. Ostatak je nanesen na kolonu sa silika-gelom uz upotrebu dihlorometana/metanola (10:1). Dobijeno je 800 mg (59%) jedinjenja (2S,4R)-4-hidroksi-1-[2-(4-hidroksi-1H-pirazol-1-il)-3-metilbutanoil]-N-[(1S)-1-[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]etil]pirolidin-2-karboksamida kao žuta čvrsta supstanca.
Korak 12
U zatvorenu cev zapremine 5 mL dodato je: (2S,4R)-4-hidroksi-1-[2-(4-hidroksi-1H-pirazol-1-il)-3-metilbutanoil]-N-[(1S)-1-[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]etil]pirolidin-2-karboksamid (300 mg, 0,60 mmol, 1,0 ekv), N,N-dimetilformamid (5,0 mL), 1,2-dibromoetan (222 mg, 1,2 mmol, 2,0 ekv), kalijum-karbonat (250 mg, 1,8 mmol, 3,0 ekv). Dobijeni rastvor je mešan 12 sata na 70°C. Reakcija je zatim zaustavljena dodatkom 1 mL vode. Sirovi proizvod je pročišćen pripremnom HPLC hromatografijom sa sledećim uslovima: Kolona, XBridge Shield RP18 OBD, 5 μm, 19 × 150 mm; mobilna faza: voda (10 mmol/L amonijumbikarbonat) i acetonitril (35,0% do 47,0% u 8 min); detekcija: UV 254 nm. Dobijeno je 120 mg (33%) jedinjenja (2S,4R)-1-[2-[4-(2-bromoetoksi)-1H-pirazol-1-il]-3-metilbutanoil]-4-hidroksi-N-[(1S)-1-[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]etil]pirolidin-2-karboksamida kao žuta čvrsta supstanca.
Korak 13
U okruglu bočicu zapremine 100 mL dodato je: 6-[2-(metoksimetoksi)fenil]-4-(8-[2-[2-(piperazin-1-il)etoksi]piridin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-il)piridazin-3-amin (54,6 mg, 0,1 mmol, 1,0 ekv), acetonitril (10,0 mL), kalijum-karbonat (41 mg, 0,30 mmol, 3,0 ekv), natrijum-jodid (18 mg, 0,1 mmol, 1,2 ekv), (2S,4R)-1-2-[4-(2-bromoetoksi)-1H-pirazol-1-il]-3-metilbutanoil-4-hidroksi-N-[(1S)-1-[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]etil]pirolidin-2-karboksamid (60 mg, 0,1 mmol, 1,0 ekv). Dobijeni rastvor je mešan 12 sata na 70°C. Reakcija je zatim zaustavljena dodatkom 3 mL vode. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil acetatom (3 × 30 mL), a organski slojevi su spojeni i koncentrisani pod vakuumom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela uz eluiranje dihlormetanom/metanolom (10/1). Dobijeno je 30 mg (29%) jedinjenja (2S,4R)-1-(2-[4-[2-(4-[2-[(4-[3-[3-amino-6-(2-hidroksifenil)piridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il]piridin-2-il)oksi]etil]piperazin-1-il)etoksi]-1H-pirazol-1-il]-3-metilbutanoil)-4-hidroksi-N-[(1S)-1-[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]etil]pirolidin-2-karboksamida kao svetlobraon čvrsta supstanca.
Korak 14
U okruglu bočicu zapremine 25 mL dodato je: (2S,4R)-1-[2-(4-[2-[4-(2-[[4-(3-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il)piridin-2-il]oksi]etil)piperazin-1-il]etoksi]-1H-pirazol-1-il)-3-metilbutanoil]-4-hidroksi-N-[(1S)-1-[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]etil]pirolidin-2-karboksamid (40 mg, 0,04 mmol, 1,0 ekv), metanol (8 mL), hlorovodonična kiselina (150 μL). Dobijeni rastvor je mešan 6 sati na sobnoj temperaturi. Reakcija je prekinuta dodatkom 1 mL vode. Sirovi proizvod (5 mL) je prečišćen pomoću preparativne HPLC pod sledećim uslovima: Kolona, XBridge Shield RP18 OBD, 5 μm, 19 × 150 mm; mobilna faza: voda (0,1% mravlje kiseline) i acetonitril (13,0% do 27,0% za 8 min); detekcija: UV 254 nm. Dobijeno je 30 mg (78%) jedinjenja (2S,4R)-1-(2-[4-[2-(4-[2-[(4-[3-[3-amino-6-(2-hidroksifenil)piridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il]piridin-2-il)oksi]etil]piperazin-1-il)etoksi]-1H-pirazol-1-il]-3-metilbutanoil)-4-hidroksi-N-[(1S)-1-[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]etil]pirolidin-2-karboksamida kao bela čvrsta supstanca.
(2S,4R)-1-(2-[4-[2-(4-[2-[(4-[3-[3-amino-6-(2-hidroksifenil)piridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il]piridin-2-il)oksi]etil]piperazin-1-il)etoksi]-1H-pirazol-1-il]-3-metilbutanoil)-4-hidroksi-N-[(1S)-1-[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]etil]pirolidin-2-karboksamid je prečišćen pomoću hromatografije na hiralnoj koloni-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona, Chiralpak IC, 2 × 25 cm, 5 μm; mobilna faza: DCM i metanol (zadržavanje na 50,0% metanola tokom 11 minuta); detekcija: UV 220/254 nm. Dobijeno je 5,6 mg jedinjenja (2S,4R)-1-[(2R)-2-[4-[2-(4-[2-[(4-[3-[3-amino-6-(2-hidroksifenil)piridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il]piridin-2-il)oksi]etil]piperazin-1-il)etoksi]-1H-pirazol-1-il]-3-metilbutanoil]-4-hidroksi-N-[(1S)-1-[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]etil]pirolidin-2-karboksamida kao bela čvrsta supstanca [<1>H NMR (300 MHz, Metanol-d4) δ 8.89 (s, 1H), 7.85 - 7.72 (m, 2H), 7.56 - 7.36 (m, 6H), 7.31 - 7.16 (m, 2H), 6.97 - 6.85 (m, 2H), 6.58 (dd, J = 6.2, 2.2 Hz, 1H), 6.24 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 5.05 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 4.67 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 4.60 - 4.47 (m, 3H), 4.46 (s, 1H), 4.39 (t, J = 5.4 Hz, 2H), 4.06 (t, J = 5.3 Hz, 2H), 3.87 (dd, J = 10.9, 4.2 Hz, 1H), 3.76 (s, 1H), 3.73 - 3.55 (m, 2H), 3.19 - 2.99 (m, 2H), 2.92 - 2.69 (m, 12H), 2.50 (s, 4H), 2.30 - 2.14 (m, 5H), 1.98 (ddd, J = 13.2, 8.7, 4.6 Hz, 1H), 1.54 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 1.41 - 1.26 (m, 4H), 1.20 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 1.08 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 0.93 (d, J = 4.1 Hz, 1H)] and 8.1 mg of (2S,4R)-1-[(2S)-2-[4-[2-(4-[2-[(4-[3-[3-amino-6-(2-hidroksifenil)piridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il]piridin-2-il)oksi]etil]piperazin-1-il)etoksi]-1H-pirazol-1-il]-3-metilbutanoil]-4-hidroksi-N-[(1S)-1-[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]etil]pirolidin-2-karboksamid kao bela čvrsta supstanca [<1>H NMR (300 MHz, Metanold4) δ 8.88 (d, J = 13.8 Hz, 1H), 7.85 - 7.69 (m, 2H), 7.59 - 7.30 (m, 6H), 7.32 - 7.18 (m, 2H), 6.97 - 6.84 (m, 2H), 6.57 (dd, J = 6.1, 2.1 Hz, 1H), 6.23 (t, J = 2.7 Hz, 1H), 4.99 (q, J = 7.0 Hz, 1H), 4.78 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.60 (t, J = 8.2 Hz, 1H), 4.53 (s, 2H), 4.37 (dd, J = 6.8, 4.1 Hz, 3H), 4.04 (t, J = 5.3 Hz, 2H), 3.64 (p, J = 6.7 Hz, 3H), 3.40 - 3.24 (m, 1H), 3.11 (dd, J = 15.8, 4.6 Hz, 2H), 2.88 - 2.64 (m, 12H), 2.49 (d, J = 13.8 Hz, 4H), 2.34 - 2.10 (m, 6H), 2.06 (s, 1H), 1.95 (td, J = 8.5, 4.2 Hz, 1H), 1.50 (d, J = 7.0 Hz, 3H), 1.33 (td, J = 7.8, 7.4, 4.4 Hz, 5H), 1.20 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 1.08 (d, J = 6.7 Hz, 3H), 0.93 (q, J = 6.8 Hz, 1H), 0.74 (dd, J = 19.3, 6.7 Hz, 3H)].
Primerna sinteza primernog jedinjenja 43 i primernog jedinjenja 44
Korak 1
U okruglu bočicu zapremine 250 mL dodat je rastvor 2-bromo-4-fluorpiridina (7,8 g, 44,32 mmol, 1,05 ekv), terc-butil 3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-karboksilata (9 g, 42,4 mmol, 1,00 ekv), DIEA (25 g, 193 mmol, 4,00 ekv) u NMP (120 mL). Dobijeni rastvor mešan je 3 sata na 150°C. Smeša reakcije je zatim ohlađena. Reakcija je prekinuta dodatkom vode (200 mL). Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil-acetatom (3 × 50 mL), a organski slojevi su spojeni. Dobijena smeša je isprana vodom (1 × 50 mL) i slanim rastvorom (1 × 50 mL). Smeša je osušena bezvodnim natrijum-sulfatom i koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela pomoću elucije etil acetatom/petrol etrom (1:2). Na taj način je dobijeno 11,7 g (75%) terc-butil 8-(2-bromopiridin-4-il)-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-karboksilata kao žute čvrste supstance.
Korak 2
U okruglu bočicu zapremine 250 mL dodat je mešani rastvor [(prop-2-in-1-iloksi)metil]benzena (10 g, 68,4 mmol, 1,00 ekv), pinakolborana (10 mL), ZrCp₂HCl (2 g) i trietilamina (850 mg, 8,40 mmol, 0,12 ekv). Dobijeni rastvor je mešan 16 sati na 65 °C u uljanoj kupki. Dobijena smeša je prekinuta dodatkom vode (30 mL), zatim ekstrahovana etilacetatom (3 × 50 mL), a organske faze su objedinjene. Nakon toga, smeša je isprana slanim rastvorom (1 × 50 mL). Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela pomoću elucije etil acetatom/petrol etrom (1:1). Na taj način je dobijeno 12,5 g (67%) jedinjenja 2-[(1E)-3-(benziloksi)prop-1-en-1-il]-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolana kao žute čvrste supstance.
Korak 3
U okruglu bočicu zapremine 250 mL, pročišćenu i održavanu pod inertnom atmosferom azota, dodat je rastvor terc-butil 8-(2-bromopiridin-4-il)-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-karboksilata (4,0 g, 10,9 mmol, 1,00 ekv), 2-[(1E)-3-(benziloksi)prop-1-en-1-il]-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolana (4,48 g, 16,3 mmol, 1,50 ekv), Pd(dppf)₂Cl₂ hlorometanski kompleks (890 mg, 1,09 mmol, 0,10 ekv) i kalijumkarbonata (4,5 g, 32,6 mmol, 3,00 ekv) u smeši rastvarača dioksan/voda (80/20 mL). Dobijeni rastvor mešan je 2 sata na 90°C. Reakciona smeša je zatim ohlađena na sobnu temperaturu. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela pomoću elucije etil acetatom/petrol etrom (1:1). Na taj način je dobijeno 4,55 g (96%) tercbutil 8-[2-[(1E)-3-(benziloksi)prop-1-en-1-il]piridin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-karboksilata kao žute čvrste supstance.
Korak 4
U okruglu bočicu zapremine 250 mL, pročišćenu i održavanu pod inertnom atmosferom azota, dodat je rastvor terc-butil 8-[2-[(1E)-3-(benziloksi)prop-1-en-1-il]piridin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-karboksilata (12,9 g, 29,6 mmol, 1,00 ekv) u smeši metanol/HOAc (200/0,5 mL). U atmosferi azota dodat je Pd na aktivnom uglju (6 g). Bočica je evakuisana i ispirana vodonikom. Smeša je hidrogenizovana na 50 °C u trajanju od 20 sati pomoću balona sa vodonikom. Čvrsta supstanca je uklonjena filtracijom kroz celit, a filtrat je koncentrisan pod smanjenim pritiskom. Dobijeno je 10,2 g (99%) terc-butil 8-[2-(3-hidroksipropil)piridin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-karboksilata kao žutog ulja.
Korak 5
U okruglu bočicu zapremine 100 mL dodat je terc-butil 8-[2-(3-hidroksipropil)piridin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-karboksilat (700 mg, 2,01 mmol, 1,00 ekv) u hlorometanu (30 mL), zatim je dodat Dess-Martin periodinan (1,7 g, 2,00 ekv) na 0-5 °C. Dobijeni rastvor mešan je 6 sati na sobnoj temperaturi. Smeša je koncentrisana pod vakuumom na 15°C. Ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu, eluiranjem hlorometan/metanol (5:1). Na taj način je dobijeno 500 mg (72%) terc-butil 8-[2-(3-okso propil)piridin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-karboksilata kao bele čvrste supstance.
Korak 6
U okruglu bočicu zapremine 50 mL dodat je terc-butil 8-[2-(3-okso propil)piridin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-karboksilat (1,4 g, 4,05 mmol, 1,00 ekv), benzil piperazin-1-karboksilat (1,07 g, 4,86 mmol, 1,20 ekv) u hlorometanu (20 mL). Smeša je mešana 20 minuta, nakon čega je dodat NaBH(OAc)₃ (2,58 g, 12,2 mmol, 3,00 ekv) na 0°C. Dobijeni rastvor je mešan 4 sata na sobnoj temperaturi. Reakcija je zatim prekinuta dodatkom smeše voda/led (50 mL). Rastvor je ekstrahovan hlorometanom (3 × 50 mL), a organske faze su sjedinjene i osušene preko bezvodnog natrijum-sulfata. Ostatak je nanet na kolonu silika gela uz eluiranje dihlormetanom/metanolom (10/1). Na taj način dobijeno je 2,19 g (98%) tercbutil 8-[2-(3-[4-[(benziloksi)karbonil]piperazin-1-il]propil)piridin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-karboksilata kao svetložutog ulja.
Korak 7
U okruglu bočicu zapremine 100 mL dodat je terc-butil 8-[2-(3-[4-[(benziloksi)karbonil]piperazin-1-il]propil)piridin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-karboksilat (2,19 g, 3,98 mmol, 1,00 ekv) u metanolu (20 mL). Gasoviti hlorovodonik je upućen kroz rastvor uz mešanje tokom 1 h na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Dobijeno je 1,79 g (92%) benzil 4-[3-(4-[3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il]piridin-2-il)propil]piperazin-1-karboksilat-hidrohlorida kao svetložute čvrste supstance.
Korak 8
U mikrovalnu cev zapremine 20 mL, pročišćenu i održavanu pod inertnom atmosferom azota, dodat je benzil 4-[3-(4-[3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il]piridin-2-il)propil]piperazin-1-karboksilat-hidrohlorid (1,79 g, 3,68 mmol, 1,00 ekv), 4-bromo-6-hloropiridazin-3-amin (2,47 g, 11,9 mmol, 3,00 ekv), DIEA (5,0 mL) u DMSO (10 mL). Dobijeni rastvor je mešan 16 sati na 130 °C u uljanoj kupki. Reakcija je zatim prekinuta dodatkom smeše voda/led (50 mL). Rastvor je ekstrahovan hlorometanom (3 × 50 mL), a organske faze su sjedinjene i osušene preko bezvodnog natrijum-sulfata. Ostatak je nanet na kolonu silika gela uz eluiranje dihlormetanom/metanolom (5/1). Dobijeno je 1,21 g (57%) benzil 4-(3-[4-[3-(3-amino-6-hloropiridazin-4-il)-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il]piridin-2-il]propil)piperazin-1-karboksilata kao smeđe čvrste supstance. Benzil 4-(3-[4-[3-(3-amino-6-hloropiridazin-4-il)-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il]piridin-2-il]propil)piperazin-1-karboksilat je konvertovan u 6-[2-(metoksimetoksi)fenil]-4-(8-[2-[3-(piperazin-1-il)propil]piridin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-il)piridazin-3-amin (korišćen u koraku 10) prema šemi ispod i korišćenjem procedura opisanih gore za druge primere.
Korak 9
il]-3-metilbutanoil)-4-hidroksi-N-[[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]metil]pirolidin-2-karboksamida kao svetložutog čvrstog jedinjenja.
(2S,4R)-1-(2-[3-[2-(4-[3-[4-(3-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il)piridin-2-il]propil]piperazin-1-il)etoksi]-1,2-oksazol-5-il]-3-metilbutanoil)-4-hidroksi-N-[[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]metil]pirolidin-2-karboksamid je konvertovan u krajnje jedinjenja, (2S,4R)-1-[(2S)-2-[3-(2-[4-[3-(4-[3-[3-amino-6-(2-hidroksifenil)piridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il)piridin-2-il]propil]piperazin-1-il]etoksi)-1,2-oksazol-5-il]-3-metilbutanoil]-4-hidroksi-N-[[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]metil]pirolidin-2-karboksamid i (2S,4R)-1-[(2R)-2-[3-(2-[4-[3-(4-[3-[3-amino-6-(2-hidroksifenil)piridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il)piridin-2-il]propil]piperazin-1-il]etoksi)-1,2-oksazol-5-il]-3-metilbutanoil]-4-hidroksi-N-[[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]metil]pirolidin-2-karboksamid prema šemi ispod i korišćenjem procedura analognih onima prethodno opisanima za druge primere.
Primerna sinteza primernog jedinjenja 40
Primerno jedinjenje 40 je pripremljeno prema šemi ispod, koristeći procedure opisane za druge primere iznad, kao i procedure poznate i prihvaćene među stručnjacima u oblasti.
Primerna sinteza primernog jedinjenja 41 i pimernog jedinjenja 42 Primerna jedinjenja 41 i 42 su pripremljena prema šemi ispod, koristeći procedure opisane iznad za druga primerna jedinjenja.
Primerna sinteza primerenog jedinjenja 45
Korak 1
U okruglu bočicu zapremine 250 mL, dodata je rastvor 2-[2-(prop-2-in-1-iloksi)etoksi]etan-1-ola (1 g, 6,94 mmol, 1,00 ekv) u dihlormetanu (80 mL), trietilamin (2,8 g, 27,67 mmol, 3,00 ekv), 4-dimetilaminopiridin (270 mg, 2,21 mmol, 0,30 ekv) i 4-toluensulfonil hlorid (1,9 g, 9,97 mmol, 1,50 ekv). Dobijeni rastvor je mešan 12 sati na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela pomoću elucije etil acetatom/petrol etrom (1:2). Skupljene frakcije su kombinovane i koncentrovane pod vakuumom. Dobijeno je 1,4 g (68%) jedinjenja 2-[2-(prop-2-in-1-iloksi)etoksi]etil 4-metilbenzen-1-sulfonat kao žuta uljana supstanca.
Korak 2
U zaptivenu cev zapremine 25 mL dodata je rastvor 2-[2-(prop-2-in-1-iloksi)etoksi]etil 4-metilbenzen-1-sulfonata (1,4 g, 4,69 mmol, 1,00 ekv) u N,N-dimetilformamidu (10 mL), kalijum-karbonat (1,6 g, 11,58 mmol, 3,00 ekv), natrijum-jodid (280 mg, 0,50 ekv) i terc-butil 2-(piperazin-1-il)acetat (898 mg, 4,48 mmol, 1,20 ekv). Dobijeni rastvor je mešan 12 sati na 70 °C u uljanoj kupki. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil-acetatom, a organske faze su spojene. Dobijena smeša je isprana fiziološkim rastvorom i koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela pomoću elucije etil acetatom/petrol etrom (1:1). Skupljene frakcije su kombinovane i koncentrovane pod vakuumom. Dobijeno je 910 mg (59%) jedinjenja terc-butil 2-(4-[2-[2-(prop-2-in-1-iloksi)etoksi]etil]piperazin-1-il)acetat kao žuta uljana supstanca.
Korak 3
U zaptivenu cev zapremine 25 mL, dodata je rastvor jedinjenja terc-butil 2-(4-[2-[2-(prop-2-in-1-iloksi)etoksi]etil]piperazin-1-il)acetata (910 mg, 2,79 mmol, 1,00 ekv) u tetrahidrofuranu (10 mL), pinakolboran (630 mg, 2,00 ekv), ZrCp₂HCl (70 mg, 0,10 ekv) i trietilamin (1 mL, 3,00 ekv). Dobijeni rastvor je mešan 12 sati na 80 °C u uljanoj kupki. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela uz eluiranje dihlormetanom/metanolom (10:1). Skupljene frakcije su kombinovane i koncentrovane pod vakuumom. Dobijeno je 720 mg (57%) jedinjenja terc-butil 2-[4-[2-(2-[[(2E)-3-(tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)prop-2-en-1-il]oksi]etoksi)etil]piperazin-1-il]acetata kao žuta uljana supstanca.
Korak 4
U okruglu bočicu zapremine 100 mL, dodata je rastvor jedinjenja terc-butil 3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktana-8-karboksilata (2,0 g, 9,42 mmol, 1,00 ekv) u dimetilsulfoksidu (40 mL), N,N-diizopropiletilamin (714,0 mg, 5,52 mmol, 4,00 ekv), 4-bromo-6-hloropiridazin-3-amin (3,0 g, 14,39 mmol, 1,50 ekv). Dobijeni rastvor je mešan 3 sati na 130 °C u uljanoj kupki. Reakcija je prekinuta dodatkom vode (90 mL). Dobijeni rastvor je ekstrahovan etilacetatom (3 × 80 mL), a organske faze su sjedinjene. Nakon toga, smeša je isprana slanim rastvorom (1 × 100 mL). Smeša je osušena bezvodnim natrijum-sulfatom i koncentrovana pod vakuumom. Preostali materijal je prečišćen kolonskom hromatografijom na silikagelu, eluiranjem sa smešom dihlormetana/metanola (10/1). Skupljene frakcije su kombinovane i koncentrovane pod vakuumom. Dobijeno je 1,7 g (53%) jedinjenja terc-butil 3-(3-amino-6-hloropiridazin-4-il)-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-karboksilata kao žuta čvrsta supstanca.
Korak 5
U 3-vratnu okruglu bočicu zapremine 250 mL, prethodno ispranu i održavanu pod inertnom atmosferom azota, dodata je rastvor jedinjenja terc-butil 3-(3-amino-6-hloropiridazin-4-il)-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-karboksilata (1,7 g, 5,00 mmol, 1,00 ekv) u smeši dioxan/voda (50/10 mL), kalijum-karbonat (2,1 g, 15,19 mmol, 3,00 ekv), (2-hidroksifenil)boronska kiselina (1,04 g, 7,54 mmol, 1,50 ekv), tetrakis(trifenilfosfin)palladijum(0) (578 mg, 0,50 mmol, 0,10 ekv). Dobijeni rastvor je mešan 2 sati na 100 °C u uljanoj kupki. Reakcija je prekinuta dodatkom vode (60 mL). Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil-acetatom (3 × 40 mL), a organske faze su sjedinjene. Nakon toga, smeša je isprana slanim rastvorom (1 × 60 mL). Smeša je osušena bezvodnim natrijumsulfatom i koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela uz eluiranje dihlormetanom/metanolom (10/1). Skupljene frakcije su kombinovane i koncentrovane pod vakuumom. Dobijeno je 1,62 g (81%) jedinjenja terc-butil 3-[3-amino-6-(2-hidroksifenil)pyridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-karboksilata kao žuta čvrsta supstanca.
Korak 6
U okruglu bočicu zapremine 250 mL dodata je rastvor jedinjenja terc-butil 3-[3-amino-6-(2-hidroksifenil)piridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-karboksilata (1,62 g, 4,08 mmol, 1,00 ekv) u dioksanu (50 mL). U navedeni rastvor je uveden (gasoviti) hlorovodonik. Rastvor je mešan 5 sati na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Dobijeno je 1,2 g (88%) jedinjenja 2-(6-amino-5-[3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-il]piridazin-3-il)fenol-hlorida kao žuta čvrsta supstanca.
Korak 7
U okruglu bočicu zapremine 100 mL dodata je rastvor jedinjenja 2-(6-amino-5-[3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-il]piridazin-3-il)fenola (400 mg, 1,35 mmol, 1,00 ekv) u 1-metil-2-pirolidonu (30 mL), N,N-diizopropiletilamin (693 mg, 5,36 mmol, 4,00 ekv), 2-bromo-4-fluoropiridin (355,0 mg, 2,02 mmol, 1,50 ekv). Dobijeni rastvor je mešan 2 sati na 130 °C u uljanoj kupki. Reakcija je prekinuta dodatkom vode (40 mL). Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil-acetatom (3 × 30 mL), a organski slojevi su spojeni. Nakon toga, smeša je isprana slanim rastvorom (1 × 40 mL). Smeša je osušena bezvodnim natrijum-sulfatom i koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela pomoću elucije etil acetatom/petrol etrom (4/1). Skupljene frakcije su kombinovane i koncentrovane pod vakuumom. Dobijeno je 410 mg (67%) jedinjenja 2-[6-amino-5-[8-(2-bromopiridin-4-il)-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-il]piridazin-3-il]fenola kao žuta čvrsta supstanca.
Korak 8
U zaptivenu cev zapremine 20 mL dodat je rastvor jedinjenja terc-butil 2-[4-[2-(2-[[(2E)-3-(tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)prop-2-en-1-il]oksi]etoksi)etil]piperazin-1-il]acetata (628 mg, 1,38 mmol, 1,00 ekv) u smeši dioksan/voda (5:1 mL), tetrakis(trifenilfosfin)palladijum (108 mg, 0,15 mmol, 0,10 ekv), kalijum-karbonat (286 mg, 2,07 mmol, 1,50 ekv), 2-(6-amino-5-((1R,5S)-8-(2-bromopiridin-4-il)-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-il)piridazin-3-il)fenol (500 mg, 1,10 mmol, 0,80 ekv). Dobijeni rastvor je mešan 2 sati na 80 °C u uljanoj kupki. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela uz eluiranje dihlormetanom/metanolom (10:1). Skupljene frakcije su kombinovane i koncentrovane pod vakuumom. Dobijeno je 540 mg (56%) jedinjenja terc-butil 2-[4-[2-(2-[[(2E)-3-(4-[3-[3-amino-6-(2-hidroksifenil)pyridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il]piridin-2-il)prop-2-en-1-il]oksi]etoksi)etil]piperazin-1-il]acetata kao žuta čvrsta supstanca.
Korak 9
U okruglu bočicu zapremine 100 mL dodata je rastvor jedinjenja terc-butil 2-[4-[2-(2-[[(2E)-3-(4-[3-[3-amino-6-(2-hidroksifenil)piridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il]piridin-2-il)prop-2-en-1-il]oksi]etoksi)etil]piperazin-1-il]acetata (200 mg, 0,29 mmol, 1,00 ekv) u 2-propanolu (30 mL) i PtO₂ (10 mg, 0,10 ekv). Dobijeni rastvor je mešan pod atmosferskim pritiskom vodonika 12 sati na sobnoj temperaturi. Rastvor je zatim razblažen sa 50 mL 2-propanola i isparen pod vakuumom. Dobijeno je 190 mg (95%) jedinjenja terc-butil 2-[4-(2-[2-[3-(4-[3-[3-amino-6-(2-hidroksifenil)piridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il]piridin-2-il)propoksi]etoksi]etil)piperazin-1-il]acetata kao žute čvrste supstance.
Korak 10
U okruglu bočicu zapremine 100 mL dodat je rastvor jedinjenja terc-butil 2-[4-(2-[2-[3-(4-[3-[3-amino-6-(2-hidroksifenil)piridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il]piridin-2-il)propoksi]etoksi]etil)piperazin-1-il]acetata (190 mg, 0,27 mmol, 1,00 ekv) u dioksanu (20 mL). U rastvor je uveden (gasoviti) hlorovodonik. Dobijeni rastvor je mešan 2 sati na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Dobijeno je 160 mg (92%) jedinjenja 2-[4-(2-[2-[3-(4-[3-[3-amino-6-(2-hidroksifenil)piridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il]piridin-2-il)propoksi]etoksi]etil)piperazin-1-il]sirćetne kiseline kao žute čvrste supstance.
Korak 11
U okruglu bočicu zapremine 100 mL dodat je 2-[4-(2-2-[3-(4-3-[3-amino-6-(2-hidroksifenil)piridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-ilpiridin-2-il)propoksi]etoksietil)piperazin-1-il]sirćetna kiselina (160 mg, 0,25 mmol, 1,00 ekv), N,N-diizopropiletilamin (0,3 mL, 0,30 ekv), rastvor jedinjenja (2S,4R)-1-[(2S)-2-amino-3,3-dimetilbutanoil]-4-hidroksi-N-[[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]metil]pirolidin-2-karboksamid-hidrohlorida (139 mg, 0,30 mmol, 1,20 ekv) u acetonitrilu (20 mL) i T3P (188 mg, 3,00 ekv). Dobijeni rastvor je mešan 2 sati na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Sirovi proizvod (100 mL) je pročišćen preparativnom HPLC metodom pod sledećim uslovima: Kolona, XBridge Prep C18 OBD, 5 µm, 19×150 mm; Mobilna faza: voda (10 mmol/L amonijum-bikarbonata) i acetonitril (od 26,0% do 49,0% acetonitrila za 8 minuta); Detektor: UV 254 nm. Dobijeno je 28,5 mg (11%) jedinjenja (2S,4R)-1-[(2S)-2-[2-[4-(2-[2-[3-(4-[3-[3-amino-6-(2-hidroksifenil)piridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il]piridin-2-il)propoksi]etoksi]etil)piperazin-1-il]acetamido]-3,3-dimetilbutanoil]-4-hidroksi-N-[[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]metil]pirolidin-2-karboksamida kao bele čvrste supstance.
<1>H NMR (300 MHz, CD3OD) : δ 8.88-8.66 (m, 1H), 8.09-7.88 (m, 1H),7.76-7.57 (m,1H), 7.52-7.01 (m, 6H), 6.92-6.62(m, 4H), 4.66-4.21(m, 6H), 3.94-3.72 (m, 2H),3.69-3.33 (m, 12H), 3.14-2.89 (m, 4H), 2.81-2.34 (m, 14H), 2.32-1.78 (m, 8H), 1.32-0.74 (m, 12H).
Primerna sinteza primernog jedinjenja 46 i pimernog jedinjenja 42
Korak 1
U okruglu bočicu zapremine 50 mL dodat je rastvor jedinjenja 2-(3-metoksi-1,2-oksazol-5-il)-3-metilbutanoične kiseline (2,0 g, 10,0 mmol, 1,0 ekv) u N,N-dimetilformamidu (20 mL), N,N,N',N'-tetrametil-O-(7-azabenzo-triazol-1-il)uronijum heksafluorofosfatu (4,1 g, 10,8 mmol, 1,1 ekv), N,N-dizopropiletilaminu (6,0 g, 46,4 mmol, 4,6 ekv), i (2S,4R)-4-hidroksi-N-[(1S)-1-[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]etil]pirolidin-2-karboksamid hloridhidrohloridu (3,5 g, 9,5 mmol, 1,0 ekv). Dobijeni rastvor mešan je 30 minuta na sobnoj temperaturi. Reakcija je prekinuta dodatkom 30 mL vode. Rastvor je zatim ekstrahovan etil acetatom (3 × 30 mL), a organski slojevi su sjedinjeni i koncentrisani pod vakuumom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela uz eluiranje dihlormetanom/metanolom (10:1). Dobijeno je 2,1 g (41%) jedinjenja (2S,4R)-4-hidroksi-1-[2-(3-metoksi-1,2-oksazol-5-il)-3-metilbutanoil]-N-[(1S)-1-[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]etil]pirolidin-2-karboksamida u obliku svetložutog čvrstog materijala.
Korak 2
U okruglu bočicu zapremine 50 mL dodato je jedinjenje (2S,4R)-4-hidroksi-1-[2-(3-metoksi-1,2-oksazol-5-il)-3-metilbutanoil]-N-[(1S)-1-[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]etil]pirolidin-2-karboksamid (2,1 g, 4,1 mmol, 1,0 ekv) i 48% vodeni rastvor vodonikbromida (15 mL). Dobijeni rastvor je mešan preko noći na 60 °C u uljanoj kupki. Reakciona smeša je zatim koncentrisana pod vakuumom, naznačeno time što je dobijeno 1,9 g sirovog proizvoda.
Korak 3
U okruglu bočicu od 50 mL dodat je rastvor jedinjenja (2S,4R)-4-hidroksi-1-[2-(3-hidroksi-1,2-oksazol-5-il)-3-metilbutanoil]-N-[(1S)-1-[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]etil]pirolidin-2-karboksamid (1,9 g, 3,8 mmol, 1,0 ekv) u acetonitrilu (CH₃CN, 20 mL), zatim kalijum-karbonat (3,5 g, 25,3 mmol, 6,6 ekv), natrijum-jodid (800,0 mg, 5,3 mmol, 1,4 ekv), i 1,2-dibromoetan (1 g, 5,3 mmol, 1,4 ekv). Dobijeni rastvor je mešan preko noći na 60 °C u uljanoj kupki. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela uz eluiranje dihlormetanom/metanolom (10:1). Dobijeno je 1,1 g (48%) jedinjenja (2S,4R)-1-[2-[3-(2-bromoetoksi)-1,2-oksazol-5-il]-3-metilbutanoil]-4-hidroksi-N-[(1S)-1-[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]etil]pirolidin-2-karboksamida u obliku belog čvrstog materijala.
Korak 4
U okruglu bočicu zapremine 50 mL dodato je rastvor jedinjenja (2S,4R)-1-[2-[3-(2-bromoetoksi)-1,2-oksazol-5-il]-3-metilbutanoil]-4-hidroksi-N-[(1S)-1-[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]etil]pirolidin-2-karboksamida (200 mg, 0,3 mmol, 1,0 ekv) u CH₃CN (20 mL), kalijum-karbonata (400 mg, 2. 9 mmol, 8,8 ekv), natrijum-jodida (80 mg, 0,53 mmol, 1,6 ekv) i 6-[2-(metoksimetoksi)fenil]-4-(8-2-[2-(piperazin-1-il)etoksi]piridin-4-il-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-il)piridazin-3-amin (190 mg, 0,4 mmol, 1,1 ekv) [pripremljen prema postupcima prethodno opisanim za druge primere]. Dobijeni rastvor je mešan preko noći na 60 °C u uljanoj kupki. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela uz eluiranje dihlormetanom/metanolom (5:1). Dobijeno je 180 mg (51%) jedinjenja (2S,4R)-1-[2-(3-[2-[4-(2-[[4-(3-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il)piridin-2-il]oksi]etil)piperazin-1-il]etoksi]-1,2-oksazol-5-il)-3-metilbutanoil]-4-hidroksi-N-[(1S)-1-[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]etil]pirolidin-2-karboksamida kao svetložuta čvrsta supstanca.
Korak 5
U okruglu bočicu od 50 mL, dodat je rastvor jedinjenja (2S,4R)-1-[2-(3-[2-[4-(2-[[4-(3-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il)piridin-2-il]oksi]etil)piperazin-1-il]etoksi]-1,2-oksazol-5-il)-3-metilbutanoil]-4-hidroksi-N-[(1S)-1-[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]etil]pirolidin-2-karboksamida (180 mg, 0,17 mmol, 1,0 ekv) u metanol (5 mL), i hlorovodonična kiselina (0,068 mL rastvora 4M u dioksanu, 0,27 mmol, 1,6 ekv). Dobijeni rastvor je mešan 2 sati na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Chiral-Prep-HPLC pod sledećim uslovima: Kolona, ; mobilna faza, Kolona: CHIRALPAK ID-03, 2,0 cm i.D*25 cm dužina (5 µm); Mobilna faza A: MTBE (0,2% izopropanol) – HPLC; Mobilna faza B: metanol – HPLC; Protok: 18 mL/min; gradijent: 50 B do 50 B za 18 min; 254/220 nm. Dobijeno je 46,7 mg (2S,4R)-1-[(2S)-2-[3-[2-(4-[2-[(4-[3-[3-amino-6-(2-hidroksifenil)piridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il]piridin-2-il)oksi]etil]piperazin-1-il)etoksi]-1,2-oksazol-5-il]-3-metilbutanoil]-4-hidroksi-N-[(1S)-1-[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]etil]pirolidin-2-karboksamida kao bela čvrsta supstanca [<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 14.10 (s, 1H), 8.99 - 8.83 (m, 1H), 8.25 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.92 - 7.83 (m, 2H), 7.75-7.12 (m, 6H), 6.81 (td, J = 8.4, 2.2 Hz, 2H), 6.49 (dd, J = 6.1, 2.0 Hz, 1H), 6.15 -5.93 (m, 4H), 5.06 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 4.98 - 4.79 (m, 1H), 4.38 (t, J = 7.7 Hz, 3H), 4.19 (dt, J= 21.0, 5.6 Hz, 5H), 3.98 (m, 1H),3.71 (d, J = 8.6 Hz, 2H), 3.57 - 3.34 (m, 2H), 3.33 - 3.15 (m, 2H), 2.97 (d, J = 11.6 Hz, 4H), 2.57- 2.40 (d, J = 8.0 Hz, 11H), 2.31 - 2.07 (m, 1H), 2.06 - 1.97 (m, 2H), 1.91 - 1.66 (m, 3H), 1.42 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 1.31 (d, J= 7.0 Hz, 3H), 0.92 - 0.67 (m, 6H)] i 54.4 mg of (2S,4R)-1-[(2R)-2-[3-[2-(4-[2-[(4-[3-(2S,4R)-1-[(2S)-2-[3-[2-(4-[2-[(4-[3-[3-amino-6-(2-hidroksifenil)pyridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il]pyridin-2-il)oksi]etil]piperazin-1-il) etoksi]-1,2-oksazol-5-il]-3-metilbutanoil]-4-hidroksi-N-[(1S)-1-[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil] etil]pirolidin-2-karboksamid kao bela čvrsta supstanca [<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 14.11 (s, 1H), 8.95 (s, 1H), 8.37 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.88 -7.75 (d, J = 5.9 Hz, 2H), 7.49 - 7.28 (m, 6H), 7.18 (ddd, J = 8.3, 7.0, 1.6 Hz, 1H), 6.88 - 6.75 (m, 2H), 6.49 (dd, J = 6.2, 2.0 Hz, 1H), 6.16 - 6.02 (m, 2H), 5.93 (s, 2H), 5.05 (d, J = 3.7 Hz, 1H), 5.00 - 4.81 (m, 1H), 4.46 (s, 2H), 4.39 - 4.13 (m, 6H), 3.72 - 3.55 (m, 2H), 3.45 - 3.35 (m, 1H), 3.21 (d, J = 11.7 Hz, 2H), 2.98 (d, J = 11.6 Hz, 2H), 2.59 (q, J = 6.5 Hz, 4H), 2.42 (s, 6H), 2.17 (dd, J = 20.0, 8.3 Hz, 3H), 1.94 (s, 4H), 1.75 (t, J = 9.6 Hz, 1H), 1.37 (dd, J = 20.9, 7.0 Hz, 3H), 1.17 (d, J = 14.9 Hz, 1H), 1.05 - 0.87 (m, 3H), 0.77 (dd, J = 10.6, 6.7 Hz, 3H)].
Primerna sinteza primerenog jedinjenja 48
Korak 1
U okruglu bočicu zapremine 100 mL, pročišćenu i održavanu pod inertnom atmosferom azota, dodati metil 2-(6-hloropiridin-3-il)acetat (1,86 g, 10,0 mmol, 1,00 ekv), toluen (50 mL), Cs₂CO₃ (10,0 g, 30,0 mmol, 3,00 ekv), 1-benzilpiperazin (2,11 g, 12,0 mmol, 1,2 ekv) i RuPhosPd (0,39 g, 0,05 ekv). Dobijeni rastvor je mešan 10 sati na 100 °C u uljanoj
U 3-vratnu okruglu bočicu zapremine 100 mL, pročišćenu i održavanu pod inertnom atmosferom azota, dodato je N-(2-aminoetil)-N-(2-hloroetil)-5-(2-[[(2E)-3-(tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)prop-2-en-1-il]oksi]etil)piridin-2-amin (410 mg, 1,00 mmol, 1,00 ekv) u dihormetanu, N,N-diizopropiletilamin (645 mg, 4,99 mmol, 5,00 ekv), a zatim je dodat tercbutil 2-bromoacetat (585 mg, 3,00 mmol, 3,00 ekv). Dobijeni rastvor je mešan 12 sati na 25 °C. Smeša je zatim koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela uz eluiranje dihlormetanom/metanolom (v:v=10/1). Dobijeno je 0,32 g (66%) jedinjenja tercbutil 2-[4-[5-(2-[[(2E)-3-(tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)prop-2-en-1-il]oksi]etil)piridin-2-il]piperazin-1-il]acetata kao žute uljaste materije.
Korak 7
U zaptivenu cev zapremine 25 mL, pročišćenu i održavanu pod inertnom atmosferom azota, dodato je 2-6-amino-5-[8-(2-bromopiridin-4-il)-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-il]piridazin-3-ilfenol (158 mg, 0,35 mmol, 1,00 ekv) u dioksanu/vodi (v:v = 4:1), terc-butil 2-[4-[5-(2-[[(2E)-3-(tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)prop-2-en-1-il]oksi]etil)piridin-2-il]piperazin-1-il]acetat (205 mg, 0,42 mmol, 1,20 ekv), kalijum-karbonat (145 mg, 1,05 mmol, 3,00 ekv), i dodat je Pd(dppf)Cl₂ (12 mg, 0,02 mmol, 0,05 ekv). Dobijeni rastvor je mešan 3 sati na 80 °C u uljanoj kupki. Reakciona smeša je ohlađena na 25 °C. Reakcija je zatim zaustavljena dodatkom vode (5 mL). Dobijeni rastvor je ekstrahovan sa etil-acetatom (2 × 20 mL), a organski slojevi su sjedinjeni, osušeni preko bezvodnog natrijum-sulfata i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela uz dihlormetan/metanol (v:v=10/1). Dobijeno je 0,16 g (63%) jedinjenja terc-butil 2-[4-[5-(2-[[(2E)-3-(4-[3-[3-amino6-(2-hidroksifenil)piridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il]piridin-2-il)prop-2-en-1-il]oksi]etil)piridin-2-il]piperazin-1-il]acetata kao svetložute čvrste materije.
Terc-butil 2-[4-[5-(2-[[(2E)-3-(4-[3-[3-amino-6-(2-hidroksifenil)piridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il]piridin-2-il)prop-2-en-1-il]oksi]etil)piridin-2-il]piperazin-1-il]acetat je konvertovan u krajnje jedinjenje, (2S,4R)-1-((2S)-2-(2-(4-(5-(2-(3-(4-(3-(3-amino-6-(2-hidroksifenil)piridazin-4-il)-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il)piridin-2-il)propoksi)etil)piridin-2-il)piperazin-1-il)acetamido)-3,3-dimetilbutanoil)-4-hidroksi-N-(4-(4-metiltiazol-5-il)benzil)pirolidin-2-karboksamid prema šemi ispod, korišćenjem procedura opisanih iznad za druge primere, kao i postupaka poznatih stručnjacima iz ove oblasti.
Primerna sinteza primerenog jedinjenja 49
Korak 1
U okruglu bočicu zapremine 100 mL dodato je benzil 3-hidroksiazetidin-1-karboksilat (3,11 g, 15,01 mmol, 1,00 ekv), dihlormetan (30 mL), terc-butil 2-bromoacetat (4,37 g, 22,40 mmol, 1,50 ekv), natrijum-hidroksid (37% vodeni rastvor) (30 mL) i TBAC (4,17 g, 1,00 ekv) na 0 °C. Dobijeni rastvor je mešan 3 sata na 25 °C. Dobijeni rastvor je ekstrahovan sa dihormetanom (2 × 30 mL), a organski slojevi su sjedinjeni, osušeni preko bezvodnog natrijum-sulfata i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela pomoću elucije etil acetatom/petrol etrom (1/5). Dobijeno je 3,6 g (75%) jedinjenja benzil 3-[2-(terc-butoksi)-2-oksoetoksi]azetidin-1-karboksilata kao bezbojna uljasta materija.
Korak 2
U okruglu bočicu zapremine 250 mL dodato je benzil 3-[2-(terc-butoksi)-2-oksoetoksi]azetidin-1-karboksilat (3,22 g, 10,02 mmol, 1,00 ekv), etanol (100 mL), paladijum na ugljeniku (0,322 g). Dobijeni rastvor je mešan 12 sati pod H₂ atmosferom na 25 °C. Čvrste materije su profiltrirane. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Dobijeno je 1,75 g (93%) jedinjenja terc-butil 2-(azetidin-3-iloksi)acetata kao bezbojna uljasta materija.
Korak 3
U okruglu bočicu zapremine 50 mL dodato je terc-butil 2-(azetidin-3-iloksi)acetat (374 mg, 2,00 mmol, 1,00 ekv), N,N-dimetilformamid (15 mL), kalijum-karbonat (828 mg, 5,99 mmol, 3,00 ekv), i 1,2-dibromoetan (1,86 g, 9,90 mmol, 5,00 ekv). Dobijeni rastvor je mešan 12 sati na 25 °C. Reakcija je zatim zaustavljena dodatkom vode (10 mL). Dobijeni rastvor je ekstrahovan sa etil-acetatom (2 × 20 mL), a organski slojevi su sjedinjeni i osušeni preko bezvodnog natrijum-sulfata. Ostatak je nanet na kolonu silika gela pomoću elucije etil acetatom/petrol etrom (1/3). Dobijeno je 80 mg (14%) jedinjenja terc-butil 2-[[1-(2-bromoetil)azetidin-3-il]oksi]acetata kao bezbojna uljasta materija.
Terc-butil 2-[[1-(2-bromoetil)azetidin-3-il]oksi]acetat je konvertovan u krajnje jedinjenje, (2S,4R)-1-((2S)-2-(2-((1-(2-(4-(3-(4-(3-(3-amino-6-(2-hidroksifenil)piridazin-4-il)-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il)piridin-2-il)propil)piperazin-1-il)etil)azetidin-3-il)oksi)acetamido)-3,3-dimetilbutanoil)-4-hidroksi-N-((S)-1-(4-(4-metiltiazol-5-il)fenil)etil)pirolidin-2-karboksamid, korišćenjem procedura opisanih iznad za druge primere, kao i procedura koje su poznate stručnjacima iz ove oblasti.
Primerna sinteza primerenog jedinjenja 51
Primerno jedinjenje 51 je pripremljeno prema šemi ispod korišćenjem procedura iz primera opisanih iznad (npr. Primerno jedinjenje 37) i drugih procedura poznatih stručnjacima iz ove oblasti.
Primerna sinteza primerenog jedinjenja 52
Primerno jedinjenje 52 je pripremljeno prema šemi ispod.
Primerna sinteza primerenog jedinjenja 53 Primerno jedinjenje 53 je pripremljeno prema šemi ispod.
Primerena sinteza primernih jedinjenja 54 i 55
254
Korak 1
U okruglu bočicu zapremine 100 mL dodato je 2-(3-metoksi-1,2-oksazol-5-il)-3-metilbutanojeva kiselina (2,1 g, 10,5 mmol, 1,00 ekv), etanol (20,0 g, 434 mmol, 41,2 ekv), sumporna kiselina (2,0 g, 20,4 mmol, 1,9 ekv). Dobijeni rastvor je mešan 12 sati na 70 °C u uljanoj kupki. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Dobijeno je 1,9 g (79%) jedinjenja etil 2-(3-metoksi-1,2-oksazol-5-il)-3-metilbutanoata kao bela čvrsta materija.
Korak 2
U okruglu bočicu zapremine 50 mL dodato je etil 2-(3-metoksi-1,2-oksazol-5-il)-3-metilbutanoat (1,9 g, 8,4 mmol, 1,0 ekv) i sumporni hlorid (20 mL). Dobijeni rastvor je mešan preko noći na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Reakcija je prekinuta dodatkom 30 mL vode. Dobijeni rastvor je ekstrahovan sa etil-acetatom (3 × 30 mL), a organski slojevi su sjedinjeni. Ostatak je nanet na kolonu silika gela pomoću elucije etil acetatom/petrol etrom (1:1). Dobijeno je 1,5 g (69%) jedinjenja etil 2-(4-hloro-3-metoksi-1,2-oksazol-5-il)-3-metilbutanoata kao žuta uljasta materija.
Korak 3
U okruglu bočicu zapremine 50 mL dodato je rastvor etil 2-(4-hloro-3-metoksi-1,2-oksazol-5-il)-3-metilbutanoata (1,5 g, 5,7 mmol, 1,0 ekv) u metanol/voda (5/5 mL) i litijumhidroksid (300 mg, 12,5 mmol, 2,2 ekv). Dobijeni rastvor je mešan preko noći na 50 °C u uljanoj kupki. pH vrednost rastvora je podešena na 6 pomoću 1M HCl. Dobijeni rastvor je ekstrahovan sa etil-acetatom (3 × 30 mL), a organski slojevi su sjedinjeni i koncentrovani pod vakuumom. Sirovi proizvod je pročišćen pripremnom HPLC hromatografijom sa sledećim uslovima: Kolona; mobilna faza, Kolona: XBridge Prep C18 OBD kolona, 5 μm, 19 × 150 mm; mobilna faza A: voda (0,1% FA), Mobilna faza B: ACN; protok: 20 mL/min; gradijent: 34% B do 48% B u 8 min; 220 nm. Dobijeno je 300 mg (22,4%) jedinjenja 2-(4-hloro-3-metoksi-1,2-oksazol-5-il)-3-metilbutanojeve kiseline kao bela čvrsta materija.
Korak 4
U okruglu bočicu zapremine 50 mL dodato je rastvor jedinjenja 2-(4-hloro-3-metoksi-1,2-oksazol-5-il)-3-metilbutanojeve kiseline (260 mg, 1,1 mmol, 1,0 ekv) u N,N-dimetilformamidu (20 mL), N,N,N',N'-tetrametil-O-(7-azabenzotriazol-1-il)uronijumheksafluorofosfat (360 mg, 1,0 mmol, 0,9 ekv), N,N-diizopropiletilamin (350 mg, 2,7 mmol, 2,4 ekv), i (2S,4R)-4-hidroksi-N-[(1S)-1-[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]etil]pirolidin-2-karboksamid (350 mg, 1,1 mmol, 1,0 ekv). Dobijeni rastvor mešan je 30 minuta na sobnoj temperaturi. Reakcija je prekinuta dodatkom 30 mL vode. Dobijeni rastvor je ekstrahovan sa etil-acetatom (3 × 30 mL), a organski slojevi su sjedinjeni, osušeni preko bezvodnog natrijum-sulfata i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela uz eluiranje dihlormetanom/metanolom (10:1). Dobijeno je 275 mg (45%) jedinjenja (2S, 4R)-1-[2-(4-hloro-3-metoksi-1, 2-oksazol-5-il)-3-metilbutanoil]-4-hidroksi-N-[(1S)-1-[4-(4-metil-1, 3-tiazol-5-il)fenil]etil]pirolidin-2-karboksamida kao bela čvrsta materija.
Korak 5
U okruglu bočicu zapremine 50 mL dodato je (2S,4R)-1-[2-(4-hloro-3-metoksi-1,2-oksazol-5-il)-3-metilbutanoil]-4-hidroksi-N-[(1S)-1-[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]etil]pirolidin-2-karboksamid (275 mg, 0,5 mmol, 1,0 ekv) i 4 M rastvor hlorovodonične kiseline u dioksanu (25 mL). Dobijeni rastvor je mešan 96 sati na 60 °C u uljanoj kupki. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Dobijeno je 259 mg (97%) jedinjenja (2S,4R)-1-[2-(4-hloro-3-hidroksi-1, 2-oksazol-5-il)-3-metilbutanoil]-4-hidroksi-N[(1S)-1-[4-(4-metil-1, 3-tiazol-5-il)fenil]etil]pirolidin-2-karboksamida kao žuta čvrsta materija.
(2S,4R)-1-[2-(4-hloro-3-hidroksi-1, 2-oksazol-5-il)-3-metilbutanoil]-4-hidroksi-N-[(1S)-1-[4-(4-metil-1, 3-tiazol-5-il)fenil]etil]pirolidin-2-karboksamid je konvertovan u krajnja jedinjenja: (2S,4R)-1-((2S)-2-(3-(2-(4-(2-((4-(3-(3-amino-6-(2-hidroksifenil)piridazin-4-il)-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il)piridin-2-il)oksi)etil)piperazin-1-il)etoksi)-4-hloroizoksazol-5-il)-3-metilbutanoil)-4-hidroksi-N-((S)-1-(4-(4-metiltiazol-5-il)fenil)etil)pirolidin-2-karboksamid i (2S,4R)-1-((2R)-2-(3-(2-(4-(2-((4-(3-(3-amino-6-(2-hidroksifenil)piridazin-4-il)-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il)piridin-2-il)oksi)etil)piperazin-1-il)etoksi)-4-hloroizoksazol-5-il)-3-metilbutanoil)-4-hidroksi-N-((S)-1-(4-(4-metiltiazol-5-il)fenil)etil)pirolidin-2-karboksamid, prema šemi ispod i korišćenjem procedura opisanih za prethodne primere iznad.
Primerna sinteza primerenog jedinjenja 56
Korak 1
U okruglu bočicu zapremine 250 mL dodato je rastvor jedinjenja 3-(benziloksi)ciklobutan-1-ona (6,0 g, 34,05 mmol, 1,0 ekv) u etanolu (100 mL). Zatim je dodat natrijum-borohidrid (1,25 g, 33,94 mmol, 1,00 ekv) u nekoliko porcija na 0 °C. Dobijeni rastvor je mešan 3 sata na 0 °C. Reakcija je zatim zaustavljena dodatkom vode (100 mL). Dobijeni rastvor je ekstrahovan sa etil-acetatom (2 × 50 mL), a organski slojevi su sjedinjeni, osušeni preko bezvodnog natrijum-sulfata i koncentrovani pod vakuumom. Dobijeno je 6,0 g (99%) jedinjenja (1s,3s)-3-(benziloksi)ciklobutan-1-ola kao svetložute uljaste materije.
Korak 2
U okruglu bočicu zapremine 500 mL, pročišćenu i održavanu pod inertnom atmosferom azota, dodato je (1s,3s)-3-(benziloksi)ciklobutan-1-ol (8,0 g, 44,89 mmol, 1,10 ekv) u N,N-dimetilformamidu (100 mL). Zatim je dodat natrijum-hidrid (60%) (2,15 g, 89,58 mmol, 1,20 ekv) u nekoliko porcija na 0 °C. Nakon toga je dodat 4-bromo-2-fluoropiridin (70,0 g, 39,78 mmol, 1,00 ekv). Dobijeni rastvor je mešan preko noći na sobnoj temperaturi. Reakcija je zatim prekinuta dodatkom vode/leda. Dobijeni rastvor je ekstrahovan sa etilacetatom (2 × 80 mL), a organski slojevi su sjedinjeni. Nakon toga, smeša je isprana slanim rastvorom (2 × 80 mL). Dobijena smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela pomoću elucije etil acetatom/petrol etrom (1:1). Dobijeno je 7,0 g (53%) jedinjenja 4-bromo-2-[(1s,3s)-3-(benziloksi)ciklobutoksi]piridina kao svetložute uljaste materije.
Korak 3
U okruglu bočicu zapremine 500 mL, pročišćenu i održavanu pod inertnom atmosferom azota, dodato je rastvor jedinjenja 4-bromo-2-[(1s,3s)-3
U 3-vratnu okruglu bočicu zapremine 50 mL, pročišćenu i održavanu pod inertnom atmosferom azota, dodat je rastvor tributilfosfina (149 mg, 0,74 mmol, 10,00 ekv) u tetrahidrofuranu (20 mL). Zatim je dodat rastvor tetrametilazodikarboksamida (126 mg, 0,73 mmol, 10,00 ekv) u tetrahidrofuranu (5 mL) kap po kap uz mešanje na -5°C. U ovu smešu su zatim dodati (2S,4R)-4-hidroksi-1-[2-(3-hidroksi-1,2-oksazol-5-il)-3-metilbutanoil]-N-[[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]metil]pirolidin-2-karboksamid (42 mg, 0,09 mmol, 1,20 ekv), i (2E)-3-[5-[(1r,3r)-3-[[4-(3-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il)piridin-2-il]oksi]ciklobutoksi]piridin-2-il]prop-2-en-1-ol (47 mg, 0,07 mmol, 1,00 ekv). Reakcioni rastvor je mešan preko noći na 50 °C. Reakcija je zatim prekinuta dodatkom vode. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil-acetatom (3 × 30 mL), a organski slojevi su spojeni. Dobijena smeša je isprana slanim rastvorom (50 mL). Organska faza je isparena pod sniženim pritiskom i nanesena na kolonu sa silika-gelom, eluenta dihlormetan/metanol (10:1). Dobijeno je 32 mg (39%) jedinjenja (2S,4R)-4-hidroksi-N-[[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]metil]-1-[3-metil-2-(3-[[(2E)-3-[5-[(1r,3r)-3-[[4-(3-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il)piridin-2-il]oksi]ciklobutoksi]piridin-2-il]prop-2-en-1-il]oksi]-1,2-oksazol-5-il)butanoil]pirolidin-2-karboksamida kao svetložuta čvrsta materija.
Korak 12
U okruglu bočicu zapremine 25 mL, pročišćenu i održavanu pod inertnom atmosferom azota, dodat je rastvor jedinjenja (2S,4R)-4-hidroksi-N-[[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]metil]-1-(3-metil-2-[3-[(3-[5-[(1r,3r)-3-[[4-(3-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il)piridin-2-il]oksi]ciklobutoksi]piridin-2-il]prop-2-en-1-il)oksi]-1,2-oksazol-5-il]butanoil)pirolidin-2-karboksamida (23 mg, 0,02 mmol, 1,00 ekv) u metanolu (3 mL) i hlorovodoničnoj kiselini 37% (1,5 mL). Dobijeni rastvor je mešan 2 sati na sobnoj temperaturi. Smeša je ohlađena na 0 °C pomoću kupke sa vodom i ledom. pH vrednost rastvora je podešena na pH 7 NH4HCO3. Dobijeni rastvor je ekstrahovan dihlormetanom (3 × 30 mL), a organski slojevi su spojeni. Nakon toga, smeša je isprana slanim rastvorom (3 × 50 mL). Smeša je osušena preko bezvodnog natrijum-sulfata. Sirovi proizvod je pročišćen pripremnom HPLC hromatografijom sa sledećim uslovima: Kolona, XBridge Prep C18 OBD, 5 µm, 19 × 150 mm; mobilna faza: voda (10 mmol/L NH₄HCO₃) i ACN (od 41,0% do 62,0% ACN tokom 8 minuta); detektor: UV 254 nm. Dobijeno je 8,1 mg (37%) jedinjenja (2S,4R)-4-hidroksi-N-[[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]metil]-1-(3-metil-2-[3-[(3-[5-[(1r,3r)-3-[(4-[3-[3-amino-6-(2-hidroksifenil)piridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il]piridin-2-il)oksi]ciklobutoksi]piridin-2-il]prop-2-en-1-il)oksi]-1,2-oksazol-5-il]butanoil)pirolidin-2-karboksamida kao svetložuta čvrsta materija.
Primerna sinteza primerenog jedinjenja 57
Primerno jedinjenje 57 je pripremljeno prema šemi ispod korišćenjem procedura opisanih iznad za sintezu drugih primernih jedinjenja.
U smešu terc-butil 8-[2-[2-(4-benzyloxycarbonylpiperazin-1-il)etoksi]-4-piridil]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-karboksilata (18,3 g, 33,17 mmol, 1 ekv) u metanolu (150 mL), dodat je hlorovodonična kiselina u metanolu (4 M, 360 mL, 43,41 ekv). Reakciona smeša je mešana na 25 °C tokom 2 sata. Reakcija je zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom bez pročišćavanja. Dobijeno je sirovo jedinjenje benzil 4-[2-[[4-(3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il)-2-piridil]oksi]etil]piperazin-1-karboksilat (19 g) kao žuta čvrsta materija.
Korak 5
Smeši benzil 4-[2-[[4-(3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il)-2-piridil]oksi]etil]piperazin-1-karboksilata (19 g, 42,08 mmol, 1 ekv) i 4-bromo-6-hloropiridazin-3-amin (10,52 g, 50,49 mmol, 1,2 ekv) u dimetilsulfoksidu (190 mL), dodat je diizopropiletilamin (54,38 g, 420,76 mmol, 10 ekv). Reakciona smeša je mešana na 130 °C tokom 5 sata. Reakcija je zatim zaustavljena dodatkom vode (600 mL), razblažena sa etil-acetatom (150 mL) i ekstrahovana sa etil-acetatom (3 × 300 mL). Sjedinjeni organski slojevi su isprani sa slanom vodom (5 × 150 mL), osušeni preko bezvodnog natrijum-sulfata, profiltrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom do ostatka. Ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom (petrolejski etar / etil-acetat = 1:1 do dihormetan: metanol = 50:1). Dobijeno je 12,6 g (21 mmol, 50%) jedinjenja benzil 4-[2-[[4-[3-(3-amino-6-hloropiridazin-4-il)-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il]-2-piridil]oksi]etil]piperazin-1-karboksilata kao svetložuta čvrsta materija.
Korak 6
U smešu benzil 4-[2-[[4-[3-(3-amino-6-hloropiridazin-4-il)-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il]-2-piridil]oksi]etil]piperazin-1-karboksilata (10,6 g, 18,30 mmol, 1 ekv) i (2-hidroksifenil)boronske kiseline (5,05 g, 36,61 mmol, 2 ekv) u dioksanu (160 mL) i vodi (25 mL), dodat je tetrakis[trifenilfosfin]paladijum(0) (2,12 g, 1,83 mmol, 0,1 ekv) i kalijum-karbonat (5,06 g, 36,61 mmol, 2 ekv). Reakciona smeša je mešana na 110 °C tokom 2 sata. Reakciona smeša je razblažena sa vodom (200 mL), a zatim ekstrahovana sa etil-acetatom (3 × 200 mL). Sjedinjeni organski slojevi su isprani sa slanom vodom (3 × 150 mL), osušeni preko bezvodnog natrijum-sulfata, profiltrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom do ostatka. Ostatak je prečišćen pomoću pripremne HPLC (bazni uslovi: kolona: Phenomenex Gemini C18, 250 × 50 mm, 10 µm; mobilna faza: [voda (0,05% amonijumhidroksid v/v) – acetonitril]; B%: 50%-80%, 20 minuta, 60%/min.) da bi se dobilo jedinjenje. Dobijeno je jedinjenje benzil 4-[2-[[4-[3-[3-amino-6-(2-hidroksifenil)piridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il]-2-piridil]oksi]etil]piperazin-1-karboksilat (7 g, 10,22 mmol, 55%) kao žuta čvrsta materija.
Korak 7
U rastvor benzil 4-[2-[[4-[3-[3-amino-6-(2-hidroksifenil)piridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il]-2-piridil]oksi]etil]piperazin-1-karboksilata (7 g, 10,99 mmol, 1 ekv) u tetrahidrofuranu (100 mL), dodat je katalizator paladijum-hidroksid na aktivnom ugljeniku (0,7 g, 0,49 mmol, 0,04 ekv) pod azotom. Reakciona smeša je mešana na 60 °C pod pritiskom vodonika (50 Psi) tokom 48 sati. Zatim je u smešu dodat etil-alkohol (150 mL). Reakciona smeša je filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 5 g (9,68 mmol, 88%) jedinjenja 2-[6-amino-5-[8-[2-(2-piperazin-1-il-etoksi)-4-piridil]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-il]piridazin-3-il]fenola.
Korak 8
U rastvor metil 2-(3-hidroksiizoksazol-5-il)-3-metil-butanoata (3,5 g, 17,57 mmol, 1 ekv) u N,N-dimetilformamidu (40 mL) dodat je 2-bromo-1,1-dietoksietan (5,19 g, 26,35 mmol, 1,5 ekv) i kalijum-karbonat (4,86 g, 35,14 mmol, 2 ekv). Reakciona smeša je mešana na 70 °C tokom 12 h. Reakciona smeša je zaustavljena dodatkom 50 mL vode, zatim razblažena sa dodatnih 100 mL vode i ekstrahovana sa etil-acetatom (3 × 80 mL). Sjedinjeni organski slojevi su isprani sa slanom vodom (2 × 100 mL), osušeni preko bezvodnog natrijum-sulfata, profiltrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom do ostatka. Ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (petrolejski etar: etil-acetat = 100:1 do 50:1). Dobijeno je (4,38 g 12,50 mmol, 71%) jedinjenje metil 2-[3-(2,2-dietoksietoksi)izoksazol-5-il]-3-metil-butanoata kao bezbojna uljasta materija.
Korak 9
U rastvor metil 2-[3-(2,2-dietoksietoksi)izoksazol-5-il]-3-metil-butanoata (4,38 g, 12,5 mmol, 1 ekv) u metanolu (30 mL) i vodi (15 mL) dodat je litijum-hidroksid monohidrat (2,10 g, 50 mmol, 4 ekv). Reakciona smeša je mešana na 40 °C tokom 2 h. pH je podešen na 4–5 pomoću 1 M hlorovodonične kiseline, a smeša je zatim ekstrahovana sa etil-acetatom (2 × 50 mL). Sjedinjeni organski slojevi su osušeni preko bezvodnog natrijum-sulfata, profiltrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 4 g sirovog jedinjenja 2-[3-(2,2-di(etoksi)etoksi)izoksazol-5-il]-3-metil-butanojeve kiseline kao bezbojna uljasta materija.
Korak 10
U rastvor 2-[3-(2,2-dietoksietoksi)izoksazol-5-il]-3-metil-butanojeve kiseline (3,84 g, 11,99 mmol, 1 ekv) u N,N-dimetilformamidu (20 mL) dodat je O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijum-heksafluorofosfat (5,47 g, 14,38 mmol, 1,2 ekv). Reakciona smeša je mešana na 20°C tokom 0,5 sata. Zatim je smeši dodat rastvor (2S,4R)-4-hidroksi-N-[(1S)-1-[4-(4-metiltiazol-5-il)fenil]etil]pirolidin-2-karboksamid-hlorida (4,41 g, 11,99 mmol, 1 ekv) i trietilamina (3,64 g, 35,96 mmol, 5 mL, 3 ekv) u N,N-dimetilformamidu (10 mL). Reakciona smeša je mešana na 20°C tokom 0,15 sata. Reakcija je zaustavljena dodatkom vode (30 mL), zatim razblažena sa (80 mL) vode i ekstrahovana sa etil-acetatom (3 × 60 mL). Sjedinjeni organski slojevi su isprani sa slanom vodom (2 × 80 mL), osušeni preko bezvodnog natrijum-sulfata, profiltrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom do ostatka. Ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (dihlormetan: metanol = 100:1 do 50:1). Dobijeno je (7 g 10,96 mmol, 91%) jedinjenja (2S,4R)-1-[2-[3-(2,2dietoksietoksi)izoksazol-5-il]-3-metil-butanoil]-4-hidroksi-N-[(1S)-1-[4-(4-metiltiazol-5-il)fenil]etil]pirolidin-2-karboksamida kao bela čvrsta materija.
Korak 11
(2S,4R)-1-[2-[3-(2,2-diethoxyethoxy)isoxazol-5-yl]-3-methyl-butanoyl]-4-hydroxy-N-[(1S)-1-[4-(4-methylthiazol-5-yl)phenyl]ethyl]pyrrolidine-2-carboxamide (7 g, 11,39 mmol, 1 ekv) je razdvojen pomoću SFC. Uslov je bio kolona: DAICEL CHIRALPAK AD (250 mm × 30 mm, 10 µm); mobilna faza: [0,1% NH₃H₂O u IPA]; B%: 35%–35%, 2,4 min: 550 min. (2S,4R)-1-[(2S)-2-[3-(2,2-dietoksietoksi)izoksazol-5-il]-3-metil-butanoil]-4-hidroksi-N-[(1S)-1-[4-(4-metiltiazol-5-il)fenil]etil]pirolidin-2-karboksamid (3,2 g, 5,08 mmol, 89% prinos) i (2S,4R)-1-[(2R)-2-[3-(2,2-dietoksietoksi)izoksazol-5-il]-3-met
il-butanoil]-4-hidroksi-N-[(1S)-1-[4-(4-metiltiazol-5-il)fenil]etil]pirolidin-2-karboksamid (2,67 g, 4,17 mmol, 73% prinos) dobijeni su kao bele čvrste materije.
Korak 12
U rastvor jedinjenja (2S,4R)-1-[(2R)-2-[3-(2,2-dietoksietoksi)izoksazol-5-il]-3-metilbutanoil]-4-hidroksi-N-[(1S)-1-[4-(4-metiltiazol-5-il)fenil]etil]pirolidin-2-karboksamida (2 g, 3,25 mmol, 1 ekv) u tetrahidrofuranu (40 mL) dodata je sumporna kiselina (1 M, 40 mL, 12,3 ekv). Rastvor je zagrejan na 50 °C tokom 7 sati. Zatim je ohlađen na 20 °C i neutralisan zasićenim rastvorom natrijum-bikarbonata do pH = 8. Smeša je ekstrahovana sa etil-acetatom (3 × 30 mL). Sjedinjeni organski sloj je ispran sa slanom vodom (50 mL) i osušen preko natrijum-sulfata. Smeša je zatim filtrirana, a filtrat koncentrovan pod vakuumom. Sirovi proizvod je korišćen direktno u sledećem koraku. Dobijeno je 1,7 g (2,52 mmol, 77% prinos) jedinjenja (2S,4R)-4-hidroksi-1-[(2R)-3-metil-2-[3-(2-oksoetoksi)izoksazol-5-il]butanoil]-N-[(1S)-1-[4-(4-metiltiazol-5-il)fenil]etil]pirolidin-2-karboksamida kao bela čvrsta materija.
Korak 13
U rastvor (2S,4R)-4-hidroksi-1-[(2R)-3-metil-2-[3-(2-oksoetoksi)izoksazol-5-il]butanoil]-N-[(1S)-1-[4-(4-metiltiazol-5-il)fenil]etil]pirolidin-2-karboksamida (930 mg, 1,38 mmol, 1 ekv) i 2-[6-amino-5-[8-[2-(2-piperazin-1-il-etoksi)-4-piridil]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-il]piridazin-3-il]fenola (691 mg, 1,38 mmol, 1 ekv) u metanolu (15 mL) i dihlormetanu (5 mL) dodat je sirćetna kiselina (82 mg, 1,38 mmol, 1 ekv). Rastvor je mešan na 30 °C tokom 0,5 sata. Zatim je dodat natrijum-cijanoborohidrid (129 mg, 2,06 mmol, 1,5 ekv) i smeša je mešana 7 sati na 30 °C. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom, a sirovi proizvod je prečišćen pomoću pripremne HPLC (kolona: Phenomenex Synergi Max-RP 250 × 50 mm, 10 µm; mobilna faza: [voda (10 mM NH₄HCO₃) – ACN]; B%: 45ACN%-75ACN%, 28min, 78% min). Dobijeno je 840 mg (0,8 mmol, 58% prinos, 98% čistoća) jedinjenja (2S,4R)-1-[(2R)-2-[3-[2-[4-[2-[[4-[3-[3-amino-6-(2-hidroksifenil)piridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il]-2-piridil]oksi]etil]piperazin-1-il]etoksi]izoksazol-5-il]-3-metil-butanoil]-4-hidroksi-N-[(1S)-1-[4-(4-metiltiazol-5-il)fenil]etil]pirolidin-2-karboksamida kao bela čvrsta materija.
Primerna sinteza primernih jedinjenja 59 i 60
Pripremljena prema šemi ispod korišćenjem procedura opisanih iznad za druge primere.
Primerna sinteza primerenog jedinjenja 61
U okruglu bočicu zapremine 500 mL, u rastvor 1-(6-bromopiridin-3-il)etan-1-ona (10 g, 49,99 mmol, 1 ekv) u etanolu (200 mL), dodat je natrijum-borohidrid (4 g, 105,73 mmol, 2,11 ekv) u vodi (80 mL) na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je mešana 30 minuta na sobnoj temperaturi. Smeša je koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu, eluiran sa etil-acetatom / petrolejskim etrom (1:1), čime je dobijen 1-(6-bromopiridin-3-il)etan-1-ol (9,2 g, 91%) kao žuta uljasta materija.
Korak 2
U okruglu bočicu zapremine 100 mL, u rastvor 1-(6-bromopiridin-3-il)etan-1-ola (2 g, 9,90 mmol, 1 ekv) i trietilamina (3 g, 0,03 mmol) u dihlormetanu (30 mL), dodat je metansulfonil-hlorid (1,3 g, 11,35 mmol, 1,15 ekv) na 0 °C. Smeša je mešana 16 sati na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je ekstrahovana sa dihlormetanom (3 × 30 mL). Sjedinjeni organski slojevi su isprani sa slanom vodom (1 × 20 mL), osušeni preko bezvodnog natrijum-sulfata. Nakon filtracije, filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Dobijeno je 1-(6-bromopiridin-3-il)etil metansulfonat (1,6 g, 23%) kao žuta čvrsta materija.
Korak 3
U zaptivenu cev zapremine 25 mL, dodati su: 1-(6-bromopiridin-3-il)etil metansulfonat (1,4 g, 1,2 ekv), 6-[2-(metoksimetoksi)fenil]-4-(1H-pirazol-4-il)piridazin-3-amin (350 mg, 1 ekv) i kalijum-karbonat (490 mg, 3,0 ekv) u N,N-dimetilformamidu (15 mL) na sobnoj temperaturi. Smeša je mešana 2 sata na 60 °C pod atmosferom azota. Vodni sloj je ekstrahovan sa dihlormetanom (3 × 50 mL). Ostatak je ispran sa slanom vodom (1 × 20 mL), osušen preko bezvodnog natrijum-sulfata. Nakon filtracije, filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu, eluiran sa dihlormetan / metanol (10:1), čime je dobijeno jedinjenje 4-[1-[1-(6-bromopiridin-3-il)etil]-1H-pirazol-4-il]-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-3-amin (90 mg, 16%) kao žuta čvrsta materija.
4-[1-[1-(6-bromopiridin-3-il)etil]-1H-pirazol-4-il]-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-3-amin je konvertovan u krajnje jedinjenje prema šemi ispod, korišćenjem procedura opisanih za prethodne primere.
Primerna sinteza primerenog jedinjenja 62
Korak 1
U smešu 6-[2-(metoksimetoksi)fenil]-4-(1H-pirazol-4-il)piridazin-3-amina (300 mg, 1,01 mmol, 1 ekv) i 1-bromo-2-(2-bromoetoksi)etana (702 mg, 3,03 mmol, 3 ekv) u dimetilformamidu (3 mL), dodat je kalijum-karbonat (418 mg, 3,03 mmol, 3 ekv). Reakciona smeša je mešana na 70 °C tokom 2 sata. Zatim je dodatak vode (10 mL), i reakcioni rastvor je ekstrahovan sa etil-acetatom (3 × 20 mL). Sjedinjeni organski slojevi su isprani sa slanom vodom (2 × 15 mL), osušeni preko bezvodnog natrijum-sulfata, profiltrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom do ostatka. Ostatak je prečišćen pomoću prep-TLC (dihlormetan: metanol = 10:1). Dobijeno je 100 mg (0,22 mmol, 22%) jedinjenja 4-[1-[2-(2-bromoetoksi)etil]pirazol-4-il]-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-3-amin kao žuta uljasta materija.
U rastvor 4-[1-[2-(2-bromoetoksi)etil]pirazol-4-il]-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-3-amina (100 mg, 0,22 mmol, 1 ekv) i terc-butil piperazin-1-karboksilata (83 mg, 0,44 mmol, 2 ekv) u acetonitrilu (2 mL), dodat je N,N-diizopropiletilamin (86,49 mg, 0,66 mmol, 3 ekv). Reakciona smeša je mešana na 100 °C tokom 12 sata. Zatim je dodatak vode (5 mL), i reakcioni rastvor je ekstrahovan sa etilacetatom (3 × 15 mL). Sjedinjeni organski slojevi su isprani sa slanom vodom (3 × 10 mL), osušeni preko bezvodnog natrijum-sulfata, profiltrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom do ostatka. Ostatak je prečišćen pomoću prep-TLC (dihlormetan: metanol = 10: 1). Dobijeno je 93 mg (0,15 mmol, 71%) jedinjenja terc-butil 4-[2-[2-[4-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]pirazol-1-il]etoksi]etil]piperazin-1-karboksilat kao žuta čvrsta materija.
terc-butil 4-[2-[2-[4-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]pirazol-1-il]etoksi]etil]piperazin-1-karboksilat je konvertovan u krajnje jedinjenje prema šemi ispod korišćenjem procedura opisanih za prethodne primere.
Primerna jedinjenja 165 i 124 su pripremljena korišćenjem analognih procedura.
Primerna sinteza primerenog jedinjenja 64
Korak 1
7,37 mmol, 2 ekv) u acetonitrilu (10 mL) degazirana je i inertizovana azotom tri puta, zatim mešana 12 sati na 90 °C pod atmosferom azota. Reakciona smeša je filtrirana i koncentrovana, čime je dobijen sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (petrolejski etar: etil-acetat = 1:0 do 10:1). Dobijeno je 1,36 g (3,18 mmol, 86%) jedinjenja terc-butil 4-[3-[(4-bromopiridin-2-il)oksi]ciklobutoksi]piperidin-1-karboksilata kao bezbojna uljasta materija.
Korak 7
U rastvor terc-butil 3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktane-8-karboksilata (10 g, 47,11 mmol, 1 ekv) u dihlormetanu (140 mL), dodat je CbzCl (9,64 g, 56,53 mmol, 8,04 mL, 1,2 ekv) i trietilamin (8,58 g, 84,79 mmol, 11,80 mL, 1,8 ekv). Smeša je mešana na 20 °C tokom 20 h. TLC (dihlormetan : metanol = 10:1) je pokazao da reaktant 1 nije potpuno potrošen, te je dodat još CbzCl (1,61 g, 9,42 mmol, 1,34 mL, 0,2 ekv). Reakciona smeša je mešana na 20 °C tokom 2 h. Reakciona smeša je isprana sa vodom (2 × 80 mL), organski sloj osušen preko bezvodnog natrijum-sulfata, zatim koncentrovan radi dobijanja sirovog proizvoda. Sirovi proizvod je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (petrolejski etar: etil-acetat = 1:0 do 4:1). Dobijeno je 11,48 g (33,14 mmol, 70%) jedinjenja 8-benzil 3-(terc-butil) 3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktane-3,8-di-karboksilata kao bezbojna uljasta materija.
Korak 8
U rastvor 8-benzil 3-(terc-butil) 3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktano-3,8-di-karboksilata (6,20 g, 17,90 mmol, 1 ekv) u dihlormetanu (80 mL), dodata je trifluorsirćetna kiselina (12,32 g, 108,05 mmol, 8,00 mL, 6,04 ekv). Smeša je mešana na 20 °C tokom 2 h. Reakciona smeša je neutralisana zasićenim vodenim rastvorom natrijum-bikarbonata do pH = 8, zatim ekstrahovana sa hloroformom i izopropanolom (3 × 80 mL, u odnosu 5:1). Sjedinjeni slojevi su osušeni preko bezvodnog natrijum-sulfata, koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 4,7 g (17,68 mmol, 98% prinos, 92% čistoća) jedinjenja benzil 3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktano-3-karboksilata kao žuta uljasta materija.
Korak 9
U rastvor terc-butil 4-[3-[[4-[3-[3-amino-6-(2-hidroksifenil)piridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il]-2-piridil]oksi]ciklobutoksi]piperidin-1-karboksilata (500 mg, 0,78 mmol, 1 ekv) u dihlormetanu (5 mL), dodat je hlorovodonična kiselina u dioksanu (4 M, 5 mL, 25,75 ekv). Smeša je mešana na 20 °C tokom 2 h. Smeša je koncentrovana do sirovog proizvoda. Dobijeno je 500 mg sirovog 2-[6-amino-5-[8-[2-[3-(4-piperidiloksi)ciklobutoksi]-4-piridil]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-il]piridazin-3-il]fenola (trihlorid) kao žuta čvrsta materija.
Korak 14
U rastvor 2-[6-amino-5-[8-[2-[3-(4-piperidiloksi)ciklobutoksi]-4-piridil]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-il]piridazin-3-il]fenol trihlorida (400 mg, 612 μmol, 1 ekv) i (2S,4R)-4-hidroksi-1-[(2R)-3-metil-2-[3-(2-oksoetoksi)izoksazol-5-il]butanoil]-N-[(1S)-1-[4-(4-metiltiazol-5-il)fenil]etil]pirolidin-2-karboksamida (331 mg, 0,61 mmol, 1 ekv) u smeši dihlormetana (16 mL) i metanola (16 mL), dodat je natrijum-acetat (201 mg, 2,45 mmol, 4 ekv), zatim sirćetna kiselina do pH = 6, i zatim natrijum-cijanoborohidrid (192 mg, 3,06 mmol, 5 ekv). Smeša je mešana na 20 °C tokom 10 h. Reakciona smeša je razblažena sa vodom (20 mL) i ekstrahovana sa dihlormetanom (3 × 20 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni preko bezvodnog natrijum-sulfata i koncentrovani do sirovog proizvoda, koji je zatim prečišćen pomoću semi-pripremne reverzno-fazne HPLC (kolona: Phenomenex Synergi C18 150*25*10 um; mobilna faza: [voda (0,225%FA)-ACN]; B%: 18%-48%, 9 min). Dobijeno je 321 mg (0,28 mmol, 45%) jedinjenja (2S,4R)-1-[(2R)-2-[3-[2-[4-[3-[[4-[3-[3-amino-6-(2-hidroksifenil)piridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il]-2-piridil]oksi]ciklobutoksi]-1-piperidil]etoksi]izoksazol-5-il]-3-metil-butanoil]-4-hidroksi-N-[(1S)-1-[4-(4-metiltiazol-5-il)fenil]etil]pirolidin-2-karboksamid bistrifluoracetat kao svetlobež čvrsta materija.
Primerna jedinjenja 63 i 146 su pripremljeni korišćenjem analognih procedura.
Primerna sinteza primernih jedinjenja 67 i 68
periodinan (1298 mg, 3,06 mmol, 2 ekv) na 0 °C. Dobijena smeša je mešana 2 sata na 30 °C, a zatim je reakcija zaustavljena dodatkom zasićenog rastvora natrijum-tiosulfata. Dobijena smeša je ekstrahovana sa DCM-om (3 × 20 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani zasićenim rastvorom natrijum-bikarbonata, osušeni preko natrijum-sulfata i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću Prep-TLC (CH₂Cl₂ / MeOH 10:1), čime je dobijen metil 3-metil-2-(3-[2-[2-(4-oksobutoksi)etoksi]etoksi]-1,2-oksazol-5-il)butanoat (440 mg, 80%) kao svetložuta čvrsta materija.
Metil 3-metil-2-(3-[2-[2-(4-oksobutoksi)etoksi]etoksi]-1,2-oksazol-5-il)butanoat je konvertovan u ciljna jedinjenja prema šemi ispod, korišćenjem procedura analognih onima opisanima za druge primere iz serije (npr. primerni spoj 91), kao i procedura koje su poznate stručnjacima iz oblasti.
Primerna jedinjenja 65, 66, 71, 73 i 74 su pripremljena korišćenjem analognih procedura.
Primerna sinteza primernih jedinjenja 69 i 70
U okruglu bočicu zapremine 250 mL dodato je rastvor jedinjenja 3-(benziloksi)ciklobutan-1-ona (6,0 g, 34,05 mmol, 1,0 ekv) u etanolu (100 mL). Zatim je dodat natrijum-borohidrid (1,25 g, 33,94 mmol, 1,00 ekv) u nekoliko porcija na 0 °C. Dobijeni rastvor je mešan 3 sata na 0 °C. Reakcija je zatim zaustavljena dodatkom vode (100 mL). Dobijeni rastvor je ekstrahovan sa etil-acetatom (2 × 50 mL), a organski slojevi su sjedinjeni, osušeni preko bezvodnog natrijum-sulfata i koncentrovani pod vakuumom. Dobijeno je 6,0 g (99%) jedinjenja (1s,3s)-3-(benziloksi)ciklobutan-1-ola kao svetložute uljaste materije.
Korak 2
U okruglu bočicu zapremine 500 mL, zaptivenu i održavanu pod inertnom atmosferom azota, dodat je rastvor (1s,3s)-3-(benziloksi)ciklobutan-1-ola (8,0 g, 44,89 mmol, 1,10 ekv) u N,N-dimetilformamidu (100 mL). Zatim je dodat natrijum-hidrid (60%) (2,15 g, 89,58 mmol, 1,20 ekv) u nekoliko porcija na 0 °C. Nakon toga je dodat 4-bromo-2-fluoropiridin (70,0 g, 39,78 mmol, 1,00 ekv). Dobijeni rastvor je mešan preko noći na sobnoj temperaturi. Reakcija je zatim prekinuta dodatkom vode/leda. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil-acetatom (2 × 80 mL), a organske faze su sjedinjene. Nakon toga, smeša je isprana slanim rastvorom (2 × 80 mL). Dobijena smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je nanesen na kolonu silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:1). Dobijeno je 7,0 g (53%) jedinjenja 4-bromo-2-[(1s,3s)-3-(benziloksi)ciklobutoksi]piridina kao svetložute uljaste materije.
Korak 3
820,0 mg (82%) jedinjenja (1s,3s)-3-[[4-(3-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il)piridin-2-il]oksi]ciklobutan-1-ol kao žuta čvrsta materija.
Korak 8
U mešani rastvor 6-bromopiridin-3-ola (12,70 g, 72,9 mmol, 1,00 ekv) i imidazola (7,45 g, 109,5 mmol, 1,50 ekv) u DMF-u (100 mL), dodat je TBSCl (16,50 g, 109,47 mmol, 1,50 ekv) u porcijama na 0 °C pod inertnom atmosferom azota. Dobijena smeša je mešana 3 sata na sobnoj temperaturi pod azotom. Reakcija je zaustavljena dodatkom vode (100 mL) na sobnoj temperaturi, a dobijena smeša je ekstrahovana sa etil-acetatom (3 × 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani sa slanom vodom (2 × 100 mL), osušeni preko bezvodnog natrijum-sulfata i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu, eluiranjem sa PE/EtOAc (5:1). Dobijeno je 2-bromo-5-[(terc-butildimetilsilil)oksi]piridin (19 g, 90%) kao bezbojna uljasta materija.
Korak 9
U uzburkanu smešu 2-bromo-5-[(terc-butildimetilsilil)oksi]piridina (4,00 g, 13,88 mmol, 1,00 ekv) i NaI (10,40 g, 69,38 mmol, 5,00 ekv) u 1,4-dioksanu (20 mL), dodat je CuI (0,26 g, 1,365 mmol, 0,10 ekv) i metil[2-(metilamino)etil]amin (0,12 g, 1,361 mmol, 0,10 ekv) kap po kap na sobnoj temperaturi pod inertnom atmosferom azota. Dobijena smeša je mešana 5 sati na 110 °C pod azotom. Reakciona smeša je filtrirana, a filter kolač je ispran sa 1,4-dioksanom. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu, eluiranjem sa heksan/EtOAc (5:1). Dobijeno je 5-[(terc-butildimetilsilil)oksi]-2-jodopiridin (4,2 g, 90%) kao beličasta čvrsta materija.
Korak 10
U mešani rastvor 5-[(terc-butildimetilsilil)oksi]-2-jodopiridina (4,20 g, 12,53 mmol, 1,00 ekv) u THF-u (20 mL), dodat je TBAF (1 mol/L, 27 mL, 27 mmol, 2,00 ekv) kap po kap na 0 °C pod vodoničnom atmosferom. Dobijena smeša je mešana 2 sata na sobnoj temperaturi pod azotom. Reakcija je zaustavljena dodatkom vode (50 mL) na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je ekstrahovana sa etil-acetatom (3 × 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani slanom vodom (50 mL), sušeni preko bezvodnog natrijum-sulfata i koncentrovani pod smanjenim pritiskom. Ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu, eluiranjem sa heksan/EtOAc (2:1) da bi se dobio 6-jodopiridin-3-ol (2,3 g, 83%) kao svetložuta čvrsta materija.
Korak 11
U rastvor PPh₃ (523 mg, 2,00 mmol, 2,00 ekv) u THF-u (10 mL), dodat je DIAD (403 mg, 2,00 mmol, 2,00 ekv), (1s,3s)-3-[[4-(3-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il)piridin-2-il]oksi]ciklobutan-1-ol (504 mg, 1,00 mmol, 1,00 ekv) i 6-jodopiridin-3-ol (265 mg, 1,20 mmol, 1,20 ekv) na 0 °C pod azotnom atmosferom. Dobijena smeša je mešana 5 minuta na 0 °C, zatim zagrejana na 50 °C i mešana 2 sata na 50 °C pod azotom. Reakcija je zaustavljena dodatkom vode (20 mL) na sobnoj temperaturi, a dobijena smeša je ekstrahovana sa etil-acetatom (3 × 20 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani slanom vodom (30 mL), sušeni preko bezvodnog natrijum-sulfata i koncentrovani pod smanjenim pritiskom. Ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu, eluiranjem sa dihlormetan/metanol (10:1). Dobijeno je 6-[2-(metoksimetoksi)fenil]-4-(8-[2-[(1r,3r)-3-[(6-jodopiridin-3-il)oksi]ciklobutoksi]piridin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-il)piridazin-3-amin (382 mg, 54%) kao svetložuta čvrsta materija.
Korak 12
U rastvor (2S,4R)-4-hidroksi-1-[2-(3-hidroksi-1,2-oksazol-5-il)-3-metilbutanoil]-N-[(1S)-1-[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]etil]pirolidin-2-karboksamida (780 mg, 1,56 mmol, 1,00 ekv) u acetonu (40 mL), dodati su Cs₂CO₃ (1019 mg, 3,13 mmol, 2,00 ekv) i 3bromoprop-1-in (558 mg, 4,69 mmol, 3,00 ekv) na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je mešana 3 sati na 50 °C pod azotom. Smeša je filtrirana, a filter kolač ispran sa THF-om (2 × 50 mL). Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu, eluiranjem sa dihlormetan/metanol (10:1), čime je dobijeno (2S,4R)-4-hidroksi-N-[(1S)-1-[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]etil]-1-[3-metil-2-[3-(prop-2-in-1-iloksi)-1,2-oksazol-5-il]butanoil]pirolidin-2-karboksamid (520 mg, 62%) kao bledo bela čvrsta materija.
Korak 13
U mešanu smešu 6-[2-(metoksimetoksi)fenil]-4-(8-[2-[(1r,3r)-3-[(6-jodopiridin-3-il)oksi]ciklobutoksi]piridin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-il)piridazin-3-amin (224 mg, 0,317 mmol, 1,00 ekv) i CuI (6,0 mg, 0,032 mmol, 0,10 ekv) u DMF-u (5 mL), dodat je TEA (96 mg, 0,950 mmol, 3,00 ekv) i Pd(PPh₃)₂Cl₂ (22,2 mg, 0,032 mmol, 0,10 ekv) na sobnoj temperaturi pod inertnom atmosferom azota. Dobijena smeša je mešana 5 minuta na sobnoj temperaturi, zatim dodata rastvoru (2S,4R)-4-hidroksi-N-[(1S)-1-[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]etil]-1-[3-metil-2-[3-(prop-2-in-1-iloksi)-1,2-oksazol-5-il]butanoil]pirolidin-2-karboksamida (170 mg, 0,317 mmol, 1,00 ekv) u DMF-u (2 mL). Reakciona smeša je mešana 2 sata na 65 °C pod azotnom atmosferom. Reakcija je zaustavljena dodatkom vode (30 mL). Dobijena smeša je ekstrahovana sa etil-acetatom (3 × 20 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani sa slanom vodom (3 × 30 mL), osušeni preko bezvodnog natrijum-sulfata i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen preparativnim TLC-om, eluiranjem sa dihlormetan/metanol (9:1), čime je dobijen (2S,4R)-4-hidroksi-N-[(1S)-1-[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]etil]-1-(3-metil-2-[3-[(3-[5-[(1r,3r)-3-[[4-(3-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il)piridin-2-il]oksi]ciklobutoksi]piridin-2-il]prop-2-in-1-il)oksi]-1,2-oksazol-5-il]butanoil)pirolidin-2-karboksamid (175 mg, 49%) kao svetložuta čvrsta materija.
Dva dijastereomera jedinjenja (2S,4R)-4-hidroksi-N-[(1S)-1-[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]etil]-1-(3-metil-2-[3-[(3-[5-[(1r,3r)-3-[(4-[3-[3-amino-6-(2-hidroksifenil)piridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il]piridin-2-il)oksi]ciklobutoksi]piridin-2-il]prop-2-in-1-il)oksi]-1,2-oksazol-5-il]butanoil)pirolidin-2-karboksamid (620 mg) su razdvojena hiralnom HPLC metodom pod sledećim uslovima: Kolona: CHIRALPAK IG, 2,0 cm I.D × 25 cm (5
Dobijen je terc-butil N-[(1S)-1-(4-bromofenil)etil]karbamat (6,4 g, 20,68 mmol, 82% prinos) kao bela čvrsta materija.
Korak 2
U rastvor terc-butil N-[(1S)-1-(4-bromofenil)etil]karbamata (3 g, 9,99 mmol, 1,0 ekv) i 2-metil-1H-imidazola (902 mg, 10,99 mmol, 1,1 ekv) u dimetilsulfoksidu (15 mL) dodati su L-prolin (1,38 g, 11,99 mmol, 1,2 ekv), cezijum-karbonat (9,77 g, 29,98 mmol, 3,0 ekv) i bakar-jodid (2,28 g, 11,99 mmol, 1,2 ekv) pod atmosferom azota. Smeša je mešana na 130 °C tokom 12 sati. Nakon toga je razblažena sa vodom (200 mL), filtrirana i ekstrahovana sa etilacetatom (3 × 200 mL), zatim oprana sa slanom vodom (200 mL), osušena preko bezvodnog natrijum-sulfata, filtrirana i koncentrisana. Ostatak je prečišćen reverzno-faznom fleš hromatografijom (mravlja kiselina). Dobijen je terc-butil N-[(1S)-1-[4-(2-metilimidazol-1-il)fenil]etil]karbamat (250 mg, 0,83 mmol, 8% prinos) kao žućkasto ulje.
terc-butil N-[(1S)-1-[4-(2-metilimidazol-1-il)fenil]etil]karbamat je konvertovan u finalno jedinjenje prema šemama u nastavku, koristeći procedure opisane gore za primerna jedinjenja 47 i 64.
Primerno jedinjenje 75 je pripremljeno korišćenjem analognih procedura.
Primerna sinteza primerenog jedinjenja 116
Korak 1
U rastvor 1-(6-bromo-3-piridil)etanona (11,88 g, 59,41 mmol, 1,2 ekv) i tetraetoksititanijuma (22,58 g, 99,01 mmol, 2 ekv) u tetrahidrofuranu (50 mL) dodat je (R)-2-metilpropan-2-sulfinamid (6 g, 49,50 mmol, 1 ekv) pod azotom. Reakciona smeša je mešana na 70 °C tokom 12 h. Reakcija je prekinuta dodatkom vode (30 mL), zatim dodatnom količinom vode (100 mL), filtrirana i ekstrahovana sa etil-acetatom (3 × 80 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani sa slanom vodom (100 mL), osušeni preko bezvodnog natrijum-sulfata, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom, čime je dobijeno željeno jedinjenje (R,E)-N-(1-(6-bromopiridin-3-il)etiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamid (16 g, 43,27 mmol, 87% prinos) kao svetložuta čvrsta materija.
Korak 2
U rastvor (R,E)-N-(1-(6-bromopiridin-3-il)etiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamida (16 g, 52,77 mmol, 1 ekv) u tetrahidrofuranu (160 mL) dodat je L-selektrid (1 M, 158 mL, 3 ekv) na 0 °C. Reakcioni rastvor je zagrejan i mešan na 20 °C tokom 3 sata. Reakcija je prekinuta dodatkom vode (100 mL), zatim dodatnom količinom vode (100 mL), filtrirana i ekstrahovana sa etil-acetatom (3 × 100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani sa slanom vodom (100 mL), osušeni preko bezvodnog natrijum-sulfata, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom a grubi proizvod je prečišćen rekristalizacijom iz petrolejskog etra:etil-acetata = 1:1 (10 mL). Zatim je ostatak prečišćen polu-pripremnom reverzno-faznom HPLC metodom (FA uslovi: kolona: Phenomenex Synergi Max-RP 250 × 50 mm, 10 µm; mobilna faza: [voda (0,225% FA) - ACN]; B%: 20%-55%, 30 min). Dobijen je N-[(1S)-1-(6
ekv) u dioksanu (10 mL) dodat je 1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen-paladijum(II)dihlorid (164 mg, 0,22 mmol, 0,05 ekv) i kalijum-acetat (882 mg, 8,99 mmol, 2 ekv). Reakciona smeša je mešana na 100 °C tokom 12 h. Reakciona smeša je filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom, čime je dobijen 4-metil-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)tiazol (1 g, sirov) kao smeđe ulje koje je korišćeno bez dodatnog prečišćavanja.
Korak 6
U rastvor 4-metil-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)tiazola (617 mg, 2,74 mmol, 1,5 ekv) i terc-butil-N-[(1S)-1-(6-bromopiridin-3-il)etil]karbamata (550 mg, 1,83 mmol, 1 ekv) u dioksanu (12 mL) i vodi (2 mL) dodat je 1,1'-bis(difenilfosfino)ferocenpaladijum(II)dihlorid (134 mg, 0,18 mmol, 0,1 ekv) i kalijum-karbonat (505 mg, 3,65 mmol, 2 ekv). Reakciona smeša je mešana na 100 °C tokom 12 h. Reakciona smeša je prekinuta dodatkom vode (10 mL), zatim razblažen sa još vode (30 mL), filtriran i ekstrahovan sa etilacetatom (3 × 30 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani sa slanom vodom (60 mL), osušeni preko bezvodnog natrijum-sulfata, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobio ostatak koji je prečišćen pripremnom TLC hromatografijom (petrolejski etar: etil-acetat = 1:1). Željeno jedinjenje terc-butil-N-[(1S)-1-[6-(4-metiltiazol-5-il)piridin-3-il]etil]karbamat (200 mg, 0,62 mmol, 34% prinos) dobijen je kao svetložuti čvrsti proizvod.
Terc-butil-N-[(1S)-1-[6-(4-metiltiazol-5-il)piridin-3-il]etil]karbamat je konvertovan u finalno jedinjenje kao što je opisano gore za primerno jedinjenje 76.
Primerno jedinjenje 160 je pripremljeno korišćenjem analognih procedura.
Primerna sinteza primerenog jedinjenja 117
Korak 1
Primerna sinteza primerenog jedinjenja 81
U okruglu bočicu zapremine 250 mL dodato je 1-(4-hidroksifenil)etan-1-on (6,0 g, 44,08 mmol, 1 ekv), terc-butil(hloro)dimetilsilan (10 g, 66,1 mmol, 1,5 ekv) i K₂CO₃ (12 g, 88,14 mmol, 2 ekv) u DMF-u (100 mL). Dobijena smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakcija je zatim prekinuta dodatkom vode (100 mL). Reakciona smeša je ekstrahovana sa dihlorometanom (3 × 100 mL), a kombinovani organski slojevi su osušeni preko bezvodnog natrijum-sulfata i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je nanesen na kolonu sa silika-gelom i eluiran sa etil-acetat/petrolejskim etrom (1:10). Dobijeno je 5,2 g (47%) jedinjenja 1-[4-[(terc-butildimetilsilil)oksi]fenil]etan-1-on kao beličasti čvrsti proizvod.
Korak 2
U okruglu bočicu zapremine 250 mL dodato je 1-[4-[(tercbutildimetilsilil)oksi]fenil]etan-1-on (5 g, 20,0 mmol, 1 ekv) u metanol (100 mL), zatim je dodat natrijum-borohidrid (1,5 g, 39,94 mmol, 2 ekv) u porcijama na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je mešan 5 sati na sobnoj temperaturi, zatim koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela pomoću elucije etil acetatom/petrol etrom (1/1). Dobijeno je 3,8 g (76%) jedinjenja 1-[4-[(terc-butildimetilsilil)oksi]fenil]etan-1-ol kao žuta uljana supstanca.
Korak 3
U okruglu bočicu zapremine 250 mL dodato je jedinjenje 1-[4-[(tercbutildimetilsilil)oksi]fenil]etan-1-ol (3,8 g, 15,05 mmol, 1 ekv) i trietilamin (6,1 g, 60,21 mmol, 4 ekv) u dihlorometanu (100 mL), na šta je polako dodat metansulfonil-hlorid (2,1 g, 18,07 mmol, 1,20 ekv) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana 2 sata na sobnoj temperaturi. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Dobijeno je 3,6 g sirovog jedinjenja 1-[4-[(terc-butildimetilsilil)oksi]fenil]etil-metanosulfonata kao žuti čvrsti proizvod.
Korak 4
U okruglu bočicu zapremine 250 mL dodato je jedinjenje 1-[4-[(tercbutildimetilsilil)oksi]fenil]etil-metanosulfonat (5,0 g, 15,13 mmol, 1 ekv), 2-(ciklopenta-1,4-dien-1-il)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan (3,5 g, 18,17 mmol, 1,20 ekv) i kalijumkarbonat (6,3 g, 45,38 mmol, 3 ekv) u DMF-u (150 mL) pod azotnom atmosferom. Reakciona smeša je mešana preko noći na 90°C. Reakcija je zatim prekinuta dodatkom vode (150 mL). Reakciona smeša je ekstrahovana sa dihlorometanom (3 × 150 mL), a kombinovani organski slojevi su osušeni preko bezvodnog natrijum-sulfata i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela pomoću elucije etil acetatom/petrol etrom (1:5). Dobijeno je 600 mg (9%) jedinjenja 1-(1-[4-[(terc-butildimetilsilil)oksi]fenil]etil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazola kao žuti čvrsti proizvod.
1-(1-[4-[(terc-butildimetilsilil)oksi]fenil]etil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol je konvertovan u finalno jedinjenje u skladu sa šemom ispod, korišćenjem procedura analognih onima opisanima za druge primere.
Primerno jedinjenje 156 je pripremljeno korišćenjem analognih procedura.
Primerna sinteza primerenog jedinjenja 162
U okruglu bočicu zapremine 250 mL dodato je rastvor jedinjenja 1-(6-fluoropiridin-3-il)etan-1-on (4,17 g, 29,97 mmol, 1 ekv) u etanolu (60 mL). Rastvor je ohlađen na 0 °C u kupki sa ledom i vodom, nakon čega je dodat rastvor natrijum-borohidrida (2,27 g, 61,65 mmol, 2,06 ekv) u vodi (10 mL) kap po kap. Reakciona smeša je mešana 0,5 sati na sobnoj temperaturi. Reakcija je pažljivo prekinuta dodatkom vode (400 mL) i ekstrahovana sa etilacetatom (3 × 200 mL). Organski slojevi su spojeni, osušeni iznad anhidrovanog natrijum sulfata i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela pomoću elucije etil acetatom/petrol etrom (1:1). Dobijeno je 3,87 g (91%) jedinjenja 1-(6-fluoropiridin-3-il)etan-1-ol kao svetložuto ulje.
Korak 2
U 3-vratu okruglu bočicu zapremine 500 mL, pročišćenu i održavanu pod inertnom atmosferom azota, dodat je 1-(6-fluoropiridin-3-il)etan-1-ol (4,06 g, 28,76 mmol, 1 ekv) u dihlorometanu (200 mL). Rastvor je ohlađen na 0°C u kupki s ledom i vodom, zatim su sukcesivno dodati trifenilfosfin (PPh₃) (11,28 g, 43,01 mmol, 1,50 ekv) i N-bromosukcinimid (NBS) (7,66 g, 43,04 mmol, 1,50 ekv) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana 2 sata na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela pomoću elucije etil acetatom/petrol etrom (1:9). Dobijeno je 5,83 g (99%) jedinjenja 5-(1-bromoetil)-2-fluoropiridin kao svetložuta tečnost.
Korak 3
Korak 7
U okruglu bočicu zapremine 50 mL, pročišćenu i održavanu pod inertnom atmosferom azota, dodat je rastvor tetrametilazodikarboksamida (861 mg, 5,00 mmol, 10,00 ekv) i tributilfosfina (1,01 g, 4,99 mmol, 9,98 ekv) u THF-u (15 mL) na 0°C. U smešu je dodat rastvor jedinjenja 2-([5-[1-(4-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-1H-pirazol-1-il)etil]piridin-2-il]oksi)etan-1-ol (231,3 mg, 0,50 mmol, 1 ekv) i (2S,4R)-4-hidroksi-1-[2-(3-hidroksi-1,2-oksazol-5-il)-3-metilbutanoil]-N-[(1S)-1-[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]etil]pirolidin-2-karboksamid (249 mg, 0,50 mmol, 1,00 ekv). Reakciona smeša je mešana 10 minuta na 0 °C, zatim dodatno 2 sata na 50 °C u uljanoj kupki. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i zatim razblažena sa vodom (150 mL). Dobijena smeša je ekstrahovana etil acetatom (150 mL), organski sloj je ispiran slanom vodom (2 × 150 mL), sušen preko bezvodnog natrijum-sulfata i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela uz eluiranje dihlormetanom/metanolom (10/1). Proizvod je dalje prečišćen prep-HPLC metodom sa sledećim uslovima: Kolona, XBridge Prep OBD C18 Kolona, 19 × 150 mm, 5 um; mobilna faza, voda (sa 10 mmol/L. NH4HCO3) i acetonitril, 35% ACN do 53% za 8 min. Dobijeno je 68 mg (14%) jedinjenja (2S,4R)-1-(2-(3-(2-(5-(1-(4-(3-amino-6-(2-(metoksimetoksi)fenil)piridazin-4-il)-1H-pirazol-1-il)etil)-2-oksopiridin-1(2H)-il)etoksi)izoksazol-5-il)-3-metilbutanoil)-4-hidroksi-N-((S)-1-(4-(4-metiltiazol-5-il)fenil)etil)pirolidin-2-karboksamid kao bledo-bela čvrsta supstanca.
(2S,4R)-1-(2-(3-(2-(5-(1-(4-(3-amino-6-(2-(metoksimetoksi)fenil)piridazin-4-il)-1H-pirazol-1-il)etil)-2-oksopiridin-1(2H)-il)etoksi)izoksazol-5-il)-3-metilbutanoil)-4-hidroksi-N-((S)-1-(4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil)etil)pirrolidin-2-karboksamid je konvertovano u krajnje jedinjenje korišćenjem postupaka analognih onima koji su opisani za druge prethodno navedene primere.
Primerno jedinjenje 157 je pripremljeno korišćenjem analognih procedura.
Primerna sinteza primerenog jedinjenja 100
Korak 1
U smešu etanola (350 mL, 7,60 mmol, 0,04 ekv) i vode (60 mL, 3,33 mmol, 0,02 ekv) na sobnoj temperaturi dodat je bezvodni natrijum-acetat (18 g, 264,71 mmol, 1,47 ekv) u porcijama, pod inertnom atmosferom azota. Dobijena smeša je mešana 16 sati na 70 °C pod azotom. Dobijena smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Smeša je zatim razblažena sa vodom (500 mL). Vodeni sloj ekstrahovan etil acetatom (2 × 300 mL). Ostatak je ispran slanim rastvorom (2 × 100 mL), osušen i koncentrovan pod smanjenim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum-dioksidu elucijom sa etil acetat/petroleum etar (1:5), čime je dobijeno 1-(4-bromofenil)-2-hidroksietan-1-on (32 g, 83%) kao bela čvrsta supstanca.
Korak 2
U okruglu bočicu zapremine 1 L dodato je 1-(4-bromofenil)-2-hidroksietan-1-on (32 g, 148,8 mmol, 1 ekv), hlorometan (500 mL), imidazol (30 g, 440,7 mmol, 2,96 ekv), 4-dimetilaminopiridin (1,8 g, 14,73 mmol, 0,10 ekv) i hlorid terc-butil-dimetilsilila (26,8 g, 177,8 mmol, 1,19 ekv) na sobnoj temperaturi pod azotnom atmosferom. Dobijena smeša je mešana 2 sata na sobnoj temperaturi pod azotom. Reakciona smeša je zatim pogašena dodatkom vode na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je ekstrahovana sa metilen-hloridom (3 × 200 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (2 × 100 mL), sušeni preko bezvodnog natrijum-sulfata i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum-dioksidu elucijom sa etil acetatom / petroleum etrom (1:20), čime je dobijeno 1-(4-bromofenil)-2-[(terc-butildimetilsilil)oksi]etan-1-on (29 g, 59%) kao svetložuta čvrsta supstanca.
Korak 3
U r-vratnu okruglu bočicu zapremine 1 L dodato je 1-(4-bromofenil)-2-[(tercbutildimetilsilil)oksi]etan-1-on (27 g, 81,99 mmol, 1 ekv), tetrahidrofuran (500 mL) i (S)-2-metilpropan-2-sulfinamid (19,5 g, 160,9 mmol, 1,96 ekv) na sobnoj temperaturi. U mešani rastvor dodat je Ti(i-PrO)₄ (70 g, 246,5 mmol, 3,01 ekv) kap po kap na sobnoj temperaturi pod azotom. Dobijena smeša je mešana 16 sati na 70 °C pod azotom. Smeša je ostavljena da se ohladi na sobnu temperaturu. Dobijena smeša je filtrirana, a čvrsti ostatak ispran etil acetatom (2 × 200 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani slanom vodom (200 mL), sušeni preko bezvodnog natrijum-sulfata i koncentrovani pod smanjenim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum-dioksidu elucijom sa etil acetat / petroleum etar (1:15), čime je dobijeno (S)-N-[(1Z)-1-(4-bromofenil)-2-[(terc-butildimetilsilil)oksi]etiliden]-2-metilpropan-2-sulfinamid (16 g, 45%) kao žuta uljana supstanca.
Korak 4
U 3-vratnu bočicu zapremine 500 mL dodato je (S)-N-[(1Z)-1-(4-bromofenil)-2-[(terc-butildimetilsilil)oksi]etiliden]-2-metilpropan-2-sulfinamid (15 g, 34,68 mmol, 1 ekv) i THF (150 mL) na sobnoj temperaturi. U mešani rastvor dodat je BH₃. THF (52 mL, 52 mmol, 1,5 ekv) kap po kap na −70 °C pod azotom. Reakciona smeša je mešana 1 sat na −70 °C pod azotom. Reakcija je prekinuta dodatkom metanola na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je filtrirana, a čvrsti ostatak ispran etil acetatom (2 × 100 mL). Filtrat je ispiran slanom vodom (2 × 50 mL), sušen preko bezvodnog natrijum-sulfata i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum-dioksidu elucijom sa etil acetat / petroleum etar (1:2), čime je dobijeno (S)-N-[(1R)-1-(4-bromofenil)-2-[(terc-butildimetilsilil)oksi]etil]-2-metilpropan-2-sulfinamid (5,6 g, 37%) kao žuta čvrsta supstanca.
Korak 5
U okruglu bocu od 100 mL, prethodno inertizovanu i održavanu pod atmosferom azota, dodato je (S)-N-[(1R)-1-(4-bromofenil)-2-[(terc-butildimetilsilil)oksi]etil]-2-metilpropan-2-sulfinamid (2,6 g, 5,98 mmol, 1,00 ekv), dioksan (30 mL), 4-metil-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,3-tiazol (2 g, 8,88 mmol, 1,48 ekv), kalijum-karbonat (2,5 g, 18,09 mmol, 3,02 ekv), voda (5 mL) i Pd(dppf)Cl₂·CH₂Cl₂ (440 mg, 0,51 mmol, 0,09 ekv). Dobijena reakciona smeša mešana je 2 sata na 90 °C. Čvrsta faza je uklonjena filtracijom. Filtrat je razblažen vodom (50 mL) i ekstrahovan etil-acetatom (3 × 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani sa slanom vodom (2 × 35 mL), osušeni preko bezvodnog natrijum-sulfata i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela pomoću elucije etil acetatom/petrol etrom (1:5). Dobijeno je 2,5 g (92%) jedinjenja (S)-N-[(1R)-2-[(terc-butildimetilsilil)oksi]-1-[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]etil]-2-metilpropan-2-sulfinamid kao narandžasto ulje.
Korak 6
U okruglu bocu zapremine 250 mL dodato je (S)-N-[(1R)-2-[(tercbutildimetilsilil)oksi]-1-[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]etil]-2-metilpropan-2-sulfinamid (2,6 g, 5,74 mmol, 1,00 ekv) i hlorovodonična kiselina u dioksanu (100 mL, 4 M). Dobijeni rastvor je mešan preko noći na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Na taj način dobijeno je 1,5 g (96%) jedinjenja (2R)-2-amino-2-[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]etan-1-ol hlorida kao žuto ulje.
Korak 7
U okruglu bocu zapremine 250 mL dodato je ethyl 2-(3-hidroksi-1,2-oksazol-5-il)-3-metilbutanoat (1 g, 4,69 mmol, 1 ekv), Cs₂CO₃ (4,5 g, 13,81 mmol, 3,0 ekv) i 1,2-dibromoetan (2,60 g, 13,84 mmol) u aceton (100 mL). Dobijena smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim zaustavljena dodatkom vode (100 mL). Dobijena smeša je ekstrahovana etil-acetatom (3 × 100 mL), a kombinovani organski slojevi su osušeni preko bezvodnog natrijum-sulfata i koncentrovani pod smanjenim pritiskom. Ostatak je nanesen na kolonu sa silika-gelom i eluiran sa etil-acetat/petrolejskim etrom (3:10). Na taj način dobijeno je 600 mg (40%) jedinjenja etil 2-[3-(2-bromoetoksi)-1,2-oksazol-5-il]-3-metilbutanoat kao svetložuto ulje.
(2R)-2-amino-2-[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]etan-1-ol i etil 2-[3-(2-bromoetoksi)-1,2-oksazol-5-il]-3-metilbutanoat su konvertovani u jedinjenje (2S,4R)-1-(2-(3-(2-bromoetoksi)izoksazol-5-il)-3-metilbutanoil)-4-hidroksi-N-((R)-2-hidroksi-1-(4-(4metiltiazol-5-il)fenil)etil)pyrrolidine-2-karboksamid prema šemi ispod, koristeći postupke opisane za druge primere i poznate stručnjacima iz oblasti.
Jedinjenje (2S,4R)-1-(2-(3-(2-bromoetoksi)izoksazol-5-il)-3-metilbutanoil)-4-hidroksi-N-((R)-2-hidroksi-1-(4-(4-metiltiazol-5-il)fenil)etil)pyrrolidine-2-karboksamid dalje je konvertovano u finalno jedinjenje korišćenjem postupaka analognih onima opisanim za primerno jedinjenje 47.
Primerno jedinjenje 158 je pripremljeno korišćenjem analognih procedura.
Primerna sinteza primerenog jedinjenja 115
U bočicu je dodato terc-butil N-[(1S)-1-(4-bromfenil)etil]karbamat (1,4 g, 4,66 mmol, 1 ekv), 4,4,5,5-tetrametil-2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,3,2-dioksaborolan (1,42 g, 5,60 mmol, 1,2 ekv), (1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen)palladijum(II) hlorid (170 mg, 0,23 mmol, 0,05 ekv), kalijum-acetat (915 mg, 9,33 mmol, 2 ekv) i dioksan (30 mL). Smeša je ispirana azotom 10 minuta, zatim zagrevana na 80 °C tokom 1 sata. Reakciona smeša je ohlađena na 20 °C i filtrirana kroz sloj celita. Filtrat je zatim koncentrovan pod vakuumom. Sirovi proizvod je prečišćen kolonskom hromatografijom (petrolej etar: etil-acetat = 10:1). Dobijen je terc-butil N-[(1S)-1-[4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil]etil]karbamat (1,9 g, sirovo) kao bezbojno ulje.
Korak 2
U novu bočicu je dodat terc-butil N-[(1S)-1-[4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil]etil]karbamat (1,90 g, 5,47 mmol, 1,1 ekv), 2-bromo-1-metilimidazol (800 mg, 4,97 mmol, 1 ekv), (1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen)palladijum(II) hlorid (181 mg, 0,24 mmol, 0,05 ekv), natrijum-karbonat (1,05 g, 9,94 mmol, 2 ekv), dioksan (18 mL) i voda (3 mL). Smeša je ispirana azotom 5 minuta i zagrevana na 110 °C tokom 12 sati. Smeša je zatim razblažena sa vodom (50 mL) i ekstrahovana etil-acetatom (3 × 20 mL). Organski sloj je ispran slanim rastvorom (50 mL), osušen preko natrijum-sulfata i filtriran. Filtrat je zatim koncentrovan pod vakuumom. Sirovi ostatak prečišćen kolonskom hromatografijom (petrolej etar: etil-acetat = 1:0 do 3:1). Dobijen je terc-butil N-[(1S)-1-[4-(1-metilimidazol-2-il)fenil]etil]karbamat (850 mg, 2,82 mmol, 56% prinos) kao siva čvrsta supstanca.
Korak 3
U rastvor terc-butil N-[(1S)-1-[4-(1-metilimidazol-2-il)fenil]etil]karbamata (850 mg, 2,82 mmol, 1 ekv) u dioksanu (2 mL) dodat je rastvor hlorovodonične kiseline (4 M u dioksanu, 10 mL, 14,18 ekv). Rastvor je mešan na 20° C tokom 1 sata. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeno je (1S)-1-[4-(1-metilimidazol-2-il)fenil]etanamin (670 mg, sirov, hidrohlorid) kao siva čvrsta supstanca.
Korak 4
U rastvor (2S,4R)-1-terc-butioksikarbonil-4-hidroksiprolidin-2-karboksilne kiseline (651 mg, 2,82 mmol, 1 ekv) u N,N-dimetilformamidu (2 mL) dodati su 1-hidroksibenzotriazol (456 mg, 3,38 mmol, 1,2 ekv) i 1-(3-dimetilaminopropil)-3-etilkarbodiimid-hidrohlorid (648 mg, 3,38 mmol, 1,2 ekv). Smeša je mešana na 20 °C tokom 0,5 sati, a zatim je dodat rastvor (1S)-1-[4-(1-metilimidazol-2-il)fenil]etanamina (670 mg, 2,82 mmol, 1 ekv, hidrohlorid) i N,N-dizopropiletilamina (1,09 g, 8,46 mmol, 1,47 mL, 3 ekv) u N,N-dimetilformamidu (3 mL), i smeša je mešana 11,5 sati. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Sirovi ostatak je prečišćen pomoću semipripremne reverzno-fazne HPLC (kolona: Phenomenex Gemini C18, 250 × 50 mm, 10 µm; mobilna faza: [voda (0,05% amonijum-hidroksid v/v)-ACN]; B%: 20%-50%, 20 min, 60% min). Terc-butil (2S,4R)-4-hidroksi-2-[[(1S)-1-[4-(1-metilimidazol-2-il)fenil]etil]karbamoil]prolidin-1-karboksilat (800 mg, 1,93 mmol, 68% prinos) dobijen je kao bezbojno ulje.
Korak 5
U rastvor terc-butil (2S,4R)-4-hidroksi-2-[[(1S)-1-[4-(1-metilimidazol-2-il)fenil]etil]karbamoil]pirolidin-1-karboksilata (350 mg, 0,84 mmol, 1 ekv) u hlorometanu (3 mL) dodat je rastvor hlorovodonične kiseline/dioksana (4 M u dioksanu, 3 mL, 14,21 ekv). Zatim je reakciona smeša mešana na 20 °C tokom 2 sata. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, čime je dobijeno (2S,4R)-4-hidroksi-N-[(1S)-1-[4-(1-metilimidazol-2-il)fenil]etil]pirolidin-2-karboksamid (400 mg, sirovo, hidrohlorid) kao svetložuti čvrsti materijal.
(2S,4R)-4-hidroksi-N-[(1S)-1-[4-(1-metilimidazol-2-il)fenil]etil]pirolidin-2-karboksamid je pretvoren u konačno jedinjenje korišćenjem postupaka opisanih na primer za Primer jedinjenja 47.
Jedinjenje 159 je pripremljeno korišćenjem analognih procedura.
Primerna sinteza primerenog jedinjenja 162
U okruglu bočicu zapremine 250 mL dodato je rastvor jedinjenja 1-(6-fluoropiridin-3-il)etan-1-on (4,17 g, 29,97 mmol, 1 ekv) u etanolu (60 mL). Rastvor je ohlađen na 0 °C u kupki sa ledom i vodom, nakon čega je dodat rastvor natrijum-borohidrida (2,27 g, 61,65 mmol, 2,06 ekv) u vodi (10 mL) kap po kap. Dobijena smeša je mešana 0,5 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je pažljivo prekinuta dodatkom vode (400 mL) i ekstrahovana sa etilacetatom (200 mL x 3). Organski slojevi su spojeni, osušeni iznad anhidrovanog natrijum sulfata i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela pomoću elucije etil acetatom/petrol etrom (1:1). Dobijeno je 3,87 g (91%) jedinjenja 1-(6-fluoropiridin-3-il)etan-1-ol kao svetložuto ulje.
Korak 2
U 3-vratu okruglu bočicu zapremine 500 mL, pročišćenu i održavanu pod inertnom atmosferom azota, dodat je 1-(6-fluoropiridin-3-il)etan-1-ol (4,06 g, 28,76 mmol, 1 ekv) u dihlorometanu (200 mL). Rastvor je ohlađen na 0°C u kupki s ledom i vodom, zatim su sukcesivno dodati trifenilfosfin (PPh₃) (11,28 g, 43,01 mmol, 1,50 ekv) i N-bromosukcinimid (NBS) (7,66 g, 43,04 mmol, 1,50 ekv) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana 2 sata na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela pomoću elucije etil acetatom/petrol etrom (1:9). Dobijeno je 5,83 g (99%) jedinjenja 5-(1-bromoetil)-2-fluoropiridin kao svetložuta tečnost.
Korak 3
U okruglu bočicu zapremine 100 mL dodat je rastvor jedinjenja 5-(1-bromoetil)-2-fluoropiridin (3,06 g, 15,00 mmol, 1 ekv), 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol (3,20 g, 16,49 mmol, 1,10 ekv) i kalijum-karbonat (4,15 g, 30,03 mmol, 2,00 ekv) u DMF-u (50 mL). Dobijena smeša je mešana 2 h na 60 °C u uljanoj kupki. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i zatim razblažena sa vodom (400 mL). Smeša je ekstrahovana sa etil-acetatom (100 mL x 4), a kombinovani organski slojevi su isprani sa slanom vodom (2 × 300 mL), osušeni preko bezvodnog natrijum-sulfata i koncentrovani pod vakuumom. Dobijeno je 3,43 g (72%) jedinjenja 2-fluoro-5-[1-[4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-il]etil]piridin kao svetložuti čvrsti proizvod.
Korak 4
U okruglu bočicu zapremine 100 mL, pročišćenu i održavanu pod inertnom atmosferom azota, dodato je jedinjenje 2-fluoro-5-[1-[4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol-1-il]etil]piridin (2,54 g, 8,01 mmol, 1 ekv), 4-bromo-6-hloropiridazin-3-amin (2,00 g, 9,60 mmol, 1,20 ekv), natrijum-karbonat (2,12 g, 20,00 mmol, 2,50 ekv) i Pd(dppf)Cl₂·CH₂Cl₂ (327 mg, 0,40 mmol, 0,05 ekv) u smešu dioksana (50 mL) i vode (8 mL). Dobijena smeša je mešana 2 h na 90 °C u uljanoj kupki. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i zatim razblažena sa vodom (200 mL). Smeša je ekstrahovana sa etil-acetatom (2 × 300 mL), kombinovani organski slojevi su osušeni preko bezvodnog natrijum-sulfata i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela uz eluiranje dihlormetanom/metanolom (20:1). Dobijeno je 1,88 g (74%) jedinjenja 6-hloro-4-[1-[1-(6-fluoropiridin-3-il)etil]-1H-pirazol-4-il]piridazin-3-amin kao braon čvrsti proizvod.
Korak 5
U zaptivenu cev zapremine 30 mL, pročišćenu i održavanu pod inertnom atmosferom azota, dodat je 6-hloro-4-[1-[1-(6-fluoropiridin-3-il)etil]-1H-pirazol-4-il]piridazin-3-amin (765 mg, 2,40 mmol, 1 ekv), [2-(metoksimetoksi)fenil]boronska kiselina (524 mg, 2,88 mmol, 1,20 ekv), K₂CO₃ (829 mg, 6,00 mmol, 2,50 ekv) i Pd(dppf)Cl₂·CH₂Cl₂ (196 mg, 0,24 mmol, 0,10 ekv) u dioksanu (18 mL) i H₂O (3 mL). Dobijena smeša je mešana 2 h na 100 °C u uljanoj kupki. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela uz eluiranje dihlormetanom/metanolom (20:1). Dobijeno je 860 mg (85%) jedinjenja 4-[1-[1-(6-fluoropiridin-3-il)etil]-1H-pirazol-4-il]-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-3-amin kao braon čvrsta supstanca.
Korak 6
U okruglu bočicu zapremine 50 mL, pročišćenu i održavanu pod inertnom atmosferom azota, dodat je etandiol (1,48 g, 23,84 mmol, 10,03 ekv) u DMF (15 mL). Rastvor je ohlađen na 0 °C u kupki sa ledom i vodi, zatim je dodat NaH (0,76 g, 19,00 mmol, 7,99 ekv, 60%) u porcijama na 0°C. Reakciona smeša je mešana 1,5 sati na sobnoj temperaturi, nakon čega je dodat rastvor jedinjenja 4-[1-[1-(6-fluoropiridin-3-il)etil]-1H-pirazol-4-il]-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-3-amin (1,00 g, 2,38 mmol, 1 ekv) u DMF (5 mL) kap po kap na 0 °C. Reakciona smeša je dodatno mešana 3 sata na 55 °C u uljanoj kupki. Nakon hlađenja na sobnu temperaturu, reakcija je zaustavljena dodatkom vode (200 mL). Smeša je ekstrahovana sa etil-acetatom (2 × 300 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani sa slanom vodom (2 × 200 mL), osušeni preko bezvodnog natrijum-sulfata i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela uz eluiranje dihlormetanom/metanolom (15:1). Dobijeno je 361 mg (33%) jedinjenja 2-([5-[1-(4-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-1H-pirazol-1-il)etil]piridin-2-il]oksi)etan-1-ol kao svetložuti čvrsti proizvod.
Korak 7
U okruglu bočicu zapremine 50 mL, pročišćenu i održavanu pod inertnom atmosferom azota, dodat je rastvor tetrametilazodikarboksamida (861 mg, 5,00 mmol, 10,00 ekv) i tributilfosfina (1,01 g, 4,99 mmol, 9,98 ekv) u THF-u (15 mL) na 0°C. U smešu je dodat rastvor jedinjenja 2-([5-[1-(4-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-1H-pirazol-1-il)etil]piridin-2-il]oksi)etan-1-ol (231,3 mg, 0,50 mmol, 1 ekv) i (2S,4R)-4-hidroksi-1-[2-(3-hidroksi-1,2-oksazol-5-il)-3-metilbutanoil]-N-[(1S)-1-[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]etil]pirolidin-2-karboksamid (249 mg, 0,50 mmol, 1,00 ekv). Reakciona smeša je mešana 10 min na 0 °C, zatim dodatno 2 sata na 50°C u uljanoj kupki. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i zatim razblažena sa vodom (150 mL). Dobijena smeša je ekstrahovana etil acetatom (150 mL), organski sloj je ispiran slanom vodom (2 × 150 mL), sušen preko bezvodnog natrijum-sulfata i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela uz eluiranje dihlormetanom/metanolom (10/1). Proizvod je dalje prečišćen prep-HPLC metodom sa sledećim uslovima: Kolona, XBridge Prep OBD C18 Kolona, 19 × 150 mm, 5 um; mobilna faza, voda (sa 10 mmol/L NH4HCO3) i acetonitril, 35% ACN do 53% za 8 min. Ovim je dobijeno 68 mg (14%) jedinjenja (2S,4R)-1-(2-(3-(2-(5-(1-(4-(3-amino-6-(2-(metoksimetoksi)fenil)piridazin-4-il)-1H-pirazol-1-il)etil)-2-oksopiridin-1(2H)-il)etoksi)izoksazol-5-il)-3-metilbutanoil)-4-hidroksi-N-((S)-1-(4-(4-metiltiazol-5-il)fenil)etil)pirolidin-2-karboksamida kao prljavo bele čvrste supstance.
(2S,4R)-1-(2-(3-(2-(5-(1-(4-(3-amino-6-(2-(metoksimetoksi)fenil)piridazin-4-il)-1H-pirazol-1-il)etil)-2-oksopiridin-1(2H)-il)etoksi)izoksazol-5-il)-3-metilbutanoil)-4-hidroksi-N-((S)-1-(4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil)etil)pirrolidin-2-karboksamid je konvertovano u krajnje jedinjenje korišćenjem postupaka analognih onima koji su opisani za druge prethodno navedene primere.
Primerno jedinjenje 157 je pripremljeno korišćenjem analognih procedura.
Primerna sinteza primerenog jedinjenja 82
Korak 1
1,54 mmol, 1,20 ekv) u DMF (6 mL). Rastvor je ohlađen na 0 °C u kupki sa vodom i ledom, zatim je dodat NaH (128,4 mg, 3,21 mmol, 2,50 ekv, 60%). Dobijena smeša je mešana 1 sat na sobnoj temperaturi, a zatim je dodat kap po kap rastvor jedinjenja 4-[1-[1-(6-fluoropiridin-3-il)etil]-1H-pirazol-4-il]-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-3-amin (540 mg, 1,28 mmol, 1 ekv) u DMF (4 mL) na 0 °C. Nakon toga, smeša je mešana još 1 sat na 35 °C u uljanoj kupki. Reakciona smeša je zatim neutralisana dodatkom zasićenog rastvora NH₄Cl (30 mL), a pH vrednost je podešena na približno 8 pomoću zasićenog rastvora NaHCO₃. Smeša je ekstrahovana pomoću etil-acetata (100 mL × 2). Organske faze su sjedinjene i isprane slanim rastvorom (100 mL × 2), osušene preko bezvodnog natrijum-sulfata i koncentrovane pod vakuumom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela uz eluiranje dihlormetanom/metanolom (30/1). Dobijeno je 540 mg (65%) metil 2-[3-[2-([5-[1-(4-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-1H-pirazol-1-il)etil]piridin-2-il]oksi)etoksi]-1,2-oksazol-5-il]-3-metilbutanoata kao svetlobraon čvrsta supstanca.
Metil 2-[3-[2-([5-[1-(4-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-1H-pirazol-1-il)etil]piridin-2-il]oksi)etoksi]-1,2-oksazol-5-il]-3-metilbutanoat konvertovan je u konačno jedinjenje korišćenjem procedura sličnih onima koje su opisane u prethodnim primerima.
Primerno jedinjenje 163 je pripremljeno korišćenjem analognih procedura.
Primerena sinteza primernih jedinjenja 93 i 164
U rastvor terc-butil 2-hidroksi-7-azaspiro[3.5]nonan-7-karboksilata (1,8 g, 7,46 mmol, 1 ekv) u DMF-u (20 mL) dodat je natrijum-hidrid (60% u ulju, 358 mg, 14,9 mmol, 2 ekv) na 0 °C. Smeša je mešana 15 minuta. Zatim je dodat 2-(2-bromoetoksi)oksan (2,3 g, 11,00 mmol, 1,47 ekv) i smeša je ostavljena da se zagreje na 50 °C i mešana je 16 sati. Reakciona smeša je zaustavljena dodatkom vode (100 mL) i ekstrahovana pomoću DCM-a (100 mL × 3), zatim isprana vodom (50 mL × 3) i slanim rastvorom (50 mL), osušena preko bezvodnog natrijum-sulfata i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je nanesen na kolonu sa
vode (30 mL) i ekstrahovana pomoću dihlorometana (30 mL × 2). Sjedinjena organska faza je isprana slanim rastvorom (30 mL), osušena preko bezvodnog natrijum-sulfata i koncentrovana. Dobijeno je 420 mg (85%) benzil 2-[2-(metansulfoniloksi)etoksi]-7-azaspiro[3.5]nonan-7-karboksilata kao žuto ulje.
Korak 5
U okruglu bočicu zapremine 100 mL stavljen je rastvor benzil 2-[2-(metansulfoniloksi)etoksi]-7-azaspiro[3.5]nonan-7-karboksilata (300 mg, 0,75 mmol, 1 ekv), 6-[2-(metoksimetoksi)fenil]-4-[1-oksa-4,9-dijazaspiro[5.5]undekan-9-il]piridazin-3-amin (291 mg, 0,75 mmol, 1 ekv), kalijum-karbonat (K₂CO₃, 313 mg, 2,26 mmol, 3 ekv), natrijumjodid (NaI, 113 mg, 0,75 mmol, 1 ekv) u acetonitrilu (MeCN, 15 mL). Dobijena smeša je mešana 16 h na 75 °C u uljanoj kupki. Čvrste supstance su filtrirane i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je nanesen na kolonu sa silicijum-gelom, eluirano pomoću dihlorometana/metanola (v:v = 10:1). Dobijeno je 130 mg (25%) benzil 2-[2-(9-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-1-oksa-4,9-dijazaspiro[5.5]undekan-4-il)etoksi]-7-azaspiro[3.5]nonan-7-karboksilata kao žuto ulje.
Korak 6
U okruglu bočicu zapremine 100 mL stavljen je rastvor benzil 2-[2-(9-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-1-oksa-4,9-dijazaspiro[5.5]undekan-4-il)etoksi]-7-azaspiro[3.5]nonan-7-karboksilata (230 mg, 0,33 mmol, 1 ekv) u THF-u (5 mL), kome je dodat trietilborohidrid litijuma (1,0 M u THF-u, 1,65 mmol, 5,0 ekv) na 0 °C. Dobijena smeša je mešana 16 sati na sobnoj temperaturi, zatim je zaustavljena dodatkom vode (50 mL) i ekstrahovana pomoću dihlorometana (50 mL × 3). Kombinovani organski sloj je ispran slanim rastvorom (50 mL), osušena preko bezvodnog natrijum-sulfata i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Dobijeno je 140 mg (76%) jedinjenja 4-[4-(2-[7-azaspiro[3.5]nonan-2iloksi]etil)-1-oksa-4,9-dijazaspiro[5.5]undekan-9-il]-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-3-amin kao žuto ulje.
4-[4-(2-[7-azaspiro[3.5]nonan-2-iloksi]etil)-1-oksa-4,9-dijazaspiro[5.5]undekan-9-il]-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-3-amin konvertovano je u finalna jedinjenja prema šemi ispod korišćenjem procedura opisanih u prethodnim primerima.
Primerno jedinjenje 164 je pripremljeno korišćenjem analognih procedura.
Primerna sinteza primerenog jedinjenja 113
U rastvor but-2-in-1,4-diola (10 g, 116,16 mmol, 1 ekv) i 2,3-dihidro-2H-pirana (9,77 g, 116,16 mmol, 10,6 mL, 1 ekv) u dihlorometanu (200 mL) dodat je piridinijum-ptoluensulfonat (2,92 g, 11,62 mmol, 0,1 ekv). Reakciona smeša je mešana na 40°C tokom 1 sata. Smeši je dodata voda (200 mL), a dobijena smeša je ekstrahovana pomoću
14,44 mmol, 2,5 ekv) i (1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen)palladijum(II) hlorid (422 mg, 0,58 mmol, 0,1 ekv) pod azotom. Reakciona smeša je mešana na 110 °C tokom 3 h. Smeši je dodata voda (200 mL), a dobijena smeša je ekstrahovana pomoću etil-acetata (100 mL × 3). Kombinovani organski sloj je ispran slanim rastvorom (100 mL), osušen preko natrijumsulfata, profiltriran i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum-gelu (dihlorometan : metanol = 1:0 do 50:1). Dobijeno je 6-hloro-4-[1-(4-tetrahidropiran-2-iloksibut-2-inil)pirazol-4-il]piridazin-3-amin (1,3 g, 3,40 mmol, prinos 58%) kao žvrsta žuta supstanca.
Korak 5
U rastvor 6-hloro-4-[1-(4-tetrahidropiran-2-iloksibut-2-inil)pirazol-4-il]piridazin-3-amina (1,6 g, 4,60 mmol, 1 ekv) u metanolu (15 mL) dodat je rastvor hlorovodonične kiseline (4 M u metanolu, 15 mL, 13,04 ekv). Reakciona smeša je mešana na 20°C tokom 1 sata. Zasićeni rastvor natrijum-hidrogenkarbonata (50 mL) dodat je smeši radi podešavanja pH vrednosti na približno 6, nakon čega je dobijena smeša ekstrahovana pomoću etil-acetata (30 mL × 3). Kombinovani organski sloj je ispran slanim rastvorom (30 mL), osušen preko natrijum-sulfata, profiltriran i koncentrovan u vakuumu. Dobijeno je 4-[4-(3-amino-6-hloropiridazin-4-il)pirazol-1-il]but-2-in-1-ol (1,0 g, 3,79 mmol, prinos 82%) kao svetložuta čvrsta supstanca.
Korak 6
U rastvor 4-[4-(3-amino-6-hloropiridazin-4-il)pirazol-1-il]but-2-in-1-ola (1,0 g, 3,79 mmol, 1 ekv) i trifenilfosfina (1,19 g, 4,55 mmol, 1,2 ekv) u tetrahidrofuranu (20 mL) dodat je tetrabromid ugljenika (1,51 g, 4,55 mmol, 1,2 ekv). Reakciona smeša je mešana na 20°C tokom 1 sata. Smeša je koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum-gelu (dihlorometan : metanol = 1:0 do 50:1). Dobijeno je 4-[1-(4-bromobut-2-inil)pirazol-4-il]-6-hloropiridazin-3-amin (1,0 g, 1,87 mmol, prinos 49%) kao svetložuta čvrsta supstanca.
Korak 7
U rastvor 4-[1-(4-bromobut-2-inil)pirazol-4-il]-6-hloropiridazin-3-amina (1 g, 1,87 mmol, 1 ekv) i terc-butil piperazin-1-karboksilata (696 mg, 3,74 mmol, 2 ekv) u acetonitrilu (10 mL) dodat je N,N-diizopropiletilamin (724 mg, 5,60 mmol, 1,0 mL, 3 ekv). Smeša je mešana na 80 °C tokom 12 h. Smeši je dodata voda (30 mL), a dobijena smeša je ekstrahovana pomoću etil-acetata (20 mL × 3). Kombinovani organski sloj je ispran slanim rastvorom (20 mL), osušen preko natrijum-sulfata, profiltriran i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum-gelu (dihlorometan : metanol = 1:0 do 20:1). Dobijen je terc-butil 4-[4-[4-(3-amino-6-hloropiridazin-4-il)pirazol-1-il]but-2-inil]piperazin-1-karboksilat (600 mg, 1,34 mmol, prinos 71%) kao braon čvrsta supstanca.
Korak 8
U rastvor terc-butil 4-[4-[4-(3-amino-6-hloropiridazin-4-il)pirazol-1-il]but-2-inil]piperazin-1-karboksilata (500 mg, 1,16 mmol, 1 ekv) i (2-hidroksifenil)boronske kiseline (192 mg, 1,39 mmol, 1,2 ekv) u dioksanu (10 mL) i vodi (2 mL) dodat je kalijum-karbonat (400 mg, 2,89 mmol, 2,5 ekv) i tetrakis[trifenilfosfin]palladijum(0) (134 mg, 0,12 mmol, 0,1 ekv) pod azotom. Reakciona smeša je mešana na 110 °C tokom 10 h. Smeši je dodata voda (100 mL), a dobijena smeša je ekstrahovana pomoću etil-acetata (50 mL × 3). Kombinovani organski sloj je ispran slanim rastvorom (50 mL), osušen preko natrijum-sulfata, profiltriran i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen preparativnom tankoslojnom hromatografijom (dihlorometan : metanol = 10:1). Dobijen je terc-butil 4-[4-[4-[3-amino-6-(2-hidroksifenil)piridazin-4-il]pirazol-1-il]but-2-inil]piperazin-1-karboksilat (340 mg, 0,65 mmol, prinos 56%) kao svetložuta čvrsta supstanca.
Terc-butil 4-[4-[4-[3-amino-6-(2-hidroksifenil)piridazin-4-il]pirazol-1-il]but-2-inil]piperazin-1-karboksilat je konvertovan u finalno jedinjenje prema šemi ispod korišćenjem procedura opisanih u prethodnim primerima.
U okruglu bočicu zapremine 100 mL stavljeni su 4-[1-(4-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-1H-pirazol-1-il)etil]benzaldehid (300,0 mg, 0,70 mmol, 1 ekv), benzil piperazin-1-karboksilat (185 mg, 0,84 mmol, 1,2 ekv), HOAc (0,1 mL, 1,75 mmol, 2,50 ekv) u DCM-u (10 mL). Dobijena smeša je mešana 0,5 sati, zatim je dodat NaBH(OAc)₃ (444,1 mg, 2,10 mmol, 3 ekv). Smeša je dalje mešana 16 sati na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim zaustavljena dodatkom vode (20 mL) i ekstrahovana pomoću dihlorometana (20 mL × 3). Kombinovani organski sloj je ispran vodom (20 mL × 2) i slanim rastvorom (20 mL), osušen preko bezvodnog natrijum-sulfata i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je nanesen na kolonu sa silicijum-gelom, eluiran dihlorometanom/metanolom (v:v = 10:1). Dobijen je benzil 4-([4-[1-(4-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-1H-pirazol-1-il)etil]fenil]metil)piperazin-1-karboksilat (260 mg, 59%) kao žuto ulje.
Korak 6
U okruglu bočicu zapremine 100 mL, ispranu i održavanu pod inertnom atmosferom azota, stavljen je rastvor benzil 4-([4-[1-(4-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-1H-pirazol-1-il)etil]fenil]metil)piperazin-1-karboksilata (260,0 mg, 0,41 mmol, 1 ekv) u THF-u (8 mL), kome je dodat trietilborohidrid litijuma (2,1 mL, 2,05 mmol, 5,00 ekv) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana 16 sati na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim zaustavljena dodatkom vode (30 mL) i ekstrahovana pomoću dihlorometana (30 mL × 3). Kombinovani organski sloj je ispran slanim rastvorom (30 mL), osušen preko bezvodnog natrijuma i koncentrovan. Dobijeno je jedinjenje 6-[2-(metoksimetoksi)fenil]-4-[1-(1-[4-[(piperazin-1-il)metil]fenil]etil)-1H-pirazol-4-il]piridazin-3-amin (200 mg, 98%) kao žuto ulje.
Jedinjenje 6-[2-(metoksimetoksi)fenil]-4-[1-(1-[4-[(piperazin-1-il)metil]fenil]etil)-1H-pirazol-4-il]piridazin-3-amin je konvertovano u ciljno jedinjenje prema šemi ispod korišćenjem procedura opisanih u prethodnim primerima.
Primerna sinteza primerenog jedinjenja 167
U rastvor terc-butil N-[(1S)-1-(4-bromofenil)etil]karbamata (5 g, 16,7 mmol, 1 ekv) i 4,4,5,5-tetrametil-2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,3,2-dioksaborolana (5,08 g, 20,0 mmol, 1,2 ekv) u dioksanu (100 mL) dodat je [1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]dihloropalladijum(II) (975 mg, 1,33 mmol, 0,08 ekv) i kalijumacetat (3,27 g, 33,31 mmol, 2 ekv). Smeša je mešana na 90 °C tokom 2 h. Reakciona smeša je koncentrovana radi dobijanja sirovog proizvoda. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na silicijum-gelu (petrolej-etar: etil-acetat = 1:0 do 10:1). Jedinjenje tercbutil N-[(1S)-1-[4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil]etil]karbamat (8,2 g, 16,44 mmol, prinos 99%) dobijeno je kao žuto ulje.
Korak 2
Smeša etil 5-bromotiazol-4-karboksilata (3,49 g, 14,77 mmol, 0,9 ekv), terc-butil N-[(1S)-1-[4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil]etil]karbamata (5,70 g, 16,41 mmol, 1 ekv), [1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]dihloropalladijum(II) (120 mg, 0,16 mmol, 0,01 ekv), kalijum-karbonata (4,54 g, 32,83 mmol, 2 ekv) u smeši dioksana (130 mL) i vode (22 mL) je degazirana i isprana azotom tri puta, nakon čega je smeša mešana na 80 °C tokom 10 sati pod azotnom atmosferom. Reakciona smeša je koncentrovana i dodat je voda (50 mL), zatim ekstrahovana pomoću etil-acetata (60 mL) dva puta. Kombinovani organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom natrijum-hlorida (50 mL) dva puta, osušeni preko bezvodnog natrijum-sulfata i koncentrovani do sirovog proizvoda. Sirovi proizvod je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (petrolejski etar: etil-acetat = 1:0 do 1:1). Jedinjenje etil 5-[4-[(1S)-1-(terc-butilokarbamoylamino)etil]fenil]tiazol-4-karboksilat (5,07 g, 13,48 mmol, prinos 82%) dobijeno je kao žvrsta žuta supstanca.
Korak 3
Rastvor jedinjenja etil 5-[4-[(1S)-1-(terc-butilokarbamoylamino)etil]fenil]tiazol-4-karboksilata (4 g, 10,63 mmol, 1 ekv) u tetrahidrofuranu (60 mL) ohlađen je na −78 °C pod azotnom atmosferom. Zatim je rastvor diizobutilaluminijum-hidrida u THF-u (1 M, 11,69 mL, 1,1 ekv) dodat kap po kap na −78 °C. Reakciona smeša je mešana na −78 °C tokom 0,5 sati. Metanol (2 mL) je dodat radi zaustavljanja reakcije, a zatim i voda (50 mL). Smeša je ekstrahovana pomoću etil-acetata (40 mL × 2). Organski sloj je osušen preko natrijum-sulfata i zatim koncentrovan u vakuumu do ostatka. Ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silicijum-gelu (10–50% etil-acetata u petrolej-etru). Jedinjenje terc-butil N-[(1S)-1-[4-(4-formiltiazol-5-il)fenil]etil]karbamat (3,2 g, 9,63 mmol, prinos 91%) dobijeno je kao bela čvrsta supstanca.
Korak 4
Smeša je mešana na 0 °C tokom 30 minuta, zatim je dodat jodmetan (3,58 g, 25,25 mmol, 1,57 mL, 5 ekv) na 0 °C. Smeša je mešana na 15 °C tokom 2 sata pod azotom. Smeša je ohlađena na 0 °C, reakcija je zaustavljena polako dodatkom zasićenog vodenog rastvora amonijum-hlorida, a zatim je ekstrahovano pomoću etil-acetata (50 mL × 3). Kombinovani organski sloj je ispran slanim rastvorom (25 mL × 2), osušen preko bezvodnog natrijumsulfata, profiltriran i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum-gelu (petrolej-etar: etil-acetat = 20:1 do 10:1), čime je dobijen 5-bromo-4-(metoksimetil)tiazol (910 mg, 4,37 mmol, prinos 86%) kao žvrsta žuta supstanca.
Korak 3
U bočicu je dodato terc-butil N-[(1S)-1-(4-bromfenil)etil]karbamat (1,4 g, 4,66 mmol, 1 ekv), 4,4,5,5-tetrametil-2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,3,2-dioksaborolan (1,42 g, 5,60 mmol, 1,2 ekv), (1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen)palladijum(II) hlorid (170 mg, 0,23 mmol, 0,05 ekv), kalijum-acetat (915 mg, 9,33 mmol, 2 ekv) i dioksan (30 mL). Smeša je isprana azotom tokom 10 minuta, zatim zagrejana na 80 °C tokom 1 sata. Reakciona smeša je ohlađena na 20 °C i filtrirana kroz sloj celita. Filtrat je zatim koncentrovan pod vakuumom. Sirovi proizvod je prečišćen brzorastućom hromatografijom (petrolej-etar: etil-acetat = 10:1). Dobijen je terc-butil N-[(1S)-1-[4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil]etil]karbamat (1,9 g, sirovo) kao bezbojno ulje.
Korak 4
U smešu 5-bromo-4-(metoksimetil)tiazola (900 mg, 4,33 mmol, 1 ekv) i terc-butil N-[(1S)-1-[4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil]etil]karbamata (2,25 g, 6,49 mmol, 1,5 ekv) u dioksanu (30 mL) i vodi (5 mL) dodat je kalijum-karbonat (1,20 g, 8,65 mmol, 2 ekv) i [1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]dihloropalladijum(II) (316 mg, 0,43 mmol, 0,1 ekv) u jednoj porciji na 15 °C pod azotom. Smeša je mešana na 90 °C tokom 3 h. Smeša je ohlađena na 15 °C, profiltrirana i koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum-gelu (petrolej-etar: etil-acetat = 10:1 do 1:1), čime je dobijen terc-butil N-[(1S)-1-[4-[4-(metoksimetil)tiazol-5-il]fenil]etil]karbamat (1,87 g, sirovo) kao žuta čvrsta supstanca.
Jedinjenje terc-butil N-[(1S)-1-[4-[4-(metoksimetil)tiazol-5-il]fenil]etil]karbamat odnosno terc-butil N-[(1S)-1-[4-[4-(hidroksimetil)tiazol-5-il]fenil]etil]karbamat konvertovano je u finalni proizvod korišćenjem procedura opisanih za primer jedinjenja 76.
Primerna jedinjenja 184 i 185 takođe su pripremljena korišćenjem procedura analognih onima opisanim iznad.
Primerna sinteza primernih jedinjenja 170 i 134
U rastvor metil 2-[3-(3-hidroksipropil)izoksazol-5-il]-3-metil-butanoata (460 mg, 1,91 mmol, 1 ekv) u dihlorometanu (5 mL) dodat je Dess-Martin periodinan (970 mg, 2,29 mmol, 1,2 ekv). Reakciona smeša je mešana na 20°C tokom 1 sata. Smeši je dodat etil-acetat (50 mL), zatim je smeša profiltrirana, a filtrat koncentrovan u vakuumu. Organska faza je isprana vodom (20 mL) i slanim rastvorom (20 mL), osušena preko natrijum-sulfata, profiltrirana i ponovo koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (petrolejski etar: etil-acetat = 100:1 do 50:1). Dobijen je metil 3-metil-2-[3-(3-oksopropil)izoksazol-5-il]butanoat (300 mg, 1,25 mmol, prinos 65%) kao bezbojno ulje.
Metil 3-metil-2-[3-(3-oksopropil)izoksazol-5-il]butanoat je konvertovan u finalna jedinjenja prema šemi ispod, korišćenjem procedura opisanih u prethodnim primerima.
iloksipent-2-inil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)pirazol (2 g, 5,55 mmol, prinos 75%) dobijeno je kao svetložuto ulje.
Jedinjenje 1-(5-tetrahidropiran-2-iloksipent-2-inil)-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)pirazol konvertovano je u finalno jedinjenje prema šemi ispod korišćenjem procedura opisanih iznad za druge primere.
Primerna sinteza primerenog jedinjenja 131
(2S,4R)-N-((R)-2-(dimetilamino)-1-(4-(4-metiltiazol-5-il)fenil)-2-oksoetil)-4-hidroksiprolidin-2-karboksamid pripremljen je prema šemi ispod korišćenjem procedura opisanih u prethodnim primerima i očiglednih stručnjacima iz oblasti.
(2S,4R)-N-((R)-2-(dimetilamino)-1-(4-(4-metiltiazol-5-il)fenil)-2-oksoetil)-4-hidroksiprolidin-2-karboksamid je konvertovan u finalno jedinjenje korišćenjem procedura opisanih u prethodnim primerima.
Primerno jedinjenje 171 je pripremljeno korišćenjem analognih procedura.
Primerna sinteza primerenog jedinjenja 172
U rastvor terc-butil N-[(1S)-1-[4-(4-formiltiazol-5-il)fenil]etil]karbamata (2 g, 6,02 mmol, 1 ekv) i 1-diazo-1-dimetoksifosforil-propan-2-ona (1,16 g, 6,02 mmol, 1 ekv) u metanolu (20 mL) dodat je kalijum-karbonat (1,66 g, 12,03 mmol, 2 ekv) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na 15 °C tokom 16 sati. Zatim je dodat 1-diazo-1-dimetoksifosforil-propan-2-on (116 mg, 0,60 mmol, 0,1 ekv), i smeša je mešana na 15 °C još 1 sat. Dodat je etil-acetat (50 mL) i voda (40 mL), a smeša je razdvojena. Organski sloj je osušen preko natrijumsulfata i zatim koncentrovan u vakuumu do ostatka koji je prečišćen kolonskom hromatografijom na silicijum-gelu (10–30% etil-acetata u petrolej-etru), čime je dobijen tercbutil N-[(1S)-1-[4-(4-etiniltiazol-5-il)fenil]etil]karbamat (1,8 g, 5,48 mmol, prinos 91%) kao bela čvrsta supstanca.
Korak 2
je prečišćen hromatografijom na silicijum-gelu (petrolej-etar), čime je dobijen 4-bromo-2-(2,2-dietoksietoksi)piridin (22,8 g, 74,7 mmol, prinos 66%) kao žuto ulje.
Korak 2
U smešu 4-bromo-2-(2,2-dietoksietoksi)piridina (10 g, 34,46 mmol, 1 ekv) i benzil 3,8-dijazabiciklo[3.2.1]oktane-3-karboksilata (8,49 g, 34,46 mmol, 1 ekv) u toluenu (200 mL) dodat je cezijum-karbonat (22,46 g, 68,93 mmol, 2 ekv) i [2-(2-aminofenil)fenil]-hloropalladijum dicyclohexyl-[2-(2,6-diizopropoksifenil)fenil]fosfan (1,61 g, 2,07 mmol, 0,06 ekv) u jednoj porciji na 15 °C pod azotom. Smeša je mešana na 110 °C tokom 12 h. Smeša je ohlađena na 20 °C, profiltrirana i koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum-gelu (petrolej-etar / etil-acetat = 10:1, 3:1), čime je dobijen benzil 8-[2-(2,2-dietoksietoksi)-4-piridil]-3,8-dijazabiciklo[3.2.1]oktane-3-karboksilat (12,1 g, 26,6 mmol, prinos 77%) kao žuto ulje.
Korak 3
U rastvor benzil 8-[2-(2,2-dietoksietoksi)-4-piridil]-3,8-dijazabiciklo[3.2.1]oktane-3-karboksilata (13,1 g, 28,76 mmol, 1 ekv) u tetrahidrofuranu (300 mL) i etanolu (300 mL) dodat je 10% hidroksid-palladijum na ugljeniku (4,04 g, 2,88 mmol, 0,1 ekv) pod azotom. Suspenzija je degazirana pod vakuumom i inertizovana vodonikom nekoliko puta. Smeša je mešana pod pritiskom vodonika (50 Psi) na 60 °C tokom 12 sati. Reakciona smeša je filtrirana, a filtrat koncentrovan. Sirovi proizvod 8-[2-(2,2-dietoksietoksi)-4-piridil]-3,8-dijazabiciklo[3.2.1]oktan (8,27 g, 25,73 mmol, prinos 89,47%) dobijen je kao braon ulje.
Jedinjenje 8-[2-(2,2-dietoksietoksi)-4-piridil]-3,8-dijazabiciklo[3.2.1]oktan je konvertovano u finalno jedinjenje prema šemi ispod korišćenjem procedura opisanih u prethodnim primerima, kao i standardnih procedura koje su očigledne stručnjacima iz oblasti.
sulfata i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je nanesen na kolonu sa silika-gelom i eluiran sa etil-acetat/petrolejskim etrom (1:10). Dobijeno je 7,6 g (64%) jedinjenja 1-(4-bromofenil)-2,2-difluoroetan-1-on kao svetložuta polučvrsta supstanca.
Korak 2
U zaptivenu cev zapremine 30 mL, ispranu i održavanu pod inertnom atmosferom azota, stavljeni su 1-(4-bromofenil)-2,2-difluoroetan-1-on (3,5 g, 14,9 mmol, 1,0 ekv), (S)-2-metilpropan-2-sulfinamid (3,6 g, 29,8 mmol, 2,0 ekv) i tetrakis(propan-2-iloksi)titanijum (12,7 g, 44,7 mmol, 3,0 ekv) u THF-u (10 mL) pod atmosferom azota. Dobijena smeša je mešana 14 sati na 80 °C u uljanoj kupki pod atmosferom azota. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela pomoću elucije etil acetatom/petrol etrom (1:5). Dobijeno je 2,8 g (56%) jedinjenja (S)-N-[(1Z)-1-(4-bromofenil)-2,2-difluoroetiliden]-2-metilpropan-2-sulfinamida kao žuto ulje.
Korak 3
U okruglu bočicu sa 3 grla zapremine 250 mL, ispranu i održavanu pod inertnom atmosferom azota, stavljeni su (S)-N-[(1Z)-1-(4-bromofenil)-2,2-difluoroetiliden]-2-metilpropan-2-sulfinamid (2,8 g, 8,3 mmol, 1 ekv) i rastvor BH₃–THF (40,0 mL, 40,0 mmol, 1,0 M, 4,8 ekv) u THF-u (40,0 mL) na 0 °C. Dobijena smeša je mešana 1 sat na 0 °C, zatim zagrejana na sobnu temperaturu i dalje mešana 6 sati. Reakcija je zaustavljena dodatkom 100 mL vode. Dobijena smeša je ekstrahovana pomoću etil-acetata (100 mL × 2). Organski slojevi su sjedinjeni i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je nanesen na kolonu sa silicijum-gelom i eluiran dihlorometanom/petrolej-etrom (1:1). Dobijeno je 1,3 g (45%) jedinjenja (S)-N-[(1R)-1-(4-bromofenil)-2,2-difluoroetil]-2-metilpropan-2-sulfinamid kao bela čvrsta supstanca.
Korak 4
U zaptivenu cev zapremine 30 mL, ispranu i održavanu pod inertnom atmosferom azota, stavljeni su (S)-N-[(1R)-1-(4-bromofenil)-2,2-difluoroetil]-2-metilpropan-2-sulfinamid (1,3 g, 3,8 mmol, 1,0 ekv), 4-metil-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,3-tiazol (1,25 g, 5,5 mmol, 1,5 ekv), K₂CO₃ (1,5 g, 11,3 mmol, 3,0 ekv) i Pd(dppf)Cl₂·CH₂Cl₂ (62,0 mg, 0,08 mmol, 0,02 ekv) u dioksanu (15,0 mL) i vodi (3,0 mL) pod atmosferom azota. Dobijena suspenzija je mešana 12 sati na 90 °C u uljanoj kupki pod azotom. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela pomoću elucije etil acetatom/petrol etrom (1:1). Dobijeno je 750,0 mg (56%) jedinjenja (S)-N-[(1R)-2,2-difluoro-1-[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]etil]-2-metilpropan-2-sulfinamid kao svetložuta čvrsta supstanca.
(S)-N-[(1R)-2,2-difluoro-1-[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]etil]-2-metilpropan-2-sulfinamid je konvertovan u finalno jedinjenje prema šemi ispod korišćenjem procedura analognih onima opisanim za druge primere u ovoj prijavi.
Primerna jedinjenja 267 i 268 su pripremljeni korišćenjem analognih procedura.
Primerna sinteza primerenog jedinjenja 174
U rastvor terc-butil N-[(1S)-1-[4-[4-(hidroksimetil)tiazol-5-il]fenil]etil]karbamata (400 mg, 1,20 mmol, 1 ekv), izoindolin-1,3-diona (352 mg, 2,39 mmol, 2 ekv) i trifenilfosfina (471 mg, 1,79 mmol, 1,5 ekv) u tetrahidrofuranu (8 mL) dodat je N,N-diizopropilazodikarboksilat (290 mg, 1,44 mmol, 0,27 mL, 1,2 ekv) na 0 °C. Smeša je mešana na 15 °C tokom 16 sati. Reakciona smeša je koncentrovana do sirovog proizvoda koji je prečišćen preparativnom tankoslojnom hromatografijom (petrolej-etar: etil-acetat = 1:1), čime je dobijen terc-butil N-[(1S)-1-[4-[4-[(1,3-dioksoizoindolin-2-il)metil]tiazol-5-il]fenil]etil]karbamat (560 mg) kao bela čvrsta supstanca.
Korak 2
Smeša terc-butil N-[(1S)-1-[4-[4-[(1,3-dioksoizoindolin-2-il)metil]tiazol-5-il]fenil]etil]karbamata (600 mg, 1,29 mmol, 1 ekv) i hidrazin-hidrata (661 mg, 12,94 mmol, 0,64 mL, 98% čistoće, 10 ekv) u etanolu (24 mL) je degazirana i tri puta isprana azotom, zatim mešana na 70 °C tokom 3 sata pod atmosferom azota. Reakciona smeša je profiltrirana, a filter-kolač je ispran etanolom (30 mL). Filtrat je koncentrovan do sirovog proizvoda. Dobijen je terc-butil N-[(1S)-1-[4-[4-(aminometil)tiazol-5-il]fenil]etil]karbamat (530 mg, sirov) kao bela čvrsta supstanca.
Korak 3
U rastvor terc-butil N-[(1S)-1-[4-[4-(aminometil)tiazol-5-il]fenil]etil]karbamata (618 mg, 1,85 mmol, 1 ekv) i trietilamina (563 mg, 5,56 mmol, 0,77 mL, 3 ekv) u dihlorometanu (30 mL) dodat je anhidrid sirćetne kiseline (227 mg, 2,22 mmol, 0,21 mL, 1,2 ekv) na 0 °C. Smeša je mešana na 15 °C tokom 3 sata. Reakciona smeša je razblažena vodom (30 mL), zatim je organski sloj koncentrovan do sirovog proizvoda. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom tankoslojnom hromatografijom (dihlorometan: metanol = 10:1). Dobijen je terc-butil N-[(1S)-1-[4-[4-(acetamidometil)tiazol-5-il]fenil]etil]karbamat (400 mg, 1,07 mmol, prinos 58%) kao bela čvrsta supstanca.
terc-butil N-[(1S)-1-[4-[4-(acetamidometil)tiazol-5-il]fenil]etil]karbamat je konvertovan u finalno jedinjenje korišćenjem procedura opisanih za primer jedinjenja 76.
Primerna sinteza primerenog jedinjenja 175
Korak 1
U rastvor terc-butil N-[(1S)-1-[4-(4-etiniltiazol-5-il)fenil]etil]karbamata (1,73 g, 5,27 mmol, 1 ekv) u tetrahidrofuranu (50 mL) dodat je n-butil-litijum (2,5 M, 4,42 mL, 2,1 ekv) na −78 °C pod azotnom atmosferom. Reakciona smeša je mešana na -50 °C tokom 2 h. Zatim je dodat triformol (474 mg, 5,27 mmol, 1 ekv), i smeša je ostavljena da se zagreje do 10 °C tokom 22 sata. Reakciona smeša je dalje mešana na 10 °C još 20 sati. Dodata je voda (40 mL), a zatim je smeša ekstrahovana pomoću etil-acetata (40 mL). Organski sloj je osušen preko natrijum-sulfata i zatim koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silicijum-gelu (10–80% etil-acetata u petrolej-etru), čime je dobijen tercbutil N-[(1S)-1-[4-[4-(3-hidroksiprop-1-inil)tiazol-5-il]fenil]etil]karbamat (480 mg, 1,34 mmol, prinos 25%) kao bela čvrsta supstanca. 950 mg početnog jedinjenja je povraćeno.
terc-butil N-[(1S)-1-[4-[4-(3-hidroksiprop-1-inil)tiazol-5-il]fenil]etil]karbamat je konvertovan u terc-butil (S)-(1-(4-(4-(3-acetamidoprop-1-in-1-il)tiazol-5-il)fenil)etil)karbamat korišćenjem procedura opisanih iznad za primer jedinjenja 174.
terc-butil (S)-(1-(4-(4-(3-acetamidoprop-1-in-1-il)tiazol-5-il)fenil)etil)karbamat je dalje konvertovan u finalno jedinjenje korišćenjem procedura analognih onima opisanim za primer jedinjenja 76.
Primerna sinteza primerenog jedinjenja 178
Pripremljeno prema šemi ispod korišćenjem procedura opisanih iznad.
Primerno jedinjenje 176 je pripremljeno korišćenjem analognih procedura.
Primerna sinteza primerenog jedinjenja 180
Pripremljeno prema šemi ispod korišćenjem procedura opisanih iznad.
Primerna jedinjenja 179 su pripremljena korišćenjem analognih procedura.
Primerna sinteza primerenog jedinjenja 183
U rastvor 2,2-dietoksietanola (2,06 g, 15,38 mmol, 1,5 ekv) u THF-u (50 mL) dodat je natrijum-hidrid (615 mg, 15,38 mmol, 60% čistoće, 1,5 ekv) na 0 °C, i smeša je mešana na 0 °C tokom 30 minuta. Zatim je dodat rastvor terc-butil 2-bromoacetata (2 g, 10,25 mmol, 1,52 mL, 1 ekv) u THF-u (50 mL) na 0 °C, i reakciona smeša je mešana na 15 °C tokom 2 sata pod azotom. Smeša je ohlađena na 0 °C i reakcija je zaustavljena dodatkom zasićenog vodenog rastvora amonijum-hlorida. Vodena faza je ekstrahovana pomoću etil-acetata (20 mL × 3). Kombinovani organski sloj je ispran slanim rastvorom (15 mL × 2), osušen preko bezvodnog natrijum-sulfata, profiltriran i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum-gelu (petrolej-etar / etil-acetat = 50:1 do 20:1), čime je dobijen terc-butil 2-(2,2-dietoksietoksi)acetat (883 mg, 3,56 mmol, prinos 34%) kao žuto ulje.
Korak 2
U smešu terc-butil 2-(2,2-dietoksietoksi)acetata (0,7 g, 2,82 mmol, 1 ekv) u THF-u (3 mL), metanolu (3 mL) i vodi (6 mL) dodat je litijum-hidroksid monohidrat (1,18 g, 28,19
Ostatak je nanet na kolonu silika gela uz eluiranje dihlormetanom/metanolom (10:1). Dobijen je proizvod 3-[5-[(1r,3r)-3-[[4-(3-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-3,8-dijazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il)piridin-2-il]oksi]ciklobutoksi]piridin-2-il]prop-2-en-1-ol (1,1 g, prinos 62%) kao svetložuta čvrsta supstanca.
Korak 4
U rastvor tributilfosfina (634 mg, 3,14 mmol, 10,00 ekv) i tetrametilazodikarboksamida (588 mg, 3,14 mmol, 10,00 ekv) u THF-u dodat je (2S,4R)-4-hidroksi-1-[2-(3-hidroksi-1,2-oksazol-5-il)-3-metilbutanoil]-N-[(1S)-1-[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]etil]pirolidin-2-karboksamid (172 mg, 0,345 mmol, 1,10 ekv) i (2E)-3-[5-[(1r,3r)-3-[[4-(3-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-3,8-dijazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il)piridin-2-il]oksi]ciklobutoksi]piridin-2-il]prop-2-en-1-ol (70 mg, 0,11 mmol, 1 ekv) na −10 °C pod azotom. Dobijena smeša je mešana 16 sata na sobnoj temperaturi pod azotom. Reakcija je zaustavljena dodatkom vode (50 mL) na sobnoj temperaturi, a dobijena smeša je ekstrahovana sa etil-acetatom (30 mL x 3). Kombinovani organski slojevi su isprani slanom vodom (50 mL), sušeni preko bezvodnog natrijum-sulfata i koncentrovani pod smanjenim pritiskom. Ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silicijum-gelu eluiranjem sa dihlorometanom/metanolom (10:1), čime je dobijen proizvod (2S,4R)-4-hidroksi-N-[(1S)-1-[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]etil]-1-[3-metil-2-(3-[[(2E)-3-[5-[(1r,3r)-3-[[4-(3-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-3,8-dijazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il)piridin-2-il]oksi]ciklobutoksi]piridin-2-il]prop-2-en-1-il]oksi]-1,2-oksazol-5-il)butanoil]pirolidin-2-karboksamid (120 mg, prinos 34%) kao svetložuta čvrsta supstanca.
Jedinjenje (2S,4R)-4-hidroksi-N-[(1S)-1-[4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]etil]-1-[3-metil-2-(3-[[(2E)-3-[5-[(1r,3r)-3-[[4-(3-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-3,8-dijazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il)piridin-2-il]oksi]ciklobutoksi]piridin-2-il]prop-2-en-1-il]oksi]-1,2-oksazol-5-il)butanoil]pirolidin-2-karboksamid konvertovano je u finalno jedinjenje korišćenjem standardnih procedura opisanih iznad za druge primere.
Primerna jedinjenja 186, 206 i 207 pripremljena su korišćenjem analognih procedura.
Primerna sinteza primerenih jedinjenja 189
bezvodnog natrijum-sulfata, profiltrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen preparativnom tankoslojnom hromatografijom (petrolej-etar: etil-acetat = 3:1). Dobijen je terc-butil 4-[5-(1-metoksikarbonil-2-metil-propil)izoksazol-3-il]piperazin-1-karboksilat (130 mg, 0,35 mmol, prinos 42%) kao bezbojno ulje.
Korak 4
U rastvor terc-butil 4-[5-(1-metoksikarbonil-2-metil-propil)izoksazol-3-il]piperazin-1-karboksilata (130 mg, 0,35 mmol, 1 ekv) u metanolu (2 mL), tetrahidrofuranu (2 mL) i vodi (2 mL) dodat je litijum-hidroksid (44 mg, 1,06 mmol, 3 ekv). Reakciona smeša je mešana na 15°C tokom 1 sata. Dodata je voda (3 mL). pH vrednost je podešena na 6 pomoću hlorovodonične kiseline (1 M u vodi), zatim je smeša ekstrahovana pomoću etil-acetata (10 mL × 5). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (50 mL × 1), osušeni preko bezvodnog natrijum-sulfata, profiltrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Dobijena je 2-[3-(4-terc-butoksikarbonilpiperazin-1-il)izoksazol-5-il]-3-metil-butanoična kiselina (100 mg, 0,28 mmol, prinos 79%) kao bela čvrsta supstanca.
Korak 5
U rastvor 2-[3-(4-terc-butoksikarbonilpiperazin-1-il)izoksazol-5-il]-3-metilbutanoične kiseline (100 mg, 0,28 mmol, 1 ekv) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N’,N’-tetrametiluronijum-heksafluorofosfata (129 mg, 0,33 mmol, 1,2 ekv) u dimetilformamidu (5 mL) dodat je (2S,4R)-4-hidroksi-N-[(1S)-1-[4-(4-metiltiazol-5-il)fenil]etil]pirolidin-2-karboksamid-hidrohlorid (104 mg, 0,28 mmol, 1 ekv) i diizopropiletilamin (109 mg, 0,84 mmol, 3 ekv). Reakciona smeša je mešana na 15°C tokom 0,5 sata. Reakciona smeša je izlivena u vodu (20 mL) i ekstrahovana pomoću etil-acetata (30 mL × 3). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (50 mL × 3), osušeni preko bezvodnog natrijumsulfata, profiltrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen preparativnom tankoslojnom hromatografijom (dihlorometan: metanol = 10:1). Dobijen je terc-butil 4-[5-[1-[(2S,4R)-4-hidroksi-2-[[(1S)-1-[4-(4-metiltiazol-5-il)fenil]etil]karbamoil]pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil]izoksazol-3-il]piperazin-1-karboksilat (180 mg, 0,26 mmol, prinos 92%) kao bezbojno ulje.
Korak 6
terc-butil 4-[5-[1-[(2S,4R)-4-hidroksi-2-[[(1S)-1-[4-(4-metiltiazol-5-il)fenil]etil]karbamoil]pirolidin-1-karbonil]-2-metil-propil]izoksazol-3-il]piperazin-1-karboksilat (200 mg, 0,29 mmol, 1 ekv) je razdvojen pomoću kiralne superkritične fluidne hromatografije. Instrument: CASWH-Prep-SFC-C, SFC kolona: DAICEL Chiralpak AS (250 mm *30 mm, 10um); mobilna faza: etanol (0.1% NH3·H2O) u CO2od 25% do 25%; protok: 55 g/min; talasna dužina: 220 nm. Dobijen je terc-butil 4-[5-[(1S)-1-[(2S,4R)-4-hidroksi-2-[[(1S)-1-[4-(4-metiltiazol-5-il)fenil]etil]karbamoil]pirolidin-1-karbonil]-2-metilpropil]izoksazol-3-il]piperazin-1-karboksilat (80 mg, 0,11 mmol, prinos 76%, čistoća 95%) kao bela čvrsta supstanca. Dobijen je i terc-butil 4-[5-[(1R)-1-[(2S,4R)-4-hidroksi-2-[[(1S)-1-[4-(4-metiltiazol-5-il)fenil]etil]karbamoil]pirolidin-1-karbonil]-2-metilpropil]izoksazol-3-il]piperazin-1-karboksilat (70 mg, 0,1 mmol, prinos 68%, čistoća 98%) kao bela čvrsta supstanca.
Korak 7
U rastvor terc-butil 4-[5-[(1R)-1-[(2S,4R)-4-hidroksi-2-[[(1S)-1-[4-(4-metiltiazol-5-il)fenil]etil]karbamoil]pirolidin-1-karbonil]-2-metilpropil]izoksazol-3-il]piperazin-1-karboksilata (70 mg, 0,1 mmol, 1 ekv) u dihlorometanu (2 mL) dodat je hlorovodonična kiselina (4 M u dioksanu, 3 mL). Reakciona smeša je mešana na 15°C tokom 1 sata.
Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Dobijen je (2S,4R)-4-hidroksi-1-[(2R)-3-metil-2-(3-piperazin-1-ilizoksazol-5-il)butanoil]-N-[(1S)-1-[4-(4-metiltiazol-5-il)fenil]etil]pirolidin-2-karboksamid (55 mg, 0,09 mmol, prinos 91%) kao bela čvrsta supstanca.
Korak 8
Smeši koja sadrži (2S,4R)-4-hidroksi-1-[(2R)-3-metil-2-(3-piperazin-1-ilizoksazol-5-il)butanoil]-N-[(1S)-1-[4-(4-metiltiazol-5-il)fenil]etil]pirolidin-2-karboksamid (100 mg, 0,16 mmol, 1 ekv, hidrohlorid), 1,2-dibromoetan (31 mg, 0,16 mmol, 1 ekv) i 2-[6-amino-5-[8-[2-[3-(4-piperidiloksi)ciklobutoksi]-4-piridil]-3,8-dijazabiciklo[3.2.1]oktan-3-il]piridazin-3-il]fenol dihidrohlorid (102 mg, 0,16 mmol, 1 ekv) u acetonitrilu (12 mL) dodat je N,N-diizopropiletilamin (128 mg, 0,99 mmol, 6 ekv). Smeša je mešana na 100 °C tokom 2 sata pod mikrotalasima. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom do ostatka. Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC hromatografijom (kolona: Phenomenex Synergi C18 150*25*10 um; mobilna faza: [voda (0,225% FA)-ACN]; B%: 5%-35%, 10 min). Dobijeno je jedinjenje (2S,4R)-1-[(2R)-2-[3-[4-[2-[4-[3-[[4-[3-[3-amino-6-(2-hidroksifenil)piridazin-4-il]-3,8-dijazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il]-2-piridil]oksi]ciklobutoksi]-1-piperidil]etil]piperazin-1-il]izoksazol-5-il]-3-metil-butanoil]-4-hidroksi-N-[(1S)-1-[4-(4-metiltiazol-5-il)fenil]etil]pirolidin-2-karboksamid format (24,6 mg, 0,02 mmol, prinos 12%) kao bledobela čvrsta supstanca.
Pripremljeno korišćenjem analognih procedura kao i za primerno jedinjenje 195.
Primerna sinteza primernih jedinjenja 197 i 352
Smeša terc-butil N-[(1R)-1-(4-bromofenil)-2-hidroksi-etil]karbamata (2,0 g, 6,33 mmol, 1 ekv), 4-metil-tiazola (1,25 g, 12,65 mmol, 1,15 mL, 2 ekv), kalijum-acetata (1,24 g, 12,65 mmol, 2 ekv) i paladijum-acetata (142 mg, 0,63 mmol, 0,1 ekv) u dimetilacetamidu (40 mL) je degazirana i tri puta isprana azotom, zatim mešana na 100 °C tokom 12 sati pod azotnom atmosferom. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom radi uklanjanja dimetilacetamida. Ostatak je ekstrahovan etil-acetatom (40 mL × 2) i ispiran zasićenim slanim rastvorom (40 mL × 2). Kombinovani organski slojevi su osušeni preko bezvodnog natrijum-sulfata, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum-gelu (petrolej-etar/etil-acetat = 5/1 do 1/2). Dobijeno je jedinjenje terc-butil N-[(1R)-2-hidroksi-1-[4-(4-metiltiazol-5-il)fenil]etil]karbamat (1,45 g, 3,98 mmol, prinos 63%) kao žuto ulje.
Terc-butil N-[(1R)-2-hidroksi-1-[4-(4-metiltiazol-5-il)fenil]etil]karbamat je konvertovan u krajnje jedinjenje korišćenjem procedura analognih onima opisanim za primerno jedinjenje 180 iznad.
Primerna jedinjenja 199, 158 i 100 su pripremljena korišćenjem sličnih procedura. Primerna sinteza primerenog jedinjenja 202
U rastvor 1-(4-bromo-2-hidroksi-fenil)etanona (10 g, 46,50 mmol, 1,0 ekv) u dimetilformamidu (50 mL) dodat je kalijum-karbonat (9,64 g, 69,75 mmol, 1,5 ekv). Zatim je dodat jodmetan (13,20 g, 93,00 mmol, 2,0 ekv) na 0 °C. Smeša je zatim mešana na 20 °C tokom 12 sati. Smeša je razblažena vodom (200 mL), ekstrahovana etil-acetatom (100 mL × 3), isprana slanim rastvorom (50 mL × 2), osušena preko bezvodnog natrijum-sulfata, filtrirana i koncentrovana. Dobijeno je jedinjenje 1-(4-bromo-2-metoksi-fenil)etanon (10,5 g, 45,84 mmol, prinos 98%) kao žuta čvrsta supstanca.
Korak 2
U rastvor 1-(4-bromo-2-metoksi-fenil)etanona (10 g, 43,65 mmol, 1,18 ekv) u tetrahidrofuranu (50 mL) dodat je tetraetoksi-titanijum (16,94 g, 74,26 mmol, 2,0 ekv). Zatim je dodat 2-metilpropan-2-sulfinamid (4,5 g, 37,13 mmol, 1,0 ekv), a smeša je tri puta isprana azotom. Smeša je zatim mešana na 70 °C tokom 12 sati. Reakcija je zaustavljena dodatkom vode (100 mL), zatim razblažena vodom (200 mL), filtrirana i ekstrahovana etil-acetatom (200 mL × 3), isprana slanim rastvorom (200 mL), osušena preko bezvodnog natrijumsulfata, filtrirana i koncentrovana. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni sa silicijum-gelom (petrolej-etar: etil-acetat = 20:1 do 3:1). Dobijeno je jedinjenje ((R,E)-N-(1-(4-bromo-2-metoksi-fenil)etiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamid (9 g, 27,09 mmol, prinos 73%) kao žuto ulje.
Korak 3
U rastvor ((R,E)-N-(1-(4-bromo-2-metoksifenil)etiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamida (9 g, 27,09 mmol, 1,0 ekv) u tetrahidrofuranu (90 mL) dodat je L-selektrid (1 M, 81,26 mL, 3,0 ekv) na 0 °C. Zatim je smeša mešana na 20 °C tokom 2 sata. Smeša je zatim zaustavljena dodatkom vode (100 mL), razblažena dodatnom vodom (20 mL), ekstrahovana etil-acetatom (300 mL × 3), isprana slanim rastvorom (200 mL), osušena preko bezvodnog natrijumsulfata, filtrirana i koncentrovana. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni sa silicijum-gelom (petrolej-etar: etil-acetat = 20:1 do 1:1). Dobijeno je jedinjenje N-[(1S)-1-(4-bromo-2-metoksifenil)etil]-2-metilpropan-2-sulfinamid (5,5 g, 16,45 mmol, prinos 60%) kao žuto ulje.
Korak 4
U rastvor N-[(1S)-1-(4-bromo-2-metoksifenil)etil]-2-metilpropan-2-sulfinamida (4,7 g, 14,06 mmol, 1,0 ekv) i 4,4,5,5-tetrametil-2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,3,2-dioksaborolana (5,36 g, 21,09 mmol, 1,5 ekv) u dioksanu (12 mL) dodat je [1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]di-hloropaladijum(II) (1,03 g, 1,41 mmol, 0,1 ekv) i kalijum-acetat (2,76 g, 28,12 mmol, 2,0 ekv). Zatim je smeša 3 puta isprana sa N2. Smeša je mešana na 90 °C tokom 5 sati. Smeša je razblažena vodom (20 mL), filtrirana i ekstrahovana etil-acetatom (50 mL × 3), isprana slanim rastvorom (30 mL), osušena preko bezvodnog natrijum-sulfata, filtrirana i koncentrovana. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni sa silicijum-gelom (petrolej-etar: etil-acetat = 10:1 do 1:1). Dobijeno je jedinjenje N-[(1S)-1-[2-metoksi-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil]etil]-2-metilpropan-2-sulfinamid (4,5 g, 11,80 mmol, prinos 84%) kao žuto ulje.
N-[(1S)-1-[2-metoksi-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil]etil]-2-metilpropan-2-sulfinamid je konvertovan u (S)-1-(2-metoksi-4-(4-metiltiazol-5-il)fenil)etan-1-amin u skladu sa šemom prikazanom ispod.
(S)-1-(2-metoksi-4-(4-metiltiazol-5-il)fenil)etan-1-amin je konvertovan u finalno jedinjenje korišćenjem procedura analognih onima opisanima za druge primere iznad (npr. primerno jedinjenje 64).
Primerno jedinjenje 201 je pripremljeno korišćenjem procedura analognih gore opisanim.
Primerna sinteza primerenog jedinjenja 203
U rastvor terc-butil N-[(1S)-1-(4-bromofenil)etil]karbamata (2 g, 6,66 mmol, 1 ekv) u N,N-dimetilformamidu (20 mL) dodati su tetrakistrifenilfosfinpalladijum (770 mg, 0,67 mmol, 0,1 ekv) i cink-cijanid (782 mg, 6,66 mmol, 0,4 mL, 1 ekv). Reakciona smeša je mešana na 80 °C tokom 14 sati. Smeša je zatim zaustavljena dodatkom vode (80 mL) i ekstrahovana etil-acetatom (50 mL × 3). Kombinovani organski sloj je ispran slanim rastvorom (20 mL × 3). Organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum-sulfata, filtriran i koncentrovan pod smanjenim pritiskom da bi se dobio ostatak. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni sa silika-gelom (petrolejski etar/etil-acetat = 30/1 do 3/1) da bi se dobio proizvod. Dobijeno je jedinjenje terc-butil N-[(1S)-1-(4-cijanofenil)etil]karbamat (1,6 g, 6,50 mmol, prinos 97,50%) kao bezbojna smola.
terc-butil N-[(1S)-1-(4-cijanofenil)etil]karbamat je konvertovan u finalno jedinjenje korišćenjem gore opisanih procedura.
Primerno jedinjenje 204 je pripremljeno korišćenjem analognih procedura.
Primerna sinteza primerenog jedinjenja 91
Korak 4
U zaptivenu cev zapremine 30 mL stavljeni su benzil 9-(3-amino-6-hloropiridazin-4-il)-1-oksa-4,9-dijazaspiro[5.5]undekan-4-karboksilat (3,1 g, 7,4 mmol, 1,0 ekv), [2-(metoksimetoksi)fenil]boronska kiselina (2,7 g, 0,1 mmol, 2,0 ekv), Pd(PPh₃)₄ (859,4 mg, 0,7 mmol, 0,1 ekv) i K₂CO₃ (3,1 g, 0,1 mmol, 3,0 ekv) u dioksanu (5 mL) i H₂O (1 mL). Dobijena smeša je mešana 12 sati na 100 °C u uljanoj kupki, a zatim ekstrahovana etil-acetatom (20 mL × 2). Kombinovani organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum-sulfata i koncentrovan pod smanjenim pritiskom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela uz eluiranje dihlormetanom/metanolom (10:1). Dobijeno je 3,2 g (83%) jedinjenja benzil 9-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-1-oksa-4,9-dijazaspiro[5.5]undekan-4-karboksilat kao žuta čvrsta supstanca.
Korak 5
U okruglu bociču zapremine 100 mL, u rastvor benzil 9-[3-amino-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-4-il]-1-oksa-4,9-dijazaspiro[5.5]undekan-4-karboksilata (3,2 g, 6,2 mmol, 1,0 ekv) u metanolu (10 mL) dodat je Pd(OH)₂/C (10%, 500 mg) u atmosferi azota. Bočica je evakuisana i ispirana vodonikom. Reakciona smeša je hidrogenizovana na sobnoj temperaturi 6 sati pod vodoničnom atmosferom uz korišćenje balona sa vodonikom, zatim je procedjena kroz sloj Celita i koncentrovana pod smanjenim pritiskom. Dobijeno je 1,8 g (76%) jedinjenja 6-[2-(metoksimetoksi)fenil]-4-[1-oksa-4,9-dijazaspiro[5.5]undekan-9-il]piridazin-3-amin kao žuta čvrsta supstanca.
Korak 6
U okruglu bočicu zapremine 250 mL stavljena je smeša but-2-in-1,4-diola (2,58 g, 30,00 mmol, 1,00 ekv), srebro-oksida (10,35 g, 45,00 mmol, 1,50 ekv) i kalijum-jodida (498 mg, 3,00 mmol, 0,10 ekv) u dihlorometanu (80 mL). Zatim je dodat 4-metilbenzensulfonilhlorid (5,70 g, 30,00 mmol, 1,00 ekv). Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Nerastvorljive čvrste supstance su profiltrirane, a filtrat je koncentrovan. Ostatak je nanet na kolonu silika gela pomoću elucije etil acetatom/petrol etrom (1:2). Dobijeno je 6,13 g (85%) jedinjenja 4-hidroksibut-2-in-1-il 4-metilbenzensulfonata kao žuto ulje.
Korak 7
U okruglu bočicu zapremine 250 mL stavljena je smeša 4-hidroksibut-2-in-1-il 4-metilbenzensulfonata (6,13 g, 25,54 mmol, 1,10 ekv), benzil piperazin-1-karboksilata (5,11 g, 23,22 mmol, 1,00 ekv) i kalijum-karbonata (12,82 g, 92,88 mmol, 4,00 ekv) u DMF (40 mL). Dobijena smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim zaustavljena dodatkom vode (400 mL) i ekstrahovana etil-acetatom (200 mL × 2). Kombinovani organski sloj je osušen preko natrijum-sulfata i koncentrovan. Ostatak je nanet na kolonu silika gela pomoću elucije etil acetatom/petrol etrom (1:1). Dobijeno je 2,01 g (30%) jedinjenja benzil 4-(4-hidroksibut-2-in-1-il)piperazin-1-karboksilata kao žuto ulje.
Korak 8
U okruglu bociču zapremine 250 mL stavljena je smeša benzil 4-(4-hidroksibut-2-in-1-il)piperazin-1-karboksilata (2,01 g, 6,98 mmol, 1,00 ekv) i kalijum-hidroksida (3,91 g, 69,80 mmol, 10,00 ekv) u dietil-eteru (100 mL). Zatim je dodat 4-metilbenzensulfonil-hlorid (1,99 g, 10,47 mmol, 1,50 ekv). Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Nerastvorljive čvrste supstance su odstranjene filtracijom. Filtrat je ispiran vodom (100 mL), osušen preko bezvodnog natrijum-sulfata i koncentrovan pod vakuumom. Dobijeno je 1,80 g (59%) jedinjenja benzil 4-(4-(tosiloksi)but-2-in-1-il)piperazin-1-karboksilata kao žuto ulje.
Korak 9
natrijum-sulfata i koncentrovan pod smanjenim pritiskom. Dobijeno je 292 mg (83%) jedinjenja 6-(2-(metoksimetoksi)fenil)-4-(4-(4-(piperazin-1-il)butil)-1-oksa-4,9-dijazaspiro[5.5]undekan-9-il)piridazin-3-amina kao braon ulje.
Jedinjenje 6-(2-(metoksimetoksi)fenil)-4-(4-(4-(piperazin-1-il)butil)-1-oksa-4,9-dijazaspiro[5.5]undekan-9-il)piridazin-3-amin konvertovano je u krajnje jedinjenje prema šemi ispod koristeći postupke analogne gore opisanim za druge primere.
Primerno jedinjenje 205 je pripremljeno korišćenjem analognih procedura.
Primerna sinteza primerenog jedinjenja 188
Pripremljeno prema šemi ispod koristeći postupke analogne onima opisanim gore za primerno jedinjenje 91.
Primerno jedinjenje 187 je pripremljeno korišćenjem analognih procedura.
Primerna sinteza primerenog jedinjenja 192
Benzil 4-(2-((1r,3r)-3-(2-(9-(3-amino-6-(2-(metoksimetoksi)fenil)piridazin-4-il)-1-oksa-4,9-dijazaspiro[5.5]undekan-4-il)etoksi)ciklobutoksi)etil)piperazin-1-karboksilat je pripremljen prema šemi ispod koristeći postupke opisane za druge primere, kao i postupke koji su očigledni stručnjacima u oblasti.
Benzil 4-(2-((1r,3r)-3-(2-(9-(3-amino-6-(2-(metoksimetoksi)fenil)piridazin-4-il)-1-oksa-4,9-dijazaspiro[5.5]undekan-4-il)etoksi)ciklobutoksi)etil)piperazin-1-karboksilat je konvertovan u krajnje jedinjenje koristeći postupke analogne onima opisanim za primerno jedinjenje 91.
Primerna sinteza primernih jedinjenja 212 i 213
Pripremljeno korišćenjem postupaka analognih onima opisanim u koracima 1 i 2 primerenog jedinjenja 117, a zatim koracima opisanim za primerno jedinjenje 180.
Primerna sinteza primerenih jedinjenja 214 i 215
terc-butil (2S,4R)-4-hidroksi-2-((2-metoksi-4-(4-metiltiazol-5-il)benzil)karbamoil)piperidin-1-karboksilat je pripremljen prema šemi ispod koristeći standardne postupke koji su očigledni stručnjacima u oblasti.
terc-butil (2S,4R)-4-hidroksi-2-((2-metoksi-4-(4-metiltiazol-5-il)benzil)karbamoil)piperidin-1-karboksilat je konvertovan u krajnja jedinjenja koristeći standardne postupke opisane za druge primere iznad.
Primerna sinteza primerenog jedinjenja 238
U rastvor metil 3-hidroksiciklobutan-karboksilata (14,2 g, 109,11 mmol, 1,00 ekv) u DMF-u (150 mL) dodat je natrijum-hidrid (5,24 g, 130,93 mmol, 60% čistoće, 1,20 ekv), i smeša je mešana 0,5 sata na 0 °C. Nakon toga, dodat je benzil-bromid (20,53 g, 120,02 mmol, 14,26 mL, 1,1 ekv), i smeša je mešana na 25 °C tokom 2 sata. Reakciona smeša je zaustavljena dodatkom zasićenog rastvora amonijum-hlorida (200 mL) na 25°C, zatim razblažena sa vodom (100 mL) i ekstrahovana etil acetatom (80 mL × 3). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (150 mL × 2), osušeni preko bezvodnog natrijum-sulfata, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobio ostatak. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0-20% etil acetat/petrolej-eter gradijent). Jedinjenje metil 3-benzyloksiciklobutan-karboksilat (8,9 g, 40,41 mmol, 37% prinos) dobijeno je kao svetložuta uljana supstanca.
Korak 2
U rastvor litijum-aluminijum-hidrida (1,53 g, 40,41 mmol, 1,00 ekv) u tetrahidrofuranu (80 mL) dodat je metil 3-benzyloksiciklobutan-karboksilat (8,90 g, 40,41 mmol, 1,00 ekv) na 0°C, i smeša je mešana na 25°C tokom 2 sata. Reakciona smeša je zaustavljena dodatkom vode (1 mL), rastvora natrijum-hidroksida (15%, 2 mL) i vode (3 mL) na 25 °C, zatim razblažena etil acetatom (80 mL) i ekstrahovana etil acetatom (15 mL × 3). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (50 mL × 2), osušeni preko bezvodnog natrijum-sulfata, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobio ostatak. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0–50% etil acetat/petrolej-eter). Jedinjenje (3-benzyloksiciklobutil)metanol (7,4 g, 38,5 mmol, 95% prinos) dobijeno je kao bezbojna uljana supstanca.
Korak 3
U rastvor (3-benziloksiciklobutil)metanola (7,4 g, 38,49 mmol, 1,00 ekv) i 3,4-dihidro-2H-pirana (16,19 g, 192,5 mmol, 17,6 mL, 5,00 ekv) u dihlormetanu (125 mL) dodat je piridinijum-p-toluensulfonat (967 mg, 3,85 mmol, 0,10 ekv), i smeša je mešana na 25°C tokom 12 sati. Smeši je dodata voda (200 mL), a dobijena smeša je ekstrahovana pomoću dihlorometana (100 mL × 2). Zatim su kombinovani organski slojevi isprani slanim rastvorom (150 mL × 2), osušeni preko bezvodnog natrijum-sulfata, filtrirani i koncentrovani pod smanjenim pritiskom da bi se dobio ostatak. Ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom (SiO₂, petrolej etar:etil acetat = 1:0 do 20:1). Jedinjenje 2-[(3-benziloksiciklobutil)metoksi]tetrahidropiran (10,20 g, 36,9 mmol, 95% prinos) dobijeno je kao bezbojna uljana supstanca.
U rastvor ((1r,3r)-3-(piridin-4-iloksi)ciklobutil)metanola (4,2 g, 23,44 mmol, 1 ekv) u toluenu (40 mL) dodat je benzil-bromid (4,41 g, 25,78 mmol, 3,1 mL, 1,1 ekv). Reakciona smeša je mešana na 80 °C tokom 4 h. Smeša je koncentrovana u vakuumu. Ostatak je tritiran petrolej-etrom i etil-acetatom (40 mL, V/V = 1/1). 1-benzil-4-((1r,3r)-3-(hidroksimetil)ciklobutil)piridin-1-ijum (8 g, 22,8 mmol, 97% prinos) dobijeno je kao beli čvrsti proizvod.
Korak 7
U rastvor 1-benzil-4-((1r,3r)-3-(hidroksimetil)ciklobutil)piridin-1-ijuma (8 g, 22,84 mmol, 1 ekv) u etanolu (100 mL) dodat je natrijum-borohidrid (1,73 g, 45,68 mmol, 2 ekv) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na 20 °C tokom 4 sata. Reakcija je zaustavljena dodatkom vode (100 mL). Dobijena smeša je ekstrahovana pomoću etil-acetata (100 mL × 3). Kombinovani organski sloj je ispran slanim rastvorom (100 mL), osušen preko natrijumsulfata, profiltriran i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum-dioksidu (petrolej-etar: etil-acetat = 50:1 do 0:1). ((1r,3r)-3-((1-benzil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)oksi)ciklobutil)metanol (5,2 g, 19,02 mmol, 83% prinos) dobijeno je kao svetložuta uljana supstanca.
Korak 8
U rastvor [3-[(1-benzil-3,6-dihidro-2H-piridin-4-il)oksi]ciklobutil]metanola (5,2 g, 19,02 mmol, 1 ekv) i di-terc-butil-di-karbonata (8,30 g, 38,04 mmol, 8,7 mL, 2 ekv) u metanolu (100 mL) dodat je 10% paladijum na aktivnom ugljeniku (0,7 g) i 20% paladijumhidroksid na ugljeniku (0,7 g) pod azotom. Reakciona smeša je mešana na 40 °C pod vodonikom (50 psi) tokom 16 sati. Smeša je filtrirana kroz Celite sloj, a filtrat koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobio sirovi proizvod. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum-dioksidu (petrolej-etar: etil-acetat = 100:1 do 0:1). terc-butil 4-((1r,3r)-3-(hidroksimetil)ciklobutil)piperidin-1-karbamat (4,5 g, 15,77 mmol, 83% prinos) dobijeno je kao bezbojna uljana supstanca.
Korak 9
U rastvor terc-butil 4-((1r,3r)-3-(hidroksimetil)ciklobutil)piperidin-1-karbamata (2,5 g, 8,76 mmol, 1 ekv) u dihlorometanu (25 mL) dodat je Dess-Martinov periodinan (4,46 g, 10,51 mmol, 1,2 ekv) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na 20 °C tokom 2 sata. Smeša je filtrirana, a zatim je dodat zasićen rastvor natrijum-bikarbonata (50 mL). Vodena faza je ekstrahovana etil-acetatom (50 mL × 3). Kombinovani organski sloj je ispran slanim rastvorom (80 mL), osušen preko natrijum-sulfata, profiltriran i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum-dioksidu (petrolej-etar: etil-acetat = 1:0 do 5:1). terc-butil 4-((1r,3r)-3-formilciklobutil)piperidin-1-karbamat (2,0 g, 7,06 mmol, 80% prinos) dobijeno je kao bezbojna uljana supstanca.
Korak 10
U rastvor terc-butil 4-((1r,3r)-3-formilciklobutil)piperidin-1-karbamata (2,0 g, 7,06 mmol, 1 ekv) u metanolu (20 mL) dodat je kalijum-karbonat (1,95 g, 14,12 mmol, 2 ekv) i 1-diazo-1-dimetoksifosforil-propan-2-on (1,42 g, 7,41 mmol, 1,05 ekv) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na 20 °C tokom 12 sati. Voda (100 mL) je dodata u smešu, a zatim je smeša ekstrahovana etil-acetatom (50 mL × 3). Kombinovani organski sloj je ispran slanim rastvorom (50 mL), osušen preko natrijum-sulfata, profiltriran i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum-dioksidu (petrolej-etar : etil-acetat = 1:0 do 20:1). terc-butil 4-((1r,3r)-3-etinilciklobutil)piperidin-1-karbamat (1,3 g, 4,65 mmol, 66% prinos) dobijeno je kao bezbojna uljana supstanca.
Korak 11
U rastvor terc-butil 4-((1r,3r)-3-etinilciklobutil)piperidin-1-karbamata (1,7 g, 6,09 mmol, 1 ekv) u tetrahidrofuranu (17 mL) dodat je n-butil-litijum (2,5 M, 3,6 mL, 1,5 ekv) na -78 °C. Smeša je mešana na -78 °C tokom 0,5 sata. Zatim je dodat izobutil-hloroformijat (1,66
Korak 14
U rastvor terc-butil 4-((1r,3r)-3-(3-hidroksiprop-1-in-1-il)ciklobutil)piperidin-1-karbamata (1,06 g, 3,43 mmol, 1 ekv) u diklormetanu (10 mL) dodat je trifenilfosfin (1,08 g, 4,11 mmol, 1,2 ekv) i tetrabrommetan (1,36 g, 4,11 mmol, 1,2 ekv) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na 20 °C tokom 3 sata. Smeša je koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum-dioksidu (petrolej-etar: etil-acetat = 1:0 do 20:1). terc-butil 4-[3-(3-bromoprop-1-inil)ciklobutil]piperidin-1-karbamat (1 g, 2,69 mmol, 78% prinos) dobijeno je kao svetložuta uljana supstanca.
terc-butil 4-((1r,3r)-3-(3-hidroksiprop-1-in-1-il)ciklobutil)piperidin-1-karbamat konvertovano je u krajnje jedinjenje prema šemi ispod, koristeći postupke opisane za druge primere iznad.
Primerna sinteza primerenog jedinjenja 216
Korak 1
Smeša 2-bromo-4-fluoropiridina (310 mg, 1,76 mmol, 1,2 ekv), 4-(3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-il)-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-3-amina (500 mg, 1,46 mmol, 1 ekv) i diizopropiletilamina (2,27 g, 17,57 mmol, 3 mL, 12 ekv) u dimetilsulfoksidu (30 mL) je degazirana i tri puta ispirana azotom, zatim je smeša mešana na 130 °C tokom 5 sati pod azotnom atmosferom. Reakciona smeša je razblažena vodom (50 mL) i ekstrahovana etil-acetatom (50 mL) tri puta. Kombinovani organski slojevi su osušeni preko bezvodnog natrijum-sulfata i koncentrovani da bi se dobio sirovi proizvod. Ostatak je prečišćen polupripremnom hromatografijom u reverznoj fazi (kolona: Phenomenex Synergi C18 150*30mm*4 um; mobilna faza: [voda (0,225% FA) - ACN]; B%: 15% - 45%, 10 min). 4-[8-(2-bromo-4-piridil)-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-il]-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-3-amin (562 mg, 1,13 mmol, 77% prinos) dobijen je kao žuta čvrsta supstanca.
Korak 2
Smeša 4-[8-(2-bromo-4-piridil)-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-il]-6-[2-(metoksimetoksi)fenil]piridazin-3-amina (568 mg, 1,14 mmol, 1 ekv), terc-butil 4-((1r,3r)-3-etinilciklobutil)piperidin-1-karbamata (479 mg, 1,71 mmol, 1,5 ekv), bis(trifenilfosfin)palladijum(II) dihlorida (80 mg, 0,1 mmol, 0,1 ekv), bakar-jodida (22 mg, 0,1 mmol, 0,1 ekv) i N-izopropilpropan-2-amina (8,13 g, 80,38 mmol, 11,36 mL, 70,39 ekv) u dimetilformamidu (35 mL) je degazirana i tri puta ispirana azotom, zatim je smeša mešana na 75 °C tokom 12 sati pod azotnom atmosferom. Reakciona smeša je razblažena vodom (30 mL) i ekstrahovana etil-acetatom (60 mL) tri puta. Kombinovani organski slojevi su dva puta oprani fiziološkim rastvorom (50 mL), osušeni preko bezvodnog natrijum-sulfata i koncentrovani da bi se dobio sirovi proizvod. Ostatak je prečišćen polupripremnom hromatografijom u reverznoj fazi (kolona: Phenomenex luna C18 250*50mm*10 um; mobilna faza: [voda (0,225% FA) - ACN]; B%: 15% - 45%, 25 min). terc-Butil 4-((1r,3r)-3-((4-(3-(3-amino-6-(2-(metoksimetoksi)fenil)piridazin-4-il)-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il)piridin-2-il)etinil)ciklobutiloksi)piperidin-1-karbamat (581 mg, 0,8 mmol, 73% prinos) dobijen je kao žuta čvrsta supstanca.
Jedinjenje terc-butil 4-((1r,3r)-3-((4-(3-(3-amino-6-(2-(metoksimetoksi)fenil)piridazin-4-il)-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il)piridin-2-il)etinil)ciklobutiloksi)piperidin-1-karbamat je konvertovano u krajnje jedinjenje prema postupcima opisanim za druge primere iznad.
Primerna sinteza primernih jedinjenja 217 i 218
U rastvor metil 2-(3-hidroksiizoksazol-5-il)-3-metil-butanoata (500 mg, 2,51 mmol, 1 ekv) i 3-bromopropan-1-ola (523 mg, 3,77 mmol, 0,34 mL, 1,5 ekv) u N,N-dimetilformamidu (5 mL) dodat je kalijum-karbonat (693 mg, 5,02 mmol, 2 ekv) na 20 °C, i smeša je mešana na 80 °C tokom 4 sata. Reakciona smeša je zaustavljena dodatkom vode (20 mL), zatim je ekstrahovana etil-acetatom (10 mL × 3). Kombinovani organski slojevi su isprani sa slanom vodom (10 mL), osušeni preko bezvodnog natrijum-sulfata, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobio ostatak. Ostatak je prečišćen kolonama od silika-gela (petrolej/etil-acetat = 20:1 do 4:1). Metil 2-[3-(3-hidroksipropoksi)izoksazol-5-il]-3-metilbutanoat (370 mg, 1,44 mmol, 57% prinos) dobijen je kao bezbojno ulje.
Korak 2
U rastvor metil 2-[3-(3-hidroksipropoksi)izoksazol-5-il]-3-metil-butanoata (370 mg, 1,44 mmol, 1 ekv) u dihlormetanu (5 mL) dodati su trietilamin (291 mg, 2,88 mmol, 0,40 mL, 2 ekv) i p-toluensulfonil-hlorid (411 mg, 2,16 mmol, 1,5 ekv) redom na 20 °C, a zatim je smeša mešana na 20 °C tokom 16 sati. Reakciona smeša je koncentrovana do ostatka. Ostatak je prečišćen prep-TLC-om (petrolej/etil-acetat = 3/1). Metil 3-metil-2-[3-[3-(p-tolilsulfoniloksi)propoksi]izoksazol-5-il]butanoat (438 mg, 1,06 mmol, 74% prinos) dobijen je kao bezbojno ulje.
Korak 3
U rastvor metil 3-metil-2-[3-[3-(p-tolil-sulfoniloksi)propoksi]izoksazol-5-il]butanoata (250 mg, 0,61 mmol, 1 ekv) i 2-[6-amino-5-[8-[2-[3-(4-piperidiloksi)ciklobutoksi]-4-piridil]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-il]piridazin-3-il]fenola (386 mg, 0,61 mmol, 1 ekv, 2-trifluoracetat) u dimetil-sulfoksidu (3 mL) dodati su N,N-diizopropiletilamin (314 mg, 2,43 mmol, 0,42 mL, 4 ekv) i kalijum-jodid (10 mg, 0,06 mmol, 0,1 ekv) na 20 °C, i smeša je mešana na 80 °C tokom 12 sati. Reakciona smeša je razblažena vodom (20 mL), zatim ekstrahovana etil-acetatom (10 mL × 3). Kombinovani organski slojevi su isprani sa slanom vodom (10 mL), osušeni preko bezvodnog natrijum-sulfata, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobio ostatak. Ostatak je prečišćen kolonama od silika-gela (dihlormetan/metanol = 10/1). Metil 2-[3-[3-[4-[3-[[4-[3-[3-amino-6-(2-hidroksifenil)piridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il]-2-piridil]oksi]ciklobutoksi]-1-piperidil]propoksi]izoksazol-5-il]-3-metil-butanoat (90 mg, 0,11 mmol, 17% prinos) dobijen je kao žuto ulje.
Metil 2-[3-[3-[4-[3-[[4-[3-[3-amino-6-(2-hidroksifenil)piridazin-4-il]-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il]-2-piridil]oksi]ciklobutoksi]-1-piperidil]propoksi]izoksazol-5-il]-3-metil-butanoat je konvertovan u krajnje jedinjenje prema šemi ispod koristeći postupke opisane za druge primere iznad.
2-[4-hloro-3-(2,2-diethoksiethoksi)izoksazol-5-il]-3-metil-butanoična kiselina (229 mg, 0,68 mmol, 63% prinos) dobijena je kao beli čvrsti proizvod.
2-[4-Hloro-3-(2,2-diethoksiethoksi)izoksazol-5-il]-3-metil-butanoična kiselina je konvertovana u krajnje jedinjenje koristeći postupke opisane za druge primere iznad.
Primerno jedinjenje 222 je pripremljeno korišćenjem analognih procedura.
Primerna sinteza primerenog jedinjenja 225
U rastvor 5-bromo-2-metil-benzonitrila (5 g, 25,50 mmol, 1 ekv) u tetraklorometanu (50 mL) dodat je N-bromosukcinimid (4,77 g, 26,78 mmol, 1,05 ekv) i 2,2-azobis(2-metilpropionitril) (419 mg, 2,55 mmol, 0,1 ekv) pod azotom. Reakciona smeša je mešana na 80 °C tokom 16 h. Smeša je filtrirana, a filtrat koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum-gelu (petrolej-etar: etil-acetat = 1:0 do 10:1). 5-Bromo-2-(bromometil)benzonitril (4,5 g, 16,37 mmol, 64% prinos) dobijen je kao svetložuti čvrsti proizvod.
Korak 2
U rastvor 5-bromo-2-(bromometil)benzonitrila (4,4 g, 16,00 mmol, 1 ekv) i terc-butil N-terc-butoksikarbonilkarbamata (4,17 g, 19,20 mmol, 1,2 ekv) u acetonitrilu (50 mL) dodat je kalijum-karbonat (4,42 g, 32,01 mmol, 2 ekv). Reakciona smeša je mešana na 50 °C tokom 12 h. LCMS je pokazao da je većina 5-bromo-2-(bromometil)benzonitrila iskorišćena. U smešu je dodata voda (100 mL), a zatim je ekstrahovano etil-acetatom (50 mL × 3). Kombinovani organski sloj je ispran slanim rastvorom (50 mL), osušen preko natrijumsulfata, profiltriran i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen silika gel hromatografijom (petrolej etar: etil-acetat = 100:1 do 5:1). terc-butil N-[(4-bromo-2-cijanofenil)metil]-N-terc-butoksikarbonilkarbamat (6,4 g, 15,56 mmol, 97% prinos) dobijen je kao bezbojno ulje.
Korak 3
U rastvor terc-butil N-[(4-bromo-2-cijanofenil)metil]-N-tercbutoksikarbonilkarbamata (2 g, 4,86 mmol, 1 ekv), 4,4,5,5-tetrametil-2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,3,2-dioksaborolana (1,36 g, 5,35 mmol, 1,1 ekv) u dioksanu (20 mL), dodat je kalijum-acetat (1,19 g, 12,16 mmol, 2,5 ekv) i (1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen)palladijum(II) hlorid (356 mg, 0,49 mmol, 0,1 ekv) pod azotom. Reakciona smeša je mešana na 90 °C tokom 12 h. Smeša je filtrirana kroz Celite sloj, a filtrat koncentrovan dobijajući terc-butil N-terc-butoksikarbonil-N-[[2-cijano-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil]metil]karbamat (2,2 g, sirovi) kao crno ulje.
Korak 4
U rastvor terc-butil N-terc-butoksikarbonil-N-[[2-cijano-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil]metil]karbamata (2,2 g, 4,80 mmol, 1 ekv), 5-bromo-4-metil-tiazola (940 mg, 5,28 mmol, 1,1 ekv) u dioksanu (20 mL) i vodi (4 mL), dodat je kalijum-karbonat (1,66 g, 12,00 mmol, 2,5 ekv) i (1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen)palladijum(II) hlorid (351 mg, 0,48 mmol, 0,1 ekv) pod azotom. Reakciona smeša je mešana na 100 °C tokom 12 h. Voda (100 mL) je dodata u smešu, a zatim je smeša ekstrahovana etil-acetatom (50 mL × 3). Kombinovani organski sloj je ispran slanim rastvorom (50 mL), osušen preko natrijumsulfata, profiltriran i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen silika gel hromatografijom (petrolej etar:etil-acetat = 100:1 do 1:1). terc-butil N-terc-butoksikarbonil-N-[[2-cijano-4-(4-metiltiazol-5-il)fenil]metil]karbamat (1,7 g, 3,96 mmol, 82% prinos) dobijen je kao svetložuti čvrsti proizvod.
terc-butil N-terc-butoksikarbonil-N-[[2-cijano-4-(4-metiltiazol-5-il)fenil]metil]karbamat je konvertovan u krajnje jedinjenje prema postupcima opisanim gore za druge primere.
Primerno jedinjenje 224 je pripremljeno korišćenjem analognih procedura.
Primerna sinteza primerenog jedinjenja 126
U smešu benzil-3-oksoazetidin-1-karboksilata (25 g, 122 mmol, 1 ekv) i 2-metilpropan-2-sulfinamida (14,8 g, 122 mmol, 1 ekv) u THF-u (250 mL) dodat je titanijum(IV)-izopropilat (38,9 g, 171 mmol, 35,4 mL, 1,4 ekv) u jednom dodatku na 15 °C pod azotom. Smeša je mešana na 60 °C tokom 2 h. Smeša je sipana u etil-acetat i ledenu vodu (1000 mL), mešana 20 minuta, zatim filtrirana. Vodena faza je ekstrahovana pomoću etilacetata (500 mL × 3). Kombinovana organska faza je isprana slanim rastvorom (200 mL × 3), osušena bezvodnim natrijum-sulfatom, profiltrirana i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen silika gel hromatografijom (petrolej etar/etil-acetat = 30/1 do 8/1) i dobijen je benzil-3-terc-butilsulfinil-iminoazetidin-1-karboksilat (39 g, sirov) kao žuti čvrsti proizvod.
Korak 2
U rastvor 1-bromo-4-jodo-benzena (35,78 g, 126 mmol, 1 ekv) u THF-u (350 mL) dodat je n-butil-litijum (2,5 M, 50,6 mL, 1 ekv) kap po kap na -70°C pod azotom, a smeša je mešana na toj temperaturi 30 minuta. Zatim je rastvor benzil-3-terc-butilsulfiniliminoazetidin-1-karboksilata (39 g, 126,46 mmol, 1 ekv) u THF-u (70 mL) dodat kap po kap pod azotom. Reakciona smeša je mešana na -70°C tokom 1 sata. Smeša je prekinuta dodatkom ledene vode (200 mL). Vodena faza je ekstrahovana pomoću etil-acetata (500 mL × 3). Kombinovana organska faza je isprana slanim rastvorom (200 mL × 2), osušena bezvodnim natrijum-sulfatom, profiltrirana i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen silika gel hromatografijom (petrolej etar/etil-acetat = 3/1 do 1/1). Zatim je sirovi proizvod prečišćen pomoću polu-pripremne reverzno-fazne HPLC hromatografije (kolona: Phenomenex luna c18 250 mm*100 mm*10 um; mobilna faza: [voda (0,1%TFA) - ACN]; B%: 40% ACN – 70% ACN, 45 minuta) i dobijen je benzil-3-(4-bromofenil)-3-(tercbutilsulfinilamino)azetidin-1-karboksilat (4,62 g, 9,93 mmol, 7% prinos) kao žuto ulje. Pored toga, prikupljeno je i 4,16 g proizvoda sa nešto nižom čistoćom (86%) kao žuto ulje.
Korak 3
U smešu benzil-3-(4-bromofenil)-3-(terc-butilsulfinilamino)azetidin-1-karboksilata (4,62 g, 9,93 mmol, 1 ekv), kalijum-acetata (1,95 g, 19,85 mmol, 2 ekv) i 4-metil-tiazola (1,97 g, 19,85 mmol, 1,8 mL, 2 ekv) u dimetilacetamidu (60 mL) dodat je paladijum(II)-acetat (223 mg, 0,99 mmol, 0,1 ekv) u jednom dodatku na 20 °C pod azotom. Smeša je mešana na 100 °C tokom 16 h. Smeša je ohlađena na 20 °C, sipana u smešu leda i vode (m/m = 1/1, 100 mL) i mešana 5 minuta. Vodena faza je ekstrahovana pomoću etil-acetata (50 mL × 4). Kombinovana organska faza je isprana slanim rastvorom (30 mL × 2), osušena bezvodnim natrijum-sulfatom, profiltrirana i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen polupripremnom reverzno-faznom HPLC hromatografijom (uslovi sa mravljom kiselinom; kolona: Phenomenex Synergi Max-RP 250*50 mm*10 um;mobilna faza: [voda (0,225% FA)-ACN]; B%: 45% ACN – 75% ACN, 29 min) i dobijen je benzil-3-(terc-butilsulfinilamino)-3-[4-(4-metiltiazol-5-il)fenil]azetidin-1-karboksilat (2,3 g, 4,76 mmol, 48% prinos) kao žuti čvrsti proizvod.
Korak 4
Rastvor benzil-3-(terc-butilsulfinilamino)-3-[4-(4-metiltiazol-5-il)fenil]azetidin-1-karboksilata (3,4 g, 7,03 mmol, 1 ekv) i hlorovodonične kiseline/metanola (4 M, 30 mL, 17,07 ekv) u dihlormetanu (5 mL) mešan je na 25 °C tokom 2 sata. Jedinjenje benzil-3-amino-3-[4-(4-metiltiazol-5-il)fenil]azetidin-1-karboksilat-hidrohlorid (3 g, sirov) dobijeno je kao beli čvrsti proizvod.
Korak 5
U smešu benzil-3-amino-3-[4-(4-metiltiazol-5-il)fenil]azetidin-1-karboksilathidrohlorida (3 g, 7,21 mmol, 1 ekv), O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijum-heksafluorofosfata (4,11 g, 10,82 mmol, 1,5 ekv) i (2S,4R)-1-tercbutiloksi-karbonil-4-hidroksi-pirolidin-2-karboksilne kiseline (1,67 g, 7,21 mmol, 1 ekv) u N,N-dimetilformamidu (40 mL) dodat je trietilamin (2,19 g, 21,64 mmol, 3,0 mL, 3 ekv) u jednom dodatku na 15 °C pod azotom. Smeša je mešana na 15 °C tokom 1 h. Smeša je sipana u ledenu vodu (m/m = 1/1, 100 mL) i mešana 5 minuta. Vodena faza je ekstrahovana pomoću etil-acetata (60 mL × 3). Kombinovani organski sloj je ispran slanim rastvorom (30 mL × 2), osušen preko bezvodnog natrijum-sulfata, profiltriran i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću semi-pripremne reverzno-fazne HPLC (kolona: Phenomenex Synergi Max-RP 250 × 80 mm, 10 µm; mobilna faza: [voda (0,225% FA) - ACN]; B%: 30% - 60%, 30 min). Jedinjenje terc-butil-(2S,4R)-2-[[1-benziloksikarbonil-3-[4-(4-metiltiazol-5-il)fenil]azetidin-3-il]karbamoil]-4-hidroksi-pirolidin-1-karboksilat (3,32 g, 5,60 mmol, 77% prinos) dobijeno je kao beli čvrsti proizvod.
Korak 6
U smešu terc-butil-(2S,4R)-2-[[1-benziloksikarbonil-3-[4-(4-metiltiazol-5-il)fenil]azetidin-3-il]karbamoil]-4-hidroksi-pirolidin-1-karboksilata (1,1 g, 1,86 mmol, 1 ekv) i trietilamina (666 mg, 6,59 mmol, 0,9 mL, 3,55 ekv) u dihlormetanu (100 mL) dodat je paladijum(II)-hlorid (329,10 mg, 1,86 mmol, 1 ekv) u jednom dodatku na 0 °C pod azotom. Zatim je dodat trietilsilan (2,81 g, 24,13 mmol, 3,8 mL, 13 ekv), i smeša je mešana na 20°C tokom 2 sata. Reakciji je zatim dodat trifluorsirćetni acid (4,23 g, 37,14 mmol, 2,75 mL, 20,01 ekv), i smeša je mešana dodatnih 1 sat na 20 °C. Smeša je filtrirana i zatim koncentrovana pod smanjenim pritiskom na 40 °C. Ostatak je prečišćen polu-preparativnom reverzno-faznom HPLC hromatografijom (uslovi sa mravljom kiselinom; kolona: Kromasil 250 × 50 mm, 10 µm: mobilna faza: [voda (0,225% FA) - ACN]; B%: 26ACN% - 56ACN%, 28 minuta). Dobijen je terc-butil-(2S,4R)-4-hidroksi-2-[[3-[4-(4-metiltiazol-5-il)fenil]azetidin-3-il]karbamoil]pirolidin-1-karboksilat (336 mg, 0,73 mmol, 39% prinos) kao beli čvrsti proizvod.
Korak 7
Smeša terc-butil-(2S,4R)-4-hidroksi-2-[[3-[4-(4-metiltiazol-5-il)fenil]azetidin-3-il]karbamoil]pirolidin-1-karboksilata (390 mg, 0,85 mmol, 1 ekv) i formaldehida (138 mg, 1,70 mmol, 0,1 mL, 37% čistoće, 2 ekv) u dihlormetanu (15 mL) mešana je na 20 °C tokom 30 minuta. Zatim su dodati sirćetna kiselina (51 mg, 0,85 mmol, 1 ekv) i natrijumtriacetoksiborohidrid (901 mg, 4,25 mmol, 5 ekv), i smeša je mešana na 20 °C tokom 5 sati. Smeša je koncentrovana pod smanjenim pritiskom na 40°C. Ostatak je prečišćen polupreparativnom reverzno-faznom HPLC hromatografijom (uslovi sa mravljom kiselinom; kolona: Phenomenex Synergi C18150*25*10 um; mobilna faza: [voda (0,225% FA) - ACN]; B%: 0% - 30%, 10 min). Dobijen je terc-butil-(2S,4R)-4-hidroksi-2-[[1-metil-3-[4-(4-metiltiazol-5-il)fenil]azetidin-3-il]karbamoil]pirolidin-1-karboksilat (300 mg, 0,63 mmol, 74% prinos) kao žuta uljana supstanca.
terc-butil-(2S,4R)-4-hidroksi-2-[[1-metil-3-[4-(4-metiltiazol-5-il)fenil]azetidin-3-il]karbamoil]pirolidin-1-karboksilat je konvertovan u krajnje jedinjenje korišćenjem procedura analognim onima koje su opisane za prethodne primere.
Primerno jedinjenje 228 je pripremljeno korišćenjem analognih procedura.
Primerna sinteza primernih jedinjenja 233 i 234
Pripremljeno prema šemi ispod korišćenjem procedura analognih onima opisanim za primerna jedinjenja 76 i 70.
Primerna sinteza primerenog jedinjenja 127
U smešu terc-butil-(2S,4R)-4-hidroksi-2-[[3-[4-(4-metiltiazol-5-il)fenil]azetidin-3-il]karbamoil]pirolidin-1-karboksilata (300 mg, 0,65 mmol, 1 ekv) i trietilamina (198 mg, 1,96 mmol, 3 ekv) u dihlormetanu (60 mL) dodat je anhidrid sirćetne kiseline (100,18 mg, 0,98 mmol, 91,9 μL, 1,5 ekv) u jednom dodatku na 25 °C pod azotom. Smeša je mešana na 25 °C tokom 16 h. Smeša je koncentrovana pod smanjenim pritiskom na 45 °C. Ostatak je prečišćen polu-preparativnom reverzno-faznom HPLC hromatografijom (bazni uslovi, kolona: Waters Xbridge 150*25 5 um; mobilna faza: [voda (0,05% amonijum-hidroksid v/v) - ACN]; B%: 10% - 40%, 10 min). Dobijen je sirovi proizvod terc-butil-(2S,4R)-2-[[1-acetil-3-[4-(4-metiltiazol-5-il)fenil]azetidin-3-il]karbamoil]-4-hidroksi-pirolidin-1-karboksilat (232 mg, 0,46 mmol, 71% prinos) kao žuto ulje.
terc-butil-(2S,4R)-2-[[1-acetil-3-[4-(4-metiltiazol-5-il)fenil]azetidin-3-il]karbamoil]-4-hidroksi-pirolidin-1-karboksilat je konvertovan u krajnji proizvod korišćenjem procedura opisanih u prethodnim primerima.
Primerno jedinjenje 235 je pripremljeno korišćenjem analognih procedura.
Primerna sinteza primerenog jedinjenja 240
terc-butil-(S)-(1-(2-fluoro-4-(4-metiltiazol-5-il)fenil)etil)karbamat je pripremljen prema šemi ispod korišćenjem procedura analognih onima opisanim za primerno jedinjenje 202.
Terc-butil-(S)-(1-(2-fluoro-4-(4-metiltiazol-5-il)fenil)etil)karbamat je konvertovan u krajnje jedinjenje korišćenjem procedura analognih onima opisanim za ostale primere.
Primerno jedinjenje 239 je pripremljeno korišćenjem analognih procedura.
Primerna sinteza primernih jedinjenja 243 i 244
U rastvor etil-trifluoroacetata (21,31 g, 150 mmol, 20,7 mL, 1,5 ekv) u tetrahidrofuranu (300 mL) dodat je bis(trimetilsilil)amid litijuma (1 M, 120 mL, 1,2 ekv) na -78°C. Smeša je mešana na -78°C tokom 1 sata. Zatim je rastvor 1-(6-bromo-3-piridil)etanona (20 g, 100 mmol, 1 ekv) u tetrahidrofuranu (20 mL) dodat kap po kap u smešu na -78 °C. Reakciona smeša je potom mešana na 20 °C tokom 2 sata. Zasićeni rastvor amonijum-hlorida (200 mL) je dodat kako bi se reakcija zaustavila, zatim je dodata voda (500 mL). Smeša je ekstrahovana sa etil-acetatom (3 × 300 mL). Kombinovani organski sloj je ispran slanim rastvorom (500 mL), osušen preko natrijum-sulfata, profiltriran i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je triturisan sa petrolej etrom i etil-acetatom (255 mL, petrolej etar:etil-acetat = 50:1) i filtriran kako bi se dobio svetložuti čvrsti materijal. Filtrat je zatim koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (petrolejski etar: etil-acetat = 10:1 do 0:1). 1-(6-Bromo-3-piridil)-4,4,4-trifluoro-butan-1,3-dion (28 g, 94,6 mmol, 94% prinos) je dobijen kao žuti čvrsti proizvod.
Korak 2
U rastvor 1-(6-bromo-3-piridil)-4,4,4-trifluoro-butan-1,3-diona (15 g, 50,67 mmol, 1 ekv) u acetonitrilu (150 mL) dodat je 1-(hlorometil)-4-fluoro-1,4-diazoniabiciklo[2.2.2]oktan; ditetrafluoroborat (44,87 g, 126,7 mmol, 2,5 ekv). Reakciona smeša je mešana na 90 °C tokom 3 h. Zatim je u smešu dodata voda (1,83 g, 101,3 mmol, 1,8 mL, 2 ekv), a reakciona smeša je mešana na 90°C tokom 15 minuta. Zatim je dodat trietilamin (25,64 g, 253,3 mmol, 35,2 mL, 5 ekv) na 20°C, i smeša je mešana na 20°C tokom 16 sati. Zatim je dodata voda (300 mL). Smeša je ekstrahovana sa etil-acetatom (3 × 300 mL). Kombinovani organski sloj je ispran slanim rastvorom (500 mL), osušen preko natrijum-sulfata, profiltriran i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum-gelu (dihlorometan : metanol = 1:0 do 10:1). 1-(6-Bromo-3-piridil)-2,2-difluoro-etanon (7,9 g, sirov) je dobijen kao braon ulje.
Korak 3
U rastvor jedinjenja 1-(6-bromo-3-piridil)-2,2-difluoro-etanona (7,9 g, 33,47 mmol, 1 ekv) u etanolu (80 mL) dodat je natrijum-borohidrid (1,27 g, 33,47 mmol, 1 ekv) u tri porcije na 0°C. Reakciona smeša je mešana na 0°C tokom 1 sata. Smeši je dodata voda (200 mL), a dobijena smeša je ekstrahovana pomoću etil-acetata (100 mL × 3). Kombinovani organski sloj je ispran slanim rastvorom (150 mL), osušen preko natrijum-sulfata, profiltriran i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (petrolejski etar: etil-acetat = 100:1 do 1:1). 1-(6-Bromo-3-piridil)-2,2-difluoro-etanol (5,3 g, 21,20 mmol, 63% prinos) je dobijen kao svetložuto ulje.
Korak 4
U rastvor jedinjenja 1-(6-bromo-3-piridil)-2,2-difluoro-etanola (3,3 g, 13,86 mmol, 1 ekv) i izoindolin-1,3-diona (2,45 g, 16,64 mmol, 1,2 ekv) u tetrahidrofuranu (30 mL) dodat je trifenilfosfin (4,36 g, 16,64 mmol, 1,2 ekv), a zatim kap po kap dietil-azodikarbonat izopropila (3,36 g, 16,64 mmol, 3,2 mL, 1,2 ekv) u tetrahidrofuranu (5 mL) pod azotom na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na 20 °C tokom 12 sati. Smeša je koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum-gelu (petrolej-etar: etil-acetat = 1:0 do 5:1). 2-[1-(6-bromo-3-piridil)-2,2-difluoro-etil]izoindolin-1,3-dion (2,8 g, 6,89 mmol, 49% prinos) je dobijeno kao svetložuti čvrsti proizvod.
Korak 5
U rastvor jedinjenja 2-[1-(6-bromo-3-piridil)-2,2-difluoro-etil]izoindolin-1,3-diona (2 g, 5,45 mmol, 1 ekv) u etanolu (20 mL) dodat je hidrazin-hidrat (1,36 g, 27,24 mmol, 1,3 mL, 5 ekv). Reakciona smeša je mešana na 80 °C tokom 2 h. Etanol (30 mL) je dodat smeši, smeša je filtrirana, a filtrat je koncentrovan u vakuumu. Ostatak je upotrebljen direktno u sledećem koraku. Jedinjenje 1-(6-bromo-3-piridil)-2,2-difluoro-etanamin (1,2 g, sirov) je dobijeno kao svetložuti čvrsti proizvod.
Korak 6
U rastvor jedinjenja 1-(6-bromo-3-piridil)-2,2-difluoro-etanamina (1,2 g, 5,06 mmol, 1 ekv) i natrijum-bikarbonata (850 mg, 10,12 mmol, 2 ekv) u tetrahidrofuranu (5 mL) i vodi (5 mL) dodat je di-terc-butil-di-karbonat (2,21 g, 10,12 mmol, 2,3 mL, 2 ekv). Reakciona smeša je mešana na 20 °C tokom 2 h. Smeši je dodata voda (100 mL), a dobijena smeša je ekstrahovana pomoću etil-acetata (50 mL × 3). Kombinovani organski sloj je ispran slanim rastvorom (60 mL), osušen preko natrijum-sulfata, profiltriran i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silicijum-gelu (petrolejski etar: etil-acetat = 3:1). Sirovi proizvod je dodatno prečišćen preparativnom tečnom hromatografijom visoke efikasnosti (kolona: Phenomenex Gemini C18 250*50mm*10 um;mobilna faza: [voda (0,05% amonijum-hidroksid v/v)-ACN];B%: 40%-65%, 22 min). terc-butil N-[1-(6-bromo-3-piridil)-2,2-difluoro-etil]karbamat (1,4 g, 4,15 mmol, 82% prinos) je dobijeno kao svetložuti čvrsti proizvod.
Korak 7
U rastvor jedinjenja terc-butil N-[1-(6-bromo-3-piridil)-2,2-difluoro-etil]karbamata (2 g, 5,93 mmol, 1 ekv) i 4-metil-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)tiazola (3,34 g, 14,83 mmol, 2,5 ekv) u dioksanu (50 mL) i vodi (10 mL) dodati su kalijum-karbonat (2,05 g, 14,83 mmol, 2,5 ekv) i (1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen)paladijum(II) hlorid (434 mg, 0,59 mmol, 0,1 ekv) pod azotom. Reakciona smeša je mešana na 100 °C tokom 12 h. Smeši je dodata voda (150 mL), a dobijena smeša je ekstrahovana pomoću etil-acetata (50 mL × 3). Kombinovani organski sloj je ispran slanim rastvorom (80 mL), osušen preko natrijumsulfata, profiltriran i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika-gelu (petrolejski etar: etil-acetat = 100:1 do 1:1). Ostatak je zatim dodatno prečišćen preparativnom HPLC analizom (kolona: Phenomenex Synergi C18 150*30mm*4um;mobilna faza: [voda(0,225%FA)-ACN];B%: 35%-65%,10 minuta). tercbutil N-[2,2-difluoro-1-[6-(4-metiltiazol-5-il)-3-piridil]etil]karbamat (480 mg, 1,33 mmol, 22% prinos) je dobijeno kao svetložuti čvrsti proizvod.
Korak 8
terc-butil N-[2,2-difluoro-1-[6-(4-metiltiazol-5-il)-3-piridil]etil]karbamat (480 mg, 1,35 mmol, 1 ekv) prečišćeno je prep-SFC (SFC kolona: DAICEL CHIRALPAK AY 250×50mm, I.D., 10um; Mobilna faza: etil alkohol u CO2od 30% do 30%; Protok: 60 g/min; talasna dužina: 220nm). Izomer 1 (privremeno označen kao terc-butil N-[(1S)-2,2-difluoro-1-[6-(4-metiltiazol-5-il)-3-piridil]etil]karbamat; 200 mg, 0,56 mmol, 82% prinos) dobijen je kao svetložuti čvrsti proizvod. Izomer 2 (privremeno označen kao terc-butil N-[(1R)-2,2-difluoro-1-[6-(4-metiltiazol-5-il)-3-piridil]etil]karbamat; 210 mg, 0,59 mmol, 87% prinos) dobijen je kao svetložuti čvrsti proizvod.
Korak 9
U rastvor 2-[3-(2,2-diethoksiethoksi)izoksazol-5-il]-3-metil-butanoične kiseline (400 mg, 1,33 mmol, 1 ekv) i metil (2S,4R)-4-hidroksiprolin-2-karboksilata (241 mg, 1,33 mmol, 1 ekv, hlorid) u N,N-dimetilformamidu (5 mL) dodati su N,N-dizopropiletilamin (686 mg, 5,31 mmol, 0,9 mL, 4 ekv) i O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijum heksafluorofosfat (605 mg, 1,59 mmol, 1,2 ekv) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na 20 °C tokom 1 sata. Smeši je dodata voda (50 mL), a dobijena smeša je ekstrahovana pomoću etil-acetata (20 mL × 3). Kombinovani organski sloj je ispran slanim rastvorom (30 mL × 2), sušen preko natrijum-sulfata, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC (kolona: Phenomenex Synergi C18 150*25*10um; mobilna faza:
[voda(0,225%FA)-ACN]; B%: 36%-66%, 10 min). Metil (2S,4R)-1-[2-[3-(2,2-diethoksiethoksi)izoksazol-5-il]-3-metil-butanoil]-4-hidroksi-pirolidin-2-karboksilat (450 mg, 1,05 mmol, 78% prinos) dobijeno je kao bezbojno ulje.
Korak 10
Smeša je prečišćena prep-SFC (kolona: DAICEL CHIRALPAK IC 250×30mm, I.D., 10um; Mobilna faza: metanol (0,1% NH4OH) u CO2od 30% do 30%; Protok: 50 g/min; talasna dužina: 220nm). Metil (2S,4R)-1-[(2S)-2-[3-(2,2-diethoksiethoksi)izoksazol-5-il]-3-metil-butanoil]-4-hidroksi-pirolidin-2-karboksilat (180 mg, 0,36 mmol, 69% prinos) dobijen je kao bezbojno ulje. Metil (2S,4R)-1-[(2R)-2-[3-(2,2-diethoksiethoksi)izoksazol-5-il]-3-metil-butanoil]-4-hidroksi-pirolidin-2-karboksilat (220 mg, 0,51 mmol, 96% prinos) dobijen je kao bezbojno ulje.
Metil (2S,4R)-1-[(2R)-2-[3-(2,2-diethoksiethoksi)izoksazol-5-il]-3-metil-butanoil]-4-hidroksi-pirolidin-2-karboksilat konvertovano je u krajnje jedinjenje prema šemi ispod koristeći postupke analogne gore opisanim za druge primere.
Primerno jedinjenje 243 je pripremljeno korišćenjem analognih procedura.
Primerna sinteza primerenog jedinjenja 246
U okruglu bočicu zapremine 50 mL dodato je jedinjenje (2R)-2-(4-bromofenil)-2-[[(terc-butoksi)karbonil]amino]sirćetna kiselina (1 g, 3,029 mmol, 1 ekv) u DMF (15 mL), nakon čega su redom dodati dizopropiletilamin (1,57 g, 12,115 mmol, 4 ekv), N-metilciklobutamin-hidrohlorid (368 mg, 3,03 mmol, 1 ekv) i BOP (1,61 g, 3,63 mmol, 1,2 ekv). Dobijeni rastvor je mešan 2 sati na sobnoj temperaturi. Reakcija je prekinuta dodatkom vode (10 mL). Dobijena smeša je ekstrahovana etil-acetatom (4 × 30 mL), a kombinovani organski sloj je ispiran slanim rastvorom (2 × 10 mL), osušen preko bezvodnog natrijumsulfata i koncentrovan. Ostatak je nanet na kolonu silika gela pomoću elucije etil acetatom/petrol etrom (1/1). Time je dobijeno 1,1 g (91%) jedinjenja terc-butil N-[(R)-(4-bromofenil)[ciklobutil(metil)karbamoil]metil]karbamat kao žuti čvrsti proizvod.
Korak 2
U okruglu bočicu zapremine 100 mL dodato je jedinjenje terc-butil N-[(R)-(4-bromofenil)[ciklobutil(metil)karbamoil]metil]karbamat (1 g, 2,52 mmol, 1 ekv), K₂CO₃ (1,04 g, 7,55 mmol, 3 ekv), 4-metil-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,3-tiazol (850 mg, 3,78 mmol, 1,5 ekv) i Pd(dppf)Cl₂ (184 mg, 0,25 mmol, 0,1 ekv) u dioksanu (10 mL) i vodi (2 mL), pod azotnom atmosferom. Dobijena smeša je mešana 3 sati na 90 °C u uljanoj kupki pod atmosferom azota. Smeša je koncentrovana, a ostatak nanesen na kolonu sa silikagelom i eluirao se etil-acetatom/petrolejskim etrom (1:1). Time je dobijeno 480 mg (46%) jedinjenja terc-butil N-[(R)-[ciklobutil(metil)karbamoil][4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]metil]karbamat kao žuti čvrsti proizvod.
terc-butil N-[(R)-[ciklobutil(metil)karbamoil][4-(4-metil-1,3-tiazol-5-il)fenil]metil]karbamat konvertovano je u krajnje jedinjenje korišćenjem postupaka analognim prethodno opisanim za druge primere.
Primerno jedinjenje 245 je pripremljeno korišćenjem analognih procedura.
Primerna sinteza primerenog jedinjenja 248
U okruglu bočicu zapremine 250 mL dodata je rastvor jedinjenja 4-(trifluormetil)benzaldehid (3,0 g, 17,2 mmol, 1,0 ekv), (S)-2-metilpropan-2-sulfinamida (4,2 g, 0,035 mmol, 2,0 ekv) i titan-izopropoksida (14,9 g, 0,052 mmol, 3,0 ekv) u THF (50 mL). Dobijeni rastvor je mešan 16 sati na 80 °C u uljanoj kupki. Reakcija je zatim zaustavljena dodatkom 200 mL vode, a smeša je ekstrahovana etil-acetatom (100 mL × 3). Kombinovani organski sloj je ispiran slanim rastvorom, osušen preko natrijum-sulfata i koncentrovan pod smanjenim pritiskom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela pomoću elucije etil acetatom/petrol etrom (1:1). Time je dobijeno 3,1 g (65%) jedinjenja (S)-2-metil-N-[[4-(trifluormetil)fenil]metiliden]propan-2-sulfinamid kao žuto ulje.
Korak 2
U rastvor (S)-2-metil-N-[[4-(trifluormetil)fenil]metiliden]propan-2-sulfinamida (3,1 g, 11,2 mmol, 1,0 ekv) u DCM-u (20 mL) dodat je metilmagnezijum-hlorid u rastvoru (3,0 M u etru, 5 mL) kap po kap tokom 20 minuta na -48 °C pod azotnom atmosferom. Dobijena smeša je zatim mešana 2 sata na sobnoj temperaturi. Reakcija je zaustavljena dodatkom 50 mL zasićenog rastvora amonijum-hlorida, a zatim je ekstrahovana hlorometanom (3 × 50 mL). Kombinovani organski sloj je ispiran slanim rastvorom, osušen preko natrijum-sulfata i koncentrovan pod smanjenim pritiskom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela pomoću elucije etil acetatom/petrol etrom (1:1). Time je dobijeno 1,83 g (56%) jedinjenja (S)-2-metil-N-[(1S)-1-[4-(trifluormetil)fenil]etil]propan-2-sulfinamid kao beli čvrsti proizvod.
Korak 3
U bočicu zapremine 100 mL dodato je jedinjenje (S)-2-metil-N-[(1S)-1-[4-(trifluormetil)fenil]etil]propan-2-sulfinamid (1,8 g, 6,2 mmol, 1,0 ekv) u metanol (10 mL). Zatim je dodat vodeni rastvor hlorovodonične kiseline (37%, 5 mL). Dobijeni rastvor je mešan 2 sata na sobnoj temperaturi, a zatim koncentrovan pod smanjenim pritiskom. Time je dobijeno 970 mg (82%) jedinjenja (1S)-1-[4-(trifluormetil)fenil]etan-1-amin kao beli čvrsti proizvod.
Jedinjenje (1S)-1-[4-(trifluormetil)fenil]etan-1-amin konvertovano je u krajnje jedinjenje korišćenjem postupaka analognim prethodno opisanim za druge primere.
Primer jedinjenja 247 pripremljen je korišćenjem analognih postupaka.
Primerna sinteza primernog jedinjenja 404
Kako je prikazano na šemi iznad, terc-butil 4-((1R,3R)-3-((4-bromopiridin-2-il)oksi)ciklobutoksi)piperidin-1-karbamat je dezaštićen pod kiselim uslovima, a dobijeni slobodni ciklični amin je reagovao sa aktiviranim izoksazolnim derivatom da bi se formirao metil 3-metil-2-(3-(((perfluorobutil)sulfonil)oksi)izoksazol-5-il)butanoat kao produkt spajanja. Palladijum-katalizovana reakcija bromidnog fragmenta piridina u proizvodu sa tercbutil 3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktano-3-karbamatom, praćena uklanjanjem Boc (tercbutilokarbamil) zaštitne grupe, dala je slobodni amin, koji je podvrgnut nukleofilnoj reakciji spajanja sa 4-bromo-6-hloropiridazin-3-aminom pri povišenoj temperaturi u DMSO u prisustvu amina. Suzuki spajanje bromida piridazina sa (2-hidroksifenil)boronskom kiselinom završilo je sklapanje PTM vezujuće grupe. Hidroliza estera, praćena kondenzacijom sa (2S,4R)-4-hidroksi-N-((S)-1-(4-(4-metiltiazol-5-il)fenil)etil)pyrrolidin-2-karboksamidom, dovela je do željenog krajnjeg proizvoda kao smeše dijastereoizomera, koji su razdvojeni superkritičnom fluidnom hromatografijom (SFC).
Primerna sinteza primernog jedinjenja 411
Kao što je prikazano na šemi iznad, Micunobu reakcija između metil 2-(3-hidroksiizoksazol-5-il)-3-metilbutanoata i (1R,3R)-3-(benziloksi)ciklobutanola, praćena uklanjanjem benziloksi grupe, dovela je do dobijanja metil 2-(3-((1S,3S)-3-hidroksiciklobutoksi)izoksazol-5-il)-3-metilbutanoata. Aktivacija hidroksilne grupe trifličnom anhidridom, a zatim zamena triflatne grupe cikličnim aminom koji uključuje WPTM5-WPTM3-WPTM2-WPTM1fragment, dala je spojeni produkt koji sadrži vezujuću grupu L. Hidroliza estera, praćena kondenzacijom sa (2S,4R)-4-hidroksi-N-((S)-1-(4-(4-metiltiazol-5-il)fenil)etil)pirrolidin-2-karboksamidom, dovela je do željenog krajnjeg proizvoda.
Primerna sinteza primernog jedinjenja 428
Kao što je prikazano na šemi iznad, 4-bromo-6-hloropiridazin-3-amin je konvertovan u 4-vinil derivat, koji je zatim podvrgnut Heck reakciji spajanja sa terc-butil 4-((1R,3R)-3-((4-bromopiridin-2-il)oksi)ciklobutoksi)piperidin-1-karbamatom, čime je dobijen spojeni produkt. Motiv 6-hloropiridazina u tom produktu potom je reagovao sa (2-hidroksifenil)boronskom kiselinom u Suzuki uslovima kako bi se formirao WPTM5-WPTM3fragment. Nakon toga je usledila Boc-dezaštita, a zatim reduktivna aminacija sa (2S,4R)-4-hidroksi-1-((R)-3-metil-2-(3-(2-oksoetoksi)izoksazol-5-il)butanoil)-N-((S)-1-(4-(4-metiltiazol-5-il)fenil)etil)pirrolidin-2-karboksamidom, čime je dobijen željeni krajnji proizvod.
Primerna sinteza primernog jedinjenja 445
Kao što je prikazano na šemi iznad, hidroksilna grupa u terc-butil 4-(2-hidroksietil)piperidin-1-karbamatu je aktivirana pomoću tozil-hlorida, a dobijeni tozilat je podvrgnut nukleofilnoj supstituciji sa metil 2-(3-hidroksiizoksazol-5-il)-3-metilbutanoatom. Boc-grupa u dobijenom produktu je uklonjena, a oslobođeni ciklični amin je reagovao sa 3-(hidroksimetil)ciklobutanonom i natrijum-triacetoksiborohidridom čime je dobijen metil 2-(3-(2-(1-(3-(hidroksimetil)ciklobutil)piperidin-4-il)etoksi)izoksazol-5-il)-3-metilbutanoat.
Oksidacija hidroksilne grupe pomoću Dess-Martin periodinana, zatim reduktivna aminacija nastalog aldehida sa spiro-aminom dala je spojeni produkt koji kombinuje PTM vezujući motiv i vezujuću grupu L. Hidroliza estera, nakon čega je usledila kondenzacija sa (2S,4R)-4-hidroksi-N-((S)-1-(4-(4-metiltiazol-5-il)fenil)etil)pirrolidin-2-karboksamidom, dovela je do željenog krajnjeg jedinjenja.
Primerna sinteza primernog jedinjenja 449-456
Kao što je prikazano na šemi iznad, sklapanje prve jedinice za spajanje počelo je od terc-butil 4-acetilpiperidin-1-karbamata, koji je redukovan do alkohola i zatim konvertovan u tozilat. Tozilna grupa je zamenjena sa 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazolom, a dobijeni proizvod je spojen sa 4-bromo-6-hloropiridazin-3-aminom u Suzuki reakciji, čime je dobijena racemična smeša terc-butil 4-(1-(4-(3-amino-6-(2-(metoksimetoksi)fenil)piridazin-4-il)-1H-pirazol-1-il)etil)piperidin-1-karbamata, koja je razdvojena pomoću hiralne superkritične fluidne hromatografije (SFC). Nakon toga, uklanjanje Boc-zaštitne grupe dovelo je do željenih prvih jedinjenja za spajanje u enantiomerno čistom stanju.
Formiranje druge jedinice za spajanje počelo je od 3-metilenciklobutankarbonitrila, koji je hidrolizovan do karboksilne kiseline i zatim zaštićen kao benzilni estar. Hidroboracija endo-dvostruke veze, praćena oksidacijom, dala je dijastereomernu smešu alkohola, koja je razdvojena pomoću superkritične fluidne hromatografije (SFC). Pojedinačni alkoholi su oksidovani Dess-Martin periodinanom da bi se dobili željeni izomerni aldehidi.
Reduktivna aminacija prve i druge jedinice za spajanje pomoću natrijumborohidrida, praćena baznom hidrolizom, dovela je do (1R,3S)-3-((4-((S)-1-(4-(3-amino-6-(2-hidroksifenil)piridazin-4-il)-1H-pirazol-1-il)etil)piperidin-1-il)metil)ciklobutankarbonatne kiseline, koja je podvrgnuta kondenzaciji sa (2S,4R)-4-hidroksi-1-((S)-3-metil-2-(3-(2-(piperidin-4-il)etoksi)izoksazol-5-il)butanoil)-N-((S)-1-(4-(4-metiltiazol-5-il)fenil)etil)pirrolidin-2-karboksamidom da bi se dobilo željeno krajnje jedinjenje. Ova metoda se može praktično koristiti za sintezu svih enantiomerno čistih izomera željenog jedinjenja korišćenjem reagenasa i međuproizvoda sa odgovarajućom stereohemijom.
Primerna sinteza primernog jedinjenja 458
Kao što je prikazano na šemi iznad, terc-butil 4-formilpiperidin-1-karbamat je podvrgnut reduktivnoj aminaciji sa (2S,4R)-4-hidroksi-1-((S)-3-metil-2-(3-(piperazin-1-il)izoksazol-5-il)butanoil)-N-((S)-1-(4-(4-metiltiazol-5-il)fenil)etil)pirrolidin-2-karboksamidom i natrijumcijanoborohidridom, čime je, nakon uklanjanja Boc-zaštitne grupe, dobijeno jedinjenje (2S,4R)-4-hidroksi-1-((S)-3-metil-2-(3-(4-(piperidin-4-ilmetil)piperazin-1-il)izoksazol-5-il)butanoil)-N-((S)-1-(4-(4-metiltiazol-5-il)fenil)etil)pirrolidin-2karboksamid. Nakon toga, reduktivna aminacija dobijenog jedinjenja sa (1R,3R)-3-((4-(3-(3-amino-6-(2-hidroksifenil)piridazin-4-il)-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il)piridin-2-il)oksi)ciklobutan-karbaldehidom u sličnim uslovima dovela je do željenog krajnjeg proizvoda.
Primerna sinteza primernog jedinjenja 474
Kao što je prikazano na šemi iznad, Mitsunobu reakcijom između 4-hidroksipiridina i terc-butil 4-hidroksipiperidin-1-karbamata dobijen je terc-butil 4-(piridin-4-iloksi)piperidin-1-karbamat, koji je pretvoren u so alkilacijom azota piridinskog prstena benzil-bromidom. Piridinski prsten je zatim redukovan dvofaznim postupkom da bi se formirao derivat sa dvostrukim piperidinskim jedinicama, koji je reagovao sa metil 3-metil-2-(3-(((perfluorobutil)sulfonil)oksi)izoksazol-5-il)butanoatom u uslovima nukleofilne supstitucije na heteroaromatskom prstenu, čime je dobijen spoj za spajanje. Hidrolizom estara, a zatim kondenzacijom dobijene kiseline sa (2S,4R)-4-hidroksi-N-((S)-1-(4-(4-metiltiazol-5-il)fenil)etil)pirrolidin-2-karboksamidom dobijeni su dijastereoizomerni krajnji proizvodi, koji su razdvojeni pomoću superkritične fluidne hromatografije (SFC).
Primerna sinteza primernog jedinjenja 494, 495
Kao što je prikazano na šemi iznad, sinteza vezujućeg segmenta za PTM započeta je od 3-((4-metoksibenzil)oksi)propan-1-ola, koji je tretiran natrijum-hidridom radi otvaranja (S)-2-metiloksirana. Bromisanjem dobijenog alkohola, a zatim zamenom bromida enolatom izvedenim iz metil 2-(3-metilizoksazol-5-il)acetata, dobijen je (3R)-metil 4-(3-hidroksipropoksi)-3-metil-2-(3-metilizoksazol-5-il)butanoat. Mitsunobu reakcija ovog produkta sa 4-bromopiridin-2-olom, praćena paladijum-katalizovanom reakcijom spajanja bromida piridinskog prstena sa mono-Boc-zaštićenim 3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktanom, dala je terc-butil 8-(2-(3-((2R)-4-metoksi-2-metil-3-(3-metilizoksazol-5-il)-4-oksobutoksi)propoksi)piridin-4-il)-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-karboksilat. Nakon toga, uklanjanjem Boc-zaštitne grupe dobijen je slobodni amin koji je podvrgnut nukleofilnoj reakciji spajanja sa 4-bromo-6-hloropiridazin-3-aminom grejanjem u aprotičnom bipolarno rastvaraču (DMSO) u prisustvu amina (DIEA). Suzuki spajanje bromida piridazina sa (2-hidroksifenil)boronskom kiselinom završilo je sklapanje PTM vezujuće grupe. Hidroliza estera, praćena kondenzacijom sa (2S,4R)-4-hidroksi-N-((S)-1-(4-(4-metiltiazol-5il)fenil)etil)pyrrolidin-2-karboksamidom, dovela je do željenog krajnjeg proizvoda kao smeše dijastereoizomera, koji su razdvojeni superkritičnom fluidnom hromatografijom (SFC).
Primerna sinteza primernog jedinjenja 496, 497
Kao što je prikazano na šemi iznad, željeni proizvod je dobijen reduktivnom aminacijom jedinjenja (2S,4R)-1-((R)-2-(3-(4-formilpiperidin-1-il)izoksazol-5-il)-3-metilbutanoil)-4-hidroksi-N-((S)-1-(4-(4-metiltiazol-5-il)fenil)etil)pirrolidin-2-karboksamida sa 2-(6-amino-5-(1-((R)-4-((1r,3R)-3-(piperidin-4-iloksi)ciklobutil)but-3-in-2-il)-1H-pirazol-4-il)piridazin-3-il)fenolom u prisustvu natrijum-cijanoborohidrida. Ova metoda se može praktično koristiti za sintezu svih enantiomerno čistih izomera željenog proizvoda primenom odgovarajućih stereohemijskih oblika reaktanata za spajanje.
Primerna sinteza primernog jedinjenja 499
Kao što je prikazano na šemi iznad, terc-butil 4-(5-(1-((2S,4R)-4-hidroksi-2-(((S)-1-(4-(4-metiltiazol-5-il)fenil)etil)karbamoil)pirrolidin-1-il)-3-metil-1-oksobutan-2-il)izoksazol-3-il)piperazin-1-karbamat kao dijastereomerska smeša je razdvojen na pojedinačne izomere. Svaki od ovih izomera je zatim reagovao sa (1R,3R)-3-((4-(3-(3-amino-6-(2-hidroksifenil)piridazin-4-il)-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-il)piridin-2-il)oksi)ciklobutankarbaldehidom, naznačeno time što je dobijen željeni krajnji proizvod u enantiomerno čistom obliku. Ova metoda se može praktično koristiti za sintezu svih enantiomerno čistih izomera željenog proizvoda primenom odgovarajućih stereohemijskih oblika reaktanata za spajanje.
Kontrola nivoa proteina
Ovaj opis takođe pruža metode za kontrolu nivoa proteina u ćeliji. To se zasniva na upotrebi jedinjenja opisanih u ovom tekstu, za koja je poznato da interaguju sa specifičnim ciljnim proteinom, tako da degradacija ciljnog proteina in vivo rezultira kontrolom količine proteina u biološkom sistemu, po mogućstvu radi postizanja određenog terapijskog efekta.
Sledeći primeri se koriste za dodatno objašnjenje ovog otkrića,
Specifične reprezentativne opcije Ovde su opisani sledeći primerni SMARCA2 (tj. BRAHMA ili BRM) PROTAC molekuli (jedinjenja 1–535 iz Tabele 1A, Tabele 1B, Tabele 1C, Tabele 2A, Tabele 2B i Tabele 2C), uključujući njihove soli, prolekove, polimorfe, analoge, derivate i deuterisane oblike. Opis obuhvata bifunkcionalna jedinjenja opšte hemijske strukture: PTM-L-ULM, ili farmaceutski prihvatljive soli, enantiomere, stereoizomere, solvate, polimorfe ili prolekove istih, naznačeno time što: ULM je mala molekula vezujuća komponenta za E3 ubiquitin ligazu koja se vezuje za Von Hippel-Lindau E3 ubiquitin ligazu; L je veza ili hemijska povezujuća komponenta koja spaja ULM i PTM; PTM je mala molekula koja sadrži komponentu usmerenu ka SMARCA2 proteinu i ima hemijsku strukturu predstavljenu formulama I, II, III, IVa ili IVb:
pri čemu:
WPTM1je opciono zamenjen 5- ili 6-člani arilni ili heteroarilni prsten (npr. 5-6-člani aril ili heteroaril sa 0, 1, 2 ili 3 supstituenta izabranih iz: hidroksi, halogen, alkoksi, alkil, haloalkil, amino, alkilamino i ciano);
WPTM2je opciono supstituisani 5-6-člani aril ili heteroarilni prsten (npr. 5-6 člani aril ili heteroaril supstituisani sa 0, 1, 2 ili 3 supstituenta izabrani iz hidroksi, halogena, alkoksi, alkil, haloalkil, amino, alkilamino i cijana);
WPTM3je odsutan ili opciono zamenjen 5-6-člani arilni ili heteroarilni prsten (npr.5-6-člani arilni ili heteroarilni prsten zamenjen sa 0, 1, 2 ili 3 supstituenta izabranih iz grupe: hidroksi, halogen, alkoksi, alkil, haloalkil, amino, alkilamino i ciano), ili opciono zamenjen 4-9-člani cikloalkilni ili heterociklični prsten, opciono zamenjen mostovni biciklični alkil ili mostovni biheterociklični prsten (npr.4-9-člani cikloalkilni ili heterociklični prsten zamenjen sa 0, 1 ili 2 supstituenta izabranih iz grupe: hidroksi, halogen, alkoksi, alkil, haloalkil, amino, alkilamino i ciano);
WPTM4je opciono zamenjen 5-7-člani cikloalkilni ili heterociklični prsten (npr. 5-7-člani cikloalkilni ili heterociklični prsten zamenjen sa 0, 1, 2 ili 3 supstituenta izabranih iz grupe: hidroksi, halogen, alkoksi, alkil, haloalkil, amino, alkilamino i ciano) koji je kondenzovan sa WPTM2prstenom;
WPTM5je odsutan ili opciono zamenjen 5-6-člani arilni ili heteroarilni prsten (npr.5-6-člani arilni ili heteroarilni prsten zamenjen sa 0, 1 ili 2 supstituenta izabranih iz grupe: hidroksi, halogen, alkoksi, alkil, haloalkil, amino, alkilamino i ciano);
WPTM6i WPTM7su nezavisno opciono zamenjeni 4-7-člani cikloalkilni ili heterociklični prstenovi (npr. svaki je nezavisno 4-7-člani cikloalkilni ili heterociklični prsten zamenjen sa 0, 1 ili 2 supstituenta izabranih iz grupe: hidroksi, halogen, alkoksi, alkil, haloalkil, amino, alkilamino i ciano), i prstenovi WPTM6i WPTM7su međusobno spojeni ili
povezani preko spiro veze; i predstavljaju tačku vezivanja za linker, ULM grupu, ULM' grupu, VLM grupu ili VLM' grupu.
Ovde je opisan PTM predstavljen Formulom I:
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu:
WPTM1je opciono zamenjen fenil ili piridil (npr. zamenjen kako je ovde opisano, kao što je fenil zamenjen hidroksi supstituentom sa ili bez dodatnog opcionog supstituenta izabranog u skladu sa ovim opisom);
WPTM2je opciono supstituisani 6-člani heteroarilni prsten (npr. supstituisan kako je ovde opisano, kao što je piridazin supstituisan amino grupom);
WPTM3je odsutan, opciono zamenjen 5-6-člani heteroarilni prsten (npr. pirazol, pirol, imidazol, oksazol, oksadiazol ili triazol) ili opciono zamenjen 4-9-člani cikloalkilni ili heterociklični prsten, opciono zamenjen mostovni biciklični alkilni ili mostovni biheterociklični prsten.
PTM je opciono predstavljen sledećom formulom:
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu:
WPTM3je odsutan ili je opciono supstituisani 5-6-člani heteroaril, opciono supstituisani 4-9 cikloalkil ili heterocicilni prsten, opciono supstituisani premošćeni bicikloalkil i premošćeni biheterocicilni prsten; i
WPTM5je opciono zamenjen 5-6-člani heteroarilni prsten.
PTM je opciono predstavljen sledećom formulom:
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu:
WPTM5je fenil ili piridinil.
PTM je opciono predstavljen sledećom formulom:
ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so.
PTM je opciono predstavljen formulom III:
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu:
WPTM1je fenil zamenjen hidroksi supstituentom sa ili bez dodatnog opcionog supstituenta;
WPTM2je piridazin zamenjen amino grupom; a
WPTM6i WPTM7su spirociklični prstenasti sistem (npr. spirociklični prsten izabran iz:
).
Želite li da nastavim sa prevođenjem opisa formula IVa i IVb:
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu:
WPTM1je fenil zamenjen hidroksi supstituentom sa ili bez dodatnog opcionog supstituenta izabranog kako je ovde opisano;
WPTM2je piridazin supstituisan amino grupom;
WPTM5je odsutan, pirolni prsten ili prsten piridina.
PTM je opciono izabran iz grupe koju čine:
ULM je opciono hemijska struktura predstavljena kao:
pri čemu:
W<3>je izabran iz grupe opciono zamenjenog arila, opciono zamenjenog heteroarila, ili
R<9>i R<10>su nezavisno vodonik, opciono supstituisani alkil, opciono supstituisani cikloalkil, opciono supstituisani hidroksialkil, opciono supstituisani heteroaril ili haloalkil, ili R<9>, R<10>i ugljenikov atom za koji su vezani formiraju opciono supstituisani cikloalkil;
R11je izabran iz grupe opciono zamenjenog heterocikla, opciono zamenjenog alkoksila, opciono zamenjenog heteroarila, opciono zamenjenog arila,
R12je izabran iz grupe H ili opciono zamenjenog alkila;
R13je izabran iz grupe H, opciono zamenjeni alkil, opciono zamenjeni alkilkarbonil, opciono zamenjeni (cikloalkil)alkilkarbonil, opciono zamenjeni aralkilkarbonil, opciono zamenjeni arilkarbonil, opciono zamenjeni (heterociklil)karbonil ili opciono zamenjeni aralkil;
R14ai R14bsu nezavisno izabrani iz grupe H, haloalkil (npr. fluoroalkil), opciono zamenjeni alkil, opciono zamenjeni alkoksi, opciono zamenjeni hidroksialkil, opciono zamenjeni alkilamin, opciono zamenjeni heteroalkil, opciono zamenjeni alkilheterocikloalkil, opciono zamenjeni alkoksi-heterocikloalkil, COR26, CONR27aR276, NHCOR26ili NHCH3COR26; a drugi od R14ai R14bje H; ili R14ai R14bzajedno sa ugljenikovim atomom na koji su vezani formiraju opciono zamenjeni cikloalkil sa 3 do 5 članova, heterocikloalkil, spirocikloalkil ili spiroheterocikloalkil, naznačeno time što spiroheterocikloalkil nije epoksid ili aziridin;
W<5>je opciono supstituisani fenil, opciono supstituisani naftil, ili opciono supstituisani heteroaril sa 5 do 10 članova;
R15je izabran iz grupe H, halogen, CN, OH, NO2, NR27aR278, OR27a, CONR27aR27b, NR27aCOR27b, SO2NR27aR27b, NR27aSO2R27b, opciono zamenjeni alkil, opciono zamenjeni haloalkil (npr. opciono zamenjeni fluoroalkil), opciono zamenjeni haloalkoksi, opciono zamenjeni aril, opciono zamenjeni heteroaril, opciono zamenjeni cikloalkil, ili opciono zamenjeni heterociklil;
svaki R16je nezavisno izabran iz grupe halo, CN, opciono zamenjeni alkil, opciono zamenjeni haloalkil, hidroksi ili opciono zamenjeni haloalkoksi;
o je 0, 1, 2, 3 ili 4;
R18je nezavisno izabran iz grupe H, halo, opciono zamenjeni alkoksi, ciano, opciono zamenjeni alkil, haloalkil, haloalkoksi ili linker;
svaki R26je nezavisno izabran od H, opciono supstituisanog alkila ili NR27aR27b; svaki R27ai R27bje nezavisno H, opciono zamenjeni alkil, ili R27ai R27bzajedno sa azotnim atomom na koji su vezani formiraju heterociklični prsten sa 4 do 6 članova; i
p je 0, 1, 2, 3 ili 4, a naznačeno time što isprekidana linija označava mesto vezivanja najmanje jednog PTM, drugog ULM (ULM') ili hemijske linker grupe koja povezuje najmanje jedan PTM ili ULM' ili oba sa ULM.
ULM opciono ima hemijsku strukturu izabranu iz grupe:
pri čemu:
R<1>je H, opciono supstituisani alkil, opciono supstituisani cikloalkil, opciono supstituisani hidroksialkil, opciono supstituisani heteroaril ili haloalkil;
R14aje H, haloalkil, opciono zamenjeni alkil, metil, fluorometil, hidroksimetil, etil, izopropil ili ciklopropil;
R15je izabran iz grupe koju čine H, halogen, CN, OH, NO2, opciono zamenjeni heteroaril, opciono zamenjeni aril, opciono zamenjeni alkil (npr. opciono zamenjeni haloalkil), opciono zamenjeni haloalkil, opciono zamenjeni haloalkoksi, opciono zamenjeni cikloalkil ili opciono zamenjeni heterociklil;
X je C, CH2ili C=O;
R3je odsutan ili opciono zamenjeni heteroaril sa 5 ili 6 članova; a naznačeno time što isprekidana linija označava mesto vezivanja najmanje jednog PTM, drugog ULM (ULM') ili hemijske linker grupe koja povezuje najmanje jedan PTM ili ULM' ili oba sa ULM.
ULM opciono sadrži grupu prema hemijskoj strukturi:
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu:
R<1'>ULM-g je opciono supstituisana C1-C6alkil grupa, opciono supstituisana -(CH2)nOH, opciono supstituisana -(CH2)nSH, opciono supstituisana (CH2)n-O-(C1-C6)alkil grupa, opciono supstituisana (CH2)n-WCOCW-(C0-C6)alkil grupa koja sadrži epoksidni deo WCOCW gde je svaki W nezavisno H ili C1-C3alkil grupa, opciono supstituisan -(CH2)nCOOH, opciono supstituisan - (CH2)nC(O)-(C1-C6alkil), opciono supstituisan -(CH2)nNHC(O)-R", opciono supstituisan -(CH2)nC(O)-N(R")2, opciono supstituisan -(CH2)nOC(O)-N(R")2, - (CH2O)nH, opciono supstituisan -(CH2)nOC(O)-(C1-C6alkil), opciono supstituisan -(CH2)nC(O)-O-(C1-C6alkil), opciono supstituisan -(CH2O)nCOOH, opciono supstituisan -(OCH2)nO-(C1-C6alkil), opciono supstituisan - (CH2O)nC(O)-(C1-C6alkil), opciono supstituisan -(OCH2)nNHC(O)-R", opciono supstituisan -(CH2O)nC(O)-N(R")2, -(CH2CH2O)nH, opciono supstituisan -(CH2CH2O)nCOOH, opciono supstituisan -(OCH2CH2)nO-(C1-C6alkil), opciono supstituisan -(CH2CH2O)nC(O)-(C1-C6alkil), opciono supstituisan -(OCH2CH2)nNHC(O)-R", opciono supstituisan -(CH2CH2O)nC(O)-N(R")2, opciono supstituisan -SO2RS, opciono supstituisan S(O)RS, NO2, CN ili halogen (F, Cl, Br, I, poželjno F ili Cl);
svaki R" ULM-g je nezavisno H ili C1-C6alkil grupa koja može biti opciono supstituisana sa jednom ili dve hidroksilne grupe ili do tri halogene grupe (poželjno fluor);
RSULM-g je C1-C6 alkil grupa, opciono supstituisana aril, heteroaril ili heterocicilna grupa ili a -(CH2)mN(R")2, grupa;
X i X' ULM-g su svaki nezavisno C=O, C=S, -S(O), S(O)2, (poželjno je da su X i X' oba C=O);
R<2'>ULM-g je opciono supstituisana -(CH2)n-(C=O)u(NR")v(SO2)walkilna grupa, opciono supstituisana -(CH2)n-(C=O)u(NR")v(SO2)wNR1NR2Ngrupa, opciono supstituisan -(CH2)n-(C=O)u(NR")v(SO2)w-Aril, opciono supstituisan -(CH2)n-(C=O)u(NR")v(SO2)w-Heteroaril, opciono supstituisan -(CH2)n-(C=O)vNR" (SO2)wHeterociklil, opciono supstituisan -NR"-(CH2)n-C(O)u(NR")v(SO2)w-alkil, opciono supstituisan -NR"-(CH2)nC(O)u(NR")v(SO2)w-NR1nR2N, opciono supstituisan -NR"-(CH2)n-C(O)u(NR")v(SO2)w-NR"C(O)R1N, opciono supstituisan -NR"-(CH2)n-(C=O)u(NR")v(SO2)w-Aril, opciono supstituisan-NR"-(CH2)n-(C=O)u(NR")v(SO2)w-Heteroaril ili opciono supstituisan -NR"-(CH2)n-(C=O)vNR"(SO2)w-Heterociklil, opciono supstituisana -X<R2'>-alkil grupa; opciono supstituisana -X<R2'>- Aril grupa; opciono supstituisana -X<R2'>- Heteroaril grupa; opciono supstituisana -X<R2'>- Heterociklil grupa;
R<3'>od ULM-g je opciono supsituisana alkil grupa, opciono supsituisan -(CH2)n-(O)u(NR")v(SO2)w-alkil, opciono supsituisan -(CH2)n-C(O)u(NR")v(SO2)w-NR1NR2N, opciono supsituisan -(CH2)n-C(O)u(NR")v(SO2)w-NR"C(O)R1N, opciono supsituisan -(CH2)n-C(O)u(NR")v(SO2)w-C(O)(R")2, opciono supsituisan -(CH2)n-C(O)u(NR")v(SO2)w-Aril, opciono supsituisan -(CH2)n-C(O)u(NR")y(SO2)w-Heteroaril, opciono supsituisan -(CH2)n-C(O)u(NR")v(SO2)w-Heterociklil, opciono supsituisan -NR"-(CH2)n-C(O)u(NR")v(SO2)w-alkil, opciono supsituisan -NR"-(CH2)n-C(O)u(NR")v(SO2)w-NR1NR2N, opciono supsituisan -NR"-(CH2)n-C(O)u(NR")v(SO2)w-NR"C(O)R1N, opciono supsituisan -NR"-(CH2)n-C(O)u(NR")v(SO2)w-Aril, opciono supsituisan -NR"-(CH2)n-C(O)u(NR")v(SO2)w-Heteroaril, opciono supsituisan -NR<1>-(CH2)n-C(O)u(NR")v(SO2)w-Heterociklil, opciono supsituisan -O-(CH2)n-(C=O)u(NR")v(SO2)w-alkil, opciono supsituisan -O-(CH2)n-(C=O)u(NR")v(SO2)w-NR1NR2N, opciono supsituisan -O-(CH2)n-(C=O)u(NR")v(SO2)w-NR"C(O)R1N, opciono supsituisan -O-(CH2)n-(C=O)u(NR")v(SO2)w-Aril, opciono supsituisan -O-(CH2)n-(C=O)u(NR")v(SO2)w-Heteroaril ili opciono supsituisan -O-(CH2)n-(C=O)u(NR")v(SO2)w-Heterociklil; -(CH2)n-(V)n'-(CH2)n-(V)n'-alkil grupa, opciono supsituisana -(CH2)n-(V)n'-(CH2)n-(V)n'-Aril grupa, opciono supsituisana -(CH2)n-(V)n'-(CH2)n-(V)n'-Heteroaril groupa, opciono supsituisana -(CH2)n-(V)n'-(CH2)n-(V)n'-Heterociklil grupa, opciono supsituisana -(CH2)n-N(R1')(C=O)m'-(V)n'-alkil grupa, opciono supsituisana -(CH2)n-N(R1')(C=O)m'-(V)n'-Aril grupa, opciono supsituisan -(CH2)n-N(R1')(C=O)m'-(V)n'-Heteroaril grupa, opciono supsituisan -(CH2)n-N(R1')(C=O)m'-(V)n'-Heterociklil grupa, opciono supsituisan -X<R3'>- alkil grupa; opciono supsituisan -X<R3'>- Aril grupa; opciono supsituisan -X<R3'>- Heteroaril grupa; opciono supsituisan -X<R3'>-Heterociklil grupa;
R1Ni R2NULM-g su svaki nezavisno H, C1-C6alkil koji je opciono supstituisan sa jednom ili dve hidroksilne grupe i do tri halogene grupe ili opciono supstituisanom -(CH2)n-Aryl, -(CH2)n-heteroaril ili -(CH2)n-heterociklilnom grupom;
V od ULM-g je O, S ili NR1;
svaki R1,ULM-g je nezavisno H ili C1-C3alkilna grupa;
X<R2'>and X<R3'>ULM-g su svaki nezavisno opciono supstituisani -CH2)n-, - CH2)n-CH(Xv)=CH(Xv)-(cis ili trans), -CH2)n-CH≡CH-, -(CH2CH2O)n- or a C3-C6cikloalkilna grupa, gde je XvH, halo ili C1-C3alkil grupa koja je opciono supstituisana;
svaki m od ULM-g je nezavisno 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6;
svaki m' od ULM-g je nezavisno 0 ili 1;
svaki n od ULM-g je nezavisno 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6;
svaki n' od ULM-g je nezavisno 0 ili 1;
svaki u od ULM-g je nezavisno 0 ili 1;
svaki v od ULM-g je nezavisno 0 ili 1;
svaki w od ULM-g je nezavisno 0 ili 1; i
bilo koji jedan ili više R<1'>, R<2'>, R<3'>, X i X' ULM-g je opciono modifikovan da bude kovalentno vezan za PTM grupu preko grupe linkera kada PTM nije ULM', ili kada je PTM ULM', bilo koji ili više R<1'>, R<2'>, R<3'>, X i X' svakog od ULM' i ULM' opciono se modifikuju da bi bili kovalentno vezani jedni za druge direktno ili preko grupe linkera.
ULM je opciono formula:
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu:
R1je H, opciono supstituisani alkil ili opciono supstituisani cikloalkil;
R3je opciono supstituisani 5-6-člani heteroaril;
W<5>je opciono supstituisani fenil, opciono supstituisani naftil ili opciono supstituisani piridinil;
jedan od R14ai R14bje H, opciono supstituisani alkil, opciono supstituisani haloalkil, opciono supstituisani alkoksi, opciono supstituisani hidroksialkil, opciono supstituisani alkilamin, opciono supstituisani heteroalkil, opciono supstituisani alkil-heterocikloalkil, opciono supstituisani alkoksi-heterocikloalkil, COR26, CONR27aR276, NHCOR26ili NHCH3COR26; a drugi od R14ai R14bje H; ili R14a, R14b, zajedno sa ugljenikovim atomom za koji su vezani, formiraju opciono supstituisani cikloalkil, heterocikloalkil, spirocikloalkil ili spiroheterociklični prsten sa 3 do 5 članova, naznačeno time što spiroheterociklični prsten nije epoksid niti aziridin;
upstituisani fluoroalkil,
opciono supstituisan
o supstituisani alkil ili fluoroalkil) ili
svaki R16je nezavisno izabran od halo, CN, opciono supstituisanog alkila, opciono supstituisanog haloalkila, hidroksi ili haloalkoksija;
svaki R26je nezavisno H, opciono supstituisani alkil ili NR27aR27b;
svaki R27ai R27bsu nezavisno H, opciono supstituisani alkil, ili R27ai R27bzajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4-6 člani heterociklil;
R28je H, opciono zamenjeni alkil, opciono zamenjeni alkoksi, opciono zamenjeni heteroalkil, opciono zamenjeni alkilamin, opciono zamenjeni hidroksialkil, amin, opciono zamenjeni alkil ili opciono zamenjeni cikloalkil; i
o je 0, 1 ili 2.
ULM je opciono formula:
pri čemu:
svaki od X<4>, X<5>i X<6>je izabran iz CH i N, naznačeno time što ne više od 2 je N;
R<1>je C1-6 alkil;
jedan od R14ai R14bje H, opciono supstituisani alkil, opciono supstituisani haloalkil, opciono supstituisani alkoksi, opciono supstituisani hidroksialkil, opciono supstituisani alkilamin, opciono supstituisani heteroalkil, opciono supstituisani alkil-heterocikloalkil, opciono supstituisani alkoksi-heterocikloalkil, COR<26>, CONR<27a>R<27b>, NHCOR<26>ili NHCH3COR<26>; a drugi od R<14a>i R14bje H; ili R<14a>i R<14b>, zajedno sa ugljenikovim atomom za koji su vezani, formiraju opciono supstituisani cikloalkil, heterocikloalkil, spirocikloalkil ili spiroheterociklični prsten sa 3 do 5 članova, naznačeno time što spiroheterociklični prsten nije epoksid niti aziridin;
svaki R27ai R27bje nezavisno H ili C1-6alkil;
q je 1, 2, 3 ili 4;
R<15>je,
ili CN;
R<28>je H, metil, CH2N(Me)2, CH2OH, CH2O(C1-4alkil), CH2NHC(O)C1-4alkil, NH2,
R<28C>je H, metil, fluoro ili hloro; i
R<16>je H, C1-4alkil, fluoro, hloro, CN ili C1-4alkoksi.
U bilo kom aspektu ili otelotvorenju opisanom ovde, R<14a>i R14bsu izabrani iz: H, C1-
4alkila, C1-4cikloalkila, C1-4haloalkila, C1-4hidroksialkila, C1-4alkiloksialkila, C1-4alkila-NR27aR27bi CONR27aR276.
U bilo kom aspektu ili otelotvorenju opisanom ovde, najmanje jedan od R<14a>i R<14b>je H (npr. i R<14a>i R<14b>su H).
U bilo kom aspektu ili otelotvorenju opisanom ovde, bar jedan od R<14a>i R<14b>je opciono supstituisani alkil, opciono supstituisani haloalkil, opciono supstituisani alkoksi, opciono supstituisani hidroksialkil, opciono supstituisani alkilamin, opciono supstituisani heteroalkil, opciono supstituisani alkil-heterocikloalkil, opciono supstituisani alkoksiheterocikloalkil, COR<26>, CONR<27a>R<27b>, NHCOR<26>ili NHCH3COR<26>. Alternativno, u bilo kom aspektu ili otelotvorenju opisanom ovde, jedan od R<14a>i R<14b>je opciono supstituisani alkil, opciono supstituisani haloalkil, opciono supstituisani alkoksi, opciono supstituisani hidroksialkil, opciono supstituisani alkilamin, opciono supstituisani heteroalkil, opciono supstituisani alkil-heterocikloalkil, opciono supstituisani alkoksi-heterocikloalkil, COR<26>, CONR<27a>R<27b>, NHCOR<26>ili NHCH3COR<26>; a drugi R<14a>i R<14b>je H.
U bilo kom aspektu ili otelotvorenju opisanom u ovom dokumentu, R<14a>i R<14b>zajedno sa ugljenikovim atomom na koji su vezani
formiraju grupu, naznačeno time što R<23>izabran između H, C1-4alkila, -C(O)C1-4alkila. U bilo kom od aspekata ili otelotvorenju opisanih u ovom dokumentu, ULM ima formulu:
ili farmaceutski prihvatljivu so istog, naznačeno time što su R1, R3, R14a, R14bi R15od ULM-q i ULM-r definisani kako je opisano ovde; a X je CH ili N.
U bilo kom od aspekata ili otelotvorenja opisanih u ovom dokumentu R1je C1-6alkil. U bilo kom od aspekata ili izvedbi opisanih u ovom dokumentu, jedan od R14ai R14bis H, C1-6alkil, C1-6haloalkil, opciono supstituisani C1-4alkilamin, C1-6alkoksi, (CH2)qC1-
6alkoksi, (CH2)qC1-6alkoksi-C3-C7heterocikloalkil, (CH2)qOH, (CH2)qNR27aR27b, (CH2)qNHCOC1-6alkil, C3-6cikloalkil ili NR27aR27b; svaki R26je nezavisno H, C1-6alkil ili NR27aR27b; svaki R27ai R27bje nezavisno H ili C1-6alkil; a q je 1, 2, 3 ili 4.
U bilo kom od aspekata ili izvedbi opisanih u ovom dokumentu, jedan od R14ai R14bis H, C1-4alkil, C1-4haloalkil, C1-4alkoksi, opciono supstituisani C1-4alkilamin, (CH2)qC1-
6alkoksi, (CH2)qC1-6alkoksi-C3-C7heterocikloalkil, (CH2)qOH, (CH2)qNR27aR27b, (CH2)qNHCOC1-6alkil, C3-6cikloalkil ili NR27aR27b; svaki R26je nezavisno H, C1-4alkil ili NR27aR27b; svaki R27ai R27bje nezavisno H ili C1-4alkil; a q je 1 ili 2.
U bilo kom od aspekata ili izvedbi opisanih u ovom dokumentu, R28is C1-6alkil, C3-
6cikloalkil, C1-6haloalkil, (CH2)qOC1-6alkil, (CH2)qOH, (CH2)qNR27aR27b, (CH2)qNHCOC1-
6alkil, ili
R29je H, C1-6alkil, NR27aR27biliqNHCOC1-6alkil; i
naznačeno time što je q 1 ili 2.
U bilo kom od aspekata ili otelotvorenja opisanih u ovom dokumentu, R<3>je izoksazolil, 4-hlorizoksazolil, 4-fluorizoksazolil ili pirazolil. U bilo kom od aspekata ili otelotvorenja opisanih u ovom dokumentu, X je CH.
U bilo kom aspektu ili otelotvorenju opisanom ovde, ULM je prema formuli:
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so,
pri čemu:
R1, R14ai R14bsu kako je ovde opisano;
X je CH ili N;
R30je H, F ili Cl;
R<16>je H, C1-4alkil, fluoro, hloro, CN ili C1-4alkoksi; i
R28je H, metil, CH2N(Me)2, CH2OH, CH2O(C1-4alkil), CH2NHC(O)C1-4alkil, NH2,
U bilo kom od aspekata ili otelotvorenja opisanih u ovom dokumentu, ULM je prema formuli:
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što su R1, R14ai R14bkako je ovde opisano; a R30je H, F ili Cl.
U bilo kom od aspekata ili otelotvorenja opisanih u ovom dokumentu, ULM je ULM naveden u Tabeli 1A, Tabeli 1B, Tabeli 1C, Tabeli 2A, Tabeli 2B ili Tabeli 2C.
U bilo kom od aspekata ili otelotvorenja opisanih u ovom dokumentu, jedinjenje uključuje linker (L) kako je ovde opisano.
U bilo kom od aspekata ili otelotvorenja opisanih u ovom dokumentu, linker (L) je polietilenoksi grupa opciono supstituisana arilom ili fenilom i sadrži od 1 do 10 jedinica etilen glikola.
U bilo kom od aspekata ili otelotvorenja opisanih u ovom dokumentu, jedinjenje je izabrano iz jedinjenja iz Tabele 1A, Tabele 1B, Tabele 1C, Tabele 2A, Tabele 2B i Tabele 2C (npr. izabrano iz jedinjenja 1-535).
U bilo kom od aspekata ili otelotvorenja opisanih u ovom dokumentu, jedinjenje ima Dmax veći ili jednak od 80%.
U dodatnom aspektu, opis obuhvata sastav koji sadrži efikasnu količinu bifunkcionalnog jedinjenja kako je ovde opisano i farmaceutski prihvatljiv nosač.
U bilo kom od aspekata ili otelotvorenja opisanih u ovom dokumentu, sastav kako je ovde opisan dodatno sadrži najmanje jednu dodatnu bioaktivnu supstancu ili drugo bifunkcionalno jedinjenje prema bilo kojoj od zahteva 1-32.
U bilo kom od aspekata ili otelotvorenja opisanih u ovom dokumentu, dodatna bioaktivna supstanca je antikancerogeno sredstvo.
U bilo kom od aspekata ili otelotvorenja opisanih u ovom dokumentu, sastav kako je ovde opisan sadrži farmaceutski prihvatljiv nosač i efikasnu količinu najmanje jednog jedinjenja kako je ovde opisano za lečenje bolesti ili poremećaja kod subjekta, naznačeno time što metod obuhvata primenu sastava subjektu kome je to potrebno, naznačeno time što je jedinjenje efikasno u lečenju ili ublažavanju najmanje jednog simptoma bolesti ili poremećaja.
U bilo kom aspektu ili otelotvorenju opisanom u ovom dokumentu, bolest ili poremećaj je povezan sa akumulacijom i agregacijom SMARCA1, BRAHMA ili BRM. U bilo kom aspektu ili otelotvorenju opisanom u ovom dokumentu, bolest ili poremećaj je rak. U bilo kom aspektu ili otelotvorenju opisanom u ovom dokumentu, rak je rak povezan sa SWI/SNF kompleksom ili rak sa SMARCA4 mutacijom (npr. rak pluća ili nemikrocelularni rak pluća). U bilo kom aspektu ili otelotvorenju opisanom u ovom dokumentu, rak je SMARCA4-deficijentni rak ili rak sa smanjenom ekspresijom SMARCA4 u odnosu na normalnu ekspresiju SMARCA4 (npr. u poređenju sa ekspresijom nemutiranog SMARCA4 ili SMARCA4 u sličnim nemalignim ćelijama sa SMARCA4 divljeg tipa), kao što je rak pluća ili nemikrocelularni rak pluća.
PRIMERI
Predmetni pronalazak je prikazan u priloženim skupu zahteva. Svi primeri koji se ne odražavaju u priloženom skupu zahteva nisu u skladu sa pronalaskom i prisutni su samo u svrhu ilustracije.
Testovi i podaci o degradaciji
Western blot test degradacije BRM proteina u SW1573 ćelijama
Radi procene degradacije BRM proteina (Dmax i DC50), ćelije su semirane u količini od 8000 po jažici u 96-jažičnim pločama sa crnim zidovima i providnim dnom, u 180 µL DMEM medijuma za rast (koji sadrži 1% penicilin-streptomicin, 1% HEPES i 10% FBS) po jažici. Ploče su inkubirane preko noći radi adhezije ćelija. Sledećeg jutra, ćelije su tretirane dodatkom 20 µL 10X koncentracije ciljnog jedinjenja (1% DMSO) u odgovarajuće jažice i vraćene u inkubator preko noći (18–20 sati). Konačna koncentracija DMSO iznosila je 0,1%.
Za liziranje, adherentne ćelije su jednom isprane sa 100 µL DPBS-a. Ćelije su lizirane u 40 µL 1X RIPA rastvora sa HALT inhibitorom proteaza na ledu tokom 10 minuta, a zatim zamrznute na -80 °C do upotrebe. Odmrznuti lizati su prečišćeni filtracijom kroz ploče sa filterima od 1,2 µm, ili alternativno centrifugirani na 2300g pri 4 °C tokom 30 minuta.
Za Western blot, za svaki uzorak dodato je 30 µL lizata u 10 µL 4X LDS pufera, zatim denaturisano na 95°C tokom 5 minuta u termalnom cikleru i stavljeno na led. Uzorci su naneseni na 4–15% Tris/Glicin gelove i elektroforezom razdvojeni tokom 25 minuta pri 250 V konstantnog napona u 1X Tris/Glicin puferu, sa 4 µL standarda i 12 µL svakog uzorka po gelu. Protein je prenet sa gela na NC membranu pomoću BioRad Turbo uređaja za suvi transfer koristeći Turbo/midi standardni program. Svi blotovi su isprani ddH₂O i blokirani 1 sat na sobnoj temperaturi u 5% BSA u TBST (0,1%) na tresaču. Blotovi su inkubirani sa primarnim antitelima u 5% BSA u TBST (0,1%) preko noći na 4°C na tresaču (1:1000 za BRM (Cell Signaling Tech. kat. br.11966) i 1:2000 za alfa-tubulin (Cell Signaling Tech. kat. br. 3873), kontrolni protein. Blotovi su zatim tri puta isprani sa TBST (0,1%) tokom po 5 minuta na sobnoj temperaturi na tresaču. Sekundarno antitelo je dodato i blotovi su inkubirani 1 sat na sobnoj temperaturi na tresaču u rastvoru 1:18,000 anti-rabbit-HRP i/ili anti-mouse-HRP u 5% BSA u TBST (0,1%). Blotovi su ponovo isprani tri puta u TBST (0,1%) po 5 minuta na sobnoj temperaturi na tresaču. Signal je razvijen pomoću Femto supstrata za maksimalnu osetljivost tokom 4 minuta i blotovi su očitani na uređaju ChemiDoc<™>.
In-Cell Western test degradacije BRM proteina u SW1573 ćelijama
Radi procene degradacije BRM proteina (Dmax i DC50), ćelije su semirane u količini od 8000 po jažici u 96-jažičnim pločama sa crnim zidovima i providnim dnom, u 180 µL DMEM medijuma za rast (koji sadrži 1% penicilin-streptomicin, 1% HEPES i 10% FBS) po jažici. Ploče su inkubirane preko noći radi adhezije ćelija. Sledećeg jutra, ćelije su tretirane dodatkom 20 µL 10X jedinjenja (1% DMSO) u odgovarajuće jažice, a zatim su vraćene u inkubator na inkubaciju preko noći (18-20 sati). Konačna koncentracija DMSO iznosila je 0,1%.
Za obradu, ploče su uklonjene iz inkubatora, medijum je uklonjen, i odmah je u sve jažice dodat 200 µL hladnog (4 °C) DPBS-a. DPBS je zatim uklonjen, i u sve jažice je dodat 50 µL 4% paraformaldehida (PFA) u DPBS-u (4°C), a ploče su inkubirane na sobnoj temperaturi 20 minuta. Nakon toga je uklonjen PFA i u sve jažice je dodat 200 µL TBS-T rastvora koji sadrži 0,5% Triton X-100, a ploče su inkubirane na sobnoj temperaturi 30 minuta. TBS-T sa 0,5% Triton X-100 je zatim uklonjen, i u sve jažice je dodat 50 µL Li-Cor blokirajućeg rastvora, nakon čega su ploče inkubirane na sobnoj temperaturi najmanje jedan sat. Blokirajući rastvor je uklonjen, i u sve jažice je dodat 50 µL Li-Cor blokirajućeg rastvora koji sadrži koktel primarnih antitela (1:1000 za BRM (Cell Signaling Tech. kat. br. 11966) i 1:2000 za alfa-tubulin (Sigma kat. br. T6074), kontrolni protein. Ploče su potom ostavljene u hladnoj prostoriji do narednog dana.
Narednog dana, ploče su tri puta isprane TBS-T rastvorom, po 200 µL po jažici. Zatim je u sve jažice dodat po (50) µL koktela sekundarnih antitela u LI-COR blokirajućem rastvoru (anti-rabbit_800 nm i anti-mouse_680 nm) (razblaženih 1:5000). Ploče su inkubirane na sobnoj temperaturi najmanje jedan sat zaštićene od svetlosti. Ploče su zatim dva puta isprane sa TBS-T rastvorom, po 200 µL po jažici.
Za očitavanje, TBS-T je uklonjen, a ploče su okrenute i istapkane o papirni ubrus. Ploče su očitane pomoću LI-COR Odyssey aparata sa podrazumevanim intenzitetom 5.0 za oba kanala. Slike su analizirane pomoću funkcije "in-cell Western" softvera Image Studio Lite.
Sledeća jedinjenja su pokazala degradaciju ciljnih proteina pod gore opisanim uslovima:
Tabela 1A. Primer bifunkcionalnih jedinjenja za razgradnju
Tabela 1B. Primer bifunkcionalnih jedinjenja za razgradnju
Tabela 1C. Primer bifunkcionalnih jedinjenja za razgradnju
Tabela 2A. Ciljna razgradnja proteina putem primernih bifunkcionalnih jedinjenja za razgradnju iz Tabele 1A
<†>kada se testira na najvišoj koncentraciji između 0,3 i 10 µM *DC50 (nM)
degradacije)
Tabela 2B. Ciljna razgradnja proteina putem primernih bifunkcionalnih jedinjenja za razgradnju iz Tabele 1B
Tabela 2C. Ciljna razgradnja proteina putem primernih bifunkcionalnih jedinjenja za razgradnju iz Tabele 1C
<†>kada se testira na najvišoj koncentraciji između 0,3 i 10 µM *DC50 (nM)
A < 2,5
2,5 ≤ B <10
10 ≤ C <30
D ≥ 30
NA nije izračunato/nema uklapanja krive
**Dmax (% degradacije)
50 < B ≤ 75
C ≤ 50
NA nije izračunato/nema uklapanja krive
Opisana je nova bifunkcionalna molekula koja putem PROTAC tehnologije sadrži komponentu za regrutovanje SMARCA2, BRAHMA ili BRM proteina i komponentu za regrutovanje E3 ligaze. Bifunkcionalne molekule opisane u ovom dokumentu aktivno degradiraju SMARCA2, što dovodi do snažne supresije ćelijske proliferacije i indukcije apoptoze. PROTAC-posredovana degradacija proteina predstavlja obećavajuću strategiju za ciljanje patoloških proteina koji su „nedosežni“ tradicionalnim pristupima.
Razume se da su detaljni primeri i otelotvorenja opisani u ovom dokumentu dati isključivo kao ilustracija, te se ni na koji način ne smatraju ograničavajućim za predmet ovog otkrića. Na primer, relativne količine sastojaka mogu se varirati radi optimizacije željenih efekata, mogu se dodati dodatni sastojci i/ili slični sastojci mogu se zameniti za jedan ili više opisanih sastojaka.

Claims (22)

  1. supstituisani alkoksi-heterocikloalkil, COR<26>, CONR<27a>R<27b>, NHCOR<26>ili NCH3COR<26>; a drugi od R<14a>i R<14b>je vodonik; ili R<14a>i R<14b>zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani formiraju opciono supstituisani cikloalkil sa 3 do 5 članova, heterocikloalkil, spirocikloalkil sa do 12 članova, ili spiroheterociklil sa do 12 članova, naznačeno time što spiroheterociklil nije epoksi niti aziridin; W<5>je opciono supstituisani fenil, opciono supstituisani naftil, ili opciono supstituisani heteroaril sa 5 do 10 članova; R<15>je H, halogen, CN, OH, NO2, NR<27a>R<27b>, OR<27a>, CONR<27a>R<27b>, NR<27a>COR<27b>, SO2NR<27a>R<27b>, NR<27a>SO2R<27b>, opciono supstituisani alkil, opciono supstituisani haloalkil, opciono supstituisani haloalkoksi, opciono supstituisani aril, opciono supstituisani heteroaril, opciono supstituisani cikloalkil ili opciono supstituisani heterociklil; svaki R<16>je nezavisno halogen, CN, opciono supstituisani alkil, opciono supstituisani haloalkil, hidroksi ili opciono supstituisani haloalkoksi; o je 0, 1, 2, 3 ili 4; svaki R<18>je nezavisno H, halogen, opciono supstituisani alkoksi, cijano, opciono supstituisani alkil, haloalkil ili haloalkoksi; svaki R<26>je nezavisno H, opciono supstituisani alkil ili NR<27a>R<27b>; svaki R<27a>i R<27b>su nezavisno H, opciono supstituisani alkil, ili R<27a>i R<27b>zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4-6 člani heterociklil; p je 0, 1, 2, 3 ili 4, i
    označava mesto vezivanja L; (b) L je -(A<L>)q-, pri čemu: (A<L>)qje grupa koja je povezana sa PTM i ULM; q od L je ceo broj od 1 do 100; svaki A<L>je nezavisno CR<L1>R<L2>, O, S, SO, SO2, NR<L3>, SO2NR<L3>, SONR<L3>, CONR<L3>, NR<L3>CONR<L4>, NR<L3>SO2NR<L4>, CO, CR<L1>=CR<L2>, C≡C, SiR<L1>R<L2>, P(O)R<L1>, P(O)OR<L1>, NR<L3>C(=NCN)NR<L4>, NR<L3>C(=NCN), NR<L3>C(=CNO2)NR<L4>, C3-11cikloalkil opciono supstituisan 1-6 R<L1>i/ili R<L2>grupama, C3-11heterociklil opciono supstituisan 1-6 R<L1>i/ili R<L2>grupama, i aril opciono supstituisan 1-6 R<L1>i/ili R<L2>grupama, i heteroaril opciono supstituisan 1-6 R<L1>i/ili R<L2>grupama, gde su R<L1>ili R<L2>, svaki nezavisno, opciono povezani sa drugim grupama u cilju formiranja cikloalkilne ili heterociklične jedinice, opciono supstituisane 1-4 R<L5>grupom; i svaki R<L1>, R<L2>, R<L3>, R<L4>i R<L5>je nezavisno H, halogen, C1-8alkil, OC1-8alkil, SC1-8alkil, NHC1-8alkil, N(C1-8alkil)2, C3-11cikloalkil, aril, heteroaril, C3-11heterociklil, OC3-8cikloalkil, SC3-8cikloalkil, NHC3-8cikloalkil, N(C3-8cikloalkil)2, N(C3-8cikloalkil)(C1-8alkil), OH, NH2, SH, SO2C1-8alkil, P(O)(OC1-8alkil)(C1-8alkil), P(O)(OC1-8alkil)2, CC-C1-8alkil, CCH, CH=CH(C1-8alkil), C(C1-8alkil)=CH(C1-8alkil), C(C1-8alkil)=C(C1-8alkil)2, Si(OH)3, Si(C1- 8alkil)3, Si(OH)(C1-8alkil)2, COC1-8alkil, CO2H, CN, CF3, CHF2, CH2F, NO2, SF5, SO2NHC1- 8alkil, SO2N(C1-8alkil)2, SONHC1-8alkil, SON(C1-8alkil)2, CONHC1-8alkil, CON(C1-8alkil)2, N(C1-8alkil)CONH(C1-8alkil), N(C1-8alkil)CON(C1-8alkil)2, NHCONH(C1-8alkil), NHCON(C1- 8alkil)2, NHCONH2, N(C1-8alkil)SO2NH(C1-8alkil), N(C1-8alkil) SO2N(C1-8alkil)2, NH SO2NH(C1-8alkil), NH SO2N(C1-8alkil)2, ili NH SO2NH2; i (c) PTM je:
    pri čemu: je tačka vezivanja za L; WPTM1je fenil supstituisan hidroksi supstituentom i opciono supstituisan sa 1 ili 2 supstituenta nezavisno izabrana iz grupe koju čine: hidroksi, halogen, alkoksi, alkil, haloalkil, amino, fosfat, alkilamino i cijano; WPTM2je piridazinil opciono supstituisan amino grupom; WPTM3je opciono supstituisani 5–6-člani heteroaril, opciono supstituisani 4–9-člani cikloalkil, opciono supstituisani 4–9-člani heterociklil, opciono supstituisani premošćeni bicikloalkil, ili opciono supstituisani premošćeni biheterociklil, poželjno opciono supstituisani pirazol, pirol, imidazol, oksazol, oksadiazol ili triazol; WPTM5je opciono supstituisani 5–6-člani aril ili opciono supstituisani 5–6-člani heteroaril; ili (b)
    pri čemu: je tačka vezivanja za L; WPTM1je fenil supstituisan hidroksi supstituentom i opciono supstituisan sa 1 ili 2 supstituenta nezavisno izabrana iz grupe koju čine: hidroksi, halogen, alkoksi, alkil, haloalkil, amino, fosfat, alkilamino i cijano; WPTM2je piridazinil supstituisan amino grupom; i WPTM6i WPTM7su spirociklični prstenasti sistem sa strukturom izabranom od:
  2. 2. Jedinjenje iz zahteva 1, pri čemu, PTM je:
  3. a 1, pri čemu, PTM je:
  4. 4. Jedinjenje iz zahteva 1, pri čemu, PTM je:
    pri čemu, je tačka vezivanja za L.
  5. 5. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1-4, pri čemu: (a) ULM je:
    pri čemu: R<1>je H, opciono supstituisani alkil, opciono supstituisani cikloalkil, opciono supstituisani hidroksialkil, opciono supstituisani heteroaril ili haloalkil; R<14a>je H, haloalkil, opciono supstituisani alkil, metil, fluormetil, hidroksimetil, etil ili izopropil; R<15>je H, halogen, CN, OH, NO2, opciono supstituisani heteroaril, opciono supstituisani aril, opciono supstituisani alkil, opciono supstituisani haloalkil, opciono supstituisani haloalkoksi, opciono supstituisani cikloalkil ili opciono supstituisani heterociklil; X je CH2ili C=O; R<3>je opciono supstituisani 5- ili 6-člani heteroaril; i
    označava mesto vezivanja L; ili (b) ULM je:
    pri čemu: R<1>je H, opciono supstituisani alkil ili opciono supstituisani cikloalkil; R<3>je opciono supstituisani 5-6-člani heteroaril; W<5>je opciono supstituisani fenil, opciono supstituisani naftil ili opciono supstituisani piridinil; jedan od R<14a>i R<14b>je H, opciono supstituisani alkil, haloalkil, opciono supstituisani alkoksi, opciono supstituisani hidroksialkil, opciono supstituisani alkilamino, opciono supstituisani heteroalkil, opciono supstituisani alkil-heterocikloalkil, opciono supstituisani alkoksi-heterocikloalkil, COR<26>, CONR<27a>R<27b>, NHCOR<26>ili NCH3COR<26>; a drugi od R<14a>i R<14b>je H; ili R<14a>i R<14b>zajedno sa ugljenikovim atomom za koji su vezani formiraju opciono supstituisani cikloalkil sa 3 do 5 članova, heterocikloalkil, spirocikloalkil ili spiroheterociklil, pri čemu, spiroheterociklil nije epoksid ili aziridinil; R<15>je CN, fluoralkil,
    ili opciono supstituisani
    pri čemu, R<28>je halogen, opciono supstituisani alkil ili fluoralkil; svaki R<16>je nezavisno halogen, CN, opciono supstituisani alkil, opciono supstituisani haloalkil, hidroksi ili haloalkoksi; svaki R<26>je nezavisno H, opciono supstituisani alkil ili NR<27a>R<27b>; svaki R<27a>i R<27b>su nezavisno H, opciono supstituisani alkil, ili R<27a>i R<27b>zajedno sa atomom azota za koji su vezani formiraju 4-6 člani heterociklil; R<28>je H, opciono supstituisani alkil, opciono supstituisani alkoksi, opciono supstituisani heteroalkil, opciono supstituisani alkilamino, opciono supstituisani hidroksialkil, amino, opciono supstituisani alkinil ili opciono supstituisani cikloalkil; o je 0, 1 ili 2; i
    označavaju mesto vezivanja L.
  6. 6. Jedinjenje iz zahteva 1, pri čemu, ULM je:
    pri čemu: R<3>je opciono supstituisani 5-6-člani heteroaril; svaki X<4>, X<5>i X<6>je CH ili N, pri čemu, najviše 2 su N; R<1>je C1-6alkil; jedan od R<14a>i R<14b>je H, opciono supstituisani alkil, opciono supstituisani haloalkil, opciono supstituisani alkoksi, opciono supstituisani hidroksil alkil, opciono supstituisani alkilamino, opciono supstituisani heteroalkil, opciono supstituisani alkil-heterocikloalkil, opciono supstituisani alkoksi-heterocikloalkil, COR<26>, CONR<27a>R<27b>, NHCOR<26>ili NCH3COR<26>; i drugi od R<14a>i R<14b>je H; ili R<14a>i R<14b>, zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani, formiraju opciono supstituisani 3- do 5-člani cikloalkil, heterocikloalkil, spirocikloalkil ili spiroheterociklil, pri čemu, spiroheterociklil nije epoksid ili aziridinil; svaki R<27a>i R<27b>je nezavisno H ili C1-6alkil;
    R<28C>je H, metil, fluor ili hlor; fluor, hlor, CN ili C1-4alkoksi; i označava mesto vezivanja L.
  7. 7. Jedinjenje prema zahtevu 6, pri čemu, jedan od R<14a>i R<14b>je: H, C1-4alkil, C1- 4cikloalkil, C1-4haloalkil, C1-4hidroksialkil, C1-4alkiloksialkil, C1-4alkil-NR<27a>R<27b>i CONR<27a>R<27b>; a drugi od R<14a>ili R<14b>je H; ili R<14a>i R<14b>, zajedno sa atomom ugljenika na koji su vezani formiraju C3-4cikloalkil.
  8. 8. Jedinjenje prema zahtevu 6, pri čemu, R<14a>i R<14b>zajedno sa atomom ugljenika za koji su vezani formiraju
    pri čemu, R<23>je H, C1-4alkil ili -C(O)C1-4alkil.
  9. 9. Jedinjenje iz zahteva 6, pri čemu, ULM je:
    naznačeno time što je X CH ili N, i
    označava mesto vezivanja L.
  10. 10. Jedinjenje prema zahtevu 6 ili 9, pri čemu: (a) jedan od R<14a>i R<14b>je H, C1-6alkil, C1-6haloalkil, opciono supstituisani C1- 4alkilamino, C1-6alkoksi, (CH2)qC1-6alkoksi, (CH2)qC1-6alkoksi-C3-7heterocikloalkil, (CH2)qOH, (CH2)qNR<27a>R<27b>, ili (CH2)qNHCOC1-6alkil; a drugi od R<14a>i R<14b>je H; svaki R<26>je nezavisno H, C1-6alkil ili NR<27a>R<27b>; svaki R<27a>i R<27b>je nezavisno H ili C1-6alkil; i q od ULM je 1, 2, 3 ili 4; ili (b) jedan od R<14a>i R<14b>je H, C1-4alkil, C1-4haloalkil, C1-4alkoksi, opciono supstituisani C1-4alkilamino, (CH2)qC1-6alkoksi, (CH2)qC1-6alkoksi-C3-7heterocikloalkil, (CH2)qOH, (CH2)qNR<27a>R<27b>, ili (CH2)qNHCOC1-6alkil; a drugi od R<14a>ili R<14b>je H; svaki R<26>je nezavisno H, C1-4alkil ili NR<27a>R<27b>; svaki R<27a>i R<27b>je nezavisno H ili C1-4alkil; i q od ULM je 1 ili 2; ili (c) R<28>je C1-6alkil, C3-6cikloalkil, C1-6haloalkil, (CH2)qOC1-6alkil, (CH2)qOH, alkil, ili R<29>je H, C1-6alkil, NR<27a>R<27b>ili NHCOC1-6alkil; i q od ULM je 1 ili 2.
  11. 11. Jedinjenje prema zahtevu 6, pri čemu, R<3>je izoksazolil, 4-hlorizoksazolil, 4-fluorizoksazolil ili pirazolil.
  12. 12. Jedinjenje prema zahtevu 11, pri čemu: (a) X<4>je CH; i/ili (b) ULM je:
    pri čemu: X je CH ili N; R<1>je C1-6alkil; R<30>je H, F ili Cl; R<16>je H, C1-4alkil, fluor, hlor, CN ili C1-4alkoksi; R<28>je H, metil, CH2N(Me)2, CH2OH, CH2O(C1-4alkil), CH2NHC(O)C1-4alkil, NH2,
    označava mesto vezivanja L.
  13. 13. Jedinjenje iz zahteva 12, pri čemu, ULM je:
    naznačeno time što je R<30>H, F ili Cl, i
    označava mesto vezivanja L.
  14. 14. Jedinjenje prema zahtevu 1, pri čemu: (a) Lis:
    pri čemu: W<L1>i W<L2>su svaki nezavisno 4-8-člani prsten sa 0-4 heteroatoma, opciono supstituisani sa R<Q>, svaki R<Q>je nezavisno H, halogen, OH, CN, CF3, opciono supstituisani linearni ili razgranati C1-C6alkil, opciono supstituisani linearni ili razgranati C1-C6alkoksi, ili 2 R<Q>grupe uzete zajedno sa atomom na koji su vezani formiraju sistem prstenova sa 4-8 članova koji sadrži 0-4 heteroatoma; svaki Y<L1>je nezavisno veza, opciono supstituisani linearni ili razgranati C1-C6alkil i opciono jedan ili više C atoma zamenjeno je sa O; ili opciono supstituisani linearni ili razgranati C1-C6alkoksi; ili 10; i označava tačku vezivanja za PTM ili ULM; ili (b) L je:
    pri čemu: W<L1>i W<L2>su svaki nezavisno aril, heteroaril, ciklični, heterociklil, C1-6alkil, biciklični, biaril, biheteroaril ili biheterociklil, svaki opciono supstituisan sa R<Q>, svaki R<Q>je nezavisno H, halogen, OH, NH2, NR<Y1>R<Y2>, CN, CF3, hidroksil, nitro, C≡CH, C2-6alkenil, C2- 6alkinil, opciono supstituisani linearni ili razgranati C1-C6alkil, opciono supstituisani linearni ili razgranati C1-C6alkoksi, OC1-3alkil opciono supstituisan sa 1 ili više -F; ili 2 R<Q>grupe uzete zajedno sa atomom na koji su vezani čine 4-8-člani prstenasti sistem koji sadrži 0-4 heteroatoma; svaki Y<L1>je nezavisno veza, NR<YL1>, O, S, NR<YL2>, CR<YL1>R<YL2>, C=O, C=S, SO, SO2, opciono supstituisani linearni ili razgranati C1-C6alkil i opciono jedan ili više C atoma zamenjeno je sa O; opciono supstituisani linearni ili razgranati C1-C6alkoksi; Q<L>je 3-6 člani aliciklični ili aromatični prsten sa 0-4 heteroatoma, opciono premošćen, opciono supstituisan sa 1-6 R<Q>, svaki R<Q>je nezavisno H, linearni ili razgranati C1- 6alkil opciono supstituisan sa 1 ili više halogena ili C1-6alkoksi, ili 2 R<Q>grupe uzete zajedno sa atomom na koji su vezani formiraju 3-8 člani prstenasti sistem koji sadrži 0-2 heteroatoma; R<YL1>i R<YL2>su svaki nezavisno H, OH, linearni ili razgranati C1-6alkil opciono supstituisan sa 1 ili više halogena ili C1-6alkoksila, ili R<YL1>i R<YL2>zajedno sa atomom na koji su vezani formiraju 3-8-člani prstenasti sistem koji sadrži 0-2 heteroatoma; ili 10; i označava tačku vezivanja na PTM ili ULM.
  15. 15. Jedinjenje prema zahtevu 1, pri čemu: (a) L je: -O-(CH2)m-O(CH2)n-O(CH2)o-O(CH2)p-O(CH2)q-O(CH2)r-O(CH2)s-O(CH2)t-; -O-( CH2)m-O(CH2)n-O(CH2)o-O(CH2)p-O(CH2)q-O(CH2)r-O(CH2)s-O-; -(CH2)m-O(CH2)n-O(CH2)o-O(CH2)p-O(CH2)q-O(CH2)r-O(CH2)s-O(CH2)t-; -CH=CH(CH2)m-O(CH2)n-O(CH2)o-O(CH2)p-O(CH2)q-O(CH2)r-O(CH2)s-O(CH2)t-;
    pri čemu, svaki m, n, o, p, q, r, s i t od L je nezavisno izabran od 0, 1, 2, 3 i 4; ili
  16. 16. Jedinjenje iz zahteva 1, pri čemu, jedinjenje je:
    ili
  17. 17. Jedinjenje prema zahtevu 16, pri čemu, jedinjenje ima Dmaxveći ili jednak 80%.
  18. 18. Jedinjenje iz zahteva 1, pri čemu, ULM je:
    je, ULM je povezan sa L na bilo kojoj odgovarajućoj lokaciji, uključujući, na primer, aril, heteroar, fenil ili fenil indolne grupe, opciono preko bilo koje odgovarajuće funkcionalne grupe, kao što su amin, estar, etar, alkil ili alkoksi.
  19. 19. Farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1 do 18 i farmaceutski prihvatljiv nosač.
  20. 20. Farmaceutska kompozicija prema zahtevu 19, pri čemu, kompozicija dalje sadrži dodatni bioaktivni agens, po mogućstvu antikancerogeni agens.
  21. 21. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1–18 ili farmaceutska kompozicija prema zahtevima 19 ili 20, za upotrebu u lečenju kancera.
  22. 22. Jedinjenje ili farmaceutska kompozicija za upotrebu prema zahtevu 21, pri čemu, kancer je: (i) kancer povezan sa SWI/SNF kompleksom ili kancer sa SMARCA4 mutacijom, kao što je kancer pluća ili nemikrocelularni kancer pluća; ili (ii) kancer sa nedostatkom SMAPCA4 ili kancer sa smanjenom ekspresijom SMARCA4 u poređenju sa normalnom ekspresijom SMARCA4, kao što je kancer pluća ili nemikrocelularni kancer pluća.
RS20250498A 2018-04-01 2019-04-01 Jedinjenja za ciljanje brm i povezane metode upotrebe RS66841B1 (sr)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201862651186P 2018-04-01 2018-04-01
US201962797754P 2019-01-28 2019-01-28
EP19717685.2A EP3774789B1 (en) 2018-04-01 2019-04-01 Brm targeting compounds and associated methods of use
PCT/US2019/025254 WO2019195201A1 (en) 2018-04-01 2019-04-01 Brm targeting compounds and associated methods of use

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS66841B1 true RS66841B1 (sr) 2025-06-30

Family

ID=66175525

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20250498A RS66841B1 (sr) 2018-04-01 2019-04-01 Jedinjenja za ciljanje brm i povezane metode upotrebe

Country Status (29)

Country Link
US (2) US20190300521A1 (sr)
EP (2) EP3774789B1 (sr)
JP (3) JP7721270B2 (sr)
KR (2) KR102697733B1 (sr)
CN (2) CN120504668A (sr)
AU (3) AU2019249849C1 (sr)
BR (1) BR112020020196A2 (sr)
CA (1) CA3094305A1 (sr)
CL (1) CL2020002546A1 (sr)
CO (1) CO2020013762A2 (sr)
CR (1) CR20200527A (sr)
DK (1) DK3774789T3 (sr)
ES (1) ES3027032T3 (sr)
FI (1) FI3774789T3 (sr)
HR (1) HRP20250617T1 (sr)
HU (1) HUE071391T2 (sr)
IL (1) IL277677A (sr)
LT (1) LT3774789T (sr)
MX (2) MX2020010368A (sr)
MY (1) MY198308A (sr)
PE (1) PE20212108A1 (sr)
PH (1) PH12020500663A1 (sr)
PL (1) PL3774789T3 (sr)
PT (1) PT3774789T (sr)
RS (1) RS66841B1 (sr)
SG (1) SG11202008898UA (sr)
SI (1) SI3774789T1 (sr)
UA (1) UA130603C2 (sr)
WO (1) WO2019195201A1 (sr)

Families Citing this family (70)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2019140380A1 (en) 2018-01-12 2019-07-18 Kymera Therapeutics, Inc. Protein degraders and uses thereof
US20190300521A1 (en) * 2018-04-01 2019-10-03 Arvinas Operations, Inc. Brm targeting compounds and associated methods of use
US12539292B2 (en) 2018-04-01 2026-02-03 Arvinas Operations, Inc. BRM targeting compounds and associated methods of use
WO2019195609A2 (en) 2018-04-04 2019-10-10 Arvinas Operations, Inc. Modulators of proteolysis and associated methods of use
EP3784665A4 (en) * 2018-04-26 2022-01-26 Aurigene Discovery Technologies Limited PYRIDAZINE DERIVATIVES AS SMARCA2/4 DEGRADERS
US11771697B2 (en) 2018-04-30 2023-10-03 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Small molecule degraders of polybromo-1 (PBRM1)
WO2020010227A1 (en) 2018-07-06 2020-01-09 Kymera Therapeutics, Inc. Protein degraders and uses thereof
JP7297053B2 (ja) 2018-08-20 2023-06-23 アルビナス・オペレーションズ・インコーポレイテッド 神経変性疾患を治療するためのｅ３ユビキチンリガーゼ結合活性を有するキメラ（ｐｒｏｔａｃ）化合物を標的とし、アルファ－シヌクレインタンパク質を標的とするタンパク質分解
JP7708662B2 (ja) 2018-10-24 2025-07-15 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト コンジュゲート化された化学的分解誘導物質および使用方法
CN120698983A (zh) 2018-12-20 2025-09-26 C4医药公司 靶向蛋白降解
CN113874016A (zh) 2019-01-29 2021-12-31 福宏治疗公司 化合物及其用途
WO2020210630A1 (en) 2019-04-12 2020-10-15 C4 Therapeutics, Inc. Tricyclic degraders of ikaros and aiolos
WO2020251972A1 (en) 2019-06-10 2020-12-17 Kymera Therapeutics, Inc. Smarca degraders and uses thereof
EP3999182A1 (en) 2019-07-17 2022-05-25 Arvinas Operations, Inc. Tau-protein targeting compounds and associated methods of use
WO2021022163A2 (en) 2019-07-31 2021-02-04 Foghorn Therapeutics Inc. Compounds and uses thereof
JP7502425B2 (ja) * 2019-10-01 2024-06-18 アルヴィナス・オペレーションズ・インコーポレイテッド Ｂｒｍ標的化化合物および関連使用方法
IL292153A (en) * 2019-10-16 2022-06-01 Cemm Forschungszentrum Fur Molekulare Medizin Gmbh Oxazole and thiazole type choline ubiquitin ligase ring compounds and uses thereof
CA3154386A1 (en) 2019-10-17 2021-04-22 Michael Berlin Bifunctional molecules containing an e3 ubiquitine ligase binding moiety linked to a bcl6 targeting moiety
JP2023511471A (ja) * 2019-10-28 2023-03-20 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト 二官能性化合物
JP2023511472A (ja) * 2019-10-29 2023-03-20 エフ・ホフマン－ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト がんの治療のための二官能性化合物
EP4081308A4 (en) 2019-12-23 2024-01-24 Kymera Therapeutics, Inc. Smarca degraders and uses thereof
WO2021133917A1 (en) 2019-12-23 2021-07-01 Kymera Therapeutics, Inc. Smarca inhibitors and uses thereof
WO2021142247A1 (en) * 2020-01-10 2021-07-15 Amgen Inc. Smarca2-vhl degraders
JP7693688B2 (ja) * 2020-01-29 2025-06-17 フォグホーン セラピューティクス インコーポレイテッド 化合物およびその使用
EP4096651A4 (en) 2020-01-29 2024-01-24 Foghorn Therapeutics Inc. COMPOUNDS AND THEIR USES
US12528825B2 (en) 2020-01-29 2026-01-20 Foghorn Therapeutics Inc. Compounds and uses thereof
US12599671B2 (en) 2020-02-12 2026-04-14 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Compounds, compositions, and methods for protein degradation
TW202146412A (zh) 2020-03-05 2021-12-16 美商Ｃ４醫藥公司 用於標靶降解brd9之化合物
CN115867554B (zh) * 2020-06-09 2025-09-02 普莱鲁德疗法有限公司 Brm靶向化合物和相关使用方法
PE20231104A1 (es) * 2020-07-21 2023-07-19 Genentech Inc Inductores quimicos de degradacion conjugados con anticuerpo de brm y metodos de estos
US11787800B2 (en) 2020-07-29 2023-10-17 Foghorn Therapeutics Inc. BRD9 degraders and uses thereof
US12570650B2 (en) 2020-08-04 2026-03-10 Aurigene Oncology Limited 6-substituted pyridazine compounds as SMARCA2 and/or SMARCA4 degraders
IL300397A (en) 2020-08-05 2023-04-01 C4 Therapeutics Inc Compounds for targeted knockdown of RET
WO2022099117A1 (en) 2020-11-06 2022-05-12 Prelude Therapeutics Incorporated Brm targeting compounds and associated methods of use
EP4259144A4 (en) 2020-12-09 2025-08-20 Kymera Therapeutics Inc SMARCA DEGRADING AGENTS AND THEIR USES
WO2022125800A1 (en) * 2020-12-09 2022-06-16 Kymera Therapeutics, Inc. Smarca degraders and uses thereof
AU2022207648A1 (en) 2021-01-13 2023-07-27 Monte Rosa Therapeutics Ag Isoindolinone compounds
TW202241855A (zh) * 2021-01-27 2022-11-01 美商富曼西公司 用於防治無脊椎有害生物之唑類化合物
KR20230171979A (ko) 2021-04-16 2023-12-21 아비나스 오퍼레이션스, 인코포레이티드 Bcl6 단백질 분해의 조절제 및 관련 사용 방법
TW202309039A (zh) 2021-05-05 2023-03-01 美商百健Ｍａ公司 用於靶向布魯頓氏酪胺酸激酶降解之化合物
KR20240004983A (ko) * 2021-05-10 2024-01-11 포그혼 쎄라퓨틱스 인크. 화합물 및 이의 용도
CN117337178A (zh) * 2021-05-10 2024-01-02 福宏治疗公司 化合物及其用途
US11767330B2 (en) 2021-07-06 2023-09-26 Foghorn Therapeutics Inc. Citrate salt, pharmaceutical compositions, and methods of making and using the same
US20250018046A1 (en) 2021-07-07 2025-01-16 Biogen Ma Inc Compounds for targeting degradation of irak4 proteins
EP4367113A1 (en) 2021-07-07 2024-05-15 Biogen MA Inc. Compounds for targeting degradation of irak4 proteins
US20240336612A1 (en) 2021-07-13 2024-10-10 Prelude Therapeutics Incorporated BRM Targeting Compounds And Associated Methods Of Use
CN118696045A (zh) * 2021-11-23 2024-09-24 南京再明医药有限公司 Brm选择性降解剂化合物及其应用
CN118574827A (zh) * 2021-11-24 2024-08-30 阿维纳斯运营公司 Brm靶向化合物和相关的使用方法
US20250059198A1 (en) * 2021-11-24 2025-02-20 Arvinas Operations, Inc. Brm degrading compounds and associated methods of use
JP2025503429A (ja) * 2021-12-14 2025-02-04 プレーザー セラピューティクス インコーポレイティド ポリユビキチン化による標的タンパク質またはポリペプチドの分解用の新規化合物
KR20240128955A (ko) * 2021-12-28 2024-08-27 더 보드 오브 리젠츠 오브 더 유니버시티 오브 텍사스 시스템 암 치료제로서의 강력하고 선택적인 smarca2 분해 키메라 분자
AR128330A1 (es) 2022-01-26 2024-04-17 Genentech Inc Inductores químicos de degradación conjugados con anticuerpo y métodos de estos
AR128331A1 (es) 2022-01-26 2024-04-17 Genentech Inc Inductores químicos de degradación conjugados con anticuerpos y métodos de estos
CN119836416A (zh) 2022-06-16 2025-04-15 普莱鲁德疗法有限公司 具有泛素连接酶结合部分的靶向kat6的化合物
EP4549431A1 (en) * 2022-06-30 2025-05-07 Gan & Lee Pharmaceuticals Co., Ltd. Compound functioning as smarca2/4 inhibitor and use thereof
CN115353468B (zh) * 2022-08-19 2023-06-30 安阳工学院 一种对甲苯磺酰氧基取代低聚乙二醇丙酸叔丁酯的制备方法
JP2025538228A (ja) 2022-11-15 2025-11-26 プレリュード・セラピューティクス・インコーポレイテッド Ｂｒｍ標的化化合物及び関連する使用方法
US12448399B2 (en) 2023-01-26 2025-10-21 Arvinas Operations, Inc. Cereblon-based KRAS degrading PROTACs and uses related thereto
CN120752233A (zh) * 2023-02-28 2025-10-03 上海海雁医药科技有限公司 取代的三环衍生物及其药物组合物和用途
TW202502750A (zh) 2023-06-08 2025-01-16 美商新銳思生物製藥股份有限公司 Smarca2之雙官能選擇性降解劑及其治療用途
WO2024256574A1 (en) * 2023-06-13 2024-12-19 Crossfire Oncology Holding B.V. Process for preparing macrocyclic btk inhibitors
PE20260301A1 (es) 2023-06-14 2026-02-10 Astrazeneca Ab Derivados de 3-[3-amino-6-(2-hidroxifenil)piridazin-4-il]-3,8-diazabiciclo[3.2.1]octano como protacs degradantes de smarca2 para el tratamiento del cancer
PE20260307A1 (es) 2023-06-14 2026-02-11 Astrazeneca Ab Degradadores de smarca2 y usos de estos
CN121620368A (zh) * 2023-06-16 2026-03-06 普莱克斯姆公司 降解swi/snf相关基质相关联肌动蛋白依赖性染色质调控因子a亚家族的化合物和药物组合物
WO2025094065A1 (en) * 2023-11-01 2025-05-08 Aurigene Oncology Limited Amino-substituted pyridazine compounds as smarca2 and/or smarca4 degraders
WO2025101942A1 (en) 2023-11-10 2025-05-15 Prelude Therapeutics Incorporated Kat6 targeting compounds
WO2025106637A1 (en) * 2023-11-16 2025-05-22 Foghorn Therapeutics Inc. Cinnoline derivatives useful as baf modulators
WO2025131111A1 (zh) * 2023-12-22 2025-06-26 上海海雁医药科技有限公司 双环稠杂芳环衍生物及其药物组合物和用途
US20250276074A1 (en) 2024-03-01 2025-09-04 Prelude Therapeutics Incorporated Brm and brg1 targeting antibody-drug conjugates and methods of use thereof
TW202543650A (zh) 2024-03-08 2025-11-16 美商海爾達醫療運營公司 異雙官能化合物及其在治療疾病中之用途

Family Cites Families (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4522811A (en) 1982-07-08 1985-06-11 Syntex (U.S.A.) Inc. Serial injection of muramyldipeptides and liposomes enhances the anti-infective activity of muramyldipeptides
EP2717295B1 (en) 2003-12-03 2018-07-18 Nikon Corporation Exposure apparatus, exposure method, and method for producing a device
KR102668696B1 (ko) * 2012-01-12 2024-05-29 예일 유니버시티 E3 유비퀴틴 리가아제에 의한 표적 단백질 및 다른 폴리펩티드의 증진된 분해를 위한 화합물 및 방법
RU2738833C9 (ru) 2014-04-14 2022-02-28 Арвинас, Оперэйшнз, Инк. Имидные модуляторы протеолиза и способы их применения
US9694084B2 (en) * 2014-12-23 2017-07-04 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Methods to induce targeted protein degradation through bifunctional molecules
WO2016105518A1 (en) * 2014-12-23 2016-06-30 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Methods to induce targeted protein degradation through bifunctional molecules
JP6817962B2 (ja) * 2015-01-20 2021-01-20 アルビナス・オペレーションズ・インコーポレイテッドＡｒｖｉｎａｓ Ｏｐｅｒａｔｉｏｎｓ， Ｉｎｃ． ターゲティングされたアンドロゲン受容体分解のための化合物および方法
MA41598A (fr) 2015-02-25 2018-01-02 Constellation Pharmaceuticals Inc Composés thérapeutiques de pyridazine et leurs utilisations
EP3270917A4 (en) 2015-03-18 2018-08-08 Arvinas, Inc. Compounds and methods for the enhanced degradation of targeted proteins
EP3319944A4 (en) * 2015-07-10 2019-04-24 Arvinas, Inc. MDM2-BASED MODULATORS OF PROTEOLYSIS AND RELATED USE METHODS
BR112017028269A2 (pt) * 2015-07-13 2018-09-04 Arvinas Inc composto, composição farmacêutica, uso de uma quantidade efetiva de um composto, estado ou condição de doença, e, método para identificar um composto.
US10772962B2 (en) 2015-08-19 2020-09-15 Arvinas Operations, Inc. Compounds and methods for the targeted degradation of bromodomain-containing proteins
BR112018008918A8 (pt) * 2015-11-02 2019-02-26 Univ Yale compostos de quimera proteólise dirigida e métodos para preparação e uso dos mesmos
IL312367A (en) 2017-01-31 2024-06-01 Arvinas Operations Inc Cereblon ligands and bifunctional compounds comprising the same
CN107698657A (zh) * 2017-09-26 2018-02-16 中国药科大学 基于vhl配体和bet抑制剂诱导bet降解的双功能分子及其制备和应用
US20190300521A1 (en) * 2018-04-01 2019-10-03 Arvinas Operations, Inc. Brm targeting compounds and associated methods of use

Also Published As

Publication number Publication date
EP4537905A3 (en) 2025-06-25
EP3774789A1 (en) 2021-02-17
UA130603C2 (uk) 2026-04-01
LT3774789T (lt) 2025-06-25
JP2025143253A (ja) 2025-10-01
NZ767872A (en) 2024-04-26
KR20210005037A (ko) 2021-01-13
CN112166114B (zh) 2024-11-19
US20240076295A1 (en) 2024-03-07
IL277677A (en) 2020-11-30
CN120504668A (zh) 2025-08-19
CL2020002546A1 (es) 2021-01-29
BR112020020196A2 (pt) 2021-01-26
EP4537905A2 (en) 2025-04-16
HRP20250617T1 (hr) 2025-07-18
JP7721270B2 (ja) 2025-08-12
FI3774789T3 (fi) 2025-06-17
MY198308A (en) 2023-08-22
ES3027032T3 (en) 2025-06-12
AU2019249849A1 (en) 2020-10-01
KR102697733B1 (ko) 2024-08-26
AU2019249849C1 (en) 2022-09-29
KR20240130153A (ko) 2024-08-28
AU2022204042A1 (en) 2022-06-30
PL3774789T3 (pl) 2025-08-18
DK3774789T3 (da) 2025-06-10
PT3774789T (pt) 2025-05-28
US20190300521A1 (en) 2019-10-03
JP2023071767A (ja) 2023-05-23
MX2020010368A (es) 2021-01-08
EP3774789B1 (en) 2025-03-05
WO2019195201A1 (en) 2019-10-10
CR20200527A (es) 2021-04-09
RU2020135754A3 (sr) 2022-05-04
SI3774789T1 (sl) 2025-07-31
AU2024203058A1 (en) 2024-05-30
JP2021520350A (ja) 2021-08-19
PE20212108A1 (es) 2021-11-04
SG11202008898UA (en) 2020-10-29
CA3094305A1 (en) 2019-10-10
CN112166114A (zh) 2021-01-01
MX2024000329A (es) 2024-01-25
AU2019249849B2 (en) 2022-03-17
HUE071391T2 (hu) 2025-08-28
RU2020135754A (ru) 2022-05-04
PH12020500663A1 (en) 2021-06-07
CO2020013762A2 (es) 2021-01-18

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US20240076295A1 (en) Brm targeting compounds and associated methods of use
US20260041671A1 (en) Brm targeting compounds and associated methods of use
US12036209B2 (en) Compounds and methods for the targeted degradation of Interleukin-1 receptor-associated kinase 4 polypeptides
CN114787159B (zh) Brm靶向化合物及相关使用方法
KR102642203B1 (ko) 급속 진행형 섬유육종 폴리펩티드의 표적화 분해를 위한 다중 고리 화합물 및 방법
US11986531B2 (en) Compounds and methods for the targeted degradation of rapidly accelerated fibrosarcoma polypeptides
KR102839545B1 (ko) 급속 진행성 섬유육종 폴리펩티드의 표적화 분해를 위한 화합물 및 방법
WO2017011590A1 (en) Alanine-based modulators of proteolysis and associated methods of use
RU2797832C2 (ru) Соединения, целенаправленно воздействующие на brm, и связанные с ними способы применения
RU2830173C2 (ru) Полициклические соединения и способы целенаправленной деградации полипептидов быстро ускоренной фибросаркомы
RU2782458C2 (ru) Соединения и способы нацеленного расщепления полипептидов быстропрогрессирующей фибросаркомы
HK40037668B (zh) Brm靶向化合物和相关使用方法
HK40037668A (en) Brm targeting compounds and associated methods of use