WO2008144792A4 - Verfahren zur herstellung von ascorbinsäure unter verwendung von pectobacterium cypripedii - Google Patents

Verfahren zur herstellung von ascorbinsäure unter verwendung von pectobacterium cypripedii Download PDF

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Abstract

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zum Herstellen von Ascorbinsäure, bei welchem in einem ersten Schritt eine Kohlenstoffquelle fermentativ in 2,5-Diketo-D-Gluconsäure umgewandelt wird, welche dann in einem zweiten Schritt enzymatisch mit 2,5-Diketo-D-Gluconsäure-Reduktase aus Corynebacterium glutamicum zu 2-Keto-L-Gulonsäure umgesetzt wird. Zwecks höheren Produktausbeuten ist die Kohlenstoffquelle Glucose und die Umwandlung von Glucose in 2,5-Diketo-D-Gluconsäure erfolgt durch den Pectobacter cypripedii Stamm HEPOl (DSMZ 12393) direkt.

Claims

GEÄNDERTE ANSPRÜCHE[beim Internationalen Büro am 22 Dezember 2008 (22.12.2008) eingegangen; ursprüngliche Ansprüche 1-7 geändert; alle weiteren Ansprüche unverändert (1 Seite)]
1. Verfahren zum Herstellen von Ascorbinsäure, bei welchem in einem ersten- Schritt eine Kohlenstoffquelle fermentativ in 2,5-Diketo-D-Gluconsäure umgewandelt wird, welche dann in einem zweiten Schritt enzymatisch mit 2,5-Diketo-D-Gluconsäure-Reduktase aus Corynebacterium glutamicum zu 2-Keto-L-Gulonsäure umgesetzt wird, dadurch gekennzeichnet, dass die Kohlenstoffquelle Glucose ist und die Umwandlung von Glucose in 2,5-Diketo-D-Gluconsäure durch den Pectobacter cypripedii Stamm HEPOl (DSMZ 12939) direkt erfolgt.
2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, dass im ersten Schritt die Luftzufuhr bis zum Erreichen anaerober Bedingungen in der Nährlösung verringert bzw. eingestellt wird, wenn die Bildung der 2,5-Diketo-D-Gluconsäure aus dem Zwischenprodukt 2-Keto-D-Gluconsäure ausbleibt.
3. Verfahren nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, dass die Luftzufuhr über eine Sauerstoffsonde gesteuert wird.
4. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 3, dadurch gekennzeichnet, dass während der Fermentation des ersten Schrittes der pH- Wert überwacht und/oder geregelt wird.
5. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 4, dadurch gekennzeichnet, dass der erste Schritt des Verfahrens im Batch-Betrieb ausgeführt wird.
6. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 4, dadurch gekennzeichnet, dass der erste Schritt des Verfahrens im Fed-Batch Betrieb ausgeführt wird.
7. Verfahren nach einem der Ansprüche 1 bis 6, dadurch gekennzeichnet, dass das im zweiten Schritt benötigte Coenzym NADPH durch die Glucose-Dehydrogenase, die Glucose in Gluconsäure umwandelt, regeneriert wird, wobei die durch die Regenerierung entstehende Gluconsäure, und gegebenenfalls verbleibende Glucose und/oder 2,5-Diketo- D-Gluconsäure in den ersten Schritt zurückgeführt wird.
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