BE1001263A4

BE1001263A4 - Procede en vue de provoquer la regression de la leucemie et l'inhibition de la croissance des tumeurs chez les mammiferes.

Info

Publication number: BE1001263A4
Application number: BE8800818A
Authority: BE
Inventors: Arthur D Brewer
Original assignee: Uniroyal Chem Co Inc; Uniroyal Chemical Ltd
Priority date: 1988-07-14
Filing date: 1988-07-14
Publication date: 1989-09-05
Also published as: GB8815055D0; FR2628869A1; GB2219999A

Abstract

Le procédé consiste à administrer aux mammitères une quantité efficace d'un composé répondant à la formule dans laquelle R1 représente un atome d'hydrogène ou un radical carbohydrate choisi parmi le groupe comprenant les groupes furanosyle, pyranosyle, glucopyranosyle ou galactopyranosyle, leurs dérivés déoxy, ainsi les groupes hydroxyalcoxyalkyle et polyhydroxyalkyle contenant 2 à 12 atomes de carbone dans chacune de leurs fractions alcoxy et alkyle; et un des radicaux R3 ou R4 représente un atome de fluor et l'autre, un atome d'hydrogène.

Description


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 procédé en vue de provoquer la regression de la leucémie et l'Inhibition de la croissance des tumeurs chez les mammifères. 



   Sommaire de l'invention
La présente invention concerne de nouveaux 5-pyrimidine-carboxamides substitués par un groupe N-fluorophényle et répondant   ä   la formule : 
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 dans laquelle   R.   représente un atome d'hydrogène ou un radical carbohydrate du type décrit ci-dessus, tandis que l'un des radicaux R3 ou R4 représente un atome de fluor et l'autre, un atome d'hydrogène. 



   L'invention concerne, en outre, des mélanges des composés   1, 2, 3, 4-tétrahydro indiqués   avec les 
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 composés 3, 4-dihydro correspondants répondant ä la formule : 
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 dans laquelle   R., R..   et R4 ont les significations définies ci-dessus, en proportions telles que le mélange exerce une activité contre la leucémie et contre les tumeurs.

   On a trouvé que les composés tétrahydro de formule I et les mélanges contenant au moins environ 5% molaires, de préférence, environ 25% molaires des composés tétrahydro en mélange avec les composés dihydro correspondants ou des sels d'addition pharmacologiquement acceptables des composes dihydro de formule   (II)   étaient dès lors actifs in vivo contre la leucémie L1210 implantée par voie   intraperitoneale   dans le protocole d'essai 3LE31 du "National Cancer Institute" (NCI), comme décrit plus en détail ci-après. 



   Les composés tétrahydro de la présente invention ne forment pas de sels d'addition. Toutefois, les composés dihydro (que l'on peut y mélanger) forment assurément des sels d'addition avec une variété de réactifs formateurs de sels organiques et inorganiques pharmacologiquement acceptables. En général, les sels d'addition sont des solides cristallins qui sont relativement insolubles à la fois dans des solvants polaires tels que l'eau, le méthanol et   l'ethanol,   ainsi que des solvants organiques non polaires tels que l'ether diéthylique, le benzène, le toluène et analogues. Ils sont quelque peu solubles dans des solvants aprotiques tels que le dimethylformamide et le   diméthylsulfoxyde.   



   D'autre part, lorsque R1 représente un radical carbohydrate, il peut etre un groupe furanosyle (par exemple, ribofuranosyle), un groupe pyranosyle (par exemple, arabinopyranosyle, glucopyranosyle ou galactopyranosyle), leurs dérivés déoxy ou leurs analogues aliphatiques (par exemple, les groupes hydroxyalcoxyalkyle ou polyhydroxyalkyle contenant 2   ä   12 

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 atomes de carbone dans chacune de leurs fractions alcoxy et alkyle, notamment le groupe 2-hydroxy- éthoxyméthyle ou le groupe 2, 3-dihydroxypropyle). 



  Telle qu'elle est utilisée dans la présente spécification, l'expression "radical carbohydrate" désigne les groupes cycliques et acycliques qui forment des pyrimidine-nucléosides ou les pseudo-nucléosides, par exemple, des matières comportant   ä   la fois les groupes cycliques et acycliques spécifiés ci-dessus. 



   Les 5-pyrimidine-carboxamides substitués par un groupe fluorophényle selon l'invention peuvent exister sous la forme représentée dans la formule (I) ci-dessus ou sous la forme de l'une quelconque de ses formes tautomères. Pour faciliter la   compréhen-   sion, les composés de l'invention seront uniquement représentés dans la présente spécification sous la forme indiquée dans la formule ci-dessus, mais il est entendu qu'ils englobent leurs formes tautomères ou leurs mélanges tautomères. 



   On peut préparer les 5-pyrimidine-carboxamides substitués par un groupe fluorophényle à partir des 2-thioxo-5-pyrimidine-carboxamides substitués par un groupe N- (2-fluorophényle) et par un groupe N- (4-   fluorophenyle) correspondants, prepares   comme décrit dans la demande de brevet des Etats-Unis   d'Amerique     n  699. 776 du   8 Février 1985   (5933 KONlA)) par réduction   avec du nickel de Raney. 



   Les nouveaux composés de l'invention sont des agents cytotoxiques utiles pour provoquer la régression des affections malignes du sang telles que la leucémie, ainsi que pour inhiber la croissance de tumeurs solides et non solides. On peut les utiliser seuls ou en combinaison avec d'autres agents chimiothérapeutiques actifs à cet effet. Telles qu'elles sont utilisées dans la présente spécification, 

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 les expressions"régression"et"inhibition"compren- nent l'arrêt ou le ralentissement du développement de l'affection maligne ou d'une autre manifestation de la maladie, comparativement à l'evolution de cette maladie en absence de traitement. 



   On a trouvé que l'administration des nouveau) 5-pyrimidine-carboxamides substitués par un groupe fluorophényle à des souris, en quantités comprises entre environ 12 et 200 mg/kg, de préférence, entre environ 25 et 100 mg/kg du poids du corps était efficace pour provoquer la régression de la leucémie. 



  La relation mutuelle des posologies pour les mammifères d'autres tailles et d'autres espèces est décrite par Freireich, E. J. et   a1., "Quantitative   Comparison of Toxicity of Anti-Cancer Agents in Mouse, Rat, Hamster, Dog, Monkey and Man" (Comparaison quantitative de la toxicité des agents contre le cancer chez la souris, le rat, le hamster, le chien, le singe et   l'homme), "Cancer   Chemotherapy", Reg. 50,   n    4. 219-244, mai   1966.   



   Le niveau posologique peut évidemment être réglé pour assurer une réponse thérapeutique optimale. 



  Par exemple, on peut administrer quotidiennement plusieurs doses fractionnées ou la dose peut etre réduite proportionnellement, suivant les exigences indiquées par la situation thérapeutique. 



   On peut judicieusement administrer les composés actifs par voie parentérale,   intraperitoneale,   intraveineuse ou orale. On peut préparer les solutions ou les dispersions des composes actifs dans de   lleau,   en   melange   judicieux avec un agent tensio-actif tel que l'hydroxypropylcellulose. On peut légalement préparer des dispersions dans le glycérol, les   polyethylene-glycols   liquides et leurs mélanges, ainsi que dans des huiles. Dans les conditions habituelles 

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 de conservation et d'utilisation, ces préparations contiennent un agent de conservation pour empêcher la croissance des micro-organismes. 



   Les formes pharmaceutiques appropriées pour être injectées englobent les solutions ou les dispersions aqueuses stériles, ainsi que les poudres stériles en vue de la préparation extemporanée de dispersions ou de solutions injectables stériles. 



  Pour ces utilisations, la forme pharmaceutique doit être stérile et elle doit avoir une fluidité suffisante pour permettre une   injection äisee   au moyen d'une seringue. Elle doit être stable dans les conditions de fabrication et de conservation et elle doit être préservée contre la contamination par des microorganismes tels que les bactéries et les champignons. 



   Le support peut être un solvant ou un milieu dispersant contenant, par exemple, de l'eau, de   l'étha-   nol, un polyol (par exemple, le glycerol, le propylèneglycol, le   polyethylene-glycol   liquide, ou analogues), leurs mélanges appropriés, ainsi que des huiles végétales. On peut maintenirla fluidité appropriée, par exemple, en utilisant un enrobage tel que la lécithine, en conservant la granularité requise des particules dans le cas d'une dispersion et en utilisant des agents tensio-actifs. On peut assurer la prévention contre l'action des micro-organismes grâce   ä   différents agents antibactériens et antifongiques, par exemple, le paraben, le chlorobutanol, le phénol, l'acide sorbique le   thimerosal   ou analogues.

   Dans de nombreux cas, il peut être préférable d'incorporer des agents isotoniques, par exemple, le sucre ou le chlorure de sodium, dans la forme posologique. On peut assurer l'absorption prolongée des formulations injectables en y incorporant des agents retardant l'absorption, par exemple, le monostéarate d'aluminium et la gelatine. 

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   On prépare les solutions injectables stériles en incorporant le composé actif dans le solvant approprié, en mélange avec différents autres ingrédients énumérés ci-dessus, au besoin, en procédant ensuite à une stérilisation filtrée. En généra1, on prépare les dispersions en incorporant l'ingredient actif stérilisé dans un véhicule stérile contenant le milieu dispersant et n'importe quels autres ingrédients requis Lorsque, d'autre part, on utilise des poudres steriles pour préparer des solutions injectables stériles, il est préférable de soumettre une solution filtrée stérile des ingrédients désirés à un séchage sous vide ou à une lyophilisation, ce qui donne une poudre de l'ingredient actif plus n'importe quels ingrédients supplémentaires désirés. 



   Telle qu'elle est utilisée dans la présente spécification, l'expression "excipient ou support pratiquement non toxique, pharmaceutiquement acceptable"englobe les solvants, les milieux dispersants, les enrobages, les agents   antibactériens   et antifongiques, les agents isotoniques et retardant l'absorption, et analogues. L'utilisation de ces milieux et agents comme supports ou excipients pour ces substances pharmaceutiquement actives est bien connue dans la technique. Excepté dans la mesure où l'un ou l'autre agent ou milieu conventionnel est incompatible avec l'ingredient actif ou est toxique, on envisage son utilisation dans les formulations thérapeutiques de l'invention. On peut également incorporer, dans les compositions thérapeutiques, des ingrédients actifs supplémentaires. 



   11 peut être avantageux de formuler les compositions de l'invention en conformations posologiques unitaires en vue de faciliter l'administration et d'assurer l'uniformité de la posologie.   L'expressior   

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   "conformation posologique unitaire", telle   qu'elle est utilisée dans la présente spécification, désigne une unité physiquement discrète appropriée pour être utilisée sous forme d'une unité posologique pour les mammifères   ä   traiter ; chaque unité contient une quantité prédéterminée de la matière active, calculée pour produire l'effet thérapeutique désiré, en association avec le support pharmaceutiquement acceptable requis.

   Les spécifications des conformations posologiques unitaires sont dictées par et dépendent directement de   (a)   les caractéristiques uniques de la matière active et l'effet thérapeutique particulier à atteindre et (b) les limitations inhérentes à la technique de combinaison de cette matière active pour le traitement de la maladie chez les sujets vivants souffrant d'un état pathologique, sans qu'il se produise des effets secondaires cytotoxiques excessifs. 



   On peut obtenir la régression de la leucémie ou 1'inhibition de la croissance des tumeurs avec les 5-pyrimidine-carboxamides de la présente invention, par exemple, en administrant quotidiennement le médicament pendant une période pouvant aller jusqu'à 5 ou 10 jours ou davantage. On peut également adopter une administration multiple du médicament ou une administration s'étendant sur n'importe quelle période de base désirée. L'ingrédient thérapeutiquement actif est dès lors administre en quantités suffisantes pour favoriser la régression et l'inhibition d'un développement ultérieur ou la régression de la leucémie ou des tumeurs en absence d'effets secondaires néfastes excessifs d'une nature cytotoxique. 



  Brève description des dessins
Les dessins annexés sont donnés en vue de faciliter davantage la description de l'invention. 



  Dans ces dessins : 

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 la figure 1 représente un spectre de résonance magnétique nucléaire du mélange des composés 
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 préparé comme décrit à l'exemple 1 ci-après la figure 2 représente un spectre de masse du melange de l'exemple 1 la figure 3 représente un spectre de résonance magnétique nucléaire du   compose 3',   4-dihydro purifié de    l'exemple témoin A;   la figure 4 représente un spectre de masse du compose   3, 4-dihydro purifié   de l'exemple témoin A ; la figure 5 représente un spectre de résonance magnétique nucléaire du mélange de l'exemple 2 ci-après ; et la figure 6 représente un spectre de masse du mélange de l'exemple 2. 



  Meilleur mode de mise en oeuvre de l'invention. 



   Parmi les   5-pyrimidine-carboxamides   substitués par un groupe fluorophényle de l'invention, sont préférés le N-(4-fluorophényl)-1,2,3,4-tétrahydro-6hydroxy-4-oxo-5-pyrimidine-carboxamide et le N- (2fluorophényl) -1,2,3,4-tétrahydro-6-hydroxy-4-oxo-5pyrimidine-carboxamide, ainsi que des   melanges   contenant les composés précités conjointement avec leurs contre-parties 3, 4-dihydro. L'invention sera décrite plus en détail en se référant aux exemples spécifiques ci-après illustrant la préparation et la mise à l'épreuve de ces composés. 



   Exemple 1 Préparation de N-   (2-fluorophényl)-1,   2,3, 4-tétrahydro- 6-hydroxy-4-oxo-5-pyrimidine-carboxamide en mélange avec le N-(s-fluorophényl)-3,4-dihydro-6-hydroxy-4oxo-5-pyrimidine-carboxamide. 



   A un   melange   de 200 ml d'ammoniaque aqueuse concentrée et de 200 ml d'eau, on a ajouté 7, 2 g de la matière de départ,   ä   savoir le   N-   (2-fluorophényl)- 

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   1, 2, 3, 4-tétrahydro-6-hydroxy-4-oxo-2-thioxo-S-    pyrimidine-carboxamide (préparé de la même manière que le composé analogue dont la préparation est décrite dans l'exemple 1 de la demande de brevet   U. S. précitée n  699. 776   A ce mélange, on a ajoute 26 g de nickel de Raney. On a   chauffe mode-   riment la   suspension à 80-90oC   pendant six heures et on l'a refroidie.

   On a ajouté de l'acide chlorhydrique fort jusqu'à ce que le   melange   réactionnel soit complètement acide et que le nickel de Raney commence à se dissoudre. Lorsqu'il ne   s'est   plus produit de dégagement d'hydrogène, on a recueilli les solides, on les a lavés sur le   gäteau   de filtre avec de 
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 l'eau et de l'éthanol, puis on les aremis en suspen- sion dans 50 ml   d'éthanol.   On a ensuite porté la suspension à une température voisine du point   d'ébul-   lition, on a recueilli les solides, on les a lavés avec un peu d'éthanol et d'éther éthylique et on les a séchés. 



   Cette préparation a donné 4, 2 g d'une poudre de couleur grise n'ayant pas de point de fusion précis et se décomposant à   240 C   et plus. 



  Le produit possédait les spectres de résonance magnétique nucléaire et de masse repris dans les figures 1 et 2 des dessins. On a trouvé qu'il contenait 
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 environ 30% en poids de N- tétrahydro-6-hydroxy-4-oxo-5-pyrimidine-carboxamide et environ 70% en poids de N- (2-fluorophenyl)-1, 2, 3, 4-dihydro-6-hydroxy-4-oxo-5-pyrimidine-carboxamide. 



   Les structures attribuées   ä   ces composes sont basées sur l'interprétation des spectres de résonance magnétique nucléaire et de masse des figures 1 et 2. En se référant tout d'abord à la figure 1, le spectre de résonance magnétique nucleaire montre tous les pics de resonance d'hydrogène qui sont théoriquement 

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 présents en se basant sur la structure du N- (2-fluoro-   phényl)-3, 4-dihydro-6-hydroxy-4-oxo-5-pyrimidine-    carboxamide. Est significatif le pic du singulet distinct   ä   8,32 5, ce qui indique la présence d'hydrogène en position 2 du noyau pyrimidine ; il en est de même du multiplet large à 4,5   S,   qui indique la présence de 2 atomes d'hydrogène en position 2 du noyau pyrimidine.

   La présence de deux groupes de ces 
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 pics au meme moment met positivement en évidence l'existence des deux composes, dire, les structures 3, 4-dihydro et 1, 2, 3, 4-tétrahydro. 



  La structure   ä   pics multiples à 6,95-7, 75 S est due   ä   la presence d'atomes d'hydrogène aromatiques sur le noyau carboxamide substitué. La forme spécifique de ce complexe de pics est révélatrice de la position du substituant fluor. En figure 1, le fluor occupe la position 2 du noyau. (Comparer à la figure 5 où le fluor occupe la position   4).   



   Le spectre de masse illustré en figure 2 confirme l'attribution structurale basée sur les données du spectre de résonance magnétique nucléaire. 



  Les caractéristiques principales sont les deux pics "apparentés" (M) des composés (249 et 251 m/e) et leurs M + 1 équivalents (250 et 252 m/e) dus à la fixation de protons. Dans le diagramme de rupture, le pic le plus fort est de   111   m/e dus   ä   la fixation de   , protons, commune à   la fois aux composants dihydro et tétrahydro, de la fraction 2-fluoroanilino. Les fragments pyrimidine-carbonyle à 139 et 141 m/e sont également présents. 



   Jusqu'à présent, le composé 1, 2, 3, 4-tétrahydro n'a pas été obtenu sous forme pure et il existe uniquement sous forme de mélanges du composé précité et de produits réactionnels similaires, conjointement avec sa contre-partie   3, 4-dihydro.   

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   TEMOIN A N- (2-fluorophényl)-3,4-dihydro-6-hydroxy-4-oxo-5pyrimidine-carboxamide
On a préparé le   N- (2-f1uorophény1) -3, 4-   dihydro-6-hydroxy-4-oxo-5-pyrimidine-carboxamide purifié par oxydation contrôlée du composé 1, 2, 3, 4tétrahydro contenu dans le mélange de l'exemple 1, de la manière suivante :
On a mis 10 9 du   melange   en suspension dans 25 ml d'acide acétique glacial et on a ajouté 
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 prudemment 9 ml d'acide peracgtique à 40% dans de l'acide acétique. On a chauffe modérément le mélange pendant une demi-heure. On a ajouté de l'acide acétique glacial supplémentaire à 1a solution chaude, tout en chauffant jusqu'à ce que les solides soient pratiquement dissous. On a filtré la solution encore chaude, puis on l'a refroidie pendant une heure et on a recueilli les solides qui sont apparus.

   On a obtenu 6, 2 g d'un solide microcristallin de couleur chamois pale, qui ne présentait pas de point de fusion precis et se décomposait en fondant   ä   environ   230 C.   



   L'elimination du compose 1, 2, 3, 4-tétrahydro a été indiquée par la disparition du pic à   4,     55 S   et d'autres pics mineurs dans le spectre de résonance magnétique nucléaire, comme représenté en figure 3, ainsi que par l'absence du pic à 251 m/e dans le spectre de masse, comme représenté en figure 4. 
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  Exemple 2 N- (4-fluorophényl) 2, 3, 4-tétrahydro-6-hydroxy-4-oxo- 5-pyrimidine-carboxamide en mélange avec le N- (4-fluorphenyl 4-dihydro-6-hydroxy-4-oxo-5-pyrimidine-carbo- xamide
A un mélange de 200 ml d'ammoniaque aqueuse   concentres   et de 200 ml d'eau, on a ajoute 7,2 g de 

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 la matière de depart,   ä   savoir le   N- (4-fluorophenyl)-     1, 2, 3, 4-tétrahydro-6-hydroxy-4-oxo-2-thioxo-5-    pyrimidine-carboxamide (préparé de la même manière que le compose analogue dont la préparation est décrite dans l'exemple 1 de la demande de brevet   n  699. 776).   On y a ajouté 26 g de nickel de Raney. 



  On a chauffé modérément la   suspension a 80-900C   pendant six heures et on l'a refroidie. On a ajouté de l'acide chlorhydrique fort jusqu'à ce que le mélange réactionnel soit tout   ä   fait acide et que le nickel de Raney commence   ä   se dissoudre. Lorsqu'il ne s'est plus produit de dégagement d'hydrogène, on a recueilli les solides, on les a lavés sur le gâteau de filtre avec de l'eau et de l'éthanol, puis on les a remis en suspension dans 50 ml   d'éthanol.   On a ensuite porté la suspension à une temperature voisine du point d'ébullition. On a recueilli les solides, on les a lavés avec un peu d'éthanol et de l'ether éthylique et on les a séchés.

   On a obtenu 4, 2 g d'une poudre de couleur grise n'ayant pas de point de fusion précis et se décomposant à   240 C   et plus. Les spectres de résonance magnétique nucléaire et de masse du produit sont représentés dans les figures 5 et 6 en annexe. 
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  Les spectres étaient compatibles avec un mélange de N- (4-fluorophényl) 2, 3, 4-tétrahydro-6-hydroxy- 4-oxo-5-pyrimidine-carboxamide et de N- 3, -1,Spécifiquement, le spectre de résonance magnétique   nucleaire   de la figure 5 présente des pics   ä   8,32   #   et à 4, 5 S, ce qui indique la présence d'un seul atome d'hydrogène en position 2 du noyau pyrimidine, tout comme dans le composé   3, 4-dihydro,   ainsi que de deux atomes d'hydrogène en position 2 du noyau pyrimidine, tout comme dans le compose 1, 2, 3, 4-tétrahydro. Du fait que ces deux structures ne peuvent 

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 exister simultanément dans la   meme   molecule indique la présence d'un   melange   de ces composés.

   Cette conclusion est étayée par les données du spectre de masse de la figure 6. Dans ce spectre, apparaissent clairement deux pics M apparentés, un pour le composé   3, 4-dihydro   (249 m/e) et un pour le composé 
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 1, (251 m/e). 



  Comparaison des activités contre la leucémie des composés de l'exemple 1 et du témoin A, ainsi que de l'exemple 2 avec les   5-pyrimidine-carboxamides   substitués analogues dans la régression de la leucémie lympholde L1210 implantée par voie intrapéritonéale. 



   On a soumis des échantillons des composes d'essai de l'exemple 1, du témoin A et de l'exemple 2, ainsi que d'autres   5-pyrimidine-carboxamides   substitués de structures similaires à des essais in vivo conformement au protocole d'essai 3LE31 NCI (protocole NCI   1.     100,"Cancer   Chemotherapy Reports", partie 3, volume 3, n  2, septembre 1972) en vue de déterminer les effets des composés sur la leucémie L1210 implan-   tée   par voie   intraperitoneale ("J. Nat'l.   Cancer Inst." 13 (5) : 1328, 1953).

   Chaque essai consistait   ä   implanter des cellules de leucémie   ä   six souris DBA/2, à raison d'un sexe par essai, les souris mâles pesant au minimum 18 g et les souris femelles, au minimum, 17 g, tandis que le poids de tous ces animaux d'essai se situait dans un intervalle de 3 g. On a administré les composes d'essai par des injections par voie   intraperitoneale,   en doses de 0, 1 ml de liquide ascitique dilué    (105   cellules    par'dose)   en commençant un jour après l'implantation de la tumeur et en poursuivant les injections quotidiennement pendant neuf jours. 



   On a pesé les animaux d'essai et on a enre- 

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 gistré le nombre de survivants sur une base régulière au cours d'une période d'essai de trente jours. On a déterminé le rapport du temps de survie pour les animaux traités et les animaux témoins (T/C) sous forme d'un pourcentage. 



   On a effectué les essais à des niveaux posologiques variables en fonction des résultats obtenus avec chaque composé d'essai. On a déterminé statistiquement dans le système   d'essai 3LE31 qu'une   valeur initiale T/C au moins égale à 125% était nécessaire pour démontrer l'activité, tandis qu'une valeur T/C reproductible égale ou supérieure   ä   125% justifiait une étude   complementaire.   On considère qu'une valeur T/C reproductible de 150% ou plus représente une activité significative. 



   Les résultats des essais pour les composés de l'exemple 1 et du témoin A, de l'exemple 2, ainsi que des composés analogues substitués par un groupe 
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 2-chlorophényle, 3-fluorophényle ou 2, 
4-difluorophény-le et préparés de la même manière (témoins B-D) sont résumés au Tableau   I.   Dans le système   d'essai 3LE31,   les composés de l'exemple 1 ont montré une activité contre la leucémie (T/C % >   125%) ä   une posologie aussi faible que 50 mg/kg (exemple 1). D'autre part, aucun des composés témoins n'a exercé d'activité. 

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  TRBLEMJ 1 TABLEAU I ACl'IVIT. ES crMPARATIVES aNmE IA mx > > ITE L 1210 IMPIANI'EE PAR vom 
 EMI15.2 
 Ccmposesd'essai (Mélanges : contraire) R-. "-C---- "T-C-. t )-- H m e N , . OH R, H H 
 EMI15.3 
 1, 2, 3, 4-tétrahydro 3, 4-dihydro Cümpose (mg/kg) (ng/kg) repe- tition) tition) tition)   CCMPOSES   ACTIFS    Exemple 1 H H F H 200 250 220 260 230 267 100 147 154 153 153 179     50117   139 139 128 120   25 106   127 127   119   105   Exemple 2 H F H H 400 --- 148 200 139 127  
100 104 113
50102111
25 98 Termin A H H F H 400 -- 97 
 EMI15.4 
 (3, 4-dihydro, 200 106 115 1 T 11 purifié) 25 6J 

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Outre l'essai 3LE31, le mélange de l'exemple 1 a subi l'épreuve conforme au protocole du "National 
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 Cancer Institute" par voie intrapéritonéale) et au protocole NCI 3MBG5 (xénogreffe MX-1 du carcinome mammaire humain dans la glande    3PS31 (leucémie p388 implantéesurrénale),   de la manière suivante :

   Activité contre la leucémie du composé de l'exemple 1 dans la regression de la leucémie P388 implantée par voie intrapéritonéale
On a soumis des échantillons du mélange d'essai de l'exemple 1 à un essai in vivo suivant le protocole d'essai 3PS31 NCI ("Cancer Chemotherapy Reports", partie 3, volume 3,   n"2, septembre 1972)   pour déterminer l'action du mélange sur la leucémie P388 implantée par voie   intraperitoneale   ("American Journal of Pathology", 33 :   nO 3,   page 603, 1957). 



  Chaque essai consistait à implanter des cellules de leucémie à six souris DBA/2, à raison d'un sexe par essai, les souris mâles pesant au minimum 18 g et les souris femelles, au minimum, 17 g, tandis que le poids de tous les animaux d'essai se situait dans un intervalle de 3 g. On a administré les composés d'essai par des injections par voie   intraperitoneale,   en doses de 0, 1 ml de liquide ascitique dilué (106 cellules par dose) en commençant un jour après l'implantation de la tumeur et en poursuivant quotidiennement pendant cinq jours l'administration de ces produits synthétiques. 



   On a pesé les animaux d'essai et on a enregistré chaque jour le nombre de survivants pendant une période d'essai de trente jours. Le rapport de la durée de survie pour les animaux traités et les animaux témoins (T/C) a été déterminé sous forme d'un pourcentage. 



   On a effectué les essais   ä   des niveaux 

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 posologiques variables. Dans le système d'essai 3PS31, on a déterminé qu'une valeur T/C initiale au moins égale à ou supérieure à 120% pour les produits synthétiques était nécessaire pour démontrer une activité modérée. On considère qu'une valeur T/C reproductible de 175% ou plus représente une activité significative. 



  Le mélange de l'exemple 1 a exerce   l'activiste   suivante
TABLEAU II Activité des composés de l'exemple 1 dans la régression de la leucémie P388 implantée par voie   intraperitoneale   Dose (mg/kg) T/C % T/C % (répétition)   400   200 188 171 100 158 144
50 124 134
25   128 127  
Le mélange de l'exemple 1 a exercé une activité contre la leucémie   (T/C   % >   120%) ä   une posologie aussi faible que 25 mg/kg. 



  Essai comparatif du mélange de l'exemple 1 dans la régression de la xénogreffe   MX-1   du carcinome mammaire humain dans la glande surrénale
On a soumis des échantillons du mélange d'essai de l'exemple 1   ä   des essais in vivo conformément au protocole d'essai 3MBG5 NCI ("Cancer Chemotherapy Reports", partie 3, volume 3,   nO 2,   septembre 1972) pour déterminer les effets du mélange sur des carcinomes mammaires humains dans la glande surrénale (explant chirurgical prélevé en 1974 à partir d'une tumeur mammaire primaire chez une   femme agee   de 29 ans n'ayant subi aucune chimiothérapie préalable). 



  Chaque essai a consisté à implanter un fragment de tumeur sous l'enveloppe membraneuse du rein de souris thymiques Swiss ou athymiques élevées au hasard. 



  Chaque groupe d'essai comprenait six souris et chaque 

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 groupe témoin, 12 souris, à raison d'un sexe par essai, les souris mâles pesant au minimum 18 g et les souris femelles, au minimum, 17 g, tandis que le poids de tous les animaux d'essai se situait dans un intervalle de 4 g. On a administré les composés d'essai par injection par voie   intrapéritonéale,   en commençant un jour après l'implantation de la tumeur'et on a répété l'injection tous les quatre jours pour arriver   ä   un total de trois injections. 



   On a pesé les animaux d'essai et on a enregistré quotidiennement le nombre de souris mortes au cours d'une période d'essai de 11 jours. On a déterminé sous forme d'un pourcentage le rapport du changement de poids moyen des tumeurs pour les animaux traités et les animaux témoins (T/C). 



   On a effectué les essais   ä   des niveaux posologiques variables. On a   determine   qu'une valeur initiale T/C inférieure ou égale à 20% était nécessaire pour démontrer une activité modérée. Une valeur T/C reproductible inférieure ou égale   ä   10% est considérée comme une activité significative.

   Le mélange de l'exemple 1 a exercé   l'activiste   suivante : Activité   des cnposes   de l'exemple 1 dans la régression de   laxénogreffe MX-1 du   carcinome mammaire humain dans la glande surrénale 
 EMI19.1 
 
<tb> 
<tb> Dose <SEP> (mg/kg) <SEP> T/C <SEP> % <SEP> T/C <SEP> % <SEP> (répétition)
<tb> 800----
<tb> 400---58
<tb> 200 <SEP> 33 <SEP> 51
<tb> 100 <SEP> 55 <SEP> 67
<tb> 
 
On a trouvé que le mélange de l'exemple 1 était inefficace dans le système d'essai 3MBG5. 



   D'après ce qui précède, on peut constater que, suivant la présente invention, on prévoit une classe de nouveaux   5-pyrimidine-carboxamides   dont 

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 les membres exercent une activité cytotoxique   impor-   tante et provoquent la régression et/ou inhibent le développement de la leucémie et des tumeurs chez les mammifères. 11 est clair que différents changements peuvent etre apportés dans le procédé de préparation et l'utilisation, ainsi que dans la substitution particulière des   composés thérapeutiquement actifs   de l'invention. En conséquence, la description qui précède, doit être considérée comme donnée uniquement ä titre d'illustration et le cadre de l'invention doit être interprété conformément aux revendications en annexe.

Claims

REVENDICATIONS 1. Procédé en vue de provoquer la régression de la leucémie et l'inhibition de la croissance des tumeurs chez les mammifères, caractérisé en ce qu'il consiste à administrer, aux mammifères, une quantité efficace d'un compose répondant ä la formule : (I) EMI21.1 dans laquelle R1 représente un atome d'hydrogène ou un radical carbohydrate choisi parmi le groupe comprenant les groupes furanosyle, pyranosyle, glucopyranosyle ou galactopyranosyle, leurs dérivés doxy, ainsi les groupes hydroxyalcoxyalkyle et polyhydroxyalkyle contenant 2-12 atomes de carbone dans chacune de leurs fractions alcoxy et alkyle ; et un des radicaux R3 ou R4 représente un atome de fluor et l'autre, un atome d'hydrogène.

2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le composé est le N- (2-fluorophényl) - 1, 2, 3, 4-tétrahydro-6-hydroxy-4-oxo-5-pyrimidine- carboxamide.

3. procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le composé est le N- (4-fluorophényl) - 1,2, 3, 4-tétrahydro-6-hydroxy-4-oxo-5-pyrimidinecarboxamide.

4. procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le composé lest mélangé avec un composé de formule : <Desc/Clms Page number 22> EMI22.1 dans laquelle R-, R3 et R4 ont les significations définies ci-dessus, ou un de ses sels d'addition pharmacologiquement acceptables ; et les composés I et II sont présents en proportions telles que le melange exerce une activité contre la leucémie ou contre les tumeurs.

5. procédé selon la revendication 4, caractérisé en ce que le composé lest présent en une quantité d'au moins 5% molaires du mélange.

6. Procédé selon la revendication 4, caractérisé en ce que le composé I est le N- (2-fluoro- phenyl)-1, 2,3, 4-tétrahydro-6-hydroxy-4-oxo-5-pyrimidine-carboxamide et le composé II est le N- (2fluorophényl) -3, 4-dihydro-6-hydroxy-4-oxo-5-pyrimidine-carboxamide.

7. Procédé selon la revendication 6, caractérisé en ce que le N- (2-fluorophenyl)-1, 2, 3, 4-tétra- hydro-6-hydroxy-4-oxo-5-pyrimidine-carboxamide est présent en une quantité d'au moins 5% molaires du melange.

8. procédé selon la revendication 4, caractérisé en ce que le composé lest 1e N- {4-f1uoro- phényl) -1, 2,3, 4-tétrahydro-6-hydroxy-4-oxo-5-pyrimidine-carboxamide et le composé II est le N- (4fluorophényl) -3,4-dihydro-6-hydroxy-4-oxo-5-pyrimidine-carboxamide.

9. procédé selon la revendication 8, caracterse en ce que le N- (4-fluorophényl)-1, 2,3, 4- <Desc/Clms Page number 23> tétrahydro-6-hydroxy-4-oxo-5-pyrirnidine-carboxamide est présent en une quantité d'au moins 5% molaires du mélange.

10. 5-pyrimidine-carboxamide substitué par un groupe fluorophényle et répondant à la formule (I) EMI23.1 dans laquelle R représente un atome d'hydrogène ou un radical carbohydrate choisi parmi le groupe comprenant les groupes furanosyle, pyranosyle, glucopyranosyle ou galactopyranosyle, leurs dérivés EMI23.2 deoxy et les groupes hydroxyalcoxyalkyle et polyhydroxyalkyle contenant 2 ä 12 atomes de carbone dans chacune de leurs fractions alcoxy et alkyle ; et un des radicaux R3 ou R4 représente un atome de fluor, tandis que l'autre représente un atome d'hydrogène.

11.5-pyrimidine-carboxamide substitué par un groupe fluorophényle selon la revendication 10, à EMI23.3 savoir le N- hydroxy-4-oxo-5-pyrimidine-carboxamide.

(2-fluorophényl) -1, 2, 3, 4-tétrahydro-6-12. 5-pyrimidine-carboxamide substitué par un groupe fluorophényle selon la revendication 10, à savoir le N- (4-fluorophényl) -1, 2,3, 4-tétrahydro-6- hydroxy-4-oxo-5-pyrimidine-carboxamide.

13. Mélange de 5-pyrimidine-carboxamides substitués par un groupe fluorophényle, caractérisé en ce qu'il comprend le compose I en melange avec un compose de formule : <Desc/Clms Page number 24> EMI24.1 dans laquelle R., R et R4 ont les significations définies ci-dessus, ou un de ses sels d'addition pharmacologiquement acceptables ; et les composés I et II sont présents en proportions telles que le mélange exerce une activité contre la leucémie ou contre les tumeurs.

14. Mélange selon la revendication 13, caractérisé en ce que le composé lest présent en une quantité d'au moins 5% molaires du melange.

15. Mélange de 5-pyrimidine-carboxamides substitués par un groupe fluorophényle selon la revendication 9, caractérisé en ce que le composé I est le N- (2-fluorophényl)-1, 2, 3, 4-tétrahydro-6- hydroxy-4-oxo-5-pyrimidine-carboxamide et le composé II est le N-(2-fluorophényl)-3,4-dihydro-6-hydroxy- 4-oxo-5-pyrimidine-carboxamide. EMI24.2

16. de 5-pyrimidine-carboxamides Mélangesubstitués par un groupe fluorophényleselon la revendication 13, caractérisé en ce que le composé I est le N- (4-fluorophenyl)-1, 2,3, 4-tétrahydro-6- hydroxy-4-oxo-5-pyrimidine-carboxamide et le compose II est le N-(4-fluorophényl)-3,4-dihydro-6-hydroxy-4oxo-5-pyrimidine-carboxamide.

17. Composition pharmaceutique en vue de provoquer la régression de la leucémie ou l'inhibition de la croissance des tumeurs, caractérisée en ce qu'elle contient une quantité efficace du composé <Desc/Clms Page number 25> selon la revendication 10, en melange avec un excipient ou un support pratiquement non toxique, pharmaceutiquement acceptable.

18. Composition pharmaceutique en vue de provoquer la régressionde1a 1eucémie ou 1'inhibition de la croissance des tumeurs, caractérisée en ce qu'elle contient une quantité efficace du compose selon la revendication 11, en Melange avec un excipient ou un support pratiquement non toxique, pharmaceutiquement acceptable.

19. Composition pharmaceutique en vue de provoquer la régression de la leucémie ou l'inhibition de la croissance des tumeurs, caractérisée en ce qu'elle contient une quantite efficace du composé selon la revendication 12, en melange avec un excipient ou un support pratiquement non toxique, pharmaceutiquement acceptable.

20. Còmposition pharmaceutique en vue de provoquer la régression de la leucémie ou l'inhibition de la croissance des tumeurs, caractérisee en ce qu'elle contient une quantité efficace du melange selon la revendication 13, en mélange avec un excipient ou un support pratiquement non toxique, pharmaceutiquement acceptable.