TR201909072T4 - Fosforilkoline karşı yeni antikorlar. - Google Patents

Fosforilkoline karşı yeni antikorlar. Download PDF

Info

Publication number
TR201909072T4
TR201909072T4 TR2019/09072T TR201909072T TR201909072T4 TR 201909072 T4 TR201909072 T4 TR 201909072T4 TR 2019/09072 T TR2019/09072 T TR 2019/09072T TR 201909072 T TR201909072 T TR 201909072T TR 201909072 T4 TR201909072 T4 TR 201909072T4
Authority
TR
Turkey
Prior art keywords
sequence
region
antibody
kim
sek
Prior art date
Application number
TR2019/09072T
Other languages
English (en)
Inventor
Pettersson Knut
Camber Ola
sexton Dan
e nixon Andrew
Original Assignee
Athera Biotechnologies Ab
Dyax Corp
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Athera Biotechnologies Ab, Dyax Corp filed Critical Athera Biotechnologies Ab
Publication of TR201909072T4 publication Critical patent/TR201909072T4/tr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/44—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material not provided for elsewhere, e.g. haptens, metals, DNA, RNA, amino acids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/06—Antihyperlipidemics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/48—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones
    • A61P5/50—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones for increasing or potentiating the activity of insulin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/55—Fab or Fab'
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/567—Framework region [FR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Transplantation (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)

Abstract

Mevcut buluş, fosforilkolin ve/veya bir fosforilkolin konjugatına bağlanabilen bir antikor veya antikor parçası ile ilgilidir, burada antikor veya antikor parçası bir değişken ağır zincir (VH) bölgesi ve/veya bir değişken hafif zincir (VL) bölgesini içerir ve burada - (a) bir VH bölgesi, şunlardan oluşan bir gruptan seçilen bir, iki veya üç tamamlayıcılık belirleme bölgesini (CDR'ler) içeren bir amino asit dizisini içerir: SEK KİM NO: 17'nin dizisi ile en az %25, %50, %75 veya %100 dizi aynılığına sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDR1 dizisi; SEK KİM NO: 18'in dizisi ile en az %5, %11, %17, %23, %29, %35, %47, %52, %58, %64, %70, %76, %82, %94 veya %100 dizi aynılığına sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDR2 dizisini ve SEK KİM NO: 19, 20, 21 veya 22'nin dizisi ile en az %4, %9, %13, %18, %22, %27, %31, %36, %40, %45, %50, %54, %59, %63, %68, %72, %77, %81, %86, %90, %95 veya %100 dizi aynılığına sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDR3 dizisi ve/veya (b) bir VL bölgesi, şunlardan oluşan gruptan seçilen bir, iki veya üç tamamlayıcılık belirleme bölgesini (CDR'ler) içeren bir amino asit ¬dizisini içerir: SEK KİM NO: 23 veya 24'ün dizisi ile en az %5, %11, %17, %23, %29, %35, %47, %52, %58, %64, %70, %76, %82, %94 veya %100 dizi aynılığına ¬sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDR4 dizisi; SEK KİM NO: 25'in dizisi ile en az %14, %28, %42, %57, %71, %85 veya %100 dizi aynılığına sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDR5 dizisi; SEK KİM NO: 26'nın dizisi ile en az %11, %22, %33, %44, %55, %66, %77, %88 veya %100 dizi aynılığına sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDR6 dizisi.

Description

TARIFNAME FOSFORILKOLINE KARSI YENI ANTIKORLAR BULUS SAHASI Mevcut bulus, fosforilkoline (PC) ve/veya PC konjugatlarina baglanan ve sasirtici bir sekilde etkili in vivo özelliklere sahip olan yeni antikorlar ile ilgilidir. BULUSUN ALT YAPISI Bu spesifikasyonda açik bir sekilde önceden yayinlanmis dokümanin listelenmesi veya açiklanmasinin, dokümanin teknigin bilinen durumu oldugu veya ortak genel bilgi olduguna dair bir onay olarak alinmasina gerek yoktur. Kardiyovasküler hastaliga yönelik mevcut tedavi seçeneklerine ragmen, akut koroner sendrom (ACS), endüstrilesmis dünyada baslica ölüm nedenidir. ACS, arter duvarinda kronik inIlamasyon ile baglantili olan bir koroner arter lumeninde tromboz olusumunun bir sonucu olarak ortaya çikar. Aiteriyel inflamasyon, bir lipid çekirdeginin olusumu ve plak olusumuna neden olan inflamatuar hücrelerin infiltrasyonu tarafindan baslatilir. Stabil olmayan plaklar, endotelyumu kesintiye ugratan büyük bir nekrotik çekirdek ve apoptotik hücreyi içerir ve platelet adezyonu, aktivasyon ve agregasyona baslatilmasina olanak taniyan altta bulunan kolajen, von Willebrand faktörü (vWF), doku faktörü, lipidler ve düz kasi ortaya çikaran plak yirtilmasina neden olabilir (Libby vd. 1996. Macrophages and atherosclerotic plaque stability. Curr Opin Lipidol 7, 330-335). ACS, perkütanöz koroner girisim (PCI) ve stent implantasyonu yoluyla cerrahi rekanalizasyonun yani sira antplateler terapileri, kolesterol düsürme ilaçlari (örnegin, statinler) anti-koagülanlarin bir kombinasyonu ile tedavi edilir. COX-l inhibitörleri (örnegin, aspirin), ADP reseptör antagonistleri (örnegin, Tiklopedin ve klopidogrel) ve glikoprotein IIb/IIIa reseptör antagonistleri gibi anti-platelet terapilerinin, birçok farkli klinik denemede baslica olumsuz koroner olaylarin (MACE) meydana gelme sikligini azalttigi gösterilmistir (Dupont vd- 2009- Antiplatelet therapies and the role of antiplatelet resistance in acute coronary syndrome. Thromb Res 124, 6-13). Ancak, uzun sürekli anti-platelet terapisindeki hastalarin bir kismi kardiyovasküler olaylar yasamaya devam etmektedir. Ayrica kronik önleme terapisinin, maksimum faydali etkiler göstermesi iki yil kadar sürebilir ve birçok hasta daha sonradan hala hastaligin nüksetmesi bakimindan yüksek risk altindadir. Hastanin restenoz nedeniyle re-oklüzyondan dolayi siklikla MACEye yatkin oldugu bir miyokard enfarktüsünden sonra 6-12 aya kadar olan bir periyot vardir (Tabas. 2010. Macrophage death and defective inflammation resolution in atherosclerosis. Nat Rev Immunol 10, 36-46). Sonuç olarak, spesifik olarak daha fazla plak ilerleyisinin Önlenmesine yönelik tedavilere önemli oranda ihtiyaç vardir ve plak regresyonunun desteklenmesi bu periyot sirasinda olaylari önemli derecede azaltir. Belli fosfolipidler üzerindeki bir polar bas bölge olan fosforilkolin kapsamli bir sekilde kardiyovasküler hastalikta gösterilmistir. Koroner inflamasyon sirasinda olusturulan reaktif oksijen türleri, okside LDL (oksLDL) olusturmak üzere düsük yogunluklu lipoproteinin (LDL) oksidasyonuna neden olur. Esasen, ateroskleroz, kararsiz angina veya akut koroner sendrom gibi karsiyovasküler hastaliklarin (CVD), 0ksLDL"nin artan plazma seviyeleri ile baglantili oldugu gösterilmistir (Itabe ve Ueda. 2007. Measureinent of plasina oxidized low-density lipoprotein and its clinical implications. J Atheroscler Thromb 14, 1-11). LDL, bir PC polar bas grubu ve bir apoBlOO proteinine sahip lipidleri içeren dolasimdaki bir lipoprotein partikülüdür. LDL"nin oksidasyonu sirasinda, modifiye edilmemis LDL üzerinde bulunmayan neo-epitoplari içeren PC olusturulur. OksLDL üzerinde yeni ortaya çikarilmis PC, CD36 gibi makrofaj lar üzerindeki süpürücü reseptörler tarafindan taninir ve ortaya çikan makrofaj tarafindan yutulmus oksLDL, damar duvarinda proinflamatuar köpük hücrelerinin olusumuna dogru ilerler. Okside LDL ayrica, endotelyal hücre yüzeyleri üzerindeki reseptörler tarafindan taninir ve bunun, endotelyal disfonksiyon, apoptoz ve katlanmamis protein yanitini içeren çesitli yanitlari uyardigi rapor edilmistir (Gora vd. 2010. Phospholipolyzed LDL induces an inflammatory response in endothelial cells through endoplasinic reticulum stress signaling. FASEB J 24(9):3284-97). PC neo-epitoplari ayrica, glikolize proteinlerin oksidasyonundan olusturulan aldehitler gibi olmak üzere fosfolipaz A2 veya amin reaktif hastalik metabolitleri ile modifikasyonun akabinde LDL üzerinde açiga çikarilir. Alternatif olarak modifiye edilmis bu LDL partikülleri ayrica CVDSdeki pro- inflamatuar faktörlerdir. Fosforilkoline (PC) yönelik antikorlarin, Okside veya baska sekilde modifiye LDL°ye baglandigi ve in vivo modellerde veya in vitro çalismalarda oks LDLlnin pro-inflamatuar aktivitesini bloke ettigi gösterilmistir (ShaW Vd. 2000. Natural antibodies With the T15 idiotype may act in atherosclerosis, apoptotic clearance, and protective immunity. J Clin Invest 105, 1731-1740; Shaw vd. 2001. Human- derived anti-oxidized LDL autoantibody blocks uptake of oxidized LDL by macrophages and localizes to atherosclerotic lesions in Vivo. Arterioscler Thromb Vasc Biol 21, 1333-1339. Ayrica klinik verilerin incelenmesi, az sayidaki dogal lgM anti-PC antikorlarmm, ACS hastalarinda artan bir MACE riski ile baglantili oldugunu göstermistir (Frostegard, J . 2010. Low level natural antibodies against phosphorylcholine: a novel risk marker and potential mechanism in atherosclerosis and cardiovascular disease. Clin Immunol 134, 47-54). Ewing vd 010 Circulation 122: Al4320, fosforilkolin/(PC)-spesifik fare antikoru T15/E06 kullanilarak bir fare modelinde model-restenoz ve ateroskleroz tedavisini açiklar. ShaW vd 2000 J Clin lnv 105: 1731-1740, çoklu anti-PC inonoklonal antikorlari (örnegin, E06) açiklar. Chang vd `1999 PNAS 96: 6353-6358, anti-PC fare antikorlan E06 ve E03"ün, oksLDL içeren apoptotik hücrelerin fagositozunu inakrofajlar ile inhibe ettigini açiklar. Horkko vd 1999 Journal of Clinical Investigation 103: 117-128 oksLDL baglanmasi ve bozunmasinin mAb E06 tarafindan inhibisyonunu açiklar. Palinski vd. 1996 Journal of Clinical Investigation 98: 800-814 hibridoin taramasi yoluyla fare antikoru E06"nin üretimini açiklar. Buna göre, özellikle insanlarin terapisi için uygun tam insan anti-PC antikorlari olmak üzere terapide etkili bir sekilde kullanilabilen anti- PC antikor moleküllerine ihtiyaç vardir. Basvuru sahibinin bilgisi dahilinde, bugüne kadar teknik, terapötik olarak etkili insan anti-PC antikorlarini saglama konusunda basarisiz olmustur. Bu tür antikorlarin tanimlanmasi, anti-PC baglanma aktivitesine sahip insan antikorlarina yönelik in vitro tarama yöntemlerinin in VIVO terapötik aktivitenin zayif ön göstergeleri olmasi nedeniyle zorlastirilmistir. Bu bakimdan, teknikte in Vivo sistemlerde kullanildiginda, özellikle terapi için insanlara uygulandiginda etkili ve avantajli özellikler saglayan insan anti-PC antikor moleküllerine ihtiyaç vardir. BULUSUN AÇIKLAMASI Bulus istemlerde açiklandigi gibidir ve bir birinci açida asagidakileri saglar: Fosforilkoline baglanabilen bir insan antikoru veya antikor parçasi, burada antikor veya antikor parçasi bir degisken agir zincir (VH) bölgesi ve bir degisken hafif zincir (VL) bölgesini içerir ve burada - (a) asagidakilerden olusan üç tamamlayicilik belirleme bölgesini (CDR"ler) içeren bir amino asit dizisini içeren bir VH bölgesi: SEK KIM NO: l7snin dizisi ile en az %75 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDRl dizisi ; SEK KIM NO: 18,in dizisi ile en az %94 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDR2 dizisi ; ve SEK KIM NO: 19, 20, 21 veya 22anin dizisi ile en az %95 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDR3 dizisi; ve (b) asagidakilerden olusan üç tamamlayicilik belirleme bölgesini (CDRjler) içeren bir amino asit dizisini içeren bir VL bölgesi: SEK KIM NO: 23 veya 24anin dizisi ile en az %94 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDR4 dizisi ; SEK KIM NO: 25sin dizisi ile en az %85 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDRS dizisi ; SEK KIM NO: 26"nin dizisi ile en az %88 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDR6 dizisi ; burada antikor veya antikor parçasi, örneklerde kullanilan yüzey plazmon rezonans kosullari altinda test edildiginde 500 nM,den daha fazla olinayan bir Kd"ye sahip iininobilize aininofenil- fosforilkoline baglanir. Mevcut basvuru, fosforilkolin ve/Veya fosforilkolin konjugatlarina baglanabilen yeni antij en baglama bölgelerini içeren yeni antikorlar ve antikor parçalarinin üretimini ve test edilmesini açiklar. Bir tarifname, fosforilkolin ve/veya bir fosforilkolin konjugatina baglanabilen bir antikor veya antikor parçasini saglar, burada antikor veya antikor parçasi bir degisken agir zincir (VH) bölgesi ve bir degisken hafif zincir (VL) bölgesini içerir ve burada - (a) asagidakilerden olusan gruptan seçilen bir, iki veya tercihen üç tamamlayicilik belirleme bölgesini (CDR"ler) içeren bir amino asit dizisini içeren bir VH bölgesi: SEK KIM NO: 17"nin dizisi ile en az %25, %50, %75 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDRlüüg; SEK KIM NO: 18,in dizisi ile en az %5, %11, %17, %23, %29, %35, %47, %52, %58, %64; %70, %76, %82, %94 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDRZ dizisi; ve SEK KIM NO: 19, 20, 21 veya 229nin dizisi ile en az %4, %9 %13, %18, %22, %27, %31, %36, %40, %45, %50, %54, %59, %63, %68, %72, %77, %81, %86, %90, %95 veya %100 dizisi ; ve/Veya (b) asagidakilerden olusan gruptan seçilen bir, iki veya tercihen üç tamamlayicilik belirleme bölgesini (CDR"ler) içeren bir amino asit dizisini içeren bir VL bölgesi: SEK KIM NO: 23 veya 24°ün dizisi ile en az %5, %11, %17, %23, %29, %35, %47, %52, %58, %64; %70, %76, %82, %94 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDR4 dizisi; SEK KIM NO: 25,in dizisi ile en az %14, %28, %42, %57, %71, %85 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDR5 dizisi ; SEK KIM NO: 263n1n dizisi ile en az %11, %22, %33, %44, %55, %66, %77, %88 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDR6 dizisi . Bir tarifnamede, antikor veya antikor parçasi, yukarida tanimlandigi üzere bir CDRl dizisi, bir CDR2 ve bir CDR3 dizisini içeren bir amino asit dizisini içeren bir VH bölgesi ve/Veya yukarida tanimlandigi üzere bir CDR4 dizisi, bir CDRS ve bir CDR6 dizisini içeren bir amino asit dizisini içeren bir VL bölgesini içerir. Bir diger tarifnamede antikor veya antikor parçasi asagidakileri içerir - SEK KIM NO: 1, 3, 5, 7, 9, 11, 13 veya 157ten olusan gruptan seçilen bir amino asit dizisi SEK KIM NO:1, 3, 5, 7, 9, 11, 13 veya 'ten herhangi birinin bir amino asit dizisi ile en az %80, %85, %90 veya %95 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisinde bulunan üç CDRl, CDR2 ve CDR3"ün tümünü içeren bir amino asit dizisini içeren bir VH bölgesi; ve/veya SEK KIM NO: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14 veya 169dan olusan gruptan seçilen bir amino asit dizisi SEK KIM No:2, 4, 6, 8, 10, 12, 14 veya 16"dan herhangi birinin bir ainino asit dizisi ile en az %80, %85, %90 veya %95 dizi ayniligma sahip bir amino asit dizisinde bulunan üç CDRl, CDR2 ve CDR39ün tümünü içeren bir amino asit dizisini içeren bir VL bölgesi. Bir diger tarifnamede, antikor veya antikor parçasi bir degisken agir zincir (VH) bölgesi ve/veya bir degisken hafif zincir (VL) bölgesini içerir, burada - VH bölgesi SEK KIM NO: 1, 3, 5, 7, 9, 11, 13 veya 15Sten olusan gruptan seçilen bir amino asit dizisi veya SEK KIM NO: 1, 3, 5, 7, 9, 11, 13 veya 15°ten herhangi birinin bir ainino asit dizisi ile en az %50, %60, %70, %80, %85, %90 veya %95 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içerir; ve VL bölgesi, SEK KIM NO: 2, 4, 6, 8, 10, 12, 14 veya 167dan olusan gruptan seçilen bir amino asit dizisi veya SEK KIM NO: 2, 4, 6, 8, , 12, 14 veya l6°dan herhangi birinin bir amino asit dizisi ile en az %50, %60, %70, %80, %85, %90 veya %95 dizi ayniligina sahip bir dizisini içerir. SEK KIM NO: 1, asagidaki örneklerde açiklandigi üzere Xl9-A05 antikorunun degisken agir (VH) bölgesidir ve asagidaki diziye sahiptir: EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTFSGYWMHWVRQAPGKGLEWVSYI SPSGGGTHYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQM NSLRAEDTAVYYCARVRFRS VCSNAVCRPTAYDAFDI WGQGTMVTVSS, ve asagidaki tamamlayicihk belirleme bölgelerini (CDRWer) içerir: VH CDR1: GYWM (SEK KIM NO: 17); VH CDR2: YISPSGGGTHYADSVKG (SEK KIM NO; 18); VH CDR3: VRFRSVCSNAVCRPTAYDAFDI (SEK KIM NO: 19); SEK KIM NO: 2, Xl9-A05 antikorunun degisken hafif (VL) bölgesidir ve asagidaki diziye sahiptir: DlVMTQSPDSLAVSLGERATl N CKSSQSVFYQSN KKNYLAWYQQKPGQPPKL LIYWASTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISS LQAEDVAVYYCQQYFNAPRTFG QGTKVEIK, ve asagidaki tamamlayicilik belirleme bölgelerini (CDRSIer) içerir: VL CDR4: KSSQSVFYQSNKKNYLA (SEK KIM NO: 23); VL CDR5: WASTRES (SEK KIM NO; 25); VL CDRB: QQYFNAPRT (SEK KIM NO; 26), SEK KIM NO:3, asagidaki örneklerde açiklandigi üzere M99-B05 antikorunun degisken agir (VH) bölgesidir ve asagidaki diziye sahiptir: EVQ LLESG GG LVQPGGSLRLSCAASG FTSGYWM HWVRQAPG KG LEWVSYIS PSGGGTHYADSVKGRFTISRDNSKNTLY LQMNSLRAE DTAVYYCARVRFRSV CSNGVCRPTAYDAFDIWGOGTAVTVSS, ve asagidaki tamamlayicilik belirleme bölgelerini (CDR"ler) içerir: VH CDR1: GYWM (SEK KIM NO; 17); VH CDRZZ YlSPSGGGTHYADSVKG (SEK KIM NO; 18); VH CDR3: VRFRSVCSNGVCRPTAYDAFDI (SEK KIM NO: 20) SEK KIM NO: 4, M99-B05 antikorunun degisken hafif (VL) bölgesidir ve asagidaki diziye sahiptir: QDIQMTQSPDSLAVSLGERATINCKSSQSVFYNSN KKNYLAWYQQ KAGQPPK LLIHWASTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISNLQAEDVALYYCQQYFNAPRTF GOGTKVEIK, 11 ve asagidaki tamamlayicilik belirleme bölgelerini (CDR"ler) içerir: VL CDR4: KSSQSVFYNSNKKNYLA(SEK KIM NO: 24); VL CDRS: WASTRES (SEK KIM NO: 25); VL CDR6: OQYFNAPRT (SEK KIM NO: 26), SEK KIM No:5, asagidaki örneklerde açiklandigi üzere Xl9-A01 antikorunun degisken agir (VH) bölgesidir ve asagidaki diziye sahiptir: EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTSGYWMHWVRQAPGKGLEWVSYlS PSGGGTHYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARVRFRSV CSNGVCRPTAYDAFDIWGQGTAVTVSS, ve asagidaki tamamlayicilik belirleme bölgelerini (CDR,ler) içerir: VH CDR1: GYWM ( SEK KIM NO: 17); VH CDR2: YISPSGGGTHYADSVKG( SEK KIM NO; 18); VH CDRB: VRFRSVCSNGVCRPTAYDAFDI (SEK KIM NO: 20), SEK KIM NO: 6, X19-A01 antikorunun degisken hafif (VL) bölgesidir ve asagidaki diziye sahiptir: DIQMTQSPDSLAVSLGERATI NCKSSQSVFYNSNKKNYLAWYQQKAGQP PKL LIHWASTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTI SN LQAEDVALYYCQQYFNAPRTFG QGTKVEIK, ve asagidaki tamamlayicilik belirleme bölgelerini (CDRller) içerir: VL CDR4: KSSQSVFYNSNKKNYLA (SEK KIM NO: 24); VL CDR5: WASTRES (SEK KIM NO: 25); VL CDR6: QQYFNAPRT (SEK KIM NO: 26), SEK KIM NO: 7, asagidaki örneklerde açiklandigi üzere X19-A03 antikorunun degisken agir (VH) bölgesidir ve asagidaki diziye sahiptir: EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASG FTSGYWM HWVRQAPGKG LEWVSYIS PSGGGTHYADSVKGRFTI SRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARVRFRSV CSNAVCRPTAYDAFDIWGQGTMVTVSS, ve asagidaki tamamlayicilik belirleme bölgelerini (CDRller) içerir: VH CDRiz GYWM(SEK KIM NO: 17); VH CDR2: YISPSGGGTHYADSVKG (SEK KIM No; 18); VH CDR3: VRFRSVCSNAVCRPTAYDAFDI (SEK KIM NOS 19), SEK KIM NO: 8, X19-A03 antikorunun degisken hafif (VL) bölgesidir ve asagidaki diziye sahiptir: 13 DIVMTOSPDSLAVSLGERATINCKSSQSVFYOSN KKNYLAWYOQKPGOPPKL LIYWASTRESGVP DRFSGSGSGTD FTLTlSS LQAEDVAVYYCOQYFNAP RT FG QGTKVEIK, ve asagidaki tamamlayicilik belirleme bölgelerini (CDR"ler) içerir: VL co R4: KSSQSVFYOSNKKNYLA(SEK KIM No; 23); VL CDRS: WASTRES (SEK KIM NO: 25); VL CDRG: OQYFNAPRT (SEK KIM NO: 26), SEK KIM NO: 9, asagidaki örneklerde açiklandigi üzere Xl9-A07 antikorunun degisken agir (VH) bölgesidir ve asagidaki diziye sahiptir: EVQLLESGGG LVQ PGGSLRLSCAASGFTSGYWM HWVRQAPGKG LEWVSYl S PSGGGTHYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARVRFRSV CSNGVCRPTAYDAFDIWGQGTMVTVSS, ve asagidaki tamamlayicilik belirleme bölgelerini (CDR,ler) içerir: 14 VH CDR1: GYWM (SEK KIM NO: 17); VH CDR2: YISPSGGGTHYADSVKG (SEK KIM NO: 18); VH CDR3: VRFRSVCSNGVCRPTAYDAFDI (SEK KIM NO; 20), SEK KIM NO: 10, X19-A07 antikorunun degisken hafif (VL) bölgesidir ve asagidaki diziye sahiptir: DIVMTOSPDSLAVSLGERATlNCKSSQSVFYNSNKKNYLAWYQQKPGQPPKL LIYWASTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTlSSLQAEDVAVYYCQQYFNAPRTFG OGTKVEIK, ve asagidaki tamamlayicilik belirleme bölgelerini (CDR,ler) içerir: VL CDR4: KSSOSVFYNSNKKNYLA (SEK KIM NO: 24); VL CDR5: WASTRES (SEK KIM NO: 25); VL CDRG: QQYFNAPRT (SEK KIM NO; 26), SEK KIM NO:l 1, asagidaki Örneklerde açiklandigi üzere Xl9-AO9 antikorunun degisken agir (VH) bölgesidir ve asagidaki diziye sahiptir: EVQLLESGGG LVQPGGSLRLSCAASG FT FSGYWM HWVRQAPG KGLEWVSYI SPSGGGTHYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARVRFRS VCSNGVCRPTAY DAFDlWGQGTMVTVSS, ve asagidaki tamamlayicilik belirleme bölgelerini (CDR,ler) içerir: VH CDR1: GYWM (SEK KIM NO: 17); VH CDR2: YISPSGGGTHYADSVKG (SEK KIM NO; 18); VH CDR3: VRFRSVCSNGVCRPTAYDAFDI (SEK KIM NO; 20), SEK KIM NO: 12, X1 9-A09 antikorunun degisken hafif (VL) bölgesidir ve asagidaki diziye sahiptir: DIVMTQSP DSLAVSLGERATI NCKSSQSVFYNS NKKNYLAWYQQKPGQPPKL LIYWASTRESGVP DRFSGSGSGTDFT LTl SS LQAEDVAVYYCOQYFNAP RTFG QGTKVEIK, ve asagidaki tamamlayicilik belirleme bölgelerini (CDR"ler) içerir: VL CDR4: KSSQSVFYNSNKKNYLA(SEK KIM NO: 24). VL CDRS: WASTRES (SEK KIM NO: 25); VL CDRö: QOYFNAPRT (SEK KIM NO: 26), SEK KIM NO:13, asagidaki örneklerde açiklandigi üzere Xl9-Al l antikorunun degisken agir (VH) bölgesidir ve asagidaki diziye sahiptir: EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTSGYWMHWVRQAPGKGLEWVSYIS PSGGGTHYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARVRFRSV SSNGVSRPTAYDAFDIWGQGTAVTVSS, ve asagidaki tamamlayicilik belirleme bölgelerini (CDR°ler) içerir: VH CDR1: GYWM (SEK KIM NO: 17); VH CDR2: YlSPSGGGTHYADSVKG (SEK KIM NO: 18); VH CDRB: VRFRSVSSNGVSRPTAYDAFDI (SEK KIM NO: 21), 16 SEK KIM NO: 14, X1 9-A11 antikorunun degisken hafif (VL) bölgesidir ve asagidaki diziye sahiptir: DIQMTQSPDS LAVSLGERATI NCKSSQSVFYNSN KKNYLAWYQQKAGQPP KL LI HWASTRESGVPDRFSGSGSGTDFTLTISNLQAEDVALYYCQQYFNAP RTFG QGTKVEIK, ve asagidaki tamamlayicilik belirleme bölgelerini (CDR"ler) içerir: VL CDR4: KSSQSVFYNSNKKNYLA (SEK KIM NO: 24); VL CDRS: WASTRES (SEK KIM NO: 25); VL CDR6: QQYFNAPRT (SEK KIM NO: 26), SEK KIM NO: 15, asagidaki örneklerde açiklandigi üzere X1 9-C01 antikorunun degisken agir (VH) bölgesidir ve asagidaki diziye sahiptir: EVQLLESGGGLVQPGGSLRLSCAASGFTSGYWMHWVRQAPGKGLEWVSYIS PSGGGTHYADSVKGRFTISRDNSKNTLYLQMNSLRAEDTAVYYCARVRFRSV SSNAVSRPTAYDAFDIWGQGTMVTVSS, ve asagidaki tamamlayicilik belirleme bölgelerini (CDR"ler) içerir: VH com: GYWM (SEK KIM NO: 17); VH CDR2: YISPSGGGTHYADSVKG(SEK KIM NO; 18); VH CDR3: VRFRSVSSNAVSRPTAYDAFDI (SEK KIM NO: 22), 17 SEK KIM NO: 16, X19-C01 antikorunun degisken hafif (VL) bölgesidir ve asagidaki diziye sahiptir: DIVMTQSPDSLAVSLGERATI NCKSSQSVFYQSNKKNYLAWYQQKPGQPPKL LIYWASTRESGVPDRFSGSGSGTDFT LTISSLQAEDVAVYYCQQYFNAPRTFG QGTKVEIK, ve asagidaki tamamlayicilik belirleme bölgelerini (CDRller) içerir: VL CDR4: KSSQSVFYQSNKKNYLA (SEK KIM NO; 23); VL CDRS: WASTRES (SEK KIM NO: 25); VL CDR6: QQYFNAPRT (SEK KIM NO: 26). Yukarida tanimlandigi üzere SEK KIM NO,larin bir kisa açiklamasi asagidaki sekilde gösterilir: VH VL CDRl CDR2 CDR3 CDR4 CDRS CDRÖ Xl9-A05 SEK KIM SEK KIM SEK KIM SEK KIM SEK KIM SEK KIM SEK KIM SEK KIM NO: 1 .\'O:2 NO: 17 NO: 18 NO: 19 NO: 23 NO:25 NO: 26 M99-1305 SEK KIM SEK KIM SEK KIM SEK KIM SEK KIM SEK KIM SEK KIM SEK KIM NO: 3 NO: 4 NO: 17 NO: 18 NO: 20 NO:24 NO: 25 NO: 26 Xl9-A01 SEK KIM SEK KIM SEK KIM SEK KIM SEK KIM SEK KIM SEK KIM SEK KIM NO: 5 NO: 6 NO: 17 NO: 18 NO: 20 NO:24 NO: 25 NO: 26 Xl9-A03 SEK KIM SEK KIM SEK KIM SEK KIM SEK KIM SEK KIM SEK KIM SEK KIM NO: 7 `\'0: 8 NO: 17 NO: 18 NO: 19 NO:23 NO:25 NO: 26 X19-A07 SEK KIM SEK KIM SEK KIM SEK KIM SEK KIM SEK KIM SEK KIM SEK KIM NO' 9_ \0~ 10 NO' 17 NO' 113 NO' 2Q NO' 24 NO' 25 NO* 26; XI9-A09 SEK KIM SEK KIM SEK KIM SEK KIM SEK KIM SEK KIM SEK KIM SEK KIM NO: 11 .\'O: 12 NO: 17 NO: 18 NO: 20 NO:24 NO: 25 NO: 26 X19-A11 SEK KIM SEK KIM SEK KIM SEK KIM SEK KIM SEK KIM SEK KIM SEK KIM NO: 13 NO: 14 NO: 17 NO: 18 NO:21 NO: 24 NO: 25 NO: 26 X19-C01 SEK KIM SEK KIM SEK KIM SEK KIM SEK KIM SEK KIM SEK KIM SEK KIM NO: 15 NO: 16 NO: 17 NO: 18 NO:22 NO:23 NO: 25 NO: 26 Bir tarifnamede antikor veya antikor parçasi X19-A05"in VH ve/veya VL bölgelerine dayalidir ve böylece - VH bölgesi (i) SEK KIM NO:1 ile en az %80, %85, %90, %95 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içerir ve/veya (ii) SEK KIM NO:17,nin dizisi ile en az %25, %50, %75 CDRl dizisi, SEK KIM NO:18,in dizisi ile en az %5, %11, %17, %23, %29, %35, %47, %52, %58, %64, %70, %76, %82, %94 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDR2 dizisi ve SEK KIM NO: 19,un dizisi ile en az %4, %9 %13, %18, %22, %27, %31, %36, %40, %45, %50, %54, %59, %63, %68, %72, %77, %81, %86, %90, %95 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDR3 dizisini içerir; ve/veya VL bölgesi (iii) SEK KIM N02 ile en az %80, %85, %90, %95 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içerir ve/Veya (iv) SEK KIM NO:237ün dizisi ile en az %5, %11, %17, %23, %29, %35, %47, %52, %58, %64, %70, %76, %82, %94 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDR4 dizisi, SEK KIM NO: 25,in dizisi ile en az %14, %28, %42, %57, %71, %85 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDR5 dizisi ve SEK KIM NO: 26°nin dizisi ile en az %11, %22, %33, %44, %55, %66, %77, %88 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDR6 dizisini içerir. VH bölgesinin SEK KIM NO:1,in dizisini içermesi ve VL bölgesinin SEK KIM NO:2,nin dizisini içermesi tercih edilebilir. Bu tarifnamenin antikor veya antikor parçasi ayrica, bir agir zincir sabit (CH) bölgesi veya bunun bir parçasini içerebilir, bu parça bir CH bölgesinin örnegin en az 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 120, 140, 160, 180, 200, 220, 240, 260, 280, 300, 320 veya daha fazla amino asidini içerebilir. CH bölgesi veya bunun bir parçasi, VH bölgesine baglanabilir. Bir düzenlemede bunun bir insan CH bölgesi olmasina ragmen CH bölgesinde herhangi bir belirli sinirlama yoktur. Teknik, insan CH bölgelerinin birçok örnegini içerir. Bu baglamda kullanilmaya yönelik örnek niteligindeki CH bölgeleri asagidakileri içerir: ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHT FPAVLOSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDK THTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKF NWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNK ALPAPlEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESN GOPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMH EA LHNHYTQKSLSLSPGK (SEO ID NO:(SEK KIM NO: 27); ve ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHT FPAVLOSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDK THTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVWDVSHEDPEVKF NWYVDGVEVHNAKTKPREEQYNSTYRWSVLTVLHODWLNGKEYKCKVSNK ALPAPlEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSRDELTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVE WESN GOPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEA LHNHYTQKSLSLSPG (SEO ID NO:(SEK KIM NO: 28). SEK KIM NO:27 M99-B05"in CH bölgesidir ve Insan lgG1"in bir CH bölgesinin dizisine sahiptir (Uni-ProtKB/Swiss-Prot: P01857.1). SEK KIM NO: 28, X19-A059in CH bölgesidir. SEK KIM NO: 28, SEK KIM NO: 27aden SEK KIM NO:28ain CH bölgesindeki terminal Ksnin (Lys) uzaklastirilmasi ile farklilik gösterir, bu da peptidaz bozunmasina yönelik potansiyeli azaltir veya önler. Bu düzenlemenin antikor veya antikor parçasi ek olarak veya alternatif olarak ayrica, bir hafif zincir sabit (CL) bölgesi veya bunun bir parçasini içerebilir, bu parça bir CL bölgesinin örnegin en az 10, , 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100 veya daha fazla ainino asidini içerebilir. CL bölgesi veya bunun bir parçasi, VL bölgesine baglanabilir. Bir düzenlemede bunun bir insan CL bölgesi olmasina ragmen CL bölgesinde herhangi bir belirli sinirlama yoktur. Teknik, insan CL bölgelerinin birçok örnegini içerir. Bu baglamda kullanilmaya yönelik örnek niteligindeki bir CL bölgesi asagidakini içerir: RTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVOWKVDNALQSGNS QESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNR GEC (SEO ID NO:(SEK KIM NO: 29). SEK KIM NO:29 M99-B05 ve Xl9-A057in CL bölgesidir ve Insan kappa CL bölgesinin dizisine sahiptir (UniProtKB/Swiss-Prot: P01834.l). Bu tarifnameye göre, VH bölgesinin, SEK KIM NO:28°in CH bölgesine bagli SEK KIM NO: 1 "in dizisini içermesi ve VL bölgesinin SEK KIM NO:29"un CL bölgesine bagli SEK KIM NO:2,Nin dizisini içermesi tercih edilebilir. Bir diger tarifnamede antikor veya antikor parçasi M99-BOS antikorunun VH ve/veya VL bölgelerine dayalidir ve böylece - VH bölgesi (i) SEK KIM N03 ile en az %80, %85, %90, %95 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içerir ve/veya (ii) SEK KIM NO:17,nin dizisi ile en az %25, %50, %75 CDRl dizisi, SEK KIM NO:18,in dizisi ile en az %5, %11, %17, %23, %29, %35, %47, %52, %58, %64, %70, %76, %82, %94 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDR2 dizisi ve SEK KIM NO: 207nin dizisi ile en az %4, %9 %13, %18, %22, %27, %31, %36, %40, %45, %50, %54, %59, %63, %68, %72, %77, %81, %86, %90, %95 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDR3 dizisini içerir; ve/Veya VL bölgesi (iii) SEK KIM NO:4 ile en az %80, %85, %90, %95 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içerir ve/veya (iv) SEK KIM NO:24"ün dizisi ile en az %5, %11, %17, %23, %29, %35, %47, %52, %58, %64, %70, %76, %82, %94 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDR4 dizisi, SEK KIM NO: 25"in dizisi ile en az %14, %28, %42, %57, %71, %85 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDR5 dizisi ve SEK KIM NO: 26,n1n dizisi ile en az %11, %22, %33, %44, %55, %66, %77, %88 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDR6 dizisini içerir. VH bölgesinin SEK KIM NO:3°ün dizisini içermesi ve VL bölgesinin SEK KIM NO:4,ün dizisini içermesi tercih edilebilir. Bu tarifnamenin antikor veya antikor parçasi ayrica, bir agir zincir sabit (CH) bölgesi veya bunun bir parçasini içerebilir, bu parça bir CH bölgesinin örnegin en az 10, 20, 30,40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 120, 140, 160, 180, 200, 220, 240, 260, 280, 300, 320 veya daha fazla amino asidini içerebilir. CH bölgesi veya bunun bir parçasi, VH bölgesine baglanabilir. Bir düzenlemede bunun bir insan CH bölgesi olmasina ragmen CH bölgesinde herhangi bir belirli sinirlama yoktur. Teknik, insan CH bölgelerinin birçok örnegini içerir. Bu baglamda kullanilmaya yönelik örnek niteligindeki CH bölgeleri SEK KIM NO: 27 ve 27 ve SEK KIM NO: 28'i içerir. Bu tarifnamenin antikor veya antikor parçasi ek olarak veya alternatif olarak ayrica, bir hafif zincir sabit (CL) bölgesi veya bunun bir parçasini içerebilir, bu parça bir CL bölgesinin örnegin en az 10, 20, , 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100 veya daha fazla amino asidini içerebilir. CL bölgesi veya bunun bir parçasi, VL bölgesine baglanabilir. Bir düzenlemede bunun bir insan CL bölgesi olmasina ragmen CL bölgesinde herhangi bir belirli sinirlama yoktur. Teknik, insan CL bölgelerinin birçok örnegini içerir. Bu baglamda kullanilmaya yönelik örnek niteligindeki bir insan CL bölgesi SEK KIM NO: 29"u içerir. Bu tarifnameye göre, VH bölgesinin, SEK KIM NO:27 veya 28jin CH bölgesine bagli SEK KIM NO:3,ün dizisini içermesi ve VL bölgesi SEK KIM NO:29,un CL bölgesine bagli SEK KIM NO:4,ün dizisini Içermesi tercih edilebilir. Bir diger tarifnamede antikor veya antikor parçasi Xl9-A01 antikorunun VH ve/veya VL bölgelerine dayalidir ve böylece - VH bölgesi (i) SEK KIM NO:5 ile en az %80, %85, %90, %95 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içerir ve/Veya (ii) SEK KIM NO:17"nin dizisi ile en az %25, %50, %75 CDR] dizisi, SEK KIM NO:18"in dizisi ile en az %5, %11, %17, %23, %29, %35, %47, %52, %58, %64, %70, %76, %82, %94 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDR2 dizisi ve SEK KIM NO: 20,nin dizisi ile en az %4, %9 %13, %18, %22, %27, %31, %36, %40, %45, %50, %54, %59, %63, %68, %72, %77, %81, %86, %90, %95 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDR3 dizisini içerir; ve/veya VL bölgesi (i) SEK KIM NO:6 ile en az %80, %85, %90, %95 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içerir ve/veya (iV) SEK KIM NO:24sün dizisi ile en az %5, %11, %17, %23, %29, %35, %47, %52, %58, %64, %70, %76, %82, %94 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDR4 dizisi, SEK KIM NO: 25,in dizisi ile en az %14, %28, %42, %57, %71, %85 CDR5 dizisi ve SEK KIM NO: 267nin dizisi ile en az %11, %22, %33, %44, %55, %66, %77, %88 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDR6 dizisini içerir. VH bölgesinin SEK KIM NO:5,in dizisini içermesi ve VL bölgesinin SEK KIM NO:6,nin dizisini içermesi tercih edilebilir. Bu tarifnainenin antikor veya antikor parçasi ayrica, bir agir zincir sabit (CH) bölgesi veya bunun bir parçasini içerebilir, bu parça bir CH bölgesinin örnegin en az 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 120, 140, 160, 180, 200, 220, 240, 260, 280, 300, 320 veya daha fazla amino asidini içerebilir. CH bölgesi veya bunun bir parçasi, VH bölgesine baglanabilir. Bir düzenlemede bunun bir insan CH bölgesi olmasina ragmen CH bölgesinde herhangi bir belirli sinirlama yoktur. Teknik, insan CH bölgelerinin birçok örnegini içerir. Bu baglamda kullanilmaya yönelik örnek niteligindeki insan CH bölgeleri SEK KIM NO: 27 ve SEK KIM NO: 28,i içerir. Bu tarifnamenin antikor veya antikor parçasi ek olarak veya alternatif olarak ayrica, bir hafif zincir sabit (CL) bölgesi veya bunun bir parçasini içerebilir, bu parça bir CL bölgesinin örnegin en az 10, 20, , 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100 veya daha fazla amino asidini içerebilir. CL bölgesi veya bunun bir parçasi, VL bölgesine baglanabilir. Bir düzenlemede bunun bir insan CL bölgesi olmasina ragmen CL bölgesinde herhangi bir belirli sinirlama yoktur. Teknik, insan CL bölgelerinin birçok örnegini içerir. Bu baglamda kullanilmaya yönelik örnek niteligindeki bir insan CL bölgesi SEK KIM NO: 293u içerir. Bu düzenlemeye göre, VH bölgesinin, SEK KIM NO:27 veya 28"in CH bölgesine bagli SEK KIM NO:5,in dizisini içermesi ve VL bölgesi SEK KIM NO:29,un CL bölgesine bagli SEK KIM NO:6"n1n dizisini içermesi tercih edilebilir. Bir diger tarifnamede antikor veya antikor parçasi X19-A03 antikorunun VH ve/Veya VL bölgelerine dayalidir ve böylece - VH bölgesi (i) SEK KIM NO:7 ile en az %80, %85, %90, %95 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içerir ve/Veya (ii) SEK KIM NO:179nin dizisi ile en az %25, %50, %75 CDRl dizisi, SEK KIM NO:18°in dizisi ile en az %5, %11, %17, %23, %29, %35, %47, %52, %58, %64, %70, %76, %82, %94 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDR2 dizisi ve SEK KIM NO: l9*un dizisi ile en az %4, %9 %13, %18, %22, %27, %31, %36, %40, %45, %50, %54, %59, %63, %68, %72, %77, %81, %86, %90, %95 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDR3 dizisini içerir; ve/Veya VL bölgesi (iii) SEK KIM NO:8 ile en az %80, %85, %90, %95 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içerir ve/Veya (iV) SEK KIM NO:23"ün dizisi ile en az %5, %11, %17, %23, %29, %35, %47, %52, %58, %64, %70, %76, %82, %94 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDR4 dizisi, SEK KIM NO: 25,in dizisi ile en az %14, %28, %42, %57, %71, %85 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDR5 dizisi ve SEK KIM NO: 267nin dizisi ile en az %11, %22, %33, %44, %55, %66, %77, %88 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDR6 dizisini içerir. VH bölgesinin SEK KIM NO:7"nin dizisini içermesi ve VL bölgesinin SEK KIM NO:8"in dizisini içermesi tercih edilebilir. Bu tarifnamenin antikor veya antikor parçasi ayrica, bir agir zincir sabit (CH) bölgesi veya bunun bir parçasini içerebilir, bu parça bir CH bölgesinin örnegin en az 10, 20, 30,40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 120, 140, 160, 180, 200, 220, 240, 260, 280, 300, 320 veya daha fazla amino asidini içerebilir. CH bölgesi veya bunun bir parçasi, VH bölgesine baglanabilir. Bir düzenlemede bunun bir insan CH bölgesi olmasina ragmen CH bölgesinde herhangi bir belirli sinirlama yoktur. Teknik, insan CH bölgelerinin birçok örnegini içerir. Bu baglamda kullanilmaya yönelik örnek niteligindeki insan CH bölgeleri SEK KIM NO: 27 ve SEK KIM NO: 28,i içerir. Bu tarifnamenin antikor veya antikor parçasi ek olarak veya alternatif olarak ayrica, bir hafif zincir sabit (CL) bölgesi veya bunun bir parçasini içerebilir, bu parça bir CL bölgesinin örnegin en az 10, 20, , 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100 veya daha fazla amino asidini içerebilir. CL bölgesi veya bunun bir parçasi, VL bölgesine baglanabilir. Bir düzenlemede bunun bir insan CL bölgesi olmasina ragmen CL bölgesinde herhangi bir belirli sinirlama yoktur. Teknik, insan CL bölgelerinin birçok örnegini içerir. Bu baglamda kullanilmaya yönelik örnek niteligindeki bir insan CL bölgesi SEK KIM NO: 29"u içerir. Bu tarifnameye göre, VH bölgesinin, SEK KIM NO:27 veya 28,in CH bölgesine bagli SEK KIM NO:7,nin dizisini içermesi ve VL bölgesinin SEK KIM NO:29"un CL bölgesine bagli SEK KIM NO:8,in dizisini içermesi tercih edilebilir. Bir diger tarifnamede antikor veya antikor parçasi Xl9-A07 antikorunun VH ve/veya VL bölgelerine dayalidir ve böylece - VH bölgesi (i) SEK KIM NO:9 ile en az %80, %85, %90, %95 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içerir ve/veya (ii) SEK KIM NO:17anin dizisi ile en az %25, %50, %75 CDRl dizisi, SEK KIM NO:18,in dizisi ile en az %5, %11, %17, %23, %29, %35, %47, %52, %58, %64, %70, %76, %82, %94 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDR2 dizisi ve SEK KIM NO: 20,nin dizisi ile en az %4, %9 %13, %18, %22, %27, %31, %36, %40, %45, %50, %54, %59, %63, %68, %72, %77, %81, %86, %90, %95 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDR3 dizisini içerir; ve/veya VL bölgesi (iii) SEK KIM NO:10 ile en az %80, %85, %90, %95 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içerir ve/Veya (iv) SEK KIM NO:24°ün dizisi ile en az %5, %11, %17, %23, %29, %35, %47, %52, %58, %64, %70, %76, %82, %94 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDR4 dizisi, SEK KIM NO: 25,in dizisi ile en az %14, %28, %42, %57, %71, %85 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDRS dizisi ve SEK KIM NO: 26"nin dizisi ile en az %11, %22, %33, %44, %55, %66, %77, %88 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDR6 dizisini içerir. VH bölgesinin SEK KIM NO:9,un dizisini içermesi ve VL bölgesinin SEK KIM NO:101un dizisini içermesi tercih edilebilir. Bu tarifiiamenin antikor veya antikor parçasi ayrica, bir agir zincir sabit (CH) bölgesi veya bunun bir parçasini içerebilir, bu parça bir CH bölgesinin örnegin en az 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 120, 140, 160, 180, 200, 220, 240, 260, 280, 300, 320 veya daha fazla amino asidini içerebilir. CH bölgesi veya bunun bir parçasi, VH bölgesine baglanabilir. Bir düzenlemede bunun bir insan CH bölgesi olmasina ragmen CH bölgesinde herhangi bir belirli sinirlama yoktur. Teknik, insan CH bölgelerinin birçok örnegini içerir. Bu baglamda kullanilmaya yönelik örnek niteligindeki insan CH bölgeleri SEK KIM NO: 27 ve SEK KIM NO: 28"i içerir. Bu tarifnamenin antikor veya antikor parçasi ek olarak veya alternatif olarak ayrica, bir hafif zincir sabit (CL) bölgesi veya bunun bir parçasini içerebilir, bu parça bir CL bölgesinin Örnegin en az 10, 20, , 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100 veya daha fazla amino asidini içerebilir. CL bölgesi veya bunun bir parçasi, VL bölgesine baglanabilir. Bir düzenlemede bunun bir insan CL bölgesi olmasina ragmen CL bölgesinde herhangi bir belirli sinirlama yoktur. Teknik, insan CL bölgelerinin birçok örnegini içerir. Bu baglamda kullanilmaya yönelik örnek niteligindeki bir insan CL bölgesi SEK KIM NO: 29,u içerir. Bu tarifnameye göre, VH bölgesinin, SEK KIM NO:27 veya 28°in CH bölgesine bagli SEK KIM NO:9"un dizisini içermesi ve VL bölgesinin SEK KIM NO:29sun CL bölgesine bagli SEK KIM NO: 1 0"un dizisini içermesi tercih edilebilir. Bir diger tarifnamede antikor veya antikor parçasi Xl9-A09 antikorunun VH ve/Veya VL bölgelerine dayalidir ve böylece - VH bölgesi (i) SEK KIM NO:11 ile en az %80, %85, %90, %95 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içerir ve/Veya (ii) SEK KIM NO:17"nin dizisi ile en az %25, %50, %75 CDR] dizisi, SEK KIM NO:18'in dizisi ile en az %5, %11, %17, %23, %29, %35, %47, %52, %58, %64, %70, %76, %82, %94 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDR2 dizisi ve SEK KIM NO: 20,nin dizisi ile en az %4, %9 %13, %18, %22, %27, %31, %36, %40, %45, %50, %54, %59, %63, %68, %72, %77, %81, %86, %90, %95 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDR3 dizisini içerir; ve/Veya VL bölgesi (iii) SEK KIM NO:12 ile en az %80, %85, %90, %95 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içerir ve/veya (iv) SEK KIM NO:24"ün dizisi ile en az %5, %11, %17, %23, %29, %35, %47, %52, %58, %64, %70, %76, %82, %94 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDR4 dizisi, SEK KIM NO: 253in dizisi ile en az %14, %28, %42, %57, %71, %85 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDR5 dizisi ve SEK KIM NO: 267nin dizisi ile en az %11, %22, %33, %44, %55, %66, %77, %88 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDR6 dizisini içerir. VH bölgesinin SEK KIM NO:11"in dizisini içermesi ve VL bölgesinin SEK KIM NO:12"nin dizisini içermesi tercih edilebilir. Bu tarifnamenin antikor veya antikor parçasi ayrica, bir agir zincir sabit (CH) bölgesi veya bunun bir parçasini içerebilir, bu parça bir CH bölgesinin örnegin en az 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 120, 140, 160, 180, 200, 220, 240, 260, 280, 300, 320 veya daha fazla amino asidini içerebilir. CH bölgesi veya bunun bir parçasi, VH bölgesine baglanabilir. Bir düzenlemede bunun bir insan CH bölgesi olmasina ragmen CH bölgesinde herhangi bir belirli sinirlama yoktur. Teknik, insan CH bölgelerinin birçok örnegini içerir. Bu baglamda kullanilmaya yönelik örnek niteligindeki insan CH bölgeleri SEK KIM NO: 27 ve SEK KIM NO: 28,i içerir. Bu tarifnamenin antikor veya antikor parçasi ek olarak veya alternatif olarak ayrica, bir hafif zincir sabit (CL) bölgesi veya bunun bir parçasini içerebilir, bu parça bir CL bölgesinin örnegin en az 10, 20, , 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100 veya daha fazla amino asidini içerebilir. CL bölgesi veya bunun bir parçasi, VL bölgesine baglanabilir. Bir düzenlemede bunun bir insan CL bölgesi olmasina ragmen CL bölgesinde herhangi bir belirli sinirlama yoktur. Teknik, insan CL bölgelerinin birçok örnegini içerir. Bu baglamda kullanilmaya yönelik örnek niteligindeki bir insan CL bölgesi SEK KIM NO: 293u içerir. Bu tarifnameye göre, VH bölgesinin, SEK KIM NO:27 veya 28°in CH bölgesine bagli SEK KIM N02] l"un dizisini içermesi ve VL bölgesinin SEK KIM NO:29°un CL bölgesine bagli SEK KIM NO: 12,nin dizisini içermesi tercih edilebilir. Bir diger tarifnamede antikor veya antikor parçasi Xl9-A11 antikorunun VH ve/veya VL bölgelerine dayalidir ve böylece - VH bölgesi (i) SEK KIM NO:13 ile en az %80, %85, %90, %95 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içerir ve/veya (ii) SEK KIM NO:17anin dizisi ile en az %25, %50, %75 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDRl dizisi, SEK KIM NO:18"in dizisi ile en az %5, %11, %17, %23, %29, %35, %47, %52, %58, %64, %70, %76, %82, %94 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDR2 dizisi ve SEK KIM NO: 217in dizisi ile en az %4, %9 %13, %18, %22, %27, %31, %36, %40, %45, %50, %54, %59, %63, %68, %72, %77, %81, %86, %90, %95 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDR3 dizisini içerir; ve/Veya VL bölgesi (i) SEK KIM NO:14 ile en az %80, %85, %90, %95 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içerir ve/Veya (iv) SEK KIM NO:24"ün dizisi ile en az %5, %11, %17, %23, %29, %35, %47, %52, %58, %64, %70, %76, %82, %94 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDR4 dizisi, SEK KIM NO: 25"in dizisi ile en az %14, %28, %42, %57, %71, %85 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDR5 dizisi ve SEK KIM NO: 267nin dizisi ile en az %11, %22, %33, %44, %55, %66, %77, %88 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDR6 dizisini içerir. VH bölgesinin SEK KIM NO:13"ün dizisini içermesi ve VL bölgesinin SEK KIM NO:14,ün dizisini içermesi tercih edilebilir. Bu tarifnamenin antikor veya antikor parçasi ayrica, bir agir zincir sabit (CH) bölgesi veya bunun bir parçasini içerebilir, bu parça bir CH bölgesinin örnegin en az 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 120, 140, 160, 180, 200, 220, 240, 260, 280, 300, 320 veya daha fazla amino asidini içerebilir. CH bölgesi veya bunun bir parçasi, VH bölgesine baglanabilir. Bir düzenlemede bunun bir insan CH bölgesi olmasina ragmen CH bölgesinde herhangi bir belirli sinirlama yoktur. Teknik, insan CH bölgelerinin birçok örnegini içerir. Bu baglamda kullanilmaya yönelik örnek niteligindeki insan CH bölgeleri SEK KIM NO: 27 ve SEK KIM NO: 28"i içerir. Bu tarifnamenin antikor veya antikor parçasi ek olarak veya alternatif olarak ayrica, bir hafif zincir sabit (CL) bölgesi veya bunun bir parçasini içerebilir, bu parça bir CL bölgesinin örnegin en az 10, 20, , 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100 veya daha fazla amino asidini içerebilir. CL bölgesi veya bunun bir parçasi, VL bölgesine baglanabilir. Bir düzenlemede bunun bir insan CL bölgesi olmasina ragmen CL bölgesinde herhangi bir belirli sinirlama yoktur. Teknik, insan CL bölgelerinin birçok örnegini içerir. Bu baglamda kullanilmaya yönelik örnek niteligindeki bir insan CL bölgesi SEK KIM NO: 29"u içerir. Bu tarifname düzenlemesine göre, VH bölgesinin, SEK KIM NO:27 veya 28,in CH bölgesine bagli SEK KIM NO:13,ün dizisini içermesi ve VL bölgesinin SEK KIM NO:29,un CL bölgesine bagli SEK KIM NO: 14,ün dizisini içermesi tercih edilebilir. Bir diger tarifnamede antikor veya antikor parçasi X19-C01 antikorunun VH ve/veya VL bölgelerine dayalidir ve böylece - VH bölgesi (i) SEK KIM NO:15 ile en az %80, %85, %90, %95 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içerir ve/Veya (ii) SEK KIM NO:17"nin dizisi ile en az %25, %50, %75 CDR] dizisi, SEK KIM NO:18"in dizisi ile en az %5, %11, %17, %23, %29, %35, %47, %52, %58, %64, %70, %76, %82, %94 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDR2 dizisi ve SEK KIM NO: 22,nin dizisi ile en az %4, %9 %13, %18, %22, %27, %31, %36, %40, %45, %50, %54, %59, %63, %68, %72, %77, %81, %86, %90, %95 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDR3 dizisini içerir; ve/Veya VL bölgesi (iii) SEK KIM NO:16 ile en az %80, %85, %90, %95 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içerir ve/veya (iv) SEK KIM NO:233ün dizisi ile en az %5, %11, %17, %23, %29, %35, %47, %52, %58, %64, %70, %76, %82, %94 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDR4 dizisi, SEK KIM NO: 25iin dizisi ile en az %14, %28, %42, %57, %71, %85 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içeren bir CDR5 dizisi ve SEK KIM NO: 267nin dizisi ile en az %11, %22, %33, %44, %55, %66, %77, %88 veya %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit NO: 15,in dizisini içermesi ve VL bölgesinin SEK KIM NO: 16inin dizisini içermesi tercih edilebilir. Bu tarifnamenin antikor veya antikor parçasi ayrica, bir agir zincir sabit (CH) bölgesi veya bunun bir parçasini içerebilir, bu parça bir CH bölgesinin örnegin en az 10, 20, 30,40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 120, 140, 160, 180, 200, 220, 240, 260, 280, 300, 320 veya daha fazla amino asidini içerebilir. CH bölgesi veya bunun bir parçasi, VH bölgesine baglanabilir. Bir düzenlemede bunun bir insan CH bölgesi olmasina ragmen CH bölgesinde herhangi bir belirli sinirlama yoktur. Teknik, insan CH bölgelerinin birçok örnegini içerir. Bu baglamda kullanilmaya yönelik örnek niteligindeki insan CH bölgeleri SEK KIM NO: 27 ve SEK KIM NO: 28°i içerir. Bu tarifnamenin antikor veya antikor parçasi ek olarak veya alternatif olarak ayrica, bir hafif zincir sabit (CL) bölgesi veya bunun bir parçasini içerebilir, bu parça örnegin bir CL bölgesinin örnegin en az , 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100 veya daha fazla amino asidini içerebilir. CL bölgesi veya bunun bir parçasi, VL bölgesine baglanabilir. Bir düzenlemede bunun bir insan CL bölgesi olmasina ragmen CL bölgesinde herhangi bir belirli sinirlama yoktur. Teknik, insan CL bölgelerinin birçok örnegini içerir. Bu baglamda kullanilmaya yönelik örnek niteligindeki bir insan CL bölgesi SEK KIM NO: 29,u içerir. Teknik, insan CL bölgelerinin birçok örnegini içerir. Bu baglamda kullanilmaya yönelik örnek niteligindeki bir insan CL bölgesi SEK KIM NO: 2911 içerir. Bu tarifnameye göre, VH bölgesinin, SEK KIM NO:27 veya 28°in CH bölgesine bagli SEK KIM NO:151in dizisini içermesi ve VL bölgesinin SEK KIM No:29lun CL bölgesine bagli SEK KIM NO: 163nin dizisini içermesi tercih edilebilir. Yukaridaki çesitli düzenlemelerde CH bölgeleri ve bunun parçalarinin açiklamasinin, bunun bir varyantlnln kullanim seçenegini içermesi hedeflenir. Varyant, %50, %60, %70, %80, %85, %90, %95, %96, %97, %98 veya %99"dan fazla dizi aynillgi gibi olmak üzere belirtilen CH bölgesi veya bunun parçasi ile %100°den az dizi aynillglna sahip bir diziyi içerir. Buna göre bir CH bölgesi veya bunun bir parçasinin varyantlari, belirtilen CH bölgesi veya bunun parçasina kiyasla bir veya daha fazla (örnegin, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 15, 20, 25, 30, 40, 50, 60, 70 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150 160 veya daha fazla) dizi varyasyonuna sahip olabilir. Dizideki varyasyonlar, belirtilen CH bölgesi veya bunun parçasina kiyasla bir veya daha fazla amino asit ekleme, bir veya daha fazla amino asit silme ve/Veya bir veya daha fazla amino asit substitüsyonundan dolayi olabilir. Birden fazla varyasyonun oldugu yerde, akabinde varyasyonlar ardisik veya ardisik olinayan pozisyonlarda olabilir. Ayni sekilde, yukaridaki çesitli tarifnamelerde CL bölgeleri ve bunun parçalarinin açiklamasinin ayrica bunun bir varyantinin kullanim seçenegini içermesi hedeflenir. Varyant, %50, %60, %70, %80, %85, %90, %95, %96, %97, %98 veya %99,dan fazla dizi ayniligi gibi olmak üzere belirtilen CL bölgesi veya bunun parçasi ile %100,den az dizi ayniligina sahip bir diziyi içerir. Buna göre bir CL bölgesi veya bunun bir parçasinin varyantlari, belirtilen CL bölgesi veya bunun parçasina kiyasla bir veya daha fazla (örnegin, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, , 20, 25, 30, 40, 50, 60 veya daha fazla) dizi varyasyonuna sahip olabilir. Dizideki varyasyonlar, belirtilen CL bölgesi veya bunun parçasina kiyasla bir veya daha fazla amino asit ekleme, bir veya daha fazla amino asit silme ve/Veya bir veya daha fazla amino asit substitüsyonundan dolayi olabilir. Birden fazla varyasyonun oldugu yerde, akabinde varyasyonlar ardisik veya ardisik olmayan pozisyonlarda olabilir. Yukaridaki tarifnamelere göre antikor veya antikor parçasinda, VH bölgesi, VL bölgesi veya tercihen VH ve VL bölgelerinin her ikisinin de, belirtilen SEK KIM NO ile veya ayri CDR dizilerine karsilik gelen belirtilen SEK KIM NO°larin durumunda, akabinde her birinin biri veya daha fazlasi (örnegin iki veya üç) ile %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içermesi tercih edilebilir. Alternatif olarak VH bölgesi, VL bölgesi veya tercihen VH ve VL bölgelerinin her ikisinin de, belirtilen SEK KIM NO ile veya ayri CDR dizilerine karsilik gelen belirtilen SEK KIM NO,larin durumunda, akabinde her birinin biri veya daha fazlasi (örnegin iki veya üç) ile %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içerebilir. Bir tarifnamede, belirtilen SEK KIM NO ile %100'den aza sahip bir amino asit dizisini içeren bir dizi, belirtilen SEK KIM NO,ya kiyasla bir veya daha fazla (örnegin, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 veya daha fazla) dizi varyasyonuna sahip olan bir dizi olabilir. Dizideki varyasyonlar belirtilen SEK KIM NO7ya kiyasla bir veya daha fazla (örnegin 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 veya daha fazla) amino asit ekleme, bir veya daha fazla (örnegin 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 veya daha fazla) amino asit silme ve/veya bir veya daha fazla (örnegin 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10 veya daha fazla) amino asit substitüsyonundan dolayi olabilir. Birden fazla varyasyonun oldugu yerde, akabinde varyasyonlar ardisik veya ardisik olmayan pozisyonlarda olabilir. SEK KIM NO: 1 ila 167dan seçilen belirtilen bir SEK KIM NO ile %100,den az, ancak en az %80, %85, %90, %95 dizi ayniligina sahip olan bir varyant antijen baglama bölgesinde dizideki bir veya daha fazla varyasyon çerçeve bölgelerinin biri veya daha fazlasini olusturan amino asit dizisinde veya özellikle bunda bulunabilir. Çerçeve bölgeleri, burada tanimlandigi üzere CDR°leri olusturmayan amino asit bölgelerini içerir. Ek olarak veya alternatif olarak, SEK KIM NO: 1 ila 16°dan seçilen belirtilen bir SEK KIM NO ile %100,den az, ancak en az %80, %85, %90, %95 dizi ayniligina sahip olan bir varyant antijen baglama bölgesinde dizideki bir veya daha fazla varyasyon tamamlayicilik belirleme bölgelerinin (CDRller) biri veya daha fazlasini olusturan amino asit dizisinde veya özellikle bunda bulunabilir. SEK KIM NO:1-16"daki CDR,ler yukarida tanimlanan sekildedir ve ayrica asagidaki Tablolar 2 ve 3lte gösterilir. Bulusun birinci açisinin tüm açiklamalarinda genel olarak antikor veya antikor parçasinin baglanma özellikleri ve/veya in vivo etkinligi büyük ölçüde degistirilmeksizin CDR"lerde oldugundan daha yüksek dizi modifikasyonu seviyeleri çerçeve bölgelerinde tolere edilebilir. Böylece bir diger tarifnamede, mevcut bulusun birinci açisina göre bir antikor veya antikor parçasinda bir, bu veya her bir CDR, SEK KIM NO 17 ila 26"n1n birinde tanimlanan "ana, CDR dizisine kiyasla lae kadar amino ait substitüsyonu, eklemesi ve/veya silmesini içerebilir. Ek olarak ve/veya alternatif olarak, mevcut bulusun birinci açisina göre bir antikor veya antikor parçasindaki bir, bu veya her bir çerçeve bölgesi, SEK KIM NO 1 ila 16,da tanimlanan VH veya VL dizilerinin herhangi birinde bulunan karsilik gelen çerçeve dizilerine kiyasla l, 2, 3,4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19,20 veya daha fazla amino asit substitüsyonu, eklemesi ve/veya silmesi ve istege bagli olarak 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 veya 1 "den daha fazla olinayan amino asit substitüsyonu, eklemesi ve/veya silmesini içerebilir; herhangi bir çerçeve bölgesinde uygulanan amino asit substitüsyonu, eklemesi ve/Veya silmesinin sayisinin dizi ayniligi seviyesini karsilik gelen tanimlanmis SEK KIM NOsya kiyasla %10, %20, %30, %40, %50, %60, %70, %75, %80, %85, %90, %95"ten daha aza indirmemesi tercih edilebilir. Çerçeve veya tamamlayicilik belirleme bölgelerinin biri veya daha fazlasinda olsun veya olmasin substitüsyonlar konservatif veya konservatif olmayan substitüsyonlar olabilir. "Konservatif substitüsyonlar" ile, Gly, Ala; Val, Ile, Leu; Asp, Glu; Asn, Gln; Ser, Thr; Lys, Arg; ve Phe, Tyr gibi kombinasyonlar hedeflenir. Dizi varyasyonlari örnegin, antijen baglama bölgesinin (bölgelerinin) dizisini germ hatti dizilerine daha yakin bir hale getirmek, varyant antijen baglama bölgesini (bölgelerini) içeren antikor veya antikor parçasinin stabilitesini attirmak, varyant antijen baglama bölgesini (bölgelerini) içeren antikor veya antikor parçasinin immünojenesitesini azaltmak ve/Veya üretim sürecinde dezavantajli olabilen özellikleri önlemek veya azaltmak amaciyla uygulanabilir. Uygun dizi varyasyonlarinin sinirlayici olmayan örnekleri, X19-A01, X19-A03, X19-A05, X19-A07, Xl9-A09, X19-A11 ve/Veya X19- COl,i olusturmak amaciyla M99-B05sin agir ve/veya hafif zincir dizilerine uygulanan varyasyonlarin referansi ile örneklerde gösterilir. Bu tür varyasyonlar, asagida açiklanan sekilde protein mühendisligi ve bölgeye yönlendirilmis mutajenez yöntemleri veya teknikte iyi bilinen alternatif yöntemler kullanilarak yapilabilir. Mevcut bulusun birinci açisinin antikor veya antikor parçasinin VH bölgesi, VL bölgesi veya VH ve VL bölgelerinin her ikisinin belirtilen SEK KIM NO ile veya bunun her birinden biri veya da fazlasi ile %100'den az dizi ayniligina sahip oldugu yerde, akabinde bir düzenlemede antikor veya antikor parçasinin fosforilkolin ve/Veya bir fosforilkolin konjugatina baglanma yetenegi örnegin, karsilik gelen bir "ana, antikor veya antikor parçasinin yetenegine büyük oranda esit olabilir (diger bir deyisle, en az %80, %85, %90 veya %95) veya bundan daha fazla olabilir, burada karsilik gelen "ana, antikor veya antikor parçasinin VH bölgesi ve VL bölgesinin her biri belirtilen SEK KIM NO ile veya her biri ile %100 dizi ayniligina sahip bir amino asit dizisini içerir. Böylece örnegin, antikor veya antikor parçasinin Xl9-A05 antikoruna dayali oldugu ve VH bölgesinin SEK KIM NO:1 ile %100,den az, ancak en az %80, %85, %90 veya %95 dizi ayniligina sahip olan bir amino asit dizisini içerdigi: ve/veya VL bölgesinin SEK KIM NO:2 ile %100,den az, ancak en az %80, %85, %90 veya %95 dizi ayniligina sahip olan bir amino asit dizisini içerdigi yerde, akabinde antikor veya antikor parçasinin fosforilkolin ve/veya bir fosforilkolin konjugatina baglanma yetenegi örnegin SEK KIM NO:17in dizisini içeren bir VH bölgesi ve SEK KIM NO:2"nin dizisini içeren bir VL bölgesine sahip karsilik gelen bir "ana, antikor veya antikor parçasinin baglanma yetenegi ile esdeger olabilir. Bu baglamda "karsilik gelen "ana" antikor veya antikor parçasi" ile, mevcut "antikor veya antikor parçasi" ile "karsilik gelen "ana" antikor veya antikor parçasi" arasindaki sadece dizi farkinin ve VH ve/Veya VL bölgelerinin biri veya her ikisinde oldugu kastedilir. Bir düzenlemede karsilik gelen parent antikor, Xl9-A05"in VH, VL, CH ve CL bölgelerinin, diger bir deyisle SEK KIM NO:28,in CH bölgesine bagli SEK KIM NO:17in bir VH bölgesi ve SEK KIM NO:29"un CL bölgesine bagli SEK KIM NO:2"nin VL bölgesine sahip bir antikordur. Ayni durum, gerekli degisikliklerin yapilmasi kosuluyla, yukarida listelenen diger antikor veya antikor parçasi için de geçerlidir, burada VH ve/veya VL bölgesi belirtilen SEK KIM NO ile veya her birinden bir veya daha fazlasi ile %1003den az dizi ayniligina sahip bir veya daha fazla amino asit dizisini içerir ve fosforilkolin ve/veya bir fosforilkolin konjugatina baglanma esdegerliliginin belirlenmesi amaçlarina yönelik olarak "karsilik gelen "ana, antikor veya antikor parçasi" sadece VH ve/veya VL bölgesinin dizilerinin biri veya her ikisinde farklilik gösterir ve belirtilen SEK KIM NO ile veya her bir veya her birine sahiptir. Buna göre, antikor veya antikor parçasinin M99-B05"e dayali oldugu yerde, akabinde bir düzenlemede karsilik gelen parent antikor, M99- B05,in VH, VL, CH ve CL bölgelerinin, diger bir deyisle SEK KIM NO:27,nin CH bölgesine bagli SEK KIM NO:3,in bir VH bölgesi ve SEK KIM NO:29°un CL bölgesine bagli SEK KIM NO:4,ün VL bölgesinin dizisine sahip bir antikordur. Bu bakimdan antikor veya antikor parçasinin fosforilkolin ve/Veya bir fosforilkolin konjugatina baglanma yetenegi, Biacore SPR biyosensörü gibi olmak üzere antikor veya antikor parçasinin bir kati yüzeye immobilize edilmis (örnegin, bir aminofenil baglayici araciligiyla) fosforilkoline baglanmasini ölçmek amaciyla Yüzey Plazmon Rezonans (SPR) analizi yoluyla oldugu gibi herhangi bir uygun yöntem ile belirlenebilir. Bir ek düzenlemede, mevcut bulusun birinci açisina göre bir antikor veya antikor parçasi, burada açiklandigi üzere PC veya bir PC konjugatina baglanmaya yönelik olarak bir "karsilastirici" antikor veya antikor parçasi ile yarisir (örnegin, ELISA veya SPR analizinde belirlendigi gibi) Bu baglamda bir karsilastirici antikor veya antikor parçasi X19-A05 (sirasiyla SEK KIM NO: 1, 2, 28 ve 29 ile tanimlandigi üzere) M99-B05 (SEK KIM NO: 3, 4, 27 ve 29 ile tanimlandigi üzere), Xl9-A01 (sirasiyla SEK KIM NO: 5, 6, 27 ve 29 ile tanimlandigi üzere), X19-A03 (sirasiyla SEK KIM NO: 7, 8, 27 ve 29 ile tanimlandigi üzere), X19-A07 (sirasiyla SEK KIM NO: 9, 10, 27 ve 29 ile tanimlandigi üzere), X19-A09 (sirasiyla SEK KIM NO: 11, 12, 27 ve 29 ile tanimlandigi üzere), Xl9-All (sirasiyla SEK KIM NO: 13, 14, 27 ve 29 ile tanimlandigi üzere), veya X19-C017in (sirasiyla SEK KIM NO: 15, 16, 27 ve 29 ile tanimlandigi üzere) CH ve VL bölgeleri ve istege bagli olarak ayrica CH ve CL bölgelerini içerebilir ve tercihen VH ve/veya VL bölgelerinde sadece dizi varyasyonu ile test edilen antikor veya antikor parçasindan farklilik gösterir. "Yarisma" ile, mevcut bulusun bir açisina göre antikor veya antikor parçasinin ve "karsilastirici" antikorun bir analizde es molar miktarlarinin dahil edilmesinin, mevcut bulusun birinci açisina göre antikor veya antikor parçasinin eksikliginde ayni analizdeki "karsilastirici" antikorun PC veya bir PC konjugatina baglanmanin saptanabilir seviyesine kiyasla büyük ölçüde %100 gibi olmak üzere karsilastirici antikorun PC veya bir PC konjugatina baglanmasinin saptanabilir seviyesini %10, %20, %30, %40, %50, %60, %70, %80, %90, %95 veya daha fazla azaltabilecegi kastedilir. Asagidaki örneklerde açiklandigi üzere M99-B05 yaklasik 150 nM,lik belirgin bir Kd ile aminofenil fosforilkoline baglanir, Bir düzenlemede, mevcut bulusa göre bir antikor veya antikor parçasi, M99-BOSain (sirasiyla SEK KIM NO: 3 ve 4 ile tanimlandigi üzere) VH ve VL bölgelerine sahip bir antikor veya antikor parçasinin yaklasik 150 nM,lik belirgin bir Kd ile immobilize aminofenil fosforilkoline baglanmasini saglayan örneklerde kullanilan SPR kosullari atinda test edildiginde yaklasik 500nM, yaklasik 400 nM, yaklasik 300nM, yaklasik 250nM, yaklasik 200 nM, yaklasik 190 nM, yaklasik 180 nM, yaklasik 170 nM, yaklasik 160nM, yaklasik 155 nM, yaklasik 150 nM'den daha fazla olmayan veya daha az belirgin bir Kd ile immobilize aminofenil fosforilkoline baglanacaktir. Bu baglamda "yaklasik" terimi, belirtilen degerin ±%20, %15, %10, %5, %4, %3, %2 veya %1 "i içinde olan bir deger anlamina gelecek sekilde kullanilir. Ayrica asagidaki örneklerde açiklandigi üzere M99-B05, nM araligindaki bir 1C50°ye sahip oksLDL ile uyarima yanit olarak MCP- l,in inonositlerden salinmasini engelleyebilir. Baska bir düzenlemede, mevcut bulusa göre bir antikor veya antikor parçasi 0.7-2.6 nM araliginda M99-B05 (sirasiyla SEK KIM NO: 3 ve 4 ile tanimlandigi üzere) VH ve VL bölgelerine sahip bir antikor veya antikor parçasini saglayan kosullar (asagidaki örnekte açiklanan gibi) altinda test edildiginde yaklasik 10 nM, yaklasik 5 nM, yaklasik 4 nM, yaklasik 3 nM, yaklasik 2.8 nM, yaklasik 2.6 nM, yaklasik 2.4 nM, yaklasik 2 nM, yaklasik 1.8 nM, yaklasik 1.6 nM, yaklasik 1.4 nM, yaklasik 1.3 nM, yaklasik 1.2 nM, yaklasik 1.1 nM, yaklasik 1.0 nM, yaklasik 0.9 nM, yaklasik 0.8 nM, yaklasik 0.7 nM°den daha az veya bundan daha az bir IC50°ye sahip oksLDL ile uyarima yanit olarak MP-l ,in monositlerden salinmasini engelleyecektir. Bu baglamda "yaklasik" terimi, belirtilen degerin ±%20, %15, %10, %5, %4, %3, %2 veya %1 ,i içinde olan bir deger anlamina gelecek sekilde kullanilir. Mevcut bulusa göre bir antikor veya antikor parçasinin bir fosforilkolin konjugatina baglanma yetenegi, fosforilkolin fosforilkolin konjugati ile degistirilerek, yukarida açiklananlar ile esdeger yöntemler ile belirlenebilir. Uygun fosforilkolin konjugatlari, PC-BSA ve PC-KLH konjugatlari gibi, istege bagli olarak bir aralayici araciligiyla bir tasiyiciya baglanan bir fosforilkolin kismini içermek üzere yukarida açiklananlari içerir. Tercihen, bir antikor veya antikor parçasinin fosforilkolin konjugatina baglanma yeteneginin belirlendigi yerde bu, antikor veya antikor parçasinin spesifik olarak fosforilkolin konjugatinda fosforilkolin kismina baglanma yetenegine göre belirlenir. Bu, antikor veya antikor parçasinin fosforilkolin konjugatma baglanma yetenegi ve bir fosforilkolin kismini içermeyen karsilik gelen molekülün karsilastirilmasi yoluyla oldugu gibi teknikte bilinen yöntemler ile belirlenebilir. Bir düzenlemede mevcut bulusun antikor veya antikor parçasi, bir lineer polipeptit dizisinde VH bölgesi ve VL bölgesini içerebilir. Bir baska düzenlemede mevcut bulusun antikor veya antikor parçasi, ayri bir polipeptit dizisinde VH bölgesi ve VL bölgesinin her birini içerebilir. Bu düzenlemede, ayri polipeptit dizisinin direkt olarak veya dolayli olarak birbirlerine baglanmasi tercih edilebilir (ayri polipeptit dizisi arasindaki bir veya daha fazla disülfid bagi ile oldugu gibi). Baska bir düzenlemede VH bölgesi, yukarida açiklandigi üzere bir CH bölgesi veya CH bölgesi veya bunun bir parçasinin bir varyantinin örnegin en az 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90,100,120,140, 160,180, 200, 220, 240, 260, 280, 300, 320 veya daha fazla amino asidini içerebilen bir CH bölgesi veya bunun bir parçasina baglanabilir. Baglanma, VH bölgesi ve CH bölgesi tek bir polipeptit olarak saglanacak sekilde bir peptit bagi araciligiyla bir direkt füzyon olabilir veya baglanma bir peptit veya diger baglayici gibi bir baglayici araciligiyla veya bir peptit bagi disinda ir direkt kimyasal bag araciligiyla olabilir. Bir düzenlemede bunun bir insan CH bölgesi olmasina ragmen CH bölgesinde herhangi bir belirli sinirlama yoktur. Teknik, insan CH bölgelerinin birçok örnegini içerir. Bu baglamda kullanilmaya yönelik örnek niteligindeki insan CH bölgeleri SEK KIM NO: 27 ve SEK KIM NO: 28,i içerir. Herhangi bir CH bölgesi kullanildiginda terminal amino asit modifikasyonlari (baska bir amino asit veya diger kimyasal kismin silinmesi veya eklenmesi yoluyla maskelenmesi dahil olmak üzere) peptidaz bozunmasi potansiyelini azaltmak veya önlemek üzere uygulanabilir. Baska bir düzenlemede VL bölgesi, yukarida açiklandigi üzere bir CL bölgesi veya CL bölgesi veya bunun bir parçasinin bir varyantinin örnegin en az 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100 veya daha fazla amino asidini içerebilen bir CL bölgesi veya bunun bir parçasina baglanabilir. Baglanma, VL bölgesi ve CL bölgesi tek bir polipeptit olarak saglanacak sekilde bir peptit bagi araciligiyla bir direkt füzyon olabilir veya baglanma bir peptit veya diger baglayici gibi bir baglayici araciligiyla veya bir peptit bagi disinda bir direkt kimyasal bag araciligiyla olabilir. Bir düzenlemede bunun bir insan CL bölgesi olmasina ragmen CL bölgesinde herhangi bir belirli sinirlama yoktur. Teknik, insan CL bölgelerinin birçok örnegini içerir. Bu baglamda kullanilmaya yönelik örnek niteligindeki bir insan CL bölgesi SEK KIM NO: 29"u içerir. Terminal amino asit modifikasyonlari (baska bir amino asit veya diger kimyasal kismin silinmesi veya eklenmesi yoluyla maskelenmesi dahil olmak üzere) kullanilan herhangi bir CL bölgesinin peptidaz bozunmasi potansiyelini azaltmak veya önlemek üzere uygulanabilir. Bir baska düzenlemede mevcut bulusun antikor veya antikor parçasi, bir polipeptit dizisinde CH bölgesine bagli bir VH bölgesi ve baska bir ayri polipeptit dizisinde bir CL bölgesine bagli bir VL bölgesini içerebilir. Bu düzenlemede, ayri polipeptit dizisinin direkt olarak veya dolayli olarak birbirlerine baglanmasi tercih edilebilir (ayri polipeptit dizisi arasindaki bir veya daha fazla disülfid bagi ile oldugu gibi). Bir diger düzenlemede mevcut bulusun antikor veya antikor parçasi asagidakileri içerir - ° bir birinci CH bölgesine bagli bir birinci VH bölgesini içeren bir birinci agir zincir, ° bir birinci CL bölgesine bagli bir birinci VL bölgesini içeren bir birinci hafif zincir, ° bir ikinci CH bölgesine bagli bir ikinci VH bölgesini içeren bir ikinci agir zincir, ° bir ikinci CL bölgesine bagli bir ikinci VL bölgesini içeren bir ikinci hafif zincir; ve burada istege bagli olarak birinci hafif ve agir zincirler direkt olarak veya dolayli olarak birbirlerine baglanir (ayri polipeptit dizisi arasindaki bir veya daha fazla disülfid bagi yoluyla oldugu gibi) ve ikinci hafif ve ikinci agir zincirler direkt olarak veya dolayli olarak birbirlerine baglanir (ayri polipeptit dizisi arasindaki bir veya daha fazla disülfid bagi yoluyla oldugu gibi) ve ayrica istege bagli olarak burada birinci ve ikinci agir zincirler direkt olarak veya dolayli olarak birbirlerine baglanir (ayri polipeptit dizisi arasindaki bir veya daha fazla disülfid bagi yoluyla oldugu gibi). Bir diger düzenlemede mevcut bulusun antikor veya antikor parçasi, bir monoklonal antikor, daha çok tercihen bir insan monoklonal antikor olabilir. Mevcut bulusun antikor veya antikor parçasi bir hümanize antikor veya kimerik antikor olabilir. Tercih edilen bir düzenlemede mevcut bulusun antikor veya antikor parçasi bir izole antikor veya antikor parçasidir. Baska bir düzenlemede mevcut bulusun antikor veya antikor parçasi, standart protein mühendisligi teknikleri kullanilarak immünoglobulinlerin insan protein iskeleleri üzerinde grefte edilmis, yukarida açiklanan VH, VL, CDRl, CDR2, CDR3, CDR4, CDR5 ve/veya CDR6 dizilerini içeren amino asit dizilerinin biri veya daha fazlasini içerebilir. Teknikte uzman kisi, çesitli protein iskeleleriniii kullanim için temin edilebilir oldugunu ve teknikte yaygin olarak bilindigini kabul edecektir. Nihai sonuç, bir yeni çerçevede korunmus antij en baglanma aktivitesidir. Örnegin bir tarifnamede immünoglobulinlerin iskelesi IgA, IgE, lgGl, lgGZa, lgGZb, lgG3, IgM"den derive edilebilir. Iskeleler fareler, siçanlar, tavsanlar, keçiler, develer, lamalar, primatlar gibi herhangi bir memeliden elde edilen bir immünoglobulinden derive edilebilir. Immünoglobulin iskelesinin insan immünoglobulinlerinden derive edilmesi tercih edilebilir. Mevcut bulusun birinci açisina göre antikor parçalari, standart moleküler biyoloji teknikleri ile veya bu parçalari olusturan enzimler kullanilarak saIlastirilmis antikorlarin (örnegin pepsin veya papain) klevaji ile olusturulabilir. Bulusa göre bu tür antikor parçasi tek Zincirli antikorlar, Fv, scFv, Fab, F(ab")2, Fab72, FabgFd veya scFv-Fc parçalari veya ikili antikorlar veya örnegin PEGilasyon yoluyla stabilize edilmis olabilen herhangi bir parça ile sinirlanmamak üzere örneklendirilebilir. Mevcut bulusun bir ikinci açisi, bulusun birinci açisina göre bir antikor veya bir antikor parçasi ve farmasötik olarak kabul edilebilir bir tasiyici veya eksipiyani içeren bir farrnasötik bilesimi saglar. Istege bagli olarak bilesimde bulunan tek antikorlar veya antikor parçasi, mevcut bulusun birinci açisina ait olanlardir. Daha çok tercihen burada, bilesimde tek bir tip antikor veya antikor parçasi olabilir, örnegin burada tip, amino asit dizisi, moleküler agirlik ve/veya fosforilkoline baglanma spesifikligine göre belirlenir. Bu bakimdan teknikte uzman kisi, örnegin N-terminal varyasyon ve/veya kismi bozunmadan dolayi herhangi bir popülasyonda antikorlar veya antikor parçalarinin dizilerindeki bazi düsük varyasyon seviyeleri olabilecegini kabul edecektir; buna göre bu baglamda örnegin bilesimdeki antikorlar veya antikor parçalarinin saptanabilir seviyesinin agirlikça en az yaklasik %80, yaklasik %90, yaklasik %95, yaklasik %96, yaklasik %97, yaklasik %98, yaklasik %99 veya büyük oranda %1007ünün amino asit dizisi, moleküler agirlik ve/veya fosforilkoline baglanma spesifikligine göre belirlendigi üzere tek bir tipte olmasi halinde tek bir antikor veya antikor parçasi tipini içerdigi belirtilebilir. Mevcut bulusun bir üçüncü açisi, mevcut bulusun birinci açisina göre bir antikor veya antikor parçasi veya insan veya hayvan vücudu üzerinde veya bir ex vivo numune üzerinde gerçeklestirilen bir terapi, ameliyat veya teshis yönteminde kullanilmaya yönelik oldugu gibi ilaçta kullanilmaya yönelik mevcut bulusun ikinci açisina göre bir farmasötik bilesimi saglar. Örnegin mevcut bulusun üçüncü açisi, mevcut bulusun birinci açisina göre bir antikor veya antikor parçasi veya insanlar dahil memelilerin ateroskleroz, aterosklerotik ile baglantili bir hastalik veya kardiyovasküler hastaliga karsi önlenmesi, profîlaksisi ve/veya tedavisinde kullanilmaya yönelik olarak mevcut bulusun ikinci açisina göre bir farmasötik bilesimi saglar. Diger bir deyisle mevcut bulusun üçüncü açisi, mevcut bulusun birinci açisina göre bir antikor veya antikor parçasi veya insanlar dahil memelilerin ateroskleroz, aterosklerotik ile baglantili bir hastalik veya kardiyovasküler hastaliga karsi önlenmesi, profilaksisi ve/veya tedavisinde kullanilmaya yönelik olarak bir ilacin üretiminde mevcut bulusun ikinci açisina göre bir farmasötik bilesimi saglar. Ayrica açiklanan, insanlar dahil nienielilerin ateroskleroz, aterosklerotik ile baglantili bir hastalik veya kardiyovasküler hastaliga karsi önlenmesi, protîlaksisi ve/veya tedavisine yönelik bir yöntemdir, yöntem memeliye bulusun birinci açisina göre bir antikor veya antikor parçasi veya bulusun ikinci açisina göre bir farmasötik bilesimin uygulanmasi adimini içerir. Ayrica burada açiklanan mevcut bulusun birinci açisina göre bir antikor veya antikor parçasidir veya Alzheimer hastaliginin profilaksisi, önlenmesi ve/veya tedavisinde kullanilmaya yönelik olarak mevcut bulusun ikinci açisina göre bir farmasötik bilesimdir. Diger bir deyisle ayrica burada açiklanan mevcut bulusun birinci açisina göre bir antikor veya antikor parçasidir veya Alzheimer hastaliginin profilaksisi, önlenmesi ve/veya tedavisine yönelik bir ilacin üretiminde mevcut bulusun ikinci açisina göre bir farmasötik bilesimdir. Ayrica açiklanan, immünizasyona ve Alzheimer hastaligina karsi bir öznenin profilaksisi önlenmesi ve/veya tedavisine yönelik bir yöntemdir, yöntem özneye bulusun birinci açisina göre bir antikor veya antikor parçasi veya bulusun ikinci açisina göre bir farmasötik bilesimin uygulanmasi adimini içerir. Ayrica burada açiklanan mevcut bulusun birinci açisina göre bir antikor veya antikor parçasidir veya insanlar dahil olmak üzere memelilerde immünizasyonda veya metabolik hastaligin profilaksisi, önlenmesi ve/veya tedavisinde kullanilmaya yönelik olarak mevcut bulusun ikinci açisina göre bir farmasötik bilesimdir. Diger bir deyisle burada açiklanan mevcut bulusun birinci açisina göre bir antikor veya antikor parçasi veya insanlar dahil olmak üzere memelilerde immünizasyonda veya metabolik hastaligin profilaksisi, önlenmesi ve/veya tedavisine yönelik bir ilacin üretiminde mevcut bulusun ikinci açisina göre bir farmasötik bilesimin kullanimidir. Ayrica açiklanan, bir insan gibi bir memelide immünizasyon veya metabolik hastaliklarin proIilaksisi veya tedavisine yönelik bir yöntemdir, yöntem memeliye bulusun birinci açisina göre bir antikor veya antikor parçasi veya bulusun ikinci açisina göre bir farmasötik bilesimin uygulanmasi adimini içerir. Tarifnameye göre ele alinacak ve/veya tedavi edilecek olan metabolik hastalik örnegin metabolik sendrom, insülin direnci, glukoz intoleransi, hiperglisemi, tip 1 diyabet, tip II diyabet, hiperlipidemi, hipertrigliseridemi, hiperkolesterolemi, dislipidemi ve polikistik over sendromundan (PCOS) olusan gruptan seçilen bir durum olabilir. Mevcut bulusun bir dördüncü açisi, bulusun birinci açisina göre bir antikor veya bir antikor parçasini kodlayan bir diziyi içeren bir nükleik asit molekülünü saglar. Nükleik asit molekülü örnegin DNA veya RNA olabilir. Nükleik asit molekülü, bulusun birinci açisina göre antikor veya bir antikor parçasini kodlayan diziye ek dizi 57 ve/veya 3"ü içerebilir. Bu tür 5, ve 3, dizileri, teknikte çok iyi bilinen ve örnegin tercih edilen bir konakçi hücrede fonksiyonel olmak amaciyla seçilebilen bir promotör ve/veya terrninatör diziler gibi transkripsiyonel ve/veya translasyonel düzenleyici dizileri içerebilir. Buna göre nükleik asit molekülü, tercih edilen bir konakçi hücrede transforinasyonun akabinde, bulusun birinci açisina göre kodlanmis antikor veya bir antikor parçasinin üretimi ile sonuçlanacak sekilde konakçi hücrenin transkripsiyonel ve/veya translasyonel sistemleri ile ifade edilebilen bir ifade kasetini içerebilir. Mevcut bulusun bir besinci açisi, bulusun dördüncü açisina göre bir veya daha fazla nükleik asit dizisini içeren bir vektör veya plazmidi saglar. Antikor veya antikor parçasinin birden fazla polipeptit zincirini içerdigi yerde vektör veya plazmid Örnegin, vektör veya plazmid ile transforme edilmis bir konakçi hücre, antikor veya antikor parçasinda bulunan tüm polipeptit Zincirlerini ifade edebilecek sekilde her bir polipeptit zincirini kodlayan bir nükleik asit kodlama dizisini içerebilir. Buna göre ayrica açiklanan bir konakçi hücrenin transforrnasyonunda bir vektör veya plazmidin kullanimidir. Konakçi hücrelerin vektörler veya plazmidler ile transforrne edilmesinin yöntemleri teknikte iyi bilinir. Transforrne edilmis konakçi hücrelerin seçilmesine yardimci olmak için vektör veya plazmid seçilebilir bir markör içerebilir. Mevcut bulusun bir altinci açisi, bulusun besinci açisina göre bir veya daha fazla vektör veya plazmidi içeren bir konakçi hücreyi saglar. Altinci açi ayrica, tüm veya büyük oranda tüm hücrelerin bulusun besinci açisina göre ayni bir veya daha fazla vektör veya plazmidi içerdigi monokültür gibi bulusun besinci açisina göre bir veya daha fazla vektör veya plazmidi içeren bir hücre kültürü saglar. Bu tür monokültürler örnegin bir veya daha fazla plazmid veya vektör üzerinde bir veya daha fazla seçilebilir markörün varligina yönelik hücrelerin seçilmesi ve istege bagli olarak seçilen hücrenin kültürde büyümesi sirasinda selektif basincin saglanmasi yoluyla elde edilebilir. Mevcut bulusun birinci açisina göre antikor veya antikor parçasinin birden fazla polipeptit zincirini içerdigi yerde konakçi hücre, vektör veya plazmid ile transforme edilmis bir konakçi hücre, antikor veya antikor parçasinda bulunan tüm polipeptit Zincirlerini ifade edebilecek sekilde her bir polipeptit zincirini kodlayan bir nükleik asit kodlama Alternatif olarak mevcut bulusun birinci açisina göre antikor veya antikor parçasinin birden fazla polipeptit zincirini içerdigi yerde konakçi hücre, birden fazla vektör veya plazmid ile transforrne edilmis bir konakçi hücre, antikor veya antikor parçasinda bulunan tüm polipeptit Zincirlerini ifade edebilecek sekilde polipeptit zincirlerinin en az birini kodlayan bir nükleik asit kodlama dizisini içeren birden fazla vektör veya plazmid ile transforrne edilebilir. Bir diger alternatifte, mevcut bulusun birinci açisina göre antikor veya antikor parçasinin birden fazla polipeptit zincirini içerdigi yerde birçok konakçi hücrenin her biri, antikor veya antikor parçasini olusturan her biri farkli polipeptit zincirlerinin bir veya daha fazla farkli üyesini kodlayan ve her biri ayri olarak her bir polipeptit zincirini ifade etmek üzere kültürlenen konakçi hücre olmak üzere farkli bir nükleik asit kodlama dizisini içeren bir vektör veya plazmid ile transforine edilebilir. Geri kazanilan farkli polipeptit zincirleri akabinde antikor veya antikor parçasini olusturmak üzere birlestirilebilir. Herhangi bir uygun konakçi hücre bulusun besinci ve/veya altinci açilarinda kullanilabilir. Örnegin konakçi hücre bir Escherichia coli hücresi gibi bir prokaryot hücre olabilir. Konakçi hücre bir hayvan hücresi, bir bitki hücresi ve bir mantar hücresi gibi bir ökaryot hücre olabilir. Uygun hayvan hücreleri, memeli hücreleri, kus hücreleri ve böcek hücrelerini içerebilir. Uygun memeli hücreleri CHO hücreleri ve COS hücrelerini içerebilir. Uygun mantar hücreleri bir Saccharomyces cerevisiae hücresi gibi maya hücrelerini içerebilir. Memeli hücreleri insan hücrelerini içerebilir veya içerrneyebilir ve embriyonik hücreleri içerebilir veya içermeyebilir. Mevcut bulusun bir yedinci açisi, yukarida açiklandigi üzere transforme edilmis bir veya daha fazla konakçi hücrenin kültürlenmesi ve mevcut bulusun besinci açisina göre bir antikor veya bir antikor parçasinin buradan geri kazanilmasini içeren, mevcut bulusun besinci açisina göre bir antikor veya bir antikor parçasi antijen baglama dizisinin olusturulmasina yönelik bir yöntem saglar. Mevcut bulusun bir sekizinci açisi, mevcut bulusun besinci açisina göre antikor veya antikor parçalarinin bir varyantinin hazirlanma yöntemini saglar, bu varyant fosforilkolin ve/veya bir fosforilkolin konjugatina baglanma yetenegini korur, bu yöntem asagidaki adimlari içerir - (i) bir ara antikor veya antikor parçasi veya polipeptit zinciri olusturma parçasi kodlanarak mevcut bulusun dördüncü açisina göre bir nükleik asidin saglanmasi; (ii) mutasyona ugramis nükleik asit, parent antikor veya antikor parçasina kiyasla farkli bir amino asit dizisine sahip bir varyant antikor veya antikor parçasini kodlayacak sekilde, istege bagli olarak VH ve/veya VL bölgesini (bölgelerini) kodlayan bölgelerde olmak üzere bir veya daha fazla nükleotid mutasyonunun (istege bagli olarak, 50, 40, 30, 20, 15, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2 veya 1 nükleotid mutasyonu) nükleik asit dizisinin amino asit kodlama bölgelerine uygulanmasi; (iii) mutasyona ugramis nükleik asit dizisi tarafindan kodlanan varyant antikor veya antikor parçasi veya polipeptit zinciri olusturan kismin ifade edilmesi; ve (iv) varyant antikor veya antikor parçasi ve parent antikor veya antikor parçasinin fosforilkolin ve/veya bir fosforilkolin konjugatina baglanma yeteneginin karsilastirilmasi. Mevcut bulusun sekizinci açisina göre nükleotid mutasyonlari, nükleik asit dizisinin amino asit kodlama bölgelerinde rastgele bir sekilde veya bölgeye yönlendirilmis bir sekilde uygulanabilir. Bu tür mutasyonlar, mutasyondan Önce nükleik asit tarafindan kodlanmis amino asit dizisine kiyasla bir veya daha fazla amino asit ekleme, bir veya daha fazla amino asit silme ve/veya bir veya daha fazla amino asit substitüsyonunu içeren bir amino asit dizisini kodlayan kodlama bölgesi ile sonuçlanabilir. Bu tür nükleotid mutasyonlari, antij en baglama bölgesindeki dizide bir veya daha fazla varyasyon içeren bir amino asidi kodlayan kodlama bölgesi ile sonuçlanabilir veya sonuçlanmayabilir. Bu tür nükleotid mutasyonlari, örnegin çerçeve bölgelerinin biri veya daha fazlasini olusturan amino asit dizisinde bulunan veya özellikle bulunan amino asit dizisi varyasyonu (diger bir deyisle, bir veya daha fazla ainino asit ekleme, bir veya daha fazla amino asit silme ve/veya bir veya daha fazla amino asit substitüsyonu) ile sonuçlanabilir. Ek olarak veya alternatif olarak bu tür nükleotid mutasyonlari, örnegin tamamlayicilik belirleme bölgelerinin biri veya daha fazlasini olusturan amino asit dizisinde bulunan veya özellikle bulunan amino asit dizisi varyasyonu (diger bir deyisle, bir veya daha fazla amino asit ekleme, bir veya daha fazla amino asit silme ve/veya bir veya daha fazla amiiio asit substitüsyonu) ile sonuçlanabilir. Çerçeve bölgeleri CDRller ve/veya VH veya VL bölgelerine göre tolere edilen amino asit varyasyonlari/modifikasyonlarinin seviyeleri bütün olarak, mevcut bulusun birinci açisina göre yukarida açiklanir ve gerekli degisikliklerin yapilmasi kosuluyla mevcut bulusun sekizinci açisinin yöntemine göre uygulanabilen varyasyon/modifikasyon seviyesine uygulanabilir. Ek olarak veya alternatif olarak bu tür nükleotid mutasyonlari, CH1,CH2,CH3,CL bölgeleri veya diger bölgelerin biri veya daha fazlasinda oldugu gibi antijen baglama bölgesi disinda antikor veya antikor parçasinin bir veya daha fazla parçasindaki dizide bir veya daha fazla varyasyonu içeren bir amino asit dizisini kodlayan kodlama bölgesi ile sonuçlanabilir veya sonuçlanmayabilir. Bir veya daha fazla nükleotid mutasyonunun kodlanmis üründe bir veya daha fazla amino asit substitüsyonu ile sonuçlandigi yerde, akabinde bir veya daha fazla substitüsyonun her biri bagimsiz olarak konservatif veya konservatif olmayan substitüsyon olabilir. "Konservatif substitüsyonlar" ile, Gly, Ala; Val, Ile, Leu; Asp, Glu; Asn, Gln; Ser, Thr; Lys, Arg; ve Phe, Tyr gibi kombinasyonlar hedeflenir. Nükleotid varyasyonlari örnegin, kodlanmis antikor veya antikor parçalarinin dizisini germ hatti dizilerine daha yakin bir hale getirmek, varyant antijen baglama bölgesini (bölgelerini) içeren antikor veya antikor parçasinin stabilitesini attirmak, varyant antijen baglama bölgesini (bölgelerini) içeren antikor veya antikor parçasinin immünojenesitesini azaltmak ve/veya üretim sürecinde dezavantajli olabilen özellikleri önlemek veya azaltmak amaciyla uygulanabilir. Bu tür nükleotid mutasyonlari, teknikte iyi bilinen yöntemler kullanilarak yapilabilir. Mevcut bulusun sekizinci açisina göre, varyant antikor veya antikor parçasinin fosforilkolin ve/veya fosforilkolin konjugatina baglanma yeteneginin degerlendirilmesi adimi ayrica parente kiyasla büyük oranda esit veya gelismis fosforilkolin ve/Veya bir fosforilkolin konjugatina baglanma yetenegine sahip olan varyantlarm seçilmesini içerebilir. Varyantlar ve parentlerin fosforilkolin ve/veya bir fosforilkolin konjugatina baglanma yetenegi, mevcut bulusun belli açisina göre yukarida açiklananlar gibi yöntemler ile degerlendirilebilir. Mevcut bulusun sekizinci açisinin yöntemi istege bagli olarak ayrica, varyant antikor veya antikor parçasini kodlayan mutasyona ugramis nükleik asit dizisini içeren bir nükleik asit molekülünün geri kazanilmasi ve istege bagli olarak bir konakçi hücrenin geri kazanilan nükleik asit molekülünü içeren bir bilesim ile transforme edilmesi ve ayrica istege bagli olarak varyant antikor veya antikor parçasinin konakçi hücreden ifade edilmesi ve yine ayrica istege bagli olarak geri kazanilan varyant antikor veya antikor parçasinin farmasötik olarak kabul edilebilir bir bilesimde formüle edilmesini içerebilir. Ayrica burada açiklanan, bulusun sekizinci açisinin yöntemi ile elde edilen veya elde edilebilen bir varyant antikor veya antikor parçasi veya ilaçta kullanilmaya yönelik olarak bulusun sekizinci açisinin yöntemi ile elde edilen veya elde edilebilen farmasötik olarak kabul edilebilendir. Ayrica burada açiklanan, bulusun sekizinci açisinin yöntemi ile elde edilen veya elde edilebilen bir varyant antikor veya antikor parçasi veya asagidakilerde kullanilmaya yönelik olarak bulusun sekizinci açisinin yöntemi ile elde edilen veya elde edilebilen farmasötik olarak kabul edilebilendir - (i) insanlar dahil nieinelilerin ateroskleroz, aterosklerotik ile baglantili bir hastalik veya kardiyovasküler hastaliga karsi önlenmesi, profilaksisi ve/veya tedavisi; (ii) Alzheimer hastaliginin profilaksisi, önlenmesi ve/veya tedavisi; ve/veya (iii) insanlar dahil olmak üzere memelilerde metabolik hastaliga karsi immünizasyon veya profilaksisi veya bunun önlenmesi veya tedavisi. Diger bir deyisle, ayrica burada açiklanan, bulusun sekizinci açisinin yöntemi ile elde edilen veya elde edilebilen bir varyant antikor veya antikor parçasi veya asagidakilere yönelik bir ilacin üretiminde bulusun sekizinci açisinin yöntemi ile elde edilen veya elde edilebilen fannasötik olarak kabul edilebilendir - (i) insanlar dahil memelilerin ateroskleroz, aterosklerotik ile baglantili bir hastalik veya kardiyovasküler hastaliga karsi önlenmesi, profilaksisi ve/veya tedavisi; (ii) Alzheimer hastaliginin profilaksisi, önlenmesi ve/veya tedavisi; ve/Veya (iii) insanlar dahil olmak üzere memelilerde metabolik hastaliga karsi immünizasyon veya profilaksisi veya bunun önlenmesi veya tedavisi. Buna göre, ayrica burada açiklanan asagidakilere yönelik bir yöntemdir- (i) bir insan dahil bir inemelinin ateroskleroz, aterosklerotik ile baglantili bir hastalik veya kardiyovasküler hastaliga karsi önlenmesi, profilaksisi ve/veya tedavisi, (ii) bir öznenin Alzheimer hastaligina kari immünizasyonu ve profilaksisi, bunun önlenmesi ve/veya tedavisi veya bir insan gibi bir memelinin metabolik hastaliklarinin tedavisi, Yöntem bulusun sekizinci açisinin yöntemi ile elde edilen veya elde edilebilen bir varyant antikor veya antikor parçasinin memeliye veya özneye uygulanmasi adimi veya bulusun sekizinci açisinin yöntemi ile elde edilen veya elde edilebilen farmasötik olarak kabul edilebilenin kullanimini içerir. Mevcut bulusun sekizinci açisina göre ele alinacak ve/veya tedavi edilecek olan metabolik hastalik örnegin metabolik sendrom, insülin direnci, glukoz intoleransi, hiperglisemi, tip I diyabet, tip II diyabet, hiperlipidemi, hipertrigliseridemi, hiperkolesterolemi, dislipidemi ve polikistik over sendromundan (PCOS) olusan gruptan seçilen bir durum olabilir. Fosforilkolin Fosforilasyon (PC) ile, formüle göre fosforilkolin kastedilir. O \ // N+ P /|\/\0/ l `OH o_ Bir fosforilkolin konjugati ile, tercihen bir aralayici araciligiyla bir tasiyiciya baglanan bir fosforilkolin kismi kastedilir. Fosforilkolin kismi, tasiyiciya kovalent olarak veya kovalent olmayan bir sekilde baglanabilir. Tercihen fosforilkolin kismi fosfat grubu araciligiyla tasiyiciya baglanir. Tasiyici örnegin bir protein, bir karbohidrat, bir polimer, lateks boncuklar veya kolloid metal olabilir. Fosforilkolin konjugati örnegin, bir insan serum albuinin (HSA)-PC konjugati, bir transferrin-PC konjugati, bir keyhole limpet hemosiyanin (KLH)-PC konjugati veya bir bovin serum albumin (BSA)-PC konjugati gibi bir protein-PC konjugati olabilir. PC konjugatinin bir aralayici araciligiyla bir tasiyiciya bagli PC,yi içerdigi yerde, akabinde herhangi bir uygun aralayici kullanilabilir. Aralayicilarin sinirlayici olmayan örnekleri, süksinik ve glutamik asit benzeri bir di-karboksili asitler gibi baglama ajanlari (tipik olarak, bi- fonksiyonel bilesikler), karsilik gelen di-aldehitler, 1,6 diaminohekzan gibi di-aminler, p-amino-fenol, p-diazo-fenol, p-fenilendiamin, p- benzokinon ve benzerleri gibi di-substitüe fenolleri içerir. Kardivovasküler hastalik Kardiyovasküler hastaliklar teriminin, bunlarla sinirli olmamak üzere akut koroner sendrom, akut miyokard enfarktüsü, miyokard enfarktüsü (kalp krizi), kararli ve kararsiz angina pektoris, anevrizmalar, koroner arter hastaligi (CAD), iskemik kalp hastaligi, iskemik miyokardiyum, kardiyak ve ani kardiyak ölüm, kardiyomiyopati, konjestif kalp yetmezligi, kalp yetmezligi, stenoz, periferik arter hastaligi (PAD), interrnittan klodikasyon, kritik uzuV iskemisi ve inmeyi içermesi hedeflenir. Fosforilkolin ve fosforilkolin konjugatlarina reaktivite ile antikorlar kullanilarak kardiyovasküler hastaliklarin tedavisi veya önlenmesi örnegin WO 2005/ 1 00405 ve US 2007-0286868"de açiklanir. Alzheimer hastaligi Mevcut bulusa göre, birinci açiya göre antikor veya antikor parçalari, buna ihtiyaci olan veya bu risk altinda olan kisilerde Alzheimer hastaligini tedavi etmek veya önlemek üzere kullanilabilir. WO 2010/003602 ve US Patent Basvuru No.61/078677, fosforilkolin ve fosforilkolin konjugatlarina reaktivite ile antikorlar kullanilarak Alzheimer hastaliginin tedavisi veya önlenmesini açiklar ve ayrica birinci açiya göre antikor veya antikor parçalarinin Alzheimer hastaligini tedavi etmek veya önlemek üzere kullanilabildigi yollari açiklar. Metabolik hastaliklar Metabolik hastaliklar teriminin, bunlarla sinirli olmamak üzere, metabolik sendrom X, insülin direnci (IRS), glukoz intoleransi, hiperglisemi, tip I diyanet, tip II diyabet, hiperlipidemi, hipertrigliseridemi, hiperkolesteroleini, dislipidemi, polikistik over sendromu (PCOS) ve ilgili hastaliklari içermesi hedeflenir. Fosforilkolin ve fosforilkolin konjugatlarina reaktivite ile antikorlar ile tedavi edilecek olan metabolik hastaliklarin ayrica açiklanmasi, birinci açiya göre antikor veya antikor parçalarinin metabolik hastaliklari tedavi etmek veya önlemek üzere kullanilabildigi yollari açiklayan WO 2012/010291,de açiklanir. Amino asit dizi avniligi Iki amino asit dizisi arasindaki aynilik yüzdesi asagidaki sekilde belirlenir. Ilk olarak, bir amino asit dizisi, örnegin, BLASTN versiyon 2.0.14 ve BLASTP versiyon 2.0.14 dahil BLASTZ bagimsiz versiyonundan BLAST 2 Dizileri (BIZseq) programi kullanilarak SEK KIM NO:1 ile karsilastirilir. Bu bagimsiz BLAST 2 versiyonu, ncbi.nlm.nih.gov adresinde ABD hükümeti Ulusal Biyoteknoloji Bilgi Merkezi web sitesinden elde edilebilir. BIZseq programinin nasil kullanilacagini açiklayan talimatlar, BLASTX ekli readme dosyasinda bulunabilir. B12seq, BLASTP algoritmasi kullanilarak iki amino asit dizisi arasinda bir karsilastirma gerçeklestirir. Iki amino asit dizisini karsilastirmak üzere, BIZseq seçenekleri asagidaki sekilde ayarlanir: -I karsilastirilacak olan birinci amino asit dizisini içeren bir dosyaya ayarlanir (örnegin, C:\seql.txt); -j karsilastirilacak olan ikinci amino asit dizisini içeren bir dosyaya ayarlanir (örnegin, C:\seq2.txt); -p blastp,ye ayarlanir; -o istenen herhangi bir dosya adina ayarlanir (örnegin, C:\0utput.txt); ve diger tüm seçenekler bunlarin varsayilan ayarinda birakilir. Örnegin, asagidaki komut, iki amino asit dizisi arasindaki bir karsilastirmayi içeren bir çikti dosyasini olusturmak üzere kullanilabilir: C:\BIZseq -i c:\seq1.txt -j c:\seq2.txt -p blastp - o c:\0utput.txt. Karsilastirilan iki dizinin homoloji paylasmasi halinde, akabinde gösterilen çikti dosyasi bu homoloji bölgelerini hizalanmis diziler olarak gösterecektir. Karsilastirilan iki dizinin homoloji paylasmamasi halinde, akabinde gösterilen çikti dosyasi hizalanmis dizileri göstermeyecektir. Hizalandiginda, eslesme sayilari, ayni nükleotid veya amino asit kalintisinin her iki dizide gösterildigi pozisyonlarin sayisinin sayilmasi yoluyla belirlenir. Aynilik yüzdesi, ortaya çikan degerin 100 ile çarpilmasinin akabinde tanimlanmis bir dizide açiklanan dizinin uzunlugu ile eslesme sayisinin bölünmesi yoluyla belirlenir. Örnegin bir dizinin SEK KIM NO: A,da açiklanan dizi ile karsilastirilmasi (SEK KIM NO:A"da açiklanan dizinin uzunlugu 10"dur) ve eslesme sayisinin 9 olmasi halinde, akabinde dizi, SEK KIM NO:A,da açiklanan dizi ile %90ilik (diger bir deyisle, 9 + 10 * 100 = 90) bir aynilik yüzdesine sahiptir. Antikorlar Burada mevcut bulusun kapsaminda refere edildigi üzere " veya antikor parçasi" terimi, "antijen baglama bölgesi" veya bunun tek zincirleri olarak refere edilen tam antikorlari ve herhangi bir antijen baglayici parçasini içerir. Bir "antikor, birbirine disülfid baglari ile bagli olan en az iki agir (H) zincir ve iki hafif (L) zincir içeren bir protein ya da bu proteinin antijen baglayici bir kismina refere edebilir. Her bir agir zincir, bir agir zincir degisken bölgesinden (burada VH olarak kisaltilmistir) ve bir agir zincir sabit bölgesinden olusur. Agir zincir sabit bölgesi CHl, CH2 ve CH3 olmak üzere üç bölgeden meydana gelir. Her bir hafif zincir, bir hafif zincir degisken bölgesinden (burada VL olarak kisaltilmistir) ve bir hafif zincir sabit bölgesinden olusur. Hafif zincir sabit bölgesi CL olmak üzere bir bölgeden olusur. VH ve VL bölgeleri ayrica, çerçeve bölgeleri (FR) olarak adlandirilan daha korunmus olan bölgeler ile karistirilmis tamamlayicilik belirleme bölgeleri (CDR) olarak adlandirilan hiper degiskenlik bölgelerine bölünebilir. Her bir VH tipik olarak, amino tenninusundan karboksi terminusuna dogru asagidaki sekilde düzenlenen üç CDR ve dört FR"yi içerir: FRl, CDRl, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4. Ayni sekilde her bir VL tipik olarak, amino terminusundan karboksi terminusuna dogru asagidaki sekilde düzenlenen üç CDR ve dört FR,yi içerir: FRS, CDR4, FR6, CDR5, FR7, CDR6, FR& Agir ve hafif zincirlerin degisken bölgeleri, bir antijen ile etkilesime geçen bir baglayici bölgeyi içerir. Antikorlarin sabit bölgeleri, immünglobülinin, bagisiklik sisteminin muhtelif hücreleri (örnegin, efektör hücreler) ve klasik tamamlayici sistemin birinci bileseni (Clq) de dahil olmak üzere konakçi dokulara veya faktörlere baglanmasina aracilik edebilir. Burada kullanildigi haliyle, "antijen baglayici bölge" terimi, spesifik olarak bir antijene baglanma yetenegini koruyan bir antikorun bir veya daha fazla parçasina refere eder. Bir antikorun antijene baglanma fonksiyonunun, tam uzunluktaki bir antikorun parçalari ile gerçeklestirilebilecegi gösterilmistir. Bir antikorun "antijen baglayici bölge" terimi dahilinde kapsanan baglayici parçalarin örnekleri asagidakileri içerir - (i) VL, VH, CL ve CHl bölgelerinden olusan bir tek degerlikli parça olan bir Fab parçasi; (ii) mentese bölgesinde bir disülfid köprüsü ile bagli iki Fab parçasini içeren çift degerlikli bir parça olan bir F(ab,)2 parçasi; (iii) temelde mentese bölgesinin parçasina sahip bir Fab olan bir Fab, parçasi; (iv) VL ve CHl bölgelerinden olusan bir Fd parçasi; (V) bir antikorun bir tek kolunun VL ve VH bölgelerinden olusan bir F v parçasi, (vi) bir VH bölgesinden olusan bir dAb parçasi; (Vii) bir izole tamamlayicilik belirleme bölgesi (CDR); ve (Viii) tek bir degisken bölge ve iki sabit bölgeyi içeren bir agir zincir degisken bölge olan bir nanokor. Ayrica VL ve VH olmak üzere F v parçasinin iki bölgesinin ayri genler ile kodlanmasina ragmen bunlar, VL ve VH bölgelerinin tek degerlikli molekülleri (tek Zincirli FV (scFV) olarak bilinir) olusturmak üzere eslestigi bir tek protein zinciri olarak olusmasina olanak taniyan bir sentetik baglayici araciligiyla rekombinant yöntemler kullanilarak baglanabilir. Bu tür tek Zincirli antikorlarin ayrica, bir antikorun "antijen baglayici kismi" teriminin kapsamina girmesi amaçlanmaktadir. Ikili antikorlar, bir peptit baglayici araciligiyla baglanan ayni polipeptit zinciri (VH-VL) üzerinde bir hafif zincir degisken bölgesine (VL) baglanmis her biri bir agir (VH) zincir degisken bölgesini içeren iki polipeptitten olusur. Bu antikor parçalari, teknikte uzman kisilerce bilinen klasik teknikler kullanilarak elde edilir ve bu parçalar, saglam antikorlar ile ayni sekilde fayda bakimindan taranir. Burada kullanildigi üzere bir "izole antikor" teriminin, farkli anti jenik spesifikliklere sahip diger antikorlari esasen içermeyen bir antikora refere etmesi hedeflenir (örnegin fosforilkoline spesifik olarak baglanan bir izole antikor, fosforilkolin disindaki antijenlere spesifik olarak baglanan antijenleri esasen içermez). Ayrica bir izole antikor, diger hücresel materyalleri ve/Veya kimyasallari da esasen içermeyebilir. Burada kullanildigi üzere "monoklonal antikor" veya "monoklonal antikor bilesimi" terimleri, tek moleküler bilesime sahip antikor moleküllerinin bir preparatina refere eder. Bir monoklonal antikor bilesimi, belirli bir epitopa yönelik tek bir baglanma spesifikligi ve afinitesi sergiler. "Hümanize antikor" teriminin, bir fare gibi baska bir memeli türünün gerrn hattindan derive edilen CDR dizilerinin insan çerçeve dizileri üzerinde grefte edildigi antikorlara refere etmesi hedeflenir. Ek çerçeve bölgesi modifikasyonlari, insan çerçeve dizilerinde olusturulabilir. "Kimerik antikor" teriminin, degisken bölge dizilerinin bir türden derive edildigi ve sabit bölge dizilerinin, baska bir türden derive edildigi antikorlara, örnegin degisken bölge dizilerinin bir fare antikorundan türetildigi ve sabit bölge dizilerinin bir insan antikorundan derive edildigi bir antikora refere etmesi hedeflenir. Farmasötik bilesimler Bulusa göre bir farmasötik bilesim, tipik olarak hedeflenen uygulama yolu ve standart farmasötik uygulamaya göre seçilecek olan farmasötik olarak kabul edilebilir bir tasiyici ve/veya eksipiyan ile karisim içinde bulusa göre bir baglayici proteini içerebilir. Bilesim, çabuk, gecikmis veya kontrollü salimli uygulamalar formunda olabilir. Tercihen formülasyon, aktif bilesenin bir günlük dozu veya birimi, günlük alt dozu veya bir uygun fraksiyonunu içeren bir birim dozajdir. Bulusa göre farmasötik bilesim, parenteral, intravenöz, intra-arteriyel, intraperitoneal, intra-müsküler, intra-serebrventriküler veya subkütanöz uygulamaya yönelik olarak hedeflenebilir veya hedeflenemez ve buna yönelik bir sekilde formüle edilir veya bunlar iniîizyon teknikleri ile uygulanabilir. Bunlar, diger maddeler, örnegin solüsyonu kan veya beyin omurilik sivisi (CSF) ile izotonik yapmak için yeterli tuzlar veya glukoz içerebilen bir steril solüsyon formunda en iyi sekilde kullanilabilir. Aköz solüsyonlar, gerekli olmasi halinde, uygun bir sekilde tamponlanmis olabilir (tercihen 3,ten 9"a kadar bir pH9ye kadar). Uygun farmasötik forinülasyonlarin steril sartlar altinda hazirlanmasi, teknikte uzman kisiler tarafindan iyi bilinen standart farmasötik teknikler ile kolay bir biçimde elde edilir. Bu tür formülasyonlar, formülasyonu hedeflenen alicinin kani veya CSFisi ile izotonik hale getiren antioksidanlar, tamponlar, bakteriyostatlar ve çözünmüs maddeleri içerebilen aköz ve aköz olmayan steril enjeksiyon solüsyonlar; ve süspanse edici ajanlar ve koyulastirma ajanlarini içerebilen aköz ve aköz olmayan steril süspansiyonlari içerebilir. Formülasyonlar tek dozlu veya çok dozlu kaplar, Örnegin yalitilmis ampuller ve siseler içinde sunulabilir ve kullanimdan hemen önce yalnizca steril sivi tasiyicinin, örnegin enjeksiyonluk suyun eklenmesini gerektiren dondurularak kurutulmus (liyofilize) durumda saklanabilir. Ekstamporane enjeksiyon solüsyonlari ve süspansiyonlar daha önceden açiklanan türdeki steril tozlar, granüller ve tabletlerden hazirlanabilir. Bir günlük dozaj seviyesi temelinde bir insan hasta gibi bir hastaya uygulanmaya yönelik bulusa göre bir antikor veya bir antikor parçasinin terapötik olarak etkili bir miktari, tek veya bölünmüs dozlarda uygulanmak üzere yetiskin basina 0.01 ila 1000 mg antikor veya antikor parçasi olabilir (örnegin, 0.01 ila 10 mg/kg gibi olmak üzere hastanin vücut agirligi kg,si basina 0.001 ila 20 mg, örnegin 0.1 mg/kg'den daha fazla ve yaklasik 1 mg/kg gibi olmak üzere 20, 10, 5, 4, 3 veya 2 mg/kg"den daha az). Herhangi bir durumda doktor, herhangi bir ayri hasta için en uygun olacak olan gerçek dozu belirleyecektir ve bu, belirli hastanin yasi, kilosu ve yaniti ile degisiklik gösterecektir. Yukaridaki dozajlar, ortalama vakanin örnegi niteligindedir. Daha yüksek veya daha düsük dozaj araliklarina deginildigi ve bunlarin bu bulusun kapsami dahilinde oldugu ayri örnekler olabilir. SEKILLERIN AÇIKLAMASI Sekil 1. Biacore ile bir denge baglama analizinden baglama afinitesinin tahminleri. (o) M99-B05 (lot W21573) (Kd = 160 ± 32 nM), (O) M99-B05 (lot W22595) (Kd = 148 ± 8 nM). Panel, antikorun bu iki farkli preparatini karsilastirir. Sekil 2. ELISA ile ölçüldügü üzere PC-BSASVa baglanan saflastirilmis lgG°ler. (o) M4-G02 (EC50 : 0.14 nM), (O) M73-G03 (EC50 : 0.91 nM), (A) M99-BOS (EC50= 0.11 nM). Veriler, ECSO deger tahminlerini elde etmek üzere bir küresel BmkS ile 4 parametreli bir lojistik denkleme uydurulmustur. Sekil 3. Femoral arter kafli farelerde merkeze dogru CD45 pozitif lökosit inflüksünün inhibisvonu. Transgenik erkek ApoE*3 Leiden fareleri, hiperkolesterolemiyi indüklemek üzere %1 kolesterol ve %0.05 kolat içeren yüksek kolesterollü ve yüksek yagli bir diyet ile beslenmistir. Üç haftalik yüksek yagli diyetten sonra farelere anestezi uygulanmistir ve femoral arter çevresinden kesilip parçalara ayrilmistir ve konstriktif olmayan bir polietilen kaf (Portex, 0.40 mm iç çap, 0.80 mm dis çap ve 2.0 mm uzunluk) ile gevsek bir sekilde kaplanmistir. Fareler, 0. günde PBS içinde çözünmüs 10 mg/kg rekombinant anti-PC lgG antikorlari, PBS veya sadece IP enjeksiyonu yoluyla PBS içinde 10 mg/kg anti-streptavidin A2 lgG antikorlari ile isleme tabi tutulmustur. Fareler, ameliyattan üç gün sonra öldürülmüstür ve kafli femoral arterler hasat edilmistir ve parafine gömülmüstür. Seri çapraz kesitler (5 mm) histokimyasal analiz için katli femoral arter segmentinin tüm uzunlugundan alinmistir. * p < 0.01, n=15. Sekil 4. Femoral arteri kafli farelerde intimal kalinlasmanin inhibisyonu. Transgenik erkek ApoE*3 Leiden fareleri, hiperkolesterolemiyi indüklemek üzere %1 kolesterol ve %005 kolat içeren yüksek kolesterollü ve yüksek yagli bir diyet ile beslenmistir. Üç haftalik yüksek yagli diyetten sonra farelere anestezi uygulanmistir ve femoral arter çevresinden kesilip parçalara ayrilmistir ve konstriktif olmayan bir polietilen kaf (Portex, 0.40 mm iç çap, 0.80 mm dis çap ve 2.0 mm uzunluk) ile gevsek bir sekilde kaplanmistir. Fareler, ameliyattan sonraki 0, 3i 7 ve 10. günde PBS içinde çözünmüs 10 mg/kg rekombinant anti-PC lgG antikorlari, PBS veya sadece IP enjeksiyonu yoluyla PBS içinde 10 mg/kg anti- streptavidin A2 lgG antikorlari ile isleme tabi tutulmustur. Fareler, ameliyattan 14 gün sonra öldürülmüstür ve kafli femoral arterler hasat edilmistir ve parafine gömülmüstür. Seri çapraz kesitler (5 um) histokimyasal analiz için kafli femoral arter segmentinin tüm uzunlugundan alinmistir. A. 3 paneldeki intimal alanin (ok ile gösterilmistir) karsilastirmasi, antikorlar M99-B053in, kaf-indüklü vasküler yaralanmadan 14 gün sonra gözlemlenen intimal kalinlasmayi azalttigini gösterir. B. (Mm)22 cinsinden intimal kalinlasma, n = 10, * p < 0.05 Sekil 5. ELISA kullanilarak ölçülen M99-B05 mutantlarinin PC baglanma aktivitesi (o) M99-BOS (EC50 = 0.28 nM), (O) X19-A01 (EC50 = 0.42 nM), (v) X19-A03 (EC50 = 0.54 nM), (A) X19-A05 (EC50=0.52 nM), (i) X19-AO7 (EC50 = 0.62 nM), (u) X19-A09 (EC50= 0.58 nM), (o) X19-A11 (EC50 : 0.97 nM), (0) X19-C01(EC50 : 1.4 nM). Sekil 6. Donmus insan aterosklerotik lezvon dokusunun bir anti- fosforilkolin antikoru ile immünohistokimvasal bovamasi Bir normal doku kontrolünün yani sira, insan aterosklerotik lezyon dokusu, Biochain Human donmus dokulardan ticari olarak elde edilmistir. Doku, 0.1 ug/mL biyotinlenmis M99-BOS anti- fosforilkolin lgG ile bir gece 4°C"de inkübe edilmistir. Dokuya baglanan antikor, streptavidin-yaban turpu peroksidaz (HRP) ve HRP substratinin eklenmesinin akabinde görsellestirilmistir. Antikor baglanmasinin varligi, HRP substratindan üretilen renk ile gösterilir. Bir izotip kontrolü ile baglanma gözlenmemistir (veriler gösterilmemistir). Sekil 7. Femoral arteri katli farelerde intimal kalinlasmanin inhibisyonu. Transgenik erkek ApoE*3 Leiden fareleri, hiperkolesterolemiyi indüklemek üzere %1 kolesterol ve %0.05 kolat içeren yüksek kolesterollü ve yüksek yagli bir diyet ile beslenmistir. Üç haftalik yüksek yagli diyetten sonra farelere anestezi uygulanmistir ve femoral arter çevresinden kesilip parçalara ayrilmistir ve konstriktif olmayan bir polietilen kaf (Portex, 0.40 mm iç çap, 0.80 mm dis çap ve 2.0 mm uzunluk) ile gevsek bir sekilde kaplanmistir. Fareler, ameliyattan sonraki 0, 3, 7 ve 10. günde gösterilen antikor ve IP enjeksiyonu yoluyla PBS içinde çözünen bir miktar ile isleme tabi tutulmustur. Fareler, ameliyattan 14 gün sonra öldürülmüstür ve kafli femoral arterler hasat edilmistir ve parafine gömülmüstür. Seri çapraz kesitler (5 um) histokimyasal analiz için katli femoral arter segmentinin tüm uzunlugundan alinmistir ve (um)2 cinsinden intimal kalinlasma hesaplanmistir, 11 = 10, * p < 0.05. ÖRNEKLER Örneklerin istemlerin kapsami disinda kalmasi ile ilgili olarak bunlar, sadece gösterme amaçlarina yönelik olarak saglanir. Asagidaki önekler, ayrica bulusun çesitli açilarini göstermek üzere dahil edilir. Teknikte uzman kisiler tarafindan, takip eden örneklerde açiklanan tekniklerin, bulusun uygulanmasinda iyi sekilde islemek üzere bulusçu tarafindan bulunan teknikler ve/veya bilesimleri gösterdigi ve bu nedenle bunun uygulanmasi için tercih edilen yöntemleri olusturdugunun düsünülebilmesi kabul edilmelidir. Ancak teknikte uzman kisiler, mevcut tarifnamenin isigi altinda, açiklanan ve spesifik düzenlemelerde birçok degisikligin yapilabilecegini ve esit veya benzer bir sonuç elde edebilecegini kabul etmelidir. Faz gösterim antikor kütüphanesinin taranmasi PC°ye baglanan ve kardiyovasküler hastalikta oksLDL veya apoptotik endotelyal hücreler üzerinde açiga çikarilan PC,nin pro-inflamatuar aktivitesini nötralize eden insan antikorlarini tanimlamak üzere bir faj gösterim seçimi ve tarama çalismasi gerçeklestirilmistir. Anti-PC antikorlarinin seçimi, bovin serum albümine (BSA) konjuge edilmis PC kullanilarak yönlendirilmistir ve ferritine konjuge edilmis OC ile devirler arasinda degistirilmistir. Faj gösterim seçimi sonucu, ELISA ile PC-BSA7ya baglanmaya yönelik ayri faj olarak taranmistir ve vuruslar, özgün antikorlarin tam sayisini tanimlamak üzere DNA dizilenmistir: bunlarin tümü rekombinant olarak lgGiye dönüstürülmüstür. Toplamda, iki farkli faj gösterim kütüphanesinde seçimlerin gerçeklestirilmesinden sonra, 41 tam insan lgG tanimlanmistir ve üretilmistir. Bu antikorlar, 1,511 ELISA pozitif vurusunun oldugu ELISA ile, toplamda 10.660 farkli faz klonunun taranmasindan sonra tanimlanmistir. Bir ELISA vurusu, altyapi sinyalinden (streptavidin ile kapli plaka) en az 3 kat daha fazla olan immobilize hedef (diger bir deyisle, PC-BSA) üzerindeki bir sinyale sahip sekilde tanimlanmistir. 1.511 ELISA pozitifin dizilenmesi ve faj üzerinde gösterilen Fab parçalarindan elde edilen antikorlarin tam insan lgG,lere dönüstürülmesinden sonra, birinci fajemid kütüphanesinden 26 ve ikinci faj kütüphanesinden 30 olmak üzere 56 farkli antikor dizisi geri kazanilmistir. lgG yeniden formatlama, Ifade ve Saüastirma Burada, tam uzunluktaki lgG,ye kadar faj üzerinde gösterilen F ab,den rekombinant yeniden formatlamadan sonra 56 antikordan 40,1nin geri kazanim sonuçlari açiklanir. Her bir 1gG°ye yönelik DNA hazirlanmistir ve 10 günlük bir ortam hasadindan sonra lgG°yi geçici olarak olusturmak üzere insan böbrek 292T hücrelerine transfekte edilmistir. In vitro çalismalar için kullanilan lgG,ler, protein A Sefaroz (MabSelect) ve PES içinde degistirilmis tampon kullanilarak saflastirilmistir. ln vivo test için hedeflenen lgG,ler, gradyan siyirina ile katyon iyon degisiminin (Poros HS) akabinde protein A Sefaroz ile saflastirilmistir. In vivo test için hedeflenen lgG antikorlari, Antikor Formülasyon Tamponunda (0.1 M sürat-fosfat, 50 HM NaCl, %001 Tween-80, %2 Trehaloz, pH 6.0) degistirilmis tampondur. Antikor konsantrasyonlari, 280 nm9de absorbans ile saflastirilmis numuneler üzerinde belirlenmistir (l mg/mL = 1.4 O.D.). In vitro analizler 40 lgG, istenen özelliklere sahip antikorlari tanimlamak üzere bir dizi in vitro testte test edilmistir. Tablo 1, tam insan lgG Anti-Fosforilkolin antikorlarinin seçimi için baglanma özelliklerini kisaca açiklar. Tablo 1"deki ikinci sütun (sütun A), 96 gözlü bir plaka yüzeyi üzerinde immobilize edilmis PC-BSA°ya eklenen sadece 15.6 mg/mL kullanilarak elde edilen ELISA sinyalini gösterir. ELISA sinyalleri l"e sahip antikorlarin daha yüksek afiniteli antikorlar olmasi beklenir. Tablo l"deki üçüncü sütun (sütun B), antikorlar bir biyosensör çip üzerinde kovalent olarak immobilize edilmis aminofenil fosforilkolin üzerine enjekte edildiginde ve bir Biacore 3000 aleti kullanilarak yüzey plazmon rezonansi ile baglanma tespit edildiginde elde edilen sinyali gösterir. Biacore sinyali ne kadar yüksek olursa, baglanma da 0 kadar çok gözlenmistir. Tablo l"deki dördüncü sütun (sütun C), fosforilkolini BSA veya biyosensör çipe kovalent olarak baglamak üzere kullanilan baglayici olan kovalent olarak immobilize edilmis aminofenole baglanmanin test edilmesi yoluyla antikorlarin fosforilkoline yönelik spesifikligini belirlemek üzere test sonuçlarini gösterir. Antikorlardan birkaçi, aminofenil fosforilkolinin yani sira veya bundan daha iyi sekilde baglayici moleküle baglanir. Bu antikorlarin, etkili terapötik antifosforilkolin antikorlar olmasi olasi degildir. Tablo lldeki besinci sütun (sütun D), kardiyovasküler inflamasyonda bir erke durum olan ve köpük hücrelerin olusmasina yol açan, antikorlarin makrofajlar ile oksLDL'nin alinmasini inhibe etme yeteneginin test sonuçlarini kisaca açiklar. Makrofaj alimi, test edilen 80 ug/mL antikor varliginda veya eksikliginde floresan ile modifiye edilmis oksLDL kullanilarak akis sitometrisi ile izlenmistir. Her bir deneyse, 100 ug/mL afinite saflastirilmis lgM anti-PC poliklonal antikor, bir pozitif kontrol olarak kullanilmistir. Floresan ile izlendigi üzere, test edilen monoklonal antikorlarin varliginda alinan oksLDL miktari, poliklonal antikor varliginda gözlenen Iloresan ile bölünmüstür ve akabinde 100 ile çarpilmistir. Böylece, 100,ün altindaki bir deger, 80 ug/lelik bir konsantrasyondaki antikorun, oksLDL aliminin inhibe edilmesinde, 100 ug/mL7lik bir konsantrasyondaki insan serumundan ekstrakte edilen poliklonal anti- PCaden daha etkili oldugunu gösterir. lOOlün üzerindeki bir deger benzer bir sekilde, antikorun poliklonal anti-PCden daha az etkili oldugu gösterir. Antikorlarin birkaçinin, poliklonal anti-PC kontrolü ile benzer sekilde veya bundan daha iyi sekilde alimi inhibe ettigi gözlenmistir. Ek olarak, bu antikorlari ön seçimden hariç tutan bir özellik olmak üzere birkaç antikorun, oksLDL°nin makrofaj alimini uyardigi gözlenmistir. Tablo 1°deki son sütun (sütun E), oksLDL veya dogal LDL içeren 96 gözlü bir plakanin gözlerine lgG,lerin eklenmesi yoluyla elde edilen ELISA verilerini gösterir. LDL yoluyla gözlenen ile bölünen oksLDL°ye baglanmaya yönelik olarak gözlenen ELISA sinyalinin orani, test edilen her bir antikor içinde Tablo 1,de listelenir. Belirli antikorlarin, LDL°ye kiyasla oksLDL,nin daha iyi baglayicilari oldugu açiktir. Tablo 1. Tam Insan lgG Anti-PC Antikorlarina yönelik Baglanma Özelliklerinin Kisa Açiklamasi Numune KIM A B C D E MOOO4-BO2 1.24 366.4 38.6 233.3 6.7 M0004-C02 0.11 44.8 0.2 93 1.2 MOOO4-GO2 1.23 10285 15.7 nd 8.4 M0007-H10 0.49 415.8 2.7 105 0.6 M0009-A06 0.48 912.1 2.5 80.5 2 8 M0011-F05 1.56 44736 155.6 547.5 10.3 M0024-B01 0.26 nd nd iid 1 1 .1 M0026-H05 0.03 1.6 17.8 73.7 1.4 M0027-H05 0.03 -3.3 1.4 79.3 1.1 M0028-H05 0.03 1.8 5 86 0.6 M0029-H05 0.08 nd nd 370 0.9 M0030-H05 0.02 19.1 32.8 nd nd M0031-H05 0.03 -4.1 0.2 81 l M0034-G12 0.84 462.3 14.6 78 nd M0035-E11 0.14 41.5 2.1 68 0.5 M0039-H05 2.73 -6.4 2.1 80.4 0.7 M0042 -G07 nd -2.9 2.3 93 .7 0 8 M0043-D09 1.24 172.7 2.1 '1310 `16.8 M0050-H09 0.22 279.1 7 71.5 nd M0073-G03 0.18 46.3 19.9 51.1 1.2 M0077-A11 0.26 836.3 1.3 78.4 0.7 M0086-F02 0.99 1.4 12.6 315 nd M0086-H01 0.41 51.2 4.9 85 1 M0086-H11 1 -1.1 0.9 74 nd M0097-B04 0.22 109.5 -O.5 98 1.3 M0097-B05 1.01 699.6 -3.2 80 1.1 M0099-B05 1.03 52193 233 71 1.5 M0099-D11 0.03 170.7 8.6 560 2.1 M0100-A01 1.53 75328 39347 nd 1.1 M0102-E11 0.02 1.6 -1.3 83 nd M0108-H03 nd 532.7 4.5 nd 1.1 M0126-A04 0.03 34.2 -8 nd 2.8 M0126-F10 nd 32.9 -8.3 nd nd M0126-H08 0.03 114.3 5661 98 nd M0127-A09 0.03 18.2 -8.7 160 1.6 M0127-B07 0.05 16.3 -7 67 nd M0127-E06 nd 21.9 -42 md nd M0127-E07 nd 15.4 -6.2 nd 1.8 M0127-F01 0.02 9.6 3.6 77 md X0009-A01 0.23 198.1 2 95 1.5 Tam Sütun Basliklari: A) 15.6 n/ml Ab,de (OD) ELISA ile BSA"ya konjuge edilmis PC°ye baglanma B) Biacore (RU) ile aminofenil PC°ye baglanma a) Makrofailar ile oksLDL alimi Dil etiketli (1,1,-di0ktadesi1- 3,3,313 "-tetrametilindokarbosiyanin perklorat) Cu-okside LDL (oksLDL, Intracel Corp, US) alimi, insan THP-l monositlerinden (ATCC, ABD) derive edilen makrofajlarda incelenmistir. Farklilasma, ortamin degistirilmesinden 24 saat sonra RPMI ve %10 FCS içinde 100 nM PMA (Sigma- ALdrich) ile inkübasyon yoluyla indüklenmistir ve hücreler bir 48 saat daha birakilmistir. Hücreler daha sonra, 37°Clde 50-60 dakika gösterilen sekilde antikorlar ile inkübe edilmistir. Bunun ardindan 20 ug/ml OksLDL eklenmistir ve inkübasyon saat devam etmistir. Inkübasyon periyodunun sonunda hücreler, iki kez çok soguk PBS/%0.2 BSA ile ve bir kez PBS ile yikanmistir. Hücreler, %2 PFA içeren PBS içinde hasat edilmistir. Verilerin elde edilmesi ve analizi için, Cell Quest yazilimi ile FACS Calibur kullanilmistir. Her bir numune için, minimum 10.000 hücre analiz edilmistir. 1)) OksLDL ELISA. hLDL (Kalen Biomedical #770200-4), OksLDL (Kalen Bioinedical # 770252-7) (bu verilerin göstermedigi sekilde), 4°C1de bir gece bir ELISA plakasi (Immulon 2HB) üzerinde 10 ug/ml°lik bir konsantrasyon ve 100 ug/mPlik bir hacimde kaplanmistir. Plakalar, oda sicakliginda 2 saat %1 "lik bir BSA solüsyonu (300 ml/göz) ile bloke edilmistir. Yikandiktan sonra plaka, oda sicakliginda 1 saat gösterilen antikorlar (100 ;il/göz; 25 - 100 nM) ile inkübe edilmistir. 1:5000"1ik bir dilüzyonda AP ile konjuge edilmis keçi anti insan sekonder antikor (ThermoScientific #31316) 100 ul/ göz oraninda, yikanmis plakaya eklenistir ve 1 saat oda sicakliginda inkübe edilmistir. Saptama reaktifi (ThermoScientific #37621) eklenmistir (100 ;il/göz) ve plaka hemen kinetik modda 405 nm1de 30°C sicaklikta okunmustur. Sonuçlar ODoksLDL/ODLDL olarak gösterilmektedir. Anti-PC IgG"nin PCR/e karsi afinitesinin SPR ile analizi lgGller, Biacore yüzey plazmon rezonans (SR) biyosensörü kullanilarak PC"ye baglanmaya yönelik olarak taranmistir. Aminofenil fosforilkolin (Biosearch Technologies), serbest amin grubu araciligiyla 120 RUaluk bir yogunluga kadar bir CMS çipinin bir akis hücresine birlestirilmistir. Aminofenil baglayici, yaklasik olarak 120 RU°1uk bir yogunluga kadar ayni CM5lin baska bir akis hücresine birlestirilmistir. PC-KLl-l ve PC-BSA ayrica bir CMS çipinin ayri akis hücrelerine birlestirilmistir. Farkli baglamlarda immobilize PC ile bu yüzeyler kullanilarak antikorlar, 50 ;aL/dakikada 100 nMlde enjekte edilmistir ve baglanma sensörgramlar elde edilmistir. M99-B05"in afinitesi, 50 üL/dakikada yüzey üzerindeki antikorun akan farkli konsantrasyonlari ile incelenmistir. Bu immobilize antijene yönelik olarak antikorlar, hizli bir açilma hizi ve hizli bir kapanma hizi sergiler, bu da kinetik sensörgramlardan güvenilir kaçilma ve kkapamml tahminlerinin elde edilmesini engeller. Enjeksiyonun sonuna yakin her bir antikor konsantrasyonuna yönelik olarak gözlemlenen sinyal, antikor konsantrasyonuna karsilik olarak grafik haline getirilmistir ve bir standart hiperbolik denge baglanma denklemine (Sekil 1) verileri uydurmustur. Sekil l,de görüldügü üzere M99-B05,in, yaklasik olarak 150 nM,lik bir açik Kd ile aminofenil PC ,ye baglandigi görülür. Rmaks (maksimum yanit) disinda esdeger Kd degerlerine sahip test edilmis iki preparat farklilik gösterir. Bu yüzey üzerinde her bir antikora yönelik olarak gözlemlenen açik Kd degerleri, daha fazla fizyolojik substrat üzerinde gözlemlenen afiniteyi gösterebilir veya göstermeyebilir. Satlastirilmis Anti-PC lgGslerin ELISA Taramasi Saflastirilmis lgGller ayrica, PC-BSA ile bir ELISA kullanilarak PC "ye baglanmaya yönelik olarak taranmistir. Bu veri, tahmin edilen EC50 degerlerini saglamak üzere yerlestirilmistir (Sekil 2). oksLDL indüklü MCP-1 "in monositlerden saliminin inhibisyonu Antikorlardan birkaçi, oksLDL ile uyarima yanit olarak monositlerden kemokin MCP-1 "in salimini bloke etme yetenegine yönelik olarak test edilmistir. Tablo 2"de gösterildigi üzere M99-B05 oksLDL indüklü MCP-1 saliminin bloke edilmesinde oldukça etkili olmustur. Bu antikor, nM araligindaki bir IC50 ile MCP-1 salimini güçlü bir sekilde inhibe etmistir. MCP-l, bir aterosklerotik lezyon bölgesinde lökositlerin inflüksünü destekleyen güçlü bir pro-inflamatuar kemokindir (Reape ve Groot. 1999. Chemokines and atherosclerosis. Atherosclerosis 147, 213-225). Kontrol lgG anti streptavidin A2, negatif kontrol olarak, inonositlerden oksLDL indüklü MCP-1 saliminin herhangi bir inhibisyonunu göstermemistir (veri gösterilmemistir). Tablo 2 - Insan monositlerden oksLDL indüklü MCP-1 salgisinin anti-PC inhibisyonu. M99-BOS"in IC50"si Donör 1 1.8 ± 0.74 nM Donör 2 1.3 ± 0.7 nM Monositler, insan kanindan izole edilmistir ve 10 pM ila 40 nM anti- PC IgG varliginda veya eksikliginde 2 ug/mL bakir-okside oksLDL ile uyarilmistir. Hücre ortamindaki MCP-l seviyeleri, ticari olarak temin edilebilir bir MCP-l spesifik ELISA kiti kullanilarak ölçülmüstür. Aiitikorun (M99-B05) ayrica insan aterosklerotik lezyon dokusuna baglandigi gösterilmistir (Sekil 6). In vivo analizler ln vitro analizlerde uygun in vitro baglanma özellikleri ve fonksiyonelligin bir kombinasyonuna dayali olarak antikorlar M4-G2, M73-G03 ve M99-B057in ayrica koroner inflamasyonun bir in vivo modelinde test edilmistir. Bu fare modeli, açiga çikarilan femoral arter etrafina bir sinirlayici kafin yerlestirilmesi yoluyla indüklenen vasküler yaralanmaya yanit olarak sub-endotelyal dokuda (diger bir deyisle, ortam) inflamatuar hücre inflüksünü ölçmüstür (Sekil 3). Sekil 3°ten, M99-BOSlin sub- endotelyal katmanda lökosit inflüksünü azalttigi açiktir, bu azalmanin istatistiksel olarak anlami oldugu görülmüstür. Bunun aksine ve bunlarin in vitro analizlerde uygun in vitro baglanma özellikleri ve fonksiyonelliklerine ragmen M4-G2 veya M73-G03, kontrol antikoruna ("HuIgGl a-AZ" olarak adlandirilan anti-streptavidin A2 lgG) kiyasla herhangi bir istatistiksel olarak anlamli azalma göstermemistir. M4-G2 ve M73-GO3,e kiyasla, bu analizde M99-B05"in oldukça ayirt edici etkisi tahmin edilememistir ve bulusçular için sürpriz olmustur. Bu, anti-PC antikorlarinin in vivo etkinliginin pozitif in vitro verilerden tahmin edilebilir olmayabilecegini gösterir. Sonuç olarak M99-B05, farelerde bir vasküler restenoz modelinde test edilmistir, burada yaralanma tekrardan, femoral arter etrafina bir kafin yerlestirilmesi yoluyla indüklenmistir, ancak 3 gün yerine 14 gün ilerlemesine izin verilmistir. Etkilenen arterlerde damar neotimanin bir kalinlasmasi olarak gözlemlenen stenoz miktari akabinde histokimya yoluyla analiz edilmistir (Sekil 4). Sekil 4aten, M99-B05°in kaf indüklü vasküler yaralanmadan sonra damar duvari kalinlasmasini önemli ölçüde inhibe ettigi açiktir. Bu ayrica M99-B057in in Vivo olarak yüksek oranda etkili oldugunu gösterir. Germ Hatti ve Stabi'lite Mutantlarmm Yapilandirilmasi M99-BOS antikorunun agir ve hafif zincirlerinin degisken bölgelerinin bir amino asit dizisi analizi, antikor ifadesi ve saflastirmasi sirasinda meydana gelebilmek üzere potansiyel immünojenesitenin azaltilmasi ve süpheli amino asit modifikasyonunun önlenmesi hedefi ile yapilandirmak üzere amino asit substitüsyonlarini tanimlamistir. Asagidaki tablolar, Kabat veri tabani kullanilarak en yakindan ilgili germ hatti antikor dizisi le degisken bölgenin amino asit dizisinin hizalanmasini gösterir. Ayrica tablolarda vurgulananlar, tümü üretilebilirlige dikkat çekebilen ("Stabilite Mutantlari" denir) bir HCDR3 disülfid agi olmak üzere potansiyel deamidasyon bölgelerini uzaklastiran mutantlara ek olarak, bunu germ hattina yakinlastirmak üzere antikorda olusturulan amino asit substitüsyonlaridir. M99-BO5 Mutantlari Xl9-A01 mutanti, M99-B05,teki birinci amino asidin (bir glutamin) germ hatti dizisi ile daha iyi eslesmek amaciyla Xl9-A017de silinmesi disinda dogal sus M99-B05 ile ayni agir ve hafif amino asit dizilerine sahiptir. X19-A03 mutantinin dizisi, ifade ve saflastirma sirasinda protein amino asit modifikasyonunu potansiyel olarak azaltmak üzere amino asit substitüsyonlarinda (stabilite mutasyonlari) ek olarak agir degisken bölgenin (HV-FRI) çerçeve l°inde yerlesik bir fenilalanin (F) olmaksizin VH3-23, JH3 agir zincir ve VK4-B3, .I K] hafif zincir germ hatti dizilerine göre tam germ hatli antikoru kodlar. M99-B05 antikorunun, germ hatti dizisine göre HV-FRl °in kuyrugunda silinmis bir F amino asidine sahip oldugu bulunmustur. F,nin bu pozisyona eklenmesi, antikoru germ hatti dizisine yakinlastirir ve muhtemelen bunun immünojenik olmasi daha az olasidir. Xl9-A03 mutanti, bu ekleinenin PC baglanmasini etkilemesi durumunda F eklemesi disinda diger tüm germ hatti substitüsyonlarini içerecek sekilde yapilandirilmistir. Stabilite mutantlari, bir potansiyel deamidasyon bölgesini (NG) kesintiye ugratmak üzere gerçeklestirilmis olan HV- CDR3,te bir G ila A mutasyonu ve baska bir potansiyel deamidasyon bölgesini uzaklastirmak üzere LV-CDR17de N ila Q substitüsyonunu içerir. X19-A05 mutantinin dizisi, HVFRVe yerlestirilmis F ve stabilite mutasyonlarini içermek üzere tüm germ hatti substitüsyonlarini içerir. Xl9-A05 antikoru, tüm germ hatti substitüsyonlari ve stabilite mutasyonlarini içeren bu örnekte üretilen tek mutant antikordur. Xl9-A11 mutanti, Xl9-A01 ile ayni diziye sahiptir, ancak bu bölgede olusturulmasi beklenen disülfidi uzaklastirmak üzere HV-CDR3°te iki C ila S substitüsyonuna sahiptir. 80 X19-C01, F eklenmeden ve disülfidi uzaklastirmak üzere C ila S substitüsyonlarina sahip stabilite mutantlari ile germ hatti çikarilir. Karsilastirmali antikor (ön disülfid uzaklastirma) Xl 9-A03"tür. Tablo 3. M99-B05 ,in agir zincir dizi optimizasyonu "199805 "' OLLE ss o:: »Pozisß ?Lscmsam sari-:- l'$\›'RQAPGI- X19-AO1 F.`lr`I LESGGG .JLJL'GC-QLRLPCAA -sii: YW? -l'v'RÇsAPiSKGLRWS 1. X 9AO3 2"`LLE:I.4:I'J;'.'I`PGGSLRLSCAÃSGE'T-SHI'NJRQAPGKGLljl'i"v'5 X19'AO5 Ew›l.'i:3Gf`"`L îFi-G"'RI:C. ASSETFQ ::I'JRÇIAPGE(GLZ'i~J'v':'-I X19-AO7 EJOLLESGGSLEJQ?GGSLRLS?FüiSSFT- q-iivawvmaizis X19-A09 E "OL 1;an?Incpçqnqîcnußqprpn-iWT IPrFY'lEw . xi9-A11 mü ;:Sisorsw op: C'RL..L."uJ.,JFT siiimiai J-"Lma X19-C01 Evo; Lzs WGGSL* QEGGSL ;s-:aase FT- s'W%3.2-'le-i '%5 *ivÖ+9***vt*+ývýtf***'+ûviût iii-***ûvt-ticâffvûéoâ M99-BOS _..__ YIS ?Çayin/_rs 30* FTI*°C`JU<\1TL icni-nsmmuz 'I'CAP X19-A01 i I PSGGC W( *Riv'i' i SRDNS:mm:igiiii›15î,_=!JiEL:TAi.-"r?CAR Xlg'AO3 m Finans-! iWlRF"I RDNSKNTL!I_CIJJNSLRAED'IAE-"i"?EKIAR X19-A05 "i'ISPSGSGIlii'ßDQVSLRF"ICFPV T' ioinis: RAEETAT ?4. 1- 7 F_: _ _ , . . X QAO i- U-CIJCGT-li-*E°.«'KGRFTISalltxSKNTL't'l.-',2MI\IbLRÄF.IJT VIIILAF' x19-A09 Grairics EGRFTISQPD.SK`~JTL LQMNS "AE'MT 3-3-5& Xlg'AH ":'IS ?_LJMTLK 'iî'bG FTISFUNSKNTL': LQ`4NbJ~REL"`"'I" ' 9 xig-coi SPECEIIÄISTHYRDS'IIKG:aFTISRDNSKNTLYAÇHI'I\151.F'\EEIIA .› CAR i*7~iiö)^gh&dipýiöiiûigiwwiiiýgli,"kd'irvüdiö vji'rvzritiif M99-BOS - . [RRFRS JCSNÇ'J:R"TRVLp-rr'wi :mm-'Tv ss SEK KIM NO . 3 ""01 *:rRwzswrvi RP?? _nr' iRrJrcim'ww SEK KIM NO ; 5 X19*^°3 ['I.FRE`RE"›.-'CSI\` :Rprn Dr. FEIbiigguTMVITSa SEKKIM No:7 Xlg'AO5 'JRFRS" _CSNA'I'CRDTAYDÄFDZWGQGTM'R'TVSS SEK KIM NO: 1 X19'^07 ILFFRS*V'CSr113'u'CR ;rarDRFCIWGQSMJTVRR SEK KIM No ; 9 Xlg'AOQ [JRERSV SP4GueF3T`JL/Â'CII'JF iis'rm'r'u'ss SEK KIM N03 11 X19-A11 - -- . .rRrasvssNew-'SRRTRrDAFc-iama :www :s SEK KIM No; 13 X19-C01 [R'wg' s3içRvs RPTRYrzch-i : C. - . SEKKIMNO:15 IIIW*Y w* * '?***'**f***y** yi*** Germ hatti çikarilan dizi mutasyonlari koyu gösterilir. Olasi üretim sorunlarini hafifletebilen kalinti mutasyonlarin alti çizilidir. CDR bölgeleri kutu içindedir. Tablo 4. M99-B05°in hafif zincir dizi optimizasvonu "199805 Q wiçm `-RLW- :::ERP-.T INL ' :KN'E :EhIwKlBLi-uii ic; m: spr::: X19.A01 _ _ w_ -_ -IJIQ'MTQSP-ISLA»'.J.-';;RP.II.\1. i'I: QQÃH :2?qu X19-A03 QSIIKKDÇE LR 'TI'QQKPGQPPKL -E IVMTQSPDSLA . SL'SbRJ-"IRHIKSSÇSVF X19-A05 'l '1' ;IQ KPCQ P PK L -DIVHT"SFDSLAVSLSEPATIN Xlg'Am -DIVVTQSPDS mwLbERiTIME Q's- rrbsriKn-vLmuWpi PFKL X19~A09 -LILWJILVSQSP Ab'u'SL ER.`.TINL lKi SÇSV FiNLI.KK\l`1Lz-^Jii`fgi X19-A11 -:iIQI~iTQsPDSLAVSLGERI-SINCgßçsv :'I-JSNKKNYI..-`i .~I'i'QQK.AC-QPP 'L xiacoi _ _ . -`IIVM":3P"JSLF».S;ÇZ .-NslKssçsvriçör KRNEU i-SYQQKPSQPFK; &o *v*+*rû+l--i**+1+iit+*v+***i*fi***týiiiûivyü tir*** "499805 ;1 HWASTRBSG'IJPDRFSGEGSGTDFTLT i SNLQAEDFALYYCQQ i'FNAPRT F xig-A01 X19-A03 LI NASTRES UPDRFSGSSSGTDETLIISSLQRSD'JFAVI'YL " ` "Sl-"05 ama G.':` DRESGSGSGI DPT LTI SSLQABDVAVY YCÃCQY ?NÃE'RT X19-A07 â z.t'mas'i'nzsksi-*PeawsscseraîrsriSSLQAEJW-.vzyqz-drîwapaâî X19-A09 X19-A11 xig~c01 v'PZIRFSGSGSGTDFTLTICSLQREUVAVYîC QQYE'NAPRTF IIzfßiüi'ißligibioöküqilülii*vhh'-iillli:-LÂ'lli'iiû'Acviû' M99-805 GQGTKVEIK SEK KIM NO : 4 X19~A01 GQGTKVEIK SEK KIM NO ; 6 X19-AO3 GOGTKVEIK SEK KIM NO 2 8 X19-A05 GQGTKVEIK X19-A07 GOGTKVEIK X19-A09 GQGTKVEIK SEK KIM NO : 2 SEK KIM NO : 10 X19AA11 GQGTKVEIK SEK KIM NO : 12 x1g.cm GQGTKVEIK SEK KIM NO: 14 SEK KIM NO: 16 Gerrn hatti çikarilan dizi mutasyonlari koyu gösterilir. Olasi üretim sorunlarini hafifletebilen kalinti mutasyonlarin alti çizilidir. CDR bölgeleri kutu içindedir. Süpheye mahal vermemek için, bu basvuruda dizilerin sunumu arasindaki herhangi bir uygun olmayan uyumsuzluk durumunda, VH ve VL bölgelerine yönelik olarak saglanan diziler ve Tablolar 3 ve 4,teki çesitli CDR dizileri kesin dizilerdir. M99-BOS,in mutantlarinin PC baglanmasi M99-B05 mutantlarinin PC baglanmasi ELISA ile degerlendirilmistir (Sekil 5). ELISA verilerinden (Sekil 5), M99-B05,teki mutasyonlarin birçogunun PC,ye baglanmayi önemli ölçüde etkilemedigi açiktir. Ancak Hv-CDR3"teki sistein kalintilarinin serin (Xl9-All ve X19- COl) ile degistirilmesi afiniteyi azaltmistir. Bu sistein kalintilarmin, bir disülfid olusturmasi beklenir ve VK4-B3 tarafindan kodlanan gerrn hatti antikor dizisinde bulunur. Gözlemlenen baglanma sinyallerindeki farkliliklar, konsantrasyon ölçümlerindeki her bir hazirlik ve/veya hafif hatalarda aktif antikor miktarindaki farkliliklara baglanabilir. Optimize edilmis maksimum sayida permisif dizi içeren M99-B05"in antikor mutanti Xl9-A05,tir. Bu antikor, tüm stabilite ve germ hatti substitüsyonlarini içerir, ancak Hv-CDR3 disülfidi korur. M99-BOS ve Xl9-A05,in in vivo etkisinin karsilastirilmasi M999-B05 ve Xl9-A05, farelerde bir vasküler restenoz modelinde test edilmistir, burada yaralanma tekrardan, femoral arter etrafina bir kafm yerlestirilmesi yoluyla indüklenmistir, ancak 3 gün yerine 14 gün ilerlemesine izin verilmistir. Etkilenen arterlerde damar neotimanin bir kalinlasmasi olarak gözlemlenen stenoz miktari akabinde histokimya yoluyla analiz edilmistir ve intimal kalinlasma hesaplanmistir (Sekil 7). Sekil 77den, Xl9-A057in kaf indüklü vasküler yaralanmadan sonra damar duvari kalinlasmasini M99-B05"e kiyasla benzer bir ölçüde önemli oranda inhibe ettigi açiktir. X19- B05"in etkisi ayrica açik bir doz-yanit iliskisi göstermistir. TARIFNAME IÇERISINDE ATIF YAPILAN REFERANSLAR Basvuru sahibi tarafindan atif yapilan referanslara iliskin bu liste, yalnizca okuyucunun yardimi içindir ve Avrupa Patent Belgesinin bir kismini olusturmaz. Her ne kadar referanslarin derlenmesine büyük önem verilmis olsa da, hatalar veya eksiklikler engellenememektedir ve EPO bu baglamda hiçbir sorumluluk kabul etmemektedir. TR TR TR TR TR TR TR TR TR

Claims (1)

1.
TR2019/09072T 2011-08-09 2012-08-08 Fosforilkoline karşı yeni antikorlar. TR201909072T4 (tr)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201161521593P 2011-08-09 2011-08-09

Publications (1)

Publication Number Publication Date
TR201909072T4 true TR201909072T4 (tr) 2019-08-21

Family

ID=46679261

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
TR2019/09072T TR201909072T4 (tr) 2011-08-09 2012-08-08 Fosforilkoline karşı yeni antikorlar.

Country Status (28)

Country Link
US (3) US9803028B2 (tr)
EP (1) EP2742068B1 (tr)
JP (1) JP6277125B2 (tr)
KR (1) KR101947758B1 (tr)
CN (1) CN104039832B (tr)
AR (1) AR087485A1 (tr)
AU (1) AU2012293646B2 (tr)
BR (1) BR112014002929A8 (tr)
CA (1) CA2843921A1 (tr)
CY (1) CY1121950T1 (tr)
DK (1) DK2742068T3 (tr)
ES (1) ES2732838T3 (tr)
HK (1) HK1200852A1 (tr)
HR (1) HRP20190988T1 (tr)
HU (1) HUE045163T2 (tr)
LT (1) LT2742068T (tr)
MX (1) MX364425B (tr)
PL (1) PL2742068T3 (tr)
PT (1) PT2742068T (tr)
RS (1) RS58986B1 (tr)
RU (1) RU2654584C2 (tr)
SG (1) SG2014009344A (tr)
SI (1) SI2742068T1 (tr)
SM (1) SMT201900366T1 (tr)
TR (1) TR201909072T4 (tr)
TW (1) TWI707873B (tr)
WO (1) WO2013020995A1 (tr)
ZA (1) ZA201400665B (tr)

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN103906532B (zh) 2011-08-09 2018-01-26 阿瑟拉生物技术公司 结合磷酰胆碱（pc）和/或pc结合物的抗体
HUE045163T2 (hu) * 2011-08-09 2019-12-30 Athera Biotechnologies Ab Új ellenanyagok foszforilkolin ellen
US10942184B2 (en) 2012-10-23 2021-03-09 Caris Science, Inc. Aptamers and uses thereof
WO2016145128A1 (en) 2015-03-09 2016-09-15 Caris Science, Inc. Oligonucleotide probes and uses thereof
EP3314027A4 (en) 2015-06-29 2019-07-03 Caris Science, Inc. THERAPEUTIC OLIGONUCLEOTIDES
US10941176B2 (en) 2015-07-28 2021-03-09 Caris Science, Inc. Therapeutic oligonucleotides
KR20250173600A (ko) 2023-03-17 2025-12-10 옥시토프 파마 비.브이. 항-포스포콜린 항체 및 그 사용 방법

Family Cites Families (37)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2402664A1 (fr) 1977-09-07 1979-04-06 Agronomique Inst Nat Rech Produits de couplage phosphorylcholine, composes amines procede d'obtention et applications
US5955584A (en) 1986-03-31 1999-09-21 Charter Ventures Atherosclerotic plaque specific antigens, antibodies thereto, and uses thereof
DE3751182T2 (de) 1986-08-06 1995-10-26 Scripps Clinic Res Monoklonale Antikörper, B-spezifisch für Apolipoprotein, die von zwei Hybridomen erzeugt werden.
JPH02188532A (ja) 1989-01-17 1990-07-24 Otsuka Pharmaceut Co Ltd リポソームワクチン
WO1990012632A1 (en) 1989-04-19 1990-11-01 The United States Of America, Represented By The Secretary, United States Department Of Commerce Process for removing c-reactive protein and anti-phosphorylcholine antibodies from biological fluids
JP3283041B2 (ja) 1990-07-13 2002-05-20 学校法人藤田学園 人工抗体
AU666473B2 (en) 1990-12-10 1996-02-15 Entremed, Inc A vaccine against cholesterol to prevent hypercholesterolemia and atherosclerosis
RU2014609C1 (ru) * 1991-06-06 1994-06-15 Московский институт тонкой химической технологии им.М.В.Ломоносова Способ определения белков, специфичных к фосфорилхолину
JPH07504817A (ja) 1992-03-03 1995-06-01 ザ ロックフェラー ユニヴァーシティ Ｂ２９（Ｉｇ‐βまたはＩｇ−γ）を含むレセプタ複合体およびその利用
AU5959494A (en) 1992-12-29 1994-07-19 Entremed, Inc Vaccines against sterols
MX9401351A (es) 1993-02-22 1994-08-31 Alza Corp Composiciones para suministro oral para agentes activos.
US5455032A (en) 1993-07-29 1995-10-03 The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Use of phosphocholine hapten conjugates in vaccines
WO1998021581A1 (en) 1996-11-08 1998-05-22 The Regents Of The University Of California Methods and reagents for non-invasive imaging of atherosclerotic plaque
US6375925B1 (en) 1996-11-08 2002-04-23 The Regents Of The University Of California Methods and reagents for non-invasive imaging of atherosclerotic plaque
US6225070B1 (en) 1997-08-07 2001-05-01 The Regents Of The University Of California Antibodies to oxidation-specific epitopes on lipoprotein and methods for their use in detecting, monitoring and inhibiting the growth of atheroma
US20040185039A1 (en) 2002-08-30 2004-09-23 Heinz Kohler Therapeutic applications of noncovalent dimerizing antibodies
US6300308B1 (en) 1997-12-31 2001-10-09 Board Of Regents, The University Of Texas System Methods and compositions for inducing autoimmunity in the treatment of cancers
SE9802402D0 (sv) 1998-07-03 1998-07-03 Karolinska Innovations Ab Method of diagnosing cardiovascular disease and early atherosclerosis
ATE250228T1 (de) 1998-07-03 2003-10-15 Athera Biotechnologies Ab Verfahren zur diagnose von gefässerkrankungen und früher atheriosklerose
JP2003513027A (ja) 1999-10-26 2003-04-08 ザ レジェンツ オブ ザ ユニヴァースティ オブ カリフォルニア アテローム性動脈硬化症の診断、結像、治療用の薬剤及びその方法
SE0000855D0 (sv) 2000-03-15 2000-03-15 Karolinska Innovations Ab Antigenic composition useful as a vaccine against atherosclerosis
AU2001259730A1 (en) 2000-05-12 2001-11-26 The Regents Of The University Of California Standardized oxidized ldl assay
DE10041515A1 (de) 2000-08-24 2002-03-14 Gerold Schuler Verfahren zur Herstellung gebrauchsfertiger, Antigen-beladener oder -unbeladener, kryokonservierter reifer dendritischer Zellen
US6838452B2 (en) 2000-11-24 2005-01-04 Vascular Biogenics Ltd. Methods employing and compositions containing defined oxidized phospholipids for prevention and treatment of atherosclerosis
SE0103754L (sv) 2001-04-05 2002-10-06 Forskarpatent I Syd Ab Peptider från apolipoprotein B, användning därav immunisering, diagnosmetod eller terapeutisk behandling av ischemiska kardiovaskulära sjukdomar, samt farmaceutisk komposition och vaccin innehållande sådan peptid
WO2004091520A2 (en) 2003-04-11 2004-10-28 The Regents Of The University Of California Methods and compositions for treating atherosclerosis
ATE463254T1 (de) 2004-04-15 2010-04-15 Athera Biotechnologies Ab Antikörper gegen phosphorylcholinkonjugate
CA2575791A1 (en) 2004-08-03 2006-02-16 Dyax Corp. Hk1-binding proteins
EP1868651A4 (en) 2005-04-12 2010-10-06 Univ Duke METHOD FOR INDUCTION OF NEUTRALIZING ANTIBODIES TO THE HIV VIRUS
WO2007076200A2 (en) 2005-11-28 2007-07-05 Medimmune, Inc. Antagonists of hmgb1 and/or rage and methods of use thereof
US20090258005A1 (en) 2007-05-29 2009-10-15 Trubion Pharmaceuticals Inc. Therapeutic compositions and methods
JP5122908B2 (ja) 2007-10-17 2013-01-16 日泉化学株式会社 自動車の内装用部材の取り付け構造
CA2730042A1 (en) * 2008-07-07 2010-01-14 Athera Biotechnologies Ab New therapeutic and diagnostic methods for alzheimer's disease
WO2012010291A1 (en) 2010-07-21 2012-01-26 Athera Biotechnologies Ab Diagnostic and therapeutic methods and compositions for metabolic disease
KR102320178B1 (ko) 2011-01-06 2021-11-02 다케다 파머수티컬 컴패니 리미티드 혈장 칼리크레인 결합 단백질
HUE045163T2 (hu) * 2011-08-09 2019-12-30 Athera Biotechnologies Ab Új ellenanyagok foszforilkolin ellen
CN103906532B (zh) 2011-08-09 2018-01-26 阿瑟拉生物技术公司 结合磷酰胆碱（pc）和/或pc结合物的抗体

Also Published As

Publication number Publication date
CY1121950T1 (el) 2020-10-14
MX364425B (es) 2019-04-25
PT2742068T (pt) 2019-07-08
CN104039832B (zh) 2021-02-12
JP2014525233A (ja) 2014-09-29
HUE045163T2 (hu) 2019-12-30
AU2012293646B2 (en) 2017-08-31
DK2742068T3 (da) 2019-06-11
AU2012293646A8 (en) 2014-03-06
BR112014002929A2 (pt) 2017-03-28
US9803028B2 (en) 2017-10-31
TWI707873B (zh) 2020-10-21
AR087485A1 (es) 2014-03-26
KR20140068948A (ko) 2014-06-09
JP6277125B2 (ja) 2018-02-07
HRP20190988T1 (hr) 2019-09-20
AU2012293646A1 (en) 2014-02-20
MX2014001313A (es) 2014-07-28
RS58986B1 (sr) 2019-08-30
SI2742068T1 (sl) 2019-08-30
TW201321415A (zh) 2013-06-01
RU2014108815A (ru) 2015-09-20
EP2742068B1 (en) 2019-04-03
LT2742068T (lt) 2019-07-10
US20210238311A1 (en) 2021-08-05
EP2742068A1 (en) 2014-06-18
US20180086848A1 (en) 2018-03-29
ES2732838T3 (es) 2019-11-26
SMT201900366T1 (it) 2019-07-11
BR112014002929A8 (pt) 2021-09-28
WO2013020995A1 (en) 2013-02-14
SG2014009344A (en) 2014-07-30
PL2742068T3 (pl) 2020-01-31
ZA201400665B (en) 2019-08-28
US20140178410A1 (en) 2014-06-26
RU2654584C2 (ru) 2018-05-21
HK1200852A1 (en) 2015-08-14
CA2843921A1 (en) 2013-02-14
KR101947758B1 (ko) 2019-02-14
CN104039832A (zh) 2014-09-10

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP2022528061A (ja) 抗クローディン１８．２抗体及びその用途
US20210238311A1 (en) Antibodies against phosphorylcholine
CN108064243B (zh) 对lox1具有特异性的结合蛋白及其用途
TR201808486T4 (tr) Bradikinin B1 reseptör ligandlarına karşı antikorlar.
US20210230310A1 (en) Antibodies binding to phosphorylcholine (pc) and/or pc conjugates
KR20240004860A (ko) 디엘엘3에 대한 결합 분자 및 이의 용도
CN110945029A (zh) 用于治疗的药剂、用途和方法
TW202337908A (zh) 抗b7-h7抗體或其抗原結合片段及製備方法與應用
KR20220050182A (ko) 항-cd22 항체 및 그의 용도
WO2025113639A1 (zh) 抗gdf15的抗体及其方法和用途
HK40062907A (en) Binding proteins specific for lox1 and uses thereof
HK40076989B (zh) 抗cd22抗体及其用途
HK1199409B (en) Antibodies binding to phosphorylcholine (pc) and/or pc conjugates