TW577897B - Conjugates useful in the treatment of prostate cancer - Google Patents

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Description

577897 五、發明說明（1) 1 9 9 β年預測於美國診斷患有前列腺癌之男性為3 1 7，〇⑽ 人而42,000名美國男性因此病致命（(^1*11丨〇{^，18· (1 9 94 )。前列腺癌之兩難。科學美國，4月：72 —81)。如 此’岫列腺癌乃美國男性最常被診斷的惡性病（皮膚除 外），且為惡性病中因癌症致死的第二大原因（排名於肺癌 之後）。 W列腺特異性抗原（psa)是一種單鏈33 kDa糖蛋白，其 表乎絕對由人類前列腺上皮產生，於人類精液含量為〇 . 5
至 2.0 毫克 / 毫升（Nadji，M·，Taber，S.Z·，Castro, A·， et al· (1981)癌症48 · 1229 ; Papsidero， L.，
Kuriyama, M., Wang, M., et al., (1981). JNCI 66 ： 37； Qui, S.D., Young, C.Y.F., Bihartz, D.L., et al. (1990), J. Urol. 144 ：1550 ； Wang, M. C., Valenzuela, L. A. , Murphy, G. P. , etal. ( 1 9 7 9 ). I n v e s t · U r o 1 · 1 7 : 1 5 9 )。單一碳水化合物單位附接於天
冬胺殘基編號4 5且占總分子量之2至3 k D a。P S A為具有 仿胰凝乳蛋白酶特異性之蛋白酶（Ch r i stensson, A ., Laurell, C.B., Lilja, H. (1990). Eur. J. Biochem. 1 9 4 : 7 5 5 - 7 6 3 )。顯示PS A主要負責溶解於射精時形成的凝 膠結構，該結構係由精子捕集凝膠之主要蛋白質，精液膠 I及精液膠I I及纖維蛋白膠之蛋白質分解作用達成（L i 1 j a， Η. ( 1 9 8 5 ). J. Clin. Invest. 7 6 ： 1 8 9 9 ； L ι 1 j a, H., Oldbring， J·， Rannevik， G.， et al. ， （1987). J.
第5頁 577897 五、發明說明（2)
Clin· InVeSt* 8〇 *-281 ；McGee, R.S., Herr, J.C. (1988)所 hoi· Repr〇d· 3 9 : 4 9 9 )。pSA 媒介成膠蛋白質 之蛋白貝刀解作用產生若干可溶性精液膠I及精液膠I I片 段及可溶性纖維蛋白膠片段，伴隨射精液化及釋放出*具有 激烈活動力的精蟲（Li 1 ja， H.， Laurel 1，C. Β· ( 1 984 )·
Scand. J· Clln· Lab. invest. 44 :447 ;McGee， R.S·， Herr， J.C· (1987). Bi〇i· Repr〇d· 37 :432)。此外pSA 可以蛋白貝分解方式分解I GFBP- 3 (仿胰島素生長因子結合 蛋白負3)可使igf特異性刺激PSA分泌細胞生長（Cohen et al·，（ 1 9 9 2 ) J· Πιη· End〇.& Meta· 75 : 1046-1053) 〇 PSA複合至α 1 -抗胰凝乳蛋白酶乃血清PSa之主要分子形 式且占檢測得之血清PSA高達95% (Christensson，A.，
Bjork, T., Nilsson, 0., et al. (1993). J. Urol. 150 · 100-105 ；Lilja, H., Christensson, A., Dahlen, U. (1991). Clin. Chem. 37 * 1618-1625 ； Stenman,
U.H., Leinoven, J., Alfthan, H. , et al. (1991). Cancer Res· 5 1 : 2 2 2 - 2 2 6 )。前列腺組織（正常，良性增殖 或惡性組織）主要釋放成熟具有酶分解活性形式之P S A，厚 因為此種形式乃與α 1 -抗胰凝乳蛋白酶之複合物形式所需 (Mast, A.E., Enghild, J.J., Pizzo, S.V., et al. (1991).生物化學30 :1723-1730 ;Perlmutter， D.H., Glover，G.I·，Rivetna, M·，et al· (1990). Proc. Natl. Acad· Sci. USA 87:37 53-3757)。因此於前列腺
第6頁
577897 五、發明說明（3) PS A分泌細胞之顯微環境中，相信ps a係被處理及以成熟解 酉母活性形式分泌而未複合至任何抑制分子。也可與α 2 -巨球蛋白形成複合體，但導致PSA包囊且完全喪失pSA抗 原決定部位，此種複合體形成的活體内意義未明。游離且 未複合形式之PSA占血清PSA之小部分（christensson， A.， Bjork, T., Nilsson, 〇., et al. (1993). J. Urol. 150 · 100-105 ’ Lilja， H·， Christensson, A·，
Dahlfen， U· (1991). Clin· Chem. 37 :1618-1625)。此 種形式血清PSA之大小類似精液中之pSA大小（Li 1 ja，Η.， Christensson, A., Dahlen, U. (1991). Clin. Chem. 3 7 · 1 6 1 8 1 6 2 5 )但仍未知游離形式之血清p g a是否可作為酶 原；内部分割惰性形式之成熟PSA ;或具有酶活性之psa。 但游離形式血清PSA似乎不可能發揮酶活性，原因為血清 所含未反應α 1 -抗胰凝乳蛋白酶及α 2 -巨球蛋白濃度比較 游離形式33 kDa形式PSA檢測得之血清濃度顯著莫耳過量 (100 至 1000 倍）（Christensson, A·， Bjdrk， 丁.，
Nilsson, 0., et al. (1993). J. Urol. 150 ： 100-105 ；Lilja, H., Christensson, A., Dahlen, U. (1991)· Clin, Chem. 37 : 1618-1625)。 PSA之血清測量值可用於監視前列腺癌之治療（Duffy， M.S. (1989). Ann. Clin. Biochem. 26 ： 379-387 ； Brawer, M.K. and Lange, P.H. (1989). Urol. Suppl. 5 : 11-16 ;Hara， M· and Kimura， H· (1989). J· Lab· Clin. Med. 1 1 3 : 5 4 1 - 5 4 8 )，但前述正常PSA血清濃度也
i ”7897 五、發明說明（4) 報告出現於良性如列腺肥大以及前列腺手術創傷後 (Lilja, H., Christensson, A., Dahlen, U. (1991) C1 ln· Chem· 37 : 1618-162 5)。前列腺癌轉移也已知可分 泌免疫反應性PSA，原因為擴散轉移前列腺癌病人 腺切除手術後測得高濃度血清PSA (F〇rd，了 F '
Butcher, D. N. , Masters, R. W. , et al. ( 1 98 5 )- BrU> .Urology 57 : 5 0-55)。因此可被PSA之蛋白 ，化的細胞毒性化合物必然具有前列腺細胞特里：：對’ PSA分泌性前列腺癌移轉具有|特異性。 /、且對 本發明之目的係提供一種新穎抗癌組合 W列腺癌’包含寡肽，•可選擇性藉 列=二療 ，共輟接合長春花生物驗細胞 質分解切割。 k擇性蛋白 =發明之另-目的係提供—種前列 包含投予該新穎抗癌組合物。 心〜療方法，其 發明概述 揭示化學共軛物其包含寡肽，苴呈 列..腺特異性抗原（PSA)作選擇性蛋、白^八^基酸序列可由前 花生物驗細胞毒劑。太於明之 貝刀解切釗’及長春 月太附接於已經被脫乙醯化之長表4 4 、攻為可切割之寡 種共軛物可用於治療前列腺癌及;匕：f4:置氧原子。此 發明之詳細說明 义丨生則列腺肥大（BPH)。 本發明係關於新穎抗癌組合物可 種組合物包含寡肽以共耗鍵結擇列腺癌。此 悻性处過化學鍵聯基鍵結 577897 五、發明說明（5) 至長春花生物驗細胞毒劑。寡肽附接於長春花生物驗細胞 毒劑位於長春花生物鹼細胞毒劑之4位置的氧原子。須瞭 解4位置氧原子具有乙酿基部分之長春花生物驗細胞毒劑 於形成共軛物之前首先須脫乙醯化。寡肽係選自可由游離 如列腺抗原（P S A )遙擇性辨識的养聚物’且可由游離如歹U 腺特異性抗原之酶活性作蛋白質分解切割。此種寡肽與細 胞毒劑之組合稱作共軛物。 理想上長春花藥物之細胞毒性於含PSA蛋白質分解切割 位置的寡肽直接或透過化學鍵聯基附接至長春花藥物且保 持完整時可大減或不存在。又理想上，長春花藥物之細胞 毒性於寡肽藉游離PSA切割且隨後藉内生性胺基肽解酶水 解時，附接於肽鍵結之寡肽藉蛋白質分解切割而使長春花 藥物顯著或返回未經改質之長春花藥物之活性。
V 此外，較佳寡肽係選自不會被切割或於非PSA蛋白質解 酶存在下例如人類血清内生性酶存在下，於藉游離PSA切 割前，比較於游離酶活性P S A存在下切割寡肽，可能不被 切割或以遠更緩慢的速率被切割。發現較佳於寡肽附接於 長春花藥物或選擇性鍵聯基該點之胺基酸為第二胺基酸選 自包括脯胺酸，3 -羥脯胺酸，3 -氟脯胺酸，吼啶曱酸，3 -羥吡啶曱酸，2 -吖丁啶，3 -羥-2 -吖丁啶，肌胺酸等。更 佳寡肽卩士接於長春花藥物或選擇性鍵聯基該點之胺基酸為 環形胺基酸選自包括脯胺酸，3 -羥脯胺酸，3 -氟脯胺酸， u比啶曱酸，3 -羥吡啶曱酸，2 -吖丁啶，3 -羥-2 -吖丁啶 等。
第9頁 577897 五、發明說明（6) 由於前述原因，故希望寡肽包含短肽序列，較佳少於1 0 個胺基酸。最佳肽包含7或6個胺基酸。因共軛物較佳包含 短胺基酸序列，故共輛物之溶解度大為受細胞毒劑成分之 通常疏水特性影響。因此具有親水取代基之胺基酸可合併 入寡肽序列，或可選用N端封阻基來補償或消除細胞毒劑 的疏水性質。 雖然無須實施本發明之此方面，但本發明之較佳具體例 為一種共軛物其中寡肽及選擇性化學鍵聯基（若存在時）係 藉游離PSA及任何其它存在於組織附近天然蛋白質解酶之 蛋白質分解活性而由細胞毒劑脫離，如此呈現出細胞毒 劑，或細胞毒劑保持為寡肽/鍵聯基單位之一部分但仍具 有細胞毒性，呈現於蛋白質分解切割位置之生理環境。本 發明也包括共I厄物之醫藥可接受性鹽。 須瞭解寡肽共概接合至細胞毒劑，無論透過直接共價鍵 或透過化學鍵聯基接合，寡肽皆無須具有被游離PS A最大 辨識且最易藉游離PSA作蛋白分解切割。如此選擇合併於 此種抗癌組合物之寡肽可選用可由游離PSA進行選擇性蛋 白分解切割及選擇由此種切割獲得的細胞毒劑-蛋白分解 殘基共概物之細胞毒性（或視為理想情況之未改質細胞毒 劑）。此處藉蛋白分解PS A切割使用的「選擇性」一詞表示 相對於包含無規序列胺基酸之寡肽之切割，本發明之寡肽 成分藉游離P S A之切割速率較高。因此本發明之寡肽成分 為游離PSA之較佳酶基質。「選擇性」一詞也指示寡肽藉 游離PS A介於寡肽之兩個特定胺基酸間作蛋白分解切割。
11 第10頁 I» 577897 五、發明說明（Ό 本發明之募肽成分可由游離前列腺特異性抗原（p s A)選 擇性辨識，且可由游離前列腺特異性抗原之酶活性作蛋白 分解切割。此等寡肽包含選自下列之寡聚物： a) AsnLysI 1 eSerTyrGln | Ser (序歹識另J 編號：1)， b) LysIleSerTyrGln | Ser (序列識別編號：2)， c ) AsnLys I 1 eSerTyrTyr | Ser (序歹，J 識另》J 、編號：3)， d) AsnLysAl aSerTyrGln | Ser (序列識別編號：4) ’ e) SerTyrGln | SerSer (序列識別編號：5); f ) LysTyrGl n | SerSer (序.列識別編號：6 ); g) hAr gTyrG In | SerSer (序列識別編號：7); i) TyrGln SerSer (序列識別編號 9)； j) TyrG1n | SerLeu (序列識別編號 10); k) TyrGln Ser N1e (序列識別編號 11) ^ 1) ChgGln | SerLeu (序列識別編號 12)； m ) ChgG 1 n Ser N 1 e (序列識別編號 13)； n ) SerTyrGln | Ser (#歹ij ^另J矣島号虎 14)； 〇) SerChgG1n | Ser (序列識別編號 15)； p) SerTyrGln | SerVal (序列識別編 號：16) Q) Ser ChgG1n | SerVal (序列識別編 號·· 17) r ) SerTyrGln Se rLeu (序列識別編號· 1 8 ) s ) Ser ChgG1n S e r L e u (序列識別編 號·· 19) t) HaaXaaSerTy rG In | Ser (序列識別編號：20 )， u) HaaXaaLysTyrG 1 n | Ser (序列識別編號·21) ’ h) hArgChaGln | SerSer (序列識別編號：8);
577897 五、發明說明（8) v) Haa Xaah A r gT y r G 1 n | Ser (序列識別編號：22); w) HaaXaahArgChaG 1 n | Ser (序列識別編號：23); x) HaaTyrG In | Ser (序列識別編號：24); y) HaaXaaSerChgG 1 n | Ser (序列識別編號：25); z) HaaChgG In | Ser (序列識別編號：26 ); 其中Haa為以親水部分取代之環狀胺基酸，hArg為同精胺 酸，Xaa為任一種胺基酸，Cha為環己基丙胺酸及Chg為環 己基甘胺酸。 本發明之具體例中，募肽包含選自下列之任一種寡聚 物： a) SerSerTyrGln | SerAla (序列識別編號·27)， b) SerSerChgGln | SerSer (序列識別編號·28)， c) SerSerTyrGln | SerAla (序列識別編號·29)， d) SerSerChgGln | SerSer (序列識別編號·30) ’ e) 4-HypSerSerTyrGln I Ser (序列識別編號：31 ); f) 4-HypSerSerChgGln | Ser (序列識別編號：32); h) AlaSerTyrGln | SerSer (序列識別編號·33) ’ i) AlaSerChgGln | SerSer (序列識別編號·34) ’ j) AlaSerTyrGln | SerAla (序列識別編號：35); k) AlaSerChgGln | SerAla (序列識別編號·36) ’ 1 ) 4-HypAlaSerTyrGln | Ser (序列識別編號：37); m) 4-HypAlaSerChgGln | Ser (序列識別編號：38); 其中4-Hyp為4 -羥脯胺酸，Xaa為任一種胺基酸’hArS為同 精胺酸，Cha為環己基丙胺酸及Chg為環己基甘胺酸。
第12頁 577897 五、發明說明（9) 本發明之更佳具體例中，寡肽包含選自下列之任一種寡 聚物：
SerSerChgGln | SerAlaPro (序列識別編號·39)， SerSerChgGln | SerSerPro (序列識別編號·4〇)， SerSerChgGln |SerAla4-Hyp (序列識別編號·41) ’ SerSerChgGln | SerSer4-Hyp (序列識別編號· 42) ’ AbuSer SerChgG 1 n | SerPro (序列識別編號·43) ’ AbuSerSerChgGln |Ser4-Hyp (序列識別編號·44) ’ SerSerSerChgG 1 η | SerLeuPro (序列識別編號·45) ’ SerSerSerChgG 1 n | SerValPro (序列識別編號·46) ’ SerAlaSerChgGln I SerLeu4-Hyp (序列識別編號：47 ); SerA 1 aSerChgG 1 n | SerValPro (序列識別編號·48) ’ (N-甲基-Ser )SerSerChgGln I SerLeuPip (序列識別編 號：4 9 ); (N-甲基-Ser )SerSerChgGln I SerValPip (序列識別編 號：5 0 ); 4-HypSerSerTyrGln | SerSerPro (序列識別編號：51 ): 4-HypSerSer Tyr G 1 n | SerSer4-Hyp (序列識別編號· 52)； 4-HypSerSerTyrG1 η | SerSerPro (序列識別編號·53)， 4-HypSerSerTyrGln I SerSerSer (序列識別編號：54 ); 4-HypSerSer Tyr G 1 n | Ser4-Hyp (序列識別編號·55) ’ 4-HypSerSerChgG1n | SerPro (序列識別編號· 56) ’ 4-HypSerSerChgG1n | SerSerPro (序列識別編號·57) ’
第13頁 577897 五、發明說明（ίο) 4-HypSerSerChgGln 4-HypSerSerChgGln 4-HypAlaSerChgGl η 4-HypAlaSerChgGln 4-HypSerSerChgGln 4-HypSerSerChgGln
SerLeu (序列識別編號：58 ); SerVa 1 (序列識別編號：59 );
SerValPro (序列識別編號：60); SerSerPip (序列識別編號：61 ); S θ r (序列識別編5虎· 6 2 )， S e r G 1 y (序列識別編號·· 6 3 ); SerSerChgGln | SerGly (序列識別編號：64); 3-PalSerSerTyrGln |Ser4-Hyp (序列識別編號：65); 3-PalSerSerChgGln |SerPro·(序列識別編號：66); (3,4-DiHyp)SerSerTyrGln |SerSerPro (序列識別編號： 67);及 (3,4-DiHyp)SerSerTyrGln |SerSer4-Hyp (序列識別編 號：6 8 ); 其中Abu為胺基丁酸，4-Hyp為4-羥脯胺酸，Pip為吡啶曱 酸，3, 4-DiHyp為3, 4 -二羥脯胺酸，3-Pal為3 -吡啶基丙胺 酸，Sar為精胺酸及Chg為環己基甘胺酸。 前文及發明之詳細說明使用「包含胺基酸序列之寡聚 物」一詞敘述含約3至約1 0 0胺基酸殘基之寡聚物其於胺基 酸序列包括所述特定胺基酸序列，因此可於所述胺基酸序 列藉游離PSA作蛋白分解切割。較佳寡聚物含5呈1 0個胺基 酸殘基。如此例如下述寡聚物： hArgSerAlaChgG In | SerLeu (序列識別編號：69); 包含胺基酸序列：
ChgGln | SerLeu (序列識別編號：1 2);因此屬於本發明
苐14頁 577897 五、發明說明（11) 之範圍。及寡聚物： hArgSer4-HypChgG In | SerLeu (序列識別編號：70); 包含胺基酸序列： 4-HypChgGln | SerLeu (序列識別編號：71);因此屬於 本發明之範圍。須瞭解此等寡聚物不包括精液膠I及精液 膠I I。 肽化學業界人士容易瞭解生物活性募肽中之某些胺基酸 可以其它同源、立體異構及/或等電胺基酸替代，其中原 始寡肽之生物活性於改質募肽中保留。某些非天然及改質 天然胺基酸也可用於替代本發明之寡肽之對應天然胺基 酸。如此例如酪胺酸可由3 -碘酪胺酸，2—甲基酪胺酸，3_ 氟酪胺酸，3〜曱基酪胺酸等替代。又例如離胺酸可以 Ν’ -(2_咪唑基）離胺酸等替代。以下胺基酸之替代表僅供 舉例說明而非限制性：
第15頁 577897 五、發明說明（12) 原先胺基酸 替代胺基酸 Ala Gly，Abu Arg Lys，烏胺酸 Asn Gin Asp Glu Glu Asp Gin Asn Gly Ala lie Val? Leu, Met, Nle, Nva Leu lie, Val，Met, Nle，Nva Lys Arg，鳥胺酸 Met Leu，lie，Nle，Val 鳥胺酸 Lys, Arg Phe Tyr, Trp Ser Thr, Abu, Hyp, Ala 丁 hr Ser, Abu, Hyp Tip Phe, Tyr Tyr Phe, Trp Val Leu, lie, Met, Nle, Nva 如此例如下列寡肽可藉業界人士眾所周知之技術合成且 預期可以藉游離PSA作蛋白分解切割： AsnArglleSerTyrGln |Ser (序列識別編號：72); AsnLysValSerTyrGln |Ser (序列識別編號：73);
第16頁 577897 五、發明說明（13)
AsnLysMetSerTyrGln | SerSer (序列識別編號·？4) ’ AsnLy sLeuSerTy rG In | SerSer (序列識別編號·75) ’ AsnLys I leSerTyrG In | Ser (序列識別編號：76); G 1 nLy s I 1 eSe r Ty r G 1 n | SerSer (序列識別編號·？？）’ Asn4-Hypl leSerTyrGln | Ser (序列識別編號：78 ); A sn4-H y p Va 1 Ser Ty r G 1 n | Ser (序列識別編號：79)， 4-HypA 1 aSerTyrG 1 n | SerSer (序列識別編號：80)， (3,4-二經脯胺酸）人18861^7『0111|86『861"(序列識別編 號·· 8 1 ); . 3 -羥脯胺酸SerChgG In I Ser (序列識別編號：82); 4-HypAlaSerChgGln | SerSer (序列識別編號：83); 胺基酸序列中含括符號” I ”指示該序列中寡肽由游離 PSA作蛋白分解切割點。 本發明化合物具有非對稱切割中心可呈外消旋物，外 旋混合物及個別非對映立體異構物存在，而全部显 構物包括光學異構物皆屬於本發明之範圍内了除匕的^ 定，否則所述胺基酸皆具有天然” L”立體組態。’、 仃、 本發明中揭示之胺基酸係以習知3字母及單 標示，指示如下： 甘細寫法
577897 五、發明說明（14)
丙胺酸 Ala A 精胺酸 Arg R 天冬醯胺 Am N 天冬酸 Asp D 天冬醯胺或天冬酸 Asx B 半胱胺酸 Cys C 麩胺 • Gln Q 麩胺酸 Glu E 麩胺或麵胺酸 Glx Z 甘胺酸 Gly G 組胺酸 His H 異白胺酸 lie I 白胺酸 Leu L 離胺酸 Lys K 蛋胺酸 Met M 苯基丙胺酸 Plie F 脯胺酸 Pro P 絲胺酸 Ser S 蘇胺酸 Thr T 色胺酸 Tip W 酪胺酸 Tyr Y 纈胺酸 Val V
1I1II1I 第18頁 577897 五、發明說明（15) 下列縮寫用於說明書及附圖代表所指胺基酸及部分： hR 或 hArg : 同精胺酸 hY 或 hTyr ·· 同酪胺酸 Cha : 環己基丙胺酸 Amf : 4-胺基甲基苯基丙胺酸 DAP ： 1，3-二胺基丙基 DPL ： 2-(4,6-二甲基嘧啶基)離胺酸 (咪唑基)K : N’-(2-咪唑基)離胺酸 Me2P〇3-Υ : 〇-二甲基磷醯酪胺酸 O-Me-Y ： 〇-曱基酪胺酸 TIC ： 1，2,3,4_四氫-3-異喹啉叛酸 DAP ： 1，3-二胺基丙烧 TFA ： 三氟乙酸 AA ： 乙酸 3PAL ： 3-¾°定基丙胺酸 4-Hyp ： 4-羥丙胺酸 dAc-Vin ： 4-脫乙酸基長春驗(vinblastine) Pip ： 吡啶甲酸 Abu : 2-胺基丁酸 Nva : 新纈胺酸
苐19頁 五、發明說明（16) 業界眾所周知且本發明 劑共輛物較佳具有任何寡 保護基保護，如乙醯基， 末胺基之保護可藉由存在 解酶作用而減少或去除肽 括親水封阻基，其係基於 基可提高共軛物之親水性 度，包括但非限於水解院 醇，糖基化物，糖類及冠 可改善此種被外生性胺基 較佳N端保護基係選自 a) 乙酿基； b) ::肽基治療劑如寡肽-細胞毒 ^取代*之#末胺基部分以適當 本甲醯基’特戊醯基等。此種端 於溫血動物血漿的外生性胺基肽 基治療劑被酶分解。保護基也包 親水g此基的存在而選用。封阻 ’因此可提高共輛物之水中溶解 醯基，多羥化烷醯基，聚乙二 醚類’。N端非天然胺基酸部分也 肽解酶之酶分解作用。
c) h3c /〇
d)
HO
第20頁 577897 五、發明說明（17) 其中： R1及R2分別選自： a) 氫， b) 無取代或取代芳基，無取代或取代雜環基，C3-C1Q環 烷基，C2-C6烯基，c2-c6快基，鹵原子，C「c6全氟烷基， R3〇-，R3C(0)NR3-，（R3)2NC(〇)-，R32N-C(NR3)~， R4S(0)2NH，CN，N02，R3C(〇)—，N3, —N(R3)2，或 R40C(0)NR3-， c) 無取代C6院基’ d) 取代C6烷基其中取代Ci—G烧基之取代基係選自無 取代或取代芳基，無取代或取代雜環基’ C:3 — ClG環烧基’ C2-C6 稀基，C2-C6 炔基，㈣—，R4S(〇)2NH ，R3C(0)NR3-，、 (R3)9NC(0)-，R32N-C(NR3)_，CN，R3C(〇)_，N3，_N(R3)2，或 R40C(0)-NR3-;或 R1及R2合併形成-(C H2) s - ’其中一個碳原子選擇性由選 自：〇，S(0)m，-NC(0)-，關及―N(C〇R4) -之一部分替代； R3係選自··氫，芳基，取代芳基，雜環基，取代雜環 基/ (：厂(：6烷基及C3-C1G環烷基； R4係選自：芳基，取代芳基’雜環基，取代雜環基’ C} - C 6烧基及C 3 - C1。環烧基， m為0 ，1或2 ; η 為 1 ，2，3 或 4 ; ρ為0或1至100之整數；及 q為0或1，但若ρ為0，則Q為1 ，及
第21頁 577897
第22頁
577897 五、發明說明（19) 非限於下列特定結構式：
本發明之共軛物具有非對稱中心且呈外消旋物，外消旋 混合物及個別非對映異構物存在，而全部可能的異構物包 括光學異構物皆含括於本發明之範圍。當任何變數（例如 芳基，雜環基，R3等）於任何成分中出現多於一次時，其 於各次出現之定義彼此無關。例如Η 0 ( C R1 R2) 2 -表示 HOCH2CH2-，HOCH2CH(OH)-，hoch(ch3)ch(oh)-等。又，唯 有於取代基及/或變數之組合可獲得穩定化合物時才容許 取代基及/或變數的組合。 如此處使用「烷基」及芳烷基及類似術語之烷基部分預 期含括具有特定數目碳原子之分支及直鏈飽和脂族烴基； 「烷氧基」表示具有指定碳原子數之烷基透過一個氧橋附 接。 如此處使用「環烷基」意圖含括具有特定碳原子數之非 芳族環狀烴基。環烷基之例包括環丙基，環丁基，環戊 基，環己基等。 「烯基」包括具有特定數目之碳原子且含一或多個雙鍵 之基。烯基之例包括乙烯基，烯丙基，異丙烯基，戊烯 基，己稀基，庚稀基，環丙稀基，環丁稀基，環戊稀基，
苐23頁 577897 五、發明說明（20) 環己烯基，1-丙烯基，2 - 丁烯基，2 -曱基-2 - 丁烯基，異 戊間二稀基，法尼基，天竺葵基，天竺蔡基天竺葵基等。 「炔基」包括具指定數目之碳原子且含一個參鍵之基。 快基之例包括乙快基，2 - 丁快基，2 -戊決基，3 -戊快基 等。 「鹵素」或「鹵原子」如此處使用表示氟，氯，溴及 碳。
如此處使用「芳基」及芳烷基及芳醯基之芳基部分意圖 表示任何環中含至多7員之穩定單環或雙環碳環，其中至 少一環為芳族。此種芳基元體之例包括苯基，萘基，四氫 萘基，四氫茚基，聯苯基，菲基，蒽基或苊基。
此處使用雜環基或雜環族一詞表示穩定5至7員單環或穩 定8至1 1員雙環雜環族環其可飽和或未飽和及其係由碳原 子及1至4個選自包含N，0及S之雜原子組成，且包括其中 前文定義之雜環族環稠合至苯環之任何雙環基。雜環族環 可附接於任何雜原子或碳原子結果導致形成穩定結構。雜 環族元體之例包括但非限於氮雜罩基，苯并咪唑基，苯并 異[嘿唑基，苯并呋贊基，笨并哌喃基，苯并硫哌喃基，笨 并呋喃基，苯并噻唾基，笨并噻吩基，苯并噚唾基，苯并 二氫哌喃基，噌啉基，二氫苯并呋喃基，二氫苯并噻吩 基，二氫笨并硫哌喃基，二氫苯并硫哌喃基瓶，味喃基， 咪唑啶基，咪唑啉基，咪唑基，吲哚啉基，吲哚基，異笨 并二氫哌喃基，異吲哚啉基，異喹啉基，異噻唑啶基，異 噻唑基，異噻唑啶基，嗎啉基，萘啶基，鸣二唑基，2 -氧
第24頁 577897 五、發明說明（21) 基氮雜ϋ坐基，曙σ坐基，2 -氧基六氫哦哄基，2 -氧基六氫D比 咬基，2 -氧基哦ϋ各咬基，六氫吼咬基，六氫π比哄基，π比咬 基，吡畊基，吡唑啶基，吡唑基，嗒畊基，嘧啶基，吡咯 啶基，吡咯基，喹唑啉基，喹啉基，喹噚啉基，四氫呋喃 基，四氫異喹啉基，四氫喹啉基，噻嗎啉基，噻嗎啉基亞 楓，噻唑基，噻唑啉基，噻吩并呋喃基，噻吩并噻吩基及 噻吩基。
如此處使用「取代烷基」，「取代芳基」及「取代 雜環基」包括除附接至其餘化‘合物之附接點外含有1至3個 取代基部分。此種額外取代基係選自F，C 1，Br，CF3， NH2，N(Cr C6 烷基）2，N02，CN，（CrQ 烷基）0-，-OH， (CrQ 烷基）S(0)m-，（C「C6 烷基）C(0)NH-，H2N-C(NH)-， ((：厂（：6 烷基）C (0)-，（(：丨-(：6 烷基）0C (0)-，N3，（CrQ 烷 基）0C(0)NH-及匕-匕。烷基。 當R1及R2組合形成-（CH2)S-時，如此定義之環狀部分及含 雜原子之環狀部分包括但非限於：
第25頁
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第26頁 577897
第27頁
577897 五、發明說明（24)
H0 如此處使用π 4 -乙氧方醒基（s q u a r a ΐ e ) π表示如下結構 式：
Et〇、
X 0^0 劑可選自長春花生物驗細 包括例如長春花生物驗選 tine)，白諾西丁 i n e )，文諾賓 i n e )，白諾辛 3須瞭解本發明之共軛物 花生物鹼之C-4。因此某 花生物鹼於偶合至寡肽 脫乙遜化。此外，業界人 質俾使化合物反應更方便 用於本發明之共輛物之細胞毒 胞毒劑。此類中特別有用之成員 自長春驗，文克里斯汀（vincris (leurosidine)，文得欣（vindes (vinorelbine)，那維賓（naveib (ieurosine)等或其光學異構物 含有寡肽透過氧原子附接至長春 些於該氧含有乙醯基部分之長春 (或選擇性鍵聯基單位）前必須先 士可對所需細胞毒劑進行化學改 製備本發明之共耗物。 本發明之4 -脫乙酸基長春花生物驗細胞毒性之較佳組別 包括下式藥物：
第28頁 577897 五、發明說明（25)
式I長春花生物驗藥物組另丨J R8 R1 n/y^co2ch3 Η ' CH30
，：,,/CH2CH3 OR11 ⑴ 其中 R7 為Η ，CH3 或(：11〇； 當R9及R1{]單獨時，R1G為Η，及R8及R9中之一者為乙基及另 一者為Η或0H ; 當R9及RiG共同形成雙鍵時，R8為乙基； R11為氫； R12 為 OH，O-arC:;烷基），或 NH2。 本發明之寡肽-細胞毒劑共輛物其中細胞毒劑為較佳細 胞毒齊]4 - 0 _脫乙醒基長春驗月以如下通式I a說明·
第29頁 577897 五、發明說明（27) d)
e)
〇 〇 及 f ) 乙氧方酿基 g ) 可鐵寧基； R1及R2分別選自：氫，0H，（：厂C6烧基，（:厂心烷氧基， q-Ce芳烷基及芳基； 多經化C3-C8 -環烧
Rla為q _ C6 -烧基，經化C3 -C8-環烧基 基，羥化芳基，多羥化芳基或芳基， R9為氫，（(：广(：3烷基）-C0或氯取代（Cj 環己基，環庚 W係選自分支或直鍵C i - C 6 -烧基，環戊基 基或雙環[2 · 2 · 2 ]辛烷基； η 為 1 ，2，3 或4 ; ρ為0或1至1 0 0之整數； q為0或1 ，但若ρ為0，則q為1 ; r為1 ，2或3 ; t為3或4 ; u 為 0 ，1 ，2 或 3， 或其醫藥可接受性鹽或光學異構物。
第31頁 577897 五、發明說明（28) 較佳X L為一鍵結。 本案具體例中寡肽R部分係選自：
Ac〜4 -反-L-HypSerSerChgGlnSerSerPr〇；（序列識別編 號：8 4 )
Ac-4-反-L-HypSerSerChgGlnSerGly ;(序列識別編號： 85)
Ac-4 - ^-L-HypSerSerChgGl nSer SerSar ;(序歹J 識另U 編 號：8 6 )
Ac — 4 -反-L-Hyp-Ser-Ser—Chg^Gln — Ser-Ser-Pro ;(序列識 別編號：8 7 )
Ac-4-反-L-Hyp - Ser-Ser-Chg-Gln-SerVal ;(序列識別編 號：8 8 )
Ac~4-反-L-Hyp-Ser-Ser-Chg-Gln-Ser-Ser-4-反-L-Hyp ; (序列識別編號：8 9 )
Ac-Abu-Ser-Ser-Chg-Gin-Ser-Pro ;(序列識別編號·· 90) 沒乙 Si基Abu-Ser-Ser-Chg-Gln-Ser-Pro ;(序列識別編 號：9 1 ) 乙醯基3-PALSer-Ser-Chg-Gln-Ser-Ser-Pro :(序列識別 編號：92)
Ac--4 -反-L-Hyp-Ser-Ser-Chg-Gln-Ser-Val ;(序列識別 蝙號：9 3 )
Ac — 4 -反-L-Hyp-Ser-Ser-Chg-Gin-Ser-Leu ·，（序列識別 編號：9 4 ) .
Ac-4 -反-L-HypSerSerChgGlnSerSer4-反-L-Hyp ;(序歹丨J 識
第32頁 577897 五、發明說明（29) 別編號：9 5 )
Ac-4 -反-L-HypSerSerChgGlnSerPro ;(序列識別編號： 96)
Ac-SerSerChgGlnSerGly ;(序列識別編號：98)
Ac-SerSerChgGlnSerSer-4-反 -L-Hyp ;(序列識別編號： 99)
Ac-SerSerChgGlnSerSerPro ;(序列識別編號：1〇〇)
Ac-4 -反-L- HypSerSerChgGlnSerAla ;(序列識別編號· 103) *
Ac-4 -反- L- HypSerSerChgGlnSerChg ;(序列識別編號· 104)
Ac-4 -反-L- HypSerSerChgGlnSerSerSar ;(序列識別編 號：1 〇 5 )
Ac-SerSerChgGlnSerSerHyp ;(序列識別編號：106)
Ac-4 -反HypSerSerChgGlnSerSerPro ;(序列識別編 號：1 07)
Ac-AbuSerSerChgGlnSer(dSer)Pro ;(序列識別編號·
108) A c - A b u S e r S e r C h g G 1 n S e r S e r P r 〇 ;(序列識別編號：1 〇 9 )
Ac-SerSerChgGlnSerSerPro ;(序列識別編號：111)
Ac-4-反-L-HypSerSerChg(dGln)SerSerPro ;(序列識別編 號：1 1 4 )
Ac-4 -反-L-HypSerSerChg(dGln)(dSer)SerPro ;(序列識 別編號：1 1 5 )
第33頁 577897 五、發明說明（30)
Ac-SerChgGln-SerSerPro ;(序列識別編號：116) Ac-SerChgGlnSerSer-4-反-L-Hyp ;(序列識別編號：117) Ac--SerChgGlnSerSerSar ;(序列識別編號：118) Ac-SerChgGlnSerSerAibPro ;(序列識別編號：119) A c - S e r C h g G 1 n S e r S e r N - M e - A 1 a ;(序列識別編號：1 2 0 )
Ac-4 -反- L- HypSerSerChgGlnSerSerPip ;(序列識別編 號：1 2 4 )及
Ac-SerChgGlnSerSerN-Me-dA ;(序列識別編號·· 125) •其中Abu為胺基丁酸，4 -反-L-Hyp為4 -反-L-羥脯胺酸， ； Pip為吡啶甲酸，3, 4-Di Hyp為3, 4 -二羥脯胺酸，3-PAL為 | 3 -吡啶基丙胺酸，Sar為肌胺酸及Chg為環己基甘胺酸。 |
下列化合物為本發明之寡肽-脫乙醯基文克里斯汀共軛 | 物之特例： I
OH -4“'CH2CH3
2 . co2ch3
第34頁 577897 五、發明說明（31)
Η . Ac_4->^-L-Hyp-Ser-Ser-Chg-G ln-Ser-Ser-N
(序列識別編號：84) C端
Ac-4-反七-Hyp-Ser-Ser-Chg-GIn-Ser (序列識別編號：85) / C端 Ac-4-反-L-Hyp-Ser-Ser-Chg-GIn-SerSer 〆 (序列識別編5虎· 86) j C端 CH〇 0 | 〇 II ,Ν、
Ac-4-^-L-Hyp-Ser-Ser-Chg-Gln-Ser-Ser-N (序列識別編號：87) 丄 Ac-4-反-L-Hy|>Se「-Se「-Chg-GIn-SerVal / 广 / (序列識別編號：88) C端
零 第35頁 577897 五、發明說明（32)
Η
OH
Ac-4-反-L-HypSer-Ser-Chg-GIn-Ser-Ser-N (序列識別編號：89) c端
‘ Η
Ac-Abu-Ser-Ser-Chg-GIn-Ser-N / (序列識別編號·· 90) c端
Η
HO、
Abu-Ser-Ser-Chg-GIn-Ser-N (序列識別編號：91) J瑞
I 〇 〇Λ.
AcHN^JL η1 Γ
Ser-Ser-Chg-GIn-Ser-Ser-N- Ν (序列識別編號：92) NBii 第36頁 577897 五、發明說明（33)
Ac-4-反[L-Hyp«Ser-Ser-Chg*GIn-Ser-Val /〇
/ QU (序列識別編號：93) 3
Ac -4-反-L-Hyp-Ser-Ser-Chg-Gln-Ser-Leij/C’
或其醫藥可接受性鹽或光學異構物。 本發明之寡肽，肽亞單位及肽衍生物（亦名「肽類」）可 藉習知肽合成技術較佳藉固相技術由組成胺基酸合成。然 後肽類藉反相高效液相層析（HPL C )純化。 肽合成之標準方法揭示於例如下列研究工作：
Schroeder等「肽類」，第丨卷，學術出版社1 96 5年； hdansky等「肽合成」，科技出版社1 966年；Mc〇nne(編 輯有機化學保護基」，pienum出版社1 973年；Barany 寺1肽類·分析、合成、生物學」名，第丨章，學術出版 社，1 9 8 0年，及Stewart等「固相肽合成」，第二版， pierce化學公司，1 984年。此等研究工作之教示皆併述於 此以供參考。 、 可藉標準狀合成技術合併 適當取代環狀胺基酸本身為 或此處敘述之技術合成。此 下列文章及其中引述之參考
入本共輛物之含親水取代基之 市面可得或易藉業界眾所周知 處適當取代脯胺酸之合成述於 文獻:J· Ezquerra e t a 1 .
苐37頁 577897 五、發明說明（34) J. Org. Chem. 60 ： 2925-2930 (1995) ； P. Gill and W.D. Lubell， J. Org. Chem., 60 ： 2658-2659 (1995)； 及M.W. Holladay et al·， J· Med· Chem. ， 34 :457-461 (1 9 9 1 )。此等研究工作之教示併述於此以供參考。
本發明化合物之醫藥可接受性鹽包括例如由無毒無機酸 或有機酸生成之習知本發明化合物之無毒鹽。例如此種習 知無毒鹽包括衍生自無機酸之鹽，例如氫氯酸，氫溴酸， 硫酸，胺基磺酸，磷酸，硝酸等；及由有機酸製備之鹽例 如乙酸，丙酸，丁二酸，乙醇酸，硬脂酸，乳酸，蘋果 酸，酒石酸，檸檬酸，抗壞血酸，帕末伊酸（ρ a m 〇 i c )，馬 來酸，羥馬來酸，苯基乙酸，麩胺酸，苯甲酸，水楊酸，i 對胺基苯磺酸，2 -乙醯氧苯曱酸，反丁烯二酸，曱苯磺 I 酸，曱烷磺酸，乙烷二磺酸，草酸，羥乙基磺酸，三氟乙 酸等。
包含含P S A切割位置之寡肽及長春花生物驗細胞毒劑之 本發明之共軛物可藉醫藥化學界眾所周知之技術合成。例 如長春花藥物之羥基部分可共價附接至羧基端之寡肽故形i 成醋鍵。供此項目的之闬，可使用化學劑例如Η B T U與Η 0 B T | 之組合，Β 0 Ρ與咪σ坐之組合，D C C與D M A Ρ之組合等。緩酸也 | 可藉由形成硝基苯基酯等活化及於DBU( 1，8-二吖雙環 [5, 4, 0 ]十一碳-7 -烯）存在下反應。 業界人士瞭解合成本發明化合物時，可能於對分子其它 部分進行預定反應時需要保護起始化合物及中間物之多個 | 反應性官能基。於所需反應完成後或於任何預定時間，通 |
第38頁 577897 五、發明說明（35) 常保護基可藉例如水解或氫解手段去除。此種保護及脫保 護步驟為有機化學界習知。業界人士可參照有機化學保護 羞，McOmie，編輯，Plenum Press，NY，NY (1973);及 有機合成之保護基，G r e e n e ’編輯’約翰威利父子公司， NY，NY (1981)有關可用於製備本發明化合物之保護基之 教示。 僅供舉例說明目的，有用的胺基保護基包括例WCi-Ca 烷醯基如曱醯基，乙醯基，二氣乙醯基，丙醯基，己醯 基^^-二乙基己醯基’^-氯丁醯基等：^-^烷氧羰基 &C5-C15芳氧羰基如第三丁氧羰基’ $氧羰基’烯丙氧羰 基，4-硝基ΐ氧羰基；苗基甲氡羰基及桂皮醯基氧羰基； 鹵-((]「(]1())'~烧氧幾基如2，2，2-三氣乙氧魏基；及(]1-(]15芳 基烷基及烯基如今基，苯乙基，烯丙基，三苯甲基等。其 它常用胺基保護基為以/3 -酮-酯類如乙醯乙酸曱酯或乙酯 製備之烯胺形式。 有用的羧基保護基包括例如- C1Q烷基如曱基，第三丁 基’癸基’鹵素-烧基如2，2，2 -三氣乙基’及2 -蛾乙 基；C5-C15芳基烧基如ί基，4-曱氧布基，4 -硝基T基， | 三苯曱基，二苯曱基；烷醯氧甲基如乙醯氧曱基， I 丙醯氧曱基等；及下列基例如笨甲醯基，4 -鹵苯甲§1基， 烯丙基，二曱基烯丙基，三-(q - C3烷基）矽烷基例如三曱 基矽烷基，/5 -對曱苯磺醯乙基，’/5 -對硝基笨硫乙基，2, 4,6 -三曱基东基，/5 -曱硫乙基，车醯亞胺基曱基，2, 4-二硝基-苯基亞磺醯基，2-硝基二苯曱基及相關基。 |
苐39頁 577897 五、發明說明（36) 同理，有用的羥基保護基包括例如曱醯基，氯乙醯基， 基，二苯甲基，三苯曱基，4 -硝基车基，三曱基矽烷基， 苯曱醯基，第三丁基，甲氧甲基，四氫哌喃基等。 至於與脫乙醯基長春鹼組合之寡肽之較佳具體例，下列 反應圖示例說明本發明之共軛物之合成。 反應圖I示例說明本發明之寡肽與長春花生物鹼細胞毒 劑長春驗之共輛物之製備，其中4 -脫乙ϋ基長春驗之氧係 附接於寡肽C端。雖然其它反應順序也可用於形成此種共 軛物，但發現初步附接單一胺基酸至4 -氧基隨後附接其餘 寡肽序列至該胺基酸為較佳方法。也發現3, 4-二氫-3-羥 -4 -氧基-1，2,3 -苯并三畊（ODHBT)可用於替代HOAti^於最 終偶合步驟。 反應圖I I示例說明本發明之寡肽之共軛物之製備，其中 羥烷酸用作長春花藥物與寡肽間之鍵聯基。
第40頁 577897 五、發明說明（37)
反應圖I
0H
長春鹼 C02C：H3
OH
脫乙醯基長春鹼 C〇2CH3 第41頁 577897 五、發明說明（38)
反應圖1(續） 0H •ΝΓ 0H :、'CH2CH3 N^Wc〇2CH3 CH30
H
hr
,，μ/οη2οη3-胺基酸-肽 ：· OH CH3 z co2ch3 N端 IBi 苐42頁 577897 五、發明說明（39)
反應圖II
DMAP/ DCC N-保護胺基酸 + H〇-(CH2)UW(CH2)U - C〇2 苄基 N-保護胺基酸-(CH2)UW(CH2)U - C〇2苄基
1BI 第43頁 577897 五、發明說明（40) 反應圖Π(續）
•N
OH Uch2ch3 肽-民HOAt N入〆b〇2CH3 2,4,6-三甲美吼咬
•N Η
EDC, DMF
•"^CHoCHo Nr^^q 乂· ·；〇H
〇 CH30 CH3 , C02CH3 胺基酸-CMCH^WiChy \。端
OH
第44頁 577897 五、發明說明（41) 本發明之寡肽-細胞毒劑共軛物可用於治療以異常細胞 或異常細胞增生為特徵的疾病，包括惡性病或良性病，其 中該等細胞係以分泌具有酶活性之PSA為特徵。此等疾病 包括但非限於前列腺癌，良性前列腺肥大，轉移前列腺 癌，乳癌等。 本發明之寡肽-細胞毒劑共輛物係以醫藥組合物形式投 予病人，組合物包含本發明之共軛物及醫藥可接受性載 劑、賦形劑或稀釋劑。如此處使用「醫藥可接受性」表示 可用於治療或診斷溫血動物之藥劑包括例如人，馬，豬， 牛，鼠，犬，貓或其它哺乳類及禽或其它溫血動物。較佳 投藥模式為腸外投藥，特別經由靜脈、肌肉、皮下、腹内 或淋巴内途徑投藥。此種配方可使用業界人士熟知之載 劑、稀釋劑或賦形劑製備。就此方面而言可參考例 如Remington醫藥科學第16版，1980年，Mack出版公司， | 0 s 〇丨等編輯。組合物包括蛋白質如血清蛋白例如人血清白 I蛋白，緩衝劑或緩衝物質如磷酸鹽，其它鹽類或電解質 等。適當稀釋劑包括例如無菌水，等張鹽水，稀葡萄糖水 溶液，多經基醇或醇之混合物，例如甘油，丙二醇，聚乙 二醇等。組合物可含有保藏劑如苯乙醇，曱基及丙基對羥 笨曱酸酯，柳硫汞等。若有所需組合物可包括約0. 0 5至約 | 0. 2 0 %重量比抗氧化劑如偏亞硫酸氫鈉或亞硫酸氫鈉。 如此處使用「組合物」一詞意圖含括包含特定量之特定 成分之產物，以及可直接或間接由特定量之特定成分組合 形成的產物。
丨巧 f
I
第45頁 577897 五、發明說明（42) 醫藥組合物可呈無菌注射水溶液劑型。可使用之可接受 性媒劑及溶劑為水，林格氏溶液及等張氯化納溶液。 無菌注射製劑也可為無菌注射水包油型為乳液劑，此處 活性成分係溶解於油相。例如活性成分可首先溶解於大豆 油與卵鱗脂混合物。然後由溶液引進水與甘油混合物及加 工處理形成微乳液劑。 注射用溶液劑或微乳液可藉局部大劑量注射引進病人血 流。另外也較佳以可維持穩定循環濃度化合物之方式投予 溶液劑或微乳液劑。為了維持·此種恆定濃度，可使用連續 靜脈輸注裝置。此種裝置之一例為Deltec 號540 0靜脈幫浦。 醫藥組合物可呈無菌注射用水性或油性懸浮液劑供肌肉 及皮下投藥。懸浮液劑可根據已知技術使用適當分散劑或 濕潤劑及前述懸浮劑配方。無菌注射用製劑亦可為無菌注 射用溶液或懸浮液於無毒腸外可接受性稀釋劑或溶劑例如 於1，3 - 丁二醇之溶液。此外無菌固定油習知用作溶劑或懸 浮介質。用於此項目的可使用任何品牌的固定油包括合成 一-或二酸甘油酯類。此外脂肪酸類如油酸可用於製備注 射劑。 供靜脈投藥，組合物較佳製備成病人之投藥量為約0 . 0 1 至約1克共輛物。較佳投藥量為約0. 2克至約1克共輛物。 本發明之共軛物依據下列因素決定可於廣泛劑量範圍有 效，例如待治療之病情或待修改之生物效應，共軛物投藥 方式，病人年齡、體重及情況，以及其它由臨床醫師決定
第46頁 577897 五、發明說明（43) 的因素。如此對指定病人之投藥量須依個別基準決定。 業界人士瞭解雖然於後文實例摘述特定反應劑及反應條 件，但可作修改仍含括於本發明之精髓及範圍。下列製備 例及實例係供進一步示例說明本發明而非限制性。 實例 實例1 脫乙醯基長春鹼-4-0-(N -乙醯基-4 —反Uyp-Ser-Ser- %
Chg-Gln-Ser-Ser-Pro) §§ A
步驟A ： 4 -脫乙醯基長春鹼之製Jt . I 2·40克（2·63毫莫耳）長春鹼硫酸鹽（Sigma V- 1 3 7 7 )樣本鲁 於氮下溶解於135毫升絕對曱醇及以45毫升無水肼處理， | 溶液於20-25 °C攪拌18小時。反應蒸發成稠厚糊，分配於 | 3 0 0毫升二氣甲烷與1 5 〇毫升飽和碳酸氫鈉間。水層以2次 1 00毫升二氣曱烷洗滌及各3層二氣甲烷又以各1 〇〇毫升水 (2次）及飽和氣化鈉（1次）洗滌。合併有機層以無水硫酸鈉 脫水及於減壓下去除溶劑獲得標題化合物呈灰白色結晶固
體。此材料儲存於-20DG至使用時。 I 一步驟B · 4-脫乙酿某長春給4·-。胺^基）_之製雙 ! " — · 1 ! 804毫克（1.047毫莫耳）4 -脫乙醯基長春鹼樣本於氮下溶 解於3毫升二氣曱烷及18毫升無水d比啶，以1.39克Fmoc -脑 胺醯氣（Fmoc-Pro-Cl，Advanced Chemtech)處理，混合物 | · 於25 t攪拌20小時。藉Hplc分析顯示存在有未反應之起始| 物料脫乙酿基長春鹼，又加入〇·5〇克Fmoc-Pro-Cl，又搜 | 拌2 0小時而完成反應。加水（約3毫升）而與過量醯氣反 j
第47頁 577897 五、發明說明（44) 應，然後/谷液瘵發至乾及分配於3 〇 〇毫升乙酸乙酯與1 5 〇毫 升飽和奴酸氫鈉鹼，接著以飽和氣化鈉洗兩次。脫水（硫 酸鈉）後於減壓下去除溶劑獲得橙褐色殘餘物，於其中加 入3 0宅升D^F及14毫升六氫吡啶，5分鐘後溶液於減壓下蒸 發獲得检汽色丁固體殘餘物。真空脫水約1小時，約2 〇 〇毫 升水及1 0 0宅升_添加至此物料，接著以振搖逐滴加入冰 酿酸及超音波處理至完全溶解及水層達到穩定p Η 4. 5 - 5 · 0 (濕ρ Η範圍4 - 6試紙）為止。然後水層以1份1 〇 〇毫升 醚洗條’各_層又以5 〇毫升水洗務。合併水層分成兩份於
Waters C4 Delta-Pak 柱 15 "Μ 3 0 0Α 接受製備性 HPLC (A二0.1% TFA/H20 ; B = TFA/CH3CN)，梯度溶離95 至 7 0% A/ 70分鐘。獲得匯集溶離分，濃縮及凍乾獲得標題化 合物。 步驟C : N-乙 §1 基-4-反-L-Hyp-Ser-Ser-Chg-Gln-Ser- S e r - W A N G 樹脂 始於0. 5 毫莫耳（〇· 61 克）Fmoc-Ser (t-Bu)-WANG 樹脂以 〇·82毫莫耳/克裝載，經保護之肽係於適合用於基於Fmoc/ 第三丁基合成之A BI型號430A肽合成儀上合成。使用之合 成計晝為兩倍過量（1 . 0毫莫耳）如下經保護之胺基酸： Fm〇c-Ser(t-Bu)-〇H，Fmoc-Gin-〇H，Fmoc-Chg-OH，
Fmoc-4 -反-L-Hyp-OH ;及乙酸（雙重偶合）。各偶合週期期 間，Fmoc保護使用20%六氫吡啶於N-曱基-2 -吡咯啶酮 (NMP)去除接著以NMP洗滌。偶合係使用DCC及HOBt活化於 NMP達成。合成完成時，肽樹脂經脫水獲得標題化合物。
577897 五、發明說明（45) 步驟D · N-乙醢基—4 —反一L — HvD-Ser-Ser-Chg — Gln-Ser-
Ser - 0H 〇· 5毫莫耳前述肽樹脂懸浮於25毫升TFA接著加入各 0· 6 25毫升水及三異丙基矽烷，然後於25 °C攪拌2. 0小時。 過濾割裂混合物，固體以TF A洗滌，溶劑於減壓下由遽液 去除，殘餘物以醚研製獲得淡黃色固體，其藉過濾分離及 真空脫水獲得標題化合物。 HPLC條件系統A : 柱··· Vydac 15厘米#218TP5415 ， C18 溶離劑· · · 梯度（95%Α至50%Α)經45分鐘 Α = 0· 1% TFA/H20，Β:0· 1% 流速.，. 高解析度ES/FT-MS :
TFA/乙腈 1 . 5毫升/分鐘 78 9.3 重驟E蠢 脫乙酸基長春驗-4-0-(N-乙酸基-4-反-L-Hyp-
Ser-Ser-Chg-Gln~Ser-Ser-Pro) §§
5 22毫克（0· 66毫莫耳）步驟D之肽樣本及5 5 5毫克（約0. 6 J毫莫耳）如前述製備之得自步驟B之4 -脫乙醯基長春鹼 4 - 0 -(脯胺醯基）酯於氮下溶解於1 7毫升D M F。然後加入1 6 3 愛：克（1·13宅旲耳）ΐ -經—7- π丫苯并三吐（HOAt)，及pH以 2，4，6 -三曱基吡啶調整至6 . 5 _ 7 (潮濕5 - 1 〇 PH試紙範圍）， 接著冷卻至0°C及加入155毫克（0.81毫莫耳）1-(3 -二甲基 胺基丙基）-3 -乙基甲胺醯亞胺（e DC )。於〇 - 5 T：持續攪拌至 藉分析性HPLC(A:〇· 1% TFA/H20 ; B:0. 1% TFA/CH3CN)監測
第49頁 577897 五、發明說明（46) 得反應完成為止，定期添加2，4, 6 -三甲基D比咬維持ρ η於 6 · 5 - 7。經1 2小時後反應藉加入約4毫升水後續處理及授動 1小時後真空濃縮至小量容積及溶解於約1 5 0毫升5 %乙酸， 分成兩份於 Waters C18 Delta-Pak 柱 15 //Μ 3 0 0Α (Α=0·1% TFA/H20 ; Β = 0· 1% TFA/CH3CN)進行製備性HPLC ,梯度溶離 95至65% Α/70分鐘。兩回合所得含較遲溶離產物之均勻溶 離分（藉HPLC評估，系統a，95至65% A/30分鐘）經匯集及 濃縮至約50毫升容積並通過約4〇毫升AG4X4離子交換樹脂 (乙酸酿循環），接著凍乾獲得標題化合物呈凍乾粉末。 高解析度ES/FT-MS : 163了_ 〇
貫例1 A 脫乙醯基長春鹼—4-〇-(N —乙醯基—4_反—L_Hyp —^卜Ser 一 n-SeT -Se 旨乙酸鹽 4:5〇克（3· 7笔莫耳）4 — 〇—(脯胺醯基）脫乙醯基長春鹼ha 鹽樣本（如實例}步驟B所述製備）於氮下溶解於3〇〇毫升 ’合液冷部至〇 。然後加入1 · 7 2克（1 〇 · 5毫莫耳）3，4 - =—羥一4 —氧基一1，2,3—苯并三畊（ODHBT)，pH以N-甲基 ·、'β N〇)調整至7· 0(濕潤5-10範圍pH試紙），接著逐份加 =二· 95兄（D，23毫莫耳）實例1步驟D之N-乙醯基-七肽，各 人…加間使其凡全溶解。Μ再度以調整至〇，加入 克〇·8笔莫耳Μ—(3 —二曱基胺基丙基）-3-乙基曱二醯 二鹽广鹽(EDC)，接著溶液於〇_5。。攪拌至藉分析性 'T、統A)監測得偶合完成為止，定期添加NMΜ將pH維持 ；。分析顯示主要成分之停駐時間為2 6 · 3分鐘，前方
第50頁 577897 五、發明說明（47) 為2 6 · 1分鐘之小量成分（約1 〇 % )’識別為標題化合物之 D - S e r異構物。2 0小時後反應藉加入3 〇毫升水後續處理及 攪拌1小時後真空濃縮至小量容積及溶解於約5〇〇毫升2〇〇/0 乙酸’分成 12 份於 Waters C18 Delta-Pak 柱 15mM 3 0 0 A (Α = 0·1% TFA/H20 ;Β=0·1% TFA/CH3CN)接受製備性HPLC， 梯度溶離85至65% A/90分鐘，流速80毫升/分鐘。 均負/谷離份（藉Η P L C系統C評估），占總流量之約1 / 4經匯 集及濃縮至約150毫升容積並通過約2〇〇毫升Bi〇-Racj AG4X4離子交換樹脂（乙酸鹽週期）接著凍乾溶離分獲得標 題化合物乙酸鹽呈凍乾粉末：停駐時間（系統Α) 26· 7分 鐘’98,9%純質；高解析度5^/1?7 —化11]/6 1 63 6.82;胺基 酸組成分析2 0小時，1 〇 〇 °c，6 N鹽酸（理論值/實測值）， Ser4/3.91(校正），Glu l/〇.92(Gln 轉成Glu)，Chg 1/ 1·11 lyp ΐ/ΐ·〇7，ρΓ0 1/〇·99 ,肽含量 〇·516 毫莫耳 / 毫 克。 進一步組合均質溶離分及純化去除副溶離分，如前述麵 田約5 0 0宅升離子交換樹脂加工處理獲得額外量之標題化 合物。 HPLC條件，系統a :
Cl 才主·.· Vydac 15 厘米 #218ΊΓΡ5415， 流速· . . 1 · 5毫升/分鐘 溶離劑· . · 梯度（95 %Α至50%A )經45分鐘 AU% TFA/H2〇，B二0.1% TFA/ 乙腈 /皮長·.· 214 nm, 2 8 0 nm
第51頁 577897 五、發明說明（48) HPLC條件，系統C : 柱·… Vydac 15厘米#2 1 8TP5415，C18 流速... 1. 5毫升/分鐘 溶離劑·.. 梯度（85%A至65%A)經30分鐘 A二0.1% TFA/H2〇，B二0.1% TFA/ 乙腈 波長..· 2 1 4 nm， 2 8 0 nm
表1顯示藉實例1及1 A所述程序製備之其它肽-長春花藥 物共軛物，但利用適當胺基酸殘基及封阻基醯化。除非另 行指示否則係製備及試驗共軛物之乙酸鹽。
577897 五、發明說明（49) 表1 序列 肽-長春花藥物共1 厄物 藉約克(York)PSA 識別 編號 至50%酶基質 切割時間(分鐘） 95 4-0·(Αο4-反-L-HypSSChgQ-SS-4-反-L-Hyp)-dAc-VIN 13 96 4-〇-(Ac-4-反-L-HypSSChgQ-S-PydAc-VIN 1小時=8% 90 4-0-(Ac-Abu-SSChgQ-SP)-dAc-VIN 80 91 4-0-((2-0H)Ac-Abu-SSChgQ-S-P)-dAc-VIN 110 92 4-0-(Ac-3-Pal-SSChgQS-P)-dAc-VIN 80 97 4-0-(Ac-3-Pal-SSChgQ(dS)-P)-dAc-VIN 3小時=0% 93 4-〇-(Αο4-反-L-HypSSChgQSL-乳醯胺)-dAc-VIN 1〇(略微分解） 94 4-〇-(Ac-4·反-L-HypSSChgQSV-乳醯胺)-dAc-VIN 7(穩定） 88 4-〇-(Ac-4-反-L-HypSSChgQSV-乙醇醯基)-VIN 8 85 4-CKAc-4-反-L-HypSSChgQS-GlycineHdAcO-VIN 30 86 4-〇-(Ac-4-反-L-HypSSChgQSS-Sar)-(dAc)-VIN 32 84 4-〇-(Ac-4-反-L-HypSSChgQSSPr〇HdAc)-VIN 17 87 4-〇-(Ac-4-反-Ι^Ηγρ88(^§(^8-(ά)-ΡΐΌΗ^1Α(：)-νΐΝ 1小時=34% 98 4-0-(Ac-SSChgQS-Gly)-(dAc)-VIN 55 99 4-〇-(Ac-SSChgQ-SS-4-反-L-Hyp^dAoVIN 22 100 4-0-(Ac-SSChgQ-SS-P)-dAc-VIN 15 101 4-〇-(Ac-4-反-L-HypSSChgQ-S(dS)-4-反-L-Hyp)- dAc-VIN 1小時二12%
4 —反—L — Hyp為反-4_爹呈—L—脯胺酸 當η大於1時；值為平均值
苐53頁 577897 五、發明說明（50)
序列 識別 編號 肽-長春花藥物共軛物 藉約克(York)PSA 昱50%酶某皙 _切割時間(分鏟、 102 (4-〇)-Ac-(4-反-L-Hyp)SSChgQ-SL-(dAc)-VIN 35 103 Ac-4-反-L-HypSSChgQS-(4-〇-Ala)-(dAc)-VIN 23(pr〇d 轉成 A-dAc-VIN'i 104 Ac-4-反-L-HypSSChgQSChg-(4-〇-乙醇醯基)-VIN 12 〜 105 Ac-4_ 反-L-HypSSChgQSS-(4-〇-Sar)-(dAc)-VIN *--1 厶 15 — 102 4-〇-(Ao4-反-L-HypSSChgQSL-乳 Si 基)-(dAc)-VIN ___ 10 ^ 106 Ac-SSChgQ-SS-(4-〇-4反-L-HypHAc-VIN __ 22 ^ 107 Ac-4-反-L-HypSSChgQ-SS(4-〇-P)-文得辛 ___ 12 ^ 108 Ac-AbuSSChgQ-S(dSH4-0-P)-dAc-VIN __ 60 ^ 109 Ac-AbuSSChgQ-SS-(4-0-P>dAc-VIN __ 7 — 110 Ac-AbuSSChgQ-(dSH4-0-P)-dAc-VIN 1小時=〇% 104 Ac-4-反-L-HypSSChgQ-SChg-(4-〇-乳酿基)- ^---- ^ 14 ^ dAc-VIN 111 Ac-SSChgQ-SS-(4-〇-P)-文得辛 22 ^ 112 4_〇-[Ac-SSChgQ-S(dS)-4-反-L-Hyp]-dAc-VIN 1小時=14% 113 4-〇-[Ac-4-反-L-HypSSChgQ-(dS)SP]-dAc-VIN __ jj、時(lOXENZf 114 4_〇-[Ac-4-反 Ι-Ηγρ38(：1^(οΚ^)38Ρ]-€ΐΑ(：-νΐΝ ]〇X ENZ o/n=0%^ 115 4-C4Ac-4-反-L-HypSSChg(dQ)(dS)SP]-dAc-VIN !〇X ENZ o/n-0%' 116 4-〇-(Ac-SChgQ-SSP)-dAc-VIN ^_ 15 — 117 4-〇-[Ac-SChgQSS4-反-L-Hyp]-dAc-VIN 15 ^ 118 4_〇-[Ac—SChgQSS-Sar]-dAc-VIN "---— 39n=2 ' 119 4-0-[Ac-SChgQSS-Aib-P]-dAc-VIN 15 ， 23 ~ 120 4-0-[Ac-SChgQSS(N-Me-Ala)]-dAc-VIN __ 30 ^ 121 4-0-[Ac-SChgQS-Aib-P]-dAc-VIN 1小時=8% 122 4-0-[(2-0H)Ac-SChgQSS-Sar]-dAc-VIN — 1 小時二4〇/0 — 123 4-0-[Ac-SChgQSS-Pip]-dAc>VIN —：— 15 — 124 4-〇-[Ac-4-反-L-HypSSChgQSS-Pip]-dAc-VIN 13 ' 125 4-0-[Ac-SChgQSS-(N-Me-dA)]-dAc-VIN 1小時=26% 第54頁 577897 五、發明說明（51) 實例4 募脉二t春花藥物共耗物由游離P S A辨識之評估 如貫例3所述製備之共軛物個別溶解於psa消化缓衝液 (50mM參（羥曱基）-胺基甲烷ρΗ 7· 4，140 uiM NaCl)及溶 液以10 0至1之莫耳比添加至PSA。另外使用之psa消化緩衝 液為50 mM參（羥曱基）胺基曱烷PH 7.4，140 mM NaCl。反 應於不等反應時間後藉加入三氟乙酸（T f a )至最終1 %
(v / v ) >乎媳。另外反應以1 〇 m μ氣化鋅淬德。淬媳反應藉 HPLC於反相C18柱使用〇· i% TFA/乙腈水溶液梯度分析。9寡 肽-細胞毒劑共軛物使用酶活性游離PSA 50%切割所需時間 (分鐘）經算出。結果示於表1。 ^ S 實例5 之肽基衍生物毒性之試管試驗檢定 如實例3所述製備之可切割之寡肽—長春花藥物共軛物對 已知可由未改質長春花藥物殺死之一種系細胞之細胞毒性 係使用愛瑪藍（Alamar Blue)檢定分析評估。特別LNCap前| 列腺腫瘤钿胞，C ο 1 〇 3 2 0 D Μ細胞（標示為c 3 2 0 )或T 4 7 D細胞j 於9 6孔平板之細胞培養醪以含以不等濃度指定共軛物之介i 質稀釋（平板孔終容積2 0 0微升）。不會表現游離pSA之 Co 1 〇3 2 0 DM細胞用作對照細胞種系而決定無機轉基礎毒 性。細胞於3 7 °C培育3日，2 0微升愛瑪蘭添加至檢定分析j 礼。進一步培育細胞及檢定分析平板於添加愛瑪藍後4小 丨 時及7小時以雙重波長5 7 0及6〇〇㈣於el-310 ELISA閱讀機I 閱讀。然後於接受試驗之各種濃度共軛物計算相對於對照|
苐55頁 577897 五、發明說明（52) (不含共軛物）培養醪至相對變異百分比，並決定EC5G。結 果顯示於表2。除非另行指示否則係使周共軛物之乙酸鹽 進行試驗。 表2 序列 識別 編號 肽-長春花藥物共軛物(細胞毒劑） 72小時殺死LNCaP 細胞丨48小時} EC 50( uM) 長春驗 0.5(C〇1〇320DM=0.5) (4-0-4-反-L-Hyp)-dAc-VIN 1 0.6(C〇1〇320DM=1.1) n=2 4-0-甘胺酸-(dAc)_VIN 0.3(C〇1〇320DM 二 1.8) 4-0-肌胺醯基-(dAc)-VIN 1.3(C〇1〇320DM 二 1.8) 95 4-〇-(Ac-4-反-L-HypSSChgQ-SS-4-反-L-Hyp)-dAc-VIN 16.3 (C〇1〇320DM=13.1) 96 4-〇-(Ac-4-反-L-HypSSChgQ-S-PVdAc-VIN 47.9 (C〇1〇320DM=83.9) 96 4-〇-(Ac-4-反-L-HypSSChgQS-ProHdAcO-VIN >16(Colo320DM-26) 於 5%FBS 90 4-0-(Ac-Abu-SSChgQ-S-P)-dAc-VIN 9.7(C〇1〇320DM 二 14.5) n=2 90 “ >5(C〇1〇320DM 二 23·8) 於 0.5%FBS 91 4-0-((2-0H)Ac-Abu-SSChgQ-S-P)-dAc-VIN 11.9 (C〇1〇320DM=52.5) 92 4-0-(Ac-3-Pal-SSChgQS-P)-dAc-VIN 5.8(C〇1〇320DM=8.0) PS 93 4-〇-(Ac-4-反-L-Hyp SSChgQSL-乳醯基)-dAc-νΓΝ 1.1(C〇1〇320DM=13.3) 1 94 j 4-〇-(Ac斗反-L-Hyp SSChgQSV-乳醯基)-dAc-VIN 3.1(C〇1〇320DM-8.1)
第56頁 577897 五、發明說明（53) 序列 識別 編號 月太-長春花藥物共1厄物(細胞毒劑V 72小時殺死LNCaP 細胞丨48小時} EC 50( ίζ Μ) 88 4-〇-(Ac-4-反-L-Hyp SSChgQSV-乙醇醯基)-VIN 4.1(C〇1〇320DM=8.1) 86 4-〇-(Ao4-反-L-Hyp SSChgQSS-Sar)-(dAc)-VIN 4.1(C〇1〇320DM=13.0) 84 4-〇-(Ac-4-反-；^Ηγρ33αι§(^8ΡΐΌ)-((1Α(：)Λ/ΊΝ 3.0(C〇1〇320DM=12) n=3 87 ‘CKAc-4-反-Ι^Ηγρ88(：1^(^8-(φ-ΡΐΌ)-(dAc)-VIN 4.1(C〇1〇320DM=8.1) 85 4_0-(Α〇4,反-L-HypSSChgQSGlyMdAcO-VIN 9.3(C〇1〇320DM=13.5) n=2 98 4-〇-(Ac-SSChgQS-Gly)-(dAc>VIN 16.3(C〇1〇320DM=16.3) 100 4-〇-(Ac-SSChgQ-SS-4-反-L-Hyp)-dAc-VIN 6.8(C〇1〇320DM=8.1) n=2 4-0-leucyl-(dAc)-VIN 4.5(C〇1〇320DM=4.5) 4-〇-Abu-(dAc)-VIN，外消旋混合物 3.8(C〇1〇320DM=5.5) 4-0-Abu-(dAc)-VIN，I 異構型 3.9(C〇1〇320DM=2.3) 102 (4-〇)-Ac-(4-反-L_Hyp)SSChgQ-SL-(dAc)-VIN 40(C〇1〇320DM=86.7) SF ； 50(97)0.5% FBS 4-0-(脯胺醯基)-dAc-VIN 0.7(C〇1〇320DM=4.1) n-2 (4-0-PheHdAc)-VIN 3.8(Colo320DM-2.2) (4-0-AlaHdAc)-VIN 0.6(C〇1〇320DM=4.2) 103 Ac-4-反-L-HypSSChgQS-(4-〇-AlaHdAc>VIN 12.5(C〇1〇320DM=32.5) 4-羥乙醯基-VIN=4-〇-乙醇醯基-dAc-VIN 1.3(C〇1〇320DM=3.3) 104 Ac-4-反-L-HypSSChgQSChg-(4-〇-乙醇醯基)- VIN 4.1(C〇1〇320DM=4.1) 4-〇-(d)-脯胺醯基-(dAc)-VIN酯 2.0(C〇1〇320DM=4.1) Chg-(4-〇-乙醇醯基)-VIN 105 Ac-4-反-L-HypSSChgQSS-(4-〇-Sar：l· (dAc)-VIN 12(C〇1〇320DM=12) 111111 第57頁 577897 五、發明說明（54) 序列 識別 編號 肽-長春花藥物共軛物(細胞卷密,η 72小時殺死LNCaP 細胞{48小時} EC 50( uM) 102 4-〇-(Α〇4-反心 HypSSChgQSL-乳醯基)-(dAc)-VIN 1.1(C〇1〇320DM=13.3) 4-〇-(V-乳醯基)-dAc-VIN 1.3(C〇1〇320DM=2.6) 4-〇-(L· 乳醯基)-dAc-VIN 0.7(C〇1〇320DM 二 2·0) 4-〇-(Chg-乳醯基)-dAc-VIN 4.1(C〇1〇320DM 二 8·4) 104 4-〇-(Ao4-反-L-HypSSChgQSChg-乳酿基)-dAc-VIN * 8.1(Colo320DM-27.9) PS 106 Ac-SSChgQ-SS-(4-0-Hyp)-dAc-VIN 6.8(C〇1〇320DM=8.1) n=2 107 Ac-4-反-1^-1'1}^口88〇1§(^-88(4-〇-?)-文得辛 12.5(C〇1〇320DM>73) 108 Ac-AbuSSChgQ-SS-(4-0-P)-dAc-VIN 12.8(C〇1〇320DM=28.4) 脯胺醯基-文得辛 0.3(C〇1〇320DM=6.9) 111 Ac-SSChgQ-SS-(4-〇-P)_ 文得辛 32.5(C〇1〇320DM>73) 4-0-(SP)-dAc-VIN 0.1(C〇1〇320DM 二 0.3) 4-0-(SSP)-dAc-VIN 2.0(C〇1〇320DM=14.5) 114 4-〇-[Ac-4-反-Ι^Ηγρ38α^(ά(^)88Ρ]-οΙΑο:-νΐΝ 12.2(C〇1〇320DM=43.7) 115 4-0-[Ac-4-反-ί-Ηγρ380：1^(€ΐ(5)(ο18)8Ρ]-(1Α〇νΐΝ 16.3(C〇1〇320DM=47.7) 116 4-0-(Ac-SChgQ-SSP)-dAc~VIN 15(C〇1〇320DM=20) 4-0-吡啶甲醯基-dAc-VIN 0.7(C〇1〇320DM 二 0.7) 117 4-0-[Ac-SChgQSS4-反-L-Hyp]-dAc-VIN 5.6(C〇1〇320DM=5.6) 4-0-N-甲基丙胺醯基-dAc-VIN 2.9(C〇1〇320DM=2.9) 118 4-0-[Ac-SChgQSS-Sar]-dAc-VIN 0.8(C〇1〇=3.0) 119 4-0-[Ac-SChgQSS-Aib-P]-dAc-VIN >25(C〇1〇320DM>25) 120 4-0-[Ac-SChgQSS(N-Me-Ala)]-dAc-VIN 2.3(C〇1〇320DM=3.1) 123 4-0-[Ac-SChgQSS-Pipl-dAc-VIN 80(C〇1〇320DM>75) 124 4-〇-[Ac-4-反-L-HypSSChgQSS-PipJ-dAc-VIN 7.5(C〇1〇320DM 二 60) 4-0-[N-Me-dA]-dAc-VIN 1.0(C〇1〇320DM=1.7) 111 第58頁 577897 五、發明說明（55)
Pip為吡啶甲酸；Sar為肌胺酸；Chg為環己基甘胺酸；Abu 為2 -胺基丁酸；Aib為2-胺基異丁酸。 實例6 、 肽基-細胞毒劑共軛物之活體試驗效果 LNCaP. FGC或DuPR〇-l細胞經過胰蛋白酶分解，再度懸浮 於生長培養基及於200xg離心6分鐘。細胞再度懸浮於不含 血清之a -MEΜ及計算數目。含需要量細胞之適當容積溶液 ；移轉至錐形離心管内，如前離心及再度懸浮於適當容積之 a - Μ Ε Μ -馬翠潔（M a t r i g e 1 ) 1 ‘ ： 1混合物。懸浮液於冰上維 持至接種於動物體為止。 哈蘭史伯格達利雄裸小鼠（1 0 - 1 2週齡）被約束但未麻 醉，左脅使用2 2 G針頭皮下注射接種0. 5毫升細胞懸浮液。 小鼠給予約5 X 1 05 Du PRO細胞或1 . 5 X 1 07 LNCaP. FGC細 I胞。 |接種腫瘤細胞後小鼠接受如下兩種方案之一的處理： |方案A : 細胞接種後1日動物給藥0 . 1 - 0 . 5毫升容積試驗共輛物， !長春花藥物或媒劑對照（無菌水）。共軛物及長春花藥物劑 I量最初為非致命之最大量，隨後可遞減。相等劑量以24小 I時間隔連續投藥5日。1 0日後由小鼠取得血樣益測定P S A血 清濃度。以5 - 1 0日間隔測定類似的血清PSA濃度。5 . 5週結 束時犧牲小鼠測量腫瘤重量並再度測量血清PSA。檢定分 析開始及結束時測量動物體重。 方案B :
第59頁 577897
五、發明說明（56) 細胞接種後1 0日，由動物取得血樣及測定血清PSA濃 度。然後動物根據PSA血清濃度分組。細胞接種後丨44 5 曰，動物給予0 · ；1 - 0 · 5毫升容積試驗共軛物，長春花藥物 或媒劑對照（無菌水）。共輛物及長春花藥物劑量最初為非 致命之最大量，隨後矸遞減。相等劑量以24小時間隔連續 投藥5日。1〇日後由小鼠取得血樣並測定？3人血清濃度。= 5- 1 0日間隔測定類似的血清PSA濃度。5· 5週結束時犧牲小 鼠測量腫瘤重量並再度測量血清PSA。檢定分析開始及結 束時測量動物體重。 ‘ 藉内生性非PS A蛋白解酶進行共軛物之蛋白質分解切割 之試管試驗定 - 蛋白分解細胞萃出物之製備 全部程序皆於4 t進行。犧牲適當動物並分離相關組織 及儲存於液態氮。冷凍組織使用研妹及研杵粉化，粉化組 織送至波特倚未杰（Potter-Elvej eh)均化器及加入2倍容 j 積緩衝液A ( 50 mM Tr i s 含1 · 1 5% KC 1，pH 7· 5 )。組織使 | 用首先為鬆鬆嵌合之研杵然後為緊密後合研杵來回2 〇次破j 壞。均化物於搖擺桶轉子（HB4-5)於1 0, 0 0 0 xg離心，抛棄|
丸教’再度將上清液於1〇〇, 〇〇〇 “（Ή 70)離心。保留上 I 清液（胞溶體）。 |
A丸粒使用如上使用緩衝液如上步驟使用緩衝液A之相等 | 谷積再懸浮於緩衝液B(1 〇 EDTA含丨· 15% Kc丨，PH I
7 ·5)。fe浮液於蕩司（d 〇 u n c e)均化器内均化及溶液於I 577897 五、發明說明（57) ---Π 1 0 0，0 0 0 xg離心。拋棄上清液及丸粒再度懸浮於緩衝液C (10 Π1Μ磷酸鉀缓衝液含0·25 M蔬糖，ρΗ 7·4)但使用前述 半量容積及以蕩司均化器均化。 兩種溶液（胞溶體及胞膜）之蛋白質含量係使用布拉福 (Bradford)檢定分析測定。然後檢定分析部分取出並於液 態氮冷凍。整分儲存於—7〇 。 免驟β : 蛋白f切割檢定分折 ·
對各個時間點如步驟A製備且藉布拉福測定之2 〇微克肽—… 長春花藥物共軛物及1 5 〇微克組織蛋白質於反應緩衝液置 於終容積為2 0 0微升於緩衝液（5〇 — TRIS，140 mM NaCl， |φ pH 7. 2)之溶液内。檢定分析係於〇，3〇，6〇，1 20及180分 鐘進行’然後以9微升〇 · 1 μ氣化鋅淬熄且即刻置於沸水中 90秒。反應產物使用VYDAc C18 15厘米柱於水/乙腈（5%至 50%乙腈經歷30分鐘）藉HPLC分析。 I
第61頁 577897 五、發明說明（58) 序列表 <110> Merck & Co., Inc.
Brady, Stephen F·
Feng, Dong-Me i Gar sky , Victor M.
< 1 2 0 > 用於治療前列腺癌之共軛物 <130> 20120Y <150〉60 / 0 6 7, 1 1 0 <151> 1997-12-02 * <160〉 125
<170〉 FastSEQ 視窗3.0 版 <210> 1 <211> 7 I <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 <2 2 0 > ! <223〉 完全合成 I <40 0〉1 I Asn Lys lie Ser Tyr Gin Ser ；1 5 <21 0> 2
< 2 1 1 > 6 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列
第62頁 577897 五、發明說明（59) <22 0 > <22 3〉 完全合成 <400〉 2
Lys lie Ser Ty r Gin S er 1 5 <210> 3 <211> 7 <21 2> PRT · < 2 1 3 > 人造序列 <22 0 > <223〉 完全合成 <400> 3
Asn Lys lie Ser Tyr Tyr Ser 1 5
<210〉 4 <211> 7 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 <2 2 0〉 <22 3〉 完全合成 <4 0 0 > 4
苐63頁
577897 五、發明說明（60)
Asn Lys Ala Ser Tyr Gin Ser 1 5
<210> 5 <211> 5 <212> PRT
< 2 1 3 > 人造序列 <22 0〉 <223〉 完全合成 ι <400> 5
Ser Ty r Gin Ser Ser 1 5
<210> 6 <211> 5 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 < 2 2 0 >
<22 3〉 完全合成 <4 0 0 > 6
Lys Ty r Gin Ser Ser 1 5 577897 五、發明說明（61)
<21 1 > 5 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 <22 0 > <22 3〉 完全合成 < 2 2 1 >變異株 <222> (1)...(1) | <223〉 同精胺酸 |-
<400> 7 ‘ J
Xaa Tyr Gin Ser Ser , 1 5 j i <210> 8 j <211> 5 j
<212> PRT I j < 2 1 3 > 人造序列 < 22 0 > <223〉 完全合成 ! <221 >變異株 < 2 2 2 > (1)...(1) !
第65頁 577897 五、發明說明（62) <400> 8
Xaa Xaa Gin Ser Ser 1 5 <210> 9
< 2 1 1 > 4 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 <22 0 > <22 3〉 完全合成 <400> 9
Tyr Gin Ser Ser 1 <210> 10 < 2 1 1 > 4 <2I2> PRT i <21 3> 人造序列 i <22 0〉 <22 3 > 完全合成 iW <40 0 > 10 擊 Tyr Gin 1 Ser Leu •
第66頁 577897 五、發明說明（63) <21 0> 11 <211> 4 <212〉 PRT < 2 1 3 > 人造序列 <22 0 > <22 3〉 完全合成 <221> MOD_RES <222> (4)...(4) <223> Nle <400> 11 Tyr Gin Ser Leu <210〉 12
< 2 1 1 > 4 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 < 2 2 0〉 <22 3〉 完全合成 <221 >變異株 <222> (1)...(1) < 2 2 3 > 環己基甘胺酸 <400〉 12
第67頁 577897 五、發明說明（64)
Xaa Gin Ser Leu 1
<210> 13 <211> 4 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 <22 0 > <22 3〉 完全合成 <221 >變異株 <222> (1)...(1) < 2 2 3 > 環己基甘胺酸 <221> MOD_RES <222> (4)...(4) <223> Nle <400> 13 Xaa Gin Ser Leu
<21 Ο> 14
< 2 1 1 > 4 <212〉 PRT < 2 1 3 > 人造序列 < 2 2 0〉 < 2 2 3〉 完全合成
第68頁 577897
第69頁 577897 五、發明說明（66)
Ser Tyr Gin Ser Va 1 i 5
<210> 17 <211> 5 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 < 2 2 Ο > <22 3〉 完全合成 <221 >變異株 <222> (2)...(2) ” < 2 2 3 > 環己基甘胺酸 <400> 17
Ser Xaa Gin Ser Va 1 1 δ <210〉 18
< 2 1 1 > 5 <212〉 PRT < 2 1 3 > 人造序列 <22 0〉 < 2 2 3〉 完全合成 <400〉 18
第70頁 577897
第71頁 577897 :五、發明說明（68) < 2 2 3 > 以親水部分取代之環狀胺基酸 <400〉 20
Xaa Xa a Ser Ty r Gin S er 1 5
<210> 21 <21 1 > 6 <212〉 PRT < 2 1 3 > 人造序列 ‘
< 2 2 0 > <22 3〉 完全合成 <221 > 變異株 <22 2〉（1 )· . . (1 ) < 2 2 3 > 以親水部分取代之環狀胺基酸 <400> 21
Xaa Xaa Lys Ty r Gin Ser <210> 22 < 2 1 1 > 6 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 ! < 2 2 0〉 I < 2 2 3 > 完全合成 577897 五、發明說明（69) <221 >變異株 <222> (1)...(1) < 2 2 3 > 以親水部分取代之環狀胺基酸 <221 >變異株 <222> (3)...(3) <2 23〉 同精胺酸 <400> 22
Xaa Xa a Xaa Tyr Gin Ser
<210〉 23 <211> 6 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 < 2 2 0〉 <2 2 3〉 完全合成 <221 >變異株 < 2 2 2 > (1)...(1) < 2 2 3 > 以親水部分取代之環狀胺基酸 <221 >變異株 < 2 2 2 > (3)...(3) <223〉 同精胺酸 <221 > 變異株 < 2 2 2 > (4)...(4)
577897 五、發明說明（70) <223〉環己基丙胺酸 <400> 23
Xaa Xaa Xaa Xaa Gin Ser
<210> 24 <211> 4 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 ‘ < 22 0 > . <22 3〉 完全合成 <221 >變異株 <222> (1)...(1) < 2 2 3 > 以親水部分取代之環狀胺基酸 <400> 24 \ X a a Ty r Gin Ser
<210〉 25 < 2 1 1 > 6 <212〉 PRT < 2 1 3 > 人造序列 < 2 2 0〉 < 2 2 3〉 完全合成
第74頁 577897 五、發明說明（71) <221〉變異株 < 2 2 2 > (1)...(1) < 2 2 3 > 以親水部分取代之環狀胺基酸 <221 >變異株 <222> (4)...(4) <223〉環己基甘胺酸 <400> 25
Xaa Xaa Ser Xa a Gin S er 1 5 * <21 0> 26
< 2 1 1 > 4 <2!2> PRT < 2 1 3 > 人造序列 <22 0〉 <223〉 完全合成 <221 >變異株 <222> (1)...(1) < 2 2 3 > 以親水部分取代之環狀胺基酸 <221 >變異株 < 2 2 2 > (2)...(2) < 2 2 3 > 環己基甘胺酸 <400〉 26
I
11 mw&Mi 'mi
I 第75頁 577897 五、發明說明（72)
Xaa Xaa Gin Se r <210> 27 <211> 6 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 <22 0 > <223〉 完全合成 <400> 27
Ser Se r 丁yr Gin Ser Ala 1 5
<210> 28 < 2 1 1 > 6 <212〉 PRT < 2 1 3 > 人造序列 < 2 2 0〉 !· < 2 2 3〉 完全合成 <221 >變異株 < 2 2 2 > (3)...(3) < 2 2 3 > 環己基甘胺酸 <400〉 28
! 第76頁 577897 五、發明說明（73)
Ser Se r Xaa Gin Ser Ser 1 5 <210> 29 <211> 6 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 <22 0 > <22 3〉 完全合成 <400> 29
Ser Ser 丁yr Gin Ser Ala 1 5
<210> 30 < 2 1 1 > 6 <212〉 PRT < 2 1 3 > 人造序列 <22 0 > <22 3〉 完全合成 <221 >變異株 <222> (3)...(3) < 2 2 3 > 環己基甘胺酸 <400> 30
第77頁 577897 五、發明說明（74)
Ser Ser Xaa Gin Ser Ser
<210> 31 <211> 6 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 < 2 2 Ο > <2 23〉 完全合成 <221> MOD_RES <222> (1)...(1) <223> 4Hyp <400> 31
Pro Ser Ser Tyr Gin Ser 1 5
<21 0> 3 2 <211〉 6 <212〉 PRT < 2 1 3 > 人造序列 < 2 2 0〉 < 22 3〉 完全合成 <221> M〇D„RES <222> (1)...(1)
第78頁 577897 五、發明說明（75) <223> 4Hyp <221 > 變異株 <222> (4)...(4) <223〉環己基甘胺酸 <400> 32
Pro Se r Ser Xa a Gin Ser 1 5
<210> 33 < 2 1 1 > 6 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 <2 2 0 > <22 3〉 完全合成 <400> 33 A I a Ser Tyr G1n Ser Ser 1 5
<210〉 34 <21 1 > 6 <212〉 PRT
< 2 ] 3 > 人造序列 < 2 2 0〉 <223〉 完全合成
第79頁 577897 I五、發明說明（76) < 2 2 1 > 變異株 <222> (3)...(3) <223〉環己基甘胺酸 <400> 34
Aia Ser Xaa Gin Ser Ser 1 5
<210> 35 <211〉 6 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 < 22 0〉 < 2 2 3〉 完全合成 <400> 35
Ala Ser Tyr Gin Ser Ala 1 5
<21 0> 3 6 < 2 1 1 > 6 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 < 2 2 0 > <22 3〉 完全合成 <221 > 變異株
第80頁 i 577897 五、發明說明（77) <222〉 （3)···(3) <223〉環己基甘胺酸 <400> 36
Ala Ser Xaa Gin Ser Ala 1 5
<210> 37 < 2 1 1 > 6 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 <22 0 >
<223〉 完全合成 <221> MOD.RES < 2 2 2 > (1 )…（1 ) <223> 4Hyp <400> 37
Pro Ala Ser Tyr Gin Ser <210〉 38
< 2 1 I > 6 <212〉 PRT < 2 1 3 > 人造序列 <22 0〉
577897 五、發明說明（78) < 2 2 3 > 完全合成 <221> MOD.RES <222〉（1 )…（1 ) <223> 4Hyp <221 > 變異株 < 2 2 2 > (4)...(4) <223〉環己基甘胺酸 <400〉 38
Pro Ala Ser Xaa Gin Ser * 1 5
<210> 39 <21 1 > 7 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 < 2 2 0〉 < 2 2 3 > 完全合成 <221〉 變異.株 < 2 2 2 > (3)...(3) < 2 2 3 > 環己基甘胺酸 <400> 39
Ser Ser Xaa Gin Ser Ala Pro 1 5 577897 五、發明說明（79) <210> 40
< 2 1 1 > 7 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 <22 0〉 <223〉 完全合成 <221 >變異株 <222〉（3)· · . (3) <223〉環己基甘胺酸 丨 <400> 40
Ser Ser Xaa Gin Ser Ser Pro 1 5 < 210 > 41
< 2 1 1 > 7 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 < 2 2 0 > < 2 2 3 > 完全合成 <221 >變異株 < 2 2 2 > ( 3 ) · . . ( 3 )
< 2 2 3 > 環己基甘胺酸 <221> M〇D_RES < 2 2 2 > (7)...(7)
第83頁 577897 五、發明說明（80) <223> 4Hyp <400> 41
Pro
Ser Ser Xaa Gin Ser A 1 a 1 5
<210> 42 <211> 7 <212〉 PRT < 2 1 3 > 人造序列 < 2 2 0 > <22 3〉 完全合成 <221 > 變異株 <22 2〉（3) ... (3 ) < 2 2 3 > 環己基甘胺酸 <221> MOD._RES <222> (7)...(7) <223> 4Hyp <400> 42
Pro
Ser Ser Xaa Gin Ser Ser 1 5
<210〉 43 < 2 1 1 > 7 <212> PRT 577897 五、發明說明（81) < 2 1 3 > 人造序列 <22 0 >
<223〉 完全合成 <221> MOD_RES < 2 2 2 > (1),..(1) <223〉 Abu <221 > 變異株 <222> (4)...(4) < 2 2 3 > 環己基甘胺酸 * <400> 43
Ala Ser Ser Xaa Gin Ser Pro 15
<210> 44 <211> 7 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 < 2 2 0〉 <2 2 3〉 完全合成 <221〉 M〇D_RES <22 2 > (1). . . (1 ) < 2 2 3 > Abu <221 > 變異株 < 2 2 2 > (4)...(4)
第85頁 577897 五、發明說明（82) <223〉環己基甘胺酸 <221〉 MOD_RES <222> (7)...(7) <223> 4Hyp <400> 44
Ala Ser Ser Xaa Gin Ser Pro 1 5 <210> 45 *
< 2 1 1 > 8 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 <22 0〉 <2 23〉 完全合成 <221 >變異株 <222> (4)...(4) < 2 2 3 > 環己基甘胺酸 <400〉 45
Ser Ser Ser Xaa Gin Ser Leu Pro
<210> 46 < 2 1 1 > 8 <212〉 PRT 577897 五、發明說明（83) < 2 1 3 > 人造序列 <22 0 > <223〉 完全合成 <221 >變異株 < 2 2 2 > (4)...(4) < 2 2 3 > 環己基甘胺酸 <400> 46
Ser Ser Ser Xaa Gin Ser Val Pro 1 5 * <210〉 47 '
< 2 1 1 > 8 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 < 2 2 0 > < 2 2 3 > 完全合成 <221 >變異株 < 2 2 2 > ( 4 ) · · · ( 4 ) < 2 2 3 > 環己基甘胺酸
< 2 21> M0D.RES < 2 2 2 > (8)...(8) < 2 2 3 > 4Hyp
苐87頁 577897
第88頁 577897 五、發明說明（85) <223〉N.曱基絲胺酸 <221 > 變異株 < 2 2 2 > (4)...(4) <2 23〉環己基甘胺酸 <221 > 變異株 <222〉（8)· · · (8) < 2 2 3 > D比啶曱酸 <400> 49
Xaa Ser Ser Xaa Gin Ser Leu Xaa 1 5
<210〉 50 < 2 1 1 > 8 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 <22 0〉 <223〉 完全合成 < 2 2 1 > 曱基化 <222> (1)...(1) < 2 2 3 > N -曱基絲胺酸 < 2 2 1 > 變異株 < 2 2 2 > (4)...(4) < 2 2 3 > 環己基甘胺酸 <221 > 變異株 577897 五、發明說明（86) <222〉 （8)…（8) <223〉 π比啶曱酸 <400> 50
Xaa Ser Ser Xaa Gin Ser Val Xaa 1 δ <210> 51 * <211> 8 * <212> PRT ^ < 2 1 3 >人造序列 |9 < 2 2 0 > 1 < 22 3〉 完全合成 j <221〉 MOD RES ] 一 i <222> (1)...(1) ] <223> 4Hyp ] <400> 51 j
Pro Ser Ser Tyr Gin Ser Ser Pro | 1 5 i
<210〉 52 <211> 8 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 < 2 2 0〉 577897 五、發明說明（87) <223〉 完全合成 <221> MOD.RES < 2 2 2 > (1)...(1) <223> 4Hyp <22l> MOD.RES <222> (8)...(8) <223> 4Hyp <400> 52
Pro
Pro Ser Ser Tyr Gin Ser Ser 1 5
<210> 53 <211> 8 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 <22 0 >
<22 3〉 完全合成 <221> M0D_RES < 2 2 2 > (1)...(1) <223> 4Hyp <400> 53
Pro
Pro Ser Ser Tyr Gin Ser Ser 5 577897 五、發明說明（88) <210〉 54
<211> 8 I <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 <22 0 > <223〉 完全合成 <221〉 MOD RES ' — ! <222> (1)...(1) h <223〉 4Hyp 1 <400〉 54 ·
Pro Ser Ser Tyr Gin Ser Ser Ser 1 5 <210> 55 <211> 7 <212〉 PRT < 2 1 3 > 人造序列 <2 2 0〉
<223〉 完全合成 <221> MOD RES <222> (1)...(1) <223> 4Hyp <221〉 M0D_RES <222> (8)...(8)
第92頁 577897 I五、發明說明（89) <223> 4Hyp < 4 0 0 > 5 5
Pro Ser Ser Tyr Gin Ser Pro 1 5 <21 0> 56
< 2 1 1 > 7 <212〉 PRT < 2 1 3 > 人造序列 · <22 0 >
<22 3〉 完全合成 <221> M0D_RES < 2 2 2 > (1)...(1) <223> 4Hyp <221 >變異株 < 2 2 2 > ( 4 ) · · · ( 4 ) < 2 2 3 > 環己基甘胺酸 <400> 56 i
Pro Ser Ser Xaa Gin Ser Pro 1 5
<21 0> 5 7 <211> 8 <：212> PRT 577897 五、發明說明（90) < 2 1 3 > 人造序列 <22 0 > <2 2 3〉完全合成 <221> MOD_RES <222> (1)...(1) <223> 4Hyp <221 > 變異株 <22 2〉（4)· · · (4) <223〉環己基甘胺酸 ‘ <400> 57
Pro Ser Ser Xaa Gin Ser Ser Pro 1 5 <210〉 58
< 2 1 1 > 7 <212〉 PRT < 2 1 3 > 人造序列 < 2 2 0〉 <22 3〉 完全合成 <22l> M0D_RES < 2 2 2 > ( 1 ) . . . ( 1 ) < 2 2 3 > 4 H y p <221 >變異株 <2 2 2〉（4)· · . (4) 577897 五、發明說明（91) <223〉環己基甘胺酸 <400〉 58
Pro Ser Ser Xaa Gin Ser Leu 1 5
<210> 59 <211> 7 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 ‘ < 2 2 0 > <223〉 完全合成 <221> MOD.RES <222> (1)...(1) <223> 4Hyp <221 > 變異株 <22 2〉（4)··· (4) 〈2 2 3 > 環己基甘胺酸 < 4 0 0 > 5 9
Pro Ser Ser Xaa Gin Ser Val 1 5
< 2 1 0 > 60 < 2 1 1 > δ < 2 1 2 > PRT
I 第95頁 577897 五、發明說明 (92) <21 3> < 2 2 0 > 人造序列 <22 3 > 完全合成 <221 > M0D_RES <22 2 > (1)...(1) <22 3 > 4Hy ρ 1 < 2 2 1 > 變異株 <22 2 > (4)...(4) <22 3 > 環己基甘胺酸 1 <40 0 > 60 Pro Ala Ser Xaa Gin Ser Val Pro 1 5 ! ί I ! <210> < 2 1 1 > 61 8 <212> PRT <21 3> < 2 2 0 > 人造序列 1 <223> 完全合成 < 2 2 1 > MOD RES ! — i < 2 2 2 > (1)...(1) < 2 2 3 > 4Hy p < 2 2 1 > 變異株 | <22 2 > (4)...(4) 丨 577897 五、發明說明（93) <223〉環己基甘胺酸 <221 > 變異株 <222〉（8). · · (8) <223〉吡啶曱酸 <400> 61
ProAla Ser Xaa Gin Ser Ser Xaa 1 5 <210> 62 *
< 2 1 1 > 6 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 < 2 2 0〉 <22 3〉 完全合成 <221〉 M0D_RES < 2 2 2 > (1 )…（1 ) <223> 4Hyp <221 > 變異株 < 2 2 2 > (4)...(4) < 2 2 3 > 環己基甘胺酸 <400> 62
Pro Ser Ser Xaa Gin Ser
第97頁 577897 五、發明說明（94) <21 0> 63 <211> 7
<212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 < 2 2 0 > <223〉 完全合成 <221> MOD.RES <222〉（1)…（1 ) <223> 4Hyp 1 <221 >變異株 <222〉（4)· . · (4) < 2 2 3 > 環己基甘胺酸 <400> 63
Pro Ser Ser Xaa Gin Ser Gly I·
<210〉 64 < 2 1 1 > 6 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 < 22 0〉 < 22 3〉 完全合成 <221 >變異株 < 2 2 2 > (3)...(3)
第98頁 577897 五、發明說明（95) <223〉環己基甘胺酸 <400> 64 \ Ser Ser Xaa Gin Ser Gly 1 5
<210> 65 <211> 7 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 ‘ <22 0〉 <223〉 完全合成 <221 > 變異株 <22 2 > ⑴…（1 )
< 2 2 3 > 3 -吡啶基丙胺酸 <221〉MOD.—RES < 2 2 2 > ( 7 )…（7 ) <223〉 4Hyp <400> 65
Xaa Ser Ser Tyr Gin Ser Pro 1 5
<21 0> 6 6 <211> 7 <212> PRT
第99頁 577897 五、發明說明（96) < 2 1 3 > 人造序列 <22 0 > <223〉 完全合成 <221 > 變異株 <222> (1)...(1) < 2 2 3 > 3 -吡啶基丙胺酸 <221 >變異株 <222> (4)...(4) <223〉環己基甘胺酸 ‘
<400> 66
Xaa Ser Ser Xaa Gin Ser Pro i 5 <210> 67 <211> 8
<212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 < 2 2 0 > < 2 2 3 > 完全合成 <221 > 變異株 < 2 2 2 > (1)...(1) < 2 2 3 > 3，4 -二羥脯胺酸 <400〉 67
第丨00頁 577897 五、發明說明（97)
Xaa Ser Ser Tyr Gin Ser Ser Pro 1 5 <210> 68 <211> 8 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 <22 0 > <22 3〉 完全合成 ‘ <221 > 變異株 <222> (1)...(1) <223〉3,4 -二羥脯胺酸 <221> M0D_RES <222> (8)...(8) <223> 4Hyp <400> 68
Xaa Ser Ser Tyr Gin Ser Ser Pro 1 5 <210> 69
< 2 1 1 > 7 <212〉 PRT < 2 1 3 > 人造序列 < 2 2 0〉
577897 五、發明說明（98) <22 3〉 完全合成 <221〉變異株 <222> (1)...(1) <223〉 同精胺酸 <221 > 變異株 <222> (4)...(4) <223〉環己基甘胺酸 <400> 69
Xaa Ser Ala Xaa Gin Ser Leu 1 5
<210> 70 <211> 7 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 <2 2 0 > <2 2 3〉 完全合成 <221 >變異株 <22 2〉（1 )· . . (1 )
<223〉 同精胺酸 <221〉 MOD—RES < 2 2 2 > (3)...(3) <223> 4Hyp <221 > 變異株
苐102頁 577897
第103頁 577897 五、發明說明（100)
<212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 < 2 2 0 > <223〉 完全合成 <400> 72
Asn Arg lie Ser Tyr Gin Ser 1 5 <210> 73 ·
< 2 1 1 > 7 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 < 2 2 0 > <2 2 3〉 完全合成 <400> 73
Asn Lys Val Ser Tyr Gin Ser 1 5 <210> 74 < 2 1 1 > 1 0 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 <2 2 0 > <2 2 3〉 完全合成 577897
第105頁 577897 五、發明說明（102)
<210> 77 <211> 8 <212〉 PRT < 2 1 3 > 人造序列 <22 0〉 <223〉 完全合成 <400> 77
Gin Lys lie Ser Tyr Gin Ser Ser 1 5 ·
<210〉 78 <211> 7 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 <22 0 >
<22 3〉 完全合成 <221> MOD_RES < 2 2 2 > ( 2 )…（2 ) <22 3 > 4Hyp <400> 78
Asn Pro lie Ser Tyr Gin Ser 1 5
第106頁 577897 五、發明說明（103) <211> 7 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 <220 > <223〉完全合成 <221> MOD_RES <222 > (2). . . (2) <223 > 4Hyp <400> 79
577897 五、發明說明（104)
<210> 81 <211> 7 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 <22 0 > <223〉 完全合成 <221 >變異株 <222> (1)...(1) · < 2 2 3 > 3，4 -二羥脯胺酸 <400> 81
Xaa Ala Ser Tyr Gin Ser Ser 1 5
<210> 82 <211〉 5 <212〉 PRT < 2 1 3 > 人造序列 < 2 2 0〉 <2 2 3〉 完全合成 <221〉 M〇D_RES < 2 2 2 > (1 ) · . . (1 ) <223> 3Hyp <221 > 變異株
豢 577897 五、發明說明（105) <222〉（3)· · · (3) <223〉環己基甘胺酸 <400> 82
Pro Ser Xaa Gin Ser 1 5 <210> 83 <211> 7 <212> PRT - < 2 1 3 > 人造序列 < 2 2 0 > <22 3〉 完全合成 <221> M0D.RES < 2 2 2 > (1)...(1) <223> 4Hyp <221 > 變異株 <22 2〉（4)· · · (4) < 2 2 3 > 環己基甘胺酸 <400> 83
Pro Ala Ser Xaa Gin Ser Ser <210〉 84 <211> 8
第109頁 577897 五、發明說明（106)
<212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 <220 > <2 2 3〉完全合成 < 2 2 1 > 乙醯化 <222> (1)...(1) <223〉N-乙醯基-4-反-L-羥脯胺酸 < 2 2 1 > 變異株 <222> (4)...(4) * <223〉環己基甘胺酸 <400> 84
Xaa Ser Ser Xaa Gin Ser Ser Pro 1 5
<210> 85 <211> 7 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 < 2 2 0 > <22 3〉 完全合成 <221 >變異株 < 2 2 2 > (1)...(1) <22 3〉N-乙醯基-4-反-L-羥脯胺酸 <221 >變異株
«
第110頁 577897 五、發明說明（107) <222> (4)...(4) <223 > 環己基甘胺酸 <40 0 > 85 Xaa Ser Ser Xaa Gin Ser Gly 1 5 j <21 0> 86 <21 1 > 8 <212> PRT * <213> <22 0 > 人造序列 <22 3 > 完全合成 <22 1> 變異株 < 2 2 2 > (1)...(1) <22 3 > N-乙醯基-4-反-L-羥脯胺酸 <221 > 變異株 < 2 2 2 > (4)· · · (4) ! ϊ < 2 2 3 > 環己基甘胺酸 丨 j <221〉 MOD一RES <22 2 > (8)...(8) <22 3 > MeG 1 y J 1 <40 0 > 86 ! Xaa Ser Ser Xaa Gin Ser Ser Gly ! 5 577897 五、發明說明（108) ί
<210> 87 <211> 8 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 <2 2 0 > 導 <223〉完全合成 <221 >變異株 · <222> (1)...(1) ‘ j <223〉N-乙醯基-4-反-L-羥脯胺酸 _ <221 >變異株 <222> (4)...(4)
< 2 2 3 > 環己基甘胺酸 I ! <400> 87 丨
Xaa Ser Ser Xaa Gin Ser Ser Pro 1 5
<210〉 88 <211> 7 <212> PRT
第112頁 577897 五、發明說明（109) <222> (1)...(1) <22 3〉N-乙醯基-4_反-L-羥脯胺酸 <221 >變異株 <222〉（4). · · (4) <223〉環己基甘胺酸 <400> 88
Xaa Ser Ser Xaa Gin Ser Val 1 5
<210〉 89 < 2 1 1 > 8 <212〉 PRT < 2 1 3 > 人造序列 <22 0〉 <22 3〉 完全合成 <221 > 變異株 < 2 2 2 > (1)...(1) < 2 23〉N-乙醯基-4-反-L-羥脯胺酸 <221 >變異株 <222> (4)...(4) <223〉環己基甘胺酸 <221 > 變異株 <222> (8)...(8) < 2 2 3〉4 -反-L-經捕胺酸
第113頁 577897 五、發明說明（110) <400〉 89
Xaa Ser Ser Xaa Gin Ser Ser Xaa
<210> 90 <211〉 7 <212〉 PRT < 2 1 3 > 人造序列 <220> 1 <22 3〉 完全合成 < 2 2 1 > 乙醯化 <222> (1)...(1) <22 3〉N-乙醯基-2-胺基丁酸 <221 > 變異株 < 2 2 2 > (4)...(4) <223〉環己基甘胺酸 <400> 90
Xaa Ser Ser Xaa Gin Ser Pro 1 5 <210> 91
< 2 1 1 > 7 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列
苐114頁 577897 五、發明說明（111) <22 0 > <223〉完全合成 <221 >變異株 <222> (1)...(1) <223〉N-羥乙醯基-2-胺基丁酸 <221 >變異株 <222> (4)...(4) <2 2 3〉環己基甘胺酸 <400> 91 *
Xaa Se r Ser Xaa Gin Ser Pro 1 5
<210〉 92 <211> 8 <212〉 PRT < 2 1 3 > 人造序列 < 2 2 0〉 <2 23〉 完全合成 <221 >變異株 < 2 2 2 > (1)...(1) <223〉N-乙醯基-3-吡啶基丙胺酸 <221 > 變異株 < 2 2 2 > (4)...(4) < 2 2 3 > 環己基甘胺酸
第115頁 577897 五、發明說明（112) <400> 92
Xaa Ser Ser Xaa Gin Ser Ser Pro 1 5
<210> 93 <211> 7 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 <220〉 · <2 23〉 完全合成 <221 >變異株 <222> (1)...(1) <223〉N-乙蕴基-4_反-L-經捕胺酸 <221 >變異株 < 2 2 2 > (4)...(4) 〇 <223〉環己基甘胺酸 <400> 93
Xaa Ser Ser Xaa Gin Ser Va 1 <210〉 94
< 2 1 1 > 7 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列
第116頁 577897 五、發明說明（113) < 2 2 0 > <223〉 完全合成 . <221〉變異株 <22 2〉（1)…（1 ) <2 23〉N-乙酿基-4_反-L-經膽胺酸 <221 >變異株 <222> (4)...(4) <223〉環己基甘胺酸 <400> 94 ‘
Xaa Ser Ser Xaa Gin Ser Leu 1 5
<210〉 95 < 2 1 1 > 8 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 <2 2 0 > <22 3〉 完全合成 <221 >變異株 < 2 2 2 > (1)...(1) <22 3〉N-乙醯基-4-反-L-羥脯胺酸 <221>變異株 < 2 2 2 > (4)...(4) < 2 2 3 > 環己基甘胺酸 577897 I五、發明說明（114) <221 > 變異株 <222〉（8). · · (8) <22 3〉4-反-L-羥脯胺酸 <400> 95
Xaa Ser Ser Xaa Gin Ser Ser Xaa 1 5 <210〉 96 <211> 7 *
<212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 <22 0 > C2 23> 完全合成 <221 > 變異株 <222> (1)...(1) <22 3〉N-乙醯基-4-反-L-羥脯胺酸 <221 > 變異株 <222> (4)...(4) < 2 2 3 > 環己基甘胺酸 <400> 96
Xaa Ser Ser Xaa Gin Ser Pro 1 5 <21 0> 9 7
577897 五、發明說明（115)
<211> 7 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 <22 0 > <223〉完全合成 <221〉變異株 <222〉（1 )…（1 ) <22 3〉N-乙醯基-3-吡啶基丙胺酸 <221 > 變異株 · <222〉（4). · · (4) < 2 2 3 > 環己基甘胺酸 <221 >變異株 <222> (6)...(6) 〈2 2 3〉d -絲胺酸 <400> 97
Xaa Ser Ser Xaa Gin Xaa Pro 1 5 <210〉 98 <2II> 6 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 <2 2 0〉 <223〉 完全合成
第119頁 577897
、發明說明 (116) <221 > 乙醯 化 <222 > (1). • . (1 ) <223 > N-曱 基絲胺酸 <221 > 變異 株 < 2 2 2 > (3). • · (3) <22 3 > 環己 基甘胺酸 <40 0 > 98 aa Se r Xaa Gin Ser G 1 1 5 <210> 99 <21 1 > 7 <212> PRT <213> 人造序列 < 2 2 0 > <22 3 > 完全合成 <221 > 乙醯 化 < 2 2 2 > ⑴· ..(1) < 2 2 3 > N-乙 醯基絲胺酸 < 2 2 1 > 變異 株 < 2 2 2 > (3). • · (3) < 22 3 > 環己 基甘胺酸 < 2 2 1 > 變異 株 < 2 2 2 > ⑺· • · (7)
第120頁 577897 五、發明說明（in) <223〉4-反-L-羥脯胺酸 <400> 99
Xaa Ser Xaa Gin Ser Ser Xaa 1 5
<210> 100 <211> 7 <212〉 PR丁 < 2丨3 > 人造序列 ‘ <22 0 > <22 3〉 完全合成 < 2 2 1 > 乙醯化 <2 2 2〉（1 )…（1 ) <22 3〉N-乙醯基絲胺酸 <221 > 變異株 <222> (3)...(3) < 2 2 3 > 環己基甘胺酸 <400> 100 •1
Xaa Ser Xaa Gin Ser Ser Pro I 5 <210> 101
< 2 1 1 > 8 <212〉 PRT
第121頁 577897 五、發明說明（118) < 2 1 3 > 人造序列 <22 0 > <223〉 完全合成 <221 >變異株 <222> (1)...(1) <223〉N-乙醯基-4-反-L-羥脯胺酸 <221 > 變異株 <222> (4)...(4) <223〉環己基甘胺酸 ， <221 >變異株 <22 2 > (7). . . (7) < 2 2 3 > d -絲胺酸 <221 >變異株 < 2 2 2 > (8)...(8) <22 3〉4-反-L-羥脯胺酸 <400> 101 X aa Se r Ser X a a Gin Ser Xaa X aa 1 5
<210〉 102 <211> 7 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 < 2 2 0〉 577897 五、發明說明（119) <2 23〉 完全合成 <221〉變異株 <222> (1)...(1) <22 3〉N-乙醯基-4-反-L-羥脯胺酸 <221 > 變異株 < 2 2 2 > (4)...(4) < 2 2 3 > 環己基甘胺酸 <400> 102
Xaa Ser Ser Xaa Gin Ser Leu 1 5
<210> 103 <211> 7 <212〉 PRT < 2 1 3 > 人造序列 <2 2 0〉 <2 23〉 完全合成 〈221 > 變異株 < 2 2 2 > (1)...(1) <22 3〉N-乙醯基-4-反-L-羥脯胺酸 <221 > 變異株 <222> (4)...(4) < 2 2 3 > 環己基甘胺酸 <400> 103 _
577897 五、發明說明（120)
Xaa Ser Ser Xaa Gin Ser Ala 1 5
<210> 104 <211> 7 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 <22 0 > ： <223〉 完全合成 . <221 > 變異株 <22 2〉（1 )· . . (1 ) <223〉N_乙酿基-4 -反_L -經捕胺酸 <221 >變異株 .< 2 2 2 > (4)...(4) ； < 2 2 3 > 環己基甘胺酸 <221 > 變異株 <222> (7)...(7) < 2 2 3 > 環己基甘胺酸 | <400> 104 \ Xaa Ser Ser Xaa Gin Ser Xaa ! 1 5 <210> 105 <211> 8 577897
第125頁 577897 五、發明說明（122) <222> (1)...(1) < 2 2 3 > N -乙醯基絲胺酸 <221 >變異株 <222> (3)...(3) <223〉環己基甘胺酸 <221 > 變異株 <222〉（8)· · · (8) <223〉4-反-L-羥脯胺酸 <400> 106 ‘
Xaa Ser Xaa Gin Ser Ser Xaa 1 5
<210> 107 <211> 8 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 <2 2 0 > < 2 2 3〉 完全合成 <221 > 變異株 < 2 2 2 > (1)...(1) 、 <22 3〉N-乙醯基-4-反-L-羥脯胺酸 <221 >變異株 <222> (4)...(4) < 2 2 3 > 環己基甘胺酸
第126頁 577897 五、發明說明（123) <400> 107
Xaa Ser Ser Xaa Gin Ser Ser Pro 1 5
<210> 108 <211〉 8 <212〉 PRT
< 2 1 3 > 人造序列 <22 0〉 <223〉 完全合成 < 2 2 1 > 變異株 <222> (1)...(1) <223〉N-乙醯基-胺基丁酸 <221 >變異株 < 2 2 2 > (4)...(4) < 2 2 3 > 環己基甘胺酸 <221 > 變異株 < 2 2 2 > (7)...(7)
〈2 2 3 > d -絲胺酸 <400> 108
Xaa Ser Ser Xaa Gin Ser Xaa Pro 577897 五、發明說明（124) < 2 1 1 > 8 <212> PRT 〈2 1 3 > 人造序列 <2 2 0 > <2 23〉 完全合成 <221 >變異株 < 2 2 2 > (1)...(1) <22 3〉N-乙醯基-2-胺基丁酸 <221 >變異株 ‘ <22 2〉⑷…（4) <22 3〉環己基甘胺酸 <400> 109
Xaa Ser Ser Xaa Gin Ser Ser Pro 1 5 <210> 110 < 2 1 1 > 7 PRT 人造序列 < 2 ! 2 > <21 3> < 2 2 0 > 完全合成 變異株 <222> (1)...(1) < 2 2 3 > N -乙醯基-2 -胺基丁酸
第128頁 <22 3 > <221 > 577897 五、發明說明（125) <221 >變異株 <222> (4)...(4) <223〉環己基甘胺酸 <221 >變異株 <222> (6)...(6) < 2 2 3 > d -絲胺酸 <400〉 110 Xaa Se r Ser Xa a Gin X aa Pro1 5 * <210> 111 <211> 7 <212〉 PR丁 < 2 1 3 > 人造序列 < 2 2 0 > < 2 2 3 > 完全合成 < 2 2 1 > 乙醯化<222> (1)...(1) < 2 2 3 > N -乙醯基絲胺酸 <221 > 變異株<222> (3)...(3)< 2 2 3 > 環己基甘胺酸 <400> 111
苐129頁
577897 !五、發明說明（126)
Xaa Ser Xaa Gin Ser Ser Pro 1 5 <210> 112
< 2 1 1 > 7 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 <22 0〉 <223〉 完全合成 <221 >變異株 <22 2 > ( 1 X. . . (1 ) <22 3〉Ν-乙醯基絲胺酸 <221 >變異株 <222> (3)...(3) < 2 2 3 > 環己基甘胺酸 <221〉矛盾 < 2 2 2〉（6) ... (6 ) < 2 2 3 > d -絲胺酸 <221 >變異株 <222> (7)...(7) < 2 2 3〉4-反-L-羥脯胺酸 <400〉 112
Xaa Ser Xaa Gin Ser Xaa Pro 5 ί. s __________ _____ί 1 1 I I ί i 1 I SI i 1 1 第130頁 577897 五、發明說明（127)
<210> 113 <211> 8 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 <22 0 > <22 3〉 完全合成 <221〉 變異株 <222> (1)...(1) <223〉N-乙醯基-4-反-L-羥脯胺酸 <221 > 變異株 <22 2〉（4).·· (4) < 2 2 3 > 環己基甘胺酸 <221 > 變異株 <222> (6)...(6) < 2 2 3 > d -絲胺酸 <400> 113
Xaa Ser Ser Xaa Gin Xaa Ser Pro 1 5
<21 0> 114 <211> 8 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 < 2 2 0 >
苐131頁 577897 五、發明說明（128) <223〉 完全合成 < 2 2 1 >變異株 <222〉（1)…（1 ) <223〉N-乙醯基-4-反-L-羥脯胺酸 <221 >變異株 <222> (4)...(4) <223〉環己基甘胺酸 <221 >變異株 <222> (5)...(5) * <223〉 d-麩胺 <400> 114
Xaa Ser Ser Xaa Xaa Ser Ser Pro 1 5
<210> 115 <211> 8 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 <22 0〉 <223〉 完全合成 <221 >變異株 <222> (1)...(1) <223〉N-乙醯基-4 -反-L -羥脯胺酸 <221 >變異株
第132頁 577897 五、發明說明（129) <222> (4)...(4) < 2 2 3 > 環己基甘胺酸 <221 > 變異株 <222> (5)...(5) <223〉 d-麩胺 <221 > 變異株 <222> (6)...(6) <223〉d-絲胺酸 <400> 115 ‘
Xaa Ser Ser Xaa Xaa Xaa Ser Pro 1 5
<210> 116 <211> 6 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 <22 0 > <223〉 完全合成 <221 > 變異株 <222> (1)...(1) <22 3〉N-乙醯基絲胺酸 <221 > 變異株 < 2 2 2 > (2)...(2) < 2 2 3 > 環己基甘胺酸
第133頁 577897 五、發明說明（130) <400〉 116
Xaa Xaa Gin Ser Ser Pro 1 5
<210> 117 <21 1 > 6 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 <22 0 > <223〉 完全合成 <221 > 變異株 < 2 2 2 > (1 )…⑴ <22 3〉N-乙醯基絲胺酸 <221 > 變異株 < 2 2 2 > (2)...(2) < 2 2 3 > 環己基甘胺酸 <221 > 變異株 <222> (6)...(6) <22 3〉4-反-L-羥脯胺酸 <400> 117 aa Xaa Gin Ser Ser Xaa 1 5
第134頁 577897 I五、發明說明（131)
<21 0> 118 <211> 6 <212> PRT
< 2 1 3 > 人造序歹丨J < 2 2 0 > <22 3〉完全合成 < 2 2 1 > 變異株 <222> (1)...(1) <22 3〉N-乙醯基絲胺酸 < 2 2 1 >變異株 < 2 2 2 > (2)...(2) I < 2 2 3〉環己基甘胺酸 <221〉 MOD_RES <222> (6)...(6) <223> MeGly <400〉 118 I X a a X a a Gin Se r Se r G 1 y ! 1 5
<210> 119 <21 1> 7 <2i2> PRT < 2 1 3 > 人造序列 < 2 2 0 >
第135頁 577897 五、發明說明（132) <223〉 完全合成 <221 > 變異株 < 2 2 2 > (1)...(1) <223 > N-乙醯基絲胺酸 <221 > 變異株 <222> (2)...(2) < 2 2 3 > 環己基甘胺酸 <221〉 MOD_RES *
<22 2〉（6)…（6 ) <223〉 Aib <400> 119
Xaa Xaa Gin Ser Ser Ala Pro 1 5
<2i0> 120 <211> 6 <2!2> PRT
< 2 1 3 > 人造序列 < 2 2 0 > <22 3〉 完全合成 <221 > 變異株 < 2 2 2 > (1)...(1) < 2 2 3〉N -乙酸基絲胺酸 577897 五、發明說明（133) <221 >變異株 <222> (2)...(2) <223〉環己基甘胺酸 <221 > 變異株 <222> (6)...(6) <22 3〉N-曱基-丙胺酸 <400> 120
Xaa X a a Gin Ser Ser Xaa 1 5 <210> 121 I <211> 6
<212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 < 2 2 0 > <2 23〉 完全合成 j <221> 變異株 I < 2 2 2 > (1)...(1) < 2 2 3 > N -乙醯基絲胺酸 <221 >變異株 <222〉（2) ... (2 )
< 2 2 3 > 環己基甘胺酸 <221> MOD_RES ! < 2 2 2 > (5)...(5)
577897 五、發明說明（134) <223〉 Aib <400> 121
Xaa Xaa Gin Ser Ala Pro 1 5
<210> 122 <211> 6 <212> PRT < 2 i 3 > 人造序列 <22 0 > <223〉 完全合成 <221 >變異株 <222> (1)...(1) < 2 2 3 > N -羥乙醯基絲胺酸 <221 >變異株 <22 2〉（2) ... (2 )
< 2 2 3 > 環己基甘胺酸 <221> M0D_RES < 2 2 2 > (6)...(6) <223> MeGly <400> 122
Xaa Xaa Gin Ser Ser Gly 1 5 !
I
第138頁 577897 I五、發明說明（135)
<210> 123 <211〉 6 <212> PRT < 2 1 3 > 人造序列 I <220〉 <223〉 完全合成 <221 > 變異株 <22 2〉（1 )…（1 ) < 2 2 3 > N -乙醯基絲胺酸 <221 >變異株 j < 2 2 2 > (2)...(2) < 2 2 3 > 環己基甘胺酸 <221 >變異株 <222〉 （6)…（6) < 2 2 3 > π比啶曱酸 | <400〉 123 I X a a X a a Gin Se r Se r X a a i 5 <21 0> 124
! I
< 2 1 1 > 8 <212〉 PRT
第139頁 577897 五、發明說明（136) i <223〉完全合成 i j <221>變異株 <222> (1)...(1) 〈223 > N-乙醯基-4-反-L-羥脯胺酸 < 2 2 1 >變異株 <222〉⑷…（4) ! <223〉環己基甘胺酸 | <221>變異株 I <222〉 （8),··(8) *
I ! < 2 2 3 > D比啶曱酸 <400〉 124
Xaa Se r Ser Xa a Gin S er Ser Xaa ! 1 5 ! i j <210> 125 I < 2 1 1 > 6
J <212> PRT I < 2 1 3 > 人造序列 j / ] < 2 2 0 > j <223〉 完全合成 < 2 2 1 >變異株 < 2 2 2 > ( 1 ) , · · (1) j <223〉Ν-乙醯基絲胺酸 I <221 >變異株
第140頁 577897 五、發明說明（137) <222> (2)...(2) <223〉環己基甘胺酸 <221〉變異株 〈222> (6)···(6) <22 3 > N-曱基-d-丙胺酸 <400〉 125
Xaa Xaa Gin Ser Ser Xaa 5

Claims (2)

  1. O:\56\56072-920603.ptc 第143頁 577897 _案號87119985 砰>年U月 日__ 六、申請專利範圍 Ac-4 -反-L-Hyp-Ser-Ser-Chg-Gin-SerVal ;(序列識 別編號：8 8 ) Ac-4-反-L-Hyp-Ser-Ser-Chg-Gln-Ser-Ser-4-反 -L - H y p ; (序列識別編號：8 9 ) Ac-Abu-Ser-Ser-Chg-Gln-Ser-Pro ;(序列識別編 號：9 0 ) 經乙醯基Abu-Ser-Ser-Chg-Gln-Ser-Pro ;(序列識 別編號：9 1 ) 乙酸基3-PALSer-Ser-Chg-Gln_Ser-Ser-Pro ;(序列 識別編號：9 2 ) Ac--4-反-L-Hyp-Ser-Ser-Chg-Gin-Ser-Val ;(序列 識別編號：9 3 ) Ac--4-反-L-Hyp-Ser-Ser-Chg-Gin-Ser-Leu ;(序列 識別編號：9 4 ) Ac-4-反-L-HypSerSerChgG1nSerSer4-反-L-Hyp ; (序列識別編號：9 5 ) Ac-4 -反-L- HypSerSerChgGlnSerPro ;(序列識別編 號：9 6 ) Ac-SerSerChgGlnSerGly ;(序列識別編號：98) Ac-SerSerChgGlnSerSer- 4-反 -L- Hyp ;(序列識別編 號：9 9 ) Ac-SerSerChgGlnSerSerPro ;(序列識別編號·· 100) Ac-4-反-L- HypSerSerChgGlnSerAla ;(序列識別編 號：1 0 3 )
    O:\56\56072-920603.ptc 第144頁 577897 __案號 8Ή19985_W月 曰_修正 _ 六、申請專利範圍 八〇-4-反4-1^086『361'(：1^〇1113 61'(：1^;(序列識別編 號·· 1 0 4 ) Ac- 4-反-L-HypSerSerChgGlnSerSerSar ;(序列識別 編號：1 0 5 ) Ac-SerSerChgGlnSerSerHyp ;(序列識別編號：106) Ac-4-反 -L-HypSerSerChgGlnSerSerPro ;(序列識別 編號：1 0 7 ) Ac-AbuSerSerChgGlnSer(dSer)Pro ;(序列識別編 號：1 0 8 ) Ac-AbuSerSerChgGlnSerSerPro ;(序列識別編號： 109) Ac-SerSerChgGlnSerSerPro ;(序列識另丨J 編號：111) Ac-4—反一L-HypSerSerChg(dGln)SerSerPro ;(序歹J 識別編號：1 1 4 ) Ac-4-反-L-HypSerSerChg(dGln)(dSer)SerPro ;(序 列識別編號：1 1 5 ) Ac-SerChgGln-SerSerPro ;(序列識別編號：116) Ac-SerChgGlnSerSer-4-反 _L_Hyp ;(序列識別編 號：1 1 7 ) Ac--SerChgGlnSerSerSar ;(序列識別編號：118) Ac-SerChgGlnSerSerAibPro ;(序列識另丨J 編號：119) Ac-SerChgGlnSerSerN-Me-Ala ;(序列識別編號： 120) Ac-4 -反 -L-HypSerSerChgGlnSerSerPip ;(序列識別
    O:\56\56072-920603.ptc 第145頁 577897 修正 序列識別編號： __案號 87119985 W 曰― 日 六、申請專利範圍 編號：1 2 4 )及 Ac-SerChgGlnSerSerN-Me〜dA· 125) ’ 其中Abu為胺基丁酸，4-反、經脯胺 酸，P1P為吡唆甲酸，3,4-DiHyp為3,4_二經脯胺酸， 胺酸及Chg為環己基甘
  2. 3 - PAL為3 -吼°定基丙胺酸，Sar為肌 胺酸； L係一鍵； 或其醫藥上可接受之鹽或其光學異構物。 2 ·如申請專利範圍第1項之共軛物，其係選自
    0H
    其車X為
    Η
    Ac-4-^-L-Hyp-Ser-Ser-Chg-Gln-Ser-Ser-N (序列識別編號：84) J端
    O:\56\56072-920603.ptc 第146頁 577897 案號87119985 u月 日 修正 六、申請專利範圍 Ac-4-^-L-Hyp-Ser-Ser-Chg-Gln-Ser (序列識別編號：85) / C端 CH〇 0 I ° II Ac_4_ 反-L-Hyp-Ser-Ser-Chg-Gln-SerSer/N、 (序列識別編號：86) / C端 Ac-4-反 “Hyp-Ser-Se 卜 Chg*<3 In-Ser-Se 卜 N (序列識別編號：87) f
    C端 Ac«4-反丄-Hyp-Ser-Ser-Chg-GIn-Ser^al (序列識別編號：8勢. C端
    Ac-4-反-L-HyphSer-Ser-Chg-G ln-Ser-Ser-N
    H^l >-〇H C端 (序列識別編號：89) Bii 第147頁 O:\56\56072-920603.ptc 577897 案號 87119985 V月 曰 修正 六、申請專利範圍
    Η Ac-Abu-Ser-Ser-Chg-GIn-Ser-N
    (序列識別編號：90) C端 〇
    Η HO、 Abu-Ser-Ser-Chg-Gin-Ser-N (序.列識別編號：91)
    C端 AcHN Λ,
    Η Ser-Ser-Chg-GIn-Ser-Ser-N / c端
    (序列識別編號：92) Ac-4-反七-Hyp-Ser-Ser-Chg*Gln-Ser-Val
    或 ch3 (序列識別編號·· 93} C端 Ac-4-反-L_Hyp-Ser-Ser-Chg-GlrvSer-Leu / 〇 O
    CH3 (序'列纖H鑒：94) C嬝 ΙΒΒ O:\56\56072-920603.ptc 第148頁 577897 修正 _案號 87119985 六、申請專利範圍 或其醫藥上可接受之鹽或其光學異構物 3 .如申請專利範圍第2項之共軛物，其為··
    或其醫藥上可接受之鹽或其光學異構物。 4. 一種用於治療前列腺癌或良性前列腺肥大之醫藥組合 物，其包含醫藥載劑及分散於其中之治療有效量之如申請 專利範圍第1項之共軛物。 5. —種用於治療前列腺癌或良性前列腺肥大之醫藥組合 物，其包含醫藥載劑及分散於其中之治療有效量之如申請 專利範圍第2項之共軛物。
    O:\56\56072-920603.ptc 第149頁 577897
    O:\56\56072-920603.ptc
    第150頁
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Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PT1144011E (pt) * 1998-12-11 2010-06-16 Coulter Pharm Inc Compostos pró-fármacos e processo para a sua preparação
GB9924759D0 (en) 1999-10-19 1999-12-22 Merck Sharp & Dohme Process for preparing peptide intermediates
US7842581B2 (en) 2003-03-27 2010-11-30 Samsung Electronics Co., Ltd. Methods of forming metal layers using oxygen gas as a reaction source and methods of fabricating capacitors using such metal layers
EP4464384A3 (en) 2007-08-17 2025-01-08 Purdue Research Foundation Psma binding ligand-linker conjugates and methods for using
US9951324B2 (en) 2010-02-25 2018-04-24 Purdue Research Foundation PSMA binding ligand-linker conjugates and methods for using
JP6370785B2 (ja) * 2012-08-15 2018-08-08 ビセン メディカル， インコーポレイテッド 前立腺がんイメージングのための前立腺特異的抗原薬剤およびその使用方法
AU2013341711A1 (en) * 2012-11-12 2015-05-21 Redwood Bioscience, Inc. Compounds and methods for producing a conjugate
BR112015011118B1 (pt) 2012-11-15 2022-12-13 Endocyte, Inc Conjugado; composição farmacêutica; e uso de um conjugado
EP2992531B1 (en) 2013-04-30 2019-06-19 Hewlett-Packard Enterprise Development LP Memory access rate
LT4095130T (lt) 2013-10-18 2024-04-25 Novartis Ag Žymėti prostatos specifinio membranos antigeno (psma) inhibitoriai, jų naudojimas kaip vizualizavimo medžiagų ir farmacinių medžiagų prostatos vėžiui gydyti
BR112016010927A2 (pt) 2013-11-14 2017-08-08 Endocyte Inc Conjugado de fórmula
US10188759B2 (en) 2015-01-07 2019-01-29 Endocyte, Inc. Conjugates for imaging
US12208102B2 (en) 2018-04-17 2025-01-28 Endocyte, Inc. Methods of treating cancer
CN114096264B (zh) 2019-05-20 2025-03-14 因多塞特股份有限公司 制备psma缀合物的方法
CA3203072A1 (en) 2020-12-22 2022-06-30 Andrea CASAZZA Compounds comprising a tetrapeptidic moiety
WO2022167664A1 (en) 2021-02-07 2022-08-11 Cobiores Nv Compounds comprising a tetrapeptidic moiety

Family Cites Families (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4203898A (en) * 1977-08-29 1980-05-20 Eli Lilly And Company Amide derivatives of VLB, leurosidine, leurocristine and related dimeric alkaloids
US4296105A (en) * 1978-08-03 1981-10-20 Institut International De Pathologie Cellulaire Et Moleculaire Derivatives of doxorubicine, their preparation and use
US4719312A (en) * 1978-10-02 1988-01-12 Merck & Co., Inc. Lysosometropic detergent therapeutic agents
US4376765A (en) * 1980-03-31 1983-03-15 Institut International De Pathologie Cellulaire Et Moleculaire Medicaments, their preparation and compositions containing same
US4639456A (en) * 1980-06-10 1987-01-27 Omnichem S.A. Vinblastin-23-oyl amino acid derivatives
ATE64396T1 (de) * 1983-04-29 1991-06-15 Omnichem Sa Konjugierte vinblastin-verbindungen und ihre derivate, verfahren zu ihrer herstellung und diese enthaltende pharmazeutische zusammensetzungen.
FR2546163B1 (fr) * 1983-05-16 1987-10-09 Centre Nat Rech Scient Nouveaux derives acyles hydrosolubles de peptides ou d'amino-acides, leur preparation et leur application
FR2626882B1 (fr) * 1988-02-08 1991-11-08 Ire Celltarg Sa Conjugues de derives de vinca comportant une chaine detergente en position c-3
US5391723A (en) * 1989-05-31 1995-02-21 Neorx Corporation Oligonucleotide conjugates
EP0647450A1 (en) * 1993-09-09 1995-04-12 BEHRINGWERKE Aktiengesellschaft Improved prodrugs for enzyme mediated activation
US5866679A (en) * 1994-06-28 1999-02-02 Merck & Co., Inc. Peptides
US6143864A (en) * 1994-06-28 2000-11-07 Merck & Co., Inc. Peptides
US5599686A (en) * 1994-06-28 1997-02-04 Merck & Co., Inc. Peptides
AU708475B2 (en) * 1995-10-18 1999-08-05 Merck & Co., Inc. Conjugates useful in the treatment of benign prostatic hyperplasia
WO1998010651A1 (en) * 1996-09-12 1998-03-19 Merck & Co., Inc. Conjugates useful in the treatment of prostate cancer
US5998362A (en) * 1996-09-12 1999-12-07 Merck & Co., Inc. Conjugates useful in the treatment of prostate cancer
HRP970566A2 (en) * 1996-10-30 1998-08-31 Jones Deborah Defeo Conjugates useful in the treatment of prostate canser

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