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Publication number: BE623205A
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Description


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  "Procédé de séchage par congélation de préparations de catalase". 



   La présente invention a pour objet des enzymes et plus particulièrement un nouveau procédé perfectionné de prépa- ration de catalase de foie séchée. 



   Jusqu'à présent, on a formé des préparations de cata- lase séchées par congélation, mais undes inconvénients de ces préparations réside dans la perte partielle de l'activité de la catalase, se produisant non seulement au cours du séchage par congélation, mais également après un long repos. Il fallait trouver un procédé permettant de protéger la catalase contre la désactivation au cours de l'étape de séchage et lors du 

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 stockage ultérieur. 



   En conséquence, un objet de la présente   invention   est de prévoir un nouveau procédé perfectionné de séchage par con-   gélation   des préparations de catalase. 



   Un autre objet de la présente invention est de pré- voir une préparation de catalase de foie séchée, protégée contre la perte d'activité et conservant une haute   efficacité   sus forme sèche. 



   Un autre objet de la présente   invention   est d'aug- menter sensiblement l'activité de la catalane dans une prépara- tion séchée. 



   Suivant la présente invention, on a trouvé un moyen de préparer une   catalane   lyophilisée pratiquement stable à partir d'une solution de catalane semi-purifiée, à laquelle on ajoute une des matières choisies parmi le groupe comprenant la glycine, le lactose, le chlorure de sodium et le citrate de sodium. La matière première, à partir de laquelle l'enzyme est obtenu peut être décrit, d'une manière générique, comme un tissu de foie de mammifère. 



   La catalase peut être récupérée du foie par un des procédés connus, comme par exemple celui décrit dans le brevet      américain N  2.834.713 de la Demanderesse, déposé au nom de Kenneth C. Robbins. Dans ce procédé, oh peut obtenir un extrait aqueux purifié du foie, contenant une importante quantité de ' la catalase présente dans la matière première. Le produit   contient*   des impuretés indirectement vis-à-vis de l'extrait utilisé. 



   Un procédé particulièrement approprié pour   l'extrac-   tion de la catalase du foie de porc est décrit dans le brevet      américain ?   2.703.779   de la Demanderesse, déposé de 8 mars 1955 au nom de August L. Lolli. Par ce procédé, on prépare une catalase hydrosoluble stable ayant une activité relativement élevée..      

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   Il est entendu que la catalase utilisée comme matière première suivant la présente   invencion   contiendra de nombreuses impuretés connues et présentes dans la solution de catalane non-purifiée. Le degré de   purification   ne semble pas critique pour la réalisation de la présente invention, qui a pour ob- jet un nouveau procédé perfectionné de   séchage   par congélation de préparation de catalase ,   où le   produit conserve la majeure partie de l'activité initiale de la catalase après séchage. 



  Pour atteindre ce résultat, on a, suivant la présente inven- tion, ajouté certaine produits à une solution de catalase avant le séchage. Ces produits comprennent la glycine, le lactose, le chlorure de sodium ou le citrate de sodium. On a constaté que ces produits, présents dans les quantités   spéci-   fiées, favorisaient considérablement le produit dérivé dans le séchage par congélation de la catalase, en particulier celui extrait du foie de boeuf, tout en le rendant, par conséquent, plus efficace dans toute une variété de formules. 
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 MP:# '1 
On a divisé, en parties aliquotes, une solution de oa-   talase,   extraite par les procédés décrits ci-dessus et conte- nant environ 153 unités Keil par ml de catalase active. Des quantités de 500 ml ont été séchées par congélation en guise de contrôle.

   A d'autres quantités de 500 ml, on a ajouté res-   paotivement   20g de glycine, de lactose,de chlorure de sodium et de citrate de sodium. Ensuite, on a séché ces solutions par congélation.Le procédé utilisé pour le séchage par congélation est bien connu dans la technique.C'est pourquoi,il ne semble pas nécessaire de décrire le procédé de séchage dans la présente description. 



   Les exemples montrent l'accroissement de l'activité de la catalane suivant la présente invention, mais   ils   ne limi- tent nullement cette dernière. Les résultats repris dans le premier exemple montrent les différentes valeurs de l'éohantil- 
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 lon avant l'addition des produits repris ci-dessus. L'activité" 

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 est exprimée en unités Keil par gramme de solide. La "récupération d'activité" est le total d'unités Keil dans les solides 
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 secep multiplié par 100 et divisé par le total d'unités Keil dans le liquide.Le pH est la valeur de la solution de la poudre séchée, reconstituée dansïleau. les échantillons de contrôle avaient les valeurs suivantes : 
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 .m:Sipn ActImlt4 Rr.9.Q...'.a<?.iY.i .... 



  2093 9 2340 62% 7,5 
 EMI4.3 
 PZPL4p-LB il 
A une partie aliquoto de   500   ml de la solution préparée, on a ajouté 20 g de glyoine. Les résultats sont les suivants : 
 EMI4.4 
 Récupération Aotvité técunr..dri d, ' activité .. 
 EMI4.5 
 
<tb> 40,7 <SEP> g <SEP> 1525 <SEP> 81% <SEP> 7,3
<tb> 
 
EXEMPLE   III   
A une partie aliquote de 500 ml de la solution préparée, on a ajouté 20 g D laotose. Les résultats sont les suivants 
 EMI4.6 
 Récupération A9Y ,..:....t ....., 
 EMI4.7 
 
<tb> 40,0 <SEP> g <SEP> 1670 <SEP> 87% <SEP> 7,6
<tb> 
 
EXEMPLE IV 
A une partie aliquote de 500 ml de la solution préparée, on a ajouté 20 g de chlorure de sodium.

   Les résultats sont les suivante : 
 EMI4.8 
 
<tb> Récupération <SEP> Activité <SEP> Récupération <SEP> d'activité <SEP> pH
<tb> 
<tb> 39,6 <SEP> g <SEP> 1700 <SEP> 88% <SEP> 7,4
<tb> 
 
EXEMPLE V 
A une partie aliquote de 500 ml de la solution prépa- rée, on a ajouté 20 g de citrate de sodium.

   Les résultats sont les suivants ! 
 EMI4.9 
 Récupération Activité Réçupér19n 9faotivit -PIL 39, g 1760 91% 7,6 Bien que, dans la spécification ci-dessus, on ait 

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 décrit différentes formes de réalisation de la présente inven- tion dans leurs détails   spécifiques   titre d'illustration, l'homme de métier comprendra que d'autres formes de réalisation sont possibles et que l'on peu modifier la   plupart   des détails spécifiques dans une large mesure, sans se départir de l'esprit et du cadre de la présente invention. 



   REVENDICATIONS. 



   1.- Procédé de préparation de catalane séchée, carac-   térisé   en ce qu'il comprend les étapes qui consistent à ajouter, à une solution de catalase, une matière choisie parmi le groupe comprenant la glycine, le lactose, le chlorure de sodium et le citrate de sodium, puis sécher la solution par congélation. 



   2.- Procédé de séchage d'une solution de catalase, en vue de conserver la majeure partie de l'activité initiale de la catalase, caractérisé en ce qu'il comprend les étapes qui consistent à ajouter de la glycine à une solution de catalase, puis sécher la solution par congélation. 



   3.- Procédé de séchage d'une solution de catalase, en vue de conserver la majeure partie de l'activité initiale de la catalase,   caractérise*   en ce qu'il comprend les étapes qui con- sistent à ajouter du   lactose   à   Un*   solution de   caisse )   puis   Bêcher   la solution pur congélation. 



     4.-   Procédé de séchage d'une solution de catalase, en vue de conserver la majeure partie de   l'activité   initiale de la catalase, caractérisé en ce qu'il comprend les étapes qui consistent à   ajouteu   chlorure de sodium à une solution de catalase, puis sécher la solution par congélation. 

**ATTENTION** fin du champ DESC peut contenir debut de CLMS **.

Claims

5.- Procédé de séchage d'une solution de oatalase, en vue de conserver la majeure partie de l'activité initiale de la catalase, caractérisé en ce qu'il comprend les étapes qui con- sistent à ajouter du citrate de sodium à la solution de catalase, puis sécher la¯solution par congélation. **ATTENTION** fin du champ CLMS peut contenir debut de DESC **.