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La présente invention a pour objet la. préparation de la tétracycline par fermentation.
Il a été découvert récemment que les microorganismes du genre Streptomyce s , qui produisent de la chlorotëtracy- cline, produisent aussi de la tétracycline,particulièrement si la concentration eu ions chlorure du milieu de fermenta- tion est maintenue faible. On peut y arriver en préparant des milieux de fermentation dont les ions chlorure sont exel@ soit en préparant le Milieu de fermentation avec des consti- tuants exempts de chlorures, soit en traitant le milieu par des agents qui éliminent ou séquestrent les ions chlorure, les rendant ainsi indisponibles pour la formation de la chlore -tétracycline.
.Malheureusement, certaine ces constituants lesplus efficaces des milieux de fermentation destinés à la prépara- tion des antibiotiques du groupe tétracycline, contiennent des quantités appréciables d'ions chlorures La liqueur de ma- cération de mais est l'une des substances nutritives les plus efficaces pour la production des antibiotiques du groupe tétracycline ainsi que de beaucoup d'autres antibiotiques.
Apparemment, cette matière naturelle contient quelque chose qui est spécialement désirable pour le microorganisme de fermentation. Les rendements les plus élevés sont donc obtenus lorsqu'on inclut une portion de liqueur de macération de mais dans le milieu nutritif aqueux.
Mais la liqueur de macération de mais contient une quantité notable d'ions chlorure, et lorsqu'on doit maintenir la formation de chlorotétracycline à un niveau raisonnable- ment bas, il est nécessaire, jusqu'il présent, de réduire la
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teneur en chlorures de cette matière. Il en est de même pour plusieurs autres matières nutritives de provenance naturelle que l'on utilise avantageusement dans le processus de fermen- tation.
Plusieurs moyens ont été suggérés pour réduire la te- neur en ions chlorure des solutions nutritives aqueuses des- tinées à la production de la tétracycline. La précipitation de l'ion chlorure sous forme de chlorure d'argent est un moyen très efficace .pour réduire/la teneur en ions chlorure.
Toutefois, c'est là un procédé coûteux, qui nécessite des ma- tières premières coûteuses, un matériel spécial,, et un gaz toxique, l'hydrogène sulfuré, pour la récupération de l'ar- gent.
Des résines échangeuses d'ions ont été également proposées pour réduire le. teneur en ions chlorure des milieux de fermentation. Ces substances tendent à éliminer certains sels et certaines substances organiques de composition non identifiée qui sont des constituants désirables des milieux de fermentation. Par suite, on obtient parfois de faibles rendements en antibiotique , quand on utilise des solutions nutritives qui ont été traitées au préalable par des résines échangeuses d'ions pour en éliminer les ions chlorure.
Toutefois, les systèmes d'élimination des chlorures laissent beaucoup à désirer, en raison des investissements de capitaux nécessaires, des moyens relativement compliqués employés pour éliminer les ions chlorure du milieu de fermen- tation, et aussi du fait qu'en pareil cas, le milieu de fer- mentation peut être composé uniquement de matières premières dont on peut facilement éliminer l'ion chlorure, ou qui sont naturellement pauvres en chlorures.
Il a été proposé aussi de déplacer l'équilibre dans une fermentation de tétracycline-chlorotôtracycline, en utili.
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sant du bromure, qui,apparemment inhibe à certains égard::;la
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.formation de 10 chlorotétr8,c:;n; .Li.ne.
Pour produire efficacement des rendements élevés en tétracycline, la présente invention a recours à un milieu de fermentation dans lequel il n'est pas nécessaire d'élimi- ner les ions chlorure du système. La présente invention est basée sur la découverte suivant laquelle, lorsqu'on ajoute à un milieu de fermentation qui contient des chlorures, un inhibiteur de chloruration tel que défini ci-après l'activi- té des microorganismes est détournée de la synthèse de la chlorotétracycline , vers la synthèse de la tétracycline.
L'invention est d'une importance pratique extrême parce qu'elle supprime les frais et les inconvénients occasionnés par l'élimination des ions chlorure du milieu de fermentation.
Suivant l'invention, on fournit un procédé de prépa- ration de la. tétracycline par fermentation aérobie d'un
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milieu de fermentation aqueux au moyen d'un ilicroorgallÎsfhe du genre StreT.Jtor.1yces, procédé qui consiste à ajouter,. à ce milieu, un azole-1,3,4 substitué en 2,5, répondant à la for- mule générale suivante :
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dans laquelle X représente NH, S ou 0; R1 représente SE}
EMI3.4
SR, Sali, SC3ft S02NH2' Br ou Cl (R étant un radical non réactif, non toxique et indifférent); et Ri représente II9 8H, SR, SUtti ..;, /(.
(R étant comme défini ci-dessus), S02Ml:[2 13r, J¯, ou un groupe aminé, alkylar25.zxe'infEerieure, allylanline, arylamine monocyclique, aralkylaminc. ïf10T10CyCa..Z,tlIIC'y ncylamine, alkyle inférieur, aryle monocyclique, ara Iky le mnuocyclique, furylc, thiaxolyle et nyridyle; cet azolo-1,3,.;>lltaStitu en 2,5 est présent en quantité suffisante pour inhiber la forma-
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tion de la chlorotétracycline et entraîner la formation de quantités notables de tétracycline.
Par exemple, lorsqu'on prend un milieu de fermenta- tion courant du S.sursofaciens, qui, en l'absence d'inhibi- teurs, donnerait 8700 gammas/cm3 de chlorotétracycline et 555 gammas/cm3 de tétracycline, et qu'on y ajoute seulement 10 parties par million de l'un de ces inhibiteurs de chloru- ration, ceci a pour effet de convertir la fermentation en une fermentation productrice de tétracycline, et d'amener la for- mation de 240 gammas/cm3 de chlorotétracycline et 7540 gammas /cm3 de tétracycline.
En fait, ces nouveaux inhibiteurs de chloruration permettent d'obtenir, dans Ses conditions usu- elles de fermentation de chlorotétracycline, un rapport té- tracycline : chlorotétracycline d'environ 99:1*
On peut utiliser n'importe quel microorganisme du genre Streptomyces qui produit à la fois de la chloro:bétracy- cline et de la tétracycline par biosynthèse fermentative.
Il semble jusqu'à nouvel ordre que tous ces microorganismes soient du genre Streptomyces. Un utilise de préférence l'espè. ce aureofaciens, qui produit la chlorotétracycline dans des milieux de fermentation contenant des ions chlorure, ainsi que de nombreuses mutantes naturelles et provoquées, et bien entendu ces microorganismes produisent aussi de la tétracycli ne lorsqu'ils sont privés d'ions chlorure, un certain nombre d'autres microorganismes producteurs de tétracycline ont été mentionnés dans la littérature comme de prétendues espèces distinctes de Strebtomyces, par exemple le S.viridifaciens, le S.sayamaensis, le S.fsofaciens, et d'autres encore.
Les données morphole ioues publiéessur ces microorganismes sont insuffisamment concluantes pour déterminer si ce sont, ou non. de.^, espacer; nouvel! on, ou simplement des souches de S. nuroo- faciens. @ais dans tous les cas, In présente invention n'est
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pas basée sur le choix d'une esnèce parclculière, mais, cor-nue on l'a indioué plus haut, elle concerne l'usage d'inhibiteurs de chloruration qui détourne ivo l'activité du ::licroorp-e.t'3mE' de la synthèse de la chlorortbtracycline vers la synthèse de la tétracycline. far conséquent, la présente invention com- tout microorgal1Ísn:
e qui produit aE la chlorotétracy- cline et de la tétracycline.
Parmiles inibiteurs de chloruration particulièrement utiles, pour la réalisation de la présente invention, on
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peut mentionner le 5-amino-2-mercapto-l,3,4-thiadiazole, le 2,5-dimercapto-l,3,4-thiadi:1lo1e, le 2-T)Iié-iiyl-5-mercanto- 1,3,4-oxadiazole, le 2-(2-furyl)-5-mercapto-l,3,4-oxadiazole, le -benzylmercpto-1,,.-th,adl,azole, ainsi que divers autres composés de la présente invention qui apparaîtront à l'examen des exemples détaillés donnés ci-après.
Comme dans le cas où l'on utilise des ions bromure pour diminuer la chloruration fermentative, les inhibiteurs de la présente invention peuvent être quelque peu toxiques
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pour les nticroorganismes, spécialement quand ils sont utili- sés à de fortes concentrations. Heureusement, de très petites
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quantités d'inibiteurs de la présente invention diminuent ae façon très notable la formation de la chlorotétracycline.bne quantité d'une partie par million seulement donne un certain effet. De façon générale, on a trouvé que les inhibiteurs peuvent être ajoutés en quantités variant d'environ 1 partie à 50u parties par million, la gamme optimum étant d'environ 5 à 100 parties par million.
De façon générale, plus on ajoute
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d'inhibiteur, moins il se formera de efilorotétricycliiie.l'ar contre, à mesure que l'on ajoute l'inhibiteur, le?, effets toxiques commencent à se manifester et le rel. "I-I(:11t total en antibiotique di-minue. Par suite, on n'a observé aucun
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avantage à dépasser 500 parties par million environ, et moins .encore dans certains cas.
¯)Il oeut aussi utilement ajouter des ions bromure cans la fermentation, en même temps die les azoles-1,3,4- substitués en , de la présente invention, En pareil cas, on a constaté outil faut une quantité encore moindre d'inhibiteur organique ae chloruration pour ramener la chlorotétracycline à un niveau donné lorsau'on ajoute du bromure. Par conséquent, il suffit d'une partie par million seulement d'azole, et moins encore dans certains cas, pour diminuer la chlorotétra- cycline dans la mesure désirée, lorsqu'on ajoute du bromure.. - En conséquence, on peut utiliser l'ion bromure en quantités variant de 1 partie par million seulement, jusqu'à 6000- 7000 parties par million si on le désire.
Un autre avantage de la présente invention est que les inhibiteurs de chloruration permettent d'utiliser une large variété de souches de S. aureofaciens. Autrement dit, avec les systèmes de privation de chlorures, les souches les plus fortement productrices de tétracycline, c'est-à-dire les souches ramasseuses de chlorures, ne pouvaient souvent pas être utilisées parce qu'elles produisaient aussi une for- te quantité de chlorotétracycline. Par contre, avec la présen -te invention, on neut utiliser facilement ces souches, car les inhibiteurs de chloruration permettent de déplacer facile. ment l'équilibre en faveur de la tétracycline.
Les conditions de la fermentation visant à donner de la tétracycline sont généralement les marnes que dans les méthodes actuellement connues de préparation de la tétracy- cline ou de la chlorotétracyline par fermentation. Autrement dit, le milieu de fermentation contient les principes nutri- tifs usuels et les substances minérales usuelles.
Des sub- tances nutritives appropriées, que peuvent fournir les corps
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nécessaires, sont notamment 1 c : :ecozz, lo t:':^'¯,,ï;'c7:ue , In ::1r::- de canne, le F^1¯uCOSe, la IJ!6L;::- #."*, la iar:.. , soja, #: /# *\l¯ ne d'arachide. la levure, J,-'8 .¯.;raits ce 1.:-',["):'.", la :. >##"?, le sulfate d'ammonium, l'urée, la liqueur de '.lacération de mais, les produits solubles de distillerie, la farine de
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poisson et autres substances courantes.
Les sets -2*--lorge,.Ii-- ques comprennent par exemple le carbonate de c<"Jlciu1:l, le su3..- fate d'ammonium, le chlorure d'ammonium, le phosphate monoso- dique, et les divers oligo-éléments tels que le manganèse, le cobalt, le zinc, le cuivre, le fer, etc...
Les autres conditions générales de la fermentation telles que le pH, la température, le temps, le taux d'aéra- tion, la préparation de l'inoculum, la stérilisation, l'ino-
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culatioll, .etc.... sont usuelles.
De même, la récupération de la tétracycline à partir de -la liqueur de fermentation est usuelle et n'a pas besoin d'être-décrite, car on a fait connaître de nombreuses métho- des pour récupérer la tétradycline dans les liqueurs de fer- mentation.
Dans les exemples qui suivent, les rendements en tétracycline et en chlorotétracycline sont exprimés en gam- mas/cm3.
On décrira l'invention plus en détail à propos des exemples précis qui suivent.
EXEMPLE 1.-
Un milieu de fermentation, propre à servir à une production sur grande échelle, et contenant une grande quanti- té d'ions chlorure, est composé comme suit :
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amidon 55 g/1 liqueur de macération de maïs 25 CaCO3 9 (NH4)2SO4 5,6
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I.uSO 4 (70) 30 t.lll Colz.SI-I0 5 '" Huile de;saindoux 3% en volume chlorure d' ar;t:notiiurrt 1,7 g/1 A ce milieu, on ajoute des quantités variables de : .-dimercanto-1,3,.rthiadiazole. On distribue les milieux, en quantités aODropriées, dans des flacons, on les stérilise, on les inocule avec un inoculum végétatif de ê..nureofaciens et on fait incuber à 26,5 C sur une secoueuse, rotative pen- dant 96 heures. On titre alors leur teneur en chlorotétracy- cline et en tétracycline.
Les résultats obtenus sont indi- qués dans le tableau ci-dessous.
TABLEAD I.-
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r. ¯ ¯.. parties Chloroté- 1 Tétracycli-1 i de tétra- Compose - ?ar tracycline j gammas/ par tracycline i ,ie --¯arnas/ cycline million ja;a!)imas/cm3 Cta3 cyclino témoin 0 6950 76? 11 ,5-dimercato--1, 100 70 6250 98,9 3,4-thiadiazo- zoo 60 5560 1 .90
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<tb> le <SEP> 400 <SEP> 45 <SEP> 5260 <SEP> 99,2
<tb>
<tb>
<tb>
<tb>
<tb>
<tb> 0 <SEP> 7350 <SEP> 927 <SEP> 87
<tb>
EMI8.4
25 440 7200 # 94,2 50 255 (D98o 0,5 75 190 7025 97,4 100 10 6750 97.4 '
EMI8.5
IJ lL:J1Li 3JIJ 2.- 'l'outes les operntiotiR indiquées ci-dessous ont; lieu dans des flacons de secoueuse, à ;o-:?7')t.:, sur unt- St3COueuse rotative fonctionnant 3 14 t/Mi.
LG iillieu, l'inoculum et ] lE' tefrP3 de récolte sont les que ceux iadiou68 -1 lt{'{t"m-
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pie 1, la seule différence résidant dans l'addition de dif- férents azoles à la fermentation. Les résultats obtenus sont indiqués dans le tableau ci-dessous ;
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TABLEAU 2. - ¯¯¯¯-.¯.
EMI10.2
Composé parties par Chloroététxac Tétracyeline ,1 de tétra- million cline,gamns gammasfcm3 cycline cm3 5-ani no-2-.ercapto-1, 3 , 4-thiadiazole 0 7100 3t7 10,6
EMI10.3
<tb> 25 <SEP> 545 <SEP> 6200 <SEP> 92,0
<tb> 50 <SEP> 375 <SEP> 6225 <SEP> 94,0
<tb> 100 <SEP> 360 <SEP> 5356 <SEP> 84,0
<tb>
EMI10.4
3-:
ercapto-l ,2-,-I-ïi.zoe .g0 12 100 095 8$7 50 2-(4-pyridyl)-5-mercapto-l,3,4-oxadiazole 0 7550 580 7,1
EMI10.5
<tb> 20 <SEP> 1040 <SEP> 5850 <SEP> 84,9
<tb>
EMI10.6
50 47J 4440 4G 2-phényl-5-#ercapto-l,3,4-oxadiazole 0 7550 5$0 7,1
EMI10.7
<tb> 5 <SEP> 170 <SEP> 6100 <SEP> 97,2
<tb> 10 <SEP> 40 <SEP> 3920 <SEP> 98.9
<tb>
EMI10.8
2-g-chlorophényl-5-.^,lercapto-la3sl-oxadiazole 0 7550 580 ---# 7
EMI10.9
<tb> 5 <SEP> 4405 <SEP> 2155 <SEP> 32,8
<tb> 10 <SEP> 780 <SEP> 2965 <SEP> 79,1
<tb>
EMI10.10
2-(2-i'trrl3 -5-mercapto-1,3, .-oxadiazole 0 7550 580 7,1
EMI10.11
<tb> 5 <SEP> 435 <SEP> 6450 <SEP> 93,6
<tb> 10 <SEP> 160 <SEP> 6805 <SEP> 97,7
<tb>
EMI10.12
1,.0 20 1780 95, è 2-é thy 3a:
.ino-5-mercapto-l, 3, -thi adiazole 0 7550 580 7el
EMI10.13
<tb> 5 <SEP> 2540 <SEP> 2130 <SEP> 45,8
<tb> 10 <SEP> 540 <SEP> 1670 <SEP> 74,4
<tb>
EMI10.14
2-mµth.ylaraino-5-taercapto-l,3,4-thiadiazole 0 7550- 580 7,1
EMI10.15
<tb> 10 <SEP> 910 <SEP> 5150 <SEP> 84,9
<tb> 20 <SEP> 450 <SEP> 4900 <SEP> 91,5
<tb>
EMI10.16
¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯ 50 22 3475 93.
') 2-ani1ino-5-mercapto-l,3,4-thiadiazo1e 0 7550 580 7,1
EMI10.17
<tb> 5 <SEP> 1940 <SEP> 1470 <SEP> 43,1
<tb> <-## <SEP> 10 <SEP> 280 <SEP> 1215 <SEP> 8le2
<tb>
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TABLEAU 2 (SUITE).-'
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###!#! -'#-#.I ### ### l l" #'# #####!### ##'####### #-" --###- '####'
EMI11.2
<tb> Composé <SEP> é <SEP> Parties <SEP> par <SEP> Chlorotétracy- <SEP> Tétracycline <SEP> % <SEP> de <SEP> tétra-
<tb> ,Million <SEP> cline,gammas/ <SEP> gammas/cm3 <SEP> cycline
<tb> cm3
<tb>
EMI11.3
3, ',-thiadiazole 0 7550 580 7}1
EMI11.4
<tb> 5 <SEP> 1550 <SEP> 1810 <SEP> 53,8
<tb> 10 <SEP> 270 <SEP> 1382 <SEP> 83.6
<tb>
EMI11.5
2 -a e 3 , 4-thiadiazole 0 7550 5$0 7,1 ¯.
¯
EMI11.6
<tb> " <SEP> ' <SEP> ' <SEP> 10 <SEP> 1175 <SEP> 5575 <SEP> 82,6
<tb> 20 <SEP> 445 <SEP> 5360 <SEP> 92,3
<tb>
EMI11.7
¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯ 50 zl 5 -0'7 5 94.9¯¯¯¯¯¯ I z.-ben4ylme.L ccp to1, 39! thfadïazole 0 6600 770 10,5 ' 50 40 4375. 99 100 110 4325 97 200 50 1355 96. 5 2"(2-hiasolyl)-5-:nercapto-l,3:4<-oxadiazole 0 6600 770 10,5 100 165 2200 -- 933 z:z.--'ahrl-5ben.zylr:ercapto-1, 3, t.r-thi adiazole 0 6250 èô2 12,1.
EMI11.8
<tb>
10 <SEP> 2280 <SEP> 3925 <SEP> 63,2
<tb> 25 <SEP> 475 <SEP> 5400 <SEP> 91,9
<tb>
EMI11.9
z-a: :ino5-êe>7 zylmerca pt odl 8 3 , I-thiadiazole 0 6250 862 12,1
EMI11.10
<tb> ' <SEP> 5 <SEP> 2600 <SEP> 2410 <SEP> 48,1
<tb> 10 <SEP> 1005 <SEP> 4920 <SEP> 83,0
<tb> 25 <SEP> 575 <SEP> 5500 <SEP> 90,5
<tb>
EMI11.11
?-'ceâz;lvul on;Tl e-1, 3 a IY-ihi adin2ole 0 6750 635 Il,0
EMI11.12
<tb> ' <SEP> 5 <SEP> 720 <SEP> 5060 <SEP> 87,5
<tb> 10 <SEP> 400 <SEP> 5200 <SEP> 92,9
<tb>
EMI11.13
¯2¯5 ¯ l$a 5z$0 6 5-Ê r¯iô- -hsz zyl mercapto-1 y 3 81-thiadiazole 0 5050 590 10,5
EMI11.14
<tb> 5 <SEP> 3775 <SEP> 802 <SEP> 17,5
<tb> 10 <SEP> 3100 <SEP> 1080 <SEP> 25,8
<tb>
EMI11.15
25 2300 . 1115 32.6 .¯....¯
<Desc/Clms Page number 12>
TABLEAU 2(Suite).
EMI12.1
Parties Chlorotâtracycli- T4trayycline % de tétra- Composé par i]Le,gammas/cm3 gammasi'cm3 cycline million 2-méthylmercapto-l,3,4-thiadiazolie 0 5050 590 loge
EMI12.2
<tb> 5 <SEP> 4050 <SEP> 777 <SEP> 16,0
<tb> 10 <SEP> 2200 <SEP> 1385 <SEP> 38,6
<tb>
EMI12.3
¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯ 25 1000 1445 $9,.1 2-acêtylaniino-5-benzylmercapto-l,3t4- 0 5050 590 10,5
EMI12.4
<tb> thiadiazole <SEP> 5 <SEP> 2700 <SEP> 2740 <SEP> 50,3
<tb> 10 <SEP> 1180 <SEP> 3340 <SEP> 73,8
<tb> 25 <SEP> 610 <SEP> 3670 <SEP> 85,7
<tb>
EMI12.5
5-acéty1amino-l,3,4-thiadiazo1e-2- 0 5050 590 10,5 sÎfonyl-méthane 5 4400 642 12,7
EMI12.6
<tb> 10 <SEP> 4500 <SEP> 697 <SEP> 13,4
<tb> 25 <SEP> 3500 <SEP> 1020 <SEP> 22,5
<tb>
EMI12.7
2,5-dibromo-1,3,4...thiadiazo1e 0 4750 615 IIJ5
EMI12.8
<tb> 5 <SEP> 2505 <SEP> 2330 <SEP> 49,2
<tb> 10 <SEP> 540 <SEP> 3030 <SEP> 84,
9
<tb>
EMI12.9
¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯¯ 25 162 1760 9lr7 2-amino-5-bromo-l,3,4-thiadiazole 0 4750 615 11,5 25 4600 835 15,3 2-acétamido-5-bromo-l,3,4-thiadiazole 0 4750 615 11, ff
EMI12.10
<tb> 10 <SEP> 2150 <SEP> 70 <SEP> .3,15
<tb>
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EXEMPLE 3.- On répète les opérations de l'exemple 2, sauf que l'on utilise des quantités plus petites des inhibiteurs indi- qués ci-dessous.
Les résultats obtenus sont indiqués dans la tableau ci-dessous :
TABLEAU 3.-
EMI13.1
--...- parties Chloroté- Tétracycli-1 % de té
EMI13.2
<tb> Compose <SEP> par <SEP> tracycline <SEP> ne <SEP> gamma/ <SEP> tracycline
<tb>
<tb>
<tb>
<tb> million <SEP> gamma/cm3 <SEP> cm3
<tb>
<tb>
<tb>
<tb>
<tb>
<tb> 2-phényl-5-mercap- <SEP> 0 <SEP> 8700 <SEP> 555 <SEP> 6,0
<tb>
<tb>
<tb>
<tb> to-l,3,4-oxadia- <SEP> 1 <SEP> 2375 <SEP> 2490 <SEP> 51,2
<tb>
<tb>
<tb> zole <SEP> 2 <SEP> 485 <SEP> 4320 <SEP> 89,9
<tb>
<tb>
<tb> 3 <SEP> 210 <SEP> 4160 <SEP> ' <SEP> 95,2
<tb>
<tb>
<tb> 4 <SEP> 140 <SEP> 3985 <SEP> 96,5
<tb>
<tb>
<tb>
<tb> 5 <SEP> 100 <SEP> 3370 <SEP> 97,1
<tb>
<tb>
<tb>
<tb>
<tb>
<tb> 2-(2-furyl)-5-mercap- <SEP> 0 <SEP> 8700 <SEP> 555 <SEP> 6,0
<tb>
<tb>
<tb>
<tb> to-l,3,4-oxadiazol <SEP> 5 <SEP> 500 <SEP> 6860 <SEP> 93,
2
<tb>
EMI13.3
6 390 710 9., $
EMI13.4
<tb> 7 <SEP> 335 <SEP> 7300 <SEP> 95,6
<tb>
<tb>
<tb> 8 <SEP> 275 <SEP> 7520 <SEP> 96,5
<tb>
<tb>
<tb> 9 <SEP> 245 <SEP> 7620 <SEP> 96,9
<tb>
<tb>
<tb> 10 <SEP> 240 <SEP> 7540 <SEP> 96,9
<tb>
<tb>
<tb>
<tb> 2-benzylmercapto-l,3, <SEP> 0 <SEP> 6850 <SEP> 805 <SEP> 10,5
<tb>
<tb>
<tb> 4-thiadiazole <SEP> 1 <SEP> 5675 <SEP> 1375 <SEP> 19,5
<tb>
<tb>
<tb> 3 <SEP> 2605 <SEP> 2955 <SEP> 53,1
<tb>
<tb>
<tb> 5 <SEP> 1000 <SEP> 4015 <SEP> 80,5
<tb>
<tb>
<tb> 10 <SEP> 450 <SEP> 5080 <SEP> 91,9
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EXEMPLE 4.-
Voici un tableau de l'effet combiné du bromure et du 2-(2-furyl)-5-mercapto-l,3,4-oxadiazole. On peut y voir qu'il faut moins d'oxadiazole pour ramener la chlorotétracy- cline à un niveau donné, lorsqu'on utilise du bromure.
<Desc/Clms Page number 14>
Bromure de potassium g/1
EMI14.1
<tb> Oxadiazol <SEP> 0 <SEP> 1,0 <SEP> 2,5 <SEP> 4,0
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<tb> parties
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<tb> par <SEP> million <SEP> CTC <SEP> TC <SEP> CTC <SEP> TC <SEP> CTC <SEP> @ <SEP> CTC <SEP> TC
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<tb> 0 <SEP> 5200 <SEP> 675 <SEP> 300 <SEP> 2075 <SEP> 2050 <SEP> 2905 <SEP> 1975 <SEP> 2890
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<tb>
<tb>
<tb>
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<tb> 2 <SEP> 1025 <SEP> ' <SEP> 3210 <SEP> 505 <SEP> 3735 <SEP> 260 <SEP> 3700 <SEP> 155 <SEP> 3900
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<tb>
<tb>
<tb>
<tb>
<tb>
<tb> 3 <SEP> 665 <SEP> 3750 <SEP> 265 <SEP> 4240 <SEP> 155 <SEP> 3960 <SEP> 105 <SEP> 3720
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<tb>
<tb>
<tb>
<tb>
<tb> 5 <SEP> 365 <SEP> 4080 <SEP> 190 <SEP> 4240 <SEP> 100 <SEP> 3995 <SEP> 90 <SEP> 3790
<tb>
<tb>
<tb>
<tb>
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<tb> 7 <SEP> 260 <SEP> .
<SEP> 4260 <SEP> 160 <SEP> 4540 <SEP> 90 <SEP> 3160 <SEP> 85 <SEP> 3610
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REVENDICATIONS.- 1.- Procédé de préparation de la tétracycline par fermentation aérobie en milieu aqueux, au moyen d'un micro- organisme apte à produire de la tétracycline du genre Strep- tomyces, dans lequel procédé on ajoute au milieu de fermenta- tion un azole-1,3,4 substitué en 2,5et répondant à la for- mule générale :
EMI14.2
**ATTENTION** fin du champ DESC peut contenir debut de CLMS **.