BE879489A - Compositions pharmaceutiques antiracteriennes et leur methode d'utilisation - Google Patents

Description

  " Compositions pharmaceutiques antibactériennes et leur méthode d'utilisation"

  
La présente invention est relative à des composositions pharmaceutiques douées d'une activité antibactérienne vis-à-vis des organismes Gram-positifs et des organismes Gram-négatifs .

  
Les compositions pharmaceutiques de l'invention sont for mées d'un antibiotique associé à un p-cétoacide hétérocyclique répondant à la formule générale suivante (I):

  

 <EMI ID=1.1> 
 

  
 <EMI ID=2.1> 

  
zote , B représente un groupement benzénique , d'azine ou de diazine portant éventuellement des groupements de substitution tels

  
 <EMI ID=3.1> 

  
atomes d'halogène- , des groupes dioxyméthylène ou des groupes hétérocycliques saturés , et R représente soit un atome d'hydrogène soit un groupe alkyle en Cl-C4.

  
Suivant une forme de réalisation préférée de la présente invention, B prend des aspects structuraux tels qu'il forme, avec le noyau condensé apparenté , des squelettes de quinoléine , de cinnoline, de naphtiridine ou de pyrido 2,3-d pyrimidine , tandis que R représente un groupe éthyle.

  
D'une façon spécifique , les composés caractérisés par la formule (I), tels qu'utilisés dans les compositions de la présente invention, sont représentés par l'acide nalidixique (la) , l'acide oxolinique (Ib), la cinoxacine (Ic), l'acide piromidique
(Id) et l'acide pipémidique (le):

  

 <EMI ID=4.1> 
 

  

 <EMI ID=5.1> 


  
D'une manière générale , l'antibiotique utilisé comme composant dans les compositions de la présente invention , peut être représenté par n'importe quel antibiotique ; suivant une forme de réalisation préférée de l'invention , on peut utiliser, à cet effet, des antibiotiques appartenant à la famille des tétracyclines , de

  
la kanamycine , de l'oléandomycine et , en particulier , des céphalosporines.

  
On a constaté que les compositions de la présente invention assuraient un effet de synergie vis-à-vis des pathogènes Grampositifs et Gram-négatifs et présentaient une efficacité particulièrement importante vis- à-vis des souches résistant aux antibiotiques.

  
Il est connu que la résistance des pathogènes aux substances antiobiotiques a pris une importance de plus en plus grande , et qu'un effort de plus en plus important a été réalisé au cours de ces dernières années pour tenter de découvrir les agents antibactériens particulièrement efficaces dans ce domaine.

  
Par conséquent, les compositions de la présente invention  <EMI ID=6.1> 

  
progrès thérapeutique puisque, comme déjà mentionné , elles permettent non seulement d'obtenir une inhibition bactérienne sensiblement supérieure à celle à laquelle on se serait attendu sur la base d'un simple effet d'addition des deux composants,mais qu'elles permettert également d'inhiber essentiellement les souches résistant aux substances antibiotiques.

  
Par conséquent , la présente invention concerne également l'utilisation des compositions susmentionnées pour le traitement

  
de toutes les infections dues aux pathogènes Gram-positifs et Gramnégatifs.

  
On entend , dans le cadre de la présente invention , par le terme "utilisation" toutes les opérations se rapportant à la préparation des composants de la combinaison , à leur purification ,

  
à leur formulation à l'état de formes posologiques et pharmaceutiques convenant pour l'administration , et/ou à leur emballage dans des récipients appropriés pour leur administration.

  
Suivant l'invention, l'efficacité particulière des compositions mentionnées vis-à-vis des souches résistant aux antibiotiques provient vraisemblablement d'un transfert inhibé des facteurs

  
 <EMI ID=7.1> 

  
mule générale (I) ; toutefois, on ne doit pas considérer la présente invention comme étant associée à l'interprétation mentionnée cidessus ou à d'autres interprétations possibles des résultats expérimentaux.

  
Les propriétés des compositions de la présente invention sont illustrées par les exemples donnés ci-après, qui ne constituant en aucun cas une limitation à la présente invention. La stabilité

  
de ces compositions a d'abord été examinée , comme on peut  le voir d'après les exemples 1 et 2 donnés ci-après.

Exemple 1

  
Stabilité des mélanges de pivcéphalexine et d'acide nalidixique 

  
 <EMI ID=8.1>  lexine dans de l'éthanol (ester pivaloyloxyméthylique de céphalexine) , caractérisée par une concentration de 10 &#65533;g/ml. Conformément aux résultats disponibles dans la littérature , le spectre ultraviolet de la solution montre une absorption maximale à 254 nm et un minimum centré à 240 nm.
(B) De plus, on prépare une solution éthanolique d'acide nalidixique :

  

 <EMI ID=9.1> 


  
cette solution se caractérisant par une concentration de 5 &#65533;g/ml. Le spectre ultraviolet de la solution montre deux maxima d'absorption caractéristiques , centrés respectivement à 330 nm et 257 nm.

  
(C) On prépare une solution éthanolique contenant de la pivcéphalexine à raison de 10 &#65533;g/ml et de l'acide nalidixique à raison de 5 &#65533;g/ml . Ensuite, on réalise un examen différentiel des spectres ultraviolets respectivement entre la solution (A) et la solution (B) , ainsi qu'entre la solution (B) et la solution (C). On n'observe aucune modification dans le spectre , soit tout juste après la préparation de la solution (C) soit à des intervalles d'une heure qui se suivent pendant 4 heures consécutives : ceci met en évidence à la fois l'absence d'interactions et la stabilité parfaite du mélange.

  
On obtient des résultats identiques lorsque l'on fait varier les rapports entre la pivcéphalexine et l'acide nalidixique respectivement de 2/1 à 1/1 et 5/1. 

  
1

Exemple 2

  
Stabilité des mélanges de picéphalexine et d'acide oxoliniaue

  
On réalise le même processus que celui indiqué dans l'exemple 1, en remplaçant toutefois l'acide nalidixique par de l'acide oxolinique :

  

 <EMI ID=10.1> 


  
On montre également , dans ce cas, la stabilité parfaite du mélange par les résultats de l'examen différentiel des spectres entre une solution contenant de la pivcéphalexine à raison de 10 &#65533;g/ml ou de l'acide nalidixique à raison de 5 &#65533;g/ml , et une solution contenant de la pivcéphalexine à raison de 10 &#65533;g/ml plus de l'acide oxolinique à raison de 5 &#65533;g/ml.

  
On obtient également les mêmes résultats en examinant des mélanges analogues, par exemple des mélanges de pivcéphalexine avec de l'acide pipémidique et de l'acide piromidique , ou des mélanges de céphadroxyle et de céphalexine avec des acides pipémidique , piromidique , oxolinique ou nalidixilique , ou bien avec de la cinoxacine.

  
Les meilleures propriétés antibactériennes de la composition suivant l'invention , sont mises en évidence par les valeurs des concentrations inhibitrices minimales de différents antibiotiques , des composés caractérisés par la formule générale

  
 <EMI ID=11.1> 

  
le (I), dans un rapport de 1/1.

  
Matières et méthodes

  
La concentration inhibitrice minimale (C.I.M.) , c'est-à-dire la concentration en composé la plus basse capable d'inhiber la croissance bactérienne , a été établie sur 62 souches  <EMI ID=12.1> 

  
(Gram-positifs et Gram-négatifs ) subdivisées. de la façon suivante:
16 souches de Staphylococcus aureus, une souche de B.subtilis, une souche de B.megatherium, une souche de B.cereus ATCC 9341, quatre souches de streptococcus faecalis , une souche de Serratia marcescens, neuf souches d'Escherichia coli, cinq souches de Klebsiella pneumoniae , six souches de Salmonella spp., deux souches de Shigella spp., neuf souches de Proteus spp., et trois souches de Pseudomonas aeruginosa.

  
Toutes les souches ont été ensemencées dans un bouillon de soja à la Tripticase de B.B.L. (Baltimora Biological Laboratory): une culture de bouillon de chacune d'entre elles a été obtenue après une incubation de 18 heures dans un thermostat à 34[deg.]C.

  
 <EMI ID=13.1> 

  
lange qui s'y rapporte formulé dans un rapport de 1/1 , ont été dissous dans une quantité préalablement établie dans le même milieu de culture: on a obtenu des solutions de réserve qui s'y rapportent.

  
A partir de ces solutions de réserve , on a réalisé des séries différentes de dilutions doubles dans des séries différentes de tubes d'essai, chaque tube d'essai contenant 5 ml 

  
de fluide pour chaque concentration de chaque antibiotique pris isolément ,pour leur mélange et pour la totalité des souches bactériennes envisagées. Ces souches ont été ensemencées avec 0,05 ml

  
de culture de bouillon dans chaque tube d'essai.

  
Les résultats qui s'y rapportent ont été enregistrés après thermostatisation de la totalité du système à une température de 37[deg.]C pendant 18 heures; la concentration inhibitrice minimale
(C.I.M.) de l'antibiotique , du composé (I) et de leur concentration qui s'y rapporte , capable d'inhiber la croissance du pathogène ensemencé , a été établie pour chaque souche bactérienne.

  
Les résultats obtenus par la détermination de la concentration inhibitrice minimale (C.I.M.) sont donnés dans les tableaux ci-après. 

  
Le Tableau 1 montre l'exemple de la combinaison d'acide oxolinique et de céphalexine qui, bien qu'utilisée au départ sous la forme d'ester pivaloyloxyméthylique , est en fait présente dans les cultures sous la forme de céphalexine et est déterminé telle quelle pour ce qui est des concentrations.

  
Tableau 1

  

 <EMI ID=14.1> 


  
Le Tableau 1 montre , par exemple , que le pourcen-

  
 <EMI ID=15.1> 

  
dire la concentration ordinairement décelable dans les fluides biologiques après l'administration d'agents antibactériens , est sensi-

  
 <EMI ID=16.1> 

  
cas des composants pris isolément (15%). En d'autres mots, 1,56 mcg/ litre de céphalexine + l,56mcg/ml d'acide oxolinique produisent un effet sensiblement plus favorable que l'effet obtenu à partir de 3,12mcg/ml de céphalexine ou d'acide oxolinique. Des résultats analogues sont obtenus à des concentrations plus élevéeae,bien que l'ef- <EMI ID=17.1> 

  
trations auxquelles les composants pris isolément commencent déjà à produire un effet inhibiteur dans 100% des souches.

  
Le Tableau 2 cnncerne la combinaison entre de la céphalexine (utilisée sous la forme de pivcéphalexine , voir précédemment ) et de l'acide nalidixique.

  

 <EMI ID=18.1> 


  
Apparemment , les résultats donnés au Tableau 2 se montrent inférieurs aux résultats donnés dans le Tableau 1. On notera , toutefois, à cet égard que, même en partant de la concentration de 100 mcg/ml, la combinaison inhibe 100% des souches examinées, tandis que les composante pris isolément, même à une concentration

  
huit fois supérieures , permettent encore la survie de la plupart des souches visibles, c'est-à-dire les souches qui, à cause de leur résistance, provoquent une infection latente et chronique caractérisée par des inflammations fréquentes . Un des avantages les plus
-plus importantsdes combinaisons suivant l'invention , consiste justement à faire disparaître ce type de souches. 

  
La valeur de la concentration inhibitrice minimale obtenue expérimentalement pour la combinaison examinée sera comparée aux valeurs de concentration inhibitrice minimale calculées sur la base d'une activité strictement d'addition des deux antibiotiques combinés (concentration inhibitrice minimale prévue ) afin de mettre en évidence le phénomène de synergie entre les composants de la combinaison.

  
L'expression fondamentale suivante,développée par CIMMINO et Collaborateurs (A ntibiot.Anm.,1957/58, pages 708-715)

  
a été utilisée pour établir la valeur de la concentration inhibitrice minimale prévue:

  

 <EMI ID=19.1> 


  
Dans cette expression, Cr est la concentration inhibitrice minima-

  
 <EMI ID=20.1> 

  
tion inhibitrice minimale de l'antibiotique , et C est la concentration inhibitrice minimale prévue de la combinaison dans un rapport de 1/1, correspondant à une activité strictement d'addition des deux antibiotiques.

  
A présent , le rapport entre la valeur de la concentration inhibitrice minimale prévue et la valeur de la concentration inhibitrice minimale déterminée permet de mettre en évidence l'ef-

  
 <EMI ID=21.1> 

  
synergie lorsque ce rapport est supérieur à l'unité.

  
Les Tableaux 3,4,5 et 6 donnés ci-après montrent les résultats obtenus. Les Tableaux 3 et 4 considèrent les effets produits sur les pathogènes Gram-positifs respectivement par les combinaisons de céphalexine et d'acide oxolinique et de céphalexine et d'acide nalidixique ; les Tableaux 5 et 6 considèrent les effets produits par les combinaisons susmentionnée sur des pathogènes Gramnégatifs. 

  

 <EMI ID=22.1> 


  

 <EMI ID=23.1> 
 

  

 <EMI ID=24.1> 


  

 <EMI ID=25.1> 
 

  

 <EMI ID=26.1> 


  

 <EMI ID=27.1> 
 

  

 <EMI ID=28.1> 


  

 <EMI ID=29.1> 
 

  
Un examen des résultats donnés dans les quatre Tableaux précédents permet de réaliser que les combinaisons suivant l'invention , s'avèrent extrêmement efficaces essentiellement contre les souches résistant le plus aux composants isolés.

  
On soulignera que les résultats donnés dans le cas des combinaisons de (piv) céphalexine/acide oxolinique et de (piv) céphalexine/aeide nalidixique , sont uniquement donnés à titre d'exemple . D'autres combinaisons se sont révélées aussi efficaces, comme dans le cas des combinaisons céphadroxyle/acide pipémidique, céphadroxyle/cinoxacine , céphadroxyle/acide nalidixique , pivcéphalexine/acide pipémidique , céfatrizine/acide piromidique , céfatriaine/acide oxolinique , céfatrizine/acide pipémidique , et bien d'autres.

REVENDICATIONS

  
1. Composition pharmaceutique , douée d'une activité antibactérienne , caractérisée en ce qu'elle contient comme ingrédients actifs , une combinaison d'un antibiotique et d'un p-cétoaci-

  
 <EMI ID=30.1> 

  

 <EMI ID=31.1> 


  
dans laquelle A représente un groupe CH ou un atome d'azote , B représente un groupement benzénique , d'azine ou de diazine portant éventuellement des groupes de substitution tels que des grou-

  
 <EMI ID=32.1> 

Claims (11)

1, caractérisée en ce que l'antibiotique appartient à la famille des céphalexines.

2. Composition pharmaceutique suivant la revendication

3. Composition, pharmaceutique suivant la revendication 2, caractérisée en ce que l'antibiotique est la pivcéphalexine .

4. Composition pharmaceutique suivant la revendication 2, caractérisée, en ce que l'antibiotique est du céphadroxyle.

5. Composition pharmaceutique suivant la revendication 2, caractérisée en ce que l'antibiotique est de la céfatrizine.

6. Composition pharmaceutique suivant l'une quelconque des revendications 1 à 5, caractérisée en ce que le composé répondant à la formule (l) , est de l'acide nalidixique .

7. Composition pharmaceutique suivant l'une quelconque des revendications 1 à 5 , caractérisée en ce que le composé de la formule (I), est de l'acide oxolinique.

8. Composition pharmaceutique suivant l'une quelconque des revendications 1 à 5, caractérisée en ce que le composé de la formule (I), est de l'acide pipémidique.

9. Composition pharmaceutique suivant l'une quelconque des revendications 1 à 5, caractérisée en ce que le composé de la formule (I), est de l'acide piromidique.

10. Composition pharmaceutique suivant l'une quelconque des revendications 1 à 5, caractérisée en ce que le composé de la <EMI ID=33.1>

11. Composition pharmaceutique douée d'une activité antibactérienne , telle que décrite ci-dessus, notamment dans les exemples donnés.

<EMI ID=34.1>

que suivant l'une quelconque des revendications 1 à 11, pour le trai tement d'infections bactériennes dues à des organismes Gram-positifs ou Gram-négatifs.

<EMI ID=35.1>