SK9782000A3

SK9782000A3 - Macrolides, method for production thereof and pharmaceutical compositions on their base

Info

Publication number: SK9782000A3
Application number: SK978-2000A
Authority: SK
Inventors: John Philip Dirlam; Hamish Alastair Irvin Mcarthur
Original assignee: Pfizer Prod Inc
Priority date: 1998-01-02
Filing date: 1998-12-21
Publication date: 2001-12-03
Also published as: US6472371B1; OA11438A; PL341642A1; AU756409B2; AR014948A1; MA24729A1; AP9801420A0; NO20003347D0; WO1999035156A1; NO20003347L; AR020851A2; AR019787A2; CN1284081A; CA2316919C; PE20000049A1; EP1044207A1; EA200000594A1; KR20010024818A; BG104644A; TNSN98238A1

Description

Oblasť techniky

Vynález sa týka nových erytrcmycínov a azalidov, ktoré sú užitočné ako antibakteriálne a antiprotozoálne činidlá a pri iných aplikáciách ( napríklad ako protirakovinné Činidlá, antiaterosklerotické činidlá a činidlá znižujúce motilitu žalúdka apod.) u cicavcov, vrátane človeka, ako aj u rýb a vtákov. Ďalej sa vynález týka farmaceutických kompozíc na báze týchto zlúčenín a spôsobu liečenia bakteriálnych a protozoálnych infekcií u cicavcov, rýb a vtákov. Vynález sa tiež týka spôsobu výroby takýchto zlúčenín.

Doterajší stav techniky

Je známe, že makrolidové antibiotiká sú užitočná pri liečení širokého spektra bakteriálnych a protozoálnych infekcií u cicavcov, rýb a vtákov. Takýmito antibiotikámi sú napríklad rôzne deriváty erytromycínu A, ako azitromycin, ktorý je dostupný na trhu a vzťahujú sa k nemu US patenty

474 768 a 4 517 359, ktoré sú citované náhradou za prenesenie celého ich obsahu do tohto textu. Ďalších makrolidov sa týkajú US patentová prihláška č. 60/063676, podaná 29. októbra 1997 (Yong-Jin Wu), US patentová prihláška č. 60/063161, podaná 29. októbra 1997 ( Yong-Jin Wu), US patentová prihláška č. 60/054866, podaná 6. augusta 1997 (Hiroko Masamune, Yong-Jin Wu, Takushi Kaneko a Paul R.

McGuirk), US patentová prihláška č. 60/049980, podaná 11. júna

1997 (Brian S. Bronk, Michael A. Letavic, Takushi Kaneko a ·· ···· · ·· ·· ·· · ···· ··· ··· ····· ···· ··· ·· ·· ·· ··· ·· ·· ·

Bingwei V. Yang), US patentová prihláška č. 60/049348, podaná 11. júna 1997 ( Brian S. Bronk, Hengmiao Cheng, E. A. Glaser,

Michael A. Letavic, Takushi Kaneko a Bingwei V. Yang), medzinárodná patentová prihláška PCT/GB97/01810, podaná 4. júla 1997 (Peter Francis Leadlay, James Staunton, Jesus Cortes a Michael Stephen Pacey), medzinárodná prihláška PCT/GB97/01819, podaná 4. júla 1997 (Feter Francis Leadlay, James Staunton a Jesus Cortes), US patentová prihláška č. 60/070343, podaná 2. januára 1998 (Dirlam), US patentová prihláška č. 60/070358, podaná 2. januára 1998 (Yong-Jin Wu) a US patentová prihláška 60/097075, podaná 19. augusta 1998 (Hengmiao Cheng, Michael A. Letavic, CarL B. Ziegler, Jason K. Dutra, Brian S. Bronk). Tieto dokumenty sú citované náhradou za prenesenie celého ich obsahu do tohto textu. Podobne ako azitromycin a iné makrolidové antibiotiká aj nové makrolidové zlúčeniny podlá vynálezu vykazujú silnú účinnosť oproti rôznym bakteriálnym a protozoálnym infekciám, ako je popísané ďalej.

Podstata vynálezu

Predmetom vynálezu sú makrolidové zlúčeniny obecného vzorca I

O predstavuje vodík alebo skupinu obecného vzorca kde

R²⁰

Y predstavuje vodík, alkylskupinu s 1 až 10 atómami uhlíka, alkenylskupinu s 2 až 10 atómami uhlíka, alkynylskupinu s 2 až 10 atómami uhlíka, skupinu -(CH2)_m-aryl s 6 až 10 atómami uhlíka v arylovej časti, - (CH₂) _m-(päť- až desaťčlánkový heteroaryl), kde m predstavuje celé číslo 0 až 4, pritom alkyl-, alkenyl-, aryl-, heteroaryl- a alkynyl- skupina sú poprípade substituované 1 až 3 substituentami nezávisle zvolanými zo súboru zostávajúceho z halogénu, kyanoskupiny, nitroskupiny, trifluórmetylskupiny, azidoskupiny, (0) R²¹, -OC(O)R²¹, -NR²¹C(O)R²², -C(O)NR²¹R²², -NR²¹R²², hydroxyskupiny, alkylskupiny s 1 až 6 atómami uhlíka, alkoxyskupiny s 1 až 6 atómami uhlíka, arylskupiny s 6 až 10 atómami uhlíka a päť- až desaťčlánkovej heteroarylskupiny;

R¹ predstavuje alfa-rozvetvenú alkyl-, alkenyl-, alkynyl-, alkoxyalkyl- alebo alkyltioalkylskupinu, z ktorých každá obsahuje 3 až 8 atómov uhlíka a je po prípade substituovaná jednou alebo viacej hydoxyskupinami; cykloalkylalkylskupinu s 5 až 8 atómami uhlíka v cykloalkylovej časti, pritom alkylová časť je alfa-rozvetvená a obsahuje 2 až 5 atómov uhlíka; cykloalkylskupinu s 3 až 8 atómami atómami uhlíka alebo cykloalkenylskupinu s 5 až 8 atómami uhlíka, z ktorých každá je poprípade substituovaná metylskupinou alebo jednou alebo viacej hydroxyskupinami alebo jednou alebo viacej alkylskupinami s 1 až 4 atómami uhlíka alebo atómami halogénu; alebo troj- až šesťčlánkový heterocyklický kruh obsahujúci kyslík alebo síru, ktorý môže byť nasýtený alebo celý alebo čiastočne nenasýtený a môže byť poprípade substituovaný jednou alebo viacej alkylskupinami s 1 až 4 atómami uhlíka alebo halogénu; alebo

R¹ predstavuje fenylskupinu, ktorá je poprípade substituovaná aspoň jedným substituentom zvoleným zo súboru zostávajúceho z alkylskupiny s 1 až 4 atómami uhlíka, alkoxyskupiny s 1 až 4 atómami uhlíka a alkyltioskupiny s 1 az. 4 atómami uhlíka, atómov halogénu, hydroxyskupiny, trifluórmetylskupiny a kyanoskupiny; alebo x

R¹ môže predstavovať skupinu obecného vzorca a

kde

X predstavuje kyslík, síru alebo skupinu -CH₂-;

a, b, c a d predstavuje každý nezávisle celé číslo 0 až 2, ·· ···· · ·· ·· • · · ···· ··· e · · ·····

···· ··· · · ·· ·· ····· ·· · pritom súčet a + b + c + d je menši alebo rovný 5; alebo predstavuje skupinu obecného vzorca CH₂R²⁴, kde R²⁴predstavuje vodík, alkylskupinu s 2 až 8 atómami uhlíka_z alkenylskupinu s 2 až 8 atómami uhlíka, alkynylskupinu s 2 až 8 atómami uhlíka, alkoxyalkyl- alebo alkyltioalkylskupinu stále s 1 až 6 atómami uhlíka v každej z alifatických častí, pritom akákoľvek z uvedených alkyl-, alkoxy-, alkenyl- alebo alkynylskupín môže byť substituovaná jednou alebo viacej hydroxyskupinami alebo jedným alebo viacej atómami halogénu; alebo cykloalkylskupinu s 3 až 8 atómami uhlíka s lebo cykloalkenylskupinu s 5 až 8 atómami uhlíka, z ktorých každá môže byť prípadne substituovaná metylskupinou alebo jednou alebo viacej alkylskupinami s 1 až 4 atómami uhlíka alebo atómami halogénu; alebo troj- až šesťčlánkový heterocyklický kruh obsahujúci kyslík alebo síru, ktorý môže byť nasýtený alebo celý alebo čiastočne nenasýtený a môže byť poprípade substituovaný jednou alebo viacej alkylskupinami s 1 až 4 atómami uhlíka alebo alebo atómami halogénu; alebo skupinu SR²³, kde R²³ predstavuje alkylskupinu s 1 až 8 atómami uhlíka, alkenylskupinu s 2 až 8 atómami uhlíka, alkynylskupinu s 2 až 8 atómami uhlíka,cykloalkylskupinu s 3 až 8 atómami uhlíka, cykloalkenylskupinu s 5 až 8 atómami uhlíka, fenylskupinu alebo substituovanú fenylskupinu, kde substituentom je alkylskupina s 1 až 4 atómami uhlíka, alkoxyskupina s 1 až 4 atómami uhlíka alebo halogén, alebo troj- až šesťčlánkový heterocyklický kruh obsahujúci kyslík alebo síru, ktorý môže byť nasýtený alebo celý alebo čiastočne nenasýtený a môže byť poprípade substituovaný jednou alebo viacej alkylskupinami s 1 až 4 atómami halogénu; a

R² predstavuje vodík alebo hydroxyskupinu;

R³ predstavuje vodík, hydroxyskupinu alebo skupinu OCH₃;

R⁴ predstavuje vodík, skupinu -C(O)R⁹, -C(O)OR⁹,

-C(O)NR⁹R¹⁰ alebo ochraňujúcu skupinu hydroxyskupiny;

R⁵ predstavuje skupinu vzorca -SR⁸, - (CH2) _nC (0) R⁸, kde n predstavuje číslo 0 alebo 1, alkylskupinu s 1 až 10 atómami uhlíka, alkenylskupinu s 2 až 10 atómami uhlíka, alkynylskupinu s 2 až 10 atómami uhlíka, skupinu - (CH2)_m-aryl s 6 až 10 atómami uhlíka v arylovej časti alebo -(CH₂)_m- (päť- až desaťčlánkový heteroaryl), kde m predstavuje celé číslo 0 až 4, pritom vyššie uvedené skupiny R⁵ sú poprípade substituované jednou až tromi skupinami R¹⁶;

R⁶ a R⁷ predstavuje každý nezávisle vodík, hydroxyskupinu, alkoxyskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, alkylskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, alkenylskupinu s 2 až 6 atómami uhlíka, alkynylskupinu s 2 až 6 atómami uhlíka alebo skupinu - (CH2)_m ^_aryl s 6 až 10 atómami uhlíka v arylovej časti alebo - (CH₂)_m-(päť- až desaťčlánkový heteroaryl), kde m predstavuje celé číslo 0 až 4;

R⁸ predstavuje vždy nezávisle vodík, alkylskupinu

S 1 až 10 atómami uhlíka, alkenylskupinu s 2 až 10 atómami uhlíka, alkynylskupinu s .2 až 10 atómami ·· ···· · ·· ·· • · · ······ ··· · · · · · • · φ · · · · · · ·· ·· ··· ·· ·· uhlíka, skupinu - (CH₂) gCn¹^¹² (CH₂,' _rNR¹³R¹⁴ , kde q a r predstavujú každý nezávisle celé číslo 0 až 3, pritom však q a r nepredstavujú oba číslo 0,

- (CH₂)m^_aryl s 6 až 10 atómami uhlíka v arylovej časti alebo - (CH₂)_m-(päť- až desaťčlánkový heteroaryl), kde m predstavuje celé čislo 0 až 4, pritom vyššie uvedené skupiny R⁸ , okrem vodíka, sú poprípade substituované jednou až tromi skupinami R¹⁶; alebo ak je v skupine -CH₂NR⁸R¹⁵, môžu byť R¹⁵ a R⁸ zobraté dokopy za vzniku stvor- až desať článkového monocyklického alebo polycyklického nasýteného kruhu alebo päť- až desaťčlánkového heteroarylového kruhu, pritom nasýtený kruh a heteroarylový kruh okrem dusíka, ku ktorému sú R¹⁵ a R⁸ viazané, poprípade obsahujú 1 až 2 heteroatómy zvolené z kyslíku, síry a skupiny -N(R⁸)- , pritom nasýtený kruh poprípade obsahuje obsahuje jednu alebo dve dvojité alebo trojité väzby uhlík- uhlík, a pritom nasýtený heteroarylový kruh sú poprípade substituované 1 až 3 skupinami R¹⁶;

R⁹ a R¹⁰ predstavuje každý nezávisle vodík alebo alkylskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka;

R¹¹, R¹², R¹³ a R¹⁴ sú vždy nezávisle zvolené zo súboru zostávajúceho z vodíka, alkylskupiny s 1 až 10 atómami uhlíka, skupiny -(CH₂)_m-aryl s 6 až 10 atómami uhlíka v arylovej časti a

- (CH₂) _m-(päť- až desaťčlánkový heteroaryl), kde m predstavuje celé číslo 0 až 4, pritom skupiny vo význame R¹¹, R¹², R¹³ a R¹⁴ , okrem vodíka, sú poprípade substituované 1 až 3 skupinami R¹⁶; alebo

R¹¹ a R¹³ sú zobraté dokopy za vzniku skupiny -(CH₂)_P, kde p predstavuje celé číslo 0 až 3, tak preto vzniká štvor- až sedemčlánkový nasýtený kruh, ktorý poprípade obsahuje jednu alebo dve dvojité alebo trojité väzby uhlík-uhlik; alebo

R¹³ a R¹⁴ sú zobraté dokopy za vzniku štvor- až desaťčlánkového monocyklického alebo polycyklického nasýteného kruhu alebo päť- až desaťčlánkového heteroarylového kruhu, pritom nasýtený kruh a heteroarylový kruh okrem dusíka, ku ktorému sú R¹³ a R¹⁴ viazané, poprípade obsahujú 1 alebo 2 heteroatómy zvolené z kyslíka, síry a skupiny -N(R⁸)- ,pritom nasýtený kruh poprípade obsahuje jednu alebo dve dvojité alebo trojité väzby uhlík-uhlik, a pritom nasýtený a heteroarylový kruh sú poprípade substituované 1 až 3 skupinami R¹⁶;

R¹⁵ predstavuje vodík, alkylskupinu s 1 až 10 atómami uhlíka, alkenylskupinu s 2 až 10 atómami uhlíka alebo alkynylskupinu s 2 až 10 atómami uhlíka, pritom tieto skupiny vo význame R¹⁵ sú poprípade substituované 1 až 3 substituentami nezávisle zvolenými z halogénu a skupiny -OR⁹;

R¹⁶ je vždy nezávisle zvolený zo súboru zostávajúceho z halogénu, kyanoskupiny, nitroskupiny, trifluórmetylskupiny, azidoskupiny, skupiny -C (O) R¹⁷,

-C (O) OR¹⁷, -C (O) OR¹⁷, -OC(O)OR¹⁷, -1JR⁶C(O)R⁷,

-C(O)NR⁶R⁷, -NR⁶R⁷, hydroxyskupiny, alkylskupiny s 1 až 6 atómami uhlíka, alkoxyskupiny s 1 až 6 atómami • ·· ·· ·· · · · · · t · · · · ·· ···· • · · • · · • · · · ·· ·· • · · · · · ··· ·· ·· ·· · uhlíka, skupiny -(CH₂)_m-aryl s 6 až 10 atómami uhlíka v arylovej časti a - (CH₂) _m-(päť- až desaťčlánkový heteroaryl),kde m predstavuje celé číslo 0 až 4, pritom arylový a heteroarylový substituent je poprípade substituovaný 1 až 2 substituentami nezávisle zvolenými zo súboru zostávajúceho z halogénu, kyanoskupiny, nitroskupiny, trifluórmetylskupiny, azidoskupiny, skupiny -C (0) R¹⁷, -C(0)0R¹⁷, -C(O)OR¹⁷, -0C(0)0R¹⁷, -NR⁶C(0)R⁷, -C(O)NR⁶R⁷, -NR⁶R⁷, hydroxyskupiny, alkylskupiny s 1 až 6 atómami uhlíka a alkoxyskupiny s 1 až 6 atómami uhlíka,

R¹⁷	je vždy nezávisle zvolený zo súbcru zostávajúceho z vodíka , alkylskupiny s 1 až 10 atómami uhlíka, alkenylskupiny s 2 až 10 atómami uhlíka alebo alkynylskupiny s 2 až 10 atómami uhlíka a skupiny -(CH₂)_m-aryl s 6 až 10 atómami uhlíka v arylovej časti a - (CH₂) _m-(päť- až desaťčlánkoý heteroaryl),kde m predstavuje celé číslo 0 až 4, pritom R⁸ nepredstavuje vodík, keď R¹⁹ predstavuje skupinu -CH₂S (0) _nR⁸;
R¹⁰	predstavuje hydroxyskupinu;
R¹⁹	predstavuje alkylskupinu s 1 až 10 atómami uhlíka, alkenylskupinu s 1 až 10 atómami uhlíka, alkynylskupinu s 2 až 10 atómami uhlíka, kyanoskupinu, skupinu -CH₂S(O)_nR⁸, kde n predstavuje celé číslo 0 až 2, -CH2OR⁸, -CH2N(OR⁹)R⁸, -CH2NR^£iR¹⁵, -(CH2)_m-aryl s 6 až 10 atómami uhlíka v arylovej časti a - (CH₂)_m(päť- až desaťčlánkový heteroaryl),kde m predstavuje celé číslo 0 až 4, pritom skupiny vo význame R¹⁹ sú poprípade substituované 1 až

skupinami R¹⁶; alebo

• ·	···· • •	• ·· · • ·	··	• •	·· • •	• •	• ·
• •	• •
•	•	• ♦	• 9		•	•	•
• ·		• «	·«·	··		• ·		• ·

R¹⁰ a R¹⁹ sú zobraté dokopy za vzniku oxazolylového kruhu obecného vzorca

R²¹ a R²² predstavuje každý nezávisle vočík, hydroxyskupinu, alkoxyskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, alkylskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, alkenylskupinu s 2 až 6 atómami uhlíka, skupinu - (CH₂) _m-aryl s 6 až 10 atómami uhlíka v arylovej časti a -(CH2)_m (päť- až desaťčlánkový heteroaryl), kde m predstavuje celé číslo 0 až 4, alebo alkylyl skupinu s 2 až 10 atómami uhlíka;

a ich farmaceutický vhodné soli.

Predmetom vynálezu sú ďalej makrolidové zlúčeniny obecného vzorca II

O

	··		····	•	··
•		•	•	·· ·		•	•	• ·
•		•	•	• ·		•	•	•
•		•	• ·	• ·		•	•	•
	··		• ·	···	··		··	•

kde

R²⁰ predstavuje vodík alebo skupinu obecného vzorca

Y predstavuje vodík, alkylskupinu s 1 až 10 atómami uhlíka, alkenylskupinu s 2 až 10 atómami uhlíka, alkynylskupinu s 2 až 10 atómami uhlíka, skupinu -(CH₂)_m-aryl s 6 až 10 atómami uhlíka v arylovej časti a ~(CH₂)· (päť- až desaťčlánkový heteroaryl), kde m predstavuje celé číslo 0 až 4, pritom alkyl-, alkenyl-, aryl-, heteroaryl- a alkynyl- skupina sú poprípade substituované 1 až 3 substituentami nezávisle zvolenými zo súboru zostávajúceho z halogénu, kyanoskupiny, nitroskupiny, trifluórmetyl skupiny, azidoskupiny, -C (O) R²¹, -OC(O)R², -NR²¹C (O) R²², -C (O) NR²¹R²², -NR²¹R²², hydroxyskupiny, alkylskupiny s 1 až 6 atómami uhlíka, alkoxyskupiny s 1 až 6 atómami uhlíka, arylskupiny s 6 až 10 atómami uhlíka a päť až desaťčlánkové heteroarylskupiny;

R¹ predstavuje alfa-rozvetvenú alkyl-, alkenyl-, alkynyl-, alkoxyalkyl- alebo alkyltioalkylskupinu, z ktorých každá obsahuje 3 až 8 atómov uhlíka a je poprípade substituovaná jednou alebo viacej hydroxyskupinani; cykloalkylalkylskupinu ·· ·· • · · · • · · · ·· ···· • · · · • t · ···· · · · · · ·· ·· ··· ·· ·· s 5 až 8 atómami uhlíka v cykloalkylovej časti, pritom alkylová časť je alfa-rozvetvená a obsahuje 2 až 5 atómov uhlíka; cykloalkylskupinu s 3 až 8 atómami uhlíka alebo cykloalkenylskupinu s 5 až 8 atómami uhlíka, z ktorých každá je poprípade substituovaná metylskupinou alebo jednou alebo viacej hydroxyskupinami alebo jednou alebo viacej alkylskupinami s 1 až 4 atómami uhlíka alebo atómami halogénu; alebo troj- až šesťčlánkový heterocyklický kruh obsahujúci kruh obsahujúci kyslík alebo síru, ktorý môže byť nasýtený alebo celý alebo časťou nenasýtený a môže byť poprípade substituovaný jednou alebo viacej alkylskupinami s 1 až 4 atómami uhlíka alebo atómami halogénu; alebo

R¹ predstavuje fenylskupinu, ktorá je poprípade substituovaná aspoň jedným substituentom zvoleným zo súboru zostávajúceho z alkylskupiny s 1 až 4 atómami uhlíka, alkoxyskupiny s 1 až 4 atómami uhlíka a alkyltioskupiny s 1 až 4 atómami uhlíka, atómov halogénu, hydroxyskupiny, trifluórmetylskupiny a kyanoskupiny; alebo

R¹ môže predstavovať skupinu obecného vzorca a

kde predstavuje kyslík, síru alebo skupinu -CH₂-;

·· ···· · ·· ·· ·· · ···· ··· • · · ····· • · · · ······ ·· ·· ··· ·· ·· ··· a, b, c a d predstavuje každý nezávisle celé číslo 0 až 2, pritom súčet a+b+c+d je menší alebo rovný 5; alebo

R¹ predstavuje skupinu obecného vzorca CH₂R²⁴, kde R²⁴ predstavuje vodík, alkylskupinu s 1 až 8 atómami uhlíka, alkenylskupinu s 2 až 8 atómami uhlíka, alkynylskupiny s 2 až 8 atómami uhlíka, alkoxyalkylalebo alkyltioalkylskupinu vždy s 1 až 6 atómami uhlíka v každej z alifatických častí, pritom ktorákoľvek z uvedených alkyl-, alkoxy-, alkenylalebo alkynylskupín môže byť substituovaná jednou alebo viacej hydroxyskupinami alebo jedným alebo viacej atómami halogénu; alebo cykloalkylskupinu s 3 až 8 atómami uhlíka alebo cykloalkenylskupinu s 5 až 8 atómami uhlíka, z ktorých každá môže byť poprípade substituovaná metylskupinou alebo jednou alebo viacej alkylskupinami s 1 až 4 atómami uhlíka alebo atómami halogénu; alebo troj- až šesťčlánkový heterocyklický kruh obsahujúci kyslík alebo síru, ktorý môže byť nasýtený alebo celý alebo čiastočne nenasýtený a môže byť poprípade substituovaný jednou alebo viacej alkylskupinami s 1 až 4 atómami uhlíka alebo atómami halogénu; alebo skupinu SR²³, kde R²³predstavuje alkylskupinu s 1 až 8 atómami uhlíka, alkenylskupinu s 2 až 8 atómami uhlíka, alkynylskupinu s 2 až 8 atómami uhlíka, cykloalkylskupinu s 3 až 8 atómami uhlíka, cykloalkenylskupinu s 5 až 8 atómami uhlíka, fenylskupinu alebo substituovanú fenylskupinu, kde substituentom je alkylskupina s 1 až 4 atómami uhlíka, alkoxyskupina s 1 až 4 atómami uhlíka alebo halogén, alebo trojaž šesťčlánkový heterocyklický kruh obsahujúci kyslík ·· ···· · ·· ·· ·· · ···· ··· • · · ····· • · · · ··· ··· ·· ·· ··· ·· ·· ··· alebo síru, ktorý môže byť nasýtený alebo celý alebo čiastočne nenasýtený a môže byť poprípade substituovaný jednou alebo viacej alkylskupinami s 1 až 4 atómami uhlíka alebo atómam:. halogénu; a

R² predstavuje vodík alebo hydroxyskupinu;

R³ predstavuje vodík, hydroxyskupinu alebo skupina OCH3;

R⁴ predstavuje vodík, skupinu -C(O)R⁹, -C(O)OR⁹,

-C(O)NR⁹R¹⁰ alebo chrániacu skupinu hydroxyskupiny;

R¹⁸ predstavuje hydroxyskupinu;

R¹⁹ predstavuje vodík; a

R²¹ a R²² predstavuje každý nezávisle vodík, hydroxyskupinu, alkoxyskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, alkylskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, alkenylskupinu s 2 až 6 atómami uhlíka , skupinu - (CH₂)_m-é.ryl s 6 až 10 atómami uhlíka v arylovej časti a - (CH₂)_m- (päť- až desaťčlánkový heteroaryl), kde m predstavuje celé číslo od 0 do 4, alebo alkylylskupinu s 2 až 10 atómami uhlíka;

a ich farmaceutický vhodné soli.

Zlúčeninami obecného vzorca I sú napríklad ďalej uvedené zlúčeniny vzorca 5, kde Y predstavuje vodík, vzorca 6, kde Y predstavuje skupinu CH₃.

·· ···· · ·· ·· • · · ···· · · · • · · ····· ···· ······ ·· ·· ··· ·· ·· ···

Prednosť sa dáva zlúčeninám obecného vzorca I, kde R¹predstavuje izopropyl-, sek. butyl-, cyklopropyl-, cyklobutyl, cyklopentyl-, metyltioetyl- a 3-furylskupinu.

Zlúčeninami obecného vzorca II sú napríklad ďalej uvedené zlúčeniny vzorca 6, kde Y predstavuje vodík, a vzorca 6a, kde Y predstavuje skupinu CH₃.

Prednosť sa dáva zlúčeninám obecného vzorca II, kde

R¹ predstavuje izopropyl·-, sek. butyl-, cyklopropyl-, cyklobutyl-, cyklopentyl-, metyltioetyl- a 3-furylskupinu.

Ako iné zlúčeniny, ktorým sa dáva prednosť, je možno uviesť zlúčeniny obecného vzorca I a II, kde R²⁰ predstavuje skupinu obecného vzorca

R¹ predstavuje izopropylskupinu, R² predstavuje vodík a R¹⁹predstavuje hydroxyskupinu;

R¹ predstavuje izopropylskupinu, R² predstavuje hydroxyskupinu a R¹⁹ predstavuje hydroxyskupinu;

R¹ predstavuje cyklopropylskupinu, R² predstavuje vodík a R¹⁹ predstavuje hydroxyskupinu;

R¹ predstavuje cyklopropylskupinu, R² predstavuje hydroxyskupinu a R¹⁹ predstavuje hydroxyskupinu;

R¹ predstavuje sek.butylskupinu, R² predstavuje vodík a R¹⁹ predstavuje hydroxyskupinu;

	99	····	•	··		• ·
•	9	•	·· ·	•	•	•	• ·
•	•	e	• ·	•	•	•
9	•	• 9	• ·	•	•	•
	··	9 ·	• · ·	• ·		• ·	··

R¹ predstavuje sek.butylskupinu, R² predstavuje hydroxyskupinu a R¹⁹ predstavuje hydroxyskupinu;

R¹ predstavuje cyklobutylskupinu, R² predstavuje vodík a R¹⁹predstavuje hydroxyskupinu;

R¹ predstavuje cyklobutylskupinu, R² predstavuje hydroxyskupinu a R¹⁹ predstavuje hydroxyskupinu;

R¹ predstavuje cyklopentylskupinu, R² predstavuje vodík a R¹⁹predstavuje hydroxyskupinu;

R¹ predstavuje cyklopentylskupinu, R² predstavuje hydroxyskupinu a R¹⁹ predstavuje hydroxyskupinu;

R¹ predstavuje metyltioetylskupinu, R² predstavuje vodík a R¹⁹predstavuje hydroxyskupinu;

R¹ predstavuje metyltioetylskupinu, R² predstavuje hydroxyskupinu a R¹⁹ predstavuje hydroxyskupinu;

R¹ predstavuje 3-furylskupinu, R² predstavuje vodík a R¹⁹predstavuje hydroxyskupinu;

R¹ predstavuje 3-furylskupinu, R² predstavuje hydroxyskupinu a R¹⁹ predstavuje hydroxyskupinu;

Ďalej sú predmetom vynálezu zlúčeniny vzorcov 2, 2a,

3, 3a, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, a 18.

Predmetom vynálezu sú ďalej makrolidové zlúčeniny obecného vzorca 8

OH (8) predstavuje alfa-rozvetvenú alkyl-, alkenyl-, alkynyl-, alkoxyalkyl- alebo a]kyltioalkylskupinu, z ktorých každá obsahuje 3 až 8 atómov uhlíka ·· ···· • · ·· • · · •· · · ·· ·· · ·· ·· • · · · · • · ·e • · ·· • ·· ···

R¹ viacej s 5 až pritom až 5 a je poprípade substituovaná jednou alebo hydroxyskupinani; cykloalkylalkylskupinu 8 atómami uhlíka v cyklealkylovej časti, alkylová časť je alfa-rozvetvená a obsahuje atómov uhlíka; cykloalkylskupinu s 3 až 8 atómami uhlíka alebo cykloalkenylskupinu s 5 až 8 atómami uhlíka, z ktorých každá je poprípade substituovaná metylskupinou alebo jednou alebo viacej hydroxyskupinami alebo jednou alebo viacej alkylskupinami s 1 až 4 atómami uhlíka alebo atómami halogénu; alebo troj- až šesťčlánkový heterocyklický kruh obsahujúci kruh obsahujúci kyslík alebo síru, ktorý môže byť nasýtený alebo celý alebo čiastočne nenasýtený a jednou alebo uhlíka alebo môže byť poprípade substituovaný viacej alkylskupinami s 1 až 4 atómami atómami halogénu; alebo

R¹ predstavuje fenylskupinu, ktorá je poprípade substituovaná aspoň jedným substituentom zvoleným zo súboru zostávajúceho z alkylskupiny s 1 až 4 atómami uhlíka a alkoxyskupiny s 1 až 4 atómami uhlíka a alkyltioskupiny s 1 až 4 atómami uhlíka, atómov halogénu, hydroxyskupiny, trifluórmetylskupiny a kyanoskupiny; alebo

R¹ môže predstavovať skupinu obecného vzorca a (a)

X / (CHzJŕ (CHád ·· ···· · ·· ·· ·· · ···· ··· ··· ····· • · · · ······ ·· ·· ··· ·· ·· ··· kde

X predstavuje kyslík, síru alebo skupinu -CH₂-;

a, b, c a d predstavuje každý nezávisle celé číslo 0 až 2, pritom súčet a+b+c+d je menší alebo rovný 5; alebo

R¹ predstavuje skupinu obecného vzorca CH₂R²⁴, kde R²⁴ predstavuje vodík, alkylskupinu s 1 až 8 atómami uhlíka, alkenylskupinu s 2 až 8 atómami uhlíka, alkynylskupiny s 2 až 8 atómami uhlíka, alkoxyalkylalebo alkyltioalkylskupinu vždy s 1 až 6 atómami uhlíka v každej z alifatických častí, pritom akákolvek z uvedených alkyl-, alkoxy-, alkenylalebo alkynylskupín môže byť substituovaná jednou alebo viacej hydroxyskupinami alebo jedným alebo viacej atómami halogénu; alebo cykloalkylskupinu s 3 až 8 atómami uhlíka alebo cykloalkenylskupinu s 5 až 8 atómami uhlíka, z ktorých každá môže byť poprípade substituovaná metylskupinou alebo jednou alebo viacej alkylskupinami s 1 až 4 atómami uhlíka alebo atómami halogénu; alebo troj- až šesťčlánkový heterocyklický kruh obsahujúci kyslík alebo síru, ktorý môže byť nasýtený alebo celý alebo čiastočne nenasýtený a môže byť poprípade substituovaný jednou alebo viacej alkylskupinami s 1 až 4 atómami uhlíka alebo atómami halogénu; alebo skupinu SR²³, kde R²³predstavuje alkylskupinu s 1 až 8 atómami uhlíka, alkenylskupinu s 2 až 8 atómami uhlíka, alkynylskupinu s 2 až 8 atómami uhlíka, cykloalkyl19 skupinu s 3 až 8 atómami uhlika, cykloalkenylskupinu s 5 až 8 atómami uhlíka, fenylskupinu alebo substituovanú fenylskupinu, kde substituentom je alkylskupina s 1 až 4 atómami uhlíka, alkoxyskupina s 1 až 4 atómami uhlíka alebo halogén, alebo trojaž šesťčlánkový heterocyklický kruh obsahujúci kyslík alebo síru, ktorý môže byť nasýtený alebo celý alebo čiastočne nenasýtený a môže byť poprípade substituovaný jednou alebo viacej alkylskupinami s 1 až 4 atómami uhlíka alebo atómami halogénu; a

R² predstavuje vodík alebo hydroxyskupinu;

a ich farmaceutický vhodné soli.

Predmetom obecného vzorca 9

R¹ predstavuje alfa-rozvetvenú alkyl-, alkenyl-, alkynyl-, alkoxyalkyl- alebo alkyltioalkylskupinu, z ktorých každá obsahuje 3 až 8 atómov uhlíka a je poprípade substituovaná jednou alebo viacej hydroxyskupinani; cykloalkylalkylskupinu

··		····	•	··		··
•	•	•	·· ·		•	• ·	• ·
•	•	•	• ·		•	• ·
•	•	• ·	• ·		•	• ·
• ·		··	···	··		··	··

s 5 až 8 atómami uhlíka v cykloalkylovej časti, pritom alkylová časť je alfa-rozvetvená a obsahuje 2 až 5 atómov uhlíka; cykloalkylskupinu s 3 až 8 atómami uhlíka alebo cykloalkenylskupinu s 5 až 8 atómami uhlíka, z ktorých každá je poprípade substituovaná metylskupinou alebo jednou alebo viacej hydroxyskupinami alebo jednou alebo viacej alkylskupinami s 1 až 4 atómami uhlíka alebo atómami halogénu; alebo troj- až šesťčlánkový heterocyklický kruh obsahujúci kruh obsahujúci kyslík alebo síru, ktorý môže byť nasýtený alebo celý alebo čiastočne nenasýtený a môže byť poprípade substituovaný jednou alebo viacej alkylskupinami s 1 až 4 atómami uhlíka alebo atómami halogénu; alebo

R¹ môže predstavovať skupinu obecného vzorca a

kde predstavuje kyslík, síru alebo skupinu -CHž-;

a, b, c a d predstavuje každý nezávisle celé číslo 0 až 2, pritom súčet a+b+c+d je menší alebo rovný 5;

·· ···· • · · • · · • · · · ·· ·· • · · · · · ··· ·· ·· ··· alebo

R¹ predstavuje skupinu obecného vzorca CH₂R²⁴, kde R²⁴ predstavuje vodík, alkylskupinu s 1 až 8 atómami uhlíka, alkenylskupinu s 2 až 8 atómami uhlíka, alkynylskupiny s 2 až 8 atómami uhlíka, alkoxyalkylalebo alkyltioalkylskupinu vždy s 1 až 6 atómami uhlíka v každej z alifatických častí, pritom ktorákoľvek z uvedených alkyl-, alkoxy-, alkenylalebo alkynylskupín môže byť substituovaná jednou alebo viacej hydroxyskupinami alebo jedným alebo viacej atómami halogénu; alebo cykloalkylskupinu s 3 až 8 atómami uhlíka alebo cykloa.'.kenylskupinu s 5 až 8 atómami uhlíka, z ktorých každá môže byť poprípade substituovaná metylskupinou alebo jednou alebo viacej alkylskupinami s 1 až 4 atómami uhlíka alebo atómami halogénu; alebo troj- až šesťčlánkový heterocyklický kruh obsahujúci kyslík alebo síru, ktorý môže byť nasýtený alebo celý alebo čiastočne nenasýtený a môže byť poprípade substituovaný jednou alebo viacej alkylskupinami s 1 až 4 atómami uhlíka alebo atómami halogénu; alebo skupinu SR²³, kde R²³predstavuje alkylskupinu s 1 až & atómami uhlíka, alkenylskupinu s 2 až 8 atómami uhlíka, alkynylskupinu s 2 až 8 atómami uhlíka, cykloalkylskupinu s 3 až 8 atómami uhlíka, cykloalkenylskupinu s 5 až 8 atómami uhlíka, fenylskupinu alebo substituovanú fehylskupinu, kde substituentom je alkylskupina s 1 až 4 atómami uhlíka, alkoxyskupina s 1 až 4 atómami uhlíka alebo halogén, alebo trojaž šesťčlánkový heterocyklický kruh obsahujúci kyslík alebo síru, ktorý môže byť nasýtený alebo celý alebo • ·· ·· ·· · · · · · • · · · · čiastočne nenasýtený a môže byť poprípade substituovaný jednou alebo viacej alkylskupinami s 1 ·· ···· • · · • · · • · · · ·· ·· • · · · · · ··· ·· ·· ··· až 4 atómami uhlíka alebo atómami halogénu; a

R² predstavuje vodík alebo hydroxyskupinu;

a ich farmaceutický vhodné soli.

Ďalej je predmetom vynálezu farmaceutická kompozícia pre liečenie bakteriálnych infekcií alebo protozoálnych infekcií u cicavcov, rýb alebo vtákov, ktorých podstata spočíva v tom, že obsahuje terapeuticky účinné množstvo zlúčeniny obecného vzorca I, II, 8 alebo 9 alebo ich farmaceutický vhodné soli a farmaceutický vhodný nosič.

Predmetom vynálezu je tiež spôsob liečenia bakteriálnych alebo protozoálnych infekcií u cicavcov, rýb alebo vtákov, pri ktorom sa takému cicavcu, rybe alebo vtákovi podáva terapeuticky účinné množstvo zlúčeniny obecného vzorca I, II, 8 alebo 9 alebo jej farmaceutický vhodnej soli.

Predmetom vynálezu je tiež spôsob výroby zlúčenín obecného vzorca 5

I 0¾

OH • ·· ·· ·· · · · · · • · · · · kde R¹ a R² majú význam uvedený u obecného vzorca I, ktorého ·· ···· • · · e · · • · · · ·· ·· • · · · · ··· ·· ·· · podstata spočíva v tom, že sa zlúčenina obecného vzorca 3 kde R¹ a R² majú význam uvedený u obecného vzorca I, nechá reagovať s redukčným činidlom.

Predmetom vynálezu je ďalej vyššie popísaný spôsob, kde redukčným činidlom je tetrahydroboritan sodný alebo oxid platiny.

Ďalej je predmetom vynálezu spôsob výroby zlúčenín obecného vzorca 6

kde R^{1 a} R² majú význam uvedený u obecrého vzorca I, ktorého podstata spočíva v tom, že sa zlúčenina obecného vzorca 5

		··	····	•	··	··	•
	•	•	•	·· ·	•	•	9	··
	•	e	•	• e	•	•	•	•
	•	•	• ·	• 9	•	9	•	9
24		··	··	···	··	99	999

kde R¹

R² majú význam uvedený u obecného vzorca

I, nechá reagovať s metylačným činidlom.

Predmetom vynálezu je tiež vyššie popísaný spôsob, pri ktorom je metylačným činidlom formaldehyd.

obecného

zlúčenín (5a) kde R^{1 a} R² majú význam uvedený u obecného vzorca I, ktorého podstata spočíva v tom, že sa zlúčenina obecného vzorca 3a (3a) kde R¹

R² majú význam uvedený

reagovať s redukčným činidlom.

Predmetom vynálezu je tiež vyššie popísaný spôsob, pri ktorom je redukčným činidlom tetrahydroboritan sodný alebo oxid platiny.

Ďalej je predmetom vynálezu spôsob výroby zlúčenín obecného vzorca 6a kde R¹

R² majú význam uvedený u obecného vzorca ktorého podstata spočíva v tom, že sa zlúčenina obecného vzorca 5a ·· ····

kde R^{1 a} R² majú význam uvedený u obecného vzorca I, nechá reagovať s metylačným činidlom.

Ďalej sú predmetom vynálezu zlúčeniny obecného vzorca

kde

R²⁰ predstavuje vodík alebo skupinu obecného vzorca

	··	····	•	··		··
•	•	•	·· ·		•	•	•	··
•	•	•	• ·		•	•	•
•	•	• ·	• ·		•	e	•
	··	• ·	• · ·	··		··	··

Y predstavuje vodík, alkylskupinu s 1 až 10 atómami uhlíka, alkenylskupinu s 2 až 10 atómami uhlíka, alkynylskupinu s 2 až 10 atómami uhlíka, skupinu -(CH₂)_m-aryl s 6 až 10 atómami uhlíka v arylovej časti, - (CH₂) _m- (päť- až desaťčlánkový heteroaryl), kde m predstavuje celé číslo 0 až 4, pritom alkyl-, alkenyl-, aryl-, heteroaryl- a alkynyl- skupina sú poprípade substituované 1 až 3 substituentami nezávisle zvolenými zo súboru zostávajúceho z halogénu, kyanoskupiny, nitroskupiny, trifluórmetylskupiny, azidoskupir.y, -C (O) R²¹, -OC(O)R²¹, -NR²¹C(O)R²², -C(O)NR²¹R⁵², -nr²¹r²², hydroxyskupiny, alkylskupiny s 1 až 6 atómami uhlíka, alkoxyskupiny s 1 až 6 atómami uhlíka, arylskupiny s 6 až 10 atómami uhlíka a päť- až desaťčlánkovej heteroarylskupiny;

R¹ predstavuje alfa-rozvetvenú alkyl-, alkenyl-, alkynyl-, alkoxyalkyl- alebo alkyltioalkylskupinu, z ktorých každá obsahuje 3 až 8 atómov uhlíka a je po prípade substituovaná jednou alebo viacej hydoxyskupinami; cykloalkylalkylskupinu s 5 až 8 atómami uhlíka v cykloalkylovej časti, pritom alkylová časť je alfa-rozvetvená a obsahuje 2 až 5 atómov uhlíka; cykloalkylskupinu s 3 až 8 atómami atómami uhlíka alebo cykloalkenylskupinu s 5 až 8 atómami uhlíka, z ktorých každá je prípadne substituovaná metylskupinou alebo jednou alebo viacej hydroxyskupinami alebo jednou alebo viacej alkylskupinami s 1 až 4 atómami uhlíka alebo atómami halogénu; alebo troj- až šesťčlánkový heterocyklický kruh obsahujúci kyslík alebo síru, ktorý môže byť nasýtený alebo celý alebo čiastočne nenasýtený a môže byť poprípade substituovaný jednou alebo viacej alkylskupinami s 1 až 4 atómami uhlíka alebo halogénu; alebo

··	····	• ··	··
• ·	*	·· · ·	9 9	•
• ·	•	• · ·	9 9
• ·	• ·	• · · ·	9 9
• ·	• ·	• · ·	9 9
··	··	··· ··	99	•

R¹ predstavuje fenylskupinu, ktorá je poprípade substituovaná aspoň jedným substituentom zvoleným zo súboru zostávajúceho z alkylskupiny s 1 až 4 atómami uhlíka, alkoxyskupiny s 1 až 4 atómami uhlíka a alkyltioskupiny s 1 až 4 atómami uhlíka, atómov halogénu, hydroxyskupiny, trifluórmetylskupiny a kyanoskupiny; alebo môže predstavovať skupinu obecného vzorca a

X a, b,

R¹ kde predstavuje kyslík, síru alebo skupinu -CH₂-;

c a d predstavuje každý nezávisle celé číslo 0 až 2, pritom súčet a+b+c+dje menší alebo rovný 5; alebo predstavuje skupinu obecného vzorca CH₂R²⁴, kde R²⁴predstavuje vodík, alkylskupinu s 2 až 8 atómami uhlíka, alkenylskupinu s 2 až 8 atómami uhlíka, alkynylskupinu s 2 až 8 atómami uhlíka,

··		····	• ··		··
•	•	•	·· ·	•	• ·	··
•	•	•	• ·	•	•	•
•	•	• ·	• ·	•	•	•
··		··	··· ··		··	··

alkoxyalkyl- alebo alkyltioalkylskupinu stále s 1 až 6 atómami uhlíka v každej z aliféitických častí, pritom akákoľvek z uvedených alkyl-, alkoxy-, alkenyl- alebo alkynylskupín môže byť substituovaná jednou alebo viacej hydroxyskupinami alebo jedným alebo viacej atómami halogénu; alebo cykloalkylskupinu s 3 až 8 atómami uhlíka alebo cykloalkenylskupinu s 5 až 8 atómami uhlíka, z ktorých každá môže byť prípadne substituovaná metylskupinou alebo jednou alebo viacej alkylskupinami s 1 až 4 atómami uhlíka alebo atómami halogénu; alebo troj- až šesťčlánkový heterocyklický kruh obsahujúci kyslík alebo síru, ktorý môže byť nasýtený alebo celý alebo čiastočne nenasýtený a môže byť poprípade substituovaný jednou alebo viacej alkylskupinami s 1 až 4 atómami uhlíka alebo atómami halogénu; alebo skupinu SR²³, kde R²³predstavuje alkylskupinu s 1 až E atómami uhlíka, alkenylskupinu s 2 až 8 atómami uhlíka, alkynylskupinu s 2 až 8 atómami uhlíka, cykloalkylskupinu s 3 až 8 atómami uhlíku, cykloalkenylskupinu s 5 až 8 atómami uhlíka, fenylskupinu alebo substituovanú fenylskupinu, kde substituentom je alkylskupina s 1 až 4 atómami uhlíka, alkoxyskupina s 1 až 4 atómami uhlíka alebo halogén, alebo troj- až šesťčlánkový heterocyklický kruh obsahujúci kyslík alebo síru, ktorý môže byť nasýtený alebo celý alebo čiastočne nenasýtený a môže byť poprípade substituovaný jednou alebo viacej alkylskupinami s 1 až 4 atómami halogénu; a

R² predstavuje vodík alebo hydroxyskupinu;

·· ···· · ·· ·· ·· · ···· ··· • 9 · · · · · ·

R³ predstavuje vodík, hydroxyskupinu alebo skupinu OCH₃;

R⁴ predstavuje vodík, skupinu -C (O) R⁹, -C (O) OR⁹,

-C(O)NR⁹R¹⁰ alebo ochraňujúcu skupinu hydroxyskupiny;

R⁵ predstavuje skupinu vzorca -SR®, - (CH₂) _nC (O) R®, kde n predstavuje číslo 0 alebo 1, alkylskupinu s 1 až 10 atómami uhlíka, alkenylskupinu s 2 až 10 atómami uhlíka, alkynylskupinu s 2 až 10 atómami uhlíka, skupinu -(CH₂)_m-aryl s 6 až 10 atómami uhlíku v arylovej časti alebo -(CH₂) _m ^- (päť- až desaťčlánkový heteroaryl), kde m predstavuje celé číslo 0 až 4, pritom vyššie uvedené skupiny R⁵ sú poprípade substituované jednou až tromi skupinami R¹⁶;

R® a R⁷ predstavuje každý nezávisle vodík, hydroxyskupinu, alkoxyskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, alkylskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, alkenyl-skupinu s 2 až 6 atómami uhlíka, alkynylskupinu s 2 až 6 atómami uhlíka alebo skupinu- (CH₂) _m-aryl s 6 až 10 atómami uhlíka v arylovej časti alebo

- (CH₂)_m-(päť- až desaťčlánkový heteroaryl), kde m predstavuje celé číslo 0 až 4;

R® predstavuje vždy nezávisle vodík, alkylskupinu s 1 až 10 atómami uhlíka, alkenylskupinu s 2 až 10 atómami uhlíka, alkynylskupinu s 2 až 10 atómami uhlíka, skupinu - (CH₂) _qCRⁿR¹² (CH2) rNR¹³R¹⁴ , kde q a r predstavujú každý nezávisle celé číslo 0 až 3, pritom však q a r nepredstavujú oba číslo 0, ^-(CH2)m~axyl s 6 až 10 atómami uhlíka v arylovej časti alebo - (CH2) m~ (päť- až desaťčlánkový heteroaryl), ·· ···· · ·· ·· ·· · ···· ··· • · · ····· • · · · ··· ·· · ·· ·· ··· ·· ·· ··· kde m predstavuje celé číslo 0 až 4, pritom vyššie uvedené skupiny R⁸ , okrem vodíke, sú poprípade substituované jednou až tromi skupinami R¹⁶; alebo ak je v skupine -CH₂NR⁸R¹⁵, môžu byť R¹⁵ a R⁸ zobraté dokopy za vzniku štvor- až desať článkového monocyklického alebo polycyklického nasýteného kruhu alebo päť- až desaťčlánkového heteroarylového kruhu, pritom nasýtený kruh a heteroarylový kruh okrem dusíka, ku ktorému sú R¹⁵ a R⁸ viazané, poprípade obsahujú 1 až 2 heteroatómy zvolené z kyslíka, síry a skupiny -N(R⁸)- , pritom nasýtený kruh poprípade obsahuje obsahuje jednu alebo dve dvojité alebo trojité väzby uhlík- uhlík, a pritom nasýtený heteroarylový kruh sú poprípade substituované 1 až 3 skupinami R¹⁶;

R¹¹, R¹², R¹³ a R¹⁴ sú vždy nezávisle zvolené zo súboru zostávajúceho z vodíka, alkylskupiny s 1 až 10 atómami uhlíka, skupiny -(CH₂)_m-aryl s 6 až 10 atómami uhlíka v arylovej časti a - (CH₂) _m-(päť- až desaťčlánkový heteroaryl), kde m predstavuje celé číslo D až 4, pritom skupiny vo význame R¹¹, R¹², R¹³ a R¹⁴ , okrem vodíka, sú poprípade substituované 1 až 3 skupinami R¹⁶; alebo

R¹¹ a R¹³ sú zobraté dokopy za vzniku skupiny -(CH₂)_P, kde p predstavuje celé číslo 0 až 3, ta.k preto vzniká štvor- až sedemčlánkový nasýtený kruh, ktorý poprípade obsahuje jednu alebo dve dvojité alebo trojité väzby uhlík-uhlik; alebo ·· ···· · ·· ·· • · · ···· ··· ··· · e · · · ·· · · ······ • · · · ··· ·· ·· ·· ··· ·· ·· ·

R¹³ a R¹⁴ sú zobraté dokopy za vzniku stvor- až desaťčlánkového monocyklického alebo polycyklického nasýteného kruhu alebo päť- až desaťčlánkového heteroarylového kruhu, pritom nasýtený kruh a heteroarylový kruh okrem dusíka, ku ktorému sú R¹³ a R¹⁴ viazané, poprípade obsahujú 1 alebo 2 heteroatómy zvolené z kyslíka, síry a skupiny -N(R⁰)- ,pritom nasýtený kruh poprípade obsahuje jednu alebo dve dvojité alebo trojité väzby uhlík-uhlík, a pritom nasýtený a heteroarylový kruh sú poprípade substituované 1 až 3 skupinami R¹⁶;

R¹⁵ predstavuje vodík, alkylskupinu s 1 až 10 atómami uhlíka, alkenylskupinu s 2 až 10 atómami uhlíka alebo alkynylskupinu s 2 až 10 atómami uhlíka, pritom tieto skupiny vo význame R¹⁵ sú poprípade substituované 1 až 3 substituentami nezávisle zvolenými z halogénu a skupiny -C'R⁹;

R¹⁶ je vždy nezávisle zvolený zo súboru zostávajúceho z halogénu, kyanoskupiny, nitroskupiny, trifluórmetylskupiny, azidoskupiny, skupiny -C (O) R¹⁷, -C (O) OR¹⁷, -C (O) OR¹⁷, -OC(O)OR¹⁷, -NR⁶C(O)R⁷, -C(O)NR⁶R⁷, -NR⁶R⁷, hydroxyskupiny, alkylskupiny s 1 až 6 atómami uhlíka, alkoxyskupiny s 1 až 6 atómami uhlíka, skupiny - (CH2)m-aryl s 6 až 10 atómami uhlíka v arylovej časti a - (CH2) _m-(päť- až desaťčlánkový heteroaryl),kde m predstavuje celé číslo 0 až 4, pritom arylový a heteroarylový substituent je poprípade substituovaný 1 až 2 suostituentami nezávisle zvolenými zo súboru zostávajúceho z halogénu, kyanoskupiny, nitroskupiny, trifluórmetylskupiny, azidoskupiny, skupiny -C (O) R¹⁷, ·· ·» • · · · · • · · · ·· ···· • · · • · · · ·· ·· • ·· ·· ·

R¹⁷

R¹⁸

R¹⁹

R¹⁸

R¹⁹

-C (O) OR¹⁷, -C(O)OR¹⁷, -OC(O)OR¹⁷, -NR⁶C(O)R⁷,

-C(O)NR⁶R⁷, -NR⁶R⁷, hydroxyskupiny, alkylskupiny s 1 až 6 atómami uhlíka a alkoxyskupiny s 1 až 6 atómami uhlíka, je vždy nezávisle zvolený zo súboru zostávajúcej z vodíka , alkylskupiny s 1 až 10 atómami uhlíka, alkenylskupiny s 2 až 10 atómami uhlíka alebo alkynylskupiny s 2 až 10 atómami uhlíka a skupiny -(CH₂)_m-aryl s 6 až 10 atómami uhlíka v arylovej časti a - (CH₂) _m-(päť- až desaťčlánkový heteroaryl),kde m predstavuje celé číslo 0 až 4, pritom R⁸ nepredstavuje vodík, keď R¹⁹ predstavuje skupinu -CH₂S (O) _nR⁸;

predstavuje hydroxyskupinu;

predstavuje alkylskupinu s 1 až 10 atómami uhlíka, alkenylskupinu s 1 až 10 atómami uhlíka, alkynylskupinu s 2 až 10 atómami uhlíka, kyanoskupinu, skupinu -CH₂S(O)_nR⁸, kde n predstavuje celé číslo 0 až 2, -CH2OR⁸, -CH2N(OR⁹)R⁸, -CH2HR⁸R¹⁵, -(CH2)_m-aryl s 6 až 10 atómami uhlíka v arylovej časti a

- (CH₂)ni - (päť- až desaťčlánkový heteroaryl) , kde m predstavuje celé číslo 0 až 4, pritom skupiny vo význame R¹⁹ sú poprípade substituované 1 až 3 skupinami R¹⁶; alebo

R¹⁸ a R sú vziaté dokopy za vzniku oxazolylového kruhu obecného vzorca • · · · • · · · · • · · · ·· ···· • · · · • · · • · · · ·· ·· · • · · · • ·· ·· ·

R²¹ a R²² predstavuje každý nezávisle vodík, hydroxyskupinu, alkoxyskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, alkylskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, alkenylskupinu s 2 až 6 atómami uhlíka, skupinu -- (CH₂) _m-aryl s 6 až 10 atómami uhlíka v arylovej časti a -(CH₂)_m (päť- až desaťčlánkový heteroaryl), kde m predstavuje celé číslo 0 až 4, alebo alkylyl skupinu s 2 až 10 atómami uhlíka;

a ich farmaceutický vhodné soli.

Pod pojmom „liečenie, ako sa ho používa v tomto texte, pokial nie je uvedené ináč, sa rozumie liečenie a prevencia bakteriálnych infekcii alebo protozoálnych infekcii spôsobom podía tohto vynálezu.

Pod pojmom „bakteriálna infekcia a „protozoálna infekcia sa, pokial nie je uvedené ináč, rozumie bakteriálna infekcia a protozoálna infekcia, ktoré sa vyskytujú u cicavcov, rýb a vtákov, ako tiež aj choroby súvisiajúce s bakteriálnymi infekciami a protozoálnymi infekciami, ktoré je možno liečiť alebo ktorým možno predchádzať podávaním antibiotík, ako sú zlúčeniny podľa vynálezu. Ako tiež bakteriálne infekcie a protozoálne infekcie a choroby s nimi spojené možno uviesť pneumóniu, ottitis média, sinusitis, bronchitis, tonsilitis a mastoiditis, ktoré súvisia s infekciami Streptococcus pneumoniae, Haemophilus influenzae, Moraxella____catarrhalis,_____Staphylococcus__aureus____alebo

Peptostreptococcus spp; faryngitída, reumatickú horúčku a

··		····	• ··		• ·
•	•	•	·· ·	•	•	•	• ·
•	•	•	• ·	•	•	•
•	•	• ·	• ·	•	•	•
··		··	··· ··		··		• ·

s infekciami Mycoplasma infekciami Streptococcus G, Clostridium diptheriae infekcie dýchacieho traktu pneumoniae, Legionella

Streptococcus pneumoniae, Hč.emophilus influenzae glomerulonefritídu súvisiacu pyogenes, streptokoky skupiny C alebo Actinobacillus haemolyticum; spojené pneumophila, alebo Chlamydia pneumoniae; nekomplikované infekcie osteomyelitída a horúčka Staphylococcus aureus, (tj. S. epidermis, S.

kože a omladnic mäkkých tkanív, abscesy, spojené s infekciami pozitívnymi stafylokokmi atď) , Streptococcus pyogenes, Streptococcus streptokoky streptokoky Clostridium skupín C-F viridans, spp. alebo koaguláza haemolyticus agalactiae, ( streptokoky s malými kolóniami), Korynebacterium____minutissimum,

Bartonella henselae; nekomplikované akútne infekcie močového traktu súvisiaceho s infekciami

Staphylococcus saprophyticus alebo Enterococcus spp. urethritis a cervicitis; a pohlavne prenosné choroby spojené s infekciami Chlamydia trachomatis, Heamophilus ducreyi, Treponema pallidum, Ureaplasma urealyticum alebo Neiserria gonorrheae; choroby z toxínov spojené s infekciami S. aureus ( otrava streptokoky

Helicobacter jedlom a syndróm toxického šokuí alebo

A, B a C; vredy spojené s infekciami systemický febrilný syndróm spojený i recurrentis; Lymes ká choroba spoj ená l____burgdorferi; conjunctivitis, keratitis dacrocystitis spojené s infekciou Chlétmydia trachomatis, Neisseria gonorrhoeae, S aureus, S pneumoniae, S pyogenes, H inŕluenzae alebo Listeria spp.; diseminovaná choroba skupina pylori; Borrelia

Borrelia s infekciou s infekciou z mykobaktérií komplexu Mycobacterium avium spojená s in f e kciou Mycobacterium avium alebo Mycobacterium intracelulare; gastroenteritis spojená s infekciou Campylobacter jejúni; črevné protozoálne infekcie spojené s infekciami Cryptosporidium spp.; odontogénne infekcie spojené s infekciou streptokokmi viridans; persistentný kašeľ spojený s infekciou Bordetella pertussis; plynatú sneť spojenú • ·· ·· · · • · · ·· • · · • · • · · · · · ··· ·· ·· ··· s infekciou Clostridium perfrigens alebo Bacteroides spp.; ateroskleróza spojená s infekciami Helicobacter pylori alebo Chlamydia pneumoniae. Ako bakteriálna infekcia a protozoálna infekcia a choroby spojené s takými infekciami, ktoré je možno liečiť alebo ktorým možno predchádzať u zvierat podávaním antibiotík, ako sú zlúčeniny podía vynálezu, je možno uviesť respiračnú chorobu hovädzieho skotu spojenú s infekciou P. haem., P. multocida, Mycoplasma bovis alebo Bordetella spp.; enterickú chorobu hovädzieho skotu spojenú s infekciou E. coli alebo prvokmi (tzn. kokcídiami, kryptosporídiami atď) ; mastitis mliečneho skotu spojenú s infekciou Staph. aureus, Strep. uberis, Strep. agalactiae, Strep. dysgalactiae, Klebsiella spp., Corynebacterium alebo Enterococcus spp.; respiračnú chorobu prasiat spojenú s infekciou A. pleuro., P multocida alebo Mycoplasma spp., enterickú chorobu prasiat spojenú s infekciou E. coli, Lawsonia intracellularis, Salmonella alebo Serpulina hyodyisinteriae; paznechtnica u hovädzieho skotu spojená s infekciou Fusobacterium spp., metritis hovädzieho skotu spojenú s infekciou E. coli, prstovitá dermatitis u hovädzieho skotu, spojené s infekciou

Fusobacterium necrophorum alebo Bacteroides nodosus; zápa1 spojiviek u hovädzieho skotu spojený s infekciou Moraxella bovis; smetanie u hovädzieho dobytka spojené s infekciou prvokmi (tzn.neosporium); infekcie močového traktu u psov a mačiek spojené s infekciami E. coli; infekcie kože a mäkkých tkanív u psov a mačiek spojené s infekciami Staph. epidermidis, Staph. intermedius, koagulázeí negatívnymi Staph. alebo P. multocida; infekcie zubov alebo tlamy psov a mačiek spojené s infekciami

Alcaligenes spp., Bacteroides spp.,

Clostridium____spp.,_____Enterobacter_____spp.,_____Eubacterium, bakteriálne infekcie a protozoálne infekcie a choroby spojené s takými infekciami, ktoré je možno liečiť alebo ktorým možno predchádzať spôsobmi podľa vynálezu, možno nájsť v J. P.

Peptostreptococcus,

Porphyromonas alebo Prevotella.

Ďalšie • ·· ·· ·· · · · · · • · · · ·

Sanford et al., The Sanford Guide To Antimicrobial Therapy ·· ···· • · · • · · • · · ♦ ·· ·· • · · · · · ··· ·· ·· ··· , 26. vydanie (Antimicrobial Therapy, Inc., 1996).

Predmetom vynálezu je tiež spôsob výroby vyššie uvedených zlúčenín obecného vzorca I, II, 8 alebo 9. Východzie zlúčeniny, ktorých sa používa pri výrobe zlúčenín obecných vzorcov I, II, 8 alebo 9, je možno pripravovať spôsobmi popísanými v medzinárodnej patentovej prihláške

PCT/GB97/01810, podanej 4. Júla 1997 (Peter Francis Leadlay, James Staunton a Jesus Cortes a Michael Stephen Pacey) a medzinárodnej patentovej prihláške PCT/GB/01819, podanej 4. júla 1997 (Peter Francis Leadlay, James Staunton a Jesus Cortes), ktoré sú citované náhradou za prenesenie celého ich obsahu do tohto textu.

Predmetom vynálezu sú tiež zlúčeniny obecných vzorcov 2, 2a, 3, 3a, a 4 až 23, ktoré sú užitočné pri výrobe vyššie uvedených zlúčenín obecného vzorca I, II, 8 a 9 a ich farmaceutický vhodných solí.

Do rozsahu pojmu „chrániaca skupina hydroxyskupiny, ako sa ho používa v tomto texte, pokiaľ nie je uvedené ináč, spadajú acetylskupina, benzyloxykarbonylskupina a rôzne chrániace skupiny hydroxyskupiny, ktoré sú odborníkom v tomto obore známe a sú popísané napríklad v publikácii T. W. Greene, P. G. M. Wuts, „Protective Groups in Organic Synthesis (J. Wiley & Sons, 1991).

Pod pojmom „halogén sa rozumie fluór, chlór, bróm alebo jód, pokiaľ nie je uvedené ináč.

Pod pojmom „alkyl, ako sa ho používa v tomto texte, sa rozumejú nasýtené jednoväzobné uhľovodíkové zvyšky s reťazcom priamym, cyklickým alebo rozvetveným alebo kombinovaným,

	• ·	··♦·	•	··	··
•	•	•	·· ·	•		•	• ·
•	•	•	• ·	•	•	•
•	•	• ·	• ·	•	•	•
	··	··	···	• ·	• ·		• ·

pokial nie je uvedené ináč. Je zjavné, že v prípade cyklického reťazca musia alkylskupiny obsahovať aspoň 3 atómy uhlíka.

Takými skupinami s cyklickým reťazcom sú napríklad cyklopropyl-, cyklobutyl- a cyklopentylskupina.

Pod pojmom „alkoxy sa rozumie skupina vzorca -O-alkyl, kde alkyl má vyššie uvedený význam, pokial nie je uvedené ináč.

Pod pojmom „aryl” sa rozumie organický zvyšok odvodený od aromatického uhľovodíka odstránením jedného atómu vodíka, pokial nie je uvedené ináč. Ako príklad arylskupiny je možno uviesť fenyl alebo naftylskupinu.

Pod pojmom „päť- až desaťčlánkový heteroaryl”, ako sa ho používa v tomto texte, sa rozumie aromatické heterocyklická skupiny, ktoré obsahujú jeden heteroatóm alebo väčší počet heteroatómov zvolených z kyslíka, síry a dusíka, pritom každá heterocyklická skupina vo svojom kruhovom systéme obsahuje 5 až 10 atómov. Ako príklady vhodných päť- až desaťčlánkových heteroarylskupín je možno uviesť pyridyl-, imidazolyl-, pyrimidinyl-, pyrazolyl-, (1,2,3)- a (1,2,4)-triazolyl-, pyrazinyl-, tetrazolyl-, furyl-, thienyl-, izoxazolyl-, oxazolyl, pyrrolyl- a thiazolylskupinu.

Pod pojmom „farmaceutický vhodná sol” sa rozumie, pokial nie je uvedené ináč, soli kyslých alebo bázických skupín, ktoré sa môžu vyskytovať v zlúčeninách podľa vynálezu. Zlúčeniny podľa vynálezu, ktoré majú bázickú povahu sú schopné tvoriť rôzne soli s rôznymi anorganickými a organickými kyselinami. Pre výrobu farmaceutický vhodných adičných solí bázických zlúčenín podlá vynálezu s kyselinami sa používa kyselín, ktoré tvoria netoxické adične soli, tj. soli obsahujúce farmakologicky vhodné anióny. Ako príklady takých solí je možno uviesť hydrochloridy, hydrobromidy, hydrojodidy, nitráty, sulfáty, hydrogensulfáty, fosfáty, hydrogenfosfáty, izonikotináty, acetáty, laktáty, salicyláty, citráty, hydrogencitráty tartráty, pantotenáty, hydrogentartráty,

··	····	• ··		··
• ·	•	·· ·	•	•	•	··
•	•	•	• ·	•	•	•
•	•	• ·	• ·	•	• ·
··	··	··· ··		··	··

askorbáty, sukcináty, maleáty, gentizináty, fumaráty, glukonáty, glukaronáty, sacharáty, formiáty, benzoáty, glutamáty, me tánsulfonáty, etánsulfonáty, benzénsulfonáty, ptoluénsulfonáty a pamoáty (tj . 1,1'-metylénbis(2-hydroxy

3naftoáty)). Zlúčeniny podía vynálezu, ktoré obsahujú aminoskupinu, môžu okrem kyselín uvedených vyššie tvoriť farmaceutický vhodné soli s rôznymi aminokyselinami.

Zlúčeniny podlá vynálezu, ktoré majú kyslú povahu, sú schopné tvoriť soli s bázami, ktoré obsahujú farmakologicky vhodné katióny. Ako príklady takých solí je možno uviesť soli s alkalickými kovmi a kovmi alkalických zemín, najmä soli zlúčenín podía vynálezu s vápnikom, horčíkom, sodíkom a draslíkom.

Niektoré zlúčeniny podía vynálezu môžu obsahovať centrá asymetrie, a vyskytujú sa teda v rôznych enentiomérnych a diastereomérnych formách. Predmetom vynálezu je použitie všetkých optických izomérov a stereoizomérov zlúčenín podía vynálezu a ich zmesí a všetky farmaceutické kompozície a spôsoby liečenia, pri ktorých sa ich využíva alebo ktoré je obsahujú.

Do rozsahu vynálezu taktiež spadajú zlúčeniny podía vynálezu a ich farmaceutický vhodné soli, v ktorých je jeden alebo viacej vodíkových, uhlíkových alebo iných atómov nahradené ich izotópmi. Také zlúčeniny môžu byť užitočné pri výskume a ako diagnostické prostriedky pri farmakokinetických štúdiích a väzobných skúškach.

Nasleduje podrobnejší popis vynálezu.

Zlúčeniny podlá vynálezu je možno pripravovať podlá nasledujúcich schém 1 až 4 a naviazujúceho popisu. V týchto schémach majú substituenty R¹, R² , R³ , R⁴ , R⁵ , R⁶ , R⁷ , R⁸ , R⁹plO pil pl2 pl3 pl4 pl5 pl6 ρΐθ pl9 Ρ^θ _a V f X\ y Xx y Xx / Xx / Λ y Xx y Xx y y IX y <LX y Xx CL X vyššie uvedený význam.

Schéma 1

··	····	• ··	··
•	•	•	·· · ·	•	• ·
•	•	•	• · ·	•	•
•	•
•	•	• ·	• · ·	•	•
··		• ·	·· · ··	··	•

·· ·· • · · · · • · · · ·· ···· • · · • · · • · · · ·· ··

Schéma 1- pokračovanie • · · · · · ··· ·· ·· ···

O ·· ·· • · · · · • · · · ·· ···· • · · · • · ·

Schéma 1 -pokračovanie « · · · · ·· ·· ··· ·· · ^H ₃C CH, 3 \ / 3

• ·· ·· ·· · · · · · • · · · ·

Schéma 2 ·· ···· • · · · · · ··· ·· ·· ···

3a

OH

CH, • ·· ·· · · • · *

Schéma 2 - pokračovanie ·· ···· • ·· • · · • ·· • · ·· ·· ·· • · · ··· ··

4a

5a

·· • · • · · ·· ··· ·· ···· · ·· ·· · ·· · ···· · · · · ··· ······ • · ·· ······ · ···· ······ ·· ·· ··· ·· ·· ···

Schéma 3A

h₃c ch₃ ³ X / ³

N

H,C O ³ I ch₃

H,C _zCH_a

h₃c o ch₃

Schéma 3B

·· ···· • · · • · ·	• ·· ·· · · • · ·	·· · • · ·· • · ·
	• · · ·	• · ·	• ·	•
	·· ··	··· ··	··	···
47

H,C CH, ’ X /

ch₃ ·· ···· · ·· ·· • · · ···· ··· • · · ····· ···· · · · · · · ·· ·· ··· ·· ·· ···

Schéma 4

Schéma 4 - pokračovanie

·· ···· • · · • · ·	• ·· ·· · · 9 · ·	·· • · • ·	• ·· •
	• · · ·	• · ·	• ·	•
	·· ··	··· ··	··	···
49

	9999	9 99	99	•
•	9	99 9 9	• ·	• ·
•	9	9 9 9	• 9
•				•
9	9 9	9 9 9	9 9	e
	99	999 99	··	• é·

Zlúčeniny podlá vynálezu je možno pripravovať lahko. Zlúčeniny popísané ďalej, ktorých sa používa pri príprave zlúčenín obecných vzorcov I, II, 8 a 9 možno pripravovať spôsobmi popísanými v medzinárodnej patentovej prihláške PCT/GB97/01810, podané 4. Júla 1997 ( Peter Francis Leadlay, James Staunton, Jesus Cortes a Michael Stephen Pacey) a medzinárodnej patentovej prihláške PCT/GB97/01819, podanej 4. júla 1997 (Peter Francis Leadlay, James Staunton a Jesus Cortes), ktoré sú citované náhradou za prenesenie celého ich obsahu do tohto textu.

Nové polyketidy a spôsoby a prostriedky pre ich výrobu, a najmä nové makrolidy, ktoré sú užitočné pri výrobe zlúčenín podlá vynálezu, sa pripravujú fermentáciou vhodných organizmov za prítomnosti karboxylovej kyseliny obecného vzorca RCO2H, kde R má význam uvedený u obecného vzorca 1. Prednostným organizmom je Saccaropolyspora erythraea,__ktorý prednostne obsahuje integrovaný plazmid schopný riadiť syntézu požadovaných zlúčenín. Pri výrobe takých nových polyketidov sa prevádzajú manipulácie biosyntetíckych génov alebo ich časti pre polyketidy, ktoré môžu byť odvodené z rôznych zhlukov biosyntetíckych génov pre polyketidy, ktoré umožňujú produkciu nových erytromycínov.

Polyketidy predstavujú rozsiahlú a ľstruktúrne rôznorodú triedu prírodných látok, ktorá zahŕňa rad zlúčenín, ktoré vykazujú antibiotické alebo iné farmakologické vlastnosti. Takými látkami sú napríklad erytromycín, tetracyklíny, rapamycin, avermektin, polyéterové ionofóry a FK506. Polyketidy sú konkrétne často produkované Streptomyces a príbuznými baktériami Actinomycetes. Syntetizujú sa opakovanou niekolkostupňovou kondenzáciou acyltioesterov spôsobom, ktorý ·· • · • · ·· ···· • · · • · · ·· • · · ·

• · · · ·· ·· • · ·· • · ·* · je podobný biosyntéze mastných kyselín. Príčinou značnej štrukturálnej rozrôznenosti medzi prírodnými polykektidmi je výber (obyčajne) acetátu alebo propionátu, ako „štartérových alebo „extenderových jednotiek; a rôzny stupeň premeny βketoskupiny, ktorý je pozorovaný po každej kondenzácii. Ako príklady procesných stupňov premeny je možno uviesť redukciu na β-hydroxyacylskupinu, redukciu nasledovanou dehydratáciou na 2-enoylskupinu a úplnú redukciu na nasýtený acyltioester. Výsledok týchto procesných stupňov je z hľadiska stereochémie taktiež špecifický pre každý cyklus predlžovania reťazca. Biosyntéza polykektidov je zahajovaná skupinou enzýmov tvoriacich reťazce, ktoré sú známe ako polyketid syntázy (PKS) . V aktinomycetách boli popísané c.ve triedy polyketid syntáz (PKS). Nové polyketidy podľa vynálezu sú syntetizované PKS typu I, ktorých predstavitelia sú PKS pre makrolidy erytromycín, avermektin a rapamycín. PKS zostávajú z rôznych sád alebo „modulov enzýmov pre každý cyklus predlžovania polyketidového reťazca (Cortes, J. et al., Náture 1990, 348:

176 až 178; Donadio S. et al., Science (1991), 252: 675 až

679; MacNeil, D. J. et al., Gene (1992), 115: 119 až 125;

Schwecke T. et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA (1995) 92: 7839 až 7843). Poznámka: Pojmom „prírodný modul sa tu označuje sada priľahlých domén, od génu a, β-ketoacylsyntázy (KS) k nasledujúcemu génu acýlového nosiča proteínu (ACP), ktorý sa zaisťuje jeden cyklus predlžovania polyketidového reťazca. Pod pojmom „kombinatorický modul sa tu rozumie akákoľvek skupina priľahlých domén (alebo časti domén) od prvého miesta v prvom prírodnom module do druhého ekvivalentného miesta v druhom prírodnom module. Prvé a druhé miesto sa bude nachádzať v jadrových doménach, ktoré sú prítomné vo všetkých moduloch, tj. obe u ekvivalentných miest príslušných KS, AT (acyl transferázy), ACP domén alebo v linkérových oblastiach medzi doménami.

·· • · • ·	···· • •	• ·· · • ·	·· • •	··	··
• •	• •
• ·	• ·	• ·	•	•	•
··	··	···	··	··		··

Usporiadanie génov PKS produkujúce erytromycin, ktorá je tiež známa ako 6-deoxyerytronolid B syntáza, DEBS) zahŕňa tri otvorené čítacie rámce kódujúce DEBS polypeptidy. Gény sú usporiadané do šiestich opakujúcich sa jednotiek označených modulov. Prvý otvorený čítací rámec kóduje prvý multienzým alebo kazetu (BEBS1), ktorá zostáva z troch modulov: vkladacieho modulu (ery-load) a dvoch predlžovacích modulov (moduly 1 a 2) . Vkladací modul zahrnuje acyl transferázu a acylový nosičový proteín. To môže byť v rozpore s obr. 1 WO 93/13663 (viď ďalej). Ten znázorňuje, že ORF1 sa skladá iba z dvoch modulov, z ktorých prvý je v skutočnosti ako vkladacím modulom, tak prvým predlžovacím modulom.

O rámcovej delécii DNA kódujúcej časť keteroreduktázovej domény modulu 5 v DEBS sa ukázalo, že vedie k vzniku analóg erytromycínu, 5,6-dideoxy-3-mykarozyl-5-oxoerytronolidu B, 5,6-dideoxy-5-oxoerytronolidu B a 5, 6--dideoxy-6, 6-epoxy-5oxoerytronolidu B (Donadio S. et al., Science (1991) 252: 675 až 679). Podobne alterácia zvyškov aktívnych miest v enoylreduktázovej doméne modulu 4 v DEBS, keď sa DNA kódujúca PKS podrobí metódam génového inžinierstva a zavedie do Saccharopolyspora erythraea, vedie k produkcii 6,7anhydroerytromycínu C (Donadio S.et al., Proc. Natl. Acad. Sci. USA (1993) 90: 7119 až 7123).

V medzinárodnej patentovaj prihláške WO 93/13663, ktorá je tu citovaná náhradou za prenesenie celého jej obsahu do tohto textu, sú popísané ďalšie typy génových manipulácií génov DEBS, ktoré sú schopné produkovať alternované polyketídy. Vo vela takých pokusoch sa ale uvádza, že sú neproduktívne (Hutchinson C. R. a Fujii I., Annu. Rev. Microbiol. (1995) 49; 201 až 238, str. 231). Bola popísaná úplná DNA sekvencia génov z Streptomyces hygroscopicus, ktorá kóduje modulárnu PKS typu 1 riadiacu biosyntézu makrocyklického imunosupresivného

·· ····	• ·· ·· · · • · ·	·· • · • ·	··
• •	• •	• •
•	•	• ·	• · ·	• ·
··		··	··· ··	··	··

polyketidu rapamycínu (Schwecke T., et al. (1995) Proc. Natl.

Acad. Sci. USA 92: 7839 až 7843) (obr.3) . Táto sekvencia DNA je uložená v zbierke EMBL/Genbank Database pod prírastkovým číslom X86780.

Zložité polyketidy produkované modulárnym typom I PKS sú zvlášť hodnotné, nakoľko zahrnujú slúčeniny, o ktorých je známe, že sú užitočné ako antelmintiká, insekticídy, imunosupresíva, antifungálne a/alebo antibakteriálne činidlá. Vzhľadom k svojej štruktúrnej zložitosti sa nedajú takéto nové polyketidy ľahko získať totálnou chemickou syntézou alebo chemickými modifikáciami známych polykektidov. Ako je popísané v medzinárodnej patentovej prihláške PCT/GB97/01810, génový súbor PKS typu I kóduje vkladací modul, ktorý je nasledovaný predlžovacími modulmi. To je zvlášť užitočné pre získanie génového súboru hybridnej PKS, kde vkladací modul je heterológny vzhľadom k predlžovacím modulom a je taký, že vedie k polyketidu s alternovanou štartérovou jednotkou. V medzinárodnej patentovej prihláške PCT/GB97/01810 sa uvádza, že tento koncept je vzhľadom k doterajšemu stavu techniky takmer neznámy, nakoľko až doposiaľ nebola známa existencia vkladacích modulov. WO 93/13663 sa týka alterácie génom pre PKS pomocou inaktivácie jedinej funkcie (tj. jediného enzýmu) alebo ovplyvnením „celého modulu deléciou, inzerciou alebo nahradením. Pojem „vkladací súbor, ako sa používa v WO 93/13663, nepredstavuje modul.

Ak je vkladacím modulom modul, ktorý prijíma množstvo rôznych jednotiek karboxylovej kyseliny, potom sa pre produkciu množstiev rôznych polykektidov môže použiť hybridného génového súboru. Tak napríklad hybridný génový súbor môže využívať nukleových kyselín kódujúcich avr vkladací modul s ery extenderovými modulmi. Vkladací modul môže prijímať jednotky neprírodných kyselín a ich deriváty; zvlášť ·· ·· • · · ·· · · ··· ··· · · · · · ·· ·· ······ ···· ··· ·· ·· ·· ··· ·· ·· · je v tomto ohlade avr vkladací modul (Dutton et až 365) . Okrem toho ·· ···· užitočný 1991 ) .

J. Antiobiot., 44: 357 špecifitu prírodného neprirodné štartérové jednotky špecificity vkladacieho modulu polyketidov.

PCT/GB97/01810 je vkladacieho modulu stanoviť medzinárodnej al.

možno pre vy u 2 iť výhody uvolnené pre generovanie nových patentovej prihláške vkladacieho modulu neočakávaná schopnosť ery ďalej popísaná prijímať neprirodné karboxylové kyseliny a ich deriváty, tým sa u kmeňov produkujúcich erytromycín, ktoré obsahujú iba DEBS gény, dosiahne produkcie nových erytromycinov. Je samozrejme tiež možné previesť previesť alterácie v polyketidovom produkte, najmä nahradením predlžovacieho modulu modulom, ktorý poskytuje ketidovú jednotku v inom oxidačnom stave a/alebo o inej stereochémii. Obecne sa predpokladá, že stereochémia metylskupín v polyketidovom reťazci je daná acyltransferázou, čo je však v skutočnosti znakom ďalších domén PKS, a zmenu je tedy možno previesť iba nahradením týchto domén jednotlivo alebo nahradením modulu. Nahradením acyltransferázovej domény alebo nahradením celého modulu je možno zavádzať alebo odstraňovať metylové a ďalšie substituenty. V týchto súvislostiach bude tiež odborníkom v tomto obore zrejmé, že je možné kombinovať využitie uvolnenej substrátovej špecifity erytromycínového vkladacieho modulu s nahradením predlžovacieho modulu a substitúcii hybridného vkladacieho modulu s nahradením predlžovacieho modulu, ako mechanizmu pre produkciu širokej palety nových erytromycinov. V medzinárodnej patentovej prihláške PCT/GB97/01810 je tedy popísaná produkcia nových erytrQmycínov ne transformovanými organizmami a ďalej tiež také génové súbory, vektory obsahujúce také génové súbory a transformované organizmami, ktoré je exprimujú za účelom produkcie nových erytromycinov transformovanými organizmami. Transformované organizmy môžu obsahovať rekombinantné plazmidy, alebo plazmidy môžu integrovať. Plazmid s int • ·· ·· ·· · · · · · • · · · · ·· ···· • · · · · · ··· ·· ·· ··· sekvenciou bude integrovať do špecifického miesta pripojenia (att) hostiteľského chromozómu. Transformované organizmy môžu byť schopné modifikovať počiatočné produkty, napríklad uskutočnením všetkých alebo niektorých biosyntetíckych modifikácii, ktoré sú normálne pri produkcii erytromycínov. Je ale možno využiť takých mutantných organizmov, ktoré majú niektoré normálne dráhy zablokované, napríklad za účelom produkcie bez jednej alebo viacej „prírodných hydroxyskupin alebo cukorných skupín, ako je to napríklad popísané vo WO 91/16334 alebo v Weber et al. (1985) J. Bacteriol. 164: 425 až 433, ktoré sú tu citované náhradou za prenesenie celého ich obsahu do tohto textu. Alternatívne možno využiť organizmov, v ktorých sú niektoré normálne dráhy nadexprimované, za účelom prekonania možných stupňov, ktoré by obmedzovali rýchlosť produkcie požadovaného produktu, viď napríklad WO 97/06266, ktorá je tu citovaná náhradou za prenesenie celého jej obsahu do tohto textu.

Tento aspekt tohto spôsobu vo veľkej miere súvisí s pôsobením na génové moduly PKS, ako stavebné bloky, ktorých je možno použiť pre zostavenie enzýmových systémov, a teda nových erytromycinových produktov, požadovaného typu. To obyčajne zahrnuje vyštiepenie a zostavenie modulov a multimodulových zoskupení. Logické miesta pre vytvorenie a prerušenie intermodulárnych spojení sa nachádzajú vo väzobnej oblasti medzi modulmi. Môže ale byť výhodné štepenie a spojovanie prevádzať priamo v doménach (tzn. častiach kódujúcich enzým), v blízkosti ich krajov. DNA je tu medzi všetkými modulárnymi PKS vysoko konzervovaná, čo môže napomáhať pri konštrukcii hybridov, ktoré môžu byť transkribované. To môže tiež napomôcť k zachovaniu vzdialenosti väzobných miest kódovaných enzýmov, čo môže byť dôležité. Tak napríklad pri produkcii hybridného génu nahradením ery vkladacieho modulu avr vkladacím modulom sa ·· • · • · ·· ···· • · · · · ·· • · · • · • · • ·· • · ·· · spoločne s ery modulom odstráni malé množstvo nasledujúcej ketosyntázovej (KS) domény. Počiatok KS domény (v dobrej vzdialenosti od aktívneho miesta) je vysoko konzervovaný a poskytuje teda vhodné miesto zostrihu, ako alternatívu k linkerovej oblasti medzi vkladacou doménou a počiatkom KS domény. Vyštiepený ery modul sa potom nahradí avr vkladacím modulom.

Pri substitúcii vkladacieho modulu v skutočnosti môže byť žiadúce nahradiť nielen domény vkladacieho modulu (obecne acyl transferáza (AT) a acylový nosičový proteín (ACP)), ale tiež KS v počiatku nasledujúceho predlžovacieho modulu. Vyštiepený vkladací modul by obyčajne poskytol propionátový štartér a nahradenie má poskytnúť jeden alebo viacej rôznych štartérov. Propionát sa však môže posunovať do KS predlžovacieho modulu z propionátovej skupiny v hostiteľskej bunke, čo vedie k zriedeniu požadovaných produktov. Tomu je možno výrazne zabrániť substitúciou predĺženého vkladacieho modulu vrátane všetkých alebo väčšiny KS domén. (Miesto zostrihu sa môže nachádzať v koncovej oblasti génu KS alebo na počiatku v nasledujúcom AT génu alebo linkerovej oblasti medzi nimi.)

Pri nahradzovaní modulov neexistuje obmedzenie na prírodné moduly. Tak napríklad „kombinatorický modul, ktorý má byť vyštiepený a/alebo nahradený a/alebo inzertovaný, môže siahať od odpovedajúcej domény dvoch modulov prírodného typu, napríklad od AT jedného modulu do AT nasledujúceho modulu, alebo od KS do KS. Miesta zostrihu sa budú nachádzať v odpovedajúcich konzervovaných marginálnych oblastiach alebo v linkerových oblastiach. Kombinatorický modul tiež môže byť „dvojitý alebo viacdetný, keď sa súčasne pridajú 2 alebo viacej modulov.

··		····	•	··	··
•	•	•	·· ·	•	•	•	• ·
•	•	•	• ·	•	•	•
•	•	• ·	• ·	•	•	•
··		··	·· ·	··	··	··

V PCT/GB97/01810 sú popísané nové erytromycíny, ktoré možno získať na základe vyššie popísaných aspektov. Tieto zlúčeniny sú popísané ďalej.

(i) (i )Analóg erytromycínu (ktorý je makrolidovou zlúčeninou s 14-článkovým kruhom), kde substituent R, v polohe C-13 nesie postranný reťazec odlišný od etylskupiny, pritom takým postranným reťazcom je obecne lineárna alkylskupina s 3 až 6 atómami uhlíka, rozvetvená alkylskupina s 3 až 8 atómami uhlíka, cykloalkylskupina alebo cykloalkenylskupina s vždy 3 až 8 atómami uhlíka (poprípade substituovaná napríklad jednou alebo viacej hydroxyskupinami, alkylskupinami alebo alkoxyskupinami vždy s 1 až 4 atómami uhlíka alebo atómami halogénu), alebo 3- až 6-článkový heterocyklus obsahujúci kyslík alebo síru, ktorý je nasýtený alebo celý alebo čiastočne nenasýtený a poprípade substituovaný (napríklad tak, ako je to uvedené vyššie pre cykloalkylskupinu), alebo R predstavuje fenylskupinu, ktorá je poprípade substituovaná aspoň jedným substituentom zvoleným zo súboru zostávajúceho z alkylskupiny s 1 až 4 atómami uhlíka, alkoxyskupiny s 1 až 4 atómami uhlíka a alkyltioskupiny s 1 až 4 atómami uhlíka, atómov halogénu, trifluórmetylskupiny a kyanoskupiny; alebo R môže predstavovať skupinu obecného vzorca a

(a) kde predstavuje kyslík, síru alebo skupinu -CH2-,

·· • · • 9	···· • •	• ·· ·· · · • · ·	·· • · • ·	··
• ·		• · ·	• ·
··	··	·· · ··	··	··

a, b, c, a d, predstavuje každý nezávisle číslo 0 až 2, pritom súčet a+b+c+d^5.

Ako prednostné substituenty R na uhlíku C-13 je možno uviesť zvyšky karboxylátových jednotiek RCOOR', ktoré sú použiteľné ako substráty avr štartérovým modulom alebo rapamycínovými štartérovými variantami. Prednostnými substrátmi sú karboxylové kyseliny obecného vzoxca R''COOH. Ako alternatívnych substrátov je možno použiť soli karboxylových kyselín, esterov karboxylových kyselín alebo amidov. Prednostnými estermi sú tioestery N-acetylcystamínu, ktoré môžu byť avr štartérovým modulom snadno využité ako substráty, ako je to popísané v citovaný náhradou za textu. Prednostnými použiteľné oxidačnými substrátmi

Dutton et al. EP 0 350 187, ktorý je tu prenesenie celého jeho obsahu do tohto amídmi sú N-acyl:.midazoly.

substráty možno uviesť deriváty, prekurzormi karboxylových kyselín.

by teda napríklad boli aminokyseliny

Ako iné ktoré sú

Vhodnými obecného vzorca RCH (NH₂)COOH, glyoxylové kyseliny obecného vzorca

RCOCOOH, deriváty metylaminu obecného vzorca RCH₂NH₂, deriváty metanolu obecného vzorca RCH₂OH, aldehydy obecného vzorca RCHO alebo substituované alkánové kyseliny obecného vzorca R(CH₂)_nCOOH, kde n predstavuje číslo 2, 4 alebo 6. Ako príklady prednostných substrátov je teda možno uviesť izobutyrát (R =izopropyl) a 2-metylbutyrát (R = 1-metylpropyl). Ďalšími možnosťami sú napríklad n-butyrát, cyklopropylkarboxylát, cyklobutylkarboxylát, cy klopentylkarboxylát, cyklohexylkarboxylát, cykloheptylkarboxylát, cyklohexenylkarboxyláty, cykloheptenylkarboxyláty, obmeny cyklických karboxylátov s metylovaným kruhom a ich vyššie uvedené deriváty.

··	····	• ··	·· ·
•	•	•	·· · ·	• ·	··
•	•	•	• · ·	• ·
•	•
• ··	•	• · ··	• · · ··· ··	• · ··	··

Analóga erytromycínu môžu odpovedať počiatočnému produktu PKS (6-deoxyerytronolidu) alebo produktu získanému po jednom alebo väčšom počte stupňov normálnej biosyntézy. Táto biosyntéza zahrnuje hydroxyláciu v polohe 6; O-glykosyláciu v polohe 3; O-glykosyláciu v polohe 5; hydroxyláciu v polohe 12; a špecifickú metyláciu cukorných zvyškov.

Ako neobmedzujúce príklady takých analóg je možné uviesť analóga odpovedajúce 6-deoxyerytronolidu B, erytromycínu A a rôznym ich medziproduktom a alternatívam.

( ii ) Analóga erytromycínu, ktoré sa od odpovedajúcej „prírodnej zlúčeniny líšia v oxidačnom stave jednej alebo viacej ketidových jednotiek (ako alternatívy prichádzajúcej v úvahu skupiny -C0-, -CH(OH)-, =CH- a -CH_ľ-) .

Stereochémia akékolvek jednotky -CH(OH)- je taktiež nezávisle voliteľná.

( iii ) Analóga erytromycínu, ktoré sa líšia od odpovedajúcich „prírodných zlúčenín v éibsencii „prírodnej postrannej metylskupiny. (To je dosiahnuteľné za použitia varianty AT) . U normálnych predlžovacích modulov sa za účelom získania nemetylovaných a metylovaných ketidových jednotiek využíva jednotiek s 2 alebo 3 atómami uhlíka. Nemetylované jednotky je možno získať, keď sú metylované jednotky prírodné (a naopak, u systémov, v ktorých sa vyskytujú prírodné nemetylované jednotky). Pre etylové substituenty je tiež možné poskytnúť dlhšie jednotky, napríklad s 4 atómami uhlíka.

( iv ) Analóga erytromycínu, ktoré sa od odpovedajúcej „prírodnej zlúčeniny odlišujú v stereochémii „prírodnej metylskupiny; a/alebo substituentoch na kruhe odlišných od metylskupiny.

·· ···· • · ( v ) Analóga erytromycinu, ktoré vykazujú dve alebo viacej vlastností popísaných v odsekoch (i) až (iv) .

( vi ) Deriváty akékoľvek zlúčeniny popísanej v predchodzích odsekoch, ktoré podstúpili ďalšie spracovanie nie-PKS enzýmami, ako je napríklad jedna alebo viacej hydroxylácii, epoxidáciou, glykosyláciou a metyláciou.

V PCT/GB97/01810 sú ďalej popísané spôsoby výroby nových erytromycínov, ktoré sú užitočné pre výrobu zlúčenín podlá tohto vynálezu. Pri najjednoduchšom spôsobe sa neprirodné štartérové jednotky (prednostne, ale nielen, analóga karboxylových kyselín neprirodných štartérových jednotiek) zavedú do netransformovaných organizmov schopných produkovať erytromycín. V prednostnom prevedení sa štartérová jednotka zavedie do fermentačnej pôdy organizmu produkujúceho erytromycín, čo je u transformovaných organizmov schopných produkovať erytromycín efektívnejšie. Analóg štartérovej jednotky je však tiež možné zaviesť do alternatívnych prípravkov organizmov produkujúcich erytromycín, napríklad frakcionovaných alebo nefrakcionovaných prípravkov s rozbitými bunkami. Toto prevedenie je taktiež rovnako efektívne pre transformované organizmy schopné produkovať erytromycíny. Pri inom spôsobe sa použije jedného alebo viacej segmentov DNA kódujúcich jednotlivé moduly alebo domény v heterológnom PKS typu I („donorná PKS) pre nahradenie DNA kódujúcej jednotlivé moduly alebo domény v génoch DEBS organizmu produkujúceho erytromycín. Pre túto „donornú PKS sú vhodné vkladacie moduly a predlžovacie moduly získané z akékoľvek prírodnej alebo neprírodnej PKS typu I. Zvlášť vhodné pre tento účel však sú komponenty PKS typu I pre biosyntézu erytromycinu, rapamycínu, avermektínu, tetronazínu, oleandomycínu, monenzínu, amfotericínu a rifamycínu, u ktorých je vďaka génovej

···· · ·· ·· • ·· · · · · · • · · · · · • · ·· ··· · • · · · · · · ·· ····· ·· · sekvenčnej analýze aspoň čiastočne známa génová a modulárna organizácia. Ako príklady zvlášť prednostných vkladacích modulov donornej PKS sú vkladacie moduly, ktoré vykazujú uvoľnenú špecifitu, ako je vkladací modul PKS produkujúci avermektín zo Streptomyces avermitilis; alebo vkladacie moduly, ktoré vykazujú neobyčajnú špecificitu, ako sú napríklad vkladacie moduly PKS produkujúce rapamycin, FK506 alebo askomycín, ktoré všetky prirodzene prijímajú shikimátodvodenú štartérovu jednotku. Neočakávane bolo zistené, že ako netransformované, tak aj geneticky modifikované organizmy produkujúce erytromycín, keď sú pestované za vhodných podmienok, produkujú neprírodné erytromycíny, a v prípadoch, kedy je to vhodné, sa môžu takéto produkty podrobiť rovnakému spracovaniu ako prírodný erytromycín.

V medzinárodnej patentovaj prihláške PCT/GB97/01810 je ďalej popísaný plazmid obsahujúci DNA „donorná PKS, ktorý sa zavedie do hostitelskej bunky za pomienok, v ktorých sa plazmid homológny rekombináciou integruje do DEBS génov na chromozómu kmeňa produkujúceho erytromycín, za vzniku hybridnej PKS.

Donorná PKS DNA prednostne zahrnuje segment kódujúci vkladací modul tak, že sa tento vkladací modul viaže k DEBS génom na chromozómu. Takéto hybridné PKS, keď sú kultivované za vhodných, tu popísaných, podmienok produkujú cenné a nové erytromycínové produkty. Konkrétne, keď sa vkladací modul DEBS génov nahradí vkladacím modulom PKS produkujúci avermektín (avr), nové erytromycínové produkty obsahujú štartérovú jednotku, ktorá je typická pre produkty, ktoré sú prítomné v avr PKS. Keď sa teda vkladací modul ery PKS nahradí avr vkladacim modulom, zistí sa, že kmene Saccharopolyspora erythraea obsahujúci takú hybridnú PKS produkujú 14-článkové ·· ···· ·· · ········ ··· ······ · ·· ······ · ···· ··· · · · ·· ·· ··· ·· ·· ··· makrolidy obsahujúce štartérové jednotky, ktoré sú typicky prítomné v avr PKS.

V medzinárodnej patentovej prihláške PCT/GB97/01810 sa uvádza, že sa neočakávane zistilo, že 14-článkové makrolidové polyketidy produkované takými rekombinantnými bunkami S. erythraea zahŕňajú deriváty erytromycínu A, čo ukazuje, že bolo správne prevedené niekoľko procesných stupňov, ktoré sú potrebné pre transformáciu produktov hybridnej PKS na nové a terapeuticky cenné deriváty erytromycínu A. V PCT/GB97/01810 je popísané neočakávané a prekvapujúce zistenie, že transkripciu akýchkoľvek hybridných erytromycinových génov je možno špecificky zvyšovať, pokiaľ sa hybridne gény umiestnia pod kontrolu promotóra génu PKS zypu II viazaného k špecifickému aktivátorovému génu pre tento promotór. Je zvlášť pozoruhodné, že keď sa geneticky modifikované bunky obsahujúce hybridne gény pre erytromycín pod takou kontrolou pestujú za podmienok vhodných pre produkciu erytromycínu, významne sa zvýši úroveň produkcie nového erytromycínu. Takéto špecifické zvýšenie výťažkov cenného erytromycínového produktu sú tiež pozorované u prírodných erytromycinových PKS umiestnených pod kontrolou promotóra PKS typu II a aktivátorového génu. V prednostnom prevedení sú požadované gény prítomné na plazmidu odvodenom od SCP2* umiestnené pod kontrolou dvojsmerného promotóra act.I odvodeného od aktinorhodínového biosyntetického génového zhluku Streptomyces coelicolor a vektor tiež obsahuje štruktúrny gén kódujúci špecifický aktivátorový proteín Act II-orf 4. Rekombinantný plazmid sa do Saccharopolyspora erythraea zavádza za podmienok, pri ktorých sú zavedené gény PKS alebo gény PKS už prítomné v hostiteľskom kmeni exprimované pod kontrolou promotóra actl.

·· ···· · ·· ·· ·· · ···· · · · ··· · · · · · ···· ··· · · ·· ·· ··· ·· ·· ·

Takéto kmene produkujú požadovaný erytromycínový produkt a aktivátorový gén vyžaduje iba prítomnosť špecifického promotóra, aby sa posílila transkripčná účinnosť od promotóra. Prekvapujúce je najmä to, že tieto aktivätory typu ActII-0rf4 nenáležia k poznanej triede proteínov viazajúcich sa na DNA. Dalo by sa teda predpokladať, že pre aktiváciu by bolo treba, aby sa v heterológnom hostiteľovi, o ktorom nie je známe, že produkuje aktinorhodin alebo príbuzný izochromanchinónový pigment, vyskytovali ďalšie proteíny alebo iné kontrolné elementy. Taktiež je prekvapivé a užitočné, že rekombinantné kmene môžu produkovať erytromycínový produkt v množstve viacej ako desaťkrát väčším, ako keď sú rovnaké PKS gény pod kontrolou prírodného promotóra, a špecifický erytromycínový produkt je taktiež produkovaný v rastúcej kultúre, skôr ako počas prechodu od rastu do stacionárnej fázy. Takéto erytromycíny sú užitočné ako antibiotiká a slúžia veľa ďalším účelom v humánnej aj veterinárnej medicíne. Keď je teda bunkou modifikovanou metódami genetického inžinierstva Saccharopolyspora erythraea, aktivátor a promotór sú odvodené od aktinorhodínového PKS génového zhluku a actI/actII-0rf4regulovaný eryPKS génový zhluk je umiestnený v chromozómu, po ktorom nasleduje miestne špecifická integrácia plazmidového vektoru o nízkom počte kópií, môže sa pestovaním týchto buniek za vhodných podmienok vyrábať 14-článkový makrolidový produkt vo viacej ako desať násobnom celkovom výťažku v srovnani s kmeňom, ktorý pod takou heterológnou kontrolou nie je. Keď sú v takejto geneticky modifikovanej bunke S. erythraea PKS gény pod touto heterológnou kontrolou hybridnými génmi PKS typu I, ktorých vytvorenie je tu popísané, je možné v srovnani s rovnakými hybridnými génmi PKS typu I, ktoré pod takouto kontrolou nie sú, získať viacej ako desaťnásobok hybridného polyketidového produktu. Konkrétne, keď sú hybridné gény PKS typu I gény ery PKS, v ktorých je vkladací modul nahradený avr vkladacím modulom, zistí sa desaťnásobné zvýšenie celkového ·· ·· • · · · · • · · · množstva nových 14-článkových makrolidov, ktoré sú produkované geneticky modifikovanými bunkami, ak sú pestované za vhodných podmienok popísaných v PCT/GB97/01810.

Vhodné a prednostné spôsoby pestovania netransformovaných a geneticky modifikovaných buniek produkujúcich erytromycin a vhodné a prednostné spôsoby izolácie, identifikácie a praktického využitia nových erytromvcinov podrobnejšie popísané v medzinárodnej patentovej prihláške PCT/GB97/01810.

Eratromycínové deriváty popísané v medzinárodnej patentovaj prihláške PCT/GB97/01810 sa pripravujú fermentáciou netransformovaného alebo transformovaného organizmu, ktorý je schopný produkovať erytromycíny. Ako neobmedzujúce príklady takých organizmov je možno uviesť Saccharopolyspora species, Streptomyces griseoplanus, Nocardia sp., Micromonospora sp.,

Arthobacter sp. a Streptomyces antibioticus, ale nie S.

coelicolor. Ako zvlášť vhodné

v tomto smere netransformované a transformované kmene erythraea, napríklad NRRL 2338, 18643,

Saccharopolyspora 21484. Zvláštna prednosť sa dáva transformovaným kmeňom, v ktorých je erytromycínový vkladací modul nahradený vkladacím modulom z organizmu avermitilis, produkujúceho avermektín, Streptomyces alebo organizmu produkujúceho rapamycín,

Streptomyces hygroscopicus. Prednostným spôsobom výroby zlúčenín je fermentácia vhodného organizmu za prítomnosti vhodnej karboxylovej kyseliny obecného vzorca Ri COOH, kde Ri má význam uvedený u obecných vzorcov 1 a 2 v PCT/GB97/01810 alebo predstavuje zvyšok R zlúčenín podlá vynálezu, alebo jej soli, esteru (zvlášť prednostne tioesteru N-acetylcystaminu) alebo amidu alebo oxidačného prekurzoru. Kyselina alebo jej derivát sa k fermentačnej zmesi pridáva alebo v dobe inokulácie alebo v intervaloch počas fermentácie. Produkciu zlúčenín je možno monitorovať tak, že sa odoberú vzorky

	··	····	• ··	··
•	•	•	·· · ·	•	•	··
•	•	•	• · ·	•	•
•	•	• ·	• · ·	•	•
	• ·	• ·	··· ··	• ·		• ·

fermentačnou zmesou, ktoré sa extrahujú organickým rozpúšťadlom a prítomnosť zlúčenín podía vynálezu sa stanoví chromatograficky, napríklad vysokotlakou kvapalinovou chromatografiou. Inkubácia sa prevádza až do maximálneho výťažku zlúčeniny obecného vzorca 1 alebo 2, obyčajne po dobu 4 až 10 dní. Karboxylová kyselina alebo jej derivát sa pri každom prídavku pridáva v množstve 0,05 až 4,0 g/liter. Najlepších výťažkov zlúčenín obecného vzorca 1 alebo 2 sa obyčajne dosiahne tak, že sa kyselina alebo jej derivát k fermentačnej zmesi pridáva postupne, napríklad denne po dobu niekoľko dní. Ako fermentačného média je možno použiť zvyčajného komplexného média, ktoré obsahuje asimilovatelné zdroje uhlíka, dusíka a stopových prvkov.

Veľký rozsah štartérových jednotiek prijímaných avr vkladacím modulom bol súhrnne popísaný v predchádzajúcich štúdiích (napríklad v evrópskych patentových prihláškach 0 214 731, 0 350 187 a 0 317 148, ktoré sú tu citované náhradou za prenesenie celého ich obsahu do tohto textu). V súvislosti s tým je treba chápať, že sa vynález neobmedzuje na konkrétne podrobnosti uvádzaných príkladov, ktoré iba slúžia pre potvrdenie účinnosti avr vkladacieho modulu. Okrem toho sa v príkladoch používa konštruktu pIGl alebo pND30 čisté pre demonštráciu schopnosti actl promotóra a jeho rozpoznávacieho aktivátorového génu actll-orf4 zvyšovať exprešiu nových zlúčenín podľa vynálezu, ak je pripojený k avr vkladaciemu modulu. Z príkladov je tiež vidno, že netransformované kmene Saccharopolyspora erythraea sú snadno schopné vstrebávať substráty dodávané zvonku za vzniku nových erytromycínových polyketidov. Odborníkom v tomto obore bude tiež zrejmé, že konkrétne nové zlúčeniny podľa vynálezu je možno snadno produkovať tak, že sa zvolí vhodný kmeň produkujúci erýtromycín (poprípade so začlenením plazmidu pIGl alebo pND30 do požadovaného kmeňa) a fermentačná zmes sa doplní vhodnou ·· ···· • · · • · · • · · · ·· ·· štartérovou jednotkou. Deriváty 6-deoxyerytromycínu a 6,12dideoxyerytromycínu podľa vynálezu je teda možno snadno získať za použitia Saccharopolyspora erythraea KRRL 18643 alebo NRRL 21484, ako je to uvedené v US patentu č. 5 141 926 a WO 97/06266. Podobne možno za účelom získania požadovaných nových analóg podľa vynálezu možno použiť kmeňov Saccharopolyspora erythraea spôsobom popísaným vo Weber et al., J. Bacteriol. 164: 425 až 433. Tak je napríklad za účelom získania nových analóg erytronolídu možno použiť kmeňa UW24 (poprípade transformovaného pIGl alebo pND30).

V stupni 1 postupu podlá schémy 1 sa C-9 karbonyl v zlúčenine obecného vzorca 1 prevedie na odpovedajúcu skupinu oximu v polohe C-9 tak, že sa makrolid nechá reagovať s hydroxylamínom alebo, prednostne, solou hydroxylamínu, ako hydrochloridom. Za podmienok, ktorým sa v súčasné dobe dáva prednosť, sa používa aspoň jedného molárneho ekvivalentu, obyčajne nadbytku, 5 až 10 ekvivalentov v slabej zásade, terciárnemu amínu (prednostne pyridínu), ako rozpúšťadle a teploty v rozmedzí 20 až 80 °C. Spcločne s bázou, ako uhličitanom barnatým, je tiež možno použiť protického rozpúšťadla, ako metanolu, čím sa získa slabo zásadité rozpúšťadlo.

V stupni 2 postupu podľa schémy 1 sa oxim obecného vzorca 2 prevedie na odpovedajúci iminoéter Beckmanovým presmykom popísaným v J. Chem. Soc., Perkin. Trans. I, 1986, 1181. V prednostnom prevedení sa používa nadbytku (2 až 4 molárnych ekvivalentov) organického sulfonylchloridu, prednostne ptoluénsulfonylchloridu, ktorý sa pri teplote 0 až 50, prednostne 0 až 30 °C, nechá reagovať s oximom vo forme volnej bázy alebo soli s kyselinou v zmesi nižšieho ketónu, ako metylketónu alebo acetónu, a vody obsahujúcej hydrogénuhličitan sodný vo veľkom molárnom nadbytku.

·· ···· • · · • · · • · · · ·· ··

V stupni 3 postupu podía schémy 1 sa iminoéter obecného vzorca 3 redukuje na zmes laktámu obecného vzorca 4 a azalidu obecného vzorca 5. Táto konverzia sa prevádza za použitia rôznych spôsobov známých odborníkom v tomto obore. Jedným takým spôsobom je katalytická hydrogenácia za použitia redukčného činidla, ako organokovového katalyzátoru, ako oxidu platiny v kyslom rozpúšťadle, ako ladovej kyseline octovej, za tlaku vodíka 343,5 kPa. Prednostný spôsob výroby zlúčeniny obecného vzorca 5 zahrnuje použitie redukčného činidla obsahujúceho bór, ako tetrahydroboritanu sodného, zvyčajne v nadbytku, 2 až 10 ekvivalentov, v protickom rozpúšťadle ako metanolu alebo etylénglykolu, pri teplote v rozmedzí od -5 do 40 °C, prednostne od 0 do 20 °C.

V stupni 4 postupu podía schémy 1 sa azalid obecného vzorca 5 prevedie na zlúčeninu obecného vzorca 6 redukčnou metyláciou za použitia metylačného činidla, ako formaldehydu, za prítomnosti redukčného činidla, prednostne kyseliny mravčej. V prednostnom prevedení sa tento spôsob prevádza za použitia aspoň jedného molárneho ekvivalentu formaldehydu a kyseliny mravčej v inertnom rozpúšťadle, ako chloroformu, pri 20 až 100, prednostne 30 až 60 °C.

V stupni 1 postupu podía schémy 2 sa C-9 karbonyl v zlúčenine obecného vzorca 1 prevedie na odpovedajúcu skupinu oximu v polohe C-9 tak, že sa makrolid nechá reagovať s hydroxylamínom alebo, prednostne, solou hydroxylamínu, ako hydrochloridom. Za podmienok, ktorým sa v súčasnej dobé dáva prednosť, sa používa aspoň jedného molárneho ekvivalentu, zvyčajne nadbytku, 5 až 10 ekvivalentov v slabej zásade# terciárnom amíne (prednostne pyridíne), ako rozpúšťadle a teploty v rozmedzí 20 až 80 °C. Spoločne s bázou, ako uhličitanom bárnatým, je tiež možno použiť protického ·· ·♦·· · ·· ·· ·· · ···· ··· ··· · · · · · ···· ··· · · · ·· ·· ··· ·· ·· ··· rozpúšťadla, ako metanolu, čím sa získa slabo zásadité rozpúšťadlo.

V stupni 2a postupu podlá schémy 2 sa oxim obecného vzorca 2, kde geometria olefínu je prednostne E izomér, prevedie na Z izomér v protickom rozpúšťadle, ako etanolu, za použitia bázy, ktorá je tolko silná, aby v podstate deprotonovala 9E oxim, s malým protiiónom, ako je Li⁺ alebo Na⁺ , ako hydroxidu líthneho.

V stupni 3a postupu podlá schémy 2 sa zlúčenina obecného vzorca 2a prevedie na odpovedajúci iminoéter Beckmanovým presmykom popísaným v J. Chem. Soc., Perkin. Trans. I, 1986, 1181. V prednostnom prevedení sa používa nadbytku (2 až 4 molárnych ekvivalentov) organického sulfonylchloridu, prednostne p-toulénsulfonylchloridu, ktorý sa pri teplote 0 až 50, prednostne 0 až 30 °C, nechá reagovať s oximom vo forme volnej bázy alebo soli s kyselinou v zmesi nižšieho ketónu, ako metyletylketónu alebo acetónu, a vody obsahujúcej hydrgenuhličitan sodný vo velkom molárnom nadbytku.

V stupni 4a postupu podlá schémy 2 sa iminoéter obecného vzorca 3a redukuje na azalid obecného vzorca 5a. Túto redukciu možno prevádzať rôznymi spôsobmi známymi odborníkom v tomto obore. Jedným takým spôsobom je katalytická hydrogenácia za použitia redukčného činidla, ako organokovového katalyzátoru, ako oxidu platiny v kyslom rozpúšťadle, ako ladovej kyseline octovej, za tlaku vodíka najmenej 343,5 kPa. Prednostný spôsob výroby zlúčeniny redukčného činidla obecného vzorca zahrnuje použitie obsahujúceho bór, v nadbytku, 2 ako až tetrahydroboritanu ekvivalentov, sodného, obyčajne v protickom rozpúšťadle, ako metanolu teplote v rozmedzí od -5 do 40 °C, prednostne od 0 do 20 alebo etylénglykolu, pri °C.

·· • · • ·	···· • •	• ·· ·· · · • · ·	·· ·
• · • ·	··
• ·	• ·	• · ·	• ·
··	··	··· ··	··	··

V stupni 5a postupu podľa schémy 2 sa azlid obecného vzorca 5a prevedie na zlúčeninu obecného vzorca 6a redukčnou ňietyláciou za použitia metylačného činidla, ako formaldehydu, za prítomnosti redukčného činidla, prednostne kyseliny mravčej. V prednostnom prevedení sa tento spôsob prevádza za použitia aspoň jedného molárneho ekvivalentu formaldehydu a kyseliny mravčej v inertnom rozpúšťadle, ako chloroformu, pri 20 až 100, prednostne 30 až 60 °C.

V stupni 1 postupu podľa schémy 3A je C-2'hydroxyskupinu možno selektívne chrániť tak, že sa zlúčenina obecného vzorca 10 nechá reagovať s jedným ekvivalentom acetanhydridu v dichlórmetáne za neprítomnosti vonkajšej bázy, čím sa ziska zlúčenina obecného vzorca 11, kde R₄ predstavuje acetylskupinu. Acetylovou chrániacu skupinu je možné odstrániť tak, že sa zlúčenina obecného vzorca 11 nechá reagovať s metanolom pri 23 až 65 °C po dobu 10 až 48 hodín. C-2'hydroxyskupinu je tiež možno chrániť inými chrániacimi skupinami, ako je benzyloxykarbonylskupina (Cbz), za použitia spôsobov známych odborníkom v tomto obore. V prípadé, že Y predstavuje vodík, môže byť pred prevedením ďalších syntetický modofikácií taktiež žiadúce chrániť C-9a aminoskupinu. Vhodnými chrániaciami skupinami sú Cbz a terc.butoxykarbonylskupina (Boe). Za účelom ochrany C-9a aminoskupiny je makrolid možno nechať reagovať s terc.butyldikarbonátom v bezvodnom tetrahydrofuráne (THF) alebo benzyloxvkarbonylestérom Ahydroxysukcimidom alebo benzylchlórformiátom. Aminoskupina je potom chránená vo forme terc. butylkarbamátu alebo benzylkarbamátu. Ako C-9a, tak C-2'hydroxyskupinu je možno v jednom stupni selektívne chrániť Cbz skupinou tak, že sa zlúčenina obecného vzorca 10, kde Y predstavuje vodík, nechá reagovať s benzylchlórformiátom v tetrahydrofuráne a vode. Skupinu Boe možno odstrániť pôsobením kyseliny a skupinu Cbz zvyčajnou katalytickou hydrogenáciou. V nasledujúcom popise sa má za to, že ochrana C-9a aminoskupiny a C-2'hydroxyskupiny sa zavádza a odstraňuje tak, ako by odborník v tomto obore považoval za vhodné.

V stupni 2 postupu podía schémy 3A sa C-4'' hydroxyskupina zlúčeniny obecného vzorca 11 oxiduje na odpovedajúci ketón obecného vzorca 12 spôsobmi známymi odborníkom v tomto obore. Zlúčeninu obecného vzorca 14 je možno získať tak, že sa zlúčenina obecného vzorca 12 nechá reagovať so zlúčeninou obecného vzorca RigMgXi alebo Rig-Li a Mg(Xi)2 / kde Xi predstavuje halogén, tetrahydrofuráne, diizopropylétere, tetrametyletyléndiamíne rozpúšťadiel, v rozmedzí od ako chlór alebo etylénglykole, touléne, (TMEDA) prednostne v éterovom asi -78°C približne do bróm, v rozpúšťadle, ako dimetylétere dietylétere alebo zmesi (DME), alebo týchto teplote rozpúšťadle, pri teploty miestnosti (20 až

25°C).

V schéme 3B je znázornená príprava zlúčenín obecného vzorca 14 za použitia epoxidového medziproduktu. Pri postupu podía schémy 3B je zlúčeninu obecného vzorca 13 možno pripraviť dvoma spôsobmi. Reakciou zlúčeniny obecného vzorca 12 so zlúčeninou obecného vzorca (CE₃)₃S(O)X² , kde X predstavuje halogén alebo skupinu -BF₄ alebo -PF₆ , prednostne jód, za prítomnosti bázy, ako terc.butoxidu draselného, etoxidu sodného, hydridu sodného, 1,1,3,3tetrametylguanidinu, 1/8- diazabicyklo[5,4,0]undec-7-énu, 1,5-diazabicyklo[4,3,0]nón-5-énu, etoxidu draselného alebo metoxidu sodného, prednostne bázy obsahujúcej sodík, ako hydridu sodného, v rozpúšťadle, ako tetrahydrofuráne, éterovom rozpúšťadle, dimetylformamide (DMF) alebo dimetylsulfoxide (DMSO) alebo zmesi týchto rozpúšťadiel, pri teplote v rozmedzí od asi 0 do asi 60 °C sa získa zlúčenina obecného vzorca 13, kde môže prevládať nasledujúca konfigurácia epoxidového zvyšku ·· ···· · ·· ·· • · · ···· ··· • · · ····· • · · · ······ ·· ·· ··· ·· ·· ···

Reakciou zlúčeniny obecného vzorca 12 so zlúčeninou obecného vzorca (CH₃)₃SX³ , kde X³ predstavuje halogén alebo skupinu BF₄ alebo -PF₆, prednostne BF< , za prítomnosti bázy, ako terc.butoxidu draselného, etoxidu sodného, hydridu sodného, 1,1,3, 3-tetrametylguanidínu, 1,8- diazabicyklo[5, 4,0]undec-7énu, 1,5-diazabicyklo[4,3,0]nón-5-énu, etoxidu draselného, terc.butoxidu draselného, KHMDS alebo metoxidu sodného, prednostne KHMDS v rozpúšťadle, ako tetrahydrofuráne, éterovom rozpúšťadle, dimetylformamidu (DMF) alebo dimetylsulfoxidu (DMSO) alebo zmesi týchto rozpúšťadiel, pri teplote v rozmedzí od asi 0 do 60 °C sa získa zlúčenina obecného vzorca 13, kde môže prevládať nasledujúca konfigurácia epoxidového zvyšku

V stupni 1 postupu podľa schémy 3B je zlúčeninu obecného vzorca 13 možno previesť na zlúčeninu obecného vzorca 14, kde

Rie predstavuje hydroxyskupinu a Rig predstavuje skupinu, ktorá je k uhlíku C-4'' pripojená cez metylovú skupinu, ako je tomu keď Rig predstavuje skupinu -CH₂NR⁶ R⁸ alebo -CH₂S(O)_nR⁸ , kde n, R⁶ a R⁸ majú vyššie uvedený význam. Pri príprave zlúčeniny obecného vzorca 14, kde Rig predstavuje skupinu CH₂NR⁶ R⁸ , je ·· ···· · ·· ·· · • · · ···· ···· • · · ······ ·· · · ······ · • · · · ······ ·· ·· ··· ·· ·· ··· zlúčeninu obecného vzorca 13 možno nechať reagovať so zlúčeninou obecného vzorca NHR⁶ R⁸ , kde R⁶ a R⁸ majú vyššie uvedený význam, za neprítomnosti alebo za prítomnosti rozpúšťadla, ako vody, metanolu alebo tetrahydrofuránu, alebo zmesi takých rozpúšťadiel, pri teplote v rozmedzí od asi teploty miestnosti do asi 100°C, prednostne pri 60°C, poprípade za prítomnosti halogenidu kovu, ako jodidu draselného, pyridíniumhydrochloridu alebo tetraalkylamóniumhalogenidového reakčného činidla, ako benzénu alebo toulénu, pri teplote v rozmedzí od asi teploty miestnosti do asi 120 °C.

Zlúčeniny zo schémy 4 je možno pripravovať za použitia v podstate rovnakých spôsobov, aké sú popísané v US patentu č. 3 681 322, udeleného 1. augusta 1972 a spôsobmi známymi odborníkom v tomto obore.

V stupni 1 podľa schémy 4 sa C-9 karbonyl v zlúčenine obecného vzorca 15 prevedie na odpovedajúcu skupinu oximu v polohe C-9 tak, že sa makrolid nechá reagovať s hydroxylamínom alebo, prednostne, soľou hydroxylamínu, ako hydrochloridom. Za podmienok, ktorým sa v súčasnej dobe dáva prednosť, sa používa aspoň jedného molárneho ekvivalentu, zvyčajne nadbytku, 5 až 10 ekvivalentov v slabej zásade, terciárnom amíne (prednostne pyridíne), ako rozpúšťadle a teploty v rozmedzí 20 až 80 °C. Spoločne s bázou, ako uhličitanom barnatým, je tiež možno použiť protického rozpúšťadla, ako metanolu , čím sa získa slabo zásadité rozpúšťadlo.

V stupni 2 postupu podľa schémy 4 je oxim obecného vzorca 16 možno redukovať na odpovedajúci imín reakciou s halogenidom kovu, ako chloridom titanitým, v acetátom pufrovanom rozpúšťadle, ako metanolu alebo etanolu, prednostne metanolu.

·· ···· · ·· ·· · ·· · ···· ···· • · · ······ • · ·· ······ · • · · · ······ ·· ·· ··· ·· ·· ···

Redukciu možno previesť za použitia dvojmocného vanádia (pripraveného redukciou vanadylsulfátu zz.nkom za prítomnosti ortuti v kyseline chlorovodíkovej) v protickom organickom rozpúšťadle, ako metanolu alebo etanolu, prednostne metanolu.

V stupni 3 postupu podía schémy 4 je imín obecného vzorca možno redukovať na odpovedajúci amín obecného vzorca 18 za použitia rôznych spôsobov známych odborníkom v tomto obore. Prednostný spôsob zahŕňa použitie redukčného činidla obsahujúceho bór, ako je tetrahydroboritan sodný zvyčajne v nadbytku, 2 až 10 ekvivalentov, v protickom rozpúšťadle, ako metanole alebo etylénglykole, pri teplote v rozmedzí od -5 do 40°C, prednostne od 0 do 20°C.

Zlúčeniny podía vynálezu môžu obsahovať asymetrické atómy uhlíka, a môžu sa teda vyskytovať v rôznych enantiomérnych formách. Diastereomérne zmesi je možno rozdelovať na jednotlivé diastereoméry na základe ich fyzikálne chemických odlišností za použitia postupov dobre známych odborníkom v tomto obore. Ako príklady takých postupov možno uviesť chromatografiu a frakčnú kryštalizáciu. Enantioméry je možno rozdelovať tak, že sa enantiomerná zmes· reakciou s vhodnou opticky aktívnou zlúčeninou, napríklad alkoholom, prevedie na diastereoizomérnu zmes, diastereoméry sa rozdelia a jednotlivé diastereoméry sa odpovedajúce čisté spadá použitie diastereomérnych zmesí a čistých enantiomérov.

prevedú, napríklad hydrolýzou, na enantioméry. Do rozsahu tohto vynálezu všetkých takých izomérov, vrátane

Zlúčeniny podía vynálezu, ktoré majú bázickú povahu, sú schopné tvoriť rôzne soli s rôznymi anorganickými a organickými kyselinami. Aj keď také soli musia byť pre podávanie cicavcom farmaceutický vhodné,, v praxi je často žiadúce zlúčeninu podía vynálezu z reakčnej zmesi izolovať ·· • · • ·

• · ·· ···· • · • · • · · ·· ·· • · ·· • · ·· e najskôr vo forme farmaceutický nevhodné soli, ktorá sa potom reakciou s alkalickým činidlom lahko prevedie späť na volnú bázu, Volná báza sa následne prevedie na farmaceutický vhodnú adičnú sol s kyselinou. Adične soli bázických zlúčenín podlá vynálezu s kyselinami je možno snadno pripravovať tak, že sa bázická zlúčenina nechá reagovať s v podstate ekvivalentným množstvom zvolenej minerálnej alebo organickej kyseliny vo vodnom rozpúšťadlovom médiu alebo vhodnom organickom rozpúšťadle, ako metanolu alebo etanolu. Po opatrnom odparení rozpúšťadla sa získa požadovaná pevná sol. Požadovanú sol možno tiež vyzrážať z roztoku voľnej bázy v organickom rozpúšťadle prídavkom vhodnej minerálnej alebo organickej kyseliny.

Zlúčeniny podľa vynálezu, ktoré majú kyslú povahu, sú schopné tvoriť soli s bázami obsahujúcimi rôzne katióny. Aj keď takéto soli musia byť pre podávanie cicavcu farmaceutický vhodné, v praxi je často žiadúce zlúčeninu podľa vynálezu z reakčnej zmesi izolovať najprv vo forme farmaceutický nevhodnej soli, ktorá sa potom jednoducho prevedie späť na voľnú bázu. Pri tom sa používa postupu popísaného vyššie pre prevádzanie farmaceutický nevhodných adičných solí s kyselinami na farmaceutický prijateľné soli. Ako príklady soli s bázami je možno uviesť soli alkalických kovov a kovov alkalických zemín, najmä soli sodné, soli s amíny a soli draselné. Všetky tieto soli sa pripravujú zvyčajnými postupmi.

Chemické bázy, ktorých sa používa ako činidiel pri príprave farmaceutický vhodných solí zlúčenín podľa vynálezu sú bázy, s ktorými kyslé zlúčeniny podľa vynálezu tvoria netoxické soli. Ako príklady netoxických solí s bázami je možno uviesť soli s farmakologicky vhodnými katióny, ako katióny sodíka, draslíka, vápnika, horčí.<a a rôzne amóniové katióny. Soli kyslých zlúčenín podľa vynálezu s bázami je ·· ···· · ·· ·· ·· · ···· ··· • e· · e e e · ···· ······ ·· ·· ··· ·· ·· ··· možno snadno pripravovať tak, že sa kyslá zlúčenina nechá reagovať s v podstate ekvivalentným množstvom zvolenej bázy vo vodnom rozpúšťadlovom médiu alebo vhodnom organickom rozpúšťadle, ako metanolu alebo etanolu. Po opatrnom odparení rozpúšťadla (prednostne za zníženého tlaku) sa získa požadovaná sol. Alternatívne je takéjto soli tiež možno pripravovať tak, že sa zmieša roztok kyslej zlúčeniny v nižšom alkanolu s roztokom požadovaného alkoxidu alkalického kovu a výsledný roztok sa vyššie popísaným spôsobom odparí do sucha. V oboch prípadoch sa reakčných činidiel prednostne používa v stechiometrických množstvách, aby sa zaistila úplnosť reakcie a maximalizácia výťažkov požadovaného konečného produktu.

Schopnosť zlúčenín podía tohto vynálezu potlačovať bakteriálne a protozoálne patogény je demonštrovaná ich schopnosťou inhibovať rast definovaných kmeňov ľudských (skúška I) a zvieracích (skúšky II a III) patogénov.

Skúška I

Pri ďalej popísanej skúške I, sa používa štandardnej metológie a štandardných kritérií pre interpretáciu. Táto skúška je navrhnutá tak, aby poskytovala návod k chemickým modifikáciám, ktoré môžu viesť k zlúčeninám, ktoré sú schopné obísť mechanizmus rezistencie voči makrolidom. Skúška I sa prevádza na panelu bakteriálnych kmeňov, zostavenom tak, aby zahŕňal rôzne druhy cieľových patogénov, vrátane typických príkladov mechanizmov rezistencie voči makrolidom, ktoré boli popísané. Tento panel umožňuje stanoviť vzťah chemická štruktúra/aktivita, čo sa týka účinnosti, spektra aktivity a štruktúrnych elementov alebo modifikácií, ktoré sú potrebné pre obchádzanie mechanizmu rezistencie. Eakteriálne patogény,

• ·		····	• ··		··
•	•	•	·· ·	•	•	• 4
•	•	•	• ·	•	•	•
•	•	• ·	• ·	•	•	•
··		··	··· ··		··	•

ktoré tvoria panel, sú uvedené v nasledujúcej tabulke. V radu prípadov je dostupný ako rodičovský kmeň susceptibilný k makrolidom, tak aj kmeň rezistentný k makrolidom odvodený od kmeňa rodičovského. To umožňuje presnejšie stanovenie schopnosti zlúčenín obísť mechanizmus rezistencie. Kmene, ktoré obsahujú gén s označením ermA/ermB/ermC sú rezistentné voči antibiotikom makrolidového typu, linkosamidom a streptograminu B v dôsledku modifikácie (metylácia) molekúl 23S rRNA Erm metylázou, ktorá obecne zabraňuje naviazanie všetkých troch štruktúrnych tried. Boli popísané dva typy vypudzovania makrolidov (efluxu); msrA kóduje zložku vypudzovacieho systému u stafylokokov, ktorá zabraňuje vstupu makrolidov a streptogramínov, zatial čo mefA/E kóduje transmembránový proteín, ktorý zrejme vypudzuje iba makrolidy. Môže dochádzať k inaktivácii makrolidových antibiotík a táto inaktivácia môže byť sprostredkovaná fosforyláciou 2'hydroxylu (mph) alebo štiepením makrocyklického laktónu (esterázou). Kmene možno charakterizovať za použitia zvyčajných pCR postupov a/alebo sekvenovaním determinantmi rezistencie. PCR postupy použité v vynálezom sú popísané v J. Sutcliffe et Erythromycin-Resistant Determinants By

Agents and Chemotherapy, 40(11), 2562 až súvislosti s týmto „Detection Of al.,

PCR,

Antimicrobial

2566 (1996).

Antibakteriálna skúška sa prevádza v mikrotitrových miskách a interpretuje sa podía smerníc „Performance Standards f or Antimicrobial Disk Susceptibility Tests - 6. vydanie

Approved Štandard, vydaných The National Committee for Clinical Laboratory Standards (NCCLS); pre porovnanie kmeňov sa použije minimálna inhibíčna koncentrácia (MIC), acrAB alebo ako-acrAB označuje kmene s vlastnou pumpou pre vypudzovanie viacej liečiv („intrinsic multidrug efflux púmp). Zlúčeniny sa najprv rozpustia v dimetylsulfoxide (DMSO), čím sa získajú zásobné roztoky o koncentrácii 40 mg/ml.

·· ·· • · · · · · · ·

Označenie kmeňa

Mechani zmus/mechani zmy

Rezistencia voči makrolidom

Staphyloccocus aureus1116

Staphyloccocus aureus1117

Staphyloccocus aureus0052

Staphyloccocus aureus1120

Staphyloccocus aureus1032

Staphylococcus haemolyticus susceptibilný rodičovský ermB susceptibilný rodičovský ermC msrA, mph, esterázový

1006 msrA, mph

Streptococcus Streptococcus Streptococcus Streptococcus Streptococcus Streptococcus Streptococcus Streptococcus Streptococcus Streptococcus Streptococcus pyogenes 0203 pyogenes 1079 pyogenes 1062 pyogenes 1061 pyogenes 1064 agalactiae 1024 agalactiae 1023 pneumoniae 1016 pneumoniae 1046 pneumoníae 1095 pneumoniae 1175

Haemophillus influenzae 0085

Haemophillus influenzae 0131 Moraxella catarrhalis 0040 Moraxella catarrhalis 1055 susceptibilný rodičovský ermB susceptibilný rodičovský ermB mefA susceptibilný rodičovský ermB susceptibilný ermB ermB mefE susceptibilný, ako -acrAB susceptibilný, ako -acrAB susceptibilný erytromycin; stredná rezistencia

Escherichia coli

0266 susceptibilný; acrA

Haemophillus influenzae

1100 susceptibilný; ako -acrAB

Skúšky II sa použije pre stanovenie aktivity proti proti Pasteurella häemolytica.

Pasteurella multocida a skúšky III pre stanovenie aktivity

Skúška II

Táto skúška je založená na kvapalinovej zrieďovacej metóde v mikrolitrovom formáte. 5 ml pôdy s nálevom z mozgu a srdca sa zaočkuje jedinou kolóniou P. multocida ( kmeň 59Ά067). Skúšané zlúčeniny sa pre skúšanie pripravia tak, že sa 1 mg zlúčeniny rozpusti v 125 μΐ dimetylsulfoxidu (DMSO). Pre zriedenie skúšanej zlúčeniny sa použije nezaočkovanej pôdy BHI. Koncentračné rozmedzie skúšaných zlúčenín je od 200 pg/ml do 0,098 pg/ml pri dvojnásobnom sériovom riedení. BHI zaočkovaná P. multocida sa zriedi nezaočkovanou pôdou BHI tak, že sa získa suspenzia o koncentrácii 10⁴ buniek/200 pl. Suspenzia buniek v BHI sa zmieša s každým z roztokov skúšanej zlúčeniny zo sériového riedenia a výsledná suspenzia sa inkubuje 18 hodín pri 37 °C. Minimálna inhibíčna koncentrácia (MIC) je rovná koncentrácii zlúčeniny, ktorá vykazuje 100% inhibíciu rastu P. multocida, ako bola stanovená porovnaním s nezaočkovanou kontrolou.

Skúška III

Táto skúška je založená na zrieďovacej metóde v agáre za použitia Steersova replikátora. Pôda BHI sa zaočkuje dvomi až piatimi kolóniami izolovanými z agárových misiek a inkubuje cez noc pri 37 °C za trasení pri 200 min¹. Nasledujúce ráno sa 300 μΐ predpestovaného plného nárastu P. haemolytica zaočkujú 3 ml čerstvej pôdy BHI a zaočkovaná pôda sa inkubuje pri 37 °C za trasení pri 200 min¹. Vhodné množstvá skúšaných zlúčenín sa rozpustia v etanole a pripraví sa séria dvojnásobných zriedení. Vždy 2 ml roztoku o odpovedajúcom zriedení sa zmieša s 18 ml tekutého BHI agáru a nechá stuhnúť. Keď zaočkovaná kultúra P. haemolytica dosiahne 0,5 McFarlandovy štandardnej hustoty, asi ·· ····

• ·· t ·· • ·· • · ·· ·· ·· • ·· ·· ·· · · · · · • · · · · • · * · · · ··· ·· ·· ·*· μΐ kultúry P. haemolytica sa pomocou Steersova replikátora použije pre zaočkovanie misiek s BHI agárom obsahujúcim rôzne koncentrácie skúšanej zlúčeniny. Misky sa inkubujú 18 hodín pri 37 °C . Počiatočná koncentrácia skúšanej zlúčeniny je v rozmedzí 100 až 200 pg/ml. Minimálna inhibičná koncentrácia je rovná koncentrácii skúšanej zlúčeniny, ktorá vykazuje 100% inhibiciu rastu P. haemolytica, ako bola stanovená porovnaním s nezaočkovanou kontrolou.

In vivo aktivitu zlúčenín podlá vynálezu je možno stanoviť za použitia zvyčajných skúšok ochrany na zvieratoch, zvyčajne myších.

Po dodaní sa zvieratá náhodne umiestnia do klietok (po desiatich) a pred použitím sa im ponechá aspoň 48 hodín na aklimatizáciu. Zvieratá sa intraperitoneálne zaočkujú 0,5 ml bakteriálnej suspenzie 3 x 10³ CFU/ml (P. multocida kmeň 59A006). Každá skúška zahŕňa aspoň tri nemedikované kontrolné skupiny, z ktorých jedna sa infikuje 0,lx provokačnou dávkou a dve sa infikujú lx provokačnou dávkou; možno tiež použiť skupiny infikovanej lOx provokačnou dávkou. Všetky myši pri danej skúške možno obecne provokovať v priebehu 30 až 90 minút, najmä, pokial sa pre podanie provokačnej dávky použije injekčnej striekačky pre opakované použizie (ako striekačky Cornwall ^(R)) . Tridsať minút po zahájení provokácie sa prevedie prvé ošetrenie zlúčeninou. V prípade, že po uplynutí 30 minút všetkým zvieratám ešte nebola podaná provokačná dávka, je nutné, aby podávanie zlúčeniny zahájila druhá osoba. Zlúčeniny sa podávajú subkutánne alebo perorálne. Subkutánne podávanie sa prevádza pod volnú kožu chrbtovej časti krku a perorálne podávanie sa prevádza za použitia kŕmiacej ihly. V oboch prípadoch sa použije objemu 0,2 ml na myš. Zlúčeniny sa podávajú 30 minút, 4 hodiny a 24 hodín po provokácii. Každá skúška zahŕňa podanie kontrolných zlúčenín so známou aktivitou

rovnakým spôsobom. Zvieratá sa pozorujú každý deň, zaznamenáva sa počet zvierat, ktoré prežili v každej skupine. Monitorovanie modelu P. multocida trvá 96 hodín (4 dni) po provokácii.

Vypočíta sa hodnota PD₅₀, dávka pri ktorej skúšaná zlúčenina ochráni 50% myši zo skupiny pred úhynom následkom bakteriálnej infekcie, ktorá by bez liečenia danou zlúčeninou bola letálna.

Zlúčeniny obecných vzorcov I, II, 8 a 9 a ich farmaceutický vhodné soli (ďalej označované ako „účinné zlúčeniny) je pri liečení bakteriálnych a protozoálnych infekcií možno podávať perorálne, parenterálne, topicky alebo rektálne. Zvyčajne sa tieto zlúčeniny budú najvýhodnejšie podávať v denných dávkach v rozmedzí od asi 0,2 mg na kg hmotnosti (mg/kg) až asi 200 mg/kg, vo forme jedinej alebo niekolko dielčích dávok (napríklad vo forme 1 až 4 dávok za deň). V závislosti na druhu, hmotnosti a stavu liečeného subjektu a konkrétne zvolenom spôsobe podávania ale bude nevyhnutné dochádzať k odchýlkam v dávkovaní. Najvhodnejšie sú ale denné dávky v rozmedzí od asi 4 mg/kg do asi 50 mg/kg. Ale však, v závislosti na druhu liečeného cicavca, ryby alebo vtáka a jeho individuálnej odpovedi na takéto liečivo,ako aj na zvolenom typu farmaceutickej formulácie a dobe a intervalu v akom sa podávanie prevádza, môže byť dávkovanie odlišné. V niektorých prípadoch môžu postačovať dávky nižšie ako je limitovaná dávka vo vyššie uvedenom rozmedzí. V iných prípadoch možno použiť dávok vyšších ako je horná hranica tohto rozmedzia, aby to vyvolalo škodlivé vedlajšie účinky, pritom sa takáto veľká dávka najprv rozdelí na niekolko menších dávok, ktoré sa podávajú v priebehu celého dňa.

·· • •	····	• ·· ·· · · • · ·	·· • · • ·	··
• •	• •
•	•	• ·	• · ·	• ·
··		··	··· ··	··	··

Účinné zlúčeniny sa môžu podávať samé alebo v kombinácii s farmaceutický vhodnými nosičmi alebo riedidlami niektbrým z vyššie uvedených spôsobov, pritom sa môže podávať jedna alebo viacej dávok. Konkrétnejšie sa aktívne zlúčeniny môžu podávať vo forme najrôznejších dávkovacích foriem, t j. farmaceutických kompozíc, v ktorých sú zmiešané s rôznymi farmaceutický vhodnými inertnými nosičmi a spracované do podoby tabliet, toboliek, pastiliek, tuhých cukríkov, práškov, sprejov, krémov, salves, čípkov, želé, gélov, pást, lotiónov, mastí, vodných suspenzií, injekčných roztokov, elixírov, sirupov apod. Takéto nosiči zahŕňajú pevné riedidlá alebo plnivá, sterilné vodné médiá a rôzne netoxické organické rozpúšťadlá atď. Farmaceutické prostriedky pre perorálne podávanie môžu okrem tohto prídavné obsahovať sladidlá a/alebo aromatizačné priesady. Účinné zlúčeniny sú v takých dávkovacích formách spravidla prítomné v koncentrácii v rozmedzí od asi 5,0 do asi 70 % hmotnostných.

Pre perorálne podávanie sa môže použiť tabliet obsahujúcich rôzne excipienty, ako je mikrokryštalická celulóza, citran sodný, uhličitan vápenatý, dikalciumfosfát a glycín, spoločne s rôznymi rozvolňujúcimi prostriedkami, ako je škrob (prednostne kukuričný, zemiakový alebo tapiokový škrob), kyselina alginová a určité komplexné silikáty, a granulačnými poj ivami, ako je polyvinylpyrrolidón, sacharóza, želatína a klovatina. Pre tabletovacie účely môžu byť prídavné prítomné lubrikačné natriumlaurylsulfát a činidlá, mastenec.

ako je stearan horečnatý, prostriedky podobného

Pevné typu môžu tobolkách.

byť tiež prítomné ako

V tomto tiež prednostne polyetylénglykoly. elixírov, ktoré sa prípade laktózu obsahujú alebo vodných náplne v želatínových použité prostriedky vysokomolekulárne suspenzií a/alebo zlúčenina miešať

Pri výrobe hodia pre orálne podávanie, sa môže účinná s rôznymi sladidlami alebo aromatizačnými

··		····	• ··	··
•	•	•	·· · ·	• ·	··
•	•	•	• · ·	Φ i
•	•	• ·	• · ·	• ·
··		··	··· ··	··	··

látkami, farbiacimi priesadami alebo farbivami a - pokial je to treba - emulgátormi a/alebo suspenznými činidlami a ďalej takými riedidlami, ako je voda, etanol, propylénglykol, glycerol a ich rôzne kombinácie.

Pre perorálne podávanie sa môže použiť roztokov účinných zlúčenín buď v sezamovom alebo arašidovom oleji, alebo vo vodnom propylénglykole. Vodné roztoky by mali byť účelne pufrované, pokial je to nutné, prednostne na hodnotu vyššiu ako 8, a kvapalné riedidlo by malo byť najprv izotonizované. Takéto vodné roztoky sa hodia pre intravenózne injekčné podávanie. Olejové roztoky sa hodia pre intraartikulárne, intramuskulárne a subkutánne injekčné podávanie. Výroba všetkých takých roztokov za sterilných podmienok sa lahko prevádza štandardnými farmaceutickými technológiami, ktoré sú dobre známe odborníkom v tomto obore.

Účinné zlúčeniny je tiež možno podávať topicky, čo možno prednostne prevádzať za použitia krémov, želé, gélov, pást, mastí apod., ktoré sa vyrábajú podlá štandardných farmaceutických technológií.

Iným živočíchom ako luďom, ako hovädziemu skotu alebo domácim zvieratám, možno účinné zlúčeniny podávať v krmivu alebo perorálne vo forme tekutých kompožíc pre nútené podávanie.

Účinné zlúčeniny je tiež možno podávať vo forme lipozomálnych systémov pre dodávku liečiv, ako sú malé unilamelárne vezikula, velké unilamelárne vezikula a multilamelárne vesikula. Lipozómy možno pripravovať z rôznych fosfolipidov, ako cholesterolu, sterylaminu alebo fosfatidylcholinov.

·· • · • ·	···· • •	• ·· ·· · · • · ·	·· • · • ·	··
• ·	• ·	• · ·	• ·
··	··	··· ··	··	··

Účinné zlúčeniny taktiež môžu byť naviazané na rozpustné polyméry, ako nosičov pre cielenú dodávku liečiv. Takými polymérmi sú napríklad polyvinylpyrrolidón, pyránový kopolymér, polyhydroxypropylmetakrylamid fenyl, polyhydroxyetylaspartamid-fenol alebo polyetylénoxid-polylyzín substituovaný palmitoylovými zvyškami. Účinné zlúčeniny môžu byť ďalej naviazané na polymér z triedy biodegradovatalných polymérov, pomocou ktorých možno dosiahnuť riadeného uvoľňovania liečiv. Takýmito polymérmi sú napríklad kyselina polymliečna, kyselina polyglykolová, kopolyméry kyseliny polymliečnej a polyglykolovej, polyepsilónkaprolaktón, kyselina polyhydroxymasľová, polyortoestery, polyacetály, polydihydropyrány, polykyanoakryláty a zosieťované alebo amfipatické blokové kopolyméry hydrogélov.

Vynález je bližšie objasnený v nasledujúcich príkladoch prevedenia. Tieto príklady majú výhradne ilustratívny charakter a rozsah vynálezu v žiadnom ohľade neobmedzujú.

Príklady prevedenia

Zlúčeniny z príkladov 1 až 9 odpovedajú znázornenému obecnému vzorcu a význam substituentov R je uvedený v tabulke pod vzorcom. Tieto zlúčeniny sa pripravujú spôsobmi popísanými v postupoch prípravy. Výťažky a hmotnosté spektrá (MS) sa vzťahujú ku konečným produktom.

Tabuľka 1 (2)

Príklad R¹

Postup Výťažok MS prípravy ( % )

1-1	izopropyl	H	1	95	747
1-2	cyklopropyl	H	].	96	745
1-3	sek.butyl	H	1	95	761
1-4	cyklobutyl	H	1	98	759
1-5	cyklopentyl	H	1	94	773
1-6	metyltioetyl	H	1	91	779
1-7	cyklopropyl	OH	1	95	761
1-8	cyklobutyl	OH	1	86	775

Postup	prípravy	1
Odpovedajúci makrolid	obecného vzorca 1	(0,095 až 4,96

sa rozpustí v 1,9 až 50 ml bezvodného pyridínu. K vzniklému roztoku sa pridá hydrochlorid hydroxylamínu (7,5 ekv.). Reakčný roztok sa 24 hodín za miešania zohrieva na 60 °C. Reakčná zmes sa spracuje dekantáciou do 50 ml zmesi metylénchloridu a vody v pomere 1:1. Hodnota pH výslednej zmesi sa za použitia IM hydroxidu sodného nastaví na 9 až 11 a získaná zmes sa extrahuje 3 x 25 ml metylénchloridu, vysuší síranom sodným, prefiltruje a filtrát sa skoncentruje. Získa sa svetlo žltý pevný produkt, ktorého sa použije v nasledujúcom stupni bez ďalšieho prečistenia.

·· • · • ·	9999 9 9	• ·· · • ·	·· • •	·· • · • ·	··
• 9	9 9	• ·	•	• ·
99	99	···	··	··	··

Príprav zlúčeniny 1-1 z tabuľky 1

400 mg odpovedajúceho makrolidu obecného vzorca 1, kde R¹predstavuje izopropylskupinu a R² predstavuje vodík, sa rozpustí v 8 ml bezvodného pyridínu. K vzniklému roztoku sa pridá hydrochlorid hydroxylamínu (0,285 g, 7,5 ekv.). Reakčný roztok sa 24 hodín za miešania zohrieva na 60 °C. Reakčná zmes sa spracuje dekantáciou do 50 ml zmesi metylénchloridu a vody v pomere 1 : 1. Hodnota pH výslednej zmesi sa za použitia IM hydroxidu sodného nastaví na 9 a získaná zmes sa extrahuje 3 x 25 ml metylénchloridu, vysuší síranom sodným, prefiltruje a filtrát skoncentruje. Získa sa svetlo žltý pevný produkt. Tohto produktu (0,403 g) sa použije v nasledujúcom stupni bez ďalšieho prečistenia.

Príprava zlúčeniny 1-2 z tabuľky 1

250 mg odpovedajúceho makrolidu obecného vzorca 1, kde R¹predstavuje cyklopropylskupinu a R² predstavuje vodík, sa rozpustí v 5 ml bezvodného pyridínu. K vzniklému roztoku sa pridá hydrochlorid hydroxylamínu (0,178 g, 7,5 ekv.). Reakčný roztok sa 24 hodín za miešania zohrieva na 60 °C. Reakčná zmes sa spracuje dekantáciou do 50 ml zmesi metylénchloridu a vody v pomere 1:1. Hodnota pH výslednej zmesi sa za použitia IM hydroxidu sodného nastaví na 9 a získaná zmes sa extrahuje 3 x 25 ml metylénchloridu, vysuší síranom sodným, prefiltruje a filtrát sa skoncentruje. Získa sa svetlo žltý pevný produkt. Tohto produktu (0,252 g) sa použije v nasledujúcom stupni bez ďalšieho prečistenia.

Príprava zlúčeniny 1-3 z tabuľky

·· • •	• •	···· • •	• ·· ·· 9 • ·	··	··
• •	• •	• •
•	•	• ·	• ·	•	•	•
··		··	··· ··		··		··

250 mg odpovedajúceho makrolidu obecného vzorca 1, kde R¹predstavuje sek.butylskupinu a R² predstavuje vodík, sa rozpustí v 5 ml bezvodného pyridínu. K vzniklému roztoku sa pridá hydrochlorid hydroxylamínu (0,175 g, 7,5 ekv.). Reakčný roztok sa 24 hodín za miešania zohrieva na 60 °C. Reakčná zmes sa spracuje dekantáciou do 50 ml zmesi metylénchloridu a vody v pomere 1 : 1. Hodnota pH výslednej zmesi sa za použitia IM hydroxidu sodného nastaví na 9 a získaná 2:mes sa extrahuje 3 x 25 ml metylénchloridu, vysuší síranom sodným, prefiltruje a filtrát skoncentruje. Získa sa svetlo žltý pevný produkt. Tohto produktu (0,246 g) sa použije v nasledujúcom stupni bez ďalšieho prečistenia.

Príprava zlúčeniny 1-4 z tabulky 1

250 mg odpovedajúceho makrolidu obecného vzorca 1, kde R¹predstavuje cyklobutylskupinu a R² predstavuje vodík, sa rozpustí v 5 ml bezvodného pyridínu. K vzniklému roztoku sa pridá hydrochlorid hydroxylamínu (0,175 g, 7,5 ekv.). Reakčný roztok sa 24 hodín za miešania zohrieva na 60 °C. Reakčná zmes sa spracuje dekantáciou do 50 ml zmesi metylénchloridu a vody v pomere 1 : 1. Hodnota pH výslednej zmesi sa za použitia IM hydroxidu sodného nastaví na 9 a získaná zmes sa extrahuje 3 x 25 ml metylénchloridu, vysuší síranom sodným, prefiltruje a filtrát skoncentruje. Získa sa svetlo žltý pevný produkt. Tohto produktu (0,249 g) sa použije v nasledujúcom stupni bez ďalšieho prečistenia.

Príprava zlúčeniny 1-5 z tabulky 1

100 mg odpovedajúceho makrolidu obecného vzorca 1, kde R¹predstavuje cyklopentylskupinu a R² predstavuje vodík, sa rozpusti v 2 ml bezvodného pyridínu. K vzniklému roztoku sa ·· ···· • · · • · · • · · · ·· ·· • ·· ·· ·· · · · · · • · · · · • · · · · · *··· ·· ·· ··· pridá hydrochlorid hydroxy1aminu (0,070 g, 7,5 ekv.). Reakčný roztok sa 24 hodín za miešania zohrieva na 60 °C. Reakčná zmes sa spracuje dekantáciou do 50 ml zmesi metylénchloridu a vody v pomere 1:1. Hodnota pH výslednej zmesi sa za použitia IM hydroxidu sodného nastaví na 9 až 11 a získaná zmes sa extrahuje 3 x 25 ml metylénchloridu, vysuší síranom sodným, prefiltruje a filtrát skoncentruje. Získa sa svetlo žltý pevný produkt. Tohto produktu (0,094 g) sa použije v nasledujúcom stupni bez ďalšieho prečistenia.

Príprava zlúčeniny 1-6 z tabulky 1 mg odpovedajúceho makrolidu obecného vzorca 1, kde R¹ predstavuje metyltioetylskupinu a R² predstavuje vodík, sa rozpustí v 1,9 ml bezvodného pyridinu. K vzniklému roztoku sa pridá hydrochlorid hydroxylamínu (0,065 g, 7,5 ekv.). Reakčný roztok sa 24 hodín za miešania zohrieva na 60 °C. Reakčná zmes sa spracuje dekantáciou do 50 ml zmesi metylénchloridu a vody v pomere 1:1. Hodnota pH výslednej zmesi sa za použitia IM hydroxidu sodného nastaví na 9 a získaná zmes sa extrahuje 3 x 25 ml metylénchloridu, vysuší síranom sodným, prefiltruje a filtrát skoncentruje. Získa sa svetlo žltý pevný produkt. Tohto produktu (0,091 g) sa použije v nasledujúcom stupni bez ďalšieho prečistenia.

Príprava zlúčeniny 1-7 z tabulky 1 mg odpovedajúceho makrolidu obecného vzorca 1, kde

R¹ predstavuje cyklopropylskupinu a R² predstavuje hydroxyskupinu, sa rozpustí v 2,0 ml bezvodného pyridinu. K vzniklému roztoku sa pridá hydrochlorid hydroxylamínu (0,068 g, 7,5 ekv.). Reakčný roztok sa 24 hodín za miešania zohrieva na 60 °C. Reakčná zmes sa spracuje dekantáciou do 50 ml zmesi ·· • · • · • · · • · výslednej na 9 a ·· ···· • o· •· · • · ·· • · ·· ·· ·* ·· •· · •· •· •· ·· · metylénchloridu a vody v pomere 1 : 1. Hodnota pH zmesi sa za použitia IM hydroxidu sodného nastaví získaná zmes sa extrahuje 3 x 25 ml metylénchloridu, vysuší síranom sodným, prefiltruje a filtrát skoncentruje. Získa sa svetlo žltý pevný produkt. Tohto produktu (0,100 g) sa použije v nasledujúcom stupni bez ďalšieho prečistenia.

Príprava zlúčeniny 1-8 z tabuľky

4,96 g odpovedajúceho makrolidu obecného vzorca

1, kde R¹ predstavuje cyklobutylskupinu a R² predstavuje hydroxyskupinu, sa rozpustí v 50,0 ml bezvodného pyridinu. Ke vzniklému roztoku sa pridá hydrochlorid hydroxylamínu (3,4 g, 7,5 ekv.). Reakčný roztok sa 24 hodín za miešania zohrieva na 60 °C. Reakčná zmes sa spracuje dekantáciou do 50 ml zmesi metylénchloridu a vody v pomere 1 : 1. Hodnota pH výslednej zmesi sa za použitia IM hydroxidu sodného nastaví na 9 a získaná zmes sa extrahuje 3 x 25 ml metylénchloridu, vysuší síranom sodným, prefiltruje a filtrát skoncentruje. Získa sa svetlo žltý pevný produkt. Tohto produktu (4,24 g) sa použije v nasledujúcom stupni bez ďalšieho prečistenia.

Tabulka 2

OH

··		····	• ··	··
•	•	•	·· · ·	• ·	··
•	•	•	• · ·	• ·
•	•	• ·	• · ·	• ·
··		··	··· ··	··	··

Príklad R¹

R² Postup Výťažok MS prípravy ( % )

2-1	izopropyl	H	2	81	729
2-2	cyklopropyl	H	2	90	727
2-3	sek.butyl	H	2	85	743
2-4	cyklobutyl	H	2	98	741
2-5	cyklopentyl	H	2	41	755
2-6	metyltioetyl	H	2	28	761
2-7	cyklopropyl	OH	2	95	743
2-8	cyklobutyl	OH	2	97	747

Postup prípravy 2 až 500 mg odpovedajúceho oximu obecného vzorca 2 sa rozpustí v 1 až 7 ml acetónu. K acetónovému roztoku sa pridá O,1M vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného ( 2 ekv. ). Výsledná zmes sa ochladí na 0 až 5 °C a pridá sa k nej 0,lM roztok p-toluénsulfonylchloridu v acetóne ochladený na 0 až 5 °C. Reakčná zmes sa cez noc mieša a potom spracuje dekantáciou do 25 ml zmesi metylénchloridu a vody v pomere 1:1. Hodnota pH výslednej zmesi sa použitia IM hydroxidu sodného nastaví na 9 až 10 a získaná zmes sa extrahuje 3 x 20 ml metylénchloridu, vysuší síranom sodným, prefiltruje a filtrát sa skoncentruje. Získa sa pevný produkt, ktorého sa použije v nasledujúcom stupni bez ďalšieho prečistenia.

Príprava zlúčeniny 2-1 z tabulky 2

415 mg odpovedajúceho oximu obecného vzorca 2, kde R¹ predstavuje izopropylskupinu a R² predstavuje vodík, sa rozpustí v 7 ml acetónu. K acetónovému roztoku sa pridá 0,lM vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného ( 0,193 g v 2,0 ml vody ) . Výsledná zmes sa ochladí na 0 °C a pridá sa k nej roztok p-toluénsulfonylchloridu (0,220g) v acetóne (2,0 ml) ochladený na 0°C. Reakčná zmes sa cez noc mieša a potom spracuje dekantáciou do 25 ml zmesi metylénchloridu a vody v pomere 1 ; 1. Hodnota pH výslednej zmesi sa použitia IM hydroxidu sodného nastaví na 9 a získaná zmes sa extrahuje 3 x 20 ml metylénchloridu, vysuší síranom sodným, prefiltruje a filtrát sa skoncentruje, tým sa získa pevný produkt. Tohto produktu (0,329 g) sa použije v nasledujúcom stupni bez ďalšieho prečistenia.

Príprava zlúčeniny 2-2 z tabulky 2

200 mg odpovedajúceho oximu obecného vzorca 2, kde R¹predstavuje cyklopropylskupinu a R² predstavuje vodík, sa rozpustí v 2 ml acetónu. K acetónovému roztoku sa pridá 0,lM vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného ( 0,093 g v 1,0 ml vody ) . Výsledná zmes sa ochladí na 0 °C a pridá sa k nej roztok p-toluénsulfonylchloridu (0,106 g) v acetóne (1,0 ml) ochladený na 0°C. Reakčná zmes sa cez noc mieša a potom spracuje dekantáciou do 25 ml zmesi metylénchloridu a vody v pomere 1:1. Hodnota pH výslednej zmesí sa za použitia IM hydroxidu sodného nastaví na 9 a získaná zmes sa extrahuje 3 x 20 ml metylénchloridu, vysuší síranom sodným, prefiltruje a filtrát sa skoncentruje, tým sa získa pevný produkt. Tohto produktu (0,177 g) sa použije v nasledujúcom stupni bez ďalšieho prečistenia.

Príprava zlúčeniny 2-3 z tabulky 2

420 mg odpovedajúceho oximu obecného vzorca 2, kde R¹predstavuje sek.butylskupinu a R² predstavuje vodík, sa rozpustí v 7 ml acetónu. K acetónovému roztoku sa pridá O,1M vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného ( 0,192 g v 2,0 ml vody ) . Výsledná zmes sa ochladí na 0 °C a pridá sa k nej roztok p-toluénsulfonylchloridu (0,220 g) v acetóne (2,2 ml) ochladený na 0°C. Reakčná zmes sa cez noc mieša a potom spracuje dekantáciou do 25 ml zmesi metylénchloridu a vody v pomere 1 : 1. Hodnota pH výslednej zmesi sa za použitia IM hydroxidu sodného nastaví na 9 a získaná zmes sa extrahuje 3 x 20 ml metylénchloridu, vysuší síranom sodným, prefiltruje a filtrát sa skoncentruje, tým sa získa pevný produkt. Tohto produktu (0,348 g) sa použije v nasledujúcom stupni bez ďalšieho prečistenia.

Príprava zlúčeniny 2-4 z tabulky 2

500 mg odpovedajúceho oximu obecného vzorca 2, kde R¹predstavuje cyklobutylskupinu a R² predstavuje vodík, sa rozpustí v 5 ml acetónu. K acetónovému roztoku sa pridá 0,IM vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného ( 0,229 g v 2,0 ml vody ) . Výsledná zmes sa ochladí na 0 °C a pridá sa k nej roztok p-toluénsulfonylchloridu (0,260 g) v acetóne (2,0 ml) ochladený na 0°C. Reakčná zmes sa cez noc mieša a potom spracuje dekantáciou do 25 ml zmesi metylénchloridu a vody v pomere 1:1. Hodnota pH výslednej zmesi sa za použitia IM hydroxidu sodného nastaví na 9 a získaná zmes sa extrahuje 3 x 20 ml metylénchloridu, vysuší síranom sodným, prefiltruje a filtrát sa skoncentruje, tým sa získa pevný produkt. Tohto produktu (0,485 g) sa použije v nasledujúcom stupni bez ďalšieho prečistenia.

Príprava zlúčeniny 2-5 z tabulky 2 mg odpovedajúceho oximu obecného vzorca 2, kde R¹predstavuje cyklopentylskupinu a R² predstavuje vodík, sa rozpusti v 1 ml acetónu. K acetónovému roztoku sa pridá O,1M vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného ( 0,038 g v 0,5 ml vody ) . Výsledná zmes sa ochladí na 0 °C a pridá sa k nej roztok p-toluénsulfonylchloridu (0,043 g) v acetóne (0,5 ml) ochladený na 0°C. Reakčná zmes sa cez noc mieša a potom spracuje dekantáciou do 25 ml zmesi metylénchloridu a vody v pomere 1:1. Hodnota pH výslednej zmesi sa za použitia IM hydroxidu sodného nastaví na 9 a získaná zmes sa extrahuje 3 x 20 ml metylénchloridu, vysuší síranom sodným, prefiltruje a filtrát sa skoncentruje, tým sa získa pevný produkt. Tohto produktu (0,042 g) sa použije v nasledujúcom stupni bez ďalšieho prečistenia.

Príprava zlúčeniny 2-6 z tabulky 2 mg odpovedajúceho oximu obecného vzorca 2, kde R¹ predstavuje metyltioetylskupinu a R² predstavuje vodík, sa rozpustí v ml acetónu. K acetónovému roztoku sa pridá 0,lM vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného ( 0,038 g v 0,5 ml vody ) . Výsledná zmes sa ochladí na 0 °C a pridá sa k nej roztok p-toluénsulfonylchloridu (0,043 g) v acetóne (0,5 ml) ochladený na 0°C. Reakčná zmes sa cez noc mieša a potom spracuje dekantáciou do 25 ml zmesi metylénchloridu a vody v pomere 1:1. Hodnota pH výslednej zmesi sa za použitia IM hydroxidu sodného nastaví na 9 a získaná zmes sa extrahuje 3 x 20 ml metylénchloridu, vysuší síranom sodným, prefiltruje a

• · · · ·· ·· ·· ·· • · · · · • · · · • ·· filtrát sa skoncentruje, tým sa získa pevný produkt. Tohto produktu (0,024 g) sa použije v nasledujúcom stupni bez ďalšieho prečistenia.

Príprava zlúčeniny 2-7 z tatulky 2 mg odpovedajúceho oximu obecného vzorca 2, kde R¹predstavuje cyklopropylskupinu a R² predstavuje hydroxyskupinu, sa rozpustí v 1 ml acetónu. K acetónovému roztoku sa pridá O,1M vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného ( 0,027 g v 0,5 ml vody ) . Výsledná zmes sa ochladí na 0 °C a pridá sa k nej roztok p-toluénsulfonylchloridu (0,031 g) v acetóne (0,5 ml) ochladený na 0°C. Reakčná zmes sa cez noc mieša a potom spracuje dekantáciou do 25 ml zmesi metylénchloridu a vody v pomere 1:1. Hodnota pH výslednej zmesi sa za použitia IM hydroxidu sodného nastaví na 9 a získaná zmes sa extrahuje 3 x 20 ml metylénchloridu, vysuší síranom sodným, prefiltruje a filtrát sa skoncentruje, tým sa získa pevný produkt. Tohto produktu (0,058 g) sa použije v nasledujúcom stupni bez ďalšieho prečistenia.

Príprava zlúčeniny 2-8 z tabulky 2

500 mg odpovedajúceho oximu obecného vzorca 2, kde R¹ predstavuje cyklobutylskupinu a R² predstavuje hydroxyskupinu, sa rozpustí v 5 ml acetónu. K acetónovému roztoku sa pridá

0, IM vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného ( 0,224 g v 2,5 ml vody ) . Výsledná zmes sa ochladí na 0 °C a pridá sa k nej roztok p-toluénsulfonylchloridu (0,255 g) v acetóne (2,5 ml) ochladený na 0°C. Reakčná zmes sa cez noc mieša a potom ·· ···· · ·· ·· ·· · ···· ··· • · · ····· • · · · ··· ··· ·· ·· ··· ·· ·· ··· spracuje dekantáciou do 25 ml zmesi metylénchloridu a vody v pomere 1:1. Hodnota pH výslednej zmesi sa za použitia IM hydroxidu sodného nastaví na 9 a získaná zmes sa extrahuje 3 x 20 ml metylénchloridu, vysuší síranom sodným, prefiltruje a filtrát sa skoncentruje, tým sa získa pevný produkt. Tohto produktu (0,485 g) sa použije v nasledujúcom stupni bez ďalšieho prečistenia.

Tabuľka 3

Príklad	R¹	R²	Postup prípravy	Výťažok ( % )	MS
3-1	izopropyl	H	4	93	733
3-2	cyklopropyl	H	3	10	731
3-3	sek.butyl	H	4	45	747
3-4	cyklobutyl	H	4	84	745
3-5	cyklopentyl	H	3	88	759
3-6	cyklopropyl	OH	4	92	747
3-7	cyklobutyl	OH	4	90	761

Postup prípravy 3 až 165 mg odpovedajúceho imidátu obecného vzorca 3 sa rozpustí v ladovej kyseline octovej. K vzniklému roztoku sa pridá katalytický oxid platičitý (50 % mol.). Reakčná zmes sa prepláchne dusíkom a zatrasie za tlaku vodíka pri 343,5 kPa pri teplote miestnosti po dobu 24 hodín a pridá sa k nej ďalší katalytický oxid platičitý (50 % mol.;. Reakčná zmes sa prepláchne dusíkom a v traseniu za tlaku vodíku pri 343,5 kPa pri teplote miestnosti sa pokračuje ďalších 24 až 48 hodín.

Potom sa reakčná zmes spracuje filtráciou cez celit.

K filtrátu sa pridá 25 ml vody a pH vodnej zmesi so IM hydroxidom sodným nastaví na 9 až

10. Výsledná zmes sa extrahuje 3 x 25 ml metylénchloridu, prefiltruje a filtrát sa skoncentruje.

vysuší síranom sodným,

Získa sa pevný produkt, zmes, ktorá obsahuje azalid obecného vzorca 4 a laktám obecného vzorca 5. Izolácia sa prevádza preparatívnou vysokotlakou kvapalinovou chromatografiou.

Postup prípravy 4 až 250 mg odpovedajúceho imidátu obecného vzorca 3 sa rozpustí v tetrahydrofuráne a etylénglykole. Výsledný roztok sa ochladí na 0 až 5 °C a pridá sa k nemu tetrahydroboritan sodný (5 až 10 ekv.). Reakčná zmes sa 4 hodiny mieša pri 0 až 5 °C, potom zohreje na teplotu miestnosti a spracuje dekantáciou do 10 ml zmesi metylénchloridu a vody v pomere 1 : 1. Vodná vrstva sa reextrahuje 3 x 5 ml metylénchloridu. Organické vrstvy sa spoja a vysuší síranom sodným. Po filtrácii a skoncentrovaní sa získa pevný produkt.

Príprava zlúčeniny 3-1 z tabulky 3 ·· ···· · ·· ·· ·· · ···· ··· • · · ····· • · · · ··· ··· ·· ·· ··· ·· ·· ···

150 mg odpovedajúceho imidátu obecného vzorca 3, kde R¹predstavuje izopropylskupinu a R² predstavuje vodík, sa rozpustí v 3,75 ml tetrahydrofuránu a 7,5 ml etylénglykolu. Výsledný roztok sa ochladí na 0 až 5 °C a pridá sa k nemu tetrahydroboritan sodný (0,039 g). Reakčná zmes sa 6 hodín mieša pri 0 až 5 °C, potom zohreje na teplotu miestnosti a spracuje dekantáciou do 10 ml zmesi metylénchloridu a vody v pomere 1 : 1. Vodná vrstva sa reextrahuje 3 x 5 ml metylénchloridu. Organické vrstvy sa spoja a vysuší síranom sodným. Po filtrácii a skoncentrovaní sa získa pevný produkt (0,149 g).

Príprava zlúčeniny 3-2 z tabulky 3

165 mg odpovedajúceho imidátu obecného vzorca 3, kde R¹predstavuje cyklopropylskupinu a R² predstavuje vodík, sa rozpustí v ľadovej kyseline octovej (20 ml) . K vzniklému roztoku sa pridá katalytický oxid platičitý (0,028 g, 50 % mol.). Reakčná zmes sa prepláchne dusíkom a zatrasie za tlaku vodíka 343,5 kPa pri teplote miestnosti po dobu 24 hodín a pridá sa k nej ďalší katalytický oxid platičitý (50 % mol.). Reakčná zmes sa prepláchne dusíkom a v traseniu za tlaku vodíka pri 343,5 kPa pri teplote miestnosti sa pokračuje ďalších 24 hodín. Potom sa reakčná zmes spracuje filtráciou cez celit. K filtrátu sa pridá 25 ml vody a pH vodnej zmesi s IM hydroxidom sodným nastaví na 9. Výsledná zmes sa extrahuje 3 x 25 ml metylénchloridu, vysuší síranom sodným, prefiltruje a filtrát sa skoncentruje. Získa sa pevný produkt, zmes, ktorá obsahuje azalid obecného vzorca 4 a laktám obecného vzorca 5. Izolácia sa prevádza preparatívnou vysokotlakou kvapalinovou chromatografiou (0,019 g).

•· ···· • · · · • β β

Príprava zlúčeniny 3-3 z tabulky 3 ·· ·« • · · · · • · · · • ·· ·· · mg odpovedajúceho imidátu obecnéno vzorca 3, kde R¹predstavuje sek.butylskupinu a R² predstavuje vodík, sa rozpustí v 0,275 ml tetrahydrofuránu a 0,55 ml etylénglykolu. Výsledný roztok sa ochladí na 0 až 5 °C a pridá sa k nemu tetrahydroboritan sodný (0,003 g). Reakčná zmes sa 6 hodín mieša pri 0 až 5 °C, potom zohreje na teplotu miestnosti a spracuje dekantáciou do 10 ml zmesi metylénchloridu a vody v pomere 1 : 1. Vodná vrstva sa reextrahuje 3 x 5 ml metylénchloridu. Organické vrstvy sa spoja a vysuší síranom sodným. Po filtrácii a skoncentrovaní sa získa pevný produkt (0,005 g) .

Príprava zlúčeniny 3-4 z tabulky 3

250 mg odpovedajúceho imidátu obecného vzorca 3, kde R¹predstavuje cyklobutylskupinu a R² predstavuje vodík, sa rozpustí v 3,83 ml tetrahydrofuránu a 5,0 ml etylénglykolu. Výsledný roztok sa ochladí na 0 až 5 °C a pridá sa k nemu tetrahydroboritan sodný (0,191 g). Reakčná zmes sa 6 hodín mieša pri 0 až 5 °C, potom zohreje na teplotu miestnosti a spracuje dekantáciou do 10 ml zmesi metylénchloridu a vody v pomere 1 : 1. Vodná vrstva sa reextrahuje 3 x 5 ml metylénchloridu. Organické vrstvy sa spoja a vysuší síranom sodným. Po filtrácii a skoncentrovaní sa získa pevný produkt (0,201 g) .

Príprava zlúčeniny 3-5 z tabulky 3 mg odpovedajúceho imidátu obecnéhc vzorca 3, kde R¹ predstavuje cyklopentylskupinu a R² predstavuje vodík, sa rozpustí v ladovej kyseline octovej (10 ml) . K vzniklému roztoku sa pridá katalytický oxid platičitý (0,006 g, 50 %

·· • · • ·	···· • •	• • · · • ·	·· • •	• · • · • ♦	··
• ·	• ·	• ·	•	• ·
··	··	···	··	• ·	• ·

mol.). Reakčná zmes sa prepláchne dusíkom a zatrasie za tlaku vodíka 343,5 kPa pri teplote miestnosti po dobu 24 hodin a pridá sa k nej ďalší katalytický oxid platičitý (50 % mol.). Reakčná zmes sa prepláchne dusíkom a v traseniu za tlaku vodíka pri 343,5 kPa pri teplote miestnosti sa pokračuje ďalších 24 hodín. Potom sa reakčná zmes spracuje filtráciou cez celit. K filtrátu sa pridá 25 ml vody a pH vodnej zmesi s IM hydroxidom sodným nastaví na 9. Výsledná zmes sa extrahuje 3 x 25 ml metylénchloridu, vysuší síranom sodným, prefiltruje a filtrát sa skoncentruje. Získa sa pevný produkt, zmes, ktorá obsahuje azalid obecného vzorca 4 a laktám obecného vzorca 5. Izolácia sa prevádza preparatívnou vysokotlakou kvapalinovou chromatografiou (0,037 g).

Príprava zlúčeniny 3-6 z tabuľky 3 mg odpovedajúceho imidátu obecného vzorca 3, kde R¹predstavuje cyklopropylskupinu a R² predstavuje hydroxyskupinu, sa rozpustí v 0,6 ml tetrahydrofuránu a 1,8 ml etylénglykolu. Výsledný roztok sa ochladí na 0 až 5 °C a pridá sa k nemu tetrahydroboritan sodný (0,046 g). Reakčná zmes sa 6 hodín mieša pri 0 až 5 ’C, potom zohreje na teplotu miestnosti a spracuje dekantáciou do 10 ml zmesi metylénchloridu a vody v pomere 1 : 1. Vodná vrstva sa reextrahuje 3 x 5 ml metylénchloridu. Organické vrstvy sa spoja a vysuší síranom sodným. Po filtrácii a skoncentrovaní sa získa pevný produkt (0,055 g) .

Príprava zlúčeniny 3-7 z tabuľky 3

250 mg odpovedajúceho imidátu obecného vzorca 3, kde R¹ predstavuje cyklobutylskupinu a R² predstavuje hydroxyskupinu, sa rozpustí v 3,75 ml tetrahydrofuránu a 5,0 ml etylénglykolu.

Výsledný roztok sa ochladí na 0 až 5 ’C a pridá sa k nemu ·· ···· • ···· · ·· · · · ··· • · · 9 99

9 9 9 9 99

9 9 9 99

999 99 99999 tetrahydroboritan sodný (0,187 g). Reakčná zmes sa 6 hodín mieša pri 0 až 5 °C, potom zohreje na teplotu miestnosti a spracuje dekantáciou do 10 ml zmesi metylénchloridu a vody v pomere 1 : 1. Vodná vrstva sa reextrahuje 3 x 5 ml metylénchloridu. Organické vrstvy sa spoja a vysuší síranom sodným. Po filtrácii a skoncentrovaní sa získa pevný produkt (0,226 g).

Údaje z NMR zlúčenín, ktoré spadajú do rozsahu obecného vzorca 5 sú znázornené v asledujúcich tabulkách 3A a 3B.

Tabulka 3A

T T

H,C_{X z}CH₃

Uhlík č.	“C - ppm	‘H - ppm
1	178,89	-
2	45,92	2,84
3	78,39	4,37
4	42,58	1,98
5	84,03	3,69
6	74,48	-
7	42,78	1,80 1,42
B	29,84	1,87
S	57_f55	3,14 1,96
10	57_;42	2,68

100

• ··	··	•
·· ·	•	•	•	··
• ·	•	•	•	•
• ·	• ·	•	•	•
• ·	•	•	•	•
···	··		··	···

Uhlík č.	^WC - ppm	Ή-ppm
11	73,24	3,50
12	75,25	-
13	78,48	4,87
14	34,91	2,89
15	25,84	2,01 1.95
16	19,64	1,92 1.76
17	26,90	2,04 1,91
18	15,68	1-28
19	9,69	1,12
20	27,58	1,37
21	22,48 '	1,02
22	14,18	U4
23	17,30	1,10
24	-	-
ľ	103,51	4.49
2'	71,27	3.30
3’	66,21	2.54
4’	29.36 1	1J5 1,30
5‘	69,24	3.57
6'	21,79	1,28
7’	40,84	2,37
r	95,52	5,14
2”	35,24	2,40 1,64
3	73,39	-
4	78,55	3,10
5“	68,05	4,13
6’	18.73	1,38
7‘	49.91 f	3,40

·· ····

Uhlík č.	“C-ppm	‘H - ppm
B	22,04	1,30

Tabuľka 3 E;

Uhlík č.	'‘c-ppm	’H - ppm
1	178,71	-
2	45,77	2,84
3	79,20	4,31
4	42,04	2,05
5	84,33	3,70
6	74,49	-
7	42,82	1,77 1,43
8	30,13	1,86
S	57,57	3,11 1,99
10	57,49	2,59
11	73,92	3,31
12	38,60	1,64
13	7^07	5,12
14	41,71	2,16
15	2^90	1,70 1,2Ó
16	25,67	1,69 1,55
17	25,49	1,69 1,54

• ·· ·· ·· · · · · · • · · · · • ·· • · · • ·· • · ·· ·· ··

102 ·· ···· • · · · · ··· ·· ·· ·

Uhlík č.	’C - ppm	Ή - ppm
18	31,10	1,74 1,27
19	15,75	1,25
20	9,72	1,10
21	27,62	1,36
22	22,49	1,00
23	12,79	1,11
24	9,81	0,86
ľ	103,50	4,50
2'	71,41	3,28 f
3'	66,05	2,52
4’	29,40	1,71 1,28
5'	69,15	3,56
6*	21,81	1,27
7'	40,81	2,34
r	95,81	5,09
2	35,37	2,38 1,61
3*	73,41	-
4	78,54	3,07
5	66,05	4,10
6	18,75	1,36
7“	49,86	3,37
8*	22,04	1,28 f

Tabuľka 4

o

103

Príklad	R¹	R²	Postup prípravy	Výťažok ( % )	MS
4-1	izopropyl	H	5	92	747
4-2	cyklopropyl	OH	5	95	761

Postup prípravy 5

Odpovedajúci azalid obecného vzorca 5 sa rozpustí v chloroformu. K vzniklému roztoku sa pridá 37% formaldehyd (3,0 ekv.) a kyselina mravčia (3,0 ekv.). Výsledný roztok sa mieša 12 až 24 hodín pri 45 až 50 °C. Reakčná zmes sa potom skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa rozpustí v 1 až 2 ml metylénchloridu a k metylénchloridovému roztoku sa pridá 2 až 5 ml nasýteného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Vrstvy sa oddelia a vodná vrstva sa reextrahuje rovnakým objemom metylénchloridu. Organické vrstvy sa spoja, vysuší síranom sodným, prefiltrujú a filtrát sa skoncentruje. Izoluje sa pevná látka.

Príprava zlúčeniny 4-1 z tabúlky 4 mg odpovedajúceho azalidu obecného vzorca 5, kde R¹predstavuje izopropylskupinu a R² predstavuje vodík, sa rozpusti v 1,0 ml chloroformu. K vzniklému roztoku sa pridá 37% formaldehyd (7,5 μΐ, 3,0 ekv.)) a kyselina mravčia (10,5 μΐ, 3,0 ekv.). Výsledný roztok sa mieša 12 až 24 hodín pri 45 až 50 °C. Reakčná zmes sa potom skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa rozpustí v 2 ml metylénchloridu a k metylénchloridovému roztoku sa pridá 5,0 ml nasýteného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Vrstvy sa oddelia ·· ·· • · · · · • · · ·

104 ·· ···· • · · • · · ·· ·· • ·· ·· · a vodná vrstva sa reextrahuje rovnakým objemom metylénchloridu. Organické vrstvy sa spoja, vysuší síranom sodným, prefiltrujú a filtrát sa skoncentruje. Izoluje sa pevná látka (0,023 g).

Príprava zlúčeniny 4-2 z tanulky 4 mg odpovedajúceho azalidu obecného vzorca 5, kde R¹predstavuje cyklopropylskupinu a R² predstavuje hydoxyskupinu, sa rozpustí v 2,0 ml chloroformu. K vzniklému roztoku sa pridá 37% formaldehyd (6 μΐ, 3,0 ekv.)) a kyselina mravčia (8,5 μΐ, 3,0 ekv.) . Výsledný roztok sa mieša 12 až 24 hodín pri 45 až 50 °C. Reakčná zmes sa potom skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa rozpusti v 2 ml metylénchloridu a k metylénchloridovému roztoku sa pridá 5,0 ml nasýteného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Vrstvy sa oddelia a vodná vrstva sa reextrahuje rovnakým objemom metylénchloridu. Organické vrstvy sa spoja, vysuší síranom sodným, prefiltrujú a filtrát sa skoncentruje. Izoluje sa pevná látka (0,019 g).

Tabuľka 5

O (2a)

105

Príklad	R¹	R²	Postup prípravy
1	izopropyl	H	6
2	cyklopropyl	H	6
3	sek.butyl	H	6
4	cyklobutyl	H	6
5	cyklopentyl	H	6
6	metyltioetyl	H	6
7	furyl	H	6
8	cyklopropyl	OH	6
9	cyklobutyl	OH	6

Postup prípravy 6

Odpovedajúci oxim obecného vzorca 2 sa rozpustí v etanolu. K vzniklému roztoku sa pridá monohydrát hydroxydu lítneho (2 ekv.). Reakčná zmes sa cez noc mieša pri teplote miestnosti a skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa rozdelí medzi vodný roztok chloridu sodného a etylacetát. Hodnota pH reakčnej zmesi sa nastaví na 9 až 10. Reakčná zmes sa extrahuje etylacetátom. Extrakt sa vysuší síranom sodným. Získajú sa izoméry Z a E v pomere 4 : 1. Izoméry sa izolujú chromatograficky alebo kryštalizáciou z nitrometánu.

Tabulka 6

O

106

Príklad	R¹	R²	Postup prípravy
1	izopropyl	H	7
2	cyklopropyl	H	7
3	sek.butyl	H	7
4	cyklobutyl	H	7
5	cyklopentyl	H	7
6	metyltioetyl	H	7
7	furyl	H	7
8	cyklopropyl	OH	7
9	cyklobutyl	OH	7

Postup prípravy 7

Odpovedajúci oxim obecného vzorca 2a sa rozpustí v acetóne. K acetónovému roztoku sa pridá O,1M vodný roztok hydrogenuhličitanu sodného (2 ekv.). Výsledná zmes sa ochladí na 0 až 5°C a pridá sa k nej O,1M roztok ptoluénsulfonylchloridu v acetóne, Reakčná zmes sa cez noc mieša a potom spracuje dekantáciou do 25 ml zmesi metylénchloridu a vody v pomere 1:1. Hodnota pH zmesi sa IM hydroxidom sodným nastaví na 9 až 10 a vzniklá zmes sa extrahuje 3 x 20 ml metylénchloridu. Extrakt sa vysuší síranom sodným, prefiltruje a filtrát skoncentruje. Získa sa pevný produkt, ktorého sa použije v nasledujúcom stupni bez ďalšieho prečistenia.

·· ···· • · · · • · ·

107

Tabuľka 7

Príklad	R¹	R²	Postup prípravy
1	izopropyl	H	8
2	cyklopropyl	H	8
3	sek.butyl	H	8
4	cyklobutyl	H	8
5	cyklopentyl	H	8
6	metyltioetyl	H	8
7	furyl	H	8
8	cyklopropyl	OH	9
9	cyklobutyl	OH	9

Postup prípravy 8

Odpovedajúci imidát obecného vzorca 3a sa rozpustí v ľadovej kyseline octovej. K vzniklému roztoku sa pridá katalytický oxid platičitý (50 % mol.). Reakčná zmes sa prepláchne dusíkom a zatrasie za tlaku vodíka pri 343,5 kPa ·· ···· • · · • · ·

108 pri teplote miestnosti po dobu 24 hodín a pridá sa k katalytický oxid platičitý (50 % mol.,'. Reakčná prepláchne dusíkom a v traseniu za tlaku vodíku pri teplote

Potom sa

K filtrátu hydroxidom extrahuje 3 prefiltruje Izolácia sa ·· ·· • · · · · • · ·e • · ·· • ·· ··· nej ďalší zmes sa miestnosti sa pokračuje reakčná zmes spracuje ďalších 24 filtráciou pri až

343,5 kPa cez hodín.

celit.

sa pridá 25 ml vody a sodným nastaví na 9 až x 25 ml pH vodnej zmesi so IM a filtrát

10. Výsledná zmes sa vysuší síranom sodným, Získa sa pevný produkt.

prevádza chromatografiou.

metylénchloridu, sa skoncentruje.

preparatívnou vysokotlakou kvapalinovou

Postup prípra vy 9

Odpovedajúci imidát obecného vzorca ml metanolu. Vzniklý roztok sa ochladí na sa rozpusti v 0,5 0 až 5 °C a pridá

Reakčná zmes sa 4 sa k nemu tetrahydroboritan sodný (10 ekv.).

až 5 °C, zohreje na teplotu miestnosti, potom spracuje dekantáciou do 10 ml zmesi hodiny mieša pri cez noc mieša a vody v pomere 1:1.

metylénchloridu a použitia IM hydroxidu sodného nastaví extrahuj e 3 x Po filtrácii ml metylénchloridu a a skoncentrovaní sa

Prečistenie sa prevádza chromatografiou.

Hodnota pH zmesi sa za na 8 až 9 a zmes sa vysuší získa vysokotlakou síranom sodným, pevný produkt.

kvapalinovou

9 9

9 ·· ···· • · · • · ·

109

999

99

99 • · ·9

9999

99

99999

99

99999

Tabuľka 8

Príklad	R¹	R²	Postup prípravy
1	izopropyl	H	10
2	cyklopropyl	H	10
3	sek.butyl	H	10
4	cyklobutyl	H	10
5	cyklopentyl	H	10
6	metyltioetyl	H	10
7	furyl	H	10
8	cyklopropyl	OH	10
9	cyklobutyl	OH	10

P o	stup	príprav y	10
Odpovedajúci	azalid	obecného vzorca	5a	sa rozpusti
v chloroformu. K	chloroformovému roztoku	sa	pridá	37%

formaldehyd (1,0 ekv.) a kyselina mravčia (1,0 ekv.). Reakčný roztok sa mieša 48 až 72 hodín pri 45 až 50 °C. Výsledná zmes sa dekantuje do zmesi chloroformu a vody v pomere 1 : 1.

Hodnota pH zmesi sa IM hydroxidom sodným nastaví na 9 až 10 a

110

• · • •	• •	···· • •	• ·· · • ·	·· • •	··	• ·
• •	• •
•	•	• ·	• ·	•	•	•
··		··	···	··	··		··

zmes sa extrahuje chloroformom, vysuší síranom sodným, prefiltruje a skoncentruje. Získa sa pevný produkt. Izolácia sa prevádza chromatografiou na silikagéle alebo vysokotlakou kvapalinovou chromatografiou.

Postup prípravy 11

100 až 200 mg odpovedajúceho azalidu sa rozpustí v roztoku metanolu (5 až 10 ml) a acetylchloridu (2,6 ekv.). Výsledná zmes sa mieša cez noc pri teplote miestnosti a skoncentruje za zníženého tlaku. Zvyšok sa vyberie do malého množstva metanolu (1 ml) . Vzniklá zmes sa zohrieva a zmieša s horúcim cyklohexánom (10 ml) a potom ochladí na teplotu miestnosti. Produkt sa izoluje filtráciou.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY ·· B···

1. Makrolidové zlúčeniny obecného vzorca I kde

R²⁰ predstavuje vodík alebo skupinu obecného ·· /y ··

Y predstavuje vodík, alkylskupinu s 1 až 10 atómami uhlíka, alkenylskupinu s 2 až 10 atómami uhlíka, alkynylskupinu s 2 až 10 atómami uhlíka, skupinu -(CH₂)m^-aryl s 6 až 10 atómami uhlíka v arylovej časti, - (CH₂) _m-(päť- až desaťčlánkový heteroaryl), kde m predstavuje celé číslo 0 až 4, pritom alkyl-, alkenyl-, aryl-, heteroaryl- a alkynyl- skupina sú poprípade substituované 1 až 3 substituentmi nezávisle zvolenými zo súboru zostávajúceho z halogénu, kyanoskupiny, nitroskupiny, trifluórmetylskupiny, azidoskupiny, -C (O) R²¹, -OC(O)R²¹, -NR²¹C(O)R²², -C(O)NR²¹R²², -NR²¹R²², hydroxyskupiny, alkylskupiny s L až 6 atómami uhlíka,

112

·· • · • e ···· • • • ·· ·· · · • · · ·· • · • · ·· • · • · • · · • · ·· ·· ··· ·· ·· ··

alkoxyskupiny s 1 až 6 atómami uhlíka, arylskupiny s 6 až 10 atómami uhlíka a päť- ólž desaťčlánkovej heteroarylskupiny;

R¹ predstavuje alfa-rozvetvenú alkyl·-, alkenyl-, alkynyl-, alkoxyalkyl- alebo alkyltioalkylskupinu, z ktorých každá obsahuje 3 až 8 atómov uhlíka a je po prípade substituovaná jednou alebo viacej hydoxyskupinami; cykloalkylalkylskupinu s 5 až 8 atómami uhlíka v cykloalkylovej časti, pritom alkylová časť je alfa-rozvetvená a obsahuje 2 až 5 atómov uhlíka; cykloalkylskupinu s 3 až 8 atómami atómami uhlíka alebo cykloalkenylskupinu s 5 až 8 atómami uhlíka, z ktorých každá je poprípade substituovaná metylskupinou alebo jednou alebo viacej hydroxyskupinami alebo jednou alebo viacej alkylskupinami s 1 až 4 atómami uhlíka alebo atómami halogénu; alebo troj- až šesťčlánkový heterocyklický kruh obsahujúci kyslík alebo síru, ktorý môže byť nasýtený alebo celý alebo čiastočne nenasýtený a môže byť poprípade substituovaný jednou alebo viacej alkylskupinami s 1 až 4 atómami uhlíka alebo halogénu; alebo

R¹ predstavuje fenylskupinu, ktorá je poprípade substituovaná aspoň jedným substituentom zvoleným zo súboru zostávajúceho z alkylskupiny s 1 až 4 atómami uhlíka, alkoxyskupiny s 1 až 4 atómami uhlíka a alkyltioskupiny s 1 až 4 atómami uhlíka, atómov halogénu, hydroxyskupiny, trifluórmetylskupiny a kyanoskupiny; alebo

R¹ môže predstavovať skupinu obecného vzorca a

113 ·· ···· • ·· •t · • · ·· • · ·· ·· ·· x

a, b

R¹ kde predstavuje kyslík, síru alebo skupinu -CH₂-;

c a d predstavuje každý nezávisle celé číslo 0 až 2, pritom súčet a+b+c+dje menší alebo rovný 5; alebo predstavuje skupinu obecného vzorca CH₂R²⁴, kde R²⁴predstavuje vodík, alkylskupinu s 2 až 8 atómami uhlíka, alkenylskupinu s 2 až 8 atómami uhlíka, alkynylskupinu s 2 až 8 atómami uhlíka, alkoxyalkyl- alebo alkyltioalkylskupinu stále s 1 až 6 atómami uhlíka v každej z alifatických časti, pritom akákoľvek z uvedených alkyl-, alkoxy-, alkenyl- alebo alkynylskupín môže byť substituovaná jednou alebo viacej hydroxyskupinami alebo jedným alebo viacej atómami halogénu; alebo cykloalkylskupinu s 3 až 8 atómami uhlíka alebo cykloalkenylskupinu s 5 až 8 atómami uhlíka, z ktorých každá môže byť prípadne substituovaná metylskupinou alebo jednou alebo viacej alkylskupinami s 1 až 4 atómami uhlíka alebo atómami halogénu; alebo troj- až šesťčlánkový heterocyklický kruh obsahujúci kyslík alebo síru, ktorý môže byť nasýtený alebo celý alebo čiastočne nenasýtený a môže byť poprípade substituovaný jednou alebo viacej alkylskupinami s 1 až 4 atómami uhlíka

114

·· ··· • ·· ·· • • • ·· · • • · ·· • • • • · • • • • • • · • · • • • ·· ·· ··· ·· ·· ··

alkylskupinu s 1
2 až 8 atómami až 8 atómami uhlíka, uhlíka,

2 až 8 atómami uhlíka,cykloalkylatémami uhlíka, alebo alebo atómami halogénu; alebo skupinu SR²³, kde

R²³ predstavuje alkenylskupinu alkynylskupinu skupinu s 3 až cykloalkenylskupinu s 5 až 8 atómami uhlíka, fenylskupinu alebo substituovanú fenylskupinu, kde substituentom je alkylskupina s 1 až 4 atómami uhlíka, alkoxyskupina s 1 až 4 atómami uhlíka alebo troj- až šesťčlánkový kruh obsahujúci kyslík alebo síru, nasýtený alebo celý alebo čiastočne alebo halogén, heterocyklický ktorý môže byť nenasýtený a môže byť poprípade substituovaný jednou alebo viacej alkylskupinami s 1 až 4 atómami halogénu; a

R² predstavuje vodík alebo hydroxyskupinu;

R³ predstavuje vodík, hydroxyskupinu alebo skupinu OCH3;

R⁴ predstavuje -C(O)NR⁹R¹⁰ vodík, skupinu -C (O) R⁹, -C (O) OR⁹, alebo ochraňujúcu skupinu hydroxyskupiny;

R⁵ predstavuje skupinu vzorca -SR⁸, - (CH₂) _nC (O) R⁸, kde n predstavuje číslo 0 alebo 1, alkylskupinu s 1 až 10 atómami uhlíka, uhlíka, alkenylskupinu s 2 až 10 atómami alkynylskupinu s 2 až 10 atómami uhlíka, ^-(CH2)_m-aryl s 6 až 10 atómami uhlíka v skupinu arylovej časti alebo - (CH₂) _m“ (päť- až desaťčlánkový heteroaryl), kde m predstavuje celé číslo 0 až 4, pritom vyššie uvedené skupiny R⁵ sú poprípade substituované jednou až tromi skupinami R¹⁶;

R⁶ a

R⁷ predstavuje každý nezávisle vodík, hydroxyskupinu, ·· ···· · ·· ·· • · · ·· · · ··· • · · ·····

115 • · · · ··· ·· · ·· ·· ··· ·· ·· ··· alkoxyskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, alkylskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, alkenylskupinu s 2 až 6 atómami uhlíka, alkynylskupinu s 2 až 6 atómami uhlíka alebo skupinu -(CH₂)_m-aryl s 6 až 10 atómami uhlíka v arylovej časti alebo

- (CH₂)_m-(päť- až desaťčlánkový heteroaryl), kde m predstavuje celé číslo 0 až 4;

R⁸ predstavuje vždy nezávisle vodík, alkylskupinu s 1 až 10 atómami uhlíka, alkenylskupinu s 2 až 10 atómami uhlíka, alkynylskupinu s 2 až 10 atómami uhlíka, skupinu - (CH₂) qCRⁿR¹² (CH₂) _rNR¹³R¹⁴ , kde q a r predstavujú každý nezávisle celé číslo 0 až 3, pritom však q a r nepredstavujú oba číslo 0,

- (CH₂)_m-aryl s 6 až 10 atómami uhlíka v arylovej časti alebo - (CH₂) _m- (päť- až desaťčlánkový heteroaryl), kde m predstavuje celé číslo 0 až 4, pritom vyššie uvedené skupiny R⁸ , okrem vodíka,, sú poprípade substituované jednou až tromi skupinami R¹⁶; alebo ak je v skupine -CH₂NR⁸R¹⁵, môžu byť R¹⁵ a R⁸ zobraté dokopy za vzniku stvor- až desať článkového monocyklického alebo polycyklického nasýteného kruhu alebo päť- až desaťčlánkového heteroarylového kruhu, pritom nasýtený kruh a heteroarylový kruh okrem dusíka, ku ktorému sú R¹⁵ a R⁸ viazané, poprípade obsahujú 1 až 2 heteroatómy zvolené z kyslíka, síry a skupiny -N(R⁸)- , pritom nasýtený kruh poprípade obsahuje obsahuje jednu alebo dve dvojité alebo trojité väzby uhlík- uhlík, a prirom nasýtený heteroarylový kruh sú poprípade substituované 1 až 3 skupinami R¹⁶;

R⁹ a R¹⁰ predstavuje každý nezávisle vodík alebo alkylskupinu ······ · ·· ·· ·· · ·· · · ··· • · · ·····

116 • · · · ······ ·· ·· ··· ·· ·· ··· s 1 až 6 atómami uhlika;

R¹¹, R¹², R¹³ a R¹⁴ sú vždy nezávisle zvolené zo súboru zostávajúceho z vodíka, alkylskupiny s 1 až 10 atómami uhlíka, skupiny - (CH₂) _m-aryl s 6 až 10 atómami uhlíka v arylo^^ej časti a - (CH₂) _m-(päť- až desaťčlánkový heteroaryl), kde m predstavuje celé číslo 0 až 4, pritom skupiny vo význame R¹¹, R¹², R¹³ a R¹⁴ , okrem vodíka, sú poprípade substituované 1 až 3 skupinami R¹⁶; alebo

R¹¹ a R¹³ sú zobraté dokopy za vzniku skupiny -(CH₂)_P, kde p predstavuje celé číslo 0 až 3, tak preto vzniká stvor- až sedemčlánkový nasýtený kruh, ktorý poprípade obsahuje jednu alebo dve dvojité alebo trojité väzby uhlík-uhlík; alebo

R¹³ a R¹⁴ sú zobraté dokopy za vzniku stvor- až desaťčlánkového monocyklického alebo polycyklického nasýteného kruhu alebo päť- až desaťčlánkového heteroarylového kruhu, pritom nasýtený kruh a heteroarylový kruh okrem dusíka, ku ktorému sú R¹³ a R¹⁴ viazané, poprípade obsahujú 1 alebo 2 heteroatómy zvolené z kyslíka, síry a skupiny -N(R⁸)- ,pritom nasýtený kruh poprípade obsahuje jednu alebo dve dvojité alebo trojité väzby uhlík-uhlík, a pritom nasýtený a heteroarylový kruh sú poprípade substituované 1 až 3 skupinami R¹⁶;

R¹⁵ predstavuje vodík, alkylskupinu s 1 až 10 atómami uhlíka, alkenylskupinu s 2 až 10 atómami uhlíka alebo alkynylskupinu s 2 až 10 atómami uhlíka, pritom tieto skupiny vo význame R¹⁵ sú poprípade

117

Β· ···· · ·· ·· • · · ······ • · · · B · · 9 • · ·· ······ ···· · · · · · ·· ·· <·· ·· ··

substituované 1 až 3 substituentnii nezávisle zvolenými z halogénu a skupiny -CR⁹; R¹⁶ je vždy nezávisle zvolený zo súboru zostávajúceho z halogénu, kyanoskupiny, nitroskupiny, trifluórmetylskupiny, azidoskupiny, skupiny -C(O)R¹⁷, -C(O)OR¹⁷, -C(O)OR¹⁷, -OC(O)OR¹⁷, -NR⁶C(O)R⁷, -C(0)NR⁶R⁷, -NR⁶R⁷, hydroxyskupiny, alkylskupiny s 1 až 6 atómami uhlíka, alkoxyskupiny s 1 až 6 atómami uhlíka, skupiny - (CH₂) _m-aryl s 6 až 10 atómami uhlíka v arylovej časti a - (CH₂) _m-(päť- až desaťčlánkový heteroaryl),kde m predstavuje celé číslo 0 až 4, pritom arylový a heteroarylový substituent je poprípade substituovaný 1 až 2 substituentami nezávisle zvolenými zo súboru zostávajúceho z halogénu, kyanoskupiny, nitroskupiny, trifluórmetylskupiny, azidoskupiny, skupiny -C(O)R¹⁷, -C(O)OR¹⁷, -C(O)OR¹⁷, -0C(0)0R¹⁷, -NR⁶C(O)R⁷, -C(0)NR^sR⁷, -NR⁶R⁷, hydroxyskupiny, alkylskupiny s 1 až 6 atómami uhlíka a alkoxyskupiny s 1 až 6 atómami uhlíka, R¹⁷ je vždy nezávisle zvolený zo súboru zostávajúceho z vodíka , alkylskupiny s 1 až 10 atómami uhlíka, alkenylskupiny s 2 až 10 atómami uhlíka alebo alkynylskupiny s 2 až 10 atómami uhlíka a skupiny -(CH₂)_m-aryl s 6 až 10 atómami uhlíka v arylovej časti a - (CH₂) _m-(päť- až desaťčlánkový heteroaryl),kde m predstavuje celé číslo 0 až 4, pritom R⁸ nepredstavuje vodík, keď R¹⁹ predstavuje skupinu -CH₂S (O) _nR⁸; R¹⁸ predstavuje hydroxyskupinu;

• ·· ·· ·· · · · · · • · · 9 9

118 ·· ···· • · · • · · • e · · ·» ··

9 9 9 9 9

999 99 99 ·

R¹⁹ predstavuje alkylskupinu s 1 až 10 atómami uhlika, alkenylskupinu s 1 až 10 atómami uhlika, alkynylskupinu s 2 až 10 atómami uhlíka» kyanoskupinu, skupinu -CH₂S(O)_nR⁸, kde n predstavuje celé číslo 0 až 2, -CH2OR⁸, -CH2N(OR⁹)R⁸, -CHzNR⁸R¹⁵, - (CH2)_m-aryl s 6 až 10 atómami uhlika v arylovej časti a

- (CH₂)_ra(päť- až desaťčlánkový heteroaryl),kde m predstavuje celé číslo 0 až 4, pritom skupiny vo význame R¹⁹ sú poprípade substituované 1 až 3 skupinami R¹⁶; alebo

R¹⁸ a R¹⁹ sú zobraté dokopy za vzniku oxazolylového kruhu obecného vzorca a

R²¹ a R²² predstavuje každý nezávisle vodík, hydroxyskupinu, alkoxyskupinu s 1 až 6 atómami uhlika, alkylskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, alkenylskupinu s 2 až 6 atómami uhlíka, skupinu -(CH₂)_m-aryl s 6 až 10 atómami uhlíka v arylovej časti a -(CH₂)_m (päť- až desaťčlánkový heteroaryl), kde m predstavuje celé číslo 0 až 4, alebo alkylyl skupinu s 2 až 10 atómami uhlíka;

a ich farmaceutický vhodné soli.

2. Makrolidové zlúčeniny obecného vzorca II

119

·· ···· • ·· ·· • • • ·· · · • · ·· • • • • · · • · • • • · • · · • · ·· ·· ··· ·· ·· ··

kde (II)

R²⁰ predstavuje vodík alebo skupinu obecného vzorca

Y predstavuje vodík, alkylskupinu s 1 až 10 atómami uhlíka, alkenylskupinu s 2 až 10 atómami uhlíka, alkynylskupinu s 2 až 10 atómami uhlíka, skupinu - (CH₂)_n)-aryl s 6 až 10 atómami uhlíka v arylovej časti a ~(CH₂)_m (päť- až desaťčlánkový heteroaryl), kde m predstavuje celé číslo 0 až 4, pritom alkyl-, alkenyl-, aryl-, heteroaryl- a alkynyl- skupina sú poprípade substituované 1 až 3 substituentmi nezávisle zvolenými zo súboru zostávajúceho z halogénu, kyanoskupiny, nitroskupiny, trifiuórmetyl skupiny, azidoskupiny, -C(O)R²¹, -OC(O)R²¹, -NR²¹C (O)R²², -C (0)NR²¹R²², -NR²¹R²², hydroxyskupiny, alkylskupiny ·· ···· • · • · • · · ···· · · · ··· ····· ·· ·· ····♦· • · · · · · · · · ·· ·· ··· ·· ·· ·

120 s 1 až 6 atómami uhlíka, alkoxyskupiny s 1 až 6 atómami uhlika, arylskupiny s 6 až 10 atómami uhlika a päť až desaťčlánkové heteroarylskupiny;

R¹ predstavuje alfa-rozvetvenú alkyl·-, alkenyl-, alkynyl-, alkoxyalkyl- alebo alkyltioalkylskupinu, z ktorých každá obsahuje 3 až 8 atómov uhlíka a je poprípade substituovaná jednou alebo viacej hydroxyskupinani; cykloalkylalkylskupinu s 5 až 8 atómami uhlika v cykloalkýlovej časti, pritom alkylová časť je alfa-rozvetvená a obsahuje 2 až 5 atómov uhlíka; cykloalkylskupinu s 3 až 8 atómami uhlíka alebo cykloalkenylskupinu s 5 až 8 atómami uhlíka, z ktorých každá je poprípade substituovaná metylskupinou alebo jednou alebo viacej hydroxyskupinami alebo jednou alebo viacej alkylskupinami s 1 až 4 atómami uhlíka alebo atómami halogénu; alebo troj- až šesťčlánkový heterocyklický kruh obsahujúci kruh obsahujúci kyslík alebo síru, ktorý môže byť nasýtený alebo celý alebo časťou nenasýtený a môže byť poprípade substituovaný jednou alebo viacej alkylskupinami s 1 až 4 atómami uhlíka alebo atómami halogénu; alebo

R¹ predstavuje fenylskupinu, ktorá je poprípade substituovaná aspoň jedným substituentom zvoleným zo súboru zostávajúceho z alkylskupiny s 1 až 4 atómami uhlíka, alkoxyskupiny s 1 až 4 atómami uhlíka a alkyltioskupiny s 1 až 4 atómami uhlíka, atómov halogénu, hydroxyskupiny, trifluórmetylskupiny a kyanoskupiny; alebo

R¹ môže predstavovať skupinu obecného vzorca a (a) kde predstavuje kyslík, síru alebo skupinu -CH2-;

a, b, c a d predstavuje každý nezávisle celé číslo 0 až 2, pritom súčet a+b+c+d je menší alebo rovný 5;

alebo

R¹ predstavuje skupinu obecného vzorca CH₂R²⁴, kde R²⁴ predstavuje vodík, alkylskupinu s 1 až 8 atómami uhlíka, alkenylskupinu s 2 až E atómami uhlíka, alkynylskupiny s 2 až 8 atómami uhlíka, alkoxyalkylalebo alkyltioalkylskupinu vždy s 1 až 6 atómami uhlíka v každej z alifatických častí, pritom ktorákoľvek z uvedených alkyl-, alkoxy-, alkenylalebo alkynylskupin môže byť substituovaná jednou alebo viacej hydroxyskupinami alebo jedným alebo viacej atómami halogénu; alebo cykloalkylskupinu s 3 až 8 atómami uhlíka alebo cykloalkenylskupinu s 5 až 8 atómami uhlíka, z ktorých každá môže byť poprípade substituovaná metylskupinou alebo jednou alebo viacej alkylskupinami s 1 až 4 atómami uhlíka alebo atómami halogénu; alebo troj- až šesťčlánkový heterocyklický kruh obsahujúci kyslík alebo síru, ktorý môže byť nasýtený alebo celý alebo čiastočne nenasýtený a môže byť poprípade substituovaný jednou alebo viacej alkylskupinami s 1 až 4 atómami uhlíka alebo atómami halogénu; alebo skupinu SR²³, kde R²³ • · ·· ···· • · · · ·· • · · · · ·· • · · · · ·· ·· ·· ·····

122 predstavuje alkylskupinu s 1 až 8 atómami uhlíka, alkenylskupinu s 2 až 8 atómami uhlíka, alkynylskupinu s 2 až 8 atómami uhlíka, cykloalkylskupinu s 3 až 8 atómami uhlíka, cykloalkenylskupinu s 5 až 8 atómami uhlíka, fenylskupinu alebo substituovanú fenylskupinu, kde substituentom je alkylskupina s 1 až 4 atómami uhlíka, alkoxyskupina s 1 až 4 atómami uhlíka alebo halogén, alebo trojaž šesťčlánkový heterocyklický kruh obsahujúci kyslík alebo síru, ktorý môže byť nasýtený alebo celý alebo čiastočne nenasýtený a môže byť poprípade substituovaný jednou alebo viacej alkylskupinami s 1 až 4 atómami uhlíka alebo atómami halogénu; a

R² predstavuje vodík alebo hydroxyskupinu;

R³ predstavuje vodík, hydroxyskupinu alebo skupina OCH₃;

R⁴ predstavuje vodík, skupinu -C(O)R⁹, -C(O)OR⁹,

-C(O)NR⁹R¹⁰ alebo chrániacu skupinu hydroxyskupiny;

R⁹ a R¹⁰ predstavuje každý nezávisle vodík alebo alkylskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka;

R¹⁸ predstavuje hydroxyskupinu;

R¹⁹ predstavuje vodík; a

R²¹ a R²² predstavuje každý nezávisle vodík, hydroxyskupinu, alkoxyskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, alkylskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, alkenylskupinu s 2 až 6 atómami uhlíka , skupinu - (CH₂) _m-aryl s 6 až 10 atómami uhlíka v arylovej časti a - (CH₂) _m- (päť- až desaťčlánkový heteroaryl), kde m predstavuje celé

123 číslo od 0 do 4, alebo alkylylskupinu s 2 až 10 ·· ···· atómami uhlíka;

a ich farmaceutický vhodné soli.
3. Makrolidové zlúčeniny podlá nároku 1 obecného vzorca I, kde R²⁰ predstavuje skupinu obecného vzorca a

R¹ predstavuje izopropylskupinu, R² predstavuje vodík a R¹⁹predstavuje hydroxyskupinu;

R¹ predstavuje izopropylskupinu, R² predstavuje hydroxyskupinu a R¹⁹ predstavuje hydroxyskupinu;

R¹ predstavuje cyklopropylskupinu, R² predstavuje vodík a R¹⁹predstavuje hydroxyskupinu;

R¹ predstavuje cyklopropylskupinu, R² predstavuje hydroxyskupinu a R¹⁹ predstavuje hydroxyskupinu;

R¹ predstavuje sek.butylskupinu, R² predstavuje vodík a R¹⁹predstavuje hydroxyskupinu;

R¹ predstavuje sek.butylskupinu, R² predstavuje hydroxyskupinu a R¹⁹ predstavuje hydroxyskupinu;

R¹ predstavuje cyklobutylskupinu, R² predstavuje vodík a R¹⁹ predstavuje hydroxyskupinu;

R¹ predstavuje cyklobutylskupinu, R² predstavuje hydroxyskupinu a R¹⁹ predstavuje hydroxyskupinu;

124 ·· ···· • · • · • · · • · · · ·· ·· ·· ·· · • · · · ·· • · · · · • · · · · · • · · · · • e· ·· ···

R¹ predstavuje cyklopentylskupinu, R² predstavuje vodík a R¹⁹ predstavuje hydroxyskupinu;

R¹ predstavuje cyklopentylskupinu, R² predstavuje hydroxyskupinu a R¹⁹ predstavuje hydroxyskupinu;

R¹ predstavuje metyltioetylskupinu, R² predstavuje vodík a R¹⁹predstavuje hydroxyskupinu;

R¹ predstavuje metyltioetylskupinu, R² predstavuje hydroxyskupinu a R¹⁹ predstavuje hydroxyskupinu;

R¹ predstavuje 3-furylskupinu, R² predstavuje vodík a R¹⁹ predstavuje hydroxyskupinu;

R¹ predstavuje 3-furylskupinu, R² predstajni j e hydroxyskupinu a

R¹⁹ predstavuje hydroxyskupinu;

a ich farmaceutický vhodné soli.
4. Makrolidové zlúčeniny podía nároku 2 obecného vzorca II, kde R²⁰ predstavuje skupinu obecného vzorca predstavuje izopropylskupinu,

R² predstavuje vodík a R¹⁹ predstavuje hydroxyskupinu;

R¹ predstavuje izopropylskupinu, R² predstavuje hydroxyskupinu a R¹⁹ predstavuje hydroxyskupinu;

φφ ΦΦΦ· ·· ·· · ·· · φφ φ φ φ · ·· • · · ······ φ · ·· ······ · φ φ · φ φφφ ·· · • Φ φφ φφφ φφ ·· φφφ

125

R¹ predstavuje cyklopropylskupinu, R² predstavuje vodík a R¹⁹predstavuje hydroxyskupinu;

R¹ predstavuje cyklopropylskupinu,· R² predstavuje hydroxyskupinu a R¹⁹ predstavuje hydroxyskupinu;

R¹ predstavuje sek.butylskupinu, R² predstavuje vodík a R¹⁹ predstavuje hydroxyskupinu;

R¹ predstavuje sek.butylskupinu, R² predstavuje hydroxyskupinu a R¹⁹ predstavuje hydroxyskupinu;

R¹ predstavuje cyklobutylskupinu, R² predstavuje vodík a R¹⁹ predstavuje hydroxyskupinu;

R¹ predstavuje cyklobutylskupinu, R² predstavuje hydroxyskupinu a R¹⁹ predstavuje hydroxyskupinu;

R¹ predstavuje cyklopentylskupinu, R² predstavuje vodík a R¹⁹predstavuje hydroxyskupinu;

R¹ predstavuje cyklopentylskupinu, R² predstavuje hydroxyskupinu a R¹⁹ predstavuje hydroxyskuptnu;

R¹ predstavuje metyltioetylskupinu, R² predstavuje vodík a R¹⁹predstavuje hydroxyskupinu;

R¹ predstavuje metyltioetylskupinu, R² predstavuje hydroxyskupinu a R¹⁹ predstavuje hydroxyskupinu;

R¹ predstavuje 3-furylskupinu, R² predstavuje vodík a R¹⁹predstavuje hydroxyskupinu;

R¹ predstavuje 3-furylskupinu, R² predstavuje hydroxyskupinu a

R¹⁹ predstavuje hydroxyskupinu;

a ich farmaceutický vhodné soli.
5. Makrolidové zlúčeniny obecného vzorca 8 ·· ···· ·· ·· · ·· · ···· ···· • e · ······ ·· · · ······ · ···· ···*·· ·· ·· ··· ·· ·· ···

R¹ predstavuje alfa-rozvetvenú alkyl-, alkenyl-, alkynyl-, alkoxyalkyl- alebo alkyltioalkylskupinu, z ktorých každá obsahuje 3 až 8 atómov uhlíka a je poprípade substituovaná jednou alebo viacej hydroxyskupinani; cykloalkylalkylskupinu s 5 až 8 atómami uhlíka v cykloalkylovej časti, pritom alkylová časť je alfa-rozvetvená a obsahuje 2 až 5 atómov uhlíka; cykloalkylskupinu s 3 až 8 atómami uhlíka alebo cykloalkenylskupinu s 5 až 8 atómami uhlíka, z ktorých každá ;ie poprípade substituovaná metylskupinou alebo jednou alebo viacej hydroxyskupinami alebo jednou alebo viacej alkylskupinami s 1 až 4 atómami uhlíka alebo atómami halogénu; alebo troj- až šesťčlánkový heterocyklický kruh obsahujúci kruh obsahujúci kyslík alebo síru, ktorý môže byť nasýtený alebo celý alebo čiastočne nenasýtený a môže byť poprípade substituovaný jednou alebo viacej alkylskupinami s 1 až 4 atómami uhlíka alebo atómami halogénu; alebo

R¹ predstavuje fenylskupinu, ktorá je poprípade substituovaná aspoň jedným substituentom zvoleným zo súboru zostávajúceho z alkylskupiny s 1 až 4 atómami uhlíka a alkoxyskupiny s 1 až 4 atómami

127 uhlíka a alkyltioskupiny s 1 až 4 atómami uhlíka, atómov halogénu, hydroxyskupiny, trifluórmetylskupiny a kyanoskupiny; alebo ·· ····

R¹ môže predstavovať skupinu obecného vzorca a kde

X predstavuje kyslík, síru alebo skupinu -CH2-;

a, b, c a d predstavuje každý nezávisle celé číslo 0 až 2, pritom súčet a+b+c+d je menší alebo rovný 5; alebo

R¹ predstavuje skupinu obecného vzorca CH₂R²⁴, kde R²⁴ predstavuje vodík, alkylskupinu s 1 až 8 atómami uhlíka, alkenylskupinu s 2 až 8 atómami uhlíka, alkynylskupiny s 2 až 8 atómami uhlíka, alkoxyalkylalebo alkyltioalkylskupinu vždy s 1 až 6 atómami uhlíka v každej z alifatických častí, pritom akákolvek z uvedených alkyl-, alkoxy-, alkenylalebo alkynylskupín môže byť substituovaná jednou alebo viacej hydroxyskupinami alebo jedným alebo viacej atómami halogénu; alebo cykloalkylskupinu s 3 až 8 atómami uhlíka alebo cykloalkenylskupinu s 5 až 8 atómami uhlíka, z ktorých každá môže byť poprípade substituovaná metylskúpinou alebo jednou alebo viacej alkylskupinami s 1 až 4 atómami uhlíka alebo atómami halogénu; alebo troj- až šesťčlánkový • ·· ·· ·· · · « · · • · · · ·

128 ·· ···· • · · • · · • · · · ·· ·♦ • · · · · · ··· ·· ·· ·«· heterocyklický kruh obsahujúci kyslík alebo síru, ktorý môže byť nasýtený alebo celý alebo čiastočne nenasýtený a môže byť poprípade substituovaný jednou alebo viacej alkylskupinami s 1 až 4 atómami uhlíka alebo atómami halogénu; alebo skupinu SR²³, kde R²³predstavuje alkylskupinu s 1 až 8 atómami uhlíka, alkenylskupinu s 2 až 8 atómami uhlíka, alkynylskupinu s 2 až 8 atómami uhlíka, cykloalkylskupinu s 3 až 8 atómami uhlíka, cykloalkenylskupinu s 5 až 8 atómami uhlíka, fenylskupinu alebo substituovanú fenylskupinu, kde substituentom je alkylskupina s 1 až 4 atómami uhlíka, alkoxyskupina s 1 až 4 atómami uhlíka alebo halogén, alebo trojaž šesťčlánkový heterocyklický kruh obsahujúci kyslík alebo síru, ktorý môže byť nasýtený alebo celý alebo čiastočne nenasýtený a môže byť poprípade substituovaný jednou alebo viacej alkylskupinami s 1 až 4 atómami uhlíka alebo atómami halogénu; a

R² predstavuje vodík alebo hydroxyskupinu;

a ich farmaceutický vhodné soli.
6. Makrolidové zlúčeniny obecného vzorca 9

OH (9)

129

·· ·· • • · • 9 • · • 9 • • · 9 · 9 9 • · 9 • 9 • ·· 99 999

R¹ predstavuje alfa-rozvetvenú alkyl·-, alkenyl-, alkynyl-, alkoxyalkyl- alebo alkyltioalkylskupinu, z ktorých každá obsahuje 3 až 8 atómov uhlíka a je poprípade substituovaná jednou alebo viacej hydroxyskupinani; cykloalkylalkylskupinu s 5 až 8 atómami uhlíka v cykloalkýlovej časti, pritom alkylová časť je alfa-rozvetvená a obsahuje 2 až 5 atómov uhlíka; cykloalkylskupinu s 3 až 8 atómami uhlíka alebo cykloalkenylskupinu s 5 až 8 atómami uhlíka, z ktorých každá je poprípade substituovaná metylskupinou alebo jednou alebo viacej hydroxyskupinami alebo jednou alebo viacej alkylskupinami s 1 až 4 atómami uhlíka alebo atómami halogénu; alebo troj- až šesťčlánkový heterocyklický kruh obsahujúci kruh obsahujúci kyslík alebo síru, ktorý môže byť nasýtený alebo celý alebo čiastočne nenasýtený a môže byť poprípade substituovaný jednou alebo viacej alkylskupinami s 1 až 4 atómami uhlíka alebo atómami halogénu; alebo

R¹ predstavuje fenylskupinu, ktorá je poprípade substituovaná aspoň jedným substituentom zvoleným zo súboru zostávajúceho z alkylskupiny s 1 až 4 atómami uhlíka a alkoxyskupiny s 1 až 4 atómami uhlíka a alkyltioskupiny s 1 až 4 atómami uhlíka, atómov halogénu, hydroxyskupiny, trifluórmetylskupiny a kyanoskupiny; alebo

R¹ môže predstavovať skupinu obecného vzorca a (CHJb ‘(CH₂)_d (a)

130 kde

X predstavuje kyslík, síru alebo skupinu -CH₂-;

a, b, c a d predstavuje každý nezávisle celé číslo 0 až 2, pritom súčet a+b+c+d je menší alebo rovný 5; alebo

R¹ predstavuje skupinu obecného vzorca CH₂R²⁴, kde R²⁴ predstavuje vodík, alkylskupinu s 1 až 8 atómami uhlíka, alkenylskupinu s 2 až 8 atómami uhlíka, alkynylskupiny s 2 až 8 atómami uhlíka, alkoxyalkylalebo alkyltioalkylskupinu vždy s 1 až 6 atómami uhlíka v každej z alifatických častí, pritom ktorákolvek z uvedených alkyl-, alkoxy-, alkenylalebo alkynylskupín môže byť substituovaná jednou alebo viacej hydroxyskupinami alebo jedným alebo viacej atómami halogénu; alebo cykloalkylskupinu s 3 až 8 atómami uhlíka alebo cykloalkenylskupinu s 5 až 8 atómami uhlíka, z ktorých každá môže byť poprípade substituovaná metylskupinou alebo jednou alebo viacej alkylskupinami s 1 až 4 atómami uhlíka alebo atómami halogénu; alebo troj·- až šestčlánkový heterocyklický kruh obsahujúci kyslík alebo síru, ktorý môže byť nasýtený alebo celý alebo čiastočne nenasýtený a môže byť poprípade substituovaný jednou alebo viacej alkylskupinami s 1 až 4 atómami uhlíka alebo atómami halogénu; alebo skupinu SR²³, kde R²³predstavuje alkylskupinu s 1 až 8 atómami uhlíka, alkenylskupinu s 2 až 8 atómami uhlíka, alkynylskupinu s 2 až 8 atómami uhlíka, cykloalkylskupinu s 3 až 8 atómami uhlíka, cykloalkenylskupinu s 5 až 8 atómami uhlíka, fenylskupinu alebo

131 substituovanú fenylskupinu, kde substituentom je alkylskupina s 1 až 4 atómami uhlíka, alkoxyskupina s 1 až 4 atómami uhlíka alebo halogén, alebo trojaž šesťčlánkový heterocyklický kruh obsahujúci kyslík alebo síru, ktorý môže byť nasýtený alebo celý alebo čiastočne nenasýtený a môže byť poprípade substituovaný jednou alebo viacej alkylskupinami s 1 až 4 atómami uhlíka alebo atómami halogénu; a

R² predstavuje vodík alebo hydroxyskupinu;

a ich farmaceutický vhodné soli.
7. Farmaceutická kompozícia pre liečenie bakteriálnych infekcií alebo protozoálnych infekcií u cicavcov, rýb alebo vtákov, vyznačujúca sa tý m, že obsahuje terapeuticky účinné množstvo zlúčeniny podlá akéhokolvek z nárokov 1, 2, 3, 4, 5, alebo 6 alebo jej farmaceutický vhodnej soli a farmaceutický vhodný nosič.
8. Spôsob liečenia bakteriálnych alebo protozoálnych infekcii u cicavcov, rýb alebo vtákov, vyznačuj úci sa t ý m, že sa takémuto cicavcu, rybe alebo vtákovi podáva terapeuticky účinné množstvo zlúčeniny podľa akéhokoľvek z nárokov 1, 2, 3, 4, 5 alebo 6 alebo jej farmaceutický vhodné soli.
9. Spôsob výroby zlúčenín obecného vzorca 5 kde R¹ a R² majú význam uvedený v nároku 1, vyznačujú c i sa t ý m, že zlúčenina obecného vzcrca 3 kde R¹ a R² majú význam uvedený v nároku 1, nechá reagovať s redukčným činidlom.
10. Spôsob podľa nároku 9, vyznačujúci sa t ý m , že redukčným činidlom je tetrahydroboritan sodný alebo oxid platiny.

133
11. Spôsob výroby zlúčenín obecného vzorca 6 kde R¹

R² majú význam uvedený v nároku 1, vyznačuj ú c i sa tým že sa zlúčenina obecného vzorca 5

CH₃ (5) kde R¹ a R² majú význam uvedený v nároku 1, nechá reagovať s metylačným činidlom.

·· ···· · ·· ·· ·· · ·· · · ··· • · · · · · · ·

134
12. Spôsob podía nároku 11, vyznačujúci • · · · ······ ·· ·· ··· ·· ·· ··· sa t ý m , že metylačným činidlom je formaldehyd.
13. Spôsob výroby zlúčenín obecného vzorca 5a (13) kde kde R¹ a R² majú význam uvedený v nároku 1, j ú c i sa t ý m, že sa zlúčenina obecného vzorca 3a

CH, kde R¹ a R² majú význam uvedený v nároku L, nechá reagovať s redukčným činidlom.

135
14. Spôsob podlá nároku 13, vyznačuj úci sa tým že redukčným činidlom je tetrahydroboritan sodný alebo oxid platiny.
15.

Spôsob výroby zlúčenín obecného vzorca 6a (6a) kde R¹ a R² majú význam uvedený v nároku 1, c i sa tým vyznačuj ú že sa zlúčenina obecného vzorca 5a h₃c CH, N kde R¹ a R² majú význam uvedený v nároku 1, nechá reagovať s metylačným činidlom.

136
16. Spôsob podlá nároku 15, vyznačuj úci ·· ···· sa t ý m , že metylačným činidlom je formaldehyd.
17. Makrolidové zlúčeniny obecného vzorca I kde

R²⁰ predstavuje vodík alebo skupinu obecného vzorca

Y predstavuje vodík, alkylskupinu s 1 až 10 atómami uhlíka, alkenylskupinu s 2 až 10 atómami uhlíka, alkynylskupinu s 2 až 10 atómami uhlíka, skupinu -(CH2)_m-aryl s 6 až 10 atómami uhlíka v ·· ···· · ·· ·· ·· · ···· ··· ··· ·····

137 ···· ··· ·· · ·· ·· ··· ·· ·· ··· arylovej časti, - (CH₂) _m-(päť- až desaťčlánkový heteroaryl), kde m predstavuje celé číslo 0 až 4, pritom alkyl-, alkenyl-, aryl-, heteroaryl- a alkynyl- skupina sú poprípade substituované 1 až 3 substituentami nezávisle zvolenými zo súboru zostávajúceho z halogénu, kyanoskupiny, nitroskupiny, trifluórmetylskupiny, azidoskupiny, -C(O)R²¹, -OC(O)R²¹, -NR²¹C(O)R²², -C(O)NR²¹R²², -nr²¹r²², hydroxyskupiny, alkylskupiny s 1 až 6 atómami uhlíka, alkoxyskupiny s 1 až 6 atómami uhlíka, arylskupiny s 6 až 10 atómami uhlíka a päť- až desaťčlánkovej heteroarylskupiny;

R¹ predstavuje alfa-rozvetvenú alkyl-, alkenyl-, alkynyl-, alkoxyalkyl- alebo alkyltioalkylskupinu, z ktorých každá obsahuje 3 až 8 atómov uhlíka a je po prípade substituovaná jednou alebo viacej hydoxyskupinami; cykloalkylalkylskupinu s 5 až 8 atómami uhlíka v cykloalkylovej časti, pritom alkylová časť je alfa-rozvetvená a obsahuje 2 až 5 atómov uhlíka; cykloalkylskupinu s 3 až 8 atómami atómami uhlíka alebo cykloalkenylskupinu s 5 až 8 atómami uhlíka, z ktorých každá je prípadne substituovaná metylskupinou alebo jednou alebo viacej hydroxyskupinami alebo jednou alebo viacej alkylskupinami s 1 až 4 atómami uhlíka alebo atómami halogénu; alebo troj- až šesťčlánkový heterocyklický kruh obsahujúci kyslík alebo síru, ktorý môže byť nasýtený alebo celý alebo čiastočne nenasýtený a môže byť poprípade substituovaný jednou alebo viacej alkylskupinami s 1 až 4 atómami uhlíka alebo halogénu; alebo

R¹ predstavuje fenylskupinu, ktorá je poprípade

138 substituovaná aspoň jedným substituentom zvoleným zo súboru zostávajúceho z alkylskupiny s 1 až 4 atómami uhlíka, alkoxyskupiny s 1 až 4 atómami uhlíka a alkyltioskupiny s 1 až 4 atómami uhlíka, atómov halogénu, hydroxyskupiny, trifluórmetylskupiny a kyanoskupiny; alebo

R¹ môže predstavovať skupinu obecného vzorca a kde

X predstavuje kyslík, síru alebo skupinu -CH₂-;

a, b, c a d predstavuje každý nezávisle celé číslo 0 až 2, pritom súčet a+b+c+dje menší alebo rovný 5; alebo

R¹ predstavuje skupinu obecného vzorca CH₂R²⁴, kde R²⁴ predstavuje vodík, alkylskupinu s 2 až 8 atómami uhlíka, alkenylskupinu s 2 až 8 atómami uhlíka, alkynylskupinu s 2 až 8 atómami uhlíka, alkoxyalkyl- alebo alkyltioalkylskupinu stále s 1 až 6 atómami uhlíka v každej z alifatických častí, pritom akákoľvek z uvedených alkyl-·, alkoxy-, alkenyl- alebo alkynylskupín môže byť substituovaná jednou alebo viacej hydroxyskupinair.i alebo jedným alebo viacej atómami halogénu; alebo cykloalkylskupinu s 3 až 8 atómami uhlíka alebo

139

R²

R³

R⁴

R⁵

·· ···· • ·· ·· • • • ·· · • • • ·· • • • • · • • • • • • · ô · • • • ·· ·· ··· ·· ·· ··

cykloalkenylskupinu s 5 až 8 atómami uhlíka, z ktorých každá môže byť prípadne substituovaná metylskupinou alebo jednou alebo viacej alkylskupinami s 1 až 4 atómami uhlíka alebo atómami halogénu; alebo troj- až šesťčlánkový heterocyklický kruh obsahujúci kyslík alebo síru, ktorý môže byť nasýtený alebo celý alebo čiastočne nenasýtený a môže byť poprípade substituovaný jednou alebo viacej alkylskupinami s 1 až 4 atómami uhlíka alebo atómami halogénu; alebo skupinu SR²³, kde R²³predstavuje alkylskupinu s 1 až alkenylskupinu s 2 až alkynylskupinu s 2 až cykloalkylskupinu s 3 cykloalkenylskupinu s skupinu alebo substituovanú fenylskupinu, kde substituentom je alkylskupina s 1 až 4 atómami uhlíka, alkoxyskupina s 1 až 4 atómami uhlíka alebo halogén, heterocyklický ktorý môže byť nenasýtený a môže byť poprípade substituovaný jednou alebo viacej alkylskupinami s 1 až 4 atómami halogénu; a

8 atómami uhlíka,

8 atómami uhlíka, uhlíka, až 8 atómami uhlíku,

5 až 8 atómami uhlíka, fenyl8 atómami alebo troj- až šesťčlánkový kruh obsahujúci kyslík alebo síru, nasýtený alebo celý alebo čiastočne predstavuje predstavuje predstavuje -C(O)NR⁹R¹⁰ vodík alebo hydroxyskupinu;

vodík, hydroxyskupinu alebo skupinu OCH3;

vodík, skupinu -C (O) R⁹, -C (O) OR⁹, alebo ochraňujúcu skupinu hydroxyskupiny;

predstavuje skupinu vzorca -SR⁸, - (CH₂) _nC (0) R⁸, kde n predstavuje číslo 0 alebo 1, alkylskupinu s 1 až 10

140

·· • · • · ···· • • • ·· ·· · · • · · ·· • · • · ·· • · • · • · · • · ·· ·· ··· ·· ·· ··

atómami uhlíka, alkenylskupinu s 2 až 10 atómami uhlíka, alkynylskupinu s 2 až 10 atómami uhlíka, skupinu -(CH2)m^_aryl s 6 až 10 atómami uhlíku v arylovej časti alebo - (CH₂)_m-(päť- až desaťčlánkový heteroaryl), kde m predstavuje celé číslo 0 až 4, pritom vyššie uvedené skupiny R⁵ sú poprípade substituované jednou až tromi skupinami R¹⁶;

R⁶ a R⁷ predstavuje každý nezávisle vodík, hydroxyskupinu, alkoxyskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, alkylskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, alkenyl-skupinu s 2 až 6 atómami uhlíka, alkynylskupinu s 2 až 6 atómami uhlíka alebo skupinu- (CH₂) m^-aryl s 6 až 10 atómami uhlíka v arylovej časti alebo

- (CH₂)m-(päť- až desaťčlánkový heteroaryl), kde m predstavuje celé číslo 0 až 4;

R⁸ predstavuje vždy nezávisle vodík, alkylskupinu s 1 až 10 atómami uhlíka, alkenylskupinu s 2 až 10 atómami uhlíka, alkynylskupinu s 2 až 10 atómami uhlíka, skupinu - (CH₂) _qCR^uR¹² (CH2) rNR¹³R¹⁴ , kde q a r predstavujú každý nezávisle celé číslo 0 až 3, pritom však q a r nepredstavujú obaja číslo 0, -(CH2)_m-aryl s 6 až 10 atómami uhlíka v arylovej časti alebo - (CH2)_m ^- (päť- až desaťčlánkový heteroaryl), kde m predstavuje celé číslo 0 až 4, pritom vyššie uvedené skupiny R⁸ , okrem vodíka, sú poprípade substituované jednou až tromi skupinami R¹⁶; alebo ak je v skupine -CH₂NR⁸R¹⁵, môžu byť R¹⁵ a R⁸ zobraté dokopy za vzniku štvor- až desať článkového monocyklického alebo polycyklického nasýteného kruhu alebo päť- až desaťčlánkového heteroarylového kruhu, ·· ···· · ·· ·· • · · ·· · · ··· • · · ·····

141 ···· ··· ·· · ·· ·· ··· ·· ·· ··· pritom nasýtený kruh a heteroaryLový kruh okrem dusíka, ku ktorému sú R¹⁵ a R⁸ viazané, poprípade obsahujú 1 až 2 heteroatómy zvolené z kyslíka, síry a skupiny -N(R⁸)- , pritom nasýtený kruh poprípade obsahuje obsahuje jednu alebo dve dvojité alebo trojité väzby uhlík- uhlík, a pritom nasýtený heteroarylový kruh sú poprípade substituované 1 až 3 skupinami R¹⁶;

R⁹ a R¹⁰ predstavuje každý nezávisle vodík alebo alkylskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka;

R¹¹, R¹², R¹³ a R¹⁴ sú vždy nezávisle zvolené zo súboru zostávajúceho z vodíka, alkylskupiny s 1 až 10 atómami uhlíka, skupiny -(CH₂)_m-aryl s 6 až 10 atómami uhlíka v arylovej časti a -(CH₂)_m-(päť- až desaťčlánkový heteroaryl), kde m predstavuje celé číslo 0 až 4, pritom skupiny vo význame R¹¹, R¹², R¹³ a R¹⁴ , okrem vodíka, sú poprípade substituované 1 až 3 skupinami R¹⁶; alebo

R¹¹ a R¹³ sú zobraté dokopy za vzniku skupiny -(CH₂)_P, kde p predstavuje celé číslo 0 až 3, tak preto vzniká štvor- až sedemčlánkový nasýtený kruh, ktorý poprípade obsahuje jednu alebo dve dvojité alebo trojité väzby uhlík-uhlík; alebo

R¹³ a R¹⁴ sú zobraté dokopy za vzniku štvor- až desaťčlánkového monocyklického alebo polycyklického nasýteného kruhu alebo päť- až desaťčlánkovéhc heteroarylového kruhu, pritom nasýtený kruh a heteroarylový kruh okrem dusíka, ku ktorému sú R¹³ a R¹⁴ viazané, poprípade obsahujú 1 alebo 2 heteroatómy zvolené z kyslíka, síry a skupiny -N(R⁸)- ,pritom nasýtený ·· ···· · ·· ·· • · · ···· ··· • · · ·····

142 • · · · ······ ·· ·· ··· ·· ·· ··· kruh poprípade obsahuje jednu alebo dve dvojité alebo trojité väzby uhlík-uhlík, a pritom nasýtený a heteroarylový kruh sú poprípade substituované 1 až 3 skupinami R¹⁶;

R¹⁵ predstavuje vodík, alkylskupinu s 1 až 10 atómami uhlíka, alkenylskupinu s 2 až 10 atómami uhlíka alebo alkynylskupinu s 2 až 10 atómami uhlíka, pritom tieto skupiny vo význame R¹⁵ sú poprípade substituované 1 až 3 substituentami nezávisle zvolenými z halogénu a skupiny -CR⁹;

R¹⁶ je vždy nezávisle zvolený zo súboru zostávajúceho z halogénu, kyanoskupiny, nitroskupiny, trifluórmetylskupiny, azidoskupiny, skupiny -C (O) R¹⁷, -C(O)OR¹⁷, -C(O)OR¹⁷, -OC(O)OR¹⁷, -1JR⁶C(O)R⁷, -C(O)NR⁶R⁷, -NR⁶R⁷, hydroxyskupiny, alkylskupiny s 1 až 6 atómami uhlíka, alkoxyskupiny s 1 až 6 atómami uhlíka, skupiny - (CH₂) _m-aryl s 6 až 10 atómami uhlíka v arylovej časti a - (CH₂)_m-(päť- až desaťčlánkový heteroaryl),kde m predstavuje celé číslo 0 až 4, pritom arylový a heteroarylový sufcstituent je poprípade substituovaný 1 až 2 substituentami nezávisle zvolenými zo súboru zostávajúceho z halogénu, kyanoskupiny, nitroskupiny, trifluórmetylskupiny, azidoskupiny, skupiny -C (O)R¹⁷, -C (O) OR¹⁷, -C (O) OR¹⁷, -OC(O)OR¹⁷, -NR⁶C(O)R⁷, -C(O)NR⁶R⁷, -NR⁶R⁷, hydroxyskupiny, alkylskupiny s 1 až 6 atómami uhlíka a alkoxyskupiny s 1 až 6 atómami uhlíka,

R¹⁷ je vždy nezávisle zvolený zo súboru zostávajúcej z vodíka , alkylskupiny s 1 až 10 atómami uhlíka, alkenylskupiny s 2 až 10 atómami uhlíka

143

·· ···· • ·· ·· • • · • ·· · • • • • · « • • • · • • • • • • • · • · • · • • • • • • · • · • • • • ·· ·· ··· ·· • · • · ·

alebo alkynylskupiny s 2 až 10 atómami uhlíka a skupiny - (CH₂) _m-aryl s 6 až 10 atómami uhlíka v arylovej časti a - (CH₂) _m-(päť- až desaťčlánkový heteroaryl),kde m predstavuje celé číslo 0 až 4, pritom R⁸ nepredstavuje vodík, keď R¹⁹ predstavuje skupinu -CH₂S(O)_nR⁸;

R¹⁸ predstavuje hydroxyskupinu;

R¹⁹ predstavuje alkylskupinu s 1 až 10 atómami uhlíka, alkenylskupinu s 1 až 10 atómami uhlíka, alkynylskupinu s 2 až 10 atómami uhlíka, kyanoskupinu, skupinu -CH₂S(O)_nR⁸, kde n predstavuje celé číslo 0 až 2, -CH2OR⁸, -CH2N(0R⁹)R⁸, -CH2NR⁸R¹⁵, - (CH2) _m-aryl s 6 až 10 atómami uhlíka v arylovej časti a

- (CH₂)_m . (päť- až desaťčlánkový heteroaryl),kde m predstavuje celé číslo 0 až 4, pritom skupiny vo význame R¹⁹ sú poprípade substituované 1 až 3 skupinami R¹⁶; alebo

R¹⁸ a R¹⁹ sú vziaté dokopy za vzniku oxazolylového kruhu obecného vzorca

R²¹ a R²² predstavuje každý nezávisle vodík, hydroxyskupinu, alkoxyskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, alkylskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, alkenylskupinu

144

·· • · • · ···· • • • · · ·· · · • · · ·· • · • 9 ·· • · ·· • · ·· • · · ··· ·· 9 9 • e ··

s 2 až 6 atómami uhlíka, skupinu - (CH₂)_m~aryl s 6 až 10 atómami uhlíka v arylovej časti a -(CH₂)_m (päť- až desaťčlánkový heteroaryl), kde m predstavuje celé číslo 0 až 4, alebo alkylyl skupinu s 2 až 10 atómami uhlíka;

a ich farmaceutický vhodné soli.