BG66936B1 - Изолирано човешко анти-tnf алфа антитяло - Google Patents

Изолирано човешко анти-tnf алфа антитяло Download PDF

Info

Publication number
BG66936B1
BG66936B1 BG111719A BG11171914A BG66936B1 BG 66936 B1 BG66936 B1 BG 66936B1 BG 111719 A BG111719 A BG 111719A BG 11171914 A BG11171914 A BG 11171914A BG 66936 B1 BG66936 B1 BG 66936B1
Authority
BG
Bulgaria
Prior art keywords
antibody
antibodies
human
tnfα
seq
Prior art date
Application number
BG111719A
Other languages
English (en)
Other versions
BG111719A (bg
Inventor
Joachim Kempeni
Kempeni Joachim
Roberta Weiss
Weiss Roberta
Steven Fischkoff
A. Fischkoff Steven
Original Assignee
Abbvie Biotechnology Ltd.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=23144283&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=BG66936(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Abbvie Biotechnology Ltd. filed Critical Abbvie Biotechnology Ltd.
Publication of BG111719A publication Critical patent/BG111719A/bg
Publication of BG66936B1 publication Critical patent/BG66936B1/bg

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61M—DEVICES FOR INTRODUCING MEDIA INTO, OR ONTO, THE BODY; DEVICES FOR TRANSDUCING BODY MEDIA OR FOR TAKING MEDIA FROM THE BODY; DEVICES FOR PRODUCING OR ENDING SLEEP OR STUPOR
    • A61M5/00—Devices for bringing media into the body in a subcutaneous, intra-vascular or intramuscular way; Accessories therefor, e.g. filling or cleaning devices, arm-rests
    • A61M5/178—Syringes
    • A61M5/28—Syringe ampoules or carpules, i.e. ampoules or carpules provided with a needle
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/06—Antigout agents, e.g. antihyperuricemic or uricosuric agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A61P29/02—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID] without antiinflammatory effect
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P41/00—Drugs used in surgical methods, e.g. surgery adjuvants for preventing adhesion or for vitreum substitution
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/24—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/24—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
    • C07K16/241—Tumor Necrosis Factors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/54—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the route of administration
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/545—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the dose, timing or administration schedule
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)

Abstract

Антитялото се отнася до изолирано човешко анти-TNFалфа антитяло, което намира приложение в медицината за лечение на заболявания, при които активността на TNFалфа е нежелателна. Човешкото анти-TNFалфа антитяло се използва чрез подкожно прилагане, през седмица на човешки антитела, за предпочитане на рекомбинантни човешки антитела, които се свързват с човешки тумор некрозис фактор алфа (hTNFалфа). Прилага се в комбинация с метотрексат. Антитялото има висок афинитет и ниска скорост на дисоциация за hTNFалфа, при което неутрализира in vitro и in vivo активността му. С изолираното човешко анти-TNFалфа антитяло се постига лечение на нарушения, при които се прилагат изолирани човешки антитела, или техни антиген-свързващи части, които се свързват с човешки анти-TNFалфа антитела с висок афинитет и ниска скорост на дисоциация, които силно неутрализират способността му, така че нарушението се лекува. Изолираното човешко анти-TNFалфа антитяло при лечение на умерен до тежък ревматоиден артрит при хора се прилага подкожно на нуждаещия се от него човек, при дозиране през седмица по 40 mg на всеки 14 дни. То има вариабилен регион на леката верига (LCVR), който включва аминокиселинна последователност от SEQ ID NO: 1, както и вариабилен регион на тежката верига, който има аминокиселинна последователност от SEQ ID NО: 2, при което има още IgG1 константен регион на тежката верига и константен регион на капа леката верига. При това антитялото трябва да се прилага в комбинация с метотрексат.

Description

Изобретението се отнася до човешки анти-TNFa антитела, които намират приложение в медицината за лечение на заболявания, при които активността на TNFa е нежелателна.
Предшестващо състояние на техниката
Тумор некрозис фактор а (TNFa) е цитокин, който се продуцира от много голям брой клетки, включващи моноцити и макрофаги, който първоначално е идентифициран въз основа на способността му да индуцира некрозис на някои миши тумори (виж например, Old, L, (1985) Science 230: 630-632).
Впоследствие е показано, че фактор наречен кахектин, свързан с хронична умствена слабост, е същата молекула както и TNFa. TNFa е включен в медиирането на шоково състояние (виж например, Beutler, В. и Cerami, А. (1988) Anna. Rev. Biochem. 57: 505-518; Beutler, В. и Cerami, A. (1989) Anna. Rev. Immunol. 7: 625-655). Освентова, TNFa е включен в патофизиологията на много други болести при човека и нарушения, включващи сепсис, инфекции, автоимунни заболявания, отхвърляне на присадка и заболяване свързано с отхвърляне на присадка на донора от рецепиента (виж например, Vasilli, R (1992) Annu. Rev. Immunol. K): 411-452; Tracey, K. J. и Cerami, A. (1994) Annu. Rev. Med. 45:491-503).
Разработени са терапевтични стратегии за инхибиране или неутрализиране на активността на hTNFа, поради вредната роля на човешкия TNFa (hTNFа) при различни болестни състояния на човека.
По-специално, като средство за потискане на активността на hTNFa, се търсят антитела, които се свързват с и неутрализират hTNFa. Някои от първите такива антитела са мишите моноклонални антитела (mAbs), секретирани от хибридоми, получени от лимфоцити на мишки, имунизирани с hTNFa (виж например, Hahn Т; et al., (1985) Proc. Natl. Acad. Sci USA 82: 3814-3818; Liang, C-M., et al. (1986) Biochem. Biophys. Res. Commun. 137: 847-854; Hirai, M., et al. (1987) J. Immunol. Methods 96: 57-62; Fendly, В. M., et al. (1987) Hybridoma6: 359-370; Moller, A., et al. (1990) Cytokine 2: 162-169; U. S. Patent No. 5,231,024 от Moeller et al.; Европейска патентна заявка No. 186 833 Bl от Wallach, D.; Европейска патентна заявка No. 218 868 Al от Old et al.; Европейска патентна заявка No. 260 610 Bl от Moeller, A., et al.). Докато тези миши анти-hTNFa антитела често показват силен афинитет към hTNFa (например, Kd ΙΟ-9 М) и са способни да неутрализират активността на hTNFa, използването им in vivo може да бъде ограничено, поради проблеми свързани с прилагането на миши антитела при хора, такива като проблем свързан с кратък полуживот в серума, неспособност да инициират някои човешки ефекторни функции и да предизвикват нежелан имунен отговор срещу мишото антитяло в човек („човешко антимишо антитяло“ (НАМА) реакция).
Един опит за да се преодолеят проблемите, свързани с използването на напълно миши антитела при хора, е създаването по генно инженерен път на миши анти-hTNFa антитела, които да са антитела “наподобяващи повече човешките”. Например, получени са химерни антитела, в които вариабилните области на антитяло веригите са с миши произход, а константните области на антитяло веригите са с човешки произход (Knight, D. М, et а1„ (1993) Mol. Immunol. 30:1443-1453; РСТ Публикация No WO 1992/016553 от Daddona, Р. Е., et ah). В допълнение, получени са също така антитела наподобяващи човешките, в които хипер вариабилните домени на антитяло вариабилните области са с миши произход, но останалата част от вариабилните области и антитяло константните области са с човешки произход (РСТ Публикация No WO 1992/011383 от Adair, J. R.,etal.). Обаче, тъй като тези химерни и наподобяващи човешките антитела все още запазват някои миши секвенции, те все още могат да предизвикват нежелана имунна реакция, реакция срещу човешко антихимерно антитяло (НАСА), особено когато се прилагат за по-дълги периоди от време, например при хронични индикации, такива като ревматоидни артрити (виж например, Elliott, М. J., et al. (1994) Lancet 344: 1125-1127; Elliot, M. J., et al. (19941 Lancet 344: 1105-1110).
Предпочитано hTNFa инхибиторно средство срещу миши mAbs или техни производни (например, химерни или наподобяващи човешките антитела), ще бъде напълно човешко анти-hTNFa антитяло, тъй като това средство не предизвиква НАМА реакция, дори и ако се използва за по-дълги периоди от време.
Описания на издадени патенти за изобретения № 09.1/16.09.2019
Чрез използване на човешки хибридомни техники са получени човешки моноклонални авто-антитела срещу hTNFa (Boyle, Р., et al. (1993) Cell. Immunol. 152: 556-568; Boyle, P., et al. (1993) Cell Immunol. 152: 569-581; Европейска Патентна Заявка Публикация No. 614 984 А2 от Boyle, et al). Съобщава се обаче, че тези моноклонални авто-антитела получени от хибридома имат афинитет към hTNFa, който е твърде слаб, за да може да се изчисли чрез стандартните методи, които не са способни да се свързват с разтворим hTNFa и не са способни да неутрализират индуцираната от hTNFa цитотоксичност (виж Boyle, et al; по-горе). Освен това, успехът по отношение на човешките хибридомни техники зависи от естественото присъствие на лимфоцити в човешката периферна кръв, продуциращи автоантитела, специфични за hTNFа. В някои изследвания са открити серумни автоантитела срещу hTNFа в човешки индивиди (Fomsgaard,. A., et al (1989) Scand. J. Immunol 30: 219-223; Bendtzen, K., et al (1990) Prog. Leukocyte Biol 10B :447-452), докато в други не са (Leusch, H-G., et al. (1991) J. Immunol Methods 139: 145-147).
Алтернатива на естествено срещащите се човешки анти-hTNFa антитела, ще бъде рекомбинантното hTNFa антитяло. Описани сарекомбинантничовешки антитела, които се свързвате hTNFa с относително нисък афинитет (т. e.,Kd~ 107 М)исъс скорост на дисоциация (т. e.,Koff~ IO-2 sec1) (Griffiths, A. D.,etal. (1993) EMBO J. 12: 725-734). Обаче, поради техните относително бързи кинетики на дисоциация, тези антитела могат да не са подходящи за терапевтично използване. В допълнение, описано е рекомбинантно човешко анти-hTNFa антитяло, което не неутрализира активността на hTNFa, а увеличава по-скоро свързването на hTNFa с повърхността на клетките и повишава интернализацията на hTNFa (Lidbury, A., et al. (1994) Biotechnol, Then 5: 27-45; PCT Публикация No. WO 1992/003145 от Aston, R. et al.).
Описани са също така рекомбинантни човешки антитела, които се свързват с разтворим hTNFa е висок афинитет и слаби дисоциационни кинетики и които имат способността за неутрализират активността на hTNFa, включващи hTNFa-индуцираната цитотоксичност (in vitro и in vivo) и hTNFaиндуцираното клетъчно активиране (виж!!. S. Патент No. 6,090,382). Типичните протоколи за прилагане на антитела са на базата на интравенозно седмично приложение. Седмичното дозиране с антитела и/или с който и да е друг лекарствен препарат, може да е скъпо, неудобно и да доведе до увеличаване на броя на страничните ефекти, поради честотата на прилагане. Интравенозното приложение също така има ограничения, поради това че прилагането обикновено се прави от някой, който има медицински опит.
VAN DE PUTTE L.B.A. et al: “Ефикасност на изцяло човешкото анти-TNFa антитяло D2E7 при лечението на ревматоиден артрит“, ARTHRITIS AND RHEUMATISM, том 42, № 9 SUPPL. (септември 1999), стр. S400, разкрива лечение на ревматоиден артрит с D2E7 антитяло чрез ежеседмично подкожно приложение на дози съответно от 20, 40 и 80 мг. SCHATTENKIRCH-NER ЕТ AL: “Дългосрочно използване на изцяло човешкото анти-TNFa антитяло D2E7 в комбинация с метотрексат при лечението на активен ревматоиден артрит“.
Техническа същност на изобретението
Въз основа на разкритието, представено по-горе, и на разкритието, съдържащо се на друго място, настоящото изобретение осигурява:
Изолирано човешко анти-TNFa антитяло за лечение на умерен до тежък ревматоиден артрит при хора. Антитялото се прилага подкожно на нуждаещия се от него човек, при дозиране през седмица по 40 mg на всеки 14 дни. Антитялото има вариабилен регион с лека верига (LCVR), който включва аминокиселинна последователност от SEQ ID NO: 1, както и вариабилен регион с тежка верига, който има аминокиселинна последователност от SEQ ID NO: 2. Има още IgGl константен регион с тежка верига и още константен регион с капа лека верига, като при това антитялото трябва да се прилага в комбинация с метотрексат.
Кратко изложение на изобретението
Настоящото изобретение осигурява лечение на свързаните с TNFa нарушения, при които дозирането е през седмица предимно подкожно. Дозирането през седмица има много предимства отколкото дозирането един път седмично, включващо, но не ограничаващо се само до, по-малък общ брой инжекции, намаляване на броя на страничните реакции от инжекциите (например, локална болка, и подуване),
Описания на издадени патенти за изобретения № 09.1/16.09.2019 увеличава се желанието на пациента (т. е. поради по-малкия брой инжекции) и не е толкова скъпо за пациента, така както и за лицето, което се грижи за здравето. Подкожното дозиране има предимство, тъй като пациентът може сам да прилага терапевтичната субстанция, например, човешко TNFa антитяло, което е удобно както за пациента, така и за лицето, което се грижи за здравето.
Това изобретение осигурява методи за лечение на нарушения, при които е нежелателна активността на TNFa. Методите включват подкожно прилагане през седмица, чрез инжектиране на антитела на лицето. За предпочитане, антителата са рекомбинантни човешки антитела, които се свързват специфично с човешки TNFa. Това изобретение осигурява по-нататък методи за лечение на нарушения, при които активността на TNFa е вредна. Тези методи включват използването комбинирана терапия, при която човешките антитела се прилагат на лицето с друго терапевтично средство, такова като едно или повече допълнителни антитела, които се свързват с други мишени (например, антитела, които свързват други цитокини или които свързват клетъчно повърхностни молекули), един или повече цитокини, разтворим TNFa рецептор (виж например, РСТ Публикация No. WO 1994/006476) и/или едно или повече химични средства, които потискат продукцията или активността на hTNFa (такива като производни на циклохексанилиден, както е описано в РСТ Публикация No. WO 1993/019751), за предпочитане метотрексат. За предпочитане е антителата да са рекомбинантни човешки антитела, които се свързват специфично с човешки TNFa. Антителата от изобретението се характеризират с това, че се свързват с hTNFa със силен афинитет и ниски дисоциационни кинетики и че неутрализират активността на hTNFa, включващи hTNFa-индуцираната цитотоксичност (in vitro и in vivo) и hTNFa-индуцираното клетъчно активиране. Антителата могат да бъдат целите антитела (например, IgGl или IgG4 антитяло) или могат да включват само антиген-свързващата част (например, Fab, F (ab‘)2, scFv фрагмент или единичен домен). Най-предпочитаното рекомбинантно антитяло от изобретението, наречено D2E7, има CDR3 домен от леката верига, включващ аминокиселинната секвенциая от SEQ ID NO: 3 и CDR3 домен от тежката верига, включващ аминокиселинната секвенция от SEQ ID N0: 4 (изложена в Приложение В). За предпочитане е, антитялото D2E7 да има вариабилна област от леката верига (LCVR), включваща аминокиселинната секвенция от SEQ ID NO: 1 и вариабилната област от тежката верига (HCVR), включваща аминокиселинната секвенция от SEQ ID NO: 2. Тези антитела са описани в U. S. Патент No. 6,090,382, включен изцяло тук в цитираната литература.
В един вариант, изобретението осигурява методи за лечение на нарушения, при които активността на TNFa е вредна. Тези методи включват потискане на активността на човешки TNFa, чрез подкожно прилагане през седмица, на анти-TNFa антитяло, така че нарушението се лекува. Нарушението може да бъде например сепсис, автоимунно заболяване (например, ревматоидни артрити, алергия, мултитиплена склероза, автоимунни диабети, автоимунни увеити и нефротичен синдром), инфекциозни болести, малигнизация, отхвърляне на присадка на донора от реципиента, пулмонарно нарушение, костно нарушение, чревно нарушение или сърдечно нарушение.
В друг вариант, изобретението осигурява методи за лечение на нарушения, при които активността на TNFa е вредна. Тези методи включват потискане на активността на човешки TNFa, чрез подкожно прилагане на анти-TNFa антитяло и метотрексат, така че нарушението да се лекува. В друг вариант, метотрексатът се прилага заедно с анти-TNFa антитяло. В друг вариант, метотрексатът се прилага преди прилагането на анти-TNFa антитялото. В още един друг вариант, метотрексатът се прилага след прилагането на анти-TNFa антитялото.
В предпочитан вариант, анти-TNFa антитялото, използвано за лечение на нарушения при които активността на TNFa е вредна, е човешко, анти-TNFa антитяло. Още по-добре е дори лечението да се провежда чрез подкожно инжектиране, през седмица на изолирано човешко антитяло, или на негова антиген-свързваща част. За предпочитане е антитялото или негова антиген-свързваща част да дисоциират от човешки TNFa с Kd от 1 х 10-8 М или по-малко и Koff скоростна константа от 1 х 10_3 s1 или по-малко, като и двете са определени чрез повърхностен плазмон резонанс и неутрализират човешката TNFa цитотоксичност в стандартен in vitro L929 анализ, с 1С50 от 1 х ΙΟ-7 М или по-малко. Още по-добре е изолираното човешко антитяло или негова антиген свързваща част да дисоциира от човешки TNFa с Koff от 5 х IO-4 s1 или по-малко, или още по-добре е с Koff от 1 х IO-4 s1 или по-малко. Още по-добре
Описания на издадени патенти за изобретения № 09.1/16.09.2019 е, изолираното човешко антитяло или негова антиген-свързваща част, да неутрализира човешка TNFa цитотоксичност в стандартния in vitro L929 анализ е 1С50 от 1 х ΙΟ-8 М или по-малко, а още по-добре е е 1С50 от 1 х ΙΟ-9 М или по-малко, а най-добре е е 1С50 от 1 х ΙΟ10 М или по-малко.
В друг предпочитан вариант, изобретението осигурява методи за лечение на нарушения, при които активността на TNFa е вредна, чрез подкожно прилагане на лицето през седмица, на човешко антитяло или на негова антиген-свързваща част. За предпочитане е антитялото или неговата антиген свързваща част да имат следните характеристики:
а) да дисоциира от човешки TNFa е Koff от 1 х 10_3 s1 или по-малко, както е определено чрез повърхностен плазмон резонанс;
б) да има домен CDR3 от леката верига, включващ аминокиселинната секвенция от SEQ ID NO:
3, или модифицирана от SEQ ID NO: 3 чрез единично заместване на аланина в позиция 1, 4, 5, 7 или 8, или чрез едно до пет консервативни аминокиселинни замествания, в позиции 1, 3, 4, 6, 7, 8 и/или 9;
в) да има домен CDR3 от тежката верига, включващ аминокиселинната секвенция от SEQ ID NO:
4, или модифицирано от SEQ ID NO: 4, чрез единично заместване на аланина в позиция 2, 3, 4, 5, 6, 8, 9, 10 или 11, или чрез едно до пет консервативни аминокиселинни замествания в позиции 2, 3, 4, 5, 6, 8, 9, 10, 11 и/или 12.
За предпочитане е антитялото или неговата антиген свързваща част да дисоциира от човешки TNFa е Koff от 5 х IO-4 s1 или по-малко. Още по-добре е антитялото или неговата антиген-свързваща част да дисоциира от човешки TNFa е Koff от 1 х IO-4 s1 или по-малко.
В друг вариант, изобретението осигурява методи за лечение на нарушения, при които активността на TNFa е вредна. Тези методи включват подкожно прилагане на лицето през седмица, на човешко антитяло или на негова антиген- свързваща част. За предпочитане е антитялото или неговата антигенсвързваща част да съдържа LCVR, притежаваща CDR3 домен, включващ аминокиселинната секвенция от SEQ ID NO: 3, или модифицирана от SEQ ID NO: 3 чрез единично заместване на аланин в позиция 1,4, 5, 7 или 8 и HCVR притежаваща CDR3 домен, включващ аминокиселинната секвенция от SEQ ID NO: 4, или модифицирана от SEQ ID NO: 4, чрез единично заместване на аланина в позиция 2, 3, 4, 5, 6, 8,9, 10 или 11. Още по-добре е освен това LCVR да има CDR2 домен, включващ аминокиселинната секвенция от SEQ ID NO: 5, а в допълнение HCVR да има CDR2 домен, включващ аминокиселинната секвенция от SEQ ID NO: 6. Още по-добре е LCVR в допълнение да има CDR1 домен, включващ аминокиселинната секвенция от SEQ ID NO: 7, а HCVR да има CDR1 домен, включващ аминокиселинната секвенция от SEQ ID NO: 8.
В друг вариант, изобретението осигурява методи за лечение на нарушения, при които активността на TNFa е вредна, чрез подкожно прилагане на лицето, през седмица, на изолирано човешко антитяло или на негова антиген-свързваща част. За предпочитане е антитялото или неговата антиген- свързваща част да съдържа LCVR, включваща аминокиселинната секвенция от SEQ ID NO: 1 и HCVR, включваща аминокиселинната секвенция от SEQ ID NO: 2. В някои варианти, антитялото има IgGl константна област от тежката верига или константна област от тежката верига на IgG 4. В други варианти, антитялото е Fab фрагмент, F (ab‘)2 фрагмент или едноверижен Fv фрагмент.
В други варианти, изобретението осигурява методи за лечение на нарушения, при които прилагането на анти-TNFa антитяло е полезно чрез подкожно прилагане на лицето, през седмица, на едно или повече анти-TNFa антитела, или на техни антиген-свързващи части. За предпочитане е антитялото или неговата антиген-свързваща част да съдържа LCVR, притежаваща CDR3 домен, включващ аминокиселинна секвенция, избрана от групата, съставена от SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 25, SEQ ID NO: 26 или HCVR, притежаваща CDR3 домен, включващ аминокиселинна секвенция, избрана от групата, съставена от SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 31, SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 34 и SEQ ID NO: 35.
Друг вариант от изобретението се отнася до китове, съдържащи формулировка, включваща фармацевтичен състав. Китовете включват анти-TNFa антитяло и фармацевтично приемлив носител. Китовете
Описания на издадени патенти за изобретения № 09.1/16.09.2019 съдържат инструкции за подкожно дозиране през седмица на фармацевтичен състав, за лечение на нарушение, при което прилагането на анти-TNFa антитяло е полезно. В друг вариант, изобретението се отнася до китове, съдържащи формулировка, включваща фармацевтичен състав, освен това включваща анти-TNFa антитяло, метотрексат и фармацевтично приемлив носител. Китовете съдържат инструкции за подкожно дозиране на фармацевтичния състав, за лечение на нарушения, при които е полезно прилагането на анти-TNFa антитяло.
Друг вариант от изобретението осигурява предварително напълнена спринцовка, съдържаща фармацевтичен състав, включващ анти-TNFa антитяло и фармацевтично приемлив носител. В друг вариант, изобретението осигурява предварително напълнена спринцовка, съдържаща фармацевтичен състав, включващ анти-TNFa антитяло, метотрексат и фармацевтично приемлив носител.
Кратко пояснение на графиките
Фигури 1А и 1В означават отговорите от American College of Rheumatology 20 (ACR20) и ACR50 на пациенти, страдащи от ревматоиден артрит (RA), след подкожно дозиране с антитялото D2E7, всяка седмица, общо за дванадесет седмици (1А), или подкожно дозиране с антитялото D2E7 и метотрексат през седмица (1В), общо за двадесет и четири седмици. Тези данни показват, че дозирането през седмица е ефективно така както и ежеседмичното дозиране.
Фигура 2 показва ACR20, ACR50, и ACR70 отговорите на пациенти, страдащи от RA след подкожно дозиране с антитялото D2E7 и метотрексат през седмица за двадесет и четири седмици.
Фигури ЗА и ЗВ показват курсовете на лечение на резултата за болезнена става (ЗА) и резултата за подута става (ЗВ) в течение на двадесет и четири седмици, за пациенти, страдащи от RA, след подкожно дозиране с D2E7 и метотрексат през седмица, за двадесет и четири седмици.
Фигура 4 показва резултатите от кратката форма от здравния преглед (SF-36) от пациенти, страдащи от RA, след подкожно дозиране с антитялото D2E7 и метотрексат през седмица, за двадесет и четири седмици. RP, физична роля; PF, физична функция; ВР, телесна болка; GH, общо здравословно състояние; V, жизненост; SF, обществена длъжност; RE, емоционална роля; и МЕ, психическо здравословно състояние.
Фигура 5 показва процентът на ACR отговорите след еднократна венозна инжекция от антитяло D2E7 и метотрексат, при пациенти, страдащи от RA.
Примерно изпълнение на изобретението
Това изобретение се отнася до лечение на нарушения, при които прилагането на анти-TNFa антитяло е полезно, включващо прилагането на изолирани човешки антитела, или техни антиген-свързващи части, които се свързват с човешки TNFa с висок афинитет, ниска скорост на дисоциация и силно неутрализират способността, така че нарушението се лекува. Различни варианти от изобретението се отнасят до лечение с антитела и антитяло фрагменти и техни фармацевтични състави.
За да може настоящото изобретение да бъде по-лесно разбрано, най-напред ще бъдат определени някои термини.
Използваният тук термин “дозиране”, се отнася до прилагане на субстанция (например, анти-TNFa антитяло), за да се постигне терапевтичната цел (например, лечението на свързано с TNFa нарушение).
Използваните тук термини „дозов режим през седмица“, „дозиране през седмица“ и „прилагане през седмица“, се отнасят до времето на прилагане на субстанция (например, анти-TNFa антитяло) на пациент, за да се постигне терапевтичната цел (например, лечението на свързано с TNFa нарушение). Дозовият режим през седмица няма за цел да включва седмичния дозов режим. За предпочитане е субстанцията да се прилага на всеки 9-19 дни, по-добре е на всеки 11-17 дни, още по-добре е на всеки 13-15 дни, а най-добре е на всеки 14 дни.
Използваният тук термин „комбинирана терапия“, се отнася до прилагането на две или повече терапевтични субстанции, например, анти-TNFa антитяло и лекарственият препарат метотрексат. Метотрексатът може да се приложи едновременно със, преди или след прилагането на анти-TNFa антитялото.
Използваният тук термин „човешки TNFa“ (съкратено тук hTNFa, или просто hTNF), се отнася до човешки цитокин, който съществува като 17 kD секретирана форма и 26 kD мембранно свързана
Описания на издадени патенти за изобретения № 09.1/16.09.2019 форма, биологично активната форма на които е съставена от тример от нековалентно свързани 17 kD молекули. Структурата на TNFa е описана освен това, например от a, D., et al. (1984) Nature 312: 724729; Davis, J. M., et al. (1987) Biochemistry 26: 1322-1326; и Jones, E. Y, et al. (1989) Nature 338: 225-228. Терминът човешки TNFa има за цел да включва рекомбинантен човешки TNFa (rh TNFa), който може да се приготви чрез стандартните рекомбинантни методи за експресия, или да се закупи от търговската мрежа (R & D Systems, Catalog No 210-ТА, Minneapolis, MN).
Използваният тук термин “антитяло”, се отнася до имуноглобулинови молекули, включващи четири полипептидни вериги, две тежки (Н) вериги и две леки (L) вериги, свързани помежду си с дисулфидни връзки. Всяка тежка верига е съставена от вариабилна област на тежката., верига (тук означена със съкращението като HCVR или VH) и константна област на тежката верига. Константната област на тежката верига е съставена от три домена, CHI, СН2 и СНЗ. Всяка лека верига е съставена от вариабилна област на леката верига (тук означена със съкращението като LCVR или VL) и константна област на леката верига. Константната област на леката верига е съставена от един домен, CL. Областите VH и VL могат да бъдат по-нататък разделени допълнително на области от хипервариабилност, наречени комплиментарни детерминиращи области (CDR), разпръснати области, които са по- консервативни, наречени рамкови области (FR). Всяка VH и VL е съставена от три CDRs и четири FRs, организирани от амино-края до карбокси-края в следната последователност: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4.
Използваният тук термин “антиген-свързваща част” от антитяло (или просто “част от антитяло”), се отнася до един или повече фрагмента от антитялото, които запазват способността да се свързват специфично е антигена (например, hTNFa). Показано е, че антиген-свързващата функция на антитялото може да се изпълни от фрагменти на цялото антитяло. Примери за свързващи фрагменти, които са включени в термина “антиген-свързваща част” от антитялото включват (1) Fab фрагмент, моновалентен фрагмент, съставен от VL, VH, CL и СН1 домени; (2) F(ab’)2 фрагмент, бивалентен фрагмент, включващ два Fab фрагмента свързани е дисулфиден мост в шарнирната област; (3) Fd фрагмент, съставен от VH и СН1 домени; (4) Fv фрагмент, съставен от VL и VH домени на едното рамо на антитялото, (5) dAb фрагмент (Ward et al., (1989) Nature 341: 544-546), който се състои от VH домен; и (6) изолирана комплиментарна детерминираща област (CDR). Освен това, въпреки че двата домена на Fv фрагмента, VL и VH, се кодират от отделни гени, те могат да се свържат, като се използват рекомбинантните методи, чрез синтетичен линкер, който им позволява да бъдат като едноверижна белтъчна верига, в която VL и VH областите са свързани, за да образуват моновалентни молекули (известна като едноверижен Fv (scFv); виж например, Bird et al. (1988) Science 242: 423-426; и Huston et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85: 5879-5883). Такива едноверижни антитела са включени също така в термина „антиген-свързваща част“ на антитялото. Включени са също така и други форми на едноверижни антитела, такива като двойни антитела.
Двойните антитела са бивалентни, биспецифични антитела, в които VH и VL домените се експресират в единична полипептидна верига, но като се използва линкер, който е твърде къс, за да позволи свързването между двата домена в същата верига, като по този начин индуцират домените да се свързват е комплиментарните домени от друга верига и създава две антиген-свързващи места (виж например, Holliger, Р, et al. (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90: 6444-6448; Poljak, R. J., et al. (1994) Structure 2: 1121-1123).
Освен това, антитяло или негова антиген-свързваща част може да е част от по-големи имуно-адхезивни молекули, образувани чрез ковалентно или нековалентно свързване на антитялото или на част от антитялото е един или повече други белтъци или пептиди. Примери за такива имуно-адхезивни молекули включват използването на стрептавидинова корова област, за да се направи тетрамерна scFv молекула (Kipriyanov, S. М., et al. (1995) Human Antibodies and Hybridomas 6: 93-101) и използване на цистеинов остатък, маркерен пептид и С-крайна полихистидинова опашка, за да се получат бивалентни и биотинилирани scFv молекули (Kipriyanov, S. М„ et al. (1994) Mol. Immunol. 31: 1047-1058). Части от антитялото такива като Fab и F (ab‘)2 могат да се получат от целите антитела, като се използват конвенционални техники, такива като разграждане с папани или пепсин, респективно на целите антитела. Освен това, антитела, части от антитела и имуно-адхезивни молекули могат да се получат като
Описания на издадени патенти за изобретения № 09.1/16.09.2019 се използват стандартните рекомбинантни ДНК техники, които са описани тук.
Използваният тук термин „човешко антитяло“, има за цел да включва антитела, притежаващи вариабилни и константни области, получени от човешки герминативни имуноглобулинови секвенции. Човешките антитела от изобретението могат да включват аминокиселинни остатъци, които не са кодирани от човешки герминативни имуноглобулинови секвенции (например, мутации въведени чрез случаен или място-специфичен мутагенезис in vitro или чрез соматична мутация in vivo), например в CDRs и по-специално CDR3. Обаче използваният тук термин „човешко антитяло“, няма за цел да включва антитела, в които CDR секвенциите, получени от герминативната линия на други видове бозайници, такива като мишка, са присадени към човешки рамкови секвенции.
Използваният тук термин „рекомбинантно човешко антитяло“, има за цел да включва всички човешки антитела, които са приготвени, експресирани, създадени или изолирани чрез рекомбинантни средства, такива като експресирани антитела чрез използване на рекомбинантен експресионен вектор, трансфектиран в клетка гостоприемник (описан по-нататък в Раздел II, по-долу), антитела изолирани от рекомбинантна, комбинаторна библиотека за човешко антитяло (описани по-нататък в Раздел III по-долу), антитела, изолирани от животно (например, мишка), която е трансгенна за човешки имуноглобулинови гени (виж например, Taylor, L. D„ et al. (1992) Nucl. Acids Res. 20: 6287-6295), или антитела получени, експресирани, създадени или изолирани чрез други средства, които включват сплайсинг на човешките имуноглобулинови гении секвенции в сравнение е други ДНК секвенции. Тези рекомбинантни човешки антитела имат вариабилни и константни области, получени от човешки герминативни имуноглобулинови секвенции. Обаче в някои варианти такива рекомбинантни човешки антитела се подлагат на in vitro мутагенезис (или, когато се използва животно трансгенно за човешки Ig секвенции, in vivo соматичен мутагенезис) и по този начин аминокиселинните секвенции на VH и VL областите от рекомбинантните антитела са секвенции, които когато са получени от и се отнасят до човешки герминативни VH и VL секвенции, могат да не съществуват естествено в човешкия антитяло герминативен репертоар in vivo.
Използваният тук термин „изолирано антитяло“, се отнася до антитяло, което по същество е свободно от други антитела, притежаващи различни антигенни специфичност (например, изолирано антитяло, което се свързва специфично е hTNFa, фактически е свободно от антитела, които се свързват специфично е антигени, различни от hTNFa). Обаче, изолирано антитяло, което се свързва специфично е hTNFa, може да реагира кръстосано е други антигени, такива като hTNFa молекули от други видове (дискутирани е подробности по-долу). Освен това, изолираното антитяло, може да е по същество свободно от други клетъчни материали и/или химикали.
Използваният тук термин „неутрализиращо антитяло“, (или „антитяло, което неутрализира активността на hTNFa“), се отнася до антитяло, чието свързване е hTNFa, води до инхибиране на биологичната активност на hTNFa. Това потискане на биологичната активност на hTNFa може да се оцени чрез измерване на един или повече индикатори на биологичната активност на hTNFa, такива като hTNFa-индуцирана цитотоксичност (или in vitro или in vivo), hTNFа-индуциране клетъчно активиране и свързване на hTNFa е hTNFa рецепторите. Тези индикатори за биологичната активност на hTNFa, могат да се оценят чрез един или повече от няколкото стандартни in vitro или in vivo анализи известни от областта на техниката (виж Пример 4). За предпочитане е способността на антитялото да неутрализира активността на hTNFa да се оценява чрез инхибиране на индуцираната от hTNFa цитотоксичност в L929 клетки. Като допълнение или като алтернативен параметър за активността на hTNFa, може да се оцени способността на антитялото да инхибира индуцираната от hTNFa експресия на ELAM-1 в HUVEC, като мярка за индуцирането от hTNFa клетъчно активиране.
Използваният тук термин „повърхностен плазмон резонанс“, се отнася до един оптичен феномен, който позволява да се направи анализ на real-time биоспецифичните взаимодействия, чрез детектиране на промените в белтъчните концентрации в биосенсорен матрикс, например чрез използване на BIAcore system (Pharmacia Biosensor AB, Uppsala, Sweden and Piscataway, NJ). Като допълнително описание, виж
Пример 1 и Jonsson, U„ et al. (1993) Ann. Biol. Clin. 51:19-26; Jonsson, U„ et al. (1993), Ann. Biol. Clin.
51: 19-26; Jonsson, U„ et al. (1991) Biotechniques 11: 620-627; Johnsson, B„ et al. (1995) J. Mol. Recognit.
Описания на издадени патенти за изобретения № 09.1/16.09.2019
8: 125-131; и Johnnson, В., et al. (1991) Anal. Biochem. 198: 268-277.
Използваният тук термин „К се отнася до скоростна константа на дисоциация на антитялото от комплекса антитяло/антиген.
Използваният тук термин ,,Kd“, се отнася до дисоциационна константа при специфично взаимодействие на антитяло-антиген.
Използваният тук термин „молекула нуклеинова киселина“, има за цел да включва ДНК молекули и РНК молекули. Молекулата нуклеинова киселина може да бъде едноверижна или двойноверижна, но за предпочитане е двойноверижна ДНК.
Използваният тук термин „изолирана молекула нуклеинова киселина“, по отношение на нуклеиновите киселини кодиращи антитела или части от антитела (например, VH, VL, CDR3), които се свързват с hTNFa, се отнася до молекула нуклеинова киселина, в която нуклеотидните секвенции кодиращи антитялото или част от антитялото, са свободни от други нуклеотидни секвенции, кодиращи антитела или части от антитела, които се свързват с антигени, различни от hTNFa, които други секвенции могат естествено да фланкират нуклеиновата киселина в човешката геномна ДНК. Следователно, например изолираната нуклеинова киселина от изобретението кодираща VH област от анти-hTNFa антитяло не съдържа други секвенции, кодиращи други VH области, които се свързват с антигени различни от hTNFa.
Използваният тук термин „вектор”, се отнася до молекула нуклеинова киселина, способна да транспортира друга нуклеинова киселина, с която тя е свързана. Един такъв тип вектор е „плазмида“, който се отнася до циклична двойноверижна кръгова ДНК, в която могат да бъдат лигирани допълнителни ДНК сегменти. Друг тип вектор е вирусният вектор, където могат да бъдат лигирани допълнителни ДНК сегменти във вирусния геном. Някои вектори могат да се реплицират автономно в клетката гостоприемник, в която те са въведени (например, бактериалните вектори имат начало за репликацията и епизомалните вектори на бозайниците). Други вектори (например, не-епизомалните вектори на бозайниците) могат да се интегрират в генома на клетката гостоприемник при въвеждане в клетката гостоприемник и по този начин те се реплицират заедно с генома на гостоприемника.
Нещо повече, някои вектори са способни да насочват експресията на гени, с които те са свързани по оперативен път. Такива вектори тук се отнасят до „рекомбинантни експресионни вектори“ (или просто до „експресионни вектори“). Обикновено експресионните вектори, които се използват в рекомбинантните ДНК техники, често са под формата на плазмиди. В настоящата спецификация, „плазмид“ и „вектор“ могат да се използват като взаимозаменяеми, тъй като плазмидът е най-често използваната форма на вектор. Обаче изобретението има за цел да включва и други такива форми на експресионни вектори, като вирусни вектори (например, дефектни по репликация ретровируси, аденовируси и аденоасоциирани вируси), които имат еквивалентни функции.
Използваният тук термин „рекомбинантна клетка гостоприемник“ (или просто „клетка гостоприемник“), се отнася до клетка, в която е въведен рекомбинантен експресионен вектор. Трябва да е ясно, че тези термини се отнасят не само до определен вид клетка, но и до потомството на такава клетка. Тъй като могат да се срещат някои модификации в онаследените поколения, дължащи се или на мутация или поради действието на околната среда, такива поколения фактически могат да не са идентични с родителската клетка, но въпреки това те са в обхвата на термина „клетка гостоприемник“, който е използван тук.
В следващите примери са описани в детайли различни варианти от изобретението.
I. Човешки антитела, които се свързват с човешки TNFa
Това изобретение осигурява лечение на нарушения, при които прилагането на анти-TNFa антитяло е благоприятно. Това лечение включва подкожно прилагане, през седмица, на изолирани човешки антитела или на техни антиген-свързващи части, които се свързват с човешки TNFa с висок афинитет и ниска скорост на дисоциация и с висок капацитет за неутрализиране. За предпочитане е човешките антитела от изобретението да са рекомбинантни, неутрализиращи човешките анти-hTNFa антитела.
Най-предпочитаното рекомбинантно, неутрализиращо антитяло от изобретението тук, се отнася до D2E7 (аминокиселинната секвенция на D2E7 VL областта е показана в SEQ ID NO: 1; аминокиселинната
Описания на издадени патенти за изобретения № 09.1/16.09.2019 секвенция на D2E7 VH областта е показана в SEQ ID NO: 2). Свойствата на D2E7 са описани от Salfeld et al., U. S. Патент No. 6,090,382, който е включен тук в цитираната литература.
В един вариант, изобретението се отнася до лечение на нарушения, при които прилагането на анти-TNFa антитялото е благоприятно. Тези лечения включват подкожно прилагане, през седмица, на D2E7 антителата и части от антителата, сходни с D2E7 антитела и части от антитела и други човешки антитела и части от антитела с еквивалентни свойства на D2E7, такива, които имат висок афинитет за свързване с hTNFa, с ниски дисоциационни кинетики и висок неутрализиращ капацитет. В един вариант изобретението осигурява лечение с изолирано човешко антитяло или негова антиген-свързваща част, което дисоциира от човешки TNFa е Kd от 1 х ΙΟ-8 М или по-малко и Koff скоростна константа от 1 х 10_3 s1 или по-малко, като и двете са определени чрез повърхностен плазмон резонанс и което неутрализира човешка TNFa цитотоксичност в стандартен in vitro L929 анализ, с 1С50 от 1 х ΙΟ-7 М или по-малко. По-добре е изолираното човешко антитяло, или неговата антиген-свързваща част, да дисоциира от човешки TNFa с KoffOT 5 х IO-4 s1 или по-малко, или още по-добре с KoffOT 1 х IO-4 s1 или по-малко. За предпочитане е изолираното човешко антитяло или неговата антиген-свързваща част, да неутрализира човешка TNFa цитотоксичност в стандартния in vitro L929 анализ, с 1С50 от 1 х ΙΟ-8 М или по-малко, още по-добре е с 1С50 от 1 х ΙΟ-9 М или по-малко, а най-добре е с 1С50 от 1 х 1010 М или по-малко. В предпочитан вариант, антитялото е изолирано човешко рекомбинантно антитяло, негова антиген-свързваща част.
От областта на техниката е добре известно, че CDR3 домените от леката и тежка верига на антитялото имат важна роля в специфичността/афинитета на свързване на антитялото за антигена. Съответно, в друг вариант изобретението се отнася до методи за лечение на нарушения, при които прилагането на анти-TNFa антитяло е полезно, чрез подкожно прилагане на човешки антитела, които имат ниски дисоциационни кинетики за свързване с hTNFа и които имат CDR3 домени от леката и тежката верига, които структурно са идентични със или сходни с тези от D2E7. Позиция 9 от D2E7 VL CDR3 може да бъде заета от А1а или Thr, без да се повлияе съществено Koff. Съответно, консенсус мотива за D2E7 VL CDR3 включва аминокиселинната секвенция: Q-R-Y-N-R-A-P-Y- (Т/А) (SEQ ID NO: 3).
В допълнение, позиция 12 от D2E7 VH CDR3, може да бъде заета от Туг или Asn, без да се повлияе съществено Kojr Съответно консенсус мотива за D2E7 VH CDR3 включва аминокиселинната секвенция: V-S-Y-L-S-T-A-S-S-L-D-(Y/N) (SEQ ID NO: 4).
Освен това, както е показано в Пример 2, CDR3 доменът от тежката и лека верига на D2E7 е податлив на заместване с единичен аланинов остатък (в позиция 1,4, 5, 7 или 8, в VL CDR3 или в позиция 2, 3, 4, 5, 6, 8, 9, 10 или 11, в VH CDR3), без да се повлиява по същество Kojr Освен това, специалистите в областта ще оценят, че като се приема дадената податливаст на D2E7 VL и VH CDR3 домените за замествания с аланин, може да е възможно и заместването на други аминокиселини в CDR3 домените, докато все още е запазена ниската скоростна константа на дисоциация на антитялото, по-специално замествания с консервативни аминокиселини. Използваният тук термин „консервативно аминокиселинно заместване“, е това, при което един аминокиселинен остатък е заместен с друг аминокиселинен остатък, който има сходна странична верига. Семействата от аминокиселинни остатъци, притежаващи сходни странични вериги, определени от областта на техниката, включват базични странични верига (например, лизин, аргинин, хистидин), кисели странични верига (например, аспаргинова киселина, глутаминова киселина), незаредени полярни странични вериги (например, глицин, аспаргин, глутамин, серии, треонин, тирозин, цистеин), неполярни странични вериги (например, аланин, валии, левцин, изолевцин, пролин, фенилаланин, метионин, триптофан), бета-разклонени странични вериги (например, треонин, валии, изолевцин) и ароматни странични вериги (например, тирозин, фенилаланин, триптофан, хистидин).
За предпочитане е не повече от едно до пет консервативните аминокиселинни замествания да се правят в D2E7 VL и/или VH CDR3 домените. По-добре е не повече от едно до три консервативни аминокиселинни замествания да се правят в D2E7 VL и/или VH CDR3 домените. В допълнение, не трябва да се правят консервативни аминокиселинни замествания в аминокиселинни позиции, критични за свързването с hTNFa. Позициите 2 и 5 от D2E7 VL CDR3 и позиции 1 и 7 от D2E7 VH CDR3,
Описания на издадени патенти за изобретения № 09.1/16.09.2019 изглежда, че са критични за взаимодействието с hTNFa и следователно за предпочитане е да не се правят консервативни аминокиселинни замествания в тези позиции (въпреки че заместване на аланин в позиция 5 от D2E7 VL CDR3 е допустимо, както е описано по-горе) (виж U. S. Патент No. 6,090,382).
Съответно в друг вариант, изобретението осигурява методи за лечение на нарушения, при които прилагането на анти-TNFa антитяло е полезно, чрез подкожно прилагане, през седмица, на изолирано човешко антитяло, или на негова антиген-свързваща част. За предпочитане е антитялото или неговата антиген-свързваща част да имат следните характеристики:
а) да дисоциира от човешки TNFa с Koff скоростна константа от 1 х 10_3 s1 или по-малко, както е определено чрез повърхностен плазмон резонанс;
б) да има CDR3 домен от леката верига, включващ аминокиселинната секвенция от SEQ ID NO:
3, или модифицирана от SEQ ID NO: 3, чрез единично заместване на аланин в позиция 1, 4, 5, 7 или
8, или чрез едно до пет консервативни аминокиселинни замествания в позиции 1,3,4, 6, 7, 8 и/или 9;
в) да има CDR3 домен от тежката верига, включващ аминокиселинната секвенция от SEQ ID NO:
4, или модифицирана от SEQ ID NO: 4, чрез единично заместване на аланин в позиция 2, 3, 4, 5, 6, 8,
9, 10 или 11, или чрез едно до пет консервативни аминокиселинни замествания в позиции 2, 3, 4, 5, 6, 8,9, 10, 11 и/или12.
Още по-добре е, антитялото или неговата антиген-свързваща част, да дисоциира от човешки TNFa с Koff от 5 х 1 O'4 s1 или по-малко. Дори още по-добре е антитялото или неговата антиген-свързваща част да дисоциира от човешки TNFa с Koff от 1 х IO-4 s1 или по-малко.
В друг вариант, изобретението се отнася до лечение на нарушения, при които прилагането на анти-TNFa е полезно, чрез подкожно прилагане, през седмица, на изолирано човешко антитяло, или на негова антиген-свързваща част. За предпочитане е, антитялото или неговата антиген-свързваща част да съдържат вариабилна област от леката верига (LCVR), притежаваща CDR3 домена, включващ аминокиселинната секвенция от SEQ ID NO: 3, или модифицирана от SEQ ID NO: 3 чрез единично заместване на аланин в позиция 1,4,5,7 или 8 и вариабилна област от тежката верига (HCVR), притежаваща CDR3 домен, включващ аминокиселинната секвенция от SEQ ID NO: 4, или модифицирана от SEQ ID NO: 4 чрез единично заместване на аланина в позиция 2, 3, 4, 5, 6, 8, 9, 10 или 11. За предпочитане е освен това LCVR да има CDR2 домен, включващ аминокиселинната секвенция от SEQ ID NO: 5 (т. е. D2E7 VL CDR2), а освен това HCVR да има CDR2 домен, включващ аминокиселинната секвенция на SEQ ID NO: 6 (т. е. D2E7 VH CDR2). Още по-добре е освен това, LCVR да има CDR1 домен, включващ аминокиселинната секвенция от SEQ ID NO: 7 (т. е. D2E7 VL CDR1), а HCVR да има CDR1 домен, включващ аминокиселинната секвенция от SEQ ID NO: 8 (т. е. D2E7 VH CDR1). За предпочитане е очертаните в рамка области на VL да са от семейството на VkI човешка герминативна линия, още подобре от А20 човешка герминативна линия на Vk гена, а най-добре от D2E7 VL секвенциите, очертани в рамка, показани на Фигури 1А и 1В от U. S. Патент No. 6,090,382. За предпочитане е очертаните в рамка области за VH да са от семейството VH3 човешка герминативна линия, още по-добре е да са от DP-31 човешка герминативна линия на VH гена, а най-добре да са от D2E7 VH очертаните в рамка секвенции, показани на Фигури 2А и 2В U. S. Патент No. 6,090,382.
В друг вариант изобретението осигурява лечение на нарушения, при които прилагането на антиTNFa антитяло е полезно, чрез подкожно прилагане, през седмица, на изолирано човешко антитяло, или на негова антиген-свързваща част. За предпочитане е антитялото или неговата антиген- свързваща част да съдържа вариабилна област от леката верига (LCVR), включваща аминокиселинната секвенция от SEQ ID NO: 1 (т. е. D2E7 VL) и вариабилна област от тежката верига (HCVR), включваща аминокиселинната секвенция от SEQ ID N0: 2 (т. е. D2E7 VH). В някои варианти антитялото включва константна област от тежката верига, такава като IgGl, IgG2, IgG3, IgG4, IgA, IgE, IgM или IgD константна област. За предпочитане е константната област на тежката верига да е IgGl константна област от тежката верига или IgG4 константна област от тежката верига. Освен това, антитялото може да включва константна област от леката верига, или константна област от капа леката верига, или константна област от ламбда леката верига. За предпочитане е антитялото да включва константна област от капа леката верига.
Съответно, частта от антитялото може да е например Fab фрагмент или едноверижен Fv фрагмент.
Описания на издадени патенти за изобретения № 09.1/16.09.2019
В друг вариант изобретението осигурява лечение на нарушения, при които прилагането на антиTNFa антитяло е полезно, чрез подкожно прилагане, през седмица, на изолирано човешко антитяло, или на негови антиген-свързващи части. За предпочитане е антитялото или неговата антиген-свързваща част да съдържа VL и VH CDR3 домени, отнасящи се до D2E7, например антитела или техни антигенсвързващи части, е вариабилна област от леката верига (LCVR), притежаваща CDR3 домен, включващ аминокиселинна секвенция, избрана от групата, съставена от SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 15, SEQ ID QNO: 16, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 25 и SEQ ID NO: 26 или вариабилна област от тежката верига (HCVR), притежаваща CDR3 домен, включващ аминокиселинна секвенция, избрана от групата, съставена от SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 30, SEQ ID N0:31, SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 34 и SEQ ID NO: 35.
Антитяло или част от антитяло от изобретението може да е дериватизирано или свързано е друга функционални молекула (например, друг пептид или белтък). Съответно, планирано е антителата и частите от антителата от изобретението да включват дериватизирани и по друг начин модифицирани форми на човешки анти-hTNFa антитела, описани тук, включващи имуно-адхезивни молекули. Например, антитяло или част от антитяло от изобретенито може да бъде функционално свързана (чрез химично свързване, генетично сливане, нековалентно свързване или по друг начин) е една или повече други молекулни единици, такива като друга антитяло (например, биспецифично или двойно тяло), средство за детектиране, цитотоксично средство, фармацевтично средство и/или белтък или пептид, който може да медиира свързването на антитялото или на част от антитялото е друга молекула (такава като стрептавидинова корова област или полихистидинова опашка).
Един тип дериватизирано антитяло се получава чрез крос-свързване на две или повече антитела (от един и същи вид или от различни видове, например, за да се създадат биспецифични антитела). Подходящи крослинкери включват тези, които са хетеробифункционални, притежаващи две отчетливи реактивни групи, разделени чрез подходящ спейсер (например, т-малеимидобензоил-М-хидроксисукцинимид естер), или хомобифункционални (например, дисукцинимидил суберат). Такива линкери са налични от Pierce Chemical Company, Rockford, IL.
Полезни детектиращи средства, чрез които антитялото или част от антитялото от изобретението може да бъде дериватизирано, включват флуоресцентни съединения. Примерни флуоресцентни детектиращи средства включват, флуоресцеин, флуоресцеин изотиоцианат, родамин, 5-диметиламин-1-нафталенсулфонил хлорид, фикоеритрин и други подобни. Едно антитяло може да бъде дериватизирано също така е детектиращи ензими, такива като алкална фосфатаза, пероксидаза от хрян, глюкозо-оксидаза и други подобни. Когато антитялото е дериватизирано е детектиращи ензими, то се детектира чрез добавяне на допълнителни реагенти, които ензимът използва, за да се получи реакционен продукт, който може да се детектира.
Например, когато присъства като детектиращо средство пероксидаза от хрян, добавянето на водороден пероксид и диаминобензидин, води до получаването на цветен продукт от реакцията, който може да се детектира. Антитялото може да бъде дериватизирано също така е биотин и да се детектира чрез индиректно измерване на свързването е авидин или стрептавидин.
II. Експресия на антитела
Антитяло или част от антитяло от изобретението може да се получи чрез рекомбинантна експресия на леката и тежка верига от имуноглобулиновите гени в клетка гостоприемник. За да се експресира рекомбинантно антитяло, клетката гостоприемник се трансфектира е един или повече рекомбинантно експресионни вектори, носещи ДНК фрагменти, кодиращи имуноглобулиновата лека и тежка верига на антитялото, така че леката и тежката верига се експресират в клетката гостоприемник и се секретират предимно в средата, в която са култивирани клетките гостоприемници, от която среда могат да се получат антителата. Използват се стандартни рекомбинантни ДНК методологии за получаване на гени за леката и тежка верига на антитялото, включване на тези гени в рекомбинантни експресионни
Описания на издадени патенти за изобретения № 09.1/16.09.2019 вектори и въвеждане на векторите в клетки гостоприемници, като тези описани от Sambrook, Fritsch and Maniais (eds), Molecular Cloning; A Laboratory Manual, Second Edition, Cold Spring Harbor, N. Y, (1989), Ausubel, Е M. et al. (eds.) Current Protocols in Molecular Biology, Greene Publishing Associates, (1989) и в U. S. Патент No. 4,816,397 от Boss et al.
За да се експресира D2E7 или сходното с D2E7 антитяло, най-напред се получават ДНК фрагменти, кодиращи вариабилните области на леката и тежка верига. Тези ДНКи могат да се получат чрез амплифициране и модифициране на вариабилните секвенции от герминативната линия на леката и тежка верига, като се използва полимеразната верижна реакция (PCR). Герминативните ДНК секвенции за вариабилните области на гените за леката и тежка верига са известни от областта на техниката (виж например, the „Vbase“ human germline sequence database; виж също така Kabat, E. A., et al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U. S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242; Tomlinson, I. M., et al. (1992) „The Repertoire of Human Germline VH Sequences Reveals about Fifty Groups of VH Segments with Different Hypervariable Loops“ J. Mol. Biol. 227: 776-798; и Cox, J. P. L. et al. (1994) „А Directory of Human Germ-line V7g Segments Reveals a Strong Bias in their Usage „ Eur. J. Immunol. 24: 827-836; като съдържанието на всяка една от които е включено специално в цитираната литература). За да се получи ДНК фрагмент, кодиращ вариабилната област на тежка верига на D2E7, или на сходното с D2E7 антитяло, чрез стандартен PCR се амплифицира представител на VH3 семейството на човешки герминативни VH гени. Най-добре е да се амплифицира DP-31 VH герминативната секвенция. За да се получи ДНК фрагмент, кодиращ вариабилната област на леката верига на D2E7, или на сходното с D2E7 антитяло, чрез стандартен PCR се амплифицира представител на VKI семейството на човешки герминативни VL гени. Най-добре е да се амплифицира А20 VL герминативната секвенция. PCR праймерите, подходящи за използване при амплификация на DP-31 герминативната секвенция VH и А20 герминативната VL секвенция, могат да се конструират въз основа на нуклеотидните секвенции, описани в цитираната литература по-горе, като се използват стандартните методи.
След като вече са получени герминативните VH и VL фрагменти, тези секвенции могат да се променят чрез мутация, за да кодират D2E7 или сходните с D2E7 аминокиселинни секвенции, описани тук. Аминокиселинните секвенции кодирани от герминативните VH и VL ДНК секвенции, най-напред се сравняват с D2E7 или сходните с D2E7 VH и VL аминокиселинни секвенции, за да се идентифицират аминокиселинните остатъци в D2E7 или сходната с D2E7 секвенция, които се различават от герминативната линия. След това, се променят чрез мутация подходящите нуклеотиди от герминативните ДНК секвенции така, че мутиралата герминативна секвенция, кодира D2E7 или сходната с D2E7 аминокиселинна секвенция, като се използва генетичният код, за да се определи какви нуклеотидни промени трябва да се направят. Мутагенезисът на герминативните секвенции се провежда чрез стандартни методи, такива като PCR-медииран мутагенезис (при който мутантните нуклеотиди се включват в PCR праймерите така, че PCR продуктът съдържа мутациите) или чрез място-насочен мутагенезис.
След като вече се получат ДНК фрагментите кодиращи D2E7 или сходните с D2E7 VH и VL сегменти (чрез амплификация и мутагенезис на герминативните VH и VL гени, както е описано по-горе), тези ДНК фрагменти могат след това да се манипулират чрез стандартните рекомбинантни ДНК техники, например за да се превърнат вариабилните области на гените до гени с цялата дължина на антитяло веригата, до гени за Fab фрагменти или до scFv ген. При тези манипулации, VL- или VH-кодиращият ДНК фрагмент се свързва по оперативен път с друг ДНК фрагмент, кодиращ друг белтък, такъв като константна област от антитяло или гъвкав линкер. Използваният тук термин „свързан по оперативен път“, използван в този контекст, означава че два ДНК фрагмента са свързани така, че аминокиселинните секвенции кодирани от двата ДНК фрагмента, остават в рамка.
Изолираната ДНК, кодираща VH областта може да се превърне в ген с пълната дължина на тежката верига, чрез свързване по оперативен път на VH-кодиращата ДНК с друга ДНК молекула, кодираща константните области (CHI, СН2 и СНЗ) на тежката верига. Секвенциите на гените за константната област на човешката тежка верига са известни от областта на техниката (виж например, Kabat, Е. А., et al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U. S. Department of Health
Описания на издадени патенти за изобретения № 09.1/16.09.2019 and Human Services, NIH Публикация No. 91-3242), а ДНК фрагменти, включващи тези области могат да се получат чрез стандартна PCR амплификация. Константната област на тежката верига може да бъде IgGl, IgG2, IgG3, IgG4, IgA, IgE, IgM или IgD константна област, но най-добре е да е IgGl или IgG4 константна област. За гена на тежката верига от Fab фрагмента, VH-кодиращата ДНК, може да бъде свързана по оперативен път с друга ДНК молекула, кодираща само константната СН1 област от тежката верига.
Изолираната ДНК, кодираща VL областта може да се превърне в ген с цялата дължина на леката верига (така както и в ген с леката верига на Fab), чрез свързване по оперативен път на VL-кодиращата ДНК с друга ДНК молекула, кодираща константната област на леката верига, CL. Секвенциите на гените за константната област на човешката лека верига, са известни от областта на техниката (виж например, Kabat, Е. A., et al. (1991) Sequences of Proteins of Immunological Interest, Fifth Edition, U. S. Department of Health and Human Services, NIH Публикация No. 91-3242), а ДНК фрагментите включващи тези области могат да се получат чрез стандартна PCR амплификация. Константната област на леката верига може да е капа или ламбда константна област, но най-добре е да е капа константна област.
За да се създаде scFv ген, VH и VL ДНК кодиращите фрагменти се свързват по оперативен път с друг фрагмент, кодиращ гъвкав линкер, например кодиращ аминокиселинната секвенция (Gly4-Ser)3, така че VH и VL секвенциите могат да се експресират като съседен едноверижен белтък, с VL и VH области, свързани чрез гъвкав линкер (виж например, Bird et al. (1988) Science 242: 423-426; Huston et al. (1988) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 85: 5879-5883; McCafferty et al., Nature (1990) 348: 552-554).
За да се експресират антитела или части от антитела от изобретението, ДНКи кодиращи част или цялата дължина на леките и тежки вериги, получени както е описано по-горе, се включват в експресионни вектори така, че гените са свързани по оперативен път с транскрипционни и транслационни контролни секвенции. В този контекст, терминът „свързан по оперативен път“ означава, че генът за антитялото е лигиран във вектор, така че транскрипционните и транслационни контролни секвенции във вектора, изпълняват своята функция да регулират транскрипцията и транслацията на гена за антитялото. Експресионният вектор и експресионните контролни секвенции се избират така, че да са съвместими с използваната за експресия клетка гостоприемник. Генът за леката верига на антитялото и генът за тежката верига на антитялото, могат да се включат в отделен вектор, или най- често и двата гена се включват в един и същи експресионен вектор. Гените за антителата се включват в експресионния вектор чрез стандартните методи (например, лигиране на комплиментарни рестрикционни места в генния фрагмент за антитялото и вектора, или чрез лигиране на тъп край, ако не присъстват рестриктазни места). Преди въвеждане на D2E7 или на сходните с D2E7 секвенции от леката или тежка верига, експресионният вектор вече може да съдържа секвенции за константната област на антитялото. Например, един подход за превръщане на D2E7 или на сходните с D2E7 VH и VL секвенции в гени с пълната дължина на антитялото, е те да се включат в експресионните вектори, вече кодиращи съответно константните области на леката и тежка верига, така че VH сегментът е свързан по оперативен път със СН сегмента(ите) във вектора, a VL сегментът е свързан по оперативен път с CL сегмента във вектора. В допълнение или съответно, рекомбинантният експресионен вектор може да кодира сигнален пептид, който улеснява секрецията на антитяло веригата от клетката гостоприемник. Генът за антитяло веригата може да се клонира във вектор така, че сигналният пептид да е свързан в рамка с аминокрая в гена за антитяло веригата. Сигналният пептид може да е имуноглобулинов сегнален пептид или хетероложен сигнален пептид (т. е., сигнален пептид от не-имуноглобулинов белтък).
В допълнение към гените за веригата на антитялото, рекомбинантният експресионен вектор от изобретението носи регулаторни секвенции, които контролират експресията на гените за веригата на антитялото в клетката гостоприемник. Използваният тук термин „регулаторна секвенция“ има за цел да включва промотори, енхансери и други експресионни контролни елементи (например, полиаденилирани сигнали), които контролират транскрипцията или транслацията на гените за веригата на антитялото. Такива регулаторни секвенции са описани например от Goeddel; Gene Expression Technology: Methods in Enzymology 185, Academic Press, San Diego, CA (1990). За специалистите в областта ще е ясно, че конструирането на експресионен вектор, включващ селекция на регулаторни секвенции
100
Описания на издадени патенти за изобретения № 09.1/16.09.2019 може да зависи от такива фактори, като избора на клетка гостоприемник, която ще се трансформира, нивото на експресия на желания белтък и т.н. Предпочитани регулаторни секвенции за експресия в клетки от бозайник като гостоприемник включва вирусни елементи, които управляват високи нива на белтъчна експресия в клетките от бозайник, такива като промотори и/или енхансери, получени от цитомегаловирус (CMV) (такива като CMV промотор/енхансер), Simian Virus 40 (SV40) (такива като SV40 промотор/енхансер), аденовирус, (например, аденовирусният главен късен промотор (AdMLP)) и полиома. За допълнително описание на вирусните регулаторни елементи и техните секвенции, виж например U. S. Патент No. 5,168,062 от Stinski, U. S. Патент No. 4,510,245 от Bell et al. hU. S. Патент No. 4,968,615 от Schaffner et al.
В допълнение към гените за веригата на антитялото и регулаторните секвенции, рекомбинантните експресионни вектори от изобретението могат да носят допълнителни секвенции, такива като секвенции, които регулират репликацията на вектора в клетките гостоприемници (например, начала на репликация) и избрани маркерни гени. Подбраните маркерни гени улесняват селекцията на клетките гостоприемници, в които е въведен вектора (виж например, U. S. Патенти №№. 4,399,216, 4,634,665 и 5,179,017, всички от Axel et al.). Например, обикновено селектираният маркерен ген придава резистентност към лекарствените препарати, такива като G418, хигромицин или метотрексат, на клетката гостоприемник, в която е въведен вектора. Предпочитани селективни маркерни гени включват гена за дихидрофолат редуктазата (DHFR) (за използване в dhfr-клетки гостоприемници с метотрексат селекция/амплификация) и нео гена (за G418 селекция).
За експресия на леката и тежка верига, експреснонният вектор(и), кодиращи тежката и лека вериги, се трансфектира в клетка гостоприемник чрез стандартните техники. Различните форми на термина „трансфекция“ имат за цел да включват разнообразни техники, които се използват обикновено за въвеждане на екзогенна ДНК в прокариотната или еукариотната клетка гостоприемник, например, електропорация, калциево-фосфатна преципитация, DEAE-декстран трансфекция и други подобни. Въпреки че теоретично е възможно антителата от изобретението да се експресират или в прокариотни или еукариотни клетки гостоприемници, най-предпочитана е експресията на антителата в еукариотни клетки, а най-добре в клетки гостоприемници от бозайник, защото такива еукариотни клетки и по-специално клетките от бозайник са по-надеждни от прокариотните клетки за сглобяването и секрецията на правилно нагънатото и имунологично активно антитяло. Показано е, че прокариотната експресия за гените на антитялото не е ефективно за получаване на високи добиви от активно антитяло (Boss, М. A. and Wood, С. R. (1985) Immunology Today 6: 12-13).
Предпочитани клетки гостоприемници от бозайник за експресия на рекомбинантните антитела от изобретението включват клетки от яйчник на Китайски хамстер (СНО клетки) (включващи dhfrСНО клетки, описани OTUrlaub и Chasin, (1980) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 77: 4216-4220, използвани c DHFR селективен маркер, например както е описано от R. J. Kaufman и Р. A. Sharp (1982), Mol. Biol. 159: 601-621), NSO миеломни клетки, COS клетки и SP2 клетки. Когато рекомбинантни експресионни вектори, кодиращи гените за антитялото се въведат в клетки гостоприемници от бозайник, антителата се получават чрез култивиране на клетките гостоприемници за период от време, достатъчни за да се осъществи експресията на антитялото в клетките гостоприемници, или още по-добре секрецията на антитялото в културалната среда, в която растат клетките гостоприемници. Антителата могат да се получат в културалната среда, като се използват стандартните методи за пречистване на белтък.
Клетките гостоприемници могат да се използват също така и за получаване на части от интактни антитела, такива като Fab фрагменти или scFv молекули. Ясно е, че различните по-горе процедури са в обхвата на настоящото изобретение. Например, може да е необходимо да се трансфектира клетка гостоприемник с ДНК, кодираща или леката верига или тежката верига (но не и двете) на антитялото от изобретението. Могат да се използват също така и рекомбинантни ДНК технологии, за да се отстрани част или цялата ДНК, кодираща едната или и двете леката и тежката верига, която не е необходима за свързване с hTNFa. Молекулите експресирани от такива скъсени ДНК молекули са включени също така за антителата от изобретението. В допълнение, могат да се получат бифункционални антитела, в които една тежка и една лека верига са на антитяло от изобретението, а другата тежка и лека верига са
101 Описания на издадени патенти за изобретения № 09.1/16.09.2019 специфични за антиген, различен от hTNFa, чрез кръстосано свързване на антитяло от изобретението е второ антитяло, чрез стандартните химични методи за кръстосано свързване.
В предпочитана система за рекомбинантна експресия на антитяло или на негова антиген-свързваща част от изобретението, се въвежда рекомбинантен експресионен вектор, в dhfr-CHO клетки, чрез калциево-фосфатна медиирана трансфекция, кодиращ както тежката верига на антитялото, така и леката верига на антитялото. В рекомбинантния експресионен вектор, всеки един от гените за тежката и леката верига на антитялото е свързан по оперативен път е CMV енхансерни/AdMLP промоторни регулаторни елементи, за да се активират високи нива на транскрипция на тези гени. Рекомбинантният експресионен вектор носи също така DHFR ген, който позволява селекция на СНО клетки, които са трансфектирани е вектора, като се използва метотрексат селекция/амплификация. Селективно трансформираните клетки гостоприемници се култивират, за да се осъществи експресията на тежката и леката верига на антитялото и интактното антитяло се получава в културалната среда. Използват се стандартни молекулярно биологични техники, за да се приготви рекомбинантен експресионен вектор, за да се трансфектират клетките гостоприемници, за да се селектират трансформантите, за да се култивират клетките гостоприемници и за да се получи антитялото от културалната среда.
III. Избор на рекомбинантни човешки антитела
Рекомбинантните човешки антитела от изобретението в допълнение към D2E7 или неговата антиген-свързваща част, или сходни е D2E7 антитела, описани тук, могат да се изолират чрез скриниране на библиотека от рекомбинантни комбинаторни антитела, предимно на scFv phage display библиотека, получена чрез използване на човешки VL и VH кДНКи, получени от иРНК от човешки лимфоцити. Методологиите за получаване и скриниране на такива библиотеки са известни от областта на техниката. В допълнение към наличните в търговската мрежа китове за създаване на phage display библиотеки (например, Pharmacia Recombinant Phage Antibody System, Каталожен No. 27-9400-01; и Stratagene SurfZAP™ phage display kit, Каталожен No. 240612), примери за методи и реагенти, особено податливи за използване при създаването и скринирането на антитяло display библиотеки, могат да се намерят например в Ladner et al. U. S. Патент No. 5,223,409; Kang et al., PCT Публикация No. WO 1992/018619; Dower et al., PCT Публикация No. WO 1991/017271; Winter et al., PCT Публикация No. WO 1992/020791; Markland et al., PCT Публикация No. WO 1992/015679; Breitling et al., PCT Публикация No. WO 1993/001288; McCafferty et al., PCT Публикация No. WO 1992/001047; Garrard et al., PCT Публикация No. WO 1992/009690; Fuchs et al., (1991) Bio/Technology 9: 1370-1372; Hay et al., (1992) Hum Antibod Hybridomas 3: 81-85; Huse et al., (1989) Science 246: 1275-1281; McCafferty et al., Nature (1990) 348: 552-554; Griffiths et al., (1993) EMBO J 12: 725-734; Hawkins et al., (1992) J Mol Biol 226: 889-896; Clackson et al., (1991) Nature 352: 624-628; Gram et al., (1992) PNAS 89: 3576-3580; Garrard et al., (1991) Bio/Technology 9: 1373-1377; Hoogenboom et al., (1991) Nuc Acid Res 19: 4133-4137; и Barbas et al., (1991) PNAS 88: 7978-7982.
В предпочитан вариант, за да се изолират човешки антитела е висок афинитет и ниска скоростна константа на дисоциация за hTNFa, най-напред се използва мишо ати-hTNFa антитяло, притежаващо висок афинитет и ниска скоростна константа на дисоциация за hTNFa (например, МАК 195, хибридома, която има депозитен номер ЕСАСС 87 050801), за да се изолират секвенции от човешка тежка и лека верига, притежаващи сходна свързваща активност по отношение на hTNFa, като се използват епитоп импринтинг методите, описани от Hoogenboom et al., РСТ Публикация No. WO 1993/006213. Използваните в този метод библиотеки от антитела са предимно scFv библиотеки, приготвени и скринирани както е описано от McCafferty et al., РСТ Публикация No. WO 1992/001047, McCafferty et al., Nature (1990) 348: 552-554; и Griffiths et al., (1993) EMBO J 12: 725-734. За предпочитане е тези scFv антитяло библиотеки да се скринират чрез използване на рекомбинантен човешки TNFa като антиген.
След като най-напред се изберат човешките VL и VH сегменти, провеждат се „комбинирани и съответстващи“ експерименти, при които различни части от първоначално избраните VL и VH сегменти се скринират за свързване е hTNFa, за да се изберат предпочитаните VL/VH двойки комбинации. В допълнение, за да се подобрят по нататък афинитетът и/или ниската скоростна константа на дисоциация
102
Описания на издадени патенти за изобретения № 09.1/16.09.2019 за свързване с hTNFa, VL и VH сегментите от предпочитаната VL/VH двойка(и), могат произволно да се променят чрез мутация, за предпочитане в CDR3 областта на VH и/или VL, чрез метод, аналогичен на метода за соматична in vivo мутация, отговорен за афинитетното съзряване на антителата по време на естествения имунен отговор. Това in vitro афинитетно съзряване може да се осъществи чрез амплифициране на VH и VL областите, като се използват PCR праймери, комплиментарни съответно на VH CDR3 или на VL CDR3, които праймери са „с лепливи краища“ със случайна смес от четири нуклеотидни бази в някои позиции така, че получените PCR продукти да кодират VH и VL сегментите, в които са въведени произволни мутации във VH и/или VL CDR3 областите. Тези произволни мутации в VH и VL сегментите, могат да се скринират отново за свързване с hTNFa и могат да се изберат секвенции, които показват висок афинитет и ниска скоростна константа на дисоциация за свързване с hTNFa.
След скринирането и изолирането на анти-hTNFa антитяло от изобретението от рекомбинантната имуноглобулинова display библиотека, може да се получи нуклеинова киселина, кодираща избраното антитяло от display пакета (например, от фаговия геном) и да се субклонира в други експресионни вектори чрез стандартните рекомбинантни ДНК техники. Ако е необходима, по-нататък нуклеиновата киселина може да се използва, за да се създадат други антитяло форми от изобретението (например, свързани с нуклеиновата киселина, кодираща допълнителни имуноглобулинови домени, такива като допълнителни константни области). За да се експресира рекомбинантно човешко антитяло изолирано чрез скриниране на комбинаторна библиотека, ДНК кодираща антитялото се клонира в рекомбинантен експресионен вектор и се въвежда в клетки гостоприемници от бозайник, както е описано подробно в детайли в Глава II по-горе.
IV. Фармацевтични състави и фармацевтично приложение
Антителата и части от антителата от изобретението, могат да се включат във фармацевтични състави, подходящи за прилагане на лице, съгласно методите описани тук, например за подкожно дозиране, през седмица. Типично е фармацевтичният състав да включва антитяло (или част от антитяло) от изобретението и/или метотрексат и фармацевтично приемлив носител. Използваният тук термин, „фармацевтично приемлив носител“ включва всеки един и всички разтворители, дисперсионна среда, покрития, антибактериални и противогъбични средства, изотонични и абсорбционно задържащи средства и други подобни, които са физиологично съвместими и са подходящи за прилагане на лице, съгласно методите описани тук. Примери за фармацевтично приемливи носители включват едно или повече от, вода, сол, фосфатно солеви буфер, декстроза, глицерол, етанол и други подобни, така както и комбинации от тях. В много случаи за предпочитане е в състава да се включат изотонични средства, например, захари, полиалкохоли такива като манитол, сорбитол или натриев хлорид. Фармацевтично приемливите носители могат по-нататък да включват минорни количества от допълнителни субстанции, такива като овлажняващи или емулгиращи средства, консерванти или буфери, които увеличават живота или ефективността на антитялото или на частта от антитялото.
Съставите от това изобретение могат да имат разнообразни форми. Те включват например, течни, полутечни и твърди дозирани форми, такива като течни разтвори (например, инжекционни и инфузионни разтвори), дисперсии или суспензии, таблетки, пилюли, прахове, липозоми и супозитории. Предпочитаната форма зависи от начина по който е планирана да се приложи и терапевтичното приложение. Предпочитаните типични състави са под формата на инжекционни или инфузионни разтвори, такива като състави сходни с тези, използвани за пасивна имунизация на хора с други антитела. Предпочитаният начин на приложение е парентерално (например, интравенозно, подкожно, интраперитонеално, интрамускулно). В предпочитан вариант, антитялото се прилага чрез интравенозна инфузия или инжекция. В друг предпочитан вариант, антитялото се прилага чрез интрамускулна инжекция. В особено предпочитан вариант, антитялото се прилага чрез подкожна инжекция (например, подкожна инжекция през седмица).
Терапевтичните състави нормално трябва да са стерилни и стабилни при условията на производство и съхранение. Съставите могат да бъдат формулирани като разтвор, микроемулсия, дисперсия, липозоми или като други общоприети структури, подходящи за висока концентрация на лекарствения
103
Описания на издадени патенти за изобретения № 09.1/16.09.2019 препарат. Стерилните инжекционни разтвори могат да се приготвят чрез включване на активно съединение (например, антитяло или част от антитяло) в необходимото количество, b подходящ разтворител, с една или комбинация от съставки изброени по-горе, както е необходимо, след филтърна стерилизация. Обикновено дисперсиите се приготвят чрез включване на активното съединение в стерилен носител, който съдържа основна дисперсионна среда и необходимите други съставки от тези, изброени по-горе. В случай на стерилни прахове за получаване на стерилни инжекционни разтвори, предпочитаните методи за приготвяне са изсушаване под вакуум и изсушаване чрез замразяване, които водят до получаване на прах от активната съставна част плюс каквато и да е допълнителна желана съставка от предварително стерилизирания чрез филтруване техен разтвор. Типичният флуидитет на разтвора може да се поддържа например чрез използване на покритие, такова като лектин, чрез поддържане на нужния размер на частиците в случай на дисперсия и чрез използване на сърфактанти. Продължителна абсорбция на инжекционните състави може да се постигне чрез включване в състава на средство, което задържа абсорбцията, например моностеаратни соли и желатин.
Антителата и частите от антителата от изобретението, могат да се прилагат чрез различни методи, известни от областта на техниката, въпреки че за много терапевтични приложения предпочитаният път/начин на прилагане е чрез подкожна инжекция. За специалистите в областта ще е ясно, че пътят/ начинът на прилагане ще варира в зависимост от желаните резултати.
В някои варианти, активното съединение може да се приготви с носител, който ще протектира съединението срещу бързо освобождаване, такъв като формулировка с контролирано освобождаване, включваща импланти, трансдермални пластири и микрокапсулирани системи за доставяне. Могат да се използват биодеградиращи, биосъвместими полимери, такива като етилен винил ацетат, полиетилен гликол (PEG), полианхидриди, полигликолова киселина, колаген, полиортоестери и полимлечна киселина. Много от тези методи за приготвяне на такива формулировки са патентовани или са известни обикновено на специалистите в областта. Виж например, Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems, J. R. Robinson, ed., Marcel Dekker, Inc., New York, 1978.
В някои варианти антитялото или част от антитялото от изобретението, може да се прилага орално, например с инертен разредител или с асимилиращ се хранителен носител. Съединението (и ако е желателно и други съставки) може да бъде обвито в твърда или мека желатинова капсула, компресирано в таблетки, или включено директно в диетата на лицето. За орално терапевтично приложение, съединенията могат да бъдат включени с ексципиенти и да се използват под формата на таблетки за поглъщане, букални таблетки, хапчета капсули, тинктури, суспензии, сиропи, лепенки и други подобни. За да се приложи съединение от изобретението чрез друг начин, различен от парентералния, може да е необходимо да се покрие съединението със или съединението да се приложи едновременно с материал, който предпазва неговото инактивиране.
В съставите могат да се включат също така и допълнителни активни съединения. В някои варианти, антитялото или част от антитялото от изобретението е формулирано едновременно със и/или се прилага едновременно с едно или повече допълнителни терапевтични средства. Например, анти-hTNFa антитялото или част от антитялото от изобретението, може да се формулира едновременно със и/или приложи едновременно с метотрексат, с едно или повече допълнителни антитела, които се свързват с други мишени (например, антитела, които се свързват с други цитокини или които се свързват с клетъчно повърхностни молекули), с един или повече цитокини, с разтворим TNFa рецептор (виж например, РСТ Публикация No. WO 1994/006476) и/или с едно или повече химични средства, които потискат продукцията или активността на hTNFa (такива като циклохексанилиден деривативи, както е описано в РСТ Публикация No. WO 1993/019751). Освен това, могат да се използват едно или повече антитела от изобретението в комбинация с две или повече от предшестващите терапевтични средства. Такива комбинирани терапии могат да използват с предимство по- ниски дози от приложените терапевтични средства, като по този начин се избягват възможните токсичности или усложнения, свързани с различните монотерапии. Използването на антителата или на части от антителата от изобретението в комбинация с други терапевтични средства, се дискутира по-нататък в подглава IV.
Нелимитиращи примери на терапевтични средства, за ревматоидни артрити, с които едно анти
104
Описания на издадени патенти за изобретения № 09.1/16.09.2019 тяло или част от антитяло от изобретението може да се комбинира, включват следните: нестероиден противовъзпалителен лекарствен препарат(и) (NSAIDs); цитокин супресивен противовъзпалителен лекарствен препарат(и) (CSAIDs); CDP-571/BAY-10-3356 (наподобяващо човешкото анти-TNFa антитяло; Celltech/Bayer); сА2 (химерно анти-TNFa антитяло; Centocor); 75 kd TNFR-IgG (75 kD TNF рецепторен-IgG рекомбинантен белтък; Immunex; виж например, Arthritis & Rheumatism (1994) Vol. 37, S295; J. Invest. Med. (1996) Vol. 44,235A); 55 kd TNFR-IgG (55 kD TNF рецепторен-IgG рекомбинантен белтък; Hoffmann-LaRoche); IDEC-CE9. 1/SB 210396 (активно пригодено за примати анти-СО4 антитяло; IDEC/Smith Kline; виж например, Arthritis & Rheumatism (1995) Vol. 38, S 185); DAB 486-IL-2 и/или DAB 389-IL-2 (IL-2 рекомбинантни белтъци; Seragen; виж например, Arthritis & Rheumatism (1993) Vol. 36, 1223); Anti-Tac (наподобяващо 4OBeniKOTO-IL-2Ra; Protein Design Labs/Roche); IL-4 (противовъзпалителен цитокин; DNAX/Schering); IL-10 (SCH 52000; рекомбинантен IL-10, противовъзпалителен цитокин; DNAX/Schering); IL-4; IL-10 и/или IL-4 агонисти (например антитела агонисти); IL-IRA (IL-1 рецепторен антагонист; Synergen/Amgen); TNF-bp/s-TNFR (разтворим TNF свързващ белтък; виж например, Arthritis & Rheumatism (1996) Vol. 39, No. 9 (приложена), S284; Amer. J. Physiol. - Heart and Circulatory Physiology (1995) Vol. 268, pp. 37-42); R973401 (фосфодиестеразен Тип IV инхибитор; виж например, Arthritis & Rheumatism (1996) Vol. 39, No. 9 (приложена), S282); MK-966 (COX-2 инхибитор; виж например, Arthritis & Rheumatism (1996) Vol. 39, No. 9 (приложена), S81); Илопрост (виж например, Arthritis & Rheumatism (1996) Vol. 39, No. 9 (приложена), S82); метотрексат; талидомид (виж например, Arthritis & Rheumatism (1996) Vol. 39, No. 9 (приложена), S282) и сходни с талидомид лекарствени препарати (например, Celgen); лефлуномид (противовъзпалителен и цитокин инхибитор; виж например, Arthritis & Rheumatism (1996) Vol. 39, No. 9 (приложена), S131; Inflammation Research (1996) Vol. 45, pp. 103-107); транексамова киселина (инхибитор на активирането на плазминогена; виж например, Arthritis & Rheumatism (1996) Vol. 39, No. 9 (приложена), S284); T-614 (цитокин инхибитор; виж например, Arthritis & Rheumatism (1996) Vol. 39, No. 9 (приложена), S282); простагландин El (виж например, Arthritis & Rheumatism (1996) Vol. 39, No. 9 (приложена), S282); Тенидап (нестероиден противовъзпалителен лекарствен препарат; виж например, Arthritis & Rheumatism (1996) Vol. 39, No. 9 (приложена), S280); Напроксен (нестероиден противовъзпалителен лекарствен препарат; виж например, Neuro Report (1996) Vol. 7, pp. 1209-1213); Мелоксикам (нестероиден противовъзпалителен лекарствен препарат); Ибупрофен (нестероиден противовъзпалителен лекарствен препарат); Пироксикам (нестероиден противовъзпалителен лекарствен препарат); Диклофенак (нестероиден противовъзпалителен лекарствен препарат); Индометацин (нестероиден противовъзпалителен лекарствен препарат); Сулфасалазин (виж например, Arthritis & Rheumatism (1996) Vol. 39, No. 9 (приложена), S281); Азатиоприн (виж например, Arthritis & Rheumatism (1996) Vol. 39, No. 9 (приложена), S281); ICE инхибитор (инхибитор на ензима интерлевкин-ΐβ превръщащ ензим); zap-70 и/или Ick инхибитор (инхибитор на тирозин киназата zap-70 или lek); VEGF инхибитор и/или VEGF-R инхибитор (инхибитори на растежния фактор за васкуларните ендотелни клетки или на рецептора за растежния фактор на васкуларните ендотелни клетки; инхибитори на ангиогенезата); кортикостероидни противовъзпалителни лекарствени препарати (например, SB203580); TNF-конвертазни инхибитори; анти-1Е-12 антитела; интерлевкин-11 (виж например, Arthritis & Rheumatism (1996) Vol. 39, No. 9 (приложена), S296); интерлевкин-13 (виж например, Arthritis & Rheumatism (1996) Vol. 39, No. 9 (приложена), S308); интерлевкин-17 инхибитори (виж например, Arthritis & Rheumatism (1996) Vol. 39, No. 9 (приложена), S120); злато; пенициламин; хлорохин; хидроксихлорохин; хлорамбуцил; циклофосфамид; циклоспорин; обща лимфоидна ирадиация; анти-тимоцитен глобулин; анти-СО4 антитела; CD5-токсини; орално прилагани пептиди и колаген; динатриев лобензарит; Цитокинрегулиращи средства (CRAs) НР228 и НР466 (Houghten Pharmaceuticals, Inc.); ICAM-1 антисенс фосфоротиоат олигодезоксинуклеотиди (ISIS 2302; Isis Pharmaceuticals, Inc.); разтворим комплемент рецептор 1 (TP 10; Т Cell Sciences, Inc.); преднизон; орготеин; глюкозаминогликан полисулфат; миноциклин; aHTH-IL2R антитела; морски и ботанически липиди (мастни киселини от растителни семена и рибен хайвер; виж например DeLucaet al., (1995) Rheum. Dis. Clin. North Am. 21: 759-777); ауранофин; фенилбутазон; меклофенамова киселина; флуфенамова киселина; интравенозен имуноглобулин; цилеутон; микофенолова киселина (RS-61443); такролимус (FK-506); зиролимус (ра105
Описания на издадени патенти за изобретения № 09.1/16.09.2019 памицин); амиприлоз (терафектин); кладрибин (2-хлородезоксиаденозин); и азарибин.
Нелимитиращи примери на терапевтични средства за възпалителни чревни заболявания, е които може да се комбинира антитяло или част от антитяло от изобретението, включват следните: буденозид; епидермален растежен фактор; кортикостероиди; циклоспорин, сулфасалазин; аминосалицилати; 6-меркаптопурин; азатиоприн; метронидазол; липоксигеназни инхибитори; мезаламин; олсалазин; балсалазид; антиоксиданти; инхибитори на тромбоксана; IL-1 рецепторни антагонисти; aHTH-IL-Ιβ моноклонални антитела; анти-I L-6 моноклонални антитела; растежни фактори; еластазни инхибитори; пиридинил-имидазолни съединения; CDP-571/BAY-10-3356 (наподобяващо човешкото анти-TNFa антитяло; Celltech/Bayer); сА2 (химерно анти-TNFa антитяло; Centocor); 75 kd TNFR-IgG (75 kD TNF рецепторен-IgG рекомбинантен белтък; Immunex; виж например, Arthritis & Rheumatism (1994) Vol. 37, S295; J. Invest. Med. (1996) Vol. 44, 235A); 55 kd TNFR-IgG (55 kD TNF рецепторен-IgG рекомбинантен белтък; Hoffmann-LaRoche); интерлевкин-10 (SCH 52000; Schering Plough); IL-4; IL-10 и/или IL-4 агонисти (например, антитела агонисти); интерлевкин-11; глюкуронид- или декстран-конюгирани пролекарствени препарати на преднизолон, дексаметазон или будезонид; ICAM-1 антисенс фосфоротиоат олигодезоксинуклеотиди (ISIS 2302; Isis Pharmaceuticals, Inc.); разтворим комплементрецептор 1 (ΤΡΙΟ; Т Cell Sciences, Inc.); бавно освобождаващ се мезалазин; метотрексат; антагонисти на Тромбоцитния активиращ фактор (PAF); ципрофлоксацин; илигнокаин.
Нелимитиращи примери на терапевтични средства за мултитиплена склероза, е които може да се комбинира антитяло или част от антитяло от изобретението, включват следните: кортикостероиди; преднизолон; метилпреднизолон; азатиоприн; циклофосфамид; циклоспорин; метотрексат; 4-аминопиридин; тизанидин; интерферон-β la (Avonex™; Biogen); интерферон-β lb (Betaseron™; Chiron/Berlex); Кополимер 1 (Cop-1; Copaxone™; Teva Pharmaceutical Industries, Inc.); кислород под свръхналягане; интравенозен имуногло булил; клабрибин; CDP-571/BAY-10-3356 (наподобяващо човешкото анти-TNFa антитяло; Celltech/Bayer); сА2 (химерно анти-TNFa антитяло; Centocor); 75 kd TNFR-IgG (75 kD TNF рецепторен-IgG рекомбинантен белтък; Immunex; виж например, Arthritis & Rheumatism (1994) Vol. 37, S295; J. Invest. Med. (1996) Vol. 44,235A); 55 kd TNFR-IgG (55 kD TNF рецепторен-IgG рекомбинантен белтък; Hoffmann-LaRoche); IL-10; IL-4; и IL-10 и/или IL-4 агонисти (например, антитела агонисти).
Нелимитиращи примери на терапевтични средства за сепсис, е които може да се комбинира антитяло или част от антитяло от изобретението, включват следните: хипертонични солеви разтвори; антибиотици; интравенозен гамаглобулин; непрекъсната хемофилтрация; карбапенеми (например, меропенем); антагонисти на цитокините, такива като TNFa, IL-Ιβ, IL-6 и/или IL-8; CDP-571/BAY-10-3356 (наподобяващо човешкото анти-TNFa антитяло; Celltech/Bayer); сА2 (химерно анти-TNFa антитяло; Centocor); 75 kd TNFR-IgG (75 kD TNF рецепторен-IgG рекомбинантен белтък; Immunex; виж например, Arthritis & Rheumatism (1994) Vol. 37, S295; J. Invest. Med. (1996) Vol. 44, 235A); 55 kd TNFR-IgG (55 kD TNF рецепторен-IgG рекомбинантен белтък; Hoffmann-LaRoche); Цитокин регулиращи средства (CRAs) НР228 и НР466 (Houghten Pharmaceuticals, Inc.); SK & F 107647 (ниско молекулен пептид; SmithKline Beecham); тетравалентен гуанилхидразон CNI-1493 (Picower Institute); Инхибитор на обменния път на тъканния фактор (TFPI; Chiron); PHP (химически модифициран хемоглобин; APEX Bioscience); железни хелатори и хелати, включващи диетилентриамин пентаоцетна оцетна киселина-желязо (III) комплекс (DTPA желязо (III); Molichem Medicines); лизофулин (синтетична малка молекула метилксантин; Cell Therapeutics, Inc.); PGG-Глюкан (воден разтворим βΐ, 3-глюкан; Alpha-Beta Technology); аполипо-протеин А-1 реконструиран е липиди; хирални хидроксалови киселини (синтетични антибактериални, които инхибират биосинтезата на липид А); анти-ендотоксинови антитела; Е5531 (синтетичен липид А антагонист; Eisai America, Inc.); rBPI21 (рекомбинантен N-краен фрагмент от човешки белтък, увеличаващ бактерицидността/пермеабилитета); и Синтетични анти-ендотоксин пептиди (SAEP; BiosYnth Research Laboratories).
Нелимитиращи примери на терапевтични средства за респираторен дистрес синдром (ARDS) при възрастни хора, е които може да се комбинира антитяло или част от антитяло от изобретението, включват следните: анти-1Е-8 антитела; сърфактант заместваща терапия; CDP-571/BAY-10-3356 (наподобяващо човешкото анти-TNFa антитяло; Celltech/Bayer); сА2 (химерно анти-TNFa антитяло; Centocor); 75 kd
106
Описания на издадени патенти за изобретения № 09.1/16.09.2019
TNFR-IgG (75 kD TNF рецепторен-IgG рекомбинантен белтък; Immunex; виж например, Arthritis & Rheumatism (1994) Vol. 37, S295; J. Invest. Med. (1996) Vol. 44, 235A); и 55 kd TNFR-IgG (55 kD TNF рецепторен-IgG рекомбинантен белтък; Hoffmann-LaRoche).
Фармацевтичните състави от изобретението могат да включват „терапевтично ефективно количество“ или „профилактично ефективно количество“ от антитяло или част от антитяло от изобретението. „Терапевтично ефективно количество“, се отнася до количество ефективно при дозите и за периода от време, необходим за постигане на желания терапевтичен резултат. Терапевтично ефективното количество от антитялото или част от антитялото може да варира съгласно фактори, такива като етап на заболяването, възраст, пол и тегло на индивида и способността на антитялото или на част от антитялото, да предизвиква желаният отговор в индивида. Терапевтично ефективно количество е това, при което всички токсични или нежелани ефекти на антитялото или на част от антитялото да са превъзмогнати, от благоприятните терапевтични ефекти. „Профилактично ефективно количество“ се отнася до количество, ефективно при дозите и периодите от време, необходими за постигане на желания профилактичен резултат. Нормално е, тъй като профилактичната доза се използва при лица преди или в ранните етапи на болестта, профилактичното ефективно количество да бъде по-малко от терапевтично ефективното количество.
Дозовите режими могат да се коригират така, че да осигурят оптимално желания отговор (например, терапевтичен или профилактичен отговор). Например, може да се приложи еднократна болус доза, могат да се приложат няколко отделни дози за даден период от време, или дозата може да бъде пропорционално намалена или увеличена, което зависи от необходимата терапевтична ситуация. Особено предимство е да се формулират парентерални състави в единично дозирани форми за лесно приложение и еднаквост на дозата. Използваната тук единично дозирана форма, се отнася до физично дискретни единици, комплектовани като цели дози за лечение на индивиди, отнасящи се до бозайниците; всяка единица съдържаща предварително определено количество от активно съединение, изчислено за да осигури желаният терапевтичен ефект свързан с необходимият фармацевтичен носител. Спецификацията за единично дозираните форми лот изобретението е продиктувана от и зависи директно от (а) уникалните характеристики на активното съединение и от постигането на специфичния терапевтичен или профилактичен ефект, и (б) типичните ограничения в техниката на смесване на активно съединение за лечение на чувствителността при пациентите.
Един примерен, нелимитиращ обхват за терапевтично или профилактично ефективно количество от антитяло или част от антитяло от изобретението, е 10-100 mg, за предпочитане 20-80 mg, а най-добре е да е около 40 mg. Трябва да се отбележи, че стойностите на дозата могат да варират в зависимост от вида и тежестта на заболяването, което трябва да се облекчи. Освен това трябва да е ясно, че за всеки отделен пациент, трябва да се направи специфичен дозов режим за определен период от време, съгласно нуждите на пациента и професионалното решение на човека, наблюдаващ или ръководещ прилагането на съставите и че поредицата от дози изложени тук, са само примерни и нямат за цел да ограничават обхвата или приложението на заявеният състав.
Въз основа на представеното по-горе разкритие, както и на разкритието, съдържащо се тук, настоящото изобретение се отнася до изолирано човешко анти-TNFa антитяло, използвано за лечение на умерен до остър ревматоиден артрит, както е посочено в приложената претенция 1, където антитялото трябва да се прилага в комбинация с метотрексат.
Следващият подраздел разкрива различни приложения на антителата от настоящото разкритие.
V. Използване на антитела от изобретението
Склонността им да се свързват с hTNFa, анти-hTNFa антителата или части от тях, от изобретението, могат да се използват за детектиране на hTNFa (например, в биологична проба, такава като серум или плазма), като се използва стандартен имуноанализ, такъв като свързан имуносорбентен анализ (ELISA), радиоимуноанализ (RIA) или тъканна имунохистохимия. Изобретението осигурява метод за детектиране на hTNFa в биологична проба, включващ контактуване на биологичната проба с антитяло или част от антитяло от изобретението и детектиране или на антитялото (или на част от антитялото)
107
Описания на издадени патенти за изобретения № 09.1/16.09.2019 свързано с hTNFa, или на несвързаното антитяло (или на част от антитялото), за да се детектира hTNFa в биологичната проба. Антитялото е белязано директно или индиректно със субстанция, която може да се детектира, за да се улесни детекцията на свързаното или несвързаното антитяло. Подходящи субстанции за детектиране включват различни ензими, простетични групи, флуоресцентни материали, луминесцентни материали и радиоактивни материали. Примери за подходящи ензими включват, пероксидаза от хрян, алкална фосфатаза, β-галактозидаза, или ацетилхолинестераза; примери за подходящи комплекси от простетични групи включват, стрептавидин/биотин и авидин/биотин; примери за подходящи флуоресцентни материали включват, умбелиферон, флуоресцеин, флуоресцеин изотиоцианат, родамин, дихлоротриазиниламин флуоресцеин, данзил хлорид или фикоеритрин; пример за луминесцентен материал включва луминол; и примери за подходящ радиоактивен материал включва, 125I, 131I, 35S или 3Н.
Освен чрез белязане на антитялото, hTNFa може да се анализира в биологични течности чрез конкурентен имуноанализ, като се използват rhTNFa стандарти, белязани със субстанция, която може да се детектира и небелязано анти-hTNFa антитяло. В този анализ биологичната проба, белязаните rhTNFa стандарти и анти-hTNFa антитялото се комбинират и се определя количеството на белязания rh hTNFa стандарт свързан с небелязаното антитяло. Количеството на hTNFa в биологичната проба е обратно пропорционално на количеството на белязания hTNFa стандарт, свързан с анти-hTNFa антитялото.
Може да се използва също така и D2E7 антитялото от изобретението, за детектиране на TNFa от видове, различни от човек, по-специално TNFa от примати (например, шимпанзе, павиан, мармозетка, циномолгус и резус), прасе и мишка, тъй като D2E7 може да се свързва с всеки един от тези TNFa.
Антителата и частите от антителата от изобретението са способни да неутрализират активността на hTNFa както in vitro, така и in vivo (виж U.S. Патент No. 6,090,382). Освен това, поне някои от антителата от изобретението, като D2E7, може да неутрализира активността на hTNFa от други видове. Съответно, антителата и части от антителата от изобретението могат да се използват за инхибиране на активността на hTNFa, например в клетъчна култура, съдържаща hTNFa, в хора или други представители на бозайниците, притежаващи TNFa, с които антитялото от изобретението крос-реагира (например, шимпанзе, павиан, мармозетка, циномолгус и резус, прасе или мишка). В един вариант изобретението се осигурява потискане на активността на TNFa, включващ контактуване на TNFa с антитяло или част от антитяло от изобретението, така че активността на TNFa се потиска. За предпочитане е TNFa да е човешки TNFa. Например, в клетъчна култура, съдържаща или за която се предполага, че съдържа TNFa, може да се добави антитяло или част от антитяло от изобретението, за да се потисне активността на TNFa в културата.
В предпочитан вариант, изобретението осигурява лечение на нарушения, при които прилагането на анти-TNFa антитяло е благоприятно, включващи подкожно прилагане на лице, през седмица, на антитяло или на част от антитяло от изобретението, така че нарушението се лекува. В по-специален предпочитан вариант, антитялото се прилага подкожно, по схема през седмица. В друг особено предпочитан вариант, антитялото се прилага подкожно преди, по време на или след прилагането на метотрексат. За предпочитане е субектът да е човек. Съответно, субектът може да е бозайник експресиращ TNFa, с който антитялото от изобретението крос-реагира. Освен това, субектът може да е бозайник, в който е въведен hTNFa (например, чрез прилагане на hTNFa или чрез експресия на hTNFa трансген). Антитялото от изобретението може да се приложи на човек с терапевтични цели (дискутира се по-нататък, по-долу). Освен това, антитяло от изобретението може да се приложи на бозайник, различен от човек, експресиращ TNFa, с който антитялото крос-реагира (например, маймуна, прасе или мишка), с ветеринарна цел или като животински модел за човешко заболяване. По отношение на последното, такива животински модели могат да са полезни за оценка на терапевтичният ефект на антителата от изобретението (например, за анализ на дозите и времето на прилагане).
Използваният тук термин „нарушение, при което прилагането на анти-TNFa е благоприятно“, има за цел да включва заболявания и други нарушения, при които е показано че или се предполага, че наличието на TNFa в лице, страдащо от нарушение е или отговорно за патофизиологията на нарушението, или е фактор, който допринася за влошаване на нарушението, или при което е показано, че
108
Описания на издадени патенти за изобретения № 09.1/16.09.2019 друго анти-TNFa антитяло или биологично активна негова част се използва успешно за лечение на заболяването. Съответно, нарушение, при което е определена активността на TNFa, е нарушение, при което се очаква, че потискането на активността на TNFa ще облекчи симптомите и/или развитието на нарушението. Такива нарушения могат да се докажат, например чрез увеличаване на концентрацията на TNFa в биологичната течност, на лице страдащо от нарушение (например, увеличаване на концентрацията на TNFa в серум, плазма, синовиална течност и т. н. от лицето), което може да се детектира например чрез използване на анти-TNFa антитяло, както е описано по-горе. Има доста голям брой примери за нарушения, при които активността на TNFa не е желателна. Използването на антитела и части от антитела от изобретението за лечение на специфични нарушения, се дискутира по-долу в детайли.
А. Сепсис
Тумор некрозис фактора има определено установена роля в патофизиологията на сепсиса, е биологични ефекти, които включват хипотензия, миокардиална супресия, синдром на съдово изтичане, органна некроза, стимулиране на освобождаването на токсични вторични медиатори и активиране на каскадата за съсирване (виж например, Tracey, К. J. and Cerami,A. (1994)Annu. Rev. Med. 45: 491-503; Russell, D and Thompson, R. C. (1993) Curr. Opin. Biotech. 4 : 714-721).
Съответно, човешките антитела и части от антителата от изобретението, могат да се използват за лечение на сепсис, в които и да са от неговите клинични прояви, включващи септичен шок, ендотоксичен шок, грам отрицателен сепсис и токсичен шоков синдром.
Освен това, за лечението на сепсис, анти-hTNFa антитялото или част от антитялото от изобретението може да се приложи едновременно е едно или повече допълнителни терапевтични средства, които могат по-нататък да облекчат сепсиса, такива като интерлевкин-1 инхибитор (такъв като този, описан в РСТ Публикация Nos. WO 1992/016221 и WO 1992/017583), цитокинът интерлевкин-6 (виж например, РСТ Публикация No. WO 1993/011793), или антагонист на активиращия тромбоцитите фактор (виж например, Европейска патентна заявка, Публикация No. ЕР 374 510).
В допълнение, в предпочитан вариант, анти-TNFa антитялото или част от антитялото от изобретението, се прилага на човек, в подгрупа от пациенти със сепсис, имащи серумна или плазмена концентрация от IL-6 над 500 pg/ml и по-добре 1000 pg/ml, в момента на лечението (виж РСТ Публикация No. WO 1995/020978 от Damn, L., et al.).
Б. Автоимунни заболявания
Тумор некрозис факторът участва и има важна роля в патофизиологията на различни автоимунни заболявания. Например, TNFa участва в активирането на тъканното възпаление и причинява разрушаване на ставите при ревматоидни артрити (виж например, Tracey and Cerami, по-горе; Arend, W. P. and Dayer, J-M.(1995) Arth. Rhum. 38: 151-160; Fava, R. A., et al., (1993) Clin. Exp. Immunol. 94: 261-266). TNFa участва също така в активирането на клетките от островчетата към клетъчна смърт и в медиирането на инсулиновата резистентност при диабети (виж например, Tracey and Cerami, по-горе; РСТ Публикация No. WO 1994/008609). TNFa участва също така в медиирането на цитотоксичността към олигодендроцитите и в индукцията на възпалителни плаки при мултитиплената склероза (виж например, Tracey and Cerami, по-горе). Химерните и наподобяващите човешки миши анти-hTNFa антитела са преминали клиничните тестове за лечение на ревматоидни артрити (виж например, Elliott, М. J., et al., (1994) Lancet 344: 1125-1127; Elliot, M. J., et al., (1994) Lancet 344: 1105-1110; Rankin, Е. C., et al., (1995) Br. J. Rheumatol. 34: 334-342).
Човешките антитела и части от антитела от изобретението могат да се използват за лечение на автоимунни заболявания, по-специално на тези, свързани е възпаление, включващи ревматоидни артрити, ревматоидни спондилити, остеоартрити и артрити вследствие на подагра, алергии, мултитиплена склероза, автоимунни диабети, автоимунни увеити и нефротичен синдром. Обикновено, антитялото или част от антитялото се прилага на целия организъм, въпреки че при някои нарушения може да е по-благоприятно да се използва локално приложение на антитялото или на част от антитялото в мястото на възпалението (например, локално приложение в ставите при ревматоидни артрити или местно приложение при диабетни улцерити, самостоятелно или в комбинация е производно на циклохексан
109 Описания на издадени патенти за изобретения № 09.1/16.09.2019 илиден, както е описано в РСТ Публикация No. WO 1993/019751).
В. Инфекциозни болести
Тумор некрозис факторът участва в медиирането на биологичните ефекти, наблюдавани при различни инфекциозни заболявания. Например, TNFa участва в медиирането на мозъчно възпаление и капилярната тромбоза и при инфаркт при малария (виж например, Tracey and Cerami, по-горе). TNFa участва също така в медиирането на мозъчно възпаление, индуцирайки увреждане на кръвно-мозъчната бариера, като инициира септичен шоков синдром и активирайки венозен инфаркт при менингити (виж например, Tracey and Cerami, по-горе). TNFa участва също така и в индуцирането на психическо умствено разстройство, като стимулира вирусната пролиферация и като медиира увреждането на централната нервна система, в синдром на придобитата имунна недостатъчност (AIDS) (виж например, Tracey and Cerami, по-горе).
Съответно, антителата и части от антителата от изобретението, могат да се използват за лечение на инфекциозни заболявания, включващи бактериални менингити (виж например, Европейска патентна заявка, Публикация No. ЕР 5 85 705), церебрална малария, AIDS и сходен с AIDS комплекс (ARC) (виж например, Европейска патентна заявка, Публикация No. ЕР 230 574), така както и цитомегаловирусна инфекция, вторична по отношение на трансплантацията (виж например, Fietze, Е., et al., (1994) Transplantation 58: 675-680). Антителата и части от антителата от изобретението, могат да се използват също така и за облекчаване на симптомите свързани с инфекциозните заболявания, включващи треска и миалгия, дължащи се на инфекция (такава като грипна) и умствено разстройство, вторично по отношение на инфекцията (например, вторично по отношение на AIDS или ARC).
Г. Трансплантация
Тумор некрозис факторът участва като ключов медиатор при отхвърляне на хомоложна присадка на донора от рецепиента (GVHD) и при медииране на неблагоприятна реакция, която може да се наблюдава, когато се използва плъшото антитяло ОКТЗ, насочено срещу Т клетъчният рецепторен CD3 комплекс, за да се потисне отхвърлянето на бъбречни присадки (виж например, Tracey and Cerami, по-горе; Eason, J. D., et al., (1995) Transplantation 59: 300-305; Suthanthiran, M. and Strom, T. B. (1994) New Engl. J. Med. 331: 365-375). Съответно, антителата и части от антителата от изобретението, могат да се използват за потискане на отхвърлянето на присадка, включващо отхвърляне на хомоложна и кръстосана присадка и за потискане на GVHD. Въпреки че антитялото или част от антитялото може да се използва самостоятелно, за предпочитане е то да се използва в комбинация с едно или повече други средства, които потискат имунният отговор срещу хомоложната присадка или потискат GVHD. Например, в един вариант антитяло или част от антитяло от изобретението, се използва в комбинация с ОКТЗ, за да се инхибират ОКТЗ-индуцираните реакции. В друг вариант, антитяло или част от антитяло от изобретението се използва в комбинация с едно или повече антитела, насочени срещу други мишени, включени в регулирането на имунния отговор, такива като клетъчно повърхностните молекули CD25 (интерлевкин-2 рецептор-α), CD Па (LFA-1), CD54 (ICAM-1), CD4, CD45, CD28/CTLA4, CD80 (В71) и/или CD86 (В7-2). В друг вариант, антитяло или част от антитяло от изобретението, се използва в комбинация с едно или повече общи имуносупресивни средства, такива като циклоспорин А или FK506.
Д. Малигнизация
Тумор некрозис факторът участва при индуциране на умствено разстройство, като стимулира туморният растеж, повишава възможностите за метастазиране и медиира цитотоксичността при малигнезации (виж например, Tracey and Cerami, по-горе). Съответно, антителата и части от антителата от изобретението, могат да се използват за лечение на малигнизации, за да подтиснат туморният растеж или метастазирането и/или за да облекчат умствените разстройства, вторични за малигнизацията. Антитялото или част от антитялото може да се приложи върху целия организъм или локално върху мястото на тумора.
Е. Белодробни нарушения
Тумор некрозис факторът участва в патофизиологията на респираторен дистрес синдром при въз
110
Описания на издадени патенти за изобретения № 09.1/16.09.2019 растни, включващ стимулиране на левкоцит-ендотелно активиране, насочване на цитотоксичността към пневмоцитите и индуциране на васкуларния синдром за изтичане (виж например, Tracey and Cerami, по-горе). Съответно, антителата и части от антителата от изобретението, могат да се използват за лечение на различни белодробни нарушения, включващи респираторен дистрес синдром при възрастни (виж например, РСТ Публикация No. WO 1991/004054), белодробен шок, хронично белодробно възпалително заболяване, белодробна саркоидоза, белодробна фиброза и силикоза. Антитялото или част от антитялото, може да се прилага върху целия организъм или локално върху белодробната повърхност, например като аерозол.
Ж. Чревни нарушения
Тумор некрозис факторът участва в патофизиологията на чревните възпалителни процеси и нарушения (виж например, Tracy, К. J., et al., (1986) Science, 234: 470-474; Sun, X-M., et al., (1988) J. Clin. Invest. 81: 1328-1331; MacDonald, T. T., et al., (1990) Clin. Exp. Immunol. 81: 301-305). Химерни миши анти-hTNFa антитела са преминали през клинично изпитание за лечение на заболяването на Crohn (van Dullemen, Η. Μ., et al., (1995) Gastroenterology 109: 129-135). Човешките антитела и части от антитела от изобретението, могат да се използват също така и за лечение на чревни нарушения, такива като идиопатично възпалително чревно заболяване, което включва два синдрома, болест на Crohn и улцеративни колити.
3. Сърдечни нарушения
Антителата и части от антителата от изобретението, могат да се използват също така и за лечение на различни сърдечни нарушения, включващи исхемия на сърцето (виж например Европейска патентна заявка, Публикация No. ЕР 453 898) и сърдечна недостатъчност (слабост на сърдечния мускул) (виж например, РСТ Публикация No. WO 1994/020139).
И. Други
Антителата и части от антителата от изобретението, могат да се използват също така и за лечение на различни други нарушения, при които активността на TNFa не е желателна. Примери за други заболявания и нарушения, при които е включена активността на TNFa в патофизиологията и следователно, които могат да се лекуват като се използва антитяло или част от антитяло от изобретението, включват възпалителни костни нарушения и костно резорбционно заболяване (виж например, Bertolini, D. R., et al., (1986) Nature 319: 516-518; Konig, A., et al., (1988) J. Bone Miner. Res. 3: 621- 627; Lerner, U. H. and Ohlin, A. (1993) J. Bone Miner. Res. 8: 147- 155; and Shankar, G. and Stem, P. H. (1993), Bone 14: 871-876), хепатити, включващи хепатити вследствие на алкохол (виж например, McClain, С. J. and Cohen, D. A. (1989) Hepatology 9: 349-351; Felver, Μ. E., et al., (1990) Alcohol. Clin. Exp. Res. 14: 255-259; и Hansen,
J., et al., (1994), Hepatology, 20: 461-474) и вирусни хепатити (Sheron, N., et al., (1991) J. Hepatol. 12: 241-245; и Hussain, M. J., et al., (1994) J. Clin. Pathol. 47: 1112-1115), смущения в коагулацията (виж например, van der Poll, T., et al., (1990) N. Engl. J. Med. 322: 1622-1627; и van der Poll, T., et al., (1991) Prog. Clin.Biol. Res. 362: 55-60), изгаряния (виж например, Giroir, В. P, et al., (1994), Am. J. Physiol. 267: Hl 18-124; и Liu, X. S., et al., (1994), Bums 20: 40-44), реперфузионно увреждане (виж например, Scales, W E.,etal., (1994) Am. J. Physiol. 267: G1122-1127; Serrick, C.,etak, (1994) Transplantation, 58:1158-1162; и Yao, Y. M., et al., (1995) Resuscitation, 29: 157-168), келоидна формация (виж например, McCauley, R. L., et al., (1992), J. Clin. Immunol. 12: 300-308), образуване на белег в тъканта и треска.
Това изобретение по-нататък е илюстрирано със следните примери, които не трябва да се считат като лимитиращи. Съдържанието на всички цитати, патенти и публикувани патентни заявки, цитирани в цялата тази заявка са включени в литературната справка.
Примери за изпълнение на изобретението
Пример 1.
Лечение с анти-TNFa антитяло
Ефективност на D2E7 след подкожно приложение
В това изследване, са третирани двайсет и четири пациента с активен RA, със седмични дози от 0.5
Ill
Описания на издадени патенти за изобретения № 09.1/16.09.2019 mg/kg D2E7 (п=18) или плацебо (п=6), чрез подкожно инжектиране в рамките на три месеца. Пациентите участващи в това изследване имат средно времетраене на заболяването от 10.1 години, с резултат от активното заболяване (DAS) резултат от 4.87 и средно от 3.4 DMARDs (заболяване модифицирано от анти-ревматоидните лекарствени препарати), преди да постъпят в изследването; отново като се отчита значителната активност на болестта. Отговарящите продължават лечението с белязано D2E7, докато пациентите, които не успяват да отговорят на дозата от 0.5 mg/kg или при които е изчезнал DAS отговора при 0.5 mg/kg доза, получават повишена доза от 1 mg/kg, чрез подкожно инжектиране, след дванадесетата седмица от изследването.
Първите записани пациенти получават до шестдесет инжекции и следователно са били в изследването с лекарствената терапия шестдесет седмици. Ефективността на подкожните дози е сходна с тази на интравенозните инжекции. До 78 % от пациентите достигат DAS и ACR20 отговор, през време на първите седмици от лечението.
Подкожно, D2E7 с доза от 0.5 mg/kg/седмица редуцира подутата става (SWJ) с 54 %, болезнената става (TJC) с 61 % и CRP с 39 % за дванадесет седмици, в сравнение с базовата линия, докато всички параметри се увеличават в групата приемаща плацебо. След завършване на плацебо-контролния период от това изследване, пациентите продължават лечението до четиринадесет месеца с продължителна ефективност. Тези резултати показват, че подкожното прилагане на D2E7, с доза от 0.5 mg/kg/седмица, следователно може да се прилага благополучно самостоятелно с добра локална поносимост.
Прилагане на D2E7 и на метотрексат
В това изследване пациентите получават подкожно или интравенозно плацебо или D2E7, с доза от 1 mg/kg, в допълнение към тяхното лечение с (метотрексат) МТХ. Петдесет и четири пациента са постъпили в изследването и осемнадесет пациента са получили интравенозно D2E7 и подкожно плацебо, осемнадесет пациента са получили интравенозно плацебо и подкожно D2E7, и осемнадесет пациента са получили плацебо интравенозно и подкожно. Пациентите получават своята втора доза само след като е изчезнал техният статус за сляп отговор, не по-рано от четири седмици след първата доза. След това всички пациенти получават подкожна инжекция, през седмица от белязано D2E7.
Демографските характеристики от изследваната популация в това изследване, включват средна продължителност на RA от 1Е1 години, преди излагане до средното от 3.6 DMARDs (различно от МТХ), и средно DAS при встъпване в изследването от 4.81. На двадесет и деветият ден, 72 % от пациентите третирани интравенозно с D2E7 и 44 % от пациентите, третирани подкожно D2E7, достигнаха отговор чрез DAS критериите, в сравнение само с 28 % от плацебо третираните пациенти (показано на Фигура 5). От отговорилите в това изследване, 28 % от третираните с плацебо пациенти, поддържат ACR20 отговор до ден 29, в сравнение с 72 % от третираните с D2E7 интравенозно пациенти и 67 % от третираните с D2E7 пациенти подкожно, които поддържат техните отговори между един и три месеца.
Пример 2.
Обща телесна доза на подкожно приложеното анти-TNFa антитяло
Седмично, подкожно прилагане на D2E7
В това изследване са постъпили двеста осемдесет и четири пациента с RA и то има за цел да се определи оптималната, обща телесна доза на подкожно приложеното D2E7. Пациентите получават произволно или 20, 40 или 80 mg D2E7 или плацебо, седмично за дванадесет седмици, след което време, плацебо-третираните пациенти преминават случайно на 40 mg О2Е7/седмично.
Приблизително 49 % от пациентите достигат ACR20 с 20 mg, 55 % от пациентите достигат ACR20 с 40 mg, и 54 % от пациентите достигат ACR20 с 80 mg, докато само 10 % от пациентите получаващи плацебо, достигат ACR20 (показано е на Фигура 1А). Приблизително 23 % от пациентите достигат ACR50 с 20 mg, 27 % от пациентите достигат ACR50 с 40 mg, и 20 % от пациентите достигат ACR50 с 80 mg и само 2 % от пациентите получаващи плацебо достигат ACR50. Тези данни илюстрират, че подкожното прилагане на D2E7, по-специално с доза от 40 mg/седмица, предизвиква добър отговор.
Пример 3.
Подкожно приложение, през седмица на анти-TNFa антитяло
Подкожно приложение, през седмица на D2E7
112
Описания на издадени патенти за изобретения № 09.1/16.09.2019
Изследвани са клиничните ефекти, безопасността, имуногенността и поносимостта на RA пациентите с частични отговори към МТХ, след подкожна инжекция (s. с.) през седмица, на плацебо или D2E7, с няколко дозови нива за двадесет и четири седмици, заедно с продължително МТХ лечение.
Модел на изследването
Проведено е плацебо-контролирано, двойно-сляпо, произволно, мулти-центърно изследване на пациенти с RA, които имат недостатъчен ефект или поносимост към МТХ.
По време на курса на лечение пациентите се поддържат със стабилна доза от МТХ, с доза определена във включените критерии, описани по-долу.
Това изследване се състои от две части: 1) а „празен период“ от четири седмици преди прилагането на първата доза медикамент, през което време липсват DMARDs (с изключение на МТХ); и 2) „плацебо контролиран период“, през което време пациентите се разпределят произволно в една от четирите групи от шестдесет и седем пациента, за да получат плацебо, 20, 40 или 80 mg D2E7 (като обща телесна доза), давана през седмица подкожно, за 24 седмица. Всяка доза от изследвания лекарствен препарат се прилага като две подкожни инжекции от 1.6 ml всяка. Първата доза на пациентите се прилага от медицински персонал, като част от подготовката на пациента. Следващите дози се прилагат самостоятелно от пациента в изследването, под директното наблюдение на квалифицирания персонал, през първите четири седмици. След това, дозите се прилагат извън мястото на изследване, от пациента, трениран индивид посочен от пациента или от медицински персонал.
След всяка клинична оценка се определя лечението с лекарствените препарати за четири или пет седмици. Пациентите се изследват серийно в седмици, една, две, три, четири, шест, осем, дванадесет, шестнадесет, двадесет и двадесет и четири от изследването, с изследване на ставите, което се провежда от случаен оценител, независимо от лекуващия лекар.
В това изследване са записани двеста седемдесет и един пациента с RA. Изследваната популация е представена от популация със среден до тежък RA в Северна Америка: приблизително 70 % жени и то с преобладаваща възраст над четиридесет. Популацията е избрана, като се използват предварително определени включващи и изключващи критерии, известни на специалистите в областта, например пациентът трябва да има диагноза RA, която е определена от ревизираните критерии от 1987 на Американския колеж по ревматология (ACR) (изложени в Приложение А).
Резултати
Фигури 1В и 2-4 показват, че подкожното, през седмица, лечение с D2E7, в комбинация с метотрексат, е значително по-добро отколкото плацебо, за редуциране на сигналите и симптомите на RA за двадесет и четири седмици. Всичките три дози от D2E7 са статистически значимо по-ефективни, отколкото плацебо, даван ежеседмично. Освен това, D2E7 с доза от 40 mg и 80 mg има по-добър ефект, отколкото дозата от 20 mg.
Еквиваленти
Специалистите в областта ще оценят или ще бъдат способни да се убедят, като използват само рутинен експеримент в много еквиваленти на специфичните варианти от изобретението, описано тук. Тези еквиваленти са предназначени да бъдат включени в следните претенции.

Claims (1)

  1. Патентни претенции
    1. Изолирано човешко анти-TNFa антитяло за лечение на умерен до тежък ревматоиден артрит при хора, което се прилага подкожно на нуждаещия се от него човек, при дозиране през седмица по 40 mg на всеки 14 дни, като антитялото има вариабилен регион на леката верига (LCVR), който включва аминокиселинна последователност от SEQ ID NO: 1, както и вариабилен регион на тежката верига, който има аминокиселинна последователност от SEQ ID NO: 2, при което има още IgGl константен регион на тежката верига и константен регион на капа леката верига, като антитялото трябва да се прилага в комбинация с метотрексат.
    Приложение: 5 фигури
    113
    Описания на издадени патенти за изобретения № 09.1/16.09.2019
    ACR Определение н RA
    Класификация от 1987 пд тдн критерия и функции зя рснматтщднн артрити (RA)
    Критерии Определение ί. Артрит от3 buiH повече ставни сб листи 1 юне в три ставни области има едновременно подуване на мените тъкани или течност (не саиО свръх кРотен -ρίΟιΐΜί)·, наблюдавано от лекар. 14 аъзможнн ставни обдастн са дясно нлн ляво ΓΙί\ МОР, китка, лакът, коляно, глезен н МТР стави, ; 2, Артрита при стави иа ръка Китка МГР МСР или китка МСР н китна Подута меки тъкани или течност (не само костен свръх растеж), а специфична област наблюдавана от ле*ир Taw където са специфицирани 2 области, услсовг1ението трябва да е едновременно 3. Симетрично подуване (артрита) Едновременни усовижзиеннв на съш.ите ставни сйласта (какю е определено ο L от двете страни па тялото (бнлатералното усложнение на Р1Р^Н МСРз нлн МГР$ е. приемливо бст абсолютни симетрия) 4, Серумен релмятомлен фактор Демонстрация Eta аномални количества отсерумеЕЕ резматоиден фактор, чрез който и да е метод, зя мйто резултатите за попажнгелЕЕИ в < 5 % ст нормалните контролни субекта 5. Радиотрафски промени при реоматоиднм арфи™ 1 Радио графе ни промени, типични за рсиматонднитс артрити в задно-грт.дн ага -част из ръката н ралиографня из китка, кгкитп рябвн .да включват из нос а ин е или недвусмислено листна лекалцнфккаиця, локализирани в или в 1шп--за&слежнми1« мята съседни на ставните усложнения, (Само остсойртритннтс промени tie cu шшлнзнранн ло саношение нл. качествтн} 1
    * за пациента се е казва, че има RA ако той/тя е еключен В 1 ОТ SRA ПСДipyiw're, изброени в Таблица 7 и има клинична диагноза пт
    RA στ иегония/неяняя лекар. Критерий 1,2, и 3 трябуд да присъстват поне за 6 седмици.
BG111719A 2001-06-08 2014-03-12 Изолирано човешко анти-tnf алфа антитяло BG66936B1 (bg)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US29696101P 2001-06-08 2001-06-08
US60/296961 2001-06-08
PCT/US2002/017790 WO2002100330A2 (en) 2001-06-08 2002-06-05 METHODS OF ADMINISTERING ANTI-TNFα ANTIBODIES
BG108514A BG66459B1 (bg) 2001-06-08 2004-01-06 Методи за прилагане на анти -tnf алфа антитела

Publications (2)

Publication Number Publication Date
BG111719A BG111719A (bg) 2014-06-30
BG66936B1 true BG66936B1 (bg) 2019-08-15

Family

ID=23144283

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
BG108514A BG66459B1 (bg) 2001-06-08 2004-01-06 Методи за прилагане на анти -tnf алфа антитела
BG111719A BG66936B1 (bg) 2001-06-08 2014-03-12 Изолирано човешко анти-tnf алфа антитяло

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
BG108514A BG66459B1 (bg) 2001-06-08 2004-01-06 Методи за прилагане на анти -tnf алфа антитела

Country Status (32)

Country Link
US (16) US8889135B2 (bg)
EP (6) EP2364731A3 (bg)
JP (7) JP2005517629A (bg)
KR (8) KR101497363B1 (bg)
CN (5) CN103495165A (bg)
AR (3) AR034429A1 (bg)
AU (1) AU2002314922C1 (bg)
BG (2) BG66459B1 (bg)
BR (1) BR0206289A (bg)
CA (3) CA2385745C (bg)
CL (1) CL2012000856A1 (bg)
CY (1) CY1120540T1 (bg)
CZ (1) CZ309160B6 (bg)
DK (2) DK2940044T3 (bg)
EC (1) ECSP034867A (bg)
ES (2) ES2612436T3 (bg)
HU (1) HU230947B1 (bg)
IL (4) IL158831A0 (bg)
LT (1) LT2940044T (bg)
MX (2) MXPA03011316A (bg)
NO (2) NO334490B1 (bg)
NZ (6) NZ529574A (bg)
PE (2) PE20030065A1 (bg)
PH (3) PH12013500297A1 (bg)
PL (4) PL217217B1 (bg)
PT (2) PT2940044T (bg)
SA (1) SA02230384B1 (bg)
SI (2) SI2940044T1 (bg)
SK (1) SK288509B6 (bg)
TW (1) TWI473622B (bg)
WO (1) WO2002100330A2 (bg)
ZA (1) ZA200308861B (bg)

Families Citing this family (122)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6090382A (en) 1996-02-09 2000-07-18 Basf Aktiengesellschaft Human antibodies that bind human TNFα
DE122004000004I1 (de) * 1996-02-09 2004-08-12 Abott Biotechnology Ltd Humane Antikörper welche an Humanen TNFalpha binden.
CA2385745C (en) 2001-06-08 2015-02-17 Abbott Laboratories (Bermuda) Ltd. Methods of administering anti-tnf.alpha. antibodies
US20030206898A1 (en) * 2002-04-26 2003-11-06 Steven Fischkoff Use of anti-TNFalpha antibodies and another drug
US20040009172A1 (en) * 2002-04-26 2004-01-15 Steven Fischkoff Use of anti-TNFalpha antibodies and another drug
AR040603A1 (es) * 2002-07-19 2005-04-13 Abbott Lab S A El uso de un anticuerpo anti-tnfalfa neutralizador de alta afinidad en la fabricacion de un medicamento y conjunto de elementos
US20090280065A1 (en) * 2006-04-10 2009-11-12 Willian Mary K Uses and Compositions for Treatment of Psoriasis
US20040033228A1 (en) 2002-08-16 2004-02-19 Hans-Juergen Krause Formulation of human antibodies for treating TNF-alpha associated disorders
MY150740A (en) * 2002-10-24 2014-02-28 Abbvie Biotechnology Ltd Low dose methods for treating disorders in which tnf? activity is detrimental
WO2004087730A2 (en) * 2003-03-27 2004-10-14 The Johns Hopkins University Method for producing diverse libraries of encoded polymers
US8273347B2 (en) * 2003-05-13 2012-09-25 Depuy Spine, Inc. Autologous treatment of degenerated disc with cells
US7344716B2 (en) * 2003-05-13 2008-03-18 Depuy Spine, Inc. Transdiscal administration of specific inhibitors of pro-inflammatory cytokines
US7892563B2 (en) * 2003-05-20 2011-02-22 Wyeth Holdings Corporation Methods for treatment of severe acute respiratory syndrome (SARS)
US8361467B2 (en) * 2003-07-30 2013-01-29 Depuy Spine, Inc. Trans-capsular administration of high specificity cytokine inhibitors into orthopedic joints
US8895540B2 (en) * 2003-11-26 2014-11-25 DePuy Synthes Products, LLC Local intraosseous administration of bone forming agents and anti-resorptive agents, and devices therefor
AU2011218744B2 (en) * 2004-04-09 2012-09-20 Abbvie Biotechnology Ltd Multiple-variable dose regimen for treating TNFalpha-related disorders
TWI439284B (zh) * 2004-04-09 2014-06-01 Abbvie Biotechnology Ltd 用於治療ＴＮＦα相關失調症之多重可變劑量療法
GB0414054D0 (en) 2004-06-23 2004-07-28 Owen Mumford Ltd Improvements relating to automatic injection devices
WO2006014477A1 (en) * 2004-07-06 2006-02-09 Bioren, Inc. HIGH AFFINITY ANTI-TNF-α ANTIBODIES AND METHOD
EP1807111A4 (en) * 2004-10-08 2009-05-27 Abbott Biotech Ltd SYNCYTIAL RESPIRATORY VIRUS INFECTION (RSV)
US20060253100A1 (en) 2004-10-22 2006-11-09 Medtronic, Inc. Systems and Methods to Treat Pain Locally
JP5129122B2 (ja) 2005-04-26 2013-01-23 トリオン ファーマ ゲーエムベーハー 癌治療のための抗体およびグルココルチコイドの組み合わせ
AU2012254978C1 (en) * 2005-05-16 2017-06-01 Abbvie Biotechnology Ltd Use of TNF inhibitor for treatment of erosive polyarthritis
AU2006246721B2 (en) 2005-05-16 2012-12-13 Abbvie Biotechnology Ltd Use of TNF inhibitor for treatment of erosive polyarthritis
US20070041905A1 (en) * 2005-08-19 2007-02-22 Hoffman Rebecca S Method of treating depression using a TNF-alpha antibody
CA2626804A1 (en) 2005-11-01 2007-08-09 Abbott Biotechnology Ltd. Methods and compositions for diagnosing ankylosing spondylitis using biomarkers
WO2007110219A1 (en) * 2006-03-27 2007-10-04 Ablynx N.V. Medical delivery device for therapeutic proteins based on single domain antibodies
CA3086149A1 (en) 2006-04-04 2007-10-11 Singulex, Inc. Highly sensitive system and methods for analysis of troponin
MX2008012896A (es) 2006-04-05 2008-10-14 Abbott Biotech Ltd Purificacion de anticuerpos.
WO2007120651A2 (en) * 2006-04-10 2007-10-25 Abbott Biotechnology Ltd. Uses and compositions for treatment of juvenile rheumatoid arthritis
WO2007120656A2 (en) * 2006-04-10 2007-10-25 Abbott Biotechnology Ltd. Uses and compositions for treatment of rheumatoid arthritis
EP2666472A3 (en) 2006-04-10 2014-04-02 Abbott Biotechnology Ltd Uses and compositions for treatment of psoriatic arthritis
US9605064B2 (en) 2006-04-10 2017-03-28 Abbvie Biotechnology Ltd Methods and compositions for treatment of skin disorders
US20090317399A1 (en) * 2006-04-10 2009-12-24 Pollack Paul F Uses and compositions for treatment of CROHN'S disease
EP2708242A3 (en) 2006-04-10 2014-03-26 Abbott Biotechnology Ltd Uses and compositions for treatment of ankylosing spondylitis
CA2564435A1 (en) 2006-04-10 2007-10-10 Abbott Biotechnology Ltd. Methods for monitoring and treating intestinal disorders
WO2007120626A2 (en) 2006-04-10 2007-10-25 Abbott Biotechnology Ltd. Uses and compositions for treatment of ankylosing spondylitis
US20080131374A1 (en) * 2006-04-19 2008-06-05 Medich John R Uses and compositions for treatment of rheumatoid arthritis
CN101426514A (zh) * 2006-04-25 2009-05-06 英特塞尔股份公司 Hcv疫苗
US20080311043A1 (en) * 2006-06-08 2008-12-18 Hoffman Rebecca S Uses and compositions for treatment of psoriatic arthritis
US20100021451A1 (en) 2006-06-08 2010-01-28 Wong Robert L Uses and compositions for treatment of ankylosing spondylitis
CN103316402A (zh) 2006-06-30 2013-09-25 艾伯维生物技术有限公司 自动注射装置
NZ576133A (en) 2006-10-27 2012-10-26 Abbott Biotech Ltd Crystalline anti-htnfalpha antibodies
WO2008150491A2 (en) * 2007-05-31 2008-12-11 Abbott Laboratories BIOMARKERS PREDICTIVE OF THE RESPONSIVENESS TO TNFα INHIBITORS IN AUTOIMMUNE DISORDERS
WO2008154543A2 (en) 2007-06-11 2008-12-18 Abbott Biotechnology Ltd. Methods for treating juvenile idiopathic arthritis
EP2173380A4 (en) * 2007-07-13 2011-08-31 Abbott Biotech Ltd METHOD AND COMPOSITIONS FOR PULMONARY ADMINISTRATION OF A TNFa HEMMER
WO2009020654A1 (en) 2007-08-08 2009-02-12 Abbott Laboratories Compositions and methods for crystallizing antibodies
NZ622583A (en) 2007-11-30 2015-08-28 Abbvie Biotechnology Ltd Protein formulations and methods of making same
US8883146B2 (en) 2007-11-30 2014-11-11 Abbvie Inc. Protein formulations and methods of making same
US8986696B2 (en) 2007-12-21 2015-03-24 Depuy Mitek, Inc. Trans-capsular administration of p38 map kinase inhibitors into orthopedic joints
PL2808343T3 (pl) 2007-12-26 2019-11-29 Xencor Inc Warianty Fc ze zmienionym wiązaniem do FcRn
CN101965514A (zh) * 2008-01-03 2011-02-02 艾博特生物技术有限公司 预测化合物在治疗银屑病中的长期功效
BRPI0907186A2 (pt) 2008-01-15 2015-07-14 Abbott Gmbh & Co Kg Composições proteicas pulverizadas e métodos para sua produção
US20100040630A1 (en) * 2008-03-24 2010-02-18 Aake Elden Methods and compositions for treating bone loss
USRE48948E1 (en) 2008-04-18 2022-03-01 Warsaw Orthopedic, Inc. Clonidine compounds in a biodegradable polymer
US20100239632A1 (en) 2009-03-23 2010-09-23 Warsaw Orthopedic, Inc. Drug depots for treatment of pain and inflammation in sinus and nasal cavities or cardiac tissue
CA2758964A1 (en) 2009-04-16 2010-10-21 Abbott Biotherapeutics Corp. Anti-tnf-.alpha. antibodies and their uses
CN102458517B (zh) 2009-04-29 2014-07-23 阿布维生物技术有限公司 自动注射装置
NZ600069A (en) 2009-12-15 2015-02-27 Abbvie Biotechnology Ltd Improved firing button for automatic injection device
JP2013514388A (ja) 2009-12-16 2013-04-25 フィリップ ボッシュ， 間質性膀胱炎の処置の方法
JO3417B1 (ar) 2010-01-08 2019-10-20 Regeneron Pharma الصيغ المستقرة التي تحتوي على الأجسام المضادة لمضاد مستقبل( interleukin-6 (il-6r
EP2531613A2 (en) 2010-02-02 2012-12-12 Abbott Biotechnology Ltd. Methods and compositions for predicting responsiveness to treatment with tnf-alpha inhibitor
NZ702172A (en) 2010-04-21 2016-03-31 Abbvie Biotechnology Ltd Wearable automatic injection device for controlled delivery of therapeutic agents
US20110287018A1 (en) 2010-05-19 2011-11-24 Philip Bosch Methods of Treating Interstitial Cystitis
HUE039740T2 (hu) 2010-06-03 2019-01-28 Abbvie Biotechnology Ltd Alkalmazások és készítmények hidradenitis suppurativa (HS) kezelésére
AR083495A1 (es) 2010-10-22 2013-02-27 Esbatech Alcon Biomed Res Unit Anticuerpos estables y solubles
AU2011325974B2 (en) 2010-11-11 2016-10-27 Abbvie Biotechnology Ltd. Improved high concentration anti-TNFalpha antibody liquid formulations
EP3187216B1 (en) 2011-01-24 2019-08-21 AbbVie Biotechnology Ltd. Automatic injection devices having overmolded gripping surfaces
EP2702077A2 (en) 2011-04-27 2014-03-05 AbbVie Inc. Methods for controlling the galactosylation profile of recombinantly-expressed proteins
US10040855B2 (en) * 2011-05-02 2018-08-07 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Formulation for anti-α4β7 antibody
KR102103036B1 (ko) 2011-06-13 2020-04-22 압제노믹스 코오페라티에프 유.에이. 항-ｐｓｇｌ-１ 항체 및 그의 용도
US8795357B2 (en) 2011-07-15 2014-08-05 Edwards Lifesciences Corporation Perivalvular sealing for transcatheter heart valve
HK1202628A1 (en) 2011-11-30 2015-10-02 Abbvie Deutschland Gmbh & Co Kg Methods and compositions for determining responsiveness to treatment with a tnf-alpha inhibitor
US9067990B2 (en) 2013-03-14 2015-06-30 Abbvie, Inc. Protein purification using displacement chromatography
US9505833B2 (en) 2012-04-20 2016-11-29 Abbvie Inc. Human antibodies that bind human TNF-alpha and methods of preparing the same
US9334319B2 (en) 2012-04-20 2016-05-10 Abbvie Inc. Low acidic species compositions
US9181572B2 (en) 2012-04-20 2015-11-10 Abbvie, Inc. Methods to modulate lysine variant distribution
WO2013176754A1 (en) 2012-05-24 2013-11-28 Abbvie Inc. Novel purification of antibodies using hydrophobic interaction chromatography
HK1211981A1 (en) 2012-09-02 2016-06-03 Abbvie Inc. Methods to control protein heterogeneity
US9512214B2 (en) 2012-09-02 2016-12-06 Abbvie, Inc. Methods to control protein heterogeneity
AU2013312300A1 (en) 2012-09-07 2015-04-16 Coherus Biosciences, Inc. Stable aqueous formulations of adalimumab
US9017687B1 (en) 2013-10-18 2015-04-28 Abbvie, Inc. Low acidic species compositions and methods for producing and using the same using displacement chromatography
WO2014159579A1 (en) 2013-03-14 2014-10-02 Abbvie Inc. MUTATED ANTI-TNFα ANTIBODIES AND METHODS OF THEIR USE
WO2014151878A2 (en) 2013-03-14 2014-09-25 Abbvie Inc. Methods for modulating protein glycosylation profiles of recombinant protein therapeutics using monosaccharides and oligosacharides
WO2015051293A2 (en) 2013-10-04 2015-04-09 Abbvie, Inc. Use of metal ions for modulation of protein glycosylation profiles of recombinant proteins
WO2015057910A1 (en) 2013-10-16 2015-04-23 Oncobiologics, Inc. Buffer formulations for enhanced antibody stability
US9085618B2 (en) 2013-10-18 2015-07-21 Abbvie, Inc. Low acidic species compositions and methods for producing and using the same
US9181337B2 (en) 2013-10-18 2015-11-10 Abbvie, Inc. Modulated lysine variant species compositions and methods for producing and using the same
US8946395B1 (en) 2013-10-18 2015-02-03 Abbvie Inc. Purification of proteins using hydrophobic interaction chromatography
US20150139988A1 (en) 2013-11-15 2015-05-21 Abbvie, Inc. Glycoengineered binding protein compositions
US9763992B2 (en) 2014-02-13 2017-09-19 Father Flanagan's Boys' Home Treatment of noise induced hearing loss
GB201407852D0 (en) * 2014-05-02 2014-06-18 Iontas Ltd Preparation of libraries od protein variants expressed in eukaryotic cells and use for selecting binding molecules
CA2949236C (en) 2014-05-15 2023-06-13 Incube Labs, Llc Pharmaceutical compositions and methods for fabrication of solid masses comprising polypeptides and/or proteins
US10689460B2 (en) 2014-05-15 2020-06-23 Incube Labs, Llc PCSK9 antibody preparations for delivery into a lumen of the intestinal tract using a swallowable drug delivery device
US11548940B2 (en) 2014-05-15 2023-01-10 Rani Therapeutics, Llc Anti-interleukin antibody preparations for delivery into a lumen of the intestinal tract using a swallowable drug delivery device
EP3145951A1 (en) 2014-06-24 2017-03-29 InSight Biopharmaceuticals Ltd. Methods of purifying antibodies
AU2015298263B2 (en) 2014-07-31 2020-05-14 Anji Pharmaceuticals, Inc. ApoE mimetic peptides and higher potency to clear plasma cholesterol
CN104382977A (zh) * 2014-11-17 2015-03-04 昆明朗盛生物科技有限公司 一种女性专用的玛咖组合物
EP3237000A1 (en) 2014-12-23 2017-11-01 Pfizer Inc Stable aqueous antibody formulation for anti tnf alpha antibodies
US10696735B2 (en) 2015-01-21 2020-06-30 Outlook Therapeutics, Inc. Modulation of charge variants in a monoclonal antibody composition
EP3078675A1 (en) 2015-04-10 2016-10-12 Ares Trading S.A. Induction dosing regimen for the treatment of tnf alpha mediated disorders
AU2016257813B2 (en) 2015-05-01 2021-05-13 Rani Therapeutics, Llc Pharmaceutical compositions and methods for fabrication of solid masses comprising polypeptides and/or proteins
US11229702B1 (en) 2015-10-28 2022-01-25 Coherus Biosciences, Inc. High concentration formulations of adalimumab
US10988543B2 (en) 2015-11-11 2021-04-27 Opi Vi—Ip Holdco Llc Humanized anti-tumor necrosis factor alpha receptor 2 (anti-TNFR2) antibodies and methods of use thereof to elicit an immune response against a tumor
EP3411401A1 (en) 2016-02-03 2018-12-12 Oncobiologics, Inc. Buffer formulations for enhanced antibody stability
TWI819435B (zh) * 2016-03-07 2023-10-21 法商賽諾菲生物技術公司 用於治療類風濕性關節炎之組成物及方法
US11071782B2 (en) 2016-04-20 2021-07-27 Coherus Biosciences, Inc. Method of filling a container with no headspace
SG10202001787QA (en) 2016-06-02 2020-04-29 Abbvie Inc Glucocorticoid receptor agonist and immunoconjugates thereof
EP3824906A1 (en) 2016-12-21 2021-05-26 Amgen Inc. Anti-tnf alpha antibody formulations
KR20190024572A (ko) * 2017-08-30 2019-03-08 (주)셀트리온 TNFα 관련 질환을 치료하기 위한 피하 투여 요법
EP3456739A1 (en) * 2017-09-19 2019-03-20 Tillotts Pharma Ag Use of anti-tnfalpha antibodies for treating wounds
CA3082356A1 (en) 2017-12-01 2019-06-06 Abbvie Inc. Glucocorticoid receptor agonist and immunoconjugates thereof
CN112955222A (zh) 2018-08-29 2021-06-11 里珍纳龙药品有限公司 用于治疗患有类风湿性关节炎的个体的方法和组合物
TW202521583A (zh) 2019-01-31 2025-06-01 法商賽諾菲生物技術公司 用於治療幼年原發性關節炎之組成物及方法
AR118191A1 (es) * 2019-02-28 2021-09-22 Celltrion Inc MÉTODOS PARA EL TRATAMIENTO DE ENFERMEDADES RELACIONADAS CON TNFa
JP2022525332A (ja) * 2019-03-14 2022-05-12 ビオンド バイオロジクス リミテッド 免疫抑制の方法
MA55760A (fr) 2019-04-24 2022-03-02 Regeneron Pharma Procédés de diagnostic et de traitement de la polyarthrite rhumatoïde
JP2022534794A (ja) 2019-06-04 2022-08-03 サノフィ・バイオテクノロジー 関節リウマチを有する対象における疼痛を治療するための組成物および方法
TWI841810B (zh) * 2020-01-24 2024-05-11 日商西斯美股份有限公司 提升抗體對抗原之親和性的方法及其用途
US20230091156A1 (en) * 2021-09-14 2023-03-23 Mayo Foundation For Medical Education And Research Methods and materials for assessing and treating arthritis
TW202509220A (zh) * 2023-06-26 2025-03-01 美商旗艦先鋒創新有限責任（Ｖｉｉ）公司 經工程化之瘧原蟲及相關方法
KR20250031013A (ko) * 2023-08-23 2025-03-06 (주)셀트리온 TNFα 관련 질환을 치료하는 방법

Family Cites Families (123)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5179017A (en) 1980-02-25 1993-01-12 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials
US4634665A (en) 1980-02-25 1987-01-06 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials
US4399216A (en) 1980-02-25 1983-08-16 The Trustees Of Columbia University Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials
CA1208546A (en) 1981-09-08 1986-07-29 Anthony Cerami Lipoprotein lipase suppression by endotoxin-induced mediator (shock assay)
US4510245A (en) 1982-11-18 1985-04-09 Chiron Corporation Adenovirus promoter system
GB8308235D0 (en) 1983-03-25 1983-05-05 Celltech Ltd Polypeptides
US5672347A (en) 1984-07-05 1997-09-30 Genentech, Inc. Tumor necrosis factor antagonists and their use
IL73883A (en) 1984-12-20 1990-12-23 Yeda Res & Dev Monoclonal antibodies against tnf-alpha,hybridomas producing them and method for the purification of tnf-alpha
US5168062A (en) 1985-01-30 1992-12-01 University Of Iowa Research Foundation Transfer vectors and microorganisms containing human cytomegalovirus immediate-early promoter-regulatory DNA sequence
EP0613006A1 (en) 1985-08-16 1994-08-31 The Rockefeller University Antibodies to cachectin and immunoassays
US4870163A (en) 1985-08-29 1989-09-26 New York Blood Center, Inc. Preparation of pure human tumor necrosis factor and hybridomas producing monoclonal antibodies to human tumor necrosis factor
US5246714A (en) 1985-10-11 1993-09-21 Aktiebolaget Hassle Drug preparation
GB8528234D0 (en) 1985-11-15 1985-12-18 Wyeth John & Brother Ltd Heterocyclic compounds
US4968615A (en) 1985-12-18 1990-11-06 Ciba-Geigy Corporation Deoxyribonucleic acid segment from a virus
EP0230574A3 (en) 1986-01-31 1989-03-22 Yale University Pharmaceutical compositions against infections caused by lav/htlv iii virus and the use thereof
DE3631229A1 (de) 1986-09-13 1988-03-24 Basf Ag Monoklonale antikoerper gegen humanen tumornekrosefaktor (tnf) und deren verwendung
JP2638652B2 (ja) 1988-07-18 1997-08-06 カイロン・コーポレーション カケクチンと反応するモノクロナール抗体
US5223409A (en) 1988-09-02 1993-06-29 Protein Engineering Corp. Directed evolution of novel binding proteins
DE68914244T2 (de) 1988-10-24 1994-10-27 Otsuka Pharma Co Ltd Monoklonaler Antikörper.
EP0374510B1 (en) 1988-12-19 1997-01-15 American Cyanamid Company Products for the treatment of endotoxic shock in a mammal
JP3443119B2 (ja) 1989-08-07 2003-09-02 ペプテック リミテッド 腫瘍壊死因子結合リガンド
FR2651130B1 (fr) 1989-08-23 1991-12-13 Roussel Uclaf Sequence d'oligonucleotides anti-sens, anti-arn message du tnf alpha, procede de preparation, application a titre de medicaments et compositions pharmaceutiques.
GB8921123D0 (en) 1989-09-19 1989-11-08 Millar Ann B Treatment of ards
GB8928874D0 (en) 1989-12-21 1990-02-28 Celltech Ltd Humanised antibodies
US5859205A (en) 1989-12-21 1999-01-12 Celltech Limited Humanised antibodies
US6075181A (en) * 1990-01-12 2000-06-13 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
US5945098A (en) 1990-02-01 1999-08-31 Baxter International Inc. Stable intravenously-administrable immune globulin preparation
DE4037604A1 (de) 1990-04-25 1991-10-31 Bayer Ag Verwendung von anti-tnf-antikoerpern als arzneimittel bei der behandlung von ischaemien und deren folgen
US5427908A (en) 1990-05-01 1995-06-27 Affymax Technologies N.V. Recombinant library screening methods
GB9014932D0 (en) 1990-07-05 1990-08-22 Celltech Ltd Recombinant dna product and method
JPH06508511A (ja) 1990-07-10 1994-09-29 ケンブリッジ　アンティボディー　テクノロジー　リミティド 特異的な結合ペアーの構成員の製造方法
GB9015198D0 (en) 1990-07-10 1990-08-29 Brien Caroline J O Binding substance
CA2090401A1 (en) 1990-08-27 1992-02-28 Deborah A. Rathjen Method of treating viral infection
DE69129154T2 (de) 1990-12-03 1998-08-20 Genentech, Inc., South San Francisco, Calif. Verfahren zur anreicherung von proteinvarianten mit geänderten bindungseigenschaften
US5994510A (en) 1990-12-21 1999-11-30 Celltech Therapeutics Limited Recombinant antibodies specific for TNFα
GB9109645D0 (en) 1991-05-03 1991-06-26 Celltech Ltd Recombinant antibodies
GB2279077B (en) 1990-12-21 1995-06-14 Celltech Ltd Therapeutic compositions comprising recombinant antibodies specific for the TNFalpha
GB9028123D0 (en) 1990-12-28 1991-02-13 Erba Carlo Spa Monoclonal antibodies against human tumor necrosis factor alpha
DE69233769D1 (de) 1991-03-01 2009-09-24 Dyax Corp Chimäres Protein mit Mikroprotein mit zwei oder mehr Disulfidbindungen und Ausgestaltungen davon
DE69233069T2 (de) 1991-03-15 2003-11-27 Amgen Inc., Thousand Oaks Pegylation von polypeptiden
US6277969B1 (en) 1991-03-18 2001-08-21 New York University Anti-TNF antibodies and peptides of human tumor necrosis factor
US20060246073A1 (en) 1991-03-18 2006-11-02 Knight David M Anti-TNF antibodies and peptides of human tumor necrosis factor
US20040120952A1 (en) 2000-08-07 2004-06-24 Centocor, Inc Anti-TNF antibodies and peptides of human tumor necrosis factor
US5698195A (en) 1991-03-18 1997-12-16 New York University Medical Center Methods of treating rheumatoid arthritis using chimeric anti-TNF antibodies
EP1097945B1 (en) 1991-03-18 2007-07-04 New York University Monoclonal and chimeric antibody specific for human tumor necrosis factor
US20070298040A1 (en) 1991-03-18 2007-12-27 Centocor, Inc. Methods of treating seronegative arthropathy with anti-TNF antibodies
ATE171471T1 (de) 1991-03-29 1998-10-15 Immunex Corp Isolierte virale proteine als cytokinantagonisten
ATE414768T1 (de) 1991-04-10 2008-12-15 Scripps Research Inst Bibliotheken heterodimerer rezeptoren mittels phagemiden
EP0940468A1 (en) * 1991-06-14 1999-09-08 Genentech, Inc. Humanized antibody variable domain
DE4122599C2 (de) 1991-07-08 1993-11-11 Deutsches Krebsforsch Phagemid zum Screenen von Antikörpern
ATE181571T1 (de) 1991-09-23 1999-07-15 Medical Res Council Methoden zur herstellung humanisierter antikörper
AU3244693A (en) 1991-12-17 1993-07-19 Schering Corporation Use of the combination of anti-tumor necrosis factor plus interleukin-6 to treat septic shock
US5195967A (en) * 1992-02-18 1993-03-23 Nakao Naomi L Anticlotting device and method for use with IV catheters
US5605923A (en) 1992-04-02 1997-02-25 Smithkline Beecham Corporation Compounds useful for treating inflammatory diseases and inhibiting production of tumor necrosis factor
EP0585705B1 (en) 1992-08-28 1998-11-04 Bayer Corporation Use of monoclonal antibodies to TNF to treat bacterial meningitis
JPH07504203A (ja) 1992-09-15 1995-05-11 イミュネックス・コーポレーション 腫瘍壊死因子アンタゴニストを用いるｔｎｆ−依存性炎症の治療方法
US6270766B1 (en) 1992-10-08 2001-08-07 The Kennedy Institute Of Rheumatology Anti-TNF antibodies and methotrexate in the treatment of arthritis and crohn's disease
WO1994008609A1 (en) 1992-10-15 1994-04-28 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. TREATMENT OF INSULIN RESISTANCE IN OBESITY LINKED TYPE II DIABETES USING ANTAGONISTS TO TNF-α FUNCTION
DE69427928T3 (de) 1993-03-05 2012-05-10 Bayer Healthcare Llc Humane monoklonale anti-TNF alpha Antikörper
DE4307508A1 (de) 1993-03-10 1994-09-15 Knoll Ag Verwendung von anti-TNF-Antikörpern als Arzneimittel bei der Behandlung von Herzinsuffizienz (Herzmuskelschwäche)
ATE183513T1 (de) 1993-06-03 1999-09-15 Therapeutic Antibodies Inc Herstellung von antikörperfragmenten
US5500227A (en) 1993-11-23 1996-03-19 Euro-Celtique, S.A. Immediate release tablet cores of insoluble drugs having sustained-release coating
EP0659766A1 (en) 1993-11-23 1995-06-28 Schering-Plough Human monoclonal antibodies against human cytokines and methods of making and using such antibodies
NZ278607A (en) 1994-02-07 1999-05-28 Knoll Ag Use of tnf antagonists for treating disorders involving elevated serum levels of il-6 wherein the serum levels are 500pg/ml or above
WO1995023813A1 (en) 1994-03-04 1995-09-08 Merck & Co., Inc. In vitro antibody affinity maturation using alanine scanning mutagenesis
ZA955642B (en) 1994-07-07 1997-05-06 Ortho Pharma Corp Lyophilized imaging agent formulation
PT1516628E (pt) 1995-07-27 2013-09-24 Genentech Inc Formulação de proteína liofilizada isotónica estável
US6267958B1 (en) * 1995-07-27 2001-07-31 Genentech, Inc. Protein formulation
US6090382A (en) 1996-02-09 2000-07-18 Basf Aktiengesellschaft Human antibodies that bind human TNFα
DE122004000004I1 (de) * 1996-02-09 2004-08-12 Abott Biotechnology Ltd Humane Antikörper welche an Humanen TNFalpha binden.
GB9610992D0 (en) * 1996-05-24 1996-07-31 Glaxo Group Ltd Concentrated antibody preparation
JP2000516594A (ja) 1996-07-26 2000-12-12 スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション 免疫細胞介在全身性疾患の改良された治療法
DK0999853T3 (da) 1997-06-13 2003-04-22 Genentech Inc Stabiliseret antostofformulering
US6171586B1 (en) 1997-06-13 2001-01-09 Genentech, Inc. Antibody formulation
US5971953A (en) * 1998-01-09 1999-10-26 Bachynsky; Nicholas Dual chamber syringe apparatus
TR200103054T2 (tr) 1998-06-15 2002-06-21 Sepracor Inc. Apne,bulimi ve başka bozuklukların tedavi edilmesi için optik açıdan saf (+)-norsisapridin kullanımı
JP3889197B2 (ja) * 1999-02-22 2007-03-07 中外製薬株式会社 プランジャロッド付きシリンジ製剤の製造方法及びその組付装置
US6419944B2 (en) 1999-02-24 2002-07-16 Edward L. Tobinick Cytokine antagonists for the treatment of localized disorders
US6537549B2 (en) 1999-02-24 2003-03-25 Edward L. Tobinick Cytokine antagonists for the treatment of localized disorders
US6015557A (en) 1999-02-24 2000-01-18 Tobinick; Edward L. Tumor necrosis factor antagonists for the treatment of neurological disorders
US6423321B2 (en) 1999-02-24 2002-07-23 Edward L. Tobinick Cytokine antagonists for the treatment of sensorineural hearing loss
AU756677B2 (en) 1999-03-02 2003-01-23 Centocor Inc. Anti-TNFalpha antibodies in therapy of asthma
EP1041072B1 (en) 1999-03-31 2003-07-16 Pfizer Products Inc. Dioxocyclopentyl hydroxamic acids
SE9901366D0 (sv) * 1999-04-16 1999-04-16 Pharmacia & Upjohn Ab Injector device and method for its operation
CA2371427A1 (en) 1999-04-28 2000-11-09 Yamanouchi Pharmaceutical Co., Ltd. Parenteral pharmaceutical composition containing humanized monoclonal antibody fragment and stabilizing method thereof
US6502867B2 (en) 1999-06-16 2003-01-07 United States Pipe & Foundry Flanged pipe fitting
EP1189628A1 (en) 1999-06-24 2002-03-27 Pharmacia Corporation Combination of tumor necrosis factor (tnf) antagonists and cox-2 inhibitors for the treatment of inflammation
ATE389414T1 (de) * 1999-09-08 2008-04-15 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Stabile proteinlösung abgefüllt in einem behältnis aus hydrophobem harz und eine methode zur stabilisierung derselben
AU3082401A (en) 1999-11-24 2001-06-04 Centocor Inc. Therapy of psoriasis
WO2001047554A1 (fr) 1999-12-28 2001-07-05 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Compositions d'anticorps stables et preparations pour injection
GB0013810D0 (en) 2000-06-06 2000-07-26 Celltech Chiroscience Ltd Biological products
US20050249735A1 (en) 2000-08-07 2005-11-10 Centocor, Inc. Methods of treating ankylosing spondylitis using anti-TNF antibodies and peptides of human tumor necrosis factor
US20060018907A1 (en) 2000-08-07 2006-01-26 Centocor, Inc. Anti-TNF antibodies and peptides of human tumor necrosis factor
UA81743C2 (uk) 2000-08-07 2008-02-11 Центокор, Инк. МОНОКЛОНАЛЬНЕ АНТИТІЛО ЛЮДИНИ, ЩО СПЕЦИФІЧНО ЗВ'ЯЗУЄТЬСЯ З ФАКТОРОМ НЕКРОЗУ ПУХЛИН АЛЬФА (ФНПα), ФАРМАЦЕВТИЧНА КОМПОЗИЦІЯ, ЩО ЙОГО МІСТИТЬ, ТА СПОСІБ ЛІКУВАННЯ РЕВМАТОЇДНОГО АРТРИТУ
US20030012786A1 (en) 2001-05-25 2003-01-16 Teoh Leah S. Use of anti-TNF antibodies as drugs in treating septic disorders of anemic patients
CA2385745C (en) 2001-06-08 2015-02-17 Abbott Laboratories (Bermuda) Ltd. Methods of administering anti-tnf.alpha. antibodies
PL217752B1 (pl) * 2001-08-23 2014-08-29 Genmab As Izolowane ludzkie przeciwciało monoklonalne wobec IL-15 lub jego fragment wiążący antygen i związane z nimi hybrydoma, kompozycja farmaceutyczna oraz zastosowania medyczne
US20030161828A1 (en) 2002-02-19 2003-08-28 Abbott Gmbh & Co. Kg Use of TNF antagonists as drugs for the treatment of patients with an inflammatory reaction and without suffering from total organ failure
CN1305905C (zh) 2002-03-22 2007-03-21 Aprogen株式会社 人源化抗体及其制备方法
US20040009172A1 (en) 2002-04-26 2004-01-15 Steven Fischkoff Use of anti-TNFalpha antibodies and another drug
AR040603A1 (es) 2002-07-19 2005-04-13 Abbott Lab S A El uso de un anticuerpo anti-tnfalfa neutralizador de alta afinidad en la fabricacion de un medicamento y conjunto de elementos
US20090280065A1 (en) 2006-04-10 2009-11-12 Willian Mary K Uses and Compositions for Treatment of Psoriasis
US7226426B2 (en) 2002-07-25 2007-06-05 Thomson Paul E Apparatus and method for the detection and quantification of joint and tissue inflammation
US20040033228A1 (en) 2002-08-16 2004-02-19 Hans-Juergen Krause Formulation of human antibodies for treating TNF-alpha associated disorders
MY150740A (en) 2002-10-24 2014-02-28 Abbvie Biotechnology Ltd Low dose methods for treating disorders in which tnf? activity is detrimental
TWI439284B (zh) 2004-04-09 2014-06-01 Abbvie Biotechnology Ltd 用於治療ＴＮＦα相關失調症之多重可變劑量療法
EP1807111A4 (en) 2004-10-08 2009-05-27 Abbott Biotech Ltd SYNCYTIAL RESPIRATORY VIRUS INFECTION (RSV)
AU2006246721B2 (en) 2005-05-16 2012-12-13 Abbvie Biotechnology Ltd Use of TNF inhibitor for treatment of erosive polyarthritis
US20070041905A1 (en) 2005-08-19 2007-02-22 Hoffman Rebecca S Method of treating depression using a TNF-alpha antibody
CA2626804A1 (en) 2005-11-01 2007-08-09 Abbott Biotechnology Ltd. Methods and compositions for diagnosing ankylosing spondylitis using biomarkers
MX2008012896A (es) 2006-04-05 2008-10-14 Abbott Biotech Ltd Purificacion de anticuerpos.
US9605064B2 (en) 2006-04-10 2017-03-28 Abbvie Biotechnology Ltd Methods and compositions for treatment of skin disorders
CN103316402A (zh) 2006-06-30 2013-09-25 艾伯维生物技术有限公司 自动注射装置
NZ576133A (en) 2006-10-27 2012-10-26 Abbott Biotech Ltd Crystalline anti-htnfalpha antibodies
WO2009020654A1 (en) 2007-08-08 2009-02-12 Abbott Laboratories Compositions and methods for crystallizing antibodies
WO2014152463A1 (en) 2013-03-15 2014-09-25 Cyberheart, Inc. Apparatus and method for real-time tracking of tissue structures
CN102458517B (zh) 2009-04-29 2014-07-23 阿布维生物技术有限公司 自动注射装置
RU2560701C2 (ru) 2009-05-04 2015-08-20 Эббви Байотекнолоджи Лтд. Стабильные композиции с высокими концентрациями белков антител человека против tnf-альфа
CN102167741B (zh) 2010-02-25 2014-05-14 上海百迈博制药有限公司 一种全人源抗TNF-α单克隆抗体、其制备方法及用途
HUE039740T2 (hu) 2010-06-03 2019-01-28 Abbvie Biotechnology Ltd Alkalmazások és készítmények hidradenitis suppurativa (HS) kezelésére
GB201112429D0 (en) 2011-07-19 2011-08-31 Glaxo Group Ltd Antigen-binding proteins with increased FcRn binding
JP6274421B2 (ja) 2013-03-22 2018-02-07 キヤノンメディカルシステムズ株式会社 超音波診断装置及びその制御プログラム
KR102197477B1 (ko) 2014-07-04 2020-12-31 주식회사 유풍 모자

Also Published As

Publication number Publication date
EP1406656B1 (en) 2013-01-09
EP2940044B8 (en) 2017-01-18
NO20035426L (no) 2004-02-03
US20130004507A1 (en) 2013-01-03
HK1065471A1 (en) 2005-02-25
HUP0600688A3 (en) 2012-09-28
IL222495A (en) 2015-03-31
EP1406656A2 (en) 2004-04-14
EP2324851A1 (en) 2011-05-25
CN105412922A (zh) 2016-03-23
US20150071945A1 (en) 2015-03-12
MXPA03011316A (es) 2004-12-06
US20150175691A1 (en) 2015-06-25
KR101282807B1 (ko) 2013-07-05
BG111719A (bg) 2014-06-30
NZ560792A (en) 2009-09-25
PL394085A1 (pl) 2011-07-04
IL212419A (en) 2015-03-31
US8911737B2 (en) 2014-12-16
PH12013500866B1 (en) 2016-02-22
US20120177596A1 (en) 2012-07-12
EP2940044A1 (en) 2015-11-04
KR101715028B1 (ko) 2017-03-10
CA2385745C (en) 2015-02-17
US20150023982A1 (en) 2015-01-22
AR034429A1 (es) 2004-02-25
IL212419A0 (en) 2011-06-30
KR101142825B1 (ko) 2012-05-08
CA2385745A1 (en) 2002-12-08
CA2868614A1 (en) 2002-12-08
TWI473622B (zh) 2015-02-21
CA2817619A1 (en) 2002-12-08
BG108514A (bg) 2005-04-30
ES2612436T3 (es) 2017-05-16
PL399491A1 (pl) 2012-10-08
US20150246968A1 (en) 2015-09-03
NO334490B1 (no) 2014-03-17
EP2940044B1 (en) 2016-11-16
PL399548A1 (pl) 2012-11-05
TW201332570A (zh) 2013-08-16
PL217217B1 (pl) 2014-06-30
SA02230384B1 (ar) 2009-08-19
US9546212B2 (en) 2017-01-17
US20200181252A1 (en) 2020-06-11
US9073987B2 (en) 2015-07-07
PT2940044T (pt) 2017-01-12
KR20090035746A (ko) 2009-04-10
SK288509B6 (sk) 2017-11-03
AU2002314922B2 (en) 2008-05-15
SI2940044T1 (sl) 2017-03-31
PH12013500865B1 (en) 2018-06-27
US20140271637A1 (en) 2014-09-18
US20150017175A1 (en) 2015-01-15
PH12013500865A1 (en) 2016-02-01
PL217666B1 (pl) 2014-08-29
NO20035426D0 (no) 2003-12-05
US8992926B2 (en) 2015-03-31
EP2364731A9 (en) 2012-06-20
PL217702B1 (pl) 2014-08-29
KR101497363B1 (ko) 2015-03-03
PH12013500866A1 (en) 2016-02-22
US8889135B2 (en) 2014-11-18
BR0206289A (pt) 2004-11-30
EP2359855A2 (en) 2011-08-24
US20150079101A1 (en) 2015-03-19
SI1406656T1 (sl) 2013-04-30
AR090099A2 (es) 2014-10-22
NO20120288L (no) 2004-02-03
NZ596878A (en) 2013-07-26
CY1120540T1 (el) 2019-07-10
AR077572A2 (es) 2011-09-07
JP2012184242A (ja) 2012-09-27
JP2005517629A (ja) 2005-06-16
JP2009167193A (ja) 2009-07-30
CN101574520A (zh) 2009-11-11
NZ586063A (en) 2012-02-24
CN103110944A (zh) 2013-05-22
NZ529574A (en) 2006-05-26
MX341001B (es) 2016-08-03
LT2940044T (lt) 2017-01-10
KR20040030661A (ko) 2004-04-09
US20140186368A1 (en) 2014-07-03
BG66459B1 (bg) 2014-10-31
KR20080089681A (ko) 2008-10-07
PH12013500297A1 (en) 2015-09-07
ES2400458T3 (es) 2013-04-10
JP6302529B2 (ja) 2018-03-28
EP2364731A3 (en) 2011-11-02
EP2364731A2 (en) 2011-09-14
DK2940044T3 (en) 2017-02-20
JP5832952B2 (ja) 2015-12-16
KR20100075698A (ko) 2010-07-02
AU2002314922C1 (en) 2017-11-09
HU230947B1 (hu) 2019-05-28
CN103495165A (zh) 2014-01-08
WO2002100330A9 (en) 2007-06-21
EP3190124A1 (en) 2017-07-12
ZA200308861B (en) 2004-09-13
JP2015003922A (ja) 2015-01-08
EP2359855A9 (en) 2012-06-20
CN1638796A (zh) 2005-07-13
NO343721B1 (no) 2019-05-20
NZ545649A (en) 2009-04-30
US9017680B2 (en) 2015-04-28
KR20140012210A (ko) 2014-01-29
PT1406656E (pt) 2013-03-25
JP2013100311A (ja) 2013-05-23
PE20030065A1 (es) 2003-02-12
PE20160999A1 (es) 2016-10-08
US8974790B2 (en) 2015-03-10
IL158831A (en) 2014-06-30
US20150071939A1 (en) 2015-03-12
PL366694A1 (en) 2005-02-07
JP6074462B2 (ja) 2017-02-01
CL2012000856A1 (es) 2012-09-14
JP2015166389A (ja) 2015-09-24
EP2359855A3 (en) 2011-11-02
WO2002100330A2 (en) 2002-12-19
US20030235585A1 (en) 2003-12-25
HUP0600688A2 (en) 2006-11-28
CZ200420A3 (cs) 2005-01-12
ECSP034867A (es) 2004-01-28
CZ309160B6 (cs) 2022-03-30
US20140322232A1 (en) 2014-10-30
SK16462003A3 (sk) 2004-08-03
WO2002100330A3 (en) 2004-02-12
KR20120139851A (ko) 2012-12-27
KR20110039505A (ko) 2011-04-18
US20160280777A1 (en) 2016-09-29
DK1406656T3 (da) 2013-04-15
PL215861B1 (pl) 2014-02-28
JP2017031213A (ja) 2017-02-09
IL158831A0 (en) 2004-05-12
EP1406656A4 (en) 2006-05-24
NZ573478A (en) 2011-02-25
US20150165023A1 (en) 2015-06-18
KR20160096222A (ko) 2016-08-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US8911737B2 (en) Methods of administering anti-TNFα antibodies
AU2013204359B2 (en) Methods of administering anti-TNFalpha antibodies
AU2012209040B2 (en) Methods of administering anti-TNFalpha antibodies
AU2008202001A1 (en) Methods of administering anti-TNFalpha antibodies
HK1065471B (en) Methods of administering anti-tnf-alpha antibodies
HK1161103A (en) Methods of administering anti-tnfalpha antibodies