WO1991008199A1

WO1991008199A1 - Derive d'acide amine

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Publication number: WO1991008199A1
Application number: PCT/JP1990/001515
Authority: WO
Inventors: Takakazu Morita; Shiro Mita; Yoichi Kawashima
Original assignee: Santen Pharmaceutical Co Ltd
Current assignee: Santen Pharmaceutical Co Ltd
Priority date: 1989-11-27
Filing date: 1990-11-21
Publication date: 1991-06-13
Anticipated expiration: 1992-05-27
Also published as: KR950001634B1; US5214181A; AU6733190A; ES2074257T3; KR920701144A; DE69018816D1; EP0455833A1; DE69018816T2; EP0455833A4; EP0455833B1

Description

明細書発明の名称アミノ酸誘導体技術分野

本発明は免疫不全ゃ自己免疫疾患等、種々の免疫異常に起因する疾患の治療剤として有用な新規化合物を提供するものである。背景技術

近年、種々の免疫異常に起因する疾患や、抗癌剤の副作用等による免疫能の低下に関する研究が盛んになつており、その治療剤についての研究も数多くなされている。胸腺で産生されるサイムリンは、 9個のアミノ酸で構成されるペプチドで、亜鉛とコンブレックスを形成して、低下した免疫機能を回復させる作用を示すことが知られており、免疫不全や自己免疫性疾患に有効な薬物となる可能性が示唆されている。しかしながら、まだ不明な点も多く、特にサイムリン様活性を示す合成化合物についての研究は、ほとんどなされていない。

サイムリンは胸腺で産生される微量物質であり、また、生体成分であるため、生体内にある分解酵素により分解されやすく、臨床の場に応用するには問題も多い。そこで、本発明者等は、サイムリンの効果発現機序に着目し、硫黄原子を含む種々のアミノ酸誘導体を合成し、そのサイムリン様活性を調べた。発明の開示本発明は下記一般式 [ I ] で表わされる化合物およびその塩類に関する。

R ¹ - S - A - C O N H

[式中、 R ¹ および R ² は同一かまたは異なって、水素原子、低級アルキル基、低級アルカノィル基、フヱニルカルボニル基、フエニル低級アルキル基またはフエニル低級アルコキシ力ルポニル基を示し、フエニルカルボニル基、フエニル低級アルキル基およびフェニル低級アルコキシカルポニル基のフェニル璟は低級アルキル基、ヒドロキシ基、低級アルコキシ基またはハロゲン原子で置換されていてもよい。

R ³ はヒドロキシ基、低級アルコキシ基、アミノ基または低級ァルキルアミノ基を示す。

5

R ⁴ はヒドロキシ基、 - N、または一 C 0 R ⁷ を示す。

、R ⁶

R ⁵ および R ⁶ は同一かまたは異なって、水素原子、低級アルキル基、低級アルカノィル基、低級アルコキシカルボニル基、フエニルカルボニル基、フエニル低級アルキル基、フエニル低級アルコキシカルボニル基または— C 0 C H N H C 0— A— S R ¹ を示

B - S - R ²

し、フエニルカルボニル基、フエニル低級アルキル基およびフエニル低級アルコキシカルボニル基のフヱニル璟は低級アルキル基、ヒドロキシ基、低級アルコキシ基またはハロゲン原子で置換されていてもよい。 R ⁷ は R ³ と同義。

A、 Bおよび Xは同一かまたは異なって、直鎖または分枝の低級アルキレン基を示す。

mは 0 または 1 を示す。以下同じ。 ]

上記で規定したグループをさらに詳しく説明すると、低級アルキル基とは、メチル、ェチル、ブロピル、へキシル、イソブロピル、 t一ブチル等の 1〜 6個の炭素原子を有する直鎖または分枝のアルキルを示し、低級アルカノィルとは、ァセチル、プロピオニル、へキサノィル、イソブピオニル、 tーブタノィル等の 2〜 6個の炭素原子を有する直鎖または分枝のアルカノィルを示し、低級アルコキシとは、メトキシ、エトキシ、ブロポキシ、へキシルォキシ、ィソブロボキシ、 t一ブトキシ等の 1 〜 6個の炭素原子を有する直鎖または分枝のアルコキシを示す。ハロゲン原子とはフッ素、塩素、臭素、ョゥ素を示す。

塩類とは、医薬として許容される有機または無機の酸および塩基との塩類を示し、例として、塩酸塩、臭化水素酸塩、硫酸塩、リン酸塩、乳酸塩、マレイン酸塩、フマル酸塩、シユウ酸塩、メタンスルホン酸塩、 P— トルエンスルホン酸塩、ナトリウム塩、カリウム塩、カルシウム塩、マグネシウム塩、亜鉛塩、アンモニゥム塩、卜リエタノ一ルァミン塩、ジシクロへキシルァミン塩等が挙げられる

本発明化合物は以下に示すような方法により合成することができる 1 ) R^S-A-CONHCHCOOH + NH₂f CH— 1— -R⁴ → [ I ]

B-S-R² \COR³/m

[ Π ] [ΠΙ] 式 [ Π ] で表わされる化合物と式 [ΠΙ ] で表わされる化合物をべプチド合成に汎用される N， N * —ジシクロへキシルカルポジイミド等の縮合剤を用いて縮合させるか、式 [ Π ] で表わされる化合物を酸クロリド、酸無水物、混合酸無水物、活性エステル等の活性誘導体に導き、式 [m] で表わされる化合物と反応させて式 [ I ] で表わされる化合物を得る。上記の反応は、ペプチド合成に汎用される方法で、反応条件等特に限定する必要はなく、汎用される条件を用いればよい。

2 ) NH₂CHC00H + → NH₂CHCONH CH— 4—X-R⁴

B-S-R²

B-S-R² lcOR³/ m 「V ]

[IV] [ ΠΙ ] R^S-A-COOH [VI]

[ I ]

まず、式 [ IV] で表わされる化合物と式 [ΠΙ] で表わされる化合物を 1 ) 項で説明したのと同様の方法で反応させ式 [V] で表わされる化合物を得る。この反応において、式 [IV] で表わされる化合物のアミノ基は、 t一ブトキシカルボニル基、ベンジルォキシカルボニル基等ぺブチド合成の際に汎用される保護基で保護しておき、反応後除去してもよい。次いで、上記で得られた化合物 [V ] と式 [VI] で表わされる化合物を 1 ) 項で説明したのと同様にして反応させ、式 [ I ] で表わされる化合物を得る。

1 ) および 2 ) 項で示した各化合物において、 R ¹ 、 R ² 、 R ³ および R ⁴ が低級アルカノィル、低級アルコキシ、低級アルコキシカルボニルゃフエ二ル璟に置換基を有してもよいフエニルカルボ二ル、フヱニル低級アルキルまたはフヱニル低級アルコキシカルボ二ルを含む様なグループであって、それらが保護基の目的で使用される場合は、 1 ) および 2 ) 項の反応後または反応途中で除去してもよい。

上記の方法によって得られた化合物は、常法により前述の様な塩類とすることができる。

本発明化合物は不'斉炭素を有するので、光学異性体が存在する力それらはいずれも本発明に包含される。

本発明化合物はサイムリン様活性を示し、免疫不全や自己免疫疾患等、種々の免疫異常に起因する疾患の治療剤として有用なものである。サイムリンは胸腺で産生される微量物質で、亜鉛とコンブレツクスを形成して、低下した免疫機能を回復させる作用を示すことが知られている。

しかしながら、サイムリンを臨床の場に応用するには種々の問題がある。そこで本発明者等は、サイムリンの効果発現機序に着目し、硫黄原子を含む種々のアミノ酸誘導体を合成し、そのサイムリン様活性を調べた結果、後述の薬理試験の項で示す様に、本発明化合物は優れた活性を示し、免疫不全や自己免疫疾患等、種々の免疫異常に起因する疾患の治療剤として有用であることを見い出した。

免疫異常に起因する疾患には種々のものがあり、例えば慢性関節リウマチ、慢性肝炎、貧血、全身性エリテマトーデス、原発性免疫不全症、低丫ーグロブリン血症等が挙げられ、本発明化合物はそれらの種々の疾患に対して有用なものである。

本発明化合物はサイムリンと同様、亜鉛とコンプレックスを形成して効果発現すると考えられるが、実際に臨床で用いる際は、生体内に存在する微量の亜鉛を利用し、コンプレツクスを形成させることも可能であると考えられ、また塩化亜鉛等の亜鉛塩を併用してもよい。

本発明化合物は経口または非経口投与することができる。投与剤型としては錠剤、カブセル剤、注射剤等が挙げられ、通常の製剤方法として汎用されている技術を用いて製剤化することができる。投与量は症状、剤型等により適宜選択でき、特に限定されるものではない。発明を実施するための最良の形態

実施例 1

N - [ S —べンジルー N— （ 3—べンジルチオ一 2， 2 —ジメチルブロピオニル）一 D—システィニル] グリシンェチルエステル（化合物 1 )

S—べンジルー N— （ 3—べンジルチオ一 2， 2—ジメチルプロピオニル）一 D—システィン（ 0 · 3 2 g ) およびグリシンェチルエステル塩酸塩（ 0. 1 2 ）の1^， N—ジメチルホルムァミド（ D M F、 3 m l ) 溶液に、氷冷撹拌下、 N—メチルホルモリン（ N M M、 0. 1 9 m l ) 、 1 ーヒドロキシジベンゾトリアゾール（H 0 B t、 0. 1 7 g ) 、次いで N， N ' ージシクロへキシルカルボジイミド（ D C C、 0. 1 8 g ) の D M F ( 2 m l ) 溶液を加える。 0 °Cで 2時間、室温で 2時間撹拌した後一夜放置する。反応液に 1 N塩酸（ 3 0 m l ) を加え、エーテルで抽出する。有機層を飽和重曹水次いで飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後減圧濃縮する。得られる油状物をシリカゲルカラムクロマトで精製して標記化合物 0. 3 5 g ( 9 1 % ) を得

IR (film, cm"¹) ： 1 7 4 5 , 1 7 4 1 , 1 6 3 4 , 1 5 1 9 , 1 5 0 8 , 1 4 9 3 , 1 4 5 1 , 1 3 7 4 , 1 1 9 6，

7 0 0

20

[ a ]p + 2 8 2 ( c = 3 ，メタノール）

実施例 2

N - [ S —ベンジルー N— （ 3 —べンジルチオ一 2 , 2 —ジメチルプロピオニル）一 D—システィニル】グリシンアミド（化合物 2 ) 化合物 1 ( 1 . 8 5 g ) のメタノール（ 5 0 m l ) 溶液に氷冷下アンモニアガスを 1 5分間通じた後、室温で一夜放置する。反応液を減圧濃縮して標記化合物 1 . 7 5 g (定量的）を得る。 IR ( KBr, cm-¹) ： 1 6 7 3 , 1 6 2 4 , 1 5 2 8 , 1 4 9 3 ， 1 3 8 3 , 1 2 3 1 , 1 2 2 3 , 6 9 6

実施例 3

N - [ N — （ 2 ， 2 —ジメチルー 3 —メルカブトプロピオニル）一 D—システィニル] グリシンアミド（化合物 3 ) 化合物 2 ( 1 . 6 0 g ) を液体アンモニア（ 2 0 m l ) に溶解し、窒素雰囲気下、金属ナトリウム（ 0. 45 g) を少量ずつ加える。塩化アンモニゥムを加えた後、アンモニアを留去する。残渣に 2 N塩酸を加え酸性とした後、エーテルで抽出する。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮する。得られる油状物をシリカゲルカラムクロマ卜で精製し標記化合物 0. 5 8 g ( 5 9 %) を得る。

IR (film, cm"¹) ： 3 3 04 , 2 540， 1 6 54 , 1 644，

1 6 34， 1 5 1 3 , 1 474 , 1 4 1 8， 1 388 , 1 2 34 , 5 58

90

[ a ]_D + 1 8. 9 ° ( c = 1. 2 , メタノール）実施例 3 と同様の方法で下記の化合物が得られる。

• N， N * 一ビス [N— ( 2 , 2—ジメチルー 3—メルカプトブロピオニル）一し一システィニル] 一 1， 5—ジァミノペンタン（化合物 4 )

N , N ' 一ビス [ S—ベンジルー N— （ 3—べンジルチオ一 2 , 2—ジメチルプロピオニル） — L一システィニル] 一 1， 5—ジァミノペンタン（化合物 3 2 ) を出発原料として用いた。 IR (nujol, cm"¹) : 3 3 0 0 , 2 9 24 , 1 6 5 3 , 1 5 2 2 , 1 4 5 8 , 1 3 7 6 , 7 2 0

20

[ a ]_D 一 2 7. 6 ° ( c = 1. 0，メタノール） • 3—アミノー N— [ N - ( 2， 2—ジメチルー 3—メルカブトブ口ピオニル）一 L一システィニル] プロピルアミン塩酸塩 (化合物 5 )

3 — アミノー N — [ S—ベンジルー N — （ 3 —べンジルチオ一 2 , 2 —ジメチルプロピオニル）一 L一システィニル] ブロピルァミン（化合物 2 8 ) を出発原料として用いた。

IR (nujol, cm"¹) ： 3 2 3 6 , 2 9 2 0 , 1 6 4 1 , 1 5 1 5 ,

1 4 6 8 , 1 3 6 5 , 1 2 4 0

Π

[ α ]_β 一 1 9 . 9 ° ( c = 1 . 0，メタノール）

• 4一アミノー N— [ N - ( 2 ， 2—ジメチルー 3—メルカブトプ口ピオニル）一 L—システィニル] プチルァミン塩酸塩（化合物 6 )

4一アミノー N — [ S —べンジルー N — ( 3 —べンジルチオ一 2 , 2 —ジメチルブロピオニル）一 L一システィニル] ブチルァミン（化合物 2 9 ) を出発原料として用いた。

IR (nujol, cm"¹) ： 3 2 4 0 , 2 9 1 6 , 1 6 4 0 , 1 5 1 3 ,

1 4 6 9 , 1 3 6 5 , 1 2 2 9

20

[ a ] - 1 3 . 1 ° ( c = 0 . 9 ，メタノール）

• 5—アミノー N— [ N - ( 2 , 2—ジメチルー 3—メルカブ卜ブ口ピオニル）一 L一システィニル] ペンチルァミン塩酸塩（化合物 7 )

5 —アミノー N — [ S —べンジルー N — （ 3 —べンジルチオ一 2 ， 2 —ジメチルプロピオニル）一 L一システィニル] ペンチルァミン（化合物 3 1 ) 出発原料として用いた。 IR (nujol, cm"¹) : 3 2 6 0 , 2 9 4 5 , 1 6 4 8 , 1 5 1 9 , 1 4 8 4 , 1 3 7 0 , 1 2 3 2

[ a ]^ — 1 6. 6 ° ( c = 1 . 0，メタノール） 6—アミノー N— [ N— （ 2 , 2—ジメチルー 3—メルカブトブ口ピオニル）一 L一システィニル] へキシルァミン塩酸塩（化合物 8 )

6 —アミノー N— [ S —べンジル一 N— ( 3 —べンジルチオ一 2， 2 —ジメチルプロピオニル）一 L一システィニル] へキシルァミン（化合物 3 0 ) を出発原料として用いた。

IR ( KBr, cnT¹) ： 3 2 6 0 , 2 9 2 8 , 1 6 3 9 , 1 5 1 7 , 1 4 6 8， 1 3 6 4 , 1 2 2 9

20

[ a ] — 1 4. 2 ° ( c = 1 . 0，メタノール） 5—ヒドロキシー N— [ N - ( 2， 2—ジメチルー 3—メルカブトプロピオニル）一 L一システィニル] ペンチルァミン（化合物 9 )

5 — ヒドロキシ一 N— [ S—べンジルー N— （ 3 —べンジルチオ一 2， 2 —ジメチルプロピオニル） — L一システィニル] ペンチルァミン（化合物 3 3 ) を出発原料として用いた。 IR (film, cm-リ : 3 3 1 2 , 2 9 3 6 , 1 6 3 8， 1 5 3 0 , 1 4 7 3， 1 3 6 5 , 1 2 3 9

20

[ a ]_D — 1 4. 0 ° ( c = 1 . 0，メタノール）実施例 4

N ^α - [ S—べンジルー N— （ 3—べンジルチオ一 2 , 2—ジメチルブ口ピオニル）一 L一システィニル] 一 Ν ^ε — t—ブトキシカルボ二ルー L一リジンメチルエステル（化合物 1 0 )

S—べンジルー N— （ 3—べンジルチオ一 2， 2—ジメチルブロピオニル）一 L一システィン（ 4. 0 1 g) 、 Ν ^ε— t一ブ卜キシカルボ二ルー L— リジンメチルエステル（ 2. 08 g ) および NMM ( 1 . l m l ) の DM F ( 2 0 m l ) 溶液に、氷冷撹拌下、 H O B t ( 2. 1 6 g ) を加え、次いで D C C ( 1. 8 2 g ) の DM F ( 1 0 m l ) 溶液をゆっくり加え、氷冷下 1時間、室温で 1 8時間撹拌する。反応液に酢酸ェチル—ベンゼン（ 2 ： 1 ) の混液（ 5 0 0 m l ) を加え、 1 0 %クェン酸水溶液、水、飽和重曹水、水、飽和食塩水の順で洗浄する。有機層を無水硫酸ナトリゥムで乾燥後、減圧濃縮する。得られる油状物をシリ力ゲルカラムクロマトで精製して標記化合物 3. 2 2 g ( 6 1 %) を得る。

IR (film, cm"¹) : 3 3 00， 2 9 2 8 , 1 74 1 , 1 68 2 ,

1 6 3 9， 1 5 0 9 , 1 3 64 , 1 2 44 , 1 1 94， 70 1

[ α ] — 1 7. 7 ° ( c = 1 . 0，メタノール）

実施例 5

Ν ^α - [ S—べンジルー Ν— （ 3—べンジルチオ一 2， 2—ジメチルブ口ピオニル）一 L一システィニル] 一 Ν ^ε — t—ブトキシカルボ二ルー L一リジン（化合物 1 1 )

化合物 1 0 ( 2. 2 1 g ) をジォキサンとメタノールの混液（ 3 5 m l ) に溶解し、氷冷下 1 N水酸化ナトリウム水溶液（ 8 m l ) を加え、室温で 1 . 5時間撹拌する。希塩酸を加え酸性とした後、反応液に塩化ナトリウムを加え酢酸ェチルで抽出する。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮する。得られる油状物をシリ力ゲルカラムクロマ卜で精製して標記化合物 1 . 9 8 g ( 9 2 %) を得る。

IR (film, cm"¹) : 3 3 1 2 , 2 9 6 4 , 2 9 2 4 , 1 7 0 1 ,

1 6 3 5 , 1 5 1 3 , 1 3 6 5 , 1 2 4 3 , 1 1 6 7， 7 0 1

[ α ]_η — 1 4. 1 ° ( c = l . 0，メタノール）実施例 5 と同様の方法で下記の化合物が得られる。 N ^α - [ S—べンジルー Ν— （ 3—ベンジルチオ一 2， 2 —ジメチルプロピオニル）一 L—システィニル] 一 Ν ^ε —べンジルォキシカルボ二ルー L一リジン（化合物 1 2 )

Ν a [ S—べンジルー N— （ 3—ベンジルチオ一 2 , 2—ジメチルブ口ピオニル）一 L一システィニル] 一 N ^ε—べンジルォキシカルボ二ルー L一リジンメチルエステル（化合物 2 0 ) を出発原料として用いた。

IR ( KBr .cm"¹) : 3 3 4 4， 3 0 0 0 , 2 9 2 8 , 1 7 1 7 ,

1 6 7 2 , 1 5 0 9 , 1 4 9 7 , 1 2 0 6 , 6 9 8 ?n

[ α ]p - 3 0 . 0 ° ( c = l . 0 1 , メタノール）標記化合物のジシクロへキシルアミン塩の物性

融点 1 1 7 — 1 1 8。C (酢酸ェチルー n—へキサン）

IR ( KBr .cm"¹) : 3 3 3 2 , 2 9 3 2 , 2 3 2 0 , 1 6 9 1 ,

1 6 3 4， 1 5 7 6 , 1 5 2 3 , 1 5 0 8 , 1 4 9 7 ,

6 9 8

？ n

[ a ] - 2 2 . 0 ° ( c = 1 . 1 0 ，メタノール）

• N ^a — [ S—ベンジル— N — [ 2 , 2—ジメチルー 3 — （ 4 — メトキシベンジルチオ）プロピオニル] 一 L一システィニル] 一 N ^ε—べンジルォキシカルボ二ルー L— リジン（化合物 1 3 )

N ^a - [ S —べンジルー Ν — [ 2， 2—ジメチルー 3 — （ 4 — メトキシベンジルチオ）プロピオニル] 一 L一システィニル] 一 Ν ^ε —べンジルォキシカルボ二ルー L一リジンメチルエステル（化合物 1 9 ) を出発原料として用いた。

IR (クロ口ホルム， cnTリ： 2 9 2 8 , 1 7 1 5 , 1 6 6 7 , 1 5 1 2 , 1 2 3 4 , 1 2 0 6 , 7 1 7

n

[ a ] — 2 9 . 3 ° ( c = l . 0 1 ，メタノール）

• N ^a - [ S —べンジルー N — （ 2 —べンジルチオ— 2 —メチルブ口ピオニル）一 L一システィニル] 一 N ^ε—べンジルォキシカルボニルー Lーリジン（化合物 1 4 )

Ν ^α — [ S—ベンジルー Ν — （ 2 —べンジルチオ一 2 —メチルブロピオニル） — L一システィニル] 一 Ν ^ε —ベンジルォキシカルポ二ルー L一リジンメチルエステル（化合物 1 8 ) を出発原料として用いた。

IR (クロ口ホルム， cm-リ： 3 344， 1 7 1 6 , 1 6 6 7 , 1 508 ,

1 49 7 , 1 2 0 5 , 6 9 7

20

[ a ] - 1 7. 6 ( c = 0. 6 7，メタノール）標記化合物のジシクロへキシルァミン塩の物性

融点 1 08— 1 '1 0 °C (酢酸ェチルー n—へキサン）

IR ( r .cm"¹) ： 3 3 52 , 2 9 3 6 , 2 860 , 1 69 0

6 3 5 , 1 53 5 , 1 49 2 , 1 2 68 , 69 7

20

[ a ] - 1 3. 8 ( c = 0，メタノール）

N - [ S—べンジルー N— （ 3—べンジルチオ一 2， 2—ジメチルプロピオニル）一 D—システィニル）グリシン（化合物 1 5 ) N - [ S—べンジルー N— （ 3—べンジルチオ一 2 , 2—ジメチルプロピオニル）一 D—システィニル] グリシンェチルエステル（化合物 1 ) を出発原料として用いた。

IR ( film , cm"¹) ： 3 3 2 8 , 1 72 9 , 1 643 , 1 53 2 ,

49 6 , 1 453 , 1 2 08 , 70 2

20

[ Γ_Ώ + 2 8 c = l . 0，メタノール） 5一

実施例 6

N a一 [ N - ( 2， 2—ジメチルー 3—メルカブ卜ブロピオ二ル）一 L一システィニル] — Ν ^ε - ΐ—ブトキシカルボ二ルー L 一リジン（化合物 1 6 )

化合物 1 1 ( 3. 8 3 g ) の無水テトラヒドロフラン（ T H F、 2 0 m l ) 溶液を、液体アンモニア（ 70 m l ) に加える。この溶液に金属ナトリウムを少量ずつ、溶液の青色が 1分間持続するまで加える。反応液に塩化アンモニゥムを加えた後、窒素ガスを吹き込みながらァンモニァを留去する。さらに減圧濃縮して得られる白色固形物に酢酸ェチル（ 2 0 0 m l ) と 1 0 %クェン酸水溶液（ 5 0 m l ) を加えて溶解する。この溶液に塩化ナトリゥムを加え、有機層を分取し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後、減圧濃縮する。得られる油状物をシリカゲルカラムクロマトで精製して標記化合物 0. 58 g ( 6 5 %) を白色粉末として得る。 IR ( KBr, cm-リ： 3 2 88 , 2 9 1 6 , 1 63 6 , 1 50 9 ,

1 64

25

[ a ] - 4. 2 ( c = 1 . 0，メタノール）

実施例 Ί

Ν ^α— [ Ν— （ 2， 2 — ジメチル— 3—メルカブ卜プロピオ二ル）一 L一システィニル] 一 L一リジンメチルエステル塩酸塩 (化合物 1 7 )

化合物 1 6 ( 1 . 03 g ) を 4 N塩化水素メタノ一ル溶液（ 1 0 m l ) に溶解し、室温で 3 0分間撹拌した後、減圧濃縮する。得られる油状物をシリ力ゲルカラムクロマ卜で精製して標記化合物 0 . 5 8 g ( 6 5 % ) を白色粉末として得る。

IR ( KBr, cur¹) : 3 2 0 4， 2 9 2 0 , 1 7 3 2 , 1 6 3 4 ,

1 5 0 8 , 1 2 0 7

[ a — 1 7. 3 ° ( c - 1 . 0，メタノール）

実施例 8 '

Ν ^α — [ S —べンジルー Ν — （ 2 —べンジルチオ一 2 —メチルブロピオニル）一 L一システィニル] 一 Ν ^ε—ベンジルォキシカルポ二ルー L一リジンメチルエステル（化合物 1 8 )

Ν ^α - ( S—ベンジルー L一システィニル）一 Ν ^ε—ベンジルォキシカルボ二ルー L一リジンメチルエステル塩酸塩（ 3. 1 g ) の D M F ( 1 5 m l ) 溶液に窒素雰囲気下氷冷撹拌しながら、 N MM ( 1 . 2 g ) 、 2 —べンジルチオ一 2 —メチルプロピオン酸（ 1 . 3 6 g ) 、 H 0 B t ( 1 . 6 g ) を加え、次いで D C C ( 1 . 3 4 g ) の D M F ( 5 m l ) 溶液を少しずつ加えた後、氷冷下 1 時間、さらに室温で 1 6時間撹拌する。不溶物をろ別し、減圧濃縮した後、鲊酸ェチルーベンゼン（ 2 ： 1 、 3 0 0 m l ) に溶解する。この溶液を 1 0 %クェン酸水溶液、水、 5 %重曹水、水、飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥後減圧濃縮する。得られる油状物をシリカゲルカラムクロマトで精製して標記化合物 4. 2 g ( 9 8 % ) を得る。 IR ( KBr, cm"¹) : 3 3 1 2 , 1 744 , 1 68 6， 1 63 7 , 1 54 7 , 1 49 6 , 1 2 5 2 , 6 9 9

? n

[ a ]p - 2 0. 9。（ c = 0. 5 3，メタノール）実施例 8と同様の方法で下記の化合物が得られる。

• N ^a - [ S—べンジルー N— [ 2， 2—ジメチルー 3 — ( 4 - メトキシベンジルチオ）プロピオニル] — L—システィニル] 一 N ^ε—ベンジルォキシカルボ二ルー L一リジンメチルエステル（化合物 1 9 )'

Ν ^Ω - ( S—べンジルー L— システィニル）一 Ν ^ε—ベンジルォキシカルボ二ルー L一リジンメチルエステル塩酸塩および 2， 2—ジメチルー 3— ( 4—メトキシベンジルチオ）ブロピオン酸を出発原料として用いた。

IR ( film, cm"') : 3 3 1 0， 1 73 8 , 1 6 9 7 , 1 643， 1 5 1 0 , 1 244 , 75 1

？ n

[ a ]^ — 3 1 . 0。（ c - 1. 08，メタノール）

• N ^a - [ S—べンジルー N— （ 3—べンジルチオ一 2， 2—ジメチルブ口ピオニル）一 L一システィニル] 一 Ν ^ε —べンジルォキシカルボ二ルー L一リジンメチルステ（化合物 2 0 )

N ^a - ( S—ベンジルー L一システィニル，一 Ν ^ε —ベンジルォキシカルボ二ルー L一リジンメチルエステル塩酸塩および 3— ベンジルチオ一 2， 2—ジメチルブロピオン酸を出発原料として用いた。 IR (film, cm"¹) : 3 3 1 6 , 2 9 4 8 , 1 7 4 1， 1 6 9 7 , 1 6 4 4 , 1 5 2 2 , 1 4 5 4 , 1 2 4 2 , 1 2. 1 2， 7 5 2 , 7 0 0

[ a ] ^ — 3 0. 9 ° ( c = l . 0 1 ，メタノール）

実施例 9

N ^a— [ N - ( 2， 2—ジメチルー 3—メルカプトブロピオニル ) 一 L—システィ： iル] 一 L一リジン（化合物 2 1 )

液体アンモニアに化合物 1 2 ( 0. 3 4 g ) の T H F ( 5 m l ) 溶液を加え、金属ナトリウムを少しずつ加える。反応終了後、塩化アンモニゥムを加え、次いでアンモニアと T H Fを減圧留去する。酢酸を加えて酸性とした後、減圧濃縮し得られる油状物をォクタデシルシリル化シリカゲルカラムクロマトで精製して標記化合物 0. 1 7 g ( 4 7 %) を得る。

IR ( KBr, cm"¹) : 3 3 0 4， 3 0 44， 2 9 2 8 , 2 8 6 4 ,

1 6 4 2 , 1 5 2 3 , 1 3 9 5

[ a ]p° - 2 6. 1 ° ( c = 1 . 0 1 ，メタノ一ル）実施例 9 と同様の方法で下記の化合物が得られる。

N ^ε , Ν ^ε—ジメチルー Ν ^α— [ Ν - ( 2， 2—ジメチルー 3 — メルカブトプロピオニル）一 L一システィニル] 一 L一リジン

(化合物 2 2 )

N ^a - [ S—べンジルー Ν— （ 3—べンジルチオ一 2 , 2 —ジメチルブ口ピオニル）一 L—システィニル] 一 Ν ^ε ， Ν ^ε —ジメチルー L一リジン塩酸塩（化合物 2 5 ) を出発原料として用いた。

IR (クロ口ホルム， cm"¹) ： 2 9 60 , 2 9 2 8 , 1 648 , 1 49 7 ,

1 2 6 1 , 1 0 9 5 , 1 0 1 1 , 80 7 , 72 5

[ α ]^ — 1 9. 5 ° ( c = 1 . 1，メタノール）

• Ν ^α - [ Ν - ( 2—メルカブ卜 — 2—メチルプロピオニル）一 L 一システィニル] 二 L一リジン（化合物 2 3 )

Ν ^α - [ S—べンジルー Ν— （ 2—べンジルチオ一 2—メチルブ口ピオニル）一 L一システィニル] 一 Ν ^Ε —べンジルォキシカルボニルー L一リジン（化合物 1 4 ) を出発原料として用いた。 IR ( KBr .cnTリ： 3 3 3 6， 2 9 2 0 , 2 8 5 6 , 1 648 ,

1 5 77 , 1 5 09 , 1 4 58 , 1 3 94

[ α〗^ — 1 1 , 7° ( c = 1 . 0，メタノール）

実施例 1 0

N ^α - [ S—べンジルー Ν— （ 3 -ベンジルチオ一 2 , 2—ジメチルプロピオニル）一 L一システィニル] 一 L一リジン臭化水素酸塩（化合物 24 )

化合物 1 2 ( 2. 1 4 g ) の酢酸（ 3 5 m l ) 溶液に氷冷下 2 5 %臭化水素一酢酸溶液（ 1 0 m l ) を加え、室温で 5 0分間撹拌する。溶媒を減圧留去し、得られる油状物をシリカゲルカラムク口マトで精製して標記化合物 1 . 8 3 g ( 9 3 %) を得る。

IR (クロ口ホルム， cnT ') : 2 9 6 4 , 2 9 2 4， 1 7 2 7 , 1 6 4 2 , 1 5 0 8 , 1 4 9 6 , 1 4 5 4 , 1 2 0 5 , 6 9 9

？ n

[ a — 3 2. 0 ° ( c = 1 . 0，メタノール）

実施例 1 1

N ^α - [ S—べンジルー Ν— （ 3—べンジルチオ一 2 , 2 —ジメチルブ口ピオニル） ' 一 L一システィニル] 一 Ν ^ε , Ν ^ε—ジメチルー L一リジン塩酸塩（化合物 2 5 ) 化合物 2 4 ( 0. 8 ) のメタノール（ 2 5 m l ) 溶液に氷ーメ夕ノールで冷却しながら 3 7 %ホルマリン水溶液（ 1 m l ) を加え 1 0分間撹拌し、次いで水素化ホウ素ナトリウム（ 0. 4 5 _g ) を少しずつ加えさらに 3 0分間撹拌する。希塩酸を加えて酸性とし、減圧濃縮した後、クロ口ホルムで抽出する。溶媒を減圧留去し得られる油状物をシリカゲルカラムクロマトで精製して標記ィ匕合物 0. 5 8 g ( 8 1 % ) を得る。

IR (クロ口ホルム， cnTリ： 2 9 5 6 , 2 9 2 8 , 2 8 6 0 , 1 7 3 1 , 1 6 6 1 , 1 5 0 7 , 1 4 9 6 , 1 4 7 7 , 1 4 6 5 , 1 2 0 5 , 7 0 0

[ a ]^ — 2 9. 6。（ c = 1 . 0，メタノール）実施例 1 2

N "— [ S—ァセチル— N— （ 3—ァセチルチオ一 2， 2—ジメチルプロピオニル）一 L一システィニル] 一 Ν ^ε— t一ブトキシカルボ二ルー L— リジン（化合物 2 6 )

化合物 1 6 ( 0. 79 g) の 1 N水酸化ナトリウム溶液（ 5. 5 m l ) に窒素雰囲気下、塩化ァセチル（ 0. 43 g ) の塩化メチレン（ 6 m l ) 溶液を氷冷下で激しく撹拌しながら加え、さらに 1 . 5時間撹拌する。塩化メチレン（ 3 0 m l ) で抽出し、有機層にトリヱチルァミン（ 0. 2 m l ) を加え、次にヨウ素の塩化メチレン溶液を溶液が着色され始めるまで加える。減圧濃縮して得られる油状物をシリカゲルカラムクロマ卜で精製して標記化合物 0. 6 64 g ( 7 1 %) を得る。

IR ( film, cm-リ： 3 3 24 , 2 9 72 , 2 9 3 2， 1 6 9 2 ,

1 6 5 0 , 1 5 1 8 , 1 3 6 6， 1 24 6 , 1 1 68 ,

3 3 , 6.2 4

20

C α ] - 8. 4 ( c = 3，メタノール）

実施例 1 3

Ν α一 [ S—ァセチルー Ν— （ 3—ァセチルチオ一 2 , 2—ジメチルプロピオニル）一 L一システィニル] 一 L一リジンメチルエステル塩酸塩（化合物 2 7 )

化合物 2 6 ( 0. 3 4 4 g ) のメタノール（ 1 0 m l ) 溶液に 6. 5 N塩化水素—ジォキサン（ 0. 3 m l ) 溶液を加え、室温で 1時間撹拌する。減圧濃縮して得られる油状物をシリカゲル力ラムクロマトで精製して標記化合物 0. 2 5 g ( 7 9 %) を得る。

IR (クロ口ホルム， cm—リ： 2 9 5 6， 1 745 , 1 69 0 , 1 647，

1 5 1 7， 1 2 2 0 , 1 1 3 5 , 6 2 5

2(1

[ a ]^ — 1 6. 4。（ c = 1. 0，メタノール）

実施例 1 4 ,

3 —アミノー N— [ S—べンジルー N— （ 3—べンジルチオ一 2 , 2 —ジメチルプロピオニル）一 L一システィニル] プロピルァミン（化合物 2 8 )

S—べンジルー N— （ 3—べンジルチオ一 2 , 2—ジメチルプロピオニル）一 L一システィン（ 2 . 0 4 g ) および N— ヒドロキシスクシンイミド（ 0. 5 63 g) の DMF ( 5 m l ) 溶液に、氷冷下 D C C ( 1 . l l g) 0DM F ( 5 m l ) 溶液を撹拌しながら滴下する。氷冷下で 0. 5時間、さらに室温で 0. 5時間撹拌した後、不溶物をろ別する。ろ液に 1， 3—ジアミノブ口パン ( 1 . 0 9 ) の D M F ( 3 0 m l ) 溶液を撹拌しながら滴下する。滴下終了後 1時間撹拌した後、水を加え酢酸ェチルで抽出する。有機層を水次いで飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシゥムで乾燥後、減圧濃縮する。得られる油状物をシリカゲルカラムクロマ卜で精製して檩記化合物 1 . 6 g ( 69 %) を得る。

IR ( film , cm"¹) ： 3 2 9 6 , 2 9 24 , 1 644， 1 53 2 , 1 4 9 6 , 1 4 5 3 , 7 0 2 [ α〗^ - 1 5 . 8 ° ( c = 1 . 0，メタノール）実施例 1 4 と同様の方法で下記の化合物が得られる。

• 4一アミノー N — [ S —べンジルー N — （ 3 —べンジルチオ一 2 ， 2 —ジメチルブロピオニル）一 L—システィニル] プチルァミン（化合物 2 9 )

S—べンジリレー N— （ 3—べンジルチオ一 2 , 2—ジメチルブロピオニル）一 L一システィンおよび 1 ， 4 ージアミノブタンを出発原料として用いた。

IR ( film , cm" ') ： 3 2 9 6 , 2 9 2 8 , 1 6 4 1 ， 1 5 2 3 ,

1 4 9 6 , 1 4 5 3 , 7 0 2

[ α ] - 1 2 . 6 ° ( c = 1 . 0 , メタノール）

• 6 — アミノー N — [ S —べンジルー N — （ 3 —べンジルチオ— 2 , 2 —ジメチルブロピオニル）一 L一システィニル] へキシルァミン（化合物 3 0 )

S —べンジルー N — （ 3—べンジルチオ— 2 ， 2—ジメチルブロピオニル）一 L一システィンおよび 1 , 6—ジァミノへキサンを出発原料として用いた。

IR ( film , cm"¹) ： 3 2 9 6 , 2 9 2 8 , 1 6 3 9 ， 1 5 3 1 ,

1 4 9 6 , 1 4 5 3 , 7 0 1

9 n

[ a ] - 1 5. 1 ° ( c = 1 . 0 ，メタノール）実施例 1 5

5 —アミノー N— [ S—べンジルー N— （ 3—べンジルチオ一 2 , 2—ジメチルブロピオニル）一 L—システィニル] ペンチルァミン（化合物 3 1 ) および

N , N ' 一ビス [ S—べンジルー N— （ 3—ベンジルチオ— 2， 2—ジメチルブロピオニル）一 L一システィニル] 一 1 , 5—ジァミノペンタン（化合物 3 2 )

S—べンジルー N— （ 3—べンジルチオ— 2， 2—ジメチルプロピオニル）一 L一システィン（ 0. 62 7 g ) の DMF ( 5 m l ) 溶液に N—ヒドロキシスクシンイミド（ 0. 1 73 g) を加えた後、氷冷下 D C C ( 0. 34 g ) の DMF ( 5 m l ) 溶液を撹拌しながら滴下する。氷冷下一晩放置した後、不溶物をろ別する。ろ液に水および酢酸ェチルを加え、有機層を水次いで飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧濃縮する。得られる油状物をクロ口ホルム（ 1 0 m l ) に溶解し、撹拌しながら 1， 5—ジァミノペンタン（ 0. 46 g) のクロ口ホルム（ 1 0 m l ) 溶液を加え、さらに室温で 1時間撹拌する。反応液に水を加え有機層を分取し、飽和重曹水および飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥後、減圧濃縮する。得られる油状物をシリカゲルカラムクロマトで精製して 0. 3 7 2 g ( 49 %) の化合物 3 1 と 0. 2 54 g ( 3 8 %) の化合物 3 2を得る。

化合物 3 1の物性

IR ( film , cm"¹) : 3 2 9 2 , 2 9 28 , 1 64 1 , 1 53 3 , 1 4 9 6 , 1 453 , 70 1

2(1

[ α — 1 7. 0 ° ( c = 1 . 1 , メタノール）化合物 3 2の物性

IR ( film .cm"¹) : 3 3 08， 2 9 3 2 , 1 64 3， 1 5 3 0 , 1 49 5 , 1 4 5 3 , 70 2

？ n

[ α ]^ - 1 9. 0。（ c = l . 1 ，メタノール）

実施例 1 6

5— ヒドロキシー N— [ S—ベンジルー N— （ 3—べンジルチオ一 2， 2—ジメチルブロピオニル）一 L一システィニル] ペンチルァミン（化合物 3 3 )

S—べンジルー N— （ 3—べンジルチオ— 2， 2—ジメチルプロピオニル）一 L一システィン（4. 1 8 g ) および N—ヒドロキシスクシンィミド（ 1 . 1 5 g ) の D M F ( 1 0 m 1 ) 溶液に、氷冷下 D C C ( 2. 0 6 ) の DMF ( 1 0 m l ) 溶液を撹拌しながら滴下し、一晩水冷下で放置する。析出した不溶物をろ別した後、ろ液に 5—アミノー 1 一ペンタノ一ル（ 1 · 5 5 g) の D M F ( 3 0 m l ) 溶液を加え、室温で 3時間撹拌する。反応液に水を加えて酢酸ェチルで抽出する。酢酸ェチル溶液を飽和重曹水、水次いで飽和食塩水で洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥した後、減圧濃縮する。得られる油状物をシリカゲルカラムクロマ卜で精製して標記化合物 3. 4 g ( 6 9 %) を得る。 IR ( film , cm"¹) ： 3 3 0 0 , 2 9 28 , 1 63 6 , 1 5 2 8 , 1 4 9 4， 1 4 5 3 , 7 0 0

2 n

[ a ]_β 一 1 4. 6 ° ( c = 1 . 0，メタノール）

薬理試験

本発明化合物のサイムリン様活性を J · F . B a c h等（Bull. Inst. Pasteur, 76, 325 (1978) )の方法に準じて調べた。

(実験方法）

胸腺摘出後約 2週間経過した C57BL/6系雄性マウス（ 1 0週齢、 1群 4匹）の脾臓を摘出し、脾細胞浮遊液（ 1 X 1 0⁸ cells/ml, Hank's溶液）を調製する。この調製液 1 0 0 μ 1 に、被験化合物と塩化亜鉛を 1 ： 1 のモル比で Hank's溶液に溶解した液 1 0 0 1 を加え、 3 7 °Cで 3 0分間インキュベートした後、ァザチォブリン（ 5 0 μ g /m 1、 Hank's溶液） 5 0 w 1 を加え、同温度でさらに 6 0分間インキュベーションする。この溶液に sheep red blood cell ( 1 X 1 0⁸ cells/m Hank's溶液） 5 0 1 を加え混和し、 4 °C で一夜インキュベーションする。次いで穏やかに振って混和した後、 E—ロゼット形成細胞（ E— R F C ) を測定した。陽性対照としてサイムリンと塩化亜鉛を 1 ： 1 のモル比で各々 1 X 1 0 - ¹⁴ M の濃度となる様調製した溶液を用いて、被験化合物の場合と同様に操作した。

(結果）

サイムリン様活性を以下の式により求めた。 (被験化合物の E-RFC ) - （コントロールの E-RFC )

■X 1 Q 0 (%)

(陽性対照の E-RFC ) 一（コントロールの E- RFC )

本発明化合物を 1 0 - ⁸Mの濃度で加えたときの試験結果の一例を表に示す。

表本発明化合物（ 1 0 -⁹M) のサイムリン（ 1 0 _¹⁴ M) に対する比活性

表に示したように、本発明化合物はいずれもサイムリン様活性を有しており、本発明化合物の有用性を示した。

Claims

請求の範囲 . 下記一般式 [ I ] で表わされる化合物およびその塩類。'

R ¹ - S - A - C O N H

[式中、 R ¹ および R ² は同一かまたは異なって、水素原子、低級アルキル基、低級アルカノィル基、フヱニルカルボニル基、フエニル低級アルキル基またはフェニル低級アルコキシ力ルポニル基を示し、フエニルカルボニル基、フエニル低級アルキル基およびフェニル低級ァルキシカルポニル基のフェニル璟は低級アルキル基、ヒドロキシ基、低級アルコキシ基またはハロゲン原子で置換されていてもよい。

R ^s

R はヒドロキシ基、一 N、または一 C 0 R ⁷ を示す。

R ⁶

R ⁵ および R ⁶ は同一かまたは異なって、水素原子、低級アルキル基、低級アルカノィル基、低級アルコキシカルボニル基、フエニルカルボニル基、フエニル低級アルキル基、フエニル低級アルコキシカルボニル基または一 C O C H N H C O— A— S R ¹ を示

B - S - R ²

し、フヱニルカルボニル基、フエニル低級アルキル基およびフエニル低級アルコキシカルボニル基のフエ二ル璟は低級アルキル基、ヒドロキシ基、低級アルコキシ基またはハロゲン原子で置換されていてもよい。 R ⁷ は R ³ と同義。 A、 Bおよび Xは同一かまたは異なって、直鎖または分枝の低級アルキレン基を示す。 mは 0 または 1 を示す。 ]

2 . 下記一般式 [ Π ] で表わされる化合物およびその塩類

R ¹ - S - A - C O N H

[式中、 R ¹ および R ² は同一かまたは異なって、水素原子、低級アルカノィル基、低級アルコキシ基で置換されていてもよいフエ二ル低級アルキル基を示す。

R ³ はヒドロキシ基または低級アルコキシ基を示す。

R ⁵

R ⁴ はヒドロキシ基、一 N または— C 0 R ⁷ を示す。

、R ⁶

R ⁵ および R ⁶ は同一かまたは異なって、水素原子、低級アルキル基、低級アルコキシカルボニル基、フエニル低級アルコキシ力ルポニル基または一 C O C H N H C O— A— S R ¹ を示す。

B - S - R ²

R ⁷ はヒドロキシ基、低級アルコキシ基またはアミノ基を示す。 A、 Bおよび Xは同一かまたは異なって、直鎖または分枝の低級アルキレン基を示す。 mは 0または 1 を示す。 ]

3. 下記一般式 [ΠΙ] で表わされる化合物およびその塩類。

R ¹ - S - A - C O N H

[式中、 R ¹ および R ² は同一かまたは異なって、水素原子、ァセチル基、ベンジル基またはメトキシベンジル基を示す。 -

R ³ はヒドロキシ基またはメトキシ基を示す。

5

R ⁴ はヒドロキシ基、一 N、または一 C 0 R ⁷ を示す。

R ⁶

R ⁵ および R ⁶ は同一かまたは異なって、水素原子、メチル基、ーブトキシカルボニル基、ベンジルォキシカルボニル基または

- C 0 C H N H C 0 - A - S R ¹ を示す。

I

B - S - R ²

R ⁷ はヒドロキシ基、エトキシ基またはアミノ基を示す。

A、 Bおよび Xは同一かまたは異なって、直鎖または分枝の低級アルキレン基を示す。 mは 0または 1 を示す。 ]

4. 一般式 [ I ] で表わされる化合物またはその塩類および医薬として許容される添加物よりなる医薬組成物。

5. —般式 [ I ] で表わされる化合物またはその塩類を有効成分とする免疫異常治療剤。

6. —般式 [ I ] で表わされる化合物またはその塩類

R ¹ - S - A - C O N H

[式中、 R ¹ および R ² は同一かまたは異なって、水素原子、低級アルキル基、低級アルカノィル基、フエニルカルボニル基、フエニル低級アルキルまたはフヱニル低級アルコキシカルボ二ル基を示し、フヱニルカルボニル基、フエニル低級アルキル基およびフエニル低級アルコキシカルボニル基のフヱニル環は低級アルキル基、ヒドロキシ基、低級アルコキシ基またはハロゲン原子で置換されていてもよい。

R ³ はヒドロキシ基、低級アルコキシ基、アミノ基または低級アルキルアミノ基を示す。

5

R ⁴ はヒドロキシ基、一 N、または - C 0 R ⁷ を示す。

, R ⁶

R ⁵ および R ⁶ は同一かまたは異なって、水素原子、低級アルキル基、低級アルカノィル基、低級アルコキシ力ルポ二ル基、フエニルカルボニル基、フエニル低級アルキル基、フエニル低級アルコキシカルボニル基または

- C O C H N H C O - A - S R ¹ を示し、フエニルカルボニル

B - S - R ²

基、フヱニル低級アルキル基およびフヱニル低級アルコキシ力ルポニル基のフヱニル璟は低級アルキル基、ヒドロキシ基、低級アルコキシ基またはハロゲン原子で置換されていてもよい。 R ⁷ は R ³ と同義。

A、 Bおよび Xは同一かまたは異なって、直鎖または分枝の低級アルキレン基を示す。 mは 0または 1を示す。 ] の製造方法であって、

1 ) 一般式 [IV] で表わされる化合物またはその活性誘導体と一般式 [V ] で表わされる化合物を反応させるか、 R'-S-A-CONH ⁴ ■→ [ I ]

[IV] [ V ]

2 ) —般式 [VI] で表わされる化合物またはその活性誘導体と一般式 [ V ] で表わされる化合物を反応させ、次いで一般式 [VH] で表わされる化合物を反応させる方法。

NH₂ - -→ [ I ]

[VI] [ V ] R'-S-A-COOH [VI] 但し、上記 1 ) 、 2 ) の反応において R ¹ 、 R ² 、 R ³ 、 R ⁵ 、 R ⁶ または R ⁷ が保護基として用いられた場合、反応の途中または終了時に除去することができる。