TH11510C3 - "กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อฟลาโวเบคทีเรี่ยม คอลัมนาเร่ ในปลานิลและปลาทับทิม" - Google Patents
"กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อฟลาโวเบคทีเรี่ยม คอลัมนาเร่ ในปลานิลและปลาทับทิม"Info
- Publication number
- TH11510C3 TH11510C3 TH1403000057U TH1403000057U TH11510C3 TH 11510 C3 TH11510 C3 TH 11510C3 TH 1403000057 U TH1403000057 U TH 1403000057U TH 1403000057 U TH1403000057 U TH 1403000057U TH 11510 C3 TH11510 C3 TH 11510C3
- Authority
- TH
- Thailand
- Prior art keywords
- tilapia
- reaction
- sequence
- lamp
- mmolar
- Prior art date
Links
Abstract
DC60 การประดิษฐ์นี้พัฒนากรรมวิธีการตรวจหาเชื้อฟลาโวแบคทีเรี่ยม คอลัมนาเร่ ในปลานิล และปลา ทับทิม โดยผนวกเทคนิคแลมป์เข้ากับการผสมสีแคลซีนลงในส่วนผสมแลมป์ก่อนทำปฏิกิริยา โดยมี ความจำเพาะเจาะจงอยู่ที่ การออกแบบไพร์เมอร์ที่มีความจำเพาะต่อลำดับเบสในจีโนมของ ฟลาโวแบคที เรี่ยม คอลัมนาเร่ 8 ตำแหน่ง และสภาวะที่เหมาะสมในการทำปฏิกิริยา เพื่อสร้างต้นแบบของวิธีการตรวจ วินิจฉัยโรคให้มีความไวและความจำเพาะยิ่งขึ้น ง่ายต่อการวิเคราะห์ผล ไม่ต้องใช้เครื่องมือที่ยุ่งยากซับซ้อน และไม่ต้องใช้เวลาการตรวจนานเหมือนเทคนิคอื่น การประดิษฐ์นี้พัฒนากรรมวิธีการตรวจหาเชื้อฟลาโวแบคทีเรี่ยม คอลัมนาเร่ ในปลานิล และปลา ทับทิม โดยผนวกเทคนิคแลมป์เข้ากับการผสมสีแคลซีนลงในส่วนผสมแลมป์ก่อนทำปฏิกิริยา โดยมี ความจำเพาะเจาะจงอยู่ที่ การออกแบบไพร์เมอร์ที่มึความจำเพาะต่อลำดับเบสในจีดนมของ วิธีการตรวจ วินิจฉัยโรคให้มีความไวและความจำเพาะยิ่งขึ้น ง่ายต่อการวิเคราะห์ผล ไม่ต้องใช้เครื่องมือที่ยุ่งยากซับซ้อน และไม่ต้องใช้เวลาการตรวจนานเหมือนเทคนิคอื่น
Claims (1)
1. กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อฟลาโวแบคทีเรี่ยม คอลัมนาเร่ ในปลานิลและปลาทับทิม ประกอบด้วย 1.1 เตรียมสารละลายเอ็นเอที่สกัดได้จากตัวอย่างอวัยวะปลานิลและทับทิมที่ต้องการทดสอบ 1.2 ทำปฏิกิริยาแลมป์ที่ 65 องศาเซลเซียส 45 นาที ในกล่องให้ความร้อน โดยมีสวนประกอบ ของปฏิกิริยา และสารละลายดีเอ็นเอที่สกัดได้จากตัวอย่างสิ่งมีชีวติที่ต้องการทดสอบ ใน สัดส่วนดังนี้ ก. เทอร์ไพร์เมอร์ F3 ลำดับเบส (5\'3\') CGTTGTATACACATCCGAAGT และ เอาท์ เทอร์โพร์เมอร์ B3 บำดับเบส (5\'3\') CCTGTACCTAATTGGGGAA อย่างละ 0.2 ไมโคร โมลาร์ ข. อินเนอร์ไพรเมอร์ FIP ลำดับเบส (5\'3\') GGCATAACCGCTAATAAATCATGGT-TTTT- TCCATTCGTTTGAGATATTTCTGA และ อินเตอร์ไพรเมอร์ BIP ลำดับเบส (5\'3\') CATAGATCATAGCTGATGCTCCATT-TTTT-AAGAGGGTAAAAACAACAATGA อย่าง ละ 2 ไมโครโมล่าร์ ค. ลูปไพร์เมอร์ LF ลำดับ เบน (5\'3\') CTAATGCAAGTACTAGAT และลูปไพร์เมอร์ LB ลำดับเบส (5\'3\') GTAGTCTATGAGGAGGA อย่างละ 2 ไมโครโมลาร์ ง. สาร dNTPs 1.2 มิลลิโมลาร์ จ. สารเบตาอีน 0.6 โมลาร์ ฉ. สารละลายแมกนีเซียมซัลเฟส 6 มิลลิโมล่าร์ ช. สารละลายแคลซีน (ร่วมกับ 0.5 มิลลิโมล่าร์ แมกกานีสคลอไล) 25ไมโครโมลาร์ ซ. เอ็นไซม์ Bst อีเอ็นเอ โพลีเมอเรส 8 หน่วย ฒ. บัฟเฟอร์ที่ความเข้มข้น 1 เท่า ญ . สารละลายดีเอ็นเอที่สกัดได้จากตัวอย่างอวัยวะปลานิลหรือทับทิมที่ต้องการทดสอบ 2 ไมโครลิตรและ ฎ. น้ำกลั่นเพื่อปรับปริมาตรรวมให้ได้ 25 ไมโครลิตร 1.3 อ่านผลด้วยตาเปล่าได้ทันที ถ้าตัวอย่างมีเชื้อปลาโวแลคทีเรียม คอลัมนาเร่ สีของส่วนผสม แลมป์หลังเสร็จปฏิกิริยาจะเปลี่ยนเป็นสีเขียว หากตัวอย่างเป็นลบ (ไม่มีเชื้อแบคทีเรีย ) สีของ ส่วนผสมของแลมป์ ยังคงสีเดิม คือสีส้ม หลังเสร็จปฏิกิริยา ที่มีลักษณะเฉพาะคือ ไพร์เมอร์มีความจำเพาะต่อลำดับเบสในจีโนมของ ฟลาโวแบคทีเรียม คอลัม นาเร่ 8 ตำแหน่ง และสภาวะที่เหมาะสมในการทำปฏิกิริยาแลมป์
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| TH11510C3 true TH11510C3 (th) | 2016-05-19 |
| TH11510A3 TH11510A3 (th) | 2016-05-19 |
Family
ID=
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Di Bella et al. | High throughput sequencing methods and analysis for microbiome research | |
| Srivastava et al. | Biosensors/molecular tools for detection of waterborne pathogens | |
| CN105154530B (zh) | 一种检测食品中致病菌的八重pcr扩增试剂盒及其扩增引物 | |
| CN106893764A (zh) | 一种青枯菌的lamp检测引物组合及其lamp检测试剂盒和lamp方法 | |
| TH11510A3 (th) | "กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อฟลาโวเบคทีเรี่ยม คอลัมนาเร่ ในปลานิลและปลาทับทิม" | |
| Russell et al. | Rapid on-site detection of the huanglongbing/citrus greening causal agent “Candidatus Liberibacter asiaticus” by AmplifyRP, a novel rapid isothermal nucleic acid amplification platform | |
| CN107916294B (zh) | 一种用于检测哈维弧菌多重毒力基因的引物组、试剂盒及其应用 | |
| WO2016114675A1 (en) | Method and kit for identification of nematodes, forest plant pests, by real-time pcr | |
| CN102925568B (zh) | 瓜类果斑病菌检测用引物探针及其检测方法 | |
| CN103361445A (zh) | 用于检测狂犬病病毒的lamp引物及其试剂盒 | |
| RU2012144762A (ru) | Способ тестирования вируса лейкоза крупного рогатого скота с использованием пцр-диагностики с флуоресцентной формой детекции | |
| RU2011120790A (ru) | Способ диагностики коклюша и определения авирулентных мутантов возбудителя и диагностический набор | |
| TH11509A3 (th) | "กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อแบคทีเรีย Shewanella spp. ในปลานิลและปลาทับทิม" | |
| TH11509C3 (th) | "กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อแบคทีเรีย Shewanella spp. ในปลานิลและปลาทับทิม" | |
| WO2016011086A3 (en) | Method and kit for protozoa characterization | |
| Soylar et al. | Viral agents in patients with central nervous infections admitted to Ege University Hospital | |
| WO2015185982A3 (en) | Primers, probes and test kit for the detection of salmonella | |
| EA201401195A1 (ru) | Набор реагентов для выявления днк chlamydia trachomatis и его применение | |
| MY187887A (en) | Strongyloides stercoralis protein and/or corresponding dna and rna sequences for application in diagnosis | |
| Malviya et al. | Molecular diagnostic procedures using RT-PCR to alleviate taxonomic impediments of parasite species segregation | |
| Nor et al. | The evaluation of a multiplex PCR-DNA dipstick assay with culture method and EZ Typhi Carrier DNA assay to detect Salmonella Typhi in well water samples | |
| Fathy et al. | Comparison of PCR for Detection of tcdA and tcdB in Stool Samples and Direct Toxin Testing Versus Stool Culture for Diagnosis of Toxigenic Clostridium difficile from Hospitalized Patients in Egypt | |
| Gholamhoseinpor et al. | MOLECULAR EVALUATION OF METHICILLIN RESISTANT STAPHYLOCOCCUS AUREUS (MRSA) BY PCR TO BACTERIOLOGICAL METHODS | |
| TH11956Y (th) | กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อแบคทีเรีย Streptococcus agalactiae ก่อโรคในปลา | |
| TH21912U (th) | กรรมวิธีการตรวจหาเชื้อก่อโรคโควิด 19 |