RS67073B1 - Inhibitori glukozilceramid sintaze - Google Patents

Inhibitori glukozilceramid sintaze

Info

Publication number
RS67073B1
RS67073B1 RS20250761A RSP20250761A RS67073B1 RS 67073 B1 RS67073 B1 RS 67073B1 RS 20250761 A RS20250761 A RS 20250761A RS P20250761 A RSP20250761 A RS P20250761A RS 67073 B1 RS67073 B1 RS 67073B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
compound
methyl
formula
further relates
disease
Prior art date
Application number
RS20250761A
Other languages
English (en)
Inventor
Elyse Bourque
Cassandra Celatka
Bradford Hirth
Markus Metz
Zhong Zhao
Renato Skerlj
Yibin Xiang
Katherine Jancsics
Andrew Good
John Marshall
Seng Cheng
Ronald Scheule
Mario Cabrera-Salazar
Original Assignee
Genzyme Corp
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Genzyme Corp filed Critical Genzyme Corp
Publication of RS67073B1 publication Critical patent/RS67073B1/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/08—Bridged systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/55—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/439—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom the ring forming part of a bridged ring system, e.g. quinuclidine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/454—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pimozide, domperidone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/46—8-Azabicyclo [3.2.1] octane; Derivatives thereof, e.g. atropine, cocaine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/55—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole
    • A61K31/551—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole having two nitrogen atoms, e.g. dilazep
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/43—Enzymes; Proenzymes; Derivatives thereof
    • A61K38/46—Hydrolases (3)
    • A61K38/47—Hydrolases (3) acting on glycosyl compounds (3.2), e.g. cellulases, lactases
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/14—Drugs for disorders of the nervous system for treating abnormal movements, e.g. chorea, dyskinesia
    • A61P25/16—Anti-Parkinson drugs
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/04—Anorexiants; Antiobesity agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D453/00—Heterocyclic compounds containing quinuclidine or iso-quinuclidine ring systems, e.g. quinine alkaloids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D453/00—Heterocyclic compounds containing quinuclidine or iso-quinuclidine ring systems, e.g. quinine alkaloids
    • C07D453/02—Heterocyclic compounds containing quinuclidine or iso-quinuclidine ring systems, e.g. quinine alkaloids containing not further condensed quinuclidine ring systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D455/00—Heterocyclic compounds containing quinolizine ring systems, e.g. emetine alkaloids, protoberberine; Alkylenedioxy derivatives of dibenzo [a, g] quinolizines, e.g. berberine
    • C07D455/02—Heterocyclic compounds containing quinolizine ring systems, e.g. emetine alkaloids, protoberberine; Alkylenedioxy derivatives of dibenzo [a, g] quinolizines, e.g. berberine containing not further condensed quinolizine ring systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Y—ENZYMES
    • C12Y302/00—Hydrolases acting on glycosyl compounds, i.e. glycosylases (3.2)
    • C12Y302/01—Glycosidases, i.e. enzymes hydrolysing O- and S-glycosyl compounds (3.2.1)
    • C12Y302/01022—Alpha-galactosidase (3.2.1.22)

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Child & Adolescent Psychology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Psychology (AREA)

Description

Opis
POZADINA PRONALASKA
Oblast pronalaska
[0001] Ovaj pronalazak se generalno odnosi na oblast terapije metaboličkih bolesti.
Preciznije, pronalazak se odnosi na inhibitore glukozilceramid sintaze (GCS) za upotrebu u lečenju bolesti skladištenja lipozoma, bilo samostalno ili u kombinaciji sa enzimskom zamenskom terapijom.
Sažetak povezanog stanja tehnike
[0002] Glukozilceramid sintaza (GCS) je ključni enzim koji katalizuje početni korak glikozilacije u biosintezi glukozilceramid-baziranih glikosfingolipida (GSL), odnosno putem ključnog prenosa glukoze iz UDP-glukoze (UDP-Glc) na ceramid radi formiranja glukozilceramida (videti sliku 1). GCS je transmembranski, integralni protein tipa III lokalizovan u cis/medijalnom Goldžijevom aparatu. Smatra se da su glikosfingolipidi (GSL) integralni za dinamiku mnogih događaja u ćelijskoj membrani, uključujući ćelijske interakcije, signalizaciju i transport. Pokazano je da je sinteza GSL struktura (videti, Yamashita et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1999, 96(16), 9142-9147) od suštinskog značaja za embrionalni razvoj i za diferencijaciju nekih tkiva. Ceramid igra centralnu ulogu u metabolizmu sfingolipida, a pokazano je da smanjena aktivnost GCS ima značajne efekte na sfingolipidni obrazac sa smanjenom ekspresijom glikosfingolipida. Sfingolipidi (SL) imaju biomodulatornu ulogu u fiziološkim, kao i patološkim kardiovaskularnim stanjima. Posebno, sfingolipidi i enzimi koji ih regulišu, izgleda da igraju ulogu u adaptivnim odgovorima na hroničnu hipoksiju u srcu neonatalnog pacova (videti, El Alwanit et al., Prostaglandins & Other Lipid Mediators 2005, 78(1-4), 249-263).
[0003] GCS inhibitori su predloženi za lečenje raznih bolesti (videti, na primer, WO2005068426). Takvi tretmani uključuju lečenje bolesti skladištenja glikolipida (npr. Tej-Saksova bolest, Sandhofova bolest, nedostatak GM2 aktivatora, GM1 gangliozidoza i Fabrijeva bolest), bolesti povezane sa akumulacijom glikolipida (npr. Gošeova bolest;
Miglustat (Zavesca), GCS inhibitor, odobren je za terapiju pacijenata sa Gošeovom bolešću tipa 1, videti Treiber et al., Xenobiotica 2007, 37(3), 298-314), bolesti koje uzrokuju hipertrofiju ili hiperplaziju bubrega kao što je dijabetička nefropatija; bolesti koje uzrokuju hiperglikemiju ili hiperinsulinemiju; karcinome kod kojih je sinteza glikolipida abnormalna, infektivne bolesti uzrokovane organizmima koji koriste glikolipide na površini ćelije kao receptore, infektivne bolesti kod kojih je sinteza glukozilceramida esencijalna ili važna, bolesti kod kojih je sinteza glukozilceramida esencijalna ili važna, bolesti kod kojih dolazi do prekomerne sinteze glikolipida (npr. ateroskleroza, policistična bolest bubrega i hipertrofija bubrega), neurološki poremećaji, neurološke povrede, inflamatorne bolesti ili poremećaji povezani sa regrutacijom i aktivacijom makrofaga (npr. reumatoidni artritis, Kronova bolest, astma i sepsa) i dijabetes melitus i gojaznost (videti WO 2006053043). WO 2010/091164 takođe otkriva inhibitore GCS.
[0004] Posebno je pokazano da je prekomerna ekspresija GCS uključena u višestruku otpornost na lekove i narušava apoptozu izazvanu ceramidom. Na primer, Turzanski et al., (Experimental Hematology 2005, 33 (1), 62-72) su pokazali da ceramid indukuje apoptozu u ćelijama akutne mijeloidne leukemije (AML) i da P-glikoprotein (p-gp) pruža otpornost na apoptozu izazvanu ceramidom, pri čemu modulacija puta ceramid-glukozilceramid značajno doprinosi ovoj otpornosti u TF-1 ćelijama. Stoga, GCS inhibitori mogu biti korisni za lečenje proliferativnih poremećaja indukujući apoptozu u obolelim ćelijama.
SAŽETAK PRONALASKA
[0005] Reference na metode lečenja u celom ovom opisu treba tumačiti kao reference na jedinjenja, farmaceutske kompozicije i lekove ovog obelodanjivanja ili pronalaska za upotrebu u tim metodama.
[0006] Ovaj pronalazak je definisan u patentnim zahtevima. Primeri obelodanjivanja koji nisu navedeni u patentnim zahtevima su izostavljeni.
[0007] Uopšteno govoreći, ovo obelodanjivanje se odnosi na jedinjenje predstavljeno sledećom strukturnom formulom,
ili farmaceutski prihvatljivom solju ili prolekom istog, pri čemu je:
n 1, 2 ili 3;
m je 0 ili 1;
p je 0 ili 1;
t je 0, 1 ili 2;
y je 1 ili 2;
z je 0, 1 ili 2;
E je S, O, NH, NOH, NNO2, NCN, NR, NOR ili NSO2R;
X<1>je CR<1>kada je m 1 ili N kada je m 0;
X<2>je O, -NH, -CH2-, SO2, NH-SO2;CH(C1-C6) alkil ili -NR<2>;
X<3>je O, -NH, -CH2-, CO, - CH(C1-C6) alkil, SO2NH, -CO-NH- ili -NR<3>;
X<4>je CR<4>R<5>, CH2CR<4>R<5>ili CH2-(C1-C6) alkil-CR<4>R<5>;
X<5>je direktna veza, O, S, SO2, CR<4>R<5>; (C1-C6)alkil, (C1-C6)alkiloksi, (C1-C6)alkenil, (C1-C6)alkeniloksi;
R je (C6-C12)aril, (C2-C9)heteroaril, (C1-C6)alkil, (C2-C9)heteroaril(C1-C6)alkil;
R<1>je H, CN, (C1-C6)alkilkarbonil ili (C1-C6)alkil;
R<2>i R<3>su svaki nezavisno -H, (C1-C6)alkil opciono supstituisan jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od halogena, (C1-C6)alkil, (C6-C12)aril, (C2-C9)heteroaril, (C1-C6)alkil(C6-C12)aril, halo(C6-C12)aril, i halo(C2-C9)heteroaril, ili opciono kada je X<2>-NR<2>i X<3>je -NR<3>, R<2>i R<3>mogu biti zajedno sa atomima azota na koje su vezani da formiraju nearomatični heterociklični prsten opciono supstituisan sa jednim ili više supstituenata izabranih iz halogena, (C1-C6)alkil, (C6-C12)aril, (C2-C9)heteroaril, (C1-C6)alkil(C6-C12)aril, halo(C6-C12)aril, i halo(C2-C9)heteroaril;
R<4>i R<5>izabrani iz H, (C1-C6)alkila, ili zajedno sa ugljenikom na koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten;
R<6>je -H, halogen, -CN, (C6-C12)aril, (C6-C12)ariloksi, (C1-C6)alkiloksi; (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do četiri halogena ili (C1-C6)alkil;
A<1>je (C2-C6)alkinil; (C6-C12)aril, (C2-C9)heteroaril, (C2-C9)heterocikloalkil ili benzo(C2-C9)heterocikloalkil opciono supstituisan sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od halogena, (C1-C6)alkil opciono supstituisanog sa jednim do tri halogena; (C1-C6)alkenil, amino, (C1-C6)alkilamino, (C1-C6)dialkilamino, (C1-C6)alkoksi, nitro, CN, -OH, (C1-C6)alkiloksi opciono supstituisanog sa jednim do tri halogena; (C1-C6)alkoksikarbonil, i (C1-C6)alkilkarbonil;
A<2>je H, (C6-C12)aril, (C2-C9)heteroaril, (C2-C9)heterocikloalkil ili benzo(C2-C9)heterocikloalkil opciono supstituisan sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od halogena, (C1-C6)alkil opciono supstituisanog sa jednim do tri halogena; (C1-C6)alkilenil, amino, (C1-C6)alkilamino, (C1-C6)dialkilamino, (C1-C6)alkoksi, O(C3-C6cikloalkil), (C3-C6)cikloalkoksi, nitro, CN, OH, (C1-C6)alkiloksi opciono supstituisanog sa jednim do tri halogena; (C3-C6)cikloalkil, (C1-C6)alkoksikarbonil, (C1-C6)alkilkarbonil, (C1-C6)haloalkil;
uz uslov da zbir n t y z nije veći od 6;
uz uslov da kada je p 0; X<2>je NH-SO2i X<3>je NH;
uz uslov da kada je n 1; t je 0; y je 1; z je 1; X<2>je NH; E je O; X<3>je NH; A<2>je H i X<5>je direktna veza; A<1>nije nesupstituisani fenil, halofenil ili izopropenil fenil;
uz uslov da kada je n 1; t je 0; y je 1; z je 1; X<2>je O; E je O; X<3>je NH; A<1>je (C6-C12)aril i X<5>je direktna veza; A<2>je H i R<4>je H onda R<5>nije cikloheksil; i
uz uslov da kada je n 1; t je 0; y je 1; z je 1; X<2>je NH; E je O; X<3>je CH2; R<4>i R<5>su oba vodonik; A<2>je H i X<5>je direktna veza; onda A<1>nije nesupstituisani fenil. Određeni aspekti obelodanjivanja uključuju primenu navedenog jedinjenja na pacijentu kao deo kombinovane terapije koja uključuje enzimsku zamensku terapiju (ERT) i terapiju malim molekulima (SMT) kako bi se smanjila količina i/ili inhibirala akumulacija supstrata kod pacijenta dijagnostikovanog sa bolešću skladištenja lipozoma.
[0008] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; t je 0; y je 1, a z je 1.
[0009] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; t je 1; y je 1, a z je 1.
[0010] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 2; t je 0; y je 1, a z je 1.
[0011] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 2; t je 1; y je 1, a z je 1.
[0012] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 3; t je 0; y je 1, a z je 1.
[0013] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; t je 2; y je 1, a z je 1.
[0014] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; t je 0; y je 1, a z je 0.
[0015] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; t je 1; y je 1, a z je 0.
[0016] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 2; t je 0; y je 1, a z je 0.
[0017] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 2; t je 1; y je 1, a z je 0.
[0018] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 3; t je 0; y je 1, a z je 0..
[0019] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; t je 2; y je 1, a z je 0.
[0020] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; t je 1; y je 2, a z je 0.
[0021] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 2; t je 0; y je 2, a z je 0.
[0022] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je m 1, a X<1>je CR<1>.
[0023] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je m 0, a X<1>je N.
[0024] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je m 1; E je o; X<2>je O, a X<3>je NH.
[0025] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je m 1; E je O; X<2>je NH, a X<3>je NH.
[0026] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je m 1; E je E je O; X<2>je CH<2>, a X<3>je NH.
[0027] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je m 1; E je O; X<2>je CH<2>, a X<3>je NH.
[0028] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je m 1; E je S; X<2>je NH, a X<3>je NH.
[0029] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je m 0; E je O; X<1>je NH, a X<3>je NH.
[0030] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je m 1; E je O; X<2>je NH, a X<3>je CO-NH.
[0031] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je m 1; p je 0; X<2>je NH-SO2, a X<3>je NH.
[0032] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu su R 4 i R 5 svaki (C1-C6)alkil ili zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten.
[0033] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu su R<4>i R<5>svaki metil.
[0034] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten.
[0035] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro ciklopropil prsten.
[0036] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten.
[0037] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je A<1>(C2-C6)alkinil ili (C6-C12)aril.
[0038] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je A<1>(C2-C9)heteroaril.
[0039] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je A<1>tiofen, tiazol, izotiazol, furan, oksazol, izoksazol, pirol, imidazol, pirazol, triazol, piridin, pirimidin, piridazin, indol, benzotiazol, benzoizoksazol, benzopirazol, benzoimidazol, benzofuran, benzooksazol ili benzoizoksazol.
[0040] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je A<1>(C2-C9)heterocikloalkil.
[0041] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je A<1>pirolidinil, tetrahidrofuranil, dihidrofuranil, tetrahidropiranil, piranil, tiopiranil, aziridinil, azetidinil, oksiranil, metilendioksil, hromenil, barbituril, izoksazolidinil, 1,3-oksazolidin-3-il, izotiazolidinil, 1,3-tiazolidin-3-il, 1,2-pirazolidin-2-il, 1,3-pirazolidin-1-il, piperidinil, tiomorfolinil, 1,2-tetrahidrotiazin-2-il, 1,3-tetrahidrotiazin-3-il, tetrahidrotiadiazinil, morfolinil, 1,2-tetrahidrodiazin-2-il, 1,3-tetrahidrodiazin-1-il, tetrahidroazepinil, piperazinil, piperizin-2-onil, piperizin-3-onil, hromanil, 2-pirolinil, 3-pirolinil, imidazolidinil, 2-imidazolidinil, 1,4-dioksanil, 8-azabiciklo[3.2.1]oktanil, 3-azabiciklo[3.2.1]oktanil, 3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktanil, 2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptanil, 2,5-diazabiciklo[2.2.2]oktanil, oktahidro-2H-pirido[1,2-a]pirazinil, 3-azabiciklo[4.1.0]heptanil, 3-azabiciklo[3.1.0]heksanil 2-azaspiro[4.4]nonanil, 7-oksa-1-aza-spiro[4.4]nonanil, 7-azabiciklo[2.2.2]heptanil ili oktahidro-1H-indolil.
[0042] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je A<1>benzo(C2-C9)heterocikloalkil.
[0043] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je A<1>2,3-dihidrobenzo[b][1,4]dioksin ili 2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol.
[0044] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je R<6>H.
[0045] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je X<5>direktna veza.
[0046] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je X<5>CR<4>R<5>.
[0047] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu su R<4>i R<5>svaki metil.
[0048] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten.
[0049] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro ciklopropil prsten.
[0050] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten.
[0051] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je A<2>(C6-C12)aril.
[0052] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je A<2>(C2-C9)heteroaril.
[0053] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je A<2>piridin.
[0054] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je A<2>(C2-C9)heterocikloalkil.
[0055] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je A<2>pirolidinil, tetrahidrofuranil, dihidrofuranil, tetrahidropiranil, piranil, tiopiranil, aziridinil, azetidinil, oksiranil, metilendioksil, hromenil, barbituril, izoksazolidinil, 1,3-oksazolidin-3-il, izotiazolidinil, 1,3-tiazolidin-3-il, 1,2-pirazolidin-2-il, 1,3-pirazolidin-1-il, piperidinil, tiomorfolinil, 1,2-tetrahidrotiazin-2-il, 1,3-tetrahidrotiazin-3-il, tetrahidrotiadiazinil, morfolinil, 1,2-tetrahidrodiazin-2-il, 1,3-tetrahidrodiazin-1-il, tetrahidroazepinil, piperazinil, piperizin-2-onil, piperizin-3-onil, hromanil, 2-pirolinil, 3-pirolinil, imidazolidinil, 2-imidazolidinil, 1,4-dioksanil, 8-azabiciklo[3.2.1]oktanil, 3-azabiciklo[3.2.1]oktanil, 3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktanil, 2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptanil, 2,5-diazabiciklo[2.2.2]oktanil, oktahidro-2H-pirido[1,2-a]pirazinil, 3-azabiciklo[4.1.0]heptanil, 3-azabiciklo[3.1.0]heksanil 2-azaspiro[4.4]nonanil, 7-oksa-1-aza-spiro[4.4]nonanil, 7-azabiciklo[2.2.2]heptanil ili oktahidro-1H-indolil.
[0056] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je A<2>benzo(C2-C9)heterocikloalkil.
[0057] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je R<1>vodonik ili metil.
Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; p je 1; E je O; X<2>je O; X<3>je NH; R<1>je H; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0058] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; p je 1; E je O; X<2>je O; X<3>je NH; R<1>je H; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0059] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; p je 1; E je O; X<2>je O; X<3>je NH; R<1>je H; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0060] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; p je 1; E je O; X<2>je O; X<3>je NH; R<1>je H; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0061] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; p je 1; E je O; X<2>je O; X<3>je NH; R<1>je H; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0062] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; p je 1; E je O; X<2>je O; X<3>je NH; R<1>je H; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0063] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0064] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0065] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0066] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0067] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0068] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0069] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je CH2; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0070] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je CH2; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0071] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je CH2; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0072] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je CH2; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0073] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je CH2; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0074] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je CH2; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0075] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je CH2; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0076] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je CH2; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0077] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je CH2; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0078] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je CH2; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0079] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je CH2; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0080] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je CH2; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0081] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je S; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0082] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je S; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0083] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je S; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0084] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je S; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0085] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je S; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0086] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je S; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0087] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je SO2; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0088] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je SO2; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0089] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je SO2; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0090] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je SO2; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0091] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je SO2; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0092] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je SO2; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0093] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je N; m je 0; E je O; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C5-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0094] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je N; m je 0; E je O; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0095] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je N; m je 0; E je O; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0096] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je N; m je 0; E je O; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0097] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je N; m je 0; E je O; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0098] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je N; m je 0; E je O; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0099] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je CO-NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0100] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je CO-NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0101] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je CO-NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0102] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je CO-NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0103] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je CO-NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0104] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je CO-NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0105] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; p je 1; E je O; X<2>je O; X<3>je NH; R<1>je H; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heterocikloalkil.
[0106] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; p je 1; E je O; X<2>je O; X<3>je NH; R<1>je H; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heterocikloalkil.
[0107] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; p je 1; E je O; X<2>je O; X<3>je NH; R<1>je H; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heterocikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0108] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; p je 1; E je O; X<2>je O; X<3>je NH; R<1>je H; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heterocikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0109] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heterocikloalkil.
[0110] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heterocikloalkil.
[0111] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heterocikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0112] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heterocikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0113] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je CH2; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heterocikloalkil.
[0114] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je CH2; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heterocikloalkil.
[0115] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je CH2; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heterocikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0116] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je CH2; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heterocikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0117] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je CH2; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heterocikloalkil.
[0118] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3 t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je CH2; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heterocikloalkil.
[0119] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je CH2; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heterocikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0120] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je CH2; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heterocikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0121] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je S; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heterocikloalkil.
[0122] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je S; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heterocikloalkil.
[0123] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je S; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heterocikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0124] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je S; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heterocikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0125] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je SO2; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heterocikloalkil.
[0126] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je SO2; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heterocikloalkil.
[0127] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X' je CR<1>; m je 1; E je SO2; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heterocikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0128] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je SO2; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heterocikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0129] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je N; m je 0; E je O; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heterocikloalkil.
[0130] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je N; m je 0; E je O; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heterocikloalkil.
[0131] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je N; m je 0; E je O; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heterocikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0132] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je N; m je 0; E je O; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heterocikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0133] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je CO-NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heterocikloalkil.
[0134] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je CO-NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heterocikloalkil.
[0135] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je CO-NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heterocikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0136] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je CO-NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heterocikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0137] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; p je 1; E je O; X<2>je O; X<3>je NH; R<1>je H; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heterocikloalkil.
[0138] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; p je 1; E je O; X<2>je O; X<3>je NH; R<1>je H; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heterocikloalkil.
[0139] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; p je 1; E je O; X<2>je O; X<3>je NH; R<1>je H; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heterocikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0140] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; p je 1; E je O; X<2>je O; X<3>je NH; R<1>je H; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heterocikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0141] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heterocikloalkil.
[0142] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<3>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heterocikloalkil.
[0143] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heterocikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0144] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heterocikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0145] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je CH2; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heterocikloalkil.
[0146] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je CH2; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heterocikloalkil.
[0147] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je CH2; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heterocikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0148] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je CH2; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heterocikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0149] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je CH2; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heterocikloalkil.
[0150] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je CH2; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heterocikloalkil.
[0151] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je CH2; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heterocikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0152] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je CH2; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heterocikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0153] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je S; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heterocikloalkil.
[0154] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je S; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heterocikloalkil.
[0155] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je S; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heterocikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0156] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je S; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heterocikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0157] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je SO2; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heterocikloalkil.
[0158] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je SO2; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heterocikloalkil.
[0159] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je SO2; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heterocikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0160] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je SO2; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heterocikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0161] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je N; m je 0; E je O; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heterocikloalkil.
[0162] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je N; m je 0; E je O; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heterocikloalkil.
[0163] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je N; m je 0; E je O; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heterocikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0164] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je N; m je 0; E je O; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heterocikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0165] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je CO-NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heterocikloalkil.
[0166] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je CO-NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heterocikloalkil.
[0167] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je CO-NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heterocikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0168] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je CO-NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heterocikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0169] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; p je 1; E je O; X<2>je O; X<3>je NH; R<1>je H; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0170] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; p je 1; E je O; X<2>je O; X<3>je NH; R<1>je H; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0171] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0172] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0173] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je CH2; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0174] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je CH2; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0175] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je CH2; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0176] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je CH2; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0177] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je S; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0178] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je S; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0179] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je SO2; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0180] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je SO2; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0181] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je N; m je 0; E je O; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0182] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je N; m je 0; E je O; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0183] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je CO-NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0184] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je CO-NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0185] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; p je 1; E je O; X<2>je O; X<3>je NH; R<1>je H; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C3-C10)cikloalkil.
[0186] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; p je 1; E je O; X<2>je O; X<3>je NH; R<1>je H; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C3-C10)cikloalkil.
[0187] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; p je 1; E je O; X<2>je O; X<3>je NH; R<1>je H; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C3-C10)cikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0188] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; p je 1; E je O; X<2>je O; X<3>je NH; R<1>je H; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C3-C10)cikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0189] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C3-C10)cikloalkil.
[0190] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C3-C10)cikloalkil.
[0191] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C3-C10)cikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0192] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C3-C10)cikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0193] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je CH2; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C3-C10)cikloalkil.
[0194] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je CH2; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C3-C10)cikloalkil.
[0195] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je CH2; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C3-C10)cikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0196] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je CH2; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C3-C10)cikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0197] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je CH2; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C3-C10)cikloalkil.
[0198] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je CH2; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C3-C10)cikloalkil.
[0199] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je CH2; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C3-C10)cikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0200] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je CH2; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C3-C10)cikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C4-C12)aril.
[0201] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je S; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C3-C10)cikloalkil.
[0202] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je S; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C3-C10)cikloalkil.
[0203] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je S; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C3-C10)cikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0204] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je S; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C3-C10)cikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0205] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je SO2; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C3-C10)cikloalkil.
[0206] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je SO2; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C3-C10)cikloalkil.
[0207] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je SO2; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C3-C10)cikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0208] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je SO2; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A' je (C3-C10)cikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0209] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je N; m je 0; E je O; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C3-C10)cikloalkil.
[0210] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je N; m je 0; E je O; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C3-C10)cikloalkil.
[0211] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je N; m je 0; E je O; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C3-C10)cikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0212] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je N; m je 0; E je O; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C3-C10)cikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0213] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je CO-NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C3-C10)cikloalkil.
[0214] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je CO-NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C3-C10)cikloalkil.
[0215] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je CO-NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C3-C10)cikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0216] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je CO-NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C3-C10)cikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C6-C12)aril.
[0217] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; p je 1; E je 0; X<2>je O; X<3>je NH; R<1>je H; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C3-C10)cikloalkil.
[0218] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; p je 1; E je O; X<2>je O; X<3>je NH; R<1>je H; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C3-C10)cikloalkil.
[0219] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X je CR ; m je 1; p je 1; E je O; X<2>je O; X<3>je NH; R<1>je H; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C3-C10)cikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0220] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; p je 1; E je O; X<2>je O; X<3>je NH; R<1>je H; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C3-C10)cikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0221] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C3-C10)cikloalkil.
[0222] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C3-C10)cikloalkil.
[0223] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C3-C10)cikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0224] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C3-C10)cikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0225] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je CH2; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C3-C10)cikloalkil.
[0226] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je CH2; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C3-C10)cikloalkil.
[0227] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je CH2; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C3-C10)cikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0228] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je CH2; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C3-C10)cikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0229] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je CH2; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C3-C10)cikloalkil.
[0230] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je CH2; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C3-C10)cikloalkil.
[0231] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR'; m je 1; E je O; X<2>je CH2; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C3-C10)cikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0232] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je CH2; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C3-C10)cikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0233] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je S; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C3-C10)cikloalkil.
[0234] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je S; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C3-C10)cikloalkil.
[0235] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je S; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C3-C10)cikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C1-C9)heteroaril.
[0236] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je S; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C3-C10)cikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0237] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je SO2; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C3-C10)cikloalkil.
[0238] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je SO2; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C3-C10)cikloalkil.
[0239] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je SO2; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C3-C10)cikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0240] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je SO2; X<2>je NH; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C3-C10)cikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0241] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je N; m je 0; E je O; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C3-C10)cikloalkil.
[0242] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je N; m je 0; E je O; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C3-C10)cikloalkil.
[0243] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je N; m je 0; E je O; X<3>je NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C3-C10)cikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0244] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je N; m je 0; E je O; X<3>je NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C3-C10)cikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0245] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je CO-NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C3-C10)cikloalkil.
[0246] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je CO-NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C3-C10)cikloalkil.
[0247] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je CO-NH; R<4>i R<5>zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C3-C10)cikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0248] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je n 1; 2 ili 3; t je 0, 1 ili 2; y je 0 ili 1; z je 0, 1 ili 2; X<1>je CR<1>; m je 1; E je O; X<2>je NH; X<3>je CO-NH; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C3-C10)cikloalkil; X<5>je direktna veza, O ili CR<4>R<5>, a A<2>je (C2-C9)heteroaril.
[0249] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je A<1>je (C3-C10)cikloalkil.
[0250] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, pri čemu je A<2>je (C3-C10)cikloalkil.
[0251] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje opšte formule I, ili farmaceutski prihvatljivu so ili prolek istog, izabrano iz grupe koju čine:
1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il [2-(2,4'-difluorobifenil-4-il)propan-2-il]karbamat;
1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il {2-[4-(1,3-benzotiazol-6-il)fenil]propan-2-il}karbamat;
1-azabiciklo[3.2.2]non-4-il {1-[5-(4-fluorofenil)piridin-2-il]ciklopropil)karbamat; 1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il {1-[3-(4-fluorofenoksi)fenil]ciklopropil}karbamat;
1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il {1-[4-(1,3-benzotiazol-5-il)fenil]ciklopropil}karbamat;
1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il [1-(4'-fluoro-3'-metoksibifenil-4il)ciklopropil]karbamat;
1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il [3-(4'-fluorobifenil-4-il)oksetan-3-il]karbamat;
1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il {1-[6-(4-fluorofenoksi)piridin-2-il]ciklopropil}karbamat;
1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il [3-(4'-fluorobifenil-4-il)pentan-3-il]karbamat;
1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il {2-[2-(4-fluorofenil)-2H-indazol-6-il]propan-2 il}karbamat;
1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il {2-[2-(1H-pirol-1-il)piridin-4-il]propan-2-il}karbamat;
1-(3-etil-1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il)-3-[1-(4'-fluorobifenil-4-il)ciklopropil]urea;
N-(1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il)-N'-[1-(4'-fluorobifenil-4il)ciklopropil]etandiamid;
1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il (1-(4[(4,4difluorocikloheksil)oksi]fenil}ciklopropil) karbamat;
1-(4-metil-1-azabiciklo[3.2.2]non-4-il)-3-[1-(5-fenilpiridin-2-il)ciklopropil]urea;
1-[1-(4'-fluorobifenil-4-il)ciklopropil]-1-metil-3-(3-metil-1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il)urea;
1-[1-(4'-fluorobifenil-4-il)ciklopropil]-1-metil-3-(3-metil-1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il)urea;
1-{2-[4'-(2-metoksietoksi)bifenil-4-il]propan-2-il}-3-(3-metil-1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il)urea;
2-(1-azabiciklo[3.2.2]non-4-il)-N-[1-(5-fenilpiridin-2-il)ciklopropil]acetamid;
3-(4'-fluorobifenil-4-il)-3-metil-N-(4-metil-1-azabiciklo[3.2.2]non-4-il)butanamid; N-[2-(bifenil-4-il)propan-2-il]-N'-(3-metil-1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il)sulfurni diamid;
N-[2-(4'-fluorobifenil-4-il)propan-2-il]-N'-(3-metil-1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il)sulfurni diamid;
1-(3-butil-1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il)-3-{2-[1-(4-fluorofenil)-1H-pirazol-4-il]propan-2-il}urea;
1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il [4-(4-fluorofenil)-2-metilbut-3-in-2-il]karbamat;
1-(3-butil-1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il)-3-[4-(4-fluorofenil)-2-metilbut-3-in-2-il]urea;
N-[1-(4'-fluorobifenil-4-il)ciklopropil]-1,4-diazabiciklo[3.2.2]nonan-4-karboksamid;
1-(2-(4'-fluoro-[1,1'-bifenil]-4-il)propan-2-il)-3-(3-metil-1-azabiciklo[3.2.2]nonan-3-il)urea;
1-(2-(4'-fluoro-[1,1'-bifenil]-4-il)propan-2-il)-3-(4-metil-1-azabiciklo[4.2.2]dekan-4-il)urea;
1-(2-(4'-fluoro-[1,1'-bifenil]-4-il)propan-2-il)-3-(3-metil-1-azabiciklo[4.2.2]dekan-3-il)urea; i
1-(2-(4'-fluoro-[1,1'-bifenil}-4-il)propan-2-il)-3-(5-metil-1-azabiciklo[4.2.2]dekan-5-il)urea.
[0252] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na farmaceutsku kompoziciju za lečenje bolesti ili poremećaja posredovanog glukozilceramid sintazom (GCS) ili bolesti ili poremećaja u kojima je GCS impliciran kod subjekta kojem je takav tretman potreban, a koja obuhvata primenu efektivne količine jedinjenja formule I na subjektu.
[0253] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na metodu za lečenje bolesti ili poremećaja posredovanog glukozilceramid sintazom (GCS) ili bolesti ili poremećaja u kojima je GCS impliciran kod subjekta kojem je takav tretman potreban, a koja obuhvata primenu efektivne količine jedinjenja formule I na subjektu.
[0254] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na metodu za lečenje bolesti ili poremećaja kao što je karcinom.
[0255] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na metodu za lečenje bolesti ili poremećaja kao što je metabolički poremećaj.
[0256] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na metodu za lečenje bolesti ili poremećaja kao što je neuropatska bolest.
[0257] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na metodu gde je neuropatska bolest Alchajmerova bolest.
[0258] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na metodu gde je neuropatska bolest Parkinsonova bolest.
[0259] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na metodu za izazivanje smanjene katalitičke aktivnosti glukozilceramid sintaze u ćeliji, in vitro, koja obuhvata kontaktiranje ćelije sa efektivnom količinom jedinjenja formule I.
[0260] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, predstavljeno sledećom strukturnom formulom,
ili farmaceutski prihvatljivom solju ili prolekom istog.
[0261] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na jedinjenje formule I, predstavljeno sledećom strukturnom formulom,
ili farmaceutski prihvatljivom solju ili prolekom istog.
[0262] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na metodu lečenja subjekta dijagnostikovanog sa bolešću skladištenja lipozoma, pri čemu metoda uključuje primenu efektivne količine jedinjenja formule I, a u određenim slučajevima jedinjenje je predstavljeno sledećim strukturnim formulama,
ili farmaceutski prihvatljivom solju ili prolekom istog, ili
ili farmaceutski prihvatljivom solju ili prolekom istog.
Ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenje definisano u patentnim zahtevima, ili farmaceutski prihvatljivu so istog, za upotrebu u lečenju bolesti skladištenja lipozoma.
[0263] U određenim otelotvorenjima pronalaska, bolest skladištenja lipozoma nastaje usled defekta u putu glikosfingolipida.
[0264] U određenim otelotvorenjima pronalaska, bolest skladištenja lipozoma je Gošeova bolest, Fabrijeva bolest, GM1-gangliozidoza, nedostatak GM2aktivatora, Tej-Saksova bolest ili Sandhofova bolest.
[0265] Ovaj pronalazak se dalje odnosi na jedinjenje za upotrebu u lečenju
bolesti skladištenja lipozoma, pri čemu se jedinjenje koristi u kombinaciji sa lizozomskim enzimom.
[0266] U određenim otelotvorenjima pronalaska, lizozomski enzim je glukocerebrozidaza, alfa-galaktozidaza A, heksozaminidaza A, heksozaminidaza B ili GM1-gangliozid-βgalaktozidaza.
[0267] U određenim otelotvorenjima obelodanjivanja, subjekat ima povišene nivoe lizozomskog supstrata pre lečenja, a nakon lečenja subjekat ima niže kombinovane količine lizozomskog supstrata u urinu i plazmi od subjekta lečenog samo lizozomskim enzimom ili samo jedinjenjem.
[0268] U određenim otelotvorenjima obelodanjivanja, supstrat je globotriaozilceramid ili lizo-globotriaozilceramid, i kombinacije istih.
[0269] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na metodu redukcije aktivnosti glukozilceramid sintaze (GCS) kod subjekta dijagnostikovanog sa bolešću skladištenja lipozoma, uključujući primenu na pacijenta efektivne količine jedinjenja formule I, bilo samostalno ili kao kombinovana terapija sa enzimskom zamenskom terapijom.
[0270] Ovo obelodanjivanje se dalje odnosi na metodu redukcije akumulacije materijala koji potiče od GCS kod subjekta dijagnostikovanog sa bolešću skladištenja lipozoma, uključujući primenu na pacijenta efektivne količine jedinjenja formule I, bilo samostalno ili kao kombinovana terapija sa enzimskom zamenskom terapijom.
[0271] Ovo obelodanjivanje pruža metodu kombinovane terapije za lečenje subjekta dijagnostikovanog sa bolešću skladištenja lipozoma, koja obuhvata naizmeničnu primenu enzimske zamenske terapije i terapije malim molekulima.
[0272] Ovo obelodanjivanje pruža metodu kombinovane terapije za lečenje subjekta dijagnostikovanog sa bolešću skladištenja lipozoma, koja obuhvata istovremenu primenu enzimske zamenske terapije i terapije malim molekulima.
[0273] U različitim kombinovanim terapijama ovog obelodanjivanja, podrazumeva se da primena terapije malim molekulima može nastupiti pre, istovremeno sa, ili posle, primene enzimske zamenske terapije. Slično tome, primena enzimske zamenske terapije može nastupiti pre, istovremeno sa, ili posle, primene terapije malim molekulima.
Definicije
[0274] Kao što se ovde koristi, termin „farmaceutski prihvatljiva so“ podrazumeva ili farmaceutski prihvatljivu so dobijenu adicijom kiseline ili farmaceutski prihvatljivu so dobijenu adicijom baze od trenutno obelodanjenog jedinjenja, koja se može primeniti bez ikakvih značajnih nepoželjnih bioloških efekata ili bilo kakvih štetnih interakcija sa bilo kojom drugom komponentom farmaceutske kompozicije u kojoj se može nalaziti.
[0275] Kao što se ovde koristi, termin „prolek“ podrazumeva farmakološki derivat matičnog molekula leka koji zahteva biotransformaciju, bilo spontanu ili enzimsku, unutar organizma da bi oslobodio aktivni lek. Na primer, prolekovi su varijacije ili derivati jedinjenja formule I koji imaju grupe koje se mogu cepati pod određenim metaboličkim uslovima, a koje, kada se cepi, postaju jedinjenja formule I. Takvi prolekovi su tada farmaceutski aktivni in vivo, kada prolaze solvolizu pod fiziološkim uslovima ili podležu enzimskoj degradaciji. Prolekovi ovde mogu biti nazvani jednostruki, dvostruki, trostruki itd., zavisno od broja koraka biotransformacije potrebnih za oslobađanje aktivnog leka unutar organizma, i broja funkcionalnih grupa prisutnih u prekursorskom obliku. Oblici proleka često nude prednosti rastvorljivosti, tkivne kompatibilnosti ili odloženog oslobađanja u sisarskom organizmu (videti, Bundgard, Design of Prodrugs, pp.7-9, 21-24, Elsevier, Amsterdam 1985 and Silverman,
[0276] The Organic Chemistry of Drug Design and Drug Action, pp.352-401, Academic Press, San Diego, Calif., 1992). Prolekovi poznati u struci uključuju dobro poznate derivate kiselina, kao što su, na primer, estri pripremljeni reakcijom matičnih kiselina sa pogodnim alkoholom, amidi pripremljeni reakcijom matičnog kiselinskog jedinjenja sa aminom, bazne grupe reagovale da formiraju acilovani derivat baze, itd. Naravno, drugi derivati prolekova mogu se kombinovati sa drugim karakteristikama obelodanjenim ovde kako bi se poboljšala bioraspoloživost. Kao takvi, stručnjaci u ovoj oblasti će ceniti da se neka od trenutno obelodanjenih jedinjenja koja imaju slobodne amino, amido, hidroksi ili karboksilne grupe mogu pretvoriti u prolekove. Prolekovi uključuju jedinjenja koja imaju ostatak aminokiseline, ili polipeptidni lanac od dva ili više (npr. dva, tri ili četiri) ostatka aminokiselina koji su kovalentno spojeni peptidnim vezama sa slobodnim amino, hidroksi ili karboksilnim grupama trenutno obelodanjenih jedinjenja. Ostaci aminokiselina uključuju 20 prirodnih aminokiselina koje se obično označavaju trostrukim simbolima, a takođe uključuju 4-hidroksiprolin, hidroksilizin, dezmozin, izodezmozin, 3-metilhistidin, norvalin, beta-alanin, gama-aminobuternu kiselinu, citrulin homocistein, homoserin, ornitin i metionin sulfon. Prolekovi takođe uključuju jedinjenja koja imaju karbonatnu, karbamatnu, amidnu ili alkil estersku grupu kovalentno vezanu za bilo koji od gore navedenih supstituenata obelodanjenih ovde.
[0277] Kao što se ovde koristi, termin „(C1-C6)alkil“ podrazumeva zasićeni linearni ili razgranati slobodni radikal koji se suštinski sastoji od 1 do 6 atoma ugljenika i odgovarajućeg broja atoma vodonika. Primeri (C1-C6)alkil grupa uključuju metil, etil, n-propil, izopropil, nbutil, izobutil, itd. Naravno, druge (C1-C6)alkil grupe biće lako očigledne stručnjacima u ovoj oblasti s obzirom na prednosti ovog obelodanjivanja.
[0278] Kao što se ovde koristi, termin „(C3-C10)cikloalkil“ podrazumeva nearomatični zasićeni slobodni radikal koji formira najmanje jedan prsten koji se suštinski sastoji od 3 do 10 atoma ugljenika i odgovarajućeg broja atoma vodonika. Kao takve, (C3-C10)cikloalkil grupe mogu biti monociklične ili multiciklične. Pojedinačni prstenovi takvih multicikličnih cikloalkil grupa mogu imati različite veze, npr. fuzionisane, premošćene, spiro, itd. pored kovalentne supstitucije veze. Primeri (C3-C10)cikloalkil grupa uključuju ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil, norbornanil, biciklo[3.2.1]oktanil, oktahidro-pentalenil, spiro[4.5]dekanil, ciklopropil supstituisan ciklobutilom, ciklobutil supstituisan ciklopentilom, cikloheksil supstituisan ciklopropilom, itd. Naravno, druge (C3-C10)cikloalkil grupe biće lako očigledne stručnjacima u ovoj oblasti s obzirom na prednosti ovog obelodanjivanja.
[0279] Kao što se ovde koristi, termin „(C2-C9)heterocikloalkil“ podrazumeva nearomatični slobodni radikal koji ima 3 do 10 atoma (tj. atoma prstena) koji formiraju najmanje jedan prsten, pri čemu su 2 do 9 atoma prstena ugljenik, a preostali atomi prstena (tj. hetero atomi prstena) izabrani iz grupe koja se sastoji od azota, sumpora i kiseonika. Kao takve, (C2-C9)heterocikloalkil grupe mogu biti monociklične ili multiciklične. Pojedinačni prstenovi takvih multicikličnih heterocikloalkil grupa mogu imati različite veze, npr. fuzionisane, premošćene, spiro, itd. pored kovalentne supstitucije veze. Primeri (C2-C9)heterocikloalkil grupa uključuju pirolidinil, tetrahidrofuranil, dihidrofuranil, tetrahidropiranil, piranil, tiopiranil, aziridinil, azetidinil, oksiranil, metilendioksil, hromenil, barbituril, izoksazolidinil, 1,3-oksazolidin-3-il, izotiazolidinil, 1,3-tiazolidin-3-il, 1,2-pirazolidin-2-il, 1,3-pirazolidin-1-il, piperidinil, tiomorfolinil, 1,2-tetrahidrotiazin-2-il, 1,3-tetrahidrotiazin-3-il, tetrahidrotiadiazinil, morfolinil, 1,2-tetrahidrodiazin-2-il, 1,3-tetrahidrodiazin-1-il, tetrahidroazepinil, piperazinil, piperizin-2-onil, piperizin-3-onil, hromanil, 2-pirolinil, 3-pirolinil, imidazolidinil, 2-imidazolidinil, 1,4-dioksanil, 8-azabiciklo[3.2.1]oktanil, 3-azabiciklo[3.2.1]oktanil, 3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktanil, 2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptanil, 2,5-diazabiciklo[2.2.2]oktanil, oktahidro-2H-pirido[1,2-a]pirazinil, 3-azabiciklo[4.1.0]heptanil, 3-azabiciklo[3.1.0]heksanil 2-azaspiro[4.4]nonanil, 7-oksa-1-aza-spiro[4.4]nonanil, 7-azabiciklo[2.2.2]heptanil, oktahidro-1H-indolil, itd. Generalno, (C2-C9)heterocikloalkil grupa je tipično vezana za glavnu strukturu preko atoma ugljenika ili atoma azota. Naravno, druge (C2-C9)heterocikloalkil grupe biće lako očigledne stručnjacima u ovoj oblasti s obzirom na prednosti ovog obelodanjivanja.
[0280] Kao što se ovde koristi, termin „(C2-C9)heteroaril“ podrazumeva aromatični slobodni radikal koji ima 5 do 10 atoma (tj. atoma prstena) koji formiraju najmanje jedan prsten, pri čemu su 2 do 9 atoma prstena ugljenik, a preostali atomi prstena (tj. hetero atomi prstena) izabrani iz grupe koja se sastoji od azota, sumpora i kiseonika. Kao takve, (C2-C9)heteroaril grupe mogu biti monociklične ili multiciklične. Pojedinačni prstenovi takvih multicikličnih heteroaril grupa mogu imati različite veze, npr. fuzionisane, itd. pored kovalentne supstitucije veze. Primeri (C2-C9)heteroaril grupa uključuju furil, tienil, tiazolil, pirazolil, izotiazolil, oksazolil, izoksazolil, pirolil, triazolil, tetrazolil, imidazolil, 1,3,5-oksadiazolil, 1,2,4-oksadiazolil, 1,2,3-oksadiazolil, 1,3,5-tiadiazolil, 1,2,3-tiadiazolil, 1,2,4-tiadiazolil, piridil, pirimidil, pirazinil, piridazinil, 1,2,4-triazinil, 1,2,3-triazinil, 1,3,5-triazinil, pirazolo[3,4-b]piridinil, cinolinil, pteridinil, purinil, 6,7-dihidro-5H-[1]pirindinil, benzo[b]tiofenil, 5,6,7,8-tetrahidro-hinolin-3-il, benzoksazolil, benzotiazolil, benzizotiazolil, benzizoksazolil, benzimidazolil, tianaftenil, izotianaftenil, benzofuranil, izobenzofuranil, izoindolil, indolil, indolizinil, indazolil, izohinolil, hinolil, ftalazinil, hinoksalinil, hinazolinil i benzoksazinil, itd. Generalno, (C2-C9)heteroaril grupa je tipično vezana za glavnu strukturu preko atoma ugljenika, međutim, stručnjaci u ovoj oblasti će shvatiti kada se određeni drugi atomi, npr. hetero atomi prstena, mogu vezati za glavnu strukturu. Naravno, druge (C2-C9)heteroaril grupe biće lako očigledne stručnjacima u ovoj oblasti s obzirom na prednosti ovog obelodanjivanja.
[0281] Kao što se ovde koristi, termin „(C6-C10)aril“ podrazumeva fenil ili naftil.
[0282] Kao što se ovde koristi, termin „halo“ podrazumeva fluor, hlor, brom ili jod.
[0283] Kao što se ovde koristi, termin „amino“ podrazumeva slobodni radikal koji ima atom azota i 1 do 2 atoma vodonika. Kao takav, termin amino se generalno odnosi na primarne i sekundarne amine. U tom smislu, kao što se ovde koristi i u priloženim zahtevima, tercijarni amin je predstavljen opštom formulom RR'N-, pri čemu su R i R' ugljenični radikali koji mogu ili ne moraju biti identični. Ipak, termin „amino“ se generalno može koristiti ovde za opisivanje primarnog, sekundarnog ili tercijarnog amina, a stručnjaci u ovoj oblasti će lako moći da utvrde identifikaciju, s obzirom na kontekst u kojem se ovaj termin koristi u ovom obelodanjivanju.
[0284] Kao što se ovde koristi, termin „kombinovana terapija“ podrazumeva lečenje pacijenta sa dve ili više terapeutskih platformi (npr. enzimska zamenska terapija i terapija malim molekulima) u rotirajućim, naizmeničnim i/ili istovremenim rasporedima lečenja. Primeri rasporeda lečenja mogu uključivati, ali nisu ograničeni na: (1) enzimsku zamensku terapiju, zatim terapiju malim molekulima; (2) terapiju malim molekulima, zatim enzimsku zamensku terapiju; (3) enzimsku zamensku terapiju istovremeno sa terapijom malim molekulima, i (4) i bilo koju kombinaciju prethodnih. Kombinovana terapija može obezbediti vremensko preklapanje terapeutskih platformi, po potrebi, zavisno od kliničkog toka date bolesti skladištenja kod datog subjekta.
Kao što se ovde koristi, termin „enzimska zamenska terapija“, ili „ERT“ podrazumeva primenu egzogeno proizvedenog prirodnog ili rekombinantnog enzima na pacijentu kojem je to potrebno. U slučaju bolesti skladištenja lipozoma, na primer, pacijent akumulira štetne nivoe supstrata (tj. uskladištenog materijala) u lizozomima zbog deficita ili defekta u enzimu odgovornom za metabolizam supstrata, ili zbog deficita u enzimskom aktivatoru potrebnom za pravilnu enzimsku funkciju. Enzimska zamenska terapija se pruža pacijentu radi redukcije nivoa (tj. smanjenja) akumuliranog supstrata u zahvaćenim tkivima. Tabela 1 pruža listu bolesti skladištenja lizozoma i identifikuje odgovarajući nedostatak enzima i akumulirani supstrat za svaku bolest. Enzimske zamenske terapije za lečenje bolesti skladištenja lizozoma su poznate u struci. U skladu sa kombinovanom terapijom ovog obelodanjivanja, lizozomski enzimi identifikovani u tabeli 1 mogu se koristiti za enzimsku zamensku terapiju radi redukcije nivoa odgovarajućeg supstrata kod pacijenta dijagnostikovanog sa dotičnom bolešću skladištenja lizozoma.
Kao što se ovde koristi, „efektivna količina“ enzima ili malog molekula, kada se primeni na subjektu u kombinovanoj terapiji ovog obelodanjivanja, je količina dovoljna da poboljša klinički tok bolesti skladištenja lizozoma, gde se kliničko poboljšanje meri bilo kojim od različitih definisanih parametara dobro poznatih stručnjaku.
Skraćenice
[0285]
ACN se odnosi na acetonitril.
DMF se odnosi na N,N-dimetilformamid.
DMSO se odnosi na dimetilsulfoksid.
EtOAc se odnosi na etil acetat.
EtOH se odnosi na etanol.
Hunigova baza se odnosi na diizopropiletilamin („DIPEA“).
MeOH se odnosi na metanol.
NaOH se odnosi na natrijum hidroksid.
THF se odnosi na tetrahidrofuran.
TFA se odnosi na trifluoroacetnu kiselinu.
[0286] Dodatne karakteristike i prednosti obelodanjenih jedinjenja biće očigledne iz sledećeg detaljnog opisa određenih otelotvorenja.
KRATAK OPIS CRTEŽA
[0287]
SLIKA 1 Prikazuje metabolički put za potencijalnu sintezu Gb3 i lizo-Gb3. Dokumentovani sintetički putevi prikazani su crnim strelicama, a nedokumentovani (potencijalni) putevi su prikazani sivim strelicama.
SLIKA 2A Hemijska struktura (S)-hinuklidin-3-il (2-(2-(4-fluorofenil)tiazol-4-il)propan-2-il)karbamata.
SLIKA 2B Hemijska struktura hinuklidin-3-il (2-(4'-fluoro-[1,1'-bifenil]-3-il)propan-2-il)karbamata.
SLIKA 3
Koncentracija Gb3 u bubrezima (A) i srcu (B) 12-mesečnih miševa obolelih od Fabrijeve bolesti, tretiranih sa 300 mg/kg/dan (1R,2R)-oktanskom kiselinom [2-(2',3'-dihidrobenzo[1,4]dioksin-6'-il)-2-hidroksi-1-pirolidin-1-ilmetil-etil]-amid-L-vinskom kiselinom soli („GZ 638“) ili 60 mg/kg/dan (S)-hinuklidin-3-il (2-(2-(4-fluorofenil)tiazol-4-il)propan-2-il)karbamat (S)-2-hidroksisukcinat soli („GZ 452“).
SLIKA 4A
Vremenska linija studije koja prikazuje miševa obolelih od Fabrijeve bolesti, koji su počeli tretman sa 60 mg/kg/dan GZ 452, počevši sa 3, 8 i 12 meseci starosti. Periodična uzorkovanja krvi, sakupljanje urina, testovi vruće ploče i komore aktivnosti su obavljani kako je naznačeno.
SLIKA 4B
Koncentracija Gb3 u urinu (A) i plazmi (B) miševa obolelih od Fabrijeve bolesti, koji su počeli tretman sa 60 mg/kg/dan GZ 452 sa 3 ili 8 meseci starosti. Tretman lekom (Rx) trajao je 2 ili 4 meseca.
SLIKA 5
Koncentracija Gb3 (A) i lizo-Gb3 (B) u tkivu bubrega 12-mesečnih miševa obolelih od Fabrijeve bolesti, koji su bili netretirani (UNT) ili tretirani sa 60 mg/kg/dan GZ 452 tokom 4 meseca (SRT).
SLIKA 6A
Vremenska linija studije koja prikazuje miševe obolele od Fabrijeve bolesti, tretirane alfagalaktozidazom A (1 mg/kg svaka 2 meseca) ili sa 60 mg/kg/dan GZ 452 ili kombinacijom ova 2 tretmana, počevši sa 3 meseca starosti. Periodična uzorkovanja krvi, sakupljanje urina i testovi na vrućoj ploči su obavljani kako je naznačeno.
SLIKA 6B
Koncentracije Gb3 (A&C) i lizo-Gb3 (C&D) u plazmi (A&C) i urinu (B&D) 5-mesečnih miševa obolelih od Fabrijeve bolesti, tretiranih samo alfa-galaktozidazom A (ERT), samo GZ 452 (SRT) ili kombinacijom ova dva (E+S) tokom 2 meseca.
SLIKA 7
Analiza N-vezanih izoformi acilnog lanca Gb3 izolovanog iz plazme, urina i bubrega miša obolelog od Fabrijeve bolesti.
SLIKA 8
Latencija (vreme odziva) na toplotni stimulus (vruća ploča na 55°C) 10-mesečnih miševa obolelih od Fabrijeve bolesti nakon 7 meseci tretmana alfa-galaktozidazom A (ERT), GZ 452 (SRT) ili kombinacijom ova dva (E+S) u odnosu na netretirane miševe (UNT) i miševe divljeg tipa (WT).
SLIKA 9 Glukozil ceramid (GluCer) i glukozil sfingozin (GluSph) su značajno povišeni u mozgu neonatalnih K14 miševa. Masena spektrometrijska analiza glukozil- i galaktozilceramida pokazuje da je (A) GluCer bio povišen 10 puta kod K14 miševa (životinjski model neonatalne Gošeove bolesti, poznate i kao Gošeova bolest tipa 2) u poređenju sa WT miševima tokom prve 2 nedelje života, (B) nivoi GalCer bili su slični tokom vremena kod K14 i WT miševa, (C) nivoi GluSph bili su ≥10 puta viši kod K14 miševa nego kod WT miševa iste starosti tokom prve 2 nedelje života; nivoi GluSph kod WT životinja bili su ispod nivoa detekcije (<0,3 ng/mg). (D) Nije bilo značajnih razlika u težini mozga između K14 i WT miševa tokom prve 2 nedelje života. Tačke podataka predstavljaju srednje vrednosti, a trake greške SEM za N=4.
SLIKA 10 Sistemska primena hinuklidin-3-il (2-(4'-fluoro-[1,1'-bifenil]-3-il)propan-2-il)karbamata („GZ 161“) smanjuje nivoe GluCer i GluSph u mozgu K14 miša. K14 i WT miševi su tretirani svakodnevno (IP) počevši od P4 sa vehikulom ili 5 mg/kg GZ 161, a mozgovi su analizirani na GluCer i GluSph na P10. Životinje tretirane sa GZ 161 bile su asimptomatske u to vreme. Tretman GZ 161 smanjio je (A) nivoe GluCer kod K14 miševa za ~70% i (B) nivoe GluSph za ~60%. Nivoi oba glikosfingolipida nakon tretmana ostali su značajno povišeni u poređenju sa njihovim WT leglima, a genotipovi su potvrđeni postmortem analizom DNK. *p<0,05. N=4/grupi.
SLIKA 11 Sistemska primena GZ 161 smanjuje CD68 bojenje u celom mozgu K14 miševa. (Gornji paneli) Reprezentativno imunohistohemijsko CD68 bojenje na P10 u hipokampusu, talamusu, moždanom stablu i malom mozgu K14 miševa tretiranih svakodnevno (IP) počevši od postnatalnog dana 4 (P4) sa vehikulumom ili GZ 161 i WT miševa. (Donji paneli) Kvantifikacija bojenja u gore prikazanim grupama, pokazujući da sistemski tretman GZ 161 rezultira značajnom redukcijom CD68+ ćelija u svim regionima mozga. Slične redukcije su primećene u drugim strukturama kao što su olfaktorna lukovica i frontalni korteks (podaci nisu prikazani). **p<0,01. N=4/grupi
SLIKA 12 Sistemska primena GZ 161 smanjuje F4/80 bojenje u nekim regionima mozga K14 miševa. (Gornji paneli) Reprezentativno imunohistohemijsko F4/80 bojenje na P10 u hipokampusu, talamusu, moždanom stablu i malom mozgu K14 miševa tretiranih svakodnevno (IP) počevši od P4 sa vehikulumom ili GZ 161 i WT miševa. (Donji paneli) Kvantifikacija bojenja u gore prikazanim grupama, pokazujući da sistemski tretman GZ 161 rezultira značajnom redukcijom F4/80+ ćelija u talamusu i moždanom stablu. Slične redukcije su primećene u drugim strukturama kao što su olfaktorna lukovica i frontalni korteks; statističke razlike su primećene u obe strukture (podaci nisu prikazani). *p<0,05. N=4/grupi
SLIKA 13 Sistemska primena GZ 161 smanjuje gliozu kod K14 miševa. (Gornji paneli) Reprezentativno imunohistohemijsko GFAP bojenje na P10 u hipokampusu, talamusu, moždanom stablu i malom mozgu K14 miševa tretiranih svakodnevno (IP) počevši od P4 sa vehikulumom ili GZ 161 i WT miševa. (Donji paneli) Kvantifikacija bojenja u gore prikazanim grupama, pokazujući da sistemski tretman GZ 161 rezultira značajnom redukcijom GFAP+ ćelija u hipokampusu i malom mozgu; statističke razlike su primećene u obe strukture (podaci nisu prikazani).
SLIKA 14 Sistemska primena GZ 161 povećava prosečni životni vek K14 miševa. K14 miševi su injicirani (IP) svakodnevno počevši od P4 sa vehikulumom ili GZ 161 ili im je data kombinovana terapija tri intracerebroventrikularne (ICV) injekcije rhGC na P1, 2, 3 zajedno sa svakodnevnim (IP) injekcijama GZ 161 počevši od P4. Miševi tretirani vehikulumom imali su prosečni životni vek od 15 dana (N=25); miševi tretirani GZ 161 imali su prosečni životni vek od 18 dana (N=12; p<0,0001 u poređenju sa miševima tretiranim vehikulumom); miševi na kojima je ko-primenjivan GZ 161 i rhGC imali su prosečni životni vek od 26 dana (N=13).
SLIKA 15 GZ 161 izgleda da prolazi kroz krvno-placentnu barijeru. Sistemska primena (20 mg/kg/dan u hrani) GZ 161 na trudnim WT miševima redukuje opterećenje sa GluCer u homogenatima celog mozga miševa pri rođenju (P0). N=7; p<0,0001)
SLIKA 16 Tretiranje K14 miševa sa GZ 161 in utero ima minimalan efekat na preživljavanje. K14 miševi tretirani svakodnevno (IP) počevši od P4 sa vehikulumom imali su prosečni životni vek od 14 dana (N=13). Sistemska primena (20 mg/kg/dan u hrani) GZ 161 na trudnim K14 miševima, a zatim svakodnevna sistemska (IP) primena GZ 161 (5 mg/kg) na mladuncima počevši od P0 produžila je životni vek na 19 dana (N=13), što je sličan rezultat tretmanu mladunaca svakodnevno sistemski (IP) sa GZ 161 u dozi od 5 mg/kg počevši od P4 (N=12).
SLIKA 17 Nivoi Gb3 u tkivu bubrega 12-mesečnih muških i ženskih miševa obolelih od Fabrijeve bolesti, tretiranih sa GZ 452, GZ 161 i GZ 638. Miševi su počeli tretman sa ~8 meseci starosti i tretirani su 4 meseca sa: 60 mg/kg/dan GZ 452, 120 mg/kg/dan GZ 452, 20 mg/kg/dan GZ 161, 300 mg/kg/dan GZ 638, plus WT i UNT kontrole.
DETALJAN OPIS
[0288] Iako će specifična otelotvorenja ovog obelodanjivanja sada biti opisana sa referencama na pripreme i šeme, treba razumeti da su takva otelotvorenja samo primer i da su ilustracija malog broja od mnogih mogućih specifičnih otelotvorenja koja mogu predstavljati primenu principa ovog obelodanjivanja. Različite promene i modifikacije biće očigledne stručnjacima u ovoj oblasti s obzirom na prednosti ovog obelodanjivanja.
[0289] Ovaj pronalazak je definisan u priloženim patentnim zahtevima.
[0290] Osim ako nije drugačije definisano, svi tehnički i naučni termini korišćeni ovde imaju isto značenje kao što se uobičajeno podrazumeva od strane stručnjaka iz oblasti kojoj ovo obelodanjivanje pripada. Iako se druga jedinjenja ili metode mogu koristiti u praksi ili testiranju, određene preferirane metode su sada opisane u kontekstu sledećih priprema i šema.
PRIPREMA A [0291]
PRIPREMA B
[0292]
PRIPREMA D
[0294]
[0296] U reakciji 1 pripreme A, jedinjenje formule A-7 se konvertuje u odgovarajuće jedinjenje formule A-1, pri čemu je X OH, redukcijom A-7 redukcionim sredstvom, poželjno litijum-aluminijum-hidridom u aprotičnom rastvaraču kao što je tetrahidrofuran. Reakcija se meša na temperaturi između 0°C i sobne temperature u vremenskom periodu između oko 15 minuta do oko 2 sata, poželjno oko 30 minuta. Alternativno, jedinjenje formule A-7 se konvertuje u odgovarajuće jedinjenje formule A-1, pri čemu je X OH, redukcijom A-7 pod približno 1 atmosferom vodonika u prisustvu katalizatora, poželjno platina oksida, i polarnog rastvarača kao što je metanol ili etanol u periodu od 2 do 6 sati, poželjno 4 sata. Alternativno, jedinjenje formule A-7 se konvertuje u odgovarajuće jedinjenje formule A-1, pri čemu je X NH, reakcijom A-7 sa hidroksilamin hidrohloridom i natrijum-acetatom u polarnom rastvaraču kao što je etanol, metanol, izopropanol, poželjno izopropanol. Reakciona smeša se meša na temperaturi između 50-80°C u periodu od 2 do 7 sati, poželjno 3 sata. Zatim se tako formirano jedinjenje konvertuje u jedinjenje formule A-1 redukcionim sredstvom, poželjno metalnim natrijumom u polarnom protičnom rastvaraču kao što je etanol, metanol, propanol, poželjno n-propanol. Reakcija se meša preko noći na 50-80°C, poželjno na temperaturi refluksa rastvarača.
[0297] U reakciji 2 pripreme A, jedinjenje formule A-7 se konvertuje u odgovarajuće jedinjenje formule A-5, pri čemu su R1, n i z kao što je gore definisano, dodavanjem rastvora R1-magnezijum-bromida u etru rastvoru A-7 u aprotičnom rastvaraču, kao što je etar, na temperaturi između oko -60°C do oko -90°C, poželjno oko -78°C u vremenskom periodu između oko 1 sata do oko 4 sata, poželjno oko 2 sata. Alternativno, jedinjenje formule A-7 može reagovati sa R1-litijumom da bi se dobilo jedinjenje formule A-5.
[0298] U reakciji 3 pripreme A, jedinjenje formule A-5 se konvertuje u odgovarajuće jedinjenje formule A-4, pri čemu su R1, n i z kao što je gore definisano, tretiranjem A-5 jakom kiselinom, poželjno sumpornom kiselinom, u prisustvu acetonitrila. Reakcija se meša preko noći na sobnoj temperaturi.
[0299] U reakciji 4 pripreme A, jedinjenje formule A-4 se konvertuje u odgovarajuće jedinjenje formule A-3, pri čemu su R1, n i z kao što je gore definisano, tretiranjem A-4 kiselinom, poželjno hlorovodoničnom kiselinom. Reakcija se meša pod refluksom u periodu od 18 do 72 sata, poželjno 24 sata i bazifikuje se do pH=8 tretiranjem neorganskom bazom u vodenom rastvoru, kao što je natrijum-hidroksid.
[0300] U reakciji 5 pripreme A, jedinjenje formule A-7 se konvertuje u odgovarajuće jedinjenje formule A-6, pri čemu su R1, n i z kao što je gore definisano, reakcijom A-7 sa trifenil-fosfonijum ilidom da bi se dobilo odgovarajuće alken jedinjenje formule A-6.
Reakcija se meša na sobnoj temperaturi preko noći.
[0301] U reakciji 6 pripreme A, jedinjenje formule A-6 se konvertuje u odgovarajuće jedinjenje formule A-3, pri čemu su R1, n i z kao što je gore definisano, redukcijom A-6 pod približno 1 atmosferom vodonika u prisustvu katalizatora, poželjno paladijuma na ugljeniku, i polarnog rastvarača, kao što je metanol, etanol ili etil acetat. Reakcija se meša na sobnoj temperaturi u vremenskom periodu između oko 2 sata do oko 24 sata, poželjno oko 18 sati. Zatim se tako formirano jedinjenje tretira bazom, poželjno litijum-hidroksidom, u smeši rastvarača kao što su tetrahidrofuran, metanol i voda da bi se dobilo jedinjenje A-3. Reakcija se meša preko noći na sobnoj temperaturi.
[0302] U reakciji 1 pripreme B, jedinjenje formule B-2 se konvertuje u odgovarajuće jedinjenje formule B-1, redukcijom B-2 redukcionim sredstvom, poželjno litijumaluminijum-hidridom u aprotičnom rastvaraču kao što je tetrahidrofuran. Reakcija se meša na temperaturi između 0°C i sobne temperature u vremenskom periodu između oko 15 minuta do oko 2 sata, poželjno oko 30 minuta.
[0303] U reakciji 1 pripreme C, jedinjenje C-4 se konvertuje u odgovarajuće jedinjenje formule C-3, pri čemu je X brom ili hlor, reakcijom C-4 sa boronskom kiselinom u prisustvu katalizatora, poželjno 1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen-paladijum(II)-dihlorida, i kalijumkarbonata. Reakcija se vrši u mikrotalasnoj pećnici u smeši dimetoksietana i vode na temperaturi između oko 130°C do oko 170°C, poželjno oko 150°C, u vremenskom periodu između oko 15 minuta do oko 1 sata, poželjno oko 30 minuta. Alternativno, reakcija se može izvesti koristeći rastvarač kao što je dioksan i mešati preko noći na 100°C pod konvencionalnim zagrevanjem.
[0304] U reakciji 2 pripreme C, jedinjenje C-3 se konvertuje u odgovarajuće jedinjenje formule C-1, pri čemu su f od 1 do 8 i A1, X5 i A2 su kao što je gore definisano, dodavanjem etil-magnezijum-bromida kap po kap smeši C-3 i titanijum-izopropoksida u etru. Reakcija se meša na temperaturi između oko -50°C do oko -90°C, poželjno oko -70°C. Dobijena reakciona smeša se ostavi da se zagreje na oko 20°C do oko 30°C, poželjno oko 25°C, i ostavi da se meša dodatni vremenski period između oko 30 minuta do oko 2 sata, poželjno oko 1 sat. Boron-trifluorid-dietil-eterat se zatim dodaje smeši kap po kap na temperaturi između oko 20°C do oko 30°C, poželjno oko 25°C.
[0305] U reakciji 3 pripreme C, jedinjenje C-3 se konvertuje u odgovarajuće jedinjenje formule C-2, pri čemu su A1, X5 i A2 kao što je gore definisano, prvo mešanjem suspenzije cerijum(III)-hlorida u aprotičnom rastvaraču, kao što je tetrahidrofuran, na sobnoj temperaturi u vremenskom periodu između oko 30 minuta do oko 2 sata, poželjno oko 1 sat. Dobijena suspenzija se ohladi na temperaturu između oko -60°C do oko -90°C, poželjno oko -78°C i dodaje se organolitijumski agens, poželjno metil-litijum u etarskom rastvoru. Dobijeni organocerijumski kompleks se ostavi da se formira u vremenskom periodu između oko 30 minuta do oko 2 sata, poželjno oko 1 sat, nakon čega sledi dodavanje C-3 u aprotičnom rastvaraču, kao što je tetrahidrofuran. Dobijena reakciona smeša se zatim zagreje na sobnu temperaturu i ostavi da se meša u vremenskom periodu između oko 16 sati do oko 20 sati, poželjno oko 18 sati.
[0306] U reakciji 1 pripreme D, jedinjenje D-5, pri čemu je R CO2Et ili CN i X je brom ili hlor, konvertuje se u odgovarajuće jedinjenje formule D-3, reakcijom D-5 sa alkildihalogenidom kao što je 1,2-dibromoetan. Zatim se tako formirano jedinjenje tretira neorganskom bazom kao što je litijum-hidroksid ili kalijum-hidroksid, u smeši rastvarača kao što su tetrahidrofuran, metanol, glikol i voda da bi se dobilo jedinjenje D-3, pri čemu je f od 1 do 8. Reakcija se meša preko noći na temperaturi između 25°C i 130°C. Alternativno, da bi se formiralo odgovarajuće jedinjenje formule D-3, pri čemu je X X5-A2, D-5 se prvo mora reagovati prema proceduri o kojoj se govorilo gore u reakciji 1 pripreme C.
[0307] U reakciji 2 pripreme D, jedinjenje D-3 se konvertuje u odgovarajuće jedinjenje formule D-1 reakcijom D-3 sa bazom kao što je trietilamin i difenilfosforil-azidom u aprotičnom rastvaraču kao što je toluen. Reakcija je zagrejana do temperaturnog opsega između 80°C-110°C, poželjno na 110°C u trajanju od 15 minuta do 1 sata, poželjno 30 minuta. Tako formirani intermedijer se zatim tretira terc-butil alkoholom preko noći na 60-110°C, poželjno 90°C. Zatim se tako formirani karbamat konvertuje u odgovarajuće jedinjenje formule D-1, pri čemu je f od 1 do 8, tretiranjem pod kiselim medijem koristeći poželjno trifluoroacetnu kiselinu u dihlorometanu na sobnoj temperaturi u periodu od 30 minuta do 5 sati, poželjno 2 sata.
[0308] U reakciji 3 pripreme D, jedinjenje D-5, pri čemu je R CO2Et ili CN i X je brom ili hlor, konvertuje se u odgovarajuće jedinjenje formule D-4, reakcijom D-5 sa alkil halogenidom kao što je MeI. Zatim se tako formirano jedinjenje tretira neorganskom bazom kao što je litijum-hidroksid ili kalijum-hidroksid, u smeši rastvarača kao što su tetrahidrofuran, metanol, glikol i voda da bi se dobilo jedinjenje D-4. Reakcija se meša preko noći na temperaturi između 25°C i 130°C. Alternativno, da bi se formiralo odgovarajuće jedinjenje formule D-4, pri čemu je X X5-A2, D-5 se prvo mora reagovati prema proceduri o kojoj se govorilo gore u reakciji 1 pripreme C.
[0309] U reakciji 4 pripreme D, jedinjenje D-4 se konvertuje u odgovarajuće jedinjenje formule D-2, reakcijom D-4 sa bazom kao što je trietilamin i difenilfosforil-azidom u aprotičnom rastvaraču kao što je toluen. Reakcija je zagrejana do temperaturnog opsega između 80°C-110°C, poželjno na 110°C u trajanju od 15 minuta do 1 sata, poželjno 30 minuta. Tako formirani intermedijer se zatim tretira terc-butil alkoholom preko noći na 60-110°C, poželjno 90°C. Zatim se tako formirani karbamat konvertuje u odgovarajuće jedinjenje formule D-1 tretiranjem pod kiselim medijem koristeći poželjno trifluoroacetnu kiselinu u dihlorometanu na sobnoj temperaturi u periodu od 30 minuta do 5 sati, poželjno 2 sata.
[0310] U reakciji 1 pripreme E, jedinjenje formule E-2, pri čemu je X bromid ili hlorid, konvertuje se u odgovarajuće jedinjenje formule E-1, reakcijom E-2 sa metil-magnezijumbromidom u etru, na temperaturi između oko -60°C do oko -90°C, poželjno oko -78°C u vremenskom periodu između oko 30 minuta do oko 3 sata, poželjno oko 2 sata. Alternativno, da bi se formiralo odgovarajuće jedinjenje formule E-1, pri čemu je X X5-A2, E-2 se prvo mora reagovati prema proceduri o kojoj se govorilo gore u reakciji 1 pripreme C.
[0311] U reakciji 2 pripreme E, jedinjenje formule E-1 se konvertuje u odgovarajuće jedinjenje D-2 tretiranjem E-1 jakom kiselinom, poželjno sumpornom kiselinom, u prisustvu hloroacetonitrila. Reakcija se meša preko noći na sobnoj temperaturi. Reakcija se meša preko noći na sobnoj temperaturi. Zatim se tako formirano jedinjenje tretira tiourom u polarnom protičnom rastvaraču kao što je etanol preko noći na 80°C da bi se formiralo odgovarajuće jedinjenje formule D-2. Alternativno, E-1 se tretira natrijum-azidom i trifluoroacetnom kiselinom u aprotičnom rastvaraču kao što je dihlorometan u temperaturnom opsegu od -10°C do sobne temperature, poželjno 0°C. Tako formirano jedinjenje se redukuje u prisustvu trifenilfosfina u rastvoru tetrahidrofurana i vode da bi se formiralo odgovarajuće jedinjenje formule D-2. Reakcija se meša u temperaturnom opsegu 25-80°C, poželjno na sobnoj temperaturi u periodu od 2 do 24 sata, poželjno 18 sati.
[0312] U reakciji 1 šeme 1, jedinjenja formule A-1 ili A-2 se konvertuju u odgovarajuća jedinjenja formule II, pri čemu je f od 1 do 8, ili III, respektivno, dodavanjem trifosgena suspenziji C-1 ili C-2 i trietilamina u aprotičnom rastvaraču, kao što je tetrahidrofuran.
Reakcija se meša na sobnoj temperaturi u vremenskom periodu između oko 5 minuta do oko 20 minuta, poželjno oko 15 minuta, i dodaje se mala količina etra. Trietilamonijumova so koja je nastala se filtrira. Odvojeno, natrijum-hidrid se dodaje suspenziji A-1 ili A-2, pri čemu je X OH ili NH, u aprotičnom rastvaraču, kao što je tetrahidrofuran, na 0°C ili sobnoj temperaturi. Reakcija se meša na sobnoj temperaturi u vremenskom periodu između oko 5 minuta do oko 20 minuta, poželjno oko 15 minuta, i izocijanatni rastvor tetrahidrofurana/etra tako formiran gore se dodaje kap po kap. Alternativno, jedinjenja formule II i III se mogu formirati reakcijom jedinjenja D3 ili D4 sa A-1 i A-2 u prisustvu baze kao što je trietilamin i difenilfosforil-azidom u aprotičnom rastvaraču kao što je toluen, kao što je opisano u proceduri o kojoj se govorilo gore u reakciji 4 pripreme D.
[0313] U reakciji 1 šeme 2, jedinjenja formule A-1, A-2 ili B-1 se konvertuju u odgovarajuća jedinjenja formule IV, V, VI i VII, pri čemu je f od 1 do 8, respektivno, dodavanjem trifosgena suspenziji C-1, C-2, D-1 ili D-2 i trietilamina u aprotičnom rastvaraču, kao što je tetrahidrofuran ili toluen. Reakcija se meša na sobnoj temperaturi u vremenskom periodu između oko 5 minuta do oko 20 minuta, poželjno oko 15 minuta, i dodaje se mala količina etra. Zatim se A-1 ili A-2, pri čemu je X NH, dodaje tako formiranom rastvoru izocijanata i reakcija se meša u temperaturnom opsegu od 25-100°C, poželjno na sobnoj temperaturi u periodu od oko 2 sata do 24 sata, poželjno 18 sati.
[0314] U reakciji 1 šeme 3, jedinjenje formule A-3 se konvertuje u odgovarajuća jedinjenja formule VIII, pri čemu je f od 1 do 8, i IX, respektivno, reakcijom A3 sa C1, C-2, D-1 ili D-2 putem peptidnog kuplovanja korišćenjem karbodimidnog agensa za kuplovanje kao što je 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)karbodimid i 1-hidroksibenzotriazol ili 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil uronijum heksafluorofosfat u rastvaraču kao što je tetrahidrofuran ili dimetilformamid. Reakcija se meša na sobnoj temperaturi preko noći.
[0315] Iako će specifična otelotvorenja ovog obelodanjivanja sada biti opisana sa referencama na pripreme i šeme, treba razumeti da su takva otelotvorenja samo primer i da su ilustracija malog broja od mnogih mogućih specifičnih otelotvorenja koja mogu predstavljati primenu principa ovog obelodanjivanja. Različite promene i modifikacije biće očigledne stručnjacima u ovoj oblasti s obzirom na prednosti ovog obelodanjivanja.
[0316] Ovaj pronalazak je definisan u priloženim patentnim zahtevima.
[0317] Osim ako nije drugačije definisano, svi tehnički i naučni termini korišćeni ovde imaju isto značenje kao što se uobičajeno podrazumeva od strane stručnjaka iz oblasti kojoj ovo obelodanjivanje pripada. Iako se druga jedinjenja ili metode mogu koristiti u praksi ili testiranju, određene preferirane metode su sada opisane u kontekstu sledećih priprema i šema.
[0318] Sve farmaceutski prihvatljive soli, prolekovi, tautomeri, hidrati i solvati trenutno obelodanjenih jedinjenja takođe su u okviru ovog obelodanjivanja.
[0319] Trenutno obelodanjena jedinjenja koja su po prirodi bazna generalno su sposobna da formiraju širok spektar različitih soli sa raznim neorganskim i/ili organskim kiselinama. Iako su takve soli generalno farmaceutski prihvatljive za primenu na životinjama i ljudima, u praksi je često poželjno da se jedinjenje inicijalno izoluje iz reakcione smeše kao farmaceutski neprihvatljiva so, a zatim jednostavno konvertuje nazad u slobodno bazno jedinjenje tretiranjem alkalnim reagensom, i naknadno konvertuje slobodnu bazu u farmaceutski prihvatljivu so dobijenu adicijom kiseline. Soli dobijene adicijom kiseline baznih jedinjenja mogu se lako pripremiti korišćenjem konvencionalnih tehnika, npr. tretiranjem baznog jedinjenja sa suštinski ekvivalentnom količinom izabrane mineralne ili organske kiseline u vodenom rastvaračkom medijumu ili u pogodnom organskom rastvaraču kao što je, na primer, metanol ili etanol. Pažljivim isparavanjem rastvarača dobija se željena čvrsta so.
[0320] Kiseline koje se mogu koristiti za pripremu farmaceutski prihvatljivih soli dobijenih adicijom kiseline baznih jedinjenja su one koje mogu formirati netoksične soli dobijene adicijom kiseline, tj. soli koje sadrže farmakološki prihvatljive anjone, kao što su hlorid, bromid, jodid, nitrat, sulfat ili bisulfat, fosfat ili kiseli fosfat, acetat, laktat, citrat ili kiseli citrat, tartarat ili bitartarat, sukcinat, maleat, fumarat, glukonat, saharat, benzoat, metansulfonat i pamoat [tj., 1,1'-metilen-bis-(2-hidroksi-3-naftoat)] soli.
[0321] Trenutno obelodanjena jedinjenja koja su po prirodi kisela, npr. sadrže COOH ili tetrazolnu grupu, generalno su sposobna da formiraju širok spektar različitih soli sa raznim neorganskim i/ili organskim bazama. Iako su takve soli generalno farmaceutski prihvatljive za primenu na životinjama i ljudima, u praksi je često poželjno da se jedinjenje inicijalno izoluje iz reakcione smeše kao farmaceutski neprihvatljiva so, a zatim jednostavno konvertuje nazad u jedinjenje slobodne kiseline tretiranjem kiselim reagensom, i naknadno konvertuje slobodnu kiselinu u farmaceutski prihvatljivu so dobijenu adicijom baze. Ove soli dobijene adicijom baze mogu se lako pripremiti korišćenjem konvencionalnih tehnika, npr. tretiranjem odgovarajućih kiselih jedinjenja vodenim rastvorom koji sadrži željene farmakološki prihvatljive katjone, a zatim isparavanjem dobijenog rastvora do suvoće, poželjno pod smanjenim pritiskom. Alternativno, mogu se pripremiti i mešanjem nižih alkanolnih rastvora kiselih jedinjenja i željenog alkalnog metal-alkoksida, a zatim isparavanjem dobijenog rastvora do suvoće na isti način kao i pre. U oba slučaja, poželjno je koristiti stehiometrijske količine reagenasa kako bi se osigurala potpunost reakcije i maksimalni prinosi željene čvrste soli.
[0322] Baze koje se mogu koristiti za pripremu farmaceutski prihvatljivih soli dobijenih adicijom baze baznih jedinjenja su one koje mogu formirati netoksične soli dobijene adicijom baze, tj. soli koje sadrže farmakološki prihvatljive katjone, kao što su katjoni alkalnih metala (npr. kalijum i natrijum), katjoni zemnoalkalnih metala (npr. kalcijum i magnezijum), amonijum ili druge hidrosolubilne soli adicije amina kao što su N-metilglukamin-(meglumin), niži alkanolamonijum i druge takve baze organskih amina.
[0323] Izotopski-obeležena jedinjenja su takođe u okviru ovog obelodanjivanja. Kao što se ovde koristi, „izotopski-obeleženo jedinjenje“ se odnosi na trenutno obelodanjeno jedinjenje uključujući farmaceutske soli i prolekove istog, svaki kako je ovde opisano, u kojem su jedan ili više atoma zamenjeni atomom koji ima atomsku masu ili maseni broj različit od atomske mase ili masenog broja koji se obično nalazi u prirodi. Primeri izotopa koji se mogu inkorporirati u trenutno obelodanjena jedinjenja uključuju izotope vodonika, ugljenika, azota, kiseonika, fosfora, fluora i hlora, kao što su<2>H ,<3>H ,<13>C,<14>C,<15>N,<18>O,<17>O,<31>P,<32>P,<35>S,<18>F i<36>Cl, respektivno.
[0324] Izotopskim obeležavanjem trenutno obelodanjenih jedinjenja, jedinjenja mogu biti korisna u testovima distribucije leka i/ili supstrata u tkivima. Tritijumom (<3>H) i ugljenikom-14 (<14>C) obeležena jedinjenja su posebno poželjna zbog lakoće pripreme i detektabilnosti. Dalje, supstitucija težim izotopima kao što je deuterijum (<2>H) može pružiti određene terapeutske prednosti koje proističu iz veće metaboličke stabilnosti, na primer povećanog in vivo poluživota ili smanjenih zahteva za doziranjem i, stoga, mogu biti poželjna u nekim okolnostima. Izotopski obeležena jedinjenja trenutno obelodanjena, uključujući farmaceutske soli i prolekove istih, mogu se pripremiti bilo kojim sredstvom poznatim u struci.
[0325] Stereoizomeri (npr. cis i trans izomeri) i svi optički izomeri trenutno obelodanjenog jedinjenja (npr. R i S enantiomeri), kao i racemske, dijastereomerne i druge smeše takvih izomera su u okviru ovog obelodanjivanja.
[0326] Jedinjenja, soli, prolekovi, hidrati i solvati trenutno obelodanjenog mogu postojati u nekoliko tautomernih oblika, uključujući enol i iminski oblik, te keto i enaminski oblik i geometrijske izomere i njihove smeše. Tautomeri postoje kao smeše tautomernog skupa u rastvoru. U čvrstom obliku, obično preovlađuje jedan tautomer. Iako se jedan tautomer može opisati, svi tautomeri su u okviru ovog obelodanjivanja.
[0327] Atropizomeri su takođe u okviru ovog obelodanjivanja. Atropizomeri se odnose na jedinjenja koja se mogu razdvojiti na rotaciono ograničene izomere.
[0328] Ovo obelodanjivanje takođe pruža farmaceutske kompozicije koje obuhvataju najmanje jedno trenutno obelodanjeno jedinjenje i najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv nosač. Farmaceutski prihvatljiv nosač može biti bilo koji takav nosač poznat u struci, uključujući one opisane u, na primer, Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co., (A. R. Gennaro edit.1985). Farmaceutske kompozicije trenutno obelodanjenih jedinjenja mogu se pripremiti konvencionalnim sredstvima poznatim u struci uključujući, na primer, mešanje najmanje jednog trenutno obelodanjenog jedinjenja sa farmaceutski prihvatljivim nosačem.
[0329] Trenutno obelodanjene farmaceutske kompozicije mogu se koristiti kod životinja ili ljudi. Stoga se trenutno obelodanjeno jedinjenje može formulisati kao farmaceutska kompozicija za oralnu, bukalnu, parenteralnu (npr. intravensku, intramuskularnu ili supkutanu), topikalnu, rektalnu ili intranazalnu primenu ili u obliku pogodnom za primenu inhalacijom ili insuflacijom.
[0330] Trenutno obelodanjena jedinjenja mogu se takođe formulisati za produženo oslobađanje prema metodama dobro poznatim stručnjacima u ovoj oblasti. Primeri takvih formulacija mogu se naći u patentima Sjedinjenih Država 3,119,742, 3,492,397, 3,538,214, 4,060,598 i 4,173,626.
[0331] Za oralnu primenu, farmaceutska kompozicija može biti u obliku, na primer, tablete ili kapsule pripremljene konvencionalnim sredstvima sa farmaceutski prihvatljivim ekscipijent(ima) kao što je vezivno sredstvo (npr. preželatinizovani kukuruzni skrob, polivinilpirolidon ili hidroksipropil metilceluloza); punilo (npr. laktoza, mikrokristalna celuloza ili kalcijum fosfat); mazivo (npr. magnezijum stearat, talk ili silicijum dioksid); dezintegrant (npr. krompirov skrob ili natrijum skrob glikolat); i/ili ovlaživač (npr. natrijum lauril sulfat). Tablete se mogu obložiti metodama dobro poznatim u struci. Tečne pripreme za oralnu primenu mogu biti u obliku, na primer, rastvora, sirupa ili suspenzije, ili se mogu predstaviti kao suvi proizvod za rekonstituciju vodom ili drugim pogodnim vehikulumom pre upotrebe. Takve tečne pripreme mogu se pripremiti konvencionalnim sredstvima sa farmaceutski prihvatljivim aditivima kao što je sredstvo za suspenziju (npr. sorbitol sirup, metil celuloza ili hidrogenizovane jestive masti); emulgator (npr. lecitin ili bagrem); nevodeni vehikulum (npr. bademovo ulje, uljani estri ili etil alkohol); i/ili konzervans (npr. metil ili propil p-hidroksibenzoati ili sorbinska kiselina).
[0332] Za bukalnu primenu, kompozicija može biti u obliku tableta ili lozengi formulisanih na konvencionalan način.
[0333] Trenutno obelodanjena jedinjenja mogu biti formulisana za parenteralnu primenu injekcijom, uključujući korišćenje konvencionalnih tehnika kateterizacije ili infuzije.
Formulacije za injekciju mogu biti predstavljene u jediničnom doznom obliku, npr. u ampulama ili u više-doznim posudama, sa dodatkom konzervansa. Kompozicije mogu biti u oblicima kao što su suspenzije, rastvori ili emulzije u uljanim ili vodenim vehikulumima, i mogu sadržati agens za formulisanje kao što je sredstvo za suspenziju, stabilizaciju i/ili dispergovanje prepoznato od strane stručnjaka u ovoj oblasti. Alternativno, aktivni sastojak može biti u praškastom obliku za rekonstituciju sa pogodnim vehikulumom, npr. sterilnom vodom bez pirogena, pre upotrebe.
[0334] Za topikalnu primenu, trenutno obelodanjeno jedinjenje može biti formulisano kao mast ili krema.
[0335] Trenutno obelodanjena jedinjenja mogu biti formulisana i u rektalnim kompozicijama kao što su supozitorije ili retencione klizme, npr. koje sadrže konvencionalne baze za supozitorije kao što su kakao puter ili drugi gliceridi.
[0336] Za intranazalnu primenu ili primenu inhalacijom, trenutno obelodanjena jedinjenja se mogu lako isporučiti u obliku rastvora ili suspenzije iz posude za sprej pumpicu koju pacijent stiska ili pumpa ili kao aerosol sprej prezentacija iz posude pod pritiskom ili nebulizatora, uz upotrebu pogodnog pogonskog gasa, npr. dihlorodifluorometana, trihlorofluorometana, dihlorotetrafluoroetana, ugljen-dioksida ili drugog pogodnog gasa. U slučaju aerosola pod pritiskom, dozna jedinica se može odrediti obezbeđivanjem ventila za isporuku odmerene količine. Posuda pod pritiskom ili nebulizator mogu sadržati rastvor ili suspenziju trenutno obelodanjenog jedinjenja. Kapsule i kertridži (napravljeni, na primer, od želatina) za upotrebu u inhalatoru ili insuflatoru mogu biti formulisani tako da sadrže praškastu smešu trenutno obelodanjenog jedinjenja i odgovarajuće praškaste baze kao što su laktoza ili skrob.
[0337] Predložena doza trenutno obelodanjenog jedinjenja za oralnu, parenteralnu ili bukalnu primenu kod prosečne odrasle osobe za lečenje ili prevenciju stanja bolesti povezanih sa TPO iznosi oko 0,1 mg do oko 2000 mg. U određenim otelotvorenjima, predložena doza je od oko 0,1 mg do oko 200 mg aktivnog sastojka po jediničnoj dozi. Bez obzira na količinu predložene doze, primena jedinjenja može se vršiti, na primer, 1 do 4 puta dnevno.
[0338] Aerosol formulacije za lečenje ili prevenciju gore navedenih stanja kod prosečne odrasle osobe poželjno su raspoređene tako da svaka odmerena doza ili „udah“ aerosola sadrži oko 20 mg do oko 10.000 mg, poželjno, oko 20 mg do oko 1000 mg trenutno obelodanjenog jedinjenja. Ukupna dnevna doza sa aerosolom biće u opsegu od oko 100 mg do oko 100 mg. U određenim otelotvorenjima, ukupna dnevna doza sa aerosolom generalno će biti u opsegu od oko 100 mg do oko 10 mg. Primena može biti nekoliko puta dnevno, na primer 2, 3, 4 ili 8 puta, dajući na primer, 1, 2 ili 3 doze svaki put.
[0339] Aerosol kombinovane formulacije za lečenje ili prevenciju gore navedenih stanja kod prosečne odrasle osobe poželjno su raspoređene tako da svaka odmerena doza ili „udah“ aerosola sadrži od oko 0,01 mg do oko 1000 mg kombinacije koja obuhvata trenutno obelodanjeno jedinjenje. U određenim otelotvorenjima, svaka odmerena doza ili
„udah“ aerosola sadrži oko 0,01 mg do oko 100 mg kombinacije koja obuhvata trenutno obelodanjeno jedinjenje. U određenim otelotvorenjima, svaka odmerena doza ili
„udah“ aerosola sadrži oko 1 mg do oko 10 mg kombinacije koja obuhvata trenutno obelodanjeno jedinjenje. Primena može biti nekoliko puta dnevno, na primer 2, 3, 4 ili 8 puta, dajući na primer, 1, 2 ili 3 doze svaki put.
[0340] Farmaceutske kompozicije i metode lečenja ili prevencije koje obuhvataju primenu prolekova najmanje jednog trenutno obelodanjenog jedinjenja takođe su u okviru ovog obelodanjivanja.
Test za glukozilceramid sintazu
[0341] Enzimski test koji koristi mikrozome kao izvor aktivnosti glukozilceramid sintaze. Fluorescentni ceramidni supstrat se isporučuje membranski vezanom enzimu kao kompleks sa albuminom. Nakon reakcije, ceramid i glukozilceramid se razdvajaju i kvantifikuju reverznom faznom HPLC metodom sa fluorescentnom detekcijom.
Procedura
Priprema mikrozoma iz A375 humanih ćelija melanoma:
[0342]
Ćelijska suspenzija je sonikovana na ledu do potpune lize ćelija, nakon čega je usledila centrifugacija pri 10.000 g tokom 10 minuta na 4°C.
Supernatant je razbistren ponovnom centrifugacijom pri 100.000 g tokom 1 sata na 4°C. Pelet je resuspendovan u puferskom rastvoru za lizu, alikvotiran i čuvan na -80°C.
Test za glukozilceramid sintazu
[0343] Supstrat i mikrozomi su kombinovani u odnosu 1:1, dobro promešani na tresilici za ploče, ploča je zapečaćena i inkubirana 1 sat na sobnoj temperaturi u mraku.
Reakcija je zaustavljena rastvorom za zaustavljanje u reakcionu ploču i prebačena na ploču za analizu.
RP-HPLC analiza
[0344]
kolona: MercuryMS<™>(Phenomenex) zamenljivi kertridž (Luna C8, 3 Om, 20 x 4 mm)
sistem: Agilent 1100 sa Agilent 1200 serijom fluorescentnog detektora
mobilna faza: 1% mravlja kiselina u 81% metanolu, 19% voda, brzina protoka 0,5 mL/min, izokratsko izvođenje, 4 minuta
razređivač uzorka: 0,1 mM C8ceramid (ceramid (blokator adsorpcije) u 50% izopropanola, 50% vode (v/v)
fluorescentna detekcija: □ex= 470 nm, □em= 530 nm
pod ovim uslovima, NBD C6GluCer je imao vreme zadržavanja od oko 1,7 minuta, a NBD C6Cer je imao vreme zadržavanja od oko 2,1 minuta; pikovi su bili jasno odvojeni do bazne linije i automatski su integrisani HPLC softverom
% konverzije supstrata u proizvod je korišćen kao očitavanje za testiranje inhibitora kako bi se izbegla varijabilnost zbog greške razblaživanja ili isparavanja uzorka
[0345] Sva navedena jedinjenja imala su IC50vrednost manju od 5 µM u Reporter testu.
EKSPERIMENTALNI DEO
Opšta procedura A: Formiranje karbamata/uree sa trifosgenom
[0346] U suspenziju aminhidrohlorida (1 ekvivalent) i trietilamina (3-4 ekvivalenta) u THF (koncentracija ~ 0,2M) na sobnoj temperaturi dodat je trifosgen (0,35 ekvivalenta).
Reakciona smeša je mešana 10 minuta i dodata je mala količina etra (1-2 mL).
Trietilamonijumska so je filtrirana da bi se dobio bistar rastvor izocijanata u THF/etru.
[0347] U rastvor alkohola (1,5 ekvivalenta) u THF (koncentracija ~ 0,2M) na sobnoj temperaturi dodat je NaH [60%, ulje] (1,5 ekvivalenta). Reakciona smeša je mešana 15 minuta i gore navedeni rastvor (izocijanat u THF/etru) je dodat kap po kap.
[0348] U standardnoj završnoj obradi, reakcija je zaustavljena slanim rastvorom. Rastvor je ekstrahovan sa EtOAc, a organski sloj je osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen na combiflash uređaju (SiO2kertridž, CHCl3i 2N NH3u MeOH) da bi se dobio odgovarajući karbamat.
[0349] Alternativno: U suspenziju aminhidrohlorida A (1 ekvivalent) i trietilamina (3-4 ekvivalenta) u THF (koncentracija ~ 0,2M) na sobnoj temperaturi dodat je trifosgen (0,35 ekvivalenta). Reakciona smeša je mešana 10 minuta i dodata je mala količina etra (1-2 mL). Trietilamonijumska so je filtrirana da bi se dobio bistar rastvor izocijanata u THF/etru.
[0350] U rastvor amina B (1 ekvivalent) u THF (koncentracija ~ 1,0M) na sobnoj temperaturi dodat je gore navedeni rastvor (izocijanat u THF/etru) kap po kap. Reakcija je mešana tokom 18 sati i koncentrovana. Sirovi materijal je prečišćen na combiflash uređaju (SiO2kertridž, CHCl3i 2N NH3u MeOH) da bi se dobila odgovarajuća urea.
Opšta procedura B: Alkilacija sa organocerijumom
[0351] Suspenzija CeCl3(4 ekvivalenta) u THF (koncentracija ~ 0,2M) je mešana na sobnoj temperaturi 1 sat. Suspenzija je ohlađena na -78°C i MeLi /Etar [1,6M] (4 ekvivalenta) je dodat kap po kap. Organocerijumskom kompleksu je dozvoljeno da se formira tokom 1 sat i rastvor nitrila (1 ekvivalent) u THF (koncentracija 2,0M) je dodat kap po kap. Reakciona smeša je zagrejana na sobnu temperaturu i mešana 18 sati. Rastvor je ohlađen na 0°C i ugašen vodom (~ 1 mL), nakon čega je usledilo dodavanje 50% vodenog rastvora amonijumhidroksida (~ 3 mL) dok se talog nije formirao i slegnuo na dno boce. Smeša je filtrirana kroz celitni uložak i koncentrovana. Sirovi materijal je tretiran rastvorom HCl/dioksana [4,0M]. Intermedijerni arilpropan-2-amin hidrohlorid je triturisan u etru i korišćen kao takav za sledeći korak. Alternativno, sirovi slobodni bazni amin je prečišćen na combiflash uređaju (SiO2kertridž, CHCl3i 2N NH3u MeOH) da bi se dobio odgovarajući arilpropilamin.
Opšta procedura C: Formiranje uree sa karbonil diimidazolom (CDI)
[0352] Rastvor amina A (1 ekvivalent) i CDI (1,3 ekvivalenta) u THF (koncentracija ~ 0,15M) je mešan pod refluksom 1 sat. Dodat je rastvor amina B (1,3 ekvivalenta) u THF i reakciona smeša je mešana dodatnih 1,5 sati. Reakcija je ohlađena na sobnu temperaturu i razređena etrom. Željeno jedinjenje se istaložilo i filtrirano je. Sirovi materijal je prečišćen na combiflash uređaju (bazični Al2O3kertridž, CHCl3i MeOH) ili (SiO2kertridž, CHCl3i 2N NH3u MeOH) da bi se dobila odgovarajuća urea.
Opšta procedura D: Formiranje uree sa trifozgenom
[0353] U suspenziju amina A (1 ekvivalent) i trietilamina (4 ekvivalenta) u THF (koncentracija ~ 0,15M) na sobnoj temperaturi dodato je trifozgen (0,35 ekvivalenta).
Reakciona smeša je mešana 15 minuta i dodat je amin B (1,1 ekvivalenta). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 18 sati i zatim razređena sa EtOAc. Organski sloj je ispran vodenim NaOH [1,0 M], osušen preko Na2SO4filtriran i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen na combiflash uređaju (SiO2kertridž, CHCl3i 2N NH3u MeOH) da bi se dobila odgovarajuća urea.
Opšta procedura E: Suzuki kuplovanje
[0354] U rastvor aril halogenida (1 ekvivalent) u smeši DME/vode [4:1] (koncentracija ~ 0,2M) dodati su boronska kiselina (2 ekvivalenta), paladijum katalizator (0,1-0,25 ekvivalenta) i natrijum-karbonat (2 ekvivalenta). Reakciona smeša je obrađena mikrotalasima 25 minuta na 150°C. Nakon filtriranja kroz celitni čep i koncentrovanja, sirovi proizvod je prečišćen na combiflash uređaju (SiO2kertridž, CHCl3i 2N NH3u MeOH) da bi se dobio odgovarajući adukt kuplovanja.
[0355] Alternativno: U rastvor aril halogenida (1 ekvivalent) u smeši toluena/vode [20:1] (koncentracija ~ 0,2 M) dodati su boronska kiselina (1,3-2,5 ekvivalenta), paladijum katalizator (0,05-0,15 ekvivalenta), tricikloheksilfosfin (0,15-0,45 ekvivalenta) i kalijumfosfat (5 ekvivalenata). Reakciona smeša je obrađena mikrotalasima 25 minuta na 150°C. Nakon filtriranja kroz celitni čep i koncentrovanja, sirovi proizvod je prečišćen na combiflash uređaju (SiO2kertridž, CHCl3i 2N NH3u MeOH) da bi se dobio odgovarajući adukt kuplovanja.
Opšta procedura F: Hidrogenacija
[0356] U rastvor supstrata u metanolu, etanolu ili EtOAc (koncentracija ~ 0,2M) dodat je paladijum katalizator (20% m/m supstrata). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi pod 1 atm H2do završetka. Reakcija je filtrirana kroz celitni čep, nakon čega su usledila dva ispiranja hloroformom. Sirovi proizvod je koncentrovan i prečišćen na combiflash uređaju (SiO2kertridž, CHCl3i 2N NH3u MeOH) da bi se dobio hidrogenovani proizvod. Alternativno, konačni materijal je prečišćen precipitacijom ili rekristalizacijom.
Opšta procedura G: Ciklopropanacija
[0357] U smešu arilnitrila (1 ekvivalent) i Ti(Oi-Pr)4 (1,7 ekvivalenta) koja se mešala na -70°C, dodat je kap po kap EtMgBr [3,0 M u etru] (1,1 ekvivalenta). Reakciona smeša je ostavljena da se zagreje na 25°C i mešana je 1 sat. Gore navedenoj smeši je dodat BF3·Et2O (3 ekvivalenta) kap po kap na 25°C. Nakon dodavanja, smeša je mešana još 2 sata, a zatim ugašena vodenim HCl [2M]. Dobijeni rastvor je zatim bazifikovan dodavanjem vodenog NaOH [2M]. Organski materijal je ekstrahovan etil etrom. Organski slojevi su kombinovani, osušeni preko Na2SO4, filtrirani i koncentrovani. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni sa silika gelom (elucija petrolej etrom/EtOAc: 10/1 do 1/1) da bi se dobio odgovarajući 1-aril-ciklopropanamin.
Opšta procedura H: Kuplovanje putem in-situ Kurtiusovog rearanžmana
[0358] Smeša kiseline (1 ekvivalent), trietilamina (2,5 ekvivalenta), DPPA (1,0 ekvivalenta) u toluenu (koncentracija ~ 0,3M) je refluksovana 30 minuta. Smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i dodat je alkohol (1 ekvivalent). Nakon dodavanja, smeša je zagrevana na 90°C 18 sati. Reakcija je ohlađena na sobnu temperaturu, razređena sa EtOAc i isprana zasićenim vodenim natrijum-dikarbonatom. Organska faza je osušena preko Na2SO4, koncentrovana i prečišćena preparativnom TLC (EtOAc/MeOH 5:1, koji sadrži 1% TEA) da bi se dobio odgovarajući karbamat.
Opšta procedura I: Formiranje amida korišćenjem EDCI
[0359] U rastvor amina (1 ekvivalent) u DMF ili THF (koncentracija ~ 0,3M) dodati su EDCI (1,2-2,5 ekvivalenta), HOBT (1,2-2,5 ekvivalenta), DIPEA (1,2-2,5 ekvivalenta) i trietilamin (nekoliko kapi). Reakciona smeša je mešana i dodata je kiselina (1,2 ekvivalenta). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 18 sati i zatim koncentrovana. Ostatak je rastvoren u EtOAc i ispran slanim rastvorom. Organski sloj je osušen preko Na2SO4i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen preparativnom HPLCMS ili na combiflash uređaju (SiO2kertridž, CHCl3i 2N NH3u MeOH).
Priprema A
Intermedijer 1
2-(3-bromofenil)propan-2-amin hidrohlorid
[0360] U rastvor metil 3-bromobenzoata (15,0 g, 69,8 mmol) u THF (140 mL) na -78 °C dodat je kap po kap rastvor MeMgBr/dietil etra [3,0M] (58 mL). Rastvor je uliven u vodeni zasićeni rastvor amonijum-hlorida, a organski materijal je ekstrahovan sa EtOAc. Organski sloj je osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan da bi se dobio odgovarajući alkohol (14,9 g) koji je korišćen bez daljeg prečišćavanja.
[0361] U rastvor 2-(3-bromofenil)propan-2-ola (17,2 g, 79,8 mmol) u hloroacetonitrilu (160 mL) dodata je sirćetna kiselina (14 mL). Reakciona smeša je ohlađena na 0 °C i H2SO4(14 mL) je dodat kap po kap. Reakciona smeša je zagrejana na sobnu temperaturu i mešana 18 sati. Reakcija je zatim ulivena u led i ekstrahovana sa EtOAc. Organski sloj je ispran vodenim rastvorom NaOH [1,0M] i slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4i koncentrovan da bi se dobio odgovarajući hloroacetamid (21,4 g) koji je korišćen bez daljeg prečišćavanja.
[0362] U rastvor N-(2-(3-bromofenil)propan-2-il)-2-hloroacetamida (20,3 g) u etanolu (120 mL) dodata je sirćetna kiselina (20 mL). Reakciona smeša je mešana pod refluksom 18 sati. Rastvor je ohlađen na sobnu temperaturu i talog je filtriran na celitnom ulošku. Filtrat je koncentrovan, a ostatak je rastvoren u EtOAc. Organski sloj je tretiran vodenim rastvorom NaOH [1,0M], osušen preko Na2SO4i koncentrovan. Sirovi materijal je tretiran rastvorom HCl/dioksana [4M]. Intermedijerni 2-(3-bromofenil)propan-2-amin hidrohlorid je triturisan u etru i korišćen kao takav za sledeći korak (7,50 g, 43%).<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.69 (q, J = 1.8 Hz, 1H), 7.55 (ddd, J = 1.0, 1.8, 7.9 Hz, 1H), 7.49 (ddd, J = 1.0, 2.0, 8.0 Hz, 1H), 7.38 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 1.71 (s, 6H) ppm.
Priprema B
Intermedijer 2
2-(5-bromo-2-fluorofenil)propan-2-amin hidrohlorid
[0363] U rastvor 5-bromo-2-fluorobenzojeve kiseline (4,85 g, 22,8 mmol) u metanolu (45 mL) dodata je H2SO4(4.5 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 18 sati i rastvor je koncentrovan. Ostatak je tretiran vodenim rastvorom NaOH [10% m/v] i organski materijal je ekstrahovan CHCl3. Organski sloj je osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan da bi se dobio odgovarajući estar (4,69 g, 91%) koji je korišćen bez daljeg prečišćavanja.
[0364] Estarski intermedijer (4,69 g, 20,1 mmol) je konvertovan u intermedijer 2 koristeći istu proceduru kao što je navedeno u primeru intermedijera 1 da bi se dobila odgovarajuća amonijumova so (3,94 g, 67% ukupnog prinosa) kao čvrsta bela supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.67 - 7.57 (m, 2H), 7.21 (dd, J = 8.7, 12.3 Hz, 1H), 1.77 (s, 6H) ppm.
Intermedijer 3
2-(3-bromo-4-fluorofenil)propan-2-amin hidrohlorid.
[0365] 5-bromo-2-fluorobenzojeva kiselina je transformisana u intermedijer 3 koristeći istu proceduru kao što je navedeno u primeru intermedijera 2 da bi se dobila odgovarajuća amonijumova so (2,79 g, 49% ukupnog prinosa) kao čvrsta bela supstanca.
Intermedijer 4
2-(3-bromo-2-fluorofenil)propan-2-amin
[0366] 3-bromo-2-fluorobenzojeva kiselina je transformisana u intermedijer 4 koristeći istu proceduru kao što je navedeno u primeru intermedijera 2 da bi se dobio odgovarajući amin kao svetlo žuto ulje.
Intermedijer 5
2-(4-bromofenil)propan-2-amin hidrohlorid
[0367] Korišćenjem opšte procedure B, bromobenzonitril (2,00 g, 11,0 mmol) je konvertovan u odgovarajući 2-(4-bromofenil)propan-2-amin, koji je dobijen kao smeđe ulje (1,20 g, 51 %).
Priprema C
Intermedijer 6
1,4-diazabiciklo[3.2.2]nonan
[0368] U mešani rastvor 1,4-diazabiciklo[3.2.2]nonan-3-ona (1,0 g, 7,2 mmol) u 1,4-dioksanu (7,2 mL) na sobnoj temperaturi dodat je litijum-aluminijum-hidrid [2,0M/THF] (4,1 mL, 8,2 mmol). Reakciona smeša je zatim zagrevana pod refluksom 6 sati pre hlađenja na sobnu temperaturu. Reakcija je ugašena postepenim dodavanjem 200 µL H2O, 200 µL 15% vodenog NaOH, i 600 µL H2O. Smeša je filtrirana kroz celit, koji je zatim ispran sa EtOAc. Kombinovani filtrat je koncentrovan in vacuo da bi se dobio proizvod (0,82 g, 90%) koji je korišćen bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.28-3.25 (m, 1H), 2.99-2.95 (m, 8H), 1.86-1.80 (m, 3H), 1.69-1.64 (m, 2H) ppm.
Priprema D
Intermedijer 7
2-metilhinuklidin-3-ol
[0369] Rastvor kalijum-karbonata (11,4g, 82,8 mmol) i hinuklidin hidrata (5,00 g, 20,4 mmol) rastvoren je u H2O (15.6 mL). Kada se potpuno rastvorilo, dodat je dihlorometan (20,4 mL) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Organska faza je odvojena, a vodena faza ekstrahovana hloroformom (3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni preko MgSO4, filtrirani i koncentrovani in vacuo. Proizvod je korišćen bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) 2.79 (s, 1H), 5.19 (s, 1H), 3.14-3.06 (m, 2H), 2.99-2.91 (m, 2H), 2.57-2.55 (m, 1H), 1.98-1.93 (m, 4H) ppm.
[0370] 2-metilenhinuklidin-3-on (3,50 g) u etanolu (30 mL) je redukovan preko 10% Pd/C (50 mas. %) pod H2atmosferom. Kada je prema TLC procenjeno da je reakcija završena (~3 dana), katalizator je odfiltriran, a filter kolač ispran etil acetatom. Rastvarač je uklonjen in vacuo da bi se dobio željeni proizvod (2,80 g, 80%) koji je korišćen bez daljeg prečišćavanja.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) 3.37-3.31 (m, 1H), 3.21-3.13 (m, 2H), 3.09-3.00 (m, 1H), 2.97-2.89 (m, 1H), 2.46-2.43 (m, 1H), 2.05-1.91 (m, 4H), 1.34 (d, J = 7.6 Hz, 3H) ppm.
[0371] U 2-metilhinuklidin-3-on (0,50g, 3,60 mmol) u 1,4-dioksanu (18 mL) na sobnoj temperaturi dodat je litijum-aluminijum-hidrid [1,0M/THF] (4,1, 4,1 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 15 minuta. Reakcija je ugašena postepenim dodavanjem 116 µL H2O, 116 µL 15% vodenog NaOH, i 348 µL H2O. Smeša je filtrirana kroz celit, koji je zatim ispran sa EtOAc. Rastvarač je uklonjen in vacuo da bi se dobio proizvod (0,48 g, 95%) koji je korišćen bez daljeg prečišćavanja kao 2:1 smeša dijastereomera.
Priprema E
Intermedijer 8
1-azabiciklo[3.2.2]nonan-4-ol
[0372] U 1-azabiciklo[3.2.2]nonan-4-on (0,20 g, 1,4 mmol) u 1,4-dioksanu (2,8 mL) na 0 °C dodat je litijum-aluminijum-hidrid [1,0M/THF] (1,7 mL, 1,7 mmol). Reakciona smeša je održavana na 0 °C 15 minuta. Reakcija je ugašena postepenim dodavanjem 46 µL H2O, 46 µL 15% vodenog NaOH, i 138 µL H2O. Smeša je filtrirana kroz celit, koji je zatim ispran sa EtOAc. Rastvarač je uklonjen in vacuo da bi se dobio proizvod (0,19 g, 96%) koji je korišćen bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.90-3.86 (m, 1H), 3.09-3.03 (m, 1H), 2.96-2.91 (dd, J = 9.2, 6.8 Hz, 1H), 2.86-2.75 (m, 3H), 2.71-2.64 (m, 1H), 2.34-2.27 (bs s, 1H), 1.98-1.86 (m, 3H), 1.71-1.59 (m, 3H), 1.51-1.35 (m, 1H) ppm.
Priprema F
Intermedijer 9
1-azabiciklo[2.2.1]heptan-3-ol
[0373] U smešu natrijum-metoksida (2,00 g, 37,9 mmol) u metanolu (9 mL) na 0 °C dodati su glicin metil estar hidrohlorid (4,76 g, 37,9 mmol) i dimetil itakonat (5,00 g, 31,6 mmol). Reakcija je zagrevana pod refluksom 16 sati pre hlađenja na sobnu temperaturu. Čvrsta supstanca je odfiltrirana i isprana dihlorometanom. Filtrat je koncentrovan, a ostatak razređen sa 5N HCl (50 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan dihlorometanom (4 x 50mL), osušen preko MgSO4, filtriran i koncentrovan in vacuo. Proizvod je korišćen bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.04 (dd, J = 82.0, 17.6 Hz), 3.74-3.64 (m, 8H), 3.32-3.24 (m, 1H), 2.77-2.63 (m, 2H) ppm.
[0374] U metil 1-(2-metoksi-2-oksoetil)-5-oksopirolidin-3-karboksilat (3,40 g, 16,0 mmol) u THF (20 mL) na 0 °C dodat je boran-THF [1,0M/THF] (32,0 mL, 32,0 mmol). Reakcija je mešana pod refluksom 1 sat, a zatim ohlađena na sobnu temperaturu gde je ostavljena da se meša dodatnih 12 sati. Reakcija je ugašena dodavanjem zasićenog rastvora kalijum-karbonata (5,52 g u 20 mL H2O) i zagrevana pod refluksom dodatnih 1 sat pre hlađenja na sobnu temperaturu. Rastvarač je uklonjen in vacuo, a ostatak je zakiseljen dodavanjem 5N HCl (25 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan dihlorometanom (2 x 30 mL). pH vodenog sloja je zatim povećan dodavanjem čvrstog kalijum-karbonata. Vodeni sloj je dalje ekstrahovan dihlorometanom (5 x 30 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni preko MgSO4, filtrirani i koncentrovani in vacuo. Proizvod je korišćen bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.66 (s, 3H), 3.63 (s, 3H), 3.29 (ABq, 2H, J = 24.0, 16.8 Hz), 3.06-3.02 (m, 2H), 2.87-2.81 (m, 1H), 2.71-2.65 (m, 1H), 2.56-2.50 (m, 1H), 2.09-2.04 (m, 2H) ppm.
[0375] U refluksujući rastvor kalijum-terc-butoksida (2,46 g, 22,0 mmol) u toluenu (32 mL) dodat je kap po kap rastvor metil 1-(2-metoksi-2-oksoetil)pirolidin-3-karboksilata (2,00 g, 10,0 mmol) u toluenu (10 mL) tokom 1 sata. Reakcija je ostavljena da se meša dodatna 3 sata pod refluksom pre nego što se prvo ohladila na sobnu temperaturu, a zatim na -10 °C.Sirćetna kiselina (1,3 mL) je zatim dodata uz mešanje. Toluenov sloj je ekstrahovan sa 5N HCl ( 4 x 50mL). Kombinovani vodeni slojevi su zagrevani na 110°C 8 sati. Reakcija je zatim ohlađena na sobnu temperaturu, a zapremina je smanjena za polovinu in vacuo. pH reakcione smeše je povećan dodavanjem čvrstog kalijum-karbonata. Vodeni sloj je ekstrahovan dihlorometanom (5 x 50mL) i kombinovani organski slojevi su koncentrovani in vacuo. Sirovom proizvodu je dodat etil etar. Čvrsta supstanca je odfiltrirana da bi se dobio željeni proizvod (0,30 g, 27%) koji je korišćen bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.05-2.96 (m, 3H), 2.76 (s, 2H), 2.72-2.66 (m, 2H), 2.09-2.01 (m, 1H), 1.78-1.71 (m, 1H) ppm.
[0376] 1-azabiciklo[2.2.1]heptan-3-on (0,30 g, 2,7 mmol) u etanolu (2-3 mL) je redukovan preko PtO2 (50 mas. %) pod H2 atmosferom. Nakon mešanja 4 sata, katalizator je odfiltriran, a filter kolač ispran etanolom. Etanol je uklonjen in vacuo da bi se dobio željeni proizvod (0,29 g, 95%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.36-4.35 (m, 1H), 3.10-3.05 (m, 1H), 2.95-2.88 (m, 1H), 2.72-2.66 (m, 1H), 2.63-2.57 (m, 2H), 2.48-2.44 (dd, J = 10.0, 3.2 Hz, 1H), 2.11-2.05 (m, 2H), 1.51-1.44 (m, 1H) ppm.
Priprema G
Intermedijer 10
(R)-3-metilhinuklidin-3-amin i (S)-3-metilhinuklidin-3-amin
[0377] U dobro mešani rastvor MeLi [3,0M/dietil etar] (67,0 mL, 201 mmol) u anhidrovanom dietil etru (150 mL) na -78 °C dodat je, kap po kap, rastvor hinuklidin-3-ona (12,5 g, 100 mmol) u dietil etru (100 mL). Dobijeni rastvor je održavan na -78 °C 1 sat, zatim na sobnoj temperaturi 18 sati. Voda (60 mL) je dodata kap po kap na 0 °C i smeša je koncentrovana in vacuo da bi se dobio ostatak, koji je prečišćen hromatografijom na koloni sa neutralnim aluminijum oksidom (0-20% MeOH u CHCl3) da bi se dobio 3-metilhinuklidin-3-ol (10,0 g, 71%) kao svetlo žuta čvrsta supstanca. U mešani acetonitril (250 mL) na 0 °C polako je dodata koncentrovana sumporna kiselina (100 mL). Dobijeni rastvor je dodat kap po kap smeši 3-metilhinuklidin-3-ola (9,10 g, 64,5 mmol) u acetonitrilu (250 mL) na 0 °C.
Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 60 sati, zatim ohlađena ledenom kupkom i bazifikovana vodenim rastvorom natrijum-hidroksida do pH 10. Smeša je ekstrahovana sa 5:1 (v/v) CHCl3/i-PrOH. Organski sloj je koncentrovan da bi se dobio ostatak koji je razređen sa 2N vodenim HCl i ispran sa 5:1 (v/v) CHCl3/i-PrOH. Preostali vodeni sloj je zatim bazifikovan sa 2N NaOH i ekstrahovan sa 5:1 (v/v) CHCl3/i-PrOH. Kombinovani ekstrakti su isprani vodom, osušeni (Na2SO4) i koncentrovani da bi se dobilo 9,5 g (82%) željenog jedinjenja kao svetlo žuto ulje. Dva enantiomera gornjeg intermedijera su razdvojena korišćenjem hiralne kolone na sistemu za superkritičnu tečnu hromatografiju (SFC).
[0378] Rastvor gornjeg hiralnog acetamid intermedijera (9,50 g, 52,0 mmol) u konc. HCl (100 mL) je refluksovan 3 dana, ohlađen ledenom kupkom i neutralisan vodenim rastvorom natrijum-hidroksida do pH 1. Smeša je isprana sa 5:1 (v/v) CHCl3/i-PrOH. Vodeni sloj je zatim bazifikovan sa 2N NaOH i ekstrahovan sa 5:1 (v/v) CHCl3/i-PrOH. Kombinovani ekstrakti su isprani vodom, osušeni (Na2SO4) i koncentrovani da bi se dobilo 5,00 g (69%) željenog hiralnog jedinjenja kao svetlo žuta polučvrsta supstanca.<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 2.72-2.39 (m, 6H), 2.01-1.96 (m, 1H), 1.67-1.61 (m, 1H), 1.43-1.36 (m, 2H), 1.23-1.17 (m, 1H), 1.09 (s, 3H) ppm.<13>C NMR (125 MHz, DMSO-d6) δ 65.3, 48.3, 46.6, 46.4, 34.2, 30.0, 24.8, 22.8 ppm. Čistoća: > 99% (GC-MS); vreme zadržavanja 6.63 min; (M) 140.1.
Priprema H
Intermedijer 11
2-(3-(4-fluorofenil)izotiazol-5-il)propan-2-amin
[0379] U mešanu suspenziju 4-fluorobenzamida (70,00 g, 503,1 mmol) u toluenu (900 mL) dodat je hlorokarbonil sulfenil hlorid (83,0 mL, 1,00 mol). Smeša je zagrevana preko noći na 60 °C i koncentrovana. Dobijena tamna čvrsta supstanca je triturirana sa metilen hloridom (200 mL), sakupljena sukcionom filtracijom i isprana dodatnim metilen hloridom (4 x 70 mL). Sirovi proizvod je impregniran na silika gel (100 g) i hromatografisan u velikom filterskom levku suvo napunjenom silika gelom koristeći heksan/etil acetat gradijent.
Proizvod 5-(4-fluorofenil)-1,3,4-oksatiazol-2-on je dobijen kao prljavo bela čvrsta supstanca (55,98 g, 56%).
[0380] U mešani rastvor 5-(4-fluorofenil)-1,3,4-oksatiazol-2-ona (42,80 g, 217,1 mmol) u odihlorobenzenu (600 mL) dodat je etil propiolat (66,0 mL, 651 mmol). Smeša je zagrevana preko noći na 135 °C i koncentrovana. Preostalo ulje je prečišćeno fleš hromatografijom koristeći heksan/etil acetat gradijent da bi se dobio etil 3-(4-fluorofenil)izotiazol-5-karboksilat kao svetlo zlatna čvrsta supstanca (17,35 g, 32%). Polarizovaniji izomer, etil 3-(4-fluorofenil)izotiazol-4-karboksilat (generisan u odnosu ~57/43 u odnosu na željeni proizvod) je odbačen.
[0381] U mešani i ohlađeni (0 °C) rastvor etil 3-(4-fluorofenil)izotiazol-5-karboksilata (38,50 g, 153,2 mmol) u THF (400 mL) dodat je rastvor metilmagnezijum-bromida u dietil etru (3,0 M, 128 mL, 384 mmol), kap po kap tokom 20 minuta. Nakon još 1,5 sata na 0 °C, reakcija je ugašena sporim dodavanjem etil acetata (20 mL) i koncentrovana. Ostatak je rastvoren u vodenom NH4Cl (400 mL) i ekstrahovan etil acetatom (2 x 150 mL). Kombinovani ekstrakti su osušeni (Na2SO4) i koncentrovani. Dobijeni ćilibarni sirup je prečišćen fleš hromatografijom koristeći heksan/etil acetat gradijent da bi se dobio 2-(3-(4-fluorofenil)izotiazol-5-il)propan-2-ol kao meka, zlatna čvrsta supstanca (29,02 g, 80%).
[0382] 2-(3-(4-fluorofenil)izotiazol-5-il)propan-2-ol (29,00 g, 122,2 mmol) je rastvoren u tionil hloridu (75 mL). Smeša je kratko ohlađena (ledena kupka) i mešana. Nakon 4 sata reakcija je koncentrovana, a ostatak je podeljen između etil acetata (200 mL) i vodenog NaHCO3(300 mL). Organski sloj je kombinovan sa povratnim ekstraktom vodenog sloja (etil acetat, 1 x 100 mL), osušen (Na2SO4) i koncentrovan da bi se dobila smeša 5-(2-hloropropan-2-il)-3-(4-fluorofenil)izotiazol proizvoda i 3-(4-fluorofenil)-5-(prop-1-en-2-il)izotiazol eliminacionog nusproizvoda (odnos ~63/39) kao tamno ćilibarno ulje (29,37 g). Ovaj materijal je korišćen bez prečišćavanja u sledećoj reakciji.
[0383] TU mešani rastvor proizvoda iz prethodnog koraka u DMSO (80 mL) dodat je natrijum-azid (14,89 g, 229,0 mmol). Smeša je zagrevana na 50 °C preko noći, razređena etil acetatom (250 mL) i isprana vodom (6 x 400 mL). Organski sloj je osušen (Na2SO4) i koncentrovan da bi se dobila smeša 5-(2-azidopropan-2-il)-3-(4-fluorofenil)izotiazola i 3-(4-fluorofenil)-5-(prop-1-en-2-il)izotiazola (odnos ~56/44) kao tamno ćilibarno ulje (29,10 g). Ovaj materijal je korišćen bez prečišćavanja u sledećoj reakciji.
[0384] Proizvod iz prethodnog koraka je kombinovan sa 10% paladijuma na ugljeniku (50% vode; 7,50 g) i rastvoren u metanolu (350 mL). Mešana suspenzija je tri puta ciklično izlagana vakuumu i pročišćavanju azotom. Nakon dodatne evakuacije, reakcija je napunjena vodonikom (balonski rezervoar) i mešana preko noći. Reakcija je filtrirana kroz celit. Filtrat je kombinovan sa ispiranjima celita metanolom i koncentrovan. Dobijeno tamno ćilibarno ulje je prečišćeno fleš hromatografijom koristeći dihlorometan/metanol gradijent da bi se dobio 2-(3-(4-fluorofenil)izotiazol-5-il)propan-2-amin kao viskozno, ćilibarno ulje (14,23 g, 49% u 3 koraka).
[0385] Nekoliko pristupa se koristi ili se istražuje za lečenje LSD, od kojih se većina fokusira na enzimsku zamensku terapiju za samostalnu upotrebu u upravljanju bolešću. Brojne odobrene enzimske zamenske terapije su komercijalno dostupne za lečenje LSD (npr.
Myozyme<®>za Pompeovu bolest, Aldurazyme<®>za mukopolisaharidozu I, Cerezyme<®>za Gošeovu bolest i Fabrazyme<®>za Fabrijevu bolest). Pored toga, pronalazači su identifikovali niz malih molekula za samostalnu upotrebu u lečenju LSD. Jedinjenja za upotrebu u ovom pronalasku pružaju opcije lečenja za kliničare koji se suočavaju sa upravljanjem različitim bolestima skladištenja lizozoma, kao što je detaljno opisano u nastavku.
[0386] U određenim aspektima obelodanjivanja, jedinjenja ovog obelodanjivanja mogu se koristiti za lečenje metaboličke bolesti, kao što je bolest skladištenja lizozoma (LSD), bilo samostalno ili kao kombinovana terapija sa enzimskom zamenskom terapijom. U drugim aspektima obelodanjivanja, jedinjenja ovog obelodanjivanja mogu se koristiti za inhibiranje ili redukciju GCS aktivnosti kod subjekta dijagnostikovanog sa metaboličkom bolešću, kao što je LSD, bilo samostalno ili kao kombinovana terapija sa enzimskom zamenskom terapijom. U drugim aspektima obelodanjivanja, jedinjenja ovog obelodanjivanja mogu se koristiti za redukciju i/ili inhibiranje akumulacije uskladištenog materijala (npr. lizozomskog supstrata) kod subjekta dijagnostikovanog sa metaboličkom bolešću, kao što je LSD. U određenim otelotvorenjima prethodnih aspekata, LSD je Gošeova bolest (tip 1, tip 2 ili tip 3), Fabrijeva bolest, GM1-gangliozidoza ili GM2-gangliozidoza (npr. nedostatak GM2 aktivatora, Tej-Saksova bolest i Sandhofova bolest). Tabela 1 navodi brojne LSD i identifikuje odgovarajući deficitarni enzim koji se može koristiti kao ERT u prethodnim aspektima obelodanjivanja.
[0387] U drugim scenarijima može biti neophodno obezbediti SMT pacijentu čije stanje zahteva redukciju supstrata u mozgu i stoga nije izlečivo sistemskom primenom ERT. Dok direktna intracerebroventrikularna ili intratekalna primena može smanjiti nivoe supstrata u mozgu, sistemska primena ERT nije pogodna za LSD sa zahvaćenošću centralnog nervnog sistema (CNS) zbog njene nesposobnosti da pređe krvno-moždanu barijeru (BBB) i SMT se može pokazati korisnim kod pacijenata koji imaju rezidualne enzimske aktivnosti u CNS.
[0388] U skladu sa ovim obelodanjivanjem, SMT se pruža pacijentu za lečenje karcinoma i/ili metaboličke bolesti, kao što je bolest skladištenja lizozoma. SMT može uključivati jedan ili više malih molekula. SMT uključuje primenu jedinjenja ovog obelodanjivanja na pacijentu. U posebnim slučajevima, jedinjenje je (S)-hinuklidin-3-il (2-(2-(4-fluorofenil)tiazol-4-il)propan-2-il)karbamat ili hinuklidin-3-il (2-(4'-fluoro-[1,1'-bifenil]-3-il)propan-2-il)karbamat, ili kombinacije istih.
[0389] U određenim slučajevima, jedinjenja obelodanjivanja, kao što su, na primer, (S)-hinuklidin-3-il (2-(2-(4-fluorofenil)tiazol-4-il)propan-2-il)karbamat i hinuklidin-3-il (2-(4'-fluoro-[1,1'-bifenil]-3-il)propan-2-il)karbamat mogu se koristiti za lečenje praktično bilo koje bolesti skladištenja koja proizlazi iz defekta u putu glikosfingolipida (npr. Gošeova bolest (tj. tip 1, tip 2, tip 3), Fabrijeva bolest, GM1-gangliozidoza, GM2-gangliozidoza (npr. nedostatak GM2 aktivatora, Tej-Saksova bolest i Sandhofova bolest)). U posebno preferiranom slučaju, (S)-hinuklidin-3-il (2-(2-(4-fluorofenil)tiazol-4-il)propan-2-il)karbamat ili farmaceutski prihvatljiva so ili prolek istog koristi se za inhibiranje i/ili redukciju akumulacije Gb3 i/ili lizo-Gb3 kod pacijenta obolog od Fabrijeve bolesti, bilo samostalno ili kao kombinovana terapija sa enzimskom zamenskom terapijom (videti primere). U preferiranom slučaju, enzimska zamenska terapija uključuje primenu alfa-galaktozidaze na pacijentu obolelom od Fabrijeve bolesti. Zaista, primeri u nastavku pokazuju da GCS inhibitor obelodanjivanja efikasno smanjuje skladištenje Gb3 i lizo-Gb3 u mišjem modelu Fabrijeve bolesti, čime podržava njegovu upotrebu kao održiv pristup za lečenje Fabrijeve bolesti. Dalje, in vivo podaci o kombinovanoj terapiji dati u primerima snažno sugerišu da kombinovani terapijski pristup može biti i aditivan i komplementaran.
[0390] U određenim slučajevima, jedinjenja obelodanjivanja, kao što su, na primer, (S)-hinuklidin-3-il (2-(2-(4-fluorofenil)tiazol-4-il)propan-2-il)karbamat i hinuklidin-3-il (2-(4'-fluoro-[1,1'-bifenil]-3-il)propan-2-il)karbamat mogu se koristiti za redukciju nivoa GluCer i GluSph u mozgu subjekta dijagnostikovanog sa neuropatskom Gošeovom bolešću, bilo samostalno ili u kombinaciji sa ERT (npr. primenom glukocerebrozidaze).
[0391] Režimi doziranja za komponentu terapije malim molekulima u kombinovanoj terapiji obelodanjivanja generalno se određuju od strane stručnog kliničara i očekuje se da značajno variraju zavisno od specifične bolesti skladištenja koja se leči i kliničkog statusa određenog pogođenog pojedinca. Opšti principi za određivanje režima doziranja za dati SMT obelodanjivanja za lečenje bilo koje bolesti skladištenja dobro su poznati stručnjaku.
Uputstva za režime doziranja mogu se dobiti iz bilo kog od mnogih dobro poznatih referenci u struci na ovu temu. Dalja uputstva su dostupna, između ostalog, iz pregleda specifičnih referenci citiranih ovde. U određenim otelotvorenjima, takve doze mogu se kretati od oko 0,5 mg/kg do oko 300 mg/kg, poželjno od oko 5 mg/kg do oko 60 mg/kg (npr.5 mg/kg, 10 mg/kg, 15, mg/kg, 20 mg/kg, 25 mg/kg, 30 mg/kg, 35 mg/kg, 40 mg/kg, 45 mg/kg, 50 mg/kg, 55 mg/kg i 60 mg/kg) intraperitonealnom, oralnom ili ekvivalentnom primenom jedan do pet puta dnevno. Takve doze mogu se kretati od oko 5 mg/kg do oko 5 g/kg, poželjno od oko 10 mg/kg do oko 1 g/kg oralnom, intraperitonealnom ili ekvivalentnom primenom jedan do pet puta dnevno. U jednom otelotvorenju, doze se kreću od oko 10 mg/dan do oko 500 mg/dan (npr. 10 mg/dan, 20 mg/dan, 30 mg/dan, 40 mg/dan, 50 mg/dan, 60 mg/dan, 70 mg/dan, 80 mg/dan, 90 mg/dan, 100 mg/dan, 110 mg/dan, 120 mg/dan, 130 mg/dan, 140 mg/dan, 150 mg/dan, 160 mg/dan, 170 mg/dan, 180 mg/dan, 190 mg/dan, 200 mg/dan, 210 mg/dan, 220 mg/dan, 230 mg/dan, 240 mg/dan, 250 mg/dan, 260 mg/dan, 270 mg/dan, 280 mg/dan, 290 mg/dan, 300 mg/dan). Posebno preferirani oralni opseg doze je od oko 50 mg do oko 100 mg, pri čemu se doza primenjuje dva puta dnevno. Poseban oralni opseg doze za jedinjenje ovog obelodanjivanja je od oko 5 mg/kg/dan do oko 600 mg/kg/dan. U posebnom oralnom opsegu doze za jedinjenje ovog obelodanjivanja je od oko 1 mg/kg/dan do oko 120 mg/kg/dan, npr.1 mg/kg/dan, 5 mg/kg/dan, 10 mg/kg/dan, 15 mg/kg/dan, 20 mg/kg/dan, 25 mg/kg/dan, 30 mg/kg/dan, 35 mg/kg/dan, 40 mg/kg/dan, 45 mg/kg/dan, 50 mg/kg/dan, 55 mg/kg/dan ili 60 mg/kg/dan, 65 mg/kg/dan, 70 mg/kg/dan, 75 mg/kg/dan, 80 mg/kg/dan, 85 mg/kg/dan, 90 mg/kg/dan, 95 mg/kg/dan, 100 mg/kg/dan, 105 mg/kg/dan, 110 mg/kg/dan, 115 mg/kg/dan ili 120 mg/kg/dan.
[0392] U određenim otelotvorenjima, obelodanjivanje se odnosi na kombinovane terapije SMT koristeći jedinjenja definisana u patentnim zahtevima i ERT terapiju za lečenje bolesti skladištenja lizozoma. Delimična lista poznatih bolesti skladištenja lizozoma koje se mogu lečiti u skladu sa obelodanjivanjem data je u tabeli 1, uključujući uobičajeni naziv bolesti, uskladišteni materijal i odgovarajući nedostatak enzima (adaptirano iz tabele 38-4 Kolodny et al., 1998, Id.).
TABELA 1
Neuronalne ceroidne lipofuscinoze (NCL)*
* Davidson et al., The Neuronal Ceroid Lipofuscinosis, Clinical Features and Molecular Basis of Disease. In Barranger JA and Cabrera-Salazar MA (Eds) Lysosomal Storage Disorders. 2007. pp.371-388. Springer, New York, U.S.A.
[0393] Bilo koja metoda poznata stručnjaku može se koristiti za praćenje statusa bolesti i efikasnosti kombinovane terapije obelodanjivanja. Klinički monitori statusa bolesti mogu uključivati, ali nisu ograničeni na zapreminu organa (npr. jetra, slezina), hemoglobin, broj eritrocita, hematokrit, trombocitopeniju, kaheksiju (gubitak težine) i nivoe plazma hitinaze (npr. hitotriozidaza). Hitotriozidaza, enzim iz familije hitinaza, poznato je da se proizvodi od strane makrofaga u visokim nivoima kod subjekata sa bolestima skladištenja lizozoma (videti Guo et al., 1995, J. Inherit. Metab. Dis. 18, 717-722; den Tandt et al., 1996, J. Inherit. Metab. Dis. 19, 344-350; Dodelson de Kremer et al., 1997, Medicina (Buenos Aires) 57, 677-684; Czartoryska et al., 2000, Clin. Biohem.33, 147-149; Czartoryska et al., 1998, Clin. Biohem.
31, 417-420; Mistry et al., 1997, Baillieres Clin. Haematol.10, 817-838; Young et al., 1997, J. Inherit. Metab. Dis.20, 595-602; Hollak et al., 1994, J. Clin. Invest.93, 1288-1292).
Hitotriozidaza se poželjno meri u kombinaciji sa angiotenzin konvertujućim enzimom i netartrat-rezistentnom kiselom fosfatazom za praćenje odgovora na lečenje pacijenata sa Gošeovom bolešću.
[0394] Metode i formulacije za primenu kombinovanih terapija obelodanjivanja uključuju sve metode i formulacije dobro poznate u struci (videti, npr. Remington's Pharmaceutical Sciences, 1980 and subsequent years, 16th ed. and subsequent editions, A. Oslo editor, Easton Pa.; Controlled Drug Delivery, 1987, 2nd rev., Joseph R. Robinson & Vincent H. L. Lee, eds., Marcel Dekker, ISBN: 0824775880; Enciklopedia of Controlled Drug Delivery, 1999, Edith Mathiowitz, John Wiley & Sons, ISBN: 0471148288; američki patent br.6,066,626 i reference citirane u njemu; videti takođe, reference citirane u odeljcima ispod).
[0395] Prema obelodanjivanju, dati su sledeći opšti pristupi za kombinovanu terapiju u lečenju bolesti skladištenja lizozoma. Svaki opšti pristup uključuje kombinovanje enzimske zamenske terapije sa terapijom malim molekulima na način koji je u skladu sa optimizacijom kliničke koristi, uz minimiziranje nedostataka povezanih sa upotrebom svake terapije samostalno.
[0396] U jednom otelotvorenju obelodanjivanja, enzimska zamenska terapija (samostalno ili u kombinaciji sa terapijom malim molekulima) primenjuje se za iniciranje lečenja (tj. za smanjenje nagomilanih supstanci kod subjekta), a terapija malim molekulima primenjuje se nakon faze smanjenja nagomilanih supstanci kako bi se postigao i održao stabilan, dugoročni terapijski efekat bez potrebe za čestim intravenskim ERT injekcijama. Na primer, enzimska zamenska terapija se može primeniti intravenski (npr. tokom jednog do dva sata) jednom, na nedeljnoj bazi, jednom svake dve nedelje, ili jednom svaka dva meseca, tokom nekoliko nedelja ili meseci, ili duže (npr. dok zahvaćeni indikator organa kao što je slezina ili jetra ne pokaže smanjenje veličine). Štaviše, ERT faza početnog tretmana za smanjenje nagomilanih supstanci može se sprovesti samostalno ili u kombinaciji sa terapijom malim molekulima. Komponenta terapije malim molekulima je posebno poželjna gde je mali molekul kompatibilan sa oralnom primenom, čime se pruža dodatno olakšanje od čestih intravenskih intervencija.
[0397] Naizmenična primena ERT i SMT, ili dopunjavanje SMT sa ERT po potrebi, pruža strategiju za istovremeno korišćenje prednosti i rešavanje slabosti povezanih sa svakom terapijom kada se koristi samostalno. Prednost ERT, bilo da se koristi za smanjenje nagomilanih supstanci i/ili za dugoročnu negu, je mnogo šire kliničko iskustvo dostupno za donošenje odluka kliničara. Štaviše, subjekat se može efikasno titrirati sa ERT tokom faze smanjenja nagomilanih supstanci, na primer, praćenjem biohemijskih metabolita u urinu ili drugim telesnim uzorcima, ili merenjem zapremine zahvaćenog organa. Nedostatak ERT, međutim, je učestalost potrebne primene, koja tipično uključuje intravensku injekciju na nedeljnoj ili dvonedeljnoj bazi zbog stalnog ponovnog nagomilavanja supstrata. Upotreba terapije malim molekulima za redukciju količine ili inhibiranje akumulacije supstrata kod pacijenta može zauzvrat smanjiti učestalost primene ERT. Na primer, režim doziranja enzimske zamenske terapije na dvonedeljnoj bazi može dobiti „ERT odmor“ (npr. korišćenjem SMT) tako da česte enzimske injekcije nisu potrebna terapija. Nadalje, lečenje bolesti skladištenja lizozoma kombinovanom terapijom može pružiti komplementarne terapijske pristupe. Zaista, kao što je prikazano u primerima u nastavku, kombinovana terapija sa SMT i ERT može pružiti značajna poboljšanja u odnosu na bilo koju terapijsku platformu samostalno. Ovi podaci sugerišu da kombinovana terapija korišćenjem SMT i ERT može biti i aditivna i komplementarna. U jednom otelotvorenju, ERT se može koristiti kao strategija za smanjenje nagomilanih supstanci (tj. za iniciranje lečenja), nakon čega sledi ili se istovremeno dopunjuje sa SMT koristeći jedinjenje ovog obelodanjivanja. U drugom otelotvorenju, pacijent se prvo tretira sa SMT koristeći jedinjenje ovog obelodanjivanja, nakon čega sledi ili se istovremeno dopunjuje sa ERT. U drugim otelotvorenjima, SMT se koristi za inhibiranje ili redukciju dalje akumulacije supstrata (ili ponovne akumulacije supstrata ako se koristi nakon smanjenja nagomilanih supstanci sa ERT) kod pacijenta sa bolešću skladištenja lizozoma, i opciono se po potrebi daje ERT za redukciju bilo kakve dalje akumulacije supstrata. U jednom otelotvorenju, ovo obelodanjivanje pruža kombinovanu terapiju za lečenje subjekta dijagnostikovanog sa bolešću skladištenja lizozoma, koja obuhvata naizmeničnu primenu enzimske zamenske terapije i terapije malim molekulima. U drugom otelotvorenju, ovo obelodanjivanje pruža kombinovanu terapiju za lečenje subjekta dijagnostikovanog sa bolešću skladištenja lizozoma, koja obuhvata istovremenu primenu enzimske zamenske terapije i terapije malim molekulima. U različitim kombinovanim terapijama obelodanjivanja, podrazumeva se da primena terapije malim molekulima može nastupiti pre, istovremeno sa, ili posle, primene enzimske zamenske terapije. Slično tome, primena enzimske zamenske terapije može nastupiti pre, istovremeno sa, ili posle, primene terapije malim molekulima.
[0398] U bilo kom od otelotvorenja obelodanjivanja, bolest skladištenja lizozoma je izabrana iz grupe koja se sastoji od Gošeove bolesti (tipovi 1, 2 i 3), Niman-Pikove bolesti, Farberove bolesti, GM1-gangliozidoze, GM2-gangliozidoze (npr. nedostatak GM2 aktivatora, Tej-Saksova bolest i Sandhofova bolest), Krabeove bolesti, Hurler-Šajeovog sindroma (MPS I), Hanterovog sindroma (MPS II), Sanfilipovog sindroma (MPS III) tipa A, Sanfilipovog sindroma (MPS III) tipa B, Sanfilipovog sindroma (MPS III) tipa C, Sanfilipovog sindroma (MPS III) tipa D, Morkiovog sindroma (MPS IV) tipa A, Morkiovog sindroma (MPS IV) tipa B, Maroto-Lemijevog sindroma (MPS VI), Slajevog sindroma (MPS VII), mukosulfatidoze, sijalidoze, mukolipidoze II, mukolipidoze III, mukolipidoze IV, Fabrijeve bolesti, Šindlerove bolesti, Pompeove bolesti, bolesti skladištenja sijalične kiseline, fukozidoze, manozidoze, aspartilglukozaminurije, Volmanove bolesti i neuronalnih ceroidnih lipofuscinoza.
[0399] Dalje, ERT obezbeđuje efektivnu količinu najmanje jednog od sledećih enzima; glukocerebrozidaza, sfingomijelinaza, keramidaza, GM1-gangliozid-beta-galaktozidaza, heksozaminidaza A, heksozaminidaza B, beta-galaktocerebrozidaza, alfa-L-iduronoza, iduronat sulfataza, heparan-N-sulfataza, N-acetil-alfa-glukozaminidaza, acetil CoA:alfaglukozaminid acetil-transferaza, N-acetil-alfa-glukozamin-6-sulfataza, galaktozamin-6-sulfataza, beta-galaktozidaza, galaktozamin-4-sulfataza (arilsulfataza B), beta-glukuronidaza, arilsulfataza A, arilsulfataza C, alfa-neuraminidaza, N-acetil-glukozamin-1-fosfat transferaza, alfa-galaktozidaza A, alfa-N-acetilgalaktozaminidaza, alfa-glukozidaza, alfa-fukozidaza, alfamanozidaza, aspartilglukozamin amidaza, kisela lipaza, palmitoil-protein tioesteraza (CLN-1), PPT1, TPP1, CLN3, CLN5, CLN6, CLN8, NPC1 ili NPC2.
[0400] U skladu sa obelodanjivanjem, SMT i/ili ERT proizvode smanjenje u najmanje jednoj od sledećih uskladištenih materijala; glukocerebrozid, sfingomijelin, ceramid, GM1-gangliozid, GM2-gangliozid, globosid, galaktozilceramid, dermatan sulfat, heparan sulfat, keratan sulfat, sulfatidi, mukopolisaharidi, sijalioligosaharidi, glikoproteini, sijalioligosaharidi, glikolipidi, globotriaozilceramid, O-vezani glikopeptidi, glikogen, slobodna sijalična kiselina, fukoglikolipidi, fukoziloligosaharidi, manoziloligosaharidi, aspartilglukozamin, holesteril estri, trigliceridi, granularne osmoprilne naslage - Saposini A i D, ATP sintaza subjedinica c, NPC1 ili NPC2.
[0401] U određenim otelotvorenjima obelodanjivanja, terapija malim molekulima obuhvata primenu na subjekta efektivne količine (S)-hinuklidin-3-il (2-(2-(4-fluorofenil)tiazol-4-il)propan-2-il)karbamata (videti sliku 2A). U drugim otelotvorenjima, terapija malim molekulima obuhvata primenu na subjekta efektivne količine hinuklidin-3-il (2-(4'-fluoro-[1,1'-bifenil]-3-il)propan-2-il)karbamata (videti sliku 2B). Terapija malim molekulima može uključivati primenu jednog ili više jedinjenja na subjekta. U određenim otelotvorenjima, najmanje jedno od jedinjenja je jedinjenje ovog obelodanjivanja, kao što su ona prikazana na slici 2A i/ili 2B.
[0402] Enzimska zamenska terapija može izazvati neželjene imune odgovore. Shodno tome, imunosupresivni agensi se mogu koristiti zajedno sa komponentom enzimske zamenske terapije u kombinovanoj terapiji obelodanjivanja. Takvi agensi se takođe mogu koristiti sa komponentom terapije malim molekulima, ali je potreba za intervencijom ovde generalno manje verovatna. Bilo koji imunosupresivni agens poznat stručnjaku može se koristiti zajedno sa kombinovanom terapijom obelodanjivanja. Takvi imunosupresivni agensi uključuju, ali nisu ograničeni na ciklosporin, FK506, rapamicin, CTLA4-Ig, i anti-TNF agense kao što je etanercept (videti npr. Moder, 2000, Ann. Allergy Asthma Immunol. 84, 280-284; Nevins, 2000, Curr. Opin. Pediatr.12, 146-150; Kurlberg et al., 2000, Scand. J. Immunol. 51, 224-230; Ideguchi et al., 2000, Neuroscience 95, 217-226; Potteret al., 1999, Ann. N.Y. Acad. Sci.875, 159-174; Slavik et al., 1999, Immunol. Res.19, 1-24; Gaziev et al., 1999, Bone Marrow Transplant. 25, 689-696; Henry, 1999, Clin. Transplant.13, 209-220; Gummert et al., 1999, J. Am. Sokt. Nephrol.10, 1366-1380; Qi et al., 2000, Transplantation 69, 1275-1283). Antitelo koje cilja IL-2 receptor (alfa-podjedinicu) daclizumab (npr.
Zenapax.TM.), , za koje je dokazano da je efikasno kod transplantiranih pacijenata, takođe se može koristiti kao imunosupresivni agens (videti npr. Wiseman et al., 1999, Drugs 58, 1029-1042; Beniaminovitz et al., 2000, N. Engl J. Med.342, 613-619; Ponticelli et al., 1999, Drugs R. D.1, 55-60; Berard et al., 1999, Pharmacotherapy 19, 1127-1137; Eckhoff et al., 2000, Transplantation 69, 1867-1872; Ekberg et al., 2000, Transpl. Int.13, 151-159). Dodatni imunosupresivni agensi uključuju, ali nisu ograničeni na anti-CD2 (Branco et al., 1999, Transplantation 68, 1588-1596; Przepiorka et al., 1998, Blood 92, 4066-4071), anti-CD4 (Marinova-Mutafchieva et al., 2000, Arthritis Rheum. 43, 638-644; Fishwild et al., 1999, Clin. Immunol. 92, 138-152) i anti-CD40 ligand (Hong et al., 2000, Semin. Nephrol.20, 108-125; Chirmule et al., 2000, J. Virol.74, 3345-3352; Ito et al., 2000, J. Immunol. 164, 1230-1235).
[0403] Bilo koja kombinacija imunosupresivnih agenasa poznata stručnjaku može se koristiti zajedno sa kombinovanom terapijom obelodanjivanja. Jedna kombinacija imunosupresivnih agenasa od posebne koristi je takrolimus (FK506) plus sirolimus (rapamicin) plus daklizumab (antitelo koje cilja α-podjedinicu IL-2 receptora). Ova kombinacija je dokazano efikasna kao alternativa steroidima i ciklosporinu, i kada je specifično usmerena na jetru. Štaviše, ova kombinacija je nedavno pokazala da omogućava uspešne transplantacije ćelija pankreasnih ostrvaca. Videti Denise Grady, The New York Times, Saturday, May 27, 2000, pages A1, a A11. Videti takođe A. M. Shapiro et al., Jul.27, 2000, "Islet Transplantation In Seven Patients With Type 1 Diabetes Mellitus Using A Glucoktorticoid-Free Immunosuppressive Regimen", N. Engl. J. Med.343, 230-238; Ryan et al., 2001, Diabetes 50, 710-719. Plazmafereza bilo kojom metodom poznatom u struci takođe se može koristiti za uklanjanje ili smanjenje antitela koja se mogu razviti protiv različitih komponenti kombinovane terapije.
[0404] Indikatori imunološkog statusa za upotrebu sa obelodanjivanjem uključuju, ali nisu ograničeni na antitela i bilo koji od citokina poznatih stručnjaku, npr., interleukine, CSF i interferone (videti generalno, Leonard et al., 2000, J. Allergy Clin. Immunol. 105, 877-888; Oberholzer et al., 2000, Crit. Care Med.28 (4 Suppl.), N3-N12; Rubinstein et al., 1998, Cytokine Growth Factor Rev.9, 175-181). Na primer, antitela specifično imunoreaktivna sa zamenskim enzimom mogu se pratiti kako bi se odredio imunološki status subjekta. Među dvadesetak poznatih interleukina, posebno preferirani indikatori imunološkog statusa su IL-1α, IL-2, IL-4, IL-8 i IL-10. Među faktorima koji stimulišu kolonije (CSF), posebno preferirani indikatori imunološkog statusa su G-CSF, GM-CSF i M-CSF. Među interferonima, jedan ili više alfa, beta ili gama interferona su preferirani kao indikatori imunološkog statusa.
[0405] U odeljcima koji slede, dati su različite komponente koje se mogu koristiti za osam specifičnih bolesti skladištenja lizozoma (tj. Gošeova bolest (uključujući tipove 1, 2 i 3), Fabrijeva bolest, Niman-Pikova bolest tipa B, Hanterov sindrom, Morkiov sindrom, Maroto-Lemijev sindrom, Pompeova bolest i Hurler-Šajeov sindrom). U narednim odeljcima, dato je dalje omogućujuće obelodanjivanje za komponente enzimske zamenske terapije i terapije malim molekulima u kombinovanoj terapiji obelodanjivanja.
Gošeova bolest
[0406] Kao što je gore navedeno, Gošeova bolest je uzrokovana nedostatkom enzima glukocerebrozidaze (beta-D-glukozil-N-acilsfingozin glukohidrolaze, EC 3.2.1.45) i akumulacijom glukocerebrozida (glukozilceramida). Za komponentu enzimske zamenske terapije u kombinovanoj terapiji ovog obelodanjivanja za lečenje Gošeove bolesti, dostupne su brojne reference koje navode zadovoljavajuće režime doziranja i druge korisne informacije u vezi sa lečenjem (videti Morales, 1996, Gaucher's Disease: A Review, The Annals of Pharmacotherapy 30, 381-388; Rosenthal et al., 1995, Enzyme Replacement Therapy for Gaucher Disease: Skeletal Responses to Macrophage-targeted Glucokterebrosidase, Pediatrics 96, 629-637; Barton et al., 1991, Replacement Therapy for Inherited Enzyme Deficiency--Macrophage-targeted Glucokterebrosidase for Gaucher's Disease, New England Journal of Medicine 324, 1464-1470; Grabowski et al., 1995, Enzyme Therapy in Type 1 Gaucher Disease: Comparative Efficacy of Mannose-terminated Glucokterebrosidase from Natural i Recombinant Sources, Annals of Internal Medicine 122, 33-39; Pastores et al., 1993, Enzyme Therapy in Gaucher Disease Type 1: Dosage Efficacy, a Adverse Effects in 33 Patients treated for 6 to 24 Months, Blood 82, 408-416); i Weinreb et al., Am. J.
Med.;113(2):112-9 (2002).
[0407] IU jednom otelotvorenju, ERT režim doziranja od 2,5 jedinica po kilogramu (U/kg) tri puta nedeljno do 60 U/kg jednom u dve nedelje je predviđen, pri čemu se enzim primenjuje intravenskom infuzijom tokom 1-2 sata. Jedinica glukocerebrozidaze je definisana kao količina enzima koja katalizuje hidrolizu jednog mikromola sintetičkog supstrata paranitrofenil-p-D-glukopiranozida u minuti na 37 °C. U drugom otelotvorenju, predviđen je režim doziranja od 1 U/kg tri puta nedeljno do 120 U/kg jednom u dve nedelje. U još jednom otelotvorenju, predviđen je režim doziranja od 0,25 U/kg dnevno ili tri puta nedeljno do 600 U/kg jednom u dve do šest nedelja.
[0408] Od 1991. godine, algluceraza (Ceredase<®>) je dostupna od strane Genzyme Corporation. Algluceraza je modifikovani oblik glukocerebrozidaze poreklom iz placente. Godine 1994, imigluceraza (Cerezyme<®>) je takođe postala dostupna od strane Genzyme Corporation. Imigluceraza je modifikovani oblik glukocerebrozidaze dobijen ekspresijom rekombinantne DNK u sistemu ćelijskih kultura sisara (ćelije jajnika kineskog hrčka).
Imigluceraza je monomerni glikoprotein od 497 aminokiselina koji sadrži četiri N-vezana mesta glikozilacije. Imigluceraza ima prednosti teoretski neograničene ponude i smanjene šanse za biološke kontaminante u odnosu na aglucerazu poreklom iz placente. Ovi enzimi su modifikovani na svojim mestima glikozilacije kako bi se izložili ostaci manoze, što je manevar koji poboljšava lizozomsko ciljanje putem manozno-6-fosfatnog receptora.
Imigluceraza se razlikuje od placente glukocerebrozidaze za jednu aminokiselinu na poziciji 495, gde je histidin zamenjen argininom. Poznato je da su nekoliko režima doziranja ovih proizvoda efikasni (videti Morales, 1996, Id.; Rosenthal et al., 1995, Id.; Barton et al., 1991, Id.; Grabowski et al., 1995, Id.; Pastores et al., 1993, Id.). Na primer, režim doziranja od 60 U/kg jednom u dve nedelje je od kliničke koristi kod subjekata sa umerenom do teškom bolešću. Navedene reference i uputstva za pakovanje za ove proizvode treba da konsultuje stručni kliničar za dodatne informacije o režimu doziranja i primeni. Videti takođe američke patente br.5,236,838 i 5,549,892 dodeljene kompaniji Genzyme Corporation.
[0409] Kao što je gore navedeno, Gošeova bolest je rezultat deficita lizozomskog enzima glukocerebrozidaze (GC). U najčešćem fenotipu Gošeove bolesti (tip 1), patologija je ograničena na retikuloendotelni i skeletni sistem i nema neuropatskih simptoma. Videti Barranger, Glucosilceramid lipidosis: Gaucher disease. In: Scriver CR BA, Sly WS, Valle D, editor. The Metabolic Basis of Inherited Disease. New York: McGraw-Hill. pp.3635-3668 (2001). Kod neuropatske Gošeove bolesti (nGD), podeljene na tip 2 i tip 3 Gošeove bolesti, deficit glukocerebrozidaze (GC) uzrokuje akumulaciju glukozilceramida (GluCer; GL-1) i glukozilsfingozina (GluSph) u mozgu, što dovodi do neurološkog oštećenja. Gošeova bolest tipa 2 karakteriše rani početak, brza progresija, ekstenzivna patologija u visceralnim organima i centralnom nervnom sistemu, i smrt obično do 2. godine života. Gošeova bolest tipa 3, poznata i kao subakutna nGD, je intermedijerni fenotip sa različitim uzrastom početka i različitim stepenima težine i brzinama progresije. Goker-Alpan et al., The Journal of Pediatrics 143: 273-276 (2003). Nedavni razvoj proizveo je K14 lnl/lnl mišji model Gošeove bolesti tipa 2 (u daljem tekstu „K14 miš“); ovaj mišji model blisko rekapitulira ljudsku bolest pokazujući ataksiju, napade, spastičnost i smanjen prosečni životni vek od samo 14 dana. Enquist et al., PNAS 104: 17483-17488 (2007).
[0410] Kao i kod pacijenata sa nGD, nekoliko mišjih modela bolesti ima povećane nivoe GluCer i GluSph u mozgu zbog deficita GC aktivnosti. Liu et al., PNAS 95: 2503-2508 (1998) i Nilsson, J. Neurohem 39: 709-718 (1982). „K14“ miševi pokazuju neuropatski fenotip koji deli mnoge patološke karakteristike sa Gošeovom bolešću tipa 2, kao što su neurodegeneracija, astroglijoza, mikroglijalna proliferacija i povećani nivoi GluCer i GluSph u specifičnim regionima mozga. Enquist et al. (2007).
[0411] Kliničko upravljanje pacijentima pogođenim nGD predstavlja izazov za lekare koji leče, kako zbog ozbiljnosti bolesti tipa 2, tako i zbog nesposobnosti trenutnih terapija da pređu krvno-moždanu barijeru (BBB). Trenutno lečenje ne-nGD se oslanja na intravensku primenu rekombinantne humane glukocerebrozidaze (Imigluceraza; Cerezyme<™>) za zamenu nedostajućeg enzima ili primenu inhibitora glukozilceramid sintaze za ublažavanje proizvodnje supstrata (GL-1). Međutim, ovi lekovi ne prelaze krvno-moždanu barijeru, i stoga se ne očekuje da pruže terapeutsku korist za pacijente sa nGD. Trenutni inhibitori glukozilceramid sintaze malih molekula u klinici verovatno neće rešiti neuropatske fenotipe nGD. Evaluacija jedinjenja ovog obelodanjivanja, hinuklidin-3-il (2-(4'-fluoro-[1,1'-bifenil]-3-il)propan-2-il)karbamata (u daljem tekstu, „Gz161“), u K14 mišjem modelu Gošeove bolesti tipa 2 pokazala je da može zaista smanjiti GluCer i GluSph u mozgu (videti primere 122-125). Takođe je smanjila neuropatologiju mozga i produžila životni vek ovog modela. Štaviše, kombinovani pristup korišćenjem i enzimske zamene i redukcije supstrata malim molekulima može predstavljati superiornu terapiju za Gošeovu bolest tipa 2.
Fabrijeva bolest
[0412] Kao što je prethodno navedeno, Fabrijeva bolest je uzrokovana nedostatkom lizozomskog enzima alfa-galaktozidaze A. Enzimski defekt dovodi do sistemskog taloženja glikosfingolipida koji imaju terminalne alfa-galaktozilne grupe, pretežno globotriaozilceramida (GL3 ili Gb3) i, u manjoj meri, galabiozilceramida i glikosfingolipida krvne grupe B.
[0413] Dostupno je nekoliko testova za praćenje progresije bolesti i određivanje kada preći sa jednog modaliteta lečenja na drugi. U jednom slučaju, može se koristiti test za određivanje specifične aktivnosti alfa-galaktozidaze A u uzorku tkiva. U drugom slučaju, može se koristiti test za određivanje akumulacije Gb3. U još jednom slučaju, kliničar može testirati taloženje glikosfingolipidnih supstrata u telesnim tečnostima i u lizozomima vaskularnih endotelnih, peritelijalnih i glatkih mišićnih ćelija krvnih sudova. Druge kliničke manifestacije koje mogu biti korisni pokazatelji upravljanja bolešću uključuju proteinuriju, ili druge znakove oštećenja bubrega kao što su crvene krvne ćelije ili lipidne globule u urinu, i povišenu brzinu sedimentacije eritrocita. Takođe se može pratiti anemija, smanjena koncentracija serumskog gvožđa, visoka koncentracija beta-tromboglobulina i povišen broj retikulocita ili agregacija trombocita. Zaista, može se koristiti bilo koji pristup za praćenje progresije bolesti koji je poznat stručnjaku (videti generalno Desnick RJ et al., 1995, .alpha.-galaktozidaza A Deficiency: Fabry Disease, In: The Metabolic and Molecular Bases of Inherited Disease, Scriver et al., eds., McGraw-Hill, N.Y., 7.sup.th ed., pages 2741-2784). Preferirani surogat marker je bol za praćenje upravljanja Fabrijevom bolešću. Druge preferirane metode uključuju merenje ukupnog klirensa enzima i/ili supstrata iz telesne tečnosti ili bioptičkog uzorka. Preferirani režim doziranja za enzimsku zamensku terapiju kod Fabrijeve bolesti je 1-10 mg/kg i.v. svaki drugi dan. Može se koristiti režim doziranja od 0,1 do 100 mg/kg i.v. sa učestalošću od svaki drugi dan do jednom nedeljno ili svake dve nedelje.
Niman-Pikova bolest tipa B
[0414] Kao što je prethodno navedeno, Niman-Pikova bolest tipa B je uzrokovana smanjenom aktivnošću lizozomskog enzima kisele sfingomijelinaze i akumulacijom membranskih lipida, prvenstveno sfingomijelina. Efektivna doza zamenske kisele sfingomijelinaze koja se isporučuje može se kretati od oko 0,01 mg/kg do oko 10 mg/kg telesne težine sa učestalošću od svaki drugi dan do nedeljno, jednom u dve nedelje, ili jednom u dva meseca. U drugim otelotvorenjima, efektivna doza može se kretati od oko 0,03 mg/kg do oko 1 mg/kg; od oko 0,03 mg/kg do oko 0,1 mg/kg; i/ili od oko 0,3 mg/kg do oko 0,6 mg/kg. U posebnom otelotvorenju, pacijentu se primenjuje kisela sfingomijelinaza u režimu eskalirajuće doze sa sledećim sekvencijalnim dozama: 0,1 mg/kg; 0,3 mg/kg; 0,6 mg/kg; i 1,0 mg/kg, pri čemu se svaka doza kisele sfingomijelinaze primenjuje najmanje dva puta, i svaka doza se primenjuje u intervalima od dve nedelje, i pri čemu se pacijent prati zbog toksičnih neželjenih efekata pre podizanja doze na sledeći nivo (videti Publikaciju američke patentne prijave br.2011/0052559.
Hurler-Šajeov sindrom (MPS I)
[0415] Hurlerov, Šajeov i Hurler-Šajeov sindrom, poznat i kao MPS I, uzrokovan je inaktivacijom alfa-iduronidaze i akumulacijom dermatan sulfata i heparan sulfata. Dostupno je nekoliko testova za praćenje progresije MPS I bolesti. Na primer, aktivnost enzima alfaiduronidaze može se pratiti u uzorcima tkivne biopsije ili kultivisanim ćelijama dobijenim iz periferne krvi. Pored toga, pogodna mera progresije bolesti kod MPS I i drugih mukopolisaharidoza je urinarna ekskrecija glikozaminoglikana dermatan sulfata i heparan sulfata (videti Neufeld et al., 1995, Id.). U posebnom slučaju, enzim alfa-iduronidaza se primenjuje jednom nedeljno kao intravenska infuzija u dozi od 0,58 mg/kg telesne težine.
Hanterov sindrom (MPS II)
[0416] Hanterova bolest (takođe poznata kao MPS II) je uzrokovana inaktivacijom iduronat sulfataze i akumulacijom dermatan sulfata i heparan sulfata. Hanterova bolest se klinički manifestuje u teškim i blagim oblicima. Preferira se režim doziranja terapeutskog enzima od 1,5 mg/kg svake dve nedelje do 50 mg/kg svake nedelje.
Morkiov sindrom (MPS IV)
[0417] Morkiov sindrom (takođe poznat kao MPS IV) nastaje usled akumulacije keratan sulfata zbog inaktivacije jednog od dva enzima. Kod MPS IVA inaktivirani enzim je galaktozamin-6-sulfataza, a kod MPS IVB inaktivirani enzim je beta-galaktozidaza. Preferira se režim doziranja terapeutskog enzima od 1,5 mg/kg svake dve nedelje do 50 mg/kg svake nedelje.
Maroto-Lemijev sindrom (MPS VI)
[0418] Maroto-Lemijev sindrom (takođe poznat kao MPS VI) je uzrokovan inaktivacijom galaktozamin-4-sulfataze (arilsulfataza B) i akumulacijom dermatan sulfata. Režim doziranja od 1,5 mg/kg svake dve nedelje do 50 mg/kg svake nedelje je preferirani opseg efektivnog terapeutskog enzima koji pruža ERT. Optimalno, primenjena doza je manja ili jednaka 10 mg/kg nedeljno. Preferirani surogat marker za progresiju MPS VI bolesti su nivoi proteoglikana.
Pompeova bolest
[0419] Pompeova bolest je uzrokovana inaktivacijom enzima kisele alfa-glukozidaze i akumulacijom glikogena. Gen za kiselu alfa-glukozidazu nalazi se na ljudskom hromozomu 17 i označen je kao GAA. H. G. Hers je prvi predložio koncept urođene lizozomske bolesti na osnovu svojih studija ove bolesti, koju je nazvao tip II bolesti skladištenja glikogena (GSD II), a koja se sada takođe naziva deficit kiseline maltaze (AMD) (videti Hers, 1965, Gastroenterology 48, 625). U posebnom slučaju, GAA se primenjuje svake 2 nedelje kao intravenska infuzija u dozi od 20 mg/kg telesne težine.
[0420] Dostupno je nekoliko testova za praćenje progresije Pompeove bolesti. Može se koristiti bilo koji test poznat stručnjaku. Na primer, može se testirati intralizozomna akumulacija granula glikogena, posebno u miokardu, jetri i vlaknima skeletnih mišića dobijenih biopsijom. Aktivnost enzima alfa-glukozidaze takođe se može pratiti u bioptičkim uzorcima ili kultivisanim ćelijama dobijenim iz periferne krvi. Povišeni nivoi kreatin kinaze (CK) u serumu mogu se pratiti kao indikacija progresije bolesti. Serumski CK može biti povišen do deset puta kod pacijenata sa infantilnim početkom bolesti i obično je povišen u manjoj meri kod pacijenata sa početkom bolesti u odraslom dobu. Videti Hirschhorn R, 1995, Glycogen Storage Disease Type II: Acid alpha-glukozidaza (Acid Maltase) Deficiency, In: The Metabolic and Molecular Bases of Inherited Disease, Scriver et al., eds., McGraw-Hill, N.Y., 7.sup.th ed., pages 2443-2464.
Enzimska zamenska terapija
[0421] Sledeći odeljci navode specifična obelodanjivanja i alternativna otelotvorenja dostupna za komponentu enzimske zamenske terapije u kombinovanoj terapiji obelodanjivanja. Generalno, režimi doziranja za komponentu enzimske zamenske terapije u kombinovanoj terapiji obelodanjivanja generalno se određuju od strane stručnog kliničara. Nekoliko primera režima doziranja za lečenje Gošeove bolesti glukocerebrozidazom dato je gore. Opšti principi za određivanje režima doziranja za bilo koju datu ERT komponentu kombinovane terapije obelodanjivanja za lečenje bilo koje LSD biće očigledni stručnjaku iz javno dostupnih informacija, kao što je, na primer, pregled specifičnih referenci citiranih u odeljcima za svaku specifičnu LSD. ERT se može primeniti pacijentu intravenskom infuzijom. Intracerebroventrikularna i/ili intratekalna infuzija može se koristiti (npr., pored intravenske infuzije) za primenu ERT na pacijentu dijagnostikovanom sa bolešću skladištenja lizozoma koja ima manifestacije CNS.
[0422] ABilo koja metoda poznata u struci može se koristiti za proizvodnju enzima koji će se koristiti u komponenti enzimske zamenske terapije u kombinovanoj terapiji obelodanjivanja. Mnoge takve metode su poznate i uključuju, ali nisu ograničene na tehnologiju aktivacije gena koju je razvila Shire plc (videti američke patente br.5,968,502 i 5,272,071).
Terapija malim molekulima
[0423] Sledeći odeljak takođe navodi specifična obelodanjivanja i alternativna otelotvorenja dostupna za komponentu terapije malim molekulima u kombinovanoj terapiji obelodanjivanja. Režimi doziranja za komponentu terapije malim molekulima u kombinovanoj terapiji obelodanjivanja generalno se određuju od strane stručnog kliničara i očekuje se da značajno variraju zavisno od specifične bolesti skladištenja koja se leči i kliničkog statusa određenog pogođenog pojedinca. Opšti principi za određivanje režima doziranja za datu SMT komponentu bilo koje kombinovane terapije obelodanjivanja za lečenje bilo koje bolesti skladištenja dobro su poznati stručnjaku. Uputstva za režime doziranja mogu se dobiti iz bilo kog od mnogih dobro poznatih referenci u struci na ovu temu. Dalja uputstva su dostupna, između ostalog, iz pregleda specifičnih referenci citiranih ovde.
[0424] Generalno, jedinjenja prema zahtevima, kao što su, na primer, (S)-hinuklidin-3-il (2-(2-(4-fluorofenil)tiazol-4-il)propan-2-il)karbamat i hinuklidin-3-il (2-(4'-fluoro-[1,1'-bifenil]-3-il)propan-2-il)karbamat mogu se koristiti u kombinovanim terapijama pronalaska za lečenje praktično bilo koje bolesti skladištenja koja proizlazi iz lezije u putu glikosfingolipida (npr. Gošeova bolest, Fabrijeva bolest, GM1-gangliozidoza i GM2-gangliozidoza (npr. nedostatak GM2 aktivatora, Tej-Saksova bolest i Sandhofova bolest)). Isto tako, aminoglikozidi (npr. gentamicin, G418) mogu se koristiti u kombinovanim terapijama obelodanjivanja za svakog pojedinca sa bolešću skladištenja koji ima mutaciju preranog stop-kodona (tj. nonsense mutaciju). Takve mutacije su posebno rasprostranjene kod Hurlerovog sindroma.
Komponenta terapije malim molekulima u kombinovanoj terapiji obelodanjivanja je posebno poželjna tamo gde postoji manifestacija centralnog nervnog sistema kod bolesti skladištenja koja se leči (npr. Sandhofova bolest, Tej-Saksova bolest, Niman-Pikova bolest tipa A i Gošeova bolest tipa 2 i 3), budući da mali molekuli generalno mogu lako preći krvnomoždanu barijeru u poređenju sa drugim terapijama.
[0425] Preferirane doze inhibitora supstrata koji se koriste u kombinovanoj terapiji obelodanjivanja lako se određuju od strane stručnjaka. U određenim otelotvorenjima, takve doze mogu se kretati od oko 0,5 mg/kg do oko 300 mg/kg, poželjno od oko 5 mg/kg do oko 60 mg/kg (npr.5 mg/kg, 10 mg/kg, 15, mg/kg, 20 mg/kg, 25 mg/kg, 30 mg/kg, 35 mg/kg, 40 mg/kg, 45 mg/kg, 50 mg/kg, 55 mg/kg i 60 mg/kg) intraperitonealnom, oralnom ili ekvivalentnom primenom jedan do pet puta dnevno. Takve doze mogu se kretati od oko 5 mg/kg do oko 5 g/kg, poželjno od oko 10 mg/kg do oko 1 g/kg oralnom, intraperitonealnom ili ekvivalentnom primenom jedan do pet puta dnevno. U jednom otelotvorenju, doze se kreću od oko 10 mg/dan do oko 500 mg/dan (npr.10 mg/dan, 20 mg/dan, 30 mg/dan, 40 mg/dan, 50 mg/dan, 60 mg/dan, 70 mg/dan, 80 mg/dan, 90 mg/dan, 100 mg/dan, 110 mg/dan, 120 mg/dan, 130 mg/dan, 140 mg/dan, 150 mg/dan, 160 mg/dan, 170 mg/dan, 180 mg/dan, 190 mg/dan, 200 mg/dan, 210 mg/dan, 220 mg/dan, 230 mg/dan, 240 mg/dan, 250 mg/dan, 260 mg/dan, 270 mg/dan, 280 mg/dan, 290 mg/dan, 300 mg/dan). Posebno preferirani oralni opseg doze je od oko 50 mg do oko 100 mg, pri čemu se doza primenjuje dva puta dnevno. Poseban oralni opseg doze za jedinjenje ovog obelodanjivanja je od oko 5 mg/kg/dan do oko 600 mg/kg/dan. U posebnom oralnom opsegu doze za jedinjenje ovog obelodanjivanja je od oko 1 mg/kg/dan do oko 100 mg/kg/dan, npr., 1 mg/kg/dan, 5 mg/kg/dan, 10 mg/kg/dan, 15 mg/kg/dan, 20 mg/kg/dan, 25 mg/kg/dan, 30 mg/kg/dan, 35 mg/kg/dan, 40 mg/kg/dan, 45 mg/kg/dan, 50 mg/kg/dan, 55 mg/kg/dan ili 60 mg/kg/dan, 65 mg/kg/dan, 70 mg/kg/dan, 75 mg/kg/dan, 80 mg/kg/dan, 85 mg/kg/dan, 90 mg/kg/dan, 95 mg/kg/dan ili 100 mg/kg/dan.
[0426] Rotirajuća kombinacija terapeutskih platformi (tj. enzimske zamene i terapije malim molekulima) je preferirana. Međutim, subjekti se takođe mogu lečiti preklapanjem oba pristupa po potrebi, kako odredi stručni kliničar. Primeri rasporeda lečenja mogu uključivati, ali nisu ograničeni na: (1) SMT praćenu sa ERT; (2) ERT praćenu sa SMT; i (3) ERT i SMT primenjene približno u isto vreme. Kao što je prethodno navedeno, vremensko preklapanje terapeutskih platformi takođe se može izvesti, po potrebi, zavisno od kliničkog toka date bolesti skladištenja kod datog subjekta.
[0427] Intervalni tretmani za različite kombinovane terapije mogu značajno varirati i generalno se mogu razlikovati među različitim bolestima skladištenja i različitim pojedincima u zavisnosti od toga koliko se agresivno akumuliraju proizvodi skladištenja. Na primer, akumulacija proizvoda skladištenja kod Fabrijeve bolesti može biti spora u poređenju sa brzom akumulacijom proizvoda skladištenja kod Pompeove bolesti. Titracija određene bolesti skladištenja kod određenog pojedinca vrši se od strane stručnjaka praćenjem kliničkih znakova progresije bolesti i uspeha lečenja.
[0428] Različiti makromolekuli koji se akumuliraju u bolestima skladištenja lizozoma nisu ravnomerno raspoređeni, već se talože na određenim preferiranim anatomskim lokacijama za svaku bolest. Međutim, egzogeno snabdeveni enzim se generalno preuzima od strane ćelija retikuloendotelnog sistema i sortira u lizozomski odeljak gde deluje hidrolizujući akumulirani supstrat. Štaviše, ćelijsko preuzimanje terapeutskog enzima može se pojačati određenim manevrima za povećanje lizozomskog ciljanja (videti npr. američki patent br.5,549,892 od Friedman et al., dodeljen kompaniji Genzyme Corporation, koji opisuje rekombinantnu glukocerebrozidazu sa poboljšanom farmakokinetikom zahvaljujući preoblikovanim oligosaharidnim bočnim lancima prepoznatim od strane manoznih receptora na ćelijskoj površini koji se endocitoziraju i transportuju u lizozome).
[0429] Neki modaliteti lečenja ciljaju neke pogođene organe bolje od drugih. Kod Fabrijeve bolesti, na primer, ako ERT ne dopire do bubrega dovoljno dobro za zadovoljavajući klinički ishod, SMT se može koristiti za redukciju nivoa supstrata u bubregu. Kao što je pokazano u primeru 112 i slici 6B, SMT je efikasno smanjila nivoe Gb3 (tj. supstrata akumuliranog kod pacijenata obolelih od Fabrijeve bolesti) u urinu mišjeg modela Fabrijeve bolesti u većoj meri nego ERT. Veruje se da su bubrezi glavni izvor Gb3 u urinu. Nasuprot tome, slika 6B pokazuje da je ERT efikasno smanjila nivoe Gb3 u plazmi u većoj meri nego SMT. Ovi rezultati pokazuju da kombinovana ERT i SMT terapija pruža komplementarnu terapeutsku strategiju koja koristi prednosti i rešava slabosti povezane sa svakom terapijom koja se primenjuje samostalno. SMT je u mogućnosti da pređe BBB, pružajući moćan pristup, kada se kombinuje sa ERT, za lečenje LSD koji imaju manifestacije CNS, kao što su Niman-Pikova bolest tipa A i neuropatska Gošeova bolest (nGD). Štaviše, redukcija supstrata putem SMT u kombinaciji sa zamenom enzima rešava problem skladištenja na zasebnim i različitim tačkama intervencije, što može poboljšati klinički ishod.
[0430] Podrazumeva se da referenca na istovremenu ili simultanu primenu dve ili više terapija ne zahteva da se one primenjuju u isto vreme, već samo da deluju kod subjekta u isto vreme.
Primer 1
hinuklidin-3-il 1-fenilciklobutilkarbamat
[0431] Koristeći opštu proceduru A, 1-fenilciklobutanamidin hidrohlorid (100 mg, 0,540 mmol) i hinuklidin-3-ol (103 mg, 0,810 mmol) dali su hinuklidin-3-il 1-fenilciklobutilkarbamat (76 mg, 47%) kao čvrstu belu supstancu.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.43 (d, J = 7.9 Hz, 2H), 7.34 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 7.23 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 5.75 -5.25 (m, 1H), 4.60 (br s, 1H), 3.25-2.22 (m, 9H), 2.16 - 2.03 (m, 1H), 2.02- 0.94 (m, 6H), 0.88 (t, J = 6.8 Hz, 1H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 158.1, 128.5, 126.9, 125.6, 71.4, 59.4, 55.7, 47.5, 46.6, 34.0, 31.8, 29.9, 25.5, 24.7, 22.9, 19.7, 15.3, 14.4 ppm.
Čistoća: >99.9% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 0.62 min; (M+1) 331.
Primer 2
hinuklidin-3-il 2-(benzo[d][1,3]dioksol-5-il)propan-2-ilkarbamat
[0432] Koristeći opštu proceduru B, benzo[d][1,3]dioksol-5-karbonitril (1,00 g, 6,81 mmol) je konvertovan u 2-(benzo[d][1,3]dioksol-5-il)propan-2-amin hidrohlorid (692 mg, 47%).
[0433] Koristeći opštu proceduru A, gore navedeni amonijum hlorid intermedijer (150 mg, 0,695 mmol) i hinuklidin-3-ol dali su hinuklidin-3-il 2-(benzo[d][1,3]dioksol-5-il)propan-2-ilkarbamat (125 mg, 54%) kao čvrstu belu supstancu.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 6.91 (dd, J= 1.9 Hz, 1H), 6.87 (dd, J = 1.9, 8.2 Hz, 1H), 6.75 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 5.93 (s, 2H), 5.12 (s, 1H), 4.69-4.66 (m, 1H), 3.26-2.11 (m, 7H), 2.03-1.07 (m, 4H), 1.63 (s, 6H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 156.7, 147.9, 118.0, 108.1, 106.1, 101.2, 71.2, 55.9, 55.3, 47.6, 46.7, 29.9, 29.7, 25.6, 24.8, 19.8 ppm. Čistoća: 97.5% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 0.65 min; (M+1) 333.
Primer 3
hinuklidin-3-il 2-(naftalen-1-il)propan-2-ilkarbamat
[0434] Koristeći opštu proceduru A, 2-(naftalen-1-il)propan-2-amin hidrohlorid (100 mg, 0,450 mmol) i hinuklidin-3-ol dali su hinuklidin-3-il 2-(naftalen-1-il)propan-2-ilkarbamat (115 mg, 59%) kao čvrstu belu supstancu.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.79-8.46 (m, 1H), 7.99-7.72 (m, 2H), 7.69-7.36 (m, 4H), 5.86 -5.37 (m, 1H), 4.72 -4.34 (m, 1H), 3.25-2.20 (m, 6H), 2.16-0.41 (m, 5H), 1.93 (s, 6H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 154.6, 135.2, 130.7, 129.7, 128.8, 125.9, 125.3, 123.9, 72.2, 71.1, 56.5, 55.7, 47.6, 46.6, 31.8, 31.2, 25.5, 24.8, 22.9, 19.7, 14.4 ppm. Čistoća: 100% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 0.80 min; (M+1) 339.
Priprema I
Primer 4
(R)-hinuklidin-3-il 2-(3-(prop-1-en-2-il)fenil)propan-2-ilkarbamat
[0435] U rastvor (R)-hinuklidin-3-ola (194 mg, 1,52 mmol) u THF (5 mL) na sobnoj temperaturi dodato je NaH [60%, ulje] (64 mg, 1,6 mmol). Reakciona smeša je mešana 15 minuta i 1-(2-izocijanatopropan-2-il)-3-(prop-1-en-2-il)benzen (302 µL, 1,53 mmol) je dodat kap po kap. Reakcija je mešana 30 minuta i ugašena slanim rastvorom. Rastvor je ekstrahovan sa EtOAc, a organski sloj je osušen preko Na2SO4i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen na combiflash uređaju (SiO2kertridž, CHCl3i 2N NH3u MeOH) da bi se dobio odgovarajući karbamat (475 mg, 95%) kao bistro ulje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.49 (s, 1H), 7.31 (br s, 3H), 5.33 (s, 1H), 5.17 (s, 1H), 5.08 (s, 1H), 4.77 - 4.61 (m, 1H), 3.33 - 2.27 (m, 5H), 2.14 (s, 3H), 2.25-0.75 (m, 6H), 1.68 (br s, 6H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 154.7, 147.2, 143.7, 141.6, 128.5, 124.2, 122.1, 112.8, 70.9, 55.7, 55.5, 47.5, 46.6, 32.2, 31.5, 29.9, 29.6, 25.5, 24.6, 22.9, 22.2, 19.6 ppm. Čistoća: 100% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 0.84 min; (M+1) 329.2. Anal. Izračunato. za C20H28N2O2·0.06 (CHCl3): C, 71.59; H, 8.40; N, 8.58. Pronađeno: C, 71.51; H, 9.05; N, 8.60.
Priprema J
Primer 5
hinuklidin-3-il 2-(3-izopropoksifenil)propan-2-ilkarbamat
[0436] Rastvor 3-cijanofenola (1,00 g, 8,39 mmol), 2-jodopropana (839 µL, 8,39 mmol) i cezijum-karbonata (2,73 g, 8,39 mmol) u 1:1 CH2Cl2/CH3CN (16 mL) je mešan pod refluksom 18 sati. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i filtrirana kroz celit. Filtrat je koncentrovan, a sirovi materijal je prečišćen na combiflash uređaju (SiO2kertridž, CH2Cl2) da bi se dobio odgovarajući etar (763 mg, 57%) kao čvrsta bela supstanca.
[0437] Koristeći opštu proceduru B, 3-izopropoksibenzonitril (763 mg, 4,24 mmol) je konvertovan u odgovarajući 2-(3-izopropoksifenil)propan-2-amin (362 mg, 45%) kao bistro ulje.
[0438] Koristeći opštu proceduru A, gore navedeni amin (100 mg, 0,520 mmol) i hinuklidin-3-ol dali su hinuklidin-3-il 2-(3-izopropoksifenil)propan-2-ilkarbamat (110 mg, 61%) kao čvrstu belu supstancu.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.17 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 6.92 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 6.89 (t, J = 2.1 Hz, 1H), 6.70 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 5.38 - 5.13 (m, 1H), 4.58 (br s, 1H), 4.49 (hept, J = 6.1 Hz, 1H), 3.31-2.04 (m, 6H), 2.00-0.79 (m, 5H) 1.60 (br s, 6H), 1.28 (d, J = 6.1 Hz, 6H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 158.1, 129.5, 117.2, 113.6, 71.1, 69.9, 55.8, 55.4, 47.6, 46.6, 29.4, 25.6, 24.8, 22.3, 19.7 ppm. Čistoća: >99.9% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 0.83 min; (M+1) 347.
Primer 6
hinuklidin-3-il 2-(3-bromo-2-fluorofenil)propan-2-ilkarbamat
[0439] Koristeći opštu proceduru A, 2-(3-bromo-2-fluorofenil)propan-2-amin (1,0 g, 4,3 mmol) i hinuklidin-3-ol dali su hinuklidin-3-il 2-(3-bromo-2-fluorofenil)propan-2-ilkarbamat (957 mg, 58%) kao čvrstu belu supstancu.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.45 (ddd, J = 1.6, 6.3, 7.9 Hz, 1H), 7.31 (td, J = 1.6, 7.7 Hz, 1H), 6.99 (td, J = 1.0, 8.0 Hz, 1H), 5.31-5.15 (br s, 1H), 4.59 (br s, 1H), 3.25-2.19 (m, 6H), 2.06-0.81 (m, 5H), 1.73 (s, 3H), 1.71 (s, 3H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 158.1, 155.6, 132.5, 127.1, 127.0, 124.8, 124.8, 110.6, 110.4, 71.5, 55.7, 54.2, 47.5, 46.7, 29.9, 28.4, 25.5, 24.8, 19.7 ppm. Čistoća: >99.9% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 0.79 min; (M+1) 385.
Primer 7
(+/-) hinuklidin-3-il (1R,2S)-2-fenilciklopropilkarbamat
[0440] Koristeći opštu proceduru A, (+/-)((1S,2R)-2-izocijanatociklopropil)benzen (117 µL, 0,780 mmol) i hinuklidin-3-ol dali su (+/-)-hinuklidin-3-il (1R,2S)-2-fenilciklopropilkarbamat (63 mg, 28%) kao čvrstu belu supstancu.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.30-7.05 (m, 5H), 5.43 (br s, 1H), 4.77 (br s, 1H), 3.23 (dd, J = 9.0, 14.0 Hz, 1H), 2.97-2.65 (m, 6H), 2.15-1.12 (m, 8H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 157.1, 140.7, 140.2, 128.5, 126.8, 126.3, 71.5, 55.7, 47.5, 46.6, 32.7, 25.6, 25.2, 24.5, 19.5, 16.2 ppm. Čistoća: >99.9% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 0.67 min; (M+1) 287.
Primer 8
hinuklidin-3-il 1-fenilcikloheksilkarbamat
[0441] Koristeći opštu proceduru A, 1-fenilcikloheksanamin (36 mg, 0,21 mmol) i hinuklidin-3-ol dali su hinuklidin-3-il 1-fenilcikloheksilkarbamat (40 mg, 58%) kao čvrstu belu supstancu.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.41 (d, J= 7.4 Hz, 2H), 7.32 (t, J = 7.7 Hz, 2H), 7.21 (t, J= 7.3 Hz, 1H), 5.19-4.98 (br s, 1H), 4.70-4.56 (s, 1H), 3.34-0.83 (m, 21H) ppm.
<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 158.4, 128.3, 126.5, 124.9, 57.2, 46.3, 36.1, 25.4, 24.2, 22.0, 19.2, 15.2 ppm. Čistoća: >99.9% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 0.84 min; (M+1) 329.
Priprema K
Primer 9
(R)-1-(2-(3-(prop-1-en-2-il)fenil)propan-2-il)-3-(hinuklidin-3-il)urea
[0442] U rastvor (R)-hinuklidin-3-amin dihidrohlorida (120 mg, 0,603 mmol) i 1-(2-izocijanatopropan-2-il)-3-(prop-1-en-2-il)benzen (119 mg, 0,597 mmol) u THF (3 mL) dodat je trietilamin (168 µL, 1,21 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 18 sati i zatim ugašena slanim rastvorom. Smeša je ekstrahovana sa CHCl3a organski sloj je osušen (Na2SO4) i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen na combiflash uređaju (SiO2kertridž, CHCl3i 2N NH3u MeOH) tda bi se dobila odgovarajuća urea (163 mg, 50%) kao čvrsta bela supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.62 (t, J = 1.6 Hz, 1H), 7.44 (dt, J = 1.9, 7.0 Hz, 1H), 7.41 - 7.33 (m, 2H), 5.35 (br s, 1H), 5.11 (p, J = 1.4 Hz, 1H), 4.84 (s, 1H), 4.21 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 3.70-3.61 (m, 1H), 3.13 (ddd, J = 2.3, 9.3, 14.2 Hz, 1H), 2.71 - 2.54 (m, 3H), 2.30-2.22 (m, 1H), 2.15 (dd, J = 0.8, 1.4, 3H), 2.05-1.96 (m, 1H), 1.65 (s, 3H), 1.64 (s, 3H), 1.65-1.60 (m, 1H) 1.54-1.45 (m, 2H), 1.22-1.12 (m, 1H), 0.95-0.80 (m, 1H) ppm.<13>C NMR (400 MHz, CDCl3) δ 157.4, 148.5, 143.8, 141.3, 128.4, 124.4, 123.8, 122.2, 112.6, 55.2, 53.4, 46.2, 46.1, 44.5, 30.5, 30.4, 25.0, 22.2, 17.7, 8.9 ppm. Čistoća: 97.5% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 0.83 min; (M+1) 328.
Primer 10
1-(2-(naftalen-2-il)propan-2-il)-3-(hinuklidin-3-il)urea
[0443] Koristeći opštu proceduru B, naftalen-2-karbonitril (1,00 g, 6,53 mmol) je konvertovan u odgovarajući 2-(naftalen-2-il)propan-2-amin (294 mg, 25%) kao bistro ulje.
[0444] Koristeći opštu proceduru C, hinuklidin-3-amin (102 mg, 0,808 mmol), CDI (131 mg, 0,808 mmol) i 2-(naftalen-2-il)propan-2-amin (150 mg, 0,819 mmol) dali su 1-(2-(naftalen-2-il)propan-2-il)-3-(hinuklidin-3-il)ureu (132 mg, 49%) kao čvrstu belu supstancu.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.94-7.78 (m, 4H), 7.69 (dd, J = 2.0, 8.7 Hz, 1H), 7.53-7.46 (m, 2H), 4.84 (s, 1H), 4.23 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 3.68-3.54 (m, 1H), 3.07 (ddd, J = 2.3, 9.3, 14.1 Hz, 1H), 2.61-2.51 (m, 2H), 2.42-2.32 (m, 1H), 1.95-1.83 (m, 2H), 1.75 (s, 3H), 1.74 (s, 3H), 1.58-1.54 (m, 1H), 1.46-1.40 (m, 2H), 1.03-0.91 (m, 1H), 0.72-0.60 (m, 1H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 157.5, 143.7, 133.4, 132.8, 129.3, 128.1, 127.8, 126.9, 126.7, 124.4, 124.0, 57.0, 55.0, 47.1, 47.1, 46.6, 30.5, 30.3, 26.0, 25.9, 20.0 ppm. Čistoća: >99.9% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 0.71 min; (M+1) 338.
Primer 11
1-(2-metil-2-(m-tolil)propil)-3-(3-metilhinuklidin-3-il)urea
[0445] Koristeći opštu proceduru D, 2-metil-2-(m-tolil)propan-1-amin hidrohlorid (100 mg, 0,501 mmol), trietilamin (279 µL, 2,00 mmol), trifozgen (47 mg, 0,18 mmol) i 3-metilhinuklidin-3-amin 2,2,2-trifluoroacetat (140 mg, 0,550 mmol) dali su 1-(2-metil-2-(mtolil)propil)-3-(3-metilhinuklidin-3-il)ureu (41 mg, 25%) kao čvrstu belu supstancu.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.23 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 7.18-7.12 (m, 2H), 7.04 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 4.12 (s, 1H), 4.08 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 3.39-3.22 (m, 2H), 2.81-2.62 (m, 6H), 2.34 (s, 3H), 1.98-1.89 (m, 1H), 1.80-1.63 (m, 2H), 1.51-1.23 (m, J= 26.9 Hz, 2H), 1.37 (s, 3H), 1.30 (s, 6H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 157.9, 147.1, 138.2, 128.6, 127.1, 127.1, 123.3, 64.0, 52.2, 52.1, 46.9, 46.7, 39.2, 31.2, 27.1, 26.8, 25.4, 23.5, 22.7, 21.9. Čistoća: >99.9% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 0.79 min; (M+1) 330.
Primer 12
1-(2-(3-metoksifenil)propan-2-il)-3-(hinuklidin-3-il)urea
[0446] Koristeći opštu proceduru C, hinuklidin-3-amin (380 mg, 3,01 mmol), CDI (489 mg, 3,01 mmol) i 2-(3-metoksifenil)propan-2-amin (506 mg, 3,07 mmol) dali su 1-(2-(3-metoksifenil)propan-2-il)-3-(hinuklidin-3-il)ureu (560 mg, 59%) kao čvrstu belu supstancu.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.35-7.29 (m, 1H), 7.14-7.07 (m, 2H), 6.87-6.81 (ddd, 1H), 4.76 (s, 1H), 4.19 (d, 1H), 3.81 (s, 3H), 3.70-3.62 (m, 1H), 3.19-3.10 (m, 1H), 2.74-2.59 (m, 3H), 2.37-2.26 (m, 1H), 2.07-1.98 (dd, 1H), 1.80 (br s, 1H), 1.69-1.63 (m, 1H), 1.63 (s, 3H), 1.62 (s, 3H), 1.58-1.44 (m, 2H), 1.28-1.14 (m, 1H), 1.02-0.90 (m, 1H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 160.0, 157.5, 148.4, 129.9, 117.7, 112.0, 111.9, 56.7, 55.3, 54.6, 47.2, 46.8, 46.4, 30.1, 25.8, 20.0 ppm. Čistoća: >99.4% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 1.73 min; (M+1) 318.
Primer 13
hinuklidin-3-il 2-(3-metoksifenil)propan-2-ilkarbamat
[0447] Koristeći opštu proceduru A, 1-(3-metoksifenil)propan-2-amin (327 mg, 1,98 mmol) i hinuklidin-3-ol dali su hinuklidin-3-il 2-(3-metoksifenil)propan-2-ilkarbamat (370 mg, 59%) kao čvrstu belu supstancu.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.30-7.20 (m, 1H), 7.03-6.97 (m, 1H), 6.97-6.93(m, 1H), 6.80-6.74 (dd, 1H), 5.18-5.00 (br s, 1H), 4.67-4.57 (m, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.30-2.12 (br m, 7H), 2.02-1.00 (m, 10H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 159.7, 154.5, 149.0, 129.3, 117.2, 111.4, 111.0, 70.9, 55.7, 55.1, 47.4, 46.5, 29.4, 25.4, 24.6, 19.6 ppm. Čistoća: >99.9% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 1.85 min; (M+1) 319.
Primer 14
hinuklidin-3-il 2-(3-metoksifenil)propan-2-ilkarbamat
[0448] Koristeći opštu proceduru A, 1-(4-metoksifenil)propan-2-amin hidrohlorid (316 mg, 1,57 mmol) i hinuklidin-3-ol dali su hinuklidin-3-il 2-(3-metoksifenil)propan-2-ilkarbamat (370 mg, 59%) kao čvrstu belu supstancu.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.33 (d, 2H), 6.86 (d, 2H), 5.15-5.01(br s, 1H), 4.66-4.57 (m, 1H), 3.79 (s, 3H), 3.33-2.12 (m, 7H), 2.10-0.96 (m, 10H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 158.1, 154.5, 139.2, 125.8, 113.5, 70.7, 55.7, 55.2, 54.6, 47.2, 46.3, 31.2, 29.4, 25.3, 24.5, 19.4 ppm. Čistoća: >94.1% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 1.81 min; (M+1) 319.
Primer 15
hinuklidin-3-il 2-(4-terc-butilfenil)propan-2-ilkarbamat
[0449] Koristeći opštu proceduru A, 1-(4-terc-butilfenil)propan-2-amin (348 mg, 1,82 mmol) i hinuklidin-3-ol dali su hinuklidin-3-il 2-(4-terc-butilfenil)propan-2-ilkarbamat
(427 mg, 68%) kao čvrstu belu supstancu.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.34 (s, 4H), 5.09 (br s, 1H), 4.69-4.52 (m, 1H), 3.47-2.05 (m, 7H), 3.33-2.12 (m, 7H), 2.00-0.80 (m, 20H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 156.2, 149.4, 144.5, 125.3, 124.5, 70.9, 55.8, 55.1, 47.5, 46.6, 34.4, 31.4, 29.8, 29.3, 25.5, 24.6, 19.6 ppm. Čistoća: >98.2% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 2.29 min; (M+1) 345.
Primer 16
hinuklidin-3-il 2-(4-izopropilfenil)propan-2-ilkarbamat
[0450] Koristeći opštu proceduru A, 1-(4-izopropilfenil)propan-2-amin (158 mg, 0,891 mmol) i hinuklidin-3-ol dali su hinuklidin-3-il 2-(4-izopropilfenil)propan-2-ilkarbamat (205 mg, 70%) kao čvrstu belu supstancu.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.33 (d, J = 7.3 Hz, 2H), 7.19 (s, 1H), 7.17 (s, 1H), 5.09 (s, 1H) 4.69-4.51 (br s, 1H) 3.30-1.30 (m, 17 H), 1.24(s, 3H), 1.22 (s, 3H), 1.06-0.77 (m, 1H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 156.2, 147.1, 144.4, 126.4, 124.7, 70.9, 55.7, 55.0, 47.4, 46.5, 33.6, 29.8, 29.4, 25.4, 24.6, 24.0, 19.5 ppm.
Čistoća: >98.3% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 2.19 min; (M+1) 331.
Primer 17
hinuklidin-3-il 2-(4-etilfenil)propan-2-ilkarbamat
[0451] Koristeći opštu proceduru A, 1-(4-etilfenil)propan-2-amin (230 mg, 1,41 mmol) i hinuklidin-3-ol dali su hinuklidin-3-il 2-(4-etilfenil)propan-2-ilkarbamat (248 mg, 56%) kao čvrstu belu supstancu.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.33 (d, J = 7.3 Hz, 2H), 7.19 (s, 1H), 7.17 (s, 1H), 5.09 (s, 1H) 4.69-4.51 (br s, 1H) 3.34-0.73 (m, 22 H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 154.5, 144.3, 142.4, 127.8, 124.7, 71.0, 55.6, 55.1, 47.4, 46.5, 29.6, 28.3, 25.4, 24.6, 19.5, 15.8, 15.4 ppm. Čistoća: >99.5% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 2.07 min; (M+1) 317.
Primer 18
hinuklidin-3-il 2-o-tolilpropan-2-ilkarbamat
[0452] Koristeći opštu proceduru A, 2-o-tolilpropan-2-amin (230 mg, 1,52 mmol) i hinuklidin-3-ol dali su hinuklidin-3-il 2-o-tolilpropan-2-ilkarbamat (200 mg, 44%) kao čvrstu belu supstancu.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) (rotameri) δ 7.33 (s, br, 1H), 7.15-7.10 (m, 3H), 5.35-5.20 (m, 1H), 4.60 (br s, 1H), 3.20-2.60 (m, 5H), 2.5 (s, 3H), 2.15 (br s, 1H), 1.80-1.30 (m, 10 H).<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) (rotameri) δ 154.2, 144.5, 140.2, 133.0, 127.1, 126.2, 126.1, 72.2, 71, 56.0, 46.6, 46.7, 31.0, 29.0, 26.0, 24.7, 22.3, 19.7. Čistoća: >95 % UPLCMS (210 nm); (M+1) 303.
Primer 19
hinuklidin-3-il 2-(2-metoksifenil)propan-2-ilkarbamat
[0453] Koristeći opštu proceduru A, 2-(2-metoksifenil)propan-2-amin (150 mg, 0,908 mmol) i hinuklidin-3-ol dali su hinuklidin-3-il 2-(2-metoksifenil)propan-2-ilkarbamat (60 mg, 21%) kao čvrstu belu supstancu.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) (rotameri) δ 7.3 (m, 1H), 7.2 (m, 1H), 6.9 (m, 2H), 5.4 (s, br, 1H), 4.6 (m, 1H), 3.8 (s, 1H), 3.1 (m, 1H), 2.4-2.8 (m, 5H), 1.9 (s, 1H), 1.3-1.7 (m, 10H).<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) (rotameri) δ 157, 155, 140, 134, 129, 127, 121, 111, 70, 56, 55, 48, 47, 29, 26, 25, 20. Čistoća: > 99 % UPLCMS (210 nm); (M+1) 319.
Priprema L
Primer 20
1-(3-cijanohinuklidin-3-il)-3-(2-(3-(prop-1-en-2-il)fenil)propan-2-il)urea
[0454] 3-amino-3-cijanohinuklidin je pripremljen kako je opisano u literaturi (Fernandez, M. A.; Gonzalez, G.; Martinez, M.; Galvez, E. Anales de la Real Academia de Farmacia 1988, 54, 502).
[0455] U rastvor 3-amino-3-cijanohinuklidina (100 mg, 0,661 mmol) u CH2Cl2(5 mL) dodat je, kap po kap, 3-izoprenil-α,α-dimetilbenzil izocijanat (0,13 mL, 0,66 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 18 sati, koncentrovana i podvrgnuta fleš hromatografiji na silika gelu (19:1 CH2Cl2/7M NH3(CH3OH)). Željeni proizvod je dobijen kao čvrsta bela supstanca (155 mg, 67%).<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.52 (s, 1H), 7.35-7.25 (m, 3H), 5.34 (s, 1H), 5.05 (s, 1H), 2.60-3.41 (m, 6H), 2.25- 2.32 (m, 1H), 2.13 (s, 3H), 1.42-2.10 (m, 4H), 1.64 (s, 6H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CD3OD) δ 157.0, 147.9, 144.0, 141.4, 128.1, 124.0, 123.4, 121.9, 121.7, 111.5, 61.0, 55.1, 50.4, 30.9, 23.3, 22.5, 21.019.0 ppm. Čistoća: >99.9% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 0.82 min; (M+1) 353.
Priprema M
Primer 21
1-[(3S)-1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il]-3-{2-[3-(prop-1-en-2-il)fenil]propan-2-il}urea
[0456] U suspenziju (S)-(-)-3-aminohinuklidin dihidrohlorida (120 mg, 0,603 mmol) i trietilamina (168 µL, 1,21 mmol) u THF (2 mL) na sobnoj temperaturi dodat je 3-izopropenilα,α-dimetilbenzil-izocijanat (121 mg, 0,601 mmol). Reakciona smeša je mešana 18 sati i zatim isprana zasićenim vodenim NaHCO3. Organska faza je osušena preko Na2SO4i koncentrovana. Sirovi materijal je prečišćen na combiflash uređaju (SiO2kertridž, CHCl3i 2N NH3u MeOH) da bi se dobilo željeno jedinjenje (29 mg, 47%) kao prljavo bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.51 (dt, J = 2.5, 1.2 Hz, 1H), 7.41-7.14 (m, 3H), 5.32 (dd, J = 1.6, 0.8 Hz, 1H), 5.06 (s, 1H), 3.74-3.60 (m, 1H), 3.31-3.29 (m, 2H), 3.19 (ddd, J = 13.7, 9.5, 1.6 Hz, 1H), 2.88-2.50 (m, 4H), 2.37 (ddd, J = 14.0, 4.9, 2.2 Hz, 1H), 2.14 (ddd, J = 2.3, 1.8, 1.0 Hz, 3H), 1.81-1.63 (m, 4H), 1.62 (d, J = 6.2 Hz, 6H), 1.55-1.38 (m, 1H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CD3OD) δ 158.4, 148.4, 144.0, 141.3, 128.0, 124.1, 123.3, 121.9, 111.4, 55.7, 54.7, 46.7, 46.4, 46.0, 29.6, 29.4, 28.4, 26.1, 25.1, 21.0, 19.4 ppm.
Čistoća: >96% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 0.81 min; (M+1) 329.5.
Priprema N
Primer 22
1-(1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il)-3-{2-[3-(propan-2-il)fenil]propan-2-il}urea
[0457] U rastvor 3-aminohinuklidina (150 mg, 1,19 mmol) u THF (5 mL) dodat je 3-izopropenil-α,α-dimetilbenzilizocijanat. Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi 30 min, zatim koncentrovan na silika gel i prečišćen na combiflash uređaju (SiO2kertridž, CHCl3i 2N NH3u MeOH) da bi se dobila prljavo bela čvrsta supstanca (299 mg, 77%).
[0458] Koristeći opštu proceduru F, Koristeći opštu proceduru F, gore navedena izoprenil urea (150 mg, 1,19 mmol) i paladijum-hidroksid (30 mg, 20 mas. % na ugljeniku) dali su 1-(1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il)-3-{2-[3-(propan-2-il)fenil]propan-2-il}ureu (116 mg, 77%) kao prljavo belu čvrstu supstancu.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.38-7.28 (m, 3H), 7.16 (dt, J = 6.9, 1.6 Hz, 1H), 4.93 (s, 1H), 4.26 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 3.70-3.58 (m, 1H), 3.11 (ddd, J = 14.1, 9.4, 2.3 Hz, 1H), 2.90 (hept, J = 6.9 Hz, 1H), 2.71-2.52 (m, 4H), 2.31-2.19 (m, 1H), 1.98 (dd, J = 14.2, 2.9 Hz, 1H), 1.61 (d, J = 2.0 Hz, 6H), 1.52-1.43 (m, 2H), 1.23 (d, J = 6.9 Hz, 6H), 1.19-1.09 (m, 1H), 0.92-0.79 (m, 1H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 157.6, 150.1, 146.1, 129.2, 125.8, 124.1, 123.3, 57.1, 54.9, 47.4, 47.0, 46.6, 34.5, 30.7, 30.5, 26.1, 26.0, 24.3, 24.2, 20.3 ppm. Čistoća: 94% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 0.87 min; (M+1) 329.3.
Primer 23
1-(1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il)-3-[1-(naftalen-1-il)etil]urea
[0459] 3-aminohinuklidin dihidrohlorid (150 mg, 0,753 mmol) je pomešan sa THF (3 mL) i trietilaminom (152 mg, 1,50 mmol) pre dodavanja 1-(1-naftil)etil izocijanata (149 mg, 0,752 mmol). Smeša je mešana 48 sati na sobnoj temperaturi. Reakcioni rastvor je koncentrovan i prečišćen na combiflash uređaju (SiO2kertridž, CHCl3i 2N NH3u MeOH) da bi se dobilo željeno jedinjenje kao prljavo bela čvrsta supstanca (46 mg, 19%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.20-8.05 (m, 1H), 7.85 (dd, J = 7.9, 1.5 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.59 -7.34 (m, 4H), 5.55 (hept, 1H), 5.35 - 5.19 (m, 1H), 4.84 (dd, 1H), 3.70 - 3.53 (m, 1H), 3.09 (ddd, 1H), 2.74 - 2.28 (m, 4H), 2.17 (ddd, J = 1.8, 4.5, 14.1 Hz, 1H), 1.75 - 1.62 (m, 1H), 1.55 (dd, J = 1.8, 6.8 Hz, 3H), 1.52 - 1.06 (m, 4H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 157.7, 140.0, 134.1, 130.9, 129.2, 128.3, 126.8, 126.7, 126.7, 126.0, 125.6, 123.2, 123.1, 122.8, 122.7, 56.9, 56.7, 47.4, 47.3, 46.7, 46.4, 26.1, 25.9, 22.7, 22.6, 20.1, 20.0 ppm.
Čistoća: 97% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 0.68 min; (M+1) 324.2
Primer 24
1-(1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il)-3-[2-(3-bromofenil)propan-2-il]urea
[0460] Koristeći opštu proceduru C, hinuklidin-3-amin (100 mg, 0,792 mmol), CDI (128 mg, 0,789 mmol) i 2-(3-bromofenil)propan-2-amin (170 mg, 0,791 mmol) dali su željeno jedinjenje kao čvrstu belu supstancu (166 mg, 75%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.50 (s, 1H), 7.30 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 7.15 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 5.54 (d, J = 22.7 Hz, 1H), 5.16 (d, J = 29.7 Hz, 1H), 3.60 (s, 1H), 3.14 (ddd, J = 13.3, 9.4, 1.6 Hz, 1H), 2.61 (d, J = 52.6 Hz, 4H), 2.18 (dd, J = 14.1, 2.8 Hz, 1H), 1.66 (d, J = 3.0 Hz, 2H), 1.51 (d, J = 7.6 Hz, 6H), 1.28 (s, 3H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 157.1, 150.4, 130.3, 130.0, 128.6, 124.0, 123.0, 57.0, 54.6, 47.6, 47.2, 46.8, 30.5, 30.3, 26.3, 26.2, 20.2 ppm. Čistoća: 100% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 0.66 min; (M+1) 367.8.
Primer 25
1-(1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il)-3-[2-(bifenil-3-il)propan-2-il]urea
[0461] Koristeći opštu proceduru E, 1-(1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il)-3-[2-(3-bromofenil)propan-2-il]urea (111 mg, 0,301 mmol), fenilboronska kiselina (78,8 mg, 0,606 mmol) i tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0) dali su željeno jedinjenje kao prljavo belu čvrstu supstancu (21 mg, 11%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.74 (s, 1H), 7.52-7.40 (m, 8H), 4.89 (s, 1H), 4.28 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 3.75-3.59 (m, 1H), 3.15 (ddd, J = 1.9, 9.3, 13.9 Hz, 1H), 2.46 (m, 4H), 2.05 (dd, J = 3.5, 14.0 Hz, 1H), 1.68 (d, J = 4.7 Hz, 6H), 1.66-0.76 (m, 5H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 157.4, 146.9, 142.5, 141.1, 129.7, 129.1, 127.8, 127.4, 126.7, 124.8, 124.7, 57.1, 55.1, 30.7, 30.1, 26.1, 26.0, 20.2 ppm. Čistoća: 100% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 0.78 min; (M+1) 364.0.
Primer 26
1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il {2-(3-(propan-2-il)fenil]propan-2-il}karbamat
[0462] Koristeći opštu proceduru F, 1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il {2-[3-(prop-1-en-2-il)fenil]propan-2-il}karbamat (48,8 mg, 0,146 mmol) i paladijum-hidroksid (30 mg, 20 mas. % na ugljeniku) dali su željeno jedinjenje kao prljavo belu čvrstu supstancu (16 mg, 33%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.24 (d, J = 5.1Hz, 3H), 7.10 (d, 1H), 5.12 (s, 1H), 4.63 (s, 1H), 3.54-2.96 (m, 1H), 2.89 (s, 1H), 2.68 (s, 5H), 2.17-1.75 (m, 2H), 1.67 (s, 6H), 1.62-1.30 (m, 2H), 1.24 (d, J = 6.9 Hz, 6H), 1.15-0.85 (m, 1H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 149.1, 128.5, 124.9, 123.1, 122.5, 55.8, 55.6, 46.6, 34.5, 25.6, 24.6, 24.3, 19.7 ppm.
Čistoća: 94% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 0.89 min; (M+1) 331.1.
Primer 27
1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il [2-(3-bromofenil)propan-2-il]karbamat
[0463] Koristeći opštu proceduru A, 2-(3-bromofenil)propan-2-amin hidrohlorid (2,00 g, 7,89 mmol) i hinuklidin-3-ol dali su željeno jedinjenje kao čvrstu belu supstancu (2,23 g, 76%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.54 (s, 1H), 7.41-7.30 (m, 2H), 7.19 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 5.11 (s, 1H),4.68-4.54 (m, 1H), 3.51-2.11 (m, 6H), 2.04-1.68 (m, 2H), 1.63 (d, J = 10.2 Hz, 6H), 1.51-0.67 (m, 3H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 156.0, 154.7, 150.6, 149.7, 130.2, 130.0, 128.4, 123.7, 72.5, 71.6, 71.5, 55.8, 55.1, 47.6, 46.7, 31.2, 29.9, 29.8, 29.5, 25.6, 24.8, 19.7 ppm. Čistoća: 100% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 0.69 min; (M+1) 368.8.
Primer 28
1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il [2-(3-ciklopropilfenil)propan-2-il]karbamat
[0464] Koristeći opštu proceduru E, 11-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il [2-(3-bromofenil)propan-2-il]karbamat (44,3 mg, 0,121 mmol), ciklopropil boronska kiselina (14 mg, 0,16 mmol) i paladijum(II) acetat dali su željeno jedinjenje kao prljavo belu čvrstu supstancu (21 mg, 11%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.54 (s, 1H), 7.41-7.30 (m, 2H), 7.19 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 5.11 (s, 1H), 4.68-4.54 (m, 1H), 3.51-2.11 (m, 6H), 2.04-1.68 (m, 2H), 1.63 (d, J = 10.2 Hz, 6H), 1.36 (d, J = 9.5 Hz, 3H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 147.2, 144.2, 128.6, 128.4, 125.0, 123.7, 122.8, 122.1, 110.0, 72.2, 71.4, 55.9, 55.4, 47.7, 47.3, 46.7, 33.1, 31.6, 30.0, 29.6, 25.6, 24.8, 19.8, 19.3, 15.8, 9.5 ppm. Čistoća: 91% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 0.75 min; (M+1) 329.0.
Primer 29
1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il [2-(bifenil-3-il)propan-2-il]karbamat
[0465] Koristeći opštu proceduru E, 1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il [2-(3-bromofenil)propan-2-il]karbamat (600 mg, 1,63 mmol), fenilboronska kiselina (398 mg, 3,27 mmol) i paladijum(II) acetat dali su željeno jedinjenje kao čvrstu belu supstancu (379 mg, 64%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.61 (s, 1H), 7.56 (d, J = 7.4 Hz, 2H), 7.50-7.38 (m, 4H), 7.34 (m, 2H), 5.16 (s, 1H), 4.63 (s, 1H), 3.39-2.09 (m, 6H), 1.72 (s, 6H), 2.02-0.73 (m, 5H) ppm.
<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 154.8, 147.8, 141.6, 129.0, 129.0, 128.6, 127.5, 125.8, 125.0, 124.0, 71.6, 71.3, 55.9, 55.5, 47.6, 46.8, 31.5, 30.2, 30.0, 29.5, 25.6, 24.8, 19.8 ppm. Čistoća: 99% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 0.84 min; (M+1) 365.0. Anal. Izračunato. za C23H28N2O2·0.29(CHCl3): C, 70.02; H, 7.14; N, 7.01. Pronađeno: C, 70.02; H, 7.37; N, 6.84.
Primer 30
1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il {2-[3-(2-metilpropil)fenil]propan-2-il}karbamat
[0466] Koristeći opštu proceduru E, 1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il [2-(3-bromofenil)propan-2-il]karbamat (75 mg, 0,20 mmol), 2-metilpropil boronska kiselina (28,1 mg, 0,276 mmol) i paladijum(II) acetat dali su željeno jedinjenje kao čvrstu belu supstancu (50 mg, 71%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.21 (d, J = 4.9 Hz, 2H), 7.16 (s, 1H), 7.00 (s, 1H), 5.17 (s, 1H), 4.60 (s, 1H), 3.35-2.10 (m, 6H), 2.45 (d, J = 7.1 Hz, 2H), 1.82 (dt, J = 6.8, 13.5 Hz, 1H), 2.03-0.94 (m, 5H), 1.65 (s, 6H), 0.89 (d, J= 6.6 Hz, 6H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 172.6, 172.1, 170.8, 170.2, 160.1, 160.0, 157.8, 157.7, 140.4, 139.8, 130.5, 130.4, 130.0, 129.8, 129.5, 129.3, 127.9, 127.7, 120.8, 120.7, 120.3, 113.9, 113.6, 113.2, 113.0, 110.5, 110.4, 66.6, 66.5, 56.8, 56.3, 55.4, 55.4, 54.0, 53.7, 51.1, 46.6, 43.8, 43.7, 42.0, 38.4, 37.8, 37.7, 33.8, 33.2, 27.4, 27.0, 25.7, 25.5, 20.9, 20.9 ppm. Čistoća: 90% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 0.89 min; (M+1) 345.
Primer 31
1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il [2-(5-bromo-2-fluorofenil)propan-2-il]karbamat
[0467] Koristeći opštu proceduru A, 2-(5-bromo-2-fluorofenil)propan-2-amin hidrohlorid (100 mg, 0,372 mmol) i hinuklidin-3-ol dali su željeno jedinjenje kao čvrstu belu supstancu (90,3 mg, 98%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.45 (dd, J= 2.3, 7.3 Hz, 1H), 7.31 (ddd, J = 2.5, 4.2, 8.6 Hz, 1H), 6.88 (dd, J = 8.6, 11.9 Hz, 1H), 5.38 (s, 1H), 4.82-4.33 (m, 1H), 3.28-2.28 (m, 6H), 1.68 (d, J = 9.0 Hz, 6H), 1.98-1.27 (m, 5H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 161.1, 158.6, 131.7, 131.6, 131.0, 131.0, 118.6.118.3, 116.8, 55.8, 54.0, 47.6, 46.7, 28.5, 25.6, 24.8, 19.7 ppm. Čistoća: 100% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 0.81 min;
(M+1) 386.7. Anal. Izračunato. za C17H22BrFN2O2·0.37(CHCl3): C, 52.20; H, 5.66; N, 7.14. Pronađeno: C, 52.21; H, 5.57; N, 7.13.
Primer 32
1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il [2-(4'-fluorobifenil-3-il)propan-2-il]karbamat
[0468] Koristeći opštu proceduru E, 1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il [2-(3-bromofenil)propan-2-il]karbamat (600 mg, 1,63 mmol), 4-fluorofenil boronska kiselina (457 mg, 3,27 mmol) i paladijum(II) acetat dali su željeno jedinjenje kao čvrstu belu supstancu (373 mg, 60%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.56 (s, 1H), 7.52 (dd, J = 5.4, 8.4 Hz, 2H), 7.42-7.38 (m, 3H), 7.12 (m, 2H), 5.18 (s, 1H), 4.62 (s, 1H), 2.66 (m, 6H), 1.72 (s, 6H), 2.01-0.83 (m, 5H) ppm.
<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 125.0, 124.0, 123.8, 116.0, 116.0, 71.3, 55.9, 55.5, 47.6, 46.7, 29.6, 25.6, 24.8, 19.8 ppm. Čistoća: 98.0% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 0.95 min; (M+1) 382.9. Anal. Izračunato. za C23H27FN2O2·0.37(CHCl3): C, 65.86; H, 6.47; N, 6.57. Pronađeno: C, 65.85; H, 6.69; N, 6.49.
Primer 33
1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il [2-(4-fluorobifenil-3-il)propan-2-il]karbamat
[0469] Koristeći opštu proceduru E, 1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il [2-(5-bromo-2-fluorofenil)propan-2-il]karbamat (990 mg, 2,57 mmol), fenilboronska kiselina (209 mg, 1,71 mmol) i paladijum(II) acetat dali su željeno jedinjenje kao čvrstu belu supstancu (257 mg, 26%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.58-7.49 (m, 3H), 7.44-7.38 (m, 3H), 7.35-7.29 (m, 1H), 7.08 (dd, J = 8.4, 12.1 Hz, 1H), 5.30 (s, 1H), 4.75-4.42 (m, 1H), 2.89 (d, J = 10.2 Hz, 6H), 1.81-1.66 (m, 6H), 2.04-1.18 (m, 5H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 161.7, 159.3, 140.7, 137.3, 137.3, 131.7, 131.7, 131.0, 129.0, 127.5, 127.3, 126.7, 117.1, 116.9, 71.4, 55.8, 54.3, 47.6, 46.7, 28.6, 25.6, 24.8, 19.8 ppm. Čistoća: 92.0% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 0.95 min; (M+1) 382.9. Anal. Izračunato. za C23H27FN2O2·0.4(CHCl3): C, 65.39; H, 6.43; N, 6.52. Pronađeno: C, 65.39; H, 6.51; N, 6.42.
Primer 34
1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il {2-[2-fluoro-5-(2-metilpropil)fenil]propan-2-il}karbamat
[0470] Koristeći opštu proceduru E, 1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il [2-(5-bromo-2-fluorofenil)propan-2-il]karbamat (120 mg, 0,312 mmol), 2-metilpropilboronska kiselina (79,4 mg, 0,779 mmol) i paladijum(II) acetat dali su željeno jedinjenje kao čvrstu belu supstancu (37 mg, 33%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.08 (dd, J = 2.0, 8.2 Hz, 1H), 6.95 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 6.93-6.85 (m, 1H), 5.23 (s, 1H), 4.72-4.52 (m, 1H), 3.20-2.47 (m, 6H), 2.41 (d, J = 7.1 Hz, 2H), 1.89-1.76 (m, 1H), 2.02-1.26 (m, 5H), 1.70 (d, J = 7.6 Hz, 6H), 0.88 (d, J = 6.6 Hz, 6H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 160.4, 158.0, 137.1, 137.1, 129.2, 129.1, 128.1, 116.2, 116.0, 71.2, 55.8, 54.2, 47.6, 46.7, 45.1, 30.5, 29.9, 28.6, 27.0, 25.6, 24.8, 22.5, 19.8, 19.5 ppm. Čistoća: 95.0% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 1.02 min; (M+1) 363.
Primer 35
1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il [2-(5-ciklopropil-2-fluorofenil)propan-2-il]karbamat
[0471] Koristeći opštu proceduru E, 1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il [2-(5-bromo-2-fluorofenil)propan-2-il]karbamat (750 mg, 0,649 mmol), ciklopropilboronska kiselina (139 mg, 1,62 mmol) i paladijum(II) acetat dali su željeno jedinjenje kao čvrstu belu supstancu (727 mg, 86%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.08 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 6.97-6.78 (m, 2H), 5.19 (s, 1H), 4.65-4.57 (m, 1H), 2.66 (s, 6H), 1.85 (tt, J = 5.1, 8.4 Hz, 1H), 2.00-1.17 (m, 5H), 1.71 (d, J = 8.7 Hz, 6H), 0.92 (ddd, J = 4.6, 6.3, 8.4 Hz, 2H), 0.62 (dt, J = 4.7, 6.4 Hz, 2H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 160.2, 157.8, 139.2, 139.2, 125.6, 125.5, 125.4, 116.5, 116.3, 71.3, 55.8, 54.2, 47.6, 46.7, 29.9, 29.6, 28.6, 25.6, 24.8, 19.6, 15.2, 9.1 ppm. Čistoća: 100% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 0.87 min; (M+1) 347.2. Anal.
Izračunato. za C20H27FN2O2·0.07(CHCl3): C, 68.00; H, 7.70; N, 7.90. Pronađeno: C, 67.99; H, 7.86; N, 7.81.
Primer 36
1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il [2-(3-bromo-4-fluorofenil)propan-2-il]karbamat
[0472] Koristeći opštu proceduru A, 2-(3-bromo-4-fluorofenil)propan-2-amin hidrohlorid (1,00 g, 3,72 mmol) i hinuklidin-3-ol dali su željeno jedinjenje kao čvrstu belu supstancu (434 mg, 30%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.57 (s, 1H), 7.38-7.25 (m, 1H), 7.06 (t, J = 8.5 Hz, 1H), 5.62 (s, 1H), 4.86-4.32 (m, 1H), 3.33-2.12 (m, 6H), 1.73 (t, J = 7.2 Hz, 5H), 1.61 (d, J = 9.6 Hz, 6H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 159.1, 156.7, 154.6, 130.4, 125.8, 125.7, 116.4, 116.2, 109.1, 108.9, 71.3, 55.7, 54.7, 47.4, 46.5, 29.9, 29.6, 25.5, 24.6, 22.9, 19.6 ppm. Čistoća: 100% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 0.79 min; (M+1) 387.8. Anal. Izračunato. za C17H22BrFN2O2·0.27(CHCl3): C, 49.68; H, 5.38; N, 6.71. Pronađeno: C, 49.67; H, 5.39; N, 6.74.
Primer 37
1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il [2-(6-fluorobifenil-3-il)propan-2-il]karbamat
[0473] Koristeći opštu proceduru E, 1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il [2-(3-bromo-4-fluorofenil)propan-2-il]karbamat (750 mg, 1,95 mmol), fenil boronska kiselina (418 mg, 4,87 mmol) i paladijum(II) acetat dali su željeno jedinjenje kao čvrstu belu supstancu (195 mg, 29%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.49 (s, 2H), 7.46-7.38 (m, 3H), 7.35 (dd, J = 4.3, 11.7 Hz, 2H), 7.08 (dd, J = 8.6, 10.1 Hz, 1H), 5.10 (s, 1H), 4.60 (s, 1H), 3.33-2.10 (m, 6H), 1.67 (d, J = 7.9 Hz, 6H), 1.67 (m, 5H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 159.9, 157.4, 136.2, 129.3, 129.0, 128.7, 127.9, 127.6, 125.7, 125.6, 71.0, 66.1, 55.7, 55.1, 47.5, 46.6, 29.9, 29.6, 25.5, 24.5, 19.5, 15.5 ppm. Čistoća: 98% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 0.95 min; (M+1) 382.9. Anal. Izračunato. za C23H27FN2O2·0.29(CHCl3): C, 67.08; H, 6.60; N, 6.72. Pronađeno: C, 67.09; H, 6.95; N, 6.37.
Primer 38
1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il{2-[4-fluoro-3-(2-metilpropil)fenil]propan-2-il}karbamat
[0474] Koristeći opštu proceduru E, 1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il [2-(3-bromo-4-fluorofenil)propan-2-il]karbamat (125 mg, 0,324 mmol), 2-metilpropilboronska kiselina (66 mg, 0,65 mmol) i paladijum(II) acetat dali su željeno jedinjenje kao čvrstu belu supstancu (27 mg, 23%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.23-7.11 (m, 2H), 7.04-6.82 (m, 1H), 5.11 (s, 1H), 4.59 (s, 1H), 3.32-2.12 (m, 6H), 2.48 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 1.86 (d, J = 6.7, Hz, 1H), 2.05-0.96 (m, 5H), 1.62 (d, J = 5.8 Hz, 6H), 0.90 (d, J = 6.6 Hz, 6H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 161.4, 159.0, 154.7, 142.5, 128.3, 124.0, 115.1, 114.9, 71.2, 66.1, 55.8, 55.0, 47.6, 46.7, 38.7, 29.9, 29.6, 25.6, 24.8, 22.6, 19.7, ppm. Čistoća: 85% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 1.0 min; (M+1) 362.9.
Primer 39
1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il [2-(4',6-difluorobifenil-3-il)propan-2-il]karbamat
[0475] Koristeći opštu proceduru E, 1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il [2-(3-bromo-4-fluorofenil)propan-2-il]karbamat (125 mg, 0,324 mmol), 4-fluoroboronska kiselina (64 mg, 0,46 mmol) i paladijum(II) acetat dali su željeno jedinjenje kao čvrstu belu supstancu (76 mg, 56%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.48 (t, 2H), 7.44-7.29 (m, 2H), 7.21-7.00 (m, 3H), 5.27 (s, 1H), 4.68-4.55 (m, 1H), 3.29-2.10 (m, 6H), 1.67 (d, J = 9.4 Hz, 6H), 2.01-0.69 (m, 5H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 163.9, 161.4, 159.8, 157.3, 154.8, 143.5, 132.2, 130.9, 127.9, 127.8, 127.4, 125.9, 125.8, 116.2, 116.0, 115.7, 115.5, 71.4, 66.1, 55.9, 47.6, 46.7, 30.0, 39.7, 25.6, 24.8, 19.8 ppm. Čistoća: 98% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 0.96 min; (M+1) 400.9.
Primer 40
1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il {2-[4-fluoro-3-(pirimidin-5-il)fenil]propan-2-il}karbamat
[0476] Koristeći opštu proceduru E, 1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il [2-(3-bromo-4-fluorofenil)propan-2-il]karbamat (150 mg, 0,389 mmol), pirimidin-5-boronska kiselina (75,9 mg, 0,613 mmol) i tris(dibenzilidenaceton)dipadijum(0) dali su željeno jedinjenje kao čvrstu belu supstancu (49 mg, 31%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.22 (s, 1H), 8.92 (s, 2H), 7.55-7.41 (m, 2H), 7.19 (dd, J = 8.7, 9.9 Hz, 1H), 5.37 (s, 1H), 4.72-4.49 (m, 1H), 3.34-2.04 (m, 6H), 2.04-0.98 (m, 5H), 1.66 (t, J = 10.9 Hz, 6H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 159.9, 157.9, 157.4, 156.6, 154.7, 130.2, 127.85, 127.77, 126.9, 122.0, 121.8, 116.7, 116.5, 116.2, 71.6, 55.9, 54.9, 47.6, 46.7, 30.3, 29.6, 25.6, 24.8, 19.8 ppm. Čistoća: 93% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 0.63 min; (M+1) 384.9
Primer 41
1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il {2-[4-fluoro-3-(piridin-3-il)fenil] propan-2-il}karbamat
[0477] Koristeći opštu proceduru E, 1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il [2-(3-bromo-4-fluorofenil)propan-2-il]karbamat (110 mg, 0,286 mmol), piridin-3-boronska kiselina (53 mg, 0,43 mmol) i tris(dibenzilidenaceton)dipadijum(0) dali su željeno jedinjenje kao čvrstu belu supstancu (42 mg, 39%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.78 (s, 1H), 8.62 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 7.86 (s, 1H), 7.46 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 7.38 (dd, J = 4.9, 7.9 Hz, 1H), 7.15 (dd, J = 8.7, 9.9 Hz, 1H), 5.32 (s, 1H), 4.69-4.57 (m, 1H), 2.68 (s, 6H), 1.70 (d, J= 11.3 Hz, 6H), 2.08-0.94 (m, 5H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 160.0, 157.5, 149.9, 149.0, 136.6, 132.1, 127.3, 126.8, 126.7, 125.5, 125.3, 123.5, 116.4, 116.2, 71.5, 55.9, 55.0, 47.6, 46.7, 30.1, 29.66, 25.6, 24.8, 19.7 ppm. Čistoća: 100% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 0.54 min; (M+1) 367.8.
Primer 42
1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il {2-[4-fluoro-3-(furan-3-il)fenil]propan-2-il}karbamat
[0478] Koristeći opštu proceduru E, 1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il [2-(3-bromo-4-fluorofenil)propan-2-il]karbamat (110 mg, 0,296 mmol), furan-3-boronska kiselina (47,9 mg, 0,428 mmol) i tris(dibenzilidenaceton)dipadijum(0) dali su željeno jedinjenje kao čvrstu belu supstancu (47 mg, 44%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.88 (ddd, J = 0.9, 1.5, 2.5 Hz, 1H), 7.53 (dd, J = 2.5, 7.1 Hz, 1H), 7.50 (t, J = 1.7 Hz, 1H), 7.31-7.23 (m, 1H), 7.08 (dd, J = 8.6, 10.6 Hz, 1H), 6.76 (dt, J = 0.8, 1.7 Hz, 1H), 5.22 (s, 1H), 4.62 (s, 1H), 3.40-2.11 (m, 6H), 2.02-0.87 (m, 5H), 1.59 (dd, J = 11.6, 70.3 Hz, 6H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 160.0, 157.5, 150.2, 143.9, 127.44, 127.36, 127.0, 126.1, 123.8, 116.6, 116.4, 71.5, 55.9, 55.0, 47.6, 46.7, 30.1, 29.9, 25.6, 24.8, 19.8 ppm. Čistoća: 96% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 0.85 min; (M+1) 372.9.
Primer 43
1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il {2-[4-fluoro-3-(piridin-4-il)fenil]propan-2-il}karbamat
[0479] Koristeći opštu proceduru E, 1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il [2-(3-bromo-4-fluorofenil)propan-2-il]karbamat (130 mg, 0,291 mmol), piridin-4-boronska kiselina (54 mg, 0,43 mmol) i tris(dibenzilidenaceton)dipadijum(0) dali su željeno jedinjenje kao čvrstu belu supstancu (46 mg, 41%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.68 (dd, J = 1.6, 4.5 Hz, 2H), 7.61-7.39 (m, 4H), 7.15 (dd, J = 8.6, 10.2 Hz, 1H), 5.31 (s, 1H), 4.69-4.57 (m, 1H), 3.40-2.07 (m, 6H), 1.69 (d, J = 10.8 Hz, 6H), 2.06-0.74 (m, 5H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 160.0, 157.6, 143.3, 141.6, 141.5, 126.7, 126.6, 124.9, 124.8, 120.1, 119.9, 116.1, 115.9, 115.4, 115.1, 109.2, 71.4, 55.9, 55.0, 47.6, 46.7, 29.9, 25.6, 24.8, 19.8 ppm. Čistoća: 97% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 0.82 min; (M+1) 384.6.
Primer 44
1-(1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il)-3-(2-fenilpropan-2-il)urea
[0480] Koristeći opštu proceduru C, hinuklidin-3-amin (102 mg, 0,6 mmol), CDI (131 mg, 0,789 mmol) i kumilamin (95 mg, 0,70 mmol) dali su željeno jedinjenje kao čvrstu belu supstancu (21 mg, 10%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.61-7.47 (m, 2H), 7.44-7.37 (m, 2H), 7.34-7.28 (m, 1H), 4.86 (s, 1H), 4.20 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 3.71-3.60 (m, 1H), 3.14 (ddd, J = 2.3, 9.4, 14.2 Hz, 1H), 2.79-1.89 (m, 6H), 1.64 (d, J = 3.3 Hz, 6H), 1.58-1.10 (m, 5H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 157.4, 146.2, 129.3, 127.8, 125.8, 57.1, 54.9, 47.7, 47.1, 46.7, 30.6, 30.5, 26.0, 20.3 ppm. Čistoća: 79% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 0.61 min; (M+1) 288.2.
Priprema O
Primer 45
3-cijano-1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il {2-[3-(prop-1-en-2-il)fenil]propan-2-il}karbamat
[0481] U rastvor 3-hidroksihinuklidin-3-karbonitrila (38 mg, 0,25 mmol) u acetonitrilu/dioksanu (3 mL) na sobnoj temperaturi dodat je trietilamin (7,0 µL, 0,05 mmol). Reakciona smeša je mešana 15 minuta i 1-(2-izocijanatopropan-2-il)-3-(prop-1-en-2-il)benzen (49,0 µL, 0,248 mmol) je dodat kap po kap. Reakcija je mešana 18 sati na 65 °C i koncentrovana. Sirovi materijal je prečišćen na combiflash uređaju (SiO2kertridž, CHCl3i 2N NH3u MeOH) da bi se dobio odgovarajući karbamat kao bistro ulje (57 mg, 65%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.42-7.20 (s, 5H), 6.61(s, 1H), 5.11 (s, 1H), 3.29 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 3.09 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 2.93 (d, J = 4.0 Hz, 2H), 2.79-2.68 (m, 2H), 2.13 (s, 6H) 2.05-2.00 (m, 2H),1.91 (s, 3H), 1.87 (s, 2H),1.50-1.37 (m, 2H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 135.4, 128.7, 125.2, 124.5, 124.0, 122.0, 112.9, 61.2, 47.0, 46.2, 32.4, 31.8, 29.9, 29.4, 29.2, 26.6, 25.7, 23.7, 22.8, 22.2, 19.2 ppm. Čistoća: >99% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 0.81 min; (M+1) 354.
Priprema P
Primer 46
N-(2-(3-(prop-1-en-2-il)fenil)propan-2-il)-1,4-diazabiciklo[3.2.2]nonan-4-karboksamid
[0482] U rastvor 1,4-diazabiciklo[3.2.2]nonana (350 mg, 2,77 mmol) i 1-(2-izocijanatopropan-2-il)-3-(prop-1-en-2-il)benzen (1,09 mL, 5,55 mmol) u hloroformu (2 mL) dodata su 3-4 komada molekularnih sita. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 18 sati i zatim koncentrovana. Sirovi materijal je prečišćen na combiflash uređaju (SiO2kertridž, CHCl3i 2N NH3u MeOH) tda bi se dobila odgovarajuća urea kao prljavo bela čvrsta supstanca (650 mg, 36%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.48 (s, 1H), 7.31-7.26 (m, 3H), 5.34(s, 1H), 5.07 (s, 1H), 4.73 (br s, 1H), 4.03 (BR s, 1H), 3.64 (m, 2H), 3.14-3.03 (m, 6H), 2.15 (s, 3H) 2.06 (m, 2H), 1.72 (m, 8H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 155.7, 148.3, 143.8, 141.3, 128.5, 124.1, 123.9, 122.0, 112.5, 57.8, 55.8, 48.1, 46.4 (2x), 41.2, 30.2 (2x), 27.3 (2x), 22.1 ppm. Čistoća: >98% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 0.71 min; (M+1) 328
Primer 47
bifenil-2-il 1,4-diazabiciklo[3.2.2]nonan-4-karboksilat
[0483] Bifenil-2-il hlorokarbonat (83,0 mg, 0,358 mmol) je tretiran sa 1,4-diazabiciklo[3.2.2]nonanom (113 mg, 0,896 mmol) koristeći istu proceduru kao što je navedeno u primeru 46 da bi se dobilo željeno jedinjenje kao prljavo bela čvrsta supstanca (17 mg, 15%). Čistoća: >99% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 0.75 min; (M+1) 323.
Primer 48
N-{2-[3-(propan-2-il)fenil]propan-2-il}-1,4-diazabiciklo[3.2.2]nonan-4-karboksamid
[0484] Koristeći opštu proceduru F, N-(2-(3-(prop-1-en-2-il)fenil)propan-2-il)-1,4-diazabiciklo[3.2.2]nonan-4-karboksamid (100 mg, 0,305 mmol) i paladijum (20 mg, 20 mas. % na ugljeniku) dali su željeno jedinjenje kao prljavo belu supstancu (60 mg, 57%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.28-7.21 (m, 3H), 7.11 (d, J= 8.0 Hz, 1H) , 4.71 (s, 1H), 4.02 (s, 1H), 3.66 (t, J = 8.0 Hz, 2H) 3.15 (m, 7H), 2.06 (br s, 2H), 1.77 (s, 7H) 1.26 (d, J = 4.0 Hz, 6H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 155.8, 148.9, 148.5, 128.5.1, 124.7, 123.1, 122.4, 57.8, 56.0, 48.1, 46.4, 41.2, 34.5, 32.2, 30.4, 30.0, 29.9, 27.3, 24.3, 22.9 ppm. Čistoća: >91% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 0.74 min; (M+1) 330.
Priprema Q
Primer 49
(+/-)-(3S,4S)-1-azabiciklo[2.2.1]heptan-3-il-2-(3-(prop-1-en-2-il)fenil)propan-2-ilkarbamat
[0485] U rastvor (+/-)-(3S,4S)-1-azabiciklo[2.2.1]heptan-3-ola (294 mg, 2,6 mmol) u THF (5 mL) na sobnoj temperaturi dodato je NaH [60%, ulje] (107 mg, 2,67 mmol). Reakciona smeša je mešana 15 minuta i 1-(2-izocijanatopropan-2-il)-3-(prop-1-en-2-il)benzen (344 µL, 1,73 mmol) je dodat kap po kap. Reakcija je mešana 30 minuta i ugašena slanim rastvorom. Rastvor je ekstrahovan sa EtOAc, a organski sloj je osušen preko Na2SO4i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen na combiflash uređaju (SiO2kertridž, CHCl3i 2N NH3u MeOH) da bi se dobio odgovarajući karbamat kao bistro ulje (140 mg, 26%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.26-7.20 (m, 3H), 7.11 (m, 1H), 5.18 (s, 1H), 5.19 (br s, 1H), 5.01 (s, 1H), 4.81 (br s, 1H), 2.99 (br s, 1H), 2.82(br s, 1H), 2.70 (br s, 1H), 2.53 (br s, 2H), 2.33 (br s, 1H), 2.02 (s, 3H), 1.76 (br s, 1H) 1.61 (br s, 6H), 1.52 (br s, 1H), 1.37 (br s, 1H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 147.1, 143.7, 141.5, 128.5, 124.1, 122.1, 112.7, 75.6, 60.6, 59.4, 55.4, 54.3, 53.9, 41.5, 29.9, 29.8, 29.4, 22.2, 21.6 ppm. Čistoća: >98% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 0.83 min; (M+1) 315
Primer 50
(+/-)-(3S,4S)-1-azabiciklo[2.2.1]hept-3-il{2-[3-(propan-2-il)fenil]propan-2-il}karbamat
[0486] Koristeći opštu proceduru F, (+/-)-(3S,4S)-1-azabiciklo[2.2.1]heptan-3-il 2-(3-(prop-1-en-2-il)fenil)propan-2-ilkarbamat (110 mg, 0,350 mmol) i paladijum (20 mg, 20 mas. % na ugljeniku) dali su željeno jedinjenje kao prljavo belu čvrstu supstancu (36 mg, 46%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.25-7.19 (m, 3H), 7.11 (d, J = 8.0 Hz, 1H) , 5.19 (s, 1H), 4.91 (s, 1H), 3.44 (t, J = 4.0 Hz, 2H) 3.19 (br s, 1H), 3.02 (br s, 1H), 2.89 (m, 2H), 2.69 (br s, 1H), 2.39 (br s, 1H), 1.91 (br s, 1H), 1.66 (br s, 7H) 1.26 (d, J = 4.0 Hz, 6H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 128.5 (2x), 124.8, 123.1 (2x), 122.4(2x), 77.4, 60.6, 59.4, 55.5, 41.5, 34.5, 29.9, 29.9, 29.5, 24.3 (2x), 21.6 ppm. Čistoća: >95% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 0.88 min; (M+1) 317.
Primer 51
N-[2-(3-bromo-4-fluorofenil)propan-2-il]-1,4-diazabiciklo[3.2.2]nonan-4-karboksamid
[0487] Koristeći opštu proceduru A, 2-(3-bromo-4-fluorofenil)propan-2-amin hidrohlorid (1,00 g, 3,72 mmol) i 1,4-diazabiciklo[3.2.2]nonan dali su željeno jedinjenje kao čvrstu belu supstancu (265 mg, 18%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.54-7.52 (m, 1H), 7.31-7.25 (m, 1H), 7.04 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 4.71(s, 1H), 3.99 (br s, 1H), 3.59 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 3.13-2.95 (m, 6H), 2.04-1.97 (m, 2H) 1.77-1.67 (m, 2H), 1.65 (s, 6H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 158.9, 156.4, 155.4, 145.9, 130.2, 125.6, 116.2, 57.8, 54.9, 48.3, 46.6, 46.6, 41.6, 30.5, 30.5, 27.6, 27.6 ppm. Čistoća: >99% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 0.73 min; (M+1) 384.
Primer 52
N-[2-(6-fluorobifenil-3-il)propan-2-il]-1,4-diazabiciklo[3.2.2]nonan-4-karboksamid
[0488] Koristeći opštu proceduru E, N-[2-(3-bromo-4-fluorofenil)propan-2-il]-1,4-diazabiciklo[3.2.2]nonan-4-karboksamid (100 mg, 0,261 mmol), fenilboronska kiselina (79 mg, 0,65 mmol) i paladijum(II) acetat dali su željeno jedinjenje kao prljavo belu čvrstu supstancu (66 mg, 66%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.54 (m, 2H), 7.44-7.40 (m, 5H), 7.08(m, 1H), 4.78(br s, 1H), 4.00 (br s, 1H), 3.60 (m, 2H), 3.11-2.92 (m, 6H), 2.00 (m, 2H) 1.67(m, 7H), 1.26 (s, 1H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 159.6, 155.6, 144.6, 136.5, 129.3, 128.6, 128.5, 127.8, 127.5, 125.7, 125.6, 116.1, 115.9, 57.9, 55.3, 48.2, 46.4, 46.4, 41.6, 30.6, 30.5, 29.9, 27.6 ppm. Čistoća: >99% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 0.88 min; (M+1) 382.
Primer 53
N-(2-(4',6-difluorobifenil-3-il)propan-2-il)-1,4-diazabiciklo[3.2.2]nonan-4-karboksamid
[0489] Koristeći opštu proceduru E, N-[2-(3-bromo-4-fluorofenil)propan-2-il]-1,4-diazabiciklo[3.2.2]nonan-4-karboksamid (100 mg, 0,261 mmol), 4-fluorofenil boronska kiselina (91 mg, 0,65 mmol) i paladijum(II) acetat dali su željeno jedinjenje kao prljavo belu čvrstu supstancu (64 mg, 62%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.48 (m, 2H), 7.37-7.30 (m, 2H), 7.10-7.03 (m, 3H), 4.77 (s, 1H), 3.99 (br s, 1H), 3.58 (m, 2H), 3.10-2.90 (m, 6H), 1.98 (m, 2H) 1.71 (m, 8H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 163.7, 161.3, 159.5, 157.1, 155.6, 144.6, 131.0, 130.9, 127.4, 127.2, 125.7, 116.1, 115.6, 57.9, 55.2, 48.2, 46.4, 46.4, 41.5, 30.6, 30.6, 27.6, 27.6 ppm. Čistoća: >99% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 0.90 min;
(M+1) 400.
Primer 54
N-[2-(naftalen-1-il)propan-2-il]-1,4-diazabiciklo[3.2.2]nonan-4-karboksamid
[0490] Koristeći opštu proceduru A, 2-(naftalen-1-il)propan-2-amin hidrohlorid (227 mg, 1,23 mmol) i 1,4-diazabiciklo[3.2.2]nonan dali su željeno jedinjenje kao čvrstu belu supstancu (206 mg, 50%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.63-8.60 (m, 1H), 7.90-7.87 (m, 1H), 7.78 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.63 (d, J = 8.0 Hz, 1H), ), 7.47-7.42 (m, 3H), 4.86 (s, 1H), 3.94 (br s, 1H), 3.61 (m, 2H), 3.11-2.88 (m, 7H), 2.01-1.91 (m, 7H), 1.68-1.62 (m, 2H) ppm.
<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 176.2, 155.5, 142.6, 135.3, 130.6, 129.9, 128.8, 126.3, 125.4, 125.2, 123.9, 57.3, 57.1, 47.7, 45.8, 45.8, 40.7, 29.4, 29.4, 26.9, 26.9 ppm. Čistoća: >99% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 0.72 min; (M+1) 338.
Primer 55
N-(2-(5-bromo-2-fluorofenil)propan-2-il)-1,4-diazabiciklo[3.2.2]nonan-4-karboksamid
[0491] Koristeći opštu proceduru A, 2-(5-bromo-2-fluorofenil)propan-2-amin hidrohlorid (100 mg, 0,372 mmol) i 1,4-diazabiciklo[3.2.2]nonan dali su željeno jedinjenje kao čvrstu belu supstancu (70 mg, 49%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.48 (m, 1H), 7.28 (m, 1H), 6.86 (m, 1H), 4.85 (s, 1H), 3.98 (br s, 1H), 3.56 (m, 2H), 3.14-2.91 (m, 7H), 1.99 (m, 2H) 1.71 (m, 7H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 161.1, 158.6, 155.7, 131.3, 113.1, 118.3, 118.0 57.8, 54.0, 48.1, 46.4, 46.4, 41.5, 29.1, 29.1, 27.5, 27.5 ppm. Čistoća: >99% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 0.73 min; (M+1) 384.
Primer 56
N-[2-(4-fluorobifenil-3-il)propan-2-il]-1,4-diazabiciklo[3.2.2]nonan-4-karboksamid
[0492] Koristeći opštu proceduru E, N-(2-(5-bromo-2-fluorofenil)propan-2-il)-1,4-diazabiciklo[3.2.2]nonan-4-karboksamid (100 mg, 0,261 mmol), fenil boronska kiselina (30 mg, 0,25 mmol) i paladijum(II) acetat dali su željeno jedinjenje kao prljavo belu čvrstu supstancu (27 mg, 39%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.56-7.51 (m, 3H), 7.41-7.37 (m, 3H), 7.32-7.30 (m, 1H), 7.03 (m, 1H), 4.90 (s, 1H), 4.00 (br s, 1H), 3.59 (m, 2H), 3.11-2.92 (m, 6H), 2.04-1.98 (m, 2H) 1.78 (s, 6H), 1.73-1.67 (m, 2H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 161.8, 159.4, 155.9, 140.9, 137.2, 134.6, 128.9, 127.4, 127.3, 127.2, 127.1, 127.0, 116.9, 57.9, 54.4, 48.1, 46.5, 46.5, 41.4, 29.9, 29.3, 27.5, 27.5 ppm. Čistoća: >99% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 0.90 min; (M+1) 400.
Primer 57
N-(2-(3-izopropoksifenil)propan-2-il)-1,4-diazabiciklo[3.2.2]nonan-4-karboksamid
[0493] Koristeći opštu proceduru A, 2-(3-izopropoksifenil)propan-2-amin hidrohlorid (60 mg, 0,31 mmol) i 1,4-diazabiciklo[3.2.2]nonan dali su željeno jedinjenje kao prljavo belu čvrstu supstancu (70 mg, 57%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.17 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 6.92-6.87 (m, 2H) , 6.69 (d, J = 8.0 Hz, 1H) 4.66 (br s, 1H), 4.48 (m, 1H), 3.94 (br s, 1H) 3.56 (m, 2H), 3.08-2.90 (m, 5H), 1.96 (m, 2H) 1.69-1.60 (m, 7H), 1.27 (d, J= 8.0 Hz, 6H), 1.17 (br s, 2H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 158.0, 155.7, 150.3, 129.4, 117.1, 113.4, 113.1, 77.5, 69.8, 55.7, 48.2, 46.4, 46.4, 46.3, 41.5, 30.3, 30.0, 29.9, 27.6, 22.3 ppm. Čistoća: >99% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 0.75 min; (M+1) 346.
Primer 58
N-(bifenil-3-il)-1,4-diazabiciklo[3.2.2]nonan-4-karboksamid
[0494] Koristeći opštu proceduru A, bifenil-3-amin (100 mg, 0,592 mmol) i 1,4-diazabiciklo[3.2.2]nonan dali su željeno jedinjenje kao prljavo belu čvrstu supstancu (93 mg, 49%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.60 (m, 1H), 7.56-53 (m, 2H), 7.39-7.21(m, 6H), 6.67 (br s, 1H), 4.85 (s, 1H), 4.16 (br s, 1H), 3.66- 3.61 (m, 2H), 3.07-2.86 (m, 6H), 1.97 (m, 2H) 1.68 (m, 2H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 154.7, 142.0, 141.1, 139.9, 129.3, 128.8.
128.8, 127.5, 127.3, 127.3, 122.0, 119.4, 119.2, 57.5, 48.4, 46.3, 46.3, 42.1, 27.5, 27.5 ppm. Čistoća: >96% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 0.75 min; (M+1) 333.
Primer 59
N-{2-[2-fluoro-5-(2-metilpropil)fenil]propan-2-il}-1,4-diazabiciklo[3.2.2]nonan-4-karboksamid
Koristeći opštu proceduru E, N-(2-(5-bromo-2-fluorofenil)propan-2-il)-1,4-diazabiciklo
[0495] [3.2.2]nonan-4-karboksamid (100 mg, 0,261 mmol), sa izopropil boronskom kiselinom (66 mg, 0,65 mmol) i paladijum(II) acetatom, dobijeno je željeno jedinjenje kao prljavo belu čvrstu supstancu (27 mg, 39%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.08 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.93-6.81 (m, 2H), 4.85 (s, 1H), 3.96 (br s, 1H), 3.65 (q, J = 8.0 Hz, 1H), 3.55 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 3.09-2.90 (m, 5H), 2.40 (d, J = 4.0 Hz, 1H), 2.01-1.92 (m, 2H) 1.81-1.61 (m, 8H), 1.22-1.17 (m, 2H), 0.87 (d, J = 8.0 Hz, 6H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 160.5, 158.0, 155.9, 137.0, 133.6, 128.8, 116.0, 57.9, 54.3, 48.1, 46.4 (2x), 45.2, 41.4, 30.5, 29.9, 29.2, 29.2, 27.5, 22.6, 22.6 ppm. Čistoća: >99% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 0.94 min; (M+1) 362.
Primer 60
N-(bifenil-2-il)-1,4-diazabiciklo[3.2.2]nonan-4-karboksamid
[0496] Koristeći opštu proceduru A, 1-izocijanatobifenil (50 mg, 0,26 mmol) i 1,4-diazabiciklo[3.2.2]nonan dali su željeno jedinjenje kao čvrstu belu supstancu (55mg mg, 65%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.15 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.45-7.31 (m, 6H), 7.16 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.04 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 6.47 (br s, 1H), 3.63 (br s, 1H), 3.57 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 3.00-2.80 (m, 6H), 1.68 (m, 2H) 1.43 (m, 2H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 154.2, 138.9, 136.6, 131.7, 129.7, 129.5, 129.5, 129.3, 129.3, 128.7, 128.1, 122.6, 120.5, 57.6, 48.5, 46.2, 46.2, 41.6, 29.9, 27.3 ppm. Čistoća: >99% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 0.64 min; (M+1) 322.
Primer 61
N-(naftalen-1-il)-1,4-diazabiciklo[3.2.2]nonan-4-karboksamid
[0497] Koristeći opštu proceduru A, 1-izocijanatonaftalen (208 mg, 1,23 mmol) i 1,4-diazabiciklo[3.2.2]nonan dali su željeno jedinjenje kao čvrstu belu supstancu (150 mg, 48%).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.80-7.72 (m, 2H), 7.64 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.56 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.44-7.35 (m, 3H), 6.65 (br s, 1H), 4.18 (br s, 1H), 3.64 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 3.09-2.91 (m, 6H), 2.08-1.93 (m, 2H) 1.74-1.66 (m, 2H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 155.3, 134.4, 134.3, 128.9, 128.2, 126.2, 126.1, 126.0, 125.1, 121.2, 121.0, 57.6, 48.7, 46.4, 46.4, 42.2, 27.6, 27.6 ppm. Čistoća: >99% UPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 0.53 min; (M+1) 296.
Primer 62
(S)-hinuklidin-3-il 2-(bifenil-4-il)propan-2-ilkarbamat
[0498] Koristeći opštu proceduru B, bromobenzonitril (2,00 g, 11,0 mmol) je konvertovan u odgovarajući 2-(4-bromofenil)propan-2-amin (1,20 g, 51%) kao smeđe ulje.
[0499] Koristeći opštu proceduru A, 2-(4-bromofenil)propan-2-amin (1,0 g, 4,7 mmol) i (S)-hinuklidin-3-ol dali su (S)-hinuklidin-3-il 2-(4-bromofenil)propan-2-ilkarbamat (1,0 g, 58%) kao smeđe ulje.
[0500] Koristeći opštu proceduru E, gore navedeni bromid (200 mg, 0,540 mmol), fenilboronska kiselina (133 mg, 1,10 mmol) i [PdCl2(pddf)]CH2Cl2dali su željeno jedinjenje kao čvrstu belu supstancu (70 mg, 35%).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.60-7.53 (m, 4H), 7.47 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.42 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 7.33 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 5.26 (br s, 1H), 4.64 (m, 1H), 3.33-3.15 (m, 1H), 3.10-2.45 (m, 5H), 2.40-1.80 (m, 2H), 1.78-1.58 (m, 7H), 1.55-1.33 (m, 2H) ppm.<13>C NMR (125 MHz, CDCl3) δ 154.5, 146.1, 140.8, 139.5, 128.7, 127.2, 127.1, 127.1, 125.2, 70.9, 55.5, 55.1, 47.4, 46.4, 31.1, 29.5, 25.3, 24.5, 19.5 ppm. Čistoća: 100 % LCMS (214 nm & 254 nm); vreme zadržavanja 1.56 min; (M+1) 365.
Primer 63
hinuklidin-3-il 2-(4-(pirimidin-5-il)fenil)propan-2-ilkarbamat
[0501] Koristeći opštu proceduru E, hinuklidin-3-il 2-(4-bromofenil)propan-2-ilkarbamat (200 mg, 0,540 mmol), pirimidin-5-ilboronska kiselina (136 mg, 1,12 mmol) i [PdCl2(pddf)]CH2Cl2dali su željeno jedinjenje kao čvrstu belu supstancu (80 mg, 40%).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.17 (s, 1H), 8.92 (s, 2H), 7.58-7.51 (m, 4H), 5.34 (s, 1H), 4.61 (m, 1H), 3.20-3.10 (m, 1H), 2.92-2.41 (m, 5H), 2.00-1.76 (m, 2H), 1.72-1.53 (m, 7H), 1.52-1.32 (m, 2H) ppm.<13>C NMR (125 MHz, CDCl3) δ 157.4, 154.8, 154.5, 148.2, 134.0, 132.5, 127.0, 126.0, 71.2, 55.6, 55.0, 47.4, 46.3, 29.7, 29.4, 25.4, 24.5, 19.5 ppm. Čistoća: > 96 % LCMS (214 nm & 254 nm); vreme zadržavanja 1.34 min; (M+1) 366.
Primer 64
hinuklidin-3-il 1-(bifenil-4-il)ciklopropilkarbamat
[0502] Koristeći opštu proceduru G, bromobenzonitril (3,00 g, 16,5 mmol) je konvertovan u odgovarajući 1-(4-bromofenil)ciklopropanamin (1,80 g, 51%) kao žuta čvrsta supstanca.
[0503] Koristeći opštu proceduru A, 1-(4-bromofenil)ciklopropanamin (1,0 g, 4,7 mmol) i hinuklidin-3-ol dali su hinuklidin-3-il 1-(4-bromofenil)ciklopropilkarbamat (1,3 g, 75%) kao belu polučvrstu supstancu.
[0504] Koristeći opštu proceduru E, gore navedeni karbamat (400 mg, 1,12 mmol), fenilboronska kiselina (267 mg, 2,22 mmol) i [PdCl2(pddf)]CH2Cl2dali su željeno jedinjenje kao viskozno ulje (100 mg, 25%).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.47 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 7.43 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.33 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 7.26-7.15 (m, 3H), 5.93 (br s, 0.6H), 5.89 (br s, 0.4H), 4.67 (m, 1H), 3.20-3.06 (m, 1H), 2.88-2.42 (m, 5H), 1.98-1.08 (m, 9H) ppm.<13>C NMR (125 MHz, CDCl3) δ 155.0, 141.0, 139.7, 138.2, 127.7, 126.1, 126.0, 124.8, 124.1, 70.0, 54.5, 46.3, 45.4, 34.1, 24.3, 23.2, 18.3, 17.0 ppm. Čistoća: 100 % LCMC (214 nm & 254 nm); vreme zadržavanja 1.52 min; (M+1) 363.
Priprema R
Primer 65
hinuklidin-3-il 1-(4-(piridin-2-il)fenil)ciklopropilkarbamat
[0505] U rastvor hinuklidin-3-il 1-(4-bromofenil)ciklopropilkarbamata (870 mg, 2,43 mmol) u 30 mL 1,4-dioksana, dodati su bis(pinakolato)diboron (1,81 g, 7,22 mmol), CH3COOK (2,10 g, 21,4 mmol) i [PdCl2(pddf)]CH2Cl2(97 mg, 0,12 mmol). Smeša je mešana 18 sati na 80 °C. Rastvarač je isparen, a ostatak je ekstrahovan sa EtOAc. Ekstrakti su koncentrovani i prečišćeni hromatografijom na koloni sa silika gelom (elucija EtOAc/metanolom od 20/1 do 10/1, koji sadrži 1% TEA) da bi se dobio hinuklidin-3-il 1-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)ciklopropilkarbamat (260 mg, 33%) kao smeđa polučvrsta supstanca.
[0506] Koristeći opštu proceduru E, gore navedeni boronat (260 mg, 0,632 mmol), 2-bromopiridin (149 mg, 0,941 mmol) i Pd2(dba)3(32,0 mg, 0,036 mmol) dali su željeno jedinjenje kao belu polučvrstu supstancu (70 mg, 31%).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.58 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 7.82 (d, J= 7.0 Hz, 2H), 7.66-7.57 (m, 2H), 7.23-7.15 (m, 2H), 7.11 (t, J= 5.0 Hz, 1H), 6.16 (br s, 0.6H), 5.97 (br s, 0.4H), 4.63 (m, 1H), 3.17-3.02 (m, 1H), 2.90-2.38 (m, 5H), 1.90-1.10 (m, 9H) ppm.<13>C NMR (125 MHz, CDCl3) δ 156.1, 155.2, 148.6, 143.0, 136.3, 135.7, 125.9, 124.5, 120.9, 119.4, 70.3, 54.6, 46.3, 45.4, 34.1, 24.4, 23.5, 18.5, 17.3 ppm. Čistoća: 100 % LCMS (214 nm & 254 nm); vreme zadržavanja 1.18 (M+H) 364.
Primer 66
hinuklidin-3-il 1-(4-(pirimidin-5-il)fenil)ciklopropilkarbamat
[0507] Koristeći opštu proceduru E, gore navedeni hinuklidin-3-il 1-(4-bromofenil)ciklopropil-karbamat (400 mg, 1,10 mmol), pirimidin-5-ilboronska kiselina (204 mg, 1,64 mmol) i [PdCl2(pddf)]CH2Cl2dali su željeno jedinjenje kao viskozno ulje (110 mg, 28 %).<1>HNMR (500 MHz, CDCl3) δ (s, 1H), (s, 2H), 7.44 (d, J = 8.5 Hz, 2H), 7.33-7.25 (m, 2H), 6.02 (br s, 0.7H), 6.02 (br s, 0.3H), 4.65 (m, 1H), 3.20-3.05 (m, 1H), 2.86-2.40 (m, 5H), 1.98-1.12 (m, 9H) ppm.<13>C NMR (125 MHz, CDCl3) δ 156.3, 155.1, 153.7, 143.3, 132.9, 131.1, 126.0, 125.3, 70.5, 54.7, 46.4, 45.4, 34.1, 24.4, 23.5, 18.5, 17.5 ppm. Čistoća: 100 % LCMS (214 nm & 254 nm); vreme zadržavanja 1.29 min; (M+1) 365.
Primer 67
(S)-hinuklidin-3-il 1-(4'-fluorobifenil-4-il)ciklopropilkarbamat
[0508] Koristeći opštu proceduru E, (S)-hinuklidin-3-il 1-(4-bromofenil)ciklopropil karbamat, 4-F-fenilboronska kiselina i [PdCl2(pddf)]CH2Cl2dali su željeno jedinjenje kao čvrstu belu supstancu (45%).<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 8.06-7.83 (d, 1H), 7.69-7.66 (m, 2H), 7.59-7.55 (m, 2H), 7.29-7.22 (m, 4H), 4.56-4.54 (m, 1H), 3.13-2.32 (m, 6H), 1.91-1.19 (m, 9H) ppm.<13>C NMR (125 MHz, DMSO-d6) δ 163.2, 161.2, 156.4, 143.7, 136.9, 128.9, 128.8, 126.8, 125.6, 116.2, 116.0, 70.7, 55.8, 47.4, 46.4, 34.8, 25.7, 24.6, 19.6, 18.7, 18.6 ppm. Čistoća: > 97 % LCMS (214 nm & 254 nm); vreme zadržavanja 1.96 min; (M+1) 381.2.
Primer 68
1-azabiciklo [3.2.2] nonan-4-il 1-(4'-fluorobifenil-4-il) ciklopropilkarbamat
[0509] Koristeći opštu proceduru E, 1-azabiciklo[3.2.2]nonan-4-il 1-(4-bromofenil)-ciklopropil karbamat, 4-F-fenilboronska kiselina i [PdCl2(pddf)]CH2Cl2dali su željeno jedinjenje kao čvrstu belu supstancu (27%).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.52-7.48 (m, 4H), 7.33-7.28 (m, 2H), 7.14-7.11 (t, J = 8.5 Hz, 2H), 5.47-5.33 (d, 1H), 4.93-4.89 (m, 1H), 3.15-2.75 (m, 6H), 2.10-0.88 (m, 11H) ppm.<13>C NMR (125 MHz, CDCl3) δ 163.4, 161.4, 155.7, 142.1, 138.3, 136.9, 128.5, 128.5, 127.0, 125.9, 125.4, 115.7, 115.5, 78.8, 51.7, 48.3, 44.9, 35.2, 33.7, 30.6, 29.7, 24.8, 22.2, 18.1 ppm. Čistoća: > 99 % LCMS (214 nm & 254 nm); vreme zadržavanja 1.56 min; (M+1) 395.2.
Primer 69
(S)-hinuklidin-3-il 1-(4-(5-fluoropiridin-2-il)fenil)ciklopropilkarbamat
[0510] Koristeći opštu proceduru E, (S)-hinuklidin-3-il (1-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)ciklopropil)karbamat, 2-bromo-5-fluoropiridin i [PdCl2(pddf)]CH2Cl2dali su željeno jedinjenje kao čvrstu belu supstancu (34%).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.51-8.52 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 7.87-7.85 (d, J= 10.5 Hz, 2H), 7.69-7.67 (m, 1H), 7.47-7.42 (m, 1H), 7.32-7.27 (m, 2H), 5.79- 5.66 (d, 1H), 4.73-4.71 (t, J = 5.0 Hz ,1H) , 3.22-3.19 (m, 1H), 2.87-2.61 (m, 5H), 2.01-1.22 (m, 9H) ppm.<13>C NMR (125 MHz, CDCl3) δ 160.8, 157.4, 156.1, 153.5, 144.4, 137.8, 136.3, 126.7, 125.7, 124.9, 123.6, 121.1, 71.6, 55.7, 47.4, 46.5, 35.3, 29.7, 25.4, 24.8, 19.4 ,18.2 ppm. Čistoća: > 99 % LCMS (214 nm & 254 nm); vreme zadržavanja 1.41 min; (M+1) 382.2.
Priprema S
Primer 70
(S)-1-(1-(4'-fluorobifenil-4-il)ciklopropil)-3-(3-metilhinuklidin-3-il)urea
[0511] U tikvicu sa tri grla sa okruglim dnom opremljenu sa dva levka za dodavanje sa izjednačavanjem pritiska i gumenom cevi povezanom sa meračem protoka gasa, suspenzija 1-(4'-fluoro-[1,1'-bifenil]-4-il)ciklopropanamina (1,50 g, 7,07 mmol) u smeši od 20 mL vode i 1 mL konc. HCl mešana je 10 minuta. Dodat je toluen (10 mL) i rastvor je održavan uz snažno mešanje i hlađen na 0 °C. Rastvor trifozgena (3,10 g, 10,6 mmol) u 20 mL toluena i 40 mL zasićenog vodenog NaHCO3 dodat je kap po kap tokom 1 sata. Reakciona smeša je mešana dodatnih 30 minuta. Mešanje je prekinuto, a gornji sloj toluena je zatim odvojen, osušen (Na2SO4) i koncentrovan da bi se dobio odgovarajući izocijanat koji se koristi u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
[0512] U rastvor gore navedenog izocijanata (134 mg, 0,571 mmol) u 15 mL toluena dodat je (S)-3-metilhinuklidin-3-amin (80 mg, 0,57 mmol). Dobijena smeša je zagrevana pod refluksom preko noći, ohlađena na sobnu temperaturu i koncentrovana in vacuo da bi se dobio ostatak, koji je prečišćen hromatografijom reverzne faze na kombiflash-u (0-20% MeCN u vodi) da bi se dobilo željeno jedinjenje kao čvrsta bela supstanca (73 mg, 33%).<1>H NMR (500 MHz CDCl3) δ 7.52-7.48 (m, 4H), 7.27-7.25 (d, J = 10.0 Hz, 2H), 7.13-7.09 (m, 2H), 5.39 (s, 1H), 4.78 (s, 1H), 2.95-2.71 (m, 5H), 2.65-2.64 (m, 1H), 1.94-1.93 (m, 1H), 1.69-1.68 (m, 1H), 1.46-1.38 (m, 5H), 1.36-1.33 (m, 4H), 1.26-1.23 (m, 1H) ppm.<13>C NMR (125 MHz CDCl3) δ 163.5, 161.5, 157.5, 141.5, 138.5, 136.6, 136.6, 128.5, 128.4, 127.2, 124.7, 115.8, 115.6, 63.8, 52.3, 46.6, 46.3, 34.9, 31.0, 25.0, 23.2, 22.5, 20.2, 20.0 ppm.
Čistoća: > 99 % LCMS (214 nm & 254 nm); vreme zadržavanja 1.51 min; (M+H<+>) 394.2.
Primer 71
(S)-1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il [1-(2',4'-difluorobifenil-4-il)ciklopropil]karbamat
[0513] Koristeći opštu proceduru E, (S)-hinuklidin-3-il 1-(4-bromofenil)ciklopropilkarbamat (0,446 g, 1,22 mmol), 2,4-difluorofenil boronska kiselina (0,386 g, 2,44 mmol) i Pd(OAc)2(0,015 g, 0,067 mmol) dali su željeno jedinjenje kao tamnožutu čvrstu supstancu (0,111 g, 23%).<1>H NMR (CDCl3)δ 7.43 (dd, J = 8.4, 1.6 Hz, 2H), 7.40-7.33 (m, 1H), 7.31 (d, J = 7.7 Hz, 2H), 6.99-6.81 (m, 2H), 5.54 (d, J = 48.0 Hz, 1H), 4.82-4.65 (m, 1H), 3.30-3.07 (m, 1H), 2.98-2.44 (m, 5H), 1.97 (d, J = 32.7 Hz, 1H), 1.83 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 1.64 (s, 1H), 1.52 (s, 1H), 1.39 (s, 1H), 1.31 (d, J = 6.8 Hz, 4H) ppm.<13>C NMR glavni rotomer (CDCl3) δ 162.2 (dd, J = 12.8, 249.1 Hz), 159.8 (dd, J = 11.8, 251.0 Hz), 156.9, 156.0, 142.6, 133.1, 131.3 (m), 128.9, 125.6, 124.9, 111.5 (dd, J = 3.9, 21.2 Hz) 104.4 (dd, J = 25.2, 29.4 Hz), 72.1, 71.6, 55.7, 47.4, 46.5, 35.7, 35.3, 25.5, 24.6, 24.4, 19.5, 18.1 ppm. Čistoća: LCMS > 99.3 % (214 nm & 254 nm); vreme zadržavanja 0.90 min; (M+1) 399.0
Primer 72
1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il [1-(4'-metoksibifenil-4-il)ciklopropil]karbamat
[0514] Koristeći opštu proceduru E, hinuklidin-3-il 1-(4-bromofenil)ciklopropilkarbamat (0,485 g, 1,33 mmol), 4-metoksifenil boronska kiselina (0,404 g, 2,66 mmol) i Pd(OAc)2(0,016 g, 0,071 mmol) dali su željeno jedinjenje kao sivu čvrstu supstancu (0,337 mg, 65%).
<1>H NMR (CDCl3) δ 7.48 (dd, J = 8.6, 5.5 Hz, 4H), 7.29 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 6.96 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 5.58 (d, J = 48.7 Hz, 1H), 4.83-4.63 (m, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.20 (dd, J = 24.0, 15.5 Hz, 1H), 2.97-2.42 (m, 5H), 1.97 (d, J = 30.9 Hz, 1H), 1.81 (s, 1H), 1.75-1.33 (m, 3H), 1.28 (d, J = 6.8 Hz, 4H) ppm.<13>C NMR glavni rotomer (CDCl3) δ 159.1, 156.0, 141.4, 139.0, 133.4, 128.0, 126.7, 125.9, 114.2, 71.5, 55.7, 55.3, 47.4, 46.5, 35.3, 25.5, 24.6, 19.6, 17.8 ppm. Čistoća: LCMS >97.1 % (214 nm & 254 nm); vreme zadržavanja 0.88 min; (M+1) 393.4.
Priprema T
Primer 73
hinuklidin-3-il 2-(5-(4-fluorofenil)tiofen-3-il)propan-2-ilkarbamat
[0515] U mešani i ohlađeni (0 °C) rastvor etil 5-bromotiofen-3-karboksilata (13,30 g, 56,57 mmol) u THF (100 mL) dodat je rastvor metilmagnezijum-bromida u dietil etru [3,0 M] (55,0 mL, 165 mmol), kap po kap tokom 20 minuta. Nakon 2 sata, reakcioni rastvor je koncentrovan. Ostatak je rastvoren u vodenom NH4Cl (200 mL) i ekstrahovan etil acetatom (2 x 100 mL). Kombinovani ekstrakti su osušeni (Na2SO4) i koncentrovani. Dobijeno ćilibarno ulje je prečišćeno fleš hromatografijom koristeći heksan/etil acetat gradijent da bi se dobio 2-(5-bromotiofen-3-il)propan-2-ol kao svetlo ćilibarno ulje (8,05 g, 64%).
[0516] U mešani rastvor 2-(5-bromotiofen-3-il)propan-2-ola (8,03 g, 36,3 mmol) u metilen hloridu (80 mL) dodat je natrijum-azid (7,08 g, 109 mmol), a zatim trifluoroacetna kiselina (8,0 mL; kap po kap tokom 5-6 minuta). Zgušnjavajuća suspenzija je mešana 1,5 sat pre razređivanja vodom (350 mL) i ekstrakcije etil acetatom (1 x 200 mL). Organski sloj je ispran vodenim NaHCO3(1 x 250 mL), osušen (Na2SO4) i koncentrovan da bi se dobio sirovi azidni proizvod. U mešani rastvor ovog materijala u THF (160 mL) dodata je voda (11 mL), a zatim trifenilfosfin (23,8 g, 90,7 mmol). Reakcija je mešana 2 dana pre koncentrovanja. Dobijeni ostatak je rastvoren u etil acetatu (250 mL) i ekstrahovan 1 N vodenim HCl (4 x 75 mL). Kombinovani ekstrakti su bazifikovani koncentrovanim NH4OH i ekstrahovani etil acetatom (2 x 100 mL). Ovi ekstrakti su, zauzvrat, osušeni (Na2SO4) i koncentrovani. Dobijeno ćilibarno ulje je prečišćeno fleš hromatografijom koristeći hloroform/metanol/amonijak gradijent da bi se dobila smeša 2-(5-bromotiofen-3-il)propan-2-amina i trifenilfosfin oksida (odnos ~70/30) kao viskozno ćilibarno ulje (1,32 g, 17%).
[0517] U mešani rastvor 3-hinuklidinola (3,00 g, 23,6 mmol) u THF (100 mL) dodat je 4-nitrofenil hloroformat (5,94 g, 29,5). Nakon mešanja 4 sata, talog je odfiltriran, ispran sa THF i osušen na vazduhu na friti pod vakuumom. Filter kolač je rastvoren u etil acetatu (150 mL) i ispran vodenim NaHCO3(1 x 150 mL) i vodom (2 x 150 mL). Organski sloj je osušen (Na2SO4) i koncentrovan da bi se dobio sirovi 4-nitrofenil hinuklidin-3-il karbonat proizvod, koji je korišćen u sledećem koraku bez prečišćavanja.
[0518] U mešani rastvor 2-(5-bromotiofen-3-il)propan-2-amina (0,366 g, 1,66 mmol) u THF (10 mL) dodat je 4-nitrofenil hinuklidin-3-il karbonat (0,571 g, 1,95 mmol) i nekoliko granula 4-(dimetilamino)piridina. Smeša je refluksovana preko noći, koncentrovana i podeljena između etil acetata (50 mL) i vodenog NaHCO3(50 mL). Organski sloj je ponovo ispran vodenim NaHCO3(1 x 50 mL), osušen (Na2SO4) i koncentrovan. Dobijena prljavo žuta guma je prečišćena fleš hromatografijom koristeći hloroform/metanol/amonijak gradijent da bi se dobio hinuklidin-3-il (1-(5-bromotiofen-3-il)ciklopropil)karbamat kao prljavo bela čvrsta supstanca (0.305 g, 49%).
[0519] Koristeći opštu proceduru E, hinuklidin-3-il (1-(5-bromotiofen-3-il)ciklopropil)karbamat (0,227 g, 0,742 mmol), 4-fluorofenil boronska kiselina (0,208 g, 1,49 mmol), tricikloheksilfosfin (0,021 g, 0,075 mmol), kalijum-fosfat (0,866, 4,08 mmol) i paladijum-acetat (8,0 mg, 36 µmol) dali su željeno jedinjenje kao čvrsta siva supstanca (0,142 g, 49%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.60-7.45 (m, 2H), 7.24-7.19 (m, 1H), 7.10-6.97 (m, 3H), 5.23 (br s, 1H), 4.72-4.61 (m, 1H), 3.30-3.04 (m, 1H), 3.03-2.25 (m, 5H), 2.09-1.02 (m, 11H)ppm.<13>C NMR (400 MHz, CDCl3) δ 162.3 (d, J = 247.1 Hz), 154.5, 149.8, 143.6, 130.7, 127.4 (d, J= 8.1 Hz), 121.8, 118.9, 115.8 (d, J = 21.6 Hz), 70.8, 55.5, 53.4, 47.3, 46.4, 29.0, 25.4, 24.4, 19.4 ppm. Čistoća: 95.8 % UPLCMS (210 nm & 254 nm); vreme zadržavanja 0.90 min; (M+1) 389.
Priprema U
Primer 74
(S)-hinuklidin-3-il2-(3-(4-fluorofenil)izotiazol-5-il)propan-2-ilkarbamat
[0520] U mešani rastvor 2-(3-(4-fluorofenil)izotiazol-5-il)propan-2-amina (1,21 g, 5,12 mmol) u toluenu dodat je rastvor fozgena u toluenu [~1,9 M] (10,8 mL, 20,5 mmol). Reakcija je zagrevana pod refluksom dva sata i zatim koncentrovana. Ostatak je koevaporisan sa toluenom (2 x 15 mL) da bi se dobio sirovi izocijanatni intermedijer kao zlatno ulje. Ovaj materijal je rastvoren u toluenu (10 mL) i tretiran sa (S)-3-hinuklidionom (0,749 g, 5,89 mmol). Reakcija je zagrevana pod refluksom preko noći i koncentrovana. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom koristeći hloroform/metanol/amonijak gradijent da bi se dobilo željeno jedinjenje kao čvrsta bela supstanca (0,971 g, 49%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.09-8.00 (m, 2H), 7.87 (br s, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.35-7.25 (m, 2H), 4.54-4.45 (m, 1H), 3.14-2.92 (m, 1H), 2.87-2.17 (m, 5H), 1.98-0.98 (m, 11H) ppm.<13>C NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 180.1, 165.6, 162.6 (d, J = 246.4 Hz), 154.7, 131.2 (d, J = 3.0 Hz), 128.7 (d, J = 8.4 Hz), 118.2, 115.7 (d,J = 21.8 Hz), 70.6, 55.3, 52.8, 46.9, 45.9, 29.9, 25.2, 24.2, 19.2 ppm. Čistoća: 100 % UPLCMS (210 nm & 254 nm); vreme zadržavanja 0.82 min; (M+1) 390.
Priprema V
Primer 75
(S)-hinuklidin-3-il 2-(2-(4-fluorofenil)tiazol-4-il)propan-2-ilkarbamat
[0521] U mešani rastvor 4-fluorotiobenzamida (8,94 g, 57,6 mmol) u etanolu (70 mL) dodat je etil 4-hloroacetocetat (7,8 mL, 58 mmol). Reakcija je zagrevana pod refluksom 4 sata, tretirana dodatnom alikvotnom količinom etil 4-hloroacetocetata (1,0 mL, 7,4 mmol) i refluksovana dodatnih 3,5 sata. Reakcija je zatim koncentrovana, a ostatak je podeljen između etil acetata (200 mL) i vodenog NaHCO3(200 mL). Organski sloj je kombinovan sa povratnim ekstraktom vodenog sloja (etil acetat, 1 x 75 mL), osušen (Na2SO4) i koncentrovan. Dobijeno ćilibarno ulje je prečišćeno fleš hromatografijom koristeći heksan/etil acetat gradijent da bi se dobio etil 2-(2-(4-fluorofenil)tiazol-4-il)acetat kao niskotopiva, skoro bezbojna čvrsta supstanca (13,58 g, 89%).
[0522] U mešani rastvor etil 2-(2-(4-fluorofenil)tiazol-4-il)acetata (6,28 g, 23,7 mmol) u DMF (50 mL) dodat je natrijum-hidrid [60% disperzija u mineralnom ulju] (2,84 g, 71,0 mmol). Penasta smeša je mešana 15 minuta pre hlađenja u ledenoj kupki i dodavanja jodometana (4,4 mL, 71 mmol). Reakcija je mešana preko noći, dozvoljavajući kupki za hlađenje da se polako zagreje na sobnu temperaturu. Smeša je zatim koncentrovana, a ostatak je podeljen između etil acetata (80 mL) i vode (200 mL). Organski sloj je ispran drugom porcijom vode (1 x 200 mL), osušen (Na2SO4) i koncentrovan. Dobijeno ćilibarno ulje je prečišćeno fleš hromatografijom koristeći heksan/etil acetat gradijent da bi se dobio etil 2-(2-(4-fluorofenil)tiazol-4-il)-2-metilpropanoat kao bezbojno ulje (4,57 g, 66%).
[0523] U mešani rastvor etil 2-(2-(4-fluorofenil)tiazol-4-il)-2-metilpropanoata (4,56 g, 15,5 mmol) u 1:1:1 THF/etanol/voda (45 mL) dodat je litijum-hidroksid monohidrat (2,93 g, 69,8 mmol). Reakcija je mešana preko noći, koncentrovana i ponovo rastvorena u vodi (175 mL). Rastvor je ispran etrom (1 x 100 mL), zakiseljen dodavanjem 1,0 N HCl (80 mL) i ekstrahovan etil acetatom (2 x 70 mL). Kombinovani ekstrakti su osušeni (Na2SO4) i koncentrovani da bi se dobila 2-(2-(4-fluorofenil)tiazol-4-il)-2-metilpropanoinska kiselina kao čvrsta bela supstanca (4,04 g, 98%). Ovaj materijal je korišten u sledećem koraku bez prečišćavanja.
[0524] U mešani i ohlađeni (0 °C) rastvor 2-(2-(4-fluorofenil)tiazol-4-il)-2-metilpropanoinske kiseline (4,02 g, 15,2 mmol) u THF (100 mL) dodat je trietilamin (4,2 mL, 30 mmol), a zatim izobutil hloroformat (3,0 mL, 23 mmol). Reakcija je mešana na hladnom još 1 sat pre dodavanja rastvora natrijum-azida (1,98 g, 30,5 mmol) u vodi (20 mL). Reakcija je mešana preko noći, dozvoljavajući kupki za hlađenje da se polako zagreje na sobnu temperaturu. Smeša je zatim razređena vodom (100 mL) i ekstrahovana etil acetatom (2 x 60 mL). Kombinovani ekstrakti su isprani vodenim NaHCO3(1 x 150 mL) i slanim rastvorom (1 x 100 mL), osušeni (Na2SO4) i koncentrovani. Nakon koevaporacije sa toluenom (2 x 50 mL), dobijeni prljavo bela čvrsta supstanca je rastvorena u toluenu (100 mL) i refluksovana 4 sata. (S)-3-hinuklidin-3-ol (3,87 g, 30,4 mmol) je zatim dodat i refluks je nastavljen preko noći. Reakcija je koncentrovana, a ostatak je podeljen između etil acetata (100 mL) i vodenog NaHCO3(150 mL). Organski sloj je ispran vodom (1 x 150 mL), osušen (Na2SO4) i koncentrovan. Dobijena prljavo bela čvrsta supstanca je prečišćena fleš hromatografijom koristeći hloroform/metanol/amonijak gradijent da bi se dobilo željeno jedinjenje kao čvrsta bela supstanca (4,34 g, 73%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.96-7.88 (m, 2H), 7.16-7.04 (m, 3H), 5.55 (br s, 1H), 4.69-4.62 (m, 1H), 3.24-3.11 (m, 1H), 3.00-2.50 (m, 5H), 2.01-1.26 (m, 11H) ppm.<13>C NMR (400 MHz, CDCl3) δ 166.4, 165.1, 163.8 (d, J= 250.3 Hz), 162.9, 155.0, 130.1 (d, J = 3.3 Hz), 128.4 (d, J = 8.5 Hz), 115.9 (d, J = 22.3 Hz), 112.5, 71.2, 55.7, 54.2, 47.5, 46.5, 28.0, 25.5, 24.7, 19.6 ppm. Čistoća: 100 % UPLCMS (210 nm & 254 nm); vreme zadržavanja 0.83 min; (M+1) 390.
Priprema W
Primer 76
(S)-hinuklidin-3-il 2-(4-(4-fluorofenil)tiazol-2-il)propan-2-ilkarbamat
[0525] U mešani rastvor etil 3-amino-3-tioksopropanoata (20,00g, 135,9 mmol) u etanolu (120 mL) dodat je 2-bromo-4'-fluoroacetofenon (29,49 g, 135,9 mmol). Smeša je refluksovana 1 sat, koncentrovana i podeljena između etil acetata (300 mL) i vodenog NaHCO3(400 mL). Organski sloj je kombinovan sa povratnim ekstraktom vodenog sloja (etil acetat, 1 x 100 mL), osušen (Na2SO4) i koncentrovan. Dobijena svetlo smeđa čvrsta supstanca je prečišćena fleš hromatografijom koristeći heksan/etil acetat gradijent da bi se dobio etil 2-(4-(4-fluorofenil)tiazol-2-il)acetat kao prljavo bela čvrsta supstanca (29,92 g, 83%).
[0526] U mešani i ohlađeni (-78 °C) rastvor etil 2-(4-(4-fluorofenil)tiazol-2-il)acetata (10,00 g, 37,69 mmol) u THF (250 mL) dodat je rastvor kalijum t-butoksida u THF [1,0 M] (136 mL, 136 mmol), kap po kap tokom 15 minuta, nakon čega je usledilo dodavanje 18-kruna-6 (1,6 mL, 7,5 mmol). Nakon dodatnih 30 minuta na -78 °C, jodometan (8,5 mL) je dodat kap po kap tokom 5 minuta. Reakcija je mešana na hladnom još 2 sata pre ulivanja u vodu (450 mL) i ekstrakcije etil acetatom (2 x 150 mL). Kombinovani ekstrakti su isprani slanim rastvorom (1 x 200 mL), osušeni (Na2SO4) i koncentrovani. Dobijeno smeđe ulje je prečišćeno fleš hromatografijom koristeći heksan/etil acetat gradijent da bi se dobio etil 2-(4-(4-fluorofenil)tiazol-2-il)-2-metilpropanoat kao svetlo ćilibarno ulje (8,64 g, 78%).
[0527] U mešani rastvor etil 2-(4-(4-fluorofenil)tiazol-2-il)-2-metilpropanoata (0,900 g, 3,07 mmol) u 1:1:1 THF/etanol/voda (15 mL) dodat je litijum-hidroksid monohidrat (0,451 g, 10,7 mmol). Nakon mešanja preko noći, reakcija je koncentrovana i ponovo rastvorena u vodi (80 mL). Rastvor je ispran etrom (1 x 50 mL), zakiseljen dodavanjem 1 N HCl (15 mL) i ekstrahovan etil acetatom (2 x 50 mL). Kombinovani ekstrakti su osušeni (Na2SO4) i koncentrovani da bi se dobila 2-(4-(4-fluorofenil)tiazol-2-il)-2-metilpropanoinska kiselina kao svetlo zlatna čvrsta supstanca (0,808 g, 99%).
[0528] U mešani i ohlađeni (0 °C) rastvor 2-(4-(4-fluorofenil)tiazol-2-il)-2-metilpropanoinske kiseline (0,784 g, 2,96 mmol) u THF (25 mL) dodat je trietilamin (0,82 mL, 5,9 mmol), a zatim izobutil hloroformat (0,58 mL, 4,4 mmol). Reakcija je mešana na hladnom još 1 sat pre dodavanja rastvora natrijum-azida (0,385 g, 5,92 mmol) u vodi (7 mL). Reakcija je mešana preko noći, dozvoljavajući kupki za hlađenje da se polako zagreje na sobnu temperaturu. Smeša je zatim razređena vodom (100 mL) i ekstrahovana etil acetatom (2 x 60 mL). Kombinovani ekstrakti su isprani vodenim NaHCO3(1 x 150 mL) i slanim rastvorom (1 x 100 mL), osušeni (Na2SO4) i koncentrovani. Nakon koevaporacije sa toluenom (2 x 30 mL), dobijeni prljavo bela čvrsta supstanca je rastvoren u toluenu (25 mL) i refluksovan 4 sata. (S)-3-hinuklidin-3-ol (0,753 g, 5,92 mmol) je zatim dodat i refluks je nastavljen 3 sata. Reakcija je koncentrovana, a ostatak je prečišćen fleš hromatografijom koristeći hloroform/metanol/amonijak gradijent da bi se dobilo željeno jedinjenje kao čvrsta bela supstanca (0,793 g, 69%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.90-7.81 (m, 2H), 7.32 (s, 1H), 7.14-7.05 (m, 2H), 5.76 (br s, 1H), 4.72-4.65 (m, 1H), 3.26-3.10 (m, 1H), 3.03-2.37 (m, 5H), 2.05-1.23 (m, 11H) ppm.<13>C NMR (400 MHz, CDCl3) δ 177.6, 162.6 (d, J = 248.4 Hz), 154.8, 153.6, 130.8 (d, J = 3.2 Hz), 128.1 (d, J = 8.1 Hz), 115.9 (d, J = 21.7 Hz), 112.2, 71.6, 55.7, 47.4, 46.5, 29.1, 25.4, 24.7, 19.6 ppm. Čistoća: 100 % UPLCMS (210 nm & 254 nm); vreme zadržavanja 0.82 min; (M+1) 390.
Primer 77
hinuklidin-3-il 1-(4-(benziloksi)fenil)ciklopropilkarbamat
[0529] Smeša 4-cijanofenola (5,0 g, 42 mmol), benzilbromida (8,6 g, 50 mmol), kalijumkarbonata (11,6 g, 84,0 mmol) u DMF (40 mL) je mešana 3 sata na 100 °C. Talog je odfiltriran, a filtrat je razređen sa EtOAc i ispran vodom. Organski sloj je osušen (Na2SO4) i koncentrovan. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni sa silika gelom (elucija petrolej etrom/EtOAc od 20/1 do 5/1) da bi se dobio 4-(benziloksi)benzonitril kao čvrsta bela supstanca (8,1 g, 92%).
[0530] Koristeći opštu proceduru G, 4-(benziloksi)benzonitril (6,00 g, 28,7 mmol) je konvertovan u odgovarajući 1-(4-(benziloksi)fenil)ciklopropanamin kao žuta čvrsta supstanca (1,8 g, 26%).
[0531] Koristeći opštu proceduru A, 1-(4-(benziloksi)fenil)ciklopropanamin (600 mg, 2,51 mmol) i hinuklidin-3-ol dali su željeno jedinjenje kao viskozno ulje (170 mg, 17%).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.34 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 7.30 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 7.25 (t, J = 7.0 Hz, 1H), 7.16 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.07 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 6.83 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 5.50 (br s, 0.6H), 5.40 (br s, 0.4H), 4.96 (s, 2H), 4.64 (m, 1H), 3.20-3.15 (m, 1H), 2.88-2.50 (m, 5H), 1.95-1.05 (m, 9H) ppm.<13>C NMR (125 MHz, CDCl3) δ 156.6, 154.8, 136.0, 134.2, 127.6, 126.9, 126.4, 125.4, 113.7, 70.0, 69.0, 54.5, 46.3, 45.4, 34.2, 24.3, 23.3, 18.3, 15.8 ppm. Čistoća: > 90 % LCMS (214 nm & 254 nm); vreme zadržavanja 1.57 min; (M+1) 393.
Primer 78
hinuklidin-3-il bifenil-3-ilmetilkarbamat
[0532] U mešani i ohlađeni (0 °C) rastvor trifozgena (0,80 g, 2,7 mmol) u THF (20 mL) dodata je, kap po kap, smeša (3-bromofenil)metanamina (1,0 g, 5,4 mmol) i trietilamina (1,08 g, 10,7 mmol) u THF (30 mL) tokom 2 sata. Nakon što je dodavanje završeno, smeša je refluksovana 1 sat i zatim ohlađena na sobnu temperaturu. Hinuklidin-3-ol (1,40 g, 10,7 mmol) je dodat, a smeša je refluksovana 18 sati. Rastvarač je uklonjen in vacuo, a ostatak je rastvoren u EtOAc, ispran vodom, osušen preko Na2SO4, i koncentrovan. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni sa silika gelom (elucija EtOAc/metanolom = 10/1) da bi se dobio hinuklidin-3-il 3-bromobenzilkarbamat kao bezbojna tečnost (0,68 g, 37%).
[0533] Koristeći opštu proceduru E, hinuklidin-3-il 3-bromobenzilkarbamat (237 mg, 0,700 mmol), fenilboronska kiselina (171 mg, 1,4 mmol) i [PdCl2(pddf)]CH2Cl2dali su željeno jedinjenje kao viskoznu polučvrstu supstancu (110 mg, 47 %).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.57 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 7.50 (m, 2H), 7.62-7.38 (m, 3H), 7.35 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.28 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.32-5.17 (m, 1H), 7.78 (m, 1H), 4.42 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 3.26 (m, 1H), 2.95-2.65 (m, 5H), 2.05 (m, 1H), 1.84 (m, 1H), 1.70 (m, 1H), 1.58 (m, 1H), 1.42 (m, 1H) ppm.<13>C NMR (125 MHz, CDCl3) δ 155.2, 140.7, 139.8, 138.0, 128.1, 127.8, 126.4, 126.1, 125.5, 125.4, 125.3, 70.1, 54.4, 46.2, 45.3, 44.1, 24.3, 23.1, 18.2 ppm. Čistoća: > 98 % LCMS (214 nm & 254 nm); vreme zadržavanja 1.44 min; (M+1) 337.
Primer 79
hinuklidin-3-il 3-(pirimidin-5-il)benzilkarbamat
[0534] Koristeći opštu proceduru E, hinuklidin-3-il 3-bromobenzilkarbamat (203 mg, 0,600 mmol), pirimidin-5-ilboronska kiselina (149 mg, 1,2 mmol) i [PdCl2(pddf)]CH2Cl2dali su željeno jedinjenje kao viskoznu polučvrstu supstancu (110 mg, 54%).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 9.20 (s, 1H), 8.94 (s, 2H), 7.51 (m, 3H), 7.40 (m, 1H), 5.62 (m, 1H), 4.81 (m, 1H), 4.50-4.40 (m, 2H), 3.30 (m, 1H), 2.97-2.65 (m, 5H), 2.12 (m, 1H), 1.92-1.82 (m, 1H), 1.79-1.69 (m, 1H), 1.65-1.56 (m, 1H), 1.50-1.42 (m, 1H) ppm.<13>C NMR (125 MHz, CDCl3) δ 157.6, 156.2, 154.9, 140.1, 134.7, 134.1, 129.8, 128.2, 126.2, 70.9, 55.2, 47.2, 46.2, 44.8, 25.2, 23.8, 19.0 ppm. Čistoća: > 95 % LCMS (214 nm & 254 nm); vreme zadržavanja 1.22 min; (M+1) 339.
Primer 80
hinuklidin-3-il 3-(benziloksi)benzilkarbamat
[0535] Smeša 2-(3-hidroksifenil)sirćetne kiseline (0,6 g, 3,95 mmol), benzil bromida (0,710 g, 4,14 mmol), kalijum-hidroksida (0,550 g, 9,87 mmol), KI (13 mg, 0,079 mmol) u THF (20 mL) je refluksovana 18 sati. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je rastvoren u 50 mL vode i ekstrahovan etrom. Vodeni sloj je zakiseljen vodenim 1N HCl i beli talog koji se formirao je odfiltriran da bi se dobila 2-(3-(benziloksi)fenil)sirćetna kiselina kao siva čvrsta supstanca (0,87 g, 91%).
[0536] Koristeći opštu proceduru H, 2-(3-(benziloksi)fenil)sirćetna kiselina (242 mg, 1,00 mmol) i hinuklidin-3-ol dali su željeno jedinjenje kao viskoznu polučvrstu supstancu (200 mg, 55%).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.42 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 7.38 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 7.32 (t, J = 7.0 Hz, 1H), 7.24 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 6.92 (s, 1H), 6.88 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 5.30 (m, 1H), 5.05 (s, 2H), 4.75 (m, 1H), 4.32 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 3.23 (m, 1H), 2.93-2.60 (m, 5H), 2.08-1.96 (m, 1H), 1.88-1.75 (m, 1H), 1.72-1.62 (m, 1H), 1.60-1.50 (m, 1H), 1.42-1.34 (m, 1H) ppm.<13>C NMR (125 MHz, CDCl3) δ 159.1, 156.3, 140.2, 136.8, 129.7, 128.6, 128.0, 127.5, 120.0, 114.1, 113.6, 71.3, 70.0, 55.5, 47.3, 46.4, 45.0, 25.4, 24.3, 19.3 ppm. Čistoća: > 95 % LCMS (214 nm & 254 nm); vreme zadržavanja 1.51 min; (M+1) 367
Primer 81
hinuklidin-3-il 4-fenoksibenzilkarbamat
[0537] Koristeći opštu proceduru H, 2-(3-fenoksifenil)sirćetna kiselina (228 mg, 1,00 mmol) i hinuklidin-3-ol dali su željeno jedinjenje kao viskoznu polučvrstu supstancu (70 mg, 20%).
<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.29-7.18 (m, 3H), 7.03 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 6.96-6.90 (m, 3H), 6.86 (s, 1H), 6.82 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 5.40-5.15 (m, 1H), 4.70 (m, 1H), 4.25 (d, J= 6.0 Hz, 2H), 3.18 (m, 1H), 2.90-2.60 (m, 5H), 2.03-1.92 (m, 1H), 1.82-1.74 (m, 1H), 1.68-1.60 (m, 1H), 1.57-1.45 (m, 1H), 1.40-1.32 (m, 1H) ppm.<13>C NMR (125 MHz, CDCl3) δ 156.6, 155.9, 155.1, 139.6, 129.0, 128.8, 122.4, 121.1, 118.0, 116.7, 69.7, 54.1, 46.1, 45.2, 43.7, 24.2, 22.7, 18.0 ppm. Čistoća: 100 % LCMS (214 nm & 254 nm); vreme zadržavanja 1.50 min; (M+1) 353.
Primer 82
hinuklidin-3-il 3-izopropoksibenzilkarbamat
[0538] Smeša koja sadrži 2-(3-hidroksifenil)sirćetnu kiselinu (0,800 g, 5,26 mmol), 2-bromopropan (0,971 g, 7,89 mmol), kalijum-hidroksid (0,740 g, 13,2 mmol), KI (18 mg, 0,11 mmol) u 20 mL EtOH je refluksovana 18 sati. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je rastvoren u 50 mL vode i ekstrahovan etrom. Vodeni sloj je zakiseljen vodenim 1N HCl i ekstrahovan sa EtOAc. Organski slojevi su osušeni (Na2SO4) i koncentrovani da bi se dobio ostatak koji je prečišćen hromatografijom na koloni sa silika gelom (petrolej etar/EtOAc 4:1) da bi se dobila 2-(3-(benziloksi)fenil)sirćetna kiselina kao čvrsta bela supstanca (0,45 g, 44%).
Koristeći opštu proceduru H, 2-(3-izopropoksifenil)sirćetna kiselina (291 mg, 1,50 mmol) i hinuklidin-3-ol dali su željeno jedinjenje kao viskoznu polučvrstu supstancu (120 mg, 25%).
<1>H-NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.23 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 6.86-6.77 (m, 3H), 5.16-5.00 (m, 1H), 4.78 (m, 1H), 4.55 (m, 1H), 4.32 (d, J= 5.0 Hz, 2H), 3.26 (m, 1H), 2.95-2.70 (m, 5H), 2.10-2.05 (m, 1H), 1.90-1.80 (m, 1H), 1.75-1.65 (m, 1H), 1.63-1.53 (m, 1H), 1.47-1.37 (m, 1H), 1.33 (d, J = 5.5 Hz, 6H) ppm.<13>C NMR (125 MHz, CDCl3) δ 158.1, 156.2, 140.1, 129.7, 119.6, 115.2, 114.6, 71.0, 69.8, 55.3, 47.2, 46.3, 45.0, 25.3,
[0539] 24.1, 22.0, 19.2 ppm. Čistoća: > 90 % LCMS (214 nm & 254 nm); vreme zadržavanja 1.42 min; (M+1) 319.
Primer 83
hinuklidin-3-il 3-izobutoksibenzilkarbamat
[0540] Smeša koja sadrži 2-(3-hidroksifenil)sirćetnu kiselinu (1,0 g, 6,6 mmol), 1-bromo-2-metilpropan (1,08 g, 7,91 mmol), kalijum-hidroksid (0,920 g, 16,4 mmol), KI (22 mg, 0,13 mmol) u EtOH (20 mL) je refluksovana 18 sati. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je rastvoren u 50 mL vode i ekstrahovan etrom. Vodeni sloj je zakiseljen vodenim 1N HCl i ekstrahovan sa EtOAc. Organski slojevi su osušeni (Na2SO4) i koncentrovani da bi se dobio ostatak koji je prečišćen hromatografijom na koloni sa silika gelom (petrolej etar/EtOAc 4:1) da bi se dobila 2-(3-(benziloksi)fenil)sirćetna kiselina kao čvrsta bela supstanca (0,42 g, 31%).
[0541] Koristeći opštu proceduru H, 2-(3-izobutoksifenil)sirćetna kiselina (208 mg, 1,00 mmol) i hinuklidin-3-ol dali su željeno jedinjenje kao viskoznu polučvrstu supstancu (130 mg, 39%).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.23 (t, J= 7.5 Hz, 1H), 6.86-6.76 (m, 3H), 5.35-5.10 (m, 1H), 4.77 (m, 1H), 4.31 (d, J = 5.5 Hz, 2H), 3.69 (d, J = 6.5 Hz, 2H), 3.26 (m, 1H), 2.95-2.70 (m, 5H), 2.10-2.00 (m, 2H), 1.88-1.80 (m, 1H), 1.75-1.63 (m, 1H), 1.62-1.52 (m, 1H), 1.45-1.36 (m, 1H), 1.01 (d, J = 6.5 Hz, 6H) ppm.<13>C NMR (125 MHz, CDCl3) δ 159.6, 156.1, 139.9, 129.7, 119.6, 113.9, 113.4, 74.4, 70.9, 55.3, 47.2, 46.3, 45.1, 28.3, 25.3, 23.9, 19.3, 19.1 ppm. Čistoća: > 95 % LCMS (214 nm & 254 nm); vreme zadržavanja 1.50 min; (M+1) 333.
Primer 84
hinuklidin-3-il 3-(ciklopropilmetoksi)benzilkarbamat
[0542] Smeša koja sadrži 2-(3-hidroksifenil)sirćetnu kiselinu (1,0 g, 6,6 mmol), (bromometil)ciklopropan (0,97 g, 7,2 mmol), kalijum-hidroksid (0,920 g, 16,4 mmol), KI (22 mg, 0,13 mmol) u EtOH (20 mL) je refluksovana 18 sati. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom, a ostatak je rastvoren u 50 mL vode i ekstrahovan etrom. Vodeni sloj je zakiseljen vodenim 1N HCl i ekstrahovan sa EtOAc. Organski slojevi su osušeni (Na2SO4) i koncentrovani da bi se dobio ostatak koji je prečišćen hromatografijom na koloni sa silika gelom (petrolej etar/EtOAc 4:1) da bi se dobila 2-(3-(ciklopropilmetoksi)fenil)sirćetna kiselina kao čvrsta bela supstanca (0,80 g, 59%).
[0543] Koristeći opštu proceduru H, 2-(3-(ciklopropilmetoksi)fenil)sirćetna kiselina (300 mg, 1,50 mmol) i hinuklidin-3-ol dali su željeno jedinjenje kao viskozno ulje (90 mg, 19%).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.24 (t, J= 7.5 Hz, 1H), 6.88-6.78 (m, 3H), 5.13-4.95 (m, 1H), 4.74 (m, 1H), 4.33 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 3.79 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 3.23 (m, 1H), 2.93-2.63 (m, 5H), 2.04-1.98 (m, 1H), 1.85-1.76 (m, 1H), 1.72-1.60 (m, 1H), 1.58-1.50 (m, 1H), 1.41-1.22 (m, 2H), 0.68-0.62 (m, 2H), 0.37-0.32 (m, 2H) ppm.<13>C NMR (125 MHz, CDCl3) δ 158.2, 155.5, 139.3, 128.6, 118.6, 112.8, 112.3, 71.7, 70.4, 54.5, 46.2, 45.3, 43.9, 24.4, 23.5, 18.5, 9.3, 2.2 ppm. Čistoća: > 95 % LCMS (214 nm & 254 nm); vreme zadržavanja 1.44 min; (M+1) 331.
Priprema X
Primer 85
N-(2-(bifenil-4-il)propan-2-il)-2-(hinuklidin-3-il)acetamid
[0544] U rastvor 2-(hinuklidin-3-il)sirćetne kiseline hidrohlorida (0,97 g, 4,7 mmol) u DMF (30 mL) dodati su HATU (1,79 g, 4,72 mmol), 2-(4-bromofenil)propan-2-amin (1,0 g, 4,7 mmol) i trietilamin (3,9 mL, 28 mmol). Dobijena smeša je mešana na 60 °C 16 sati. Smeša je koncentrovana in vacuo, razređena sa EtOAc i isprana slanim rastvorom. Organski sloj je osušen preko Na2SO4i isparen da bi se dobio sirovi proizvod, koji je prečišćen hromatografijom na koloni sa silika gelom (EtOAc/metanol 50/1 do 3/1) da bi se dobio N-(2-(4-bromofenil)propan-2-il)-2-(hinuklidin-3-il)acetamid kao žuta čvrsta supstanca (1,3 g, 76%).
[0545] Koristeći opštu proceduru E, N-(2-(4-bromofenil)propan-2-il)-2-(hinuklidin-3-il)acetamid (200 mg, 0,550 mmol), fenilboronska kiselina (134 mg, 1,00 mmol) i [PdCl2(pddf)]CH2Cl2 dali su željeno jedinjenje kao viskozno smeđe ulje (58 mg, 32%).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.58-7.50 (m, 4H), 7.44-7.37 (m, 4H), 7.31 (t, J = 7.0 Hz, 1H), 6.50 (s, 1H), 3.16 (m, 1H), 3.02 (m, 1H), 2.92-2.78 (m, 3H), 2.60 (m, 1H), 2.40-2.20 (m, 3H), 1.47-1.90 (m, 11H) ppm.<13>C NMR (125 MHz, CDCl3) δ 170.5, 146.1, 140.7, 139.2, 128.8, 127.2, 127.0125.2, 55.6, 53.1, 46.8, 46.2, 40.3, 31.7, 29.3, 29.2, 26.0, 24.4, 19.7 ppm.
Čistoća: 100 % LCMS (214 nm & 254 nm); vreme zadržavanja 1.55 min; (M+1) 363.
Primer 86
hinuklidin-3-il bifenil-3-ilkarbamat
[0546] U rastvor hinuklidin-3-ola (635 mg, 5,00 mmol) u THF (15 mL) dodat je NaH [60% disperzija u mineralnom ulju] (260 mg, 6,50 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je mešana 15 minuta i 3-bromofenil izocijanat (990 mg, 5,00 mmol) je dodat uz mešanje. Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 18 sati, ugašena slanim rastvorom i ekstrahovana sa EtOAc. Organski slojevi su kombinovani, osušeni preko Na2SO4i koncentrovani. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni sa silika gelom (elucija EtOAc/metanol 3:1) da bi se dobio hinuklidin-3-il 3-bromofenilkarbamat kao čvrsta bela supstanca (0,70 g, 43%).
[0547] Koristeći opštu proceduru E, gore navedeni karbamat intermedijer (130 mg, 0,402 mmol), fenilboronska kiselina (72 mg, 0,6 mmol) i [PdCl2(pddf)]CH2Cl2 dali su željeno jedinjenje kao čvrstu belu supstancu (75 mg, 58%).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.67 (br s, 1H), 7.59 (d, J = 7.5 Hz, 2H), 7.43 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 7.41-7.28 (m, 4H), 6.77 (br s, 1H), 4.85 (m, 1H), 3.30 (m, 1H), 2.98-2.75 (m, 5H), 2.12 (m, 1H),1.93-1.68 (m, 2H), 1.64-1.55 (m, 1H), 1.47-1.40 (m, 1H) ppm.<13>C NMR (125 MHz, CDCl3) δ 153.3, 142.3, 140.7, 138.3, 129.5, 128.8, 127.5, 127.2, 122.3, 117.4, 72.1, 55.4, 47.4, 46.5, 30.9, 25.4, 24.5, 19.5 ppm. Čistoća: 100 % LCMS (214 nm & 254 nm); vreme zadržavanja 1.53 min; (M+1) 323.
Primer 87
hinuklidin-3-il 2'-metoksibifenil-3-ilkarbamat
[0548] Koristeći opštu proceduru E, hinuklidin-3-il 3-bromofenilkarbamat, 2-metoksifenilboronska kiselina i [PdCl2(pddf)]CH2Cl2dali su željeno jedinjenje kao čvrstu belu supstancu (75 mg, 58%).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.49 (br s, 1H), 7.41 (br s, 1H), 7.37-7.28 (m, 3H), 7.23 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.04-6.94 (m, 3H), 4.83 (m, 1H), 3.80 (s, 3H), 3.29 (m, 1H), 2.97-2.70 (m, 5H), 2.10 (m, 1H), 1.91-1.82 (m, 1H), 1.74-1.65 (m, 1H), 1.62-1.53 (m, 1H), 1.46-1.37 (m, 1H) ppm.<13>C NMR (125 MHz, CDCl3) δ 156.4, 153.4, 139.4, 137.6, 130.9, 130.2, 128.8, 128.6, 124.8, 120.8, 119.9, 117.3, 111.2, 72.0, 55.6, 55.4, 47.4, 46.5, 25.4, 24.5, 19.5 ppm. Čistoća: > 95 % LCMS (214 nm & 254 nm); vreme zadržavanja 1.52 min; (M+1) 353.
Primer 88
hinuklidin-3-il 2'-etilbifenil-3-ilkarbamat
[0549] Koristeći opštu proceduru E, hinuklidin-3-il 3-bromofenilkarbamat, 2-etilfenilboronska kiselina i [PdCl2(pddf)]CH2Cl2dali su željeno jedinjenje kao čvrstu belu supstancu (110 mg, 78%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.42-7.28 (m, 5H), 7.25-7.16 (m, 2H), 7.03-7.00 (m, 1H), 6.88 (br s, 1H), 4.83 (m, 1H), 3.27 (m, 1H), 2.98-2.70 (m, 5H), 2.61 (q, J= 7.6 Hz, 2H), 2.08 (m, 1H), 1.92-1.80 (m, 1H), 1.75-1.65 (m, 1H), 1.63-1.55 (m, 1H), 1.46-1.37 (m, 1H), 1.10 (t, J = 7.6 Hz, 3H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 152.1, 141.7, 140.4, 139.9, 136.4, 128.6, 127.5, 127.4, 126.4, 124.3, 123.2, 118.4, 115.9, 71.0, 54.3, 46.2, 45.3, 25.0, 24.2, 23.4, 18.3, 14.5 ppm. Čistoća: 100 % LCMS (214 nm & 254 nm); vreme zadržavanja 1.61 min; (M+1) 351.
Primer 89
hinuklidin-3-il 3'-metoksibifenil-3-ilkarbamat
[0550] Koristeći opštu proceduru E, hinuklidin-3-il 3-bromofenilkarbamat, 3-metoksifenilboronska kiselina i [PdCl2(pddf)]CH2Cl2dali su željeno jedinjenje kao čvrstu belu supstancu (100 mg, 71%).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.63 (br s, 1H), 7.40-7.27 (m, 4H), 7.17 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.11 (m, 1H), 7.07 (br s, 1H), 6.89 (dd, J = 8.0, 2.0 Hz, 1H), 4.85 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.30 (m, 1H), 2.99-2.70 (m, 5H), 2.12 (m, 1H), 1.92-1.84 (m, 1H), 1.75-1.68 (m, 1H), 1.62-1.55 (m, 1H), 1.48-1.40 (m, 1H) ppm.<13>C NMR (125 MHz, CDCl3) δ 159.9, 153.4, 142.3, 142.1, 138.4, 129.8, 129.4, 122.3, 119.7, 117.7, 112.9, 112.8, 72.0, 55.4, 55.3, 47.4, 46.5, 25.4, 24.5, 19.5 ppm. Čistoća: > 97 % LCMS (214 nm & 254 nm); vreme zadržavanja 1.52 min; (M+1) 353
Primer 90
hinuklidin-3-il 3'-etilbifenil-3-ilkarbamat
[0551] U rastvor 1-bromo-3-etilbenzena (370 mg, 2,00 mmol) u 5 mL 1,4-dioksana, dodati su bis(pinakolato)diboron (609 mg, 2,40 mmol), CH3COOK (589 mg, 6,02 mmol) i [PdCl2(pddt)]CH2Cl2(75 mg, 0,09 mmol). Smeša je mešana 5 sati na 80 °C. Smeša je ohlađena, razređena vodom i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani ekstrakti su osušeni (Na2SO4) i koncentrovani da bi se dobio sirovi boronat (410 mg, >100%), koji je korišćen bez prečišćavanja u sledećem koraku.
[0552] Koristeći opštu proceduru E, hinuklidin-3-il 3-bromofenilkarbamat, 3-etilfenilboronska kiselina i [PdCl2(pddf)]CH2Cl2dali su željeno jedinjenje kao čvrstu belu supstancu (78 mg, 56%).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.64 (br s, 1H), 7.43-7.27 (m, 6H), 7.24 (br s, 1H), 7.18 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.85 (m, 1H), 3.30 (m, 1H), 2.99-2.73 (m, 5H), 2.70 (q, J = 7.5 Hz, 2H), 2.12 (m, 1H), 1.92-1.84 (m, 1H), 1.75-1.67 (m, 1H), 1.62-1.55 (m, 1H), 1.48-1.38 (m, 1H), 1.27 (t, J = 7.5 Hz, 3H) ppm.<13>C NMR (125 MHz, CDCl3) δ 153.5, 144.8, 142.4, 140.8, 138.4, 129.4, 128.8, 127.1, 126.8, 124.6, 122.3, 117.4, 72.1, 55.4, 47.4, 46.5, 29.0, 25.4, 24.5, 19.5, 15.7 ppm. Čistoća: > 98 % LCMS (214 nm & 254 nm); vreme zadržavanja 1.66 min; (M+1) 351.
Primer 91
hinuklidin-3-il bifenil-2-ilkarbamat
[0553] U rastvor hinuklidin-3-ola (382 mg, 3,00 mmol) u THF (15 mL) dodat je NaH [60% disperzija u mineralnom ulju] (156 mg, 3,90 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je mešana 15 minuta i 2-bromofenil izocijanat (594 mg, 3,00 mmol) je dodat uz mešanje. Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 18 sati, ugašena slanim rastvorom i ekstrahovana sa EtOAc. Organski slojevi su kombinovani, osušeni preko Na2SO4i koncentrovani. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni sa silika gelom (elucija EtOAc/metanol 3:1) da bi se dobio proizvod hinuklidin-3-il 2-bromofenilkarbamat kao viskozno ulje (0,80 g, 82%).
[0554] Koristeći opštu proceduru E, hinuklidin-3-il 2-bromofenilkarbamat (130 mg, 0,400 mmol), fenilboronska kiselina (96 mg, 0,8 mmol) i [PdCl2(pddf)]CH2Cl2dali su željeno jedinjenje kao čvrstu belu supstancu (112 mg, 87%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.07 (br s, 1H), 7.55-7.33 (m, 6H), 7.25-7.21 (dd, J = 7.6 & 1.6 Hz, 1H), 7.43 (td, J= 8.0, 1.2 Hz, 1H), 6.65 (br s, 1H), 4.78 (m, 1H), 3.24 (m, 1H), 2.90-2.68 (m, 5H), 2.04 (m, 1H),1.80-1.62 (m, 2H), 1.61-1.50 (m, 1H), 1.41-1.30 (m, 1H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 151.2, 135.9, 132.5, 129.5, 128.0, 127.0, 126.9, 126.2, 125.7, 121.4, 117.9, 69.9, 53.1, 45.1, 44.3, 23.1, 22.3, 17.2 ppm. Čistoća: 100 % LCMS (214 nm & 254 nm); vreme zadržavanja 1.47 min; (M+1) 323.
Primer 92
hinuklidin-3-il 2'-metoksibifenil-2-ilkarbamat
[0555] Koristeći opštu proceduru E, hinuklidin-3-il 2-bromofenilkarbamat, 2-metoksifenilboronska kiselina i [PdCl2(pddf)]CH2Cl2dali su željeno jedinjenje kao čvrstu belu supstancu (102 mg, 72%).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.95 (br s, 1H), 7.42 (t, J= 7.5 Hz, 1H), 7.37 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.25 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 7.15 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.09 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.04 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.72 (br s, 1H), 4.76 (m, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.23 (m, 1H), 2.90-2.64 (m, 5H), 1.98-2.08 (m, 1H), 1.81-1.63 (m, 2H), 1.60-1.50 (m, 1H), 1.42-1.30 (m, 1H) ppm.<3>C NMR (125 MHz, CDCl3) δ 156.2, 153.8, 135.6, 132.1, 130.9, 129.7, 128.3, 127.1, 123.8, 121.5, 111.3, 71.8, 55.7, 55.5, 47.3, 46.5, 25.3, 24.5, 19.4 ppm. Čistoća: 100 % LCMS (214 nm & 254 nm); vreme zadržavanja 1.48 min; (M+1) 353.
Primer 93
hinuklidin-3-il 2'-etilbifenil-2-ilkarbamat
[0556] Koristeći opštu proceduru E, hinuklidin-3-il 2-bromofenilkarbamat, 2-etilfenilboronska kiselina i [PdCl2(pddf)]CH2Cl2dali su željeno jedinjenje kao čvrstu belu supstancu (71 mg, 51%).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.11 (br s, 1H), 7.43-7.34 (m, 3H), 7.33-7.28 (m, 1H), 7.18-7.08 (m, 3H), 6.24 (br s, 1H), 4.75 (m, 1H), 3.23 (m, 1H), 2.85-2.65 (m, 5H), 2.40 (m, 2H), 2.02 (m, 1H), 1.73-1.62 (m, 2H), 1.61-1.50 (m, 1H), 1.40-1.30 (m, 1H), 1.05 (m, 3H) ppm.<13>C NMR (125 MHz, CDCl3) δ 153.3, 142.9, 136.4, 135.3, 130.6, 130.3, 130.1, 129.0, 128.7, 128.4, 126.4, 123.0, 119.1, 72.1, 55.2, 47.3, 46.4, 26.0, 25.3, 24.5, 19.3, 15.2 ppm. Čistoća: > 98 % LCMS (214 nm & 254 nm); vreme zadržavanja 1.55 min; (M+1) 351.
Primer 94
hinuklidin-3-il 3'-metoksibifenil-2-ilkarbamat
[0557] Koristeći opštu proceduru E, hinuklidin-3-il 2-bromofenilkarbamat, 3-metoksifenilboronska kiselina i [PdCl2(pddf)]CH2Cl2dali su željeno jedinjenje kao čvrstu belu supstancu (120 mg, 85%).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.08 (br s, 1H), 7.40 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.36 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.23 (dd, J = 7.5, 1.5 Hz, 1H), 7.13 (td, J = 7.5, 1.5 Hz, 1H), 6.96 (dd, J = 8.0, 2.0 Hz, 2H), 6.91 (t, J = 1.5 Hz, 1H), 6.73 (br s, 1H), 4.79 (m, 1H), 3.84 (s, 3H), 3.24 (m, 1H), 2.90-2.70 (m, 5H), 2.05 (m, 1H), 1.80-1.70 (m, 2H), 1.62-1.52 (m, 1H), 1.41-1.32 (m, 1H) ppm.<13>C NMR (125 MHz, CDCl3) δ 160.1, 153.4, 139.5, 134.7, 131.5, 130.1, 130.1, 128.5, 123.5, 121.4, 119.9, 114.7, 113.6, 72.1, 55.3, 55.3, 47.3, 46.5, 25.3, 24.5, 19.4 ppm. Čistoća: > 98 % LCMS (214 nm & 254 nm); vreme zadržavanja 1.48 min; (M+1) 353
Primer 95
hinuklidin-3-il 3'-etilbifenil-2-ilkarbamat
[0558] Koristeći opštu proceduru E, hinuklidin-3-il 2-bromofenilkarbamat, 3-etilfenilboronska kiselina i [PdCl2(pddf)]CH2Cl2dali su željeno jedinjenje kao čvrstu belu supstancu (120 mg, 86%).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 8.09 (br s, 1H), 7.41 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.36 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.26-7.18 (m, 4H), 7.14 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 6.71 (br s, 1H), 4.79 (m, 1H), 3.25 (m, 1H), 2.90-2.65 (m, 7H), 2.05 (m, 1H), 1.80-1.64 (m, 2H), 1.62-1.52 (m, 1H), 1.40-1.32 (m, 1H), 1.28 (t, J = 7.5 Hz, 3H) ppm.<13>C NMR (125 MHz, CDCl3) δ 153.4, 145.2, 138.1, 134.7, 131.8, 130.2, 129.1, 128.8, 128.4, 127.5, 126.6, 123.5, 120.1, 72.0, 55.3, 47.3, 46.4, 28.9, 25.3, 24.5, 19.4, 15.7 ppm. Čistoća: > 95 % LCMS (214 nm & 254 nm); vreme zadržavanja 1.55 min; (M+1) 351.
Priprema Y
Primer 96
hinuklidin-3-il 2-izopropoksifenilkarbamat
[0559] U smešu 3-aminofenola (1,50 g, 13,8 mmol), izopropanola (3,3 g, 55 mmol) i trifenilfosfina (14,4 g, 54,9 mmol) u THF (15 mL) dodat je kap po kap dietilazodikarbonat (9,60 g, 55,0 mmol) tokom 30 minuta. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 3 sata i koncentrovana. Ostatak je razređen vodom, zakiseljen vodenim 2N HCl i ekstrahovan etrom. Vodena faza je bazifikovana vodenim 2N NaOH i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su osušeni (Na2SO4) i koncentrovani. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni sa silika gelom (petrolej etar/EtOAc 10:1 do 5:1) da bi se dobio 3-izopropoksibenzenamin kao žuto ulje (1,3 g, 64%).
[0560] Koristeći opštu proceduru A, 3-izopropoksibenzenamin (300 mg, 2,00 mmol) i hinuklidin-3-ol dali su željeno jedinjenje kao viskozno ulje (130 mg, 22%).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.20 (br s, 1H), 7.09 (t, J = 8.5 Hz, 1H), 7.05 (br s, 1H), 6.77 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.51 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 4.75 (m, 1H), 4.46 (m, 1H), 3.26-3.18 (m, 1H), 2.92-2.65 (m, 5H), 2.04 (m, 1H), 1.80 (m, 1H), 1.63 (m, 1H), 1.52 (m, 1H), 1.35 (m, 1H), 1.28 (d, J = 5.5 Hz, 6H) ppm.<13>C NMR (125 MHz, CDCl3) δ 157.5, 152.2, 138.2, 128.7, 110.1, 109.6, 105.1, 70.7, 68.9, 54.3, 46.3, 45.4, 28.7, 24.3, 23.3, 21.0, 18.3 ppm. Čistoća: > 90 % LCMS (214 nm & 254 nm); vreme zadržavanja 1.43 min; (M+1) 305.
Primer 97
hinuklidin-3-il 2-izobutoksifenilkarbamat
[0561] U smešu 3-aminofenola (500 mg, 4,60 mmol), 2-metilpropan-1-ola (1,40 g, 18,9 mmol) i trifenilfosfina (4,80 g, 16,2 mmol) u THF (10 mL) dodat je kap po kap dietilazodikarbonat (3,20 g, 18,3 mmol) tokom 30 minuta. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 3 sata. Rastvarač je isparen, a ostatak je razređen vodom, zakiseljen vodenim 2N HCl i ekstrahovan etrom. Vodena faza je bazifikovana vodenim 2N NaOH i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su osušeni (Na2SO4) i koncentrovani. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni sa silika gelom (petrolej etar/EtOAc 15:1) da bi se dobio 3-izobutoksibenzenamin kao žuto ulje (330 mg, 45%).
[0562] Koristeći opštu proceduru A, 3-izobutoksibenzenamin (330 mg, 2,00 mmol) i hinuklidin-3-ol dali su željeno jedinjenje kao viskozno ulje (140 mg, 22%).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.17 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.15 (br s, 1H), 6.81 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.80 (br s, 1H), 6.61 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 4.83 (m, 1H), 3.71 (d, J = 6.5 Hz, 2H), 3.34-3.21 (m, 1H), 2.97-2.72 (m, 5H), 2.12-2.04 (m, 2H), 1.90-1.84 (m, 1H), 1.75-1.67 (m, 1H), 1.55-1.63 (m, 1H), 1.46-1.38 (m, 1H), 1.01 (d, J = 6.5 Hz, 6H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 159.9, 153.4, 139.3, 129.6, 110.6, 109.7, 105.0, 74.4, 72.0, 55.4, 47.3, 46.5, 28.3, 25.4, 24.5, 19.5, 19.3 ppm. Čistoća: 100 % LCMS (214 nm & 254 nm); vreme zadržavanja 1.56 min; (M+1) 319.
Primer 98
hinuklidin-3-il 2-(ciklopropilmetoksi)fenilkarbamat
[0563] U smešu 3-aminofenola (300 mg, 2,70 mmol), ciklopropilmetanola (793 mg, 11,0 mmol) i trifenilfosfina (2,90 g, 11,0 mmol) u THF (6 mL) dodat je kap po kap dietilazodikarbonat (1,90 g, 11,0 mmol) tokom 30 minuta. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 3 sata. Rastvarač je isparen, a ostatak je razređen vodom, zakiseljen vodenim 2N HCl i ekstrahovan etrom. Vodena faza je bazifikovana vodenim 2N NaOH i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su osušeni (Na2SO4) i koncentrovani. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni sa silika gelom (petrolej etar/EtOAc 15:1) da bi se dobio 3-(ciklopropilmetoksi)benzenamin kao smeđe ulje (260 mg, 58%).
[0564] Koristeći opštu proceduru A, 3-(ciklopropilmetoksi)benzenamin (260 mg, 1,60 mmol) i hinuklidin-3-ol dali su željeno jedinjenje kao viskozno ulje (80 mg, 16%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.72 (br s, 1H), 7.14 (br s, 1H), 7.13 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 6.85 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.57 (dd, J = 8.0, 2.0 Hz, 1H), 4.85 (m, 1H), 3.75 (d, J = 6.8 Hz, 2H), 3.35-3.26 (m, 1H), 3.05-2.78 (m, 5H), 2.18-2.12 (m, 1H), 1.97-1.86 (m, 1H), 1.80-1.67 (m, 1H), 1.66-1.55 (m, 1H), 1.52-1.42 (m, 1H), 1.26-1.15 (m, 1H), 0.61-0.55 (m, 2H), 0.31-0.26 (m, 2H) ppm.<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 158.6, 152.1, 138.3, 128.6, 109.9, 108.9, 104.0, 71.7, 69.7, 53.8, 46.0, 45.2, 28.7, 24.1, 22.4, 17.8, 9.2, 2.2 ppm. Čistoća: 100 % LCMS (214 nm & 254 nm); vreme zadržavanja 1.46 min; (M+1) 317.
Primer 99
1-benzil-3-(hinuklidin-3-il)imidazolidin-2-on
[0565] U mešani rastvor hinuklidin-3-amin hidrohlorida (324 mg, 0,199 mmol) u DMF (30 ml) dodat je trietilamin (3 kapi), a zatim pažljivo (izocijanatometil)benzen (275 mg, 2,10 mmol). Dobijena smeša je mešana na 25 °C 18 sati. Nakon HPLC razdvajanja, dobijeno je 1-benzil-3-(hinuklidin-3-il)urea (283 mg, 55%).
[0566] U rastvor 1-benzil-3-(hinuklidin-3-il)uree (260 mg, 1,00 mmol) u DMF-u (30 ml) dodat je NaH [60% disperzija u mineralnom ulju] (96 mg, 2,4 mmol) uz hlađenje ledenom kupkom. Dobijena smeša je mešana 2 sata pre pažljivog dodavanja BrCH2CH2Br (0,75 g, 4,0 mmol). Reakcija je mešana dodatnih 18 sati na oko 25 °C. Nakon HPLC razdvajanja, vodeni sloj je liofilizovan i prečišćen preparativnom TLC (CHCl3do 5% MeOH u CHCl3do 5% 2N NH3(MeOH) u CHCl3) da bi se dobilo željeno jedinjenje (81 mg, 28%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.19-7.22 (m, 4H), 7.11-7.14 (m, 1H), 6.09 (dd, J = 15.2, 8.4 Hz, 1H), 5.45 (dd, J = 15.6, 4.0 Hz, 1H), 5.30 (dd, J= 8.0, 3.6 Hz, 1H), 4.17-4.29 (m, 4H), 3.66-3.75 (m, 2H), 3.47 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 3.19-3.27 (m, 3H), 2.34 (br s, 1H), 2.22 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 1.92 (br s, 2H), 1.75 (br s, 1H) ppm.<13>C NMR (400 MHz, CDCl3) δ 158.9, 141.1, 140.4, 128.7, 127.4, 127.3, 113.6, 63.6, 57.1, 56.0, 45.6, 43.9, 25.2, 23.0, 18.8 ppm. Čistoća: 93.8% HPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 1.84 min; (M+1) 286.
Primer 100
N-(1aza-biciklo[2.2.2]okt-3-il)-4-p-tolil-butiramid
[0567] Koristeći opštu proceduru I, 1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-ilamin (200 mg, 1,00 mmol) i 4-p-tolil-butirna kiselina (220 mg, 1,2 mmol) dali su N-(1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il)-4-p-tolilbutiramid (114 mg, 40%) kao čvrstu belu supstancu.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.06 (s, 4H), 4.19 (m, 1H), 3.66-3.73 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 3.29-3.33 (m, 4H), 2.91 (dd, J = 8.0, J = 3.6 Hz, 1H), 2.59 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 2.28 (s, 3H), 2.24 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 2.15-2.16 (m, 1H), 2.02-2.14 (m, 1H), 1.92-2.01 (m, 2H), 1.81-1.91 (m, 3H) ppm.<13>C NMR (400 MHz, CDCl3) δ 175.1, 138.6, 135.1, 128.8, 128.2, 52.7, 47.4, 47.3, 44.5, 34.8, 27.3, 24.3, 21.6, 19.8, 17.1 ppm. Čistoća: 99.7% HPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 1.76 min; (M+1) 287.
Primer 101
N-(1-aza-biciklo[2.2.2]okt-3-il)-4-(4-metoksi-fenil)-butiramid
[0568] Koristeći opštu proceduru I, 1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-ilamin (200 mg, 1,00 mmol) i 4-(4-metoksi-fenil)-butirna kiselina dali su željeno jedinjenje kao čvrstu belu supstancu (85 mg, 28%).<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.08 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 6.81 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 4.18 (br s, 1H), 3.74 (s, 3H), 3.68 (d, J = 11.6 Hz, 1H), 3.24-3.33 (m, 4H), 2.98-3.03 (m, 1H), 2.57 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 2.24 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 2.03-2.16 (m, 2H), 2.02 (br s, 2H), 1.85-1.91 (m, 3H) ppm.<13>C NMR (400 MHz, CD3OD) δ 175.2, 158.3, 133.6, 129.2, 113.6, 54.5, 52.6, 47.2, 46.4, 44.5, 34.9, 34.2, 27.5, 24.4, 21.5, 17.1 ppm. Čistoća: 96.4% HPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 1.76 min; (M+1) 303.
Primer 102
Bifenil-3-karboksilna kiselina (1-aza-biciklo[2.2.2]okt-3-il)-amid
[0569] Koristeći opštu proceduru I, 1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-ilamin (200 mg, 1,00 mmol) i bifenil-3-karboksilna kiselina dali su željeno jedinjenje kao čvrstu belu supstancu (211 mg, 68%).<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.86 (s, 1H), 7.59 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.53 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.40 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 7.28 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.19 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 7.11 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 4.21 (br s, 1H), 3.56 (t, J = 11.6 Hz, 1H), 3.11-3.22 (m, 1H), 3.05-3.10 (m, 4H), 2.10 (q, J = 3.2 Hz, 1H), 1.95 (br s, 1H), 1.79-1.83 (m, 2H), 1.59-1.20 (m, 1H) ppm.<13>C NMR (400 MHz, CD3OD) δ 169.6, 141.6, 140.2, 134.5, 130.3, 129.0, 127.7, 126.9, 126.3, 125.9, 51.9, 46.4, 46.0, 45.6, 24.6, 21.6, 17.3 ppm. Čistoća: 99.8% HPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 1.60 min; (M+1) 307.
Primer 103
N-(1-aza-biciklo[2.2.2]okt-3-il)-2-bifenil-4-il-acetamid
[0570] Koristeći opštu proceduru I, 1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-ilamin (200 mg, 1,00 mmol) i bifenil-4-il-sirćetna kiselina dali su željeno jedinjenje kao čvrstu belu supstancu (140 mg, 44%).<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.56 (t, J = 8.0 Hz, 4H), 7.29-7.41 (m, 5H), 4.19 (br s, 1H), 3.70 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 3.58 (s, 2H), 3.24-3.31 (m, 5H), 3.12-3.19 (m, 1H), 2.16-2.17 (m, 2H), 1.95-1.98 (m, 2H), 1.82 (br s, 1H) ppm.<13>C NMR (400 MHz, CD3OD) δ 173.1, 140.8, 140.0, 134.7, 129.4, 128.7, 126.9, 52.3, 46.4, 45.9, 44.3, 41.9, 24.4, 21.5, 17.1 ppm. Čistoća: 93.9% HPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 2.87 min; (M+1) 321.
Priprema Z
Primer 104
2-(hinuklidin-3-il)-N-(1-p-tolilciklopropil)acetamid
[0571] U rastvor metil 2-(dimetoksifosforil)acetata (2,70 g, 14,8 mmol) u THF (200 ml) na 0 °C dodat je NaH [60% disperzija u mineralnom ulju] (600 mg, 15,0 mmol). Nakon 1 sata mešanja, dodat je hinuklidin-3-on (2,00 g, 12,4 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 18 sati. Reakcija je ugašena sa 50 ml vode na 0 °C i smeša je ekstrahovana sa EtOAc. Organski slojevi su kombinovani i koncentrovani pod smanjenim pritiskom da bi se dobio sirovi metil 2-(hinuklidin-3-iliden)acetat, koji je korišćen u sledećem koraku bez prečišćavanja (1,2 g, 70%).
[0572] Smeša metil 2-(hinuklidin-3-iliden)acetata (70 mg, 0,38 mmol) i Pd/C (100 mg, 20% m/m) u EtOH (10 mL) je mešana pod H2 (20 psi) na sobnoj temperaturi 18 sati. Reakcioni rastvor je filtriran kroz celit i filtrat je koncentrovan pod smanjenim pritiskom da bi se dobio sirovi metil 2-(hinuklidin-3-il)acetat (60 mg, 85%), koji je korišćen sa prečišćavanjem u sledećem koraku.
[0573] Smeša metil 2-(hinuklidin-3-il) acetata (1,1g, 6,0 mmol) i 50 mL konc. HCl [12M] je mešana na 70°C 18 sati. Reakciona smeša je koncentrovana pod smanjenim pritiskom da bi se dobila sirova 2-(hinuklidin-3-il)sirćetna kiselina, koja je korišćena bez prečišćavanja u sledećem koraku (900 mg, 86%).
[0574] Koristeći opštu proceduru I, 2-(hinuklidin-3-il)sirćetna kiselina (169 mg, 1,00 mmol) i 1-p-tolilciklopropanamin (149 mg, 1,10 mmol) dali su željeno jedinjenje kao čvrstu belu supstancu (60 mg, 18%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.86 (s, 1H), 6.96-7.07 (m, 4H), 3.22-3.37 (m, 2H), 2.85-3.05 (m, 4H), 2.39-2.45 (m, 2H), 2.21 (s, 3H), 1.45-1.92 (m, 5H), 1.07-1.23 (m, 5H) ppm.<13>C NMR (400 MHz, CDCl3) δ 171.6, 139.8, 136.1, 129.2, 125.6, 52.1, 50.9, 46.5, 46.0, 39.2, 34.9, 30.8, 24.5, 21.1, 18.7, 17.6 ppm. Čistoća: 96.2% HPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 1.21 min; (M+1) 299.
Primer 105
N-(2-(3-metoksifenil)propan-2-il)-2-(hinuklidin-3-il)acetamid
[0575] oristeći opštu proceduru I, 2-(hinuklidin-3-il)sirćetna kiselina (169 mg, 1,00 mmol) i 2-(3-metoksifenil)propan-2-amin (182 mg, 1,10 mmol) dali su željeno jedinjenje kao čvrstu belu supstancu (126 mg, 40%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.39 (s, 1H), 7.20 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 6.92 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 6.87 (d, J= 2.0 Hz, 1H), 6.71 (dd, J = 8.0, 2.0 Hz, 1H), 3.75 (s, 3H), 3.31-3.42 (m, 2H), 3.00-3.19 (m, 4H), 2.47-2.60 (m, 2H), 2.27 (dd,J = 14.0, 6.0 Hz, 1H), 1.83-2.06 (m, 4H), 1.64-1.74 (m, 1H), 1.61 (d, J = 12.4 Hz, 6H) ppm.<13>CNMR (400 MHz, CDCl3) δ 170.0, 159.7, 149.3, 129.5, 117.5, 111.8, 111.0, 55.9, 55.4, 52.0, 50.6, 46.6, 46.0, 39.7, 30.9, 29.7, 29.1, 24.3, 18.8 ppm. Čistoća: 93.7% HPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 0.76 min; (M+1) 317.
Primer 106
2-(1-aza-biciklo[2.2.2]okt-3-il)-N-[1-(3-izopropil-fenil)-1-metil-etil]-acetamid
[0576] U rastvor 1-(1-izocijanato-1-metil-etil)-3-izopropenil-benzena (10 g, 50 mmol) u t-BuOH (1000 mL) dodat je KOH (40,0 g, 71,6 mmol). Smeša je mešana pod refluksom 3 sata. Dobijena smeša je ohlađena na sobnu temperaturu, koncentrovana i rastvorena u CH2Cl2. Čvrsti ostatak je odfiltriran i organski sloj je podešen na pH<7 koristeći konc. HCl.
Amonijumova so je ekstrahovana vodom. odeni sloj je bazifikovan korišćenjem vodenog rastvora NaOH [5% m/m, 200 ml] i slobodni bazni amin je zatim ekstrahovan sa CH2Cl2. Organski slojevi su kombinovani, osušeni preko Na2SO4, filtrirani i koncentrovani pod smanjenim pritiskom da bi se dobio 1-(3-izopropenil-fenil)-1-metil-etilamin (3,3 g, 63%).
[0577] Rastvor gore navedenog jedinjenja (8,5 g, 48 mmol) i PtO2 (1,8 g, 8,0 mmol) u EtOH (600 mL) je mešan na sobnoj temperaturi pod 1 atm H218 sati. Reakcija je filtrirana kroz celit i koncentrovana pod smanjenim pritiskom da bi se dobio 1-(3-izopropil-fenil)-1-metiletilamin (5,0 g, 58%).
[0578] Koristeći opštu proceduru I, (1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il)-sirćetna kiselina (200 mg, 1,20 mmol) i 1-(3-izopropil-fenil)-1-metil-etilamin dali su željeno jedinjenje kao čvrstu belu supstancu (42 mg, 10%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.15-1.20 (m, 3H), 7.05 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 3.41-3.45 (m, 1H), 3.26 (s, 2H), 3.15-3.22 (m, 2H), 2.71-2.82 (m, 2H), 2.41-2.47 (m, 3H), 2.05-2.12 (m, 1H), 1.79-1.90 (m, 4H), 1.61 (d, J = 8.0 Hz, 6H), 1.21 (d, J = 6.4 Hz, 6H) ppm.<13>C NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 171.1, 148.7, 147.3, 128.1, 123.9, 122.8, 122.2, 55.6, 52.1, 46.5, 45.9, 38.8, 34.5, 30.7, 28.9, 28.5, 23.8, 23.4, 18.0 ppm. Čistoća: 96.8% HPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 1.93 min; (M+1) 329.
Primer 107
2-(1-aza-biciklo[2.2.2]okt-3-il)-N-[2-(2-metoksi-fenil)-etil]-acetamid
[0579] Koristeći opštu proceduru I, (1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il)-sirćetna kiselina (200 mg, 1,20 mmol) i 2-(2-metoksi-fenil)-etilamin dali su željeno jedinjenje kao čvrstu belu supstancu (60 mg, 15%).<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.17 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 7.08 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 6.89 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.84 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.35-3.45 (m, 3H), 3.213.31 (m, 3H), 2.76-2.83 (m, 3H), 2.29-2.45 (m, 3H), 1.82-2.01 (m, 3H), 1.72-1.81 (m, 2H) ppm.<13>C NMR (400 MHz, CD3OD) δ 172.0, 158.0, 130.4, 127.8, 127.2, 120.2, 110.4, 54.6, 52.0, 46.4, 45.9, 39.1, 38.3, 30.7, 30.2, 23.8, 17.9 ppm. Čistoća: 92.4% HPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 1.59 min; (M+1) 303.
Primer 108
1-(1-aza-biciklo[2.2.2]okt-3-il)-3-[1-(3-izopropil-fenil)-ciklopropil]-urea
[0580] Smeša 3-izopropil-benzojeve kiseline (5,00 g, 30,4mmol) u SOCl2(50ml) je mešana na 100 °C 2 sata. Reakciona smeša je koncentrovana da bi se dobio 3-izopropil-benzoil hlorid (5,00 g, 91%).
[0581] U rastvor gore navedenog acid hlorida (5,00 g, 27,0 mmol) u CH2Cl2(20 ml) na -70 °C dodat je, kap po kap, rastvor NH3/CH2Cl2(200 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 18 sati i zatim koncentrovana da bi se dobio 3-izopropil-benzamid (4,2 g, 93%).
[0582] Rastvor gore navedenog amida (4,20 g, 25,7 mmol) u POCl3(36,0 g, 236 mmol) je mešan na 80 °C 18 sati. Rastvor je koncentrovan, a ostatak je uliven u vodu (100 mL). Smeša je ekstrahovana sa EtOAc. Organski slojevi su kombinovani, isprani slanim rastvorom, osušeni preko Na2SO4i koncentrovani da bi se dobio 3-izopropil-benzonitril (3,00 g, 80%).
[0583] Koristeći opštu proceduru G, 3-izopropil-benzonitril (3,00 g, 20,6 mmol) je konvertovan u odgovarajući 1-(3-izopropil-fenil)-ciklopropilamin (0,80 g, 22%).
[0584] Koristeći opštu proceduru C, gore navedeni amin (300 mg, 1,71 mmol), hinuklidin-3-amin (215 mg, 1,71 mmol) i CDI (290 mg, 2,05 mmol) dali su željeno jedinjenje kao čvrstu belu supstancu (88 mg, 46%).<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.18 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.12 (s, 1H), 7.01 (dd, J = 19.2, 7.6 Hz, 2H), 3.74-3.77 (m, 1H), 3.18-3.24 (m, 1H), 2.71-2.87 (m, 5H), 2.42-2.47 (m, 1H), 1.63-1.82 (m, 4H), 1.45 (br s, 1H), 1.21-1.26 (m, 10H) ppm.<13>C NMR (400 MHz, CD3OD) δ 193.0, 168.7, 160.1, 128.2, 122.7, 121.9, 55.3, 46.8, 46.1, 34.1, 25.9, 25.0, 23.5, 19.6, 18.2 ppm. Čistoća: 92.4% HPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 2.53 min; (M+1) 328.
Primer 109
2-(1-aza-biciklo[2.2.2]okt-3-il)-N-[1-(3-izopropil-fenil)-ciklopropil]-acetamid
[0585] Koristeći opštu proceduru I, 1-(3-izopropil-fenil)-ciklopropilamin (278 mg, 1,58 mmol) i (1-azabiciklo[2.2.2]okt-3-il)-sirćetna kiselina (267 mg, 1,58 mmol) dali su željeno jedinjenje kao čvrstu belu supstancu (70 mg, 14%).<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.16 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.07 (s, 1H), 6.97 (dd, J = 19.2, 7.6 Hz, 2H), 3.16-3.23 (m, 1H), 2.79-2.97 (m, 5H), 2.51-2.58 (m, 1H), 2.23-2.41 (m, 3H), 1.83-1.92 (m, 1H), 1.68-1.81 (m, 3H), 1.54-1.62 (m, 1H), 1.15-1.25 (m, 10H) ppm.<13>C NMR (400 MHz, CD3OD) δ 173.6, 148.5, 142.4, 127.8, 123.6, 123.1, 122.0, 73.0, 53.1, 46.6, 45.9, 39.3, 34.1, 32.3, 28.1, 26.4, 24.4, 19.7, 16.8 ppm. Čistoća: 96.9% HPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 2.55 min; (M+1) 327.
Primer 110
[1-(3-izopropil-fenil)-ciklopropil]-karbaminska
kiselina 1-aza-biciklo[2.2.2]okt-3-il estar
[0586] Koristeći opštu proceduru A, 1-(3-izopropil-fenil)-ciklopropilamin (278 mg, 1,58 mmol) i hinuklidin-3-ol dali su željeno jedinjenje kao čvrstu belu supstancu (75 mg, 22%).<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7.17 (m, 1H), 7.09 (s, 1H), 6.97-7.08 (m, 2H), 4.72-4.79 (m, 1H), 3.36-3.42 (m, 1H), 2.79-3.08 (m, 5H), 1.93-2.17 (m, 2H), 1.81-1.90 (m, 1H), 1.67-1.78 (m, 2H), 1.31-1.54 (m, 1H), 1.13-1.28 (m, 10H) ppm.<13>C NMR (400 MHz, CD3OD) δ 157.1, 148.4, 143.1, 128.1, 123.9, 123.0, 122.4, 69.2, 54.4, 46.7, 45.7, 34.7, 34.3, 24.9, 23.3, 22.0, 18.0, 17.3 ppm. Čistoća: 99.2% HPLCMS (210 nm); vreme zadržavanja 1.83 min; (M+1) 329.
Primer 111
In vivo studije efikasnosti terapije malim molekulima korišćenjem (S)-hinuklidin-3-il (2-(2-(4-fluorofenil)tiazol-4-il)propan-2-il)karbamata (S)-2-hidroksisukcinat soli na mišjem modelu Fabrijeve bolesti
[0587] Ovde su opisani in vivo eksperimenti koji koriste GCS inhibitor u mišjem modelu Fabrijeve bolesti i pokazuju da je terapija redukcije supstrata (SRT) jednako efikasna u redukciji nivoa Gb3 i lizo-Gb3 u plazmi, bubrezima i urinu miševa obolelih od Fabrijeve bolesti. Studija je osmišljena da proceni da li inhibicija supstrata (tj. „terapija redukcije supstrata“) korišćenjem jedinjenja kao što je ovde obelodanjeno može redukovati akumulaciju uskladištenog materijala globotriaozilceramida (Gb3) i lizoglobotriaozilceramida (lizo-Gb3). Nedavno je predloženo da urinarni lizo-Gb3 može predstavljati pouzdan biomarker kliničke relevantnosti za Fabrijevu bolest (Aerts et al., PNAS USA 105:2812-2817 (2008); i Auray-Blais et al., Clin Chim Acta 411:1906-1914 (2010)). Metaboličko poreklo lizo-Gb3 nije poznato i može se zamislivo dobiti deacilacijom Gb3 ili anaboličkom sintezom iz glukozilsfingozina.
[0588] Na Slici 2, crne strelice označavaju dokazane puteve, sive strelice su nedokumentovani putevi. ERT korišćenjem α-galaktozidaze A poznato je da degradira i Gb3 i lizo-Gb3. Shodno tome, SRT korišćenjem GCS inhibitora bio bi najefikasniji u ograničavanju akumulacije lizo-Gb3 ako se lizo-Gb3 generiše prvenstveno deacilacijom Gb3, putem zavisnim od GCS. Ovi eksperimenti pokazuju da je SRT korišćenjem GCS inhibitora u mišjem modelu Fabrijeve bolesti redukovao i Gb3 i lizo-Gb3, čime se podržava upotreba jedinjenja ovog obelodanjivanja kao održivih terapeutskih opcija za pacijente obolele od Fabrijeve bolesti.
[0589] U sledećim eksperimentima, miševi su dozirani GCS inhibitorima sa oko 60 mg/kg/dan (S)-hinuklidin-3-il (2-(2-(4-fluorofenil)tiazol-4-il)propan-2-il)karbamata (S)-2-hidroksisukcinat soli (u daljem tekstu „GZ 452“) ili oko 300 mg/kg/dan (1R,2R)-oktanske kiseline[2-(2',3'-dihidro-benzo[1,4]dioksin-6'-il)-2-hidroksi-1-pirolidin-1-ilmetil-etil]-amid-L-vinske kiseline soli (u daljem tekstu „GZ 638“) kao komponente peletirane hrane koja se davala ad libitum. Analiza lipida je vršena ESI/MS-om kako je opisano u Marshall et al., PLoS ONE 5:e15033 (2010). Kao što je dalje detaljno objašnjeno, lečenje je započeto kada su miševi imali 3, 8 ili 12 meseci starosti kako bi se testirala efikasnost pri različitim težinama bolesti. Krv i urin su sakupljani mesečno, a periodično uzimanje uzorka tkiva obezbedilo je materijale za procenu efikasnosti terapije (nivoi Gb3 i lizo-Gb3). Prethodne studije su pokazale da su ranije generacije inhibitora glukozilceramid sintaze (klase P4-sličnih) mogle odložiti stopu akumulacije Gb3, međutim, kao što je objašnjeno u nastavku, lečenje Genz-452 nije samo sprečilo ili odložilo dalju akumulaciju, već je dovelo do redukcije apsolutnih nivoa i Gb3 i lizo-Gb3 u testiranim tkivima (jetra, srce, urin, plazma). Kao što je dalje objašnjeno, na efikasnost SMT uticala je starost miševa na početku lečenja. Generalno, što je miš bio stariji, to su bili viši nivoi uskladištenog Gb3 i stoga je bio potreban duži period lečenja kako bi se postigla slična terapeutska korist (videti sliku 4). Eksperimenti i rezultati su detaljnije opisani u nastavku.
GCS inhibitor redukuje nivoe Gb3 u visceralnom tkivu miševa obolelih od Fabrijeve bolesti
[0590] U ovom eksperimentu, miševi oboleli od Fabrijeve bolesti su tretirani GCS inhibitorima u ishrani tokom 4 meseca, počevši sa 8 meseci starosti. Prethodno smo izvestili da je eliglustat tartarat (GZ 638) u dozi od 300 mg/kg/dan (SRT GZ 638) efikasan u inhibiciji dalje akumulacije tkivnog Gb3 (što je ovde prikazano neznačajnim promenama u Gb3 u odnosu na početne nivoe UNT (početak)). Kao što je prikazano na slici 3, potentniji GCS inhibitor, GZ 452, takođe je evaluiran (u dozi od 60 mg/kg/dan) (SRT-Gz452) i utvrđeno je da ne samo sprečava dalju akumulaciju već i značajno redukuje uskladišteni Gb3 u odnosu na početne nivoe (UNT (početak)). Takođe su prikazani nivoi divljeg tipa (WT) iste starosti. Ovi rezultati pokazuju da je GZ 638 potentan GCS inhibitor i efikasno redukuje nivoe Gb3 u visceralnim tkivima miševa obolelih od Fabrijeve bolesti.
SRT redukuje urinarni i plazma Gb3 kod mlađih i starijih miševa obolelih od Fabrijeve bolesti
[0591] U ovom eksperimentu, miševi oboleli od Fabrijeve bolesti su tretirani GZ 452 u svojoj ishrani (Rx:) tokom 2 ili 4 meseca, počevši sa 3 ili 8 meseci starosti (Starost:) kako je naznačeno na slikama 4A i 4B. Nivoi Gb3 u urinu mlađih i starijih miševa podjednako su reagovali na SRT tretman, postižući ~90% redukovanja sa 2 meseca tretmana. Nivoi Gb3 u plazmi sporije su reagovali na tretman, pri čemu je starijim miševima bilo potrebno dvostruko duže vreme tretmana od mlađih miševa (4 naspram 2 meseca) da bi se postiglo ~50% redukovanja. Ovi rezultati pokazuju da GZ 638 efikasno redukuje nivoe Gb3 u urinu i plazmi kod mlađih i starijih miševa obolelih od Fabrijeve bolesti.
SRT redukuje i Gb3 i lizo-Gb3 u bubrezima miševa obolelih od Fabrijeve bolesti
[0592] U ovom eksperimentu, miševi oboleli od Fabrijeve bolesti su tretirani Genz-452 u ishrani tokom 4 meseca, počevši sa 8 meseci starosti. Kao što je prikazano na slici 5, tkivo bubrega je analizirano na (A) Gb3 i (B) lizo-Gb3 kod netretiranih miševa obolelih od Fabrijeve bolesti iste starosti (UNT), miševa obolelih od Fabrijeve bolesti tretiranih GZ 452 (SRT) i kontrolnih miševa divljeg tipa (WT). SRT je rezultirao sličnim značajnim relativnim redukovanjima nivoa (60-70%) i za Gb3 i za lizo-Gb3. Ovi rezultati pokazuju da GZ 638 efikasno redukuje i Gb3 i lizo-Gb3 nivoe u bubrežnim tkivima miševa obolelih od Fabrijeve bolesti.
Primer 112
In vivo studije efikasnosti kombinovane terapije na Fabrijevom mišjem modelu korišćenjem GZ 452 i alfa-galaktozidaze A
[0593] Miševi oboleli od Fabrijeve bolesti su korišćeni za testiranje in vivo efikasnosti kombinovanja enzimske zamenske terapije sa terapijom malim molekulima u formatu istovremenog lečenja. Studija je osmišljena da proceni da li inhibicija supstrata (tj. „terapija redukcije supstrata“) korišćenjem GZ 452 jedinjenja može redukovati ponovnu akumulaciju uskladištene supstance Gb3 i lizo-Gb3. Protokol studije je predviđao tri različite grupe za lečenje 3-mesečnih mužjaka miševa obolelih od Fabrijeve bolesti (slika 6A). Prva grupa je primila intravenske injekcije alfa-galaktozidaze A enzima (ERT) u dozi od 1 mg/kg za redukovanje nivoa Gb3 i ponavljane su svaka 2 meseca. Druga grupa je primila iste enzimske injekcije kao grupa 1, ali su takođe dozirani sa GZ 452 u dozi od ~60 mg/kg/dan kao komponentom peletirane hrane. Treća grupa je primila samo dnevno doziranje GZ 452 u svojoj ishrani. Četvrta grupa nije primila nikakav tretman kako bi služila kao vehikulum kontrola, a peta grupa životinja divljeg tipa pružila je „normalne“ vrednosti Gb3 i lizo-Gb3. Mesečno prikupljanje urina i krvi i tromesečno uzimanje uzorka tkiva obezbedili su materijale za procenu relativne efikasnosti terapija (slika 6A).
[0594] Nakon 2 meseca (miševi su bili stari 5 meseci), plazma (slika 6B, paneli A i C) i urin (slika 6B, paneli B i D) su analizirani na Gb3 (slika 6B, paneli A i B) i lyso-Gb3 (slika 6B, paneli C i D). U plazmi, ERT i SRT su redukovali nivoe i Gb3 (panel A) i lyso-Gb3 (panel C), a kombinovanje ERT i SRT je dovelo do značajnih poboljšanja u odnosu na svaku terapiju pojedinačno. Nivoi Gb3 u urinu nisu bili pod uticajem ERT, ali su značajno redukovanim pomoću SRT (panel B). Lyso-Gb3 u urinu je slično redukovan svim tretmanima (panel D), što sugeriše da Gb3 i lyso-Gb3 u urinu mogu poticati iz različitih izvora. Rezultati ovih studija pokazuju da je SMT bio efikasan u redukovanju Gb3 u bubrezima i urinu. ERT je bio efikasniji od SMT u redukovanju Gb3 u plazmi, međutim, najefikasnija terapija je dobijena kombinovanjem ove dve terapije. SMT terapija sama ili u kombinaciji sa ERT je takođe bila sposobna da utiče (smanji akumulaciju) lyso-Gb3.
Primer 113
[0595] Profil izoforme acilnog lanca Gb3 Relativna zastupljenost acilnih grupa različite dužine ugljeničnog lanca vezanih amido vezama je određena za Gb3 iz plazme, urina i bubrega miševa obolelih od Fabrijeve bolesti. Kao što je prikazano na slici 7, glavne izoforme u plazmi bile su C16:0 i C24:1. Profili izoformi urina i bubrega su bili skoro identični, sa C24:0 i C22:0 kao dominantnim dužinama lanaca. Ovi podaci su u skladu sa tim da Gb3 u urinu predominantno potiče iz bubrega - verovatno kroz epidermalno egzosomalno izlučivanje. Korelacija ovih rezultata sa onima na slici 6, gde je ERT redukovao lyso-Gb3 u plazmi i urinu, ali ne i Gb3 u urinu, sugeriše da lyso-Gb3 u urinu potiče iz filtrata plazme. Ova diferencijacija izvora za Gb3 i lyso-Gb3 u urinu, ako je istinita i za pacijente, može objasniti zašto se lyso-Gb3 smatra preciznijim prediktorom ozbiljnosti bolesti i efikasnosti lečenja od Gb3 u urinu.
Primer 114
SRT, ali ne i ERT, značajno odlaže gubitak termičkog nociceptivnog odgovora
[0596] Tromesečni miševi oboleli od Fabrijeve bolesti su tretirani sa GZ 452 u ishrani (SRT), αgal jednom u 2 meseca (ERT), ili kombinacijom ova dva tretmana (E+S), kao što je gore opisano. Nakon 6 meseci kombinovane terapije, vreme termičkog nociceptivnog odgovora (latencija) je procenjeno postavljanjem miševa na grejnu ploču od 55°C i beleženjem vremena do odgovora (tj. prepoznatljivog trzanja zadnje šape). Kao što je prikazano na slici 8, nakon 7 meseci lečenja (miševi stari 10 meseci) grupa tretirana samo sa ERT nije se značajno razlikovala od netretirane grupe (UNT). Grupe tretirane sa SRT i kombinovanom terapijom imale su značajno kraće vreme odgovora na toplotni stimulus. Ovi rezultati pokazuju da je SRT (ali ne i ERT) odložio gubitak termičkog nociceptivnog odgovora, što je surogat za perifernu neuropatiju koja se često viđa kod pacijenata obolelih od Fabrijeve bolesti.
Primer 115
nGD mišji model za in vivo studije SMT korišćenjem Gz161
[0597] K14 lnl/lnl (skraćeno K14) miševi su dobijeni sa Univerziteta Lund (Enquist et al. (2007)) i uzgajani su prema protokolu odobrenom od strane Institucionalnog komiteta za brigu i korišćenje životinja. Mladunci dobijeni iz heterozigotnih parenja su seclani repom i genotipizirani u roku od jednog dana od rođenja (do P1). DNK je ekstrahovana pomoću liza pufera od 5 mM EDTA, 0,2% SDS, 200 mM NaCl, 100 mM Tris pH 8,0 dopunjenog sa 0,25 mg/ml Proteinaze K (Invitrogen, Carlsbad, Kalifornija), precipitirana sa 100% izopropanolom i ponovo rastvorena u 1X Tris EDTA puferu. DNK je zatim korišćena za lančanu reakciju polimeraze (PCR) kako bi se utvrdilo prisustvo GC gena pod K14 keratin promotorom (CRE) (Enquist et al. (2007)). Da bi se utvrdila disrupcija mesta otpornosti na neomicin gena mišjeg glukocerebrozidaze (NEO), koristili smo pristup sa tri prajmera: GC WT Fwd 5'-TGTTCCCCAACACAATGCTCTTT-3'; Rev 5'-TCTGTGACTCTGATGCCACCTTG-3' i Neo Rev 5'-AAGACAGAATAAAACGCACGG GTG-3' kao što je prethodno opisano u Cabrera-Salazar et al., Experimental Neurology 225: 436-444 (2010).
[0598] Novorođeni miševi su dobijali dnevne intraperitonealne injekcije Quinuclidin-3-yl (2-(4'-fluoro-[1,1'-bifenil]-3-il)propan-2-il)karbamata (u daljem tekstu „GZ 161“) u dozi od 5 mg/kg u zapremini od 10 µl/gram telesne težine, počevši od postnatalnog dana 4. K14 miševi i divlji tip legla su humano žrtvovani 10. postnatalnog dana (pre-simptomatski) i 14. dana (humana krajnja tačka) radi procene nivoa glikosfingolipida (GSL). Miševi su dobili dozu pentobarbitala od 150 mg/kg (Euthasol, Virbac Inc, Forth Worth, TX) i transkardijalno su perfuzirani hladnim 0,9% rastvorom NaCl. Mozgovi su disekovani i podeljeni; jedna hemisfera je korišćena za GSL analizu, a druga je fiksirana u 4% paraformaldehidu 96 sati i obrađena za histologiju.
[0599] Da bi se utvrdilo da li se dodatne koristi mogu postići prenatalnom izloženošću GZ 161, podgrupa gravidnih K14 ženki je dobijala GZ 161 u hrani koristeći formulaciju izračunatu da obezbedi 20 mg/kg/dan tokom poslednjih 5-7 dana gestacije. Ženke koje su dobijale GZ 161 prešle su na standardnu ishranu nakon porođaja, a mladunci su dobijali dnevne IP injekcije GZ 161 u dozi od 5 mg/kg (10 µl po gramu telesne težine) počevši od P1. Skup WT mladunaca rođenih od ženki koje su dobijale lek ili standardnu formulu je žrtvovan odmah nakon rođenja kako bi se utvrdilo da li in utero izlaganje GZ 161 može redukovati nivoe GSL u mozgu.
Primer 116
Kvantifikacija glikosfingolipida
[0600] Kvantitativna analiza sfingolipida je izvršena tečnom hromatografijom i tandem masenom spektrometrijom (LC/MS/MS) kao što je prethodno opisano u Merrill et al., Methods 36: 207-224 (2005). Ukratko, 10 µl homogenata moždanog tkiva (težina tkiva/voda: 100 mg/ml) je ekstrahovano sa 1,00 ml mešavine organskih rastvarača (97% acetonitril, 2% metanol i 1% sirćetna kiselina, v/v) i energično vorteksirano 10 minuta. Ekstrahovani sfingolipidi (GluCer i GluSph) su direktno razdvojeni hidrofilnom tečnom hromatografijom (Atlantis HILIC kolona, Waters Corp.) i analizirani trostrukim kvadrupolnim tandem masenim spektrometrom (API 4000, Applied Biosystems/MDS SCIEX) i upoređeni sa sfingolipidnim standardima (Matreya, LLC; Pleasant Gap, PA)
Primer 117
Reformulacija rekombinantne ljudske glukocerebrozidaze
[0601] Rekombinantna ljudska glukocerebrozidaza (rhGC) je reformulisana kao što je prethodno opisano u Cabrera-Salazar et al. (2010). Ukratko, rhGC je vezan korišćenjem katjonsko-jonske izmene (CM Sepharose), a humani serumski albumin (HSA) je dodat eluatu kao stabilizator. Formulacija za ICV primenu bila je 2 mg/ml rhGC u 10 mM natrijum fosfatnom puferu pri pH 7,2 koji sadrži 135 mM natrijum hlorida, 5 mg/ml HSA i 0,01% polisorbat 80.
Primer 118
Intracerebroventrikularne injekcije
[0602] Životinjski model neuropatske Gošeove bolesti (nGD) identifikovan kao K14 je krijoanestetizovan i primio je 2 µl bilateralnih intracerebroventrikularnih (ICV) injekcija rhGC u koncentraciji od 2 mg/ml ili vehikula, kao što je prethodno opisano. (Cabrera-Salazar et al. (2010)) Injektovani mladunci su praćeni radi oporavka i vraćeni majci nakon procedure.
Primer 119
Histopatologija
[0603] Nakon potvrde genotipa, životinje su humano žrtvovane u dobi od 10 dana. U ovoj dobi K14 miševi su asimptomatski. Miševi su dobili intraperitonealnu injekciju od 150 mg/kg natrijum pentobarbitala (Euthasol, Virbac Inc, Forth Worth, TX) i perfuzirani su intrakardijalnom infuzijom ohlađenog 0,9% natrijum hlorida. Mozgovi su uklonjeni i postfiksirani u 4% paraformaldehidu 72 sata. Tkivo je prebačeno u PBS i ugrađeno u parafin. Sagitalni preseci debljine 5 µm su isečeni i obojeni kako je opisano u nastavku. Glioza i prisustvo ćelija makrofagne loze su procenjivani pomoću bojenja glialnim fibrilarnim kiselim proteinom i ekspresije CD68 i F4/80 pan-makrofagnih markera korišćenjem Leica Bond Max Immunostainer sistema (Leica Microsystems, Wetzlar, Nemačka).
[0604] GFAP bojenje: Parafinski preseci su postavljeni na montažne pločice i obrađeni korišćenjem Bond Polymer Refine IHC sistema (Leica Microsystems, Wetzlar, Nemačka), blokirani 10 minuta u bloku proteina bez seruma (Dako systems, Glostrup, Danska), inkubirani 30 minuta u razblaženju 1:1500 primarnog anti-GFAP antitela u Dako diluentu za antitela (Dako, Glostrup, Danska), i obojeni korišćenjem Bond Polymer Refine kompleta za detekciju (Leica Microsystems, Wetzlar, Nemačka).
[0605] F4/80 bojenje: Parafinski preseci su postavljeni na montažne pločice i obrađeni korišćenjem Bond Polymer Refine IHC sistema (Leica Microsystems, Wetzlar, Nemačka), inkubirani 30 minuta u razblaženju 1:2500 pacovskog anti-mišjeg F4/80 antitela (eBioscience, San Diego, CA) ili pacovskog IgG2a (eBioscience, San Diego, CA) kao izotipne kontrole. Pločice su zatim inkubirane sa razblaženjem 1:250 zečjeg anti-pacovskog sekundarnog antitela (Vector laboratories, Burlingame, CA) i obojene korišćenjem Bond Polymer Refine kompleta za detekciju (Leica Microsystems, Wetzlar, Nemačka).
[0606] CD 68 bojenje: Parafinski preseci su postavljeni na montažne pločice i obrađeni korišćenjem Bond Polymer Refine IHC sistema (Leica Microsystems, Wetzlar, Nemačka), inkubirani 30 minuta u razblaženju 1:2500 pacovskog anti-mišjeg CD68 klona FA-11 antitela (AbD Serotec, Oxford, UK) ili pacovskog IgG2a izotipne kontrole (AbD Serotec, Oxford, UK). Pločice su zatim inkubirane sa razblaženjem 1:250 zečjeg anti-pacovskog sekundarnog antitela (Vector laboratories, Burlingame, CA) i obojene korišćenjem Bond Polymer Refine kompleta za detekciju (Leica Microsystems, Wetzlar, Nemačka).
[0607] Za svaku tehniku bojenja, digitalne slike usklađene po ekspoziciji su dobijene iz sličnih moždanih regiona svake eksperimentalne grupe korišćenjem Aperio ScanScope XT sistema (Aperio Technologies, Vista, CA). Obojene pločice su digitalizovane u visokoj rezoluciji i šest oblasti od interesa je istaknuto na svakoj pločici i nezavisno analizirano histomorfometrijom. Pozitivno obojena površina i jezgra su određeni, a kvantitativni podaci su analizirani jednosmernom analizom varijanse praćenom Takijevim testom višestrukih poređenja korišćenjem Graph Pad Prism V 4.0 (GraphPad Software, San Diego, CA). Razlike između srednjih vrednosti grupa sa p<0,05 smatrane su značajnim.
Primer 119
Preživljavanje
[0608] K14 miševi su primali dnevne intraperitonealne injekcije GZ 161 u dozi od 5 mg/kg telesne težine kao što je gore opisano. Posebna kohorta životinja je takođe primila ICV injekcije GC 1., 2. i 3. postnatalnog dana, praćene dnevnim IP injekcijama GZ 161. Životinje koje su dostigle dob za odbijanje od majke primale su GZ 161 u posebnoj hrani dizajniranoj da obezbedi dozu od 60 mg/kg/dan. Sve životinje su svakodnevno praćene radi razvoja neuroloških komplikacija. Miševi su žrtvovani kada su dostigli humanu krajnju tačku (nesposobnost da se uspravi u roku od 10 sekundi nakon što je postavljen u bočni položaj) injekcijom 150 mg/kg natrijum pentobarbitala (Euthasol, Virbac Inc, Forth Worth, TX). Ova vremenska tačka je zabeležena kao kraj života i analizirana korišćenjem Kaplan-Majerovih grafikona.
Primer 120
Statistička analiza
[0609] Prikazane vrednosti odgovaraju srednjim vrednostima, a trake greške predstavljaju standardnu grešku srednje vrednosti. Poređenja između grupa su analizirana jednosmernom analizom varijanse praćenom Takijevim testom višestrukih poređenja. Poređenje redukcije supstrata in utero analizirano je neuparenim t-testom sa Velčovom korekcijom. Kaplan-Majerove krive preživljavanja analizirane su korišćenjem test logaritam rangova ekvivalentnog Mantel-Henzelovom testu. Sve statističke analize su obavljene korišćenjem GraphPad Prism v4.0 (GraphPad Software, San Diego, CA). Razlike između srednjih vrednosti grupa sa p<0,05 smatrane su značajnim.
Primer 121
Akumulacija supstrata u mozgu K14 miša
[0610] Pre procene efekata leka na moždane lipide, uporedili smo vremenski zavisne promene nivoa GluCer, GalCer i GluSph u mozgu K14 miša sa onima kod kontrolnog miša divljeg tipa (WT). Slika 9, paneli A i B pokazuju da je u mozgu WT miša, dominantni GL-1 izomer u prvih nekoliko dana života bio GluCer; do postnatalnog dana 14 (P14) dominantni izomer je bio GalCer. Ovi rezultati su u skladu sa onima iz studije na mozgu pacova, koja je otkrila da se GluCer sintetiše brže tokom prve nedelje života, a zatim sledi povećana sinteza GalCer počevši od P8 (Brenkert et al., Brain Research 36: 183-193 (1972)). Slika 9, panel A takođe pokazuje da je kod K14 miševa GluCer bio povišen 10 puta u odnosu na WT miševe i da je ovo povećanje bilo održano tokom prve 2 nedelje života dok miševi nisu uginuli oko P14.
[0611] U skladu sa prethodnim mišjim modelima neuropatske Gošerove bolesti (Liu et al., PNAS 95: 2503-2508 (1998)), slika 9, panel C pokazuje da je pri rođenju lizoglikosfingolipid GluSph bio povišen >20 puta u mozgu K14 mišjeg modela u odnosu na WT miševe. Ovo povećanje je bilo održano tokom prve 2 nedelje života i bilo je još veće kod životinja žrtvovanih u završnoj fazi (slika 9, panel C). Kod WT legla K14 miševa, nivoi GluSph su bili ispod praga detekcije (0,3 ng/mg tkiva). Slika 9, panel D pokazuje da ovi povišeni glikosfingolipidi i lizoglikosfingolipidi kod K14 miša izgleda nisu imali uticaja na težinu mozga (u odnosu na WT miševe). S obzirom na poznatu toksičnost GluSph, terapeutske strategije usmerene na redukovanje akumulacije ovih supstrata u mozgu K14 miša mogle bi imati uticaja na patološke karakteristike bolesti i životni vek životinja.
Primer 122
Intraperitonealna primena GZ 161 redukuje nivoe GluCer i GluSph u mozgu K14 miševa
[0612] Slika 10 pokazuje da je, u poređenju sa K14 miševima tretiranim vehikulom u humanoj krajnjoj tački (14-15 dana starosti), dnevna intraperitonealna (IP) primena GZ 161 redukovala nivoe GluCer i GluSph u mozgu za >60%. K14 miševi tretirani GZ 161 bili su asimptomatski u ovom trenutku. Iako je primena GZ 161 značajno redukovala nivoe ovih glikosfingolipida, slika 10 pokazuje da su oni ipak ostali povišeni nekoliko puta u odnosu na miševe divljeg tipa iste starosti; GluSph nije detektovan u uzorcima analiziranim od WT ili heterozigotnih legla. Redukcija glikosfingolipida u mozgu kao posledica sistemske primene leka snažno sugeriše da je GZ 161 sposoban i da prolazi kroz krvno-moždanu barijeru i da inhibira svoj ciljni enzim, GCS.
Primer 123
Intraperitonealna primena Gz 161 redukuje mikroglijalno/makrofagno bojenje u celom mozgu K14 miševa
[0613] Ćelije mijeloidne loze mogu se detektovati u mišjem mozgu pomoću antitela na antigene kao što su F4/80 i CD68. F4/80 je transmembranski glikoprotein koji se nalazi na razgranatim (mirovanim) mikroglijama i makrofagama, dok je CD68 lizozomalni protein izražen u relativno visokim nivoima u makrofagama i aktiviranim (reaktivnim) mikroglijama, a u nižim nivoima u razgranatim mikroglijama. Povećano bojenje F4/80 i CD68 u mozgu može nastati regrutovanjem monocita ili proliferacijom mikroglija, i predstavlja normalan odgovor na povredu i upalu. Slika 11 kvalitativno i kvantitativno pokazuje da, u poređenju sa miševima divljeg tipa starih 10 dana (P10), mozak K14 miša ima povećan broj CD68+ ćelija na više lokacija (hipokampus, talamus, moždano stablo, mali mozak). Najveća koncentracija CD68+ ćelija je primećena u talamusu i moždanom stablu, dva mesta koja takođe pokazuju patologiju kod pacijenata sa Gošeovom bolešću tipa 2. (Conradi et al., Acta Neuropathologica 65: 99-109(1984); Conradi et al., Acta Neuropathologica 82: 152-157 (1991); i Wong et al., Molecular Genetics and Metabolism 82: 192-207 (2004)). Slika 11 takođe pokazuje da sistemska primena GZ 161 redukuje broj CD68+ ćelija na svim ovim lokacijama; tretman je takođe redukovao CD68+ ćelije u olfaktornom bulbusu i frontalnom korteksu (podaci nisu prikazani). U skladu sa histopatologijom CD68, slika 12 pokazuje povećano F4/80 bojenje u odnosu na WT životinje kod K14 miševa tretiranih vehikulom na P10. Dnevne IP injekcije GZ 161 redukovale su broj F4/80+ ćelija u talamusu i moždanom stablu, ali su imale marginalne efekte u drugim regionima mozga. Zajedno sa podacima o CD68, ovi rezultati sugerišu da sistemsko lečenje K14 miša sa GZ 161 rezultira redukovanim brojem makrofaga/mikroglija u više regiona mozga.
Primer 124
Intraperitonealna primena GZ 161 redukuje gliozu u nekoliko moždanih regiona K14 miševa
[0614] Astrociti mogu proći kroz hipertrofiju ili proliferisati kao odgovor na upalu i oštećenje ili smrt neurona, proces poznat kao astroglija. Glialni fibrilarni kiseli protein (GFAP) je protein intermedijarnog filamenta koji je jako izražen u aktiviranim (reaktivnim) astrocitima i stoga se može koristiti za praćenje astroglije. Slika 13 pokazuje da je kod P10 bojenje GFAP-om bilo povećano u poređenju sa nivoima WT u nekoliko regiona mozga (hipokampus, talamus, moždano stablo, mali mozak) K14 miša, što ukazuje na prisustvo reaktivnih astrocita. Slika 13 takođe pokazuje da je sistemsko lečenje K14 miševa sa GZ 161 dovelo do redukovanog GFAP bojenja u hipokampusu i malom mozgu kod P10; bojenje je takođe redukovano u olfaktornom bulbusu i frontalnom korteksu (podaci nisu prikazani). Dakle, ovi GFAP rezultati su u skladu sa gore navedenim podacima o makrofagama/mikroglijama, što pokazuje da K14 miš verovatno ima tekući upalni proces koji se u određenoj meri može ublažiti sistemskom primenom GZ 161.
Primer 125
Intraperitonealna primena GZ 161 povećava preživljavanje K14 miševa
[0615] S obzirom na pozitivne efekte lečenja GZ 161 na glikosfingolipide i histopatologiju mozga, postavili smo pitanje da li se ovi efekti prenose na povećano preživljavanje K14 miša.
Slika 14 pokazuje da K14 miševi tretirani vehikulom imaju srednji životni vek od 15 dana, što je u skladu sa našim prethodnim nalazima u ovom mišjem modelu (Cabrera-Salazar et al. (2010)). Sistemsko (IP) lečenje K14 miševa sa GZ 161 rezultiralo je produženjem srednjeg životnog veka na 18 dana (p<0,0001), što je u skladu sa koristi molekularnih i ćelijskih efekata leka u mozgu prikazanih gore.
[0616] U prethodnim eksperimentima, pokazano je kod K14 miša da neonatalne (P1-P3) intracerebroventrikularne injekcije GC mogu još više produžiti srednje preživljavanje, naime, do 23 dana (Cabrera-Salazar et al. (2010)). Budući da GC i GZ 161 oba imaju potencijal da redukuju nivoe istog glikosfingolipida, odnosno GluCer (GC razgradnjom GluCer; GZ 161 inhibicijom njegove sinteze), takođe smo se zapitali da li bi kombinacija Gz161 i intracerebroventrikularne (ICV) primene GC-a pružila korist u preživljavanju superiorniju od one koja proizlazi iz bilo kog pojedinačnog agensa. Slika 14 pokazuje da je kombinacija ICV GC (kod P1,2,3) i dnevne IP Gz161 dovela do srednjeg preživljavanja od 26 dana, značajno veće od samog GZ 161 ili ICV GC (p=0,0007). Dakle, sistemska primena GZ 161 izgleda da je aditivna za ICV GC i pruža dodatnu korist u preživljavanju.
Primer 126
Prenatalna primena GZ 161 ne uspeva da poveća preživljavanje K14 miševa
[0617] Budući da su nivoi GluSph u mozgu K14 miša bili povišeni najmanje 10 puta iznad normale na P1, i dokumentovano je da je GluSph povišen u mozgovima miševa i ljudi zahvaćenih nGD-om čak i prenatalno (Orvisky et al., Pediatric Research 48: 233-237 (2000)), istraženo je da li bi se prenatalnim tretmanom K14 miševa sa GZ 161 mogla postići prednost u preživljavanju. Slika 15 pokazuje da je tretiranje majki WT miševa sa GZ 161 dovelo do ~5 puta redukcije nivoa GluCer u mozgu novorođenog miša (P0), što sugeriše da GZ 161 može preći krvno/placentalnu barijeru. Međutim, davanje GZ 161 majkama K14 miševa, a zatim tretiranje rođenih mladunaca IP injekcijama GZ 161, nije uspelo da produži preživljavanje izvan onog kod miševa kojima je sistemski GZ 161 dat samo postnatalno (18 dana) (slike 14 i 16). Ovi podaci su stoga u skladu sa rezultatima opisanim na slici 14 i impliciraju da, iako GZ 161 može uticati na redukcije u glikosfingolipidima i neuropatologiji, trenutni režim lečenja je nedovoljan za spasavanje CNS. Ovi rezultati su u skladu sa našim prethodnim rezultatima u ovom modelu korišćenjem intracerebroventrikularnih injekcija rekombinantne ljudske glukocerebrozidaze (Cabrera-Salazar et al. (2010)), i zajedno sugerišu da će biti potrebna robusnija i kontinuiranija deplecija glikosfingolipida kao što je GluCer da bi se dodatno poboljšalo preživljavanje.
[0618] Ovi podaci pokazuju, i kvalitativno i kvantitativno, da sistemska (IP) primena GZ 161 neonatalnim K14 miševima značajno redukuje opterećenje supstratom, ublažava patološke karakteristike bolesti i povećava srednji životni vek. Kada je kombinovan sa ICVisporučenim rhGC, sistemska primena GZ 161 rezultirala je aditivnim povećanjem životnog veka, implicirajući da bi takva kombinacija mogla biti efikasnija od bilo koje monoterapije kod pacijenata sa nGD. S obzirom na implikacije ovih studija da GZ 161 očigledno može preći krvno-moždanu barijeru i inhibirati svoj ciljni enzim, glukozilceramidsintazu, razumno je pretpostaviti da bi se ova molekula takođe mogla koristiti za lečenje drugih LSD koji nastaju nakupljanjem supstrata nizvodno od GluCer.
[0619] Važno je napomenuti da je u ovim studijama GZ 161 primenjen na K14 miševima u vremenskom okviru u kojem su se GluCer i GluSph proizvodili u razvijajućem mišjem mozgu u relativno visokim nivoima u poređenju sa WT miševima (slika 9); Brenkert et al., 1972). Dnevni IP tretman sa GZ 161 uspešno je redukovao, ali nije normalizovao nivoe GluCer i GluSph u mozgu K14 (slika 10). Postoji nekoliko dokaza koji sugerišu da GluSph i drugi lizosfingolipidi, kao što je galaktozil sfingozin, mogu doprineti patologiji CNS pokretanjem proizvodnje inflamatornih medijatora Giri et al., Journal of lipid research 47: 1478-1492 (2006) i Gräler et al., Molecular and Cell Biology of Lipids 1582: 168-174 (2002). Sposobnost GZ 161 da redukuje nivoe GluSph i istovremeno rezultira redukovanim makrofagnim/mikroglijalnim i astrocitnim bojenjem (slike 11-13) u skladu je sa ovom hipotezom. Budući da GluSph takođe ima poznata neurotoksična svojstva (Schueler et al., Neurobiology of Disease 14: 595-601 (2003); Orvisky et al., Molecular Genetics and Metabolism 76: 262-270 (2002); Sun et al., Hum Mol Genet 19: 1088-1097 (2010); i Pelled et al., Journal of Inherited Metabolic Disease 23: 175-184 (2000)), nemogućnost tretmana GZ 161 da normalizuje nivoe GluSph je u skladu sa GluSph kao potencijalnim doprinosom ranoj smrti viđenoj u ovom modelu.
[0620] Uzeti zajedno, ovde prikazani pretklinički rezultati na K14 mišjem modelu sugerišu da primena GZ 161 može ublažiti progresiju bolesti i neurološke simptome kod pacijenata sa Gošeovom bolešću tipa 2 i tipa 3. Međutim, teško je predvideti potencijalne koristi takvog terapijskog pristupa kod simptomatskih pacijenata tipa 2, budući da je poznato da njihovi mozgovi sadrže vrlo visoke nivoe GluSph koji datiraju iz prenatalnog života. Goker-Alpan et al., The Journal of Pediatrics 143: 273-276 (2003). Gošeova bolest tipa 3 može biti podložnija lečenju budući da su nivoi GluSph u mozgu niži (Nilsson, J Neurochem 39: 709-718 (1982), progresija bolesti je sporija uprkos tome što je deo fenotipskog kontinuuma (Goker-Alpan et al. (2003)), i u nekim slučajevima pacijenti se mogu identifikovati analizom mutacija pre pojave neuropatskog fenotipa (Ida et al., Human Genetics 105: 120-126 (1999)). Na osnovu trenutnih rezultata, čini se da će biti potreban rani, agresivan pristup lečenju ovih pacijenata. Inhibitori glukozilceramid sintaze malih molekula mogu predstavljati jedan krak sveobuhvatnog pristupa.
Primer 127
SMT muških i ženskih miševa obolelih od Fabryjeve bolesti tretiranih sa GZ 452, GZ 161 i GZ 638.
[0621] Miševi oboleli od Fabrijeve bolesti su započeli tretman sa ~8 meseci starosti i tretirani su 4 meseca sa: 60 mg/kg/dan GZ 452 (Fab 452@ 60mkd), 120 mg/kg/dan GZ 452 (Fab 452 @120mkd), 20 mg/kg/dan GZ 161 (Fab 161 @20mkd), 300 mg/kg/dan GZ 638 (Fab 638 @300 mkd). Tkivo bubrega od 12-mesečnih muških i ženskih miševa obolelih od Fabrijeve bolesti je testirano na nivoe Gb3. Kao što je prikazano na slici 17, GZ 161 i GZ 452 su značajno redukovali količinu Gb3 prisutnog u bubrežnom tkivu u odnosu na netretirane kontrole (Fab UNT 12mo).

Claims (20)

  1. Patentni zahtevi 1. Jedinjenje za upotrebu u lečenju lizozomalne bolesti skladištenja, pri čemu je jedinjenje predstavljeno sledećom strukturnom formulom,
    ili farmaceutski prihvatljivom solju istog, pri čemu: n je 1 ili 2; m je 0 ili 1; p je 1; t je 0; y je 1; z je 0 ili 1; E je O; X<1>je CR<1>kada je m 1 ili N kada je m 0; X<2>je O, -NH, -CH2- ili -NR<2>; X<3>je O, -NH, -CH2-, - CH(C1-C6) alkil ili -NR<3>; X<4>je CR<4>R<5>, ili CH2CR<4>R<5>; X<5>je direktna veza, O, ili (C1-C6)alkiloksi, R<1>je H, CN, (C1-C6)alkilkarbonil ili (C1-C6)alkil; R<2>i R<3>su svaki nezavisno -H, ili opciono kada je X<2>-NR<2>i X<3>je -NR<3>, R<2>i R<3>mogu biti uzeti zajedno sa atomima azota za koje su vezani da formiraju nearomatični heterociklični prsten; R<4>i R<5>su nezavisno izabrani iz H, (C1-C6)alkila, ili zajedno sa ugljenikom za koji su vezani formiraju spiro (C3-C10)cikloalkil prsten ili spiro (C3-C10)cikloalkoksi prsten; R<6>je -H, -CN, ili (C1-C6)alkil, A<1>je (C6-C12)aril, (C2-C9)heteroaril, ili benzo(C2-C9)heterocikloalkil opciono supstituisan jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koju čine halo, (C1-C6)alkil; (C1-C6)alkenil i (C1-C6)alkoksi; A<2>je H, (C3-C10)cikloalkil, (C6-C12)aril, ili (C2-C9)heteroaril, opciono supstituisan jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koju čine halo, (C1-C6)alkil opciono supstituisan sa jednim do tri halo; CN, i (C1-C6)alkiloksi opciono supstituisan sa jednim do tri halo; uz uslov da kada je n 1; t je 0; y je 1; z je 1; X<2>je NH; E je O; X<3>je NH; A<2>je H i X<5>je direktna veza; A<1>nije nesupstituisani fenil, halofenil ili izopropenil fenil; uz uslov da kada je n 1; t je 0; y je 1; z je 1; X<2>je O; E je O; X<3>je NH; A<1>je (C6-C12)aril i X<5>je direktna veza; A<2>je H i R<4>je H onda R<5>nije cikloheksil; i uz uslov da kada je n 1; t je 0; y je 1; z je 1; X<2>je NH; E je O; X<3>je CH2; R<4>i R<5>su oba vodonik; A<2>je H i X<5>je direktna veza; onda A<1>nije nesupstituisani fenil.
  2. 2. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 1, pri čemu je n 1; t je 0; y je 1 i z je 1.
  3. 3. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 1, pri čemu je m 1 i X<1>je CR<1>.
  4. 4. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 1, pri čemu je m je 0 i X<1>je N
  5. 5. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 1, pri čemu je m je 1; E je O; X<2>je O i X<3>je NH.
  6. 6. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 1, pri čemu su R<4>i R<5>svaki metil.
  7. 7. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 1, pri čemu je A<1>je (C2-C9)heteroaril.
  8. 8. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 7, pri čemu je A<1>tiofen, tiazol, izotiazol, furan, oksazol, izoksazol, pirol, imidazol, pirazol, triazol, piridin, pirimidin, piridazin, indol, benzotiazol, benzoizoksazol, benzopirazol, benzoimidazol, benzofuran ili benzoksazol.
  9. 9. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 1, pri čemu je n 1 ili 2; t je 0; y je 1; z je 0 ili 1; X<1>je CR<1>; m je 1; p je 1; E je O; X<2>je O; X<3>je NH; R<1>je H; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A1 je (C6-C12)aril; X<5>je direktna veza ili O, a A<2>je (C6-C12)aril.
  10. 10. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 1, pri čemu je n je 1 ili 2; t je 0; y je 1; z je 0 ili 1; X<1>je CR<1>; m je 1; p je 1; E je O; X<2>je O; X<3>je NH; R<1>je H; R<4>i R<5>su svaki nezavisno metil; R<6>je vodonik ili metil; A<1>je (C2-C9)heteroaril; X<5>je direktna veza ili O, a A<2>je (C6-C12)aril.
  11. 11. Jedinjenje za upotrebu prema zahtevu 9, predstavljeno sledećom strukturnom formulom,
    ili farmaceutski prihvatljivom solju istog.
  12. 12. Jedinjenje za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 11, pri čemu lizozomalna bolest skladištenja rezultira defektom u putu glikosfingolipida.
  13. 13. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 12, pri čemu je lizozomalna bolest skladištenja odabrana iz grupe koja se sastoji od Gošeove bolesti, Fabrijeve bolesti, GM1-gangliozidoze, nedostatka GM2aktivatora, Tej-Saksove bolesti i Sandhofove bolesti.
  14. 14. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 13, pri čemu je lizozomalna bolest skladištenja Fabrijeva bolest.
  15. 15. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 13, pri čemu je lizozomalna bolest skladištenja Gošeova bolest.
  16. 16. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 13, pri čemu je lizozomalna bolest skladištenja Gošeova bolest tipa 2 ili Gošeova bolest tipa 3.
  17. 17. Jedinjenje za upotrebu prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 16, pri čemu se jedinjenje koristi u kombinaciji sa lizozomalnim enzimom.
  18. 18. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 17, pri čemu je lizozomalni enzim odabran iz grupe koja se sastoji od glukocerebrozidaze, alfa-galaktozidaze A, heksosaminidaze A, heksosaminidaze B i GM1-gangliozid-β-galaktozidaze.
  19. 19. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 17, pri čemu je lizozomalna bolest skladištenja Fabrijeva bolest, a lizozomalni enzim je alfa-galaktozidaza A.
  20. 20. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 17, pri čemu je lizozomalna bolest skladištenja Gošeova bolest, a lizozomalni enzim je glukocerebrozidaza.
RS20250761A 2011-03-18 2012-03-16 Inhibitori glukozilceramid sintaze RS67073B1 (sr)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201161454034P 2011-03-18 2011-03-18
US201261590711P 2012-01-25 2012-01-25
EP19207540.6A EP3673906B1 (en) 2011-03-18 2012-03-16 Glucosylceramide synthase inhibitors

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS67073B1 true RS67073B1 (sr) 2025-08-29

Family

ID=46879977

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20200222A RS59963B1 (sr) 2011-03-18 2012-03-16 Inhibitor glukozilceramid sintaze
RS20250761A RS67073B1 (sr) 2011-03-18 2012-03-16 Inhibitori glukozilceramid sintaze

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20200222A RS59963B1 (sr) 2011-03-18 2012-03-16 Inhibitor glukozilceramid sintaze

Country Status (39)

Country Link
US (5) US9139580B2 (sr)
EP (3) EP2685986B1 (sr)
JP (2) JP6117708B2 (sr)
KR (1) KR101987736B1 (sr)
CN (2) CN103917094B (sr)
AR (1) AR085425A1 (sr)
AU (2) AU2012231275A1 (sr)
BR (2) BR122019017719B1 (sr)
CA (1) CA2830540C (sr)
CL (1) CL2013002688A1 (sr)
CO (1) CO6801749A2 (sr)
CR (1) CR20190034A (sr)
DK (2) DK2685986T3 (sr)
DO (1) DOP2013000209A (sr)
EC (1) ECSP13012978A (sr)
ES (2) ES3037907T3 (sr)
FI (1) FI3673906T3 (sr)
GT (1) GT201300215A (sr)
HR (2) HRP20250907T1 (sr)
HU (2) HUE072576T2 (sr)
IL (1) IL228514B (sr)
LT (2) LT3673906T (sr)
MA (1) MA35023B1 (sr)
MX (3) MX365245B (sr)
MY (1) MY173998A (sr)
NI (1) NI201300083A (sr)
PE (1) PE20140412A1 (sr)
PH (1) PH12013501944A1 (sr)
PL (2) PL3673906T3 (sr)
PT (2) PT2685986T (sr)
PY (1) PY1212975A (sr)
RS (2) RS59963B1 (sr)
RU (2) RU2645675C2 (sr)
SI (2) SI3673906T1 (sr)
TW (2) TWI634119B (sr)
UA (1) UA118248C2 (sr)
UY (1) UY33958A (sr)
WO (1) WO2012129084A2 (sr)
ZA (1) ZA201307016B (sr)

Families Citing this family (55)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101987736B1 (ko) * 2011-03-18 2019-06-11 젠자임 코포레이션 글루코실세라마이드 합성효소 억제제
AU2019222801B2 (en) * 2012-09-11 2021-02-18 Genzyme Corporation Glucosylceramide synthase inhibitors
MA37975B2 (fr) * 2012-09-11 2021-03-31 Genzyme Corp Inhibiteurs de synthase de glucosylcéramide
MX365464B (es) * 2013-03-15 2019-06-04 Genzyme Corp Prodecimiento para preparar inhibidores de la glucosilceramida sintasa.
JO3713B1 (ar) * 2013-03-15 2021-01-31 Genzyme Corp أشكال ملح (s)-كوينوكليدين-3-يل(2-(2-(4-فلوروفينيل)ثيازول-4-يل)بروبان-2-يل)كارباميت
CN104418851A (zh) * 2013-09-02 2015-03-18 上海龙翔生物医药开发有限公司 奎宁环衍生物的制备方法及纯化方法
EP3079695B1 (en) * 2013-12-11 2021-03-17 Genzyme Corporation Glucosylceramide synthase inhibitors
BR112016028081A2 (pt) * 2014-05-30 2017-08-22 Sphaera Pharma Private Ltd Novos compostos como agentes antituberculares
WO2016126572A2 (en) 2015-02-02 2016-08-11 The Regents Of The University Of Michigan Glucosylceramide synthase inhibitors and therapeutic methods using the same
TW201642855A (zh) * 2015-03-10 2016-12-16 健臻公司 用於治療蛋白質病變之方法
CN108290855A (zh) 2015-07-01 2018-07-17 西北大学 被取代的喹唑啉化合物及其调节葡糖脑苷脂酶活性的用途
US9802942B2 (en) 2015-07-01 2017-10-31 Northwestern University Substituted 4-methyl-pyrrolo[1,2-A]pyrimidine-8-carboxamide compounds and uses thereof for modulating glucocerebrosidase activity
AR107483A1 (es) 2016-01-29 2018-05-02 Hanmi Pharm Ind Co Ltd Conjugado de enzimas terapéuticas
KR20180124971A (ko) * 2016-03-25 2018-11-21 젠자임 코포레이션 단백질병증의 바이오마커 및 이의 용도
EP3318277A1 (en) 2016-11-04 2018-05-09 Institut du Cerveau et de la Moelle Epiniere-ICM Inhibitors of glucosylceramide synthase for the treatment of motor neuron diseases
WO2018090054A1 (en) * 2016-11-14 2018-05-17 Berg Llc Methods for treating parkinson's disease
WO2018122746A1 (en) 2016-12-28 2018-07-05 Minoryx Therapeutics S.L. Isoquinoline compounds, methods for their preparation, and therapeutic uses thereof in conditions associated with the alteration of the activity of beta galactosidase
CN110325516A (zh) 2016-12-29 2019-10-11 米尼奥尔克斯治疗有限公司 杂芳基化合物和它们的用途
CN108341822B (zh) * 2017-01-23 2021-04-16 广州市恒诺康医药科技有限公司 Fxr受体调节剂及其制备方法和应用
WO2019099294A1 (en) * 2017-11-14 2019-05-23 Merck Sharp & Dohme Corp. Novel substituted biaryl compounds as indoleamine 2,3-dioxygenase (ido) inhibitors
JP2021506920A (ja) 2017-12-21 2021-02-22 リソソーマル・セラピューティクス・インコーポレイテッドＬｙｓｏｓｏｍａｌ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ Ｉｎｃ． 結晶性の置換シクロヘキシルピラゾロ［１，５−ａ］ピリミジニルカルボキサミド化合物およびその治療的使用
WO2019151269A1 (ja) * 2018-01-31 2019-08-08 武田薬品工業株式会社 複素環化合物
US10519157B2 (en) * 2018-02-09 2019-12-31 X-Cutag Therapeutics, Inc. Deuterated compounds for treating Fabry, Gaucher, Parkinson's and related diseases and conditions, and compositions and methods thereof
KR102342901B1 (ko) * 2018-11-22 2021-12-24 (주)프로스테믹스 엑소좀 및 이의 다양한 용도
KR102342902B1 (ko) * 2018-11-22 2021-12-24 (주)프로스테믹스 엑소좀 및 이의 다양한 용도
KR102233530B1 (ko) * 2018-11-22 2021-03-31 (주)프로스테믹스 엑소좀 및 이의 다양한 용도
CN114040762A (zh) 2019-02-04 2022-02-11 建新公司 使用葡糖神经酰胺合酶(gcs)的抑制剂治疗纤毛疾病
CN113645969A (zh) * 2019-02-04 2021-11-12 建新公司 用于治疗与溶酶体贮积症相关的症状和病症的方法
WO2020193746A1 (en) 2019-03-28 2020-10-01 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods for predicting the survival of patients suffering from melanoma
JP7539382B2 (ja) * 2019-07-29 2024-08-23 武田薬品工業株式会社 複素環化合物
EP4048397B1 (en) 2019-10-23 2023-08-16 The Regents Of The University Of Michigan Glucosylceramide synthase inhibitors for therapeutic applications
AU2020384066B2 (en) * 2019-11-15 2025-10-30 Green Cross Corporation Novel derivatives having 2,3-dihydro-1H-indene or 2,3-dihydrobenzofuran moiety or pharmaceutically acceptable salt thereof and pharmaceutical compositions comprising the same
US20230002380A1 (en) * 2019-11-15 2023-01-05 Yuhan Corporation Novel compounds having inhibitory activity against glucosylceramide synthase or pharmaceutically acceptable salt thereof, processes for preparing the same, and pharmaceutical compositions comprising the same
AU2020394602A1 (en) 2019-11-25 2022-06-30 Gt Gain Therapeutics Sa Heteroaryl compounds and therapeutic uses thereof in conditions associated with the alteration of the activity of beta-glucocerebrosidase
BR112022010127A2 (pt) 2019-11-25 2022-09-06 Gain Therapeutics Sa Compostos de arila e heteroarila e usos terapêuticos dos mesmos em condições associadas à alteração da atividade de galatocerebrosidase
JP2023512281A (ja) 2020-02-03 2023-03-24 ゲイン セラピューティクス エスアー Ｍｐｓ１を処置するための併用療法
JP2023512366A (ja) * 2020-02-03 2023-03-27 ジェンザイム・コーポレーション リソソーム蓄積性疾患と関連する神経学的症状を処置するための方法
WO2021214771A1 (en) 2020-04-23 2021-10-28 The Israel Institute of Biological Research (IIBR) Glucosylceramide synthase inhibitors for prevention and treatment of viral diseases
EP4142878B1 (en) 2020-04-28 2024-06-26 The Regents of The University of Michigan Pyridine inhibitors of glucosylceramide synthase and therapeutic methods using the same
AU2021311131B2 (en) 2020-07-24 2026-02-19 Genzyme Corporation Pharmaceutical compositions comprising venglustat
US20230372313A1 (en) * 2020-07-30 2023-11-23 Genzyme Corporation Methods for reducing glycosphingolipid concentration in brain tissue and methods of treatment of neurodegenerative diseases involving the same
IL306116A (en) * 2021-05-11 2023-11-01 Yuhan Corp New compounds with inhibitory activity against glucosylceramide synthase or an acceptable pharmaceutical salt thereof, processes for their preparation and pharmaceutical preparations containing them
WO2023042177A1 (en) 2021-09-20 2023-03-23 Gt Gain Therapeutics Sa Enantiomers of 5-((7-chloroisoquinolin-1-yl)amino)-n-(6-methoxy-1,2,3,4-tetrahydronaphthalen-2-yl)picolinamide
WO2023239892A1 (en) * 2022-06-10 2023-12-14 Arkuda Therapeutics Compounds for modulation of cd68 and uses thereof
CN119923397A (zh) * 2022-10-24 2025-05-02 柳韩洋行 用于制备二甲基-2,3-二氢-1h-茚衍生物的改进方法
CA3268132A1 (en) * 2022-10-24 2024-05-02 Yuhan Corporation NEW DIMETHYL-2,3-DIHYDRO-1H-INDENE DERIVATIVE SALT AND ITS PREPARATION PROCESSES
JP2025541739A (ja) 2022-12-01 2025-12-23 ジェンザイム・コーポレーション Ｃｙｐ３ａ４の強力な又は中程度の阻害剤と組み合わせたベングルスタット
EP4642455A1 (en) 2022-12-30 2025-11-05 GT Gain Therapeutics SA Method of treating tauopathies
WO2025094117A1 (en) 2023-11-02 2025-05-08 Gt Gain Therapeutics Sa Substituted indolyl compounds, compositions thereof, and therapeutic uses thereof
KR20250117295A (ko) * 2024-01-26 2025-08-04 주식회사유한양행 고셔병의 예방 또는 치료용 약제학적 조성물
WO2025215582A1 (en) 2024-04-11 2025-10-16 Gt Gain Therapeutics Sa Substituted pyrazolopyridine and pyrazolopyrimidine compounds and their use
WO2025219951A1 (en) 2024-04-19 2025-10-23 Genzyme Corporation Venglustat for use in methods for reducing disease related biomarker levels in patients with ganglioside storage disorders
WO2025219952A1 (en) 2024-04-19 2025-10-23 Genzyme Corporation Venglustat for use in methods for reducing disease related biomarker levels in patients with ganglioside storage disorders
WO2025262570A1 (en) 2024-06-17 2025-12-26 Genzyme Corporation Venglustat as an inhibitor of glucosylceramide synthase in subjects having hepatic impairment
CN118496159B (zh) * 2024-07-18 2024-09-24 广州医科大学附属市八医院 一种化合物在制备具有预防和/或治疗肝纤维化作用的药物中的应用

Family Cites Families (43)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
BE640616A (sr) 1962-12-19
US3492397A (en) 1967-04-07 1970-01-27 Warner Lambert Pharmaceutical Sustained release dosage in the pellet form and process thereof
US4060598A (en) 1967-06-28 1977-11-29 Boehringer Mannheim G.M.B.H. Tablets coated with aqueous resin dispersions
US3538214A (en) 1969-04-22 1970-11-03 Merck & Co Inc Controlled release medicinal tablets
US4173626A (en) 1978-12-11 1979-11-06 Merck & Co., Inc. Sustained release indomethacin
AU590995B2 (en) * 1986-10-03 1989-11-23 Micro Motion, Inc. Density insensitive coriolis mass flow rate meter
AU611976B2 (en) 1987-12-24 1991-06-27 John Wyeth & Brother Limited Aroyl urea and carbamic acid derivatives of azabicyclo compounds
US5549892A (en) 1988-12-23 1996-08-27 Genzyme Corporation Enhanced in vivo uptake of glucocerebrosidase
US5236838A (en) 1988-12-23 1993-08-17 Genzyme Corporation Enzymatically active recombinant glucocerebrosidase
IT1228293B (it) * 1989-02-06 1991-06-07 Angeli Inst Spa Benzoderivati di composti eterociclici contenenti azoto.
US5272071A (en) 1989-12-22 1993-12-21 Applied Research Systems Ars Holding N.V. Method for the modification of the expression characteristics of an endogenous gene of a given cell line
US5733761A (en) 1991-11-05 1998-03-31 Transkaryotic Therapies, Inc. Protein production and protein delivery
AU685225B2 (en) 1994-02-10 1998-01-15 Yamanouchi Pharmaceutical Co., Ltd. Novel carbamate derivative and medicinal composition containing the same
JPH08198751A (ja) * 1995-01-19 1996-08-06 Yamanouchi Pharmaceut Co Ltd カルバメート誘導体
KR19990067403A (ko) * 1995-11-08 1999-08-16 이곤 이 버그 1-아자바이시클로헵탄 유도체 및 이의 약제학적용도
IL135578A0 (en) 1997-10-29 2001-05-20 Genzyme Corp Compositions and methods for treating lysosomal storage disease
US6953855B2 (en) * 1998-12-11 2005-10-11 Targacept, Inc. 3-substituted-2(arylalkyl)-1-azabicycloalkanes and methods of use thereof
FR2791678B1 (fr) 1999-03-30 2001-05-04 Synthelabo Derives de 1,4-diazabicyclo [3.2.2] nonane-4-carboxylates et -carboxamides, leur preparation et leur application en therapeutique
GB0010955D0 (en) * 2000-05-05 2000-06-28 Novartis Ag Organic compounds
NZ526580A (en) * 2000-12-22 2005-04-29 Almirall Prodesfarma Ag Quinuclidine carbamate derivatives and their use as M3 antagonists
ATE348829T1 (de) * 2001-02-06 2007-01-15 Pfizer Prod Inc Pharmazeutische zusammensetzungen zur behandlung von störungen des zns oder anderen erkrankungen
JP2003267977A (ja) * 2002-03-14 2003-09-25 Yamanouchi Pharmaceut Co Ltd キヌクリジン誘導体
ES2203327B1 (es) * 2002-06-21 2005-06-16 Almirall Prodesfarma, S.A. Nuevos carbamatos de quinuclidina y composiciones farmaceuticas que los contienen.
AU2003246942B2 (en) * 2002-07-17 2009-06-25 Idorsia Pharmaceuticals Ltd Piperidinetriol derivatives as inhibitors of glycosylceramide synthase
JPWO2004011430A1 (ja) * 2002-07-25 2005-11-24 アステラス製薬株式会社 ナトリウムチャネル阻害剤
SE0202598D0 (sv) * 2002-09-02 2002-09-02 Astrazeneca Ab Alpha-7 Nicotinic receptor agonists and statins in combination
JP4750421B2 (ja) * 2002-12-06 2011-08-17 ノース ショア−ロング アイランド ジュ−イッシュ リサ−チ インスティチュ−ト α７受容体結合コリン作動性アゴニストを用いる炎症の阻害
GB0400812D0 (en) 2004-01-14 2004-02-18 Celltech R&D Ltd Novel compounds
JP2007186422A (ja) * 2004-01-28 2007-07-26 Astellas Pharma Inc アリールスルフィド誘導体
JP2008504282A (ja) * 2004-06-23 2008-02-14 ザ ファインスタイン インスティテュート フォー メディカル リサーチ コリンレセプターの薬理活性により腸閉塞を処置する方法
EP1811991B1 (en) 2004-11-10 2018-11-07 Genzyme Corporation Treatment of type 2 diabetes using inhibitors of glycosphingolipid synthesis
EP1976519A2 (en) * 2006-01-27 2008-10-08 Yale University Cytisine and acetylcholine analogs and methods of treating mood disorders
US7840109B2 (en) * 2006-08-14 2010-11-23 Adc Telecommunications, Inc. Factory spliced cable assembly
CA2706727A1 (en) * 2007-11-29 2009-06-11 Michael S. Mcgrath Compositions and methods for treating lysosomal disorders
WO2009086303A2 (en) * 2007-12-21 2009-07-09 University Of Rochester Method for altering the lifespan of eukaryotic organisms
CA2731685A1 (en) * 2008-07-28 2010-02-04 Genzyme Corporation Glucosylceramide synthase inhibition for the treatment of collapsing glomerulopathy and other glomerular disease
WO2010015816A2 (en) * 2008-08-06 2010-02-11 Summit Corporation Plc Treatment of lysosomal storage disorders and other proteostatic diseases
EP2154136A1 (en) * 2008-08-08 2010-02-17 CHIESI FARMACEUTICI S.p.A. Quinuclidine carbonate derivatives and medicinal compositions thereof
WO2010091164A1 (en) * 2009-02-06 2010-08-12 Exelixis, Inc. Inhibitors of glucosylceramide synthase
WO2010091104A1 (en) * 2009-02-06 2010-08-12 Exelixis, Inc. Glucosylceramide synthase inhibitors
US9150803B2 (en) 2009-06-09 2015-10-06 Sundrop Fuels, Inc. Systems and methods for biomass grinding and feeding
SI3998078T1 (sl) 2009-08-28 2026-02-27 Genzyme Corporation Encimsko nadomestno zdravljenje z naraščajočim odmerkom za zdravljenje pomanjkanja kisle sfingomielinaze
KR101987736B1 (ko) * 2011-03-18 2019-06-11 젠자임 코포레이션 글루코실세라마이드 합성효소 억제제

Also Published As

Publication number Publication date
CN103917094A (zh) 2014-07-09
UY33958A (es) 2012-10-31
WO2012129084A3 (en) 2014-04-24
GT201300215A (es) 2015-02-09
PT2685986T (pt) 2020-03-05
TWI546301B (zh) 2016-08-21
US20140371460A1 (en) 2014-12-18
ES3037907T3 (en) 2025-10-08
JP6117708B2 (ja) 2017-04-19
US9126993B2 (en) 2015-09-08
ES2774293T3 (es) 2020-07-20
BR112013023774A2 (pt) 2016-12-06
UA118248C2 (uk) 2018-12-26
AU2016244305B2 (en) 2018-05-24
FI3673906T3 (fi) 2025-08-14
KR20140092239A (ko) 2014-07-23
CL2013002688A1 (es) 2014-03-07
ZA201307016B (en) 2014-05-28
US9139580B2 (en) 2015-09-22
MX2019008428A (es) 2019-10-30
TW201300383A (zh) 2013-01-01
CA2830540C (en) 2021-04-27
NZ615857A (en) 2016-08-26
NI201300083A (es) 2014-02-28
PH12013501944A1 (en) 2013-10-14
IL228514A0 (en) 2013-12-31
PE20140412A1 (es) 2014-04-01
MA35023B1 (fr) 2014-04-03
LT2685986T (lt) 2020-03-10
US20200048266A1 (en) 2020-02-13
CN107080747A (zh) 2017-08-22
BR112013023774B1 (pt) 2022-01-11
CR20190034A (es) 2019-05-20
US20140255381A1 (en) 2014-09-11
HUE047888T2 (hu) 2020-05-28
BR122019017719B1 (pt) 2022-08-23
EP2685986A4 (en) 2015-03-04
DK2685986T3 (da) 2020-03-02
AU2016244305A1 (en) 2016-11-03
PT3673906T (pt) 2025-07-29
PY1212975A (es) 2015-10-01
TW201716404A (zh) 2017-05-16
CN103917094B (zh) 2016-11-09
IL228514B (en) 2019-09-26
DK3673906T3 (da) 2025-08-18
ECSP13012978A (es) 2015-04-30
PL2685986T3 (pl) 2020-07-27
JP2014517808A (ja) 2014-07-24
MX365245B (es) 2019-05-28
EP2685986B1 (en) 2019-11-27
US20210261557A1 (en) 2021-08-26
SI2685986T1 (sl) 2020-03-31
RS59963B1 (sr) 2020-03-31
MX2013010710A (es) 2013-10-17
EP4559918A3 (en) 2025-11-19
EP4559918A2 (en) 2025-05-28
MX368340B (es) 2019-09-30
RU2645675C2 (ru) 2018-02-27
WO2012129084A2 (en) 2012-09-27
RU2018104472A3 (sr) 2021-04-30
DOP2013000209A (es) 2014-04-15
JP6420860B2 (ja) 2018-11-07
CO6801749A2 (es) 2013-11-29
EP3673906B1 (en) 2025-05-14
EP2685986A2 (en) 2014-01-22
MY173998A (en) 2020-03-03
LT3673906T (lt) 2025-08-11
KR101987736B1 (ko) 2019-06-11
EP3673906A1 (en) 2020-07-01
HUE072576T2 (hu) 2025-11-28
TWI634119B (zh) 2018-09-01
PL3673906T3 (pl) 2025-09-22
AU2012231275A1 (en) 2013-10-17
US20160207933A1 (en) 2016-07-21
RU2013146550A (ru) 2015-04-27
AR085425A1 (es) 2013-10-02
JP2017141255A (ja) 2017-08-17
CA2830540A1 (en) 2012-09-27
CN107080747B (zh) 2021-02-26
RU2018104472A (ru) 2019-02-22
HRP20200226T1 (hr) 2020-05-29
SI3673906T1 (sl) 2025-09-30
HRP20250907T1 (hr) 2025-09-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US20210261557A1 (en) Glucosylceramide synthase inhibitors
US20250026749A1 (en) Glucosylceramide synthase inhibitors
HK40033123A (en) Glucosylceramide synthase inhibitors
HK40033123B (en) Glucosylceramide synthase inhibitors
OA16599A (en) Glucosylceramide synthase inhibitors.
SG193532A1 (en) Glucosylceramide synthase inhibitors
NZ615857B2 (en) Glucosylceramide synthase inhibitors