BG61059B2

BG61059B2 - Аналози на дономицина

Info

Publication number: BG61059B2
Application number: BG098211A
Authority: BG
Inventors: Bianca Patelli; Luigi Bernardi; Federico Arcamone; Aurelio Marco
Original assignee: Farmitalia Carlo Erba S.R.L.
Priority date: 1974-06-12
Filing date: 1993-11-11
Publication date: 1996-09-30
Also published as: FR2274629B1; ZA753722B; DE2525633B2; CH611317A5; DE2525633C3; AT337363B; HK982A; SE7506589L; NL7506745A; DE19375027I2; ATA437375A; NL173272C; BE830090A; JPS5840557B2; MY103666A; DE2525633A1; JPS518260A; FR2274629A1; US4046878A; SU645588A3

Abstract

Аналозите на дономицина (dаunомyсinе) имат ценни фармакологични свойства и намират приложение като лекарствени средства. Те съдържат по-специално модифициран d-цикъл и имат обща формула в която заместителите са с определени значения. Изобретението се отнася и до метод за тяхното получаване. 6 претенции

Description

Област на техниката

Предмет на настоящото изобретение са аналози на дономи цина СdaunomyciпеЗ и по-специално аналози» съдържащи модифи циран D цикъл с формула:

III

В КОЯТО:

- всяка от групите е водороден атом и всяка от R групите е водороден атом, хлорен атом или бромен атом или метилова или метокси група, или

- всяка от R_± групите е хлорен или бромен атом или метилов радикал, и всяка от R групите е водороден атом.

Предмет на настоящето изобретение е метод за получаване на тези аналози на дономицина, при които хлоридът на 2,3,6тридезокси-3-триФлуораиетанидо-4-0-триФлуорацетил-а-Е-ликсопиранозил се кондензира с антрациклинон с подходяща Формула в безводен разтворител и в присъствие на меркури окис и/или бромид и молекулно сито за получаване на желания продукт, които последователно се обработва с метанол и алкална база като натриев хидроокис.

Предшестващо състояние на техниката

Рацемичните антрациклинони, например 4-деметоксидономицинона CR = R_x =Ьр,се състоят от две съединения, а именно: х С-) донозаминилС -34-деметокси-дононицинон Сепимери а + /3), * С-5 донозаминилС+54-деметокси-дономицинон Сепимери а + /35 , които могат да бъдат разделени по класическите методи. Тяхната смес може да бъде използвана в терапевтиката на неопластични заболявания.

Техническа същност на изобретението

Новите съединения съгласно изобретението са изброени по-долу:

* С-) донозаминилС-31,4-диметил-4-деметоксидономицинон, * С-3 донозаминилС+31,4-диметил~4-деметоксидономицинон, * С-3 доноз аминилС-31-меток сидономицинон, * С-) донозаминилС+31-метоксидономицинон, * С-3 донозаминилС-31,4-дихлор-4-деметоксидономицинон, * С-3 донозаминилС+31,4-дихлор-4-деметоксидономицинон, * С-3 1,4-дибром-4-деметоксидономицинон, * С-3 донозаминилС +31,4-дибром-4-деметок сидономицинон, * С-3 донозаминилС-32,З-диметил-4-деметоксидономицинон, * С-3 донозаминилС+32,З-диметил-4-деметоксидономицинон, * С-3 донозаминилС-32,З-дихлор-4-деметоксидономицинон, * С-3 донозаминилС-32,З-дибром-4-деметоксидономицинон, * С-3 донозаминилС+32,З-дибром-4-деметоксидономицинон,

От самосебе си се разбира, че всяко съединение с антрациклинична конфигурация С75/953 или C7R/9R3 представлява смес на епимерите а и /?.

Останалите цели и предимства на настоящото изобретение са изложени в описанието, което следва и примера, които го илюстрира без да го ограничава.

Примери за изпълнение на изобретението

Получаване на съединението * С-3 донозаминилС-34-деметокси-дономицинон Сепимери а и /?3 , * С-3 донозаминилС+34-деметокси-дономицинон Сепимери а и /?3.

1.2 г 4-деметоксидономицинон-7-метилов етер Сполучен съгласно С. М. Wong, Canadian Journal of Chemistry, 1971, 49,

27125 се разтварят в 22 мл трифлуороцетна киселина и се оста- вят при стайна температура една нош. Разтворът се изпарява под вакуум.

бикарбонат.

Остатъкът от изпарението се отнема с 50 мл ацетон и към него се добавят мл 5%-ен воден разтвор на натриев

Оставя се да престои 0.5 часа, разтворителят се

изпарява под вакуум, остатъкът се отнема с хлороформ и след това полученият разтвор се промива с вода. Чрез изпаряване

на хлороформа се получава утайка, която след хроматографиране върху силикагел води до 0.475 г С+54-деметоксидономицинон, с точка на топене 152-155°С и които при тънкослойна хроматография дава едно единствено петно Ссиликагел, смес хлороФорм/ацетон: 80/20; = 0.445.

Към разтвор на 0.3 г от това съединение в 75 мл безводен CHCI з се добавят при разбъркване 0. 6 г меркури окис, 0.15 г меркури бромид и 5 г молекулно сито С5А5. След един час се добавят 0.7 г хлорид на 2,3,6-тридезокси-З-триФлуорацетамидо-4-0-триФлуорацетил-а-к-ликсопиранозила и суспензията се оставя при разбъркване в продължение на 16 часа при стайна температура, филтрува се, Филтратъът се концентрира под вакуум, утайката се отнема с 200 мл метанол и се нагрява при кипене на обратен хладник в продължение на 1/4 часа. Разтворителят се изпарява и остатъкът се хроматограФира върху силикагел. При използването за елуент смес на хлороформ/ бензол/метанол : 100/20/3 се получават 0.270 г смес на N-триФлуорацетилирани производни на С-5донозаминилС-54-деметоксидономицинон и С-5донозаминилС+5 4-деметоксидономици5

II11

нон Cα-гликозилни епимериЗ, водещи до едно единствено петно върху плаката със силикагел; хлороформ/ацетон: 80/20, Р =0.340 и 0.150 г смес на N-трифлуорацетилирани производни на С-ЗдонозаминилС-34-деметоксидономицинон и С-3донозаминилС+34-деметоксидономицинон С/З-г ликозилни епимериЗ.

Оставя се при стайна температура в продължение на 1/2 часа и към 0.17(3 г от N-трифлуорацетилираните производни на С-3донозаминилС-34-деметоксидономицинон и С-3донозаминилС+34деметоксидономицинон Са-гликозилни епимериЗ се добавя алкален разтвор С15 мл, 0. IN NaObP - pH на разтвора се установява на 8. 6 чрез добавяне на HCI ^и разтворът се екстрахира няколко пъти с хлороформ. Разтворът се концентрира под вакуум, остатъкът се отнема с 5 мл метанол, подкислява се до pH 4.5 с 0. 1N разтвор на HCI ^в метанол, добавя се етилов етер, които води до утаяване на хлорхидратите на С-3донозаминилС-34деметоксидономицинона и С-3донозаминилС+34-деметоксидономицинона Са-гликозилни епимериЗ Сдаващи едно единствено петно върху плаката със силикагел; дихлорметан/метанол/вода : 100/20/2; Р =0.163.

F

Като се работи по описания по-горе начин, но се излиза от N-трифлуорацетилираните производни на С-3донозаминилС-34-деметоксидономицинона и С-3донозаминилС+34-деметоксидономицинона С/З-гликозилни епимериЗ се получават С-3 донозаминилС-34деметоксидономицинон и С-3донозаминилС+34-деметоксидономицинон Сдаващи едно единствено петно върху плаката със силикагел дихлорметан/метанол/вода : 100/20/2; Р^ = 0.143.

В следващата по-долу фармакологична част С-3донозаминилС -34-деметоксидономицинона, които представлява смес на

11ll ot епимери C7S/9S) и C7R/9R) се нарича IMI-22.

Символите R CRectusJ и S (.Sinister) са обикновено използваните в литературата Ссъгласно номенклатурата на Cahn, Ingold, Prelog, Experientia, 1956, 12 , 81).

Фармакологични изпитания

Ефект на IMI-22 върху развитието на клетките на HeLa.

Изследванията in vitro се провеждат върху клетки на HeLa, държани в среда на Eagle, допълнена с 10% телешки серум. Клетките се обработват с изследваните съединения в периоди от време с различна продължителност. Развитието на една клетка се изчислява на базата на развитието на култура, съдържаща от 200 до 300 клетки. Шест дни по-късно броягна клетките в колонията се определя отново. Резултатите,представени в таблица I, показват, че IMI е активен съшо като адриамицина СAdri amicine) след двучасова обработка. След осем часова обработка IMI-22 е най-добър инхибитор на развитието на клетката в сравнение с адриамицина и дономицина

Cdaunomycine).

Таблица I

фармацев тични продукти	Ij-jSO Cg/ml)
2 часа	8 часа
дономицин	0. 095	0. 023
адриамицин	CO. 2)	0. 039
IMI 22	CO. 2)	0. 002

«ί * Изпитания in vitro на образуването на foyers Согниша? от вируса на саркома на Moloney CMSV?.

Действието на IMI-22 се сравнява с това на адриамицина като свидетел при въздействие върху Фибробластни култури от ембриони на мишки,заразени или не с вируса на саркома на Moloney. След тридневно третиране се изчислява процентното инхибиране по отношение на свидетеля на клетъчното размножаване на незаразените култури Сцито токсична активност? и на образуването на огнища в заразените култури Сантивирална активност?.

Резултатите, представени в таблица II, показват, че IMI-22 притежава по-висока антивирална активност в сравнение с адриамицина и цитотоксична активност равна на тази на адриамицина.

Таблица II

Съединение	Доза Cy/ml?	% огнища С свидетели=100?	% Клетка С св идетели=100?
Адриамицин	0.0250	0	29
	0. 0125	0	30
	0. 006	26	53
IMI-22	0.6	0	0
	0.1	0	4. 6
	0.0250	12	38
	0. 006	54	46

* Изследвания in vitro на антитуморната активност на сьеди8

II III нението I MI 22

Изследването на антитуморната активност на съединението IMI 22 е проведено върху няколко тумора при мишки, притежаващи твърди или асцитини тумори.

1? Асцитини тумори

Тестовете за активност са проведени с швейцарски мишки CD 1, получили интраперитонеално 1.10^ клетки на саркома 180. След това опитните животни получават интраперитонеално различни дози от съединението, 24 часа след имплантирането на тумора.

Резултатите, представени в таблица III,показват, че съединението притежава забележителен ефект върху развитието на асцитични тумори. Средното време на надживяване на третираните животни нараства значително.

Таблица III

Съединение	Доза mg/kg/ден	% Т/С на средното време на надживявано CL. Т. S. 3
IMI 22	0,12			115С0/103
	0,2		146С 0/103
	0,25			188С1/103
	0,5			181С 0/103
	1	185С 0/103	1О7СО/1ОЗ	223С1/103
	1.5		79С0/103
	2	61С1/1ОЗ
	5	38С0/103
Адриамицин	0,1			100С0/103
	0,2		107С0/103
	1	146С1/93	143С1/103	169С1/93
	2	>400С5/103
	5	311С 4/103	225С1/103
	10		193С0/103

Установява се, че съединението е активно при по-слаби дози в сравнение с адриамицина.

Твърди тумори

Тестовете за активност спрямо твърди тумори се провеждат върху швейцарски мишки CD 1, на които се трансплантира подкожно неопластична тъкан и които се третират интравенозно през петте дни след имплантирането на тумора.

На десетия ден всички животни се жертват, вземат се проби и туморите им се претеглят.

Представените в таблица IV резултати показват, че наи10

II IH

Таблица V

Съединение	Лоза mg/kg	Средно време на надживяване	5ST/C	Токсичност
Свидетел	-	8
IMI 22	0,75	12,5	156	0/10
	1,5	13	162	1/10
	3	7	87	7/10
Адриамицин	2,5	12,5	156	0/10
	5	14	175	0/10
	10	16	200	4/10

високата изпитвана нетоксична доза Cl mg/kg} притежава инхибиторна активност спрямо развитието на тумора 50 %. Терапевтичният индекс CT.1.3, дефиниран като отношение на максималната предпочитана доза Слетална доза 103 и минималната активна доза СТ/С 0,103, е съответно равен на 3,7 за IMI 22 и 1,8 за адриамицина.

Таблица IV

Съединение	Доза mg/kg	Тегло на тумора	ХТ/С	Токсичност
Свидетел	-	3,036
IMI 22	0,5	2,295	76	0/10
	1	1 ,550	51	0/10
	2	0,485	16	3/10
Адриамицин	2,5	1,465	48	0/10
	3,5	0,364	12	7/10

* Левкемия

Активността на съединението IMI 22 се изпитва върху BDF мишки, получили интраперитонеално левкемиини клетки L 1210.

Животните се третират еднократно на следващия ден след имплантиране на тумора.

Представените в таблица V резултати показват, че изпи таните нетоксични дози значително повишават средното време на преживяване на животните. Установяна се, че IMI 22 е ак тивно при по-ниски дози от адриамицина.

Claims

Патентни претенции

1. Рацемичен аналог на дономицина съдържаш епимерите а и (3 с Формула:

- всяка от групите е водороден атом и всяка от R групите е водороден атом, хлорен атом или бромен атом или метилова или метокси група, или

- всяка от R_± групите е хлорен или бромен атом или метилов радикал, и всяка от R групите е водороден атом.
2. Нови промишлени продукти, един от а и β епимерите или раиемични съединения^представляващи едно от приложените в списъка по-долу съединения:

* С-3 донозаминилС-31,4-диметил-4-деметоксидономицинон

С епимери а и /93, * С-3 донозаминилС+31,4-диметил-4-деметоксидономицинон

С епимери а и /93, * С-3 донозаминилС-31-метоксидономицинон Сепимери а и /93, * С-3 донозаминилС+31-метоксидономицинон Сепимери а и /93, .1111.
3. Нови промишлени продукти, един от а и β епимерите или рацемични съединения,представляващи едно от приложените в списъка по-долу съединения:

* С-3 донозаминилС-31,4-дихлор-4-деметоксидономицинон Сепимери а и β) , * С-3 донозаминилС+31,4-дихлор-4-деметоксидономицинон Сепимери а и /?3 , * С-3 донозаминилС-31,4-дибром-4-деметоксидономицинон Сепимери а и β), * С-3 донозаминилС+31,4-дибром-4-деметоксидономицинон Сепи- мери а и β) ,
4. Нови промишлени продукти, един от а и β епимерите или рацемични съединения,представляващи едно от приложение в _; списъка по-долу съединения:

* С-) донозаминилС-32,3-диметил-4-деметоксидономицинон Сепимери а и β), * С-3 донозаминилС+32,З-диметил-4-деметоксидономицинон Сепи-

мери а и β), * С-3 донозаминилС-32,З-дихлор-4-деметоксидономицинон Сепимери а и β) , * С-3 донозаминилС +32,3-дихлор-4-деметоксидономицинон Сепимери а и β),
5. Нови промишлени продукти, един от а и β епимерите или рацемични съединения,представляващи едно от приложение в списъка по-долу съединения:

* С-3 донозаминилС-32,З-дибром-4-деметоксидономицинон Сепимери а и β), * С-3 донозаминилС+32,З-дибром-4-деметоксидономицинон Сепи14

Ill мери а и /?5 , * С-5 донозаминилС-54-деметоксидономииинон Сепимери а и β), * С-5 донозаминилС+54-деметоксидономицинон Сепимери а и /35.
6. Метод за получаване на аналог на дономицина съгласно коя да е от претенции от 1 до 5, характеризираш се с това, че производно на дономицина със структура:

в която: R¹ и R имат дадените по-горе значения, взаимодейства с 1-хлор-2,3,6-тридезокси-З-триФлуорацетамидо-4-триФлуорацетокси-а-Ь-ликсопираноза в подходящ органичен разтворител и в присъствие на меркурисол като катализатор и подходящ акцептор на солна киселина, след което рацимичният епймер а и рацемичният епймер β се отделят и се разрушават триФлуорацетилните защитни групи.