SA99200618B1 - تراكيب وطرق لعلاج وتشخيص سرطان البروستات - Google Patents
تراكيب وطرق لعلاج وتشخيص سرطان البروستات Download PDFInfo
- Publication number
- SA99200618B1 SA99200618B1 SA99200618A SA99200618A SA99200618B1 SA 99200618 B1 SA99200618 B1 SA 99200618B1 SA 99200618 A SA99200618 A SA 99200618A SA 99200618 A SA99200618 A SA 99200618A SA 99200618 B1 SA99200618 B1 SA 99200618B1
- Authority
- SA
- Saudi Arabia
- Prior art keywords
- context
- dna
- yyy
- contexts
- polypeptide
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 163
- 206010060862 Prostate cancer Diseases 0.000 title claims abstract description 35
- 208000000236 Prostatic Neoplasms Diseases 0.000 title claims abstract description 33
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 title claims abstract description 9
- 239000000203 mixture Substances 0.000 title claims description 33
- 238000011282 treatment Methods 0.000 title abstract description 19
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims abstract description 221
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims abstract description 199
- 208000023958 prostate neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 177
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims abstract description 163
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims abstract description 125
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 claims abstract description 120
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 claims abstract description 119
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 claims abstract description 119
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims abstract description 79
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims abstract description 79
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims abstract description 79
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 claims abstract description 48
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 claims abstract description 31
- 210000001744 T-lymphocyte Anatomy 0.000 claims abstract description 20
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 261
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 214
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 207
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 claims description 130
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 claims description 117
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 claims description 91
- 230000027455 binding Effects 0.000 claims description 73
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 61
- 239000000523 sample Substances 0.000 claims description 56
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 52
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 51
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 claims description 40
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 claims description 27
- 230000005907 cancer growth Effects 0.000 claims description 27
- 230000004044 response Effects 0.000 claims description 27
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 claims description 25
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 23
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 22
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 claims description 21
- 230000015788 innate immune response Effects 0.000 claims description 18
- 238000003556 assay Methods 0.000 claims description 17
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 16
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 15
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 15
- 238000007792 addition Methods 0.000 claims description 15
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 15
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 claims description 14
- 239000003607 modifier Substances 0.000 claims description 14
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 claims description 14
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 claims description 13
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 13
- 101000930762 Sulfolobus acidocaldarius (strain ATCC 33909 / DSM 639 / JCM 8929 / NBRC 15157 / NCIMB 11770) Signal recognition particle receptor FtsY Proteins 0.000 claims description 12
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 claims description 10
- 238000003780 insertion Methods 0.000 claims description 10
- 230000037431 insertion Effects 0.000 claims description 10
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 claims description 9
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 claims description 9
- 238000012217 deletion Methods 0.000 claims description 8
- 230000037430 deletion Effects 0.000 claims description 8
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 claims description 8
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 claims description 8
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims description 8
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 claims description 7
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 claims description 7
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 claims description 7
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 7
- 238000003032 molecular docking Methods 0.000 claims description 6
- 102000014914 Carrier Proteins Human genes 0.000 claims description 5
- 238000009007 Diagnostic Kit Methods 0.000 claims description 5
- 238000010367 cloning Methods 0.000 claims description 5
- 230000012010 growth Effects 0.000 claims description 5
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 claims description 5
- 239000002245 particle Substances 0.000 claims description 5
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 claims description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 4
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 4
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 claims description 4
- 239000000376 reactant Substances 0.000 claims description 4
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 claims description 4
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 claims description 3
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 claims description 3
- 239000004033 plastic Substances 0.000 claims description 3
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 claims description 3
- IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 1-palmitoyl-2-arachidonoyl-sn-glycero-3-phosphocholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCC IIZPXYDJLKNOIY-JXPKJXOSSA-N 0.000 claims description 2
- 239000000020 Nitrocellulose Substances 0.000 claims description 2
- 102000003673 Symporters Human genes 0.000 claims description 2
- 108090000088 Symporters Proteins 0.000 claims description 2
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 claims description 2
- 239000000787 lecithin Substances 0.000 claims description 2
- 229940067606 lecithin Drugs 0.000 claims description 2
- 235000010445 lecithin Nutrition 0.000 claims description 2
- 229920001220 nitrocellulos Polymers 0.000 claims description 2
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 claims description 2
- 230000009466 transformation Effects 0.000 claims description 2
- 241000570861 Mandragora autumnalis Species 0.000 claims 3
- GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N N-[2-(1H-indol-3-yl)ethyl]-N-methylprop-2-en-1-amine Chemical compound CN(CCC1=CNC2=C1C=CC=C2)CC=C GXCLVBGFBYZDAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 3
- 102100037832 Docking protein 1 Human genes 0.000 claims 2
- 101710131740 Docking protein 1 Proteins 0.000 claims 2
- 210000004498 neuroglial cell Anatomy 0.000 claims 2
- 239000002023 wood Substances 0.000 claims 2
- 108091064702 1 family Proteins 0.000 claims 1
- ITWBWJFEJCHKSN-UHFFFAOYSA-N 1,4,7-triazonane Chemical compound C1CNCCNCCN1 ITWBWJFEJCHKSN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 101100162210 Aspergillus parasiticus (strain ATCC 56775 / NRRL 5862 / SRRC 143 / SU-1) aflM gene Proteins 0.000 claims 1
- 241000726103 Atta Species 0.000 claims 1
- 101100008638 Caenorhabditis elegans daf-1 gene Proteins 0.000 claims 1
- 101100394230 Caenorhabditis elegans ham-1 gene Proteins 0.000 claims 1
- 101100273797 Caenorhabditis elegans pct-1 gene Proteins 0.000 claims 1
- 101100102500 Caenorhabditis elegans ver-1 gene Proteins 0.000 claims 1
- 101100522280 Dictyostelium discoideum ptpA1-2 gene Proteins 0.000 claims 1
- FFFHZYDWPBMWHY-VKHMYHEASA-N L-homocysteine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCS FFFHZYDWPBMWHY-VKHMYHEASA-N 0.000 claims 1
- 101100045395 Mus musculus Tap1 gene Proteins 0.000 claims 1
- 101150006497 PTP-1 gene Proteins 0.000 claims 1
- 101100169989 Rattus norvegicus Ddah1 gene Proteins 0.000 claims 1
- 230000032683 aging Effects 0.000 claims 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 claims 1
- 238000006872 enzymatic polymerization reaction Methods 0.000 claims 1
- 230000001771 impaired effect Effects 0.000 claims 1
- 102000027450 oncoproteins Human genes 0.000 claims 1
- 108091008819 oncoproteins Proteins 0.000 claims 1
- 239000000049 pigment Substances 0.000 claims 1
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 claims 1
- 230000002889 sympathetic effect Effects 0.000 claims 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 abstract description 28
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 abstract description 28
- 201000010099 disease Diseases 0.000 abstract description 13
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 abstract description 13
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 abstract description 9
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 abstract description 6
- 108020004635 Complementary DNA Proteins 0.000 description 304
- 238000010804 cDNA synthesis Methods 0.000 description 304
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 304
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 162
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 135
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 119
- 210000002307 prostate Anatomy 0.000 description 102
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 60
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 52
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 51
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 30
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 29
- 238000011160 research Methods 0.000 description 20
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 17
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 17
- 210000001072 colon Anatomy 0.000 description 15
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 15
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 14
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 14
- 210000000496 pancreas Anatomy 0.000 description 14
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 13
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 13
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 13
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 12
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 12
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 12
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 12
- 210000005087 mononuclear cell Anatomy 0.000 description 12
- 108010074328 Interferon-gamma Proteins 0.000 description 11
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 11
- 230000028993 immune response Effects 0.000 description 11
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 11
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 11
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 10
- 102000025850 HLA-A2 Antigen Human genes 0.000 description 10
- 108010074032 HLA-A2 Antigen Proteins 0.000 description 10
- 102000008070 Interferon-gamma Human genes 0.000 description 10
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 10
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 10
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 10
- 210000004185 liver Anatomy 0.000 description 10
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 10
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 10
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 10
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 9
- 108010072866 Prostate-Specific Antigen Proteins 0.000 description 9
- 102100038358 Prostate-specific antigen Human genes 0.000 description 9
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 9
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 9
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 9
- 210000004379 membrane Anatomy 0.000 description 9
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 9
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 9
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 9
- 239000000047 product Substances 0.000 description 9
- 230000009257 reactivity Effects 0.000 description 9
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 9
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 8
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 8
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 8
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 8
- 210000002429 large intestine Anatomy 0.000 description 8
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 8
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 8
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 8
- 210000002027 skeletal muscle Anatomy 0.000 description 8
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 8
- 210000001550 testis Anatomy 0.000 description 8
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 7
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 7
- DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N Trifluoroacetic acid Chemical compound OC(=O)C(F)(F)F DTQVDTLACAAQTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000011324 bead Substances 0.000 description 7
- 229940044627 gamma-interferon Drugs 0.000 description 7
- 230000003053 immunization Effects 0.000 description 7
- 238000002649 immunization Methods 0.000 description 7
- 125000005647 linker group Chemical group 0.000 description 7
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 7
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 7
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 6
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 6
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 6
- 206010036940 Prostatic adenoma Diseases 0.000 description 6
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 6
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 6
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 6
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 6
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 6
- 238000003114 enzyme-linked immunosorbent spot assay Methods 0.000 description 6
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 6
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 6
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 6
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 6
- 210000001672 ovary Anatomy 0.000 description 6
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 6
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 6
- 238000012216 screening Methods 0.000 description 6
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 6
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 6
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 description 5
- 101000836131 Blarina brevicauda Soricidin Proteins 0.000 description 5
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 108010017213 Granulocyte-Macrophage Colony-Stimulating Factor Proteins 0.000 description 5
- 102100039620 Granulocyte-macrophage colony-stimulating factor Human genes 0.000 description 5
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 description 5
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 5
- 238000012408 PCR amplification Methods 0.000 description 5
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 5
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 5
- 230000021615 conjugation Effects 0.000 description 5
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 5
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 5
- -1 epine Proteins 0.000 description 5
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 5
- QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N nitrogen group Chemical group [N] QJGQUHMNIGDVPM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 230000002018 overexpression Effects 0.000 description 5
- 210000003819 peripheral blood mononuclear cell Anatomy 0.000 description 5
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 5
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 5
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 5
- 210000004989 spleen cell Anatomy 0.000 description 5
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 5
- 102100031780 Endonuclease Human genes 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 description 4
- 102100035703 Prostatic acid phosphatase Human genes 0.000 description 4
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 4
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N Thymidine Chemical compound O=C1NC(=O)C(C)=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-XLPZGREQSA-N 0.000 description 4
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 4
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 4
- 239000011805 ball Substances 0.000 description 4
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 4
- 230000008859 change Effects 0.000 description 4
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 4
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 4
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 4
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 4
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 4
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 4
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 4
- 229960003130 interferon gamma Drugs 0.000 description 4
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 4
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 4
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 4
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 4
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 4
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 4
- 238000003752 polymerase chain reaction Methods 0.000 description 4
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 4
- 238000010839 reverse transcription Methods 0.000 description 4
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 4
- 210000003079 salivary gland Anatomy 0.000 description 4
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 4
- 210000000813 small intestine Anatomy 0.000 description 4
- 210000000278 spinal cord Anatomy 0.000 description 4
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 4
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 4
- 230000005945 translocation Effects 0.000 description 4
- 210000003932 urinary bladder Anatomy 0.000 description 4
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 4
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 3
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 3
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 3
- 101150013553 CD40 gene Proteins 0.000 description 3
- VYZAMTAEIAYCRO-UHFFFAOYSA-N Chromium Chemical compound [Cr] VYZAMTAEIAYCRO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 101710088194 Dehydrogenase Proteins 0.000 description 3
- 238000011510 Elispot assay Methods 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000700721 Hepatitis B virus Species 0.000 description 3
- 101000711466 Homo sapiens SAM pointed domain-containing Ets transcription factor Proteins 0.000 description 3
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 3
- 241001103596 Lelia Species 0.000 description 3
- 102000004316 Oxidoreductases Human genes 0.000 description 3
- 108090000854 Oxidoreductases Proteins 0.000 description 3
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 3
- 108010092799 RNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 3
- 102100030086 Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Human genes 0.000 description 3
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 3
- 102100040245 Tumor necrosis factor receptor superfamily member 5 Human genes 0.000 description 3
- 210000004100 adrenal gland Anatomy 0.000 description 3
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 3
- WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K aluminium hydroxide Chemical compound [OH-].[OH-].[OH-].[Al+3] WNROFYMDJYEPJX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 3
- 239000003098 androgen Substances 0.000 description 3
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 3
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 3
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 3
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 3
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 3
- 150000001720 carbohydrates Chemical group 0.000 description 3
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 3
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 3
- 239000011651 chromium Substances 0.000 description 3
- 229910052804 chromium Inorganic materials 0.000 description 3
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 230000001461 cytolytic effect Effects 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 3
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 3
- 239000000975 dye Substances 0.000 description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 3
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 3
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 3
- 210000002216 heart Anatomy 0.000 description 3
- 210000004754 hybrid cell Anatomy 0.000 description 3
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 3
- 230000001976 improved effect Effects 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N iron Substances [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 3
- 208000037841 lung tumor Diseases 0.000 description 3
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 3
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 3
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 3
- 229920001469 poly(aryloxy)thionylphosphazene Polymers 0.000 description 3
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 3
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 3
- 239000000700 radioactive tracer Substances 0.000 description 3
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 3
- 230000001177 retroviral effect Effects 0.000 description 3
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 3
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 3
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 3
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 3
- 239000011269 tar Substances 0.000 description 3
- 238000004448 titration Methods 0.000 description 3
- 239000003053 toxin Substances 0.000 description 3
- 231100000765 toxin Toxicity 0.000 description 3
- 108700012359 toxins Proteins 0.000 description 3
- 102000003390 tumor necrosis factor Human genes 0.000 description 3
- 241000701161 unidentified adenovirus Species 0.000 description 3
- 241001430294 unidentified retrovirus Species 0.000 description 3
- AHOKKYCUWBLDST-QYULHYBRSA-N (2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[(2s)-2-[[2-[[(2s)-2-[[(2s,3s)-2-[[(2s)-2,6-diaminohexanoyl]amino]-3-methylpentanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]acetyl]amino]-3-hydroxypropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]propanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)CCCCN)[C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CO)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC=1C=CC=CC=1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(O)=O)C1=CC=CC=C1 AHOKKYCUWBLDST-QYULHYBRSA-N 0.000 description 2
- GZCWLCBFPRFLKL-UHFFFAOYSA-N 1-prop-2-ynoxypropan-2-ol Chemical compound CC(O)COCC#C GZCWLCBFPRFLKL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010051457 Acid Phosphatase Proteins 0.000 description 2
- 102000013563 Acid Phosphatase Human genes 0.000 description 2
- 108010088751 Albumins Proteins 0.000 description 2
- 102000009027 Albumins Human genes 0.000 description 2
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- 206010004446 Benign prostatic hyperplasia Diseases 0.000 description 2
- DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N Beta-D-1-Arabinofuranosylthymine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 DWRXFEITVBNRMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N Butyric acid Chemical compound CCCC(O)=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 2
- UDMBCSSLTHHNCD-UHFFFAOYSA-N Coenzym Q(11) Natural products C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1C1OC(COP(O)(O)=O)C(O)C1O UDMBCSSLTHHNCD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000700626 Cowpox virus Species 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- 101001012157 Homo sapiens Receptor tyrosine-protein kinase erbB-2 Proteins 0.000 description 2
- 101000818836 Homo sapiens Zinc finger protein 609 Proteins 0.000 description 2
- 102000001399 Kallikrein Human genes 0.000 description 2
- 108060005987 Kallikrein Proteins 0.000 description 2
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- 241000234435 Lilium Species 0.000 description 2
- 108090001030 Lipoproteins Proteins 0.000 description 2
- 102000004895 Lipoproteins Human genes 0.000 description 2
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 2
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 244000061176 Nicotiana tabacum Species 0.000 description 2
- 235000002637 Nicotiana tabacum Nutrition 0.000 description 2
- 208000004403 Prostatic Hyperplasia Diseases 0.000 description 2
- 102000007056 Recombinant Fusion Proteins Human genes 0.000 description 2
- 108010008281 Recombinant Fusion Proteins Proteins 0.000 description 2
- 239000006146 Roswell Park Memorial Institute medium Substances 0.000 description 2
- 102100034018 SAM pointed domain-containing Ets transcription factor Human genes 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- 229910000831 Steel Inorganic materials 0.000 description 2
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 2
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 2
- DRTQHJPVMGBUCF-XVFCMESISA-N Uridine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-XVFCMESISA-N 0.000 description 2
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000700647 Variola virus Species 0.000 description 2
- 102100021355 Zinc finger protein 609 Human genes 0.000 description 2
- UDMBCSSLTHHNCD-KQYNXXCUSA-N adenosine 5'-monophosphate Chemical compound C1=NC=2C(N)=NC=NC=2N1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)[C@H]1O UDMBCSSLTHHNCD-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 2
- 229950006790 adenosine phosphate Drugs 0.000 description 2
- AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N alumane Chemical class [AlH3] AZDRQVAHHNSJOQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000003277 amino group Chemical group 0.000 description 2
- 229940030486 androgens Drugs 0.000 description 2
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 2
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N beta-L-thymidine Natural products O=C1NC(=O)C(C)=CN1C1OC(CO)C(O)C1 IQFYYKKMVGJFEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004166 bioassay Methods 0.000 description 2
- 125000004057 biotinyl group Chemical group [H]N1C(=O)N([H])[C@]2([H])[C@@]([H])(SC([H])([H])[C@]12[H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C(*)=O 0.000 description 2
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 2
- 239000006285 cell suspension Substances 0.000 description 2
- HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N cholesterol Chemical compound C1C=C2C[C@@H](O)CC[C@]2(C)[C@@H]2[C@@H]1[C@@H]1CC[C@H]([C@H](C)CCCC(C)C)[C@@]1(C)CC2 HVYWMOMLDIMFJA-DPAQBDIFSA-N 0.000 description 2
- OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N choline Chemical compound C[N+](C)(C)CCO OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 239000003245 coal Substances 0.000 description 2
- 239000011248 coating agent Substances 0.000 description 2
- 238000000576 coating method Methods 0.000 description 2
- 230000002860 competitive effect Effects 0.000 description 2
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 2
- 238000009402 cross-breeding Methods 0.000 description 2
- 238000005520 cutting process Methods 0.000 description 2
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 2
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 2
- 238000013461 design Methods 0.000 description 2
- 229960000633 dextran sulfate Drugs 0.000 description 2
- 108091022884 dihydropyrimidinase Proteins 0.000 description 2
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 108010048367 enhanced green fluorescent protein Proteins 0.000 description 2
- 108700020302 erbB-2 Genes Proteins 0.000 description 2
- 210000000887 face Anatomy 0.000 description 2
- 210000004700 fetal blood Anatomy 0.000 description 2
- 125000000524 functional group Chemical group 0.000 description 2
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Natural products OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000004676 glycans Chemical class 0.000 description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 2
- UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N guanine Chemical compound O=C1NC(N)=NC2=C1N=CN2 UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000004820 halides Chemical class 0.000 description 2
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 2
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 2
- FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N hypoxanthine Chemical compound O=C1NC=NC2=C1NC=N2 FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 2
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 2
- 238000002991 immunohistochemical analysis Methods 0.000 description 2
- 239000000411 inducer Substances 0.000 description 2
- 206010022000 influenza Diseases 0.000 description 2
- 208000037797 influenza A Diseases 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 230000002452 interceptive effect Effects 0.000 description 2
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 2
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 2
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 2
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 2
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 2
- 210000004698 lymphocyte Anatomy 0.000 description 2
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Chemical compound [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 2
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 2
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 2
- 239000000693 micelle Substances 0.000 description 2
- 230000005012 migration Effects 0.000 description 2
- 238000013508 migration Methods 0.000 description 2
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 2
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 2
- 210000003470 mitochondria Anatomy 0.000 description 2
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 2
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 2
- 239000007764 o/w emulsion Substances 0.000 description 2
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 2
- 229920001282 polysaccharide Polymers 0.000 description 2
- 239000005017 polysaccharide Substances 0.000 description 2
- 229920000136 polysorbate Polymers 0.000 description 2
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 2
- 229920000915 polyvinyl chloride Polymers 0.000 description 2
- 239000004800 polyvinyl chloride Substances 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 210000005267 prostate cell Anatomy 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 2
- 210000003705 ribosome Anatomy 0.000 description 2
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 2
- DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M sodium pyruvate Chemical compound [Na+].CC(=O)C([O-])=O DAEPDZWVDSPTHF-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 210000004988 splenocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 2
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 2
- 239000010959 steel Substances 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 2
- 238000011410 subtraction method Methods 0.000 description 2
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 2
- 125000004434 sulfur atom Chemical group 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 2
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 2
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 2
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 2
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 2
- 125000003396 thiol group Chemical group [H]S* 0.000 description 2
- 229940104230 thymidine Drugs 0.000 description 2
- 229930003799 tocopherol Natural products 0.000 description 2
- 239000011732 tocopherol Substances 0.000 description 2
- 125000002640 tocopherol group Chemical class 0.000 description 2
- 235000019149 tocopherols Nutrition 0.000 description 2
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 2
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 2
- 125000003088 (fluoren-9-ylmethoxy)carbonyl group Chemical group 0.000 description 1
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AZQWKYJCGOJGHM-UHFFFAOYSA-N 1,4-benzoquinone Chemical compound O=C1C=CC(=O)C=C1 AZQWKYJCGOJGHM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UHDGCWIWMRVCDJ-UHFFFAOYSA-N 1-beta-D-Xylofuranosyl-NH-Cytosine Natural products O=C1N=C(N)C=CN1C1C(O)C(O)C(CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XDOFQFKRPWOURC-UHFFFAOYSA-N 16-methylheptadecanoic acid Chemical compound CC(C)CCCCCCCCCCCCCCC(O)=O XDOFQFKRPWOURC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 2-[4-(2-hydroxyethyl)piperazin-1-yl]ethanesulfonic acid Chemical compound OCC[NH+]1CCN(CCS([O-])(=O)=O)CC1 JKMHFZQWWAIEOD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BFSVOASYOCHEOV-UHFFFAOYSA-N 2-diethylaminoethanol Chemical compound CCN(CC)CCO BFSVOASYOCHEOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ROMPPAWVATWIKR-UHFFFAOYSA-N 4-[3-(4-chlorophenyl)-1,2,4-oxadiazol-5-yl]butanoic acid Chemical compound O1C(CCCC(=O)O)=NC(C=2C=CC(Cl)=CC=2)=N1 ROMPPAWVATWIKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- TVZGACDUOSZQKY-LBPRGKRZSA-N 4-aminofolic acid Chemical compound C1=NC2=NC(N)=NC(N)=C2N=C1CNC1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 TVZGACDUOSZQKY-LBPRGKRZSA-N 0.000 description 1
- 102100020979 ATP-binding cassette sub-family F member 1 Human genes 0.000 description 1
- 101001006370 Actinobacillus suis Hemolysin Proteins 0.000 description 1
- 241001093575 Alma Species 0.000 description 1
- 241000024188 Andala Species 0.000 description 1
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108090001008 Avidin Proteins 0.000 description 1
- 102100024222 B-lymphocyte antigen CD19 Human genes 0.000 description 1
- 102100022005 B-lymphocyte antigen CD20 Human genes 0.000 description 1
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N Benzene Chemical compound C1=CC=CC=C1 UHOVQNZJYSORNB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150032473 CTL gene Proteins 0.000 description 1
- 208000004434 Calcinosis Diseases 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical class [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- 108010078791 Carrier Proteins Proteins 0.000 description 1
- 240000007681 Catha edulis Species 0.000 description 1
- 235000006696 Catha edulis Nutrition 0.000 description 1
- 241000252254 Catostomidae Species 0.000 description 1
- 108010001857 Cell Surface Receptors Proteins 0.000 description 1
- 102000000844 Cell Surface Receptors Human genes 0.000 description 1
- 102100037623 Centromere protein V Human genes 0.000 description 1
- 102000009016 Cholera Toxin Human genes 0.000 description 1
- 108010049048 Cholera Toxin Proteins 0.000 description 1
- 206010010356 Congenital anomaly Diseases 0.000 description 1
- 241000557626 Corvus corax Species 0.000 description 1
- 241000612152 Cyclamen hederifolium Species 0.000 description 1
- UHDGCWIWMRVCDJ-PSQAKQOGSA-N Cytidine Natural products O=C1N=C(N)C=CN1[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-PSQAKQOGSA-N 0.000 description 1
- 102000000634 Cytochrome c oxidase subunit IV Human genes 0.000 description 1
- 108050008072 Cytochrome c oxidase subunit IV Proteins 0.000 description 1
- 210000004128 D cell Anatomy 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- 108010014303 DNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 1
- 102000016928 DNA-directed DNA polymerase Human genes 0.000 description 1
- 102000004163 DNA-directed RNA polymerases Human genes 0.000 description 1
- 108090000626 DNA-directed RNA polymerases Proteins 0.000 description 1
- 102000016911 Deoxyribonucleases Human genes 0.000 description 1
- 108010053770 Deoxyribonucleases Proteins 0.000 description 1
- 229920002307 Dextran Polymers 0.000 description 1
- 235000017274 Diospyros sandwicensis Nutrition 0.000 description 1
- 102000016607 Diphtheria Toxin Human genes 0.000 description 1
- 108010053187 Diphtheria Toxin Proteins 0.000 description 1
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010042407 Endonucleases Proteins 0.000 description 1
- 241000701959 Escherichia virus Lambda Species 0.000 description 1
- 244000187656 Eucalyptus cornuta Species 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010043428 Glycine hydroxymethyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 206010018691 Granuloma Diseases 0.000 description 1
- 239000007995 HEPES buffer Substances 0.000 description 1
- 102000011786 HLA-A Antigens Human genes 0.000 description 1
- 108010075704 HLA-A Antigens Proteins 0.000 description 1
- 102100031573 Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Human genes 0.000 description 1
- 101000783783 Homo sapiens ATP-binding cassette sub-family F member 1 Proteins 0.000 description 1
- 101000980825 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD19 Proteins 0.000 description 1
- 101000897405 Homo sapiens B-lymphocyte antigen CD20 Proteins 0.000 description 1
- 101000714682 Homo sapiens Calicin Proteins 0.000 description 1
- 101000777663 Homo sapiens Hematopoietic progenitor cell antigen CD34 Proteins 0.000 description 1
- 101000578249 Homo sapiens Homeobox protein Nkx-3.1 Proteins 0.000 description 1
- 101000599852 Homo sapiens Intercellular adhesion molecule 1 Proteins 0.000 description 1
- 101001002709 Homo sapiens Interleukin-4 Proteins 0.000 description 1
- 101001072881 Homo sapiens Phosphoglucomutase-like protein 5 Proteins 0.000 description 1
- 101000854603 Homo sapiens Protein FAM168A Proteins 0.000 description 1
- 101000580092 Homo sapiens RNA-binding protein 10 Proteins 0.000 description 1
- 101000914484 Homo sapiens T-lymphocyte activation antigen CD80 Proteins 0.000 description 1
- 101000805481 Homo sapiens Vigilin Proteins 0.000 description 1
- UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N Hydrogen Chemical compound [H][H] UFHFLCQGNIYNRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000004157 Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108090000604 Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N Hypoxanthine nucleoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(NC=NC2=O)=C2N=C1 UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102100030482 Hypoxia-inducible factor 3-alpha Human genes 0.000 description 1
- 101710083143 Hypoxia-inducible factor 3-alpha Proteins 0.000 description 1
- 229930010555 Inosine Natural products 0.000 description 1
- UGQMRVRMYYASKQ-KQYNXXCUSA-N Inosine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C2=NC=NC(O)=C2N=C1 UGQMRVRMYYASKQ-KQYNXXCUSA-N 0.000 description 1
- 102100037877 Intercellular adhesion molecule 1 Human genes 0.000 description 1
- 102100037850 Interferon gamma Human genes 0.000 description 1
- 102000014150 Interferons Human genes 0.000 description 1
- 108010050904 Interferons Proteins 0.000 description 1
- 102000000589 Interleukin-1 Human genes 0.000 description 1
- 108010002352 Interleukin-1 Proteins 0.000 description 1
- 102000004388 Interleukin-4 Human genes 0.000 description 1
- 108090000978 Interleukin-4 Proteins 0.000 description 1
- 102100021592 Interleukin-7 Human genes 0.000 description 1
- 108010002586 Interleukin-7 Proteins 0.000 description 1
- 241001580017 Jana Species 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 1
- FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N L-methotrexate Chemical compound C=1N=C2N=C(N)N=C(N)C2=NC=1CN(C)C1=CC=C(C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(O)=O)C=C1 FBOZXECLQNJBKD-ZDUSSCGKSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 1
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 241000282838 Lama Species 0.000 description 1
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101150034680 Lis-1 gene Proteins 0.000 description 1
- 206010025323 Lymphomas Diseases 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 108010031099 Mannose Receptor Proteins 0.000 description 1
- 102000018697 Membrane Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010052285 Membrane Proteins Proteins 0.000 description 1
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 1
- 102000006404 Mitochondrial Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010058682 Mitochondrial Proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000005431 Molecular Chaperones Human genes 0.000 description 1
- 108010006519 Molecular Chaperones Proteins 0.000 description 1
- MSFSPUZXLOGKHJ-UHFFFAOYSA-N Muraminsaeure Natural products OC(=O)C(C)OC1C(N)C(O)OC(CO)C1O MSFSPUZXLOGKHJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 241000699660 Mus musculus Species 0.000 description 1
- 102100021867 Natural resistance-associated macrophage protein 2 Human genes 0.000 description 1
- 108700020796 Oncogene Proteins 0.000 description 1
- 102000043276 Oncogene Human genes 0.000 description 1
- 206010061535 Ovarian neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 241000283903 Ovis aries Species 0.000 description 1
- 101150084844 PAFAH1B1 gene Proteins 0.000 description 1
- 238000009004 PCR Kit Methods 0.000 description 1
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 1
- 241000282320 Panthera leo Species 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 102000035195 Peptidases Human genes 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- 108010013639 Peptidoglycan Proteins 0.000 description 1
- YNPNZTXNASCQKK-UHFFFAOYSA-N Phenanthrene Natural products C1=CC=C2C3=CC=CC=C3C=CC2=C1 YNPNZTXNASCQKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000577218 Phenes Species 0.000 description 1
- 102000009569 Phosphoglucomutase Human genes 0.000 description 1
- 102100036635 Phosphoglucomutase-like protein 5 Human genes 0.000 description 1
- 102000004861 Phosphoric Diester Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108090001050 Phosphoric Diester Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 241000276426 Poecilia Species 0.000 description 1
- 241000276498 Pollachius virens Species 0.000 description 1
- 208000020584 Polyploidy Diseases 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 102000004245 Proteasome Endopeptidase Complex Human genes 0.000 description 1
- 108090000708 Proteasome Endopeptidase Complex Proteins 0.000 description 1
- 102100020938 Protein FAM168A Human genes 0.000 description 1
- 108010029485 Protein Isoforms Proteins 0.000 description 1
- 102000001708 Protein Isoforms Human genes 0.000 description 1
- 241000589516 Pseudomonas Species 0.000 description 1
- 108091034057 RNA (poly(A)) Proteins 0.000 description 1
- 102100027514 RNA-binding protein 10 Human genes 0.000 description 1
- 239000012979 RPMI medium Substances 0.000 description 1
- 235000004443 Ricinus communis Nutrition 0.000 description 1
- 108091006618 SLC11A2 Proteins 0.000 description 1
- 206010039509 Scab Diseases 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000019394 Serine hydroxymethyltransferases Human genes 0.000 description 1
- 102100032491 Serine protease 1 Human genes 0.000 description 1
- 101710151387 Serine protease 1 Proteins 0.000 description 1
- 102100022638 Serine protease 48 Human genes 0.000 description 1
- 101710197541 Serine protease 48 Proteins 0.000 description 1
- 108010079723 Shiga Toxin Proteins 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 108010090804 Streptavidin Proteins 0.000 description 1
- 241000193998 Streptococcus pneumoniae Species 0.000 description 1
- 101710172711 Structural protein Proteins 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 230000006052 T cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 102100027222 T-lymphocyte activation antigen CD80 Human genes 0.000 description 1
- 206010043376 Tetanus Diseases 0.000 description 1
- JZRWCGZRTZMZEH-UHFFFAOYSA-N Thiamine Natural products CC1=C(CCO)SC=[N+]1CC1=CN=C(C)N=C1N JZRWCGZRTZMZEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 1
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 1
- 108700019146 Transgenes Proteins 0.000 description 1
- 108060008539 Transglutaminase Proteins 0.000 description 1
- YZCKVEUIGOORGS-NJFSPNSNSA-N Tritium Chemical compound [3H] YZCKVEUIGOORGS-NJFSPNSNSA-N 0.000 description 1
- 241000458243 Viana Species 0.000 description 1
- 102100037814 Vigilin Human genes 0.000 description 1
- 239000005862 Whey Substances 0.000 description 1
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 description 1
- HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N Zinc Chemical class [Zn] HCHKCACWOHOZIP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DGEZNRSVGBDHLK-UHFFFAOYSA-N [1,10]phenanthroline Chemical compound C1=CN=C2C3=NC=CC=C3C=CC2=C1 DGEZNRSVGBDHLK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FHICGHSMIPIAPL-HDYAAECPSA-N [2-[3-[6-[3-[(5R,6aS,6bR,12aR)-10-[6-[2-[2-[4,5-dihydroxy-3-(3,4,5-trihydroxyoxan-2-yl)oxyoxan-2-yl]ethoxy]ethyl]-3,4,5-trihydroxyoxan-2-yl]oxy-5-hydroxy-2,2,6a,6b,9,9,12a-heptamethyl-1,3,4,5,6,6a,7,8,8a,10,11,12,13,14b-tetradecahydropicene-4a-carbonyl]peroxypropyl]-5-[[5-[8-[3,5-dihydroxy-4-(3,4,5-trihydroxyoxan-2-yl)oxyoxan-2-yl]octoxy]-3,4-dihydroxy-6-methyloxan-2-yl]methoxy]-3,4-dihydroxyoxan-2-yl]propoxymethyl]-5-hydroxy-3-[(6S)-6-hydroxy-2,6-dimethylocta-2,7-dienoyl]oxy-6-methyloxan-4-yl] (2E,6S)-6-hydroxy-2-(hydroxymethyl)-6-methylocta-2,7-dienoate Chemical compound C=C[C@@](C)(O)CCC=C(C)C(=O)OC1C(OC(=O)C(\CO)=C\CC[C@](C)(O)C=C)C(O)C(C)OC1COCCCC1C(O)C(O)C(OCC2C(C(O)C(OCCCCCCCCC3C(C(OC4C(C(O)C(O)CO4)O)C(O)CO3)O)C(C)O2)O)C(CCCOOC(=O)C23C(CC(C)(C)CC2)C=2[C@@]([C@]4(C)CCC5C(C)(C)C(OC6C(C(O)C(O)C(CCOCCC7C(C(O)C(O)CO7)OC7C(C(O)C(O)CO7)O)O6)O)CC[C@]5(C)C4CC=2)(C)C[C@H]3O)O1 FHICGHSMIPIAPL-HDYAAECPSA-N 0.000 description 1
- XJLXINKUBYWONI-DQQFMEOOSA-N [[(2r,3r,4r,5r)-5-(6-aminopurin-9-yl)-3-hydroxy-4-phosphonooxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl] [(2s,3r,4s,5s)-5-(3-carbamoylpyridin-1-ium-1-yl)-3,4-dihydroxyoxolan-2-yl]methyl phosphate Chemical compound NC(=O)C1=CC=C[N+]([C@@H]2[C@H]([C@@H](O)[C@H](COP([O-])(=O)OP(O)(=O)OC[C@@H]3[C@H]([C@@H](OP(O)(O)=O)[C@@H](O3)N3C4=NC=NC(N)=C4N=C3)O)O2)O)=C1 XJLXINKUBYWONI-DQQFMEOOSA-N 0.000 description 1
- 238000005903 acid hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 125000002252 acyl group Chemical group 0.000 description 1
- 238000007259 addition reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 230000000996 additive effect Effects 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- 125000003172 aldehyde group Chemical group 0.000 description 1
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 description 1
- 229940037003 alum Drugs 0.000 description 1
- 229910021502 aluminium hydroxide Inorganic materials 0.000 description 1
- ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K aluminium phosphate Chemical compound O1[Al]2OP1(=O)O2 ILRRQNADMUWWFW-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 150000001412 amines Chemical class 0.000 description 1
- 229960003896 aminopterin Drugs 0.000 description 1
- 229960000723 ampicillin Drugs 0.000 description 1
- AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N ampicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=CC=C1 AVKUERGKIZMTKX-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 1
- 150000008064 anhydrides Chemical class 0.000 description 1
- 125000000129 anionic group Chemical group 0.000 description 1
- 230000005809 anti-tumor immunity Effects 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 1
- 229940045686 antimetabolites antineoplastic purine analogs Drugs 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 230000005975 antitumor immune response Effects 0.000 description 1
- 230000001640 apoptogenic effect Effects 0.000 description 1
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000823 artificial membrane Substances 0.000 description 1
- 210000003567 ascitic fluid Anatomy 0.000 description 1
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 1
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000003190 augmentative effect Effects 0.000 description 1
- 238000000376 autoradiography Methods 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- DRTQHJPVMGBUCF-PSQAKQOGSA-N beta-L-uridine Natural products O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-PSQAKQOGSA-N 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001588 bifunctional effect Effects 0.000 description 1
- 238000006065 biodegradation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 210000001109 blastomere Anatomy 0.000 description 1
- 239000007767 bonding agent Substances 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000007975 buffered saline Substances 0.000 description 1
- 239000008366 buffered solution Substances 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000000234 capsid Anatomy 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 125000002915 carbonyl group Chemical group [*:2]C([*:1])=O 0.000 description 1
- 231100000504 carcinogenesis Toxicity 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 238000010370 cell cloning Methods 0.000 description 1
- 238000012832 cell culture technique Methods 0.000 description 1
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 1
- 230000036755 cellular response Effects 0.000 description 1
- 230000007541 cellular toxicity Effects 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 239000013522 chelant Substances 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- SQQXRXKYTKFFSM-UHFFFAOYSA-N chembl1992147 Chemical compound OC1=C(OC)C(OC)=CC=C1C1=C(C)C(C(O)=O)=NC(C=2N=C3C4=NC(C)(C)N=C4C(OC)=C(O)C3=CC=2)=C1N SQQXRXKYTKFFSM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 230000035605 chemotaxis Effects 0.000 description 1
- 229940044683 chemotherapy drug Drugs 0.000 description 1
- 229960005091 chloramphenicol Drugs 0.000 description 1
- WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N chloramphenicol Chemical compound ClC(Cl)C(=O)N[C@H](CO)[C@H](O)C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N 0.000 description 1
- 235000012000 cholesterol Nutrition 0.000 description 1
- 229960001231 choline Drugs 0.000 description 1
- 230000002759 chromosomal effect Effects 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 239000005515 coenzyme Substances 0.000 description 1
- 238000001246 colloidal dispersion Methods 0.000 description 1
- 239000000084 colloidal system Substances 0.000 description 1
- 230000000112 colonic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 1
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 230000001268 conjugating effect Effects 0.000 description 1
- 239000000470 constituent Substances 0.000 description 1
- 238000011109 contamination Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 210000004087 cornea Anatomy 0.000 description 1
- 230000008878 coupling Effects 0.000 description 1
- 238000010168 coupling process Methods 0.000 description 1
- 238000005859 coupling reaction Methods 0.000 description 1
- 201000003740 cowpox Diseases 0.000 description 1
- 239000003431 cross linking reagent Substances 0.000 description 1
- 239000012228 culture supernatant Substances 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 229930186364 cyclamen Natural products 0.000 description 1
- UHDGCWIWMRVCDJ-ZAKLUEHWSA-N cytidine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O1 UHDGCWIWMRVCDJ-ZAKLUEHWSA-N 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 238000012303 cytoplasmic staining Methods 0.000 description 1
- 210000000172 cytosol Anatomy 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000007123 defense Effects 0.000 description 1
- 238000004925 denaturation Methods 0.000 description 1
- 230000036425 denaturation Effects 0.000 description 1
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000000432 density-gradient centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000003599 detergent Substances 0.000 description 1
- 229960002086 dextran Drugs 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 1
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 1
- 238000001523 electrospinning Methods 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 108010084315 endopolyphosphatase Proteins 0.000 description 1
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 description 1
- 150000002148 esters Chemical class 0.000 description 1
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000029142 excretion Effects 0.000 description 1
- 210000001808 exosome Anatomy 0.000 description 1
- 238000010195 expression analysis Methods 0.000 description 1
- 210000003414 extremity Anatomy 0.000 description 1
- 238000001125 extrusion Methods 0.000 description 1
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 1
- 210000003754 fetus Anatomy 0.000 description 1
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 1
- 239000011152 fibreglass Substances 0.000 description 1
- 230000003619 fibrillary effect Effects 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 239000007850 fluorescent dye Substances 0.000 description 1
- 229940014144 folate Drugs 0.000 description 1
- 235000019152 folic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000011724 folic acid Substances 0.000 description 1
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 description 1
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 1
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 1
- 238000002523 gelfiltration Methods 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 1
- 230000002518 glial effect Effects 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N glutathione Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(=O)N[C@@H](CS)C(=O)NCC(O)=O RWSXRVCMGQZWBV-WDSKDSINSA-N 0.000 description 1
- 229910052736 halogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 108060003552 hemocyanin Proteins 0.000 description 1
- 230000002008 hemorrhagic effect Effects 0.000 description 1
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 1
- 231100000283 hepatitis Toxicity 0.000 description 1
- 230000001744 histochemical effect Effects 0.000 description 1
- 102000053898 human CCIN Human genes 0.000 description 1
- 102000055229 human IL4 Human genes 0.000 description 1
- 102000033434 human N(1)-acetylpolyamine oxidase Human genes 0.000 description 1
- 108091005273 human N(1)-acetylpolyamine oxidase Proteins 0.000 description 1
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 1
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 1
- 230000002209 hydrophobic effect Effects 0.000 description 1
- 125000002887 hydroxy group Chemical group [H]O* 0.000 description 1
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 1
- 229940127121 immunoconjugate Drugs 0.000 description 1
- 230000002055 immunohistochemical effect Effects 0.000 description 1
- 230000001024 immunotherapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 239000007943 implant Substances 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 238000011065 in-situ storage Methods 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 230000001524 infective effect Effects 0.000 description 1
- 239000003999 initiator Substances 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 229960003786 inosine Drugs 0.000 description 1
- 229940079322 interferon Drugs 0.000 description 1
- 229940100994 interleukin-7 Drugs 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 1
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 1
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LMFRELDATPGFFD-UHFFFAOYSA-N karenin Natural products O1CC(C)=CCC2=C1C=C(OC(CO)=CC1=O)C1=C2O LMFRELDATPGFFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 238000002386 leaching Methods 0.000 description 1
- GZQKNULLWNGMCW-PWQABINMSA-N lipid A (E. coli) Chemical class O1[C@H](CO)[C@@H](OP(O)(O)=O)[C@H](OC(=O)C[C@@H](CCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCCCC)[C@@H](NC(=O)C[C@@H](CCCCCCCCCCC)OC(=O)CCCCCCCCCCC)[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](OC(=O)C[C@H](O)CCCCCCCCCCC)[C@@H](NC(=O)C[C@H](O)CCCCCCCCCCC)[C@@H](OP(O)(O)=O)O1 GZQKNULLWNGMCW-PWQABINMSA-N 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 239000006166 lysate Substances 0.000 description 1
- 230000002132 lysosomal effect Effects 0.000 description 1
- 229920002521 macromolecule Polymers 0.000 description 1
- ZLNQQNXFFQJAID-UHFFFAOYSA-L magnesium carbonate Chemical compound [Mg+2].[O-]C([O-])=O ZLNQQNXFFQJAID-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000001095 magnesium carbonate Substances 0.000 description 1
- 229910000021 magnesium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 1
- 239000006249 magnetic particle Substances 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000035800 maturation Effects 0.000 description 1
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 229910044991 metal oxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000004706 metal oxides Chemical class 0.000 description 1
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 1
- 230000001394 metastastic effect Effects 0.000 description 1
- 206010061289 metastatic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N methamphetamine Chemical compound CN[C@@H](C)CC1=CC=CC=C1 MYWUZJCMWCOHBA-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 229960000485 methotrexate Drugs 0.000 description 1
- 125000002496 methyl group Chemical group [H]C([H])([H])* 0.000 description 1
- 230000011987 methylation Effects 0.000 description 1
- 238000007069 methylation reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002493 microarray Methods 0.000 description 1
- 239000011806 microball Substances 0.000 description 1
- 239000003094 microcapsule Substances 0.000 description 1
- 230000002438 mitochondrial effect Effects 0.000 description 1
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 1
- 210000003205 muscle Anatomy 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- 210000000822 natural killer cell Anatomy 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 230000037311 normal skin Effects 0.000 description 1
- 239000012038 nucleophile Substances 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 description 1
- 230000020477 pH reduction Effects 0.000 description 1
- 230000000242 pagocytic effect Effects 0.000 description 1
- 235000019834 papain Nutrition 0.000 description 1
- 210000004417 patella Anatomy 0.000 description 1
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001575 pathological effect Effects 0.000 description 1
- 239000013610 patient sample Substances 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 238000010647 peptide synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 210000004303 peritoneum Anatomy 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- JTJMJGYZQZDUJJ-UHFFFAOYSA-N phencyclidine Chemical compound C1CCCCN1C1(C=2C=CC=CC=2)CCCCC1 JTJMJGYZQZDUJJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 1
- 108091000115 phosphomannomutase Proteins 0.000 description 1
- 150000008300 phosphoramidites Chemical class 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 210000002826 placenta Anatomy 0.000 description 1
- 231100000614 poison Toxicity 0.000 description 1
- 239000002574 poison Substances 0.000 description 1
- 230000008488 polyadenylation Effects 0.000 description 1
- 238000011176 pooling Methods 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 108010043671 prostatic acid phosphatase Proteins 0.000 description 1
- 235000019419 proteases Nutrition 0.000 description 1
- 238000000159 protein binding assay Methods 0.000 description 1
- 238000001742 protein purification Methods 0.000 description 1
- 150000003212 purines Chemical class 0.000 description 1
- 150000003230 pyrimidines Chemical class 0.000 description 1
- 239000001397 quillaja saponaria molina bark Substances 0.000 description 1
- 150000003248 quinolines Chemical class 0.000 description 1
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 1
- 210000000664 rectum Anatomy 0.000 description 1
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 1
- 230000003252 repetitive effect Effects 0.000 description 1
- 230000001718 repressive effect Effects 0.000 description 1
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 1
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 1
- 238000012552 review Methods 0.000 description 1
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 1
- CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N saccharin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)NS(=O)(=O)C2=C1 CVHZOJJKTDOEJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 229930182490 saponin Natural products 0.000 description 1
- 150000007949 saponins Chemical class 0.000 description 1
- 201000000980 schizophrenia Diseases 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 1
- 239000006152 selective media Substances 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 238000007873 sieving Methods 0.000 description 1
- 230000011664 signaling Effects 0.000 description 1
- 210000002460 smooth muscle Anatomy 0.000 description 1
- 229940054269 sodium pyruvate Drugs 0.000 description 1
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 1
- 230000009870 specific binding Effects 0.000 description 1
- 238000002798 spectrophotometry method Methods 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 210000000130 stem cell Anatomy 0.000 description 1
- 229940031000 streptococcus pneumoniae Drugs 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 1
- 125000000446 sulfanediyl group Chemical group *S* 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 230000009897 systematic effect Effects 0.000 description 1
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 239000004753 textile Substances 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 235000019157 thiamine Nutrition 0.000 description 1
- KYMBYSLLVAOCFI-UHFFFAOYSA-N thiamine Chemical compound CC1=C(CCO)SCN1CC1=CN=C(C)N=C1N KYMBYSLLVAOCFI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003495 thiamine Drugs 0.000 description 1
- 239000011721 thiamine Substances 0.000 description 1
- HNKJADCVZUBCPG-UHFFFAOYSA-N thioanisole Chemical compound CSC1=CC=CC=C1 HNKJADCVZUBCPG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K thiophosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=S RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 210000001541 thymus gland Anatomy 0.000 description 1
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 231100000820 toxicity test Toxicity 0.000 description 1
- 210000003437 trachea Anatomy 0.000 description 1
- 238000010361 transduction Methods 0.000 description 1
- 230000026683 transduction Effects 0.000 description 1
- 238000011830 transgenic mouse model Methods 0.000 description 1
- 102000003601 transglutaminase Human genes 0.000 description 1
- 238000011269 treatment regimen Methods 0.000 description 1
- JREYOWJEWZVAOR-UHFFFAOYSA-N triazanium;[3-methylbut-3-enoxy(oxido)phosphoryl] phosphate Chemical compound [NH4+].[NH4+].[NH4+].CC(=C)CCOP([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O JREYOWJEWZVAOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052722 tritium Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000003171 tumor-infiltrating lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 231100000588 tumorigenic Toxicity 0.000 description 1
- 230000000381 tumorigenic effect Effects 0.000 description 1
- 241000712461 unidentified influenza virus Species 0.000 description 1
- DRTQHJPVMGBUCF-UHFFFAOYSA-N uracil arabinoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940045145 uridine Drugs 0.000 description 1
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 1
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
- 239000011701 zinc Chemical class 0.000 description 1
- 229910052725 zinc Chemical class 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
- C07K14/4701—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals not used
- C07K14/4748—Tumour specific antigens; Tumour rejection antigen precursors [TRAP], e.g. MAGE
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K40/00—Cellular immunotherapy
- A61K40/10—Cellular immunotherapy characterised by the cell type used
- A61K40/11—T-cells, e.g. tumour infiltrating lymphocytes [TIL] or regulatory T [Treg] cells; Lymphokine-activated killer [LAK] cells
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K40/00—Cellular immunotherapy
- A61K40/40—Cellular immunotherapy characterised by antigens that are targeted or presented by cells of the immune system
- A61K40/41—Vertebrate antigens
- A61K40/42—Cancer antigens
- A61K40/4274—Prostate associated antigens e.g. Prostate stem cell antigen [PSCA]; Prostate carcinoma tumor antigen [PCTA]; Prostatic acid phosphatase [PAP]; Prostate-specific G-protein-coupled receptor [PSGR]
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2239/00—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K40/00
- A61K2239/46—Indexing codes associated with cellular immunotherapy of group A61K40/00 characterised by the cancer treated
- A61K2239/58—Prostate
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Immunology (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
Abstract
الملخص: يتعلق الاختراع الراهن بتراكيب وطرق لعلاج وتشخيص سرطان، مثل سرطان البروستات.وقد تشتمل التراكيب على بروتين ورم بروستاتي واحد أو أكثر أو أجزائه المولدة للمناعة أو متعددات نوويتيد تحمل شفرة هذه الأجراء. وبدلا من ذلك، قد يشتمل تركيب علاجي على خلية منتجة لمولد مضادنعبر عن بروتين ورم بروستاتي أو خلية T متخصصة بخلايا تعبر عن بروتين من هذا القبيل. وقد تستخدم تراكببب من هذا القبيل، على سبيل المثال، للوقاية من أمراض مثل سرطان البروستات وعلاجها. وتزود كذلك طرق تشخيصية تعتمد علىالكشف عن بروتين ورم بروستاتي، او رنا رسوليحمل شفرة هذا البروتين، في عينة.
Description
Y
تراكيب وطرق لعلاج وتشخيص سرطان البروستات الوصف الكامل
J خلفية الاخترا يتعلق الاختراع الراهن بوجهِ عام بمعالجبة وتشخيص سرطان.؛ مقل سرطان البروستات. وعلى وجه التخصيصء يتعلق الاختراع بمتعددات ببتيد تشتمل على الأقل على جزء من بروتين ورم بروستاتي وبمتعددات نوويتيد تحمل شفرة متعددات الببتيد هذه. وقد تستخدم متعددات ببتيد ومتعددات نوويتيد من هذا القبيل في لقاحات وتراكيب صيدلية للوقايسة ° من سرطان البروستات وعلاجه ولتشخيص ومراقبة سرطانات من هذا القبيل. بين الكور؛ وتقدر le sad ويعتبر سرطان البروستات أحد أشكال السرطان الأكثر سنة. وقد أوضحت بينة ٠٠ نسبة حدوثه ب 9670 في الرجال الذين تزيد أعمارهم عن إكلينيكية قاهرة أن لسرطان البروستات في البشر قابلية للانتقال إلى العظام ويبدو أن المرض يتقدم بصورةٍ حتمية من حالة الاعتماد على منشط الذكورة (الأندروجين) إلى حالة عدم ٠ الاستجابة للأندروجين مما يؤدي إلى زيادة معدل الوفيات. وفي الوقت الحاضرء؛ يعبر هذا المرض المنتشر السبب الثاني المؤدي إلى الموت الناتج عن السرطان بين الرجال في الولايات المتحدة الأمريكية. وبالرغم من الأبحاث الهامة في معالجة المرض؛ إلا أنه بقي من الصعب معالجة سرطان البروستات. وعادةً؛ يعتمد العلاج على المعالجة بالجراحة و/أو بالإشعاع؛ لكن هذه ١ الطرق تعتبر غير فعالة في نسبةٍ كبيرة من الحالات. ولبروتينين متخصصين بالبروستات ~PAP وفسفاتاز حمسض البروستاتيك (PSA) محددين مسبقآً-مولد مضاد خاص بالبروستات كلية PSA مستويات Laila قدرة علاجية وتشخيصية محدودة. فعلى سبيل المثال؛ لا ترتبط بوجود سرطان البروستات؛ حيث تكون موجودة في نسبة معينة من حالات السرطان غير وعلاوةٌ على ذلك؛ ترتبط (BPH) أ البروستاتي بما في ذلك تكثر نسيج البروستات الحميد بحجم البروستات ولا تشير إلى مستوى الانتشار. PSA قياسات
وبالرغم من الأبحاث الهامة في معالجة هذه السرطانات وسرطانات أخرى. إلا أنه بقي من الصعب تشخيص ومعالجة سرطان البروستات بشكلٍ فغّال. Gg لذلك ثمة حاجة في التقنية لطرق محسنة للكشف عن ومعالجة سرطانات من هذا القبيل ٠ ويفي الاختراع الراهن بهذه الاحتياجات ويقدم كذلك مزايا أخرى وثيقة الصلة. ٠ الوصف العام للاختراع: وبعبارةٍ موجزة؛ يقدم الاختراع الراهن تراكيب وطرق لتشخيص ومعالجة سرطانء Fa سرطان البروستات. Gy لأحد الأوجه؛ يقدم الاختراع الراهن متعددات ببتيد تحتوي على الأقل على جزء من بروتين ورم بروستاتي أو متغير منه. وتعتبر أجزاء معينة ومتغيرات أخرى مولدة للمناعة؛ Jie إضعاف قدرة المتغير على التفاعل بصفةٍ جوهرية مع Jad ٠ مضادة متخصصة بالمولد المضاد. By لتجسيدات معينة؛ يحتوي متعدد الببتيد على الأقل على جزء مولد للمناعة من بروثين ورم بروستاتي أو متغير منه؛ حيث يشتمل بروتين الورم على سياق حمض أميني يحمل شفرته سياق متعدد نوويتيد يختار من الفئة المكونة من: )1( سياقات مذكورة في أي من سياقات التمييز أرقام: ١117١ أو 171-116 أو ١70-177 أو 97 أو ٠١-١79 أو ١6-70 أو 2776 أو 78 أو 6 أو لاله أو .وم م 0 9لا أو اه" أو 8 أو 77-64؟؛ (ب) سياقات تهجن إلى أي من السياقات المتدكورة (anna في ظروف معتدلة الشدة؛ و (ج) أجزاء مكملة لأي من السياقات من () أو (ب). ووفقا لتجسيدات خاصة معينة؛ يشتمل متعدد ببتيد من هذا القبيل على الأقل على جزءء أو متغير منه؛ من بروتين الورم حيث يحتوي على سياق حمض أميني يختار من الفئة المكونة من السياقات المذكورة في أي من سياقات التمييز أرقلم: ١١-117 و 177و 176و ١78 oy و YY قو HFFA TTT TTY بعصي ريرم ويقدم الاختراع الراهن كذلك متعددات نوويتيد تحمل شفرة متعدد الببتيد كما وصسف أعلاه» أو جزء منه (مثل جزء يحمل شفرة 1١ شق حمض أميني على الأقل لبروتين الورم البروستاتي)؛ ونواقل تعبير تشتمل على متعددات النوويتيد هذه وخلايا عائلة تحول أو تخمج خمجاً Glial باستخدام نواقل تعبير من هذا القبيل. Vlog
وفي أوجه AT يقدم الاختراع الراهن تراكيب صيدلية تشتمل على متعدد ببتيد أو متعدد نوويتيد كما وصف أعلاه وحامل مقبول فسيولوجياً. وفي das وثيق الصلة للاختراع الراهن؛ تزود لقاحات. وتشتمل لقاحات من هذا القبيل على متعدد ببتيد أو متعدد نوويتيد كما وصف أعلاه ومعزز استجابة مناعية غير متخصص. . ويقدم الاختراع الراهن كذلك تراكيب صيدلية تشتمل على: (أ) جسم مضاد أو جزء منه يرتبط بالمولد المضاد حيث يرتبط بصورةٍ دقيقة ببروتين ورم بروستاتي؛ و (ب) حامل مقبول فسيولوجياً. وفي ang أخرى. يقدم الاختراع الراهن تراكيب صيدلية تشتمل على: (أ) GA منتجة للمولد المضاد تعبر عن متعدد ببتيد Chay WS أعلاه و (ب) dala أو سواغ مقبول صيدلياً. ٠ وتشمل الخلايا المنتجة للمولد المضاد الخلايا المتفرعة والخلايا الملتهممة الكبيرة والخلايا أحادية النواة وأرومات ليفية وخلايا B وفي dash وثيقة الصلة؛ تزود لقاحات تشتمل على: (أ) خلية متتجة لمولد مضاد تعبر عن متعدد الببتيد كما وصف أعلاه و (ب) معزز استجابة مناعية غير متخصص. وفي أوجهٍ sal يقدم الاختراع كذلك؛ بروتينات التحام تشتمل على متعدد ببتيد واحد ّ ve على الأقل كما وصف أعلاه بالإضافة إلى متعددات نوويتيد تحمل شفرة بروتينات الالتحام هذه. As أوجه وثيقة الصلة؛ تقدم تراكيب صيدلية تشتمل على بروتين التحام.؛ أو متعدد نوويتيد يحمل شفرة بروتين الالتحام في توليفة مع حامل مقبول فسيولوجيا. وفي أوجهٍ «sal تزود كذّلك لقاحات؛ تشتمل على بروتين التحام؛ أو متعدد نوويتيد © يحمل شفرة بروتين الالتحام في توليفة مع معزز استجابة مناعية غير متخصص. وفي sal andl يقدم الاختراع الراهن طرقا لتثبيط نمو السرطان في مريض تشمل إعطاء تركيب صيدلي أو لقاح إلى مريض كما ذكر أعلاه. وفي dal أخرى؛ يقدم الاختراع الراهن كذلك؛ طرقا لإزالة خلايا ورمية من عينة إحيائية تشمل (uals عينة إحيائية مع LIA 7 تتفاعل بصورةٍ دقيقة مع بروتين ورم
بروستاتي؛ حيث تجرى خطوة التلدمس في ظروفٍ ولفترة زمنية كافية للسماح بإزالة خلايا تعبر عن البروتين من العينة.
وفي أوجه وثيقة الصلة؛ تقدم طرق لتثبيط نمو السرطان في مريض تشضمل إعطاء مريض عينة إحيائية معالجة كما وصف أعلاه.
° وفي أوجهٍ (sal تقدم كذلك طرق لتنبيه و/أو توسيع خلايا 7 متخصصة ببروتين ورم بروستاتي تشمل تلدمس خلايا 7 مع واحد أو أكثر من: )1( متعدد ببتيد كما Ging أعلاه؛ (Y) متعدد نوويتيد يحمل شفرة متعدد الببتيد هذا؛ و/أو (V) خلية منتجة لمولد مضاد تعبر عن متعدد ببتيد من هذا القبيل؛ في ظطروفٍ ولفترة زمنية كافية للسماح بتتبيه و/أو توسيع WA 7. ويزود SUX عدد من خلايا T المعزولة تشمل خلايا T المحضرة كما وصف أعلاه.
١ وفي أوجدٍ (A يقدم الاختراع الراهن طرقا لتثبيط نمو السرطان في مريض تشمل إعطاءه مقدار فال من عدد من WIA 7 كما وصف lel ويقدم الاختراع الراهن كذلك طرق لتثبيط نمو السرطان في مريسض تشتمل على الخطوات التالية: (أ) حضن خلايا T 6047 و/أو “8 المعزولة من مريض مع واحد أو أكتر من: )١( متعدد ببتيد يشتمل على الأقل على جزء مولد للمناعة من بروتين ورم بروستاتي؛ Vo (7) متعدد نوويتيد يحمل شفرة متعدد الببتيد هذا؛ و )7( خلية منتجة لمولد مضاد تعبر عن متعدد ببتيد من هذا القبيل؛ و (ب) إعطاء المريض مقدار فغّال من خلايا T المتكاثرة وبذلك تثبيط نمو السرطان في المريض . وقد تنسّل الخلايا المتكاثرة؛ لكن ليس من الضروري؛ قبل إعطائها إلى المريض. وفي أوجِهٍ coal يقدم الاختراع الراهن Bok لتحديد وجود أو عدم وجود السرطان ©“ في مريض تشمل: (أ) تلامس عينة إحيائية مأخوذة من مريض مع عامل ربط يرتبط مع متعدد الببتيد كما ذكر أعلاه؛ و (ب) الكشف عن Jae متعدد الببتيد المرتبط بعامل الربط في العينة؛ و (ج) مقارنة مقدار متعدد الببتيد مع قيمة قطع محددة مسبقاً lea يحدد وجود أو عدم وجود السرطان في المريض ٠ وفي تجسيدات مفضلة؛ يكون عامل الربط عبارة عن جسم مضاد؛ والأفضل جسم مضاد وحيد النسيلة. وقد يكون السرطان عبارة عن سرطان بروستات.
. وفي أوحِهٍ أخرى. يقدم الاختراع الراهن كذلك Th لمراقبة نمو السرطان في مريض. وتشمل طرق من هذا القبيل الخطوات التالية: (أ) تلامس عينة إحيائية مأخوذة من مريض عند فترة زمنية أولى مع عامل ربط يرتبط مع متعدد الببتيد كما ذكر del (ب) الكشف عن مقدار متعدد الببتيد المرتبط بعامل الربط في العينة؛ (ج) إعادة الخطوتين )1( و ٠ (ب) باستخدام due إحيائية مأخوذة من المريض عند فترة زمنية لاحقة؛ و (د) مقارنة مقدار متعدد الببتيد الذي iS عنه في الخطوة (ج) مع المقدار الذي كشف عنه في الخطوة (ب) Ades يراقب نمو السرطان في المريض. وفي أوجه أخرى» يقدم الاختراع الراهن كذلك Boh لتحديد وجود أو عدم وجود السرطان في مريض» تشمل الخطوات التالية: (أ) تادمس عينة إحيائية مأخوذة من مريض مع ٠ نوويتيد قصير السلسلة يهجّن إلى متعدد نوويتيد يحمل شفرة بروتين ورم بروستاتي؛ (ب) الكشف في العينة عن مستوى متعدد النوويتيد؛ ويفضل رنا (حمض ريبي نووي) رسول» الذي يهجّن إلى نوويتيد قصير السلسلة؛ و(ج) مقارنة مستوى متعدد النوويتيد الذي يهجّن إلى التوويتيد قصير السلسلة مع قيمة القطع المحددة Baus ومنها يحدد وجود أو عدم وجود السرطان في المريض. وفي تجسيدات معينة؛ يكشف عن مقدار رنا الرسول عن طريق تفاعل بلمرة نزيمية مسلسل باستخدام؛ على سبيل المثال؛ بادىء نوويتيدي قصير السلسلة واحد على الأقل يهجّن إلى متعدد نوويتيد Jeng شفرة متعدد الببتيد كما ذكر أعلاه؛ أو مكسّل لمتعدد نوويتيد من هذا القبيل. وفي تجسيدات أخرى؛ يكشف عن مقدار رنا الرسول باستخدام تقنيات تهجين تستخدم مسبار نوويتيدي قصير السلسلة يهجّن إلى متعدد نوويتيد يحمل شفرة متعدد الببتيد كما وصف أعلاه؛ أو مكسّل لمتعدد نوويتيد من هذا القبيل.
9 وفي wail وثيقة الصلة؛ تقدم طرق لمراقبة نمو السرطان في مريض»؛ تشمل الخطوات التالية: (أ) تلامس Aue إحيائية مأخوذة من مريض مع نوويتيد قصير السلسلة يهجّن إلى متعدد نوويتيد يحمل شفرة بروتين ورم بروستاتي؛ (ب) الكشف في Aull عن مقدار متعدد نوويتيد يهجّن إلى نوويتيد قصير السلسلة؛ (ج) sale] الخطوتين (أ) و (ب) باستخدام عينة إحيائية مأخوذة من المريض عند فترة زمنية لاحقة؛ و (د) مقارنة مقدار متعدد النوويتيد الذي v كشف عنه في الخطوة (ج) مع المقدار الذي كشف عنه في الخطوة (ب) ومنه يراقب نمو السرطان في المريض. أجسام مضادة وحيسدة Jia saline يزود الاختراع الراهن أجساماً (5 Al وفي أوجه التسيلة؛ ترتبط بمتعدد الببتيد كما وصق أعلاه؛ بالإضافة إلى طقوم تشخيصية تشتمل على هذه الأجسام المضادة. وتزود كذلك طقوم تشخيصية تشتمل على مسبار أو بادىء نوويتيدي قصير - ٠ السلسلة واحد أو اكثر كما وصف أعلاه. وستتضح هذه الأوجه وأوجه أخرى للاختراع الراهن بالرجوع إلى الوصف التفصيلي التالي والرسوم المرفقة. ولقد ذكرت جميع المراجع في هذا البيان لتكون بكامل محتوياتها مرجعاً يحال إليه كما ذكر كل لو منها على حدة. شرح مختصر للرسوم: 0٠ على قتل أرومات ليفية تعبر عن متعدد ببتيد ورم T يوضح مقدرة خلايا :]١[ الشكل بروستاتي 05025 تمثيلي بالمقارنة مع أرومات ليقية ضابطة. وتبين النسبة المثوية للانحلال بالنسبة إلى مجموعة من نسب الخلايا المؤثقرة: الخلايا المستهدفة؛ كما هو مبين.
OSE ٠ عن متعدد ببتيد ورم pd ]و [7 ب]: يوضحان مقدرة خلايا 7 على تمييز خلايا Y] يبين عدد بقع جاما-انترفيرون Ala بروستاتي 05025 تمثيلي. وفي كل نسبة إلى أعداد مختلفة من المستجيبات. ففي الشكل [7 أ] تمثل البيانات بالنسبة إلى أرومات ليفية تتبْض باستخدام البيتيد 025-12 بالمقارنة مع ضابط. وفي الشكل 71 ب)؛ E75 أرومات ليفية تتبّض باستخدام ببتيد ِ تمثل البيانات بالنسبة إلى أرومات ليفية تعبر عن 25025 بالمقارنة مع
HER-2/neu أرومات ليفية تعبر عن المشستق من (PIS #10 معايرة ربط ببتيد تنافسية تبين أن الببتيد Sig :]©[ الشسكل التمثيل المحصور ل PIS # 10 ويثبط الببتيد (HLA-A 5.؛ يربط
CTL للببتيد 2058 المرتبط بالنسيلة 01508458 المأخوذة من HLA-A2 Yo
A
CTL ويعتبر 01503458 المأخوذة من -TNF في معايرة إحيائية لإطلاق
HLA-A2 الأنفلونزا الرئيسي 203458 المرتبط ب ain متخصص PIS # 10 الناتجة من فثران ممنعة ب T الشكل [4]: يوضح مقدرة خطوط خلية لتعمل بصورةٍ دقيقة على انحلال خلايا مسستهدفة 82160 من نوع ب 10 2184# وخلايا مستهدفة 2160 من نوع da Jia جوركات 5 من نوع A2Kb جوركات منبّغة ب 05015 بالمقارنة مع خلايا للتحليل نسبة إلى Ay id) وتبين النسبة (EGFP جوركات منبّغة ب مجموعة من نسب الخلايا المؤثرة: الخلايا المستهدفة؛ كما هو مبين. يوضح مقدرة نسيلة خلية 7 على تمييز والعمل على حل بصورةٍ دقيقة fe] الشكل خلايا 0 من نوع جوركات التي تعبر عن متعدد يبتيسد ورم ve يكون PLS #10 بروستاتي 05015 تمثيلي وبذلك يظهر أن متعدد الببتيد 5015م. aad) عبارة عن مغير خاصية معالج طبيعياً من <a رسمان بيانيان يوضحان نوعية خط الخلية 0087 (“أ-١) للمولد fe] أ] و [ أ] نتائج ١[ المضاد للورم البروستاتي التمثيلي (25015). ويبين الشكل Vo وتبين النسبة المئوية للانحلال النوعي بالنسبة إلى Cr Ga] معايرة مجموعة من نسب الخلايا المؤثرة: الخلايا المستهدفة؛ كما هو موضح. )1-13©( ويبين الشكل ]1 ب] إنتاج جاما-انترفيرون عن طريق خلايا
LOAN ذاتي نبغ ب 25015 عند نسب متغيرة من B-LCL منبهة مع المؤثرة: الخلايا المستهدفة كما هو موضح. 7 سياقات التمييز: هو سياق الدنا (الحمض الريبي النووي منقوص الأكسجين) المككل ١ سياق التمييز رقم:
F1-13 المحدد ل سياق التمييز رقم: ؟ هو سياق الدنا المكمّل المحدد عند الطرف ؟” ل 1-12ج.
F1-12 سياق التمييز رقم: ؟ هو سياق الدنا المكمّل المحدد عند الطرف #' ل ve
سياق التمييز رقم: هو سياق Gall المكمسّل المحدد عند الطرف ¥' ل Fl1-16 سياق التمييز رقم: © هو سياق الدنا المكسّل المحدد عند الطرف “' ل 111-1. سياق التمييز رقم: 6 هو سياق Gall المكسّل المحدد عند الطرف ؟” ل 121-9. سياق التمييز رقم: ١ هو سياق (Sal Gall المحدد عند الطرف ' ل 11-4]. ٠ سياق التمييز رقم: A هو سياق الدنا المكسّل المحدد عند الطرف ؟' ل 11-17. سياق التمييز رقم: 9 هو سياق الدنا المكمّل المحدد عند الطرف 70 ل 11-17. سياق التمييز رقم: ٠١ هو سياق الدنا المكسّل المحدد عند الطرف "٠ ل 1-12]. سياق التمييز رقم: ١١ هو سياق Gall المكمّل المحدد عند الطرف #9 ل L1-12 سياق التمييز رقم: VY هو سياق الدنا المكمّل المحدد عند الطرف #' ل N1-1862 ٠ سياق Daal) رقم: VY هو سياق الدنا المكسّل المحدد عند الطرف 0" ل NI1-1862 سياق التمييز رقم: VE هو سياق الدنا المكمسّل المحدد عند الطرف “' ل 11-13. سياق التمييز رقم: V0 هو سياق Gall المكسّل المحدد عند الطرف 0" ل 11-13. سياق التمييز رقم: ١١ هو سياق الدنا المكسّل المحدد عند الطرف “' ل 11-19. سياق التمييز رقم: VY هو سياق الدنا المكسّل المحدد عند الطرف #' ل 11-19. ve سياق التمييز رقم: VA هو سياق الدنا المكمّل المحدد عند الطرف ؟' ل 11-25. سياق التمييز رقم: ١9 هو سياق الدنا المكمسّل المحدد عند الطرف #8 ل 11-25. سياق التمييز رقم: Yo هو سياق الدنا المكسّل المحدد عند الطرف 8 ل 11-24. سياق التمييز رقم: YY هو سياق الدنا المكسّل المحدد عند الطرف “' ل 11-24. سياق التمييز رقم: YY هو سياق الدنا المكمّل المحدد عند الطرف 70 ل K1-58 © سياق التمييز رقم: YT هو سياق الدنا المكسّل المحدد عند الطرف ؟” ل K1-58 سياق التمييز رقم: YE هو سياق الدنا المكسّل المحدد عند الطرف #8 ل K1-63 سياق التمييز رقم: Yo هو سياق الدنا المكمّل المحدد عند الطرف ' ل 1-63. سياق التمييز رقم: 77 هو سياق Gall المكمّل المحدد عند الطرف #8 ل L1-4 سياق التمييز رقم: 7١7 هو سياق Gall المكمسّل المحدد عند الطرف “7 ل Lid ve سياق التمييز رقم: YA هو سياق Gall المكمّل المحدد عند الطرف #9 ل 1.1-14.
- سياق التمييز رقم: 79 هو سياق الدنا المكمّل المحدد عند الطرف ؟' ل Li-14 سياق التمييز رقم: 7١ هو سياق الدنا المكسّل المحدد عند الطرف #” ل 71-12. سياق التمييز رقم: 7١ هو سياق الدنا المكسّل المحدد عند الطرف ؟' ل 11-16. سياق التمييز رقم: YY هو سياق Gall المكمّل المحدد عند الطرف ؟' ل 11-21. Swe التمييز رقم: TY هو سياق الدنا المكسّل المحدد عند الطرف ؟' ل K1d8 Glew التمييز رقم: YE هو سياق الدنا المكمّل المحدد عند الطرف ؟' ل K1-55 سياق التمييز رقم: TO هو سياق Gall المكمسّل المحدد عند الطرف ؟' ل L1-2 سياق التمييز رقم: TT هو سياق الدنا المكسّل المحدد عند الطرف ؟' ل L1-6 سياق التمييز رقم: TV هو سياق الدنا المكسّل المحدد عند الطرف ؟” ل N1-1858 ٠ سياق التمييز رقم: TA هو سياق الدنا المكسّل المحدد عند الطرف ؟” ل N1-1860 سياق التمييز رقم: 9" هو سياق الدنا المكسّل المحدد عند الطرف ؟' ل N1-1861 سياق التمييز رقم: 56 هو سياق الدنا المكسّل المحدد عند الطرف ' ل N1-1864 سياق التمييز رقم: 51 هو سياق الدنا المكمّل المحدد ل P35 سياق التمييز رقم: £Y هو سياق الدنا المكمّل المحدد ل 88. Yo سياق التمييز رقم: EY هو سياق الدنا المكمّل المحدد ل Po سياق التمييز رقم: £8 هو سياق Gall المكمّل المحدد ل P18 سياق التمييز رقم: £0 هو سياق الدنا المكمّل المحدد ل P20 سياق التمييز رقم: £7 هو سياق Gall المكمّل المحدد ل P29 سياق التمييز رقم: EV هو سياق Gall المكمّل المحدد ل P30 © سياق التمييز رقم: EA هو سياق الدنا المكمّل المحدد ل 234. سياق التمييز رقم: 59 هو سياق الدنا المكمّل المحدد ل P36 سياق التمييز ad) © هو سياق Gall المكمّل المحدد ل P38 سياق التمييز رقم: ©١ هو سياق الدنا المكمّل المحدد ل P39 سياق التمييز رقم: 0 هو سياق الدنا المكمّل المحدد ل P42 vo سياق التمييز رقم: 01 هو سياق Gall المكمّل المحدد ل P47
١ | سياق التمييز رقم: 08 هو سياق Gall المكمل المحدد ل P49 سياق التمييز رقم: 00 هو سياق Gall المكمل المحدد ل P50 سياق التمييز رقم: 07 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل P53 سياق التمييز رقم: OV هو سياق الدنا المكمل المحدد ل P55 ٠ سياق التمييز رقم: 0A هو سياق Gall المكمل المحدد ل P60 سياق التمييز رقم: 09 هو سياق Gall المكمل المحدد ل P64 سياق التمييز رقم: 60 هو سياق Gall المكمل المحدد ل P65 سياق التمييز رقم: 6١ هو سياق الدنا المكمل المحدد ل 873. سياق التمييز رقم: NY هو سياق Gall المكمل المحدد ل P75 ٠ سياق التمييز رقم: 7+ هو سياق الدنا المكمل المحدد ل P76 سياق التمييز رقم: TE هو سياق Gall المكمل المحدد ل P79 سياق التمييز رقم: 65 هو سياق الدنا المكمل المحدد P84 سياق التمييز رقم: NT هو سياق الدنا المكمل المحدد ل P68 سياق التمييز رقم: NV هو سياق الدنا المكمل المحدد ل P80 ١ سياق التمييز رقم: TA هو سياق الدنا المكمل المحدد ل P82 سياق التمييز رقم: 69 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل 01-3064. سياق التمييز رقم: Vir هو سياق الدنا المكمل المحدد ل 01-3065. سياق التمييز رقم: VY هو سياق الدنا المكمل المحدد ل 1-3692 7. سياق التمييز رقم: VY هو سياق الدنا المكمل المحدد ل 18-3905. © سياق التمييز رقم: VY هو سياق Gall المكمل المحدد ل 71-3686. سياق التمييز رقم: VE هو سياق الدنا المكمل المحدد ل R1-2330 سياق التمييز رقم: VO هو سياق الدنا المكمل المحدد ل 18-3976. سياق التمييز رقم: YU هو سياق Gall المكمل المحدد ل 1-3679 7. سياق التمييز رقم: VY هو سياق الدنا المكمل المحدد ل 1G-4736 ve سياق التمييز رقم: YA هو سياق الدنا المكمل المحدد ل 16-4738.
vy .10-4741 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل VA سياق التمييز رقم: .10-4744 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل Av سياق التمييز رقم: .106-4734 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل AY سياق التمييز رقم: 111-4774 المكمل المحدد ل Gall هو سياق AY سياق التمييز رقم: .111-4781 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل AY سياق التمييز رقم: oo .111-4785 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل AE سياق التمييز رقم: .111-4787 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل Ao سياق التمييز رقم: .111-4796 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل AT سياق التمييز رقم: .114807 المكمل المحدد ل Gall هو سياق AY سياق التمييز رقم: .11-4810 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل AA سياق التمييز رقم: ٠ .114811 المكمل المحدد ل Gall سياق التمييز رقم: 89 هو سياق 17-4876 سياق التمييز رقم: 90 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل 1K-4884 سياق التمييز رقم: 91 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل .112-4896 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل AY سياق التمييز رقم: 1G-4761 سياق التمييز رقم: 97 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل ١ 1G-4762 المكمل المحدد ل Gall سياق التمييز رقم: 95 هو سياق .111-4766 سياق التمييز رقم: 96 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل .111-4770 سياق التمييز رقم: 975 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل .111-4771 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل AY سياق التمييز رقم: .1114772 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل AA سياق التمييز رقم: xe .10-4297 سياق التمييز رقم: 19 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل .10-4309 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل ٠٠١ سياق التمييز رقم: .10.1-4278 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل ٠١١ سياق التمييز رقم: .17-4288 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل ٠١7 سياق التمييز رقم: .1-4283 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل ٠١7 سياق التمييز رقم: ve
Vlot
VY
.10-4304 المكمل المحدد ل Gall هو سياق ٠١4 سياق التمييز رقم: .19-4296 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل Veo سياق التمييز رقم: .10-4280 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل ٠76 سياق التمييز رقم: هو سياق الدنا المكمل كامل الطول المحدد ل 71-12 (يشار إليه ٠١ سياق التمييز رقم: .)05045 كذلك ب °
FL12 هو سياق الحمض الأميني المتوقع ل ٠١ سياق التمييز رقم: .11-17 هو سياق الدنا المكمل كامل الطول المحدد ل ٠١ سياق التمييز رقم: .1,1-12 المكمل كامل الطول المحدد ل Gall هو سياق ٠١١ سياق التمييز رقم:
N1-1862 هو سياق الدنا المكمل كامل الطول المحدد ل ١١١ سياق التمييز رقم: .11-17 هو سياق الحمض الأميني المتوقع ل ١١7 سياق التمييز رقم: ٠
L1-12 هو سياق الحمض الأميني المتوقع ل ١١١ سياق التمييز رقم:
N1-1862 هو سياق الحمض الأميني المتوقع ل ١١ E سياق التمييز رقم:
P89 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل ١١١ سياق التمييز رقم:
P90 المكمل المحدد ل Gall هو سياق ١١“ سياق التمييز رقم:
P92 المكمل المحدد ل Gall هو سياق ١١١7 سياق التمييز رقم: ve
P95 المكمل المحدد ل Gall Slaw هو ١١8 سياق التمييز رقم:
P98 المكمل المحدد ل Gall هو سياق ١١9 سياق التمييز رقم:
P102 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل ١١ سياق التمييز رقم:
P10 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل ١١١ سياق التمييز رقم: .8111 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل ١77 سياق التمييز رقم: vo
P14 المكمل المحدد ل Gall هو سياق ١77 سياق التمييز رقم: المكمل المحدد ل 115م. Gall هو سياق VY :مقر سياق التمييز
P116 المكمل المحدد ل Gall هو سياق ١70 سياق التمييز رقم:
P124 المكمل المحدد ل Gall هو سياق ١776 سياق التمييز رقم:
P126 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل ١7١7 سياق التمييز رقم: ve
VE
P130 المكمل المحدد ل Gall هو سياق VYA سياق التمييز رقم:
P1533 المكمل المحدد ل Gall هو سياق ١74 سياق التمييز رقم: المكمل المحدد ل 138م. Gall هو سياق ١7٠8 سياق التمييز رقم:
P143 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل ١١ سياق التمييز رقم: .2151 المكمل المحدد ل Gall م سياق التمييز رقم: 17 هو سياق
P156 المكمل المحدد ل Gall سياق التمييز رقم: 17 هو سياق هو سياق الدنا المكمل المحدد ل 157م. ١ 4 سياق التمييز رقم:
P166 المكمل المحدد ل Gall هو سياق ١2 سياق التمييز رقم: .2176 المكمل المحدد ل Gall هو سياق YY سياق التمييز رقم: .2178 سياق التمييز رقم: 17 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل ٠
P179 هو سيا الدنا المكمل المحدد ل VTA سياق التمييز رقم:
P185 المكمل المحدد ل Gall سياق التمييز رقم: 79 هو سياق
P192 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل ٠4٠0 سياق التمييز رقم:
P20] المكمل المحدد ل Gall هو سياق YE) سياق التمييز رقم: .2204 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل VEY سياق التمييز رقم: ٠ $208 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل ١67 سياق التمييز رقم: .2211 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل VEE سياق التمييز رقم: هو سياق الدنا المكمل المحدد ل 213م. YEO سياق التمييز رقم:
P219 المكمل المحدد ل Gall هو سياق VET سياق التمييز رقم:
P237 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل VEY سياق التمييز رقم: ve
P239 الدنا المكمل المحدد ل (Slow هو YEA سياق التمييز رقم: .2248 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل ١53 سياق التمييز رقم: هو سياق الدنا المكمل المحدد ل 251م. You سياق التمييز رقم:
P255 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل ١9١ سياق التمييز رقم:
P256 المكمل المحدد ل Gall هو سياق VOY سياق التمييز رقم: vo
Vio
سياق التمييز رقم: VOY هو سياق الدنا المكمل المحدد ل 259 سياق التمييز رقم: 4 ١٠9 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل 2260. سياق التمييز رقم: 100 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل P263 سياق التمييز رقم: ١97 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل 264م. © سياق التمييز رقم: ١997 هو سياق Gall المكمل المحدد ل P266 سياق التمييز رقم: VOA هو سياق Ball المكمل المحدد ل P270 سياق التمييز رقم: ١949 هو سياق Gall المكمل المحدد ل 2272. سياق التمييز رقم: ٠760 هو سياق Gall المكمل المحدد ل 278م. سياق التمييز رقم: VU) هو سياق الدنا المكمل المحدد ل P105 ٠ سياق التمييز رقم: ١67 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل 2107. سياق التمييز رقم: VAY هو سياق Gall المكمل المحدد ل 2137. سياق التمييز رقم: VUE هو سياق الدنا المكمل المحدد ل 2194. سياق التمييز رقم: ١765 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل P195 سياق التمييز رقم: ١676 هو سياق الدتا المكمل المحدد ل P196 ١ سياق التمييز رقم: VY هو سياق Gall المكمل المحدد ل 2220. سياق التمييز رقم: VTA هو سياق Gall المكمل المحدد ل P234 سياق التمييز رقم: ١764 هو سياق Gall المكمل المحدد ل 2235. سياق التمييز رقم: ١7٠0 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل P243 سياق التمييز رقم: ١77١ هو سياق الدنا المكمل المحدد ل P703P-DE] © سياق التمييز رقم: ١١77 هو سياق الحمض الأميني المتوقع ل 7038-081. سياق التمييز رقم: ١77 هو سياق Gall المكمل المحدد ل P703P-DE2 سياق التمييز رقم: 4 ١١7 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل P703P-DE6 سياق التمييز رقم: ١75 هو سياق Gall المكمل المحدد ل P703P-DE13 سياق التمييز رقم: ١776 هو سياق الحمض الأميني المتوقع ل P703P-DEI3 Ye سياق التمييز رقم: ١7/7 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل P703P-DEI4
١ .P703P-DE14 — هو سياق الحمض الأميني المتوقع ١7 سياق التمييز رقم: .10-4736 سياق التمييز رقم: 179 هو سياق الدنا المكمل المطول المحدد ل 1G-4738 سياق التمييز رقم: 185 هو سياق الدنا المكمل المطول المحدد ل .10-4741 هو سياق الدنا المكمل المطول المحدد ل VAY سياق التمييز رقم: 1G-4744 هو سياق الدنا المكمل المطول المحدد ل ١ AY هه سياق التمييز رقم: .111-4774 هو سياق الدنا المكمل المطول المحدد ل ١ AY سياق التمييز رقم: .111-4781 سياق التمييز رقم: 184 هو سياق الدنا المكمل المطول المحدد ل .111-4785 هو سياق الدنا المكمل المطول المحدد ل VAC سياق التمييز رقم: .111-4787 المكمل المطول المحدد ل Gall هو سياق VAT سياق التمييز رقم: .111-4796 المكمل المطول المحدد ل Gall هو سياق VAY سياق التمييز رقم: ٠ .114807 هو سياق الدنا المكمل المطول المحدد ل YAN سياق التمييز رقم: .1]4810 هو سياق الدنا المكمل المحدد عند الطرف “' ل VAS سياق التمييز رقم: .11-4811 سياق التمييز رقم: 1938 هو سياق الدنا المكمل المحدد عند الطرف #” ل .11-4876 هو سياق الدنا المكمل المطول المحدد ل ١9١ سياق التمييز رقم: 1K-4884 هو سياق الدنا المكمل المطول المحدد ل VAY التمييز رقم: Shwe 1K-4896 المحدد ل J shall هو سياق الدنا المكمل ١ AV سياق التمييز رقم: .16-4761 سياق التمييز رقم: 194 هو سياق الدنا المكمل المطول المحدد ل 1G-4762 سياق التمييز رقم: 1906 هو سياق الدنا المكمل المطول المحدد ل .111-4766 هو سياق الدنا المكمل المطول المحدد ل VAT سياق التمييز رقم: 1114770 AY المكمل المحدد عند الطرف Gall هو سياق VAY سياق التمييز رقم: vs 1114771 JF هو سياق الدنا المكمل المحدد عند الطرف VAN سياق التمييز رقم: .111-4772 سياق التمييز رقم: 1449 هو سياق الدنا المكمل المطول المحدد ل .10-4309 المحدد ل J shall هو سياق الدنا المكمل ٠٠١٠ سياق التمييز رقم: .1 1-4278 سياق التمييز رقم: 709 هو سياق الدنا المكمل المطول المحدد ل .10-4288 هو سياق الدنا المكمل المطول المحدد ل YoY سياق التمييز رقم: ve
Viet
لال سياق التمييز رقم: 707 هو سياق الدنا المكمل المطول المحدد ل 10-4283. سياق التمييز رقم: ٠04 هو سياق الدنا المكمل المطول المحدد ل 1D-4304 سياق التمييز رقم: Yeo هو سياق Gall المكمل المطول المحدد ل 10-4296. سياق التمييز رقم: 700 هو سياق الدنا المكمل المطول المحدد ل 1D-4280 Shwe التمييز رقم: 097 هو سياق Gall المكمل المحدد ل 10-4884. سياق التمييز رقم: Yo A هو سياق الدنا المكمل المحدد ل 0م»10-1110. سياق التمييز رقم: 709 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل 11-Crov سياق التمييز رقم: 7٠١ هو سياق Gall المكمل المحدد ل g6fwd 7 سياق التمييز رقم: YAY هو سياق الدنا المكمل المحدد ل 7.gbrev ٠ سياق التمييز رقم: 7١7 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل 8-658:0. سياق التمييز رقم: 7١ هو سياق الدنا المكمل المحدد ل »مم8-65. سياق التمييز رقم: 7١4 هو سياق Lal) المكمل المحدد ل 1ي8-066. سياق التمييز رقم: 7١١ هو سياق الدنا المكمل المحدد ل »مم8-66. سياق التمييز رقم: YIN هو سياق الدنا المكمل المحدد ل 1»م8-146. ١٠ سياق التمييز رقم: 7١١ هو سياق الدنا المكمل المحدد ل »»م8-09. سياق التمييز رقم: 718 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل 8-g3fwd سياق التمييز رقم: 71١9 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل 8-girey سياق التمييز رقم: 1٠ هو سياق Gall المكمل المحدد ل .8-hllrev سياق التمييز رقم: 17١ هو سياق الدنا المكمل المحدد ل 12600؟-؟. ov سياق التمييز رقم: YYY هو سياق الدنا المكمل المحدد ل g-Prev سياق التمييز رقم: 777 هو سياق Ball المكمل المحدد ل P5095 سياق التمييز رقم: 4 77 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل P510S سياق التمييز رقم: YYO هو سياق Gall المكمل المحدد ل PT03DES سياق التمييز رقم: 777 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل 9-811. vo سياق التمييز رقم: YYV هو سياق الدنا المكمل المحدد ل 8-66.
VA
.8-137 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل YYA سياق التمييز رقم:
JPTPNI3 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل YY سياق التمييز رقم:
JPTPN14 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل 77٠0 سياق التمييز رقم:
JPTPN23 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل 77١ سياق التمييز رقم:
JPTPN24 التمييز رقم: 777 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل Shwe
JPTPN2S هو سياق الدنا المكمل المحدد ل YTV سياق التمييز رقم:
JPTPN30 المكمل المحدد ل Gall سياق التمييز رقم: 4 77 هو سياق
JIPTPN34 سياق التمييز رقم: 770 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل
PTPN3S المكمل المحدد ل Gall هو سياق YY سياق التمييز رقم: : JPTPN36 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل YTV سياق التمييز رقم: > ٠
JPTPN3S سياق التمييز رقم: 777 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل
JPTPN39 سياق التمييز رقم: 779 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل
JPTPNAO سياق التمييز رقم: 7460 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل
JPTPNAL هو سياق الدنا المكمل المحدد ل YE) سياق التمييز رقم:
JPTPN42 سياق التمييز رقم: 47 ؟ هو سياق الدنا المكمل المحدد ل ١
JPTPN4S المكمل المحدد ل Gall سياق التمييز رقم: 4 7 هو سياق
JPTPN46 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل YEE سياق التمييز رقم: 1873451 المكمل المحدد ل Lal) سياق التمييز رقم: 46 ؟ هو سياق
JPTPN56 سياق التمييز رقم: 476 7 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل
PTPN64 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل YEV سياق التمييز رقم: vo
JPTPNGS هو سياق الدنا المكمل المحدد ل YEA سياق التمييز رقم:
JPTPN6T سياق التمييز رقم: 19 7 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل
JPTPNT6 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل Yoo سياق التمييز رقم:
JPTPNS4 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل YO سياق التمييز رقم:
JPTPNSS المكمل المحدد ل Gall سياق التمييز رقم: 707 هو سياق vo
Vlog
سياق التمييز رقم: YON هو سياق الدنا المكمل المحدد ل JPTPNS6 سياق التمييز رقم: 4 709 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل JPTPNS7 سياق التمييز رقم: Yoo هو سياق الدنا المكمل المحدد ل JPTPNSS سياق التمييز رقم: YOR هو سياق الدنا المكمل المحدد ل 18171. م سياق التمييز رقم: YO هو سياق الدنا المكمل المحدد ل JPIF2 سياق التمييز رقم: YOA هو سياق الدنا المكمل المحدد ل JP1C2 سياق التمييز رقم: 0949 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل JPIBL سياق التمييز رقم: 6٠١ هو سياق الدنا المكمل المحدد ل JPIB2 سياق التمييز رقم: 77١ هو سياق الدنا المكمل المحدد ل JPID3 ٠ سياق التمييز رقم: YAY هو سياق الدنا المكمل المحدد ل JP1A4 سياق التمييز رقم: 777 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل JPIFS سياق التمييز رقم: YE هو سياق Gall المكمل المحدد ل JPEG سياق التمييز رقم: 77625 هو سياق الدتا المكمل المحدد ل JPID6 سياق التمييز رقم: YI هو سياق الدنا المكمل المحدد ل JPIBS vo سياق التمييز رقم: 7719 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل JPLAG سياق التمييز رقم: 774 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل JPIES سياق التمييز رقم: 7719 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل JPIDT7 سياق التمييز رقم: 77٠0 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل JPIDY سياق التمييز رقم: 77١ هو سياق Gall المكمل المحدد ل 151010. x. سياق التمييز رقم: 777 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل JPIAS سياق التمييز رقم: YVY هو سياق الدنا المكمل المحدد ل JPIFI2 سياق التمييز رقم: YVE هو سياق الدنا المكمل المحدد ل JPLEL2 سياق التمييز رقم: YVO هو سياق الدنا المكمل المحدد ل JPIDIL سياق التمييز رقم: 7776 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل JPLCIHT vo سياق التمييز رقم: YVY هو سياق الدنا المكمل المحدد ل JPICI2
Y.
JPIBL2 المكمل المحدد ل Gall هو سياق YVA سياق التمييز رقم:
JPIALZ سياق التمييز رقم: 14 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل
JP3G2 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل YA سياق التمييز رقم:
JPSHI هو سياق الدنا المكمل المحدد ل YAY سياق التمييز رقم:
JPSHZ هو سياق الدنا المكمل المحدد ل YAY سياق التمييز رقم: ٠ هو سياق الدنا المكمل المحدد ل 3م178. YAY سياق التمييز رقم: المكمل المحدد ل 4م188. Lal) سياق التمييز رقم: 7484 هو سياق .18803 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل YAO سياق التمييز رقم: .17804 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل YAT سياق التمييز رقم: .18886 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل YAY سياق التمييز رقم: ٠ .17806 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل YAA سياق التمييز رقم:
PFS هو سياق الدنا المكمل المحدد ل YAR سياق التمييز رقم:
IPAS سياق التمييز رقم: 1950 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل
JPSCT هو سياق الدنا المكمل المحدد ل YY سياق التمييز رقم:
JPSDT هو سياق الدنا المكمل المحدد ل YAY سياق التمييز رقم: ve هو سياق الدنا المكمل المحدد ل 88م. YAY سياق التمييز رقم:
JPSET سياق التمييز رقم: 4 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل هو سياق الدنا المكمل المحدد ل 8ج178. YAO سياق التمييز رقم: .17808 سياق التمييز رقم: 197 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل .178810 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل YAY سياق التمييز رقم: ©
IPSCO سياق التمييز رقم: 197 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل
PREY سياق التمييز رقم: 199 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل
JPSELD هو سياق الدنا المكمل المحدد ل 7٠٠6 سياق التمييز رقم:
JPSFY هو سياق الدنا المكمل المحدد ل 7١٠ سياق التمييز رقم: :
IPH المكمل المحدد ل Gall مياق التمييز رقم: 707 هو سياق Ye
سياق التمييز رقم: 07 هو سياق الدتا المكمل المحدد ل 188012. سياق التمييز رقم: 4 76 هو سياق Gall المكمل المحدد ل JPSELL سياق التمييز رقم: Yo هو سياق الدنا المكمل المحدد ل 178812. سياق التمييز رقم: TT هو سياق الحمض الأميني للببتيد ل 12 28 PS oo سياق التمييز رقم: 097 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل PTLIP سياق التمييز رقم: To A هو سياق الدنا المكمل المحدد ل PT12P سياق التمييز رقم: 709 هو سياق Gall المكمل المحدد ل 3دع011.زم. سياق التمييز رقم: 7٠١ هو سياق الدنا المكمل المحدد ل P774P سياق التمييز رقم: 7١١ هو سياق الدنا المكمل المحدد ل 7758م. ٠ سياق التمييز رقم: YAY هو سياق الدنا المكمل المحدد ل 7158م. سياق التمييز رقم: YAY هو سياق Gall المكمل المحدد ل PTI0P سياق التمييز رقم: TYE هو سياق Gall المكمل المحدد ل PT67P سياق التمييز رقم: 7١١ هو سياق الدنا المكمل المحدد ل P763P سياق التمييز رقم: “YAN 58 هو سياق الدنا المكمل المحدد للجينات المعزولة مسبقا. Gwe التمييز رقم: 777 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل P703PDE5 سياق التمييز رقم: 777 هو سياق الحمض الأميني المتوقع ل _P703PDES سياق التمييز رقم: YYA هو سياق الدنا المكمل المحدد ل P703P6.26 سياق التمييز رقم: 779 هو سياق الحمض الأميني المتوقع ل .P703P6.26 سياق التمييز رقم: 77٠ هو سياق الدنا المكمل المحدد ل PT03PX-23 © سياق التمييز رقم: 77١ هو الحمض الأميني المتوقع ل P703PX23 سياق التمييز رقم: TTY هو سياق الدنا المكمل كامل الطول المحدد ل 5098م. سياق التمييز رقم: 77 هو سياق Gall المكمل المطول المحدد ل P707P (يشار إليه كدتلك ب (11-C9 : سياق التمييز رقم: 4 77 هو سياق الدنا المكمل المحدد ل ©714م.
+ سياق التمييز رقم: TO هو سياق الدنا المكسّل المحدد ل 27058 (يشار إليه كذلك ب (9-F3 سياق التمييز رقم: YY هو سياق الحمض الأميني المتوقع ل P705P سياق التمييز رقم: TTY هو سياق الحمض الأميني للببتد 10 # PIS ٠ سياق التمييز رقم: 778 هو سياق الحمض الأميني للببتيد PS سياق التمييز رقم: FYI هو سياق الحمض الأميني المتوقع 5095م. سياق التمييز رقم: 74560 هو سياق الدنا المكسّل المحدد ل P778P سياق التمييز رقم: YE) هو سياق الدنا المكسّل المحدد ل P786P سياق التمييز رقم: 47 ؟ هو سياق الدنا المكسّل المحدد ل P789P Ve سياق التمييز رقم: VEY هو سياق Gall المكمّل المحدد للنسيلة تظهر SUG مع رنا رسول 6 مأخوذ من هوموسابيينس. سياق التمييز رقم: WEE هو سياق الدنا المكسّل المحدد للنسيلة تظهر تماثلاً مع رنا رسول (ABC50) لبروتين ABC منبه ب TNF-Lill مأخوذ من هوموسابييتس. سياق التمييز رقم: TE هو سياق الدنا المكتّل المحدد للنسيلة تظهر تماثلاً مع رنا رسول مأخوذ من هوموسابيينس ل ئي-كاديرين. سياق التمييز رقم: YET هو سياق Gall المكمّل المحدد للنسيلة تظهر WL مع سيرين هيدروكسي متيل ترانسفيراز Daal) (SHMT) الخيطي يحمل شفرته حمض نووي بشري. Y. سياق التمييز رقم: YEV هو سياق الدنا المكمّل المحدد للنسيلة تظهر NL مع بروتين ؟ لملتهمة بكتيرية كبيرة مقترن مع مقاومة طبيعية (NRAMP2) مأخوذ من هوموسابيينس. سياق التمييز رقم: YEA هو سياق الدنا المكمّل المحدد للنسيلة تظهر ML مع بروتين مرتبط بفسفوجلوكوموتاز (PGMRP) مأخوذ من هوموسابيينس. Vlog rr هو سياق الدنا المكسّل المحدد للنسيلة تظهر تماثلاً مع رنا رسول TER سياق التمييز رقم
PAO بشري لوحدة فرعية بروتيوسوم .777© المكسّل المحدد ل Gall هو سياق Yoo سياق التمييز رقم:
P779P هو سياق الدنا المكسّل المحدد ل 72١ سياق التمييز رقم:
P790P هو سياق الدنا المكسّل المحدد ل YOY التمييز رقم: Shao
P784P سياق التمييز رقم: 727 هو سياق الدنا المكمّل المحدد ل .2776« سياق التمييز رقم: 4 75 هو سياق الدنا المكسّل المحدد ل
P780P هو سياق الدنا المكمّل المحدد ل Yoo سياق التمييز رقم:
P5445 المكمّل المحدد ل Gall هو سياق YO سياق التمييبز رقم:
P7458 المكمّل المحدد ل Ball هو سياق TOV سياق التمييز رقم: ٠
P782P هو سياق الدنا المكمسِّل المحدد ل YOA سياق التمييز رقم: .783© المكمّل المحدد ل Gall التمييز رقم: 0949 هو سياق Gl سياق التمييز رقم: 760 هو سياق الدنا المكسّل المحدد ل 179484 غير معروف.
P787P هو سياق الدنا المكمسّل المحدد ل YOY سياق التمييز رقم:
P788P هو سياق الدنا المكسّل المحدد ل YY سياق التمييز رقم: ١ غير معروف. 1١79954 هو سياق الدنا المكتّل المحدد ل YAY سياق التمييز رقم: .0781© المحدد ل SS) هو سياق الدنا YUE سياق التمييز رقم:
P785P هو سياق الدنا المكسّل المحدد ل Yo سياق التمييز رقم: سياق التمييز رقم: 759-775 هو سياق الدنا المكتّل المحدد لمتغيرات ارتباطية من .B303D Y. هو سياق الحمض الأميني المتوقع يحمل شفرته سياق التمييز رقم: TV سياق التمييز رقم: 7 سياق التمييز رقم: 7777 هو سياق الحمض الأميني المتوقع يحمل شفرته سياق التمييز رقم: 077 :
Ye هو سياق الحمض الأميني المتوقع يحمل شفرته سياق التمييز رقم: TVA سياق التمييز رقم: ا سياق التمييز رقم: 779 هو سياق الحمض الأميني المتوقع يحمل شفرته سياق التمييز رقم:
VE
هو سياق الحمض الأميني المتوقع يحمل شفرته سياق التمييز رقم: TAS سياق التمييز رقم: ٠ .Yvyo
B716P المكسّل المحدد ل Gall هو سياق YAY سياق التمييز رقم:
PIP هو سياق الدنا المكسّل كامل الطول المحدد ل FAY سياق التمييز رقم:
PTR هو سياق الحمض الأميني المتوقع ل FAT سياق التمييز رقم:
P1000C هو سياق الدنا المكسّل ل YAEL سياق التمييز رقم: ٠ .01-82 هو سياق الدنا المكسّل ل YAO سياق التمييز رقم: 77١0 هو سياق الدنا المكسّل ل TAT سياق التمييز رقم: .01-69 هو سياق الدنا المكسّل ل YAY سياق التمييز رقم: هو سياق الدنا المكسّل ل ش-ايديتول- 7-ديهيدروجيناز. YAN سياق التمييز رقم: هو سياق الدنا المكسّل ل 74؟؟. YAR سياق التمييز رقم: ١
APPA سياق التمييز رقم: 980 هو سياق الدنا المكمّل ل
KIAA0122 المكسّل ل Gall سياق التمييز رقم: 791 هو سياق
FTAA المكّل ل Gall هو سياق YAY سياق التمييز رقم: هو سياق الدنا المكسّل لجين محدد مسبقا. YAY سياق التمييز رقم:
JHCLBP المكمسّل ل Lal) سياق التمييز رقم: 14 هو سياق Y. ل ترانسجلوتاميناز. JSC Gall سياق التمييز رقم: 95 هو سياق هو سياق الدنا المكسّل لجين محدد مسبقاً. VAT التمييز رقم: (She
PAP هو سياق الدنا المكمّل ل TAY سياق التمييز رقم:
Ets لنسخ PDEF هو سياق الدنا المكسّل لمعامل YAA سياق التمييز رقم: .117018 سياق التمييز رقم: 7149 هو سياق الدنا المكسّل ل vo \lo¢
Yo
KIAA0295 سياق التمييز رقم: 5060 هو سياق الدنا المكسّل ل .777 go المكسّل ل Gall سياق التمييز رقم: )£0 هو سياق
Yo EY ل JCal سياق التمييز رقم: 507 هو سياق الدنا
YYO SA سياق التمييز رقم: 507 هو سياق الدنا المكسّل ل
YYoos سياق التمييز رقم: 504 هو سياق الدنا المكمّل ل ° .77551 سياق التمييز رقم: £140 هو سياق الدنا المكّل ل سياق التمييز رقم: 5070 هو سياق الدنا المكسّل ل 57ه؟؟. سياق التمييز رقم: 5097 هو سياق الدنا المكسّل ل 557؟؟. سياق التمييز رقم: 507 هو سياق الدنا المكسّل ل 58ه؟؟.
YoY سياق التمييز رقم: 509 هو سياق الدنا المكسّل ل ١
Yolo المكّل ل Gall هو سياق 4٠١0 سياق التمييز رقم:
YoY المكبّل ل Gall هو سياق 41١ سياق التمييز رقم:
YO A المكمّل ل Gall سياق التمييز رقم: 517 هو سياق سياق التمييز رقم: 5417 هو سياق الدنا المككّل ل 5176؟؟. .7706971 سياق التمييز رقم: 514 هو سياق الدنا المكّل ل
XYOVY هو سياق الدنا المكسّل ل ٠٠ سياق التمييز رقم:
XYoVY سياق التمييز رقم: 517 هو سياق الدنا المكّل ل
XYoVE المككّل ل Gall سياق التمييز رقم: 517 هو سياق
XYovo سياق التمييز رقم: 518 هو سياق الدنا المكّل ل
YA المككّل ل Gal سياق التمييز رقم: 414 هو سياق ©
YOM) ل Jal هو سياق الدنا 47٠0 سياق التمييز رقم: سياق التمييز رقم: 571 هو سياق الدنا المكّل ل 75/87؟.
XYOAY سياق التمييز رقم: 477 هو سياق الدنا المككّل ل التمييز رقم: 577 هو سياق الدنا المكّل ل 78/84؟. Ge
YYoAo المكّل ل Gall سياق التمييز رقم: 57 هو سياق Ye
د سياق التمييز رقم: 575 هو سياق الدنا المكسّل ل YYoAT سياق التمييز رقم: 577 هو سياق Sal Gall ل XYOAY سياق التمييز رقم: 477 هو سياق الدنا المكتّل ل 775/88 سياق التمييز رقم: 5748 هو سياق الدنا المكّل ل 775084. ٠ سياق التمييز رقم: 1749 هو سياق الدنا Yodo سياق التمييز رقم: 57٠ هو سياق الدنا المكّل ل Yo) سياق التمييز رقم: )£7 هو سياق الدنا المكّل ل YoY سياق التمييز رقم: 477 هو سياق الدنا المكسّل ل 7897؟. سياق التمييز رقم: £7F هو سياق الدنا JCal ل 7594؟. ve سياق التمييز رقم: EVE هو سياق الدنا المكّل ل YYodo : سياق التمييز رقم: £70 هو سياق الدنا Jnl ل NYT سياق التمييز رقم: 477 هو سياق Gal المكسّل ل YYALY سياق التمييز رقم: FV هو سياق Gall المكّل ل 7/848؟. سياق التمييز رقم: EVA هو سياق Gall المكّل ل 77844 Vo سياق التمييز رقم: 479 هو سياق Gall المكمّل ل YAO) سياق التمييز رقم: 4546 هو سياق J Call Gall ل XYAOY سياق التمييز رقم: 4541 هو سياق الدنا JCal ل 777/857. سياق التمييز رقم: 4547 هو سياق الدنا المكّل ل 77854. سياق التمييز رقم: EEF هو سياق الدنا JCal ل XYAGO xo سياق التمييز رقم: 444 هو سياق الدنا المكسّل ل 5م8؟؟. سياق التمييز رقم: 445 هو سياق Gall المكمّل ل YAY سياق التمييز رقم: 4147 هو سياق Gall المكّل ل 01 ؟. سياق التمييز رقم: 4497 هو سياق الدنا المكمّل ل TTY ْ سياق التمييز رقم: EEA هو سياق الدنا المكمّل ل Po ve سياق التمييز رقم: 449 هو سياق الدنا المكّل TTT) ‘lot rv هو سياق الدنا المكمّل ل 617؟؟. 45٠ سياق التمييز رقم:
YE المكمّل ل Gall هو سياق 45١ سياق التمييز رقم:
TVA سياق التمييز رقم: 557 هو سياق الدنا المكمّل ل
PUYY سياق التمييز رقم: 507 هو سياق الدنا المكتسّل ل سياق التمييز رقم: 4 49 هو سياق الدنا المكسّل لفولات هيدرولاز. ٠
LIM سياق التمييز رقم: 200 هو سياق الدنا المكسّل ل بروتين سياق التمييز رقم: £07 هو سياق الدنا المكسّل لجين معروف. هو سياق الدنا المكمّل لجين معروف. 40١7 سياق التمييز رقم: سياق التمييز رقم: 557 هو سياق الدنا المكمّل لجين محدد مسبتاً.
Yate سياق التمييز رقم: 209 هو سياق الدنا المكسّل ل Ve سياق التمييز رقم: 1760 هو سياق الدنا المكّل ل 277.؟.
Yeo 4 سياق التمييز رقم: 5751 هو سياق الدنا المكسّل ل سياق التمييز رقم: 177-477 هو سياقات الدنا المكسّل لجينات معروفة.
PT710P سياق التمييز رقم: 571-4778 هو سياقات الدنا المكسّل ل
P1001C سياق التمييز رقم: 5977 هو سياق الدنا المكسّل ل vs الوصف التفصيلى: لوحظ أعلاه؛ يوجه الاختراع الراهن بوجه عام نحو تراكيب وطرق لعلاج LS وتشخيص سرطان؛ مثل سرطان البروستات. وقد تشمل التراكيب الموصوفة في هذا البيان متعددات يبتيد ورم بروستاتي و/أو متعددات نوويتيد تحمل شفرة متعددات الببتيسد هذه و/أو و/أو خلايا (APCS) الأجسام المضادة و/أو خلايا منتجة للمولد المضاد Jia عوامل ربط © للاختراع الراهن Gay مناعة (علي سبيل المثال خلايا 7). وعادةٌ تشتمل متعددات الببتيد lead جزء مولد المناعة) من بروتين ورم بروستاتي أو متغير منه. Jia) على الأقل على جزء ويعني المصطلح " بروتين ورم بروستاتي " بروتين يعبر عنه في خلايا ورم بروستاتي عتد مستوى أعلى بضعفين على الأقل ويفضل أعلى بخمس أضعاف على الأقل من مستوى التعبير ٠ عنها في نسيج اعتيادي كما حدد باستخدام معايرة تمثيلية مزودة في هذا البيان. وتتمنل Ys
Ylo¢
YA elie بروتينات ورم بروستاتي معينة في بروتينات تتفاعل بشكل قابل للكشف (في معايرة أو بقعة ويستيرن) مع أمسال (ELISA) مثل المعايرة الإشرابية المناعية المرتبطة بإنزيم تشتمل متعددات النوويتيد للاختراع Bale . مضادة لمريض مصاب بسرطان البروستات الراهن على سياق دنا أو رنا يحمل شفرة كل أو جزء من متعدد ببتيد من هذا القبيل؛ أو يكون لأجسام المضادة عبارة عن بروتينات جهاز ١ مكملاً لسياق من هذا القبيل. وعادةٌ؛ تكون o كما هو موصسوف afin متاعي؛ أو أجزاء منها لربط المولد المضاد؛ قادرة على الارتباط متعدد أعلاه. وتشمل الخلايا المنتجة للمولد المضاد الخلايا المتقرعة والخلايا الملتهمة الكبيرة والخلايا أحادية النواة والأرومات الليفية وخلايا 8 التي تعبر عن متعدد البيتيد كما هو المستخدمة في تراكيب من هذا القبيل عبارة عن T OS قد تكون dale موصوف أعلاه. خلايا ]7 متخصصة يمتعدد الببتيد كما وصف أعلاه. ٠ ويقوم الاختراع الراهن على أساس اكتشاف بروتينات ورم بروستاتي بشرية. وتوجبد سياقات متعدد نوويتيد تحمل شفرة بروتينات ورم معينة؛ أو أجزاء منهاء في سياقات التمييز لتحم أو الما أو Savy give أو ١71-116 أو ١١-١ أرقام: أى كلل FAY J FAY Sf ل اصعلا gf أو لما 7*١ أو 78 أو وتوجد سياقات متعددات ببتيد تشتمل على جزء على الأقل من بروتين الورم في سياقات ١ ولام TPA رحا رو روك 7١ AVA GIVI AVY A 4-7 التمييز أرقام:
FAY 5 نض متعددات نوويتيد من بروتين ورم بروستاتي: يشمل الاختراع الراهن أي متعدد نوويتيد يحمل شفرة بروتين ورم بروستاتي أو جزء منه أو متغير منه كما هو موصوف في هذا البيان. وتشتمل متعددات النوويتيد المفضلة على Y. go نوويتيدا متعاقب على الأقل والأفضل Vo نوويتيدا متعاقب على الأقل ويفضل ٠ نوويتيدا متعاقب على الأقل تحمل شفرة جزء من بروتين الورم البروستاتي. والأفضل أن يحمل متعدد النوويتيد شفرة جزء مولد للمتاعة لبروتين الورم البروستاتي. ويشمل الاختراع الراهن كذلك متعددات النوويتيد المكملة لأي من هذه السياقات. وقد تكون متعددات النوويتيد : الجديلة (جديلة تشفير أو عكس اتجاه القراءة) أو مزدوجة الجديلة؛ وقد تكون جزئيات Blas
rs | دنا (دنا الجلبة الخلقية أو دنا مكمل أو تخليقي) أو جزيئات رنا. وتشضمل جزينات الرنا جزيئات رنا تووي غير متجانس تحتوي على دخلونات وتناظر جزيء الدنا بأسلوب إفرادي وجزيئات رنا الرسول التي لا تحتوي على دخلونات. وقد توجد سياقات تشفير أو لا تشفير إضافية؛ لكن ليس من الضروري؛ في متعدد النوويتيد وفقا للاختراع coal ll وقد يرتبسط ° متعدد cag pill لكن ليس من الضروري؛ بجزيئات أخرى و/أو مواد حاملة. وقد تشتمل متعددات النوويتيد على سياقات أصلي (أي؛ سياق داخلي المنشأ يحمل شفرة بروتين ورم بروستاتي أو جزء منه) أو قد تشتمل على متغير من هذا السياق. وقد تحتوي متغيرات متعدد النوويتيد على إبدال و/أو إضافة و/أو حذف و/أو إيلاج واحد أو أكثر بحيث لا يضعف توليد المناعة من متعدد الببتيد المحمولة شفرته بالنسبة إلى بروتين ورم Ve أصلي . وعادة؛ قد يحدد التأثير على توليد المناعة من متعدد الببتيد المحمولة شفرته كما هرو موصوف في هذا البيان. ويفضل أن تظهر المتغيرات تماثلا مع سياق متعدد النوويتيد الذي يحمل شفرة بروتين ورم بروستاتي أصلي أو جزء مته بنسبة لا تقل عن نحو 97070 والأفضل أن لا تقل عن نحو %A والأكتر تفضيلا أن لا تقل عن نحو 0 969. ويمكن القول بأن سياقي متعدد نوويتيد أو متعدد ببتيد " متماثلان " إذا كان سياق Vo التوويتيدات أو الأحماض الأمينية نفسه في السياقين عندما يتحاذى لأقصى توافق كما سيوصف أدناه. وعادة تجرى مقارنات بين سياقين بمقارنة السياقات على نافذة مقارنة لتمييز ومقارنة مناطق موضعية لتشابه السياقات. ويشير المصطلح " نافذة مقارنة." كما استخدم في هذا البيان إلى جزء يحتوي على نحو ٠١ موضع متجاور على الأقل؛ وعادة يحتوي من ٠١ إلى نحو Vo و50 إلى نحو ٠ ©؛ حيث يمكن مقارنة السياق بسياق مرجعي يحتوي على نفس ٠ العدد من المواضع المتجاورة بعد محاذاة السياقين على نحو أمثل. وقد تجرى محاذاة متلى للسياقات لمقارنتها باستخدام برنامج ميجاليجن في مجموعة لازرجين لبرامجيات معلومات إحيائية (من شركة دناستار انك.؛ مدينة ماديسون؛ ولاية وسكونسن) باستخدام متغيرات نظامية. ويجسد هذا البرنامج عدة مخططات محاذاة موصوفة في المراجع التالية: بحث إم.أوه. ديهوف (VIVA) بعنوان نموذج لتغير متطور في Yo بروتينات-قواعد لتحديد علاقات المسافة؛ وفي إصدار إم ٠ أوه. ديهوف»؛ أطلس سياق وبنية Vlog r.
البروتينات؛ مؤسسة الأبحاث الطبية الإحيائية الوطنية؛ واشنطن دي سي»؛ مجلد 0 ملحق
)¥( ص م0 #-/ها؛ وبحث جيه. هيين )١٠530( بعنوان طريقة موحدة للمحاذاة وتطور
نشوء ADL ص 110-7477 في مجلة طرق في بحث الانزيمات؛ مجلد OAT أكاديميك
برس انك؛ سان دييجو؛ كاليفورنيا؛ وبحث دي.جي. هيجينز وبي.إم. شارب (VIA) في
م مجلة «CABIOS مجلد 5؛ ص ١٠١-57٠؛ وبحث ني.دبليو. مييرز و دبليو. مولار (VIAN) مجلة (CABIOS مجلد cf ص VV) وبحث تي .دي. روبنسون (VAY)
بعنتوان نظريات موحدة؛ مجلد 01 ص 6100 وبحث إن. سانتو وإم. (VIAY) oi في
مجلة التطور الإحيائي الجزيني؛ مجلد of ص 406؟-79؟؛ وبحث بي.اتسش.إيه. سنيث وآر.آر. سوكال (VAY) بعنوان علم التصنيف العددي-مباديء وتطبيق ale التصنيف
١ العددي؛ فريمان برس» سان فرانسيسكو؛ كاليفورنيا؛ وبحث دبليو.جيه. ويلبور ودبليو :جيه. ليبمان (VIA) مجلة محاضر أعمال أكاديمية العلوم الوطنية الأمريكية؛ مجلد Ar ص
لال لا
ويفضل تحديد " النسبة المئوية لتماتل السياق " بمقارنة سياقين متحاذيين على نحو Ji على نافذة مقارنة تحتوي على ٠١ موضع على الأقل؛ حيث قد يشتمل الجزء من سياق Vo متعدد النووييتيد أو متعدد الببتيد في نافذة المقارنة على إضافات أو حذف (أي؛ فسحات) بنسبة 967٠0 أو أقل وعادة بنسبة تتراوح من © إلى 9616 أو بنسبة تتراوح من ٠١ إلى 7 بالمقارنة مع السياقات المرجعية (التي لا تحتوي على إضافات أو (Gia لمحاذاة مثلى لنسياقين. وتحسب النسبة المئوية بتحديد عدد المواضع حيث توجد قواعد الأحماض النووية أو شقات الأحماض الأمينية ABLE في كل من السياقين للحصول على عدد Y. المواضع المطابقة؛ ويحصل على النسبة المثوية لتماثل السياق بقسمة عدد المواضع المطابقة
على العدد الكلي للمواضع في السياق المرجعي (أي؛ حجم النافذة) وضرب النتائج ب .٠٠٠١ وقد تناظر المتغيرات كذلك» أو بشكل بديل؛ جين أصلي أو جزء أو مكمل منه بصفة جوهرية. وتكون متغيرات متعدد نوييتيد من هذا القبيل قادرة على أن تهجن إلى سياق دنا ناتج طبيعيا يحمل شفرة بروتين ورم بروستاتي أصلي (أو سياق مكمل) في ظروف معتدلة Yo الشدة. وتشمل الظروف معتدلة الشدة غسلا مسبقا في محلول من 550 تركيزه © أضعاف
SDS تركيزه 960.5 و8078 تركيزه ٠١ ملي جزيئي (درجة الحموضة (Ar وتهجين عند درجة حرارة تراوح من ٠٠ د.م (درجة (Liste إلى © د.م في محلول من SSC تركيزه © أضعاف طول الليل؛ ومن ثم الغسل مرتين باستخدام كل من محلول SSC تركيزه ضعفين و5١ الضعف Y ,+ الضعف ويحتوي كل منها على 505 تركيزه 960,١ عدد 6 د.م لمدة "٠ دقيقة في كل مرة. وسيدرك من قبل أولئك الملمين في التقنية؛ كنتيجة لتحلل الشفرة الجينية؛ أن هناك sae سياقات نوويتيدية تحمل شفرة متعدد الببتيد كما وصف في هذا البيان. وتبدي بعض من متعددات النوويتيد هذه أدنى تناظر Glad النوويتيد لأي جين أصلي. وبالرغم من ذلك؛ يتضمن الاختراع الراهن بصورة دقيقة متعددات النوويتيد التي تتغير بسبب الاختلافات في 6 استخدام الشفيرة. وعلاوة على ذلك؛ تقع أليلات الجينات التي تشتمل على سياقات متعدد النوويتيد المزودة في هذا البيان ضمن نطاق الاختراع الراهن. والأليلات عبارة عن جينات داخلية المنشأ تعدل نتيجة طفرة واحدة أو أكثرء de حذف و/أو إضافة و/أو Jha) نوويتيدات. وقد يكون لرنا الرسول والبروتين الناتجين؛ لكن ليس من الضخروريء بنية أو وظيفة معدلة. وقد تميز الأليلات باستخدام تقنيات قياسية Jia) التهجين و/أو التضخيم و/أو و مقارنة سياق قاعدة البيانات. وقد تحضر متعددات النوويتيد باستخدام أي من التقنيات المختلفة. وعلى سبيل (Ji) قد يميز متعدد التوويتيد ٠ كما سيوصف بتفصيل أدناه؛ بغربلة منظومة دقيقة من سياقات دنا مكملة لتغبير مرافق للورم (أي؛ تعبير أكبر في الورم البروستاتي بخمس أضعاف على الأقل منه في النسيج السوي؛ كما حدد باستخدام المعايرة التمثيلية المزودة في هذا البيان). وقد Te تجرى عمليات غربلة من هذا القبيل باستخدام منظومة دقيقة من شركة سينتيني (مدينة بالو ألتو؛ كاليفورنيا) وفقا لتعليمات المصنع (وكما وصف سكينا ومن معه بصفة أساسية في مجلة محاضر أعمال أكاديمية العلوم الوطنية الأمريكية مجلد اك ص AVANTE 73 وهيلر ومن معه في مجلة محاضر أعمال أكاديمية العلوم الوطنية الأمريكية؛ مجلد 9%( ص 7100-71٠0 19997). وبدلا من ذلك؛ قد تضخم متعددات الببتيد من سياق دنا vo مكمل محضر من خلايا تعبر عن البروتبنات الموصوفة في هذا clad) مثقل خلايا الورم Vlog ry البروستاتي. وقد تضخم متعددات نوويتيد من هذا القبيل عن طريق تفاعل البلمرة الانزيمية وبالنسبة لهذه الطريقة؛ قد تصمم بوادىء متخصصة بالسياق اعتمادا على (PCR) المسلسل السياقات المزودة في هذا البيان وقد تشترى أو تخلق. وقد يستخدم جزء مضخم لعزل الجين ذي الطول الكامل من مكتبة ملائمة (على سبيل مكتبة دنا مكمل لورم بروستاتي) باستخدام تقنيات معروفة جيدا. وفي تقنيات من هذا (JE) o تغريل المكتبة (دنا مكمل أو الجبلة الخلقية) باستخدام مسبار أو بادىء متعدد نوويتيد Jud واحد أو أكثر ملائم للتضخيم. ويفضل اختيار حجم المكتبة لتحتوي جزيئات أكبر. وقد تفضل والمناطق السابقة من الجينات في اتجاه To كذلك مكتبات بادىء عشوائي لتمييز الطرف القراءة. وتفضل مكتبات الجبلة الخلقية للحصول على دخلونات وسياقات مطولة عند الطصرف
Jo ١ عن طريق ترجمة (JO وبالتسبة لتقنيات التهجين؛ قد يوسم سياق جزئي (على سبيل باستخدام تقنيات معروفة جيدا. ومن ثم تغربل مكتبة بكتيرية أو (Pp قطع أو وسم طرفي ب ملتهمة كبيرة عن طريق مرشحات تهجين تحتوي على مستعمرات بكتيرية ممسوخة (أو مرجات تحتوي على لويحات ملتهمة) باستخدام مسبار موسوم (ينظر ما جاء عن سام بروك ومن معه في التنسيل الجزيئي: دليل مرشد لإجراءات المختبرات؛ كولد سبرنج هاربور وتختار وتوسع (VAY لابوراتوريز؛ مدينة كولد سبرنج هاربورء ولاية نيويوك»؛ مستعمرات أو اللويحات المهجنة ويعزل الدنا لتحليل إضافي. وقد تحلل نسائل الدنا المكمل لتحديد مقدار السياق الإضافي عن طريق؛ على سبيل المثال؛ »800 باستخدام بادىء من السياق الجزئي وبادىء من الناقل. وقد تولد خرائط حصر وسياقات جزئية لتمييز نسيلة متراكبة واحدة أو أكثر. ومن ثم» قد يحدد السياق الكامل باستخدام تقنيات قياسية قد تتضمن Y. توليد سلسلة من نسائل الحذف ومن ثم تركب السياقات المتراكبة الناتجة في سياق مجاور مفرد. ويمكن توليد جزيء دنا مكمل كامل الطول عن طريق ربط أجزاء ملائمة باستخدام تقنيات معروفة جيدا. هناك تقنيات تضخيم عديدة للحصول على سياق تشفير كامل الطول (alld من Yau من سياق دنا مكمل جزني. وفي ثقنيات من هذا القبيل؛ يجرى التضخيم عادة عن طريق Yo
Vlog re وقد تستخدم أي مجموعة مختلفة من الطقوم المتوفرة تجاريا لإجراء خطوة التضخيم. PCR وقد تصمم البوادىء باستخدام؛ على سبيل المثال» برنامج معروف جيدا في التقنية ويفضل أن 70650 بنسبة GC نوويتيداء وأن يكون لها محتوى *٠ يتراوح طول البوادىء من 77 إلى
VY د.م إلى TA على الأقل وأن تلدن إلى السياق المنشود عند درجة حرارة تتراوح من نحو د.م. وقد يتتبع سياق المنطقة المخضمة كما وصف أعلاه؛ وتركب السياقات المتراكبة في 5 سياق مجاور. العكسي (ينظر ما جاء عن ترجليا ومسن PCR وتتمثل تقنية تضخيم من هذا القبيل في حيث تستخدم انزيمات (VIANA GAT ص VT معه في بحث الأحماض النووية؛ مجلد حصر لتوليد جزء في المنطقة المعروفة من الجين. ومن ثم يدور الجزء عن طريق ربط مع بوادىء متباعدة مشتقة من المنطقة PCR ضمن الجزيء ويستخدم كمرصاف ل ١ المعروفة. وفي طريقة بديلة؛ قد تسترجع سياقات مجاورة للسياق الجزئي عن طريق التضخيم مع بادىء إلى سياق رابط وبادىء متخصص بمنطقة معروفة. وعادة تعرض السياقات المضخمة إلى دورة ثانية من التضخيم مع نفس البادىء الرابط وبادىء ثان متخصسص يحثان التمدد في aly بالمنطقة المعروفة. ويوصف التغير على هذا الإجراء الذي يستخدم اتجاهات متعاكسة من السياق المعروف في نشرة البراءة الدولية رقم 95/78891. وتعرف vo وتتضمن RACE المكمل " أو Gall تقنية أخرى من هذا القبيل ب " تضخيم سريع لأطراف هذه التقنية استخدام بادىء داخلي وبادىء خارجي يهجن إلى منطقة متعدد حمض الأدينيليك
Sli أو سياق ناقل لتمييز السياقات عند الطرفين © ' و “' من السياق المعروف. وتشمل
PCR عن لاجرستروم ومن معه في تطبيقات طرق ela محصور (ينظر ما PCR إضافية عن باركر ومن معه؛ في ela جوال (ينظر ما PCR 5 (099) 114-11١ (a) مجلد 7 بحث الأحماض النووية؛ مجلد 4 ص 7-8 )149( وقد تستخدم كذلك طرق أخرى تستخدم التضخيم للحصول على سياق دنا مكمل كامل الطول. وفي حالات معينة؛ من الممكن الحصول على سياق دنا مكمل كامل الطول عن طريق تحليل السياقات الموجودة في قاعدة بيانات رقعة تمييز سياق معبر عنه (857) مثل تلك باستخدام برامج معروفة EST المتوفرة من بنك الجينات. وعادة؛ قد تجرى أبحاث لتراكب Yo
Ylo¢ ve لتوليد سياق كامل الطصول EST ؛ وقد يستخدم (NCBI BLAST جيدا (على سبيل المثال؛ أبحاثت . مجاور وتوجد سياقات أحماض نووية معينة لجزيئات دنا مكمل تحمل شفرة جزء من بروتين
WOVE أى ١7لاحل Ye أى ١١1١-١ ورم بروستاتي على الأقل في سياقات لتمييز أرقام:
SVE 4م أو .© أو 277 أو 7 أو 770 أو 27-777 أو SAVY أو ° أو 77-04 . ويوصف عزل متعددات النوويتيد هذه أدناه. ويعبر TAY أو YAY أو 70 عن كل من بروتينات الورم البروستاتي هذه بشكل مفرط في نسيج الورم البروستاتي. وعادة قد تحضر متغيرات متعدد التوويتيد باستخدام أي طريقة معروفة في التقنية؛ بما في ذلك التخليق الكيمياني من طريق» على سبيل المثال. التخليق الكيميائي للفسفوراميديت في الطور الصلب وكذلك يمكن إضافة تعديلات في سياق متعدد النووييتيد vs باستخدام تقنيات توليد طفرات مثل توليد طفرات متخصصة بالموقع وموجهة نحو النوويتيسد ص بال » Y ما جا عن أدلمان ومن معك مجلة الدناء مجلد al) قصير السلسلة وبدلا من ذلك؛ قد تولد جزيئات الرنا عن طريق نسخ سياقات الدنا التي تحمل شفرة . ١187 بروتين ورم بروستاتي ؛ أو جزء منه؛ في أنابيب الاختبار أو في الجسم الحي شريطة دمج وقد تستخدم أجزاء . (SP6 أو 17 (Jie) الدنا في ناقل باستخدام معزز انزيم بلمرة رنا ملانمة Vo معينة لتحضير متعدد ببتيد محمولة شفرته؛ كما وصف في هذا البيان . وبالإضافة إلى ذلك بحيث يولد متعدد الببتيد المحمولة شفرته فى Ud pa أو بشكل بديل ؛ قد يعطى جزء إلى تخميجا al ial) المنتجة للمولد Lad) عن طريق تخميج JE الجسم الحي (على سبيل مع وحدة دنا مكملة تحمل شفرة متعدد يبتيسد البروستاتي ac مثل الخلايا المتفر ٠ تحويليا . ع المريض الخلايا المخمجة تخميجا تحويليا) tae) Y. وقد يستخدم جزء من سياق مكمل لسياق التشفير (أي؛ متعدد نوويتيد عكس اتجاءه القراءة) كمسبار أو لتعديل تعبير الجين. وقد تضاف كذلك وحدات دنا مكمل يمكن أن تستنسخ إلى رنا عكس اتجاه القراءة إلى خلايا الأنسجة لتسهيل إنتاج رنا عكس اتجاه القراءة. وقد في هذا البيان لتثبيط تعبير بروئين Lag يستخدم متعدد نوويتيد عكس اتجاه القرا 5 كما للتحكم بتعبير الجين من خلال تشكل المنحنى vel الورم . ويمكن أسد ستخدام تقنية عكس اتجاه القر Yo
Vlog
To الحلزوني الثلاثي الذي يعمل على تسوية مقدرة المنحنى الحلزوني المزدوج للفتح بشكل كاف لربط انزيمات البلمرة وعوامل الاستنساخ وجزيئات التنظيم (ينظر ما جاء عن جي ومن معه في إصدار هوبر وكار في كتاب بعنوان طرق جزيئية ومناعية) من شركة فوتورا ببليشسنج قد يصمم جزيء عكس اتجاه lll وبدلا من .))١344 كسكو؛ مدينة تيويورك؛ al) كو. محرض أو معزز أو موقع (JE سبيل lo) القراءة ليهجن باستخدام منطقة تحكم للجين ٠م بدء الاستنساخ) وإيقاف ترجمة الجين؛ أو لإيقاف الترجمة عن طريق تثبيط ربط نسخة
بالريبوسومات. وقد يصمم كذلك جزء من سياق التشفير؛ أو من سياق مكمل كمسبار أو بادىء للكشف عن تعبير الجين. وقد توسم المسابير بمجموعة مختلفة من المجموعات المقررة؛ مل ٠ نوويدات إشعاعية وانزيمات؛ ويفضل أن يكون طولها عبارة عن ٠١ نوويتيدات على الأقل وا لأفضل Ye نوويتيدا على الأقل والأكثر تفضيلا Ye نوويتيدا على الأقل. ويفضل أن يتراوح طول البوادىء؛ كما لوحظ أعلاه؛ من ؟؟ إلى ١ نوويتيدا. وقد يعدل أي متعدد نوويتيد بشكل إضافي لزيادة الثبات في الجسم الحي. Jay التعديلات الممكنة؛ على سبيل المثال لا الحصرء إضافة سياقات مجانحة عند الطرف *' و/أو FG Ll) استخدام الفسفوروثيوات أو 0-مثيل عند YY Gohl من روابسط فسفودياستيراز في السلسلة الأساسية و/أو إضافة قواعد غير تقليدية Jia انوسين وكوسين وايبوتوسين بالإضافة إلى شقات الخليل والمثيل والثيو وأشكال معدلة أخسرى من GB) والسيتيدين والجوانين والثيامين واليوريدين. وقد تدمج سياقات النوويتيد كما ذكر في هذا البيان مع تشكيلة واسعة من سياقات vy. نوويتيدية أخرى باستخدام تقنيات الدنا المأشوب المحددة. فعلى سبيل JE يمكن أن يتسل متعدد نوويتيد إلى أية تشكيلة مختلفة من نواقل التنسيل بما في ذلك بلازميدات وخلايا agile ومشتقات ملتهمات لمبدا وكوزميدات. وتشتمل النواقل ذات الأهمية الخاصة على نواقل تعبير ونواقل تضاعف ونواقل تكوين مسابير ونواقل تتبع سياق. وعموما سيحتوي ناقل على مصدر للتضاعف يعمل في كائن حي واحد على الأقل وموقع ملاثم لأنزيم نووي داخلي andl Vlog
وواسم انتقائي واحد أو أكثر. وستعتمد العناصر الأخرى على الاستخدام المنتشسود وستتضح لأولئك الملمين في التقنية. ووفقا لتجسيدات معينة يمكن تشكيل متعددات النوويتيد في تراكيب لإتاحة دخولها إلى خلية ثديي والتعبير فيها. وهذه التراكيب مفيدة بصفة خاصة لأغراض Ladle كما سيوصف ° أدناه. وسيدرك الملمون العاديون في التقنية أنه يوجد العديد من الطرق للتعبير عن متعدد نوويتيد في خلية مستهدفة ويمكن استخدام أية طريتة ملائمة. فعلى سبيل المثال يمكن دمج متعدد نوويتيد في ناقل فيروسي مثل؛ على سبيل المتال لا الحصر؛ فيروس غدي أو فيروس مقترن بالغدد أو فيروس رجعي أو فيروس جدري البقر أو فيروس جدري آخر (مثل فيروس جدري الطيور) . وتعرف تقنيات دمج الدنا في هذه النواقل جيدا لأولئك الملمين العاديين في © - التقنية. وقد ينقل أو يضم ناقل فيروس رجعي بشكل إضافي جين لواسم انتقائي (للمساعدة في تمييز أو انتقاء خلايا متبغة) و/أو شق استهداف ie جين يحمل شفرة ربيطة لمستقبلة على خلية مستهدفة خاصة لجعل هدقف الناقل خاص. ويمكن كذلك تحقيق الاستهداف باستخدام جسم مضاد بطرق معروفة لأولئك الملمين في التقنية. وتشمل تراكيب أخرى لأغراض علاجية أنظمة تشتيت غروانية مثل متراكبات ٠ الجزيئات الضخمة والكبسولات الدقيقة والكرات الدقيقة والخرز وأنظمة أساسها شحم بما في ذلك مستحلبات الزيت في ماء والميسيلات والميسيلات المخلطة والأجسام الدهنية. ويتمتقل نظام غرواني مفضل لاستخدامه كسواغخ تصريف في أنابيب الاختبار أو في الجسم الحي في جسم دهني (أي حويصلة غشائية صناعية). وتعرف طرق تحضير واستخدام هذه الأنظمة جيدا في التقنية. 7 متعددات ببتيد ورم بروستاتي في سياق الاختراع الراهن قد تشتمل متعددات الببتيد على جزء مولد للمناعة لبروتين ورم بروستاتي على الأقل أو متغير منه كما سيوصف في هذا البيان. وكما ذكر أعلاه يقصسد ب " بروتين ورم بروستاتي" بروتين تعبر عنه LA ورم بروستاتي. وتتفاعل البروتينات التي تعتبر بروتينات ورم بروستاتي كذلك بشكل يمكن كشفه ضمن معايرة مناعية (مثل إليزا) مع ve أمصال مضادة مأخوذة من مريض مصاب بسرطان البروستات. وقد يكون لمتعددات الببتيد Vlog
كما وصف في هذا البيان أي طول. وقد توجد سياقات إضافية مشتقة من بروتين أصلي و/أر سياقات متغايرة وقد تمتلك هذه السياقات (لكن ليس بالضرورة) خواص مناعية ومولدة مضادة أخرى. ويقصد بمصطلح " جزء مولد للمناعة ” عند استخدامه في هذا البيان جزء من بروتين م يميز (أي يرتبط بشكل متخصص) Wits مولد مضاد على سطح خلية B و/أو خلية-7. وتشتمل الأجزاء المولدة للمناعة هذه عادة على © شقات أحماض أمينية على الأقل والأفضل ٠ على الأقل والأفضل كذلك 7١ شق حمض أميني على الأقل من بروتين ورم بروستات أو متغير منه. وتشتمل الأجزاء المولدة للمناعة المفضلة المعينة على ببتيدات Gla فيها سياق دليلي عند الطرف النيتروجيني و/أو منطقة غشاء إنفاذي وقد تحتوي أجزاء مولدة للمناعة - مفضلة أخرى على حذف صغير عند الطرف النيتروجيني و/أو الكربوني De) من Yom) حمضا أمينيا ويفضل من 0-0 V حمضا أمينيا) بالنسبة للبروتين الناضج. ويمكن تمييز الأجزاء المولدة للمناعة sole باستخدام تقنيات معروفة جيداء مثل تلك التي لخصها باول في كتاب أساسيات علم المناعة؛ الطبعة الثالقة؛ ص: EY 7547-7 شركة رافين برس )١997( والمراجع المذكورة فيه. وتتضمن هذه التقنيات غربلة متعددات ببتيد "١ ِ: لتحديد قدرتها على التفاعل مع أجسام مضادة و/أو أمصال مضادة و/أو خطوط أو نسائل خلية-7 متخصصة بمولد مضاد. وكما استخدم في هذا الببان تعتبر الأمصال المضادة والأجسام المضادة " متخصصة بمولد مضاد " إذا ارتبطت بمولد مضاد بصفة خاصة (أي إذا تفاعلت مع البروتين في إليزا أو معايرة مناعية أخرى aly تتفاعل مع بروتينات ليس لها علاقة بشكل يمكن كشفه). ويمكن تحضير هذه الأمصال المضادة والأجسام المضادة كما وصف في x, هذا البيان وباستخدام تقنيات معروفة جيدا. ويعتبر جزء مولد للمناعة من بروتين ورم بروستات أصلي هو ذلك الجزء الذي يتفاعل مع أمصال مضادة و/أو خلايا T من هذا Jill عند مستوى أقل بصفة جوهرية من تفاعلية متعدد الببتيد كامل الطول Sia) في إليزا و/أو معايرة تفاعلية خلية-7). وقد تتفاعل الأجزاء المولدة للمناعة من هذا القبيل في هذه المعليرات عند مستوى files أو أكبر من تفاعلية متعدد الببتيد كامل الطول. ويمكن إجراء هذه Lal vs عادة باستخدام طرق معروفة جيدة لأولئك الملمين العاديين في التقنية مثل تلك التي وصفها
Vlo¢
TA
هارلو ولين في كتاب الأجسام المضادة: دليل مرشد لإجراءات المختبرات؛ كولد سبرنج هلربر لابراتواري»؛ VIAN فعلى سبيل المثال قد يثبت متعدد ببتيد على حامل صلب ويلامس مع مصل لمريض لإتاحة ارتباط الأجسام المضادة الموجودة في المصل بمتعدد الببتيد المتبت. تم يمكن إزالة الأمصال غير المرتبطة ويكشف عن الأجسام المضادة المرتبطة باستخدام» على
SIT سبيل المثال؛ بروتين أ موسوم - ٠ ذكر أعلاه قد يشتمل تركيب على متغير من بروتين ورم بروستات أصلي. LS كما استخدم في هذا البيان» متعدد ببتيد لا يختلف عن ay ويقصد بمصطلح " متغير " لمتعدد
Ash بروتين ورم بروستات أصلي إلا في إبدال و/أو حذف و/أو إضافة و/أو إيلاج واحد أو بحيث لا تنقص القدرة على توليد المناعة لمتعدد الببتيد بصفة جوهرية. وبعبارة أخرى يمكن تعزيز قدرة متغير على التفاعل مع أمصال مضادة متخصصة بمولد مضاد أو المحافظة عليهاء ويفضل أقل من 9670 بالتسبة 9609 ٠ بالنسبة للبروتين الأصلي؛ أو يمكن تقليلها إلى أقل من للبروتين الأصلي. ويمكن تمييز هذه المتغيرات عادة بتعديل أحد سياقات متعدد الببتيد المذكورة مضادة متخصصة Jad أعلاه وتقدير تفاعلية متعدد الببتيد المعدل مع أجسام مضادة أو sa بمولد المضاد كما وصف في هذا البيان. وتشتمل المتغيرات المفضلة تلك التي أزيل منها سياق دليلي عند الطرف النيتروجيني أو منطقة غشاء إنفاذي. وتشتمل Jie واحد أو أكثر 6 حمضا ١-١ Ga Da) المتغيرات المفضلة الأخرى على متغيرات أزيل منها جزء صغير أمينيا ويفضل من 10-0 حمضا أمينيا) من الطرف النيتروجيني و/أو الطرف الكربوني من البروتين الناضج. ويفضل أن تظهر متغيرات متعددات الببتيد تطابقا (حدد كما وصف أعلاه)
Todo على الأقل والأفضل حوالي 9690 على الأقل والأكثر تفضيلا حوالي ٠ يبلغ حوالي Y. على الأقل) مع متعددات الببتيد المميزة. ويفضل أن يحتوي متغير على إبدالات مقاومة للتغير. ويقصد بمصطلح " إبدال مقاوم للتغير " ذلك الإبدال الذي يستبدل فيه حمض أميني بحمض أميني آخر له نفس الخواص بحيث يتوقع أي ملم في تقنية كيمياء الببتيدات أن تكون البنية الثانوية وطبيعة المداواة Akal لمتعدد agi) ثابتة جوهريا. ويمكن إجراء إبدالات الأحماض الأمينية عادة على أساس la yo القطبية ؛الشحنة؛ الذوبانية؛ الكره للماء؛ الميل للماء و/أو الطبيعة الأمفيفاتية للشضتات. فعلى va سبيل المثال تشتمل الأحماض الأمينية سالبة الضصحنة على حمض الأسبرتيك وحمض الجلوتاميك وتشمل الأحماض الأمينية موجبة الشحنة الليزين والأرجنين وتشمل الأحماض الأمينية ذات المجموعات الرئيسية القطبية غير المشحونة والتي لها قيم متماتلة للميل إلى الماء؛ اللوسين؛ الإيزولوسين؛ والفالين؛ الجليسين والألانين؛ الأسباراجين والجلوتامين؛ والسيرين؛ القريونين والفنيل ألانين والتيروسين. وتشتمل المجموعات الأخرى للأحماض ٠ برو؛ جلي؛ جلو؛ أسب؛ جلن؛ أسن؛ سيرء YT )١( الأمينية التي قد تمثل تغيرات محفوظة: أرج؛ هفيس؛ Gal (8) فين؛ TT ثري؛ (©) فال؛ يلي؛ ليو؛ ميث؛ US سيس» سير (Y) ثري؛ و )0( فين؛ تير ترب» هيس. وقد يحتوي متغير كذلك؛ أو بدلا من ذلك؛ على تغيرات غير أو حذف Jal محفوظة. وفي تجسيد مقضل تختلف متغيرات لمتعددات ببتيد عن سياق أصلي أو إضافة خمسة أحماض أمينية أو أقل. ويمكن كذلك (أو بدلا من ذلك)؛ تعديل المتغيراتء بحذف أو إضافة أحماض أمينية لها أقل تأثير على توليد المناعة والبنية (Jl على سبيل الثانوية وطبيعة المداواة المانية لمتعدد الببتيد. LS, ذكر أعلاه؛ قد تشتمل متعددات الببتيد على سياق إشارة (أو سياق (bby عند الطرف النيتروجيني للبروتين الذي يوجه تحول البروتين بترجمة إسهامية أو بترجمة لاحقة. وقد يقترن متعدد الببتيد كذلك بسياق رابط أو بسياق آخر لسهولة تخليق أو تنقية أو تمييز متعدد الببتيد Jia) متعدد هيس) أو لتعزيز ارتباط متعدد الببتيد بحامل صلب. فعلى سبيل Fo قد يرتبط متعدد الببتيد بمنطقة جلوبيولين مناعي (JA) ويمكن تحضير متعددات الببتيد باستخدام أية تشكيلة مختلفة من التقنيات المعروفة جيدا. ويمكن تحضير متعددات الببتيد المأشوبة التي تحمل شفرتها سياقات دنا كما وصسف أعلاه بسهولة من سياقات الدنا باستخدام أية تشكيلة مختلفة من نواقل التعبير التي يعرفها vy, الملمون في التقنية. وبمكن الحصول على التعبير في أية خلية عائلة مناسبة حولت أو خمجست بخمج تحويلي بناقل تعبير يحتوي على جزيء دنا يحمل شفرة متعدد ببتيد مأوب. وتضمل الخلايا العائلة الملائمة خلايا بدائية النواة والخميرة وخلايا سوية النواة عليا. ويفضل أن تكون
CHO أو COS ie Audi خلايا العائل المستخدمة الإشريكية القولونية أو الخميرة أو خط خلية ويمكن أولا تركيز السوائل الطافية من أنظمة عائل/ناقل ملانمة تفرز بروتين أو متعدد ببتيد ve Ylo¢
مأشوب في أوساط المستعمرة باستخدام مرشح متوفر تجاريا. وبعد التركيز يمكن وضع الركاز على قالب تنقية ملائم مثل قالب ألفة أو راتنج تبادل أيوني. وأخيرا يمكن استخدام خطوة استشراب سائل le الأداء معكوس الطور واحدة أو أكثر لتنقية متعدد ببتيد Gale بشكل إضافي.
وقد تنتج أجزاء ومتغيرات أخرى تحتوي على أقل من نحو ٠٠١ حمض أميني وعادة Jif من نحو 5٠0 حمض أميني بوسائل تخليقية باستخدام تقنيات معروفة جيدا للملمين في التقنية. فعلى سبيل (JU يمكن تخليق متعددات ببتيد من هذا القبيل باستخدام أي من تقنيات الطور الصلب المتوفرة تجاريا مثل طريقة تخليق مريفيلد باستخدام طور صلب حيث تضاف الأحماض الأمينية بشكل متعاقب إلى سلسلة أحماض أمينية نامية (ينظر على سبي المثال بحث
. مريفيلد في مجلة الجمعية الكيميائية الأمريكية؛ مجلد 36 ص: 1543-7159 AVANT وتتوفر معدات التخليق الذّاتي لمتعددات الببتيد من مزودين متل شركة بركن ألم ر/أبليد بيوسيستمز دفجن (مدينة فوسترء كاليفورنيا) وقد تشغل وفقا لتعاليم الصناع.
ووفقا لتجسيدات معينة خاصة قد يكون متعدد ببتيد بروتين التحام يشتمل على متعددات ببتيد متعددة كما وصف في هذا البيان أو يشتمل على متعدد ببتيد واحد على الأقل كما وصسف
١ في هذا البيان وسياق ليس له علاقة Jie بروتين ورم معروف. وقد يساعد شريك الالتحام؛ على سبيل المثال؛ في تزويد مغيرات خاصية مساعد 7 (شريك التحام مولد للمناعة) days مغيرات خاصية مساعد 7 يميزها البشر أو قد يساعد قي التعبير عن البروتين (معزز تعبير) بمعدلات إنتاج أعلى بالمقارنة مع البروتين المأشوب الأصلي. ومن بين Aad شركاء الالتحام المفضلة المعينة كل من شريكي الالتحام المعززين لتوليد المناعة والتعبير. ويمكن أن يختار
© شركاء التحام آخرين لزيادة ذوبانية البروتين أو لتمكين توجيه البروتين نحو حجيرات خلوية داخلية منشودة. ويشتمل شركاء التحام إضافيون كذلك على رقع تمييز ألفية تسهل تنقية البروتين. ويمكن sale تحضير بروتينات الالتحام باستخدام تقنيات قياسية Ley في ذلك الا -تران الكيميائي. ويفضل أن يعبر عن بروتين التحام في صورة بروتين مأشوب مما يتيسح إنتاج ve مستويات عالية بالنسبة لبروتين غير ملتحم في نظام تعبير. وبعبارة مختصرة يمكن تجميع
ف سياقات الدنا التي تحمل شفرة مكونات متعدد الببتيد بشكل منفصل وربطها في ناقل تعبير مناسب. ويربط الطرف TY لسياق الدنا الذي يحمل شفرة مكون واحد لمتعدد ببتيد» بامستخدام رابط ببتيدي أو بدونه؛ مع الطرف To لسياق دنا يحمل شفرة مكون لمتعدد ببتيد تان Gay تكون إطارات القراءة للسياقات متوافقة. وهذا يتيح الترجمة إلى بروتين التحام مفرد يحتفظ م بالفعالية الحيوية لكل من مكوني متعددات الببتيد. ويمكن استخدام سياق رابط satis لفصل مكوني متعدد الببتيد الأول والثاني بمسافة ١ كافية لضمان أن ينثني كل متعدد ببتيد إلى بتيته الثنائية والثلاثية. ويدمج سياق رابط ببتيدي من هذا القبيل في بروتين الالتحام باستخدام تقنيات قياسية معروفة جيدا في التقنية. وقد تختار سياقات رابطة ببتيدية Aad اعتمادا على العوامل التالية: )١( قدرتها على اتخاذ بنية ممددة قايلة للانثناء» (Y) عدم قدرتها على اتخاذ بنية ثانوية يمكنها أن تتفاعل مع مغيرات خاصية وظيفية على متعدد الببتيد الأول والثاني؛ و (©) الافتقار إلى شقات كارهة للماء أو مشحونة قد تتفاعل مع مغيرات الخاصية الوظيفية من متعدد ببتيد. وتحتوي السياقات الرابطة الببتيدية المفضلة على شقات جلي وأسن وسير. وقد يستخدم كذلك أحماض أمينية متعادلة قريبة أخرى a ثري وألا في السياق الرابط. وتشتمل سياقات الأحماض الأمينية التي يمكن استخدامها Vo على نحو مفيد كروابط على تلك السياقات الموصوفة في بحث ماراتي ومن معه؛ في مجلة الجينات؛ مجلد cE ص: ١566 (ETT وبحث مورفي ومن معه؛ في مجلة محاضر أعمال أكاديمية العلوم الوطنية الأمريكية؛ مجلد (AY ص: AAYTY=AYOA 1145 والبراءة الأمريكية رقم 1,475,777 والبراءة الأمريكية رقم £,VOV VAY وقد يكون طول السياق الرابط من ١ إلى 5٠ حمض أميني ولا توجد هنالك حاجة إلى سياقات رابطة عندما يحوي vy. متعدد الببتيد الأول والثاني على مناطق أحماض أمينية ذات طرف نيتروجيني غير أساسية يمكن استخدامها لفصل المناطق الوظيفية ومنع التداخل الفراغي. ويمكن ربط سياقات الدنا المرتبطة بعناصر منظمة ملائمة للنسخ أو الترجمة بشسكل فعال. ويحدد موضع العناصر المنظمة المسؤولة عن التعبير عن الدنا عند الطرف 0" لسياق دنا يحمل شفرة متعدد الببتيد الأول. وبالمثل توجد شفيرات توقف مطلوبة لإيقاف إشارات ve إنهاء الترجمة والنسخ فقط عند الطرف Sled الدنا الذي يحمل شفرة متعدد الببتيد الثاني.
وتزود كذلك بروتينات التحام تشتمل على متعدد ببتيد وفقا للاختراع الراهمن مع بروتين مولد للمناعة غير وثيق الصلة. ويفضل أن يكون البروتين المولد للمناعة قادرا على إحداث استجابة استدعاء. وتشمل أمثلة بروتينات من هذا القبيل بروتينات الكزاز والسل والتهاب الكبد (ينظر على سبيل المثال بحث ستوت ومن معه؛ في المجلة الطبية الصادرة في م نيوانجلاند؛ مجلد FT ص: 1-436 (YY) ووفقا لتجسيدات مفضلة يشتق شريك التحام مولد للمناعة من بروتين 0 وهو عبارة عن بروتين سطحي لبكتيريا الأنفلونزا النتزفية 3 سالبة الجرام (ينظر ما جاء في طلب البراءة الدولي 11/18977). ويفضل أن تشتمل مشتقة بروتين 0 على حوالي الثلث الأول من البروتين a) أول ١١١-٠٠١ حمض أميني عند الطرف النتيتروجيني) ويمكن أن تحول > مشتقة بروتين © إلى مشتقة دهنية. ووفقا لتجسيدات مفضلة معينة يضاف أول ٠٠١9 شق من شريك التحام بروتين دهني © على الطرف النيتروجيني لتزويد متعدد الببتيد بمغيرات خاصية خلية-7 خارجية المنشاً إضافية ولزيادة مستوى التعبير في الإشريكية القولونية (وبالتالي يعمل كمعزز تعبير). ويضمن ذيل الدهن تمثيلا أمتل لمولد المضاد للخلايا المنتجة لمولد المضاد. ويشتمل شركاء الالتحام الآخرين بروتين غير بنيوي من فيروس الأنفلوتزاء NST (ملزن - دموي). وعادة يستخدم أل VA حمض أميني عند الطرف النيتروجيني مع أنه يمكن استخدام أجزاء مختلفة تشتمل على مغيرات خاصية مساعد-1. وفي تجسيد آخر يكون شريك الالتحام المولد للمناعة عبارة عن البروتين المعروف ب LYTA أو جزء منه (ويفضل جزء الطرف الكربوني). ويشتق LYTA من مكورات ley) الرئوي السبحية التي تخلق 7<-خليل-ش- ألانين أميداز الذي يعرف ب LYTA أميداز (الذي © > يحمل شفرته جين (LytA ينظر ما جاء في مجلة الجينات؛ مجلد 47 ص: 17-72١ .)١5 و LYTA عبارة عن مذوب ذاتي يحلل روابط معينة بصفة خاصة في هيكل الببتيدوجليكان. وتكون منطقة الطرف الكربوني لبروتين LYTA مسؤولة عن الألفة للكولين CS لبعض نظائر الكولين DEAE Jie ولقد استغلت هذه الخاصية لتطوير البلازميدات التي تعبر عن LYTA عند الطرف الكربوني المأخوذة من الإشريكية القولونية والمفيدة للتعبير عن vo بروتينات الالتحام. ولقد وصف تنقية بروتينات مهجنة تحتوي على جزء 1.1718 كربوني
الطرف عند الطرف الأميني ( ينظر ما جاء في مجلة التقنية 0٠٠0 alae Ala) ص: 7420- هلاء 139( وفي تجسيد مفضل يمكن دمج جزء متكرر من 177178 في بروتين التحام. ويوجد جزء متكرر في المنطقة الطرفية الكربونية بدءآ من الشق VA ويضم جزء متكرر مفضل Diva خاصة الشقات Fo AA s وعمومآً تعزل متعددات الببتيد (بما في ذلك بروتينات الالتحام) ومتعددات النوويتيد كما وصف في هذا البيان. ويكون متعدد ببتيد أو متعدد نوويتيد " معزول " ذلك الذي أزيل من وسطه الأصلي. فعلى سبيل المثال يعزل بروتين موجود في الطبيعة إذا فصل عن بعض أو كل المواد الموجودة بشكل مشترك في النظام الطبيعي. ويفضل أن تبلغ نسبة نقاوة متعددات الببتيد هذه حوالي 964٠ على الأقل والأفضل حوالي 9655 على الأقل والأكثر Sal حوالي 0 9699 على الأقل: ويعتبر متعدد نوويتيد معزولا إذا نسل؛ على سبيل المتال؛ إلى ناقل لا يشكل جزءا من الوسط الطبيعي. عوامل الربط: يقدم الاختراع الراهن بشكلٍ إضافي عوامل Jie أجسام مضادة وأجزاء ربط مولد مضاد متها ترتبط بصفة خاصة ببروتين ورم بروستات. وكما استخدم في هذا البيان يعتبر vs جسم مضاد أو جزء ربط-مولد مضاد منه بأنه " يرتبط بصفةٍ خاصة " ببروتين ورم بروستات إذا تفاعل بمستوى يمكن كشفه (ضمن؛ على سبيل المثال؛ إليزا) مع بروتين ورم بروستات ولم يتفاعل KG يمكن كشفه مع بروتينات غير وثيقة الصلة في نفس الظروف. وكما استخدم في هذا البيان يشير مصطلح " ربط " إلى اقتران غير إسهامي التكافؤ بين جزيئين منفصلين بحيث يتشكل متراكب. ويمكن تقييم القدرة على الربط على سبيل المثال بتحديد ثابت ربط لتشكيل © - المتراكب. ويكون ثابت الربط عبارة عن القيمة لتي يحصل عليها من قسمة تركيز المتراكب على حاصل ضرب تراكيز المكونات. وعمومآً يعتبر مركبان بأنهما " مرتبطان " في سياق الاختراع الراهن عندما يتجاوز ثابت الربط لتشكيل المتراكبات حوالي "٠١ لتر/مول. ويمكن تحديد ثابت الربط باستخدام طرق معروفة Tas في التقنية. وقد تكون عوامل الربط كذلك قادرة على التفريق بين مرضسى مصابين بسرطان ve وأفراد غير مصابين بسرطان؛ Jie سرطان البروستات؛ بامستخدام الاختبارات النموذجية Vio
الموصوفة في هذا البيان. وبعبارة أخرى ستولد الأجسام المضادة أو عوامل ربط أخرى مرتبطة ببروتين ورم بروستات إشارة تدل على وجود سرطان في حوالي 967٠0 على الأق-ل من المرضى المصابين بالمرض وستولد إشارة سالبة تدل على عدم وجود المرض في حوالي © على الأقل من الأفراد غير المصابين بالسرطان. ولتحديد ما إذا كان عامل ربط يفي
م - بهذا المتطلب يمكن اختبار عينات إحيائية (مثل pall و/أو المصل و/أو البول و/أو خزعات ورمية) من مرضى مصابين بسرطان وغير مصابين به (كما حدد باستخدام اختبارات إكلينيكية قياسية) كما وصف في هذا البيان لتحديد وجود متعددات ببتيد مرتبطة بعامل الربط. وسيتضح أنه يمكن اختبار عدد كبير إحصائياً من العينات التي تحتوي على المرض وتخلو منه. وينبغي أن يفي كل عامل ربط بالمعايير السابقة بيد أنه سيدرك الملمون العاديون في
٠ > التقنية أنه يمكن استخدام عوامل ربط في توليفة لتحسين حساسيتها.
وقد يكون أي عامل يفي بالمتطلبات السابقة عبارة عن عامل ربط. فعلى سبيل JL قد يكون عامل الربط جسيم ريبوزومي مع أو بدون مكون ببتيد أو جزيء رنا أو متعدد ببتيد. وفي تجسيد مفضل يكون عامل ربط عبارة عن جسم مضاد أو جزء منه مرتبط بمولد مضاد. ويمكن تحضير الأجسام المضادة بأي من التقنيات المختلفة المعروفة لأولئك الملمين في ys التقنية. ينظر على سبيل المثال ما ela عن هارلو ولين في كتاب الأجسام المضادة: dda مرشد لإجراءات المختبرات؛ شركة كولد سبرنج هاربر لابوراتوريء VAAN وعموماً يمكن إنتاج الأجسام المضادة بتقنيات استنبات خلايا بما في ذلك توليد أجسام مضادة وحيدة النسيلة كما وصف في هذا البيان أو عن طريق تخميج جينات جسم مضاد بخمج تحويلي إلى خلايا عائلة بكتيرية أو تديية لإتاحة إنتاج أجسام مضادة مأشوبة.
Y. وفي إحدى هذه التقنيات؛ يحقن أولاً مولد مناعة يحتوي على متعدد الببتيد في أية مجموعة متنوعة بشكل كبير من الثدييات (متل الفتران أوالجرذان أوالأرانب أوالضان أوالماعز). وفي هذه الخطوة؛ قد تعمل متعددات ببتيد Ey للاختراع الراهن كمولد المناعة بدون تعديل. وبدلاً من ذلك؛ وبصفةٍ خاصة بالنسبة لمتعددات ببتيد قصيرة La قد تظهر استجابة مناعية فائقة إذا ارتبط متعدد الببتيد ببروتين حامل؛ مل زلازل مصل البقر أو
vo هيموسيانين رخو ساد للمسام . ويحقن مولد المناعة في العائل الحيواني؛ ويفضل Wy لبرنامج
محدد laa يشمل تحصين معزز واحد أو أكثر ويسال دم الحيوانات بشكل دوري. ومن ثم يمكن تنقية الأجسام المضادة متعددة will المتخصصة بمتعدد الببتيد من الأمصال المضادة هذه Sa باستشراب يعتمد على AY) باستخدام متعدد الببتيد المقترن بحامل صلب ملائم. ويمكن تحضير الأجسام المضادة وحيدة النسيلة المتخصصة بمتعدد الببتيد المولد م للأجسام المضادة موضوع البحث Wie باستخدام تقنية كوهلر وميلستين في مجلة cla ale الأوروبية/ مجلد oT ص: 019-011 ٠9736 والتحسينات الخاصة بها. وبعبارة مختصرة؛ تشمل هذه الطرق تحضير خطوط خلايا دائمة قادرة على إنتاج أجسام مضادة تمتلك Ae ol) المنشودة (أي متفاعلة مع متعدد الببتيد موضوع البحث). ويمكن إنتاج خطوط الخلايا هذه متلا من خلايا طحال مأخوذة من حيوان (fans كما وصف أعلاه. ومن قم تلت خلايا © الطحال Se بالتحامها مع شريك في الالتحام من WIA ورم نخاعي ويفضل خلايا Bla. النسيج مع الحيوان المحصّن. ويمكن استخدام تقنيات التحام مختلفة. فعلى Ja المثال يمكن دمج خلايا الطحال وخلايا الورم النخاعي ومنظف عديم التأين لعدة دقائق ومن ثم تطلى بكثافة منخفضة على وسط انتقائي يساعد على نمو خلايا هجينة وليس خلايا ورم نخاعي. وتستخدم تقنية انتقاء مفضلة انتقاء HAT (هيبوزانثين وأمينو بترين وتيميدين). وبعد فترة vs زمنية كافية؛ Bale من نحو أسبوع إلى أسبوعين؛ يلاحظ تشكّل مستعمرات من خلايا هجينة. وتختار مستعمرات مفردة وتختبر سوائل مزرعتها الطافية لمعرفة فاعلية الارتباط مع متعدد الببتيد. وتفضل خلايا التضخم المهجنة ذات التفاعلية والنوعية العالية. ويمكن عزل الأجسام المضادة وحيدة النسيلة من الوسائل الطافية لمستعمرات خلايا مهجنة نامية. وبالإضافة إلى ذلك؛ يمكن استخدام تقنيات مختلفة لتعزيز الإنتاج Jie حقن خط © خلايا مهجنة في الجوف الصفاقي لعائل فقاري ملائم مثل فأر. ومن ثم يمكن جمع الأجسام المضادة وحيدة النسيلة من مائع الاستسقاء أو الدم. ويمكن إزالة الملوثات من الأجسام المضلاة بتقنيات تقليدية Jie الاستشراب والترشيح الهلامي والترسيب والاستخلاص ويمكن استخدام متعددات الببتيد GE للاختراع الراهن في عملية التنقية في خطوة الاستشراب بالألفة على : سبيل المثال. ض 4
وفي تجسيدات معينة قد يفضل استخدام أجزاء مرتبطة بمولد مضاد من الأجسام المضادة. وتشمل هذه الأجزاء أجزاء Fab قد تحضر باستخدام تقنيات قياسية. وبعبارة مختصرة يمكن تنقية الجلوبيولينات المناعية من مصل أرنب باستشراب الألفة باستخدام أعمدة تحتوي على خرزات بروتين A (ينظر ما ela عن هارلو ولين في QUES الأجسام المضادة: ٠ دليل مرشد لإجراءات المختبرات؛ شركة كولد سبرنج هاربر لابوراتوري؛ (VIAN وهضمها عن طريق بابائين لإنتاج Fab of Jal و Fo ويمكن فصل أجزاء Fab و Fe بالاستشراب بالألفة على أعمدة تحتوي على خرزات من بروتين A وقد تقترن الأجسام المضادة وحيدة النسيلة وفقآ للاختراع الراهن بعامل ade واحد أو أكثر. وتشتمل العوامل الملائمة في هذا الخصوص نوويدات مشعة ومحرضات تمييز ١ وعقاقير وتكسينات ومشتقات منها. وتشمل النوويدات المشعة المفضلة "تو 1133و كقا1 و IP و Re و ACT و BE? وتشمل العقاقير المفضلة مثوتركسات وبيريميدين ونظائر بورين وتشمل محرضات التمييز المفضلة استرات فوربول وحمض البوتيريك. وتشمل التكسينات المفضلة الخروع والإبرين وتكسين الدفتيريا وتكسين الكوليرا وجلونين وتكسين خارج الخلايا الزائفة وتكسين الشيغلة وبروتين مضاد لفيروسات بوكويد. s وقد يقترن عامل علاجي (مثلا بارتباط إسهامي) بجسم مضاد وحيد النسيلة Caf ale مباشرةٌ أو بطريق غير مباشر Mia) عن طريق مجموعة رابطة). Jo dingy حدوث @ Jel مباشر بين عامل وجسم مضاد عندما يمتلك كل منهما J قادرآ على التفاعل مع الآخر. فعلى سبيل المثال قد يكون لمجموعة محبة للنواة؛ Jia مجموعة أمينية أو مجموعة كبريتيدريل على أحدهماء؛ قدرة على التفاعل مع مجموعة تحتوي على كربونيل؛ Je أنهيدريد أو هاليد ©“ - الحمضء أو مع مجموعة ألكيل تحتوي على مجموعة سهلة الإزالة (مثل مجموعة هاليد) على الآخر. وبدلا من ذلك؛ قد يكون من المنشود ربط عامل علاجي بجسم مضاد عن طريق مجموعة رابطة. وقد تعمل المجموعة الرابطة كفاصل لإبعاد جسم مضاد عن عامل لتفادي التعارض مع قدرات الارتباط. وقد تعمل المجموعة الرابطة ol VS على زيادة التفاعلية الكيميائية لبديل على عامل أو جسم مضاد وبذلك تزيد كفاءة الاقتران. وقد تسهل زيادة Vlog
Lv التفاعلية الكيميائية كذلك من استخدام العوامل؛ أو المجاميع الوظيفية على العوامل؛ التي لا يمكن استخدامها بطريقة أخرى. استخدام أنواع مختلفة من كواشضف ثنائية أو (Say وسيتضح للملمين بهذه التقنية بأنه تلك الموصوفة في كتللوج (Ba) متعددة الوظيفة؛ كل من الكواشف الوظيفية المتماثلة والمغايرة شركة بيرس كيميكال كو.؛ مدينة روكفورد؛ ولاية الينوي) استخداما كمجموعة رابطة. ويمكن ٠ عن طريق شقات أمينية أو شقات كربوكسيلية أو قات كبريتيدريل أو Da إجراء الاقتران شقات كربوهيدراتية متأكسدة. وثمة مراجع عديدة تصف هذه المنهجية مثل البراءة الأمريكية
Axa رقم 5,691,164 باسم رودويل ومن يكون خالياً من جزء الجسم المضاد Laie وعندما يكون العامل العلاجي أكثر فعالية رابطة Ae gana لنواتج الاقتران المناعية وفقآ للاختراع الراهن؛ فقد يكون من المنشود استخدام ٠ قابلة للقصم أثناء أو عند الدخول إلى خلية. وقد وصف عدد من مجاميع رابطة قابلة للقصم مختلفة. وتشمل الآليات لانطلاق عامل من المجاميع الرابطة هذه داخل الخلايا آلية ففصم (Shi باسم £ ATV البراءة الأمريكية رقم Die باختزال رابطة ثاني كبريتيد ( ينظر 4,176,014 وبتعريض رابطة متتقلة بالضوء إلى الإشعاع ( ينظر مثلا البراءة الأمريكية رقم باسم سنتر ومن معه) وبحلمأة سلاسل جانبية من أحماض أمينية مشتقة ( ينظر متلا البراءة
Sia الأمريكية رقم 5,677,046 باسم كوهن ومن معه) وبحلمأة تجرى لمتمم المصل ( ينظر البراءة الأمريكية رقم 5,171,588 باسم رودويل ومن معه) وحلمأة محفزة بحمض ( ينظر مثلا البراءة الأمريكية رقم 5,974,789 باسم بلاتلر ومن معه). وقد يكون من المنشود اقتران أكثر من عامل بجسم مضاد. وفي أحد التجسيدات؛ تقترن جزيئات متعددة لعامل بجزيء جسم مضاد. وفي تجسيد آخرء قد يقترن أكثر من نوع من العوامل بجسم مضاد واحد. وبغض النظر عن التجسيد الخاص» يمكن تحضير نواتج الاقتران المناعي مع أكثر من عامل بعدة طرق. فعلى سبيل المثال؛ قد يقترن أكثر من عامل مباشرة بجزيء جسم مضاد أو يمكن استخدام مجاميع رابطة تكفل مواقع عديدة للارتباط. حاملة. sale من ذلك يمكن استخدام Yau
EA
وقد تحمل المادة الحاملة العوامل بعدة طرق بما في ذلك ارتباط إسهامي إمّا مباشرةٌ أو عن طريق مجموعة رابطة. وتشمل المواد الحاملة الملائمة بروتينات مثل ألبومينات (تتظر على سبيل المثال البراءة الأمريكية رقم 5,901,774 باسم كاتو ومن معه) وببتيدات ومتعددات سكريد مثل أمينو دكستران ( تنظر على سبيل المثال السبراءة الأمريكية رقم 5,544,284 باسم شيه ومن معه). وقد تحمل المادة الحاملة كذلك Sale بارتباط غير إسهامي أو بالتغليف Wie ضمن حويصلة جسيم دهني ( تنظر متقلا البراءتان الأمريكيتان أرقام ه57 وهاه 877,؛). وتشمل المواد الحاملة المتخصصة بعوامل نوويدية مشعة جزيئات صغيرة مهلجنة بالإشعاع ومركبات خلابية. فعلى سبيل المتال تصف البراءة الأمريكية رقم 5,775,797 جزيئات صغيرة هالوجينية مشعة نموذجية وطرق تخليقها. ويمكن تشكيل خلابة نوويد مشع من مركبات خلابية تشمل تلك المركبات التي تحتوي على ذرات نيتروجين وكبريت كذرات مائحة لربط النوويد المشع من الفلز أو أكسيد الفلز. ad سبيل المتال تصف البراءة الأمريكية رقم 5,177,577 باسم دافيسون ومن dra مركبات خلابية نموذجية وطرق تخليقها. ويمكن استخدام طرق مختلفة لإعطاء الأجسام المضادة ونواتج الاقتران المناعي. 0s ونموذجيآً تعطى هذه المواد في الوريد أو في العضل أو تحت الجلد أو في طبقة من ورم مستأاصل. وسيتضح أن الجرعة الدقيقة من الجسم المضاد وناتج الاقتران المناعي تختلف اعتمادآً على الجسم المضاد المستخدم وكتافة مولد المضاد على الورم ومعدل تصفية الجسم المضاد. WA Y. 1: وقد تشتمل التراكيب العلاجية المناعية كذلك؛ أو بدلا من ذلك؛ على خلايا 7 متخصصة ببروتين ورم بروستات. وقد تحضر هذه الخلايا Sale في أنابيب الاختبار أو خارج الجسم الحي باستخدام إجراءات قياسية. فعلى سبيل المثال قد تعزل خلايا 7 من نخاع العظم أو الدم المحيطي أو جزء من نخاع العظم أو الدم المحيطي لمريض باستخدام نظام فصل خلايا © _متوفر Ji Led نظام سبريت (CEPRATE) (علامة تجارية) متوفر من شركة سلبرو إنك.؛ ١+4
£9 بوتل؛ واشنطن (ينظر كذلك ما جاء في البراءة الأمريكية رقم co, YE AON والبراءة الأمريكية رقم 0,41 0,Y) وطلبات البراءات الدولية 2748١ :/حخ و 11/131156 و EY 17/077). وبدلا من ذلك؛ قد تشتق خلايا 7 من بشر ذوي صلة أو ليس لهم صلة أو من تدييات غير البشر أو من خطوط خلايا أو مستنبتات.
° وقد تنبه خلايا 7 بمتعدد ببتيد ورم بروستات و/أو متعدد نوويتيد يحمل شفرة متعدد ببتيد ورم بروستات و/أو خلية منتجة لمولد مضاد (APC) تعبر عن متعدد ببتيد من هذا القبيل. ويجرى هذا التنبيه في ظروف ولفترة زمنية كافية لإتاحة توليد خلايا 7 المتخنصصة بمتعدد ببتيد. ويفضل أن يوجد متعدد ببتيد أو متعدد نوويتيد ورم بروستات داخل سواغ تصريف Jie كرة دقيقة لتسهيل توليد T WIA المتخصصة.
٠١ وتعتبر خلايا T متخصصة بمتعدد ببتيد ورم بروستات إذا قتلت خلايا T مستهدفة مغلفة بمتعدد الببتيد أو تعبر عن جين يحمل شفرة متعدد الببتيد. ويمكن ani خصوصية خلية
7 باستخدام أي من التقنيات القياسية المختلفة. فعلى سبيل JE ووفقا لمعايرة إطلاق الكروم
أو معايرة التكاثر يزيد معامل تنبيه بأكثر من ضعفين في التحلل و/أو التكاثر بالمقارنة مع ضوابط سلبية مما يدل على تخصص خلية 7. ويمكن إجراء هذه cal padi على سبيل
. المثال» كما وصف شين ومن معه؛ في مجلة أبحاث السرطان؛ مجلد of ص: -٠١٠9 ٠١7٠ 1995. وبدلا من ذلك يمكن الكشف عن SIS خلايا 7 بأي من التقنيات المعروفة المختلفة. فعلى سبيل المثال يمكن الكشف عن تكاثر خلايا T بقياس زيادة معدل تخليق Lal)
(مثلا عن طريق مستنبتات موسومة بشكل نتبضي من خلايا 7 بثيميدين معالج بالترتيوم وقياس
مقدار التيميدين المعالج بالترتيوم المدموج في الدنا). وينبغي أن يؤدي التلامس مع متعدد ببتيد
Ys ورم بروستات (يتراوح تركيزه من ٠٠١ نانوجرام/مل إلى ٠٠١ ميكروجرام/مل ويفضل من 70 نانوجرام/مل إلى Yo ميكروجرام/مل) لمدة تتراوح من ؟ إلى 7 أيام إلى زيادة بمقدار الضعفين على الأقل في تكاثر Wa 7. وينبغي أن يؤدي التلامس كما وصسف أعلاه لمدة تتراوح من ساعتين إلى ثلاث ساعات إلى تنشيط خلايا 7 كما قيس باستخدام معايرات السيتوكين القياسية حيث تدل زيادة بمقدار ضعفين في مستوى إطلاق السيتوكين INF Jie) أو
ve جاما-171) على تنشيط TWA (ينظر ما جاء عن كوليجان ومن معه في كتاب
البروتوكولات الحالية في علم المناعة؛ مجلد ١١ وايلي انترسينس»؛ (جرين .))١9948 وقد تكون خلايا 7 التي نشطت استجابة لمتعدد ببتيد ورم بروستات أو متعدد نوويتيد أو خلايا منتجة لمولد مضاد تعبر عن متعدد ببتيد عبارة عن 604 و/أو *008. ويمكن توسيع LDA 7 متخصصة ببروتين ورم بروستات باستخدام تقنيات قياسية. ووفقا لتجبسيدات مفضلة تشضتق ض ٠ خلايا 7 من مريض أو مانح ذي صلة أو ليس له صلة وتعطى للمريض بعد التنبيه والتوسيع. ولأغراض علاجية يمكن توسيع عدد CDA 7 WIA أو “008 التي تكاترت استجابة لمتعدد ببتيد ورم بروستات أو متعدد نوويتيد أو APC في أنابيب الاختبار أو في الجسم الحي. (Says إجراء تكاثر خلايا T هذه في أنابيب الاختبار بعدة طرق. فعلى سبيل المثال قد يعاد تعريض خلايا 7 لمتعدد ببتيد ورم بروستات أو ببتيد قصير مناظر لجزء مولد للمناعة من .1 متعدد يبتيد من هذا القبيل مع Jal se Ala) نمو خلايا 7 أو بدون إضافتها Jie اتترلوكين-؟ و/أو خلايا منبهة تخلق متعدد ببتيد ورم بروستات. وبدلا من ذلك يمكن توسيع عدد من خلايا 7 واحدة أو أكثر التي تتكاثر في وجود بروتين ورم بروستات بالتنسيل. وتعرف طرق تتسيل الخلايا جيدا في التقنية وتشمل التخفيف المحدود. تراكيب صيدلية ولقاحات ووفقا لأوجه معينة يمكن دمج متعددات ببتيد و/أو متعددات نوويتيد و/أو WA 7 و/أو عوامل ربط موصوفة في هذا البيان في تراكيب صيدلية أو تراكيب مولدة للمناعة (أي لقاحات). وتحتوي التراكيب الصيدلية على مركب واحد أو أكثر من هذه lS pall وحامل مقبول فسيولوجيا. وقد تشتمل اللقاحات على مركب واحد أو أكثر من هذه المركبات ومعزز استجابة مناعية غير متخصص. وقد يكون معزز الاستجابة المناعية غير المتخصص أية مادة »| تعزز استجابة مناعية لمولد مضاد خارجي المنشأً. وتشمل أمثلة معززات الاستجابة ed) غير المتخصصة مواد مساعدة وكرات دقيقة قابلة للانحلال Lilia) (مثل متعدد جالاكتيد لاكتيك) وجسيمات دهنية an) فيها المركب؛ ينظر على سبيل المثال ما جاء عن فولرتون في البراءة الأمريكية رقم 5,7708,/877). ولقد وصفت طريقة تحضير اللقاح بشكل عام فيما جاء coe على سبيل (JE إم.إف. بويل وإم.جيه. نيومان في كتاب " تصميم اللقاح (طريقة ve الوحدة الفرعية والمادة المساعدة) "؛ شركة بلينوم برس»؛ (نيويورك .)١995 وقد تحتوي كذلك Vlog
01١ التراكيب الصيدلية واللقاحات ضمن نطاق الاختراع الراهن على مركبات أخرى قد تكون فعالة إحيائيا أو غير فعالة إحيائيا. فعلى سبيل المثال قد يوجد جزء مولد للمناعة واحد أو اكثر لمولدات مضادات ورمية أخرى مدموجة في متعدد ببتيد التحام أو توجد في صسورة مركب منفصل في التركيب أو اللقاح. وقد يحتوي تركيب صيدلي أو لقاح على دنا يحمل شفرة متعدد ببتيد واحد أو اكثر كما > وصف أعلاه بحيث يولد متعدد ببتيد في موضع التفاعل. وكما ذكر أعلاه قد يوجد الدنا في أي نظام من أنظمة التصريف المختلفة المعروفة لأولئك الملمين في التقنية بما في ذلك أنظمة التعبير الحمضية النووية والبكتيرية والفيروسية. وتعرف تقنيات تصريف الجينات العديدة جيدا معايير أنظمة حوامل عقاقيرية Aaa تلك الموصوفة من قبل رولاند في Ji في التقنية والمراجع المذكورة فيها. وتحتوي أنظمة VIAN 154-147 ص: ٠6 علاجية؛ مجلد << معزز Jie) التعبير الحمضية النووية المناسبة على سياقات دنا ضرورية للتعبير في المريض ملائم وإشارة إيقاف). باشيلس-كلميتي-جيورين) تعبر (ia) وتشمل أنظمة التصريف البكتيرية إعطاء بكتيريا عن جزء مولد للمناعة من متعدد ببتيد على سطحه الخلوي أو تعزز مغير خاصية من هذا فيروس Jia) القبيل. وفي تجسيد مفضل؛ يمكن إدخال الدنا باستخدام نظام تعبير فيروسي - ١ الجدري البقري أو فيروس جدري آخر أو الفيروس الرجعي أو الفيروس الغدي) قد يتضمن استخدام فيروس قادر على الانطواء غير ممرض (ناقص). وتوصف الأنظمة الملائمة على سبيل المثال في بحث فيشر-هوتش ومن معه في مجلة محاضر أعمال أكاديمية العلوم الوطنية وبحث فلكسنر ومن معه في مجلة حوليات DAT 771-7١١7 ص: AT الأمريكية؛ مجلد وبحث فلكسنر ومن معه AAA ٠١-8“ العلوم الأكاديمية الأمريكية؛ مجلد 019 ص: © وفي البراءات الأمريكية أرقام AAT 71-١١7 ص: cA في مجلة اللقاحات» مجلد وطلب البراءة الدولي 49/019977 والبراءة 0,0 VY, EAY و 1426لا و 2:7 والبراءة الأوروبية رقم YY oe oN الأمريكية رقم 5,777,179 والبراءة البريطانية رقم وطلب البراءة الدولي 91/077806 وبحث بيركنر في مجلة التقنيات الإحيائية؛ + YEO VEY
YoY وبحث روسنفلد ومن معه في مجلة العلم» مجلد DIAL 177-713 ص: ١7 مجلد Yo
Ylo¢ oy
ص: 174-571 VAY) وبحث كولز ومن معه في مجلة محاضر أعمال أكاديمية العلوم الوطنية الأمريكية؛ مجلد )3 ص: 19-715 19554 وبحث كاز -ايسلر ومن معه في Alas محاضر أعمال أكاديمية العلوم الوطنية الأمريكية مجلد يبك ضص: EAN جمد
VAY وبحث جوزمان ومن معه في مجلة سيركيولاشن؛ مجلد AA ص: لماكت
NAY وبحث جوزمان ومن معه في مجلة سيركيولاشن؛ مجلد ا ص: 7١؟ تحن 1947. وتعرف تقنيات دمج الدنا في أنظمة التعبير هذه معرفة جيدة في التقنية. وقد يكون
الدنا كذلك مكشوفا كما وصف على سبيل المثال في بحث ألمر ومن معه في مجلة العلم؛ مجلد
4 ص: #؟ لأاحة لالد ؟كحا٠ واستعرضه كوهين في مجلة العلم؛ مجلد 7599 ص: 197-171 1ء 1947 وقد يزداد امتصاص الدنا المكشوف بطلاء الدنا على خرزات LE
| تنقل بفعالية إلى الخلايا. Wa) DM ا ٠
ومع أنه يمكن استخدام أي حامل ملائم معروف للملمين بهذه التقنية في التراكيب
الصيدلية وفقا لهذا الاختراع؛ إلا أن نوع الحامل يتغير اعتمادا على طريقة الإعطاء. ويمكن
تشكيل تراكيب الاختراع الراهن لإعطائها بأية كيفية مناسبة بما في ذلك على سييل (Jil الإعطاء الموضعي أو عن طريق الفم أو الأنف أو داخل الوريد أو في القرنية أو داخل
ve الصفاق أو تحت الجلد أو في العضل. وللإعطاء عن طريق الحقن Jie الحقن تحت الجلد يفضل أن يشتمل الحامل على ماء أو محلول ملحي أو كحول أو دهن أو شمع أو محلول منظم لدرجة الحموضة. وللإعطاء عن طريق الفم؛ يمكن استخدام أي من الحوامل المذكورة أعلاه
أو حامل صلب مثل المانيتول » اللاكتوز؛ النشاء استيارات المغنيسيوم؛ سكرين الصوديوم؛ الطلق؛ السيليلوز, الجلوكوز؛ السكروز وكربونات المغنيسيوم. ويمكن كذلك استخدام كرات
7 دقيقة قابلة للتحلل إحيائيا Jie) متعدد لاكتات متعدد جليكولات) كحوامل للتراكيب الصيدلية Ui لهذا الاختراع. وتوصف الكرات الدقيقة القابلة للانحلال إحيائيا الملائمة؛ على سبيل
المثال؛ في البراءتين الأمريكيتين أرقام ARV, XTA و 4 عله
وقد تشتمل هذه التراكيب كذلك على محاليل منظمة (fia) محلول ملحي منظم متعادل
أو محلول ملحي منظم بالفسفات)؛ مواد كربوهيدراتية (ie) الجلوكوز أو المانوز أو المسكروز
أو الدكستران)؛ مانيتول؛ بروتينات؛ متعددات ببتيد أو أحماض أمينية Jia الجليسين؛ موانع Vlog
تأكسد؛ عوامل خلابية «Jie ه807 أو جلوتاثيون؛ مواد مساعدة Jia) هيدروكسيد الألمنيوم) و/أو مواد حافظة. وبدلا من ذلك قد تشكل تراكيب الاختراع الراهن كناتج تجفيد. وقد LS ف المركبات كذلك في جسيمات دهنية باستخدام تقنية معروفة جيدا. ويمكن استخدام أي من معززات الاستجابة المناعية غير المتخصصة المختلفة في م لقاحات هذا الاختراع. فعلى سبيل المثال يمكن إضافة أية مادة مساعدة. وتحتوي معظم المواد المساعدة على مادة مصممة لوقاية مولد المضاد من الأيض الهدمي السريع Jie هيدروكسيد الألمنيوم أو الزيت المعدني ومعزز للاستجابات المناعية مثل الشحم أ أو بروتينات مشتقة من بورتاديلا بروتوسيس أو عصية التدرن الفطرية. وتتوفر المواد المساعدة الملائمة على Shai تجاري مثل؛ على سبيل المثال؛ إضافة فروند غير الكاملة وإضافة فروند الكاملة (من شركة ٠ ديفيكو لابوراتوريز؛ دترويت؛ ميتشيغان)؛ إضافة ميرك © (من شركة ميرك آند كمبني؛ coli راواي؛ نيوجيرسي)؛ أملاح الألمنيوم مثل هلام هيدروكسيد الألمنيوم (الشب) أو فسفات الألمنيوم؛ أملاح الكالسيوم أو الحديد أو الخارصين؛ معلق عديم الذوبان من تيروسين حمضيلي؛ متعددات سكريد مشتقة كاتيونيا أو أنيونيا؛ متعددات الفسفازين؛ كرات دقيقة ALG للانحلال إحيائيا؛ شحم أ أحادي الفسفوريل وكويل أ. ويمكن كذلك استخدام السيتوكينات Jie ve 0-0588 أو انترلوكين-7 أو Vo أو VY كمواد مساعدة. ومن ضمن اللقاحات المزودة في هذا البيان يفضل أن يصمم تركيب المادة المساعدة لحث استجابة مناعية بشكل سائد من النوع Thi وتميل المستويات العالية من سيتوكينات النوع Thi (مثل جاما-انترفيرون وانترلوكين-؟ (11-2) و انترلوكين-"١) إلى مساندة ححث الاستجابات المناعية في الأوساط الخلوية لمولد مضاد معطى. وعلى العكس تماماء تميل Y. المستويات العالية من سيتوكينات النتوع Th2 (مثل 14و 11-5 و 11-6 و 11-10 و 1748-بيتا) إلى مساندة حث استجابات مناعية خلطية. وبعد استخدام لقاح وفقا لهذا البيان ستقوى استجابة مناعية تتضمن استجابة من النوع 78:1 و 1102 في مريض. وفي تجسيد Janke حيث تكون الاستجابة عبارة عن استجابة من النوع -751 بشكل سائد؛ سيزيد مستوى سيتوكينات النوع 1 إلى درجة أكبر من مستوى سيتوكينات النوع Th ويمكن تقدير مستويات هذه ve السيتوكينات بسهولة باستخدام معايرات قياسية. ولاستعراض عائلات السيتوكينات ينظر ما ot جاء عن موزمان وكوفمان؛ في مجلة حوليات علم المناعة؛ مجلد of ص: AYY=1€0
REVS
بشكل Th وتشمل المواد المساعدة المفضلة لاستخدامها في إظهار استجابة من النوع سائد؛ على سبيل المثال؛ توليفة من شحم أ أحادي الفسفوريل ويفضل شحم أ أحادي الفسفوريل . مع ملح ألمنيوم. (3D-MPL) )7( منزوع مجموعة الحمضيل عند ذرة الأكسجين الموضع - ٠ (Ll se من شركة ريبي إمينيو كيم رسيرش إنك. (هاميلتون؛ MPL وتتوفر المواد المساعدة .) 6ق لق CLAN OTE للا TN) تنظر البراءات الأمريكية أرقام 77ر45
CPG (حيث يكون ثاني نوويتيد CPG وتحث النوويتيدات قصيرة السلسلة التي تحتوي على بشكل سائد أيضا. وتعرف النوويتيدات قصيرة السلسلة هذه جيدا Th منزوع المثيل) استجابة ١ وتوصف؛ على سبيل المثال؛ في طلب البراءة الدولي ©93/0720900. ومن المواد المساعدة الأخرى المفضلة صابونين ويفضل 0521 قد يستخدم لوحده أو في توليفة مع مواد مساعدة أخرى. فعلى سبيل المثال يتضمن نظام معزز توليفة من and أ أحادي الفسفوريل ومشتقة صابونين مثل توليفة من 0521 و 3D-MPL كما وصف في طلب البراءة الدولي 14/600167 أو تركيب له قدرة أقل على إحداث تفاعل حيث يسقى 0921 بالكوليسترول كما وصف في ve طلب البراءة الدولي 976/779779. وتشتمل التراكيب المفضلة الأخرى مستحلب زيت في ماء وتوكوفرول. ووصف في طلب البراءة الدولي 95/19771١ تركيب مساعد فعال بصفة خاصة يتضمن 0821 و .30-101 وتوكوفرول في مستحلب زيت في ماء. ويمكن تحضير أي لقاح وفقا لهذا البيان باستخدام الطرق المعروفة جيدا التي تؤدي إلى توليفة من Ase مضاد ومعزز استجابة مناعية وحامل أو سواخ ملائم. T وقد تعطى التراكيب الموصوفة في هذا البيان كجزء من تركيب مؤكد الإطلاق (أي تركيب مثل كبسولة أو إسفنج يحث إطلاق بطيء للمركب بعد الإعطاء). وقد تحضر هذه التراكيب عادة باستخدام تقنية معروفة جيدا وتعطى؛ على سبيل (JO) عن طريق الغرز في الفم أو المستقيم أو تحت الجلد أو بالغرز عند موقع مستهدف منشود. وقد تحتوي تراكيب الإطلاق المؤكد على متعدد ببتيد أو متعدد نوويتيد أو جسم مضاد مشتت في قالب حامل و/أو 1 موجود داخل خزان محاط بغشاء يتحكم بالمعدل. وتكون الحوامل التي تستخدم في هذه
التراكيب ملائمة إحيائيا وقد تكون قابلة للانحلال إحيائيا ويفضل أن يزود الستركيب مستوى ثابت نسبيا لإطلاق المكون الفعال. ويعتمد مقدار المركب الفعال الموجود في تركيب مؤكد الإطلاق على موقع الغرز والمعدل والأمد المتوقع للإطلاق وطبيعة الحالة المراد علاجبها أو وقايتها. > ويمكن استخدام أي سواغ من سواغات التصريف المختلفة في تراكيب صيدلية ولقاحات لتسهيل إحداث استجابة Lelia متخصصة بمولد مضاد تستهدف الخلايا الورمية. وتشتمل سواغات التصريف على خلايا منتجة لمولد المضاد (APCs) مثل خلايا متفرعة وملتهمات كبيرة وخلايا 8 وخلايا أحادية النواة وخلايا أخرى قد تصمم لتكون خلايا APC فعالة. وقد تعدل هذه الخلاياء ولكن ليس بالضرورة؛ Wg لزيادة قدرة إنتاج مولد المضادء؛ "ا لتحسين التتشيط و/أو المحافظة على استجابة خلية oT للحصول على تأثيرات مضادة للورم معروفة بحد ذاتها و/أو لتكون منسجمة مناعيا مع المستقبل (أي bai فرادي HLA ملائم). وقد تعزل خلايا APC بشكل عام ومن أي من الموائع الإحيائية المختلفة والأعضاء بما في ذلك الورم والأنسجة حول الورم وقد تكون خلايا ذاتية أو متغايرة الجينات أو متوافقة الجينات أو خلايا مختلفة النسل. وتستخدم تجسيدات مفضلة معينة وفقا للاختراع الراهن خلايا متفرعة أو أسلافها LISS مولدة al gal المضاد. وتعتبر الخلايا المتفرعة Ald APC WIA جدا (ينظر ما ela عن بانخيرو وستينمان في مجلة الطبيعة؛ مجلد (FY ص: £0 7501-7 (VA وأظهرت بأنها فعالة بصفتها مادة مساعدة قسيولوجية لإظهار مناعة مضادة للورم وقائية أو Ladle (ينظر ما جاء عن تيميرمان وليفي في مجلة حوليات الطب مجلد نف ص: اا محة؟م 1939( ©“ - وعموما يمكن تمييز الخلايا المتفرعة على أساس أشكالها النموذجية (فهي نجمية Jal في موضعها الأصلي خلال عمليات ساتوبلازمية موسومة (تفرعات) يمكن رؤيتها في أنابيب الاختبار) وتعتمد على نقص واسمات التفريق لخلايا CD19) B و (CD20 وخلايا (CD3) T وخلايا أحادية النواة (CD14) وخلايا قاتلة طبيعية (CD56) كما حدد باستخدام معايرات قياسية. وقد تصمم الخلايا المتفرعة؛ بالطبع؛ للتعبير عن مستقبلات أو ربيطات متخصصة سطحية خلوية لم توجد بشكل عام على DIS متفرعة في الجسم الحي وخارج الجسم الحي؛ ويتضمن ا
الاختراع الراهن هذه الخلايا المتفرعة المعدلة. وكبديل للخلايا المتفرعة يمكن استخدام خلايا متفرعة محملة بمولد مضاد من حويصلات مفروزة (تسمى خلايا اكسوسوم) في لقاح (ينظر ما جاء عن زيتفوجل ومن معه؛ في مجلة الطب الطبيعي؛ مجلد cf ص: 0-244
RAREST
العظم lady ويمكن الحصول على الخلايا المتفرعة وأسلافها من الدم المحيطي 5 وخلايا راشحة من ورم وخلايا راشحة من أنسجة محيطية بالورم وعقد ليمفية وطحال وجلد ودم الحبل السري أو أي نسيج أو مائع ملائم آخر. فعلى سبيل المثال يمكن تفريق الخلايا و/أو 11-13 (IL-4 «GM-CSF المتفرعة خارج الجسم الحي بإضافة توليفة من سيتوكينات مقل إلى مستنبتات من خلايا أحادية النواة مجموعة من دم محيطي. وبدلا من ذلك يمكن TNF- WS موجبة مجموعة من الدم المحيطي أو دم الحبل السري أو نخاع العظم إلى CD34 تفريق خلايا 1 «CD40 ألفا-171.؛ ربيطة (JL-3 «GM-CSF متفرعة بإضافة توليفات وسط المستنبت من WIS ربيطة 8 و/أو مركب (مركبات) آخر تحث إنضاج وتكاثر الخلايا المتفرعة. +5 ناضجة "؛ WA" وتصنف الخلايا المتفرعة بشكل تقليدي إلى خلايا " غير ناضجة مما يتيح التمييز بين نمطين ظاهريين مميزين جيدا بطريقة بسيطة. بيد أنه لا ينبغي أن تعتبر هذه التسمية بأنها تستثنس كل مراحل التفريق الوسيطية المحتملة. وتميز الخلايا المتفرعة غير - ذات قدرة عالية على امتصاص مولد المضاد والمعالجة وهذا يرتبط APC التاضجة بأنها ويميز النمط الظاهري DEC-205 ومستقبلة المانوز وواسم Fo بالتعبير المرتفع لمستقبلة جاما الناضج عادة بتعبير منخفض لهذه الواسمات لكن بتعبير مرتفع للجزيئات السطحية الخلوية
CD54) dda و ¥ وجزيئات الالتصاق ١ من الصنف MHC fa T المسؤولة عن تنشيط خلايا (CD86 و CD80 و CD40 Jia) وجزيئات منبهة مشتركة (CDIL و - © شفرة any بخمج تحويلي باستخدام متعدد نوويتيد APC ويمكن عادة تخميج خلايا بروتين ورم بروستات (أو جزء أو متغير آخر منه) بحيث يعبر عن متعدد ببتيد ورم البروستات أو جزء منه مولد للمناعة على سطح الخلية. وقد يجرى هذا التخميج بالخمج التحويلي خارج الجسم الحي وقد يستخدم تركيب أو لقاح يشتمل على خلايا مصابة بخمج tars تحويلي من هذا القبيل لأغراض علاجية كما وصف في هذا البيان. وبدلا من ذلك قد ve ay سواغ تصريف جين يستهدف خلية متفرعة أو خلية أخرى منتجة لمولد المضاد إلسى مريض مما يؤدي إلى الإصابة بالخمج التحويلي الذي يحدث في الجسم الحي. وقد يجبرى التخميج بالخمج التحويلي للخلايا المتفرعة في الجسم الحي وخارجه؛ على سبيل المثال؛ باستخدام طرق معروفة في التقنية مثل تلك الموصوفة في طلب البراءة الدولي 597 97/7 أو طريقة مدفع ص: Ve الجينات التي وصفها مافي ومن معه في مجلة علم المناعة وأحياء الخلاياء؛ مجلد ٠ المتفرعة بمولدات المضادات بحضن خلايا WAN ويمكن تحميل .19997 50-5 متفرعة أو أسلاف خلايا مع متعدد ببتيد ورم البروستات أو الدنا (المكشوف أو داخل ناقل فيروس Jia) بلازميد) أو الرنا؛ أو مع بكتيريا أو فيروسات مأشوبة تعبر عن الجسم المضاد جدري البقر أو جدري الطيور أو فيروس رجعي أو نواقل فيروسية عدسية). وقبل التحميل يمكن إجراء اقتران إسهامي لمتعدد الببتيد مع شريك مناعي يزود مساعدة لخلية 7 (مقل ٠ جزيء حامل). وبدلا من ذلك يمكن تنبيض خلية متفرعة بشريك مناعي غير مقترن بشكل منفصل أو في وجود متعدد الببتيد. علاج السرطان: وفي أوجه أخرى للاختراع الراهن قد تستخدم التراكيب الموصوفة في هذا البيان سرطان البروستات. وفي هذه الطرق تعطى التراكيب الصيدلية Jia اللعلاج المناعي للسرطان؛ oe واللقاحات عادة إلى مريض. ويشير مصطلح " مريض " عند استخدامه في هذا البيان إلى أي tie حيوان من ذوات الدم الحار ويفضل بشر. وقد يكون مريض مبتلى بالسرطان أو غير به. ووفقا لذلك يمكن أن تستخدم التراكيب الصيدلية واللقاحات السابقة لمنع تطور سرطان أو لمعالجة مريض مبتلى بالسرطان. ويمكن تشخيص سرطان باستخدام المعايير المقبولة عادة في التقنية بما في ذلك وجود ورم خبيث. وقد تعطى التراكيب الصيدلية واللقاحات إما قبل © إعطاء عقاقير المعالجة بالإشضعاع (Jie وإما بعد الإزالة الجراحية لأورام أولية و/أو لمعالجة أو عقاقير علاجية كيميائية تقليدية. وفي تجسيدات معينة قد تكون المعالجة المناعية معالجة مناعية فعالة حيث تعتمد المعالجة على التنبيه؛ في الجسم الحي؛ لجهاز مناعة داخلي المنشاً في عائل بحيث يتفاعل ضد oA متعددات الببتيد ومتعددات النوويتيد Jie) الأورام مع إعطاء عوامل معدلة للاستجابة المناعية المذكورة في هذا البيان). وفي تجسيدات أخرى قد تكون المعالجة المناعية معالجة مناعية منفعلة حيث تتضمن مؤقرة أو أجسام LIA (Jia) لها تفاعلية مناعية ضد الورم محددة Jal go المعالجة تصريف مضادة) قد تسبب تأثيرات مضادة للورم بشكل مباشر أو غير مباشر ولا تعتمد بالضرورة ٠ على جهاز مناعة في عائل سليم. وتشمل أمثلة الخلايا المؤثرة خلايا 7 كما وصف أعلاه ليمفية سامة لخلايا “608 وخلايا ليمفية 7 راشحة للورم مساعدة T خلايا Jie) وخلايا 7 ليمفية 8 خلايا قاتلة طبيعية وخلايا قاتلة منشطة بلمفوكين) وخلديا Jia) وخلايا قاتلة (CDA من نوع وملتهمات كبيرة) تعبر عن متعدد ببتيد مزود de ite خلايا Jia) وخلايا منتجة لمولد المضاد في هذا البيان. ويمكن تنسيل مستقبلات خلية 1 ومستقبلات جسم مضاد متخصصة بمتعددات ١ الببتيد المذكورة في هذا البيان والتعبير عنها ونقلها إلى تواقل أو خلايا مؤثرة أخرى للمعالجبة المختارة. ويمكن كذلك استخدام متعددات الببتيد المزودة في هذا البيان لتوليد أجسسام Lelia) وصف على سبيل المثال في البراءة LS) مضادة أو أجسام مضادة ضد الطراز الجنسي الأمريكية رقم 4,918:1754) للمعالجة المناعية المنفعلة. المؤثرة بكميات كافية للمعالجة المناعية WAY وبشكل عام يمكن الحصول على ve المختارة عن طريق النمو في أنابيب الاختبار كما وصق في هذا البيان. وتعرف ظروف مؤثرة مفردة متخصصة بمولد المضاد إلى عدة ملايين مع المحافظطة WIA استتبات لزيادة عدد على تمييز مولد المضاذ في الجسم الحي جيدا في التقنية. وتستخدم ظروف الاستتبات في أنابيب الاختبار من هذا القبيل تنبيه متقطع بمولد مضادء غالبا في وجود سيتوكينات (مثل 1-2) وخلايا مغذية غير منقسمة. وكما ذكر أعلاه قد تستخدم متعددات الببتيد المتفاعلة © كما وصف في هذا البيان لتوسيع مستنبتات خلايا 7 متخصصة بمولد المضاد بشسكل Lelia سريع لتوليد عدد كاف من الخلايا للمعالجة المناعية. وبصفة خاصة قد تتببض خلايا منتجبة المتفرعة أو الملتهمات الكبيرة أو الخلايا الأحادية النواة أو الأرومة WAY Jie لمولد المضاد أو تخمج بخمج تحويلي باستخدام Lelia الليفية أو خلايا 8 باستخدام متعددات ببتيد متفاعلة متعدد نوويتيد واحد أو أكثر باستخدام تقنيات قياسية معروفة جيدا في التقنية. فعلى سبيل المثال vo cq منتجة لمولد المضاد خمجا تحويليا باستخدام متعدد نوويتيد يحتوي على معزز LOA قد تخمج ويتبغي أن تكون الخلايا المؤقرة AT مناسب لزيادة التعبير في فيروس مأشوب أو نظام تعبير المستنبتة لاستخدامها في العلاج قادرة على النمو والتوزيع بشكل واسع وقادرة على البقاء قد تحت Antal لفترة طويلة في الجسم الحي. ولقد أظهرت الدراسات أن الخلايا المؤثرة على النمو في الجسم الحي وتكون قادرة على البقاء لفترة طويلة بأعداد كبيرة عن طريق - ٠ التنبيه المتكرر باستخدام مولد مضاد مكمل ب 11-2 (ينظر على سبيل المثال ما جاء عن شيفر (YAY AVY ص: YoY ومن معه في مجلات علم المناعة مجلد وبدلا من ذلك قد يضاف ناقل يعبر عن متعدد ببتيد مذكور في هذا البيان إللسى خلايا منتجة لمولد المضاد مأخوذة من مريض وموزعة نسيليا خارج الجسم الحي لإعادة غرسها في نفس المريض. ويمكن إعادة إضافة الخلايا المخمجة بخمج تحويلي في المريض باستخدام أية طريقة معروفة في التقنية ويفضل في صورة معقمة عن طريق الإعطاء في الوريد أو داخل التجويق أو في الصفاق أو داخل الورم. وتتفاوت طرق الإعطاء وعدد مراته للتراكيب العلاجية الموصوفة في هذا البيان بالإضافة إلى الجرعة من شخص لآخر ويمكن تحديدها بسهولة باستخدام التقنيات القياسية. وعموما قد تعطى التراكيب الصيدلية واللقاحات عن طريق الحقن (مثل الحقن داخل الجلد أو 0 العضل أو في الوريد أو تحت الجلد) أو عن طريق الأنف (مثلا بالاستتنشاق) أو عن Jas
OY طريق الفم. ويفضل أن تعطى جرعة إلى عشر جرعات خلال فترة زمتية تزيد عن أسبوعا. ويفضل أن تعطى 6 جرعات بفترات زمنية يبلغ كل منها شهر واحد وقد تعطى بعد ذلك مقادير منشطة بشكل دوري. وقد تكون طرق الإعطاء البديلة ملائمة لمرضى بشكل إنفرادي. والجرعة الملائمة هي مقدار مركب يستطيع؛ عند إعطائه كما وصف أعلاه؛ تعزيز © فوق المستوى الرئيسي (أي 969٠ إلى 96٠0 استجابة مناعية مضادة للورم بنسبة لا تقل عن المستوى في شخص لا يخضع للمعالجة). ويمكن مراقبة هذه الاستجابة بقياس الأجسام المضادة ضد الورم في مريض أو بالتوليد المعتمد على اللقاح لخلايا مؤقرة حالة للخلايا تستطيع قتل الخلايا الورمية في عينات من مريض في أنابيب الاختبار. وينبغي كذلك أن تكون هذه اللقاحات قادرة على إحداث استجابة مناعية تؤدي إلى تحسين الناتج الإكلينيكي (مثل خمود Yo
Vlo¢
حدة المرض بشكل أكثر تكرارا وفترة بقاء بدون مرض كاملة أو جزئية أو أطول) في مرضى ملقحين بالمقارنة مع مرضي غير ملقحين. وعموما بالنسبة لتراكيب صيدلية ولقاحات Jai على متعدد ببتيد واحد أو أكثر يتراوح مقدار كل متعدد ببتيد موجود في جرعة مسن حوالي ٠ ميكروجرام إلى © مجم لكل كجم من العائل. وتتفاوت مقادير الجرعات الملائمة مع ٠ حجم المريض ولكنها تتراوح عادة من حوالي ١٠ مل إلى حوالي © مل. وعموما تزود جرعة مناسبة ونظام معالجة مناسب المركب (المركبات) الفعال بمقدار يكفي لتزود فائدة علاجية و/أو وقائية. ويمكن مراقبة استجابة من هذا القبيل عن طريق تحديد ناتج إكلينيكي محسن (مثل خمود حدة المرض بشكل أكثر تكرارا وفترة بقاء بدون مرض كاملة أو جزئية أو أطول) في مرضى معالجين بالمقارنة مع مرضي غير معالجين. وعادة - ترتبط زيادة الاستجابات المناعية الموجودة مسبقا لبروتين ورم بروستات بناتج إكلينيكي محسن. وقد تقيم الاستجابات المناعية هذه عادة باستخدام معايرات قياسية للتكاثر والسمية الخلوية والمعايرات السيتوكينية التي قد تجرى باستخدام عينات يحصل عليها من مريض قبل وبعد المعالجة. طرق للكشف عن السرطان: Vo وعموما يمكن الكشف عن سرطان في مريض على أساس وجود بروتين ورم بروستاتي واحد أو أكثر و/أو متعدد نوويتيد واحد أو أكثر يحمل شفرة هذه البروتينات في die إحيائية (مثل الدم؛ المصلء البول و/أو الخزعات) مأخوذة من المريض. وبعبارة أخري قد تستخدم هذه البروتينات كواسمات لتدل على وجود أو عدم وجود سرطان a سرطان البروستات. وبالإضافة إلى ذلك قد تكون هذه البروتينات مفيدة للكشف عن سرطانات أخرى. x وتتيح عوامل الربط المزودة في هذا البيان عادة الكشف عن مستوى مولد مضاد يرتبط بالعامل في العينة الإحيائية. وقد تستخدم بوادىء ومسابير متعدد نوويتيد للكشف عن مستوى رنا الرسول الذي يحمل شفرة بروتين ورم وهو مؤشر على وجود سرطان أو عدم وجود سرطان أيضا. وعموما ينبغي أن يوجد سياق ورم بروستات بمستوى أعلى بثلاث مرات على الأقل في نسيج ورمي بالمقارنة مع نسيج سوي.
أ“ وتوجد أشكال مختلفة من الاختبارات معروفة للملمين في التقنية لاستخدام عامل ربط للكشف عن واسمات متعدد ببتيد في عينة. ينظر على سبيل المثال كتاب هارلو ولين بعنوان الأجسام المضادة: دليل مرشد لإجراءات المختبرات؛ شركة كولد سبرنج هاربر لابوراتوري؛ VIAN وعموما يمكن تحديد وجود أو عدم وجود سرطان في مريض عن طريق (أ) تلامس ٠ عينة إحيائية مأخوذة من مريض مع عامل ربط؛ (ب) الكشف في العينة عن مسستوى متعدد الببتيد المرتبط بعامل الربط و (ج) مقارنة مستوى متعدد الببتيد مع قيمة قطع محددة مسبقا. وفي تجسيد مفضل يشمل الاختبار استخدام عامل ربط مثتبت على dela صلب لارتباطه بمتعدد الببتيد وإزالته من باقي العينة. ومن ثم يمكن الكشف عن متعدد الببتيد المرتبط باستخدام مفاعل كشف يحتوي على مجموعة مقررة ويرتبط بشكل خاص بمتراكب من عامل ١ الربط/متعدد الببتيد. وقد تشمل مفاعلات الكشف هذه؛ على سبيل (JU عامل ربسط يرتبط بشكل خاص بمتعدد الببتيد أو جسم مضاد أو عامل آخر يرتبط بشكل خاص بعامل الربط die جلوبيولين مناعي مضاد أو بروتين 6 أو بروتين SIA لسيثين. وبدلا من ذلك قد يستخدم اختبار تنافس حيث يوسم متعدد ببتيد بمجموعة مقررة ويسمح له بالارتباط مع عامل ربط مثبت بعد حضن عامل الربط مع العينة. ويدل مدى تثبيط مكونات العينة لربط متعدد الببتيد 1 الموسوم مع عامل الربط على تفاعلية العينة مع عامل الربط المثبت. وتشمل متعددات الببتيد الملائمة للاستخدام في هذه المعايرات بروتينات ورم بروستات كاملة الطول وأجزاء منها basi ys بها عامل الربط كما وصف أعلاه. وقد يكون الحامل الصلب أي مادة معروفة للملميين بهذه التقنية قد يرتبط بها بروتين الورم. فعلى سبيل المثال قد يكون الحامل الصلب عين اختبار في لوح معايرة دقيقة أو © تيتروسيليلوز أو غشاء آخر ملائم. وبدلا من ذلك؛ قد يكون الحامل خحرزة أو قرصا die الزجاج أو الزجاج الليفي أو عصارة النباتات أو مادة بلاستيكية متل متعدد ستيرين أو كلوريد متعدد فينيل. وقد يكون الحامل جسيما مغنطيسيا أو مجسا بصريا ليفيا Jia تلك الموصوفة على سبيل المثال في البراءة الأمريكية رقم 0,799,7181. وقد يثبت عامل الربط على الحامل الصلب باستخدام تقنيات مختلفة معروفة للملمين بهذه التقنية وموصوفة بإسهاب في البراءات » والنشرات العلمية. وفي سياق الاختراع الراهن؛ يشير المصطلح " تثبيت " إلى الاقتران غير Ylo¢
>“
الإسهامي؛ مثل الامتزاز؛ والارتباط الإسهامي (الذي قد يكون رابطة مباشرة بين العامل ومجاميع وظيفية على الحامل أو قد يكون رابطة عن طريق عامل ترابط تقاطعي). ويفضل التثبيت بالامتزاز على عين في لوح معايرة دقيقة أو على غشاء. وفي هذه الحالات؛ يمكن إجراء الامتزاز بتلامس عامل الربط في محلول منظم ملائم؛ مع الحامل الصلب لفترة زمنية ٠ ملائمة. ويختلف زمن التلامس باختلاف درجة الحرارة ولكنه يتراوح Lind gad من نحو ساعة إلى نحو يوم. وعموما يعتبر تلامس عين من لوح معايرة دقيقة من مادة بلاستيكية Jia) متعدد ستيرين أو متعدد كلوريد فينيل) مع مقدار من عامل الربط يتراوح من نحو ٠١ نانوجرام إلى نحو ٠١ ميكروجرام؛ ويفضل من نحو ٠٠١ نانوجرام إلى نحو ١ ميكروجرام؛ TS
مقدار مناسب من عامل الربط.
١ وعموما يمكن تحقيق ارتباط عامل الربط بحامل صلب ارتباطا إسهاميا بتفاعل الحامل أولا مع مفاعل ثنائي الوظيفة يتفاعل بدوره مع كل من الحامل ومجموعة وظيفية؛ Je مجموعة هيدروكسيل أو مجموعة أمينية؛ على عامل الربط. فعلى سبيل المثال قد يرتبط عامل الربط إسهاميا بحوامل تحتوي على طلاء بوليمري ملائم بامستخدام بنزوكينون أو بتكثتيف مجموعة ألدهيد على الحامل مع أمين وهيدروجين نشط على الشريك في الارتباط (ينظر على
.)13-412 جزء OT) سبيل المثال كتالوج ودليل علم تقنية المناعة لبيرس» Vo
وفي تجسيدات معينة؛ يستخدم اختبار الطبقة بين الطبقتين باستخدام جسمين مضادين. ويمكن إجراء هذا الاختبار أولا بتلامس جسم مضاد مثبت على Jala صلب؛ عادة عين مسن لوح معايرة دقيقة؛ مع العينة بحيث ترتبط متعددات الببتيد في العينة بالجسم المضاد المثبت. ومن ثم تزال العينة غير المرتبطة من المتراكبات المثبتة من الجسم المضاد ومتعدد الببتيد
Y. ويضاف مفاعل كشف( ويفضل جسم مضاد ثان قادر على الارتباط بموقع مختلق على متعدد الببتيد) يحتوي على مجموعة مقررة. ومن ثم يحدد مقدار مفاعل الكشف الذي بقي مرتبطا بالحامل الصلب باستخدام طريقة ملائمة للمجموعة المقررة الخاصة.
وبعبارة أدق بمجرد تثبيت الجسم المضاد على الحامل كما وصف أعلاه؛ تسد عادة مواقع ارتباط البروتين المتبقية على الحامل. ويمكن استخدام أي عامل سد ملام معروف
vo لاللملمين بهذه التقنية Jie زلال مصل البقر أو توين ٠١ (علامة تجارية) (من شركة سيجما
ا كيميكال كو.؛ سانت لويس؛ ولاية ميسوري). ومن ثم يحضن الجسم المثبت مع العينة؛ ويربط متعدد الببتيد بالجسم المضاد. ويمكن تخفيف العينة بمخفف ملائم؛ مثل محلول ملحي متظم بالفسفات (PBS) قبل الحضن. وعموما يكون زمن التلامس الملائم (أي فترة الحضانة) هو الفترة الزمنية الكافية لكشف وجود متعدد الببتيد في عينة مأخوذة من فرد ممصساب بسرطان ٠ البروستات. ويفضل أن يكون زمن التلامس WS لتحقيق مستوى ارتباط لا يقل عن نحو 59 من ذلك الارتباط الناتج عند الاتزان بين متعدد الببتيد المرتبط وغير المرتبط. وسيدرك الملمون بهذه التقنية الفترة الزمنية الضرورية لتحقيق الاتزان والتي يمكن تحديدما بسهولة باختبار مستوى الارتباط الذي يحدث خلال فترة زمنية معينة. وعند درجة حرارة Ad all تعتبر فترة الحضانة التي تبلغ نحو “٠ دقيقة عموما كافية. ١ ومن ثم يمكن إزالة العينة غير المرتبطة بغسل الحامل الصلب بمحلول منظم ملائقم؛ مثل محلول منظم بالفسفات (PBS) يحتوي على 960/1 من توين ٠١ (علامة تجارية). ومن ثم يمكن إضافة الجسم المضاد الثاني؛ الذي يحتوي على مجموعة مقررة.؛ إلى الحامل الصلب. وتشمل المجاميع المقررة المفضلة تلك المجاميع المذكورة أعلاه. ومن ثم يحضن مفاعل الكشف مع المتراكب المتبت من الجسم المضاد ومتعدد الببتيد ve «الفترة زمنية كافية لكشف متعدد الببتيد المرتبط. وعموما يمكن تحديد الفتقرة الزمنية الملائمة باختبار مستوى الارتباط الذي يحدث خلال فترة زمنية. ومن ثم يزال مفاعل الكشف غير Jag yall ويكشف مفاعل الكشف المرتبط باستخدام المجموعة المقررة. وتعتمد الطريقة المستخدمة لكشف المجموعة المقررة على طبيعة المجموعة المقررة. ولكشف المجاميع المشعة؛ من الملائم عموما استخدام طريقتي تعداد الومضان أو التصوير بالإضعاع الذاتي. © ويمكن استخدام طرق التحليل بالمطياف لكشف الأصباغ والمجموعات ذات الإشعاع الضوئي والمجموعات الفلورية. ويمكن كشف البيوتين باستخدام افيدين مقترن بمجموعة مقررة مختلفة (عادة مجموعة مشعة أو فلورية أو أنزيم). وعموما يمكن كشف المجاميع المقررة من الأنزيمات بإضافة طبقة أساس (عادة لفترة زمنية معينة) ثم بالتحليل بالمطياف أو بتحليل AT لمنتجاث التفاعل.
1¢
ولتحديد وجود سرطان أو عدم وجوده fie سرطان البروستات؛ تقارن عادةٌ الإشارة
الناتجة من المجموعة المقررة التي لا تزال مرتبطة بالحامل الصلب بإشارة تناظر قيمة قطع
محددة مسبقاً. وفي تجسيدٍ مفضل؛ تكون dad القطع للكشف عن سرطان هي معدل الإشارة الناتجة عند حضن الجسم المضاد المثبلت مع عينات مأخوذة من أفراد غير مصابين
٠ بالسرطان. وعمومآ تعطى العينة التي تنتج إشارة فوق قيمة القطع المحددة مسبقا بثلاثة انحرافات معيارية نتيجة إيجابية بالنسبة لسرطان البروستات. وفي تجسيدٍ بديل مفضل»؛ تحدد
قيمة القطع باستخدام منحنى تشغيل مستقبل Gog لطريقة ساكيت ومن معه في كتاب ple الأوبئة
الإكلينيكي: العلوم الأساسية للدواء الإكلينيكي؛ ليتل براون آند كو.؛ 194806 ص: AY
| وبعبارة مختصرة؛ يمكن تحديد قيمة القطع في هذا التجسيد من مخطط بياني لنقاط مزدوجة .من معدلات إيجابية حقيقية (أي الحساسية) ومعدلات إيجابية مصطنعة (أي 96٠00 نوعية) مناظرة لكل قيمة قطع محتملة لنتيجة اختبار تشخيصي. وتعتبر قيمة القطع على المخطط
البياني الأقرب إلى الزاوية اليسارية العلوية (أي القيمة التي تتضمن المنطقة الكبرى) هي قيمة
القطع SY) دقة؛ ويمكن اعتبار عينة تولد إشارة Jel من قيمة القطع التي حددت بهذه الطريقة أنها تعطي نتيجة إيجابية. Yay من ذلك؛ يمكن نقل قيمة القطع إلى اليسار على امتداد
os المخطط البياني لتقليل المعدل الإيجابي المصطنع إلى الحد الأدنى أو يمكن نقلها إلى اليمين لخفض المعدل السلبي المصطنع إلى الحد الأدنى. وعموماآً يمكن اعتبار عينة تولد إشارة أعلى
من قيمة القطع التي حددت بهذه الطريقة أنها تعطي نتيجة إيجابية للسرطان.
وفي تجِسَيدٍ وثيق الصلة؛ يجرى الاختبار بنسق اختبار بالانسياب أو بالإزالة حيث
يثبّت الجسم المضاد على غشاء Jie نيتروسيليلوز. وفي الاختبار بالانسياب؛ ترتبط متعددات
© الببتيد الموجودة في العينة بعامل الربط المثبتت بمجرد مرور العينة خلال الغشاء. ومن ثم يرتبط عامل ربط موسوم ثان بالمتراكب من عامل الربط ومتعدد الببتيد بمرور محلول يحتوي
على عامل الربط الثاني من خلال الغشاء. ومن ثم يمكن الكشف عن عامل الربط الثاني المرتبط كما وصف أعلاه. وفي نسق الاختبار AYU يغمر طرف الغشاء الذي يرتبط عامل
الربط به في محلول يحتوي على العينة. وتنتقل العينة عبر الغشاء خلال منطقة تحتوي على
vo عامل ربط ثان وإلى منطقة عامل الربط ef Bd ويشير تركيز عامل الربط الثاني عند Vlog
منطقة الجسم المضاد fi) إلى وجود السرطان. Lad gay يولد تركيز عامل الربط الثاني عند تلك المنطقة نمطاء Jie خط؛ يمكن قراءته بالنظر. ويشير غياب هذا التمط إلى Lagi سلبية. Legacy يختار مقدار عامل الربط cl gd على الغشاء لتوليد نمط يمكن تمييزه بالتظر عندما تحتوي العينة الإحيائية على مستوى من متعدد ببتيد كاف لتوليد إشارة إيجابية في اختبار
٠ الطبقة بين طبقتين باستخدام جسمين مضادين في النسق الموصوف أعلاه. ومن عوامل الربط المفضلة للاستخدام في هذه الاختبارات أجسام مضادة وأجزاء منها للارتباط مع مولد المضاد. ويفضل أن يتراوح مقدار الجسم المضاد المثبسّت على الغشاء نحو Yo نانوجرام إلى نحو ١ ميكروجرام؛ والأفضل من نحو on نانوجرام إلى نحو ove نانوجرام. ونموذجياً يمكن إجراء هذه الاختبارات بمقدار صغير faa من عينة إحيائية.
١ وبالطبع توجد طرق اختبار أخرى عديدة ملائمة للاستخدام مع بروتينات الورم أو عوامل الربط Gy للاختراع الراهن. ولقد ذكر الوصف السابق على سبيل المثال فقط. lad سبيل المثال» سيتضح لأولئك الملمين في التقنية أنه يمكن تعديل الطرق السابقة بسهولة لاستخدام متعددات ببتيد ورم البروستات للكشف عن الأجسام المضادة التي ترتبط بمتعددات الببتيد هذه في عينة إحيائية. وقد يرتبط الكشف عن الأجسام المضادة المتخصصة لبروتين ورم
Vo البروستات هذه بوجود سرطان.
ويمكن الكشف عن سرطان كذلك؛ أو بدلا من ذلك؛ على أساس وجود T WIA تتفاعل بشكلٍ خاص مع بروتين ورم بروستات في عينة إحيائية. وفي طرق معينة تحضن عينة إحيائية تحتوي على خلايا T من نوع CDA" و/أو 008 معزولة من مريض مع متعدد ببتيد ورم بروستات و/أو متعدد نوويتيد يحمل شفرة متعدد ببتيد من هذا القبيل و/أو APC تعبر عن
أ ja مولد للمناعة على الأقل من متعدد ببتيد من هذا القبيل» ويكشف عن وجود أو عدم وجود تنشيط خاص WA 7. وتشمل العينات الإحيائية الملائمة؛ على سبيل المثال لا الحصر؛ خلايا T معزولة. فعلى سبيل المثال قد تعزل خلايا 7 من مريض بتقنيات روتينية Je) فرز فيكول/هيباكيو للخلايا الليمفية المأخوذة من دم محيطي بالطرد المركزي متدرج الكثافة). وقد تحضن WDA 7 في أنابيب الاختبار لمدة يومين إلى 9 أيام (وعادةٌ ؛ أيام) عند YY د.م مع
ve متعدد ببتيد ورم بروستات (تركيزه يتراوح Ble من © إلى YO ميكروجرام/مل). وقد يكون nl
من المشنود حضن Ja آخر من عينة خلية 7 في عدم وجود متعدد ببتيد ورم بروستات لتعمل كضابط. وبالنسبة لخلايا 7 “004 يفضل الكشف عن التنشيط بتقدير تكاثر خلايا 7. وبالنسبة
لخلايا T “608 يفضل الكشف عن التنشيط بتقدير الفعالية الحالة للخلايا. ويدل مستوى تكائر
أكبر بمرتين على الأقل و/أو مستوى الفعالية الحالة للخلايا الذي يكون أكبر ب 9670 على
٠ الأقل من ذلك في أشخاص غير مصابين بالمرض على وجود سرطان في مريض.
LS ذكر أعلاه يمكن الكشف عن سرطان كذلك؛ أو بدلا من ذلك؛ على أساس مستوى
رنا الرسول الذي dang شفرة بروتين ورم بروستات في عينة إحيائية. فعلى سبيل JOA يمكن استخدام بادئين نوويتيدين قصيري السلسلة على الأقل في اختبار أساسه تفاعل بلمرة أنزيمية مسلسل (PCR) لتضخيم جزء دنا مكل لورم بروستات مأخوذ من عينة إحيائية حيث يكون
٠ أحد البادئين التوويتيدين قصيري السلسلة على الأقل متخصص (أي يتهجن إلى) بمتعدد نوويتيد يحمل شفرة بروتين ورم البروستات. ثم يفصل الدنا المكمّل المضخم ويكشف باستخدام تقنيات معروفة Tas في التقنية Jie تحليل الهجرة الكهربائية على هلام. وبالمتل يمكن استخدام مسابير نوويتيدية قصيرة السلسلة تهجّن بصفةٍ خاصة إلى متعدد نتوويتيد يحمل شفرة بروتين
ورم بروستات في اختبار تهجين للكشف عن وجود متعدد ببتيد يحمل شفرة بروتين الورم في
١ عينة إحيائية.
ولإتاحة التهجين في ظروف الاختبار ينبغي أن تحتوي البوادئ أو المسابير Ladi gill
قصيرة السلسلة على سياق نوويتيد قصير السلسلة يتطابق بنسبة حوالي 9660 على الأقل ويفضل حوالي 9675 على الأقل والأفضل حوالي 9690 على الأقل مع جزء من متعدد نوويتيد يحمل شفرة بروتين ورم بروستات طوله لا يقل عن ٠١ نوويتيدات ويفضل أن لا يقل
© عن Yo نوويتيدا. ويفضل أن تهجتن بوادئ و/أو مسابير نوويتيدية قصيرة السلسلة إلى متعدد نوويتيد يحمل شفرة متعدد ببتيد موصوف في هذا البيان في ظروف متوسطة الشدة كما نكر
أعلاه. ويفضل أن يتراوح طول البوادئ و/أو المسابير النوويتيدية قصيرة السلسلة المستخدمة
في الطرق التشخيصية الموصوفة في هذا البيان من 50-٠١ نوويتيدآا على الأقل. وفي تجسيدٍ مفضل تحتوي البوادئ النوويتيدية قصيرة السلسلة على ٠١ نوويتيدات متجاورة على الأقل
© والأفضل Vo نوويتيدا متجاورً على الأقل من جزيء دنا له سياق مذكور في سياقات التمييز Vlog
ّ| 17> أرقام: (VII e YY الإاتخحدلال لاجد لتحم لجع حا YA FY. 270-74320007 و TAY وتعرف تقنيات لكل من الاختبارات التي أساسها PCR واختبارات التهجين Tus في التقنية lan) على سبيل المثال؛ ما جاء عن موليز ومن معه في مجلة ندوات في علم الأحياء الكمية في كولد سبرنج هاربر» مجلد 801 ص: YAY م1987 وكتاب ايرلتش بعنوان تقنية PCR شركة ستوكتون برس» نيويورك؛ (VAAN ويستخدم اختبار مفضل RT-PCR حيث يطبق PCR مع النسخ العكسي. وعادة يستخلص الرنا من عينة إحيائية Jie نسيج خزعي وينسخ عكسيا لإنتاج جزينات الدنا المكمّل. ويولد تضخيم PCR باستخدام بادئ متخصص واحد على الأقل جزيء دنا Jee قد يفضل ويبدو للعيان باستخدام تحليل الهجرة الكهربائية على هلام. ويمكن إجراء التضخيم ٠ على عينات إحيائية مأخوذة من مريض يخضع لاختبار ومن ثم شخص غير مبتلى بسرطان. وقد يجرى تفاعل التضخيم على عدة محاليل مخففة من الدنا المكمّل تشمل مقدارين. وتعتبر زيادة بمقدار الضعفين أو أكثر في التعبير في عدة محاليل مخففة لعينة مريض يخضع للاختبلر بالمقارنة مع نفس المحاليل المخففة لعينة لا تحتوي على سرطان إيجابية عادة. وفي تجسيدٍ مفضل قد تستخدم التراكيب الموصوفة كواسمات لتطور السرطان. وفي ve هذا التجسيد قد تجرى الاختبارات كما وصف أعلاه لتشخيص سرطان مع الزمن ويقدر التغير في مستوى متعدد (متعددات) ail أو متعدد النوويتيد المتفاعل. فعلى سبيل JE قد تجبرى الاختبارات كل 4 77-7 ساعة لفترة زمنية تتراوح من + شهور إلى سنة واحدة وبعد ذلك تجرى حسب الحاجة. وعموما يتقدم سرطان في أولئك المرضى الذين يزيد فيهم مستوى متعدد الببتيد أو متعدد النوويتيد المكشوف مع الزمن. وعلى العكس تمامآً لا يتقدم Gla dl عندما ve يبقى مستوى متعدد الببتيد أو متعدد النوويتيد المتفاعل ثابتاً أو يقل مع الزمن. ويمكن إجراء اختبارات تشخيصية معينة في الجسم الحي مباشرة على ورم. ويتضمن اختبار من هذا القبيل تلامس خلايا الورم مع عامل ربط. ثم يمكن الكشف عن عامل الربط المرتبط مباشرة أو بشكل غير مباشر عن طريق مجموعة مقررة. وقد تستخدم كذلك dsl so الربط هذه في تطبيقات نسيجية. وبدلا من ذلك قد تستخدم مسابير متعددات النوويتيد ضمن هذه Yo التطبيقات. ١+4
IA
وكما ذكر أعلاه لتحسين الحساسية قد تعاير واسمات متعددة لبروتين ورم بروستات معينة. وسيتضح أنه يمكن دمج عوامل ربط متخصصة ببروتينات مختلفة مزودة في die في هذا البيان في معايرة مفردة. وعلاوة على ذلك قد تستخدم بوادئ مسابير متعددة في نفس الوقت. ويعتمد اختبار واسمات لبروتين ورم على تجارب روتينية لتحديد توليفات تؤدي إلى حساسية مثلى. وبالإضافة إلى ذلك؛ أو بدلا من ذلك؛ قد تدمج معايرات لبروتينات ورم مزودة ١ في هذا البيان مع معايرات لمولدات مضادات ورم معروفة أخرى. الطقوم التشخيصية: يقدم الاختراع الراهن كذلك طقوما لاستخدامها في أية طريقة من الطرق التشخيصية المذكورة أعلاه. وتحتوي هذه الطقوم عادة على مكونين أو أكثر ضروريين لإجراء اختبار تشخيصي. وقد تكون المكونات مركبات؛ مفاعلات؛ أوعية و/أو معدات. فعلى سبيل المثال قد ٠ ala يحتوي وعاء في طقم على جسم مضاد أحادي النسيلة أو جزء منه يرتبط بصفة ببروتين ورم بروستات. وقد تزود هذه الأجسام المضادة أو الأجزاء بشكل مرتبط بمادة حاملة عناصر مثل المفاعلات أو المحاليل SSI كما وصف أعلاه. وقد يتضمن وعاء إضافي واحد أو cdl 15 المنظمة التي ينبغي استخدامها في الاختبار. وقد تحتوي هذه الطقوم كذلك؛ أو بدلا من على مفاعل كشف كما وصف أعلاه يحتوي على مجموعة مقررة ملائمة للكشف عن ارتباط vs المضاد بشكل مباشر أو غير مباشر. من ذلك قد يصمم طقم للكشف عن مستوى رنا الرسول الذي يحمل شفرة Yau بروتين ورم بروستات في عينة إحيائية. وعادة تحتوي هذه الطقوم على مسبار أو بادئ dang نوويتيدي قصير السلسلة واحد على الأقل كما وصف أعلاه يهجن إلى متعدد نوويتيد شفرة بروتين ورم بروستات. وقد يستخدم نوويتيد قصير السلسلة من هذا القبيل في اختبار > © أو اختبار تهجين. وتشمل المكونات الإضافية التي قد توجد في هذه الطقوم نوويتيدا PCR قصير السلسلة ثانيا و/أو مفاعل أوعاء تشخيص لتسهيل الكشف عن متعدد نوويتيد يحمل شفرة بروتين ورم بروستات. وتقدم الأمثلة التالية للتوضيح لا للحصر. :
Yo lot
)١( Jaa عزل وتمييز متعددات ببتيد ورم بروستاتي يصف هذا المثال عزل متعددات ببتيد ورم بروستاتي معين من مكتبة دنا مكل لورم بروستاتي. شيّدت مكتبة تعبير دنا مكسّل لورم بروستاتي بشري من متعدد (رنا حمض أدينيليك) لورم بروستاتي باستخدام نظام بلازميد سوبرسكريبت لتخليق الدنا المكمّل وطقسم تنسيل بلازميد (من شركة بي آر إل لايف تكتولوجيز؛ جيترسبيرغ؛ ميريلاند (YAY باتباع طريقة الصانع. وبعبارةٌ أدق؛ جونست أنسجة الورم البروستاتي ببوليترون (من شركة كاينماتيكا؛ سويسرا) واستخلص الرنا الكلي باستخدام كاشف ترايزول (من شركة بي آر إل ١ لايف تكنولوجيز) Gy لإرشادات الصانع. ومن ثم نقتي متعدد رنا حمض أدينيليك باستخدام طقم تنقية رنا الرسول على عمود تدويم كياجن أوليجوتكس (من شركة كياجن؛ سانتا كلاريتا؛ كاليفورنيا Yoo )9( وفقآ لطريقة الصانع. وخلتقت الجديلة الأولسى من الدنا المككتل باستخدام بادئ 20/أوليجو-0718. وخلتق دنا Joa مزدوج الجديلة؛ وربط بمهايئات 3 (من شركة إنفيتروجين؛ ساندييجو» كاليفورنيا) وهضم ب Noth وبعد التجزئة VEY شركة كلونتك؛ بالوألتو» كاليقفورنيا a) ٠٠١٠١-نبس-امورك الحجمية في أعمدة vo
Js—as (من شركة أنفيتروجين) pCDNA3.1 ل Notl/EcoRI ربط الدنا المكمسّل في موقع إلى خلايا اشريكية قولونية 011108 من الكتروماكس عن طريق عملية تشكيل المسام بالكهرباء. وبتطبيق الإجراءات نفسهاء حضترت مكتبة تعبير دنا مكسّل مأخوذ من بنكرياس أ إنسان سوي من de gana عينات نسيجية عددها ستة (من شركة كلونتك). ij Jay مكتبات Gall المكمّل بتحديد عدد المستعمرات المستقلة والنسبة المئوية للتسائل التي حملت all ومتوسط حجم الوليجة وبتحليل متعاقب. وقد احتوت مكتبة الورم البروستاتي على ٠,5 »* ٠ مستعمرة مستقلة؛ حيث احتوى 967٠ من النسائل على وليجة وكان متوسط حجم الوليجة ١١55 زوج قاعدة. واحتوت مكتبة الدنا all المأخوذة من بنكرياس سوي على ٠١ X ©,» Yo مستعمرة مستقلة؛ Cun احتوى 9679 من النسائل على ولائج وكان متوسط Vlog
حجم الوليجة ١١7١ زوج قاعدة. وبينت نتائج تحليل السياق في WS المكتبتين أن معظم التسائل احتوت على سياق دنا مكسّل كامل الطول وأنها خلقت من رنا (Jay مع أقل
قدر ممكن من التلوث بالرنا الريبوزي ودنا الحبيبات الخيطية. وأجري طرح مكتبة الدنا Jalal باستخدام الورم البروستاتي السابق ومكتبات دنا ٠ مكمسل لبنكرياس سوي؛ كما وصف هارا ومن معه في مجلة oll مجلد AE ص -١84 4 ؛ 1496( مع إجراء بعض التعديلات. وبعبارةٍ أدق؛ شك all مكتبة دنا Ja مطروحة متخصصة بورم بروستاتي بالطريقة التالية. هضم Vr ميكروجم من مكتبة دنا مكمسّل مأخوذ من بنكرياس سوي ب EcoRI و1100 و 88:1 ثم عرض لتفاعل sds مع جزء كلينو لبوليمراز دنا. وبعد الاستخلاص في فنول وكلوروفورم والترسيب بأثانول؛ أتيب ٠٠١ ALA ميكرولتر من الماء ومسخ بالحرارة ومزج مع ٠٠١ ميكرولتر ٠٠١( ميكروجم) من بيوتين مسبار ضوئي (فكتورلابراتوريز؛ برلنجام؛ كاليفورنيا). ووفقآً لتعليمات الصانع؛ عرض المزيج الناتج للإشعاع بمصباح شمس قدرته 77١0 واط على ثلج لمدة ٠١ دقيقة. وأضيف مقدار إضافي يعادل ٠٠ ميكرولتر من بيوتين مسبار ضوئي وأعيد تفاعل إضافة البيوتينيل. وبعد الاستخلاص ببوتانول خمس مرات؛ رستب الدنا بأثانول وأذيب في
ve *؟ ميكرولتر من الماء لتشكيل Gall الموجّه.
ولتشكيل الدنا المتتبع؛ هضم ٠١ ميكروجم من مكتبة دنا JS لورم بروستاتي ب Xhol 5 BamHI واستخلص بفنول وكلوروفورم ومرّر خلال أعمدة كروما-سبن-0٠؟ (كلونتك). وبعد الترسيب بأتانول؛ أذيب الدنا المتتبع في © ميكرولتر من الماء. ومزج الدنا المتتبع مع ١5 ميكرولتر من الدنا الموجسّه و١٠ ميكرولتر من محلول تهجين منظم مرتيسن NaCl) Y- تركيزه ٠# جزيئي EDTA تركيزه ٠١ ملي جزيئشي 5 35S HEPES © ملي جزيئي درجة حموضته V0 وكبريتات دوديسيل الصوديوم بتركيز (YY وطلي بزيت معدني ومسخ بالحرارة بشكل تام. ونقلت العينة مباشرةٌ إلى حمام مائي درجة حرارته TA د.م وحضنت لمدة ٠١ ساعة (تهجين طويل الأمد [111]). ثم عرض مزيج التفاعل لمعالجة بالستربتافيدين ثم استخلص بمزيج الفنول والكلوروفورم. وكسّررت هذه العملية ثلاث مرات > أخرى. ورستب الدنا المطروح. وأذيب في VY ميكرولتر من الماء ومزج مع A ميكرولتر Vlog
من الدنا الموجّه Tog ميكرولتر من محلول تهجين منظم مرتين وعرض للتهجين عند TA د.م لمدة ساعتين (تهجين قصير الأمد [911]). وبعد إزالة الدنا مزدوج الجديلة المعالج بالبيوتينيل»؛ ربط الدنا المكسّل المطروح في موقع Xhol/BamHI ل pBCSK مقاوم للكلور أمفينكول (من ستراتاجين/لاجولا؛ كاليفورنيا da (AY TY إلى خلايا اشريكية قولونية ° 8 من الكتروماكس عن طريق تشكيل المسام بالكهرباء لتشكيل مكتبة دنا مكمّل مطروحة متخصصة بورم بروستاتي ( طرح بروستاتي .)١ ولتحليل مكتبة الدنا المكمّل المطروحة؛ sas دنا بلازميد من ٠٠١ نسيلة Ale اختيرت عشوائياً من المكتبة المطروحة المتخصصة بالورم البروستاتي وصنستقفت oldie) على حجم الوليجة. وقد ميّزت نسائل دنا مكل نموذجية بشكلٍ إضافي بتتبع سياق دنا ٠ باستخدام متتبع سياق أوتوماتي طراز TYE إيه من شركة بيركن إلم ر/أبلايد بيومسستمز دفيجن (من فوستر ستيء كاليفورنيا). ولقد تبيسّن أن نسائل الدنا oS الستة والتي سيطلق عليها laid بعد 71-13 و 71-12 و 21-16 و 1141-1 و 1141-9 و HI-4 وافرة في مكتبة Gal المكمسّل المرطوحة المتخصصة في البروستات. وتوجد سياقات الدنا المكتّل المحددة عند الطرفين “” و To للنسيلة 21-12 في سياقي التمييز أرقام: ١ و © على الترتيب؛ بينما Vo توجد سياقات Gall المكمّل المحددة عند الطرف © للنسائل 71-13 و 11-16و 21-1 و 111-9 و 1114 في سياقات التمييز أرقام: ١ و 4 و © و ١ و ١ على الترتيب. وقورنت سياقات الدنا J oC) للنسائل المعزولة بسياقات معروفة في بنك الجينات باستخدام قواعد genBank s EMBL lily (تحرير 17). وحددت أربع نسائل من نسائل دنا Jala لورم بروستاتي هي 71-13 و 21-16 و 111-1 و 111-4 لحمل شفرة البروتينات المميزة Gos التالية: مولد مضاد متخصص بالبروستات (PSA) وكاليكرين ws بتشري وجين معزز التعبير من ورم بشري ووحدة فرعية ؟ من أكسيداز © الصبغ الخلوي لحبيبات خيطية. وتبسّين أن 111-9 مطابق لسياق متكاثر بشكلٍ ذاتي بشري مميز مسبقا. ولم Oi أي تماتل واضح مع سياق Ball المكمّل للنسيلة F1-12
وأدت الدراسات اللاحقة إلى عزل سياق دنا مكمسّل كامل الطول ل 21-12. ويوجد هذا السياق في سياق التمييز رقم: Lain ٠١١7 يوجد سياق الحمض الأميني المتوقع المناظر في سياق التمييز رقم: NA ولتتسيل الجينات المتخصصة بالورم البروستاتي الأقل وفرة؛ أجري طرح مكتبة الدنا Jal) o عن طريق طرح مكتبة الدنا المكمّل لروم بروستاتي الموصوفة أعلاه مع مكتبة الدنا المكمسّل لبنكرياس سوي ومع الجينات الثلاث الأكثر وفرة في مكتبة الدنا المكمسل المطروحة Ge والمتخصصة بالورم البروستاتي: كاليكرين حبيّبي بشري ومولد مضاد متخصص بالبروستات (PSA) ووحدة فرعية Y من أكسيداز © صبغ خلوي لحبيبات خيطية. وبعبارةٍ أدق؛ أضيف ١ ميكروجم من كل من الكاليكرن (all البشري ومولد المضاد ١ المتخصص بالبروستات والدنا المكمّل لوحدة فرعية ؟ من أكسيداز ع الصبغ الخلوي للحبيبات الصبغية في pCDNAZL إلى الدنا الموجّه وجرى الطرح بالكيفية الموصوفة أعلاه لإيجاد مكتبة دنا مكمّل مطروحة ثانية سيطلق عليها فيما بعد " مكتبة الدنا المكمل المطروحة المتخصصة بالورم البروستاتي مع سفاة". وعزلت اثنتا وعشرون نسيلة دنا مكمصّل من مكتبة الدنا المكمل المطروحة المتخصصة في الورم البروستاتي مع سفاة. وتوجد سياقات الدنا المكم_سٌل المحددة عند الطرفين ؟” و fo للنسائل التي يطلق ede 11-17 و 11-12 و 111-1862 و 11-13 و 11-19 و 11-5 و 11-24 و 101-58 و 161-63 و 11-4 و 11-14 في سياقات التمييز أرقلم: A و 4 و ٠١ وااو "١و “او ؛او ك١١او “١٠١و 5S VA SIV ١7و الاو "7و 7و 2 و #؟ و ١؟ و 77 و 78 و YA على الترتيب. وتوجد سياقات الدنا المكمسّل المحددة عند Y. الطرف fv للنسائل التي يطلق Lele 11-12و 571-16 11-21و 1148و 1155و 11-2 و 11-6 و N1-1858 و N1-1860 و N1-1861 و 111-1864 في سياقات التمييز أرقام: 0-٠١ على الترتيب. وقد بيسنت مقارنة السياقات هذه مع تلك السياقات في بنك الجينات كما وصسف أعلاه عدم وجود Bilal واضح مع ثلاثة أنواع من جزيئات الدنا الخمس الأكثر وفرة (وهي 11-17 و 11-12 و 221-1862 التي تناظر سياقات التمييز أرقام: 4و 9و ١٠و ١١و ١ Yo و ١“ على الترتيب). ولقد تبيسّن أن أحد النوعين الأكثر وفرة المتبقيين (وهو 11-12
7< الذي يناظر سياق التمييز رقم: 7( مطابق للبروتين الرئوي البشري المميز مسبقا المقترن بخافض توتر سطحي والآخر يماتل نوع ما رنا رسول مشتق من آر.نورفيجيكوس لابيمراز (أنزيم حفز إعداة الترتيب) 7-أريل بروبيونيل-008. وتبيّن أن أربعة نسائل الدنا المكمّل السبعة عشر على الأقل وفرة المعزولة من مكتبة الدنا المككل المطروحة المتخصصة ° بالورم البروستاتي مع سفاة (وهي 11-6 و 11-55 و 11-6 و 111-1864 التي تناظر سياقات التمييز أرقام: ١ و VE و 571 £0 على الترتيب) مطابقة لسياقات مميزة مسبقاً Oat أن اتنتين منها (وهما 11-21 و 211-1860 اللتان تناظران سياقي التمييز أرقام: 7 و YA على الترتيب) تماثلان إلى حدٍ ما سياقات غير بشرية واثنثتان (هما 11-2 و 111-1861 اللتان تناظران سياقي التمييز أرقام: ve 4 على الترتيب) تماثلان إلى حدٍ ما سياقات بشرية 0 معروفة. ولم يتبيسن أي تماتل واضح مع متعددات الببتيد 11-13 و 11-19 و 11-25 و 11-24 و 1-8 و 161-63 و 11-4 و 11-14 (سياقات التمييز أرقام: 4 18-١ و 6-١و ١7-١او ١-1 و 17-77 و 4 1-7 و 27-736 و 1-748 على الترثيب). وأدت الدراسات التالية إلى عزل سياقات Gall المكمّل كاملة الطول ل 11-17و 11-2 و 101-1862 (سياقات التمييز أرقام: ١١1-٠١4 على الترتيب). وتوجد سياقات vo الأحماض الأمينية المتوقعة المناظرة في سياقات التمييز أرقام: .١١ 5-1١7 ويشار كذلك إلى 11-2 ب P5018 وفي تجربة أخرى؛ ميّزت أربع نسائل إضافية بطرح مكتبة الدنا aS) لورم بروستاتي باستخدام دنا Jala لبروستات سوي محضر من تجمع متعدد رنا حمض أدينيليك لثلاثة بروستاتات سوية (طرح بروستاتي 7). وتوجد سياقات الدنا المكمسّل المحددة لهذه 0 النسائل والتي سيطلق عليها فيا بعد 171-3064 و 11-3065 و 71-3692 و 14-3905 في سياقات التمييز أرقام :71-7 على الترتيب. وأظهرت مقارنة السياقات المحددة مع تلك السياقات في بنك الجينات أنه لا يوجد Bld واضح مع 171-3065 وأجري طرح ثان مع سفاة (سفاة طرح بروستاتي ؟) بطرح مكتبة دنا مكتّل متخصص بالورم البروستاتي مع سفاة باستخدام مكتبة دنا مكمّل مشتقة من بنكرياس سوي vo وثبلت مع 2588 و 11-17 وبروتين رثوي مقترن بخافض توتر سطحي ودنا حبيبات خيطية ve 11-12 ووحدة فرعية من أكسيداز © الصبغ الخلوي و 101-1862 وسياق متكرر بشكلٍ ذاتي و إضافية؛ سيطلق عليها فيما بعد 71-3686 و Jibs وجين ورم معزز التعبير. وعزلت أربع وتوجد سياقات الدنا المكمّل المحددة لهذه النسائل في .VI-3679 و 18-3976 و 21-0 سياقات التمييز أرقام: 776-77 على الترتيب. وأظهرت مقارنة هذه السياقات مع تلك
السياقات في بنك الجينات عدم وجود Jil واضح مع 71-3686 و 121-2330.
وأدى التحليل الإضافي لإجراءات الطرح الثلاث الموصوفة أعلاه للبروستات (الطرح البروستاتي ؟ ومكتبة الدنا المكمل المطروحة المتخصصة بالورم البروستاتي مع سفاة وسفاة الطرح البروستاتي ؟) إلى تمييز ست عشرة نسيلة إضافية يطلق عليها 16-4736 و 16-4738 و 164741 و 16-4744 و 16-4734 و 1114774 و 1114781 و 1114785 و 1114787 و
1H-4796 ١ و 11-4810 و 11-4811 و 114876 و 112-4884 و 162-4896. وتوجد سياقات الدنا المكمل المحددة لهذه التسائل في سياقات التمييز أرقام: 97-77 على الترتيب. وأظهرت مقارنة هذه السياقات مع تلك السياقات في بنك الجينات كما وصف أعلاه عدم وجود تماتل واضح مع و 16-4741 و 16-4734 و 11-4807 و 114876 و 16-4896 (سياقات التمييز أرقام: ١ 9 4 و SAY 50 و 997 على الترتيب). وأدى التحليل الإضافي للنسائل المعزولة إلى
| تحديد سياقات الدنا المكمل الممتدة ل- 16-4736 و 16-4738 و 16-4741 و 10-4744 و 1114 و 1H-4781 و 1114785 و 1114787 و 1114796 و 11-4807 و 114876 و 1K-4884 و 16-4896 الموجودة في سياقات التمييز أرقام: ١48-1149 و ١9١ و VAY على الترتيب وإلى تحديد سياقات الدنا المكم ل الجزئية الإضافية ل 11-4810 و 11-4811 الموجودين في سياقي التمييز أرقام: ١84 و ٠١90 على الترتيب.
0 وأدت دراسات إضافية باستخدام سفاة الطرح البروستاتي ؟ إلى عزل ثلاث نسائل إضافية. ولقد حددت سياقاتها كما وصف أعلاه وقورنت مع بنك الجينات الأكثر حداثة. ولقد وجد أن جميع الثلاث نسائل تتمائل مع جينات معروفة وهي بروتين غني بالسيستيئين و 2ه و KIAA0280 (سياقات التمييز أرقام: ١١7 و ٠١9 و YY على الترتيب). وأوضح التحليل الإضافي لهذه النسائل باستخدام منظومة دقيقة سينتيني (من شركة سيتتيني؛
Gln ve ألتو؛ كاليفورنيا) أن جميع الثلاث نسائل عبر عنها بشكل مفرط في معظم الأورام
Vlog vo البروستاتي كما هو الحال في معظم أنسجة البروستات السوية المختبرة BPH البروستاتية و لكن عبر عنها بشكل قليل في جميع الأنسجة السوية الأخرى. وأجري طرح إضافي عن طريق طرح مكتبة دنا مكمل لبروستات سوي باستخدام دنا مكمل مأخوذ من بنكرياس سوي (طرح بروستاتي “). وقد أدى ذلك إلى تمييز ست 1114771 تسائل إضافية يطلق عليها 16-4761 و 16-4762 و 1114766 و 1114770 و ٠ وأظهرت مقارنة هذه السياقات مع تلك السياقات (IAAT و 111-4772 (سياقات التمييز أرقام:
A في بنك الجينات عدم وجود تمائتل واضح مع 16-4761 و 111-4771 (سياقي التمييز أرقام: على الترتيب). وأدى التحليل الإضافي للنسائل المعزولة إلى تحديد سياقات دنا مكمل AY و ممتدة ل 16-4761 و 16-4762 و 111-4766 و 1114772 موجودة في سياقات التمييز أرقام: على الترتيب وإلى تحديد سياقات الدنا المكمل الجزئية الإضافية ل ١4 و 141-1440 ٠ على الترتيب. ١98 و ١97 و 1124771 الموجودتين في سياقي التميز أرقام: 110 وأدى طرح مكتبة دنا مكمل لورم بروستاتي؛ محضرة من تجمع متعدد رنا حمسض أدينيليك من ثلاثة مرضى مصابين بسرطان البروستات باستخدام مكتبة دنا مكمل من 10-4309 بنكرياس سوي (طرح بروستاتي ) إلى تمييز ثمان نسائل يطلق عليها 10-4297 و و 10-4273 و 10-4288 و 137-4283 و 10-4304 و 190-4296 و 10-4280 (سياقات التميبيز | ٠ وقورنت هذه السياقات مع تلك السياقات في بنك الجينات كما وصسف ٠ )٠١7-44 أرقام: واضح مع السياقين 10-3 و 10-4304 (سياقي التمييز Bla أعلاه؛ وتبين عدم وجود على الترتيب). وأدى التحليل الإضافي للنسائل المعزولة إلى تحديد vet و ٠١" أرقام: 10-4304 و 19-4288 و 10-4283 و 1D.1-4278 سياقات الدنا المكمل الممتدة ل 11-9 و و 10-4296 و 10-4280 الموجودة في سياقات التمييز أرقام: 016-7056 ؟ على الترتيب. ٠ والطرح ١ وضخمت نسائل الدنا المكمل المعزولة في الطرح البروستاتي إلى مستعمرة بتفاعل بلمرة انزيمية مسلسل وحددت مستويات dled البروستاتي ؟ الموصوفين التعبير في رنا الرسول لهذه النسائل في ورم بروستاتي وبروستات سوي وفي أنسجة سوية أخرى متنوعة باستخدام تقنية المنظومة الدقيقة (من شركة سينتيني؛ بالو ألتوء كاليفورنيا). وبعبارة موجزة؛ وضعت منتجات التضخيم بتفاعل البلمرة الانزيمية المتسلسل في صورة نقاط Yo vi على شرائح في نموذج منظومي»؛ بحيث يشغل كل منتج موقعا واحدا في المنظومة. واستخلص رنا الرسول من العينة النسيجية المراد اختبارها واستتسخ بشكل عكسي وأنتجت مسابير دنا مكمل موسومة بمادة مفلورة. وسبرت المنظومات الدقيقة بمسابير الدنا المكمل الموسومة ومسحت الشرائح وقيست شدة التفلور. وترتبط هذه الشدة مع شدة التهجين. وتبين أنه قد بشكل مفرط في الورم (P510S عبر عن نسيلتين جديدتين (يطلق عليهما 25098 و © البروستاتي والبروستات السوي وعبر عنهما بمستويات منخفضة في كافة الأنسجة السوية الأخرى (الكبد والبنكرياس والجلد ونخاع العظم والدماغ والثدي والغدة الكظرية والمثانة والخصيتان والغدة اللعابية والمعي الغليظ والكلية والمبيض والرئة والحبل الشوكي والعضلة في سياقي P5108 الهيكلية والقولون). وتوجد سياقات الدنا المكمل المحددة ل 5 و على الترتيب. وأظهرت مقارنة هذه السياقات مع تلك السياقات 7١8 و YY التمييز أرقام: > المميز مسبقا. ESTs الموجودة في بنك الجينات كما وصف أعلاه بعض التمائل مع وبالإضافة إلى ذلك وجيت الدراسات إلى عزل سياق الدنا المكمل كامل الطول ل ويوجد هذا السياق في سياق التمييز رقم: 7 بحيث يزود سياق الحمض الأميني .5
YA المتوقع المناظر في سياق التمييز رقم: (¥) Jud vo تحديد نوعية نسيج متعددات الببتيد لورم بروستاتي فحص باستخدام بوادىء متخصصة بجين مستويات تعبير رنا الرسول لمتعددات الببتيد 11-12 و 11-17 (الذي يشار إليها — 25028) و HI-1 النموذجية من ورم البرستات ض 21-6 و 111-1862 و (P5048 و 21-12 (الذي يشار إليه كذلك بس (P501S (الذي يشار إليه كذلك ب (الذي يشار إليه كذلك ب 05035) في مجموعة متنوعة من أنسجة سوية وورمية باستخدام | ٠ تفاعل بلمرة انزيمية مسلسل بانزيم نسخ عكسي. وبعبارة موجزة؛ استخلص الرنا الكلي من مجموعة متنوعة من أنسجة سوية وورمية باستخدام كاشف ترايزول كما وصف أعلاه. وأجرى تخليق الجديلة الأولى بامستخدام ميكروجرام من الرنا الكلي مع انزيم نسخ عكسي من نوع سوبرسكريبت (7) (من 7-١ شركة بي. آر إل لايف تكنولوجيز) عند 47 د.م لمدة ساعة واحدة. ثم ضخم الدنا المكمل ve vy
بتفاعل بلمرة انزيمية مسلسل باستخدام بوادىء متخصصة بجين. وللتأكد من طبيعة تفاعل البلمرة الانزيمية المسلسل بانزيم نسخ عكسي شبه الكمية؛ استخدم بيتا-أكتين كضابط داخلي لكل الأنسجة المختبرة. حيث حضرت أولا محاليل مخففة متسلسلة من الجدائل الأولى للدنا المكمل وأجريت اختبارات بتفاعل بلمرة انزيمية مسلسل بانزيم نسخ عكسي باستخدام ٠ - بوادىء متخصصة ببيتا-أكتين ٠ ثم اختير مقدار التخفيف الذي يجعل التضخيم الخطي المدى لمرصاف بيتا-أكتين ممكنا والذي كان شديد التأثر بما يكفي لعكس الفروق في أعداد النسخ الابتدائية. وباستخدام هذه الظروف حددت مستويات بيتا-أكتين لكل Jeli نسخ عكسي من كل نسيج. وقللت ملوثات الدنا بالمعالجة بدناز وبضمان نتيجة سلبية لتفاعل البلمرة الانزيمية المسلسل عند استخدام الجديلة الأولى من الدنا المكمل التي حضرت بدون إضافة اتزيم التسخ
٠ العكسي. وفحصت مستويات تعبير عن رنا الرسول في أربعة أنواع مختلفة من النسيج الورمي (ورم البروستات مأخوذ من مريضين وورم الثدي من “” مرضى وورم القولون وورم الرثة) و ١١ نسيجا سويا مختلفا بما في ذلك البروستات والقولون والكلية والكبد والرة والمبيض والبنكرياس والعضلة الهيكلية والجلد والمعدة والخصيتين ونخاع العظم والدماغ. ولقد وجد أنه ١ عبر عن 21-16 عند مستويات عالية في نسيج ورم البروستات وورم القولون والبروستات السوي وعند مستويات منخفضة في الكبد السوي والجلد السوي والخصيتين السويتين aly يمكن الكشف عن التعبير في الأنسجة الأخرى المختبرة. ووجد بأنه عبر عن 111-1 عند مستويات عالية في ورم البروستات وورم الرئة وورم الثدي والبروستات السوي والقولون السسوي والدماغ السوي وعند مستويات أقل بكثير في الأنسجة السوية التالية والبنكرياس والعضلة © - الهيكلية والجلد والأمعاء الدقيقة ونخاع العظم ولم يكشف die في الأنسجة الأخرى المختبرة. وظهر أنه عبر عن 11-17 (P5028) و 11-12 (05015) بشكل مفرط بصفة خاصسة في البروستات وعبر عن كلا الجينين عند مستويات عالية في ورم البروستات والبروستات السوي لكن عبر عنه عند مستويات منخفضة إلى مستويات لا يمكن الكشف عنها في كل الأنسجة الأخرى المختبرة. ووجد بأنه عبر عن 101-1862 (25038) بشكل مفرط في 96260 ve .من أورام البروستات ويمكن الكشف عنه في القولون والكلية السويتين. وهكذا تدل نتائج تفاعل
YA
N1-1862 و (P5028) 11-17 و HI-1 البلمرة الانزيمية المسلسل بانزيم نسخ عكسي أن 71-16 و متخصصة بالبروستات أو يعبر عنها عند مستويات مرتفعة (P5018) 11-12 و )05035( بشكل ملحوظ في البروستات. وكذلك بينت الدراسات الأخرى باستخدام تفاعل بلمرة انزيمية مسلسل بانزيم نسخ م عكسي أنه عبر عن 21-12 (05045) بشكل مفرط في 96760 من أورام البروستات وأنه يمكن الكشف عنه في الكلية الطبيعية لكن لا يمكن الكشف عنه في جميع الأنسجة الأخرى المختبرة وبالمتل تبين أنه عبر عن 81-2330 بشكل مفرط في 9650 من أورام البروستات وأنه يمكن الكشف عنه في الكلية والكبد السويتين ولا يمكن الكشف عنه في جميع الأنسجة الأخرى المختبرة. ووجد بأنه عبر عن 11-3064 بشكل مفرط في 9660 من أورام البروستات وعبر عنه كذلك في أورام الثدي والقولون ولم يمكن الكشف عنه في الأنسجة السوية. ٠ وبين تمييز 81-2330 و 171-3064 و 10-4279 بتفاعل البلمرة الانزيمية المسلسل بانزيم نسخ عكسي أنه عبر عن هذه الثلاثة مولدات مضادات بشسكل مفرط في أورام البروستات و/أو أورام البروستات. وبين تحليل نورذرن باستخدام أربعة أورام بروستاتية وعينتين من البروستات ty والأنسجة السوية التالية: قولون سوي وكلية وكبد BPH الطبيعي وعينتين من بروستات 1 وبنكرياس وعضلة هيكلية ودماغ ومعدة وخصيتين وأمعاء دقيقة ونخاع عظم أنه عبر عن بشكل مفرط في ورم البروستات والبروستات السوي بينما لم يمكن الكششف (P501S) 11-2 في ورمين للبروستات (P5028) 11-17 عنه في الأنسجة السوية الأخزى المختبرة. وكشف عن 111-1862 في الأنسجة السوية الأخرى المختبرة. ووجد بأنه عبر عن die ولم يكشف بشكل مفرط في ثلاثة أورام للبروستات وأنه عبر عنه في البروستات السوي (PSO3S) | © والقولون السوي والكلية السوية لكن لم يعبر عنه في الأنسجة الأخرى المختبرة. ووجد بأنه عبر عن 21-12 (05045) بشكل مفرط في ورمين للبروستات ولم يمكن الكشف عنه في الأنسجة الأخرى المختبرة. واستخدمت تقنية المنظومة الدقيقة الموصوفة أعلاه لتحديد مستويات التعبير لمولدات مضادات نموذجية موصوفة في هذا البيان في ورم البروستات وورم الثدي والأنسجة السوية ve ٠+4 vA التالية: البروستات والكبد والبنكرياس والجلد ونخاع العظم والدماغ والثدي والغدة الكظرية والحبل الشوكي Bl والمثانة والخصيتين والغدة اللعابية والأمعاء الغليظة والكلية والمبيض بشكل مفرط في البروستات (PSO1S) 11-12 والعضلة الهيكلية والقولون. ووجد بأنه عبر عن السوي وورم البروستات مع الكشف عن بعض التعبير في العضلة الهيكلية السوية. ووجد بأنه بشكل مفرط في ورم البروستات وكان التعبير أقل (PS04S) 21-12 عبر عن كل من 11-12 و ٠ 111-1862 أو لم يمكن الكشف عنه في جميع الأنسجة الأخرى المختبرة. ووجد بأنه عبر عن بشكل مفرط في ورم البروستات والبروستات السوي وعند مستويات منخفضة في (P3038) الأمعاء الغليظة والقولون السوي أو لم يمكن الكشف عنه في جميع الأنسجة السوية الأخرى المختبرة. ووجد بأنه عبر عن 81-2330 بشكل مفرط في ورم البروستات والبروستات وعبر عنه عند مستويات منخفضة في جميع الأنسجة الأخرى المختبرة. ووجد بأنه sd عبر عن 10-4279 بشكل مفرط في ورم البروستات والبروستات السوي وعبر عنه عند مستويات منخفضة في الحبل الشوكي السوي ولم يمكن الكشف عنه في جميع الأنسجة الأخرى المختبرة. وأظهر تحليل منظومة دقيقة إضافي منصب بصفة خاصة على مدى التعبير عن في ورم تدي تعبيرا مفرطا بشكل متوسط ليس فقط في ورم )٠١١ (سياق التمييز رقم: 25015 ١٠ مع تعبير يمكن إهماله إلى تعبير منخفض (TVX) التدي لكن كذلك في ورم الثدي الانتشاري في الأنسجة السوية. وتوحي هذه البيانات أن 5 عبر عنه بشكل مفرط في أورام قدي مختلفة بالإضافة إلى أورام البروستات. (رقع تمييز معبر عنها) وصفها فازماتزيس ESTs YY وفحصت مستويات التعبير
SF ومن معه (في مجلة محاضر أعمال أكاديمية العلوم الوطنية الأمريكية؛ مجلد 00 ص: 1 في أنسجة ورمية وسوية مختلفة بتقنية منظومة دقيقة كما وصف أعلاه. ووجد )١9946 4 عبر عنهما بشكل مفرط في (PLOOIC أن نسيلتين من هذه النسائل (يشار إليها ب 210006 و ورم بروستات وبروستات سوي وعبر عنها عند مستويات منخفضة إلى مستويات لا يمكن الكشف عنها في جميع الأنسجة السوية الأخرى المختبرة (الوتين التوثة؛ خلايا أحادية النواة ظهارية؛ الحبل الشوكي؛ الغدة الكظرية؛ WIA ومنشطة/ ASL (PBMC) .من دم محيطي To
Ar الرة:؛ الخلايا call الأنسجة الجنينية؛ الجلد؛ الغدة اللعابية؛ الأمعاء الغليظة؛ نخاع العظم؛ المتفرعة؛ المعدة؛ العقد الليمفية؛ الدماغ؛ القلب؛ الأمعاء الدقيقة؛ العضلة الملساءء القولون في سياقات التمييز 010016 5 P1000C والكلية). وتوجد سياقات الدنا المكمل المحددة ل مع رنا Baill و 77؛ على الترتيب. ووجد أن سياق 010010 يظهر بعض FAL أرقام: P1000C الرسول البشري المعزول مسبقا لبروتين 7. ولم يوجد أي تمائل ملحوظ لسياق 0 وفحص تعبير متعدد الببتيد الذي يحمل شفرته سياق الدنا المكمل كامل الطول ل بتحليل كيميائي نسيجي (Vo A سياق التمييز رقم: (P3048 (والذي يشار إليه كذلك ب 21-2 مناعي. وولدت أجسام مضادة متعددة النسيلة ضد 05048 مأخوذ من أرنب ضد بروتين كامل الطول بتقنيات قياسية. وأجري عزل وتمييز للأجسام المضادة متعددة النسيلة 5 بتقنيات معروفة جيدا في التقنية. وبين التحليل الكيميائي النسيجي المناعي أن متعدد BY ٠ (0 في جميع عينات سرطانية البروستات المختبرة (والتي عددها Ade ببتيد 05045 عبر ولم يظهر أن الجسم المضاد متعدد النسيلة ضد 05045 المأخوذ من أرنب يوسم خلايا بروستات حميدة بنفس الصبغ الحبيبي السيتوبلازمي لكن بصبغ نووي فاتح. وبين تحليل الأنسجة السوية أن متعدد الببتيد المحمول الشفرة عبر عنه في بعض الأنسجة البشرية السوية ووجد الصبغ السيتوبلازمي الإيجابي باستخدام الجسم المضاد متعدد النسيلة ضسد ٠ وليس كلها Vo المأخوذ من أرنب في الأنسجة البشرية السوية التالية: الكلية والكبد والدماغ والقولون 5 والملتهمات الكبيرة المقترنة بالرئة بينما أعطى القلب ونخاع العظم نتيجة سلبية. وتدل هذه البيانات أن متعدد الببتيد 85045 موجود في أنسجة سرطان بروستاتي وأنه يوجد اختلافات نوعية وكمية في الصبغ بين أنسجة مفرطة النمو بروستاتية حميدة وأنسجة مما يوحى أنه قد يكشف عن متعدد الببتيد هذا بشسكل انتقائي في أورام SEI سرطان © بروستاتية ومن ثم فهو مفيد في تشخيص سرطان البروستات.
Yo
Vlo¢
ٍْ ا المثال 0 Joe وتمييز متعددات ببتيد ورم بروستاتي عن طريق طرح أساسه تفاعل بلمرة انزيمية مسلسل اشتريت مكتبة طرح دنا مكمل تحتوي على دنا مكمل من بروستات سوي مطووح ٠ بجزيئات دنا مكمل من عشرة أنسجة سوية أخرى (الدماغ والقلب والكلية والكبد والرة والمبيض والسخد والعضلة الهيكلية والطحال والغدة التيموسية) ثم خاضع لدورة أولى من التضخيم بتفاعل بلمرة انزيمية مسلسل من شركة كلونتك ٠ وعرضت هذه المكتبسة إلى دورة ثانية من التضخيم بتفاعل بلمرة انزيمية مسلسل باتباع طريقة الصانع. وتسلت أجزاء الدنا المكمل الناتجة جزئيا إلى الناقل - 7 17م -بلو (من شركة نوفاجن؛ مدينة ماديسونء ولاية ٠ ويسكونسن) وحؤولت إلى اشريكية قولونية ”1-1180 بلو (من شركة ستراتاجين). وعزل الدنا من نسائل مستقلة وتتبع سياقه باستخدام متتبع سياق ذاتي نموذج PYF إيه من شركة بركين إلمر/أبلايد بييوسستمز دفجن. وتتبع سياق 09 نسيلة موجبة. وأظهرت مقارنة سياقات الدنا لهذه النسائل مع تلك السياقات في بنك الجينات كما وصف أعلاه عدم وجود أي JL ملحوظ ل Yo نسيلة من هذه النسائل. التي سيشار إليها فيما يلي ب 05و 08و 09و 018و 720و 030و 234و 236و 8 و 039 و 242 و 049 و 250 و 253 و 255 و 260 و 264و 265و 273و 1275و 1276و 9 و 084. وتوجد سياقات Gall المكمل المحددة لهذه النسائل في سياقات التمييز أرقام: 0-61 و الهلا © و 19-51 على الترتيب. ووجد بأن 3P29 47ط و تومو P80 5 دوم (سياقات التمييز أرقام: 7 و oF و 187-66 على الترتيب) تظهر درجة معينة من lll © مع سياقات الدنا المميزة مسبقا. وعلى حد ما يعرفه (ose inal لم يتبن مسبقا وجود هذه السياقات في البروستات. وأدت دراسات أخرى باستخدام الطريقة التي أساسها تفاعل البلمرة الانزيمية المسلسل الموصوفة أعلاه إلى عزل أكثر من ١8١ نسيلة إضافية من بينها وجد أن YY نسيلة لا تظير أي Sls ملحوظ مع السياقات المعروفة. وتوجد سياقات الدنا المكمل المحددة لهذه النسائل في سياقات التمييز أرقام: 369-؟1 ر SITY YY لاو Eo و لماعلاو
AY
و ١71-١74 (سياقات التمييز أرقام: As YY ووجد بأن Ne و ١-195 و ٠7 تظهر (109 5100 و١24 و١٠57 SET 5-174؛او HITE FY IF VTA المميزة مسبقا.ء ووجد أن لعشر نسائل إضافية (سياقات التمييز ESTs مع سياقات Jill (any
Ala) درجة معينة من التمائل مع الجينات المعروفة. ووجد بأن نسيلة )١7 ١-17 أرقام: يشار إليها ب 0703؛ تحتوي على خمسة متغيرات ارتباطية. ويوجد سياق الدنا المحدد ٠ ١78 و AVY و 0813 و 0814 في سياقات التمييز أرقام: DEL للمتغيرات التي أشير إليها ب وتوجد سياقات الأحماض الأمينية المتوقعة المناظرة في سياقات التمييز ci A على ١777 و على الترتيب. ويوجد سياق الدنا المكمل المحدد لصورة ١78 SIVA و ١ VY أرقام: وتوجد سياقات الدنا للمتغيرات YYO ارتباطية موسعة من 2703 في سياق التمييز رقم: على ١74 و١١77 الارتباطية التي يشار إليها ب 022 و 086 في سياقي التمييز أرقام: > ٠ الترتيب. وحددت مستويات التعبير عن رنا الرسول للنسائل النموذجية في أنسجة الورم (وهمي البروستات (العدد- ؟) والثدي (العددح ") والقولون والرئة) والأنسجة السوية (البروستات والعضلة الهيكلية (Y والمبيض (العدد< (Y (العددح 0( والقولون والكلية والكبد والرئة (العدد< والجلد والمعدة والأمعاء الغليظة والدماغ) وخلايا أحادية النواة من دم محيطي منشطة وغير ve منشطة بتفاعل بلمرة انزيمية مسلسل بانزيم نسخ عكسي كما وصف أعلاه. وفحص التعبير في عينة واحدة لكل نوع من النسيج ما لم ينص على خلاف ذلك. بشكل كبير في البروستات السوي وورم البروستات بالمقارنة PO ووجد أنه يعبر عن مع كل الأنسجة الطبيعية المختبرة باستثناء القولون السوي الذي أظهر تعبيرا مماثلا. ووجد أنه وهو جزء من جين 07037 بشكل كبير في البروستات السوي وورم P20 يعبر عن ٠ ولوحظت زيادة VY البروستات بالمقارنة مع كل الأنسجة السوية المختبرة التي يبلغ عددها مع AEG معتدلة في التعبير عن 020 في ورم الثدي (العدد< ؟) وورم القولون وورم الرئة كل الأنسجة السوية باستثناء رئة واحدة من الرئتين. ووجد أن زيادة التعبير عن 718 في البروستات السوي وورم البروستات وورم الثدي بالمقارنة مع الأنسجة الأخرى السوية باستثناء الرثة والمعدة. ولوحظت زيادة معتدلة في التعبير عن 05 في البروستات السوي ve
AY
بالمقارنة مع أغلب الأنسجة السوية الأخرى. بيد أنه لوحظ بعض التعبير المرتفع في الرثشة في أورام PS السوية وخلايا أحادية النواة من دم محيطي. ولحظ كذلك تعبير مرتفقع عن البروستات (ورمين من خمسة أورام) وورم الثدي وعينة ورم رئة واحدة. ولحظت مستويات في البروستات السوي وورم البروستات بالمقارنة مع ستة أنسجة من بين P30 تعبير مماثلة ل ولوحظ تزايد في التعبير في أورام OY الأنسجة السوية المختبرة الأخرى التي يبلغ عددها ٠ الثدي وعينة ورم رئة واحدة وعينة ورم قولون واحدة وكذلك في الخلايا أحادية النواة من دم محيطي. ووجد بأنه عبر عن 029 بشكل مفرط في جميع أورام البروستات )© من #) وكل البروستات السوي )0 من 0( بالمقارنة مع أغلبية الأنسجة السوية . بيد أنه لوحظ تعبير
P30 جوهري ل 229 في القولون السوي والرئة السوية (7 من ؟). ووجد بأنه عبر عن بشكل مفرط في جميع أورام البروستات )© من 0( والبروستات السوي (© من 0( بالمقارزنة ض ٠ مع كل الأنسجة السوية الأخرى المختبرة. ولوحظ كذلك تعبير متزايد في ورم القولون. 10-48 يلي ب Lash نسيلة إضافية سيسار إليها VY وتؤدي الدراسات الأخرى إلى عزل للطة ور 5912 قو. 58-g3 58-d9 58-d4 58-b6 و 10-10 و 11-68 و 7-66 و كنءة و وتوجد سياقات الدنا المحددة ل 10-48 و 1010 و 11-8 و 85-44 و 8-49 و 811و 902و و77١ و77٠١ و١١ في سياقات التمييز أرقام: ادكو كرتو قاو 717و 9-8 ٠ على الترتيب. وتوجد سياقات الدنا المحددة الأمامية والعكسية ل 7-86 و 8-55 و 8-06 و YYY 117و 717 114و ارما رحلا 11١ 7٠١ في سياقات التمييز أرقام: 8-3 على الترتيب. ولم تظهر مقارنة هذه السياقات مع تلك في بنك الجينات أي تمائل ملحوظا مع معزولة ESTs السياق 9-2. ووجد أن النسائل 10-8 و 11-88 و 8-5011 تظهر بعض التماتل مع و 9-02 بعض 8-g3 مسبقا بينما تظهر التسائل 10810 و 8-05 و 8-66 و 8-44 و 8-49 و vo مع الجينين Wai 8-03 التمائل مع جينات مميزة مسبقا ويظهر التمييز الإضافي ل 7-06 و على الترتيب. PSA و PAP المعروفين وحددت مستويات تعبير رنا الرسول لهذه النسائل باستخدام تقنية متظومة دقيقة كما 59-F3 وطق و 58D4 58B6 وصف أعلاه. ووجد أن النسائل 7-66 و 8-63 و 8-85 و و 10-84 و 11-09 و 112 عبر عنها بشسكل مفرط في ورم 10-A2 و 9-H3 9120و 0+٠ ١+4
At بروستات وبروستات سوي بينما كان التعبير في الأنسجة الأخرى منخفضا أو لا يمكن كشفه. ولوحظ التعبير المتزايد ل 8-211 في ورم البروستات والبروستات السوي والمثانة والعضلة الهيكلية والقولون. ولوحظ التعبير المتزايد ل 10-310 في ورم البروستات والبروستات 9-31 السوي والمثانة والرئة والقولون والدماغ والأمعاء الغليظة. ولوحظ التعبير المتزايد ل في ورم البروستات وورم الثدي والبروستات السوي والغدة اللعابية والأمعاء الغليظة والجلد؛ ٠ بينما لوحظ تعبير متزايد ل 11-08 في ورم البروستات والبروستات السوي والأمعاء الغليظة. كما POR] ووجد أن جزء دنا مكمل إضافي مشتق من طرح بروستات سوي وصف أعلاه بأنه متخصص بالبروستات عن طريق كل من تقنية المنظومة الدقيقة و ويزود سياق الدنا المكمل المحدد لهذه النسيلة (التي أشير إليها ب 9-811) في RT-PCR وأظهرت مقارنة هذا السياق مع تلك السياقات الموجودة في قواعد YY سياق التمييز رقم: ٠
HOXBI3 البيانات العامة تطابقا بنسبة 9699 مع الجين المعروف و 8-157. وتوجد سياقات الدنا 8-C6 ووجيت دراسات أخرى إلى عزل النسيلتين على الترتيب. ووجد أن YYA و 77١ المكمل المحددة لهذه النسائل في سياقي التمييز أرقام: معزولة مسبقا. ESTs هذه السياقات تظهر بعض التمائل مع والتهجين للحصول على سياقات دنا مكمل أطول PCR واستخدمت منهجيات أساسها Vo مما أدى إلى إنتاج ثلاثة أجزاء دنا مكمل (P703P (التي أشير إليها كذلك ب P20 للنسيلة للجين بشكل متزايد. وتحتوي هذه الأجزاء؛ التي أشير إليها ب To إضافية تمد الطرف (سياقات التمييز أرقام: 3736 ومو .مم بحيث P703PX-23 و P703P6.26 و P703PDES 74و TYY تزود سياقات الأحماض الأمينية المناظرة المتوقعة في سياقات التمييز أرقام:
J aS على الترتيب) على سياق © إضافي. واستخلص 070300285 بغربلة مكتبة دنا 7١ أ من مخلوط من P703P6.26 ؟) باستخدام جزء من ©2703 كمسبار. واستخلص 7-١1 (رقم من مكتبة دنا مكمل (رقم PTO3PX-23 ثلاثة جزيئات دنا مكمل لورم بروستات واستخلص وعلاوة على ذلك تشمل السياقات الإضافية سيرين البروتياز الناضج المفسترض .)1/- 48 بأكمله مع جزء من سياق الإشارة المفترض. وأدت دراسات أخرى باستخدام مكتبة طرح لتجمع ورم بروستاتي مطروح مقابل تجمع الأنسجة السوية (يشار إليه بطرح PCR wld re
Ylo¢
Ao نسائل منها بأي تماتل ملحوظ مع سياقات ١7 نسيلة إضافية لا يسهم VY إلى عزل (JPPCR و P711P) بنك الجينات المعروفة. وتوجد سياقات الدنا المكمل المحددة لهذه السسبع نسائل في سياقات التمييز (p768P و ©2710 و P775P و P774P الجديدة و YY والنسيلة 8 على الترتيب. وأظهرت الست نسائل المتبقية (سياقات Yio و ١“ 1-707 أرقام: مع جينات معروفة. وعن BLN م التمييز أرقام :© و ١0-77؟©) بأنها تسهم في بعض أكبر بثلاقة Lda jie طريق تحليل المنظومة الدقيقة أظهرت كل النسائل الثلاثة عشر تعبيرآً والبروستات BPH أضعاف أو أكثر في أنسجة البروستات بما في ذلك أورام البروستات و
P712P و P711P السوي بالمقارنة مع الأنسجة السوية غير البروستاتية. وأظهرت التنسائل
BPH في معظم أورام البروستات وأنسجة Un jie الجديدة و 07687 تعبيراً YY والنسيلة عددها يبلغ 74) وفي معظم أنسجة البروستات السوية (التي عددها يبلغ ؛) لكن (A) المختبرة - ٠ أظهرت مستويات تعبير خلفية إلى منخفضة في كل الأنسجة السوية. وأظهرت النسائل 7748م و ©2775 و 27108 تعبيراً منخفضاً بشكلٍ نسبي وتعبيراً في أورام بروستات قليلة وعينات مع تعبير سلبي إلى منخفض في البروستات السوي. 2 وحصل على الدنا المكمّل كامل الطول ل 27117 عن طريق استخدام السياق الجزئي لسياق التمييز رقم: 07 لغربلة مكتبة دنا مكمّل من بروستات. وبعبارة أدق؛ ١ حضستّرت مكتبة دنا مكمسّل بروستاتية منسسئلة بشكلٍ اتجاهي باستخدام التقنيات القياسية. واستخدمت مرشحات غشائية LB/Amp وطليت مليون مستعمرة من هذه المكتبة على ألواح نيلونية لرقع هذه المستعمرات ومسخت جزيئات الدنا المكمل التي التقطت باستخدام هذه تقاطعياً مع المرشحات عن طريق الإشعاع فوق البنفسجي. ووسم ayy المرشحات وربطت بالإشعاع واستخدم للتهجين باستخدام THY جزء الدنا المكمّل 27117 ذو سياق التمييز رقم: © وتتبع سياقها Jal هذه المرشحات. واختيرت نسائل موجبة وحضارت جزيئات الدنا باستخدام متتبع سياق أوتوماتي من بركين إلمر/أبلايد بيوسيستمز. ويوجد السياق المحدد كامل بحيث يزود سياق الحمض الأميني المتوقع YAY الطول ل 27119 في سياق التمييز رقم:
TAY المناظر في سياق التمييز رقم:
ال وباستخدام المنهجيات التي أساسها PCR والتهجين اشتقت معلومات إضافية عن سياق Gl) المكمل للنسيلتين الموصوفتين أعلاه؛ 11-9 و <9-F3 سيشار إليهما فيما يلي ب 7078م و ©2714 على الترتيب (سياقي التمييز أرقام (FYE YTV وبعد المقارنة ببننك الجينات SY حداثة وجد أن 27078 عبارة عن متغير ارتباطي للجين المعروف Hox-B13 وعلى ٠ العكس تماماً لم يوجد أي Sil ملحوظ مع 27148.
ووجد أن النسائل 8-33 و P89 و 298 و 2130 و 2201 (كما وصف في طلب البراءة
الأمريكية رقم 30/070557 المودع في (VIIA ld A موجودة في سياق متجاور
واحد يشار إليه ب ©2705 (سياق التمييز رقم: 05 بحيث يوجد سياق الحمض الأميني
المتوقع في سياق التمييز رقم: (YY الذي حدد ail متغير ارتباطي للجين المعروف ّ NKX3.1 vs (£) Jad تخليق متعددات ببتيد
يمكن تخليق متعددات الببتيد باستخدام جهاز تخليق ببتيد من طراز £7 إيهمن
شركة بيركن إلمر/ابلايد بيوسستمز باستخدام كيمياء FMOC بالتتشيط — HPTU
٠ (سادس فلورو فسفات 0-بنزو ثالث INN N= sof <”-رابع مثيل يورانيوم). ويمكن أن يرتبط سياق جلي -سيس-جلي بالطرف الأميني للببتيد لإيجاد طريقة اقتران؛ تتمثل في ارتباط بسطح مثبت؛ أو وسم الببتيد ٠ وبالإمكان فصم الببتيدات عن الحامل الصلب باستخدام مزيج
الفصم التالي: حمض ثالث فلوروخليك وأثان تاني يول وثيوآأنيزول وماء وفنول (بنسبة
SABA FARE وبعد Saal pall ساعتين؛ قد تترسب الببتيدات في مثيل-ثث-بوتيل-أثير
Ys بارد. من ثم قد تذاب حبيبات الببتيد في ماء يحتوي على 960,١ من حمض ثالث فلوروخليك
(TFA) وتجفد قبل تنقيتها بالاستشراب بسائل عالي الأداء معكوس الطور على عمود سي
. وقد يستخدم محلول من خلونتريل (يحتوي على 96001 من (TFA يتدرج تركيزه خطياً
من Ha 9676 في ماء (يحتوي على 960.1 من (TFA لتصويل الببتيدات. وبعد تجفيد
الأجزاء النقية؛ يمكن تمييز الببتيدات باستخدام مطياف الكتلة بانتشار الإلكترونات أو بأنواع
vo أخرى من مطياف الكتلة وبتحليل الأحماض الأمينية.
AY
( 2 ) المثال عزل وتمييز متعددات ببتيد ورم بروستاتي بشكلٍ إضافي
PCR عن طريق طرح أساسه طرحت مكتبة دنا مكمسّل متولدة من رنا رسول من ورم بروستاتي أولي كما وصسف
PCR من بروستات سوي. وأجري الطصرح باستخدام طريقة أساسيها Jala أعلاه بدنا - ٠ ثنائي الجديلة J Sa وفي هذه الطريقة هضم دنا ٠ (كلونتيك) عدلت لتوليد أجزاء أكبر على حدة بخمسة انزيمات حصر تميز ستة مواقع حصر نوويتيدية US اختباري وموجته
Tor وأدّى الهضم إلى متوسط حجم للدنا المكمّل يبلغ (Stl للد 11ه5؛ <Mscl 11( زوج قاعدة بدلا من متوسط الحجم الذي يبلغ Vo زوج قاعدة الناتج من هضم باستخدام Rsal ٠ - وفقآ لطريقة كلونتيك. وهذا التعديل لم يؤثر على فعالية الطرح. وكونت مجموعتان اختباريتان باستخدام مهايئات مختلفة وبقيت المكتبة الموجهة بدون مهايئات). ثم هجنت المكتبات الاختيارية والموجهة باستخدام كمية A alld من الدنا المكمل الموجّّه. وفي خطوة التهجين الأولى هجنت المكتبات الموجهة بشكلٍ منفصل باستخدام كل من مجموعتي الدنا Jalal الاختباري وهذا 631 إلى مجموعات من )1( جزيئات دنا مكمل Jaa اختباري غير مهجنة؛ (ب) جزيئات دنا مكمل اختباري مهجنة إلى جزيثات دنا ve اختباري أخرى»؛ (ج) جزيئات دنا مكمل اختباري مهجنة إلى جزيئات دنا مكمسّل موجته و (د) جزيئات دنا مكمل موجته غير مهجنة. ثم دمج تفاعلا التهجين المنفصلان وأعيد تهجينهما في وجود دنا مكمّل موجه غير ممسوخ إضافي. وبعد التهجين الثاني هذاء وبالإضافة إلى المجموعات من (أ) إلى (د)؛ ولدت مجموعة خامسة (ه) حيث هجسن الدنا المكمل > الاختباري مع مهايئ واحد مهجن إلى دنا Jala اختباري مع مهايئ ثان. ووفقا لذلك أدت خطوة التهجين الثانية إلى زيادة السياقات المعبر عنها تفاضليآً التي يمكن استخدامها كمراصيف لتضخيم PCR باستخدام بوادىء متخصصة بمهايئات. ثم ملأت الأطراف وأجري تضخيم PCR باستخدام بوادىء متخصصة بمهائيات. ولم يضخم Lal إلا المجموعة (ه) التي تحتوي على دنا Ja اختباري لم يهجن إلى الدنا
AA
المكمّل الموجته. ثم أجريت خطوة تضخيم 208 تانية لتقليل السياقات الخلفية والسياقات الأخرى المزودة المعبر عنها تفاضليا. جزئيات الدنا المكمسل المعبر عنها PCR وتجعل تقنية الطرح هذه التي أساسها عنها بشكلٍ مفرط في أنسجة ورم Te تفاضلياً عيارية بحيث لا يمكن استعادة إلا نسخ نادرة البروستات وسيصعب استعادة هذه النسخ بطرق طرح تقليدية. ٠ وبالإضافة إلى الجينات المعروف بأنه عبر عنها بشكلٍ مفرط في ورم بروستاتي نسيلة أخرى. وتوجد سياقات جزيئات الدنا المكمّل الجزئية هذه في سياقات VY ميتزت ملحوظ مع سياقات قاعدة BLS ولم تظهر معظم هذه النسائل أي Yoo إلى YA التمييز أرقام: لبروتين يحتوي على فالوزين Silas ؛؟7١ (سياق التمييز رقم: JPTPN البيانات ما عدا23 خنزير)؛ 17101030 (سياق التمييز رقم: ؛ *؟؛ مماتل لرنا رسول من جرذ لوحدة فرعية ٠ لأيزوسترات ديهيدروجيناز معتمد Ble ؟؛ EY بروتيازومية)؛ 177773453 (سياق التمييز رقم: من عصارة خلوية لنورفيجكس من جرذ)؛ 10101146 (سياق التمييز رقم: 4 ؛ ؟؛ NADP على لسياق دنا نسيلة فرعية بشرية 118-4-44)؛ 10106 (سياق التمييز رقسم: 7669؟؛ مماتل Silas لسلسة-اً خفيفة دينين من جالوس جالوس)؛ 10806 (سياق التمييز رقم: 748؛ ممائل لنسيلة بشري)؛ 15875 (سياق التمييز رقم: 489؟؛ مماتل لسياق الدنا من النسيلة BAC من 8601604 - البشري). Alu البشرية)؛ و 10859 (سياق التمييز رقم: 1949؟؛ مماتل لسياق HB 305 الفرعية تتكون من تجمع ورم PCR وأدت دراسات إضافية باستخدام مكتبة طرح أساسها إلى إنتاج (PT-PN PCR بروستاتي مطروح مقابل تجمع بروستات سوي (يشار إليه بطرح ثلاثة نسائل إضافية. وأظهرت مقارنة سياقات الدنا المكمسّل لهذه النسائل مع أكثر إطلاق 2767© حداثة لبنك الجينات عدم وجود أي تماثل ملحوظ للنسيلتين المشار إليهما ب 27158 و © ووجد بأن النسيلة المتبقية تظهر بعض التمائل مع الجين (MVE و WY (سياقي التمييز أرقام: وباستخدام تحليل المنظومة الدقيقة لقياس (YA المعروف 121480056 (سياق التمييز رقم: مستويات التعبير عن رنا الرسول في أنسجة مختلفة وجد أن جميع الثلاث نسائل عبّر عنها بشكلٍ مفرط في أورام بروستاتية وأنسجة 8711. وبعبارةٍ أدق؛ عبسّر عن النسيلة 27158 بشكل بعامل يبلغ ثلاث أو أكثر ولوحظ تعبير BPH مفرط في معظم الأورام البروستاتية وأنسجة vo
Ad مرتفع في معظم عينات البروستات السوي وفي نسيج جنيني لكن التعبير كان يتراوح من السلبي إلى المنخفض في الأنسجة السوية الأخرى. وعبر عن النسيلة 07677 بشكل مفرط في عدة أورام بروستاتية وفي أنسجة 4 لكن كانت مستويات التعبير متوسطة في تصف عينات البروستات السوي وتتراوح من الخلفية إلى المنخفضة في جميع الأنسجة السوية الأخرى المختبرة. ٠ وأدى التحليل الإضافي عن طريق المنظومة الدقيقة كما وصف أعلاه؛ لمكتبة طرح ومكتبة طرح دنا تحتوي على دنا مكمل من ورم بروستاتي مطروح باستخدام PT-PN PCR تجمع من جزيئات دنا مكمل من نسيج سوي إلى عزل 77 نسيلة إضافية (إسياقات التمييز حدد بأنه عبر عنها بشكل مفرط في ورم البروستات. ووجد (PAY أرقام: 16-745 و 68و “و GTEV 7؛“و 58و STE) كذلك أن النسائل ذات سياقات التمييز أرقام: و 04-7500 و 711 و 717و 714 عبر عنها في بروستات سوي. ووجد أن 5١ ie التعبير عن جميع ال 776 نسيلة في أنسجة سوية مختلفة كان منخفضا أو لم يمكن الكشف الذي وجد بأنه عبر عنه في الأمعاء (You باستثناء النسيلة 25445 (سياق التمييز رقم: تظهر (PEATE منها (سياقات التمييز أرقام: ٠١ الدقيقة. ومن بين ال +7؟ نسيلة وجد أن مع سياقات مميزة مسبقا. ولم يوجد أي تماثلات ملحوظة للنسائل ذات سياقات Sill بعض vo .3165-706 60 التمييز أرقام: (3) المتال CTL تحضير بوادىء ببتيدية من فئران وانتشار خطوط متخصص بخلايا تعبر عن جين CTL يوضح هذا المثال تحضير خط خلية )١٠-7( -P502S 7 بشري (الذي يزوده HLA 42.1 أجري تمنيع للفئران التي تعبر عن جين محول ل دكتور إل. شيرمان؛ شركة سكريبس رسيرش انستيتيوت؛ مدينة لاجولاء ولاية كاليفورنيا) من جين Gi الذي (YN سياق التمييز رقم: ¢VLGWVAEL) P2S # 12 باستخدام ببتيد كما وصف ثيوبولد ومن معه (A ب 71-17؛ سياق التمييز رقم: AX و(الذي يشار إليه 5 -١١947 في مجلة محاضر أعمال أكاديمية العلوم الوطنئية الأمريكية؛ مجلد 97؛ ص: ve
Vlog
١995 17 مع إجراء التعديلات التالية: أجري تمنيع للفئران باستخدام ٠٠١ ميكروجوام من 228812 و ١٠١ ميكروجرام من ببتيد ربط TA” مشتق من بروتين فيروس التهاب الكبد ب استحلب في إضافة فروند غير الكاملة. وبعد ثلاثة أسابيع لاحقة قتلت هذه الفئران وباستخدام غربال نيلوني حضرت معلقات خلوية مفردة. ثم أعيد تعليق الخلايا بتركيز XT ٠١ ٠ خلية/مل في أوساط ALS (80111-1640؛ من شركة جيبكو بي.آر.إل.؛ مدينة جيثرسبرغ؛ AY ميريلاند) تحتوي على 96٠0 من 705 و ؟ ملي جزيئي من جلوتامين (من شركة جيبكو بي.آر.إل) وبيروفات الصوديوم (من شركة جيبكو بي.آر.إل) وأحماض أمينية غير أساسية (من شركة جيبكو بي.آر.إل) و7-مركبتو إثانول تركيزه Giga "٠١ XY و on وحدة/مسل من البنسيلين وستربتوميسين؛ واستنبتت في وجود أرومات LPS (خلايا Jak محولة جينيا ب A2 ٠ | مستتنبتة في وجود ١ ميكروجم/مل من كبريتات الدكستران و YO ميكروجم/مل من LPS لمدة ؟ أيام) معرضة للإشعاع Fr vv) راد) ومنبضة ب #12 P2S )0 مجم/مل من # P2S ٠١ 2 مجم/مل من بيتا "-جلوبيولين دقيق). وبعد + أيام لاحقة أعيد تتبيه الخلايا (التي . aly عددها © X ١٠”/مل) باستخدام 7,5 dof) + X من خلايا EL4AZKD معالجة بالإشعاع Tove) راد) ومنبضة ببتيد و X ١٠"/مل من خلايا مغذية طحالية محولة جينيا ب (A2 ve واستنبتت الخلايا في وجود Yo وحدة/مل من 11-2. واستمرت إعادة تتبيه الخلايا كل أسبوع كما وصف أعلاه في التحضير لتنسيل الخلية. ونسل الخط 12 2258 بتحليل تحديد التخفقيف باستخدام خلايا ورم EL4A2Kb منبضة ببتيد (بمعدل ٠١ X ١ خلية/عين) بصفتها المنبهات وخلايا الطحال المحولة جينيا ب A2 بصنتها المغذيات (بمعدل © "٠١ X خلية/عين) نامية في وجود ١ وحدة/مل من © 11-2. وفي اليوم VE أعيد تنبيه الخلايا كما وصف أعلاه. وفي اليوم YY عزلت النسائل النامية وحوفظ عليها في المستنبت. وأظهرت العديد من هذه التسائل تفاعلية (تحلل) أعلى بشكل كبير مقابل الأورمات الليفية البشرية (التي تعبر عن 42.1 HLA بشري والمنبغة باستخدام 5025 بالمقارنة مع التفاعلية مقابل الأرومات الليفية الضابطة. ويبين الشسكل DV مثالا على ذلك. Vlog
ٍْ 951 وتبين هذه البيانات أن 12 2258 يمثل مغير خاصية معالج طبيعيا من بروتين 25025 الذي عبر عنه في سياق جزيء 42.1 HLA البشري. (Y-1) يوضح هذا المثال تحضير خطوط CTL فأرية ونسائل CTL متخصصة بخلايا تعبر عن الجين P5018 5 أجريت سلسلة التجارب هذه بكيفية مماثلة لتلك الموصوفة أعلاه. وأجري iad للفثران باستخدام ببتيد 10 # PIS (سياق التمييز رقم: (YY اشتق من جين 25015 (الذي يشسلر إليه كذلك في هذا البيان ب 11-12؛ سياق التمييز رقم: .)٠١١ واشتق ببتيد 10 # PIS عن طريق تحليل سياق متعدد الببتيد المتوقع ل 25015 لسياقات الربط HLA-A? المحتملة كما حدد عن طريق حوافز ربط HLA-A2 المنشورة (ينظر ما جاء عن كيه سي؛ باركر ومن معه في Aaa. | علم المناعة؛ مجلد 167 ص: (VIE OTF وخلق ببتيد 218810 كما وصسف في Jia) )£( واختبر تجريبيا لتحديد ربط HLA-A2 باستخدام معايرة تنافسية أساسها خلية 7. واختبرت ببتيدات الربط 82 المتوقعة لتحديد قدرتها على منافسة تمثيل ببتيدي متخصص ب HLA-A2 على نسيلة CTL محصورة ب (D150MS8) HLA-A2 متخصصة ببتيد 1011458 رئيسي من أنفلونزا لربط .HLA-A2 وتفرز CTL 01503458 عامل النخر الورمي (TNF) ve استجابة للتمثيل SA لببتيد fluMS8 وفي المعايرة التنافسية أضيفت ببتيدات اختبار بتركيز يتراوح من ٠00-٠٠١ ميكروجرام/مل إلى مستتبتات من CTL 01503458 لربط HLA-A2 على CTL وبعد Ye دقيقة اختبرت CTL المستنبتة مع ببتيدات الاختبار أو الببتيدات الضابطة لتحديد استجابة جرعة مولد مضاد منها لببتيد 802458 في معايرة إحيائية قياسية باستخدام . TNF وكما يظهر في الشكل [©] ينافس PIS # 10 Stall التمثيل المحصور ل HLA-A2 من fluMS8 | + موضحا أن الببتيد 10 2015# يرتبط ب تححمضمتة. وأجري تمنيع of Jil التي تعبر عن الجين المحول ل HLA-A2.1 بشري كما وصسف تيوبولد ومن معه (في مجلة محاضر أعمال أكاديمية العلوم الوطنية الأمريكية؛ مجلد AY ص: )١995 A VAAY-VVAAY مع إجراء التعديلات التالية: أجري تمنيع للفئثران باستخدام 0 ميكروجرام من 215810 و ٠١٠١ ميكروجرام من ببتيد ربط I-A” مشتق من بروتين ve فيروس التهاب الكبد ب الذي استحلب في إضافة فروند غير الكاملة. وبعد ثلاثة أسابيع لاحقة Vlog
قتلت هذه ol idl وباستخدام غربال نيلوني حضرت معلقات خلوية مفردة. ثم أعيد تعليق الخلايا بتركيز "٠١ xT خلية/مل في أوساط كاملة (كما وصف أعلاه) واستنبتت في وجود أرومات LPS (خلايا Jada محولة جينيا ب 82 مستنبتة في وجود ١ ميكروجبم/مل من كبريتات الدكستران و Yo ميكروجم/مل من LPS لمدة أيام) معرضة للإشعاع )+70 راد) © ومنبضة ب Y) PISH10 ميكروجم من 10 0188 و ٠١ مجم/مل من بيتا ؟-جلوبيولين دقيق). وبعد ١ أيام لاحقة أعيد تنبيه الخلايا (التي يبلغ عددها 0 X ١٠”/مل) باستخدام 5,؟ X dof ٠ من EL4A2KD WA معالجة بالإشضعاع ٠٠٠٠١( راد) ومنبضة ببتيد و »* ٠/مل من خلايا مغذية طحالية محولة bia ب 2م). واستتبتت الخلايا في وجود ٠١ وحدة/مل من 11-2. وأعيد تنبيه الخلايا أسبوعيا أثناء التحضير للتنسيل. وبعد ثلاث دورات ٠ .-من التنبيه في أنابيب الاختبار ولد خط واحد يميز الخلايا المستهدفة 82105 من نوع جوركات dia idl ب 218810 والخلايا المستهدفة من نوع جوركات المتبغة ب P5015 Jus خط CTL المتخصص ب #10 PIS عن طريق تحليل تحديد iad باستخدام خلايا ورمية 8144210 منبضة بالببتيد (بمعدل "٠١ ” ١ خلية/عين) بصفتها منبهات وخلايا طحالية محولة جينيا ب 82 بصفتها خلايا مغذية بمعدل © Oe [Ada "٠١ X ve نامية في وجود Ye وحدة/مل من 11-2. وفي اليوم VE أعيد تنبيه الخلايا كما وصف أعلاه. وفي اليوم 7١ عزلت نسائل قابلة للحياة وحوفظ عليها في المستنبت. وكما يظهر في الشكل ]0[ أوضحت 0 نسائل من هذه النسائل تفاعلية حالة للخلايا متخصصة مقابل الخلايا المستهدفة A2KD من نوع جوركات المنبغة ب 25018. وهذه البيانات تدل على أن #10 Bar PIS مغير خاصية معالج طبيعيا من بورتين 05015 الذي عبر عنه في سياق جزيء HLA A21 x البشري. المثال )٠( قدرة خلايا 7 البشرية على تمييز متعددات ببتيد ورم بروستاتي يوضح هذا المثال قدرة خلايا T متخصصة بمتعدد ببتيد ورم بروستاتي على تمييز ورم بشري.
av برمجت WIA 7 0087 البشرية في أنابيب الاختبار إلى الببتيد 725-12 (سياق التمييز رقم: (Yo المشتق من 05025 (الذي يشار إليه dS ب 11-17) باستخدام DAY المتقوع ة وفقا لطريقة فان تساي ومن معه (المجلات الهامة في علم المناعة؛ مجلد VA ص: Vo=10 .)٠8 واختبرت المستنبتات الدقيقة الناتجة من WA 00877 لتحديد قدرتها على تمييز ٠ الببتيد 228-12 الذي أنتجته الأرومات الليفية الذاتية أو الأرومات الليفية المنبغة للتعبير عن الجين 25025 في معايرة ELISPOT جاما-انترفيرون (ينظر ما جاء عن لالفاني ومن معه؛ في مجلة الطب التجريبي؛ مجلد VAT ص: 8560-4889 (VAY وبعبارة موجزة اختبرت أعداد معايرة من WIA 7 في صورة نسخ مطابقة على 4٠١ أرومة ليفية في Vasa ميكروجرام/مل من بيتا “-جلوبيولين دقيق بشري و ١ ميكروجرام/مل من ببتيد 228-12 أو ٠ ببتيد 875 ضابط. وبالإضافة إلى ذلك اختبرت خلايا 7 في نفس الوقت على أرومات ليفية ذاتية منبغة بالجين 25025 أو أرومات ليفية متبغة ب HER-2/neu كضوابط. وقبل الاختبار عولجت الأرومات الليفية ب ٠١ تاتوجرام/مل من جاما انترفيرون لمدة EA ساعة لزيادة تنظيم MHC ued من الصنف ]. وأظهرت saa) المستنبتات الدقيقة ll) عددها 0( تمييز شديد لكل من الأرومات الليفية المتبضة بالببتيد بالإضافة إلى الأرومات الليفية المنبغة في Vo معايرة ELISPOT جاما انترفيرون. ويتضح من الشكل [؟ أ] أنه يوجد زيادة شديدة في عدد بقع جاما-انترفيرون مع زيادة أعداد خلايا T على الأرومات الليفية المتبضة بالببتيد P28-12 (القضبان المجسمة) ولكن لا يوجد ذلك بالنسبة للأرومات الليفية المنبسضة بالببتيد E75 الضابط (القضبان المفتوحة). وهذا يوضح قدرة خلايا 7 هذه على تمييز الببتيد 225-12 بصفة خاصة. وكما يظهر في الشكل Y] ب] توضح المستنبتة الدقيقة هذه كذلك زيادة في عدد بقع © جاما-انترفيرون مع زيادة أعداد خلايا 7 على الأرومات الليفية المنبغة للتعبير عن الجين ولا توجد هذه الزيادة بالنسبة للأرومات الليفية المنبغة للتعبير عن جين HER-2/neu وتزود هذه النتائج دليل إثبات إضافي على أن الببتيد 225-12 عبارة عن مغير خاصية معالج طبيعيا من البروتين 05025. وعلاوة على ذلك يوضح هذا كذلك أنه يوجد في ذخيرة خلايا 7 البشرية خلايا 7 عالية الألفة تستطيع تمييز مغير الخاصية هذا وينبغي أن تكون خلايا 7 هذه
P5028 قادرة على تمييز أورام بشرية تعبر عن الجين vo
4¢ ( A) المثال تحضير بوادىء CTL في الجسم ad) باستخدام التمنيع بدتا مكشوف مع مولد مضاد بورستاتي يشار إلى مولد مضاد ورم البروستات (L1-12 كما ذكر أعلاه؛ كذلك ب P501S ومنعت فئران 4210078 All) HLA يزودها دكتور إل. شيرمان؛ شركة سكريبس رسيرش © انستيتيوت؛ مدينة لاجولاء ولاية كاليفورنيا) باستخدام ٠٠١ ميكروجرام من 1718101325018 إما في العضل أو في الجلد. ومتعت Ol SA ثلاث مرات بحيث تفصل التمنيعات فترة زمنية مدتها أسبوعين. وبعد أسبوعين من آخر تمنيع استنبتت خلايا الطجال الممنعة مع خلايا منبهة Lain ب AZKD-P50IS من نوع جوركات. ونبهت خطوط be pul CTL وبعد أسبوعين من التتبيه في أنابيب الاختبار قدرت فعالية CTL مقابل WA مستهدفة منبغة ب .PSOIS ٠ وأظهر فأران من A فئران استجابات ل CTL شديدة ضد 25015. وتبين هذه النتائج أن 25015 يحتوي على مغير خاصية CTL محصور ب A2 معالج طبيعيا واحد على الأقل. (3) Jud بشري في أنابيب الاختبار باستخدام برمجة لجين كامل CTL توليد وتقنيات تنبيه باستخدام مولد مضاد بروستاتي باستخدام برمجة لجين كامل في أنابيب الاختبار بأرومات ليفية ذاتية منبغة تتبيغا Vo ما جاء عن يي ومن معه في مجلة علم JE فيروسيا رجعيا ب 25015 (ينظر على سبيل بشرية CTL اشتقت خطوط (1397 £0 AT=£0 VA (العدد 9( ص: ١5١7 المناعة؛ مجلد . كما حدد (L1-12 تميز بصفة خاصة أرومات ليفية ذاتية منبغة ب 25015 (وتغرف كذلك ب ليفية WA جاما-انترفيرون كما وصف أعلاه. وباستخدام لوحة من خطوط ELISPOT بتحليل هذه عبارة عن CTL ومنبغة ب 25015 تبين بأن خطوط HLA متزاوجة تزاوجا خاطئا مع > © من (DC) أليل من الصنف 1 من 1118-82 محصور. وبعبارة أدق؛ ميزت الخلايا المتفرعة مأخوذة من بشر أسوياء بجعلها تتمو لمدة PBMC أحادية النواة مشتقة من WDA مستتبتات بشري GM-CSF و 90٠١0 يحتوي على مصل بشري تركيزه RPMI خمسة أيام في وسط نانوجرام/مل. وبعد الاستنبات خمجت Vo نانوجرام/مل و 11-4 بشري تركيزه ٠٠ تركيزه الخلايا المتفرعة طوال الليل بفيروس جدري البقر 05015 المأشوب خمس مرات ونضجت vo
Vlog qo طوال الليل بإضافة ربيطة VL 3S 53 CD40 ميكروجرام/مل. وشل نشاط الفيروس بتعريضسه للأشعة فوق البنفسجية. وعزلت WIA 7 008 باستخدام نظام خرزات مغناطيسية ling المستنبتات المبرمجة باستخدام تقنيات الاستنبات القياسية. وأعيد تنبيه المستنبتات كل ٠١-١7 أيام باستخدام أرومات ليفية أولية ذاتية منتبغة تنبيغا فيروسيا رجعيا ب PSOIS وبعد ؛ دورات من التتبيه ميزت خطوط WIA 1 008 التي تنتج JSG خاص جاما-انترفيرون عند تنبيهها بأرومات ليفية ذاتية منبغة ب 25015. ويمكن دعم الفعالية المتخصصة ب 25018 عن طريق التنبيه المتواصل للمستنبتات بأرومات ليفية منبغة ب 25015 في وجود 11-15. وولدت لوحة من خطوط أرومات ليفية متزاوجة تزاوجا خاطئا مع HLA ومنبغة ب 25018 لتحديد أليل الحصر للاستجابة. وبقياس جاما-انترفيرون في معايرة ELISPOT تبين أن
© > الاستجابة المتخصصة ب 25018 محصورة ب 82-.1. وتبين EU أنه يمكن aL
استجابة CTL 008 ل .P501S المثال )٠٠١( تمييز مغير خاصية CLT معالج طبيعيا موجود في مولد مضاد ورم بروستاتي اشتق الببتيد PS للحد-9 (سياق التمييز رقم: (FFA من مولد مضاد P703P (الذي يشار إليه كذلك ب (P20 ويكون الببتيد PS مولدا للمناعة في مانحي 1114-42 من البشسر ومغير خاصية معالج طبيعيا. ويمكن برمجة CDS’ 7 WA متخصصة بمولد مضاد بعد التتبيهات المتكررة في أنابيب الاختبار باستخدام خلايا أحادية النواة متببضة ببتيد PS وتميز خطوط CLT هذه بصفة خاصة خلايا مستهدفة منبضة ب PS في كل من معايرة ELISPOT (كما وصف أعلاه) وفي معايرة إطلاق الكروم. وبالإضافة إلى ذلك يؤدي التمنيع of ll المحولة > جينيا ب HLA-A2 باستخدام PS إلى توليد خطوط CTL تميز خلايا مختلفة مستهدفة Lia ب P703P تعبر عن HLA-A2Kb أو تهشتة. وبعبارة أدق؛ منعت الفتئران المحولة جينيا ب HLA-A2 بإعطائها ٠٠١ ميكروجرام من ببتيد PS مع ١60 ميكروجرام من ببتيد SS pe من فيروس التهاب الكبد ب (ببتيد (Th في إضافة فروند غير الكاملة إعطاء تحت ala وطاء القدم. وبعد ثلاثة أسابيع من التمنيع نبهت خلايا الطحال من الفثران الممتعة في أنابيب ve الاختبار باستخدام أرومات TPS منبضة بالببتيد. وقدرت فعالية CTL عن طريق معايرة
إطلاق الكروم بعد خمسة أيام من التنبيه الأولي في أنابيب الاختبار واستخدمت خلايا منبغة تنبيغًا فيروسيا رجعيا تعبر عن مولد المضاد الضابط P703P و HLA-A2KD كخلايا مستهدفة. وميزت خطوط CTL تميز بصفة خاصة كل من الخلايا المستهدفة da idl ب 5م والخلايا المستهدفة التي تعبر عن PT03P وأوضحت تجارب البرمجة في أنابيب الاختبار لعينات بتشرية أن الببتيد 25 مولد للمناعة في البشر. وميزت الخلايا المتفرعة (DC) من مستنبتات خلايا أحادية النواة مشتقة من PBMC مأخوذة من بشر أسوياء عن طريق استنباتها لمدة خمسة al في وسط RPMI يحتوي على مصل بشري تركيزه 90٠0 و GM-CSF بشري تركيزه ٠ © نانوجرام/مل و IL-4 بشري تركيزه ٠ ؟ نانوجرام/مل. وبعد الاستنبات نبضت WAN المتفرعة باستخدام ببتيد P5 ٠ واستنبتت باستخدام GM-CSF و IL-4 مع PBMC مزود بخلايا 00877. وأعيد تتبيه Ly hi CTL أسبوعيا باستخدام WIA أحادية النواة منبضة ب 25. وبعد خمسة إلى ستة أسابيع من حث مستنبتات CTL اتضح تمييز CTL للخلايا المستهدفة Aa ial ب P35 المثال (VY) التعبير عن مولد مضاد مشتق من ورم دي في البروستات vo وصف عزل alge مضاد 33050 من ورم ثدي عن طريق العرض التفاضلي في طلب البراءة الأمريكية رقم 4 AMY المودع في 7٠١ أغسطس»؛ VAT وعزلت عدة أشكال ارتباطية مختلفة من مولد المضاد هذا. وتوجد سياقات Gall المكمسل المحددة لهذه الأشضكال الارتباطية في سياقات التمييز أرقام: 7975-7175 بحيث تزود سياقات الأحماض الأمينية . المتوقعة المناظرة لسياقات التمييز أرقام: 797 و 79/8 و "07-70١٠ في سياقات التمييز © > أرقام: "١-794 على الترتيب. وفحصت مستويات التعبير ل 53050 في أنسجة ورمية وسوية مختلفة عن طريق PCR في الوقت الفعلي وتحليل نورذرن. وتدل النتائج أن B30SD عبر die بشكل مفرط في ورم الثدي وورم البروستات والبروستات السوي والخصيتين السويتين بحيث كان التعبير منخفضا أو لا يمكن الكشف عنه في جميع الأنسجة الأخرى المختبرة (ورم القولون؛ ورم vy
At الكبد؛ A ISH الرئة؛ ورم المبيض»؛ الأنسجة السوية التالية: نخاع العظم.؛ القولون» المبيضء الجلد؛ الأمعاء الدقيقة؛ المعدة). (OY) Jad متخصصة بمولد مضاد ورم بروستاتي في دم البشر CTL إثارة استجابات في دم CTL يوضح هذا المثال قدرة مولد مضاد من ورم بروستات على إثارة استجابة 5 بشر أسوياء. من مستتبتات خلايا أحادية النواة مشتقة من (DC) ميزت الخلايا المتفرعة الذاتية يحتوي RPMI من متبرعين أسوياء عن طريق جعلها تنمو لمدة خمسة أيام في وسط 0 ٠١ نانوجرام/مسل و11-4 تركيزه ٠٠ تركيزه GM-CSF و 96٠١0 على مصل بشري تركيزه تانوجرام/مل. وبعد الاستتبات خمجت الخلايا المتفرعة لوال الليل باستخدام فيروس جدري ٠ ساعات بإضافة ربيطة A البقر الذي يعبر عنه 25015 المأشوب 0 مرات ونضجت لمدة ميكروجرام/مل. وشل نشاط الفيروس بتعريضه للأشضعة فوق البنفسجية ١ تركيزها 0 وعزلت خلايا *008 عن طريق الانتقاء الإيجابي باستخدام خرزات مغناطيسية وحثتت وبعد خمس دورات من التتبيه ميزت خطوط Lue YE المستتبتات المبرمجة في ألواح بها تنتج بصفة خاصة جاما-انترفيزون عند تنبيهها باستخدام أرومات ليفية ذائبة متبسسغة 008 10 ويمكن المحافظة على الفعالية المتخصصة ب 25015 لخط الخلية 34-1 بعد .P50LS ب Lia) ذاتي منبغ ب 205015. وتبين أن الخط 38-1 يميز B-LCL دورات تنبيه إضافية على كما EGFP الذاتي المنبغ ب B-LCL المنبغ للتعبير عن 25015 وليس SI 3-101, خاصة جاما- ELISPOT) وإنتاج جاما-انترفيرون ('C1 قيس باختبارات سمية الخلايا (إطلاق انترفيرون؛ ينظر المرجع السابق وما جاء عن لالفاني ومن معه في مجلة الطب التجريبي؛ xs ّ >[ وتبين النتائج هذه المعايرات في الشكلين [ أ] و (VAY 860-6549 ص: OAT مجلد ب]. aA )٠( المتال تمييز المولدات المضادة لورم بروستاتي عن طريق تحليل منظومة دقيقة يصف هذا المثال عزل متعددات ببتيد ورم بروستاتي معين من مكتبة دنا مكمل لورم بروستاتي.
غربلت مكتبة تعبير دنا مكمل لورم بروستاتي بشري كما هو موصوف أعلاه باستخدام تحليل منظومة دقيقة لتمييز نسائل تظهر تعبيرا مفرطا في نسيج ورم بروستاتي و/أو نسيج بروستاتي سوي بمقدار ؟ أضعاف على الأقل بالمقارنة مع أنسجة سوية غير بروستاتية (لا تشمل الخصية). وميزت 777 نسيلة وتتبع سياق ٠9 نسيلة بنجاح. ويبين الجدول Ladle )١( لهذه النسائل التي وضحت في سياقات التمييز أرقام: 88*-4060. ولقد ye ناظرت سياقات التمييز هذه أرقام PAG TAT و9950 FAY الجينات الجديدة؛ وناظرت سياقات التمييز أرقام FAT FAY السياقات المميزة مسبقا. وناظرت السياقات الأخرى (سياقات التمييز أرقام: YAY 5 FAC وكا و91" و44 5 TRO و7ا4*-400) السياقات
المعروفة؛ كما هو مبين في الجدول .)١(
الجدول )١( Vo ملخص المولدات المضادة لورم بروستاتي التمييز رقم: (PAS
ل الس سير | سس | اد Vlog
٠ | ش-ايديتول-؟ ديهيدروجيناز YTV) سياق P5028 التمييزرقم: (FAA عامل PDEF لنسخ Ets (77777؛ سياق التمييز P706P رقم: ART ¢TYTVA) Higr سياق التمييز رقم: (F494 7 ؛ سياق بانجور YYIYY) سياق التمييز رقم: (ran 5ه (١*778"؛ سياق التمييز رقم 4060) 01 وانج (77505؛ سياق التمييز رقم: (FAY فسفاتاز حمض بروستاتي £YYT00) سياق التمييز P712P رقم: (FAV ا ال ا هرق سيز رم ف اد بروتين 661-69 (777717؛ سياق التمييز رقم: YAY ( [esses 00 gaa 0b me وأظهر 001-82 تعبيرا Un jie في أنسجة بروستاتية بمقدار 5,07 ضعف بالمقارنة مع أنسجة سوية مختبرة أخرى. ولقد عبر die بشكل مفرط في 9647 من أورام البروستات و9670 من البروستات cg geal) ولم يكشف عنه في أنسجة سوية مختبرة أخرى. وأظهر ش- ايديتول-؟ ديهيدروجيناز تعبيرا مفرطا في أنسجة بروستاتية بمقدار 34,؛ ضعف بالمقارنة o مع أنسجة سوية مختبرة أخرى. ally عبر عنه بشكل مفرط في ٠ 964 من أورام البروستات Vlog
Ve
Fo) vv من البروستات السوي؛ ولم يكشف عنه في أنسجة سوية مختبرة أخرى. وأظهر
معامل PDEF لنسخ Ets تعبيرآ مفرطاً في أنسجة بروستاتية بمقدار 5,55 ضعف بالمقارنة مع
أنسجة سوية مختبرة أخزى. ولقد عبر عنه بشكل مفرط في 9657 من أورام البروستات
و9676 من البروستات السوي ولم يكشف عنه في أنسجة سوية مختبرة أخرى. وأظهر
: 1 تعبيراً في أنسجة بروستاتية بمقدار 9,1١ ضعف بالمقارنة مع أنسجة سوية مختبرة أخرى. ولقد عبر عنه بشكلٍ مفرط في 9077 من أورام البروستات ولم يكف عنه في
أنسجة سوية مختبرة تشمل البروستات السوي. وأظهر KIAA0295 تعبيراً Un ja في Lol بروستاتية بمقدار 5,54 ضعف بالمقارنة مع أنسجة سوية مختبرة أخرى. ولقد عبر عنه
Ja مفرط في 96547 من أورام البروستات وتراوح من التعبير المتخفض إلى التعبير الذي
١ لم يمكن الكشف عنه في أنسجة سوية بما في ذلك الأنسجة البروستاتية السوية. وأظهر فسفاتاز حمض بروستاتي تعبيرآ Uo ie في أنسجة بروستاتية بمقدار 9,146 ضعف بالمقارنة
مع أنسجة سوية مختبرة أخرى. ولقد عبر عنه بشكلٍ مفرط في 96767 من أورام البروستات
و٠965 من البروستات السوي؛ ولم يكشف عنه في أنسجة سوية مختبرة أخرى. واظهر الترانسجلوتاميناز تعبيرآ مفرطاً في أنسجة بروستاتية بمقدار ١4,84 ضعف بالمقارنة مع
Vo أنسجة سوية مختبرة أخرى. ولقد عبر عنه بشكلٍ مفرط في 9670 من الأورام البروستاتية و9606 من البروستات السوي ولم يكشف die في أنسجة سوية مختبرة أخرى. وأظهر
بروتين ربط البروتين الدهني عالي الكتافة (HDLBP) تعبيراً Us jie في أنسجة بروستاتية
بمقدار 78,05 ضعف بالمقارنة مع أنسجة سوية مختبرة أخرى. ولقد عبر die بشكلٍ مفرط
في 96957 من أورام البروستات و9670 من البروستات السوي alg يكن قابلا للكشف في كل
0 الأنسجة السوية المختبرة الأخرى. وأظهر 001-69 تعبيراً a jie في الأنسجة البروستاتية بمقدار Yoo ضعف بالمقارنة مع الأنسجة السوية المختبرة الأخرى. وهو جين متوفر بشكل
قليل كشف عنه في أكثر من 96480 من أورام البروستات و9675 من أنسجة البروستات
السوي. وكان تعبير هذا الجين في الأنسجة السوية منخفضاً جدآ. وأظهر 0140122 تعبيراً
Ua i في أنسجة بروستاتية بمقدار ؛ 7,؛ ضعف بالمقارنة مع أنسجة سوية مختبرة أخرى.
ve ولقد عبر عنه JE مفرط في 9607 من أورام البروستات وكان غير قابل للكشف في كل
٠١١ الأنسجة السوية المختبرة بما في ذلك أنسجة البروستات السوي. وأظهر سياق بانجور ضعف بالمقارنة مع أنسجة YY, YO تعبيرآ مفرطا في أنسجة بروستاتية بمقدار 1 7 96٠٠0و من أورام البروستات BY بشكلٍ مفرط في die سوية مختبرة أخرى. ولقد عبر من البروستات السوي. وكان غير قابل للكشف في أنسجة سوية مختبرة أخرى. وأظهر سياق ضعف بالمقارنة مع أنسجة 7,7١ وانج ,0017 تعبيرآ مفرطاً في أنسجة بروستاتية بمقدار o سوية مختبرة أخرى. ولقد عبر عنه بشكل مفرط في 9657 من أورام البروستات و9075 من مفرط في نتخاع العظم السوي والبنكرياس و JSG) البروستات السوي وعبر عنه كذلك في أنسجة بروستاتية بمقدار Ua jie المنشطة وأظهرت نسيلة 77779 الجديدة تعبيراً PBMC من BV ضعف بالمقارنة مع أنسجة سوية مختبرة أخرى. وكانت قابلة للكشف في 7 أورام البروستات و9675 من البروستات السوي وكانت غير قابلة للكشف في جميع الأنسجة ١ في أنسجة Uda jie السوية المختبرة الأخرى. وأظهرت نسيلة 77744 الجديدة تعبيرآ بروستاتية بمقدار 09,£ ضعف بالمقارنة مع أنسجة سوية مختبرة أخرى. ولقد عبر عنها بشكلٍ مفرط 9677 من أورام البروستات وكانت غير قابلة للكشف في كل الأنسجة السوية الجديدة تعبيرآً YYYY المختبرة بما في ذلك أنسجة البروستات السوية. وأظهرت نسيلة ضعف بالمقارنة مع أنسجة سوية مختبرة أخرى. 7.٠١ مفرطاً في أنسجة بروستاتية بمقدار Vo وكانت قابلة للكشف في كل أورام البروستات و١ 969 من أنسجة البروستات السوي. وعبر عنها كذلك في نسيلة سوية ورغامي سوي. ولم تعبر أنسجة سوية أخرى عن هذا الجين عند
Je مستوى )١؟( المتال تمييز المولدات المضادة لورم بروستاتي عن طريق الطرح الإلكتروني Y. يصف هذا المثال استخدام تقنية الطرح الإلكتروني لتمييز مولدات مضادة لورم بروستاتي. البشسري EST ميزت جينات محتملة متخصصة ببروستات موجودة في قاعدة بيانات من بنك الجينات عن طريق الطرح الإلكتروني (مماثل لذلك الموصوف من قبل فاسماتيزيس “Yer ومن معه في مجلة محاضر أعمال أكاديمية العلوم الوطنية الأمريكية؛ مجلد 30 ص Yo
(Fo 116١)؛ وحصل على سياقات نسائل (ET EAT) EST المشتقة من مكتبات بروستات مختلفة من قاعدة EST lily البشري العام من بنك الجينات. واستخدم كل سياق EST بروستاتي كسياق استفهام في بحث BLASTN (المركز الوطني للمعلومات عن التقنية الإحيائية) مقابل قاعدة بيانات EST البشري. وجمعت (تحاذت) كل المقارنات التي اعتبرت + متطابقة (طول السياق المقارن > ٠٠١ زوج قاعدة؛ EES المقارنات المتطايقة ضمن هذه المنطقة > 9670) lea في مجموعة. وطرحت المجموعات المحتوية على أكثر من ٠٠١ 7 بسبب أنها من المحتمل أن تمثل عناصر متكررة أو جينات معبر عنها بشكل كبير مثشل تلك للبروتينات الرييوزومية. وإذا اشتركت مجموعتين أو أكثر ب (ESTs تجمع هذه المجموعات في " مجموعة كبيرة " مما يؤدي إلى 4745 مجموعة بروستات كبيرة. ؛ ونقلت سجلات 79؛ مكتبة دنا مكمل بشري ممثلة في إطلاق بنك الجينات لتشكيل قاعدة بيانات من سجلات مكتبة الدنا المكمل هذه. وصنفت $V مكتبة دنا مكمل إلى ثلاث مجموعات وهي موجبة (مكتبات بروستات سوي وورم بروستاتي وخطوط خلية تدي حيسث يكون التعبير منشودآ)؛ سالبة (مكتبات من أنسجة بالغ سوية Cun لا يكون التعبير متشودآ)؛ وأخرى (نسيج جنيني ونسيج طفل وأنسجة موجودة في المرأة فقط وأورام غير بروستاتية م وخطوط خلية غير خطوط خلية البروستات حيث يكون التعبير غير وثيقة الصلة). ويبين ملخص مجموعات المكتبة هذه في الجدول (7). الجدول (؟) مكتبات دنا مكمل بروستاتي و1575 ل
0
وحللت كل مجموعة كبيرة بدلالة ESTs في المجموعة الكبيرة. ولوحظ مصدر النسيج لكل نسيلة EST واستخدم لتصتيف المجموعات الكبيرة إلى أربع مجموعات: النوع -١ نسائل 7 موجودة في المجموعة الموجبة من المكتبات فقط» ولم يكف عن أي تعبير في المجموعة السالبة أو الأخرى من المكتبات؛ النوع 7- نسائل EST موجودة في المجموعة ٠ الموجبة والأخرى من المكتبات فقط؛ ولم يكشف عن أي تعبير في المجموعة AL النوع *- نسائل EST موجودة في المجموعة الموجبة والسالبة والأخرى من المكتبات لكن التعبير في المجموعة الموجبة كان أعلى منه في كل من المجموعة السالبة أو الأخرى؛ والنوع ؟- نسائل EST موجودة في المجموعة الموجبة والسالبة والأخرى من المكتبات لكن التعبير في المجموعة الموجبة كان Jef منه في المجموعة السالبة. وميز هذا التحليل 5؛؛ 1 مجموعة ثدي (ينظر الجدول ()). ومن هذه المجموعات؛ نظمت ١77 نسيلة EST من شركة ريسيرش جينيتكس؛ إنك.؛ واستقبلت على شكل خامات جليسرول مجمدة في ألواح بها
7 عيناً.
الجدول )¥( ملخص مجموعات البروستات Vo
وضخمت هذه الولائج عن طريق PCR باستخدام بوادئ PCR مرتبطة بأمينو لتحليل منظومة سينتيني الدقيقة. وإذا حصل على أكثر من منتج PCR واحد لنسيلة خاصة؛ فإنه لا yt
يستخدم منتج PCR لتحليل التعبير. ومن حيث المجموع؛ حللت YO YA نسيلة من طريقة الطرح الإلكتروني عن طريق تحليل المنظومة الدقيقة لتمييز نسائل قدي من الطرح الإلكتروني التي لها ورم عال مقابل رنا رسول لنسيج سوي. وأجريت عمليات غربلة من هذا القبيل باستخدام منظومة سينتيتي الدقيقة (مدينة بالو ألتو؛ كاليفورنيا) وفقا لتعليمات المصتع ° (وبصفة أساسية كما وصف من قبل شينا ومن معه في مجلة محاضر أعمال أكاديمية العلوم الوطنية الأمريكية؛ مجلد AY ص (M191 OTA) 11 E وهيلر ومن معه في مجلة محاضر أكاديمية العلوم الوطنية الأمريكية؛ مجلد df ص 1198-7190 15997). وفي هذه التحليلات؛ صففت النسائل على الشرحة الرقيقة والتي سبرت Lad بعد باستخدام مسابير مفلورة مولدة من دنا مكمل من بروستات ورمي وسوي بالإضافة إلى أنسجة سوية أخرى
٠١ مختلفة وفحصت هذه الشرائح بدقة وقيست شدة الفلورة. وميزت نسائل ذات تسبة تعبير أكبر من * (أي؛ يكون المستوى في Gall المكمل لورم بروستاتي ثلاثة أضعاف المستوى في الدنا المكمل من بروستات سوي على الأقل) كسياقات متخصصة بورم بروستاتي (الجدول (؟)). وتوجد سياقات هذه النسائل في سياقات التمييز أرقام 1-5 مع سياقات جديدة معينة مبينة في سياقات التمييز أرقام 507 و41
.؟ه١وكااو؟ل77و و01-415 و77 vo (£) الجدول نسائل متخصصة بورم البروستات
Ylo¢
١١و دي is ض ض rs Vlog
٠١ قل جنا سم يد on rim
ل \o ) JE تمييز آخر للمولدات المضادة للورم البروستاتي عن طريق تحليل المنظومة الدقيقة يصف هذا المثال عزل متعددات ببتيد ورم بروستاتي أخرى من مكتبة دنا مكمل لورم بروستاتي. غربلت مكتبة تعبير دنا مكمل لورم بروستاتي بشري كما وصسف أعلاه باستخدام تحليل المنظومة الدقيقة لتمييز نسائل تظهر تعبيرا مفرطا في نسيج ورم بروستاتي و/أو بروستات سوي بمقدار أضعاف على الأقل بالمقارنة مع أنسجة سوية غير بروستاتية ( لا تشمل الخصية). وميز وتتبع سياق VEY نسيلة. وبينت أمثلة لهذه التسائل في سياقات التمييز أرقام: 4 517-46 . ومن هذه السياقات؛ ناظرت سياقات التمييز أرقام 11-4854؛ lis ١ جديدة. وناظرت الأخرى (سياقات التمييز أرقام 40/004 و4561 -717؟) سياقات معروفة. Jed )11( خاصية أخرى للمولد المضاد وللورم البروستاتي P710P يصف هذا المثال التتسيل كامل الطول ل P710P غربلت مكتبة الدنا المكمل البروستاتي الموصوفة أعلاه باستخدام الجزء P710P vo الموصوف أعلاه . وطليت مليون مستعمرة على ألواح 13/أمبيسيلين. واستخدمت مرشحات غشاء نيلوني لرفع هذه المستعمراتء ومن ثم مسخت سياقات الدنا المكمل الملتقطة عن طريق هذه المرشحات وربطت ربطا تقاطعيا بالمرشحات عن طريق الأشعة فوق البنفسجية. ووسم الجزء 27108 إشعاعيا واستخدم ليهجن باستخدام المرشحات. واختيرت نسائل دنا مكمل موجبة واسترجعت سياقات الدنا المكمل لها وتتبعت سياقاتها باستخدام متتبع سياق ABI Y. أوتوماتي. وحصل على أربعة سياقات ومثلت في سياقات التمييز أرقام: SEV Y= TA وكما ذكر مسبقاء من المدرك أنه قد تجرى عدة تعديلات بدون الخروج من مبدأ ونطاق الاختراع بالرغم من أنه قد وصفت تجسيدات خاصة للاختراع في هذا البيان لأغراض التوضيح. ووفقا لذلك؛ لا يحدد الاختراع الراهن إلا عن طريق عناصر الحماية الملحقة.
Claims (1)
- ١٠١“ Las) yale متعدد ببتيد معزول يشتمل على الأقل على جسزء مولد للمناعة من بروتين ورم -١ ١ بروستاتي؛ أو متغير منه؛ حيث يشتمل بروتين الورم على سياق حمض أميني يحمل شفرته سياق متعدد نوويتيد يختار من الفئة المكونة من: r go—t) J 71-8 Sv ؟ أى ald (أ) سياقات مذكورة في أي من سياقات التمييز 1 AY أو 0 JAY أو 87-497 أو 004 أو ١لا أو الاكلا أو 724 أو ١ه أو . ١7١ Teme N= ed أر ٠١“ أو ٠١6 أو ٠١ أو 97 ay “ أو ١8 أو 97 أو 19454 أو 141 AN أو 17-277 أو 197/97 أو لل أو v أو 77-777 أو الالال أو YY. أو 4 أ 7١7 أو 5ه" أو 7 A FAL ناث أى .محم أى J تت Ger. ارخ امت ار vYe-vay . £0) أو 297 أو 97 أو 2976 أو 40 PAS أو PAT SETAE أو 2/87 أو 4 أو 7١ EYY أو ٠-416 أو “1 أو ٠١ أو EA أو 507 أو 507 أو vo أو 07 أو to. 28% 95؟ أو 1-117 أو ive أو 477 أو 7١ Vy CEVY J EVI—ETA فممفحنت؛ اوم 4 Sov - (ب) سياقات تهجن إلى أي من السياقات السابقة في ظروف معتدلة الشدة؛ و (ج) أجزاء مكملة لأي من السياقين (أ) أو (ب). حيث يشتمل متعدد الببتيد على سياق حمسض )١( متعدد ببتيد معزول وفقا لمطلب الحماية -" ١ < أميني يحمل شفرته سياق متعدد نوويتيد مذكور في أي من سياقات التمييز أرقام: ؟ أو AV SAY أو 1-8؟ أو 41د أو 497ل أو 4 د أو ١لا أو لاحء ا أو ل أو r ١ فاحللا أرى مناحن ey أر ٠١6 Gy Gav أو 0 أو 37 أو 37 أو ¢ VAA أو ١4 أو /17/9 أو ١ل أو 1 أو 191 أو 197 أو ١76-2177 أو ١/١ أو ° أو 777 أو الا 776-777 YY. أو ٠١5 أو "١٠7 أو ٠١ أو ٠١7 أو “ أو 787 TAY أو 0676 أو TYE أو 7١7 أو 7١ أو 77 أو 78 أو ٠ vA 4 أو SPAT 284 أو 0 أو ran rar ray 501 أو 507 أو 507 أو 4 50 أو 5٠ أو 417 أو 14416 أو 577 أو eY1 أو 577 أو 7 أو Seve ve أر تنص ار تت ار fo. 4 كف أ م J كممكحاكت أو محا ١ أو £VY أو جزء مكمل لأي من سياقات متعددة النوويتيد السابقة. ١ ”- متعدد ببتيد يشتمل على سياق مذكور في أي من سياقات التمييز أرقام: عاو SAVY Y و كللر “لاحر IVI تأر ار TY لطي FAY TT ١ 8 — متعدد نوويتيد معزول يحمل شفرة 3510 حمض أميني على الأقل من بروتين ورم بروستاتي؛ أو متغير منه يختلف في إبدال و/أو حذف و/أو إضافة و/أو إيلاج واحد أو JK v بحيث لا تضعف مقدرة المتغير على التفاعل مع أمصال مضادة متخصصة بالمولد t المضاد بصفة جوهرية؛ حيث يشتمل بروتين الورم على سياق حمض أميني يحمل شفرته ° متعدد نوويتيد يشتمل على سياق مذكور في أي من سياقات التمييز أرقام: ؟ أو “ أو 8- Yq ّ أو to—t) أو 497لا أو 10-54 أو ٠١ أو “لكلا أو 4لا أو ١ أو ٠١ JAY أو 97 أو 9 أو 97 أو ٠١“ أو ٠١6 أر ٠١١7 أي لحلل أي WY Teme A أو 70-1177 أو 197/97 أو 181 أو هه أو 191 أو 197 أو ١34 أو ١86 أو Yor 4 أو ٠١ أر ٠١١ Sf ٠١١7 أى J 1-177 YY. لمات J لا ١ أو ١ © أو YYA أو 7١ أو 7١7 أو 4 أو #6 دا أو 8 أو SFA SPAY "١ © أو vA 43 أو fray 47 أو 43 أو 501 أو 407 أو 07 أو 6 أو ٠ VY أو 517 أو 51-416 أو 5717 أو 5717 أو 577 أو 7 أو Sve Seve Vr 46-7 ار £47 sf fo. sf كم Jf ف أ كمفحلة؛ أر مختفحالاء أو EVY V4 أو جزء مكمل من أي من السياقات السابقة. ١ ©- متعدد نوويتيد معزول يحمل شفرة بروتين ورم بروستاتي؛ أو متغير die حيث يشتمل 1 بروتين الورم على سياق حمض أميني يحمل شفرته متعدد نوويتيد يشتمل على سياق٠ v مذكور في أي من سياقات التمييز أرقام: " أو JY 11-46 أو 41 -؟؛ أو 1-497 أو ¢ 10-04 أو ١ أو للا أو 125 أو ١ه أو 497 أو 90 أو 97 أو 99 أو 7 أو ٠١٠ ° أو ٠١4 أو ٠١١7 أو ١١1-٠١4 أو 10-1 أو 1701 أو ١7-179 أو ١77 أو١ . أو ١448 أو ١91 أو 197 أو 54 أو 134 أو ٠0 أو 4 ٠١ أو 707 أو 7١4 أوYY. 0 أو 7-777 أو بساحم ff لاحم أى FEY FF FYA SFY A أو ؛ 7 أو 0-06 أو © أو FAY Sra. SrA TAT TAL FAY 9 أو 97 أو rat 560 أو 07 أو ا أو ب أو EV J ٠١ 4 ماعو اء أو 577 أو 7١7 EY أو ؟ أو 74 أو 75 أو 2-67 أو £81 أو go. ١ أر كم tov J 4 “مكحلا أو لمختحالاء أو EVY أو جزء مكمل من أي من 7 السياقات السابقة. ٍْ ١ ١ متعدد نوويتيد معزول يشتمل على سياق مذكور في أي من سياقات التمييز أرقام: ؟ أو ؟ 0 أو 1-8 ؟ أو 49 -؛ أو 0-7 أو 20-04 أو ١لا أو الا لا أو 124 أو لله أو AY :0 أو 60 أو 97 أو أو ٠١6 dyer ay أو ey فاحللا أرى مدناحن ٠ ¢ أو ١7١ أو 70-177 أو SAY Savy هل أو 131 أو 197 أو ١6 أو ٠١8 5 أو ٠١7 أو ٠١5 أو ٠١٠7 أو 4 أ YY. احم أب Fee=YYY أو FeV ٠ \ أو 77 أو 78 أو © أو 277 أو 274 أو vte-vo. أو FAY أو SPAY TAL v أو ا" أو 84 أو 90 أو 7 أو 247 أو fran 501 أو 507 أو Sv A 560 أو 5٠١ أو 5٠7 أو 1-4 أو 477 أو Sev 477 أو 7 أو Jere 9 5؟؟ أو 1-7 أت J fo. sf كف £11—f0q sf for fl اولخد ١ أو 577 ١ "- متعدد نوويتيد معزول يشتمل على سياق يهجن؛ في ظروف معتدلة الشدة؛ إلى سياق 0 مذكور في أي من سياقات التمييز أرقام: SY أو 9-4؟ أو to-g) أو 49حلاه أو r 0-4 أو ٠ أو 7727 أو 9 أو اه أو لاه أو 0 أو 47 أو 99 أو 7 أو ٠١٠ Vlo¢ل ¢ أو ٠١54 أو ٠١١7 أو ١١1-34 أو ١: أو ١7-177 savy أو ١77 أو ١١ > أو 18 أو ١91 أو ٠97 أو ١354 أو 134 أو ٠07 أو ٠١4 أو 7١7 أو ٠١ أو ١-777 YY. . أو لاحم أر لاحم أرى يت FEY TFL TYAS v أو 4 أو Ylo=Yo. أو FAY STA ا أو 85 أو 4م98 أو 43 أو PAY 1 أو rar 95 أو 501 أو EY أر اد of ENF SEV. £0 J ماح 4 أو 577 أو 277 أو 477 أو TE EIA RIES TARE BACNET Savy ve أى to أر tov 4 متحت أو مختحالا J الى ١ \ متعدد نوويتيد معزول مكمّل لمتعدد نوويتيد iy لأي من مطالب الحماية من )2( إلى ل )¥( \ 1- ناقل تعبير يشتمل على متعدد نوويتيد Gy لأي من مطالب الحماية من (5) إلى AY) ١ ١ خلية عائلة تحول أو تخمج خمجاً LL gad باستخدام ناقل تعبير وفقا لمطلب الحماية ) 4 ( . -١١ ١ ناقل ل لعبير يشتمل على متعدد Gi, Aly ged لمطلب الحماية (A) -١ ١ خلية die تحول أو تخمج خمجاً تحويلياً باستخدام ناقل تعبير وفقاً لمطلب الحماية.)١١( Y ١ 7 - تركيب صيدلي يشتمل على متعدد ببتيد 4 (aa لمطلب الحماية ) \ ( في توليفة مع Jala Y مقبول فسيولوجياً. ١ 8 )= لقاح يشتمل على متعدد ببتيد وفقآً لمطلب الحماية )١( في توليفة مع معزز استجابة 7 مناعية غير متخصص.١٠ -١ © ١ لقاح وفقا لمطلب الحماية ) Yi ( حيث يكون معزز ١ لاستجابة المناعية غير المتخصسص 7 عبارة عن مادة مساعدة.١ 1- لفاح (Ga لمطلب الحماية ) Cua ( Vi يحث معزز الاستجابة المنا ic غير المتخصسص r الاستجابة من نوع 1 بشكلٍ سائد.-١١ \ تركيب صيدلي يشتمل على متعدد نوويتيد Gy لمطلب الحماية (؛) في توليفة مع حامل T مقبول فسيولوجيا.\ أرا- لفاح يشتمل على متعدد نوويتيد (as لمطلب الحماية ) t ( في توليفة مع معزز استجابة v مناعية غير متخصص.\ - لقاح وفقا لمطلب الحماية (VA) حيث يكون معزز الاستجابة المناعية غير المتخصسص + عبارة عن مادة مساعدة.١ ا لقاح Gg لمطلب الحماية ١ A) ( حيث يحث معزز الاستجابة المناعية غير المتخصسص Y الاستجابة من نوع 1 بشكلٍ سائد.A \ - جسم مضاد Js ma ¢ أو جزء مرتبط بالمولد المضادء يرتبط بصورة دقيقة مع بروئين 7 ورم بروستاتي يشتمل على سياق حمض أميني يحمل شفرته سياق متعدد نوويتيد منذكور r في أي من سياقات التمييز أرقام: HY # أو YA-A أو 0-41؟؛ أو 7-67 أو 4ه- 4 “> أو ل أو جاع لا أو va أو ANY أو AY أو .9 أو 4 أو qv أو 7 أو ٠١ أو ٠ 8 أو ٠١7 أو حخيلحالل أو te=vve 1701 أو ١77 gave avy أو ١8١ 1 أو ها أو 191 أو 137 أو ١34 أو 1448 أو 07 أو 7١7 Yee أو YadWYJTF. أو ملا أو TY Si أو 770-777 أو لتحم أو لاحم 77٠١ أو v أو 85 أو 84 أو 0 أو YAS أو 87 FAY أو 0-7950 YY أو 7 A ٠١ J ENT gE). أو 508 SEY أو 507 أو 501 rat var أو 7 4 Seg أو 41-547 أو 0 Seve أو 7 أو 576 أو 577 أو 477 أو 8 ١ أو جزء مكمّل من أى EVY أو 07 أو 21-4 أو 4548-ا72؛ أو oY أو fo. 58 من سياقات متعدد التوويتيد السابقة. yy في (VA) لمطلب الحماية a5 تركيب صيدلي يشتمل على جسم مضاد أو جزء منه -7 \ توليفة مع حامل مقبول فسيولوجيا. Y لمطل_ب sg تركيب صيدلي يشتمل على خلية منتجة لمواد مضاد تعبر عن متعدد ببتيد -Yy \ في توليفة مع حامل أو سواخ مقبول صيدلياً. )١( الحماية حيث تعتبر الخلية المنتجة للمولد المضاد خليةٍ (YY) لمطلب الحماية Gay تركيب صيدلي -* 4 \ متفرعة أو ملتهمة كبيرة. 0 ( ١ ) لمطلب الحماية Gd, لفاح يشتمل على خلية منتجة لمولد مضاد تعبر عن متعدد ببتيد —-Yo \ في توليفة مع معزز استجابة مناعية غير متخصص. يعتبر معزز الاستجابة المناعية غير المتخمسسص Cua (Yo) لقاح وفقا لمطلب الحماية -١ \ مادة مساعدة. 7 حيث يحث معزز الاستجابة المناعية غير المتخصسص ( Yo ) لمطلب الحماية ag لقاح ١ ١ الاستجابة من نوع 1 بشكلٍ سائد. 0ا =YA \ لقاح (ag لمطلب الحماية ) Yo ( حيث الخلية المنتجة للمولد المضاد عبارة عن خلية :0 متفرعة. ١ 8 - طريقة لتثبيط نمو السرطان في al a تشمل إعطاء المريض مقدار فعال من متعدد , ببتيد وفقا لمطلب الحماية )١( وبذلك يثبط نمو السرطان في المريض. -*٠ \ طريقة لتثبيط نمو السرطان في مريض تشمل إعطاء المريض مقدار فعال من متعدد نوويتيد Tg لمطلب الحماية )2( وبذلك Jad نمو السرطان في المريض.-١ ١ . طريقة لتثبيط نمو السرطان في ad ya تشمل إعطاء المريض مقدار فعال من جسم ‘ 7 مضاد أو جز 6 Aa يرتبط بالمولد المضاد dg لمطلب الحماية ) 7 ( وبذلك يتبط نمو v السرطان في المريض.١ 7 طريقة لتتبيط نمو السرطان في ad pa تشمل tac) ءِِ المريض مقدار فعال من خلية Y منتجة لمولد مضاد تعبر عن متعدد ببتيد Gs, لمطلب الحماية ) ١ ( وبذلك ينبط نمو r السرطان في المريض. YY ١ طريقة وفقآ لمطلب الحماية ) (v Y حيث الخلية المنتجة للمولد المضاد عبارة عن خلية v متفرعة —T 8 \ طريقة 5 لأي من مطالب الحماية من (9؟) إلى (TY) حيث السرطان هو سرطان 7 البروستات . Ye \ بروتين التحام يشتمل على متعدد ببتيد واحد على الأقل Gay لمطلب الحماية .)١(Vlogا ١ + بروتين التحام Gd, لمطلب الحماية ) 0 Cua (v يشتمل بروتين ١ لالتحام على معززر تعبير يعمل على زيادة تعبير بروتين الالتحام في خلية عائلة تخمج خمجاً تحويلياً باستخدام v متعدد نوويتيد يحمل شفرة بروتين | لالتحام . YY ١ بروتين التحام Ga لمطلب الحماية ) Yo ( حيت يشتمل بروتين ١ لالتحام على مغير Y خاصية مساعد 7 غير موجود في متعدد الببتيد Why لمطلب الحماية .)١( ١ أ بروتين التحام GG لمطلب الحماية ) 0 (v حيث يشتمل بروتين | لالتحام على رقعة تمييز : ألفية. \ 4- متعدد توويتيد معزول يحمل شفرة بروتين التحام وفقاً لمطلب الحماية ) © (v . ١ 6 تركيب صيدلي يشتمل على بروتين التحام CEP لمطلب الحماية ) (r Y في توليفة مع Jala Y مقبول فسيولوجياً. ٠ 9- لقاح يشتمل على بروتين التحام وفقا لمطلب الحماية )10( في توايفة مع معزز استجابة Y مناعية غير متخصص. ١ 7- لقاح (aa لمطلب الحماية ) ف حيث معزز الاستجابة المناعية غير المتخصص عبارة v عن مادة مساعدة. ١ - لقا Ga, Id لمطلب الحماية ) ل حيث يحث معزز الاستجابة المناعية غير المتخصسص Y الاستجابة من نوع JIT سائد.Vlog١ تركيب صيدلي يشتمل على متعدد توويتيد وفقا لمطلب الحماية ) ف ( في توليفة مع حامل - \ مقبول فسيولوجيا. Y لقاح يشتمل على متعدد نوويتيد وفقا لمطلب الحماية )£0( في توليفة مع معزز استجابة - 8 ١ مناعية غير متخصص. 1 معزز الاستجابة المناعية غير المتخصص عبارة Cus (£0) لقاح وفقا لمطلب الحماية -+ ١ عن مادة مساعدة. Y : حيث يحث معزز الاستجابة المناعية غير المتخصسص ( to ) لقاح وفقا لمطلب الحماية © ١ الاستجابة من نوع 1 بشكل سائد. 0 طريقة لتثبيط نمو السرطان في مريض تشمل إعطاء المريض مقدار فعال من تركيب - EA ١ (£2) صيدلي وفقا لمطلب الحماية )£0( أو مطلب الحماية 0 طريقة لتثبيط نمو السرطان في مريض تشمل إعطاء المريض مقدار فعال من لقاح وفقا -49 ١ (£0) لمطلب الحماية ))£( أو مطلب الحماية طريقة لإزالة خلايا ورمية من عينة إحيائية تشمل تلامس عينة إحيائية مع خلايا 7 التي -٠٠ ١ تتفاعل بصفة خاصة مع بروتين ورم بروستاتي؛ حيث يشتمل بروتين الورم على سياق Y حمض أميني يحمل شفرته سياق متعدد نوويتيد يختار من الفئة المكونة من: r -١١١ SAN = متعددات النوويتيد المذكورة في أي من سياقات التمييز أرقام: (V) ¢ أو 7 أو 78 أو ١# اتح أو vy Gave ivy أى ١١ ° GEEVY=TAL أو PAY أو 8٠ أو 0-777 أو 0-746 أو ٠ .\lo¢7 ) 7 1 أجزا ِِ مكملة من متعددات النوويتيد السابقة حيث تجرى خطوة التلامس فى A ظروف ولفترة زمنية كافية للسماح بإزالة الخلايا التي تعبر عن بروتين الورم البروستاتي من العينة. -5١ ١ طريقة وفقا لمطلب الحماية )00( حيث العينة الإحيائية عبارة عن دم أو جزء منه. —0Y ٠ طريقة لتثبيط نمو السرطان في مريض تشمل إعطاء المريض عينة إحيائية معالجة وفقا ْ لطريقة مطلب الحماية (0 5). ١ *0- طريقة لتنبيه و/أو توسيع T WIA متخصصة ببروتين ورم بروستاتي تشمل تلامس Y خلايا 7 مع واحد أو أكثر من: r )"( متعدد ببتيد وفقا لمطلب الحماية (١)؛ (Y ) ‘ متعدد ببتيد يحمل شفرته متعدد نويتيد يشتمل على سياق موجود في أي من سياقات 0 التمييز أرقام: ١١١1-١ أو ١71-116 أو ١70-1977 أو ١797 أو 0-179 *٠ أو \ لاء 0# © أو 2776 أو لا" أو 7١ أو 7-777 أو 436 077لا أو 78١ أو CEVY-TAEL J TAY v 1 )1( متعدد نوويتيد يحمل شفرة متعدد الببتيد )١( أو (؟)؛ و/أو 4 (؟) خلية منتجة لمولد مضاد تعبر عن متعدد ببتيد )١( أو (7)؛ في ظروف ولفترة ١ زمنية كافية للسماح بتنتبيه و/أو توسيع خلايا 1. o0¢ \ - عدد من خلايا 1 معزولة تشمل خلايا T المحضرة وفقا لطريقة مطلب الحماية 9 2 ( . \ 00— طريقة لتثبيط نمو السرطان في Ua ya تشمل إعطاء المريض مقدار فعال من عدد من r خلايا 7 وفقا لمطلب الحماية )08(هلا ١ 7- طريقة لتثبيط نمو السرطان في مريض تشمل الخطوات التالية: r (أ) حضن خلايا 00877 و/أو “004 المعزولة من مريض مع مكون واحد على الأقل 1 يختار من Al) المكونة من: )١( 1 متعدد ببتيد وفقا لمطلب الحماية (١)؛ (Y) : متعدد ببتيد يحمل شفرته متعدد نوويتيد يشتمل على سياق من أي من سياقات “ التمييز أرقام: ١١11-١ أو 171-1195 أو ١7-177 أو ١797 أو -١74 7١6 rier fire v أر FY. J FYA أو 7ت أو .“+ A ملا أى YAY ار CEVY=TAL of YAY (V) 4 متعدد نوويتيد يحمل شفرة متعدد الببتيد )١( أو (7)؛ أو: .\ )€( خلية منتجة لمولد مضاد تعبر عن متعدد ببتيد )١( أو §(Y) ١ حيث WA ST 1؛ و VY (ب) إعطاء المريض مقدار فعال من خلايا 7 المتكاثرة وبذلك يثبط نمو السرطان في ١ المريض. -©١ ١ طريقة لتثبيط نمو السرطان في مريض تشمل الخطوات التالية: (أ) حضن خلايا 00877 و/أو “004 المعزولة من مريض مع مكون واحد على الأقل r يختار من الفئة المكونة من: )١( ¢ متعدد ببتيد وفقا لمطلب الحماية (١)؛ ° (7) متعدد ببتيد يحمل شفرته متعدد نوويتيد يشتمل على سياق من أي من سياقات . التمييز أرقام: ١1١1-١ أو 171-115 أو ١70-177 أو 177 أو 174- v 05 أو ¥ve-v.v أو 777 أو YYA أو 77١ أو 7-77١7 أو 46 7- A لال أو YAY أو PAY أو CEVY-TAE (V) | متعدد نوويتيد يحمل شفرة متعدد الببتيد )١( أو (7)؛ أو ye (؛) خلية منتجة لمولد مضاد تعبر عن متعدد ببتيد )١( أو (Y) ١١ حيث HSE خلايا T4< (ب) تنسيل خلية متكاترة واحدة على الأقل؛ و V7 (ج) إعطاء المريض مقدار فعال من خلايا T المنسلة وبذلك hi نمو Ola ull فى Vt المريض. —-0A \ طريقة لتحديد وجود أو عدم وجود السرطان في Ul pe تشمل الخطوات التالية : (أ) تلامس عينة إحيائية مأخوذة من مريض مع عامل ربط مرتبط مع بروتين ورم 1 بروستاتي حيث يشتمل بروتين الورم على سياق حمض أميني يحمل شفرته سياق ¢ متعدد نوويتيد يختار من الفئة المكونة من: )0( متعددات نوويتيد مذكورة في أي من سياقات التمييز أرقام: SVN 171-١6 “ أو 176-177 أو YY 2-174 أو 7ا١<-5 ١ أو ovyy v أو رلا أو ١ لال أو © أو 70-7456 أو FAY او YAY A أو SEEVY=TAL 4 (7) أجزاء مكملة من متعددات النوويتيد السابقة؛ ١ (ب) الكشف عن مقدار متعدد الببتيد المرتبط مع عامل الربط في العينة؛ و ١ (ج) مقارنة مقدار متعدد الببتيد مع قيمة قطع محددة مسبقا ومنها يحدد وجود أو عدم وجود السرطان في المريض. ١ 059- طريقة وفقا لمطلب الحماية A) م( حيث عامل الربط عبارة عن جسم مضاد. ١ 6 طريقة Lad لمطلب الحماية ) 09 ( حيث الجسم المضاد عبارة عن جسم مضاد وحيد ٍ : النسيلة. \ = طريقة وفقا لمطلب الحماية A) 2 ( حيث السرطان هو سرطان البروستات . ١ "+- طريقة لمراقبة نمو السرطان في مريض تشمل الخطوات التالية: Ylo¢١1 (أ) تلامس عينة إحيائية مأخوذة من مريض عند فترة زمنية أولى مع عامل ربط 1 مرتبط مع بروتين ورم بروستاتي حيث يشتمل بروتين الورم على سياق حمسض ¢ أميني يحمل شفرته سياق متعدد نوويتيد مذكور في أي من سياقات التمييز أرقام: م 11-١ أو 16 لحالا١ أو 172-177 أو 1797 أو Yeo IVa أو ١٠-٠١ أو 1 7 أو لام أو vv. 7ه أو 0780© أو “YALE FAY FAY EVY v أو جزء مكمل من أي من متعددات النوويتيد السابقة؛A (ب) الكشف عن مقدار متعدد الببتيد المرتبط مع عامل الربط في العينة؛3 (ج) إعادة الخطوتين )1( و (ب) باستخدام عينة إحيائية مأخوذة من المريض عند أ فترة Lia) لاحقة؛ 31 )2( مقارنة مقدار متعدد الببتيد الذي كشف عنه في الخطوة (ج) مع المقدار الذي ١ VY كشف عنه في الخطوة (ب) ومنها يراقب نمو السرطان في المريض.١ 4 طريقة وفقا لمطلب الحماية ) Y 1( حيث عامل الربط عبارة عن جسم مضاد.١ 7 طريقة وفقا لمطلب الحماية )¥ 1 ( حيث الجسم المضاد عبارة عن جسم مضاد وحيد 7 النسيلة.١ 05- طريقة وفقا لمطلب الحماية (FY) حيث السرطان هو سرطان البروستات.١ 7[ طريقة لتحديد وجود أو عدم وجود السرطان في مريض تشمل الخطوات التالية:Y (أ) تلامس عينة إحيائية مأخوذة من مريض مع نوويتيد قصير السلسلة يهجبن إلى r متعدد نوويتيد يحمل شفرة بروتين ورم بروستاتي حيث يشتمل بروتين الورم على t سياق حمض أميني يحمل شفرته سياق متعدد نوويتيد مذكور في أي من سياقات ° التمييز أرقام: 1١11-١ أو 17١-116 أو 178-177 أو 77 أو ١-١74 أوVlogYY او 7١ أو 270 أو 77ت أو 226-740 أو YYA با مام © أو 277 أو 1 أو جزء مكمل من أي من متعددات النوويتيد السابقة؛ EVY-TAE TAY 7 م (ب) الكشف عن مقدار متعدد النوويتيد الذي يهجن إلى نوويتيد قصير السلسلة في العينة؟ و 4 قصير السلسلة مع قيمة ag oll (ج) مقارنة مقدار متعدد النوويتيد الذي يهجن إلى ١ قطع محددة مسبقا ومنه يحدد وجود أو عدم وجود السرطان في المريض. ١١ لمطلب الحماية ( 7) حيث يحدد مقدار متعدد النوويتيد الذي يهجن إلى Gay طريقة —1Y \ نوويتيد قصير السلسلة باستخدام تفاعل بلمرة اتزيمية مسلسل. 1 طريقة وفقا لمطلب الحماية )11( حيث يحدد مقدار متعدد النتوويتيد الذي يهجن إلى -+8 1 نوويتيد قصير السلسلة باستخدام معايرة تهجين. Y طريقة لمراقبة نمو السرطان في مريض تشمل الخطوات التالية: — 14 ١ تلامس عينة إحيائية مأخوذة من مريض مع نوويتيد قصير السلسلة يهجبن إلى (0) 0 متعدد نوويتيد يحمل شفرة بروتين ورم بروستاتي حيث يشتمل بروتين الورم على or من سياقات gh (A سياق حمض أميني يحمل شفرته سياق متعدد نوويتيد مذكور t أو 171-116 أو 9177لا أو 177 أو #9794 ؛” أو 111-1١ التمييز أرقام: 0 أو 75-777 أو 70-7476 أو ا او 7١0 أو FYA لا ها أو 7276 أو 1 أو جزء مكمل من أي من متعددات التوويتيد السابقة؛ EVY=TAE أو TAY 7 قصير السلسلة في ag gill (ب) الكشف عن مقدار متعدد التوويتيد الذي يهجن إلى A العينة؛ 4 الخطوتين (أ) و (ب) باستخدام عينة إحيائية مأخوذة من المريض عند sale) (ج) ٠١ فترة زمنية لاحقة؛ و ١VY (د مقارنة مقدار متعدد النوويتيد الذي كشف عنه في shall 3 )—( مع المقدار الذي كشف عنه في الخطوة (ب) ومنه يراقب نمو السرطان في المريض. 97/٠ \ طريقة وفقا لمطلب الحماية ) 19 ( Cua يحدد مقدار متعدد النوويتيد الذي Cm إلى 7 التوويتيد قصير السلسلة باستخدام تفاعل بلمرة انزيمية مسلسل. -١ \ طريقة وفقا لمطلب الحماية (19) حيث يحدد مقدار متعدد التوويتيد الذي يهجن إلى Y النوويتيد قصير السلسلة باستخدام معايرة تهجين. ١ "لا- طقم تشخيصي يشتمل على: Y 0 جسم مضاد واحد أو أكثر وفقا لمطاب الحماية ) ١ ؟ و v (ب ( مفاعل ail يشتمل على مجموعة مقررة. —VF ١ طقم وفقا لمطلب الحماية (VY) حيث تثبت الأجسام المضادة على حامل صلب. VE \ — طقم وفقا لمطلب الحماية (YT) حيث يشمل الحامل الصلب نتروسيليلوز أو عصارة Y نباتات أو مادة بلاستيكية. -Yo ١ طقم وفقا لمطلب الحماية ) VY ( حيث يشتمل مفاعل الكشف على جلوبيولين مناعي Y مضاد أو بروتين © أو بروتين 8 أو لسيتين. -١ ١ طقم وفقا لمطلب الحماية Y) 0( حيث تختار المجموعة المقررة من الفئة المكونة من Y النتظائر المشعة والمجموعات المفلورة والمجموعات المتألقة والأنزيمات والبيوتين 3 وجسيمات الصباغ. VlogVY ١ نوويتيد قصير السلسلة يشتمل على عدد يتراوح من ٠١ إلى 560 توويتيدا يهجن في Y ظروف معتدلة الشدة إلى متعدد نوويتيد يحمل شفرة بروتين ورم بروستاتي حيث يشتمل , بروتين الورم على سياق حمض أميني يحمل شفرته سياق متعدد نوويتيد مذكور في أي t من سياقات التمييز أرقام: ؟ أو © أو 5-8؟ أو 50-41 أو 7-497 أو 10-54 أو ٠ ° أو 7/7 لا أو va له أو ٠ SAV أو 97 أو ar 497 أو Veg Ver 1 أو ٠١١ أو قلحلا أو للح أو 7١ أو 170-1177 أو 1797 أو ١8١ أو ها أو 131 أو 137 أو Saag 348 أو ٠١7 أو ٠١4 أو 797 أو 7١4 أو .الا A أو YYo-YYY أو ٠١-77١7 أو ١-7 أو TYR ها أو ١ أو SEE 9 © أو 0-50 أو 80 أو STAY 5ه أو حلم أو 84 أو Sra. 347 أو ١ 7 أو gran 501 أو 507 أو 5097 أو 508 أو 5٠ أو 417 أو 1-416 أو ١ 7 أو 576 أو 577 أو 77؟ أو Save 5 أو 544-467 أو Jogo. fren SAP LA VY أرى 21-464 أو مختحالاء أو 77 أو جزء مكمل من أي من متعددات النوويتيد السابقة.١ 8/- نوويتيد قصير السلسلة وفقا لمطلب الحماية (YY) حيث يشتمل النوويتيد قصير السلسلة على نوويتيدات يتراوح عددها من ٠١ إلى Er مذكورة في أي من سياقات التمييز r أرقام: ؟ أو * أو 40-4١ SYA أو 7-497 أو 28-84 أو Jv. الال أو : 4 أو ١ه أو 9ه أو 0 أو 97 أو 97 أو 397 أو ٠١# أو ٠١6 أو PE ENV > أو ١-16 أو SAVY 1/677 أو لال أو 181 أو هه أو ١91 أو ٠7 1 أو ١94 أو ١8 أو 7 أو ١١4 أو 109 أو ٠١4 أو 17١ أو 775-777 أو ٠١-١ v أو 2١6-7١ أو 7176© أو 3١7 SFT.YYA أو أو “Yo. 1 5 أو 8١ أو 98 أو TAS ار YAS STAT نك أب كك أو J rar جوم 4 أو 561 أو 567 أو 0 أو 508 أو 4٠١ أو 417 أو 1-415؛ أو 77؛أو 7١ ve أو 57١ أو 577 أو ؛7؟ أو م أو تللح ارت J toy J fo. ff هع ١ أو 11-4 أو EVA ETA أو AVY١7: طقم تشخيص يشتمل على: ض -4 نوويتيد قصير السلسلة وفقا لمطلب الحماية (797)؛ و (0 v (ب) مفاعل تشخيص لاستخدامه في تفاعل بلمرة انزيمية مسلسل أو في معايرة تهجين. 1 Ylo¢١ . . ب قائمة بيان السياقات١ <١٠١>شركة كوريكسا كوربورشن١١< > مركبات للعلاج المناعي وتشخيصض سرطان البروستات وطرق لاستخدامها١7 > > اإانلاتغراتاء ١آبي سيV £0 : > معاهدة التعاون في مجال البراءات١ ذ//ا/كق > ١ًء١<دا ل IVY| فاست سيك للوندوز نسخة رقم ؟ > ١7١< ١ > ؟٠١<١< 7 > كالم: ؟ > دنا ١7<<7١؟ > هوموسابيين: > ١١< >سمة متتوعة YY Y>: : (AY (.........)١( <YYY>G 0ن أو TA=n<YYY>١ > tee14 ٍracaacager 553 -- 9293-3 ctaggaaacce 650 9 ا ع ججح ااا arcaaatcrtg agggtigtct ggaggactic aaracacctc 00-03-33 gaaccagett 1280 - CTStIactica 0-0-3-2 atgeccaaagg aagacectee 180 ج----02-57-0 2223233-27 caggacagag tgggorange 240: 203929-2-526 2399-25-6 3030-02-5 9-0و جع CCCCagCTtes 2-2-0-3 -35-:-9 2329239-2-296 gtgcgtigng CChecagets 2350-2-86 300 CTLCatggac agrgtccage acatgrcacs CLCCaguatc tcagugugga tccacTagrs 364 ctagagcegge Cgccacageg grggagctas ageing cocttiagtg agggtraats 4249 gCgcgctisyg cgtaatcarg grcataactg LLreotgrgt gaaattgtta tcocogancaca 480 atcgoacaca acatacgage cggaagcata aagrtgtaaag cctggggrtgc ctaatgageg S440 anctaactca ¢actaatige gtigogctca CTgnccgats LCcagtangg aaaactgrcyg 600 LgCCageige 3553323332 cggccaacge ncggggaaaa geggtitgey totngggggc 660 nantcctgcg CtCggtantt cggctgcggyg gaacggrats 720 220905-63-02 عاو ا actccrcaaa ggrniggtatta cggttatccn naaatcnggg gataccengg aaaaaantss 784 cancaaaggg cngaaacgta aaaa 814 32323333333 <١٠؟ > ١ :MT > ؟ ١ ١<١ 7< ؟ > دنا ْ<١؟ > هوموساييين> ١١١<YY > >سمة متنوعة)ملت(.........)١( > YYY>© أو «CT A=n<YY™>: 7 <i> acagaaatgt tggatggtgg agcaccttfc Catacgactt acaggacagc agacggggaa 60 وفع ctggagcaat agaacccoag ttcracgage tgetgatcaa aggacttgga 120 . Ccraaagrtctg atgaacttce caatcagatg agcacggatg attggccaga aatgaagaag 180 dagtttgcag 2513-2-96 aaagaagacg 2399039395 ggtgtcaaat ctrtgacggca 240 acagatgccet gtgrgactcs ggtictgact titgaggagg ttgttcatca tgatcacaac 300 aaggaacggg gctcgtttat caccagtgag gagcaggacg tgagcccccg coctgeaces 360 crgcrgttaa acacoccage catcccticet ttcaaaaggg atccactagt tctagaagceg 420 gcecgecaccg cggtggaget ccageithityg Ltocctitag tgagggttaa ttgcgagett 480 ggcgtaacca tggtcatage tgtitcctgt gtgaaattgt tatcegetca caattcccca S40 aacatacgag ccggaacata aagtgttaag cctggggtge ctaatgantg agcetaactcn 600 cattaattgc gttgcgetca 0290009-22 tccagtcggyg aaaactgtcg 2 660\lo¢ r ccancgaace ngccaccoce cgggaaaagyg cggrtgcencet CTgggeeten tocgettece 7298 2552و 22-0-2207 CCggtetecg Jgoetgaggnga acggttcact cotcaaagge 788 ggtnenccgg ttatceccaa acuggggaca ceenga 81s Y<YY> YVY >» YAY > دنا > YYY> هوموسابيين > ؟١٠١'< ا > YY > سمة متنوعة > YY >ْ .لال ........)١( > YY Y> G دمحف 01 و > ١ ١١< V<iv> Ctitlgaaag aaggzatgece 393532-29-22 aacagcagag grgcagegaeg gagacicacy 680 2202و CcacIdgugat 3242-0393-0202 92-2-2292 tgugatcatg atgaacaacs 122 و23343433 )حا 2293220239 222323-03-39 1035-35-32 cgtcaaagat 9203-0-22 10 02229و 0222-39-2 a28CaCatct 35033420-25-2022 90-2-2803 240 229-0223 2293-2539 aagticarca 98-02522539226 302102-2-122 gatcageage 300 fcgtagaact gggguoatat cgciccaaca gocatgaatt coccatctge tgtocsgraa 360 gtcgrtataga aaggrgCicc accatccaac atgtictgte 5093399333 ggccaggtac 420 6442203-22 cratancgag tcgrartacg Cgcgcotcact ggcegtcgtt ttacaacgea 480 : grtgacrggga aaacccotggg Cgttaccaac ttaatcgcct tgragracat 20-0-2025 540 ccagetggge gtaatancga 23202-2-9- 2009220902 cttccaacag ttgegeacet 600 gaatgggrnaa atgggaccoc cctgriaccyg cgcattnaac ccocgenggg 2292-0 660 acceccacnt nnaccgetia 0323-2-3 gCgecttane geccgctaas 0-0 720 CCTCCCUECC 5-10-2121 CItaCCCCg ggguitccee cntcaaacse cna 773 - : ٠ صر“ . > YY AYA < YY < دنا > YYY> : هوموسابيين > ؟١7<¢: > ١١ ١<As pia daus > YY\> }: )تفل.........)١( > 77 7< ٍ ِ 0+0 >محفغ ىت 0 أو 7١١ -< : Et <tt> ووه 2293-6 tgtgctitcet 91239-39332392 ccagggetgce آ- 75 60 : aatgggeaga cacaggtgta 23329و rteggaaatgg gtacaatito gteoretece 120 tcggaacact ggcotgtctct gaagacttct cgcTcagtit cagtgaggac acacacaaag 180 acgrgggrga ccatgttgtt tguggggtgc agagacggga ggg9csyggac ccaccengga 240 agagtggaca grzacacaag gnggacactce tctacagactce actgaggata agcectggagcee 300 acaatgcatg aggcacacac acagcaaggs tgacnctgta aacatagcece acgceogooct 380 :angggcactyg ggaagcoran atnaggccgt gagcanaaag aaggggagga tccactages 420 cranagegge Cgccacsgcyg gngganctcs anctIiIight CcCCtitagtg agggttaact 480 gCgcgertge cnitaarcatyg grcatanctrl 029-29-2 gaaattgrta 0-83 S40 atcccacaca acatacganc cggaaacata aantgtaaac ctggggrgcc taacgancga 00 33-0223-2533 0302-3-2 gooCgctnte caatcnggaa accrgecIng 880 ‘CCnCcTTgcat tatgaatcn gogiaccccs ggggaaaage Jgriigegit 9992392022620 720 0622و 0102-6312-2534 26202012 09926325226 39029013526 330203226 780 200612-20-23 aagggggrat CCCggUtice conaartcegyg dganance 828 © > ١١٠١<AYE > 7١ i>١< ؟ > دنا<'١؟ > هوموساييين> 7١<ic sla سمة <YY\>١ )874(.........)١( > ١١77<ٍ 0 أو 0 TA=p<YYY><Q oO < م.م الح Ctottactga tagatggaac rrattaagct tttcacatgec gatagcacac 60 معفم 2و2 gcatccaaag tactaacaaa aactctagca atcaagaatg 1039032-92 120° atcocacaac aatcaacacc الل ووو aaaatttggt tttcataaga raatcratac 180 tgaagtaaat ctagccatgc 383 rgcetttaggt cactccaage ttggeagrea 244 acatttgges, t2aacaataa raaaacaatc acaattrtaat aaataacaaa tacaacatts 300 caggccataa tcatatacag rataaggaaa aggrggtagt gttgagraag cagrtattag 360 aaragaatac CLTggcctcrt 32290334323 gtctagacac tttgattcac tcageocrga 420 cattcagtrT tcaaagtagg agacaggttc tacagratca tcoracagtt tccaacacac 130 tgaaaac3ag tagaaaatga tgagrtgatt trctattaacg cattacatce tcaagagtia 540 ccaccaaccc 2-39-2303 aaaaattitc aagttatatc agrcatataa crTggtgrgc 500 crattccoaaa ttagtgcotaa atggattaag tgaagacaac aatggreccc taacgrgacs 660 gatattggtc atcoitacca getictaaat crnaactitc aggcettitga actggaacac 720 cgnatnacag tgttccanag ttncaaccta ctggaacatc acagutgrtget tgattcaaaa 780 وم 2و Ttaaaaacrta aaccttaacc tggtggaaaa ataacttgaa atna 834 T<YY > AMA <> دنا > YYY> : هوموسابيين > YA Y> <YY+> ic 4a >سمة YY > )ملغ(.........)١( > <77؟ لى | و0© A=n<YYY> “> > E> 2ج وج جح لح aagacccreca tcaatagatg gagacataca gaaatagtca ed aaccacatct acaaaatgcec agtatcaggc ggcggcttcy aagccaaagt gacgrrrgga 120 tgraaagtga aatatcagee ggcggargaa gcagatagtg aggaaagteg agccaataat 180 932-03239339 ccgtggaage ctgtggetac aaaaaatgtt gagccgraga tgecgregga 240 aatggtgaag ggagactcga agractctga ggcttgtagg agggtaaaac agagacceag 300 taaaattgta ataagcagtg ctrgaaccat ctggtettcgg ttgteeocea tcagactatg 360 gtgagctcag gtgattgata cceotgatge gagtaatacyg gatgtgttta ggagtgggac 420 tcetagggga تي cgatgccegr rgggggccag tgecceecta grtgggggst 480 i aggggcrtagg ctggagrdgc aaaaggctca gaaaaatcct gcgaagaaaa aaacttctga S40 Vlog ggraaraaac aggattatce cgtaccgaag gocttTttgg acaggeggtyg tgtggcggec 600 ب 17292و 0-0-3 cracatcgeg ccatcattgg tatatggtta gtgrgrrggg 680 grancanggc ctancicgaa gaacttitgg antggaatcca aatcaatrnge ccggecggaa 720 gtcattanga nggctnaaaa ggocctgtta 1999-2-9 ctnggoLtta cecnacccat fp ggaacnencc ccccggacna ntgnatcecce acccrraa 1 لا > 7٠ ١< AY > ؟ ١ ١< ؟ > دنا ١ <؟ هوموسابيين > 7١ 7< م > YY > ic مثنو daa <Y¥YY\> : )8197(.........)١( <YYY> G أو «CT دمحف > ١7 < <هه؛ > لا 9-0و .المامعج مج الجا تا 2-63-333 gggggtagag ggggrtgcerac agggtaaatsa 60 . 2919-0262-2532 2429252 titaggggaa ttaattctag gacgatgggt atgaaactge 124 ggrtogcoce acagattica gagcattigac cgtagtatac ccccggtegst gragcggtga 180 4agTtggrtig gritagacgt ccgggaattg catcTguitt raagectaat gtggegacag 240 CTtcatgagtg 2493-32-02 tgtgatgtaa trattacacn aatgggggct tcaatcggga 300 gracrtacccg attgtcaacg tcaaggagrce Jgcaggtcges tggtictagg 2-19 360 gaagratgta ggaactgaag attaatccge cgtagtcgge gttctcetag gticaatace 420 artggtggcce 3235593-2-296 atggrtaaggg 1299393-2-392 tgaactcgte 9-3943 480 ---12212وة2 2 ngggatggga 2139-2132-2332 ggactangga tnaacggcgg 202039263 50 233-13-2 tCtancicct gaaacgtctg aaatgttaat aanaactaan 525209223 600 gaacntinng gaaaaggdgcer tacaggacta gaaaccaaat angaaaanta atnntaangg 660 015235-72-52 aaaggrtnata accnctecsa triatcccace caatngnactt ccccacnenn 720 acrattggat necccantic canaaanggc Cruceccecgg tgnannccenc ceIstgrnice 780 cornantcgan ggttatbcnc CCCtngentt atcance 817 / > ١٠١< ١+4ل <١١؟ > Yad YYY> > دنا ا 7١7 < > هوموسابيين ا <١؟7 > YY > > سمة متنوعة <77؟ > (١)......ت 430 7) ١١ < + > ودوحشقضء ىت 0 أو 0+0 : ><« و < A aaggaaagec gagesgaage tgctaacgtyg 2-493 50 ع2 2-9 cataaggaga actiictgct ggcacgcget agggacaagce gggagagcega ctccogagcogt 120 ١ cTtgaagcgea -0-12-2-2-3933234 ggtggacttg gcactgaaac 29-02393933202 cartccgcegag 180 racgaacage gcctgaaagt gcetggagegg Jgaggrecage agrgtagecs 3-343 240 TCggtggecg angcctganc cgctctgcct LgCTtgecoac angtgggccg ccaccccceyg 300 accrgecrgg grecaaacac tgagecctge tggeggactt caagganaac ccccacangg 3840 . ggattttgcet cctanantaa ggcetcarctg ggoctcgges cccccacetg guiggeentg 4240 tcottgangt gagecccatg Lccaictggg Cccactgtcng gaccaccttt ngggageget 480 cmecttacaa ccacannatg cccggctcct cccggaaacs antcccancs tgngaaggac 540 Caagricctgn atccactiant nctanadaccg gccrnccncecg cngtggaace cnccrentge 630 tnagggttaa Crancgccttg gocttnecan ngtcclinene ntttecennt 660 عمجا اح gttnaaattg LLangcrnccs NCCnntcoen Cancnncnan cccgaccenn annconnann 720 : ncccgggegt necancngat tgacconnec ncccLntant tgenconggy nncennegece 780 nggganncyg 799 هوج 7١٠١< > ١ ١< ؟ > Avy ١ < ؟ > دنا YIV> > هوموسابيين <YY>A CL do glia سمة > YYi> (AV) )١( > <777؟ 0+0 د خحف 1 0ن أو < 77١ -< > <ه9.6 296022922 cctcccaggce 1193132-2-932 -- 32 9-023393-63-25 5-399 60 taangatgac actcccaaag grggoecsga CagTggceca gatggacatg gggcrcaces 120 caaggacaag gcecaccaggdt 2093-2-9 dagcccacac gaccoutact ctacgagcaa 189 242062062035952 gggggeuict courgaagra Cgccancagg gctcagtctt tggacccang 240 Caggrtcatgyg ggrogtiagne caactggggg ccncaacgta aaangacnca gggcoTengn 30a 2 34602322626 31233-03039326 303-0200296 gaccorocena ClCaczacti 320 360 CSCncacccy CInatntgte ccancIgooc Cngtgccnac teganczcs nggacgrgcg 420 534-62230326 CCggantcnc nctccegees CgTCCcoTatc cacgnnccan caacaaacree 430 CTlCCNtantg caccnattcc Cacnriinne مجح عدو NnCgngeoos ctintaaaag 340 ggtigances cggaaaacnc cccaaagggg 999933-2-239 tacccaactn ccooctnara 500 getgaanccs ccatnaccnn Gnetcnatgg ancenccent tttaannacn tictnaacste 660 gggaanancs CUCgnecntn cscoonttaa CCCCICTTIig ChangruIcns cecocnneos 72Q Acccnnneng geneiacnann crnaaaaaggc connnancaa ورج ودج ccrcancicg 780 6312122232293 aaatcgeacn 801 ٠١ > YY > ؟ > كلا ١ < : ؟ > دنا ١< > ١١< ١ سمة متتوعة > +؟١٠< )7483(.........)١( > <77؟ G JC TA=n<YYY> ٠١ > <<30-532 ggccagtgtg gcagerttce Ctgtggetge cggrgccaca cgectgtecce 60 acagtgtgge cgtggtgaca gecttcagecyg cccrcaccgg gttcacette tcageectge 120 agatccrgec ctacacactyg 020602020 accaccggga gaagcaggdtg ttcctgecca 180 aataccgagg dggacactgga 3-8 gtgaggacag cctgatgacce agettcctge 240 caggeccraa 02029938990 ceccrreccta arggacacgt gggtgcetgga ggcagtggec 300 02-02-26 0244-26-39 19 ووه tgatgtctcc gtacgtgtag 360 tggtgggtga gccocaccgan gecagggtay TTCCgggecg gggcatctge crggacctcg 420 ccatcctgga tagtgcttcce tgetgtceca ngtggeccca وج tgggerccac 480 tgtccagerc agecagtatg tcactgecta racggrgtct gcocgcagges tgggtctggt 540 © cccactzact ttgetacaca ggtantattt gacaagaacg anttggccaa atactcageg 00 222222 ccagcaacat tgggggtgga 29-0-9022 cactgggrtec aacrtceecge 660 TcCCcTgttaac cecarggggac £tgeeggettg gccgecaatt tcugttgetg ccaaancnac 720 951210-02-02 1-59-0032 gttgetgget gaagtgenta cngencanct nggggaggeng 780 ggngrLccc ‘ 789%. ١١ > ؟١٠١< YYY > YY > ١7< ؟ > دنا ْ ؟ > هوموسابيين ١١< |ّ ٍ >77١< <١77؟ > سمة متنوعة )17/7(.........)١( > YYY> 0 أو «CC TA=n<YYY> ١١ <tr> cccaccctac ccaaatatta gacaccaaca .cagaaaaget agcaatggac recctzetac 60 ttcgrtaaat aaataagtta aatatttaaa امعو وو tetgtgatgg caacagaagyg 120 accaacaggc gacatcctga taaaaggtaa Jgaggggggtd gatcagcaaa aagacagrtge 180 tgTgggcoga ggggacctgg Ltcttgtgtg ttgcccctca ggactcttce ccracaaata 240 } acttrtcatat gttcaaatcc catggaggag tgtttcatcc tagaaactcce catgcaagag 300 ctacattaaa cgaagctgcea ggttaagggg crttanagatg ggaaaccagg 802939 360 racccagctce ccaaaaaccc Ltetctaggt gtgtcrcaac taggaggeta gcetgtraaco 420 ctgagectgg graatccacc £gcagagted ccgcattcca gtgcatggaa cccttcotgga 480 ctcococtgrat aagtccagac tgaaaccccc ttggaaggne tccagtcagg cagecectana 540 aactggggaa aaaagaaaag gacgecscan Cccocagetg tgcancracg caccrcaaca 600 ٠ gcacagggtg gcagcaaaaa aaccacttra ctttggcaca aacaaaaact ngggggggca 660 accceggeac cccnandggg gttaacagga ancngggnaa cntggaacce aarccnaggea 720 ggcccnccac cccnaatntt getgggaaat ttttcetcece ctaaactnee tc 772 yo.IY <YY o>ال١ > ؟١١<YYY> > دناا <7١١؟ > هو موسا بيين> ١١١<YY) > > سمة متنوعة( voy ) ER ) <YYY>G أو «CC TA=n<YYY>IN > gv e>~gccccaatee cagctgccac accacccacg gtgactgeac tagttcggat gtcatacaaa 60 agctgattga 210323-00-06 tacttttigg tcgtgagect CLogcttggt gcaggrioea 120 LLggetgtgt tggtgacgtt gtcatigcaa cagaatgggd gaaaggcact grtcrcetetg 18a aagtanggtg agtcctcaaa atccgtatag rtggtgaage cacagcactt gageccrrec 240 atggtggrtgt tccacacttg agtgaagtct tectgggaac cataatcrrt crTgatggea 300 ggcactacca gcaacgtcag ggaagtgetc agccattgrg gtgtacacca aggcgaccac 360 agcagctgen acctcagcaa tgaagatgan gaggangatg aagaagaacg tcncgaggge 420 acactrgctc tcagtcrtan caccatanca gceccntgaaa accaananca aagaccacna 430 crnccggctge gatgaagaaa tnacccencg tLgacaaact tgcatggcac tggganccac 540 agtggceccna aaaatcitca aaaaggatgce cccatcnatt gaccgceccaa atgeccactg 600ccaacagggg ctgccccacn crncnnaacga rganccnatt gnacaagacce tnentggtcc 660cnatnaacnt gaaccctgen ووو tgttcaggnc cnnggectga ctrctnaann 720 aangaactcn gaagrncccca cngganannc g 751 ٠7 > ؟٠١<YY4 > YV\ i>YYY> > دنا١7< 7 > هوموسابيين 7١١< >ل YY > > سمة متنوعة )779(.........)١( > YYY> | «CT A=n<YYT> أو 6 . ١ < 2 “> c caacac ccgggagetd cooogtecte 50 : ecg tecctcetgec rgcccactea gtgg + eer cagcagtncc ctcrotcaga actcancgcc aaganccectg aacadgasce 120 180 اح ال ccrocaatte 3و2و2 catcaagacc 2-2-6 و 22 : ctgtgtgged cagccctgtt ggeagegggc atcngggtgt caatcgatdg 90 240 it acct teggaccact gtcgrecage geccacgeage tcgtcaacgt gggeeac 30 i re cag cesgegttgt ggrcttagee craggrotee tgggetgeta tggtgctaag 380 Seen Sen agrgtgeece cgtgacgttc rcertcatcae tccreceeat ctccaceget 420 ean rgctgoggec agccTtggtge acaccacaat ggetgageac ceecegacst 480 : gectaccace aanaaaagat tatgggteec caggaanact ceactoass” 540 | مس : ض 00 caccatgaaa gggctcaagt gcrgrggett cnnccaacca cacggattee لس caattg | 20-9 2ه anccac ctacttcaaa gaaaanagtg cacagccaact rgaaaacctg cacccaacce aaangggtec ccaaccanaa 72 | الس < ة 2 attnaaggg . | YE > YY o> AMT > YY) > ١< ؟ > دنا ١7< 7 > هوموسابيين 7١١< > YY > > سمة متنوعة (MV) (VY) > 777< «CT A=n<YYY> أو 6 YE > Evب20---2-- caaagritgrnh ctigtigeca taacaaccac cataggtaaa 059 60 cgttcgerga aggggttgra graccagege 193932-1-222 cotigcagag 2393-3 120 ggcaggrcca cgcagtgcce thitgtcactg gggaaatgga tgcgctggag ctcgtcaaag 180 CCactcgtgt athtttcaca ggcagectcg tccgacgegr 393993-39-22 gggggrgrer 240 --Lcacactcca ggaaactgtc natgcagcag ccattgcotge agcggaactg ggtgggcetga 304 ٠ cangtgccag agcacactgg atggogoctt tccatgnnan gggcccrgng ggaaagtcecc 360 Cganccccan anctgcotat caaangcccc accrtgcaca ccecgacagg ctagaatgga 420 4tctEtcttcc cgaaaggtag 222-2292 tgcccaanco ancccocntaa acaaactcett 480 gcanatctge teognggggg tentantacc ancgtgggaa aagaacccca ggcengcgaac 540 caancttgtt tggatncgaa genataatct 2021-29-6 ttggtggaca gcaccantna 600 ctgrnnarnct ttagnccntg gtccicntgg grutgrncettg aacctaatcn cconnccaact 660 gggacaaggt aantngccnt ccntitnaatt cccnancntn CCccctggtt tggggtitin 720 CaCncrccta ccccagaaan nccgrgticc cccccaacta ggggeenaaa conntenec 784 cacaaccctn ccccacccac gggrenent ggting 81s Yo > ؟٠١<YAY > ؟ ١ <١< ؟ > دنا١7< ؟ > هوموسابيين> YY >dan > YY) > متنوعة(YAY) ) <YYY>G وحمل 0 أو > + ١١ <: ٠١ > Evaccaaggectyg ggcaggcacta nacttgaagg tacaacccca ggaaccectg grgctgaagg 60atgtggaaaa cacagattgg cgcctactgc ggggtgacac ggatgtcagg gtagagagga 120aagacccaaa ccaggtggaa ctgtggggac tcaaggaang cacctacctg ttccagctga 180cagrtgactag ctcagaccac ccagaggaca cggcecaacgt cacagtcact gtgetgtcca 240ccaagcagac agaagactac tgcctegceat ccaacaangt gggtcgetgce cggggcrctt 300tcccacgetg gractatgac cccacggagce agatctgcaa gagtticgtt tatggaggcet 360gcrtgggeaa caagaacaac taccttcggg aagaagagtg cattctancc tgtdngggtg 420tgcaaggtgg gectttgana ngcanctctg gggetcange gactttccco cagggceccct 480ccatggaaag gcgccatcca NLgttctctg gcacctgtca goccacceag 83 540ncaatggctg ctgcatcnac antttcctng aattgrgaca acacccccca ntgcecceccaa 500ccectcccaac aaagcTticcc tgttnaaaaa tacnccantt ggcettitnac 03 650CICCTCCnLT CTCCCCNntn aacaaaggge nctngenctt 340230002 8 720cctnecnngg aaaaarntnec Ccccctggtt 0201332-02 02-0016133 anctnccccc 780ccc 783٠4 ا١٠١ > ؟٠١<Avy > ١ <١ < ؟ > دنا<؟١؟ > هوموسابيين< YY +>ic 3a >سمة YY Y>(Ae ١(.........)١( <YVYY> 0<١١؟ >دوحمف ىن أو 60 ّ : Yl > Ev >gcccocaattc cagcetgecac accacccacg grgactgeat tagttcggat gtcatacaaa 50agcrtgattga agcaaccecsc 202222293 tcgtgagcct 23022992 gcaggtocca 120rtggctgtgt tagtgacgtt grcattgcaa cagaatgggg gaaaggcact gtictaiicg 180 aagtagggtg 2-3332--2وة3 atccogratag ttggtgaagc 2032903022 200022 24022191923139297 tccacactitg agtgaagoct tcctgggaac 3233420222 cttgatggea 300ggeactacca gcaacgrtcag gaagtgcrca gccattgtgg tgrtacaccaa ggcgaccaca 360gcagctgcaa cctcagcaat gaagartgagg aggaggatga 393393309 cncgagggea 420Cacttgctct ccgtcrttage accatageag cccangaaac caagagcaaa gaccacaacg 480ccngctgcega atgaaagaaa ntacccacgt tgacaaactg catggcecact ggacgacagt 540 tggcccgaan atcttcagaa aagggatgcee ccatcgattg aacacccana tgceccactge 500 criacaggget gConccenencn gaaagaatga gccattgaag 23199320226 ntggtcttaa 660tgaactgaaa ccnecgcatgg tggocesotgt tcagggenct tggcagtgaa trctganaaa 7290aaggaacngc 1130-2-22 ccaaangana 33403206006 99929229566 2-12 780ggccaaggan ccctgcccan g 801WY > YY a>ال١ > YY Y>YY Y> > دنا١٠١'< > هو موسابيينVe > YY > .Y Y \> > سمة متنو عه( لا £ v ) Cees ecaan ( \ ) < 7 7 7 >G أو «CT ودحف > YYYT>١ > ءّ «و١222303 2200602 حي 83 ctcagtggea acacccggga gctgteottgt 60 ccrcttgtsga geccrcageag وجوج cagaactcac tgccaagage ccrgaacadgg 120 agccaccarg cagtgecrtca gcrtcactaa gaccatgatg arcctetoca atttgetcat 180 0-9-9 ggtgcagece rgrtggcagr gggcatctgg grgtcaatcg atggggcatc 240 cceooetgaag accttcggge cacrtgtcgtc cagrgccatg cagtttgtca acgtgggeta 3100 crrecoeate geageegged ماعو ووو rgcrettggat rccctggget getatggrge 380 taagacggag agcaagtgtg cocrcgrgac 00062 2-2-2 632022263 120 tgctgaagtt gcagetgetg ووو 2980632 acaatggctyg 220222560 280 gacgttgctsg gtancgcctyg ccatcaanaa agattatggs rccccaggaa aaattcactc 540 aancrncggaa caccrniccatcg aaaagggctc caacttchgn وو aactarcaccg §00 gaatcrotgaa agantcneee racrtccaaa aaaaaanant tgccteencec cccnetigt 5460 tgeaatgaaa acntcccaan acngecaacn aaaacctgcec cnmncaaaaa ggnrcncaaa 720 T 740caaaaaaant nnaagggertn\ A < Y ١١دAvY > +١ <YVYY> > دنا<7١؟ > هوموسابيين> YY > .YY Y> > سمة gia عه(A ٠ Y ): ceanseea ( ١ ) < Y 7 7 >G sl «CT A=n<YYY>\ A > Eva>Vlog\o ccgetggrig cgetggteca gngnagccac gaagcacgte. agcatacaca gectceaacca 50 caaggrtcrotc Ccagergecge acattacgca gggcaagage ctccageaac actgcatatyg 120 |: ggatacacrtt tactitagea gccagggtga caactgagag gtgtcgaage trtattcTict 180 gageccnctgt tagtggagga agattccggg cttcagcetaa gragtcagceg tatgtcccac 240 |] aagcaaacac tgtgagcage 393 aggcaaagte 2626203902 2-22-3484 300 cattgggcat gtccageade tccccaaaca cgtagacacc agnggcestcc agcaccezac 360 ggatgagtgt ggccagadct geoccertgg ccgacttgge taggagcaga aactgciect 420 + ggrtcegecs 3030602 actcccgcac tcatcactge actgagtgtyg ggggactisg 480 gctcaggacg rccagagacg tggTtccgec ccertcnctta atgacaccgn ccanncaace S40 gtcggcetcce gecgantgng Ttogtcgtne ctgggteagg 023029920 crictacrTtge 500 اوعدو Nggeccatgg aattcaccenc accggaactn grangatcca ctnntctotat 580 aaccggricgc caccgennnc ggaactccac tetiartnec ودود ggrtaaggta 728 © accerreancg ttaccttggr ccaaaccnen ceontgtgreg anatngtnaa tenggnecna 780 tnccanccne acangaagcc ng 802 - V4 > ١ ١< YY¥Y .: ا > : ؟ > دنا ١ 7< هوموسابيين > ؟١7< < YY > ic سمة متتو <YY¥\> )771(.........)١( <YYY> G أو «CTA=n<YYY> 19 > Ev v> cnaagcthcs aggtnacggg ccgenaance tgaccenagyg rancanaang cagnengcgg 60 gagcccaccg tcacgngdng gngrcretat nggaggegggc ggagccacat cnctggacnt 120 cnicgacccca acteccecnec ncncantgca gtgatgagtg cagaactgaa ggenacgtgg 180 caggaaccaa gancaaannc tgctcenntc caagteggen nagggggcgyg ggctggecac 240 ) gencaccent cnagtgetgn aaagcecccnn cctgrcract tgtttggaga acngcannga 300 أ catgcccagn geranataac nggcngagag عمج وجو عدي ggergegean 360 cgngtntgct tagnggacat aacctgacta cttaactgaa cccnngaacce grcenccecet 420 . ccactaagct cagaacaaaa aacttcgaca ccactcantt gtcacctgnc tgcrcaagta 480 aagtgtacce catncccaac gtntgetnga ngctctgnec tgenctangt tcggtectgg 540 gaagacctat caattnaagc 3292-2269 actgcctcett getcacegna acaancnacc 600© دحج عمدحمص agggggganc ggceeoccaat ccccccaace ntruaattnan titanccccen 660 cececngges ووو cnancacent nnacngggna aaaccnnngc titneccaac 720 nnaatcence © Ce اا 731 ١ Yo > YY ex علا > ؟١< ؟ > دنا ١ < هوموسابيين > ؟١< < YY o> سمة متتوعة > YY > . . . (Yo) .......(V) <XYYV> G sl «CTA=n< YY" ١ > ١١ تجح لح ججح raaaaacccc 8 12236و czaaattgec 50 caacccccts nrccaaacna cecnoticcyy 202333396 caaacccaan tTanntttgd 120 annctaaact aaacnconnt tggnggnnd anccnaatgt nangaaagtce naacccanta ~.840 rpanctcnaa عد 484 ccngeagnel ccaaaaatnt 2223 21-3 240 2235138 nggaaaacce aanccctenc aaggrtgett gaaggnenaa cnaaaancec 300 anccaattgt trtitngecac gecrgaatta arcggnttce gncgreeiss accaaaanaa 360 ggmnnancccc ggttancnaa rccecceennc cccaattata باللا عقوو rongaattgg 420 ganccencsg 222-389 ggnnnnecec عد 383 cnggnneccs أ 480 3ه 201921 aggncnnaat 9ق cccgaaaaat cocrtccnaga aaaaaanctc 540 1 ccaggnecag nnetngggeet nccceceees canggccccet cregnanagt ووو 2139 500 9و2 89 وه 12ج 3126 14 ع2 60 roognecnnc ggeceencen aagancteotn ccganctnan rraaatccnt gectnggega 720 ٠ agtceneogn agggntaaan ggccecetnn 09 754 ىأ < ١ “> Yoo > YY > دنا > YYY> ؟ > هوموسابيين ١7<VY <YYe> سمة متنوعة > YY > ( Yoo ) Cerne ( ١ ) <YYY> G أو «CTA=n<YYV> ’ YY > $v accancccat gaccccnaac nngggacenc ceanccggne nncnacens cggecnacca - 80 nngtnagnne actnenneen natcacnccc cnecnactac geccnenanc cnacgeneta 120 nncanactncc actganngcg cgangengan ngagaaance nataccanag ncaccanacn 180 0: ccagergeec nanaangcct nnnatacngg annacccaat ncgnanccte cnaagraten 240 Ancancanat gattttcctn anccgactac وج ددح Lancecctes ¢ccccaacna 300 cgaaggcnct ggnecenaagyg nngcgnence ccgetagnec cccnncaagt cnencneceta 350 aactcanccn nattacncge toentgagea Lcactcccccg ممعي tactcaactae 420 aaaaanatcn gatacaaaac aatncaagcc tgneratnac actntgactg 90-03 480 ا ntnaancntc ctaacacthc اح tenccaactct ccnaangget S40 ctrtengaca gcatnciitg gttecennct ووو ngaattgcce ttenengaac 500 gggcTenect 1ع وو rcennccgge cagrracttat عع عمج 650 aaaccentnc cntttanttt وو 8 aaccccegge cttgaaaacyg gccecectagt 720 aaaagcccgt tttganaaaa لاع وج 8 755 YY > YY o> 0 Atl > ؟١< ؟ > دتا ١7< هوموسابيين ا > 7 ١< > YY > سمة متنوعة > YY (Ata) (V) <YYY> G او «CT A=n<YY¥>ها در رج > YY ا rccorangtg tngtcgtgca ggtagagget 3023088112 0 60 عع إ: acgctnggan taangcgacs cgantoctag ganrncrnccet aaaatcanac tgtgaagactn 120 ’_ acccrgnnna cggaanggts accgemnngact 012-1938 CgTICCNCECe cannnenetn 180 cataactceng nggecctgcs 362-2662226 0-0-9 ngnccgggee 22-3 240 ncccenncng acconggega 299392116 300 2262031 وود مومسم ع2 gnnttaacern TCTCTCLICS CCTgnagncen anaaantggd CCHnCggricce ctitacccct nnacaagceca 360 NCCnCngess ccceTecant 0129999930 gcconanngct ccgtracng 423 وجوه nnaccoonnn gggticctcg goTtgtcgant cnaccgnang ccanggattc cnaaggaagg 430 TTCGCTACcEg nncaccetitc ccgacnanga 1-0-2-3 540 ممه وج لم ووو CCLonccIcg c2acacccege ncreatcengt nCggnInNccc CCCoacecgc 500 ومموعمدعدهه ncccroncne ngncgnanc CtcCncsncs gretdannca ccacccogec ccgccagece 550 nccanccacn ¢grIgecnng nagenuennte gCncegagen geanenccst cgecnengaa 720 ccacnLcneg ccantnncge tcaanconna cnaaacgccyg Ctgcgagges 311292316 . 780 ncecIcencga gTCoTCoogn CIICCnaces angnnttcn cgaggacacn nnacccegec 80 ال 849 1-9 ١ <Y)e> AYY > YY ١< YYY> > دنا ١١٠١< > هوموسابيين ١١١< > YY > > سمة متنوعة )/489/7(.........)١( > YYY> «CT A=n<YYV> أو G ١ <tr> cgcaaccatyg 60 اج عه gcgcaaacta tacttcgcerc gnactegtge gecregenac gctgacnanc c¢cgattngge ngatatcnan aagnceganc agrccaaact gantaacaca 120 cacacnacnan aganaaatcc nctgectrcec anagtanacn attgaacnng agaaccangc 180 nggcgaatcg taatnaggcy tgcgecgeca atncgeence gtrtattnen ccagenicnce 240 ctncenacec tacntcttcn nagctgeenn acccctngtn cgnaccccce naggreggga 300 TcgggttLnn nncgaccgng cnncccctee cccentccat nacganccenc ccgeaccace 360 nanngcencge nccccegnnet cctogecnce ctgrectain ccecrgtnge ctggenengn 420 ٍ accgcactga 00 ctacnngaaa ncgnanacgt ccgggeognn annancgctg 480 gtrcctiecn ncnncrececa ccatctecne tacngggtcc S540 و tgggnnngcg cecnegeente tennncacne cctgggacge tntcconege cecectenac teccecectt © 600 cgnecgegnec cgnccccace necatcenca nacgnecctte acaannncct ggntnnccce 660 cnancngnen gtcanccnag ggaagggngg ggnnccnntg ntcgacgetyg nggngangtce 720 aacttancaa 780 ممعم وده cgaanantcc tcnccnecan encracecet cgggegnnet'! z ctetgcantg Lrnctcetgeta 840 ntcTcccecyg ngngencnee 1د وده 3 g 9 J cnaccnntac gantnctcgn cnccgrcTtt ccYE > YYAe > YY >YYY> > دنا<< ؟ > هوموسابيين .: ااا < YY»: dc sila سمة > YY Y>)816(.........)١( <YYY>G و «C«TA=n<YYT>i Ye < tvgcatgcaagce trgagrattc ratagngtca cctaaatanc ttggencaat catggeenea 50 nctgnettces tgtgtcaaat gratacnaan ranatatgaa tctnacntga caaganngca 120 rcntncatta gtaacaantg Lnncgecsat cctgrengan canattccca tnnattnegn 180 cgcattcncn gencantacn taatngggaa NCCnNNCIN NCacCincac. cratcntnce 240 gcniccctgac tggnagagac ggatnantIc tnntncgacce nacacgttca tgriggactn 300 aananccccc. cgengnecac CggrTIngnng Cnagesmuite ccaagaccec ctgrggaggt 360 aacctgcgte aganncatca aacncgggaa accegenncc angthnriaagt ngnnncanan 424 gatcccgtcee aggnetnacce acccctoenc agcgecccct LLngtgcectt anagrgnage 480 gtgrcenanc 102033403 ganacgcgcc ‘agnccanccg caattnggea caatgtcgnc 540 gaacccccta gggggantna tncaaanccc caggatitgtc cnencangaa atcecncanc 600 دوه cconncrtgyg gacngtgacce aantcccgga gtrnccagrce 99-0113163 650 cccecaccggt nnecntgegg gggtgaanct cngnatcanc cngncgaggn nccgnaagga 7290 accggncectn ggncgaanng ancnntcenga agngcencnt cgrataaccc cccctencca 780 nccnacngnt agntccccce 22999323299 9 81s Yo > YY v>YYo > YY \>Vlogدتا > 7 ١7< ؟ > هوموسابيين ١7< > 7"١< de gta سمة > YY > )الال6(.........)١( > YYY> G yl 0 هد حم كلك > ١ ١< Yo > tv ccgagatgee rcgctcegtg gcettagetg Lgetcgeget actctcetctt tetggectgyg ~ 60 aggctatcca gogractcca aagaticagg tttactcacg tcatccagea gagaatggaa 120 agtcaaattt cctgaattgc tatgtgtctg ggtttcactcc atccgacactt gaanttgact 180 ractgaagaa tgganagaga attgaaaaag tggagdcattc agacttgtcet ttcageaagg 244 actggrtctot ctatctentg tactacactg aattcacccc cactgaaaaa gatgagracyg 300 cctgeegtgt gaaccatgtg actitgtcac agcccaagat agttaagtgg gatcgagaca 38d tgtaagcagn cnncatggaa gtitgaagat gocgceatttg gattggatga atcccaaatt 40 2592و geonttttaat antgatatgc ntatacaccc 30600222342 100-833 480 tgtaggggtt acatnantgt tenentngga catgatcttce ctttataant ccnccneecyg S40 aatcgcccgt Cncccngtin ngaatgttic cnnaaccacyg Jgrtggetccc ccaggrenca 600 rccracggaa gggectggge cnctttncaa ggrtggggga accnaaaact tcncttntge "690 ccncccericca cnntcttgng nancncanttis ggaaccetite 0132-0-02 0-8 720 nCctrnncta anaaaacttn aaancgtngc naaanncttn 202-0200266 ttacc 775 ١ > 7٠١< م١ > YY < ؟ > دنا ١7< ؟ > هوموسابيين ١< > ١١١< : سمة متنوعة > ؟7١< ل“ )87(.........)١( > YYY>G وحف ل © أو > YY" Y “> 6.١ anactantac agtgraatct 9 gcgtgranag ggaacggggc ctagaggcac 60 cccanagata ncttatanca 20و23 gaccaagage tgctgggeac atctectgea 120 28-23 cggrecccat 202-0222 creoccatage cacccecagag 192399 180 ccazcangee cocggtggga gogagrcang gaaacaacan accacagagc anacagacca 240 atgatgacca 2 3 مويو 3 gggtggecana nganagesta 300 nccgaggggt cacaccataa acgctaacga ccnagatnan CaccTgcorntc aagrgcaces 35 وجو جع acnaccagng acsmnnaact gcngectgggd gacagenccg ggancageta 229 acanagcacT CaccIgeocc CSCatggecy CnCgentces ووو aagggaages 480 cccmgttaca acTacgagga nacczaggga جوج CCanctgrgad aggaaaaant S40 gacggaacts تدده وهو مهد TULICCTEta cacgecoocT 246012 600 2ف ممح مجع ده 222234-2 ceannatttc 222024293 416 550 ganactcgac tancgectnc 0122-93 naanacnaaa قمع عومد 0999936 720 ggenncctcg necatceten مووود دح ACCncCanti ctiTtgcctet ceoTtngatca 780tccaacseacc gritggeenen cocooconnn CCCTttices 820 YY > ؟٠١< ٍ AMA > 7؟ ١ ١< 7؟ > دنا ١ 7< هوموساييين > ؟٠١< . . > YY > ic sia سمة <YY\> (غلم) .......)١( > YYY> G أو 0 «TA=n<YYY> 7 Y < £ «* ><ه tctgggtgat ggoctorttcs toctcaggga cctetgactg 20295990234 3393832026 60 Lgrttcttct ccgagoccca ggcageggtg attcageccct goccaaccetyg attatgarga 120 g 9 ctgcggatge tgtgacggac ccaaggggca aartagggtcc cagggtccag 99299399-9>- 180 ctgectgagea CLLCCgeccs tCaccetges Cageceenge catgagetct gggetgggece 240 tccgcoetcca gggtictget chtccangca ngecancaag tggegcetggyg ccacactgge 300 ووه 2-1-2629 getetgantc 0292-2-66 tgtactgtge 19-1-2029 360 192020322 02-2-0202 anngaactct gritetgann tctrcantta actntgancc 420 VlogTY مووي CogmCEgEnC قدي TaatgggocR 926696622 FEcereetre 480 acccectocS ancoennnna توعد جمد وجو cencancecy cengggasns 540 . دوو وج 0-13 2206-9 ceocnennetn ggggggcnng grnnctncnc 500 1-2-6 cnctenenne وعد 6 cnncnncgen nngeannttae ncngeeccnn 6640 الموج بجوو ngrntcgnaa وج 201و المعدومصممو متعسعده عدو 720 ennncgnang متمد ممه >ه>مووحج عمسستمص عمم nggnnnennn وده 780 موه ngnattaagy CceoTCQIIIECT CCggecnc 818 Y A < Y \ «> لا ١ > YY Y> دنا > YYY> هوموساييين <Y\V> : < YY > ic 40a >سمة YY Y> (YX) (Y) > YYY> G و «CT كج حش YYY> YA < Cv aggaag = - 2 gagggatatt grangggatt gagggaragg agnataangg 399399-93 60 2 دي gt 3و2 angagggttg اممو 199-999 120 وجوج cc catcgracgg agnnaaaggn tctnagggat Ltttcggete ttatcagrat 180 امد ل 2042-2992 aaatnactntt قدوووممممع aatnttgcte 2283 240 J cg ggragtgcac necngggaan cngccangtt tcccaggetg cranaaccgt 300 ١ ِ 28 naagtgggan cncaaatgaa aacctuncac agagnaccea 223829 36Q ممعم ممع TIFCCCEntg actctgenng agcccaatac cconngngnat geeaccangn 120 Ct onemcar tgaaannnnc tcgnggctnn gancatcang gggtttegca tcaaaagona 480 hi 4 naaggcactt LNgectcatc C3acCnctng CCCIiclncca 229-29-2 540 لس acgCtnneig CRCCTnNnin ganactttnc 009 naancctect 500 FP gggnetinte ممع عمج gnggtnract aatcnnctiac acgcatrcet 6840 2ج معد caatcccanc ggenaatg جح مرح سح حب 0 معمعمدجعممه > : t9gg gTeticecnn Cgandgasss 720 : 731 hf 1 < Y ١ «>YT . AYY > +7١ > Lo دنا > YY Y> ١ هوموسابيين >77 IRS > ١١7 ١< ic سمة مثو > ١ Yi> )877(.........)١( > YYY> G محف لت 0 أو > +١١ : we : Yd > tv 0 &ctagrccag 5-93-9333 206325-32-29 ttggggncenc ttotatganc ancaccagac 60 3-65-3418 tcacanccic ccnacnangc ciataangaa 2200283 ncTgTnenne 120 5111130-16 TCATancet CrUlnacccac Loccicttaa cocntacoge gcecratngen 180 : CANCCantct nogccgecin Cnancsacen grgggccnac Cncnnagnatt ctcaaceres 240 TCnccactnon goctananta ngtncatace ctatacctac 1020334259053 nnnctaancn 200 234-5124152 عصمثقة 23-0534 ccactgacnt 230-72-0 2-0130 aactrcgaacc 80 2626294-02 cCcacngect annnattage ancntccccs Nacnatntet 23-4-3232 420 Htcaacaacs tatcranccg ticncaacc nLincctccyg atcoolirac aaccosmere 480 Cccadataccc nccacctgac nccraacocn caccarccocg goaagecnan ggncatsoan 540 ccactggaac cacrnatngga 0233433333326 CCcnaactctc Lancnennat 2-2 500 24210202632 naatttactn ncantnccat caancccacn tgaaacanaa ccecrgroe §60 Canatcccio ctitcgaaaa cCllaccctit annncccaac cttingggec coccencene 720 2021334293239 12-21220203342 23293343409 262025932433 ancnaggena anannntccyg 780 canacccrat ccctrantin ggggneccit nccongggces cc 822 Ye > ؟٠١< : YAY > 7 ١ > ؟ > دنا ١ 7< هوموسابيين > ١٠١ < > ١١١< ic glia سمة > +7١٠<Y¢ (YAY)......... (V)<YYY> G ol «C«TA=n<YYYT> Ye > <ه.؛ cggecgectg ctctggeaca tgectectga atggcatcaa aagtgatgga ctgcccaceg 60 ctagagaaga ccttcictec tactgroatt atggagccoct geagactgag ggctocooot 120 guctgcagga tttgatgtos gaageogtgg 2292990322 ggagetcocts atccacacna 180 92939534922 Cctggagggcs totatogeca gecteccoat tctcrtccacy ctcoecancg 240 acaccagggg ctccaggcag cocattaree ccagnangac atggtgetec Cccacgecgga 300 CCCatggegc Cctgnaaggcce agggrotoct ttgacaccat CTCLCCCgLT ctgecoggea 380 99-23-9993 tecaczantt cranaacggn cgccaccneg grtgggagete cagetitoat 420 -cochnttaac gaaggrtaat tgencgceteg gcgtaaccat nggrtcanaac cnciiccoge 480 9293388252352 2-2-2-2 200325-2-026 ncnacaracn dacccggaan cataaagtge 540 2389-022:353 9992129-2-227 20223252332 0132-2-22 8825290922 ggctcatgece 600 cCgetitcen ticnggaaaa Cctgtcencecs ctgontIant gaatcggeca ccecocengeg 680 d33agCIITT CYCNLLILNg 599900-0-200 cctcnctaan ccoeIncgess 720 = CEgTCgUine nggltngcggg gaangggnat nnnctcoecnc 132395999129 agnniicncac 1780 2ح 787 7١ > ١٠١< 4ل > YY > دنا > ؟7١7< هوموسابيين > ؟١١< > 77'١< سمة متنوعة > ؟7١< : 7 53(.........)١ ) <YYY> © د حم 1 © او > ١ << YY > <م.؟ِ . EE 1 608 1 ل ا cticetegee 93229-02520595 532229-02 ggaggrgggg إٍُ , -29222332؟ cdtgtaccag 590-2828 agcaagaagg aaggagggag ggcagagegc CoIgetgage 120 dacaaagcac tccrgeagee او gretcttgge gcaggcacat ggggaggect 180 1 Ylo¢Yo ] - a 1 -0323133وهب gggggccace agtecagggg 999339-03-62 203233393 33952993 240 22193092 cnaatggcocet gncacanatc cctacgatic ttgacacctg gaticcacca "0 999932-0222 1---2-2-3 219033-0-226 2032-2-2 aaagaacaca 36292220 | 360 cngcanttsT ggotgttcat ggaaagcaca ggtgtccnac 1299-2999 actiggraca. 424 : Catggriccs gcccacctct coentcnaan aagraattca 0062020000012 conecetneeg 480 cotgggeoet taantaccca caccggaact cantrtantta ttcatceting dntgggcettg S40 nTnatcneen cctgaangcg ccaagttgaa aggecacges gtacceonctc cccatagnan 600 NCoCCANCOC Cancraatgc CCCcCcengge aacriatccaa 02026260226212 tgggggesce 660 agcecangge.CCCCgneicyg ggnnncengn Cncgnantce 03991220226 Ccantcngnc 720 cennngence cccgcacgca gaacanaagg ntngagecnce Cgcannmnn nggrancnac 780 0302-0062 cenncgnng 799 YY > ١٠١< ا YAY > +١ 1< دنا > YYY> هوموسابيين . و" > ؟١< ا >7"7١< سمة متنوعة <YY\> )73(.........)١( > YYY> 6 و «CTA=n<YVV"> TY > tv بح مج ومع 2-6 2 2 222 اا ااا ا 6 مج جح ع 60 tottncecnag ggcaggttta ttgacaacct cncgggacac aancaggctg gggacaggac 120 ggcaacaggc tccggcggcyg goggdceggcgg ccctacctge ggtaccaaat ntgcagcocte 180 Ccgcrcccget tgatnttcct ctgcagctgc aggatgccnt aaaacagggc ctcggeentn 240 ggtgggcacc ctgggatttn aatttccacg ggcacaatge ggtcgcance ccotcaccace 300 nattaggaat agtggrntta CCcnccrnccg ttggencact ccccntggaa accacttnee 360 909902-6-699 catcrggrct taaaccttgc aaacnctggg goccctcrtttt tggttantnc 420 nccngccaca atcatnactc agactggcence gggctggccc Caaaaaancn Ccccaaaace 480 ggnccatgece tinncggggt tgctgenatn tncatcacct cocgggcenca ncaggncaac 540 Ccaaaagttc ttgnggcccn caaaaaanct ccggggggnc ccagtttcaa caaagtcatc 606 CCCCLLgges cccaaatcct cceccegntt nctgggtttyg ggaacccacg corctnnctt 660 tggnnggcaa gntggntccc ccttcgggce CCcggtgggc cocnnctetaa ngaaaacncc 720 ntcctinnnca ccatcccoce MNngnnacgnc tancaangna 000222 tanaaacggg 780 ¢ceeeceneg 789 . . , 9 Vlogِ YY > 7٠١< : 7لا > 7١ < دتا > ؟7١7<١ هوموسابيين > ؟١٠١'< > ١7١“ < : ic $a سمة > YY) > : (Yar) (> 777< إ: 0 0ن أو TWA=1n<YYV> 77 > 5.8 > 35262533032 gttggatgge ggagcaccet tctatacgas Ctacaggaca gcagargagg 50 -adattcatgge tgrrggagea atanaaccce aguictacga gctgctgace aaaggacttg 120 ' gactaaagcc tgatgaaces =ccaatcaga tgagcatgga tgactggeca Saaatgaana 130 2934922232 agatgracos gcaaagaaga cgaagocaga gtggrgtcaa 2262-98-9 210 gcacagatge cIgrgtgact ccggrrctga croctgagga 9922922-03 catgatcaca 300 dcaangaacg gggcregren atcaccantg aggagcagga cgrgageees cgccctgeac 350 ctcrgcergts aaacacecca 90234-22062252 cottcaaaag ggatcccacea ctictagagc 420 ggncgccacs gecggrggage CCTagectitt grreecrtca Stgacggrea atsgcgeges £30 tgcctgraacs atggtcacan ctgtiTcctyg tgtgazaztg ttacccgete acaactccac £49 ‘acaacatacg anccggaage atnaaacceco daagcciggn ggtngcctaa Cgancgaacs 500 flactcacact aacttggette gcgcetcactg cecogerttec agtccggaaa acctgtecre 850 gccagctgee nttaatgaat cnggccacce ccocggggaaa aggcngrtog 1-5 720 cgcncetcee gcetirtcrege ttectgaant ccttececee 99-0522-6399 cttgeggena 780 acggratcna cee 793 YE > YY ١ Yol > YY > ؟ > دنا ١ <ا هوموسابيين <Y\Y¥> <YY>ب YY > >سمة متنوعة )7576(.........)١( > YYY> <١؟ > ورخف 2 © أو G ده *« ¢ < ve gcatgtacga gcaactcaag ggcgagtgga accgtaaaag ccccaatcet 60 20-00-03 ancaagtgcg gggaanagcet gggrcgactc aagcragttc grctggagcee caacttcttg 120 ccaaccacag ggaccaagct gaccaaacag cagcgaattc tggeccgrga catactggag 180 atcggggcce aatggagcat ccracgecaarn gacatceect ccttocgageg ctacatggec 240 cagctcaaat gctactactt tgattacaan gagcagetce ccgagtcagc ctatatgeac 300 gecocaacct ccrchtcectg crmgteccaga accgggrgac tgancnecac 360 2-0-5-5 acgganttgg ancggctgec rgcccaanga catacanacc aatgtctaca rcaaccaceca 420 gtgtectgga gcaatactga tgganggcag crtaccncaaa 220609 ccnagggtaa 480 catcccccgc cgagagcerac accttetLea crgacatcct gctcgacacet atcagggatg 540 aaaatcgcng ggtegctcea gaaaggecernc aanaanaccc tLTtonctga aggecccecgd 600 660 16200 جوج atncrnctagt nctagaatcsg gccegeeatc gcggtgganc ctccaacgtt rcactgaggg ttnattgcecy cocttggegt tatcatdggrce acnccagttn cctgtgtiga 720 aaccnctaac cccccacaat rccacgcena cating 756 Yeo < 1١ «> ١ < ؟ > AYE ١ < ؟ > دنا : YAY> > هوموسابيين 7١١< > daw > YY > متنوعة (AVE). (VN) <YYY> A= n < YYY> 1 0 او © .و < Yo VlogTA ggggaccTeT anatcnacet gnatgcatgg ttgteggtgt 9223-29 gatgaanacg 80 aacaggatct موتو 226392062 629 225102-03 1-0-3 124 cagccagaca CTICTCTtggg caaazaacan caggatnrga grettgatto cacctccaac 180 . aacettcengg getgretgce cggtgaactc gatgacnang ggcagerggt cgrgtncgac 240 aaantcsanc امود tggtgaccta 0-00-0413 09390و -- 20-8 300 crretnnaan angannance canctttgec gageroggnat ttgganaaca cgrcaccoget 360 ggaaacrtgat cIcaaatggt atgrcatcea cCgecTetge tgegtgeaaa 2440223-05 420 ggcncaaatc cgactcceccn tccttgaaag aagcecnatca.Caccccccete cotggactee 480 nncaangact <TICCgCtnc CCCnteciig cagggTtggt ggcannceygg goointgesc 540 rcottcages agttcacnat nticatcagce cecctcogeca gergerncat 0-19 600 ggaanccgtc tctcecticc tgaannaact trgaccgtng gaaragccge 04110051 510 acricactggg cogggttcaa 12-20 cegrnenneen ceTegggeca tictggacee 720 ncenaacttt مو وج Cncecsicgyg 922299 cLocatnggg coccaactct 780 gCTnLogges anccoectgyd gggenenran توعد 92626022539 gece 834 : 7١ > ؟7٠١< 0 AVE > YY < ٍ ؟ > دنا ١ 7< Cd هو موسا > ١ ٠١ < ٍ >77<< >سمة متو عه YY Y> (AVE) (NV) > YY Y> G دحف 1 © او > ١١ ١< و Y 3 < ¢ a> cggncgettit ccngecgege cccgtttceca tgacnaagge teccrrcang traaatacnn 60 cctagnaaac attaatgggt ggcrctacta atacatcata cnaaccagta agcctgcecca 120 naacgccaac tcaggcecatt cctaccaaag gaagaaaggc tggrtcrtctcc acccecrgea 180 : ggaaaggccet gectitgraag acaccacaat neggcetgaat ctnaagtctt 2226و 240 aatggaaaaa aaaaataaac aanaggtttt gttctcatgg ctgcccaccyg cagectggea 300 craaaacanc ccagcgctca Crictgettg ganaaatatt امومع ttggacatca 360 ggcrtgatgg tatcactgee acntroccac ccagerggge NCCCTticcec Catnutiga 420 antganctgg aaggcstgaa ncctagtcerc caaaagrctc ngcccacaag accggcecace 480 aggggangtc ntttncageg gatctgecaa anantaccen tatcacgennc gaataaaaag S40 gecectgaac ganatgcttc cancanccto taagaccgeat aatcctngaa ccatcggtgec 600 ctrecggece gacccnaaag gaatgrtcct gggtcccant CCctectLyg ttnctracge 660 VlogYq i tgraccg c grtattggac ccntgetngn acnacccaan tganacccce ngaagcaceo cnce a oo atteoganctt cntaaatcers ctgccecrac netgaaagea cnatececen: Tocceesgs 20 ~~ SCL cn T = gdngaaceca agaaggreon ngaaaaacea cnem ا ggencenaam 780 . : oo } 814 0 YY > ١1 o> ا > .كلا ١١< ؟ > دنا ١آ< هوموسابيين > ؟١٠١< <YY > سمة متتنوعة > YY > : )7 ١ (.........)١( > <777؟ | G أو «CT ¢A=n<YYY> YY > $v > geatgoTget 55-03-0333 grtgrorcttg tigccataac aaccaccata ggraaagesg 60 gCgeagrgut cgeIgaaggg grtgtagrac cagocgcgsga Lgetenactt gcagagract 1260 92912-02323032 ggresacgca atgccctitg :03-023939333 232593323903 299305 180 2231-23-6 223523-52 030319-03 025-02226295 aagentcoge 2-3-9 240 grgrcgucac acIccactaa 202952-33-51 Ccancagecsa Ltigetgeage 539340299939 309 gggctgacag grgcecagaac acacrggatn ggcecotiicca 593333322 tgggggaaac 360 CHOCCEIlance caaactgect <tcaaaggcec accttgceaca ciccgacagyg ctagaaatga 420 4CTCTULCLIC Cccaaaggrag LTgUTCrigt Lgcccaagea ncecrccanca aaccaaaanc 480 ttgcaaaacc tgctocogtgg gggtoatnnn taccanggtt ggggaaanaa 0-0-2-7: 5440 ganccncctt gutigaatgc naaggnaata atcctcecigt Cttgctiggg tggaanagea 600 caattgaact gtraacnttg ggccgngtic Cnctiggdgtg gtetgaaact aatcaccgre 650 -actggaaaaa ggrangtgcc ttgcttgaat tcccaaantt CCoctagnet tgggrnntet 720 006-21-2 3433433825036 2122-0002-2601 760 YA <YY o> لا > "١ < ؟ > دنا ١ 7< هوموسابيين > ١١ > Ylo¢. > YY +> سمة متتقوعة > YY > (YY (.........)١ ) <YYY> G كع حش 1 © او 77١7 < ذلا > 6 ١ء< "الاج ااا ل 11ج لعج اج عا 2233333 000202-2-235 tgaatgaaaa 650 cttccnaaat tgtccaacce cctcannecaa atnnecattt 020993999939 grtccaaace 120 caaattaatt ttgganctta aattaaaltnt tnattnggggd aanaanccaa acgtnaagaa 180 aatttaacce attatnaact 333210-2-512 gaaacccntg gntticcaaaa atzcttaace © 240 Cttaaatccc tccgaaacttg ntaanggaaa accaaattcn cctaaggetn tttgaaggut 300 ngaccrcaaac 0002552325 25552512306 cnngncrnaa 1362551916 --39929-- 3640 tcecrnttaan cntnggtaad tceccgntaat gaannccct aanccaatta aaccgaattt 4240 CCCttgaatt ggaaattcecrn ngggaattna Cccggggtitl 0-12-5539 gggccatnce 480 CCCrictttcg gggtttgggrn ntaggttgaa totttanang ncccaaaaaa ncccccaana S40 aaaaaactcc caagrnnttaa ttngaatntc coccttccca ggecttttgg daaaggnggg 600 coTncggogg Conggganct Cnttcecscn 10016020 0262:1392 aaanggctrat 560 ngnnCItggt ttttgggoce ctinanggac cttccggacn gaaattaaat ccccgggneg 720 . geeg . 724 3 : ١ > ١٠١< Yor > "١ ١< : دنا > ؟١< هوموسابيين > ؟١١<<YY.> ic sia سمة <YY\> (Vol تل 1 )<YYY> G أو «CT محف YYY> Vlog™ ١ > tee i اجات ا tCotbctitg ctcacattta atotttattt tgattttizt taacgetgea 60 caacacaata toratstcat CLgTLtcotC 3255603-22 345252902229 2962-5 120 tLTacttars tftactgaaa grgagaggga acttitgtgg CCUTUttIcc 3 180 ggCCgecnta agerttctaa attiggaaca tcetaagceaag ctgaariggaa 33999992 240 cgcaaaatca ctcgggogaa nggaaaggtt gctttgttaa tcacgceccta tggtgggrga 300 TTaactgcrot gracaabttac nritceacttt taattaattg tgetnaangc tttaaccana 360 513323322 coctcsccan accaaccccrn ctgacaaaaa grgeeongccc tcaasatnacg 420 Tccoggannt crnctgaaaca cacngcengaa ngttctcant NTCCCCncnc caggtnaaaa 480 tgaagggtia ccatricttaa Crnccacctce acncggennn goctgaatcc tcnaazancn S40 cocncaancn aattnconng CCCcggecric gantangees Cncceggget ccgggaanen 5800 cacccooconga anncnntinc naacnaaact ccgaagartat tCccantcenc tcaattcecce 80 23-225و2قده cctenncenan Cncaattitc و2 ممع gaacncgnne 1ح 720 111-01102226 122092-02-13 naacenccan © 751 : te > 7٠< YoY > YY > ؟ > دنا ١< هوموسابيين <Y\Y> <YY' > سمة متنوعة > ١7١٠< )757(.........)١( > YYY> G أو «CT A=n< YYY> . $ » << ¢ 0 من . gtggratttt ctgtaagatc aggtgttcct cceteogtagg tttagaggaa acaccctcat 60 agatgaaaac ccceccgaga cagcagcact gcaactgeca agcagccggg gtaggagggg 120 cgccecratge acagetgggce ccttgagaca gcagggctic gatgtcagge tcgatgtcaa 180 tggtctggaa gcggcggetg tacctgegta ggggcacace gtcagggece accaggaacet 240 CCtcaaagtt ccaggcaacn togttgcgac acaccggaga ccaggtgatn 2902-9939 300 cggtcacaan cgcggrggceyg tegtcgetgg gagetggcag ggcectcacge aggaaggena 350 ataaaagglg cgccccegea 006925-32-62 090320550526 naanaccatg angttgggct 4420 crnaacccacc accannccgg actteocttga nggaattccc 3434650202226 gntcttggge 484 ry tcconctgat geccranctg gttgeccngn atgecaanca nceccaance ccggggteee 540 22842020620263 002-60201222 025-2939 2522-0-22 9920-0299 5-6 500 ggancccata tcotcnaccan tactcaccnt ncceceacnt gnnacceanc ctrtetanngn 660 CCScencccyg nCCtctggec cntcaaanan gctincacna cotggguctyg cottcccces 7 Lriccctatcet gnacccecnen tttgtetcan tne 1 3 $Y > ؟٠١< ١ > ؟١١< ؟ > دنا ١< هوموسابيين > ؟١١'< ١٠ > teva 222532532526283 tcacaacaga catgettcat cccacagace tcttgacaca gottcaaacg 60 —p— - : - - 3 2 agtgaaczca tccttgatts atatacatat atgtictcag tattttggga gccrTtceac 120 Ctclttaeac CTttgttcatt atgaacactg aaaataggaa tttgrugaaga gttaaaaage 180 tatagerIget ttacgragrta agttttigaa grtcracattc aatccagaca cttagttgag 240 Cgttaaactg tgacttitaa aaaatatcat ttgagaatat 293 9862-3 300 2022255 tgactaattg tgutttatat attagggrag ع 0 341 EY < 7٠< ٠١١ > ؟١ا< 7؟ > دنا ١ < هوموسابيين <Y\¥> EY > 56 +< acttactgaa tttagttcty 902-26-0 tatttagege tgratcataa atacttzgat 60 gtltcaaaca ttcraaataa ataattttca gtggetceac a 101 0 (EY > YY > Yo > ١١ \> : ؟ > دنا ١< Ylo¢TY هو موسابيين > ١ ١< : : EY > 56 > 2032622532932 tacagtctaa gJgatgrtgtict taaatcacca LLCchtcoIig gtoctcacss . 60 ; TCcagggrgg tctcacactg taatrtagage tattgaggag tcrtacage z2aatctaagat 120 tcagatgeon Cgcraaguet agagttctag agttatgtit cagaaagtct aagaaaccrza 1890 ccrcrttgaga ggtcagtaaa gaggacttaa tatttcatat ctacaaaatg accacaggat 240 tggatacaga 2093935-53 tcctggataa ctcagagcetg agtacctges cggaggccac 300 tcgaa 308 tt < YY v> AoY > YY < 0 دنا > ؟١7< ٍ هوموسابيين > ؟١7< > 77١< : ] متنوعة dan <YYY> ( ب( اعم 0 ) <YYY> G أو «CT >وحفطد ؟١١< ti <ter> acataaacat cagagaaaag tagtctttga aatatttacg tccaggagot cTrtgrrtcee 60 93253225299 929292552 ggtttgtgtc caaagtattg gcagottcag ttooceatott 120 ctctccatce tcgggcoattc ttcccaaatt tatataccag tcettcogtcca tccacacger 180 ccagaacicce 02-22522953239 taatatctca tagetcggct gagcottittca taggtcatge 240 i EgCrgrogte ctrtcttrtta ccccataget gagecactge ctctgatttic aagaaccrtga 300 dgacgccctc agatcggtcrt Loccatiota Ltaatcctgg gttcttgtet gggttcaaga 360 ggatgtcgcg gatgaattcc cataagtgag teccetctcgg gttgtgoott tcggegegge 420 acttggcagg ggggtcttge tcctttttca tatcaggtga ctctgcaaca ggaaggtgac 480 Tggrggrigt catggagatc tgageccgge agaaagtttt gctgtccaac aaatcraccg S40 : tgcraccata grrggtgtca tataaatagt tCotngtcttt ccaggtgrtc atgatggaag 600 1 : : i .Ye gctcagtttg ttcagtcttg acaatgacat tgtgtgtgga ctggaacagg tcactactgc 860 actggecgtt ccacttcaga tgcrgcaagt. tgecrgtagag gagntgecce gecgreccey 720 ccgeccgggt gaactcctgce aaactcatge tgcaaaggtg ctcgocgtig atgtcgaact 780 cntggaaagg gatacaattg gcatccaget ggttggtgtc caggaggtga tggagccact 840 cccacacctyg gt 0 ا 852 ْ ؛ < YY > ؛77 > +١١ا< دنا > YYY> هوموسابيين > ؟١7< © > fv acaacagacc cttgcteget aacgacctca tgctcatcaz gttggacgaa tCogrgtccg 60 agtctgacac catccggage 320890329 ctocgecagtg وقوه gggaactcett 120 gcctogrits tggcetggggt ctgctggcega acggcagaat gcctaccgtg ctgcagrgeyg 183 tgaacgtgtc ggtggtgtct gaggaggetct gcagtaagct ctatgacccg و 234 1 > YY o> ا ody > 7١١٠< دنا > YYY> هوموسابيين > ؟١< > 77١< سمة متنوعة > ؟7١< )940(.........)١( <YYY> : G دمحف 2 © أو > 1 7< EN > tre actrtttatt taaatgtota taaggcagat ctatgagaat gatagaaasc atggtgtgta 60 atctgatage aatattttgg agattacaga ygttttagtaa ttaccaatta cacagttaaa 120 aagaagataa tatattccaa gcanatacaa aatatctaat gaaagatcaa ggcaggaaaa 180 . tgantataac taattgacaa tggaaaatca attttaatgt gaattgcaci ttatccettta 240 aaagctttca aaanaaanaa ttattgcagt ctanttaatt caaacagtgt taaatggtat 300Yo caggataaan aactgaaggg canaaagaat CaatftCcac LLCatgtaac ncacccanat 360 ttacaatggc ttaaatgcan 91933333903 gtggaagtag ggaagtancc aaggtctttc 420 cggtcoctaa tcotgcettac tetttgggtg tggetttgat ccteuggaga cagctgecag 480 ggctectgts atatccacaa tcccagcagce aagatgaagg gatgaaiaag gacacatgeo S42 gccotccrt gaggagactt catctcactg gccaacactc agtcacatgt S30 LY > YY o> YYE > YY > دنا > YYY> ْ هوموسابيين > ؟١؟< ٍ < YY > " ْ سمة متنوعة > YY > . )744(.........)١( > <77؟ 0 محف 0:1 أو > +١١ <رء5 > لا acaagggggc ataatgaagg agtggggana gattttaaag aaggaaaaaa aacgaggcecc 60 tgaacagaat titcctgnac aacggggctt caaaataatt ttcttgggga ggttcaagac 120 gcttcactgce ttgaaactta aatggatgtg ggacanaatt ttctgtaatg accctgaggg 180 cattacagac gggactctgg gaggaaggat aaacagaaag gggacaaacg ctaatcccaa 240 aacarcaaag aaaggaaggt ggcgtcatac ctcccagcct acacagttcs ccagggctcet 300 cctcatcect ggaggacgac agtggaggaa caactgacca tgtccccagg ctectgtgtyg 360 ctggctectg gtottcagce cccagerctyg gaageeccace Ctotgetgat cctgegtgge 420 ccacactcct tgaacacaca tccccaggtt atattcectgg acatggetga accrcectatt - 480 : cctacttccg agatgecttg ctcccrgeag cctgtcaaaa tccgcactcac cctccaaace 540 acggcatggg aagccrttict gacttgectg atractccag catcttggaa caatccectga 600 ctccccacte cttagaggca agatagggtg gttaagagta gggctggacce acttggagcece 660 aggergcetgg cttcaaattn tggetcattt acgagctatg ggaccttggg caagtnatct 720 tcacttcrat gggentcatt ttgttctacce tgcaaaatgg gggataataa tage 774 EA < YY >دا ّ ١١5 > YYW > دنا > ؟١< هوموسابيين > ؟١7< > YY > سمة متنوعة > YY > )175(.........)١( > <77؟ ١١١ < |ّ >وحمف د 0 أو 0. EA < << > caneaattga aattttataa aaaggcattt tCoctcettata tocataaaat gatataatts 60 203232223 anaaatgtgt cataaattat aatgricceot aattacagcet caacgcaact 120 tggc - 124 £4 > YY v> VEY > YY ١< دنا > YYY> : ؟ > هوموسابيين ١7< > ١7١< سمة متنوعة > ؟7١< )١7(........)١( > YYY> G محف ته أو > ؟7١< £4 > <+ه6 rv gecgatgeta ctattotatt geaggaggtg 999996 caccatzcoe tcaacageet 60 tgtggetaca ggtggtgtet gactgcatna aaaanttttt tacgggrgac tgcaaaaatt 120 tracggcacc catatcccaa goantgt 147 ov < YY > ٠١١ > YY Y> دنا > YY Y> هوموسابيين > YYY> Ov > ve scatcaaact aataaaagza- CCGLTggggt CCTgotaaaa cacatggett gatacattge 60 atggetogag gttaggagga 3223990303 tgreotggga gagggge 107 oY > YY o> Yet <YYY> دنا > YYY> هوموسابيين > ؟١7< oY > .١< gtcctaggaa gtctagggga cacacgactc tggggtcacg gggccgacac acttgcacgg 60 cgogaaggaa aggcagagaa grgacaccge cagggggaaa tgacagaaag gaaaatcaag 120 gccrtgeaag gtcagaaagg ggacrtcaggg crLcgcaccac ageecrgece cacrrggecca i 180 جه gggaccagea atgt 204 oY < YY v> £4) > YY \> ؟ > دنا ١ <TA . ١ هوموسابيين > ؟١٠١'< > ١١١< سمة متنوعة > ؟7١< )591(.........)١( <YYY> G او «CT حل < YYY> oY > tv > acaaagataa cattralicte acaacaaaaa tttgatagot ttaaadggera grattgtgra | 60 gggtattooce caaaagacta aagagataac tcaggraaaa agtcagaaat grataaaaca 120 ccatcagaca ggutrtitaaa aaacaacarta [tacaaaatt agacaatcat ccrtaaaaaa 180 asaaccooot 222023 0222923 aaatgactga 02525342626 22288822 240 ٍِ tcanaaacac لخادت - ااه ما attttcaana ووو 4034292169 crcagrccea 300 acgttgctca gacaaataaa rctcgrgaga acttaccace caccacaagce toLcrtgggsc 360 atgcaacagt 92020226 اجاج الج وجو ttacaggceac agaaactcat 420 caattcotact tggataacaa agggocrceca aattatatcg aaaaataaat ccaagrtaat 480 atcacteoeg t 491 oY > YY > : tA < YY Y> ؟ > دنا ١ < هوموسابيين > ١٠١< : > 7١< ic sla سمة > YY Y> )41(........)١( > YYY> G >دص«حف لىع أو YY> . oY > 6 <ه acataattta gcagggctaa ttaccataag acgerattea ttaanaggtn tatgacctga 60 gtattaacag ttgctgaagt ttggtatttt tatgcagcac وج ااا ctttgataac 120 actacagaac ccttaaggac actgaaaatt agtaagtaaa gttcagaaac arcagctgct 180 caatcaaatc tctacataac actatagtaa ttaaaacgti aaaaaaaagt gttgaaatct 240 ١" وج ra gcactagrat anaccgcotcc tgtcaggata anactgettt ggaacagaaa gggaaaaanc 300 agctttgant وجو عع tgatangagg aaaggcsgaa 2800229 geeooneces 360 aacgattgge aggtcnggta د22 catattccaa ctcaacactt 2-3 420 rancctgant ctgtgtattc caggancagg cggatggaat gggccagecc ncggatgrec 480 cant Eo. 484 0t <YV > ٠١١ > ؟١١< : دنا > ؟١١< 0 هوموسابيين > ؟١7< oft <tr> actaaaccrcc gtgcettgrtga actccataca gaaaacggtg ccatccctga acacggetag 60 ccactgggta tactgctgac aaccgcaaca acaaaaacac aaatccrtgg cactggetag 120 tcracgccect ctcaagtgcec tttttgretg t 151 co < YY > ١ <YV > دنا > YYY> هوموسابيين > IVS 00 > 4. a> ا acctggerntg totccgggtg grttcccggeg ووع 22-2639226 ggacactttc 60 gccctccagt ggatactcga gocaaagtgg t 91 el < YY > YY > YY > ؟ > دنا ١ < هوموسابيين > ؟7١7< 5ه > ba Ca > ggcsgatgtg عق ووو acacaaacat ا ا graagggact rgagtaract 1 09و 2202-9 grooggggga 1-348 accaataccc catggatacc 12 إ: د ب - ااانا ب Jd =e : ١ aagggacaac tgt 3 oY < YY > VEY > YYW > دنا > YYY> ّ ؟ > هوموسابيين ١7< ا | <YY > : >سمة متنوعة ؟7١٠< 0 EV) ) <YYY> G أو «C TA=n<YYY> 0 Y < 4 ve > ~ actccggaga accrtgagccg ومو tctgggatga ggrgacgean gengregeas oe gactgggage tgageeceee ccorrgegec tgectcagag gatrtgrtgec دع 120 tcrcantggg ctggatncat 34999و oA > YY > YAA < YY < ١9" جمف ١ < ؟ > دنا َ ١7 < ؟ > هوموسابيين ١١ > > ١7١٠< >سمة مثنو ic ١ (VAAN) > YYY> YY >وحفق 07 أو G .م.م < OA aatrcct ctgtatactc 60 scagggatat aggtttnaag cratcgenac tgraaaatac ee atta 120 180 وفع tgactacata catttatcce tcaaaaaaga tgraaacccc aa Sane accraccaat gagttacctt graaatgaga agtcatgata gcactga , 198 rcgactocta agtttgge YY +> < 04 YY Y> > 779 YYY> > دنا <7١؟ > هوموسابيين 09d < ter> acaacaaatg ggttgtgagg aagtcttatc agcaaaactg gtgatggcta ctgaaaagat 60 ccartgaaaa ttatcattaa tgattttaaa tgacaagtta tcaaaaactc 302033222 120 caccTgtget agcttgctaa aatgggagrt aactcragag caaatatagt atctetctgaa 180 } tacagrtcaat aaatgacaaa gccagggcct acaggtggtt tccagacttt ccagacccag ~ 240 cagaaggaat crtatcttatc acatggatct ccgrctgtge tcaaaatacc taatgatatt 300 attggactte tttgaagagt 330 عجوو Tr > YY > YY > > دلا YY Y> > دناو3 7١٠١ < > هوموسابيين Te > ¢ « «<> coc tecricacea acatcogge crtactrcgge 60 = acegegagtd cecectacst Ce cagctgersc rgcrcatega ctttgegcac 120 3 ك2 mca -_ ——- ar 175 ب ١ اناا غ3 انا و0 greoctggaget aac agcggtggct gggcaagece gaggagt3cyg attccogtge Cts TY > YY o> ٠٠6 <YVY> <7١؟ > دنا a 7١٠١ < > هوموسابيين TY > $a v> ageagtetgd acttotcact getacacgat gagggtgage oe واو acoccactot ggruTgrtget CTtcaacage acccIcccctT toecggatct gctgagecgg acagcagrge 2 tggactgcac ageccegsged ctocacattg cTtgt : 1 Ye 7 < 7 1 0 <٠١١؟ > ٠١ ١ < ؟ > دنا 0 <7١؟ > هوموسابيين ae D> $ < 7 9 cgctcgagee cratagtgag togtattaga 30J . WY > } Ad < XV <؟ > دنا ١ < هوموسابيين > YIT> ّ “7> ta = 50 acaagtcatt tcageaccct معو aaactgacca tctrttatat عجوي °° ctgratgaat aaaaatggtlt 229263349 : TE >» ١٠١< 7 > ؟١١< ؟ > دنا ١١< ؟ > هوموسابيين ١7< ده *« ¢ < £ أ" accggagtaa 38 acgcrgaatc tgaatccacc aataaataaa ggttctgeag °° aaccagtgca tccaggactg gtccttggat 9999“ to < Y \ «> YY < YY) > ؟ > دنا ١< ّ هوموسابيين > ؟١7< < Y X > سمة متنوعة > YY > 977 0 ( \ ) <XYY> G أو 0 «TA=n< ١ 7١< Ho < ١١£¢ acaacaanaa ntoccticts taggecactg atggaaacct ggaaccccct titgatggea 60 : gcatggegtce craggecriyg acacageggce tggggrttgg gcetnrcccaa accgcacace 120 ْ ccaacccrngg tceracccaca 255-0259373 tgggetgtet Ctgecactga 303203999 180 ٍ Tcggtcataa natgaaatcs caanggggac agaggtcagt agaggaagct caatgagaaa 2440 GgTgCLgtot gotcagecag aaaacagetg 59303222 gecgetgaac tatgaacceey 300 tgggggtgaa ctacccccan gaggaatcat goctggzcga tgcaangdtg coaacaggag 360 599-3939393 29039 377 حي > ؟٠١< Fro > ؟١١< ْ ؟ > دنا ١< هوموسابيين > 7 ١7< ك>“ > ten 2-2-0222 cicagaattc agggaagaga 0292--09-6-6-9 0220602-0-209 92099و 60 2922-00-22 20-2-2222 caccatatcc 2-22-9022 032-2229382 ctcaaacacyg 120 . aggaachaac tgCaccctgg TCCTCTCCCC agteggcagh Lcacgctcoca toccucacct 180 - 202-62-6 taagggatat Caacactgcce cagcacaggg 02020293322 32329922 240 32222 totaataaga 02023و gtcatttitt 34253434392262 323332234 300 عمجي 385 TY > 7 ٠١< YAo > + ١ ١< ؟ > دنا ١< ؟ > هوموسابيين ١ < TY > << actacacaca ctccacttgce ccttgtgaga cactitgtcc cagcacttta ggaatgetga 60 ggrcggacca goccacatctc atgrgcaaga ttgcccagea gacatcaggt ctgagagtoc 120 ccctertraaa aaaggggact tgcttaaaaa agaagtcrtag ccacgattgt gtagagcagce 180 tgtgetgtge tggagattca cttttgagag agttcrcctc tgagacctga tectitagagg 240 ctgggeagte ttgcacatga gatggggcotg gtctgatctc agcactcctt agtuctgettg 300 ‘cctetcccag ggecccagec tggecacace tgettacagg gcactcrcag atgeccatac 360 catagtttct gtgctagtgg accget 33s Vioرد TA > YY : YY > YY > YY Y> > دنا <Y\V> هوموسابيين TA < 5 ١< act-aaccag atacattttt accccagatg gggatacter rcgraaaaaa tgaaaacaaa 5 gttooootaa tgg <١٠؟ > >“ 0 oY > YVi> : ٍ ١ < ؟ > دنا YAY > هوموسابيين ١١١< > <٠١آ؟ >سمة متنوعة )573(.........)١( > YYY> : ١< ا لمحف تن أو G 1d > << acrtagtccag tgtgotggaa tcecartgtg tLgggggete tCacccuecet ctectgeage 60 rccageruttg tgctcogect ctgaggagac catggcccag catcrgagta ceeTgetget 124 cecrgeTgges accctagetg 2-2396 ctggagecce aaggaggagg ataggataac 180 gracagcgug cectrcacee 240 23د cccgggtgge atctataacg cagacctcaa 300 يه cgccatcage gagtataaca aggocoaccaa agatgacrtac tacagacgtc د 360 actaagagcc aggcaacaga 2-218 ggrgaattac ttcttcgacg tagadgrgse ccgaaccata tgtaccaagt cccagcccaa 22998202 tgtgcecTTas atgaacagec 4420 agaactgcag aagaaacagt 7-0202 cgagatcrac gaagticcect ggggagaaca 480 gaangtccct gggtgaaatc caggogreaa gaaatcctan ggatctgttg 238996 536£1 : Ye <)> ؟ > لال ١< دنا > YYY> هوموسابيين > YAY Ye < جيرج argacceera acaggggccec rctcagccct Sctaatgace rccggoctag ccatgtgatt 60 وجوه tecataacdge geccreatact aggcctacta accaacacac caaccataca 120 ccaatgatgg cgcgatgraa cacgagaaag cacataccaa ggccaccaca caccaccgt 180 ccaaaaaggc CLLCGaracyg cgataatcct atgtactaca tcagaagtc دوجا 240 2و2 ctgagegcttl raccacocca gectageecce عي cTaggagegsc 300 actggceces aacaggcatc accccgetaa atcccctaga agrececactc ccaaacacat 360 ccgtactact cgcatzagga graccaataca cctgagetca ccatagretad atagaaaaca 420 accgaaacca aactactcaa agcactgctt atcacaattT Tactgggtcet cTactit 477 YY > YY»> 7ه > YVY\> ؟ > دنا ١ 7< هوموسابيين > YAY < YY > ’ ic sila >سمة YY > )677(.-........)١( > YYY> 0+0 مح 3 0 أو < YYY> YY > ٠ <ف6 agagcrtatag gtacagtgtg at ctcagcectt tgca aggractaat agatatgtaa و 2 اي سس ttooetacat agatagract ب | tgtgatttta 92و92 tggcacactt acaarggraa gacrtggeeta 120 ace atatatgttt tccaaacttt cagca atttcca taacttaaaa agtgagettt gcagtgac 180 ra gagtttg aaaaagaaaa tctccagcaa geat aataaagg tttgtcatct ttaaaaatac agcaatatgt gact J creact 240 aaataggrgt gaccctacta ataattatta gaaatacatt : ا faaagerare 300 aaaaacatc¢ gagtaccerca 360 agtcagritg ccttgaaaaa 32-2333423 aactcttaga gaaatgtaca taaaagaatg 420 cttcegraates ttggagtang aggttccctc ctcaattttg 2222-8 aagtacacgg 4380 taaaaaaaaa aattcacaac agtatataag 9029233433 gaagaactct gcc 333 YY > YY v> ه١ < YYW > دنا > YYY> هوموسابيين <YV\YV> > ١١١< : سمة متنوعة > ؟7١< )0911(.........)١( > YYY> G 5 «CT«A=n<YYV> YY > £0 rattacggaa aaacacacca cataattcaa ctancaaaga anactgcetcc agggcgrgea 60 aaatgaaagg 032993 929-82606293 taaagaacac raaaagaggg acaaggceraa 120 aagccgeagg atgecracac -acancaggc 19 rcggetggag gagetgrgga 180 aaacatggan agattggtdce tgganatcgce cgtggctatt ccrcattgto attacanagt 240 gaggttctce grtgrgeccac rggrttgaaa accgetetac aataatgaca gaatagtaca 200 cacatgagaa ctgaaatggc ccaaacccag aaagaaagcc caactagatc ctcagaanac 360 gcttctaggg acaataaccy atgaagaaaa gatggectcco وو grcetgtracg 420 attrccncrce attgeagena naaacccgrt cttctaagea aacncaggtg atgatggena 480 aaatacaccc ccrcttgaag naccnggagg a 11 YY > YY ١< £949 > YY > دنا > YYY> هوموسابيين > 7١7< : > YY > lotم <YY\> سمة متنوعة )4934(.........)١( <YYY> TA=n<YYY> © أو G ده *« $ < YY graccagtac caataacagt gccagtgcca gtgccageac 50 2-19-3028 210-0380 gaccgecact ciicacatosd ggcrcotcsge 120 ووو rtcagtgetg -302393299ه ccagcaccag tggcagcerct 2000-3 grttcrecta 180 32-3999 دوو caagtsagat ctragatatt gotaatcctg ccagncTric Cottcaages agggrgcacc 240 gcagccacta 2063342033 gaagttgaca 300 2-9و ractcaacac 22و22 ctctgeatta aatctacotya ccatccoctga azaaaaaaaa aaaaaaagcd cggcegetcg 380 anttgcecagae 420 ووو antctagagg gcccgtttaa accecgctgat cagcectcegac coogntgcct rcctrtgacce tggaaagtgc cacrtcecace 480 وجو caccrgrtstc . 499 grecroecet aantaaazat. 9 . YE > YY o> YV\> > ااه <7١؟ > دتا <7١؟ > هوموسابيين ١١١< > <١7؟ > سمة ica )677(.........)١( > YYY> YYY> > و A= 1 0 أو G <*ه < Vi tttcatagga gaacacactg aggagatact tgaagaattt ggattcagcc gcgaagagat 60 cratcagets aactcagata aaatcattga aagtaataag graaaagcta gtetceraact 120 tccaggccca cggctcaagt gaattrtgaat actgcattta cagtgtagag taacacataa 180 cattgtatgc atggaaacat ggaggaacad raccacagtg tccraccact ctaatcaasa 240 aaagaattac agactcrgat rctacagtga tgattgaact ctaaaaatgg taatcattag 300 atactaaatct atggrtagtea tactgcctrc 360 ووو ggcrtrcgat ttacaanact cagtttgctt gatatatttg rtgatattaa gatrtctegac rratattttg aatgggttct 420 \lo¢- .actgaaaaan gaatgatata trccocgaaga catcgatata catrcactca cactcttgat 10 © eormacaacgt agaaaatgaa ggaaatgecc caaaccgeat ggtgataaaa 926669 537 Yo < 7١ ١< اكت > YY > دنا > YYY> هوموسابيين <i> <Y ¥ «> 2 ١ سمة متنوعة > YY (eV) ) >77 G >دصدحها 61 0 و 7 ١7< . Yo > ع « «<> caaanacaat cgrrcaaaadg atgcaaatga racactactg crgcageca caaacaccec 60 rgcatagtac acgraccrce cccTgctcot Caagtagrgt 99262822 gccatzactca 120 ادوع وج gottagaaga acggettect gccccaangg agagaaatc:a T2acagacsy 180 tggcacaagg aggccatcit BLocteatcs grzactgtac ctagaagesc حي 38 240 tcragotggg مص gggtitgggc cacrcrccantt ctcatgtgog 2ع 03 300 tcarcattgt ataacggott tcaaaccnge gggeacncag agaacctcac tctgraacaa 159 caacgaggaa tagccacggt gatctecage accazaccrtc العم اوعقو tccagagernc 429 ctecagecaa cccaaatage وو gtgragaaca 0-22 457 كلا > ؟٠١< : 0ف > XV > دنا > YYY> هوموسابيين > ١١< < XY > سمة متنوعة > ؟؟١<0 ْ )0(.......)١( > YYY> 0 دمحف ىن أو > ١ 7١< حرفم < كلا aagctgacag cattcgggcec gagatgretc gctccgtgge crtagetgeg crtcgegerac 60 جه tggectggay gcrartecage gtactccaaa gactcaggeo racrtcacgtc 120 atccagcaga gaatggaaag rcaaactctcc tgaattgceta tgtgtctggg trtcacccat 180 ccgacattga agtcgaceta ctgaagaatg gagagagaac tgaaaaagtg gagcatccag 240 acctgtceto cagcaaggac TggrcTict arcocctgta ctacactgaa 83 300 ctgazaaadga tgagratgee tgccgtgtga accatgegac cctgtcacag cccaagarng 360 ctnagtggga tcganacatg taagcagcan catgggaggt 400 7 : إ: YY > ؟ << YEA < YY Y> دنا > YVY> " هوموسابيين > ؟١7< YY > o> ctggagtgcce ttggtgtttc. aagecccctge aggaageaga atgcaccrttc tgaggeacet 60 ccagergeoc 8 1320-2 91933032000 tgcccggetg 32092و 120 caggcactgt tcatctcage rotoctgtece cttrgeteec ggcaagcget tctgcergaaa 180 grttcatatct ggagecctgac grtctctaacga ataaaggtcc catgctccac ccgaaaaaaa 240 aaaaaaaa 248 YA > ١ ٠١< ٠١١ > "١ا< ؟ > دنا ١١< هوموسابيين > ؟١7< YA > ١ <
Applications Claiming Priority (7)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US09/115,453 US6657056B2 (en) | 1997-02-25 | 1998-07-14 | Compounds for immunotherapy of prostate cancer and methods for their use |
| US09/116,134 US7008772B1 (en) | 1997-02-25 | 1998-07-14 | Compounds for immunodiagnosis of prostate cancer and methods for their use |
| US15982298A | 1998-09-23 | 1998-09-23 | |
| US09/159,812 US6613872B1 (en) | 1997-02-25 | 1998-09-23 | Compounds for immunotherapy of prostate cancer and methods for their use |
| US09/232,149 US6465611B1 (en) | 1997-02-25 | 1999-01-15 | Compounds for immunotherapy of prostate cancer and methods for their use |
| US09/232,880 US7270980B2 (en) | 1997-02-25 | 1999-01-15 | Compounds for immunodiagnosis of prostate cancer and methods for their use |
| US28894699A | 1999-04-09 | 1999-04-09 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| SA99200618B1 true SA99200618B1 (ar) | 2007-01-20 |
Family
ID=27568734
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| SA99200618A SA99200618B1 (ar) | 1998-07-14 | 1999-09-28 | تراكيب وطرق لعلاج وتشخيص سرطان البروستات |
Country Status (17)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (2) | EP1097208A2 (ar) |
| JP (1) | JP2002520054A (ar) |
| KR (2) | KR20010083111A (ar) |
| CN (1) | CN100419079C (ar) |
| AU (2) | AU762812B2 (ar) |
| BR (1) | BR9912007A (ar) |
| CA (1) | CA2334038A1 (ar) |
| CZ (1) | CZ2001149A3 (ar) |
| HU (1) | HUP0203035A3 (ar) |
| IL (1) | IL140845A0 (ar) |
| NO (1) | NO20010196L (ar) |
| NZ (1) | NZ509178A (ar) |
| PL (1) | PL200772B1 (ar) |
| SA (1) | SA99200618B1 (ar) |
| TR (1) | TR200100916T2 (ar) |
| TW (2) | TW200532020A (ar) |
| WO (1) | WO2000004149A2 (ar) |
Families Citing this family (138)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US6828431B1 (en) * | 1999-04-09 | 2004-12-07 | Corixa Corporation | Compositions and methods for the therapy and diagnosis of breast cancer |
| US7241876B2 (en) | 1996-01-11 | 2007-07-10 | Corixa Corporation | Compositions and methods for the therapy and diagnosis of breast cancer |
| US6657056B2 (en) | 1997-02-25 | 2003-12-02 | Corixa Corporation | Compounds for immunotherapy of prostate cancer and methods for their use |
| US6943236B2 (en) | 1997-02-25 | 2005-09-13 | Corixa Corporation | Compositions and methods for the therapy and diagnosis of prostate cancer |
| US6818751B1 (en) | 1997-08-01 | 2004-11-16 | Corixa Corporation | Compositions and methods for the therapy and diagnosis of prostate cancer |
| US6894146B1 (en) | 1997-02-25 | 2005-05-17 | Corixa Corporation | Compositions and methods for the therapy and diagnosis of prostate cancer |
| US6620922B1 (en) | 1997-02-25 | 2003-09-16 | Corixa Corporation | Compositions and methods for the therapy and diagnosis of prostate cancer |
| US6759515B1 (en) | 1997-02-25 | 2004-07-06 | Corixa Corporation | Compositions and methods for the therapy and diagnosis of prostate cancer |
| US6329505B1 (en) | 1997-02-25 | 2001-12-11 | Corixa Corporation | Compositions and methods for therapy and diagnosis of prostate cancer |
| US7202342B1 (en) | 1999-11-12 | 2007-04-10 | Corixa Corporation | Compositions and methods for the therapy and diagnosis of prostate cancer |
| US7517952B1 (en) | 1997-02-25 | 2009-04-14 | Corixa Corporation | Compositions and methods for the therapy and diagnosis of prostate cancer |
| US6800746B2 (en) | 1997-02-25 | 2004-10-05 | Corixa Corporation | Compositions and methods for the therapy and diagnosis of prostate cancer |
| US20030185830A1 (en) | 1997-02-25 | 2003-10-02 | Corixa Corporation | Compositions and methods for the therapy and diagnosis of prostate cancer |
| US6465611B1 (en) | 1997-02-25 | 2002-10-15 | Corixa Corporation | Compounds for immunotherapy of prostate cancer and methods for their use |
| US7033827B2 (en) | 1997-02-25 | 2006-04-25 | Corixa Corporation | Prostate-specific polynucleotide compositions |
| US6630305B1 (en) | 1999-11-12 | 2003-10-07 | Corixa Corporation | Compositions and methods for the therapy and diagnosis of prostate cancer |
| DE69840669D1 (de) | 1997-04-10 | 2009-04-30 | Stichting Katholieke Univ | Pca3, pca3-gene und verfahren zu ihrer verwendung |
| US6365369B1 (en) | 1998-04-01 | 2002-04-02 | Human Genome Sciences, Inc. | Prostate specific secreted protein |
| US6861215B1 (en) | 1998-05-21 | 2005-03-01 | Diadexus, Inc. | Method of diagnosing, monitoring, and staging prostate cancer |
| US20060052321A1 (en) | 2002-04-05 | 2006-03-09 | Raitano Arthur B | Nucleic acid and corresponding protein entitled 98P4B6 useful in treatment and detection of cancer |
| US20030149531A1 (en) | 2000-12-06 | 2003-08-07 | Hubert Rene S. | Serpentine transmembrane antigens expressed in human cancers and uses thereof |
| US6833438B1 (en) | 1999-06-01 | 2004-12-21 | Agensys, Inc. | Serpentine transmembrane antigens expressed in human cancers and uses thereof |
| US20040141975A1 (en) | 1998-06-01 | 2004-07-22 | Raitano Arthur B. | Nucleic acid and corresponding protein entitled 98P4B6 useful in treatment and detection of cancer |
| US7037667B1 (en) | 1998-06-01 | 2006-05-02 | Agensys, Inc. | Tumor antigen useful in diagnosis and therapy of prostate and colon cancer |
| EP1086223B1 (en) | 1998-06-01 | 2009-07-29 | Agensys, Inc. | Novel serpentine transmembrane antigens expressed in human cancers and uses thereof |
| AU1097500A (en) * | 1998-10-02 | 2000-04-26 | Agensys, Inc. | Human gene expressed in cancers of prostate, bladder, pancreas and colon, 36p1a6 |
| US6902892B1 (en) | 1998-10-19 | 2005-06-07 | Diadexus, Inc. | Method of diagnosing, monitoring, staging, imaging and treating prostate cancer |
| US6528054B1 (en) * | 1998-12-28 | 2003-03-04 | Corixa Corporation | Compositions and methods for the therapy and diagnosis of breast cancer |
| AU774824B2 (en) * | 1999-04-09 | 2004-07-08 | Corixa Corporation | Compositions and methods for the treatment and diagnosis of breast cancer |
| US6943235B1 (en) | 1999-04-12 | 2005-09-13 | Agensys, Inc. | Transmembrane protein expressed in prostate cancer |
| WO2000065067A2 (en) * | 1999-04-23 | 2000-11-02 | University Of Washington | Prostate-specific polynucleotides, polypeptides and their methods of use |
| WO2000071711A2 (en) * | 1999-05-20 | 2000-11-30 | Fahri Saatcioglu | Differentially expressed genes in prostate cancer |
| CA2378846A1 (en) * | 1999-07-13 | 2001-01-18 | Smithkline Beecham Biologicals S.A. | Prostase vaccine |
| EP1222266B1 (en) | 1999-09-29 | 2006-03-29 | Diagnocure Inc. | Pca3 messenger rna in benign and malignant prostate tissues |
| AU7917200A (en) | 1999-09-30 | 2001-04-30 | Institut Pasteur | Hybrid or chimeric polynucleotides, proteins, and compositions comprising hepatitis b virus sequences |
| WO2001025272A2 (en) * | 1999-10-04 | 2001-04-12 | Corixa Corporation | Compositions and methods for therapy and diagnosis of prostate cancer |
| HK1048494B (en) * | 1999-10-05 | 2009-06-12 | Agensys, Inc. | G protein-coupled receptor up-regulated in prostate cancer and uses thereof |
| US7361338B2 (en) | 1999-10-05 | 2008-04-22 | Agensys, Inc. | Methods to inhibit growth of prostate cancer cells |
| US7208280B2 (en) | 1999-10-05 | 2007-04-24 | Agensys, Inc. | Nucleic acid and corresponding protein entitled 101P3A41 useful in treatment and detection of cancer |
| US6790631B1 (en) | 1999-10-05 | 2004-09-14 | Agensys, Inc. | G protein-coupled receptor up-regulated in prostate cancer and uses thereof |
| AU7753700A (en) * | 1999-10-07 | 2001-05-10 | Schering Aktiengesellschaft | Dna encoding prost 07 polypeptide |
| AU1656501A (en) * | 1999-11-12 | 2001-06-06 | Corixa Corporation | Compositions and methods for the therapy and diagnosis of prostate cancer |
| US20020048777A1 (en) | 1999-12-06 | 2002-04-25 | Shujath Ali | Method of diagnosing monitoring, staging, imaging and treating prostate cancer |
| CA2397741A1 (en) * | 2000-01-14 | 2001-07-19 | Corixa Corporation | Compositions and methods for the therapy and diagnosis of prostate cancer |
| AU2001236782A1 (en) * | 2000-02-08 | 2001-08-20 | Agensys, Inc. | 34p3d7: a tissue specific protein highly expressed in prostate cancer |
| WO2001060860A2 (en) * | 2000-02-17 | 2001-08-23 | Millennium Predictive Medicine, Inc. | Genes differentially expressed in human prostate cancer and their use |
| WO2001070979A2 (en) * | 2000-03-21 | 2001-09-27 | Millennium Pharmaceuticals, Inc. | Genes, compositions, kits, and method for identification, assessment, prevention and therapy of ovarian cancer |
| US7611892B2 (en) | 2000-03-24 | 2009-11-03 | President And Fellows Of Harvard College | Prostate-specific or testis-specific nucleic acid molecules, polypeptides, and diagnostic and therapeutic methods |
| CA2403909A1 (en) * | 2000-03-27 | 2001-10-04 | Corixa Corporation | Compositions and methods for the therapy and diagnosis of prostate cancer |
| GB0015722D0 (en) * | 2000-06-27 | 2000-08-16 | Smithkline Beecham Sa | Vaccine |
| GB0015736D0 (en) * | 2000-06-27 | 2000-08-16 | Smithkline Beecham Biolog | Vaccine |
| SI2266603T1 (sl) | 2000-10-18 | 2012-12-31 | Glaxosmithkline Biologicals S.A. | Tumorska cepiva |
| US7048931B1 (en) | 2000-11-09 | 2006-05-23 | Corixa Corporation | Compositions and methods for the therapy and diagnosis of prostate cancer |
| US7037652B2 (en) | 2000-11-28 | 2006-05-02 | Wyeth | Expression analysis of KIAA nucleic acids and polypeptides useful in the diagnosis and treatment of prostate cancer |
| CA2429722A1 (en) | 2000-11-28 | 2002-06-06 | Wyeth | Expression analysis of fkbp nucleic acids and polypeptides useful in the diagnosis and treatment of prostate cancer |
| WO2002083921A2 (en) | 2001-04-10 | 2002-10-24 | Agensys, Inc. | Nuleic acids and corresponding proteins useful in the detection and treatment of various cancers |
| JP2005504513A (ja) * | 2001-05-09 | 2005-02-17 | コリクサ コーポレイション | 前立腺癌の治療及び診断のための組成物及び方法 |
| US6897024B2 (en) | 2001-05-31 | 2005-05-24 | Stichting Katholieke Universiteit More Particularly The University Medical Centre Nijmegen | Nucleic acid molecules comprising the promoter for PCA3, and uses thereof |
| US7494646B2 (en) | 2001-09-06 | 2009-02-24 | Agensys, Inc. | Antibodies and molecules derived therefrom that bind to STEAP-1 proteins |
| EP2287186B1 (en) | 2001-09-06 | 2014-12-31 | Agensys, Inc. | Nucleic acid and corresponding protein entitled STEAP-1 useful in treatment and detection of cancer |
| CA2480811A1 (en) * | 2002-04-01 | 2003-10-16 | Agensys, Inc. | Nucleic acid and corresponding protein entitled 213p1f11 useful in treatment and detection of cancer |
| KR20050010040A (ko) * | 2002-06-11 | 2005-01-26 | 글락소스미스클라인 바이오로지칼즈 에스.에이. | 면역원성 조성물 |
| WO2003103706A2 (en) * | 2002-06-11 | 2003-12-18 | Glaxosmithkline Biologicals S.A. | Immunogenic compositions |
| AU2003243151A1 (en) | 2002-08-16 | 2004-03-03 | Agensys, Inc. | Nucleic acid and corresponding protein entitled 251p5g2 useful in treatment and detection of cancer |
| EP1592809B1 (en) | 2003-02-07 | 2013-04-10 | Diagnocure Inc. | Method to detect prostate cancer in a sample |
| ATE500267T1 (de) | 2003-07-21 | 2011-03-15 | Transgene Sa | Multifunktionelle cytokine |
| AU2004319915B9 (en) | 2004-04-22 | 2011-12-22 | Agensys, Inc. | Antibodies and molecules derived therefrom that bind to STEAP-1 proteins |
| CA2491067A1 (en) | 2004-12-24 | 2006-06-24 | Stichting Katholieke Universiteit | Mrna rations in urinary sediments and/or urine as a prognostic marker for prostate cancer |
| US9957569B2 (en) | 2005-09-12 | 2018-05-01 | The Regents Of The University Of Michigan | Recurrent gene fusions in prostate cancer |
| CA2814598A1 (en) | 2005-09-12 | 2007-03-22 | The Regents Of The University Of Michigan | Recurrent gene fusions in prostate cancer |
| TWI457133B (zh) | 2005-12-13 | 2014-10-21 | Glaxosmithkline Biolog Sa | 新穎組合物 |
| WO2008016111A1 (fr) | 2006-08-04 | 2008-02-07 | Ajinomoto Co., Inc. | Procédé permettant d'évaluer un cancer du poumon, dispositif d'évaluation d'un cancer du poumon, procédé d'évaluation d'un cancer du poumon, système d'évaluation d'un cancer du poumon, programme d'évaluation d' |
| US20090181078A1 (en) | 2006-09-26 | 2009-07-16 | Infectious Disease Research Institute | Vaccine composition containing synthetic adjuvant |
| PL2068918T5 (pl) | 2006-09-26 | 2024-12-02 | Access To Advanced Health Institute | Kompozycja szczepionki zawierająca syntetyczny adiuwant |
| BRPI0717638A2 (pt) | 2006-10-27 | 2013-11-12 | Genentech Inc | Anticorpors e imunoconjugados e usos para os mesmos |
| JP5746811B2 (ja) | 2006-12-21 | 2015-07-08 | 味の素株式会社 | 大腸癌の評価方法、ならびに大腸癌評価装置、大腸癌評価方法、大腸癌評価システム、大腸癌評価プログラムおよび記録媒体 |
| WO2008075662A1 (ja) | 2006-12-21 | 2008-06-26 | Ajinomoto Co., Inc. | 乳癌の評価方法、ならびに乳癌評価装置、乳癌評価方法、乳癌評価システム、乳癌評価プログラムおよび記録媒体 |
| CA2692793C (en) | 2007-07-06 | 2014-05-20 | The Regents Of The University Of Michigan | Mipol1-etv1 gene rearrangements |
| US8106037B2 (en) | 2007-08-03 | 2012-01-31 | The Brigham And Women's Hospital, Inc. | Identification and treatment of estrogen responsive prostate tumors |
| KR100976218B1 (ko) | 2008-05-26 | 2010-08-17 | 한국표준과학연구원 | 비행시간이차이온질량분광법을 이용한 질병의 진단 방법,질병 지표의 스크린 방법, 및 질병 지표 |
| JP5754137B2 (ja) | 2008-06-20 | 2015-07-29 | 味の素株式会社 | 前立腺癌の評価方法、前立腺癌評価装置、前立腺癌評価方法、前立腺癌評価プログラム、記録媒体、前立腺癌評価システム、および情報通信端末装置 |
| PT2324842E (pt) * | 2008-08-05 | 2015-07-21 | Toray Industries | Agente de indução de imunidade |
| MX2011001445A (es) | 2008-08-05 | 2011-04-05 | Toray Industries | Metodo para detectar cancer. |
| BRPI0911926A2 (pt) | 2008-08-05 | 2020-08-18 | Toray Industries, Inc | composições farmacêuticas, anticorpos e usos de um anticorpo ou um fragmento do mesmo. |
| KR102110469B1 (ko) * | 2009-05-12 | 2020-05-14 | 코닌클리케 필립스 엔.브이. | 악성의 호르몬 민감성 전립선 암에 대한 마커로서의 포스포디에스테라제 4ｄ7 |
| CA2764374C (en) | 2009-06-05 | 2019-11-19 | Infectious Disease Research Institute | Synthetic glucopyranosyl lipid adjuvants |
| EP2478120B1 (en) | 2009-09-17 | 2015-09-02 | The Regents Of The University Of Michigan | Recurrent gene fusions in prostate cancer |
| HUE040012T2 (hu) | 2010-02-04 | 2019-02-28 | Toray Industries | Gyógyászati ágens rák kezelésére és/vagy megelõzésére |
| DK2532366T3 (da) | 2010-02-04 | 2017-01-02 | Toray Industries | Farmaceutisk sammensætning til behandling og/eller forebyggelse af cancer |
| RU2603742C2 (ru) | 2010-02-04 | 2016-11-27 | Торэй Индастриз, Инк. | Фармацевтическая композиция для лечения и/или профилактики рака |
| US9115200B2 (en) | 2010-02-04 | 2015-08-25 | Toray Industries, Inc. | Pharmaceutical composition for treating cancer using a monoclonal antibody having immunological reactivity with CAPRIN-1 |
| CA2788545C (en) | 2010-02-04 | 2019-03-26 | Toray Industries, Inc. | Pharmaceutical composition for treating and/or preventing cancer |
| US8945556B2 (en) | 2010-11-19 | 2015-02-03 | The Regents Of The University Of Michigan | RAF gene fusions |
| WO2012112691A1 (en) | 2011-02-15 | 2012-08-23 | Immune Design Corp. | Methods for enhancing immunogen specific immune responses by vectored vaccines |
| EA027236B1 (ru) | 2011-04-08 | 2017-07-31 | Иммьюн Дизайн Корп. | Иммуногенные композиции и способы применения таких композиций для индукции гуморального и клеточного иммунного ответа |
| ES2629061T3 (es) | 2011-08-04 | 2017-08-07 | Toray Industries, Inc. | Método para la detección de cáncer pancreático |
| US9181348B2 (en) | 2011-08-04 | 2015-11-10 | Toray Industries, Inc. | Pharmaceutical composition for treatment and/or prophylaxis of cancer |
| EP2740794B1 (en) | 2011-08-04 | 2018-04-04 | Toray Industries, Inc. | Pharmaceutical composition for treatment and/or prophylaxis of cancer |
| PT2740489T (pt) | 2011-08-04 | 2017-01-10 | Toray Industries | Composição farmacêutica para o tratamento e/ou a prevenção do cancro pancreático |
| RU2595400C2 (ru) | 2011-08-04 | 2016-08-27 | Торэй Индастриз, Инк. | Фармацевтическая композиция для лечения и/или профилактики злокачественной опухоли |
| PL2740793T3 (pl) | 2011-08-04 | 2018-04-30 | Toray Industries, Inc. | Kompozycja leku do leczenia i/lub zapobiegania nowotworowi |
| PT2740796T (pt) | 2011-08-04 | 2017-07-26 | Toray Industries | Composição farmacêutica para o tratamento e/ou profilaxia de cancro |
| ES2729967T3 (es) | 2012-02-07 | 2019-11-07 | Infectious Disease Res Inst | Formulaciones de adyuvante mejoradas que comprenden agonistas de TLR4 y métodos para usar las mismas |
| ES2739612T3 (es) | 2012-02-21 | 2020-02-03 | Toray Industries | Composición farmacéutica para el tratamiento de cáncer |
| US9260513B2 (en) | 2012-02-21 | 2016-02-16 | Toray Industries, Inc. | Pharmaceutical composition for treatment and/or prevention of cancer |
| WO2013125654A1 (ja) | 2012-02-21 | 2013-08-29 | 東レ株式会社 | 癌の治療及び／又は予防用医薬組成物 |
| BR112014021103A2 (pt) | 2012-02-21 | 2019-10-15 | Toray Industries, Inc | Anticorpo, composição farmacêutica, droga de combinação, dna, método de tratamento e uso de anticorpo |
| WO2013147176A1 (ja) | 2012-03-30 | 2013-10-03 | 東レ株式会社 | 胆嚢癌の治療及び／又は予防用医薬組成物 |
| JP6107654B2 (ja) | 2012-03-30 | 2017-04-05 | 東レ株式会社 | 肝臓癌の治療及び／又は予防用医薬組成物 |
| HRP20181102T1 (hr) | 2012-05-16 | 2018-09-07 | Immune Design Corp | Cjepiva za hsv-2 |
| BR112014029417B1 (pt) * | 2012-05-25 | 2023-03-07 | Cellectis | Método ex vivo para a preparação de células t para imunoterapia |
| MX357292B (es) | 2012-07-19 | 2018-07-04 | Toray Industries | Método para detectar cáncer. |
| PL2876447T3 (pl) | 2012-07-19 | 2020-05-18 | Toray Industries, Inc. | Sposób wykrywania nowotworu |
| CA2873155C (en) * | 2012-09-11 | 2022-07-26 | Oncotherapy Science, Inc. | Ube2t peptides and vaccines containing the same |
| EP3587455A1 (en) | 2012-10-23 | 2020-01-01 | Emory University | Gm-csf and il-4 conjugates, compositions, and methods related thereto |
| MX370573B (es) | 2013-04-18 | 2019-12-17 | Immune Design Corp | Monoterapia con glucopiranosil lipido a para usarse en el tratamiento del cancer. |
| US9463198B2 (en) | 2013-06-04 | 2016-10-11 | Infectious Disease Research Institute | Compositions and methods for reducing or preventing metastasis |
| AU2014303375B2 (en) | 2013-08-09 | 2019-07-04 | Toray Industries, Inc. | Pharmaceutical composition for treatment and/or prevention of cancer |
| IL310015B2 (en) | 2013-12-31 | 2026-02-01 | Access To Advanced Health Inst | Single vial formulation |
| KR20170032373A (ko) | 2014-07-15 | 2017-03-22 | 이뮨 디자인 코포레이션 | Tlr4 작용제 보조제 및 렌티바이러스 벡터를 이용한 프라임-부스트 요법 |
| PH12018501207B1 (en) * | 2015-12-21 | 2024-02-23 | Novartis Ag | Compositions and methods for decreasing tau expression |
| EP3400005A1 (en) * | 2016-01-08 | 2018-11-14 | Vaccibody AS | Neoepitope rna cancer vaccine |
| EP3443123B1 (en) | 2016-04-11 | 2021-08-11 | Board of Regents, The University of Texas System | Methods and compositions for detecting single t cell receptor affinity and sequence |
| MX2018014086A (es) | 2016-05-16 | 2019-09-18 | Infectious Disease Res Inst | Formulacion que contiene agonista tlr y metodos de uso. |
| WO2017200957A1 (en) | 2016-05-16 | 2017-11-23 | Infectious Disease Research Institute | Pegylated liposomes and methods of use |
| KR20250008135A (ko) | 2016-06-01 | 2025-01-14 | 액세스 투 어드밴스드 헬스 인스티튜트 | 사이징제를 함유하는 나노명반 입자 |
| MX2019011769A (es) | 2017-04-03 | 2019-11-07 | Hoffmann La Roche | Anticuerpos que se unen a steap-1. |
| MX2019015076A (es) | 2017-06-15 | 2020-08-03 | Infectious Disease Res Inst | Portadores lípidos nanoestructurados y emulsiones estables y usos de los mismos. |
| WO2019051149A1 (en) | 2017-09-08 | 2019-03-14 | Infectious Disease Research Institute | LIPOSOMAL FORMULATIONS COMPRISING SAPONIN AND METHODS OF USE |
| EP3880827A4 (en) * | 2018-11-07 | 2023-04-26 | Akouos, Inc. | COMPOSITIONS AND METHODS FOR INDUCING DIFFERENTIATION OF A HAIR CELL |
| CN111000858B (zh) * | 2019-05-10 | 2021-04-09 | 常州市第二人民医院 | Nupr1抑制剂在制备膀胱癌治疗药物中的用途 |
| CA3141577A1 (en) | 2019-05-25 | 2020-12-03 | Infectious Disease Research Institute | Composition and method for spray drying an adjuvant vaccine emulsion |
| CA3179694A1 (en) * | 2020-04-17 | 2021-10-21 | The Francis Crick Institute Limited | Fusion proteins of ctl antigens for treating melanoma |
| CN111968751B (zh) * | 2020-06-29 | 2021-10-19 | 金电联行（北京）信息技术有限公司 | 一种使用多基线校正模型的传染病趋势预测方法与系统 |
| WO2022051022A1 (en) | 2020-09-04 | 2022-03-10 | Infectious Disease Research Institute | Co-lyophilized rna and nanostructured lipid carrier |
| AU2021335334A1 (en) | 2020-09-04 | 2023-04-20 | Access To Advanced Health Institute | Genetically-adjuvanted rna vaccines |
| EP4048308A1 (en) | 2020-12-23 | 2022-08-31 | Infectious Disease Research Institute | Solanesol vaccine adjuvants and methods of preparing same |
| CA3266697A1 (en) | 2022-09-09 | 2024-03-14 | Access To Advanced Health Institute | COMPOSITION OF AN IMMUNOGENEOUS VACCINE CONTAINING A SAPONIN |
Family Cites Families (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5041289A (en) * | 1987-11-13 | 1991-08-20 | Becton Dickinson And Company | Method of purging residual tumor cells in vitro with lymphokine activated cytotoxic cells |
| NZ236114A (en) * | 1989-11-22 | 1993-04-28 | Merrell Dow Pharma | Peptide antagonists of bombesin and of gastrin releasing peptide, and pharmaceutical compositions |
| CN1183104A (zh) * | 1995-04-28 | 1998-05-27 | 武田药品工业株式会社 | Lh－rh受体拮抗剂 |
| NZ331866A (en) * | 1996-03-15 | 2000-05-26 | Corixa Corp | Compounds for immunotherapy and immunodiagnosis of prostate cancer |
| PL196260B1 (pl) * | 1997-02-25 | 2007-12-31 | Corixa Corp | Polipeptyd, cząsteczka DNA, komórka gospodarza, białko fuzyjne, kompozycje farmaceutyczne i szczepionki do leczenia raka prostaty |
| CA2281954A1 (en) * | 1997-02-25 | 1998-08-27 | Corixa Corporation | Compounds for immunodiagnosis of prostate cancer and methods for their use |
| WO1998050567A1 (en) * | 1997-05-02 | 1998-11-12 | Abbott Laboratories | Reagents and methods useful for detecting diseases of the prostate |
-
1999
- 1999-07-14 HU HU0203035A patent/HUP0203035A3/hu unknown
- 1999-07-14 CN CNB998103349A patent/CN100419079C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1999-07-14 EP EP99938735A patent/EP1097208A2/en not_active Withdrawn
- 1999-07-14 BR BR9912007-0A patent/BR9912007A/pt not_active Application Discontinuation
- 1999-07-14 JP JP2000560247A patent/JP2002520054A/ja active Pending
- 1999-07-14 AU AU53148/99A patent/AU762812B2/en not_active Ceased
- 1999-07-14 EP EP07015347A patent/EP1870466A3/en not_active Withdrawn
- 1999-07-14 KR KR1020017000549A patent/KR20010083111A/ko not_active Withdrawn
- 1999-07-14 CA CA002334038A patent/CA2334038A1/en not_active Abandoned
- 1999-07-14 CZ CZ2001149A patent/CZ2001149A3/cs unknown
- 1999-07-14 IL IL14084599A patent/IL140845A0/xx unknown
- 1999-07-14 NZ NZ509178A patent/NZ509178A/en unknown
- 1999-07-14 TR TR2001/00916T patent/TR200100916T2/xx unknown
- 1999-07-14 WO PCT/US1999/015838 patent/WO2000004149A2/en not_active Ceased
- 1999-07-14 PL PL346359A patent/PL200772B1/pl not_active IP Right Cessation
- 1999-07-14 KR KR1020077023762A patent/KR20070112860A/ko not_active Ceased
- 1999-07-14 TW TW094116927A patent/TW200532020A/zh unknown
- 1999-07-14 TW TW095142289A patent/TW200728465A/zh unknown
- 1999-09-28 SA SA99200618A patent/SA99200618B1/ar unknown
-
2001
- 2001-01-12 NO NO20010196A patent/NO20010196L/no not_active Application Discontinuation
-
2003
- 2003-09-22 AU AU2003248213A patent/AU2003248213A1/en not_active Abandoned
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| KR20070112860A (ko) | 2007-11-27 |
| TR200100916T2 (ar) | 2002-06-21 |
| CA2334038A1 (en) | 2000-01-27 |
| EP1097208A2 (en) | 2001-05-09 |
| CN100419079C (zh) | 2008-09-17 |
| KR20010083111A (ko) | 2001-08-31 |
| PL346359A1 (en) | 2002-02-11 |
| NO20010196L (no) | 2001-03-12 |
| AU5314899A (en) | 2000-02-07 |
| PL200772B1 (pl) | 2009-02-27 |
| EP1870466A3 (en) | 2008-03-19 |
| CN1315998A (zh) | 2001-10-03 |
| WO2000004149A2 (en) | 2000-01-27 |
| EP1870466A2 (en) | 2007-12-26 |
| AU762812B2 (en) | 2003-07-03 |
| TW200532020A (en) | 2005-10-01 |
| TW200728465A (en) | 2007-08-01 |
| CZ2001149A3 (cs) | 2002-02-13 |
| JP2002520054A (ja) | 2002-07-09 |
| AU2003248213A1 (en) | 2003-10-30 |
| IL140845A0 (en) | 2002-02-10 |
| HUP0203035A2 (hu) | 2002-12-28 |
| NO20010196D0 (no) | 2001-01-12 |
| BR9912007A (pt) | 2002-01-29 |
| NZ509178A (en) | 2004-04-30 |
| HUP0203035A3 (en) | 2007-12-28 |
| WO2000004149A3 (en) | 2000-07-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| SA99200618B1 (ar) | تراكيب وطرق لعلاج وتشخيص سرطان البروستات | |
| RU2234942C2 (ru) | Выделенный опухолевый полипептид предстательной железы и кодирующий его полинуклеотид | |
| EP1992640A1 (en) | Compounds for immunotherapy and diagnosis of breast cancer and methods for their use | |
| WO2001025272A2 (en) | Compositions and methods for therapy and diagnosis of prostate cancer | |
| JP2002533056A (ja) | 肺癌の治療および診断のための化合物および方法 | |
| US7074898B2 (en) | Compositions and methods for therapy and diagnosis of prostate cancer | |
| WO2001034802A2 (en) | Compositions and methods for the therapy and diagnosis of prostate cancer | |
| KR20020007348A (ko) | 유방암의 치료 및 진단용 조성물 및 이의 사용 방법 | |
| WO1999065928A2 (en) | Polynucleotide population isolated from non-metastatic and metastatic breast tumor tissues | |
| CA2344995A1 (en) | Cancer associated antigens and uses therefor | |
| US6410507B1 (en) | Compounds for immunotherapy and diagnosis of breast cancer and methods for their use | |
| JP4097178B2 (ja) | 腫瘍抗原 | |
| KR20010075418A (ko) | 유방 특이적으로 분비되는 유방암 단백질인 마마글로빈 | |
| KR20020026418A (ko) | 유방암을 치료 및 진단하기 위한 조성물 및 방법 | |
| US20020111467A1 (en) | Compositions and methods for the treatment and diagnosis of breast cancer | |
| US6861506B1 (en) | Compositions and methods for the treatment and diagnosis of breast cancer | |
| US7048931B1 (en) | Compositions and methods for the therapy and diagnosis of prostate cancer | |
| RU2828631C1 (ru) | Иммунобиологическое средство для терапии онкологических заболеваний на основе мРНК вектора. | |
| CA2375049A1 (en) | Compositions and methods for the therapy, diagnosis and monitoring of breast cancer | |
| US7270980B2 (en) | Compounds for immunodiagnosis of prostate cancer and methods for their use | |
| US20020082216A1 (en) | Compositions and methods for the therapy, diagnosis and monitoring of breast cancer | |
| AU2004218695B2 (en) | Compositions and methods for the treatment and diagnosis of breast cancer | |
| JP2009195236A (ja) | 乳癌の免疫療法および診断のための化合物ならびにそれらの使用のための方法 | |
| CA2613125A1 (en) | Compositions and methods for therapy and diagnosis of prostate cancer | |
| AU2008201853A1 (en) | Compositions and methods for the treatment and diagnosis of breast cancer |