TW400385B - A method of assaying cholesterol in a high density lipoprotein - Google Patents

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TW400385B
TW400385B TW084103384A TW84103384A TW400385B TW 400385 B TW400385 B TW 400385B TW 084103384 A TW084103384 A TW 084103384A TW 84103384 A TW84103384 A TW 84103384A TW 400385 B TW400385 B TW 400385B
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Koichi Hino
Mitsuhiro Nakamura
Mitsuhisa Manabe
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Daiichi Pure Chemicals Co Ltd
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五、發明説明（豕） 實施例3 就含脂蛋白質之檢體31〜40號依本發明方法及以往沈 澱法定量HDL中膽固醇，比較測定值，結果如表3。 即於檢體4/i 1加含磷_酸銷0.2%,氰化鎂100bM及聚 氧乙烯-聚氣丙烯縮合物（Phuronic F-88,旭電化公司） 0.2%之試藥300wl,次加與實施例1 一樣之膽固醇測 定試藥10 0W 1。以下仿S施例1求HDL中之膽固醇濃度。 另沈澱法也仿實施例1測定。 表3 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) • I · 檢體No. 膽固醇濃度（ng/d 1) 沈澱法 本發明方法 31 46 46 32 59 57 33 52 52 34 39 39 35 31 34 36 55 54 37 40 49 38 78 77 39 42 40 40 S3 52 訂 經濟部中央橾準局貝工消费合作社印東 由表3得知，本發明方法能簡便操作，仍可得與以往 沈澱法同等測定值。 10 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4^格（210X297公嫠） 經濟部十央標準局負工消费合作杜印製 Α7 Β7 五、發明説明（1) 技術領域 本發明為有拥無霈離心分離等前處理，以簡便之操作而 高效率地定量高比重脂蛋白質中之《固醇。又可適用種 種自動分析装置，在醢床檢査上極有用。 背景技術 «固醇等脂霣乃在血淸中舆脱補基蛋白結合而形成脂 蛋白質。脂蛋白質乃依物理性狀之差異而分為乳糜脂蛋 白質（Chyloaicron),超低比重脂蛋白，低比重腊蛋白 (LDU,离比重脂蛋白（HDL)，e逭些脂蛋白質中，LDL 具有動脈硬化引起性，而HDL則有抗動脈硬化作用β 疫學上證明HD L中臛固酵值舆動腯硬化性疾病之發症 頻度呈反相蘭，目前以虛血性心疾病之預防或診斷為目 的，廣泛地測定HDL中之臛固醇β 至於HDL中之膽固酵之澍定法，已知例如經超離心分 離HDL與其他脂蛋白質後，供臛固酵澜定之方法，經霣 泳分離後，将脂質染色而澜定其發色強度之方法等。但 埴些方法均操作煩雜，不能處理多數檢體之問賵，而平 常殆無使用β 作為H D L中之臛固醇剷定方法，目前饞床檢査領域一 般廣泛採用之方法乃於檢醮加沈澱劑使HDL以外之脂蛋 白質凝集，将此離心來去除，所分離之只含H DL之上淸 中之«固酵予以測定之沈澱法。 此方法雖比超離心法及電泳法簡便，佴因加沈澱劑來 分離，故須較多檢體量，且發生分析誤差之可能性也离, 本紙張尺度適用中國國家揉準（CNS ) Α4規格（210X297公釐） (请先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) -Ι-訂 修正 補充•邮 五、發明説明（1
實施例4 就含脂蛋白質之檢體4 i〜50號依本發明方法及以往沈 澱法定悬HDL中暖固酵，比較測定值，結果如表“ 即於檢醱4wl加含磷鎢酸銷0.2%，氯化^100bM及聚 «乙嫌-十六H (Eiulgen 22Θ,花王公司）0.1%之試 藥3001/ 1，次加膽固酵g酶0.2 υ/·1,膽固醇氣化瞄0.: ΙΙ/·1·過氣化酶Θ.31Ι/·1，二磺酸丁基Ν,Ν_二甲間甲苯胺 Θ.04%» 4 按基安替比林 0.005^6 及 0.7%e_ulgen Α_6ι (花王公司）之臛固醇拥定試藥100W 1。以下仿實施例1 求HDL中之膽固酵濃度。 另沈澱法也仿實施例1測定。 表4 (請先聞讀背面之注f項再填寫本頁) 訂 經濟部中央揉率局Λ工消费合作杜印*. 檢體No. 膽固醇濃度（Bg/dl) _ -. 沈澱法 本發明方法 41 90 89 42 85 84 43 79 76 44 77 74 45 74 74 46 70 68 47 69 6S 48 62 62 49 53 59 50 49 S3 由表4得知，本發明方法能簡便操作，仍可得舆以往 沈澱法同等測定值。 -11 本紙張尺度遙用中國國家橾率（CNS ) Α4规格（210X297公釐） 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明説明（2 ) 不能將全分析程序完全自動化。 另也檢討酵素方式分別定量HDL中之膽固酵之方法， 例如己知在膽酸鹽或非離子条界面活性劑之存在下進行 酵素反應之方法（日本特两昭6 3 - 1 2 6 4 9 8號公報）„此方 法利用其反應初期之酵素反應速度與LDL濃度成比例而 其後與HDL中轚固酵瀑度成比例者，但HDL中之鼴固醇與 其他脂蛋白質中膽固酵之反應無法完全分別，所測定對 象並非LDL中轚固酵至HDL中嫌固酵成階段性，乃邊重叠 邊徐徐變化，故雞諝正確之方法》 又知将HDL以外之脂蛋白質預先凝集，僅将BDL中之轚 固醇予以酵素反應後，使酵素失活同時使凝集再溶解而 測定吸光度之方法（特開平6-242110號公報）。但此方法 須至少3次添加試藥之操作，故只適用於有限之自動分 析装置，在泛用性上有問題。又在沈澱之再溶解時用高 灌度之鹽等對分析機器之損寄及試蕖廢棄上也非滿足者。 故本發明之目的為提供無需離心等前處理，能以簡便 之操作高效率地ill定，並適用於種種自動分析装置之HDL 中β固醇之定量方法。 鑑此，本發明者們棰力研究之結果發現於檢髏添加與 HDL以外之脂蛋白質形成複合體之物質及界面活性劑後， 酵素測定膽固醇，則可高效率地定量HDL中之磨固醇，且 能適用於自動分析裝置，终於完成本發明。 發明之掲示 本發明傜一種高比重脂蛋白質中膽固醇之定量方法， 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210 X 297公釐） ^—^1- IT flm n^i nn i m· t— n· 1 1 IJAI« n^i —4 ¥ - .1 Π (諳先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 400385
修正 補充％W 8 A7 B7
五、發明説明（K 實施例5 躭含脂蛋白質之檢體41〜50號依本發明方法及以往沈 澱法定量HDL中腭固醇，比較測定值，結果如表5。 即於檢髏4«1加含磷鎢酸銷0.2%,氰化鎂100·Μ及聚 氣乙烯-壬基苯基醚（e*ulgen 913,花王公司）0.190之 試藥3 00 //丨，次加與實施例4 一樣之膽固醇測定試藥 100« 1。以下仿實施例1求HDL中之鼸固酵濃度。 另沈澱法位仿實施例1測定。 表 5 檢曄Ho. 膽固醇鸛度Us/dl) 沈澱法 本發明方法. 41 90 96 42 85 93 43 79 77 44 77 76 45 74 79 46 70 74 47 69 67 48 62 64 49 53 63 SO 49 51 經濟部中央揉準f工消费合作社印氧 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 由表5得知，本發明方法能簡便操作，仍可得舆以往 沈澱法同等測定值。 -12 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS > A4规格（2丨0X297公釐） 經濟部中夬標準局貝工消費合作杜印製 A7 B7 五、發明説明（3 ) ，聚氣乙烯-聚氣丙烯縮合物有Pluronic F88(旭電化公 司製造）等；聚氣乙烯烷基醚硫酸鹽有聚氧乙烯十二醚 硫酸筘（花王公司製造之Ε·ιι1 20C等）；烷苯磺酸鹽宜為 十二基苯裹酸納。 這些界面活性劑可用一種或併用二種以上，其使用置 並無待定，惟宜舆試料混合時之濃度為0.01〜5重貴％ ，尤其0.05〜1重量％。 在本發明先将舆HDL以外之脂蛋白質形成複合鼸之物 質及界面活性_加入檢體，此時可将疽些物質混合當作 同一試藥添加，或以分別試蕖添加β 次將如此添加與HDL以外之脂蛋白質形成後合鼸之物 霣及界面活性劑之檢饑直接測定β固酵，邸無須離心等 前處理。 至於臛固酵之測定方法，可用任何習知酵素式測定法 ，例如酵素試藥僳併用膽固醇酯酶及磨固酵氣化梅之方 法，及併用膽固醇酯酶及胺固醇脱氫_之方法等。其 中宜併用膽固醇酯及臛固醇氣化_之方法。 添加酵素試蕖後，測定一定時間的倍號量，求出拥定 對象之嫌固酵濃度，更為提高分析之正確度，在添加酵 素試藥後，比較一定二點時間之信號量（2黏法），求出 91固酪之濃度。 又在添加逭些酵素試蕖等後，最後檢出膽固醇之方法 無待定，有例如更併用過氣化酶及色原讎之吸光度分析 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS > A4規格（210X297公釐> ^^1- ^n» ^1.^1 nn n In tut m 1« n^i n n —an n^i IP—·--SJ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 400385
A7 B7 五、發明説明（I丨） 實施例6 就含脂蛋白質之檢體41〜5 0號依本發明方法及以往沈 截法定量HDL中18固酵，比較測定值，結果如表6。 即於檢體4«1加含磷箱酸銷0.2%,氯化鎂100·Μ及聚 氧乙烯-十二醚硫酸銷（eBul 20C,花王公司）0.1%之 試藥30 0wl,次加與賁施例4 一樣之膽固酵測定試藥 100«1。以下仿實施例1求HDL中之»固酵濃度。 另沈鎩法也仿實施例1測定。 表6 (請先聞讀背面之注$項再填寫本頁) 經濟部中央揉率局貝工消费合作社印装 檢體Ho. 膽固醇濃度（ng/dO 沈澱法 本發明方法 41 90 93 42 85 95 43 79 79 44 77 72 45 74 79 46 70 75 47 69 66 46 62 64 49 53 65 50 49 52 由表6得知，本發明方法能_便操作，仍可得舆以往 沈截法同等測定值。 -13 - 本紙張尺度適用中國國家揉率（CNS ) A4规格（210X297公釐） 訂 A7 B7 經濟部中央標準局貝工消費合作杜印製 五、發明説明 ( 4 ) 1 1 一 其 特 歎 為 於 含 脂 蛋白質之檢 臁中 添 加 與高 比重腊 蛋白質 1 1 I 以 外 之 脂 蛋 白 質 形成複合* 之物 質 及 界面 活性劑 後，依 1 1 酵 素 澜 定 法 m 定 臛固鱒》 請 1 先 1 實 施 本 發 明 之 最 佳形態 閲 讀 1 本 發 明 所 用 輿 HDL以外之脂蛋白質形成禊合龌之物質 背 1 I 之 只 要 為 對 HDL及HDL以外之脂 蛋白 質 之 間有 親和性 差異之 注 1 1 物 質 即 可 9 例 如 聚蕕萄糖硫 酸， 磷 m 酸， 肝素等 聚陰雄 事 項 再 1 1 子 如 鎂 離 子 * 鈣離子等二 價金 羼 離 子； 如聚乙 二醇等 填 窝 本 A 水 溶 性 离 分 子 對抗HDL以外之脂蛋白質之抗«等❶這些 頁 1 I 物 質 可 用 —* 種 或 併用二種以 上， 尤 宜 併用 聚陰離 子舆二 1 1 價 金 屬 離 子 〇 1 這 些 物 質 之 用 量並無特定 ，難 視 物 霣之 種類而 異，但 訂 只 要 造 些 物 質 與 HDL以外之脂蛋白質在制定時形成複合 钃 邸 可 » 不 拘 凝 集物形成輿 否。 例 如 併用 聚陰離 子與二 1 j 價 金 羼 離 子 時 > 混合試料時 之濃 度 宜 呈聚 陰離子 0 · 02〜2 1 1 重 m % 9 二 價 金 屬離子10〜 500bM, 尤宜用形成聚陰離子 r 1 0 . 05 1 重 量 % ，二價金羼 離子 20 〜 2 0 0道 M〇 Λ 1 本 發 明 所 用 界 面活性_宜 為對 膽 固 醇之 酵素式 澜定条 1 1 有 抑 制 效 果 9 m 不溶解脂蛋 白質 者 9 諸如 聚氧乙 烯烷基 1 I 醚 聚 氣 乙 ί烷基苯基_ 聚 氧 乙 烯-聚氣丙烯縮合 1 1 ，物 聚 氧 乙 播 丨烷基醚硫酸鹽， 院 苯 磺酸 邇等。 其中 1 1 聚 氣 乙 烯 焼 基 m 可為聚氣乙 烯十 - m (HLB 1 4 )(花 王公司 1 I 製 造 之 £ η ul ge η 2 2D等）；聚氣乙烯烷基苯基醚有聚氣乙 1 1 烯 壬 基 苯 基 m (H L Β 1 5 )(花王 -5 公司 製 造 之S· u 1 g e η 913 等） 1 1 1 1 1 1 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4规格（210X 297公釐）
實施例7 就含脂蛋白質之檢體41〜50號依本發明方法及以往沈 澱法定量HDL中膽固醇，比較測定值，結果如表7。 即於檢體4wl加含璘鎢酸納0.2%,氛化鎂100 ·Μ及聚 氣乙嫌-十一院苯横酸納（Neopelex F-65,花王公司） 0.1%之試藥300« 1,次加與實施例4 一樣之膽固醇測 定試藥100W 1。以下仿實施例1求HDL中之_固酵濃度 〇 另沈澱法也仿實施例1測定。 表7 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 檢醱Ho. 膽固醇港度（》g/dl) 沈戳法. 本發明方法 41 90 82 42 85 80 43 79 74 44 77 70 45 74 75 46 70 73 47 69 64 48 62 63 49 53 66 50 49 55 經濟部中央橾準局貝工消費合作社印裝 由表7得知，本發明方法能簡便操作，仍可得與以往 沈澱法同等測定值。 -14 - 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） 經濟部中央標準局員工消費合作社印製 A7 B7 五、發明説明（5 ) ，直接檢出輔醻及過氣化氬之方法等。 實施例 次舉實施例說明，但本發明並不限於渣些實施例。 實施例1 就含脂蛋白質之血淸檢體1〜10號依本發明方法及以 往沈澱法，定量HDL中之醺固酵，比較這些測定值，如 表1。 即於檢釀4；ul加含磷鎢酸納0.2%,氯化镁IOObM及聚 氣乙烯-聚氧丙烯缩合物（Pluronic F-68,旭東化公司） 0 . 5 %之試藥3 0 0 1 ,次加朦固酵酯_ 0 · 2 U / 1，明[固酵 氣化_〇.2ϋ/·1，遇氣化_0.3ϋ/·1， N，N -二甲間甲苯 胺 0.04%, 4-胺基安替比林 0.0 0 5 % 及 0.1% Triton X- 100之轚固醇測定試藥1〇〇#1後，测定在5 4 5 nm之吸光度 之差，以求出HDL中之臛固醇濃度。以上操作用日立7150 型自動分析装置〇 若依沈澱法潮定HDL中之膽固醇時，混合含聚葡萄糖 硫酸0.3%及氛化鎂2%之水溶液0.2*1及檢體0.2nl,而 以30()()γρβ離心10分。採集上淸5D# 1混合同上轚固醇測 定試藥3b1,保溫37 °C 10分後，在545η B測定吸光度， 求出HDL中之腾固醇驀度。 本紙伕尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（2丨0 X 297公釐） 1^1- n n^i n^l nn HI I ^1. m n^— ml n^i \J - i (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) I補充 五、發明説明（丨3) A7400385 B7 而 作 操 之 BC 簡 以 1 —1 理 處 前 等 離 分 性心 bb ttv 链 ΐΐ 可箱 用無 利， 之明 上發 業本 産依 sl_ 1 用 適 可 又 0 醇 。 固用 膽有 之極 中上 質查 白檢 蛋床 脂臨 重在 比 ， 高置 董裝 定析 地分 率動 效自 高種 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)
、tT 經濟部中央揉準局貝工消费合作社印«.-
5 1X 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） A7 B7 五、發明説明（6 ) 表1 檢醱No. 膽固酵濃度（《g/d_α ) 本發明方法 沈澱法 1 79 80 2 65 64 3 64 64 4 64 58 5 15 18 6 8 1 88 7 47 48 8 38 38 9 4 7 4 6 10 33 32 tml. —^—1— fl 1^1^1 I ml n m ^i^ifl Bl nn —mmt—·nl·— 4 - i (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 經濟部中央樣準局負工消費合作社印製 由表1得知，本發明方法雖為簡便之操作，仍能獲與 習用沈澱法同等潮定值。 資施例2
就含脂蛋白質之檢釀11〜20號依本發明方法及以往沈 澱法定量HDL中臛固醇，比較澜定值，結果如表I 即於檢龌4# 1加含磷鎢酸納0.2%,聚葡萄糖硫酸1.8 克/ JI ,氯化鎂IOObM及聚氣乙烯-聚氣丙烯缩合物（ -8 - 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X 297公釐） 經濟部中央橾準局員工消费合作社印聚 A7 B7五、發明説明（7 ) Phuronic F-68,旭霉化公司）0.2%之試藥300#1,次加 與實施例1 一樣之«固醇測定試藥100/^1。以下仿實施 例1求HDL中之》固醇蠹度。另沈澱法也仿實施例1測定。表2 檢釀No. 膽固酵濃度Ug/d_α ) 本發明方法 沈澱法 11 47 4 5 12 38 34 13 36 3 2 14 54 52 15 26 2 2 16 93 92 17 6 1 62 18 36 32 19 5 5 50 20 75 74 由表2得知，本發明方法用較少試料，能簡便操作， 仍可得舆以往沈澱法同等測定值<» 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） l^n- nn ( ml ml ^^^1 n D n m· IJI—--aJ (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)
五、發明説明（豕） 實施例3 就含脂蛋白質之檢體31〜40號依本發明方法及以往沈 澱法定量HDL中膽固醇，比較測定值，結果如表3。 即於檢體4/i 1加含磷_酸銷0.2%,氰化鎂100bM及聚 氧乙烯-聚氣丙烯縮合物（Phuronic F-88,旭電化公司） 0.2%之試藥300wl,次加與實施例1 一樣之膽固醇測 定試藥10 0W 1。以下仿S施例1求HDL中之膽固醇濃度。 另沈澱法也仿實施例1測定。 表3 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) • I · 檢體No. 膽固醇濃度（ng/d 1) 沈澱法 本發明方法 31 46 46 32 59 57 33 52 52 34 39 39 35 31 34 36 55 54 37 40 49 38 78 77 39 42 40 40 S3 52 訂 經濟部中央橾準局貝工消费合作社印東 由表3得知，本發明方法能簡便操作，仍可得與以往 沈澱法同等測定值。 10 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4^格（210X297公嫠） 修正 補充•邮 五、發明説明（1
實施例4 就含脂蛋白質之檢體4 i〜50號依本發明方法及以往沈 澱法定悬HDL中暖固酵，比較測定值，結果如表“ 即於檢醱4wl加含磷鎢酸銷0.2%，氯化^100bM及聚 «乙嫌-十六H (Eiulgen 22Θ,花王公司）0.1%之試 藥3001/ 1，次加膽固酵g酶0.2 υ/·1,膽固醇氣化瞄0.: ΙΙ/·1·過氣化酶Θ.31Ι/·1，二磺酸丁基Ν,Ν_二甲間甲苯胺 Θ.04%» 4 按基安替比林 0.005^6 及 0.7%e_ulgen Α_6ι (花王公司）之臛固醇拥定試藥100W 1。以下仿實施例1 求HDL中之膽固酵濃度。 另沈澱法也仿實施例1測定。 表4 (請先聞讀背面之注f項再填寫本頁) 訂 經濟部中央揉率局Λ工消费合作杜印*. 檢體No. 膽固醇濃度（Bg/dl) _ -. 沈澱法 本發明方法 41 90 89 42 85 84 43 79 76 44 77 74 45 74 74 46 70 68 47 69 6S 48 62 62 49 53 59 50 49 S3 由表4得知，本發明方法能簡便操作，仍可得舆以往 沈澱法同等測定值。 -11 本紙張尺度遙用中國國家橾率（CNS ) Α4规格（210X297公釐） 400385
修正 補充％W 8 A7 B7
五、發明説明（K 實施例5 躭含脂蛋白質之檢體41〜50號依本發明方法及以往沈 澱法定量HDL中腭固醇，比較測定值，結果如表5。 即於檢髏4«1加含磷鎢酸銷0.2%,氰化鎂100·Μ及聚 氣乙烯-壬基苯基醚（e*ulgen 913,花王公司）0.190之 試藥3 00 //丨，次加與實施例4 一樣之膽固醇測定試藥 100« 1。以下仿實施例1求HDL中之鼸固酵濃度。 另沈澱法位仿實施例1測定。 表 5 檢曄Ho. 膽固醇鸛度Us/dl) 沈澱法 本發明方法. 41 90 96 42 85 93 43 79 77 44 77 76 45 74 79 46 70 74 47 69 67 48 62 64 49 53 63 SO 49 51 經濟部中央揉準f工消费合作社印氧 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 由表5得知，本發明方法能簡便操作，仍可得舆以往 沈澱法同等測定值。 -12 本紙張尺度適用中國國家標準（CNS > A4规格（2丨0X297公釐） 400385
A7 B7 五、發明説明（I丨） 實施例6 就含脂蛋白質之檢體41〜5 0號依本發明方法及以往沈 截法定量HDL中18固酵，比較測定值，結果如表6。 即於檢體4«1加含磷箱酸銷0.2%,氯化鎂100·Μ及聚 氧乙烯-十二醚硫酸銷（eBul 20C,花王公司）0.1%之 試藥30 0wl,次加與賁施例4 一樣之膽固酵測定試藥 100«1。以下仿實施例1求HDL中之»固酵濃度。 另沈鎩法也仿實施例1測定。 表6 (請先聞讀背面之注$項再填寫本頁) 經濟部中央揉率局貝工消费合作社印装 檢體Ho. 膽固醇濃度（ng/dO 沈澱法 本發明方法 41 90 93 42 85 95 43 79 79 44 77 72 45 74 79 46 70 75 47 69 66 46 62 64 49 53 65 50 49 52 由表6得知，本發明方法能_便操作，仍可得舆以往 沈截法同等測定值。 -13 - 本紙張尺度適用中國國家揉率（CNS ) A4规格（210X297公釐） 訂
實施例7 就含脂蛋白質之檢體41〜50號依本發明方法及以往沈 澱法定量HDL中膽固醇，比較測定值，結果如表7。 即於檢體4wl加含璘鎢酸納0.2%,氛化鎂100 ·Μ及聚 氣乙嫌-十一院苯横酸納（Neopelex F-65,花王公司） 0.1%之試藥300« 1,次加與實施例4 一樣之膽固醇測 定試藥100W 1。以下仿實施例1求HDL中之_固酵濃度 〇 另沈澱法也仿實施例1測定。 表7 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁) 訂 檢醱Ho. 膽固醇港度（》g/dl) 沈戳法. 本發明方法 41 90 82 42 85 80 43 79 74 44 77 70 45 74 75 46 70 73 47 69 64 48 62 63 49 53 66 50 49 55 經濟部中央橾準局貝工消費合作社印裝 由表7得知，本發明方法能簡便操作，仍可得與以往 沈澱法同等測定值。 -14 - 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐） I補充 五、發明説明（丨3) A7400385 B7 而 作 操 之 BC 簡 以 1 —1 理 處 前 等 離 分 性心 bb ttv 链 ΐΐ 可箱 用無 利， 之明 上發 業本 産依 sl_ 1 用 適 可 又 0 醇 。 固用 膽有 之極 中上 質查 白檢 蛋床 脂臨 重在 比 ， 高置 董裝 定析 地分 率動 效自 高種 (請先閲讀背面之注意事項再填寫本頁)
、tT 經濟部中央揉準局貝工消费合作社印«.-
5 1X 本纸張尺度適用中國國家標準（CNS ) A4規格（210X297公釐）

Claims (1)

  1. 公告本 修正 P88 400385 ：8 )8 經濟部中央榡準局貞工消费合作社印製 六、申請專利範圍 — 第84 1033 84號「膽固醇之定量方法」專利案 (88年6月1日修正） 六、申請專利範圍： 1. 一種高比重脂蛋白質中膽固醇之定量方法，其特徴爲 於含脂蛋白質之檢體中添加與高比重脂蛋白質以外之 脂蛋白質形成複合體之物質及界面活性劑後，將該檢 體利用直接酵素測定法測定膽固醇，其中與高比重脂 蛋白質以外之脂蛋白質形成褀合髋之物質爲選自聚陰 離子，二價金屬離子，水溶性高分子化合物或對高比 重脂蛋白質以外之脂蛋白質之抗體；界面活性劑爲選 自聚氧乙烯十六醚（HLB14)，聚氧乙烯壬基苯基醚 (HLB 15)，聚氧乙烯-聚氧丙烯縮合物，聚氧乙烯烷基 醚硫酸鹽及烷苯磺酸鹽之不溶解脂蛋白質者。 2如申請專利範圔第1項之高比重脂蛋白質中膽固醇之 定量方法，其中膽固醇之測定乃倂用膽固醇酯酶及膽 固醇氧化酶來施行。 3.如申請專利範圍第1或2項之高比重脂蛋白質中膽固 醇之定量方法，其中該不溶解脂蛋白質之界面活性劑 係聚氧乙烯-聚氧丙烯縮合物。 (請先Η讀背面之注項再填 ! - I I— H— :ί«, Μ, 本紙張尺度逍用中固两家揉率（CNS ) A4规格（210X297公釐） 公告本 修正 P88 400385 ：8 )8 經濟部中央榡準局貞工消费合作社印製 六、申請專利範圍 — 第84 1033 84號「膽固醇之定量方法」專利案 (88年6月1日修正） 六、申請專利範圍： 1. 一種高比重脂蛋白質中膽固醇之定量方法，其特徴爲 於含脂蛋白質之檢體中添加與高比重脂蛋白質以外之 脂蛋白質形成複合體之物質及界面活性劑後，將該檢 體利用直接酵素測定法測定膽固醇，其中與高比重脂 蛋白質以外之脂蛋白質形成褀合髋之物質爲選自聚陰 離子，二價金屬離子，水溶性高分子化合物或對高比 重脂蛋白質以外之脂蛋白質之抗體；界面活性劑爲選 自聚氧乙烯十六醚（HLB14)，聚氧乙烯壬基苯基醚 (HLB 15)，聚氧乙烯-聚氧丙烯縮合物，聚氧乙烯烷基 醚硫酸鹽及烷苯磺酸鹽之不溶解脂蛋白質者。 2如申請專利範圔第1項之高比重脂蛋白質中膽固醇之 定量方法，其中膽固醇之測定乃倂用膽固醇酯酶及膽 固醇氧化酶來施行。 3.如申請專利範圍第1或2項之高比重脂蛋白質中膽固 醇之定量方法，其中該不溶解脂蛋白質之界面活性劑 係聚氧乙烯-聚氧丙烯縮合物。 (請先Η讀背面之注項再填 ! - I I— H— :ί«, Μ, 本紙張尺度逍用中固两家揉率（CNS ) A4规格（210X297公釐）
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