CZ200420A3 - Způsoby podávání anti-TNF alfa protilátek - Google Patents

Způsoby podávání anti-TNF alfa protilátek Download PDF

Info

Publication number
CZ200420A3
CZ200420A3 CZ200420A CZ200420A CZ200420A3 CZ 200420 A3 CZ200420 A3 CZ 200420A3 CZ 200420 A CZ200420 A CZ 200420A CZ 200420 A CZ200420 A CZ 200420A CZ 200420 A3 CZ200420 A3 CZ 200420A3
Authority
CZ
Czechia
Prior art keywords
antibody
seq
human
tnfα
antigen
Prior art date
Application number
CZ200420A
Other languages
English (en)
Other versions
CZ309160B6 (cs
Inventor
Joachim Kempeni
Roberta Weiss
Steven A. Fischkoff
Original Assignee
Abbott Biotechnology Ltd.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=23144283&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=CZ200420(A3) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Abbott Biotechnology Ltd. filed Critical Abbott Biotechnology Ltd.
Publication of CZ200420A3 publication Critical patent/CZ200420A3/cs
Publication of CZ309160B6 publication Critical patent/CZ309160B6/cs

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/3955—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against proteinaceous materials, e.g. enzymes, hormones, lymphokines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61M—DEVICES FOR INTRODUCING MEDIA INTO, OR ONTO, THE BODY; DEVICES FOR TRANSDUCING BODY MEDIA OR FOR TAKING MEDIA FROM THE BODY; DEVICES FOR PRODUCING OR ENDING SLEEP OR STUPOR
    • A61M5/00—Devices for bringing media into the body in a subcutaneous, intra-vascular or intramuscular way; Accessories therefor, e.g. filling or cleaning devices, arm-rests
    • A61M5/178—Syringes
    • A61M5/28—Syringe ampoules or carpules, i.e. ampoules or carpules provided with a needle
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/02—Drugs for dermatological disorders for treating wounds, ulcers, burns, scars, keloids, or the like
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/06—Antigout agents, e.g. antihyperuricemic or uricosuric agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/08—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease
    • A61P19/10—Drugs for skeletal disorders for bone diseases, e.g. rachitism, Paget's disease for osteoporosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/02—Ophthalmic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A61P29/02—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID] without antiinflammatory effect
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/14—Antivirals for RNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/06—Immunosuppressants, e.g. drugs for graft rejection
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P41/00—Drugs used in surgical methods, e.g. surgery adjuvants for preventing adhesion or for vitreum substitution
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P7/00—Drugs for disorders of the blood or the extracellular fluid
    • A61P7/04—Antihaemorrhagics; Procoagulants; Haemostatic agents; Antifibrinolytic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/24—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C07K16/24—Immunoglobulins [IG], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans against cytokines, lymphokines or interferons
    • C07K16/241—Tumor Necrosis Factors
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/54—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the route of administration
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/545—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the dose, timing or administration schedule
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/21—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin from primates, e.g. man
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/52—Constant or Fc region; Isotype
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/56—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments variable (Fv) region, i.e. VH and/or VL
    • C07K2317/565—Complementarity determining region [CDR]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/70—Immunoglobulins specific features characterized by effect upon binding to a cell or to an antigen
    • C07K2317/76—Antagonist effect on antigen, e.g. neutralization or inhibition of binding
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)

Description

f • · • · ·· ····
Způsoby podávání anti-TNFa protilátek 'Jí/ olOQY^tW
Dosavadní stav techniky α-Faktor nekrotizující tumor (TNFa) je cytokinem produkovaným četnými buněčnými typy včetně monocytů a makrofágů, jak bylo původně zjištěno na základě jeho schopnosti indukovat nekrózu určitých myších tumorů [viz např. Old L., Science 230, 630-632 (1985)]. Na to bylo prokázáno, že faktor označovaný kachektin, spojený s kachexií, je stejnou molekulou jako TNFa. TNFa byl zahrnut mezi mediátory šoku [viz např. Beutler B. a Cerami A., Annu. Rev. Biochem. 57, 505-518 (1988); Beutler B. a Cerami A., Annu. Rev. Immunol. 7, 625-655 (1989)]. Navíc dále byl TNFa implikován do patofysiologie řady jiných lidských onemocnění a poruch, včetně sepse, infekcí, autoimunitních chorob, odmítání transplantátu, chorob štěp-verzus-hostitel [viz např. Vasilli P., Annu. Rev. Immunol. 10, 411-452 (1992); Tracey K. J. a Cerami A., Annu. Rev. Med. 45, 491-503 (1994)].
Vzhledem ke škodlivé úloze lidského TNFa (hTNFa) při různých lidských chorobách byly navrhovány terapeutické strategie pro inhibici nebo paralyzování aktivity hTNFa. Za prostředek pro inhibici aktivity hTNFa byly považovány zvláště protilátky, které se váží a neutralizují hTNFa. Některé z nejdřívějších takových protilátek byly monoklonální myší protilátky (mAbs), vylučované hybridomy připravenými z lymfocytů myší imunizovaných hTNFa [ viz např. Hahn T. a spol., Proč. Nati. Akad. Sci. U.S.A. 82, 3814-3818 (1985); Liang C-M. a spol., Biochem. Biophys. Res. Commun. 137, 847-854 (1986); Hirai M. a spol., J. Immunol. Methods 96, 57-62 (1987); Fendly B. M. a spol., Hybridoma 6, 359-370 (1987); Moeller A. a spol., Cytokine 2, 162-169 (1990); U. S. patent 5,231,024 pro Moellera a spol.; Wallach D., Evropský patent 186 833 B1; Old a spol., Evropská patentová přihláška 218 868 A1; Moeller A. a spol., Evropský patent 260 610 B1). I když tyto myší anti-hTNFa protilátky často projevují vysokou afinitu vůči hTNFa (např. Kd ^ 10*9 M) a byly schopny neutralizovat aktivitu hTNFa, může být jejich užití in vivo limitováno problémy spojenými s podáváním myších protilátek lidem, jako je krátký poločas séra, neschopnost spouštět určité funkce lidského efektoru a vyvolávání nežádoucí imunitní odezvy proti myší protilátce v lidech [reakce "human anti-mouse antibody" (HAMA)].
Ve snaze překonat problémy spojené s užíváním čistě myších protilátek u lidí byly pomocí genetického inženýrství upravovány myší anti-hTNFa protilátky tak, aby se staly "lidem podobnější". Byly připraveny například chimerové protilátky, ve kterých variabilní oblasti řetězce protilátky pocházejí z myší a konstantní oblasti řetězce protilátky pocházejí z lidí [ Knight D. M. a spol., Mol. Immunol. 30, 1443-1453 (1993); Daddona P. E. a spol., PCT publikace č. WO 92/16553]. Vedle toho byly rovněž připraveny humanizované protilátky, ve kterých hypervariabilní domény protilátky pocházejí z myší, ale zbytek variabilních oblastí a konstantní oblasti protilátky pocházejí z lidí (Adair J. R. a spol., PCT publikace č. WO 92/11383). Avšak protože v těchto chimerových a humanizovaných protilátkách zůstávají ještě určité myší sekvence, mohou stále, zejména pokud jsou dlouhodobě podávány, vyvolávat nežádoucí imunitní reakci, reakci lidské antichimerové protilátky (HACA), např. u chronických indikací jako je reumatoidní artritida [např. Elliott M. J. a spol., Lancet 344, 1125-1127 (1994); Elliott M. J. a spol., Lancet 344,1105-1110 (1994)].
Preferovaným hTNFa inhibičním činidlem vůči myší mAbs nebo jejím derivátům (např. chimerovým nebo humanizovaným protilátkám) by byla zcela lidská anti-hTNFa protilátka, protože takové činidlo by nevyvolávalo HAMA reakci, i když bude dlouhodobě používáno. Lidské monoklonální auto-protilátky proti hTNFa byly připraveny při použití techniky hybridomu [Boyle P. a spol., Cell. Immunol. 152, 556-568 (1993); Boyle P. a spol., Cell. Immunol. 152, 569-581 (1993); Boyle P. a spol., Evropská patentová přihláška č. 614 984 A2]. Avšak tyto z hybridomu pocházející monoklonální protilátky, u nichž bylo popsáno, že mají afinitu pro hTNFa, která byla příliš nízká pro vypočtení konvenčními metodami, nebyly schopné vázat rozpustnou hTNFa a nebyly schopné neutralizovat cytotoxicitu indukovanou hTNFa (viz Boyle a spol. shora). Navíc úspěch techniky lidského hybridomu závisí na přirozené přítomnosti lymfocytů, produkujících v lidském krevním oběhu auto-protilátky specifické pro hTNFa. Určité studie zjistily u lidských subjektů v séru auto-protilátky proti hTNFa [Fomsgaard A. a spol., Scand. J. Immunol. 30, 219-223 (1989); Bendtzen K. a spol., Prog. Leukocyte Biol. 10B, 447-452(1990)], zatímco jiné nikoliv (Leusch H-G. a spol., J. Immunol. Methods 139, 145-147 (1991)].
Alternativou k přirozeně se vyskytujícím lidským anti-hTNFa protilátkám by byla rekombinantní hTNFa protilátka. Byly popsány rekombinantní lidské protilátky, které vážou hTNFa s relativně nízkou afinitou (tj. Kd ~ 10'7 M) a rychlým stupněm zániku (tj. Koff - 10‘2 s1) [Griffiths A. D. a spol., EMBO J. 12, 725-734 (1993)]. Avšak tyto protilátky nemohou být vhodné pro terapeutické použití vzhledem k jejich relativně rychlé kinetice disociace. Vedle toho byla popsána lidská rekombinantní anti-hTNFa, která neneutralizuje hTNFa aktivitu, nýbrž spíše zvyšuje vázání hTNFa na povrch buněk a zvyšuje internalizaci hTNFa [Lidbury A., a spol., Biotechnol. Ther. 5, 27-45 (1994); Aston R. a spol., PCT publikace č. WO 92/03145].
Rekombinantní lidské protilátky, které vážou rozpustnou hTNFa s vysokou afinitou a pomalou kinetikou disociace, a které mají schopnost neutralizovat hTNFa aktivitu včetně hTNFa indukované cytotoxicity (in vitro a in vivo) a hTNFa indukované aktivace buněk, byly popsány rovněž (viz U. S. patent č. 6,090,382). Typické postupy pro podávání protilátek byly uskutečněny intravenozně v týdenním cyklu. Týdenní dávkování antilátek a/nebo léčiva může být nákladné, nepohodlné a díky frekvenci podávání má za následek vzrůst počtu vedlejších účinků. Intravenozní administrace má rovněž své meze v tom, že administrace je obvykle prováděna někým, kdo je zdravotnicky vyškolen.
Podstata vynálezu Předložený vynález poskytuje způsoby pro čtrnáctidenní režimy dávkování při léčení s TNFa spojených chorob, přednostně subkutánní cestou. Čtrnáctidenní dávkování má před týdenním dávkováním mnoho výhod včetně, ale ne jenom, menšího počtu celkových injekcí, sníženého počtu reakcí v místě (lokání bolest a otok), zvýšení pacientovy pohody (tj. díky menší frekvenci injekcí) a menších nákladů na pacienta právě tak jako na poskytovatele zdravotní péče. Subkutánní dávkování je výhodné, protože pacient si může terapeutickou substanci, např. lidskou TNFa protilátku, podávat sám, což vyhovuje oběma, jak pacientovi tak poskytovateli zdravotní péče.
Vynález poskytuje způsoby pro ošetřování chorob, při kterých aktivita TNFa škodí. Způsoby zahrnují čtrnáctidenní subkutánní injekce protilátek subjektu. Protilátkami jsou přednostně rekombinantní lidské protilátky, které se vážou na lidský TNFa. Tento vynález dále poskytuje způsoby pro léčení chorob, při kterých je aktivita TNFa škodlivá. Tyto způsoby zahrnují využití kombinované terapie, při níž se lidské protilátky podávají subjektu spolu s jiným terapeutickým prostředkem, jako je ·· ···♦ ·· · · · · · • · · ···· · · · ··· · · · ···· • · « · · · I ♦ · · · · · 4······· · · · ·· · · ·· MM ·· · například jedna nebo více dalších protilátek, které se vážou na jiné cíle (např. protilátky, které se vážou s jinými cytokiny, nebo které se vážou na molekuly buněčného povrchu), jeden nebo více cytokinů, rozpustný TNFa receptor (viz např. PCT publikaci č. WO 94/06476) a/nebo jedno či více chemických činidel, která inhibují produkci nebo aktivitu hTNFa (jako cyklohexanyliden deriváty, jak je popsáno v PCT publikaci č. WO 93/19751), nejlépe methotrexat. Protilátkami jsou především rekombinantní lidské protilátky, které se specificky vážou na lidský TNFa. Protilátky podle vynálezu jsou charakterizovány vazbou na hTNFa s vysokou afinitou a pomalou kinetikou disociace a neutralizováním hTNFa aktivity, včetně cytotoxicity indukované hTNFa (in vitro a in vivo) a hTNFa indukované buněčné aktivace. Protilátky mohou mít celou délku (např. protilátka lgG1 nebo lgG4) nebo mohou obsahovat pouze část vázající se na antigen [např. fragment Fab, F(ab')2, scFv nebo jednotlivá doména]. Nejvíce preferovaná rekombinantní protilátka podle vynálezu, označovaná D2E7, má CDR3 doménu lehkého řetězce, obsahující sekvenci aminokyselin SEQ ID NO: 3 a CDR3 doménu těžkého řetězce, obsahující sekvenci aminokyselin SEQ ID NO: 4 (uvedeny dále v příloze B). Přednostně má D2E7 variabilní oblast lehkého řetězce (LCVR) obsahující sekvenci aminokyselin SEQ ID NO: 1 a variabilní oblast těžkého řetězce (HCVR) obsahující sekvenci aminokyselin SEQ ID NO: 2. Tyto protilátky jsou popsány v U. S. patentu č. 6,090,382, na který se kompletně odkazuje. Při jednom provedení poskytuje vynález způsoby pro ošetřování chorob, u kterých aktivita TNFa škodí. Tyto způsoby zahrnují inhibici TNFa aktivity subkutánním, čtrnáctidenním podáváním anti-TNFa protilátky, takže dochází k léčení choroby. Chorobou může být na příklad sepse, autoimunitní nemoc (např. reumatoidní arthritida, alergie, roztroušená skleróza, autoimunitní diabetes, autoimunitní uveitis a nefrotický syndrom), infekční choroba, zhoubný nádor, odmítání transplantátu nebo nemoc štěp-verzus-hostitel, plicní choroba, onemocnění kostí, střevní choroba nebo srdeční choroba. Při jiném provedení poskytuje vynález způsoby pro ošetřování chorob, u kterých aktivita TNFa škodí. Tyto způsoby zahrnují inhibici aktivity TNFa subkutánním, čtrnáctidenním podáváním anti-TNFa protilátky a methotrexatu, takže dochází k léčení choroby. Podle jednoho hlediska je methotrexat podáván spolu s anti-TNFa protilátkou. Podle jiného hlediska je methotrexat podáván před podáním • · · · · · • · · · · · • · • · · • ···· • · · · · ♦ · • · • · β · · · • · · · * · · Γ ······· Q ···· ······ anti-TNFa protilátky. Podle ještě dalšího hlediska je methotrexat podáván po podání anti-TNFa protilátky. Při preferovaném provedení je anti-TNFa protilátka, užitá pro ošetřování chorob, u kterých aktivita TNFa škodí, lidskou anti-TNFa protilátkou. Vhodněji probíhá léčení právě pomocí čtrnáctidenní subkutánní administrace izolované lidské protilátky nebo její části, která se váže na antigen. Protilátka nebo její část, která se váže na antigen, přednostně disociuje z lidského TNFa s Kd 1 x 10'8M nebo méně a K0ff rychlostní konstantou 1 x 10'3 s"1 nebo méně, obojí stanoveno rezonancí povrchových plazmonů, a neutralizuje cytotoxicitu lidské TNFa při standardním L929 testu in vitro s IC5o 1 x 10’7 M nebo méně. Vhodněji izolovaná lidská protilátka nebo její část, která se váže na antigen, disociuje z lidského TNFa s K0ff 5 x 10-4 s'1 nebo méně, nebo ještě vhodněji s K0ff 1 x 10"4 s'1 nebo méně. Izolovaná lidská protilátka nebo její část, která se váže na antigen, přednostně neutralizuje cytotoxicitu lidské TNFa při standardním L929 testu in vitro s IC5o 1 x 10'8 M nebo méně, ještě vhodněji s IC501 x 10'9 M nebo méně a ještě nejvhodněji s IC501 x 10'10 M nebo méně. Při dalším provedení poskytuje vynález způsoby pro ošetřování chorob, u kterých aktivita TNFa škodí, tak, že se subjektu čtrnáctidenně subkutánně podává lidská protilátka nebo její část, která se váže na antigen. Lidská protilátka nebo její část, která se váže na antigen, má nejvhodněji následující charakteristiku: a) disociuje z lidského TNFa s K0ff rychlostní konstantou 1 x 10'3 s'1 nebo méně, jak bylo stanoveno rezonancí povrchových plazmonů; b) má CDR3 doménu lehkého řetězce obsahující sekvenci aminokyselin SEQ ID NO: 3, nebo modifikovanou z SEQ ID NO: 3 jednotlivou substitucí alaninem v poloze 1, 4, 5, 7 nebo 8 nebo jednou až pěti konzervativními substitucemi aminokyselin v polohách 1,3,4, 6, 7, 8 a/nebo 9; c) má CDR3 doménu těžkého řetězce obsahující sekvenci aminokyselin SEQ ID NO: 4, nebo modifikovanou z SEQ ID NO: 4 jednotlivou substitucí alaninem v poloze 2, 3, 4, 5, 6, 8, 9, 10 nebo 11 nebo jednou až pěti konzervativními substitucemi aminokyselin v polohách 2, 3,4, 5, 6, 8, 9,10,11 a/nebo 12.
Vhodněji protilátka nebo její část, která se váže na antigen, disociuje z lidského TNFa s K0tt 5 x 10'4 s'1 nebo méně. Ještě vhodněji protilátka nebo její část, která se váže na antigen, disociuje z lidského TNFa s K0ff 1 x 10"4 s'1 nebo méně.
Vynález způsoby poskytuje pro ošetřování chorob, u kterých aktivita TNFa škodí ještě při jiném provedení. Tyto metody u subjektu zahrnují čtrnáctidenní subkutánní podávání lidské protilátky nebo její části, která se váže na antigen. Protilátka nebo její část, která se váže na antigen obsahuje přednostně LCVR mající CDR3 doménu obsahující sekvenci aminokyselin SEQ ID NO: 3, nebo modifikovanou z SEQ ID NO: 3 jednotlivou substitucí alaninem v poloze 1, 4, 5, 7 nebo 8 a s HCVR mající CDR3 doménu obsahující sekvenci aminokyselin SEQ ID NO: 4, nebo modifikovanou z SEQ ID NO: 4 jednotlivou substitucí alaninem v poloze 2, 3, 4, 5, 6, 8, 9, 10 nebo 11. Přednostněji má LCVR dále doménu CDR2 obsahující sekvenci aminokyselin SEQ ID NO: 5 a HCVR dále má doménu CDR2 obsahující sekvenci aminokyselin SEQ ID NO: 6. Ještě preferovaněji má LCVR dále doménu CDR1 obsahující sekvenci aminokyselin SEQ ID NO: 7 a HCVR má doménu CDR1 obsahující sekvenci aminokyselin SEQ ID NO: 8. Při dalším provedení poskytuje ještě vynález způsoby pro ošetřování chorob, u kterých aktivita TNFa škodí, tak, že se subjektu čtrnáctidenně subkutánně podává izolovaná lidská protilátka nebo její část, která se váže na antigen. Protilátka nebo její část, která se váže na antigen, obsahuje LCVR zahrnující sekvenci aminokyselin SEQ ID NO: 1 a HCVR zahrnuje sekvenci aminokyselin SEQ ID NO: 2. Při určitých provedeních má protilátka konstantní oblast těžkého řetězce lgG1 nebo konstantní oblast těžkého řetězce lgG4. U jiných provedení je protilátkou Fab fragment, F(ab')2 fragment nebo fragment jednotlivého Fv řetězce. Při jiných provedeních poskytuje vynález ještě způsoby pro ošetřování chorob, při kterých administrace anti-TNFa protilátky je prospěšná subjektu při čtrnáctidenním subkutánním podávání jedné nebo více anti-TNFa protilátek nebo jejich částí, které se vážou na antigen. Protilátky nebo jejich části, které se vážou na antigen preferenčně obsahují LCVR mající CDR3 doménu obsahující sekvenci aminokyselin zvolenou ze skupiny, která sestává z SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 25, SEQ ID NO: 26
nebo s HCVR mající CDR3 doménu obsahující sekvenci aminokyselin zvolenou ze skupiny, která sestává z SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 28, SEQ ID ♦« ···· • · ·· ·♦ ·· · ♦ ♦ · · · · · • · ♦ · ♦ · · ♦ · · « φ ···· ···· ···· 7···· ··· ··· ·« ·♦ ♦♦ ···· ·· · NO: 29, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 31, SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 34 a SEQ ID NO: 35.
Další aspekt vynálezu se ještě týká sad obsahujících formulaci zahrnující farmaceutickou kompozici. Sady obsahují anti-TNFa protilátku a farmaceuticky přijatelný nosič. Sady obsahují instrukce pro čtrnáctidenní subkutánní dávkování farmaceutické kompozice pro léčení choroby, u které je podávání anti-TNFa protilátky prospěšné. Z jiného hlediska se vynález týká sad obsahujících formulaci zahrnující farmaceutickou kompozici, obsahující dále anti-TNFa protilátku, methotrexat a farmaceuticky přijatelný nosič. Sady obsahují instrukce pro čtrnáctidenní subkutánní dávkování farmaceutické kompozice pro léčení choroby, u které je podávání anti-TNFa protilátky prospěšné.
Ještě jiný aspekt vynálezu poskytuje předem naplněnou injekční stříkačku obsahující farmaceutickou kompozici, ve které je anti-TNFa protilátka a farmaceuticky přijatelný nosič. Z dalšího aspektu ještě poskytuje vynález předem naplněnou injekční stříkačku s farmaceutickou kompozici obsahující ánti-TNFa protilátku, methotrexat a farmaceuticky přijatelný nosič.
Podrobný popis vynálezu
Tento vynález se týká způsobů léčení chorob, při nichž je prospěšné podávat anti-TNFa protilátku, zahrnujících administraci izolovaných lidských protilátek, nebo jejich antigen vázajících částí, které se vážou na lidský TNFa s vysokou afinitou, nízkou rychlostí zániku a vysokou schopností neutralizace, takže dochází k léčení choroby. Různá hlediska vynálezu se vztahují na léčení protilátkami nebo fragmenty protilátek a jejich farmaceutických kompozic.
Aby mohlo být vynálezu snadněji porozuměno jsou nejprve definovány určité termíny.
Termín "dávkování", jak je zde používán, se týká administrace substance (např. anti-TNFa protilátky) pro dosažení terapeutického cíle (např. léčení choroby spojené s TNFa).
Zde používané termíny "čtrnáctidenní režim dávkování", čtrnáctidenní dávkování" a "čtrnáctidenní administrace" se vztahují na časový průběh podávání substance (např. anti-TNFa protilátky) subjektu pro dosažení terapeutického cíle 8 8 ♦ ♦ ···· • · • · t · · · · • · · · · ♦ ♦ · · · · ♦ · ♦ · * · ·· *t ♦· ·· · • · · · · • · · · · • · · ···*· • · · · ♦ ··« ·· · (např. léčení choroby spojené s TNFa). Čtrnáctidenním dávkovacím režimem se nemyslí, že by zahrnoval týdenní dávkovači režim. Substance je administrována pokud možno každých 9-19 dnů, vhodněji každých 11-17 dnů, ještě vhodněji každých 13-15 dnů a nejvýhodněji každých 14 dnů.
Jak se zde používá termín "kombinovaná terapie", týká se podávání dvou nebo více terapeutických substancí, např. anti-TNFa protilátky a léčiva methotrexatu. Methotrexat může být administrován doprovodně společně, napřed nebo následně s podáváním anti-TNFa protilátky. U zde používaného termínu "lidská TNFa" (zde zkracovaná jako hTNFa nebo jednoduše hTNF) se rozumí, že se vztahuje na lidský cytokin, který existuje jako vylučovaná forma o 17 kD a membráně asociovaná forma o 26 kD, jehož biologicky aktivní forma je složena z trimeru nekovalentně vázaných 17 kD molekul. Struktura TNFa je dále popisována např. v Pennica D., a spol., Nátuře 312, 724-729 (1984); Davis J. M. a spol., Biochemistry 26, 1322-1326 (1987) a Jones E. Y. a spol., Nátuře 338, 225-228 (1989). Pod termínem lidský TNFa se rozumí, že zahrnuje rekombinantní lidský TNFa (rhTNFa), který může být připraven metodami rekombinantní exprese nebo komerčně nakoupen (R & D Systems, Catalog No. 210 TA, Minneapolis, MN). U zde používaného termínu "protilátka" se rozumí, že se vztahuje na molekuly imunoglobulinu sestávající ze čtyřech polypeptidových řetězců, dvou těžkých (H) řetězců a dvou lehkých (L) řetězců navzájem spojených disulfidovými vazbami. Každý těžký řetězec sestává z variabilní oblasti těžkého řetězce (zde zkracované jako HCVR nebo VH) a konstantní oblasti těžkého řetězce. Konstantní oblast těžkého řetězce je složena ze tří domén, CH1, CH2 a CH3. Každý lehký řetězec sestává z variabilní oblasti lehkého řetězce (zde zkracované jako LCVR nebo VL) a konstantní oblasti lehkého řetězce. Konstantní oblast lehkého řetězce je složena z jedné domény, CL. VH a VL oblasti mohou být dále rozděleny na oblasti hypervariability, označované jako komplementaritu určující oblasti (CDR), promísené s oblastmi, které jsou více zachovávané, označované jako nosné strukturní oblasti (FR). Každá VH a VL je složena ze tří CDR a čtyř FR, uspořádaných od koncové aminoskupiny do koncové karboxyskupiny v následujíím pořadí: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4.
Termín "část protilátky, která se váže na antigen" (nebo jednoduše "část protilátky"), který se zde používá, se týká jednoho nebo více fragmentů protilátky, které zachovávají schopnost vázat se specificky na antigen (např. hTNFa). Bylo prokázáno, že funkce vázání se protilátky na antigen může být prováděna fragmenty z celkové délky protilátky. Příklady vázajících se fragmentů zahrnovaných pod termín "část protilátky, která se váže na antigen" tvoří (I) Fab fragment, monovalentní fragment sestávající z domén VL, VH, CL a CH1; (II) F(ab')2 fragment, bivalentní fragment obsahující dva Fab fragmenty spojené disulfidovým můstkem v pantové oblasti; (III) Fd fragment sestávající z domén VH a CH1; (IV) Fv fragment sestávající z VL a VH domén jednotlivého ramena protilátky; (V) dAb fragment [Ward a spol., Nátuře 341, 544-546 (1989)], který sestává z VH domény; a (VI) izolovaná, komplementaritu určující oblast (CDR). Dále navíc, i když dvě domény Fv fragmentu , VL a VH, jsou kódovány oddělenými geny, mohou být pomocí rekombinantních metod spojeny syntetickým spojovníkem, který jim umožní utvořit jednotný proteinový řetězec, ve kterém VL a VH oblasti jsou spárovány, aby tvořily monovalentní molekuly [známý jako jednotný řetězec Fv (scFv); viz např. Bird a spol., Science 242, 423-426 (1988) a Huston a spol., Proč. Nati. Acad. Sci. U.S.A. 85, 5879-5883 (1988)]. Takové jednořetězové protilátky jsou rovněž považovány za patřící pod termín "část protilátky, která se váže na antigen". Zahrnuty jsou rovněž jiné formy jednořetězových protilátek jako diaprotilátky. Diaprotilátky jsou bivalentní, bispecifické protilátky, ve kterých domény VH a VL jsou exprimovány na jediném polypeptidovém řetězci, avšak pomocí spojovníku, který je tuze krátký, aby dovolil párování mezi dvěma doménami na témž řetězci a takto vynucují, aby se domény párovaly s komplementárními doménami jiného řetězce a vytvořila se dvě vazebná místa antigenu [viz např. Holliger P. a spol., Proč. Nati. Acad. Sci. U.S.A. 90, 6444-6448 (1993); Poljak R. J. a spol., Structure 2, 1121-1123 (1994)]. A dále ještě protilátka nebo její část, která se váže na antigen, může být částí větších imunoadhezivních molekul, utvořených kovalentním nebo nekonvalentním přidružením protilátky nebo její, na antigen se vázající části, k jednomu nebo více proteinům nebo peptidům. Mezi příklady takových imunoadhezivních molekul patři použití jádrové oblasti streptavidinu, aby se vytvořila tetramerní scFv molekula [Kipriyanov S. M. a spol., Human Antibodies and Hybridomas 6, 93-101 (1995)] a použití cysteinového zbytku, signálního peptidu a C-zakončení volného konce polyhistidinu, aby se vytvořily bivalentní a biotinylované scFv molekuly [Kipriyanov S. M. a spol., Mol. Immunol. 31,1047-1058 (1994)]. Části protilátky, jako fragmenty Fab a F(ab')2, mohou být připraveny z kompletních protilátek pomocí konvenčních technik jako je digesce kompletních protilátek s papainem respektive s pepsinem. Nad to navíc protilátky, části protilátek a imunoadhezivní molekuly mohou být získány pomocí standardních rekombinantních technik DNA, jak se zde popisuje. U zde používaného termínu "lidská protilátka" se rozumí, že zahrnuje protilátky mající variabilní a konstantní oblasti pocházející z lidské zárodečné linie imunoglobulinových sekvencí. Lidské protilátky podle vynálezu mohou zahrnovat aminokyselinové zbytky nekódované lidskou zárodečnou linií imunoglobulinových sekvencí (např. mutace zavedené náhodnou nebo místně specifickou mutagenezí in vitro nebo somatickou mutací in vivo) například v CDR a zejména v CDR3. U zde používaného termínu "lidská protilátka" se však neuvažuje, že by zahrnoval protilátky, u nichž byly do struktur lidských sekvencí naroubovány CDR sekvence, pocházející z zárodečných linií jiných savčích druhů, jako například myši. U zde používaného termínu "rekombinantní lidská protilátka" se rozumí, že zahrnuje všechny lidské protilátky, které jsou připraveny, exprimovány, vytvořeny nebo izolovány rekombinantními prostředky, jako jsou protilátky exprimované pomocí rekombinantního expresivního vektoru transferovaného do hostitelské buňky (popsáno dále v Sekci II, níže), protilátky izolované z rekombinantní, kombinatorické knihovny lidských protilátek (popsáno dále v Sekci III, níže), protilátky izolované ze zvířete (např, myši), které je transgenní pro geny lidského imunoglobulinu [viz např. Taylor L. D. a spol., Nud. Acids Res. 20, 6287-6295 (1992)] nebo protilátky připravené, exprimované, vytvořené nebo izolované jinými prostředky, které zahrnují spojování sekvencí lidského genu imunoglobulinu s jinými DNA sekvencemi. Takové rekombinantní lidské protilátky mají variabilní a konstantní oblasti pocházející z lidské zárodečné linie imunoglobulinových sekvencí. Při určitých provedeních jsou však takové rekombinantní lidské protilátky podrobeny mutagenezi in vitro (nebo somatické mutagenezi in vivo, pokud je použito zvíře transgenní pro lidské Ig sekvence) a tudíž sekvence aminokyselin VH a VL oblastí rekombinantních protilátek jsou sekvence, které nemohou přirozeně existovat v repertoáru zárodečné linie lidské protilátky in vivo, i když pocházejí a vztahují se na lidskou zárodečnou linii VH a VL sekvencí.
Pod zde používanou "izolovanou protilátkou" se rozumí, že se vztahuje na protilátku, která je v podstatě prosta jiných antilátek majících odlišné antigenní specifičnosti (např. izolovaná protilátka, jež specificky váže hTNFa je v podstatě prosta protilátek, které specificky vážou antigeny jiné než hTNFa). Izolovaná protilátka, jež specificky váže hTNFa však může mít křížovou reaktivitu vůči jiným antigenům, jako například hTNFa molekulám z jiných druhů (podrobněji diskutováno níže). K tomu navíc izolovaná protilátka může být v podstatě prosta od jiného buněčného materiálu a/nebo chemikálií.
Pod zde používanou "neutralizující protilátkou" (nebo "protilátkou, která neutralizuje hTNFa aktivitu") se rozumí, že se vztahuje na protilátku, jejíž vazba na hTNFa má za následek inhibici biologické aktivity hTNFa. Tato inhibice biologické aktivity hTNFa může být stanovena změřením jednoho nebo více indikátorů biologické aktivity hTNFa, jako je cytotoxicita indukovaná hTNFa (buď in vitro nebo in vivo), hTNFa indukovaná buněčná aktivace a hTNFa vazba na hTNFa receptory. Tyto indikátory biologické aktivity hTNFa mohou být stanoveny pomocí jednoho nebo více v praxi známých standardních testů in vitro nebo in vivo (viz příklad 4). Přednostně je schopnost protilátky neutralizovat aktivitu hTNFa hodnocena inhibici cytotoxicity L929 buněk, indukované hTNFa. Dalším nebo alternativním parametrem aktivity hTNFa může být stanovení schopnosti protilátky inhibovat pomocí hTNFa indukovanou expresi ELAM-1 na HUVEC jako míry hTNFa indukované buněčné aktivace.
Termín " rezonance povrchových plazmonů", který se zde používá, se týká optického fenoménu, který poskytuje analýzu biospecifických interakcí v reálném čase detekcí změn proteinových koncentrací v biosenzorové matrici, na příklad pomocí systému BIAcore (Pharmacia Biosensor AB, Uppsala Sweden a Piscataway, NJ). Pro další popis viz příklad 1 a Jčnsson U. a spol., Ann. Bio!. Clin. 51, 19-26 (1991); Jónsson U. a spol., Biotechniques 11, 620-627 (1991); Johnsson B. a spol., J. Mol. Recognit. 8, 125-131 (1995) a Johnsson B. a spol., Anal. Biochem. 198, 268-277(1991).
Zde používaným termínem "K0ff" se rozumí, že se týká rychlostní konstanty pro disociaci protilátky z komplexu protilátka/antigen.
Zde používaným termínem "Kd" se rozumí, že se týká konstanty disociace pro určitou interakci protilátka-antigen.
Termínem "molekula nukleové kyseliny" jak se zde používá, se rozumí, že zahrnuje DNA molekuly a RNA molekuly. Molekula nukleové kyseliny může být jednořetězcová nebo dvouřetězcová, ale přednostně je dvou řetězcovou DNA.
Termínem "izolovaná molekula nukleové kyseliny" jak se zde používá v odkazu na nukleové kyseliny kódující protilátky nebo části protilátek (např. VH, VI, CDR3), které vážou hTNFa, se rozumí, že se týká molekuly nukleové kyseliny, ve které nukleotidové sekvence, kódující protilátku nebo část protilátky, jsou prosty jiných nukleotidových sekvencí kódujících protilátky nebo části protilátek, které vážou antigeny jiné než hTNFa, a kteréžto jiné sekvence mohou přirozeně doprovázet nukleovou kyselinu v lidské genomické DNA. Tak například izolovaná nukleová kyselina podle vynálezu, kódující VH oblast anti-hTNFa protilátky, neobsahuje jiné sekvence kódující jiné VH oblasti, které vážou antigeny jiné než hTNFa.
Zde používaným termínem "vektor" se rozumí, že se vztahuje na molekulu nukleové kyseliny schopnou transportovat jinou nukleovou kyselinu, se kterou byl spojen. Jedním typem vektoru je "plazmid", který se týká cirkulární smyčky dvouřetězcové DNA, do níž mohou být navázány další segmenty DNA. Jiným typem vektoru je virální vektor, do něhož může být navázán další segment DNA do genomu viru. Určité vektory jsou schopny autonomní replikace v hostitelské buňce do níž jsou zavedeny (např. bakteriální vektory mající bakteriální původ replikace a epizomální savčí vektory). Jiné vektory (např. neepizomální savčí vektory) mohou být integrovány do genomu hostitelské buňky po zavedení do hostitelské buňky, a tudíž jsou replikovány spolu s genomem hostitele. Navíc mimo to mají určité vektory schopnost řízení exprese genů, ke kterým jsou operativně připojeny. Takové vektory jsou zde označovány jako "rekombinantní expresní vektory" (nebo jednoduše "expresní vektory"). Expresivní vektory užitečné pro rekombinantní DNA techniky jsou obvykle často ve formě plazmidů. V existující specifikaci mohou být "plazmid" a "vektor" užívány zaměnitelně, protože plazmid je nejobvykleji užívaná forma vektoru. Nicméně u vynálezu se má na mysli, že zahrnuje takové jiné formy expresních vektorů jako např. virální vektory, které poskytují ekvivalentní funkce (např. replikační defektivní retroviry, adenoviry a adeno-asociované viry).
Pod zde používaným termínem "rekombinantní hostitelská buňka" (nebo jednoduše "hostitelská buňka") se rozumí, že se týká buňky, do které byl zaveden rekombinantní expresní vektor. Je třeba chápat, že pod takovými termíny se má na mysli, že se týkají nejen konkrétního buněčného subjektu, nýbrž i potomstva takových buněk. Protože v následujících generacích může dojit k určitým modifikacím buď mutací nebo vlivy prostředí, nemusí být takové potomstvo ve skutečnosti identické s matečnou buňkou, ale stále jsou zahrnována do rámce zde používaného termínu "hostitelská buňka". Různá hlediska vynálezu jsou popsána v následujících pododdílech dalšími detaily. I. Lidské protilátky, které vážou lidský TNFa
Tento vynález poskytuje způsoby léčení chorob, u nichž je prospěšná administrace anti-TNFa protilátky. Tyto způsoby zahrnují čtrnáctidenní subkutánní administraci izolovaných lidských protilátek nebo jejich, na antigen se vázajících částí, které se vážou na lidský TNFa s velkou afinitou, nízkou rychlostí zániku a vysokou schopností neutralizace. Lidské protilátky podle vynálezu jsou přednostně rekombinantními, neutralizujícími lidskými anti-TNFa protilátkami. Nejvíce preferovaná rekombinantní, neutralizující protilátka podle vynálezu je zde uváděna jako D2E7 (sekvence aminokyselin D2E7 VL oblasti je uvedena v SEQ ID NO:1; sekvence aminokyselin D2E7 VH oblasti je uvedena v SEQ ID NO:2). Vlastnosti D2E7 byly popsány v Salfeld a spol., U. S. patent č. 6,090,382, na který se zde odkazuje.
Jedno hledisko vynálezu se týká léčení chorob, u nichž je prospěšná administrace anti-TNFa protilátky. Tyto způsoby zahrnují čtrnáctidenní subkutánní administraci D2E7 protilátek a částí protilátek, D2E7-příbuzných protilátek a částí protilátek a jiných lidských protilátek a částí protilátek s ekvivalentními vlastnostmi jako D2E7, jako je vysoká afinita vazby k lidskému hTNFa s nízkou disociační kinetikou a vysokou neutralizační kapacitou. Při jednom provedení poskytuje vynález léčení s izolovanou lidskou protilátkou, nebo její, na antigen se vázající částí, která disociuje z lidského TNFa s Kd 1 x 10'8 M nebo méně a K0ff rychlostní konstantou 1 x 10'3 s"1 nebo méně, obojí stanoveno rezonancí povrchových plazmonů, a neutralizuje cytotoxicitu lidského TNFa při standardním L929 testu in vitro s IC501 x 10'7 M nebo méně. Přednostněji izolovaná lidská protilátka nebo její část, která se váže na antigen, disociuje z lidského TNFa s K0ff 5 x 10"4 s"1 nebo méně, nebo ještě preferovaněji s Koff 1 x 10'4 s'1 nebo méně. Přednostněji izolovaná lidská protilátka nebo její část, která se váže na antigen, neutralizuje cytotoxicitu lidské TNFa při standardním L929 testu in vitro s IC501 x 10'8M nebo méně, ještě lépe s IC501 x 10 9 M nebo méně a ještě nejlépe s IC50 1 x 10"10 M nebo méně. Při preferovaném provedení je protilátkou izolovaná lidská rekombinantní protilátka nebo její antigen vázající část.
Obecně je známo z praxe, že těžký a lehký řetězec CDR3 domén protilátky hrají významnou úlohu ve specifičnosti vazby/afinity protilátky na antigen. Podle toho, se vynález z jiného hlediska týká léčení chorob, u nichž je prospěšná administrace anti-TNFa protilátky subkutánním podáváním lidských protilátek, které mají pomalou disociační kinetiku pro asociaci s hTNFa, a které mají těžký a lehký řetězec CDR3 domén, jež jsou identické nebo příbuzné těm v D2E7. Poloha 9 D2E7 VL CDR3 může být obsazena s Ala nebo Thr, aniž by to K0ff podstatně ovlivnilo. Podle toho konsenzuální motiv pro D2E7 VL CDR3 obsahuje aminokyselinovou sekvenci: Q-R--Y-N-R-A-P-Y-(T/A) (SEQ ID NO: 3). Dodatečně poloha 12 D2E7 VL CDR3 může být obsazena s Tyr nebo Asn , aniž by to K0ff podstatně ovlivnilo. Podle toho konsenzuální motiv pro D2E7 VH CDR3 obsahuje aminokyselinovou sekvenci: V-S-Y-L-S-T-A-S-S-L-D-(Y/N) (SEQ ID NO: 4). Mimo to navíc, jak je ukázáno v příkladu 2, CDR3 doména těžkých a lehkých řetězců v D2E7 je přístupná substituci jednotlivým alaninovým zbytkem (v poloze 1, 4, 5, 7 nebo 8 ve VL CDR3 nebo v poloze 2, 3, 4, 5, 6, 8, 9, 10 nebo 11 ve VH CDR3), aniž by to K0ff podstatně ovlivnilo. Zkušený pracovník dále ještě ocení, že existující přístupnost D2E7 VL a VH CDR3 domén pro substituce alaninem, může umožnit substituci jiných aminokyselin v CDR3 doménách, především substituci konzervativními aminokyselinami, když je stále zachovávána nízká konstanta rychlosti zániku protilátky. Zde používaná "konzervativní substituce aminokyselin" je taková, ve které je jeden zbytek aminokyseliny nahrazen jiným zbytkem aminokyseliny majícím podobný vedlejší řetězec. Skupiny aminokyselinových zbytků majících podobný vedlejší řetězec jsou v oboru definovány, včetně zásaditých vedlejších řetězců (např. lysin, arginin, histidin), kyselých vedlejších řetězců (např. kyselina asparagová, kyselina glutamová), • · ···· · · ·· · · · * · · ···· · » « ·· · # · · · · * · • · β · · · · ·· ·····
Ar· ······· · · · |0 ·· »· ·· ···· ·· · polárních vedlejších řetězců bez náboje (např. asparagin, glutamin, serin, threonin, tyrosin, cystein), nepolárních vedlejších řetězců (např. alanin, valin, leucin, isoleucin, prolin, fenylalanin, methionin, tryptofan), β-rozvětvených vedlejších řetězců (např. threonin, valin, isoleucin) a aromatických vedlejších řetězců (např. tyrosin, fenylalanin, tryptofan, histidin). V doménách D2E7 VL a/nebo VH CDR3 se pak přednostně nedělá více než jedna až pět konzervativních substitucí aminokyselin. V doménách D2E7 VL a/nebo VH CDR3 se pak přednostně neprovede více než jedna až tři konzervativní substituce aminokyselin. Navíc konzervativní substituce aminokyselin nesmí být provedeny v polohách aminokyselin kritických pro vazbu k hTNFa. Polohy 2 a 5 u D2E7 VL CDR3 a polohy 1 a 7 u D2E7 VH CDR3 se jeví jako kritické pro interakci s hTNFa, a tudíž v těchto polohách se přednostně konzervativní substituce aminokyselin neprovádějí (i když je přijatelná substituce alaninem v poloze 5 u D2E7 VL CDR3, jak se popisuje shora) (viz U. S. patent č. 6,090,382).
Shodně při jiném provedení poskytuje vynález způsoby léčení chorob, u nichž je prospěšná administrace anti-TNFa protilátky při čtrnáctidenní subkutánní administraci izolované lidské protilátky nebo její antigen vázající části. Protilátka nebo její antigen vázající část, má nejvhodněji následující charakteristiku: a) disociuje z lidské TNFa s Koff rychlostní konstantou 1 x 10'3 s'1 nebo méně, jak bylo stanoveno rezonancí povrchových plazmonů; b) má CDR3 doménu lehkého řetězce obsahující sekvenci aminokyselin SEQ ID NO: 3, nebo modifikovanou z SEQ ID NO: 3 jednotlivou substitucí alaninem v poloze 1, 4, 5, 7 nebo 8 nebo jednou až pěti konzervativními substitucemi aminokyselin v polohách 1, 3, 4, 6, 7, 8 a/nebo 9; c) má CDR3 doménu těžkého řetězce obsahující sekvenci aminokyselin SEQ ID NO: 4, nebo modifikovanou z SEQ ID NO: 4 jednotlivou substitucí alaninem v poloze 2, 3, 4, 5, 6, 8, 9, 10 nebo 11 nebo jednou až pěti konzervativními substitucemi aminokyselin v polohách 2, 3,4, 5,6, 8, 9,10,11 a/nebo 12. Přednostněji protilátka nebo její část, která se váže na antigen, disociuje z lidské TNFa s Koff 5 x 10'4 s'1 nebo méně. Ještě preferovanější je, když protilátka nebo její část, která se váže na antigen, disociuje z lidské TNFa s Koff 1 x 10"4 s_1 nebo méně.
Vynález poskytuje způsoby pro ošetřování chorob, u nichž je prospěšná administrace anti-TNFa protilátky při čtrnáctidenní subkutánní administraci izolované 16 • * · · · · ·· · • « · · • · • · · • * • · ι · « · · • · · · · · • · · · · · · • · · · · · · ·· »« · · ···· lidské protilátky nebo její antigen vázající částí ještě při jiném provedení. Protilátka nebo její část, která se váže na antigen, obsahuje přednostně variabilní oblast lehkého řetězce (LCVR) mající CDR3 doménu obsahující sekvenci aminokyselin SEQ ID NO: 3, nebo modifikovanou z SEQ ID NO: 3 jednotlivou substitucí alaninem v poloze 1,4, 5, 7 nebo 8 a variabilní oblast (HCVR) mající CDR3 doménu obsahující sekvenci aminokyselin SEQ ID NO: 4, nebo modifikovanou z SEQ ID NO: 4 jednotlivou substitucí alaninem v poloze 2, 3, 4, 5, 6, 8, 9, 10 nebo 11. Přednostněji má LCVR dále doménu CDR2 obsahující sekvenci aminokyselin SEQ ID NO: 5 (tj. D2E7 VL CDR2) a HCVR dále má doménu CDR2 obsahující sekvenci aminokyselin SEQ ID NO: 6 (tj. D2E7 VH CDR2). Ještě přednostněji má LCVR dále doménu CDR1 obsahující sekvenci aminokyselin SEQ ID NO: 7 (tj. D2E7 VL CDR1) a HCVR má doménu CDR1 obsahující sekvenci aminokyselin SEQ ID NO: 8 (tj. D2E7 VH CDR1). Struktury oblastí pro VL jsou přednostně z V« I druhu lidské zárodečné linie, přednostněji z A20 lidské zárodečné linie Vk genu a nejpřednostněji z D2E7 VL rámce sekvencí uvedených na obrázcích 1A a 1B U. S. patentu č. 6,090382. Struktury oblastí pro VH jsou přednostně z VH3 I druhu lidské zárodečné linie, přednostněji z DP31 lidské zárodečné linie VH genu a nejpřednostněji z D2E7 VH rámce sekvencí uvedených na obrázcích 2A a 2B U. S. patentu č. 6,090382. Při ještě dalším provedení poskytuje vynález způsoby pro ošetřování chorob, u nichž je prospěšná administrace anti-TNFa protilátky pň čtrnáctidenní subkutánní administraci izolované lidské protilátky nebo její antigen vázající části. Protilátka nebo její část, která se váže na antigen, obsahuje přednostně variabilní oblast lehkého řetězce (LCVR) obsahující sekvenci aminokyselin SEQ ID NO: 1 (tj. D2E7 VL) a variabilní oblast těžkého řetězce (HCVR) obsahující sekvenci aminokyselin SEQ ID NO: 2 (tj. D2E7 VH). U jistých provedení obsahuje protilátka konstantní oblast těžkého řetězce jako je lgG1, lgG2, lgG3, lgG4, IgA, IgE, IgM nebo IgD konstantní oblast. Přednostně je konstantní oblastí těžkého řetězce lgG1 konstantní oblast těžkého řetězce nebo lgG4 konstantní oblast těžkého řetězce. Navíc může protilátka obsahovat dále konstantní oblast lehkého řetězce, buď kappa konstantní oblast lehkého řetězce nebo lambda konstantní oblast lehkého řetězce. Přednostně obsahuje protilátka kappa konstantní oblast lehkého řetězce. Částí protilátky může být alternativně na příklad Fab fragment nebo jednořetězový Fv fragment. Při jiném provedení poskytuje ještě vynález způsoby pro ošetřování chorob, u nichž je prospěšná administrace anti-TNFa protilátky při čtrnáctidenní subkutánní administraci izolované lidské protilátky nebo její antigen vázající částí. Protilátka nebo její část, která se váže na antigen, obsahuje přednostně na D2E7 se vztahující VL a VH CDR3 domény, na příklad protilátky nebo jejich antigen vázající části s variabilní oblastí lehkého řetězce (LCVR) mající CDR3 doménu obsahující sekvenci aminokyselin volenou ze skupiny, kterou tvoří: SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 25 a SEQ ID NO: 26, nebo s variabilní oblastí těžkého řetězce (HCVR) mající CDR3 doménu obsahující sekvenci aminokyselin volenou ze skupiny, kterou tvoří: SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 31, SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 33, SEQ ID NO: 34 a SEQ ID NO: 35.
Protilátka nebo část protilátky podle vynálezu může být derivatizována nebo napojena na jinou funkční molekulu (např. jiný peptid nebo protein). Protilátka nebo část protilátky podle vynálezu jsou tedy myšleny, že zahrnují derivatizované a jinak modifikované formy zde popisovaných lidských anti-TNFa protilátek, včetně imunoadhezivních molekul. Na příklad protilátka nebo část protilátky podle vynálezu může být funkčně spojena (chemickou vazbou, genetickou fúzí, nekovalentní asociací nebo jinak) s jednou nebo více jinými molekulárními entitami jako jinou protilátkou (např. bispecifická protilátka nebo diaprotilátka), detegovatelným agens, cytotoxickým činidlem, farmaceutickým agens a/nebo proteinem či peptidem., které mohou zprostředkovat asociát protilátky nebo části protilátky s jinou molekulou (jako jádrovou oblastí streptavidinu nebo volným koncem polyhistidinu).
Jeden typ derivatizované protilátky se produkuje příčným spojováním dvou nebo více protilátek (stejného typu nebo různých typů, aby se např. vytvořily bispecifické protilátky). Vhodné příčné spojovníky zahrnují ty, které jsou heterobifunkční, mající dvě rozdílně reaktivní skupiny oddělené vhodným mezerníkem (např. m-maleinimidobenzoyl-N-hydroxysukcinimid-ester) nebo homobifunkční (např. disukcinimidyl suberát). Takové spojovníky lze získat od Pierce Chemical Company, Rockford, IL.
Vhodná detegovatelná činidla, se kterými může být protilátka nebo část protilátky derivatizována, představují fluorescenční sloučeniny. Příkladná fluorescenčně detegovatelná činidla zahrnují fluorescein, fluorescein-isokyanát, rhodamin, 5-dimethylamin-1-naftalensulfonylchlorid, fýkoerythrin a podobně. • · • * · • · · · ·
Protilátka může být derivatizována také detegovatelnými enzymy, jako alkalickou fosfatázou, křenovou peroxidázou, glukosaoxidázou a podobně. Jestliže je protilátka derivatizována detegovatelným enzymem, provádí se detekce přidáním dodatečných reagentů, které enzym využívá, aby produkoval detegovatelný reakční produkt. Je-li na příklad jako detegovatelné činidlo přítomna křenová peroxidáza, vede přidání hydrogen peroxidu a diaminobenzidinu k barevnému reakčnímu produktu, který je detegovatelný. Protilátka může být derivatizována také biotinem a detegována nepřímým měřením vazby avidinu nebo streptavidinu. II. Exprese protilátek
Protilátka nebo část protilátky podle vynálezu může být připravena rekombinantní expresí genů imunoglobulinového lehkého a těžkého řetězce v hostitelské buňce. Aby se protilátka exprimovala rekombinantně, je hostitelská buňka transfektována jedním nebo více rekombinantními expresivními vektory nesoucími DNA fragmenty, které kódují imunoglobulinové lehké a těžké řetězce protilátky tak, že lehké a těžké řetězce jsou exprimovány v hostitelské buňce a vylučovány přednostně do media, ve kterém jsou hostitelské buňky kultivovány, a z kteréhožto media mohou být protilátky zpět získány. Pro získání genů těžkého a lehkého řetězce protilátky jsou používány standardní rekombinantní DNA metodologie, tyto geny inkorporují do rekombinantních expresních vektorů a zavádějí vektory do hostitelských buněk tak, jak jsou popisovány v Sambrook, Fritsch a Maniatis (editoři), Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Second Edition, Cold Spring Harbor, N. Y. (1989); Ausubell F. M. a spol. (editoři), Current Protocols in Molecular Biology, Greene Publishing Associates (1989) a v Boss a spol., U. S. patent č. 4,816,397.
Pro expresi D2E7 nebo s D2E7 příbuzné protilátky se nejprve získají DNA fragmenty kódující variabilní oblasti lehkého a těžkého řetězce. Tyto DNA mohou být získány amplifikací a modifikací variabilních sekvencí lehkého a těžkého řetězce zárodečné linie pomocí řetězové reakce polymerázy (PCR). Sekvence zárodečné linie DNA pro geny variabilní oblasti lidského těžkého a lehkého řetězce jsou v oboru známé [viz např. "Vbase" databáze sekvencí lidské zárodečné linie; viz také Kabat E. A. a spol., Sequences of Proteine of Immunological Interest, Fifth Edition, U. S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242 (1991); Tomlinson I. M. a spol., "The Repertoire of Human Germline VH Sequences Reveals about Fiftz Groups of Vh Segments with Different Hypervariable Loops" J. Mol. Biol. 227, 776-798 (1992) a Cox J. P. L. a spol., "A Directory of Human Germ-line V78 Segmente Reveals a Strong Bias in their Usage" Eur. J. Immunol. 24, 827-836 (1994); na obsah každé z nich se zde výslovně odkazuje]. Aby se získal DNA fragment kódující variabilní oblast těžkého řetězce D2E7 nebo D2E7 příbuzné protilátky, amplifikuje se pomocí standardní PCR člen Vh3 skupiny zárodečné linie VH genů. Nejpřednostněji se amplifikuje sekvence DP-31 VH zárodečné linie. Aby se získal DNA fragment kódující variabilní oblast lehkého řetězce D2E7 nebo D2E7 příbuzné protilátky, amplifikuje se pomocí standardní PCR člen V«l skupiny zárodečné linie VL genů. Nejpřednostněji se amplifikuje sekvence A20 VL zárodečné linie. PCR primery vhodné pro amplifikaci sekvencí DP-31 zárodečné linie VH a A20 zárodečné linie VL mohou být určeny pomocí standardních metod na základě nukleotidových sekvencí uvedených v odkazech citovaných shora.
Jakmile se získají fragmenty zárodečné limie VH a VL, mohou být tyto sekvence mutovány, aby kódovaly zde uváděné D2E7 nebo s D2E7 příbuzné sekvence aminokyselin. Sekvence aminokyselin, kódované zárodečnou linií VH a VL DNA sekvencí, se nejprve srovnávají s D2E7 nebo s D2E7 příbuznými VH a VL sekvencemi aminokyselin pro identifikování aminokyselinových zbytků v D2E7 nebo s D2|7 příbuzných sekvencích, které se od zárodečné linie liší. Potom jsou vhodné nukleotidy zárodečné linie DNA sekvencí mutovány tak, že mutovaná sekvence zárodečné řady kóduje D2E7 nebo s D2E7 příbuzné sekvence aminokyselin za pomoci genetického kódu, aby se určilo jaké změny nukleotidů mají být učiněny. Mutageneze zárodečné řady sekvencí se provádí standardními metodami, např. mutagenezí zprostředkovanou PCR (při níž jsou mutované nukleotidy inkorporovány do PCR primerů tak, že produkt PCR obsahuje mutace) nebo místně cílenou mutagenezí.
Jakmile se (amplifikaci a mutagenezí zárodečné linie VH a VL genů, jak je shora popsáno) získají DNA fragmenty kódující D2E7 nebo s D2E7 příbuzné VH a VL segmenty, mohou být tyto DNA fragmenty dále zpracovávány standardními rekombinantními DNA technikami, například, aby se variabilní oblasti genů konvertovaly na geny s úplnou délkou řetězce protilátky, na geny Fab fragmentů nebo na scFv gen. Při těchto manipulacích je VL- nebo VH-kódující DNA fragment operativně spojen s jiným DNA fragmentem kódujícím jiný protein jako například konstantní oblastí protilátky nebo flexibilním spojovníkem. Termínem "operativně spojen", užívaným v tomto kontextu se rozumí, že znamená, že dva DNA fragmenty jsou spojeny tak, že sekvence aminokyselin kódované dvěma DNA fragmenty zůstávají součástí struktury.
Izolovaná DNA kódující VH oblast může být konvertována na gen těžkého řetězce o plné délce operativním spojením VH-kódující DNA s jinou DNA molekulou kódující konstantní oblasti těžkého řetězce (CH1, CH2 a CH3). Sekvence lidských genů konstantní oblasti těžkého řetězce jsou v praxi známy [viz např. Kabat E. A. a spol., Sequences of Protein of Immunological Interest, Fifíh Edition, U. S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242 (1991)] a DNA fragmenty obsahující tyto oblasti mohou být získány standardní PCR amplifikací. Konstantní oblastí těžkého řetězce může být lgG1, lgG2, lgG3, lgG4, IgA, IgE, IgM nebo IgD konstantní oblast, ale nejpreferovanější je lgG1 nebo lgG4 konstantní oblast. Pro gen Fab fragmentu těžkého řetězce může být VH-kódující DNA operativně spojena s jinou molekulou DNA kódující pouze CH1 konstantní oblast těžkého řetězce.
Izolovaná DNA kódující VL oblast může být konvertována na gen lehkého řetězce o plné délce operativním spojením VL-kódující DNA s jinou DNA molekulou kódující konstantní oblast lehkého řetězce, CL. Sekvence lidských genů konstantní oblasti lehkého řetězce jsou v praxi známy [viz např. Kabat E. A. a spol., Sequences of Protein of Immunological Interest, Fifíh Edition, U. S. Department of Health and Human Services, NIH Publication No. 91-3242 (1991)] a DNA fragmenty obsahující tyto oblasti mohou být získány standardní PCR amplifikací. Konstantní oblastí lehkého řetězce může být kappa nbo lambda konstantní oblast, ale nejpreferovanější je kappa konstantní oblast.
Pro vytvoření scFv genu jsou VH- a VL-kódující DNA fragmenty operativně spojeny s jiným fragmentem kódujícím flexibilní spojovník, např. kódující sekvenci aminokyselin (Gly4-Ser)3 tak, že VH a VL sekvence mohou být exprimovány jako souvislý jednořetězový protein s VL a VH oblastmi spojenými flexibilním spojovníkem [viz . Bird a spol., Science 242, 423-426 (1988) a Huston a spol., Proč. Nati. Acad. Sci. U.S.A. 85, 5879-5883 (1988), McCafferty a spol., Nátuře 348, 552-554 (1990)]. K exprimování protilátek nebo částí protilátek podle vynálezu, DNA kódující lehké a těžké řetězce zčásti nebo o úplné délce, získané jak je popisováno shora, jsou vloženy do expresního vektoru tak, že geny jsou operativně spojeny s transkripčními a translačními kontrolními sekvencemi. Termínem "operativně spojen", užívaným v tomto kontextu se rozumí, že znamená, že gen protilátky je vázán do vektoru tak, že transkripční a translační kontrolní sekvence ve vektoru slouží jejich zamýšlené funkci regulování transkripce a translace genu protilátky. Expresní vektor a expresivní kontrolní sekvence jsou voleny tak, aby byly kompatibilní s expresí použitých hostitelských buněk. Gen lehkého řetězce protilátky a gen těžkého řetězce protilátky může být vložen do separátního vektoru nebo typičtěji jsou oba geny vloženy do téhož expresního vektoru. Geny protilátky se do expresního vektoru vkládají standardními metodami (např. spojením komplementárních restrikčních míst na genu fragmentu protilátky a vektoru nebo spojením na otevřeném konci, pokud nejsou restrikční místa přítomna). Před inzercí D2E7 nebo D2E7 příbuzných sekvencí lehkého nebo těžkého řetězce může expresní vektor již nést sekvence konstantní oblasti protilátky. Na příklad jeden přístup ke konvertování D2E7 nebo D2E7 příbuzných VH a VL sekvencí na geny protilátky o úplné délce je vložit je do expresivních vektorů, které již kódují konstantní oblasti těžkého řetězce, respektive konstantní oblasti lehkého řetězce tak, že VH segment je operativně připojen k CH segmentu/segmentům ve vektoru a VLsegment je operativně připojen k CL segmentu ve vektoru. Dodatečně nebo alternativně může rekombinantní expresivní vektor kódovat signální peptid, který usnadňuje sekreci řetězce protilátky z hostitelské buňky. Gen řetězce protilátky může být klonován na vektor tak, že signální peptid se zapojí do struktury na aminovém zakončení řetězce genu protilátky. Signálním peptidem může být imunoglobulinový signální peptid nebo heterologní signální peptid (tj. signální peptid nikoliv z imunoglobulinového proteinu).
Navíc ke genům řetězce protilátky nesou rekombinantní expresní vektory podle vynálezu regulativní sekvence, které kontrolují expresi genů řetězce protilátky v hostitelské buňce. Termínem "regulativní sekvence" se rozumí, že zahrnuje promotory, zesilovače transkripce a jiné prvky kontroly exprimování (např. polyadenylační signály), které ovládají transkripci a translaci genů řetězce protilátky. Takové regulativní sekvence jsou popsány například v Goedel, Gene Expression Technology: Methods in Enzymology 185, Academie Press, San Diego, CA (1990). Zkušení odborníci si jsou vědomi, že určení expresního vektoru, včetně selekce regulativních sekvencí může záviset na takových faktorech jako volbě hostitelské buňky, která má být transformována, úrovně exprese požadovaného proteinu atd. Preferované regulativní sekvence pro expresi savčích hostitelských buněk zahrnují virové elementy, které řídí vysoké úrovně exprese v savčích buňkách, jako například 22 • · · • · · • · ι • · · « ·· · · ·· ·· • ♦ · · ♦ · * * ♦ ♦ · • · · • · ···· ·♦ · • · · • · # · é ♦ ·«··· • · · ·· « promotory a/nebo zesilovače transkripce pocházející z cytomegaloviru (CMV) (jako CMV promotor/zesilovač transkripce), Simian Virus 40 (SV 40) (jako SV 40 promotor/zesilovač transkripce), adenovirus [např. promotor pozdního adenoviru major (AdMLP)] a polyomy. Pro další popis virálních regulativních elementů a jejich sekvencí viz Stinski, U. S. patent č. 5,168,062; Bell a spol., U. S. patent č. 4,510,245 a Schaffner a spol., U. S. patent č. 4,968,615.
Navíc ke genům řetězce protilátky a regulativním sekvencím, mohou rekombinantní expresivní vektory nést další sekvence, například sekvence, které regulují replikaci vektoru v hostitelské buňce (např. původce replikace) a volitelné signální geny. Volitelné signální geny usnadňují volbu hostitelských buněk, do nichž má být vektor zaveden (viz např. Axel a spol., U. S. patenty č. 4,399,216, 4,634, 665 a 5,179,017). Například volitelné signální geny, hostitelské buňce, do které byly zavedeny, přinášejí typicky odolnost vůči léčivům jako například G418, hygromycin nebo methotrexat. Preferované volitelné signální geny zahrnují geny dihydrofolátreduktázy (DHFR) (pro použití u dhfr" hostitelských buňkách se selekcí/amplifikací methotrexatu) a neo geny (pro selekci G418).
Pro expresi lehkých a těžkých řetězců je standardními technikami do hostitelské buňky transfektován expresní vektor(vektory) kódující lehké a těžké řetězce. Pod rozličnými formami termínu "transfekce" se rozumí, že zahrnuje širokou různost technik běžně užívaných pro zavádění exogenní DNA do prokaryotických nebo eukaryotických hostitelských buněk, např. elektroporaci, srážení fosforečnanem vápenatým, transfekci DEAE-dextranu a podobně. I když je teoreticky možné exprimovat protilátky podle vynálezu buď v prokaryotických nebo v eukaryotických hostitelských buňkách, je exprese protilátek v eukaryotických buňkách a nejlépe v savčích hostitelských buňkách, preferována nejvíce, protože eukaryotické buňky a zejména savčí buňky, lze vhodněji než prokaryotické buňky shromažďovat a vylučují protilátku správně složenou a imunologicky aktivní. Prokaryotická exprese genů protilátek byla pro produkci vysokých výtěžků aktivní protilátky publikována jako neefektivní [Boss M. A. a Wood C. R., Immunology Today 6,12-13 (1985)].
Preferované savčí hostitelské buňky pro exprimování rekombinantních protilátek podle vynálezu představují ovaria čínského křečka (CHO buňky) [počítaje v to dhfr-CHO buňky popsané v Urlaub a Chasin, Proč. Nati. Acad. Sci. U.S.A. 77, 42164220 (1980), užívané s DHFR volitelným signálním znakem např. jak je popsáno v Kaufman R. J. a Sharp P. A., Mol. Biol. 159, 601-621 (1982)], NSO myeloma buňky, COS buňky a SP2 buňky. Když se do savčích hostitelských buněk zavedou rekombinantní expresivní vektory kódující geny protilátek, jsou kultivací hostitelských buněk produkovány protilátky po dobu, která umožní expresi protilátky v hostitelské buňce nebo přednostněji sekreci protilátky do kultivačního media, ve kterém jsou hostitelské buňky pěstovány. Z kultivačního media mohou být protilátky získány pomocí standardních metod pro purifikaci proteinů.
Hostitelské buňky mohou být také využity k produkci částí celkových protilátek, například Fab fragmentů nebo scFv molekul. Rozumí se, že variace shora uvedené procedury patří do rozsahu předkládaného vynálezu. Na příklad může být žádoucí tranfektovat hostitelskou buňku s DNA kódující buď lehký řetězec nebo těžký řetězec (nikoliv však oba) protilátky podle tohoto vynálezu. Rekombinantní DNA technologie může být využita také k odstranění některých nebo všech DNA kódujících buď jeden nebo oba z lehkých a těžkých řetězců, které nejsou pro vazbu s hTNFa nutné. Molekuly exprimované z takto zkrácených DNA molekul jsou rovněž zahrnovány do protilátek podle vynálezu. Kromě toho mohou být produkovány bifunkční protilátky, ve kterých jeden těžký a jeden lehký řetězec jsou protilátkou podle vynálezu a jiný těžký a lehký řetězec jsou specifické pro jiný antigen než hTNFa vazbou protilátky podle vynálezu křížem s další protilátkou pomocí standardních chemických metod křížové vazby. Při preferovaném systému pro rekombinantní expresi protilátky nebo její antigen vázající části podle vynálezu, je rekombinantní expresivní vektor kódující obojí, těžký řetězec protilátky i lehký řetězec protilátky, zaveden do dhfr-CHO buněk transfekcí zprostředkovanou fosforečnanem vápenatým. V rekombinantním expresivním vektoru jsou geny těžkého a lehkého řetězce každý operativně navázán na regulatorní elementy CMV zesilovače transkripce / AdMLP promotoru, aby se dosahovaly vysoké úrovně transkripce genů. Rekombinantní expresivní vektor nese také DHFR gen, který umožňuje selekci CHO buněk, které byly transfektovány vektorem pomocí selekce/amplifikace methotrexatem. Vybrané transformované hostitelské buňky se kultivují, aby se umožnila exprese těžkých a lehkých řetězců protilátky a z kultivačního media se izoluje úplná protilátka. Pro přípravu rekombinantního expresivního vektoru, transfekci hostitelských buněk, selekci transformantů, kultivaci hostitelských buněk a izolaci protilátky z kultivačního media, se používají standardní techniky molekulární biologie. III. Selekce rekombinantních lidských protilátek
Rekombinantní lidské protilátky podle vynálezu, vedle D2E7 nebo jejich antigen vázajících částí či s D2E7 příbuzných protilátek zde popisovaných, mohou být izolovány screeningem z rekombinantní, kombinatorické knihovny protilátek, přednostně knihovny ukázek scFv tágu, připravené za použití lidských VL a VH cDNA získaných z mRNA pocházejících z lidských lymfocytů. Metodologie pro přípravu a screening takových knihoven jsou v praxi známy. Kromě komerčně dostupných sad ke generování knihoven ukázek fágu (např. Pharmacia, Recombinant Antibody System, katalog č. 27-9400-01 a Stratagene SurfZAP™ sada ukázek fágu, katalog č. 240612), příklady metod a reagentů obzvlášť přístupných pro použití a screening knihoven displeje protilátek, lze nalézt na příklad v Ladner a spol., U. S. patent č. 5,223,409; PCT publikace č. WO 92/18619; Dower a spol., PCT publikace č. WO 91/17271; Winter a spol., PCT publikace č. WO 92/20791; Markland a spol., PCT publikace č. WO 92/15679; Breitling a spol., PCT publikace č. WO 93/01288; McCafferty a spol., PCT publikace č. WO 92/01047; Garrad a spol., PCT publikace č. WO 92/09690; Fuchs a spol., Bio/Technology9, 1370-1372 (1991); Hay a spol., Hum. Antibod. Hybridomas 3, 81-85 (1992); Huse a spol., Science 246, 1275-1281 (1989); McCafferty a spol., Nátuře 348, 552-554 (1990); Griffiths a spol., EMBO J. 12, 725-734 (1993); Hawkins a spol., J. Mol. Biol. 226, 889-896 (1992); Clackson a spol., Nátuře 352, 624-628 (1991); Gram a spol., PNAS 89, 3576-3580 (1992); Griffiths a spol., EMBO J. 12, 725-734 (1993); Garrad a spol., Bio/Technology 9,1373-1377 (1991); Hoogenboom a spol., Nuc. Acid Res. 19,4133-4137 (1991) a Barbas a spol., PNAS 88, 7978-7982 (1991). V preferovaném provedení pro izolaci lidské protilátky s vysokou afinitou a nízkou konstantou rychlosti zániku pro hTNFa, byla myší anti-hTNFa protilátka mající vysokou afinitu a nízkou konstantu rychlosti zániku pro hTNFa (např. MAK 195, hybridom pro který má depozitní číslo ECACC 87 050801), nejprve použita k selekci sekvencí lidského těžkého a lehkého řetězce majících podobnou vazebnou aktivitu vůči pro hTNFa za použití metod vtiskování epitopu, popisovaných v Hoogeboom a spol., PCT publikace č. WO 93/06213. Při této metodě používané knihovny jsou především scFv knihovny připravené a screeningované jak je popsáno v McCafferty a spol., PCT publikace č. WO 92/01047a Griffiths a spol., EMBO J. 12, 725-734 (1993). Knihovny scFv protilátek jsou přednostně screeningovány za použití rekombinantního lidského TNFa jako antigenu.
Jakmile jsou lidské VL a VH segmenty vybrány, provedou se "mix and match" experimenty, ve kterých jsou různé páry počátečně vybraných VL a VH segmentů sceeningovány pro hTNFa vazbu, aby byly vybrány preferované kombinace VL / VH párů. Kromě toho, aby se dále zlepšila afinita a/nebo snížila konstanta rychlosti zániku pro hTNFa vazbu, mohou být VL a VH segmenty preferovaných VL / VH páru(ů) náhodně mutovány, nejlépe v CDR3 oblasti VH a/nebo VL, v postupu analogickém procesu somatické mutace in vivo, zodpovědném za vyzrání afinity protilátek během přirozené imunitní odezvy. Toto vyzrání afinity in vitro může být dosaženo amplifikací VH a VL oblastí pomocí PCR příměrů komplementárních k VH CDR3 nebo respektive VL CDR3, kteréžto primery byly "říznuty" náhodnou směsí čtyř nukleotidových bází v určitých polohách tak, že výsledný PCR produkt kóduje VH a VL segmenty, ve kterých byly do VH a/nebo VL CDR3 oblastí zavedeny náhodné mutace. Tyto náhodně mutované VH a VL segmenty mohou být znovu screeningovány pro vazbu na hTNFa a mohou být vybrány sekvence, které projevují vysokou afinitu a nízkou konstantu rychlosti zániku pro hTNFa vazbu.
Po screeningu a izolaci anti-hTNFa podle vynálezu z knihovny ukázek rekombinantního imunoglobulinu, může být z komplexu ukázek (např. z genomu fágu) izolována nukleová kyselina kódující vybranou protilátku a subklonována na jiné expresivní vektory pomocí standardních rekombinantních DNA technik. Pokud se žádá, může být nukleová kyselina dále zpracována, aby vytvořila jiné formy protilátek podle vynálezu (např. spojena s nukleovou kyselinou kódující další imunoglobulinové domény, např. další konstantní oblasti). K exprimování rekombinantní lidské protilátky izolované screeningen z kombinatorické knihovny, se DNA kódodující protilátku klonuje na rekombinantní expresivní vektor a zavede do savčích hostitelských buněk jak se podrobněji popisuje v oddíle II shora. IV. Farmaceutické kompozice a farmaceutická administrace
Protilátky nebo části protilátek podle vynálezu mohou být zahrnuty do farmaceutických kompozic vhodných pro podávání subjektu podle zde popisovaných způsobů, např. čtrnáctidenními, subkutánními dávkami. Farmaceutická kompozice typicky obsahuje protilátku (nebo část protilátky) podle vynálezu a/nebo methotrexat a farmaceuticky přijatelný nosič. Jak se zde používá "farmaceuticky přijatelný nosič", zahrnuje jakékoliv a všechna rozpouštědla, disperzní media, povlaky, antibakteriální a antifungální prostředky, izotonická a absorpci zpožďující činidla a podobně, která jsou fysiologicky kompatibilní a jsou vhodná pro podávání subjektu způsoby zde popisovanými. Příklady farmaceuticky přijatelných nosičů představují jeden nebo více příkladů jako je voda, solanka, fosfáty pufrovaná solanka, dextrosa, glycerol, ethanol a podobně, právě tak jako jejich kombinace. V mnoha případech bude výhodnější zahrnout do směsi izotonická činidla např. cukry, polyalkoholy jako mannitol, sorbitol nebo chlorid sodný. Farmaceuticky přijatelné nosiče mohou dále obsahovat menší množství pomocných látek jako smáčecích nebo emulzifikačních prostředků, konzervačních prostředků nebo pufrů, které zvyšují skladovatelnost nebo účinnost protilátky nebo části protilátky.
Kompozice podle tohoto vynálezu mohou existovat v rozličných formách. Patří sem na příklad kapalné, polotuhé a tuhé formy dávek jako kapalné roztoky (např. injekční a infuzní roztoky), disperze nebo suspenze, tablety, pilulky, prášky, liposomy a čípky. Preferovaná forma závisí na zamýšleném způsobu administrace a terapeutické aplikace. Typicky preferované kompozice jsou ve formě injekčních nebo infuzních roztoků, například kompozice podobné těm, které se používají na pasivní imunizaci lidí jinými protilátkami. Preferovaný způsob administrace je parenterální (např. intravenozní, subkutánní, intraperitoneální, intramuskulární). V jednom z preferovaných provedení je protilátka podávána intravenozní infuzí nebo injekcí. Při jiném preferovaném provedení se protilátka podává intramuskulární injekcí. Při zvlášť preferovaném provedení je látka podávána subkutánní injekcí (např. čtrnáctidenní subkutánní injekce).
Terapeutické kompozice musí typicky být sterilní a stabilní za podmínek výroby a skladování. Kompozice může být formulována jako roztok, mikroemulze, disperze, liposom nebo jiná uspořádaná struktura vhodná pro vysokou koncentraci léčiva. Sterilní injektovatelné roztoky mohou být připravovány začleněním aktivní sloučeniny (tj. protilátky nebo části protilátky) v požadovaném množství do vhodného rozpouštědla podle potřeby s jednou nebo s kombinací shora vyjmenovaných ingrediencí a následující filtrací a sterilizací. Disperze se zpravidla připravují vložením aktivní sloučeniny do sterilního vehikula, které obsahuje základní disperzní medium a požadované další ingredience z těch, jež jsou shora jmenovány. V případě sterilních prášků k přípravě sterilních injektovatelných roztoků jsou preferovanými metodami přípravy sušení ve vakuu a lyofilizace, které z jejich předem sterilně zfiltrovaného roztoku, poskytují prášek aktivního ingredientu plus jakoukoliv dále požadovanou ingredienci. Vhodná tekutost roztoku může být udržována na příklad pomocí povlaku jako je lecitin, v případě disperze udržováním vhodné velikosti částic a pomocí povrchově aktivních látek. Prolongované absorpce injektovatelných kompozic může být dosahováno tak, že se do kompozice přidává činidlo, které absorpci zpožďuje, na příklad soli monostearátu a želatina.
Protilátky a části protilátek podle předkládaného vynálezu mohou být aplikovány nejrůznějšími, z praxe známými metodami, i když pro mnohé terapeutické aplikace preferovanou cestou / způsobem podání je subkutánní injekce. Jak zkušení odborníci uznají, bude se cesta a/nebo způsob aplikace lišit v závislosti na požadovaných výsledcích. U určitých provedení může být účinná komponenta připravována s nosičem, který bude sloučeninu chránit před rychlým uvolňováním, jako jsou formulace s kontrolovaným uvolňováním, včetně implantátů, transdermálních náplastí a mikroenkapsulovaných systémů uvolňování. Použity mohou být biodegradabilní, biokompatibilní polymery jako ethylenvinylacetát, polyethylenglykol (PEG), polyanhydridy, polyglykolová kyselina, kollagen, polyorthoestery a kyselina poly(mléčná). Mnohé metody pro přípravu takových formulací jsou patentovány nebo jsou zkušeným odborníkům obecně známy. Viz např. Robinso, J. R. (editor), Sustained and Controlled Release Drug Delivery Systems, Marcel Dekker inc., New York, 1978. U určitých provedení může být protilátka nebo část protilátky podle vynálezu podávána orálně, například s inertním ředidlem nebo asimilovatelným, jedlým nosičem. Sloučenina (a jiné ingredienty, žádají-li se) mohou být rovněž uzavřeny do tvrdého nebo měkkého obalu želatinové kapsle, slisovány do tablet nebo přidány přímo do stravy subjektu. Pro orální terapeutickou administraci mohou být sloučeniny inkorporovány do excipientů a použity ve formě ingestivních tablet, bukálních tablet, pastilek, tinktur, suspenzí, sirupů, oplatek a podobně. Pro podávání sloučeniny podle vynálezu jinou než parenterální aplikací, může být nezbytné sloučeninu potáhnout nebo podávat spolu s materiálem, aby se předešlo její inaktivaci.
Do kompozic mohou být rovněž včleněny doplňující účinné sloučeniny. Při určitých provedeních je protilátka nebo část protilátky podle vynálezu spolu-formulována a/nebo spolu-podávána s jedním nebo více dalšími terapeutickými prostředky. Na příklad hTNFa protilátka nebo část protilátky podle vynálezu může být spolu-formulována a/nebo spolu-podávána s methotrexatem, jednou nebo více dalšími protilátkami, které se vážou na jiné cíle (např. protilátky, které vážou jiné cytokiny, nebo které vážou molekuly buněčného povrchu), na jeden nebo více cytokinú, rozpustné TNFa receptory (viz např. PCT publikaci č. 94/06476) a/nebo na jedno nebo více chemických činidel, která inhibují produkci nebo účinnost hTNFa (jako cyklohexanyliden deriváty, jak je popsáno v PCT publikaci č. 93/19751). Mimo to jedna nebo více protilátek podle vynálezu mohou být užity v kombinaci se dvěma nebo více z předcházejících terapeutických prostředků. Takové kombinované terapie mohou výhodně využívat nižší dávky aplikovaných terapeutických prostředků a tak se vyhýbat možným toxicitám nebo komplikacím spojeným s různými mono-terapiemi. Užívání protilátek nebo částí protilátek podle vynálezu v kombinaci s jinými terapeutickými prostředky je diskutováno dále v oddíle IV.
Neomezující příklady terapeutických prostředků pro reumatoidní artritidu, se kterými může být protilátka nebo část protilátky podle vynálezu kombinována, zahrnují následující: nesteroidní, protizánětlivé(á) léčivo(a) (NSAID); cytokin-supresivní protizánětlivé(á) léčivo(a) (CSAID); CDP-571/BAY-10-3356 (humanizovaná anti-hTNFa protilátka, Celltech/Bayer; cA2 (chimerová anti-hTNFa protilátka, Centocor); 75 kdTNFR-lgG [75 kD TNF receptor-lgG fúzního proteinu, Immunex; viz např. Arthritis & Rheumatism 37, S295 (1994); J. Invest. Med Vol. 44 235A (1996)]; 55 kdTNFR-lgG (55 kD TNF receptor-lgG fúzního proteinu, Hoffman-LaRoche); IDEC-C9.1/SB 210396 [nedepleční primatizovaná anti-CD4 protilátka, IDEC/SmithKline; viz např. Arthritis & Rheumatism 38, S185 (1995)]; DAB 486-IL-2 a/nebo DAB 389-IL-2 [ IL-2 fúzní proteiny, Seragen; viz např. Arthritis & Rheumatism 36,1233 (1993)]; Anti-Tag (humanizovaný anti-IL-2Ra; Protein Design Labs/Roche); IL-4 (protizánětlivý cytokin, DNAX/Schering); IL 10 (SCH 52000, rekombinantní IL-10 protizánětlivý cytokin, DNAX/Schering); IL-4; IL-10 a/nebo agonisty IL-4 (např. agonistní protilátky); IL-1RA (antagonistický IL-1 receptor, Synergen/Amgen); TNF-bp/s-TNFR [rozpustný TNF vázající protein; viz např. Arthritis & Rheumatism 39, No. 9 (supplement) S284 (1996); Amer. J. Physiol. - Heart and Circulatory Physiology 268, 37-42 (1995)]; R973401 [inhibitor fosfodiesterázy Typ IV; viz např. Arthritis & Rheumatism 39, No. 9 (supplement) S282 (1996)]; MK-966[COX-2 inhibitor; viz např. Arthritis & Rheumatism 39, No. 9 (supplement) S81 (1996)]; lloprost [viz např. Arthritis & Rheumatism 39, No. 9 (supplement) S82 (1996)]; methotrexat; thalidomid [viz např. Arthritis & Rheumatism 39, No. 9 (supplement) S282 (1996)] a thalidomidu příbuzná léčiva (např. Celgen); leflunomid [proti zánětům a inhibitor cytokinu; viz např. Arthritis & Rheumatism 39, No. 9 (supplement) S131 (1996); Inflammation Research 45, 103-107 (1996)]; tranexamovou kyselinu [inhibitor aktivace plazminogenu; viz např. Arthritis & Rheumatism 39, No. 9 (supplement) S284 (1996)]; T-614 [inhibitor cytokinu; viz např. Arthritis & Rheumatism 39, No. 9 (supplement) S284 (1996)]; prostaglandin E1 [viz např. Arthritis & Rheumatism 39, No. 9 (supplement) S282 (1996)]; tenidap [nesteroidní protizánětlivé léčivo; viz např. Arthritis & Rheumatism 39, No. 9 (supplement) S280 (1996)]; naproxen [nesteroidní protizánětlivé léčivo; viz např. Neuro Report 7, 1209-1213 (1996)]; meloxicam (nesteroidní protizánětlivé léčivo); ibuprofen (nesteroidní protizánětlivé léčivo); piroxicam (nesteroidní protizánětlivé léčivo); diclofenac (nesteroidní protizánětlivé léčivo); indomethacin (nesteroidní protizánětlivé léčivo); sulfasalazine [viz např. Arthritis & Rheumatism 39, No. 9 (supplement) S281 (1996)]; azathioprine [viz např. Arthritis & Rheumatism 39, No. 9 (supplement) S281 (1996)]; ICE inhibitor (inhibitor enzymu konvertujícího interleukin-1 β); zap-70 a/nebo lek inhibitor (inhibitor tyrosinkinázy zap-70 nebo lek); VEGF inhibitor a/nebo VGEF-R inhibitor (inhibitor růstového faktoru vaskulárních endotelových buněk nebo receptoru vaskulárních endotelových buněk; inhibitory angiogeneze); kortikosteroidní protizánětlivé léky (např. SB203580); inhibitory TNF konvertázy; anti-IL12 protilátky; interleukin-11 [viz např. Arthritis & Rheumatism 39, No. 9 (supplement) S286 (1996)]; interleukin-13 [viz např. Arthritis & Rheumatism 39, No. 9 (supplement) S308 (1996)]; inhibitory interleukinu-17 [viz např. Arthritis & Rheumatism 39, No. 9 (supplement) S120 (1996)]; zlato; penicillamin; chlorochin; hydroxychlorochin; chlorambucil; cyklofosfamid; cyklosporin; totální lymfoidní ozáření; anti-tymocytový globulin; anti-CD4 protilátky; CD5-toxiny; orálně podávané peptidy a kolagen; lobenzarit disodný, cytokin regulující agens (CRA) HP228 a HP466 (Houghten Pharmaceuticals, inc.); ICAM-1 antimediátorové fosforothioátové oligodeoxynukleotidy (ISIS 2302; Isis Pharmaceuticals, Inc.); rozpustný komplementní receptor 1 (TP10; T Cell Sciences, Inc.); prednison, orgotein; glykosaminoglykan-polysulfát; minocyklin; anti-IL2R protilátky, mořské a botanické lipidy [mastné kyseliny z ryb a semen rostlin; viz např. DeLuca a spol., Rheum. Dis. din. North Am. 21, 759-777 (1995)]; auranofin; fenyl-butazon; meklofenamová kyselina; flufenamová kyselina; intravenozní imunoglobulin; zileuton; mykofenolová kyselina (RS-61443); tacrolimus (FK-506); sirolimus (rapamycin); amiprilose (therafektin); kladribin (2-chlordeoxyadenosin) a azaribin.
Neomezující příklady terapeutických prostředků pro zánětlivou chorobu vnitřností, se kterými může být protilátka nebo část protilátky podle vynálezu kombinována, zahrnují následující: budenosid; epidermální růstový faktor; kortikosteroidy; cyklosporin; sulfasalazin; aminosalicyláty; 6-merkaptopurin; azathioprin; metronidazol; inhibitory lipoxygenázy; mesalamin; olsalazin; balsalazid; antioxidanty; inhibitory tromboxanu; antagonisty IL-1 receptoru; anti-IL-1 p monoklonální protilátky; růstové faktory; inhibitory elastázy; pyridyl-imidazolové sloučeniny; CDP-571/BAY-10-3356 (humanizovaná anti-TNFa protilátka, Celltech/Bayer); cA2 (chimerová anti-TNFa protilátka, Centocor); 75 kdTNFR-lgG [75 kD TNF receptor-lgG fúzního proteinu, Immunex; viz např. Arthritis & Rheumatism 37, S295 (1994); J. Invest. Med. Vol. 44 235A (1996)]; 55 kD TNFR-lgG (55 kD TNF receptor-lgG fúzního proteinu, Floffman-LaRoche); interleukin-10 (SCFI 52000, Schering Plough); IL-4; agonisty IL-10 a/nebo IL-4 (např. agonistní protilátky); interleukin-11; prekurzory prednisolonu, dexamethasonu nebo budenosidu konjugované s glukuronidem nebo dextranem; ICAM-1 antimediátorové fosforothioátové oligodeoxynukleotidy (ISIS 2302; Isis Pharmaceuticals, lne.); rozpustný komplementní receptor 1 (TP10; T Cell Sciences, lne.); mesalazin s pomalým uvolňováním; methotrexat; antagonisté faktoru aktivace krevních destiček (PAF); ciprofloxacin a lignokain.
Neomezující příklady terapeutických prostředků pro roztroušenou sklerózu, se kterými může být protilátka nebo část protilátky podle vynálezu kombinována, zahrnují následující: kortikosteroidy; prednisolon; methylprednisolon; azathioprin; cyklofosfamid; cyklosporin, methotrexat; 4-aminopyridin; tizanidin; interferon-pia (Avonex™, Biogen); interferon-p1b (Betaseron™, Chiron/Berlex); Copolymer 1 (Cop-1, Copaxone™, Teva Pharmaceutical Industries, lne.); hyperbarický kyslík; intravenozní imunoglobulin; clabribine; CDP-571/BAY-10-3356 (humanizovaná anti-hTNFa protilátka, Celltech/Bayer); cA2 (chimerová anti-hTNFa protilátka, Centocor); 75 kdTNFR-lgG [75 kD TNF receptor-lgG fúzního proteinu, Immunex; viz např. Arthritis & Rheumatism Vol. 37, S295 (1994); J. Invest Med. Vol. 44 235A (1996)]; 55 kdTNFR-lgG (55 kD TNF receptor-lgG fúzního proteinu, Floffman-LaRoche); IL-10; IL-4 a agonisté IL-10 a/nebo IL-4 (např. agonistní protilátky).
Neomezující příklady terapeutických prostředků pro sepsi, se kterými může být protilátka nebo část protilátky podle vynálezu kombinována, zahrnují následující: hypertonické roztoky solanky; antibiotika, intravenozní gamma globulin, kontinuální hemofiltraci; karbapenem (např. meropenem); antagonisty cytokinů jako TNFa, IL-1 β, IL-6 a/nebo IL-8; CDP-571/BAY-10-3356 (humanizovaná anti-hTNFa protilátka, Celltech/Bayer); cA2 (chimerová anti-hTNFa protilátka, Centocor); 75 kdTNFR-lgG [75 kD TNF receptor-lgG fúzního proteinu, Immunex; viz např. Arthritis & Rheumatism Vol. 37, S295 (1994); J. Invest. Med. Vol. 44 235A (1996)]; 55 kdTNFR-lgG (55 kD TNF receptor-lgG fúzního proteinu, Hoffman-LaRoche); regulační činidla cytokinů (CRA) HP228 a HP466 (Houghten Pharmaceuticals, lne.); SK&F 107647 (nízkomolekulární peptid, SmithKline Beecham); tetravalentní guanylhydrazon CNI-1493 (Picower Institute); inhibitor cesty tkáňového faktoru (TFPI, Chiron); PHP (chemicky modifikovaný hemoglobin, APEX Bioscience); chelátory a cheláty železa včetně komplexu trojmocného železa s kyselinou diethylentriaminpentaoctovou [DTPA iron (III), Molichem Medicines); lysofyllin (syntetická malá molekula methylxanthinu, Cell Therapeutics, lne.); PGG-Glucan (ve vodě rozpustný p1,3 glukán, Alpha-Beta technology); apolipoprotein A-1 rekonstituovaný s lipidy; chirální hydroxamové kyseliny (syntetické antibakteriální látky, které inhibují biosyntézu lipidu A); protilátky anti-endotoxinu; E5531 (syntetický antagonista lipidu A, Eisai America, lne.); rBPl2i (rekombinantní N-terminální fragment lidského proteinu baktericidního / permeabilitu zvyšujícího proteinu a syntetické anti-endotoxinové peptidy (SAEP, BiosYnth Research Laboratories).
Neomezující příklady terapeutických prostředků pro syndrom dechové obstrukce dospělých, se kterými může být protilátka nebo část protilátky podle vynálezu kombinována, zahrnují následující: anti-IL-8 protilátky; terapii náhrady povrchově aktivních látek; CDP-571/BAY-10-3356 (humanizovaná anti-hTNFa protilátka, Celltech/Bayer; cA2 (chimerová anti-hTNFa protilátka, Centocor); 75 kdTNFR-lgG [75 kD TNF receptor-lgG fúzního proteinu, Immunex; viz např. Arthritis & Rheumatism Vol. 37, S295 (1994); J. Invest. Med. Vol. 44 235A (1996)] a 55 kdTNFR-lgG (55 kD TNF receptor-lgG fúzního proteinu, Hoffman-LaRoche).
Farmaceutické kompozice podle vynálezu mohou obsahovat "terapeuticky efektivní množství" nebo "profylakticky efektivní množství" protilátky nebo části protilátky podle vynálezu. "Terapeuticky efektivní množství" se týká množství 32 • ι »·
#· ·♦ t ♦ · · ♦ • ♦ · · · • · ♦···· • · t efektivního pro dosažení požadovaného terapeutického výsledku při dávkách a nutných časových periodách. Terapeuticky efektivní množství protilátky nebo části protilátky podle vynálezu může kolísat podle faktorů jako je stav choroby, věk, pohlaví a hmotnost jednotlivce a schopnosti protilátky nebo části protilátky vyvolat u jednotlivce požadovanou odezvu. Terapeuticky efektivní množství je také takové, při němž jakékoliv toxické nebo škodlivé účinky protilátky nebo části protilátky jsou převažovány účinky terapeuticky prospěšnými. "Profylakticky efektivní množství" se týká množství efektivního pro dosažení požadovaného profylaktického výsledku při dávkách a nutných časových periodách. Protože profýlaktická dávka bývá podávána subjektu před nebo v ranějším období choroby, je typické, že profylakticky efektivní množství bude menší než terapeuticky efektivní množství.
Režim dávkování může být upraven, aby poskytoval optimum požadované odezvy (např. terapeutické nebo profylaktické odezvy). Na příklad může být administrován jediný bolus, může být podáno několik rozdělených dávek po čase, nebo dávka může být proporcionálně snižována nebo zvyšována podle potřeb terapeutické situace. Je zvláště výhodné formulovat parenterální kompozice ve formě jednotek pro usnadnění administSce a jednotnost dávkování. Zde používaná forma jednotky dávky se vztahuje na fysikálně samostatné celky, vhodné jako jednotkové dávky pro savčí objekty, které mají být ošetřovány; každá jednotka obsahuje předem stanovené množství účinné sloučeniny vypočtené, aby poskytovalo požadovaný terapeutický efekt ve spojení s požadovaným farmaceutickým nosičem. Specifikace pro jednotkové formy dávky podle vynálezu jsou diktovány a přímo závisí na (a) jedinečných vlastnostech účinné sloučeniny a zejména na terapeutickém nebo profylaktickém účinku, který má být dosažen a (b) omezeních sensitivity u jednotlivců, inherentních druhu namísení takové účinné sloučeniny k ošetřování. Příkladný, neomezující rozpětí pro terapeuticky nebo profylakticky účinné množství protilátky nebo části protilátky podle vynálezu je 10-100 mg, raději 20-80 mg a nejlépe kolem 40 mg. Je třeba poznamenat, že hodnoty dávek mohou kolísat podle typu a vážnosti stavu, v němž má dojít k úlevě. Dále je třeba pochopit, že pro každý jednotlivý subjekt by měly být časově upravovány specifické režimy dávkování podle individuální potřeby a profesionálního posouzení osoby, která podává nebo dohlíží na podávání kompozic, a že rozpětí zde uváděné dávky jsou pouze jako příklad a nejsou myšleny, aby omezovaly rozsah nebo praktikování nárokované kompozice. 33 «· 9 4 9 4 t · * 4 4 9 9 4 4 4 t · · t · 4 4*44 99 · * 9 9 *999 4494 4949 449 49 9 99 49 49 9944 99 4 V. Využití protilátek podle vynálezu
Anti-hTNFa protilátky nebo jejich části podle vynálezu mohou být svojí danou schopností vázat hTNFa využity k detekci hTNFa (např. v biologickém vzorku jako je sérum nebo plazma) při použití konvenčního imunotestu jako jsou testy s enzymem spojeného imunosorbentu (ELISA), radioimunotestj (RIA) nebo imunohistochemie tkáně. Vynález poskytuje způsob pro detekci hTNFa v biologickém vzorku zahrnující navázání styku biologického vzorku s protilátkou nebo částí protilátky podle vynálezu a detegování buď protilátky (či části protilátky) vázané na hTNFa anebo nevázané protilátky (či části protilátky), aby se takto zjistila hTNFa v biologickém vzorku. Protilátka je přímo nebo nepřímo označena detegovatelnou substancí, aby se usnadnila detekce vázané nebo nevázané protilátky. Vhodné detegovatelné substance představují různé enzymy, prostetické skupiny, fluorescenční materiály, luminiscenční materiály a radioaktivní materiály. Příklady vhodných enzymů zahrnují peroxidázu křene alkalickou fosfatázu, β-galaktosidázu nebo acetylcholinesterázu; příklady vhodných komplexů prostetických skupin představuje streptavidin/biotin a avidin/biotin; příklady vhodných fluorescenčních materiálů jsou umbelliferon, fluorescein, fluorescein-isokyanát, rhodamin, dichlortriazinylaminofluorescein, dansylchlorid, fykoerythrin; příkladem luminiscenčního materiálu je luminol a příklady vhodných radioaktivního materiálů jsou 125l, 131l, 35S nebo 3H.
Alternativně k označování protilátky může být hTNFa v biologických tekutinách analyzována kompetičním imunotestem využívajícím rhTNFa standardy označené detegovatelnou substancí a neoznačenou anti-hTNFa protilátku. Při tomto eseji se kombinují rhTNFa standardy a anti-hTNFa protilátka a stanoví se množství rhTNFa standardu vázaného na neoznačenou protilátku. Množství hTNFa v biologickém vzorku je nepřímo úměrné množství labelovaného hTNFa standardu vázaného na anti-hTNFa protilátku.
Pro detekci TNFa z jiných než lidských species, zejména TNFa z primátů (např. šimpanz, pavián, kosman, cynomolgus a makak), vepře a myši může být použita také D2E7 protilátka, protože D2E7 se může vázat ke každému z těchto TNFa.
Protilátky a části protilátek podle vynálezu jsou schopné neutralizovat účinnost hTNFa jak in vitro, tak in vivo (viz U. S. patent č. 6,090,382). Navíc alespoň některé z protilátek podle vynálezu, jako D2E7 mohou neutralizovat účinnost hTNFa z jiných 34 34 99 9999 99 99 99 9 9 9 · » « · t 9 9 9 • » « f 9 · « · t · 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9 9999 • t · · 9 9 9 9 9 9 99 99 99 9999 99 9 species. Protilátky a části protilátek podle vynálezu mohou být podle toho využity pro inhibici účinnosti hTNFa např. v kultuře buněk obsahující hTNFa u lidských subjektů nebo u jiných savčích subjektů majících TNFa, se kterým protilátka podle vynálezu křížově reaguje (např. šimpanz, pavián, kosman, cynomolgus a makak, vepř nebo myš). U jednoho provedení poskytuje vynález způsob inhibice účinnosti TNFa představující kontaktování TNFas protilátkou nebo částí protilátky podle vynálezu tak, že je účinnost TNFa inhibována. TNFa je přednostně lidským TNFa. Na příklad do buněčné kultury obsahující, nebo domněle obsahující TNFa, může být do kultivačního media přidána protilátka nebo část protilátky podle vynálezu, aby byla účinnost hTNFa v kultuře inhibována. V preferovaném provedení poskytuje vynález způsoby ošetřování zdravotních potíží, při kterých je podávání anti-TNFa protilátky prospěšné, zahrnující čtrnáctidenně subkutánní administraci protilátky nebo části protilátky podle vynálezu subjektu tak, že je zdravotní potíž léčena. Při zvlášť preferovaném provedení je protilátka aplikována subkutánně ve čtrnáctidenním harmonogramu. Při jiném zejména preferovaném provedení je protilátka podávána před, během nebo po aplikaci methotrexatu. Přednostně je subjektem subjekt lidský. Alternativně může být subjektem savec exprimující TNFa, se kterým protilátka podle vynálezu reaguje křížově. Dále může ještě být subjektem savec, do něhož byl zaveden hTNFa (např. podáním hTNFa nebo expresí hTNFa transgenu). Protilátka podle vynálezu může být lidskému subjektu podávána za terapeutickými účely (diskutováno dále, níže). Mimoto kvůli veterinárním účelům nebo jako model lidské choroby na zvířeti může být protilátka podle vynálezu podávána jinému než lidskému savci exprimujícímu TNFa, se kterým protilátka reaguje křížově (např. primátovi, vepři nebo myši). Vzhledem k tomu mohou být takové modely na zvířatech užitečné pro hodnocení terapeutické účinnosti protilátek podle vynálezu (např. testování dávek a časových průběhů administrace).
Pod zde užívaným výrazem "zdravotní potíž, při které je podávání anti-TNFa protilátky prospěšné" se rozumí, že zahrnuje choroby a jiné zdravotní potíže, při kterých se prokázalo, že přítomnost TNFa u subjektu trpícího chorobou je nebo existuje domněnka, že je buď zodpovědná za patofysiologii choroby nebo je faktorem, který přispívá ke zhoršování choroby, anebo kde bylo prokázáno, že jiná anti-TNFa protilátka nebo její biologicky účinná část byla úspěšně použita k léčení 35 • · Μ • · · ♦ · · · ♦ · ♦ ♦ · · • · · ♦ · * · • · ♦ · · · · ·· ♦ · ·· ·· · · ·· ·♦·· • · ·· · • · * t * t ·«!· • · · ♦ · ♦ choroby. Tudíž zdravotní potíž, při které účinnost TNFa škodí, je potíží u které se očekává, že inhibice účinnosti TNFa uleví symptomům a/nebo progresi zdravotní potíže. Takové potíže mohou být dosvědčeny např. zvýšením koncentrace TNFa v biologické tekutině subjektu trpícího chorobou (např. zvýšení koncentrace TNFa v séru, plazmě, synoviálním mazu atd. u subjektu), které může být detegováno např. za použití anti-TNFa protilátky, jak je shora popsáno. Existují početné příklady potíží, při nichž je účinnost TNFa na újmu. Využití protilátek a částí protilátek podle vynálezu při léčení specifických potíží je diskutováno níže dále: A. Sepse
Faktor nekrotizující tumor v patofysiologii sepse hraje nepopiratelnou roli s biologickými účinky, mezi něž patří hypotenze, myokardiální suprese, syndrom vaskulární propustnosti, nekróza orgánu, stimulace uvolňování toxických sekundárních mediátorů a aktivace kaskády srážení [viz např. Tracey K. J. a Cerami A., Annu. Rev. Med. 45, 491-503 (1994); Russell D. a Thompson R. C. Curr. Opin. Biotech. 4, 714-721 (1993)]. Podle toho lidské protilátky a části protilátek podle vynálezu mohou být využity k léčení sepse v každé její klinické situaci, včetně septického šoku, endotoxického šoku, gramnegativní sepse, a syndromu toxického šoku. Dále navíc, anti-TNFa protilátka nebo její část podle vynálezu může být pro léčení sepse administrována spolu s jedním nebo více dalšími terapeutickými prostředky, které mohou sepsi dále zmírňovat, jako je inhibitor interleukinu-1 (jako ty, popisované v PCT publikaci č. WO 92/16221 a č. WO 92/17583), cytokin interleukin-6 (viz např. PCT publikaci č. WO 93/11793) nebo antagonista faktoru aktivace krevních destiček (viz např. publikaci Evropské patentové přihlášky č. EP 374 510).
Dodatečně je anti-TNFa protilátka nebo její část podle vynálezu v preferovaném provedení administrována lidskému subjektu v podskupině pacientů se sepsí majících v době ošetřování koncentraci IL-6 v séru nebo plazmě nad 500 pg/ml nebo přednostněji 1000 pg/ml (viz Daum L. a spol., PCT publikace č. WO 95/20978). 36 ·* ·· *· · ♦ · · ·*·* I 9 · • · · · · 0 0 0 0 0 0 0 000 0 0 00 00000 0 0 0 0 t · f · · · 00 00 00 0000 00 0 B. Autoimunitní choroby
Faktoru nekrotizující tumor byla prokázána aktivní role při patofysiologii různých autoimunitních chorob. TNFa byla například prokázána účast na vyvolávání zánětu tkáně a příčině destrukce kloubu při reumatoidní artritidě [viz např. Tracey a Cerami, shora; Arend W. P, a Dayer J-M., Arth. Rheum. 38,151-160 (1995); Fava R. A. a spol., Clin. Exp. Immunol. 94, 261-266 (1993)]. TNFa byl také účasten na vyvolávání smrti buněčných ostrůvků a zprostředkování inzulínové rezistence při diabetes (viz např. Tracey a Cerami, shora; PCT publikace č. WO 94/08609). TNFa byl rovněž prokázán jako mediátor cytotoxicity vůči oligodendrocytům a indukce zánětlivých nákaz při roztroušené skleróze (viz např. Tracey a Cerami, shora). Chimerové a humanizované myší anti-hTNFa protilátky byly podrobeny klinickému testování pro léčbu reumatoidní artritidy [viz např. Elliott M. J. a spol., Lancet 344, 1125-1127 (1994); Elliott M. J. a spol., Lancet 344, 1105-1110 (1994); Rankin E. C. a spol., Br. J. Rheumatol. 34, 334-342 (1995)].
Lidské protilátky a části protilátek podle vynálezu mohou být využity pro léčení autoimunitních chorob, zejména těch, které jsou spojeny se zánětem, včetně reumatoidní artritis, reumatoidní spondylitis, osteoartritis a artritické dny, alergie, roztroušené sklerózy, autoimunitní diabetes, autoimunitní uveitis a nefrotického syndromu. Typické je protilátku nebo část protilátky administrovat systémově, i když pro určité nemoci může být prospěšná lokální administrace protilátky nebo části protilátky v místě zánětu (např. lokální administrace do kloubů při reumatoidní artritidě nebo topická administrace k diabetickým vředům, samotná nebo v kombinaci s cyklohexanylidenderivátem, jak je popsáno v PCT publikaci č. WO 93/19751). C. Infekční choroby
Faktor nekrózy tumoru byl prokázán jako mediátor biologických účinků pozorovaných při různých infekčních chorobách. TNFa byl na příklad prokázán jako mediátor zánětu mozku a kapilární trombózy a postižení infarktem při malarii (viz např. Tracey a Cerami, shora). TNFa byl také prokázán jako mediátor zánětu mozku, při indukování porušení hematoencefalické bariéry, při spouštění septického šokového syndromu a při aktivaci žilního infarktu při meningitidě (viz např. Tracey a Cerami, shora). TNFa byl rovněž prokázán při vyvolání kachexie, stimulaci proliferace viru a mediaci poškození centrálního nervového systému při syndromu získané imunitní nedostatečnosti (AIDS) (viz např. Tracey a Cerami, shora). Protilátky a části protilátek podle vynálezu mohou být tedy využity k léčení infekčních chorob, včetně bakteriální meningitidy (viz např. publikaci Evropské patentové přihlášky č. EP 585 705), cerebrální malarie, AIDS a AIDS příbuzného komplexu (ARC) (viz např. publikaci evropské patentové přihlášky č. EP 230 574), stejně jako infekce cytomegalovirem sekundární po transplantaci [viz např. Fietze E. a spol., Transplantation 58, 675-680 (1994)]. Protilátky a části protilátek podle vynálezu mohou být také využity ke zmírnění symptomů spojených s infekčními chorobami včetně horečky a myalgie vlivem infekce (jako při chřipce) a kachexie druhotné k infekci (např. druhotné k AIDS nebo ARC). D. Transplantace
Faktor nekrotizující tumor byl prokázán jako klíčový mediátor odmítání allo-štěpů a nemoci transplantát verzus hostitel (GVHD) a při mediaci nepříznivé reakce, která byla pozorována, když, aby se inhibovalo odmítání ledvinových transplantátů, se použije krysí protilátka OKT3, zacílená proti komplexu CD3 receptoru T buněk [viz např. Tracey a Cerami, shora; Eason J. D. a spol., Transplantation 59, 300-305 (1995); Suthanthiran M. a Strom T. B., New Engl. J. Med. 331, 365-375 (1994)]. Protilátky a části protilátek podle vynálezu mohou být tedy využity k inhibici odmítání transplantátu včetně odmítání allotransplantátů i xenotransplantátů a k inhibování GVHD. I když protilátka nebo část protilátky může být používána samotná, více se preferuje užívat ji v kombinaci s jedním nebo více jinými prostředky, které inhibují imunitní odezvu proti allotransplantátů nebo inhibují GVHD. Například při jednom provedení je protilátka nebo část protilátky podle vynálezu použita v kombinaci s OKT3, aby se inhibovaly reakce, které OKT3 indukuje. Při jiném provedení je protilátka nebo část protilátky podle vynálezu použita v kombinaci s jednou nebo více protilátkami zaměřenými na jiné cíle zapojené do regulování imunitních odpovědí, např. na CD25 molekuly buněčného povrchu (α-receptor interleukinu-2), CD11a (LFA-1), CD54 (ICAM-1), CD4, CD45, CD28/CTLA4, CD80 (B7-1) a/nebo CD86 (B7-2). Při ještě jiném provedení je protilátka nebo část protilátky podle vynálezu použita v kombinaci s jedním nebo více obvyklými supresivními činidly jako je cyklosporin A nebo FK506. 38 ·· ···· • · »· ·· • • · • • · · · ♦ · • # · • « f · • · • · • · • • · · · ♦ · ♦ ♦ ··· • · • · • ♦ • ·· ·· ·· »··· • E. Zhoubné bujení
Faktor nekrotizující tumor byl prokázán při vznikání kachexie, ve stimulování růstu nádoru, při zvyšování metastatického potenciálu a mediaci cytotoxicity při zhoubném bujení (viz např. Tracey a Cerami, shora). Podle toho protilátky nebo části protilátek podle vynálezu mohou být použity při léčbě zhoubných nádorů k inhibici růstu nádoru nebo metastáze a/nebo ke zmírnění kachexie, druhotné ke zhoubnému bujení. Protilátka nebo část protilátky může být podávána systémově nebo lokálně na místě tumoru. F. Plicní potíže
Faktor nekrotizující tumor byl prokázán v patofysiologii syndromu dechové obstrukce dospělých, včetně stimulování leukocyt-endoteliální aktivace, zaměření cytotoxicity na pneumocyty a indukování syndromu vaskulární propustnosti (viz např. Tracey a Cerami, shora). Podle toho mohou být protilátky nebo části protilátek podle vynálezu použity při léčbě různých plicních potíží, včetně syndromu dechové obstrukce dospělých (viz např. PCT publikaci č. WO 91/04054), plicního šoku, chronické plicní zánětlivé choroby, pulmonární sarkoidózy, pulmonární fibrózy a silikózy. Protilátka nebo část protilátky může být podávána systémově nebo lokálně na povrch plic na příklad jako aerosol. G. Střevní potíže
Faktor nekrotizující tumor byl prokázán v patofysiologii zánětlivých střevních potíží [viz např. Tracy K. J. a spol., Science 234, 470-474 (1986); Sun X-M. a spol., J. Clin. Invest. 81, 1328-1331 (1988); MacDonald T. T. a spol., Clin. Exp. Immunol. 81, 301-305 (1990)]. Chimerové myší anti-hTNFa protilátky byly podrobeny klinickému testování pro léčení Crohnovy choroby [ Dullemen Η. M. a spol., Gastroenterology 109, 129-135 (1995)]. Lidské protilátky nebo části protilátek podle vynálezu mohou být pro léčení střevních potíží použity rovněž, např. u idiopatické zánětlivé střevní choroby, která zahrnuje dva syndromy, Crohnovu chorobu a ulcerózní kolitidu. H. Srdeční potíže
Protilátky a části protilátek podle vynálezu mohou být také použity k léčení různých kardiálních potíží včetně ischemie srdce (viz např. publikaci evropské patentové přihlášky č EP 453 898) a srdeční nedostatečnosti (slabost srdečního svalu) (viz např. PCT publikaci č. WO 94/20139). I. Jiné
Protilátky a části protilátek podle vynálezu mohou být také použity k léčení různých jiných potíží, u nichž je aktivita TNFa na újmu. Příklady jiných chorob a potíží, u kterých byla v patofysiologii aktivita TNFa prokázána, a které tedy mohou být ošetřovány za použití protilátky nebo části protilátky podle vynálezu, zahrnují zánětlivé kostní potíže a chorobu kostní resorpce [viz např. Bertolini D. R. a spol., Nátuře 319, 516-518 (1986); Konig A. a spol., J. Bone Miner. Res. 3, 621-627 (1988); Lerner U.H. a Ohlin A., J. Bone Miner. Res. 8, 147-155 (1993) a Shankar G. a Stem P. H., Bone 14, 871-876 (1993)], hepatitidu včetně alkoholické hepatitidy [viz např. McCIain C. J. a Cohen D. A., Hepatology 9, 349-351 (1989); Felver Μ. E. a spol., Alcohol. din. Exp. Res. 14, 255-259 (1990) a Hansen J., a spol., Hepatology 20, 461-474 (1994)] a virovou hepatitidu [ Sheron N. a spol., J. Hepatol. 12, 241-245 (1991) a Hussain M. J. a spol., J. din. Pathoi. 47, 1112-1115 (1994)], poruchy koagulace [viz např. van der Poli a spol., Prog. din. Biol. Res. 367, 55-60 (1991)], spáleniny [ viz např. Giroir B. P. a spol., Am. J. Physiol. 267, H118-124 (1994) a Liu X. S. a spol., Burns 20, 40-44 (1994)], požkození reperfuze (viz např. Scales W. E. a spol., Am. J. Physiol. 267, G1122-1127 (1994); Serrick a spol., Transplantation 58, 1158-1162 (1994) a Yao Y. M. a spol., Resuscitation 29, 157-168 (1995)] tvorbu keloidů (viz např. McCauley R. L. a spol., J. din. Immunol. 12, 300-308 (1992)], tvorbu zjizvené tkáně a horečku. Přehled obrázků na výkresech
Obrázky 1A a 1B popisují odezvy na American College of Rheumatology 20 (ACR20) a ACR 50 u pacientů trpících reumatoidní artritidou (RA) po subkutánním dávkování protilátky D2E7 každý týden celkem po dvanáct týdnů (1A) nebo po subkutánním dávkování protilátky D2E7 a methotrexatu každý druhý týden (1B) celkem po dvacetčtyři týdnů. Data ukazují, že dávkování každý druhý týden je účinné stejně jako dávkování každý týden.
Obrázek 2 popisuje odezvy na ACR20, ACR50 a ACR70 u pacientů trpících RA po subkutánním dávkování protilátky D2E7 a methotrexatu každý druhý týden po dvacetčtyři týdnů.
Obrázky 3A a 3B popisují časové průběhy počtu bolestivých kloubů (3A) a počtu oteklých kloubů (3B) po dvacetčtyři týdnů u pacientů trpících RA po subkutánním dávkování protilátky D2E7 a methotrexatu každý druhý týden po dvacetčtyři týdnů.
Obrázek 4 popisuje výsledky krátké formy zdravotního vyšetření (SF-6) pacientů trpících RA po subkutánním dávkování protilátky D2E7 a methotrexatu každý druhý týden po dvacetčtyři týdnů. RP = fysická role, PF = fysická funkce, BP = tělesná bolest, GH = celkové zdraví, V = vitalita, SF = sociální činnost, RE = emoční role a ME = duševní zdraví.
Obrázek 5 popisuje procenta subjektů odpovídajících na ACR po jediné intravenozní injekci protilátky D2E7 a methotrexatu u pacientů trpících RA.
Tento vynález je dále objasňován následujícími příklady, které nejsou chápány jako omezující. Obsahy všech odvolávek , patentů a publikovaných patentových přihlášek citované všude v této přihlášce jsou tímto zahrnovány v odkazech. Příklady provedení vynálezu Příklad 1 Ošetření anti-TNFa protilátkou Účinnost D2E7 po subkutánní administraci V této studii bylo dvacetčtyři pacientů s aktivní RA ošetřováno v týdenních dávkách s 0,5 mg/kg D2E7 (n = 18) nebo s placebo (n = 6) subkutánními injekcemi po tři měsíce. Pacienti zúčastňující se na této studii měli před vstupem do studie střední dobu trvání choroby 10,1 roků při skóre aktivity choroby (DAS) v počtu 4,87 a průměrem 3,4 DMARD (chorobu modifikujících antireumatických léků) a znovu procházeli značnou aktivitou nemoci. Ti, kdož projevili odezvu, pokračovali v základním ošetřování s D2E7, zatímco u pacientů, u nichž odezva na 0,5 mg/kg dávky selhala, nebo kteří ztratili DAS odezvu na 0,5 mg/kg dávky, bylo po dvanáctém týdnu studie zvýšeno dávkování subkutánní injekcí na 1 mg/kg.
První zaregistrovaní pacienti obdrželi až šedesát injekcí a byli tudíž šedesát týdnů se studovaným lékem. Účinnost subkutánního dávkování byla podobná intravenozním injekcím. Až 78 % pacientů dosáhlo DAS a ACR20 odezvu během prvních týdnů ošetřování. Subkutánní D2E7 při dávce 0,5 mg/kg/týden snížila po dvanácti týdnech ve srovnání se základní linií počet oteklých kloubů (SWJ) o 54 %, počet bolestivých kloubů (TJC) o 61 % a CPR o 39 %, zatímco ve skupině s placebo všechny parametry vzrostly. Po ukončení placebem kontrolované doby v této studii, pokračovali pacienti v ošetřování až po čtrnáct měsíců s trvalou účinností. Tyto výsledky ukazují, že subkutánní D2E7 o dávce 0,5 mg/kg/týden může být tedy bezpečně, soběstačně administrována s dobrou lokální snášenlivostí.
Administrace D2E7 a methotrexatu V této studii pacienti obdrželi subkutánně nebo intravenozně placebo nebo D2E7 v dávce 1 mg/kg vedle jejich stále pokračujícího ošetřování MTX (methotrexatem). Do studie bylo zaregistrováno padesát čtyři pacientů a osmnáct pacientů obdrželo intravenozně D2E7 a subkutánně placebo, osmnáct pacientů obdrželo intravenozně placebo a subkutánně D2E7 a osmnáct pacientů obdrželo placebo intravenozně a subkutánně. Pacienti dostali svoji druhou dávku teprve až když ztratili svůj status slepé odezvy, ne dříve než čtyři týdny po první dávce. Od té doby dostávali všichni pacienti čtrnáctidenně základní dávku subkutánní injekce D2E7.
Demografická charakteristika studované populace v této studii představovala průměrné trvání RA 11,1 let, před expozicí průměrně 3,6 DMARD (jiné než MTX) a průměrné DAS při vstupu do studie 4,81. Dvacátýdevátý den 72 % intravenozně ošetřených pacientů a 44 % subkutánně ošetřených pacientů dosáhlo odezvy podle DAS kriteria při srovnání s pouze 28 % pacienty ošetřenými placebo (uvedeno dále na obrázku 5). Z těch, kteří se podrobili této studii 28 % placebem ošetřených pacientů vytrvávalo na ACR20 odezvě do 29 dne, ve srovnání se 72 % intravenozně D2E7 ošetřenými pacienty a 67 % subkutánně D2E7 ošetřenými pacienty, kteří udržovali své odezvy mezi jedním a třemi měsíci. 42 ·· ···· • · · • · · · · · · ·ι· · · · • · • A ·· · • « · · · · · • · · φ · · · ·· · * ·· ···· Příklad 2
Celková tělesná dávka subkutánně administrované anti-TNFa protilátky Subkutánní administrace D2E7 týdně V této studii bylo zaregistrováno stoosmdesátčtyři pacientů s RA a bylo určeno stanovit optimální celkovou tělesnou dávku subkutánně podávaného D2E7. Pacienti byli náhodně vybráni a dostávali buď 20, 40 nebo 80 mg D2E7 anebo placebo týdně po 12 týdnů, a po tomto čase byli placebem ošetření pacienti naslepo převedeni na 40 mg D2E7/týden. Přibližně 49 % pacientů dosáhlo ACR20 při 20 mg, 55 % pacientů dosáhlo ACR20 při 40 mg a 54 % pacientů dosáhlo ACR20 při 80 mg, zatímco pouze 10 % pacientů přijímajících placebo dosáhlo ACR20 (uvedeno dále na obrázku 1A). Přibližně 23 % pacientů dosáhlo ACR50 při 20 mg, 27 % pacientů dosáhlo ACR50 při 40 mg a 20 % pacientů dosáhlo ACR50 při 80 mg, a pouze 2 % pacientů přijímajících placebo dosáhlo ACR50. Tato data ukazují, že subkutánní D2E7, zvláště při dávce 40 mg/týden vyvolává dobrou odezvu. Příklad 3 Čtrnáctidenní subkutánní administrace anti-TNFa protilátky Subkutánní administrace D2E7 čtrnáctidenně
Byly zkoumány klinické efekty, bezpečnost, imunogenicita a tolerance RA pacientů s parciální odezvou na MTX po každém druhém týdnu po subkutánních (s. c.) injekcích placeba nebo D2E7 při několika úrovních dávek po dvacetčtyři týdnů ve spojení s pokračujícím ošetřováním s MTX.
Provedení studie
Byla provedena placebem kontrolovaná, dvojmo naslepo, randomizovaná, mnohacentrická studie u pacientů, u nichž byla nedostatečná účinnost nebo snášenlivost MTX. V průběhu pokusu pokračovali pacienti při stabilní dávce MTX v rozsahu dávek specifikovaném v započítávaných kriteriích popisovaných níže.
Tato studie sestává ze dvou částí" 1) "vymývací periody" čtyř týdnů před podáním první dávky medikace, při čemž během této doby byly odstraněny DMARD (s výjimkou MTX); a 2) "placebem kontrolované periody", při čemž během této doby byli pacienti randomizováni do jedné ze čtyř skupin po šedesáti sedmi pacientech, kteří obdrželi placebo, 20, 40 nebo 80 mg D2E7 (jako celkovou tělesnou dávku) podávané každý druhý týden s. c. po 24 týdnů. Každá dávka léku při studii byla podávána jako dvě s. c. injekce, každá po 1,6 ml. První dávka byla pacientovi administrována zdravotním personálem jako součást pacientova tréninku. Následující dávky byly administrovány samotným pacientem při studii za přímého dohledu školeného personálu po první čtyři týdny. Poté byly dávky administrovány mimo dějiště studie pacientem, školeným subjektem určeným pacientem nebo zdravotnickým personálem. Medikace pro čtyři nebo pět týdnů byla rozdělována pokaždé po klinickém ohodnocení. Pacienti byli sériově prohlíženi v prvním, druhém, třetím, čtvrtém šestém, osmém, dvanáctém a dvacátém čtvrtém týdnu studie s prohlídkami kloubu, jež byly prováděny inkognito konzultantem nezávislým na ošetřujícím lékaři. V této studii bylo zaregistrováno dvěstěsedmdesátjedna pacientů s RA. Populace studie zastupovala od umírněné do silné RA v populaci Severní Ameriky: přibližně ze 70 % ženskou populaci a převážně starší čtyřiceti let. Populace byla zvolena pomocí předem stanovených započítávaných a vylučovaných kriterií, která jsou zkušeným odborníkům známa, např. pacient musí získat diagnózu RA jak je definována kriterii American College of Rheumatology (ACR) (uvedeno dále v Příloze A) revidovanými v roce 1987.
Obrázky 1 B a 2-4 ukazují, že subkutánní, čtrnáctidenní ošetřování D2E7 kombinované s methotrexatem, bylo ve snižování příznaků a symptomů RA ve dvaceti čtyřech týdnech výrazně lepší než placebo. Všechny tři dávky D2E7 byly statisticky signifikantně účinnější než placebo podávané týdně. Dále navíc, D2E7 při 40 mg a 80 mg má lepší účinnost než 20 mg dávka.
EKVIVALENTY
Zkušení odborníci připustí nebo jsou schopni zjistit mnohé ekvivalenty ke zde popisovaným specifickým provedením, když není užíváno nic víc než rutinní experimentování. O takových ekvivalentech se má za to, že jsou zahrnuty v následujících nárocích.
ACR definice RA
Klasifikační soubor kriterií a funkcí pro reumatoidní artritidu (RA) z roku 1987
Kriterium Definice 1. Arthritis 3 nebo více oblastí kloubu Nejméně 3 oblasti kloubu měly současně otok měkkých tkání nebo výpotek (nejen samotné přerůstání kosti), zjištěné lékařem. 14 možných oblastí kloubů jsou levé nebo pravé PIP, MOP, zápěstí, loket, koleno, kotník a MTP klouby. 2. Arthritis kloubů ruky Zápěstí MCP MCP nebo zápěstí MCP a zápěstí Otok měkkých tkání nebo výpotek (nejen samotné přerůstání kosti) ve specifikované oblasti, zjištěný lékařem. Kde jsou specifikovány 2 oblasti muselo být postižení současné. Současné postižení týchž kloubních oblastí (jak je definováno pod 1. na obou 3. Symetrický otok (arthritis) stranách těla (bilaterární zahrnutí PIP, MCP nebo MTP je přípustné bez absolutní symetrie) 4. Reumatoidní faktor séra Demonstrace abnormálních množství reumatoidního faktoru séra jakoukoliv metodou pro kterou byl výsledek pozitivní u < 5 % normálních kontrolních subjektů. 5. Radiografické změny reumatoidní artritidy Radiografické změny typické pro reumatoidní artritidu na radiografech posteroanteriorní ruky a zápěstí, které musí zahrnovat eroze nebo nepochybné dekalcifikace kosti lokalizované uvnitř nebo nejzřetelněji přilehlé poškozeným kloubům (Samotné změny osteoartritidy nekvalifikují) Říká se, že pacient má RA, pokud je zahrnut do jedné z 5 RA podskupin uvedených v Tabulce 7 a má lékařem stanovenou klinickou diagnózu. Kriteria 1, 2 a 3 musela být přítomná nejméně 6 týdnů.
Arthritis and Rheumatism, Vol. 31, No. 2 (březen 1988)
PŘÍLOHA A • » • · iiS. SEQ ID N0:1:
Asp Ile Gin Met Thr Gin Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 5 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gin Gly Ile Arg Asn Tyr 20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Thr Leu Gin Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 .60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gin Pro 65 70 75 80
Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gin Arg Tyr Asn Arg Ala Pro Tyr 85 90 95
Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 10S SEQ ID NO:2:
Glu Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu vál Gin Pro Gly Arg 15 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asp Asp Tyr 20 25 30
Ala Met His Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 35 40 45
Ser Ala Ile Thr Trp Asn Ser Gly His Ile Asp Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60 .Glu Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr . 65 70 75 80
Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cyš 85 90 95
Ala Lys Val Ser Tyr Leu Ser Thr Ala Ser Ser Leu Asp Tyr Trp Gly 100 105 110
Gin Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 SEQ ID NO:3 :
Gin Arg Tyr Asn Arg Ala Pro Tyr Xaa 1 5
PŘÍLOHA B • * «· ·· • • • « · · • * • · · ·’ . · • • · · 1 ···· • ♦ · · ' · ·♦·· ♦· • * · · • · · • · · • · · * liG *· ** seq id ho:4:
Val Ser Tyr Leu Ser Thr Ala Ser Ser Leu Asp Xaa 1 S 10 SEQ XD NO: S:
Ala Ala Ser Thr Leu Gin Ser 1 S SEQ ID NO:6:
Ala Ile Thr Trp Asm Ser Gly His Ile Asp Tyr Ala Asp Ser Val Glu 1 5 10 1S
Gly SEQ ID NO:7:
Arg Ala Ser Gin Gly Ile Arg Asn Tyr Leu Ala 15 10 SEQ ID NO:8:
Asp Tyr Ala Met His 1 S SEQ ID NO:3:
Asp Ile Gin Met Thr Gin Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Ile Gly 15 10 15
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg Ala Ser Gin Gly Ile Arg Asn Tyr 20 2S 30
Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 4S
Tyr Ala Ala Ser Thr Leu Gin Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gin Pro 65 70 75 80
Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gin Lys Tyr Asn Ser Ala Pro Tyr 85 90 95
Ala Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 LOS SEQ ID NO:10: m
·*··
Gin Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Arg 1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asp Asp Tyr ‘ 20 25 30
Ala Met His Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Asp Trp Val 35 40 45
Ser Ala Ile Thr Trp Asn Ser Gly His Xle Asp Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60
Glu Gly Arg Phe Ala Val Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ala Leu Tyr 65 70 75 60
Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95
Thr Lys Ala Ser Tyr Leu Ser Thr Ser Ser Ser Leu Asp Asn Trp Gly 100 105 110
Gin Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 SEQ ID NO: 11:
Gin Lys Tyr Asn Ser Ala Pro Tyr Ala l 5 SEQ ID NO:12:
Gin Lys Tyr Asn Arg Ala Pro Tyr Ala 1 5 SEQ ID NO:13:
Gin Lys Tyr Gin Arg Ala Pro Tyr Thr 1 5 SEQ ID NO:14:
Gin Lys Tyr Ser Ser Ala Pro Tyr Thr 1 5 SEQ ID NO:15:
Gin Lys Tyr Asn Ser Ala Pro Tyr Thr 1 5 SEQ ID NO:16:
Gin Lys Tyr Asn Arg Ala Pro Tyr Thr 4$ 4$ ·· ···· ·· · · · »«· ·· · »··* • I ··»· ··«· ·«·· *·· · · · · · · «· λ· ·· · · · · ·· * 1 5 SEQ ID NO:17:
Gin Lys Tyr Asn Ser Ala Pro Tyr Tyr 1 5 SEQ ID NO:18:
Gin Lys Tyr Asn Ser Ala Pro Tyr Asn i s SEQ ID NO:19:
Gin Lys Tyr Thr Ser Ala Pro Tyr Thr l 5 SEQ ID NO:20: • Gin Lys Tyr Asn Arg Ala Pro Tyr Asn 1 5 SEQ ID NO:21:
Gin Lys Tyr Asn Ser Ala Ala Tyr Ser
1 S SEQ ID NO:22:
Gin Gin Tyr Asn Ser Ala Pro Asp Thr 1 S SEQ ID NO:23:
Gin Lys Tyr Asn Ser Asp Pro Tyr Thr 1 S SEQ ID NO:24:
Gin Lys Tyr Ile Ser Ala Pro Tyr Thr 1 5 SEQ ID NO: 2 5 :
Gin Lys Tyr Asn Arg Pro Pro Tyr Thr 1 5 SEQ ID NO:26:
♦ * t
Gin Arg Tyr Asn Arg Ala Pro Tyr Ala 15. SEQ ID NO:27:
Ala Ser Tyr Leu Ser Thr Ser Ser Ser Leu Asp Asn i 5 10 SEQ ID NO:2 8:
Ala Ser Tyr Leu Ser Thr Ser Ser Ser Leu Asp Lys 15 10 SEQ ID NO:29:
Ala Ser Tyr Leu Ser Thr Ser Ser Ser Leu Asp Tyr i 5 10 SEQ ID NO:3 0:
Ala Ser Tyr Leu Ser Thr Ser Ser Ser Leu Asp Asp 1 5 10 SEQ ID NO:31:
Ala Ser Tyr Leu Ser Thr Ser Phe Ser Leu Asp Tyr 1 5 10 SEQ ID NO:32:
Ala Ser Tyr Leu Ser Thr Ser Ser Ser Leu His Tyr 1 5 10 SEQ -ID NO:33:
Ala Ser Phe Leu Ser Thr Ser Ser Ser Leu Glu Tyr 1 5 10 SEQ ID NO:34:
Ala Ser Tyr Leu Ser Thr Ala Ser Ser Leu Glu Tyr 15 10 SEQ ID NO:3 5:
Val Ser Tyr Leu Ser Thr Ala Ser Ser Leu Asp Asn 15 10 • · · ··· · 9 ·· ·· · • · · ··»· · · · 9 * · · 9 * · 9 » · • · · 9 9 9 9 9 9 9 999 9 9 9 9 9 9 9 9 9 | 99 *9 ·· ···» 91 9 SEQ ID NO:36: GACATCCAGA TGACCCAGTC TCCATCCTCC CTGTCTGCAT CTGTAGGGGA CAGAGTCACC 60 ATCACTTGTC GGGCAAGTCA GGGCATCAGA AATTACTTAG CCTGGTATCA GCAAAAACCA 120 GGGAAAGCCC CTAAGCTCCT GATCTATGCT GCATCCACTT TGCAATCAGG GGTCCCATCT 180 CGGTTCAGTG GCAGTGGATC TGGGACAGAT TTCACTCTCA CCATCAGCAG CCTACAGCCT 240 GAAGATGTTG CAACTTATTA CTGTCAAAGG TATAACCGTG CACCGTATAC TTTTGGCCAG 300 GGGACCAAGG TGGAAATCAA A 321 SEQ ID NOs37s GAGGTGCAGC TGGTGGAGTC TGGGGGAGGC TTGGTACAGC CCGGCAGGTC CCTGAGACTC 60 TCCTGTQCGG CCTCTGGATT CACCTTTGAT GATTATGCCA TGCACTGGGT CCGGCAAGCT 120 CCAGGGAAGG GCCTGGAATG GGTCTCAGCT ATCACTTGGA ATAGTGGTCA CATAGACTAT 180 GCGGACTCTG TGGAGGGCCG ATTCACCATC TCCAGAGACA ACGCCAAGAA CTCCCTGTAT 240 CTGCAAATGA ACAGTCTGAG AGCTGAGGAT ACGGCCGTAT ATTACTGTGC GAAAGTCTCG 300 TACCTTAGCA CCGCGTCCTC CCTTGACTAT TGGGGCCAAG GTACCCTGGT CACCGTCTCG 360 363
AGT • · • · · • ♦♦ · · ·· ··♦♦ • *· * · · ♦ · · é ' ···*···
Sl **·.*· ·· ··· PŘEHLED SEKVENCÍ ;
<110> Abbott Laboratories (B^rmuda) Ltd. et al. r<120> ZPŮSOBY ADMINISTRACE anti-TNFa PROTILÁTEK
<130> BBI-168PC <140> PCT/OS02/17790 <141> 2002-06-05 <150> 60/296961 <151> 2001-06-08 <160> 37 ; <170> Rychlá SEQ pro Windows verze 4.0 r; ~<210> 1 <211> 107
<212> PRT <213> Umělá sekvence <220> <223> Mutovaná lidská protilátka <220> i <223> Mutovaná lidská protilátka <400> 1
Asp Ile Gin Met Thr Gin Ser Pro Ser Ser Leu Ser Ala Ser Val Gly 1 .5 10 15
Asp Arg Val Thr tle Thr Cys Arg Ala Ser Gin Gly lle Arg Asn Tyr 20 25 30
Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 35 40 45
Tyr Ala Ala Ser Thr Leu Gin Ser Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 50 55 60
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gin Pro 65 70 75 80
Glu Asp Val Ala Thr Tyr Tyr Cys Gin Arg Tyr Asn Arg Ala Pro Tyr 85 90 95
Thr Phe Gly Gin Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 100 105 <210> 2 <211> 121
<212> PRT <213> Umělá sekvence <220> <223> Mutovaná lidská protilátka <400> 2
Glu Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Arg 1 5 10 15 Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asp Asp Tyr 20 25 30 Ala Met His Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Val 5*2 • 9 ♦· » 9 f ♦ # · · • « · · · · t · · ♦ · · · 9 9 · · · · · ·· «· ♦♦ ···· ·· «·*· • · • · • ♦ • ♦ · ·· *··· 35. 40 45
Ser Ala Ile Thr Trp Asn Ser Gly His Ile Asp Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60
Glu Gly Arg Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr 65 70 75 80
Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 85 90 95
Ala Lys Val Ser Tyr Leu Ser Thr Ala Ser Ser Leu Asp Tyr Trp Gly 100 105 110
Gin Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120
<210> 3 <211> 9 <212> PRT <213> Umělá sekvence <220> <223> Mutovaná lidská protilátka <220> <221> VARIANT <222> (9) <223> Xaa - Thr or Ala <400> 3
Gin Arg Tyr Asn Arg Ala Pro Tyr Xaa 1 5
<210> 4 <211> 12 <212> PRT "<213> Umělá sekvence- ‘<220> <223> Mutovaná lidská protilátka <220> <221> VARIANT <222> (12) <223> Xaa - Tyr or Asn <400> 4
Val Ser Tyr Leu Ser Thr Ala Ser Ser Leu Asp Xaa 1 5 10 <210> 5 <211> 7
<212> PRT !<213> Umělá sekvence <220> <223> Mutovaná lidská protilátka <400> 5
Ala Ala Ser Thr Leu Gin Ser 1 5 ·· ··♦· 09 ·« ·♦ ♦ ♦ · · « » * * 9 0 9 • # » 0 9 . 0 0 9 9 0 9 9 999 9 009 0 0999 S3 9 0 9 9 9 9 0 9 9 9 99 00 09 9999 09 * <210> 6 <2ii> n <212> PRT <213> Umělá sekvence <220> <223> Mutovaná lidská protilátka <400> 6
Ala Ile Thr Trp Asn Ser Gly His Ile Asp Tyr Ala Asp Ser Val Glu 1 5 10 15
Gly <210> 7 <211> 11 <212> PRT <213> Umělá sekvence <220> <223> Mutovaná lidská protilátka <400> 7
Arg Ala Ser Gin Gly Ile Arg Asn Tyr Leu Ala 1 5 10 <210> 8 <211> 5
<212> PRT I <213> Umělá sekvence i<220> •<223> Mutovaná lidská protilátka <400> 8
Asp Tyr Ala Met His 1 5 <210> 9 <211> 107 <212> PRT <213> Umělá sekvence <220> <223> Mutovaná lidská protilátka <400> 9
Asp Ile Gin Met Thr Gin Ser Pro 1 5
Asp Arg Val Thr Ile Thr Cys Arg 20
Leu Ala Trp Tyr Gin Gin Lys Pro 35 40
Tyr Ala Ala Ser Thr Leu Gin Ser 50 55
Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr 65 70
Ser Ser Leu Ser Ala Ser Ile Gly 10 15
Ala Ser Gin Gly Ile Arg Asn Tyr 25 30
Gly Lys Ala Pro Lys Leu Leu Ile 45
Gly Val Pro Ser Arg Phe Ser Gly 60
Leu Thr Ile Ser Ser Leu Gin Pro 75 80 ···«♦· ·· *· ·· · • « · «··· I » · • « « f f ♦ «··· ψ Φ · · · · ♦ · · · »··* • · · « · · · · · ·
Glu Asp Val Ala Ala Phe Gly Gin 100
Thr Tyr Tyr Cys Gin Lys Tyr Asn Ser Ala Pro Tyr 85 90 95
Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 105 <210> 10 <211> 121
<212> PRT <213> Umělá sekvence <220> <223> Mutovaná lidská protilátka <400> 10
Gin Val Gin Leu Val Glu Ser Gly Gly Gly Leu Val Gin Pro Gly Arg 1 5 10 15
Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Asp Asp Tyr 20 25 30
Ala Met His Trp Val Arg Gin Ala Pro Gly Lys Gly Leu Asp Trp Val 35 40 45
Ser Ala Ile Thr Trp Asn Ser Gly His Ile Asp Tyr Ala Asp Ser Val 50 55 60
Glu Gly Arg Phe Ala Val Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ala Leu Tyr 65 70 75 80
Leu Gin Met Asn Ser Leu Arg Pro Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys- 85 90 95
Thr Lys Ala Ser Tyr Leu Ser Thr Ser Ser Ser Leu Asp Asn Trp Gly 100 105 110
Gin Gly Thr Leu Val Thr Val Ser Ser 115 120 <210> 11 <211> 9 <212> PRT..... : <213> Umělá sekvence <220 i<223> Mutovaná lidská protilátka <400> 11
Gin Lys Tyr Asn Ser Ala Pro Tyr Ala 1 5 <210> 12 <211> 9
<212> PRT <213> Umělá sekvence <220 i<223> Mutovaná lidská protilátka <400> 12
Gin Lys Tyr Asn Arg Ala Pro Tyr Ala 1 5 <210> 13 <211> 9 55 ·· *··· • · t • * · • · · • · * * «« · «· ·* ·· • ♦ · · • * * • · I · • « · ·♦ ·♦·· ι· · • · · « <« t ft · t ··!« • · Φ + · * <212> PRT ; <213> Umělá sekvence <220> <223> Mutovaná lidská protilátka <400> 13
Gin Lys Tyr Gin Arg Ala Pro Tyr Thr 1 5
<210> 14 <211> 9 <212> PRT ! <213> Umělá sekvence <220> <223> Mutovaná lidská protilátka <400> 14
Gin Lys Tyr Ser Ser Ala Pro Tyr Thr 1 5 <210> 15 <211> 9 <212> PRT ^ <213> Umělá sekvence !<220> <223> Mutovaná lidská protilátka <400> 15
Gin Lys Tyr Asn Ser Ala Pro Tyr Thr 15 <210> 16 <211> 9
<212> PRT <213> Umělá sekvence : <220> <223> Mutovaná lidská protilátka <400> 16
Gin Lys Tyr Asn Arg Ala Pro Tyr Thr 1 5 <210> 17 <211> 9 <212> PRT <213> Umělá sekvence <220> <223> Mutovaná lidská protilátka <400> 17
Gin Lys Tyr Asn Ser Ala Pro Tyr Tyr • 1 5
<210> 18 <211> 9 <212> PRT <213> Umělá sekvence" <220> <223> Mutovaná lidská protilátka <400> 18
Gin Lys Tyr Asn Ser Ala Pro Tyr Asn 1 5 <210> 19 <211> 9 <212> PRT ! <213> Umělá sekvence <220> <223> Mutovaná lidská protilátka <400> 19
Gin Lys Tyr Thr Ser Ala Pro Tyr Thr 1 5
<210> 20 <211> 9 <212> PRT <213> Umělá sekvence i<220> • <223> Mutovaná lidská protilátka <400> 20
Gin Lys Tyr Asn Arg Ala Pro Tyr Asn 1 5 <210> 21 <211> 9
<212> PRT <213> Umělá sekvence : <220> <223> Mutovaná lidská protilátka <400> 21
Gin Lys Tyr Asn Ser Ala Ala Tyr Ser 1 5 <210> 22 <211> 9 <212> PRT <213> Umělá sekvence <220> <223> Mutovaná lidská protilátka $7 $7 ·· ···· ·* ·* »· • • • Ψ • ♦ · · • · • • • • • • · • • • · • • • · • · • · t ·· ·· • • • · • • · t • • - ·· • · ···· ·· • <400> 22
Gin Gin Tyr Asn Ser Ala Pro Asp Thr 1 5 <210> 23 <211> 9
<212> PRT <213> Umělá sekvence <220 <223> Mutovaná lidská protilátka <40Q> 23
Gin Lys Tyr Asn Ser Asp Pro Tyr Thr 1 5 <210> 24 <211> 9
<212> PRT <213> Umělá sekvence <220> <223> Mutovaná lidská protilátka <400> 24
Gin Lys Tyr Ile Ser Ala Pro Tyr Thr 1 5 <210> 25 <211> 9 <212> PRT : <213> Umělá sekvence <220. <223> Mutovaná lidská protilátka <400> 25
Gin Lys Tyr Asn Arg Pro Pro Tyr Thr 1 5 <210> 26 <211> 9 <212> PRT <213> Umělá sekvence <220> <223> Mutovaná lidská protilátka <400> 26
Gin Arg Tyr Asn Arg Ala Pro Tyr Ala 1 5
<210> 27 <211> 12 <212> PRT Γ8 ·· ··«· ·* β· »· * • · · · * · · »#· ♦ · ·* · · · ··» « • · * · · · · · · φ *··« • * ♦ · · · · · · « ··. ·· »t t#·· »· * <213> Umělá sekvence <220> <223> Mutovaná lidská protilátka <400> 27
Ala Ser Tyr Leu Ser Thr Ser Ser Ser Leu Asp Asn 15 10 <210> 28 <211> 12 <212> PRT <213> Umělá sekvence <220> <223> Mutovaná lidská protilátka <400> 28
Ala Ser Tyr Leu Ser Thr Ser Ser Ser Leu Asp Lys 1 5 10 <210> 29 <211> 12 <212> PRT <213> Umělá sekvence <220> <223> Mutovaná lidská protilátka <400> 29
Ala Ser Tyr Leu Ser Thr Ser Ser Ser Leu Asp Tyr 15 10 <210> 30 <211> 12 <212> PRT <213> Umělá sekvence ;<220> i <223> Mutovaná lidská protilátka <400> 30
Ala Ser Tyr Leu Ser Thr Ser Ser Ser Leu Asp Asp 15 10 <210> 31 <211> 12 <212> PRT <213> Umělá sekvence <220> <223> Mutovaná lidská protilátka <400> 31
Ala Ser Tyr Leu Ser Thr Ser Phe Ser Leu Asp Tyr 15 10 44 4444 • 4 44 44 4 • · • « • · · 4 4 4 • ♦ • 4 4 · 4 • 4 4 • • 4 • t • 44 • • • 444 • 4 • · 4 4 · 4 4 4 • 4 « « 4 4 • •4· 44 4 r9 <210> 32 <211> 12 <212> PRT <213> Umělá sekvence <220> <223> Mutovaná lidská protilátka <400> 32
Ala Ser Tyr Leu Ser Thr Ser Ser Ser Leu His Tyr 15 10 <210> 33 <211> 12 <212> PRT <213> Umělá sekvence <220> <223> Mutovaná lidská protilátka <400> 33
Ala Ser Phe Leu Ser Thr Ser Ser Ser Leu Glu Tyr 1 5 10 <210> 34 <211> 12 <212> PRT <213> Umělá sekvence" <220> i <223> Mutovaná lidská protilátka <400> 34
Ala Ser Tyr Leu Ser Thr Ala Ser Ser Leu Glu Tyr 15 10 <210> 35 <211> 12 <212> PRT <213> Umělá sekvence ’<220> \ <223> Mutovaná lidská protilátka <400> 35
Val Ser Tyr Leu Ser Thr Ala Ser Ser Leu Asp Asn 1 5 10 <210> 36 <211> 321
<212> DNA <213> Umělá sekvence <220> <223> Mutovaná lidská protilátka 60 ·# ♦·♦· • · • ♦
<400> 36 gacatccaga tgacccagtc tccatcctcc ctgtctgcat ctgtagggga cagagtcacc 60 atcacttgtc gggcaagtca gggcatcaga aattacttag cctggtatca gcaaaaacca 120 gggaaagccc ctaagctcct gatctatgct gcatccactt tgcaatcagg ggtcccatct 180 cggttcagtg gdagtggatc tgggacagat ttcactctca ccatcagcag cctacagcct 240 gaagatgttg caacttatta ctgtcaaagg tataaccgtg caccgtatac ttttggccag 300 gggaccaagg tggaaatcaa a 321 <210> 37 <211> 363
<212> DNA <213> Umělá sekvence <220> <223> Mutovaná lidská protilátka <‘400> 37 gaggtgcagc tggtggagtc tgggggaggc ttggtacagc ccggcaggtc cctgagaotc 60 tcctgtgcgg cctctggatt cacctttgat gattatgcca tgcactgggt ccggcaagct 120 ccagggaagg gcctggaatg ggtctcagct atcacttgga atagtggtca catagactat 180 gcggactctg tggagggccg attcaccatc tccagagaca acgccaagaa ctccctgtat 240 ctgcaaatga acagtctgag agctgaggat acggccgtat attactgtgc gaaágtctcg 300 taccttagca ccgcgtcctc ccttgactat tggggccaag gtaccctggt caccgtctcg 360 agt 363

Claims (71)

  1. 61 ............. ; /-ΙΐιΥ'Μΐ PATENTOVÉ NÁROKY 1. Použití anti-TNFa protilátky nebo její antigen vázající části pro výrobu léčiva pro ošetřování onemocnění lidského subjektu, u něhož je nemoc léčitelná TNFa protilátkou, určeného pro režim čtrnáctidenního dávkování.
  2. 2. Použití podle nároku 1 pro výrobu léčiva určeného k podávání subkutánní injekcí.
  3. 3. Použití podle nároku 1, kde uvedená anti-TNFa protilátka nebo její antigen vázající část je lidská anti-TNFa protilátka.
  4. 4. Použití podle nároku 3, kde uvedená lidská protilátka nebo její antigen vázající část disociuje z lidského TNFa s Kd 1 x 10'1M nebo méně a K0ff rychlostní konstantou 1 x 10"3 s‘1 nebo méně, obojí stanoveno rezonancí povrchových plazmonů, a neutralizuje cytotoxicitu lidského TNFa při standardním L929 testu in vitro s IC501 x 10'7M nebo méně.
  5. 5. Použití podle nároku 3, kde uvedená lidská protilátka nebo její antigen vázající část disociuje z lidského TNFa s K0ff rychlostní konstantou 5 x1ο-4 s'1 nebo méně.
  6. 6. Použití podle nároku 3, kde uvedená lidská protilátka nebo její antigen vázající část disociuje z lidského TNFa s K0ff rychlostní konstantou 1 x 10'4 s'1 nebo méně.
  7. 7. Použití podle nároku 3, kde uvedená lidská protilátka nebo její antigen vázající část neutralizuje cytotoxicitu lidského TNFa při standardním L929 testu in vitro s IC501 x 10'1 M nebo méně. 1 Použití podle nároku 3, kde uvedená lidská protilátka nebo její antigen vázající část neutralizuje cytotoxicitu lidského TNFa při standardním L929 testu in 62 62 • · ·· t • · * • · · · * * · Μ·· • t · ·· ·
  8. 9. Použití podle nároku 3, kde uvedená lidská protilátka nebo její antigen vázající část neutralizuje cytotoxicitu lidského TNFa při standardním L929 testu in vitro s IC5o 1 x 10‘10 M nebo méně.
  9. 10. Použití podle nároku 3, kde uvedená lidská protilátka nebo její antigen vázající část je rekombinantní protilátka nebo její rekombinantní antigen vázající část.
  10. 11. Použití lidské anti-TNFa protilátky pro výrobu léčiva pro inhibici aktivity lidského TNFa u lidského subjektu trpícího onemocněním, při kterém je aktivita TNFa škodlivá, určeného pro čtrnáctidenní režim dávkování, přičemž uvedená lidská protilátka nebo její část, která se váže na antigen, má následující charakteristiku: a) disociuje z lidského TNFa s Koff rychlostní konstantou 1 x 10'3 s'1 nebo méně, jak bylo stanoveno rezonancí povrchových plazmonů; b) má CDR3 doménu lehkého řetězce obsahující sekvenci aminokyselin SEQ ID NO: 3, nebo modifikovanou z SEQ ID NO: 3 jednotlivou substitucí alaninem v poloze 1, 4, 5, 7 nebo 8 nebo jednou až pěti konzervativními substitucemi aminokyselin v polohách 1,3,4, 6, 7, 8 a/nebo 9; c) má CDR3 doménu těžkého řetězce obsahující sekvenci aminokyselin SEQ ID NO: 4, nebo modifikovanou z SEQ ID NO: 4 jednotlivou substitucí alaninem v poloze 2, 3, 4, 5, 6, 8, 9, 10 nebo 11 nebo jednou až pěti konzervativními substitucemi aminokyselin v polohách 2, 3,4, 5, 6, 8, 9,10,11 a/nebo 12.
  11. 12. Použití podle nároku 11 pro výrobu léčiva, jehož podávání se děje subkutánně.
  12. 13. Použití podle nároku 11, kde uvedená lidská protilátka nebo její antigen vázající část disociuje z lidského TNFa s K0ff rychlostní konstantou 5 x 10"4 s‘1 nebo méně.
  13. 14. Použití lidské anti-TNFa protilátky pro výrobu léčiva pro inhibici aktivity lidského TNFa u lidského subjektu trpícího onemocněním, při kterém je aktivita TNFa škodlivá, určeného pro čtrnáctidenní režim dávkování subkutánně, přičemž • * 63 ·· ♦ Φ ··· ·♦♦· ♦ • · ♦ ♦ • · ♦ · · • ♦ uvedená lidská protilátka nebo její část, která se váže na antigen, má variabilní oblast lehkého řetězce (LCVR) mající CDR3 doménu obsahující sekvenci aminokyselin SEQ ID NO: 3, nebo modifikovanou z SEQ ID NO: 3 jednotlivou substitucí alaninem v poloze 1,4, 5, 7 nebo 8 a má variabilní oblast těžkého řetězce (HCVR) mající CDR3 doménu obsahující sekvenci aminokyselin SEQ ID NO: 4, nebo modifikovanou z SEQ ID NO: 4 jednotlivou substitucí alaninem v poloze 2, 3,4, 5, 6, 8, 9,10 nebo 11.
  14. 15. Použití podle nároku 14, kde LCVR uvedené lidské protilátky nebo její části, která se váže na antigen, má dále doménu CDR2 obsahující sekvenci aminokyselin SEQ ID NO: 5 a HCVR má dále doménu CDR2 obsahující sekvenci aminokyselin SEQ ID NO: 6.
  15. 16. Použití podle nároku 14, kde LCVR uvedené lidské protilátky nebo její části, která se váže na antigen, má dále doménu CDR1 obsahující sekvenci aminokyselin SEQ ID NO: 7 a HCVR má dále doménu CDR1 obsahující sekvenci aminokyselin SEQ ID NO: 8.
  16. 17. Použití lidské anti-TNFa protilátky pro výrobu léčiva pro inhibici aktivity lidského TNFa u lidského subjektu trpícího onemocněním, při kterém je aktivita TNFa škodlivá, určeného pro čtrnáctidenní režim dávkování subkutánně, přičemž uvedená lidská protilátka nebo její část, která se váže na antigen, má variabilní oblast lehkého řetězce (LCVR) obsahující sekvenci aminokyselin SEQ ID NO: 1 a variabilní oblast těžkého řetězce (HCVR) obsahující sekvenci aminokyselin SEQ ID NO: 2.
  17. 18. Použití podle nároku 17, kde uvedená lidská protilátka má konstantní oblast těžkého řetězce lgG1.
  18. 19. Použití podle nároku 17, kde uvedená lidská protilátka má konstantní oblast těžkého řetězce lgG4.
  19. 20. Použití podle nároku 17, kde uvedená lidská protilátka je Fab fragment. 64 64 • · • · *·· ···· ·· · * · · • · · · • · · »··· ♦ · ♦
  20. 21. Použití podle nároku 17, kde uvedená lidská protilátka je jednořetězcový Fv fragment.
  21. 22. Použití lidské anti-TNFa protilátky pro výrobu léčiva pro inhibici aktivity lidského TNFa u lidského subjektu trpícího onemocněním, při kterém je aktivita TNFa škodlivá, určeného pro čtrnáctidenní režim dávkování subkutánně, přičemž uvedená lidská protilátka nebo její část, která se váže na antigen, má variabilní oblast lehkého řetězce (LCVR) mající CDR3 doménu obsahující sekvenci aminokyselin zvolenou ze skupiny, která sestává z SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 25, SEQ ID NO: 26 nebo variabilní oblast těžkého řetězce (HCVR) mající CDR3 doménu obsahující sekvenci aminokyselin zvolenou ze skupiny, která sestává z SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 31, SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 33 a SEQ ID NO: 34.
  22. 23. Použití lidské anti-TNFa protilátky pro výrobu léčiva pro inhibici aktivity lidského TNFa u lidského subjektu trpícího onemocněním, při kterém je aktivita TNFa škodlivá, určeného pro čtrnáctidenní režim dávkování subkutánně, přičemž uvedená lidská protilátka je protilátka D2E7 nebo její antigen vázající část.
  23. 24. Sada obsahující formulaci zahrnující a) farmaceutickou kompozici obsahující anti-TNFa protilátku a farmaceuticky přijatelný nosič a b) instrukce pro čtrnáctidenní dávkování farmaceutické kompozice pro léčení choroby, při které je anti-TNFa protilátka nebo její vázající část v léčbě choroby účinná.
  24. 25. Sada podle nároku 24 vyznačující se tím, že uvedená protilátka zahrnuje protilátku nebo její antigen vázající část jak je uvedeno v kterémkoliv z nároků 2 až 22. 65 • ·· φ * · • · • f • Φ • · • • Φ • M·· ♦ • « ψ ··· • · •
  25. 26. Předplněná injekční stříkačka obsahující farmaceutickou kompozici zahrnující anti-TNFa protilátku a farmaceuticky přijatelný nosič.
  26. 27. Injekční stříkačka podle nároku 26 vyznačující se tím, že uvedená lidská protilátka zahrnuje protilátku nebo její antigen vázající část jak je uvedeno v kterémkoliv z nároků 2 až 22.
  27. 28. Použití anti-TNFa protilátky nebo její antigen vázající části v kombinaci s methotrexátem pro výrobu léčiva pro ošetřování onemocnění, při kterém je anti-TNFa protilátka nebo její antigen vázající část účinná při léčení onemocnění.
  28. 29. Použití podle nároku 28 pro výrobu léčiva, kde methotrexát je aplikován spolu s podáváním anti-TNFa protilátky nebo její antigen vázající části.
  29. 30. Použití podle nároku 28 pro výrobu léčiva, kde methotrexát je aplikován před podáváním anti-TNFa protilátky nebo její antigen vázající části.
  30. 31. Použití podle nároku 28 pro výrobu léčiva, kde methotrexát je aplikován po podávání anti-TNFa protilátky nebo její antigen vázající části.
  31. 32. Použití podle nároku 28, kde uvedená anti-TNFa protilátka je lidská anti-TNFa protilátka nebo její antigen vázající část.
  32. 33. Použití podle nároku 28, kde uvedená lidská protilátka nebo její antigen vázající část disociuje z lidského TNFa s Kd 1 x 10'8M nebo méně a K0ff rychlostní konstantou 1 x 10'3 s'1 nebo méně, obojí stanoveno rezonancí povrchových plazmonů, a neutralizuje cytotoxicitu lidského TNFa při standardním L929 testu in vitro s IC501 x 10'7 M nebo méně.
  33. 34. Použití podle nároku 28, kde uvedená lidská protilátka nebo její antigen vázající část disociuje z lidského TNFa s K0ff rychlostní konstantou 5 x 10-4 s"1 nebo méně. 66 66 • ·· • ♦ · • · • ♦ • « • · • • · · • • · ♦ · ♦ • ·« M t « • · : .· · ·······
  34. 35. Použití podle nároku 28, kde uvedená lidská protilátka nebo její antigen vázající část disociuje z lidského TNFa s K0ff rychlostní konstantou 1 x 1CT4 s'1 nebo méně.
  35. 36. Použití podle nároku 28, kde uvedená lidská protilátka nebo její antigen vázající část neutralizuje cytotoxicitu lidského TNFa při standardním L929 testu in vitro s IC501 x 10'8 M nebo méně.
  36. 37. Použití podle nároku 28, kde uvedená lidská protilátka nebo její antigen vázající část neutralizuje cytotoxicitu lidského TNFa při standardním L929 testu in vitro s IC501 x 10'9 M nebo méně.
  37. 38. Použití podle nároku 28, kde uvedená lidská protilátka nebo její antigen vázající část neutralizuje cytotoxicitu lidského TNFa při standardním L929 testu in vitro s IC501 x 10'10 M nebo méně.
  38. 39. Použití podle nároku 28, kde uvedená lidská protilátka nebo její antigen vázající část je rekombinantní protilátka nebo její rekombinantní, antigen vázající část.
  39. 40. Použití podle nároku 28, kde uvedená lidská protilátka nebo její antigen vázající část, inhibuje v endotelových buňkách lidské pupeční žíly expresi ELAM-1 indukovanou lidským TNFa.
  40. 41. Použití methotrexátu a subkutánně podávané lidské anti-TNFa protilátky pro výrobu léčiva pro inhibici aktivity lidského TNFa u lidského subjektu trpícího onemocněním, při kterém je aktivita TNFa škodlivá, přičemž uvedená lidská protilátka nebo její část, která se váže na antigen, má následující charakteristiku: a) disociuje z lidského TNFa s Koff rychlostní konstantou 1 x 10'3 s'1 nebo méně, jak bylo stanoveno rezonancí povrchových plazmonů; b) má CDR3 doménu lehkého řetězce obsahující sekvenci aminokyselin SEQ ID NO: 3, nebo modifikovanou z SEQ ID NO: 3 jednotlivou substitucí alaninem v poloze 1, 4, 5, 7 nebo 8 nebo jednou až pěti konzervativními substitucemi aminokyselin v polohách 1,3, 4, 6, 7, 8 a/nebo 9; 67 67 • ·# ·· f · • · • · • ι *·· ··»· • t * • I » • · · · • · ····« • · · ·· · c) má CDR3 doménu těžkého řetězce obsahující sekvenci aminokyselin SEQ ID NO: 4, nebo modifikovanou z SEQ ID NO: 4 jednotlivou substitucí alaninem v poloze 2, 3, 4, 5, 6, 8, 9, 10 nebo 11 nebo jednou až pěti konzervativními substitucemi aminokyselin v polohách 2, 3,4, 5, 6, 8, 9,10,11 a/nebo 12.
  41. 42. Použití podle nároku 41, kde uvedená lidská protilátka nebo její antigen vázající část disociuje z lidského TNFa s Koff rychlostní konstantou 5 x 10"4 s'1 nebo méně.
  42. 43. Použití podle nároku 41, kde uvedená lidská protilátka nebo její antigen vázající část disociuje z lidského TNFa s Κ0« rychlostní konstantou 1 x 1CT4 s"1 nebo méně.
  43. 44. Použití methotrexátu a subkutánně podávané lidské anti-TNFa protilátky pro výrobu léčiva pro inhibici aktivity lidského TNFa u lidského subjektu trpícího onemocněním, při kterém je aktivita TNFa škodlivá, přičemž uvedená lidská protilátka nebo její část, která se váže na antigen, má variabilní oblast lehkého řetězce (LCVR) mající CDR3 doménu obsahující sekvenci aminokyselin SEQ ID NO: 3, nebo modifikovanou z SEQ ID NO: 3 jednotlivou substitucí alaninem v poloze 1,4, 5, 7 nebo 8 a má variabilní oblast těžkého řetězce (HCVR) mající CDR3 doménu obsahující sekvenci aminokyselin SEQ ID NO: 4, nebo modifikovanou z SEQ ID NO: 4 jednotlivou substitucí alaninem v poloze 2, 3, 4, 5,6, 8, 9,10 nebo 11.
  44. 45. Použití podle nároku 44, kde LCVR uvedené lidské protilátky nebo její části, která se váže na antigen, má dále doménu CDR2 obsahující sekvenci aminokyselin SEQ ID NO: 5 a HCVR má dále doménu CDR2 obsahující sekvenci aminokyselin SEQ ID NO: 6.
  45. 46. Použití podle nároku 44, kde LCVR uvedené lidské protilátky nebo její části, která se váže na antigen, má dále doménu CDR1 obsahující sekvenci aminokyselin SEQ ID NO: 7 a HCVR má dále doménu CDR1 obsahující sekvenci aminokyselin SEQ ID NO: 8.
  46. 47. Použití methotrexátu a subkutánně podávané lidské anti-TNFa protilátky pro výrobu léčiva pro inhibici aktivity lidského TNFa u lidského subjektu trpícího onemocněním, při kterém je aktivita TNFa škodlivá, přičemž uvedená lidská protilátka nebo její část, která se váže na antigen, má variabilní oblast lehkého řetězce (LCVR) obsahující sekvenci aminokyselin SEQ ID NO: 1 a variabilní oblast těžkého řetězce (HCVR) obsahující sekvenci aminokyselin SEQ ID NO: 2.
  47. 48. Použití podle nároku 47, kde uvedená lidská protilátka má konstantní oblast těžkého řetězce lgG1.
  48. 49. Použití podle nároku 47, kde uvedená lidská protilátka má konstantní oblast těžkého řetězce lgG4.
  49. 50. Použití podle nároku 47, kde uvedená lidská protilátka je Fab fragment.
  50. 51. Použití podle nároku 47, kde uvedená lidská protilátka je jednořetězcový Fv fragment.
  51. 52. Použití methotrexátu a subkutánně podávané lidské anti-TNFa protilátky nebo její části, která se váže na antigen, pro výrobu léčiva pro inhibici aktivity lidského TNFa u lidského subjektu trpícího onemocněním, při kterém je aktivita TNFa škodlivá, kde protilátka má variabilní oblast lehkého řetězce (LCVR) mající CDR3 doménu obsahující sekvenci aminokyselin zvolenou ze skupiny, která sestává z SEQ ID NO: 3, SEQ ID NO: 11, SEQ ID NO: 12, SEQ ID NO: 13, SEQ ID NO: 14, SEQ ID NO: 15, SEQ ID NO: 16, SEQ ID NO: 17, SEQ ID NO: 18, SEQ ID NO: 19, SEQ ID NO: 20, SEQ ID NO: 21, SEQ ID NO: 22, SEQ ID NO: 23, SEQ ID NO: 24, SEQ ID NO: 25, SEQ ID NO: 26 nebo má variabilní oblast těžkého řetězce (HCVR) mající CDR3 doménu obsahující sekvenci aminokyselin zvolenou ze skupiny, která sestává z SEQ ID NO: 4, SEQ ID NO: 27, SEQ ID NO: 28, SEQ ID NO: 29, SEQ ID NO: 30, SEQ ID NO: 31, SEQ ID NO: 32, SEQ ID NO: 33 a SEQ ID NO: 34.
  52. 53. Použití methotrexátu a subkutánně podávané lidské anti-TNFa protilátky pro výrobu léčiva pro inhibici aktivity lidské TNFa u lidského subjektu trpícího 69 « · • ·« ·· i · • · · • ···· • Μ onemocněním, při kterém je aktivita TNFa škodlivá, přičemž uvedená lidská protilátka je protilátka D2E7 nebo její antigen vázající část.
  53. 54. Sada obsahující formulaci zahrnující a) farmaceutickou kompozici obsahující anti-TNFa protilátku nebo její antigen vázající část, methotrexat a farmaceuticky přijatelný nosič a b) instrukce pro subkutánní dávkování farmaceutické kompozice subjektu pro léčení choroby, při které je aktivita TNFa škodlivá.
  54. 55. Sada podle nároku 54 vyznačující se tím, že uvedená protilátka zahrnuje protilátku nebo její antigen vázající část jak je uvedeno v kterémkoliv z nároků 32 až 51.
  55. 56. Předplněná injekční stříkačka obsahující farmaceutickou kompozici zahrnující anti-TNFa protilátku, methotrexat a farmaceuticky přijatelný nosič.
  56. 57. Injekční stříkačka podle nároku 56 vyznačující se tím, že uvedená protilátka zahrnuje protilátku nebo její antigen vázající část jak je uvedeno v kterémkoliv z nároků 32 až 52.
  57. 58. Použití podle nároku 1 nebo 28, kde onemocněním je sepse.
  58. 59. Použití podle nároku 1 nebo 28 pro výrobu léčiva, kde protilátka je lidskému subjektu podávána spolu s cytokinem interleukin-6 (IL-6) neboje podávána se sérovou nebo plazmovou koncentrací IL-6 nad 500 pg/ml lidskému subjektu.
  59. 60. Použití podle nároku 1 nebo 28, kde onemocněním je autoimunitní choroba.
  60. 61. Použití podle nároku 60, kde uvedené autoimunitní onemocnění je vybráno ze skupiny, kterou tvoří reumatoidní atrtritida, reumatoidní spondylitida, osteoartritida a dna. 70
    • # ·«· ···« ·· »· t ·· * • · • ···· • ·
  61. 62. Použití podle nároku 61, kde uvedené autoimunitní onemocnění je reumatoidní artritida.
  62. 63. Použití podle nároku 60, kde uvedené autoimunitní onemocnění je vybráno ze skupiny, kterou tvoří alergie, roztroušená skleróza, autoimuniní diabetes, autoimunitní uveitida a nefrotický syndrom.
  63. 64. Použití podle nároku 1 nebo 28, kde onemocněním je infekční choroba.
  64. 65. Použití podle nároku 1 nebo 28, kde chorobou je odmítnutí transplantátu nebo nemoc štěp-verzus-hostitel.
  65. 66. Použití podle nároku 1 nebo 28, kde chorobou je zhoubné bujení.
  66. 67. Použití podle nároku 1 nebo 28, kde chorobou je plicní choroba.
  67. 68. Použití podle nároku 1 nebo 28, kde chorobou je střevní choroba.
  68. 69. Použití podle nároku 1 nebo 28, kde chorobou je srdeční choroba.
  69. 70. Použití podle nároku 1 nebo 28, kde onemocnění je zvoleno ze skupiny, kterou tvoří zánětlivé kostní potíže, choroba kostní resorpce, alkoholická hepatitida, virová hepatitida, poruchy koagulace, spáleniny, poškození reperfuze, tvorba keloidů, tvorba zjizvené tkáně a pyrexie.
  70. 71. Sada obsahující: a) farmaceutickou kompozici obsahující anti-TNFa protilátku nebo její antigen vázající část a farmaceuticky přijatelný nosič; b) farmaceutickou kompozici obsahující methotrexat a farmaceuticky přijatelný nosič a c) instrukce pro subkutánní dávkování farmaceutické kompozice anti-TNFa protilátky a dávkování farmaceutické kompozice methotrexatu před, současně nebo po dávkování farmaceutické kompozice anti-TNFa protilátky subjektu. 71 ΦΦ φ Φ· Φ · Φ · Φ Φ • ΦΦ ΦΦΦΦ Φ Φ Φ ΦΦ %· Φ Φ Φ Φ Φ φ Φ ΦΦΦΦ Φ Φ Φ
  71. 72. Sada podle nároku 71 vyznačující se tím, že anti-TNFa protilátka nebo její antigen vázající část je D2E7 či její část vázající antigen.
CZ200420A 2001-06-08 2002-06-05 Způsoby podávání anti-TNF alfa protilátek CZ309160B6 (cs)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US29696101P 2001-06-08 2001-06-08
US60/296,961 2001-06-08

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CZ200420A3 true CZ200420A3 (cs) 2005-01-12
CZ309160B6 CZ309160B6 (cs) 2022-03-30

Family

ID=23144283

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CZ200420A CZ309160B6 (cs) 2001-06-08 2002-06-05 Způsoby podávání anti-TNF alfa protilátek

Country Status (32)

Country Link
US (16) US8889135B2 (cs)
EP (6) EP2364731A3 (cs)
JP (7) JP2005517629A (cs)
KR (8) KR101497363B1 (cs)
CN (5) CN103495165A (cs)
AR (3) AR034429A1 (cs)
AU (1) AU2002314922C1 (cs)
BG (2) BG66459B1 (cs)
BR (1) BR0206289A (cs)
CA (3) CA2385745C (cs)
CL (1) CL2012000856A1 (cs)
CY (1) CY1120540T1 (cs)
CZ (1) CZ309160B6 (cs)
DK (2) DK2940044T3 (cs)
EC (1) ECSP034867A (cs)
ES (2) ES2612436T3 (cs)
HU (1) HU230947B1 (cs)
IL (4) IL158831A0 (cs)
LT (1) LT2940044T (cs)
MX (2) MXPA03011316A (cs)
NO (2) NO334490B1 (cs)
NZ (6) NZ529574A (cs)
PE (2) PE20030065A1 (cs)
PH (3) PH12013500297A1 (cs)
PL (4) PL217217B1 (cs)
PT (2) PT2940044T (cs)
SA (1) SA02230384B1 (cs)
SI (2) SI2940044T1 (cs)
SK (1) SK288509B6 (cs)
TW (1) TWI473622B (cs)
WO (1) WO2002100330A2 (cs)
ZA (1) ZA200308861B (cs)

Families Citing this family (122)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US6090382A (en) 1996-02-09 2000-07-18 Basf Aktiengesellschaft Human antibodies that bind human TNFα
DE122004000004I1 (de) * 1996-02-09 2004-08-12 Abott Biotechnology Ltd Humane Antikörper welche an Humanen TNFalpha binden.
CA2385745C (en) 2001-06-08 2015-02-17 Abbott Laboratories (Bermuda) Ltd. Methods of administering anti-tnf.alpha. antibodies
US20030206898A1 (en) * 2002-04-26 2003-11-06 Steven Fischkoff Use of anti-TNFalpha antibodies and another drug
US20040009172A1 (en) * 2002-04-26 2004-01-15 Steven Fischkoff Use of anti-TNFalpha antibodies and another drug
AR040603A1 (es) * 2002-07-19 2005-04-13 Abbott Lab S A El uso de un anticuerpo anti-tnfalfa neutralizador de alta afinidad en la fabricacion de un medicamento y conjunto de elementos
US20090280065A1 (en) * 2006-04-10 2009-11-12 Willian Mary K Uses and Compositions for Treatment of Psoriasis
US20040033228A1 (en) 2002-08-16 2004-02-19 Hans-Juergen Krause Formulation of human antibodies for treating TNF-alpha associated disorders
MY150740A (en) * 2002-10-24 2014-02-28 Abbvie Biotechnology Ltd Low dose methods for treating disorders in which tnf? activity is detrimental
WO2004087730A2 (en) * 2003-03-27 2004-10-14 The Johns Hopkins University Method for producing diverse libraries of encoded polymers
US8273347B2 (en) * 2003-05-13 2012-09-25 Depuy Spine, Inc. Autologous treatment of degenerated disc with cells
US7344716B2 (en) * 2003-05-13 2008-03-18 Depuy Spine, Inc. Transdiscal administration of specific inhibitors of pro-inflammatory cytokines
US7892563B2 (en) * 2003-05-20 2011-02-22 Wyeth Holdings Corporation Methods for treatment of severe acute respiratory syndrome (SARS)
US8361467B2 (en) * 2003-07-30 2013-01-29 Depuy Spine, Inc. Trans-capsular administration of high specificity cytokine inhibitors into orthopedic joints
US8895540B2 (en) * 2003-11-26 2014-11-25 DePuy Synthes Products, LLC Local intraosseous administration of bone forming agents and anti-resorptive agents, and devices therefor
AU2011218744B2 (en) * 2004-04-09 2012-09-20 Abbvie Biotechnology Ltd Multiple-variable dose regimen for treating TNFalpha-related disorders
TWI439284B (zh) * 2004-04-09 2014-06-01 Abbvie Biotechnology Ltd 用於治療ＴＮＦα相關失調症之多重可變劑量療法
GB0414054D0 (en) 2004-06-23 2004-07-28 Owen Mumford Ltd Improvements relating to automatic injection devices
WO2006014477A1 (en) * 2004-07-06 2006-02-09 Bioren, Inc. HIGH AFFINITY ANTI-TNF-α ANTIBODIES AND METHOD
EP1807111A4 (en) * 2004-10-08 2009-05-27 Abbott Biotech Ltd SYNCYTIAL RESPIRATORY VIRUS INFECTION (RSV)
US20060253100A1 (en) 2004-10-22 2006-11-09 Medtronic, Inc. Systems and Methods to Treat Pain Locally
JP5129122B2 (ja) 2005-04-26 2013-01-23 トリオン ファーマ ゲーエムベーハー 癌治療のための抗体およびグルココルチコイドの組み合わせ
AU2012254978C1 (en) * 2005-05-16 2017-06-01 Abbvie Biotechnology Ltd Use of TNF inhibitor for treatment of erosive polyarthritis
AU2006246721B2 (en) 2005-05-16 2012-12-13 Abbvie Biotechnology Ltd Use of TNF inhibitor for treatment of erosive polyarthritis
US20070041905A1 (en) * 2005-08-19 2007-02-22 Hoffman Rebecca S Method of treating depression using a TNF-alpha antibody
CA2626804A1 (en) 2005-11-01 2007-08-09 Abbott Biotechnology Ltd. Methods and compositions for diagnosing ankylosing spondylitis using biomarkers
WO2007110219A1 (en) * 2006-03-27 2007-10-04 Ablynx N.V. Medical delivery device for therapeutic proteins based on single domain antibodies
CA3086149A1 (en) 2006-04-04 2007-10-11 Singulex, Inc. Highly sensitive system and methods for analysis of troponin
MX2008012896A (es) 2006-04-05 2008-10-14 Abbott Biotech Ltd Purificacion de anticuerpos.
WO2007120651A2 (en) * 2006-04-10 2007-10-25 Abbott Biotechnology Ltd. Uses and compositions for treatment of juvenile rheumatoid arthritis
WO2007120656A2 (en) * 2006-04-10 2007-10-25 Abbott Biotechnology Ltd. Uses and compositions for treatment of rheumatoid arthritis
EP2666472A3 (en) 2006-04-10 2014-04-02 Abbott Biotechnology Ltd Uses and compositions for treatment of psoriatic arthritis
US9605064B2 (en) 2006-04-10 2017-03-28 Abbvie Biotechnology Ltd Methods and compositions for treatment of skin disorders
US20090317399A1 (en) * 2006-04-10 2009-12-24 Pollack Paul F Uses and compositions for treatment of CROHN'S disease
EP2708242A3 (en) 2006-04-10 2014-03-26 Abbott Biotechnology Ltd Uses and compositions for treatment of ankylosing spondylitis
CA2564435A1 (en) 2006-04-10 2007-10-10 Abbott Biotechnology Ltd. Methods for monitoring and treating intestinal disorders
WO2007120626A2 (en) 2006-04-10 2007-10-25 Abbott Biotechnology Ltd. Uses and compositions for treatment of ankylosing spondylitis
US20080131374A1 (en) * 2006-04-19 2008-06-05 Medich John R Uses and compositions for treatment of rheumatoid arthritis
CN101426514A (zh) * 2006-04-25 2009-05-06 英特塞尔股份公司 Hcv疫苗
US20080311043A1 (en) * 2006-06-08 2008-12-18 Hoffman Rebecca S Uses and compositions for treatment of psoriatic arthritis
US20100021451A1 (en) 2006-06-08 2010-01-28 Wong Robert L Uses and compositions for treatment of ankylosing spondylitis
CN103316402A (zh) 2006-06-30 2013-09-25 艾伯维生物技术有限公司 自动注射装置
NZ576133A (en) 2006-10-27 2012-10-26 Abbott Biotech Ltd Crystalline anti-htnfalpha antibodies
WO2008150491A2 (en) * 2007-05-31 2008-12-11 Abbott Laboratories BIOMARKERS PREDICTIVE OF THE RESPONSIVENESS TO TNFα INHIBITORS IN AUTOIMMUNE DISORDERS
WO2008154543A2 (en) 2007-06-11 2008-12-18 Abbott Biotechnology Ltd. Methods for treating juvenile idiopathic arthritis
EP2173380A4 (en) * 2007-07-13 2011-08-31 Abbott Biotech Ltd METHOD AND COMPOSITIONS FOR PULMONARY ADMINISTRATION OF A TNFa HEMMER
WO2009020654A1 (en) 2007-08-08 2009-02-12 Abbott Laboratories Compositions and methods for crystallizing antibodies
NZ622583A (en) 2007-11-30 2015-08-28 Abbvie Biotechnology Ltd Protein formulations and methods of making same
US8883146B2 (en) 2007-11-30 2014-11-11 Abbvie Inc. Protein formulations and methods of making same
US8986696B2 (en) 2007-12-21 2015-03-24 Depuy Mitek, Inc. Trans-capsular administration of p38 map kinase inhibitors into orthopedic joints
PL2808343T3 (pl) 2007-12-26 2019-11-29 Xencor Inc Warianty Fc ze zmienionym wiązaniem do FcRn
CN101965514A (zh) * 2008-01-03 2011-02-02 艾博特生物技术有限公司 预测化合物在治疗银屑病中的长期功效
BRPI0907186A2 (pt) 2008-01-15 2015-07-14 Abbott Gmbh & Co Kg Composições proteicas pulverizadas e métodos para sua produção
US20100040630A1 (en) * 2008-03-24 2010-02-18 Aake Elden Methods and compositions for treating bone loss
USRE48948E1 (en) 2008-04-18 2022-03-01 Warsaw Orthopedic, Inc. Clonidine compounds in a biodegradable polymer
US20100239632A1 (en) 2009-03-23 2010-09-23 Warsaw Orthopedic, Inc. Drug depots for treatment of pain and inflammation in sinus and nasal cavities or cardiac tissue
CA2758964A1 (en) 2009-04-16 2010-10-21 Abbott Biotherapeutics Corp. Anti-tnf-.alpha. antibodies and their uses
CN102458517B (zh) 2009-04-29 2014-07-23 阿布维生物技术有限公司 自动注射装置
NZ600069A (en) 2009-12-15 2015-02-27 Abbvie Biotechnology Ltd Improved firing button for automatic injection device
JP2013514388A (ja) 2009-12-16 2013-04-25 フィリップ ボッシュ， 間質性膀胱炎の処置の方法
JO3417B1 (ar) 2010-01-08 2019-10-20 Regeneron Pharma الصيغ المستقرة التي تحتوي على الأجسام المضادة لمضاد مستقبل( interleukin-6 (il-6r
EP2531613A2 (en) 2010-02-02 2012-12-12 Abbott Biotechnology Ltd. Methods and compositions for predicting responsiveness to treatment with tnf-alpha inhibitor
NZ702172A (en) 2010-04-21 2016-03-31 Abbvie Biotechnology Ltd Wearable automatic injection device for controlled delivery of therapeutic agents
US20110287018A1 (en) 2010-05-19 2011-11-24 Philip Bosch Methods of Treating Interstitial Cystitis
HUE039740T2 (hu) 2010-06-03 2019-01-28 Abbvie Biotechnology Ltd Alkalmazások és készítmények hidradenitis suppurativa (HS) kezelésére
AR083495A1 (es) 2010-10-22 2013-02-27 Esbatech Alcon Biomed Res Unit Anticuerpos estables y solubles
AU2011325974B2 (en) 2010-11-11 2016-10-27 Abbvie Biotechnology Ltd. Improved high concentration anti-TNFalpha antibody liquid formulations
EP3187216B1 (en) 2011-01-24 2019-08-21 AbbVie Biotechnology Ltd. Automatic injection devices having overmolded gripping surfaces
EP2702077A2 (en) 2011-04-27 2014-03-05 AbbVie Inc. Methods for controlling the galactosylation profile of recombinantly-expressed proteins
US10040855B2 (en) * 2011-05-02 2018-08-07 Millennium Pharmaceuticals, Inc. Formulation for anti-α4β7 antibody
KR102103036B1 (ko) 2011-06-13 2020-04-22 압제노믹스 코오페라티에프 유.에이. 항-ｐｓｇｌ-１ 항체 및 그의 용도
US8795357B2 (en) 2011-07-15 2014-08-05 Edwards Lifesciences Corporation Perivalvular sealing for transcatheter heart valve
HK1202628A1 (en) 2011-11-30 2015-10-02 Abbvie Deutschland Gmbh & Co Kg Methods and compositions for determining responsiveness to treatment with a tnf-alpha inhibitor
US9067990B2 (en) 2013-03-14 2015-06-30 Abbvie, Inc. Protein purification using displacement chromatography
US9505833B2 (en) 2012-04-20 2016-11-29 Abbvie Inc. Human antibodies that bind human TNF-alpha and methods of preparing the same
US9334319B2 (en) 2012-04-20 2016-05-10 Abbvie Inc. Low acidic species compositions
US9181572B2 (en) 2012-04-20 2015-11-10 Abbvie, Inc. Methods to modulate lysine variant distribution
WO2013176754A1 (en) 2012-05-24 2013-11-28 Abbvie Inc. Novel purification of antibodies using hydrophobic interaction chromatography
HK1211981A1 (en) 2012-09-02 2016-06-03 Abbvie Inc. Methods to control protein heterogeneity
US9512214B2 (en) 2012-09-02 2016-12-06 Abbvie, Inc. Methods to control protein heterogeneity
AU2013312300A1 (en) 2012-09-07 2015-04-16 Coherus Biosciences, Inc. Stable aqueous formulations of adalimumab
US9017687B1 (en) 2013-10-18 2015-04-28 Abbvie, Inc. Low acidic species compositions and methods for producing and using the same using displacement chromatography
WO2014159579A1 (en) 2013-03-14 2014-10-02 Abbvie Inc. MUTATED ANTI-TNFα ANTIBODIES AND METHODS OF THEIR USE
WO2014151878A2 (en) 2013-03-14 2014-09-25 Abbvie Inc. Methods for modulating protein glycosylation profiles of recombinant protein therapeutics using monosaccharides and oligosacharides
WO2015051293A2 (en) 2013-10-04 2015-04-09 Abbvie, Inc. Use of metal ions for modulation of protein glycosylation profiles of recombinant proteins
WO2015057910A1 (en) 2013-10-16 2015-04-23 Oncobiologics, Inc. Buffer formulations for enhanced antibody stability
US9085618B2 (en) 2013-10-18 2015-07-21 Abbvie, Inc. Low acidic species compositions and methods for producing and using the same
US9181337B2 (en) 2013-10-18 2015-11-10 Abbvie, Inc. Modulated lysine variant species compositions and methods for producing and using the same
US8946395B1 (en) 2013-10-18 2015-02-03 Abbvie Inc. Purification of proteins using hydrophobic interaction chromatography
US20150139988A1 (en) 2013-11-15 2015-05-21 Abbvie, Inc. Glycoengineered binding protein compositions
US9763992B2 (en) 2014-02-13 2017-09-19 Father Flanagan's Boys' Home Treatment of noise induced hearing loss
GB201407852D0 (en) * 2014-05-02 2014-06-18 Iontas Ltd Preparation of libraries od protein variants expressed in eukaryotic cells and use for selecting binding molecules
CA2949236C (en) 2014-05-15 2023-06-13 Incube Labs, Llc Pharmaceutical compositions and methods for fabrication of solid masses comprising polypeptides and/or proteins
US10689460B2 (en) 2014-05-15 2020-06-23 Incube Labs, Llc PCSK9 antibody preparations for delivery into a lumen of the intestinal tract using a swallowable drug delivery device
US11548940B2 (en) 2014-05-15 2023-01-10 Rani Therapeutics, Llc Anti-interleukin antibody preparations for delivery into a lumen of the intestinal tract using a swallowable drug delivery device
EP3145951A1 (en) 2014-06-24 2017-03-29 InSight Biopharmaceuticals Ltd. Methods of purifying antibodies
AU2015298263B2 (en) 2014-07-31 2020-05-14 Anji Pharmaceuticals, Inc. ApoE mimetic peptides and higher potency to clear plasma cholesterol
CN104382977A (zh) * 2014-11-17 2015-03-04 昆明朗盛生物科技有限公司 一种女性专用的玛咖组合物
EP3237000A1 (en) 2014-12-23 2017-11-01 Pfizer Inc Stable aqueous antibody formulation for anti tnf alpha antibodies
US10696735B2 (en) 2015-01-21 2020-06-30 Outlook Therapeutics, Inc. Modulation of charge variants in a monoclonal antibody composition
EP3078675A1 (en) 2015-04-10 2016-10-12 Ares Trading S.A. Induction dosing regimen for the treatment of tnf alpha mediated disorders
AU2016257813B2 (en) 2015-05-01 2021-05-13 Rani Therapeutics, Llc Pharmaceutical compositions and methods for fabrication of solid masses comprising polypeptides and/or proteins
US11229702B1 (en) 2015-10-28 2022-01-25 Coherus Biosciences, Inc. High concentration formulations of adalimumab
US10988543B2 (en) 2015-11-11 2021-04-27 Opi Vi—Ip Holdco Llc Humanized anti-tumor necrosis factor alpha receptor 2 (anti-TNFR2) antibodies and methods of use thereof to elicit an immune response against a tumor
EP3411401A1 (en) 2016-02-03 2018-12-12 Oncobiologics, Inc. Buffer formulations for enhanced antibody stability
TWI819435B (zh) * 2016-03-07 2023-10-21 法商賽諾菲生物技術公司 用於治療類風濕性關節炎之組成物及方法
US11071782B2 (en) 2016-04-20 2021-07-27 Coherus Biosciences, Inc. Method of filling a container with no headspace
SG10202001787QA (en) 2016-06-02 2020-04-29 Abbvie Inc Glucocorticoid receptor agonist and immunoconjugates thereof
EP3824906A1 (en) 2016-12-21 2021-05-26 Amgen Inc. Anti-tnf alpha antibody formulations
KR20190024572A (ko) * 2017-08-30 2019-03-08 (주)셀트리온 TNFα 관련 질환을 치료하기 위한 피하 투여 요법
EP3456739A1 (en) * 2017-09-19 2019-03-20 Tillotts Pharma Ag Use of anti-tnfalpha antibodies for treating wounds
CA3082356A1 (en) 2017-12-01 2019-06-06 Abbvie Inc. Glucocorticoid receptor agonist and immunoconjugates thereof
CN112955222A (zh) 2018-08-29 2021-06-11 里珍纳龙药品有限公司 用于治疗患有类风湿性关节炎的个体的方法和组合物
TW202521583A (zh) 2019-01-31 2025-06-01 法商賽諾菲生物技術公司 用於治療幼年原發性關節炎之組成物及方法
AR118191A1 (es) * 2019-02-28 2021-09-22 Celltrion Inc MÉTODOS PARA EL TRATAMIENTO DE ENFERMEDADES RELACIONADAS CON TNFa
JP2022525332A (ja) * 2019-03-14 2022-05-12 ビオンド バイオロジクス リミテッド 免疫抑制の方法
MA55760A (fr) 2019-04-24 2022-03-02 Regeneron Pharma Procédés de diagnostic et de traitement de la polyarthrite rhumatoïde
JP2022534794A (ja) 2019-06-04 2022-08-03 サノフィ・バイオテクノロジー 関節リウマチを有する対象における疼痛を治療するための組成物および方法
TWI841810B (zh) * 2020-01-24 2024-05-11 日商西斯美股份有限公司 提升抗體對抗原之親和性的方法及其用途
US20230091156A1 (en) * 2021-09-14 2023-03-23 Mayo Foundation For Medical Education And Research Methods and materials for assessing and treating arthritis
TW202509220A (zh) * 2023-06-26 2025-03-01 美商旗艦先鋒創新有限責任（Ｖｉｉ）公司 經工程化之瘧原蟲及相關方法
KR20250031013A (ko) * 2023-08-23 2025-03-06 (주)셀트리온 TNFα 관련 질환을 치료하는 방법

Family Cites Families (123)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5179017A (en) 1980-02-25 1993-01-12 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials
US4634665A (en) 1980-02-25 1987-01-06 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials
US4399216A (en) 1980-02-25 1983-08-16 The Trustees Of Columbia University Processes for inserting DNA into eucaryotic cells and for producing proteinaceous materials
CA1208546A (en) 1981-09-08 1986-07-29 Anthony Cerami Lipoprotein lipase suppression by endotoxin-induced mediator (shock assay)
US4510245A (en) 1982-11-18 1985-04-09 Chiron Corporation Adenovirus promoter system
GB8308235D0 (en) 1983-03-25 1983-05-05 Celltech Ltd Polypeptides
US5672347A (en) 1984-07-05 1997-09-30 Genentech, Inc. Tumor necrosis factor antagonists and their use
IL73883A (en) 1984-12-20 1990-12-23 Yeda Res & Dev Monoclonal antibodies against tnf-alpha,hybridomas producing them and method for the purification of tnf-alpha
US5168062A (en) 1985-01-30 1992-12-01 University Of Iowa Research Foundation Transfer vectors and microorganisms containing human cytomegalovirus immediate-early promoter-regulatory DNA sequence
EP0613006A1 (en) 1985-08-16 1994-08-31 The Rockefeller University Antibodies to cachectin and immunoassays
US4870163A (en) 1985-08-29 1989-09-26 New York Blood Center, Inc. Preparation of pure human tumor necrosis factor and hybridomas producing monoclonal antibodies to human tumor necrosis factor
US5246714A (en) 1985-10-11 1993-09-21 Aktiebolaget Hassle Drug preparation
GB8528234D0 (en) 1985-11-15 1985-12-18 Wyeth John & Brother Ltd Heterocyclic compounds
US4968615A (en) 1985-12-18 1990-11-06 Ciba-Geigy Corporation Deoxyribonucleic acid segment from a virus
EP0230574A3 (en) 1986-01-31 1989-03-22 Yale University Pharmaceutical compositions against infections caused by lav/htlv iii virus and the use thereof
DE3631229A1 (de) 1986-09-13 1988-03-24 Basf Ag Monoklonale antikoerper gegen humanen tumornekrosefaktor (tnf) und deren verwendung
JP2638652B2 (ja) 1988-07-18 1997-08-06 カイロン・コーポレーション カケクチンと反応するモノクロナール抗体
US5223409A (en) 1988-09-02 1993-06-29 Protein Engineering Corp. Directed evolution of novel binding proteins
DE68914244T2 (de) 1988-10-24 1994-10-27 Otsuka Pharma Co Ltd Monoklonaler Antikörper.
EP0374510B1 (en) 1988-12-19 1997-01-15 American Cyanamid Company Products for the treatment of endotoxic shock in a mammal
JP3443119B2 (ja) 1989-08-07 2003-09-02 ペプテック リミテッド 腫瘍壊死因子結合リガンド
FR2651130B1 (fr) 1989-08-23 1991-12-13 Roussel Uclaf Sequence d'oligonucleotides anti-sens, anti-arn message du tnf alpha, procede de preparation, application a titre de medicaments et compositions pharmaceutiques.
GB8921123D0 (en) 1989-09-19 1989-11-08 Millar Ann B Treatment of ards
GB8928874D0 (en) 1989-12-21 1990-02-28 Celltech Ltd Humanised antibodies
US5859205A (en) 1989-12-21 1999-01-12 Celltech Limited Humanised antibodies
US6075181A (en) * 1990-01-12 2000-06-13 Abgenix, Inc. Human antibodies derived from immunized xenomice
US5945098A (en) 1990-02-01 1999-08-31 Baxter International Inc. Stable intravenously-administrable immune globulin preparation
DE4037604A1 (de) 1990-04-25 1991-10-31 Bayer Ag Verwendung von anti-tnf-antikoerpern als arzneimittel bei der behandlung von ischaemien und deren folgen
US5427908A (en) 1990-05-01 1995-06-27 Affymax Technologies N.V. Recombinant library screening methods
GB9014932D0 (en) 1990-07-05 1990-08-22 Celltech Ltd Recombinant dna product and method
JPH06508511A (ja) 1990-07-10 1994-09-29 ケンブリッジ　アンティボディー　テクノロジー　リミティド 特異的な結合ペアーの構成員の製造方法
GB9015198D0 (en) 1990-07-10 1990-08-29 Brien Caroline J O Binding substance
CA2090401A1 (en) 1990-08-27 1992-02-28 Deborah A. Rathjen Method of treating viral infection
DE69129154T2 (de) 1990-12-03 1998-08-20 Genentech, Inc., South San Francisco, Calif. Verfahren zur anreicherung von proteinvarianten mit geänderten bindungseigenschaften
US5994510A (en) 1990-12-21 1999-11-30 Celltech Therapeutics Limited Recombinant antibodies specific for TNFα
GB9109645D0 (en) 1991-05-03 1991-06-26 Celltech Ltd Recombinant antibodies
GB2279077B (en) 1990-12-21 1995-06-14 Celltech Ltd Therapeutic compositions comprising recombinant antibodies specific for the TNFalpha
GB9028123D0 (en) 1990-12-28 1991-02-13 Erba Carlo Spa Monoclonal antibodies against human tumor necrosis factor alpha
DE69233769D1 (de) 1991-03-01 2009-09-24 Dyax Corp Chimäres Protein mit Mikroprotein mit zwei oder mehr Disulfidbindungen und Ausgestaltungen davon
DE69233069T2 (de) 1991-03-15 2003-11-27 Amgen Inc., Thousand Oaks Pegylation von polypeptiden
US6277969B1 (en) 1991-03-18 2001-08-21 New York University Anti-TNF antibodies and peptides of human tumor necrosis factor
US20060246073A1 (en) 1991-03-18 2006-11-02 Knight David M Anti-TNF antibodies and peptides of human tumor necrosis factor
US20040120952A1 (en) 2000-08-07 2004-06-24 Centocor, Inc Anti-TNF antibodies and peptides of human tumor necrosis factor
US5698195A (en) 1991-03-18 1997-12-16 New York University Medical Center Methods of treating rheumatoid arthritis using chimeric anti-TNF antibodies
EP1097945B1 (en) 1991-03-18 2007-07-04 New York University Monoclonal and chimeric antibody specific for human tumor necrosis factor
US20070298040A1 (en) 1991-03-18 2007-12-27 Centocor, Inc. Methods of treating seronegative arthropathy with anti-TNF antibodies
ATE171471T1 (de) 1991-03-29 1998-10-15 Immunex Corp Isolierte virale proteine als cytokinantagonisten
ATE414768T1 (de) 1991-04-10 2008-12-15 Scripps Research Inst Bibliotheken heterodimerer rezeptoren mittels phagemiden
EP0940468A1 (en) * 1991-06-14 1999-09-08 Genentech, Inc. Humanized antibody variable domain
DE4122599C2 (de) 1991-07-08 1993-11-11 Deutsches Krebsforsch Phagemid zum Screenen von Antikörpern
ATE181571T1 (de) 1991-09-23 1999-07-15 Medical Res Council Methoden zur herstellung humanisierter antikörper
AU3244693A (en) 1991-12-17 1993-07-19 Schering Corporation Use of the combination of anti-tumor necrosis factor plus interleukin-6 to treat septic shock
US5195967A (en) * 1992-02-18 1993-03-23 Nakao Naomi L Anticlotting device and method for use with IV catheters
US5605923A (en) 1992-04-02 1997-02-25 Smithkline Beecham Corporation Compounds useful for treating inflammatory diseases and inhibiting production of tumor necrosis factor
EP0585705B1 (en) 1992-08-28 1998-11-04 Bayer Corporation Use of monoclonal antibodies to TNF to treat bacterial meningitis
JPH07504203A (ja) 1992-09-15 1995-05-11 イミュネックス・コーポレーション 腫瘍壊死因子アンタゴニストを用いるｔｎｆ−依存性炎症の治療方法
US6270766B1 (en) 1992-10-08 2001-08-07 The Kennedy Institute Of Rheumatology Anti-TNF antibodies and methotrexate in the treatment of arthritis and crohn's disease
WO1994008609A1 (en) 1992-10-15 1994-04-28 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. TREATMENT OF INSULIN RESISTANCE IN OBESITY LINKED TYPE II DIABETES USING ANTAGONISTS TO TNF-α FUNCTION
DE69427928T3 (de) 1993-03-05 2012-05-10 Bayer Healthcare Llc Humane monoklonale anti-TNF alpha Antikörper
DE4307508A1 (de) 1993-03-10 1994-09-15 Knoll Ag Verwendung von anti-TNF-Antikörpern als Arzneimittel bei der Behandlung von Herzinsuffizienz (Herzmuskelschwäche)
ATE183513T1 (de) 1993-06-03 1999-09-15 Therapeutic Antibodies Inc Herstellung von antikörperfragmenten
US5500227A (en) 1993-11-23 1996-03-19 Euro-Celtique, S.A. Immediate release tablet cores of insoluble drugs having sustained-release coating
EP0659766A1 (en) 1993-11-23 1995-06-28 Schering-Plough Human monoclonal antibodies against human cytokines and methods of making and using such antibodies
NZ278607A (en) 1994-02-07 1999-05-28 Knoll Ag Use of tnf antagonists for treating disorders involving elevated serum levels of il-6 wherein the serum levels are 500pg/ml or above
WO1995023813A1 (en) 1994-03-04 1995-09-08 Merck & Co., Inc. In vitro antibody affinity maturation using alanine scanning mutagenesis
ZA955642B (en) 1994-07-07 1997-05-06 Ortho Pharma Corp Lyophilized imaging agent formulation
PT1516628E (pt) 1995-07-27 2013-09-24 Genentech Inc Formulação de proteína liofilizada isotónica estável
US6267958B1 (en) * 1995-07-27 2001-07-31 Genentech, Inc. Protein formulation
US6090382A (en) 1996-02-09 2000-07-18 Basf Aktiengesellschaft Human antibodies that bind human TNFα
DE122004000004I1 (de) * 1996-02-09 2004-08-12 Abott Biotechnology Ltd Humane Antikörper welche an Humanen TNFalpha binden.
GB9610992D0 (en) * 1996-05-24 1996-07-31 Glaxo Group Ltd Concentrated antibody preparation
JP2000516594A (ja) 1996-07-26 2000-12-12 スミスクライン・ビーチャム・コーポレイション 免疫細胞介在全身性疾患の改良された治療法
DK0999853T3 (da) 1997-06-13 2003-04-22 Genentech Inc Stabiliseret antostofformulering
US6171586B1 (en) 1997-06-13 2001-01-09 Genentech, Inc. Antibody formulation
US5971953A (en) * 1998-01-09 1999-10-26 Bachynsky; Nicholas Dual chamber syringe apparatus
TR200103054T2 (tr) 1998-06-15 2002-06-21 Sepracor Inc. Apne,bulimi ve başka bozuklukların tedavi edilmesi için optik açıdan saf (+)-norsisapridin kullanımı
JP3889197B2 (ja) * 1999-02-22 2007-03-07 中外製薬株式会社 プランジャロッド付きシリンジ製剤の製造方法及びその組付装置
US6419944B2 (en) 1999-02-24 2002-07-16 Edward L. Tobinick Cytokine antagonists for the treatment of localized disorders
US6537549B2 (en) 1999-02-24 2003-03-25 Edward L. Tobinick Cytokine antagonists for the treatment of localized disorders
US6015557A (en) 1999-02-24 2000-01-18 Tobinick; Edward L. Tumor necrosis factor antagonists for the treatment of neurological disorders
US6423321B2 (en) 1999-02-24 2002-07-23 Edward L. Tobinick Cytokine antagonists for the treatment of sensorineural hearing loss
AU756677B2 (en) 1999-03-02 2003-01-23 Centocor Inc. Anti-TNFalpha antibodies in therapy of asthma
EP1041072B1 (en) 1999-03-31 2003-07-16 Pfizer Products Inc. Dioxocyclopentyl hydroxamic acids
SE9901366D0 (sv) * 1999-04-16 1999-04-16 Pharmacia & Upjohn Ab Injector device and method for its operation
CA2371427A1 (en) 1999-04-28 2000-11-09 Yamanouchi Pharmaceutical Co., Ltd. Parenteral pharmaceutical composition containing humanized monoclonal antibody fragment and stabilizing method thereof
US6502867B2 (en) 1999-06-16 2003-01-07 United States Pipe & Foundry Flanged pipe fitting
EP1189628A1 (en) 1999-06-24 2002-03-27 Pharmacia Corporation Combination of tumor necrosis factor (tnf) antagonists and cox-2 inhibitors for the treatment of inflammation
ATE389414T1 (de) * 1999-09-08 2008-04-15 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Stabile proteinlösung abgefüllt in einem behältnis aus hydrophobem harz und eine methode zur stabilisierung derselben
AU3082401A (en) 1999-11-24 2001-06-04 Centocor Inc. Therapy of psoriasis
WO2001047554A1 (fr) 1999-12-28 2001-07-05 Chugai Seiyaku Kabushiki Kaisha Compositions d'anticorps stables et preparations pour injection
GB0013810D0 (en) 2000-06-06 2000-07-26 Celltech Chiroscience Ltd Biological products
US20050249735A1 (en) 2000-08-07 2005-11-10 Centocor, Inc. Methods of treating ankylosing spondylitis using anti-TNF antibodies and peptides of human tumor necrosis factor
US20060018907A1 (en) 2000-08-07 2006-01-26 Centocor, Inc. Anti-TNF antibodies and peptides of human tumor necrosis factor
UA81743C2 (uk) 2000-08-07 2008-02-11 Центокор, Инк. МОНОКЛОНАЛЬНЕ АНТИТІЛО ЛЮДИНИ, ЩО СПЕЦИФІЧНО ЗВ'ЯЗУЄТЬСЯ З ФАКТОРОМ НЕКРОЗУ ПУХЛИН АЛЬФА (ФНПα), ФАРМАЦЕВТИЧНА КОМПОЗИЦІЯ, ЩО ЙОГО МІСТИТЬ, ТА СПОСІБ ЛІКУВАННЯ РЕВМАТОЇДНОГО АРТРИТУ
US20030012786A1 (en) 2001-05-25 2003-01-16 Teoh Leah S. Use of anti-TNF antibodies as drugs in treating septic disorders of anemic patients
CA2385745C (en) 2001-06-08 2015-02-17 Abbott Laboratories (Bermuda) Ltd. Methods of administering anti-tnf.alpha. antibodies
PL217752B1 (pl) * 2001-08-23 2014-08-29 Genmab As Izolowane ludzkie przeciwciało monoklonalne wobec IL-15 lub jego fragment wiążący antygen i związane z nimi hybrydoma, kompozycja farmaceutyczna oraz zastosowania medyczne
US20030161828A1 (en) 2002-02-19 2003-08-28 Abbott Gmbh & Co. Kg Use of TNF antagonists as drugs for the treatment of patients with an inflammatory reaction and without suffering from total organ failure
CN1305905C (zh) 2002-03-22 2007-03-21 Aprogen株式会社 人源化抗体及其制备方法
US20040009172A1 (en) 2002-04-26 2004-01-15 Steven Fischkoff Use of anti-TNFalpha antibodies and another drug
AR040603A1 (es) 2002-07-19 2005-04-13 Abbott Lab S A El uso de un anticuerpo anti-tnfalfa neutralizador de alta afinidad en la fabricacion de un medicamento y conjunto de elementos
US20090280065A1 (en) 2006-04-10 2009-11-12 Willian Mary K Uses and Compositions for Treatment of Psoriasis
US7226426B2 (en) 2002-07-25 2007-06-05 Thomson Paul E Apparatus and method for the detection and quantification of joint and tissue inflammation
US20040033228A1 (en) 2002-08-16 2004-02-19 Hans-Juergen Krause Formulation of human antibodies for treating TNF-alpha associated disorders
MY150740A (en) 2002-10-24 2014-02-28 Abbvie Biotechnology Ltd Low dose methods for treating disorders in which tnf? activity is detrimental
TWI439284B (zh) 2004-04-09 2014-06-01 Abbvie Biotechnology Ltd 用於治療ＴＮＦα相關失調症之多重可變劑量療法
EP1807111A4 (en) 2004-10-08 2009-05-27 Abbott Biotech Ltd SYNCYTIAL RESPIRATORY VIRUS INFECTION (RSV)
AU2006246721B2 (en) 2005-05-16 2012-12-13 Abbvie Biotechnology Ltd Use of TNF inhibitor for treatment of erosive polyarthritis
US20070041905A1 (en) 2005-08-19 2007-02-22 Hoffman Rebecca S Method of treating depression using a TNF-alpha antibody
CA2626804A1 (en) 2005-11-01 2007-08-09 Abbott Biotechnology Ltd. Methods and compositions for diagnosing ankylosing spondylitis using biomarkers
MX2008012896A (es) 2006-04-05 2008-10-14 Abbott Biotech Ltd Purificacion de anticuerpos.
US9605064B2 (en) 2006-04-10 2017-03-28 Abbvie Biotechnology Ltd Methods and compositions for treatment of skin disorders
CN103316402A (zh) 2006-06-30 2013-09-25 艾伯维生物技术有限公司 自动注射装置
NZ576133A (en) 2006-10-27 2012-10-26 Abbott Biotech Ltd Crystalline anti-htnfalpha antibodies
WO2009020654A1 (en) 2007-08-08 2009-02-12 Abbott Laboratories Compositions and methods for crystallizing antibodies
WO2014152463A1 (en) 2013-03-15 2014-09-25 Cyberheart, Inc. Apparatus and method for real-time tracking of tissue structures
CN102458517B (zh) 2009-04-29 2014-07-23 阿布维生物技术有限公司 自动注射装置
RU2560701C2 (ru) 2009-05-04 2015-08-20 Эббви Байотекнолоджи Лтд. Стабильные композиции с высокими концентрациями белков антител человека против tnf-альфа
CN102167741B (zh) 2010-02-25 2014-05-14 上海百迈博制药有限公司 一种全人源抗TNF-α单克隆抗体、其制备方法及用途
HUE039740T2 (hu) 2010-06-03 2019-01-28 Abbvie Biotechnology Ltd Alkalmazások és készítmények hidradenitis suppurativa (HS) kezelésére
GB201112429D0 (en) 2011-07-19 2011-08-31 Glaxo Group Ltd Antigen-binding proteins with increased FcRn binding
JP6274421B2 (ja) 2013-03-22 2018-02-07 キヤノンメディカルシステムズ株式会社 超音波診断装置及びその制御プログラム
KR102197477B1 (ko) 2014-07-04 2020-12-31 주식회사 유풍 모자

Also Published As

Publication number Publication date
EP1406656B1 (en) 2013-01-09
EP2940044B8 (en) 2017-01-18
NO20035426L (no) 2004-02-03
US20130004507A1 (en) 2013-01-03
HK1065471A1 (en) 2005-02-25
HUP0600688A3 (en) 2012-09-28
IL222495A (en) 2015-03-31
EP1406656A2 (en) 2004-04-14
EP2324851A1 (en) 2011-05-25
CN105412922A (zh) 2016-03-23
US20150071945A1 (en) 2015-03-12
MXPA03011316A (es) 2004-12-06
US20150175691A1 (en) 2015-06-25
KR101282807B1 (ko) 2013-07-05
BG111719A (bg) 2014-06-30
NZ560792A (en) 2009-09-25
PL394085A1 (pl) 2011-07-04
IL212419A (en) 2015-03-31
US8911737B2 (en) 2014-12-16
PH12013500866B1 (en) 2016-02-22
US20120177596A1 (en) 2012-07-12
EP2940044A1 (en) 2015-11-04
KR101715028B1 (ko) 2017-03-10
CA2385745C (en) 2015-02-17
US20150023982A1 (en) 2015-01-22
AR034429A1 (es) 2004-02-25
IL212419A0 (en) 2011-06-30
KR101142825B1 (ko) 2012-05-08
CA2385745A1 (en) 2002-12-08
CA2868614A1 (en) 2002-12-08
TWI473622B (zh) 2015-02-21
CA2817619A1 (en) 2002-12-08
BG108514A (en) 2005-04-30
ES2612436T3 (es) 2017-05-16
PL399491A1 (pl) 2012-10-08
US20150246968A1 (en) 2015-09-03
BG66936B1 (bg) 2019-08-15
NO334490B1 (no) 2014-03-17
EP2940044B1 (en) 2016-11-16
PL399548A1 (pl) 2012-11-05
TW201332570A (zh) 2013-08-16
PL217217B1 (pl) 2014-06-30
SA02230384B1 (ar) 2009-08-19
US9546212B2 (en) 2017-01-17
US20200181252A1 (en) 2020-06-11
US9073987B2 (en) 2015-07-07
PT2940044T (pt) 2017-01-12
KR20090035746A (ko) 2009-04-10
SK288509B6 (sk) 2017-11-03
AU2002314922B2 (en) 2008-05-15
SI2940044T1 (sl) 2017-03-31
PH12013500865B1 (en) 2018-06-27
US20140271637A1 (en) 2014-09-18
US20150017175A1 (en) 2015-01-15
PH12013500865A1 (en) 2016-02-01
PL217666B1 (pl) 2014-08-29
NO20035426D0 (no) 2003-12-05
US8992926B2 (en) 2015-03-31
EP2364731A9 (en) 2012-06-20
PL217702B1 (pl) 2014-08-29
KR101497363B1 (ko) 2015-03-03
PH12013500866A1 (en) 2016-02-22
US8889135B2 (en) 2014-11-18
BR0206289A (pt) 2004-11-30
EP2359855A2 (en) 2011-08-24
US20150079101A1 (en) 2015-03-19
SI1406656T1 (sl) 2013-04-30
AR090099A2 (es) 2014-10-22
NO20120288L (no) 2004-02-03
NZ596878A (en) 2013-07-26
CY1120540T1 (el) 2019-07-10
AR077572A2 (es) 2011-09-07
JP2012184242A (ja) 2012-09-27
JP2005517629A (ja) 2005-06-16
JP2009167193A (ja) 2009-07-30
CN101574520A (zh) 2009-11-11
NZ586063A (en) 2012-02-24
CN103110944A (zh) 2013-05-22
NZ529574A (en) 2006-05-26
MX341001B (es) 2016-08-03
LT2940044T (lt) 2017-01-10
KR20040030661A (ko) 2004-04-09
US20140186368A1 (en) 2014-07-03
BG66459B1 (bg) 2014-10-31
KR20080089681A (ko) 2008-10-07
PH12013500297A1 (en) 2015-09-07
ES2400458T3 (es) 2013-04-10
JP6302529B2 (ja) 2018-03-28
EP2364731A3 (en) 2011-11-02
EP2364731A2 (en) 2011-09-14
DK2940044T3 (en) 2017-02-20
JP5832952B2 (ja) 2015-12-16
KR20100075698A (ko) 2010-07-02
AU2002314922C1 (en) 2017-11-09
HU230947B1 (hu) 2019-05-28
CN103495165A (zh) 2014-01-08
WO2002100330A9 (en) 2007-06-21
EP3190124A1 (en) 2017-07-12
ZA200308861B (en) 2004-09-13
JP2015003922A (ja) 2015-01-08
EP2359855A9 (en) 2012-06-20
CN1638796A (zh) 2005-07-13
NO343721B1 (no) 2019-05-20
NZ545649A (en) 2009-04-30
US9017680B2 (en) 2015-04-28
KR20140012210A (ko) 2014-01-29
PT1406656E (pt) 2013-03-25
JP2013100311A (ja) 2013-05-23
PE20030065A1 (es) 2003-02-12
PE20160999A1 (es) 2016-10-08
US8974790B2 (en) 2015-03-10
IL158831A (en) 2014-06-30
US20150071939A1 (en) 2015-03-12
PL366694A1 (en) 2005-02-07
JP6074462B2 (ja) 2017-02-01
CL2012000856A1 (es) 2012-09-14
JP2015166389A (ja) 2015-09-24
EP2359855A3 (en) 2011-11-02
WO2002100330A2 (en) 2002-12-19
US20030235585A1 (en) 2003-12-25
HUP0600688A2 (en) 2006-11-28
ECSP034867A (es) 2004-01-28
CZ309160B6 (cs) 2022-03-30
US20140322232A1 (en) 2014-10-30
SK16462003A3 (sk) 2004-08-03
WO2002100330A3 (en) 2004-02-12
KR20120139851A (ko) 2012-12-27
KR20110039505A (ko) 2011-04-18
US20160280777A1 (en) 2016-09-29
DK1406656T3 (da) 2013-04-15
PL215861B1 (pl) 2014-02-28
JP2017031213A (ja) 2017-02-09
IL158831A0 (en) 2004-05-12
EP1406656A4 (en) 2006-05-24
NZ573478A (en) 2011-02-25
US20150165023A1 (en) 2015-06-18
KR20160096222A (ko) 2016-08-12

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US20200181252A1 (en) Methods of administering anti-tnfalpha antibodies
AU2002314922A1 (en) Methods of administering anti-TNFalpha antibodies
NZ560793A (en) Use of TNFalpha antibodies and another drug
AU2008202001B2 (en) Methods of administering anti-TNFalpha antibodies
AU2013204357B2 (en) Methods of administering anti-TNFalpha antibodies
AU2011218743B2 (en) Methods of administering anti-TNFalpha antibodies

Legal Events

Date Code Title Description
MK4A Patent expired

Effective date: 20220605