TH9629A - โพรเทเอส, รีเวอร์ส แทรนส์คริพเทส และเอนโดนิวคลี?เอสของ?ของเรโทรไวรัส และวิธีการสำหรับผลิตเอนไซม์เหล่า?นี้ - Google Patents

Abstract

สิ่งที่ได้เปิดเผยคือวิธีการสำหรับผลิตโปรตีนจากเรโทรไวรัส ซึ่งคือ โพรเทเอส รีเวอร์ส แทรนส์คริพเทส เอนโดนิวคลี เอส และโปรตีน Gag วิธีการมีลักษณะเฉพาะที่มีการทำให้มีการแสดง ออก และการผ่านกรรมวิธีของจีนเรโทรไวรัส และภายใต้การเพาะ เลี้ยง เป็นขั้น ๆ ของเซลล์เจ้าบ้านที่เปลี่ยนรูปด้วยพาหะที่สร้าง ให้ นำพาชิ้นส่วนจีนเรโทรไวรัส ผลิตภัณฑ์เหล่านี้ประกอบด้วยจีน โพร เทเอสอย่างน้อยหนึ่งอย่าง และจีนอื่นอีกหนึ่งชนิดหรือมาก กว่า ที่มีรหัสสำหรับโปรตีนของเรโทรไวรัส โปรตีนของเรโทรไวรัส ของ การประดิษฐ์นี้ ใช้เป็นรีเอเจนท์จำเพาะสำหรับตรวจวินิจฉัย โรค ที่เกิดจากเรโทรไวรัส นั่นคือ AIDS, เนื้องอกที่เป็น อันตรายถึง ตายและอื่น ๆ นอกจากนี้ยังอาจใช้เป็นพื้นฐานสำหรับงานวิจัย และ การพัฒนาสารต่อต้านไวรัสและเป็นวัคซีนต่อต้านโรคติดเชื้อ ดัง ข้างบน และสำหรับวิศวกรรมพันธุศาสตร์

Claims (6)

1. วิธีการสำหรับผลิตเอนไซม์ ที่มีลักษณะเฉพาะประกอบด้วยขั้นตอนดังนี้ การสร้างพาหะแสดงออกให้อยู่ในรูปเชื่อมติด กัน ด้วยการสอดแทรกชิ้นส่วน cDNA จากจีนของเรโทรไวรัสที่อย่าง น้อย มีจีนชนิดหนึ่ง ซึ่งจีนโพรเทเอสถูกเลือกว่าเป็นสิ่งจำเป็น จาก หมู่จีนที่มีรหัสสำหรับโปรตีนต่าง ๆ ของเรโทรไวรัส เช่น โพรเท เอส รีเวอร์ส แทรนส์คริพเทส, เอนโดนิวคลีเอส และโปรตีน Gag เข้าไปในจีนที่มีความสามารถในการแสดงออกสูง ด้วยการจับคู่ กรอบ อ่านรหัสที่เหมาะสม ใส่พาหะแสดงออกที่สร้างขึ้นมาเข้าไปใน เซลล์ ที่เป็นตัวรับ จากนั้นเพาะเลี้ยงตัวเปลี่ยนรูปและทำให้เกิด การ ผลิตโปรตีนด้วยโพรเทเอสที่ผลิตจากการเพาะเลี้ยง และผลิต เอนไซม์ ขึ้นเป็นโปรตีนเดี่ยวที่พร้อมใช้งานแต่ละตัวเป็นผลิตภัณฑ์ จาก จากการเพาะเลี้ยงของตัวเปลี่ยนรูปดังกล่าว

2. วิธีการสำหรับผลิตเอนไซม์ตามที่ถือสิทธิไว้ในข้อถือ สิทธิข้อที่ 1 ซึ่งตัวเปลี่ยนรูปดังกล่าวเพาะเลี้ยงด้วย วิธีการเพาะเลี้ยงสองขั้นตอน

3. วิธีการสำหรับผลิตเอนไซม์ตามที่ถือสิทธิไว้ในข้อถือ สิทธิข้อที่ 1 ซึ่งวิธีการมีลักษณะเฉพาะที่ประกอบด้วยขั้น ตอน การสร้างพาหะแสดงออกที่ทำให้อยู่ในรูปเชื่อมติดกันด้วย การสอดแทรกชิ้นส่วน cDNA จากจีนของเรโทรไวรัส ที่อย่างน้ยอ มีจีนชนิดหนึ่ง ซึ่งจีนโพรเทเอส ถูกเลือกให้เป็นสิ่งจำเป็น จากหมู่จีนที่มีรหัสสำหรับโปรตีนต่าง ๆ ของเรโทรไวรัส เช่น โพรเทเอส, รีเวอร์ส แทรนส์คริพเทส เอนโดนิวคลีเอส และ โปรตีน Gag เข้าไปในจีนที่มีความสามารถในการแสดงออกสูงด้วย การจับคู่กรอบอ่านรหัสที่เหมาะสม การใส่พาหะแสดงออกที่ สร้างขึ้นมาเข้าไปในเซลล์ผู้รับ จากนั้นเพาะเลี้ยงตัว เปลี่ยนรูปที่ได้จากการคัดเลือกก่อนเป็นเวลาจาก 1 ถึง 24 ชั่วโมง ที่อุณหภูมิจาก 100 ถึง 40 องศาเซลเซียส จากนั้น ทำให้เกิดการผลิตโปรตีนโดยโพรเทเอสที่ผลิตจากการเพาะเลี้ยง ทีหลังที่อุณหภูมิจาก 10 ถึง 35 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 1 ถึง 40 ชั่วโมง และเอนไซม์ที่ผลิตได้เป็นโปรตรีนเดี่ยวที่ พร้อมใช้งานแต่ละตัวในผลิตภัณฑ์เพาะเลี้ยงของตัวเปลี่ยนรูป ดังกล่าว

4. วิธีการสำหรับผลิตเอนไซม์ตามที่ถือสิทธิไว้ในข้อถือ สิทธิข้อที่ 1 ซึ่งชิ้นส่วน cDNA จากจีนของเรโทรไวรัสดัง กล่าวถูกเลือกและเตรียมจาก E. coli UT 481/pNLH 402 (FERM BP-2417) และพลาสมิด pSRA2

5. วิธีการสำหรับผลิตเอนไซม์ตามที่ถือสิทธิไว้ในข้อถือ สิทธิข้อที่ 1 ซึ่งส่วนของการสอดแทรกและส่วนเชื่อมต่อของ ชิ้นส่วน cDNA จากจีนของเรโทรไวรัสดังกล่าวอยู่ในจีน lac Z ของอนุกรมพาหะพลาสมิด

6. เอนไซม์ ที่มีลักษณะเฉพาะโดยประกอบด้วยขั้นตอนต่าง ๆ คือ การสร้างพาหะแกสดงออกที่อยู่ในลักษณะการต่อเชื่อมด้วย การสอดแทรกชิ้นส่วน cDNA จากจีนของเรโทรไวรัสที่มีจีนอย่าง น้อยหนึ่งชนิด ซึ่งจีนโพรเทเอสถูกเลือกให้เป็นสิ่งจำเป็น สำหรับหมู่จีนที่แปลรหัสโปรตีนต่าง ๆ ของเรโทรไวรัส เช่น โพรเทเอส, รีเวอร์สแทรนส์คริพเทส, เอนโดนิวคลีเอส และ โปรตีน Gag เข้าไปในจีนที่มีความสามารถในการแสดงออกสูงโดย การจับคู่กับกรอบอ่านรหัส การใส่พาหะแสดงออกที่สร้างได้ เข้าไปในเซลล์ผู้รับจากนั้นทำการเพาะเลี้ยงตัวเปลี่ยนรูป ที่ได้จากการคัดเลือกก่อนเป็นเวลา 1 ถึง 24 ชั่วโมง ที่ อุณหภูมิจาก 10 ถึง 40 องศาเซลเซียส จากนั้นทำให้เกิดการ ผลิต โปรตีนด้วยโพรเทเอสที่ผลิตจากการเพาะเลี้ยงทีหลังที่ อุณหภูมิจาก 10 ถึง 35 องศาเซลเซียส เป็นเวลาจาก 1 ถึง 40 ชั่วโมง และผลิตเอนไซม์ขึ้นมาเป็นโปรตีนเดี่ยวพร้อมใช้งาน แต่ละตัวในผลิตภัณฑ์เพาะเลี้ยงของตัวเปลี่ยนรูปดังกล่าว (ข้อถือสิทธิ 6 ข้อ, 2 หน้า, 4 รูป)