RS66953B1 - Modulatori transmembranskog regulatora provodljivosti cistične fibroze - Google Patents

Modulatori transmembranskog regulatora provodljivosti cistične fibroze

Info

Publication number
RS66953B1
RS66953B1 RS20250633A RSP20250633A RS66953B1 RS 66953 B1 RS66953 B1 RS 66953B1 RS 20250633 A RS20250633 A RS 20250633A RS P20250633 A RSP20250633 A RS P20250633A RS 66953 B1 RS66953 B1 RS 66953B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
independently selected
compound
optionally substituted
halogen
groups independently
Prior art date
Application number
RS20250633A
Other languages
English (en)
Inventor
Jeremy J Clemens
Brett C Bookser
Thomas Cleveland
Timothy R Coon
Michel Gallant
Peter Grootenhuis
Ruah Sara Sabina Hadida
Julie Laterreur
Vito Melillo
Mark Thomas Miller
Prasuna Paraselli
Yeeman K Ramtohul
Thumkunta Jagadeeswar Reddy
Claudio Sturino
Lino Valdez
Jinglan Zhou
William Schulz Bechara
Minson Baek
Original Assignee
Vertex Pharma
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Vertex Pharma filed Critical Vertex Pharma
Publication of RS66953B1 publication Critical patent/RS66953B1/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/403—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with carbocyclic rings, e.g. carbazole
    • A61K31/404—Indoles, e.g. pindolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/439—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom the ring forming part of a bridged ring system, e.g. quinuclidine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/443—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with oxygen as a ring hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4439—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. omeprazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D498/12—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D498/18—Bridged systems

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Oscillators With Electromechanical Resonators (AREA)
  • Amplifiers (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)

Description

Opis
[0001] Pronalazak se odnosi na modulatore regulatora transmembranske provodljivosti cisti čne fibroze (CFTR), farmaceutske kompozicije koje sadrže modulatore, metode lečenja cistične fibroze i CFTR-posredovanih poremeć aja koriš ć enjem takvih modulatora i farmaceutskih kompozicija, kao i postupke za proizvodnju takvih modulatora.
[0002] Cistična fibroza (CF) je recesivna genetska bolest koja pogađa približno 83.000 dece i odraslih širom sveta. Uprkos napretku u lečenju CF, ne postoji lek.
[0003] Kod pacijenata sa CF, mutacije u CFTR endogeno eksprimirane u respiratornom epitelu dovode do smanjene apikalne sekrecije anjona, što uzrokuje neravnotežu u transportu jona i tečnosti. Rezultujuć e smanjenje transporta anjona doprinosi poveć anoj akumulaciji sluzi u plu ć ima i prate ć im mikrobnim infekcijama koje na kraju uzrokuju smrt kod pacijenata sa CF. Pored respiratornih bolesti, pacijenti sa CF obično pate od gastrointestinalnih problema i pankreasne insuficijencije koji, ako se ne le če, dovode do smrti. Pored toga, već ina muškaraca sa cističnom fibrozom je neplodna, a plodnost je smanjena kod žena sa cističnom fibrozom.
[0004] Analiza sekvence gena CFTR otkrila je razne mutacije koje uzrokuju bolesti (Cutting, G. R. et al.
15 (1990) Nature 346:366-369; Dean, M. et al. (1990) Cell 61:863:870; i Kerem, B-S. et al. (1989) Science 245:1073-1080; Kerem, B-S et al. (1990) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87:8447-8451). Do danas je identifikovano više od 2000 mutacija u genu CF; trenutno, baza podataka CFTR2 sadrži informacije o samo 322 od ovih identifikovanih mutacija, sa dovoljnim dokazima da se 281 mutacija defini še kao mutacija koja uzrokuje bolesti. Najčešć a mutacija koja izaziva bolest je delecija fenilalanina na poziciji 508 aminokiselinske sekvence CFTR i obično se naziva mutacija F508del. Ova mutacija se javlja u mnogim slučajevima cistične fibroze i povezana je sa teškim oblikom bolesti.
[0005] CFTR je cAMP/ATP-posredovan anjonski kanal koji se ekspresuje u različitim tipovima ć elija, uključujuć i apsorptivne i sekretorne epitelne ć elije, gde reguli še anjonski fluks kroz membranu, kao i aktivnost drugih jonskih kanala i proteina. U epitelnim ć elijama, normalno funkcionisanje CFTR je klju čno za održavanje transporta elektrolita kroz telo, uključujuć i respiratorno i digestivno tkivo. CFTR se sastoji od 1480 aminokiselina koje kodiraju protein koji je sastavljen od tandemskog ponavljanja transmembranskih domena, od kojih svaki sadrži šest transmembranskih heliksa i domen za vezivanje nukleotida. Dva transmembranska domena su povezana velikim, polarnim, regulatornim (R)-domenom sa višestrukim mestima fosforilacije koja regulišu aktivnost kanala i ć elijski transport.
[0006] Transport hlorida se odvija koordinisanom aktivnošć u ENaC (epitelni natrijumski kanal) i CFTR prisutnih na apikalnoj membrani i Na+-K+-ATPase pumpe i Cl- kanala eksprimiranih na bazolateralnoj površini ć elije. Sekundarni aktivni transport hlorida sa luminalne strane dovodi do akumulacije intracelularnog hlorida, koji zatim može pasivno napustiti ć eliju preko Cl- kanala, što rezultira vektorskim transportom. Raspored Na+/2Cl-/K+ ko-transportera, Na+-K+-ATPase pumpe i K+ kanala bazolateralne membrane na bazolateralnoj površini i CFTR na luminalnoj strani koordinira sekreciju hlorida. Po što se voda verovatno nikada aktivno ne transportuje sama, njen protok kroz epitel zavisi od malih transepitelnih osmotskih gradijenata generisanih protokom natrijuma i hlorida u već ini.
[0007] Nedavno je identifikovan niz CFTR modulatora. Ovi modulatori se mogu okarakterisati kao, na primer, potenciatori, korektori, pojačivači/ko-potenciatori potenciatora, pojačivači, agensi za čitanje i terapije nukleinskim kiselinama. CFTR modulatori koji poveć avaju aktivnost otvaranja kanala mutantnog i divljeg tipa CFTR na površini epitelnih ć elija poznati su kao potenciatori. Korektori pobolj šavaju neispravnu obradu proteina i rezultujuć i transport do povr šine epitela. Ghelani and Schneider-Futschik (2020) ACS Pharmacol. Transl. Sci. 3:4-10. Postoje tri CFTR korektora koje je odobrila američka FDA za lečenje cistične fibroze. Međutim, monoterapija sa nekim CFTR korektorima nije se pokazala dovoljno efikasnom i kao rezultat toga, potrebna je kombinovana terapija sa potenciatorom da bi se pobolj šala CFTR aktivnost. Trenutno postoji samo jedan CFTR potenciator koji je odobren za le čenje cistične fibroze. Dakle, iako je lečenje cistične fibroze transformisano ovim novim malim molekulskim CFTR modulatorima, potrebni su novi i bolji modulatori kako bi se sprečila progresija bolesti, smanjila težina cistične fibroze i drugih CFTR-posredovanih bolesti i kako bi se lečili teži oblici ovih bolesti.
[0008] Jedan aspekt pronalaska pruža nova jedinjenja, uključuju ć i jedinjenja Formule I, I’, I", I′′′, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf, jedinjenja 1 do 53, jedinjenja 54 do 77, njihove farmaceutski prihvatljive soli i deuterizovane derivate bilo kojeg od navedenih.
[0009] Na primer, jedinjenja Formule I mogu se prikazati kao:
i deuterizovani derivati i njihove farmaceutski prihvatljive soli, pri čemu:
X je izabran iz -O-, -S-, -SO- i -SO2-;
svaki Y je nezavisno izabran iz -C(R<Y>)2-, -O-, -CO- i
Svaki R<Y>je nezavisno izabran iz vodonika, halogena, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz hidroksi i Q), C3-C8cikloalkila, C6-C10arila, 5- do 10-članog heteroarila, -OR<Y1>, -CO2R<Y1>, -COR<Y1>, -CON(R<Y1>)2i -NR<Y1>-; ili dva slučaja R<Y>na istom atomu uzeta zajedno da formiraju prsten izabran iz C3-C8cikloalkila i 3- do 6-članog heterociklila; ili dva slučaja R<Y>, od kojih je jedan na jednom atomu, a drugi na susednom atomu, uzeta zajedno da formiraju pi vezu;
svaki R<Y1>je nezavisno izabran iz vodonika i C1-C6alkila, ili dva slučaja R<Y1>vezana za isti azot uzeta zajedno da formiraju 3- do 6-člani heterociklil;
Prsten B je izabran iz:
▪ C6-C10arila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena, C1-C6alkila i C1-C6alkoksi grupe),
▪ C8-C8cikloalkila,
▪ 5- do 10-članog heteroarila, i
▪ 3- do 6-članog heterociklila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz C1-C6alkila);
Svaki Q je nezavisno izabran iz:
▪ C1-C6alkila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ halogena,
∘ okso,
∘ C6-C10arila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena i -OCF3), i
∘ C3-C8cikloalkila,
▪ C3-C8cikloalkila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ halogena,
∘ CN,
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena, -NH2i -NHCOMe), ∘ C1-C6alkoksija,
∘ C6-C10arila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz C1-C6alkila), i
∘ C3-C8cikloalkila,
▪ C6-C10arila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ halogena,
∘ CN,
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena i hidroksi),
∘ C1-C6alkoksija opciono supstituisanog sa 1-4 grupe nezavisno izabrane iz:
▪ halogena,
▪ C3-C8cikloalkila (opciono supstituisanog sa CF3),
∘ C3-C8cikloalkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena, CF3, OCF3i C1-C6alkila), i
∘ C6-C10arila,
▪ 5- do 10-člani heteroarila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ halogena,
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena),
∘ C3-C8cikloalkila (opciono supstituisanog sa 1-3 CF3grupe), i
∘ 3- do 10-članog heterociklila,
▪ 3- do 10-članog heterociklila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od:
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od okso i C3-C8cikloalkila), i ∘ okso;
svaki R<1>je nezavisno izabran iz halogena, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno izabranih od halogena i hidroksi), -OR<2>, -N(R<2>)2, -CO2R<2>, -CO-N(R<2>)2, -CN, fenila, benzila, C1-C6alkoksija, C3-C8cikloalkila, 5- do 6-članog heteroarila, 3- do 6-članog heterociklila, -SO2R<2>, -SR<2>, -SOR<2>, -PO(OR<2>)2i -PO(R<2>)2;
Svaki R<2>je nezavisno izabran iz vodonika, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena) i C6-C10arila (opciono supstituisanog sa C1-C6alkoksija, koji je opciono supstituisan sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena);
Z je izabran iz
pri čemu je prsten C izabran iz C6-C10arila i 5- do 10-članog heteroarila;
R<Z1>je izabran iz vodonika, -CN, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena ili 1-3 hidroksi), 3- do 6-članog heterociklila, 3- do 6-članog cikloalkila, 5- do 6-članog arila i 5- do 6-članog heteroarila;
R<Z2>je izabran iz vodonika, halogena i hidroksi, ili R<Z1>i R<Z2>zajedno čine grupu izabranu iz okso i =N-OH;
svaki R<Z3>je nezavisno izabran iz hidroksi, C1-C6alkoksi, C1-C6alkila, C1-C6haloalkila i C6-C10arila; ili dva primera R<Z3>su uzeta zajedno da bi se formirao 3- do 6-člani heterociklil;
n je izabran od 4, 5, 6, 7 i 8; i
m je izabran od 0, 1, 2 i 3.
[0010] U nekim realizacijama, X je -O-.
[0011] U nekim realizacijama, svaki R<Y>je nezavisno izabran iz vodonika, halogena, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz hidroksi i Q), C3-C8cikloalkila i -OR<Y1>, pri čemu su Q i R<Y1>kao što je napred definisano. U nekim realizacijama, -OR<Y1>je -OH.
[0012] U nekim realizacijama, svaki Q je nezavisno izabran iz C3-C8cikloalkila i C6-C10arila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena i C1-C6alkila. U nekim realizacijama, svaki Q je nezavisno izabran od
[0013] U nekim realizacijama, svaki R<Y>je nezavisno izabran iz: vodonika, fluora,
[0014] U nekim realizacijama, Prsten B je izabran iz C3-C8cikloalkila i fenila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena. U nekim realizacijama, Prsten B je izabran iz:
[0015] U nekim realizacijama, n je izabrano iz 4, 5 i 6.
[0016] U nekim realizacijama, -(Y)n- je grupa izabrana iz:
[0017] U nekim realizacijama, svaki R<1>je nezavisno izabran iz C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena i hidroksi), -N(R<2>)2i -CO2R<2>, pri čemu je R<2>kao što je napred definisano. U nekim realizacijama, svaki R<1>je nezavisno izabran iz -CF3, -NH2, -NH(CH2CH3), CO2H i CH2OH.
[0018] U nekim realizacijama, svaki R<2>je nezavisno izabran iz vodonika i C1-C6alkila.
[0019] U nekim realizacijama, Z je izabran iz
pri čemu su R<Z1>, R<Z2>i prsten C kao što je napred definisano. U nekim realizacijama, Z je
pri čemu su R<Z1>, R<Z2>kao što je napred definisano. U nekim realizacijama, Z je
gde su R<Z1>, R<Z2>kao što je napred definisano. U nekim realizacijama, Z je
pri čemu su R<Z1>, R<Z2>kao što je napred definisano. U nekim realizacijama, Z je
pri čemu su R<Z1>, R<Z2>kao što je napred definisano, i gde se (R) odnosi na stereohemijsku oznaku centralnog atoma ugljenika prema Kan-Ingold-Prelog konvenciji. U nekim realizacijama, Z je
pri čemu RZ1 i RZ2 kao što je napred definisano, i gde se (S) odnosi na stereohemijsku oznaku centralnog atoma ugljenika prema Kan-Ingold-Prelog konvenciji.
[0020] U nekim realizacijama, grupa
je odabrana od
[0021] U nekim realizacijama, grupa:
je odabrana od
[0022] U nekim realizacijama R<Z1>je izabran iz vodonika i C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe izabrane iz halogena). U nekim realizacijama, R<Z1>je izabran iz vodonika i -CF3. U nekim realizacijama, R<Z1>je -CF3.
[0023] U nekim realizacijama, R<Z2>je hidroksi.
[0024] U nekim realizacijama, Z je izabran iz:
u nekim realizacijama Z je
u nekim realizacijama Z je
u nekim realizacijama Z je
u nekim realizacijama Z je
[0025] U nekim realizacijama, m je izabran od 1 i 2.
[0026] U nekim realizacijama, jedinjenja pronalaska su obuhva ć ena Formulom I’
i deuterizovani derivati i njihove farmaceutski prihvatljive soli,
pri čemu X je -O-;
Svaki Y je nezavisno izabran iz -C(R<Y>)2-, -O- i
Svaki R<Y>je nezavisno izabran iz vodonika i C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz hidroksi i Q);
Prsten B je izabran iz C3-C8cikloalkil grupe:
svaki Q je nezavisno izabran iz C3-C8cikloalkila i C6-C10arila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena i C1-C6alkila,
svaki R<1>je nezavisno izabran iz C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena) i -NH2;
Z je
R<Z1>je izabran iz C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena);
R<Z2>je hidroksi;
n je izabrano iz 5 i 6; i
m je 2.
[0027] U nekim realizacijama, svaki Q Formule I’ je nezavisno izabran iz:
[0028] U nekim realizacijama, svaki R<Y>formule I’ je nezavisno izabran iz: vodonika,
[0029] U nekim realizacijama, prsten B Formule I’ je
[0030] U nekim realizacijama, -(Y)n- Formule I’ je grupa izabrana iz:
[0031] U nekim realizacijama, R<Z1>u Formuli I’ je -CF3.
[0032] U nekim realizacijama, Z u Formuli I’ je
U nekim realizacijama, Z u Formuli I’ je
[0033] U nekim realizacijama, n u Formuli I’ je 5. U nekim realizacijama, n u Formuli I’ je 6.
[0034] U nekim realizacijama, jedinjenja pronalaska su obuhva ć ena Formulom I":
i deuterizovani derivati i njihove farmaceutski prihvatljive soli, pri čemu
X je izabran iz -O-, -S-, -SO- i -SO2-;
svaki Y je nezavisno izabran iz -C(R<Y>)2-, -O-, -CO- i
Svaki R<Y>je nezavisno izabran iz vodonika, halogena, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz hidroksi i Q), C6-C10arila, 5- do 10-članog heteroarila, -OR<Y1>, -CO2R<Y1>, -COR<Y1>, -CON(R<Y1>)2i -NR<Y1>-; ili dva slučaja R<Y>na istom atomu uzeta zajedno da formiraju prsten izabran iz C3-C8cikloalkila i 3- do 6-članog heterociklila; ili dva slučaja R<Y>, od kojih je jedan na jednom atomu, a drugi na susednom atomu, uzeta zajedno da formiraju pi vezu;
svaki R<Y>je nezavisno izabran iz vodonika, halogena, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz hidroksi i Q), C6-C10arila, 5- do 10-članog heteroarila, -OR<Y1>, -CO2R<Y1>, -COR<Y1>, -CON(R<Y1>)2i -NR<Y1>-; ili dva slučaja R<Y>, od kojih je jedan na jednom atomu, a drugi na susednom atomu, uzeta zajedno formiraju pi vezu;
svaki R<Y1>je nezavisno izabran iz vodonika i C1-C6alkila, ili dva slučaja R<Y1>vezana za isti azot zajedno formiraju 3- do 6-člani heterociklil;
Prsten B je izabran iz:
▪ C6-C10arila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena, C1-C6alkila i C1-C6alkoksija),
▪ C3-C8cikloalkila,
▪ 5- do 10-članog heteroarila, i
▪ 3- do 6-članog heterociklila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno odabrane od C1-C6alkila);
Svaki Q je nezavisno izabran iz:
▪ C1-C6alkila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ halogena,
∘ okso,
∘ C6-C10arila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena i -OCF3), i
∘ C3-C8cikloalkila,
▪ C3-C8cikloalkila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ halogena,
∘ CN,
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena, -NH2i -NHCOMe), ∘ C1-C6alkoksija,
∘ C6-C10arila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz C1-C6alkila), i
∘ C3-C8cikloalkila,
▪ C6-C10aril opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od:
∘ halogena,
∘ CN,
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od halogena i hidroksi),
∘ C1-C6alkoksija opciono supstituisanog sa 1-4 grupe nezavisno izabrane od:
▪ halogena,
▪ C3-C8cikloalkil (opciono supstituisanog sa CF3),
∘ C3-C8cikloalkil (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od halogena, CF3, OCF3i C1-C6alkila), i
∘ C6-C10arila,
▪ 5- do 10-članog heteroarila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od:
∘ halogena,
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od halogena),
∘ C3-C8cikloalkila (opciono supstituisanog sa 1-3 CF3grupe), i
∘ 3- do 10-članog heterociklila,
▪ 3- do 10-članog heterociklila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od:
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od okso i C3-C8cikloalkila), i ∘ okso;
svaki R<1>je nezavisno izabran iz halogena, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno izabranih od halogena), -OR<2>, -N(R<2>)2, -CO2R<2>, -CO-N(R<2>)2, -CN, fenila, benzila, C1-C6alkoksija, C1-C6alkila, C3-C8cikloalkila, 5- do 6-člani heteroarila, 3- do 6-člani heterociklila, -SO2R<2>, -SR<2>, -SOR2, -PO(OR<2>)2i
-PO(R<2>)2;
svaki R<2>je nezavisno izabran iz vodonika, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena) i C6-C10arila (opciono supstituisanog sa C1-C6alkoksijem, koji je opciono supstituisan sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena);
Z je izabran iz
R<Z1>je izabran iz vodonika, -CN, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena ili 1-3 hidroksi), 3- do 6-članog heterociklila, 3- do 6-članog cikloalkila, 5- do 6-članog arila i 5- do 6-članog heteroarila;
R<Z2>je izabran iz vodonika, halogena i hidroksi, ili R<Z1>i R<Z2>su uzeti zajedno da formiraju grupu izabranu iz okso i =N-OH;
svaki R<Z3>je nezavisno izabran iz hidroksi, C1-C6alkoksija, C1-C6alkila i C6-C10arila; ili dva slučaja R<Z3>su uzeta zajedno da bi se formirao 3- do 6-člani heterociklil;
n je izabrano od 4, 5, 6 i 7; i
m je izabrano od 0, 1, 2 i 3.
[0035] U nekim realizacijama, X u Formuli I" je -O-.
[0036] U nekim realizacijama, svaki Y u Formuli I" je nezavisno izabran od -C(R<Y>)2-, -CO-, i
pri čemu su R<Y>i prsten B kao što je definisano za Formulu I".
[0037] U nekim realizacijama, svaki Y u Formuli I" je -C(R<Y>)2-, pri čemu je R<Y>kao što je definisano za Formulu I".
[0038] U nekim realizacijama, svaki R<Y>u Formuli I" je nezavisno izabran iz vodonika, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz hidroksi i Q), i -OR<Y1>, pri čemu su R<Y1>i Q kao što su definisani za Formulu I".
[0039] U nekim realizacijama, svaki R<Y>u Formuli I" je nezavisno izabran iz:
vodonika,
pri čemu je Q kao što je definisano za Formulu I".
[0040] U nekim realizacijama, svaki Q u Formuli I" je nezavisno izabran iz:
▪ C3-C8cikloalkila,
▪ C6-C10arila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena i C1-C6alkila.
[0041] U nekim realizacijama, svaki Q u Formuli I" je nezavisno izabran iz:
[0042] U nekim realizacijama, prsten B u Formuli I" je izabran iz C6-C10arila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena.
[0043] U nekim realizacijama, prsten B u Formuli I" je izabran iz:
[0044] U nekim realizacijama, -(Y)n- u Formuli I" je grupa izabrana iz:
Ċ
i
[0045] U nekim realizacijama, svaki R<1>u Formuli je nezavisno izabran iz C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena) i -N(R<2>)2, pri čemu je R<2>kao što je definisano za Formulu I". U nekim realizacijama, svaki R<1>u Formuli I" je nezavisno izabran iz -CF3i -N(R<2>)2, pri čemu je R<2>kao što je definisano za Formulu I".
[0046] U nekim realizacijama, svaki R<2>u Formuli I" je nezavisno izabran iz vodonika, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena) i C6-C10arila (opciono supstituisanog sa C1-C6alkoksijem opciono supstituisanim sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena). U nekim realizacijama, svaki R<2>u Formuli I" je nezavisno izabran iz vodonika i C1-C6alkila. U nekim realizacijama, svaki R<2>u Formuli I" je vodonik.
[0047] U nekim realizacijama, Z u Formuli I" je
pri čemu su su R<Z1>i R<Z2>kao što su definisani za Formulu I".
U nekim realizacijama, Z u Formuli I" je
pri čemu su R<Z1>i R<Z2>kao što su definisani za Formulu I".
U nekim realizacijama, Z u Formuli I" je
[0048] U nekim realizacijama, R<Z1>u Formuli I" je izabran iz C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe izabrane iz halogena). U nekim realizacijama, R<Z1>u Formuli I" je -CF3.
[0049] U nekim realizacijama, R<Z2>u Formuli I" je hidroksi.
[0050] U nekim realizacijama, n u Formuli I, I’ i/ili I" je izabrano od 4, 5 i 6. U nekim realizacijama, n u Formuli I, I’ i/ili I" je 5. U nekim realizacijama, n u Formuli I, I’ i/ili I" je 6.
[0051] U nekim realizacijama, m u Formuli I, I’ i/ili I" je izabrano od 1 i 2. U nekim realizacijama, m u Formuli I, I’ i/ili I" je 1. U nekim realizacijama , m u Formuli I, I’ i/ili I" je 2.
[0052] Još jedan aspekt pronalaska obezbeđuje farmaceutske kompozicije koje sadrže najmanje jedno jedinjenje izabrano iz novih jedinjenja ovde opisanih, njihove farmaceutski prihvatljive soli i deuterizovane derivate bilo kog od napred navedenih, i najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv nosa č, koje kompozicije mogu dalje da sadrže najmanje jedan dodatni aktivni farmaceutski sastojak. Dakle, drugi aspekt pronalaska pruža metode lečenja cistične fibroze posredovane CFTR-om, koje obuhvataju primenu najmanje jednog jedinjenja izabranog iz novih jedinjenja opisanih ovde, njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata bilo kog od napred navedenih, i najmanje jednog farmaceutski prihvatljivog nosača, opciono kao dela farmaceutske kompozicije koja sadrži najmanje jednu dodatnu komponentu, subjektu kome je to potrebno.
[0053] U određenim realizacijama, farmaceutske kompozicije pronalaska sadrže najmanje jedno jedinjenje izabrano iz jedinjenja formula I, I’, I", I′′, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf, jedinjenja 1 do 53, jedinjenja 54 do 77 i njihove farmaceutski prihvatljive soli i deuterizovane derivate. U nekim realizacijama, kompozicije koje sadr že najmanje jedno jedinjenje izabrano iz jedinjenja formula I, I’, I", I′′, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf , jedinjenja 1 do 53, jedinjenja 54 do 77 i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata mogu opciono dalje da sadrže najmanje jedno jedinjenje izabrano iz jedinjenja II, jedinjenja IV, jedinjenja V, jedinjenja VI, jedinjenja VII, jedinjenja VIII, jedinjenja IX, jedinjenja X i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata.
[0054] Još jedan aspekt pronalaska pruža metode lečenja cistične fibroze posredovane CFTR-om, koje obuhvataju davanje pacijentu kome je to potrebno najmanje jednog jedinjenja izabranog iz novih jedinjenja opisanih ovde, njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata bilo kojeg od napred navedenih, i opciono dalje davanje jednog ili vi še dodatnih CFTR modulirajuć ih sredstava izabranih iz (R)-1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)-N-(1-(2,3-dihidroksipropil)-6-fluoro-2-(1-hidroksi-2-metilpropan-2-il)-1H-indol-5-il)ciklopropankarboksamida (Jedinjenje II), N-[2,4-bis(1,1-dimetiletil)-5-hidroksifenil]-1,4-dihidro-4-oksohinolin-3-karboksamida (Jedinjenje III) ili N-(2-(terc-butil)-5-hidroksi-4-(2-(metil-d3)propan-2-il-1,1,1,3,3,3-d6)fenil)-4-okso-1,4-dihidrohinolin-3-karboksamida (Jedinjenje III-d), 3-(6-(1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)ciklopropan karboksamido)-3-metilpiridin-2-il)benzojeve kiseline (Jedinjenje IV), N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi) pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamida (Jedinjenje V), N-(benzensulfonil)-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamida (Jedinjenje VI), (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-triona (Jedinjenje VII), (11R)-6-(2,6-dimetilfenil)-11-(2-metilpropil)-12-{spiro[2.3]heksan-5-il}-9-oksa-2l6-tia-3,5,12,19-tetra-azatriciklo[12.3.1.14,8]nonadeka-1(17),4(19),5,7,14(18),15-heksaen-2,2,13-triona (Jedinjenje VIII); N-(benzensulfonil)-6-(3-fluoro-5-izobutoksi-fenil)-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamida (Jedinjenje IX) i N-[(6-amino-2-piridil)sulfonil]-6-(3-fluoro-5-izobutoksi-fenil)-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamida (Jedinjenje X).
[0055] Još jedan aspekt pronalaska pruža metode lečenja cistične fibroze posredovane CFTR-om, koje obuhvataju davanje pacijentu kome je to potrebno najmanje jednog jedinjenja izabranog iz novih jedinjenja opisanih ovde, njihove farmaceutski prihvatljive soli i deuterizovanih derivata bilo kojeg od navedenih, i opciono dodatno davanje jednog ili vi še dodatnih CFTR modulirajuć ih sredstava izabranih od:
objavljeno u časopisu Journal of Cystic Fibrosis (2018), 17(5), 595-606 i:
objavljeno u WO 2016/105485. U jednoj realizaciji, dodatni agens za modulaciju CFTR-a je ASP-11. U jednoj realizaciji, dodatni agens za modulaciju CFTR-a je PTI-428.
[0056] Još jedan aspekt pronalaska pruža metode lečenja cistične fibroze posredovane CFTR-om, koje obuhvataju davanje pacijentu kome je to potrebno najmanje jednog jedinjenja izabranog iz novih jedinjenja objavljenih ovde, njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata bilo kojeg od navedenih, i opciono dalje davanje jednog ili vi še dodatnih agensa za modulaciju CFTR-a izabranih iz:
objavljeno u US 2016-0120841;
objavljeno u WO 2018/065921;
objavljeno u WO 2017/062581; ABBV-2851, objavljeno u WO 2017/009804; GLPG2737, objavljeno u US 2017-0101405; ABBV-3748; ABBV-3903; i ABBV-119.
[0057] Još jedan aspekt pronalaska opisuje jedinjenja formula I, I’, I", I′′′, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf, jedinjenja 1 do 53, jedinjenja 54 do 77, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i deuterizovane derivate, za upotrebu u bilo kojoj od ovde opisanih metoda.
Kratak opis slika
[0058]
Slika 1 prikazuje difraktogram snage X-zraka (XRPD) heptanskog solvata Jedinjenja 11.
Slika 2 prikazuje preklapanje difrakcijskih dijagrama snage X-zraka (XRPD) heptanskog solvata Jedinjenja 11 pripremljenog pod tri različita uslova sušenja.
Slika 3 prikazuje DSC analizu heptanskog solvata Jedinjenja 11.
Slika 4 prikazuje<13>C NMR spektar čvrstog stanja heptanskog solvata Jedinjenja 11.
Slika 5 prikazuje<19>F NMR spektar čvrstog stanja heptanskog solvata Jedinjenja 11.
Slika 6A prikazuje krivu termogravimetrijske analize (TGA) za heptanski solvat Jedinjenja 11 (Uslovi sušenja 1).
Slika 6B prikazuje krivu termogravimetrijske analize (TGA) za heptanski solvat Jedinjenja 11 (Uslovi sušenja 2).
Slika 6C prikazuje krivu termogravimetrijske analize (TGA) za heptanski solvat Jedinjenja 11 (Uslovi sušenja 3).
Definicije
[0059] WO2013/038386 se odnosi na derivate piridin-oksadiazola/tiadiazola.
[0060] „Jedinjenje II“, kako se ovde koristi, odnosi se na (R)-1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)-N-(1-(2,3-dihidroksipropil)-6-fluoro-2-(1-hidroksi-2-metilpropan-2-il)-1H-indol-5-il)ciklopropankarboksamid, koji se može prikazati sledeć om strukturom:
Jedinjenje II može biti u obliku farmaceutski prihvatljive soli. Jedinjenje II i postupci za proizvodnju i upotrebu jedinjenja II su objavljeni u WO 2010/053471, WO 2011/119984, WO 2011/133751, WO 2011/133951 i WO 2015/160787.
[0061] „Jedinjenje III“, kako se koristi u ovom pronalasku, odnosi se na N-(5-hidroksi-2,4-di-terc-butilfenil)-4-okso-1H-hinolin-3-karboksamid koji je prikazan strukturom:
Jedinjenje III može takođe biti u obliku farmaceutski prihvatljive soli. Jedinjenje III i postupci za proizvodnju i upotrebu Jedinjenja III su objavljeni u WO 2006/002421, WO 2007/079139, WO 2010/108162 i WO 2010/019239.
[0062] U nekim realizacijama, deuterizovani derivat Jedinjenja III (Jedinjenje III-d) se koristi u kompozicijama i postupcima koji su ovde objavljeni. Hemijski naziv za Jedinjenje III-d je N-(2-(tert-butil)-5-hidroksi-4-(2-(metil-d3) propan-2-il-1,1,1,3,3,3-d6)fenil)-4-okso-1,4-dihidrohinolin-3-karboksamid, kao što je prikazano strukturom:
Jedinjenje III-d može biti u obliku farmaceutski prihvatljive soli. Jedinjenje III-d i postupci za njegovo pravljenje i upotrebu jedinjenja III-d su objavljeni u WO 2012/158885, WO 2014/078842 i US br.
8,865,902.
[0063] „Jedinjenje IV“, kako se ovde koristi, odnosi se na 3-(6-(1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)ciklopropankarboksamido)-3-metilpiridin-2-il)benzojevu kiselinu, koja je prikazana hemijskom strukturom:
Jedinjenje IV može biti u obliku farmaceutski prihvatljive soli. Jedinjenje IV i postupci za proizvodnju i upotrebu jedinjenja IV su opisani u WO 2007/056341, WO 2009/073757 i WO 2009/076142.
[0064] „Jedinjenje V“, kako se ovde koristi, odnosi se na N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid, koji je prikazan hemijskom strukturom:
Jedinjenje V može biti u obliku farmaceutski prihvatljive soli. Jedinjenje V i postupci za proizvodnju i upotrebu jedinjenja V su objavljeni u WO 2018/107100 i WO 2019/113476.
[0065] „Jedinjenje VI“, kako se ovde koristi, odnosi se na N-(benzensulfonil)-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid, koji je prikazan hemijskom strukturom:
Jedinjenje VI može biti u obliku farmaceutski prihvatljive soli. Jedinjenje VI i postupci za njegovo pravljenje i upotrebu Jedinjenja VI su opisani u WO 2018/064632.
[0066] „Jedinjenje VII“, kako se ovde koristi, odnosi se na (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23 pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion, koji je prikazan hemijskom strukturom:
Jedinjenje VII može biti u obliku farmaceutski prihvatljive soli. Jedinjenje VII i postupci za proizvodnju i upotrebu Jedinjenje VII su objavljeni u WO 2019/152940 i US br. 62/886,660.
[0067] „Jedinjenje VIII“, kako se ovde koristi, odnosi se na (11R)-6-(2,6-dimetilfenil)-11-(2-metilpropil)-12-{spiro[2.3]heksan-5-il}-9-oksa-2λ<6>-tia-3,5,12,19-tetraazatriciklo[12.3.1.14,8]nonadeka-1(17),4(19),5, 7,14(18),15-heksaen-2,2,13-trion, koji je prikazan hemijskom strukturom:
Jedinjenje VIII može biti u obliku farmaceutski prihvatljive soli. Jedinjenje VIII i postupci za proizvodnju i upotrebu Jedinjenja VIII su objavljeni u PCT/US2020/026331.
[0068] „Jedinjenje IX“, kako se ovde koristi, odnosi se na N-(benzensulfonil)-6-(3-fluoro-5-izobutoksifenil)-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid, koji je prikazan hemijskom strukturom:
Jedinjenje IX može biti u obliku farmaceutski prihvatljive soli. Jedinjenje IX i postupci za proizvodnju i upotrebu Jedinjenja IX su objavljeni u WO 2016/057572.
[0069] „Jedinjenje X“, kako se ovde koristi, odnosi se na N-[(6-amino-2-piridil)sulfonil]-6-(3-fluoro-5-izobutoksi-fenil)-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid, koji je prikazan hemijskom strukturom:
Jedinjenje X može biti u obliku farmaceutski prihvatljive soli. Jedinjenje X i postupci za proizvodnju i upotrebu Jedinjenja X su objavljeni u WO 2016/057572.
[0070] Kako se ovde koristi, termin „alkil“ se odnosi na zasić eni, razgranati ili nerazgranati alifati čni ugljovodonik koji sadrži atome ugljenika (kao što su, na primer, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 ili 20 atoma ugljenika). Alkil grupe mogu biti supstituisane ili nesupstituisane.
[0071] Kako se ovde koristi, termin „pi veza“ se odnosi na kovalentnu vezu formiranu p orbitalama susednih atoma. Pi veze postoje tamo gde postoji višestruka veza, tj. dvostruka ili trostruka veza, između dva atoma. Na primer, dvostruka veza ugljenik-ugljenik se sastoji od jedne pi veze, a trostruka veza ugljenik-ugljenik se sastoji od dve pi veze.
[0072] Kako se ovde koristi, termin „haloalkil grupa“ se odnosi na alkil grupu supstituisanu jednim ili vi še atoma halogena.
[0073] Termin „alkoksi“, kako se ovde koristi, odnosi se na alkil ili cikloalkil kovalentno vezan za atom kiseonika. Alkoksi grupe mogu biti supstituisane ili nesupstituisane.
[0074] Kako se ovde koristi, termin „haloalkoksi grupa“ odnosi se na alkoksi grupu supstituisanu sa jednim ili aroma više halogena.
[0075] Kako se ovde koristi, „cikloalkil“ se odnosi na ciklične, biciklične, triciklične ili policiklične nearomatične ugljovodonične grupe koje imaju 3 do 12 ugljenika (kao što su, na primer, 3-10 ugljenika). „Cikloalkil“ grupe obuhvataju monociklične, biciklične, triciklične, premošć ene, kondenzovane i spiro prstenove, uključujuć i mono spiro i dispiro prstenove. Neograničavaju ć i primeri cikloalkil grupa su ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil, adamantil, norbornil i dispiro[2.0.2.1]heptan. Cikloalkil grupe mogu biti supstituisane ili nesupstituisane.
[0076] Termin „heteroaril prsten“, kako se ovde koristi, odnosi se na aromatični prsten koji sadrži najmanje jedan atom prstena koji je heteroatom, kao što su O, N ili S.
[0077] Kako se ovde koriste, termini „heterociklil prsten“ i „heterociklil“ odnose se na nearomati čni ugljovodonik koji sadrži 3 do 12 atoma u prstenu (kao što su, na primer, 3-10 atoma) koji sadrži najmanje jedan atom prstena koji je heteroatom, kao što su O, N, S ili Si. „Heterociklil“ prstenovi obuhvataju monociklične, biciklične, triciklične, policiklične, premošć ene, kondenzovane i spiro prstenove, uključujuć i monospiro i dispiro prstenove.
[0078] „Supstituisan“ označava da je najmanje jedan vodonik „supstituisane“ grupe zamenjen supstituentom. Osim ako nije drugačije naznačeno, „opciono supstituisana“ grupa može imati odgovarajuć i supstituent na svakoj supstitubilnoj poziciji grupe, a kada vi še od jedne pozicije u bilo kojoj datoj strukturi može biti supstituisano sa više od jednog supstituenta izabranog iz određene grupe, supstituent može biti isti ili različit na svakoj poziciji.
[0079] Primeri zaštitnih grupa za azot uključuju, na primer, t-butil karbamat (Boc), benzil (Bn), parametoksibenzil (PMB), tetrahidropiranil (THP), 9-fluorenilmetil karbamat (Fmoc), benzil karbamat (Cbz), metil karbamat, etil karbamat, 2,2,2-trihloroetil karbamat (Troc), 2-trimetilsililetil karbamat (Teoc), alil karbamat (Aloc ili Alloc), formamid, acetamid, benzamid, alilamin, trifluoroacetamid, trifenilmetilamin, benzilidenamin i p-toluensulfonamid. Sveobuhvatna lista za štitnih grupa azota može se na ć i u knjizi Wuts, P. G. M. "Greene’s Protective Groups in Organic Synthesis: Fifth Edition," 2014, John Wiley and Sons.
[0080] Kako se ovde koristi, „deuterizovani derivat(i)“ označava istu hemijsku strukturu, sa jednim ili više atoma vodonika zamenjenih atomom deuterijuma. U nekim realizacijama, deuterizovani derivati su jedinjenja gde je jedan ili više atoma vodonika alkil grupe zamenjen atomom deuterijuma.
[0081] Kako se ovde koristi, „CFTR“ označava regulator transmembranske provodljivosti cistične fibroze.
[0082] Kako se ovde koristi, termin „CFTR modulator“ odnosi se na jedinjenje koje poveć ava aktivnost CFTR-a. Poveć anje aktivnosti koje proizilazi iz CFTR modulatora uključuje, ali nije ograničeno na jedinjenja koja koriguju, potenciraju, stabilizuju i/ili pojačavaju CFTR.
[0083] Kako se ovde koristi, termin „CFTR korektor“ odnosi se na jedinjenje koje olak šava obradu i transport CFTR-a kako bi se poveć ala količina CFTR-a na površini ć elije.
[0084] Kako se ovde koristi, termin „CFTR potenciator“ odnosi se na jedinjenje koje poveć ava aktivnost kanala CFTR proteina koji se nalazi na površini ć elije, što rezultira poboljšanim transportom jona. Nova jedinjenja opisana ovde su CFTR potenciatori.
[0085] Kako se ovde koristi, termini „CFTR pojačivač potenciatora“, „CFTR pojačivač potenciacije“ i „CFTR ko-potenciator“ koriste se naizmenično i odnose se na jedinjenje koje pojačava CFTR potenciaciju.
[0086] Kako se ovde koristi, termin „aktivni farmaceutski sastojak“ („API“) ili „terapeutsko sredstvo“ odnosi se na biološki aktivno jedinjenje.
[0087] Kako se ovde koristi, termin „jedan ili više dodatnih terapeutskih sredstava sadrži“ uključuje moguć nost da postoji samo jedno terapeutsko sredstvo.
[0088] Termini „pacijent“ i „subjekat“ koriste se naizmenično i odnose se na životinju, uključujuć i i ljude.
[0089] Termini „efikasna doza“ i „efikasna količina“ koriste se ovde naizmenično i odnose se na onu količinu jedinjenja koja proizvodi željeni efekat zbog kojeg se primenjuje (npr. poboljšanje CF ili simptoma CF, ili smanjenje težine CF ili simptoma CF). Tačna količina efikasne doze zavisić e od svrhe lečenja i moć i ć e da je utvrdi stručnjak u ovoj oblasti koriste ć i poznate tehnike (videti, npr., Lloyd (1999) The Art, Science and Technology of Pharmaceutical Compounding).
[0090] Kako se ovde koriste, termini „lečenje“, „lečenje“ i slično generalno znače poboljšanje jednog ili više simptoma CF ili smanjenje težine CF ili jednog ili više simptoma CF kod subjekta. „Lečenje“, kako se ovde koristi, obuhvata, ali nije ograničeno na, sledeć e: pove ć an rast subjekta, pove ć ano pove ć anje telesne težine, smanjenje sluzi u pluć ima, poboljšanu funkciju pankreasa i/ili jetre, smanjenje infekcija grudnog koša i/ili smanjenje kašlja ili kratkog daha. Poboljšanja ili smanjenje težine Bilo koji od ovih simptoma može se lako proceniti prema standardnim metodama i tehnikama poznatim u struci.
[0091] Kako se ovde koristi, termin „u kombinaciji sa“, kada se odnosi na dva ili vi še jedinjenja, agenasa ili dodatnih aktivnih farmaceutskih sastojaka, označava davanje dva ili više jedinjenja, agenasa ili aktivnih farmaceutskih sastojaka pacijentu pre, istovremeno sa ili jedno nakon drugog.
[0092] Termini „oko“ i „približno“, kada se koriste u vezi sa dozama, količinama ili težinskim procentima sastojaka kompozicije ili doznog oblika, uključuju vrednost određene doze, količine ili težinskog procenta ili opseg doze, količine ili težinskog procenta koji je prepoznat od strane stručnjaka u struci da bi se obezbedio farmakološki efekat ekvivalentan onom dobijenom od navedene doze, količine ili težinskog procenta. Termini „oko“ i „približno“ mogu se odnositi na prihvatljivu grešku za određenu vrednost koju odredi stručnjak u ovoj oblasti, što delimično zavisi od toga kako se vrednosti mere ili određuju. U nekim implementacijama, termini „oko“ i „približno“ znače unutar 20%, 15%, 10%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1% ili 0,5% date vrednosti ili opsega. Kako se ovde koristi, simbol „~“ koji se pojavljuje neposredno ispred numeričke vrednosti ima isto značenje kao termini „oko“ i „približno“.
[0093] Kako se ovde koristi, termin „rastvarat“ se odnosi na bilo koju tečnost u kojoj je proizvod bar delimično rastvorljiv (rastvorljivost proizvoda >1 g/L).
[0094] Kako se ovde koristi, termin „sobna temperatura“ ili „temperatura okoline“ znači od 15 °C do 30 °C.
[0095] Bić e cenjeno da određena jedinjenja ovog pronalaska mogu postojati kao odvojeni stereoizomeri ili enantiomeri i/ili smeše tih stereoizomera ili enantiomera. Kako se koristi u hemijskim strukturama opianim ovde, „klinasta“ ili „tačkasta“ veza sa stereogenim atomom označava hiralni centar
poznate apsolutne stereohemije (tj. jedan stereoizomer). Kako se koristi u hemijskim strukturama otkrivenim ovde, „talasasta“ veza sa stereogenim atomom označava hiralni centar nepoznate
apsolutne stereohemije (tj. jedan stereoizomer). Kako se koristi u hemijskim strukturama otkrivenim ovde, „talasasta“ veza sa dvostruko vezanim ugljenikom označava smešu E/Z izomera. Kako se
koristi u hemijskim strukturama otkrivenim ovde, („prava“) veza sa stereogenim atomom označava
mesto gde postoji smeša (npr. racemat ili obogać enje). Kako se ovde koristi, dve („prave“) veze sa dvostruko vezanim ugljenikom ukazuju na to da dvostruka veza poseduje E/Z stereohemiju kao što je nacrtano. Kako se koristi u hemijskim strukturama ovde otkrivenim, („talasovita“ linija
normalna na „pravu“ vezu sa grupom „A“) označava da je grupa „A“ supstituent čija se tačka vezivanja nalazi na kraju veze koja se završava na „talasastoj“ liniji. Kako se ovde koristi, stereogeni atom koji je označen sa (R) ili (S) označava stereohemijsku oznaku stereogenog atoma prema Kan-Ingold-Prelogovoj konvenciji.
[0096] Određena jedinjenja opisana ovde mogu postojati kao tautomeri i namenjena su oba tautomerna oblika, iako je prikazana samo jedna tautomerna struktura. Na primer, opis Jedinjenja A podrazumeva njegov tautomer Jedinjenje B i obrnuto, kao i njihove sme še:
[0097] Kako se ovde koristi, „mutacije minimalne funkcije (MF)“ odnose se na mutacije CFTR gena povezane sa minimalnom CFTR funkcijom (CFTR protein sa malo ili bez funkcionalnosti) i uključuju, na primer, mutacije povezane sa teškim defektima u sposobnosti CFTR kanala da se otvori i zatvori, poznate kao defektno otvaranja kanala ili „mutacije otvaranja“; mutacije povezane sa te škim defektima u ć elijskoj obradi CFTR i njegovoj isporuci na površinu ć elije; mutacije povezane sa bez (ili minimalnom) sintezom CFTR; i mutacije povezane sa teškim defektima u provodljivosti kanala.
[0098] Kako se ovde koristi, termin „farmaceutski prihvatljiva so“ odnosi se na oblik soli jedinjenja ovog otkrić a gde je so netoksična. Farmaceutski prihvatljive soli jedinjenja ovog otkri ć a uključuju one izvedene iz odgovarajuć ih neorganskih i organskih kiselina i baza. Na primer, oblik „slobodne baze“ jedinjenja ne sadrži jonski vezanu so.
[0099] Termin „i farmaceutski prihvatljive soli i njihovi deuterizovani derivati“ se koristi naizmeni čno sa „i njihove farmaceutski prihvatljive soli i deuterizovani derivati bilo kog od navedenih“ u odnosu na jedno ili više jedinjenja ili formula pronalaska. Ove fraze treba da obuhvate farmaceutski prihvatljive soli bilo kog od navedenih jedinjenja, deuterizovane derivate bilo kog od navedenih jedinjenja i farmaceutski prihvatljive soli tih deuterizovanih derivata.
[0100] Osoba stručnjak u ovoj oblasti ć e prepoznati da, kada se otkrije količina „jedinjenja ili njegove farmaceutski prihvatljive soli“, količina farmaceutski prihvatljivog oblika soli jedinjenja je količina ekvivalentna koncentraciji slobodne baze jedinjenja. Treba napomenuti da su otkrivene koli čine jedinjenja ili njihovih farmaceutski prihvatljivih soli ovde zasnovane na njihovom obliku slobodne baze.
[0101] Pogodne farmaceutski prihvatljive soli su, na primer, one otkrivene u S. M. Berge i dr., J. Pharma-Centusic Sciences, 1977, 66, 1-19. Na primer, Tabela 1 tog članka daje sledeć e farmaceutski prihvatljive soli:
Tabela 1
[0102] Neograničavajuć i primeri farmaceutski prihvatljivih soli dobijenih adicijom kiselina uklju čuju: soli formirane sa neorganskim kiselinama, kao što su hlorovodonična kiselina, bromovodonična kiselina, fosforna kiselina, sumporna kiselina ili perhlorna kiselina; soli formirane sa organskim kiselinama, kao što su sirć etna kiselina, oksalna kiselina, maleinska kiselina, vinska kiselina, limunska kiselina, ć ilibarna kiselina ili malonska kiselina; i soli formirane korišć enjem drugih metoda koje se koriste u struci, kao što je jonska izmena. Neograničavajuć i primeri farmaceutski prihvatljivih soli uključuju adipat, alginat, askorbat, aspartat, benzensulfonat, benzoat, bisulfat, borat, butirat, kamforat, kamforsulfonat, citrat, ciklopentanpropionat, diglukonat, dodecilsulfat, etansulfonat, formiat, fumarat, glukoheptonat, glicerofosfat, glukonat, hemisulfat, heptanoat, heksanoat, hidrojodid, 2-hidroksietansulfonat, laktobionat, laktat, laurat, lauril sulfat, malat, maleat, malonat, metansulfonat, 2-naftalensulfonat, nikotinat, nitrat, oleat, oksalat, palmitat, pamoat, pektinat, persulfat, 3-fenilpropionat, fosfat, pikrat, pivalat, propionat, stearat, sukcinatne, sulfatne, tartartatne, tiocijanatne, p-toluensulfonatne, undekanoatne i valeratne soli. Farmaceutski prihvatljive soli izvedene iz odgovarajuć ih baza uključuju soli alkalnih metala, zemnoalkalnih metala, amonijuma i N+(C1-4alkil)4 soli. Ovo otkrić e takođe predviđa kvaternizaciju bilo kojih baznih grupa koje sadrže azot jedinjenja ovde opisanih. Pogodni neograničavajuć i primeri soli alkalnih i zemnoalkalnih metala uključuju natrijum, litijum, kalijum, kalcijum i magnezijum. Dalji neograničavajuć i primeri farmaceutski Prihvatljive soli uključuju amonijumove, kvaternarne amonijumove i aminske katjone formirane korišć enjem kontrajona kao što su halid, hidroksid, karboksilat, sulfat, fosfat, nitrat, niži alkil sulfonat i aril sulfonat. Drugi pogodni, neograničavajuć i primeri farmaceutski prihvatljivih soli uključuju besilatne i glukozaminske soli.
[0103] Kako se ovde koristi, termin „amorfan“ se odnosi na čvrsti materijal koji nema dugodometni red u položaju svojih molekula. Amorfne čvrste supstance su generalno prehlađene tečnosti u kojima su molekuli raspoređeni nasumično tako da ne postoji dobro definisan raspored, npr. molekularno pakovanje, i nema dugodometni red. Amorfne čvrste supstance su generalno izotropne, tj. pokazuju slična svojstva u svim pravcima i nemaju definisane tačke topljenja. Na primer, amorfni materijal je čvrsti materijal koji nema oštar karakterističan kristalni vrh(ove) u svom XRPD (X-ray energy difraction) dijagramu (tj. nije kristalan kako je određeno XRPD). Umesto toga, jedan ili više širokih vrhova (npr. oreoli) se pojavljuju u njegovom XRPD dijagramu. Široki vrhovi su karakteristični za amorfnu čvrstu supstancu. Videti, US 2004/0006237 za poređenje XRPD amorfnog materijala i kristalnog materijala. U nekim implementacijama, čvrsti materijal može da sadrži amorfno jedinjenje, a materijal može, na primer, biti okarakterisan nedostatkom oštrih karakterističnih kristalnih vrhova u svom XRPD spektru (tj. materijal nije kristalan, već je amorfan, što je određeno XRPD-om). Umesto toga, jedan ili nekoliko širokih vrhova (npr. oreoli) mogu se pojaviti u XRPD dijagramu materijala. Videti US 2004/0006237 za poređenje XRPD amorfnog materijala i kristalnog materijala. Čvrsti materijal, koji sadrži amorfno jedinjenje, može biti okarakterisan, na primer, temperaturom prelaska u staklasto stanje koja je ni ža od tačke topljenja čiste kristalne čvrste supstance. Druge tehnike, kao što je, na primer, NMR čvrstog stanja, takođe se mogu koristiti za karakterizaciju kristalnih ili amorfnih oblika.
[0104] Kako se ovde koriste, termini „kristalni oblik“, „kristalni oblik“ i „oblik“ se naizmenično odnose na kristalnu strukturu (ili polimorf) koja ima određeni raspored molekularnog pakovanja u kristalnoj rešetki. Kristalni oblici se mogu identifikovati i razlikovati jedni od drugih jednom ili vi še tehnika karakterizacije, uključuju ć i, na primer, rendgensku difrakciju praha (XRPD), rendgensku difrakciju monokristala i<13>C nuklearnu magnetnu rezonancu čvrstog stanja (<13>C SSNMR). Shodno tome, kako se ovde koriste, termini „kristalni oblik [X] jedinjenja I“ odnose se na jedinstvene kristalne oblike koji se mogu identifikovati i razlikovati od drugih kristalnih oblika jednom ili više tehnika karakterizacije, uključujuć i, na primer, XRPD, rendgensku difrakciju monokristala i<13>C SSNMR. U nekim realizacijama, novi kristalni oblici su okarakterisani rendgenskim difraktogramom praha koji ima jedan ili vi še signala na jednoj ili više određenih vrednosti dva-teta (°2θ).
[0105] Kako se ovde koristi, termin „slobodan oblik“ odnosi se na nejonizovanu verziju jedinjenja u čvrstom stanju. Primeri slobodnih oblika uključuju slobodne baze i slobodne kiseline.
[0106] Kako se ovde koristi, termin „solvat“ odnosi se na kristalni oblik koji sadrži jedan ili više molekula jedinjenja ovog otkrić a i, ugrađenih u kristalnu rešetku, jedan ili više molekula rastvarača ili rastvarača u stehiometrijskim ili nestehiometrijskim količinama. Kada je rastvarač voda, solvat se naziva „hidrat“.
[0107] U nekim realizacijama, čvrsti materijal može da sadrži smešu kristalnih čvrstih materija i amorfnih čvrstih materija. Čvrsti materijal koji sadrži amorfno jedinjenje može takođe, na primer, da sadrži do 30% kristalne čvrste materije. U nekim realizacijama, čvrsti materijal pripremljen da sadrži amorfno jedinjenje može takođe, na primer, da sadrži do 25%, 20%, 15%, 10%, 5% ili 2% kristalne čvrste materije. U oličenjima gde čvrsti materijal sadrži smešu kristalnih čvrstih materija i amorfnih čvrstih materija, karakteristični podaci, kao što je XRPD, mogu sadržati indikatore i kristalnih i amorfnih čvrstih materija. U nekim oličenjima, kristalni oblik ovog otkrić a može sadržati do 30% amorfnog jedinjenja. U nekim oličenjima, kristalni preparat jedinjenja Formule I može sadržati do 25%, 20%, 15%, 10%, 5% ili 2% amorfne čvrste materije.
[0108] Kako se ovde koristi, termin „suštinski amorfan“ odnosi se na čvrsti materijal koji ima malo ili nimalo dugoročnog reda u položaju svojih molekula. Na primer, suštinski amorfni materijali imaju manje od 15% kristalnosti (npr. manje od 10% kristalnosti, manje od 5% kristalnosti ili manje od 2% kristalnosti). Takođe se napominje da termin „suštinski amorfan“ uključuje deskriptor „amorfan“, koji se odnosi na materijale koji nemaju (0%) kristalnosti.
[0109] Kako se ovde koristi, termin „suštinski kristalan“ odnosi se na čvrsti materijal koji ima malo ili nimalo amorfnih molekula. Na primer, suštinski kristalni materijali imaju manje od 15% amorfnih molekula (npr. manje od 10% amorfnih molekula, manje od 5% amorfnih molekula ili manje od 2% amorfnih molekula). Takođe se napominje da termin „suštinski kristalan“ uključuje opis „kristalni“, koji se odnosi na materijale koji su 100% u kristalnom obliku.
[0110] Kako se ovde koristi, kristalni oblik je „suštinski čist“ kada čini količinu po težini jednaku ili već u od 90% zbira svih čvrstih oblika u uzorku, kako je određeno metodom u skladu sa strukom, kao što je kvantitativna XRPD. U nekim realizacijama, čvrsti oblik je „suštinski čist“ kada čini količinu po težini jednaku ili već u od 95% zbira svih čvrstih oblika u uzorku. U nekim implementacijama, čvrsti oblik je „suštinski čist“ kada čini količinu po težini jednaku ili već u od 99% zbira svih čvrstih oblika u uzorku. Takođe se napominje da termin „suštinski čist“ uključuje opis „čist“, koji se odnosi na materijale koji su 100% čisti.
[0111] Kako se ovde koristi, termin „XRPD“ odnosi se na metod analitičke karakterizacije difrakcije X-zraka praha. XRPD dijagrami opisani ovde su snimljeni u ambijentalnim uslovima u geometriji transmisije ili refleksije korišć enjem difraktometar.
[0112] Kako se ovde koristi, termin „ambijentalni uslovi“ označava sobnu temperaturu, uslove na otvorenom i uslove nekontrolisane vlažnosti. Termini „sobna temperatura“ i „ambijentalna temperatura“ označavaju od 15 °C do 30 °C.
[0113] Kako se ovde koriste, termini „rendgenski difraktogram praha“, „rendgenski difraktogram praha“, „XRPD dijagram“, „XRPD spektar“ naizmenično se odnose na eksperimentalno dobijeni dijagram koji prikazuje položaje signala (na apscisi) u odnosu na intenzitete signala (na ordinati). Za amorfni materijal, rendgenski difraktogram praha može da sadrži jedan ili više širokih signala; i za kristalni materijal, rendgenski difraktogram praha može da sadrži jedan ili više signala, svaki identifikovan svojom ugaonom vrednošć u merenom u stepenima 2 θ (° 2θ), prikazanim na apscisi rendgenskog difraktograma praha, koji se može izraziti kao „signal na ... stepeni dva teta“, „signal na [jednoj] vrednosti dva teta od ...“ i/ili „signal na najmanje ... vrednosti dva teta izabrane od ...“.
[0114] „Signal“ ili „pik“, kako se ovde koristi, odnosi se na tačku u XRPD dijagramu gde je intenzitet izmeren u brojevima na lokalnom maksimumu. Osoba sa prosečnim znanjem u ovoj oblasti bi prepoznala da se jedan ili više signala (ili vrhova) u XRPD dijagramu mogu preklapati i, na primer, mogu biti neprimetni golim okom. Zaista, osoba sa prosečnim znanjem u ovoj oblasti bi prepoznala da su neke metode koje su priznate u ovoj oblasti sposobne i pogodne za određivanje da li signal postoji u dijagramu, kao što je Ritveldovo prečišć avanje.
[0115] Kako se ovde koristi, „signal na ... stepenima dva teta“ odnosi se na položaje refleksije X-zraka kako su izmereni i primeć eni u eksperimentima difrakcije X-zraka na prahu (° 2 θ).
[0116] Ponovljivost izmerenih ugaonih vrednosti je u opsegu ±0,2°2θ, tj. ugaona vrednost može biti na navedenoj ugaonoj vrednosti 0,2 stepena dva teta, ugaonoj vrednosti - 0,2 stepena dva teta ili bilo kojoj vrednosti između te dve krajnje tačke (ugaona vrednost 0,2 stepena dva teta i ugaona vrednost -0,2 stepena dva teta).
[0117] Termini „intenziteti signala“ i „intenziteti vrhova“ naizmenično se odnose na relativne intenzitete signala unutar datog difraktograma X-zraka na prahu. Faktori koji mogu uticati na relativni signal ili intenzitete vrhova uključuju debljinu uzorka i preferiranu orijentaciju (npr. kristalne čestice nisu raspoređene nasumično).
[0118] Kako se ovde koristi, rendgenski difraktogram praha je „suštinski sličan onom na [određenoj] slici“ kada se najmanje 90%, kao što je najmanje 95%, najmanje 98% ili najmanje 99%, signala u dva difraktograma preklapa. Prilikom određivanja „suštinske sličnosti“, stručnjak u ovoj oblasti ć e razumeti da može postojati varijacija u intenzitetima i/ili položajima signala u XRPD difraktogramima čak i za isti kristalni oblik. Stoga, stručnjaci u ovoj oblasti ć e razumeti da maksimalne vrednosti signala u XRPD difraktogramima (u stepenima dva teta) generalno znače da je vrednost identifikovana kao ±0,2 stepena dva teta od prijavljene vrednosti, što je varijansa prepoznata u struci.
[0119] Kako se ovde koristi, spektar čvrste nuklearne magnetne rezonance (SSNMR) je „suštinski sličan onom na [određenoj] slici“ kada se najmanje 90%, kao što je najmanje 95%, najmanje 98% ili najmanje 99%, signala u dva spektra preklapa. Prilikom određivanja „suštinske sličnosti“, stručnjak u ovoj oblasti ć e razumeti da može postojati varijacija u intenzitetima i/ili položajima signala u SSNMR spektrima čak i za isti kristalni oblik. Stoga, stručnjaci u ovoj oblasti ć e razumeti da hemijska pomeranja u SSNMR spektrima (u delovima na milion (ppm) navedenim ovde) generalno znače da je vrednost identifikovana kao ± 0,2 ppm prijavljene vrednosti, što je varijacija prepoznata u struci.
[0120] Termin „rendgenski difraktogram praha sa signalom na ... vrednostima dva teta“, kako se ovde koristi, odnosi se na XRPD dijagram koji sadrži položaje refleksije X-zraka merene i primeć ene u eksperimentima difrakcije X-zraka praha (° dva teta).
[0121] Kako se ovde koristi, termin „DSC“ se odnosi na analitičku metodu diferencijalne skenirajuć e kalorimetrije.
[0122] Kako se ovde koristi, termin „početak razlaganja“ se odnosi na tačku preseka osnovne linije pre prelaza i tangente interfleksije.
[0123] Kako se ovde koristi, termin „temperatura staklastog prelaza“ ili „Tg“ se odnosi na temperaturu iznad koje tvrda i krhka „staklasta“ amorfna čvrsta supstanca postaje viskozna ili gumasta.
[0124] Kako se ovde koristi, termin „TGA“ se odnosi na analitičku metodu termo gravimetrijske (ili termogravimetrijske) analize.
Detaljan opis izvođenja
[0125] Pored jedinjenja formule I, I’ i I”, njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterovanih derivata tih jedinjenja i soli, pronalazak daje i jedinjenja formula I′′′, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf, jedinjenja 1 do 53, jedinjenja 54 do 77, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i deuterizovane derivate.
[0126] Na primer, u nekim realizacijama, jedinjenje Formule I je izabrano iz jedinjenja Formule Ia:
i deuterizovani derivati i njihove farmaceutski prihvatljive soli,
pri čemu X je izabran iz -O-, -S-, -SO- i -SO2-;
svaki Y je nezavisno izabran iz -C(R<Y>)2-, -O-, -CO-, i
svaki R<Y>je nezavisno izabran iz vodonika, halogena, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz hidroksi i Q), C6-C10arila, 5- do 10-članog heteroarila, -ORY1, -CO2R<Y1>, -COR<Y1>, -CON(R<Y1>)2i -NR<Y1>-; ili dva slučaja R<Y>na istom atomu uzeta zajedno da formiraju prsten izabran iz C3-C8cikloalkila i 3- do 6-članog heterociklila; ili dva slučaja R<Y>, od kojih je jedan na jednom atomu, a drugi na susednom atomu, da zajedno formiraju pi vezu;
svaki R<Y1>je nezavisno izabran iz vodonika i C1-C6alkila, ili dva slučaja R<Y1>vezana za isti azot zajedno formiraju 3- do 6-člani heterociklil;
prsten B je izabran iz:
▪ C6-C10arila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena, C1-C6alkila i C1-C6alkoksija),
▪ C3-C8cikloalkila,
▪ 5- do 10-članog heteroarila, i
▪ 3- do 6-članog heterociklila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz C1-C6alkila); svaki Q je nezavisno izabran iz:
▪ C1-C6alkila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ halogen,
∘ okso,
∘ C6-C10arila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena i -OCF3), i
∘ C3-C8cikloalkila,
▪ C3-C8cikloalkila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ halogena,
∘ CN,
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena, -NH2i -NHCOMe), ∘ C1-C6alkoksija,
∘ C6-C10arila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz C1-C6alkila), i
∘ C3-C8cikloalkila,
▪ C6-C10arila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno odabrane od:
∘ halogena,
∘ CN,
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno odabrane od halogena i hidroksi),
∘ C1-C6alkoksija opciono supstituisanog sa 1-4 grupe nezavisno izabrane od:
▪ halogena,
▪ C3-C8cikloalkila (opciono supstituisanog sa CF3),
∘ C3-C8cikloalkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od halogena, CF3, OCF3i C1-C6alkila), i
∘ C6-C10 arila,
▪ 5- do 10-člani heteroarila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od:
∘ halogena,
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od halogena),
∘ C3-C8cikloalkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe i CF3), i
∘ 3- do 10-članog heterociklila,
▪ 3- do 10-članog heterociklila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od:
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz okso i C3-C8cikloalkila), i
∘ okso;
svaki R<1>je nezavisno izabran iz halogena, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena), -OR<2>, -N(R<2>)2, -CO2R2, -CO-N(R<2>)2, -CN, fenila, benzila, C1-C6alkoksija, C1-C6alkila, C3-C8cikloalkila, 5- do 6-člani heteroarila, 3- do 6-člani heterociklila, -SO2R<2>, -SR<2>, -SOR<2>, -PO(OR<2>)2i -PO(R<2>)2;
Svaki R<2>je nezavisno izabran iz vodonika, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena) i C6-C10arila (opciono supstituisanog sa C1-C6alkoksijem, koji je opciono supstituisan sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena);
Z je izabran iz
R<Z1>je izabran iz vodonika, -CN, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena ili 1-3 hidroksi), 3- do 6-članog heterociklila, 3- do 6-članog cikloalkila, 5- do 6-članog arila i 5-do 6-članog heteroarila;
R<Z2>je izabran iz vodonika, halogena i hidroksi grupe, ili RZ1i R<Z2>zajedno čine grupu izabranu iz okso i =N-OH;
svaki R<Z3>je nezavisno izabran iz hidroksi, C1-C6alkoksi grupe, C1-C6alkila i C6-C10arila; ili dva slučaja R<Z3>zajedno čine 3- do 6-člani heterociklil; i
n je izabran od 4, 5, 6 i 7.
[0127] U nekim realizacijama, X u Formuli Ia je -O-.
[0128] U nekim realizacijama, svaki Y u Formuli Ia je nezavisno izabran od -C(R<Y>)2-, -CO-, i
pri čemu su R<Y>i prsten B kao što je definisano za Formulu Ia.
[0129] U nekim realizacijama, svaki Y u Formuli Ia je -C(R<Y>)2-, pri čemu je R<Y>kao što je definisano za Formulu Ia.
[0130] U nekim realizacijama, svaki R<Y>u Formuli Ia je nezavisno izabran iz vodonika, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno odabrane iz hidroksi i Q) i -OR<Y1>, pri čemu su Q i R<Y1>kao što je definisano za Formulu Ia.
[0131] U nekim realizacijama, svaki R<Y>u Formuli Ia je nezavisno izabran iz:
vodonika,
[0132] U nekim realizacijama, svaki Q u Formuli Ia je nezavisno izabran iz:
▪ C3-C8cikloalkila,
▪ C6-C10arila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno odabrane iz halogena i C1-C6alkila
[0133] U nekim realizacijama, svaki Q u Formuli Ia je nezavisno izabran iz:
[0134] U nekim realizacijama, prsten B u Formuli Ia je izabran iz C6-C10arila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena.
[0135] U nekim realizacijama, prsten B u Formuli Ia je izabran iz:
[0136] U nekim realizacijama, -(Y)n- u Formuli Ia je grupa izabrana iz:
[0137] U nekim realizacijama, svaki R<1>u Formuli Ia je nezavisno C1-C6alkil (opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena) i -N(R<2>)2, pri čemu je R<2>kao što je definisano za Formulu Ia. U nekim realizacijama, svaki R<1>u Formuli Ia je nezavisno izabran iz -CF3i -N(R<2>)2, pri čemu je R<2>kao što je definisano za Formulu Ia.
[0138] U nekim realizacijama, svaki R<2>u Formuli Ia je nezavisno izabran iz vodonika, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena) i C6-C10arila (opciono supstituisanog sa C1-C6alkoksijem, koji je opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena). U nekim realizacijama, svaki R<2>u Formuli Ia je nezavisno izabran iz vodonika i C1-C6alkila. U nekim realizacijama, svaki R<2>u Formuli Ia je vodonik.
[0139] U nekim realizacijama, Z u Formuli Ia je
pri čemu su R<Z1>i R<Z2>kao što je definisano za Formulu Ia.
[0140] U nekim realizacijama, R<Z1>u Formuli Ia je izabran iz C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe izabrane iz halogena). U nekim realizacijama , R<Z1>u Formuli Ia je -CF3.
[0141] U nekim realizacijama, R<Z2>u Formuli Ia je hidroksi.
[0142] U nekim realizacijama, n u Formuli Ia je izabrano od 4, 5 i 6. U nekim realizacijama, n u Formuli Ia je 6.
[0143] U nekim realizacijama, jedinjenje Formule I je izabrano od jedinjenja Formula IIa, IIb i IIc:
i deuterizovanih derivata i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, pri čemu:
X je izabran iz -O-, -S-, -SO- i -SO2-;
svaki Y je nezavisno izabran iz -C(R<Y>)2-, -O-, -CO- i
Svaki R<Y>je nezavisno izabran iz vodonika, halogena, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz hidroksi i Q), C6-C10arila, 5- do 10-članog heteroarila, -OR<Y1>, -CO2R<Y1>, -COR<Y1>, 25-CON(R<Y1>)2i -R<Y1>-; ili dva slučaja R<Y>na istom atomu uzeta zajedno da formiraju prsten izabran iz C3-C8cikloalkila i 3- do 6-članog heterociklila; ili dva slučaja R<Y>, od kojih je jedan na jednom atomu, a drugi na susednom atomu, uzeta zajedno da formiraju pi vezu;
svaki R<Y1>je nezavisno izabran iz vodonika i C1-C6alkila, ili dva slučaja R<Y1>vezana za isti azot uzeta zajedno da formiraju 3- do 6-člani heterociklil;
Prsten B je izabran iz:
▪ C6-C10arila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena, C1-C6alkila i C1-C6alkoksi grupe),
▪ C3-C8cikloalkila,
▪ 5- do 10-članog heteroarila, i
▪ 3- do 6-članog heterociklila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz C1-C6alkila);
Svaki Q je nezavisno izabran iz:
▪ C1-C6alkila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ halogena,
∘ okso,
∘ C6-C10arila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena i -OCF3), i
∘ C3-C8cikloalkila,
▪ C3-C8cikloalkila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ halogena,
∘ CN,
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena, -NH2i -NHCOMe), ∘ C1-C6alkoksija,
∘ C6-C10arila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz C1-C6alkila), i
∘ C3-C8cikloalkila,
▪ C6-C10arila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ halogena,
∘ CN,
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena i hidroksija),
∘ C1-C6alkoksija opciono supstituisanog sa 1-4 grupe nezavisno izabrane iz:
▪ halogena,
▪ C3-C8cikloalkila (opciono supstituisanog sa CF3),
∘ C3-C8cikloalkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena, CF3, OCF3i C1-C6alkila), i
∘ C6-C10arila,
▪ 5- do 10-članog heteroarila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ halogena,
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena),
∘ C3-C8cikloalkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe i CF3), i
∘ 3- do 10-članog heterociklila,
▪ 3- do 10-članog heterociklila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od:
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od okso i C3-C8cikloalkila), i
∘ okso;
svaki R<1>je nezavisno izabran iz halogena, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno izabranih od halogena), -OR<2>, -N(R<2>)2, -CO2R<2>, -CO-N(R<2>)2, -CN, fenila, benzila, C1-C6alkoksija, C1-C6alkila, C3-C8cikloalkila, 5- do 6-članog heteroarila, 3- do 6-članog heterociklila, -SO2R<2>, -SR<2>, -SOR<2>, -PO(OR<2>)2i -PO(R<2>)2;
Svaki R<2>je nezavisno izabran iz vodonika, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena) i C6-C10arila (opciono supstituisanog sa C1-C6alkoksijem, koji je opciono supstituisan sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena);
Z je izabran iz
R<Z1>je izabran iz vodonika, -CN, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena ili 1-3 hidroksi), 3- do 6-članog heterociklila, 3- do 6-članog cikloalkila, 5- do 6-članog arila i 5-do 6-članog heteroarila;
R<Z2>je izabran iz vodonika, halogena i hidroksi, ili R<Z1>i R<Z2>zajedno čine grupu izabranu iz okso i =N-OH; svaki R<Z3>je nezavisno izabran iz hidroksija, C1-C6alkoksija, C1-C6alkila i C6-C10arila; ili su dva slučaja R<Z3>uzeta zajedno formiraju heterociklil sa 3 do 6 članova; i
m je izabrano od 0, 1, 2 i 3.
[0144] U nekim realizacijama, m u formulama IIa, IIb ili IIc je izabrano od 1 i 2. U nekim realizacijama, m u formulama IIa, IIb ili IIc je 2.
[0145] U nekim realizacijama, jedinjenje formule I je izabrano od jedinjenja formula IId, IIe i Iif:
i deuterizovani derivati i njihove farmaceutski prihvatljive soli, pri čemu:
X je izabran iz -O-, -S-, -SO- i -SO2-;
svaki Y je nezavisno izabran iz -C(R<Y>)2-, -O-, -CO- i
Svaki R<Y>je nezavisno izabran iz vodonika, halogena, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz hidroksi i Q), C6-C10arila, 5- do 10-članog heteroarila, -OR<Y1>, -CO2R<Y1>, -COR<Y1>, -CON(R<Y1>)2i -NR<Y1>-; ili dva slučaja R<Y>na istom atomu uzeta zajedno da formiraju prsten izabran iz C3-C8cikloalkila i 3- do 6-članog heterociklila; ili dva slučaja R<Y>od kojih je jedan na jednom atomu, a drugi na susednom atomu, uzeta zajedno da formiraju pi vezu;
svaki R<Y1>je nezavisno izabran iz vodonika i C1-C6alkila, ili dva slučaja R<Y1>vezana za isti azot uzeta zajedno da formiraju 3- do 6-člani heterociklil;
Prsten B je izabran iz:
▪ C6-C10arila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena, C1-C6alkila i C1-C6alkoksi grupe),
▪ C3-C8cikloalkila,
▪ 5- do 10-članog heteroarila, i
▪ 3- do 6-članog heterociklila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz C1-C6alkila);
Svaki Q je nezavisno izabran iz:
▪ C1-C6alkil opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ halogena,
∘ okso,
∘ C1-C6arila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena i -OCF3), i
∘ C3-C8cikloalkila,
▪ C3-C8cikloalkial opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ halogena,
∘ CN,
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena, -NH2i -NHCOMe), ∘ C1-C6alkoksija,
∘ C1-C6arila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz C1-C6alkila), i
∘ C3-C8cikloalkila,
▪ C1-C6arila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ halogena,
∘ CN,
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena i hidroksija),
∘ C1-C6alkoksija opciono supstituisanog sa 1-4 grupe nezavisno izabrane iz:
▪ halogena,
▪ C3-C8cikloalkila (opciono supstituisanog sa CF3),
∘ C3-C8cikloalkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena, CF3, OCF3i C1-C6alkila), i
∘ C1-C6arila,
▪ 5- do 10-članog heteroarila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ halogena,
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena),
∘ C3-C8cikloalkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe i CF3grupe), i
∘ 3- do 10-članog heterociklila,
▪ 3- do 10-članog heterociklila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz okso i C3-C8cikloalkila), i
∘ okso;
svaki R<1>je nezavisno izabran iz halogena, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena), -OR<2>, -N(R<2>)2, -CO2R<2>, -CO-N(R<2>)2, -CN, fenila, benzila, C1-C6alkoksija, C1-C6alkila, C3-C8cikloalkila, 5- do 6-članog heteroarila, 3- do 6-članog heterociklila, -SO2R<2>, -SR<2>, -SOR<2>, -PO(OR<2>)2i -PO(R<2>)2;
Svaki R<2>je nezavisno izabran iz vodonika, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena) i C1-C6arila (opciono supstituisanog sa C1-C6alkoksi, koji je opciono supstituisan sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena);
Z je izabran iz
R<Z1>je izabran iz vodonika, -CN, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena ili 1-3 hidroksi), 3- do 6-članog heterociklila, 3- do 6-članog cikloalkila, 5- do 6-članog arila i 5-do 6-članog heteroarila;
R<Z2>je izabran iz vodonika, halogena i hidroksija, ili R<Z1>i R<Z2>zajedno čine grupu izabranu iz okso i =N-OH; i svaki R<Z3>je nezavisno izabran iz hidroksija, C1-C6alkoksija, C1-C6alkila i C6-C10arila; ili dva primera R<Z3>su uzeta zajedno da bi se formirao 3- do 6-člani heterociklil.
[0146] U nekim realizacijama, X u formulama IIa, IIb, IIc, IId, IIe ili IIf je -O-.
[0147] U nekim realizacijama, svaki Y u formulama IIa, IIb, IIc, IId, IIe ili IIf je nezavisno izabran iz -C(R<y>)2-, -CO-, i
pri čemu su R<y>i prsten B kao što je definisano za formule IIa, IIb, IIc, IId, IIe ili IIf.
[0148] U nekim realizacijama, svaki Y u formulama IIa, IIb, IIc, IId, IIe ili IIf je -C(R<y>)2-, pri čemu je R<y>kao što je definisano za Formule IIa, IIb, IIc, IId, IIe ili IIf.
[0149] U nekim realizacijama, svaki R<Y>u formulama IIa, IIb, IIc, IId, IIe ili IIf je nezavisno izabran iz vodonika, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz hidroksija i Q) i -OR<Y1>, pri čemu su Q i R<Y1>kao što je definisano za formule IIa, IIb, IIc, IId, IIe ili IIf.
[0150] U nekim realizacijama, svaki R<Y>u formulama IIa, IIb, IIc, IId, IIe ili IIf je nezavisno izabran iz: vodonika,
pri čemu je Q kao što je definisano za formule IIa, IIb, IIc, IId, IIe ili IIf.
[0151] U nekim realizacijama, svaki Q u formulama IIa, IIb, IIc, IId, IIe ili IIf je nezavisno izabran iz:
▪ C3-C8cikloalkila,
▪ C6-C10arila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena i C1-C6alkila.
[0152] U nekim realizacijama, svaki Q u formulama IIa, IIb, IIc, IId, IIe ili IIf je nezavisno izabran iz:
[0153] U nekim realizacijama, prsten B u formulama IIa, IIb, IIc, IId, IIe ili IIf je izabran iz C6-C10arila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena.
[0154] U nekim realizacijama, prsten B u formulama IIa, IIb, IIc, IId, IIe ili IIf je izabran iz:
[0155] U nekim realizacijama, svaki R<1>u Formulama IIa, IIb, IIc, IId, IIe ili IIf je nezavisnoC1-C6alkil (opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena) i -N( R<2>)2pri čemu je R<2>kao što je definisano za Formule IIa, IIb, IIc, IId, IIe ili IIf. U nekim realizacijama, svaki R<1>u Formulama IIa, IIb, IIc, IId, IIe ili IIf je nezavisno izabran iz -CF3i -N(R<2>)2pri čemu je R<2>kao što je definisano za Formule IIa, IIb, IIc, IId, IIe ili IIf.
[0156] U nekim realizacijama, svaki R<2>u Formulama IIa, IIb, IIc, IId, IIe ili IIf je nezavisno izabran iz vodonika, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena) i C6-C10arila (opciono supstituisanog saC1-C6alkoksijem, koji je opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena). U nekim realizacijama, svaki R<2>u Formulama IIa, IIb, IIc, IId, IIe ili IIf je nezavisno izabran iz vodonika i C1-C6alkila. U nekim realizacijama, svaki R<2>u Formulama IIa, IIb, IIc, IId, IIe ili IIf je vodonik.
[0157] U nekim realizacijama, Z u Formulama IIa, IIb, IIc, IId, IIe ili IIf je
pri čemu su R<Z1>i R<Z2>kao što je definisano za Formule IIa, IIb, IIc, IId, IIe ili IIf.
[0158] U nekim realizacijama, R<Z1>u Formulama IIa, IIb, IIc, IId, IIe ili IIf je izabran izC1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe izabrane iz halogena). U nekim realizacijama, R<Z1>u Formulama IIa, IIb, IIc, IId, IIe ili IIf je -CF3.
[0159] U nekim realizacijama, R<Z2>u Formulama IIa, IIb, IIc, IId, IIe ili IIf je hidroksi.
[0160] U nekim realizacijama, jedinjenje Formule I je izabrano iz jedinjenja Formula IIIa, IIIb i IIIc:
i deuterizovanih derivata i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, pri čemu:
X je izabran iz -O-, -S-, -SO- i -SO2-;
svaki Y je nezavisno izabran iz -C(R<Y>)2-, -O-, -CO- i
Svaki R<y>je nezavisno izabran iz vodonika, halogena, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz hidroksi i Q), C6-C10arila, 5- do 10-članog heteroarila, -OR<Y1>, -CO2R<y1>, -COR<y1>, -CON(R<y1>)2i -NR<y1>-; ili dva slučaja R<y>na istom atomu uzeta zajedno da formiraju prsten izabran iz C3-C8cikloalkila i 3- do 6-članog heterociklila; ili dva slučaja R<y>od kojih je jedan na jednom atomu, a drugi na susednom atomu, uzeta zajedno da formiraju pi vezu;
svaki R<y1>je nezavisno izabran iz vodonika i C1-C6alkila, ili dva slučaja R<y1>vezana za isti azot uzeta zajedno da formiraju 3- do 6-člani heterociklil;
Prsten B je izabran iz:
▪ C6-C10arila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena, C1-C6alkila i C1-C6alkoksi grupe),
▪ C3-C8cikloalkila,
▪ 5- do 10-članog heteroarila, i
▪ 3- do 6-članog heterociklila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz C1-C6alkila);
Svaki Q je nezavisno izabran iz:
▪ C1-C6alkila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ halogena,
∘ okso,
∘ C6-C10aril (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena i -OCF3), i
∘ C3-C8cikloalkila,
▪ C3-C8cikloalkila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ halogena,
∘ CN,
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena, -NH2i -NHCOMe), ∘ C1-C6alkoksija,
∘ C6-C10arila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz C1-C6alkila), i
∘ C3-C8cikloalkila,
▪ C6-C10arila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ halogena,
∘ CN,
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena i hidroksija),
∘ C1-C6alkoksija opciono supstituisanog sa 1-4 grupe nezavisno izabrane iz:
▪ halogena,
▪ C3-C8cikloalkila (opciono supstituisan sa CF3),
∘ C3-C8cikloalkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena, CF3, OCF3i C1-C6alkila), i
∘ C6-C10arila,
▪ 5- do 10-članog heteroarila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ halogena,
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena),
∘ C3-C8cikloalkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe i CF3), i
∘ 3- do 10-članog heterociklila,
▪ 3- do 10-članog heterociklila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od:
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od okso i C3-C8cikloalkila), i ∘ okso;
svaki R<1>je nezavisno izabran iz halogena, C1-C6alkila (opciono supstituisan sa 1-6 grupa nezavisno izabranih od halogena), -OR<2>, -N(R<2>)2, -CO2R<2>, -CO-N(R<2>)2, -CN, fenila, benzila, C1-C6alkoksija, C1-C6alkila, C3-C8cikloalkila, 5- do 6-članog heteroarila, 3- do 6-članog heterociklila, -SO2R<2>, -SR<2>, -SOR<2>, -PO(OR<2>)2i -PO(R<2>)2;
Svaki R<2>je nezavisno izabran iz vodonika, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena) i C6-C10arila (opciono supstituisanog sa C1-C6alkoksijem, koji je opciono supstituisan sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena);
Z je izabran iz
R<Z1>je izabran iz vodonika, -CN, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena ili 1-3 hidroksi), 3- do 6-članog heterociklila, 3- do 6-članog cikloalkila, 5- do 6-članog arila i 5-do 6-članog heteroarila;
R<Z2>je izabran iz vodonika, halogena i hidroksija, ili R<Z1>i R<Z2>zajedno čine grupu izabranu iz okso i =N-OH; svaki R<Z3>je nezavisno izabran iz hidroksija, C1-C6alkoksija, C1-C6alkila i C6-C10arila; ili dva slučaja R<Z3>uzeta zajedno formiraju heterociklil sa 3 do 6 članova; i
m je izabrano od 0, 1, 2 i 3.
[0161] U nekim realizacijama, m u formulama IIIa, IIIb ili IIIc je izabrano od 1 i 2. U nekim realizacijama, m u formulama IIIa, IIIb i IIIc je 2.
[0162] U nekim realizacijama, jedinjenje formule I je izabrano od jedinjenja formula IIId, IIIe i IIIf:
i deuterizovanih derivata i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, pri čemu:
X je izabran iz -O-, -S-, -SO- i -SO2-;
svaki Y je nezavisno izabran iz -C(R<Y>)2-, -O-, -CO- i
Svaki R<Y>je nezavisno izabran iz vodonika, halogena, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz hidroksija i Q), C6-C10arila, 5- do 10-članog heteroarila, -OR<Y1>, -CO2R<Y1>, -COR<Y1>, -CON(R<Y1>)2i -NR<Y1>-; ili dva slučaja R<Y>na istom atomu uzeta zajedno da formiraju prsten izabran iz C3-C8cikloalkila i 3- do 6-članog heterociklila; ili dva slučaja R<Y>, od kojih je jedan na jednom atomu, a drugi na susednom atomu, uzeta zajedno da formiraju pi vezu;
svaki R<Y1>je nezavisno izabran iz vodonika i C1-C6alkila, ili dva slučaja R<Y1>vezana za isti azot uzeta su zajedno da formiraju 3- do 6-člani heterociklil;
Prsten B je izabran iz:
▪ C6-C10arila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena, C1-C6alkila i C1-C6alkoksi grupe),
▪ C3-C8cikloalkila,
▪ 5- do 10-članog heteroarila, i
▪ 3- do 6-članog heterociklila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz C1-C6alkila);
Svaki Q je nezavisno izabran iz:
▪ C1-C6alkila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ halogena,
∘ okso,
∘ C6-C10arila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena i -OCF3), i
∘ C3-C8cikloalkila,
▪ C3-C8cikloalkila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ halogena,
∘ CN,
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena, -NH2i -NHCOMe), ∘ C1-C6alkoksija,
∘ C6-C10arila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz C1-C6alkila), i
∘ C3-C8cikloalkila,
▪ C6-C10arila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ halogena,
∘ CN,
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena i hidroksi),
∘ C1-C6alkoksija opciono supstituisanog sa 1-4 grupe nezavisno izabrane iz:
▪ halogena,
▪ C3-C8cikloalkila (opciono supstituisanog sa CF3),
∘ C3-C8cikloalkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena, CF3, OCF3i C1-C6alkila), i
∘ C6-C10arila,
▪ 5- do 10-članog heteroarila opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ halogena,
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena),
∘ C3-C8cikloalkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe i CF3), i
∘ 3- do 10-članog heterociklila,
▪ 3- do 10-članog heterociklila opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz okso i C3-C8cikloalkila), i ∘ okso;
svaki R<1>je nezavisno izabran iz halogena, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena), -OR<2>, -N(R<2>)2, -CO2R<2>, -CO-N(R<2>)2, -CN, fenila, benzila, C1-C6alkoksija, C1-C6alkila, C3-C8cikloalkila, 5- do 6-člani heteroarila, 3- do 6-članog heterociklila, -SO2R<2>, -SR<2>, -SOR<2>, -PO(OR<2>)2i -PO(R<2>)2;
Svaki R<2>je nezavisno izabran iz vodonika, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena) i C6-C10arila (opciono supstituisanog sa C1-C6alkoksijem, koji je opciono supstituisan sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena);
Z je izabran iz
R<Z1>je izabran iz vodonika, -CN, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena ili 1-3 hidroksi), 3- do 6-članog heterociklila, 3- do 6-članog cikloalkila, 5- do 6-članog arila i 5-do 6-članog heteroarila;
R<Z2>je izabran iz vodonika, halogena i hidroksija, ili R<Z1>i R<Z2>zajedno čine grupu izabranu iz okso i =N-OH; svaki R<Z3>je nezavisno izabran iz hidroksija, C1-C6alkoksija, C1-C6alkila i C6-C10arila; ili dva primera R<Z3>zajedno formiraju heterociklil sa 3 do 6 članova.
[0163] U nekim realizacijama, X u formulama IIIa, IIIb, IIIc, IIId, IIIe ili IIIf je -O-.
[0164] U nekim realizacijama, svaki Y u formulama IIIa, IIIb, IIIc, IIId, IIIe ili IIIf je nezavisno izabran iz -C(R<Y>)2-, -CO-, i
pri čemu su R<Y>i prsten B kao što je definisano za formule IIIa, IIIb, IIIc, IIId, IIIe ili IIIf.
[0165] U nekim realizacijama, svaki Y u formulama IIIa, IIIb, IIIc, IIId, IIIe ili IIIf je -C(R<Y>)2-, pri čemu je R<Y>kao što je definisano za Formule IIIa, IIIb, IIIc, IIId, IIIe ili IIIf.
[0166] U nekim realizacijama, svaki R<Y>u Formulama IIIa, IIIb, IIIc, IIId, IIIe ili IIIf je nezavisno izabran iz vodonika, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz hidroksi i Q) i -OR<Y1>, pri čemu su Q i R<Y1>kao što je definisano za Formule IIIa, IIIb, IIIc, IIId, IIIe ili IIIf.
[0167] U nekim realizacijama, svaki R<Y>u Formulama IIIa, IIIb, IIIc, IIId, IIIe ili IIIf je nezavisno izabran iz: vodonika,
pri čemu je Q kao što je definisano za Formule IIIa, IIIb, IIIc, IIId, IIIe ili IIIf.
[0168] U nekim realizacijama, svaki Q u Formulama IIIa, IIIb, IIIc, IIId, IIIe ili IIIf je nezavisno izabran iz: ▪ C8-C8cikloalkila,
▪ C6-C10 arila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena i C1-C6alkila.
[0169] U nekim realizacijama, svaki Q u Formulama IIIa, IIIb, IIIc, IIId, IIIe ili IIIf je nezavisno izabran iz:
[0170] U nekim realizacijama, prsten B u formulama IIIa, IIIb, IIIc, IIId, IIIe ili IIIf je izabran iz C6-C10arila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena.
[0171] U nekim realizacijama, prsten B u formulama IIIa, IIIb, IIIc, IIId, IIIe ili IIIf je izabran iz:
[0172] U nekim realizacijama, svaki R<1>u Formulama IIIa, IIIb, IIIc, IIId, IIIe ili IIIf je nezavisno C1-C6alkil (opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena) i -N( R<2>)2, gde je R<2>kao što je definisano za Formule IIIa, 40 IIIb, IIIc, IIId, IIIe ili IIIf. U nekim realizacijama, svaki R<1>u Formulama IIIa, IIIb, IIIc, IIId, IIIe ili IIIf je nezavisno izabran iz -CF3i -N(R<2>)2, gde je R<2>kao što je definisano za Formule IIIa, IIIb, IIIc, IIId, IIIe ili IIIf.
[0173] U nekim realizacijama, svaki R<2>u Formulama IIIa, IIIb, IIIc, IIId, IIIe ili IIIf je nezavisno izabran iz vodonika, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena) i C6-C10arila (opciono supstituisanog sa C1-C6alkoksijem, koji je opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena). U nekim realizacijama, svaki R<2>u Formulama IIIa, IIIb, IIIc, IIId, IIIe ili IIIf je nezavisno izabran iz vodonika i C1-C6alkila.
[0174] U nekim realizacijama, svaki R<2>u Formulama IIIa, IIIb, IIIc, IIId, IIIe ili IIIf je vodonik.
[0175] U nekim realizacijama, Z u Formulama IIIa, IIIb, IIIc, IIId, IIIe ili IIIf je
pri čemu je Z kao što je definisano za Formule IIIa, IIIb, IIIc, IIId, IIIe ili IIIf.
[0176] U nekim realizacijama, R<Z1>u Formulama IIIa, IIIb, IIIc, IIId, IIIe ili IIIf je izabran iz C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe izabrane iz halogena). U nekim realizacijama, R<Z1>u Formulama IIIa, IIIb, IIIc, IIId, IIIe ili IIIf je -CF3.
[0177] U nekim realizacijama, R<Z2>u Formulama IIIa, IIIb, IIIc, IIId, IIIe ili IIIf je hidroksi.
[0178] U nekim realizacijama, jedinjenje Formule I je izabrano iz jedinjenja Formule I′′′:
i njegovih deuterizovanih derivata i farmaceutski prihvatljivih soli, pri čemu:
X je izabran iz -O-, -S-, -SO- i -SO2-;
svaki Y je nezavisno izabran iz -C(R<Y>)2-, -O-, -CO- i
Svaki R<Y>je nezavisno izabran iz vodonika, halogena, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz hidroksi i Q), C3-C8cikloalkila, C6-C10arila, 5- do 10-članog heteroarila, -OR<Y1>,-CO2R<Y1>,-COR<Y1>,-CON(R<Y1>)2i -NR<Y1>-; ili dva slučaja R<Y>na istom atomu uzeta zajedno da formiraju prsten izabran iz C3-C8cikloalkila i 3- do 6-članog heterociklila; ili dva slučaja R<Y>, od kojih je jedan na jednom atomu, a drugi na susednom atomu, uzeta zajedno da formiraju pi vezu;
svaki R<Y1>je nezavisno izabran iz vodonika i C1-C6alkila, ili dva slučaja R<Y1>vezana za isti azot uzeta zajedno da formiraju 3- do 6-člani heterociklil;
Prsten B je izabran iz:
▪ C6-C10arila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena, C1-C6alkila i C1-C6alkoksi grupe),
▪ C3-C8cikloalkila,
▪ 5- do 10-članog heteroarila, i
▪ 3- do 6-članog heterociklila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz C1-C6alkila);
svaki Q je nezavisno izabran iz:
▪ C1-C6alkila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ halogena,
∘ okso,
∘ C6-C10arila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena i -OCF3), i
∘ C3-C8cikloalkila,
▪ C3-C8cikloalkila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ halogena,
∘ CN,
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena, -NH2i -NHCOMe), ∘ C1-C6alkoksija,
∘ C6-C10arila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz C1-C6alkila), i
∘ C3-C8cikloalkila,
▪ C6-C10arila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ halogena,
∘ CN,
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena i hidroksija),
∘ C1-C6alkoksija opciono supstituisanog sa 1-4 grupe nezavisno izabrane iz:
▪ halogena,
▪ C3-C8cikloalkila (opciono supstituisanog sa CF3),
∘ C3-C8cikloalkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena, CF3, OCF3i C1-C6alkila), i
∘ C6-C10arila,
▪ 5- do 10-članog heteroarila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ halogena,
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena),
∘ C3-C8cikloalkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe i CF3), i
∘ 3- do 10-članog heterociklila,
▪ 3- do 10-članog heterociklila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od:
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od okso i C3-C8cikloalkila), i ∘ okso;
svaki R<1>je nezavisno izabran iz halogena, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno izabranih od halogena i hidroksija), -OR<2>, -N(R<2>)2, -CO2R<2>, -CO-N(R<2>)2, -CN, fenila, benzila, C1-C6alkoksija, C3-C8cikloalkila, 5- do 6-članog heteroarila, 3- do 6-članog heterociklila, -SO2R<2>, -SR<2>, -SOR<2>, -PO(OR<2>)2i -PO(R<2>)2;
Svaki R<2>je nezavisno izabran iz vodonika, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena) i C6-C10arila (opciono supstituisanog sa C1-C6alkoksijem, koji je opciono supstituisan sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena);
R<Z1>je izabran iz vodonika, -CN, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena ili 1-3 hidroksija), 3- do 6-članog heterociklila, 3- do 6-članog cikloalkila, 5- do 6-članog arila i 5-do 6-članog heteroarila;
R<Z2>je izabran iz vodonika, halogena i hidroksija, ili R<Z1>i R<Z2>zajedno čine grupu izabranu iz okso i =N-OH; n je izabrano iz 4, 5, 6, 7 i 8; i
m je izabrano od 0, 1, 2 i 3.
[0179] U nekim realizacijama, X u Formuli I'''' je -O-.
[0180] U nekim realizacijama, svaki R<Y>u Formuli I′′′ je nezavisno izabran iz vodonika, halogena, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz hidroksi i Q), C3-C8cikloalkila i -OR<Y1>, gde su Q i R<Y1>kao što je definisano za Formulu I′′. U nekim realizacijama, -OR<Y1>u Formuli I′′′ je -OH.
[0181] U nekim realizacijama, svaki Q u Formuli I′′′ je nezavisno izabran iz Cs-Cscikloalkila i C6-C10arila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena i C1-C6alkila. U nekim realizacijama, svaki Q u Formuli I′′′ je nezavisno izabran iz:
[0182] U nekim realizacijama, svaki R<Y>u Formuli I′′′ je nezavisno izabran iz: vodonika, fluora,
[0183] U nekim realizacijama, Prsten B u Formuli I''''' je izabran iz C3-C8cikloalkila i fenila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena. U nekim realizacijama, Prsten B u Formuli I''''' je izabran iz:
[0184] U nekim realizacijama, n u Formuli I''''' je izabrano iz 4, 5 i 6.
[0185] U nekim realizacijama, -(Y)n- u Formuli I′′′ je grupa izabrana iz:
[0186] U nekim realizacijama, svaki R<1>u Formuli I''' je nezavisno izabran iz C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena i hidroksija), -N(R<2>)2i -CO2R<2>, gde je R<2>kao što je definisano za Formulu I′′′. U nekim realizacijama, svaki R<1>u Formuli I′′′ je nezavisno izabran iz -CF3, -NH2, -NH(CH2CH3), CO2H i CH2OH.
[0187] U nekim realizacijama, svaki R<2>u Formuli I′′′ je nezavisno izabran iz vodonika i C1-C6alkila.
[0188] U nekim realizacijama, R<Z1>u Formuli I′′′ je izabran iz vodonika i C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa izabranih iz halogena). U nekim realizacijama, R<Z1>u Formuli I′′′ je -CF3.
[0189] U nekim realizacijama, R<Z2>u Formuli I′′′ je hidroksi.
[0190] U nekim realizacijama, R<Z1>u Formuli I''''' je C1-C6alkil (opciono supstituisan sa 1-6 grupa izabranih iz halogena) i R<Z2>u Formuli I''''' je hidroksi. U nekim realizacijama, R<Z1>u Formuli I''''' je -CF3, a R<Z2>u Formuli I''''' je hidroksi.
[0191] U nekim realizacijama, m u Formuli I''''' je izabrano iz 1 i 2.
[0192] U nekim realizacijama, jedinjenje Formule I je izabrano iz jedinjenja Formule IIa’:
i deuterizovanih derivata i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, pri čemu:
X je izabran iz -O-, -S-, -SO-, i -SO2-;
svaki Y je nezavisno izabran iz -C(R<Y>)2-, -O-, -CO-, i
Svaki R<Y>je nezavisno izabran iz vodonika, halogena, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz hidroksija i Q), C6-C10arila, 5- do 10-članog heteroarila, -OR<Y1>, -CO2R<Y1>, -COR<Y1>, -CON(R<Y1>)2i -NR<Y1>-; ili dva slučaja R<Y>na istom atomu uzeta zajedno da formiraju prsten izabran iz C3-C8cikloalkila i 3- do 6-članog heterociklila; ili dva slučaja R<Y>, od kojih je jedan na jednom atomu, a drugi na susednom atomu, uzeta zajedno da formiraju pi vezu;
svaki R<Y1>je nezavisno izabran iz vodonika i C1-C6alkila, ili dva slučaja R<Y1>vezana za isti azot uzeta zajedno da formiraju 3- do 6-člani heterociklil;
Prsten B je izabran iz:
▪ C6-C10arila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena, C1-C6alkila i C1-C6alkoksi grupe),
▪ C3-C8cikloalkila,
▪ 5- do 10-članog heteroarila, i
▪ 3- do 6-članog heterociklila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz C1-C6alkila);
Svaki Q je nezavisno izabran iz:
▪ C1-C6alkila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ halogena,
∘ okso,
∘ C6-C10arila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena i -OCF3), i
∘ C3-C8cikloalkila,
▪ C3-C8cikloalkila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ halogena,
∘ CN,
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena, -NH2i -NHCOMe), ∘ C1-C6alkoksija,
∘ C6-C10arila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz C1-C6alkila), i
∘ C3-C8cikloalkila,
▪ C6-C10aril opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ halogena,
∘ CN,
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od halogena i hidroksi),
∘ C1-C6alkoksija (opciono supstituisanog sa 1-4 grupe nezavisno izabrane od:
▪ halogena,
▪ C3-C8cikloalkila (opciono supstituisanog sa CF3),
∘ C3-C8cikloalkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od halogena, CF3, OCF3i C1-C6alkila), i
∘ C6-C10arila,
▪ 5- do 10-člani heteroaril opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od:
∘ halogena,
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena),
∘ C3-C8cikloalkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe i CF3grupe), i
∘ 3- do 10-članog heterociklila,
▪ 3- do 10-člani heterociklil opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz okso i C8-C8cikloalkila), i ∘ okso;
svaki R<1>je nezavisno izabran iz halogena, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena), -OR<2>, -N(R<2>)2, -CO2R<2>, -CO-N(R<2>)2, -CN, fenila, benzila, C1-C6alkoksija, C1-C6alkila, C3-C8cikloalkila, 5- do 6-članog heteroarila, 3- do 6-članog heterociklila, -SO2R<2>, -SR<2>, -SOR<2>, -PO(OR<2>)2i -PO(R<2>)2;
Svaki R<2>je nezavisno izabran iz vodonika, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena) i C6-C10arila (opciono supstituisanog sa C1-C6alkoksijem, koji je opciono supstituisan sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena);
R<Z1>je izabran iz vodonika, -CN, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena ili 1-3 hidroksija), 3- do 6-članog heterociklila, 3- do 6-članog cikloalkila, 5- do 6-članog arila i 5-do 6-članog heteroarila;
R<Z2>je izabran iz vodonika, halogena i hidroksija, ili R<Z1>i R<Z2>zajedno čine grupu izabranu iz okso i =N-OH; i m je izabran iz 0, 1, 2 i 3.
[0193] U nekim realizacijama, m u Formuli IIa’ je izabran iz 1 i 2. U nekim realizacijama, m u Formuli IIa’ je 2.
[0194] U nekim realizacijama, X u Formuli IIa’ je -O-.
[0195] U nekim realizacijama, svaki Y u Formuli IIa’ je nezavisno izabran iz -C(R<Y>)2-, -CO-, i
gde su R<Y>i prsten B kao što je definisano za Formulu IIa’.
[0196] U nekim realizacijama, svaki Y u Formuli IIa’ je -C(R<Y>)2-, gde je R<Y>kao što je definisano za Formulu IIa’.
[0197] U nekim realizacijama, svaki R<Y>u Formuli IIa’ je nezavisno izabran iz vodonika, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz hidroksija i Q), i -OR<Y1>gde su Q i R<Y1>kao što su definisani za Formulu IIa’.
[0198] U nekim realizacijama, svaki R<Y>u Formuli IIa’ je nezavisno izabran iz:
vodonika,
gde je Q kao što je definisano za Formulu IIa’.
[0199] U nekim realizacijama, svaki Q u Formuli IIa’ je nezavisno izabran iz:
▪ C3-C8cikloalkila,
▪ C6-C10arila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena i C1-C6alkila.
[0200] U nekim realizacijama, svaki Q u Formuli IIa’ je nezavisno izabran iz:
[0201] U nekim realizacijama, prsten B u Formuli IIa’ je izabran iz C6-C10arila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena.
[0202] U nekim realizacijama, prsten B u Formuli IIa’ je izabran iz:
[0203] U nekim realizacijama, svaki R<1>u Formuli IIa' je nezavisno C1-C6alkil (opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno odabrane iz halogena) i -N(R<2>)2gde je R<2>kao što je definisano za Formulu IIa'. U nekim realizacijama, svaki R<1>u Formuli IIa' je nezavisno izabran iz -CF3i -N(R<2>)2gde je R<2>kao što je definisano za Formulu IIa'.
[0204] U nekim realizacijama, svaki R<2>u Formuli IIa' je nezavisno izabran iz vodonika, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno odabrane iz halogena) i C6-C10arila (opciono supstituisanog sa C1-C6alkoksijem, koji je opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno odabrane iz halogena). U nekim realizacijama, svaki R<2>u Formuli IIa' je nezavisno izabran iz vodonika i C1-C6alkila. U nekim realizacijama, svaki R<2>u Formuli IIa' je vodonik.
[0205] U nekim realizacijama, R<Z1>u Formuli IIa’ je izabran iz C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa izabranih iz halogena). U nekim realizacijama, R<Z1>u Formuli IIa’ je -CF3.
[0206] U nekim realizacijama, R<Z2>u Formuli IIa’ je hidroksi.
[0207] U nekim realizacijama, R<Z1>u Formuli IIa’ je C1-C6alkil (opciono supstituisan sa 1-6 grupa izabranih iz halogena) i R<Z2>u Formuli IIa’ je hidroksi. U nekim realizacijama, R<Z1>u Formuli IIa’ je -CF3i R<Z2>u Formuli IIa’ je hidroksi.
[0208] U nekim realizacijama, jedinjenje Formule I je izabrano iz jedinjenja Formule IIIa’:
i deuterizovanih derivata i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, pri čemu:
X je izabran iz -O-, -S-, -SO- i -SO2-;
svaki Y je nezavisno izabran iz -C(R<Y>)2-, -O-, -CO- i
Svaki R<Y>je nezavisno izabran iz vodonika, halogena, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz hidroksi i Q), C6-C10arila, 5- do 10-članog heteroarila, -OR<Y1>, -CO2R<Y1>, -COR<Y1>, -CON(R<Y1>)2i -NR<Y1>-; ili dva slučaja R<Y>na istom atomu uzeta zajedno da formiraju prsten izabran iz C3-C8cikloalkila i 3- do 6-članog heterociklila; ili dva slučaja R<Y>, od kojih je jedan na jednom atomu, a drugi na susednom atomu, uzeta zajedno da formiraju pi vezu;
Svaki R<Y1>je nezavisno izabran iz vodonika i C1-C6alkila, ili dva slučaja R<Y1>vezana za isti azot zajedno formiraju 3- do 6-člani heterociklil;
Prsten B je izabran iz:
▪ C6-C10arila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena, C1-C6alkila i C1-C6alkoksija),
▪ C3-C8cikloalkila,
▪ 5- do 10-članog heteroarila, i
▪ 3- do 6-članog heterociklila (opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz C1-C6alkila);
svaki Q je nezavisno izabran iz:
▪ C1-C6alkila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od:
∘ halogena,
∘ okso,
∘ C6-C10aril (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od halogena i -OCF3), i
∘ C3-C8cikloalkila,
▪ C3-C8cikloalkil opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od:
∘ halogena,
∘ CN,
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od halogena, -NH2i -NHCOMe), ∘ C1-C6alkoksija,
∘ C6-C10arila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od C1-C6alkila), i
∘ C3-C8cikloalkila,
▪ C6-C10aril opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od:
∘ halogena,
∘ CN,
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno odabrane od halogena i hidroksija), ∘ C1-C6alkoksija opciono supstituisanog sa 1-4 grupe nezavisno odabrane od:
▪ halogena,
▪ C3-C8cikloalkila (opciono supstituisanog sa CF3),
∘ C3-C8cikloalkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno odabrane od halogena, CF3, OCF3i C1-C6alkila), i
∘ C6-C10arila,
▪ 5- do 10-člani heteroaril opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno odabrane od:
∘ halogena,
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno odabrane od halogena),
∘ C3-C8cikloalkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe i CF3), i
∘ 3- do 10-članog heterociklila,
▪ 3- do 10-člani heterociklil opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno izabrani od:
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od okso i C3-C8cikloalkila), i ∘ okso;
Svaki R<1>je nezavisno izabran iz halogena, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena), -OR<2>, -N(R<2>)2, -CO2R<2>, -CO-N(R<2>)2, -CN, fenila, benzila, C1-C6alkoksija, C1-C6alkila, C3-C8cikloalkila, 5- do 6-članog heteroarila, 3- do 6-članog heterociklila, -SO2R<2>, -SR<2>, -SOR<2>, -PO(OR<2>)2i -PO(R<2>)2;
svaki R<2>je nezavisno izabran iz vodonika, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena) i C6-C10arila (opciono supstituisanog sa C1-C6alkoksija, koji je opciono supstituisan sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena); R<Z1>je izabran iz vodonika, -CN, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena ili 1-3 hidroksija), 3- do 6-članog heterociklila, 3- do 6-članog cikloalkila, 5- do 6-članog arila i 5- do 6-članog heteroarila;
R<Z2>je izabran iz vodonika, halogena i hidroksi, ili R<Z1>i R<Z2>zajedno čine grupu izabranu iz okso i =N-OH; i m je izabrano iz 0, 1, 2 i 3.
[0209] U nekim realizacijama, X u Formuli IIIa’ je -O-.
[0210] U nekim realizacijama, svaki Y u Formuli IIIa’ je nezavisno izabran iz -C(R<Y>)2-, -CO- i
gde su R<Y>i Prsten B kao što je definisano za Formulu IIIa’.
[0211] U nekim realizacijama, svaki Y u Formuli IIIa’ je -C(R<Y>)2-, gde je R<Y>kao što je definisano za Formulu IIIa’.
[0212] U nekim realizacijama, svaki R<Y>u Formuli IIIa’ je nezavisno izabran iz vodonika, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz hidroksija i Q), i -OR<Y1>gde su Q i R<Y1>kao što je definisano za Formulu IIIa’.
[0213] U nekim realizacijama, svaki R<Y>u Formuli IIIa’ je nezavisno izabran iz:
vodonika,
gde je Q kao što je definisano za Formulu IIIa’.
[0214] U nekim realizacijama, svaki Q u Formuli IIIa’ je nezavisno izabran iz:
▪ C3-C8cikloalkila,
▪ C6-C10arila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena i C1-C6alkila.
[0215] U nekim realizacijama, svaki Q u Formuli IIIa’ je nezavisno izabran iz:
[0216] U nekim realizacijama, Prsten B u Formuli IIIa’ je izabran iz C6-C10arila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena.
[0217] U nekim realizacijama, Prsten B u Formuli IIIa’ je izabran iz:
[0218] U nekim realizacijama, svaki R<1>u Formuli IIIa’ je nezavisno C1-C6alkil (opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena) i -N(R<2>)2, gde je R<2>kao što je definisano za Formulu IIIa’. U nekim realizacijama, svaki R<1>u Formuli IIIa’ je nezavisno izabran iz -CF3i -N(R<2>)2, gde je R<2>kao što je definisano za Formulu IIIa’.
[0219] U nekim realizacijama, svaki R<2>u Formuli IIIa’ je nezavisno izabran iz vodonika, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena) i C6-C10arila (opciono supstituisanog sa C1-C6alkoksijem, koji je opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena). U nekim realizacijama, svaki R<2>u Formuli IIIa’ je nezavisno izabran iz vodonika i C1-C6alkila.
[0220] U nekim realizacijama, svaki R<2>u Formuli IIIa’ je vodonik.
[0221] U nekim realizacijama, R<Z1>u Formuli IIIa’ je izabran iz C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa izabranih iz halogena). U nekim realizacijama, R<Z1>u Formuli IIIa’ je -CF3.
[0222] U nekim realizacijama, R<Z2>u Formuli IIIa’ je hidroksi.
[0223] U nekim realizacijama, R<Z1>u Formuli IIIa’ je C1-C6alkil (opciono supstituisan sa 1-6 grupa izabranih iz halogena) i R<Z2>u Formuli IIIa’ je hidroksi. U nekim realizacijama, R<Z1>u Formuli IIIa’ je -CF3i R<Z2>u Formuli IIIa’ je hidroksi.
[0224] Jedinjenja pronalaska uključuju jedinjenja 1-53 i 54-77, i deuterizovane derivate i njihove
farmaceutski prihvatljive soli.
Ĩnastavak)
Ĩnastavak)
Ĩnastavak)
Ĩnastavak)
Ĩnastavak)
(nastavak)
Reference na metode lečenja u narednim pasusima ovog opisa treba tumačiti kao reference na jedinjenja, farmaceutske kompozicije i lekove ovog pronalaska za upotrebu u metodu lečenja ljudskog (ili životinjskog) tela terapijom (ili za dijagnozu).
Metode lečenja
[0225] Bilo koje od novih jedinjenja ovde opisanih, kao što su na primer jedinjenja Formula I , I’, I", I′′, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf , jedinjenja 1 do 53, jedinjenja 54 do 77, njihove farmaceutski prihvatljive soli i deuterizovani derivati takvih jedinjenja i soli mogu delovati kao CFTR modulator, tj. moduliraju CFTR aktivnost u telu. Pojedinci koji pate od mutacije u genu koji kodira CFTR mogu imati koristi od primanja CFTR modulatora. CFTR mutacija može uticati na količinu CFTR, tj. broj CFTR kanala na površini ć elije, ili može uticati na funkciju CFTR, tj. funkcionalnu sposobnost svakog kanala da otvori i transportuje jone. Mutacije koje utiču na količinu CFTR uključuju mutacije koje uzrokuju defektnu sintezu (defekt klase I), mutacije koje uzrokuju defektnu obradu i transport (defekt klase II), mutacije koje uzrokuju smanjenu sintezu CFTR-a (defekt klase V) i mutacije koje smanjuju površinsku stabilnost CFTR-a (defekt klase VI). Mutacije koje utiču na funkciju CFTR-a uključuju mutacije koje uzrokuju defektno otvaranja vrata (defekt klase III) i mutacije koje uzrokuju defektnu provodljivost (defekt klase IV). Neke CFTR mutacije pokazuju karakteristike višestrukih klasa. Određene mutacije u CFTR genu dovode do cistične fibroze.
[0226] Stoga, u nekim realizacijama, pronalazak pruža metode lečenja, smanjenja težine ili simptomatskog lečenja cistične fibroze kod pacijenta, koje obuhvataju davanje pacijentu efikasne količine bilo kog od novih jedinjenja opisanih ovde, kao što su na primer jedinjenja Formula I, I’, I", I′′, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf , jedinjenja 1 do 53, jedinjenja 54 do 77, njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, i/ili deuterizovanih derivata takvih jedinjenja i soli, sami ili u kombinaciji sa drugim aktivnim sastojkom, kao što je drugi agens koji modulira CFTR. U nekim realizacijama, pacijent ima genotip F508del/minimalna funkcija (MF), genotip F508del/F508del (homozigotan za F508del mutaciju), genotip F508del/otvaranja vrata ili genotip F508del/rezidualna funkcija (RF). U nekim realizacijama, pacijent je heterozigotan i ima jednu F508del mutaciju. U nekim realizacijama, pacijent je homozigotan za N1303K mutaciju.
[0227] U nekim realizacijama, 1 mg do 1000 mg jedinjenja opisanog ovde, njegove farmaceutski prihvatljive soli ili deuterizovanog derivata takvog jedinjenja ili soli se primenjuje dnevno.
[0228] U nekim realizacijama, pacijent je heterozigotan i ima F508del mutaciju na jednom alelu i mutaciju na drugom alelu izabranom iz Tabele 2:
Ċ
Tabela 2: CFTR mutacije (nastavak)
[0229] U nekim realizacijama, pronalazak se takođe odnosi na metode lečenja korišć enjem izotopski obeleženih jedinjenja napred navedenih jedinjenja ili njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, gde su formula i promenljive takvih jedinjenja i soli, svaka i nezavisno, kao što je napred opisano ili bilo koje druge realizacijame opisana napred, pod uslovom da je jedan ili vi še atoma u njima zamenjen atomom ili atomima koji imaju atomsku masu ili maseni broj koji se razlikuje od atomske mase ili masenog broja atoma koji se obično javlja prirodno (izotopski obeležen). Primeri izotopa koji su komercijalno dostupni i pogodni za otkrić e uključuju izotope vodonika, ugljenika, azota, kiseonika, fosfora, fluora i hlora, na primer<2>H,<3>H,<13>C,<14>C,<15>N,<18>O,<17>O,<31>P,<32>P,<35>S,<18>F i<36>Cl, respektivno.
[0230] Izotopski obeležena jedinjenja i soli mogu se koristiti na brojne korisne načine. Mogu biti pogodni za lekove i/ili različite vrste testova, kao što su testovi distribucije supstrata u tkivu. Na primer, jedinjenja obeležena tricijumom (<3>H) i/ili ugljenikom-14 (<14>C) su posebno korisna za različite vrste testova, kao što su testovi distribucije supstrata u tkivu, zbog relativno jednostavne pripreme i odli čne detektabilnosti. Na primer, jedinjenja obeležena deuterijumom (<2>H) su terapeutski korisna sa potencijalnim terapeutskim prednostima u odnosu na jedinjenja koja nisu obele žena<2>H. Generalno, jedinjenja i soli obeležena deuterijumom (<2>H) mogu imati već u metaboličku stabilnost u poređenju sa onima koja nisu izotopski obeležena zbog kinetičkog izotopskog efekta opisanog u nastavku. Već a metabolička stabilnost se direktno prevodi u poveć ano vreme poluraspada in vivo ili ni že doze, što bi moglo biti poželjno. Jedinjenja i soli obeležena izotopski se obično mogu pripremiti sprovođenjem postupaka opisanih u šemama sinteze i povezanom opisu, u delu sa primerima i u delu o pripremi u ovom tekstu, zamenom reaktanta koji nije obeležen izotopski lako dostupnim reaktantom obeleženim izotopski.
[0231] U nekim realizacijama, jedinjenja i soli obeleženi izotopima su obeleženi deuterijumom (<2>H). U nekim specifičnim realizacijama, jedinjenja i soli obeleženi izotopima su obeleženi deuterijumom (<2>H), gde je jedan ili više atoma vodonika zamenjen deuterijumom. U hemijskim strukturama, deuterijum je predstavljen kao "<2>H" ili "D".
[0232] Prilikom otkrivanja i razvoja terapijskih sredstava, stručnjak u ovoj oblasti pokušava da optimizuje farmakokinetičke parametre uz zadržavanje poželjnih in vitro svojstava. Može biti razumno pretpostaviti da su mnoga jedinjenja sa lošim farmakokinetičkim profilima podložna oksidativnom metabolizmu.
[0233] Jedinjenja i soli obeleženi deuterijumom (<2>H) mogu modulirati oksidativni metabolizam jedinjenja putem primarnog kinetičkog izotopskog efekta. Primarni kinetički izotopski efekat je promena brzine hemijske reakcije koja je rezultat razmene izotopskih jezgara, što je zauzvrat uzrokovano promenom energija osnovnog stanja neophodnih za formiranje kovalentne veze nakon ove izotopske razmene. Zamena težeg izotopa obično dovodi do smanjenja energije osnovnog stanja hemijske veze i time uzrokuje smanjenje prekida veze koji ograničava brzinu. Ako se prekid veze dogodi u ili u blizini regiona sedlaste tačke duž koordinate reakcije sa više proizvoda, odnosi raspodele proizvoda mogu se značajno promeniti. Za objašnjenje: ako je deuterijum vezan za atom ugljenika na poziciji koja se ne mo že zameniti, tipične su razlike u brzini od kM/kD= 2-7. Za dalju diskusiju, videti S. L. Harbeson i R. D. Tung, Deuterijum u otkrivanju i razvoju lekova, Ann. Rep. Med. Chem. 2011, 46, 403-417.
[0234] Koncentracija izotopa (npr. deuterijuma) ugrađenih u jedinjenja i soli obeležena izotopima iz ovog otkrić a može se definisati faktorom izotopskog oboga ć ivanja. Termin „faktor izotopskog oboga ć ivanja“, kako se ovde koristi, označava odnos između izotopskog obilja i prirodnog obilja određenog izotopa. U nekim realizacijama, ako je supstituent u jedinjenju iz ovog otkrić a ozna čen kao deuterijum, takvo jedinjenje ima izotopski faktor obogać ivanja za svaki označeni atom deuterijuma od najmanje 3500 (52,5% inkorporacije deuterijuma na svakom označenom atomu deuterijuma), najmanje 4000 (60% inkorporacije deuterijuma), najmanje 4500 (67,5% inkorporacije deuterijuma), najmanje 5000 (75% inkorporacije deuterijuma), najmanje 5500 (82,5% inkorporacije deuterijuma), najmanje 6000 (90% inkorporacije deuterijuma), najmanje 6333,3 (95% inkorporacije deuterijuma), najmanje 6466,7 (97% inkorporacije deuterijuma), najmanje 6600 (99% inkorporacije deuterijuma) ili najmanje 6633,3 (99,5% inkorporacije deuterijuma).
Kombinovane terapije
[0235] Jedan aspekt opisan ovde pruža metode lečenja cistične fibroze i drugih bolesti posredovanih CFTR-om koriš ć enjem bilo kog od novih jedinjenja opisanih ovde, kao što je na primer, jedinjenje Formula I, I’, I", I′′′, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’,IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf, jedinjenja 1 do 53, jedinjenja 54 do 77, njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata takvih jedinjenja i soli u kombinaciji sa najmanje jednim dodatnim aktivnim farmaceutskim sastojkom.
[0236] Dakle, u nekim realizacijama, pronalazak pruža metode lečenja, smanjenja težine ili simptomatskog lečenja cistične fibroze kod pacijenta, što obuhvata davanje pacijentu efikasne količine bilo kog od novih jedinjenja opisanih ovde, kao što su na primer jedinjenja Formula I, I’, I", I′′, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf, jedinjenja 1 do 53, jedinjenja 54 do 77, njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i/ili deuterizovanih derivata takvih jedinjenja i soli, sami ili u kombinaciji sa najmanje jednim dodatnim aktivnim farmaceutskim sastojkom, kao što je, npr., sredstvo za modulaciju CFTR-a.
[0237] U nekim realizacijama, najmanje jedan dodatni aktivni farmaceutski sastojak je izabran iz mukolitičkih sredstava, bronhodilatatora, antibiotika, antiinfektivnih sredstava i antiinflamatornih sredstava.
[0238] U nekim realizacijama, dodatni terapeutski agens je antibiotik. Primeri antibiotika korisnih ovde uključuju tobramicin, uključujuć i tobramicin inhalacioni prah (TIP), azitromicin, aztreonam, uklju čuju ć i aerosolizovani oblik aztreonama, amikacin, uključujuć i njegove lipozomalne formulacije, ciprofloksacin, uključujuć i njegove formulacije pogodne za primenu inhalacijom, levoflaksacin, uklju čuju ć i njegove aerosolizovane formulacije, i kombinacije dva antibiotika, npr. fosfomicin i tobramicin.
[0239] U nekim realizacijama, dodatni agens je mukolit. Primeri mukolita korisnih ovde uklju čuju Pulmozyme<®>.
[0240] U nekim realizacijama, dodatni agens je bronhodilatator. Primeri bronhodilatatora uklju čuju albuterol, metaprotenerol sulfat, pirbuterol acetat, salmeterol ili tetrabulin sulfat.
[0241] U nekim realizacijama, dodatni agens je antiinflamatorni agens, tj. sredstvo koje mo že smanjiti upalu u pluć ima. Primeri takvih sredstava korisnih ovde uključuju ibuprofen, dokozaheksanojsku kiselinu (DHA), sildenafil, inhalacioni glutation, pioglitazon, hidroksihlorokin ili simavastatin.
[0242] U nekim realizacijama, dodatno sredstvo je nutritivno sredstvo. Primeri nutritivnih sredstava uključuju pankrelipazu (zamena pankreatičnog enzima), uključujuć i Pancrease<®>, Pancreacarb<®>, Ultrase<®>ili Creon<®>, Liprotomase<®>(ranije Trizytek<®>), Aquadeks<®>ili inhalaciju glutationa. U jednoj realizaciji, dodatno nutritivno sredstvo je pankrelipaza.
[0243] U nekim realizacijama, najmanje jedan dodatni aktivni farmaceutski sastojak je izabran iz CFTR modulirajuć ih sredstava. U nekim realizacijama, CFTR moduliraju ć e sredstvo je CFTR korektor. U nekim realizacijama, CFTR modulirajuć e sredstvo je CFTR pojačivač/ko-potencijator (na primer, ASP-11). U nekim realizacijama, najmanje jedan dodatni aktivni farmaceutski sastojak je CFTR poja čavač. U nekim realizacijama, najmanje jedan dodatni aktivni farmaceutski sastojak je CFTR sredstvo za čitanje. U nekim realizacijama, najmanje jedan dodatni aktivni farmaceutski sastojak je CFTR terapija nukleinskom kiselinom.
[0244] U nekim realizacijama, najmanje jedan dodatni aktivni farmaceutski sastojak je ENaC inhibitor. U nekim realizacijama, najmanje jedan dodatni aktivni farmaceutski sastojak je TMEM16A modulator. U nekim realizacijama, najmanje jedan dodatni aktivni farmaceutski sastojak je GPR39 agonist.
[0245] U nekim realizacijama, najmanje jedan dodatni aktivni farmaceutski sastojak je izabran iz (a) Jedinjenja II i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterovanih derivata; (b) Jedinjenja IV i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterovanih derivata; (c) Jedinjenja V i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterovanih derivata; (d) Jedinjenja VI i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterovanih derivata; (e) Jedinjenja VII i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterovanih derivata; i (f) Jedinjenja VIII i farmaceutski prihvatljive soli i njihovi deuterizovani derivati. Stoga, u nekim realizacijama, kombinovane terapije date ovde sadrže jedinjenje izabrano iz jedinjenja Formula I, I’, I", I′′ ′, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf, jedinjenja 1 do 53, jedinjenja 54 do 77 i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata; i najmanje jedno jedinjenje izabrano iz jedinjenja II, jedinjenja IV, jedinjenja V, jedinjenja VI, jedinjenja VII, jedinjenja VIII, jedinjenja IX, jedinjenja X i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata. U nekim realizacijama, kombinovane terapije koje su ovde date obuhvataju (a) najmanje jedno jedinjenje izabrano iz jedinjenja Formula I, I’, I", I′′, Ia, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf , jedinjenja 1 do 53, jedinjenja 54 do 77 i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata; (b) najmanje jedno jedinjenje izabrano iz jedinjenja II, jedinjenja i IV, i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata; i (c) najmanje jedno jedinjenje izabrano iz jedinjenja V, jedinjenja VI, jedinjenja VII, jedinjenja VIII, jedinjenja IX, jedinjenja X, i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata. U nekim realizacijama, kombinovane terapije koje su ovde date obuhvataju (a) najmanje jedno jedinjenje izabrano iz jedinjenja Formula I, I’, I", I′′′, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’,IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf, jedinjenja 1 do 53, jedinjenja 54 do 77 i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterovanih derivata; (b) najmanje jedno jedinjenje izabrano iz jedinjenja II i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterovanih derivata; i (c) najmanje jedno jedinjenje izabrano iz jedinjenja VII i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterovanih derivata.
[0246] U nekim realizacijama, kombinovane terapije koje su ovde date obuhvataju (a) jedinjenje izabrano iz jedinjenja Formula I, I’, I", I′′, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’,IIIb, IIIc, IIId, IIIe, i IIIf , jedinjenja 1 do 53, Jedinjenja 54 do 77, i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata; (b) najmanje jedno jedinjenje izabrano iz Jedinjenja II, Jedinjenja IV, Jedinjenja V, Jedinjenja VI, Jedinjenja VII, Jedinjenja VIII, Jedinjenja IX, Jedinjenja X, i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata; i (c) najmanje jedno jedinjenje izabrano iz jedinjenja objavljenih u WO 2016/105485, US 5 2016-0120841, US 2017-0101405, WO 2017/009804, WO 2018/065921, WO 2017/062581, ili Časopisu za cističnu fibrozu (2018), 17(5), 595-606.
[0247] U nekim realizacijama, kombinovane terapije koje su ovde date obuhvataju (a) jedinjenje izabrano iz jedinjenja Formula I, I’, I", I′′, Ia, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf, jedinjenja 1 do 53, jedinjenja 54 do 77 i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata; (b) najmanje jedno jedinjenje izabrano iz Jedinjenja II, Jedinjenja IV, Jedinjenja V, Jedinjenja VI, Jedinjenja VII, Jedinjenja VIII, Jedinjenja IX, Jedinjenja X, i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata; i (c) najmanje jedno jedinjenje izabrano iz PTI-428, ASP-11, ABBV-2222, ABBV-2851, GLPG2737, ABBV-3221, ABBV-3748, ABBV-3903, ABBV-119 i PTI-801.
[0248] U nekim realizacijama, kombinovane terapije date ovde obuhvataju (a) jedinjenje izabrano od jedinjenja Formula I, I’, I", I′′, Ia, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf, jedinjenja 1 do 53, jedinjenja 54 do 77, i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata; i (b) najmanje dva jedinjenja izabrana od jedinjenja objavljenih u WO 2019/195739, WO 2019/200246, WO 2021/030555, WO 2021/030556, WO 2017/173274, WO 2019/010092, WO 2019/018353, WO 2010/053471, WO 2011/119984, WO 2011/133751, WO 2011/133951, WO 2015/160787, WO 2007/056341, WO 2009/073757, WO 2009/076142, WO 20 2018/107100, WO 2019/113476, WO 2018/064632, WO 2019/152940, WO 2016/057572, WO 2021/030554, WO 2020/206080, WO 2016/105485, US 2016-0120841, US 2017-0101405, WO 2017/009804, WO 2018/065921, WO 2017/062581, Časopis za cističnu fibrozu (2018), 17(5), 595-606, Pedemonte, N. i dr., Sci. Adv. 2020, 6 (8), eaay9669, Fuan, P.-V. i dr. Sci. Rep. 2019, 9 (1), 17640, Boze, S. i dr. J. Cyst. Fibros. 2020, 19 Suppl 1, S25-S32, Kroford, D.K. J. Pharmacol. Exp. Ther. 2020, 374 25 (2), 264-272, Brasel, E.J. i dr. PLoS One 2019, 14 (12), e0223954, Smit, N.J., Solovej, K.F., Pharm. Pat. Anal.
2017, 6 (4), 179-188, Kuncelman, K. i dr., Front. Pharmacol. 2019, 10, 3, ili Sin, J.-H. et al., Eur. J. of Med. Chem. 2020, 112888.
[0249] U nekim realizacijama, kombinovane terapije date ovde obuhvataju (a) jedinjenje izabrano iz jedinjenja Formula I, I’, I", I′′′, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’,IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf , jedinjenja 1 do 53, jedinjenja 54 do 77 i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata; i (b) najmanje dva jedinjenja izabrana iz Jedinjenja II, Jedinjenja IV, Jedinjenja V, Jedinjenja VI, Jedinjenja VII, Jedinjenja VIII, Jedinjenja IX, Jedinjenja X, PTI-428, ASP-11, ABBV-2222, ABBV-2851, GLPG2737, ABBV-3221, ABBV-3748, ABBV-3903, ABBV-119 i PTI-801, i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i njihovih deuterizovanih derivata.
[0250] U nekim realizacijama, kombinovane terapije date ovde obuhvataju (a) jedinjenje izabrano iz jedinjenja Formula I, I’, I", I′′′, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf, jedinjenja 1 do 53, jedinjenja 54 do 77 i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata; (b) najmanje jedno jedinjenje izabrano iz Jedinjenja II, Jedinjenja III, Jedinjenja III-d, Jedinjenja IV, Jedinjenja V, Jedinjenja VI, Jedinjenja VII, Jedinjenja VIII, Jedinjenja IX, Jedinjenja X, PTI-428, ASP-11, ABBV-2222, ABBV-2851, GLPG2737, ABBV-3221, ABBV-3748, ABBV-3903, ABBV-119, FDL-169, ARN5562, ARN21586, ARN22081, ARN22652, ARN23765, ARN23766, PTI-801, FDL-176, PTI-808 (dirokaftor), GLPG1837, GLPG2451/ABBV-2451, QBW251 (icentikaftor), GLPG3067/ABBV-3067 (Navokaftor), ABBV-191, ELX-02, MRT5005, Lunar-CF, RCT223, amilorid, ETD001, CF552, GS-9411, GS-5737, P-1037 (VX-371), P-1055 (VX-551), AZD5634, SPX-101, Ionis-ENaC-2.5 Rx, BI 1265162, AZ5634, ARO-ENaC1001, ETD002 i DS-1039, i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata; i (c) najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv nosač.
[0251] U nekim realizacijama, najmanje jedno jedinjenje izabrano iz jedinjenja Formula I, I’, I", I′′′, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf , jedinjenja 1 do 53, jedinjenja 54 do 77 i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata, primenjuje se u kombinaciji sa najmanje jednim izabranim jedinjenjem iz Jedinjenja II i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata. U nekim realizacijama, najmanje jedno jedinjenje izabrano iz jedinjenja Formula I, I’, I", I′′, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf, Jedinjenja 1 do 53, Jedinjenja 54 do 77 i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata primenjuje se u kombinaciji sa najmanje jednim jedinjenjem izabranim iz Jedinjenja IV i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata. U nekim realizacijama, najmanje jedno jedinjenje izabrano iz jedinjenja Formula I, I’, I", I′′, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf, Jedinjenja 1 do 53, Jedinjenja 54 do 77 i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata primenjuje se u kombinaciji sa najmanje jednim jedinjenjem izabranim iz Jedinjenja V i njegove farmaceutski prihvatljive soli i deuterizovanih derivata. U nekim realizacijama, najmanje jedno jedinjenje izabrano iz jedinjenja Formula I, I’, I", I′′, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf , jedinjenja 1 do 53, jedinjenja 54 do 77 i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata primenjuje se u kombinaciji sa najmanje jednim jedinjenjem izabranim iz Jedinjenja VI i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata. U nekim realizacijama, najmanje jedno jedinjenje izabrano iz jedinjenja Formula I, I’, I", I′′, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf , jedinjenja 1 do 53, jedinjenja 54 do 77 i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata primenjuje se u kombinaciji sa najmanje jednim jedinjenjem izabranim iz Jedinjenja VII i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata. U nekim realizacijama, najmanje jedno jedinjenje izabrano iz jedinjenja Formula I, I’, I", I′′, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf , jedinjenja 1 do 53, jedinjenja 54 do 77 i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata primenjuje se u kombinaciji sa najmanje jednim jedinjenjem izabranim iz Jedinjenja VIII i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli i njegovih deuterizovanih derivata.
[0252] Svako od jedinjenja Formula I, I’, I", I′′, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf, jedinjenja 1 do 53, jedinjenja 54 do 77, Jedinjenja II, Jedinjenja IV, Jedinjenja V, Jedinjenja VI, Jedinjenja VII, Jedinjenja VIII, Jedinjenja IX, Jedinjenja X i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata, nezavisno se može primenjivati jednom dnevno, dva puta dnevno ili tri puta dnevno. U nekim realizacijama, najmanje jedno jedinjenje izabrano iz jedinjenja Formula I, I’, I", I′′, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf , jedinjenja 1 do 53, jedinjenja 54 do 77 i farmaceutski prihvatljivih soli i njihovi deuterizovanih derivata se primenjuju jednom dnevno. U nekim realizacijama, najmanje jedno jedinjenje izabrano iz jedinjenja Formula I, I’, I", I′′, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf, jedinjenja 1 do 53, jedinjenja 54 do 77 i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata primenjuje se dva puta dnevno. U nekim realizacijama, najmanje jedno jedinjenje izabrano iz jedinjenja Formula I, I’, I", I′′, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf, jedinjenja 1 do 53, jedinjenja 54 do 77 i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata i najmanje jedno jedinjenje izabrano iz Jedinjenja II i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli primenjuju se jednom dnevno. U nekim realizacijama, najmanje jedno jedinjenje izabrano iz jedinjenja Formula I, I’, I", I′′, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf, jedinjenja 1 do 53, jedinjenja 54 do 77 i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata i najmanje jedno jedinjenje izabrano iz Jedinjenja II i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli se primenjuju dva puta dnevno. U nekim realizacijama, najmanje jedno jedinjenje izabrano iz jedinjenja Formula I, I’, I", I′′, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf, jedinjenja 1 do 53, jedinjenja 54 do 77 i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata i najmanje jedno jedinjenje izabrano iz Jedinjenja IV i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli od njih se primenjuju jednom dnevno. U nekim realizacijama, najmanje jedno jedinjenje izabrano iz jedinjenja Formula I, I’, I", I′′, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf, jedinjenja 1 do 53, jedinjenja 54 do 77 i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata i najmanje jedno jedinjenje izabrano iz Jedinjenja IV i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli se primenjuju dva puta dnevno. U nekim realizacijama, najmanje jedno jedinjenje izabrano iz jedinjenja Formula I, I’, I", I"’, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf, jedinjenja 1 do 53, jedinjenja 54 do 77 i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata i najmanje jedno jedinjenje izabrano iz Jedinjenja V i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli se primenjuju jednom dnevno. U nekim realizacijama, najmanje jedno jedinjenje izabrano iz jedinjenja Formula I, I’, I", I′′′, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf, jedinjenja 1 do 53, jedinjenja 54 do 77 i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata i najmanje jedno jedinjenje izabrano iz Jedinjenja V i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli primenjuju se dva puta dnevno. U nekim realizacijama, najmanje jedno jedinjenje izabrano iz jedinjenja Formula I, I’, I", I′′, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf, Jedinjenja 1 do 53, Jedinjenja 54 do 77 i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata i najmanje jedno jedinjenje izabrano iz Jedinjenja VI i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli se primenjuju jednom dnevno. U nekim realizacijama, najmanje jedno jedinjenje izabrano iz jedinjenja Formula I, I’, I", I′′, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf, Jedinjenja 1 do 53, Jedinjenja 54 do 77 i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata i najmanje jedno jedinjenje izabrano iz Jedinjenja VI i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli se primenjuju dva puta dnevno. U nekim realizacijama, najmanje jedno jedinjenje izabrano iz jedinjenja Formula I, I’, I", I′′, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf, jedinjenja 1 do 53, jedinjenja 54 do 77 i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata i najmanje jedno jedinjenje izabrano iz Jedinjenja VII i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli primenjuju se jednom dnevno. U nekim realizacijama, najmanje jedno jedinjenje izabrano iz jedinjenja Formula I, I’, I", I′′, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf, jedinjenja 1 do 53, jedinjenja 54 do 77 i njihove farmaceutski prihvatljive soli i deuterizovanih derivata i najmanje jedno jedinjenje izabrano iz Jedinjenja VII i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli primenjuju se dva puta dnevno. U nekim realizacijama, najmanje jedno jedinjenje izabrano iz jedinjenja Formula I, I’, I", I′′, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf, Jedinjenja 1 do 53, Jedinjenja 54 do 77 i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata i najmanje jedno jedinjenje izabrano iz Jedinjenja VIII i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli se primenjuju jednom dnevno. U nekim realizacijama, najmanje jedno jedinjenje izabrano iz jedinjenja Formula I, I’, I", I′′, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf, Jedinjenja 1 do 53, Jedinjenja 54 do 77 i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata i najmanje jedno jedinjenje izabrano iz Jedinjenja VIII i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli se primenjuju dva puta dnevno.
[0253] U nekim realizacijama, najmanje jedno jedinjenje izabrano iz jedinjenja Formula I, I’, I", I"’, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf , jedinjenja 1 do 53, jedinjenja 54 do 77 i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata; najmanje jedno jedinjenje izabrano iz Jedinjenja II, Jedinjenja IV i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli; i najmanje jedno jedinjenje izabrano iz Jedinjenja V, Jedinjenja VI, Jedinjenja VII, Jedinjenja VIII, Jedinjenja IX, Jedinjenja X i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli primenjuju se jednom dnevno. U nekim realizacijama, najmanje jedno jedinjenje izabrano iz jedinjenja Formula I, I’, I", I′′, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf, jedinjenja 1 do 53, jedinjenja 54 do 77 i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata; najmanje jedno jedinjenje izabrano iz Jedinjenja II, Jedinjenja IV i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli; i najmanje jedno jedinjenje izabrano iz Jedinjenja V, Jedinjenja VI, Jedinjenja VII, Jedinjenja VIII, Jedinjenja IX, Jedinjenja X i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli primenjuju se dva puta dnevno. U nekim realizacijama, najmanje jedno jedinjenje izabrano iz jedinjenja Formula I, I’, I", I′′, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf , jedinjenja 1 do 53, jedinjenja 54 do 77 i njihove farmaceutski prihvatljive soli i deuterizovanih derivata; najmanje jedno jedinjenje izabrano iz Jedinjenja II i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli; i najmanje jedno jedinjenje izabrano iz Jedinjenja VII i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli primenjuju se jednom dnevno. U nekim realizacijama, najmanje jedno jedinjenje izabrano iz jedinjenja Formula I, I’, I", I′′, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf, jedinjenja 1 do 53, jedinjenja 54 do 77 i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata; najmanje jedno jedinjenje izabrano iz Jedinjenja II i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli; i najmanje jedno jedinjenje izabrano iz Jedinjenja VII i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli primenjuju se dva puta dnevno.
[0254] Jedinjenja Formula I, I’, I", I′′, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf, jedinjenja 1 do 53, jedinjenja 54 do 77, Jedinjenje II, Jedinjenje IV, Jedinjenje V, Jedinjenje VI, Jedinjenje VII, Jedinjenje VIII, Jedinjenje IX, Jedinjenje X i njihove farmaceutski prihvatljive soli i deuterizovani derivati mogu se primenjivati u jednoj farmaceutskoj kompoziciji ili odvojenim farmaceutskim kompozicijama. Takve farmaceutske kompozicije mogu se primenjivati jednom dnevno ili više puta dnevno, kao što je dva puta dnevno. Kako se ovde koristi, fraza da se data količina API (npr. Jedinjenje II, Jedinjenje VII ili njihove farmaceutski prihvatljive soli) primenjuje jednom ili dva puta dnevno ili dnevno znači da se navedena data količina primenjuje po doziranju, što se može desiti jednom ili dva puta dnevno.
[0255] U nekim realizacijama, najmanje jedno jedinjenje izabrano iz jedinjenja Formula I, I’, I", I′′′, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf , jedinjenja 1 do 53, jedinjenja 54 do 77 i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata primenjuje se u prvoj farmaceutskoj kompoziciji; i najmanje jedno jedinjenje izabrano iz Jedinjenja VII i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli primenjuje se u drugoj farmaceutskoj kompoziciji.
[0256] U nekim realizacijama, najmanje jedno jedinjenje izabrano iz jedinjenja Formula I, I’, I", I"’, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf , jedinjenja 1 do 53, jedinjenja 54 do 77 i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i njihovih deuterizovanih derivata se primenjuju u prvoj farmaceutskoj kompoziciji; najmanje jedno jedinjenje izabrano iz Jedinjenja II i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli se primenjuje u drugoj farmaceutskoj kompoziciji; i najmanje jedno jedinjenje izabrano iz Jedinjenja VII i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli se primenjuje u trećoj farmaceutskoj kompoziciji.
[0257] Bilo koja pogodna farmaceutska kompozicija poznata u struci može se koristiti za jedinjenja Formula I, I’, I", I′′, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf , Jedinjenja 1 do 53, Jedinjenja 54 do 77, Jedinjenje II, Jedinjenje IV, Jedinjenje V, Jedinjenje VI, Jedinjenje VII, Jedinjenje VIII, Jedinjenje IX, Jedinjenje X, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i deuterizovane derivate. Neke primerne farmaceutske kompozicije za Jedinjenje II i njegove farmaceutski prihvatljive soli mogu se nać i u WO 2011/119984 i WO 2014/014841. Neke primerne farmaceutske kompozicije za Jedinjenje III i njegove farmaceutski prihvatljive soli mogu se nać i u WO 2007/134279, WO 2010/019239, WO 2011/019413, WO 2012/027731, i WO 2013/130669, a neke primerne farmaceutske kompozicije za Jedinjenje III-d i njegove farmaceutski prihvatljive soli mogu se nać i u US 8,865,902, US 9,181,192, US 9,512,079, WO 2017/053455 i WO 2018/080591. Neke primerne farmaceutske kompozicije za Jedinjenje IV i njegove farmaceutski prihvatljive soli mogu se nać i u WO 2010/037066, WO 2011/127421 i WO 2014/071122. Neke primerne farmaceutske kompozicije za Jedinjenje V i njegove farmaceutski prihvatljive soli mogu se nać i u WO 2019/152940. Neke primerne farmaceutske kompozicije za Jedinjenje VI i njegove farmaceutski prihvatljive soli mogu se na ć i u WO 2019/079760.
Farmaceutske kompozicije
[0258] Još jedan aspekt pronalaska obezbeđuje farmaceutsku kompoziciji koji sadrži najmanje jedno jedinjenje izabrano iz jedinjenja Formula I, I’, I", I′′′, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf, jedinjenja 1 do 53, jedinjenja 54 do 77 i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata, i najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv nosa č.
[0259] U nekim realizacijama, pronalazak daje farmaceutske kompozicije koje sadr že najmanje jedno jedinjenje izabrano iz jedinjenja Formula I, I’, I", I"’, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf, jedinjenja 1 do 53, jedinjenja 54 do 77 i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata u kombinaciji sa najmanje jednim dodatnim aktivnim farmaceutskim sastojkom. U nekim realizacijama, najmanje jedan dodatni aktivni farmaceutski sastojak je CFTR modulator. U nekim realizacijama, najmanje jedan dodatni aktivni farmaceutski sastojak je CFTR korektor. U nekim realizacijama, najmanje jedan dodatni aktivni farmaceutski sastojak je CFTR potencijator. U nekim realizacijama, najmanje jedan dodatni aktivni farmaceutski sastojak je jedinjenje koje poja čava CFTR potencijaciju, tj. pojačivač/ko-potencijator CFTR potencijatora. U nekim realizacijama, najmanje jedan dodatni aktivni farmaceutski sastojak je CFTR pojačavač. U nekim realizacijama, najmanje jedan dodatni aktivni farmaceutski sastojak je CFTR sredstvo za očitavanje. U nekim realizacijama, najmanje jedan dodatni aktivni farmaceutski sastojak je CFTR terapija nukleinskom kiselinom. U nekim realizacijama, najmanje jedan dodatni aktivni farmaceutski sastojak je ENaC inhibitor. U nekim realizacijama, najmanje jedan dodatni aktivni farmaceutski sastojak je TMEM16A modulator. U nekim realizacijama, najmanje jedan dodatni aktivni farmaceutski sastojak je GPR39 agonist. U nekim realizacijama, farmaceutska kompozicija sadrži najmanje jedno jedinjenje izabrano iz jedinjenja Formula I, I’, I", I"’, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf, jedinjenja 1 do 53, jedinjenja 54 do 77 i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata i najmanje dva dodatna aktivna farmaceutska sastojka, od kojih je svaki CFTR korektor. U nekim realizacijama, farmaceutska kompozicija sadr ži najmanje jedno jedinjenje izabrano iz jedinjenja Formula I, I’, I", I"’, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf, jedinjenja 1 do 53, jedinjenja 54 do 77 i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata i najmanje dva dodatna aktivna farmaceutska sastojka, od kojih je jedan korektor CFTR-a, a jedan pojačivač CFTR-a.
[0260] U nekim realizacijama, pronalazak daje farmaceutsku kompoziciju koja sadr ži (a) najmanje jedno jedinjenje izabrano iz jedinjenja Formula I, I’, I", I′′′, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf, jedinjenja 1 do 53, jedinjenja 54 do 77 i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata, (b) najmanje jedno jedinjenje izabrano iz Jedinjenja II, Jedinjenja IV, Jedinjenja V, Jedinjenja VI, Jedinjenja VII, Jedinjenja VIII, Jedinjenja IX, Jedinjenja X, i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, i (c) najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv nosač.
[0261] U nekim realizacijama, pronalazak daje farmaceutsku kompoziciju koja sadr ži (a) najmanje jedno jedinjenje izabrano iz jedinjenja Formula I, I’, I", I′′, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf, jedinjenja 1 do 53, jedinjenja 54 do 77 i njihove farmaceutske prihvatljive soli i deuterizovane derivate, (b) najmanje jedno jedinjenje izabrano iz Jedinjenja II i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli, i (c) najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv nosač.
[0262] U nekim realizacijama, pronalazak daje farmaceutsku kompoziciju koja sadr ži (a) najmanje jedno jedinjenje izabrano iz jedinjenja Formula I, I’, I", I′′′, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf, jedinjenja 1 do 53, jedinjenja 54 do 77 i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata, (b) najmanje jedno jedinjenje izabrano iz Jedinjenja VII i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli, i (c) najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv nosač.
[0263] U nekim realizacijama, pronalazak daje farmaceutsku kompoziciju koja sadr ži (a) najmanje jedno jedinjenje izabrano iz jedinjenja Formula I, I’, I", I′′, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf, jedinjenja 1 do 53, jedinjenja 54 do 77, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i deuterizovane derivate, (b) najmanje jedno jedinjenje izabrano iz Jedinjenja II, Jedinjenja IV i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, (c) najmanje jedno jedinjenje izabrano iz Jedinjenja V, Jedinjenja VI, Jedinjenja VII, Jedinjenja VIII, Jedinjenja IX, Jedinjenja X i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, i (d) najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv nosač.
[0264] U nekim realizacijama, pronalazak daje farmaceutsku kompoziciju koja sadr ži (a) najmanje jedno jedinjenje izabrano iz jedinjenja Formule I, I’, I", I′′′, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf, Jedinjenja 1 do 53, Jedinjenja 54 do 77, i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata, (b) najmanje jedno jedinjenje izabrano iz Jedinjenja II i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli, (c) najmanje jedno jedinjenje izabrano iz Jedinjenja VII i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli, i (d) najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv nosa č.
[0265] U nekim realizacijama, pronalazak daje farmaceutsku kompoziciju koja sadr ži (a) jedinjenje izabrano iz jedinjenja Formula I, I’, I", I′′, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf, Jedinjenja 1 do 53, jedinjenja 54 do 77, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i deuterizovane derivate; (b) najmanje jedno jedinjenje izabrano iz Jedinjenja II, Jedinjenja IV, Jedinjenja V, Jedinjenja VI, Jedinjenja VII, Jedinjenja VIII, Jedinjenja IX, Jedinjenja X, i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata; (c) najmanje jedno jedinjenje izabrano iz jedinjenja objavljenih u WO 2016/105485, US br. 2016-0120841, US 2017-0101405, WO 2017/009804, WO 2018/065921, WO 2017/062581, časopisa za cističnu fibrozu (2018), 17(5), 595-606, Pedemonte, N. i dr. Sci. Adv. 2020, 6 (8), eaay9669, Fuan, P.-V. i dr. Sci. Rep. 2019, 9 (1), 17640, Boze, S. i dr. J. Cyst. Fibros. 2020, 19 Suppl 1, S25-S32, Kroford, D.K. J. Pharmacol. Exp. Ther. 2020, 374 (2), 264-272, Brasell, E.J. et al. PLoS One 2019, 14 (12), e0223954, Smith, N.J, Solovay, C.F., Pharm. Pat. Anal. 2017, 6 (4), 179-188, Kunzelmann, K. et al., Front. Pharmacol. 2019, 10, 3, ili Son, J.-H. et al., Eur. J. of Med. Chem. 2020, 112888; i (d) najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv nosač.
[0266] U nekim realizacijama, farmaceutske kompozicije ovde date sadrže (a) jedinjenje izabrano iz jedinjenja Formula I, I’, I", I′′′, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf, jedinjenja 1 do 53, jedinjenja 54 do 77 i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata; (b) najmanje jedno jedinjenje izabrano iz Jedinjenja II, Jedinjenja IV, Jedinjenja V, Jedinjenja VI, Jedinjenja VII, Jedinjenja VIII, Jedinjenja IX, Jedinjenja X, i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata; (c) najmanje jedno jedinjenje izabrano iz PTI-428, ASP-11, ABBV-2222, ABBV-2851, GLPG2737, ABBV-3221, ABBV-3748, ABBV-3903, ABBV-119, i PTI-801; i (d) najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv nosač.
[0267] U nekim realizacijama, farmaceutske kompozicije date ovde sadrže (a) jedinjenje izabrano iz jedinjenja Formula I, I’, I", I′′′, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf , jedinjenja 1 do 53, jedinjenja 54 do 77, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i deuterizovane derivate; (b) najmanje dva jedinjenja izabrana od jedinjenja objavljenih u WO 2019/195739, WO 2019/200246, WO 2021/030555, WO 2021/030556, WO 2017/173274, WO 2019/010092, WO 2019/018353, WO 2010/053471, WO 2011/119984, WO 2011/133751, WO 2011/133951, WO 2015/160787, WO 2007/056341, WO 2009/073757, WO 2009/076142, WO 2018/107100, WO 2019/113476, WO 2018/064632, WO 2019/152940, WO 2016/057572, WO 2021/030554, WO 2020/206080, WO 2016/105485, US 2016-0120841, US 2017-0101405, WO 2017/009804, WO 2018/065921, WO 2017/062581, Časopisa za cističnu fibrozu (2018), 17(5), 595-606, Pedemonte, N. i dr., Sci. Adv. 2020, 6 (8), eaay9669, Fuan, P.-V. i dr. Sci. Rep. 2019, 9 (1), 17640, Boze, S. i dr. J. Cyst. Fibros. 2020, 19 Suppl 1, S25-S32, Kroford, D.K. J. Pharmacol. Exp. Ther. 2020, 374 (2), 264-272, Brasel, E.J. i dr. PLoS One 2019, 14 (12), e0223954, Smit, N.J., Solovej, C.F., Pharm. Pat. Anal. 2017, 6 (4), 179-188, Kuncelman, K. i dr., Front. Pharmacol. 2019, 10, 3, ili Son, J.-H. i dr., Eur. J. of Med. Chem. 2020, 112888; i (c) najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv nosač.
[0268] U nekim realizacijama, farmaceutske kompozicije date ovde sadrže (a) jedinjenje izabrano iz jedinjenja Formula I, I’, I", I′′′, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf , jedinjenja 1 do 53, jedinjenja 54 do 77 i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata; (b) najmanje dva jedinjenja izabrana iz Jedinjenja II, Jedinjenja IV, Jedinjenja V, Jedinjenja VI, Jedinjenja VII, Jedinjenja VIII, Jedinjenja IX, Jedinjenja X, PTI-428, ASP-11, ABBV-2222, ABBV-2851, GLPG2737, ABBV-3221, ABBV-3748, ABBV-3903, ABBV-119 i PTI-801, i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata; i (c) najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv nosa č.
[0269] U nekim realizacijama, farmaceutske kompozicije ovde date sadrže (a) jedinjenje izabrano iz jedinjenja Formula I, I’, I", I′′′, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf, jedinjenja 1 do 53, jedinjenja 54 do 77, i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata; (b) najmanje jedno jedinjenje izabrano iz Jedinjenja II, Jedinjenja III-a, Jedinjenja IV, Jedinjenja V, Jedinjenja VI, Jedinjenja VII, Jedinjenja VIII, Jedinjenja IX, Jedinjenja X, PTI-428, ASP-11, ABBV-2222, ABBV-2851, GLPG2737, ABBV-3221, ABBV-3748, ABBV-3903, ABBV-119, FDL-169, ARN5562, ARN21586, ARN22081, ARN22652, ARN23765, ARN23766, PTI-801, FDL-176, PTI-808 (dirokaftor), GLPG1837, GLPG2451/ABBV-2451, QBW251 (icentikaftor), GLPG3067/ABBV-3067 (Navokaftor), ABBV-191, ELX-02, MRT5005, Lunar-CF, RCT223, amilorid, ETD001, CF552, GS-9411, GS-5737, P-1037 (VX-371), P-1055 (VX-551), AZD5634, SPX-101, Ionis-ENaC-2.5 Rx, BI 1265162, AZ5634, ARO-ENaC1001, ETD002 i DS-1039, i njihove farmaceutski prihvatljive soli i deuterizovani derivati; i (c) najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv nosač.
[0270] Bilo koja farmaceutska kompozicija opisana ovde može da sadrži najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv nosač. U nekim realizacijama, najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv nosa č je izabran iz farmaceutski prihvatljivih nosača i farmaceutski prihvatljivih adjuvanasa. U nekim realizacijama, najmanje jedno farmaceutski prihvatljivo sredstvo je izabrano iz farmaceutski prihvatljivih punila, dezintegratora, surfaktanata, veziva, maziva.
[0271] Farmaceutske kompozicije opisane ovde su korisne za lečenje cistične fibroze i drugih bolesti posredovanih CFTR-om.
[0272] Kao što je napred opisano, farmaceutske kompozicije opisane ovde mogu opciono dodatno da sadrže najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv nosač. Najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv nosač može biti izabran iz adjuvanata i nosača. Najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv nosač, kako se ovde koristi, uključuje sve rastvarače, razblaživače, druge tečne nosače, pomoć na sredstva za disperziju, pomoć na sredstva za suspenziju, površinski aktivna sredstva, izotonična sredstva, sredstva za zgušnjavanje, emulgatore, konzervanse, čvrsta veziva i maziva, kako je pogodno za određeni željeni oblik doziranja. Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21. izdanje, 2005, ur. D.B. Troj, Lipinkot Wilijams i Wilkins, Filadelfija, i Encyclopedia of Pharmaceutical Technology, ur. J. Svarbrik i J. C. Bojlan, 1988-1999, Marsel Deker, Njujork, otkriva različite nosače koji se koriste u formulisanju farmaceutskih kompozicija i poznate tehnike za njihovu pripremu. Osim ukoliko je bilo koji konvencionalni nosa č nekompatibilan sa jedinjenjima ovog pronalaska, na primer tako što proizvodi bilo kakav neželjeni biološki efekat ili na drugi način štetno interaguje sa bilo kojom drugom komponentom(ma) farmaceutske kompozicije, smatra se da je njegova upotreba nepoželjna u okviru ovog pronalaska. Neograničavajuć i primeri pogodnih farmaceutski prihvatljivih nosača uključuju, ali nisu ograničeni na, jonske izmenjivače, aluminijum oksid, aluminijum stearat, lecitin, serumske proteine (kao što je ljudski serumski albumin), puferske supstance (kao što su fosfati, glicin, sorbinska kiselina i kalijum sorbat), delimične gliceridne smeše zasić enih biljnih masnih kiselina, vodu, soli i elektrolite (kao što su protamin sulfat, dinatrijum hidrogenfosfat, kalijum hidrogenfosfat, natrijum hlorid i cinkove soli), koloidni silicijum dioksid, magnezijum trisilikat, polivinil pirolidon, poliakrilate, voskove, polietilen-polioksipropilen blok polimere, vunenu mast, šeć ere (kao što su laktoza, glukoza i saharoza), skrobove (kao što su kukuruzni skrob i skrob od krompira), celulozu i njene derivate (kao što su natrijum karboksimetil celuloza, etil celuloza i celulozni acetat), praškasti tragakant, slad, želatin, talk, ekscipijente (kao što su kakao puter i voskovi za supozitorije), ulja (kao što su ulje od kikirikija, ulje od semena pamuka, ulje šafrane, susamovo ulje, maslinovo ulje, kukuruzno ulje i sojino ulje), glikoli (kao što su propilen glikol i polietilen glikol), estri (kao što su etil oleat i etil laurat), agar, puferi (kao što su magnezijum hidroksid i aluminijum hidroksid), alginska kiselina, voda bez pirogena, izotonični fiziološki rastvor, Ringerov rastvor, etil alkohol, rastvori fosfatnog pufera, netoksična kompatibilna maziva (kao što su natrijum lauril sulfat i magnezijum stearat), boje, sredstva za oslobađanje, sredstva za premazivanje, zaslađivači, sredstva za poboljšanje ukusa, parfimerski agensi, konzervansi i antioksidansi.
Jedinjenje 11 Heptan solvat
[0273] U nekim realizacijama, pronalazak pruža solvatirane kristalne oblike Jedinjenja 11. U nekim realizacijama, solvatirani kristalni oblik je heptan solvat. U nekim realizacijama, pronalazak pru ža heptan solvat Jedinjenja 11. Slika 1 prikazuje rendgenski difraktogram praha heptan solvata Jedinjenja 11 na sobnoj temperaturi.
[0274] U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je suštinski čist. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je suštinski kristalan. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan rendgenskim difraktogramom praha generisanim rendgenskom difrakcijom praha sa upadnim snopom Cu Ka zračenja. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 ima mnogo molekula u asimetričnoj jedinici. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je fizi čka smeša kristalnih rešetki. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 ima promenljivu količinu heptana u kristalnoj rešetki. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 ima stehiometrijsku koli činu heptana u kristalnoj rešetki. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 ima nestehiometrijsku količinu heptana u kristalnoj rešetki.
[0275] U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 karakteri še se rendgenskim difraktogramom praha koji ima signal na 5,8 ± 0,2 stepena dva teta. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 karakteriše se rendgenskim difraktogramom praha koji ima signal na 10,1 ± 0,2 stepena dva teta. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 karakteriše se rendgenskim difraktogramom praha koji ima signal na 11,7 ± 0,2 stepena dva teta. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 karakteri še se rendgenskim difraktogramom praha koji ima jedan, dva ili tri signala izabrana od 5,8 ± 0,2 stepena dva teta, 10,1 ± 0,2 stepena dva teta i 11,7 ± 0,2 stepena dva teta.
[0276] U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 karakteriše se rendgenskim difraktogramom praha koji ima (a) jedan, dva ili tri signala izabrana od 5,8 ± 0,2 stepena dva teta, 10,1 ± 0,2 stepena dva teta i 11,7 ± 0,2 stepena dva teta, i (b) jedan, dva, tri ili četiri signala izabrana od 5,6 ± 0,2 stepena dva teta, 18,1 ± 0,2 stepena dva teta, 20,5 ± 0,2 stepena dva teta i 20,9 ± 0,2 stepena dva teta. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 karakteriše se rendgenskim difraktogramom praha koji ima signale na 5,6 ± 0,2 stepena dva teta, 5,8 ± 0,2 stepena dva teta, 10,1 ± 0,2 stepena dva teta, 11,7 ± 0,2 stepena dva teta, 18,1 ± 0,2 stepena dva teta, 20,5 ± 0,2 stepena dva teta i 20,9 ± 0,2 stepena dva teta.
[0277] U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 karakteriše se rendgenskim difraktogramom praha suštinski sličnim Slici 1.
[0278] U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 karakteri še se<13>C SSNMR spektrom sa pikom na 166,3 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan kao da ima<13>C SSNMR spektar sa pikom na 165,8 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan kao da ima<13>C SSNMR spektar sa pikom na 164,6 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan kao kao da ima<13>C SSNMR spektar sa pikom na 163,4 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan kao da ima<13>C SSNMR spektar sa pikom na 154,8 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan kao da ima<13>C SSNMR spektar sa pikom na 154,0 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan kao da ima<13>C SSNMR spektar sa pikom na 152,1 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan kao da ima<13>C SSNMR spektar sa pikom na 151,6 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan kao da ima<13>C SSNMR spektar sa pikom na 140,2 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan kao da ima<13>C SSNMR spektar sa pikom na 139,4 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan kao da ima<13>C SSNMR spektar sa pikom na 138,5 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan kao da ima<13>C SSNMR spektar sa pikom na 138,0 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan kao da ima<13>C SSNMR spektar sa pikom na 135,1 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan kao da ima<13>C SSNMR spektar sa pikom na 134,6 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan kao da ima<13>C SSNMR spektar sa pikom na 131,3 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan kao da ima<13>C SSNMR spektar sa pikom na 130,2 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan kao da ima<13>C SSNMR spektar sa pikom na 129,6 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan kao da ima<13>C SSNMR spektar sa pikom na 128,5 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan kao da ima<13>C SSNMR spektar sa pikom na 125,7 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan kao da ima 13C SSNMR spektar sa pikom na 123,7 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan kao da ima<13>C SSNMR spektar sa pikom na 123,2 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan kao da ima<13>C SSNMR spektar sa pikom na 122,9 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan kao<13>C SSNMR spektar sa pikom na 121,1 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan kao<13>C SSNMR spektar sa pikom na 120,2 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan kao<13>C SSNMR spektar sa pikom na 119,2 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan kao<13>C SSNMR spektar sa pikom na 117,8 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan kao<13>C SSNMR spektar sa pikom na 76,2 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan kao<13>C SSNMR spektar sa pikom na 74,4 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan kao<13>C SSNMR spektar sa pikom na 73,7 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan kao<13>C SSNMR spektar sa pikom na 73,3 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan kao<13>C SSNMR spektar sa pikom na 40,0 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan kao<13>C SSNMR spektar sa pikom na 38,6 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 karakteri še se kao<13>C SSNMR spektar sa pikom na 37,6 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 karakteri še se kao<13>C SSNMR spektar sa pikom na 36,9 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 karakteriše se kao<13>C SSNMR spektar sa pikom na 35,7 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 karakteriše se kao<13>C SSNMR spektar sa pikom na 33,6 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 karakteriše se kao<13>C SSNMR spektar sa pikom na 32,5 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan kao da ima<13>C SSNMR spektar sa pikom na 32,0 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan kao da ima<13>C SSNMR spektar sa pikom na 30,4 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan kao da ima<13>C SSNMR spektar sa pikom na 30,1 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan kao da ima<13>C SSNMR spektar sa pikom na 29,5 ± 0,235 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan kao da ima<13>C SSNMR spektar sa pikom na 28,8 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 karakteri še se kao<13>C SSNMR spektar sa pikom na 28,1 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 karakteriše se kao<13>C SSNMR spektar sa pikom na 27,1 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 karakteriše se kao<13>C SSNMR spektar sa pikom na 25,3 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 karakteriše se kao<13>C SSNMR spektar sa pikom na 23,1 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 karakteriše se kao<13>C SSNMR spektar sa pikom na 22,7 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan kao da ima<13>C SSNMR spektar sa pikom na 22,0 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan kao da ima<13>C SSNMR spektar sa pikom na 21,6 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan kao da ima<13>C SSNMR spektar sa pikom na 20,3 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan kao da ima<13>C SSNMR spektar sa pikom na 19,6 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan kao<13>C SSNMR spektar sa pikom na 18,3 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan kao<13>C SSNMR spektar sa pikom na 17,6 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan kao<13>C SSNMR spektar sa pikom na 13,8 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan kao<13>C SSNMR spektar sa pikom na 13,1 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan kao<13>C SSNMR spektar sa pikom na 12,5 ± 0,2 ppm.
[0279] U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan kao da ima<13>C SSNMR spektar sa jednim, dva, tri, četiri, pet, šest, sedam, osam, devet, deset ili više vrhova izabranih od 166,3 ± 0,2 ppm, 165,8 ± 0,2 ppm, 164,6 ± 0,2 ppm, 163,4 ± 0,2 ppm, 154,8 ± 0,2 ppm, 154,0 ± 0,2 ppm, 152,1 ± 0,2 degppm, 151,6 ± 0,2 ppm, 140,2 ± 0,2 ppm, 139,4 ± 0,2 ppm, 138,5 ± 0,2 ppm, 138,0 ± 0,2 ppm, 135,1 ± 0,2 ppm, 134,6 ± 0,2 ppm, 131,3 ± 0,2 ppm, 130,2 ± 0,2 ppm, 129,6 ± 0,2 ppm, 128,5 ± 0,2 ppm, 125,7 ± 0,2 ppm, 123,7 ± 0,2 ppm, 123,2 ± 0,2 ppm, 122,9 ± 0,2 ppm, 121,1 ± 0,2 ppm, 120,2 ± 0,2 ppm, 119,2 ± 0,2 ppm, 117,8 ± 0,2 ppm, 76,2 ± 0,2 ppm, 74,4 ± 0,2 ppm, 73,7 ± 0,2 ppm, 73,3 ± 0,2 ppm, 40,0 ± 0,2 ppm, 38,6 ± 0,2 ppm, 37,6 ± 0,2 ppm, 36,9 ± 0,2 ppm, 35,7 ± 0,2 ppm, 33,6 ± 0,2 ppm, 32,5 ± 0,2 ppm, 32,0 ± 0,2 ppm, 30,4 ± 0,2 ppm, 30,1 ± 0,2 ppm, 29,5 ± 0,2 ppm, 28,8 ± 0,2 ppm, 28,1 ± 0,2 ppm, 27,1 ± 0,2 ppm, 25,3±0,2 ppm, 23,1±0,2 ppm, 22,7±0,2 ppm, 22,0±0,2 ppm, 21,6±0,2 ppm, 20,3±0,2 ppm, 19,6±0,2 ppm, 18,3±0,2 ppm, 17,6 ± 0,2 ppm, 13,8 ± 0,2 ppm, 13,1 ± 0,2 ppm i 12,5 ± 0,2 ppm.
[0280] U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 karakteriše se<13>C SSNMR spektrom koji je suštinski sličan Slici 3.
[0281] U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 karakteri še se<19>F SSNMR spektrom sa pikom na -63,5 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan kao<19>F SSNMR spektar sa pikom na -63,8 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan kao<19>F SSNMR spektar sa pikom na -65,1 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan kao<19>F SSNMR spektar sa pikom na -65,8 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan kao<19>F SSNMR spektar sa pikom na -66,3 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan kao<19>F SSNMR spektar sa pikom na -67,0 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 karakteri še se kao<19>F SSNMR spektar sa pikom na -74,0 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 karakteri še se kao<19>F SSNMR spektar sa pikom na -74,9 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 karakteriše se kao<19>F SSNMR spektar sa pikom na -76,6 ± 0,2 ppm.
[0282] U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 karakteri še se kao<19>F SSNMR spektar sa jednim, dva ili tri vrha izabrana od -65,1 ± 0,2 ppm, -67,0 ± 0,2 ppm i -76,6 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat jedinjenja 1120 karakteriše se kao<19>F SSNMR spektar sa jednim, dva, tri, četiri ili pet vrhova izabranih od -63,5 ± 0,2 ppm, -65,1 ± 0,2 ppm, -67,0 ± 0,2 ppm, -74,9 ± 0,2 ppm i -76,6 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 je okarakterisan kao da ima<19>F SSNMR spektar sa jednim, dva, tri, četiri, pet ili više vrhova izabranih od -63,5 ± 0,2 ppm, -63,8 ± 0,2 ppm, -65,1 ± 0,2 ppm, -65,8 ± 0,2 ppm, -66,3 ± 0,2 ppm, -67,0 ± 0,2 ppm, -74,0 ± 0,2 ppm, -74,9 ± 0,2 ppm i -76,6 ± 0,2 ppm. U nekim realizacijama, heptanski solvat Jedinjenja 11 karakteri še se<19>F SSNMR spektrom sa jednim, dva, tri, četiri, pet ili više vrhova izabranih od -63,5 ± 0,2 ppm, -63,8 ± 0,2 ppm, -65,1 ± 0,2 ppm, -65,8 ± 0,2 ppm, -66,3 ± 0,2 ppm, -67,0 ± 0,2 ppm, -74,0 ± 0,2 ppm, -74,9 ± 0,2 ppm, -76,6 ± 0,2 ppm i -77,6 ± 0,2 ppm.
[0283] U nekim realizacijama, heptan solvat Jedinjenja 11 karakteri še se<19>F SSNMR spektrom koji je suštinski sličan Slici. 4.
[0284] Još jedan aspekt pronalaska pruža postupak za pripremu rastvorenog kristalnog čvrstog oblika Jedinjenja 11 koji obuhvata rastvaranje Jedinjenja 11 u jednom ili vi še rastvarača da bi se formirala smeša i kristalizaciju jedinjenja iz smeše. U nekim realizacijama, jedan ili više rastvarača sadrže heptan. U nekim realizacijama, jedan ili više rastvarača sadrže heptan i dihlorometan.
[0285] Još jedan aspekt pronalaska pruža postupak za pravljenje heptanskog solvata Jedinjenja 11. U nekim realizacijama, postupak za pravljenje heptanskog solvata Jedinjenja 11 obuhvata: (i) rastvaranje Jedinjenja 11 u heptanu i dihlorometanu da bi se formirala sme ša; (ii) koncentrovanje smeše; (iii) sakupljanje čvrstih materija iz smeše; i (iv) sušenje sakupljenih čvrstih materija. U nekim realizacijama, (ii) opciono obuhvata mešanje smeše na sobnoj temperaturi. U nekim realizacijama, (iii) opciono obuhvata ispiranje sakupljenih čvrstih materija hladnim heptanom. U nekim realizacijama, postupak pravljenja heptanskog solvata Jedinjenja 11 obuhvata rastvaranje Jedinjenja 11 u heptanu i dihlorometanu, koncentrovanje pod rotacionim isparavanjem, mešanje na sobnoj temperaturi, filtriranje čvrstih materija, pranje čvrstih materija hladnim heptanom i sušenje pod vakuumom da bi se dobio heptanski solvat Jedinjenja 11.
Neograničavajuć i primeri realizacija
[0286]
1. Jedinjenje izabrano iz jedinjenja Formule I:
i deuterizovani derivati i njihove farmaceutski prihvatljive soli,
pri čemu:
X je izabran iz -O-, -S-, -SO- i -SO2-;
svaki Y je nezavisno izabran iz -C(R<Y>)2-, -O-, -CO- i
Svaki R<Y>je nezavisno izabran iz vodonika, halogena, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz hidroksija i Q), C3-C8cikloalkila, C6-C10arila, 5- do 10-članog heteroarila, -OR<Y1>, -CO2R<Y1>, -COR<Y1>, -CON(R<Y1>)2i -NR<Y1>-; ili dva slučaja RY na istom atomu uzeta zajedno da formiraju prsten izabran iz C3-C8cikloalkila i 3- do 6-članog heterociklila; ili dva slučaja R<Y>, od kojih je jedan na jednom atomu, a drugi na susednom atomu, uzeta zajedno da formiraju pi vezu;
svaki R<Y1>je nezavisno izabran iz vodonika i C1-C6alkila, ili dva slučaja R<Y1>vezana za isti azot uzeta zajedno da formiraju 3- do 6-člani heterociklil;
Prsten B je izabran iz:
▪ C6-C10arila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena, C1-C6alkila i C1-C6alkoksi grupe),
▪ C3-C8cikloalkila,
▪ 5- do 10-članog heteroarila, i
▪ 3- do 6-članog heterociklila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz C1-C6alkila);
Svaki Q je nezavisno izabran iz:
▪ C1-C6alkila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ halogena,
∘ okso,
∘ C6-C10arila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena i -OCF3), i
∘ C3-C8cikloalkila,
▪ C3-C8cikloalkil opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ halogena,
∘ CN,
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena, -NH2i -NHCOMe), ∘ C1-C6alkoksija,
∘ C6-C10arila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz C1-C6alkila), i
∘ C3-C8cikloalkila,
▪ C6-C10aril opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ halogena,
∘ CN,
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena i hidroksija), ∘ C1-C6alkoksija opciono supstituisanog sa 1-4 grupe nezavisno izabrane iz:
▪ halogena,
▪ C3-C8cikloalkila (opciono supstituisanog sa CF3),
∘ C3-C8cikloalkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena, CF3, OCF3i C1-C6alkila), i
∘ C6-C10arila,
▪ 5- do 10-člani heteroaril opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od:
∘ halogena,
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od halogena),
∘ C3-C8cikloalkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe i CF3), i
∘ 3- do 10-članog heterociklila,
▪ 3- do 10-člani heterociklil opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od:
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od okso i C3-C8cikloalkila), i ∘ okso;
Svaki R<1>je nezavisno izabran iz halogena, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena i hidroksi), -OR<2>, -N(R<2>)2, -CO2R<2>, -CO-N(R<2>)2, -CN, fenila, benzila, C1-C6alkoksija, C3-C8cikloalkila, 5- do 6-članog heteroarila, 3- do 6-članog heterociklila, -SO2R<2>, -SR<2>, -SOR<2>, -PO(OR<2>)2i -PO(R<2>)2;
svaki R<2>je nezavisno izabran iz vodonika, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena) i C6-C10arila (opciono supstituisanog sa C1-C6alkoksija, koji je opciono supstituisan sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena);
Z je izabran iz
gde je prsten C izabran iz C6-C10arila i 5- do 10-članog heteroarila;
R<Z1>je izabran iz vodonika, -CN, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena ili 1-3 hidroksi), 3- do 6-članog heterociklila, 3- do 6-članog cikloalkila, 5- do 6-članog arila i 5-do 6-članog heteroarila;
R<Z2>je izabran iz vodonika, halogena i hidroksija, ili R<Z1>i R<Z2>zajedno čine grupu izabranu iz okso i =N-OH; svaki R<Z3>je nezavisno izabran iz hidroksija, C1-C6alkoksija, C1-C6alkila, C1-C6haloalkila i C6-C10arila; ili dva primera R<Z3>su uzeta zajedno da bi se formirao 3- do 6-člani heterociklil;
n je izabrano od 4, 5, 6, 7 i 8; i
m je izabrano od 0, 1, 2 i 3.
2. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema Realizaciji 1, pri čemu:
X je izabrano od -O-, -S-, -SO- i -SO2-;
svaki Y je nezavisno izabrano od -C(R<Y>)2-, -O-, -CO- i
Svaki R<Y>je nezavisno izabran iz vodonika, halogena, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz hidroksija i Q), C6-C10arila, 5- do 10-članog heteroarila, -OR<Y1>, -CO2R<Y1>, -COR<Y1>, -CON(R<Y1>)2i -NR<Y1>-; ili dva slučaja R<Y>na istom atomu uzeta zajedno da formiraju prsten izabran iz C3-C8cikloalkila i 3- do 6-članog heterociklila; ili dva slučaja R<Y>, od kojih je jedan na jednom atomu, a drugi na susednom atomu, uzeta zajedno da formiraju pi vezu;
svaki R<Y1>je nezavisno izabran iz vodonika i C1-C6alkila, ili dva slučaja R<Y1>vezana za isti azot uzeta zajedno da formiraju 3- do 6-člani heterociklil;
Prsten B je izabran iz:
▪ C6-C10arila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena, C1-C6alkila i C1-C6alkoksi grupe),
▪ C3-C8cikloalkila,
▪ 5- do 10-članog heteroarila, i
▪ 3- do 6-članog heterociklila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz C1-C6alkila);
Svaki Q je nezavisno izabran iz:
▪ C1-C6alkila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ halogena,
∘ okso,
∘ C6-C10aril (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena i -OCF3), i
∘ C3-C8cikloalkila,
▪ C3-C8cikloalkil opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ halogena,
∘ CN,
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena, -NH2i -NHCOMe), ∘ C1-C6alkoksija,
∘ C6-C10arila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz C1-C6alkila), i
∘ C3-C8cikloalkila,
▪ C6-C10aril opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ halogena,
∘ CN,
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena i hidroksija), ∘ C1-C6alkoksija opciono supstituisanog sa 1-4 grupe nezavisno izabrane iz:
▪ halogena,
▪ C3-C8cikloalkila (opciono supstituisanog sa CF3),
∘ C3-C8cikloalkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena, CF3, OCF3i C1-C6alkila), i
∘ C6-C10arila,
▪ 5- do 10-člani heteroaril opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ halogena,
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena),
∘ C3-C8cikloalkila (opciono supstituisan sa 1-3 grupe i CF3), i
∘ 3- do 10-članog heterociklila,
▪ 3- do 10-člani heterociklil opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od:
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od okso i C3-C8cikloalkila), i ∘ okso;
svaki R<1>je nezavisno izabran iz halogena, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno izabranih od halogena), -OR<2>, -N(R<2>)2, -CO2R<2>, -CO-N(R<2>)2, -CN, fenila, benzila, C1-C6alkoksija, C3-C8cikloalkila, 5-do 6-članog heteroarila, 3- do 6-članog heterociklila, -SO2R<2>, -SR<2>, -SOR<2>, -PO(OR<2>)2i -PO(R<2>)2; svaki R<2>je nezavisno izabran iz vodonika, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena) i C6-C10arila (opciono supstituisanog sa C1-C6alkoksijem, koji je opciono supstituisan sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena);
Z je izabran iz
R<Z1>je izabran iz vodonika, -CN, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena ili 1-3 hidroksi), 3- do 6-članog heterociklila, 3- do 6-članog cikloalkila, 5- do 6-članog arila i 5-do 6-članog heteroarila;
R<Z2>je izabran iz vodonika, halogena i hidroksija, ili R<Z1>i R<Z2>zajedno čine grupu izabranu iz okso i =N-OH; svaki R<Z3>je nezavisno izabran iz hidroksi, C1-C6alkoksija, C1-C6alkila i C6-C10arila; ili dva slučaja R<Z3>uzeta zajedno da formuraju 3- do 6-člani heterociklil;
n je izabrano iz 4, 5, 6 i 7; i
m je izabrano iz 0, 1, 2 i 3.
3. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema Realizaciji 1 ili 2, pri čemu X je -O-.
4. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 1-3, pri čemu je svaki Y nezavisno izabran od -C(R<Y>)2-, -CO-, i
5. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 1-4, pri čemu je svaki R<Y>nezavisno izabran iz vodonika, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz hidroksi i Q) i -OR<Y1>.
6. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 1-5, pri čemu je svaki R<Y>nezavisno izabran iz:
vodonika,
7. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 1-6, pri čemu je svaki Q nezavisno izabran iz:
▪ C3-C8cikloalkila,
▪ C6-C10arila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena i C1-C6alkila.
8. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 1-7, pri čemu je svaki Q nezavisno izabran od:
9. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 1-8, pri čemu je Prsten B izabran iz C6-C10arila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena.
10. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 1-9, pri čemu je Prsten B izabran iz:
11. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 1-10, pri čemu je -(Y)n- grupa izabrana iz:
12. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 1-11, pri čemu je svaki Y -C(R<Y>)2-.
13. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 1-12, pri čemu je svaki R<1>nezavisno izabran iz -CF3i -N(R<2>)2.
14. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 1-13, pri čemu je svaki R<2>nezavisno izabran iz vodonika i C1-C6alkila.
15. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 1-14, pri čemu je svaki R<2>vodonik.
16. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 1-15, pri čemu je Z
17. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 1-16, pri čemu je R<Z1>izabran iz C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe izabrane iz halogena).
18. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 1-17, pri čemu R<Z1>je -CF3.
19. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 1-18, pri čemu je R<Z2>hidroksi.
20. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 1-19, pri čemu je n izabrano od 4, 5 i 6.
21. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 1-20, pri čemu n je 6.
22. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 1-21, pri čemu je m izabrano od 1 i 2.
23. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 1-22, pri čemu m je 2.
24. Jedinjenje izabrano od jedinjenja Formule Ia:
i njihovih deuterizovanih derivata i farmaceutski prihvatljivih soli, pri čemu:
X je izabran iz -O-, -S-, -SO- i -SO2-;
svaki Y je nezavisno izabran iz -C(R<Y>)2-, -O-, -CO- i
Svaki R<Y>je nezavisno izabran iz vodonika, halogena, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz hidroksija i Q), C6-C10arila, 5- do 10-članog heteroarila, -OR<Y1>, -CO2RR<Y1>, -COR<Y1>, -CON(R<Y1>)2i -NR<Y1>-; ili dva slučaja R<Y>na istom atomu uzeta zajedno da formiraju prsten izabran iz C3-C8cikloalkila i 3- do 6-članog heterociklila; ili dva slučaja RY, od kojih je jedan na jednom atomu, a drugi na susednom atomu, uzeta zajedno da formiraju pi vezu;
svaki R<Y1>je nezavisno izabran iz vodonika i C1-C6alkila, ili dva slučaja R<Y1>vezana za isti azot uzeta zajedno da formiraju 3- do 6-člani heterociklil;
Prsten B je izabran iz:
▪ C6-C10arila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena, C1-C6alkila i C1-C6alkoksi grupe),
▪ C3-C8cikloalkila,
▪ 5- do 10-članog heteroarila, i
▪ 3- do 6-članog heterociklila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz C1-C6alkila);
Svaki Q je nezavisno izabran iz:
▪ C1-C6alkila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ halogena,
∘ okso,
∘ C6-C10arila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena i -OCF3), i
∘ C3-C8cikloalkila,
▪ C3-C8cikloalkil opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ halogena,
∘ CN,
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena, -NH2i -NHCOMe), ∘ C1-C6alkoksija,
∘ C6-C10arila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz C1-C6alkila), i
∘ C3-C8cikloalkila,
▪ C6-C10aril opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ halogena,
∘ CN,
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena i hidroksija), ∘ C1-C6alkoksija opciono supstituisanog sa 1-4 grupe nezavisno izabrane iz:
▪ halogena,
▪ C3-C8cikloalkila (opciono supstituisanog sa CF3),
∘ C3-C8cikloalkil (opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena, CF3, OCF3i C1-C6alkila), i
∘ C6-C10arila,
▪ 5- do 10-člani heteroaril opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ halogena,
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena),
∘ C3-C8cikloalkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe i CF3), i
∘ 3- do 10-članog heterociklila,
▪ 3- do 10-člani heterociklil opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz okso i C3-C8cikloalkila), i ∘ okso;
svaki R<1>je nezavisno izabran iz halogena, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena), -OR<2>, -N(R<2>)2, -CO2R<2>, -CO-N(R<2>)2, -CN, fenila, benzila, C1-C6alkoksija, C1-C6alkila, C3-C8cikloalkila, 5- do 6-članog heteroarila, 3- do 6-članog heterociklila, -SO2R<2>, -SR<2>, -SOR<2>, -PO(OR<2>)2i -PO(R<2>)2;
Svaki R<2>je nezavisno izabran iz vodonika, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena) i C6-C10arila (opciono supstituisanog sa C1-C6alkoksijem, koji je opciono supstituisanim sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena);
Z je izabran iz
R<Z1>je izabran iz vodonika, -CN, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena ili 1-3 hidroksija), 3- do 6-članog heterociklila, 3- do 6-članog cikloalkila, 5- do 6-članog arila i 5-do 6-članog heteroarila;
R<Z2>je izabran iz vodonika, halogena i hidroksija, ili R<Z1>i R<Z2>zajedno čine grupu izabranu iz okso i =N-OH; svaki R<Z3>je nezavisno izabran iz hidroksija, C1-C6alkoksija, C1-C6alkila i C6-C10arila; ili dva primera R<Z3>su uzeta zajedno da bi se formirao heterociklil sa 3 do 6 članova; i
n je izabrano od 4, 5, 6 i 7.
25. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema Realizaciji 24, pri čemu X je -O-.
26. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema Realizaciji 24 ili 25, pri čemu je svaki Y nezavisno izabran od -C(R<Y>)2-, -CO-, i
27. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 24-26, pri čemu je svaki R<Y>nezavisno izabran iz vodonika, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz hidroksi i Q) i -OR<Y1>,
28. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 24-27, pri čemu je svaki R<Y>nezavisno izabran iz:
vodonika,
29. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 24-28, pri čemu je svaki Q nezavisno izabran iz:
▪ C3-C8cikloalkila,
▪ C6-C10arila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena i C1-C6alkila.
30. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 24-29, pri čemu je svaki Q nezavisno izabran od:
31. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 24-30, pri čemu je Prsten B izabran iz C6-C10arila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena.
32. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 24-31, pri čemu je Prsten B izabran iz:
33. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 24-32, gde je -(Y)n- grupa izabrana iz:
34. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 24-33, pri čemu je svaki Y -C(R<Y>)2-.
35. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 24-34, pri čemu je svaki R<1>nezavisno izabran iz -CF3i -N(R<2>)2.
36. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 24-35, pri čemu je svaki R<2>nezavisno izabran iz vodonika i C1-C6alkila.
37. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 24-36, pri čemu je svaki R<2>vodonik.
38. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 24-37, pri čemu je Z
39. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 24-38, gde je R<Z1>izabran iz C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe izabrane iz halogena).
40. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so bilo kojoj od Realizacija 24-39, pri čemu je R<Z1>jednak -CF3.
41. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so bilo kojoj od Realizacija 24-40, pri čemu R<Z2>je hidroksi.
42. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so bilo kojoj od Realizacija 24-41, pri čemu je n izabrano od 4, 5 i 6.
43. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so bilo kojoj od Realizacija 24-42, pri čemu n je 6.
44. Jedinjenje izabrano od jedinjenja Formula IIa, IIb i IIc:
i deuterizovanih derivata i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, pri čemu:
X je izabran iz -O-, -S-, -SO- i -SO2-;
svaki Y je nezavisno izabran iz -C(R<Y>)2-, -O-, -CO- i
Svaki R<Y>je nezavisno izabran iz vodonika, halogena, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz hidroksija i Q), C6-C10arila, 5- do 10-članog heteroarila, -OR<Y1>, -CO2R<Y1>, -COR<Y1>, -CON(R<Y1>)2i -NR<Y1>-; ili dva slučaja R<Y>na istom atomu uzeta zajedno da formiraju prsten izabran iz C3-C8cikloalkila i 3- do 6-članog heterociklila; ili dva slučaja R<Y>, od kojih je jedan na jednom atomu, a drugi na susednom atomu, uzeta zajedno da formiraju pi vezu;
svaki R<Y1>je nezavisno izabran iz vodonika i C1-C6alkila, ili dva slučaja R<Y1>vezana za isti azot uzeta zajedno da formiraju 3- do 6-člani heterociklil;
Prsten B je izabran iz:
▪ C6-C10arila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena, C1-C6alkila i C1-C6alkoksi grupe),
▪ C3-C8cikloalkila,
▪ 5- do 10-članog heteroarila, i
▪ 3- do 6-članog heterociklila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz C1-C6alkila);
Svaki Q je nezavisno izabran iz:
▪ C1-C6alkila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ halogena,
∘ okso,
∘ C6-C10aril (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena i -OCF3), i
∘ C3-C8cikloalkila,
▪ C3-C8cikloalkil opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ halogena,
∘ CN,
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena, -NH2, i -NHCOMe), ∘ C1-C6alkoksija,
∘ C6-C10arila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od C1-C6alkila), i
∘ C3-C8cikloalkila,
▪ C6-C10aril opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od:
∘ halogena,
∘ CN,
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od halogena i hidroksija), ∘ C1-C6alkoksija opciono supstituisanog sa 1-4 grupe nezavisno izabrane od:
▪ halogena,
▪ C3-C8cikloalkila (opciono supstituisanog sa CF3),
∘ C3-C8cikloalkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od halogena, CF3, OCF3i C1-C6alkila), i
∘ C6-C10arila,
▪ 5- do 10-člani heteroaril opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od:
∘ halogena,
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od halogena),
∘ C3-C8cikloalkila (opciono supstituisan sa 1-3 grupe i CF3), i
∘ 3- do 10-članog heterociklila,
▪ 3- do 10-člani heterociklil opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od:
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od okso i C3-C8cikloalkila), i ∘ okso;
Svaki R<1>je nezavisno izabran iz halogena, -CF3, -OR<2>, -N(R<2>)2, -CO2R<2>, -CO-N(R<2>)2, -CN, fenila, benzila, C1-C6alkoksija, C1-C6alkila, C3-C8cikloalkila, 5- do 6-članog heteroarila, 3- do 6-članog heterociklila, -SO2R<2>, -SR<2>, -SOR<2>, -PO(OR<2>)2i -PO(R<2>)2;
svaki R<2>je nezavisno izabran iz vodonika, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena) i C6-C10arila (opciono supstituisanog sa C1-C6alkoksijem, koji je opciono supstituisan sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena);
Z je izabran iz:
R<Z1>je izabran iz vodonika, -CN, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe izabrane iz halogena i hidroksi grupe), 3- do 6-članog heterociklila, 3- do 6-članog cikloalkila, 5- do 6-članog arila i 5- do 6-članog heteroarila;
R<Z2>je izabran iz vodonika, halogena i hidroksi grupe, ili R<Z1>i R<Z2>zajedno čine grupu izabranu iz okso i =N-OH;
svaki R<Z3>je nezavisno izabran iz hidroksi grupe, C1-C6alkoksi grupe, C1-C6alkila i C6-C10arila; ili dva slučaja R<Z3>uzeta zajedno da formiraju 3- do 6-člani heterociklil; i
m je izabrano od 0, 1, 2 i 3.
45. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema Realizaciji 44, pri čemu je m izabrano od 1 i 2.
46. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema Realizaciji 44 ili 45, pri čemu m je 2.
47. Jedinjenje izabrano od jedinjenja Formula IId, IIe i IIf:
i deuterizovani derivati i njihove farmaceutski prihvatljive soli, pri čemu:
X je izabran iz -O-, -S-, -SO- i -SO2-;
svaki Y je nezavisno izabran iz -C(R<Y>)2-, -O-, -CO- i
Svaki R<Y>je nezavisno izabran iz vodonika, halogena, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz hidroksija i Q), C6-C10arila, 5- do 10-članog heteroarila, -OR<Y1>, -CO2R<Y1>, -COR<Y1>, -CON(R<Y1>)2i -NR<Y1>-; ili dva slučaja R<Y>na istom atomu uzeta zajedno da formiraju prsten izabran iz C3-C8cikloalkila i 3- do 6-članog heterociklila; ili dva slučaja R<Y>, od kojih je jedan na jednom atomu, a drugi na susednom atomu, uzeta zajedno da formiraju pi vezu;
svaki R<Y1>je nezavisno izabran iz vodonika i C1-C6alkila, ili dva slučaja R<Y1>vezana za isti azot uzeta zajedno da formiraju 3- do 6-člani heterociklil;
Prsten B je izabran iz:
▪ C6-C10arila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena, C1-C6alkila i C1-C6alkoksi grupe),
▪ C3-C8cikloalkila,
▪ 5- do 10-članog heteroarila, i
▪ 3- do 6-članog heterociklila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz C1-C6alkila);
Svaki Q je nezavisno izabran iz:
▪ C1-C6alkila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ halogena,
∘ okso,
∘ C6-C10aril (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena i -OCF3), i
∘ C3-C8cikloalkila,
▪ C3-C8cikloalkil opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ halogena,
∘ CN,
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena, -NH2i -NHCOMe), ∘ C1-C6alkoksija,
∘ C6-C10arila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz C1-C6alkila), i
∘ C3-C8cikloalkila,
▪ C6-C10aril opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od:
∘ halogena,
∘ CN,
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od halogena i hidroksija), ∘ C1-C6alkoksija opciono supstituisanog sa 1-4 grupe nezavisno izabrane od:
▪ halogena,
▪ C3-C8cikloalkila (opciono supstituisanog sa CF3),
∘ C3-C8cikloalkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od halogena, CF3, OCF3i C1-C6alkila), i
∘ C6-C10aril,
▪ 5- do 10-člani heteroaril opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od:
∘ halogena,
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od halogena),
∘ C3-C8cikloalkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe i CF3), i
∘ 3- do 10-članog heterociklila,
▪ 3- do 10-člani heterociklil opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od:
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od okso i C3-C8cikloalkila), i ∘ okso;
Svaki R<1>je nezavisno izabran iz halogena, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena), -OR<2>, -N(R<2>)2, -CO2R<2>, -CO-N(R<2>)2, -CN, fenila, benzila, C1-C6alkoksija, C1-C6alkila, C8-C8cikloalkila, 5- do 6-članog heteroarila, 3- do 6-članog heterociklila, -SO2R<2>, -SR<2>, -SOR<2>, -PO(OR<2>)2i -PO(R<2>)2;
svaki R<2>je nezavisno izabran iz vodonika, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena) i C6-C10arila (opciono supstituisanog sa C1-C6alkoksijem, koji je opciono supstituisan sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena);
Z je izabran iz
R<Z1>je izabran iz vodonika, -CN, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena ili 1-3 hidroksi), 3- do 6-članog heterociklila, 3- do 6-članog cikloalkila, 5- do 6-članog arila i 5-do 6-članog heteroarila;
R<Z2>je izabran iz vodonika, halogena i hidroksi, ili R<Z1>i R<Z2>zajedno čine grupu izabranu iz okso i =N-OH; i svaki R<Z3>je nezavisno izabran iz hidroksi, C1-C6alkoksija, C1-C6alkila i C6-C10arila; ili dva slučaja R<Z3>su uzeta zajedno da bi se formirao 3- do 6-člani heterociklil.
48. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 44-47, pri čemu X je -O-.
49. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 44-48, pri čemu je svaki Y nezavisno izabran od -C(R<Y>)2-, -CO-, i
50. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 44-49, pri čemu je svaki R<Y>nezavisno izabran iz vodonika, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz hidroksi i Q) i -OR<Y1>.
51. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 44-50, pri čemu je svaki R<Y>nezavisno izabran iz:
vodonika,
52. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 44-51, pri čemu je svaki Q nezavisno izabran iz:
▪ C3-C8 cikloalkila,
▪ C6-C10arila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena i C1-C6alkila.
53. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema prema bilo kojoj od Realizacija 44-52, pri čemu je svaki Q nezavisno izabran iz:
54. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 44-53, pri čemu je Prsten B izabran iz C6-C10arila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena.
55. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 44-54, pri čemu je Prsten B izabran od:
56. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 44-55, gde je svaki Y-C(RY)2-.
57. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 44-56, gde je svaki R<1>nezavisno izabran iz -CF3i -N(R<2>)2.
58. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 44-57, gde je svaki R<2>nezavisno izabran iz vodonika i C1-C6alkila.
59. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 44-58, gde je svaki R<2>vodonik.
60. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 44-59, pri čemu je Z
61. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 44-60, pri čemu je R<Z1>izabran iz C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe izabrane iz halogena).
62. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 44-61, pri čemu R<Z1>je -CF3.
63. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 44-62, pri čemu je R<Z2>hidroksi.
64. Jedinjenje izabrano iz jedinjenja Formula IIIa, IIIb i IIIc:
i deuterizovanih derivata i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, pri čemu:
X je izabran iz -O-, -S-, -SO- i -SO2-;
svaki Y je nezavisno izabran iz -C(R<Y>)2-, -O-, -CO-, i
Svaki R<Y>je nezavisno izabran iz vodonika, halogena, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz hidroksija i Q), C6-C10arila, 5- do 10-članog heteroarila, -OR<Y1>, -CO2R<Y1>, -COR<Y1>, -CON(R<Y1>)2i -NR<Y1>-; ili dva slučaja R<Y>na istom atomu uzeta zajedno da formiraju prsten izabran iz C3-C8cikloalkila i 3- do 6-članog heterociklila; ili dva slučaja R<Y>, od kojih je jedan na jednom atomu, a drugi na susednom atomu, uzeta zajedno da formiraju pi vezu;
svaki R<Y1>je nezavisno izabran iz vodonika i C1-C6alkila, ili dva slučaja R<Y1>vezana za isti azot uzeta zajedno da formiraju 3- do 6-člani heterociklil;
Prsten B je izabran iz:
▪ C6-C10arila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena, C1-C6alkila i C1-C6alkoksija),
▪ C3-C8cikloalkila,
▪ 5- do 10-članog heteroarila, i
▪ 3- do 6-članog heterociklila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz C1-C6alkila);
svaki Q je nezavisno izabran iz:
▪ C1-C6alkila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ halogena,
∘ okso,
∘ C6-C10arila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena i -OCF3), i
∘ C3-C8cikloalkila,
▪ C3-C8cikloalkil opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ halogena,
∘ CN,
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno odabrane iz halogena, -NH2i -NHCOMe), ∘ C1-C6alkoksija,
∘ C6-C10arila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno odabrane iz C1-C6alkila), i
∘ C3-C8cikloalkila,
▪ C6-C10aril opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od:
∘ halogena,
∘ CN,
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od halogena i hidroksija), ∘ C1-C6alkoksija opciono supstituisanog sa 1-4 grupe nezavisno izabrane od:
▪ halogena,
▪ C3-C8cikloalkila (opciono supstituisanog sa CF3),
∘ C3-C8cikloalkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od halogena, CF3, OCF3i C1-C6alkila), i
∘ C6-C10arila,
▪ 5- do 10-člani heteroaril opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od:
∘ halogena,
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od halogena),
∘ C3-C8cikloalkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe i CF3), i
∘ 3- do 10-članog heterociklila,
▪ 3- do 10-člani heterociklil opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od:
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od okso i C3-C8cikloalkila), i ∘ okso;
Svaki R<1>je nezavisno izabran iz halogena, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena), -OR<2>, -N(R<2>)2, -CO2R<2>, -CO-N(R<2>)2, -CN, fenila, benzila, C1-C6alkoksija, C1-C6alkila, C3-C8cikloalkila, 5- do 6-članog heteroarila, 3- do 6-članog heterociklila, -SO2R<2>, -SR<2>, -SOR<2>, -PO(OR<2>)2, svaki R<2>je nezavisno izabran iz vodonika, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena) i C6-C10arila (opciono supstituisanog sa C1-C6alkoksijem, koji je opciono supstituisan sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena);
Z je izabran iz
R<Z1>je izabran iz vodonika, -CN, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena ili 1-3 hidroksi), 3- do 6-članog heterociklila, 3- do 6-članog cikloalkila, 5- do 6-članog arila i 5-do 6-članog heteroarila;
R<Z2>je izabran iz vodonika, halogena i hidroksi, ili R<Z1>i R<Z2>zajedno čine grupu izabranu iz okso i =N-OH; svaki R<Z3>je nezavisno izabran iz hidroksija, C1-C6alkoksija, C1-C6alkila i C6-C10arila; ili dva slučaja R<Z3>zajedno formiraju heterociklil sa 3 do 6 članova; i
m je izabran od 0, 1, 2 i 3.
65. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema Realizaciji 64, pri čemu je m izabrano od 1 i 2.
66. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema Realizaciji 64 ili 65, pri čemu m je 2.
67. Jedinjenje izabrano od jedinjenja Formula IIId, IIIe i IIIf:
i deuterizovani derivati i njihove farmaceutski prihvatljive soli,
pri čemu:
X je izabran iz -O-, -S-, -SO- i -SO2-;
svaki Y je nezavisno izabran iz -C(R<Y>)2-, -O-, -CO- i
Svaki R<Y>je nezavisno izabran iz vodonika, halogena, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz hidroksija i Q), C6-C10arila, 5- do 10-članog heteroarila, -OR<Y1>, -CO2R<Y1>, -COR<Y1>, -CON(R<Y1>)2i -NR<Y1>-; ili dva slučaja R<Y>na istom atomu uzeta zajedno da formiraju prsten izabran iz C3-C8cikloalkila i 3- do 6-članog heterociklila; ili dva slučaja R<Y>, od kojih je jedan na jednom atomu, a drugi na susednom atomu, uzeta zajedno da formiraju pi vezu;
svaki R<Y1>je nezavisno izabran iz vodonika i C1-C6alkila, ili dva slučaja R<Y1>vezana za isti azot uzeta zajedno da formiraju 3- do 6-člani heterociklil;
Prsten B je izabran iz:
▪ C6-C10arila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena, C1-C6alkila i C1-C6alkoksi grupe),
▪ C3-C8cikloalkila,
▪ 5- do 10-članog heteroarila, i
▪ 3- do 6-članog heterociklila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz C1-C6alkila);
Svaki Q je nezavisno izabran iz:
▪ C1-C6alkila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ halogena,
∘ okso,
∘ C6-C10aril (opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena i -OCF3), i
∘ C3-C8cikloalkila,
▪ C3-C8cikloalkil opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz:
∘ halogena,
∘ CN,
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena, -NH2, i -NHCOMe), ∘ C1-C6alkoksija,
∘ C1-C6arila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od C1-C6alkila), i
∘ C3-C8cikloalkila,
▪ C1-C6aril opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od:
∘ halogena,
∘ CN,
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od halogena i hidroksija), ∘ C1-C6alkoksija opciono supstituisanog sa 1-4 grupe nezavisno izabrane od:
▪ halogena,
▪ C3-C8cikloalkila (opciono supstituisanog sa CF3),
∘ C3-C8cikloalkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od halogena, CF3, OCF3i C1-C6alkila), i
∘ C6-C10arila,
▪ 5- do 10-člani heteroaril opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od:
∘ halogena,
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od halogena),
∘ C1-C6cikloalkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe i CF3), i
∘ 3- do 10-članog heterociklila,
▪ 3- do 10-člani heterociklil opciono supstituisan sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od:
∘ C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane od okso i C3-C8cikloalkila), i ∘ okso;
Svaki R<1>je nezavisno izabran iz halogena, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena), -OR<2>, -N(R<2>)2, -CO2R<2>, -CO-N(R<1>)2, -CN, fenila, benzila, C1-C6alkoksija, C1-C6alkila, C3-C8cikloalkila, 5- do 6-članog heteroarila, 3- do 6-članog heterociklila, -SO2R<2>, -SR<2>, -SOR<2>, -PO(OR<2>)2i -PO(R<2>)2;
svaki R<2>je nezavisno izabran iz vodonika, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena) i C6-C10arila (opciono supstituisanog sa C1-C6alkoksijem, koji je opciono supstituisan sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena);
Z je izabran iz:
R<Z1>je izabran iz vodonika, -CN, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena ili 1-3 hidroksija), 3- do 6-članog heterociklila, 3- do 6-članog cikloalkila, 5- do 6-članog arila i 5-do 6-članog heteroarila;
R<Z2>je izabran iz vodonika, halogena i hidroksija, ili R<Z1>i R<Z2>zajedno čine grupu izabranu iz okso i =N-OH; svaki R<Z3>je nezavisno izabran iz hidroksi, C1-C6alkoksija, C1-C6alkila i C6-C10arila; ili dva slučaja R<Z3>zajedno čine 3- do 6-člani heterociklil.
68. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 64-67, pri čemu X je -O-.
69. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 64-68, pri čemu je svaki Y nezavisno izabran iz -C(R<Y>)2-, -CO- i
70. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 64-69, pri čemu je svaki R<Y>nezavisno izabran iz vodonika, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz hidroksija i Q) i -OR<Y1>.
71. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 64-70, pri čemu je svaki R<Y>nezavisno izabran iz:
vodonika,
72. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 64-71, pri čemu je svaki Q nezavisno izabran iz:
▪ C3-C8cikloalkila,
▪ C6-C10arila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena i C1-C6alkila.
73. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 64-72, pri čemu je svaki Q nezavisno izabran iz:
74. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 64-73, pri čemu je Prsten B izabran iz C6-C10arila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena.
75. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 64-74, pri čemu je Prsten B izabran iz:
76. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 64-75, pri čemu svaki Y je -C(R<Y>)2-.
77. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 64-76, pri čemu je svaki R<1>nezavisno izabran iz -CF3i -N(R<2>)2.
78. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 64-77, pri čemu je svaki R<2>nezavisno izabran iz vodonika i C1-C6alkila.
79. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 64-78, pri čemu svaki R<2>je vodonik.
80. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 64-79, pri čemu je Z
81. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 64-80, pri čemu je R<Z1>izabran iz C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe izabrane iz halogena).
82. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 64-81, pri čemu R<Z1>je -CF3.
83. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 64-82, pri čemu je R<Z2>hidroksi.
84. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema Realizaciji 1, pri čemu X je -O-.
85. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema Realizaciji 1 ili 84, pri čemu je svaki R<Y>nezavisno izabran iz vodonika, halogena, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz hidroksija i Q), C3-C8cikloalkila i -OR<Y1>.
86. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 1, 84 i 85, pri čemu -OR<Y1>je -OH.
87. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 1 i 84-86, pri čemu je svaki Q nezavisno izabran iz:
▪ C3-C8cikloalkila,
▪ C6-C10arila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena i C1-C6alkila.
88. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 1 i 84-87, pri čemu je svaki Q nezavisno izabran od:
89. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 1 i 84-88, pri čemu je svaki R<Y>nezavisno izabran iz:
vodonika, fluora,
90. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 1 i 84-89, pri čemu je Prsten B izabran iz C3-C8cikloalkila i fenila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz halogena.
91. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 1 i 84-90, pri čemu je Prsten B izabran iz:
92. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 1 i 84-91, pri čemu je n izabrano od 4, 5 i 6.
93. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 1 i 84-92, pri čemu je -(Y)n- grupa izabrana od:
94. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 1 i 84-93, pri čemu je svaki R<1>nezavisno izabran iz C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena i hidroksija), -N(R<2>)2i -CO2R<2>.
95. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 1 i 85-94, pri čemu je svaki R<2>nezavisno izabran iz vodonika i C1-C6alkila.
96. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 1 i 84-95, pri čemu je svaki R<1>nezavisno izabran iz -CF3, -NH2, -NH(CH2CH3), CO2H i CH2OH.
97. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 1 i 84-96, pri čemu je Z izabran od
i
98. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 1 i 84-97, pri čemu je grupa:
izabrana od:
99. Jedinjenje, deuterovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 1 i 84-98, pri čemu je grupa:
izabrana od:
100. Jedinjenje, deuterovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 1 i 84-99, pri čemu je R<Z1>izabran iz vodonika i C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe izabrane iz halogena).
101. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 1 i 84-100, pri čemu je R<Z1>izabran iz vodonika i -CF3.
102. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 1 i 84-101, pri čemu je R<Z2>hidroksi.
103. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 1 i 84-102, pri čemu je Z izabran iz:
104. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 1 i 84-103, pri čemu je m izabrano od 1 i 2.
105. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 1, 2 i 84-104, pri čemu:
X je -O-;
svaki Y je nezavisno izabran iz -C(R<Y>)2-, -O-, i
svaki R<Y>je nezavisno izabran iz vodonika i C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabrane iz hidroksija i Q);
Prsten B je izabran iz C3-C8cikloalkil grupa:
svaki Q je nezavisno izabran iz: C3-C8cikloalkila i C6-C10arila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno izabranih iz halogena i C1-C6alkila,
svaki R<1>je nezavisno izabran iz C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena) i -NH2;
Z je
R<Z1>je izabran iz C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno izabranih iz halogena);
R<Z2>je hidroksi;
n je izabrano iz 5 i 6; i
m je 2.
106. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 1, 50 2 i 84-105, pri čemu je svaki Q nezavisno izabran iz:
107. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 1, 2 i 84-106, pri čemu je svaki R<Y>nezavisno izabran iz:
vodonika,
8. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 1, 2 i -107, pri čemu je Prsten B
9. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 1, 2 i -108, pri čemu je -(Y)n- grupa izabrana iz:
110. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 1, 2 i 84-109, pri čemu R<Z1>je -CF3.
111. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 1, 2 i 84-110, pri čemu n je 5.
112. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 1, 2 i 84-110, pri čemu n je 6.
113. Jedinjenje izabrano iz jedinjenja iz Tabele 12, njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata bilo kojeg od navedenih.
114. Jedinjenje izabrano iz jedinjenja iz Tabele 13, njihovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterizovanih derivata bilo kojeg od navedenih.
115. Jedinjenje prema Realizaciji 113, pri čemu je jedinjenje izabrano iz:
(nastavak)
njegovih deuterovanih derivata i farmaceutski prihvatljivih soli bilo kojeg od navedenih.
116. Jedinjenje prema Realizaciji 114, pri čemu je jedinjenje izabrano iz:
njegovih deuterovanih derivata i farmaceutski prihvatljivih soli bilo kojeg od navedenih.
117. Farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljivu so bilo kojeg od Realizacija 1-116 i farmaceutski prihvatljiv nosač.
118. Farmaceutski sastav prema Ostvarenju 117, koji dodatno sadrži jedno ili više dodatnih terapeutskih sredstava.
119. Farmaceutska kompozicija prema Realizaciji 118, pri čemu jedno ili više dodatnih terapeutskih sredstava obuhvataju jedinjenje sa CFTR modulatorskom aktivnošć u ili njegovu so ili deuterizovani derivat.
120. Farmaceutska kompozicija prema Realizaciji 118 ili 119, pri čemu jedno ili više dodatnih terapeutskih sredstava obuhvataju CFTR korektor.
121. Farmaceutska kompozicija prema bilo kojoj od Realizacija 118-120, pri čemu jedno ili više dodatnih terapeutskih sredstava obuhvataju (R)-1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)-N-(1-(2,3-dihidroksipropil)-6-fluoro-2-(1-hidroksi-2-metilpropan-2-il)-1H-indol-5-il)ciklopropankarboksamid (Jedinjenje II):
122. Farmaceutska kompozicija prema bilo kojoj od Realizacija 118-121, pri čemu jedno ili više dodatnih terapeutskih sredstava obuhvataju 3-(6-(1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3] dioksol-5-il)ciklopropankarbo ksamido)-3-metilpiridin-2-il)benzojeevu kiselinu (Jedinjenje IV):
123. Farmaceutska kompozicija prema bilo kojoj od Realizacija 118-122, pri čemu jedno ili više dodatnih terapeutskih sredstava obuhvataju N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-(3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (Jedinjenje V):
124. Farmaceutska kompozicija prema bilo kojoj od Realizacija 118-123, pri čemu jedno ili više dodatnih terapeutskih sredstava obuhvataju N-(benzensulfonil)-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (Jedinjenje VI):
125. Farmaceutska kompozicija prema bilo kojoj od Realizacija 118-124, pri čemu jedno ili više dodatnih terapeutskih sredstava obuhvataju (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje VII):
126. Farmaceutska kompozicija prema bilo kojoj od Realizacija 118-125, pri čemu jedno ili više dodatnih terapeutskih sredstava obuhvataju (11R)-6-(2,6-dimetilfenil)-11-(2-metilpropil)-12-{spiro[2.3]heksan-5-il}-9-oksa-2λ<6>-tia-3,5,12,19-tetraazatriciklo[12.3.1.14,8]nonadeka-1(17),4(19),5,7,14(18),15-heksan-2,2,13-trion (Jedinjenje VIII):
127. Farmaceutska kompozicija prema bilo kojoj od Realizacija 118-126, pri čemu jedno ili više dodatnih terapeutskih sredstava obuhvataju najmanje jedno jedinjenje izabrano od PTI-428, ABBV-2222, ABBV-2851, GLPG2737, ABBV-3221, ABBV-3748, ABBV-3903, ABBV-119 i PTI-801.
128. Farmaceutska kompozicija prema bilo kojoj od Realizacija 118-127, pri čemu jedno ili više dodatnih terapeutskih sredstava obuhvataju pojačivač CFTR potencijatora.
129. Farmaceutska kompozicija prema bilo kojoj od Realizacija 118-128, pri čemu jedno ili više dodatnih terapeutskih sredstava obuhvataju ASP-11.
130. Postupak lečenja cistične fibroze, koji obuhvata davanje efikasne količine jedinjenja, soli ili deuterizovanog derivata prema bilo kojoj od Realizacija 1-116 ili farmaceutske kompozicije prema bilo kojoj od Realizacija 117-129 pacijentu kome je to potrebno.
131. Postupak prema Realizaciji 130, koji dodatno obuhvata davanje jednog ili vi še dodatnih terapeutskih sredstava.
132. Postupak prema Realizaciji 131, pri čemu jedno ili više dodatnih terapeutskih sredstava obuhvataju jedinjenje sa CFTR modulatornom aktivnošć u ili njegovu so ili deuterizovani derivat.
133. Postupak prema Realizaciji 131 ili 132, pri čemu jedno ili više dodatnih terapeutskih sredstava obuhvataju CFTR korektor.
134. Postupak prema bilo kojoj od Realizacija 131-133, pri čemu jedan ili više dodatnih terapeutskih sredstava obuhvataju (R)-1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)-N-(1-(2,3-dihidroksipropil)-6-fluoro-2-(1-hidroksi-2-metilpropan-2-il)-1H-indol-5-il)ciklopropankarboksamid (Jedinjenje II):
135. prema bilo kojoj od Realizacija 131-134, pri čemu jedno ili više dodatnih terapeutskih sredstava obuhvataju 3-(6-(1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)ciklopropankarboksamido)-3-metilpiridin
-2-il)benzojevu kiselinu (Jedinjenje IV):
136. Postupak prema bilo kojoj od Realizacija 131-135, pri čemu jedno ili više dodatnih terapeutskih sredstava obuhvataju N-(1,3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4- trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (Jedinjenje V):
137. Postupak prema bilo kojoj od Realizacija 131-136, pri čemu jedno ili više dodatnih terapeutskih sredstava obuhvataju N-(benzensulfonil)-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi|pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (Jedinjenje VI):
138. Postupak prema bilo kojoj od Realizacija 131-137, pri čemu jedno ili više dodatnih terapeutskih sredstava obuhvataju (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje VII):
139. Postupak prema bilo kojoj od Realizacija 131-138, gde jedan ili više dodatnih terapeutskih sredstava obuhvataju (11R)-6-(2,6-dimetilfenil)-11-(2-metilpropil)-12-{spiro[2.3]heksan-5-il}-9-oksa-λ<6>-tia-3,5,12,19-tetraazatriciklo[12.3.1.14,8]nonadeka-1(17),4(19),5,7,14(18),15-heksan-2,2,13-trion (Jedinjenje VIII):
140. Postupak prema bilo kojoj od Realizacija 131-139, pri čemu jedno ili više dodatnih terapeutskih sredstava obuhvataju najmanje jedno jedinjenje izabrano od PTI-428, ABBV-2222, ABBV-2851, GLPG2737, ABBV-3221, ABBV-3748, ABBV-3903, ABBV-119 i PTI-801.
141. Postupak prema bilo kojoj od Realizacija 131-140, pri čemu jedno ili više dodatnih terapeutskih sredstava obuhvataju pojačivač CFTR potencijatora.
142. Postupak prema bilo kojoj od Realizacija 131-141, pri čemu jedno ili više dodatnih terapeutskih sredstava obuhvataju ASP-11.
143. Jedinjenje, deuterizovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojoj od Realizacija 1-116 ili farmaceutska kompozicija prema bilo kojoj od Realizacija 117-129 za upotrebu u lečenju cistične fibroze.
144. Upotreba jedinjenja, deuterizovanog derivata ili farmaceutski prihvatljive soli prema bilo kojoj od Realizacija 1-117 u proizvodnji leka za lečenje cistične fibroze.
145. Upotreba farmaceutske kompozicije prema bilo kojoj od Realizacija 117-129 u proizvodnji leka za lečenje cistične fibroze.
146. Suštinski kristalni heptanski solvat Jedinjenja 11 (tj. Pri čemu je manje od 15% Jedinjenja 11 u amorfnom obliku, pri čemu je manje od 10% Jedinjenja 11 u amorfnom obliku, pri čemu je manje od 5% Jedinjenja 11 u amorfnom obliku).
147. Jedinjenje 11 prema Realizaciji 146, pri čemu je Jedinjenje 11100% kristalni heptanski solvat.
148. Kristalni heptanski solvat Jedinjenja 11 prema Realizaciji 146 ili 147, naznačeno rendgenskim difraktogramom praha sa jednim, dva ili tri signala izabrana od 5,8 ± 0,2 stepena dva teta, 10,1 ± 0,2 stepena dva teta i 11,7 ± 0,2 stepena dva teta.
149. Kristalni heptanski solvat Jedinjenja 11 prema bilo kojoj od Realizacija 146-148, naznačeno rendgenskim difraktogramom praha koji ima (a) jedan, dva ili tri signala izabrana od 5,8 ± 0,2 stepena dva teta, 10,1 ± 0,2 stepena dva teta i 11,7 ± 0,2 stepena dva teta, i (b) jedan, dva, tri ili četiri signala izabrana od 5,6 ± 0,2 stepena dva teta, 18,1 ± 0,2 stepena dva teta, 20,5 ± 0,2 stepena dva teta i 20,9 ± 0,2 stepena dva teta.
150. Kristalni heptanski solvat Jedinjenja 11 prema bilo kojoj od Realizacija 146-149, naznačeno rendgenskim praškastim difraktogramom koji ima signale na 5,6 ± 0,2 stepena dva teta, 5,8 ± 0,2 stepena dva teta, 10,1 ± 0,2 stepena dva teta, 11,7 ± 0,2 stepena dva teta, 18,1 ± 0,2 stepena.
151. Kristalni heptanski solvat Jedinjenja 11 prema bilo kojoj od Realizacija 146-150, naznačeno rendgenskim praškastim difraktogramom suštinski sličnim Slici. 1.
152. Kristalni heptanski solvat Jedinjenja 11 prema bilo kojoj od Realizacija 146-151, naznačeno<13>C ssNMR spektrom koji ima jedan, dva, tri, četiri, pet, šest, sedam, osam, devet, deset ili više vrhova izabranih od 166,3 ± 0,2 ppm, 165,8 ± 0,2 ppm, 164,6 ± 0,2 ppm, 163,4 ± 0,2 ppm, 154,8 ± 0,2 ppm, 154,0 ± 0,2 ppm, 152,1 ± 0,2 ppm, 151,6 ± 0,2 ppm, 140,2 ± 0,2 ppm, 139,4 ± 0,2 ppm, 138,5 ± 0,2 ppm, 138,0 ± 0,2 ppm, 135,1 ± 0,2 ppm, 134,6 ± 0,2 ppm, 131,3 ± 0,2 ppm, 130,2 ± 0,2 ppm, 129,6 ± 0,2 ppm, 128,5 ± 0,2 ppm, 125,7 ± 0,2 ppm, 123,7 ± 0,2 ppm, 123,2 ± 0,2 ppm, 122,9 ± 0,2 ppm, 121,1 ± 0,2 ppm, 120,2 ± 0,2 ppm, 119,2 ± 0,2 ppm, 117,8 ± 0,2 ppm, 76,2 ± 0,2 ppm, 74,4 ± 0,2 ppm, 73,7±0,2 ppm, 73,3±0,2 ppm, 40,0±0,2 ppm, 38,6±0,2 ppm, 37,6±0,2 ppm, 36,9±0,2 ppm, 35,7±0,2 ppm, 33,6±0,2 ppm, 32,5 ± 0,2 ppm, 32,0 ± 0,2 ppm, 30,4 ± 0,2 ppm, 30,1 ± 0,2 ppm, 29,5 ± 0,2 ppm, 28,8 ± 0,2 ppm, 28,1 ± 0,2 ppm, 27,1 ± 0,2 ppm, 25,3 ± 0,2 ppm, 23,1 ± 0,2 ppm, 22,7 ± 0,2 ppm, 22,0 ± 0,2 ppm, 21,6 ± 0,2 ppm, 20,3 ± 0,2 ppm, 19,6 ± 0,2 ppm, 18,3 ± 0,2 ppm, 17,6 ± 0,2 ppm, 13,8 ± 0,2 ppm, 13,1 ± 0,2 ppm i 12,5 ± 0,2 ppm.
153. Kristalni heptanski solvat Jedinjenja 11 prema bilo kojoj od Realizacija 146-152, naznačeno<13>C SSNMR spektrom suštinski sličnim Slici. 3.
154. Kristalni heptanski solvat Jedinjenja 11 prema bilo kojoj od Realizacija 146-153, naznačeno kao da ima<19>F SSNMR spektar sa jednim, dva, tri, četiri, pet ili više vrhova izabranih od -63,5 ± 0,2 ppm, -63,8 ± 0,2 ppm, -65,1 ± 0,2 ppm, -65,8 ± 0,2 ppm, -66,3 ± 0,2 ppm, -67,0 ± 0,2 ppm, -74,0 ± 0,2 ppm, -74,9 ± 0,2 ppm i -76,6 ± 0,2 ppm.
155. Kristalni heptanski solvat Jedinjenja 11 prema bilo kojoj od Realizacija 146-154, naznačeno kao da ima<19>F SSNMR spektar sa jednim, dva, tri, četiri, pet ili više vrhova izabranih od -63,5 ± 0,2 ppm, -63,8 ± 0,2 ppm, -65,1 ± 0,2 ppm, -65,8 ± 0,2 ppm, -66,3 ± 0,2 ppm, -67,0 ± 0,2 ppm, -74,0 ± 0,2 ppm, -74,9 ± 0,2 ppm, -76,6 ± 0,2 ppm i -77,6 ± 0,2 ppm.
156. Kristalni heptanski solvat Jedinjenja 11 prema bilo kojoj od Realizacija 146-155, naznačeno kao da ima<19>F SSNMR spektar sa vrhom na -67,0 ± 0,2 ppm.
157. Kristalni heptanski solvat Jedinjenja 11 prema bilo kojoj od Realizacija 146-156, naznačeno kao da ima<19>F SSNMR spektar sa vrhom na -65,1 ± 0,2 ppm.
158. Kristalni heptanski solvat Jedinjenja 11 prema bilo kojoj od Realizacija 146-157, naznačeno posedovanjem<19>F SSNMR spektra sa vrhom na -76,6 ± 0,2 ppm.
159. Kristalni heptanski solvat Jedinjenja 11 prema bilo kojoj od Realizacija 146-158, naznačeno posedovanjem<19>F SSNMR spektra sa vrhom na -63,5 ± 0,2 ppm.
160. Kristalni heptanski solvat Jedinjenja 11 prema bilo kojoj od Realizacija 146-159, naznačeno kao da ima<19>F SSNMR spektar sa vrhom na -74,9 ± 0,2 ppm.
161. Kristalni heptanski solvat Jedinjenja 11 prema bilo kojoj od Realizacija 146-160, naznačeno kao da ima<19>F SSNMR spektar sa najmanje jednim vrhom izabranim od -65,1 ± 0,2 ppm, -67,0 ± 0,2 ppm i -76,6 ± 0,2 ppm.
162. Kristalni heptanski solvat Jedinjenja 11 prema bilo kojoj od Realizacija 146-161, naznačeno kao da ima<19>F SSNMR spektar sa vrhovima na -65,1 ± 0,2 ppm, -67,0 ± 0,2 ppm i -76,6 ± 0,2 ppm.
163. Kristalni heptanski solvat Jedinjenja 11 prema bilo kojoj od Realizacija 146-162, naznačeno kao da ima<19>F SSNMR spektar sa najmanje jednim vrhom izabranim od -63,5 ± 0,2 ppm, -65,1 ± 0,2 ppm, -67,0 ± 0,2 ppm, -74,9 ± 0,2 ppm i -76,6 ± 0,2 ppm.
164. Kristalni heptanski solvat Jedinjenja 11 prema bilo kojoj od Realizacija 146-163, naznačeno kao da ima<19>F SSNMR spektar sa vrhovima na -63,5 ± 0,2 ppm, -65,1 ± 0,2 ppm, -67,0 ± 0,2 ppm, -74,9 ± 0,2 ppm i -76,6 ± 0,2 ppm.
165. Kristalni heptanski solvat Jedinjenja 11 prema bilo kojoj od Realizacija 146-164, naznačen<19>F SSNMR spektrom suštinski sličnim Slici. 4.
166. Kristalni heptanski solvat Jedinjenja 11 prema bilo kojoj od Realizacija 146-165, pripremljen postupkom koji obuhvata rastvaranje Jedinjenja 11 u heptanu i dihlorometanu, koncentrovanje pod rotacionim isparavanjem, vrtloženje na sobnoj temperaturi, filtriranje čvrstih materija, pranje čvrstih materija hladnim heptanom i sušenje pod vakuumom da bi se dobio heptanski solvat Jedinjenja 11.
167. Postupak za pripremu kristalnog heptanskog solvata Jedinjenja 11 prema bilo kojoj od Realizacija 146-166, pripremljenog postupkom koji obuhvata rastvaranje Jedinjenja 11 u heptanu i dihlorometanu, koncentrovanje pod rotacionim isparavanjem, vrtloženje na sobnoj temperaturi, filtriranje čvrstih materija, pranje čvrstih materija hladnim heptanom i sušenje pod vakuumom da bi se dobio heptanski solvat Jedinjenja 11.
168. Farmaceutska kompozicija prema bilo kojoj od Realizacija 118-126, pri čemu jedno ili više dodatnih terapeutskih sredstava obuhvataju najmanje jedno jedinjenje izabrano iz Jedinjenja II, Jedinjenja III, Jedinjenja III-d, Jedinjenja IV, Jedinjenja V, Jedinjenja VI, Jedinjenja VII, Jedinjenja VIII, Jedinjenja IX, Jedinjenja X, PTI-428, ASP-11, ABBV-2222, ABBV-2851, GLPG2737, ABBV-3221, ABBV-3748, ABBV-3903, ABBV-119, FDL-169, ARN5562, ARN21586, ARN22081, ARN22652, ARN23765, ARN23766, PTI-801, FDL-176, PTI-808 (dirocaftor), GLPG1837, GLPG2451/ABBV-2451, QBV251 (icenticaftor), GLPG3067/ABBV-3067 (Navocaftor), ABBV-191, ELX-02, MRT5005, Lunar-2CF, RCT 010 CF552, GS-9411, GS-5737, P-1037 (VX-371), P-1055 (VKS-551), AZD5634, SPX-101, Ionis-ENaC-2.5 Rx, BI 1265162, AZ5634, AZ5634 i AZ5634. DS-1039.
169. Postupak prema prema bilo kojoj od Realizacija 131-139, pri čemu jedno ili više dodatnih terapeutskih sredstava obuhvataju najmanje jedno jedinjenje izabrano iz jedinjenja IJedinjenja II, Jedinjenja III, Jedinjenja III-d, Jedinjenja IV, Jedinjenja V, Jedinjenja VI, Jedinjenja VII, Jedinjenja VIII, Jedinjenja IX, Jedinjenja X, PTI-428, ASP-11, ABBV-2222, ABBV-2851, GLPG2737, ABBV-3221, ABBV-3748, ABBV-3903, ABBV-119, FDL-169, ARN5562, ARN21586, ARN22081, ARN22652, ARN23765, ARN23766, PTI-801, FDL-176, PTI-808 (dirokaftor), GLPG1837, GLPG2451/ABBV-2451, QBW251 (icentikaftor), GLPG3067/ABBV-3067 (Navokaftor), ABBV-191, ELX-02, MRT5005, Lunar-CF, RCT223, amilorid, ETD001, CF552, GS-9411, GS-5737, P-1037 (VX-371), P-1055 (VX-551), AZD5634, SPX-101, Ionis-ENaC-2.5 Rx, BI 1265162, AZ5634, ARO-ENaC1001, ETD002 i DS-1039.
170. Suštinski kristalno Jedinjenje 6 (slobodan oblik) (tj. pri čemu je manje od 15% Jedinjenja 6 u amorfnom obliku, pri čemu je manje od 10% Jedinjenja 6 u amorfnom obliku, pri čemu je manje od 5% Jedinjenja 6 u amorfnom obliku).
171. Jedinjenje 6 (slobodan oblik) prema Realizaciji 170, pri čemu je Jedinjenje 6 100% kristalno Jedinjenje 6 (slobodan oblik).
172. Kristalno jedinjenje 6 (slobodan oblik) prema Realizaciji 170 ili 171, naznačeno monokliničnim kristalnim sistemom, prostornom grupom P21i dimenzijama jedinične ć elije merenim na 100 K na Brukerovom difraktometru opremljenom Cu Kαzračenjem (λ=1,5478 Å) od:
173. Suštinski kristalno Jedinjenje 19 (slobodan oblik) (tj. pri čemu je manje od 15 % Jedinjenja 19 u amorfnom obliku, pri čemu je manje od 10% Jedinjenja 19 u amorfnom obliku, pri čemu je manje od 5% Jedinjenja 19 u amorfnom obliku).
174. Jedinjenje 19 (slobodan oblik) prema Realizaciji 173, pri čemu je Jedinjenje 19 100% kristalno Jedinjenje 19 (slobodan oblik).
175. Kristalno Jedinjenje 19 (slobodan oblik) prema Realizaciji 173 ili 174, naznačeno tetragonalnim kristalnim sistemom, prostornom grupom P41212 i dimenzijama jedinične ć elije merenim na 100 K na Brukerovom difraktometru opremljenom Mo Kαzračenjem (λ=0,71073 Å) od:
176. Suštinski kristalno Jedinjenje 20 (slobodan oblik) (tj. pri čemu je manje od 15% Jedinjenja 20 u amorfnom obliku, pri čemu je manje od 10% Jedinjenja 20 u amorfnom obliku, pri čemu je manje od 5% Jedinjenja 20 u amorfnom obliku).
177. Jedinjenje 20 (slobodan oblik) prema Realizaciji 176, pri čemu je Jedinjenje 20 100% kristalno Jedinjenje 20 (slobodan oblik).
178. Kristalno Jedinjenje 20 (slobodan oblik) prema Realizaciji 176 ili 177, naznačeno ortorombičnim kristalnim sistemom, prostorna grupa P212121i dimenzije jedinične ć elije merene na 100 K na Brukerovom difraktometru opremljenom Mo Kαzračenjem (λ=0,71073 Å) od:
Primeri
Opšti eksperimentalni postupci
Skrać enice
[0287]
ACN: Acetonitril
AcOH: Sirć etna kiselina
BCl3: Bor trihlorid
Boc anhidrid ((Boc)2O): Di-terc-butil dikarbonat
CDCl3: Hloroform-d
CDI: 1,1’-Karbonildiimidazol
CD3OD: Metil-d3alkohol-d
CH2Cl2: Dihlorometan
CH3CN: Acetonitril
CO2: Ugljen-dioksid
Cs2CO3: Cezijum-karbonat
CuBr2: Bakar(II) bromid CuI: Bakar(I)jodid
DCE: 1,2-Dihloretan
DCM: Dihlorometan
DDQ: 2,3-Dihloro-5,6-dicijano-1,4-benzohinon
DI: Dejonizovano
DIAD: Diizopropil azodikarboksilat
DIEA: DIPEA; N,N-Diizopropiletilamin
DMAP: 4-Dimetilaminopiridin
DMF: N,N-Dimetilformamid
DMSO: Dimetil sulfoksid
DMSO-d6: Dimetil sulfoksid-d6
EA: Etil acetat
ELSD: Detektor rasejanja svetlosti isparavanjem
Et2O: Dietil etar
EtOAc: Etil acetat
EtOH: Etanol
ESI-MS: Elektrosprej jonizaciona masena spektrometrija
Grubbs katalizator 1. generacije:
Dihloro(benziliden)bis(tricikloheksilfosfin)rutenijum(II)
Grubbs katalizator 2. generacije: [1,3-Bis(2,4,6-trimetilfenil)imidazolidin-2-iliden]-dihloro-[(2-izopropoksifenil)metilen]rutenijum
H2: Vodonik
HATU: N-[(Dimetilamino)-1H-1,2,3-triazolo-[4,5-b]piridin-1-ilmetilen]-N-metilmetanaminijum heksafluorofosfat N-oksid
HCl: Hlorovodonična kiselina
HFIP: Heksafluoroizopropanol
Hovejda-Grabs katalizator druge generacije: Dihloro[1,3-bis(2,4,6-trimetilfenil)-2-imidazolidiniliden](2-izopropoksifenilmetilen)rutenijum(II)
HPLC: Tečna hromatografija visokih performansi
IPA: Izopropanol
IPAC: Izopropil acetat
iPrOH: Izopropanol
KHSO4: Kalijum bisulfat
LC: Tečna hromatografija
LCMS: Tečna hromatografija, masena spektrometrija
LDA: Litijum diizopropilamid
LiOH: Litijum hidroksid
MeCN: Acetonitril
MeTHF ili 2-MeTHF: 2-metiltetrahidrofuran
MeOH: Metanol
MTBE: Metil tert-butil etar
MgSO4: Magnezijum sulfat
n-BuLi: n-Butillitijum
NaBH4: Natrijum borohidrid
NaHCO3: Natrijum bikarbonat
NaHMDS: Natrijum bis(trimetilsilil)amid
NaOH: Natrijum hidroksid
Na2S2O3: Natrijum tiosulfat
Na2SO4: Natrijum sulfat
NBS: N-Bromosukcinimid
NMP: N-Metil-2-pirolidon
NMR: Nuklearna magnetna rezonanca
Pd/C: Paladijum na ugljeniku
Pd(OAc)2: Paladijum(II) acetat
rt: Sobna temperatura
SFC: Superkritična fluidna hromatografija
Silika Cat Pd: Paladijum na silicijum dioksidu
SilicaMetS: Metalni hvatač na silicijum dioksidu
SiO2: Silika gel
T3P: 1-Propanfosfonski anhidrid
TBAI: Tetrabutilamonijum jodid
TEA: Trietilamin
TFA: Trifluorosirć etna kiselina
THF: Tetrahidrofuran
UPLC: Ultraperformansna tečna hromatografija
Xantphos: 4,5-Bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilksanten
XPhos Pd G3: (2-Dicikloheksilfosfino-2’,4’,6’-triizopropil-1,1’-bifenil)[2-(2’-amino-1,1’-bifenil)]paladijumm(II) metansulfonat
Zhan katalizator-1B: Dihloro[1,3-bis(2,4,6-trimetilfenil)-2-imidazolidiniliden][[5-[(dimetilamino)sulfonil]-2(1-metiletoksi-O)fenil]metilen-C]rutenijum(II)
Opšti postupci
[0288] Reagensi i početni materijali su nabavljeni iz komercijalnih izvora, osim ako nije druga čije naznačeno, i korišć eni su bez prečiš ć avanja.
[0289] Protonski i ugljenični NMR spektri su snimljeni ili na Bruker Biospin DRX 400 MHz FTNMR spektrometru koji radi na<1>H i<13>C rezonantnoj frekvenciji od 400 i 100 MHz respektivno, ili na 300 MHz NMR spektrometru. Jednodimenzionalni protonski i ugljenični spektri su snimljeni korišć enjem BBFO (broadband observation) sonde sa rotacijom uzorka od 20 Hz pri digitalnoj rezoluciji od 0,1834 i 0,9083 Hz/Pt respektivno. Svi protonski i ugljenični spektri su snimljeni uz kontrolu temperature na 30 °C koriš ć enjem standardnih, prethodno objavljenih impulsnih sekvenci i rutinskih parametara obrade.
[0290] NMR (1D i 2D) spektri su takođe snimljeni na Bruker AVNEO 400 MHz spektrometru koji radi na 400 MHz i 100 MHz respektivno, opremljenom sa 5 mm multinuklearnom I-sondom.
[0291] NMR spektri su takođe snimljeni na Varian Mercury NMR instrumentu na 300 MHz za<1>H koristeć i ugao impulsa od 45 stepeni, spektralnu širinu od 4800 Hz i 28860 tačaka akvizicije. FID je popunjen nulama do 32k tačaka i primenjeno je proširenje linije od 0,3 Hz pre Furijeove transformacije.<19>F NMR spektri su snimljeni na 282 MHz koristeć i ugao impulsa od 30 stepeni, spektralnu širinu od 100 kHz i snimljeno je 59202 tačaka. FID je popunjen nulama do 64k tačaka i primenjeno je proširenje linije od 0,5 Hz pre Furijeove transformacije.
[0292] NMR spektri su takođe snimljeni na Bruker Avance III HD NMR instrumentu na 400 MHz za<1>H koristeć i ugao impulsa od 30 stepeni, spektralnu širinu od 8000 Hz i 128k tačaka akvizicije. FID spektri su popunjeni nulama do 256 hiljada tačaka i primenjeno je proširenje linije 45 od 0,3 Hz pre Furijeove transformacije.<19>F NMR spektri su snimljeni na 377 MHz koristeć i ugao impulsa od 30 stepeni, spektralnu širinu od 89286 Hz i snimljeno je 128 hiljada tačaka. FID spektri su popunjeni nulama do 256 hiljada tačaka i primenjeno je proširenje linije od 0,3 Hz pre Furijeove transformacije.
[0293] NMR spektri su takođe snimljeni na Bruker AC 250MHz instrumentu opremljenom sa: 5mm QNP(H1/C13/F19/P31) sondom (tip: 250-SB, s#23055/0020) ili na Varian 500MHz instrumentu opremljenom ID PFG, 5 mm, 50-202/500 MHz sondom (model/del# 99337300).
[0294] Osim ako nije drugačije naznačeno u sledeć im primerima, konačna čisto ć a jedinjenja je određena obrnuto-faznom UPLC korišć enjem kolone Acquity UPLC BEH C18(50 × 2,1 mm, čestice 1,7 µm) proizvođača Waters (pn: 186002350), i dvostrukim gradijentnim tokom od 1-99% mobilne faze B tokom 3,0 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = CH3CN (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C. Konačna čistoć a je izračunata usrednjavanjem površine ispod krive (AUC) dva UV traga (220 nm, 254 nm). Maseni spektri niske rezolucije su prikazani kao [M+1]+ vrste dobijene korišć enjem jednog kvadrupolnog masenog spektrometra opremljenog izvorom elektrosprej jonizacije (ESI) sposobnim da postigne tačnost mase od 0,1 Da i minimalnu rezoluciju od 1000 (bez jedinica na rezoluciji) u celom opsegu detekcije.
[0295] NMR spektri čvrstog stanja (SSNMR) su snimljeni na Bruker-Biospin 400 MHz spektrometru širokog prečnika opremljenom Bruker-Biospin 4mm HFX sondom. Uzorci su spakovani u 4mm ZrO2 rotore i rotirani pod uslovima magičnog ugla rotacije (MAS) sa brzinom rotacije tipično podešenom na 12,5 kHz. Vreme relaksacije protona je mereno koriš ć enjem<1>H MAS T1 eksperimenta relaksacije oporavka zasić enja kako bi se podesilo odgovaraju ć e kašnjenje recikliranja<13>C unakrsne polarizacije (CP) MAS eksperimenta. Vreme relaksacije fluora je mereno koriš ć enjem<19>F MAS T1 eksperimenta relaksacije oporavka zasić enja kako bi se podesilo odgovarajuć e kašnjenje recikliranja 19F MAS eksperimenta. Vreme kontakta CP ugljenika CPMAS eksperimenta je podešeno na 2 ms. Korišć en je CP protonski impuls sa linearnim porastom i padom (od 50% do 100%). Hartman-Hanovo podudaranje ugljenika je optimizovano na spoljnom referentnom uzorku (glicin). Spektri ugljenika i fluora su snimljeni sa razdvajanjem protona kori šć enjem TPPM15 sekvence za razdvajanje sa jačinom polja od približno 100 kHz.
Opšte sintetičke šeme
[0296] Još jedan aspekt ovog pronalaska opisuje postupke za pravljenje jedinjenja Formula I, I’, I", I′′, Ia, IIa, IIa’, IIb, IIc, IId, IIe, IIf, IIIa, IIIa’, IIIb, IIIc, IIId, IIIe i IIIf , jedinjenja 1 do 53, jedinjenja 54 do 77 i farmaceutski prihvatljivih soli bilo kojeg od tih jedinjenja, deuterizovanih derivata bilo kog od navedenih i intermedijera za pravljenje bilo kojeg od navedenih. U nekim realizacijama sledeć ih šema i primera, svaki atom azota i kiseonika može opciono imati, pored ili umesto određenog promenljivog supstituenta, jednu ili više zaštitnih grupa izabranih iz opsega zaštitnih grupa ovde opisanih. U nekim realizacijama sledeć ih šema i primera, svako jedinjenje može biti zamenjeno svojim deuterizovanim derivatom.
[0297] Šema 1 se odnosi na postupke za pripremu intermedijernog jedinjenja Formule S1-7 iz jedinjenja Formule S1-1. Alk je izabran iz C1-C6linearnih ili razgranatih alkil grupa. X<1>je izabran iz halogena kao što su Cl, I ili Br. Y i R<Y>su kao što je definisano za Formulu I napred.
[0298] Bilo koji pogodni uslovi za Grinjarovu adiciju mogu se koristiti za reakciju jedinjenja Formule S1-1 sa jedinjenjem Formule S1-2 da bi se formiralo jedinjenje Formule S1-3. Na primer, Grinjarova adicija jedinjenja Formule S1-1 sa jedinjenjem Formule S1-2 može se izvesti u Et2O na -78 °C, nakon čega sledi dodavanje 1 N vodenog rastvora HCl da bi se dobilo jedinjenje Formule S1-3. Konverzija jedinjenja Formule S1-3 u jedinjenje Formule S1-4 može se postić i bilo kojim pogodnim postupkom benzilacije. Konverzija estra Formule S1-4 u karboksilnu kiselinu Formule S1-5 može se postić i bilo kojim odgovaraju ć im uslovima hidrolize. Na primer, konverzija karboksilne kiseline Formule S1-5 u jedinjenje Formule S1-6 može se postić i reakcijom jedinjenja Formule S1-5 sa HATU i Et3N u DMF-u, nakon čega sledi dodavanje terc-butil N-aminokarbamata. Bilo koji odgovarajuć i uslovi hidrolize mogu se koristiti za konverziju karbamata Formule S1-6 u hidrazid Formule S1-7. Na primer, jedinjenje Formule S1-7 može se dobiti reakcijom jedinjenja Formule S1-6 sa HCl u CH2Cl2na sobnoj temperaturi.
[0299] Šema 2 se odnosi na postupke za pripremu intermedijernog jedinjenja formule S2-3 iz jedinjenja formule S2-1. R<A1>je izabran iz -X-(Y)2-4-C(R<Y>)=C(R<Y>)2, -OH, -OPG (gde je PG odgovarajuć a zaštitna grupa) i halogena. R<1>, m, X, Y i R<Y>su kao što je definisano za Formulu I napred.
[0300] Bilo koji pogodni uslovi za formiranje amidne veze mogu se koristiti za proizvodnju jedinjenja formule S2-2 iz jedinjenja formule S2-1 i jedinjenja formule S1-7. Na primer, jedinjenje formule S2-1 može reagovati sa CDI u acetonitrilu i DMF-u, nakon čega sledi dodavanje jedinjenja formule S1-7, da bi se dobilo jedinjenje formule S2-2. Jedinjenje formule S2-2 može se pretvoriti u jedinjenje formule S2-3 koriš ć enjem bilo kojih uslova pogodnih za formiranje oksadiazola. Na primer, jedinjenje formule S2-2 može reagovati sa DIPEA u acetonitrilu, nakon čega sledi dodavanje p-toluensulfonil hlorida, da bi se dobio oksadiazol formule S2-3.
[0301] Šema 3 se odnosi na postupke za pripremu jedinjenja Formule S3-8 iz jedinjenja Formule S3-1.
Alk je izabran iz C1-C6linearnih ili razgranatih alkil grupa. LG je izabran iz halogena i odlazeć ih grupa na bazi kiseonika, kao što je OTf. R<1>, m, Y i R<Y>su kao što je definisano za Formulu I napred.
[0302] Reakcija jedinjenja Formule S3-1 sa jedinjenjem Formule S3-2, da bi se dobilo jedinjenje Formule S3-3, može se postić i bilo kojim odgovaraju ć im uslovima aromatične supstitucije. Na primer, jedinjenje Formule S3-2 može reagovati sa natrijum hidridom u DMF-u, nakon čega sledi dodavanje jedinjenju Formule S3-1, da bi se dobilo jedinjenje Formule S3-3. Konverzija estra Formule S3-3 u karboksilnu kiselinu Formule S3-4 može se posti ć i bilo kojim odgovaraju ć im uslovima hidrolize. Jedinjenje formule S3-5 može se pripremiti iz jedinjenja formule S3-4 i jedinjenja formule S1-7 koristeć i bilo koje pogodne uslove za formiranje amidne veze. Jedinjenje formule S3-5 može se pretvoriti u jedinjenje formule S3-6 koriste ć i bilo koje uslove pogodne za formiranje oksadiazola. Na primer, jedinjenje formule S3-5 može reagovati sa metoksikarbonil-(trietilamonio)sulfonil-azanidom u THF-u da bi se dobio oksadiazol formule S3-6. Makrociklizacija jedinjenja formule S3-6 može se postić i bilo kojim pogodnim uslovima metateze za zatvaranje prstena. Na primer, jedinjenje formule S3-6 može reagovati u prisustvu [1,3-bis(2,4,6-trimetilfenil)imidazolidin-2-iliden]-dihloro-[(2-izopropoksi-5-nitro-fenil)metilen]rutenijuma u DCE da bi se dobio makrociklus formule S3-7 kao smeša E/Z izomera (kao što je označeno). Konverzija nezasi ć enog jedinjenja formule S3-7 u makrociklus formule S3-8 može se postić i koriš ć enjem bilo koje odgovarajuć e procedure za redukciju olefina i deprotekciju benzila.
[0303] Šema 4 se odnosi na postupke za pripremu jedinjenja Formule S4-4 iz jedinjenja Formule S4-1. LG je izabran iz halogena, hidroksi grupe i odlaze ć ih grupa na bazi kiseonika, kao što je OTf. R<1>, m, Y i R<Y>su kao što je definisano za Formulu I napred.
[0304] Reakcija jedinjenja Formule S4-1 sa jedinjenjem Formule S3-2 da bi se dobilo jedinjenje Formule S4-2 može se postić i bilo kojim pogodnim uslovima aromatične supstitucije ili Micunobuovim uslovima. Na primer, jedinjenje Formule S4-1 može reagovati sa alkoholom Formule S3-2 sa cezijum karbonatom i jodbakarom u DMSO. Makrociklizacija jedinjenja Formule S4-2 može se postić i bilo kojim pogodnim uslovima metateze za zatvaranje prstena. Na primer, jedinjenje Formule S4-2 može reagovati u prisustvu Grubsovog katalizatora druge generacije u DCE da bi se dobio makrociklus Formule S4-3 kao smeša E/Z izomera (kao što je označeno vezom). Konverzija nezasi ć enog jedinjenja formule S4-3 u makrociklus formule S4-4 može se izvršiti korišć enjem bilo koje odgovaraju ć e procedure za redukciju olefina i deprotekciju benzila.
[0305] Šema 5 se odnosi na postupke za pripremu jedinjenja Formule S5-3, jedinjenja Formule S5-6 i jedinjenja Formule S5-7 iz jedinjenja Formule S5-1. R<1>, m i Y su kao što je definisano za Formulu I napred.
[0306] Konverzija jedinjenja Formule S5-1 u deuterisano jedinjenje Formule S5-2 može se postić i bilo kojim pogodnim uslovima katalitičke deuteracije. Na primer, jedinjenje Formule S5-1 može reagovati sa 10% paladijuma na ugljeniku u CD3OD pod atmosferom deuterijumskog gasa da bi se dobilo jedinjenje Formule S5-2. Konverzija benzil-zaštić enog jedinjenja Formule S5-2 u slobodni alkohol Formule S5-3 može se postić i bilo kojim pogodnim uslovima deprotekcije.
[0307] Konverzija nezasić enog jedinjenja Formule S5-1 u alkohol Formule S5-4 može se postić i bilo kojim pogodnim uslovima hidroboracije/oksidacije. Na primer, jedinjenje formule S5-1 može reagovati sa kompleksom boran dimetilsulfida u THF-u, nakon čega sledi gašenje sa vodenim NaOH i naknadno dodavanje vodonik-peroksida da bi se dobio alkohol formule S5-4 kao smeša regioizomera. Debenzilacija jedinjenja formule S5-4 da bi se dobilo jedinjenje formule S5-5 može se postić i koriš ć enjem bilo kojih pogodnih uslova za deprotekciju benzila. Konverzija jedinjenja formule S5-5 u jedinjenje formule S5-7 može se posti ć i bilo kojim pogodnim uslovima oksidacije. Na primer, jedinjenje formule S5-5 može reagovati sa NaHCO3i Des-Martinovim periodinanom u CH2Cl2da bi se dobilo jedinjenje formule S5-7.
[0308] Na alternativni način, konverzija jedinjenja formule S5-4 u jedinjenje formule S5-6 može se posti ć i bilo kojim pogodnim uslovima oksidacije. Na primer, jedinjenje formule S5-4 može reagovati sa Des-Martinovim periodinanom u CH2Cl2da bi se dobilo jedinjenje formule S5-6. Debenzilacija jedinjenja formule S5-6 da bi se dobilo jedinjenje formule S5-7 može se izvršiti korišć enjem bilo kojih pogodnih uslova za deprotekciju benzila.
[0309] Šema 6 se odnosi na postupke za pripremu jedinjenja Formule S6-5 iz jedinjenja Formule S6-1. LG je izabran iz halogena i odlaze ć ih grupa na bazi kiseonika, kao što je OTf. R<1>, m, Y i R<Y>su kao što je definisano za Formulu I napred.
[0310] Konverzija jedinjenja Formule S6-1 i jedinjenja Formule S6-2 u jedinjenje Formule S6-3 može se posti ć i bilo kojim odgovaraju ć im uslovima aromatične supstitucije. Na primer, jedinjenje Formule S6-1 može reagovati sa jedinjenjem Formule S6-2 i DMSO. Makrociklizacija jedinjenja Formule S6-3 može se postić i bilo kojim odgovaraju ć im uslovima metateze za zatvaranje prstena. Na primer, jedinjenje formule S6-3 može reagovati u prisustvu benziliden-[1,3-bis(2,4,6-trimetilfenil)imidazolidin-2-iliden]-dihlororutenijum;triciklokloheksilfosfana u DCE da bi se dobio makrociklus formule S6-4 kao smeša E/Z izomera (kao što je označeno ). Konverzija nezasi ć enog jedinjenja formule S6-4 u makrociklus formule S6-5 može se izvršiti korišć enjem bilo koje pogodne procedure za redukciju olefina i deprotekciju benzila.
[0311] Šema 7 se odnosi na postupke za pripremu jedinjenja formule S7-6 iz jedinjenja formule S7-1. R<1>, m, Y i R<Y>su kao što je definisano za Formulu I napred. LG je izabran iz halogena i odlazeć ih grupa na bazi kiseonika kao što je OTf.
[0312] Reakcija jedinjenja Formule S7-1 sa jedinjenjem Formule S7-2 da bi se formiralo jedinjenje Formule S7-3 može se izvršiti bilo kojim odgovarajuć im postupkom litiacije. Na primer, reakcija jedinjenja Formule S7-1 sa jedinjenjem Formule S7-2 može se izvršiti u etru na -78 °C sa n-BuLi da bi se formiralo jedinjenje Formule S7-3. Konverzija jedinjenja Formule S7-3 u jedinjenje Formule S7-4 može se izvršiti bilo kojim odgovarajuć im postupkom metateze za zatvaranje prstena. Na primer, reakcija metateze zatvaranja prstena jedinjenja formule S7-3 može se izvršiti u prisustvu benziliden-[1,3-bis(2,4,6-trimetilfenil)imidazolidin-2-iliden]-dihloro-rutenijum;tricikloheksilfosfana u DCE da bi se dobilo jedinjenje formule S7-4 kao smeša E/Z izomera (kako je označeno ). Konverzija jedinjenja formule S7-4 u jedinjenje formule S7-5 može se izvršiti bilo kojim pogodnim postupkom za redukciju olefina i deprotekciju benzila. Konverzija jedinjenja formule S7-5 u jedinjenje formule S7-6 može se izvršiti bilo kojim pogodnim postupkom za oksidaciju tioetra u sulfoksid.
[0313] Šema 8 se odnosi na postupke za pripremu jedinjenja Formule S8-8 iz jedinjenja Formule S8-1.
Alk je izabran iz C1-C6linearnih ili razgranatih alkil grupa. LG je izabran iz odlazeć ih grupa na bazi kiseonika kao što su OTf i halogeni kao što su Cl, I i Br. R<1>, m, Y, R<Y>i prsten B su kao što je definisano za Formulu I napred.
[0314] Bilo koji pogodni uslovi za sintezu aril etra iz alkohola i aril halida mogu se koristiti za reakciju jedinjenja Formule S8-1 sa jedinjenjem Formule S8-2 da bi se dobilo jedinjenje Formule S8-3. Bilo koji pogodni uslovi za kondenzaciju hidrazida sa karboksilnom kiselinom mogu se koristiti za reakciju jedinjenja Formule S8-3 sa jedinjenjem Formule S8-4 da bi se formiralo jedinjenje Formule S8-5. Bilo koji pogodni uslovi za formiranje oksadiazola iz hidrazida mogu se koristiti za pretvaranje jedinjenja Formule S8-5 u jedinjenje Formule S8-6. Konverzija jedinjenja formule S8-6 u jedinjenje formule S8-7 može se postić i bilo kojim odgovaraju ć im postupkom metateze zatvaranja prstena. Na primer, reakcija metateze zatvaranja prstena jedinjenja formule S8-6 može se postići u prisustvu benziliden-[1,3-bis(2,4,6-trimetilfenil)imidazolidin-2-iliden]-dihlororutenijum;tricikloheksilfosfana u DCE da bi se dobilo jedinjenje formule S8-7 kao smeša E/Z izomera (kao što je označeno vezom). Konverzija jedinjenja formule S8-7 u jedinjenje formule S8-8 može se postić i bilo kojim odgovaraju ć im postupkom za redukciju olefina i deprotekciju benzila.
[0315] Šema 9 se odnosi na postupke za pripremu jedinjenja formule S9-6 i jedinjenja formule S9-7 iz jedinjenja formule S9-1. R<1>, m, Y, R<Y>i prsten B su kao što je definisano za Formulu I napred. LG je izabran iz kiseoničnih odlaze ć ih grupa kao što je OTf i halogena kao što su Cl, I i Br. L<x>je izabran iz halogena kao što su Cl, I ili Br.
[0316] Bilo koji pogodni uslovi za sintezu aril etra iz alkohola i aril halida mogu se koristiti za reakciju jedinjenja formule S9-1 sa jedinjenjem formule S9-2 da bi se formiralo jedinjenje formule S9-3. Konverzija jedinjenja formule S9-3 u jedinjenje formule S9-4 i/ili jedinjenje formule S9-5 može se postić i bilo kojim pogodnim postupkom unakrsnog kuplovanja. Na primer, reakcija makrociklizacije jedinjenja Formule S9-3 može se izvršiti u prisustvu paladijum (II) acetata, tris-o-tolilfosfana i trietilamina u acetonitrilu da bi se dobilo jedinjenje Formule S9-4 i/ili jedinjenje Formule S9-5. Konverzija jedinjenja Formule S9-4 u jedinjenje Formule S9-6 i konverzija jedinjenja Formule S9-5 u jedinjenje Formule S9-7 može se izvršiti bilo kojim pogodnim postupkom redukcije olefina i deprotekcije benzila.
[0317] Šema 10 se odnosi na postupke za pripremu jedinjenja formule S10-6 iz jedinjenja formule S10-1.
R<1>, m, Y, R<Y>i prsten B su kao što je definisano za Formulu I napred. L<x>je izabran iz halogena kao što su Cl, I ili Br.
[0318] Reakcija jedinjenja formule S10-1 sa jedinjenjem formule S10-2 da bi se dobilo jedinjenje formule S10-3 može se izvršiti korišć enjem bilo koje odgovaraju ć e procedure formiranja oksadiazola. Na primer, jedinjenje formule S10-1 može reagovati sa jedinjenjem formule S10-2 i (izocijanoimino)trifenilfosforanom da bi se dobilo jedinjenje formule S10-3. Konverzija jedinjenja formule S10-3 u jedinjenje formule S10-4 može se izvršiti bilo kojom odgovarajućom procedurom unakrsnog kuplovanja. Na primer, reakcija makrociklizacije jedinjenja formule S10-3 može se izvršiti u prisustvu paladijum (II) acetata, tris-otolilfosfana i trietilamina u acetonitrilu da bi se dobilo jedinjenje formule S10-4 kao smeša E/Z izomera (kao što je označeno vezom). Konverzija jedinjenja formule S10-4 u jedinjenje formule S10-5 može se izvršiti bilo kojim pogodnim postupkom za redukciju olefina.
Postupci za sintezu uobičajenih intermedijara
Intermedijar 1: Priprema metil 6-hloro-3-nitro-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilata
[0319]
Korak 1: Metil 1-oksido-5-(trifluorometil)piridin-1-ijum-2-karboksilat
[0320]
[0321] Urea vodonik-peroksid (62,7 g, 646,53 mmol) je dodat u porcijama u mešani rastvor metil 5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilata (40 g, 191,09 mmol) u 1,2-dihloretanu (300 ml) na 0 °C. Trifluorosirć etni anhidrid (107,70 g, 72 ml, 507,65 mmol) je zatim dodat tokom 30 minuta na temperaturi od -10 °C, uz hladno kupatilo (kupatilo CO2/aceton). Reakciona smeša je zatim mešana još 30 minuta na temperaturi od 0 °C, a zatim 1 sat na sobnoj temperaturi. Reakciona sme ša je zatim sipana u ohlađenu ledenu vodu (600 ml). Smeša je razblažena dihlorometanom (300 mL), a zatim su slojevi razdvojeni. Vodena faza je ekstrahovana dihlorometanom (2 x 200 mL). Kombinovana organska faza je isprana vodom (2 x 300 mL) i rastvorom soli (1 x 200 mL), osušena preko bezvodnog natrijum sulfata, filtrirana i koncentrovana pod smanjenim pritiskom da bi se dobio metil 1-oksido-5-(trifluorometil)piridin-1-ijum-2-karboksilat (47,6 g, 90%) kao svetlo žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,89 (s, 1H), 8,02 - 7,90 (m, 1H), 7,86 - 7,72 (m, 1H), 3,89 (s, 3H) ppm.<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ –62,00 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z izračunato 221,02998, pronađeno 222,1 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,24 minuta. LCMS metoda: Kinetex Polar C183.0 X 50 mm 2.6 µm, 3 min, 5 - 95% acetonitril u H2O (0.1% mravlja kiselina) 1.2 mL/min.
Korak 2: Metil 6-hidroksi-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilat
[0322]
[0323] Trifluorosirć etni anhidrid (291.62 g, 193 mL, 1.3885 mol) je dodat kap po kap smeši metil 1-oksido-5-(trifluorometil)piridin-1-ijum-2-karboksilata (51.058 g, 230.66 mmol) u DMF (305 mL) na 0 °C. Smeša je zatim mešana na sobnoj temperaturi preko noć i. Smeša je koncentrovana pod smanjenim pritiskom da bi se uklonio višak trifluorosirć etne kiseline. Preostali rastvor DMF-a je kap po kap sipan u vodu ohlađenu na 0 °C i uz mešanje (1000 mL). Talog je sakupljen filtracijom, a zatim ispran vodom (300 mL). Čvrsta supstanca je osušena pod visokim vakuumom da bi se dobio metil 6-hidroksi-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilat (45,24 g, 86%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 7,90 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,03 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 4,02 (s, 3H) ppm.<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ –66,39 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z izračunato 221,03, pronađeno 222,1 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,43 minuta. LCMS metoda: Kinetex Polar C183,0 X 50 mm 2,6 µm, 3 min, 5 - 95% acetonitril u H2O (0,1% mravlja kiselina) 1,2 mL/min.
Korak 3: Metil 6-hidroksi-3-nitro-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilat 40
[0324]
[0325] U ledom ohlađen rastvor metil 6-hidroksi-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilata (33,04 g, 149,41 mmol) 50 u sumpornoj kiselini (200 ml 18,4 M, 3,6800 mol) dodata je azotna kiselina (13 ml 15,8 M, 205,40 mmol) kap po kap. Posle 5 minuta, ledeno kupatilo je uklonjeno, a reakciona sme ša je mešana na 38 °C preko noć i. Ako reakcija nije završena, azotna kiselina (3 ml 15,8 M, 47,400 mmol) je dodata kap po kap na sobnoj temperaturi i reakciona smesa je zagrevana na 38 °C tokom 4,5 sata. Reakcija je polako sipana u ledeno hladnu vodu (900 ml) i smeša je hlađena na 0 °C tokom 15 minuta. Zatim je dobijena čvrsta supstanca izolovana filtracijom i isprana vodom (600 ml). Čvrsta supstanca je sušena preko noć i pod visokim vakuumom od 55°C da bi se dobio metil 6-hidroksi-3-nitro-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilat (39,49 g, 99%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,54 (s, 1H), 3,95 (s, 3H) ppm.<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ –64,56 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z izračunato 266,0151, pronađeno 267,1 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,64 minuta. LCMS metoda: Kinetex Polar C183,0 X 50 mm 2,6 µm, 3 min, 5 - 95% acetonitril u H2O (0,1% mravlja kiselina) 1,2 mL/min.
Korak 4: Metil 6-hloro-3-nitro-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilat
[0326]
[0327] Smeša metil 6-hidroksi-3-nitro-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilata (10 g, 37,575 mmol) i fenil dihlorofosfata (48,008 g, 34 ml, 227,55 mmol) zagrejana je na 170 °C tokom 90 minuta. Nakon hlađenja na sobnu temperaturu, smeša je razblažena etil acetatom (400 ml) i isprana rastvorom soli (2 x 200 ml). Organska faza je osušena na bezvodnom natrijum sulfatu, filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Prečišć avanjem hromatografijom na silika gelu (0% do 15% etil acetata u heptanima) dobijen je metil 6-hloro-3-nitro-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilat (5,45 g, 50%) kao žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8,75 (s, 1H), 4,07 (s, 3H) ppm.<19>F NMR (282 MHz, CDCl3) δ -64,12 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z izračunato 283,9812, pronađeno 285,0 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,95 minuta. LCMS metoda: Kinetex Polar C183,0 X 50 mm 2,6 µm, 3 min, 5 - 95% acetonitril u H2O (0,1% mravlja kiselina) 1,2 mL/min.
Intermedijar 2: Priprema 6-hidroksi-3-nitro-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilne kiseline
[0328]
Korak 1: 6-Hidroksi-3-nitro-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilna kiselina
[0329]
[0330] Smeša metil 6-hidroksi-3-nitro-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilata (32 g, 120,24 mmol) u THF (180 ml) i vodi (180 ml) je tretirana litijum hidroksid monohidratom (15,14 g, 360,79 mmol) i mešana na 27 °C preko noć i. Sirova reakciona smeša je ohlađena na sobnoj temperaturi i pH je podešen na 2 pomo ć u 0,5 M vodenog rastvora hlorovodonične kiseline (380 ml), zatim je prebačena u levak za odvajanje od 1 litra sa 2-metil THF i ekstrahovana. Slojevi su razdvojeni, a organski sloj je zatim ispran vodom (150 mL), rastvorom soli (150 mL), osušen preko natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan pod smanjenim pritiskom da bi se dobila 6-hidroksi-3-nitro-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilna kiselina (29,61 g, 96%) kao beličasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,45 (s, 1H) ppm.<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ δ -64,53 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z izračunato 251,9994, pronađeno 253,0 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,79 minuta. LCMS metoda: Kinetex Polar C183,0 X 50 mm 2,6 µm, 3 min, 5 - 95% acetonitril u H2O (0,1% mravlja kiselina) 1,2 mL/min.
Intermedijar 3: Priprema 6-hloro-3-nitro-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilne kiseline
[0331]
Korak 1: 6-Hloro-3-nitro-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilna kiselina
[0332]
[0333] U rastvor metil 6-hloro-3-nitro-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilata (1,14 g, 4,006 mmol) u THF (48,51 ml) i vodi (24,26 ml) na 0 °C dodat je litijum hidroksid monohidrat (201,7 mg, 4,807 mmol). Reakcija je ostavljena da se zagreje do sobne temperature, a zatim je me šana 2 sata. Rastvor je zakiseljen na pH ~2-3 dodatkom 1 N HCl, a zatim ekstrahovan sa EtOAc. Organska faza je isprana vodom i rastvorom soli, zatim osušena preko natrijum sulfata, filtrirana i koncentrovana da bi se dobila, kao bistri sirup, 6-hloro-3-nitro-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilna kiselina (1,05 g, 97%). ESI-MS m/z izračunato 269,9655, pronađeno 271,0 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,37 minuta određeno obrnuto-faznom UPLC metodom koristeć i Acquity UPLC BEH C18kolonu (30 × 2,1 mm, čestice 1,7 mm) proizvođača Waters (br. artikla: 186002349), i dvostruki gradijentni niz od 1 do 99% mobilne faze B tokom 1,0 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,5 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 mL i temperatura kolone = 60°C.
Intermedijar 4: Priprema metil 3-[bis(terc-butoksikarbonil)amino]-6-bromo-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilata
Korak 1: Metil 3-(benzhidrilidenamino)-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilat
[0335]
[0336] Smeša metil 3-hloro-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilata (47,3 g, 197,43 mmol), difenilmetanimina (47 g, 259,33 mmol), Ksantfosa (9,07 g, 15,675 mmol) i cezijum karbonata (131 g, 402,06 mmol) u dioksanu (800 x 55 ml) je degasirana propuštanjem azota tokom 30 minuta. Dodat je Pd(OAc)2(3,52 g, 15,679 mmol) i sistem je tri puta produvan azotom. Reakciona smeša je zagrejana na 100 °C tokom 18 sati. Reakcija je ohlađena do sobne temperature i filtrirana na sloju celita. Kolač je ispran sa EtOAc, a rastvarači su ispareni pod sniženim pritiskom da bi se dobio metil 3-(benzhidrilidenamino)-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilat (90 g, 84%) kao žuta čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izračunato 384,10855, pronađeno 385,1 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,24 minuta. LCMS metoda: Kinetex C184,6 X 50 mm 2,6 µM, 2,0 mL/min, gradijent od 95% H2O (0,1% mravlja kiselina) 5% acetonitrila (0,1% mravlja kiselina) do 95% acetonitrila (0,1% mravlja kiselina) (2,0 min), zatim držano na 95% acetonitrila (0,1% mravlja kiselina) tokom 1,0 min.
Korak 2: Metil 3-amino-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilat
[0337]
[0338] Suspenziji metil 3-(benzhidrilidenamino)-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilata (65 g, 124,30 mmol) u metanolu (200 ml) dodata je HCl (3 M u metanolu) (146 ml od 3 M, 438,00 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1,5 sat, a zatim je rastvarač uklonjen pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren u etil acetatu (2 l) i dihlorometanu (500 ml). Organska faza je isprana 5% vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (3 x 500 ml) i rastvorom soli (2 x 500 ml), osušena preko bezvodnog natrijum sulfata, filtrirana i rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom. Ostatak je triturisan heptanima (2 x 50 ml) i matične luge su odbačene. Dobijena čvrsta supstanca je triturirana sa smešom dihlorometana i heptana (1:1, 40 mL) i filtrirana da bi se dobio metil 3-amino-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilat (25,25 g, 91%) kao žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8,24 (s, 1H), 257,28 (s, 1H), 5,98 (br. s, 2H), 4,00 (s, 3H) ppm.<19>F NMR (282 MHz, CDCl3) δ –63,23 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z izračunato 220,046, pronađeno 221,1 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,62 minuta. LCMS metoda: Kinetex Polar C183,0 X 50 mm 2,6 µm, 3 min, 5 -95% acetonitril u H2O (0,1% mravlja kiselina) 1,2 mL/min.
Korak 3: Metil 3-amino-6-bromo-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilat 30
[0339]
[0340] U rastvor metil 3-amino-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilata (18,75 g, 80,91 mmol) u acetonitrilu (300 mL) na 0 °C dodat je u porocima N-bromosukcinimid (18,7 g, 105,3 mmol). Sme ša je mešana preko noć i na 25 °C. Dodat je etil acetat (1000 mL). Organski sloj je ispran 10% rastvorom natrijum tiosulfata (3 x 200 ml), koji je ponovo ekstrahovan etil acetatom (2 x 200 ml). Kombinovani organski ekstrakti su isprani zasić enim rastvorom natrijum bikarbonata (3 x 200 ml), rastvorom soli (200 ml), osušeni preko natrijum sulfata i koncentrovani u vakuumu da bi se dobio metil 3-amino-6-bromo-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilat (25,46 g, 98%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 3,93-4,03 (m, 3H), 6,01 (br. s., 2H), 7,37 (s, 1H) ppm.<19>F NMR (282 MHz, CDCl3) ppm-64,2 (s, 3F). ESI-MS m/z izračunato 297,9565, pronađeno 299,0 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,55 minuta. LCMS metoda: Kinetex C184,6 X 50 mm 2,6 µM. Temperatura: 45 °C, Protok: 2,0 mL/min, Vreme rada: 6 min. Mobilna faza: Početni linearni gradijent od 95% H2O (0,1% mravlja kiselina) i 5% acetonitrila (0,1% mravlja kiselina) do 95% acetonitrila (0,1% mravlja kiselina) tokom 4,0 min, zatim držano na 95% acetonitrila (0,1% mravlja kiselina) tokom 2,0 min.
Korak 4: Metil 3-[bis(terc-butoksikarbonil)amino]-6-bromo-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilat [0341]
[0342] Smeša metil 3-amino-6-bromo-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilata (5 g, 15,549 mmol), (Boc)2O (11 g, 11,579 ml, 50,402 mmol), DMAP (310 mg, 2,5375 mmol) i CH2Cl2(150 ml) je mešana na sobnoj temperaturi preko noć i. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i prečiš ć avanjem hromatografijom na silika gelu (0-15% etil acetat u heptanu) je dalo metil 3-[bis(tercbutoksikarbonil)amino]-6-bromo-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilat (6,73 g, 87%) kao svetlo žutu čvrstu supstancu.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 1,42 (s, 18H), 3,96 (s, 3H), 7,85 (s, 1H) ppm.<19>F NMR (282 MHz, CDCl3) δ -63,9 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z izračunato 498,06134, Vreme zadržavanja: 2,34 minuta. LCMS metoda: Kinetex C184,6 X 50 mm 2,6 mM. Temperatura: 45 °C, Protok: 2,0 mL/min, Vreme rada: 3 min. Mobilna faza: Početni linearni gradijent od 95% H2O (0,1% mravlja kiselina) i 5% acetonitrila (0,1% mravlja kiselina) do 95% acetonitrila (0,1% mravlja kiselina) tokom 2,0 min, a zatim držano na 95% acetonitrila (0,1% mravlja kiselina) tokom 1,0 min.
Intermedijar 5: Priprema 6-bromo-3-(terc-butoksikarbonilamino)-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilne kiseline
[0343]
Korak 1: 6-bromo-3-(terc-butoksikarbonilamino)-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilna kiselina
[0344]
[0345] Smeši metil 3-[bis(terc-butoksikarbonil)amino]-6-bromo-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilata (247 g, 494,7 mmol) u THF-u (1,0 l) dodat je rastvor LiOH (47,2 g, 1,971 mol) u vodi (500 ml). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 18 sati, dajuć i žutu suspenziju. Smeša je ohlađena u ledenom kupatilu i polako zakiseljena sa HCl (1000 mL 2 M, 2.000 mol) održavajuć i temperaturu reakcije < 15 °C. Smeša je razblažena heptanom (1,5 L), pomešana i organska faza je odvojena. Vodena faza je ekstrahovana heptanom (500 mL). Spojene organske faze su isprane rastvorom soli, osu šene preko MgSO4, filtrirane i koncentrovane u vakuumu. Sirovo ulje je rastvoreno u heptanu (600 mL), posejano i me šano na sobnoj temperaturi 18 sati, dajuć i gustu suspenziju. Suspenzija je razblažena hladnim heptanom (500 mL), a talog je sakupljen pomoć u srednje frite. Filter kolač je ispran hladnim heptanom i sušen na vazduhu 1 sat, zatim u vakuumu na 45 °C tokom 48 sati, dajuć i 6-bromo-3-(terc-butoksikarbonilamino)-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilnu kiselinu (158,3 g, 83%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10,38 (s, 1H), 9,01 (s, 1H), 1,50 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z izračunato 383,99326, pronađeno 384,9 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,55 minuta. Detalji LCMS metode: Konačna čistoć a je određena UPLC-om sa obrnutom fazom korišć enjem Acquity UPLC BEH C18kolone (50 × 2,1 mm, čestice 1,7 µm) Napravio Waters (pn: 186002350), i dvostruki gradijentni niz od 1 - 99% mobilne faze B tokom 4,5 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 mL i temperatura kolone = 60 °C.
Intermedijar 6: Priprema metil 3-amino-6-bromo-5-fluoro-piridin-2-karboksilata
[0346]
Korak 1: Metil 3-amino-5-fluoro-piridin-2-karboksilat
[0347]
[0348] U autoklav (600 mL) je dodat 2-bromo-5-fluoro-piridin-3-amin (22 g, 115,18 mmol), metanol (250 mL), trietilamin (23,232 g, 32 mL, 229,59 mmol) i [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]dihloropaladijum(II) (2,1 g, 2,8700 mmol). Autoklav je produvan azotom, a zatim ugljen-monoksidom. Smeša je zagrejana na 130 °C, a pritisak ugljen-monoksida je podešen na 120 psi. Smeša je mešana 3 sata na 130 °C, zatim ohlađena na 25 °C. Smeša je produvana azotom i koncentrovana pod vakuumom. Dobijena čvrsta supstanca je razblažena etil acetatom (500 mL). Dodati su voda (200 mL) i natrijum karbonat (15 g) i sme ša je snažno mešana 20 minuta. Slojevi su razdvojeni. Organski sloj je ispran vodom (100 mL) i rastvorom soli (100 mL), osušen preko natrijum sulfata, filtriran i isparen pod sniženim pritiskom da bi se dobio metil 3-amino-5-fluoro-piridin-2-karboksilat (14,4 g, 53%) kao smeđa čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,90 (s, 1H), 6,72 (d, J = 9,8 Hz, 1H), 5,94 (br. s, 2H), 3,96 (s, 3H) ppm. ESI-MS m/z izračunato 170,04915, pronađeno 171,1 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,35 minuta. LCMS metoda: Kinetex Polar C183,0 X 50 mm 2,6 µm, 3 min, 5 - 95% acetonitril u H2O (0,1% mravlja kiselina) 1,2 mL/min.
Korak 2: Metil 3-amino-6-bromo-5-fluoro-piridin-2-karboksilat
[0349]
[0350] U rastvor metil 3-amino-5-fluoro-piridin-2-karboksilata (2,03 g, 11,931 mmol) u acetonitrilu (40 ml), dodat je u porcijama N-bromosukcinimid (2,34 g, 13,147 mmol). Nakon mešanja na sobnoj temperaturi tokom 2 sata, reakciona smeša je razblažena sa EtOAc (150 ml), isprana zasić enim vodenim rastvorom NaHCO3(150 ml) i rastvorom soli (150 ml), zatim sušena preko natrijum sulfata i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Prečišć avanjem hromatografijom na silika gelu (20% do 60% etil acetata u heptanima) dobijen je metil 3-amino-6-bromo-5-fluoro-piridin-2-karboksilat (2,9 g, 98%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 6,80 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 5,98 (br. s., 2H), 4,22 - 3,72 (m, 3H) ppm.
<19>F NMR (282 MHz, CDCl3) δ -105,70 (d, J = 9,2 Hz, 1F) ppm. ESI-MS m/z izračunato 247,9597, pronađeno 248,9 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,73 minuta. LCMS metoda: Kinetex Polar C183,0 X 50 mm 2,6 µm, 3 min, 5 - 95% acetonitril u H2O (0,1% mravlja kiselina) 1,2 mL/min.
Intermedijar 7: Priprema 2-benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enhidrazida (hidrohloridna so)
[0351]
Korak 1: Etil 2-hidroksi-2-(trifluorometil)heks-5-enoat
[0352]
[0353] U rastvor etil 3,3,3-trifluoro-2-okso-propanoata (25,15 g, 147,87 mmol) u Et2O (270 ml) na -78 °C dodat je bromo(but-3-enil)magnezijum u THF (190 ml 0,817 M, 155,23 mmol) kap po kap tokom perioda od 1,5 sata (unutrašnja temperatura od -72 °C do -76 °C). Smeša je mešana na -78 °C tokom 20 minuta. Kupatilo sa suvim ledom i acetonom je uklonjeno. Smeša je polako zagrejana do 5 °C tokom 1 sata, dodata u smešu 1 N vodenog rastvora HCl (170 ml) i usitnjenog leda (150 g) (pH = 4). Dva sloja su razdvojena. Organski sloj je koncentrovan, a ostatak je spojen sa vodenom fazom i ekstrahovan sa EtOAc (2 x 150 ml). Kombinovana organska faza je isprana sa 5% vodenim rastvorom NaHCO3(50 mL) i rastvorom soli (20 mL), osušena sa Na2SO4. Smeša je filtrirana i koncentrovana, a zatim ko-isparena sa THF (2 X 40 mL) da bi se dobio etil 2-hidroksi-2-(trifluorometil)heks-5-enoat (37,44 g, 96%) kao bezbojno ulje.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 5,77 (ddt, J = 17,0, 10,4, 6,4 Hz, 1H), 5,15 - 4,93 (m, 2H), 4,49 - 4,28 (m, 2H), 3,88 (s, 1H), 2,35 - 2,19 (m, 1H), 2,17 - 1,89 (m, 3H), 1,34 (t, J = 7,0 Hz, 3H) ppm.<19>F NMR (282 MHz, CDCl3) δ -78,74 (s, 3F) ppm.
Korak 2: Etil 2-benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enoat
[0354]
[0355] U rastvor etil 2-hidroksi-2-(trifluorometil)heks-5-enoata (24,29 g, čistoć a 87,6%, 94,070 mmol) u DMF (120 ml) na 0 °C dodat je NaH (60% u mineralnom ulju, 5,64 g, 141,01 mmol) u porcijama. Smeša je mešana na 0 °C tokom 10 minuta. Dodati su benzil bromid (24,13 g, 141,08 mmol) i TBAI (8,68 g, 23,500 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noć i. Dodat je NH4Cl (3 g, 0,6 ekvivalenta). Sme ša je mešana 10 minuta. Dodato je 30 ml EtOAc, a zatim je dodata ledena voda (400 g). Sme ša je ekstrahovana sa CH2Cl2i spojeni organski slojevi su koncentrovani. Prečišć avanjem hromatografijom na silika gelu (0-20% CH2Cl2u heptanima) dobijen je etil 2-benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enoat (26,05 g, 88%) kao ružičasto ulje.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 1,34 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 2,00-2,19 (m, 3H), 2,22-2,38 (m, 1H), 4,33 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 4,64 (d, J = 10,6 Hz, 1H), 4,84 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 4,91-5,11 (m, 2H), 5,62-5,90 (m, 1H), 7,36 (s, 5H) ppm.<19>F NMR (282 MHz, CDCl3) d -70,5 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z izračunato 316,12863, pronađeno 317,1 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,47 minuta. LCMS metod: Kinetex C184,6 X 50 mm 2,6 µM. Temperatura: 45 °C, Protok: 2,0 mL/min, Vreme rada: 3 min. Mobilna faza: Početni linearni gradijent od 95% H2O (0,1% mravlja kiselina) i 5% acetonitrila (0,1% mravlja kiselina) do 95% acetonitrila (0,1% mravlja kiselina) tokom 2,0 min, a zatim držano na 95% acetonitrila (0,1% mravlja kiselina) tokom 1,0 min.
Korak 3: 2-Benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enoinska kiselina
[0356]
[0357] Rastvor natrijum hidroksida (7,86 g, 196,51 mmol) u vodi (60 ml) dodat je rastvoru etil 2-benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enoata (24,86 g, 78,593 mmol) u metanolu (210 ml). Reakcija je zagrejana na 50 °C preko noć i. Reakcija je koncentrovana da bi se uklonio metanol, razbla žena vodom (150 ml) i karboksilatna natrijumova so je isprana heptanom (1 x 100 ml). Vodeni rastvor je zakiseljen do pH = 2 pomoć u 3N vodenog rastvora HCl. Karboksilna kiselina je ekstrahovana dihlorometanom (3 x 100 ml) i osušena preko natrijum sulfata. Rastvor je filtriran i koncentrovan da bi se dobila 2-benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enska kiselina (22,57 g, 97%) kao bledožuto ulje.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 14,31 (br. s., 1H), 7,55 - 7,20 (m, 5H), 5,93 - 5,70 (m, 1H), 5,17 - 4,91 (m, 2H), 4,85 - 4,68 (m, 1H), 4,67 -4,55 (m, 1H), 2,32 - 1,94 (m, 4H) ppm.<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -70,29 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z izračunato 288.09732, pronađeno 287.1 (M-1); Vreme zadržavanja: 3.1 minut. LCMS metoda: Kinetex Polar C183.0 X 50 mm 2.6 µm, 6 min, 5 - 95% acetonitril u H2O (0.1% mravlja kiselina) 1.2 mL/min.
Korak 4: terc-butil N-[[2-benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enoil]amino]karbamat
[0358]
[0359] U rastvor 2-benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enoinske kiseline (21.92 g, čistoć a 92.4%, 70.263 mmol) u DMF (130 mL) dodat je HATU (37.2 g, 97.836 mmol) i Et3N (15 g, 148.24 mmol). Smeša je mešana 10 minuta, a zatim je dodat terc-butil N-aminokarbamat (12,2 g, 92,312 mmol). Smeša je mešana na 25 °C preko noć i i na 40 °C tokom 1 sata. Smeša je razblažena ledenom vodom (500 g) i ekstrahovana sa CH2Cl2. Organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata i koncentrovan. Prečišć avanjem hromatografijom na silika gelu (0-30% EtOAc u heptanima) dobijen je terc-butil N-[[2-benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enoil]amino]karbamat (26,08 g, 92%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 1,46 (s, 9H), 2,10–2,31 (m, 3H), 2,34–2,51 (m, 1H), 4,60–4,72 (m, 1H), 4,73–4,86 (m, 1H), 4,95–5,19 (m, 2H), 5,83 (ddt, J = 16,7, 10,4, 6,1 Hz, 1H), 6,28 (br. s., 1H), 7,30–7,51 (m, 5H), 8,34 (d, J = 2,6 Hz, 1H) ppm.<19>F NMR (282 MHz, CDCl3) ppm –73,6 (s, 3F) ppm.
Korak 5: 2-Benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enhidrazid
[0360]
[0361] U rastvor terc-butil N-[[2-benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enoil]amino]karbamata (43,12 g, 107,2 mmol) u CH2Cl2(200 ml) dodat je HCl (100 ml 4 M, 400,0 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 7 sati. Rastvor je uklonjen u vakuumu, ostatak je 2 puta uklonjen iz heptana, a dobijena čvrsta supstanca je sušena u vakuumu pod visokim vakuumom tokom 20 sati, dajuć i 2-benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enhidrazid (hidrohloridna so) (35 g, 96%).<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 9,92 (s, 2H), 7,41 - 7,31 (m, 2H), 7,30 - 7,24 (m, 2H), 7,24 - 7,16 (m, 1H), 5,72 - 5,57 (m, 1H), 5,02 - 4,87 (m, 2H), 4,71 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 4,62 (d, J = 11,0 Hz, 1H), 3,70 (s, 2H), 2,34 - 1,85 (m, 4H) ppm. ESI-MS m/z izračunato 302,1242, pronađeno 303,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,5 minuta. Konačna čistoć a je određena obrnuto-faznom UPLC hromatografijom koristeć i Acquity UPLC BEH C18kolonu (50 × 2,1 mm, čestice 1,7 µm) proizvođača Waters (br. proizvoda: 186002350), i dvostruki gradijentni ciklus od 1 do 99% mobilne faze B tokom 2,9 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 mL i temperatura kolone = 60 °C.
Intermedijar 8: Priprema [6-[5-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-5-nitro-3-(trifluorometil)-2-piridil] trifluorometansulfonata
[0362]
Korak 1: N’-[2-benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enoil]-6-hidroksi-3-nitro-5-(trifluorometil)piridin-2-karbohidrazid
[0363]
[0364] U rastvor 6-hidroksi-3-nitro-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilne kiseline (29,92 g, 102,66 mmol) u acetonitrilu (300 ml) i DMF-u (60 ml) dodat je CDI (17,48 g, 107,80 mmol). Smeša je mešana 0,5 sati na sobnoj temperaturi, zatim je u porcijama dodat 2-benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enhidrazid (hidrohloridna so) (33,04 g, 97,534 mmol). Reakciona smeša je mešana na 26 °C tokom 19 sati. Reakciona smeša je prebačena u levak za ekstrakciju, ispran vodom (300 ml) i 2-Me THF-om (400 ml). Smeša je ekstrahovana sa 2-Me THF-om (3 x 400 ml). Kombinovani organski sloj je ispran sa 0,5 N vodenim rastvorom HCl (3 X 300 mL), slanim rastvorom (3 X 250 mL), osušen preko bezvodnog Na2SO4, filtriran i koncentrovan isparavanjem pod smanjenim pritiskom. Zatim je dva puta rastvoren u dihlorometanu (2 X 300 mL) i isparljive materije su uklonjene isparavanjem pod smanjenim pritiskom da bi se dobio N’-[2-benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enoil]-6-hidroksi-3-nitro-5-(trifluorometil)piridin-2-karbohidrazid (58,5 g, 94%) kao smeđi ostatak pene. ESI-MS m/z izračunato 536.11304, pronađeno 537.2 (M+1)+. Vreme zadržavanja: 2,03 minuta; LCMS metoda: Kinetex Polar C183,0 X 50 mm 2,6 µm, 3 min, 5 - 95% acetonitril u H2O (0,1% mravlja kiselina) 1,2 mL/min.
Korak 2: [6-[5-[1-Benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-5-nitro-3-(trifluorometil)-2-piridil] trifluorometansulfonat
[0365]
[0366] U rastvor N’-[2-benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enoil]-6-hidroksi-3-nitro-5-(trifluorometil) piridin-2-karbohidrazida (9,76 g, 16,922 mmol) u dihlorometanu (190 ml) na 0 °C dodat je DIPEA (8,0136 g, 10,8 ml, 62,004 mmol), a zatim trifluorometilsulfonil trifluorometansulfonat (12,410 g, 7,4 ml, 43,985 mmol). Ledeno hladno kupatilo je uklonjeno posle 20 minuta i reakcija je me šana na sobnoj temperaturi 2,5 sata. Smeša je prebačena u levak za odvajanje sa ledeno hladnim vodenim 1,0 N rastvorom HCl i EtOAc (300 ml). Organski sloj je odvojen, a vodena faza ekstrahovana etil acetatom (2 x 150 ml). Kombinovani organski sloj je ponovo ispran ledeno hladnim vodenim rastvorom HCl 1,0 N (60 mL) i rastvorom soli (3 X 40 mL), osušen preko bezvodnog Na2SO4, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Prečišć avanjem hromatografijom na silika gelu (0-10% EtOAc u heptanima) dobijen je [6-[5-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-5-nitro-3-(trifluorometil)-2-piridil] trifluorometansulfonat (5,334 g, 40%) kao narandžasto ulje.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8,74 (s, 1H), 7,50 -7,27 (m, 5H), 5,87 - 5,68 (m, 1H), 5,12 - 4,96 (m, 2H), 4,88 (d, J = 10,6 Hz, 1H), 4,67 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 2,60 - 2,16 (m, 4H) ppm.<19>F NMR (282 MHz, CDCl3) δ -62,68 (s, 3F), -71,80 (s, 3F), -73,04 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z izračunato 650,0518, pronađeno 651,1 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 3,94 minuta. LCMS metoda: Kinetex Polar C183,0 X 50 mm 2,6 µm, 6 min, 5 - 95% acetonitril u H2O (0,1% mravlja kiselina) 1,2 mL/min.
Intermedijer 9: Priprema terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamata
Korak 1: tert-butil N-[2-[[[2-benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enoil]amino]karbamoil]-6-bromo-5-(trifluoro-metil)-3-piridil]karbamat
[0368]
[0369] U smešu 6-bromo-3-(terc-butoksikarbonilamino)-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilne kiseline (239,2 g, 621,1 mmol) i 2-benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enhidrazida (hidrohloridna so) (230,1 g, 761,2 mmol) u EtOAc 35 (2,2 l) na sobnoj temperaturi dodat je piridin (200 ml, 2,473 mol) što je dalo talog. U smešu je dodat 1-propanfosfonski anhidrid (500 g 50% tež/tež, 785,7 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 12 sati. Reakcija je ugašena sporim dodavanjem NaOH (149 g 50% tež/tež, 1,863 mol) u vodi (2 l) i smeša je mešana 15 minuta. Organska faza je odvojena, a vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc (1 L). Spojene organske faze su isprane rastvorom soli, osušene preko MgSO4, filtrirane i koncentrovane u vakuumu. Nakon polovine vremena od 40 minuta, rastvara č je uklonjen, organska faza je isprana 2 puta vodenim rastvorom HCl (1000 mL 1 M, 1.000 mol). Organska faza je sušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana u vakuumu. Sirovi proizvod je suspendovan u toplom heptanu (2,5 L) i MTBE (0,25 L) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 12 sati, dajuć i svetlo žutu suspenziju. Suspenzija je filtrirana, a dobijeni filter kolač je ispran 2 puta sa 1 L 10% MTBE/heptana. Prljavo bela čvrsta supstanca je sušena na vazduhu 2 sata, zatim u vakuumu na 40 °C tokom 20 sati, što daje terc-butil N-[2-[[[2-benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enoil]amino]karba-45-moil]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil] karbamat (379,9 g, 91%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,09 (s, 1H), 10,92 (s, 1H), 10,35 (s, 1H), 9,15 (s, 1H), 7,50 (d, J = 7,4 Hz, 2H), 7,36 (dt, J = 24,4, 7,2 Hz, 3H), 5,87 (ddt, J = 16,0, 10,4, 5,2 Hz, 1H), 5,09 (d, J = 16,9 Hz, 1H), 5,02 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 4,84 (q, J = 11,4 Hz, 2H), 2,35 - 2,12 (m, 4H), 1,49 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z izračunato 668,1069, pronađeno 670,9 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 3,5 minuta. Konačna čistoć a je određena UPLC-om sa obrnutom fazom koriste ć i Acquity UPLC BEH C18kolonu (50 × 2,1 mm, čestice 1,7 µm) proizvođača Waters (pn: 186002350), 50 i dvostruki gradijentni niz od 1 - 99% mobilne faze B tokom 5,0 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 mL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 2: tert-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat
[0370]
[0371] terc-butil N-[2-[[[2-benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enoil]amino]karbamoil]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat (102 g, 150,8 mmol) je rastvoren u bezvodnom acetonitrilu (1000 ml) i dodat je DIPEA (92 ml, 528,2 mmol). Dobijeni narandžasti rastvor je zagrejan na 70 °C (unutrašnja temperatura) čime je dobijen bistri žuti rastvor. Zatim je dodat p-toluensulfonil hlorid (37,4 g, 196,2 mmol) u 3 jednake porcije od 12,47 g razdvojene sa 10 minuta, a zatim je reakcija zagrevana jo š 30 minuta. Reakcija je ohlađena na sobnu temperaturu i acetonitril je koncentrovan pod sni ženim pritiskom. U smešu je dodato 1000 ml MTBE, zatim 800 ml vode, i smeša je mešana, a slojevi su razdvojeni. Organski sloj je ispran rastvorom limunske kiseline (36,3 g, 188,9 mmol) u 700 ml vode, zatim 400 ml zasić enog NaHCO3, pa 300 ml slanog rastvora. Organski sloj je zatim osušen preko bezvodnog MgSO4i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Materijal je prečišć en pomo ć u hromatografije na silika gelu koriste ć i gradijent od 15% do 50% 8% EtOAc u heksanima (B) i heksanima (A) da bi se dobio terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat (91,7 g, 93%).
<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 10,18 (s, 1H), 9,35 (s, 1H), 7,55 - 7,47 (m, 2H), 7,45 - 7,37 (m, 2H), 7,36 - 7,28 (m, 1H), 5,83 - 5,68 (m, 1H), 5,10 - 4,93 (m, 2H), 4,82 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 4,69 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 2,59 - 2,13 (m, 4H), 1,56 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z izračunato 650,0963, pronađeno 651,0 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 3,81 minut. Konačna čistoć a je određena UPLC-om sa obrnutom fazom koriste ć i Acquity UPLC BEH C18kolonu (50 × 2,1 mm, čestice 1,7 µm) proizvođača Waters (br. artikla: 186002350), i dvostruki gradijentni niz od 1 do 99% mobilne faze B tokom 4,5 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 mL i temperatura kolone = 60 °C.
Intermedijar 10: Priprema terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamata
[0372]
Korak 1: terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat
[0373]
[0374] U rastvor terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamata (30 g, 41,910 mmol) u MTBE (300 ml) dodat je DIEA (6,6780 g, 9 ml, 51,670 mmol), DMAP (0,28 g, 2,2919 mmol) i Boc anhidrid (20,1 g, 21,158 ml, 92,097 mmol). Dobijeni žuti mutni rastvor je mešan na 35 °C preko noć i. Nakon hlađenja na sobnu temperaturu, rastvarač je isparen. Žuti uljasti ostatak je zatim rastvoren u 300 ml DCM i ispran vodom (300 ml), a zatim rastvorom soli (300 ml). Organski sloj je odvojen, osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan. Prečišć avanjem hromatografijom na silika gelu (0% do 20% EtOAc u heksanima) dobijen je terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (28,68 g, 87%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8,89 (s, 1H), 7,51 (d, J = 7,4 Hz, 2H), 7,43 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 7,35 (t, J = 7,3 Hz, 1H), 5,96-5,76 (m, 1H), 5,11 (d, J = 17,2 Hz, 1H), 5,01 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 4,73 (d, J = 10,7 Hz, 1H), 4,66 (d, J = 10,6 Hz, 1H), 2,65 -2,51 (m, 2H), 2,36 - 2,17 (m, 2H), 1,27 (d, J = 23,5 Hz, 18H) ppm.
Intermedijar 11: Priprema 2-benziloksi-2-(trifluorometil)pent-4-enhidrazida (hidrohloridna so)
Korak 1: Etil 2-hidroksi-2-(trifluorometil)pent-4-enoat
[0376]
[0377] Rastvoru etil 3,3,3-trifluoro-2-okso-propanoat (30 g, 176,38 mmol) u dietil etru (300 mL) na -78 °C je ukapavanjem dodavan allil(bromo)magnezijum (185 mL 1 M, 185,00 mmol) tokom perioda od 3 sata (unutrašnja temperatura: -74°C - -76 °C). Smeša je mešana na -78 °C tokom 45 minuta. Kada sa suvim ledom – acetonom je uklonjena. Smeša je zagrevana do približno 10 °C tokom perioda od sat vremena i dodata je smeši 1 N vodenog HCl (210 mL) i izmrvljenog leda (400 g) (pH 4). Smeša je ekstraktovana sa EtOAc, isprana sa 5% vodenog NaHCO3, slanim rastvorom i osušena preko anhidrovanog Na2SO4. Smeša je filtrirana, koncentrovana i uparena zajedno sa heksanom čime je dobijen etil 2-hidroksi-2-(trifluorometil)pent-4-enoat (42,2 g, 90%) kao ulje svetlo žute boje.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 1,33 (t, J = 7,1 Hz, 3H), 2,60 - 2,79 (m, 2H), 3,84 (br, s,,1H), 4,24 - 4,48 (m, 2H), 5,09 - 5,33 (m, 2H), 5,59 - 5,82 (m, 1H) ppm.<19>F NMR (282 MHz, CDCl3) δ -78,5 (s, 3F) ppm.
Korak 2: Etil 2-benziloksi-2-(trifluorometil)pent-4-enoat
[0378]
[0379] Rastvoru etil 2-hidroksi-2-(trifluorometil)pent-4-enoat (18,56 g, 83,105 mmol) u DMF (100 mL) je dodat NaH (5,3 g, 60 % w/w, 132,51 mmol) na 0 °C. Reakcija je mešana 15 minuta nakon čega su dodati benzil bromid (21,14 g, 15 mL, 121,12 mol) i tetrabutil amonijum jodid (8,5 g, 23,012 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom noći. Reakcija je ugašena vodom (300 mL) i ekstraktovana etil acetatom (3 X 300 mL) pre nego što je isprana slanim rastvorom (500 mL) i osušena preko natrijum sulfata. Prečišćavanjem hromatografijom na silika gelu (20 do 60% DCM u heksanima) je dobijen etil 2-benziloksi-2-(trifluorometil)pent-4-enoat (22,01 g, 70%) kao bezbojno ulje.<1>H NMR (250 MHz, CDCl3) δ 7,55 - 7,25 (m, 5H), 6,00 - 5,80 (m, 1H), 5,30 - 5,10 (m, 2H), 4,86 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 4,68 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 4,33 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 2,81 (d, J = 7,0 Hz, 2H), 1,34 (t, J = 7,1 Hz, 3H) ppm. ESI-MS m/z izračunato 302,113, pronađeno 303,5 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 4,14 minuta. LCMS metoda: Merck Millipore Chromolith SpeedROD C18kolona (50 X 4,6 mm) i dualni gradijentni tok od 5 -100% mobilne faze B tokom 6 minuta. Mobilna faza A = voda (0,1 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,1 % CF3CO2H).
Korak 3: 2-Benziloksi-2-(trifluorometil)pent-4-enska kiselina
[0380]
[0381] U rastvor etil 2-benziloksi-2-(trifluorometil)pent-4-enoat (28,99 g, 95,902 mmol) u metanolu (150 mL) je dodat rastvor NaOH (7,6714 g, 191,80 mmol) u vodi (50 mL). Reakciona smeša je mešana na 40 °C tokom 3 sata. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom, ostatak je razblažen vodom (200 mL) i ispran dietil etrom (200 mL). Vodeni sloj je zakiseljen koncentrovanim HCl na pH 1 i ekstraktovan dietil etrom (3 X 200 mL). Spojeni organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentrovani pod vakuumom čime je dobijena 2-benziloksi-2-(trifluorometil)pent-4-enska kiselina (28,04 g, 99%) kao tečnost svetlo žute boje.<1>H NMR (250 MHz, CDCl3) δ 7,55 - 7,28 (m, 5H), 5,97 - 5,69 (m, 1H), 5,33 - 5,17 (m, 2H), 4,95 - 4,66 (m, 2H), 2,91 (d, J = 7,1 Hz, 2H) ppm.
Korak 4: terc-Butil N-[[2-benziloksi-2-(trifluorometil)pent-4-enoil]amino]karbamat
[0382]
[0383] Rastvoru 2-benziloksi-2-(trifluorometil)pent-4-enska kiselina (300 g, 1,094 mol) u DMF (2 L) su dodati HATU (530 g, 1,394 mol) i DIEA (400 mL, 2,296 mol) i smeša je mešana na temperaturi okruženja 10 minuta. Smeši je dodat terc-butil N-aminokarbamat (152 g, 1,150 mol) i smeša je mešana na temperaturi okruženja tokom 36 sati. Reakcija je ugašena hladnom vodom (4 L) i smeša je ekstraktovana 2 puta sa EtOAc (2 L). Organska faza je isprana slanim rastvorom, osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana pod vakuumom. Prečišćavanjem hromatografijom na silika gelu (0 - 40% EtOAc/heksani) je dobijen tercbutil N-[[2-benziloksi-2-(trifluorometil)pent-4-enoil]amino]karbamat (386,49 g, 91%) kao ulje koje se polako kristalisalo u beličastu čvrstu supstancu.<1>H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10,00 (d, J = 37,9 Hz, 1H), 8,93 (s, 1H), 7,46 - 7,39 (m, 2H), 7,38 - 7,29 (m, 3H), 6,01 - 5,64 (m, 1H), 5,32 (d, J = 17,1 Hz, 1H), 5,17 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 4,77 (s, 2H), 2,96 (qd, J = 15,4, 6,8 Hz, 2H), 1,39 (d, J = 17,3 Hz, 9H) ppm. ESI-MS m/z izračunato 388,16098, pronađeno 389,0 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,51 minut. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (50 × 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002350), i dualnim gradijentnim tokom od 1 - 99% mobilne faze B tokom 4,5 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 5: 2-Benziloksi-2-(trifluorometil)pent-4-enhidrazid (hidrohloridna so)
[0384]
[0385] Rastvoru terc-butil N-[[2-benziloksi-2-(trifluorometil)pent-4-enoil]amino]karbamat (98,5 g, 240,94 mmol) u DCM (400 mL) je dodat HCl u dioksanu (200 mL 4 M, 800,00 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 sata, koncentrovana i uparena zajedno sa DCM i heksanima čime je dobijen 2-benziloksi-2-(trifluorometil)pent-4-enehidrazid (hidrohloridna so) (81,15 g, 97%) kao beličasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 11,07 (s, 1H), 7,70 - 7,16 (m, 5H), 5,87 - 5,61 (m, 1H), 5,45 -5,09 (m, 2H), 4,79 (s, 2H), 3,6 - 3,4 (m, 2H), 3,23 - 3,07 (m, 1H), 3,04 - 2,87 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z izračunato 288,10855, pronađeno 289.2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,0 minuta. LCMS metoda: Waters Cortex 2.7u C18(3,0mm X 50mm), 55 °C; protok: 1,2 mL/min; mobilna faza: 100% voda sa 0,1% trifluoroacetatnom kiselinom a zatim 100% acetonitrila sa 0,1% trifluoroacetatnom kiselinom, gradijent 5% do 100% B tokom 4 minuta, sa ekvilibracijom na 100% B tokom 0,5 minuta, zatim 5% B tokom 1,5 minuta.
Intermedijer 12: Priprema [6-[5-[1-Benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-5-nitro-3-(trifluorometil)-2-piridil] trifluorometansulfonata
Korak 1: N’-[2-benziloksi-2-(trifluorometil)pent-4-enoil]-6-hidroksi-3-nitro-5- (trifluorometil) piridin-2-karbohidrazid
[0387]
[0388] Rastvoru 6-hidroksi-3-nitro-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilna kiselina (8,5 g, 29,165 mmol) u acetonitrilu (90 mL) i DMF (18 mL) je dodato CDI (5 g, 30,836 mmol). Smeša je mešana 30 minuta na sobnoj temperaturi a zatim je dodat 2-benziloksi -2-(trifluorometil)pent-4-enhidrazid (hidrohloridna so) (9 g, 27,716 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom noći. Reakciona smeša je prebačena u ekstrakcioni levak ispirajući sa vodom (300 mL) i 2-Me THF (400 mL). Smeša je ekstraktovana sa 2-metil tetrahidrofuranom (3 X 400 mL). Spojeni organski sloj je ispran sa 0.5 N vodenim rastvorom HCl (3 X 300 mL), slanim rastvorom (3 X 250 mL), osušen preko anhidrovanog Na2SO4, filtriran i koncentrovan pod redukovanim pritiskom. Zatim je dva puta solubilizovan u dihlorometanu (2 X 300 mL) i isparljive materije su uklonjene pod redukovanim pritiskom čime je dobijen N’-[2-benziloksi-2-(trifluorometil)pent-4-enoil]-6-hidroksi-3-nitro-5-(trifluorometil)piridin-2-karbohidrazid (14,7 g, 75%) kao čvrsta supstanca žute boje. ESI-MS m/z izračunato 522,0974, pronađeno 523,1 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,08 minuta. LCMS metoda: Kinetex Polar C183,0 X 50 mm 2,6 µm, 3 minuta, 5 - 95% acetonitrila u H2O (0,1% mravlja kiselina) 1,2 mL/min.
Korak 2: [6-[5-[1-Benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-5-nitro-3-(trifluorometil)-2-piridil]trifluorometansulfonat
[0389]
[0390] Trifluorometilsulfonil trifluorometansulfonat (14,758 g, 8,8 mL, 52,308 mmol) je dodat N’-[2-benziloksi-2-(trifluorometil)pent-4-enoil]-6-hidroksi-3-nitro-5-(trifluorometil)piridin-2-karbohidrazidu (14,7 g, 20,712 mmol) i DIPEA (9,79 g, 13,2 mL, 75,783 mmol) u dihlorometanu (175 mL) na 0 °C. Ledena kada je uklonjena nakon 20 minuta i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 i po sata. Smeša je prebačena u levak za odvajanje sa ledenim vodenim 1.0 N rastvorom HCl (180 mL) i EtOAc (500 mL). Organski sloj je razdvojen i vodena faza je ekstraktovana etil acetatom (2 X 120 mL). Spojeni organski sloj je ponovo ispran sa ledenim HCl 1.0 N vodenim rastvorom (120 mL) i slanim rastvorom (3 X 120 mL), osušen preko anhidrovanog Na2SO4, filtriran i koncentrovan uparavanjem pod redukovanim pritiskom. Prečišćavanjem hromatografijom na silika gelu (0% do 20% etil acetata u heptanima) je dobijen [6 -[5-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-5-nitro-3-(trifluorometil)-2-piridil] trifluorometansulfonat (5,425 g, 40%) kao narandžasto viskozno ulje.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8,65 (s, 1H), 7,36 - 7,21 (m, 5H), 5,93 - 5,74 (m, 1H), 5,28 - 5,10 (m, 2H), 4,78 (d, J= 10,9 Hz, 1H), 4,60 (d, J = 10,6 Hz, 1H), 3,21 - 3,05 (m, 2H) ppm.<19>F NMR (282 MHz, CDCl3) δ -62,69 (s, 3F), -71,82 (s, 3F), -73,32 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z izračunato 636,03613, pronađeno 637,1 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 4,0 minuta. LCMS metoda: Kinetex Polar C183,0 X 50 mm 2,6 µm, 6 minuta, 5 - 95% acetonitrila u H2O (0,1% mravlja kiselina) 1,2 mL/min.
Intermedijer 13: Priprema terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil] karbamata
[0391]
Korak 1: terc-Butil N-[2-[[[2-benziloksi-2-(trifluorometil)pent-4-enoil]amino]karbamoil]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat
[0392]
[0393] Smeši 6-bromo-3-(terc-butoksikarbonilamino)-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilna kiselina (53 g, 137,6 mmol) i 2-benziloksi-2-(trifluorometil)pent-4-enhidrazid (hidrohloridna so) (55 g, 169,4 mmol) u EtOAc (500 mL) na temperaturi okruženja je dodat piridin (44 mL, 544,0 mmol). Smeši je dodat 1-propanfosfonski anhidrid (111 g 50 % w/w, 174,4 mmol) i reakciona smeša je mešana na temperaturi okruženja tokom 12 sati. Reakcija je ugašena laganim dodavanjem NaOH (35 g 50 % w/w, 437,5 mmol) u vodi (500 mL) i smeša je mešana 15 minuta. Organska faza je razdvojena i vodena faza je ekstraktovana sa EtOAc (500 mL). Spojene organske faze su isprane sa HCl (250 mL 1 M, 250,0 mmol), slanim rastvorom, osušene preko MgSO4, filtrirane i koncentrovane pod vakuumom. Prečišćavanjem hromatografijom na silika gelu (0 - 20% EtOAc/heksani) je dobijen terc-butil N-[2-[[[2-benziloksi-2-(trifluorometil)pent-4-enoil]amino]karbamoil]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat (66 g, 73%) kao bledo ružičasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO) δ 11,11 (s, 1H), 10,91 (s, 1H), 10,40 (s, 1H), 9,16 (s, 1H), 7,47 (d, J= 6,9 Hz, 2H), 7,42 - 7,29 (m, 3H), 5,91 (ddt, J= 17,1, 10,6, 7,1 Hz, 1H), 5,37 (dd, J= 17,2, 1,9 Hz, 1H), 5,22 (dd, J= 10,4, 1,8 Hz, 1H), 4,85 (d, J= 2,1 Hz, 2H), 3,20 - 2,91 (m, 2H), 1,50 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z izračunato 654,09125, pronađeno 657,0 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 3,49 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (50 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002350) i dualnim gradijentnim tokom od 1 - 99% mobilne faze B tokom 4,5 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 2: terc-Butil N-[2-[5-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat
[0394]
[0395] Rastvor terc-butil N-[2-[[[2-benziloksi-2-(trifluorometil)pent-4-enoil]amino]karbamoil]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat (2,15 g, 3,2641 mmol) i DIPEA (1,12 g, 1,5 mL, 8,6117 mmol) u acetonitrilu (43 mL) je zagrevan na 50 °C a zatim je u delovima dodat p-toluensulfonil hlorid (765 mg, 4,0127 mmol) na 50 °C. Dobijena smeša je mešana na 70 °C tokom 2 sata. Reakciona smeša je ohlađena, zatim bazifikovana zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata (100 mL) i ekstraktovana etil acetatom (3 X 50 mL). Spojeni organski slojevi su isprani slanim rastvorom (50 mL), osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani. Prečišćavanjem hromatografijom na silika gelu (0% do 10% etil acetata u heptanima) je dobijen terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat (1,7 g, 80%) kao viskozno ulje žute boje.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 10,18 (br, s, 1H), 9,33 (br, s, 1H), 7,53 - 7,27 (m, 5H), 6,00 - 5,83 (m, 1H), 5,32 - 5,13 (m, 2H), 4,86 - 4,76 (m, 1H), 4,73 - 4,64 (m, 1H), 3,27 - 3,11 (m, 2H), 1,55 (s, 9H) ppm.<19>F NMR (282 MHz, CDCl3) δ -63,78 (s, 3F), -72,93 (s, 3F) ppm. Nije uočena jonizacija uobičajenom ESI metodom ali je jonizacija uočena pomoću APCI metode: (M-C4H8+1)<++>= 580,8. ESI-MS m/z izračunato 636,0807, vreme zadržavanja: 2,7 minuta; LCMS metoda: Kinetex Polar C183,0 X 50 mm 2,6 µm, 4 minuta, 5 - 95% acetonitrila u H2O (0,1% mravlja kiselina) 1,2 mL/min.
Intermedijer 14: Priprema terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamata
[0396]
Korak 1: terc-Butil N-[2-[[[(2R)-2-benziloksi-2-(trifluorometil)pent-4-enoil]amino] karbamoil]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat
[0397]
[0398] Racemski terc-butil N-[2-[[[2-benziloksi-2-(trifluorometil)pent-4-enoil]amino]karbamoil]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat (24,5 g, 37,38 mmol) je prečišćen preparativnom hiralnom SFC sa 500 µL ubrizgavanjima 32 mg/mL rastvora na ChiralPak IC (250 X 21,2 mm), 5 µm kolona eluirana na 40 °C pri 70 mL/min sa 8 % MeOH (20mM NH3) i 92 % CO2. Prvi eluirajući enantiomer-1 (Pik 1 pri vremenu zadržavanja = 4,17 minuta) kako bi se dobio terc-butil N-[2-[[[(2S)-2-benziloksi-2-(trifluorometil)pent-4-enoil]amino]karbamoil]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat (11,73 g, 96%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 10,59 (s, 1H), 9,83 (s, 1H), 9,28 (s, 1H), 9,02 (d, J = 29,6 Hz, 1H), 7,48 - 7,33 (m, 5H), 5,96 - 5,77 (m, 1H), 5,41 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 5,36 - 5,29 (m, 1H), 4,86 (s, 2H), 3,19 (dd, J = 15,5, 5,9 Hz, 1H), 3,03 (dd, J = 15,5, 7,8 Hz, 1H), 1,53 (s, 9H) ppm;<19>F NMR (376 MHz, hloroform-d) δ -63,89, -73,76 ppm.
ESI-MS m/z izračunato 654,09125, pronađeno 655,3 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 0,53 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (30 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002349), i dualnim gradijentnim tokom od 50 - 99% mobilna faza B tokom 1,0 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,5 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
[0399] Potonjim eluirajućim enantiomerom 2 (Pik 2 sa vremenom zadržavanja = 6,63 minuta) je dobijen terc-butil N-[2-[[[(2R)-2-benziloksi-2-(trifluorometil)pent-4-enoil]amino]karbamoil]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat (11,62 g, 95%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 10,59 (s, 1H), 9,74 (s, 1H), 9,28 (s, 1H), 9,06 (s, 1H), 7,39 (d, J = 4,4 Hz, 5H), 6,02 - 5,79 (m, 1H), 5,44 - 5,36 (m, 1H), 5,34 (dd, J = 10,3, 1,3 Hz, 1H), 4,91 - 4,81 (m, 2H), 3,19 (dd, J = 15,4, 5,8 Hz, 1H), 3,03 (dd, J = 15,5, 7,8 Hz, 1H), 1,53 (s, 9H) ppm;<19>F NMR (376 MHz, hloroform-d) δ -63,89, -73,76 ppm. ESI-MS m/z izračunato 654,09125, pronađeno 657,2 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 0,53 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (30 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002349), i dualnim gradijentnim tokom od 50 - 99% mobilne faze B tokom 1,0 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,5 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 2: terc-Butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat
[0400]
[0401] terc-Butil N-[2-[[[(2R)-2-benziloksi-2-(trifluorometil)pent-4-enoil]amino]karbamoil]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat (enantiomer 2) (24,97 g, 38,10 mmol) je rastvoren u anhidrovanom acetonitrilu (200 mL) pod azotom, stvarajući bistri rastvor žute boje. Dodato je DIPEA (19,91 mL, 114,3 mmol) i rastvor je postao narandžast. Rastvor je zagrevan do 70 °C nakon čega je iz 3 dela dodat p-toluensulfonil hlorid (7,99 g, 41,91 mmol) u intervalima od 30 minuta i zagrevan približno 3 sata. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i veća acetonitrila je isparena na 45 °C. Dodato je 145 mL MTBE a zatim rastvor limunske kiseline (11,0 g, 57,25 mmol) u 250 mL vode, mešana a zatim dodato 73 mL heksana. Slojevi su razdvojeni i vodeni sloj je ekstraktovan sa MTBE. Spojeni organski slojevi su osušeni preko MgSO4, koncentrovani pod vakuumom na 45 °C. Prečišćavanjem hromatografijom na silika gelu (15% do 80% heksana (kao rastvarač A) u 10% EtOAc/heksani (kao rastvarač B)) je dobijen terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat (20,47 g, 84%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 10,18 (s, 1H), 9,34 (s, 1H), 7,48 (d, J= 7,1 Hz, 2H), 7,39 (t, J= 7,5 Hz, 2H), 7,31 (t, J= 7,3 Hz, 1H), 6,00 - 5,81 (m, 1H), 5,25 (d, J= 17,1, 1,6 Hz, 1H), 5,20 (d, J= 10,1, 1,5 Hz, 1H), 4,82 (d, J = 10,6 Hz, 1H), 4,70 (d, J = 10,6 Hz, 1H), 3,30 - 3,09 (m, 2H), 1,56 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z izračunato 636,0807, pronađeno 637,3 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 3,81 minuta. LCMS konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (50 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002350), i dualnim gradijentnim tokom od 1 -99% mobilne faze B tokom 4,5 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Intermedijer 15: Priprema terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-hidroksi-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamata
[0402]
Korak 1: terc-Butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-hidroksi-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat
[0403]
[0404] Mešajućem rastvoru terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (5,52 g, 7,485 mmol) u DMSO (35,86 mL) na sobnoj temperaturi je dodat cezijum acetat (1,437 g, 7,486 mmol) i sme ša je zatvorena i zagrevana pod atmosferom azota na 80 °C tokom noći. Smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i razblažena zasiženim vodenim NH4Cl a zatim ekstraktovana sa EtOAc (2X). Organske frakcije su spojene, osušene preko MgSO4, filtrirane i koncentrovane u ulje žute boje. Prečišćavanjem hromatografijom na silika gelu (100% heksani do 100% EtOAc) je dobijena čvrsta supstanca bele boje, tercbutil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-hidroksi-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (1,8 g, 36%). ESI-MS m/z izračunato 674,2175, pronađeno 575,2 (M-Boc)<+>. Vreme zadržavanja: 0,45 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (30 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002349), i dualnim gradijentnim tokom od 50 - 99% mobilne faze B tokom 1,0 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,5 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Intermedijer 16: Priprema terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamata
[0405]
Korak 1: terc-Butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat
[0406]
[0407] di-terc-Butil dikarbonat (208 mg, 0,9530 mmol) i trietilamin (400 µL, 2,870 mmol) su dodati rastvoru terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat (500 mg, 0,7531 mmol) rastvorenom u dioksanu (5 mL) a zatim DMAP (14 mg, 0,1146 mmol). Reakciona smeša je mešana 3 sata na sobnoj temperaturi. Smeša je koncentrovana na polovinu svoje zapremine i dodata je voda. Ekstraktovano etil acetatom i spojene organske materije su isprane slanim rastvorom. Organske materije su razdvojene, osu šene preko natrijum sulfata i uparene. Prečišćavanjem hromatografijom na silika gelu (0 do 50% EtOAc u heksanima) je dobijen terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (487 mg, 88%) kao čvrsta supstanca bele boje.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,90 (s, 1H), 7,49 (d, J = 7,5 Hz, 2H), 7,42 (t, J = 7,4 Hz, 2H), 7,35 (t, J = 7,3 Hz, 1H), 5,93 (dq, J = 17,1, 7,6 Hz, 1H), 5,38 (d, J = 17,0 Hz, 1H), 5,25 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 4,78 (d, J = 10,6 Hz, 1H), 4,65 (d, J = 10,6 Hz, 1H), 2,50 (p, J = 1,8 Hz, 2H), 1,27 (d, J = 21,4 Hz, 18H) ppm. ESI-MS m/z izračunato 736,1331, pronađeno 739,2 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 1,66 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (50 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002350), i dualnim gradijentnim tokom od 50 - 99% mobilne faze B tokom 2,9 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Intermedijer 17: Priprema (2R)-2-benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enske kiseline
[0408]
Korak-1: (2R)-2-Benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enska kiselina; (R)-4-hinolil-[(2S,4S)-5-vinilhinuklidin-2-il]metanol
[0409]
[0410] U reaktor sa oblogom pročišćen sa N2podešen na 20 °C je dodat izopropil acetat (IPAC, 100 L, 0,173 M, 20 Vols), a zatim prethodno istopljena 2-benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enska kiselina (5,00 kg, 17,345 mol) i cinhonidin (2,553 kg, 8,67 mol) pretvoreno u kašu sa malom količinom reakcionog rastvarača. Reaktor je bio podešen da poveća unutrašnju temperaturu do 80 °C tokom sat vremena, sa čvrstim supstancama koje prelaze u rastvor nakon zagrevanja na podešenu temperaturu, zatim je rastvor održavan na temperaturi tokom najmanje 10 minuta, nakon čega je ohlađen do 70 °C održavan i zasađen sa hiralnom solju (50g, 1,0 % sa wt). Smeša je mešana 10 minuta, zatim je unutrašnja temperatura porasla na 20 °C tokom 4 sata, nakon čega je održavana tokom noći na 20 °C. Smeša je filtrirana, kolač je ispran izopropil acetatom (10,0 L, 2,0 vols) i osušena pod vakuumom. Kolač je zatim osušen pod vakuumom (50 °C, vakuum) čime je dobijeno 4,7 kg soli. Dobijena čvrsta so je vraćena u reaktor pravljenjem kaše sa porcijom izopropil acetata (94 L, 20 zap. bazirano na trenutnoj wt soli) i upumpana u reaktor i me šana. Smeša je zatim zagrevana do unutrašnjih 80 °C, vruća kaša je mešana tokom najmanje 10 minuta, nakon čega je podešeno da se zagreva do 20 °C tokom 4 – 6 sati, zatim je mešana tokom noći na 20 °C. Materijal je nakon toga filtriran i kolač je ispran izopropil acetatom (9,4 L, 2,0 zap.), osušen, kolač je izvađen i osušen pod vakuumom (50 °C, vakuum) čime je dobijeno 3.1 kg čvrste supstance. Čvrsta supstanca (3,1 kg) i izopropil acetat (62 L, 20 zap. na osnovu wt čvrste soli) su pomešani i dodati u reaktor, mešani pod N2pročišćavanjem i zagrevani do 80 °C i održavani na temperaturi najmanje 10 minuta, zatim je temperatura podešena na 20 °C tokom 4 – 6 sati, nakon čega su mešani tokom noći. Smeša je filtrirana, kolač je ispran izopropil acetatom (6,2 L, 2 zap.), osušen, izvađen i osušen pod vakuumom (50 °C, vak.) čime je dobijeno 2,25 kg čvrste soli. Čvrsta supstanca (2,25 kg) i izopropil acetat (45 L, 20 zap. na osnovu wt čvrste soli) su pomešani i dodati u reaktor, mešani pod N2pročišćavanjem i zagrevani do 80 °C, održavani na temperaturi najmanje 10 minuta, zatim je temperatura pode šena na 20 °C tokom 4 – 6 sati, nakon čega su mešani tokom noći. Smeša je filtrirana, kolač je ispran izopropil acetatom (4,5 L, 2 zap.), osušen, izvađen i osušen pod vakuumom (50 °C) čime je dobijena (2R)-2-benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enska kiselina;(R)-4-hinolil-[(2S,4S)- 5-vinilhinuklidin-2-il]metanol (1,886 kg, > 98,0 % ee ) kao beličasta do preplanula čvrsta supstanca. Hiralna čistoća je utvrđena Agilent 1200 HPLC instrumentom upotrebom Phenomenex Lux i-Amylose-3 kolone (3 µm, 150 X 4,6 mm) i dualnim, izokratskim gradijentnim tokom 30% do 70% mobilne faze B tokom 20,0 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,1 % CF3CO2H). Mobilna faza B = MeOH (0,1% CF3CO2H). Brzina protoka = 1,0 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 2 µL i temperatura kolone = 30 °C, koncentracija uzorka: 1 mg/mL u 60% acetonitril/40% voda.
Korak 2: (2R)-2-Benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enska kiselina
[0411]
[0412] Suspenzija (2R)-2-benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enska kiselina; (R)-4-hinolil-[(2S,4S)-5-vinilhinuklidin-2-il]metanol (50 g, 87,931 mmol) u etil acetatu (500,00 mL) je tretirana vodenim rastvorom hlorovodonične kiseline (200 mL 1 M, 200,00 mmol). Nakon mešanja tokom 15 minuta na sobnoj temperaturi, dve faze su razdvojene. Vodena faza je ekstraktovana dva puta etil acetatom (200 mL). Spojeni organski sloj je ispran sa 1 N HCl (100 mL). Organski sloj je osušen preko natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan. Materijal sušen preko visokog vakuuma tokom noći čime je dobijena (2R)-2-benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enska kiselina (26,18 g, 96%) kao bledo braon ulje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,46 - 7,31 (m, 5H), 5,88 - 5,73 (m, 1H), 5,15 - 4,99 (m, 2H), 4,88 (d, J = 10,3 Hz, 1H), 4,70 (d, J = 10,3 Hz, 1H), 2,37 - 2,12 (m, 4H) ppm.<19>F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -71,63 (br s, 3F) ppm. ESI-MS m/z izračunato 288,0973, pronađeno 287,0 (M-1)-; vreme zadržavanja: 2,15 minuta. LCMS metoda: Kinetex Polar C183,0 X 50 mm 2,6 µm, 3 minuta, 5 - 95% acetonitrila u H2O (0,1% mravlja kiselina) 1,2 mL/min.
Intermedijer 18: Priprema (2R)-2-benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enhidrazida
[0413]
Korak 1: terc-Butil N-[[(2R)-2-benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enoil]amino]karbamat
[0414]
[0415] Rastvoru (2R)-2-benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enska kiselina (365 g, 1,266 mol) u DMF (2 L) su dodati HATU (612 g, 1,610 mol) i DIEA (450 mL, 2,584 mol) i smeša je mešana na temperaturi okruženja 10 minuta. Smeši je dodat terc-butil N-aminokarbamat (200 g, 1,513 mol) (blaga egzotermnost nakon dodavanja) i smeša je mešana na temperaturi okruženja 16 sati. Reakcija je sipana u ledenu vodu (5 L). Dobijeni precipitat je sakupljen filtracijom i ispran vodom. Čvrsta supstanca je rastvorena u EtOAc (2 L) i isprana slanim rastvorom. Organska faza je osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana pod vakuumom. Ulje je razblaženo sa EtOAc (500 mL) a zatim heptanom (3 L) i mešano na temperaturi okruženja tokom nekoliko sati čime je dobijena gusta kaša. Kaša je razblažena dodatnim heptanom i filtrirana kako bi se sakupila pahuljasta čvrsta supstanca bele boje (343 g). Filtrat je koncentrovan i prečišćen hromatografijom na silika gelu (0 - 40% EtOAc/heksani) čime je dobijen terc-butil N-[[(2R)-2-benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enoil]amino]karbamat (464 g, 91%, spojeno sa proizvodom od kristalizacije). ESI-MS m/z izračunato 402,17664, pronađeno 303,0 (M+1-Boc)<+>; vreme zadržavanja: 2,68 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (50 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002350) i dualnim gradijentnim tokom od 1 - 99% mobilne faze B tokom 4,5 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = CH3CN (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 2: (2R)-2-Benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enhidrazid
[0416]
[0417] Rastvoru terc-butil N-[[(2R)-2-benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enoil]amino]karbamat (464 g, 1,153 mol) u DCM (1,25 L) je dodat HCl (925 mL 4 M, 3,700 mol) i smeša je mešana na temperaturi okruženja 20 sati. Smeša je koncentrovana pod vakuumom čime je uklonjen veći deo DCM. Smeša je razblažena sa izopropil acetatom (1 L) i bazifikovana na pH = 6 sa NaOH (140 g 50 % w/w, 1,750 mol) u 1L ledene vode. Organska faza je razdvojena i isprana sa 1L slanog rastvora i spojene vodene faze su ekstraktovane izopropil acetatom (1 L). Spojene organske faze su osu šene preko MgSO4, filtrirane i koncentrovane pod vakuumom čime je dobijeno tamno žuto ulje (2R)-2-benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enhidrazid (358 g, kvant.).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8,02 (s, 1H), 7,44 - 7,29 (m, 5H), 5,81 (ddt, J= 16,8, 10,1, 6,4 Hz, 1H), 5,13 - 4,93 (m, 2H), 4,75 (dd, J= 10,5, 1,5 Hz, 1H), 4,61 (d, J= 10,5 Hz, 1H), 3,78 (s, 2H), 2,43 (ddd, J= 14,3, 11,0, 5,9 Hz, 1H), 2,26 - 1,95 (m, 3H) ppm. ESI-MS m/z izračunato 302,1242, pronađeno 303,0 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 2,0 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (50 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002350), i dualnim gradijentnim tokom od 1 - 99% mobilne faze B tokom 4,5 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B =CH3CN (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Intermedijer 19: Priprema terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamata
[0418]
Korak 1: terc-Butil N-[2-[[[(2R)-2-benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enoil]amino]karbamoil]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat
[0419]
[0420] Smeši 6-bromo-3-(terc-butoksikarbonilamino)-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilna kiselina (304 g, 789,3 mmol) i (2R)-2-benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enhidrazid (270 g, 893,2 mmol) u EtOAc (2,25 L) na temperaturi okruženja je dodato DIEA (425 mL, 2,440 mol). Smeši je polako dodato T3P (622 g 50 % w/w, 977,4 mmol) korišćenjem kade sa ledenom vodom kako bi se temperatura održavala do < 35 °C (temperatura je porasla do 34 °C) i reakciona smeša je mešana na temperaturi okruženja 18 sati. Dodate su dodatne količine DIEA (100 mL, 574,1 mmol) i T3P (95 g, 298,6 mmol) i mešana je na temperaturi okruženja tokom 2 dana. Polazni materijal je još uvek bio uočljiv i dodatna količina T3P (252 g, 792 mmol) je dodata i mešana je tokom 5 dana. Reakcija je ugašena laganim dodavanjem vode (2,5 L) i smeša je mešana 30 minuta. Organska faza je razdvojena i vodena faza je ekstraktovana sa EtOAc (2 L). Spojene organske faze su isprane slanim rastvorom, osušene preko MgSO4, filtrirane i koncentrovane pod vakuumom. Sirov proizvod je rastvoren u MTBE (300 mL) i razblažen heptanom (3 L), smeša je mešana na temperaturi okruženja 12 sati čime je stvorena svetlo žuta kaša. Kaša je filtrirana, dobijena čvrsta supstanca je sušena vazduhom tokom 2 sata, zatim pod vakuumom na 40 °C tokom 48 sati. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom i prečišćen hromatografijom na silika gelu (0 - 20% EtOAc/heksani) i spojen sa materijalom dobijenim iz kristalizacije čime je dobijen terc-butil N-[2-[[[(2R)-2-benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enoil]amino]karbamoil]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat (433 g, 82%).<1>HNMR (400 MHz, DMSO) δ 11,07 (s, 1H), 10,91 (s, 1H), 10,32 (s, 1H), 9,15 (s, 1H), 7,53 - 7,45 (m, 2H), 7,45 - 7,28 (m, 3H), 5,87 (ddt, J= 17,0, 10,2, 5,1 Hz, 1H), 5,09 (dq, J= 17,1, 1,3 Hz, 1H), 5,02 (dd, J= 10,3, 1,9 Hz, 1H), 4,84 (q, J= 11,3 Hz, 2H), 2,37 - 2,13 (m, 4H), 1,49 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z izračunato 668,1069, pronađeno 669,0 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 3,55 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (50 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002350), i dualnim gradijentnim tokom od 1 - 99% mobilne faze B tokom 4,5 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = CH3CN (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 2: terc-Butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat
[0421]
[0422] Rastvoru terc-butil N-[2-[[[(2R)-2-benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enoil]amino]karbamoil]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat (240 g, 358,5 mmol) u anhidrovanom acetonitrilu (1,5 L) pod azotom je dodato DIEA (230 mL, 1,320 mol) i rastvor narandžaste boje je zagrevan do 70 °C. Smeši je u tri jednaka dela dodavan p-toluensulfonil hlorid (80,5 g, 422,2 mmol) tokom perioda od sat vremena. Smeša je mešana na 70 °C tokom 9 sati nakon čega je dodat dodatni p-toluensulfonil hlorid (6,5 g, 34,09 mmol). Smeša je mešana ukupno 24 sata nakon čega je ostavljena da se ohladi na temperaturu okruženja. Acetonitril je uklonjen pod vakuumom čime je dobijeno tamno narandžasto ulje koje je razblaženo sa EtOAc (1,5 L) i vodom (1,5 L). Organska faza je razdvojena i isprana sa 500 mL 1M HCl, 500 mL slanog rastvora, osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana pod vakuumom. Prečišćavanjem hromatografijom na silika gelu (0 - 20% EtOAc/heksani) je dobijen terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat (200 g, 86%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO) δ 10,11 (s, 1H), 9,10 (s, 1H), 7,55 - 7,48 (m, 2H), 7,47 - 7,28 (m, 3H), 5,87 (ddt, J= 16,7, 10,2, 6,4 Hz, 1H), 5,11 (dt, J= 17,2, 1,7 Hz, 1H), 5,01 (dt, J= 10,2, 1,5 Hz, 1H), 4,74 (d, J= 10,6 Hz, 1H), 4,65 (d, J= 10,6 Hz, 1H), 2,55 - 2,42 (m, 2H), 2,30 (qd, J= 11,3, 10,3, 6,9 Hz, 2H), 1,52 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z izračunato 650,0963, pronađeno 650,0 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 3,78 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (50 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002350) i dualnim gradijentnim tokom od 1 - 99% mobilne faze B tokom 4,5 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = CH3CN (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Intermedijer 20: Priprema terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamata
Korak 1: terc-Butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat
[0424]
[0425] Rastvoru terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat (222 g, 340,8 mmol) u MTBE (1,333 L) je dodato DIPEA (65,3 mL, 374,9 mmol) a zatim DMAP (2,09 g, 17,11 mmol). Tokom približno 8 minuta je dodavan rastvor di-tercbutil dikarbonat (111,6 g, 511,3 mmol) u MTBE (250 mL), i dobijena smeša je mešana dodatnih 30 minuta. Dodat je 1 L vode i slojevi su razdvojeni. Organski sloj je ispran sa KHSO4(886 mL 0.5 M, 443,0 mmol), 300 mL slanog rastvora, osušen sa MgSO4i većina (>95%) MTBE je isparena rotirajućim isparavanjem na 45 °C, ostavljajući gusto ulje. Dodato je 1,125 L heptana, centrifugirano u rotacionom ispariva ču na 45 °C dok se nije rastvorilo, a zatim je ispareno 325 mL rastvarača rotirajućim isparavanjem. Temperatura rotacionog isparivača je ostavljena da padne na sobnu temperaturu i proizvod je počeo da se kristališe tokom uparavanja. Nakon toga je postavljen u bocu u frižider na -20 °C tokom noći. Dobijena čvrsta supstanca je filtrirana i isprana hladnim heptanom i sušena na sobnoj temperaturi 3 dana čime je dobijen terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (240,8 g, 94%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 7,95 (s, 1H), 7,52 - 7,45 (m, 2H), 7,44 - 7,36 (m, 2H), 7,36 - 7,29 (m, 1H), 5,83 - 5,67 (m, 1H), 5,08 - 5,00 (m, 1H), 5,00 - 4,94 (m, 1H), 4,79 (d, J= 10,4 Hz, 1H), 4,64 (d, J= 10,4 Hz, 1H), 2,57 - 2,26 (m, 3H), 2,26 - 2,12 (m, 1H), 1,41 (s, 18H) ppm. ESI-MS m/z izračunato 750,14874, pronađeno 751,1 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 3,76 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (50 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002350), i dualnim gradijentnim tokom od 1 - 99% mobilne faze B tokom 4,5 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = CH3CN (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Intermedijer 21: Priprema terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-hidroksi-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamata
Korak 1: terc-Butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-hidroksi-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat
[0427]
[0428] terc-Butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (280 g, 372,6 mmol) je rastvoren u DMSO (1,82 L) (rastvor žute boje) i tretiran cezijum acetatom (215 g, 1,120 mol) tokom mešanja na sobnoj temperaturi. Suspenzija žute boje je zagrevana na 80 °C tokom 5 sati. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i dodata mešanoj hladnoj emulziji vode (5,5 L) sa 1 kg amonijum hlorida rastvorenog u njoj i smeši 1:1 MTBE i heptana (2 L) (u 20 L). Faze su razdvojene i organska faza je isprana vodom (3 X 3 L) i slanim rastvorom (1 X 2,5 L). Organska faza je osušena sa MgSO4, filtrirana i koncentrovana pod redukovanim pritiskom. Dobijeni rastvor žute boje je razblažen heptanom (~1 L) i zasejan sa terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-hidroksi-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamatom i mešan na rotirajućem uparivaču pri 100 mbara pritiska na sobnoj temperaturi tokom sat i po vremena. Čvrsta masa je mešana mehanički 2 sata na sobnoj temperaturi, dobijena gusta fina suspenzija je filtrirana, isprana ledeno hladnim heptanom i osu šena pod vakuumom na 45 °C uz propuštanje azota tokom 16 sati čime je dobijen terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-hidroksi-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (220 g, 85%) kao beličasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13,28 (s, 1H), 8,43 (s, 1H), 7,58 - 7,26 (m, 5H), 5,85 (ddt, J= 16,8, 10,3, 6,5 Hz, 1H), 5,10 (dq, J= 17,2, 1,6 Hz, 1H), 5,01 (dq, J = 10,2, 1,3 Hz, 1H), 4,76 (d, J= 11,0 Hz, 1H), 4,65 (d, J= 11,0 Hz, 1H), 2,55 (dd, J= 9,6, 5,2 Hz, 2H), 2,23 (td, J= 13,2, 10,0, 5,7 Hz, 2H), 1,27 (d, J= 3,8 Hz, 18H) ppm. ESI-MS m/z izračunato 688,23315, pronađeno 689,0 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 3,32 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (50 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002350), i dualnim gradijentnim tokom od 1 - 99% mobilne faze B tokom 4,5 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = CH3CN (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Intermedijer 22: Priprema (2R)-2-benziloksi-2-(trifluorometil)pent-4-enhidrazida
Korak 1: 2-Benziloksi-2-(trifluorometil)pent-4-enhidrazid
[0430]
[0431] terc-Butil N-[[2-benziloksi-2-(trifluorometil)pent-4-enoil]amino]karbamat (386,49 g, 995,1 mmol) je rastvoren u DCM (1,25 L) i toluenu (250 mL) i tretiran sa HCl (750 mL 4 M, 3,000 mol) na sobnoj temperaturi i rastvor žute boje je mešan na sobnoj temperaturi 18 sati. Smeša je koncentrovana pod vakuumom i razblažena sa EtOAc (2 L). Smeša je tretirana sa NaOH (600 mL 2 M, 1,200 mol) i mešana na temperaturi okruženja 10 minuta. Organska faza je razdvojena, isprana sa 1 L slanog rastvora, osu šena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana pod vakuumom i korišćena direktno u sledećem koraku (prisutan trag toluena), 2-benziloksi-2-(trifluorometil)pent-4-enhidrazid (286 g, 100%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9,34 (s, 1H), 7,40 - 7,22 (m, 5H), 5,69 (ddt, J = 17,1, 10,3, 6,9 Hz, 1H), 5,33 - 5,23 (m, 1H), 5,15 (dd, J= 10,3, 1,8 Hz, 1H), 4,73 (s, 2H), 4,51 (s, 2H), 3,05 - 2,87 (m, 2H) ppm. ESI-MS m/z izračunato 288,10855, pronađeno 289,0 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 1,32 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (50 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002350), i dualnim gradijentnim tokom od 1 - 99% mobilne faze B tokom 2,9 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = CH3CN (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 2: (2R)-2-Benziloksi-2-(trifluorometil)pent-4-enhidrazid
[0432]
[0433] Racemski 2-benziloksi-2-(trifluorometil)pent-4-enhidrazid (5,0 g, 17,35 mmol) je razdvojen hiralnom SFC korišćenjem ChiralPak IG kolone (250 X 21,2 mm; 5 µm) na 40 °C upotrebom mobilne faze 7% MeOH (plus 20 mM NH3), 93% CO2pri protoku od 70 mL/min i koncentracijom uzorka koja je bila 111 mg/mL u metanolu (bez modifikatora), zapremina ubrizgavanja 160 µL sa izlaznim pritiskom od 136 bara, talasna dužina detekcije 210nm što daje kao drugi eluirajući enantiomer, (2R)-2-benziloksi-2-(trifluorometil)pent-4-enhidrazid (1,7 g, 68%) kao čvrstu supstancu bele boje.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,31 (s, 1H), 7,48 - 7,39 (m, 2H), 7,39 - 7,25 (m, 3H), 5,77 - 5,62 (m, 1H), 5,28 (dq, J = 17,1, 1,6 Hz, 1H), 5,15 (dq, J = 10,2, 1,5 Hz, 1H), 4,73 (s, 2H), 4,51 (s, 2H), 3,00 (dd, J = 15,3, 7,5 Hz, 1H), 2,91 (dd, J = 15,3, 6,4 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z izračunato 288,10855, pronađeno 289,2 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 1,28 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (50 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002350), i dualnim gradijentnim tokom od 30 - 99% mobilne faze B tokom 2,9 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = CH3CN (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Intermedijer 23: Priprema terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-hidroksi-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamata
[0434]
Korak 1: terc-Butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-hidroksi-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat
[0435]
[0436] Rastvoru terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (1,089 g, 1,449 mmol) u DMSO (13,61 mL) su dodati (2S)-pent-4-en-2-ol (745,5 µL, 7,244 mmol), cezijum karbonat (1,496 g, 4,591 mmol) i jodobakar (63,93 mg, 0,3357 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 80 °C tokom sat vremena. Reakciona smeša je sipana u zasićeni vodeni NH4Cl i ekstraktovana sa EtOAc. Organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan u ulje narandžaste boje koje je rastvoreno u THF (10,89 mL) i dodata je mravlja kiselina (10,89 mL, 288,7 mmol), mešano 20 minuta nakon čega je dodata mravlja kiselina (10,93 mL, 289,7 mmol) i mešanje je nastavljeno još 45 minuta. Reakcija je ugašena laganim dodavanjem u zasićeni vodeni NaHCO3(uočena je snažna evolucija gasa) i EtOAc u razdvajajućem levku čime je vodeni sloj na kraju doveden do pH ~2 - 3. Vodeni sloj je uklonjen a EtOAc sloj je ispran zasićenim vodenim NaHCO3(i dalje snažna evolucija gasa) nakon čega je osušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan u sirup žute boje koji je prečišćen hromatografijom na silika gelu upotrebom plitkog gradijenta od 100% heksana do 100% EtOAc čime je dobijeno nekoliko proizvoda uključujući terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-hidroksi-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat u nečistoj formi. Ovaj nečisti materijal je dodatno prečišćen hromatografijom na 275g reverznoj fazi C18kolone eluirajući sa 50 - 100% acetonitril/voda čime je dobijen kao bistar sirup, tercbutil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-hidroksi-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat (126 mg, 15%). ESI-MS m/z izračunato 588,1807, pronađeno 589,2 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 0,51 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (30 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002349), i dualnim gradijentnim tokom od 50 - 99% mobilne faze B tokom 1,0 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = CH3CN (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,5 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Primeri
Primer 1: Priprema 6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5] nonadeka-1(17),2,4,14(18),15-pentaen-6-ola, Jedinjenje 1
[0437]
Korak 1: Metil 6-bromo-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilat
[0438]
[0439] Smeša metil 6-okso-5-(trifluorometil)-1H-piridin-2-karboksilat (21,15 g, 95,64 mmol), POBr3(41,14 g, 143,5 mmol) i DMF (350 mg, 4,788 mmol) u toluenu (200 mL) je zagrevana na 110 °C tokom noći. Smeša je ohlađena do 0 °C i sipana na mrvljeni led (200 g). Smeša je neutralisana do pH = 7 sa KHCO3(100 g, 10,5 ekv.) na < 2 °C i ekstraktovana sa EtOAc (2 X 200 mL). Spojeni organski slojevi isprani sa 5% vodenog NaHCO3(100 mL) i slanim rastvorom (100 mL) i osušeni sa Na2SO4. Smeša je filtrirana i rastvarač je uklonjen uparavanjem. Ostatak je triturisan heptanima/EtOAc (20:1) čime je dobijeno 22,92 g čistog proizvoda. Filtrat je koncentrovan čime je dobijeno 4,02 g, koje je prečišćeno fleš hromatografijom (heptani/EtOAc 0 - 30%) čime je dobijeno dodatnih 3,32 g proizvoda. Dva useva su spojena čime je dobijen metil 6-bromo-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilat (26,24 g, 96%) kao čvrsta supstanca bele boje.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 4,04 (s, 3H), 8,05-8,30 (m, 2H) ppm.<19>F NMR (282 MHz, CDCl3) δ -63,8 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z izračunato 282,9456, pronađeno 284,0 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 4,04 minuta. LCMS metoda: Simetrija, 4,6 X 75 mm 3,5 µm. Temp: 45 °C, protok: 2,0 mL/min, vreme trajanja: 8 minuta. Mobilna faza: Inicijal. 95% H2O (0,1% mravlja kiselina) i 5% CH3CN (0,1% mravlja kiselina) linearni gradijent do 95% CH3CN (0,1% mravlja kiselina) tokom 6,0 minuta a zatim održavan na 95% CH3CN (0,1% mravlja kiselina) tokom 2,0 minuta.
Korak 2: 6-Bromo-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilna kiselina
[0440]
[0441] Rastvoru metil 6-bromo-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilat (10,5 g, 36,968 mmol) u THF (100 mL) je dodat rastvor litijum hidroksid monohidrat (1,8 g, 42,894 mmol) u vodi (70 mL). Ova sme ša je mešana 45 minuta na sobnoj temperaturi. THF je isparen pod vakuumom. Preostalom vodenom rastvoru je dodata voda (60 mL) i pH je prilagođena na 3 – 4 dodavanjem 3 N hlorovodonične kiseline (T < 5 °C) što je dovelo do precipitacije željenog proizvoda. Čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom i osušena pod vakuumom čime je dobijen 6-bromo-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilna kiselina (9,46 g, 95%) kao čvrsta supstanca bele boje.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8,18 - 8,28 (m, 1H), 8,28 - 8,39 (m, 1H) ppm.<19>F NMR (282 MHz, CDCl3) δ -63,8 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z izračunato 268,92993, pronađeno 270,0 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 2,08 minuta; LCMS metoda: Kinetex C184,6 X 50 mm 2,6 µM. Temp: 45 °C, protok: 2,0 mL/min, vreme trajanja: 6 minuta. Mobilna faza: Inicijal. 95% H2O (0,1% mravlja kiselina) i 5% CH3CN (0,1% mravlja kiselina) linearni gradijent do 95% CH3CN (0,1% mravlja kiselina) za 4,0 minuta zatim održavano na 95% CH3CN (0,1% mravlja kiselina) tokom 2,0 minuta.
Korak 3: 6-Pent-4-enoksi-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilna kiselina
[0442]
[0443] Rastvoru pent-4-en-1-ol (1,5 mL, 14,79 mmol) u DMF (12 mL) je dodat natrijum hidrid (1,05 g 60 % w/w, 26,25 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta. Smeša je ohlađena do 0 °C i dodata je 6-bromo-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilna kiselina (2 g, 7,407 mmol) u DMF (12 mL). Reakciona smeša je zagrejana na sobnu temperaturu i mešana dodatna 2 sata. Smeša je pažljivo ugašena vodom (2 mL). Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i reakciona smeša je razblažena sa MeOH i filtrirana. Filtrat je uparen i prečišćen reverzno faznom hromatografijom na C18koloni korišćenjem gradijentne elucije 20% - 70% voda/acetonitril i protoka od 80 mL/min tokom 20 minuta čime je dobijena 6-pent -4-enoksi-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilna kiselina (1,73 g, 85%). ESI-MS m/z izračunato 275,07693, pronađeno 274,0 (M-1)<+>; vreme zadržavanja: 0,83 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC HSS T3 kolone kupljenom od Waters, i dualnim gradijentnim tokom od 15 -98% mobilne faze B tokom 1,5 minuta. Mobilna faza A = voda (sa mravljom kiselinom). Mobilna faza B = acetonitril (sa mravljom kiselinom).
Korak 4: N’-[2-Benziloksi-2-(trifluorometil)pent-4-enoil]-6-pent-4-enoksi-5-(trifluorometil) piridin-2-karbohidrazid
[0444]
[0445] Mešanom rastvoru 6-pent-4-enoksi-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilna kiselina (427,6 mg, 1,540 mmol) i HATU (761,2 mg, 2,002 mmol) u DMF (5 mL) je dodato DIPEA (697,4 µL, 4,004 mmol) (egzotermno). Nakon 5 minuta, iz jednog dela je dodat 2-benziloksi -2-(trifluorometil)pent-4-enhidrazid (so hidrohlorida) (500 mg, 1,540 mmol) i smeša je mešana 30 minuta. Reakciona smeša je razblažena vodom (15 mL), ekstraktovana etil acetatom (3 X 15 mL) i spojeni ekstrakti su isprani slanim rastvorom nakon čega su osušeni (MgSO4). Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu eluirajući sa gradijentom etil acetata u heksanima (10% do 33%) čime je dobijen N’-[2-benziloksi-2-(trifluorometil)pent-4-enoil]-6-pent-4-enoksi-5-(trifluorometil)piridin-2-karbohidrazid (725 mg, 86%) kao bezbojna guma.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 9,71 (s, 1H), 9,16 (s, 1H), 7,96 (d, J= 7,7 Hz, 1H), 7,77 - 7,70 (m, 1H), 7,38 - 7,26 (m, 5H), 5,88 - 5,72 (m, 2H), 5,36 - 5,22 (m, 2H), 5,05 - 4,90 (m, 2H), 4,85 - 4,73 (m, 2H), 4,40 (t, J= 6,2 Hz, 2H), 3,11 (dd, J= 15,5, 5,9 Hz, 1H), 2,96 (dd, J= 15,5, 7,8 Hz, 1H), 2,25 - 2,13 (m, 2H), 1,87 (dt, J= 7,9, 6,3 Hz, 2H) ppm. ESI-MS m/z izračunato 545,1749, pronađeno 546,21 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 1,12 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC HSS T3 kolone kupljenom od Waters, i dualnim gradijentnim tokom od 15 - 98% mobilne faze B tokom 1,5 minuta. Mobilna faza A = voda (sa mravljom kiselinom). Mobilna faza B = acetonitril (sa mravljom kiselinom).
Korak 5: 2-[1-Benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-5-[6-pent-4-enoksi-5-(trifluorometil)-2-piridil]-1,3,4-oksadiazol
[0447] Degaziranom rastvoru N-[2-benziloksi-2-(trifluorometil)pent-4-enoil]-6-pent-4-enoksi-5-(trifluorometil)piridin-2-karbohidrazid (100 mg, 0,1818 mmol) u THF (2 mL) je iz jednog dela dodat metoksikarbonil-(trietilamonio)sulfonilazanid (130 mg, 0,5455 mmol). Dobijeni rastvor je zagrevan u zavorenoj bočici na 80 °C tokom 2 sata, rastvarač je isparen nakon čega je ostatak razblažen etil acetatom (10 mL), ispran sa 2N NaOH rastvorom i 0.5 N HCl, slanim rastvorom, zatim osušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu eluirajući sa gradijentom etil acetata u heksanima (5% do 26%, 8 kolonskih zapremina) čime je dobijen 2-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-5-[6-pent-4-enoksi-5-(trifluorometil)-2-piridil]-1,3,4-oksadiazol (76 mg, 79%) kao ulje.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 8,07 - 8,03 (m, 1H), 7,84 (dd, J= 7,8, 0,8 Hz, 1H), 7,43 - 7,29 (m, 5H), 6,06 - 5,80 (m, 2H), 5,34 - 5,20 (m, 2H), 5,13 - 5,00 (m, 2H), 4,85 (d, J= 10,8 Hz, 1H), 4,65 (d, J= 10,9 Hz, 1H), 4,56 (t, J= 6,3 Hz, 2H), 3,30 - 3,21 (m, 2H), 2,33 - 2,22 (m, 2H), 2,02 - 1,91 (m, 2H) ppm. ESI-MS m/z izračunato 527,16437, pronađeno 528,21 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 1,23 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC HSS T3 kolone kupljenom od Waters, i dualnim gradijentnim tokom od 15 - 98% mobilne faze B tokom 1,5 minuta. Mobilna faza A = voda (sa mravljom kiselinom). Mobilna faza B = acetonitril (sa mravljom kiselinom).
Korak 6: 6-Benziloksi-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5] nonadeka-1(17),2,4,8,14(18),15-heksaen (E/Z smeša)
[0448]
[0449] Degaziranom mešanom rastvoru 2-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-5-[6-pent-4-enoksi-5-(trifluorometil)-2-piridil]-1,3,4-oksadiazol (265 mg, 0,5024 mmol) u DCE (21 mL) je dodat [1,3-bis(2,4,6-trimetilfenil)imidazolidin-2-iliden]-dihloro-[(2-izopropoksi-5-nitro-fenil)metilen]rutenijum (68 mg, 0,1012 mmol), dobijena smeša je pročišćena azotom i zagrevana na 80 °C tokom 16 sati. Reakciona smeša je koncentrovana i ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu eluirajući sa gradijentom etil acetata u heksanima (5% do 40%, 12 kolonskih zapremina) čime je dobijen 6-benziloksi-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,8,14(18),15-heksaen (E/Z smeša) (35 mg, 14%) kao ulje a zatim dimerni sporedni proizvod (85 mg) kao čvrsta supstanca bele boje.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 8,06 (dd, J= 7,7, 0,8 Hz, 1H), 7,86 - 7,79 (m, 1H), 7,28 (d, J= 2,4 Hz, 4H), 7,23 - 7,16 (m, 1H), 6,13 - 5,99 (m, 1H), 5,90 - 5,77 (m, 1H), 4,91 (d, J= 11,6 Hz, 1H), 4,79 - 4,46 (m, 3H), 3,18 (dd, J= 14,6, 5,3 Hz, 1H), 2,81 (dd, J= 14,5, 8,9 Hz, 1H), 2,24 - 1,90 (m, 4H) ppm. ESI-MS m/z izračunato 499,13306, pronađeno 500,2 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 1,17 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC HSS T3 kolone kupljenom od Waters, i dualnim gradijentnim tokom od 15 - 98% mobilne faze B tokom 1,5 minuta. Mobilna faza A = voda (sa mravljom kiselinom). Mobilna faza B = acetonitril (sa mravljom kiselinom).
Korak 7: 6,15-bis(Trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka -1(17),2,4,14(18),15-pentaen-6-ol, Jedinjenje 1
[0450]
[0451] Rastvoru 6-benziloksi-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3, 4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,8,14(18),15-heksaen (E/Z smeša) (30 mg, 0,06007 mmol) u MeOH (3 mL) je dodato Silika Cat Pd (70 mg 0,2 mmol/g, 0,01400 mmol) i mešan je 16 sati pod balonom vodonika. Smeša je razblažena etil acetatom, filtrirana kroz jastuče celita eluirajući sa etil acetatom i DCM nakon čega je koncentrovana. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu eluirano sa gradijentom etil acetata u heksanima (5% do 40%, 15 kolonskih zapremina) a zatim liofilizacijom korišćenjem acetonitrila i vode čime je dobijen racemski 6,15-bis(trifluorometil) -13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,14(18),15-pentaen-6-ol (17,5 mg, 70%) kao čvrsta supstanca bele boje.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 8,08 (dd, J= 7,7, 0,8 Hz, 1H), 7,85 (dd, J= 7,7, 0,8 Hz, 1H), 4,69 - 4,60 (m, 1H), 4,54 - 4,42 (m, 1H), 3,94 (d, J= 1,3 Hz, 1H), 2,52 - 1,34 (m, 10H) ppm. ESI-MS m/z izračunato 411,10175, pronađeno 411,54 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 3,7 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC HSS T3 kolone kupljenom od Waters, i dualnim gradijentnim tokom od 5 - 85% mobilne faze B tokom 6,0 minuta. Mobilna faza A = voda (sa mravljom kiselinom). Mobilna faza B = acetonitril (sa mravljom kiselinom).
Primer 2: Priprema 6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5] nonadeka-1(17),2,4,14(18),15-pentaen-6-ola (enantiomer 1), Jedinjenje 2, i 6,15-bis (trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,14(18),15-pentaen--6-ola (enantiomer 2), Jedinjenje 3
[0452]
Korak 1: 6,15-bis(Trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]
nonadeka-1(17),2,4,14(18),15-pentaen-6-ol (enantiomer 1), Jedinjenje 2, i 6,15-bis (Trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,14(18),15-pentaen-6-ol (enantiomer 2), Jedinjenje 3
[0453]
[0454] Racemski 6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,14(18),15-pentaen-6-ol (9,5 mg, 0,02310 mmol) je razdvojen pomoću SFC korišćenjem izokratskog 3% metanola tokom 30 minuta na Lux210 X 250 mm koloni kako bi se dobila dva pojedinačna enantiomera. Prvi enantiomer za eluiranje, 3,6 mg 6,15-bis(trifluorometil) -13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,14(18),15-pentaen-6-ol (enantiomer 1), je bio enantiomerno čist, međutim, LCMS ovog jedinjenja je pokazalo polarnu nečistoću. Ovaj materijal je ponovo prečišćen hromatografijom na silika gelu eluirajući sa gradijentom etil acetata u heksanima (5% do 40%, 15 kolonskih zapremina) čime je dobijen 6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,14(18),15-pentaen-6-ol (enantiomer 1) (2,7 mg, 54%), hiralna čistoća, > 99,9%. ESI-MS m/z izračunato 411,10175, pronađeno 412,21 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 3,76 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC HSS T3 kolone kupljenom od Waters, i dualnog gradijentnog toka od 5 - 85% mobilne faze B tokom 6,0 minuta. Mobilna faza A = voda (sa mravljom kiselinom). Mobilna faza B = acetonitril (sa mravljom kiselinom). Drugi enantiomer za eluiranje iz SFC razdvajanja je bio 6,15-bis(trifluorometil) -13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,14(18),15-pentaen-6-ol (3,3 mg, 69%), hiralna čistoća, >99,9%, ESI-MS m/z izračunato 411,10175, pronađeno 412,2 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 0,96 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC HSS T3 kolone kupljenom od Waters, i dualnim gradijentnim tokom od 15 - 98% mobilne faze B tokom 1,5 minuta. Mobilna faza A = voda (sa mravljom kiselinom). Mobilna faza B = acetonitril (sa mravljom kiselinom).
Primer 3: Priprema 17-Amino-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ola (racemski), Jedinjenje 4
[0455]
Korak 1: Metil 3,6-dibromo-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilat
[0456]
[0457] Metil 3-amino-6-bromo-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilatu (približno 2,5 g, 8,36 mmol) i CuBr2(približno 2,801 g, 12,54 mmol) u acetonitrilu (60,90 mL) na sobnoj temperaturi je ukapavanjem dodat terc-butil nitrit (približno 1,293 g, 1,491 mL, 12,54 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 16 sati pod zatvorenom atmosferom. Uočena je potpuna potrošnja SM. Reakcija je razblažena zasićenim vodenim NH4Cl i vodeni sloj je ekstraktovan sa CH2Cl2. Spojeni organski slojevi su osušeni preko natrijum sulfata i rastvarač je uklonjen pod redukovanim pritiskom. Sirov ostatak, metil 3,6-dibromo-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilat (1,6 g, 53%) je korišćen u sledećoj reakciji bez dodatnog prečišćavanja.
Korak 2: 3,6-Dibromo-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilna kiselina
[0458]
[0459] Rastvoru metil 3,6-dibromo-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilat (1 g, 2,755 mmol) u THF (10 mL) je dodat rastvor litijum hidroksid monohidrat (2 mL 1,7 M, 3,400 mmol) u vodi (2,8 mL). Sme ša je mešana na sobnoj temperaturi 15 sati, koncentrovana rotirajućim uparavanjem, zakiseljena vodenim 2 N HCl i ekstraktovana metilen hloridom (3 X 15 mL). Spojeni ekstrakti su propušteni kroz fazni separator i koncentrovani čime je dobijena 3,6-dibromo-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilna kiselina (920 mg, 93%) kao čvrsta supstanca braon boje.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 8,36 (s, 1H) ppm. ESI-MS m/z izračunato 346,84042, pronađeno 347,91 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 0,51 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC HSS T3 kolone kupljenom od Waters, i dualnim gradijentnim tokom od 15 - 98% mobilne faze B tokom 1,5 minuta. Mobilna faza A = voda (sa mravljom kiselinom). Mobilna faza B = acetonitril (sa mravljom kiselinom).
Korak 3: 3-Bromo-6-pent-4-enoksi-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilna kiselina
[0460]
[0461] Mešanoj suspenziji natrijum hidrid (310 mg 60 % w/w, 7,751 mmol) u DMF (6 mL) je dodat pent -4-en-1-ol (550 µL, 5,421 mmol) u DMF (2 mL) i mešano je na sobnoj temperaturi 30 minuta. Smeša je ohlađena do 0 °C, dodata je 3,6-dibromo-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilna kiselina (920 mg, 2,566 mmol) u DMF (6 mL), reakciona smeša je zagrejana do sobne temperature i mešana dodatna 2 sata. Smeša je pažljivo ugašena vodom (10 mL). Vodeni bazični rastvor je ispran heksanima i etrom (1:1), zakiseljen vodenim 2 N HCl, ekstraktovan etrom (3 X 20 mL) i spojeni ekstrakti su isprani slanim rastvorom, osu šeni (MgSO4) i koncentrovani. Prečišćavanjem kolonskom hromatografijom je dobijena i dalje nečista 3-bromo-6-pent-4-enoksi-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilna kiselina (600 mg, 66%) kao ulje koje je kao takvo korišćeno u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja. ESI-MS m/z izračunato 352,98743, pronađeno 354,01 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 0,86 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC HSS T3 kolone kupljenom od Waters, i dualnim gradijentnim tokom od 15 -98% mobilne faze B tokom 1,5 minuta. Mobilna faza A = voda (sa mravljom kiselinom). Mobilna faza B = acetonitril (sa mravljom kiselinom).
Korak 4: N’-[2-Benziloksi-2-(trifluorometil)pent-4-enoil]-3-bromo-6-pent-4-enoksi-5-(trifluorometil) piridin-2-karbohidrazid
[0462]
[0463] Mešanom rastvoru 3-bromo-6-pent-4-enoksi-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilna kiselina (640 mg, 1,807 mmol) i HATU (885 mg, 2,328 mmol) u DMF (6 mL) je dodato DIPEA (1,1 mL, 6,315 mmol) (egzotermno). Nakon 5 minuta iz jednog dela je dodat 2-benziloksi -2-(trifluorometil)pent-4-enhidrazid (so hidrohlorida) (600 mg, 1,791 mmol) i smeša je mešana 16 sati. Reakciona smeša je razblažena vodom (25 mL), ekstraktovana etil acetatom (3 X 25 mL) i spojeni ekstrakti su isprani slanim rastvorom i osu šeni (MgSO4) a zatim filtrirani i koncentrovani. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu eluirajući sa gradijentom etil acetata u heksanima (5% do 29%, 10 kolonskih zapremina) čime je dobijen N-[2-benziloksi-2-(trifluorometil)pent-4-enoil]-3-bromo-6-pent-4-enoksi-5-(trifluorometil)piridin-2-karbohidrazid (340 mg, 26%) kao bezbojna guma.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 9,81 (s, 1H), 9,31 (s, 1H), 8,14 (s, 1H), 7,40 - 7,35 (m, 5H), 5,88 - 5,75 (m, 2H), 5,38 - 5,26 (m, 2H), 5,07 - 4,95 (m, 2H), 4,83 (s, 2H), 4,43 (t, J = 5,9 Hz, 2H), 3,20 - 2,97 (m, 2H), 2,28 - 2,19 (m, 2H), 1,96 - 1,87 (m, 2H) ppm. ESI-MS m/z izračunato 623,08545, pronađeno 624,13 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 1,1 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC HSS T3 kolone kupljenom od Waters, i dualnim gradijentnim tokom od 15 - 98% mobilne faze B tokom 1,5 minuta. Mobilna faza A = voda (sa mravljom kiselinom). Mobilna faza B = acetonitril (sa mravljom kiselinom).
Korak 5: 2-[1-Benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-5-[3-bromo-6-pent-4-enoksi-5- (trifluorometil)-2-piridil]-1,3,4-oksadiazol
[0464]
[0465] Degaziranom rastvoru N-[2-benziloksi-2-(trifluorometil)pent-4-enoil]-3-bromo-6-pent-4-enoksi-5-(trifluorometil)piridin-2-karbohidrazid (340 mg, 0,4609 mmol) u THF (6 mL) je iz jednog dela dodat metoksikarbonil-(trietilamonio)sulfonil-azanid (330 mg, 1,385 mmol). Dobijeni rastvor je zagrevan u zatvorenoj bočici na 80 °C tokom 2 sata. Smeša je ugašena sa 2 N NaOH (~1,5 mL) i vodom (5 mL), većina rastvarača je uparena a zatim razblažena etil acetatom (20 mL). Organski rastvor je ispran sa 0.5 N HCl, slanim rastvorom, osušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu eluirajući sa gradijentom etil acetata u heksanima (0% do 12%, 12 kolonskih zapremina) čime je dobijen 2-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-5-[3-bromo-6-pent-4-enoksi-5-(trifluorometil)-2-piridil]-1,3,4-oksadiazol (240 mg, 86%) kao ulje.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 8,17 (s, 1H), 7,39 - 7,27 (m, 5H), 6,00 - 5,88 (m, 1H), 5,86 - 5,75 (m, 1H), 5,29 - 5,21 (m, 1H), 5,21 - 5,16 (m, 1H), 5,06 - 4,95 (m, 2H), 4,84 (d, J= 10,8 Hz, 1H), 4,63 (d, J= 10,8 Hz, 1H), 4,44 (t, J= 6,3 Hz, 2H), 3,20 (t, J= 6,0 Hz, 2H), 2,20 (q, J= 7,2 Hz, 2H), 1,93 - 1,84 (m, 2H) ppm. ESI-MS m/z izračunato 605,0749, pronađeno 607,12 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 1,22 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC HSS T3 kolone kupljenom od Waters, i dualnim gradijentnim tokom od 15 - 98% mobilne faze B tokom 1,5 minuta. Mobilna faza A = voda (sa mravljom kiselinom). Mobilna faza B = acetonitril (sa mravljom kiselinom).
Korak 6: 6-Benziloksi-17-bromo-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,8,14(18),15-heksaen (E/Z smeša)
[0466]
[0467] Degaziranom mešanom rastvoru 2-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-5-[3-bromo-6-pent-4-enoksi-5-(trifluorometil)-2-piridil]-1,3,4-oksadiazol (247 mg, 0,4074 mmol) u DCE (20 mL) je dodat [1,3-bis(2,4,6-trimetilfenil)imidazolidin-2-iliden]-dihloro-[(2-izopropoksi-5-nitro-fenil)metilen]rutenijum (50 mg, 0,07445 mmol) i dobijena smeša je pročišćena azotom i zagrevana na 80 °C tokom 30 minuta. Dodato je SiliaMetS (150 mg), mešano 30 minuta, filtrirano i isprano sa DCM nakon čega je koncentrovano. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu eluirajući sa gradijentom etil acetata u heksanima (0% do 20%, 15 kolonskih zapremina) čime je dobijen 6-benziloksi-17-bromo-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,8,14(18),15-heksaen (E/Z smeša) (100 mg, 42%) kao čvrsta supstanca bele boje.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 8,17 (brs, 1H), 7,25 - 7,24 (m, 2H), 7,24 - 7,23 (m, 2H), 7,18 - 7,12 (m, 1H), 5,88 - 5,80 (m, 2H), 4,88 (d, J= 11,6 Hz, 1H), 4,69 - 4,57 (m, 1H), 4,53 (d, J= 11,6 Hz, 1H), 4,50 - 4,41 (m, 1H), 3,12 (dd, J= 14,4, 4,3 Hz, 1H), 2,72 (dd, J= 14,6, 8,0 Hz, 1H), 2,19 - 1,83 (m, 4H) ppm. ESI-MS m/z izračunato 577,0436, pronađeno 579,97 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 1,16 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC HSS T3 kolone kupljenom od Waters, i dualnog gradijentnog toka od 15 - 98% mobilne faze B tokom 1,5 minuta. Mobilna faza A = voda (sa mravljom kiselinom). Mobilna faza B = acetonitril (sa mravljom kiselinom).
Korak 7: 6-Benziloksi-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5] nonadeka-1(17),2,4,8,14(18),15-heksaen-17-amin (E/Z smeša)
[0468]
[0469] Degaziranoj smeši 6-benziloksi-17-bromo-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,8,14(18),15-heksaen (E/Z smeša) (35 mg, 0,06052 mmol), ksantfos (4 mg, 0,006913 mmol), difenilmetanimin (14 µL) i cezijum karbonat (40 mg, 0,1228 mmol) u dioksanu (700 µL) je dodato Pd(OAc)2(1,8 mg, 0,008017 mmol). Degazirana upotrebom vakuuma/azota i zagrevana u zatvorenoj bočici na 100 °C tokom 2 i po sata, ohlađena na sobnu temperaturu, razblažena vodom (2 mL), ekstraktovana etil acetatom (4 X 5 mL) i spojeni ekstrakti su osu šeni (MgSO4), filtrirani i koncentrovani čime je dobijen intermedijerni N-[6-benziloksi-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,8,14(18),15-heksaen-17-il]-1,1-difenilmetanimin intermedijer kao tečnost žute boje. ESI-MS m/z izračunato 678,20654, pronađeno 678,38 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 2,16 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC HSS T3 kolone kupljenom od Waters, i dualnim gradijentnim tokom od 50 - 100% mobilne faze B tokom 3,0 minuta. Mobilna faza A = voda (sa mravljom kiselinom). Mobilna faza B = acetonitril (sa mravljom kiselinom). Mešanom rastvoru sirovog N-[6-benziloksi-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,8,14(18),15-heksaen-17-il]-1,1-difenil-metanimina (E/Z smeša) (60 mg, 129%) u THF (2 mL) je dodat HCl (2 mL 2 M, 4,000 mmol) na sobnoj temperaturi, mešano 10 minuta, koncentrovano rotirajućim uparavanjem, razblaženo vodom (1 mL), ekstraktovano metilen hloridom (3 X 5 mL) i spojeni ekstrakti su osušeni (MgSO4), filtrirani i koncentrovani. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu eluirajući sa gradijentom etil acetata u heksanima (10% do 40%, 9 kolonskih zapremina) čime je dobijen 6-benziloksi-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,8,14(18),15-heksaen-17-amin (E/Z smeša) (24 mg, 77%) kao čvrsta supstanca braon boje.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 7,40 (brs, 1H), 7,27 - 7,22 (m, 4H), 7,20 -7,14 (m, 1H), 6,09 - 5,98 (m, 1H), 5,78 (dt, J= 14,9, 7,0 Hz, 1H), 5,32 (s, 2H), 4,86 (d, J= 11,5 Hz, 1H), 4,56 (d, J= 11,5 Hz, 1H), 4,53 - 4,32 (m, 2H), 3,14 (dd, J= 14,6, 5,4 Hz, 1H), 2,78 (dd, J= 14,5, 8,7 Hz, 1H), 2,18 - 1,84 (m, 4H) ppm. ESI-MS m/z izračunato 514,144, pronađeno 515,15 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 1,14 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC HSS T3 kolone kupljenom od Waters, i dualnim gradijentnim tokom od 15 - 98% mobilne faze B tokom 1,5 minuta. Mobilna faza A = voda (sa mravljom kiselinom). Mobilna faza B = acetonitril (sa mravljom kiselinom).
Korak 8: 17-Amino-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5] nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol, Jedinjenje 4
[0471] Rastvoru 6-benziloksi-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,8,14(18),15-heksaen-17-amin (E/Z smeša) (22 mg, 0,04277 mmol) u MeOH (3 mL) je dodato SiliaCat Pd (49 mg, 0,1944 mmol), mešan je 2 sata pod balonom vodonika nakon čega je dodatna količina SiliaCat Pd (20 mg 0,2 mmol/g, 0,004000 mmol) dodata. Mešan je 2 sata a zatim je smeša zagrevana na 50 °C tokom 2 sata. Reakcija je razblažena etil acetatom, filtrirana kroz jastuče celita eluirajući sa etil acetatom nakon čega je koncentrovana. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu eluirajući sa gradijentom etil acetata u heksanima (10% do 50%, 15 kolonskih zapremina) a zatim liofilizacijom korišćenjem acetonitrila i vode čime je dobiven 17-amino-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (14,5 mg, 77%) kao svetlo žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 7,36 (s, 1H), 5,18 (brs, 2H), 4,44 - 4,24 (m, 2H), 3,48 (brs, 1H), 2,35 - 2,11 (m, 2H), 2,09 - 1,94 (m, 1H), 1,92 -1,69 (m, 1H), 1,67 - 1,33 (m, 6H) ppm. ESI-MS m/z izračunato 426,11267, pronađeno 427,29 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 3,83 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC HSS T3 kolone kupljenom od Waters, i dualnog gradijentnog toka od 5 - 85% mobilne faze B tokom 6,0 minuta. Mobilna faza A = voda (sa mravljom kiselinom). Mobilna faza B = acetonitril (sa mravljom kiselinom).
Primer 4: Priprema (6R)-17-amino-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ola, Jedinjenje 5
[0472]
Korak 1: terc-Butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-hidroksi-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat
[0473]
[0474] Mešajućem rastvoru terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat (10 g, 15,69 mmol) u DMSO (64,97 mL) na sobnoj temperaturi je dodat cezijum acetat (3,012 g, 15,69 mmol) i smeša je zatvorena i zagrevana pod atmosferom azota do 80 °C i mešana 160 minuta. Reakcija je zaustavljena jer je napredovala ka neželjenom N-acetil proizvodu. Reakciona smeša je razblažena vodom i ekstraktovana sa EtOAc. Organski sloj je ispran zasićenim vodenim NaHCO3(1X), zasićenim vodenim NH4Cl (1X) i slanim rastvorom (1X), nakon čega je osušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan u ostatak koji je prečišćen hromatografijom na silika gelu korišćenjem plitkog gradijenta od 100% heksana do 100% EtOAc. Mešane frakcije su spojene, koncentrovane i prečišćene C18reverzno faznom hromatografijom korišćenjem gradijentnog toka od 50% -99% mobilne faze B tokom 15,0 minuta (mobilna faza A = H2O (5 mM HCl), mobilna faza B = acetonitril. Izolovan je terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-hidroksi-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat (297,7 mg, 3%) kao sporedni proizvod koji je korišćen direktno u sledećem koraku.
Korak 2: terc-Butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-pent-4-enoksi-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat
[0475]
[0476] Rastvoru terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-hidroksi-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat (295 mg, 0,5135 mmol) i pent-4-en-1-ol (78,14 µL, 0,7702 mmol) u toluenu (6,21 mL) je dodat trifenilfosfin (178,4 µL, 0,7700 mmol). Nakon mešanja na sobnoj temperaturi tokom 1 minuta, dodato je DIAD (161,8 µL, 0,8218 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 5 minuta. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc a zatim isprana zasićenim vodenim NaHCO3(1X), zasićenim vodenim NH4Cl (1X) i slanim rastvorom (1X) nakon čega je osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana u ulje žute boje koje je prečišćeno hromatografijom na silika gelu korišćenjem plitkog gradijenta od 100% heksana do 100% EtOAc čime je dobijen kao bistri, blago žuti sirup, terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-pent-4-enoksi-5-(trifluorom etil)-3-piridil]karbamat (271,9 mg, 82%). ESI-MS m/z izračunato 642,22766, pronađeno 643,3 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 0,83 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (30 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002349), i dualnim gradijentnim tokom od 50 - 99% mobilne faze B tokom 1,0 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = CH3CN (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,5 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 3: terc-Butil N-[(6R)-6-benziloksi-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,8,14(18),15-heksaen-17-il]karbamat (E/Z smeša)
[0477]
[0478] U dvogrlu bocu sa mehurićima azota je dodat terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-pent-4-enoksi-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat (271,9 mg, 0,4231 mmol) u DCE (62,54 mL) i zagrevano do 60 °C. Zatim je putem šprica dodat Zhan katalizator-1B (77,63 mg, 0,1058 mmol) u dihloroetanu (1 mL), reakcija je zagrevana do 60 °C i mešana dok je azot propuštan kroz rastvor. Dihloroetan je povremeno dodavan kako je reakcija nastavila da održava volumen. Nakon 80 minuta, dodat je Zhan katalizator -1B (46,56 mg, 0,06345 mmol) i mešanje je nastavljeno na 60 °C tokom 160 minuta. Reakciona smeša je ostavljena da se ohladi na sobnu temperaturu nakon čega je dodata 2-sulfanilpiridin-3-karboksilna kiselina (26,26 mg, 0,1692 mmol) i mešana je 5 minuta. Reakciona smeša je koncentrovana rotirajućim uparavanjem a zatim prečišćena hromatografijom na silika gelu korišćenjem plitkog gradijenta od 100% heksana do 100% EtOAc čime je dobijen kao čvrsta supstanca žute boje terc-butil N-[(6R)-6-benziloksi-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,8,14(18),15-heksaen-17-il]karbamat (E/Z smeša) (169 mg, 65%). ESI-MS m/z izračunato 614,1964, pronađeno 615,2 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 0,75 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (30 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002349), i dualnim gradijentnim tokom od 50 - 99% mobilne faze B tokom 1,0 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = CH3CN (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,5 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 4: terc-Butil N-[(6R)-6-hidroksi-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,14(18),15-pentaen-17-il]karbamat
[0479]
[0480] Rastvoru terc-butil N-[(6R)-6-benziloksi-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,8,14(18),15-heksaen-17-il]karbamat (E/Z smeša) (167 mg, 0,2717 mmol) u AcOH (5,566 mL) je dodat Pd/C (88,83 mg 10 % w/w, 0,08347 mmol) i vodonični gas je propuštan kroz smešu tokom 15 minuta mešanja nakon čega je reakcija zapečaćena i zatvorena balonom vodonika i mešana 2 i po sata. Dodat je paladijum (28,91 mg 10 % w/w, 0,02717 mmol), mešana je sat vremena a zatim je kroz bocu propušten azot i filtrirana preko celita eluirajući sa EtOAc. Filtrat je koncentrovan i zatim prečišćen hromatografijom na silika gelu korišćenjem plitkog gradijenta od 100% heksana do 100% EtOAc čime je dobijen kao pena bele boje, terc-butil N-[(6R)-6-hidroksi-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,14(18),15-pentaen-17 -il]karbamat (143 mg, 100%). ESI-MS m/z izračunato 526,1651, pronađeno 527,2 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 0,52 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (30 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002349), i dualnim gradijentnim tokom od 50 - 99% mobilne faze B tokom 1,0 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = CH3CN (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,5 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 5: (6R)-17-Amino-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5] nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol, Jedinjenje 5
[0481]
[0482] Mešajućem rastvoru terc-butil N-[(6R)-6-hidroksi-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,14(18),15-pentaen-17-il]karbamat (143 mg, 0,2716 mmol) u DCM (1,43 mL) je dodato TFA (522,9 µL, 6,787 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 sata nakon čega je koncentrovana rotirajućim uparavanjem u ostatak žute boje koji je rastvoren u EtOAc i ispran zasićenim vodenim NaHCO3(1X), osušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan u bledo žuti ostatak. Ovaj materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu korišćenjem plitkog gradijenta od 100% heksana do 100% EtOAc čime je dobijen kao bledo žuta čvrsta supstanca (6R)-17-amino-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (88,7 mg, 76%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO) δ 7,80 - 7,76 (m, 1H), 7,55 (s, 1H), 6,37 (s, 2H), 4,44 - 4,27 (m, 2H), 2,20 (q, J = 7,2 Hz, 1H), 2,10 (dd, J = 14,7, 7,1 Hz, 1H), 2,06 - 1,96 (m, 1H), 1,80 (dd, J = 11,3, 5,8 Hz, 1H), 1,69 - 1,53 (m, 4H), 1,42 (d, J = 7,2 Hz, 2H) ppm. ESI-MS m/z izračunato 426,11267, pronađeno 427,4 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 1,86 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (50 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002350) i dualnim gradijentnim tokom od 1 - 99% mobilne faze B tokom 2,9 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = CH3CN (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Primer 5: Priprema (6S)-17-amino-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol, Jedinjenje 6
[0483]
Korak 1: (6S)-17-Amino-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]
nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol, Jedinjenje 6
[0484]
[0485] Racemski 17-amino-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (32,6 mg, 0,07647 mmol) je razdvojen preparativnom SFC korišćenjem LUX-4 (25 cm X 2,1 cm, 5 µM) kolone upotrebom metanola kao rastvarača kako bi se dobio kao drugi enantiomer za eluiranje, (6S)-17-amino-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (11,8 mg, 72%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,78 (s, 1H), 7,61 (s, 1H), 6,39 (s, 2H), 4,35 (s, 2H), 2,18 (s, 1H), 2,08 (d, J= 39,0 Hz, 2H), 1,82 (s, 1H), 1,64 (s, 4H), 1,42 (s, 2H) ppm. ESI-MS m/z izračunato 426,11267, pronađeno 427,0 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 1,86 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (50 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002350) i dualnim gradijentnim tokom od 1 - 99% mobilne faze B tokom 2,9 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = CH3CN (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 2: Karakterizacija čvrste forme kristalnog Jedinjenja 6 (čista forma)
[0486] Pojedinačni kristali kristalnog Jedinjenja 6 (čista forma) su uzgajani difuzijom pare pentana u rastvor Jedinjenja 6 u 1,2-diholoretanu. Podaci rendgenske difrakcije su dobijeni na 100 K na Bruker difraktometru opremljenom sa Cu Kαradijacijom (λ=1,5478 Å) i CCD detektorom. Struktura je rešena i prečišćena upotrebom SHELX programa (Sheldrick, G.M., Acta Cryst., (2008) A64, 112 -122). Rezultati su sumirani u Tabeli 3 u nastavku.
Tabela 3: Elucidacija pojedinačnog kristala kristalnog Jedinjenja 6 (čista forma)
Primer 6: Priprema 17-amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ola (so hidrohlorida) (par 1 dijastereomera), Jedinjenje 7 i 17-amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (so hidrohlorida) (par 2 dijastereomera), Jedinjenje 8
[0487]
Korak 1: Metil 3-hloro-1-oksido-5-(trifluorometil)piridin-1-ijum-2-karboksilat [0488]
[0489] Rastvoru metil 3-hloro-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilat (25 g, 102,26 mmol) u dihlorometanu (250 mL) ohlađenom do 0 °C je dodat urea vodonik peroksid (34 g, 361,43 mmol) a zatim polako dodat trifluoroacetatni anhidrid (72,528 g, 48 mL, 345,32 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 3 sata. Reakciona smeša je zatim sipana u ledenu vodu (200 mL) i pH je prilagođena na 7 – 8 sa 25% vodenog natrijum hidroksid rastvora. Smeša je razblažena dihlorometanom (100 mL) nakon čega su slojevi razdvojeni. Vodena faza je ekstraktovana sa dihlorometanom (2 X 100 mL). Spojene organske faze su isprane slanim rastvorom (250 mL), osušene preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirane i koncentrovane pod redukovanim pritiskom čime je dobijen metil 3-hloro-1-oksido-5-(trifluorometil)piridin-1-ijum-2-karboksilat (24,5 g, 94%) kao čvrsta supstanca bele boje koja je korišćena direktno u sledećem koraku.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,00 (s, 1H), 8,25 (s, 1H), 3,97 (s, 3H) ppm.<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -61,75 (br. s., 3F) ppm. ESI-MS m/z izračunato 254,99101, pronađeno 256,0 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 1,66 minuta; LCMS metoda: Kinetex Polar C183,0 X 50 mm 2,6 µm, 3 minuta, 5 - 95% acetonitrila u vodi (0,1% mravlja kiselina) 1,2 mL/min.
Korak 2: Metil 3,6-dihloro-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilat
[0490]
[0491] Metil 3-hloro-1-oksido-5-(trifluorometil)piridin-1-ijum-2-karboksilat (18,52 g, 72,463 mmol) je u delovima dodat fosforil trihloridu (121,73 g, 74 mL, 793,90 mmol) na 0 °C i dobijena smeša je mešana na 50 °C tokom noći. Uklanjanjem rastvarača pod vakuumom je dobijeno ulje crne boje koje je rastvoreno u etil acetatu (200 mL) i pažljivo neutralisano zasićenim vodenim rastvorom natrijum karbonata sve do pH ~ 8. Smeša je ekstraktovana etil acetatom (2 X 500 mL) i spojene organske faze su isprane slanim rastvorom (250 mL), osušene preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirane i koncentrovane. Ulje crne boje je prečišćeno fleš hromatografijom na silika gelu, eluirajući sa gradijentom od 0% do 20% etil aceteta u heptanima čime je dobijen metil 3,6-dihloro-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilat (16,43 g, 83%) kao svetlo žuto ulje.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8,13 (s, 1H), 4,04 (d, J = 1,8 Hz, 3H) ppm.<19>F NMR (282 MHz, CDCl3) ppm -64,2 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z izračunato 272,95712, pronađeno 274,0 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 2,02 minuta; LCMS metoda: Kinetex C184,6 X 50 mm 2.6 µM. Temp: 45 °C, protok: 2,0 mL/min, vreme trajanja: 3 minuta. Mobilna faza: Inicij. 95% H2O (0,1% mravlja kiselina) i 5% acetonitril (0,1% mravlja kiselina) linearni gradijent do 95% acetonitril (0,1% mravlja kiselina) za 2,0 minuta zatim održavano na 95% acetonitrila (0,1% mravlja kiselina) tokom 1,0 minuta.
Korak 3: 3,6-Dihloro-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilna kiselina
[0492]
[0493] Smeša metil 3,6-dihloro-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilat (14,63 g, 52,428 mmol) u THF (150 mL) i vodi (150 mL) je tretirana sa litijum hidroksid monohidratom (4,5 g, 107,24 mmol) dodatim iz delova i smeša je energično mešana na sobnoj temperaturi tokom sat i po vremena. Sirova reakciona sme ša je prebačena u razdvajajući levak zapremine 2 L sa 5% limunske kiseline (400 mL) i etil acetatom (800 mL) i slojevi su razdvojeni. Vodena faza je dodatno ekstraktovana etil acetatom (2 X 200 mL). Spojeni organski slojevi su zatim isprani vodom (120 mL), slanim rastvorom (2 X 120 mL), osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod redukovanim pritiskom čime je dobijena 3,6-dihloro-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilna kiselina (12,58 g, 92%) kao bledo roze čvrsta supstanca koja je korišćena direktno u sledećem koraku.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 14,64 (br. s, 1H), 8,68 (s, 1H) ppm.
<19>F NMR (282 MHz, DMSO-d6) δ -62,62 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z izračunato 258,94147, pronađeno 257,9 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 1,51 minuta; LCMS metoda: Kinetex Polar C183,0 X 50 mm 2,6 µm, 3 minuta, 5 - 95% acetonitrila u vodi (0,1% mravlja kiselina) 1,2 mL/min.
Korak 4: N’-[2-Benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enoil]-3,6-dihloro-5-(trifluorometil)piridin-2-karbohidrazid
[0494]
[0495] Rastvoru 3,6-dihloro-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilna kiselina (8,5 g, 32,693 mmol) u DMF (80 mL) je dodat trietilamin (10,890 g, 15 mL, 107,62 mmol) i HATU (15 g, 39,450 mmol). Smeša je mešana 10 minuta a zatim je dodat 2-benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enhidrazid (so hidrohlorida) (11,51 g, 33,978 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 18 sati, nakon čega je sipana u ledeno hladnu vodu (200 g) i ekstraktovana etil acetatom (2 X 220 mL). Spojeni organski slojevi su isprani vodenim zasićenim natrijum bikarbonat rastvorom (2 X 80 mL), vodom (1 X 80 mL) i slanim rastvorom (2 X 80 mL). Organski sloj je koncentrovan uparavanjem pod redukovanim pritiskom čime je dobijen tamno žuti uljni ostatak (19,2 g) koji je spojen sa dihlorometanom (100 mL) i prethodno adsorbovan na silika gelu. Fle š hromatografijom na silika gelu (220 g kolona, sirovo suvo napunjeno na 50 g silika gela) upotrebom gradijenta od 0% do 20% EtOAc u heptanima je dobijen N’-[2-benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enoil]-3,6-dihloro-5-(trifluorometil)piridin-2-karbohidrazid (11,37 g, 60%) kao čvrsta supstanca bele boje.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9,18 (br, s, 1H), 8,17 (s, 1H), 7,49 - 7,32 (m, 5H), 5,95 - 5,75 (m, 1H), 5,18 - 5,01 (m, 2H), 4,86 (d, J = 10,3 Hz, 1H), 4,73 (d, J = 10,6 Hz, 1H), 2,55 - 2,38 (m, 1H), 2,36 - 2,16 (m, 3H) ppm.<19>F NMR (282 MHz, CDCl3) δ -64,15 (s, 3F), -73,62 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z izračunato 543,0551, pronađeno 544,1 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 2,25 minuta; LCMS metoda: Kinetex Polar C183,0 X 50 mm 2,6 µm, 3 minuta, 5 - 95% acetonitrila u vodi (0,1% mravlja kiselina) 1,2 mL/min.
Korak 5: 2-[1-Benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-5-[3,6-dihloro-5-(trifluorometil)-2-piridil] -1,3,4-oksadiazol
[0496]
[0497] Rastvoru N’-[2-benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enoil]-3,6-dihloro-5-(trifluorometil)piridin-2-karbohidrazid (10,37 g, 17,891 mmol) i N,N-diizopropiletilamin (6,5378 g, 8,9 mL, 50,079 mmol) u acetonitrilu (240 mL) na 50 °C je iz delova dodat p-toluensulfonil hlorid (4,15 g, 21,768 mmol). Smeša je mešana na 70 °C. Nakon završetka (1 sat), reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je rastvoren u dihlorometanu i ispran sa 5% vodenog natrijum bikarbonata (20 mL), osu šen anhidrovanim natrijum sulfatom. Fleš hromatografijom na silika gelu (40 g kolona, gradijent od 0% do 15% EtOAc u heptanima) je dobijen 2-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-5-[3,6-dihloro-5-(trifluorometil)-2-piridil]-1,3,4-oksadiazol (8,1 g) kao čvrsta supstanca bele boje, koja sadrži p-toluensulfonil hlorid. Frakcija od 1,9 g je rastvorena u dihlorometanu (40 mL) i tokom mešanja je dodat amonijum hidroksid (2,5 mL, 28 - 30% NH3baza). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi sat vremena, nakon čega je prebačena u razdvajajući levak sa etil acetatom (160 mL) i razdvojena. Organski sloj je dodatno ispran vodom (2 X 30 mL) i slanim rastvorom (30 mL), osušen preko anhidrovanog natrijum sulfata i filtriran. Isparljive materije iz filtrata su uklonjene uparavanjem pod redukovanim pritiskom. Ostatak je suvo napunjen na silika gel (50 g) i prečišćen hromatografijom na silika gelu (80 g kolona) upotrebom gradijenta od 0% do 10% EtOAc u heptanima čime je dobijen 2-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-5-[3,6-dihloro-5-(trifluorometil)-2-piridil]-1,3,4-oksadiazol (1,7 g, 18%) kao čvrsta supstanca bele boje. Preostala frakcija od 6,2 g od inicijalne kolone silika gela je rastvorena u dihlorometanu (60 mL) i tokom me šanja je dodat amonijum hidroksid (5,0 mL, 28,0-30,0% NH3baza). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi sat vremena, nakon čega je prebačena u razdvajajući levak sa dihlorometanom (100 mL) i razdvojena. Organski sloj je ispran vodom (2 X 30 mL) i slanim rastvorom (30 mL), osušen preko anhidrovanog natrijum sulfata a zatim filtriran. Isparljive materije filtrata su uklonjene uparavanjem pod redukovanim pritiskom. Ostatak je suvo napunjen na silika gel (50 g) i prečišćen hromatografijom na silika gelu na koloni od 120 g upotrebom gradijenta od 0% do 10% etil acetata u heptanima čime je dobijen 2-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-5-[3,6-dihloro-5-(trifluorometil)-2-piridil]-1,3,4-oksadiazol (5,87 g, 62%) kao čvrsta supstanca bele boje, ukupan izračunati prinos proizvoda od obe kolone je bio 80%.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8,25 (s, 1H), 7,53 - 7,28 (m, 5H), 5,87 - 5,68 (m, 1H), 5,13 - 4,94 (m, 2H), 4,85 (d, J= 10,6 Hz, 1H), 4,66 (d, J= 10,9 Hz, 1H), 2,61 - 2,15 (m, 4H) ppm.<19>F NMR (282 MHz, CDCl3) δ -64,11 (s, 3F), -72,85 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z izračunato 525,04456, pronađeno 526,1 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 2,42 minuta; LCMS metoda: Kinetex Polar C183,0 X 50 mm 2,6 µm, 3 minuta, 5 - 95% acetonitrila u vodi (0,1% mravlja kiselina) 1,2 mL/min.
Korak 6: 2-[1-Benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-5-[3-hloro-6-(1-metilbut-3-enoksi)-5-(trifluorometil)-2-piridil]-1,3,4-oksadiazol
[0498]
[0499] Rastvoru 2-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-5-[3,6-dihloro-5-(trifluorometil)-2-piridil]-1,3,4-oksadiazol (1 g, 1,900 mmol) u DMSO (10 mL) su dodati pent-4-en-2-ol (502 mg, 5,828 mmol), Cs2CO3(3,2 g, 9,821 mmol) i jodobakar (215 mg, 1,129 mmol) nakon čega je smeša zagrevana na 60 °C tokom 6 sati. Reakciona smeša je sipana na mrvljeni led i dobijeni pastozni materijal je rastvoren u etil acetatu, ispran slanim rastvorom, osušen preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan. Dobijeni ostatak braon boje je prečišćen hromatografijom na silika gelu upotrebom plitkog gradijenta od 100% heksana do 50% EtOAc u heksanima čime je dobijen 2-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-5-[3-hloro-6-(1-metilbut-3-enoksi)-5-(trifluorometil)-2-piridil]-1,3,4-oksadiazol (427 mg, 39%). ESI-MS m/z izračunato 575,14105, pronađeno 567,1 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 0,79 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (50 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002350), i dualnim gradijentnim tokom od 30 - 99% mobilne faze B tokom 2,9 minuta. Mobilna faza A = voda (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 7: terc-Butil N-[2-[5-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-(1-metilbut-3-enoksi)-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat
[0500]
[0501] Rastvoru degaziranom azotom 2-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-5-[3-hloro-6-(1-metilbut-3-enoksi)-5-(trifluorometil)-2-piridil]-1,3,4-oksadiazol (425 mg, 0,7379 mmol) u dioksanu (5 mL), su dodati terc-butil karbamat (262 mg, 2,237 mmol), XPhos Pd G3 (8,6 mg, 0,01016 mmol), paladijum (II) acetat (4,2 mg, 0,01871 mmol) i Cs2CO3(375 mg, 1,151 mmol) i smeša je zagrevana u zatvorenoj bočici na 100 °C tokom noći. Smeša je ohlađena na sobnu temperaturu, razblažena vodom (8 mL), ekstraktovana etil acetatom (3 X 70 mL) nakon čega su spojeni ekstrakti isprani slanim rastvorom (15 mL), osušeni (natrijum sulfat), filtrirani i koncentrovani. Dobijeni ostatak braon boje je pre čišćen hromatografijom na silika gelu upotrebom plitkog gradijenta od 100% heksana do 100% EtOAc čime je dobijen terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-(1-metilbut-3-enoksi)-5-(trifluor ometil)-3-piridil]karbamat (152 mg, 31%) kao mešavina dijastereomera. ESI-MS m/z izračunato 656,24335, pronađeno 657,4 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 0,78 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (30 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002349) i dualnim gradijentnim tokom od 50 - 99% mobilne faze B tokom 1,0 minuta. Mobilna faza A = voda (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,5 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 8: terc-Butil N-[6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,9,14,16-heksaen-17-il]karbamat (E/Z smeša)
[0502]
[0503] Degaziranom rastvoru terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-(1-metilbut-3-enoksi)-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat (150 mg, 0,2284 mmol) u DCE (50 mL) je dodat dihloro[1,3-bis(2,4,6-trimetilfenil)-2-imidazolidiniliden][[5-[(dimetilamino)sulfonil]-2-(1-metiletoksi-O)fenil]metilen-C]rutenijum(II) (Zhan katalizator -1B, 50 mg, 0,06221 mmol) i reakcija je zagrevana na 70 °C tokom noći uz kontinuirano propuštanje azota kroz rastvor sa izlazom gasa. Reakciona smeša je zatim ohlađena na sobnu temperaturu i koncentrovana pod redukovanim pritiskom. Razbla žena je sa 1:4 EtOAc/heksani i filtrirana kroz celit. Filtrat je koncentrovan i dobijeni ostatak braon boje je prečišćen hromatografijom na silika gelu upotrebom plitkog gradijenta od 100% heksana do 30% EtOAc u heksanima čime je dobijen terc-butil N-[6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,9,14,16-heksaen-17-il]karbamat (E/Z smeša) (52 mg, 36%) kao ulje žute boje. ESI-MS m/z izračunato 628,21204, pronađeno 629,3 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 0,73 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (30 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002349) i dualnim gradijentnim tokom od 50 - 99% mobilne faze B tokom 1,0 minuta. Mobilna faza A = voda (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,5 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 9: terc-Butil N-[6-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat
[0504]
[0505] U Parovoj posudi pod pritiskom su spojeni i zatvoreni terc-butil N-[6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,9,14,16-heksaen-17-il]karbamat (E/Z smeša) (52 mg, 0,08273 mmol), Pd/C (47 mg 10 % w/w, 0,04416 mmol) i AcOH (1 mL). Podvrgnuto je vakuumu i ponovo napunjeno gasom azota tri puta nakon čega je podvrgnuto vakuumu. Posuda je napunjena gasom vodonikom pri 150 psi nakon čega je smeša mešana 15 sati. Podvrgnuta je vakuumu i ponovo napunjena gasom azotom tri puta nakon čega je razblažena etil acetatom i filtrirana preko celita. Filtrat je koncentrovan i prečišćen reverzno faznom HPLC-MS upotrebom gradijenta od 30% do 99% acetonitrila u vodi (+ 5 mM HCl) tokom 15 minuta čime je dobijen terc-butil N -[6-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat (12,7 mg, 28%) kao svetlo braon čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izračunato 540,1807, pronađeno 541,2 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 2,07 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (50 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002350) i dualnim gradijentnim tokom od 50 - 99% mobilne faze B tokom 2,9 minuta. Mobilna faza A = voda (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 10: 17-Amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (so hidrohlorida) (dijastereomerni par 1), Jedinjenje 7, i 17-amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (so hidrohlorida) (dijastereomerni par 2), Jedinjenje 8
[0506]
[0507] Rastvoru terc-butil N-[6-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat (12 mg, 0,02220 mmol) su dodati TFA (100 µL, 1,298 mmol) i dihlorometan (300 µL) (unapred pripremljen rastvor 1:4 TFA/dihlorometan) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi približno sat vremena. Rastvarači su uklonjeni i rastvoreni u DMSO (1 mL) i ostatak je prečišćen reverzno faznom HPLC-MS upotrebom gradijenta od 1% do 99% acetonitrila u vodi (+ 5 mM HCl) tokom 15 minuta čime je dobijen kao svetlo braon čvrsta supstanca i prvi eluirajući dijastereomerni par, 17-amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (so hidrohlorida) (dijastereomerni par 1) (2,1 mg, 38%). ESI-MS m/z izračunato 440,1283, pronađeno 441,16 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 1,46 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (50 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002350) i dualnog gradijentnog toka od 30 - 99% mobilne faze B tokom 2,9 minuta. Mobilna faza A = voda (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C. Drugi eluirajući dijastereomerni par, izolovan kao svetlo braon čvrsta supstanca, je bio 17-amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (so hidrohlorida) (dijastereomerni par 2) (3,6 mg, 67%).<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7,76 (s, 1H), 7,63 (s, 1H), 6,36 (s, 2H), 4,77 - 4,65 (m, 1H), 2,55 (dd, J = 8,8, 4,4 Hz, 1H), 2,17 (t, J= 12,2 Hz, 1H), 2,09 (ddd, J= 14,2, 10,5, 6,9 Hz, 1H), 1,68 (s, 1H), 1,59 (d, J = 7,9 Hz, 2H), 1,48 (d, J= 6,6 Hz, 3H), 1,33 (d, J = 6,3 Hz, 3H), 1,14 (q, J = 9,0, 8,0 Hz, 1H) ppm. ESI-MS m/z izračunato 440,1283, pronađeno 441,2 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 1,51 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (50 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002350) i dualnim gradijentnim tokom od 30 - 99% mobilne faze B tokom 2,9 minuta. Mobilna faza A = voda (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Primer 7: Priprema (6R)-17-amino-13,13-diokso-6,15-bis(trifluorometil)-19-oksa-13λ6-tia-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ola (enantiomer 1), Jedinjenje 9 i (6S)-17-amino-13,13-diokso-6,15-bis(trifluorometil)-19-oksa-13λ6-tia-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ola (enantiomer 2), Jedinjenje 10 [0508]
Korak 1: terc-Butil N-[2-[5-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-but-3-enilsulfonil-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat
[0509]
[0510] Smeša terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat (545 mg, 0,84 mmol), but-3-en-1-sulfinat (so natrijuma) (351 mg, 2,47 mmol) i CuI (472 mg, 2,48 mmol) u DMSO (5 mL) je zagrevana na 100 °C tokom 3 sata, nakon čega je razblažena etrom i vodom, smeša je filtrirana, slojevi su podeljeni i organski sloj je ispran vodom, slanim rastvorom, osušen (MgSO4) i uparen. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (24 g SiO2, 0 - 20% EtOAc u heksanima tokom 15 minuta) čime je dobijen terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-but-3-enilsulfonil-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat (327 mg, 57%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 10,36 (s, 1H), 9,57 (s, 1H), 7,42 - 7,28 (m, 5H), 5,75 (tdt, J= 17,0, 10,2, 6,5 Hz, 2H), 5,06 (dt, J= 17,1, 1,4 Hz, 2H), 5,01 (d, J = 10,2 Hz, 2H), 4,84 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 4,66 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 3,69 (hept, J = 7,0 Hz, 2H), 2,65 - 2,58 (m, 2H), 2,56 -2,31 (m, 2H), 2,30 - 2,18 (m, 1H), 1,59 (s, 9H), 1,55 - 1,51 (m, 1H)ppm.<19>F NMR (376 MHz, hloroform-d) δ -58,48, -72,86 ppm. ESI-MS m/z izračunato 690,1947, pronađeno 691,2 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 0,89 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (30 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002349) i dualnim gradijentnim tokom od 1 - 99% mobilne faze B tokom 1,0 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = CH3CN (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,5 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 2: terc-Butil N-[6-(benziloksi)-13,13-diokso-6,15-bis(trifluorometil)-19-oksa-13λ<6>-tia-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,9,14,16-heksaen-17-il]karbamat (E/Z smeša)
[0511]
[0512] Rastvor terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-but-3-enilsulfonil-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat (300 mg, 0,4344 mmol) u 5 mL DCE je dodat ukapavanjem tokom 5 minuta rastvoru benziliden-[1,3-bis(2,4,6-trimetilfenil)imidazolidin-2-iliden]-dihloro-rutenijum;tricikloheksilfosfan (55 mg, 0,06478 mmol) u DCE (42 mL) zagrevanom na 70 °C uz konstantno propuštanje N2tokom sat vremena. Rastvarač je uparen i ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (24 g SiO2, 0 - 20% EtOAc u heksanu tokom 15 minuta) čime je dobijen tercbutil N-[6-(benziloksi)-13,13-diokso-6,15-bis(trifluorometil)-19-oksa-13λ<6>-tia-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,9,14,16-heksaen-17-il]karbamat (E/Z smeša) (157 mg, 55%).
<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 10,05 (s, 1H), 9,54 (s, 1H), 7,36 - 7,20 (m, 5H), 5,67 (q, J= 8,3, 7,8 Hz, 1H), 5,48 (q, J= 9,1, 8,7 Hz, 1H), 4,90 (s, 2H), 3,65 (ddd, J = 14,6, 12,6, 4,4 Hz, 1H), 3,58 - 3,47 (m, 1H), 3,06 - 2,84 (m, 2H), 2,60 - 2,34 (m, 2H), 2,23 (t, J= 10,5 Hz, 1H), 2,12 - 2,06 (m, 1H), 1,58 (d, J = 2,9 Hz, 9H)ppm.<19>F NMR (376 MHz, hloroform-d) δ -58,72, -74,24 ppm. ESI-MS m/z izračunato 662,1634, pronađeno 663,2 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 0,85 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (30 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002349) i dualnim gradijentnim tokom od 1 - 99% mobilne faze B tokom 1,0 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = CH3CN (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,5 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 3: terc-Butil N-[6-hidroksi-13,13-diokso-6,15-bis(trifluorometil)-19-oksa-13λ<6>-tia-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat
[0513]
[0514] Smeša terc-butil N-[6-(benziloksi)-13,13-diokso-6,15-bis(trifluorometil)-19-oksa-13λ<6>-tia-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,9,14,16-heksaen-17-il]karbamat (E/Z smeša) (154 mg, 0,232 mmol) i Pd/C (74 mg 10 % w/w, 0,070 mmol) u AcOH (1,5 mL) je mešana na sobnoj temperaturi pod 180 psi H2u posudi pod pritiskom od nerđajućeg čelika tokom 15 sati. Nakon toga smeša je filtrirana i filtrat je uparen čime je dobijen ciljani terc-butil N-[6-hidroksi-13,13-diokso-6,15-bis(trifluorometil)-19-oksa-13λ<6>-tia-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat (136 mg, 96%), ESI-MS m/z izračunato 574,1321, pronađeno 575,1 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 0,72 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (30 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002349) i dualnog gradijentnog toka od 1 - 99% mobilne faze B tokom 1,0 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = CH3CN (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,5 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 4: (6R)-17-Amino-6-hidroksi-6,15-bis(trifluorometil)-19-oksa-13λ<6>-tia-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-13,13-dion (enantiomer 1), Jedinjenje 9 i (6S)-17-amino-6-hidroksi-6,15-bis(trifluorometil)-19-oksa-13λ<6>-tia-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-13,13-dion (enantiomer 2), Jedinjenje 10
[0515]
[0516] Smeša terc-butil N-[6-hidroksi-13,13-diokso-6,15-bis(trifluorometil)-19-oksa-13λ<6>-tia-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat (134 mg, 0,22 mmol), TFA (2 mL), triizopropilsilan (67 µL, 0,33 mmol) i voda (100 µL) je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta nakon čega je rastvarač isparen. Ostatak je uparen zajedno iz acetonitrila (2X). Ostatak, rastvoren u 2 mL acetonitrila, je podvrgnut preparativnoj SFC sa 330 µL ubrizgavanjima preko preparativne SFC eluirajući gradijent od 5 mM NH3in metanolu u CO2(5-15% tokom 10 minuta) preko 21,2 X 250 mm AD kolone, 5 µm čestica dajući prvi eluent (6R)-17-amino-6-hidroksi-6,15-bis(trifluorometil)-19-oksa-13λ<6>-tia-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-13,13-dion (enantiomer 1) (38 mg, 37%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,93 (s, 1H), 7,66 (s, 3H, D2O exchanged), 3,77 - 3,64 (m, 1H), 3,61 - 3,49 (m, 1H), 2,21 (t, J = 12,1 Hz, 2H), 2,08 (d, J= 15,0 Hz, 1H), 1,92 (dd, J= 12,5, 7,2 Hz, 1H), 1,56 (m, 6H) ppm;<19>F NMR (376 MHz, DMSO-d6) δ -57,96, -78,11 ppm. ESI-MS m/z izračunato 474,07965, pronađeno 475,0 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 1,16 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom HPLC-MS upotrebom Onyx Monolithic C18kolone (50 X 4,6 mm) prodate od strane Phenomenex (pn: CH0-7644) i dualnog gradijentnog toka od 1 - 99% mobilna faza B tokom 2,9 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = CH3CN (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 12 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 50 µL i temperatura kolone = 25 °C. UV/vis λmax231, 277, 356 nm.
[0517] Daljom elucijom je dobijen drugi eluent (6S)-17-amino-6-hidroksi-6,15-bis(trifluorometil)-19-oksa-13λ<6>-tia-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-13,13-dion (enantiomer 2) (36 mg, 35%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,93 (s, 1H), 7,66 (s, 3H, D2O razmenjeno), 3,77 - 3,63 (m, 1H), 3,56 (td, J = 14,9, 13,7, 4,1 Hz, 1H), 2,21 (t, J = 11,9 Hz, 2H), 2,08 (dd, J= 14,1, 8,0 Hz, 1H), 1,97 -1,84 (m, 1H), 1,56 (m, 6H) ppm;<19>F NMR (376 MHz, DMSO-d6) δ -57,96, -78,11. ESI-MS m/z izračunato 474,07965, pronađeno 475,0 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 1,16 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom HPLC-MS upotrebom Onyx Monolithic C18kolone (50 X 4,6 mm) prodatom od strane Phenomenex (pn: CH0-7644) i dualnim gradijentnim tokom od 1 - 99% mobilne faze B tokom 2,9 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = CH3CN (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 12 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 50 µL i temperatura kolone = 25 °C.
Primer 8: Priprema (6R,12R)-17-amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ola, Jedinjenje 11
[0518]
Korak 1: terc-Butil N [2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi]-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat
[0519]
[0520] Rastvoren je terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-hidroksi-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (159,3 g, 231,3 mmol) i trifenilfosfin (72,9 g, 277,9 mmol) u toluenu (1 L), zatim je dodat (2S)-pent-4-en-2-ol (28,7 mL, 278,9 mmol). Smeša je zagrevana do 45 °C, zatim je polako dodavan DIAD (58,3 mL, 296,1 mmol) (egzotermno) tokom 40 minuta. Tokom sledećih približno 2 sata, smeša je ohlađena na sobnu temperaturu. Tokom perioda hlađenja, nakon prvih 10 minuta je dodat trifenilfosfin (6,07 g, 23,14 mmol). Nakon dodatnih sat vremena, dodat je dodatni trifenilfosfin (3,04 g, 11,59 mmol). Nakon dodatna 23 minuta dodato je DIAD (2,24 mL, 11,57 mmol). Nakon perioda od približno 2 sata hlađenja na sobnu temperaturu, smeša je ohlađena do 15 °C, dodati su kristali za sejanje DIAD-trifenilfosfin oksid kompleksa što je dovelo do precipitacije, nakon čega je dodato 1000 mL heptana. Smeša je skladištena na -20 °C tokom 3 dana. Precipitat je isfiltriran i odbačen a filtrat je koncentrovan čime je dobijen ostatak/ulje crvene boje. Ostatak je rastvoren u 613 mL heptana na 45 °C, zatim ohlađen do 0 °C, zasejan sa DIAD-trifenilfosfin oksid kompleksom, mešan na 0 °C tokom 30 minuta, nakon čega je rastvor filtriran. Filtrat je koncentrovan na manju zapreminu nakon čega je postavljen na kolonu silika gela od 1,5 kg (zapremina kolone = 2400 mL, brzina protoka = 600 mL/min). Gradijentni tok od 1% do 6% EtOAc u heksanima tokom 32 minuta (8 kolonskih zapremina), zatim održavan na 6% u heksanima dok proizvod nije završio eluiranje čime je dobijen terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi]-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (163,5 g, 93%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 7,82 (s, 1H), 7,43 - 7,27 (m, 5H), 5,88 - 5,69 (m, 2H), 5,35 (h, J= 6,2 Hz, 1H), 5,16 - 4,94 (m, 4H), 4,81 (d, J= 10,7 Hz, 1H), 4,63 (d, J= 10,7 Hz, 1H), 2,58 - 2,15 (m, 6H), 1,42 (s, 18H), 1,36 (d, J= 6,2 Hz, 3H) ppm. ESI-MS m/z izračunato 756,2958, pronađeno 757,3 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 4,0 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (50 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002350) i dualnim gradijentnim tokom od 1 - 99% mobilne faze B tokom 4,5 minuta. Mobilna faza A = voda (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 2: terc-Butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,9,14,16-heksaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonilkarbamat (E/Z smeša)
[0521]
[0522] Sledeća reakcija je sprovedena, podeljena jednako između dve, reakcione boce zapremine 12 L koje su paralelno tekle. Upotrebljeno je mehaničko mešanje i reakcije su podvrgnute konstantnom pročišćavanju azotom pomoću disperzione cevi velike poroznosti. Svakoj boci je dodat terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi]-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (54 g, 71,36 mmol u svakoj boci) rastvoren u DCE (8 L u svakoj boci) i obe boce su snažno pročišćene azotom na sobnoj temperaturi. Obe boce su zagrevane do 62 °C i svakoj reakciji su dodati Grubbs katalizatori prve generacije (9 g, 10,94 mmol u svakoj boci) i mešano je na 400 rpm uz podešavanje kontrole unutrašnje temperature na 75 °C uz snažno pročišćavanje azotom (obe reakcije su dostigle ~75 °C nakon približno 20 minuta). Nakon 5 sati i 15 minuta, kontrola unutrašnje temperature je podešena na 45 °C. Nakon približno 2 sata, svakoj boci je dodata 2-sulfanilpiridin-3-karboksilna kiselina (11 g, 70,89 mmol u svakoj boci) a zatim trietilamin (10 mL, 71,75 mmol u svakoj boci). Nakon završetka reakcije, pročišćavanje azotom je obustavljeno i obe reakcione boce su mešane na 45 °C otvorene za vazduh tokom noći. Reakcije su zatim uklonjene sa toplote i svakoj reakciji je dodato 130 g silika gela i svaka je mešana na sobnoj temperaturi. Nakon približno 2 sata, smeše zelene boje su spojene i filtrirane preko celita a zatim koncentrovane rotiraju ćim uparavanjem na 43 °C. Dobijeni ostatak je rastvoren u dihlorometan/heptan 1:1 (400 mL) i formirana čvrsta supstanca narandžaste boje je uklonjena filtracijom. Zelenkasta matična tečnost je uparena čime je dobijeno 115,5 g pene zelene boje. Ovaj materijal je rastvoren u 500 mL 1:1 dihlorometan/heksani a zatim postavljen na kolonu silika gela od 3 kg (zapremina kolone = 4800 mL, brzina protoka = 900 mL/min). Gradijentni tok od 2% do 9% EtOAc u heksanima tokom 43 minuta (8 kolonskih zapremina), zatim na 9% EtOAc dok proizvod nije završio eluiranje čime je dobijeno 77,8 g nečistog proizvoda. Ovaj materijal je zajedno uparen sa metanolom (~500 mL) a zatim rablažen metanolom (200 mL) čime je dobijeno 234,5 g metanolnog rastvora, koji je prepolovljen i obe polovine su prečišćene reverzno faznom hromatografijom (3,8 kg C18kolona, zapremina kolone = 3300 mL, brzina protoka = 375 mL/min, postavljeno kao rastvor u metanolu). Kolona je bila na 55% acetonitrila tokom pribli žno 5 minuta (0,5 kolonskih zapremina), zatim na gradijentu od 55% do 100% acetonitrila u vodi tokom pribli žno 170 minuta (19-20 kolonskih zapremina), zatim održavano na 100% acetonitrila dok proizvod i nečistoće nisu završili eluiranje. Čiste frakcije proizvoda sa obe kolone su spojene i koncentrovane rotiraju ćim uparavanjem a zatim prebačene sa etanolom u posudu zapremine 5 L, uparene i pažljivo osušene (postale pena) čime je kao mešavina olefinskih izomera dobijen terc-butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,9,14,16-heksaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (E/Z smeša) (55,5 g, 53%). ESI-MS m/z izračunato 728,26447, pronađeno 729,0 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 3,82 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (50 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002350) i dualnim gradijentnim tokom od 1 - 99% mobilne faze B tokom 4,5 minuta. Mobilna faza A = voda (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 3: terc-Butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonilkarbamat
[0523]
[0524] terc-Butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,9,14,16-heksaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (E/Z smeša) (11,7 g, 16,06 mmol) je rastvoren u mešajućem etanolu (230 mL) i boca je ciklirana 3 puta vakuumom/azotom i tretirana sa 10% Pd/C (50% vodene vlažnosti, 2,2 g 5 % w/w, 1,034 mmol). Smeša je ciklirana 3 puta između vakuum/azot i 3 puta između vakuum/vodonika. Smeša je zatim snažno mešana pod vodonikom (balon) tokom 7 i po sati. Katalizator je uklonjen filtracijom, zamenjen sa sve žim 10% Pd/C (50% vodene vlažnosti, 2,2 g 5% w/w, 1,034 mmol) i snažno mešan pod vodonikom (balon) tokom noći. Nakon toga, katalizator je ponovo uklonjen filtracijom, filtrat je uparen i ostatak je (11,3 g, 1 g izdvojeno) rastvoren u etanolu (230 mL) napunjeno svežim 10% Pd/C (50% vodena vlažnost, 2,2 g 5 % w/w, 1,034 mmol) i snažno mešan pod vodonikom (balon) tokom 6 sati, napunjeno ponovo svežim 10% Pd/C (50% vodena vlažnost, 2,2 g 5 % w/w, 1,034 mmol) i snažno mešan pod vodonikom (balon) tokom noći. Katalizator je uklonjen filtracijom i filtrat je uparen (dobijeno 10 g ostatka). Ovaj sirov materijal (10 g 1 g prethodno izdvojen) je prečišćen hromatografijom na silika gelu (330 g kolona, tečnost stavljena u dihlorometan) sa linearnim gradijentom od 0% do 15% etil acetata u heksanu dok proizvod nije eluirao a zatim 15% do 100% etil acetata u heksanu čime je kao bezbojna pena dobijen terc-butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18), 2,4,14,16-pentaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (9,1 g, 78%). ESI-MS m/z izračunato 730,2801, pronađeno 731,0 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 3,89 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (50 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002350) i dualnim gradijentnim tokom od 1 - 99% mobilne faze B tokom 4,5 minuta. Mobilna faza A = voda (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 4: (6R,12R)-17-Amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol, Jedinjenje 11
[0525]
[0526] terc-Butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (8,6 g, 11,77 mmol) je rastvoren u etanolu (172 mL) nakon čega je boca ciklirana 3 puta između vakuuma/azota. Smeša je tretirana sa 10% Pd/C (50% vodena vlažnost, 1,8 g 5 % w/w, 0,8457 mmol) a zatim ciklirana 3 puta između vakuuma/azota i 3 puta između vakuuma/vodonika nakon čega je snažno mešana pod vodonikom (balon) na sobnoj temperaturi tokom 18 sati. Sme ša je ciklirana 3 puta između vakuuma/azota, filtrirana preko celit ispiranja etanolom a zatim je filtrat uparen čime je dobijeno 7,3 g terc-butil N-terc-butoksikarbonil-N-[(6R,12R)-6-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamata kao beličaste čvrste supstance. Ovaj materijal je rastvoren u dihlorometanu (69 mL), ohlađen u ledenoj kadi pod azotom i lagano tretiran sa TFA (23 mL, 298,5 mmol). Rastvor je mešan u ledenoj kadi 5 minuta a zatim na sobnoj temperaturi sat vremena. Bledo žuti rastvor je razblažen heptanom (~100 mL) i uparen čime je dobijena čvrsta masa žute boje. Ostatak je ponovo razblažen heptanom (~100 - 200 mL) i dodat je dihlorometan tokom zagrevanja dok nije dobijen rastvor žute boje. Većina dihlorometana je uklonjena rotirajućim uparavanjem (35 °C vodena kada, 100 mbar pritisak) čime je dobijena fina suspenzija žute boje. Suspenzija je mešana približno sat vremena na sobnoj temperaturi, filtrirana, čvrsta supstanca je isprana heptanom ohlađenim suvim ledom a zatim sušena tokom 3 dana pod vakuumom uz propuštanje azota na 50 °C čime je dobijena bledo žuta čvrsta supstanca, (6R,12R)-17-amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (4,68 g, 90%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,77 (s, 1H), 7,55 (s, 1H), 6,34 (s, 2H), 4,90 - 4,70 (m, 1H), 2,47 (dd, J = 7,8, 5,5 Hz, 1H), 2,29 (t, J = 11,2 Hz, 1H), 2,11 (ddd, J= 14,4, 8,7, 6,1 Hz, 1H), 1,73 (dt, J= 12,7, 7,6 Hz, 2H), 1,59 - 1,38 (m, 4H), 1,35 (d, J = 6,3 Hz, 3H), 1,18 (ddt, J = 12,4, 9,6, 6,2 Hz, 1H) ppm.
<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 7,42 (d, J = 0,8 Hz, 1H), 5,20 (s, 2H), 4,75 (dtt, J = 12,6, 6,3, 3,2 Hz, 1H), 3,98 (s, 1H), 2,68 (dtd, J = 12,9, 7,6, 2,3 Hz, 1H), 2,38 - 2,18 (m, 2H), 2,03 (d, J= 7,9 Hz, 1H), 1,75 -1,46 (m, 5H), 1,41 (d, J= 6,3 Hz, 3H), 1,35 - 1,27 (m, 1H) ppm.<19>F NMR (376 MHz, hloroform-d) δ -63,95, -77,34 ppm. ESI-MS m/z izračunato 440,1283, pronađeno 441,0 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 2,87 minuta. Konačna čvrstoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (50 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002350) i dualnim gradijentnim tokom od 1 - 99% mobilne faze B tokom 4,5 minuta. Mobilna faza A = voda (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 5: Karakterizacija čvrste forme heptan solvata Jedinjenja 11
A. Rengenska difrakcija praha
[0527] Difraktogram rengenske difrakcije praha (XRPD) proizvoda Koraka 4, Jedinjenja 11 heptanskog solvata, je dobijen na sobnoj temperaturi u transmisionom režimu upotrebom PANalytical Empyrean sistema opremljenog zatvorenim tubnim izvorom i PIXcel 1D Medipix -3 detektorom (Malvern PANalytical Inc, Westborough, Massachusetts). Rendegenski generator je radio na naponu od 45 kV i struji od 40 mA sa bakarnim zračenjem (1,54060 Å). Uzorak praha je postavljen na držač uzoraka sa 96 otvora sa milarnim filmom i ubačen u instrument. Uzorak je skeniran u opsegu od približno 3° do približno 40°2θ uz veličinu koraka od 0,0131303° i 49s po koraku.
[0528] XRPD difraktogram za heptanski solvat Jedinjenja 11 je dat na slici 1, i XRPD podaci su sumirani u Tabeli 4 u nastavku.
Tabela 4: XRPD signali za heptanski solvat Jedinjenja 11
[0529] XRPD difraktogrami za uzorke heptanskog solvata Jedinjenja 11 pripremani pod tri razli čita uslova sušenja su dati na slici 2. XRPD difraktogrami su zabeleženi na sobnoj temperaturi u kontinuiranom modu upotrebom PANalytical Empyrean rendegnskog difraktometra (Almelo, The Netherlands). Rengenski snimak je generisan upotrebom Cu tube koja radi na 45 kV i 40 mA. Pikselni 1d detektor je kori šćen sa prorezom protiv raspršivanja P8. Divergentna optika je Bragg Brentano High Definition (BBHD) sa 10mm maskom, 1/8 prorezom za divergenciju i 1/2 prorezom protiv raspršivanja. Režim kontinuiranog skeniranja je koristio korak od 0,0131 stepeni i vreme brojanja od 13,77 sekundi po koraku, integrisano u opsegu od 4 do 40 stepeni dva-teta. Uzorak praha je postavljen u udubljeno podru čje unutar držača sa nultom pozadinom i izravnan staklenom pločicom.
[0530] Pod uslovom sušenja 1, heptanski solvat Jedinjenja 11 je sušen tokom vikenda pod kućnim vakuumom uz propuštanje azota na 50 °C. Pod uslovom sušenja 2, heptanski solvat Jedinjenja 11 je sušen tokom vikenda na 40-45 °C. Pod uslovom sušenja 3, heptanski solvat Jedinjenja 11 je sušen tokom 4 dana pod kućnim vakuumom uz propuštanje azota na 40-45 °C.
[0531] XRPD difraktogrami za uzorke heptanskog solvata Jedinjenja 11 pripremani pod uslovima su šenja 1, uslovima sušenja 2 i uslovima sušenja 3 su dati na slici 2, a XRPD podaci su sumirani u nastavku u tabelama 5, 6 i 7. Na slici 2, gornja kriva odgovara uslovima sušenja 2, srednja kriva odgovara uslovima sušenja 1 a donja kriva odgovara uslovima sušenja 3. Svaka kriva je suštinski slična jedna drugoj i XRPD sa slike 1.
Tabela 5: XRPD signali za heptanski solvat Jedinjenja 11, uslovi sušenja 1
Tabela 6: XRPD signali za heptanski solvat Jedinjenja 11, uslovi sušenja 2
Tabela 7: XRPD signali za heptanski solvat Jedinjenja 11, uslovi sušenja 3
B. Analiza diferencijalne skenirajuće kalorimetrije
[0532] Tačka topljenja proizvoda iz Koraka 4, heptanskog solvata Jedinjenja 11, je izmerena kori šćenjem TA Instrumenta Q2000 DSC.
[0533] Na slici 2 je dat DSC termogram za heptanski solvat Jedinjenja 11. Termogram za heptanski solvat Jedinjenja 11 prikazuje endotermu na ~93,45 °C i rekristalizaciju na ~103 °C.
C.<13>C NMR u čvrstom stanju
[0534]<13>C SSNMR proizvoda iz Koraka 4, heptanskog solvata Jedinjenja 11, je dobijen upotrebom procedure opisane u Opštim metodama.<13>C SSNMR spektar za formu heptanskog solvata Jedinjenja 11 je dat na slici 3, a podaci su sumirani u Tabeli 8 u nastavku.
Tabela 8: 13C SSNMR signali za heptanski solvat Jedinjenja 11
D.<19>F NMR u čvrstom stanju
[0535]<19>F SSNMR proizvoda iz Koraka 4, heptanskog solvata Jedinjenja 11, je dobijen upotrebom procedure opisane u Opštim metodama.<19>F SSNMR spektar za heptanski solvat Jedinjenja 11 je dat na slici 4 i podaci su sumirani u Tabeli 9 u nastavku.
Tabela 9:<19>F SSNMR signali za heptanski solvat Jedinjenja 11
E. Termogravimetrijska analiza (TGA)
[0536] TGA je korišćena kako bi se ispitalo prisustvo rezidualnih rastvarača u karakterisanim serijama i identifikovanje temperature na kojoj dolazi do razgradnje uzorka. TGA podaci su prikupljeni sa Mettler Toledo TGA/DSC 3+ STARe sistemom.
[0537] TGA kriva za heptanski solvat Jedinjenja 11 pripremljen pod uslovima sušenja 1 je data na slici 6A. TGA kriva za heptanski solvat Jedinjenja 11 pripremljen pod uslovima sušenja 2 je data na slici 6B. TGA kriva za heptanski solvat Jedinjenja 11 pripremljen pod uslovima sušenja 3 je data na slici 6C. Svaka od kriva sa slika 6A, 6B i 6C je suštinski slična jedna drugoj.
Primer 9: Priprema (6S,12R)-17-amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ola (so hidrohlorida), Jedinjenje 12
[0538]
Korak 1: terc-Butil N-[2-[5-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi]-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat
[0539]
[0540] Rastvoru terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (500 mg, 0,6653 mmol) u DMSO (5 mL) su dodati (2R)-pent-4-en-2-ol (350 µL, 3,401 mmol), cezijum karbonat (751 mg, 2,305 mmol) i jodobakar (31 mg, 0,1628 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 100 °C tokom 6 sati u uljanoj kadi. Reakciona smeša je sipana na izmrvljeni led i ekstraktovana etil acetatom i isprana slanim rastvorom. Organske materije su razdvojene, osušene preko natrijum sulfata, filtrirane i uparene. Dobijen ostatak braon boje je prečišćen hromatografijom na silika gelu upotrebom plitkog gradijenta 100% heksana do 50% EtOAc u heksanima čime je kao svetlo braon viskozno ulje dobijen terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi]-5-(trifluorometi l)-3-piridil]karbamat (120 mg, 27%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,71 (s, 1H), 8,86 (s, 1H), 7,46 - 7,28 (m, 5H), 5,91 - 5,72 (m, 2H), 5,24 (qt, J = 6,1, 3,1 Hz, 1H), 5,16 - 4,97 (m, 4H), 4,75 (d, J= 11,0 Hz, 1H), 4,66 (d, J = 11,0 Hz, 1H), 2,50 - 2,40 (m, 4H), 2,32 (d, J= 8,1 Hz, 2H), 1,49 (s, 9H), 1,32 (d, J= 6,2 Hz, 3H) ppm. ESI-MS m/z izračunato 656,24335, pronađeno 657,3 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 0,84 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (30 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002349) i dualnim gradijentnim tokom od 50 - 99% mobilne faze B tokom 1,0 minuta. Mobilna faza A = voda (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,5 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 2: terc-Butil N-[(12R)-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,9,14,16-heksaen-17-il]karbamat (E/Z smeša)
[0541]
[0542] Degaziranom rastvoru [1,3-bis(2,4,6-trimetilfenil)imidazolidin-2-iliden]-dihloro-[(2-izopropoksifenil)metilen]rutenijum (32 mg, 0,05107 mmol) (Grubbs katalizator druge generacije) u DCE (50 mL) je polako ukapavanjem dodat degazirani rastvor terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi]-5-(trifluorometi l)-3-piridil]karbamat (150 mg, 0,2284 mmol) u DCE (50 mL) pod mlazom azota koji je puštao mehuriće kroz rastvor tokom 30 minuta i reakciona smeša je zatim zagrevana na 50 °C tokom 5 sati. Reakcija je zaustavljena i rastvarači su uklonjeni rotirajućim uparavanjem. Dobijeni ostatak braon boje je prečišćen hromatografijom na silika gelu upotrebom plitkog gradijenta od 100% heksana do 30% EtOAc u heksanima čime je kao smeša olefinskih izomera dobijen terc-butil N-[(12R)-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,9,14,16-heksaen-17-il]karbamat (E/Z smeša) (102 mg, 36%) koji je eluiran zajedno sa nekim nereagovanim početnim materijalom. ESI-MS m/z izračunato 628,21204, pronađeno 629,2 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 0,36 minuta. Ovaj materijal je korišćen direktno u sledećem koraku. ESI-MS m/z izračunato 628,21204, pronađeno 629,2 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 0,36 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (30 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002349) i dualnim gradijentnim tokom od 50 - 99% mobilne faze B tokom 1,0 minuta. Mobilna faza A = voda (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,5 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 3: terc-Butil N-[(12R)-6-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat
[0543]
[0544] Rastvoru terc-butil N-[(12R)-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,9,14,16-heksaen-17-il]karbamat (E/Z smeša) (102 mg, 0,08114 mmol) u AcOH (5 mL) je dodato 10% w/w Pd/C (54 mg, 0,05074 mmol) u boci zapremine 250 mL opremljenoj sa balonom vodonika korišćenjem trosmernog adaptera. Boca je podvrgnuta vakuumu i ponovo napunjena azotom tri puta nakon čega je podvrgnuta vakuumu. Posuda je napunjena vodonik gasom i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 15 sati. Posuda je podvrgnuta vakuumu i ponovo napunjena azotom tri puta nakon čega je razblažena etil acetatom i filtrirana preko celita. Filtrat je koncentrovan čime je dobijen terc-butil N-[(12R)-6-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat (120 mg, 96%) koji je korišćen direktno u sledećem koraku. ESI-MS m/z izračunato 540,1807, pronađeno 541,2 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 0,57 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (30 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002349) i dualnim gradijentnim tokom od 50 - 99% mobilne faze B tokom 1,0 minuta. Mobilna faza A = voda (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,5 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 4: (6S,12R)-17-Amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (so hidrohlorida), Jedinjenje 12
[0545]
[0546] Rastvoru terc-butil N-[(12R)-6-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat (120 mg, 0,2220 mmol) su dodati TFA (500 mL, 6,490 mol) i dihlorometan (1,5 mL) (unapred pripremljen rastvor 1:4 TFA/dihlorometan) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi približno sat vremena. Rastvarači su uklonjeni uparavanjem i ostatak je rastvoren u DMSO (1 mL) i prečišćen reverznom fazom HPLC upotrebom gradijentnog toka od 40% do 85% acetonitrila u vodi (+ 5 mM HCl) tokom 30 minuta čime je kao svetlo braon čvrsta supstanca i drugi dijastereomer za eluiranje dobijen (6 S,12R)-17-amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (so hidrohlorida) (14,7 mg, 28%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,78 (s, 1H), 4,72 (ddt, J= 11,5, 7,7, 3,8 Hz, 1H), 2,61 - 2,52 (m, 1H), 2,24 - 2,03 (m, 2H), 1,68 (s, 1H), 1,59 (h, J= 7,5, 6,4 Hz, 2H), 1,54 - 1,38 (m, 3H), 1,34 (d, J= 6,3 Hz, 3H), 1,21 - 1,10 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z izračunato 440,1283, pronađeno 441,1 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 2,87 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (50 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002350) i dualnim gradijentnim tokom od 1 - 99% mobilne faze B tokom 4,5 minuta. Mobilna faza A = voda (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Primer 10: Priprema (6S,12S)-17-amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ola (so hidrohlorida), Jedinjenje 13
[0547]
Korak 1: terc-Butil N-[2-[5-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-[(1S)-1-metilbut-3-enoksi]-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat
[0548]
[0549] Rastvoru terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (800 mg, 1,065 mmol) u DMSO (10 mL) su dodati (2S)-pent-4-en-2-ol (550 µL, 5,345 mmol), cezijum karbonat (1,1 g, 3,376 mmol) i jodobakar (47 mg, 0,2468 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 80 °C tokom 3 sata. Reakciona smeša je sipana na izmrvljeni led i ekstraktovana etil acetatom i organska faza je isprana slanim rastvorom. Organski sloj je osušen preko natrijum sulfata, filtriran i uparen. Dobijeni ostatak braon boje je pre čišćen hromatografijom na silika gelu upotrebom plitkog gradijenta od 100% heksana do 30% EtOAc u heksanima čime je dobijen terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-[(1S)-1-metilbut-3-enoksi]-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (303 mg, 38%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,21 (s, 1H), 7,41 - 7,30 (m, 5H), 5,90 - 5,75 (m, 2H), 5,43 (qt, J= 7,7, 3,9 Hz, 1H), 5,12 - 4,98 (m, 4H), 4,81 (d, J = 11,1 Hz, 1H), 4,68 (d, J = 11,0 Hz, 1H), 2,60 - 2,47 (m, 4H), 2,39 - 2,26 (m, 2H), 1,38 - 1,26 (m, 21H) ppm. ESI-MS m/z izračunato 756,2958, pronađeno 757,47 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 0,78 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (30 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002349) i dualnim gradijentnim tokom od 50 - 99% mobilne faze B tokom 1,0 minuta. Mobilna faza A = voda (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,5 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 2: terc-Butil N-[(12S)-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,9,14,16-heksaen-17-il]karbamat (E/Z smeša)
[0550]
[0551] Degaziranom rastvoru [1,3-bis(2,4,6-trimetilfenil)imidazolidin-2-iliden]-dihloro-[(2-izopropoksifenil)metilen]rutenijum (43 mg, 0,06862 mmol) (Grubbs katalizator druge generacije) u DCE (50 mL) je polako ukapavanjem dodat degaziran rastvor terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-[(1S)-1-metilbut-3-enoksi]-5-(trifluorometi l)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (200 mg, 0,2643 mmol) u DCE (50 mL) pod mlazom azota koji je puštao mehuriće kroz rastvor tokom 30 minuta i nakon završetka dodavanja reakciona smeša je zagrevana na 50 °C tokom 5 sati. Reakcija je zaustavljena i rastvarači su uklonjeni rotirajućim uparavanjem. Dobijeni ostatak braon boje je prečišćen hromatografijom na silika gelu upotrebom plitkog gradijenta od 100% heksana do 30% EtOAc u heksanima čime je kao smeša olefinskih izomera dobijen tercbutil N-[(12S)-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,9,14,16-heksaen-17-il]karbamat (E/Z smeša) (150 mg, 45%) zajedno sa nekim nereagovanim početnim materijalom koji je eluirao zajedno sa proizvodom. Ovaj materijal je korišćen direktno u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja. ESI-MS m/z izračunato 628,21204, pronađeno 629,3 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 0,7 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (30 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002349) i dualnim gradijentnim tokom od 50 - 99% mobilne faze B tokom 1,0 minuta. Mobilna faza A = voda (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,5 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 3: (6S,12S)-17-Amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (so hidrohlorida), Jedinjenje 13
[0552]
[0553] Rastvoru terc-butil N-[(12S)-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,9,14,16-heksaen-17-il]karbamat (E/Z smeša) (150 mg, 0,2386 mmol) u AcOH (5 mL) je dodato 10 % w/w Pd/C (78 mg, 0,07329 mmol) u boci zapremine 250 mL opremljenoj sa balonom vodonika korišćenjem trosmernog adaptera. Podvrgnuta je vakuumu i ponovo napunjena azot gasom tri puta a zatim podvrgnuta vakuumu. Posuda je napunjena vodonik gasom i sme ša je mešana na sobnoj temperaturi 15 sati. Podvrgnuta vakuumu i ponovo napunjena azot gasom tri puta a zatim razblažena etil acetatom i filtrirana preko celita. Filtrat je koncentrovan čime je dobijeno 125 mg tercbutil N-[(12S)-6-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamata kao smeša dijasteremera. Ovaj materijal je rastvoren u 1:3 mixture smeši prethodno pomešanog rastvora TFA (500 µL, 6,490 mmol) i dihlorometana (1,5 mL) i smeša je mešana 30 minuta na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen rotirajućim uparavanjem i dobijeni ostatak je prečišćen reverzno faznom HPLC upotrebom gradijenta od 40% do 85% acetonitrila u vodi (+ 5 mM HCl) tokom 30 minuta čime je kao svetlo braon čvrsta supstanca dobijen prvi enantiomer za eluiranje (6S,12S)-17-amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (so hidrohlorida) (20,6 mg, 36%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 7,42 (s, 1H), 4,75 (ddt, J= 10,6, 6,7, 3,4 Hz, 1H), 4,06 - 3,76 (m, 1H), 2,76 - 2,63 (m, 1H), 2,28 (t, J= 7,6 Hz, 2H), 2,01 (d, J= 5,7 Hz, 1H), 1,61 (m, 4H), 1,50 (dd, J = 12,0, 6,5 Hz, 1H), 1,41 (d, J= 6,3 Hz, 3H), 1,33 - 1,26 (m, 1H), 0,89 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z izračunato 440,1283, pronađeno 441,1 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 2,82 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (50 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002350) i dualnim gradijentnim tokom od 1 - 99% mobilne faze B tokom 4,5 minuta. Mobilna faza A = voda (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Primer 11: Priprema (6R,12S)-17-amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ola, Jedinjenje 14
[0554]
Korak 1: terc-Butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-[(1S)-1-metilbut-3-enoksi]-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat
[0555]
[0556] Rastvoru terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-hidroksi-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat (417,3 mg, 0,7091 mmol) i (2R)-pent-4-en-2-ol (109,5 µL, 1,064 mmol) u toluenu (8,784 mL) je dodat trifenilfosfin (246,6 µL, 1,064 mmol). Nakon mešanja na sobnoj temperaturi tokom 1 minuta, dodato je DIAD (223,5 µL, 1,135 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 5 minuta. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc nakon čega je isprana zasićenim vodenim natrijum bikarbonatom (1X), zasićenim vodenim NH4Cl (1X) i slanim rastvorom (1X) a zatim je osušena preko magnezijum sulfata, filtrirana i koncentrovana u ulje žute boje koje je prečišćeno hromatografijom na silika gelu upotrebom gradijenta od 100% heksana do 100% EtOAc čime je kao bistar, blago žućkast sirup dobijen terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-[(1S)-1-metilbut-3-enoksi]-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat (433,8 mg, 93%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 9,81 (s, 1H), 9,16 (s, 1H), 7,42 - 7,37 (m, 2H), 7,36 - 7,28 (m, 3H), 5,90 - 5,72 (m, 2H), 5,26 (q, J = 6,1 Hz, 1H), 5,13 - 4,97 (m, 4H), 4,83 (d, J= 10,8 Hz, 1H), 4,68 (d, J= 10,9 Hz, 1H), 2,51 (m, 2H), 2,46 - 2,36 (m, 3H), 2,27 (d, J= 11,2 Hz, 1H), 1,55 (s, 9H), 1,36 (d, J = 6,2 Hz, 3H) ppm. ESI-MS m/z izračunato 656,24335, pronađeno 657,3 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 0,86 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (30 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002349) i dualnim gradijentnim tokom od 50 - 99% mobilne faze B tokom 1,0 minuta. Mobilna faza A = voda (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,5 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 2: terc-Butil N-[(6R,12S)-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,9,14,16-heksaen-17-il]karbamat (E/Z smeša)
[0557]
[0558] Degaziranom rastvoru [1,3-bis(2,4,6-trimetilfenil)imidazolidin-2-iliden]-dihloro-[(2-izopropoksifenil)metilen]rutenijum (378,2 mg, 0,6036 mmol) (Hoveyda Grubbs katalizator druge generacije) u toluenu (229 mL) tokom mešanja na 100 °C sa refluksnim kondenzatorom i azotom koji se propušta kroz rastvor je polako ukapavanjem dodat degaziran rastvor terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-[(1S)-1-metilbut-3-enoksi]-5-(trifluorometi l)-3-piridil]karbamat (1,5269 g, 2,325 mmol) u toluenu (229 mL) pod mlazom azota koji je puštan kroz rastvor tokom 10 minuta i reakciona smeša je zagrevana na 100 °C tokom 60 minuta. Smeša je uklonjena iz kade za zagrevanje i dodata je 2-sulfanilpiridin-3-karboksilna kiselina (180,5 mg, 1,163 mmol). Dobijena smeša je mešana 10 minuta nakon čega je koncentrovana rotirajućim uparavanjem u ostatak koji je hromatografisan na koloni C18reverzne faze eluirajući sa gradijentom od 50% do 100% acetonitrila u vodi čime je kao beličasta/žuta pena dobijen terc-butil N-[(6R,12S)-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,9,14,16-heksaen-17-il]karbamat (E/Z smeša) (324,3 mg, 22%). ESI-MS m/z izračunato 628,21204, pronađeno 629,2 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 0,82 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (30 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002349) i dualnim gradijentnim tokom od 50 - 99% mobilne faze B tokom 1,0 minuta. Mobilna faza A = voda (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,5 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 3: terc-Butil N-[(6R,12S)-6-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat
[0559]
[0560] Rastvoru terc-butil N-[(6R,12S)-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,9,14,16-heksaen-17-il]karbamat (E/Z smeša) (324,3 mg, 0,5159 mmol) u AcOH (10,81 mL) je dodato 10% w/w Pd/C (168,7 mg, 0,1585 mmol, 50% vodene vlažnosti) i vodonik gas je propuštan kroz smešu tokom mešanja 15 minuta nakon čega je reakcija zatvorena i poklopljena balonom vodonika i mešana tokom 16 sati. Dodato je 10 % w/w Pd/C (54,9 mg, 0,05159 mmol, 50% vodene vlažnosti), mešana je sat vremena nakon čega je kroz boca propuštan azot i filtrirana preko celita eluirajući sa EtOAc. Filtrat je koncentrovan a zatim prečišćen hromatografijom na silika gelu upotrebom gradijenta od 100% heksana do 100% EtOAc čime je kao pena bele boje dobijen terc-butil N-[(6R,12S)-6-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat (216 mg, 77%). ESI-MS m/z izračunato 540,1807, pronađeno 541,2 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 0,61 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolona (30 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002349) i dualnim gradijentnim tokom od 50 - 99% mobilne faze B tokom 1,0 minuta. Mobilna faza A = voda (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,5 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL temperatura kolone = 60 °C.
Korak 4: (6R,12S)-17-Amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol, Jedinjenje 14
[0561]
[0562] Rastvoru tokom mešanja terc-butil N-[(6R,12S)-6-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat (216 mg, 0,3997 mmol) u dihlorometanu (2,16 mL) je dodato TFA (769,6 µL, 9,989 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi sat vremena nakon čega je koncentrovana rotirajućim uparavanjem u ostatak žute boje. Ostatak je hromatografisan na C18koloni reverzne faze od 100g eluirajući sa gradijentom od 50% do 100% acetonitrila u vodi čime je kao bledo žuta čvrsta supstanca dobijen (6R,12S)-17-amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (177,1 mg, 100%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,76 (s, 1H), 7,59 (s, 1H), 6,36 (s, 2H), 4,73 (dq, J= 6,4, 3,1, 2,4 Hz, 1H), 2,56 (d, J= 5,5 Hz, 1H), 2,22 - 2,04 (m, 2H), 1,74 - 1,64 (m, 1H), 1,59 (d, J = 7,9 Hz, 2H), 1,54 - 1,43 (m, 3H), 1,34 (d, J = 6,3 Hz, 3H), 1,22 - 1,10 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z izračunato 440,1283, pronađeno 441,1 (M+1)<+>; vreme zadžravanja: 2,02 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (50 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002350) i dualnim gradijentnim tokom od 1 - 99% mobilne faze B tokom 2,9 minuta. Mobilna faza A = voda (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Primer 12: Priprema 16-amino-12,12-diokso-6,14-bis(trifluorometil)-18-oksa-12λ<6>-tia-3,4,17-triazatriciklo[11.3.1.12,5]oktadeka-1(17),2,4,13,15-pentaen-6-ola (enantiomer 1), Jedinjenje 15 i 16-amino-12,12-diokso-6,14-bis(trifluorometil)-18-oksa-12λ<6>-tia-3,4,17-triazatriciklo[11.3.1.12,5]oktadeka-1(17),2,4,13,15-pentaen-6-ola (enantiomer 2), Jedinjenje 16
[0563]
Korak 1: terc-Butil N-[2-[5-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-but-3-enilsulfonil-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat
[0565] Smeša terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat (225 mg, 0,3530 mmol), but-3-en-1-sulfinat (so natrijuma) (150 mg, 1,055 mmol) i jodobakar (202 mg, 1,061 mmol) u DMSO (2,2 mL) je zagrevana na 100 °C tokom 3 sata, zatim je razblažena etrom i vodom, filtrirana kroz celit, slojevi su podeljeni i organski sloj je ispran vodom, slanim rastvorom, osušen (MgSO4) i uparen. Prečišćavanjem hromatografijom na silika gelu (0 - 20% EtOAc u heksanima) je dobijen terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-but-3-enilsulfonil-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat (99 mg, 41%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 10,36 (s, 1H), 9,56 (s, 1H), 7,41 - 7,28 (m, 5H), 5,91 (dt, J= 17,0, 8,5 Hz, 1H), 5,74 (ddt, J= 16,8, 10,2, 6,5 Hz, 1H), 5,32 - 5,17 (m, 2H), 5,10 - 5,04 (m, 1H), 5,02 (dq, J= 10,2, 1,3 Hz, 1H), 4,83 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 4,67 (d, J= 10,9 Hz, 1H), 3,80 - 3,60 (m, 2H), 3,29 - 3,14 (m, 2H), 2,65 - 2,56 (m, 2H), 1,54 (s, 9H) ppm;<19>F NMR (376 MHz, hloroform-d) δ -58,49, -73,15 ppm. ESI-MS m/z izračunato 676,179, pronađeno 677,2 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 0,87 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (30 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002349) i dualnim gradijentnim tokom od 1 - 99% mobilne faze B tokom 1,0 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = CH3CN (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,5 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 2: terc-Butil N-[6-benziloksi-12,12-diokso-6,14-bis(trifluorometil)-18-oksa-12λ<6>-tia-3,4,17-triazatriciklo[11.3.1.12,5]oktadeka-1(16),2,4,8,13(17),14-heksaen-16-il]karbamat (E/Z smeša)
[0566]
[0567] U trogrloj boci sa okruglim dnom, rastvor terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-but-3-enilsulfonil-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat (206 mg, 0,3045 mmol) u DCE (10 mL) je polako dodavan tokom 45 minuta ukapavanjem kroz levak za dodavanje rastvoru dihloro[1,3-bis(2,4,6-trimetilfenil)-2-imidazolidiniliden][[5-[(dimetilamino)sulfonil]-2-(1-metiletoksi-O)fenil]metilen-C]rutenijum(II) (34 mg, 0,04634 mmol) u DCE (25 mL) zagrejanom na 70 °C uz N2propuštanje kroz rastvor. Smeša je mešana na 70 °C uz N2propuštanje dodatnih 90 minuta nakon čega je rastvarač uparen. Prečišćavanjem hromatografijom na silika gelu (0 - 20% EtOAc u heksanima) je dobijen terc-butil N-[6-benziloksi-12,12-diokso-6,14-bis(trifluorometil)-18-oksa-12λ<6>-tia-3,4,17triazatriciklo[11.3.1.12,5]oktadeka-1(16),2,4,8,13(17),14-heksaen-16-il]karbamat (E/Z smeša) (92 mg, 44%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 9,46 (s, 1H), 9,42 (s, 1H), 7,37 - 7,27 (m, 2H), 7,25 - 7,16 (m, 3H), 5,88 - 5,64 (m, 2H), 4,92 (d, J= 11,6 Hz, 1H), 4,54 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 4,13 - 3,98 (m, 1H), 3,59 (dt, J = 15,6, 5,9 Hz, 1H), 3,12 (dd, J = 14,6, 4,8 Hz, 1H), 2,87 - 2,76 (m, 2H), 2,69 - 2,62 (m, 1H), 1,58 (s, 9H) ppm;<19>F NMR (376 MHz, hloroform-d) δ -58,84, -74,24 ppm; UV/vis λmax233, 268, 322 nm. ESI-MS m/z izračunato 648,1477, pronađeno 649,1 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 0,83 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (30 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002349) i dualnim gradijentnim tokom od 1 - 99% mobilne faze B tokom 1,0 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = CH3CN (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,5 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 3: terc-Butil N-[6-hidroksi-12,12-diokso-6,14-bis(trifluorometil)-18-oksa-12λ<6>-tia-3,4,17-triazatriciklo[11.3.1.12,5]oktadeka-1(16),2,4,13(17),14-pentaen-16-il]karbamat
[0568]
[0569] Smeša terc-butil N-[6-benziloksi-12,12-diokso-6,14-bis(trifluorometil)-18-oksa-12λ<6>-tia-3,4,17-triazatriciklo[11.3.1.12,5]oktadeka-1(16),2,4,8,13(17),14-heksaen-16-il]karbamat (E/Z smeša) (90 mg, 0,1304 mmol) i Pd/C (42 mg 10 % w/w, 0,03947 mmol) u AcOH (850 µL) je mešana na sobnoj temperaturi pod 180 psi H2u posudi pod pritiskom od nerđajućeg čelika tokom 36 sati. Smeša je zatim filtrirana i filtrat je uparen čime je dobijen terc-butil N-[6-hidroksi-12,12-diokso-6,14-bis(trifluorometil)-18-oksa-12λ<6>-tia-3,4,17-triazatriciklo[11.3.1.12,5]oktadeka-1(16),2,4,13(17),14-pentaen-16-il]karbamat (81 mg, 102%). ESI-MS m/z izračunato 560,1164, pronađeno 561,2 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 0,69 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (30 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002349) i dualnim gradijentnim tokom od 1 - 99% mobilne faze B tokom 1,0 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = CH3CN (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,5 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C; UV/vis λmax233, 268, 323 nm.
Korak 4: 16-Amino-12,12-diokso-6,14-bis(trifluorometil)-18-oksa-12λ<6>-tia-3,4,17-triazatriciklo[11.3.1.12,5]oktadeka-1(17),2,4,13,15-pentaen-6-ol (enantiomer 1) i 16-amino-12,12-diokso-6,14-bis(trifluorometil)-18-oksa-12λ<6>-tia-3,4,17-triazatriciklo[11.3.1.12,5]oktadeka-1(17),2,4, 13,15-pentaen-6-ol (enantiomer 2)
[0571] terc-Butil N-[6-hidroksi-12,12-diokso-6,14-bis(trifluorometil)-18-oksa-12λ<6>-tia-3,4,17-triazatriciklo[11.3.1.12,5]oktadeka-1(16),2,4,13(17),14-pentaen-16-il]karbamat (81 mg, 0,13 mmol) je rastvoren u TFA (1,27 mL), vodi (68 µL) i triizopropilsilanu (40 µL, 0,1953 mmol), i mešan na sobnoj temperaturi 15 minuta nakon čega su rastvarači upareni. Ostatak je podvrgnut hiralnoj separaciji pomoću SFC hromatografije upotrebom ChiralPak AD (250 X 21,2 mm kolona, 5 µm veličina čestice) sa 5% do 30% metanola (5 mM NH3)/i ugljen dioksid mobilnom fazom pri 10 mL/min tokom 10,0 minuta (zapremina ubrizgavanja = 330 µL 25mg/mL rastvora u metanolu) čime je kao prvi enantiomer za eluiranje dobijen 16-amino-12,12-diokso-6,14-bis(trifluorometil)-18-oksa-12λ<6>-tia-3,4,17-triazatriciklo[11.3.1.12,5]oktadeka-1(1 7),2,4,13,15-pentaen-6-ol (16 mg, 27%) kao bela kristalna čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,84 (s, 1H), 7,66 (s, 1H, D2O exchanged), 7,39 (s, 2H, D2O exchanged), 3,87 - 3,69 (m, 1H), 3,57 - 3,41 (m, 1H), 2,30 - 2,02 (m, 4H), 1,70 (m, 2H), 1,58 - 1,45 (m, 2H) ppm;<19>F NMR (376 MHz, DMSO-d6) δ -58,27, -77,73; UV/vis λmax230, 275, 353 nm. ESI-MS m/z izračunato 460,064, pronađeno 461,0 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 1,04 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom HPLC-MS upotrebom Onyx Monolithic C18kolone (50 X 4,6 mm) kupljenom od Phenomenex (pn: CH0-7644) i dualnog gradijentnog toka od 1 - 99% mobilne faze B tokom 2,9 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = CH3CN (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 12 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 50 µL i temperatura kolone = 25 °C.
[0572] Drugi enantiomer za eluiranje je bio 16-amino-12,12-diokso-6,14-bis(trifluorometil)-18-oksa-12λ<6>-tia-3,4,17-triazatriciklo[11.3.1.12,5]oktadeka-1(17),2,4,13,15-pentaen-6-ol (14,4 mg, 24%) kao bela kristalna čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,84 (s, 1H), 7,66 (s, 1H, D2O exchanged), 7,39 (s, 2H, D2O exchanged), 3,84 - 3,70 (m, 1H), 3,55 - 3,43 (m, 1H), 2,31 - 2,00 (m, 4H), 1,70 (s, 2H), 1,56 -1,45 (m, 2H) ppm;<19>F NMR (376 MHz, DMSO-d6) δ -58,27, -77,73 ppm; UV/vis λmax230, 275, 353 nm. ESI-MS m/z izračunato 460,064, pronađeno 460,9 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 1,04 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom HPLC-MS upotrebom Onyx Monolithic C18kolone (50 X 4,6 mm) kupljenom od Phenomenex (pn: CH0-7644) i dualnim gradijentnim tokom od 1 - 99% mobilne faze B tokom 2,9 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = CH3CN (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 12 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 50 µL i temperatura kolone = 25 °C.
Primer 13: Priprema 21-amino-6,19-bis(trifluorometil)-17,23-dioksa-3,4,22-triazatetraciklo[16.3.1.12,5.011,16]trikoza-1(22),2,4,11(16),12,14,18,20-oktaen-6-ola (so hidrohlorida), Jedinjenje 17
[0573]
Korak 1: Metil 6-(2-alilfenoksi)-3-[bis(terc-butoksikarbonil)amino]-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilat
[0574]
[0575] Rastvoru metil 3-[bis(terc-butoksikarbonil)amino]-6-bromo-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilat (1,2 g, 2,403 mmol) u DMSO (12 mL) su dodati 2-alilfenol (380 µL, 2,911 mmol), cezijum karbonat (2,43 g, 7,458 mmol) i jodobakar (100 mg, 0,5251 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 100 °C tokom 30 minuta u uljanoj kadi. LCMS prikazuje završetak reakcije. Reakciona smeša je sipana na izmrvljeni led i ekstraktovana etil acetatom i isprana slanim rastvorom. Organske materije su razdvojene, osu šene preko natrijum sulfata i uparene. Dobijeni ostatak braon boje je pre čišćen kolonskom hromatografijom na silika gelu upotrebom gradijenta od 100% heksana do 100% EtOAc čime je dobijen metil 6-(2-alilfenoksi)-3-[bis(terc-butoksikarbonil)amino]-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilat (612 mg, 46%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 7,85 (s, 1H), 7,30 - 7,25 (m, 2H), 7,20 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 5,88 (ddt, J = 16,8, 10,1, 6,6 Hz, 1H), 5,02 - 4,94 (m, 2H), 3,79 (s, 3H), 3,32 (d, J= 6,7 Hz, 2H), 1,42 (s, 18H) ppm; ESI-MS m/z izračunato 552,2083, pronađeno 453,1 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 0,75 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (30 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002349) i dualnim gradijentnim tokom od 30 - 99% mobilne faze B tokom 1,0 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = CH3CN (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,5 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 2: 6-(2-Alilfenoksi)-3-(terc-butoksikarbonilamino)-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilna kiselina
[0576]
[0577] Rastvoru metil 6-(2-alilfenoksi)-3-[bis(terc-butoksikarbonil)amino]-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilat (612 mg, 1,108 mmol) u THF (8 mL), MeOH (8 mL) i vodi (8 mL) je dodat LiOH (86 mg, 3,591 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta.
[0578] THF i metanol su uklonjeni pod redukovanim pritiskom nakon čega je 10 mL HCl (10%) pažljivo dodato za pH ~6 i proizvod je ekstraktovan sa EtOAc (2 X 50 mL). Organske faze su spojene, isprane slanim rastvorom (5 mL), osušene preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirane i koncentrovane pod vakuumom i stavljene pod visok vakuum tokom 12 sati čime je kao čvrsta supstanca žute boje dobijena 6-(2-alilfenoksi)-3-(terc-butoksikarbonilamino)-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilna kiselina (482 mg, 99%). ESI-MS m/z izračunato 438,14026, pronađeno 439,13 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 0,69 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (30 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002349) i dualnim gradijentnim tokom od 30 - 99% mobilne faze B tokom 1,0 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = CH3CN (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,5 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 3: terc-Butil N-[6-(2-alilfenoksi)-2-[[[2-benziloksi-2-(trifluorometil)pent-4-enoil]amino] karbamoil]-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat
[0579]
[0580] Rastvoru 6-(2-alilfenoksi)-3-(terc-butoksikarbonilamino)-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilna kiselina (394,8 mg, 0,9006 mmol) i 2-benziloksi-2-(trifluorometil)pent-4-enhidrazid (312,5 mg, 1,084 mmol) u DMF (5 mL) je dodato DIEA (527,0 µL, 3,026 mmol) a zatim HATU (526,6 mg, 1,385 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 4 sata. Smeša je razblažena vodom i ekstraktovana etil acetatom. Organske faze su spojene i osušene preko MgSO4, filtrirane i koncentrovane pod vakuumom. Dobijeni ostatak braon boje je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika gelu upotrebom gradijenta 100% heksana do 30% EtOAc-heksana čime je dobijen terc-butil N-[6-(2-alilfenoksi)-2-[[[2-benziloksi-2-(trifluorometil)pent-4-enoil]amino]karbamoil]-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat (543 mg, 85%). ESI-MS m/z izračunato 708,2383, pronađeno 808,0 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 0,7 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (30 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002349) i dualnog gradijentnog toka od 50 - 99% mobilne faze B tokom 1,0 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = CH3CN (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,5 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 4: terc-Butil N [6-(2-alilfenoksi)-2-[5-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat
[0581]
[0582] Rastvoru terc-butil N-[6-(2-alilfenoksi)-2-[[[2-benziloksi-2-(trifluorometil)pent-4-enoil]amino]karbamoil]-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat (630 mg, 0,8890 mmol) u acetonitrilu (75 mL) je dodato DIEA (500 µL, 2,871 mmol) i zagrevan je do 70 °C nakon čega je iz tri dela dodat 4-metilbenzensulfonil hlorid (255 mg, 1,338 mmol) (85 mg svaki deo u intervalima od 10 minuta). Dobijena smeša je zagrevana na 70 °C tokom 16 sati. Reakciona smeša je ohlađena i ugašena zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata i ekstraktovana etil acetatom. Spojeni organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i upareni pod vakuumom. Dobijeni ostatak braon boje je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika gelu upotrebom gradijenta od 100% heksana do 30% EtOAc čime je dobijen terc-butil N-[6-(2-alilfenoksi)-2-[5-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat (336 mg, 55%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,72 (s, 1H), 8,99 (s, 1H), 7,35 - 7,29 (m, 4H), 7,25 (m, 5H), 5,90 - 5,72 (m, 2H), 5,23 - 5,10 (m, 2H), 4,96 - 4,87 (m, 2H), 4,66 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 4,52 (d, J= 10,9 Hz, 1H), 3,29 (dd, J= 11,3, 6,8 Hz, 2H), 3,10 (d, J = 7,1 Hz, 2H), 1,49 (s, 9H) ppm. ESI-MS m/z izračunato 690,22766, pronađeno 691,3 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 0,81 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (30 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002349) i dualnim gradijentnim tokom od 50 -99% mobilne faze B tokom 1,0 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = CH3CN (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,5 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 5: terc-Butil N-[6-(benziloksi)-6,19-bis(trifluorometil)-17,23-dioksa-3,4,22-triazatetraciklo[16.3.1.12,5.011,16]trikoza-1(22),2,4,8,11(16),12,14,18,20-nonaen-21-il]karbamat (E/Z smeša)
[0583]
[0584] Degaziranom rastvoru benziliden-[1,3-bis(2,4,6-trimetilfenil)imidazolidin-2-iliden]-dihlororutenijum; tricikloheksilfosfan (6 mg, 0,007067 mmol) (Grubbs katalizator druge generacije) u DCE (30 mL) je polako dodat degazirani rastvor terc-butil N-[6-(2-alilfenoksi)-2-[5-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat (212 mg, 0,3070 mmol) u DCE (30 mL) pod mlazom N2propuštanim kroz rastvor tokom 30 minuta i reakciona smeša je zagrevana na 50 °C tokom 5 sati. Temperatura je povećana do 70 °C i reakciona smeša je zagrevana tokom noći. Reakcija je zaustavljena i rastvarači su uklonjeni pod vakuumom. Dobijen ostatak braon boje je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika gelu upotrebom plitkog gradijenta od 100% heksana do 30% EtOAc-heksani čime je dobijen terc-butil N-[6-(benziloksi)-6,19-bis(trifluorometil)-17,23-dioksa-3,4,22-triazatetraciklo[16.3.1.12,5.011,16]trikoza-1(22),2,4,8,11(16),12,14,18,20-nonaen-21-il]karbamat (E/Z smeša) (126 mg, 62%). ESI-MS m/z izračunato 662,1964, pronađeno 663,19 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 0,74 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (30 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002349) i dualnim gradijentnim tokom od 50 -99% mobilne faze B tokom 1,0 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = CH3CN (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,5 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 6: terc-Butil N-[6-hidroksi-6,19-bis(trifluorometil)-17,23-dioksa-3,4,22-triazatetraciklo[16.3.1.12,5.011,16]trikoza-1(22),2,4,11(16),12,14,18,20-oktaen-21-il]karbamat
[0585]
[0586] Rastvoru ~1:1 izomerne smeše terc-butil N-[6-(benziloksi)-6,19-bis(trifluorometil)-17,23-dioksa-3,4,22-triazatetraciklo[16.3.1.12,5.011,16]trikoza-1(22),2,4,8,11(16),12,14,18,20-nonaen-21-il]karbamat (E/Z smeša) (120 mg, 0,1811 mmol) i terc-butil N-[6-(2-alilfenoksi)-2-[5-[1-hidroksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat (120 mg, 0,1998 mmol) u AcOH (5 mL) je dodato Pd/C (42 mg 10 % w/w, 0,03947 mmol) u boci sa okruglim dnom opremljenom sa H2balonom upotrebom trosmernog adaptera. Podvrgnuta je vakuumu i ponovo napunjena azot gasom tri puta nakon čega je podvrgnuta vakuumu. Boca je napunjena vodonik gasom a zatim je smeša mešana 15 sati. Podvrgnuta je vakuumu i ponovo napunjena azot gasom tri puta nakon čega je razblažena etil acetatom i filtrirana preko celita. Filtrat je koncentrovan i osu šen pod visokim vakuumom. Dobijeni ostatak braon boje je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika gelu upotrebom plitkog gradijenta od 100% heksana do 30% EtOAc-heksani čime je dobijen terc-butil N-[6-hidroksi-6,19-bis(trifluorometil)-17,23-dioksa-3,4,22-triazatetraciklo[16.3.1.12,5.011,16]trikoza-1(22),2,4,11(16),12,14, 18,20-oktaen-21-il]karbamat (14,2 mg, 27%); ESI-MS m/z izračunato 574,1651, pronađeno 575,2 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 1,31 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (50 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002350) i dualnog gradijentnog toka od 50 - 99% mobilne faze B tokom 2,9 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = CH3CN (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 7: 21-Amino-6,19-bis(trifluorometil)-17,23-dioksa-3,4,22-triazatetraciklo[16.3.1.12,5.011,16]trikoza-1(22),2,4,11(16),12,14,18,20-oktaen-6-ol (so hidrohlorida), Jedinjenje 17
[0587]
[0588] Rastvoru terc-butil N-[6-hidroksi-6,19-bis(trifluorometil)-17,23-dioksa-3,4,22-triazatetraciklo[16.3.1.12,5.011,16]trikoza-1(22),2,4,11(16),12,14,18,20-oktaen-21-il]karbamat (13 mg, 0,02263 mmol) su dodati TFA (100 µL, 1,298 mmol) i DCM (400 µL) (unapred pripremljen rastvor 1: 4 TFA-DCM) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi približno sat vremena. LCMS pokazuje završetak reakcije. Rastvarači su uklonjeni i rastvoreni u DMSO (1 mL) i ostatak je prečišćen metodom reverzno fazne HPLC-MS upotrebom dualnog gradijentnog toka od 50 – 99% mobilne faze B tokom 15,0 minuta (mobilna faza A = H2O (5 mM HCl); mobilna faza B = CH3CN) čime je dobijen 21-amino-6,19-bis(trifluorometil)-17,23-dioksa-3,4,22-triazatetraciklo[16.3.1.12,5.011,16]trikoza-1(22),2,4,11(16),12,14, 18,20-oktaen-6-ol (so hidrohlorida) (2,6 mg, 22%) kao beličasta amorfna čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 7,49 (s, 1H), 7,35 - 7,33 (m, 1H), 7,21 - 7,14 (m, 3H), 5,36 (s, 2H), 3,63 (s, 1H), 3,06 -2,89 (m, 2H), 2,29 (m, 1H), 2,22 - 2,14 (m, 1H), 2,13 - 2,05 (m, 2H), 1,92 (d, J= 5,2 Hz, 2H) ppm. ESI-MS m/z izračunato 474,11267, pronađeno 475,13 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 2,76 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (50 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002350) i dualnim gradijentnim tokom od 1 - 99% mobilne faze B tokom 4,5 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = CH3CN (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Primer 14: Priprema (15R)-20-amino-8-fluoro-15-metil-6,18-bis(trifluorometil)-16,23-dioksa-3,4,21-triazatetraciklo[15.3.1.12,5.17,11]trikoza-1(21),2,4,7(22),8,10,17,19-oktaen-6-ola (dijastereomerni par), Jedinjenje 18
[0589]
Korak 1: 3-[bis(terc-Butoksikarbonil)amino]-6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi]-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilna kiselina
[0590]
[0591] Rastvoru metil 3-[bis(terc-butoksikarbonil)amino]-6-bromo-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilat (500 mg, 1,001 mmol) u DMSO (2 mL) su dodati (2R)-pent-4-en-2-ol (160 µL, 1,555 mmol), cezijum karbonat (504 mg, 1,547 mmol) i jodobakar (47 mg, 0,2468 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 100 °C tokom 3 sata. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i sipana na izmrvljeni led i ekstraktovana etil acetatom i isprana slanim rastvorom. Organske materije su razdvojene, osu šene preko natrijum sulfata i uparene. Dobijeni ostatak braon boje je pre čišćen kolonskom hromatografijom na silika gelu upotrebom 100% heksana do 30% EtOAc-heksana čime je dobijena 3-[bis(tercbutoksikarbonil)amino]-6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi]-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilna kiselina (64 mg, 26%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 10,17 (s, 1H), 7,63 (s, 1H), 5,73 (ddt, J = 17,2, 10,2, 7,1 Hz, 1H), 5,20 (p, J = 6,4 Hz, 1H), 5,17 - 5,07 (m, 2H), 2,48 (dt, J = 13,5, 6,6 Hz, 1H), 2,37 (dt, J= 14,1, 6,9 Hz, 1H), 1,45 (d, J = 3,0 Hz, 18H), 1,34 (d, J= 6,3 Hz, 3H) ppm. ESI-MS m/z izračunato 490,1927, pronađeno 391,2 (M-Boc)<+>. Vreme zadržavanja: 0,5 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (30 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002349) i dualnim gradijentnim tokom od 30 - 99% mobilne faze B tokom 1,0 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,5 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 2: terc-Butil N-terc-butoksikarbonil-N-[6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi]-2-[5-[2,2,2-trifluoro-1-(2-fluoro-5-jodo-fenil)-1-hidroksi-etil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat
[0592]
[0593] Unapred zagrejanom na 50 °C mešanom rastvoru 3-[bis(terc-butoksikarbonil)amino]-6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi]-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilna kiselina (120 mg, 0,2447 mmol) i 2,2,2-trifluoro-1-(2-fluoro-5-jodo-fenil)etanon (121 mg, 0,3805 mmol) u DMF (2 mL) je iz jednog dela dodat (izocijanoimino)trifenilfosforan (113 mg, 0,3738 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom noći nakog čega je razblažena sa EtOAc (50 mL), isprana vodom i slanim rastvorom uzastopno, zatim osušena preko natrijum sulfata i filtrirana. Filtrat je koncentrovan do suvog stanja. Dobijeni ostatak braon boje je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika gelu upotrebom 100% heksana do 50% EtOAcheksana čime je kao svetlo braon viskozno ulje dobijen terc-butil N-terc-butoksikarbonil-N-[6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi]-2-[5-[2,2,2-trifluoro-1-(2-fluoro-5-jodo-fenil)-1-hidroksi-etil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-5-(tr ifluorometil)-3-piridil]karbamat (103 mg, 51%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 8,17 (d, J= 2,2 Hz, 1H), 7,81 (s, 1H), 7,76 (ddd, J= 8,6, 4,6, 2,2 Hz, 1H), 6,83 (ddd, J = 10,4, 8,7, 1,2 Hz, 1H), 5,79 (ddtd, J = 17,4, 10,9, 7,1, 4,0 Hz, 1H), 5,38 (hept, J = 6,2 Hz, 1H), 5,14 - 5,01 (m, 2H), 4,84 (d, J = 3,9 Hz, 1H), 2,53 (dtd, J = 13,7, 6,7, 2,9 Hz, 1H), 2,42 (dt, J= 13,7, 6,7 Hz, 1H), 1,66 (s, 3H), 1,38 (dd, J= 4,1, 2,1 Hz, 18H) ppm. ESI-MS m/z izračunato 832,12036, pronađeno 733,1 (M-Boc)<+>. Vreme zadržavanja: 0,79 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18 kolone (30 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002349) i dualnim gradijentnim tokom od 30 - 99% mobilne faze B tokom 1,0 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,5 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 3: terc-Butil N-[(15R)-8-fluoro-6-hidroksi-15-metil-6,18-bis(trifluorometil)-16,23-dioksa-3,4,21-triazatetraciklo[15.3.1.12,5.17,11]trikoza-1(21),2,4,7(22),8,10,12,17,19-nonaen-20-il]karbamat (E/Z smeša)
[0594]
[0595] Mešanom rastvoru terc-butil N-terc-butoksikarbonil-N-[6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi]-2-[5-[2,2,2-trifluoro-1-(2-fluoro-5-jodo-fenil)-1-hidroksi-etil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat (100 mg, 0,1201 mmol) u acetonitrilu (10 mL) je dodat Paladijum (II) acetat (8 mg, 0,03563 mmol) a zatim tris-otolilfosfan (21 mg, 0,06900 mmol) i trietilamin (60 µL, 0,4305 mmol) i kroz rastvor je propuštan N2tokom 1 minuta nakon čega je zagrevan mikrotalasnim zračenjem na 120 °C tokom 30 minuta. Smeša je ohlađena na sobnu temperaturu a zatim razblažena sa EtOAc i isprana zasićenim vodenim NH4Cl (1X) i slanim rastvorom (1X) nakon čega je osušena preko natrijum sulfata, filtrirana i koncentrovana u ulje žute boje. Dobijeni materijal je rastvoren u DMSO, filtriran i pre čišćen korišćenjem metode reverzno fazne HPLC-MS upotrebom Luna C18kolone (75 X 30 mm, 5 µm veličina čestice) kupljenom od Phenomenex (pn: 00C-4252-U0-AX) i dualnim gradijentnim tokom od 50 - 99% mobilne faze B tokom 15,0 minuta (mobilna faza A = H2O (5 mM HCl), mobilna faza B = acetonitril, brzina protoka = 50 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 950 µL i temperatura kolone = 25 °C čime je kao čvrsta supstanca žute boje dobijen terc-butil N-[(15R)-8-fluoro-6-hidroksi-15-metil-6,18-bis(trifluorometil)-16,23-dioksa-3,4,21-triazatetraciklo[15.3.1.12,5.17,11]trikoza-1(21),2,4,7(22),8,10,12,17,19-nonaen-20-il]karbamat (E/Z smeša) (21 mg, 29%). ESI-MS m/z izračunato 604,15564, pronađeno 605,03 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 0,55 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (30 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002349) i dualnim gradijentnim tokom od 50 -99% mobilne faze B tokom 1,0 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,5 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 4: (15R)-20-Amino-8-fluoro-15-metil-6,18-bis(trifluorometil)-16,23-dioksa-3,4,21-triazatetraciklo [15.3.1.12,5.17,11]trikoza-1(21),2,4,7(22),8,10,17,19-oktaen-6-ol (dijastereomerni par), Jedinjenje 18
[0596]
[0597] Prvi deo: Rastvoru terc-butil N-[(15R)-8-fluoro-6-hidroksi-15-metil-6,18-bis(trifluorometil)-16,23dioksa-3,4,21-triazatetraciklo[15.3.1.12,5.17,11]trikoza-1(21),2,4,7(22),8,10,12,17,19-nonaen-20-il]karbamat (E/Z smeša) (20 mg, 0,03309 mmol) u etanolu (2 mL) je dodato Pd/C (18 mg 10 % w/w, 0,01691 mmol) u boci sa okruglim dnom opremljenoj H2balonom upotrebom trosmernog adaptera. Smeša je podvrgnuta vakuumu i ponovo napunjena azot gasom 3 puta nakon čega je podvrgnuta vakuumu. Boca je napunjena vodonik gasom a zatim je smeša mešana 15 sati. Smeša je podvrgnuta vakuumu i ponovo napunjena azot gasom tri puta nakon čega je razblažena etil acetatom i filtrirana preko celita. Filtrat je koncentrovan i osušen pod visokim vakuumom.
[0598] Drugi deo: Materijal iz Koraka 1 je rastvoren u TFA (100 µL, 1,298 mmol) i DCM (400 µL) (unapred pripremljen rastvor 1: 4 TFA-DCM) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi približno sat vremena. Rastvarači su uklonjeni i rastvoreni u DMSO (1 mL) i ostatak je prečišćen metodom reverzno fazne HPLC-MS upotrebom dualnog gradijentnog toka od 30 – 99% mobilne faze B tokom 15,0 minuta kori šćenjem mobilne faze A = H2O (5 mM HCl) i mobilne faze B = acetonitrila čime je dobijen (15R)-20-amino-8-fluoro-15-metil-6,18-bis(trifluorometil)-16,23-dioksa-3,4,21-triazatetraciklo[15.3.1.12,5.17,11]trikoza-1(2 1),2,4,7(22),8,10,17,19-oktaen-6-ol (2 mg, 12%) kao dijastereomerna smeša. ESI-MS m/z izračunato 506,1189, pronađeno 507,1 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 2,93 minuta; Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (50 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002350) i dualnim gradijentnim tokom od 1 - 99% mobilne faze B tokom 4,5 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Primer 15: Priprema (6R,13S)-17-Amino-13-oksido-6,15-bis(trifluorometil)-19-oksa-13-tionija-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ola, Jedinjenje 19, i (6R,13R)-17-amino-13-oksido-6,15-bis(trifluorometil)-19-oksa-13-tionija-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ola, Jedinjenje 20
[0599]
Korak 1: (6R,13S)-17-Amino-13-oksido-6,15-bis(trifluorometil)-19-oksa-13-tionija-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol, Jedinjenje 19, i (6R,13R)-17-amino-13-oksido-6,15-bis(trifluorometil)-19-oksa-13-tionija-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol, Jedinjenje 20
[0600]
[0601] Rastvoru (6R)-17-amino-6,15-bis(trifluorometil)-19-oksa-13-tia-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (56 mg, 0,127 mmol) u EtOAc (1,5 mL) ohlađenom u ledenoj kadi je dodata 3-hlorobenzenkarboperoksoična kiselina (802 µL 0,11 M, 0,088 mmol) kao rastvor u EtOAc i smeša je mešana na 0 °C tokom 15 minuta. Zatim je dodata 3-hlorobenzenkarboperoksoična kiselina (227 µL 0,11 M, 0,025 mmol) kao rastvor u EtOAc i smeša je mešana na 0 °C dodatnih 15 minuta. Nakon toga je dodato dodatne 3-hlorobenzenkarboperoksoi čne kiseline (85 µL 0,11 M, 0,0094 mmol) kao rastvor u EtOAc i smeša je mešana na 0 °C tokom 15 minuta. Nakon toga smeša je razblažena sa EtOAc (30 mL) i MeOH (1 mL) i isprana sa 5% Na2S2O3, 1 M NaHCO3, osušena (MgSO4) i uparena. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (12 g SiO2, 10-50% rastvora (10% MeOH u EtOAc) prema heksanima tokom 20 minuta) eluiranih prvih 2,3 mgs (4%) povraćenog polaznog materijala (6R)-17-amino-6,15-bis(trifluorometil)-19-oksa-13-tia-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4, 14,16-pentaen-6-ol. Nastavljenom elucijom je dobijen (6R,13R)-17-amino-13-oksido-6,15-bis(trifluorometil)-19-oksa-13-tionija-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (2,6 mg, 4%). Nastavljenom elucijom je dobijen (6R,13S)-17-amino-13-oksido-6,15-bis(trifluorometil)-19-oksa-13-tionija-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol a zatim smeša (6R,13S)-17-amino-13-oksido-6,15-bis(trifluorometil)-19-oksa-13-tionija-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol i (6R,13R)-17-amino-13-oksido-6,15-bis(trifluorometil)-19-oksa-13-tionija-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol.
[0602] Smeša (6R,13S)-17-amino-13-oksido-6,15-bis(trifluorometil)-19-oksa-13-tionija-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol i (6R,13R)-17-amino-13-oksido-6,15-bis(trifluorometil)-19-oksa-13-tionija-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol je rastvorena u 1:1 MeOH/acetonitril i podvrgnuta preparativnoj HPLC eluiraju ći sa 30-70% acetonitrila naspram 5 mM HCl u vodi pri 50 mL/min tokom 14 minuta preko Luna 5 µM C18100Å 75 X 30 mm kolone čime je dobijen prvi eluent kao čvrsta supstanca bele boje (6R,13R)-17-amino-13-oksido-6,15-bis(trifluorometil)-19-oksa-13-tionija-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (18 mg, 31%):<1>H NMR (400 MHz, metanol-d4) δ 7,82 (s, 1H), 3,80 (td, J = 12,5, 5,1 Hz, 1H), 3,15 (td, J = 12,4, 3,8 Hz, 1H), 2,37 (td, J = 13,0, 11,5, 3,3 Hz, 1H), 2,29 - 2,17 (m, 1H), 2,09 - 1,97 (m, 1H), 1,95 -1,84 (m, 1H), 1,83 - 1,65 (m, 4H), 1,59 (t, J = 8,6 Hz, 2H) ppm;<19>F NMR (376 MHz, metanol-d4) δ -60,52, -80,84 ppm; ESI-MS m/z izračunato 458,08472, pronađeno 459,1 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 0,94 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom HPLC-MS upotrebom Onyx Monolithic C18kolone (50 X 4,6 mm) kupljenom od Phenomenex (pn: CH0-7644) i dualnog gradijentnog toka od 1 - 99% mobilne faze B tokom 2,9 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 12 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 50 µL i temperatura kolone = 25 °C. Kontinuiranom elucijom je dobijen drugi eluent (6R,13S)-17-amino-13-oksido-6,15-bis(trifluorometil)-19-oksa-13-tionija-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (19 mg, 33%):<1>H NMR (400 MHz, metanol-d4) δ 7,81 (s, 1H), 3,75 (td, J= 12,7, 4,0 Hz, 1H), 3,28 - 3,17 (m, 1H), 2,48 - 2,27 (m, 3H), 2,25 - 2,11 (m, 1H), 1,72 (dddd, J= 32,5, 20,0, 13,7, 8,0 Hz, 6H) ppm;<19>F NMR (376 MHz, metanol-d4) δ -60,41, -80,81; ESI-MS m/z izračunato 458,08472, pronađeno 459,0 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 1,09 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom HPLC-MS upotrebom Onyx Monolithic C18kolone (50 X 4,6 mm) kupljenom od Phenomenex (pn: CH0-7644) i dualnog gradijentnog toka od 1 - 99% mobilne faze B tokom 2,9 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 12 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 50 µL i temperatura kolone = 25 °C.
Korak 2: Karakterizacija čvrste forme kristalnog Jedinjenja 19 (čista forma)
[0603] Jedinjenje 19 (15 mg) je rastvoreno u 0,45 mL metanola. Rastvor je ostavljen da stoji na sobnoj temperaturi 2 sata. Formirale su se kocke sa blago neprozirnim površinama.
[0604] Pojedinačni kristali kristalnog Jedinjenja 19 (čista forma) su podizani laganim hlađenjem metanol rastvora sa 80 °C na 25 °C. Podaci rendgenske difrakcije su dobijeni pri 100 K sa Brukerovim difraktometrom opremljenim sa Mo Kαzračenjem (λ=0,71073 Å) i CCD detektorom. Struktura je rešena i dorađena upotrebom SHELX programa (Sheldrick, G.M., Acta Cryst., (2008) A64, 112 -122). Rezultati su sumirani u Tabeli 10 u nastavku.
Tabela 10: Monokristalna elucidacija kristalnog Jedinjenja 19 (čista forma)
Korak 3: Karakterizacija čvrste forme kristalnog Jedinjenja 20 (čista forma)
[0605] Jedinjenje 20 (10 mg) je rastvoreno u 0,3 mL metanola. Rastvor je zagrevan a zatim hlađen na sobnu temperaturu tokom 2 sata. Dobijene su jasne pravougaone prizme.
[0606] Monokristali kristalnog Jedinjenja 20 (čista forma) su podizani laganim hlađenjem metanol rastvora. Podaci rendgenske difrakcije su dobijeni pri 100 K na Brukerovom difraktometru opremljenim sa Mo Kαzračenjem (λ=0,71073 Å) i CCD detektorom. Struktura je rešena i dorađena upotrebom SHELX programa (Sheldrick, G.M., Acta Cryst., (2008) A64, 112-122). Rezultati su sumirani u Tabeli 11 u nastavku.
Tabela 11: Monokristalna elucidacija kristalnog Jedinjenja 20 (čista forma)
Primer 16: (6R)-17-Amino-6,15-bis(trifluorometil)-19-oksa-13-tia-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol, Jedinjenje 21
[0607]
Korak 1: 1-But-3-enilsulfanilsulfonil-4-metil-benzen
[0608]
[0609] Smeša 1-metil-4-sulfidosulfonil-benzen (so kalijuma) (2000 mg, 8,836 mmol) i 4-jodobut-1-en (913 µL, 8,026 mmol) u DMF (20 mL) je mešana na 60 °C tokom 30 minuta, nakon čega je razblažena etrom i isprana vodom (2X) i slanim rastvorom, osušena (MgSO4) i uparena. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0-15% EtOAc u heksanima tokom 15 minuta) čime je dobijen 1-but-3-enilsulfanilsulfonil-4-metil-benzen (1,516 g, 78%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 7,87 - 7,78 (m, 2H), 7,35 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 5,68 (ddt, J = 17,0, 10,4, 6,7 Hz, 1H), 5,06 - 4,98 (m, 2H), 3,05 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 2,46 (s, 3H), 2,40 - 2,29 (m, 2H) ppm. ESI-MS m/z izračunato 242,04352, vreme zadržavanja: 0,6 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (30 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002349) i dualnim gradijentnim tokom od 1 - 99% mobilne faze B tokom 1,0 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,5 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 2: terc-Butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-but-3-enilsulfanil-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat
[0611] terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamatu (57 mg, 0,08750 mmol) u etru (1,15 mL) na -78 °C je dodato n-BuLi (76 µL 2,5 M, 0,1900 mmol) kao rastvor u heksanima i smeša je mešana na -78 °C tokom 15 minuta nakon čega je ukapavanjem dodat rastvor 1-but-3-enilsulfanilsulfonil-4-metil-benzen (28 mg, 0,1155 mmol) u etru (285 µL). Smeša je mešana na -78 °C tokom 15 minuta i na 0 °C tokom 15 minuta. Smeša je razblažena sa 1 M NH4Cl u vodi i etru nakon čega je podeljena. Organski sloj je razdvojen i ispran sa 1 M NaHCO3, osušen (MgSO4) i uparen. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0-10% EtOAc u heksanima tokom 15 minuta) čime je dobijen terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-but-3-enilsulfanil-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat (33 mg, 57%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 9,95 (s, 1H), 9,18 (s, 1H), 7,45 - 7,28 (m, 5H), 5,94 - 5,65 (m, 2H), 5,13 - 4,97 (m, 4H), 4,84 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 4,68 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 3,36 - 3,27 (m, 2H), 2,62 - 2,16 (m, 6H), 1,56 (s, 9H) ppm;<19>F NMR (376 MHz, hloroform-d) δ -63,55, -72,90 ppm. ESI-MS m/z izračunato 658,20483, pronađeno 659,3 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 2,09 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (50 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002350) i dualnim gradijentnim tokom od 50 - 99% mobilne faze B tokom 2,9 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 3: terc-Butil N-[(6R)-6-benziloksi-6,15-bis(trifluorometil)-19-oksa-13-tia-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,9,14,16-heksaen-17-il]karbamat (E/Z smeša)
[0612]
[0613] Rastvor terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-but-3-enilsulfanil-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat (209 mg, 0,3173 mmol) u DCE (15 mL) je ukapavanjem dodat unapred zagrejanom rastvoru na 80 °C benziliden -[1,3-bis(2,4,6-trimetilfenil)imidazolidin-2-iliden]-dihloro-rutenijum;tricikloheksilfosfan (40 mg, 0,04712 mmol) u DCE (15 mL) i dobijena smeša je zagrevana na 80 °C tokom 45 minuta. Nakon toga rastvarač je uparen. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0-5% EtOAc u heksanima tokom 15 minuta) čime je dobijen tercbutil N-[(6R)-6-benziloksi-6,15-bis(trifluorometil)-19-oksa-13-tia-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,9,14(18),15-heksaen-17-il]karbamat (E/Z smeša) (158 mg, 79%). ESI-MS m/z izračunato 630,1735, pronađeno 631,2 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 0,67 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (30 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002349) i dualnim gradijentnim tokom od 50 - 99% mobilne faze B tokom 1,0 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,5 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 4: terc-Butil N-[(6R)-6-benziloksi-6,15-bis(trifluorometil)-19-oksa-13-tia-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat
[0614]
[0615] Smeša terc-butil N-[(6R)-6-benziloksi-6,15-bis(trifluorometil)-19-oksa-13-tia-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,9,14(18),15-heksaen-17-il]karbamat (E/Z smeša) (158 mg, 0,2506 mmol) i Pd/C (50 mg 10 % w/w, 0,04698 mmol) u EtOAc (800 µL) i MeOH (800 µL) je mešana na sobnoj temperaturi pri 200 psi H2u posudi pod pritiskom od nerđajućeg čelika tokom 23 sata. Nakon toga smeša je filtrirana i filtrat je uparen čime je dobijen terc-butil N-[(6R)-6-benziloksi-6,15-bis(trifluorometil)-19-oksa-13-tia-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,14(18),15-pentaen-17-il]karbamat (160 mg, 100%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 9,70 (s, 1H), 9,14 (s, 1H), 7,33 - 7,22 (m, 5H), 4,86 (d, J = 11,2 Hz, 1H), 4,79 (d, J = 11,2 Hz, 1H), 3,06 (ddt, J = 13,8, 9,5, 4,8 Hz, 2H), 2,44 (dt, J = 15,8, 8,5 Hz, 1H), 2,27 (dt, J = 14,5, 7,0 Hz, 1H), 2,04 (s, 1H), 1,97 - 1,84 (m, 1H), 1,78 (dq, J = 13,7, 6,7 Hz, 2H), 1,64 (dt, J = 12,8, 6,7 Hz, 1H), 1,59 - 1,51 (m, 13H) ppm;<19>F NMR (376 MHz, hloroform-d) δ -63,64, -74,38 ppm. ESI-MS m/z izračunato 632,1892, pronađeno 633,3 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 0,7 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (30 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002349) i dualnim gradijentnim tokom od 50 - 99% mobilne faze B tokom 10 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,5 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 5: (6R)-17-Amino-6,15-bis(trifluorometil)-19-oksa-13-tia-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5] nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol, Jedinjenje 21
[0616]
[0617] Rastvoru terc-butil N-[(6R)-6-benziloksi-6,15-bis(trifluorometil)-19-oksa-13-tia-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,14(18),15-pentaen-17-il]karbamat (57 mg, 0,090 mmol) u DCM (2 mL) na 0 °C je dodato BCl3(2 mL 1 M, 2,00 mmol) kao rastvor u DCM i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 22 sata. Nakon toga smeša je uparena i ostatak je rastvoren u EtOAc (70 mL) i metanolu (0,5 mL) i ispran sa 1 M NaHCO3, slanim rastvorom, osušen (MgSO4) i uparen. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0-25% EtOAc u heksanima tokom 15 minuta) čime je dobijen (6R)-17-amino-6,15-bis(trifluorometil)-19-oksa-13-tia-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (61 mg, 62%).<1>H NMR (400 MHz, metanol-d4) δ 7,62 (s, 1H), 3,16 (ddd, J = 13,7, 12,1, 4,2 Hz, 1H), 2,97 (td, J = 13,2, 4,1 Hz, 1H), 2,35 (ddd, J = 14,4, 11,2, 3,3 Hz, 1H), 2,20 (dddt, J = 19,8, 14,3, 10,6, 5,1 Hz, 2H), 1,83 - 1,50 (m, 7H) ppm;<19>F NMR (376 MHz, metanol-d4) δ -64,96, -80,84 ppm. ESI-MS m/z izračunato 442,0898, pronađeno 443,0 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 1,61 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverzno faznom HPLC-MS upotrebom Onyx Monolithic C18kolone (50 X 4,6 mm) kupljenom od Phenomenex (pn: CH0-7644) i dualnim gradijentnim tokom od 1 - 99% mobilne faze B tokom 2,9 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 12 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 50 µL i temperatura kolone = 25 °C.
Primer 17: (6R)-16-amino-6,14-bis(trifluorometil)-18-oksa-12-tia-3,4,17-triazatriciklo[11.3.1.12,5] oktadeka-1(17),2,4,13,15-pentaen-6-ol, Jedinjenje 22
[0618]
Korak 1: terc-Butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-but-3-enilsulfanil-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat
[0619]
[0620] terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamatu (96 mg, 0,1506 mmol) u etru (1,8 mL) na -78 °C je dodato n-BuLi (130 µL 2,5 M, 0,3250 mmol) kao rastvor u heksanima, a zatim je ukapavanjem dodat rastvor 1-but-3-enilsulfanilsulfonil-4-metil-benzen (48 mg, 0,1981 mmol) u etru (500 µL). Smeša je mešana na -78 °C tokom 15 minuta pa na 0 °C tokom 15 minuta. Smeša je razblažena sa 1 M NH4Cl u vodi i etru a zatim podeljena. Organski sloj je razdvojen i ispran sa 1 M NaHCO3, osušen (MgSO4) i uparen. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0-5% EtOAc u heksanima tokom 15 minuta) čime je dobijen tercbutil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-but-3-enilsulfanil-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat (42 mg, 43%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 9,94 (s, 1H), 9,17 (s, 1H), 7,40 - 7,28 (m, 5H), 6,09 - 5,76 (m, 2H), 5,25 (dd, J = 17,0, 1,5 Hz, 1H), 5,22 - 5,18 (m, 1H), 5,07 (dd, J = 17,2, 1,7 Hz, 1H), 5,01 (dd, J = 10,2, 1,6 Hz, 1H), 4,83 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 4,68 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 3,31 (td, J = 7,1, 2,8 Hz, 2H), 3,21 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 2,48 (q, J = 7,0 Hz, 2H), 1,56 (s, 9H) ppm;<19>F NMR (376 MHz, hloroform-d) δ -63,56, -73,16 ppm. ESI-MS m/z izračunato 644,1892, pronađeno 645,2 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 0,7 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (30 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002349) i dualnim gradijentnim tokom od 50 - 99% mobilne faze B tokom 1,0 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,5 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 2: terc-Butil N-[(6R)-6-benziloksi-6,14-bis(trifluorometil)-18-oksa-12-tia-3,4,17-triazatriciklo [11.3.1.12,5]oktadeka-1(17),2,4,8,13,15-heksaen-16-il]karbamat (E/Z smeša)
[0621]
[0622] Rastvor terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-but-3-enilsulfanil-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat (140 mg, 0,2172 mmol) u toluenu (10 mL) je ukapavanjem dodat unapred zagrejanom rastvoru na 120 °C 1,3-biz(o-tolil) -4,5-dihidroimidazol;dihloro-[(2-izopropoksifenil)metilen]rutenijum (19 mg, 0,03330 mmol) u toluenu (10 mL) i smeša je zagrevana na 120 °C tokom 45 minuta. Zatim je dodato još 1,3-biz(otolil)-4,5-dihidroimidazol;dihloro-[(2-izopropoksifenil)metilen]rutenijuma (12 mg, 0,02103 mmol) i zagrevanje je nastavljeno na 120 °C tokom 55 minuta i ovaj postupak je izvršen još jednom precizno. Nakon toga je dodato još 1,3-biz(otolil)-4,5-dihidroimidazol;dihloro-[(2-izopropoksifenil)metilen]rutenijuma (2,7 mg, 0,004733 mmol) i zagrevanje je nastavljeno na 120 °C tokom 60 minuta i ovaj postupak je izvršen još dva puta precizno. Rastvarač je uparen i ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (12 g SiO2, 0-30% rastvora od 10% EtOAc u heksanima od 100% heksana tokom 20 minuta) čime je dobijen terc-butil N-[(6R)-6-benziloksi-6,14-bis(trifluorometil)-18-oksa-12-tia-3,4,17-triazatriciklo[11.3.1.12,5]oktadeka-1(16 ),2,4,8,13(17),14-heksaen-16-il]karbamat (E/Z smeša) (20 mg, 13%). ESI-MS m/z izračunato 616,1579, pronađeno 617,1 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 0,62 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (30 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002349) i dualnim gradijentnim tokom od 50 - 99% mobilne faze B tokom 1,0 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,5 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone= 60 °C.
Korak 3: terc-Butil N-[(6R)-6-benziloksi-6,14-bis(trifluorometil)-18-oksa-12-tia-3,4,17-triazatriciklo [11.3.1.12,5]oktadeka-1(17),2,4,13,15-pentaen-16-il]karbamat
[0623]
[0624] Smeša terc-butil N-[(6R)-6-benziloksi-6,14-bis(trifluorometil)-18-oksa-12-tia-3,4,17-triazatriciklo[11.3.1.12,5]oktadeka-1(16),2,4,8,13(17),14-heksaen-16-il]karbamat (E/Z smeša) (24 mg, 0,03309 mmol) i paladijum na ugljeniku (11 mg 10 % w/w, 0,01034 mmol) u EtOAc (300 µL) i MeOH (300 µL) je mešana na sobnoj temperaturi pod 200 psi H2tokom 40 sati, filtrirana i rastvarač je uparen. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0-30% rastvora od 10% EtOAc u heksanima od 100% heksana tokom 18 minuta) čime je dobijen terc-butil N-[(6R)-6-benziloksi-6,14-bis(trifluorometil)-18-oksa-12-tia-3,4,17-triazatriciklo[11.3.1.12,5]oktadeka-1(16),2,4,13(17),14-pentaen-16-il]karbamat (16 mg, 78%). ESI-MS m/z izračunato 618,1735, pronađeno 619,2 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 0,64 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (30 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002349) i dualnim gradijentnim tokom od 50 - 99% mobilne faze B tokom 1,0 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,5 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 4: (6R)-16-Amino-6,14-bis(trifluorometil)-18-oksa-12-tia-3,4,17-triazatriciklo[11.3.1.12,5] oktadeka-1(17),2,4,13,15-pentaen-6-ol, Jedinjenje 22
[0625]
[0626] Rastvoru terc-butil N-[(6R)-6-benziloksi-6,14-bis(trifluorometil)-18-oksa-12-tia-3,4,17-triazatriciklo[11.3.1.12,5]oktadeka-1(16),2,4,13(17),14-pentaen-16-il]karbamat (16 mg, 0,02587 mmol) u DCM (160 µL) na 0 °C je dodato BCl3(520 µL 1 M, 0,5200 mmol) kao rastvor u DCM i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 24 sata. Nakon toga smeša je uparena i ostatak rastvoren u EtOAc (20 mL) i metanolu (2 mL) i isprana sa 1 M NaHCO3, slanim rastvorom, osušena (MgSO4) i uparena. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (5-25% EtOAc u heksanima tokom 15 minuta) čime je dobijen (6R)-16-amino-6,14-bis(trifluorometil)-18-oksa-12-tia-3,4,17-triazatriciklo[11.3.1.12,5]oktadeka-1(17),2,4,13,15-pentaen-6-ol (4,5 mg, 41%).<1>H NMR (400 MHz, metanol-d4) δ 7,47 (s, 1H), 3,05 (td, J = 13,1, 4,3 Hz, 1H), 2,87 (td, J = 13,6, 13,1, 4,5 Hz, 1H), 2,25 - 2,00 (m, 3H), 1,91 - 1,84 (m, 1H), 1,79 (dq, J = 10,9, 6,3, 5,9 Hz, 2H), 1,50 (p, J = 5,5 Hz, 2H) ppm;<19>F NMR (376 MHz, metanol-d4) δ -64,87, -80,28ppm. ESI-MS m/z izračunato 428,07416, pronađeno 429,0 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 1,49 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom HPLC-MS upotrebom Onyx Monolithic C18kolone (50 X 4,6 mm) kupljenom od Phenomenex (pn: CH0-7644) i dualnim gradijentnim tokom od 1 - 99% mobilne faze B tokom 2,9 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 12 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 50 µL i temperatura kolone = 25 °C.
Primer 18: Priprema (6R)-16-amino-12-oksido-6,14-bis(trifluorometil)-18-oksa-12-tionija-3,4,17-triazatriciklo[11.3.1.12,5]oktadeka-1(17),2,4,13,15-pentaen-6-ola (enantiomer 1), Jedinjenje 23, i (6R)-16-amino-12-oksido-6,14-bis(trifluorometil)-18-oksa-12-tionija-3,4,17-triazatriciklo [11.3.1.12,5]oktadeka-1(17),2,4,13,15-pentaen-6-ola (enantiomer 2), Jedinjenje 24
[0627]
Korak 1: (6R)-16-Amino-12-oksido-6,14-bis(trifluorometil)-18-oksa-12-tionija-3,4,17-triazatriciklo[11.3.1.12,5]oktadeka-1(17),2,4,13,15-pentaen-6-ol (enantiomer 1), Jedinjenje 23, i (6R)-16-amino-12-oksido-6,14-bis(trifluorometil)-18-oksa-12-tionija-3,4,17-triazatriciklo [11.3.1.12,5]oktadeka-1(17),2,4,13,15-pentaen-6-ol (enantiomer 2), Jedinjenje 24
[0628]
[0629] Rastvoru (6R)-16-amino-6,14-bis(trifluorometil)-18-oksa-12-tia-3,4,17-triazatriciklo[11.3.1.12,5]oktadeka-1(17),2,4,13,15-pentaen-6-ol (3,7 mg, 0,0086 mmol) u EtOAc (222,0 µL) ohlađenom u ledenoj kadi je dodata 3-hlorobenzenkarboperoksoična kiselina (44 µL 0,11 M, 0,0048 mmol) kao rastvor u EtOAc i smeša je mešana na 0 °C tokom 15 minuta. Nakon toga je dodata 3-hlorobenzenkarboperoksoična kiselina (20 µL 0,11 M, 0,0022 mmol) kao rastvor u EtOAc i smeša je mešana na 0 °C tokom dodatnih 15 minuta. Zatim je dodato još 3-hlorobenzenkarboperoksoične kiseline (8 µL 0,11 M, 0,00088 mmol) kao rastvora u EtOAc uz mešanje smeše na 0 °C tokom 15 minuta. Smeša je zatim razblažena sa EtOAc (30 mL) i MeOH (1 mL) i isprana sa 5% Na2S2O3, 1 M NaHCO3, osušena (MgSO4) i uparena. Ostatak smeše je rastvoren u 1:1 MeOH/acetonitrilu i podvrgnut je preparativnoj HPLC eluiraju ći sa 30 - 99% acetonitrila naspram 5 mM HCl u vodi pri 50 mL/min tokom 14 minuta kroz Luna 5 µM C18100Å 75X30 mm kolonu čime je dobijen prvi eluirajući izomer kao čvrsta supstanca belel boje (6R)-16-amino-12-oksido-6,14-bis(trifluorometil)-18-oksa-12-tionija-3,4,17-triazatriciklo[11.3.1.12,5]oktadeka-1(17),2,4,13,1 5-pentaen-6-ol (enantiomer 1) (2 mg, 52%).<1>H NMR (400 MHz, metanol-d4) δ 7,77 (s, 1H), 3,83 (ddd, J = 13,1, 11,3, 5,5 Hz, 1H), 3,06 (ddd, J = 13,2, 11,1, 3,8 Hz, 1H), 2,38 (dt, J = 15,3, 7,8 Hz, 2H), 2,14 - 2,04 (m, 1H), 2,01 - 1,87 (m, 3H), 1,85 - 1,67 (m, 2H) ppm;<19>F NMR (376 MHz, metanol-d4) δ -60,67, -80,30 ppm. ESI-MS m/z izračunato 444,0691, pronađeno 445,0 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 1,0 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom HPLC-MS upotrebom Onyx Monolithic C18kolone (50 X 4,6 mm) kupljenom od Phenomenex (pn: CH0-7644) i dualnim gradijentnim tokom od 1 - 99% mobilne faze B tokom 2,9 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 12 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 50 µL i temperatura kolone = 25 °C.
[0630] Kontinuiranom elucijom je kao čvrsta supstanca bele boje dobijen (6R)-16-amino-12-oksido-6,14-bis(trifluorometil)-18-oksa-12-tionija-3,4,17-triazatriciklo[11.3.1.12,5]oktadeka-1(17),2,4,13,15-pentaen-6 -ol (enantiomer 2) (1,6 mg, 42%).<1>H NMR (400 MHz, metanol-d4) δ 7,76 (s, 1H), 3,64 (td, J = 12,5, 5,0 Hz, 1H), 3,22 (dd, J = 13,1, 3,8 Hz, 1H), 2,43 (dp, J = 9,1, 6,4, 4,3 Hz, 1H), 2,28 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 2,09 -1,87 (m, 2H), 1,75 (ddt, J = 34,2, 7,8, 3,7 Hz, 3H) ppm;<19>F NMR (376 MHz, metanol-d4) δ -60,71, -80,20 ppm. ESI-MS m/z izračunato 444,0691, pronađeno 445,0 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 0,81 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom HPLC-MS upotrebom Onyx Monolithic C18kolone (50 X 4,6 mm) kupljenom od Phenomenex (pn: CH0-7644) i dualnim gradijentnim tokom od 1 - 99% mobilne faze B tokom 2,9 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 12 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 50 µL i temperatura kolone = 25 °C.
Primer 19: Priprema (6R,12R)-17-amino-6-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-10-ona (so hidrohlorida), Jedinjenje 25, i (6R,12R)-17-amino-6-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-9-ona (so hidrohlorida), Jedinjenje 26
[0631]
Korak 1: terc-Butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-9-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]-N-tercbutoksikarbonil-karbamat i terc-butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-10-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (smeša regioizomernih dijastereomera)
[0633] Rastvoru terc-butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,9, 14, 16-heksaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (E/Z smeša) (190 mg, 0,2607 mmol) u THF (3 mL) na 0 °C je ukapavanjem dodat kompleks boran dimetilsulfida (200 µL 2 M, 0,4000 mmol) i dobijena smeša je ostavljena da se meša 15 minuta na 0 °C. Reakciji je omogućeno da se zagreje na sobnu temperaturu i mešana je sat vremena. Dodat je dodatni kompleks boran dimetilsulfida (200 µL 2 M, 0,4000 mmol) i mešano je na sobnoj temperaturi dodatnih 30 minuta. Reakcija je ohlađena do 0 °C nakon čega je ugašena vodenim NaOH (1,5 mL 1 M, 1,500 mmol) a zatim dodavanjem vodonik peroksida (600 µL 30 % w/v, 5,292 mmol). Dobijena smeša je ostavljena da se meša 30 minuta na sobnoj temperaturi nakon čega je ekstraktovana etil acetatom (2 X 80 mL). Organski slojevi su spojeni, isprani slanim rastvorom (80 mL), osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani. Sirov ostatak je zatim prečišćen hromatografijom na silika gelu (80 grama kolona) upotrebom gradijenta od 100% heksana do 100% etil acetata da bi se sakupila ~1:1 nerazdvojiva sme ša regioizomernih dijastereomera terc-butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-9-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat i terc-butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-10-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (smeša regioizomernih dijastereomera) (128 mg, 66%). ESI-MS m/z izračunato 746,275, pronađeno 747,4 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 1,89 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (50 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002350) i dualnim gradijentnim tokom od 30 - 99% mobilne faze B tokom 2,9 minuta. Mobilna faza A = voda (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 2: terc-Butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-12-metil-9-okso-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]-N-tercbutoksikarbonil-karbamat i terc-butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-12-metil-10-okso-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat
[0634]
[0635] Rastvoru ~1:1 smeši regioizomernih dijastereomera, terc-butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-9-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2, 4,14,16-pentaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat i terc-butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-10-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2, 4,14,16-pentaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (smeša regioizomernih dijastereomera) (106 mg, 0,142 mmol) u dihlorometanu (2 mL) je dodat Dess-Martin Periodinan (92 mg, 0,2169 mmol) na 0 °C i smeša je mešana sat vremena omogućujući reakciji da se zagreje do sobne temperature. Reakcija je razblažena etrom (10 mL) i filtrirana kroz celit. Filtrat je ispran zasićenim vodenim natrijum bikarbonatom i slanim rastvorom, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan. Dobijeni materijal je rastvoren u 2 mL DMSO, filtriran i filtrat je prečišćen reverzno faznom HPLC upotrebom gradijenta od 50% do 99% acetonitrila u vodi (+5 mM HCl) čime je kao nerazdvojiva ~1:1 smeša regioizomera dobijen terc-butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-12-metil-9-okso-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat i tercbutil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-12-metil-10-okso-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (44 mg, 42%). ESI-MS m/z izračunato 744,2594, pronađeno 645,2 (M-Boc+1)<+>; vreme zadržavanja: 2,05 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (50 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002350) i dualnim gradijentnim tokom od 30 - 99% mobilne faze B tokom 2,9 minuta. Mobilna faza A = voda (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 3: (6R,12R)-17-Amino-6-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-10-on, Jedinjenje 25, i (6R,12R)-17-amino-6-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-9-on, Jedinjenje 26
[0636]
[0637] Rastvoru ~1:1 smeši regioizomera, terc-butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-12-metil-9-okso-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat i terc-butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-12-metil-10-okso-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (34 mg, 0,0457 mmol) u etanolu (5 mL) je dodato Pd/C (116 mg 10 % w/w, 0,1090 mmol) u boci opremljenoj sa vodonik balonom upotrebom trosmernog adaptera. Materijal je podvrgnut vakuumu i ponovo napunjen azot gasom tri puta nakon čega je podvrgnut vakuumu. Boca je napunjena vodonik gasom a zatim je smeša mešana 15 sati. Posuda je podvrgnuta vakuumu i ponovo napunjena azot gasom tri puta nakon čega je razblažena etil acetatom i filtrirana preko celita. Filtrat je koncentrovan i osušen pod redukovanim pritiskom. Dobijeni ostatak je rastvoren u TFA (1,5 mL, 19,47 mmol) i dihlorometanu (4,5 mL) (unapred pripremljen rastvor 1:3 TFA/dihlorometan) i reakcija je me šana na sobnoj temperaturi približno sat vremena. Rastvarači su uklonjeni rotirajućim uparavanjem i ostatak je rastvoren u DMSO (1 mL) nakon čega je prečišćen reverznom fazom HPLC upotrebom gradijenta od 30% do 99% acetonitrila u vodi (+5 mM HCl) čime je dobijen prvi eluirajući regioizomer (baziran na H NMR AB obrascu -O CH (CH3)-CH2-CO) kao (6R,12R)-17-amino-6-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-10-on (so hidrohlorida) (2,3 mg, 41%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 7,61 (s, 1H), 6,92 (dq, J = 16,0, 6,9 Hz, 1H), 6,13 (dq, J = 15,8, 1,7 Hz, 1H), 2,67 (t, J = 6,7 Hz, 2H), 2,46 (ddd, J = 15,1, 10,2, 5,7 Hz, 1H), 2,13 (ddd, J = 14,7, 10,3, 5,0 Hz, 1H), 1,90 (dd, J = 6,9, 1,6 Hz, 3H), 1,83 (dd, J = 10,4, 4,8 Hz, 2H), 1,71 - 1,42 (m, 2H) ppm. ESI-MS m/z izračunato 454,10757, pronađeno 455,1 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 1,34 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (50 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002350) i dualnim gradijentnim tokom od 1 - 99% mobilne faze B tokom 2,9 minuta. Mobilna faza A = H2O (0.05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C i potonji eluirajući regioizomer kao (6R,12R)-17-amino-6-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-9-on (so hidrohlorida) (3,0 mg, 54%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 7,41 (s, 1H), 6,27 (s, 1H), 5,42 - 5,35 (m, 1H), 2,99 (ddd, J = 18,3, 11,2, 2,1 Hz, 1H), 2,89 - 2,80 (m, 1H), 2,79 - 2,63 (m, 2H), 2,52 (ddd, J = 18,1, 7,2, 2,2 Hz, 1H), 2,35 -2,26 (m, 1H), 2,13 - 2,01 (m, 1H), 1,99 - 1,89 (m, 1H), 1,42 (d, J = 6,4 Hz, 3H) ppm. ESI-MS m/z izračunato 454,10757, pronađeno 455,0 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 1,7 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (50 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002350) i dualnim gradijentnim tokom od 1 - 99% mobilne faze B tokom 2,9 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Primer 20: Priprema 20-amino-6,18-bis(trifluorometil)-16,23-dioksa-3,4,21-triazatetraciklo[15.3.1.12,5.111,15]trikoza-1(21),2,4,11(22),12,14,17,19-oktaen-6-ola (enantiomer 1), Jedinjenje 27, 20-amino-6,18-bis(trifluorometil)-16,23-dioksa-3,4,21-triazatetraciklo[15.3.1.12,5.111,15]trikoza-1(21),2,4,11(22),12,14,17,19-oktaen-6-ola (enantiomer 2), Jedinjenje 28, 19-amino-9-metil-6,17-bis(trifluorometil)-15,22-dioksa-3,4,20-triazatetraciklo[14.3.1.12,5.110,14]dokoza-1(20),2,4,10(21),11,13,16,18-oktaen-6-ola
(dijastereomerni par 1), Jedinjenje 29 i 19-amino-9-metil-6,17-bis(trifluorometil)-15,22-dioksa-3,4,20-triazatetraciklo[14.3.1.12,5.110,14]dokoza-1(20),2,4,10(21),11,13,16,18-oktaen-6-ola (dijastereomerni par 2), Jedinjenje 30
[0638]
Korak 1: 2-[1-Benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-5-[6-(3-jodofenoksi)-3-nitro-5-(trifluorometil)-2-piridil]-1,3,4-oksadiazol
[0639]
[0640] Reagens 3-jodofenol (30 mg, 0,1364 mmol) je dodat smeši [6-[5-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-5-nitro-3-(trifluorometil)-2-piridil]trifluorometansulfonat (69 mg, 0,1061 mmol) i Cs2CO3(35 mg, 0,1074 mmol) u DMF (1,4 mL) i mešana je na 0 °C tokom sat vremena a zatim na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Sme ša je razblažena etrom, isprana vodom (2X), slanim rastvorom, osušena (MgSO4) i uparena. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (12 g SiO2, 0-10% EtOAc u heksanima tokom 20 minuta) čime je dobijen 2-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-5-[6-(3-jodofenoksi)-3-nitro-5-(trifluorometil)-2-piridil]-1,3,4-oksadiazol (51 mg, 67%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 8,76 (s, 1H), 7,67 - 7,56 (m, 2H), 7,40 - 7,28 (m, 5H), 7,23 (ddd, J = 8,3, 2,3, 1,0 Hz, 1H), 7,12 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 5,71 (ddt, J = 16,7, 10,1, 6,3 Hz, 1H), 5,00 (dd, J = 17,1, 1,6 Hz, 1H), 4,94 (dd, J = 10,3, 1,6 Hz, 1H), 4,77 (d, J = 10,6 Hz, 1H), 4,61 (d, J = 10,6 Hz, 1H), 2,55 - 2,25 (m, 3H), 2,24 - 2,11 (m, 1H) ppm;<19>F NMR (376 MHz, hloroform-d) δ -64,07, -73,02 ppm. ESI-MS m/z izračunato 720,03046, pronađeno 721,0 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 0,56 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (30 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002349) i dualnim gradijentnim tokom od 50 - 99% mobilne faze B tokom 1,0 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,5 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 2: (9E)-6-(Benziloksi)-20-nitro-6,18-bis(trifluorometil)-16,23-dioksa-3,4,21-triazatetraciklo[15.3.1.12,5.111,15]trikoza-1(21),2,4,9,11(22),12,14,17,19-nonaen i 6-(benziloksi)-9-metiliden-19-nitro-6,17-bis(trifluorometil)-15,22-dioksa-3,4,20-triazatetraciklo[14.3.1.12,5.110,14]dokoza-1(20),2,4,10(21),11,13,16,18-oktaen (nerazdvojiva smeša izomera)
[0641]
[0642] Kroz smešu 2-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-5-[6-(3-jodofenoksi)-3-nitro-5-(trifluorometil)-2-piridil]-1,3,4-oksadiazol (126 mg, 0,1749 mmol), paladijum (II) acetat (10 mg, 0,04454 mmol), tris-o-tolilfosfan (27 mg, 0,08871 mmol) i trietilamin (51 µL, 0,3659 mmol) u acetonitrilu (6,3 mL) je propuštan N2tokom 1 minuta nakon čega je zagrevana na 100 °C tokom sat vremena. Smeša je razblažena etrom i isprana sa 1 M NH4Cl, 1 M NaHCO3, slanim rastvorom a zatim osušena (MgSO4) i uparena. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (24 g SiO2, 0-50% rastvora (20% EtOAc u heksanima) prema heksanima tokom 20 minuta) čime je kao 2:1 nerazdvojiva smeša izomera dobijen (9E)-6-(benziloksi)-20-nitro-6,18-bis(trifluorometil)-16,23-dioksa-3,4,21-triazatetraciklo[15.3.1.12,5.111,15]trikoza-1(21),2,4,9,11(22),12,14,17,19-nonaen (69 mg, 66% čistoće, 44%). ESI-MS m/z izračunato 592,11816, pronađeno 593,1 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 0,55 minuta i 6-(benziloksi)-9-metiliden-19-nitro-6,17-bis(trifluorometil)-15,22-dioksa-3,4,20-triazatetraciklo[14.3.1.12,5.110,14]dokoza-1(20),2,4,10(21),11,13,16,18-oktaen (69 mg, 33% čistoće, 22%). ESI-MS m/z izračunato 592,11816, pronađeno 593,1 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 0,54 minuta. Konačne čistoće su utvrđene reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (30 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002349) i dualnim gradijentnim tokom od 50 - 99% mobilne faze B tokom 1,0 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,5 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 3: 20-Amino-6,18-bis(trifluorometil)-16,23-dioksa-3,4,21-triazatetraciklo [15.3.1.12,5.111,15]trikoza-1(21),2,4,11(22),12,14,17,19-oktaen-6-ol (enantiomer 1), Jedinjenje 27, 20-amino-6,18-bis(trifluorometil)-16,23-dioksa-3,4,21-triazatetraciklo [15.3.1.12,5.111,15]trikoza-1(21),2,4,11(22),12,14,17,19-oktaen-6-ol (enantiomer 2), Jedinjenje 28, 19-amino-9-metil-6,17-bis(trifluorometil)-15,22-dioksa-3,4,20-triazatetraciklo [14.3.1.12,5.110,14]dokoza-1(20),2,4,10(21),11,13,16,18-oktaen-6-ol (dijastereomerni par 1), Jedinjenje 29 i 19-amino-9-metil-6,17-bis(trifluorometil)-15,22-dioksa-3,4,20-triazatetraciklo [14.3.1.12,5.110,14]dokoza-1(20),2,4,10(21),11,13,16,18-oktaen-6-ol (dijastereomerni par 2), Jedinjenje 30
[0643]
[0644] 2:1 nerazdvojiva smeša izomera, (9iE)-6-(benziloksi)-20-nitro-6,18-bis(trifluorometil)-16,23-dioksa-3,4,21-triazatetraciklo[15.3.1.12,5.111,15]trikoza-1(21),2,4,9,11(22),12,14,17,19-nonaen (47 mg, 66% čistoće, 0,052 mmol) i 6-(benziloksi)-9-metiliden-19-nitro-6,17-bis(trifluorometil)-15,22-dioksa-3,4,20triazatetraciklo[14.3.1.12,5.110,14]dokoza-1(20),2,4,10(21),11,13,16,18-oktaen (23 mg, 33% čistoće, 0,013 mmol) i Pd/C (38 mg 10 % w/w, 0,03571 mmol) u EtOAc (1,3 mL) je mešana na sobnoj temperaturi pod 200 psi H2u posudi pod pritiskom od nerđajućeg čelika tokom 16 sati. Nakon toga smeša je filtrirana i filtrat je uparen. Ostatak je mešan sa gvožđem (50 mg, 0,8953 mmol), THF (0,5 mL), EtOH (0,25 mL) i HCl (125 µL 4 M, 0,5000 mmol) kao rastvorem u vodi na 60 °C tokom 30 minuta nakon čega je razblažen sa EtOAc, filtriran i filtrat je ispran sa 1 M NaHCO3, osušen (MgSO4) i uparen. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (24 g SiO2, 5-40% rastvora (20% EtOAc u heksanima) prema heksanima tokom 20 minuta) čime je dobijena, eluirajuća prva, nerazdvojiva smeša 6-(benziloksi)-6,18-bis(trifluorometil)-16,23-dioksa-3,4,21-triazatetraciklo[15.3.1.12,5.111,15]trikoza-1(21),2,4,11(22),12,14, 17,19-oktaen-20-amin (30 mg, 92%) i prvi dijastereomerni par izomera kao 6 -(benziloksi)-9-metil-6,17-bis(trifluorometil)-15,22-dioksa-3,4,20-triazatetraciklo[14.3.1.12,5.110,14]dokoza-1(20),2,4,10(21),11,13, 16,18-oktaen-19-amin (dijastereomerni par 1) u neutvrđenom odnosu. Kontinuiranom elucijom je dobijen drugi dijastereomerni par izomera kao 6-(benziloksi)-9-metil-6,17-bis(trifluorometil)-15,22-dioksa-3,4,20-triazatetraciklo[14.3.1.12,5.110,14]dokoza-1(20),2,4,10(21),11,13,16,18-oktaen-19-amin (dijastereomerni par 2) (10 mg, 34%).
[0645] Nerazdvojiva smeša 6-(benziloksi)-6,18-bis(trifluorometil)-16,23-dioksa-3,4,21-triazatetraciklo[15.3.1.12,5.111,15]trikoza-1(21),2,4,11(22),12,14,17,19-oktaen-20-amin i prvi dijastereomerni par izomera 6-(benziloksi)-9-metil-6,17-bis(trifluorometil)-15,22-dioksa-3,4,20-triazatetraciklo[14.3.1.12,5.110,14]dokoza-1(20),2,4,10(21),11,13,16,18-oktaen-19-amin (dijastereomerni par 1) je rastvoren u TFA (0,3 mL) i vodi (0,015 mL) i zagrevan na 60 °C tokom sat vremena, nakon čega je razblažen sa EtOAc i ispran sa 1 M NaHCO3, osušen i uparen. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (12 g SiO2, 5-40% EtOAc u heksanima tokom 20 minuta) čime je dobijen prvi, racemski 20-amino-6,18-bis(trifluorometil)-16,23-dioksa-3,4,21-triazatetraciklo[15.3.1.12,5.111,15]trikoza-1(21),2,4,1 1(22),12,14,17,19-oktaen-6-ol, čija separacija u pojedinačne enantiomere je opisana u nastavku. ESI-MS m/z izračunato 474,11267, pronađeno 475,2 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 0,71 minuta. Kontinuiranom elucijom je dobijen prvi dijastereomerni par izomera 19-amino -9-metil-6,17-bis(trifluorometil)-15,22-dioksa-3,4,20-triazatetraciklo[14.3.1.12,5.110,14]dokoza-1(20),2,4,10(21),11,13,16,18-oktaen-6-ol (dijastereomerni par 1) (1,4 mg, 6%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 7,50 (s, 1H), 7,32 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,23 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,09 - 7,00 (m, 2H), 5,17 (s, 2H), 3,74 - 3,59 (m, 1H), 2,88 - 2,69 (m, 1H), 2,26 - 1,94 (m, 3H), 1,49 - 1,35 (m, 1H), 1,25 (d, J = 7,0 Hz, 3H) ppm;<19>F NMR (376 MHz, hloroform-d) δ -63,36, -80,78 ppm. ESI-MS m/z izračunato 474,11267, pronađeno 475,1 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 1,54 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom HPLC-MS upotrebom Onyx Monolithic C18kolone (50 X 4,6 mm) kupljenom od Phenomenex (pn: CH0-7644) i dualnim gradijentnim tokom od 1 - 99% mobilne faze B tokom 2,9 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 12 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 50 µL i temperatura kolone = 25 °C.
[0646] Prethodno dobijena racemska smeša 20-amino-6,18-bis(trifluorometil)-16,23-dioksa-3,4,21-triazatetraciklo[15.3.1.12,5.111,15]trikoza-1(21),2,4,11(22),12,14,17,19-oktaen-6-ol je rastvorena u 1:1 acetonitril/MeOH i prečišćena preparativnom SFC eluirajući gradijent od 5 mM NH3u metanolu u CO2(5-15% tokom 10 minuta pri 60 mL/min) preko 21,2 X 250mm AS3 kolone, 5µm čestica, čime je kao prvi enantiomer za eluiranje dobijen 20-amino-6,18-bis(trifluorometil)-16,23-dioksa-3,4,21-triazatetraciklo[15.3.1.12,5.111,15]trikoza-1(21),2,4,11(22),12,14,17,19-oktaen-6-ol (enantiomer 1) (3,5 mg, 14%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 7,51 (s, 1H), 7,48 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,31 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,06 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 6,98 (dd, J = 8,1, 2,3 Hz, 1H), 5,45 (s, 2H), 3,71 (s, 1H), 2,82 (ddd, J = 14,1, 6,7, 3,8 Hz, 1H), 2,70 (ddd, J = 13,7, 8,7, 4,0 Hz, 1H), 2,29 (ddd, J = 14,3, 12,6, 5,1 Hz, 1H), 2,07 - 2,03 (m, 1H), 2,00 - 1,92 (m, 1H), 1,86 - 1,66 (m, 3H) ppm;<19>F NMR (376 MHz, hloroform-d) δ -63,64, -78,87 ppm. ESI-MS m/z izračunato 474,11267, pronađeno 475,2 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 1,57 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom HPLC-MS upotrebom Onyx Monolithic C18kolone (50 X 4,6 mm) kupljenom od Phenomenex (pn: CH0-7644) i dualnim gradijentnim tokom od 1 - 99% mobilne faze B tokom 2,9 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 12 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 50 µL i temperatura kolone = 25 °C i kao drugi enantiomer za eluiranje, 20-amino-6,18-bis(trifluorometil)-16,23-dioksa-3,4,21-triazatetraciklo[15.3.1.12,5.111,15]trikoza-1(21),2,4,11(22),12,14,17,19-oktaen-6-ol (enantiomer 2) (2,9 mg, 12%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 7,52 (s, 1H), 7,48 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,31 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,06 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,02 - 6,95 (m, 1H), 5,45 (s, 2H), 3,69 (d, J = 6,2 Hz, 1H), 2,82 (ddd, J = 14,0, 6,7, 3,8 Hz, 1H), 2,70 (ddd, J = 13,7, 8,7, 4,0 Hz, 1H), 2,29 (td, J = 13,4, 12,9, 5,1 Hz, 1H), 2,08 - 1,91 (m, 3H), 1,87 - 1,64 (m, 2H) ppm;<19>F NMR (376 MHz, hloroform-d) δ -63,64, -78,87 ppm. ESI-MS m/z izračunato 474,11267, pronađeno 475,2 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 1,58 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reveznom fazom HPLC-MS upotrebom Onyx Monolithic C18kolone (50 X 4,6 mm) kupljenom od Phenomenex (pn: CH0-7644) i dualnim gradijentnim tokom od 1 - 99% mobilne faze B tokom 2,9 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 12 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 50 µL i temperatura kolone = 25 °C.
[0647] Prethodno opisani drugi dijastereomerni par izomera 6 -(benziloksi)-9-metil-6,17-bis(trifluorometil)-15,22-dioksa-3,4,20-triazatetraciklo[14.3.1.12,5.110,14]dokoza-1(20),2,4,10(21),11,13, 16,18-oktaen-19-amin (dijastereomerni par 2) je rastvoren u TFA (0,3 mL) i vodi (0,015 mL) i zagrevan na 60 C tokom sat vremena a zatim je razblažen sa EtOAc i ispran sa 1 M NaHCO3, osušen i uparen. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (12 g SiO2, 5-40% EtOAc u heksanima tokom 20 minuta) čime je dobijen 19-amino-9-metil-6,17-bis(trifluorometil)-15,22-dioksa-3,4,20-triazatetraciklo[14.3.1.12,5.110,14]dokoza-1(20),2,4,10(21),11,13,16,18-oktaen-6-ol (dijastereomerni par 2) (2,6 mg, 10%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 7,49 (s, 1H), 7,34 (t, J= 2,2 Hz, 1H), 7,32 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,07 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,01 (dd, J = 8,1, 2,2 Hz, 1H), 5,16 (s, 2H), 3,54 (s, 1H), 2,93 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 2,25 (t, J = 13,4 Hz, 1H), 2,08 (td, J = 13,3, 4,6 Hz, 1H), 1,98 (dt, J = 13,0, 10,7 Hz, 1H), 1,81 (t, J = 13,2 Hz, 1H), 1,33 (d, J = 7,1 Hz, 3H) ppm;<19>F NMR (376 MHz, hloroform-d) δ -63,34, -77,95 ppm. ESI-MS m/z izračunato 474,11267, pronađeno 475,1 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 1,54 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom HPLC-MS upotrebom Onyx Monolithic C18kolone (50 X 4,6 mm) kupljenom od Phenomenex (pn: CH0-7644) i dualnim gradijentnim tokom od 1 - 99% mobilne faze B tokom 2,9 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 12 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 50 µL i temperatura kolone = 25 °C.
Primer 21: Priprema 20-amino-13-fluoro-6,18-bis(trifluorometil)-16,23-dioksa-3,4,21-triazatetraciklo[15.3.1.12,5.111,15]trikoza-1(21),2,4,11(22),12,14,17,19-oktaen-6-ola (enantiomer 1), Jedinjenje 31 i 20-amino-13-fluoro-6,18-bis(trifluorometil)-16,23-dioksa-3,4,21-triazatetraciklo[15.3.1.12,5.111,15]trikoza-1(21),2,4,11(22),12,14,17,19-oktaen-6-ola (enantiomer 2), Jedinjenje 32
[0648]
Korak 1: 2-[1-Benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-5-[6-(3-fluoro-5-jodo-fenoksi)-3-nitro-5-(trifluorometil)-2-piridil]-1,3,4-oksadiazol
[0650] Reagens Cs2CO3(127 mg, 0,3898 mmol) je dodat smeši [6-[5-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-5-nitro-3-(trifluorometil)-2-piridil] trifluorometansulfonat (230 mg, 0,3536 mmol) i 3-fluoro-5-jodo-fenol (134 mg, 0,565 mmol) u DMF (4 mL) i mešana je na 0 °C tokom sat vremena. Smeša je razblažena etrom, isprana vodom (2X), slanim rastvorom, osušena (MgSO4) i uparena. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (12 g SiO2, 0-30% rastvora (20% EtOAc u heksanima) prema heksanima tokom 15 minuta) čime je dobijen 2-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-5-[6-(3-fluoro-5-jodo-fenoksi)-3-nitro-5-(trifluorometil)-2-piridil]-1,3,4-oksadiazol (180 mg, 55%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 8,76 (s, 1H), 7,43 - 7,41 (m, 1H), 7,39 (dd, J = 7,7, 1,6 Hz, 1H), 7,36 - 7,29 (m, 5H), 7,01 (dt, J = 8,7, 2,3 Hz, 1H), 5,73 (ddd, J = 17,0, 10,4, 6,4 Hz, 1H), 5,01 (d, J = 17,4 Hz, 1H), 4,95 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 4,80 (d, J = 10,6 Hz, 1H), 4,62 (d, J = 10,6 Hz, 1H), 2,54 - 2,28 (m, 3H), 2,20 (dt, J = 17,3, 7,9 Hz, 1H) ppm;<19>F NMR (376 MHz, hloroform-d) δ -63,97, -73,02, -108,26 ppm. ESI-MS m/z izračunato 738,021, pronađeno 739,0 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 0,6 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (30 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002349) i dualnim gradijentnim tokom od 50 - 99% mobilne faze B tokom 1,0 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,5 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 2: 6-(Benziloksi)-13-fluoro-20-nitro-6,18-bis(trifluorometil)-16,23-dioksa-3,4,21-triazatetraciklo[15.3.1.12,5.111,15]trikoza-1(21),2,4,9,11(22),12,14,17,19-nonaen (E/Z smeša)
[0651]
[0652] Kroz smešu 2-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-5-[6-(3-fluoro-5-jodo-fenoksi)-3-nitro-5-(trifluorometil)-2-piridil]-1,3,4-oksadiazol (180 mg, 0,2438 mmol), paladijum (II) acetat (10 mg, 0,04454 mmol), tris-o-tolilfosfan (27 mg, 0,08871 mmol) i trietilamin (51 µL, 0,3659 mmol) u acetonitrilu (6,3 mL) je propuštan N2tokom 1 minuta a zatim zagrevana do 100 °C tokom sat vremena. Smeša je razblažena etrom i isprana sa 1 M NH4Cl, 1 M NaHCO3, slanim rastvorom a zatim osušena (MgSO4) i uparena. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (24 g SiO2, 0-50% rastvora (20% EtOAc in hexanes) prema heksanima tokom 20 minuta) čime je dobijen 6-(benziloksi)-13-fluoro-20-nitro-6,18-bis(trifluorometil)-16,23-dioksa-3,4,21-triazatetraciklo[15.3.1.12,5.111,15]trikoza-1(21),2,4,9,11(22),12,1 4,17,19-nonaen (E/Z smeša) (35 mg, 18%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 8,79 (s, 1H), 7,35 - 7,27 (m, 6H), 6,89 - 6,77 (m, 2H), 6,50 (d, J = 11,5 Hz, 1H), 5,79 - 5,65 (m, 1H), 4,90 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 4,67 (d, J = 11,0 Hz, 1H), 2,88 - 2,71 (m, 1H), 2,66 - 2,52 (m, 1H), 2,39 (td, J = 13,5, 3,2 Hz, 1H), 2,34 - 2,14 (m, 1H) ppm;<19>F NMR (376 MHz, hloroform-d) δ -63,53, -63,87, -73,43, -73,64, -110,37, -110,61 ppm. ESI-MS m/z izračunato 610,1087, pronađeno 611,2 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 0,55 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (30 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002349) i dualnim gradijentnim tokom od 50 - 99% mobilne faze B tokom 1,0 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,5 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 3: 20-Amino-13-fluoro-6,18-bis(trifluorometil)-16,23-dioksa-3,4,21-triazatetraciklo[15.3.1.12,5.111,15]trikoza-1(21),2,4,11(22),12,14,17,19-oktaen-6-ol (enantiomer 1), Jedinjenje 31 i 20-amino-13-fluoro-6,18-bis(trifluorometil)-16,23-dioksa-3,4,21-triazatetraciklo[15.3.1.12,5.111,15]trikoza-1(21),2,4,11(22),12,14,17,19-oktaen-6-ol (enantiomer 2), Jedinjenje 32
[0653]
[0654] Prvi deo: Smeša 6-(benziloksi)-13-fluoro-20-nitro-6,18-bis(trifluorometil)-16,23-dioksa-3,4,21-triazatetraciklo[15.3.1.12,5.111,15]trikoza-1(21),2,4,9,11(22),12,14,17,19-nonaen (E/Z smeša) (35 mg, 0,05734 mmol) i Pd/C (15 mg 10 % w/w, 0,01410 mmol) u AcOH (400 µL), MeOH (400 µL) i EtOAc (800 µL) je mešana na sobnoj temperaturi pod 200 psi H2u posudi pod pritiskom od nerđajućeg čelika tokom 20 sati. Nakon toga smeša je filtrirana i filtrat je uparen čime je dobijen 6-(benziloksi)-13-fluoro-6,18-bis(trifluorometil)-16,23-dioksa-3,4,21-triazatetraciklo[15.3.1.12,5.111,15]trikoza-1(21),2,4,11(22),12,14, 17,19-oktaen-20-amin koji je uzet direktno za sledeću reakciju. ESI-MS m/z izračunato 582,1502, pronađeno 583,2 (M+1)<+>; vreme zadržavanjqa: 0,58 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (30 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002349) i dualnim gradijentnim tokom od 50 - 99% mobilne faze B tokom 1,0 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,5 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
[0655] Drugi deo: 6-(Benziloksi)-13-fluoro-6,18-bis(trifluorometil)-16,23-dioksa-3,4,21-triazatetraciklo[15.3.1.12,5.111,15]trikoza-1(21),2,4,11(22),12,14,17,19-oktaen-20-amin je rastvoren u TFA (300 µL) i vodi (15 µL) i zagrevan na 60 °C tokom sat vremena nakon čega je razblažen sa EtOAc i ispran sa 1 M NaHCO3, osušen i uparen. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (12 g SiO2, 5-40% EtOAc u heksanima tokom 20 minuta) čime je dobijen 20-amino-13-fluoro-6,18-bis(trifluorometil)-16,23-dioksa-3,4,21-triazatetraciklo[15.3.1.12,5.111,15]trikoza-1(21),2,4,11(22),12,14, 17,19-oktaen-6-ol (2,4 mg, 9%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 7,53 (s, 1H), 7,28 (s, 1H), 6,79 (dd, J = 9,2, 2,2 Hz, 1H), 6,73 (dd, J = 9,2, 2,3 Hz, 1H), 5,51 (s, 2H), 3,68 (s, 1H), 2,80 (ddd, J = 14,0, 6,9, 3,7 Hz, 1H), 2,69 (ddd, J = 13,8, 8,8, 3,8 Hz, 1H), 2,29 (td, J = 13,3, 5,1 Hz, 1H), 2,05 (d, J = 13,1 Hz, 1H), 2,01 -1,91 (m, 1H), 1,85 - 1,67 (m, 3H) ppm;<19>F NMR (376 MHz, hloroform-d) δ -63,62, -78,86, -112,30 ppm. ESI-MS m/z izračunato 492,10324, pronađeno 493,1 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 1,62 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom HPLC-MS upotrebom Onyx Monolithic C18kolone (50 X 4,6 mm) kupljenom od Phenomenex (pn: CH0-7644) i dualnim gradijentnim tokom od 1 - 99% mobilne faze B tokom 2,9 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 12 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 50 µL i temperatura kolone = 25 °C.
[0656] Treći deo: Racemski 20-amino-13-fluoro-6,18-bis(trifluorometil)-16,23-dioksa-3,4,21-triazatetraciklo[15.3.1.12,5.111,15]trikoza-1(21),2,4,11(22),12,14,17,19-oktaen-6-ol je rastvoren u 1:1 acetonitril/MeOH i prečišćen preparativnom SFC eluirajući gradijent od 5 mM NH3u metanolu prema CO2(5-15% tokom 10 minuta pri 60 mL/min) preko 21,2 X 250mm AS3 kolone, 5 µm čestica, čime je dobijen prvi eluent 20-amino-13-fluoro-6,18-bis(trifluorometil)-16,23-dioksa-3,4,21-triazatetraciklo[15.3.1.12,5.111,15]trikoza-1(21),2,4,11(22),12,14,17,19-oktaen-6-ol, (enantiomer 1) (1,7 mg, 5%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 7,53 (s, 1H), 7,28 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 6,79 (dt, J = 9,3, 2,0 Hz, 1H), 6,73 (dt, J = 9,1, 2,3 Hz, 1H), 5,51 (s, 2H), 3,67 (s, 1H), 2,80 (ddd, J = 14,1, 6,8, 3,7 Hz, 1H), 2,68 (ddd, J = 20,2, 9,7, 5,0 Hz, 1H), 2,29 (ddd, J = 14,1, 12,5, 5,1 Hz, 1H), 2,10 - 2,02 (m, 2H), 2,01 - 1,89 (m, 1H), 1,85 - 1,67 (m, 2H) ppm;<19>F NMR (376 MHz, hloroform-d) δ -63,62, - 78,86, -112,30 ppm; ESI-MS m/z izračunato 492,10324, pronađeno 493,1 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 1,61 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom HPLC-MS upotrebom Onyx Monolithic C18kolone (50 X 4,6 mm) kupljenom od Phenomenex (pn: CH0-7644) i dualnim gradijentnim tokom od 1 - 99% mobilne faze B tokom 2,9 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 12 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 50 µL i temperatura kolone = 25 °C.
[0657] Kontinuiranom elucijom je kao drugi eluent dobijen 20-amino -13-fluoro-6,18-bis(trifluorometil)-16,23-dioksa-3,4,21-triazatetraciklo[15.3.1.12,5.111,15]trikoza-1(21),2,4,11(22),12,14, 17,19-oktaen-6-ol (enantiomer 2) (1,4 mg, 7%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 7,53 (s, 1H), 7,28 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 6,79 (dt, J = 9,1, 2,0 Hz, 1H), 6,73 (dt, J = 9,2, 2,3 Hz, 1H), 5,51 (s, 2H), 3,63 (s, 1H), 2,80 (ddd, J = 14,0, 6,8, 3,7 Hz, 1H), 2,69 (ddd, J = 13,8, 8,7, 3,8 Hz, 1H), 2,29 (ddd, J = 14,1, 12,4, 5,1 Hz, 1H), 2,11 - 2,02 (m, 2H), 2,01 - 1,89 (m, 1H), 1,85 - 1,66 (m, 2H) ppm;<19>F NMR (376 MHz, hloroform-d) δ -63,62, - 78,87, -112,30 ppm; ESI-MS m/z izračunato 492,10324, pronađeno 493,1 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 1,62 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom HPLC-MS upotrebom Onyx Monolithic C18kolone (50 X 4,6 mm) kupljenom od Phenomenex (pn: CH0-7644) i dualnim gradijentnim tokom od 1 - 99% mobilne faze B tokom 2,9 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 12 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 50 µL i temperatura kolone = 25 °C.
Primer 22: Priprema 19-amino-12-fluoro-9-metil-6,17-bis(trifluorometil)-15,22-dioksa-3,4,20-triazatetraciklo[14.3.1.12,5.110,14]dokoza-1(20),2,4,10(21),11,13,16,18-oktaen-6-ola (dijastereomerni par 1), Jedinjenje 33
Korak 1: 6-(Benziloksi)-12-fluoro-9-metiliden-19-nitro-6,17-bis(trifluorometil)-15,22-dioksa-3,4,20-triazatetraciklo[14.3.1.12,5.110,14]dokoza-1(20),2,4,10(21),11,13,16,18-oktaen
[0659]
[0660] Kroz smešu 2-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-5-[6-(3-fluoro-5-jodo-fenoksi)-3-nitro-5-(trifluorometil)-2-piridil]-1,3,4-oksadiazol (180 mg, 0,2438 mmol), paladijum (II) acetat (10 mg, 0,04454 mmol), tris-o-tolilfosfan (27 mg, 0,08871 mmol) i trietilamin (51 µL, 0,3659 mmol) u acetonitrilu (6,3 mL) je propuštan N2tokom 1 minuta a zatim je zagrevana na 100 °C tokom sat vremena. Smeša je razblažena etrom i isprana sa 1 M NH4Cl, 1 M NaHCO3, slanim rastvorom a zatim je osušena (MgSO4) i uparena. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (24 g SiO2, 0-50% rastvora (20% EtOAc u heksanima) prema heksanima tokom 20 minuta) čime je dobijen 6-(benziloksi)-12-fluoro-9-metiliden-19-nitro-6,17-bis(trifluorometil)-15,22-dioksa-3,4,20-triazatetraciklo[14.3.1.12,5.110,14]dokoza-1(20),2,4,10( 21),11,13,16,18-oktaen (9,4 mg, 6%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 8,65 (s, 1H), 7,32 - 7,27 (m, 2H), 7,23 (d, J = 15,5 Hz, 4H), 6,84 (dt, J = 8,9, 2,4 Hz, 2H), 5,94 - 5,76 (m, 1H), 5,53 (dt, J = 14,9, 6,7 Hz, 1H), 4,83 (d, J = 11,3 Hz, 1H), 4,41 (d, J = 11,3 Hz, 1H), 3,37 (d, J = 5,9 Hz, 2H), 3,11 (dd, J = 14,9, 5,6 Hz, 1H), 2,78 (dd, J = 15,2, 7,9 Hz, 1H) ppm;<19>F NMR (376 MHz, hloroform-d) δ -63,81, -73,39, -110,54 ppm. ESI-MS m/z izračunato 610,1087, pronađeno 611,2 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 0,52 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (30 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002349) i dualnim gradijentnim tokom od 50 - 99% mobilne faze B tokom 1,0 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = CH3CN (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,5 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 2: 19-Amino-12-fluoro-9-metil-6,17-bis(trifluorometil)-15,22-dioksa-3,4,20-triazatetraciklo [14.3.1.12,5.110,14]dokoza-1(20),2,4,10(21),11,13,16,18-oktaen-6-ol (dijastereomerni par 1), Jedinjenje 33
[0661]
[0662] Prvi deo: Smeša 6-(benziloksi)-12-fluoro-9-metiliden-19-nitro-6,17-bis(trifluorometil)-15,22-dioksa-3,4,20-triazatetraciklo[14.3.1.12,5.110, 14]dokoza-1(20),2,4,10(21),11,13,16,18-oktaen (9,4 mg, 0,01540 mmol) i Pd/C (15 mg 10 % w/w, 0,01410 mmol) u AcOH (400 µL), MeOH (400 µL) i EtOAc (800 µL) je mešana na sobnoj temperaturi pod 200 psi H2u posudi pod pritiskom od nerđajućeg čelika tokom 20 sati. Nakon toga smeša je filtrirana i filtrat je uparen čime je dobijen 6-(benziloksi)-12-fluoro-9-metil-6,17-bis(trifluorometil)-15,22-dioksa-3,4,20-triazatetraciklo[14.3.1.12,5.110,14]dokoza-1(20),2,4,10 (21),11,13,16,18-oktaen-19-amin. ESI-MS m/z izračunato 582,1502, pronađeno 583,2 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 0,59 minuta (nedostaje prinos). Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (30 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002349) i dualnim gradijentnim tokom od 50 - 99% mobilne faze B tokom 1,0 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,5 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
[0663] Drugi deo: 6-(Benziloksi)-12-fluoro-9-metil-6,17-bis(trifluorometil)-15,22-dioksa-3,4,20-triazatetraciklo[14.3.1.12,5.110,14]dokoza-1(20),2,4,10(21),11,13,16,18-oktaen-19-amin je rastvoren u TFA (300 µL) i vodi (15 µL) i zagrevan na 60 °C tokom sat vremena, nakon čega je razblažen sa EtOAc i ispran sa 1 M NaHCO3, osušen i uparen. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (12 g SiO2, 5-40% EtOAc u heksanima tokom 20 minuta) čime je dobijen dijastereomerni par 1, 19-amino -12-fluoro-9-metil-6,17-bis(trifluorometil)-15,22-dioksa-3,4,20-triazatetraciklo[14.3.1.12,5.110,14]dokoza-1(20),2,4,10 (21),11,13,16,18-oktaen-6-ol (1,3 mg, 4%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 7,50 (s, 1H), 7,13 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 6,82 (dt, J = 9,6, 1,9 Hz, 1H), 6,77 (dt, J = 9,1, 2,2 Hz, 1H), 5,20 (s, 2H), 3,44 (s, 1H), 2,95 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 2,25 (t, J = 13,3 Hz, 1H), 2,13 - 1,90 (m, 2H), 1,79 (t, J = 13,3 Hz, 1H), 1,32 (d, J = 7,1 Hz, 3H) ppm;<19>F NMR (376 MHz, hloroform-d) δ -63,31, -78,21, -112,26 ppm. ESI-MS m/z izračunato 492,10324, pronađeno 493,1 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 1,83 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom HPLC-MS upotrebom Onyx Monolithic C18kolone (50 X 4,6 mm) kupljenom od Phenomenex (pn: CH0-7644) i dualnim gradijentnim tokom od 1 - 99% mobilne faze B tokom 2,9 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 12 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 50 µL i temperatura kolone = 25 °C.
Primer 23: Priprema (6R)-17-amino-12-izopropil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ola (enantiomer 1) (so hidrohlorida), Jedinjenje 34 i (6R)-17-amino-12-izopropil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ola (enantiomer 2) (so hidrohlorida), Jedinjenje 35
[0664]
Korak 1: terc-Butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-(1-izopropilbut-3-enoksi)-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat
[0665]
[0666] Rastvoru terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6hidroksi-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (200 mg, 0,2904 mmol) i 2-metilheks-5-en-3-ol (104 mg, 0,9108 mmol) u toluenu (2 mL) je dodat trifenilfosfin (162 mg, 0,6176 mmol). Nakon mešanja na sobnoj temperaturi tokom 1 minuta, dodato je DIAD (120 µL, 0,6095 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta. Reakciona sme ša je razblažena sa EtOAc a zatim isprana zasićenim vodenim natrijum bikarbonatom (1X), zasićenim vodenim NH4Cl (1X) i slanim rastvorom (1X) nakon čega je osušena preko magnezijum sulfata, filtrirana i koncentrovana u ulje žute boje koje je prečišćeno hromatografijom na silika gelu upotrebom gradijenta od 0% do 50% EtOAc u heksanima čime je kao dijastereomerna smeša i bistri, blago žuti sirup dobijen terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-(1-izopropilbut-3-enoksi)-5-(trifluorometil )-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (168 mg, 74%). ESI-MS m/z izračunato 784,3271, pronađeno 785,3 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 2,23 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (50 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002350) i dualnim gradijentnim tokom od 50 - 99% mobilne faze B tokom 2,9 minuta. Mobilna faza A = voda (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 2: terc-Butil N-[(6R)-6-benziloksi-12-izopropil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,9,14,16-heksaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonilkarbamat (E/Z smeša)
[0667]
[0668] Degaziranom rastvoru terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-(1-izopropilbut-3-enoksi)-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (164 mg, 0,2090 mmol) u DCE (100 mL) je dodat dihloro[1,3-bis(2,4,6-trimetilfenil)-2-imidazolidiniliden] [[5-[(dimetilamino)sulfonil]-2-(1-metiletoksi-O)fenil]metilen-C]rutenijum(II) (Zhan katalizator -1B, 18 mg, 0,02453 mmol) sve odjednom i rekaciona smeša je zagrevana na 60 °C tokom ~6 sati. Reakcija je ugašena sa par kapi DMSO i rastvarači su uklonjeni rotirajućim uparavanjem. Dobijeni ostatak braon boje je prečišćen hromatografijom na silika gelu upotrebom gradijenta od 0 do 50% EtOAc u heksanima čime je kao smeša dijastereomera i kao bezbojno viskozno ulje dobijen terc-butil N-[(6R)-6-benziloksi-12-izopropil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,9, 14, 16-heksaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (E/Z smeša) (97 mg, 61%). ESI-MS m/z izračunato 756,2958, pronađeno 757,3 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 2,08 minuta i 2,17 (glavni fragment 657,3 (M-Boc)<+>. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (50 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002350) i dualnim gradijentnim tokom od 50 - 99% mobilne faze B tokom 2,9 minuta. Mobilna faza A = voda (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 3: terc-Butil N-terc-butoksikarbonil-N-[(6R)-6-hidroksi-12-izopropil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat
[0669]
[0670] Rastvoru terc-butil N-[(6R)-6-benziloksi-12-izopropil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,9, 14, 16-heksaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (E/Z smeša) (97 mg, 0,1282 mmol) u EtOH (5 mL) je dodato Pd/C (46 mg 10 % w/w, 0,04322 mmol, 50% vode težinski) u boci zapremine 250 mL opremljenoj sa balonom vodonika upotrebom trosmernog adaptera. Boca je podvrgnuta vakuumu i ponovo napunjena azot gasom tri puta nakon čega je ponovo podvrgnuta vakuumu. Posuda je napunjena vodonik gasom i smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom noći. Boca je podvrgnuta vakuumu i ponovo napunjena azot gasom tri puta nakon čega je razblažena etil acetatom i filtrirana preko celita. Filtrat je koncentrovan čime je kao bezbojno viskozno ulje i smeša dijastereomera dobijen terc-butil N-terc-butoksikarbonil-N-[(6R)-6-hidroksi-12-izopropil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat (85 mg, 99%); ESI-MS m/z izračunato 668,26447, pronađeno 569,2 (M-Boc+1)<+>; vreme zadržavanja: 1,62 minuta i vreme zadržavanja: 1,65 minuta (nerazdvojivi dijastereomeri). Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (50 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002350) i dualnim gradijentnim tokom od 50 - 99% mobilne faze B tokom 2,9 minuta. Mobilna faza A = voda (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 4: (6R)-17-Amino-12-izopropil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (enantiomer 1) (so hidrohlorida), Jedinjenje 34 i (6R)-17-amino-12-izopropil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (enantiomer 2) (so hidrohlorida), Jedinjenje 35
[0671]
[0672] terc-Butil N-terc-butoksikarbonil-N-[(6R)-6-hidroksi-12-izopropil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat (80 mg, 0,1196 mmol) je rastvoren u unapred pripremljenom rastvoru (1:3 TFA/dihlorometan) TFA (250 µL, 3,245 mmol) i dihlorometanu (750 µL). Reakcija je mešana tokom ~1 sata i rastvarači su upareni. Dobijeni ostatak je rastvoren u 2 mL MeOH i prečišćen reverzno faznom HPLC upotrebom gradijenta od 40% do 80% acetonitrila u vodi (+5 mM HCl) tokom 30 minuta čime je kao beličasta čvrsta supstanca i prvi enantiomer za eluiranje dobijen (6R)-17-amino-12-izopropil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (so hidrohlorida, enantiomer 1) (18,3 mg, 61%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,77 (s, 1H), 7,57 (s, 1H), 6,35 (s, 2H), 4,59 (dt, J= 5,9, 2,7 Hz, 1H), 2,34 - 2,22 (m, 2H), 2,18 - 2,07 (m, 1H), 2,01 - 1,88 (m, 1H), 1,69 (m, 2H), 1,58 - 1,35 (m, 5H), 0,99 (d, J= 2,7 Hz, 3H), 0,98 (d, J= 2,7 Hz, 3H) ppm; ESI-MS m/z izračunato 468,1596, pronađeno 469,1 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 1,74 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (50 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002350) i dualnim gradijentnim tokom od 30 - 99% mobilne faze B tokom 2,9 minuta. Mobilna faza A = voda (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C. Drugi enantionmer za eluiranje, kao beličasta čvrsta supstanca, je bio (6R)-17-amino-12-izopropil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (so hidrohlorida, enantiomer 2) (19,0 mg, 63%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,77 (s, 1H), 7,57 (s, 1H), 6,35 (s, 2H), 4,60 - 4,39 (m, 1H), 2,34 -2,24 (m, 1H), 2,18 (d, J= 8,6 Hz, 1H), 2,14 - 2,04 (m, 1H), 1,99 - 1,89 (m, 1H), 1,63 (s, 3H), 1,42 (d, J= 23,7 Hz, 4H), 1,00 (d, J= 2,5 Hz, 3H), 0,98 (d, J= 2,4 Hz, 3H) ppm; ESI-MS m/z izračunato 468,1596, pronađeno 469,2 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 1,79 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (50 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002350) i dualnim gradijentnim tokom od 30 - 99% mobilne faze B tokom 2,9 minuta. Mobilna faza A = voda (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Primer 24: Priprema (6R,12R)-17-amino-12-(hidroksimetil)-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ola, Jedinjenje 36
[0673]
Korak 1: (2S)-1-Benziloksipent-4-en-2-ol
[0674]
[0675] Rastvoru bromo(vinil)magnezijum (37 mL 1 M, 37,000 mmol) je dodat bakar bromid (350 mg, 2,4399 mmol) na 0 °C nakon čega je smeša crne boje mešana na - 78 °C. Nakon 5 minuta, ukapavanjem je dodat rastvor (2S)-2-(benziloksimetil)oksiran (2 g, 12,180 mmol) u THF (20 mL) tokom 30 minuta na -78 °C. Zatim je smeša crne boje mešana na -78 °C tokom 30 minuta. Nakon toga je dodat metanol (5 mL) na -78 °C, a zatim vodeni vodonik hlorid (2M, 24 mL) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 5 minuta. Nakon toga je dodato MTBE (40 mL), vodeni sloj je razdvojen i ekstraktovan sa MTBE (2 X 20 mL). Organski slojevi su isprani vodenim vodonik hloridom (1M, 40 mL), vodom (40 mL), vodenim natrijum tiosulfatom (10%, 40 mL) i ponovo sa vodom (40 mL). Organski slojevi su osušeni preko natrijum sulfata i koncentrovani pod vakuumom čime je dobijen sirov (2S)-1-benziloksipent-4-en-2-ol (2,46 g, 102%) kao ulje žute boje. ESI-MS m/z izračunato 192,11504, pronađeno 193,0 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 1,92 minuta; LCMS metoda: Kinetex Polar C18, 3,0 X 50 mm 2,6 µm, 3 minuta, 5 - 95% acetonitrila u H2O (0,1% mravlja kiselina) 1,2 ml/min.
Korak 2: terc-Butil N-[6-[(1R)-1-(benziloksimetil)but-3-enoksi]-2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonilkarbamat
[0676]
[0677] Rastvor terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-hidroksi-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (1,2 g, 1,7426 mmol) i (2S)-1-benziloksipent-4-en-2-ol (1,42 g, 7,3861 mmol) u toluenu (12 mL) je tretiran sa trifenilfosfinom (1,35 g, 5,1471 mmol) a zatim sa DIAD (1,0815 g, 1,03 mL, 5,3485 mmol) na sobnoj temperaturi. Rastvor žute boje je mešan na sobnoj temperaturi tokom noći. Suspenzija žute boje je koncentrovana pod vakuumom, a zatim suvo upakovana na silika sa DCM. Prečišćavanjem hromatografijom preko silika kolone od 120 g (1 -30% EtOAc/heptani) je dobijen terc-butil N-[6-[(1R)-1-(benziloksimetil)but-3-enoksi]-2-[5-[1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-tercbutoksikarbonil-karbamat (1,5 g, 99%) kao ulje žute boje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,85 (s, 1H), 7,41 -7,24 (m, 10H), 5,78 (m, 2H), 5,61 - 5,52 (m, 1H), 5,14 - 4,95 (m, 4H),4,80 (d, J = 10,6 Hz, 1H), 4,66 - 4,51 (m, 3H), 3,80 - 3,64 (m, 2H), 2,64 - 2,16 (m, 6H), 1,43 (d, J = 2,3 Hz, 18H) ppm.<19>F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -64,05 (s, 3F), -73,04 (s, 3F) ppm.
Korak 3: terc-Butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-12-(benziloksimetil)-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,9,14(18),15-heksaen-17-il]-N-tercbutoksikarbonil-karbamat (E/Z smeša)
[0678]
[0679] Azot je propuštan kroz rastvor terc-butil N-[6-[(1R)-1-(benziloksimetil)but-3-enoksi]-2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-tercbutoksikarbonil-karbamat (200 mg, 0,2304 mmol) u DCE (62 mL) tokom 30 minuta. Nakon toga je dodat Zhan katalizator-1B (18 mg, 0,0245 mmol) na sobnoj temperaturi i azot je propuštan ponovo tokom 5 minuta. Svetlo žuti rastvor je mešan na 60 °C (unapred zagrejana uljana kada) tokom 2 i po sata. Rastvor braon boje je ohlađen na sobnu temperaturu a zatim je dodat DMSO (~5 kapljica) kako bi se ugasio katalizator. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je suvo spakovan na silika sa DCM. Proizvod je prečišćen hromatografijom na silika koloni od 40 g (1 - 30% EtOAc/heptani) čime je dobijen terc-butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-12-(benziloksimetil)-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,9,14(18),15-heksaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (E/Z smeša) (134 mg, 46%) kao svetlo žuto ulje. ESI-MS m/z izračunato 834,30634, vreme zadržavanja: 4,54 minuta; LCMS metoda: Kinetex Polar C183,0 X 50 mm 2,6 µm, 6 minuta, 5 - 95% acetonitrila u H2O (0,1% mravlja kiselina) 1,2 mL/min.
Korak 4: terc-Butil N-terc-butoksikarbonil-N-[(6R,12R)-6-hidroksi-12-(hidroksimetil)-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,14(18),15-pentaen-17-il]karbamat
[0680]
[0681] Paladijum preko uglja (280 mg, 10 % w/w, 0,2631 mmol) je dodat degaziranom rastvoru terc-butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-12-(benziloksimetil)-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,9,14(18),15-heksaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (E/Z smeša) (880 mg, 0,8296 mmol) u metanolu (40 mL) na sobnoj temperaturi. Suspenzija crne boje je degazirana azotom tokom 5 minuta nakon čega je vodonik propuštan kroz suspenziju tokom 5 minuta. Zatim je smeša mešana na sobnoj temperaturi tokom tri dana pod atmosferom vodonika. Suspenzija crne boje je filtrirana kroz celit sa DCM, i koncentrovana pod vakuumom čime je dobijen sirov terc-butil N-terc-butoksikarbonil-N-[(6R,12R)-6-hidroksi-12-(hidroksimetil)-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,14(18),15-pentaen-17-il]karbamat (630 mg, 87%) kao čvrsta supstanca bele boje.<19>F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -63,73 (s, 3F), -80,72 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z izračunato 656,2281, pronađeno 501,0 (M-155)<+>; vreme zadržavanja: 3,47 minuta; LCMS metoda: Kinetex Polar C183,0 X 50 mm 2,6 µm, 6 minuta, 5 - 95% acetonitrila u H2O (0,1% mravlja kiselina) 1,2 mL/min.
Korak 5: (6R,12R)-17-Amino-12-(hidroksimetil)-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol, Jedinjenje 36
[0682]
[0683] terc-Butil N-terc-butoksikarbonil-N-[(6R,12R)-6-hidroksi-12-(hidroksimetil)-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,14(18),15-pentaen-17 -il]karbamat (630 mg, 0,7196 mmol) je rastvoren u rastvoru vodonik hlorida u 1,4-dioksanu (4 mL 4 M, 16,000 mmol) na sobnoj temperaturi. Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom noći. Rastvarač je uparen pod vakuumom i rezidualno ulje narandžaste boje je prečišćeno reverzno faznom hromatografijom preko 50 g C18kolone (5-80% acetonitril/0,1% mravlje kiseline u vodi) čime je dobijen (6R,12R)-17-amino-12-(hidroksimetil)-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (199 mg, 59%) kao svetlo žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,77 (s, 1H), 7,59 (s, 1H), 6,38 (br s, 2H), 4,68 (t, J = 5,3 Hz, 1H), 4,65 - 4,57 (m, 1H), 3,68 - 3,56 (m, 2H), 2,28 - 2,05 (m, 3H), 1,69 - 1,30 (m, 7H) ppm.<19>F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62,23 (s, 3F), -79,01 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z izračunato 456,12323, pronađeno 457,1 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 2,91 minuta; LCMS metoda: Kinetex Polar C183,0 X 50 mm 2,6 µm, 6 minuta, 5 - 95% acetonitrila u H2O (0,1% mravlja kiselina) 1,2 mL/min.
Primer 25: Priprema (6R,12S)-17-amino-12-(hidroksimetil)-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ola, Jedinjenje 37
[0684]
Korak 1: (2R)-1-Benziloksipent-4-en-2-ol
[0685]
[0686] Rastvoru bromo(vinil)magnezijum u THF (92 mL 1 M, 92,000 mmol) je dodat bakar bromid (870 mg, 6,0648 mmol) na 0 °C nakon čega je smeša crne boje mešana na -78 °C. Nakon 5 minuta, ukapavanjem je dodat rastvor (2R)-2-(benziloksimetil)oksiran (5 g, 30,450 mmol) u THF (50 mL) pomoću levka za ukapavanje tokom 15 minuta na - 78 °C. Nakon toga smeša crne boje je mešana na -78 °C tokom 40 minuta. Zatim je dodat metanol (13 mL) na -78 °C, a nakon njega vodeni vodonik hlorid (2M, 80 mL) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 5 minuta. Zatim je dodato MTBE (80 mL), vodeni sloj je razdvojen i ekstraktovan sa MTBE (2 X 40 mL). Organski sloj je ispran vodenim vodonik hloridom (1M, 50 mL), vodom (50 mL), vodenim natrijum tiosulfatom (10%, 50 mL) i ponovo sa vodom (50 mL). Organski sloj je osušen preko natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan pod vakuumom čime je dobijeno ulje žute boje (6,01 g). Sirovo ulje je prečišćeno hromatografijom preko kolone silika gela od 120 g (1 -50% MTBE/heptani) čime je dobijen (2R)-1-benziloksipent-4-en-2-ol (5,89 g, 97%) kao svetlo žuto ulje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,42 - 7,28 (m, 5H), 5,84 (ddt, J = 17,2, 10,1, 7,1 Hz, 1H), 5,20 - 5,05 (m, 2H), 4,57 (s, 2H), 3,90 (qd, J = 6,7, 3,5 Hz, 1H), 3,53 (dd, JJ 9,5, 3,4 Hz, 1H), 3,39 (dd, J = 9,5, 7,4 Hz, 1H), 2,35 (br s, 1H), 2,28 (t, J = 6,7 Hz, 2H) ppm. ESI-MS m/z izračunato 192,11504, pronađeno 193,2 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 2,51 minuta; LCMS metoda: Kinetex Polar C183,0 X 50 mm 2,6 µm, 6 minuta, 5 - 95% acetonitrila u H2O (0,1% mravlja kiselina) 1,2 mL/min.
Korak 2: terc-Butil N-[6-[(1S)-1-(benziloksimetil)but-3-enoksi]-2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonilkarbamat
[0687]
[0688] Rastvor terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-hidroksi-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (1 g, 1,4522 mmol) i (2R)-1-benziloksipent-4-en-2-ol (837 mg, 4,3536 mmol) u toluenu (10 mL) je tretiran trifenilfosfinom (796 mg, 3,0349 mmol) a zatim sa DIAD (616,20 mg, 0,6 mL, 3,0474 mmol) na sobnoj temperaturi. Rastvor žute boje je mešan na sobnoj temperaturi tokom noći. Suspenzija žute boje je koncentrovana pod vakuumom nakon čega je suvo spakovana na siliku sa DCM. Prečišćavanjem hromatografijom preko silika kolone od 120 g (0-30% etil acetata u heptanima) je dobijen terc-butil N-[6-[(1S)-1-(benziloksimetil)but-3-enoksi]-2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-tercbutoksikarbonil-karbamat (1,21 g, 96%) kao ulje žute boje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,85 (s, 1H), 7,41 - 7,27 (m, 10H), 5,85 - 5,69 (m, 2H), 5,59 - 5,52 (m, 1H), 5,14 - 4,94 (m, 4H), 4,80 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 4,62 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 4,60 - 4,51 (m, 2H), 3,78 - 3,64 (m, 2H), 2,65 - 2,14 (m, 6H), 1,43 (s, 18H) ppm.<19>F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -64,05 (s, 3F), -73,00 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z izračunato 862,33765, pronađeno 864,1 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 4,65 minuta; LCMS metoda: Kinetex Polar C183,0 X 50 mm 2,6 µm, 6 minuta, 5 - 95% acetonitrila u H2O (0,1% mravlja kiselina) 1,2 mL/min.
Korak 3: terc-Butil N-[(6R,12S)-6-benziloksi-12-(benziloksimetil)-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,9,14(18),15-heksaen-17-il]-N-tercbutoksikarbonil-karbamat (E/Z smeša)
[0689]
[0690] Mešajući rastvor terc-butil N-[6-[(1S)-1-(benziloksimetil)but-3-enoksi]-2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-tercbutoksikarbonil-karbamat (1,21 g, 1,3911 mmol) u 1,2-dihloroetanu (500 mL) je degaziran propuštanjem azot gasa tokom 20 sati. Rastvoru je dodat Zhan katalizator -1B (118 mg, 0,1608 mmol) i reakcija je zagrevana u uljanoj kadi podešenoj na 60 °C tokom 5 i po sati. Nakon što je ohlađena na sobnu temperaturu, katalizator je ugašen sa par kapi DMSO (približno 5-6 kapljica) i reakcija je koncentrovana pod redukovanim pritiskom. Ostatak je suvo postavljen na silika gel i prečišćen tečnom hromatografijom na silika gelu eluirajući od 0% do 30% etil acetata u heptanu, čime je dobijen terc-butil N-[(6R,12S)-6-benziloksi-12-(benziloksimetil)-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,9,14(18),15-heksaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (E/Z smeša)(543 mg, 45%) kao bezbojno ulje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,93 - 7,84 (m, 1H), 7,42 - 7,23 (m, 10H), 5,65 - 5,40 (m, 2H), 5,16 - 4,93 (m, 1H), 4,76 - 4,67 (m, 3H), 4,67 - 4,44 (m, 1H), 3,91 - 3,71 (m, 2H), 3,54 - 3,43 and 2,83 - 2,70 (m, 1H), 2,65 - 2,08 (m, 5H), 1,53 - 1,38 (m, 18H) ppm.<19>F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -63,45 do -63,84 (m, 3F), -73,75 do -74,24 (m, 3F) ppm. Vreme zadržavanja: 4,51 minuta; LCMS metoda: Kinetex Polar C183,0 X 50 mm 2,6 µm, 6 minuta, 5 - 95% acetonitrila u H2O (0,1% mravlja kiselina), protok = 1,2 mL/min.
Korak 4: terc-Butil N-terc-butoksikarbonil-N-[(6R,12S)-6-hidroksi-12-(hidroksimetil)-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,14(18),15-pentaen-17-il]karbamat
[0691]
[0692] Paladijum preko uglja (214 mg, 10 % w/w, 0,2011 mmol) je dodat degaziranom rastvoru terc-butil N-[(6R,12S)-6-benziloksi-12-(benziloksimetil)-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,9,14(18),15-heksaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (E/Z smeša) (543 mg, 0,6264 mmol) u metanolu (25 mL) na sobnoj temperaturi. Suspenzija crne boje je degazirana azotom 5 minuta nakon čega je vodonik propuštan kroz suspenziju tokom 5 minuta. Zatim je smeša mešana na sobnoj temperaturi tokom noći pod atmosferom vodonika. Suspenzija crne boje je filtrirana kroz celit sa DCM, i koncentrovana pod vakuumom čime je dobijen sirovi terc-butil N-tercbutoksikarbonil-N-[(6R,12S)-6-hidroksi-12-(hidroksimetil)-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,14(18),15-pentaen-17-il]karbamat (446 mg, 96%) kao svetlo žuto ulje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,88 (s, 1H), 4,92 - 4,83 (m, 1H), 3,96 - 3,82 (m, 2H), 3,60 (br, s, 1H), 2,59 - 2,47 (m, 1H), 2,38 - 2,12 (m, 3H), 2,08 - 1,93 (m, 2H), 1,73 - 1,33 (m, 23H) ppm.<19>F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -63,78 (s, 3F), -77,56 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z izračunato 656,2281, pronađeno (M+)+; 501,1 (M-155)+; vreme zadržavanja: 3,54 minuta; LCMS metoda: Kinetex Polar C18, 3,0 X 50 mm 2,6 µm, 6 minuta, 5 - 95% acetonitrila u H2O (0,1% mravlja kiselina), protok = 1,2 mL/min.
Korak 5: (6R,12S)-17-Amino-12-(hidroksimetil)-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol, Jedinjenje 37
[0693]
[0694] Mešajućem rastvoru na 0 °C terc-butil N-terc-butoksikarbonil-N-[(6R,12S)-6-hidroksi-12-(hidroksimetil)-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka--1(17),2,4,14(18),15-pentaen-17-il]karbamat (65 mg, 0,0483 mmol) u 1,4-dioksanu (2 mL) je ukapavanjem dodat rastvor HCl u 1,4-dioksanu (0,5 mL 4 M, 2,0000 mmol). Kada za hlađenje sa ledenom vodom je uklonjena 2 minuta nakon dodavanja i smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom noći. Zatim, dodato je još HCl rastvora u 1,4-dioksanu (1,5 mL 4 M, 6,0000 mmol) na sobnoj temperaturi i mešanje je nastavljeno 4 sata. Isparljive materije su uklonjene uparavanjem pod redukovanim pritiskom i dodat je HCl (2 mL 4 M, 8,0000 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je mešana tokom noći uz blago grejanje na 30 °C. Isparljive materije su uklonjene uparavanjem pod redukovanim pritiskom. Sirova supstanca je solubilizovana u dihlorometanu (3 mL) i dodatno je koncentrovana uparavanjem pod redukovanim pritiskom. Spojene serije sirove supstance (6R,12S)-17-amino-12-(hidroksimetil)-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol su prečišćene reverzno faznom C18hromatografijom na koloni od 50 g, eluirajući sa gradijentom acetonitrila (0 – 50%) u vodi koji sadrži 0,1 w/w % mravlje kiseline. Čiste frakcije su spojene i koncentrovane uparavanjem pod redukovanim pritiskom, a zatim preba čene u bocu zapremine 25 mL i podvrgnute sušenju smrzavanjem (acetonitril/voda) tokom noći čime je finalno izolovan (6R,12S)-17-amino-12-(hidroksimetil)-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (127 mg, 49%) kao svetlo žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,77 (s, 1H), 7,58 (s, 1H), 6,44 - 6,27 (m, 2H), 4,78 - 4,60 (m, 2H), 3,74 - 3,52 (m, 2H), 2,35 - 2,24 (m, 1H), 2,21 - 2,08 (m, 2H), 1,82 - 1,33 (m, 7H).<19>F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62,24 (s, 3F), -76,43 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z izračunato 456,12323, pronađeno 457,1 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 3,02 minuta; LCMS metoda: Kinetex Polar C183,0 X 50 mm 2,6 µm, 6 minuta, 5 - 95% acetonitrila u H2O (0,1% mravlja kiselina), protok = 1,2 mL/min.
Primer 26: Priprema (6R,12R)-17-amino-9,10-dideuterio-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ola, Jedinjenje 38
[0695]
Korak 1: terc-Butil N-terc-butoksikarbonil-N-[(6R,12R)-9,10-dideuterio-6-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat
[0696]
[0697] Rastvoru terc-butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,9, 14, 16-heksaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (E/Z smeša) (200 mg, 0,2745 mmol) u CD3OD (8 mL) pod azotom je dodato 10% paladijuma na ugljeniku (50 mg, 0,0470 mmol). Azot je zamenjen deuterijum gasom kroz vakuum 3 puta. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi pod atmosferom deuterijuma (balon) tokom noći. Smeša je filtrirana kroz dijatomejsku zemlju i isprana sa EtOAc i koncentrovana čime je dobijen terc-butil N-terc-butoksikarbonil-N-[(6R,12R)-9,10-dideuterio-6-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat (184 mg, 100%) kao bezbojno ulje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,82 (s, 1H), 4,97 - 4,86 (m, 1H), 3,72 - 3,54 (m, 1H), 2,71 - 2,59 (m, 1H), 2,34 - 2,24 (m, 1 H), 2,21 - 2,11 (m, 1H), 2,08 - 1,96 (m, 1H), 1,67 - 1,19 (m, 25H) ppm.<19>F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -63,99 (s, 3F), -77,58 (s, 3F) ppm.
Korak 2: (6R,12R)-17-Amino-9,10-dideuterio-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol, Jedinjenje 38
[0698]
[0699] Rastvoru terc-butil N-terc-butoksikarbonil-N-[(6R,12R)-9,10-dideuterio-6-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat (184 mg, 0,2749 mmol) u CH2Cl2(2 mL) je dodato TFA (2,9600 g, 2 mL, 25,960 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi sat i po vremena. Smeša je koncentrovana i uparena zajedno sa EtOAc (3 X 5 mL). Ostatak je rastvoren u EtOAc (20 mL), ispran zasićenim NaHCO3(5 mL) i osušen sa Na2SO4, filtriran i koncentrovan. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (24 g SiO2, eluirajući 0 do 30% EtOAc/heptana) i proizvod je rastvoren u minimumu acetonitrila i vode i osu šen zamrzavanjem tokom noći čime je dobijen (6R,12R)-17-amino-9,10-dideuterio-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (103 mg, 83%) kao čvrsta supstanca žute boje. ESI-MS m/z izračunato 442,1409, pronađeno 443,1 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 3,63 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,76 (s, 1H), 7,57 (s, 1H), 6,35 (s, 2H), 4,84 - 4,74 (m, 1H), 2,49 - 2,42 (m, 1H), 2,33 - 2,21 (m, 1H), 2,15 - 2,04 (m, 1H), 1,77 - 1,65 (m, 1H), 1,56 - 1,36 (m, 3H), 1,34 (d, J = 6,4 Hz, 3H), 1,25 - 1,12 (m, 1H) ppm.<19>F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62,50 (s, 3F), -76,38 (br s, 3F) ppm. ESI-MS m/z izračunato 442,14087, pronađeno 443,1 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 3,63 minuta; LCMS metoda: Kinetex Polar C183,0 X 50 mm 2,6 µm, 6 minuta, 5 - 95% acetonitrila u H2O (0,1% mravlja kiselina) 1,2 mL/min.
Primer 27: Priprema (6R,12R)-17-amino-11,11,12-trideuterio-12-(trideuteriometil)-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ola, Jedinjenje 39
[0700]
Korak 1: (S)-2-(Metil-d3)oksiran-2,3,3-d3
[0701]
[0702] Acetatna kiselina (0,94 mL, 16,41 mmol, 0,021 ekv.) je dodata rastvoru (1S,2S)-(+)-[1,2-cikloheksandiamino-N,N’-bis-(3,5-di-terc-butilsaliciliden)]kobalt(II) ((S,S)-Co(salen) Jacobsen katalizator) (0,943 g, 1,56 mmol) u toluenu (25 mL). Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi otvoren tokom perioda od 30 minuta tokom kog se boja promenila iz narandžasto-crvene u tamno-braon. Rastvor je koncentrovan pod redukovanim pritiskom čime je dobijena sirova čvrsta supstanca braon boje. Dodat je racemski 2-(metil-d3)oksiran-2,3,3-d3(50 g, 781,25 mmol, 1 ekv.) kako bi se rastvorio sirov katalizator na sobnoj temperaturi nakon čega je ohlađen u ledenoj kadi do 0 °C. Ukapavanjem je dodavan oksid deuterijuma (8,6 mL, 429,69 mmol, 0,55 ekv.) tokom 10 minuta. Reakciona smeša je ostavljena da se zagreje na sobnu temperaturu i mešana je tokom noći. Destilacijom smeše pod atmosferskim pritiskom je dobijen (S)-2-(metil-d3)oksiran-2,3,3-d3(17,23 g, tačka ključanja = 31,5-34,5 °C, 34,5% prinos) kao bezbojno ulje koje je skladišteno u zamrzivaču.
Korak 2: (S)-Pent-4-en-1,1,1,2,3,3-d6-2-ol
[0703]
[0704] Rastvor 1M vinil magnezijum bromid u THF (100 mL, 100 mmol) je dodat ukapavanjem uz održavanje temperature ispod -10 °C smeši bakar(I) hlorid (0,20 g, 2 mmol) i litijum hlorid (0,17 g, 4 mmol) u anhidrovanom THF (40 mL). Smeša je mešana na -5 do -10 °C tokom 15 minuta, nakon čega je ohlađena do -15 °C. Ukapavanjem je dodat rastvor (S)-2-(metil-d3)oksiran-2,3,3-d3(6,4 g, 100 mmol) u anhidrovanom THF (100 mL) uz održavanje temperature ispod -5 °C. Dobijena smeša je mešana na -10 °C do 0 °C tokom 4 sata. Polako je dodat zasićeni amonijum hlorid u oksidu deuterijuma (50 mL) kako bi ugasio reakciju uz održavanje temperature ispod 10 °C. Dodat je deuterijum oksid (50 mL) i sme ša je mešana u ledenoj kadi 30 minuta. Slojevi su razdvojeni i organski sloj je ispran zasićenim amonijum hloridom u deuterijum oksidu (30 mL). Spojeni vodeni slojevi su ekstraktovani dietil etrom (3 X 50 mL). Spojeni organski slojevi su isprani zasićenim slanim rastvorom (50 mL), osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani destilacijom pod atmosferskim pritiskom čime je dobijen željeni (S)-pent-4-en-1,1,1,2,3,3-d6-2-ol kao bezbojno ulje (Frakcija A: 1,29 g, tačka ključanja = 80-100 °C; Frakcija B: 2,27 g, tačka ključanja = 100-80 °C; Frakcija C: 0,40 g, tačka ključanja = 80-65 °C, 40% kombinovanog prinosa).
<1>H NMR ukazuje da je frakcija A sadržala 0,25 molarnog odnosa THF, obe frakcije B i C su bile bez rastvarača. Dodatno jedinjenje (S)-2-(metil-d3)oksiran-2,3,3-d3(2 X 5 g) je obrađeno kao što je opisano u prethodnom tekstu čime je dobijeno jedinjenje (S)-pent-4-en-1,1,1,2,3,3-d6-2-ol kao bezbojno ulje (Frakcija A: 1,46 g, tačka ključanja = 75-95 °C; Frakcija B: 4,30 g, tačka ključanja = 95-100-75 °C; Frakcija C: 0,83 g, tačka ključanja = 80-65 °C, 40% kombinovanog prinosa).<1>H NMR ukazuje da je frakcija A sadržala 0,50 molarnog odnosa THF, obe frakcije B i C su bile bez rastvarača.
Korak 3: terc-Butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-[(1R)-1,2,2-trideuterio-1-(trideuteriometil)but-3-enoksi]-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-tercbutoksikarbonil-karbamat
[0705]
[0706] Rastvor terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-hidroksi-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (6,2 g, 9,04 mmol), trifenilfosfin (2,9 g, 10,9 mmol) i (S)-pent-4-en-1,1,1,2,3,3-d6-2-ol (1,0 g, 10,9 mmol) u toluenu (45,0 mL) je mešan pod atmosferom azota je zagrevan do 45 °C. Diizopropil azodikarboksilat (2,3 mL, 11,8 mmol) je dodavan polako tokom 20 minuta, održavajući unutrašnju temperaturu manjom od 55 °C. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i razblažena etil acetatom (50 mL) i vodom (50 mL). Organski sloj je razdvojen, ispran vodom (50 mL), zasićenim slanim rastvorom (50 mL), osušen preko natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan pod redukovanim pritiskom. Sirov proizvod je pre čišćen hromatografijom na silika gelu (120 g SiO2), eluirajući sa gradijentom od 0 do 10% etil acetata u heksanima čime je dobijen tercbutil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-[(1R)-1,2,2-trideuterio-1-(trideuteriometil)but-3-enoksi]-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat kao bistro, bezbojno ulje (5,7 g, 83% prinos).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,56 (d, J = 0,7 Hz, 1H), 7,44 -7,29 (m, 5H), 5,92 - 5,70 (m, 2H), 5,10 (dd, J = 4,5, 1,9 Hz, 1H), 5,06 (dd, J = 4,5, 1,9 Hz, 1H), 5,01 (ddd, J = 9,7, 7,7, 1,9 Hz, 2H), 4,77 (d, J = 11,1 Hz, 1H), 4,67 (d, J = 11,1 Hz, 1H), 2,63 - 2,52 (m, 1H), 2,47 (d, J = 15,0 Hz, 1H), 2,27 (ddt, J = 16,0, 10,4, 6,0 Hz, 2H), 1,28 (d, J = 12,6 Hz, 18H) ppm.<2>H NMR (400 MHz, DMSO) δ 5,33 (bs, 1D), 1,28 (s, 6D) ppm.<19>F NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ -62,70, -73,26 ppm. ESI-MS m/z izračunato 762,33, pronađeno 785,3 (M+Na)<+>; vreme zadržavanja: 14,5 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom HPLC upotrebom Atlantis T3, 3 µm, 2,1 X 50 mm kupljenom od Waters (pn: 186003717) i dualnim gradijentnim tokom od 5 - 95% mobilne faze B tokom 14 minuta sa 4 minuta zadržavanja na 95% B. Mobilna faza A = H2O (0,1 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,1 % CF3CO2H). Brzina protoka = 0,7 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 2 µL i temperatura kolone = 40 °C.
Korak 4: terc-Butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-11,11,12-trideuterio-12-(trideuteriometil)-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,9,14,16-heksaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (E/Z smeša)
[0707]
[0708] U trogrloj boci opremljenoj mešalicom, iglom za disperziju gasa, kondenzatorom i produvavačem, kroz terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-[(1R)-1,2,2-trideuterio-1-(trideuteriometil)but-3-enoksi]-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (5,4 g, 7,079 mmol) u DCE (810 mL, 0,009 M) je propuštan N2tokom 1 sata. Smeša je zagrevana do 75 °C, nakon čega je dodat benziliden-bis(tricikloheksilfosfin)dihlororutenijum (1,201 g, 1,416 mmol) kao čvrsta materija. Reakcija je mešana na 75 °C uz propuštanje N2. Nakon 5 sati dodat je dodatni benzilidenbis(tricikloheksilfosfin)dihlororutenijum (0,45 g, 0,531 mmol) i smeša je zagrevana na 75 °C dodatna 2 sata. Unutrašnja temperatura je smanjena na 50 °C i dodata je 2-sulfanilpiridin -3-karboksilna kiselina (1,091 g, 7,033 mmol, 0,993 ekv.) a zatim trietilamin (0,72 g, 7,115 mmol) i reakciona temperatura je podešena na 45 °C. Materijal je ostavljen da se meša tokom noći. Smeša je uklonjena od zagrevanja i dodato je 13 g silika gela i mešano 30 minuta na temperaturi okruženja. Smeša je filtrirana preko celita, isprana sa DCE i koncentrovana pod redukovanim pritiskom. Ostatku je dodat DCM/heptan (1:3, 50 mL), praćeno filtracijom i nerastvorljiv precipitat je ispran heptanom. Filtrat je koncentrovan čime je dobijen sirov materijal. Sirovo jedinjenje je rastvoreno u DCM/heptan (1:1, 4 zapremine) i hromatografisano na normalno faznoj silika koloni od 120 g upotrebom gradijenta od 0% do 5% EtOAc/heksana tokom 13 minuta, a zatim gradijentom od 5% EtOAc tokom 23 minuta čime je dobijen sirov proizvod kao bezbojno ulje. Sakupljeno ulje je zatim rastvoreno u MeOH (3 zapremine) i postavljeno na C18reverzno faznu kolonu od 50 g koja je eluirana upotrebom gradijenta od 40% do 100% acetonitrila/vode tokom 20 minuta. Dobijene čiste frakcije su koncentrovane i osušene pod kućnim vakuumom tokom noći čime je dobijen terc-butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-11,11,12-trideuterio-12-(trideuteriometil)-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4, 18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,9,14,16-heksaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (E/Z smeša) kao pena bele boje (2,21 g, 42,5 %) koja je korišćena direktno u sledećem koraku.
Korak 5: (6R,12R)-17-Amino-11,11,12-trideuterio-12-(trideuteriometil)-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol, Jedinjenje 39
[0709]
[0710] terc-Butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-11,11,12-trideuterio-12-(trideuteriometil)-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,9,14,16-heksaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (E/Z smeša) (2,21 g, 3,008 mmol) je rastvoren u EtOH (44,2 mL, 0,068 M), i vakuum i azot su ciklično smenjivani 3 puta nakon čega je tretirano sa 10 % Pd/C (50% vlažni paladijum) (0,445 g, 4,181 mmol). Smeša je mešana na temperaturi okruženja pod balonom vodonika 23 sata. Vakuum i vodonik su ciklično smenjivani 3 puta, nakon čega je filtrirano preko celita, isprano etanolom i upareno pod redukovanim pritiskom čime je dobijen sirov terc-butil N-terc-butoksikarbonil-N-[(6R,12R)-11,11,12-trideuterio-6-hidroksi-12-(trideuteriometil)-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4, 18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat. Pena bele boje je rastvorena u DCM (17,68 mL, 0,17 M), ohlađena u ledenoj kadi i tretirana trifluoroacetatnom kiselinom (5,294 mL, 69,182 mmol) pod N2. Nakon toga je uklonjena ledena kada i bledo-žuti rastvor je mešan 2 sata. Rastvor žute boje je razblažen heptanom (10 mL), filtriran i filtrat je uparen pod redukovanim pritiskom. Sirov materijal je tretiran sa DCM (2,4 mL) u vodenoj kadi na 50 °C, a zatim je žuti bistri rastvor razblažen vrelim (60 °C) heptanom (12 mL), mešan u kadi sa toplom vodom i ostavljen da se polako ohladi na temperaturu okruženja. Formirana suspenzija je mešana na temperaturi okruženja tokom noći, i sakupljena je čvrsta supstanca bele boje i isprana heptanom čime je dobijen prvi rod proizvoda. Jedinjenje je osušeno u vakuum peći na 40 °C uz propuštanje azota tokom noći. Matična tečnost je koncentrovana i postavljena na C18reverzno faznu hromatografiju (50 g) eluirajući sa acetonitrilom/vodom (30 - 80%) tokom 25 minuta. Dobijena bledo žuta čvrsta supstanca je tretirana sa vrućim DCM/heptanom (1 mL/5 mL) nakon čega je ostavljena da se ohladi na temperaturu okruženja tokom noći. Formirana čvrsta supstanca je sakupljena i isprana heptanom čime je dobijeno 0,5 g proizvoda kao drugi rod. Spojeni rodovi su osušeni u vakuum peći na 45 °C pod azotom N2čime je dobijena beličasta čvrsta supstanca (6R,12R)-17-amino-11,11,12-trideuterio-12-(trideuteriometil)-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (1,14 g, 84,9 %).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,76 (s, 1H), 7,58 (s, 1H), 6,35 (s, 2H), 2,29 (t, J= 11,7 Hz, 1H), 2,16 - 2,04 (m, 1H), 1,73 (s, 2H), 1,56 - 1,44 (m, 1H), 1,44 (s, 3H) ppm. ESI-MS m/z izračunato 446,166, pronađeno 447,225 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 2,895 minuta. Konačna čistoća je utvrđena reverznom fazom UPLC upotrebom Acquity UPLC BEH C18kolone (50 X 2,1 mm, 1,7 µm čestica) kupljenom od Waters (pn: 186002350) i dualnim gradijentnim tokom od 1 - 99% mobilne faze B tokom 4,5 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1,2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Primer 28: Priprema (6R,12R)-17-amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6,11-diola (dijastereomer 1), Jedinjenje 40 i (6R,12R)-17-amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6,11-diola (dijastereomer 2), Jedinjenje 41
[0711]
Korak 1: Metil (2S)-2-triizopropilsililoksipropanoat
[0712]
[0713] U bocu sa okruglim dnom zapremine 500 mL je dodat rastvor metil (2S)-2-hidroksipropanoat (10,702 g, 10 mL, 100,74 mmol) i imidazol (16,5 g, 242,37 mmol) u DCM (220 mL). Rastvor je ohlađen do 0 °C i reakcionoj smeši je ukapavanjem tokom 30 minuta dodavan hloro(triizopropil)silan (22,957 g, 26 mL, 116,69 mmol). Reakciona smeša je zagrejana na sobnu temperaturu kako se led topio i me šana je tokom noći. Reakciona smeša je sipana u levak za razdvajanje i isprana je vodom (100 mL), zasićenim natrijum bikarbonatom (100 mL), slanim rastvorom (100 mL), 1 N HCl (100 mL) i slanim rastvorom (100 mL). Organski sloj je osušen preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu upotrebom 0 do 5% etra u heksanu čime je dobijen metil (2S)-2triizopropilsililoksipropanoat (25,4 g, 97%) kao bistra tečnost.<1>H NMR (500 MHz, hloroform-d) δ 4,44 (q, J = 6,7, 6,7, 6,7 Hz, 1H), 3,72 (s, 3H), 1,43 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,19 - 0,99 (m, 21H) ppm.
Korak 2: (2S)-2-Triizopropilsililoksipropanal
[0714]
[0715] Rastvoru metil (2S)-2-triizopropilsililoksipropanoat (1,008 g, 3,8703 mmol) u anhidrovanom DCM (18 mL) je ukapavanjem dodat 1,0 M DIBAL-H u toluenu (7,8 mL 1 M, 7,8000 mmol) na -78 °C. Nakon dodavanja, reakcija je mešana na istoj temperaturi 30 minuta. Ugašena je etil acetatom (4 mL) na istoj temperaturi, i reakcija je zagrejana na 0 °C u ledenoj kadi. Dodat je zasi ćeni vodeni rastvor natrijum kalijum tartrat (10 mL). Reakcija je mešana tokom noći. Dva sloja su razdvojena. Vodeni sloj je ekstraktovan sa DCM (3 X 15 mL). Spojeni organski slojevi su osušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je postavljen direktno na kolonu i pre čišćen hromatografijom na silika gelu upotrebom 0 do 10% dietil etra u heksanu čime je dobijen (2S)-2-triizopropilsililoksipropanal (838 mg, 94%) kao bistra tečnost.<1>H NMR (500 MHz, hloroform-d) δ 9,66 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 4,18 (qd, J = 6,8, 6,8, 6,8, 1,7 Hz, 1H), 1,30 (d, J = 6,8 Hz, 3H), 1,17 - 0,97 (m, 21H) ppm.
Korak 3: (2S)-2-Triizopropilsililoksiheks-5-en-3-ol
[0716]
[0717] Rastvoru (2S)-2-triizopropilsililoksipropanal (18,24 g, 79,160 mmol) u anhidrovanom DCM (350 mL) je ukapavanjem dodat allil(bromo)magnezijum u dietil etru (90 mL 1 M, 90,000 mmol) na -30 °C. Reakcija je mešana na istoj temperaturi 45 minuta nakon čega je zagrejana na 0 °C i mešana dodatnih 15 minuta. Reakcija je ugašena sa 10% amonijum hlorida (300 mL). Dva sloja su razdvojena i vodeni sloj je ekstraktovan sa DCM (2 X 250 mL). Spojeni organski slojevi su isprani slanim rastvorom (150 mL), osušeni preko anhidrovanog magnezijum sulfata i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je pre čišćen hromatografijom na silika gelu upotrebom 0 do 20% etra u heksanu čime je dobijena 1:1 smeša dijastereomera, (2S)-2-triizopropilsililoksiheks-5-en-3-ol (18 g, 83%) kao bistra tečnost.<1>H NMR (500 MHz, hloroform-d) δ 6,01 - 5,75 (m, 1H), 5,21 - 4,99 (m, 2H), 4,00 - 3,82 (m, 1H), 3,75 - 3,37 (m, 1H), 2,53 -2,03 (m, 3H), 1,28 - 0,90 (m, 24H) ppm.
Korak 4: [(1S)-2-Benziloksi-1-metil-pent-4-enoksi]-triizopropil-silan
[0718]
[0719] Suspenzija NaH (110 mg, 60 % w/w, 2,7503 mmol) u anhidrovanom DMF (10 mL) je ohlađena na 0 °C. Reakcionoj smeši je ukapavanjem dodat rastvor (2S)-2-triizopropilsililoksiheks-5-en-3-ol (672 mg, 2,4661 mmol) u anhidrovanom DMF (10 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 4 sata. Reakcionoj smeši je ukapavanjem dodat bromometilbenzen (504,00 mg, 0,35 mL, 2,9468 mmol) na 0 °C. Reakcija je zatim mešana na sobnoj temperaturi 2 sata. Reakcija je sipana preko 10% amonijum hlorid vodenog rastvora (30 mL) i ekstraktovana dietil etrom (3 X 30 mL). Spojeni organski slojevi su isprani slanim rastvorom (3 X 30 mL), osušeni preko anhidrovanog magnezijum sulfata i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu upotrebom 0 do 50% DCM u heksanu čime je dobijena 1:1 smeša dijastereomera, [(1S)-2-benziloksi-1-metil-pent-4-enoksi]-triizopropil-silan (957 mg, 100%) kao bistra tečnost.<1>H NMR (500 MHz, hloroform-d) δ 7,42 - 7,22 (m, 5H), 6,01 - 5,78 (m, 1H), 5,15 -4,88 (m, 2H), 4,85 - 4,53 (m, 2H), 4,20 - 3,90 (m, 1H), 3,63 - 3,35 (m, 1H), 2,58 - 2,08 (m, 2H), 1,31 - 1,10 (m, 3H), 1,11 - 0,78 (m, 21H) ppm.
Korak 5: (2S)-3-Benziloksiheks-5-en-2-ol
[0720]
[0721] Rastvoru [(1S)-2-benziloksi-1-metil-pent-4-enoksi]-triizopropil-silan (14,76 g, 40,704 mmol) u anhidrovanom THF (140 mL) je ukapavanjem dodato 1M TBAF u THF (41 mL 1 M, 41,000 mmol) na 0 °C. Reakcija je polako zagrejana na sobnu temperaturu i mešana tokom noći. Reakcija je koncentrovana pod vakuumom kako bi se uklonio THF. Ostatak je razblažen etil acetatom (400 mL) i ispran vodom (100 mL). Organski sloj je osušen preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu upotrebom 0 do 20% etil acetata u heksanu čime je dobijena smeša dijastereomera, (2S)-3-benziloksiheks-5-en-2-ol (7,363 g, 88%) kao bistra tečnost.<1>H NMR (500 MHz, hloroform-d) δ 7,45 - 7,20 (m, 5H), 5,96 - 5,77 (m, 1H), 5,20 - 4,99 (m, 2H), 4,78 - 4,44 (m, 2H), 3,98 -3,67 (m, 1H), 3,47 - 3,20 (m, 1H), 2,56 - 1,94 (m, 3H), 1,24 - 1,12 (m, 3H) ppm.
Korak 6: Metil 6-[(1R)-2-benziloksi-1-metil-pent-4-enoksi]-3-nitro-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilat
[0722]
[0723] Reakciona bočica je napunjena sa metil 6-hidroksi-3-nitro-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilatom (67 mg, 0,2518 mmol), (2S)-3-benziloksiheks-5-en-2-olom (71 mg, 0,3442 mmol) i trifenilfosfinom (99 mg, 0,0875 mL, 0,3775 mmol) u anhidrovanom THF (1 mL). Reakcionoj smeši je ukapavanjem dodat DIAD (69,948 mg, 0,067 mL, 0,3459 mmol) na 0 °C. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 24 sata. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu direktno upotrebom 0 do 10% etil acetata u heksanu čime je dobijen metil 6-[(1R)-2-benziloksi-1-metil-pent-4-enoksi]-3-nitro-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilat (71 mg, 60%) kao bistar gel.<1>H NMR (500 MHz, hloroform-d) δ 8,73 - 8,46 (m, 1H), 7,43 - 7,16 (m, 5H), 5,98 - 5,72 (m, 1H), 5,72 - 5,50 (m, 1H), 5,19 -4,93 (m, 2H), 4,73 - 4,61 (m, 1H), 4,61 - 4,54 (m, 1H), 4,12 - 3,91 (m, 3H), 3,84 - 3,61 (m, 1H), 2,54 - 2,26 (m, 2H), 1,47 - 1,35 (m, 3H) ppm. ESI-MS m/z izračunato 454,13516, pronađeno 455,1 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 3,96 minuta; LCMS metoda: Merck Millipore Chromolith SpeedROD C18kolona (50 X 4,6 mm) i dualni gradijentni tok od 5-100% mobilne faze B tokom 6 minuta. Mobilna faza A = voda (0,1 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,1 % CF3CO2H).
Korak 7: Metil 3-amino-6-[(1R)-2-benziloksi-1-metil-pent-4-enoksi]-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilat
[0724]
[0725] Rastvoru metil 6-[(1R)-2-benziloksi-1-metil-pent-4-enoksi]-3-nitro-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilat (1,255 g, 2,6514 mmol) u acetatnoj kiselini (15 mL) je dodato gvožđe (740,34 mg, 13,257 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 3 sata. Reakciona smeša je razblažena metanolom (15 mL) i filtrirana kroz jastuče celita. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je razblažen etil acetatom (50 mL) i zasićenim natrijum bikarbonatom (100 mL). Rastvor je filtriran kroz jastuče celita. Dva sloja su razdvojena i vodeni sloj je ekstraktovan etil acetatom (2 X 50 mL). Spojeni organski slojevi su isprani slanim rastvorom (50 mL), osušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu upotrebom 0 do 15% etil acetata u heksanu čime je dobijen metil 3-amino-6-[(1R)-2-benziloksi-1-metil-pent-4-enoksi]-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilat (1,073 g, 93%) kao gel žute boje. ESI-MS m/z izračunato 424,161, pronađeno 425,0 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 3,89 minuta; LCMS metoda: Merck Millipore Chromolith SpeedROD C18kolona (50 X 4,6 mm) i dualni gradijentni tok od 5-100% mobilne faze B tokom 6 minuta. Mobilna faza A = voda (0,1 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,1 % CF3CO2H).
Korak 8: Metil 6-[(1R)-2-benziloksi-1-metil-pent-4-enoksi]-3-(terc-butoksikarbonilamino)-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilat
[0726]
[0727] Rastvoru metil 3-amino-6-[(1R)-2-benziloksi-1-metil-pent-4-enoksi]-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilat (1,073 g, 2,4776 mmol) i Boc2O (1,34 g, 6,1398 mmol) u anhidrovanom THF (20 mL) je ukapavanjem dodato 1,0 M NaHMDS u THF (5 mL 1 M, 5,000 mmol) na -78 °C. Reakcija je mešana na istoj temperaturi sat vremena. Reakcija je hladno ugašena sa 10% amonijum hlorida (20 mL). Reakcija je zagrejana na sobnu temperaturu i ekstraktovana etil acetetom (3 X 30 mL). Spojeni organski slojevi su isprani slanim rastvorom (20 mL), osušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu upotrebom 0 do 15% etil acetata u heksanu čime je dobijen metil 6-[(1R)-2-benziloksi-1-metil-pent-4-enoksi]-3-(tercbutoksikarbonilamino)-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilat (1,328 g, 100%) kao bistri gel. ESI-MS m/z izračunato 524,21344, pronađeno 525,3 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 4,51 minuta; LCMS metoda: Merck Millipore Chromolith SpeedROD C18kolona (50 X 4,6 mm) i dualni gradijentni tok od 5-100% mobilne faze B tokom 6 minuta. Mobilna faza A = voda (0,1 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,1 % CF3CO2H).
Korak 9: 6-[(1R)-2-Benziloksi-1-metil-pent-4-enoksi]-3-(terc-butoksikarbonilamino)-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilna kiselina
[0728]
[0729] Rastvoru metil 6-[(1R)-2-benziloksi-1-metil-pent-4-enoksi]-3-(tercbutoksikarbonilamino)-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilat (1,328 g, 2,4812 mmol) u THF (15 mL) je dodat rastvor LiOH (299 mg, 12,485 mmol) u vodi (5 mL). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi sat vremena. Reakcija je zakiseljena sa 1 N HCl na pH 1. Reakcija je razblažena etil acetatom (30 mL) i vodom (10 mL). Dva sloja su razdvojena i vodeni sloj je ekstraktovan etil acetatom (2 X 30 mL). Spojeni organski slojevi su isprani slanim rastvorom (30 mL), osušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentrovani pod vakuumom čime je dobijena 6-[(1R)-2-benziloksi-1-metil-pent-4-enoksi]-3-(tercbutoksikarbonilamino)-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilna kiselina (1,067 g, 83%) kao svetlo žuti gel. ESI-MS m/z izračunato 510,19778, pronađeno 511,2 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 4,21 minuta; LCMS metoda: Merck Millipore Chromolith SpeedROD C18kolona (50 X 4,6 mm) i dualni gradijentni tok od 5-100% mobilne faze B tokom 6 minuta. Mobilna faza A = voda (0,1 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,1 % CF3CO2H).
Korak 10: terc-Butil N-[6-[(1R)-2-benziloksi-1-metil-pent-4-enoksi]-2-[[[(2R)-2-benziloksi-2(trifluorometil)pent-4-enoil]amino]karbamoil]-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat
[0730]
[0731] Rastvoru 6-[(1R)-2-benziloksi-1-metil-pent-4-enoksi]-3-(tercbutoksikarbonilamino)-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilna kiselina (1,067 g, 2,0483 mmol), (2R)-2-benziloksi-2-(trifluorometil)pent-4-enhidrazid (600 mg, 2,0814 mmol) i piridin (733,50 mg, 0,75 mL, 9,2731 mmol) u etil acetatu (10 mL) je dodat 1-propanfosfonski anhidrid (T3P) (913,99 mg, 1,71 mL 50 % w/w, 1,4363 mmol) u etil acetatu. Reakcija je zatim zagrejana do 50 °C i mešana sat vremena. Reakcija je razblažena etil acetatom (100 mL) i isprana sa 10% amonijum hlorida (30 mL) i slanim rastvorom (30 mL). Organski rastvor je osušen preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu upotrebom 0 do 30% etil acetata u heksanu čime je dobijen terc-butil N-[6-[(1R)-2-benziloksi-1-metil-pent-4-enoksi]-2-[[[(2R)-2-benziloksi-2-(trifluorometil)pent-4-enoil]amino]karbamoil]-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat (1,506 g, 92%) kao čvrsta supstanca bele boje. ESI-MS m/z izračunato 780,2958, pronađeno 781,7 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 4,54 minuta; LCMS metoda: Merck Millipore Chromolith SpeedROD C18kolona (50 X 4,6 mm) i dualni gradijentni tok od 5-100% mobilne faze B tokom 6 minuta. Mobilna faza A = voda (0,1 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,1 % CF3CO2H).
Korak 11: terc-Butil N-[6-[(1R)-2-benziloksi-1-metil-pent-4-enoksi]-2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat
[0732]
[0733] Rastvoru terc-butil N-[6-[(1R)-2-benziloksi-1-metil-pent-4-enoksi]-2-[[[(2R)-2-benziloksi-2-(trifluorometil)pent-4-enoil]amino]karbamoil]-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat (1,506 g, 1,8903 mmol) i DIEA (742,00 mg, 1 mL, 5,7411 mmol) u acetonitrilu (25 mL) je dodat p-toluensulfonil hlorid (440 mg, 2,3079 mmol) na 50 °C. Reakcija je zagrevana do 70 °C i mešana 3 sata. Reakcija je ohlađena na sobnu temperaturu i razblažena etil acetatom (100 mL). Organski rastvor je ispran sa 10% amonijum hlorida (30 mL) i slanim rastvorom (30 mL), osušen preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu upotrebom 0 do 5% etil acetata u heksanu čime je dobijen terc-butil N-[6-[(1R)-2-benziloksi-1-metil-pent-4-enoksi]-2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat (1,278 g, 87%) kao gel žute boje. ESI-MS m/z izračunato 762,2852, pronađeno 763,6 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 4,79 minuta; Merck Millipore Chromolith, SpeedROD C18kolona (50 X 4,6 mm) i dualni gradijentni tok od 5-100% mobilne faze B tokom 6 minuta. Mobilna faza A = voda (0,1 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril.
Korak 12: terc-Butil N-[(6R,12R)-6,11-dibenziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,8,14,16-heksaen-17-il]karbamat (E/Z smeša)
[0734]
[0735] Reakciona bočica je napunjena sa terc-butil N-[6-[(1R)-2-benziloksi-1-metil-pent-4-enoksi]-2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamatom (108 mg, 0,1388 mmol) i anhidrovanim DCE (20 mL). Kroz reakcionu smešu je propuštan argon tokom 2 minuta. Bočica je zatvorena i zagrevana do 50 °C. Reakcionoj smeši je dodat Zhan katalizator-1B (10 mg, 0,0131 mmol). Reakcija je mešana na 70 °C tokom 2 dana. Reakcija je koncentrovana pod redukovanim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu upotrebom 0 do 10% etil acetata u heksanu čime je dobijen terc-butil N-[(6R,12R)-6,11-dibenziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,8,14,16-heksaen-17-il]karbamat (E/Z smeša) (88 mg, 56%) kao bistri gel. ESI-MS m/z izračunato 734,2539, pronađeno 735,0 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 4,77 minuta; LCMS metoda: Merck Millipore Chromolith SpeedROD C18kolona (50 X 4,6 mm) i dualni gradijentni tok od 5-100% mobilne faze B tokom 6 minuta. Mobilna faza A = voda (0,1 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,1 % CF3CO2H).
Korak 13: terc-Butil N-[(6R,12R)-6,11-dihidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat
[0736]
[0737] Reakciona boca je napunjena sa terc-butil N-[(6R,12R)-6,11-dibenziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,8,14,16-heksaen-17-il]karbamatom (E/Z smeša) (88 mg, 0,0779 mmol) u etanolu (5 mL). Reakcionoj smeši je zatim dodato 10% Pd/C (50 mg, 10 % w/w, 0,0470 mmol). Reakcija je hidrogenizovana pod pritiskom 1 atm. vodonika tokom noći. Katalizator je isfiltriran preko jastučeta celita. Rastvarač je uparen pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0 do 20% etil acetata u heksanu) čime je kao prvi izomer za eluiranje dobijen terc-butil N-[(6R,12R)-6,11-dihidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat (dijastereomer 1) (20 mg, 46%). ESI-MS m/z izračunato 556,1757, pronađeno 557,2 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 3,61 minuta i kao drugi izomer za eluiranje, terc-butil N-[(6R,12R)-6,11-dihidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat (dijastereomer 2) (12 mg, 28%). ESI-MS m/z izračunato 556,1757, pronađeno 557,3 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 3,65 minuta. LCMS metoda: Merck Millipore Chromolith SpeedROD C18kolona (50 X 4,6 mm) i dualni gradijentni tok od 5-100% mobilne faze B tokom 6 minuta. Mobilna faza A = voda (0,1 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,1 % CF3CO2H.
Korak 14: (6R,12R)-17-Amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6,11-diol (dijastereomer 1), Jedinjenje 40
[0738]
[0739] Mikrotalasna bočica je napunjena sa terc-butil N-[(6R,12R)-6,11-dihidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamatom (dijastereomer 1) (133 mg, 0,2295 mmol) i heksafluoroizopropanolom (5 mL). Bočica je zatvorena i zagrevana na 100 °C tokom 2 i po sata u mikrotalasnom reaktoru. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Prečišćavanjem hromatografijom na silika gelu (0 do 30% etil acetata u heksanu) je dobijen (6R,12R)-17-amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6,11-diol (dijastereomer 1) (75,8 mg, 71%) kao ulje žute boje.<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7,77 (s, 1H), 7,59 (s, 1H), 6,35 (s, 2H), 4,88 - 4,69 (m, 1H), 4,59 - 4,52 (m, 1H), 4,50 (d, J = 6,1 Hz, 1H), 2,36 (t, J = 12,5 Hz, 1H), 2,12 - 1,99 (m, 1H), 1,76 -1,60 (m, 3H), 1,54 - 1,40 (m, 2H), 1,35 - 1,27 (m, 1H), 1,24 (d, J = 6,6 Hz, 3H) ppm. ESI-MS m/z izračunato 456,12323, pronađeno 457,3 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 2,17 minuta; LCMS metoda: Waters Cortex 2.7u C18(3,0mm X 50mm), 55 °C; protok: 1,2mL/min; mobilna faza: 100% voda sa 0,1% trifluoroacetatne kiseline zatim 100% acetonitrila sa 0,1% trifluoroacetatne kiseline, gradijent 5% do 100% B tokom 4 minuta, sa ekvilibracijom na 100% B tokom 0,5 minuta, zatim 5% B tokom 1,5 minuta.
Korak 15: (6R,12R)-17-Amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6,11-diol (dijastereomer 2), Jedinjenje 41
[0740]
[0741] Miktotalasna bočica je napunjena sa terc-butil N-[(6R,12R)-6,11-dihidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamatom (dijastereomer 2) (75 mg, 0,1321 mmol) i heksafluoroizopropanolom (5 mL). Reakcija je zagrevana na 100 °C u mikrotalasnom reaktoru tokom 2 i po sata. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Prečišćavanjem hromatografijom na silika gelu (0 do 30% etil acetata u heksanu) je dobijen (6 R,12R)-17-amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4, 14,16-pentaen-6,11-diol (dijastereomer 2) (39,2 mg, 63%) kao ulje žute boje.<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7,75 (s, 1H), 7,57 (s, 1H), 6,37 (s, 2H), 5,09 - 4,92 (m, 1H), 4,50 (d, J = 6,4 Hz, 1H), 3,75 - 3,58 (m, 1H), 2,36 - 2,26 (m, 1H), 2,24 - 2,13 (m, 1H), 2,08 - 1,95 (m, 1H), 1,75 - 1,62 (m, 1H), 1,62 - 1,50 (m, 1H), 1,44 - 1,35 (m, 2H), 1,34 (d, J = 6,7 Hz, 3H), 1,22 - 1,07 (m, 1H) ppm. ESI-MS m/z izračunato 456,12323, pronađeno 457,3 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 2,23 minuta; LCMS metoda: Waters Cortex 2.7u C18(3,0mm X 50mm), 55 °C; protok: 1,2mL/min; mobilna faza: 100% voda sa 0,1% trifluoroacetatna kiselina zatim 100% acetonitril sa 0,1% trifluoroacetatna kiselina, gradijent 5% do 100% B tokom 4 minuta, sa ekvilibracijom na 100% B tokom 0,5 minuta, zatim 5% B tokom 1,5 minuta.
Primer 29: Priprema (6R,12R)-17-amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6,9-diola (dijastereomer 1), Jedinjenje 42
[0742]
Korak 1: terc-Butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-9-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat (dijastereomer 1)
[0743]
[0744] Rastvoru terc-butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-9-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonilkarbamat i terc-butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-10-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonilkarbamat (smeša regioizomernih dijastereomera) (0,45 g, 0,6027 mmol) u DCM (30 mL) je dodat silika gel (4,5 g, 74,895 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 dana. Smeša je koncentrovana i prečišćena hromatografijom na silika gelu (80 g SiO2, eluirajući 0 do 10% EtOAc/DCM) dva puta i hromatografijom na silika gelu (80 g SiO2, eluirajući 10% do 30% EtOAc/heptani) čime je dobijena 1:3 smeša dva regionalna izomera, terc-butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-9-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat (mali dijastereomer) i terc-butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-10-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat (glavni dijastereomer) (215 mg, 55%) kao polučvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9,29 - 9,17 (m, 1H), 9,16 - 9,11 (m, 1H), 7,38 - 7,28 (m, 5H), 4,92 - 4,79 (m, 1H), 4,79 - 4,67 (m, 2H), 4,16 - 3,92 (m, 1H), 2,77 (br dd, J = 13,1, 3,8 Hz, 1H), 2,67 - 2,55 (m, 1H), 2,48 - 2,25 (m, 1H), 1,98 - 1,80 (m, 2H), 1,78 - 1,63 (m, 3H), 1,59 (d, J = 6,4 Hz, 3H), 1,56 (s, 9H), 1,50 - 1,46 (m, 1H) ppm.<19>F NMR za glavni proizvod (377 MHz, CDCl3) δ -63,88 (s, 3F), -74,11 (s, 3F).<19>F NMR za mali proizvod (377 MHz, CDCl3) δ -63,86 (s, 3F), -74,07 (s, 3F) ppm; kao i čist terc-butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-9-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat (dijastereomer 1) (175 mg, 45%) kao bezbojno ulje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9,17 - 9,08 (m, 2H), 7,37 - 7,28 (m, 5H), 5,07 - 4,96 (m, 1H), 4,79 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 4,47 (d, J= 10,8 Hz, 1H), 4,40 -4,29 (m, 1H), 2,69 - 2,56 (m, 1H), 2,30 (dt, J = 14,8, 5,8 Hz, 1H), 2,24 - 2,14 (m, 1H), 2,06 - 1,89 (m, 2H), 1,77 - 1,60 (m, 3H), 1,57 (s, 9H), 1,53 - 1,50 (m, 1H), 1,48 (d, J = 6,1 Hz, 3H) ppm.<19>F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -63,84 (s, 3F), -73,91 (s, 3F) ppm.
Korak 2: terc-Butil N-[(6R,12R)-6,9-dihidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat (dijastereomer 1)
[0745]
[0746] Rastvoru terc-butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-9-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat (dijastereomer 1) (60 mg, 0,0928 mmol) u MeOH (5 mL) je dodato 10% paladijuma na ugljeniku 50% vlažno (30 mg, 0,0141 mmol). Smeša je mešana pod vodonikom (balon) na sobnoj temperaturi tokom noći. Smeša je filtrirana kroz dijatomejsku zemlju i isprana sa EtOAc. Filtrat je koncentrovan i ostatak je pre čišćen hromatografijom na silika gelu (24 g SiO2, eluirajući 10 do 30% EtOAc/CH2Cl2) čime je dobijen terc-butil N-[(6R,12R)-6,9-dihidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat (dijastereomer 1) (48 mg, 93%) kao čvrsta supstanca bele boje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9,15 (s, 1H), 9,07 (s, 1H), 6,65 (br s, 1H), 5,07 - 4,94 (m, 1H), 4,15 - 4,06 (m, 1H), 3,29 (br d, J = 10,0 Hz, 1H), 2,58 (br t, J = 11,9 Hz, 1H), 2,52 -2,37 (m, 2H), 2,21 - 2,08 (m, 1H), 2,05 - 1,96 (m, 1H), 1,82 - 1,66 (m, 2H), 1,56 (s, 9H), 1,54 - 1,47 (m, 4H) ppm.<19>F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -63,96 (s, 3F), -78,47 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z izračunato 556,17566, pronađeno 557,1 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 3,62 minuta; LCMS metoda: Kinetex Polar C183,0 X 50 mm 2,6 µm, 6 minuta, 5 - 95% acetonitrila u H2O (0,1% mravlja kiselina) 1,2 mL/min.
Korak 3: (6R,12R)-17-Amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6,9-diol (dijastereomer 1), Jedinjenje 42
[0747]
[0748] Rastvoru terc-butil N-[(6R,12R)-6,9-dihidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat (dijastereomer 1) (38 mg, 0,0683 mmol) u DCM (2 mL) je ukapavanjem dodato TFA (2 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi sat vremena. Smeša je koncentrovana pod redukovanim pritiskom na sobnoj temperaturi i uparena zajedno sa MeOH (2 X 3 mL). Ostatak je rastvoren u EtOAc (20 mL) i ispran zasićenim NaHCO3(5 mL), osušen sa Na2SO4, filtriran i koncentrovan. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (12 g SiO2, eluirajući 10 do 50% EtOAc/CH2Cl2) čime je dobijen (6R,12R)-17-amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6,9-diol (dijastereomer 1) (23 mg, 74%) kao bledo žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,76 (s, 1H), 7,59 (s, 1H), 6,35 (s, 2H), 5,00 - 4,89 (m, 1H), 4,57 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 3,98 - 3,87 (m, 1H), 2,37 -2,23 (m, 3H), 2,07 - 1,98 (m, 1H), 1,62 - 1,48 (m, 2H), 1,42 - 1,28 (m, 5H) ppm.<19>F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62,51 (s, 3F), -76,36 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z izračunato 456,12323, pronađeno 457,1 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 2,94 minuta; LCMS metoda: Kinetex Polar C183,0 X 50 mm 2,6 µm, 6 minuta, 5 - 95% acetonitrila u H2O (0,1% mravlja kiselina) 1,2 mL/min.
Primer 30: Priprema (6R,12R)-17-amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6,10-diola (dijastereomer 1), Jedinjenje 43
[0749]
Korak 1: terc-Butil N-[(6R,12R)-6,10-dihidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat (regioizomerni dijastereomer 1)
[0750]
[0751] Rastvoru 1:3 smeši terc-butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-9-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat i terc-butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-10-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat (1:3 smeša regioizomernih dijastereomera) (80 mg, 0,1237 mmol) u MeOH (3 mL) je dodato 10% paladijuma na ugljeniku 50% vlažnost (30 mg, 0,0141 mmol). Vazduh je zamenjen azotom kroz vakuum 3 puta. Smeša je mešana pod vodonikom (balon) na sobnoj temperaturi tokom noći. Smeša je filtrirana kroz dijatomejsku zemlju i isprana sa EtOAc. Filtrat je koncentrovan i prečišćen hromatografijom na silika gelu (40 g SiO2, eluirajući 0 do 30% EtOAc/heptani) dva puta čime je dobijen terc-butil N-[(6R,12R)-6,10-dihidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat (regioizomerni dijastereomer 1) (30 mg, 44%) kao bezbojno ulje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9,11 (s, 1H), 9,06 (s, 1H), 4,87 - 4,74 (m, 1H), 4,25 - 4,09 (m, 1H), 3,94 (br s, 1H), 2,85 (br dd, J = 13,3, 3,8 Hz, 1H), 2,47 - 2,25 (m, 2H), 2,01 - 1,79 (m, 3H), 1,73 - 1,65 (m, 1H), 1,62 - 1,47 (m, 14H) ppm.<19>F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -63,88 (s, 3F), -77,40 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z izračunato 556,17566, pronađeno 557,1 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 3,62 minuta; LCMS metoda: Kinetex Polar C183,0 X 50 mm 2,6 µm, 6 minuta, 5 - 95% acetonitrila u H2O (0,1% mravlja kiselina) 1,2 mL/min.
Korak 2: [(6R,12R)-17-Amino-6-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-10-il] 2,2,2-trifluoroacetat (regioizomerni dijastereomer 1)
[0752]
[0753] Rastvoru terc-butil N-[(6R,12R)-6,10-dihidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat (regioizomerni dijastereomer 1) (30 mg, 0,0539 mmol) u DCM (2 mL) je dodato TFA (2,9600 g, 2 mL, 25,960 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi sat vremena. Smeša je koncentrovana pod redukovanim pritiskom na 40 °C. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (24 g SiO2, eluirajući 0 do 30% EtOAc/heptani) čime je dobijen [(6R,12R)-17-amino-6-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-10-il] 2,2,2-trifluoroacetat (regioizomerni dijastereomer 1) (27 mg, 91%) kao bledo žuto ulje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,46 (s, 1H), 5,59 (tdd, J = 8,5, 3,9, 2,3 Hz, 1H), 5,37 (s, 2H), 4,58 (quin, J = 6,7 Hz, 1H), 3,82 (s, 1H), 3,01 (dd, J = 14,3, 3,8 Hz, 1H), 2,64 (br t, J= 12,2 Hz, 1H), 2,39 - 2,28 (m, 1H), 2,11 - 2,01 (m, 1H), 2,00 - 1,71 (m, 4H), 1,51 (d, J = 6,4 Hz, 3H) ppm.<19>F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -64,00 (s, 3F), -75,28 (s, 3F), -77,43 (s, 3F) ppm.
Korak 3: (6R,12R)-17-Amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6,10-diol (dijastereomer 1), Jedinjenje 43
[0754]
[0755] Rastvoru [(6R,12R)-17-amino-6-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-10-il] 2,2,2-trifluoroacetat (regioizomerni dijastereomer 1) (27 mg, 0,0489 mmol) u THF (2 mL) na 0 °C je dodat rastvor NaOH (8,6 mg, 0,2150 mmol) u H2O (0,5 mL). Smeša je mešana na 0 °C tokom sat vremena, tretirana zasićenim NaHCO3(5 mL) i slanim rastvorom (3 mL). Smeša je ekstraktovana sa EtOAc (3 X 10 mL). Spojeni organski slojevi su osušeni sa Na2SO4, filtrirani i koncentrovani. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (12 g SiO2, eluirajući 20 do 50% EtOAc/CH2Cl2) čime je dobijen (6R,12R)-17-amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6,10-diol (dijastereomer 1) (17 mg, 76%) kao bledo žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,77 (s, 1H), 7,61 (s, 1H), 6,37 (s, 2H), 4,76 - 4,65 (m, 1H), 4,52 (d, J = 5,1 Hz, 1H), 3,97 - 3,84 (m, 1H), 2,60 (br dd, J = 12,3, 4,5 Hz, 1H), 2,43 - 2,32 (m, 1H), 2,16 - 2,02 (m, 1H), 1,75 - 1,50 (m, 4H), 1,44 (d, J = 6,4 Hz, 3H), 1,31 - 1,22 (m, 1H) ppm.<19>F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62,55 (s, 3F), -76,26 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z izračunato 456,12323, pronađeno 457,1 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 2,87 minuta; LCMS metoda: Kinetex Polar C183,0 X 50 mm 2,6 µm, 6 minuta, 5 - 95% acetonitrila u H2O (0,1% mravlja kiselina) 1,2 mL/min. Primer 31: Priprema (6R,12R)-17-amino-8,9-dideuterio-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,14(18),15-pentaen-6-ola, Jedinjenje 44
[0756]
Korak 1: (2S)-Heks-5-en-2-ol
[0757]
[0758] Rastvoru žute boje alil(bromo)magnezijum (103 mL 1 M, 103,00 mmol) u dietil etru je dodat bakar bromid (975 mg, 6,7968 mmol) na 0 °C, zatim je smeša crne boje mešana na -78 °C. Nakon 5 minuta, levkom za ukapavanje je dodavan rastvor (2S)-2-metiloksiran (1,9896 g, 2,4 mL, 34,257 mmol) u THF (30 mL) tokom 20 minuta na -78 °C. Nakon toga smeša crne boje je mešana na -78 °C tokom 30 minuta. Dodat je metanol (16 mL) na -78 °C a zatim vodeni vodonik hlorid (2M, 80 mL) nakon čega je mešana na sobnoj temperaturi 5 minuta. Nakon toga je dodato MTBE (120 mL), vodeni sloj je razdvojen i ekstraktovan sa MTBE (2 X 120 mL). Organski slojevi su isprani vodenim vodonik hloridom (1M, 50 mL), vodom (50 mL), vodenim natrijum tiosulfatom (10%, 50 mL) i ponovo sa vodom (50 mL). Organski slojevi su osušeni preko natrijum sulfata i koncentrovani pod vakuumom. Uljani ostatak je suvo postavljen sa silika gelom i prečišćen tečnom hromatografijom na silika gelu eluirajući sa delovima etil acetata (0-30%) u heptanima čime je dobijen (2S)-heks-5-en-2-ol (1,66 g, 44%) kao svetlo žuto ulje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 5,93 -5,75 (m, 1H), 5,14 - 4,89 (m, 2H), 3,92 - 3,72 (m, 1H), 2,28 - 2,01 (m, 2H), 1,66 - 1,45 (m, 2H), 1,24 - 1,18 (m, 3H) ppm.
Korak 2: terc-Butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1,3,4-oksadiaziol-2-il]-6-[(1R)-1-metilpent-4-enoksi]-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat
[0759]
[0760] Rastvoru terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-hidroksi-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (325 mg, 0,4818 mmol) i (2S)-heks-5-en-2-ol (160 mg, 1,4377 mmol) u toluenu (4 mL) je tretiran sa trifenilfosfinom (264 mg, 1,0065 mmol) a zatim sa DIAD (205,40 mg, 0,2 mL, 1,0158 mmol) na sobnoj temperaturi. Rastvor žute boje je mešan na sobnoj temperaturi tokom noći. Suspenzija žute boje je koncentrovana pod vakuumom, zatim suvo postavljena na siliku sa DCM. Prečišćavanjem hromatografijom na silika gelu (0 - 30% EtOAc/heptani) je dobijen terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-[(1R)-1-metilpent-4-enoksi]-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (320 mg, 74%) kao ulje žute boje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,83 (s, 1H), 7,35 (d, J = 8,3 Hz, 5H), 5,93 (td, J = 17,0, 7,1 Hz, 1H), 5,86 - 5,74 (m, 1H), 5,37 - 5,28 (m, 1H), 5,28 - 5,15 (m, 2H), 5,03 - 4,88 (m, 2H), 4,82 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 4,63 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 3,28 - 3,11 (m, 2H), 2,27 - 2,02 (m, 2H), 1,97 - 1,84 (m, 1H), 1,79 - 1,66 (m, 1H), 1,43 (s, 18H), 1,38 (d, J = 6,1 Hz, 3H) ppm.<19>F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -64,13 do -64,28 (m, 3F), -73,32 do -73,43 (m, 3F) ppm.
Korak 3: terc-Butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,8,14,16-heksaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonilkarbamat (E/Z smeša)
[0762] Mešajući rastvor terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-[(1R)-1-metilpent-4-enoksi]-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (320 mg, 0,3582 mmol) u 1,2-dihloroetanu (175 mL) je degaziran propuštanjem azot gasa tokom 24 sata. Rastvoru na 60 °C je dodat Zhan katalizator-1B (18 mg, 0,0245 mmol) nakon čega je reakcija mešana na ovoj temperaturi 40 minuta. Zatim, dodata je jednaka količina Zhan katalizatora-1B (18 mg, 0,0245 mmol) i mešanje je nastavljeno na 60 °C tokom 2 i po sata. Nakon što je ohlađena na sobnu temperaturu, katalizator je ugašen sa nekoliko kapljica DMSO (približno 5-6) i reakcija je koncentrovana pod redukovanim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu upotrebom gradijenta od 0% do 90% etil acetata u heptanima čime je dobijen terc-butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,8,14,16-heksaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (E/Z smeša) (290 mg, 73%) kao čvrsta supstanca bele boje koja je još uvek sadržala malu količinu nepoznate nečistoće.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,82 (s, 1H), 7,34 - 7,24 (m, 5H), 5,84 (dt, J = 14,9, 7,2 Hz, 1H), 5,76 - 5,64 (m, 1H), 5,28 - 5,15 (m, 1H), 4,79 (d, J = 11,0 Hz, 1H), 4,50 (d, J= 11,2 Hz, 1H), 3,13 (dd, J = 14,4, 7,3 Hz, 1H), 2,77 (dd, J = 14,4, 6,8 Hz, 1H), 2,33 (dt, J = 13,7, 6,8 Hz, 1H), 2,13 - 2,03 (m, 1H), 1,98 (dd, J = 13,0, 7,1 Hz, 1H), 1,72 - 1,60 (m, 1H), 1,50 (d, J = 6,4 Hz, 3H), 1,46 (s, 18H) ppm.<19>F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -63,96 (s, 3F), -74,55 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z izračunato 728,26447, pronađeno 573,2 (M-155, -Boc, -<t>Bu)<+>; vreme zadržavanja: 4,48 minuta; LCMS metoda: XBridge C184,6 X 75mm 5µm, inicijalni gradijent na 95% NH4HCO3/ 5% acetonitrila 6 minuta tok sa 1 minut ekvilibracijom, gradijent 0 do 3 minuta na 95% acetonitrila i zadr žavanje 3 minuta, sa brzinom protoka 1,5 mL/min.
Korak 4: terc-Butil N-terc-butoksikarbonil-N-[(6R,12R)-8,9-dideuterio-6-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,14(18),15-pentaen-17-il]karbamat
[0763]
[0764] Rastvoru terc-butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,8, 14, 16-heksaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (E/Z smeša) (140 mg, 0,1921 mmol) u CD3OD (5,6 mL) pod azotom je dodato 10% paladijuma na ugljeniku (36 mg, 0,0338 mmol). Azot je zamenjen deuterijum gasom kroz vakuum 3 puta. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi pod atmosferom deuterijuma (balon) tokom no ći. Smeša je filtrirana kroz jastuče celita i isprana sa EtOAc (30 mL) a zatim koncentrovana uparavanjem pod redukovanim pritiskom čime je dobijen terc-butil N-terc-butoksikarbonil-N-[(6R,12R)-8,9-dideuterio-6-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,14(18),15-pentaen-17 -il]karbamat (127 mg, 88%) kao bezbojno ulje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,83 (s, 1H), 5,00 - 4,85 (m, 1H), 3,95 - 3,65 (m, 1H), 2,73 - 2,55 (m, 1H), 2,34 - 2,22 (m, 1H), 2,21 - 2,10 (m, 1H), 2,08 - 1,96 (m, 1H), 1,67 - 1,19 (m, 25H) ppm.<19>F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -63,99 (s, 3F), -77,58 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z izračunato 642,2457, proanađeno 487,1 (M-155)<+>; vreme zadržavanja: 4,01 minuta. LCMS metoda: Kinetex Polar C183,0 X 50 mm 2,6 µm, 6 minuta, 5 - 95% acetonitrila u H2O (0,1% mravlja kiselina) sa 1,2 mL/min.
Korak 5: (6R,12R)-17-Amino-8,9-dideuterio-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,14(18),15-pentaen-6-ol, Jedinjenje 44
[0765]
[0766] Rastvoru terc-butil N-terc-butoksikarbonil-N-[(6R,12R)-8,9-dideuterio-6-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,14(18),15-pentaen-17 -il]karbamat (127 mg, 0,1682 mmol) u dihlorometanu (1,4 mL) je dodata 2,2,2-trifluoroacetatna kiselina (2,0720 g, 1,4 mL, 18,172 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 i po sata. Smeša je zatim razblažena dihlorometanom (5 mL) nakon čega je koncentrovana uparavanjem pod redukovanim pritiskom. Ostatak je rastvoren u etil acetatu (100 mL), ispran vodenim zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata (3 X 15 mL) i slanim rastvorom (1 X 15 mL) a zatim je osušen anhidrovanim natrijum sulfatom, filtriran i koncentrovan uparavanjem pod redukovanim pritiskom. Ostatak je pre čišćen hromatografijom na silika gelu (12 g SiO2, 0 do 25% delova etil acetata u heptanima). Proizvod je rastvoren u minimalnoj koli čini acetonitrila i vode i osušen zamrzavanjem tokom noći čime je dobijen (6R,12R)-17-amino-8,9-dideuterio-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17), 2,4,14(18),15-pentaen-6-ol (70 mg, 94%) kao čvrsta supstanca žute boje.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,77 (s, 1H), 7,56 (s, 1H), 6,35 (s, 2H), 4,85 - 4,73 (m, 1H), 2,49 - 2,43 (m, 1H), 2,32 - 2,20 (m, 1H), 2,14 -2,04 (m, 1H), 1,73 - 1,66 (m, 1H), 1,58 - 1,37 (m, 3H), 1,34 (d, J = 6,1 Hz, 3H), 1,22 - 1,12 (m, 1H) ppm.
<19>F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62,50 (s, 3F), -76,40 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z izračunato 442,1409, pronađeno 443,1 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 3,53 minuta. LCMS metoda: Kinetex Polar C183,0 X 50 mm 2,6 µm, 6 minuta, 5 - 95% acetonitrila u H2O (0,1% mravlja kiselina) 1,2 mL/min.
Primer 32: Priprema (6R,12R)-17-amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6,9-diola (dijastereomer 2), Jedinjenje 45
[0767]
Korak 1: terc-Butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-12-metil-9-okso-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat
[0768]
[0769] Rastvoru terc-butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-9-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat (147 mg, 0,2274 mmol) u DCM (12 mL) je dodato NaHCO3(320 mg, 3,8092 mmol). Smeša je ohlađena do 0 °C i dodat je Dess-Martin Periodinan (108 mg, 0,2546 mmol). Smeša je polako zagrejana na sobnu temperaturu i mešana na sobnoj temperaturi tokom noći. Smeša je tretirana zasićenim NaHCO3(8 mL) i ekstraktovana sa CH2Cl2(3 X 10 mL). Spojeni organski slojevi su osušeni sa Na2SO4, filtrirani i koncentrovani. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (24 g SiO2, eluirajući 10 do 30% EtOAc/heptani) čime je dobijen terc-butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-12-metil-9-okso-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat (120 mg, 82%) kao bezbojno ulje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9,48 (s, 1H), 9,14 (s, 1H), 7,36 - 7,27 (m, 5H), 5,10 - 5,00 (m, 1H), 4,73 (d, J = 11,2 Hz, 1H), 4,57 (d, J = 11,0 Hz, 1H), 3,06 - 2,91 (m, 3H), 2,71 (ddd, J = 16,9, 10,1, 2,3 Hz, 1H), 2,60 - 2,47
(m, 2H), 2,29 - 2,18 (m, 1H), 1,88 - 1,76 (m, 1H), 1,55 (s, 9H), 1,48 (d, J = 6,4 Hz, 3H) ppm.<19>F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -63,85 (s, 3F), -74,57 (s, 3F) ppm.
Korak 2: terc-Butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-9-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat (dijastereomer 2)
[0770]
[0771] Rastvoru terc-butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-12-metil-9-okso-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat (120 mg, 0,1862 mmol) u EtOH (10 mL) na 0 °C je ukapavanjem dodat rastvor NaBH4(4,8 mg, 0,1269 mmol) u EtOH (1 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi sat vremena. Dodato je jo š NaBH4(4 mg, 0,1057 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 20 minuta. Dodat je aceton (1 mL). Sme ša je mešana na sobnoj temperaturi 5 minuta. Dodat je zasićeni NaHCO3(1 mL). Smeša je koncentrovana kako bi se uklonio EtOH. Ostatak je tretiran vodom (2 mL) i ekstraktovan sa CH2Cl2(3 X 10 mL). Spojeni organski slojevi su osušeni sa Na2SO4, filtrirani i koncentrovani. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (80 g SiO2, eluirajući sa 10 do 30% EtOAc/heptani) čime su dobijena dva dijastereomera. Željeni dijastereomer 2, terc-butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-9-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat (dijastereomer 2) (60 mg, 50%) kao bezbojno ulje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9,18 (s, 1H), 9,12 (s, 1H), 7,36 - 7,27 (m, 5H), 4,85 -4,67 (m, 3H), 4,01 - 3,90 (m, 1H), 2,79 (t, J = 12,3 Hz, 1H), 2,51 - 2,31 (m, 2H), 2,25 - 2,12 (m, 1H), 1,97 -1,78 (m, 2H), 1,73 - 1,63 (m, 2H), 1,56 (s, 9H), 1,54 - 1,51 (m, 1H), 1,49 (d, J = 6,4 Hz, 3H) ppm.<19>F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -63,87 (s, 3F), -74,08 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z izračunato 646,2226, pronađeno 647,2 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 4,14 minuta; LCMS metoda: Kinetex Polar C183,0 X 50 mm 2,6 µm, 6 minuta, 5 - 95% acetonitrila u H2O (0,1% mravlja kiselina) 1,2 mL/min.
[0772] Drugi enantiomer, dijastereomer 1, je bio prvi za eluiranje terc-butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-9-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2, 4,14,16-pentaen-17-il]karbamat (60 mg, 50%) kao bezbojno ulje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9,16 - 9,07 (m, 2H), 7,36 - 7,28 (m, 5H), 5,01 (ddd, J = 9,5, 6,4, 3,2 Hz, 1H), 4,79 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 4,47 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 4,40 - 4,27 (m, 1H), 2,63 (dt, J = 14,7, 7,7 Hz, 1H), 2,30 (dt, J = 14,8, 5,7 Hz, 1H), 2,24 -2,14 (m, 1H), 2,05 - 1,92 (m, 2H), 1,77 - 1,68 (m, 3H), 1,57 (s, 9H), 1,54 - 1,51 (m, 1H), 1,48 (d, J = 6,4 Hz, 3H) ppm.<19>F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -63,85 (s, 3F), -73,92 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z izračunato 646,2226, pronađeno 647,2 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 4,16 minuta; LCMS metoda: Kinetex Polar C183,0 X 50 mm 2,6 µm, 6 minuta, 5 - 95% acetonitrila u H2O (0,1% mravlja kiselina) 1,2 mL/min.
Korak 3: terc-Butil N-[(6R,12R)-6,9-dihidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat (dijastereomer 2)
[0773]
[0774] Rastvoru terc-butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-9-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat (dijastereomer 2) (60 mg, 0,0928 mmol) u MeOH (5 mL) je dodato 10% paladijuma na ugljeniku 50% vlažnost (30 mg, 0,0141 mmol). Smeša je mešana pod vodonikom (balon) na sobnoj temperaturi tokom noći. Smeša je filtrirana kroz dijatomejsku zemlju i isprana sa EtOAc. Filtrat je koncentrovan i pre čišćavanjem hromatografijom na silika gelu (24 g SiO2, eluirajući 10 do 30% EtOAc/CH2Cl2) je dobijen terc-butil N-[(6R,12R)-6,9-dihidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat (dijastereomer 2) (48 mg, 93%) kao čvrsta supstanca bele boje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9,15 (s, 1H), 9,07 (s, 1H), 6,65 (br s, 1H), 5,07 - 4,94 (m, 1H), 4,15 - 4,06 (m, 1H), 3,29 (br d, J = 10,0 Hz, 1H), 2,58 (br t, J = 11,9 Hz, 1H), 2,52 -2,37 (m, 2H), 2,21 - 2,08 (m, 1H), 2,05 - 1,96 (m, 1H), 1,82 - 1,66 (m, 2H), 1,56 (s, 9H), 1,54 - 1,47 (m, 4H) ppm.<19>F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -63,96 (s, 3F), -78,47 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z izračunato 556,17566, pronađeno 557,1 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 3,62 minuta; LCMS metoda: Kinetex Polar C183,0 X 50 mm 2,6 µm, 6 minuta, 5 - 95% acetonitrila u H2O (0,1% mravlja kiselina) 1,2 mL/min.
Korak 4: (6R,12R)-17-Amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6,9-diol (dijastereomer 2), Jedinjenje 45
[0775]
[0776] Rastvoru terc-butil N-[(6R,12R)-6,9-dihidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat (dijastereomer 2) (38 mg, 0,0683 mmol) u CH2Cl2(2 mL) na 0 °C je dodato TFA (1,4800 g, 1 mL, 12,980 mmol). Smeša je mešana na 13-15 °C tokom sat vremena. Dodat je MeOH (2 mL). Smeša je koncentrovana i uparena zajedno sa MeOH (2 X 3 mL). Ostatak je rastvoren u EtOAc (20 mL) i ispran zasićenim NaHCO3(4 mL), osušen sa Na2SO4, filtriran i koncentrovan. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (12 g SiO2, 10 do 30% EtOAc/CH2Cl2) i proizvod je osušen zamrzavanjem čime je dobijen (6R,12R)-17-amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6,9-diol (dijastereomer 2) (19 mg, 57%) kao bledo žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,75 (s, 1H), 7,61 (s, 1H), 6,33 (s, 2H), 4,70 - 4,55 (m, 2H), 3,73 - 3,62 (m, 1H), 2,46 - 2,29 (m, 2H), 2,19 - 2,08 (m, 1H), 2,02 - 1,90 (m, 1H), 1,71 - 1,45 (m, 3H), 1,35 (d, J = 6,1 Hz, 3H), 1,30 - 1,21 (m, 1H) ppm.<19>F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62,47 (s, 3F), -76,20 (br. s., 3F) ppm. ESI-MS m/z izračunato 456,1232, pronađeno 457,1 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 2,89 minuta; Kinetex Polar C183,0 X 50 mm 2,6 µm, 6 minuta, 5 - 95% acetonitrila u H2O (0,1% mravlja kiselina) 1,2 mL/min.
Primer 33: Priprema (6R,12R)-17-amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6,10-diola (dijastereomer 2), Jedinjenje 46
[0777]
Korak 1: terc-Butil N-[(6R,12R)-6-hidroksi-12-metil-10-okso-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat [0778]
[0779] Rastvoru terc-butil N-[(6R,12R)-6,10-dihidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat (65 mg, 0,1168 mmol) u CH2Cl2(8 mL) je dodato NaHCO3(168 mg, 1,9998 mmol). Smeša je ohlađena do 0 °C i dodat je Dess-Martin periodinan (51 mg, 0,1202 mmol). Smeša je ostavljena da se polako zagreje na sobnu temperaturu i mešana je na sobnoj temperaturi tokom noći. Smeša je tretirana zasićenim NaHCO3(10 mL) i ekstraktovana sa CH2Cl2(3 X 10 mL). Spojeni organski slojevi su osušeni sa Na2SO4, filtrirani i koncentrovani. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (12 g SiO2, eluirajući 10 do 60% EtOAc/heptana) čime je dobijen terc-butil N-[(6R,12R)-6-hidroksi-12-metil-10-okso-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat (38 mg, 59%) kao čvrsta supstanca bele boje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9,24 (s, 1H), 9,14 (s, 1H), 5,24 (quind, J = 6,4, 2,0 Hz, 1H), 4,75 (s, 1H), 3,56 (dd, J = 18,3, 1,7 Hz, 1H), 2,75 - 2,59 (m, 3H), 2,47 (dd, J = 18,3, 6,1 Hz, 1H), 2,25 - 2,07 (m, 2H), 2,00 - 1,87 (m, 1H), 1,55 (s, 9H), 1,53 (d, J = 6,6 Hz, 3H) ppm.<19>F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -63,83 (s, 3F), -78,16 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z izračunato 554,16003, pronađeno 499,1 (M-55)<+>; vreme zadržavanja: 2,36 minuta; LCMS metoda: Kinetex Polar C183,0 X 50 mm 2,6 µm, 3 minuta, 5 - 95% acetonitrila u H2O (0,1% mravlja kiselina) 1,2 mL/min.
Korak 2: terc-Butil N-[(6R,12R)-6,10-dihidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat (dijastereomer 2)
[0780]
[0781] Rastvoru terc-butil N-[(6R,12R)-6-hidroksi-12-metil-10-okso-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat (33 mg, 0,0595 mmol) u EtOH (4 mL) na 0 °C je dodat rastvor NaBH4(2,1 mg, 0,0555 mmol) u EtOH (0,5 mL). Smeša je bila na 0 °C tokom 4 sata. Dodat je aceton (1 mL). Smeša je mešana na 0 °C tokom 5 minuta. Dodat je zasićeni NaHCO3(5 mL). Smeša je ekstraktovana sa EtOAc (3 X 10 mL). Spojeni organski slojevi su osušeni sa Na2SO4, filtrirani i koncentrovani. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (12 g SiO2, eluirajući 0 do 50% EtOAc/heptana) čime je dobijen terc-butil N-[(6R,12R)-6,10-dihidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat (dijastereomer 2) (10 mg, 30%) kao bledo žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9,13 (s, 2H), 5,27 - 5,16 (m, 1H), 4,06 - 3,95 (m, 1H), 3,85 (s, 1H), 2,58 - 2,38 (m, 3H), 2,34 - 2,23 (m, 1H), 2,04 - 1,90 (m, 1H), 1,78 - 1,63 (m, 4H), 1,56 (s, 9H), 1,49 (d, J = 6,4 Hz, 3H) ppm.<19>F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -63,85 (s, 3F), -77,65 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z izračunato 556,17566, pronađeno 557,2 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 3,5 minuta; LCMS metoda: Kinetex Polar C183,0 X 50 mm 2,6 µm, 6 minuta, 5 - 95% acetonitrila u H2O (0,1% mravlja kiselina) 1,2 mL/min.
Korak 3: (6R,12R)-17-Amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6,10-diol (dijastereomer 2), Jedinjenje 46
[0782]
[0783] Rastvoru terc-butil N-[(6R,12R)-6,10-dihidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat (dijastereomer 2) (20 mg, 0,0359 mmol) u CH2Cl2(2 mL) na 0 °C je ukapavanjem dodato TFA (740,00 mg, 0,5 mL, 6,4899 mmol). Smeša je mešana na 0 °C tokom sat vremena i na 9-13 °C tokom sat vremena. Smeša je tretirana sa MeOH (1 mL) i koncentrovana na sobnoj temperaturi, uparena zajedno sa MeOH (2 X 2 mL). Ostatak je tretiran zasićenim NaHCO3(5 mL) i ekstraktovan sa CH2Cl2(3 X 10 mL). Spojeni organski slojevi su osušeni sa Na2SO4, filtrirani i koncentrovani. Prečišćavanjem hromatografijom na silika gelu (24 g SiO2, eluirajući 10 do 30% EtOAc/CH2Cl2) je dobijen trifluoroacetat formiran sa sekundarnim alkoholom (pribli žno 3 mg) i prvi rod željenog proizvoda. Trifluoroacetat je rastvoren u THF (1 mL) i tretiran sa 1 N vodenim NaOH (0,1 mL) na sobnoj temperaturi 20 minuta. Smeša je tretirana zasićenim NaHCO3(1 mL) i ekstraktovana sa CH2Cl2(2 X 5 mL). Spojeni organski slojevi su osušeni sa Na2SO4, filtrirani i koncentrovani. Prečišćavanjem hromatografijom na silika gelu (24 g SiO2, eluirajući 10 do 30% EtOAc/CH2Cl2) je dobijen drugi rod. Dva roda su spojena i osušena zamrzavanjem čime je dobijen (6R,12R)-17-amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6,10-diol (dijastereomer 2) (10 mg, 59%) kao bledo žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,76 (s, 1H), 7,58 (s, 1H), 6,37 (s, 2H), 5,23 - 5,14 (m, 1H), 4,38 (d, J = 4,9 Hz, 1H), 3,63 - 3,52 (m, 1H), 2,47 -2,42 (m, 1H), 2,34 - 2,25 (m, 1H), 2,14 - 2,00 (m, 2H), 1,84 - 1,70 (m, 1H), 1,55 -1,65 (m, 1H), 1,45 - 1,37 (m, 1H), 1,35 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 1,32 - 1,25 (m, 1H) ppm.<19>F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62,50 (s, 3F), -77,01 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z izračunato 456,12323, pronađeno 457,1 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 2,76 minuta; LCMS metoda: Kinetex Polar C183,0 X 50 mm 2,6 µm, 6 minuta, 5 - 95% acetonitrila u H2O (0,1% mravlja kiselina) 1,2 mL/min.
Primer 34: Priprema (6R)-17-amino-12-(ciklopropilmetil)-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ola (enantiomer 1), Jedinjenje 47 i (6R)-17-amino-12-(ciklopropilmetil)-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ola (enantiomer 2), Jedinjenje 48
[0784]
Korak 1: 2-Ciklopropil-N-metoksi-N-metil-acetamid
[0785]
[0786] Mešanom rastvoru 2-ciklopropilacetatna kiselina (10 g, 99,884 mmol) u DCM (100 mL) je iz delova dodato CDI (18,5 g, 114,09 mmol) i reakciona smeša je mešana 2 sata na 25 °C. Nakon toga je iz jednog dela dodat N,O-dimetil hidroksilamin (so hidrohlorida) (10,000 g, 102,52 mmol). Reakciona smeša je mešana 12 sati na 25 °C, sipana u ledenu vodu (100 mL) i ekstraktovana etil acetatom (300 X 2). Spojeni organski sloj je ispran slanim rastvorom (100 mL), osušen preko anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan pod redukovanim pritiskom. Sirov proizvod je prečišćen kolonskom hromatografijom preko silika gela (230-400 meša) upotrebom 12% (etil acetat-heksan) kao eluenta čime je dobijen 2-ciklopropil-N-metoksi-N-metilacetamid (12 g, 84%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 3,63 (s, 3H), 3,08 (s, 3H), 2,29 (d, J = 6,8 Hz, 2H), 0,991-0,92 (m, 1H), 0,46 - 0,42 (m, 2H), 0,12 - 0,09 (m, 2H) ppm. ESI-MS m/z izračunato 143,09464, pronađeno 144,0 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 2,29 minuta; LCMS metoda: TCG metoda 10: Zorbax Ext C18, 50 X 4,6 mm 5µm, 5 minuta tok, 10 - 90% acetonitrila u vodi (10 µM NH4OAc modifikator), 1,2mL/min.
Korak 2: 1-Ciklopropilpent-4-en-2-on
[0787]
[0788] Rastvor 2-ciklopropil-N-metoksi-N-metil-acetamid (0,5 g, 3,4920 mmol) u THF (10,5 mL) je ohlađen na -78 °C i tretiran rastvorom alilmagnezijum bromid (5 mL 1 M, 5,0000 mmol) u Et2O na -78 °C tokom 22 minuta. Reakcija je održavana na ovoj temperaturi 2 sata i 10 minuta nakon čega je tretirana zasićenim vodenim NH4Cl (50 mL) na -78° C. Organski sloj je dekantiran i vodena faza je ekstraktovana sa DCM (4 X 40 mL). Spojene organske materije su isprane sa NH4Cl (30 mL), osušene preko Na2SO4i koncentrovane pažljivo pod vakuumom na 25 °C, čime je dobijen sirov ostatak (0,564 g). Ostatak je sadržao proizvod 1-ciklopropilpent-4-en-2-on (564 mg, 77%) kao bistro ulje.<1>H NMR (500 MHz, hloroform-d) δ 6,00 - 5,86 (m, 1H), 5,22 - 5,08 (m, 2H), 3,22 (d, J = 7,0 Hz, 2H), 2,32 (d, J = 6,9 Hz, 2H), 1,07 - 0,93 (m, 1H), 0,61 - 0,53 (m, 2H), 0,11 (q, J = 5,2 Hz, 2H) ppm.
Korak 3: 1-Ciklopropilpent-4-en-2-ol
[0789]
[0790] Suspenzija litijum aluminijum hidrid (1,24 g, 32,671 mmol) u THF (36 mL) je ohlađena do -78 °C pod azotom. Suspenzija je tretirana ukapavanjem sa rastvorom 1-ciklopropilpent -4-en-2-on (3 g, 21,743 mmol) u THF (7 mL) tokom 40 minuta i održavana na ovoj temperaturi dodatnih 2 sata. Suspenzija je pažljivo tretirana ukapavanjem sa H2O (20 mL) na -78 °C nakon čega je razblažena sa DCM (150 mL) i zagrejana na sobnu temperaturu uklanjanjem kade, i me šana 30 minuta na sobnoj temperaturi. Gel bele boje je generisan kao druga komponenta dvofazne smeše. Smeša je filtrirana kroz celit i isprana sa CH2Cl2(2 X 200 mL). Filtrat je koncentrovan pod vakuumom (28° C, 140 mmHg) čime je dobijeno svetlo žuto sirovo ulje (2,99 g). Sirov ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (120 g SiO2, napunjeno u heksanima, eluirano sa 0 - 10% Et2O u heksanima tokom 40 minuta gradijenta). Čiste frakcije su spojene i rastvarači su pažljivo uklonjeni pod redukovanim pritiskom (28 °C, 140 mm Hg) čime je dobijen ciljani 1-ciklopropilpent-4-en-2-ol (1,41 g, 51%) kao providno bezbojno ulje.<1>H NMR (500 MHz, hloroform-d) δ 5,85 (dddd, J = 17,0, 10,4, 7,8, 6,5 Hz, 1H), 5,18 - 5,10 (m, 2H), 3,77 (tt, J = 7,6, 4,7 Hz, 1H), 2,40 - 2,31 (m, 1H), 2,19 (dtt, J = 14,0, 7,8, 1,2 Hz, 1H), 1,47 - 1,31 (m, 2H), 0,82 - 0,70 (m, 1H), 0,55 - 0,41 (m, 2H), 0,12 (dtd, J = 9,2, 4,8, 3,3 Hz, 1H), 0,08 - 0,03 (m, 1H) ppm.
Korak 4: terc-Butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-[1-(ciklopropilmetil)but-3-enoksi]-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat
[0792] Rastvor terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-hidroksi-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (500 mg, 0,7116 mmol) i 1-ciklopropilpent-4-en-2-ol (200 mg, 1,7830 mmol) u toluenu (5 mL) je tretiran ukapavanjem sa DIAD (261,00 mg, 0,25 mL, 1,2908 mmol) tokom jednog minuta a zatim sa trifenilfosfinom (289 mg, 1,1019 mmol) iz jednog dela na sobnoj temperaturi pod argonom. Reakcija je me šana ukupno 24 sata na sobnoj temperaturi. Reakcija je tretirana sa NaHCO3(20 mL) i razblažena sa EtOAc (100 mL). Nakon toga organski sloj je ispran zasićenim vodenim NaHCO3(1 X 20 mL), zasićenim vodenim NH4Cl (1 X 20 mL) i slanim rastvorom (1 X 20 mL) zatim osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan pod vakuumom čime je dobijeno sirovo ulje žute boje (1,13 g). Sirov ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (80 g SiO2, suvo postavljeno, eluirano sa 0-50% EtOAc u heksanima tokom 20 minuta gradijent). Čiste frakcije su spojene i rastvarač je uparen pod vakuumom čime je dobijen proizvod terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-[1-(ciklopropilmetil)but-3-enoksi]-5-(triflu orometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (465 mg, 76%) kao bezbojno ulje. ESI-MS m/z izračunato 796,3271, pronađeno 797,8 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 9,44 minuta; LCMS metoda: Merck Millipore Chromolith SpeedROD C18kolona (50 X 4,6 mm) i dualni gradijentni tok od 5 - 100% mobilne faze B tokom 12 minuta. Mobilna faza A = voda (0,1 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,1 % CF3CO2H).
Korak 5: terc-Butil N-[(6R)-6-benziloksi-12-(ciklopropilmetil)-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,9,14(18),15-heksaen-17-il]-N-tercbutoksikarbonil-karbamat (E/Z
smeša)
[0793]
[0794] Boca je napunjena sa terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-[1-(ciklopropilmetil)but-3-enoksi]-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonilkarbamatom (465 mg, 0,5836 mmol) a zatim sa 1,2-dihloroetanom (280 mL) pod argonom. Reakcioni rastvor je tretiran sa Zhan katalizatorom-1B (52 mg, 0,0708 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakcija je zagrevana na 70 °C tokom 16 sati. LCMS je ukazala na više od 95% konverzije polaznog materijala u proizvode. LCMS nije pokazala dodatnu konverziju tentativnog pika polaznog materijala. Reakcija je tretirana sa kapljicom DMSO i sadržaji reakcione posude su koncentrovani na SiO2. Materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu (40 g SiO2, suvo postavljeno, eluirano sa 0 - 15% EtOAc u heksanima tokom 20 minuta gradijenta). Materijal je sakupljen nečist a frakcije koje sadrže cilj su spojene i rastvarač je uparen pod vakuumom čime je dobijen proizvod terc-butil N-[(6R)-6-benziloksi-12-(ciklopropilmetil)-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,9,14(18),15-heksaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (E/Z smeša) (272 mg, 52%) kao smeša dijastereomera; materijal je izgledao kao providno ulje. Oba pika na 9,10 i 9,25 min. respektivno: ESI-MS m/z izračunato 768,2958, pronađeno 769,8 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 9,1 minuta; LCMS metoda: Merck Millipore Chromolith SpeedROD C18kolona (50 X 4,6 mm) i dualni gradijentni tok od 5 - 100% mobilne faze B tokom 12 minuta. Mobilna faza A = voda (0,1 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,1 % CF3CO2H).
Korak 6: terc-Butil N-terc-butoksikarbonil-N-[(6R)-12-(ciklopropilmetil)-6-hidroksi-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,14(18),15-pentaen-17-il]karbamat
[0795]
[0796] Boca je napunjena sa terc-butil N-[(6R)-6-benziloksi-12-(ciklopropilmetil)-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,9,14(18),15-heksaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonil-karbamatom (E/Z smeša) (88 mg, 0,1145 mmol) u EtOH (4,8 mL). Nakon toga N2je propuštan kroz rastvor tokom 5 minuta. Zatim je rastvor tretiran sa Pd/C (24 mg, 10 % w/w, 0,0226 mmol) na sobnoj temperaturi i N2je propuštan kroz rastvor tokom 5 minuta. Nakon toga H2gas je propuštan kroz smešu tokom 20 minuta i održavana je pod atmosferom H2sa balonom. Reakcija je kompletirana za 11 sati. Smeša je razblažena sa EtOAc i filtrirana kroz celit. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom čime je dobijen proizvod terc-butil N-terc-butoksikarbonil-N-[(6R)-12-(ciklopropilmetil)-6-hidroksi-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,14(18), 15-pentaen-17-il]karbamat (74 mg, 94%) kao smeša dijastereomera; materijal je izgledao kao svetlo žuto ulje koje je postalo pena slična smoli kada je temeljno osušeno. ESI-MS m/z izračunato 680,26447, pronađeno 581,3 (M-99)<+>; vreme zadržavanja: 8,01 minuta; LCMS metoda: Merck Millipore Chromolith SpeedROD C18kolona (50 X 4,6 mm) i dualni gradijentni tok od 5 - 100% mobilne faze B tokom 12 minuta. Mobilna faza A = voda (0,1 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0,1 % CF3CO2H).
Korak 7: (6R)-17-Amino-12-(ciklopropilmetil)-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (so trifluoroacetata)
[0797]
[0798] Bočica je napunjena sa terc-butil N-terc-butoksikarbonil-N-[(6R)-12-(ciklopropilmetil)-6-hidroksi-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,14(18), 15-pentaen-17-il]karbamatom (155 mg, 0,2277 mmol) i tretirana rastvorom TFA (518,00 mg, 0,35 mL, 4,5429 mmol) u DCM (1,4 mL) na 0 °C. Reakcija je zagrevana na sobnu temperaturu tokom 3 sata. LCMS je pokazala da je transformacija završena. Reakcija je koncentrovana pod vakuumom čime je dobijen sirov ostatak ciljanog proizvoda (128 mg). Materijal je dodatno prečišćen reverzno faznom HPLC (Higgins Analytical C18250 X 20mm (50-95%B tokom 70 minuta gradijenta), 25mL/min, 254 nm, pufer A: 0,1% CF3CO2H u H2O, pufer B: 0,1% CF3CO2H u acetonitrilu). Čiste frakcije su spojene i rastvarač je uparen pod vakuumom čime je dobijen proizvod (6R)-17-amino-12-(ciklopropilmetil)-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (so trifluoroacetata) (71 mg, 51%) kao tamno žuta smola. ESI-MS m/z izračunato 480,1596, pronađeno 481,3 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 3,27 minuta; LCMS metoda: Water Cortex 2.7u C18(3,0mm X 50mm), temperatura: 55 °C; protok: 1,2mL/min; mobilna faza: 100% voda sa 0,1% CF3CO2H zatim 100% acetonitril sa 0,1% CF3CO2H, gradijent: 5% do 100% B tokom 4 minuta, održavano na 100% B tokom 0,5 minuta, zatim ekvilibrisano na 5% B tokom 1,5 minuta.
Korak 8: (6R)-17-Amino-12-(ciklopropilmetil)-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (enantiomer 1), Jedinjenje 47 i (6R)-17-amino-12-(ciklopropilmetil)-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (enantiomer 2), Jedinjenje 48
[0799]
[0800] Dva dijastereomera (6R)-17-amino-12-(ciklopropilmetil)-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (so trifluoroacetata) (83 mg, 0,1728 mmol) su razdvojena superkritičnom fluidnom hromatografijom (SFC) upotrebom 0,1% dietilamina u EtOH kao ko-rastvaračima. Frakcije koje sadrže svaki dijastereomer su zatim koncentrovane pod redukovanim pritiskom i osušene zamrzavanjem (acetonitril/voda smeša) čime je dobijen (6R)-17-amino-12-(ciklopropilmetil)-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (enantiomer 1) (45 mg) i (6R)-17-amino-12-(ciklopropilmetil)-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (enantiomer 2) (31 mg). Zajedničko uparavanje enantiomera 1 (2 mg) sa acetonitrilom (2 X 3 mL) nije moglo ukloniti izopropanol. Enantiomer 1 (2 mg) je rastvoren u EtOAc i ispiranje sa 1 N HCl je moglo ukloniti izopropanol ali je uočen nusproizvod sa<1>H NMR. Enantiomer 1 (približno 39 mg) je prečišćen hromatografijom na silika gelu (24 g SiO2, eluirajući 10 do 30% EtOAc/CH2Cl2) i osušen zamrzavanjem čime je dobijen (6R)-17-amino-12-(ciklopropilmetil)-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (enantiomer 1) (34 mg, 40%) kao bledo žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,77 (s, 1H), 7,58 (s, 1H), 6,36 (s, 2H), 4,69 - 4,58 (m, 1H), 2,48 - 2,43 (m, 1H), 2,26 - 2,15 (m, 1H), 2,12 - 2,00 (m, 1H), 1,79 (ddd, J = 14,5, 9,0, 5,3 Hz, 1H), 1,72 - 1,54 (m, 3H), 1,54 - 1,40 (m, 3H), 1,35 (ddd, J = 14,5, 8,2, 2,4 Hz, 1H), 1,30 - 1,21 (m, 1H), 0,94 - 0,83 (m, 1H), 0,50 - 0,41 (m, 1H), 0,35 (tt, J = 8,7, 4,4 Hz, 1H), 0,16 (dq, J = 9,0, 4,6 Hz, 1H), 0,08 to -0,01 (m, 1H) ppm.<19>F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62,38 (s, 3F), -79,03 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z izračunato 480,1596, pronađeno 481,2 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 3,83 minuta; LCMS metoda: Kinetex Polar C183,0 X 50 mm 2,6 µm, 6 minuta, 5 - 95% acetonitrila u H2O (0,1% mravlja kiselina) 1,2 mL/min.
[0801] Proizvod enantiomera 2 (približno 29 mg) je prečišćen fleš hromatografijom (24 g SiO2, eluirajući 10 do 30% EtOAc/CH2Cl2) i osušen zamrzavanjem čime je dobijen (6R)-17-amino-12-(ciklopropilmetil)-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (enantiomer 2) (27 mg, 32%) kao bledo žuta čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izračunato 480,1596, pronađeno 481,1 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 3,81 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7,77 (s, 1H), 7,57 (s, 1H), 6,36 (s, 2H), 4,70 (t, J = 9,3 Hz, 1H), 2,44 - 2,35 (m, 1H), 2,35 - 2,24 (m, 1H), 2,15 - 2,03 (m, 1H), 1,84 -1,64 (m, 3H), 1,58 - 1,33 (m, 5H), 1,32 - 1,21 (m, 1H), 0,94 - 0,82 (m, 1H), 0,51 - 0,42 (m, 1H), 0,35 (tt, J = 8,5, 4,5 Hz, 1H), 0,16 (dq, J = 9,0, 4,6 Hz, 1H), 0,08 to -0,01 (m, 1H) ppm.<19>F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62,39 (s, 3F), -76,37 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z izračunato 480,1596, pronađeno 481,1 (M+1)<+>; vreme zadržavanja: 3,81 minuta; LCMS metoda: Kinetex Polar C183,0 X 50 mm 2,6 µm, 6 minuta, 5 - 95% acetonitrila u H2O (0,1% mravlja kiselina) 1,2 mL/min.
Primer 35: Priprema (6R)-17-amino-12-[(4-fluorofenil)metil]-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ola (enantiomer 1), Jedinjenje 49 i (6R)-17-amino-12-[(4-fluorofenil)metil]-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ola (enantiomer 2), Jedinjenje 50
[0802]
Korak 1: 1-(4-Fluorofenil)pent-4-en-2-ol
[0803]
[0804] Boca sa okruglim dnom osušena na plamenu je napunjena sa 2-(4-fluorofenil)acetaldehidom (7,0224 g, 6,6 mL, 48,294 mmol) i dietil etrom (57 mL) i ohlađena na 0 °C. Zatim je ukapavanjem dodavan alil(bromo)magnezijum (60,4 mL 1 M, 60,400 mmol) tokom 30 minuta. Kada za hlađenje je uklonjena i reakciona smeša je ostavljena da se zagreje na sobnu temperaturu i mešana sat vremena. U bocu je dodavan zasićeni vodeni rastvor amonijum hlorida dok beli precipitat nije nestao. Slojevi su razdvojeni i vodeni sloj je ispran etil acetatom (3 X 200 mL). Organski slojevi su spojeni i isprani slanim rastvorom (2 X 50 mL). Organski sloj je osušen preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan pod vakuumom. Sirova reakciona smeša je suvo postavljena na silika gel i prečišćena tečnom hromatografijom na silika gelu, eluirajući sa delovima etil acetata (0 – 30%) u heptanima. Izolovan je 1 -(4-fluorofenil)pent-4-en-2-ol (4,034 g, 44%) kao svetlo žuto ulje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,24 - 7,15 (m, 2H), 7,06 - 6,95 (m, 2H), 5,94 - 5,78 (m, 1H), 5,23 - 5,10 (m, 2H), 3,86 (qd, J = 7,9, 4,6 Hz, 1H), 2,85 -2,66 (m, 2H), 2,40 - 2,28 (m, 1H), 2,27 - 2,15 (m, 1H), 1,66 (d, J = 3,4 Hz, 1H) ppm.<19>F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -116,73 do -116,86 (m, 1F) ppm. ESI-MS m/z izračunato 180,095, pronađeno 163,1 (M-17)<+>; vreme zadržavanja: 2,65 minuta. LCMS metoda: Kinetex Polar C18, 3,0 X 50 mm 2,6 µm, 6 minuta, 5 - 95% acetonitrila u H2O (0,1% mravlja kiselina) 1,2 mL/min. Druga frakcija je takođe izolovana, nešto manje čista, 1-(4-fluorofenil)pent-4-en-2-ol (0,575 g, 6%) kao svetlo žuto ulje. ESI-MS m/z izračunato 180,095, pronađeno 163,1 (M-17)<+>; vreme zadržavanja: 2,65 minuta. LCMS metoda: Kinetex Polar C18, 3,0 X 50 mm 2,6 µm, 6 minuta, 5 - 95% acetonitrila u H2O (0,1% mravlja kiselina) 1,2 mL/min.
Korak 2: terc-Butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1,3,4-oksadiazol-2-il]-6-[1-[(4-fluorofenil)metil]but-3-enoksi]-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonilkarbamat
[0805]
[0806] U rastvor terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-hidroksi-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamata (250 mg, 0.3630 mmol) i 1-(4-fluorofenil) pent-4-en-2-ola (102 mg, 0.5660 mmol) u toluenu (3 mL) dodat je trifenilfosfin (204 mg, 0.7778 mmol). Nakon mešanja na sobnoj temperaturi tokom 1 minuta, dodat je DIAD (150 µL, 0.7618 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 30 minuta. Reakciona sme ša je razblažena sa EtOAc, zatim isprana zasićenim vodenim NaHCO3(1X), zasićenim vodenim NH4Cl (1X) i slanim rastvorom (1X), a zatim osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana do žutog ulja koje je prečišćeno hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% heksana do 50% EtOAc-heksana, dajući, kao dijastereomernu smešu, bistri, bledo žuti sirup, terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-[1-[(4-fluorofenil)metil]but-3-enoksi]-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (160 mg, 52%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 7.80 (s, 1H), 7.35 (ddd, J = 6.9, 5.2, 1.9 Hz, 2H), 7.33 - 7.25 (m, 3H), 7.16 (ddd, J = 8.8, 5.4, 2.1 Hz, 2H), 6.90 -6.84 (m, 2H), 5.88 - 5.69 (m, 2H), 5.61 - 5.48 (m, 1H), 5.11 - 4.97 (m, 4H), 4.79 (dd, J = 10.8, 1.9 Hz, 1H), 4.60 (dd, J = 10.7, 7.1 Hz, 1H), 3.05 (ddd, J = 13.8, 6.9, 5.3 Hz, 1H), 2.91 (dd, J = 13.9, 6.0 Hz, 1H), 2.64 - 2.08 (m, 5H), 1.40 (d, J = 6.8 Hz, 19H) ppm. ESI-MS m/z izračunato 850.3176, pronađeno 851.5 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.16 minuta. Finalna čistoća je određena reverzno faznom UPLC korišćenjem Acquity UPLC BEH C18kolone (50 × 2.1 mm, čestice 1.7 µm) proizvođača Waters (pn: 186002350), i dvojnog gradijenta od 50 - 99% mobilne faze B tokom 2.9 minuta. Mobilna faza A = CF3CO2H (0.05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0.035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1.2 mL/min, zapremina injektiranja = 1.5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 3: terc-butil N-[(6R)-6-benziloksi-12-[(4-fluorofenil)metil]-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,9,14(18),15-heksaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (E/Z smeša)
[0807]
[0808] U degazirani rastvor terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-[1-[(4-fluorofenil)metil]but-3-enoksi]-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonilkarbamata (150 mg, 0.1763 mmol) u DCE (75 mL) je odjedom dodat Zhan katalizator-1B (24 mg, 0.03271 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 60 °C oko 1 sat. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i reakcija je ugašena sa nekoliko kapi DMSO, a rastvarači su uklonjeni. Dobijeni braon ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela korišćenjem plitkog gradijenta od 100% heksana do 50% EtOAc, dajući dijastereomernu smešu terc-butil N-[(6R)-6-benziloksi-12-[(4-fluorofenil)metil]-6,15-bis (trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17), 2,4,9,14(18),15-heksaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonil-karbamata (E/Z smeša) (92 mg, 63%). ESI-MS m/z izračunato 822.2864, pronađeno 823.5 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.03 minuta. Finalna čistoća je određena reverzno faznom UPLC korišćenjem Acquity UPLC BEH C18kolone (50 × 2.1 mm, čestice 1.7 µm) proizvođača Waters (pn: 186002350), i dvojnog gradijenta od 50 - 99% mobilne faze B tokom 2.9 minuta. Mobilna faza A = CF3CO2H (0.05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0.035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1.2 mL/min, zapremina injektiranja = 1.5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 4: terc-butil N-terc-butoksikarbonil-N-[(6R)-12-[(4-fluorofenil)metil]-6-hidroksi-6,15-bis (trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,14(18),15-pentaen-1 7-il]karbamat
[0809]
[0810] U rastvor terc-butil N-[(6R)-6-benziloksi-12-[(4-fluorofenil)metil]-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,9,14(18),15-heksaen-17-il]-N-tert-butoksikarbonil-karbamata (E/Z smeša) (92 mg, 0.1118 mmol) u EtOH (3 mL) je dodat Pd/C (38 mg 10% tež/tež, 0.03571 mmol) (50% vode) u posudi od 250 mL opremljenoj H2-balonom pomoću adaptera sa tri ulaza. Posuda je vakumirana i napunjena azotom tri puta, a zatim je vakumirana. Posuda je napunjena vodonikom i smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Vakumirana je i napunjena azotom tri puta, a zatim razblažena etil acetatom i filtrirana preko Celita. Filtrat je koncentrovan da bi se dobilo bezbojno viskozno ulje kao dijastereomerna smeša terc-butil N-tercbutoksikarbonil-N-[(6R)-12-[(4-fluorofenil)metil]-6-hidroksi-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,14(18),15-pentaen-17-il]karbamata (72 mg, 88%). ESI-MS m/z izračunato 734.25507, pronađeno 735.4 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.07 minuta. Finalna čistoća je određena reverzno faznom UPLC korišćenjem Acquity UPLC BEH C18kolone (50 × 2.1 mm, čestice 1.7 µm) proizvođača Waters (pn: 186002350), i dvojnog gradijenta od 30 - 99% mobilne faze B tokom 2.9 minuta. Mobilna faza A = CF3CO2H (0.05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0.035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1.2 mL/min, zapremina injektiranja = 1.5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 5: (6R)-17-Amino-12-[(4-fluorofenil)metil]-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol
[0811]
[0812] terc-butil N-terc-butoksikarbonil-N-[(6R)-12-[(4-fluorofenil)metil]-6-hidroksi-6,15-bis (trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,14(18),15-pentaen-17-il] karbamat (72 mg, 0.09800 mmol) je rastvoren u prethodno pripremljenom rastvoru TFA (250 µL, 3.245 mmol) i DCM (750 µL). Reakcija je mešana oko 0.5 sati, a zatim su rastvarači uklonjeni. Dobijeni ostatak je rastvoren u 2 mL MeOH i prečišćen reverzno faznom HPLC-MS korišćenjem dvojnog gradijenta od 30 - 99% mobilne faze B tokom 15.0 minuta. Mobilna faza A = CF3CO2H (5 mM mravlja kiselina) dala je (6R)-17-amino-12-[(4-fluorofenil)metil]-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (42 mg, 80%); ESI-MS m/z izračunato 534.1502, pronađeno 535.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.71 minuta kao svetložuta amorfna čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izračunato 534.1502, pronađeno 535.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.71 minuta. Finalna čistoća je određena reverzno faznom UPLC korišćenjem Acquity UPLC BEH C18kolone (50 × 2.1 mm, čestice 1.7 µm) proizvođača Waters (pn: 186002350), i dvojnog gradijenta od 30 - 99% mobilne faze B tokom 2.9 minuta. Mobilna faza A = CF3CO2H (0.05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0.035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1.2 mL/min, zapremina injektiranja = 1.5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 6: (6R)-17-Amino-12-[(4-fluorofenil)metil]-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (enantiomer 1), Jedinjenje 49, i (6R)-17-amino-12-[(4-fluorofenil)metil]-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5] nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (enantiomer 2), Jedinjenje 50
[0813]
[0814] Dijastereomerna smeša (6R)-17-amino-12-[(4-fluorofenil)metil]-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ola (60 mg, 0.1123 mmol) je prečišćena preparativnom SFC eluiranjem sa 15% metanola za CO2kroz 2 × 25 cm OJ-H kolonu, dajući prvi eluent (6R)-17-amino-12-[(4-fluorofenil)metil]-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (enantiomer 1) (3.6 mg, 6%).<1>H NMR (400 MHz, metanol-d4) δ 7.62 (s, 1H), 7.36 - 7.29 (m, 2H), 7.03 - 6.93 (m, 2H), 4.86 - 4.78 (m, 1H), 3.13 (dd, J = 14.3, 2.9 Hz, 1H), 2.95 (dd, J = 14.5, 8.6 Hz, 1H), 2.66 - 2.52 (m, 1H), 2.40 (dd, J = 14.4, 9.0 Hz, 1H), 2.15 (dt, J = 14.5, 8.0 Hz, 1H), 1.77 - 1.57 (m, 6H), 1.41 - 1.29 (m, 1H) ppm.<19>F NMR (376 MHz, metanold4) δ -64.79, -81.78, -119.61 ppm. ESI-MS m/z izračunato 534.1502, pronađeno 535.4 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.21 minuta. Finalna čistoća je određena reverzno faznom HPLC-MS korišćenjem Onyx Monolithic C18kolone (50 × 4.6 mm) koju prodaje Phenomenex (pn: CH0-7644), i dvojnog gradijenta od 1 do 99% mobilne faze B tokom 2.9 minuta. Mobilna faza A = CF3CO2H (0.05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0.035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 12 mL/min, zapremina injektiranja = 50 µL i temperatura kolone = 25 °C.
[0815] Nastavak eluiranja je obezbedio drugi eluent, (6R) -17-amino-12-[(4-fluorofenil)metil]-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1 (18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (enantiomer 2) (2.8 mg, 5%).<1>H NMR (400 MHz, Metanol-d4) δ 7.63 (s, 1H), 7.32 (dd, J = 8.6, 5.6 Hz, 2H), 7.06 - 6.91 (m, 2H), 5.02 - 4.91 (m, 1H), 3.14 (dd, J = 14.4, 2.9 Hz, 1H), 2.95 (dd, J = 14.5, 8.7 Hz, 1H), 2.54 (ddd, J = 13.9, 8.5, 6.2 Hz, 1H), 2.40 (t, J = 12.0 Hz, 1H), 2.21 (dt, J = 14.5, 7.7 Hz, 1H), 1.94 - 1.72 (m, 3H), 1.68 - 1.52 (m, 3H), 1.41 (ddd, J = 13.0, 9.7, 6.5 Hz, 1H) ppm.<19>F NMR (376 MHz, metanol-d4) δ -64.76, -78.82, -119.60 ppm. ESI-MS m/z izračunato 534.1502, pronađeno 535.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.23 minuta. Finalna čistoća je određena reverzno faznom HPLC-MS korišćenjem Onyx Monolithic C18kolone (50 × 4.6 mm) koju prodaje Phenomenex (pn: CH0-7644), i dvojnog gradijenta od 1 do 99% mobilne faze B tokom 2.9 minuta. Mobilna faza A = CF3CO2H (0.05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0.035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 12 mL/min, zapremina injektiranja = 50 µL i temperatura kolone = 25 °C.
Primer 36: Priprema (6R)-17-amino-12-[(3-terc-butilfenil)metil]-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ola (enantiomer 1), Jedinjenje 51. i (6R)-17-amino-12-[(3-terc-butilfenil)metil]-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5] nonadeka-1 (18),2,4,14,16-pentaen-6-ola (enantiomer 2), Jedinjenje 52
[0816]
Korak 1: 1-(3-terc-butilfenil)pent-4-en-2-ol
[0817]
[0818] U suvu bočicu napunjenu 2-(3-terc-butilfenil)acetaldehidom (140 mg, 0.7546 mmol) je dodat bezvodni dietil etar (4 mL). Rastvor je ohlađen na 0 °C pre dodavanja alil(bromo)magnezijuma (1 mL, 1 M, 1.0000 mmol) u kapima. Nakon dodavanja, rastvor je ostavljen da se zagreje na sobnu temperaturu i mešan 1 sat. Zasićeni vodeni rastvor NH4Cl je dodavan dok beli talog nije nestao. Vodeni sloj je zatim ekstrahovan sa EtOAc (3 × 10 mL). Organski slojevi su zatim kombinovani, isprani slanim rastvorom, osušeni bezvodnim natrijum sulfatom, filtrirani i koncentrovani pod sni ženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (eluiranjem sa 0-20% EtOAc u heksanu) da bi se dobio 1-(3-terc-butilfenil)pent-4-en-2-ol (100 mg, 58%) kao bistro ulje.<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) 7.25 - 7.15 (m, 3H), 7.02 - 6.98 (m, 1H), 5.95 - 5.79 (m, 1H), 5.03 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 5.02 - 4.99 (m, 1H), 4.58 (d, J = 5.4 Hz, 1H), 3.74 - 3.68 (m, 1H), 2.63 (dd, J = 13.1, 6.3 Hz, 2H), 2.19 - 2.04 (m, 2H), 1.27 (d, J = 1.2 Hz, 9H) ppm.
Korak 2: terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-[1-[(3-terc-butilfenil) metil]but-3-enoksi]-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat
[0819]
[0820] Tikvica je napunjena terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-hidroksi-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamatom (100 mg, 0.1452 mmol), 1-(3-terc-butilfenil) pent-4-en-2-olom (30 mg, 0.1374 mmol), trifenilfosfinom (76 mg, 0.2898 mmol) i isprana gasovitim N2. Zatim je smeša tretirana toluenom (0.3 mL). Rastvor je tertian sa DIAD (62.640 mg, 0.06 mL, 0.3098 mmol) u toluenu (0.2 mL) tokom 2 sata na sobnoj temperaturi. Reakcija je mešana dodatnih 1 sat na sobnoj temperaturi; LCMS je pokazao da alkohol gotovo nije prisutan. Reakcija je mešana dodatnih 72 sata; LCMS je pokazao da alkohol gotovo nije prisutan. Reakcija je razbla žena sa EtOAc (15 mL) i isprana zasićenim NaHCO3(4 mL), zatim isprana zasićenim NH4Cl (4 mL), a potom isprana slanim rastvorom (4 mL). Organski slojevi su osušeni preko Na2SO4, filtrirani, koncentrovani u vakuumu da bi se dobio sirovi ostatak. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (12 g SiO2, napunjen minimalno sa DCM, eluiran sa 0 - 10% EtOAc u heksanu preko gradijenta od 10 zapremina kolone). Čiste frakcije su kombinovane i rastvarač je evaporisan u vakuumu se dobije proizvod tercbutil N-[2 -[5-[(1R)-1benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-[1-[(3-terc-butilfenil)metil] but-3-enoksi]-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (59 mg, 43%) kao prozirni bezbojni ostatak. ESI-MS m/z izračunato 888.3897, pronađeno 789.7 (M-99)<+>; Retenciono vreme: 9.77 minuta. LCMS metoda: Merck Millipore Chromolith SpeedROD C18kolona (50 × 4.6 mm) i dvojni gradijent od 5 - 100% mobilne faze B tokom 12 minuta. Mobilna faza A = voda (0.1 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0.1 % CF3CO2H).
Korak 3: terc-butil N-[(6R)-6-benziloksi-12-[(3-terc-butilfenil)metil]-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,9,14,16-heksaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (E/Z smeša)
[0821]
[0822] Tikvica je napunjena terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-[1-[(3-terc-butilfenil)metil]but-3-enoksi]-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamatом (25 mg, 0.0281 mmol), a zatim 1.2-dihloretanom (15 mL) pod argonom. Reakcioni rastvor je tretiran Zhan katalizatorom-1B (2.5 mg, 0.0034 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zagrevana na 70 °C tokom 15 sati. Posuda je uklonjena sa grejanja. LCMS je pokazao da je ostalo 15% SM. Reakciona smeša je zagrevana na 70 °C ukupno 24 sata. LCMS je pokazao da nije došlo do dodatne konverzije polaznog materijala u produkte. Sadržaj reakcione posude je koncentrovan na SiO2. Materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu (4 g SiO2, suvo punjeno, eluirano sa 0-15% EtOAc u heksanima tokom 20 minuta gradijenta). Materijal je regenerisan nečist, frakcije su kombinovane i rastvarač je uparavan u vakuumu da bi se dobio proizvod, terc-butil N -[(6R)-6-benziloksi-12-[(3-tercbutilfenil)metil]-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo
[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,9,14,16-heksaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (E/Z smeša) (10.7 mg, 38%) kao smeša dijastereomera u obliku providnog ulja. Materijal je korišćen bez daljeg prečišćavanja u sledećem koraku. ESI-MS m/z izračunato 860.3584, pronađeno 789.7 (M-OtBu)<+>; Retenciono vreme: 9.58 minuta; LCMS metoda: Merck Millipore Chromolith SpeedROD C18kolona (50 × 4.6 mm) i dvojni gradijent od 5 do 100% mobilne faze B tokom 12 minuta. Mobilna faza A = voda (0.1 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0.1 % CF3CO2H).
Korak 4: terc-butil N-terc-butoksikarbonil-N-[(6R)-12-[(3-terc-butilfenil)metil]-6-hidroksi-6,15-bis (trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il] karbamat
[0823]
[0824] Bočica je napunjena terc-butil N-[(6R)-6-benziloksi-12-[(3-terc-butilfenil)metil]-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,9,14,16-heksaen-17-il]-N-tercbutoksikarbonil-karbamatom (E/Z smeša) (11 mg, 0.0109 mmol) u EtOH (0.61 mL). Zatim je N2barbotiran kroz rastvor tokom 5 minuta. Nakon toga je rastvor tretiran sa Pd/C (2.4 mg, 10 % tež/tež, 0.0023 mmol) na sobnoj temperaturi i N2je barbotiran kroz rastvor tokom 5 minuta. Nakon toga je gas H2barbotiran kroz smešu tokom 20 minuta i držana je u atmosferi H2pomoću balona. Reakcija je završena za 13 sati. Smeša je razblažena sa EtOAc i filtrirana kroz celit. Filtrat je koncentrovan u vakuumu da bi se dobio proizvod terc-butil N-terc-butoksikarbonil-N-[(6R)-12-[(3-terc-butilfenil)metil]-6-hidroksi-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il] karbamat (10 mg, 100%) kao svetložuto ulje koje se pretvara u penu sličnu smoli nakon temeljnog sušenja. ESI-MS m/z izračunato 772.3271, pronađeno 673.5 (M-99)<+>; Retenciono vreme: 8.89 minuta. LCMS metoda: Merck Millipore Chromolith SpeedROD C18kolona (50 × 4.6 mm) i dvojni gradijent od 5 - 100% mobilne faze B tokom 12 minuta. Mobilna faza A = voda (0.1 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0.1 % CF3CO2H).
Korak 5: (6R)-17-Amino-12-[(3-terc-butilfenil)metil]-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol
[0825]
[0826] Debelozidna staklena bočica za mikrotalasnu peć je napunjena terc-butil N-terc-butoksikarbonil-N-[(6R)-12-[(3-terc-butilfenil)metil]-6-hidroksi-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamatom (10 mg, 0.0129 mmol) u rastvoru heksafluoro-2-propanola (0.25 mL). Reakcija je zagrevana na 100 °C u mikrotalasnoj posudi 3 sata. LCMS je pokazao da je transformacija završena. Reakcija je koncentrovana u vakuumu da bi se dobio sirovi ostatak ciljnog (6R)-17-amino-12-[(3-terc-butilfenil)metil]-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo(12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ola (7.4 mg, 98%) kao tamnožuta smola. ESI-MS m/z izračunato 572.2222, pronađeno 573.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 3.68 minuta. LCMS metoda: Merck Millipore Chromolith SpeedROD C18kolona (50 × 4.6 mm) i dvojni gradijent od 5 - 100% mobilne faze B tokom 6 minuta. Mobilna faza A = voda (0.1 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0.1 % CF3CO2H).
Korak 6: (6R)-17-Amino-12-[(3-terc-butilfenil)metil]-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (enantiomer 1), Jedinjenje 51 i (6R)-17-amino-12-[(3-terc-butilfenil)metil]-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (enantiomer 2), Jedinjenje 52
[0827]
[0828] (6R)-17-Amino-12-[(3-terc-butilfenil)metil]-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (79.3 mg, 0.1338 mmol) je prečišćen preparativnom SFC eluiranjem sa 15% metanola do CO2kroz Celulose-4 kolonu (40 °C; 100 Bar; Brzina protoka: 4 mL/min; 10% MeOH; trajanje 8.5 min), dajući dva dijastereoizomera. Prvom elucijom je dobijen (6R)-17-amino-12-[(3-terc-butilfenil)metil]-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (enantiomer 1) (30.0 mg, 39%) kao prljavobela čvrsta supstanca čistoće 99.3%.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.72 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.24 -7.12 (m, 2H), 7.11 - 7.02 (m, 1H), 6.41 - 6.32 (m, 2H), 4.93 - 4.70 (m, 1H), 3.07 (d, J= 14.1 Hz, 1H), 2.96 -2.81 (m, 1H), 2.55 - 2.39 (m, 1H), 2.29 - 2.15 (m, 1H), 2.14 - 1.98 (m, 1H), 1.73 - 1.43 (m, 6H), 1.36 - 1.14 (m, 10H) ppm.<19>F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62.12 (s, 3F), -79.06 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z izračunato 572.2222, pronađeno 573.0 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 3.95 minuta. LCMS metoda: Kinetex Polar C183.0 X 50 mm 2.6 µm, 6 min, 5 - 95% acetonitril u H2O (0.1% mravlja kiselina) 1.2 mL/min.
[0829] Nastavkom eluiranja dobijen je (6R)-17-amino-12-[(3-terc-butilfenil)metil]-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (enantiomer 2) (28.6 mg, 37%) kao prljavobela čvrsta supstanca čistoće 99.9%.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.72 (s, 1H), 7.59 (br. s, 1H), 7.28 (s, 1H), 7.24 - 7.15 (m, 2H), 7.13 - 7.00 (m, 1H), 6.42 - 6.28 (m, 2H), 4.87 (t, J = 9.0 Hz, 1H), 3.09 (d, J= 12.8 Hz, 1H), 2.89 (dd, J = 14.4, 8.4 Hz, 1H), 2.42 - 2.26 (m, 2H), 2.15 - 1.99 (m, 1H), 1.83 - 1.59 (m, 3H), 1.57 - 1.39 (m, 3H), 1.37 - 1.28 (m, 1H), 1.25 (s, 9H) ppm.<19>F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62.12 (s, 3F), -76.37 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z izračunato 572.2222, pronađeno 573.0 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 3.94 minuta; LCMS metoda: Kinetex Polar C183.0 X 50 mm 2.6 µm, 6 min, 5 - 95% acetonitril u CF3CO2H (0.1% mravlja kiselina) 1.2 mL/min.
Primer 37: Priprema (6R,12R)-17-amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6,8-diola (dijastereomer 1), Jedinjenje 53 [0830]
Korak 1: terc-butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-8-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat (dijastereomer 1)
[0831]
[0832] U rastvor terc-butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa- 3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,8,14,16-heksaen-17-il]-N-terc-butoksi-karbonil-karbamata (E/Z smeša) (230 mg, 0.2964 mmol) u THF (3.7 mL) na 0 °C pod azotom je u kapima dodavan kompleks boran dimetil sulfida (80.100 mg, 0.1 mL, 1.0544 mmol). Smeša je mešana na 0 °C tokom 10 minuta i na sobnoj temperaturi tokom 1 sata, a zatim ponovo ohlađena na 0 °C. Dodat je NaOH u vodi (1.8 mL, 1 M, 1.8000 mmol), a zatim H2O2u vodi (688.93 mg, 0.6207 mL 30% tež/tež, 6.0762 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 50 minuta. Dodati su 10% vodeni rastvor natrijum tiosulfata (9 mL) i slani rastvor (7 mL). Smeša je mešana 10 minuta na 0 °C i ekstrahovana etil acetatom 3 X 20 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni bezvodnim natrijum sulfatom, filtrirani i koncentrovani. Ostatak je pre čišćen hromatografijom na silika gelu (24 g SiO2, eluiranje sa 0% do 10% etil acetat/dihlorometan) da bi se dobila smeša koja sadrži mono-boc dijastereomere, terc-butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-8-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1-(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat (59 mg, 16%) kao bistro ulje sa nešto nečistoća koje su još uvek prisutne, ESI-MS m/z izrač.
646.2226, pronađeno 647.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 4.16 minuta (Kinetex polar C18(3.0 X 50 mm) 2.6 µm, 6 min, 5% - 95% acetonitrila u CF3CO2H (0.1% mravlja kiselina), protok = 1.2 mL/min). Ovaj materijal je suvo nanet na silika gel i prečišćen tečnom hromatografijom na 12 g silika gel koloni eluiranjem sa porcijama 0% do 30% etil acetata u heptanima. Pri 16% etil acetata u heptanima, eluiran je ciljni produkt, terc-butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-8-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5] nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat (dijastereomer 1) (17 mg, 26%), koji je izolovan kao lepljiva bela pena koja je još uvek sadržala neke manje nečistoće.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.28 (s, 1H), 9.13 (s, 1H), 7.40 - 7.28 (m, 5H), 5.10 - 4.99 (m, 1H), 4.73 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 4.65 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 4.24 - 4.15 (m, 1H), 2.72 - 2.61 (m, 1H), 2.57 - 2.48 (m, 1H), 2.47 - 2.36 (m, 1H), 2.25 - 2.13 (m, 1H), 1.85 - 1.61 (m, 5H), 1.56 (s, 9H), 1.46 (d, J = 6.1 Hz, 3H) ppm.<19>F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -63.93 (s, 3F), -74.31 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z izračunato 646.2226, pronađeno 647.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 4.15 minuta; LCMS metoda: Kinetex Polar C18(3.0 X 50 mm) 2.6 µm, 6 min, 5 - 95% MeCN u H2O (0.1% mravlja kiselina), protok = 1.2 mL/min.
Korak 2: [(6R,12R)-6-Benziloksi-17-(terc-butoksikarbonilamino)-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5] nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-8-il]acetat (dijastereomer 1)
[0833]
[0834] U rastvor terc-butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-8-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamata (dijastereomer 1) (15 mg, 0.0232 mmol) u CH2Cl2(1 mL) na 0 °C dodat je DMAP (8 mg, 0.0655 mmol), a zatim anhidrid sirćetne kiseline (6 mg, 0.0055 mL, 0.0588 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2.5 sata i koncentrovana. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (12 g SiO2, eluiranjem 0 do 25% EtOAc/heptan) da bi se dobio [(6R,12R)-6-benziloksi-17-(terc-butoksi-karbonilamino)-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5] nona-deka-1(18),2,4,14,16-pentaen-8-il] acetat (dijastereomer 1) (14 mg, 88%) kao bledožuto ulje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.23 (s, 1H), 9.13 (s, 1H), 7.36 - 7.27 (m, 5H), 5.44 - 5.33 (m, 1H), 4.95 - 4.84 (m, 1H), 4.78 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 4.60 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 2.68 - 2.56 (m, 2H), 2.55 - 2.45 (m, 1H), 2.20 - 2.10 (m, 1H), 2.01 (s, 3H), 1.74 - 1.64 (m, 1H), 1.56 (s, 9H), 1.53 - 1.46 (m, 1H), 1.44 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.41 - 1.30 (m, 2H) ppm.<19>F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -63.94 (s, 3F), -74.58 (s, 3F) ppm.
Korak 3: [(6R,12R)-17-Amino-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triaza-triciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-8-il]acetat (dijastereomer 1)
[0835]
[0836] U rastvor [(6R,12R)-6-benziloksi-17-(terc-butoksikarbonilamino)-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-8-il] acetata (dijastereomer 1) (14 mg, 0.0203 mmol) u CH2Cl2(2 mL) na 0 °C dodata je TFA (740.00 mg, 0.5 mL, 6.4899 mmol). Smeša je mešana na 10 - 13 °C tokom 1.5 h. Rastvarači su uklonjeni blagim protokom azota. Ostatak je tretiran sa 2 kapi 28% vodenog amonijaka i prečišćen hromatografijom na silika gelu (4 g SiO2, eluiranjem sa 10% do 40% EtOAc/heptani) da bi se dobio [(6R,12R) -17-amino-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-8-il] acetat (dijastereomer 1) (9 mg, 75%) kao bledožuto ulje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.45 (s, 1H), 7.37 -7.28 (m, 5H), 5.45 - 5.37 (m, 1H), 5.34 (s, 2H), 4.90 - 4.80 (m, 1H), 4.77 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.61 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 2.70 - 2.46 (m, 3H), 2.23 - 2.12 (m, 1H), 2.01 (s, 3H), 1.73 - 1.62 (m, 1H), 1.55 - 1.43 (m, 2H), 1.41 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.37 - 1.29 (m, 1H) ppm.<19>F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -64,02 (s, 3F), -74,67 (s, 3F) ppm.
Korak 4: (6R,12R)-17-Amino-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-8-ol (dijastereomer 1)
[0837]
[0838] U rastvor [(6R,12R)-17-amino-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-8-il]acetata (dijastereomer 1) (9 mg, 0.0153 mmol) u THF (2 mL) dodat je vodeni NaOH (0.4 mL 1 M, 0.4000 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 sat. Dodat je MeOH (395.50 mg, 0.5 mL, 12.343 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Smeša je koncentrovana, i ostatak je tretiran zasićenim vodenim NaHCO3(3 mL). Smeša je ekstrahovana sa EtOAc (3 X 8 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni sa Na2SO4, filtrirani i koncentrovani. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (4 g SiO2, eluiranjem 20% do 50% EtOAc/heptani) da se dobije (6R,12R)-17-amino-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluoro-metil)- 13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-8-ol (dijastereomer 1) (8 mg, 96%) kao bledožuto ulje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.45 (s, 1H), 7.38 - 7.28 (m, 5H), 5.36 (s, 2H), 5.04 -4.92 (m, 1H), 4.76 - 4.69 (m, 1H), 4.68 - 4.61 (m, 1H), 4.27 - 4.17 (m, 1H), 2.71 - 2.62 (m, 1H), 2.56 - 2.38 (m, 2H), 2.29 - 2.18 (m, 1H), 1.85 - 1.69 (m, 2H), 1.67 - 1.61 (m, 1H), 1.54 - 1.47 (m, 1H), 1.43 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.39 - 1.33 (m, 1H) ppm.<19>F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -63.99 (s, 3F), -74.38 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z izračunato 546.17017, pronađeno 546.9 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.22 minuta; LCMS metoda: Kinetex Polar C18(3.0 X 50 mm), 2.6 µm, 3 min, 5 - 95% MeCN u H2O (0.1% mravlja kiselina), protok = 1.2 mL/min.
Korak 5: (6R,12R)-17-Amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6,8-diol (dijastereomer 1), Jedinjenje 53
[0839]
[0840] Smeša (6R,12R)-17-amino-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-8-ola (dijastereomer 1) (8 mg, 0.0146 mmol) i paladijuma na ugljeniku sa 5% vlage (7 mg, 0.0033 mmol) u MeOH (2 mL) je mešana pod vodonikom (balon) na sobnoj temperaturi preko noći. Smeša je filtrirana kroz diatomejsku zemlju i isprana sa EtOAc.
Filtrat je koncentrovan, a ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (12 g SiO2, eluiranjem 30% do 50% EtOAc/pentan) i liofilizovan da bi se dobio (6R,12R)-17-amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6,8-diol (dijastereomer 1) (4.6 mg, 68%) kao bledožuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.76 (s, 1H), 7.52 (s, 1H), 6.37 (s, 2H), 5.01 - 4.89 (m, 1H), 4.55 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 3.94 - 3.79 (m, 1H), 2.39 -2.09 (m, 4H), 1.83 - 1.69 (m, 1H), 1.45 - 1.37 (m, 1H), 1.34 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.27 - 1.13 (m, 2H) ppm.
<19>F NMR (377 MHz, DMSOd6) δ -62.51 (s, 3F), -76.79 (s, 3F) ppm. ESI-MS m/z izračunato 456.12323, pronađeno 456.9 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.78 minuta; LCMS metoda: Kinetex Polar C18(3.0 X 50 mm), 2.6 µm, 6 min, 5 - 95% MeCN u H2O (0.1% mravlja kiselina), protok = 1.2 mL/min.
Primer 38: Priprema (6R)-17-amino-12-etil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ola (enantiomer 1), Jedinjenje 54, i (6R)-17-amino- 12-etil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ola (enantiomer 2), Jedinjenje 55
[0841]
Korak 1: terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-(1-etilpent-4-enoksi)-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat
[0842]
[0843] Rastvor terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-hidroksi-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamata (1 g, 1.4824 mmol), hept-6-en-3-ola (260 mg, 2.2770 mmol) i trifenilfosfina (800 mg, 0.7067 mL, 3.0501 mmol) u THF (40 mL) na 0 °C mešano je 30 minuta, a zatim je u kapima dodavan DIAD (626.40 mg, 0.6 mL, 3.0978 mmol). Reakciona smeša je zagrejana na sobnu temperaturu i mešana 2 sata. Reakciona smeša je koncentrovana, ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (kolona od 40 g, 0 do 15% EtOAc u heksanima tokom 30 minuta) i dobijen je terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-(1-etilpent-4-enoksi)-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (1.07 g, 94%).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.82 (s, 1H), 7.41 - 7.18 (m, 5H), 5.98 - 5.86 (m, 1H), 5.85 - 5.72 (m, 1H), 5.32 -5.21 (m, 2H), 5.18 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 4.99 - 4.93 (m, 1H), 4.91 (dd, J = 10.2, 2.4 Hz, 1H), 4.80 (dd, J = 10.7, 2.7 Hz, 1H), 4.62 (dd, J = 10.6, 5.7 Hz, 1H), 3.28 - 3.08 (m, 2H), 2.22 - 2.03 (m, 2H), 1.93 - 1.83 (m, 1H), 1.81 - 1.70 (m, 3H), 1.42 (s, 18H), 0.96 - 0.88 (m, 3H). ESI-MS m/z izračunato 770.3114, pronađeno 671.5 (M+H-Boc)<+>; Retenciono vreme: 4.74 minuta. LCMS metoda: Merck Millipore Chromolith SpeedROD C18kolona (50 X 4.6 mm) i dvojni gradijent od 5% do 100% mobilne faze B tokom 6 minuta. Mobilna faza A = voda (0.1% CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0.1% CF3CO2H).
Korak 2: terc-butil N-[(6R)-6-benziloksi-12-etil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,8,14,16-heksaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (E/Z smeša)
[0844]
[0845] Rastvor terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-(1-etilpent-4-enoksi)-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamata (0.88 g, 1.0846 mmol) u DCE (200 mL) je degaziran tokom 15 minuta i zagrevan na 50 °C u atmosferi a zota tokom 15 minuta. Zatim je dodat Zhan katalizator-1B (200 mg, 0.2722 mmol) i smeša je zagrevana na 70 °C preko noći.
Reakciona smeša je ohlađena i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (kolona od 40 g, 0-10% EtOAc u heksanima) da bi se dobio terc-butil N-[(6R)-6-benziloksi-12-etil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5] nonadeka-1(18),2,4,8,14,16-heksaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (E/Z smeša) (0.85 g, 91%). ESI-MS m/z izračunato 742.2801, pronađeno 643.3 (M+H-Boc)<+>; Retenciono vreme: 4.68 minuta. LCMS metoda: Merck Millipore Chromolith SpeedROD C18kolona (50 X 4.6 mm) i dvojni gradijent od 5% do 100% mobilne faze B tokom 6 minuta. Mobilna faza A = voda (0.1% CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0.1% CF3CO2H).
Korak 3: terc-butil N-terc-butoksikarbonil-N-[(6R)-12-etil-6-hidroksi-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat
[0846]
[0847] Rastvor terc-butil N-[(6R)-6-benziloksi-12-etil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,8,14,16-heksaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonil-karbamata (E/Z smeša) (0.746 g, 1.0044 mmol) u MeOH (40 mL) je tri puta prečišćenim azotom. Zatim je ponovo dva puta napunjen vodonikom pre nego što je podvrgnut hidrogenaciji na 60 psi tokom 22 sata korišćenjem Parr šejkera. Nakon završetka reakcije, reakciona smeša je filtrirana preko sloja Celita, a filterski kolač je ispran sa MeOH (3 X 20 mL). Kombinovani filtrat je koncentrovan, a ostatak je osu šen u vakuumu preko noći, dajući u obliku bistrog ulja, terc-butil N-terc-butoksikarbonil-N-[(6R)-12-etil-6-hidroksi-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat (660 mg, 98 %). ESI-MS m/z izračunato 654.24884, pronađeno 555.3 (M+H-Boc)<+>.
Korak 4: (6R)-17-Amino-12-etil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5] nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol
[0848]
[0849] U rastvor terc-butil N-terc-butoksikarbonil-N-[(6R)-12-etil-6-hidroksi-6,15-bis (trifluoro-metil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamata (660 mg, 0.9881 mmol) u DCM-u (50 mL) dodata je TFA. (14.800 g, 10 mL, 129.80 mmol). Dobijeni žuti rastvor je mešan na sobnoj temperaturi 2 sata. Reakciona smeša je koncentrovana i prečišćena reverzno-faznom hromatografijom (pufer A: voda puferovana sa 5 mM HCl; pufer B: 100% ACN, 55% do 100% tokom 40 minuta) dobijena nakon liofilizacije kao žuti prah, (6R)-17-amino-12-etil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (hidrohloridna so) (255.7 mg, 51%).<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7.76 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 6.36 (s, 2H), 4.52 (dt, J = 26.9, 9.2 Hz, 1H), 2.48 - 2.39 (m, 1H), 2.18 (t, J = 11.4 Hz, 1H), 2.12 - 2.01 (m, 1H), 1.83 - 1.72 (m, 1H), 1.70 - 1.54 (m, 4H), 1.55 - 1.37 (m, 3H), 1.29 - 1.15 (m, 1H), 0.96 (t, J = 7.3 Hz, 3H).ESI-MS m/z izračunato 454.14395, pronađeno 97.27 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 3.16 minuta. LCMS metoda: Waters Cortex veličina čestica 2.7 µm C18(3.0 mm X 50 mm), 55 °C; protok: 1.2 mL/min; mobilna faza: 100% voda sa 0.1% trifluorosirćetne kiseline, zatim 100% acetonitril sa 0.1% trifluorosirćetne kiseline, gradijent od 5% do 100% B tokom 4 minuta, sa ekvilibracijom na 100% B tokom 0.5 min, zatim 5% B tokom 1.5 min.
Korak 5: (6R)-17-Amino-12-etil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5] nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (enantiomer 1), Jedinjenje 54, i (6R)-17-amino-12-etil-6,15-bis (trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo
[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (enantiomer 2), Jedinjenje 55
[0850]
[0851] Dijastereomerna smeša, (6R)-17-amino-12-etil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ola (255.7 mg, 0.5622 mmol) je prečišćena sa SFC korišćenjem Cellulose 4 kolone (250 X 30 mm, veličina čestica 5 µm) korišćenjem dvojnog gradijenta od 10% EtOH (0.1% dietilamina) i 90% CO2. Oba izomera su ponovo rastvorena u EtOAc (5 mL), a zatim isprana sa 1 M HCl (1 X 10 mL), zasićenim natrijum bikarbonatom (1 X 10 mL) i slanim rastvorom (1 X 10 mL). Organski sloj je osušen iznad bezvodnog natrijum sulfata, koncentrovan pod vakuumom i liofilizovan. SFC pik 1 je dobijen kao svetložuta čvrsta supstanca, (6R)-17-amino-12-etil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5] nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (enantiomer 1) (134 mg, 52%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.77 (s, 1H), 7.60 (s, 1H), 6.36 (s, 2H), 4.51 (t, J = 9.0 Hz, 1H), 2.54 - 2.41 (m, 1H), 2.24 - 2.14 (m, 1H), 2.12 - 2.00 (m, 1H), 1.85 - 1.73 (m, 1H), 1.71 - 1.38 (m, 7H), 1.31 - 1.16 (m, 1H), 0.97 (t, J = 7.2 Hz, 3H).<19>F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62.45 (s, 3F), -79.05 (s, 3F). ESI-MS m/z izračunato 454.144, pronađeno 455.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 3.54 minuta. SFC pik 2 dobijen je kao svetložuta čvrsta supstanca (6R)-17-amino-12-etil-6,15-bis (trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (enantiomer 2) (126 mg, 49%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.78 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 6.36 (s, 2H), 4.56 (t, J = 9.4 Hz, 1H), 2.46 -2.36 (m, 1H), 2.35 - 2.24 (m, 1H), 2.14 - 2.05 (m, 1H), 1.87 - 1.66 (m, 3H), 1.64 - 1.35 (m, 5H), 1.33 - 1.20 (m, 1H), 0.97 (t, J = 7.2 Hz, 3H).<19>F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62..46 (s, 3F), -76.36 (s, 3F). ESI-MS m/z izračunato 454.144, pronađeno 455.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 3.5 minuta. LCMS metoda: Kinetex Polar C18kolona (3.0 X 50 mm, veličina čestica 2.6 µm, trajanje 6 minuta, 5% do 95% acetonitrila u vodi (modifikator 0.1% mravlja kiselina), brzina protoka = 1.2 mL/min).
Primer 39: Priprema (12R)-17-amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaena-6,7-diol (enantiomer 1), Jedinjenje 56, i (12R)-17-amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nona-deka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6,7-diol (enantiomer 2), Jedinjenje 57
[0852]
Korak 1: Etil 3-terc-butoksi-2-hidroksi-2-(trifluorometil)pent-4-enoat
[0853]
[0854] Tikvica osušena na plamenu napunjena je sa 2-aliloksi -2-metilpropanom (5.55 g, 43.259 mmol), THF (100 mL) i TMEDA (4.4175 g, 5.7 mL, 38.015 mmol). Tikvica je ohlađena u kupki sa suvim ledom i acetonom i u kapima tretirana rastvorom sek-butillitijuma u cikloheksanu (27 mL 1.4 M, 37.800 mmol). Nakon 45 minuta, dodat je rastvor trimetilaluminijuma u heptanu (19 mL, 2 M, 38.000 mmol) i reakciona smeša je mešana još 45 minuta. Dodat je etil 3,3,3-trifluoro-2-okso-propanoat (5.1320 g, 4 mL, 30.173 mmol) i reakcija je mešana oko 4.0 sata u hladnom kupatilu. Reakcija je polako ugašena sa 1 N vodenom HCl (150 mL) i snažno mešana na sobnoj temperaturi nekoliko minuta. Prebačena je u levak za odvajanje od 1.0 L sa 1 N HCl (200 mL) i ekstrahovana dietil etrom (1 X 300 mL, 2 X 150 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani zasićenim vodenom rastvorom natrijum bikarbonata (200 mL), slanim rastvorom (200 mL), osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (kolona od 330 g, eluiranje od 0% do 20% etil acetata u heptanima) da bi se dobio etil 3-terc-butoksi-2-hidroksi-2-(trifluorometil)pent-4-enoat (3.24 g, 38 %), kao bezbojno ulje i pojedinačni dijastereomerni par.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 5.87 (ddd, J = 17.7, 10.1. 7.9 Hz, 1H), 5.32 – 5.21 (m, 2H), 4.55 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 4.39 – 4.23 (m, 2H), 3.85 (s, 1H), 1.33 (t, J = 7.2 Hz, 3H), 1.23 (s, 9H).<19>F NMR (377 MHz, CDCl3) δ – 73.35 (s, 3F).
Korak 2: Etil 2-benziloksi-3-terc-butoksi-2-(trifluorometil)pent-4-enoat
[0855]
[0856] Rastvor etil 3-terc-butoksi-2-hidroksi-2-(trifluorometil)pent-4-enoata (3.24 g, 11.398 mmol) u DMF (50 mL) je ohlađen u ledenoj kupki i tretiran suspenzijom natrijum hidrida (563 mg, 60 % tež/tež, 14.076 mmol) u mineralnom ulju. Nakon 40 minuta, dodat je bromometil benzen (2.6459 g, 1.84 mL, 15.470 mmol) i reakcija je postepeno zagrejana na sobnu temperaturu i me šana preko noći. Prebačena je u levak za odvajanje od 1.0 L sa vodom (450 mL) i vodeni sloj je ekstrahovan sa MTBE (4 X 150 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (2 X 150 mL), slanim rastvorom (150 mL), osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (kolona od 220 g, eluiranjem od 0% do 20% etil acetata u heptanima) da bi se dobio, kao bezbojno ulje, etil 2-benziloksi-3-terc-butoksi-2-(trifluorometil)pent-4-enoat (3.86 g, 83%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.46 - 7.41 (m, 2H), 7.39 - 7.32 (m, 2H), 7.32 - 7.28 (m, 1H), 5.98 (ddd, J = 17.9, 9.3, 8.6 Hz, 1H), 5.27 -5.22 (m, 1H), 5.21 (s, 1H), 4.92 - 4.85 (m, 1H), 4.79 - 4.73 (m, 1H), 4.59 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 4.28 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 1.32 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 1.20 (s, 9H).<19>F NMR (377 MHz, CDCl3) δ-65.50 (s, 3F). ESI-MS m/z izračunato 374.1705, pronađeno 397.2 (M+23)<+>; Retenciono vreme: 2.45 minuta. LCMS metoda: Kinetex Polar C18kolona (3.0 X 50 mm, veličina čestica 2.6 µm, trajanje 3 minuta, 5% do 95% acetonitrila u vodi (modifikator 0.1% mravlja kiselina), brzina protoka = 1.2 mL/min).
Korak 3: 2-Benziloksi-3-terc-butoksi-2-(trifluorometil)pent-4-enoinska kiselina
[0857]
[0858] Rastvor natrijum hidroksida (1.13 g, 28.252 mmol) u vodi (10 mL) dodat je rastvoru etil 2-benziloksi-3-terc-butoksi-2-(trifluorometil)pent-4-enoata (3.4 g, 8.6908 mmol) u metanolu (30 mL). Reakciona smeša je mešana u uljnoj kupki na 70 °C tokom 4 dana. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se uklonio metanol. Dodata je voda (100 mL) i zakišeljena je na pH 1-2 sa 1 N vodenom HCl. Smeša je prebačena u levak za odvajanje od 500 mL, i vodeni sloj je ekstrahovan etil acetatom (3 X 100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (100 mL), slanim rastvorom (100 mL), osušeni iznad natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod sni ženim pritiskom da bi se dobila 2-benziloksi-3-terc-butoksi-2-(trifluorometil)pent-4-enska kiselina (3.29 g, 97%), kao žuto ulje.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 14.11 (br. s., 1H), 7.45 - 7.26 (m, 5H), 5.86 (ddd, J = 17.6, 10.0, 8.1 Hz, 1H), 5.34 - 5.20 (m, 2H), 4.88 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.67 - 4.56 (m, 2H), 1.15 (s, 9H).<19>F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -64.77 (s, 3F). ESI-MS m/z izračunato 346.1392, nije pronađena jonizacija; Retenciono vreme: 2.15 minuta. LCMS metoda: Kinetex Polar C18kolona (3.0 X 50 mm, veličina čestica 2.6 µm, trajanje 3 minuta, 5% do 95% acetonitrila u vodi (modifikator 0.1% mravlja kiselina), brzina protoka = 1.2 mL/min).
Korak 4: 2-Benziloksi-3-terc-butoksi-2-(trifluorometil)pent-4-enehidrazid
[0859]
[0860] Rastvor 2-benziloksi-3-terc-butoksi-2-(trifluorometil)pent-4-enske kiseline (3.29 g, 8.4354 mmol) i trietilamina (2.5410 g, 3.5 mL, 25.111 mmol) u DMF (50 mL) je tretiran sa HATU (6.46 g, 16.990 mmol) i mešan na sobnoj temperaturi 20 minuta. Ohlađen je u ledenoj kupki i dodat je hidrazin.H2O (6.7080 g, 10 mL, 87.099 mmol). Nakon otprilike 10 minuta, ledena kupka je uklonjena i reakcija je me šana na sobnoj temperaturi oko 18 sati. Prebačena je u levak za odvajanje od 1.0 L sa vodom (450 mL) i vodeni sloj je ekstrahovan etil acetatom (4 X 150 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (2 X 250 mL), slanim rastvorom (200 mL), osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (kolona od 220 g, eluiranjem od 0% do 50% etil acetata u heptanima) da bi se dobio, kao bezbojno ulje, 2-benziloksi -3-terc-butoksi-2-(trifluorometil)pent-4-enhidrazid (2.836 g, 91%) koji je stajanjem očvrsnuo.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.08 (br. s., 1H), 7.45 - 7.25 (m, 5H), 5.81 (ddd, J = 17.4, 10.5, 7.1 Hz, 1H), 5.27 (d, J = 17.1 Hz, 1H), 5.21 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 5.11 - 4.99 (m, 2H), 4.90 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 4.36 (d, J = 4.4 Hz, 2H), 1.18 (s, 9H).<19>F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -67.28 (s, 3F). ESI-MS m/z izračunato 360.1661, pronađeno 305.1 (M-55)<+>; Retenciono vreme: 2.13 minuta. LCMS metoda: Kinetex Polar C18kolona (3.0 X 50 mm, veličina čestica 2.6 µm, trajanje 3 minuta, 5 % do 95 % acetonitrila u vodi (0.1 % modifikator mravlja kiselina), brzina protoka = 1.2 mL/min).
Korak 5: terc-butil N-[2-[[[2-benziloksi-3-terc-butoksi-2-(trifluorometil)pent-4-enoil] amino] karbamoil]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil] karbamat
[0861]
[0862] Smeša 6-bromo-3-(terc-butoksikarbonilamino)-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilne kiseline (661 mg, 1.7163 mmol) i 2-benziloksi-3-terc-butoksi-2-(trifluorometil)pent-4-enhidrazida (601 mg, 1.6260 mmol) u etil acetatu (10 mL) je sukcesivno tretirana piridinom (508.56 mg, 0.52 mL, 6.4293 mmol) i rastvorom T3P u etil acetatu (1.86 g, 50 % tež/tež, 2.9229 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana 23 sata, prebačena u levak za odvajanje od 250 mL sa zasićenim vodenim amonijum hloridom (100 mL) i ekstrahovana etil acetatom (2 X 75 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani zasi ćenim vodenim natrijum bikarbonatom (100 mL), slanim rastvorom (100 mL), osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (kolona od 80 g, eluiranje od 0% do 50% etil acetata u heptanima) da bi se dobio tercbutil N-[2-[[[2-benziloksi-3-terc-butoksi-2-(trifluorometil)pent-4-enoil]amino]karbamoil]-6-bromo-5-(trifluoro-metil)-3-piridil]karbamat (1.1 g, 92%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11.04 (s, 1H), 10.84 (s, 1H), 10.10 (s, 1H), 9.13 (s, 1H), 7.47 – 7.41 (m, 2H), 7.40 – 7.33 (m, 2H), 7.33 - 7.28 (m, 1H), 6.02 (ddd, J = 17.1, 10.6, 6.4 Hz, 1H), 5.46 (d, J = 17.1 Hz, 1H), 5.35 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 5.19 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 5.10 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 4.95 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 1.49 (s, 9H), 1.22 (s, 9H).<19>F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62.86 (s, 3F), -67.31 (s, 3F). ESI-MS m/z izračunato 726.1488, pronađeno 571.0 (M-155)<+>; Retenciono vreme: 2.85 minuta. LCMS metoda: Kinetex Polar C18kolona (3.0 X 50 mm, veličina čestica 2.6 µm, trajanje 3 minuta, 5% do 95% acetonitrila u vodi (modifikator 0.1% mravlja kiselina), brzina protoka = 1.2 mL/min).
Korak 6: terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-2-terc-butoksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat
[0863]
[0864] Rastvor terc-butil N-[2-[[[2-benziloksi-3-terc-butoksi-2-(trifluorometil)pent-4-enoil]amino] karbamoil]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamata (1.1 g, 1.4969 mmol) i DIPEA (682.64 mg, 0.92 mL, 5.2818 mmol) u acetonitrilu (24 mL) je zagrejan u uljnoj kupki na 60 °C. Dodat je p-TsCl (322 mg, 1.6890 mmol) i reakcija je zagrevana u uljnoj kupki 90 minuta. Nakon hlađenja na sobnu temperaturu, reakcija je koncentrovana pod sniženim pritiskom kako bi se uklonio acetonitril. Prebačena je u levak za odvajanje od 250 mL sa zasićenim vodenim natrijum bikarbonatom (100 mL) i vodeni sloj je ekstrahovan etil acetatom (2 X 75 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (100 mL), osu šeni preko natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (kolona od 80 g, eluiranjem od 0% do 30% etil acetata u heptanima) da bi se dobio tercbutil N-[2-[5-[1-benziloksi-2-terc-butoksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]- 6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat (0.96 g, 88 %).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10.26 (s, 1H), 9.37 (s, 1H), 7.57 - 7.51 (m, 2H), 7.46 - 7.38 (m, 2H), 7.36 - 7.30 (m, 1H), 6.01 (ddd, J = 17.5, 9.4, 8.3 Hz, 1H), 5.32 - 5.20 (m, 2H), 4.90 - 4.83 (m, 1H), 4.83 - 4.75 (m, 2H), 1.58 (s, 9H), 1.12 (s, 9H).<19>F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -63,73 (s, 3F), -66,73 (s, 3F). ESI-MS m/z izračunato 708.1382, pronađeno 597.0 (M-111)<+>; Retenciono vreme: 4.85 minuta. LCMS metoda: XBridge C18kolona (4.6 X 75 mm, veličina čestica 5 mm, trajanje 6 minuta sa 1 minutom elvilibracije, inicijalna mobilna faza sa 95% vodeni NH4HCO3/ 5% acetonitril, gradijent od 0 do 3 minuta sa 95% MeCN i držanje 3 minuta, protok = 1.5 mL/min).
Korak 7: terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-2-terc-butoksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat
[0865]
[0866] Rastvor terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-2-terc-butoksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamata (1.21 g, 1.6697 mmol), DIPEA (237.44 mg, 0.32 mL, 1.8372 mmol) i DMAP (10 mg, 0.0819 mmol) u MTBE (25 mL) je tretiran di-terc-butil dikarbonatom (479 mg, 0.5042 mL, 2.1948 mmol) i mešan na sobnoj temperaturi oko 5 sati. Reakciona smeša je prebačena u levak za odvajanje od 125 mL sa vodom (75 mL) i MTBE (100 mL). Nakon ekstrakcije slojevi su odvojeni, i organski sloj je ispran slanim rastvorom (75 mL). Organski sloj je osušen iznad natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (kolona od 80 mg, eluiranjem od 0% do 25% etil acetata u heptanima) da bi se dobio terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-2-terc-butoksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (1.26 g, 91%), kao bezbojno ulje, koje je stajanjem o čvrslo u belu čvrstu supstancu.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.95 (s, 1H), 7.57 - 7.48 (m, 2H), 7.45 - 7.37 (m, 2H), 7.36 -7.30 (m, 1H), 5.98 (ddd, J = 17.4, 9.7, 7.9 Hz, 1H), 5.28 - 5.15 (m, 2H), 4.86 - 4.72 (m, 3H), 1.44 (s, 18H), 1.08 (s, 9H).<19>F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -63.74 (s, 3F), -66.63 (s, 3F). ESI-MS m/z izračunato 808.1906, pronađeno 597.0 (M-211)<+>; Retenciono vreme: 4.57 minuta. LCMS metoda: XBridge C18kolona (4.6 X 75 mm, veličina čestica 5 mm, trajanje 6 minuta sa 1 minutom ekvilibracije, inicijalna mobilna faza na 95% vodenom NH4HCO3/ 5% acetonitrilu, gradijent od 0 do 3 minuta do 95% MeCN i držanje 3 minuta, protok = 1.5 mL/min).
Korak 8:terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-2-terc-butoksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-hidroksi-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat
[0867]
[0868] Smeši terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-2-terc-butoksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamata (1.18 g, 1.4575 mmol) u DMSO (12 mL) je dodat cezijum acetat (899 mg, 4.6835 mmol). Smeša je mešana na 85 °C tokom 5 sati i ohlađena na sobnu temperaturu. Smeša je prebačena u levak za odvajanje od 250 mL sa zasićenim vodenim amonijum hloridom (25 mL) i vodom (125 mL) i ekstrahovana sa 1:1 smešom MTBE i heptana (3 X 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (2 X 50 mL), slanim rastvorom (50 mL), osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobila beličasta penasta čvrsta supstanca, terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-2-terc-butoksi-1-(trifluorometil) but-3-enil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-hidroksi-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (1.2 g, 105%, kontaminiran rezidualnim MTBE).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.75 (s, 1H), 7.45 - 7.30 (m, 5H), 7.16 - 7.08 (m, 1H), 6.03 - 5.91 (m, 1H), 5.31 - 5.21 (m, 2H), 4.91 - 4.75 (m, 3H), 1.47 (s, 9H), 1.42 (s, 9H), 1.07 (s, 9H).<19>F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -65.88 (br. s., 3F), -66.39 (s, 3F). ESI-MS m/z izračunato 746.275, pronađeno 535.2 (M-211)<+>; Retenciono vreme: 3.35 minuta. LCMS metoda: SunFire C18kolona (75 X 4.6 mm, veličina čestica 3.5 mm, trajanje 6 minuta, uslovi mobilne faze: inicijalni 95% voda 0.1% mravlja kiselina/5% acetonitril 0.1% mravlja kiselina, linearni gradijent do 95% acetonitrila tokom 4 minuta, zatim držanje 2 minuta na 95% acetonitrila, temperatura = 45 °C, protok = 1.5 mL/min).
Korak 9: terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-2-terc-butoksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-[(1R)-1-metilpent-4-enoksi]-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonilkarbamat
[0869]
[0870] Rastvor terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-2-terc-butoksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-hidroksi-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamata (1.0883 g, 1.4575 mmol) i (2S)-heks-5-en-2-ola (494 mg, 4.4389 mmol) u toluenu (24 mL) je sukcesivno tretiran sa trifenilfosfinom (883 mg, 3.3666 mmol) i DIAD (677.82 mg, 0.66 mL, 3.3521 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 19 sati. Koncentrovan je pod sniženim pritiskom i prečišćen hromatografijom na silika gelu (kolona od 80 g, eluiranjem od 0% do 20% etil acetata u heptanima) da bi se dobio, kao bezbojno ulje, terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-2-terc-butoksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1.3,4-oksa-diazol-2-il]-6-[(1R)-1-metilpent-4-enoksi]-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (1.07 g, 68 %). ESI-MS m/z izračunato 828.3533, pronađeno 617.2 (M-211)<+>; Retenciono vreme: 5.09 minuta. LCMS metoda: XBridge C18kolona (4.6 X 75 mm, veličina čestica 5 mm, trajanje 6 minuta sa 1 minutom ekvilibracije, inicijalna mobilna faza 95% vodeni NH4HCO3/5% acetonitril, gradijent od 0 do 3 minuta do 95% MeCN i zadržavanje 3 minuta, protok = 1.5 mL/min).
Korak 10: 4-[5-[3-Amino-6-[(1R)-1-metilpent-4-enoksi]-5-(trifluorometil)-2-piridil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-4-benziloksi-5,5,5-trifluoro-pent-1-en-3-ol
[0871]
[0872] Rastvor terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-2-terc-butoksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-[(1R)-1-metilpent-4-enoksi]-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamata (1.07 g, 1.2910 mmol) u dihlorometanu (15 mL) i TFA (22.200 g, 15 mL, 194.70 mmol) je mešana na sobnoj temperaturi 4.5 sata. Reakcija je koncentrovana pod sniženim pritiskom i ostatak je prebačen u levak za odvajanje od 250 mL sa dihlorometanom (50 mL) i zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (75 mL). Nakon ekstrakcije, slojevi su odvojeni, i vodeni sloj je ponovo ekstrahovan dihlorometanom (2 X 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (50 mL), osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (kolona od 40 g, eluiranjem od 0% do 30% etil acetata u heptanima) da bi se dobila, kao žuto ulje, oko 1:1 smeša dijastereomera 4-[5-[3-amino-6-[(1R)-1-metilpent-4-enoksi]-5-(trifluorometil)-2-piridil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-4-benziloksi-5,5,5-trifluoro-pent-1-en-3-ola (585 mg, 72%),.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.51 - 7.43 (m, 3H), 7.41 - 7.31 (m, 3H), 6.06 - 5.92 (m, 1H), 5.91 - 5.76 (m, 1H), 5.63 (br. s., 2H), 5.36 (d, J = 17.1 Hz, 1H), 5.25 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 5.22 - 5.14 (m, 1H), 5.13 - 5.04 (m, 1H), 5.04 - 4.85 (m, 3H), 4.84 - 4.76 (m, 1H), 3.01 - 2.75 (m, 1H), 2.29 - 2.07 (m, 2H), 1.93 - 1.82 (m, 1H), 1.76 - 1.64 (m, 1H), 1.37 (d, J = 6.1 Hz, 3H, dijastereomer A), 1.32 (d, J = 6.1 Hz, 3H, dijastereomer B).<19>F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -64.19 (s, 3F), -68.24 (s, 3F, dijastereomer A), -68.30 (s, 3F, dijastereomer B). ESI-MS m/z izračunato 572.1858, pronađeno 573.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 4.12 minuta. LCMS metoda: XBridge C18kolona (4.6 X 75 mm, veličina čestica 5 mm, trajanje 6 minuta sa 1 minutom ekvilibracije, inicijalna mobilna faza 95% vodeni NH4HCO3/5% acetonitril, gradijent od 0 do 3 minuta do 95% MeCN i držanje 3 minuta, protok = 1.5 mL/min).
Korak 11: (12R)-17-Amino-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,8,14,16-heksaen-7-ol (E/Z smeša, dijastereomerni par 1)
[0873]
[0874] Rastvor 4-[5-[3-amino-6-[(1R)-1-metilpent-4-enoksi]-5-(trifluorometil)-2-piridil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-4-benziloksi-5,5,5-trifluoro-pent-1-en-3-ola (98.7 mg, 0.1572 mmol) u dihloretanu (50 mL) je 21 sat barbotiran gasovitim azotom. Rastvor je zagrejan u uljnoj kupki na 70 °C i tretiran Zhan-1B katalizatorom (8 mg, 0.0109 mmol). Nakon 30 minuta, dodata je druga porcija Zhan -1B katalizatora (8 mg, 0.0109 mmol) i zagrevana 3 sata. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu, dodat je DMSO (4 kapi) i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (kolona od 24 g, eluiranjem od 0% do 40% etil acetata u heptanima) da bi se dobio (12R) -17-amino-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,8,14,16-heksaen-7-ol (E/Z smeša, dijastereomerni par 1) (79.6 mg, 76 %). ESI-MS m/z izračunato 544.1545, pronađeno 545.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 3.85 minuta. LCMS metoda: XBridge C18kolona (4.6 X 75 mm, veličina čestica 5 mm, trajanje 6 minuta sa 1 minutom ekvilibracije, inicijalna mobilna faza 95% vodeni NH4HCO3/5% acetonitril, gradijent od 0 do 3 minuta do 95% MeCN i držanje 3 minuta, protok = 1.5 mL/min).
Korak 12: (12R)-17-Amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6,7-diol (enantiomer 1), Jedinjenje 56, i (12R)-17-amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1-(18), 2,4,14,16-pentaen-6,7-diol (enantiomer 2), Jedinjenje 57
[0875]
[0876] Rastvor (12R)-17-amino-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,8,14,16-heksaen-7-ola (E/Z smeša, dijastereomerni par 1) (25 mg, 0.0459 mmol) u metanolu (2 mL) je tri puta prečišćenim azotom. Dodat je paladijum na ugljeniku (30 mg, 5 % tež/tež, 0.0141 mmol), reakcija je tri puta prečišćenim vodonikom i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 5 sati. Reakcija je dva puta prečišćenim azotom, filtrirana preko sloja celita i isprana metanolom. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom, a ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (kolona 4 g, eluiranjem od 0% do 40% etil acetata u heptanima). Dobijena čvrsta supstanca je prečišćena sa SFC korišćenjem kolone Cellulose 4 (150 X 12.2 mm, veličina čestica 5 µm) korišćenjem dvojnog gradijenta od 10% MeOH (bez modifikatora) i 90% CO2sa brzinom protoka od 75 mL/min, dajući, kao bledožutu čvrstu supstancu, (12R)-17-amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6,7-diol (enantiomer 1) (10.5 mg, 48%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.75 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 6.32 (s, 2H), 5.38 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 4.83 - 4.66 (m, 1H), 4.42 - 4.25 (m, 1H), 2.48 - 2.40 (m, 1H), 1.84 - 1.71 (m, 1H), 1.66 - 1.56 (m, 2H), 1.55 - 1.46 (m, 1H), 1.45 - 1.37 (m, 2H), 1.34 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.21 - 1.10 (m, 1H).<19>F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62.50 (s, 3F), -73.40 (s, 3F). ESI-MS m/z izračunato 456.1232, pronađeno 457.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 3.38 minuta. Takođe, izolovan kao prljavo bela čvrsta supstanca, (12R)-17-amino-12-metil-6,15-bis (trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6,7-diol (enantiomer 2) (9 mg, 42 %).<1>H NMR (400 MHz,DMSO-d6) δ 7.74 (s, 1H), 7.52 (s, 1H), 6.24 (s, 2H), 5.62 (d, J = 6.6 Hz, 1H), 5.04 - 4.86 (m, 1H), 4.19 - 3.99 (m, 1H), 2.43 - 2.29 (m, 1H), 2.20 - 2.08 (m, 1H), 2.07 -1.95 (m, 1H), 1.64 - 1.43 (m, 3H), 1.32 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.30 - 1.20 (m, 2H).<19>F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62.46 (s, 3F), -73.70 (s, 3F). ESI-MS m/z izračunato 456.1232, pronađeno 457.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 3.47 minuta. LCMS metoda: XBridge C18kolona (4.6 X 75 mm, veličina čestica 5 mm, trajanje 6 minuta sa 1 minutom ekvilibracije, inicijalna mobilna faza 95% vodeni NH4HCO3/ 5% acetonitril, gradijent od 0 do 3 minuta do 95% MeCN i držanje 3 minuta, protok = 1.5 mL/min).
Primer 40: Priprema (6R,12R)-17-amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6,8-diola (dijastereomer 2), Jedinjenje 58
[0877]
Korak 1: terc-Butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-12-metil-8-okso-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat
[0878]
[0879] U rastvor terc-butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-8-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5] nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il] karbamata (dijastereomer 1) (120 mg, 0.1856 mmol) u CH2Cl2(20 mL) na 0 °C je dodat NaHCO3(294 mg, 3.4997 mmol), a zatim Dess-Martin perjodinan (102 mg, 0.2405 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Smeša je tretirana sa 10% vodenim Na2S2O3(5 mL) i mešana na sobnoj temperaturi 5 minuta. Dobijena smeša je ekstrahovana sa CH2Cl2(3 X 15 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni preko Na2SO4, filtrirani i koncentrovani. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (kolona od 24 g, eluiranjem od 0% do 30% EtOAc/heptani) da bi se dobio terc-butil N -[(6R,12R)-6-benziloksi-12-metil-8-okso-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nona-deka-1 (18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat (110 mg, 92 %).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.10 (br. s, 1H), 9.09 (s, 1H), 7.34 -7.23 (m, 5H), 4.91 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 4.89 - 4.81 (m, 1H), 4.49 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 3.41 (d, J = 15.2 Hz, 1H), 3.16 (ddd, J = 19.1, 10.2, 2.7 Hz, 1H), 3.08 (d, J = 15.2 Hz, 1H), 2.64 - 2.54 (m, 1H), 2.43 - 2.32 (m, 1H), 1.98 - 1.86 (m, 1H), 1.56 (s, 9H), 1.50 - 1.35 (m, 5H).<19>F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -63.89 (s, 3F), -74.36 (s, 3F). ESI-MS m/z izračunato 644.207, pronađeno 589.1 (M-55)<+>; Retenciono vreme: 5.46 minuta. LCMS metoda: SunFire C18kolona (75 X 4.6 mm, veličina čestica 3.5 mm, trajanje 6 minuta, uslovi mobilne faze: inicijalno 95% vode 0.1% mravlje kiseline/5% acetonitrila 0.1% mravlje kiseline, linearni gradijent do 95% acetonitrila tokom 4 min, zatim držanje 2 min na 95% acetonitrila, temperatura = 45 °C, protok = 1.5 mL/min).
Korak 2: (6R,12R)-17-Amino-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-8-on
[0880]
[0881] U rastvor terc-butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-12-metil-8-okso-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamata (26 mg, 0.0403 mmol) u CH2Cl2(2 mL) na 0 °C dodat je TFA (740.00 mg, 0.5 mL, 6,4899 mmol) u kapima. Smeša je mešana na 8 do 13 °C tokom 1 sata. Rastvarači su uklonjeni blagim propuštanjem azota na 10 °C uz mešanje. Ostatak je tretiran zasićenim NaHCO3(5 mL) i ekstrahovan sa CH2Cl2(3 X 8 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni preko Na2SO4, filtrirani i koncentrovani. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (kolona od 12 g, eluiranje od 0% do 35% EtOAc/heptani) da bi se dobila bledožuta čvrsta supstanca, (6R,12R)-17-amino-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-8-on (21 mg, 96%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.43 (s, 1H), 7.35 - 7.27 (m, 5H), 5.27 (br. s, 2H), 4.89 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.87 - 4.80 (m, 1H), 4.47 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 3.39 (d, J = 15.2 Hz, 1H), 3.30 - 3.20 (m, 1H), 3.06 (d, J = 14.9 Hz, 1H), 2.62 - 2.53 (m, 1H), 2.43 - 2.32 (m, 1H), 1.98 - 1.87 (m, 1H), 1.47 - 1.41 (m, 1H), 1.39 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.37 - 1.32 (m, 1H).
<19>F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -63.99 (s, 3F), -74.33 (s, 3F).
Korak 3: (6R,12R)-17-Amino-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-8-ol (dijastereomer 2)
[0882]
[0883] U rastvor (6R,12R)-17-amino-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triaza-triciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-8-ona (21 mg, 0.0386 mmol) u MeOH (3 mL) na 0 Na 0 °C je dodat tetrametilamonijum borohidrid (9.6 mg, 0.1079 mmol). Smeša je mešana na 0 °C tokom 1.5 sati. Dodat je aceton (0.5 mL) i reakciona smeša je mešana na 0 °C tokom 5 minuta. Smeša je tretirana zasićenim NaHCO3(5 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3 X 10 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni sa Na2SO4, filtrirani i koncentrovani. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (kolona od 24 g, eluiranjem od 0% do 35% EtOAc/heptani) da bi se dobio (6R,12R) -17-amino-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka- 1(18),2,4,14,16-pentaen-8-ol (dijastereomer 2) (20 mg, 95 %).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.45 (s, 1H), 7.33 - 7.27 (m, 2H), 7.27 - 7.20 (m, 3H), 5.25 (br. s, 2H), 5.04 - 4.94 (m, 2H), 4.93 - 4.82 (m, 1H), 4.57 (d, J= 11.2 Hz, 1H), 2.79 (br. s, 1H), 2.57 (dd, J= 15.2, 8.3 Hz, 1H), 2.35 - 2.24 (m, 1H), 2.12 (d, J = 15.2 Hz, 1H), 1.90 - 1.74 (m, 2H), 1.71 - 1.58 (m, 3H), 1.40 (d, J = 6.4 Hz, 3H).<19>F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -64.03 (s, 3F), -74.22 (s, 3F).
Korak 4: (6R,12R)-17-Amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5] nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6,8-diol (dijastereomer 2), Jedinjenje 58
[0884]
[0885] Smeša (6R,12R)-17-amino-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-8-ola (dijastereomer 2) (23 mg, 0.0421 mmol) i paladijuma na ugljeniku (9 mg, 10 % 50 % vlaga, 0.0042 mmol) u MeOH (4 mL) je mešana pod balonom vodonika na sobnoj temperaturi preko noći. Smeša je filtrirana kroz celit i isprana sa EtOAc. Filtrat je koncentrovan, a ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (kolona 24 g, eluiranje 20% do 50% EtOAc/pentani) i liofilizovan, dajući (6R,12R)-17-amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6,8-diol (dijastereomer 2) (15 mg, 78 %).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.76 (s, 1H), 7.69 (s, 1H), 6.29 (s, 2H), 5.06 - 4.97 (m, 1H), 4.82 (d, J = 5.1 Hz, 1H), 4.47 - 4.37 (m, 1H), 2.29 - 2.20 (m, 1H), 2.13 - 1.92 (m, 3H), 1.72 - 1.52 (m, 2H), 1.49 - 1.37 (m, 1H), 1.33 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.30 - 1.23 (m, 1H).<19>F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62.48 (s, 3F), -78.47 (s, 3F). ESI-MS m/z izračunato 456.1232, pronađeno 457.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 3.04 minuta. LCMS metoda: Kinetex Polar C18kolona (3.0 X 50 mm, veličina čestica 2.6 µm, trajanje 6 minuta, 5% do 95% acetonitrila u vodi (modifikator 0.1% mravlja kiselina), brzina protoka = 1.2 mL/min).
Primer 41: Priprema (6R,12R)-17-amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-10.13,19-trioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ola, Jedinjenje 59
[0886]
Korak 1: terc-Butil N-[[(2R)-2-benziloksi-2-(trifluorometil)pent-4-enoil]amino]karbamat
[0887]
[0888] Reakciona bočica je napunjena sa (2R)-2-benziloksi-2-(trifluorometil)pent-4-enhidrazidom (3.479 g, 12.069 mmol) i TEA (3.7026 g, 5.1 mL, 36.591 mmol) u DCM-u. (30 mL). Dodat je Boc2O (3.26 g, 14.937 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je razblažena sa DCM (100 mL) i isprana sa 1 N HCl (30 mL), zasićenim natrijum bikarbonatom (30 mL) i slanim rastvorom (30 mL). Organski sloj je osušen preko bezvodnog natrijum sulfata i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu korišćenjem 0% do 30% etil acetata u heksanima da se dobije terc-butil N-[[(2R)-2-benziloksi-2-(trifluorometil)pent-4-enoil]amino]karbamat (3.914 g, 84 %). ESI-MS m/z izračunato 388.161, pronađeno 333.2 (M-55)<+>; Retenciono vreme: 3.46 minuta. LCMS metoda: Merck Millipore Chromolith SpeedROD C18kolona (50 X 4.6 mm) i dvojni gradijent od 5% do 100% mobilne faze B tokom 6 minuta. Mobilna faza A = voda (0.1% CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0.1% CF3CO2H).
Korak 2: terc-butil N-[[(2R)-2-benziloksi-5-hidroksi-2-(trifluorometil)pentanoil] amino]karbamat
[0889]
[0890] U rastvor terc-butil N-[[(2R)-2-benziloksi-2-(trifluorometil)pent-4-enoil]amino]karbamata (3.75 g, 9.6555 mmol) u bezvodnom THF (53 mL) u kapima je dodat 9-Borabiciklo[3.3.1]nonan (105 mL 0.5 M u THF, 52.500 mmol) na sobnoj temperaturi i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 80 minuta. Reakcija je ugašena metanolom (16 mL) na 0 °C polako i dodati su NaOH (105 mL 1 M, 105.00 mmol), H2O2(17.649 g, 53 mL 30 % tež/tež, 155.66 mmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 1 sat i razblažena etil acetatom (320 mL). Dva sloja su odvojena, i vodeni sloj je ekstrahovan etil acetatom (2 X 95 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani zasićenim natrijum tiosulfatom (130 mL) i slanim rastvorom (130 mL), osušeni preko bezvodnog magnezijum sulfata i koncentrovani. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu korišćenjem 10% do 50% acetona u heksanima da bi se dobio terc-butil N -[[(2R)-2-benziloksi-5-hidroksi-2-(trifluorometil)pentanoil] amino]karbamat (3.76 g, 96 %), kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izračunato 406.1716, pronađeno 407.5 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 3.02 minuta. LCMS metoda: Merck Millipore Chromolith SpeedROD C18kolona (50 X 4.6 mm) i dvojni gradijent od 5% do 100% mobilne faze B tokom 6 minuta. Mobilna faza A = voda (0.1% CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0.1% CF3CO2H).
Korak 3: terc-Butil N-[[(2R)-2-benziloksi-5-[(2S)-2-hidroksipropoksi]-2-(trifluorometil)pentanoil] amino]karbamat
[0891]
[0892] U rastvor terc-butil N-[[(2R)-2-benziloksi-5-hidroksi-2-(trifluorometil)pentanoil]amino]karbamata (3.34 g, 8.2186 mmol) u THF (35 mL) je dodat t-BuOK u THF (33 mL, 1 M, 33.000 mmol) na 0 °C i rastvor je mešan 10 minuta. (2S)-2-metiloksiran (994.80 mg, 1.2 mL, 17.128 mmol) je polako dodat na 0 °C i mešano je 10 minuta. Reakciona smeša je mešana na 45 °C tokom 1.5 sati. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i ugašena zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl (70 mL). Smeša je ekstrahovana sa EtOAc (3 X 50 mL), isprana slanim rastvorom (70 mL), osušena preko Na2SO4, filtrirana i koncentrovana. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu korišćenjem 0% do 50% EtOAc u heksanima da bi se dobio terc-butil N-[[(2R)-2-benziloksi-5-[(2S)-2-hidroksipropoksi]-2-(trifluorometil)pentanoil]amino] karbamat (1.65 g, 42%), kao bledožuto ulje. ESI-MS m/z izračunato 464.2134, pronađeno 465.4 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 3.06 minuta. LCMS metoda: Merck Millipore Chromolith SpeedROD C18kolona (50 X 4.6 mm) i dvojni gradijent od 5% do 100% mobilne faze B tokom 6 minuta. Mobilna faza A = voda (0.1 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0.1 % CF3CO2H).
Korak 4: terc-butil N-[[(2R)-2-benziloksi-5-[(2S)-2-[terc-butil(dimetil)silil]oksipropoksi]-2-(trifluorometil)pentanoil]amino]karbamat
[0893]
[0894] U rastvor terc-butil N-[[(2R)-2-benziloksi-5-[(2S)-2-hidroksipropoksi]-2-(trifluorometil) pentanoil] amino]karbamata (1.65 g, 3.4458 mmol) u DMF (35 mL) je dodat TBSCl (1.08 g, 7.1655 mmol), a zatim imidazol (972.5 mg, 14.285 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 3 sata. Reakciona smeša je ugašena zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl (70 mL), ekstrahovana sa EtOAc (3 X 50 mL), isprana slanim rastvorom (70 mL), osušena preko Na2SO4, filtrirana i koncentrovana. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu korišćenjem 0% do 15% EtOAc u heksanima da bi se dobio terc-butil N-[[(2R)-2-benziloksi-5-[(2S)-2-[terc-butil(dimetil)silil]oksipropoksi]-2-(trifluorometil) pentanoil] amino] karbamat (1.683 g, 84 %). ESI-MS m/z izračunato 578.2999, pronađeno 579.7 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 4.47 minuta. LCMS metoda: Merck Millipore Chromolith SpeedROD C18kolona (50 X 4.6 mm) i dvojni gradijent od 5% do 100% mobilne faze B tokom 6 minuta. Mobilna faza A = voda (0.1% CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0.1 % CF3CO2H).
Korak 5: (2R)-2-Benziloksi-5-[(2S)-2-[terc-butil(dimetil)silil]oksipropoksi]-2-(trifluorometil) pentanhidrazid
[0895]
[0896] Rastvor terc-butil N-[[(2R)-2-benziloksi-5-[(2S)-2-[terc-butil(dimetil)silil] oksipropoksi] -2-(trifluoro metil)pentanoil]amino] karbamata (1.772 g, 3.0618 mmol) u HFIP (32 mL) je zagrevan u mikrotalasnom reaktoru na 100 °C tokom 1.5 h. Reakcija je koncentrovana, a ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu korišćenjem 0% do 80% EtOAc u heksanima, dajući kao bistri gel (2R)-2-benziloksi-5-[(2S)-2-[terc-butil(dimetil)silil]oksipropoksi]-2-(trifluorometil)pentanhidrazid (1.442 g, 98%). ESI-MS m/z izračunato 478.2475, pronađeno 479.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 3.96 minuta. LCMS metoda: Merck Millipore Chromolith SpeedROD C18kolona (50 X 4.6 mm) i dvojni gradijent od 5% do 100% mobilne faze B tokom 6 minuta. Mobilna faza A = voda (0.1% CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0.1% CF3CO2H).
Korak 6: terc-butil N-[2-[[[(2R)-2-benziloksi-5-[(2S)-2-[terc-butil(dimetil)silil]oksipropoksi]-2-(trifluoro- metil)pentanoil]amino]karbamoil]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat
[0897]
[0898] U rastvor (2R)-2-benziloksi-5-[(2S)-2-[terc-butil(dimetil)silil]oksipropoksi]-2-(trifluorometil) pentanhidrazida (1.44 g, 3.0086 mmol) i 6-bromo-3-(terc-butoksikarbonilamino)-5-(trifluorometil) piridin-2-karboksilne kiseline (1.38 g, 3.5832 mmol) u bezvodnom DMF (50 mL) je dodat TEA (3.6518 g, 5.03 mL, 36.089 mmol), a zatim T3P (2.213 g, 2.07 mL 50 % tež/tež, 3.4776 mmol) u etil acetatu. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Ponovo je u reakcionu smešu dodat TEA (3.6518 g, 5.03 mL, 36.089 mmol), a zatim T3P (2.213 g, 2.07 mL 50 % tež/tež, 3.4776 mmol) u etil acetatu. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 sata. Reakcija je uga šena zasićenim amonijum hloridom (100 mL) i etil acetatom (150 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan etil acetatom (2 X 100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (2 X 100 mL), osušeni preko bezvodnog natrijum sulfata i koncentrovani. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu korišćenjem 0% do 20% acetona u heksanima da se dobije beličasta pena, terc-butil N-[2-[[[(2R)-2-benziloksi-5-[(2S)-2-[terc-butil (dimetil) silil]oksipropoksi]-2-(trifluorometil)pentanoil]amino]karbamoil]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil] karbamat (1.4724 g, 56 %). ESI-MS m/z izračunato 844.2302, pronađeno 845.5 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 4.88 minuta. LCMS metoda: Merck Millipore Chromolith SpeedROD C18kolona (50 X 4.6 mm) i dvojni gradijent od 5 % do 100 % mobilne faze B tokom 6 minuta. Mobilna faza A = voda (0.1 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0.1 % CF3CO2H).
Korak 7: terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-4-[(2S)-2-[terc-butil(dimetil)silil]oksi-propoksi]-1(trifluorometil)butil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat
[0899]
[0900] U rastvor terc-butil N-[2-[[[(2R)-2-benziloksi-5-[(2S)-2-[terc-butil(dimetil)silil]oksipropoksi]-2-(trifluorometil)pentanoil]amino]karbamoil]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamata (1.457 g, 1.6711 mmol) i DIEA (934.92 mg, 1.26 mL, 7.2338 mmol) u acetonitrilu (25 mL) je dodat p-TsCl (359.8 mg, 1.8873 mmol). Reakcija je mešana na 70 °C tokom 1.5 sati. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu korišćenjem 0% do 20% etil acetata u heksanu da bi se, kao žuti gel, dobio terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-4-[(2S)-2-[terc-butil(dimetil)silil]oksipropoksi]-1-(trifluorometil)butil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat (1.2036 g, 87 %). ESI-MS m/z izračunato 826.2196, pronađeno 827.5 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 5.25 minuta. LCMS metoda: Merck Millipore Chromolith SpeedROD C18kolona (50 X 4.6 mm) i dvojni gradijent od 5% do 100% mobilne faze B tokom 6 minuta. Mobilna faza A = voda (0.1% CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0.1% CF3CO2H).
Korak 8: terc-Butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-4-[(2S)-2-[terc-butil(dimetil)silil]oksipropoksi]-1-(trifluorometil)butil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksi-karbonilkarbamat
[0901]
[0902] U smešu terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-4-[(2S)-2-[terc-butil(dimetil)silil]oksipropoksi]-1-(trifluorometil)butil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamata (1.2036 g, 1.4541 mmol) i DIEA (296.80 mg, 0.4 mL, 2.2964 mmol) u MTBE (14 mL) na sobnoj temperaturi je dodat DMAP (17.8 mg, 0.1457 mmol), a zatim (Boc)2O (539.8 mg, 2.4733 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 17 sati. Smeša je razblažena sa EtOAc (60 ml), isprana vodom (30 mL), slanim rastvorom (30 mL), osušena preko Na2SO4, filtrirana i koncentrovana. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (kolona 40 g, od 0% do 10% EtOAc u Heksanima) da bi se dobio terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-4-[(2S)-2-[terc-butil(dimetil)silil]oksipropoksi]-1-(trifluorometil) butil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (1.34 g, 99 %). ESI-MS m/z izračunato 926.272, pronađeno 827.3 (M+H-Boc)<+>; Retenciono vreme: 5.01 minuta. LCMS metoda: Merck Millipore Chromolith SpeedROD C18kolona (50 X 4.6 mm) i dvojni gradijent od 5% do 100% mobilne faze B tokom 6 minuta. Mobilna faza A = voda (0.1% CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0.1% CF3CO2H).
Korak 9: terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-4-[(2S)-2-[terc-butil(dimetil)silil]oksipropoksi]-1-(trifluorometil)butil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-hidroksi-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat
[0903]
[0904] U rastvor terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-4-[(2S)-2-[terc-butil(dimetil)silil]oksipropoksi]-1-(trifluorometil)butil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonilkarbamata (1.3 g, 1.4011 mmol) U DMSO (14 mL) je dodat cezijum acetat (808.8 mg, 4.2136 mmol). Reakciona smeša je mešana na 80 °C tokom 7 sati. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i razblažena sa EtOAc (120 mL) i vodom (40 mL). Slojevi su odvojeni, a organski sloj je ispran vodom (3 X 30 mL), slanim rastvorom (30 mL), osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu korišćenjem 0% do 50% EtOAc u heksanima da bi se dobio terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-4-[(2S)-2-[terc-butil(dimetil)silil]oksipropoksi]-1-(trifluoro-metil)butil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-hidroksi-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (1.0947 g, 90 %).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.75 (s, 1H), 7.35 - 7.28 (m, 5H), 4.84 (d, J = 10.9 Hz, 1H), 4.62 (d, J= 10.8 Hz, 1H), 4.00 - 3.91 (m, 1H), 3.51 - 3.42 (m, 2H), 3.37 (dd, J= 9.5, 6.1 Hz, 1H), 3.24 (dd, J = 9.5, 5.1 Hz, 1H), 2.51 (t, J = 8.2 Hz, 2H), 1.86 - 1.77 (m, 1H), 1.76 - 1.67 (m, 1H), 1.40 (d, J = 4.5 Hz,18H), 1.15 (d, J = 6.2 Hz, 3H), 0.88 (s, 9H), 0.07 (d, J = 7.2 Hz, 6H). ESIMS m/z izračunato 864.3564, pronađeno 765.8 (M+H-Boc)<+>; Retenciono vreme: 4.75 minuta. LCMS metoda: Merck Millipore Chromolith SpeedROD C18kolona (50 X 4.6 mm) i dvojni gradijent od 5% do 100% mobilne faze B tokom 6 minuta. Mobilna faza A = voda (0.1% CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0.1% CF3CO2H).
Korak 10: terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-4-[(2S)-2-hidroksipropoksi]-1-(trifluorometil)butil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-hidroksi-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat
[0905]
[0906] U rastvor terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-4-[(2S)-2-[terc-butil(dimetil)silil]oksipropoksi]-1-(trifluorometil)butil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-hidroksi-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksi-karbonilkarbamata (1.079 g, 1.2475 mmol) u THF (10 mL) je dodat TBAF u THF (12.5 mL 1 M, 12.500 mmol) i mešan je na 35 °C tokom 3 sata. U reakcionu smešu je dodat zasićeni vodeni rastvor NH4Cl (80 mL) i ekstrahovana je sa EtOAc (3 X 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (50 mL), slanim rastvorom (50 mL), osušeni preko Na2SO4, filtrirani i koncentrovani. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu korišćenjem 0% do 80% etil acetata u heksanima da bi se dobio, kao bela pena, terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-4-[(2S)-2-hidroksipropoksi]-1-(trifluorometil)butil]-1.3,4-oksa-diazol-2-il]-6-hidroksi-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (916.6 mg, 98 %).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.81 (s, 1H), 7.36 - 7.27 (m, 5H), 4.90 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.78 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.17 - 4.10 (m, 1H), 3.57 - 3.51 (m, 1H), 3.47 (dd, J = 9.0, 3.0 Hz, 1H), 3.45 - 3.39 (m, 1H), 3.24 (t, J = 8.9 Hz, 1H), 2.64 - 2.44 (m, 2H), 1.70 - 1.59 (m, 2H), 1.40 (d, J = 7.0 Hz, 18H), 1.23 (d, J = 6.4 Hz, 3H). ESI-MS m/z izračunato 750.2699, pronađeno 651.4 (M+H-Boc)<+>; Retenciono vreme: 3.75 minuta. LCMS metoda: Merck Millipore Chromolith SpeedROD C18kolona (50 X 4.6 mm) i dvojni gradijent 5% do 100% mobilne faze B tokom 6 minuta. Mobilna faza A = voda (0.1% CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0.1% CF3CO2H).
Korak 11: terc-butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-10.13,19-trioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]-N-tercbutoksikarbonil-karbamat
[0907]
[0908] Rastvor terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-4-[(2S)-2-hidroksipropoksi]-1-(trifluorometil) butil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-hidroksi-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamata (845.7 mg, (1.1266 mmol) i PPh3(778.2 mg, 2.9670 mmol) u THF (75 mL) na sobnoj temperaturi u kapima je dodavan DIAD (605.52 mg, 0.58 mL, 2.9945 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 5 sati. Reakciona smeša je koncentrovana, i ostatak je direktno prečišćen hromatografijom na silika gelu korišćenjem 0% do 15% etil acetata u heksanima, dajući, kao belu penu, terc-butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-10.13,19-trioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (416.8 mg, 50 %). ESI-MS m/z izračunato 732.2594, pronađeno 733.5 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 4.36 minuta. LCMS metoda: Merck Millipore Chromolith SpeedROD C18kolona (50 X 4.6 mm) i dvojni gradijent od 5% do 100% mobilne faze B tokom 6 minuta. Mobilna faza A = voda (0.1% CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0.1% CF3CO2H).
Korak 12: terc-butil N-terc-butoksikarbonil-N-[(6R,12R)-6-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-10.13,19-trioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5] nonadeka-1 (18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat
[0909]
[0910] U rastvor terc-butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-10.13,19-trioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonilkarbamata (391.2 mg, 0.5339 mmol) u etanolu (45 mL) je dodat 10% Pd/C (200.3 mg, 1.8822 mmol). Reakciona smeša je degazirana, ponovo napunjena gasovitim vodonikom (X2), i reakciona sme ša je mešana u atmosferi vodonika na sobnoj temperaturi tokom 16 sati. Reakciona sme ša je filtrirana kroz celit, isprana sa EtOAc (30 mL) i koncentrovana da se dobije terc-butil N-terc-butoksikarbonil-N -[(6R,12R)-6-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-10.13,19-trioksa-3,4,18-triazatriciklo
[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat (352.4 mg, 100 %). ESIMS m/z izračunato 642.2124, pronađeno 643.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 3.85 minuta. LCMS metoda: Merck Millipore Chromolith SpeedROD C18kolona (50 X 4.6 mm) i dvojni gradijent od 5% do 100% mobilne faze B tokom 6 minuta. Mobilna faza A = voda (0.1% CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0.1% CF3CO2H).
Korak 13: (6R,12R)-17-Amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-10.13,19-trioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol, Jedinjenje 59
[0911]
[0912] Rastvor terc-butil N-terc-butoksikarbonil-N-[(6R,12R)-6-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-10.13,19-trioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il] karbamata (352.4 mg, 0.5320 mmol) u HFIP (15 mL) je stavljen u mikrotalasnu bočicu i zatvoren. Zagrevan je na 100 °C u mikrotalasnom sintetizatoru tokom 2 sata. Reakcija je koncentrovana, i ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu korišćenjem 0% do 35% EtOAc u heksanima da bi se dobio (6R,12R)-17-amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-10.13,19-trioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5] nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (212.6 mg, 88 %).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.43 (s, 1H), 5.20 (s, 2H), 4.90 (q, J = 6.9 Hz, 1H), 4.49 (d, J = 8.9 Hz, 1H), 3.97 - 3.88 (m, 1H), 3.62 - 3.53 (m, 2H), 3.19 (t, J = 8.5 Hz, 1H), 2.45 (t, J = 12.1 Hz, 1H), 2.30 - 2.14 (m, 2H), 1.77 - 1.68 (m, 1H), 1.52 (d, J = 6.4 Hz, 3H). ESI-MS m/z izračunato 442.10757, pronađeno 443.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.59 minuta. LCMS metoda: Cortess C18kolona veličine čestica 2.7 µm (3.0 X 50 mm) koju prodaje Waters (pn: 186007370), i dvojni gradijent od 5% do 100% mobilne faze B tokom 6.0 minuta. Mobilna faza A = voda (+ 0.1% CF3CO2H), mobilna faza B = acetonitril (0.1% CF3CO2H), brzina protoka = 1.2 mL/min, zapremina injektiranja = 2 µL i temperatura kolone = 55 °C.
Primer 42: Priprema (6R,12R)-17-amino-6-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-8-ona, Jedinjenje 60
[0913]
Korak 1: (6R,12R)-17-amino-6-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-8-on, Jedinjenje 60
[0914] U rastvor (6R,12R)-17-amino-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-8-ona (32 mg, 0.0588 mmol) u MeOH (4 mL) je dodat paladijum na ugljeniku (9.5 mg, 10%, 50% vlaga 0.0045 mmol). Smeša je mešana u atmosferi vodonika na sobnoj temperaturi tokom noći. Smeša je filtrirana kroz diatomejsku zemlju i isprana sa EtOAc. Filtrat je koncentrovan, a ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (kolona 24 g, eluiranje 20% do 40% EtOAc/pentana) da bi se dobila bledožuta čvrsta supstanca, (6R,12R)-17-amino-6-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nona-deka-1(18),2 ,4,14,16-pentaen-8-on (21 mg, 76%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.03 (s, 1H), 7.76 (s, 1H), 6.38 (s, 2H), 4.94 - 4.81 (m, 1H), 3.50 (d, J= 15.4 Hz, 1H), 3.30 - 3.23 (m, 1H), 3.01 (d, J= 15.4 Hz, 1H), 2.70 (ddd, J = 19.0, 6.4, 2.9 Hz, 1H), 2.35 - 2.20 (m, 1H), 1.89 - 1.74 (m, 1H), 1.44 - 1.27 (m, 5H).<19>F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62.58 (s, 3F), -76.69 (s, 3F). ESI-MS m/z izračunato 454.1076, pronađeno 455.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 3.02 minuta. LCMS metoda: Kinetex Polar C18kolona (3.0 X 50 mm, veličina čestica 2.6 µm, trajanje 6 minuta, 5% do 95% acetonitrila u vodi (modifikator 0.1% mravlja kiselina), brzina protoka = 1.2 mL/min).
Primer 43: Priprema (6R)-17-amino-11.11-dimetil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ola, Jedinjenje 61
[0915]
Korak 1: terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-(2,2-dimetilpent-4-enoksi)-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat
[0916]
[0917] Rastvor terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-hidroksi-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamata (1.38 g, 1.8473 mmol) i 2,2-dimetilpent-4-en-1-ola (630 mg, 5.5174 mmol) u toluenu (17 mL) je tretiran trifenilfosfinom (998 mg, 3.8050 mmol), a zatim sa DIAD (770.25 mg, 0.75 mL, 3.8092 mmol) na sobnoj temperaturi. Žuti rastvor je mešan na sobnoj temperaturi 24 sata. Žuta suspenzija je koncentrovana, i ostatak je prečišćen reverznofaznom hromatografijom (100 g C18kolona, eluiranjem sa 0% do 90% acetonitrila u vodi sa 0.1 tež/tež% mravlje kiseline sa 5 zapremina kolone, nakon čega je usledilo izokratsko eluiranje sa 90% acetonitrila u vodi sa 0.1 tež/tež % mravlje kiseline sa 10 zapremina kolone) da bi se, kao svetložuto ulje, dobio tercbutil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-(2,2-dimetilpent-4-enoksi)-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (730 mg, 51 %). ESI-MS m/z izračunato 770.3114, pronađeno 615.2 (M-155)<+>; Retenciono vreme: 4.87 minuta. LCMS metoda: XBridge C18kolona (4.6 X 75 mm, veličina čestica 5 mm, trajanje 6 minuta sa 1 minutom ekvilibracije, inicijalna mobilna faza sa 95% vodeni NH4HCO3/5% acetonitril, gradijent od 0 do 3 minuta do 95% MeCN i držanje 3 minuta, protok = 1.5 mL/min).
Korak 2: terc-Butil N-[(6R)-6-benziloksi-11.11-dimetil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,8,14,16-heksaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonilkarbamat (E/Z smeša)
[0918]
[0919] Osušena tikvica od 250 mL je napunjena toluenom (100 mL) i rastvarač je barbotiran azotom 30 minuta. Uz blagi protok azota je dodat Katalizator Zhan 1B (40 mg, 0.0545 mmol). Smeša je barbotirana azotom još 10 minuta i zagrejana na 110 °C. Azotom barbotirani rastvor terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-(2,2-dimetilpent-4-enoksi)-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamata (200 mg, 0.2595 mmol) u toluenu (20 mL) je dodavan u kapima tokom pola sata. Nakon što je dodavanje završeno, smeša je barbotirana azotom 5 minuta. Mešanje smeše je nastavljeno na 110 °C tokom 1.5 sati. Ponovo je u dve porcije dodat katalizator Zhan 1B (40 mg, 0.0545 mmol) uz zagrevanje reakcione smeše na 111 °C tokom 2 sata. Smeša je zatim ohlađena na sobnu temperaturu, a katalizator je ugašen dodavanjem DMSO (4-5 kapi). Smeša je koncentrovana, i ostatak je prečišćen reverzno-faznom hromatografijom (50 g C18kolona, eluiranjem sa 5% do 90% acetonitrila u vodi koja sadrži 0.1 tež/tež% mravlje kiseline tokom 10 CV, a zatim sa 90% acetonitrilom u vodi sa 0.1 tež/tež% mravlje kiseline tokom 10 CV) da bi se dobio, kao smeđe ulje, terc-butil N-[(6R)-6-benziloksi-11.11-dimetil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,8,14,16-heksaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (E/Z smeša) (23 mg, 10%). ESI-MS m/z izračunato 742.2801, pronađeno 587.2 (M-155)<+>; Retenciono vreme: 4.61 minuta. LCMS metoda: XBridge C18kolona (4.6 X 75 mm, veličina čestica 5 mm, trajanje 6 minuta sa 1 minutom ekvilibracije, inicijalna mobilna faza na 95% vodeni NH4HCO3/5% acetonitril, gradijent od 0 do 3 minuta do 95% MeCN i držanje 3 minuta, protok = 1.5 mL/min).
Korak 3: terc-Butil N-terc-butoksikarbonil-N-[(6R)-6-hidroksi-11.11-dimetil-6,15-bis (trifluorometil) -13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat
[0920]
[0921] Rastvor terc-butil N-[(6R)-6-benziloksi-11.11-dimetil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,8,14,16-heksaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonil-karbamata (E/Z smeša) (21 mg, 0.0283 mmol) u metanolu (5 mL) je prečišćen tri puta (vakuum, a zatim azot). Dodat je paladijum na ugljeniku (5 mg, 10% tež/tež, 50% vlaga, 0.0023 mmol), dva puta je prečišćen gasovitim vodonikom i mešan u atmosferi vodonika preko noći. Reakciona smeša je prečišćen gasovitim azotom, filtrirana kroz najlonski filter od 0.45 mikrona i koncentrovana da bi se dobio terc-butil N-tercbutoksikarbonil-N-[(6R)-6-hidroksi-11.11-dimetil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-tri-azatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il] karbamat (14 mg, 76 %). ESI-MS m/z izračunato 654.2488, pronađeno 499.2 (M-155)<+>; Retenciono vreme: 4.23 minuta. LCMS metoda: XBridge C18kolona (4.6 X 75 mm, veličina čestica 5 mm, trajanje 6 minuta sa 1 minutom ekvilibracije, inicijalna mobilna faza 95% vodeni NH4HCO3/ 5% acetonitril, gradijent od 0 do 3 minuta do 95% MeCN i držanje 3 minuta, protok = 1.5 mL/min).
Korak 4: (6R)-17-Amino-11.11-dimetil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5|nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol, Jedinjenje 61
[0922]
[0923] U rastvor terc-butil N-terc-butoksikarbonil-N-[(6R)-6-hidroksi-11.11-dimetil-6,15-bis (trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il] karbamata (14 mg, 0.0214 mmol) u dihlorometanu (1 mL) je dodata 2,2,2-trifluorosirćetna kiselina (1.4800 g, 1 mL, 12.980 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 sata. Smeša je razblažena dihlormetanom (5 mL) i koncentrovana. Ostatak je rastvoren u etil acetatu (40 mL), ispran zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (3 X 10 mL), slanim rastvorom (1 X 20 mL), osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan. Materijal je prečišćen reverzno-faznom hromatografijom (15.5 g C18kolona, korišćenjem gradijenta od 0% do 95% vode (+0.1v% FA) i MeCN) da bi se dobio (6R) -17-amino-11.11-dimetil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka- 1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (2.6 mg, 26%).<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.65 (s, 1H), 4.47 (br. s., 1H), 4.17 (br. s., 1H), 2.44 - 2.30 (m, 2H), 2.14 - 2.09 (m, 1H), 2.05 - 1.92 (m, 2H), 1.46 - 1.40 (m, 2H), 1.26 - 1.21 (m, 1H), 0.98 (s, 3H), 0.96 (s, 3H).<19>F NMR (377 MHz, CD3OD) δ -65.62 (s, 3F), -80.82 (br. s., 3F). ESI-MS m/z izračunato 454.144, pronađeno 455.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 3.95 minuta. LCMS metoda: XBridge C18kolona (4.6 X 75 mm, veličina čestica 5 mm, trajanje 6 minuta sa 1 minutom ekvilibracije, inicijalna mobilna faza 95% vodeni NH4HCO3/ 5% acetonitril, gradijent od 0 do 3 minuta do 95% MeCN i držanje 3 minuta, protok = 1.5 mL/min).
Primer 44: Priprema (12R)-17-amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6,7-diola (enantiomer 3), Jedinjenje 62
[0924]
Korak 1:(12R)-17-Amino-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,8,14,16-heksaen-7-on (E/Z smeša)
[0925]
[0926] U rastvor (12R)-17-amino-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5] nonadeka-1(18),2,4,8,14,16-heksaen-7-ola (E/Z smeša, dijastereomerni par 1) (30 mg, 0.0551 mmol) u CH2Cl2(3 mL) je dodat NaHCO3(90 mg, 1.0713 mmol), a zatim Dess-Martin perjodinan (30 mg, 0.0707 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 3 sata. Dodati su zasićeni NaHCO3(3 mL) i 10% vodeni Na2S2O3(3 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 5 minuta i ekstrahovana sa CH2Cl2(3 X 10 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni sa Na2SO4, filtrirani i koncentrovani. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (eluiranjem od 0% do 30% EtOAc/heptani) da bi se dobio (12R)-17-amino-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,8,14,16-heksaen-7-on (E/Z smeša) (24 mg, 80%), kao bledožuto ulje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.45 - 7.26 (m, 4H), 7.27 - 7.13 (m, 3H), 7.06 - 6.76 (m, 1H), 5.35 - 5.19 (m, 2H), 5.07 - 4.88 (m, 2H), 4.76 - 4.69 (m, 1H). 2.51 - 2.08 (m, 3H), 1.76 - 1.66 (m, 1H), 1.47 - 1.42 (m, 3H).<19>F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -63.98 do -64.01 (m, 3F), -70.18 do -70.70 (m, 3F). Korak 2: (12R)-17-Amino-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,8,14,16-heksaen-7-ol (E/Z smeša, dijastereomerni par 2)
[0927]
[0928] U rastvor (12R)-17-amino-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,8,14,16-heksaen-7-ona (E/Z smeša) (28 mg, 0.0516 mmol) u MeOH (2.5 mL) na -5 °C je dodat tetrametilamonijum borohidrid (10 mg, 0.1124 mmol). Smeša je mešana na -5 °C tokom 10 minuta. Dodat je aceton (0.5 mL). Smeša je mešana na -5 °C tokom 5 minuta, a zatim tretirana zasićenim vodenim NaHCO3(5 mL). Smeša je ekstrahovana sa EtOAc (3 X 10 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni sa Na2SO4, filtrirani i koncentrovani. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (eluiranjem 5% EtOAc/CH2Cl2) da bi se dobio (12R)-17-amino-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka- 1(18),2,4,8,14,16-heksaen-7-ol (E/Z smeša, dijastereomerni par 2) (22 mg, 78 %). ESI-MS m/z izračunato 544.15454, pronađeno 545.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 3.49 minuta. LCMS metoda: Kinetex Polar C18kolona (3.0 X 50 mm, veličina čestica 2.6 µm, trajanje 6 minuta, 5% do 95% acetonitril u vodi (modifikator 0.1% mravlja kiselina), brzina protoka = 1.2 mL/min).
Korak 3: (12R)-17-Amino-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,8,14,16-heksaen-7-ol (E/Z smeša,enantiomer 3)
[0929]
[0930] (12R)-17-amino-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,8,14,16-heksaen-7-ol (E/Z smeša, dijastereomerni par 2) (40 mg, 0.0735 mmol) je prečišćen hromatografijom na silika gelu (eluiranjem 10 do 30% EtOAc/heptani) da bi se dobila dva proizvoda. Manje polarni dijastereomer je izdvojen kao bledožuto ulje, (12R)-17-amino-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1 (18),2,4,8,14,16-heksaen-7-ol (E/Z smeša, enantiomer 3) (16 mg, 37 %). ESI-MS m/z izračunato 544.15454, pronađeno 545.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 3.5 minuta. LCMS metoda: Kinetex Polar C18kolona (3.0 X 50 mm, veličina čestica 2.6 µm, trajanje 6 minuta, 5% do 95% acetonitril u vodi (modifikator 0.1% mravlja kiselina), brzina protoka = 1.2 mL/min).
Korak 4: (12R)-17-Amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6,7-diol (enantiomer 3), Jedinjenje 62
[0931]
[0932] (12R)-17-Amino-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,8,14,16-heksaen-7-ol (E/Z smeša, enantiomer 3) (16 mg, 0.0272 mmol) i 10% paladijum na ugljeniku (50% vlaga, 6 mg, 0.0028 mmol) u EtOAc (3 mL) je mešan pod vodonikom (balon) na sobnoj temperaturi preko noći. Smeša je filtrirana kroz diatomejsku zemlju, a kolač je ispran sa EtOAc (oko 10 mL). Filtrat je koncentrovan, i ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (eluiranjem 20% do 50% EtOAc/pentan) i liofilizovan da bi se dobio (12R) -17-amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6,7-diol (enantiomer 3) (7 mg, 52 %) kao bledožuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.75 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 6.27 (s, 2H), 5.51 (d, J = 6.8 Hz, 1H), 4.88 - 4.78 (m, 1H), 4.35 - 4.26 (m, 1H), 2.63 -2.51 (m, 2H), 1.96 - 1.83 (m, 1H), 1.75 - 1.64 (m, 1H), 1.63 - 1.53 (m, 1H), 1.52 - 1.43 (m, 1H), 1.37 - 1.28 (m, 5H).<19>F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62.43 (s, 3F), -73.86 (s, 3F). ESI-MS m/z izračunato 456.12323, pronađeno 457.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.99 minuta. LCMS metoda: Kinetex Polar C18kolona (3.0 X 50 mm, veličina čestica 2.6 µm, trajanje 6 minuta, 5% do 95% acetonitril u vodi (modifikator 0.1% mravlja kiselina), brzina protoka = 1.2 mL/min).
Primer 45: Priprema (6R,13R)-18-amino-13-metil-6,16-bis(trifluorometil)-14,20-dioksa-3,4,19-triazatetraciklo [13.3.1.12,5.09,11]ikoza-1(19),2,4,15,17-pentaen-6-ola (enantiomer 1), Jedinjenje 63, i (6R,13R)-18-amino-13-metil-6,16-bis(trifluorometil)-14,20-dioksa-3,4,19-triazatetraciklo [13.3.1.12,5.09,11]ikoza-1(19),2,4,15,17-pentaen-6-ola (enantiomer 2), Jedinjenje 64
[0933]
Korak 1: terc-butil N-[(6R,13R)-6-benziloksi-13-metil-6,16-bis(trifluorometil)-14,20-dioksa-3,4,19-triazatetraciklo[13.3.1.12,5.09,11]ikoza-1(19),2,4,15,17-pentaen-18-il]-N-terc-butoksikarbonilkarbamat
[0934]
[0935] Tikvica je napunjena kalijum hidroksidom (800 mg, 14.259 mmol) i dodata je voda (3.4 mL). Sme ša je mešana 2 minuta dok se KOH nije rastvorio. Dodat je dietil etar (14 mL). Sme ša je ohlađena na 0 °C i dodata je 1-metil-1-nitrozo-urea (700 mg, 6.1118 mmol). Smeša je mešana na 0 °C tokom 30 minuta. Mešanje je zaustavljeno i smeša je ohlađena na -78 °C. Nakon što je vodena faza zamrznuta, žuti etarski sloj je plastičnom pipetom prenet u drugu tikvicu sa dve pelete (oko 220 mg) kalijum hidroksida. Tikvica je ostala na 0 °C tokom 5 minuta. Polovina formiranog rastvora diazometana u etru (~7 mL) je dodata plastičnom pipetom u rastvor tercbutil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis (trifluoro-metil)-13,19dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,9,14,16-heksaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonilkarbamata (E/Z smeša) (200 mg, 0.2536 mmol) u THF (10 mL) na 0 °C. Rastvor paladijum diacetata (12 mg, 0.0535 mmol) u THF (3.4 mL) je dodavan u kapima. Dobijena smeša je mešana na 0 °C tokom 15 minuta, a zatim je dodat ostatak etarskog rastvora diazometana (~7 mL). Braon rastvor je ostavljen da se zagreje na sobnu temperaturu i mešan je 1 sat. Po drugi put, tikvica je napunjena kalijum hidroksidom (800 mg, 14.259 mmol) i dodata je voda (4 mL). Smeša je mešana 2 minuta dok se KOH nije rastvorio. Dodat je dietil etar (14 mL). Smeša je ohlađena na 0 °C i dodata je 1-metil-1-nitrozo-urea (700 mg, 6.7908 mmol). Smeša je mešana na 0 °C tokom 30 minuta. Mešanje je zaustavljeno i smeša je ohlađena na -78 °C. Nakon što je vodena faza zamrznuta, žuti etarski sloj je prebačen u drugu tikvicu sa 220 mg kalijum hidroksida. Tikvica je ostala na 0 °C tokom 5 minuta. Polovina ovog rastvora diazometana u etru (~7 mL) je dodata u prethodni reakcioni rastvor. Rastvor paladijum diacetata (12 mg, 0.0535 mmol) u THF (3 mL) je u reakcionu smešu dodavan u kapima. Dobijena smeša je mešana na 0 °C tokom 15 minuta, a zatim je dodat ostatak etarskog rastvora diazometana (~7 mL). Braon rastvor je ostavljen da se zagreje na sobnu temperaturu i mešan je 1 sat. Po treći put, tikvica je napunjena kalijum hidroksidom (800 mg, 14.259 mmol) i dodata je voda (3.5 mL). Smeša je mešana 2 minuta dok se KOH nije rastvorio. Dodat je dietil etar (14 mL). Smeša je ohlađena na 0 °C i dodata je 1-metil-1-nitrozo-urea (700 mg, 6.7908 mmol). Smeša je mešana na 0 °C tokom 30 minuta. Mešanje je zaustavljeno i smeša je ohlađena na -78 °C. Nakon što je vodena faza zamrznuta, žuti etarski sloj je prebačen u drugu tikvicu sa 220 mg kalijum hidroksida. Tikvica je ostala na 0 °C tokom 5 minuta. Polovina ovog rastvora diazometana u etru (~7 mL) je dodata plasti čnom pipetom u prethodni reakcioni rastvor. U kapima je dodavan rastvor paladijum diacetata (12 mg, 0.0535 mmol) u THF (3 mL). Dobijena smeša je mešana na 0 °C tokom 15 minuta, a zatim je dodat ostatak etarskog rastvora diazometana (~7 mL). Braon rastvor je ostavljen da se zagreje na sobnu temperaturu i mešan je 1 sat. Azot je barbotiran kroz crnu smešu tokom 10 minuta, a zatim su rastvarači uklonjeni pod vakuumom (na 25 °C). Ostatak je prečišćen reverzno-faznom hromatografijom preko kolone 50 g silika gela (5% do 90% CH3CN / 0.01% mravlja kiselina u vodi) da bi se dobila dijastereomerna smeša terc-butil N-[(6R,13R)-6-benziloksi-13-metil-6,16-bis(trifluorometil)-14,20-dioksa-3,4,19-triazatetraciklo[13.3.1.12,5.09,11]ikoza-1(19),2,4,15,17-pentaen -18-il]-N-terc-butoksikarbonil-karbamata (123 mg, 64%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izračunato 742.2801, pronađeno 587.2 (M-155)<+>; Retenciono vreme: 4.6 minuta. LCMS metoda: XBridge C18kolona (4.6 X 75 mm, veličina čestica 5 µm, trajanje 6 minuta sa 1 minutom ekvilibracije, inicijalna mobilna faza 95% vodeni NH4HCO3/ 5% acetonitril, gradijent od 0 do 3 minuta do 95% MeCN i držanje 3 minuta, protok = 1.5 mL/min).
Korak 2: (6R,13R)-6-Benziloksi-13-metil-6,16-bis(trifluorometil)-14,20-dioksa-3,4,19-triazatetraciklo [13.3.1.12,5.09,11]ikoza-1(19),2,4,15,17-pentaen-18-amin
[0936]
[0937] Trifluorosirćetna kiselina (740.00 mg, 0.5 mL, 6.4899 mmol) je dodata žutom rastvoru terc-butil N-[(6R,13R)-6-benziloksi-13-metil-6,16-bis(trifluorometil)-14,20-dioksa-3,4,19-triazatetraciklo [13.3.1.12,5.09,11]ikoza-1(19),2,4,15,17-pentaen-18-il]-N-terc-butoksikarbonil-karbamata (120 mg, 0.1582 mmol) u DCM-u (2.4 mL) na sobnoj temperaturi i smeša je mešana 1 sat. Narandžasti rastvor je koncentrovan pod vakuumom. Preostala TFA je koevaporisana sa CH3CN (3 X 4 mL), CH3CN/toluen (1 X 4 mL) i toluenom (3 X 4 mL), a zatim osušena pod visokim vakuumom da se dobije sirovi (6R,13R)-6-benziloksi-13-metil-6,16-bis(trifluorometil)-14,20-dioksa-3,4,19-triazatetraciklo[13.3.1.12,5.09,11]ikoza-1(19),2,4,15,17-pentaen-18-amin (103 mg, kvantitativno) kao svetlo narandžasto ulje. ESI-MS m/z izračunato 542.17523, pronađeno 543.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 4.35 minuta. LCMS metoda: XBridge C18kolona (4.6 X 75 mm, veličina čestica 5 µm, trajanje 6 minuta sa 1 minutom ekvilibracije, inicijalna mobilna faza na 95% vodeni NH4HCO3/ 5% acetonitril, gradijent od 0 do 3 minuta do 95% MeCN i držanje 3 minuta, protok = 1.5 mL/min).
Korak 3: (6R,13R)-18-Amino-13-metil-6,16-bis(trifluorometil)-14,20-dioksa-3,4,19-triazatetraciklo [13.3.1.12,5.09,11]ikoza-1(19),2,4,15,17-pentaen-6-ol (enantiomer 1), Jedinjenje 63, i (6R,13R)-18-amino-13-metil-6,16-bis(trifluorometil)-14,20-dioksa-3,4,19-triazatetraciklo[13.3.1.12,5.09,11]ikoza-1 (19),2,4,15,17-pentaen-6-ol (enantiomer 2), Jedinjenje 64
[0938]
[0939] Paladijum na ugljeniku (10 % tež/tež, 18 mg, 0.0169 mmol) je dodat u degazirani rastvor (6R,13R)-6-benziloksi-13-metil-6,16-bis(trifluorometil)-14,20-dioksa-3,4,19-triazatetraciklo [13.3.1.12,5.09,11] ikoza-1(19),2,4,15,17-pentaen-18-amina (90 mg, 0.1659 mmol) u metanolu (2 mL) na sobnoj temperaturi. Crna suspenzija je prečišćenim azotom tokom 5 minuta, a zatim je kroz suspenziju barbotiran vodonik tokom 5 minuta. Nakon toga, smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći u atmosferi vodonika. Crna suspenzija je filtrirana preko Celita, a kolač je ispran sa DCM (3 X 5 mL), a zatim je filtrat koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo fluorescentno žuto ulje. Prečišćeno je reverznofaznom hromatografijom preko 50 g C18kolone (5% do 90% CH3CN/0.02% HCl u vodi) da bi se dobila žuta čvrsta supstanca (57 mg, 98.6% čistoće). Ova čvrsta supstanca je podvrgnuta SFC separaciji korišćenjem sledećih uslova: kolona Lux Cellulose 3, (250 X 21.2 mm), kolona 5 µm na 40 °C, eluent: 10% etanol (0.1% dietilamin), 90% CO2, brzina protoka: 75 mL/min, koncentracija: 5.7 mg/mL u etanolu (0.1% dietilamin), zapremina injektiranja: 200 µL, pritisak: 100 bar, talasna dužina: 250 nm. Isparavanje rastvarača je dalo dva izomera. Oba su ponovo rastvorena u EtOAc (5 mL), a zatim isprana sa 0.5 M vodenim rastvorom hlorovodonika (1 X 10 mL), zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (1 X 10 mL) i slanim rastvorom (1 X 10 mL). Organski sloj svakog je osušen iznad bezvodnog natrijum sulfata, a zatim koncentrovan pod vakuumom. Oba izomera su zatim liofilizovana da bi se dobio (6R,13R) -18-amino-13-metil-6,16-bis(trifluorometil)-14,20-dioksa-3,4,19-triazatetraciklo[13.3.1.12,5.09,11]ikoza-1(19), 2,4,15,17-pentaen-6-ol (enantiomer 1) (15.6 mg, 20 %).<1>H NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.66 (s, 1H), 5.34 -5.19 (m, 1H), 2.96 - 2.79 (m, 1H), 2.52 (dd, J = 15.2, 8.1 Hz, 1H), 1.96 - 1.81 (m, 2H), 1.45 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.04 - 0.96 (m, 2H), 0.91 (t, J = 12.5 Hz, 1H), 0.59 - 0.44 (m, 1H), 0.36 - 0.27 (m, 1H), 0.26 - 0.17 (m, 1H).<19>F NMR (377 MHz, MeOD) δ -65.42 (s, 3F), -80.26 (s, 3F). ESI-MS m/z izračunato 452.1283, pronađeno 453.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 3.8 minuta. LCMS metoda: XBridge C18kolona (4.6 X 75 mm, veličina čestica 5 µm, trajanje 6 minuta sa 1 minutom ekvilibracije, inicijalna mobilna faza 95% vodeni NH4HCO3/ 5% acetonitril, gradijent od 0 do 3 minuta do 95% MeCN i držanje 3 minuta, protok = 1.5 mL/min).
[0940] Drugi pik koji je eluiran pod gore navedenim SFC uslovima je ponovo prečišćen sa SFC koristeći sledeće uslove: Lux Cellulose 3 kolona, (250 X 21.2 mm), 5 µm kolona na 40 °C, eluent: 10% etanol (0.1% dietilamin), 90% CO2, brzina protoka: 75 mL/min, koncentracija: 21 mg/mL u etanolu (0.1% dietilamin), zapremina injektiranja: 200 µL, pritisak: 100 bar, talasna dužina: 250 nm. Isparavanjem rastvarača i liofilizacijom je dobijen (6R,13R)-18-amino-13-metil-6,16-bis(trifluorometil)-14,20-dioksa-3,4,19-triazatetraciklo[13.3.1.12,5.09,11]ikoza-1(19),2,4,15,17-pentaen-6-ol (enantiomer 2) (9.,61 mg, 13 %).<1>H NMR (400 MHz, MeOD) δ 7.64 (s, 1H), 5.56 - 5.38 (m, 1H), 2.63 - 2.48 (m, 1H), 2.41 - 2.17 (m, 2H), 2.09 -1.87 (m, 1H), 1.32 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.24 - 1.14 (m, 1H), 1.13 - 1.04 (m, 1H), 0.94 - 0.68 (m, 2H), 0.27 -0.10 (m, 2H). 19F NMR (377 MHz, MeOD) δ -65.27 (s, 3F), -78.81 (s, 3F).<19>F NMR (377 MHz, MeOD) δ -65.27 (s, 3F), -78.81 (s, 3F). ESI-MS m/z izračunato 452.1283, pronađeno 453.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 3.79 minuta. LCMS metoda: XBridge C18kolona (4.6 X 75 mm, veličina čestica 5 µm, trajanje 6 minuta sa 1 minutom ekvilibracije, inicijalna mobilna faza na 95% vodeni NH4HCO3/ 5% acetonitril, gradijent od 0 do 3 minuta do 95% MeCN i držanje 3 minuta, protok = 1.5 mL/min).
Primer 46: Priprema (6R)-12-ciklopropil-17-(etilamino)-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,14(18),15-pentaen-6-ola (enantiomer 1), Jedinjenje 65, i (6R)-12-ciklopropil-17-(etilamino)-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,14(18),15-pentaen-6-ola (enantiomer 2), Jedinjenje 66
Korak 1: 1-Ciklopropilbut-3-en-1-ol
[0942]
[0943] U mešani rastvor ciklopropankarbaldehida (5.0427 g, 5.6 mL, 69.068 mmol) u dietil eteru (50 mL) u trogrloj tikvici od 250 mL je dodat rastvor alil(bromo)magnezijuma (69.5 mL 1 M, 69.5 mmol) u dietil etru na -20 °C. Dobijeni rastvor je mešan 1 sat od -20 °C do 0 °C. Reakcija je zatim ugašena dodatkom 25 mL zasićenog vodenog rastvora amonijum hlorida i ekstrahovana sa 2 X 50 mL dietil etra. Kombinovani organski ekstrakti su isprani sa 1 X 50 mL slanog rastvora, osušeni preko bezvodnog natrijum sulfata i koncentrovani pod vakuumom da bi se dobio 1-ciklopropilbut -3-en-1-ol (6,008 g, 74%), kao svetložuto ulje.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 5.88 (ddt, J = 17.2, 10.2, 7.1 Hz, 1H), 5.08 - 4.94 (m, 2H), 4.54 - 4.35 (m, 1H), 2.91 (q, J = 6.5 Hz, 1H), 2.28 - 2.14 (m, 2H), 0.84 - 0.73 (m, 1H), 0.40 - 0.28 (m, 2H), 0.27 - 0.19 (m, 1H), 0.18 - 0.09 (m, 1H).
Korak 2: N'-[(2R)-2-Benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enoil]-6-hidroksi-3-nitro-5-(trifluorometil) piridin-2-karbohidrazid
[0944]
[0945] 6-Hidroksi-3-nitro-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilna kiselina (203 mg, 0.8052 mmol) i (2R)-2-benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enehidrazid (hidrohloridna so) (260 mg, 0.7675 mmol) su rastvoreni u smeši etil acetata (5 mL) i trietilamina (326.7 mg, 0.45 mL, 3.2286 mmol). Zatim je na sobnoj temperaturi (20 do 25 °C) dodat rastvor propilfosfonskog anhidrida (0.7 mL 1.68 M, 1.176 mmol) u etil acetatu i reakcija je mešana 3.5 sata na sobnoj temperaturi. Nakon toga je reakcija uga šena zasićenim vodenim rastvorom amonijum hlorida (5 mL). Faze su odvojene, a organska faza je isprana zasićenim vodenim rastvorom amonijum hlorida (5 mL), a zatim vodenim (5% w/v) rastvorom natrijum bikarbonata (2 X 5 mL), osušena preko bezvodnog natrijum sulfata, filtrirana i koncentrovana evaporacijom pod sni ženim pritiskom. Sušenjem na vakuum pumpi preko noći dobijena je žuta čvrsta supstanca,N'-[(2R)-2-benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enoil]-6-hidroksi-3-nitro-5-(trifluorometil)piridin-2-karbohidrazid (430 mg, 96 %). ESI-MS m/z izračunato 536.1131, pronađeno 537.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 3.04 minuta. LCMS metoda: Kinetex Polar C18kolona (3.0 X 50 mm, veličina čestica 2.6 µm, trajanje 6 minuta, 5 % do 95 % acetonitrila u vodi (0.1 % modifikator mravlja kiselina), brzina protoka = 1.2 mL/min).
Korak 3: 6-[5-[(1R)-1-Benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-5-nitro-3-(trifluorometil)piridin-2-ol
[0946]
[0947] U rastvor N'-[(2R)-2-benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enoil]-6-hidroksi-3-nitro-5-(trifluorometil)piridin-2-karbohidrazida (6.47 g, 8.4557 mmol) i N,N-diizopropiletilamina (5.8618 g, 7.9 mL, 45.355 mmol) u acetonitrilu (200 mL) na 0 °C u porcijama je dodat 4-metilbenzensulfonil hlorid (3.71 g, 19.460 mmol). Nakon dodavanja, rashladna kupka je uklonjena i reakcija je me šana na 26 °C tokom 44 sata. Volatili su uklonjeni evaporacijom pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren u etil acetatu (180 mL) i ispran sa 0.5 N vodenim rastvorom hlorovodonične kiseline (3 X 25 mL) i slanim rastvorom (2 X 15 mL). Organski sloj je osušen iznad bezvodnog natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan evaporacijom pod sniženim pritiskom, što je dalo 6-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-5-nitro-3-(trifluorometil)piridin-2-ol (6.67 g, 70 %) kao braon lepljivi ostatak. ESI-MS m/z izračunato 518.1025, pronađeno 519.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 3.1 minut. LCMS metoda: XBridge C18kolona (4.6 X 75 mm, veličina čestica 5 mm, trajanje 6 minuta sa 1 minutom ekvilibracije, inicijalna mobilna faza 95% vodeni NH4HCO3/ 5% acetonitril, gradijent od 0 do 3 minuta do 95% MeCN i držanje 3 minuta, protok = 1.5 mL/min).
Korak 4: 2-[(1R)-1-Benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-5-[6-(1-ciklopropilbut-3-enoksi)-3-nitro-5-(trifluorometil)-2-piridil]-1.3,4-oksadiazol
[0948]
[0949] U okruglu tikvicu od 25 mL koja sadrži 6-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-5-nitro-3-(trifluorometil)piridin-2-ol (418 mg, 0.7395 mmol) dodati su trifenilfosfin (395 mg, 1.506 mmol) i 1-ciklopropilbut-3-en-1-ol (245.1 mg, 0.2 mL, 2.0758 mmol), a zatim toluen (8.5 mL). Smeši koja je mešana na sobnoj temperaturi u kapima je dodavan DIAD (308.1 mg, 0.3 mL, 1.5237 mmol), a zatim je mešanje nastavljeno 4 sata. Nakon stajanja na sobnoj temperaturi tokom 72 sata, sme ša je koncentrovana evaporacijom pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen reverzno-faznom hromatografijom na vodenoj koloni C1850 g, eluiranjem sa gradijentom acetonitrila u baznoj vodi (pH = 10, amonijum bikarbonat) od 5% do 80% tokom 8 zapremina kolone, zatim sa 80% acetonitrila u baznoj vodi (pH = 10, amonijum bikarbonat) tokom 10 zapremina kolone. Odabrane frakcije su koncentrovane evaporacijom pod sniženim pritiskom da bi se dobio 2-[(1R)-1-benziloksi-1- (trifluorometil)pent-4-enil]-5-[6-(1-ciklopropilbut-3-enoksi)-3-nitro-5-(trifluorometil)-2-piridil]-1.3,4-oksadiazol (250 mg, 54 %) kao svetložuta čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izračunato 612.1807, pronađeno 613.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 4.08 minuta. LCMS metoda: Kinetex Polar C18kolona (3.0 X 50 mm, veličina čestica 2.6 µm, trajanje 6 minuta, 5% do 95% acetonitrila u vodi (modifikator 0.1% mravlja kiselina), brzina protoka = 1.2 mL/min).
Korak 5: (6R)-6-Benziloksi-12-ciklopropil-17-nitro-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,9,14(18),15-heksaen (E/Z smeša)
[0950]
[0951] Osušena tikvica od 250 mL je napunjena sa 1.2-dihloretanom (98 mL). Rastvarač je barbotiran azotom 30 minuta. Zhan katalizator-1B (29 mg, 0.0395 mmol) je dodat uz blagi protok azota. Smeša je barbotirana azotom 10 minuta i zagrejana na 60 °C. Azotom barbotiran rastvor 2 -[(1R)-1-benzil-oksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-5-[6-(1-ciklopropilbut-3-enoksi)-3-nitro-5-(trifluorometil)-2-piridil]-1.3,4-oksadiazola (98 mg, 0.1578 mmol) je dodavan u kapima tokom 1 sata. Smeša je mešana na 70 °C tokom 1.25 sati, a zatim ohlađena na sobnu temperaturu. Nakon toga, dodato je 5 kapi DMSO da se ugasi katalizator. Smeša je koncentrovana na silika gelu (3 g) i prečišćena hromatografijom na silika gelu (eluiranjem sa gradijentom od 5% do 25% etil acetata u heptanima) da bi se dobio (6R) -6-benziloksi-12-ciklopropil-17-nitro-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1 (17),2,4,9,14(18),15-heksaen (E/Z smeša) (60 mg, 59 %) kao svetložuta čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izračunato 584.1494, pronađeno 585.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 4.22 minuta. LCMS metoda: XBridge C18kolona (4.6 X 75 mm, veličina čestica 5 mm, trajanje 6 minuta sa 1 minutom ekvilibracije, inicijalna mobilna faza 95% vodeni NH4HCO3/ 5% acetonitril, gradijent od 0 do 3 minuta do 95% MeCN i držanje 3 minuta, protok = 1.5 mL/min).
Korak 6: (6R)-12-Ciklopropil-17-(etilamino)-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,14(18),15-pentaen-6-ol
[0952]
[0953] Rastvor (6R)-6-benziloksi-12-ciklopropil-17-nitro-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,9,14(18),15-heksana (E/Z smeša) (60 mg, 0.1027 mmol) u etanolu (4 mL) je barbotiran gasovitim azotom 5 minuta. Nakon dodavanja paladijuma na ugljeniku (63 mg, 5 % tež/tež, 0.0296 mmol), reakciona smeša je barbotirana 5 minuta gasovitim vodonikom, a zatim je reakcija ostavljena da se meša pod jednom atmosferom vodonika oko 22 sata. Reakcija je dva puta prečišćen gasovitim azotom, zatim filtrirana preko sloja celita, i kolač je ispran etanolom (30 mL). Volatili su uklonjeni pod sniženim pritiskom da bi se dobio ostatak od 54 mg u obliku intenzivno žutog ulja. Ostatak je suvo nanesen na silika gel i prečišćen hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa gradijentom etil acetata (0% do 30%) u heptanima, što je dalo (6R)-12-ciklopropil-17-(etilamino)-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5] nona-deka-1(17),2,4,14(18),15-pentaen-6-ol (22 mg, 43%) kao svetložutu čvrstu supstancu. ESI-MS m/z izračunato 494.1753, pronađeno 495.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 3.8 minuta. LCMS metoda: Kinetex Polar C18kolona (3.0 X 50 mm, veličina čestica 2.6 µm, trajanje 6 minuta, 5% do 95% acetonitrila u vodi (modifikator 0.1% mravlja kiselina), brzina protoka = 1.2 mL/min).
Korak 7: (6R)-12-ciklopropil-17-(etilamino)-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,14(18),15-pentaen-6-ol (enantiomer 1), Jedinjenje 65, i (6R)-12-ciklopropil-17-(etilamino)-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nona-deka-1(17),2,4,14(18),15-pentaen-6-ol (enantiomer 2), Jedinjenje 66
[0954]
[0955] Dijastereomerna smeša (6R)-12-ciklopropil-17-(etilamino)-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,14(18),15-pentaen-6-ola (22 mg, 0.0438 mmol) je podvrgnuta SFC separaciji korišćenjem sledećih uslova: Lux 5 µm Cellulose 4 kolona, (250 X 21.2 mm, 6.67 mg/injekciji) na 40 °C, eluent: 7 % EtOH (0.1 % dietilamin), 93 % CO2, brzina protoka: 55 mL/min, zapremina injektiranja: 400 µL, pritisak: 100 bar, talasna dužina: 250 nm. Isparavanjem rastvarača i liofilizacijom dobijena su dva izomera:
[0956] Prvi izomer koji je eluiran izolovan je kao žuta čvrsta supstanca, (6R)-12-ciklopropil-17-(etilamino)-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5] nona-deka-1(17),2,4,14(18),15-pentaen-6-ol (enantiomer 1) (3.8 mg, 17%, 98.4% de).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.63 (s, 1H), 7.59 (s, 1H), 6.37 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 4.17 - 4.06 (m, 1H), 3.46 - 3.35 (m, 2H), 2.62 - 2.53 (m, 1H), 2.21 - 2.04 (m, 2H), 1.77 - 1.41 (m, 7H), 1.23 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 1.17 - 1.11 (m, 1H), 0.64 - 0.55 (m, 1H), 0.52 - 0.39 (m, 2H), 0.31 - 0.23 (m, 1H).<19>F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ-62.11 (s, 3F), -79.02 (s, 3F). ESI-MS m/z izračunato 494.17526, pronađeno 495.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 3.81 minuta. LCMS metoda: Kinetex Polar C18kolona (3.0 X 50 mm, veličina čestica 2.6 µm, trajanje 6 minuta, 5% do 95% acetonitrila u vodi (modifikator 0.1% mravlja kiselina), brzina protoka = 1.2 mL/min).
[0957] Drugi eluirani pik je izolovan kao žuta čvrsta supstanca, (6R)-12-ciklopropil-17-(etilamino)-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5] nonadeka-1(17),2,4,14(18),15-pentaen-6-ol (enantiomer 2) (4.6 mg, 21%, 99.9% de).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.63 (s, 1H), 7.58 (s, 1H), 6.36 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 4.26 – 4.15 (m, 1H), 3.48 - 3.33 (m, 2H), 2.48 - 2.44 (m, 1H), 2.31 - 2.22 (m, 1H), 2.17 - 2.06 (m, 1H), 1.83 - 1.61 (m, 3H), 1.57 - 1.36 (m, 4H), 1.24 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 1.18 - 1.14 (m, 1H), 0.66 - 0.58 (m, 1H), 0.52 - 0.37 (m, 2H), 0.32 - 0.23 (m, 1H).<19>F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62.13 (s, 3F), -76.35 (s, 3F). ESI-MS m/z izračunato 494.17526, pronađeno 495.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 3.8 minuta. LCMS metoda: Kinetex Polar C18kolona (3.0 X 50 mm, veličina čestica 2.6 µm, trajanje 6 minuta, 5% do 95% acetonitril u vodi (modifikator 0.1% mravlja kiselina), brzina protoka = 1.2 mL/min).
Primer 47: Priprema (6R,12R)-17-amino-15-(difluorometil)-12-metil-6-(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ola, Jedinjenje 67
[0958]
Korak 1: Metil 5-(difluorometil)piridin-2-karboksilat
[0959]
[0960] U autoklav je dodat 2-bromo-5-(difluorometil)piridin (24 g, 115.38 mmol), metanol (240 mL), trietilamin (27.588 g, 38 mL, 272.64 mmol) i [1.1'-bis(difenilfosfino)ferocen]dihloropaladij(II) (2.4 g, 3.28 mmol). Autoklav je prečišćen azotom, a zatim ugljen monoksidom. Smeša je zagrejana na 130 °C, a pritisak ugljenmonoksida je podešen na 120 psi. Smeša je mešana 3 sata na 130 °C, a zatim ohlađena na 25 °C preko noći. Smeša je prečišćena azotom i koncentrovana pod vakuumom. Dobijena čvrsta supstanca je razblažena etil acetatom (500 mL). Dodati su voda (200 mL) i natrijum karbonat (20 g) i sme ša je snažno mešana 10 minuta. Slojevi su odvojeni, i organski sloj je ispran vodom (200 mL) i slanim rastvorom (200 mL), osušen preko natrijum sulfata, zatim filtriran i evaporisan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gel koloni (eluiranjem od 20% do 50% etil acetata u heptanima) da bi se dobio metil 5-(difluorometil)piridin-2-karboksilat (8.1 g, 38%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.89 (s, 1H), 8.25 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 8.02 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 6.97 – 6.61 (m, 1H), 4.05 (s, 3H).<19>F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -113.58 (d, J = 54.5 Hz, 2F). ESI-MS m/z izračunato 187.04448, pronađeno 188.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.48 minuta. LCMS metoda: Kinetex Polar C18kolona (3.0 X 50 mm, veličina čestica 2.6 µm, trajanje 3 minuta, 5% do 95% acetonitrila u vodi (modifikator 0.1% mravlja kiselina), brzina protoka = 1.2 mL/min).
Korak 2: Metil 5-(difluorometil)-1-oksido-piridin-1-ijum-2-karboksilat
[0961]
[0962] Urea vodonik peroksid (13.7 g, 145.64 mmol) je umešan u rastvor metil 5-(difluorometil)piridin-2-karboksilata (8.1 g, 43.282 mmol) u DCE (70 mL). Zatim je tokom 20 minuta na temperaturi od -10 °C, korišćenjem rashladnog kupatila (kupka CO2/aceton), dodavan trifluorosirćetni anhidrid (24.025 g, 15.9 mL, 114.39 mmol). Reakciona smeša je zatim mešana dodatnih 30 minuta na temperaturi od 0 °C, a zatim 1 sat na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je sipana u vodu sa ledom (150 mL) i podešena na pH = 2-3 sa oko 150 mL vodenog rastvora 1N natrijum hidroksida. Smeša je razblažena dihlorometanom (200 mL), a zatim su slojevi odvojeni. Vodena faza je ekstrahovana dihlorometanom (2 X 150 mL). Kombinovana organska faza je isprana slanim rastvorom (150 mL), osušena preko bezvodnog natrijum sulfata, filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobio metil 5-(difluorometil) -1-oksidopiridin-1-ijum-2-karboksilat (8.39 g, 87 %) kao žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.41 (s, 1H), 7.72 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.43 – 7.36 (m, 1H), 6.84 – 6.47 (m, 1H), 4.03 (s, 3H).<19>F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -115.27 (d, J = 55.9 Hz, 2F). ESI-MS m/z izračunato 203.0394, pronađeno 204.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.73 minuta. LCMS metoda: Kinetex Polar C18kolona (3.0 X 50 mm, veličina čestica 2.6 µm, trajanje 3 minuta, 5% do 95% acetonitrila u vodi (modifikator 0.1% mravlja kiselina), brzina protoka = 1.2 mL/min).
Korak 3: Metil 5-(difluorometil)-6-hidroksi-piridin-2-karboksilat
[0963]
[0964] Trifluorosirćetni anhidrid (84.616 g, 56 mL, 402.87 mmol) je dodavan u kapima smeši metil 5-(difluorometil)-1-oksido-piridin-1-ijum-2-karboksilata (11.63 g, 47.06 mmol) u DMF (130 mL) na temperaturi od 0 °C tokom 30 minuta. Smeša je zatim zagrejana na 48 °C i mešana još 4 sata, a zatim je reakcija mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom kako bi se uklonio trifluorosirćetni anhidrid. Preostali DMF rastvor je sipan u vodu (1 L) na 0 °C. Precipitirana čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom i isprana vodom (200 mL). Čvrsta supstanca je osušena pod visokim vakuumom, što je dalo metil 5-(difluorometil)-6-hidroksi-piridin-2-karboksilat (5.74 g, 60 %).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.29 (br. s., 1H), 7.88 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 7.13 (s, 1H), 7.07 – 6.76 (m, 1H), 3.87 (s, 3H).<19>F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -118.60 (br. s., 2F). ESI-MS m/z izračunato 203.0394, pronađeno 204.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.34 minuta. LCMS metoda: Kinetex Polar C18kolona (3.0 X 50 mm, veličina čestica 2.6 µm, trajanje 3 minuta, 5% do 95% acetonitrila u vodi (modifikator 0.1% mravlja kiselina), brzina protoka = 1.2 mL/min).
Korak 4: Metil 5-(difluorometil)-6-hidroksi-3-nitro-piridin-2-karboksilat
[0965]
[0966] U ledenom hlađen rastvor metil 5-(difluorometil)-6-hidroksi-piridin-2-karboksilata (7.43 g, 36.575 mmol) u sumpornoj kiselini (48 mL od 18.4 M, 883.2 mmol) u kapima je dodavana azotna kiselina (2.5 mL od 15.8 M, 39.5 mmol). Nakon 5 minuta, ledena kupka je uklonjena i reakciona smeša je mešana na 45 °C preko noći. Reakcija je istaložena na ledenoj vodi (300 mL). Rastvor je hlađen na 0 °C tokom 15 minuta, zatim je čvrsta supstanca izolovana filtracijom i isprana vodom (200 mL). Čvrsta supstanca je osušena preko noći pod visokim vakuumom da bi se dobio metil 5-(difluorometil) -6-hidroksi-3-nitro-piridin-2-karboksilat (5.47 g, 56 %) kao prljavobela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.41 (s, 1H), 7,19 - 6,75 (m, 1H), 3,94 (s, 3H).<19>F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -118,87 (d, J = 54,5 Hz, 2F). ESI-MS m/z izrač. 248.02448, pronađeno 249.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.6 minuta. LCMS metoda: Kinetex Polar C18kolona (3.0 X 50 mm, veličina čestica 2.6 µm, trajanje 3 minuta, 5% do 95% acetonitrila u vodi (modifikator 0.1% mravlja kiselina), brzina protoka = 1.2 mL/min).
Korak 5: Metil 5-(difluorometil)-6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi]-3-nitro-piridin-2-karboksilat
[0967]
[0968] U rastvor metil 5-(difluorometil)-6-hidroksi-3-nitro-piridin-2-karboksilata (1.6 g, 6.448 mmol) i (2S)-pent-4-en-2-ola (837 mg, 1 mL, 9.7176 mmol) u toluenu (31 mL) dodat je trifenil fosfin (2.5 g, 9.5316 mmol). Nakon mešanja na sobnoj temperaturi tokom 10 minuta, dodat je DIAD (1.9513 g, 1.9 mL, 9.65 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 sati. Otprilike polovina toluena je evaporisana pod sniženim pritiskom, a sirovi proizvod je direktno nanesen na 120 g silika kertridž. Prečišćavanje hromatografijom na silika gelu je izvršeno korišćenjem gradijenta od 0% do 5% EtOAc u heptanima. Isparavanjem volatila iz frakcija koje sadrže produkt dobijen je metil 5-(difluorometil)-6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi]-3-nitro-piridin-2-karboksilat (1.7 g, 82%) kao svetložuto ulje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.61 (s, 1H), 6.80 (t,J = 54.5Hz, 1H), 5.86 - 5.72 (m, 1H), 5.51 (m, J = 6.2 Hz,1H), 5.20 - 5.07 (m,2H), 4.03 (s, 3H), 2.58 - 2.42 (m, 2H), 1.41 (d, J = 6.4 Hz, 3H).<19>F NMR (377 MHz, CDCl3) δ – 118.39 (s, 2F). Retenciono vreme: 2.1 minuta. LCMS metoda: Kinetex Polar C18kolona (3.0 X 50 mm, veličina čestica 2.6 µm, trajanje 3 minuta, 5% do 95% acetonitrila u vodi (modifikator 0.1% mravlja kiselina), brzina protoka = 1.2 mL/min).
Korak 6: Metil 3-amino-5-(difluorometil)-6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi]piridin-2-karboksilat
[0969]
[0970] Gvožđe (2.4 g, 42.976 mmol) i amonijum hlorid (300 mg, 5.6084 mmol) su dodati u rastvor metil 5-(difluorometil)-6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi]-3-nitropiridin-2-karboksilata (1.4 g, 4.3471 mmol) u etanolu (40 mL) i vodi (12 mL) na sobnoj temperaturi. Smeša je zagrevana na 80 °C tokom 16 sati, a zatim ohlađena na sobnu temperaturu. Reakcija je filtrirana kroz celit, a kola č ispran sa EtOH (100 mL). Volatili su uklonjeni pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen reverzno-faznom hromatografijom na 120 g C18ketridžu koristeći gradijent 40% do 100% CH3CN u zakišeljenoj vodi (0.1% v/v mravlja kiselina u vodi). Frakcije koje sadrže proizvod su koncentrovane pod sniženim pritiskom sve dok nije ostala samo voda kao rastvarač. Preostala vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc (4 X 30 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni iznad natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom, što je dalo metil 3-amino-5-(difluorometil)-6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi] piridin-2-karboksilat (727 mg, 58 %) kao smeđe ulje. ESI-MS m/z izračunato 286.11288, pronađeno 287.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.05 minuta. LCMS metoda: Kinetex Polar C18kolona (3.0 X 50 mm, veličina čestica 2.6 µm, trajanje 3 minuta, 5% do 95% acetonitril u vodi (modifikator 0.1% mravlja kiselina), brzina protoka = 1.2 mL/min).
Korak 7: Metil 3-[bis(terc-butoksikarbonil)amino]-5-(difluorometil)-6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi] piridin-2-karboksilat
[0971]
[0972] U rastvor metil 3-amino-5-(difluorometil)-6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi]piridin-2-karboksilata (100 mg, 0.3409 mmol) u DCM (3 mL) je dodat (Boc)2O (298 mg, 1.3654 mmol), a zatim DMAP (4 mg, 0.0327 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 20 sati, i volatili su uklonjeni pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen fleš-hromatografijom na kertridžu 24 g silika gela, koristeći gradijent od 0% do 10% etil acetata u heptanima, što je dalo metil 3-(bis(terc-butoksikarbonil)amino]-(5-(difluorometil)-(6-[(1R)-(1-metilbut-(3-enoksi)piridin-2-karboksilat) (64 mg, 25%) kao svetložuto ulje. ESI-MS m/z izračunato 486.21774, pronađeno 387.2 (M-99)<+>; Retenciono vreme: 2.29 minuta. LCMS metoda: Kinetex Polar C18kolona (3.0 X 50 mm, veličina čestica 2.6 µm, trajanje 3 minuta, 5% do 95% acetonitril u vodi (modifikator 0.1% mravlja kiselina), brzina protoka = 1.2 mL/min).
Korak 8: 3-(terc-butoksikarbonilamino)-5-(difluorometil)-6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi]piridin-2-karboksilna kiselina
[0973]
[0974] U rastvor metil 3-[bis(terc-butoksikarbonil)amino]-5-(difluorometil)-6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi]piridin-2-karboksilata (800 mg, 1.6444 mmol) u MeOH (6 mL) i THF (6 mL) dodat je rastvor litijum hidroksid monohidrata (300 mg, 7.1491 mmol) u vodi (3 mL). Smeša je mešana na 50 °C tokom 16 sati. Reakciona smeša je zatim ohlađena na sobnu temperaturu i dodato je 5 mL vodene 1 N HCl. Volatili su uklonjeni pod sniženim pritiskom i dodata je voda (5 mL). pH je podešen na 2 korišćenjem vodene 1 N HCl i proizvod je ekstrahovan sa EtOAc (3 X 15 mL). Kombinovane organske faze su isprane slanim rastvorom (15 mL), osušene preko natrijum sulfata, filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom, što je dalo 3-(terc-butoksikarbonilamino)-5-(difluorometil)-6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi]piridin-2-karboksilnu kiselinu (650 mg, 98 %) kao žuto ulje. Retenciono vreme: 2.23 minuta. LCMS metoda: Kinetex Polar C18kolona (3.0 X 50 mm, veličina čestica 2.6 µm, trajanje 3 minuta, 5% do 95% acetonitril u vodi (modifikator 0.1% mravlja kiselina), brzina protoka = 1.2 mL/min).
Korak 9:terc-butil N-[2-[[[(2R)-2-benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enoil]amino]karbamoil]-5-(difluorometil)-6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi]-3-piridil]karbamat
[0975]
[0976] HATU (790 mg, 2.0777 mmol) je dodat u narandžasti rastvor 3-(terc-butoksikarbonilamino)-5-(difluorometil)-6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi]piridin-2-karboksilne kiseline (650 mg, 1.7334 mmol), (2R)-2-benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enhidrazida (hidrohloridna so) (705 mg, 2.0812 mmol) i DIPEA (1.1872 g, 1.6 mL, 9.1858 mmol) u DMF (11 mL) na sobnoj temperaturi. Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi 2 sata. Reakcija je direktno nanesena na 275 g C18ketridž i prečišćavanje je izvedeno eluiranjem sa gradijentom od 50% do 100% CH3CN u zakišeljenoj vodi (0.1% v/v mravlja kiselina u vodi). Frakcije koje sadrže proizvod su koncentrovane pod sniženim pritiskom, koevaporisane sa 1:1 smešom CH3CN/voda i liofilizovane, što je dalo terc-butil N-[2-[[[(2R)-2-benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enoil] amino]karbamoil]-5-(difluorometil)-6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi]-3-piridil]karbamat (690 mg, 61%) kao belu čvrstu supstancu.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.74 (s, 1H), 10.66 (s, 1H), 10.30 (s, 1H), 8.91 (s, 1H), 7.55 - 7.48 (m, 2H), 7.42 - 7.35 (m, 2H), 7.35 - 7.30 (m, 1H), 7.07 (t, J = 54.5 Hz, 1H), 6.03 - 5.79 (m, 2H), 5.79 - 5.67 (m, 1H), 5.15 - 5.06 (m, 2H), 5.05 - 4.99 (m, 2H), 4.91 - 4.77 (m, 2H), 2.39 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 2.36 - 2.27 (m, 2H), 2.26 - 2.14 (m, 2H), 1.47 (s, 9H), 1.26 (d, J = 6.4 Hz, 3H).<19>F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -71.86 (s, 3F), -117.49 (d, J = 54.5 Hz, 2F). ESI-MS m/z izračunato 656.2633, pronađeno 557.3 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 5.36 minuta. LCMS metoda: SunFire C18kolona (75 X 4.6 mm, veličina čestica 3.5 µm, trajanje 6 minuta, uslovi mobilne faze: inicijalno 95% voda 0.1% mravlja kiselina/5% acetonitril+ 0.1% mravlja kiselina, linearni gradijent do 95% acetonitrila tokom 4 min, držano 2 min na 95% acetonitrila, temperatura = 45 °C, protok = 1.5 mL/min).
Korak 10: terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-5-(difluorometil)-6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi]-3-piridil]karbamat
[0977]
[0978] U rastvor terc-butil N-[2-[[[(2R)-2-benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enoil]amino]karbamoil]-5-(difluorometil)-6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi]-3-piridil]karbamata (490 mg, 0.7455 mmol) u 1.2-dihlor-etanu (15 mL) i N,N-diizopropiletilaminu (742 mg, 1 mL, 5.7411 mmol) je dodat toluensulfonil hlorid (430 mg, 2.2555 mmol). Reakcija je mešana na 50 °C tokom 20 sati, a zatim ohlađena na sobnu temperaturu. Volatili su uklonjeni pod sniženim pritiskom, a sirovi ostatak je prečišćen reverzno-faznom hromatografijom na 50 g C18kertridžu koristeći gradijent od 50% do 100% CH3CN u zakišeljenoj vodi (0.1% v/v mravlje kiseline u vodi). Frakcije koje sadrže proizvod su koncentrovane pod sniženim pritiskom, što je dalo terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-5-(difluoro-metil)-6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi]-3-piridil]karbamat (351 mg, 73 %) kao ulje žute boje. ESI-MS m/z izračunato 638.25275, pronađeno 639.3 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 4.82 minuta. LCMS metoda: XBridge C18kolona (4.6 X 75 mm, veličina čestica 5 µm, trajanje 6 minuta sa 1 minutom ekvilibracije, inicijalna mobilna faza sa 95 % vodeni NH4HCO3/ 5 % acetonitril, gradijent od 0 do 3 minuta do 95 % MeCN i držanje 3 minuta, protok = 1.5 mL/min).
Korak 11: terc-butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-15-(difluorometil)-12-metil-6-(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,9,14,16-heksaen-17-il]karbamat (E/Z smeša)
[0979]
[0980] Rastvor terc-butil N-[2-[5-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-5-(difluorometil)-6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi]-3-piridil]karbamata (350 mg, 0.5442 mmol) u dihloretanu (180 mL) je barbotiran gasovitim azotom tokom 1.5 sati. Rastvor je zatim stavljen u uljnu kupku pode šenu na 60 °C i dodata je prva porcija Zhan katalizatora-1B (28 mg, 0.0382 mmol). Nakon 1 sata, dodata je druga porcija Zhan katalizatora-1B (20 mg, 0.0273 mmol) i zagrevanje je nastavljeno još 1 sat. Nakon hlađenja na sobnu temperaturu, reakcija je ugašena sa DMSO (8 kapi), volatili su uklonjeni pod sniženim pritiskom, a ostatak je direktno prečišćen reverzno-faznom hromatografijom na 50 g C18ketridžu, eluiranjem sa gradijentom od 65% do 100% CH3CN u zakišeljenoj vodi (0.1% v/v mravlja kiselina u vodi). Frakcije koje sadrže proizvod su koncentrovane pod sniženim pritiskom, što je dalo terc-butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-15-(difluorometil)-12-metil-6-(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,9,14,16-heksaen-17-il]karbamat (E/Z smeša) (87 mg, 26%) kao smeđe ulje. ESI-MS m/z izračunato 610.22144, pronađeno 611.3 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 4.55 minuta. LCMS metoda: XBridge C18kolona (4.6 X 75 mm, veličina čestica 5 µm, trajanje 6 minuta sa 1 minutom ekvilibracije, inicijalna mobilna faza sa 95% vodenim NH4HCO3/ 5% acetonitril, gradijent od 0 do 3 minuta do 95% MeCN i držanje 3 minuta, protok = 1.5 mL/min).
Korak 12: terc-butil N-[(6R,12R)-15-(difluorometil)-6-hidroksi-12-metil-6-(trifluorometil)-13,19-dioksa- 3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat
[0982] Paladijumu na ugljeniku (85 mg, 5 % tež/tež, 0.0399 mmol) pod azotom je dodat rastvor terc-butil N-[(6R,12R)-6-benziloksi-15-(difluorometil)-12-metil-6-(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triaza-triciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,9,14,16-heksaen-17-il]karbamat (E/Z smeša) (85 mg, 0.1357 mmol) u THF (10 mL) zakišeljenom sa kapi sirćetne kiseline (1.056 mg, 1 µL, 0.0176 mmol). Vodonik je barbotiran 1 minut i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 sati. Azot je barbotiran tokom 5 minuta i reakciona smeša je filtrirana preko Celita, a kolač je ispran sa CH3CN (40 mL). Filtrat je ponovo filtriran, a dobijeni filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, što je dalo terc-butil N-[(6R,12R)-15-(difluorometil)-6-hidroksi-12-metil-6-(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatri-ciklo[12.3.1.12,5] nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat (77 mg, 99 %) kao žućkasto-smeđu čvrstu supstancu. ESI-MS m/z izračunato 522.1902, pronađeno 467.2 (M-56)<+>; Retenciono vreme: 2.37 minuta. LCMS metoda: Kinetex Polar C18kolona (3.0 X 50 mm, veličina čestica 2.6 µm, trajanje 3 minuta, 5% do 95% acetonitrila u vodi (modifikator 0.1% mravlja kiselina), brzina protoka = 1.2 mL/min).
Korak 13: (6R,12R)-17-Amino-15-(difluorometil)-12-metil-6-(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol, Jedinjenje 67
[0983]
[0984] U rastvor terc-butil N-[(6R,12R)-15-(difluorometil)-6-hidroksi-12-metil-6-(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamata (75 mg, 0.1397 mmol) u DCM (10 mL) je dodata TFA (2.96 g, 2 mL, 25.96 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 sat. Volatili su uklonjeni pod sniženim pritiskom, a sirovi materijal je dva puta koevaporisan sa toluenom (svaki put po 10 mL). Dobijeno ulje je prečišćeno reverzno-faznom hromatografijom na 15.5 g C18kertridžu, eluiranjem od 5% do 100% acetonitrila u vodi (pH = 7). Frakcije koje sadrže proizvod su koncentrovane pod sniženim pritiskom i liofilizovane, što je dalo (6R,12R)-17-amino-15-(difluorometil)-12-metil-6-(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5] nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (39 mg, 65 %) kao žutu čvrstu supstancu.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.60 (s, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.01 (t, J = 54.5 Hz, 1H), 6.29 (s, 2H), 4.81 - 4.70 (m, 1H), 2.48 - 2.42 (m, 1H), 2.35 - 2.23 (m, 1H), 2.16 - 2.05 (m, 1H), 1.73 (br. s., 2H), 1.60 - 1.39 (m, 4H), 1.35 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.22 - 1.11 (m, 1H).<19>F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -76.38 (s, 3F), -115.10 do -116.53 (m, 1F), -116.69 do -118.00 (m, 1F). ESI-MS m/z izračunato 422.13773, pronađeno 423.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 3.22 minuta. LCMS metoda: Kinetex Polar C18kolona (3.0 X 50 mm, veličina čestica 2.6 µm, trajanje 6 minuta, 5% do 95% acetonitril u vodi (modifikator 0.1% mravlja kiselina), brzina protoka = 1.2 mL/min).
Primer 48: Priprema (6R)-17-amino-12-ciklopropil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ola (enantiomer 1), Jedinjenje 68, i (6R)-17-amino-12-ciklopropil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5] nonadeka-1 (18),2,4,14,16-pentaen-6-ola (enantiomer 2), Jedinjenje 69
[0985]
Korak 1: (6R)-17-Amino-12-ciklopropil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol
[0986]
[0987] Rastvor (6R)-6-benziloksi-12-ciklopropil-17-nitro-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(17),2,4,9,14(18),15-heksana (E/Z smeša) (48 mg, 0.0812 mmol) u tetrahidrofuranu (3 mL) je prečišćen azotom tokom 5 minuta, zatim je dodat paladijum na ugljeniku (53 mg, 5 % tež/tež, 0.0249 mmol) i vodonik je barbotiran tokom 5 minuta. Reakcija je ostavljena da se me ša pod jednom atmosferom vodonika oko 22 sata. Reakcija je ponovo prečišćen azotom, zatim filtrirana preko sloja Celita i kolač je ispran etil acetatom (30 mL). Volatili su uklonjeni pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren u tetrahidrofuranu (3 mL) i rezultujući rastvor je prečišćen azotom tokom 5 minuta. Dodat je paladijum na ugljeniku (53 mg, 5 % tež/tež, 0.0249 mmol), a zatim je barbotiran vodonik tokom 5 minuta. Reakcija je ostavljena da se meša pod jednom atmosferom vodonika još 22 sata. Reakcija je ponovo prečišćen gasovitim azotom, zatim je dodato još paladijuma na ugljeniku (25 mg, 5 % tež/tež, 0.0117 mmol) i vodonik je barbotiran tokom 5 minuta. Reakcija je ostavljena da se meša pod jednom atmosferom vodonika još 4 sata. Reakcija je prečišćena gasovitim azotom, zatim filtrirana preko sloja celita i kolač je ispran etil acetatom (30 mL). Volatili su uklonjeni pod sniženim pritiskom, a dobijeni žuti uljni ostatak je suvo nanesen na silika gel i prečišćen hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa gradijentom od 0% do 30% etil acetata u heptanima, što je dalo (6R)-17-amino-12-ciklopropil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triaza-triciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (24 mg, 63 %) kao svetložutu čvrstu supstancu. ESI-MS m/z izračunato 466.14395, pronađeno 467.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 3.48 minuta. LCMS metoda: Kinetex Polar C18kolona (3.0 X 50 mm, veličina čestica 2.6 µm, trajanje 6 minuta, 5% do 95% acetonitrila u vodi (modifikator 0.1% mravlja kiselina), brzina protoka = 1.2 mL/min).
Korak 2: (6R)-17-Amino-12-ciklopropil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (enantiomer 1), Jedinjenje 68, i (6R)-17-amino-12-ciklopropil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1 (18), 2,4,14,16-pentaen-6-ol (enantiomer 2), Jedinjenje 69
[0988]
[0989] Dijastereomerna smeša (6R)-17-amino-12-ciklopropil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa- 3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ola (24 mg, 0.0514 mmol) je podvrgnuta SFC separaciji korišćenjem sledećih uslova: Lux 5 µm Cellulose 4 kolona, (250 X 21.2 mm, 4.8 mg/injekciji) na 40 °C, eluent: 7 % reagens alkohol (+ 0.1 % dietilamin)/ 93 % CO2, brzina protoka: 75 mL/min, zapremina injektiranja: 400 uL, pritisak: 100 bar, talasna dužina: 250 nm. Evaporacija rastvarača i liofilizacija su dale dva izomera.
[0990] Prvi izomer koji je eluiran pod gore navedenim uslovima SFC je dalje prečišćen korišćenjem reverzno-fazne hromatografije eluiranjem sa 70% acetonitrila u zaki šeljenoj vodi (koja sadrži 0.1% v/v mravlje kiseline) što je kao žutu čvrstu supstancu dalo, (6R)-17-amino-12-ciklopropil-6,15-bis (trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5] nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (enantiomer 1) (7.1 mg, 29 %, 98.6 % de).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.75 (s, 1H), 7.58 (s, 1H), 6.34 (s, 2H), 4.15 – 4.07 (m, 1H), 2.61 – 2.53 (m, 1H), 2.22 – 2.03 (m, 2H), 1.80 - 1.37 (m, 7H), 1.18 - 1.08 (m, 1H), 0.63 - 0.55 (m, 1H), 0.52 - 0.38 (m, 2H), 0.31 - 0.22 (m, 1H).<19>F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62.51 (s, 3F), -79.02 (s, 3F). ESI-MS m/z izračunato 466.14395, pronađeno 467.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 4.9 minuta. LCMS metoda: SunFire C18kolona (75 X 4.6 mm, veličina čestica 3.5 µm, trajanje 6 minuta, uslovi mobilne faze: inicijalno 95% voda 0.1% mravljа kiselinа/5% acetonitril 0.1% mravljа kiselinа, linearni gradijent do 95% acetonitrila tokom 4 minuta, zatim držanje 2 minutа na 95% acetonitrila, temperatura = 45 °C, protok = 1.5 mL/min).
[0991] Drugi pik koji je eluiran је dao SFC pik 2, nakon čega je reverzno-fazno hromatografsko eluiranje sa 70% acetonitrila u zakišeljenoj vodi (koja sadrži 0.1% v/v mravlje kiseline) dalo (6R)-17-amino-12-ciklopropil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1 (18),2,4,14, 16-pentaen-6-ol (enantiomer 2) (5.36 mg, 22%, 97.7% de).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.75 (s, 1H), 7.57 (s, 1H), 6.33 (s, 2H), 4.24 - 4.14 (m, 1H), 2.48 - 2.42 (m, 1H), 2.31 - 2.21 (m, 1H), 2.17 - 2.07 (m, 1H), 1.82 - 1.62 (m, 3H), 1.57 - 1.38 (m, 4H), 1.19 - 1.08 (m, 1H), 0.67 - 0.56 (m, 1H), 0.52 - 0.36 (m, 2H), 0.32 - 0.22 (m, 1H).<19>F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62.53 (s, 3F), -76.34 (s, 3F). ESI-MS m/z izračunato 466.14395, pronađeno 467.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 4.85 minuta. LCMS metoda: SunFire C18kolona (75 X 4.6 mm, veličina čestica 3.5 µm, trajanje 6 minuta, uslovi mobilne faze: inicijalno 95% voda 0.1% mravlja kiselina/5% acetonitril 0.1% mravlja kiselina, linearni gradijent do 95% acetonitrila tokom 4 minuta, zatim držanje 2 minuta na 95% acetonitrila, temperatura = 45 °C, protok = 1.5 mL/min).
Primer 49: Priprema (12R)-17-amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-8,13,19-trioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ola (dijastereomer 1), Jedinjenje 70. i (12R)-17-amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-8,13,19-trioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5] nonadeka-1 (18),2,4,14,16-pentaen-6-ola (dijastereomer 2), Jedinjenje 71
[0992]
Korak 1: Benzil 2-(trifluorometil)oksiran-2-karboksilat
[0993]
[0994] Benzil 2-(trifluorometil)prop-2-enoat (50.45 g, 214.79 mmol) je rastvoren u smeši dioksana (1000 mL) i vode (200 mL). Smeša je ohlađena u ledenom kupatilu. Uz snažno mešanje, dodat je NaHCO3(91.2 g, 1.0856 mol), a zatim je u porcijama dodavan okson (135.5 g). Dodavanje je trajalo 80 minuta, a zatim je smeša mešana na istoj temperaturi 20 minuta, nakon čega je mešana 90 minuta na sobnoj temperaturi. Dodati su voda (300 mL) i etil acetat (300 mL) i slojevi su odvojeni. Organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen preko bezvodnog MgSO4, filtriran i koncentrovan. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 5% do 50% etil acetata u heksanima da bi se dobio produkt kao bezbojno ulje, benzil 2-(trifluorometil)oksiran-2-karboksilat (57.49 g, 98%).<1>H NMR (500 MHz, hloroformd) δ 7.62 – 7.28 (m, 5H), 5.33 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 5.28 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 3.30 – 3.18 (m, 2H).
Korak 2: Benzil 3,3,3-trifluoro-2-hidroksi-2-[[(4S)-4-[(4-metoksifenil)metoksi]pentoksi]metil] propanoat
[0995]
[0996] U rastvor (4S)-4-[(4-metoksifenil)metoksi]pentan-1-ola (1.48 g, 6.5918 mmol) u EtOAc (6.5 mL) dodat je benzil 2-(trifluorometil)oksiran-2-karboksilat (2.2 g, 8.9364 mmol), zatim magnezijum triflat (2.13 g, 6.6058 mmol) i smeša je mešana na 85 °C tokom 24 sata. U reakciju je dodat EtOAc (60 mL) i voda (20 mL), a zatim je smeša ekstrahovana sa EtOAc (2 X 50 mL), organske frakcije su isprane slanim rastvorom (25 mL), osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane pod vakuumom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu (naneto na silika gel sa benzenom i eluirano sa 0% do 15% EtOAc u heksanima tokom gradijenta od 45 minutnog) da bi se dobio benzil 3,3,3-trifluoro-2-hidroksi-2-[[(4S)-4-[(4-metoksifenil)metoksi]pentoksi]metil]propanoat (1.1 g, 35 %), kao bezbojno ulje. ESI-MS m/z izračunato 470.1916, pronađeno 471.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 6.5 minuta. LCMS metoda: Merck Millipore Chromolith SpeedROD C18kolona (50 X 4.6 mm) i dvojni gradijent od 5 - 100% mobilne faze B tokom 12 minuta. Mobilna faza A = voda (0.1% CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0.1% CF3CO2H).
Korak 3: Benzil 2-benziloksi-3,3,3-trifluoro-2-[[(4S)-4-[(4-metoksifenil)metoksi]pentoksi]metil] propanoat
[0997]
[0998] Rastvor benzil 3,3,3-trifluoro-2-hidroksi-2-[[(4S)-4-[(4-metoksifenil)metoksi] pentoksi] metil] propanoata (1.1 g, 2.3380 mmol) u DMF (5.5 mL) je ohlađen na 0 °C, a zatim su dodati benzil bromid (720 mg, 0.5 mL, 4.21 mmol) i tetrabutil amonijum jodid (171 mg, 0.463 mmol), a zatim natrijum hidrid (125 mg, 3.1253 mmol) u jednoj porciji i dobijena smeša je mešana 4 sata na 0 °C. Smeša je zagrejana na sobnu temperaturu i mešana 12 sati. Dodato je još natrijum hidrida (38 mg, 0.9501 mmol) i benzil bromida (288 mg, 0.2 mL, 1.6839 mmol) na 0 °C, a zatim je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta. Reakcija je ugašena sa NH4Cl (30 mL) na sobnoj temperaturi i ekstrahovana sa EtOAc (3 X 75 mL). Kombinovane organske faze su zatim isprane slanim rastvorom (1 X 100 mL), osušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane pod vakuumom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu (eluiranjem sa gradijentom od 0% do 10% EtOAc u heksanima tokom 50 minuta) da bi se dobio benzil 2-benziloksi -3,3,3-trifluoro-2-[[(4S)-4-[(4-metoksifenil) metoksi] pentoksi]metil]propanoat (1 g, 76 %). ESI-MS m/z izračunato 560.2386, pronađeno 561.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 7.88 minuta. LCMS metoda: Merck Millipore Chromolith SpeedROD C18kolona (50 X 4.6 mm) sa dvojnim gradijentom od 5 - 100 % mobilne faze B tokom 12 minuta. Mobilna faza A = voda (0.1 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0.1 % CF3CO2H).
Korak 4: 2-Benziloksi-3,3,3-trifluoro-2-[[(4S)-4-[(4-metoksifenil)metoksi]pentoksi]metil] propanhidrazid
[0999]
[1000] U rastvor benzil 2-benziloksi-3,3,3-trifluoro-2-[[(4S)-4-[(4-metoksifenil)metoksi] pentoksi] metil] propanoata (1.64 g, 2.9254 mmol) u metanolu (1 mL) dodat je 3,4,6,7,8,9-heksahidro-2H-pirimido[1.2-a] pirimidin (164 mg, 1.1782 mmol), zatim hidrazin hidrat (193.99 mg, 0.19 mL, 3.8751 mmol) i mešan je na sobnoj temperaturi 10 minuta. Reakcija je mešana 14 sati na sobnoj temperaturi, zatim je dodat dodatni hidrazin hidrat (204.20 mg, 0.2 mL, 4.0791 mmol) i smeša je mešana 30 minuta. Reakcija je zatim ugašena vodom (30 mL), ekstrahovana sa TBME (3 X 40 mL) i kombinovani organski slojevi su isprani zasićenim vodenim NaHCO3(50 mL), slanim rastvorom (100 mL), osušeni preko MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je prečišćen flash hromatografijom na silika gelu (napunjen sa benzen/DCM i eluiran sa gradijentom od 0% do 10% MeOH u DCM tokom 40 minuta) da bi se dobio čisti produkt i mešane frakcije koje sadrže produkt. Mešane frakcije su koncentrovane i ponovo prečišćene fleš hromatografijom na silika gelu (napunjeno benzenom i eluirano sa gradijentom od 0% do 5% metanola u dihlorometanu tokom 40 minuta) i kombinovane sa čistim produktom iz prve kolone da bi se dobio 2-benziloksi-3,3,3-trifluoro-2-[[(4S)-4-[(4-metoksifenil)metoksi]pentoksi]metil]propanhidrazid (500 mg, 35 %), kao ulje boje ćilibara. ESI-MS m/z izračunato 484.2185, pronađeno 485.5 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 5.52 minuta. LCMS metoda: Merck Millipore Chromolith SpeedROD C18kolona (50 X 4.6 mm) uz dvojni gradijent od 5 - 100% mobilne faze B tokom 12 minuta. Mobilna faza A = voda (0.1% CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0.1 % CF3CO2H).
Korak 5: terc-butil N-[2-[[[2-benziloksi-3,3,3-trifluoro-2-[[(4S)-4-[(4-metoksifenil) metoksi]pentoksi] metil]propanoil]amino]karbamoil]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat
[1001]
[1002] U rastvor 6-bromo-3-(terc-butoksikarbonilamino)-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilne kiseline (416 mg, 1.0801 mmol) i 2-benziloksi-3,3,3-trifluoro-2-[[(4S)-4-[(4-metoksifenil)metoksi]pentoksi]metil] propanhidrazida (520 mg, 1.0733 mmol) u EtOAc (5.2 mL) je dodat T3P (1.13 g, 50 % tež/tež, 1.7757 mmol) zatim piridin (391.2 mg, 0.4 mL, 4.9456 mmol) na sobnoj temperaturi i reakcija je me šana 5 sati. Reakcija je razblažena sa EtOAc (20 mL), isprana zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl (5 mL), a zatim sa NaHCO3(20 mL) i vodeni slojevi su ponovo ekstrahovani sa EtOAc (2 X 40 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko Na2SO4, filtrirani i koncentrovani pod vakuumom.Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu (eluirano sa gradijentom od 0% do 20% EtOAc u heksanima tokom 40 minuta) da bi se dobio terc-butil N-[2-[[[2-benziloksi-3,3,3-trifluoro-2-[[(4S)-4-[(4-metoksifenil) metoksi]pentoksi] metil] propanoil] amino] karbamoil]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil] karbamat (586.2 mg, 64%). ESI-MS m/z izračunato 850.2012, pronađeno 851.6 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 8.46 minuta. LCMS metoda: Merck Millipore Chromolith SpeedROD C18kolona (50 X 4.6 mm) i dvojni gradijent od 5 - 100% mobilne faze B tokom 12 minuta. Mobilna faza A = voda (0.1 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0.1 % CF3CO2H).
Korak 6: terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-2,2,2-trifluoro-1-[[(4S)-4-[(4-metoksifenil)metoksi] pentoksi] metil]etil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat
[1003]
[1004] U rastvor terc-butil N-[2-[[[2-benziloksi-3,3,3-trifluoro-2-[[(4S)-4-[(4-metoksifenil)metoksi] pentoksi]metil]propanoil]amino]karbamoil]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamata (586 mg, 0.6881 mmol) u acetonitrilu (7.6 mL) je dodat tosil hlorid (152 mg, 0.7973 mmol), a zatim DIPEA (267.12 mg, 0.36 mL, 2.0668 mmol) i reakciona smeša je mešana 5 sati na sobnoj temperaturi. Reakcija je razblažena sa EtOAc (40 mL), isprana zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl (15 mL) i slanim rastvorom (30 mL), zatim osušena preko Na2SO4, filtrirana i koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu (napunjen benzenom i eluirano sa 0% do 10% EtOAc u heksanima tokom gradijenta od 30 minuta) da bi se dobio terc-butil N -[2-[5-[1-benziloksi-2,2,2-trifluoro-1-[[(4S)-4-[(4-metoksifenil)metoksi]pentoksi]metil]etil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil] karbamat (425 mg, 73 %). ESI-MS m/z izračunato 832.1906, pronađeno 833.5 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 9.08 minuta. LCMS metoda: Merck Millipore Chromolith SpeedROD C18kolona (50 X 4.6 mm) i dvojni gradijent od 5 - 100 % mobilne faze B tokom 12 minuta. Mobilna faza A = voda (0.1 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0.1 % CF3CO2H).
Korak 7: terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-2,2,2-trifluoro-1-[[(4S)-4-[(4-metoksifenil)metoksi] pentoksi] metil]etil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat
[1005]
[1006] U rastvor terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-2,2,2-trifluoro-1-[[(4S)-4-[(4-metoksifenil)metoksi] pentoksi]metil]etil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil] karbamata (425 mg, 0.5098 mmol) u TBME (4.35 mL) je dodat DIPEA. (161.76 mg, 0.218 mL, 1.2516 mmol) i DMAP (22 mg, 0.1801 mmol). Zatim je dodat di-terc-butil dikarbonat (351.5 mg, 0.37 mL, 1.6106 mmol) i reakcija je me šana 12 sati na sobnoj temperaturi. Reakcija je dodata u vodu (10 mL), a zatim su organski dijelovi ekstrahovani sa TBME (50 mL). Organski rastvor je ispran vodom (50 mL), slanim rastvorom (50 mL), osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu (napunjen benzenom i eluiran sa 0% do 10% EtOAc u heksanima tokom gradijenta od 30 minutna) da bi se dobio tercbutil N-[2-[5-[1-benziloksi-2,2,2-trifluoro-1-[[(4S)-4-[(4-metoksifenil) metoksi] pentoksi] metil]etil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksi-karbonil-karbamat (476 mg, 99 %). ESI-MS m/z izračunato 932.2431, pronađeno 933.7 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 8.76 minuta. LCMS metoda: Merck Millipore Chromolith SpeedROD C18kolona (50 X 4.6 mm) uz dvojni gradijent od 5 - 100 % mobilne faze B tokom 12 minuta. Mobilna faza A = voda (0.1 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0.1 % CF3CO2H).
Korak 8: terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-2,2,2-trifluoro-1-[[(4S)-4-[(4-metoksifenil) metoksi]pentoksi] metil]etil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-hidroksi-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonilkarbamat
[1007]
[1008] U rastvor terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-2,2,2-trifluoro-1-[[(4S)-4-[(4-metoksifenil)metoksi] pentoksi]metil]etil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonilkarbamata (476 mg, 0.5098 mmol) u DMSO (4.75 mL) je dodat cezijum acetat (395 mg, 2.0578 mmol) i držan je na reakcionoj ploči 6 sati na 86 °C. Reakcija je ohlađena na sobnu temperaturu, razblažena sa TBME (20 mL) i vodenim NH4Cl (15 mL), a zatim ekstrahovana sa TBME (5 X 20 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (2 X 15 mL), osušeni preko Na2SO4, filtrirani i koncentrovani pod vakuumom da bi se dobio terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-2,2,2-trifluoro-1-[[( 4S)-4-[(4-metoksifenil) metoksi] pentoksi]metil]etil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-hidroksi-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (444 mg, 95 %). ESI-MS m/z izračunato 870.3275, pronađeno 871.8 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 7.85 minuta. LCMS metoda: Merck Millipore Chromolith SpeedROD C18kolona (50 X 4.6 mm) uz dvojni gradijent od 5 - 100 % mobilne faze B tokom 12 minuta. Mobilna faza A = voda (0.1 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0.1 % CF3CO2H).
Korak 9: terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-2,2,2-trifluoro-1-[[(4S)-4-hidroksipentoksi]metil]etil] -1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-hidroksi-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat
[1009]
[1010] U rastvor terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-2,2,2-trifluoro-1-[[(4S)-4-[(4-metoksifenil)metoksi] pentoksi]metil]etil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-hidroksi-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonilkarbamata (440 mg, 0.5053 mmol) u DCM (3.9 mL) dodat je DDQ (128 mg, 0.5639 mmol), a zatim voda (0.22 mL). Bezbojni reakcioni rastvor je nakon dodavanja DDQ odmah postao siva suspenzija. Sme ša je mešana 1.5 h na 30 °C, zatim je razblažena sa DCM (20 mL), isprana zasićenim vodenim NaHCO3(15 mL), osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana pod vakuumom (dobijeno je 400 mg sirovog proizvoda). Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu (napunjen benzenom i eluiran sa 0% do 50% EtOAc u heksanima tokom gradijenta od 30 minuta) da bi se dobio terc-butil N -[2-[5-[1-benziloksi-2,2,2-trifluoro-1-[[(4S)-4-hidroksipentoksi]metil]etil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-hidroksi-5- (tri-fluorometil)-3-piridil]-N-tercbutoksikarbonil-karbamat (310 mg, 81 %). ESI-MS m/z izračunato 750.2699, pronađeno 651.3 (M-100+H)<+>; Retenciono vreme: 6.95 minuta. LCMS metoda: Merck Millipore Chromolith SpeedROD C18kolona (50 X 4.6 mm) uz dvojni gradijent od 5 - 100 % mobilne faze B tokom 12 minuta. Mobilna faza A = voda (0.1 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0.1 % CF3CO2H).
Korak 10: terc-butil N-[(12R)-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-8,13,19-trioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat
[1011]
[1012] U rastvor terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-2,2,2-trifluoro-1-[[(4S)-4-hidroksipentoksi]metil]etil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-hidroksi-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamata (274 mg, 0.3650 mmol) u toluenu (60 mL) je dodat trifenilfosfin (196 mg, 0.7473 mmol), a zatim DIAD (146.16 mg, 0.14 mL, 0.7228 mmol) na sobnoj temperaturi. Nakon 6 sati, reakcija je razblažena sa EtOAc (30 mL) i isprana zasićenim vodenim NaHCO3(20 mL), zasićenim vodenim NH4Cl (20 mL) i slanim rastvorom (2 X 50 mL), zatim osušena preko Na2SO4, filtrirana i koncentrovana pod vakuumom (dobijeno je 650 mg sirovog proizvoda). Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu (napunjen minimalnim benzenom i eluiran sa 0% do 5% EtOAc u heksanima tokom 80 minuta gradijenta, zatim 5% do 10% EtOAc u heksanima tokom gradijenta od 10 minuta) da bi se dobila oba dijastereomera terc-butil N -[(12R)-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-8,13,19-trioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5] nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]-N-tercbutoksikarbonil-karbamat (160 mg, 59 %). ESI-MS m/z izračunato 732.2594, pronađeno 733.6 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 8.57 minuta. LCMS metoda: Merck Millipore Chromolith SpeedROD C18kolona (50 X 4.6 mm) i dvojni gradijent od 5 - 100 % mobilne faze B tokom 12 minuta. Mobilna faza A = voda (0.1 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0.1 % CF3CO2H).
Korak 11: terc-butil N-terc-butoksikarbonil-N-[(12R)-6-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-8,13,19-trioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat
[1013]
[1014] U rastvor terc-butil N-[(12R)-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-8,13,19-trioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonil-karbamata (40 mg, 0.0546 mmol) u etanolu (1.36 mL) je dodat 10% paladijum na ugljeniku (22 mg, 0.0207 mmol) u atmosferi azota, a zatim je reakciona atmosfera zamenjena gasovitim vodonikom. Reakciona sme ša je mešana na sobnoj temperaturi pod balonom vodonika tokom 45 minuta. Reakciona sme ša je filtrirana kroz pakovani celit, i filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio terc-butil N-terc-butoksikarbonil-N-[(12R)-6-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-8,13,19-trioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat (17 mg, 48 %). ESI-MS m/z izračunato 642.2124, pronađeno 543.1 (M-100+H)<+>; Retenciono vreme: 7.39 minuta. LCMS metoda: Merck Millipore Chromolith SpeedROD C18kolona (50 X 4.6 mm) i dvojni gradijent od 5 - 100% mobilne faze B tokom 12 minuta. Mobilna faza A = voda (0.1% CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0.1% CF3CO2H).
Korak 12: (12R)-17-Amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-8,13,19-trioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol
[1015]
[1016] Rastvor terc-butil N-terc-butoksikarbonil-N-[(12R)-6-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-8,13,19-trioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamata (17.5 mg, 0.0272 mmol) je zagrevan na 100 °C u mikrotalasnom reaktoru tokom 2 sata. Reakcija je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobio (12R)-17-amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-8,13,19-trioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (12 mg, 95 %). ESI-MS m/z izračunato 442.1076, pronađeno 443.5 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 6.08 minuta. LCMS metoda: Merck Millipore Chromolith SpeedROD C18kolona (50 X 4.6 mm) i dvojni gradijent od 5 - 100 % mobilne faze B tokom 12 minuta. Mobilna faza A = voda (0.1 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0.1 % CF3CO2H).
Korak 13: (12R)-17-Amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-8,13,19-trioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (dijastereomer 1), Jedinjenje 70. i (12R)-17-amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-8,13,19-trioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1 (18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (dijastereomer 2), Jedinjenje 71
[1017]
[1018] (12R)-17-Amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-8,13,19-trioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5] nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (19 mg, 0.04296 mmol) je razdvojen na pojedinačne dijastereomere hiralnom SFC metodom korišćenjem metode normalno fazne SFC-MS sa Phenomenex LUX-4 kolonom (250 X 10 mm; 5 µm) na 50 °C (mobilna faza je bila 8% MeOH (+ 20 mM NH3) / 92% CO2pri protoku od 10 mL/min, koncentracija uzorka je bila 20.3 mg/mL u metanolu, zapremina injektiranja = 70 µL sa izlaznim pritiskom od 128 bara i talasnom dužinom detekcije od 224 nm). Prvi eluirani pik dao je svetložutu čvrstu supstancu, (12R)-17-amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-8,13,19-trioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen- 6-ol (dijastereomer 1) (2.5 mg, 26 %).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 7.41 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 5.16 (s, 2H), 4.85 - 4.71 (m, 1H), 4.12 (d, J = 10.6 Hz, 1H), 3.99 - 3.88 (m, 2H), 3.64 (ddd, J = 8.9, 6.5, 4.6 Hz, 1H), 2.85 - 2.77 (m, 1H), 2.07 - 1.96 (m, 2H), 1.78 - 1.67 (m, 1H), 1.40 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.35 - 1.20 (m, 1H). ESIMS m/z izračunato 442.10757, pronađeno 443.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.76 minuta. ESI-MS m/z izračunato 442.10757, pronađeno 443.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.76 minuta. LCMS metoda: Acquity UPLC BEH C18kolona (50 × 2.1 mm, čestice 1.7 µm) proizvođača Waters (pn: 186002350), i dvojni gradijent od 1% do 99% mobilne faze B tokom 2.9 minuta. Mobilna faza A = CF3CO2H (0.05% CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0.035% CF3CO2H). Brzina protoka = 1.2 mL/min, zapremina injektiranja = 1.5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
[1019] Drugi pik koji je eluiran dao je svetložutu čvrstu supstancu, (12R)-17-amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-8,13,19-trioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (dijastereomer 2) (1.9 mg, 19 %).<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 7.45 - 7.38 (m, 1H), 5.21 (s, 2H), 4.86 - 4.77 (m, 1H), 4.16 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 4.02 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 3.97 - 3.91 (m, 1H), 3.74 - 3.67 (m, 1H), 2.79 - 2.67 (m, 1H), 1.96 - 1.87 (m, 1H), 1.87 - 1.75 (m, 1H), 1.41 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.39 - 1.34 (m, 1H), 1.34 - 1.24 (m, 1H). ESI-MS m/z izračunato 442.10757, pronađeno 443.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.78 minuta. LCMS metoda: Acquity UPLC BEH C18kolona (50 × 2.1 mm, čestice 1.7 µm) proizvođača Waters (pn: 186002350), i dvojni gradijent od 1% do 99% mobilne faze B tokom 2.9 minuta. Mobilna faza A = CF3CO2H (0.05% CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0.035% CF3CO2H). Brzina protoka = 1.2 mL/min, zapremina injektiranja = 1.5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Primer 50: Priprema (12R)-17-amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-9,13,19-trioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ola (dijastereomer 1), Jedinjenje 72, i (12R)- 17-amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-9,13,19-trioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka- 1 (18),2,4,14,16-pentaen-6-ola (dijastereomer 2), Jedinjenje 73
[1020]
Korak 1: 1.1.1-Trifluoro-2-(2-furil)pent-4-en-2-ol
[1021]
[1022] Alilmagnezijum hlorid u THF (53 mL 2 M, 106 mmol) je razblažen etrom (60 mL) i pod azotom ohlađen u ledenom kupatilu. Uz brzo mešanje, brzo je dodat 2,2,2-trifluoro-1-(2-furil)etanon (4.2 g, 20.478 mmol) u etru (10 mL). Smeša je mešana na 0 °C tokom 30 minuta, a zatim ohlađena na -20 °C. Dodata je vodena hlorovodonična kiselina (10 mL, 2 N) i slojevi su odvojeni. Etarski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen preko bezvodnog MgSO4, filtriran i koncentrovan da bi se dobio 1.1.1-trifluoro-2-(2-furil)pent-4-en-2-ol (5 g, kvantitativno).<1>H NMR (500 MHz, hloroform-d) δ 7.45 (s, 1H), 6.48 (d, J = 3.4, 1H), 6.41 (d, J = 3.3, 1H), 5.70 - 5.57 (m, 1H), 5.29 - 5.15 (m, 2H), 3.05 (s, 1H), 3.00 - 2.89 (m, 1H), 2.81 -2.71 (m, 1H).
Korak 2: 2-[1-Benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]furan
[1023]
[1024] 1.1.1-Trifluoro-2-(2-furil)pent-4-en-2-ol (3 g, 11.641 mmol) je rastvoren u DMF (30 mL) i rastvor je ohlađen u ledenom kupatilu. Dodat je natrijum hidrid u mineralnom ulju (822 mg, 20.552 mmol) i rastvor je postao svetlosmeđa smeša. Smeša je mešana 5 minuta, zatim je dodat bromometilbenzen (3.024 g, 2.1 mL, 17.681 mmol), a zatim tetrabutilamonijum jodid (878 mg, 2.377 mmol). Smeša je mešana na 30 °C tokom 16 sati. Dodat je zasićeni vodeni rastvor NH4Cl (15 mL), a zatim EtOAc (30 mL). Slojevi su odvojeni, i organski sloj je ispran vodom, a zatim slanim rastvorom, osušen preko bezvodnog MgSO4, filtriran i koncentrovan. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (kolona 40 g), korišćenjem gradijenta od 0% do 15% EtOAc u heksanima, dajući, kao bledožuto ulje, 2-(1-benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil)furan (3.4 g, 89%).<1>H NMR (500 MHz, hloroform-d) δ 7.59 - 7.44 (m, 1H), 7.43 -7.23 (m, 5H), 6.60 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 6.51 - 6.36 (m, 1H), 5.26 - 5.03 (m, 3H), 4.55 - 4.35 (m, 2H), 3.17 - 2.91 (m, 2H).
Korak 3: 3-Benziloksi-4,4,4-trifluoro-3-(2-furil)butanal
[1025]
[1026] 2-[1-Benziloksi-1-(trifluorometil)but-3-enil]furan (5.3 g, 16.994 mmol) je pomešan sa THF (40 mL) i vodom (20 mL) na sobnoj temperaturi. Dodati su NaJO4(10.9 g, 50.960 mmol), 2,6-lutidin (4.4304 g, 4.8 mL, 41.346 mmol) i OsO4u tercbutanolu (1.2 g, 2.5 % tež/tež, 0.118 mmol). Nakon 10 minuta mešanja, dodato je još vode (5 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 15 sati. Dodati su EtOAc (15 mL) i voda (15 mL) i slojevi su odvojeni. Organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen preko bezvodnog MgSO4, filtriran i koncentrovan. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (kolona od 80 g), koristeći gradijent od 0% do 15% EtOAc u heksanima, da bi se dobio 3-benziloksi-4,4,4-trifluoro-3-(2-furil)butanal (3,72 g, 70%), kao bledožuto ulje.<1>H NMR (500 MHz, hloroform-d) δ 9.87 (t, J = 2.2 Hz, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.44 - 7.12 (m, 5H), 6.69(d, J = 3.1 Hz, 1H), 6.60 - 6.41 (m, 1H), 4.57 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 4.39 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 3.12 (d, J= 2.7 Hz, 2H).
Korak 4: 3-Benziloksi-4,4,4-trifluoro-3-(2-furil)butan-1-ol
[1027]
[1028] 3-Benziloksi-4,4,4-trifluoro-3-(2-furil)butanal (3.72 g, 11.849 mmol) je rastvoren u MeOH (40 mL) i ohlađen u ledenom kupatilu. Dodat je NaBH4(480 mg, 0.5079 mL, 12.688 mmol) i smeša je mešana na istoj temperaturi 15 minuta. Dodat je zasićeni vodeni rastvor NH4Cl (5 mL) i smeša je koncentrovana na 1/3 prvobitne zapremine. Dodati su EtOAc (40 mL) i voda (40 mL) i dobijeni slojevi su odvojeni. Organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen preko bezvodnog MgSO4, filtriran i koncentrovan da bi se dobio 3-benziloksi-4,4,4-trifluoro-3-(2-furil)butan-1-ol (3.7 g, 94 %).<1>H NMR (500 MHz, hloroform-d) δ 7.52 (s, 1H), 7.41 – 7.27 (m, 5H), 6.67 - 6.54 (m,1H), 6.51 - 6.39 (m,1H), 4.54 (d,J = 10.9Hz, 1H), 4.43(d, J = 10.9 Hz, 1H), 3.95 - 3.80 (m, 2H), 2.57 - 2.40 (m, 2H), 2.00 (s, 1H).
Korak 5: [(1S)-3-[3-Benziloksi-4,4,4-trifluoro-3-(2-furil)butoksi]-1-metil-propoksi]-terc-butil-dimetilsilan
[1029]
[1030] 3-Benziloksi-4,4,4-trifluoro-3-(2-furil)butan-1-ol (980 mg, 2.9373 mmol) je rastvoren u DMF (8 mL) i smeša je kratko ohlađena u ledenom kupatilu. Dodat je natrijum hidrid u mineralnom ulju (202 mg, 5.0505 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 15 minuta. Dodat je terc -Butil-[(1S)-3-jodo-1-metil-propoksi]-dimetil-silan (2.15 g, 6.499 mmol) u DMF (2 mL) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi pod balonom azota 72 sata. Dodat je zasićeni vodeni rastvor NH4Cl (5 mL), a zatim EtOAc (20 mL) i voda (20 mL). Slojevi su odvojeni i organski sloj je ispran sa još vode (2 X 20 mL) i slanog rastvora, zatim osušen preko bezvodnog MgSO4, filtriran i koncentrovan. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (kolona 40 g), koristeći gradijent od 0% do 10% EtOAc u heksanima, dajući, kao bezbojno ulje, [(1S)-3-[3-benziloksi-4,4,4-trifluoro-(2-furil)butoksi)-(1-metil-propoksi)-terc-butil-dimetil-silan (760 mg, 51%).<1>H NMR (500 MHz, hloroform-d) δ 7.49 (s, 1H), 7.37 to 7.25 (m, 5H), 6.58 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 6.47 to 6.36 (m, 1H), 4.55 to 4.36 (m, 2H), 3.98 to 3.85 (m, 1H), 3.61 to 3.51 (m, 2H), 3.51 to 3.37 (m, 2H), 2.69 to 2.35 (m, 2H), 1.60 to 1.50 (m, 2H), 1.15 to 1.09 (m, 3H), 0.94 to 0.84 (m, 9H), 0.06 to -0.02 (m, 6H).
Korak 6: 2-Benziloksi-4-[(3S)-3-[terc-butil(dimetil)silil]oksibutoksi]-2-(trifluorometil)butanska kiselina
[1031]
[1032] [(1S)-3-[3-benziloksi-4,4,4-trifluoro-3-(2-furil)butoksi]-1-metil-propoksi]-terc-butil-dimetil-silan (700 mg, 1.2946 mmol) je pomešan u CH3CN (5.5 mL), CCl4(5.5 mL) i vodi (9 mL) na sobnoj temperaturi. Dodat je NaJO4(1.68 g, 7.8544 mmol), a zatim rutenijum(III) hlorid (15 mg, 0.0723 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 15 sati, zatim je dodato jo š NaJO4(278 mg, 1.2997 mmol) i smeša je mešana još jedan sat. Dodati su etil acetat (30 mL) i voda (30 mL) i slojevi su odvojeni. Organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen preko bezvodnog MgSO4, filtriran i koncentrovan da bi se dobila sirova 2-benziloksi-4-[(3S)-3-[terc-butil(dimetil) silil]oksibutoksi]-2-(trifluorometil)butanska kiselina (800 mg, kvantitativno). ESI-MS m/z izračunato 464.2206, pronađeno 465.6 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 4.33 minuta. LCMS metoda: Merck Millipore Chromolith SpeedROD C18kolona (50 X 4.6 mm) i dvojni gradijent od 5% do 100% mobilne faze B tokom 6 minuta. Mobilna faza A = voda (0.1 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0.1 % CF3CO2H).
Korak 7: terc-butil N-[[2-benziloksi-4-[(3S)-3-[terc-butil(dimetil)silil]oksibutoksi]-2-(trifluorometil) butanoil]amino]karbamat
[1033]
[1034] 2-Benziloksi-4-[(3S)-3-[terc-butil(dimetil)silil]oksibutoksi]-2-(trifluorometil)butanoična kiselina (610 mg, 1.116 mmol) je rastvorena u DMF (15 mL) na sobnoj temperaturi. Dodat je terc-butil N-aminokarbamat (221 mg, 1.6722 mmol), a zatim HATU (638 mg, 1.6779 mmol) i TEA (217.8 mg, 0.3 mL, 2.1524 mmol). Nakon 30 minuta, dodati su voda (40 mL) i EtOAc (40 mL) i slojevi su odvojeni. Organski sloj je ispran sa još vode (3 X 30 mL) i slanim rastvorom, zatim je osušen preko bezvodnog MgSO4, filtriran i koncentrovan da se dobije terc-butil N-[[2-benziloksi-4-[(3S)-3-[terc-butil(dimetil)silil]oksi-butoksi]-2-(trifluorometil)butanoil]amino]karbamat (260 mg, 38 %). ESI-MS m/z izračunato 578.2999, pronađeno 579.7 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 5.1 minuta. LCMS metoda: Merck Millipore Chromolith SpeedROD C18kolona (50 X 4.6 mm) i dvojni gradijent od 5% do 100% mobilne faze B tokom 6 minuta. Mobilna faza A = voda (0.1% CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0.1% CF3CO2H).
Korak 8: 2-Benziloksi-4-[(3S)-3-[terc-butil(dimetil)silil]oksibutoksi]-2-(trifluorometil)butanhidrazid
[1035]
[1036] terc-Butil N-[[2-benziloksi-4-[(3S)-3-[terc-butil(dimetil)silil]oksibutoksi]-2-(trifluorometil) butanoil]amino]karbamat (268 mg, 0.4399 mmol) i 1.1.1.3,3,3-heksafluoro-2-propanol (32 g, 20 mL, 190.43 mmol) su zatvoreni u mikrotalasnoj epruveti i zagrevani na 100 °C tokom 110 minuta. Smeša je zatim koncentrovana, a ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (kolona 40 g) korišćenjem gradijenta od 0% do 15% EtOAc u heksanima da bi se dobio 2-benziloksi -4-[(3S)-3-[terc-butil(dimetil) silil]oksibutoksi]-2-(trifluorometil)butanhidrazid (127 mg, 57 %). ESI-MS m/z izračunato 478.2475, pronađeno 479.3 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 3.89 minuta. LCMS metoda: Merck Millipore Chromolith SpeedROD C18kolona (50 X 4.6 mm) i dvojni gradijent od 5% do 100% mobilne faze B tokom 6 minuta. Mobilna faza A = voda (0.1% CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0.1% CF3CO2H).
Korak 9: terc-butil N-[2-[[[2-benziloksi-4-[(3S)-3-[terc-butil(dimetil)silil]oksibutoksi]-2-(trifluorometil) butanoil]amino]karbamoil]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat
[1037]
[1038] 2-Benziloksi-4-[(3S)-3-[terc-butil(dimetil)silil]oksibutoksi]-2-(trifluorometil)butanhidrazid (127 mg, 0.2521 mmol) je rastvoren u EtOAc (2 mL) na sobnoj temperaturi. Dodata je 6-bromo-3-(tercbutoksikarbonilamino)-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilna kiselina (118 mg, 0.3064 mmol), a zatim piridin (97.8 mg, 0.1 mL, 1.2364 mmol) i T3P u EtOAc (160.35 mg, 0.3 mL 50% tež/tež, 0.2520 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 14 sati. Smeša je koncentrovana, a ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (kolona 40 g) korišćenjem gradijenta od 0% do 50% EtOAc u heksanima, dajući, kao belu penu, terc-butil N-[2-[[[2-benziloksi-4-[(3S)-3-[tercbutil(dimetil)silil]oksibutoksi]-2-(trifluorometil) butanoil] amino]karbamoil]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat (200 mg, 84 %). ESI-MS m/z izračunato 844.2302, pronađeno 791.5 (M-53)<+>; Retenciono vreme: 5.09 minuta. LCMS metoda: Merck Millipore Chromolith SpeedROD C18kolona (50 X 4.6 mm) i dvojni gradijent od 5% do 100% mobilne faze B tokom 6 minuta. Mobilna faza A = voda (0.1 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0.1 % CF3CO2H).
Korak 10: terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-3-[(3S)-3-[terc-butil(dimetil)silil]oksibutoksi]-1-(trifluorometil)propil] -1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat
[1039]
[1040] terc-Butil N-[2-[[[2-benziloksi-4-[(3S)-3-[terc-butil(dimetil)silil]oksibutoksi]-2-(trifluorometil) butanoil]amino]karbamoil]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat (200 mg, 0.2128 mmol) je rastvoren u CH3CN (2 mL) na sobnoj temperaturi. Dodat je DIEA (96.46 mg, 0.13 mL, 0.7463 mmol), a zatim TsCl (60 mg, 0.3147 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 5 sati, zatim koncentrovana na 1/3 svoje zapremine i razblažena sa EtOAc (20 mL) i zasićenim vodenim NH4Cl (20 mL). Dobijeni slojevi su odvojeni, a organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen preko bezvodnog MgSO4, filtriran i koncentrovan. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (kolona od 40 g) korišćenjem gradijenta od 0% do 10% EtOAc u heksanima, dajući, kao bezbojno ulje, terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-3-[(3S)-3-[terc-butil(dimetil)silil]oksibutoksi]-1-(trifluorometil)propil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat (110 mg, 59%). ESI-MS m/z izračunato 826.2196, pronađeno 771.5 (M-55)<+>; Retenciono vreme: 5.25 minuta. LCMS metoda: Merck Millipore Chromolith SpeedROD C18kolona (50 X 4.6 mm) i dvojni gradijent od 5% do 100% mobilne faze B tokom 6 minuta. Mobilna faza A = voda (0.1 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0.1 % CF3CO2H).
Korak 11: terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-3-[(3S)-3-[terc-butil(dimetil)silil]oksibutoksi]-1-(trifluorometil)propil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonilkarbamat
[1041]
[1042] terc-Butil N-[2-[5-[1-benziloksi-3-[(3S)-3-[terc-butil(dimetil)silil]oksibutoksi]-1-(trifluorometil) propil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat (110 mg, 0.1262 mmol) je pomešan sa MTBE (2 mL) na sobnoj temperaturi. Dodat je di-terc-butil dikarbonat (51 mg, 0.0537 mL, 0.2337 mmol), a zatim DMAP (1 mg, 0.0082 mmol) i DIEA (22.26 mg, 0.03 mL, 0.1722 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 14 sati, a zatim koncentrovana i pre čišćena hromatografijom na silika gelu (24 g kolona) korišćenjem gradijenta od 0% do 20% EtOAc u heksanima, dajući, kao belu penu, terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-3-[(3S)-3-[terc-butil(dimetil)silil]oksibutoksi]-1-(trifluorometil) propil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (122 mg, 99%). ESI-MS m/z izračunato 926.272, pronađeno 773.5 (M-154)<+>; Retenciono vreme: 5.17 minuta. LCMS metoda: Merck Millipore Chromolith SpeedROD C18kolona (50 X 4.6 mm) i dvojni gradijent od 5% do 100% mobilne faze B tokom 6 minuta. Mobilna faza A = voda (0.1% CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0.1% CF3CO2H).
Korak 12: terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-3-[(3S)-3-[terc-butil(dimetil)silil] oksibutoksi]-1- (trifluorometil)propil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-hidroksi-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonilkarbamat
[1043]
[1044] terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-3-[(3S)-3-[terc-butil(dimetil)silil]oksibutoksi]-1-(trifluorometil) propil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-bromo-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (122 mg, 0.1249 mmol) je rastvoren u DMSO (1 mL). Dodat je cezijum acetat (72 mg, 0.3751 mmol) i smeša je stavljena u uljno kupatilo na 70 °C i mešana pod balonom azota tokom 20 sati. Smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i razblažena sa EtOAc (20 mL) i zasićenim vodenim NaHCO3(20 mL). Slojevi su odvojeni, a organski sloj je ispran sa još vode (2 X 20 mL) i slanim rastvorom, zatim osušen preko bezvodnog MgSO4, filtriran i koncentrovan da bi se dobilo bledožuto ulje, terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-3-[(3S)-3-[terc-butil(dimetil)silil]oksibutoksi]-1-(trifluorometil)propil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-hidroksi-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (120 mg, 94 %). ESI-MS m/z izračunato 864.3564, pronađeno 765.7 (M-99)<+>; Retenciono vreme: 4.86 minuta. LCMS metoda: Merck Millipore Chromolith SpeedROD C18kolona (50 X 4.6 mm) i dvojni gradijent od 5% do 100% mobilne faze B tokom 6 minuta. Mobilna faza A = voda (0.1% CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0.1% CF3CO2H).
Korak 13: terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-3-[(3S)-3-hidroksibutoksi]-1-(trifluorometil)propil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-hidroksi-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat
[1045]
[1046] terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-3-[(3S)-3-[terc-butil(dimetil)silil]oksibutoksi]-1-(trifluorometil) propil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-hidroksi-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (120 mg, 0.1179 mmol) je rastvoren u THF (2 mL) na sobnoj temperaturi. Dodat je tetrabutilamonijum fluorid u THF (88.7 mg, 0.1 mL, 0.3392 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 5 sati, a zatim stavljena u uljno kupatilo na 40 °C. Mešanje je nastavljeno 14 sati, a zatim je dodato još tetrabutilamonijum fluorida u THF (354.8 mg, 0.4 mL, 1.357 mmol). Nakon 6 sati, dodat je DMF (2 mL) i mešanje je nastavljeno 15 sati. Dodato je još tetrabutilamonijum fluorida u THF (354.8 mg, 0.4 mL, 1.357 mmol). Nakon još 16 sati, smeša je razblažena sa EtOAc (30 mL) i vodom (40 mL) i slojevi su odvojeni. Organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen preko bezvodnog MgSO4, filtriran i koncentrovan. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (kolona 12 g), korišćenjem gradijenta od 10% do 90% EtOAc u heksanima, dajući, kao belu penu, terc-butil N-[2-[5-[1-benziloksi-3-[(3S)-3-hidroksibutoksi]-1-(trifluorometil)propil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-hidroksi-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (73 mg, 81 %). ESI-MS m/z izračunato 750.2699, pronađeno 651.7 (M-99)<+>; Retenciono vreme: 3.8 minuta. LCMS metoda: Merck Millipore Chromolith SpeedROD C18kolona (50 X 4.6 mm) i dvojni gradijent od 5% do 100% mobilne faze B tokom 6 minuta. Mobilna faza A = voda (0.1 % CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0.1 % CF3CO2H).
Korak 14: terc-butil N-[(12R)-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-9,13,19-trioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5] nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat
[1047]
[1048] terc-Butil N-[2-[5-[1-benziloksi-3-[(3S)-3-hidroksibutoksi]-1-(trifluorometil)propil]-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-hidroksi-5-(trifluorometil)-3-piridil]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (70 mg, 0.0914 mmol) je rastvoren u toluenu (9 mL) na sobnoj temperaturi i PPh3(77 mg, 0.068 mL, 0.2936 mmol) je dodat u jednoj porciji, a zatim DIAD (62.64 mg, 0.06 mL, 0.3098 mmol) preko šprica. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 7 sati, a zatim koncentrovana. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (kolona 12 g), korišćenjem gradijenta od 0% do 15% EtOAc u heksanima, dajući, kao belu čvrstu supstancu, terc-butil N-[(12R)-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-9,13,19-trioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (40 mg, 57 %). ESI-MS m/z izračunato 732.2594, pronađeno 733.6 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 4.75 minuta. LCMS metoda: Merck Millipore Chromolith SpeedROD C18kolona (50 X 4.6 mm) i dvojni gradijent od 5% do 100% mobilne faze B tokom 6 minuta. Mobilna faza A = voda (0.1% CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0.1% CF3CO2H).
Korak 15: terc-butil N-terc-butoksikarbonil-N-[(12R)-6-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-9,13,19-trioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat
[1049]
[1050] terc-butil N-[(12R)-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-9,13,19-trioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]-N-terc-butoksikarbonil-karbamat (40 mg, 0.0519 mmol) je rastvoren u EtOH (2 mL) i dodat je 10% paladijum na uglju (20 mg, 0.1879 mmol). Smeša je nekoliko puta prečišćen gasovitim vodonikom i hidrogenizovana pod pritiskom od 50 psi na Parr šejkeru tokom 20 sati. Smeša je zatim filtrirana kroz celitni jastučić, isprana sa MeOH (~15 mL) i filtrat je temeljno koncentrovan da bi se dobio, kao sirova bela čvrsta supstanca, terc-butil N-terc-butoksikarbonil-N-[(12R)-6-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-9,13,19-trioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat (33 mg, 94 %). ESI-MS m/z izračunato 642.2124, pronađeno 643.4 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 4.88 minuta. LCMS metoda: Merck Millipore Chromolith SpeedROD C18kolona (50 X 4.6 mm) i dvojni gradijent od 5% do 100% mobilne faze B tokom 6 minuta. Mobilna faza A = voda (0.1% CF3CO2H). Mobilna faza B = acetonitril (0.1% CF3CO2H).
Korak 16: (12R)-17-Amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-9,13,19-trioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol
[1051]
[1052] terc-Butil N-terc-butoksikarbonil-N-[(12R)-6-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-9,13,19-trioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-il]karbamat (33 mg, 0.0488 mmol) je pomešan sa 1.1.1.3,3,3-heksafluoro-2-propanol (3.192 g, 2 mL, 18.996 mmol) u posudi za mikrotalasnu peć, zatim zatvoren i zagrevan na 100 °C tokom 130 minuta. Smeša je zatim ohlađena na sobnu temperaturu i koncentrovana. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (kolona 12 g), korišćenjem gradijenta od 5% do 60% EtOAc u heksanima, dajući, kao bledožutu čvrstu supstancu, (12R)-17-amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-9,13,19-trioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5] nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (21 mg, 89 %). ESI-MS m/z izrač. 442.1076, pronađeno 443.5 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.71 minuta (prosek dva dijastereomerna pika). LCMS metoda: Waters Cortex Veli čina čestica 2. 7 µm C18(3.0 mm X 50 mm), 55 °C; protok: 1.2 mL/min; mobilna faza: 100% voda sa 0.1% trifluorosirćetne kiseline, zatim 100% acetonitril sa 0.1% trifluorosirćetne kiseline, gradijent od 5% do 100% B tokom 4 min, sa ekvilibracijom na 100% B tokom 0.5 min, zatim 5% B tokom 1.5 min.
Korak 17: (12R)-17-amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-9,13,19-trioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (dijastereomer 1), Jedinjenje 72, i (12R)-17-amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-9,13,19-trioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1 (18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (dijastereomer 2), Jedinjenje 73
[1053]
[1054] (12R)-17-amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-9,13,19-trioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (20 mg, 0.04522 mmol) je razdvojen na pojedinačne dijastereomere hiralnom SFC metodom korišćenjem SFC-MS metode normalne faze uz korišćenje ChiralCel OJ kolone (250 X 10 mm; veličina čestica 5 µm) na 50 °C (mobilna faza = 7 % MeOH (+ 20 mM NH3) / 93 % CO2pri protoku od 10 mL/min, koncentracija uzorka je bila 22.0 mg/mL u metanolu, zapremina injektiranja = 70 µL sa izlaznim pritiskom od 140 bara, talasna dužina detekcije od 224 nm). Prvi pik koji je eluiran dao je bledožutu čvrstu supstancu, (12R)-17-amino-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-9,13,19-trioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (dijastereomer 1) (7.2 mg, 69 %).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 7.40 (s, 1H), 5.39 (pd, J = 6.5, 4.3 Hz, 1H), 5.14 (s, 2H), 3.99 (s, 1H), 3.86 - 3.78 (m, 1H), 3.67 - 3.61 (m, 1H), 3.60 - 3.51 (m, 2H), 2.68 (ddd, J = 14.9, 8.9, 5.9 Hz, 1H), 2.52 (dt, J = 15.2, 4.0 Hz, 1H), 2.40 - 2.30 (m, 1H), 1.64 - 1.58 (m, 1H), 1.42 (d, J = 6.5 Hz, 3H). ESI-MS m/z izračunato 442.10757, pronađeno 443.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.76 minuta. LCMS metoda: Acquity UPLC BEH C18kolona (50 × 2.1 mm, čestice 1.7 µm) proizvođača Waters (pn: 186002350), i dvojni gradijent od 1% do 99% mobilne faze B tokom 2.9 minuta. Mobilna faza A = CF3CO2H (0.05% CF3CO2H). Mobilna faza B = CH3CN (0.035% CF3CO2H). Brzina protoka = 1.2 mL/min, zapremina injektiranja = 1.5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
[1055] Drugi pik koji je eluiran dao je bledožutu čvrstu supstancu, (12R)-17-amino-12-metil-6,15-bis (trifluorometil)-9,13,19-trioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (dijastereomer 2) (5.2 mg, 51 %).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 7.42 (s, 1H), 5.25 (ddt, J = 10.2, 6.5, 3.3 Hz, 1H), 5.10 (s, 2H), 4.51 (s, 1H), 3.95 (td, J = 9.2, 4.5 Hz, 1H), 3.86 (ddd, J = 12.1, 10.3, 1.7 Hz, 1H), 3.62 - 3.51 (m, 2H), 2.75 - 2.62 (m, 2H), 2.35 (dt, J = 14.9, 4.7 Hz, 1H), 1.49 - 1.37 (m, 4H). ESI-MS m/z izračunato 442.10757, pronađeno 443.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.76 minuta. LCMS metoda: Acquity UPLC BEH C18kolona (50 × 2.1 mm, 1.7 µm čestica) proizvođača Waters (pn: 186002350), i dvojni gradijent od 1% do 99% mobilne faze B tokom 2.9 minuta. Mobilna faza A = CF3CO2H (0.05% CF3CO2H). Mobilna faza B = CH3CN (0.035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1.2 mL/min, zapremina injektiranja = 1.5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Primer 51: Priprema (15R)-15-metil-18-(trifluorometil)-16,22-dioksa-3,4,7,8,21-pentazatetraciklo [15.3.1.12,5.06,10]dokoza-1(21),2,4,6,9,17,19-heptaen-20-amina, Jedinjenje 74
[1056]
Korak 1: Metil 3-[bis(terc-butoksikarbonil)amino]-6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi]-5-(trifluorometil) piridin-2-karboksilat
[1057]
[1058] U rastvor metil 3-[bis(terc-butoksikarbonil)amino]-6-bromo-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilata (500 mg, 1.001 mmol) u DMSO (5 mL) dodat je (2R)-pent-4-en-2-ol (160 µL, 1.555 mmol), cezijum karbonat (521 mg, 1.599 mmol) i jodobakar (54 mg, 0.2835 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 100 °C tokom 3 sata. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu, izlivena na izdrobljeni led, ekstrahovana etil acetatom i isprana slanim rastvorom. Organski dijelovi su odvojeni, osu šeni preko natrijum sulfata, filtrirani i ispareni. Dobijeni braon ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela korišćenjem plitkog gradijenta od 100% heksana do 30% etil acetata u heksanu, dajući, kao bezbojno ulje, metil 3-[bis(terc-butoksikarbonil)amino]-6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi]-5- (trifluorometil) piridin-2-karboksilat (216 mg, 43%). ESI-MS m/z izračunato 504.20834, pronađeno 505.0 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.73 minuta. LCMS metoda: Acquity UPLC BEH C18kolona (50 × 2.1 mm, veličina čestica 1.7 µm) proizvođača Waters (pn: 186002350), i dvojni gradijent od 30 - 99 % mobilne faze B tokom 2.9 minuta. Mobilna faza A = H20 (0.05 % CF3CO2H). Mobilna faza B = CH3CN (0.035 % CF3CO2H). Brzina protoka = 1.2 mL/min, zapremina injektiranja = 1.5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
Korak 2: 3-(terc-butoksikarbonilamino)-6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi]-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilna kiselina
[1059]
[1060] U rastvor metil 3-[bis(terc-butoksikarbonil)amino]-6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi]-5-(trifluorometil) piridin-2-karboksilata (3.3 g, 6.5412 mmol) u MeOH (24 mL) i THF (24 mL) dodat je rastvor litijum hidroksid monohidrata (1.2 g, 28.596 mmol) u vodi (12 mL). Smeša je mešana na 50 °C tokom 16 sati. Reakciona smeša je zatim ohlađena na sobnu temperaturu i dodavan je vodeni 1N HCl dok se nije postigao pH = 2. Volatili su uklonjeni pod sniženim pritiskom i produkt je ekstrahovan etil acetatom (3 X 20 mL). Kombinovane organske faze su isprane slanim rastvorom (20 mL), osušene preko natrijum sulfata, filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom, što je dalo 3-(terc-butoksikarbonil-amino)-6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi]-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilnu kiselinu (2.66 g, 89%), kao žuto ulje.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.12 - 11.38 (m, 1H), 8.78 (s, 1H), 5.92 - 5.69 (m, 1H), 5.42 - 5.33 (m, 1H), 5.14 - 5.06 (m, 1H), 5.06 - 5.01 (m, 1H), 2.44 - 2.37 (m, 2H), 1.46 (s, 9H), 1.25 (d, J = 6.4 Hz, 3H).<19>F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62.33 (s, 3F). ESI-MS m/z izračunato 390.1403, pronađeno 389.0 (M-1)-; Retenciono vreme: 2.28 minuta. LCMS metoda: Kinetex Polar C18kolona (3.0 X 50 mm, veličina čestica 2.6 µm, trajanje 3 minuta, 5% do 95% acetonitrila u vodi (modifikator 0.1% mravlja kiselina), brzina protoka = 1.2 mL/min).
Korak 3: Etil 1-benzilpirazol-3-karboksilat
[1061]
[1062] Suspenziji etil 1H-pirazol-5-karboksilata (20 g, 142.71 mmol) i kalijum karbonata (60 g, 434.13 mmol) u dimetil formamidu (200 mL) dodat je benzil bromid (25.92 g, 18 mL, 151.55 mmol) na sobnoj temperaturi i smeša je mešana 3 sata na sobnoj temperaturi. Smeša je razblažena etil acetatom (500 mL) i isprana vodom (500 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan etil acetatom (250 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (500 mL), slanim rastvorom (500 mL), osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (eluirano sa gradijentom od 100% heptana do 30% etil acetata u heptanu) da bi se dobio kao drugi eluirani regioizomerni produkt i bela čvrsta supstanca, etil 1-benzilpirazol-3-karboksilat (21.5 g, 65%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.40 - 7.30 (m, 4H), 7.26 - 7.21 (m, 2H), 6.83 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 5.40 (s, 2H), 4.42 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 1.41 (t, J = 7.1 Hz, 3H). ESI-MS m/z izračunato 230.1055, pronađeno 231.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.85 minuta; LCMS metoda: Kinetex Polar C183,0 X 50 mm, 2.6 µm, 3 min, 5 - 95 % acetonitrila u vodi (0.1 % mravlja kiselina), protok = 1.2 mL/min.
Korak 4: Etil 1-benzil-4-bromo-pirazol-3-karboksilat
[1063]
[1064] U rastvor etil 1-benzilpirazol-3-karboksilata (7 g, 30.4 mmol) u acetonitrilu (140 mL) je dodat brom (9.3069 g, 3 mL, 58.238 mmol) na sobnoj temperaturi. Nakon mešanja na sobnoj temperaturi preko noći, dodat je dodatni brom (4.9637 g, 1.6 mL, 31.06 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 dan. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, razblažena etil acetatom (20 mL) i isprana 10% vodenim rastvorom natrijum tiosulfata (200 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan etil acetat/tetrahidrofuranom (1/1.
200 mL). Kombinovani organski sloj je osušen iznad natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (eluirano sa gradijentom od 0% do 35% etil acetata u heptanu) da bi se dobio etil 1-benzil -4-bromo-pirazol-3-karboksilat (9,1 g, 97%), kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.44 - 7.33 (m, 4H), 7.29 - 7.24 (m, 2H), 5.36 (s, 2H), 4.45 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 1.43 (t, J = 7.1 Hz, 3H). ESI-MS m/z izračunato 308.016, pronađeno 309.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.98 minuta. LCMS metoda: Kinetex Polar C18kolona (3.0 X 50 mm, veličina čestica 2.6 µm, trajanje 3 minuta, 5% do 95% acetonitrila u vodi (modifikator 0.1% mravlja kiselina), brzina protoka = 1.2 mL/min).
Korak 5: Etil 4-alil-1-benzil-pirazol-3-karboksilat
[1065]
[1066] Rastvor etil 1-benzil-4-bromo-pirazol-3-karboksilata (8.7 g, 28.141 mmol) u tetrahidrofuranu (130 mL) i vodi (25 mL) je degazirana barbotiranjem azotom tokom 15 minuta. Dodati su 1-alil-3,3,4,4-tetrametil-borolan (5,6 g, 6,25 mL, 34,127 mmol) i 1.1'-bis(difenilfosfino)ferocen paladijum(II) hlorid, kompleks sa dihlorometanom (3 g, 3.6736 mmol), a zatim cezijum karbonat (42 mL 2 M, 84 mmol) pod azotom. Reakciona smeša je zagrevana preko noći na 100 °C. Nakon hlađenja na sobnu temperaturu, reakciona smeša je razblažena etil acetatom (150 mL), filtrirana kroz sloj celita i isprana etil acetatom (2 X 100 mL). Filtrat je ispran vodom (2 X 200 mL) i slanim rastvorom (400 mL). Organska faza je zatim osušena iznad bezvodnog natrijum sulfata, filtrirana i koncentrovana u vakuumu. Dobijena sme ša je prečišćena hromatografijom na koloni silika gela (gradijent od 0% do 30% etil acetata u heptanima). Željene frakcije su sakupljene i rastvarač je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobio etil 4-alil-1-benzil-pirazol-3-karboksilat (5,02 g, 64%), kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,41 -7,31 (m, 3H), 7,26 - 7,21 (m, 2H), 7,15 (s, 1H), 5,94 (ddt, J = 17,0. 10.2, 6,6 Hz, 1H), 5,35 (s, 2H), 5,09 -4,98 (m, 2H), 4,42 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 3,50 (d, J = 6,6 Hz, 2H), 1.41 (t, J = 7,2 Hz, 3H). ESI-MS m/z izračunato 270.1368, pronađeno 271.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.0 minuta. LCMS metoda: Kinetex Polar C18kolona (3.0 X 50 mm, veličina čestica 2.6 µm, trajanje 3 minuta, 5% do 95% acetonitrila u vodi (modifikator 0.1% mravlja kiselina), brzina protoka = 1.2 mL/min).
Korak 6: 4-Alil-1-benzil-pirazol-3-karboksilna kiselina
[1067]
[1068] Rastvor litijum hidroksida (5 g, 208,78 mmol) u vodi (10 mL) dodat je rastvoru etil 4-alil -1-benzilpirazol-3-karboksilata (5 g, 18.015 mmol) u metanolu (50 mL) i tetrahidrofuranu (25 mL). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 3 sata. Reakcija je zatim koncentrovana da bi se uklonio metanol. Sirovi materijal je razblažen u vodi (100 mL) i natrijum karboksilatna so je isprana heptanom (50 mL) i MTBE (50 mL). Vodeni rastvor je zakišeljen na pH = 2 pomoću 3 N vodenog rastvora hlorovodonične kiseline. Karboksilna kiselina je ekstrahovana dihlorometanom (4 X 100 mL) i osušena iznad natrijum sulfata. Rastvor je filtriran i koncentrovan da bi se dobila 4-alil-1-benzil-pirazol-3-karboksilna kiselina (4.45 g, 99%), kao svetložuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 12.40 - 10.19 (m, 1H), 7.48 - 7.39 (m, 3H), 7.37 - 7.31 (m, 2H), 7.27 (s, 1H), 6.01 (ddt, J = 17.0, 10.2, 6.6 Hz, 1H),5.43 (s, 2H), 5.20 - 5.04 (m, 2H), 3.59 (d, J = 6.6 Hz, 2H). ESI-MS m/z izračunato 242.1055, pronađeno 243.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.79 minuta; LCMS metoda: Kinetex Polar C18kolona (3.0 X 50 mm, veličina čestica 2.6 µm, trajanje 3 minuta, 5% do 95% acetonitrila u vodi (modifikator 0.1% mravlja kiselina), brzina protoka = 1.2 mL/min).
Korak 7:4-Alil-1-benzil-pirazol-3-karbohidrazid
[1069]
[1070] Rastvor 4-alil-1-benzil-pirazol-3-karboksilne kiseline (4.15 g, 16.616 mmol) i trietilamina (5.0820 g, 7 mL, 50.222 mmol) u DMF (60 mL) je tretiran sa HATU (13 g, 34.19 mmol) i mešan na sobnoj temperaturi 20 minuta. Reakciona smeša je ohlađena u ledenoj kupki i dodat je hidrazin hidrat (13.416 g, 20 mL, 174.2 mmol). Nakon otprilike 10 minuta, ledena kupka je uklonjena i reakcija je me šana na sobnoj temperaturi oko 18 sati. Reakciona smeša je prebačena u levak za odvajanje od 1 L sa vodom (450 mL) i vodeni sloj je ekstrahovan etil acetatom (4 X 100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (2 X 200 mL), slanim rastvorom (250 mL), osušeni iznad natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod sni ženim pritiskom. Hromatografija na silika gelu (gradijent od 0% do 60% etil acetata u heptanima) dala je, kao bezbojno ulje, 4-alil-1-benzil-pirazol-3-karbohidrazid (2.45 g, 52%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.11 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.44 - 7.15 (m, 5H), 5.95 (ddt, J = 17.0, 10.2, 6.6 Hz, 1H), 5.30 (s, 2H), 5.10 - 4.89 (m, 2H), 4.34 (s, 2H), 3.45 (d, J = 6.6 Hz, 2H). ESI-MS m/z izračunato 256.1324, pronađeno 257.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 3.23 minuta. LCMS metoda: SunFire C18kolona (75 X 4.6 mm, veličina čestica 3.5 µm, trajanje 6 minuta, uslovi mobilne faze: inicijalno 95% voda 0.1% mravlja kiselina/5% acetonitril 0.1% mravlja kiselina, linearni gradijent do 95% acetonitrila tokom 4 minuta, zatim dr žanje 2 minuta na 95% acetonitrila, temperatura = 45 °C, protok = 1.5 mL/min).
Korak 8: terc-butil N-[2-[[(4-alil-1-benzil-pirazol-3-karbonil)amino]karbamoil]-6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi]-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat
[1071]
[1072] U rastvor 3-(terc-butoksikarbonilamino)-6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi]-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilne kiseline (200 mg, 0.5088 mmol) u DMF (1.5 mL) dodat je 4-alil-1-benzil-pirazol-3-karbohidrazid (160 mg, 0.5662 mmol), HATU (235 mg, 0.618 mmol) i DIEA (371 mg, 0.5 mL, 2.8706 mmol) na sobnoj temperaturi. Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi 2 sata i direktno nanesen na reverzno-faznu C18preparativnu kolonu. Prečišćavanje je izvršeno reverzno-faznom hromatografijom (kolona od 100 grama. Gradijent od 5% do 100% acetonitrila u vodi sa 0.1% mravlje kiseline) da bi se dobio, kao bela pena, tercbutil N-[2-[[(4-alil-1-benzil-pirazol-3-karbonil)amino]karbamoil]-6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi]-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat (238 mg, 71%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.83 (s, 1H), 10.65 (s, 1H), 10.15 (s, 1H), 9.01 (s, 1H), 7.77 (s, 1H), 7.50 - 7.18 (m, 5H), 5.97 (ddt, J =
17.0, 10.2, 6.6 Hz, 1H), 5.89 - 5.74 (m, 2H), 5.39 (s, 2H), 5.18 - 4.94 (m, 4H), 3.46 (d, J = 6.6 Hz, 2H), 2.47 - 2.32 (m, 2H), 1.47 (s, 9H), 1.25 (d, J = 6.1 Hz, 3H).<19>F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ-63.11 (s, 3F). ESI-MS m/z izračunato 628.2621, pronađeno 529.3 (M-99)<+>; Retenciono vreme: 4.3 minuta. LCMS metoda: XBridge C18kolona (4.6 X 75 mm, Veličina čestica 5 µm, trajanje 6 minuta sa 1 minutom ekvilibracije, inicijalna mobilna faza na 95% vodenom NH4HCO3/ 5% acetonitrilu, gradijent od 0 do 3 minuta do 95% MeCN i zadržavanje 3 minuta, protok = 1.5 mL/min).
Korak 9: terc-butil N-[2-[5-(4-alil-1-benzil-pirazol-3-il)-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi]-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat
[1073]
[1074] U rastvor terc-butil N-[2-[[(4-alil-1-benzil-pirazol-3-karbonil)amino]karbamoil]-6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi]-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamata (235 mg, 0.3577 mmol) i toluensulfonil hlorida (220 mg, 1.154 mmol) u DCE (7 mL) dodat je N,N-diizopropiletilamin (0.5 mL, 2.8706 mmol) i toluensulfonil hlorid (220 mg, 1.154 mmol). Reakcija je mešana na 50 °C tokom 20 sati, a zatim ohlađena na sobnu temperaturu. Volatili su uklonjeni pod sniženim pritiskom. Prečišćavanje je izvršeno reverznofaznom hromatografijom (kolona 50 g, Gradijent od 5% do 95% acetonitrila u vodi sa 0.1% mravlje kiseline) da bi se dobio terc-butil N-[2-[5-(4-alil-1-benzilpirazol-3-il)-1.3,4-oksadiazol-2-il]- 6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi]-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamat (202 mg, 81%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.93 (s, 1H), 8.92 (s, 1H), 7.96 (s, 1H), 7.42 - 7.26 (m, 5H), 6.04 (ddt, J = 16.8, 10.2, 6.4 Hz, 1H), 5.84 (ddt, J = 17.2, 10.1, 7.0 Hz, 1H), 5.46 (s, 2H), 5.34 (m, J = 6.1 Hz, 1H), 5.20 - 5.13 (m, 1H), 5.12 - 5.00 (m, 3H), 3.59 (d, J = 6.6 Hz, 2H), 2.50 - 2.38 (m, 2H), 1.50 (s, 9H), 1.34 (d, J = 6.1 Hz, 3H).<19>F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ-62.80 (s, 3F). ESI-MS m/z izračunato 610.2515, pronađeno 555.2 (M-55)<+>; Retenciono vreme: 2.56 minuta. LCMS metoda: Luna C18kolona (50 X 3 mm, veličina čestica 3 µm, temperatura = 45 °C, protok = 1.5 mL/min, vreme trajanja gradijenta = 3.5 minuta. Uslovi mobilne faze: Inicijalno 95% voda 0.1% mravlje kiseline / 5% acetonitrila 0.1% mravlje kiseline, linearni gradijent do 95% acetonitrila 0.1% mravlje kiseline tokom 1.3 minuta, a zatim držanje 2.2 minuta na 95% acetonitrila 0.1% mravlje kiseline.
Korak 10: terc-butil N-[(15R)-8-benzil-15-metil-18-(trifluorometil)-16,22-dioksa-3,4,7,8,21-pentazatetraciklo [15.3.1.12,5.06,10]dokoza-1(21),2,4,6,9,12,17,19-oktaen-20-il]karbamat (E/Z smeša)
[1075]
[1076] Svetložuti rastvor terc-butil N-[2-[5-(4-alil-1-benzil-pirazol-3-il)-1.3,4-oksadiazol-2-il]-6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi]-5-(trifluorometil)-3-piridil]karbamata (200 mg, 0.2879 mmol) u dihloretanu (100 mL) je barbotiran gasovitim azotom tokom 2 sata. Rastvor je zatim stavljen u uljnu kupku pode šenu na 70 °C i dodata je prva porcija Zhan katalizatora-1B (20 mg, 0.0273 mmol). Reakcija je mešana tokom 2 sata. Dodat je DMSO (2 kapi) i reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu. Volatili su uklonjeni pod sniženim pritiskom. Prečišćavanjem hromatografijom na silika gelu (gradijent od 0% do 30% etil acetata u heptanima) dobijen je, kao žuto ulje, terc-butil N-[(15R)-8-benzil-15-metil-18-(trifluorometil)-16,22-dioksa-3,4,7,8,21-pentazatetraciklo[15.3.1.12,5.06,10]dokoza-1(21),2,4,6,9,12,17,19-oktaen-20-il] karbamat (E/Z smeša) (37 %)<19>F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62.17 – -62.44 (m, 3F). ESI-MS m/z izrač.
582.2202, pronađeno 583.3 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 4.51 minuta. LCMS metoda: XBridge C18kolona (4.6 X 75 mm, veličina čestica 5 µm, trajanje 6 minuta sa 1 minutom ekvilibracije, inicijalna mobilna faza 95% vodeni NH4HCO3/ 5% acetonitril, gradijent od 0 do 3 minuta do 95% MeCN i držanje 3 minuta, protok = 1.5 mL/min).
Korak 11: terc-butil N-[(15R)-8-benzil-15-metil-18-(trifluorometil)-16,22-dioksa-3,4,7,8,21-pentazatetraciklo [15.3.1.12,5.06,10]dokoza-1(21),2,4,6,9,17,19-heptaen-20-il]karbamat
[1077]
[1078] Paladijum hidroksidu na ugljeniku (21 mg, 20 % tež/tež, 0.0299 mmol) pod azotom je dodat rastvor terc-butil N-[(15R)-8-benzil-15-metil-18-(trifluorometil)-16,22-dioksa-3,4,7,8,21-pentazatetra-ciklo [15.3.1.12,5.06,10]dokoza-1(21),2,4,6,9,12,17,19-oktaen-20-il]karbamata (E/Z smeša) (60 mg, 0.0987 mmol) u metanolu (5 mL). Vodonik je barbotiran u smešu tokom 5 minuta, a zatim je reakcija mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 sata pod atmosferom vodonika (balon). Sme ša je filtrirana kroz celit, isprana etil acetatom (50 mL) i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Prečišćavanjem ostatka hromatografijom na silika gelu (gradijent od 5% do 60% etil acetata u heptanima) dobijen je terc-butil N-[(15R)-8-benzil-15-metil-18-(trifluorometil)-16,22-dioksa-3,4,7,8,21-pentazatetraciklo [15.3.1.12,5.06,10]dokoza-1(21),2,4,6,9,17,19-heptaen-20-il]karbamat (55 mg, 88 %). ESI-MS m/z izračunato 584.2359, pronađeno 585.3 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 4.6 minuta. LCMS metoda: XBridge C18kolona (4.6 X 75 mm, veličina čestica 5 µm, trajanje 6 minuta sa 1 minutom ekvilibracije, inicijalna mobilna faza 95% vodeni NH4HCO3/ 5% acetonitril, gradijent od 0 do 3 minuta do 95% MeCN i držanje 3 minuta, protok = 1.5 mL/min).
Korak 12: terc-butil N-[(15R)-15-metil-18-(trifluorometil)-16,22-dioksa-3,4,7,8,21-pentazatetraciklo [15.3.1.12,5.06,10]dokoza-1(21),2,4,6,9,17,19-heptaen-20-il]karbamat
[1079]
[1080] Paladijumu na ugljeniku (60 mg, 5 % tež/tež, 0.0282 mmol) pod azotom je dodat rastvor terc-butil N-[(15R)-8-benzil-15-metil-18-(trifluorometil)-16,22-dioksa-3,4,7,8,21-pentazatetraciklo [15.3.1.12,5.06, 10]dokoza-1(21),2,4,6,9,17,19-heptaen-20-il]karbamata (50 mg, 0.0787 mmol) u tetrahidrofuranu (10 mL). Epruveta je zatvorena i presurizovana gasovitim vodonikom (50 psi). Reakciona sme ša je mešana na 50 °C tokom 24 sata. Smeša je zatim ohlađena, degazirana prečišćavanjem čistim azotom, a zatim filtrirana kroz celit, uz ispiranje etil acetatom (25 mL). Filtrat je koncentrovan pod sni ženim pritiskom. Prečišćavanje ostatka hromatografijom na silika gelu (gradijent od 0% do 90% etil acetata u heptanima) dalo je kao žutu čvrstu supstancu terc-butil N-[(15R)-15-metil-18-(trifluorometil)-16,22-dioksa-3,4,7,8,21-pentazatetraciklo[15.3.1.12,5.06,10]dokoza-1(21), 2,4,6,9,17,19-heptaen-20-il] karbamat (18 mg, 45%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 13.31 - 12.26 (m, 1H), 9.21 (s, 1H), 9.10 (s, 1H), 7.92 (s, 1H), 5.07 - 4.91 (m, 1H), 3.12 - 2.95 (m, 1H), 2.69 - 2.51 (m, 2H), 2.42 - 2.25 (m, 1H), 1.72 - 1.62 (m, 3H), 1.60 (s, 9H), 1.55 - 1.48 (m, 1H), 1.45 (d, J = 6.1 Hz, 3H).<19>F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -63.70 (s, 3F). ESI-MS m/z izračunato 494.1889, pronađeno 495.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 4.21 minuta. LCMS metoda: XBridge C18kolona (4.6 X 75 mm, veličina čestica 5 µm, trajanje 6 minuta sa 1 minutom ekvilibracije, inicijalna mobilna faza 95% vodeni NH4HCO3/ 5% acetonitril, gradijent od 0 do 3 minuta do 95% MeCN i držanje 3 minuta, protok = 1.5 mL/min).
Korak 13: (15R)-15-metil-18-(trifluorometil)-16,22-dioksa-3,4,7,8,21-pentazatetraciklo [15.3.1.12,5.06,10]dokoza-1(21),2,4,6,9,17,19-heptaen-20-amin, Jedinjenje 74
[1081]
[1082] U rastvor terc-butil N-[(15R)-15-metil-18-(trifluorometil)-16,22-dioksa-3,4,7,8,21-pentazatetraciklo[15.3.1.12,5.06,10]dokoza-1(21),2,4,6,9,17,19-heptaen-20-il]karbamata (18 mg, 0.0357 mmol) u dihlorometanu (1.8 mL) je dodat TFA (0.6 mL, 7.7879 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 sata. Zatim je u kapima dodavan zasićeni vodeni rastvor NaHCO3dok nije postignut pH = 6-7. Dodati su voda (10 mL) i DCM (10 mL) i faze su razdvojene. Vodena faza je ekstrahovana sa DCM (3 X 10 mL). Kombinovani organski slojevi su koncentrovani pod sniženim pritiskom. Prečišćavanjem ostatka reverznofaznom hromatografijom (kolona od 15.5 g, gradijent 5% do 90% acetonitrila u vodi) dobijen je (15R) -15-metil-18-(trifluorometil)-16,22-dioksa-3,4,7,8,21-pentazatetraciklo [15.3.1.12,5.06,10]dokoza- 1(21), 2,4,6,9,17,19-heptaen-20-amin (11.7 mg, 83%), u obliku žute čvrste supstance nakon liofilizacije.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.44 (br. s., 1H), 7.86 (br. s., 1H), 7.74 (s, 1H), 6.34 (s, 2H), 4.95 - 4.80 (m, 1H), 2.99 - 2.81 (m, 1H), 2.62 - 2.52 (m, 1H), 2.47 - 2.37 (m, 1H), 2.34 - 2.17 (m, 1H), 1.65 - 1.41 (m, 3H), 1.40 - 1.28 (m, 4H).<19>F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62.32 (s, 3F). ESI-MS m/z izrač. 394.1365, pronađeno 395.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 3.53 minuta. LCMS metoda: XBridge C18kolona (4.6 X 75 mm, veličina čestica 5 µm, trajanje 6 minuta sa 1 minutom ekvilibracije, inicijalna mobilna faza na 95% vodeni NH4HCO3/ 5% acetonitril, gradijent od 0 do 3 minuta do 95% MeCN i držanje 3 minuta, protok = 1.5 mL/min).
Primer 52: Priprema (6R,12R)-6-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-karboksilne kiseline, Jedinjenje 75
[1083]
Korak 1: (2R)-2-Benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enhidrazid (hidrohloridna sol)
[1084]
[1085] U rastvor (2R)-2-benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enhidrazida (3.672 g, 11.722 mmol) u dietil eteru (30 mL) na 0 °C u kapima je dodat rastvor hlorovodonika (8.8 mL 2 M, 17.6 mmol) u dietil eteru. Zatim je dodato još dietil etera (40 mL) na 0 °C. Nakon dodavanja, ledena kupka za hlađenje je uklonjena i smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 20 sati. Suspenzija je filtrirana na levku sa fritom, i beli talog je ispran dietil etrom (2 X 15 mL), sakupljen i osušen pod vakuumom da bi se dobio (2R)-2-benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enhidrazid (hidrohloridna sol) (3.71 g, 90 %).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.95 (široki s, 1H), 10.45 – 8.71 (m, 3H), 7.51 – 7.28 (m, 5H), 5.90 – 5.77 (m, 1H), 5.12 – 4.97 (m, 2H), 4.79 (s, 2H), 2.40 - 1.92 (m, 4H).<19>F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -72.72 (s, 3F). ESI-MS m/z izračunato 302.1242, pronađeno 303.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.83 minuta. LCMS metoda: Kinetex Polar C18kolona (3.0 X 50 mm, veličina čestica 2.6 µm, trajanje 6 minuta, 5% do 95% acetonitril u vodi (modifikator 0.1% mravlja kiselina), brzina protoka = 1.2 mL/min).
Korak 2: Metil 3-bromo-6-hidroksi-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilat
[1086]
[1087] 1-bromopirolidin-2,5-dion (18.3 g, 102.82 mmol) je dodat u tri jednaka dela u razmaku od oko 15 minuta u metil 6-hidroksi-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilat (20.6 g, 93.157 mmol) rastvoren u DMF (160 mL) i smeša je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi 60 minuta nakon završetka dodavanja. Dodata je dejonizovana voda (1 L) i dobijeni talog je filtriran i ispran dejonizovanom vodom (3 X 100 mL), a zatim osušen pod visokim vakuumom da bi se dobio metil 3-bromo-6-hidroksi-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilat (26.61 g, 95 %), kao beo prah.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) ppm 4.03 (s, 3H), 7.98 (s, 1H), 11.53 (br. s., 1H).<19>F NMR (282 MHz, CDCl3) ppm -66.4 (s, 3F). ESI-MS m/z izračunato 298.9405, pronađeno 300.0 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.64 minuta. LCMS metoda: Kinetex Polar C18kolona (4.6 X 50 mm, veličina čestica 2.6 µm, trajanje 3 minuta, 5% do 95% acetonitrila u vodi (modifikator 0.1% mravlja kiselina), brzina protoka = 2.0 mL/min).
Korak 3: Metil 3-bromo-6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi]-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilat
[1088]
[1089] U rastvor metil 3-bromo-6-hidroksi-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilata (1 g, 3.3297 mmol) i (2S)-pent-4-en-2-ola (420 mg, 4.8762 mmol) u toluenu (20 mL) dodat je trifenil fosfin (1.3 g, 4.9564 mmol). Nakon mešanja na sobnoj temperaturi tokom 10 minuta, dodat je DIAD (1.1297 g, 1.1 mL, 5.5868 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2.5 sata. Toluen je isparen pod sniženim pritiskom. Prečišćavanjem hromatografijom na silika gelu (kolona 40 g, gradijent: 0% do 5% etil acetat u heptanima) dobijen je metil 3-bromo-6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi]-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilat (1.15 g, 94%) kao svetložuto ulje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.04 (s, 1H), 5.89 - 5.76 (m, 1H), 5.37 (m, J = 6.1 Hz, 1H), 5.15 - 5.04 (m, 2H), 4.00 (s, 3H), 2.55 - 2.38 (m, 2H), 1.36 (d, J = 6.1 Hz, 3H).<19>F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -64.41 (s, 3F). ESI-MS m/z izračunato 367.0031, pronađeno 368.0 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.11 minuta. LCMS metoda: Luna C18kolona (50 X 3 mm, veličina čestica 3 µm, temperatura = 45 °C, protok = 1.5 mL/min, vreme trajanja gradijenta = 2.5 minuta. Uslovi mobilne faze: Inicijalno 95% voda 0.1% mravlja kiselina / 5% acetonitril 0.1% mravlja kiselina, linearni gradijent do 95% acetonitril 0.1% mravlja kiselina tokom 1.3 minuta, a zatim držanje 1.2 minuta na 95% acetonitril 0.1% mravlja kiselina.
Korak 4: 3-Bromo-6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi]-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilna kiselina
[1090]
[1091] U rastvor metil 3-bromo-6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi]-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilata (1.11 g, 3.0151 mmol) u MeOH (10 mL) i THF (10 mL) dodat je rastvor litijum hidroksid hidrata (550 mg, 13.107 mmol) u vodi (5 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 sata. Smeši je dodat vodeni 1 N HCl dok se ne postigne pH = 2. Volatili su uklonjeni pod sniženim pritiskom, a proizvod je ekstrahovan etil acetatom (3 X 40 mL). Kombinovane organske faze su isprane slanim rastvorom (40 mL), osušene preko natrijum sulfata, filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom, što je dalo 3-bromo-6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi]-5-(trifluorometil) piridin-2-karboksilnu kiselinu (1.1 g, 98 %).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.21 (s, 1H), 5.89 - 5.76 (m, 1H), 5.28 (m, J = 6.2 Hz, 1H), 5.19 - 5.09 (m, 2H), 2.61 - 2.43 (m, 2H), 1.43 (d, J = 6.1 Hz, 3H).<19>F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -64.44 (s, 3F). ESI-MS m/z izračunato 352.9874, pronađeno 354.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.02 minuta. LCMS metoda: Kinetex Polar C18kolona (3.0 X 50 mm, veličina čestica 2.6 µm, trajanje 3 minuta, 5% do 95% acetonitril u vodi (modifikator 0.1% mravlja kiselina), brzina protoka = 1.2 mL/min).
Korak 5: N'-[(2R)-2-benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enoil]-3-bromo-6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi]-5-(trifluorometil) piridin-2-karbohidrazid
[1092]
[1093] U rastvor 3-bromo-6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi]-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilne kiseline (1.709 g, 4.7619 mmol) i (2R)-2-benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enhidrazida (hidrohloridna so) (1.7 g, 5.0184 mmol) u etil acetatu (30 mL) dodat je trietilamin (1.8876 g, 2.6 mL, 18.654 mmol) i rastvor T3P (5.2 mL 50% w/v, 8.1714 mmol) u etil acetatu. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi (20 - 25 °C) tokom 72 sata. Smeša je ugašena zasićenim vodenim rastvorom amonijum hlorida (20 mL). Smeši je dodat etil acetat (70 mL). Faze su razdvojene, i organska faza je isprana zasićenim vodenim rastvorom amonijum hlorida (20 mL) i zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (2 X 20 mL), osu šena preko bezvodnog natrijum sulfata, filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom, dajući, kao belu čvrstu supstancu, N'-[(2R)-2-benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enoil]-3-bromo-6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi]-5-(trifluorometil)piridin-2-karbohidrazid (2.856 g, 94 %). ESI-MS m/z izračunato 637.1011, pronađeno 638.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.14 minuta. LCMS metoda: Luna C18kolona (50 X 3 mm, veličina čestica 3 µm, temperatura = 45 °C, protok = 1.5 mL/min, vreme trajanja gradijenta = 2.5 minuta. Uslovi mobilne faze: Početna 95% voda 0.1% mravlja kiselina / 5% acetonitril 0.1% mravlja kiselina, linearni gradijent do 95% acetonitrila 0.1% mravlja kiselina tokom 1.3 minuta, a zatim držanje 1.2 minuta na 95% acetonitril 0.1% mravlja kiselina.
Korak 6: 2-[(1R)-1-Benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-5-[3-bromo-6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi]-5-(trifluorometil) -2-piridil]-1.3,4-oksadiazol
[1094]
[1095] U rastvor od N'-[(2R)-2-benziloksi-2-(trifluorometil)heks-5-enoil]-3-bromo-6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi]-5-(trifluorometil)piridin-2-karbohidrazida (1.49 g, 2.1753 mmol) u 1.2-dihloretanu (25 mL) i N,N-diizopropiletilaminu (2.59 g, 3.5 mL, 20.04 mmol) je dodat toluensulfonil hlorid (1.3 g, 6.8189 mmol). Reakcija je zatim mešana na 50 °C tokom 22 sata. Reakcija je ohlađena na sobnu temperaturu i volatili su uklonjeni pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen reverzno-faznom hromatografijom (50 gramski C18gel kertridž) korišćenjem gradijenta od 5% - 100% acetonitril u vodi (+ 0.1% v/v mravlje kiseline u vodi). Frakcije koje sadrže proizvod su koncentrovane pod sniženim pritiskom da bi se dobio 2-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-5-[3-bromo-6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi]-5-(trifluorometil)-2-piridil]-1.3,4-oksadiazol (1.3 g, 86 %). ESI-MS m/z izračunato 619.0905, pronađeno 620.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.596 minuta. LCMS metoda: Kinetex Polar C18kolona (3.0 X 50 mm, veličina čestica 2.6 µm, trajanje 3 minuta, 5% do 95% acetonitril u vodi (modifikator 0.1% mravlja kiselina), brzina protoka = 1.2 mL/min).
Korak 7: (6R,12R)-6-Benziloksi-17-bromo-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,9,14,16-heksaen (E/Z smeša)
[1096]
[1097] U azotom prečišćeni rastvor 2-[(1R)-1-benziloksi-1-(trifluorometil)pent-4-enil]-5-[3-bromo-6-[(1R)-1-metilbut-3-enoksi]-5-(trifluorometil)-2-piridil]-1.3,4-oksadiazola (525 mg, 0.7591 mmol) u dihloretanu (350 mL) na 60 °C je dodata prva porcija Zhan katalizatora -1B (25 mg, 0.0341 mmol). Nakon 1 sat, dodata je druga porcija Zhan katalizatora -1B (25 mg, 0.0341 mmol) i zagrevanje je nastavljeno još 1 sat. Dodat je DMSO (2 kapi) i reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu. Volatili su uklonjeni pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen reverzno-faznom hromatografijom (C18kolona, gradijent: 0% do 100% acetonitrila u vodi koja sadrži 0.1% mravlje kiseline). Frakcije koje sadrže proizvod su koncentrovane pod sniženim pritiskom i liofilizovane, što je dalo (6R,12R)-6-benziloksi-17-bromo-12-metil-6,15-bis(trifluoro-metil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,9,14,16-heksaen (E/Z smeša) u obliku braonkaste čvrste materije (210 mg, 47 %). ESI-MS m/z izračunato 591.0592, pronađeno 592.0 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.31 minuta. LCMS metoda: Luna C18kolona (50 X 3 mm, veličina čestica 3 µm, temperatura = 45 °C, protok = 1.5 mL/min, vreme trajanja gradijenta = 2.5 minuta. Uslovi mobilne faze: Inicijalno 95% voda 0.1% mravlja kiselina / 5% acetonitril 0.1% mravlja kiselina, linearni gradijent do 95% acetonitril 0.1% mravlja kiselina tokom 1.3 minuta, a zatim dr žanje 1.2 minuta na 95% acetonitrila 0.1% mravlje kiseline.
Korak 8: Metil (6R,12R)-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,9,14,16-heksaen-17-karboksilat (E/Z smeša)
[1098]
[1099] U rastvor (6R,12R)-6-benziloksi-17-bromo-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,9,14,16-heksana (E/Z smeša) (200 mg, 0.3262 mmol) u bezvodnom metanolu (6 mL) u autoklavu dodat je Pd(dppf)Cl2dihlorometanski adukt (40 mg, 0.0482 mmol) i trietilamin (108.9 mg, 0.15 mL, 1.0762 mmol). Autoklav je prečišćen azotom, a zatim ugljen monoksidom. Smeša je zagrejana na 100 °C, a pritisak ugljen monoksida je podešen na 80 psi. Smeša je mešana 17 sati. Rastvor je ohlađen na 25 °C, prečišćen azotom i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu (kolona 40 g, gradijent: 0% do 20% etil acetata u heptanima) da bi se dobio metil (6R,12R)-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluoro-metil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,9,14,16-heksaen-17-karboksilat (E/Z smeša) (144 mg, 77 %). ESI-MS m/z izračunato 571.1542, pronađeno 572.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.2 minuta. LCMS metoda: Luna C18kolona (50 X 3 mm, Veličina čestica 3 µm, temperatura = 45 °C, protok = 1.5 mL/min, trajanje gradijenta = 2.5 minuta. Uslovi mobilne faze: Inicijalno 95% voda 0.1% mravlja kiselina / 5% acetonitril 0.1% mravlja kiselina, linearni gradijent do 95% acetonitril 0.1% mravlja kiselina tokom 1.3 minuta, a zatim držanje 1.2 minuta na 95% acetonitrila 0.1% mravlje kiseline.
Korak 9: Metil (6R,12R)-6-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-karboksilat
[1100]
[1101] U rastvor metil (6R,12R)-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,9,14,16-heksaen-17-karboksilata (E/Z smeša) (165 mg, 0.2887 mmol) u MeOH (8 mL) u atmosferi azota je dodat paladijum na ugljeniku (62 mg, 10 % tež/tež, 0.0583 mmol). Gasoviti vodonik je barbotiran tokom 5 minuta, i reakcija je me šana na sobnoj temperaturi tokom 24 sata. Smeša je prečišćena azotom, filtrirana preko celita, isprana metanolom (40 mL) i koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobio metil (6R,12R)-6-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-karboksilat (121 mg, 85 %), kao svetlobraon ulje.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.53 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 5.10 - 5.00 (m, 1H), 3.87 (s, 3H), 2.34 - 2.27 (m, 1H), 2.20 - 2.13 (m, 2H), 1.67 - 1.57 (m, 1H), 1.39 (d, J = 6.6 Hz, 9H).<19>F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62.63 (s, 3F), -76.86 (s, 3F). ESI-MS m/z izračunato 483.1229, pronađeno 484.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.99 minuta. LCMS metoda: Luna C18kolona (50 X 3 mm, veličina čestica 3 µm, temperatura = 45 °C, protok = 1.5 mL/min, vreme trajanja gradijenta = 2.5 minuta. Uslovi mobilne faze: Inicijalno 95% voda 0.1% mravlja kiselina / 5% acetonitril 0.1% mravlja kiselina, linearni gradijent do 95% acetonitrila 0.1% mravlja kiselina tokom 1.3 minuta, a zatim je dr žano 1.2 minuta na 95% acetonitrila 0.1% mravlje kiseline, CH3CN 0.1% FA. T: 45 °C, Protok: 1.5 mL/min.
Korak 10: (6R,12R)-6-Hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-karboksilna kiselina, Jedinjenje 75
[1102]
[1103] U rastvor metil (6R,12R)-6-hidroksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-karboksilata (21 mg, 0.0434 mmol) u THF (0.75 mL) je dodat rastvor litijum hidroksid monohidrata (20 mg, 0.4766 mmol) u vodi (0.25 mL). Sme ša je mešana na 0 °C tokom 15 minuta. Smeši je dodat zasićeni vodeni rastvor amonijum hlorida (2 mL) i 10% vodeni rastvor limunske kiseline dok nije postignuto pH = 4. Proizvod je ekstrahovan etil acetatom (3 X 15 mL). Kombinovane organske faze su isprane slanim rastvorom (20 mL), osušene preko natrijum sulfata, filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Prečišćavanje ostatka reverzno-faznom hromatografijom (15.5 g C18kolona, gradijent: 5% do 100% acetonitrila u vodi koja sadrži 0.1% mravlje kiseline) nakon liofilizacije je dalo, kao belu čvrstu supstancu, (6R,12R)-6-hidroksi-12-metil-6,15-bis (trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-17-karboksilnu kiselinu (7.3 mg, 36 %).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 13.96 (br. s., 1H), 8.49 (s, 1H), 7.77 (s, 1H), 5.04 - 4.96 (m, 1H), 2.31 - 2.25 (m, 1H), 2.20 - 2.12 (m, 2H), 1.60 - 1.53 (m, 1H), 1.49 - 1.43 (m, 1H), 1.41 - 1.29 (m, 8H).<19>F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62.63 (s, 3F), -77.03 (s, 3F). ESI-MS m/z izračunato 469.1072, pronađeno 468.1 (M-1)-; Retenciono vreme: 4.69 minuta. LCMS metoda: SunFire C18kolona (75 X 4.6 mm, veličina čestica 3.5 µm, trajanje 6 minuta, uslovi mobilne faze: inicijalno 95% voda 0.1% mravlja kiselina/5% acetonitril 0.1% mravlja kiselina, linearni gradijent do 95% acetonitrila tokom 4 minuta, zatim je držano 2 minuta na 95% acetonitrila, temperatura = 45 °C, protok = 1.5 mL/min).
Primer 53: Priprema (6R,12R)-17-(hidroksimetil)-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ola, Jedinjenje 76
[1104]
Korak 1: [(6R,12R)-6-Benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,9,14,16-heksaen-17-il]metanola (E/Z smeša)
[1105]
[1106] U rastvor (6R,12R)-6-benziloksi-17-bromo-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,9,14,16-heksana (E/Z smeša) (150 mg, 0.2532 mmol) u 1.4-dioksanu (3 mL) je dodat tributilstanilmetanol (163 mg, 0.5077 mmol) i Pd(dppf)Cl2dihlorometanski adukt (30 mg, 0.0367 mmol). Azot je barbotiran tokom 5 minuta. Epruveta je zatvorena i reakciona sme ša je mešana na 95 °C tokom 16 sati. Volatili su uklonjeni pod sniženim pritiskom, a ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (kolona 24 g, gradijent: 0% do 20% etil acetata u heptanima) što je dalo metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18), 2,4,9,14,16-heksaen-17-il]metanol (E/Z smeša) (58 mg, 42%), kao belu čvrstu supstancu.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.08 (s, 1H), 7.36 – 7.28 (m, 5H), 5.67 – 5.57 (m, 1H), 5.54 – 5.44 (m, 1H), 5.07 – 4.93 (m, 2H), 4.92 – 4.82 (m, 1H), 4.81 – 4.72 (m, 2H), 4.05 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 3.67 – 3.58 (m, 1H), 2.80 – 2.68 (m, 1H), 2.48 – 2.40 (m, 2H), 2.36 – 2.25 (m, 1H), 1.90 - 1.81 (m, 1H), 1.53 (s, 3H).<19>F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -63.81 (s, 3F), -73.92 (s, 3F). ESI-MS m/z izračunato 543.1593, pronađeno 544.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.13 minuta. LCMS metoda: Luna C18kolona (50 X 3 mm, veličina čestica 3 µm, temperatura = 45 °C, protok = 1.5 mL/min, trajanje gradijenta = 2.5 minuta. Uslovi mobilne faze: Inicijalno 95% voda 0.1% mravlja kiselina / 5% acetonitril 0.1% mravlja kiselina, linearni gradijent do 95% acetonitrila 0.1% mravlje kiseline tokom 1.3 minuta, a zatim držanje 1.2 minuta na 95% acetonitrila 0.1% mravlje kiseline.
Korak 2: (6R,12R)-17-(Hidroksimetil)-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol, Jedinjenje 76
[1107]
[1108] U rastvor [(6R,12R)-6-benziloksi-12-metil-6,15-bis(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,9,14,16-heksaen-17-il]metanola (E/Z smeša) (69 mg, 0.1268 mmol) u metanolu (5 mL) pod atmosferom azota je dodat paladijum na ugljeniku (30 mg, 10 % te ž/tež, 0.0282 mmol). Azot je barbotiran tokom 5 minuta, a zatim je barbotiran gasoviti vodonik tokom 5 minuta i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 16 sati. Smeša je prečišćena gasovitim azotom, filtrirana preko celita, isprana metanolom (40 mL) i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Prečišćavanjem reverznofaznom hromatografijom (15.5 g C18kolona, gradijent: 5% do 100% acetonitrila u vodi koja sadrži 0.1% mravlje kiseline) dobijen je (6R,12R)-17-(hidroksimetil)-12-metil-6,15-bis(trifluoro-metil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (19.7 mg, 33%) u obliku bele čvrste supstance.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.34 (s, 1H), 7.63 (s, 1H), 5.66 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 5.06 - 4.94 (m, 3H), 2.48 - 2.43 (m, 1H), 2.31 - 2.21 (m, 1H), 2.16 - 2.08 (m, 1H), 1.77 - 1.63 (m, 2H), 1.53 - 1.42 (m, 4H), 1.40 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.32 - 1.22 (m, 1H).<19>F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62.28 (s, 3F), -76.50 (s, 3F). ESI-MS m/z izračunato 455.128, pronađeno 456.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 4.5 minuta. LCMS metoda: SunFire C18kolona (75 X 4.6 mm, veličina čestica 3.5 µm, trajanje 6 minuta, uslovi mobilne faze: inicijalno 95% voda 0.1% mravlja kiselina/5% acetonitril 0.1% mravlja kiselina, linearni gradijent do 95% acetonitrila tokom 4 minuta, zatim držano 2 minuta na 95% acetonitrila, temperatura = 45 °C, protok = 1.5 mL/min).
Primer 54: Priprema (12R)-17-amino-7,7-difluoro-12-metil-15-(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ola (dijastereomer 1), Jedinjenje 77
[1109]
Korak 1: Metil 6-[(1R)-1-metilpent-4-enoksi]-3-nitro-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilat
[1110]
[1111] U suspenziju metil 6-hidroksi-3-nitro-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilata (5 g, 18.675 mmol), (2S)-heks-5-en-2-ola (6.45 g, 46.559 mmol) i trifenilfosfina (10.2 g, 38.889 mmol) u toluenu (150 ml) dodat je u kapima DIAD (9.5 g, 46.981 mmol). Reakciona smeša je mešana na 22 °C preko noći. Trifenilfosfin (1.95 g) je dodat da se ugasi višak DIAD. Smeša je mešana na 22 °C tokom 15 minuta i koncentrovana na silika gelu (50 g). Prečišćavanjem hromatografijom na silika gelu (kolona 220 g; gradijent: 0% do 10% tBuOCH3u heptanima) dobijen je kao bezbojno ulje metil 6-((1R)-(1-metilpent-4-enoksi)-3-nitro-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilat (6.32 g, 92%, > 95% ee),.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.64 (s, 1H), 5.87 - 5.73 (m, 1H), 5.55 - 5.44 (m, 1H), 5.05 - 4.93 (m, 2H), 4.03 (s, 3H), 2.26 - 2.07 (m, 2H), 1.99 - 1.87 (m, 1H), 1.83 - 1.71 (m, 1H), 1.41 (d, J = 6.4 Hz, 3H).<19>F NMR (377 MHz, CDCl3) δ – 64.58 (s, 3F). Retenciono vreme: 4.82 minuta. LCMS metoda: SunFire C18kolona (75 X 4.6 mm, veličina čestica 3.5 µm, trajanje 6 minuta, uslovi mobilne faze: inicijalno 95% voda 0.1% mravlja kiselina/5% acetonitril 0.1% mravlja kiselina,linearni gradijent do 95% acetonitrila tokom 4 min, zatim dr žanje 2 min na 95% acetonitrila, temperatura = 45 °C, protok = 1.5 mL/min). Merenje optičke čistoće je sprovedeno pod sledećim uslovima: Izokratski način rada, Kolona: ChiralCel OJ-H, S/Br.: OJH0CEMJ029, Brzina protoka 1 mL/min. Početni uslovi: 90% heksana DEA: 10% (10% IPA/heksan), Vreme trajanja gradijenta = 16 minuta, injektiranje = 3 µl, Sobna temperatura = 24 °C, Talasna dužina: 215 280 nm.
Korak 2: 6-[(1R)-1-metilpent-4-enoksi]-3-nitro-5-(trifluorometil)piridin-2-karbohidrazid
[1112]
[1113] U rastvor metil 6-[(1R)-1-metilpent-4-enoksi]-3-nitro-5-(trifluorometil)piridin-2-karboksilata (660 mg, 1.8022 mmol) u metanolu (14 mL) u epruveti pod pritiskom dodat je hidrazin monohidrat (670 mg, 13.384 mmol). Epruveta pod pritiskom je isprana azotom i zatvorena. Reakciona smeša je mešana na 80 °C tokom 30 minuta i ohlađena na sobnu temperaturu, a zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom do oko 5 g. Ostatak je prečišćen reverzno faznom hromatografijom (kolona 100 g C18; gradijent: 5% do 80% acetonitrila u vodi). Željene frakcije su koncentrovane pod sniženim pritiskom na 30 °C/38 Torr do pojave belog taloga. Ostatak je ekstrahovan sa tBuOCH3(3 X 30 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (5 mL), osušeni sa Na2SO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobio 6-[(1R)-1-metilpent-4-enoksi]-3-nitro-5-(trifluorometil)piridin-2-karbohidrazid (550 mg, 85 %). ESI-MS m/z izračunato 348.1045, pronađeno 267.2 (M-81)<+>; Retenciono vreme: 4.1 minuta. LCMS metoda: SunFire C18kolona (75 X 4.6 mm, veličina čestica 3.5 µm, trajanje 6 minuta, uslovi mobilne faze: inicijalno 95% voda 0.1% mravlja kiselina/5% acetonitril 0.1% mravlja kiselina, linearni gradijent do 95% acetonitrila tokom 4 minuta, zatim držanje 2 minuta na 95% acetonitrila, temperatura = 45 °C, protok = 1.5 mL/min).
Korak 3: Etil 3,3-difluoro-2-hidroksi-pent-4-enoat
[1114]
[1115] U rastvor 3-bromo-3,3-difluoro-prop-1-ena (4.8 g, 30.582 mmol) i etil 2-oksoacetata u toluenu (5.9 mL 50% w/v, 28.896 mmol) u DMF (60 mL) i vodi (18 mL) na 10 °C dodat je indijum (7 g, 60.966 mmol, samleven pre upotrebe). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Dodata je ledena voda (200 mL). Dobijena smeša je mešana 30 minuta, razblažena sa tBuOCH3(100 mL), filtrirana kroz diatomejsku zemlju i kolač je ispran sa tBuOCH3. Vodena faza je ponovo ekstrahovana sa tBuOCH3(2 X 100 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni sa Na2SO4, filtrirani i koncentrovani. Ostatak (5.8 g) je prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu (gradijent od 50% do 100% dihlorometan/pentan) da bi se dobio etil 3,3-difluoro-2-hidroksi-pent-4-enoat (4.283 g, 82%), kao bezbojno ulje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 6.10 -5.93 (m, 1H), 5.82 - 5.72 (m, 1H), 5.58 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 4.43 - 4.27 (m, 3H), 3.22 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 1.34 (t, J = 7.1 Hz, 3H).<19>F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -107.00 do -107.85 (m, 1F), -108.89 do -109.75 (m, 1F). ESI-MS m/z izračunato 180.0598, pronađeno 181.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.47 minuta. LCMS metoda: Kinetex Polar C18kolona (3.0 X 50 mm, veličina čestica 2.6 µm, trajanje 3 minuta, 5% do 95% acetonitrila u vodi (modifikator 0.1% mravlja kiselina), brzina protoka = 1.2 mL/min).
Korak 4: Etil 2-benziloksi-3,3-difluoro-pent-4-enoat
[1116]
[1117] U rastvor etil 3,3-difluoro-2-hidroksi-pent-4-enoata (2.45 g, 11.832 mmol) u dihlorometanu (19 mL) i bezvodnom heptanu (38 mL) na 0 °C je dodat benzil 2,2,2-trihloroacetimidat (7 g, 27.72 mmol). Sme ša je mešana na 0 °C tokom 5 minuta i u kapima je dodavana triflična kiselina (400 mg, 2.6653 mmol), pri čemu se pojavila velika količina belog taloga. Smeša je ostavljena da se polako zagreje do sobne temperature i mešana je na sobnoj temperaturi (5 - 19 °C) preko noći, a zatim ohlađena na 0 °C. Razblažena je dihlorometanom (50 mL), a zatim je dodat zasićeni NaHCO3(20 mL). Dva sloja su odvojena, a vodeni sloj je ekstrahovan dihlorometanom (2 X 30 mL). Kombinovani organski slojevi su osu šeni sa Na2SO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Prečišćavanjem hromatografijom na silika gelu (gradijent od 0% do 10% etil acetata u heptanima) dobijen je etil 2-benziloksi -3,3-difluoro-pent-4-enoat kao bistro ulje (1.56 g, 46%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.45 - 7.31 (m, 5H), 6.16 - 6.00 (m, 1H), 5.80 -5.71 (m, 1H), 5.56 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.79 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.61 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 4.33 - 4.16 (m, 3H), 1.31 (t, J = 7.1 Hz, 3H).<19>F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -102.91 do -103.81 (m, 1F), -106.39 do -107.27 (m, 1F). Retenciono vreme: 4.4 minuta. LCMS metoda: SunFire C18kolona (75 X 4.6 mm, veličina čestica 3.5 µm, trajanje 6 minuta, uslovi mobilne faze: inicijalno 95% voda 0.1% mravlja kiselina/5% acetonitril 0.1% mravlja kiselina, linearni gradijent 95% acetonitrila tokom 4 minuta, zatim držanje 2 minuta na 95% acetonitrila, temperatura = 45 °C, protok = 1.5 mL/min).
Korak 5: 2-Benziloksi-3,3-difluoro-pent-4-enoična kiselina
[1118]
[1119] U rastvor etil 2-benziloksi-3,3-difluoro-pent-4-enoata (1.55 g, 5.735 mmol) u DCE (60 mL) dodat je trimetilkalaj hidroksid (1.88 g, 10.397 mmol). Smeša je mešana na 82 °C tokom 30 sati i ohlađena na sobnu temperaturu. Dodat je silika gel (8 g). Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, a zatim je prečišćena hromatografijom na silika gelu (gradijent od 0% do 15% metanola u dihlorometanu) daju ći, kao bezbojno ulje, 2-benziloksi-3,3-difluoro-pent-4-ensku kiselinu (1.14 g, 78%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.42 - 7.31 (m, 5H), 6.13 - 5.97 (m, 1H), 5.77 (dt, J = 17.4, 2.2 Hz, 1H), 5.58 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 4.83 -4.70 (m, 2H), 4.25 (t, J = 9.4 Hz, 1H).<19>F NMR (377 MHz, CDCl3) δ – 103.47 do -104.44 (m, 1F), -106.04 do -106.95 (m, 1F). Retenciono vreme: 1.86 minuta. LCMS metoda: Kinetex Polar C18kolona (3.0 X 50 mm, veličina čestica 2.6 µm, trajanje 3 minuta, 5% do 95% acetonitrila u vodi (modifikator 0.1% mravlja kiselina), brzina protoka = 1.2 mL/min).
Korak 6: N'-(2-benziloksi-3,3-difluoro-pent-4-enoil)-6-[(1R)-1-metilpent-4-enoksi]-3-nitro-5-(trifluorometil)piridin-2-karbohidrazid
[1120]
[1121] U rastvor 2-benziloksi-3,3-difluoro-pent-4-enoične kiseline (850 mg, 3.3338 mmol) u dihlorometanu (24 mL) je u kapima dodavan oksalil hlorid (549 mg, 0.3773 mL, 4.3254 mmol), a zatim DMF (291 mg, 0.3083 mL, 3.9812 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata i koncentrovana pod sniženim pritiskom na oko 14 mL. Ostatak je dodavan tokom perioda od 15 minuta u rastvor 6 -[(1R)-1-metilpent-4-enoksi]-3-nitro-5-(trifluorometil) piridin-2-karbohidrazida (1.57 g, 4.3817 mmol) i DIPEA (1.75 g, 2.3585 mL, 13.54 mmol) u dihlorometanu (24 mL) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 sata i ohlađena na 0 °C. Dodat je zasićeni NaHCO3(25 mL). Smeša je ekstrahovana dihlorometanom (3 X 40 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni sa Na2SO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Prečišćavanjem ostatka reverzno-faznom hromatografijom (150 g C18kolona; gradijent: 5% do 95% acetonitrila u vodi) dobijen je kao bledožuto ulje N'-(2-benziloksi-3,3-difluoro-pent-4-enoil)-6-[(1R)-1-metilpent-4-enoksi]-3-nitro-5-(trifluorometil) piridin-2-karbohidrazid (1.32 g, 69%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.35 (s, 1H), 7.43 - 7.32 (m, 5H), 6.11 - 5.95 (m, 1H), 5.88 - 5.71 (m, 2H), 5.57 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 5.50 - 5.39 (m, 1H), 5.05 - 4.94 (m, 2H), 4.86 - 4.76 (m, 2H), 4.23 (t, J = 9.8 Hz, 1H), 2.28 - 2.08 (m, 2H), 2.00 - 1.87 (m, 1H), 1.84 - 1.73 (m, 1H), 1.43 (d, J = 6.1 Hz, 3H). Dva protona hidrazida nisu uočena.<19>F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -64.54 (s, 3F), -104.49 do -105.35 (m, 1F), -106.38 do -107.26 (m, 1F). ESI-MS m/z izračunato 572.1694, pronađeno 573.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.02 minuta. LCMS metoda: Luna C18kolona (50 X 3 mm, veličina čestica 3 µm, temperatura = 45 °C, protok = 1.5 mL/min, vreme trajanja gradijenta = 2.5 minuta. Uslovi mobilne faze: Inicijalno 95% voda 0.1% mravlja kiselina / 5% acetonitril 0.1% mravlja kiselina, linearni gradijent do 95% acetonitrila 0.1% mravlje kiseline tokom 1.3 minuta, a zatim držanje 1.2 minuta na 95% acetonitrila 0.1% mravlje kiseline.
Korak 7: 2-(1-Benziloksi-2,2-difluoro-but-3-enil)-5-[6-[(1R)-1-metilpent-4-enoksi]-3-nitro-5-(trifluorometil)-2-piridil]-1.3,4-oksadiazol
[1122]
[1123] U rastvor N'-(2-benziloksi-3,3-difluoro-pent-4-enoil)-6-[(1R)-1-metilpent-4-enoksi]-3-nitro-5-(trifluorometil)piridin-2-karbohidrazida (573 mg, 0.9739 mmol) u dihlorometanu (17 mL) na 0 °C je dodat DIPEA (761 mg, 1.0256 mL, 5.8881 mmol), a zatim u kapima anhidrid trifluorometansulfonske kiseline (420 mg, 1.4886 mmol). Smeša je mešana na 0 °C tokom 30 minuta. Morfolin (520 mg) je dodat da se reakcija prekine. Smeša je mešana na 0 °C tokom 5 minuta, a zatim je dodat zasićeni NaHCO3(20 mL). Dva sloja su odvojena, i vodeni sloj je ekstrahovan dihlorometanom (2 X 20 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni sa Na2SO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Prečišćavanjem ostatka hromatografijom na silika gelu (gradijent: 0% do 30% etil acetata u heptanima) dobijen je 2-(1-benziloksi-2,2-difluoro-but-3-enil)-5-[6-[(1R)-1-metilpent-4-enoksi]-3-nitro-5-(trifluorometil)-2-piridil]-1.3,4-oksadiazol (430 mg, 80%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.67 (s, 1H), 7.40 - 7.31 (m, 5H), 6.16 - 6.01 (m, 1H), 5.86 - 5.73 (m, 2H), 5.60 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 5.57 - 5.48 (m, 1H), 5.07 (dd, J = 10.0, 7.6 Hz, 1H), 5.03 - 4.93 (m, 2H), 4.81 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 4.60 (d, J = 11.7 Hz, 1H), 2.26 - 2.08 (m, 2H), 2.01 - 1.89 (m, 1H), 1.85 - 1.74 (m, 1H), 1.43 (d, J = 6.4 Hz, 3H).<19>F NMR (377 MHz, CDCl3) δ -64.62 (s, 3F), -103.56 do -104.43 (m, 1F), -107.41 do -108.26 (m, 1F). ESI-MS m/z izračunato 554.1589, pronađeno 555.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.17 minuta. LCMS metoda: Luna C18kolona (50 X 3 mm, veličina čestica 3 µm, temperatura = 45 °C, protok = 1.5 mL/min, vreme trajanja gradijenta = 2.5 minuta. Uslovi mobilne faze: Inicijalno 95% voda 0.1% mravlja kiselina / 5% acetonitril 0.1% mravlja kiselina, linearni gradijent do 95% acetonitrila 0.1% mravlje kiseline tokom 1.3 minuta, a zatim držanje 1.2 minuta na 95% acetonitrila 0.1% mravlje kiseline.
Korak 8: (12R)-6-benziloksi-7,7-difluoro-12-metil-17-nitro-15-(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,8,14,16-heksaen (E/Z smeša, dijastereomer 1)
[1124]
[1125] Osušena tikvica od 1 litar napunjena je sa 2-(1-benziloksi-2,2-difluoro-but-3-enil)-5-[6-[(1R)-1-metilpent-4-enoksi]-3-nitro-5-(trifluorometil)-2-piridil]-1.3,4-oksadiazolom (400 mg, 0.7185 mmol) i DCE (400 mL). Smeša je barbotirana azotom 1 sat, a zatim mešana na 75 °C tokom 10 minuta. Rastvor Grubbsovog katalizatora druge generacije (200 mg, 0.2356 mmol) u DCE (4 mL) brzo je dodat pomoću šprica. Nakon što je smeša mešana na 75 °C tokom 15 minuta, brzo je dodat rastvor Grubbs-ovog katalizatora druge generacije (80 mg, 0.0942 mmol) u DCE (2 mL) pomoću šprica. Smeša je mešana na 75 °C tokom 40 minuta i ohlađena na sobnu temperaturu. Dodat je DMSO (0.3 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 sat, a zatim koncentrovana na silika gelu (2 g). Prečišćavanjem hromatografijom na silika gelu (gradijent: 0 % do 20 % etil acetata u heptanima) dobijen je sirovi produkt (225 mg) koji je dalje prečišćen reverzno faznom hromatografijom (120 g C18kolona; gradijent: 5 % do 95 % acetonitrila u vodi). Željene frakcije su sakupljene i koncentrovane kako bi se uklonila većina acetonitrila. Ostatak je ekstrahovan etil acetatom (3 X 20 mL). Kombinovani organski slojevi su osu šeni sa Na2SO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobio (12R)-6-benziloksi-7,7-difluoro-12-metil-17-nitro-15-(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5] nonadeka-1(18),2,4,8,14,16-heksaen (E/Z smeša, dijastereomer 1) (127 mg, 30 %). Napomena: dobijen je samo jedan hiralni ishod na ugljeniku benzil alkohola, stereohemija tog centra je nepoznata. ESI-MS m/z izra čunato 526.1276, pronađeno 527.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 4.96 minuta. LCMS metoda: SunFire C18kolona (75 X 4.6 mm, veličina čestica 3.5 µm, trajanje 6 minuta, uslovi mobilne faze: inicijalno 95% voda 0.1% mravlja kiselina/5% acetonitril 0.1% mravlja kiselina, linearni gradijent do 95% acetonitrila tokom 4 minuta, zatim držanje 2 minuta na 95% acetonitrila, temperatura = 45 °C, protok = 1.5 mL/min).
Korak 9: (12R)-17-Amino-7,7-difluoro-12-metil-15-(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo [12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol (dijastereomer 1), Jedinjenje 77
[1126]
[1127] U rastvor (12R)-6-benziloksi-7,7-difluoro-12-metil-17-nitro-15-(trifluorometil)-13,19-dioksa- 3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nonadeka-1(18),2,4,8,14,16-heksaena (E/Z smeša, dijastereomer 1) (250 mg, 0.4165 mmol) u metanolu (6 mL) i etil acetatu (2 mL) u tikvici je dodat 10% paladijum na ugljeniku (86 mg, 50% vlaga, 5% tež/tež, 0.0404 mmol). Smeša je ohlađena u ledenom kupatilu. Vazduh u tikvici je dva puta zamenjen azotom uz vakumiranje. Azot u tikvici je pet puta zamenjen vodonikom uz vakumiranje. Amonijak u metanolu (0.4 mL 2 M, 0.8 mmol) je dodat špricem. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 20 sati. Smeša je filtrirana kroz celit, isprana etil acetatom, a filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Prečišćavanjem ostatka hromatografijom na silika gelu pod istim uslovima dva puta uzastopno (gradijent: 0% do 40% etil acetat u heptanima) dobijen je (12R) -17-amino-7,7-difluoro-12-metil-15-(trifluorometil)-13,19-dioksa-3,4,18-triazatriciklo[12.3.1.12,5]nona-deka -1(18), 2,4,14,16-pentaen-6-ol (dijastereomer 1) (76 mg, 44 %).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.75 (s, 1H), 7.21 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 6.27 (s, 2H), 5.24 - 5.15 (m, 1H), 5.01 - 4.90 (m, 1H), 2.32 - 2.09 (m, 3H), 2.04 - 1.87 (m, 1H), 1.75 - 1.62 (m, 1H), 1.59 - 1.47 (m, 1H), 1.45 - 1.37 (m, 1H), 1.34 (d, J = 6.4 Hz, 3H), 1.32 - 1.22 (m, 1H).
<19>F NMR (377 MHz, DMSO-d6) δ -62.41 (s, 3F), -92.20 do -93.10 (m, 1F), -99.62 do -100.68 (m, 1F). ESI-MS m/z izračunato 408.1221, pronađeno 409.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 4.42 minuta. LCMS metoda: SunFire C18kolona (75 X 4,6 mm, veličina čestica 3.5 µm, trajanje 6 minuta, uslovi mobilne faze: inicijalno 95% voda 0.1% mravlja kiselina/5% acetonitril 0.1% mravlja kiselina, linearni gradijent do 95% acetonitrila tokom 4 min, zatim držanje 2 min na 95% acetonitrila, temperatura = 45 °C, protok = 1.5 mL/min).
Primer 55: Test bioaktivnosti
Test CFTR-posredovanih struja kratkog spoja u Ussing komori
[1128] Eksperimenti u Ussing komori izvedeni su korišćenjem ćelija ljudskog bronhijalnog epitela (HBE) izvedenih od CF subjekata heterozigotnih za F508del i CFTR mutaciju minimalne funkcije (F508del/MF-HBE) i kultivisanih kao što je prethodno opisano (Neuberger T, Burton B, Clark H, Van Goor F Methods Mol Biol 2011:741:39-54). Nakon četiri dana, apikalni medijum je uklonjen, i ćelije su gajene na granici vazduh-tečnost više od 14 dana pre upotrebe. To je rezultiralo monoslojem potpuno diferenciranih stubastih ćelija koje su bile cilirane, što su svojstva karakteristična za ljudski bronhijalni epitel disajnih puteva.
[1129] Da bi se izolovala CFTR-posredovana struja kratkog spoja (ISC), F508del/MF-HBE gajen na Costar® Snapwell™ insertima za ćelijsku kulturu je postavljen u Ussing komoru i merena je transepitelna Isc u uslovima snimanja naponskom stezaljkom (voltage-clamp) (Vhold= 0 mV) na 37 °C. Bazolateralni rastvor je sadržao (u mM) 145 NaCl, 0.83 K2HPO4, 3.3 KH2PO4, 1.2 MgCl2, 1.2 CaCl2, 10 Glukoze, 10 HEPES (pH podešen na 7.4 sa NaOH), a apikalni rastvor je sadržao (u mM) 145 NaGlukonata, 1.2 MgCl2, 1.2 CaCl2, 10 glukoze, 10 HEPES (pH podešen na 7.4 sa NaOH) i 30 µM amilorida za blokiranje epitelnog natrijumskog kanala. Forskolin (20 µM) je dodat na apikalnu površinu kako bi se aktivirao CFTR, nakon čega je usledilo apikalno dodavanje koktela CFTR-inhibitora koji se sastojao od BPO, GlyH -101 i CFTR inhibitora 172 (svaki u finalnoj koncentraciji od 20 µM) kako bi se specifično izolovale CFTR struje. CFTR-posredovan ISC(µA/cm<2>) za svako stanje je određen iz pika odgovora forskolina na struju u stabilnom stanju nakon inhibicije.
Identifikacija Jedinjenja Potencijatora
[1130] Aktivnost jedinjenja CFTR- potencijatora na CFTR-posredovanu ISCje određena u studijama Ussing komore kao što je gore opisano. Ćelijske kulture F508del/MF-HBE su inkubirane sa jedinjenjima potencijatorima u različitim koncentracijama u kombinaciji sa 10 µM (14S) -8-[3-(2-{dispiro [2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2λ6-tia-3,9,11.18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111.14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trionom tokom 18-24 sata na 37 °C i u prisustvu 20% humanog seruma. Koncentracija jedinjenja potencijatora i (14S) -8-[3-(2-{dispiro [2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2λ6-tia-3,9,11.18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111.14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-triona korišćenih tokom inkubacije od 18-24 sata je održavana konstantnom tokom merenja CFTR-posredovane ISCu Ussing komori kako bi se osiguralo prisustvo jedinjenja tokom celog eksperimenta. Efikasnost i potentnost pretpostavljenih F508del potencijatora je upoređena sa onom poznatog Vertex potencijatora, ivakaftora (N -[2,4-bis(1.1-dimetiletil)-5-hidroksifenil]-1.4-dihidro-4-oksohinolin-3-karboksamid).
[1131] Tabela 12 i Tabela 13 predstavljaju aktivnost modulacije CFTR za reprezentativna jedinjenja iz pronalaska generisanu korišćenjem testa opisanog u ovom primeru (EC50: ++ je < 500 nM; + je 500 nM - 1 µM; je > 1 µM; a ND je "nije određeno u ovom testu").
Ĩnastavak)
Ĩnastavak) Ĩnastavak)
Ĩnastavak)
Ĩnastavak)
Ĩnastavak)
Ĩnastavak)
Ĩnastavak)
Ĩnastavak)
Ĩnastavak)
Ĩnastavak)
Ĩnastavak)
Ĩnastavak)
(nastavak)
Druge realizacije
[1132] Prethodna diskusija otkriva i opisuje samo primere realizacije ovog pronalaska. Stru čnjak u ovoj oblasti će lako prepoznati iz takve diskusije i iz priloženih crteža i zahteva da se u njima mogu napraviti različite izmene, modifikacije i varijacije bez odstupanja od obima ovog pronalaska kako je definisano u patentnim zahtevima.

Claims (21)

  1. Patentni zahtevi 1. Jedinjenje odabrano od jedinjenja Formule I:
    i njegovi deuterisani derivati i farmaceutski prihvatljive soli, pri čemu: X je odabrano od -O-, -S-, -SO- i -SO2-; svako Y je nezavisno odabrano od -C(R<Y>)2-, -O-, -CO-, i
    svako R<Y>je nezavisno odabrano od vodonika, halogena, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno odabrane od hidroksi i Q), C3-C8cikloalkila, C6-C10arila, 5- do 10-članog heteroarila, -OR<Y1>, -CO2R<Y1>, -COR<Y1>, -CON(R<Y1>)2i -NR<Y1>-; ili dve varijante R<Y>na istom atomu su uzete zajedno da formiraju prsten odabran od C3-C8cikloalkila i 3- do 6-članog heterociklila; ili dve varijante R<Y>, od kojih je jedna na jednom atomu, a druga na susednom atomu, su uzete zajedno da formiraju pi vezu; svaki R<Y1>je nezavisno odabran od vodonika i C1-C6alkila, ili dve varijante R<Y1>vezane za isti azot uzete zajedno da formiraju 3- do 6-člani heterociklil; Prsten B je odabran od: § C6-C10arila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno odabrane od halogena, C1-C6alkila i C1-C6alkoksi), § C3-C8cikloalkila, § 5- do 10-članog heteroarila i § 3- do 6-članog heterociklila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno odabrane od C1-C6alkila); svaki Q je nezavisno odabran od: § C1-C6alkila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno odabrane od: o halogena, o okso, o C6-C10arila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno odabrane od halogena i -OCF3), i o C3-C8cikloalkila, § C3-C8cikloalkila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno odabrane od: o halogena, o CN, o C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno odabrane od halogena, -NH2i -NHCOMe), o C1-C6alkoksi, o C6-C10arila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno odabrane od C1-C6alkila), i o C3-C8cikloalkila, § C6-C10arila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno odabrane od: o halogena, o CN, o C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno odabrane od halogena i hidroksi), o C1-C6alkoksi opciono supstituisanog sa 1-4 grupe nezavisno odabrane od: § halogena, § C3-C8cikloalkila (opciono supstituisanog sa CF3), o C3-C8cikloalkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno odabrane od halogena, CF3, OCF3i C1-C6alkila), i o C6-C10arila, § 5- do 10-člani heteroarila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno odabrane od: o halogena, o C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno odabrane od halogena), o C3-C8cikloalkila (opciono supstituisanog sa 1-3 CF3grupe), i o 3- do 10-članog heterociklila, § 3- do 10-članog heterociklila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno odabrane od: o C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno odabrane od okso i C3-C8cikloalkila), i o okso; svaki R<1>je nezavisno odabran od halogena, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupe nezavisno odabrane od halogena i hidroksi), -OR<2>, -N(R<2>)2, -CO2R<2>, -CO-N(R<2>)2, -CN, fenila, benzila, C1-C6alkoksi, C3-C8cikloalkila, 5- do 6-članog heteroarila, 3- do 6-članog heterociklila, -SO2R<2>, -SR<2>, -SOR<2>, -PO(OR<2>)2i -PO(R<2>)2; svaki R<2>je nezavisno odabran od vodonika, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno odabranih iz halogena) i C6-C10arila (opciono supstituisanog sa C1-C6alkoksi, koji je opciono supstituisan sa 1-6 grupe nezavisno odabrane iz halogena); Z je odabrano od
    pri čemu je Prsten C odabran od C6-C10arila i 5- do 10-članog heteroarila; R<Z1>je odabran od vodonika, -CN, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno odabranih od halogena ili 1-3 hidroksi), 3- do 6-članog heterociklila, 3- do 6-članog cikloalkila, 5-do 6-članog arila i 5- do 6-članog heteroarila; R<Z2>je odabran od vodonika, halogena i hidroksi grupe, ili R<Z1>i R<Z2>su uzeti zajedno da formiraju grupu odabranu od okso i =N-OH; svaki R<Z3>je nezavisno odabran od hidroksi, C1-C6alkoksi, C1-C6alkila, C1-C6haloalkila i C6-C10arila; ili dve varijante R<Z3>su uzete zajedno da formiraju 3- do 6-člani heterociklil; n je odabrano od 4, 5, 6, 7 i 8; a m je odabrano od 0, 1, 2 i 3.
  2. 2. Jedinjenje, deuterisani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema patentnom zahtevu 1, pri čemu X je -O-.
  3. 3. Jedinjenje, deuterisani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema patentnom zahtevu 1 ili patentnom zahtevu 2, pri čemu: (a) svaki R<Y>je nezavisno odabran od vodonika, halogena, C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno odabrane od hidroksi i Q), C3-C8cikloalkila i -OR<Y1>; ili (b) svaki R<Y>je nezavisno odabran od: vodonika, fluora,
  4. 4. Jedinjenje, derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojem od patentnih zahteva od 1 do 3, pri čemu n je odabrano od 4, 5 i 6; i/ili pri čemu -(Y)n- je grupa odabrana od:
  5. 5. Jedinjenje, deuterisani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojem od patentnih zahteva do 1 do 4, pri čemu svaki R<1>je nezavisno odabran od C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno odabranih od halogena i hidroksi), -N(R<2>)2i -CO2R<2>; i/ili pri čemu svaki R<2>je nezavisno odabran od vodonika i C1-C6alkila.
  6. 6. Jedinjenje, deuterisani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojem od patentnih zahteva od 1 do 5, pri čemu svaki R<1>je nezavisno odabran od -CF3, -NH2, -NH(CH2CH3), CO2H i CH2OH.
  7. 7. Jedinjenje, deuterisani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojem od patentnih zahteva od 1 do 6, pri čemu: (a) Z je odabran od
    i/ili (b) R<Z1>je odabran od vodonika i C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe odabrane od halogena); i/ili (c) R<Z1>je odabran od vodonika i -CF3; i/ili (d) R<Z2>je hidroksi; i/ili (e) Z je odabran od:
    i/ili (f) m je odabrano od 1 i 2; i/ili (g) X je -O-; svaki Y je nezavisno odabran od -C(R<Y>)2-, -O-, i
    svaki R<Y>je nezavisno odabran od vodonika i C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno odabrane od hidroksi i Q); Prsten B je odabran od C3-C8cikloalkil grupa: svaki Q je nezavisno odabrani od: C3-C8cikloalkila i C6-C10arila opciono supstituisanog sa 1-3 grupe nezavisno odabrane od halogena i C1-C6alkila, svaki R<1>je nezavisno odabran od C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno odabranih od halogena) i -NH2; Z je
    R<Z1>je odabran od C1-C6alkila (opciono supstituisanog sa 1-6 grupa nezavisno odabranih od halogena); R<Z2>je hidroksi; n je odabrano od 5 i 6; i m je 2.
  8. 8. Jedinjenje, deuterisani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojem od patentnih zahteva od 1 do 7, pri čemu: (a) svaki R<Y>je nezavisno odabran od: vodonika,
    i/ili (b) -(Y)n- je grupa odabrana od:
    i/ili (c) R<Z1>je -(CF3); i/ili (d) n je 6.
  9. 9. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1 odabrano od:
    njihove farmaceutski prihvatljive soli i deuterizovani derivati bilo kojeg od navedenog; opciono pri čemu je jedinjenje:
    njegove farmaceutski prihvatljivе soli i deuterizovani derivati bilo kojeg od navedenog.
  10. 10. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, odabrano od:
    njegove farmaceutski prihvatljive soli i deuterizovani derivati bilo kojeg od navedenog; opciono pri čemu je jedinjenje:
    njegove farmaceutski prihvatljive soli i deuterizovani derivati bilo kojeg od navedenog.
  11. 11. Farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje, deuterovani derivat ili farmaceutski prihvatljivu so iz bilo kojeg od patentnih zahteva od 1 do 10 i farmaceutski prihvatljiv nosač.
  12. 12. Farmaceutska kompozicija prema patentnom zahtevu 11, koja dodatno sadr ži jedan ili više dodatnih terapeutskih agensa; opciono pri čemu jedan ili više dodatnih terapeutskih agensa sadrže jedinjenje sa CFTR modulišućom aktivnošću ili njegovu so ili deuterisani derivat; i/ili pri čemu jedan ili više dodatnih terapeutskih agensa sadrže CFTR korektor.
  13. 13. Farmaceutska kompozicija prema patentnom zahtevu 12, pri čemu jedan ili više dodatnih terapeutskih agensa obuhvataju: (a) (R)-1-(2,2-difluorobenzo[d][1.3]dioksol-5-il)-N-(1-(2,3-dihidroksipropil)-6-fluoro-2-(1-hidroksi-2-metilpropan-2-il)-1H-indol-5-il)ciklopropankarboksamid (Jedinjenje II):
    i/ili (b) 3-(6-(1-(2,2-difluorobenzo[d][1.3]dioksol-5-il)ciklopropankarboksamido)-3-metilpiridin-2-il) benzojevu kiselinu (Jedinjenje IV):
    (c) N-(1.3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (Jedinjenje V):
    i/ili (d) N-(benzensulfonil)-6-[3-[2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (Jedinjenje VI):
    i/ili (e) (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2λ6-tia-3,9,11,18,23-pentaaza-tetraciklo [17.3.1.111.14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje VII):
    i/ili (f) (11R)-6-(2,6-dimetilfenil)-11-(2-metilpropil)-12-{spiro[2.3]heksan-5-il}-9-oksa-2λ6-tia-3,5,12,19-tetraazatriciklo[ 12.3.1.14,8]nonadeka-1(17),4(19),5,7,14(18),15-heksaen-2,2,13-trion (Jedinjenje VIII):
    i/ili (g) najmanje jedno jedinjenje odabrano iz PTI-428, ABBV-2222, ABBV-2851. GLPG2737, ABBV-3221. ABBV-3748, ABBV-3903, ABBV-119 i PTI-801.
  14. 14. Jedinjenje, deuterisani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kojem od patentnih zahteva od 1 do 10 ili farmaceutska kompozicija prema bilo kojem od patentnih zahteva 11 do 13 za upotrebu u postupku lečenja cistične fibroze, koji obuhvata davanje pacijentu kojem je to potrebno efikasne koli čine navedenog jedinjenja, deuterisanog derivata, farmaceutski prihvatljive soli ili farmaceutske kompozicije.
  15. 15. Jedinjenje, deuterisani derivat, farmaceutski prihvatljiva so ili farmaceutska kompozicija za upotrebu prema patentnom zahtevu 14, koje dodatno obuhvata davanje jednog ili vi še dodatnih terapeutskih agensa; opciono pri čemu jedan ili više dodatnih terapeutskih agensa sadrže jedinjenje sa CFTR modulišućom aktivnošću ili njegovu so ili deuterisani derivat; i/ili pri čemu jedan ili više dodatnih terapeutskih agensa sadrže CFTR korektor.
  16. 16. Jedinjenje, deuterisani derivat, farmaceutski prihvatljiva so ili farmaceutska kompozicija za upotrebu prema patentnom zahtevu 15, pri čemu jedan ili više dodatnih terapeutskih agensa obuhvataju: (a) (R)-1-(2,2-difluorobenzo[d][1.3]dioksol-5-il)-N-(1-(2,3-dihidroksipropil)-6-fluoro-2-(1-hidroksi-2-metilpropan-2-il)-1H-indol-5-il)ciklopropankarboksamid (Jedinjenje II):
    i/ili (b) 3-(6-(1-(2,2-difluorobenzo[d][1.3]dioksol-5-il)ciklopropankarboksamido)-3-metil-piridin- 2-il)benzojevu kiselinu (Jedinjenje IV):
    i/ili (c) N-(1.3-dimetilpirazol-4-il)sulfonil-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4- trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (Jedinjenje V):
    i/ili (d) N-(benzensulfonil)-6-[3-[2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]-2-[(4S)-2,2,4-trimetilpirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (Jedinjenje VI): i/ili
    i/ili (e) (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2λ6-tia-3,9,11.18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111.14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje VII):
    i/ili (f) (11R)-6-(2,6-dimetilfenil)-11-(2-metilpropil)-12-{spiro[2.3]heksan-5-il}-9-oksa-2λ<6>-tia-3,5, 12,19-tetraazatriciklo[12.3.1.14,8]nonadeka-1(17),4(19),5,7,14(18),15-heksaen-2,2,13-trion (Jedinjenje VIII):
    i/ili (g) najmanje jedno jedinjenje odabrano od PTI-428, ABBV-2222, ABBV-2851, GLPG2737, ABBV-3221. ABBV-3748, ABBV-3903, ABBV-119 i PTI-801.
  17. 17. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1 formule:
    njegov deuterisani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so bilo kojeg od prethodno navedenog.
  18. 18. Farmaceutska kompozicija koji sadrži jedinjenje, deuterisani derivat ili farmaceutski prihvatljivu so prema patentnom zahtevu 17 i farmaceutski prihvatljiv nosač.
  19. 19. Farmaceutska kompozicija prema patentnom zahtevu 18, koja dodatno sadr ži jedan ili više dodatnih terapeutskih agensa.
  20. 20. Jedinjenje, deuterisani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so prema patentnom zahtevu 17 ili farmaceutska kompozicija prema patentnom zahtevu 18, za upotrebu u postupku le čenja cistične fibroze, koji obuhvata davanje efikasne količine navedenog jedinjenja, deuterisanog derivata, farmaceutski prihvatljive soli ili farmaceutske kompozicije pacijentu kojem je to potrebno.
  21. 21. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 20, pri čemu postupak dodatno obuhvata davanje jednog ili više dodatnih terapeutskih agensa.
RS20250633A 2020-08-07 2021-08-06 Modulatori transmembranskog regulatora provodljivosti cistične fibroze RS66953B1 (sr)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US202063063194P 2020-08-07 2020-08-07
PCT/US2021/044895 WO2022032068A1 (en) 2020-08-07 2021-08-06 Modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator
EP21763444.3A EP4192829B1 (en) 2020-08-07 2021-08-06 Modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS66953B1 true RS66953B1 (sr) 2025-07-31

Family

ID=77595627

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20250633A RS66953B1 (sr) 2020-08-07 2021-08-06 Modulatori transmembranskog regulatora provodljivosti cistične fibroze

Country Status (36)

Country Link
US (2) US12269831B2 (sr)
EP (1) EP4192829B1 (sr)
JP (1) JP7860075B2 (sr)
KR (1) KR20230066348A (sr)
CN (1) CN116171154A (sr)
AR (1) AR123183A1 (sr)
AU (1) AU2021322301A1 (sr)
CA (1) CA3190583A1 (sr)
CL (1) CL2023000375A1 (sr)
CO (1) CO2023002072A2 (sr)
CR (1) CR20230120A (sr)
DK (1) DK4192829T3 (sr)
DO (1) DOP2023000024A (sr)
EC (1) ECSP23015370A (sr)
ES (1) ES3032183T3 (sr)
FI (1) FI4192829T3 (sr)
GE (2) GEAP202516158A (sr)
HR (1) HRP20250694T1 (sr)
HU (1) HUE071975T2 (sr)
IL (1) IL300224B2 (sr)
JO (1) JOP20230022A1 (sr)
LT (1) LT4192829T (sr)
MA (1) MA60597B1 (sr)
MD (1) MD4192829T2 (sr)
MX (1) MX2023001465A (sr)
PE (1) PE20231377A1 (sr)
PH (1) PH12023550238A1 (sr)
PL (1) PL4192829T3 (sr)
PT (1) PT4192829T (sr)
RS (1) RS66953B1 (sr)
SI (1) SI4192829T1 (sr)
SM (1) SMT202500214T1 (sr)
TW (1) TWI908847B (sr)
UY (1) UY39374A (sr)
WO (1) WO2022032068A1 (sr)
ZA (1) ZA202301228B (sr)

Families Citing this family (27)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RS64018B1 (sr) 2018-02-15 2023-03-31 Vertex Pharma Makrocikli kao modulatori transmembranskog regulatora provodnosti cistične fibroze, njihove farmaceutske kompozicije, njihova upotreba u lečenju cistične fibroze i proces njihove izrade
TWI848092B (zh) 2019-04-03 2024-07-11 美商維泰克斯製藥公司 囊腫纖維化跨膜傳導調節蛋白調節劑
US11873300B2 (en) 2019-08-14 2024-01-16 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Crystalline forms of CFTR modulators
TWI899097B (zh) 2019-08-14 2025-10-01 美商維泰克斯製藥公司 製備cftr調節劑之方法
TWI867024B (zh) 2019-08-14 2024-12-21 美商維泰克斯製藥公司 囊腫纖維化跨膜傳導調節蛋白之調節劑
MX2022005810A (es) 2019-11-12 2022-06-08 Genzyme Corp Heteroarilaminosulfonamidas de 6 miembros para tratar enfermedades y afecciones mediadas por la actividad de regulador de la conductancia transmembrana de la fibrosis quistica (cftr) deficiente.
WO2021113809A1 (en) 2019-12-05 2021-06-10 Genzyme Corporation Arylamides and methods of use thereof
WO2021113808A1 (en) 2019-12-05 2021-06-10 Genzyme Corporation Cftr-modulating arylamides
WO2021113806A1 (en) 2019-12-05 2021-06-10 Genzyme Corporation Arylamides and methods of use thereof
CR20230120A (es) 2020-08-07 2023-09-01 Vertex Pharma Moduladores del regulador de la conductancia transmembrana de la fibrosis quística
WO2022036060A1 (en) 2020-08-13 2022-02-17 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Crystalline forms of cftr modulators
US12612416B2 (en) 2020-10-07 2026-04-28 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator
US12324802B2 (en) 2020-11-18 2025-06-10 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator
MX2023006770A (es) 2020-12-10 2023-08-14 Vertex Pharma Metodos de tratamiento para fibrosis quistica.
CN119095597A (zh) 2022-02-03 2024-12-06 弗特克斯药品有限公司 治疗囊性纤维化的方法
US20250320226A1 (en) 2022-02-03 2025-10-16 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Methods of preparing and crystalline forms of (6a,12a)-17-amino-12-methyl-6,15-bis(trifluoromethyl)-13,19-dioxa-3,4,18-triazatricyclo[12.3.1.12,5]nonadeca-1(18),2,4,14,16-pentaen-6-ol
CA3251045A1 (en) * 2022-02-08 2023-08-17 Vertex Pharmaceuticals Incorporated MODULATORS OF THE TRANSMEMBRANE CONDUCTANCE REGULATOR IN CYSTIC FIBROSIS
PE20250606A1 (es) 2022-04-06 2025-02-26 Vertex Pharma Moduladores del regulador de la conductancia transmembrana de la fibrosis quistica
US20250340568A1 (en) * 2022-05-16 2025-11-06 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Solid forms of a macrocyclic compounds as cftr modulators and their preparation
AU2023273614A1 (en) * 2022-05-16 2024-11-07 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Methods of treatment for cystic fibrosis
IL319374A (en) 2022-09-07 2025-05-01 Sionna Therapeutics Inc Macrocyclic compounds, compositions and methods of using them
WO2024054845A1 (en) * 2022-09-07 2024-03-14 Sionna Therapeutics Macrocycic compounds, compositions, and methods of using thereof
WO2024054851A1 (en) * 2022-09-07 2024-03-14 Sionna Therapeutics Macrocyclic compounds, compositions and methods of using thereof
WO2024097355A1 (en) * 2022-11-02 2024-05-10 Vicinitas Therapeutics, Inc. Deubiquitinase-targeting chimeras and related methods
IL327468A (en) 2023-10-04 2026-05-01 Vertex Pharma Solid forms of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator
CN122374316A (zh) 2023-10-04 2026-07-10 弗特克斯药品有限公司 囊性纤维化跨膜传导调控因子的调节剂
AU2024397852A1 (en) * 2023-12-15 2026-07-02 Sionna Therapeutics Inc. Compounds, compositions, and methods of using thereof

Family Cites Families (147)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR20050044450A (ko) 2001-11-14 2005-05-12 테바 파마슈티컬 인더스트리즈 리미티드 로사르탄 칼륨의 무정형 및 결정형 형태 및 이의 제조 방법
WO2004058717A1 (en) 2002-12-20 2004-07-15 X-Ceptor Therapeutics, Inc. Isoquinolinone derivatives and their use as therapeutic agents
EP1601657A1 (en) 2003-03-12 2005-12-07 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pyrazole modulators of atp-binding cassette transporters
ATE440825T1 (de) 2003-06-06 2009-09-15 Vertex Pharma Pyrimidin-derivate zur verwendung als modulatoren von atp-bindende kassette transportern
US7973169B2 (en) 2003-09-06 2011-07-05 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of ATP-Binding Cassette transporters
US7598412B2 (en) 2003-10-08 2009-10-06 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of ATP-binding cassette transporters
CN101675928A (zh) 2003-11-14 2010-03-24 沃泰克斯药物股份有限公司 可用作atp-结合弹夹转运蛋白调控剂的噻唑和噁唑
US7977322B2 (en) 2004-08-20 2011-07-12 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of ATP-binding cassette transporters
BRPI0507278A (pt) 2004-01-30 2007-06-26 Vertex Pharma moduladores dos transportadores do cassete de ligação ao atp
US8354427B2 (en) 2004-06-24 2013-01-15 Vertex Pharmaceutical Incorporated Modulators of ATP-binding cassette transporters
CA2881078C (en) 2004-06-24 2018-10-02 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of atp-binding cassette transporters
US20140343098A1 (en) 2004-06-24 2014-11-20 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of atp-binding cassette transporters
JP5385605B2 (ja) 2005-03-11 2014-01-08 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド Ａｔｐ結合カセットトランスポーターのモジュレーター
CA2609392A1 (en) 2005-05-24 2006-11-30 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of atp-binding cassette transporters
RU2008109031A (ru) 2005-08-11 2009-09-20 Вертекс Фармасьютикалз Инкорпорейтед (Us) Модуляторы муковисцидозного трансмембранного регулятора проводимости
CA2624683A1 (en) 2005-10-06 2007-04-19 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of atp-binding cassette transporters
US20120232059A1 (en) 2005-11-08 2012-09-13 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of ATP-Binding Cassette Transporters
PT2404919E (pt) 2005-11-08 2013-10-22 Vertex Pharma Composto heterocíclico útil como um modulador de transportadores de cassete de ligação a atp
WO2007075901A2 (en) 2005-12-24 2007-07-05 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Quinolin- 4 - one derivatives as modulators of abc transporters
AU2006331565A1 (en) 2005-12-27 2007-07-05 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Compounds useful in CFTR assays and methods therewith
EP2016065B1 (en) 2005-12-28 2012-09-19 Vertex Pharmaceuticals Incorporated 1-(benzo[d][1,3]dioxol-5-yl)-n-(phenyl)cyclopropane-carboxamide derivatives and related compounds as modulators of atp-binding cassette transporters for the treatment of cystic fibrosis
US7671221B2 (en) 2005-12-28 2010-03-02 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of ATP-Binding Cassette transporters
LT1993360T (lt) 2005-12-28 2017-06-12 Vertex Pharmaceuticals Incorporated N-[2,4-bis(1,1-dimetiletil)-5-hidroksifenil]-1,4-dihidro-4-oksochinolin-3-karboksamido kieta forma
WO2007109605A2 (en) 2006-03-20 2007-09-27 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pharmaceutical compositions
JP2009530415A (ja) 2006-03-20 2009-08-27 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド 医薬組成物
US10022352B2 (en) 2006-04-07 2018-07-17 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of ATP-binding cassette transporters
US7645789B2 (en) 2006-04-07 2010-01-12 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Indole derivatives as CFTR modulators
JP5420395B2 (ja) 2006-04-07 2014-02-19 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド Ａｔｐ結合カセット輸送体の調節剤
ATE534383T1 (de) 2006-05-12 2011-12-15 Vertex Pharma Zusammensetzungen aus n-ä2,4-bis(1,1- dimethylethyl)-5-hydroxyphenylü-1,4-dihydro-4- oxochinolin-3-carboxamid
US8563573B2 (en) 2007-11-02 2013-10-22 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Azaindole derivatives as CFTR modulators
MX2009004702A (es) 2006-11-03 2009-06-19 Vertex Pharma Derivados de azaindol como moduladores del regulador de conductancia de transmembrana de fibrosis quistica.
US7754739B2 (en) 2007-05-09 2010-07-13 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of CFTR
PT2118074E (pt) 2007-02-01 2014-03-20 Resverlogix Corp Compostos para a prevenção e tratamento de doenças cardiovasculares
EP2164840A2 (en) 2007-05-09 2010-03-24 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of cftr
CN101687883B (zh) 2007-05-25 2012-05-23 沃泰克斯药物股份有限公司 囊性纤维化跨膜传导调节因子的调节剂
US20110177999A1 (en) 2007-08-09 2011-07-21 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Therapeutic Combinations Useful in Treating CFTR Related Diseases
CA2696298C (en) 2007-08-24 2016-09-06 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator
RU2010114732A (ru) 2007-09-14 2011-10-20 Вертекс Фармасьютикалз Инкорпорейтед (Us) Твердые формы n-[2,4-бис(1,1-диметилэтил)-5-гидроксифенил]-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоксамида
NZ583878A (en) 2007-09-14 2012-10-26 Vertex Pharma Modulators of ABC transporter and cystic fibrosis transmembrane conductance regulator (CFTR)
CN102743385B (zh) 2007-11-16 2014-09-17 沃泰克斯药物股份有限公司 Atp结合盒转运蛋白的异喹啉调节剂
HUE049642T2 (hu) 2007-12-07 2020-09-28 Vertex Pharma 3-(6-(1-(2,2-Difluorbenzo[d][1,3]dioxol-5-il)-ciklopropánkarboxamido)-3-metilpiridin-2-il)-benzoesav szilárd formái
CA2989620C (en) 2007-12-07 2022-05-03 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Processes for producing cycloalkylcarboxamido-pyridine benzoic acids
AU2008335439A1 (en) 2007-12-07 2009-06-18 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Formulations of 3-(6-(1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioxol-5-yl) cyclopropanecarboxamido)-3-methylpyridin-2-yl)benzoic acid
US20100036130A1 (en) 2007-12-07 2010-02-11 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Processes for producing cycloalkylcarboxamido-pyridine benzoic acids
ES2422741T3 (es) 2007-12-13 2013-09-13 Vertex Pharma Moduladores del regulador de la conductancia transmembrana de la fibrosis quística
CA2716109C (en) 2008-02-28 2016-07-19 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Heteroaryl derivatives as cftr modulators
NZ616097A (en) 2008-03-31 2015-04-24 Vertex Pharma Pyridyl derivatives as cftr modulators
US20100256184A1 (en) 2008-08-13 2010-10-07 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pharmaceutical composition and administrations thereof
US20100074949A1 (en) 2008-08-13 2010-03-25 William Rowe Pharmaceutical composition and administration thereof
RS56894B1 (sr) 2008-08-13 2018-04-30 Vertex Pharma Farmaceutska kompozicija n-[2,4-bis(1,1-dimetiletil)-5-hidroksifenil]-1,4-dihidro-4-oksohinolin-3-karboksamida i njeno ordiniranje
WO2010037066A2 (en) 2008-09-29 2010-04-01 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Dosage units of 3-(6-(1-(2,2-difluorobenzo [d] [1,3] dioxol-5-yl) cyclopropanecarboxamido)-3-methylpyridin-2-yl)benzoic acid
US20110257223A1 (en) 2008-10-23 2011-10-20 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance Regulator
NZ592504A (en) 2008-10-23 2013-04-26 Vertex Pharma Solid forms of n-(4-(7-azabicyclo[2.2.1]heptan-7-yl)-2-(trifluoromethyl)phenyl)-4-oxo-5-(trifluoromethyl)-1,4-dihydroquinoline-3-carboxamide
US8314239B2 (en) 2008-10-23 2012-11-20 Vertex Pharmaceutical Incorporated Modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator
MX2011004375A (es) 2008-10-23 2013-03-07 Vertex Pharma Moduladores del regulador de conductancia transmembrana de fibrosis quistica.
KR20160013251A (ko) 2008-11-06 2016-02-03 버텍스 파마슈티칼스 인코포레이티드 Ａｔｐ-결합 카세트 수송자의 조절자
UA104876C2 (uk) 2008-11-06 2014-03-25 Вертекс Фармасьютікалз Інкорпорейтед Модулятори atф-зв'язувальних касетних транспортерів
EP2382197B1 (en) 2008-12-30 2016-10-05 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator
CN102361856A (zh) 2009-03-20 2012-02-22 沃泰克斯药物股份有限公司 囊性纤维化跨膜传导调节因子的调节剂
SI3330255T1 (sl) 2009-03-20 2021-03-31 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Postopek izdelave regulatorja transmembranske prevodnosti pri cistični fibrozi
WO2010151747A1 (en) 2009-06-26 2010-12-29 Cystic Fibrosis Foundation Therapeutics, Inc. Pyrimine compounds and methods of making and using same
WO2011035139A1 (en) 2009-09-17 2011-03-24 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Process for preparing azabicyclic compounds
AU2010310449A1 (en) 2009-10-22 2012-05-03 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Compositions for treatment of cystic fibrosis and other chronic diseases
CN102666546B (zh) 2009-10-23 2015-09-09 沃泰克斯药物股份有限公司 N-(4-(7-氮杂双环[2.2.1]庚-7-基)-2-(三氟甲基)苯基)-4-氧代-5-(三氟甲基)-1,4-二氢喹啉-3-甲酰胺的固体形式
NZ600172A (en) 2009-10-23 2014-07-25 Vertex Pharma Process for preparing modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator
CN103180298A (zh) 2010-03-19 2013-06-26 沃泰克斯药物股份有限公司 N-[2,4-双(1,1-二甲基乙基)-5-羟基苯基]-1,4-二氢-4-氧代喹啉-3-甲酰胺的固体形式
EP2563778B1 (en) 2010-03-25 2016-08-24 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Crystalline form of (r)-1(2,2 -difluorobenzo[d][1,3]dioxol-5yl)-n-(1-(2,3-dihyderoxypropyl)-6-fluoro-2-(1-hydroxy-2-methylpropan-2yl)-1h-indol-5yl)cyclopropanecarboxamide
US8802868B2 (en) 2010-03-25 2014-08-12 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Solid forms of (R)-1(2,2-difluorobenzo[D][1,3]dioxo1-5-yl)-N-(1-(2,3-dihydroxypropyl-6-fluoro-2-(1-hydroxy-2-methylpropan2-yl)-1H-Indol-5-yl)-Cyclopropanecarboxamide
ES2900353T3 (es) 2010-04-07 2022-03-16 Vertex Pharma Composiciones farmacéuticas de ácido 3-(6-(1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioxol-5-il)ciclopropanocarboxamido)-3-metilpiriidin-2-il)benzoico y administración de las mismas
TWI549950B (zh) 2010-04-07 2016-09-21 維泰克斯製藥公司 ３－（６－（１－（２，２－二氟苯并［ｄ］［１，３］二氧雜環戊烯－５－基）環丙烷甲醯胺基）－３－甲基吡啶－２－基）苯甲酸之固體形式
CN102811938B (zh) 2010-04-09 2016-10-12 艾克索仿生技术公司 外骨骼负载处理系统及其使用方法
NZ603042A (en) 2010-04-22 2015-02-27 Vertex Pharma Pharmaceutical compositions comprising cftr modulators and administrations thereof
NZ603044A (en) 2010-04-22 2015-08-28 Vertex Pharma Pharmaceutical compositions comprising cftr modulators and administrations thereof
RU2569678C2 (ru) 2010-04-22 2015-11-27 Вертекс Фармасьютикалз Инкорпорейтед Способ получения циклоалкилкарбоксамидо-индольных соединений
WO2011133953A1 (en) 2010-04-22 2011-10-27 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pharmaceutical compositions and administrations thereof
TW201202250A (en) 2010-05-20 2012-01-16 Vertex Pharma Processes for producing modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator
EP2575814A1 (en) 2010-05-20 2013-04-10 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pharmaceutical compositions and administrations thereof
US8563593B2 (en) 2010-06-08 2013-10-22 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Formulations of (R)-1-(2,2-difluorobenzo[D] [1,3] dioxol-5-yl)-N-(1-(2,3-dihydroxypropyl)-6-fluoro-2-(1-hydroxy-2-methylpropan-2-yl)-1H-indol-5-yl)cyclopropanecarboxamide
JP2013536231A (ja) 2010-08-23 2013-09-19 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド （ｒ）−１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）−ｎ−（１−（２，３−ジヒドロキシプロピル）−６−フルオロ−２−（１−ヒドロキシ−２−メチルプロパン−２−イル）−１ｈ−インドール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミドを含む医薬組成物およびその投与
CA2809263A1 (en) 2010-08-27 2012-03-01 Eleni Dokou Pharmaceutical composition and administrations thereof
US8802700B2 (en) 2010-12-10 2014-08-12 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of ATP-Binding Cassette transporters
ME03652B (me) 2011-05-18 2020-07-20 Vertex Pharmaceuticals Europe Ltd Deuterisani derivati ivakaftora
HUE047354T2 (hu) 2011-05-18 2020-04-28 Vertex Pharmaceuticals Europe Ltd Ivacaftor deuterizált származékai
CN103946221B (zh) * 2011-09-16 2016-08-03 诺华股份有限公司 用于治疗囊性纤维化的杂环化合物
EP2773349A1 (en) 2011-11-02 2014-09-10 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Use of (n- [2, 4 -bis (1, 1 -dimethylethyl) - 5 - hydroxyphenyl]- 1, 4 - dihydro - 4 - oxoquinoline - 3 - carboxamide) for treating cftr mediated diseases
US20140127901A1 (en) 2012-11-08 2014-05-08 Taiwan Semiconductor Manufacturing Company, Ltd. Low-k damage free integration scheme for copper interconnects
CA2852991C (en) 2011-11-08 2019-12-31 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of atp-binding cassette transporters
NZ727015A (en) 2012-01-25 2017-12-22 Vertex Pharma Formulations of 3-(6-(1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioxol-5-yl) cyclopropanecarboxamido)-3-methylpyridin-2-yl)benzoic acid
EP2819670B1 (en) 2012-02-27 2026-05-20 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pharmaceutical Composition and Their Administration
EP2838882A1 (en) 2012-04-20 2015-02-25 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Solid forms of n-[2,4-bis(1,1-dimethylethyl)-5-hydroxyphenyl]-1,4-dihydro-4-oxoquinoline-3-carboxamide
US8674108B2 (en) 2012-04-20 2014-03-18 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Solid forms of N-[2,4-bis(1,1-dimethylethy)-5-hydroxyphenyl]-1,4-dihydro-4-oxoquinoline-3-carboxamide
AU2013270681A1 (en) 2012-06-08 2014-12-18 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pharmaceutical compositions for the treatment of CFTR -mediated disorders
AU2013290444B2 (en) 2012-07-16 2018-04-26 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pharmaceutical compositions of (R)-1-(2,2-diflurorbenzo[d][1,3]dioxol-5-yl)-N-(1-(2,3-dihydroxypropyl)-6-fluoro-2-(1-hydroxy-2-methylpropan-2-yl)-1H-indol-5-yl) cyclopropanecarboxamide and administration thereof
KR102396897B1 (ko) 2012-11-02 2022-05-13 버텍스 파마슈티칼스 인코포레이티드 Ｃｆｔｒ 매개된 질환의 치료를 위한 약제학적 조성물
WO2014078842A1 (en) 2012-11-19 2014-05-22 Concert Pharmaceuticals, Inc. Deuterated cftr potentiators
US20140221424A1 (en) 2013-01-30 2014-08-07 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pharmaceutical compositions for use in the treatment of cystic fibrosis
US9850203B2 (en) 2013-09-26 2017-12-26 Pharmakea, Inc. Autotaxin inhibitor compounds
CA2930199C (en) 2013-11-12 2022-10-25 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Process of preparing pharmaceutical compositions for the treatment of cftr mediated diseases
PL3925607T5 (pl) 2014-04-15 2026-06-01 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Kompozycje farmaceutyczne do leczenia chorób, w których pośredniczy mukowiscydozowy przezbłonowy regulator przewodnictwa
TW202140422A (zh) 2014-10-06 2021-11-01 美商維泰克斯製藥公司 囊腫纖維化症跨膜傳導調節蛋白之調節劑
CA2963945C (en) 2014-10-07 2023-01-10 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Co-crystals of modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator
US9642831B2 (en) 2014-10-31 2017-05-09 Abbvie S.Á.R.L. Substituted chromanes and method of use
HUE055423T2 (hu) 2014-11-18 2021-11-29 Vertex Pharma Eljárás nagy áteresztõképességû tesztelõ nagy teljesítményû folyadék-kromatográfia elvégzésére
MA41253A (fr) 2014-12-23 2017-10-31 Proteostasis Therapeutics Inc Composés, compositions et procédés pour augmenter l'activité du cftr
US10196384B2 (en) 2015-03-31 2019-02-05 Vertex Pharmaceuticals (Europe) Limited Deuterated CFTR modulators
US9840513B2 (en) 2015-07-16 2017-12-12 Abbvie S.Á.R.L. Substituted tricyclics and method of use
HK1258472A1 (zh) 2015-09-21 2019-11-15 Vertex Pharmaceuticals (Europe) Limited 氘代cftr增效剂的施用
HK1258473A1 (zh) 2015-09-25 2019-11-15 Vertex Pharmaceuticals (Europe) Limited 氘代cftr增效剂
SG11201802798WA (en) 2015-10-06 2018-05-30 Proteostasis Therapeutics Inc Compounds, compositions, and methods for modulating cftr
PL3359541T3 (pl) 2015-10-09 2021-01-11 AbbVie Overseas S.à r.l. N-SULFONYLOWANE PIRAZOLO[3,4-b]PIRYDYNO-6-KARBOKSAMIDY I SPOSÓB ZASTOSOWANIA
ES2946970T3 (es) 2016-03-31 2023-07-28 Vertex Pharma Regulador de conductancia transmembrana de moduladores de fibrosis quística
GEP20217329B (en) 2016-09-30 2021-12-10 Vertex Pharma Modulator of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator, pharmaceutical compositions, methods of treatment, and process for making the modulator
US10399940B2 (en) 2016-10-07 2019-09-03 Abbvie S.Á.R.L. Substituted pyrrolidines and methods of use
US20180125838A1 (en) 2016-10-27 2018-05-10 Vertex Pharmaceuticals (Europe) Limited Methods of treatment with deuterated cftr potentiators
AU2017352206B2 (en) 2016-10-27 2022-03-03 Vertex Pharmaceuticals (Europe) Limited Methods of treatment with deuterated CFTR potentiators
EA202192783A1 (ru) 2016-12-09 2022-02-24 Вертекс Фармасьютикалз Инкорпорейтед Модулятор регулятора трансмембранной проводимости при муковисцидозе, фармацевтические композиции, способы лечения и способ получения указанного модулятора
US20180280349A1 (en) 2017-03-28 2018-10-04 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Methods of treating cystic fibrosis in patients with residual function mutations
MA54105A (fr) 2017-06-08 2021-09-15 Vertex Pharma Méthodes de traitement de la fibrose kystique
CA3068609A1 (en) 2017-07-01 2019-01-10 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Compositions and methods for treatment of cystic fibrosis
AU2018300150A1 (en) 2017-07-11 2020-01-30 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Carboxamides as modulators of sodium channels
IL272032B2 (en) 2017-07-17 2026-04-01 Vertex Pharma Combination therapy for the treatment of cystic fibrosis including N-(1,3-DIMETHYLPYRAZOL-4-YL)SULFONYL-6-[3-(3,3,3-TRIFLUORO-2,2- DIMETHYL-PROPOXY)PYRAZOL-1-YL]-2-[(4S)-2,2,4- TRIMETHYLPYRROLIDIN-1-YL]PYRIDINE-3-CARBOXAMIDE and
CA3069225A1 (en) 2017-07-17 2019-01-24 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Methods of treatment for cystic fibrosis
EP3662079A4 (en) 2017-07-31 2021-04-14 Technion Research & Development Foundation Limited Methods of detecting modified and unmodified dna
MA49752A (fr) 2017-08-02 2021-04-21 Vertex Pharma Procédés de préparation de composés de pyrrolidine
CA3078893A1 (en) 2017-10-19 2019-04-25 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Crystalline forms and compositions of cftr modulators
WO2019109021A1 (en) 2017-12-01 2019-06-06 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Processes for making modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator
WO2019113089A1 (en) 2017-12-04 2019-06-13 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Compositions for treating cystic fibrosis
KR102716244B1 (ko) 2017-12-08 2024-10-14 버텍스 파마슈티칼스 인코포레이티드 낭포성 섬유증 막횡단 전도 조절자의 조정제의 제조 방법
TWI810243B (zh) 2018-02-05 2023-08-01 美商維泰克斯製藥公司 用於治療囊腫纖化症之醫藥組合物
RS64018B1 (sr) * 2018-02-15 2023-03-31 Vertex Pharma Makrocikli kao modulatori transmembranskog regulatora provodnosti cistične fibroze, njihove farmaceutske kompozicije, njihova upotreba u lečenju cistične fibroze i proces njihove izrade
WO2019191620A1 (en) 2018-03-30 2019-10-03 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Crystalline forms of modulators of cftr
WO2019195739A1 (en) 2018-04-05 2019-10-10 Alexander Russell Abela Modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator
WO2019200246A1 (en) 2018-04-13 2019-10-17 Alexander Russell Abela Modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator, pharmaceutical compositions, methods of treatment, and process for making the modulator
MA54227B1 (fr) 2018-11-14 2023-03-31 Vertex Pharma Méthodes de traitement de la fibrose kystique
EP3898621A1 (en) * 2018-12-21 2021-10-27 Novartis AG Macrocyclic compounds and their use in the treatment of disease
TWI848092B (zh) 2019-04-03 2024-07-11 美商維泰克斯製藥公司 囊腫纖維化跨膜傳導調節蛋白調節劑
WO2020214921A1 (en) 2019-04-17 2020-10-22 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Solid forms of modulators of cftr
WO2020242935A1 (en) 2019-05-29 2020-12-03 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Methods of treatment for cystic fibrosis
US11873300B2 (en) 2019-08-14 2024-01-16 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Crystalline forms of CFTR modulators
WO2021030556A1 (en) 2019-08-14 2021-02-18 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator
TWI867024B (zh) 2019-08-14 2024-12-21 美商維泰克斯製藥公司 囊腫纖維化跨膜傳導調節蛋白之調節劑
TWI899097B (zh) 2019-08-14 2025-10-01 美商維泰克斯製藥公司 製備cftr調節劑之方法
CR20230120A (es) 2020-08-07 2023-09-01 Vertex Pharma Moduladores del regulador de la conductancia transmembrana de la fibrosis quística
WO2022036060A1 (en) 2020-08-13 2022-02-17 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Crystalline forms of cftr modulators
TW202233635A (zh) 2020-10-07 2022-09-01 美商維泰克斯製藥公司 囊腫纖維化跨膜傳導調節蛋白之調節劑
US12612416B2 (en) 2020-10-07 2026-04-28 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator
PE20231380A1 (es) 2020-11-18 2023-09-07 Vertex Pharma Macrociclicos que contienen una anillo de 1,3,4-oxadiazol para su uso como moduladores del regulador de la conductancia transmembrana de la fibrosis quistica

Also Published As

Publication number Publication date
DOP2023000024A (es) 2023-06-30
WO2022032068A1 (en) 2022-02-10
CR20230120A (es) 2023-09-01
SMT202500214T1 (it) 2025-07-22
DK4192829T3 (da) 2025-06-02
TWI908847B (zh) 2025-12-21
BR112023002210A2 (pt) 2023-05-02
JP2023537484A (ja) 2023-09-01
MD4192829T2 (ro) 2025-10-31
LT4192829T (lt) 2025-06-25
EP4192829A1 (en) 2023-06-14
JP7860075B2 (ja) 2026-05-15
KR20230066348A (ko) 2023-05-15
CN116171154A (zh) 2023-05-26
GEP20257825B (en) 2025-11-10
CA3190583A1 (en) 2022-02-10
PT4192829T (pt) 2025-06-17
US20220041621A1 (en) 2022-02-10
AU2021322301A1 (en) 2023-04-06
PL4192829T3 (pl) 2025-08-25
SI4192829T1 (sl) 2025-07-31
AR123183A1 (es) 2022-11-02
HRP20250694T1 (hr) 2025-08-15
MX2023001465A (es) 2023-04-27
PH12023550238A1 (en) 2024-04-29
TW202221004A (zh) 2022-06-01
IL300224B2 (en) 2026-08-01
IL300224B1 (en) 2026-04-01
CL2023000375A1 (es) 2023-09-29
US20250179091A1 (en) 2025-06-05
ES3032183T3 (en) 2025-07-16
HUE071975T2 (hu) 2025-10-28
IL300224A (en) 2023-03-01
UY39374A (es) 2022-02-25
US12269831B2 (en) 2025-04-08
PE20231377A1 (es) 2023-09-07
AU2021322301A8 (en) 2023-04-13
GEAP202516158A (en) 2025-05-27
ZA202301228B (en) 2025-05-28
CO2023002072A2 (es) 2023-05-19
EP4192829B1 (en) 2025-05-07
MA60597B1 (fr) 2025-06-30
FI4192829T3 (fi) 2025-06-25
ECSP23015370A (es) 2023-05-31
JOP20230022A1 (ar) 2023-01-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
EP4192829B1 (en) Modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator
JP7843278B2 (ja) 嚢胞性線維症膜貫通コンダクタンス制御因子の調節因子
EP4247817A1 (en) Macrocycles containing a 1,3,4-oxadiazole ring for use as modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator
WO2022076622A2 (en) Modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator
TW202233635A (zh) 囊腫纖維化跨膜傳導調節蛋白之調節劑
EP4525986A1 (en) Solid forms of a macrocyclic compounds as cftr modulators and their preparation
HK40093614A (en) Modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator
HK40093614B (en) Modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator
BR112023002210B1 (pt) Compostos moduladores do regulador de condutância transmembrana da fibrose cística, composição farmacêutica e usos
EA049659B1 (ru) Модуляторы регулятора трансмембранной проводимости при муковисцидозе
TWI912411B (zh) 囊腫纖維化跨膜傳導調節蛋白之調節劑
OA21166A (en) Modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator.
EA049998B1 (ru) Макроциклы, содержащие 1,3,4-оксадиазольное кольцо для применения в качестве модуляторов регулятора трансмембранной проводимости при муковисцидозе