BE865786A - Procede de preparation de l'acide 3-(2-aminoethylthio)-6-ethyl-7-oxo-1-azabicyclo(3,2,0) hept-2-ene-2-carboxylique - Google Patents

Description

  Procédé de préparation de l'acide 3-(2-

  
 <EMI ID=1.1> 

  
Priorité de deux demandes de brevet déposées aux Etats-Unis d'Amérique le 8 avril 1977 sous le n[deg.] 785 811 et le 

  
 <EMI ID=2.1>  La présente invention est relative à l'acide

  
 <EMI ID=3.1> 

  
hept-2-ène-2-carboxylique répondant à la formule de structure générale suivante:

  

 <EMI ID=4.1> 


  
ainsi qu'à ses sels pharmaceutiquement acceptables, composés qui constituent des antibiotiques de valeur.

  
La présente invention concerne également des procédés de préparation du composé I et de ses sels, des compositions pharmaceutiques qui contiennent les substances précitées et des procédés de traitement caractérisés en ce que l'on administre le composé I ou l'un de ses sels lorsque l'on souhaite obtenir un effet antibiotique.

  
L'acide 3-(2-aminoéthylthio)-6-éthyl-7-oxo-

  
 <EMI ID=5.1> 

  
commodément de l'antibiotique thiénamycine (II) par élimination du groupe 6-hydroxyle:

  

 <EMI ID=6.1> 
 

  
La thiénamycine est décrite et revendiquée

  
dans le brevet des Etats-Unis d'Amérique n[deg.] 3 950 357 accordé le 13 avril 1976.

  
La thiénamycine et tous ses isomères (sous forme pure et sous forme de mélanges) peuvent également s'obtenir par la synthèse totale. Tous ces isomères de la thiénamycine sont disponibles comme matières de départ pour la préparation des composés conformes à l'invention.

  
La présente invention concerne aussi des composés intermédiaires (III-IV) convenant pour la préparation du composé I:

  

 <EMI ID=7.1> 


  
 <EMI ID=8.1> 

  
formules dans lesquelles R et R' représentent des atomes d'hydrogène ou des groupes protecteurs faciles à éliminer. R et R' seront définis de manière plus détaillée dans la suite du présent mémoire.

  
Il existe un besoin continu de nouveaux antibiotiques. Un antibiotique donné ne possède malheureusement pas d'efficacité statique parce que l'utilisation  continue à grande échelle de cet antibiotique engendre  sélectivement des souches d'organismes pathogènes qui lui  résistent. Au surplus, les antibiotiques connus souffrent  du désavantage de n'être seulement efficaces que contre  certains types de microorganismes. Par conséquent, la  recherche en vue de découvrir de nouveaux antibiotiques 

  
se poursuit. 

  
La présente invention a par conséquent pour objet un nouvel antibiotique ainsi que ses sels pharmaceutiquement acceptables, que l'on peut utiliser en thérapie animale et humaine et dans des systèmes inanimés. Ces antibiotiques sont actifs contre une large gamme d'organismes pathogènes dont on peut citer en exemples des bactéries Gram-positives, telles que S. aureus, Strep. pyogenes et B. subtilis, et des bactéries Gram-

  
 <EMI ID=9.1> 

  
Serratia et Klebsiella.

  
La présente invention a aussi pour objet des procédés chimiques de préparation de ces antibiotiques et de leurs sels atoxiques pharmaceutiquement acceptables, des compositions pharmaceutiques qui contiennent au moins l'un des antibiotiques en question et des procédés de traitement caractérisés en-ce que l'on administre les antibiotiques et les compositions en question lorsque l'obtention d'un effet antibiotique est souhaitable.

  
En général, on prépare les composés conformes à la présente invention selon le schéma suivant:

  

 <EMI ID=10.1> 
 

Dans les formules ci-dessus, le radical

  
OR du composé de la structure IIb est aisément éliminé par traitement par une base de façon à former une ènelactame III qui, par réduction, engendre le composé I conforme à la présente invention. Le radical OR est typiquement un radical sulfate ou sulfonate.

  
De manière plus spécifique, on prépare commo-

  
 <EMI ID=11.1> 

  
la présente invention selon le schéma réactionnel suivant:

  

 <EMI ID=12.1> 
 

  
 <EMI ID=13.1> 

  
où M représente un atome d'hydrogène ou n'importe quel cation non critique, tel qu'un métal alcalin ou une base

  
 <EMI ID=14.1> 

  
radical aryle, tel que le groupe méthyle ou toluyle et R représente un groupe bloquant (ou protégeant) la fonc-

  
 <EMI ID=15.1> 

  
groupe bloquant la fonction N,facile à éliminer.

  
Des groupes bloquant la fonction carboxyle préférés,

  
R, sont les radicaux benzyle et benzyle substitués dans le noyau:

  

 <EMI ID=16.1> 


  
X représentant un groupe nitro, alkoxy inférieur, tel

  
que méthoxy et analogues; on préfère cependart le radical benzyle. Comme groupes R' bloquant la fonction N convena-  bles, on peut.citer les radicaux bromo-t-butoxycarbonyle,  chloro-t-butoxycarbonyle, bromoéthoxycarbonyla, benzyloxycarbonyle, p-nitrobenzyloxycarbonyle et analogues. Un  groupe bloquant la fonction N tout particulièrement pré-  férés est le radical bromo-t-butoxycarbonyle. 

  
En se référant au schéma réactionnel susmention-  né, une thiénamine protégée de la manière appropriée

  
 <EMI ID=17.1>  

  
 <EMI ID=18.1> 

  
dans un solvant, tel que le chlorure de méthylène, le tétrahydrofuranne, le dioxanne, le chloroforme et analogues, par un agent de sulfonation, tel que le chlorure'de méthanesulfonyle, le chlorure de toluènesulfonyle et analogues, en présence d'une base,telle que l'un des

  
 <EMI ID=19.1> 

  
pyridine, NaH à une température qui varie de -15 à
25[deg.]C pendant une durée de 1 à 10 heures. Les esters du

  
 <EMI ID=20.1> 
-0 e M &#65533; ) conviennent également comme matières de départ et possèdent la formule de structure suivante:

  

 <EMI ID=21.1> 


  
dans laquelle M représente un atome d'hydrogène, un cation 

  
 <EMI ID=22.1> 

  
dent les significations précitées. 

  
Quant à la réaction impliquant les composés intermédiaires IIb, il faut noter que les symboles R

  
et R' peuvent également représenter des atomes d'hydrogène, outre les groupes protecteurs susmentionnés. De tels composés intermédiaires IIb se préparent en débloquant la forme protégée du composé IIb par mise en oeuvre de procédés classiques qui seront décrits dans

  
la suite du présent mémoire.

  
Il faut noter que les esters du type sulfate des composés intermédiaires IIb (R " est OH) peuvent également s'obtenir sous la forme de produits naturels.

  
En se référant de nouveau au schéma réactionnel

  
 <EMI ID=23.1> 

  
à partir du composé IIb en traitant ce composé II par une base, telle que l'un des composés suivants NaHCO-,

  
 <EMI ID=24.1> 

  
5-ène et analogues, dans un solvant, tel que le méthanol, le tétrahydrofuranne, le dioxanne et analogues, à une température qui varie de -20 à 25[deg.]C, pendant une durée qui varie de 1 à 20 heures.

  
On obtient le composé 6-éthylique intermédiaire IV à partir du composé III par réduction, de préférence, en traitant le composé III dans un solvant, tel que l'éthanol, l'acétate d'éthyle, le dioxanne, le benzène et analogues, en présence d'un catalyseur d'hydrogéna-

  
 <EMI ID=25.1> 

  
l'hydrogène sous une pression de 1 à 4 atmosphères, à une température de 0 à 25[deg.]C pendant une durée variant de 0,5 à 5 heures. On peut débloquer le composé intermédiaire IV par mise en oeuvre du procédé d'hydrogénation décrit ci-dessus en vue d'obtenir le composé I ou bien, selon l'identité des groupes protecteurs R " et R, on peut réaliser le déblocage par mise en oeuvre de procédés séparés, oomme par hydrolyse ou hydrogénation dans des conditions différentes. Il faut encore faire remarquer que le déblocage peut s'opérer antérieurement dans le schéma sur le composé intermédiaire IIb. Le procédé de déblocage peut également être effectué sous forme de réaction à étape unique au cours de la conversion du composé III en composé IV. On peut réaliser un déblocage séparé IV-*-I par mise en oeuvre de n'importe lequel de toute

  
 <EMI ID=26.1> 

  
hydrogénation. De préférence, le groupe R bloquant la fonction carboxyle est enlevé par hydrogénation dans un solvant, tel qu'un alcanol inférieur, par exemple l'éthanol, en présence d'un catalyseur d'hydrogénation, tel que le palladium, le platine ou des oxydes de ces métaux,

  
sous des pressions d'hydrogène de 1 à 40 atmosphères,

  
à une température de 0 à 50[deg.]C et pendant une durée qui varie de 1 à 10 heures.

  
Le groupe R' protégeant la fonction N peut également être éliminé par hydrogénation, mais lorsque l'on utilise le radical bromo-t-butoxy carbonyle préféré, on réalise commodément le déblocage en chauffant une solution du composé IV ou du composé IV à fonction carboxyle dé-bloquée, dans un solvant, tel que l'éthanol, l'isopropanol, l'eau et analogues, à une température de 25 à

  
80[deg.]C, pendant une durée qui varie de 10 minutes à 3 heures.

  
Le produit conforme à la présente invention (I) engendre toute une série de sels pharmaceutiquement acceptables avec des bases inorganiques et organiques; ces sels comprennent, par exemple, les sels de métaux qui proviennent de dicarbonates, carbonates ou hydroxydes de métaux alcalins ou de métaux alcalino-terreux et des sels provenant d'aminés primaires, secondaires ou tertiaires, comme des monoalkylamines, de dialkylamines, des trialkylamines, des alcanol inférieur amines, des dialcanol inférieur amines, des alkylène inférieur diamines, des N,N-diaralkyl alkylène inférieur diamines, des aralkylamines, des amino alcanols inférieurs, des N,N-di-alkyl inférieur amino alcanols inférieurs, des acides amino-, polyamino- et guanidino-alcanoiques inférieurs et des amines hétérocycliques contenant de l'azote.

   A titre d'exemples illustratifs des sels en question, on peut citer les sels dérivés de l'hydroxyde de sodium, du carbonate de sodium, du bicarbonate de sodium, du carbonate de potassium, de l'hydroxyde depotassium, du carbonate de calcium, des amines suivantes: triméthylamine, triéthylamine, pipéridine, morpholine, quinine, lysine, 

  
 <EMI ID=27.1> 

  
benzylamine, éthylènediamine, N,N'-dibenzyléthylène-  diamine, diéthanolamine, pipérazine, diméthylaminoéthanol,  2-amino-2-méthyl-1-propanol, théophylline, N-méthylglu-  camine et analogues. Des sels de l'amine primaire des composés I avec des acides organiques et inorganiques pharmaceutiquement acceptables entrent également dans le cadre de l'invention. Ces sels comprennent notamment les suivants: méthanesulfonate, 2-naphtalènesulfonate, pamoate, 3-phényl propionate, triméthylacétate, t-butyl acétate, p-toluènesulfonate, maléate, lactate, cyclamate, fumarate, tartrate, oxalate, benzoate, acétate, succinate, citrate, glutamate, chlorhydrate, bromhydrate, sulfate, phosphoate, n-acétylglycinate, benzènesulfonate, hexa-

  
 <EMI ID=28.1> 

  
et analogues et peuvent se préparer selon les procédés bien connus.

  
Les sels peuvent être des mono-sels, comme le sel monosodique obtenu en traitant un équivalent d'hydroxyde de sodium par un équivalent du produit (1)

  
 <EMI ID=29.1> 

  
sels peuvent s'obtenir en traitant un équivalent d'une base possédant un cation bivalent, comme l'hydroxyde

  
de calcium, par un équivalent du produit (I). Les sels conformes à la présente invention sont des dérivés atoxiques pharmaceutiquement acceptables que l'on peut utiliser à titre d'ingrédient actif dans des compositions pharmaceutiques qui se présentent sous forme de doses unitaires appropriées. On peut aussi les combiner à d'autres médicaments de façon à obtenir des compositions à large spectre d'activité. 

  
Les composés conformes à la présente inven-

  
 <EMI ID=30.1> 

  
des substances antimicrobiennes de grande valeur qui

  
sont actives contre divers organismes Gram-positifs

  
et Gram-négatifs. Ainsi, l'acide libre et, plus particulièrement les sels de ce dernier, comme les sels  . d'amines et de métaux, en particulier les sels de métaux alcalins et de métaux alcaline-terreux, constituent des bactéricides intéressants et peuvent s'employer pour éliminer des organismes pathogènes sensibles de l'équipement dentaire et médical, pour séparer des microorganismes et pour le traitement thérapeutique d'êtres humains et d'animaux. Dans ce dernier cas, on peut utiliser des sels pharmaceutiquement acceptables avec des bases inorganiques et organiques, tels que les sels bien connus des spécialistes et utilisés pour l'administration de pénicillines et de céphalosporines. Par exempt on peut utiliser, à cette fin, des sels tels que les sels de métaux alcalins et de métaux alcalino-terreux et dessels d'aminés primaires, secondaires et tertiaires.

   On peut combiner ces sels à des véhicules solides et liquides <EMI ID=31.1> 

  
des doses unitaires convenables, comme des pillules, des comprimés, des capsules, suppositoires, des sirops,

  
 <EMI ID=32.1>  

  
 <EMI ID=33.1> 

  
biotiques de valeur dont l'activité s'exerce contre diverses bactéries Gram-positives et Gram-négatives et, par conséquent, on peut les utiliser en médecine humaine et vétérinaire. Les composés conformes à la présente invention peuvent, par conséquent, s'utiliser comme substances antibactériennes pour le traitement d'infections provoquées par des bactéries Gram-positives et Gram-négatives, par exemple, on peut les utiliser contre les organismes suivants: Staphylococcus aureus, Escherichia

  
 <EMI ID=34.1> 

  
Salmonella typhosa, Pseudomonas et Bacterium proteus.

  
Les composés antibactériens conformes à l'invention peuvent également s'utiliser sous forme d'additifs d'aliments pour animaux, pour la conservation d'aliments et comme désinfectants. Par exemple, on peut les utiliser sous la forme de compositions aqueuses, en concentrations variant de 0,1 à 100 parties d'antibiotique par million de parties de solution, afin de détruire et d'inhibter la croissance de bactéries nuisibles sur l'équipement médical et dentaire et on peut aussi les utiliser comme bactéricides destinés à des applications

  
 <EMI ID=35.1> 

  
croissance de bactéries nuisibles. 

  
On peut utiliser les produits conformes à la présente invention, seuls ou en combinaisons, à titre d'ingrédients actifs, dans l'une quelconque de toute

  
une série de préparations pharmaceutiques. Ces antibiotiques et leurs sels correspondants peuvent s'utiliser. sous la forme de capsules ou sous la forme de comprimés,

  
de poudres ou de solutions liquides ou sous la forme de suspensions ou d'élixirs. On peut les administrer par la voie orale, intraveineuse ou intramusculaire.

  
Les compositions conformes à l'invention se présentent, de préférence, sous une forme convenant à l'absorption par le tractus gastro-intestinal. On peut présenter les comprimés et les capsules à administrer

  
par la voie orale sous la forme de doses unitaires et

  
ces comprimés et capsules peuvent contenir des excipients, comme des agents liants, par exemple du sirop, de la

  
gomme d'accacia, de la gélatine, du sorbitol, de la

  
gomme adragante ou de la polyvinyl-pyrrolidone; 

  
des charges,-par exemple, le lactose, le saccharose, l'amidon de mais, le phosphate de calcium, le sorbitol

  
ou la glycine; des lubrifiants, par exemple le stéarate  de magnésium, le talc, le polyéthylène glycol, la silice;  des agents de désintégration, par exemple la fécule de  pomme de terre ou des agents mouillants acceptables, 

  
 <EMI ID=36.1> 

  
comme le lauryl sulfate de sodium. On peut enrober les 

  
 <EMI ID=37.1> 

  
 <EMI ID=38.1> 

  
 <EMI ID=39.1>  d'émulsions, de solutions, de suspensions aqueuses

  
ou huileuses, etc., ou bien elles peuvent se présenter

  
sous la forme d'un produit sec à reconstituer avec de

  
l'eau ou avec tout autre véhicule approprié avant l'emploi. De telles préparations liquides peuvent contenir

  
des additifs classiques, comme des agents de mise en suspension, par exemple du sirop de sorbitol, de la

  
méthyl cellulose, du sirop de glucose/saccharose,

  
de la gélatine, de l'hydroxyéthylcellulose, de la carboxyméthyl cellulose, du gel de stéarate d'aluminium,

  
ou des huiles comestibles hydrogénées, par exemple

  
l'huile d'amande, l'huile de coprah fractionnée, des

  
esters huileux, le propylène glycol ou l'alcool éthylique; des conservateurs, par exemple les p-hydroxybenzoates de méthyle ou de propyle ou l'acide sorbique; les suppositoires contiendront des bases pour suppositoire classiques, par exemple le beurre de cacao ou tout autre glyceride convenable.

  
Les compositions destinées à l'injection peuvent se présenter sous la forme de doses unitaires dans

  
des ampoules ou dans des récipients qui en contiennent

  
des doses multiples en même temps qu'un conservateur. Les compositions en question peuvent se présenter sous la forme de suspensions, de solutions ou d'émulsions dans l'huile ou dans des véhicules aqueux et peuvent contenir des 

  
agents de mise en composition, comme des agents de mise

  
en suspension, des agents stabilisants et/ou dispersants. 

  
L'ingrédient actif peut aussi se présenter sous la forme d'une poudre destinée à être reconstituée avec un véhicule approprié, par exemple de l'eau apyrogène stérile, avant l'emploi.

  
On peut également préparer les compositions

  
sous des formes convenant à l'absorption à travers les muqueuses du nez et de la gorge ou à travers les tissus bronchiques et elles peuvent commodément prendre la forme de poudres, de produits à inhaler ou de sprays liquides, de pastilles, de compositions de badigeonnage de la gorge, etc. Pour le traitement des yeux ou des oreilles, les préparations peuvent se présenter sous la forme de capsules individuelles, qu'elles soient liquides ou seni-solides, ou bien on peut les utiliser sous la forme de gouttes, etc. On peut réaliser der applications topiques en incorporant les composés conformes à l'invention à des bases hydrophobes ou hydrophiles, comme des onguents, des crèmes, des lotions, des produits à badigeonner, des poudres des pommades, etc.

   De même, outre un excir'ent, les compositions conformes à l'invention peuvent également contenir d'autres ingrédients, comme des stabilisants, des liants, des antioxydants, des conservateurs, des lubrifiants,

  
des agents de mise en suspension, des agents conférant

  
de la viscosité ou des agents aromatisants et analogues.

  
Au surplus, on peut également incorporer aux compositions conformes à l'invention, d'autres ingrédients actifs de façon à obtenir un spectre d'activité antibiotique plus large. 

  
Pour l'usage en médecine vétérinaire, les compositions peuvent, par exemple, se présenter sous

  
la forme de préparations intramammaires dans des bases

  
à libération rapide de la substance médicamenteuse ou

  
à activité prolongée.

  
La dose que l'on administre dépend dans une grande mesure de l'état du sujet à traiter et du poids

  
de ce sujet, du mode et de la fréquence d'administration, la voie parentérale étant préférable pour le traitement d'infections généralisées et la voie orale étant préférable pour le traitement d'infections intestinales. En général, la dose quotidienne à administrer par la voie orale varie d'environ 15 à environ 600 mg d'ingrédient actif par kg de poids du corps du suje-t, en une ou plusieurs administrations par jour. Une dose quotidienne préférée pour l'être humain adulte varie d'environ 80 à
120 mg d'ingrédient actif par kg du poids du corps.

  
Les compositions conformes à l'invention peuvent s'administrer sous forme de plusieurs doses unitaires comme c'est le cas, par exemple, d'une forme solide ou liquide, administrée par la voie orale. Les compositions peuvent contenir, par dose unitaire, qu'elles soient soli-

  
 <EMI ID=40.1> 

  
la proportion préférée de substance active variant d'en-  viron 10 à 60 %. La composition contient généralement de 
15 mg à environ 1500 mg d'ingrédient actif; cependant, en  général, il est préférable d'utiliser une dose d'ingrédient actif dans la composition qui varie d'environ 250 mg à 1000 mg. Lors de 1'administration parentérale, la dose unitaire se présente habituellement sous forme du composé pur en solution dans de l'eau stérile légèrement acidifiée ou sous la forme d'une poudre soluble destinée à être mise en solution.

  
Les exemples qui suivent illustrent les produits, des procédés, les compositions et les méthodes de traitement conformes à l'invention sans pour autant limiter cette dernière.

  
 <EMI ID=41.1> 

  
au spectre de résonance magnétique nucléaire.

  
EXEMPLE 1

  
Préparation du sel de sodium de la N-bromo-t-butyloxy-

  
 <EMI ID=42.1> 

  
de la solution entre 8,5 et 9,0 à l'aide de NaOH 1N, cependant que l'on ajoutait 480 mg de chloroformiate de bromo-t-butyle à la solution, en l'espace de 5 minutes. On a agité le mélange pendant 30 minutes et on l'a ensuite neutralisé jusqu'à un pH de 7,0 avec de l'acide chlorhydrique 1N et on l'a extrait par de l'éther. On a séparé la couche aqueuse, on l'a concentrée jusqu'à un volume de

  
 <EMI ID=43.1> 

  
50X8 (forme Na) (3,8 x 25,4 cm) et on a procédé à l'élution avec de l'eau de manière à obtenir 113 mg du produit souhaité après lyophilisation. 

  
Méthode B: On a maintenu de la thiénamycine (95 mg) dans
10 ml d'un tampon au phosphate 0,1 M et 10 ml de dioxanne

  
à 0[deg.]C. On a ajusté et maintenu le pH de la solution à 8,5-9,0, cependant que l'on y ajoutait 240 mg de chloroformiate de bromo-t-butyle. On a agité le mélange pendant
30 minutes et on l'a ensuite acidifié jusqu'à un pH de

  
2,0 avec du H3P04. On a extrait la solution acidifiée avec 2 x 25 ml d'acétate d'éthyle. On a séparé la couche organique et on l'a réextraite par 10 ml d'une solution aqueuse

  
 <EMI ID=44.1> 

  
EXEMPLE 2

  
Préparation d' l'ester p-nitrobenzylique de la N-bromot-butyloxvcarbonyl thiénamycine

  
On a agité le sel de sodium de la N-bromo-tbutyloxycarbonylthiénamycine lyophilisé (100 mg) à 26[deg.]C, avec du bromure de p-nitrobenzyle (300 mg) dans 2 ml d'hexaméthylphosphoramide, pendant 1 heure. On a dilué

  
le mélange avec 10 ml d'acétate d'éthyle et on l'a ensuite vigoureusement lavé à l'eau. On a séparé la couche orga-

  
 <EMI ID=45.1> 

  
graphiée sur deux plaques de chromatographie en couche mince de gel de silice de 250 &#65533; GF en utilisant de l'acétate d'éthyle comme solvant (Rf: 0,45), de façon à obtenir 50 mg du produit souhaité. IR &#65533;CDC13): 1777 (P-lac-

  
 <EMI ID=46.1> 

  
max  <EMI ID=47.1> 

  
identique à celle décrite ci-dessus, sauf que l'on a substitué une quantité équivalente de bromure de benzyle au bromure de p-nitrobenzyle précité.

  
EXEMPLE 3

  
Préparation de l'ester benzylique de la N-benzyloxycarbonyl thiénamycine

  

 <EMI ID=48.1> 


  
On a dissous de la thiénamycine (214 mg,

  
 <EMI ID=49.1> 

  
on a agité la solution sous refroidissement au bain de glace; on a ajouté d'un seul coup du NaECO:; (995 mg,

  
11,85 mmoles) et on a poursuivi l'agitation pendant

  
5 minutes. On a ensuite ajouté du dioxanne (17,6 ml) et on a agité la solution pendant 5 minutes supplémentaires. On a ensuite ajouté une solution glacée de chloroformiate de benzyle (242 mg, 1,42 mmole) dans du tétrahydrofuranne
(5 ml), répartie en 5 fractions égales, en l'espace de
16 minutes. Après agitation pendant 15 minutes supplé mentaires dans le froid, on a recouvert le mélange réactionnel d'éther diéthylique glacé (Et 20) (40 ml) et on a acidifié le tout:,.-Jusqu un pH de 6,8 avec une solution aqueuse froide à 5 % de H3P04. On a séparé les couches et on a extrait la fraction aqueuse avec une quantité supplémentaire d'éther diéthylique (2 x 30 ml).

   On a recouvert la phase aqueuse d'acétate d'éthyle glacé
(EtOAc, 35 ml) et on a rapidement agité le mélange sous refroidissement au bain de glace, cependant que l'on amenait le pH à 2,4 avec une solution aqueuse froide à

  
 <EMI ID=50.1> 

  
fractim aqueuse avec une quantité supplémentaire d'acétate d'éthyle. On a lavé les solutions à l'acétate d'éthyle réunies avec une saumure glacée (20 ml), puis on les a séchées sur du Na2S04 dans le froid et on les a filtrées.

  
La solution ainsi obtenue contenait de la N-benzyloxycarbonyl thiénamycine.

  
On a ajouté du phényldiazométhane éthéré,

  
glacé (15 ml d'une solution 0,25 M) à la solution à l'acétate d'éthyle et on a laissé reposer la solution ainsi obtenue dans un réfrigérateur pendant 1 heure.

  
On a évaporé les solvants sous vide et on a dilué le résidu à deux reprises avec de l'acétate d'éthyle et on l'a débarrassé du dioxanne sous vide. On a dissous le résidu dans de l'acétate d'éthyle (5 ml) et on a lentement dilué

  
 <EMI ID=51.1> 

  
servation au réfrigérateur jusqu'au lendemain, on a filtré le mélange afin d'en séparer le précipité. On a lavé cette

  
 <EMI ID=52.1>  

  
On a réuni les liqueurs-mères et les liqueurs de lavage et on les a évaporées sous vide. On a trituré le résidu avec de l'hexane (3 x 50 ml), on l'a dissous dans de l'acétate d'éthyle et on a fait passer la solution à travers un filtre en verre fritté contenant du gel de silice (2 g). On a lavé le tampon de gel de silice avec une quantité supplémentaire d'acétate d'éthyle. On a évaporé l'acétate d'éthyle sous vide jusqu'à obtenir un volume d'environ 1 ml, on a dilué ce volume à l'aide d'éther diéthylique jusqu'à obtenir un volume de 5 ml et on a abandonné la solution dans un réfrigérateur pendant

  
2 jours. On a recueilli le précipité formé, on l'a lavé avec de l'éther diéthylique froid et on l'a séché sous vide de façon à obtenir de l'ester benzylique de N-benzyl-

  
 <EMI ID=53.1> 

  
de paillettes blanches.

  
La première récolte de produit possédait les caractéristiques suivantes: P.F. 125-126[deg.] (stade mi-

  
 <EMI ID=54.1> 

  
On a dissous de la thiénamycine (798 mg, 2,93 mmoles) dans de l'eau glacée (200 ml) et on a agité la solution ainsi obtenue sous refroidissement, au bain de glace. On a ajouté du bicarbonate de sodium solide (2,462 g, 29,3 mmoles) en une fraction et, après quelques minutes, on a ajouté du dioxanne (200 ml). On a agité le mélange ainsi obtenu dans le froid pendant 3 minutes et on l'a ensuite traité, goutte à goutte et en l'espace de
10 minutes, par une solution de chloroformiate de benzyle
(750 mg, 4,4 mmoles) dans du dioxanne anhydre (12 ml). Après agitation pendant 10 minutes supplémentaires dans le froid, on a extrait le méHaige réactionnel par de l'éther diéthylique glacé (2 x 120 ml).

   On a recouvert la couche aqueuse d'acétate d'éthyle froid (100 ml) et on l'a vigoureusement agitée, tout en l'acidifiant jusqu'à un pH de 2,3 avec de l'acide sulfurique 1M froid. On a séparé les couches et on a extrai t la phase aqueuse

  
avec une quantité supplémentaire d'acétate d'éthyle froid,
(2 x 30 ml). On a lavé les solutions à l'acétate d'éthyle réunies avec une saumure glacée (50 ml) et on les a ensuite extraites avec de l'hydroxyde de lithium 0,05 N glacé (58,6 ml) . On a soumis l'extrait à l'hydroxyde de lithium aqueux à une évaporation rotative sous vide

  
de façon à chasser l'acétate d'éthyle et on l'a ensuite lyophilisé de façon à obtenir le sel de lithium de la N-benzyloxycarbonyl thiénamycine brut (1,0 g) sous la forme d'un solide jaune clair.

  
On a mis un échantillon du carboxylate de  lithium susmentionné (864 mg) en suspension dans de  l'hexaméthylphosphoramide.anhydre (HMPA) (15,7 ml) et

  
on a traité la suspension par du bromure de benzyle

  
(1,15 ml). On a agité le mélange ainsi obtenu sous atmosphère d'azote et à 25[deg.]C pendant 2 heures, puis on l'a dilué à l'aide d'acétate d'éthyle (350 ml) et on l'a lavé avec de l'eau (2 x 300 ml), du bicarbonate de sodium à 5 % (150 ml), de l'eau (2 x 150 ml) et une saumure

  
(150 ml). On a séché la solution à l'acétate d'éthyle avec du sulfate de magnésium,on l'a filtrée et on l'a évaporée sous vide jusqu'à obtenir un résidu gommeux.

  
On a trituré cette matière avec de l'hexane (5 x 10 ml), afin d'éliminer l'excès de bromure de benzyle et on l'a ensuite séchée sous vide de façon à obtenir un solide jaune clair (817 mg).. On a dissous le produit brut dans de l'acétate d'éthyle chaud (15 ml) et on a dilué la solution avec de l'éther diéthylique (15 ml). On a ensemencé la solution ainsi. obtenue et on l'a abandonnée dans un congélateur jusqu'au lendemain. On a recueilli le précipité, on l'a lavé à l'aide d'éther diéthylique froid et on l'a séché sous vide de façon à obtenir de l'ester benzylique de N-benzyloxycarbonyl thiénamycine (405 mg) <EMI ID=55.1> 

  
On a évaporé les liqueurs-mères et les liqueurs de lavage sous vide jusqu'à obtenir un résidu huileux

  
que l'on a dissous dans de l'acétate d'éthyle chaud (envi-

  
 <EMI ID=56.1> 

  
(<-v 10 ml). On a abandonné la solution dans un congélateur pendant plusieurs jours de façon à obtenir une seconde récolte de produit (106 mg) sous la forme d'un solide jaune. 

  
EXEMPLE 5

  
Ester benzylique de N-benzyloxycarbonyl 0-méthanesulfonyl thiénamycine

  

 <EMI ID=57.1> 


  
On a dissous de l'ester benzylique de N-benzyloxycarbonyl thiénamycine (50 mg, 0,1 mmole) dans du CH2C12
(3,0 ml) et on a agité la solution sous refroidissement au bain de glace, sous atmosphère d'azote. On a ajouté de la triéthylamine (Et3N) (27,9 (il), 0,2 mmole) à la solution, cette addition étant suivie de l'addition, goutte

  
à goutte et en l'espace de 5 minutes, d'une solution de chlorure de méthanesulfonyle (17,2 mg, 0,15 mmole) dans du CH2C12 (0,4 ml). On a agité la solution obtenue dans le froid pendant 90 minutes, puis on l'a diluée avec

  
du CH2C12 glacé (10 ml), on l'a lavée avec de l'eau froide

  
 <EMI ID=58.1> 

  
et du NaHC03 à 2 % froid (5 ml), on l'a séchée sur du

  
 <EMI ID=59.1> 

  
a permis d'obtenir l'ester benzylique du la N-benzyloxycarbonyl 0-méthanesulfonyl thiénamycine (57 mg), sous la

  
 <EMI ID=60.1> 

  
7,32 (m, 10, ArH). 

  
En répétant le mode opératoire décrit cidessus, on a obtenu l'ester p-nitrobenzylique de la N-bromo-t-butylo::ycarbonyl 0-méthanesulfonyl thiénamycine lorsque l'on a remplacé l'ester benzylique de la

  
 <EMI ID=61.1> 

  
valente de l'ester p-nitrobenzylique de la N-bromo-tbutyloxycarbonyl thiénamycine.

  
EXEMPLE 6

  
6-éthylidène-3-(2-benzyloxycarbonylaminoéthyl)-thio-7-

  
 <EMI ID=62.1> 

  
benzyle

  

 <EMI ID=63.1> 


  
On a ajouté du NaHC03 pulvérulent (12,0 mg, 0,154 mmole) à une solution d'ester benzylique de N-benzyloxycarbonyl O-méthanesulfonyl thiénamycine

  
 <EMI ID=64.1> 

  
agité le mélange ainsi obtenu à 25[deg.]C pendant 10 minutes. On a dilué le mélange avec du CH2C12 (15 ml), on l'a

  
 <EMI ID=65.1> 

  
on l'a filtré et on l'a évaporé sous vide jusqu'à obtenir une huile (33 mg). On a purifié cette matière par chromatographie en couche mince sur une plaque de gel de silice GF 250 &#65533; x 20 x 20 cm en utilisant un mélange d'acétate d'éthyle et de chloroforme (3:1) comme solvant de développement. On a séparé la bande principale visible aux UV et on l'a éluée avec de l'acétate d'éthyle de façon à obtenir une huile (24 mg). On a rechromatographié cette matière de la manière décrite plus haut de façon à obtenir du 6-éthylidène-3-(2-benzyl-

  
 <EMI ID=66.1> 

  
et 210.

  
En répétant le mode opératoire décrit ci-dessus,

  
 <EMI ID=67.1> 

  
thiénamycine de l'exemple 6 par une quantité équivalente d'ester p-nitrobenzylique de la N-bromo-t-butyloxycarbonyl 0-méthanesulfonyl thiénamycine de l'exemple 5. 

  
EXEMPLE 7

  
 <EMI ID=68.1> 

  
 <EMI ID=69.1> 

  

 <EMI ID=70.1> 


  
On a hydrogéné un mélange de 6-éthylidène-3-

  
 <EMI ID=71.1> 

  
dans une bombe en verre à une pression de 2,8 kg/cm2 pendant 2 heures. On a ajouté une quantité supplémentaire de catalyseur (5 mg) et on a poursuivi l'hydrogénation pendant 2 heures encore. On a filtré le mélange à travers

  
 <EMI ID=72.1> 

  
chacune de ces matières) en utilisant de l'acétate d'éthyle (20 ni) comme éluant. L'évaporation de l'acétate

  
 <EMI ID=73.1>  du 6-éthyl-3-(2-benzyloxycarbonylaminoéthyl)-thio-7-

  
 <EMI ID=74.1> 

  
hept-2-ène-2-carboxylate de p-nitrobenzyle lorsque l'on a remplacé le 6-éthylidène-3-(2-benzyloxycarbonyl-

  
 <EMI ID=75.1> 

  
hept-2-ène-2-carboxylate de p-nitrobenzyle.

  
EXEMPLE 8

  
 <EMI ID=76.1> 

  

 <EMI ID=77.1> 


  
 <EMI ID=78.1>  (4 ml) et on a traité la solution par un tampon au

  
 <EMI ID=79.1> 

  
10 % de palladium (20 mg). On a hydrogéné le mélange

  
à la pression atmosphérique à 25[deg.]C, pendant 1 heure et

  
on l'a filtré ensuite. On a concentré le filtrat sous vide jusqu'à obtenir un volume de 2 ml et on l'a extrait par de l'acétate d'éthyle. On a chromatographié la fraction aqueuse sur une colonne échangeuse d'ions du type Dowex-50 X 4 (forme sodium), en utilisant de l'eau désionisée comme solvant d'élution. On a réuni les fractions souhaitées et on les a lyophilisées de façon à obtenir le 6--éthylidène-3-(2-aminoéthyl)-thio-7-oxo-1-aza-

  
 <EMI ID=80.1> 

  
EXEMPLE 9

  
Acide 6-éthyl-3-(2-aminoéthyl)thio-7-oxo-1-azabicyclo-

  
 <EMI ID=81.1> 

  

 <EMI ID=82.1> 


  
On a hydrogéné un mélange de 6-éthyl-3-(2benzyloxycarbonylaminoéthyl)-thio-7-oxo-1-azabicyclo- <EMI ID=83.1>  <EMI ID=84.1> 

  
de 2,8 kg/cm2 pendant 1 heure. On a filtré le mélange de façon à en séparer le catalyseur que l'on a lavé avec

  
 <EMI ID=85.1>  les liqueurs de lavage et le filtrat réunis sous vide jusqu'à un volume de 2 ml et on a introduit ces 2 ml dans une colonne de résine échangeuse d'ions du type

  
 <EMI ID=86.1> 

  
élué la colonne avec de l'eau désionisée. On a rassemblé les fractions appropriées et on les a lyophilisées de façon à obtenir l'acide 6-éthyl-3-(2-aminoéthyl)-

  
 <EMI ID=87.1> 

  
que.

  
EXEMPLE 10

  
 <EMI ID=88.1> 

  

 <EMI ID=89.1> 


  
 <EMI ID=90.1> 

  
2-ène-2-carboxylate de p-nitrobenzyle (20 mg) dans 4 ml  d'éthanol. A cette solution, on a ajouté 2 ml d'un tampon  au phosphate 0,1 M d'un pH de 8,0 et 60 mg de carbone supportant 10% de palladium. On a agité le mélange sous une  atmosphère d'hydrogène à 25[deg.]C pendant 75 minutes et on l'a ensuite filtré de façon à le débarrasser du catalyseur. On a neutralisé le filtrat jusqu'à un pH de 7,0 avec de l'acide chlorhydrique 2,5 N, on l'a concentré jusqu 'à un volume de 3 ml et on l'a rapidement extrait avec 5 ml d'éther. La solution aqueuse ainsi obtenue

  
 <EMI ID=91.1> 

  
xylate de sodium.

  
EXEMPLE 11 

  
Préparation d'acide 6-éthyl-3-(2-aminoéthyl)thio-7-oxo-

  
 <EMI ID=92.1> 

  

 <EMI ID=93.1> 


  
On a chauffé la solution obtenue à l'exemple

  
 <EMI ID=94.1> 

  
1 heure. On a chromatographié le mélange sur une colonne échangeuse d'ions du type Dowex-50 X 8 (forme sodium)

  
et on a procédé à l'élution avec de l'eau de façon à obtenir l'acide 6-éthyl-3-(2-aminoéthyl)thio-7-oxo-1-aza-

  
 <EMI ID=95.1>  

  
EXEMPLE 12

  
Ester p-nitrobenzylique de la N-(p-nitrobenzyloxycar-

  
 <EMI ID=96.1> 

  
On a dissous de la thiénamycine (140 mg,

  
0,51 mmole) dans de l'eau glacée (35 ml) et on a traité la solution par du NaHCO- (428 mg, 5,1 mmole&#65533;. On. a ensuite ajouté du dioxanne (35 ml) sous agitation et refroidissement au bain de glace. Après 3 minutes, on a ajouté, goutte à goutte et en l'espace de 2 minutes, une solution de chloroformiate de p-nitrobenzyle (165 mg,

  
 <EMI ID=97.1> 

  
dans le froid pendant 10 minutes et on l'a ensuite extrait par de l'éther diéthylique glacé (2 x 20 ml). On a séparé la phase aqueuse, on l'a recouverte d'acétate d'éthyle glacé (35 ml) et on a acidifié le tout jusqu'à pH de

  
 <EMI ID=98.1> 

  
bain de glace. On a séparé les couches et on a extrait

  
la fraction aqueuse par une quantité supplémentaire d'acé-tate d'éthyle froid (2 x 5 ml). On a lavé les extraits à l'acétate d'éthyle réunis avec une saumure froide et

  
on les a ensuite vigoureusement extraits par une solution aqueuse de LiOH 0,05 N (10 ml). On a soumis l'extrait

  
au LiOH à une évaporation rotative de manière à éliminer l'acétate d'éthyle et on a ensuite procédé à une lyophilisation de façon à obtenir le sel de lithium de la N-(p-nitrobenzyloxycarbonyl)thiénamycine brut (288 mg), sous la forme d'un solide jaune. 

  
On a agité une fraction du carboxylate de lithium brut (250 mg) et de bromure de p-nitrobenzyle

  
 <EMI ID=99.1> 

  
à la température ambiante pendant 105 minutes. On a dilué le mélange avec de l'acétate d'éthyle (60 ml), . on l'a lavé avec de l'eau (2 x 50 ml), une solution à

  
 <EMI ID=100.1> 

  
l'a filtré et évaporé sous vide de façon à obtenir un solide jaune (423 mg). On a trituré cette matière avec de l'éther diéthylique de façon à éliminer le bromure de p-nitrobenzyle en excès et on a séparé les cristaux résiduels par filtration et on les a séchés sous vide de façon à obtenir l'ester p-nitrobenzylique de la N-(p-nitrobenzyloxycarbonyl)thiénamycine (126 mg), sous la forme d'un solide jaune: P.F. 163,5-

  
 <EMI ID=101.1> 

  
EXEMPLE 13

  
Ester p-nitrobenzylique de la N-(p-nitrobenzyloxycar-

  
 <EMI ID=102.1> 
 <EMI ID=103.1> 
 A une solution agitée et glacée d'ester p-nitrobenzylique de N-(p-nitrobenzyloxycarbonyl)thiénaaycine (186 mg, 0,32 mmole) dans du tétrahydrofuranne anhydre (9,5 ml), on a ajoute de

  
l'Et N (89 (il, 0,64 mmole) et, goutte à goutte en l'espace de 2 minutes, une solution de chlorure de méthanesulfonyle (55 mg, 0,48 mmole) dans du tétrahydrofuranne (1,0 ml). On a agité le mélange ainsi obtenu dans le froid et sous azote pendant 90 minutes et on l'aensuite dilué avec du CH2C12 glacé (50 ni) . On a lavé la solution avec de l'eau froide (20 ml),

  
 <EMI ID=104.1> 

  
et une solution à 5 % de NaHCO froide (20 ml), on l'a

  
 <EMI ID=105.1> 

  
vide de façon à obtenir une moussa jaune. On a trituré cette matière avec de l'éther diéthylique anhydre de manière à obtenir l'ester p-nitrobenzylique de la N-(p-nitrobenzyloxycarbonyl)-o-méthanesulfonyl thiénamycine (192 mg) sous la forme d'un solide jaune

  
 <EMI ID=106.1> 

  
4,25; N, 8,43; S, 9,65. Trouvé: C, 49,19; H, 4,36; N, 8,09; S, 9,61. 

  
EXEMPLE 14

  
 <EMI ID=107.1> 

  
On a traité une solution d'ester p-nitrobenzylique de N-(p-nitrobenzyloxycarbonyl) 0-méthanesulfonyl thiénamycine (50 mg, 0,075 mmole) dans du

  
 <EMI ID=108.1> 

  
et du NaHC03 (12,6 ng, 0,15 mmole). On a agité le mélange ainsi obtenu à la température ambiante pendant 17 heures. On a séparé le précipité par filtration, on l'a lavé avec plusieurs fractions d'eau et on l'a séché sous

  
 <EMI ID=109.1> 

  
(m, l, -CH), 7,68 (m, ArH), et 8,25 (m, ArH); spectre de

  
 <EMI ID=110.1> 

  
EXEMPLE_15

  
Acide 6-éthyl-3-(2-aminoéthyl)-thio-7-oxo-1-azabicyclo-

  
 <EMI ID=111.1>  et à 25[deg.]C, pendant 2,5 heures. On a séparé le catalyseur par filtration et on l'a convenablement lavé avec un tampon au phosphate 0,1 M de pH 7 (5 ml). On a concentré les liqueurs de lavage et le filtrat réunis sous. vide de manière à éliminer la plus grande partie des solvants organiques. On a chromatographié le résidu aqueux sur une colonne de résine échangeuse d'ions

  
du type Dowex-50 X 4 (forme Na); on a procédé à l'élution du produit avec de l'eau désionisée. On a réuni les fractions appropriées et on les a lyophilisées de

  
 <EMI ID=112.1> 

  

 <EMI ID=113.1> 


  
A une solution de 50 mg d'ester p-nitrobenzylique de la N-(p-nitrobenzyloxycarbonyl) thiénamycine dans 0,5 ml de pyridine, on a ajouté 20 mg d'anhydride sulfurique dans de la pyridine. On a laissé réagir le mélange à 25[deg.]C pendant 4 heures, puis on a chassé l'excès de pyridine sous pression réduite. On a agité le résidu avec 20 ml de chlorure de méthylène et 20 ml d'une solution à 0,1 % de bicarbonate de sodium pendant 30 minutes, puis on a séparé la couche aqueuse et on l'a lyophilisée. On a dissous le sel de sodium de l'ester p-nitrobenzylique de la 0-sulfo N-(p-nitrobenzyloxy-

  
 <EMI ID=114.1> 

  
de dioxanne 1:1 et on a hydrogéné la solution pendant 4 heures en présence de 5,0 mg d'un catalyseur à base d'oxyde de platine, à une pression manométrique de

  
2,8 kg/cm2. On a séparé le catalyseur par filtration et on a extrait le filtrat à deux reprises avec de l'acétate d'éthyle. On a concentré la couche aqueuse jusqu'à un volume de 5 ml et on l'a chromatographiée sur 40 ml d'une résine XAD-2. On a élué la colonne avec de l'eau et on a récupère et lyophilisé la fraction contenant le sel de sodium de la 0-sulfo thiénamycine.

  
EXEMPLE 17

  
Préparation de compositions pharmaceutiques

  
Une forme de dose unitaire s'obtient en mélangeant 120 mg d'acide 3-(2-aminoéthylthio)-6-éthyl-7-

  
 <EMI ID=115.1> 

  
 <EMI ID=116.1> 

  
introduisant le mélange de 145 mg dans une capsule en gélatine n[deg.] 3. De manière similaire, en utilisant davantage d'ingrédient actif et moins de lactose, on peut obtenir d'autres doses unitaires dans des capsules en gélatine n[deg.] 3 et, s'il était nécessaire de mélanger

  
plus de 145 mg d'ingrédients, on pourrait se servir de capsules de plus grandes dimensions pour fabriquer des comprimés ou des pillules. Les exemples qui suivent illustrent.la préparation de compositions pharmaceutiques. 

  

 <EMI ID=117.1> 


  
P.E.U.A. = pharmacopée des Etats-Unis d'Amérique.

  
On mélange l'ingrédient actif au phosphate dicalcique, au lactose et à environ la moitié de l'amidon de maïs. On granule ensuite le mélange avec une

  
 <EMI ID=118.1> 

  
tamisage grossier. On sèche les granules à 45[deg.]C et on les tamise à nouveau à travers des tamis n[deg.] 16. On ajoute le reste de l'amidon de maïs et le stéarate de magnésium

  
et on comprime le mélange en comprimés d'un diamètre d'approximativement 1,27 cm pesant chacun 800 mg.

SOLUTION PARENTERALE

  

 <EMI ID=119.1> 

Claims (1)

1. <EMI ID=120.1>

   On peut introduire l'ingrédient actif dans

   les compositions susmentionnées seul ou en combinaison <EMI ID=121.1>

   exemple, avec d'autres agents antibactériens, tels que

   la lincomycine, une pénicilline, la streptomycine, la novobiocine, la gentamicine, la néomycine, colistine

   et la kanamycine, ou avec d'autres agents thérapeutiques, tels que le probénécide.

   <EMI ID=122.1>

   1.- Composé répondant -La formule de structure suivante:

   <EMI ID=123.1>

   et ses sels pharmaceuticuement acceptables.

   2.- Composés répondant à la formule de structure suivante:

   <EMI ID=124.1>

   dans laquelle R' et R représentent des atomes d'hydrogène ou des groupes protecteurs faciles à éliminer. 3.- Composé suivant la revendication 2, carac-

   <EMI ID=125.1>

   gène.

   4.- Composés répondant à la formule de structure suivante:

   <EMI ID=126.1>

   dans laquelle R' et R représentent des atomes d'hydrogène

   <EMI ID=127.1>

   atomes d'hydrogène) ou des groupes protecteurs faciles à éliminer.

   5.- Procédé de préparation d'un composé suivant la revendication 1, caractérisé en ce que l'on traite un composé de la formule suivante:

   <EMI ID=128.1>

   dans laquelle R et R' représentent des atomes d'hydrogène ou des groupes protecteurs faciles à éliminer, par un agent réducteur.

   6.- Procédé de préparation d'un composé suivant la revendication 2, caractérisé en ce que l'on traite

   un composé de la formule suivante: <EMI ID=129.1>

   dans laquelle le groupe OR " est un groupe facile à

   <EMI ID=130.1>

   ou des groupes protecteurs faciles à éliminer, par une base.

   7.- Procédé selon la revendication 6, caractérisé en ce que R " représente un groupe sulfo ou un

   <EMI ID=131.1>

   8.- Compositions pharmaceutiques, caractérisées en ce qu'elles comprennent au moins un composé suivant la revendication 1 et un excipient pharmaceutique approprié.

   9.- Compositions pharmaceutiques, caractérisées en ce qu'elles contiennent, sous forme de dose unitaire, une quantité thérapeutiquement efficace d'un composé suivant la revendication 1, ainsi qu'un excipient pharmaceutique approprié.