RS71304A

RS71304A - INHIBITORI MIKROGLIA ZA PREKIDANJE IMUNIH REAKCIJA POSREDOVANIH INTERLEUKINOM-12 I FNγ

Info

Publication number: RS71304A
Application number: YU71304A
Authority: RS
Inventors: Thorsten Blume; Wolf-Dietrich Docke; Wolfgang Halfbrodt; Joachim Kuhnke; Ursula Moning; Bernd Elger; Herbert Schneider
Original assignee: Schering Aktiengesellschaft
Priority date: 2002-02-15
Filing date: 2003-01-17
Publication date: 2006-10-27
Also published as: NO20043840L; PE20030906A1; UY27662A1; EP1474138A1; TW200306823A; AU2003245523A1; CN1756546A; MXPA04007943A; UA81111C2; AR039556A1; KR20040084909A; ZA200407382B; JP2005522447A; WO2003068225A1; PL371327A1; DE10207843A1; RU2004127677A; BR0307706A; CA2475770A1; ECSP045297A

Abstract

Pronalazak opisuje primenu mikroglia-inhibitora za proizvodnju lekova, koji inhibiraju monocitima, makrofagama i T-ćelijama posredovane imune reakcije i njihovu primenu za lečenje T-ćelijama posredovanih imunoloških oboljenja i zapaljenskih reakcija koje nisu posredovane T-ćelijama.

Description

Inhibitori mikroglia za prekidanje imunih reakcija posredovanih

interleukinom-12 i IFNy

Pronalazak se odnosi na primenu nekog mikroglia- inhibitora za dobijanje leka koji inhibira interlukinoml2 (IL 12) i interferonom y posredovane imune reakcije, i njegovu primenu u lcčenju T-ćelijski posredovanim imunoliškim oboljenjima i ne T-čelijski posredovanim zapaljensjim reakcijama.

Imuni sistem obuhvata mnogobrojne ćelije i komplekse tkiva, koji u glavnom medjusobno komuniciraju preko rastvorljivih faktora. Poznato je da mnoga imunološka oboljenja bivaju izazvana debalansom imunofaktora, kao na primer citokina (Mosmann, and Coffman., Ann. Rev. Immunol. 7 : 145 - 173 (1989 Street and Mosmann, FASEB J. 5:171 - 177 (1991); Lucey et al., Clin. Microbiol. Rev. 4: 532 - 562

(1996); Powrie and Coffman, Trends Pharmacol. Sci. 14:164 - 168

(1993); Singh et ali., Immunolog. Res., 20: 164 - 168 (1999)). Tako postoji na primer mnoštvo naznaka na ulogu interferona gama i interleukina 12 u patogenezi autoimunih oboljenja. Posebno treba navesti oboljenja koja su karakterisana T- ćelijama posredovanom inflamatornom reakcijom, kao multipla skleroza, dijabetes, hronična inflamatorna crevna oboljenja (Inflamatorv Bowel Diseases). Fagocitame ćelije produkuju citokin interleukin 12 (IL 12), kao makrofage/monociti, dendriti, B - ćelije, i druge anntigen-prczentujuće ćelije (APC) i deluju kako na funkciju prirodnih ćelija ubica (NK-ćelije) tako i na one T - limfocita. IL 12 može u oba tipa ćelija da potstakne produkciju Interferona gama (IFNy). T — limfocite možemo grubo podeliti u dve kategorije koje su karakterisane odredjenim površinskim antigenima (CD4 i CD8): CD4 - pozitivne T - ćelije (pomoćnici-T- ćelije) i CD8 - pozitivne T - ćelije (citotoksične T - ćelije). CD4 - ćelije se mogu opet podeliti u T - pomoćnike - ćelije 1 (Th 1) i u T - pomoćnike - ćelije 2 (Th2). Specijalno Thl posredovani imuni odgovori su asocirani sa patogenezom mnogobrojnih imunooboljenja, specijalno autoimunih oboljenja, kao na primenTip 1 insulin-zavisni dijabetes melitus (IDDM), multipla skleroza, alergijski kontaktekcem, psorijaza, reumatoidni artritis, hronična inflamatorna zapaljenja creva ("Inflammatorv Bowel diseases"-Morbus Crohn, Colitis ulcerosa), lupus - oboljenja i druge kolagenoze kao i akutne reakcije odbacivanja u alotransplantaciji ("Host - versus - Graft"-odbacivanje alotransplantata, „Grafit — versus - host Disease").

O interleukinu 12 je poznato da igra kritičnu ulogu u regulaciji Thl - odgovora. U ovim ćelijama interleukin 12 indukuje produkciju uglavnom IL - 2, IFNy, TNFa i TNFf3 (Mosmann and Sad, Immunol. Today 17 : 138 -146 (1996) ; Gately et al. Annu. Rev. Immunol.16 : 495 - 521

(1998)). Specijalno IFNy je potentni posrednik dejstva IL - 12. Hiperprodukcija interferona gama može na primer da bude odgovorna za MHC II (Major Histocompatibility Complex) asocirana autoimuna oboljenja. Dodatno postoji dovoljno očiglednosti što se tiče patološke uloge interferona gama u alergijskim oboljenjima kao i sarkodioze i psorijaze.(Billiau A., Adv. Immunol., 62: 61 - 130 (1996); Basham et al. J. Immunol. L30 : 1492 - 1494 (1983); Hu et al., Immunology, 98: 379 - 385 (1999); Seery JP., Arthritis Res., 2: 437 - 440 (2000)). Osim toga su IL - 12 i IL - 12/IL - 18 indukovani IFNy iz NK - ćelija bitni sudeonici u patomehanizmu zapaljenskih reakcija koje nisu posredovane T - ćelijama (na primer "Toxik Shock Svndrome", endotoxinemija, sepsa i septični šok, ARDS, "first dose response" kod terapije na antitela na primer OKT3 - davanja kod alotransplantacije) (Kum et al., Infekt. Immun. 69: 7544 - 7549 (2001); Arad et al., J Leukoc. Biol. 69_: 921 - 927 (2001); Hultgren et al., Arthritis Res. 3: 41 - 47 (2001); Arndt et al., Am..1. Respir.Cell. Moli.Biol. 22: 708-713 (2000); Grohmann et al., J. Immunol. 164; 4197 - 4203 (2000); Muraille et al., Int. Immunol. U:1403 - 1410 (1999)). IL - 12 igra takodje ulogu u za sada nejasnim patomehanizmima (na primer eklampsija) (Hayakawa et al., J. Reprod. Immunol. 47: 121 - 138 (2000); Daniel et al., Am. J. Reprod. Immunol. 39: 376 - 380 (1998)).

Pored interleukina i IFNy i drugim citokinima se pripisuje uloga u patogenezi imunih oboljenja i sistemskim zapaljenskim reakcijama, kao na primer TNFa. TNFa ima značajnu patološku ulogu kod ifekcionih oboljenja (kao na primer sepsa, ,,toxik shock syndrome" (Tracey et al., Nature 330: 662 - 664 (1987); Basger et al., Circ. Shock, 27: 51 - 61

(1989); Hinshaw et al., Circ. Shock, 30 : 279 - 292 (1990); Wage A., Lancet, 351: 603 (1998); Cohen et al., Lancet, 351: 1731 (1998) ), ali i brojnih drugih imunopsredovanih oboljenja.

Za lečenje oboljenja posredovanih IL - 12 i za suzbijanje akutnih sindroma ovih oboljenja često se upotrebljavaju kortikosteroidi, čija sporedna dejstva pri dugotrajnoj upotrebi često vode do prekidanja lečenja.

Aktiviranje mikroglia predstavlja centralni korak u zapaljenskom dogadjanju od gotovo svih degenerativnih oboljenja centralnog nervnog sistema. Mikroglie mogu da ostanu u aktiviranom stanju u toku dužeg vremenskog perioda, tako što proizvode i sekretuju različite faktore zapaljenja, na primer reaktivne kiseonik/azot — intermedijate, proteaze, citokine, komplement - faktore i neurotoksine. Ovo opet izazivaju neuronalne disfunkcije i degeneracije. Aktiviranje mikroglia može da otpočne različitim stimulatorima, kao na primer A(3 - peptidom (|3 - Amiloid, Araujo, D.M. and Cotman, C.M., Brain Res. 569: 141 - 145

(1992)), prion - proteinom, citokinom ili drugim fragmentima ćelija (Combs, C. K. et al., J. Neurosci. 19: 928 - 939 (1999); Wood, P. L., Neuroinflammation: Mechanismus and Menagement, Humana Press

(1998).

Jedinjenja, koji posle stimulacije sa Ap - peptidom suzbijaju aktiviranje mikroglia, opisani su u WO 01/51473, DE-Aktenceichen 101 34 775.8 i DE Aktenceichen 101 35 0,50.3 Iz toga je takodje poznato, da se benzimidazoli, koji suzbijaju aktiviranje mikroglia, upotrbljavaju za lečenje neuroinflamatornih oboljenja, kao AIDS - demencije, amiotrfne lateralne skleroze, Krojcfeld - Jakobsove bolesti, Daunovog sindroma, difuzne Lewy Bodi bolesti, Hantingtonove bolesti leukocefalopatije, multiple skleroze, Parkinsonove bolesti, Piksove bolesti, Alchajmerive bolesti, šloga, temporarne Lob - epilepsije i tumora.

U osnovi pronalaska je problem da na raspolaganje stavi sredstvo koje je pogodno za lečenje imunoloških oboljenja, pri čemu su imunološka oboljenja izazvana pojačanom produkcijom citokina, kao na primer IL 12, IFNy i TNFa, bez dejstva na druge faktore imunog sistema, čime se sporedna dejstva umanjuju odnosno sprečavaju.

Sada je pronadjeno da iznenadjujuće inhibitori mikroglia inhibiraju produkciju IL 12 i IFNy i indukuju produkciju interleukina 10 IL 10) i zbog toga nalaze primenu u proizvodnji leka za lečenje nekih miocitima, makrofagama ili T-ćelijama posredovanim imunološkim oboljenjima kao i ne T-ćelijski posredovanih patofizioloških zapaljenskih reakcija.

Kako je napred izloženo mogu T-limfociti, posle ekspresije njihovih površinskih antigena da se podele na CD4-pozitivne T-ćelije (T-ćelije pomoćnici) i CD8-pozitivne T-ćelije (citotoksične T-ćelije) a CD4-pomoćnici-T-ćelije (Th-ćelije) opet u T-pomoćnici- ćelije 1 (Thl) i T-pomoćnici-ćelije 2 (Th2) koje se pored ostalog razlikuju po svojoj sposobnosti da sprečavaju toleranciju. Ciotokine IL 12 i IFNy igraju važnu ulogu u indukciji i održavanju TH 1 ćelijske diferencijacije. Izdiferencirane Th 1 ćelije izdvajaju IFNy, interleukin 2 i TNFa/(3. Ovi citokini aktiviraju opet makrofage i citotoksične CD 8 pozitivne T-ćelije.

Pronalazak se odnosi naročito na primenu inhibitora mikroglia za dobijanje leka za prekidanje produkcije IL 12 odnosno IFNy u ćelijama monocitarnog porekla odnosno T-ćelijama i NK-ćelijama. Na osnovu njihove sposobnosti da prekinu produkciju IL 12 i TNFa u monocitima/makrofagama/dendritima i produkciju IFNy u T - ćelijama i NK —ćelijama, mikroglia-inhibitori su podesni za lečenje brojnih oboljenja, koja se izazvaju pojačanom produkcijom citokina, kao na primer TNFa, p\ IFNy, IL - 2 i IL 12, kao inflamatornih oboljenja , koja se ne zasnivaju na neuroinflamaciji, autoimunih oboljenja, alergijskih i infekcionih oboljenja, toksinom indukovanih oboljenja, farmakološki izazvanih zapaljenskih reakscija kao i patofiziološki relevantnih zapaljenskih reakcija za sada nejasne geneze.

Primeri za inflamatorna i autoimuna oboljenja su: hronična inflamatorna oboljenja creva (Inflammtorv Bowel Disaeses, Chron's Disaeses Ulcerative Cilitis) artritia, alergijski kontaktni ekcem, psorijaza, pemfigus, astma, multipla skleroza, dijabetes, tip-linsulin zavisni dijabetes melitus, reumatoidni artritis, lupus-oboljenja i druge kolagenoze, Grave's Disease, Hashimoto's Disease, "Graft-versus-host-Disease" i transplantaciona odbacivanja.

Primeri alergijskih, infekcionih i toksinom izazvanih i ishemijom izazvanih oboljenja su: sarkoidoza, astma, hipersenzitivni pneumonitis, sepsa, septični šok, endotoksični šok, toksični šoksindrom, toksično otkazivanje jetre, ARDS (akutni sindrom nedostatka vazduha), eklampsija, kaheksija, akutne virusne infekcije (na primer mononukleoze, fulminantni hepatitis), oštećenje organa posle reperfuzije.

Primer farmakološki izazvanog zapaljenja sa patofiziološkom relevan-tnošću je "first dose response" posle davanja antitela anti-T-ćelija kao OKT3.

Primer za sistemske zapaljenske reakcije za sada nepoznate geneze je eklampsija.

Prema pronalasku podesni inhibitori mikroglia su jedinjenja, koja pri stimulaciji sa Ap-peptidom ostvaruju suzbijanje aktiviteta mikroglia od najmanje 20% i suzbijanje aktiviteta citokina od najmanje 30%. Biološke osobine inhibitora mikroglia mogu da se pokažu prema za stručnjake poznatim metodama, na primer uz pomoć metode za ispitivanje opisane kako sledi, i koja je opisana u WO 01/51473.

Naročito podesni inhibitori mikroglia sa gore opisanim osobinama su benzimidazoli formule I, njihovi tautomerni i izomerni oblici i soli.

U njoj su

R<1>aril grupa ili jedna peto- ili šestočlana heteroarilgrupa sa jednim ili dva heteroatoma, izabrana iz grupe kuja obuhvata N, S i O, pri čemu aril- ili heteroarilgrupa može nezavisno djusobno da bude supstituisana sa do tri ostatka izabrana iz grupe, koja obuhvata

F, Cl, Br,

C(NH)NH2, C(NH)NFLR¥, C(NH)NJ?V', C(N/?<*>)NH2

C( NR4) NUR4',C(NH)NflV',

X- OU, X- OR4, X- OCOR4, X- OCONHR4, X- COR4,

X- C( NOH) R4,

X- CN,X-COOH,*-COO^,X-CONH2,X- CONR4R4, X- CONHR4,X-CONHOH

X- SR4, X- SOR4, X- S02R4

S02NH2, S02NH/?', S02N7? V

N02, X-NH2,X- NHR4, X- NR4R4, X- NR4S02R4\

x- m- iso2R4'

X- NHCOR4, X- NHCOOR4, X- NUCONHR4iR<4>,

pri čemu jeXveza, CH2ili (CH2)2ili CH(CH3)2,pri čemu se dalje ostatci R4 i R4biraju prema dalje dole navedenim značenjima i

pri čemu dva supstituenta naR<1>,ako su medjusobno orto pozicionirani mogu da budu tako medjusobno povezani da zajedno čine metandiilbisoksi-, etan-l,2-diilbisoksi-, propan-l,3-diil- ili butan-1,4-diilgrupu, ili ostatak, izabran iz grupe, koja obuhvata Ci_6-alkil, (C0-3-alkendiil-C3_7-cikloalkil) i C3_6-alkenil, u kojima H-atom može na taj način da bude zamenjen heterocikličnim ostatkom, izabranim iz grupe koja obuhvata piperazin, morfolin, piperidin i pirolidin, tako da se gradi veza prema prvom N-atomi heterocikličnog ostatka, pri čmu navedeni alkil-, cikloalkil-, alkenilostatci i heterocikličniostatak, mogu da budu supstituisani sa do dva ostatka, izabranih iz grupe, koja obuhvata Co-2-alkandiil-Oi? , C0-2-alkandiil-NH2, Co-2-alkandiil NH/?<7>,C0.2-alkandiil-N^<7>/f<7>',C0.2-alkandiil-NHC07?7, C0-2-alkandiil-N/?<7>CO/?<7>', C0.2-alkandiil-NUS02R<7>,C0.2-alkandiil-N7?<7>SO2/?<7>', C0.2-alkandiil-C02H, C0-2-alkandiil-CO/?<7>, C0.2-alkandiil-CONH2C0.2-alkandiil-CONHi?<7>,C0.2-alkandiil-N/?<7>CON/?<7>/?<7>',

fenil i jedan peto- ili šestočlani heteroarilostatak, pri čemu heteroarilostatak sadrži jedan ili dva heteroatoma izabrana iz grupe koja obuhvata N, S i O, pri čemu dalje fenil-i hetero-

arilostatak mogu da budu supstituisani sa do dva ostatka, izabrana iz grupe koja obuhvata F, Cl, Br, C2H5, OH, OCH3, OC2H5, N02, N(CH3)2, CF3, C2F5i S02NFI2 i/ili može

da nosi jednu aneliranu metandiilbisoksi- ili etan-1,2-diilbis-oksi grupu, pri čemu ostatak piperazina može na drugom atomu azota da bude takodje supstituisan sa R<7>, COR<7>ili S02R , pri čemuRiRmedjusobno nezavisno, mogu dalje da budu izabrani prema dole navedenim značenjima,

R-Z-R , jedna arilgrupa ili ili jedna peto- ili šestočlana heteroarilgrupa sa do dva heteroatoma, izabrana iz grupe koja obuhvata N, S i O, jedna benzotienilgrupa ili indolilgrupa, pri če mu navedene aril- ili heteroarilgrupe mogu biti supstitiuisane sa do tri ostatka medjusobno nezavisno, izabrana iz grupe

koja obuhvata

F, Cl, Br,

C(NH)NH2, C(NH)NH^^, C(NH)N/?V', C(N/^)NH2

C( NR4) NllR4', C(N R4) NR4R4',

X- OH, X- OR4, X- OCOR4, X- OCONHR4, X- COR4,

X- C( NOH) R4,

X- CN, X- COOU, X- COOR4,X-CONH2,X- CONR4R4', X- CONHR4,X-CONHOH

X- SR4, X- SOR4, X- S02R4

S02NH2, S02NH/^, S02N/?V

N02, X- NH2, X- NHR4, X- NR4R4 , X- NR4S02R4 ,

X- NHS02R4'

X- NHCOR4, X- NUCOOR4, X- NHCONUR4iR<4>,

pri čemu jeXveza, CFI2 ili (CH2)2ili CH(CH3)2,

pri čemu se dalje ostatciR<4>iR<4>biraju medjusobno nezavisno prema dalje dole navedenim značenjima i pri čemu dva ostatka naR<1>,ako su medjusobno orto pozicionirani mogu da budu tako medjusobno povezani da zajedno čine metandiilbisoksi-, etan-1,2-diilbisoksi-, propan-l,3-diil- ili butan-1,4-diilgrupu,

ZNH, N/r , O, S, SO ili so2, pri čemuRima u sledećem

navedeno značenje,

R2iR2nezavisno medjusobno svaka ostatak izabran iz grupe koja obuhvata : Ci_4-perfluoralkil, Ci_6-alkil, (Co-3-alkandiil-C3_7-cikloalkil), (Co-3-alkandiil-heteroaril), pri čemu je heteroarilgrupa peto- ili šestočlana, i sadrži dva heteroatoma, izabrana iz grupe koja sadrži N, S i O i pri čemu aril- i heteroarilgrupa može da bude supstituisana svaka sa po do dva ostatka izabrana iz grupe koja obuhvata F, Cl, Br, CH3, C2H5, OH, OCH3, OC2H5, N02, N(CH3)2, CF3, C2F5 i S02NH2i/ili mogu da nose aneliranu metandiilbisoksi- ili etan-1,2-diilbisoksigrupu, i dalje jedan član prstena u petočla nom cikloalkilprstenu mogu da budu prsten-N- ili prsten-O-atomi i jedan ili dva člana prstena u jednom šestočlanom ili sedmočlanom prstenu mogu da budu prsten-N- i/ili prsten-O-atomi pri čemu prsten-N-atomi u datom slušaju mogu biti supstituisani sa Ci_3-alkilom ili Ci.3-alkanoilom,

iRiR2zajedno saZ gradepeto- do sedmočlani heterociklični prsten, ako je Z N-atom, pri čemuZima.dalje gore navedeno značenje pri čemu dalje heterociklični

prsten sadrži dalji atom N-, O- iliS-atom i opcionalno može da bude supstituisan nekim ostatkom izabranim iz grupe koja obuh vata CM-alkil, (C0-3-alkandiil-Ci_3-alkoksi), CM-alkanoil, Ci_4-alkoksikarbonol, aminokarbonil i aril

R<3>medjusobno nezavisno jedan ili dva ostataka izabrana iz grupe koja obuhvata

vodonik,

F, Cl, Br,

OH,OR<4>, OCOR<4>OCONH/^,

COR<4>,

CN, COOH,COOR<4>,CONH2,CONHR<4>,CONHOH,

CONHOi^,

SR<4>, SOR<4>, S02R<4>,S02NH2, SO^UR<4>,S02N/? 4R4'

N02, NH2,NH/?', NR<4>R<4>'

NHS02R<4>, NR4S02R4\NHS02/?6,NR<4>S02R<6>,

NHCO/?',NHCOO/?', NHCONH/?' iR<4>

pri čemu ostatciR<4>, R4iR<6>mogu da budu izabrani kako je dalje dole navedeno nezavisno jedan od drugog,

Agrupa , izabrana iz grupe koja obuhvata Ci_i0-alkandiil, C2_

10-alkendiil, C2_i0-alkindiil i (C0-3-alkandiil-C3.i0-ciklo-alkandiil-Co-3-alkandiil) pri čemu u petočlanom cikloalkilprstenu jedan član prstena mogu da budu prsten-N-ili prsten-O- atomi i jedan ili dva člana prstena u jednom šestočlanom ili sedmočlanom prstenu mogu da budu prsten-N- i/ili prsten-O-atomi pri čemu prsten-N-atomi u datom

slušaju mogu biti supstituisani sa Ci_3-alkilom ili Ci_3-alkanoilom,

pri čemu u gore navedenim alifatičnim lancima jedan atom ugljenika može da bude zamenjen sa O, NH, N-Ci_3-alkil, ili alkanoil pri čemu alkil- ili cikloalkilgrupe mogu da budu opciono supstituiosana ostatkom, izabranim iz grupe, koja obuhvata -O, OH, OC,.3-alkil, NH2, NH-d_3-alkil, NH-Cj.3-alkanoil, N(C,.3-alkil)2i N(C,.3-alkil)(C1.3-alka-

noil),

Bostatak izabran iz grupe koja obuhvata COOH,COOR<5>,

CONH2, CONHNH2, CONHft5,CONR<5>R<5>',CONHOH, CONH07?<5>i

tetrazolil,

uvek vezane za C-atom grupeA

pri čemu su ostatciR<5>i i?5 medjusobno nezavisno izabra-

ni prema dalje dole navedenim značenjima

Ygrupu izabranu iz grupe koja obuhvata O, NH,NR<4>, NCOR<4>

NS02R<4>iNS02R<6>

pri čemuR<4>iR<6>imaju dalje dole navedena značenja, gde u prethodnim ostatcima, ostatciR<4>, R<4>, R<5>, Rs i R<6>imaju sledeća značenja; u njima su:R<4>iR4nezavisno medjusobno uvek ostatak, izabran iz grupe, koja obuhvata CF3, C2F2, Ci_4-alkil,C2.4-alkenil, C2.3-alkinil,

i (Co-3-alkandiil-C3.7-cikloalkil), pri čemu u petočlanom cikloalkilprstenu jedan član prstena mogu da budu prsten-N-ili prsten-O- atomi i jedan ili dva člana prstena u jednom šestočlanom ili sedmočlanom prstenu mogu da budu prsten-N- i/ili prsten-O-atomi pri čemu prsten-N-atomi u datom

slušaju mogu biti supstituisani sa C^-alkilom ili C].3-alka-noilom,

R<5>iR5nezavisno medjusobno svaki ostatak, izabran iz grupe koja obuhvata CF3, C2F5, C|.4-alkil, C2-4-alkenil, C2-3-alkinil i (C0-3-alkandiil-C3.7-cikloalkil),

pri čemu u petočlanom cikloalkilprstenu jedan član prstena mogu da budu prstcn-N- ili prsten-O- atomi i jedan ili dva člana prstena u jednom šestočlanom ili sedmočlanom prstenu mogu da budu prsten-N- i/ili prsten-O-atomi pri čemu

prsten-N-atomi u datom slučaju mogu biti supstituisani sa Ci.3-alkilom ili Ci.3-alkanoilom, kao i dalje (C0-3-alkandiil-aril)

i (Ci-3-alkndiil-heteroaril), pri čemu je heteroarilgrupa peto-ili šestočlana i sadrži jedan ili dva heteroatoma, izabrana iz grupe koja obuhvata N, S i O, pri čemu svi prethodno navedeni alkil- i cikloalkilostataci mogu da budu supstituisani sa do dva ostatka izabrana iz grupe koja obuhvata CF3, C2F5, OH, 0-Ci.3-alkil, NH2, NH-C,_3-alkil, NII-C,.3-alkanoil,

N(C,_3-alkil)2, N(C,.3-alkil)(C,.3-alkanoil), COOH, CONH2, COO-Ci-3-alkil a sve prethodno navedene aril- i heteroarilgrupe sa do dva ostatka izabrana iz grupe, koja obuhvata F, Cl, Br, CH3, C2H5, OH, OCH3, OC2H5, N02, N(CH3)2, CF2, C2F5i S02NH2, i/ili mogu da nose jednu aneliranu metandiilbisoksi- ili etan-1,2-diilbisoksigrupu, iliR<5>iR5zajedno sa N-atomom amida izBčine jedan peto do sedmočlanni, zasićeni ili nezasićeni heterociklični prsten koji može da sadrži dalji N- ili O- ili S-atom i koji može da bude supstituisan sa Ci_4-alkilom, (Co-2-alkandiil-Ci_4-alkoksi), Ci_4-alkoksikarbonil, aminokarbonilom ili arilom,

R<6>ostatak, izabran iz grupe koja obuhvata (Co-3-alkandiil-aril)

i (Co-3-alkandiil-heteroaril), pri čemu je heteroarilgrupa peto- ili šestočlana i sadrži jedan ili dva heteroatoma izabrana iz grupe koja obuhvata N, S i O, i pri čemu aril- i heteroarilgrupe mogu da budu supstituisane sa do dva ostatka izabrana iz grupe koja obuhvata F, Cl, Br, CH3, C2H5, OH, OCH3, OC2H5, N02, N(CH3)2, CF2, C2F5i S02NH2, i/ili mogu da nose jednu aneliranu metandiilbisoksi- ili etan-1,2-diilbisoksigrupu,

R<7>iR<7>medjusobno nezavisno R<4>i R6.

Podesni su takvi benzimidazoli kod kojih je supstituentB- A- Y vezanna poziciji 6 benzimidazola.

Predloženi pronalazak obuhvata takodje fiziološki podnošljive soli kao i estre prethodno navedenih jedinjenja, naročito kisele soli azotovih baza derivata benzimidazola prema pronalasku, dalje soli karbonskih kiselina derivata prema pronalasku sa bazama kao i estre karbonskih kiselina derivata kao i karbonske kiseline, izvedene iz karbonskih kiselina derivata, kao iz amida karbonskih kiselina.

Derivati benzimidazola mogu da poseduju jedan hiralni centar ili više hiralnih centara, tako da jedinjenja mogu da se pojavljuju u više izomernih oblika. Jedinjenja formule I da se nadju i kao tautomeri, stereoizomeri ili geometrijskiizomeri. Pronalazak obuhvata i sve moguće izomere, kao E- i Z-izomere, S- i R-enantiomere, diastereoizomere, racemate i smeše ovih uključujući tautomerna jedinjenja. Sva ova izomerna jedinjenja su -ako posebno nije izričito navedeno- sastavni deo predloženog pronalaska. Smeše izomera mogu prema uobičajenim metodama da se razdvoje, kao na primer kristalizacijom, hromatografijom ili gradjenjem soli, na enantiomere odnosno E/Z izomere.

Heteroarilgrupe koje su sadržane ujedinjenjima benzimidazola izgradjene su iz pet ili šest skeletnih formi i mogu da sadrže jedan ili dva heteroatoma. Heteroatomi su kiseonik (O), azot (N) i sumpor (S). Primeri za heteroarilgrupe su pirol, tienil, furanil, imidazolil, tiazolil, izotiazolil, oksazolil, izooksazolilpirazolil, piridil, pirimidinil, pirazinil i piridazinil. Kada su heteroarilgrupe deo odR<1>iliR<2>grupa se vezuje preko C-atoma na dotični N-atom skeleta benzimidazola odnosno na supstituenteZ.

Kao arilostatci u obzir dolazi pre svega fenilostatak, ali takodje i naftilostatak. Aril- i heteroarilostatci mogu biti na proizvoljan način vezani za osnovni skelet benzimidazola ili nrku drugu grupu, na primerkao 1- ili 2-naftil, ili 2-, 3- ili 4-piridinil.

Alkilgmpe mogu da budu ravnolančaste ili račvaste. Primeri za alkil grupe su metil, etil, rc-propil, zzo-propil, «-butil,sek- b\ xt\\, tert- b\\ t\\, n-pentil, se/r-pentil, terf-pentil, rceo-pentil, «-heksil, se/r-heksil, heptil, oktil, nonil, decil. Takodje i viši homolozi obuhvataju kako linearne tako i račvaste alkilgrupe, što znači naročito 2-etilheksil za oktil i 3-propil-heksil za nonil.

Perfluorovani alkili su prvenstveno CF3i C2F5.

Alkenilgrupe mogu da budu ravnolančaste i račvaste. Naprimer su vinil, 2-propenil, 1-propenil, 2-butenil, 1-bitenil, 1-metil-l-propenil, 2-metil-2-popenil i 3-metil-2-propenil alkenilostatci u smislu prema pronalasku.

Alkinilgrupe mogu da budu ravnolančaste i račvaste. Primeri za to su etinil, 1-propinil, 2-propinil, 1 -butinil i 2-butinil

Pod cikloalkilgrupama se svaki put prvenstveno podrazumevaju ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil, ili cikloheptil (odgovara C3_7-cikloalkil)

Kao zasićeni heterociklični prsten odnosno kao cikloalkil sa jednim ili više heteroatoma primerice se navode: piperidin, pirolidin, tetrahidrofuran, morfolin, piperazin, heksahidroazepin, kao i 2,6-Dimetil-morfolin, N-Fenil-piperazin, Metoksimetil-pirolidin, pri čemu vezivanje može da nastane sa, prstenu susednim, C-atomom preko u datom slučaju postojećih N-atoma prstena.

U opisu pronalaska navedeni alkandiil-, alkendiil-, alkindiil- i cikloakandiil-ostatci imaju isto značenje kao i alkilen, alkenilen, alkinilen i cikloalkilen. U koliko je u opštoj formuli alkandiilostataka naveden broj sadržanih C-atoma i ako je kao donja granica područja ovih brojeva data vrednost 0 , takav alkandiil-ostatak ne postoji u tom slučaju.

Kao alkani, alkeni i alkiniza Anavode se na primer: ravnolančasti ili rač-vasti alkandiil sa jednim do osam C-atoma na primer metandiil, etandiil, propandiil, butandiil, pentandiil, heksandiil, dalje 1-metiletandiil, 1-etiletandiil, 1-metilpropandiil, 2-metilpropandiil, 1-metilbutandiil, 2-metilbutandiil, 1-etilbutandiil, 2-etilbutandiil, 1-metilpentandiil, 2-metilpentandiil, 3-metilpentandiil kao i analogna jedinjenja.

Ravnolančasti ili račvasti alkendiil i alkindiil sa dva do osam C-atoma su alkendiilgrupe odnosno alkindiilgrupe sa dvostrukim i trostrukim vezama u svim mogućim pozicijama kao i sa svim mogućim metil- i etil-supstitucijama. U ovim ostatcima može uvek jedan ili dva C-atoma da budu zamenjena sa O, NH, N-Ci^-alkilom ili N-Ci_3-alkanoilom pri čemu je zamenjena grupa, sa najmanje dva C-atoma, odvojena odY.

Ako dva ostatka stoje ortopoložajno mogu sa susednim aromatima da čine zajednički prsten. Jedinjenja u kojima su N-, O- ili S-atomi vezani na olefinske ili acetilenske višestruke veze, ili u kojima je više N-, O-, S- ili halogenih atoma vezano na isti alifatični C-atom ili u kojima su N-; O- ili S-atomi vezani medjusobno neposredno, su izuzeta, u koliko ovakve veze nisu eksplicitno, kao u zahtevu u finkcionalnim grupama ili heteroaromatima, definisane.

Fiziološki podnošljive kisele soli azotnih baza derivata benzimidazola prema pronalasku mogu da se dobiju sa organskim i neorganskim kiselinama na primer oksalnom kiselinom, mlečnom kiselinom, limunskom kiselinom, fumarnom kiselinom, sirćetnom kiselinom, maleinskom kiselinom, vinskom kiselinom, fosfornom kiselinomsonom kiselinom, bromovodoničnom kiselinom, sumpornom kiselinom, p-toluol sulfonskom kiselinomi, metansulfonskom kiselinom.

Za dobijanje soli kiselih grupa, naročito grupa karbonskih kiselina, podesne su takodje neorganske ili organske baze, koje su poznate u dobijanju fiziološki podnošljivih soli, kao na primer alkalni hidroksidi, narošito natrijum- i kalijumhidroksid, zemnoalkalni hidroksidi, kao kalcijumhidroksid, dalje amonijak, kao i amini, kao etanolamin, dietanolamin, trietanolamin, N-metilglukamin, i tris-(hidroksimetil)-metilamin.

Za dobijanje estra pogodni su svi niži jednovalentni, dvovalentni i trovalentni alkoholi, naročito metanol, ctanol, zso-propanol i/er/-butano! kao i etilenglikol i glicerin.

Naročito pogodni su benzimidazoli opšte formule I, u kojoj, u sledećem navedeni ostatci i grupe medjusobno nezavisno imaju sledeća značenja:R<1>fenilgrupa, koja može da bude , nezavisno medjusobno, sup stituisana sa do dva ostatka, izabrana iz grupe koja obuhvata:

F, Cl, Br,

C(NH)NH2, C(NH)NH/?', C(NH)N/?V, C(N/?')NH2

C( NR4) NHR4',C(NR4) NR4R4',

OH,OR<4>, OCOR<4>,OCONFLff',COR<4>,

CNOUR<4>,

CN, COOII,COOR<4>,CONH2,CONR<4>R<4>',

CONHR4, CONHOH

SR<4>, SOR<4>, S02R<4>

S02NH2, S02NHjR',S02NR<4>R<4>'

N02, NH2,NHR<4>, NR V,NHCONHR<4>i

R<4>

pri čemu se ostatciR<4>iR<4>biraju medjusobno nezavisno prema dalje dole navedenim značenjima i pri čemu dva supstituenta naR<1>,mogu tako medjusobno da budu povezani, dazajedno čine metandiilbisoksi-, etan-1,2-diilbisoksi-, propan-l,3-diil- ili butan-l,4-diilgrupu,ako su medjusobno ortopozicionirani

R<2>mono- ili biciklična C6.10-arilgrupa ili mono ili biciklična 5-10-člana heteroarilgrupa sa 1-2 heteroatoma izabrana iz grupe od N, S ili 0 pri čemu navedena aril- ili heteroarilgrupa može da bude supstituisana medjusobno nezavisno sa do tri sledeća supstituenta:

F, Cl, Br,

XOH, XOR<4>, XOCOR<4>, XOCONHR<4>, XOCOOR<4>,

XCOR<4>, XC(NOH)R<4>, XC(NOR<4>)R<4>,XC(NO(COR<4>))R<4>XCOOH, XCOOR<4>, XCONH2, XCONR<4>R<4>, XCONHR<4>

XCONHOH, XCONHOR<4>, XCOSR<4>

XSR<4>, XSOR<4>, X-S02R<4>, S02NH2, S02NHR<4>, S02NR<4>R<4>N02, XNHR<4>, XNR<4>R<4>, XNR<4>(S02R<4>)S02R<4>, XNR<4>S02R<4>i

R<4>,

pri čemu dva ostatka na/?<2>ako su medjusobno orto pozicionirani mogu da budu tako medjusobno povezani da zajedno čine metandiilbisoksi-, etan-1,2-diilbisoksi-, propan-l,3-diil- ili butan-1,4-diilgrupu,

R<3>Ostatak, izabran iz grupe koja obuhvata vodonik, F, Cl, Br,

CH3, C2H5, CF3, C2F5, OH,OR<4>,NHS02/?6 i NHCOZ?<*>,

pri čemuR<4>iR<6>imaju dalje dole navedena značenja,

ACi.io-alkandiil, C2_io-alkendiil, C2.io-alkindiil, (Co-5-alkandiil-C3_7cikloalkandiil-C0-5-alkandiil), pri čemu u petočlanom cikloalkilprstenu jedan član prstena mogu da budu prsten-N-ili prsten-O- atomi ijedan ili dva člana prstena u jednom šestočlanom ili sedmočlanom cikloalkil prstenu mogu da budu prsten-N- i/ili prsten-O-atomi pri čemu prsten-N-atomi u datom slučaju mogu biti supstituisani sa Ci_3-alkilom ili Ci.3-alkanoilom,

pri čemu u gore navedenim alifatičnim lancima jedan ili dva ugljkenikova atoma mogu da budu zamenjena sa O, NH, NCi.3-alkilom, NCi_3-alkanoilom

Bostatak izabran iz grupe koja obuhvata COOH,COOR<5>,CONH2, CONHR<5>iCONR<5>R<5>',uvek vezane na C-atom grupe

A,

pri čemu ostatciR<5>iR<5>mogu da budu izabrani nezavisno jedan od drugog prema dalje dole navedenim značenjima,

YO

gde uprethodnim ostatcima ostatci R4, R4\ R<5>, R5 i R6imaju sledeća značenja; u njima znače:

R4 i R4isto što je dalje gore navedeno

R5iR5'medjusobno nezavisno uvek jedan ostatak, izabran iz grupe koja obuhvate Ci-6-alkil, C2-6-alkenil, C2_6-alkinil, pri čemu jedan ugljenikov atom može da bude zamenjen sa O, S, SO, S02, NH, N-Ci_3alkil ili N-C,.3-alkanoil, dalje (Co-3-alkandiil-C3.7-cikloalkil), pri čemu u petočlanom cikloalkil-prstenu jedan član prstena može da bude prsten-N ili prsten-O-atom a u šestočlanom ili sedmočlanom cikloalkilprstenu jedan ili dva člana prstena mogu da budu svaki prsten-N- i/ili prsten-O-atomi, pri čemu prsten-N-atomi u datom slučaju mogu da budu supstituisani sa Ci_3-alkilom ili C].3-alkanoilom, kao i dalje (Co-3-alkandiil-fenil) i (C0.3-alkandiil-heteroaril), pri čemu je heteroarilgrupa peto- ili šestočlana i sadrži jedan ili dva heteroatoma, izabrana iz grupe koja obuhvata N, S i O, pri čemu svi prethodno navedeni alkil- i cikloalkilostatci mogu da budu supstituisani sa nekim ostatkom izabranim iz grupe koja obuhvata CF3, C2F5, OH, 0-C,.3-alkil, NFI2, NH-C,.3-alkil, NHC-,.3-alkanoil, N(C,.3-alkil)2,N(Ci-3-alkil)(Ci.3-alkanoil)JCOOH, CONH2i COO-Ci_3-alkil a sve prethodno navedene fenil- i heteroarilgrupe sa do dva ostatka izabrana iz grupe koja obuhvata F, Cl, Br, CH3, C2H5, OH, OCH3, OC2H5, N02, N(CH3)2,

CF3, C2F5i S02NH2i/ili može da nosi aneliranu metandiilbisoksi- ili etan-1,2-diilbisoksigrupu, iliRiRzajedno sa N-atomom amida izBgrade jedan peto- do sedmočlani, za-sićeni ili nezasićeni heterociklični prsten koji može da sadrži dalji atom N- ili S- ili O-atom i koji može da bude supstituisan sa Ci.4-alkilom, (Co-2-alkandiil-Ci.4-alkoksi), C1.4-alkoksikarbonilom, aminokarbonilom, ili fenilom

R<6>fenil- ili heteroarilgrupa, pri čemu je heteroarilgrupa peto- ili šestočlana i sadrži jedan ili dva heteroatoma izabrana iz grupe koja obuhvata N, S i O, i pri čemu fenil- i heteroarilgrupe mogu da budu supstituisane sa do dva ostatka, izabrana iz grupe koja obuhvata, F,C1, Br, CH3, C2H5, OH, OCH3, OC2H5, N02, N(CH3)2, CF3, C2F5i S02NH2i/ili takodje mogu da

nose aneliranu metandiilbisoksi- ili etan-1,2-diilbisoksigru-pu.

R3je prevashodno vodonik.

Y- A-grupacija jepredstavljena u povoljnoj formi izvodjenja jednom Ci.g-alkilenoksi-grupom, povezanom sa skeletom benzimidazola preko O-atoma.

Dalje pronalazak se odnosi na farmacutska sredstva koja sadrže jedno ili više jedinjenja prema pronalasku opšte formule I kao i jednu ili više nosećih materija. Farmaceutska sredstva odnosno sastavi pronalaska proizvode se na po sebi poznat način sa uobičajenim čvrstim ili tečnim nosećim materijama ili rastvaračima i uobičajenim farmaceutskim i tehničkim pomoćnim materijama odgovarajuće željenom načinu aplikacije sa podesnim doziranjem. Podesne pripreme postoje u obliku davanja koja su pogodna za oralnu, enteralnu ili parenteralnu aplikaciju, na primeri. p.(interpritonealno),i.v. (intravenozno),i. m.(intramuskular-no) ili perkutano. Takvi oblici davanja su na primer tablete, filmtablete, dražee, pilule, kapsule, praškovi, kreme, salbe, losioni, tečnosti kao sirupi, gelovi, tečnosti koje se mogu injektirati, na primer zai. p., i. v., i. m.,ili perkutane injekcije i tako dalje. Dalje su podesne depo-forme kao implantibilne pripreme, kao i supozitorije.Pri tome pojedine pripreme derivata prema pronalasku odaju u telo, već prema njihovoj vrsti, postepeno ili ukupnu količinu u kratkom vremenu.

Za oralnu upotrebu mogu da se kao farmaceutski preparati upotrebe kapsule, pilule, tablete, dražee i tečnosti ili drugi poznati oblici davanja. U tom slučaju lekovi mogu da se formulišu na taj način, da oslobadjaju aktivnu materiju u kratkom vremenu i predaju telu ili da imaju depo dejstvo, tako da se postiže dugotrajniji lagani dotok aktivne materije u telo. Jedinice doze mogu da sadrže pored najmanje jednog derivata benzimidazola jedan ili više farmaceutski podnošljivih nosača, na primer materije za uspostavljanje reologije leka, površinski aktivne materije, posrednike rastvaranja, mikrokapsule, mikrodeliće, granulate, razredjivače, vezivne materije, kao štirak, šećer, sorbit, i želatin, dalje punioce kao silicijumova kiselina i talk, sredstva za klizanje, boje, mirisne materije i druge materije.

Odgovarajuće tablete se mogu dobiti na primer mešanjem aktivne materije sa poznatim pomoćnim materijama, na primer sa inertnim sredstvima za razblaživanje kao dekstroza, šećer, sorbit, manit, polivinilpirolidon, sredstvima za rasturanje kao kukuruzni škrob ili alginska kiselina, vezivnim sredstvima, kao štirak i li želati, sredstvima za klizanje, kao karboksipolimetilen, karboksimetilceluloza, acetatftalatce-luloze ili polivinilacetat. Tablete mogu takodje da se sastoje iz više slojeva.

Dražee mogu da se odgovarajući proizvedu prevlačenjem jezgara dobije-nih analogno tabletama sa za dražeeprevlake primenjenim uobičajenim sredstvima, na primer polivinilpirolidon ili šelak, gumiarabika, talk, titanoksid ili šećer. Pri tome i opna dražee može da se sastoji iz više slojeva, pri čemu mogu da se primene gore kod tableta pomenute pomoćne materije.

Kapsule koje sadrže aktivnu materiju mogu da se na primer proizvedu tako što se aktivna materija meša sa nekim inertnim nosačem kao mlečni šećer ili sorbit i kapsulira u kapsule od želatina.

Derivati benzimidazola prema pronalasku mogu da se formulišu takodje i u obliku rastvora, koji je odredjen za oralnu primenu i koji pored aktivnog derivata benzimidazola sadrži kao sastavne delove neko farnmaceutski podnošljivo ulje i/ili farmaceutski podnošljive lipofile, površinski aktivne supstancc i/ili neki farmaceutski podnošljive hidrofilc, površinski aktivne supstance i/ili farmaceutski podnošljivo sa vodom mešljivo sredstvo za rastvaranje.

Da bi se postigla bolja bioraspoloživost aktivne materije prema pronalasku, jedinjenja mogu da se formulišu takodje i kao ciklodekstrinklatrati. Zato jedinjenja reaguju sa a-, P- ili y-ciklodek-strinima ili njihovim derivatima.

Ako treba da se primene kreme, salbe, losioni i spolja primenljive tečnosti, ove mora da budu tako sastavljene, da jedinjenja prema pronalasku budu dopremljena telu u dovoljnoj količini. U ovim oblicima davanja sadržane su pomoćne materije, na primer materije za uspostavljanje reologije leka, površinski aktivna sredstva, sredstva za konzervisanje, posrednici rastvaranja, razblaživači, materije za povećanje permeabilnosti derivata benzimidazola prema pronalasku kroz kožu, boje, mirisne materije i sredstva zaštite za kožu, kao kondicionere i regulatore vlage. Zajedno sa jedinjenjima prema pronalasku u leku mogu biti sadržane i druge aktivne materije[ Ullmanns Enzyklopadia der technischen Chemie,Band 4 (1953), Seiten 1 — 39;J. Pharm. Sci., 52,918 ff. (1963); H. v. Czetsch-Lindemvald,Hilfsstoffe fur Pharmacie und angrencende Gebiete; Pharm. Ind.,2, 72 ff (1961); Dr. H. P. Fiedler,

Lexikon der Hilfsstoffe fur Pharmacie, Kosmetik und angrencende

Gebiete,Cantor AG, AulendorfAVurtt, 1971].

Supstance mogu da dospeju u primenu takodje i u pogodnim rastvorima kao na primer u fiziološkom rastvoru kuhinjske soli, kao infuzioni- ili injecioni rastvor. Za parenteralnu aplikaciju aktivna supstanca može biti rastvorena ili suspendovana u nekom fiziološki podnošljivom sredstvu za razblaživanje. Kao sredstva za razblaživanje podesni su naročito uljani rastvori, kao na primer rastvori u sezamovom ulju, ricinusovom ulju, i ulju pamukovog semena. Za povećanje rastvorljivosti mogu se dodati posrednici rastvaranja kao na primer benzilbenzoat ili benzilalkohol.

Za formulaciju preparata koji može da se injektuje može da se primeni bilo koji tečni nosač, u kome su jedinjenja prema pronalasku rastvorena ili emulgovana. Ove tečnosti sadrže često materije za regulisanje viskoziteta, površinski aktivne materije, konzervanse, posrednike rastvaranja, razredjivače i dalje dodatne materije sa kojima se rastvor izotonski postavlja. Zajedno sa derivatima benzimidazola mogu da se daju i druge aktivne materije.

Takodje je moguće, supstance prema pronalasku ugraditi u neki transdermalni sistem pa ih tako transdermalno aplikovati. Za to se derivati benzimidazola primenjuju u obliku depo injekcije ili nekog inplantatnog preparata, na primer subkutano. Preparati ove vrste mogu biti tako formulisani, da se omogući produženo oslobadjanje aktivne supstance. Za ovo mogu da se koriste poznate tehnike, na primer depoi koji se rastvaraju ili koji rade sa membranom. Implantati mogu da sadrže kao inertne materijale na primer biološki razgradljive polimere ili sintetičke silikone, na primer silikonkaučuk. Derivati benzimidazola mogu dalje za perkutano davanje na primer da budu ugradjeni u u flaster.

Doziranje supstanci prema pronalasku opšte formule I odredjeno je od lekara koji leci i zavisi izmedju ostalog od supstance koja se daje, puta davanja, bolesti koja se leči i od težine oboljenja. Dnevna doza iznosi ne više od 1000 mg, prvenstveno ne više od 100 mg pri čemu doza može da se daje kao jedinična doza ili podeljena u dve ili više nevnih doza.

Ispitivanje bioloških osobina

Primer1

Aktiviranje mikroglia

Za testiranje supstanci na makrofage/monocite upotrebljene su LPS-akti-virane THP-1-ćelije. Za to se raseje 2,5 x 106 čelija/ml u RPMI medijum (RPMI 1640 + 10%FCS). Jedinjenja prema pronalasku dodata su tome u koncentraciji od 5uM i predinkubirana 30 minuta. Stomulacija ćelija usledila je preko noći na 37°C sa 1 ug/ml LPS. Potom je medijum obran i količina TNFa kvantitativno odredjivana. Tretiranje ćelija sa supstancama prema pronalasku dovelo je do redukcije TNFa-količine od najmanje 30%.

Primer 2

Inhibicija produkcije TNFa- i IL 12 u THP- 1- ćelijama

Inhibicija produkcije citokina predstavlja se na primer merenjem TNFa i interleukina 12 u THP-1 ćelijama stimulisanim liposaharidom (LPS).

Za to se raseje 2,5 x IO<6>THP-1 ćelija (American Type Culture Company, Rockville, Md)/ml RPMI 1640 Medium (Life technologies) 10% FCS (Life Technologies, Kat. Nr. 10270-106) na ploču za čelijske kulture sa ravnim dnom sa 96 rupa (TPP; Produkt Nr. 9296) (100 uL/rupa). Jedinjenja prema pronalasku dodaju se u različitim koncentracijama i predinkubiraju 30 min. Predrazblaživanje testsupstanci izvodi se u inkubacionom medijumu. Dodavanje testsupstanci sledi kao dvostruko koncentrovani rastvor supstance (100 uJ/rupa). Stimulacija ćelija sledi preko noći na 37°C sa 0,lug/ml LPS (Sigma L2630, od E. Coli Serotvp 0111. B4). Potom se medijum obere i kvantitativno odredjuju količine TNFa odnosno interleukina 12. Za merenje TNFa korišćen je komercijalno dobavljiv TNFa komplet firmeCIS bio international(Produkt Nr.. 62TNFPEB). Količina interleukina 12 odredjena je uz pomoć ORIGEN Technologie (IGEN International, Inc. Gaithersburg, Marvland). Izračunata IC5ovrednost odgovara koncentraciji testsupstance koja je potrebna da bi se ostvarila 50%-tna inhibicija maksimalne produkcije TNFa odnosnio interleukina 12.

Supstance pokazuju u ovoj postavci eksprimenta IC50 ispod 10 u.M. Uz pomoć sličnih metoda može da se predstavi, takodje i pri upotrebi perifernih leukocita krvi i uporedivih stimulatora , inhibicija IL 12 i TNFa sa supstancama.

Primer 3

Inhibicija fNFy produkcije perifernih mononuklearnih ćelija krvi

Za predstavljanje uticaja supstanci na aktiviranje T-ćelija može na primer da se koristi merenje INFy sekrecije.

Za izolaciju perifernih mononuklearnih ćelija koristi se humana čista krv

(uzimanje krvi preko Na-citrata S-Monovettcn „Coagulation )

NC/lOml/Sarstedt"). Obogaćivanje ćelija krvi izvedeno je pomoću gradijentnog centrifugiranja gustine: zato se stavi 15 ml Hostoraque 1077 Sigma, Kat. Nr.H8880) u LEUCOSEP cevčice (Greiner, Kat. Nr.227290) i centrifugira 30 sekundi pri 1000 g. Tome se zatim doda 15 ml čiste krvii centrifugira 10 min na 1000 g. Potom se gornji sloj plazme odpipetira a ispod ležeći ćelijski sloj (mononuklearne ćelije krvi) prbace u 15 ml epruvete (Falcon) i zatim više puta ispere sa 10 ml FIBSS HANKS balanced Solution (bez Mg<+>i Ca<+>), Kat. Nr. 14175-53). Na kraju se ćelijski pelet resuspenduje u medijum kulture RPMI 1640 +25 mM Hepes (Life Technologie Kat. Nr. 52400-041, 10% FCS (Life Technologie Kat. Nr. 10270-106), 0,4% rastvora penicilin-streptomicina (Life Techologie, Kat. Nr.15140-106) (1 x IO<6>ćelija/ml). Po lOOul rastvora suspenzije ćelija razdeli se na ploču ćelijskih kultura sa 96 rupa sa ravnim dnom (TPP, Produkt Nr. 9296) i stimuliše sa sa 5 ug/ml fitohemaglutina. Supstance prema pronalasku dodaju se tome u različitim koncentraciljama i 30 minuta predinkubiraju. Stimulacija ćelija sledi u toku vramenskog perioda od 48 h. Potom se medijum obere i INFy kvantitativno odredjuje. fNFy odredjena je uz pomoć ORIGEN Technologie (IGEN International, Inc. Gaithersburg, Marvland). Izračunata IC50 vrednost odgovara koncentraciji testsupstance koja je potrebna da bi se ostvarila 50%>-tna inhibicija maksimalne produkcije FNFy. Tretiranje ćelija sa test-supstancama dovelo je do redukcije INFy-količine od najmanje 30%. Uz pomoć sličnih metoda može da se predstavi, takodje i pri upotrebi specifičnih aktivatora T-ćelija kao na primer monoklonalnih anti-CD3-antitela, inhibicija fNFy sa supstancama.

Supstanca 1

Izopropilestar 6-[[l-(4-metilfenil)-2-fenil-lH-benzimdazol-6-il]oksi]hek-sanove kiseline

Supstanca 2

6-[[l-(4-Metilfenil)-2-fenil-lH-benzimdazol-6-il]oksi]heksanova kiselina

Primer 4

Indukcija IL- 10 produkcije perifernih mononuklearnih ćelija krvi

Indukcija IL-10 produkcije predstavlja se na primer merenjem IL-10 u fitohemaglutininom (PHA) ili lipopolisaharidom (LPS) stimulisanim perifernim mononuklearnim ćelijama krvi.

Za izolovanje prifernih mononuklearnih ćelija krvi primenjuje se humana čista krv (uzimanje krvi preko Na-citrata S-Monovetten „Coagulation ) 9NC/10ml/Sarstedt"). Obogaćivanje limfocita i monocita izvedeno je pomoću gradijentnog centrifugiranja gustine: za to se stavi 15 ml Hostoraque- 1077 Sigma, Kat. Nr.H8880) u 50ml LEUCOSEP cevčice (Greiner, Kat. Nr.227290) i centrifugiranjem 30 sekundi pri 250 g, kroz frite koje se nalaze u cevčicama, potisne na dole. Potom se doda 20 ml čiste krvi i centrifugira 15 min na 800g na sobnoj temperaturi. Posle centrifugiranja sloj iznad se odpipetira (platma i trombociti) i odbaci a sloj koji leži ispod (limfociti i monociti) prebaci u 50 ml epruvete za centrifugiranje (Falkon) i potom ispere 3 puta u medij umu kulture VLE PPMI 1640 (Seromed, No. FG1415) (Centrifugiranje svaki put po 10 min na 250 g, sobna temperatura). Na kraju se ćelijski pelet resuspenduje u medijum kulture VLE RPMI 1640(/Seromed), No. FG1415), 10% FCS (Life Technologies Kat.Nr. 16000-044, Low endotoxin, toplotno inaktiviran lh 56°C), 50 u.g/ml rastvora penicilin-streptomicina (Life Techologie, Kat. Nr. 15140-106) i posle brojanja ćelija uz pomoć tripan-plavog obojenja postavi na 3xl06 ćelija/ml. Po 100 ul rastvora suspenzije ćelija razdeli se na ploču ćelijskih kultura sa 96 rupa sa ravnim dnom (Costar, Produkt Nr.3599). Tome je dodato po 100 u.1 3puta koncentrovanijeg stimulacionog rastvora (3 u.g/ml LPS odE. coliSerotvp 0127:B8; Sigma , Kat. No. L-4516 i 300 ng/ml PHA-L Biochrom KG Kat. Nr. M 5030). Supstance prema pronalasku dodavane su u različitim koncentracijama kao 3 puta koncentrovaniji rastvor supstance (lOOul/vvell). Stimulacija ćelija odvija se na 37°C i 5% C02u toku 24h. Potom je sloj iznad ćelijske kulture obran a koncentracija i IL-10 kvantitativno odredjuje. Koncentracija IL-10 odredjivana pomoću komercijalno dobavljivih ELISA-kompleta firmeBioSource Internacional(Human IL-10, Kat.NR. KHC0101C). Izračunata EC50vrednost odgovara koncentraciji test supstance koja je potrebna da se IL-10 produkcija poveća za 50% maksimalnog porasta. Jedinjenja prema pronalasku povećavaju IL-10 produkciju perifernih mononuklearnih ćelija krvi.

Primer 5

Inhibicija TNFa i IL- 12 HD produkcije perifernih mononuklearnih ćelija

krvi

Inhibicija TNFa i IL-12 HD p70-produkcije predstavlja se na primer merenjem TNFa i IL-12 HD p70 u perifernim mononuklearnim ćelijama krvi stimulisanim lipopolisaharidom (LPS) i interferonom gama rNFy. Za izolovanje perifernih mononuklearnih ćelija krvi primenjena je humana čista krv (uzimanje krvi preko Na-citrata S-Monovetten „Coagulation ) 9NC/10ml/Sarstedt"). Obogaćivanje limfocita i monocita izvedeno je pomoću granijentnog centrifugiranja gustine: za to se stavi 15 ml Hostoraque 1077 Sigma, Kat. Nr.H8880) u LEUCOSEP cevčice (Greiner, Kat. Nr.227290) i centrifugiranjem 30 sekundi pri 250 g,kroz frite koje se nalaze u cevčicama, potisne na dole. Potom se doda 20 ml čiste krvi i centrifugira 15 min na 800g na sobnoj temperaturi. Posle centrifugiranja sloj iznad se odpipetira i odbaci a sloj koji leži ispod (limfociti i monociti) prebaci u 50 ml epruvete za centrifugiranje (Falkon) i potom ispere 3 puta u medijumu kulture VLE PPMI 1640 (Seromed, No. FG1415) (Centrifugiranje svaki put po 10 min na 250g sobna temperatura). Na kraju se ćelijski pelet resuspenduje u medijum kulture VLE RPMI 1640 /Seromed), No. FG1415), 10% FCS (Life Technologies Kat.Nr. 16000-044, Lovv endotoxin, toplotno inaktiviran lh 56°C), 50 |ig/ml rastvora penicilin-streptomicina (Life Techologie, Kat. Nr.15140-106) i posle brojanja ćelija uz pomoć tripan-plavog obojenja postavi na 3xl06 ćelija/ml. Po 100u.l rastvora suspenzije ćelija razdeli se na ploču ćelijskih kultura sa 96 rupa sa ravnim dnom (Costar, Produkt Nr.3599). Tome je dodato po 100 ul 3 puta koncentrovanijeg stimulacionog rastvora (3 ug/mlLPS odE. coliSerotvp 0127:B8; Sigma , Kat. No. L-4516 i 30 ng/ml LNFy lb, Imukin, Boehringer Ingelheim). Supstance prema pronalasku dodavane su u različitim koncentracijama kao 3 puta koncentrovaniji rastvor supstance (100ul/well). Stimulacija ćelija odvija se na 37°C i 5% CO2u toku 24h. Potom je sloj iznad ćelijske kulture obran a koncentracija TNFa i IL-12 HD p70 odredjivana pomoću komercijalno dobavljivih ELISA-kompleta firmeBioSource Internacional(TNFa EASIA, Kat. Nr. KACI752) iR& D Systems(Quantikine™ HS IL-12, Kat. Nr. HS120).

Izračunata IC50 vrednost odgovara koncentraciji testsupstance koja je potrebna da bi se ostvarila 50%-tna inhibicija maksimalne produkcije TNFa odnosno interleukina 12 HD p70.

Jedinjenja prema pronalasku inhibiraju produkciju TNFa i interleukina 12 HD p70 perifernih mononuklearnih ćelija krvi.

Sipstanca 1

Supstanca 2

6-[[ 1 -(4-Metilfenil)-2-fenil-1 H-benzimdazol-6-il]oksi]heksanova kiselina

Claims

1. Primena nekog mikroglia-inhibitora za dobijanje leka za lečenje, monocitima makrofagama ili T-ćelijama posredovanim, imunoreakcija.

2. Primena prema zahtevu 1 za lečenje imunoreakcija posredovanih interleuki 12 (IL 12) i interferonom y (INFy)

3. Primena prema zahtevu 1 za lečenje zapaljenskih reakcija koje nisu posredovane T-ćelijama

4. Primena prema zahtevi Iza lečenje autoimunih oboljenja, inflamatornih oboljenja koja se ne zasnivaju na neuroinflamaciji, alergijskih i infekcionih oboljenja.

5. Primena prema zahtevu 4 za lečenje hroničnih inflamatornih crevnih obiljenja, na primer Inflammatorv Bowel Diseases, Chron's Diseases, ili Ulcerative Colitis, artritia, alergijski kontaktni ekcem, psorijaza, pemfigus, astma, dijabetes, tip-1 insulinzavisni dijabetesmelitus, reumatoidni artritis, lupus oboljenja i druge kolagenoze, Graves' Diseases, Hashimoto's Diseases, „Graft-versus-host Disease" i transplantaciona odbacivanja, sarkodioza, astma, hipersenzitivni pneumonitis, sepsa, septićni šok, endotoksični šok, toksični šoksindrom, toksično otkazivanje jetre, ARDS (akutni sindrom nedostatka vazduha), eklampsija, kaheksija, akutna virusna infekcija, oštećenja organa nakon reperfuzije, „first dose response" posle davanja anti-T-ćelijs-kih antitela.

6. Primena nekog benzimidazola formule 1, njegove tautomerne ili izomerne forme ili soli u kojoj znači R<1>aril grupa ili jedna peto- ili šestočlana heteroarilgrupa sa jednim ili dva heteroatoma, izabrana iz grupe kuja obuhvata N, S i O, pri čemu aril- ili heteroarilgrupa može nezavisno djusobno da bude supstituisana sa do tri ostatka izabrana iz grupe, koja obuhvata F, Cl, Br, C(NH)NH2, C(NH)NHR<4>,C( NH) NR4R4,C(N7?')NH2C( NR4) N¥LR4', C( NH) NR4R4', X- OH, X- OR4, X- OCOR4, X- OCONHR4, X- COR4, X- C( NOU) R4, x- cn, at-cooh, x- coor4, x-conh2, x- conr4r4', x- conhr4,jt-conhoh x- sr4, x- sor4, x- s02r4 s02nh2, s02nh/?', s02n/?vn02, x- nr2, x- nhr4, x- nr4r4, x- nr4s02r4\ x- i<irso2r4' X- NHCOR4, X- NHCOOR4, X- NHCON¥lR4iR<4>, pri čemu jcXveza, CH2ili (CH2)2ili CH(CH3)2, pri čemu se dalje ostatciR<4>iR<4>biraju prema dalje dole navedenim značenjima i pri čemu dva supstituenta naR<1>,ako su medjusobno orto pozicionirani mogu da budu tako medjusobno povezani da zajedno čine metandiilbisoksi-, etan-1,2-diilbisoksi-, propan-l,3-diil- ili butan-1,4-diilgrupu, ili ostatak, izabran iz grupe, koja obuhvata Cj.g-alkil, (C0-3-alkendiil-C3_7-cikloalkil) i C3_6-alkenil, u kojima H-atom može na taj način da bude zamenjen heterocikličnim ostatkom, izabranim iz grupe koja obuhvata piperazin, morfolin, piperidin i pirolidin, tako da se gradi veza prema prvom N-atomi heterocikličnog ostatka, pri čmu navedeni alkil-, cikloalkil-, alkenilostatci i heterocikličniostatak, mogu da budu supstituisani sa do dva ostatka, izabranih iz grupe, koja obuhvata C0-2-alkandiil-O7? , C0-2-alkandiil-NH2,C0.2-alkandiil NH/?<7>, C0-2-alkandiil-N/?<7>/?<7>', C0.2-alkandiil-NHCO/?7, Co-ralkandiil-N^COi?<7>', C0.2-alkandiil-NHS02i?<7>, C0-2-alkandiil-N/?<7>SO2/?<7>', C0.2-alkandiil-C02H, Co-2-alkandiil-CO/?<7>, C0-2-alkandiil-CONH2C0.2-alkandiil-CONl-lR7, C0-2-alkandiil-N/?7CONi?7/?7', fenil i jedan peto- ili šestočlani heteroarilostatak, pri čemu heteroarilostatak sadrži jedan ili dva heteroatoma izabrana iz grupe koja obuhvata N, S i O, pri čemu dalje fenil-i heteroarilostatak mogu da budu supstituisani sa do dva ostatka, izabrana iz grupe koja obuhvata F, Cl, Br, C2H5, OH, OCH3, OC2H5, N02, N(CH3)2, CF3, C2F5i S02NH2i/ili može da nosi jednu aneliranu metandiilbisoksi- ili etan-1,2-diilbis-oksi grupu, pri čemu ostatak piperazina može na drugom atomu azota da bude takodje supstituisan sa R<7>, COR<7>iliS02R 7 ,pri čemuR 7i ■R 7medjusobno nezavisno, mogu dalje da budu izabrani prema dole navedenim značenjima, R-Z-R , jedna arilgrupa ili ili jedna peto- ili šestočlana hetero arilgrupa sa do dva heteroatoma, izabrana iz grupe koja obuhvata N, S i O, jedna benzotienilgrupa ili indolilgrupa, pri če mu navedene aril- ili heteroarilgrupe mogu biti supstitiuisane sa do tri ostatka medjusobno nezavisno, izabrana iz grupe koja obuhvata F, Cl, Br, C(NH)NH2, C(NH)NPLR*, C(NH)Ni?V', C(N/?')NH2C( NR4) NHR4',C(NR4) NR4R4', X- OH, X- OR4, X- OCOR4, AT-OCONHfl', X- COR4, X- C( NOH) R4, AT-CN,AT-COOH,X- COOR4, X-CONH2, X- CONR4R4', X- CONHR4,JVT-CONHOH X- SR4, X- SOR4, X- S02R4 S02NH2, S02NKR<4>,S02N/?V N02,X- NH2, X- NHR4, X- NR4R4', X- NR4S02R4\ X- NRS02R4' X-NHCO^,X-NHCOO^,X-NHCONHi?<¥>iR<4>, pri čemu jeXveza, CH2ili (CII2)2ili CH(CH3)2, pri čemu se dalje ostatciR<4>iR<4>biraju medjusobno nezavisno prema dalje dole navedenim značenjima i pri čemu dva ostatka naR<l>,ako su medjusobno orto pozicionirani mogu da budu tako medjusobno povezani da zajedno čine metandiilbisoksi-, etan-1,2-diilbisoksi-, propan-1,3-diil- ili butan-1,4-diilgrupu, Z NH,NR2 ,O, S, SO ili S02, pri čemuRima u sledećem navedeno značenje, Rz \ R2nezavisno medjusobno svaka ostatak izabran iz grupe koja obuhvata : Ci_4-perfluoralkil, Ci_6-alkil, (Co-3-alkandiil-C3_7-cikloalkil), (Co-3-alkandiil-heteroaril), pri čemu je heteroarilgrupa peto- ili šestočlana, i sadrži dva heteroatoma, izabrana iz grupe koja sadrži N, S i O i pri čemu aril- i heteroarilgrupa može da bude supstituisana svaka sa po do dva ostatka izabrana iz grupe koja obuhvata F, Cl, Br, CH3, C2H5, OH, OCH3, OC2H5, N02, N(CH3)2, CF3, C2F5i S02NH2i/ili mogu da nose aneliranu metandiilbisoksi- ili etan-1,2-diilbisoksigrupu, i dalje jedan član prstena u petočla nom cikloalkilprstenu mogu da budu prsten-N- ili prsten-O-atomi i jedan ili dva člana prstena u jednom šestočlanom ili sedmočlanom prstenu mogu da budu prsten-N- i/ili prsten-O-atomi pri čemu prsten-N-atomi u datom slušaju mogu biti supstituisani sa Ci_3-alkilom ili C^-alkanoilom, iRiR2zajedno sa Zgrade peto- do sedmočlani heterociklični prsten, ako je Z N-atom, pri čemuZimadalje gore navedeno značenje pri čemu dalje heterociklični prsten sadrži dalji atom N-, O- iliS-atom i opcionalno može da bude supstituisan nekim ostatkom izabranim iz grupe koja obuh vata Ci-4-alkil, (C0-3-alkandiil-Ci_3-alkoksi), C1.4-alkanoil, Ci_4-alkoksikarbonol, aminokarbonil i arilR<3>medjusobno nezavisno jedan ili dva ostataka izabrana iz grupe koja obuhvata vodonik, F, Cl, Br, OH,OR<4>, OCOR<4>OCONUR<4>,COR<4>,CN, COOH,COOR<4>,CONH2, CONHtf', CONHOH,CONFIO^,SR<4>, SOR<4>, S02R<4>,S02NH2, S02NHjR<*>,S02NR<4>R<4>'N02, NH2,NHR<4>,NflVNHS02R<4>, NR<4>S02R<4>', NHS02R<6>, NR<4>S02R<6>,NHCOfl', NHCOO/^, NHCONH/f^ iR<4>pri čemu ostatciR<4>, R<4>iR<6>mogu da budu izabrani kako je dalje dole navedeno nezavisno jedan od drugog, Agrupa , izabrana iz grupe koja obuhvata CM0-alkandiil, C2_ io-alkendiil, C2_i0-alkindiil i (Co-3-alkandiil-C3_io-ciklo-alkandiil-Co-3-alkandiil) pri čemu u petočlanom cikloalkilprstenu jedan član prstena mogu da budu prsten-N-ili prsten-O- atomi i jedan ili dva člana prstena u jednom šestočlanom ili sedmočlanom prstenu mogu da budu prsten-N- i/ili prsten-O-atomi pri čemu prsten-N-atomi u datom slušaju mogu biti supstituisani sa Ci_3-alkilom ili C]_3-alkanoilom, pri čemu u gore navedenim alifatičnim lancima jedan atom ugljenika može da bude zamenjen sa O, NH, N-Ci_3-alkil, ili alkanoil pri čemu alkil- ili cikloalkilgrupe mogu da budu opciono supstituiosana ostatkom, izabranim iz grupe, koja obuhvata =0, OH, OC,.3-alkil, NH2, NH-C,.3-alkil, NH-C,.3-alkanoil, N(C,.3-alkil)2i NCC^-alkilKC^-alkanoil), Bostatak izabran iz grupe koja obuhvata COOH,COOR<5>, CONH2, CONHNH2, CONHtf<5>,CONff V,CONHOH, CONHO/?<5>i tetrazolil, uvek vezane za C-atom grupeA pri čemu su ostatciR<5>iR5 medjusobnonezavisno izabrani prema dalje dole navedenim značenjima Ygrupu izabranu iz grupe koja obuhvata O, NH,NR<4>, NCOR<4> NS02R<4>iNS02/?6 pri cemuR<4>iR<6>imaju dalje dole navedena značenja, gde u prethodnimostatcima, ostatciR<4>, R4 , R<5>, R5 i R<6>imaju sledeća značenja; u njima su: /Ti/Tnezavisno medjusobno uvek ostatak, izabran iz grupe, koja obuhvata CF3, C2F2, Ci.4-alkil,C2_4-alkenil, C2.3-alkinil, i (Co-3-alkandiil-C3.7-cikloalkil), pri čemu u petočlanom cikloalkilprstenu jedan član prstena mogu da budu prsten-N-ili prsten-O- atomi i jedan ili dva člana prstena u jednom šestočlanom ili sedmočlanom prstenu mogu da budu prsten-N- i/ili prsten-O-atomi pri čemu prsten-N-atomi u datom slušaju mogu biti supstituisani sa Ci_3-alkilom ili CV3-alka-noilom, R<5>iR<5>nezavisno medjusobno svaki ostatak, izabran iz grupe koja obuhvata CF3, C2F5, CM-alkil, C2-4-alkenil, C2.3-alkinil i (Co-3-alkandiil-C3.7-cikloalkil), pri čemu u petočlanom cikloalkilprstenu jedan član prstena mogu da budu prsten-N- ili prsten-O- atomi i jedan ili dva člana prstena u jednom šestočlanom ili sedmočlanom prstenu mogu da budu prsten-N- i/ili prsten-O-atomi pri čemu prsten-N-atomi u datom slušaju mogu biti supstituisani sa C\.3-alkilom ili Ci_3-alkanoilom, kao i dalje (C0_3-alkandiil-aril) i (Ci.3-alkndiil-heteroaril), pri čemu je heteroarilgrupa peto-ili šestočlana i sadrži jedan ili dva heteroatoma, izabrana iz grupe koja obuhvata N, S i O, pri čemu svi prethodno navedeni alkil- i cikloalkilostataci mogu da budu supstituisani sa do dva ostatka izabrana iz grupe koja obuhvata CF3, C2F5, OH, 0-d.3-alkil, NH2, NH-C^-alkil, NH-C^-alkanoil, N(C,_3-alkil)2, N(C1.3-alkil)(C,.3-alkanoil), COOFI, CONH2, COO-Ci_3-alkil a sve prethodno navedene aril- i heteroarilgrupe sa do dva ostatka izabrana iz grupe, koja obuhvata F, Cl, Br, CH3, C2H<5>, OH, OCH3, OC2H5, N02, N(CH3)2, CF2, C2F5i S02NH2, i/ili mogu da nose jednu aneliranu metandiilbisoksi- ili etan-1,2-diilbisoksigrupu, iliR<5>iR<5>zajedno sa N-atomom amida izBčine jedan peto do sedmočlanni, zasićeni ili nezasićeni heterociklični prsten koji može da sadrži dalji N- ili O- ili S-atom i koji može da bude supstituisan sa Ci_4-alkilom, (C0-2-alkandiil-Ci.4-alkoksi), Ci_4-alkoksikarbonil, aminokarbonilom ili arilom, R<6>ostatak, izabran iz grupe koja obuhvata (Co-3-alkandiil-aril) i (Co-3-alkandiil-heteroaril), pri čemu je heteroarilgrupa peto- ili šestočlana i sadrži jedan ili dva heteroatoma izabrana iz grupe koja obuhvata N, S i O, i pri čemu aril- i heteroarilgrupe mogu da budu supstituisane sa do dva ostatka izabrana iz grupe koja obuhvata F, Cl, Br, CFF, C2FI5, OH, OCH3, OC2H5, N02, N(CH3)2, CF2, C2F5i S02NH2, i/ili mogu da nose jednu aneliranu metandiilbisoksi- ili etan-1,2-diilbisoksigrupu, R<7>iR<7>medjusobno nezavisno R<4>i R<6>za proizvodnju leka za lečenje nekog oboljenja prema zahtevima 1-5.

7. Primena nekog benzimidazola prema zahtevu 6 naznačena time što je R<1>fenilgrupa, koja može da bude , nezavisno medjusobno, sup stituisana sa do dva ostatka, izabrana iz grupe koja obuhvata: F, Cl, Br, C(NH)NH2, C(NH)NHrt', C(NH)Ntf<V>', C(Nfl')NH2C( NR4) NHR4\C(NR<4>JNR<4>R<4>',OH,OR<4>, OCOR<4>,OCONH/?',COR<4>,CNOUR<4>,CN, COOH,COOR<4>,CONH2,CONR<4>R<4>',CONH/?', CONHOHSR<4>, SOR<4>, S02R<4>S02NH2, S02miR<4>,S02NR<4>R<4>'N02, NH2,miR<4>,NR<4>R<4>,NHCONH/?* iR<4>pri čemu se ostatciR<4>iR4biraju medjusobno nezavisno prema dalje dole navedenim značenjima i pri čemu dva supstituenta naR<1>,mogu tako medjusobno da budu povezani, da zajedno čine metandiilbisoksi-, etan-1,2-diilbisoksi-, propan-l,3-diil- ili butan-1,4-diilgrupu,ako su medjusobno ortopozicionirani Rmono- ili biciklična Ce-io-arilgrupa ili mono ili biciklična 5- 10-člana heteroarilgrupa sa 1-2 heteroatoma izabrana iz grupe od N, S ili O pri čemu navedena aril- ili heteroarilgrupa može da bude supstituisana medjusobno nezavisno sa do tri sledeća supstituenta: F, Cl, Br, XOH, XOR<4>, XOCOR<4>, XOCONHR<4>, XOCOOR<4>, XCOR<4>, XC(NOH)R<4>, XC(NOR4)R4,XC(NO(COR4))R4 XCOOH, XCOOR<4>, XCONH2, XCONR<4>R<4>, XCONHR<4>XCONHOH, XCONHOR<4>, XCOSR<4>XSR<4>, XSOR<4>, X-S02R<4>, S02NH2, S02NFIR4, S02NR<4>R<4>N02, XNHR<4>, XNR<4>R<4>, XNR<4>(S02R<4>)S02R<4>, XNR<4>S02R<4>iR<4>, pri čemu dva ostatka naR<2>ako su medjusobno orto pozicionirani mogu da budu tako medjusobno povezani da zajedno čine metandiilbisoksi-, etan-1,2-diilbisoksi-, propan-l,3-diil- ili butan- 1,4-diilgrupu, R<3>Ostatak, izabran iz grupe koja obuhvata vodonik, F, Cl, Br, CH3, C2H5, CF3, C2F5, OH,OR<4>,NHS02/?6 iNRCOR<4>, pri cemuR4\ R6imaju dalje dole navedena značenja, ACi_io-alkandiil, C2_io-alkendiil, C2.i0-alkindiil, (C0-s-alk andiil-C3-7cikloalkandiil-C0-5-alkandiil), pri čemu u petočlanom cikloalkilprstenu jedan član prstena mogu da budu prsten-N-ili prsten-O- atomi i jedan ili dva člana prstena u jednom šestočlanom ili sedmočlanom cikloalkil prstenu mogu da budu prsten-N- i/ili prsten-O-atomi pri čemu prsten-N-atomi u datom slučaju mogu biti supstituisani sa CV3-alkilom ili Ci_3-alkanoilom, pri čemu u gore navedenim alifatičnim lancima jedan ili dva ugljkenikova atoma mogu da budu zamenjena sa O, NH, NCi_3-alkilom, NC,.3-alkanoilom Bostatak izabran iz grupe koja obuhvata COOH,COO/<T>,CO NH2, CONH/?<5>i CONR<V>, uvek vezane na C-atom grupeA, pri čemu ostatciR<5>iR5mogu da budu izabrani nezavisno jedan od drugog prema dalje dole navedenim značenjima, YO gde u prethodnim ostatcima ostatciR<4>, R<4>', R<5>, R5iR<6>imaju sledeća značenja; u njima znače: R<4>iR4isto što je dalje gore navedeno R5iR5'medjusobno nezavisno uvek jedan ostatak, izabran iz grupe koja obuhvate CVfi-alkil, C2_6-alkenil, C2_6-alkinil, pri čemu jedan ugljenikov atom može da bude zamenjen sa O, S, SO, S02, NH, N-C,.3alkil ili N-C,.3-alkanoil, dalje (Co-3-alkandiil-C3-7-cikloalkil), pri čemu u petočlanom cikloalkil-prstenu jedan član prstena može da bude prsten-N ili prsten-O-atom a u šestočlanom ili sedmočlanom cikloalkilprstenu jedan ili dva člana prstena mogu da budu svaki prsten-N- i/ili prsten-O-atomi, pri čemu prsten-N-atomi u datom slučaju mogu da budu supstituisani sa Ci_3-alkilom ili Ci_3-alkanoilom, kao i dalje (C0-3-alkandiil-fenil) i (Co-3-alkandiil-heteroaril), pri čemu je heteroarilgrupa peto- ili šestočlana i sadrži jedan ili dva heteroatoma, izabrana iz grupe koja obuhvata N, S i O, pri čemu svi prethodno navedeni alkil- i cikloalkilostatci mogu da budu supstituisani sa nekim ostatkom izabranim iz grupe koja obuhvata CF3, C2F5, OH, 0-C,_3-alkil, NH2, NH-C,_3-alkil, NHC-,.3-alkanoil, N(C,.3-alkil)2,N(C,.3-alkil)(C1.3-alkanoil), COOH, CONH2i COO-CV3-alkil a sve prethodno navedene fenil- i heteroarilgrupe sa do dva ostatka izabrana iz grupe koja obuhvata F, Cl, Br, CH3, C2H5, OH, OCH3, OC2H5, N02, N(CH3)2, CF3, C2F5i S02NH2i/ili može da nosi aneliranu metandiilbisoksi- ili etan-1,2-diilbisoksigrupu, iliR5iR5'zajedno sa N-atomom amida izBgrade jedan peto- do sedmočlani, za-sićeni ili nezasićeni heterociklični prsten koji može da sadrži dalji atom N- ili S- ili O-atom i koji može da bude supstituisan sa Ci_4-alkilom, (Co-2-alkandiil-C]_4-alkoksi), Ci_4-alkoksikarbonilom, aminokarbonilom, ili fenilom R<6>fenil- ili heteroarilgrupa, pri čemu je heteroarilgrupa peto- ili šestočlana i sadrži jedan ili dva heteroatoma izabrana iz grupe koja obuhvata N, S i O, i pri čemu fenil- i heteroarilgrupe mogu da budu supstituisane sa do dva ostatka, izabrana iz grupe koja obuhvata, F,C1, Br, CH3, C2H5, OH, OCH3, OC2H5, N02, N(CH3)2, CF3, C2F5i S02NH2 i/ili takodje mogu da nose aneliranu metandiilbisoksi- ili etan-1,2-diilbisoksigru-pu.

8. Primena nekog benzimidazola prema zahtevu 6 ili 7naznačena timešto je R3 vodonik a Y- ACi_6-alkilenoksi.