BRPI0112375B1

BRPI0112375B1 - Aplidinas como derivados antitumorais

Info

Publication number: BRPI0112375B1
Application number: BRPI0112375-0A
Authority: BR
Inventors: Simon Munt; Ignacio Manzanares; Ignacio Rodrigues; Concepcion Polanco; Felix Cuevas; Paloma Méndez; Carmen Cuevas; Pilar Gallego
Original assignee: Pharma Mar, S.A.
Priority date: 2000-06-30
Filing date: 2001-07-02
Publication date: 2020-12-01
Also published as: JP5289662B2; CZ304204B6; HUP0301387A3; IL153680A0; EP1294747A2; BRPI0112375B8; WO2002002596A3; CN1449408A; KR100866056B1; SI1294747T1; IL153680A; BR0112375A; KR20030013477A; ATE393775T1; DE60133817D1; ES2305083T3; CN104650177A; UA76718C2; MXPA03000202A; DK1294747T3

Abstract

"MÉTODOS DE SÍNTESE PARA APLIDINA E NOVOS DERIVADOS ANTITUMORAIS, MÉTODOS PARA FABRICÁ-LOS E USÁ-LOS". A invenção fornece derivados de aplidina e métodos de síntese.

Description

[0001] A presente invenção refere-se a métodos de síntese para aplidina e novos derivados antitumorais, métodos para fabricá-los e usá-los.

ANTECEDENTES DA INVENÇÀQ

[0002] A aplidina tem uma estrutura cíclica com uma cadeia lateral, como se segue:

[0003] As didemninas formam uma classe de depsipeptídeos que foram isolados a partir de várias espécies do gênero Trididemnum (Rinehart, Jr. et al., J. Am. Chem. Soc. 103:1857-59 (1981), Rinehart, Jr. et al., Science 212:933-935 (1981), com atividades antitumoral e antiviral potentes. Dentre eles, a aplidina é uma das didemninas naturais antitumorais mais ativas. A descrição do isolamento e da atividade an- titumoral da aplidina pode ser encontrada na patente no US 5.834.586.

[0004] Inúmeros análogos sintéticos ou naturais da aplidina foram descritos (Rinehart, Jr. et al., J. Med. Chem. 39:2819-2834 (1996)), que incluem diferentes modificações na cadeia lateral, mas conser- vando a mesma estrutura macrocíclica.

[0005] Recentemente, foi descrita uma estrutura afim de didemni- nas denominadas tamandarinas (Fenical, W. et al., J. Org. Chem. 65:782-792 (2000)) que foram isoladas a partir de uma ascidina não- identificada da família Didemnidae. Descobriu-se que estas moléculas diferem somente pela presença do ácido hidroxiisovalérico (Hiv3), ao invés do ácido hidroxi-isovaleril-propiônico (Hip3). Elas foram descritas como peptídeos antivirais, antitumorais e imunossupressores altamente ativos.

SUMÁRIO DA INVENÇÀQ

[0006] A presente invenção refere-se aos compostos aqui descritos, denominados derivados de aplidina, para uso em medicina, particularmente no tratamento de tumores. A invenção refere-se também a preparações farmacêuticas que os compreendem, para tratamento de tumores, como por exemplo, tumores sólidos, e o uso do composto na preparação de um medicamento para o tratamento de tumores. É particularmente preferido o tratamento de tumores sólidos, tais como o de bexiga, mama, cólon, gástrico, fígado, nscl, ovário, pâncreas, faringe, próstata, rim, scl, retinoblastoma, melanoma, fibrossarcoma, condros- sarcoma, ou osteossarcoma, ou o tratamento de leucemia/linfomas, tais como ALL (leucemia promielocítica), ALL (linfoblástica aguda), CML (mielógena crônica), ALL (células B), leucemia (células B pilo- sas), leucemia (células plasmáticas), linfoma (células T), linfoma (células T cutâneas), linfoma (células indiferenciadas), linfoma (células B de Burkitts), linfoma (histiocítico), linfoma (células B), linfoma (ascite de Burkitts).

[0007] Os exemplos de composições farmacêuticas da invenção incluem qualquer composição sólida (como por exemplo, comprimidos, pílulas, cápsulas, grânulos) ou líquida (soluções, suspensões ou emulsões) apropriada para administração oral, tópica ou parenteral, e elas podem conter o composto puro ou em combinação com qualquer veículo ou outros compostos farmacologicamente ativos. Estas composições podem precisar ser estéreis quando administradas por via parenteral.

[0008] Adequadamente, o composto pode ser conjugado a uma proteína veículo ou outro agente apropriado para distribuição no corpo de um animal ou ser humano. A conjugação pode ocorrer diretamente entre um veículo e o composto, ou indiretamente por intermédio de um ligante apropriado

[0009] A administração do composto ou composições da presente invenção pode ser por qualquer método apropriado, tal como infusão intravenosa, preparações orais, e administração intraperitoneal e intravenosa. Prefere-se que sejam usados tempos de infusão de até 24 horas, mais preferivelmente 2-12 horas, sendo 2-6 horas mais preferido. Tempos de infusão curtos, que permitam que o tratamento seja conduzido sem internação durante a noite no hospital, são especialmente desejáveis. Entretanto, a infusão pode ser de 12 a 24 horas ou ainda mais longa, caso necessário. A infusão pode ser conduzida em intervalos apropriados de, por exemplo, 2 a 4 semanas. As composições farmacêuticas que contêm os compostos da invenção podem ser distribuídas por lipossoma ou encapsulamento em nanoesferas, em formulações de liberação retardada, ou por outros meios de distribuição padronizados.

[0010] A dosagem correta do composto variará de acordo com a formulação específica, modo de aplicação, e do sítio, hospedeiro e câncer ou tumor específico que está sendo tratado. Outros fatores tais como idade, peso corpóreo, sexo, dieta, tempo de administração, taxa de exceção, condição do hospedeiro, combinações de drogas, reações de sensibilidade e seriedade da doença devem ser levados em conta. A administração pode ser conduzida continuamente ou periodicamente dentro da dose máxima tolerada.

[0011] Os compostos desta invenção podem ser usados com outras drogas, para proporcionar uma terapia combinada. As outras drogas podem fazer parte da mesma composição, ou podem ser fornecidos como uma composição separada para administração ao mesmo tempo ou em um tempo diferente. A identidade da outra droga não é particularmente limitada, e os candidatos apropriados incluem:

[0012] drogas com efeitos antimicóticos, especialmente aqueles que visam elementos citoesqueléticos, inclusive moduladores de mi- crotúbulos, tais coma drogas taxanas (como taxol, paclitaxel, taxotere, docetaxel), podofilotoxinas ou alcalóides de vinca (vincristina, vinblas- tina);

[0013] drogas antimetabólitos tais como 5-fluorouracila, citarabina, gencitabina, análogos de purina, tais como pentostatina, metotrexato);

[0014] agentes alquilantes, tais como mostardas nitrogenadas (como a ciclofosfamida ou ifosfamida);

[0015] drogas que visam DNA tais como as drogas de antraciclina adriamicina, doxorrubicina, farmorrubicina ou epirrubicina;

[0016] drogas que visam topoisomerases, por exemplo, etoposida; f) hormônios e agonistas e antagonistas de hormônios, tais como es- trogênios, antiestrogênios (tamoxifeno e compostos relacionadas) e androgênios, flutamida, leuprorelina, goserelina, ciprotrona ou octreoti- da;

[0017] drogas que visam transdução de sinais em células tumoro- sas, inclusive derivados de anticorpos, como a herceptina;

[0018] drogas alquilantes, tais como as drogas de platina (cisplatina, carbonplatina, oxaliplatina, paraplatina) ou nitrosouréias;

[0019] drogas que potencialmente afetam a metástase de tumores, tais como os inibidores de metaloproteinases de matriz;

[0020] terapia gênica e agentes anti-sentido

[0021] terapêutica com anticorpos; e

[0022] outros compostos bioativos de origem marinha, principalmente as ecteinascidinas, tal como ET-743.

[0023] Em um aspecto, a presente invenção refere-se a compostos da fórmula:

em que:

[0024] X é independentemente -C(R<2-, -0-, -S- ou -NR-, onde R é independentemente H ou um grupo orgânico selecionado entre um grupo alquila, um grupo alquenila, um grupo arila, um grupo aralquila, e seus derivados substituídos, substituídos com um ou mais entre um grupo heterocíclico, um grupo alcóxi, um grupo hidróxi, um grupo mercapto, um grupo amino opcionalmente protegido, um grupo guanidino, ou um grupo halogênio;

[0025] X2 é independentemente CR, 0 (e R2 está ausente), S (e R2 está ausente), ou N, onde R é independentemente H ou um grupo orgânico selecionado entre um grupo alquila, um grupo alquenila, um grupo arila, um grupo aralquila, e seus derivados substituídos, substituídos com um ou mais entre um grupo heterocíclico, um grupo alcóxi, um grupo hidróxi, um grupo mercapto, um grupo amino opcionalmente protegido, um grupo guanidino, ou um grupo halogênio;

[0026] Y é -(COR’)nCO-, onde n é 0 ou 1, e R’ é um grupo orgânico selecionado entre um grupo alquila, um grupo alquenila, um grupo arila, um grupo aralquila, e seus derivados substituídos, substituídos com um ou mais entre um grupo heterocíclico, um grupo alcóxi, um grupo hidróxi, um grupo mercapto, um grupo amino opcionalmente protegido, um grupo guanidino, ou um grupo halogênio;

[0027] Xi é O ou S;

[0028] Ri, R2 e R>são cada um independentemente H ou um gru po orgânico selecionado entre um grupo amido RC0NH- ou um grupo acila RCO-, onde R é como definido, um grupo alquila, um grupo al- quenila, um grupo arila, um grupo aralquila, e derivados substituídos, substituídos com um ou mais entre um grupo heterocíclico, um grupo alcóxi, um grupo hidróxi, um grupo mercapto, um grupo amino opcionalmenteprotegido, um grupo guanidino, ou um grupo halogênio, e Ri e R2, quando X2 é N, e R>, podem ser ainda -SO2R, onde R é como definido;

[0029] ou Ri e R2 com X2 podem formar uma prolina N-substituída, sendo a prolina N-substituída aa8 da fórmula:

onde R3 é independentemente H ou um grupo orgânico selecionado de um grupo RSO2- ou um grupo acila RCQ-, onde R é como definido, ou R3 é um grupo alquila, um grupo alquenila, um grupo arila, um grupo aralquila, e derivados substituídos com um ou mais entre um grupo carbonila, um grupo hidróxi, um grupo mercapto, um grupo amino opcionalmente protegido, um grupo guanidino, ou um grupo halogênio;

[0030] ou Ri e R2 junto com X2 podem formar um grupo cicloalqui- la, arila ou heterocíclico, opcionalmente substituído com um ou mais grupos R3;

[0031] ou Ri, R2, X2, R>e o R>portador de nitrogênio podem formar um oxodiazaespiroalcano N-substituído com R5, onde R5 é independentemente H ou um grupo orgânico selecionado de um grupo RSO2- ou um grupo acila RCO-, onde R é como definido, um grupo alquila, um grupo arila, um grupo aralquila, e derivados substituídos com um ou mais entre um grupo carbonila, um grupo alcóxi, um grupo hidróxi, um grupo mercapto, um grupo amino, um grupo guanidino, ou um grupo halogênio;

[0032] ou aa8 é trocado por um grupo orgânico selecionado entre um grupo RSO2- ou um grupo acila RCQ-, onde R é como definido, um grupo alquila, um grupo arila, um grupo aralquila, e derivados substituídos com um ou mais entre um grupo carbonila, um grupo alcóxi, um grupo hidróxi, um grupo mercapto, um grupo amino, um grupo guani- dino, ou um grupo halogênio;

[0033] e seus sais farmaceuticamente aceitáveis.

[0034] Os compostos preferidos incluem aqueles em que X é -NR, onde R é como definido. Mais preferivelmente, X é -NH- ou -NMe-, e mais preferivelmente, X é -NH-.

[0035] Os outros compostos preferidos incluem aqueles em que X é -0-.

[0036] O grupo Y é, de preferência, -C0R’C0-, onde R’ é um gru po alquila, especialmente onde R’ é -CHCH3.

[0037] Outros compostos preferidos incluem aqueles onde Y é - C0-.

[0038] Tendo em vista estas preferências, uma classe preferida de compostos é aquela em que X é -NH- ou -0- e Y é -C0CHCH3C0- ou -C0-.

[0039] De preferência, R>é metila.

[0040] De preferência, Xi é =0.

[0041] De preferência, X2R1 é um grupo aralquilóxi opcionalmente substituído, tal como um grupo benzilóxi.

[0042] Outros compostos preferidos incluem aqueles em que X2R1 é um grupo amino opcionalmente substituído, mais preferivelmente aqueles em que X2R1 é um grupo -NHRi, onde Ri é um grupo alquila, um grupo alquenila, um grupo arila, ou um grupo aralquila, opcionalmente substituído, especialmente um grupo alquila ou um grupo arila, tal como um grupo fenila ou um grupo butila.

[0043] Outros compostos preferidos compreendem aqueles em que X2R1 é um grupo alquila opcionalmente substituído, especialmente em que X2R1 é um grupo propila, um grupo isopropila, um grupo pentila ou um grupo biotina.

[0044] Um grupo de compostos preferidos é aquele onde - C(=Xi)RiR2 formam um grupo acila aminoácido opcionalmente substituído. Adequadamente, o grupo acila aminoácido opcionalmente substituído é prolina opcionalmente substituída ou glicina opcionalmente substituída, ou valina opcionalmente substituída, e mais preferivelmente, a prolina opcionalmente substituída é norvalina-prilina opcionalmente substituída, alanina-prolina opcionalmente substituída, Boc-prolina, alquil-prolina opcionalmente substituída, ou a glicina opcionalmente substituída é glicina substituída com heterocíclico, ou a valina opcionalmente substituída é valina, Boc-valina, ou alquil-valina. De preferên-cia, a prolina opcionalmente substituída é norvalina-prolina, Z-norvalina- prolina, alanina-prolina, Z-alanina-prolina, Boc-alanina-prolina, isobuti- ril-prolina ou D-lactil-prolina opcionalmente protegida, ou a glicina substituída com heterocíclico é cumarinil-glicina, ou a valina opcionalmente substituída é valina, Boc-valina ou isobutirilvalina.

[0045] Um outro grupo de compostos preferidos inclui aqueles em que Xi é S e X2R1 é um grupo -NHRi, onde Ri é um grupo alquila, grupo alquenila, grupo arila, ou grupo aralquila, opcionalmente substituído. Ri é de preferência um grupo alquila ou um grupo arila, e mais preferivelmente um grupo fenila ou um grupo butila.

[0046] Ri e R2 com X2 podem formar um grupo heterocíclico, opci onalmente substituído com um ou mais grupos R3. Por exemplo, o grupo heterocíclico pode ser cumarina.

[0047] Os compostos preferidos incluem aqueles onde aa8 é trocado por um grupo orgânico RSO2-, onde R é como definido, tal como metila.

[0048] Ri, R2, X2, R4 e o R>portador de nitrogênio podem formar uma oxadiazaespiro-alcano substituído em N com R5, onde R5 é H. O oxadiazaespiroalcano substituído em N é, de preferência, 6-oxa-i,7- diazaespiro[4,4]nonano.

[0049] Os exemplos de compostos de acordo com esta invenção incluem: 3-[aip]-Z-didemnina A, 8-[feniluréia]-didemnina A, 8-[butiluréia]-didemnina A, 3-[val]-8-[isobutiril]-aplidina, 9-[norvalina]-aplidina, 3-[hiv]-9-[isobutiril]-aplidina, 3-[val]-9-[isobutiril]-aplidina, 3-[hiv]-8-[isobutiril]-didemnina A, 3-[hiv]-9-[ala]-aplidina, 3-[hiv]-9-[nva]-aplidina, 8-[feniltiouréia]-didemnina A, 8-[cumarina]-didemnina A, 8-[butiltiouréia]-didemnina A, 3-[hiv]-9-[D-lac]-aplidina, 8-[metilsulfonil]-didemnina A, 3-[val]-Z-didemnina A, 3-[hiv]-8-[val]-didemnina A, 3-[hiv]-8-[butiril]-aplidina, 3-[val]-didemnina A, 3-[hiv]-didemnina A, Z-didemina A, 9-[Z-nva]-aplidina, 3-[hiv]-9-[Z-ala]-aplidina, 8-[Gly]-9-[cumarina]-didemnina A, 8-[biotina]-didemnina A, 3-[hiv]-7,8-[espiro]-9-[Boc]-aplidina, 3-[hiv]-Z-didemnina A, 3-[hiv]-9-[Z-nva]-aplidina, 7,8-[espiro]-9-[pir]-aplidina, 3-[hiv]-9-[lac(OTBDMS)]-aplidina, 3-[hiv]-9-[Boc-ala]-aplidina, 7,8-[espiro]-9-[Boc]-aplidina, 3-[hiv]-8-[Boc-val]-aplidina, 8-[val]-9-[isobutiril]-didemnina A, 3-[hiv]-8-[hexanoil]-didemnina A, 3-[val]-9-[lac(0TBDMS)]-aplidina, 3-[aip]-didemnina A, 3-[hiv]-9-[D-lac(0TBDMS)]-aplidina, 7,8-[espiro]-9-[isobutiril]-aplidina, 3-[hiv]-7,8-[espiro]-9-[pir]-aplidina, 3-[hiv]-7,8-[espiro]-9-[isobutiril]-aplidina, 3-[hiv]-7,8-[espiro]-9-[acriloil]-aplidina, ou [aip]3-aplidina.

[0050] Em um aspecto relacionado, a presente invenção refere-se a compostos que têm as seguintes fórmulas:

Fórmula I Fórmula II e estruturas referidas.

[0051] Em uma modalidade particularmente preferida, a presente invenção fornece uma rota de síntese para a formação de aa3 = [hiv]3 ou [val]3 ou [aip]3, como parte de uma série de agentes antitumorais extraordinariamente potentes e inusitados que foram triados como candidatos para ensaios clínicos quando quantidades adequadas tornam-se disponíveis, e seus isômeros mais simples, onde os resíduos de aminoácidos são permutados. Este processo é enancio- e estereo- controlado, e rápido, beneficiando-se dos métodos padronizados de metodologia de síntese em fase de solução.

[0052] A modalidade preferida da presente invenção está representada na fórmula I, onde aa3 são independentemente a-aminoá- cidos com configuração L ou D. Caso aplicável, X é independentemente C (R<2, 0, S ou NR; onde R é independentemente H ou um grupo orgânico selecionado no grupo que consiste em um grupo alquila, um grupo arila, um grupo aralquila, e seus derivados substituídos com um grupo hidróxi, um grupo mercapto, um grupo amino, um grupo guani- dino, ou um grupo halogênio. Onde R, mais preferivelmente, tem entre 1 a cerca de 12 átomos de carbono, mais preferivelmente entre 1 a cerca de 8 átomos de carbono, ainda mais preferivelmente entre 1 a cerca de 6 átomos de carbono, e com a maior preferência, 1, 2, 3 ou 4 átomos de carbono. Metila, etila e propila, inclusive isopropila, são grupos alquila particularmente preferidos nos compostos da presente invenção. Onde aa3, mais preferivelmente, é α-(α’-hidroxiisovaleril) propionila (hip) (X = O; Y = -COCHCH3CO-) - série A, ou α-(α’-amino- isovaleril)-propionila (aip) (X = NH; Y = -COCHCH3CO-) - série N, ou valina (X = NH, Y = -CO-) - série V, ou α-hidroxiisovalerila (X = -O-, Y = -CO-) - série H, ou N-metilvalina (X = NMe, Y = -CO-) - série M. Onde aa8 é independentemente a-aminoácidos com configuração L ou D, caso aplicado; em que X2 é independentemente CR, O, S ou N; onde R é independentemente H ou um grupo orgânico selecionado no grupo que consiste em um grupo alquila, um grupo alquenila, um grupo arila, um grupo aralquila, e seus derivados substituídos com um grupo hi- dróxi, um grupo mercapto, um grupo amino, um grupo guanidino, um grupo halogênio, onde R1, R2, R3 e R>são cada um independentemente H ou um grupo orgânico selecionado no grupo que consiste em um grupo alquila, um grupo arila, um grupo aralquila, e seus derivados substituídos com um grupo hidróxi, um grupo mercapto, um grupo amino, um grupo guanidino, um grupo halogênio. Aa8 pode ser também um resíduo de prolina, como na fórmula II. Onde R3 é independentemente H ou um grupo orgânico selecionado no grupo que consiste em um grupo alquila, um grupo arila, um grupo aralquila, e seus derivados substituídos com um grupo hidróxi, um grupo mercapto, um grupo amino, um grupo guanidino, um grupo halogênio.

[0053] Onde R3, mais preferivelmente, pode ser ácido pirúvico, um grupo aralquiloxicarbonila ou aminoácido ou peptídeos. Os grupos alquila têm, de preferência, entre 1 a cerca de 12 átomos de carbono, mais preferivelmente entre 1 a cerca de 8 átomos de carbono, ainda mais preferivelmente entre 1 a cerca de 6 átomos de carbono, e com a maior preferência, 1, 2, 3 ou 4 átomos de carbono. Metila, etila e propila, inclusive isopropila, são grupos alquila particularmente preferidos nos compostos da presente invenção. Como aqui utilizado, o termo alquila, a menos que diferentemente modificado, refere-se a grupos cíclicos e também acíclicos, embora os grupos cíclicos devam com-preender pelo menos três elementos carbono no anel. Os aminoácidos preferidos são L ou D glicina, valina, leucina, isoleucina, fenilalanina, tirosina, triptofano, metionina, cisteína, aspartato, aspargina, ácido glu- tâmico, glutamina, lisina, arginina, prolina, serina, treonina, histidina e hidroxiprolina, protegidos ou não-protegidos. Os peptídeos preferidos podem ser formados com os aminoácidos mencionados acima.

[0054] Além disso, aa8 e R4 podem estar ligados entre si através de derivados de uma estrutura 6-oxo-1,7-diazaespiro[4,4]-nonano:

onde R5, mais preferivelmente, pode ser ácido pirúvico, um grupo aral- quiloxicarbonila ou aminoácido ou peptídeos. 0s grupos alquila têm, de preferência, entre 1 a cerca de 12 átomos de carbono, mais preferivelmente entre 1 a cerca de 8 átomos de carbono, ainda mais preferivelmente entre 1 a cerca de 6 átomos de carbono, e com a maior preferência, 1, 2, 3 ou 4 átomos de carbono. Metila, etila e propila, inclusive isopropila, são grupos alquila particularmente preferidos nos com-postos da presente invenção. Como aqui utilizado, o termo alquila, a menos que diferentemente modificado, refere-se a grupos cíclicos e também acíclicos, embora os grupos cíclicos devam compreender pelo menos três elementos carbono no anel. 0s aminoácidos preferidos são L ou D glicina, valina, leucina, isoleucina, fenilalanina, tirosina, trip- tofano, metionina, cisteína, aspartato, asparagina, ácido glutâmico, glutamina, lisina, arginina, prolina, serina, treonina, histidina e hidroxi- prolina, protegidos ou não-protegidos. 0s peptídeos preferidos podem ser formados com os aminoácidos mencionados acima.

[0055] Como aqui utilizado, o termo "grupo orgânico" significa um grupo hidrocarboneto que é classificado como um grupo alifático, um grupo cíclico, ou uma combinação de grupos alifáticos e cíclicos (como por exemplo, grupos aralquila). No contexto da presente invenção, o termo "grupo alifático" significa um hidrocarboneto saturado ou insatu- rado, linear ou ramificado. Este termo é usado para englobar grupos alquila, alquenila e alquinila, por exemplo. 0 termo "grupo alquila" significa um grupo de hidrocarboneto saturado, linear ou ramificado, inclusive, por exemplo, metila, etila, isopropila, isobutila, t-butila, heptila, dodecila, octadecila, amila, 2-etilhexila, 2-metil-butila, 5-metilhexila, e similares. 0 termo "grupo alquenila" significa um grupo hidrocarboneto insaturado, linear ou ramificado, com uma ou mais ligações duplas carbono-carbono, tal como um grupo vinila. 0 termo "grupo alquinila" significa um grupo hidrocarboneto insaturado, linear ou ramificado, com uma ou mais ligações triplas carbono-carbono. 0 termo "grupo cíclico" significa um grupo hidrocarboneto com anel fechado que é classificado como um grupo alicíclico, grupo aromático ou grupo heterocíclico. 0 termo "grupo alicíclico" significa um grupo hidrocarboneto cíclico que tem propriedades que assemelham-se àquelas de grupos alifáticos. 0 termo "grupo aromático" ou "grupo arila" significa um grupo hidrocarboneto aromático mono- ou policíclico. 0 termo "grupo he- terocíclico" significa um hidrocarboneto com anel fechado, no qual um ou mais átomos do anel é um elemento diferente de carbono (como por exemplo, nitrogênio, oxigênio, enxofre, etc.).

[0056] Os grupos alcóxi preferidos nos compostos da presente invenção incluem grupos que têm uma ou mais ligações oxigênio e entre 1 a cerca de 12 átomos de carbono, mais preferivelmente entre 1 a cerca de 8 átomos de carbono, ainda mais preferivelmente entre 1 a cerca de 6 átomos de carbono, e com maior preferência, 1, 2, 3 ou 4 átomos de carbono.

[0057] Os grupos heteroaromáticos apropriados nos compostos da presente invenção contêm um, dois ou três heteroátomos selecionados entre os átomos de N, 0 ou S, e incluem, por exemplo, cumarinila, incluindo 8-cumarinila, quinolinila, incluindo 8-quinolinila, piridila, pira- zinila, pirimidila, furila, pirrolila, tienila, tiazolila, oxazolila, imidazolila, indolila, benzofuranila e benzotiazol. 0s grupos heteroalicíclicos apropriados nos compostos da presente invenção contêm um, dois ou três heteroátomos selecionados entre os átomos de N, 0 ou S, e incluem, por exemplo, os grupos tetraidrofuranila, tetraidropiranila, piperidinila, morfolino e pirrolindinila.

[0058] Os grupos arila carbocíclicos apropriados nos compostos da presente invenção incluem compostos com um único anel ou múltiplos anéis, inclusive compostos com múltiplos anéis que contêm grupos arila separados e/ou fundidos. 0s grupos arila carbocíclicos típicos contêm 1 anel a 3 três anéis separados ou fundidos e entre 6 a cerca de 18 átomos de carbono no anel. 0s grupos arila carbocíclicos especialmente preferidos incluem fenila, inclusive fenila substituída, tal como fenila 2-substituída, fenila 3-substituída, fenila-2,3-substituída, fenila 2,5-substituída, fenila 2,3,5-substituída e 2,4,5-substituída, inclusive onde um ou mais dos substituintes na fenila é um grupo removedor de elétrons, tal como halogênio, ciano, nitro, alcanoíla, sulfinila, sulfonila, e similares; naftila, inclusive 1-naftila e 2-naftila; bifenila; fenantrila; e antracila.

[0059] Os grupos amino opcionalmente protegidos podem ser protegidos usando grupos conhecidos para este propósito. 0s grupos protetores apropriados para aminas incluem carbamatos, amidas e outros grupos protetores, tais como alquila, arilalquila, sulfo ou halo-arilal- quila, haloalquila, alquilsililalquila, arilalquila, cicloalquilalquila, alquilari- lalquila, heterocicloalquila, nitroarilalquila, acilaminoalquila, nitroarilditi- oarilalquila, dicicloalquilcarboxamidoalquila, cicloalquila, alquenila, ari- lalquenila, nitroarilalquenila, heterociclilalquenila, heterociclila, hidróxi- heterociclila, alquilditio, alcóxi ou halo- ou alquilsulfinilarilalquila, hete- rociclilacila, e outros carbamatos, e alcanoíla, haloalcanoíla, arilalcano- íla, alquenoíla, heterociclilacila, aroíla, arilaroíla, haloaroíla, nitroaroíla, e outras amidas, bem como alquila, alquenila, alquilsililalcóxialquila, alcóxialquila, cianoalquila, heterociclila, alcóxiarilalquila, cicloalquila, nitroarila, arilalquila, alcoxi- ou hidróxiarilalquila, e muitos outros grupos. Estes grupos podem ser opcionalmente substituídos com os grupos substituintes mencionados anteriormente.

[0060] As referências feitas aqui a grupos substituídos nos compostos da presente invenção referem-se a porção especificada que pode ser substituída em uma ou mais posições disponíveis com um ou mais grupos apropriados, como por exemplo, halogênio, tal como flúor, cloro, bromo e iodo; ciano; hidroxila; nitro; azido; alcanoíla, tal como um grupo alcanoíla de Ci-6, tal como acila e similares; carboxamido; grupos alquila, inclusive aqueles grupos que têm 1 a cerca de 12 átomos de carbono ou entre 1 a cerca de 6 átomos de carbono, e mais preferivelmente entre 1 a 3 átomos de carbono; grupos alquenila e al- quinila, inclusive grupos que têm uma ou mais ligações insaturadas e entre 2 a cerca de 12 átomos de carbono ou entre 2 a cerca de 6 átomos de carbono; grupos alcóxi, inclusive aqueles que têm uma ou mais ligações oxigênio e entre 1 a cerca de 12 átomos de carbono ou entre 1 a cerca de 6 átomos de carbono; arilóxi, tal como fenóxi; grupos alquiltio, inclusive aquelas porções que têm uma ou mais ligações tioéter e entre 1 a cerca de 12 átomos de carbono ou entre 1 a cerca de 6 átomos de carbono; grupos alquilsulfinila, inclusive aquelas porções que têm uma ou mais ligações sulfinila e entre 1 a cerca de 12 átomos de carbono ou entre 1 a cerca de 6 átomos de carbono; grupos alquilsulfinila, inclusive aquelas porções que têm uma ou mais ligações sulfonila e entre 1 a cerca de 12 átomos de carbono ou entre 1 a cerca de 6 átomos de carbono; grupos amino-alquila, tais como os grupos que têm um ou mais átomos de N e entre 1 a cerca de 12 átomos de carbono ou entre 1 a cerca de 6 átomos de carbono; arila carbocíclica, tendo 6 ou mais carbonos, particularmente fenila (como por exemplo, R sendo uma porção bifenila substituída ou não-substituída); e aralqui- la, tal como benzila.

[0061] Como é bem-entendido nesta área técnica, um grande grau de substituição não é somente tolerado, mas é freqüentemente aconselhável. A substituição é prevista nos compostos da presente invenção. Como meio de simplificar a discussão e exposição de certas terminologias usadas em todo este pedido, os termos "grupo" e "porção" são usados para diferenciar entre espécies químicas que permitem substituição ou que podem ser substituídas e aquelas que não permitem ou não podem ser substituídas. Assim sendo, quando o termo "grupo" é usado para descrever um substituinte químico, o material químico descrito inclui o grupo não-substituído e o grupo com átomos de 0, N ou S, por exemplo, na cadeia, bem como grupo carbonila ou outra substituição convencional. Quando o termo "porção" é utilizado para descrever um composto químico ou substituinte, somente um material químico não-substituído está incluído. Por exemplo, a expressão "grupo alquila" pretende incluir não somente substituintes alquila puros hidrocarbonetos de cadeia aberta saturada, tais como metila, etila, propila, isobutila, e similares, mas também substituintes alquila portadores de mais substituintes conhecidos nessas técnicas, tais como hi- dróxi, alcóxi, amino, carboxila, carboxamido, átomos de halogênio, cia- no, nitro, alquil-sulfonila, etc. Assim sendo, "grupo alquila"inclui grupos éter, halo-alquilas, álcoois, tióis, carboxila, aminas, hidroxialquila, sulfo- alquilas, etc. Por outro lado, a expressão "porção alquila"limita-se à inclusão de somente substituintes alquila hidrocarbonetos puros de cadeia aberta saturada, tais como metila, etila, propila, isobutila, e similares.

[0062] Em um outro aspecto desta invenção, fornece-se métodos de síntese.

[0063] Fornece-se um método para fabricar um fragmento de di- demnina que tem a estrutura:

o método compreende o acoplamento Boc-D-alo-lleu-0H com o enola- to lítio de acetato de benzila.

[0064] O grupo carbonila de um fragmento de didemnina da fórmula:

pode ser reduzido, para produzir um fragmento de didemnina que tem a estrutura

[0065] O grupo hidróxi de um composto da fórmula:

[0066] pode ser protegido, para produzir um fragmento de didem- nina que tem a estrutura

[0067] A desproteção posterior do grupo éster de benzila produz um fragmento de didemnina que tem a estrutura

[0068] Um outro método desta invenção, para fabricar um fragmento de didemnina, compreende acoplar um primeiro reagente que tem a estrutura

e um segundo reagente que tem a estrutura

para produzir um fragmento de didemnina que tem a estrutura

em que X é selecionado no grupo que consiste em -0- e -NH-; onde R é um grupo protetor de amina; e onde R é um grupo protetor de hi- dróxi. Adequadamente, X é -0- e R é t-butildimetilsilila; ou X é -NH- e R é Boc.

[0069] Outro método desta invenção, para fabricar um fragmento de didemnina, compreende acoplar um primeiro reagente que tem a estrutura

e um segundo reagente que tem a estrutura

para produzir um fragmento de didemnina que tem a estrutura

em que X é selecionado no grupo que consiste em -0-, -NMe, e -NH-; onde R é um grupo protetor de amina; e onde R é H. Adequadamente, X é -0- e R é H; ou X é -NH- e R é Boc; ou X é -NMe- e R é Boc.

[0070] Um método desta invenção compreende hidrolisar o fragmento de didemnina da fórmula:

para produzir um fragmento de didemnina que tem a estrutura

em que X é selecionado no grupo que consiste em -0H, -NH2.

[0071] Outro método desta invenção compreende hidrolisar o fragmento de didemnina da fórmula:

para produzir um fragmento de didemnina que tem a estrutura

em que X é selecionado no grupo que consiste em -NH2 e -NHMe.

[0072] Fornece-se outro método para fabricar um fragmento de didemnina, sendo que o método compreende acoplar um primeiro reagente que tem a estrutura

e um segundo reagente que tem a estrutura

para produzir um fragmento de didemnina que tem a estrutura

em que X é selecionado no grupo que consiste em -0-, -NMe e -NH-; onde Y é -(C0CHCH3)nC0-; onde n é 0 ou 1.

[0073] Um método compreende hidrolisar o fragmento de didemni- na da fórmula:

para produzir um fragmento de didemnina que tem a estrutura

em que X é selecionado no grupo que consiste em -0- e -NH-; onde Y é -(A presente invenção fornece outro método para fabricar um fragmento de didemnina, método compreendendo acoplar um primeiro reagente que tem a estrutura

e um segundo reagente que tem a estrutura

para produzir um fragmento de didemnina que tem a estrutura

[0074] Um método desta invenção envolve a desproteção do grupo éster de benzila do fragmento de didemnina da fórmula

para produzir um fragmento de didemnina que tem a estrutura

[0075] De acordo com esta invenção, um método para fabricar um fragmento de didemnina compreende acoplar um primeiro reagente que tem a estrutura

a um segundo reagente que tem a estrutura

para produzir um fragmento de didemnina que tem a estrutura

em que X é selecionado no grupo que consiste em -0-, e -NH-; onde Y é -(C0CHCH3)nC0-; onde n é 0 ou 1.

[0076] Um método compreende a desproteção do fragmento de didemnina

para produzir um fragmento de didemnina que tem a estrutura

[0077] Um outro método desta invenção, para fabricar um fragmento de didemnina, compreende ciclizar o fragmento da fórmula:

para produzir um análogo de didemnina que tem a estrutura

[0078] Um método envolve hidrolisar o análogo de didemnina

para produzir um análogo de didemnina que tem a estrutura

em que X é selecionado no grupo que consiste em -0- e -NH-; onde Y é -(C0CHCH3)nC0-; onde n é 0 ou 1.

[0079] Fornece-se ainda um método para fabricar um análogo de didemnina, sendo que o método compreendendo acoplar um primeiro reagente que tem a estrutura

e um segundo reagente que tem a estrutura

para produzir um análogo de didemnina que tem a estrutura

[0080] Outro método compreende a desproteção do fragmento de didemnina da fórmula:

para produzir um fragmento de didemnina que tem a estrutura

em que X é selecionado no grupo que consiste em -O- e -NH-; onde Y é -(COCHCH3)nCO-; onde n é 0 ou 1.

[0081] Um método para fabricar um fragmento de didemnina com- preende acoplar o fragmento que tem a estrutura

e um segundo reagente que tem a estrutura

para produzir um fragmento de didemnina que tem a estrutura

[0082] Um outro método compreende a desproteção do fragmento de didemnina da fórmula:

para produzir um fragmento de didemnina que tem a estrutura

[0083] Um método desta invenção, para fabricar um análogo de didemnina, compreende acoplar o análogo de didemnina da fórmula

para produzir o análogo de didemnina que

tem a estrutura

[0084] Um método para fabricar um análogo de didemnina compreende acoplar o análogo de didemnina da estrutura

e o fragmento que tem a estrutura

para produzir o análogo de didemnina que tem a estrutura

em que X é selecionado no grupo que consiste em -0-, e -NH-, e R é isopropila; em que X é -0- e R é n-propila, e R é n-pentila.

[0085] Um método desta invenção, para fabricar um análogo de didemnina, compreende acoplar o análogo de didemnina que tem a estrutura e fragmento que tem a estrutura para produzir o análogo de didemnina que tem a estrutura

e fragmento que tem a estrutura

para produzir o analogo de didemnina que tem a estruta

em que:

[0086] Um método desta invenção compreende a desproteção do análogo de didemnina

para produzir um fragmento de didemnina que tem a estrutura

onde

[0087] Fornece-se um método para fabricar um análogo de didemnina, compreendendo acoplar o análogo de didemnina que tem a estrutura

ao fragmento que tem a estrutura

para produzir o análogo de didemnina que tem a estrutura

[0088] Um outro método compreende a desproteção do análogo de didemnina

para produzir um fragmento de didemnina que tem a estrutura

[0089] Fornece-se um método para fabricar um análogo de didemnina, compreendendo acoplar o análogo de didemnina

ao cloreto de isobutirila, para produzir o análogo de didemnina que tem a estrutura

[0090] Fornece-se um método para fabricar um análogo de didem- nina, compreendendo acoplar o análogo de didemnina que tem a estrutura

ao fragmento que tem a estrutura

para produzir o análogo de didemnina que tem a estrutura

em que R é Boc, isobutirila, piruvila ou acriloíla.

[0091] Um método para fabricar um análogo de didemnina compreende acoplar o análogo de didemnina que tem a estrutura

ao fragmento que tem a estrutura

para produzir o análogo de didemnina que tem a estrutura

em que R é SQiMe, ou Z-Nva.

[0092] Fornece-se um método desta invenção compreendendo a desproteção do análogo de didemnina

para produzir um análogo de didemnina que tem a estrutura

em que R2 é Nva.

[0093] Um método para fabricar um análogo de didemnina é parte desta invenção, compreendendo acoplar o análogo de didemnina que tem a estrutura

ao fragmento que tem a estrutura

para produzir o análogo de didemnina que tem a estrutura

em que R é Boc, isobutirila ou piruvila.

[0094] Um método para fabricar um análogo de didemnina compreende acoplar o análogo de didemnina que tem a estrutura

ao fragmento que tem a estrutura

para produzir o análogo de didemnina que tem a estrutura

[0095] Fornece-se um método para fabricar um análogo de didemnina, compreendendo acoplar o análogo de didemnina que tem a estrutura

ao fragmento que tem a estrutura

para produzir o análogo de didemnina que tem a estrutura

[0096] Um método para fabricar um análogo de didemnina, preendendo acoplar o análogo de didemnina que tem a estrutura

ao fragmento que tem a estrutura

para produzir o análogo de didemnina que tem a estrutura

[0097] Fornece-se um método para fabricar um análogo de didemnina, compreendendo acoplar o análogo de didemnina que tem a estrutura

ao cloreto de metilsulfonila, para produzir o análogo de didemnina que tem a estrutura

[0098] Um método para fabricar um análogo de didemnina compreende acoplar o análogo de didemnina que tem a estrutura

ao fragmento que tem a estrutura

para produzir o análogo de didemnina que tem a estrutura

em que X é 0, e S; em que R é butila, e fenila.

[0099] Deve-se avaliar que estes métodos são todos ilustrativos da presente invenção e podem ser modificados conforme desejado. Parti-cularmente, diferentes grupos protetores podem ser adotados para a proteção de grupos amino ou grupos hidróxi. Diferentes reagentes podem ser empregados para introduzir grupos pretendidos. 0s substi- tuintes podem ser variados conforme desejado, com particular relação à fórmula geral dos compostos desta invenção, e aos exemplos de significados preferidos. 0s métodos modificados são parte desta invenção.

[00100] Até o grau em que possa ser necessário para assegurar que esta descrição inclua toda a descrição em nossos pedidos de prioridade, e para assegurar a titularidade até a máxima extensão das datasde prioridade, a requerente incorpora a título de referência o teor dos seus documentos n^ GB 0016148.9 e GB 0103750.6.

DESCRIÇÃO DETALHADA DAS MODALIDADES PREFERIDAS

[00101] Os compostos da presente invenção podem ser preparados sinteticamente. 0s métodos aqui descritos para a síntese de aplidina e derivados podem ser usados também para a síntese de uma ampla série de didemninas.

[00102] As estruturas de alguns dos compostos estão indicadas na Figura 1:

[Hiv]3-aplidina (I), A=, C, B=0 Aplidina (II), A=C,B=Q Tamandarina A (IV), A=(conformação S), B=0H Didemnina B (III) A=CH (conf. S), B=OH)

[Val]3-aplidina (V), A=, C, B=0 0, R=H Aplidina (II), A=C,B=0

[00103] Tamandarina A (IV), A=(conformação S), B=0H Didemnina B (III) A=CH (conf. S), B=0H) Figura 1

[00104] Os derivados de Aa3-aplidina são depsipeptídeos cíclicos sintéticos similares em estrutura à aplidina (composto II) (aa3 = Hip, também conhecido como desidrodidemnina B) que é uma didemnina natural isolada a partir da ascídia Aplidium albicans(Figura 1). As mo-léculas preparada diferem pela presença de ácido hidroxiisovalérico (Hiv) (composto I), ou valina (composto V) ou metil-valina (composto VI) ou α-(α’-aminoisovaleril)propionila (Aip) (composto VII), ao invés da unidade hidroxiisovalerilpropiônica (Hip) (II) que está presente em todos os outros congêneres de didemnina de ocorrência natural. A similaridade entre estas duas estruturas também foi demonstrada recentemente entre didemnina B (composto III), o elemento mais bem conhecido desta classe de depsipeptídeos, e um novo depsipeptídeo cíclico isolado a partir de uma ascídia brasileira não identificada da família Didemnidae: Tamandarina A (composto IV). 0s compostos I, V, VI e VII são derivados não-naturais de didemnina.

[00105] A homologia estrutural entre III e IV reflete-se também na sua respectiva atividade biológica. Comparando ambos compostos, IV retém níveis similares de atividade antitumoral in vitroem ensaios clonogênicos, bem como propriedades inibidoras da biossíntese de proteínas, e demonstrou ser algo mais ativo in vitrodo que III contra carcinoma pancreático. Entretanto, o composto IV não apresenta qualquer tipo de especificidade para tipo de tumor em painel de células NCI 60. A didemnina B provou ser tóxica em doses perto daquelas necessárias para aplicações terapêuticas e é possível que IV seja uma toxina de amplo espectro ao invés de um agente seletivo.

[00106] [Hiv]3-aplidina (I) diferentemente apresenta os mesmos benefícios encontrados em aplidina (II) com relação a didemnina B (III), pelo fato de que é mais específica contra tumores sólidos, como o de cólon, condrossarcoma e osteossarcoma, nos ensaios MTS. [Val]3- aplidina (V) e [MeVal]3-aplidina (VI) são diferentemente compostos novos que apresentam um alto nível de atividade antitumoral in vitro. Finalmente, os compostos V, VI e VII possivelmente resultam, em relação à aplidina de origem, em um aumento nas ligações hidrogênio no sítio ativo, e assim sendo, fornecem mais compostos ativos. Além disso, a presença da ligação amida substituindo a ligação éster pode melhorara estabilidade do núcleo ciclodepsipeptídico.

[00107] Relata-se aqui a primeira síntese total da série diferente de derivados de aplidina. A título exemplificativo, a análise retrossintética está indicada na Figura 2.

[00108] As etapas principais incluem uma macrociclização eficiente de precursores lineares 6, e uma síntese estereosseletiva prática da unidade lst-aa3-Leu-Pro (A1) e o fragmento direito D1. 0 acoplamento final do macrociclo 4 a diferentes cadeias laterais produz aa3-aa8- aplidina e derivados. A vigorosa metodologia de síntese demonstrou com sucesso desenvolver uma síntese prática de aplidina ll (aa3 = Hip).

Figura 2

[00109] A formação do núcleo macrocíclico é a principal etapa essencial em todas as séries. A ciclização exitosa em todas as quatro ligações amida possíveis foi alcançada em sínteses anteriores de di- demninas. Entretanto, no presente trabalho, a ligação que liga N(me)- 0(Me)-Tyr e Pro foi selecionada como o ponto para macrociclização, baseado em um trabalho anterior desenvolvido durante a síntese total de aplidina II (G. Jou, I. Gonzalez, F. Albericio, P. Lloyd-Williams, E. Giralt, J. Org. Chem. 62:354-366 (1997) e patente no ES-2102322.

[00110] O núcleo macrocíclico da molécula-alvo é desligado, dando a unidade tetrapeptídica Ist-aa3-Leu-Pro da esquerda A1 e o dipeptí- deo Boc-Thr-(Z-NMe-0Me-Tyr)-0H D1.

[00111] A síntese do fragmento dipeptídico D1 da direita já foi descrita. Entretanto, a síntese delineada no Esquema 1 permite a preparação deste intermediário em uma escala de quilogramas. A função ácida de Boc-Thr(0H)-0H foi protegida com brometo de fenacila, para dar diretamente o álcool D3, que foi esterificado com Z-N(Me)-Tyr-0H, usando DCC na presença de DMAP, dando D2. A remoção do grupo fenacila com Zn em ácido acético produziu o fragmento D1 puro.

[00112] A formação do precursor A1 está delineada no Esquema 2 para a série diferente. No caso das séries SHPL, SVPL e SMPL, a primeira etapa de acoplamento entre Leu-Pro-0Bzl (A5) e o ácido (B1) disponível no mercado deu diretamente o álcool A3 pronto para a próxima reação com isostatina (C1). No caso da síntese das séries SAPL e SNPL, a rota difere daquela descrita anteriormente pelo fato de que B1 é um p-cetoéster sintetizado a partir do ácido α-(α’-hidroxiisovaleril) propiônico e ácido α-(α’-amino-isovaleril)propionico, respectivamente. A síntese do fragmento B2 (séries SAPL e SNPL) está delineada no Esquema 3. A hidrogenólise a partir de B2 para B1 é alcançada antes da reação de acoplamento (uma batelada) com A5.

[00113] A preparação do fragmento A1 inteiro baseia-se na disponibilidade da parte isostatina que foi preparada a partir da Boc-D- aloisoleucina (C5) não-proteinogênica amino-protegida em grandes quantidades. A rota de síntese para a preparação de C1 está delineada no Esquema 4.

[00114] A ativação da funcionalidade carboxílica de Boc-D-alo-lle com carbonildiimidazol, seguido de condensação com o enolato de lítio do acetato de benzila, deu o p-cetoéster (C4). A redução estereossele- tiva com KBH>em metanol deu C3. A proteção do grupo hidroxila secundário como éster de TBDMS (C2) e a hidrogenólise do éster benzí- lico resultante produziu a isostatina (C1).

[00115] As etapas subseqüentes, que produzem os compostos I, II, V e VII, estão representadas no Esquema 5.

[00116] O acoplamento dos fragmentos A1 e D1 com HBTU/HQBt produziu o tipo precursor 7 linear. A hidrogenólise dos grupos protetores Cbz e benzila prossegue adequada e regularmente com Pd(QH)2, para dar 6. A etapa de macrociclização, usando HATU/HQAt, produziu o intermediário 5 com bom rendimento (75%). Q cloridrato em dioxano foi usado para clivar o grupo protetor Boc, produzindo a amina 4. Este composto foi acoplado a Z-NMe-D-Leu-QH, para dar 3, que foi submetido a hidrogenólise com Pd-C. Q composto resultante 2 foi acoplado à cadeia lateral Pyr-Pro-QH, usando DIPCDI, para produzir os compostos correspondentes.

[00117] De maneira interessante, os precursores do tipo 2, que são análogos em todos os aspectos mencionados anteriormente, à didem- nina A, serviram como blocos de partida da construção para a síntese de alguns congêneres interessantes, pois o terminal N, um grupo amino secundário livre, oferece um sítio para anexar vários grupos acila ao depsipeptídeo cíclico.

[00118] Em um estudo anterior (Rinehart et al., J. Med. Chem. 39:2819-2834 (1996)), derivados de acila de didemnina A (dA) 3 também demonstraram ser ativos como os compostos 2 originais. No caso da série aa3, descobriu-se também atividade nos compostos 3.

[00119] As Tabelas 1 e 2 indicam os valores de IC50 encontrados nos compostos 1.

[00120] Metodologia: conforme Berjeron et al., Biochem. and Bioph. Res. Comm. 121,3,:848-854 (1984).

[00121] P388 = linfoma murino; A549 = carcinoma pulmonar humano; HT-29 = carcinoma de cólon humano; MEL-28 = melanoma humano;

[00122] Os compostos aqui preparados estão indicados nos Esquemas 5 e 6. Estes compostos incluem Nα-propionil-[aa]3-dA, Na- butiril-[aa]3-dA, Nα-isobutiril-[aa]3-dA, e Na-pentanoil-[aa]3-dA.

[00123] Os análogos que têm duas subunidades acila depois do terminal N do núcleo aa3-dA foram preparados para examinar os fatores estruturais que contribuem para a especificidade para certos tumores. 0s compostos diacila isobutiril-Pro-0H, 0-isobutiril-Lac-Pro-0H, N-Benzil-Ala-Pro-QH foram preparados e condensados com os compostos tipo 2 pelo método DIPCDI, para obter, respectivamente, após desproteção e purificação, [aa]3-[isobutiril]9-aplidina, [Q-isobutiril-Lac]9- aplidina, [Ala]9-aplidina. Derivados Preferidos de Aplidina: Compostos das Séries H, V

[00124] Os espirocompostos também foram ligados, para formar compostos ativos:

Esquema 6

[00125] A síntese de fragmentos espirocíclicos está delineada no Esquema 7. A síntese iniciou a partir do composto 8 relatado anterior-mente. Referências: a) Seebach, D. et al., J. Am. Chem. Soc. 105:5390-5398 (1983); b) Genin, M. J. et al., J. Org. Chem. 58:2334- 2337 (1993).

[00126] Os espirocompostos também foram ligados como na série anterior, para dar compostos ativos:

Espiro = [(5R)-1-(substituído em 9)-7-[(1R)-1-carbóxi-3-metil-butil]-6- oxo-1,7-diazaespiro[4,4]nonano]7-9

[00127] Este composto foi descrito na literatura: Joc Org. Chem. 65:782-792 (2000). Sua síntese foi publicada antes da sua descoberta (i): Org. Lett.2000$ volume 0$ No 0$ A-D

[00128] Metodologia: segundo Berjeron et al., Biochem. and Bioph. Res. Comm. 121(3):848-854 (1984)

[00129] P388 = linfoma murino; A549 = carcinoma pulmonar huma no; HT-29 = carcinoma de cólon humano; MEL-28 = melanoma humano; DU145 = carcinoma prostático humano Lista de Abreviações Diversos AA Aminoácido 1st Isostatina Hip Ácido hidroxiisovalerilpropiônico Hiv Ácido hidroxiisovalérico Aip Ácido aminoisovalerilpropiônico Lac Ácido lático LC Cromatografia de líquidos HPLC Cromatografia de líquidos com alto desempenho TLC Cromatografia de camada fina P.f. Ponto de fusão Rt Tempo de retenção Quant. Rendimento quantitativo ESI-EM Espectros de massa ionização em eletrospray Grupos Protetores Bn Benzila Boc terc-Butiloxicarbonila TBDMS terc-butildimetilsilila Z Benziloxicarbonila Pac Ácido fenilacético Solventes THF Tetraidrofurano Hex Hexano ACN Acetonitrila DCM Diclorometano EtOAc Acetato de etila DMF Dimetilformamida MTBE Metil-t-butiléter Eti0 Dietil-éter t-Bu0H terc-Butanol TFA Ácido trifluoracético Me0H Metanol Et0H Etanol IPA Isopropanol Reagentes CDI 1,1’-carbonil-diimidazol H0Bt 1-Hidróxi-benzotriazol HBTU N-óxido de hexafluorfosfato de N-[(1H-benzotriazol-2-il)(dime- tilamino)metileno]-N-metanaminio B0P-Cl Cloreto bis-(2-oxo-3-oxazolidinil)fosfinico HATU N-óxido de hexafluorfosfato de N-[(dimetilamino)-1H-1,2,3- triazolo[4,5-b]piridin-1-ilmetileno]-N-metil-metanaminio H0At 1-Hidróxi-7-aza-benzotriazol DCC Diciclohexilcarbodiimida DIPCDI N,N’-diisopropilcarbodiimida TBAF Fluoreto de tetrabutilamônio Ac0H Ácido acético p-Ts0H Ácido p-toluenosulfônico DMAP 4-Dimetilaminopiridina NMM N-metilmorfolina DIPEA Diisopropiletilamina TEA Trietilamina TFA Ácido trifluoracético

Procedimento Geral

[00130] Todas as manipulações foram conduzidas sob uma atmosfera inerte de argônio. Todos os solventes eram grau reagente (usados em elaborações) ou grau HPLC (usados como reação ou como solvente de purificação). 0s solventes anidros foram usados diretamente como fornecidos pelo fabricante. 0 tetraidrofurano foi recém-destilado antes do uso para remover o estabilizador. Todos os outros reagentes foram compostos disponíveis no mercado com a pureza mais alta disponível. A cromatografia analítica de camada fina (TLC) foi realizada em sílica-gel da Merck, folhas de alumínio (60, F254) pré-revestidas com um indicador fluorescente. A visualização foi efetuada usando luz ultravioleta (254 nm), ácido fosfomolíbdico (5% p/v) em 95% de etanol, ou vanilina. 0s espectros de ressonância magnética de prótons e carbono (1H, 13C-RMN) foram registrados em um espectrômetro com transformada de Fourier Varian-300 (300 MHz), e os deslocamentos químicos foram expressos em partes por milhão (ppm) em relação a CHCl3 como uma referência interna (7,26 ppm para 1H e 77,0 para 13C). As multiplicidades estão designadas como singleto (s), dubleto (d), dubleto de dubletos (dd), dubleto de tripletos (dt), tripleto (t), quarteto (q), multipleto (m) e singleto amplo (bs), e as constantes de acoplamento (J) foram expressas em Hz. As rotações ópticas (em graus) foram medidas com um polarímetro Jasco P1020. 0s espectros de massa por ionização em eletrospray (ESI-EM) foram obtidos em um Hewlett Packard Série 1100 MSD, Elementar. A cromatografia de coluna flash foi conduzida em sílica-gel da E. Merck 60 (240-400 mesh) ou RP C18 (40-63 'm), usando os sistemas de solventes listados sob os experimentos individuais.

[00131] Os procedimentos que se seguem descrevem a síntese de intermediários obtidos na rota de aplidina (SAPL), [Aiv]3-aplidina (SNPL), [Hiv]3-aplidina (SHPL), [Val]3-aplidina (SVPL), e [MeVal]3- aplidina (SMPL). Exemplo 1 Síntese de (4R,5S)-4-(terc-butóxi-carbonil-amino)-5-metil-3-oxo-hepta- noato de benzila (C4)

[00132] Adicionou-se CDI (16,04 g, 98,96 mmoles) a uma solução de Boc-Alo-Ile-0H (15,26 g, 65,9 mmoles) em THF seco (200 ml) a 0oC sob argônio. Depois de 15 min, a mistura foi deixada aquecer até a temperatura ambiente, e agitada por um período de 16 h. A solução resultante foi resfriada até -78 oC, e adicionou-se a mesma por intermédio de uma cânula a uma solução bem agitada de enolato de ben- zil-lítio resfriada a -78 oC (625 ml, 0,37 M) [preparada adicionando em gotas uma solução de acetato de benzila (33,34 ml) em THF (165 ml) a uma solução de diisopropilamida-lítio (0,36 M) em THF/hexano 3:1 (642 ml) a -78 oC]. A temperatura deve ser mantida em < -75 oC. A mistura da reação foi agitada a -78 oC por 60 min. Depois, ela foi deixada aquecer até -10OC (30 min), resfriada novamente até -78 oC e resfriado bruscamente com solução aquosa saturada de cloreto de amônio (200 ml), e depois extraída com DCM (3 x 500 ml) à temperatura ambiente. Os extratos combinados foram lavados sucessivamente com solução aquosa NaHCO3 (500 ml) e salmoura (200 ml). A secagem (Na2SO4) seguida de remoção do solvente deu um óleo, que foi aplicado sobre sílica C18 e carregado no topo de uma coluna LC- RPC18 [Lichroprep RPC-18 (40-60 mícrons)]. A eluição usando um gradiente de ACN-H2O (60 até 100% de ACN) produziu o produto C4 como um óleo incolor (16,7 g, 70%). [a]20D -20,0 (c 1, CHCh), TLC: Rf = 0,32 (Merck, RP-C18, ACN-H2O 7:3).

[00133] 1H RMN (300 MHz, CDCI3) δ 0,77 (d, 3H), 0,94 (t, 3H), 1,25 (s, 9h), 1,60 (m, 1H), 1,80 (m, 2H), 3,58 (s, 2H), 4,47 (dd, 1H), 5,00 (d, 1H), 5,18 (s, 2H), 7,35 (bs, 5H). Exemplo 2 Síntese de éster benzílico de (3S,4R,5S)-N-(terc-butóxi-carbonil)-isos- tatina (C3)

[00134] C4 (16,7 g, 45,9 mmoles) foi dissolvido em metanol (690 ml) a 0OC. Adicionou-se boro-hidreto de potássio (7,43 g, 137,8 mmoles) à solução sob agitação, e depois de 30 min, a reação foi resfriada bruscamente com solução aquosa de HCl (0,1 N) até pH 4, e extraída com DCM (300 ml). O extrato foi lavado sucessivamente com NaHCÜ3 aquosa (100 ml, saturada) e salmoura (100 ml). A secagem (Na2SO4), seguida de remoção do solvente produziu o álcool C3 (15,7 g, 93%) como um óleo incolor. Rf = 0,45 (hexano:EtOAc 2:1); [«]D -9,5 (c 0,76, CHCh); Rf = 0,45 (EtOAc:Hexanos 1:2).

[00135] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 0,81 (s, 3H), 0,90 (t, 3H), 1,20 (m, 1H), 1,36 (m, 1H), 1,40 (s, 9H), 1,90 (m, 1H), 2,55 (dd, 1H), 3,20 (d, 1H), 3,61 (m, 1H) (m, 1H), 3,90 (m, 1H), 4,40 (d, 1H), 5,18 (s, 2H), 7,40 (bs, 5H). Exemplo 3 Síntese de Boc-(3S,4R,5S)-lst(TBDMS)-OBn (C2)

[00136] Adicionou-se imidazol (8,77 g, 128,8 mmoles), DMAP (1,57 g, 12,81 mmoles) e TBDMS-C1 (19,42 g, 128,8 mmoles) a uma solução de C3 (15,7 g, 42,9 mmoles) em DMF seca (65 ml) a 0°C. A mistura da reação foi deixada aquecer até a temperatura ambiente por durante a noite, e depois ela foi fracionada entre Et20 (200 ml) e sucessivamente, com solução aquosa de HCl 0,1 N 100 ml), NaHCÜ3 (100 ml) e salmoura (50 ml). Depois de secar (Na2S0>) e remoção do solvente, o resíduo foi purificado por cromatografia de coluna flash (sílica-gel, hexanos), para produzir C2 (19,96 g, 97%).

[00137] [a]D 10,6 (c 1,01, CHCh); Rf = 0,73 (Et0Ac:Hexanos 1:2).

[00138] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 0,15 (s, 6H), 0,82 (s, 9H), 0,85 (d, 3H), 0,89 (t, 3H), 1,18 (m, 1H), 1,35 (m, 1H), 1,41 (s, 9H), 1,77 (m, 1H), 2,45 (dd, 1H), 2,60 (dd, 1H), 3,62 (m, 1H), 4,20 (m, 1H), 4,40 (d, 40 (d, 1H), 5,05 (d, 1H), 5,15 (d, 1H), 7,40 (bs, 5H). Exemplo 4 Síntese de Boc-(3S,4R,5S)-lst(TBDMS)-0H (C1)

[00139] Adicionou-se Pd/C a 10% (2,096 g, 20% em peso) a uma solução de C2 (10,48 g, 21,8 mmoles) em THF (110 ml) desgaseifica- da e purgada com argônio. A mistura foi agitada sob H2 (1 atm) por 16 h, filtrada sobre um filtro de teflon de 0,45 mm e concentrada em pressão reduzida, para dar 7,8 g de um óleo incolor. 0bteve-se cristais incolores (6 g, 70%) depois da cristalização em ACN a -20°C. [a]20D 1,8 (c 0,594, DCM); [Literatura [a]D 1,74 (c 2,64, CHCb), Synthesis1991, 294]; Rf = 0,45 (Merck HPTLC, RP-18, ACN-:H2Q 8:2). Exemplo 5 Síntese de ácido (2S)-2-terc-butil(dimetil)-sililóxi-3-metil-butírico (SAPLB4)

[00140] Adicionou-se imidazol (27,24 g, 400,11 mmoles) e DMAP (6,94 g, 54,56 mmoles) a uma solução sob agitação de ácido (S)-2- hidróxi-3-metil-butírico (21,12 g, 181,9 mmoles) em DMF (91 ml) a 0°C sob argônio. Depois de 5 min, adicionou-se terc-butil-dimetil-cloro- silano (60,31 g, 400,11 mmoles). A mistura foi deixada aquecer até 23 oC e agitada durante a noite. A mistura da reação bruta foi fracionada entre Et2Q (250 ml) e solução aquosa de HCl (250 ml, 0,1 N). A fase orgânica foi lavada sucessivamente com NaHCQ3 aquosa (250 ml) e salmoura (250 ml, saturado), seca com sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob pressão reduzida, para produzir o produto bissililado como um óleo amarelo-pálido. Uma solução deste produto em THF (100 ml) foi adicionada em gotas (10 min) a uma solução resfriada (0°C) de KQH (30,47 g, 543 mmoles) em THF/H2Q (543 ml:181 ml). Depois de 40 min, a mistura da reação foi fracionada entre água (300 ml) e Et2Q (500 ml). A fase aquosa foi fracionada entre HCL aquosa 3 N de HCl (200 ml) gelada (0°C) e EtQAc (5 x 250 ml). Qs extratos orgânicos combinados foram secos (NaSQ4) filtrados e concentrados sob pressão reduzida, para produzir SAPLB4 como um óleo amarelo-pálido (38,38 g, 91%).

[00141] 1H RMN- (300 MHz, CDCh): δ 0,02 (m, 6H), 0,90 (m, 15H), 2,08 (m, 1H), 4,06 (d, 1H). Exemplo 6 Síntese de (4S)-4-terc-butil(dimetil)-sililóxi—5-metil-3-oxo-hexanoato de benzila (SAPLB3)

[00142] Adicionou-se CDI (16,04 g, 98,96 mmoles) a uma solução do ácido (S)-2-(terc-butil-dimetil-sililóxi)-3-metil-butírico (15,31 g, 65,9 mmoles) em THF seco (200 ml) a 0°C sob argônio. Depois de 15 min, a mistura foi deixada aquecer até a temperatura ambiente, e agitada por um período de 16 h. A solução resultante foi resfriada até -78 oC, e adicionou-se a mesma por intermédio de uma cânula a uma solução bem agitada de enolato de benzil-lítio resfriada a -78 oC (625 ml, 0,37 M) [preparada adicionando em gotas uma solução de acetato de benzila (33,34 ml) em THF (165 ml) a uma solução de diisopropilamida- lítio (0,36 M) em THF/hexano 3:1 (642 ml) a -78oC]. A temperatura deve ser mantida em < -75 oC. A mistura da reação foi agitada a -78oC por 60 min. Depois, ela foi deixada aquecer até -10°C (30 min), resfriada novamente até -78 oC e resfriada bruscamente com NaHCÜ3 aquosa de cloreto de amônio (200 ml, saturada), e depois extraída com DCM (3 x 500 ml) à temperatura ambiente. Os extratos combinados foram lavados sucessivamente com NaHCO3 aquosa (500 ml, saturada) e salmoura (200 ml). A secagem (NaSO4) seguida de remoção do solvente deu um óleo, que foi aplicado sobre sílica C18 e carregado no topo de uma coluna LC-RPC18 [Lichroprep RPC-18 (40-60 mí- crons)]. A eluição usando um gradiente de ACN-H2O (60 até 100% de ACN) produziu SAPLB3 como um óleo incolor (16,1 g, 70%). [Q]20D -25 (c 0,5, MeQH), Rf = 0,32 (Merck, RP-C18, ACN:H2Q 7:3).

[00143] 1H RMN- (300 MHz, CDCI3): δ 0,02 (m, 0,92 (m, 15H), 1,92 (m, 1H), 3,63 (s, 2H), 3,80 (s, 2H), 3,38 (d, 1H), 5,17 (d, 1H), 5,20 (d, 1H), 7,35 (bs, 5H). ExempIo 7 Síntese de (4S)-4-terc-butóxi-carboniI-amino—5-metiI-3-oxo-hexanoato de benzila (SNPLB3)

[00144] Seguindo o procedimento obtido para a síntese de SAPLB3 a partir de Boc-Val-QH (10 g, 46,0 mmoles), o composto do título foi obtido depois de purificação por cromatografia de coluna flash (sílica-gel, gradiente de hexano:EtQAc 10:1 até 5:1) como um óleo (6,9 g, 43%).

[00145] 1H RMN- (300 MHz, CDCh): δ 0,77 (d, J=7, 3H), 0,98 (d, J=7, 3H), 1,44 (s, 9H), 2,22 (m, 1H), 3,58 (s, 2H), 4,31 (m, 1H), 5,03 (m, 1H), 5,18 (s, 2H), 7,34 (bs, 5H).

[00146] ESI-EM: calculado para C19H27NQ5: 349,19; encontrado m/z 372,1 (M+Na)+. Exemplo 8 Síntese de (2RS,4S)-4-terc-butil(dimetil)-sililóxi—2,5-dimetil-3-oxo- hexanoato de benzila (SAPLB2)

[00147] Q éster SAPLB3 (15,12 g, 41,49 mmoles) em THF seco (43 ml) foi adicionado em gotas a uma solução de diisopropanol-amina-lítio a -78 °C [preparada adicionando butil-lítio (solução 1,6 M em hexano; 31,12 ml, 49,79 mmoles) em gotas a diisopropanol-amina (7,26 ml, 51,86 mmoles) em THF seco (83 ml) sob Ar a -78 oC por 30 min], A mistura foi agitada por 0,5 h e depois adicionou-se iodo-metano (52,11 ml, 829,8 mmoles), A mistura foi deixada aquecer até 23 oC, e depois continuou-se agitando por 24 h, Adicionou-se mais iodo-metano (2,67 ml, 42 mmoles) e a mistura foi agitada por 24 hainda ou até o desaparecimento do material de partida, A mistura foi então e fracionada entre NH>Cl aquosa (50 ml saturado) e EtQAc (2 x 200 ml), A camada orgânica foi lavada sucessivamente com NaHCQ3 aquosa (100 ml, saturada) e salmoura (100 ml), seca (Na2SQ>), filtrada e concentrada, para dar um óleo amarelo (12 g), Q produto puro (SAPLB2) foi obtido depois de purificação por cromatografia de coluna em sílica-gel, gradiente de hexano:Et2Q 100:0 até 100:2 como uma mistura diastereoisomé- rica de epímeros em C2 (10 g, 63%),

[00148] H RMN (300 MHz, CDCh) δ 0,01 (s, 3H), 0,02 (s, 3H), 0,91 (m, 15H), 1,30 (d, 3H), 2,01 (m, H), 4,01 (m, 1H), 5,10 (d, 1H), 5,15 (d, 1H), 7,34 (bs, 5H), Exemplo 9 Síntese de (2RS,4S)-4-terc-butóxi-carbonil-amino—2,5-dimetil-3-oxo- hexanoato de benzila (SNPLB2)

[00149] Seguindo o procedimento obtido para a sintese de lo foi obtido depois de purificação por cromatografia de coluna flash (sílica-gel, gradiente de hexano:Et0Ac 10:1 até 5:1) como uma mistura diastereoisomérica de epímeros (1:1) AC2 (4,4 g, 62%). Rf = 0,4 e 0,37 (sílica, hexano:Et0Ac 3:1).

[00150] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 0,72 (m, 3H), 0,86 (m, 3H), 1,37 (m, 3H), 1,44 (s, 9H), 2,22 (m, 1H), 3,79 (m, 1H), 4,43 (m, 1H), 5,02 (m, 1H), 5,16 (m, 2H), 7,34 (m, 5H). Exemplo 10 Síntese de Leu-Pro-0Bn como sal cloridrato (A5)

[00151] Adicionou-se uma solução de cloreto de hidrogênio em dioxano (209 ml, 5,3 N) a um frasco contendo Boc-Leu-Pro-0Bn (113,8 g, 272 mmoles), e continuou-se a agitação por 5 h ou até conversão total por TLC (desaparecimento do material de partida; Rf = 0,47; (hexano:Et0Ac 2:1, sílica). A solução foi concentrada sob pressão reduzida e o óleo resultante foi capturado com CHCh (3 x 50 ml), CHCl3-MTBE (30 ml-50 ml), MTBE (50 ml) e hexano (50 ml). 0 resíduo foi seco sob vácuo (16 h) para remover HCl residual, para dar o composto do título como um sólido branco. A5 (96,4 g, 100%) foi usado diretamente sem purificação adicional na próxima etapa. [a]22D -85,21 (c = 1, CHCh).

[00152] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 0,92 (d, J=7,1, 3H), 0,96 (d, J=7,1, 3H), 1,55 (m, 1H), 1,82-2,14 (m, 5H), 2,26 (m, 1H), 3,42 (m, 1H), 3,90 (m, 1H), 4,32 (bs, 1H), 4,64 (m, 1H), 5,01 (d, J=11,5, 1H), 5,16 (d, J=11,5, 1H), 7,34 (m, 5H), 8,40 (bs, 3H).

[00153] ESI-EM: calculado para C18H26N2O3: 318,19; encontrado m/z 319,2 (M+H)+. Exemplo 11 Síntese de TBDMS-Hip-Leu-Pro-OBn (SAPLA4)

[00154] Adicionou-se 10% de Pd/C (6,0 g, 30% em peso) sob argô- nio a um frasco contendo uma solução desgaseificada de SAPLB2 (20 g, 52,88 mmoles) em THF seco (158 ml), equipado com tubos de entrada e saída de gás. Depois, uma corrente de hidrogênio foi passada por 8 h ou até conversão completa por TLC (desaparecimento do material de partida). A mistura resultante foi borbulhada com Ar para deslocar o hidrogênio, e filtrada sob Ar em um funil de vidro sinterizado através de um tipo de almofada de celite, para um frasco resfriado (-5 °C) contendo HOBt (7,17 g, 52,88 mmoles) e HBTU (21,0 g, 55,53 mmoles). Adicionou-se mais THF (158 ml) para lavar a celite. Adicionou-se NMM (5,8 ml, 52,88 mmoles) à mistura (-5 oC) e depois de 5 min uma solução resfriada (-5 oC) contendo: A5 (31,96 g, 89,81 mmoles), NMM (16 ml, 145 mmoles) e DMF (120 ml), recém-preparada. A mistura da reação foi deixada aquecer até a temperatura ambiente e agitada por 14 h. A reação bruta foi filtrada e o solvente removido sob pressão reduzida. À solução residual em DMF, adicionou-se EtOAc (300 ml) e lavou-se sucessivamente com solução aquosa 0,1 N de HCl (200 ml), solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (200 ml), e enxaguou-se com salmoura (300 ml). A fase orgânica foi seca (Na2SÜ4), filtrada e concentrada. 0 material resultante foi revestrido com sílica (EtOAc como solvente) e cromatografado em sílica-gel, elu- indo com um gradiente de EtOAc:hexano 1:5 até 1:1, para produzir SAPLA4 (26,8 g, 78%) como um óleo incolor espesso. Este produto é uma mistura de diastereoisômeros 1:1. Rf = 0,5 (sílica, hexano:EtOAc 1:1, azul-escuro/vanilina).

[00155] IV (filme, DCM) 3295, 3060 e 3040, 2957, 2934, 2880, 2858, 1736, 1634, 1528, 1454, 1387, 1252, 1171, 1070 cm-1.

[00156] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 0,01 (s, 3H), 0,03 (s, 3H), 0,85-0,97 (m, 12H), 0,92 (s, 9H), 0,93 (s, 9H), 1,33 (d, J=7,0, 3H), 1,37 (d, J=7,0, 3H), 2,40-2,65 (m, 3H), 1,92-2,28 (m, 4H), 3,64-3,76 m, 1H), 4,69-4,82 (m, 1H), 5,05 (d, J=11,8, 1H), 5,20 (d, J=11,8, 2H), 6,73 (d, J=8,9, 1H), 6,98 (d, J=9,0, 1H), 7,34 (bs, 5H).

[00157] 13C RMN (75 MHz, CDCh) δ -5,24, -4,81, 15,70, 17,43, 17,57, 18,84, 21,48, 21,61, 18,05, 23,28, 24,43, 24,55, 24,76, 25,68, 28,87, 31,36, 31,77, 41,27, 41,67, 41,68, 48,55, 48,89, 58,71, 66,84, 83,84, 83,29, 128,09, 128,47, 135,40, 169,24, 170,67, 170,89, 171,16, 171,20, 209,11,211,62.

[00158] m/z (FAB) 611,5 [(M+Na)+, 15], 589,5 [(M+H)+, 100]; m/z (FABHRMS) 589,360 045, C32H52N2O6Si requer (M+H)+, 589,367 291. Exemplo 12 Síntese de Boc-Aip-Leu-Pro-OBn (SNPLA4)

[00159] Adicionou-se Pd/C a 10% (0,74 g, 16% em peso) a uma solução desgaseificada de SNPLB2 (2,3 g, 6,32 mmoles) em THF seco (30 ml), e depois hidrogenou-se à pressão atmosférica por 5 h por 30 min ou até completada a conversão por TLC (desaparecimento do material de partida). A mistura resultante foi filtrada através de um tipo de almofada de celite e adicionou-se mais THF (20 ml) para lavar a celite. À solução filtrada (a -5°C) adicionou-se B0P-Cl (1,77 g, 6,96 mmoles) e NMM (765 μl, 6,91 mmoles), e depois de 30 min uma solução resfriada (-5 oC) contendo: A5 (3,15 g, 8,85 mmoles), NMM (1,88 ml, 8,84 mmoles) e DMF (14 ml) preparada 10 min antes. A mistura da reação foi deixada aquecer até a temperatura ambiente e agitada por 17 h. A reação bruta foi filtrada e o sólido foi lavado com EtOAc (100 ml). As soluções orgânicas combinadas foram lavadas sucessivamente com solução aquosa de KHSO>(a 10% 50 ml), NaHCO3 aquosa (50 ml, saturado) e salmoura (50 ml). A fase orgânica foi seca (Na2S04), filtrada e concentrada sob vácuo, e o material resultante foi cromato- grafado em sílica-gel, eluindo com um gradiente de EtOAc:hexano 1:4 até 1:1, para produzir SNPLA4 (750 mg, 20%) como um sólido branco. Este produto é uma mistura de diastereoisômeros. Rf = 0,26 e 0,17 (sílica, hexano/EtOAc 1:1).

[00160] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 0,74-1,04 (m, 12H), 1,31-1,70 (m, 6H), 1,43 (s, 9H), 2,01 (m, 3H), 2,22 (m, 2H), 3,60 (m, 2H), 3,77 (m, 1H), 4,40 (m, 1H), 4,58 (m, 1H), 4,69 (m, 1H), 5,14 (m, 2H), 6,75 (d, J=8,7, 1H), 7,04 (d, J=7,8, 1H), 7,34 (bs, 5H).

[00161] 13C RMN (75 MHz, CDCh) δ 16,74, 1691, 20,22, 21,94, 23,53, 24,80, 25,06, 28,48, 29,14, 41,29, 41,41, 46,98, 49,45, 49,64, 51,26, 59,06, 63,70, 64,27, 67,08, 79,86, 80,10, 128,32, 128,48, 128,74, 135,74, 156,28, 169,15, 169,32, 171, 18, 171,91.

[00162] ESI-EM: calculado para C31H47N3O7: 573,34; encontrado m/z 574,4 [(M+H)]+. Exemplo 13 Síntese de Hiv-Leu-Pro-QBn (SHPLA4)

[00163] AdiCionou-se NMM (506 mg, 5,01 mmoles) a um frasco contendo A5 (2,06 g, 4,78 mmoles) em DCM (5 ml) a 0°C, sob agitação. Depois de 15 min, adicionou-se em parcelas ácido (2S)-2-hidróxi- 3-metil-butanóico (ácido hidroxiisovalérico) (487 mg, 4,78 mmoles) e DCC (986 mg, 4,78 mmoles). A mistura da reação foi deixada aquecer até 23 oC e agitada por 14 h. A suspensão foi diluída com CHCh (25 ml) e fracionada entre HCl aquosa de (1 N 10 ml), NaHCQ3 aquosa (10 ml saturado) e salmoura (10 ml), seca e concentrada sob pressão reduzida. Q resíduo foi purificado por cromatografia de coluna flash (sílica-gel, gradiente de hexano:EtQAc 1:1 até 1:3), para dar SHPLA4 (1,13 g, 80%) como um sólido branco. Rf = 0,46 (hexano:EtQAc 1:1).

[00164] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 0,81, (d, J=7,0, 3H), 0,92 (m, 6H), 0,97 (d, J=7,0, 3H), 1,42 (m, 1H), 1,63 (m, 2H), 2,00 (m, 3H), 2,19 (m, 2H), 3,60 (m, 1H), 3,85 (m, 1H), 3,88 (d, J=4,8, 1H), 4,46 (m, 1H), 4,80 (m, 1H), 5,06 (d, J=12,3, 1H), 5,14 (d, J=12,3, H), 7,32 (m, 5H), 7,41 (d, J=8,4, 1H).

[00165] 13C RMN (75 MHz, CDCh) δ 15,32, 19,08, 21,38, 23,11, 24,41, 24,69, 28,77, 31,31, 40,54, 46,81, 48,20, 58,82, 66,69, 75,76, 127,93, 128,14, 128,37, 135,28, 171,39, 171,95, 173,94. Exemplo 14 Síntese de Boc-Val-Leu-Pro-QBn (SVPLA4)

[00166] Adicionou-se NMM (0,35 ml, 3,15 mmoles) a um frasco contendo Boc-Valina-QH (652 mg, 3 mmoles) em DCM (6 ml) a 0°C. Depois de agitar por 15 min, adicionou-se parceladamente A5 (1,065 g, 3 mmoles), HQBt (405 mg, 3,0 mmoles) e DCC (650 mg, 3,15 mmoles). A mistura da reação foi deixada aquecer até 23oC e agitada por 14 h. A suspensão foi diluída com DCM (25 ml) e lavada sucessivamente com KHSQ4 aquosa de a (10% 2 x 10 ml), NaHCQ3 aquosa (2 x 10 ml) e salmoura (10 ml), seca série Na2SQ4, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. Q resíduo foi purificado por cromatografia flash (sílica, gradiente de hexano:EtQAc 2:1 até 1:1), para dar SVPLA4 (1,48 g, 93%) como um sólido branco. Rf = 0,57 (hexano:EtQAc 1:2).

[00167] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 0,83-0,95 (m, 12H), 1,2-1,4 (m, 1H), 1,42 (s, 9H), 1-40-1,51 (m, 1H), 1,60-1,75 (m, 1H), 1,82-2,20 (m, 5H), 3,50-3,60 (m, 1H), 3,74-3,78 (m, 1H), 3,91, 3,96 (m, 1H), 4,524,57(s, 1H), 4,75-4,77 (m, 1H), 5,04 (bs, 1H)-, 5,05 (d, J=12,3, 1H), 5,17 (d, J=12,3, 1H), 6,60 (d, J=8,4, 1H), 7,26-7,35 (m, 5H).

[00168] 13C RMN (75 MHz, CDCh) δ 7,61, 19,19, 21,66, 23,23, 24,43, 24,78, 24,87, 25,55, 28,20, 28,87, 30,91, 33,86, 41,68, 46,73, 48,86, 58,77, 59,74, 66,82, 79,66, 128,08, 128,08, 128,21, 128,46, 135,47, 155,66, 170,83, 171,33, 171,60.

[00169] ESI-EM: calculado para C28H43N3Q6: 517,32; encontrado m/z 518,2 [(M+H)]+. Exemplo 15 Síntese de Boc-Me-Val-Leu-Pro-QBn (SMPLA4)

[00170] Seguindo o procedimento descrito para a síntese de SVPLA4, partindo de A5 (1,07 mg, 3,00 mmoles) e Boc-(Me)Val-QH (694 mg, 3,00 mmoles), o composto do título foi obtido como um sólido branco (1,39 g, 87%) depois da purificação por cromatografia de coluna flash (sílica-gel, gradiente de hexano:EtQAc 2:1 até 1:1). Rf = 0,51 (hexano:EtQAc 1:2).

[00171] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 0,83-0,91 (m, 12H), 1,45 (s, 9H), 1,93-2,03 (m, 4H), 2,18-2,22 (m, 2H), 2,76 (s, 3H), 3,40-3,50 (m, 2H), 3,55-3,62 (m, 1H), 3,75-3,85 (m, 1H), 4,00-4,10 (m, 1H), 4,50-4,60 (m, 1H), 4,70-4,82 (m, 1H), 5,07 (d, J=11,2, 1H), 5,24 (d, J=11,2, 1H), 6,20 (m, 0,5H), 6,50 (m, 0,5 H), 7,26-7,35 (m, 5H).

[00172] 13C RMN (75 MHz, CDCh) δ 18,43, 19,77, 21,53, 23,23, 24,47, 24,77, 25, 89, 25,30, 28,85, 41,25, 46,67, 48,51, 58,75, 64,05, 66,79, 128,06, 128,18, 128,44, 135,49, 170,12, 170,80, 171,66

[00173] ESI-EM: calculado para C29H45N3Q6: 531,33; encontrado m/z 532,3 (M+H)+. Exemplo 16 Síntese de Hip-Leu-Pro-QBn (SAPLA3)

[00174] Adicionou-se uma solução límpida incolor de fluoreto de tetrabutil-amônio 1 M em THF (80,9 ml, 80,9 mmoles) a um frasco con-tendo SAPLA4 (15,86 g, 26,97 mmoles), e a mistura foi agitada inten-samente à temperatura ambiente por 15 min (ou até conversão total por TLC). A reação foi resfriada bruscamente pela adição de água (4 ml) e sílica-gel (50 g). O material bruto foi concentrado e purificado por cromatografia de coluna flash (sílica-gel, gradiente de hexano:EtOAc 2:1 até 1:1, para produzir SAPLA3 (12,2 g, 95%) como um sólido branco (mistura de diastereoisômeros). Rf = 0,36 e 0,2 (sílica, hexa- no:CHCh:IPA 1:5:1).

[00175] IV (filme, DCM) v 3450-3293, 3060 e 3040, 2961, 2946, 2883, 2852, 1746, 1632, 1533, 1454, 1357, 1387, 1265, 1173, 1095 1045, 1018 cm-1.

[00176] 1H RMN (500 MHz, CDCh) δ 0,71 (d, J=6,8, 3H), 0,81 (d, J=6,6, 3H), 0,88 (d, J=6,5, 3H), 0,91 (d, J=6,5, 3H), 0,94 (d, J=6,5, 3H), 0,99 (d, J=7,1, 3H), 1,07 (d, J=6,5, 3H), 1,36 (d, 6,5, 3H), 1,43-1,52 (m, 2H), 160-1,66 (m, 1H), 1,93-2,10 (m, 3H), 2,12-2,23 (m, 2H), 3,53-3,58 (m, 1H), 3,65 (q, J=7,1, 1H), 3,67-3,73 (m, 1H), 3,89 (q, J=7,1, H), 3,96 (d, J=4,2, 1H), 4,22 (d, J=4,1, 1H), 4,54-4,56, (m, 1H), 4,58-4,62 (m, 1H), 4,69, 4,73 (m, 1H), 5,1 (d, J=12,1, H), 5,18 (d, J=12,1, 1H), 6,57 (d, J = 8,5, 1H), 6,63 (d, J=8,5, 1H), 7,28-7,38 (m, 5H).

[00177] 13C RMN (75 MHz, CDCh) δ 14,06, 14,26, 15,85, 16,48, 20,07, 20,53, 22,02, 22,25, 25,37, 25,46, 29,45, 29,53, 31,59, 32,09, 41,13, 42,29, 49,93, 50,91, 51,02, 59,52, 67,60, 81,02, 128,78, 1,29,2, 169,48, 171,58, 172,17, 209,76.

[00178] m/z (FAB) 497,4 [(M+Na)+, 12], 475,5 [(M+H)+, 100]; m/z (FABHRMS) 497,263 162, C26H38N2O6 requer (M+Na)+ 497,262 757. Analítico: calculado para C26H38N2O6: C, 65,82; H, 8,02; N, 5,91. En-contrado: C, 65,97; H, 8,18; N, 5,76. Exemplo 17 Síntese de Aip-Leu-Pro-QBn (SNPLA3)

[00179] Adicionou-se uma solução de cloreto de hidrogênio em dioxano (39 ml, 5,3 N) a um SPNLA4 (750 mg, 1,30 mmoles), e a mistura foi agitada por 5 h ou até conversão total por TLC (desaparecimento do material de partida). A solução foi concentrada sob pressão reduzida e o óleo resultante foi capturado com CHCh (15 ml), MTBE (15 ml) e hexano (15 ml). Q resíduo foi seco sob vácuo para remover HCl residual, para dar um sólido espumoso. SNPLA3 (660 mg, quantitativo) foi usado diretamente sem purificação adicional na próxima etapa.

[00180] ESI-EM: calculado para C26H39N3Q5: 473,29; encontrado 474,2 (M+H)+. Exemplo 18 Síntese de Val-Leu-Pro-QBn (SVPLA3)

[00181] Adicionou-se uma solução de cloreto de hidrogênio em dioxano (1,5, 5,3 N) a um frasco contendo SVPLA4 (215 mg, 0,41 mmoles), e a mistura foi agitada por 5 h ou até conversão total por TLC. A solução foi concentrada sob pressão reduzida e o óleo resultante foi capturado com CHCh (5 ml), MTBE (5 ml) e hexano (5 ml). 0 resíduo foi seco sob vácuo para remover HCl residual, para dar um sólido espumoso de SVPLA3 (185 mg, quantitativo) que foi usado diretamente sem purificação adicional na próxima etapa.

[00182] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 0,86-0,90 (m, 6H), 1,04 (d, J=6,3, 3H), 1,12 (d, J=6,3, 3H), 1,45-1,55 (m, 1H), 1-60-1,80 (m, 2H), 1,82-2,11 (m, 2H), 2,11-2,25 (m, 1H), 2,25-2,40 (m, 1H), 3,50-3,70 (m, 1H), 3,80-3,95 (m, 2H), 4,52-4,57 (s, 1H), 4,70-4,85 (m, 1H), 5,05 (d, J=12, 1H), 5,20 (d, J=12,3, 1H), 7,27-7,37 (m, 5H), 7,91 (m, 1H), 8,62 (bs, 2H).

[00183] 13C RMN (75 MHz, CDCh) δ 18,57, 18,79, 21,83, 23,11, 24,50, 24,67, 24,90, 25,34, 28,92, 30,23, 33,25, 40,40, 47,04, 49,46, 49,94, 59,26, 60,02, 66,88, 128,16, 128,27, 128,51, 135,48, 167,54, 170,80, 171,94. Exemplo 19 Síntese de (Me)Val-Leu-Pro-OBn (SMPLA3)

[00184] Seguindo o procedimento descrito para a síntese de SVPLA3, partindo de SMPLA4 (940 mg, 1,94 mmoles), o composto do título (828 mg, quantitativo) foi obtido como um sólido branco. Este produto foi usado diretamente na próxima etapa sem qualquer purificação adicional.

[00185] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 0,93 (d, J=6,3, 6H), 10,07 (d, J=6,3, 3H), 1,21 (d, J=6,3, 3H), 1,47 (m, 1H), 1,73 (m, 2H), 2,00 (m, 3H), 2,23 (m, 1H), 2,52 (m, 1H), 2,83 (bs, 3H), 3,56,3,65 (m, 2H), 3,77 (m, 1H), 4,59 (m, 1H), 4,66 (m, 1H), 5,07 (d, J=12,3, 1H), 5,19 (d, J=12,3, 1H), 7,27-7,38 (m, 5H), 7,90 (m, 1H), 9,11 (m, 0,5H), 9,61 (m, 0,5H).

[00186] 13C RMN (75 MHz, CDCh) δ 13,98, 18,37, 19,57, 21,33, 22,52, 23,16, 24,74, 28,77, 29,78, 31,54, 32,54, 39,87, 46,75, 50,09, 58,91, 66,85, 122,12, 128,06, 128,24, 128,47, 135,43, 166,22, 170,73, 171,54.

[00187] ESI-EM: calculado para C24H38CIN3O4: 431,2; encontrado m/z 432,2 (M+H)+. Exemplo 20 Síntese de Boc-Ist(TBDMS)-Hip-l eu-Pro-OBn (SAPLA2)

[00188] Adicionou-se DMAP (0,932 g, 7,6 mmoles), C1 (11,89 g, 30,53 mmoles) e DCC (6,613 g, 32,05 mmoles) parceladamente a uma solução de SAPLA3 (12,2 g, 25,44 mmoles) em DCM anidro (75 ml) a -5 oC sob Ar, enquanto se mantinha a temperatura < -5 oC (banho de gelo/sal). A mistura da reação foi agitada por 14 h a -5 oC e depois, filtrada e concentrada. O material bruto foi capturado com ACN, resfriado (-10OC), filtrado e concentrado novamente. O material resultante foi dissolvido em EtQAc (400 ml) e lavado seqüencialmente com KHSÜ4 aquosa (a 10% de 2 x 200 ml), salmoura (200 ml), NaHCQ3 aquosa (200 ml, saturado), e enxaguado com salmoura (200 ml). A fase orgânica foi seca (Na2SQ>), filtrada e concentrada sob pressão reduzida, para produzir um óleo incolor que foi cromatografado em sílica-gel, eluindo com um gradiente de hexano:EtQAc 3:1 até 2:1, para produzir SAPLA2 (19,35 g, 90%) como uma espuma branca (mistura de diastereosiômeros).

[00189] IV (filme, DCM) v 3365-3200, 3069 e 3038, 2959, 2930, 2882, 2857, 1746, 1688, 1640, 1533, 1456, 1389, 1258, 1171, 1086 cm-1.

[00190] 1H RMN (500 MHz, CDCh) δ 0,01 (s, 3H), 0,03 (s, 3H), 0,05 (s, 3H), 0,07 (s, 3H), 0,77-1,03 (m, 18H), 0,84 (s, 9H), 0,85 (s, 9H), 1,33 (d, J=7,4, 3H), 1,32-1,36 (m, 2H), 1,49 (d, J=7,5, 3H), 1,38-1,62 (m, 3H), 1,42 (s, 9H), 1,44 (s, 9H), 1,51-1,77 (m, 1H), 1,88-2,37 (m, 3H), 2,17-2,33 (m, 2H), 2,47-2,74 (m, 2H), 3,34-3,72 (m, 1H), 3,72-3,82 (m, 1H), 3,99-4,40 (m, 1H), 4,03-4,16 (m, 1H), 4,49 (d, J=10,3, 1H), 4,54-4,59 (m, 1H), 4,63-4,70 (m, 2H), 4,75 (d, J=4,5, 1H), 4,77-4,81 (m, 1H), 4,95-5,19 (m, 2H), 5,22 (d, J=5,2, 1H), 5,32 (d, J=10,5, 1H), 6,38 (d, J=10,9, 1H), 6,71 (d, J=7,4, 1H), 6,76 (d, J=8,4, 1H), 8,60 (d, J=9,5, 1H).

[00191] 13C RMN (75 MHz, CDCh) δ -5,05, -4,49, 11,83, 12,03, 13,01, 13,51, 13,83, 14,08, 16,92, 17,10, 17,85, 19,14, 19,65, 21,57, 22,09, 22,96, 23,28, 24,36, 24,60, 24,85, 25,73, 26,97, 27,33, 28,35, 28,46, 28,93, 29,09, 29,65, 34,12, 34,16, 40,45, 40,85, 41,18, 42,20, 46,74, 46,16, 47,99, 48,34, 48,90, 49,42, 57,62, 58,81, 58,96, 60,46, 66,62, 66,88, 68,18, 69,69, 78,98, 79,24, 79,84, 82,95, 128,08-128-49, 135,48, 135,61, 155,85, 158,27, 157,44, 168,40, 169,07, 170,65, 170,86, 171,42, 171,79, 203,09, 205,97.

[00192] m/z (FAB) 846,6 [(M+H)+, 15], 746,6 (100); m/z (FABHRMS) 868,516 630, C45H75N3O10SÍ requer (M+Na)+ 868,511 930. Exemplo 21 Síntese de Boc-lst(TBDMS)-Aip-Leu-Pro-OBn (SNPLA2)

[00193] Adicionou-se NMM (0,19 ml) a um frasco contendo SNPLA3 (cloridrato) (600 mg, 1,12 mmoles) em DCM (15 ml anidro) a 0OC. Depois de 15 min, adicionou-se parceladamente C1 (632 mg, 1,62 mmoles), HOBt (266 mg, 1,73 mmoles) e DCC (331 mg, 1,60 mmoles). O frasco foi deixado aquecer até a temperatura ambiente e continuou-se a agitação durante a noite. A reação bruta foi fracionada entre DCM (50 ml) e Na2SO>aquosa (a 10% 2 x 20 ml). A fase orgânica foi lavada sucessivamente com NaHCO3 aquosa (2 x 20 ml, saturado) e salmoura (20 ml), seca (Na2SO>) , filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O sólido branco resultante foi purificado por cromatografia de coluna flash (sílica-gel, gradiente de hexano:EtOAc 4:1 até 1:1), para produzir o composto do título como um sólido branco (700 mg, 73%, mistura de diastereoisômeros).

[00194] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 0,05 (s, 3H), 0,08 (s, 3H), 0,09 (s, 3H), 0,68-1,05 (18H, m), 0,87 (9H, s), 1,05-1,85 (12H, m), 1,42 (9H, s), 1,85- 2,10 (3H, m), 2,11-2,31 (2H, m), 2,32-2,46 (2H, m), 2,47-2,60 (m, 2H), 3,34-3,90 (2H, m), 3,93-4,30 (2H, m), 4,50-4,89 (6H, m), 4,90-5,12 (2H, m), 5,07 (d, J=12,2, 2H), 5,18 (d, J=12,2, 2H), 5,60 (1H, d, J=9,7), 5,67 (1H, d, J=10,2), 5,89 (1H, d, J=11,2), 6,56 (1H, d, J=7,3), 6,70 (1H, d, J=8,3), 6,76 (1H, d, J=6,8), 6,94 (d, J=6,8, 1H), 7,01-7,19 (m, 1H), 7,32 (bs, 5H), 8,17 (1H, d, J=7,8), 8,28 (d, J=7,8, 1H).

[00195] ESI-EM: calculado para C45H79N4O9SÍ: 844,54; encontrado m/z 845,5 (M+H)+. Exemplo 22 Síntese de Boc-Ist(TBDMS)-Hiv-l eu-Pro-OBn (SHPLA2)

[00196] Seguindo o procedimento descrito para a síntese de SAPLA2, partindo de SHPLA4 (850 mg, 2,0 mmoles) e C1 (935 mg, 2,4 mmoles), o composto do título (1,53 g, 97%) foi obtido depois de purificação por cromatografia de coluna flash (sílica-gel, gradiente de hexano:EtOAc 3:1 até 2:1). Rf = 0,63 (hexano:EtOAc 2:1).

[00197] 1H RMN (300 MHz, CDCh) mistura de rotâmeros BocNH: δ 0,04 (s, 3H), 0,06 (s, 3H), 0,88 (s, 9H), 0,78-1,04 (m, 18H), 1,10-2,80 (m, 11H), 1,44 (s, 9H), 1,46 (s, 9H), 3,57 (m, 2H), 3,74 (m, 1H), 3,85 (m, 1H), 4,03 (m, 1H), 4,23 (d, J=4,8, 1H), 4,48 (m, 1H), 4,85 (m, 1H), 4,90 (d, J=10, 1H), 5,05, (m, 1H), 5,20 (d, J=10, 1H), 5,23 (d, J=10, 1H), 6,64 (d, J=6,4, 1H), 6,88 (d, J=8,6, 1H), 7,32 (m, 5H), 8,54 (d, J=8,3, 1H).

[00198] 13C RMN (75 MHz, CDCh) δ -5,14, -4,58, 11,84, 12,97, 17.78, 17,92, 18,98, 21,05, 23,11, 23,49, 25,61,, 26,92, 28,36, 28,70, 30,12, 33,68, 38,72, 42,86, 46,51, 48,18, 58,67, 60,24, 66,52, 71,14, 79,40, 82,66, 127,96, 128,01, 128,33, 135,36, 157,30, 169,92, 171,10, 171,69, 171,97.

[00199] ESI-EM: calculado para C42H71N3O9: 789,50; encontrado 790,5 (M+H)+. Exemplo 23 Síntese de Boc-Ist(TBDMS)-Val-l eu-Pro-OBn (SVPLA2)

[00200] Seguindo o procedimento descrito para a síntese de SNPLA2, partindo de SVPLA3 (cloridrato) (1,2 g, 2,64 mmoles), C1 (1,23 g, 3,17 mmoles), DCC (654 mg, 3,17 mmoles), HOBt (464 mg, 3,43 mmoles), NMM (0,35 ml) e DCM (6 ml). O composto do título (1,87 g, 89%) foi obtido depois de purificação por cromatografia de coluna flash (sílica-gel, gradiente de hexano:EtOAc 3:1 até 2:1).

[00201] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 0,07 (bs, 6 H), 0,81-0,96 (m, 27H), 1,11-1,38 (m, 3H), 1,39-147 (bs, 7H), 1,51 (bs, 3H), 1,58-1,70 (m, 3H), 1,70-1,84 (m, 1H), 1,86-2,60 (m, 4H), 2,28-2,58 (m, 2H), 3,583,62(m, 1H), 3,62-3,73 (m, 1H), 3,73-3,90 (m, 1H), 4,05-4,12 (m, 1H), 4,13-4,19 (m, 1H), 4,19-4,23 (m, 1H), 4,49-4,54 (m, 1H), 4,77-5,06 (m, 2H), 5,18 (d, J=12,3, 1H), 5,55 (bs, 1H), 6,44-6,61 (m, 2H), 7,30-7,35 (m, 5H), 7,94- 7,98 (m, 1H).

[00202] ESI-EM: calculado para C42H72N4OsSi: 788,51; encontrado 789,5 (M+H)+. Exemplo 24 Síntese de Boc-lst(TBDMS)-(Me)Val-Leu-Pro-QBn (SMPLA2)

[00203] Adicionou-se NMM (41 μl, 0,38 mmoles) a um frasco contendo SMPLA3 (cloridrato) (176 mg, 0,38 mmoles) em DCM (2 ml anidro) a 0OC. Depois de 15 min, adicionou-se parceladamente C1 (176 mg, 0,46 mmoles) e DCC (93 mg, 0,46 mmoles). Q frasco foi deixado aquecer até a temperatura ambiente e continuou-se a agitação durante a noite. A mistura da reação foi fracionada entre DCM (10 ml) e KHSQ4 aquosa (a 10% de KHSQ>) 2 x 5 ml). A fase orgânica foi lavada sucessivamente com NaHCQ3 aquosa (2 x 5 ml, saturado) e salmoura (5 ml), seca, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. Q sólido branco resultante foi purificado por cromatografia de coluna flash (sílica- gel, gradiente de hexano:EtQAc 3:1 até 2:1), para dar SMPLA2 (127 mg, 42%) como um sólido branco. Rf = 0,51 (Hex-EtQAc 1:1).

[00204] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ -0,08 (s, 3H), 0,05 (s, 3H), 0,75-0,86 (m, 27H), 1,00-1,43 (m, 11H), 1,52-1,65 (m, 1H), 1,68-1,80 (m, 1H), 1,83- 2,01 (m, 3H), 2,08-2,24 (m, 2H), 2,40 (m, 2H), 2,87 (s, 3H), 3,50-3,57 (m, 3H), 3,71-3,76 (m, 1H), 4,29 (m, 1H), 4,47-4,63 (m, 4H), 5,01 (d, J=12,9, 1H), 5,11 (d, J=12,9, 1H), 6,41 (d, J=7,8, 0,5 H), 6,62 (d, J=7,8, 1H), 7,01 (d, J=7,8, 0,5 H), 7,23-7,28 (m, 5H).

[00205] 13C RMN (75 MHz, CDCh) δ 11,56, 13,57, 13,98, 17,83, 18,87, 19,46, 21,77, 22,94, 23,11, 24,50, 24,71, 24,80, 25,64, 25,76, 25,97, 27,29, 28,18, 28,18, 28,75, 30,40, 34,18, 39,28, 40,85, 46,58, 48,61, 57,03, 58,65, 62,26, 66,63, 69,21, 78,72, 127,92, 128,05, 128,11, 128,33, 135,42, 155,91, 169,76, 170,48, 171,56, 172,01.

[00206] ESI-EM: calculado para C43H74N4O8SÍ: 802,53; encontrado m/z 825,5 (M+Na)+. Exemplo 25 Síntese de Ist-Hip-Leu-Pro-OBn (SAPLA1)

[00207] Adicionou-se uma solução de ácido clorídrico em dioxano anidro (4,2N, 220 ml, 924 mmoles) a uma solução contendo SAPLA2 (19,32 g, 22,8 mmoles) em dioxano anidro (78 ml). A solução resultante foi agitada a 21 oC por 4,3 h ou até desaparecimento completo do material de partida (TLC). Depois, a solução foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em DCM (25 ml) e concentrado para remover HCl residual. O resíduo resultante foi seco sob vácuo até eliminação completa de HCl livre (3 h), para dar 17,3 g de SAPLA1 (15,1 g, quantitativo) como uma espuma branca (mistura de diastere- oisômeros).

[00208] Exemplo 26

[00209] Síntese de Ist-Aip-Leu-Pro-OBn (SNPLA1)

[00210] Seguindo o procedimento descrito para a sintese de SAPLA1, partindo de SNPLA2 (700 mg, 0,82 mmoles), o composto do titulo (545 mg, quantitativo) foi obtido como um sólido branco, depois de precipitação com Eti0 (mistura de diastereoisômeros).

[00211] 1H RMN (300 MHz, CDCI3) δ 0,86-1,04 (m, 18H), 1,02-1,22 (m, 3H), 1,23-1,58 (m, 5H), 1,60-1,80 (m, 2H), 1,82-2,01 (m, 3H), 2,24 (m, 2H), 2,40-2,85 (m, 2H) 3,24 (m, 1H), 3,45 (m, 1H), 3,60 (m, 1H), 3,70-4,05 (m, 2H), 4,46 (m, 2H), 4,47-4,75 (m, 2H), 5,10 (bs, 2H), 7,34 (bs, 5H), 7,98 (bs, 1H), 8,10 (bs, 1H).

[00212] ESI-EM: calculado para C34H54N4O7: 630,40; encontrado m/z 631,4 (M+H)+. Exemplo 27 Sintese de Ist-Hiv-Leu-Pro-OBn (SHPLA1)

[00213] Seguindo o procedimento descrito para a sintese de SAPLA1, partindo de SHPLA2 (1,53 g, 1,94 mmoles), o composto do titulo (1,12 g, quantitativo) foi obtido como um sólido branco, depois de precipitação com Et20.

[00214] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 0,86-1,04 (m, 18H), 1,10-1,22 (m, 3H), 1,42 (m, 2H), 1,70 (m, 2H), 1,97, m, 3H), 2,24 (m, 2H), 2,83 (m, 1H), 2,97 (m, 1H), 3,34 (m, 1H), 3,61 (m, 1H), 3,75 (m, 1H), 3,90 (m, 1H), 4,56 (m, 2H), 4,75 (m, 1H), 5,04 (d, J=11, 1H), 5,18 (d, J=11, 1H), 7,34 (bs, 5H), 8,21 (bs, 3H).

[00215] ESI-EM: calculado para C31H49N3O7: 575,36; encontrado m/z 576,3 (M+H)+. Exemplo 28 Síntese de Ist-Val-Leu-Pro-QBn (SVPLA1)

[00216] Seguindo o procedimento descrito para a síntese de SAPLA1, partindo de SVPLA2 (1,87 g, 2,36 mmoles), o composto do título (1,40 g, quantitativo) foi obtido como um sólido branco, depois de precipitação com EtiQ.

[00217] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 0,82-1,01 (m, 15H), 1,01-1,10 (m, 3H), 1,20-1,79 (m, 5H), 1,81-2,05 (m, 4H), 2,05-2,15 (m, 2H), 2,50-2,68(m, 2H), 2,82-3,1 (m, 1H), 3,20-3,35 (m, 1H), 3,50-3,70 (m, 1H), 3,80-3,90 (m, 1H), 4,18-4,30 (m,1 H), 4,35-4,45 (m, 1H), 4,45-4,55 (m, 1H), 4,60- 4,70 (m, 1H), 5,02 (d, J=12,3, 1H), 5,15 (d, J=12,3, 1H), 7,28-7,38 (m, 5H), 7,5 (bs, 1H), 7,9 (bs, 3H), 8,15 (bs, 1H).

[00218] 13C RMN (75 MHz, CDCh) δ 10,81, 14,67, 18,29, 19,32, 21,48, 23,14, 24,48, 24,76, 25,81, 30,29, 33,41, 40,31, 46,96, 49,35, 59,14, 59,94, 60,67, 66,94, 128,11, 128,32, 128,54, 135,32, 171,58, 171,74, 171,80, 172,57.

[00219] ESI-EM: calculado para C31H50N4Q6: 574,35; encontrado m/z 575,3 (M+H)+. Exemplo 29 Éster fenacil de N-terc-butilóxi-carbonil-treonina (D3)

[00220] Adicionou-se TEA (14 ml, 0,1 mol) e bromo-acetofenona (19,0 g, 0,1 mol) a uma suspensão agitada de Boc-Thr-0H (21,91 g, 0,1 mol) em EtOAc (200 ml), a 0°C. A mistura da reação foi deixada aquecer até 20°C, agitada por 2 dias, e depois diluída com EtOAc (500 ml). Depois de lavar sucessivamente com HCL aquosa (0,1 N 200 ml), água (100 ml), NaHCO3 (aquosa 1 N 200 ml) e salmoura (200 ml), (Na2SO>) filtrado e concentrado sob vácuo, o resíduo foi triturado com Et20 e filtrado. O sólido resultante foi seco no escuro, para produzir D3 (28,6 g, 85%). Rf = 0,55 (hexano:EtOAc 1:1, sílica); p.f. = 114,2oC; [α]D22 -29,4 (c 2, EtOAc).

[00221] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 1,31 (d, J=6,6 3H), 1,46 (s, 9H), 3,77 (br, d, OH), 4,44 (dd, J=9,6 1H), 4,6 (q, 1H), 5,34 (d, J=16,5 1H) 5,37 (br d, OH) 5,68 (d, J=16,8, 1H), 7,51 (t, 2H), 7,65 (t, 1H), 7,92 (dd, 2H). Exemplo 30 N-benzilóxi-carbonil-N,O-dimetil-L-tirosina (E1)

[00222] Adicionou-se K0H em pó finamente dividido (112,72 g, 2 moles) parceladamente a uma solução agitada de Z-Tyr-0H (63,24 g, 200 mmoles) em THF (900 ml) a 0°C, seguido da adição de sulfato de hidrogênio de tetrabutil-amônio (6,36 g, 10% em peso). Depois, adicio-nou-se sulfato dimetila (127,2 ml, 1,33 mol) em gotas por 30 min, en-quanto se mantinha a mistura da reação abaixo de 4°C. A reação foi agitada por mais 30 min e adicionou-se água (950 ml). Depois de agitar por 5 h a 0°C, a reação foi diluída com éter (1.500 ml), a camada aquosa foi separada, e a camada orgânica foi extraída com NaHC03 aquosa (2 x 500 ml, saturado). As camadas aquosas combinadas foram acidificadas a pH 1 com 1M KHS0>aquosa, e extraída com Et0- Ac (5 x 500 ml). As camadas orgânicas foram combinadas, secas (Na2S04), filtradas e concentradas. 0 resíduo foi precipitado com etil- éter e filtrado, para dar E1 como um sólido branco (53,85 g, 78%).

[00223] [U]D22 -57,16 (c 2,23, CHCle), [Literatura [a]D -48 (c = 2,23, CHClβ), JACS 112:21, 1990]. Exemplo 31 Éster fenacil de 0-(benzilóxi-carbonil-N,0-dimetil-L-tirosil)-N-terc- butilóxi-carbonil-L-treonina (D2)

[00224] Adicionou-se DMAP (3,66 g, 30 mmoles) e E1 (34,33 g, 100 mmoles) a uma solução de D3 (33,72 g, 100 mmoles) em DCM a 0°C. Depois de agitar por 10 min a 0°C, adicionou-se DCC (22,7 g, 110 mmoles). A mistura da reação foi deixada aquecer até a temperatura ambiente e agitada durante a noite. Depois, a mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado até secar. 0 resíduo foi capturado com ACN (100 ml), filtrado novamente e o filtrado foi concentrado. 0 resíduo foi dissolvido em EtOAc (200 ml) e fracionado sucessivamente entre KHSO4 aquosa (a 10% 100 ml), NaHCO3 aquosa (100 ml) e salmoura (100 ml, saturado). A fase orgânica foi seca (Na2SO>) , filtrada e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna flash (sílica-gel, gradiente de EtOAc:hexano 1:4 até 1:2), para produzir D2 (65,5 g, 98%).

[00225] [a]22D -39,56 (c 1,06, CHCh); Rf = 0,55 (EtOAc:hexano 1:1). Exemplo 32 O-(benzilóxi-carbonil-N,O-dimetil-L-tirosil)-N-terc-butilóxi-carbonil-L- treonina (D1)

[00226] Adicionou-se Zn em pó (18,65 g, 288,3 mmoles) a uma solução homogênea de D2 (24,49 g, 38,4 mmoles) em AcOH aquosa (a 90% 211 ml) a 0°C. A mistura resultante foi agitada a 0°C por 3 h, até desaparecimento do material de partida (acompanhado por TLC). A mistura da reação foi filtrada através de celite e lavagem com EtOAc (200 ml). O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida, e o resíduo foi capturado com Et2O (200 ml) e filtrado. O filtrado foi fracionado su-cessivamente entre KHSO4 aquosa (a 10% KHSO4 100 ml) e salmoura (100 ml). A fase orgânica foi seca (Na2SO4) e concentrada, para dar um óleo que foi purificado por cromatografia de coluna flash [Lichro- prep RPC18, ACN:H20 1:1 (800 ml, depois 7:3 (600 ml)], para produzir D1 (15,53 g, 74% como um sólido branco. [α]D24 -27,6 (c 2,187, DCM), [Literatura [α]D -20,5 (c 2, DCM), JOC 62:2 1997]. Rf = 0,58 (ACN:H20 7:3).

[00227] IV (filme, DCM) v 3400, 3050, 2900, 1715, 1613, 1514, 1456, 1402, 1368, 1248, 1165, 1061 1036 cm'1.

[00228] 1H RMN (200 MHz, CDCI3) δ 1,29 (d, J=6,5, 3H), 1,45 (s, 9H), 2,74 (s, 3H), 2,75 (s, 3H), 2,76-3,31 (m, 2H), 3,77 (s, 3H), 4,424,52 (m, 1H), 4,66-4,83 (m, 1H), 5,01-5,16 (m, 2H), 5,30-5,53 (m, 2H), 6,72-6,81 (m, 2H), 6,95-7,09 (m, 2H), 7,35 (bs, 5H).

[00229] 13C RMN (75 MHz, CDCI3) δ 16,44, 16,82, 28,23, 31,71, 31,97, 33,82, 33,68, 55,14, 56,87, 56,75, 60,58, 67,51, 67,76, 71,83, 72,47, 8040, 113,91, 127,59, 128,69, 129,77, 136,42, 156,00, 156,19, 156,71, 158,31, 159,47, 169,78.

[00230] m/z (FAB) 567,1 [(M+Na)+, 46], 545,1 [(M+H)+, 7], 445,1 (100); m/z (FABHRMS) 567,233 280, C28H35N2O9 requer (M+Na)+ 567,231 851. Exemplo 33 Síntese de Boc-Thr(Z-N(Me)-O(Me)-Tyr)-Ist-Hip-Leu-Pro-OBn (SAPL7)

[00231] Foi canulada uma solução de DCM anidro (296 ml) e DMF anidra (148 ml), sob argônio a -50C, , a um frasco contendo HBTU (9,079 g, 23,9 mmoles), HOBt (3,490 g, 22,8 mmoles), SAPLA1 (15,258 g, 22,8 mmoles) e D1 (12,417 g, 22,8 mmoles). Depois de agitar por 5 min, adicionou-se DIPEA (15,9 ml, 91,2 mmoles) em gotas por seringa, enquanto se mantinha a temperatura < -5oC. A mistura da reação resultante foi agitada por 21 h a -5oC. Adicionou-se MTBE (300 ml) e KHSO4 (a 10% de 200 ml), e a mistura resultante foi removida por filtração e concentrada até 300 ml. Adicionou-se mais MTBE (200 ml), as camadas foram separadas, e a fase orgânica foi tratada se- qüencialmente com e KHSO4 (a 10% de 200 ml), salmoura (200 ml), e KHSO4 (a 10% de 200 ml, salmoura), e enxaguada com salmoura (200 ml). A fase orgânica foi seca (Na2SO>) e concentrada sob pressão re-duzida, para produzir um óleo amarelo (30 g). O óleo foi dissolvido em MTBE e tratado com hexano sob agitação. O sólido precipitou e adici-onou-se mais hexano. O sólido foi filtrado, para produzir SAPL7 (18,33 g, 69% de rendimento) como um sólido branco. Este produto é uma mistura de dois diestereoisômeros. Rf = 0,80 e 0,59 (hexano:EtOAc 1:2).

[00232] IV (filme, DCM) v 3350, 2961, 2927, 2893, 1744, 1688, 1638, 1514, 1454, 1368, 1304, 1248, 1171, 1067, 1036 cm-1.

[00233] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 0,74-0,92 (m, 18H), 105-1,15 (m, 2H), 1,18-1,20 (m, 2H), 1,23 (d, J=6,8, 3H), 1,25 (d, J=6,8 3H), 1,29 (d, J=6,9, 3H), 1,42 (s, 9H), 1,45 (s, 9H), 1,50-1,66 (m, 3H), 1,892,02(m, 4H), 2,17-2,25 (m, 2H), 2,37-2,42 (m, 1H), 2,81 (s, 3H), 2,88 (S, 3H), 2,91 (s, 3H), 2,91 (s, 3H), 2,84-2,93 (m, 2H), 3,17-3,25 (m, 1H), 3,53-3,59 (m, 1H), 23,75 (s, 3H), 3,88-3,98 (m, 4H), 4,49 (d, J=3,1, 1H), 4,51 (d, J= 3,1, 1H), 4,53-4,57 (m, 1H), 4,68-4,72 (m, 1H), 4,96-4,99 (m, 1H), 5,02-5,33 (m, 4H), 5,02 (d, J=3,2, 1H), 5,32 (d, J=3,1 1H), 5,26-5,33 (m, 1H), 5,47 (1d, J=9,5, 1H), 6,74 (d, J=7,8, 2H), 6,77 (d,77 (d, J=7,7, 2H), 7,08 (d, J=7,7, 2H), 7,17 (d, J=7,5, 1H), 7,21 (d, J=9,5 1H), 7,23-7,36 (m, 10H), 7,75 (d, J=7,9, 1H), (d, J=8,2, 1H).

[00234] 13C RMN (75 MHz, CDCh) δ 11,95, 13,27, 15,16, 16,47, 17,33, 18,79, 21,28, 23,65, 24,65, 24,72, 27,09, 28,08, 28,93, 31,20, 31,32, 33,62, 33,98, 33,38, 41,01, 47,12, 49,38, 54,96, 55,17, 57,89, 58,83, 60,01, 60,16, 67,18, 71,05, 71,32, 80,34, 81,24, 113,89, 127,51, 128,59, 129,69, 129,77, 135,52, 136,77, 156,93, 158,27, 169,87, 170,62, 171,15, 171,85, 172,39, 204,88.

[00235] m/z (FAB) 1.181,2 [(M+Na)+, 20], 1.159,2 [(M+H)+, 80], 1.059,2 (100). Analítico: calculado para C62H87N5O16: C, 64,30; H, 7,52; N, 6,05. Encontrado: C, 64,14; H, 7,66; N, 5,95. Exemplo 34 Síntese de Boc-The(Z-N(Me)-O(Me)-Tyr)-lst-Aip-Leu-Pro-OBn (SNPL7)

[00236] Seguindo o procedimento descrito para a síntese de SAPL7, partindo de SNPLA1 (150 mg, 0,22 mmoles) e D1 (122 mg, 0,22 mmoles), o composto do título foi obtido como um sólido branco (130 mg, 51%), depois de purificação por cromatografia de coluna flash (sílica-gel, gradiente de hexano:EtOAc 2:1 até 1:3) (mistura de diastereoisômeros).

[00237] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 0,74-1,03 (m, 18H), 1,16-1,37 (m, 10H), 1,45 (s, 9H), 1,68 (m, 3H), 1,99 (m, 4H), 2,22 (m, 2H), 2,48 (m, 1H), 2,82 (s, 3H), 2,84-3,10 (m, 2H), 3,19 (m, 1H), 3,51-3,69 (m, 2H), 3,75 (s, 3H), 3,72-4,02 (m, 3H), 4,18 (m, 1H), 4,50-4,73 (m, 4H), 5,00-5,27 (m, 5H), 5,49 (m, 2H), 6,54 (d, J=9,2, 1H), 6,78 (d, J=6,8, 2H), 7,02 (d, J=6,8, 2H), 7,18 (m, 1H), 7,23-7,36 (m, 10H), 7,52 (d, J=6,8, 1H).

[00238] ESI-EM: calculado para C62H88N6O15: 1.156,63; encontrado 1.158,3 (M+H)+. Exemplo 35 Síntese de Boc-Thre(Z-N(Me)-O(Me)-Tyr)-Ist-Hiv-Leu-Pro-OBn (SHPL7)

[00239] Seguindo o procedimento descrito para a síntese de SAPL7, partindo de SHPLA1 (1,12 g, 1,94 mmoles) e SAPLD1 (544,6 mg, 1,94 mmoles), o composto do título foi obtido como um sólido branco (1,045 g, 61%), depois de purificação por cromatografia de coluna flash (sílica-gel, gradiente de hexano:EtOAc 1:1 até 1:2). Rf = 0,46 (hexano:EtOAc 1:2).

[00240] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 0,74-1,02 (m, 18H), 1,20 (m, 5H), 1,40 (m, 3H), 1,46 (s, 9H), 1,62 (m, 2H), 1,82-2,20 (m, 3H), 2,20 (m, 2H), 2,50 (m, 1H), 2,78 (s, 3H), 2,90 (m, 1H), 3,20 (m, 1H), 3,58 (m, 1H), 3,67 (s, 3H), 3,79 (m, 1H), 3,88 (m, 1H), 4,06 (m, 2H), 4,40 (m, 2H), 4,82 (m, 2H), 4,94 (m, 1H), 5,98 (m, 1H), 5,08 (m, 1H), 5,28 (m, 3H), 5,56 (d, J=6,2, 1H), 6,84 (d, J=8,3, 2H), 6,98 (d, J=6,5, 1H), 7,07 (d, J=8,3, 2H), 7,34 (m, 10H), 7,52 (d, J=6,2, 1H).

[00241] 13C RMN (75 MHz, CDCh) δ 11,27, 13,77, 13,95, 16,75, 17,46, 18,31, 20,78, 20,96, 23,09, 24,35 24,53, 26,74, 27,93, 28,63, 30,17, 33,76, 39,06, 40,01, 46,69, 48,17, 54,89, 57,04, 57,65, 60,20, 60,60, 66,74, 67,08, 68,31, 70,30, 78,49, 70,90, 113,62, 127,36, 127,70, 128,14, 128,18, 128,31, 129,64, 135,19, 136,31, 155, 86, 156,61, 158,09, 169,77, 170,70, 171,06, 171,17, 171,78.

[00242] ESI-EM: calculado para C59H83N5O15: 1.101,59; encontrado 1.102,7 (M+H)+. Exemplo 36 Sintese de Boc-Thr(Z-N(Me)-O(Me)-Tyr)-Ist-Val-Leu-Pro-Bn (SVPL7)

[00243] Seguindo o procedimento descrito para a sintese de SAPL7, partindo de SVPLA1 (1,44 g, 2,37 mmoles) e D1 (1,29 g, 2,37 mmoles), o composto do titulo foi obtido como um sólido branco (1,96 g, 75%), depois de purificação por cromatografia de coluna flash (sili- ca-gel, gradiente de hexano:EtOAc 2:1 até 1:3). Rf = 0,56 (EtOAc).

[00244] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 0,83-0,95 (m, 15H), 1,0-1,22 (m, 4H), 1,23-1,44 (m, 9H), 1,60-1,65 (m, 1H), 1,87-2,01 (m, 4H), 2,09-2,20 (m, 3H), 2,77 (bs, 8H), 2,84-3,01 (m, 1H), 3,17-3,24 (m, 1H), 3,51-3,60 (m, 1H), 3,73 (s, 3H), 3,80-3,990 (m, 2H), 4,03-4,15 (m, 1H), 4,25-4,40 (m, 2H), 4,40-4,52 (m, 1H), 4,70-4,80 (m, 2H), 5,00-5,26 (m, 4H), 5,34-5,36 (m, 1H), 5,58 (m, 1H), 6,75 (d, 2H, J=7,8), 6,96-7,09 (m, 1H), 7,04 (d, 2H, J=8,1), 7,04-7,12 (m, 1H), 7,16-7,20 (m, 1H), 7,18-7,30 (m, 10H).

[00245] 13C RMN (75 MHz, CDCh) δ 11,43, 13,63, 17,17, 18,35, 19,21, 21,40, 23,23, 24,49, 24,67, 28,10, 28,79, 30,48, 32,11, 33,84, 38,47, 40,37, 41,22, 46,80, 48,61, 55,04, 56,88, 57,95, 58,75, 59,25, 60,82, 66,87, 67,33, 69,40, 70,50, 76,44, 80,45, 113,58, 127,51, 127,74, 127,88, 128,10, 128,25, 128,33, 128,46, 128,72, 129,64, 129,77, 135,35, 136,37, 156,77, 158,29, 169,83, 170,57, 171,3, 171,4, 172,81.

[00246] ESI-EM: calculado para C59H84N6O14: 1.100,60; encontrado m/z 1.101,7 (M+H)+. Exemplo 37 Síntese de Boc-Thr(N(Me)-O(Me)-Tyr)-Ist-Hip-l eu-Pro-OH (SAPL6)

[00247] Adicionou-se Pd(OH)2-C (20% de Pd, 7,33 g, 40% p/p) a uma solução de SAPL7 (18,33 g, 15,8 mmoles) em THF (isento de es-tabilizador, 500 ml) desgaseificada e purgada com argônio. A mistura foi agitada sob H2 (1 atm) por 20 h, e depois filtrada em um filtro de teflon de 0,45μ e concentrada sob pressão reduzida, para dar um sólido branco. Adicionou-se tolueno (30 ml) e concentrou-se novamente sob pressão reduzida e alto vácuo, para dar SAPL6 (14,78 g, quantitativo) como um sólido branco.

[00248] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 0,79-1,08 (m, 18H), 1,09-1,18 (m, 3H), 1,26 (bs, 3H), 1,29 (d, J=7,1 3H), 1,47 (s, 9H), 1,50-1,66 (m, 3H), 1,84-1,94 (m, 1HY), 1,90-2,28 (m, 4H), 2,35-2,50 (m, 4H), 2,30-2,35(m, 1H), 2,44-3,18 (m, 4H), 2,60 (m, 3H), 3,53-3,61 (m, 1H), 3,77 (s, 3H), 3,88-4,07 (m, 4H), 4,12-4,72 (m, 4H), 5,18-5,24 (m, 1H), 5,24 (bs, 1H), 6,84 (d, J=7,9, 2H), 7,08 (d, J=8,0, 2H), 7,13 (d, J=8,2, 1H), 7,18 (d, J=8,2, 1H), 7,62-7,68 (bs, 1H).

[00249] m/z (FAB) 972,7 [(M+K)+, 33], 934,9 [(M)+, 100]. Exemplo 38 Síntese de Boc-Thr(N(Me)-Q(Me)-Tvr)-lst-Aip-Leu-Pro-QH (SNPL6)

[00250] Adicionou-se Pd(QH)2-C (20% de Pd, 45 mg, 35% p/p) a uma solução de SNPL7 (130 mg, 0,11 mmoles) em uma mistura de lPA:H2Q 2:1 (4 ml:2 ml) desgaseificada e purgada com argônio. A mistura foi agitada sob H2 (1 atm) por 20 h, e depois filtrada em um filtro de teflon de 0,45μ e concentrada sob pressão reduzida, para dar um sólido branco. Adicionou-se lPA (10 ml) e concentrou-se novamente sob pressão reduzida e alto vácuo, para dar SNPL6 (100 mg, quantitativo) como um sólido branco.

[00251] ESI-EM: calculado para C47H76N6O13: 932,55; encontrado 934,0 (M+H)+. Exemplo 39 Síntese de Boc-Thr(N(Me)-O(Me)-Tyr)-Ist-Hiv-l eu-Pro-OH (SHPL6)

[00252] Seguindo o procedimento descrito para a síntese de SAPL6, partindo de SHPL7 (1,045 g, 0,95 mmoles). O composto do título foi obtido como um sólido branco (825 mg, 99%).

[00253] ESI-EM: calculado para C44H71N5O13: 877,50; encontrado 878,5 (M+H)+. Exemplo 40 Síntese de Boc-Thr(N(Me)-O(Me)-Tyr)-Ist-Val-Leu-Pro-OH (SVPL6)

[00254] Seguindo o procedimento descrito para a síntese de SAPL6, partindo de SVPL7 (250 mg, 0,23 mmoles), o composto do título foi obtido como um sólido branco (195 mg, 97%).

[00255] ESI-EM: calculado para C44H72N6O12: 876,56; encontrado m/z 877,5 (M+H)+. Exemplo 41 Sintese de Ciclo-N(Me)-Q(Me)-Tyr-Q-(Boc-Thr)-Ist-Hip-Leu-Pro (SAPL5)

[00256] Em um reator de 5 litros resfriado (-5 oC), equipado com agitador mecânico, contendo ACN (3,2 litros), adicionou-se HQTU (14,436 g, 37,9 mmoles) e HQAt (5,254 g, 38,6 mmoles) sob Ar e agitação. Adicionou-se SAPL6 (14,77 g, 15,8 mmoles) dissolvido em ACN (500 ml). Adicionou-se NMM (3,65 ml, 33,18 mmoles) em gotas através de uma seringa, mantendo ao mesmo tempo a temperatura abaixo de -5 oC. A mistura da reação resultante foi deixada aquecer até a temperatura ambiente e foi agitada por 20 h. Q solvente foi evaporado sob pressão reduzida. Q produto bruto foi capturado com EtQAc (500 ml) e a solução foi removida por filtração, para remover o precipitado. A solução foi lavada sucessivamente com solução aquosa de KHSQ4 (2 x 500 ml), salmoura (500 ml), solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (500 ml) e enxaguada com salmoura (500 ml). A fase orgânica foi seca com sulfato de sódio e concentrada sob pressão reduzida, para produzir um sólido amarelo (17,52 g) que foi purificado por cromatografia de coluna flash (sílica-gel, gradiente de hexa- no:EtQAc 3:1 até 1:1), para dar SAPL5 (9,83 g, 68%) como um sólido branco. Rf = 0,60 (hexano:EtQAc 1:3). [a]D-209,4 (c 0,3, CHCh).

[00257] IV (filme, DCM) v 3343, 2961, 2927, 2893, 1734, 1640, 1514, 1454, 1368, 1302, 1248, 1167, 1018 cm-1.

[00258] 13C RMN (75 MHz, CDCh) δ 0,78 (d, J=7,1, 3H), 0,85 (d, J=7,0, 3H), 0,87 (d, J=7,0, 3H), 0,89-0,93 (m, 9H), 1,10-1,20 (m, 1H), 1,20 (d, J= 6,4, 3H), 1,30 (d, J = 6,9, 3H), 1,36 (m, 2H), 1,40 (m, 2H), 1,44 (s, 9H),1,48-1,72 (m, 2H), 1,72-1,78 (m, 1H), 1,83-1,88 (m, 1H), 2,01-2,17 (m,3H), 2,27-2,29 (m, 1H), 2,47-2,53 (m, 1H), 2,53 (s, 3H), 2,93 (bs, 1H),3,14-3,19 (m, 2H), 3,34-3,37 (dd, Ji = 14,8, J2 = 4,1, 1H), 3,54-3,56 (dd,= 10,5, J2 = 4,1, 1H), 3,58-3,63 (m, 1H), 3,68-3,72 (m, 1H), 3,78 (s,3H), 3,94-3,98 (m, 1H), 3,98 (q, J = 7,5, 1H), 4,07-4,11 (3d, J = 3,8, 1H), 4,57-4,61 (m, 2H), 4,77-4,81 (m, 1H), 4,97-4,98 (q, J H 3,5, 1H), 5,02 (d,J H 10,5, 1H), 5,18 (d, J = 4,2, 1H), 6,81 (d, J = 8,5, 2H), 7,05 (d, J H 8,5,2H), 7,19 (d, J = 10,2, 1H), 7,64 (d, J = 10,1, 1H),

[00259] 13C RMN (75 MHz, CDCI3) δ 11,56, 14,68, 14,97, 15,27, 16,61, 18,45, 20,64, 23,50, 24,71, 24,78, 26,92, 27,73, 27,94, 31,55, 33,94, 33,94, 38,27, 38,52, 40,64, 46,86, 49,54, 49,65, 55,16, 55,19, 55,84, 57,12, 65,96, 67,30, 71,00, 80,27, 81,41, 114,02, 130,22, 158,53, 168,30, 169,3 1, 170,12, 170,29, 17 1,20, 172,38, 204,5 1.

[00260] m/z (FAB) 938,9 [(M+Na)+, 55], 916,9 [(M+H)+, 100], m/z (FABHRMS) 916,532 120, C47H73N5O13 requer (M+H)+ = 916,528 300. Exemplo 42 Síntese de CicIo-N(Me)-O(Me)-TYr-O-(Boc-Thr)-lst-Aip-Leu-Pro (SNPL5)

[00261] Seguindo o procedimento descrito para a síntese de SAPL5, partindo de SNPL6 (100 mg, 0,11 mmoles), o composto do título foi obtido como um sólido branco (40 mg, 57%) após cromatogra- fia de coluna flash (sílica-gel, gradiente de Et0Ac:hexano 4:1 até EtO- Ac puro). Rf = 0,4 (EtOAc).

[00262] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 60,76 (d, J = 6,8, 3H), 0,83 0,96 (m,15H), 1,10-1,20 (m, 1H), 1,25 (d, J = 6,4, 3H), 1,27 (d, J = 6,3, 3H), 1,32 (d, J = 6,8, 3H), 1,41 (m, 2H), 1,44 (s, 9H), 1,50-1,70 (m, 2H), 1,99-2,31(m, 5H), 2,61 (s, 3H), 2,91-3,04 (m, 1H), 3,11-3,37 (m, 2H), 3,48-3,64 (m,3H), 3,69-3,81 (m, 1H), 3,80 (s, 3H), 4,18 (m, 2H), 4,464,67 (m, 3H),4,81 (t, J-10,7, 1H), 5,01 (m, 1H), 6,85 (d, J = 8,3, 2H), 7,07 (d, J H8,3,2H), 7,33 (d, J - 8,7, 1H), 7,65 (d, J = 9,2, 1H), 7,86 (d, J = 10,7, 1H).

[00263] ESI-EM: calculado para C47H74N6O12: 914,54; encontrado m/z 915,5 (M+H)+. Exemplo 43 Síntese de Ciclo-N(Me)-O(Me)-TYr-O-(Boc-Thr)-Ist-Hiv-Leu-Pro (SHPL5)

[00264] Seguindo o procedimento descrito para a síntese de SAPL5, partindo de SHPL6 (2,45 g, 2,78 mmoles), o composto do título foi obtido como um sólido branco (2,1 g, 88%) após cristalização em DCM/n-heptano 1:3. Rf = 0,33 (hexano:EtOAc 1:3).

[00265] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 0,82-1,04 (m, 18H), 1,19 (m, 5H), 1,41 (s, 9H), 1,42 (m, 2H), 1,63 (m, 1H), 1,77 (m, 1H), 1,90 (m, 1H), 2,00-2,22(m, 3H), 2,44 (m, 1H), 2,58 (s, 3H), 2,95 (m, 1H), 3,14 (m, 1H), 3,26 (m,1H), 3,36 (m, 1H), 3,58 (m, 1H), 3,68 (m, 2H), 3,78 (s, 3H), 3,96 (m, 1H),4,12 (m, 1H), 4,30 (m, 1H), 4,61 (m, 1H), 4,87 (m, 1H), 4,94 (m, 1H), 5,03(m, 1H), 6,84 (d, J = 8,3, 2H), 7,07 (d, J = 8,3, 2H), 7,54 (d, , J H 7,3, 1H), 7,69 (d, J = 6,4, 1H).

[00266] 13H RMN (75 MHz, CDCI3) δ 11,38, 14,57, 15,15, 18,11, 18,45, 20,67, 23,40, 24,70, 26,91, 27,89, 30,20, 33,57, 33,90, 38,51, 39,07, 46,62, 48,13, 55,16, 56,05, 56,23, 56,94, 65,67, 68,60, 71,13, 79,41, 80,01, 113,97, 129,69, 130,25, 155,75, 158,49, 168,51, 169,57, 170,24, 170,94, 171,06, 173,59.

[00267] ESI-EM: calculado para C44H69N5O12: 859,49; encontrado m/z 860,4 (M+H)+. Exemplo 44 Síntese de Ciclo-N(Me)-O(Me)-TYr-O-(Boc-Thr)-Ist-Val-Leu-Pro (SVPL5)

SVPL6 SVPL5

[00268] Seguindo o procedimento descrito para a síntese de SAPL5, partindo de SVPL6 (90 mg, 0,1 mmoles), o composto do título foi obtido como um sólido branco (30 mg, 35%) após purificação por cromatografia de coluna flash (sílica, gradiente de hexano:EtOAc 1:4 até 1:10). Rf = 0,35 (EtOAc).

[00269] 1H RMN (300 MHz, CDCh): δ, 0,85-1,00 (m, 18H), 1,14-1,38 (m,8H), 1,44 (s, 9H), 1,57 (m, 2H), 1,76-1,95 (m, 2H), 2,01-2,21 (m, 2H), 2,33 (dd, 81= 7,3, 82= 14,7, 1H), 2,53 (m, 1H), 2,57 (s, 3H), 3,17 (dd, J1 = 10,7, J2= 14,7, 1H), 3,35 (dd, J1 =4,4, 82= 14,2, 1H), 3,56 (dd, J,= 3,9,J2 10,3, 1H), 3,59-3,77 (m, 4H), 3,78 (s, 3H), 4,06 (dt, J1= 3,9, J2= 9,3,1 H), 4,33 (dd, J = 2,9, J2= 9,3, 1H), 4,38 (dd, Ji= 6,8, J2= 10,3, 1H), 4,58(dd, J = 5,4, J2= 7,3, 1H), 4,79 (t, J= 10,3, 1H), 4,98 (d, J= 9,3, 1H), 5,03(dd, J = 2,4, J2= 6,3, 1H), 6,81 (bs, 1H), 6,84 (d, J= 8,3, 2H), 7,08 (d, J=8,3, 2H), 7,24 (d, J= 9,8, 1H), 7,54 (d, J= 9,8, 1H).

[00270] 13H RMN (75 MHz, CDCh) δ 11,48, 14,50, 15,20, 18,86, 19,44, 21,03, 23,64, 24,83, 24,96, 26,97, 28,01, 28,135, 30,21, 33,53, 33,96, 38,56, 38,61, 41,05, 41,66, 46,84, 48,53, 55,24, 55,51, 56,31, 57,14, 59,75, 65,85, 70,60, 80,52, 114,11, 129,75, 130,33, 156,77, 158,67, 168,53, 170,21, 170,29, 170,73, 171,02, 174,34.

[00271] ESI-EM: calculado para C44H70N6O11: 858,51; encontrado m/z 859,5 (M+H)+. Exemplo 45 Síntese de Ciclo-N(Me)-O(Me)-Tyr-O-(Thr)-Ist-Hip-l eu-Pro (SAPL4)

[00272] Adicionou-se uma solução de ácido clorídrico em dioxano anidro (5,3 N, 122 ml, 647 mmoles) a um frasco contendo SAPL5 (8,79 g, 9,6 mmoles) em dioxano anidro (93 ml). A solução resultante foi agitada à temperatura ambiente por 8 h ou até o desaparecimento completo do material de partida. Quando a reação estava completada, a solução foi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi diluído com CHCh (100 ml) e concentrado novamente. A espuma branca bruta foi co-evaporada com CHCh/hexano, para dar SAPL4 (8,17 g, 100% de rendimento) como um sólido branco.

[00273] m/z (FAB) 838,3 [(M+Na)+, 28], 816,3 [(M+H)+, 100]. Exemplo 46 Síntese de Ciclo-N(Me)-Q(Me)-TYr-Q-(Thr)-lst-Aip-Leu-Pro (SNPL4)

[00274] Seguindo o procedimento descrito para a síntese de SAPL4, partindo de SNPL5 (40 mg, 43 μmoles), o composto do título foi obtido como um sólido branco (36 mg, quantitativo) após precipitação em EtiQ.

[00275] ESl-EM: calculado para C42H65N5Q11: 815,47; encontrado m/z 815,5 (M)+. Exemplo 47 Síntese de Ciclo-N(Me)-Q(Me)-TYr-Q-(Thr)-lst-Hiv-Leu-Pro (SHPL4)

[00276] Seguindo o procedimento descrito para a síntese de SAPL4, partindo de SHPL5 (500 mg, 0,58 mmoles), o composto do título foi obtido como um sólido branco (440 mg, quantitativo) após precipitação em Et2Q.

[00277] ESl-EM: calculado para C39H61N5Q10: 759,44; encontrado m/z 760,4 (M)+. Exemplo 48 Síntese de Ciclo-N(Me)-Q(Me)-Tyr-Q-(Thr)-lst-Val-Leu-Pro (SVPL4)

[00278] Seguindo o procedimento descrito para a síntese de SAPL4, partindo de SVPL5 (25 mg, 29 μmoles). Q composto do título foi obtido como um sólido branco (22 mg, quantitativo) após co- evaporação com MTBE.

[00279] ESl-EM: calculado para C39H62N6Q9: 758,5; encontrado m/z 759,5 (M)+. Exemplo 49 Z-N-metil-D-leucina (H1)

[00280] Ref: Coggins, J.R., Benoiton, N. L., Can. J. Chem. 1971, 49:1968 (1971).

[00281] Adicionou-se iodo-metano (8,55 ml, 136,1 mmoles) em gotas por meio de uma seringa a uma solução de Z-D-Leu-QH (10,32 g, 38,9 mmoles) em THF seco (120 ml) sob agitação a 0OC sob Ar. Depois, adicionou-se parceladamente hidreto de sódio (4,80 g, 120,6 mmoles, dispersão a 60% em óleo mineral), mantendo ao mesmo tempo a temperatura a 0°C. A mistura da reação foi agitada à temperatura ambiente por 24 h. 0 solvente foi eliminado sob pressão reduzida e o resíduo foi dissolvido em EtOAc (120 ml) e extraído com solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (300 ml). A fase aquosa foi lavada com EtOAc (2 x 100 ml), resfriada, adicionou-se ácido cítrico até pH 1-2 e a solução foi extraída com EtOAc (4 x 250 ml), seca com sulfato de sódio, filtrada e concentrada. 0 produto foi cristalizado em EtOAc:heptano 1:3, para obter H1 (7,84 g, 72%) como um sólido cristalino branco. p.f. 71-72°C. [a]D25 +23 (c 1, EtOH). Exemplo 50 Síntese de Z-didemnina A (SAPL3)

[00282] Adicionou-se DCM anidro (100 ml) e DMF anidra (50 ml) a um frasco contendo HATU (8,76 g, 23,0 mmoles), HOAt (3,17 g, 23,1 mmoles), SAPL4 (7,09 g, 15,8 mmoles) e H1 (3,486 g, 12,5 mmoles), sob Ar, e a solução foi agitada a -5°C (banho de gelo). Adicionou-se NMM (2,3 ml, 21,0 mmoles) em gotas por meio de uma seringa, mantendo ao mesmo tempo a temperatura em -5°C. A mistura da reação resultante foi agitada a -5°C por 2 h, e depois deixada atingir a temperatura ambiente por mais 14 h. O solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O produto bruto foi capturado com EtOAc (100 ml) e a solução foi filtrada, para remover algum precipitado. A solução foi lavada sucessivamente com solução aquosa a 10% de KHSO4 (2 x 100 ml), salmoura (100 ml), solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (100 ml), e enxaguada com salmoura (100 ml). A fase orgânica foi seca com sulfato de sódio e concentrada sob pressão reduzida, para produzir um sólido amarelo que foi purificado por cromatografia de coluna flash (sílica-gel, gradiente de hexano:EtQAc 2:1 até 1:1), para dar SAPL3 (7,98 g, 89% de rendimento) como um sólido branco. Rf = 0,18 (hexano:EtQAc 1:1).

[00283] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 0,79-1,00 (m, 24H), 1,10-2,25 (m,10H), 1,18 (d, J = 6,3, 3H), 1,25 (s, 3H), 1,32 (d, J 6,8, 3H), 2,28- 2,34(m, 1H), 2,49 (dd, J1= 10,7, J∑=17,0, 1H), 2,54 (s, 3H), 2,83 (s, 3H), 2,95(m, 1H), 3,02-3,24 (m, 2H), 3,31-3,40 (dd, J1=3,9, J2=14,1, 1H), 3,53-3,64 (m, 2H), 3,65-3,75 (m, 1H), 3,78 (s, 3H), 3,92-4,20 (m, 3H), 4,58 (t,J=4,8, 1H), 4,75-4,85 (m, 3H), 5,00 (m, 1H), 5,12-5,26 (m, 3H), 6,84 (d, J= 8,3, 2H), 6,86 (bs, 1H), 7,07 (d, J = 8,3, 2H), 7,21-7,44 (m, 6H), 7,92 (d,J = 8,3, 1H).

[00284] 13H RMN (75 MHz, CDCh) δ 11,57, 14,05, 15,18, 16,73, 18,52, 20,83, 22,62, 22,96, 23,66, 24,55, 24,81, 25,03, 25,28, 26,90, 27,86, 28,95, 31,28, 31,81, 33,91, 34,02, 38,51, 38,61, 47,03, 49,61, 55,21, 55,38, 55,50, 57,28, 66,10, 67,65, 67,93, 70,47, 81,44, 114,09, 127,83, 128,46, 129,74, 130,29, 158,60, 168,36, 169,59, 170,28, 171,20, 172,22, 204,80.

[00285] ESI-EM: calculado para C57H84N6Q14: 1.076,60; encontrado m/z 1.077,6 (M+H)+. Exemplo 51 Síntese de [Aip]3Z-didemnina A (SNPL3)

SNpL4 SNPL3

[00286] Seguindo o procedimento descrito para a síntese de SAPL3, partindo de SNPL4 (35 mg, 41 μmoles) e H1 (17 mg, 61 μmo- les), o composto do título foi obtido como um sólido branco (36 mg, 81%) após purificação por cromatografia de coluna flash (sílica-gel, gradiente de hexano:Et0Ac 1:4 até EtQAc puro). Rf = 0,30 (EtQAc).

[00287] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 0,74 (d, J = 6,3, 3H), 0,80-1,00 (m,2 1H), 1,10-2,25 (m, 10H), 1,21 (d, J = 5,8, 3H), 1,24 (s, 3H), 1,34 (d, J = 6,3, 3H), 2,61 (s, 3H), 2,86 (s, 3H), 3,12-3,25 (dd, J1=11,2, J2=14,1, 1H),3,27-3,36 (dd, J1=4,3, J2~14,1, 1H), 3,52-3,63 (m, 3H), 3,69-3,81 (m,2H), 3,80 (s, 3H), 4,09 (m, 3H), 4,47-4,63 (m, 3H), 4,764,92(m, 2H),5,00 (m, 1H), 5,08 (m, 1H), 5,18 (s, 2H), 6,85 (d, J = 8,3, 2H), 6,97 (d,J=6,97, 1H), 7,07 (d, J = 8,3, 2H),7,35 (bs, 5H), 7,48 (d, J 8,3, 1H), 7,67(d, J = 8,3, 1H), 7,87 (d, J = 10,2, 1H).

[00288] ESl-EM: calculado para C57H85N7O13: 1.075,62; encontrado m/z 1.076,6 (M+H)+. Exemplo 52 Síntese de [Hiv]3Z-didemnina A (SHPL3)

[00289] Seguindo o procedimento descrito para a síntese de SAPL3, partindo de SHPL4 (116 mg, 0,15 mmoles) e H1 (63 mg, 0,23 mmoles), o composto do título foi obtido como um sólido branco (86 mg, 52%) após purificação por cromatografia de coluna flash (sílica- gel, gradiente de hexano:EtOAc 1:1 até 1:2). Rf = 0,27 (hexano:EtOAc 1:2).

[00290] 1H RMN (300 MHz, CDCI3) δ 0,80-1,08 (m, 24H), 1,18 (m, 3H), 1,21(m, 4H), 1,58 (m, 2H), 1,74 (m, 1H), 1,80-2,42 (m, 6H), 2,56 (s, 3H), 2,80(s, 3H), 2,88 (m, 1H), 3,15 (m, 1H), 3,32 (m, 1H) 3,60 (m, 3H), 3,78 (s,3H), 3,83 (m, 1H), 3,98 (m, 1H), 4,42 (m, 1H), 4,58 (m, 1H), 4,75 (m, 1H), 4,84 (m, 1H), 4,92 (d, J =3,8, 1H), 5,00 (m, 1H), 5,20 (m, 2H), 6,65 (d,J=6,3, 1H), 6,84 (d, J - 8,3, 2H), 7,07 (d, J = 8,3, 2H), 7,34 (m, 5H), 7,50(d, J=6,7, 1H), 7,75 (d, J = 7,2, 1H).

[00291] 13C RMN (75 MHz, CDCI3) δ 11,58, 14,21, 15,39, 17,64, 18,63, 20,74, 21,88, 22,84, 23,48, 24,22, 24,75, 27,05, 27,84, 29,34, 29,99, 33,42, 33,86, 35,81, 38,52, 39,37, 46,63, 48,14, 55,13, 55,47, 55,53, 55,87, 56,92, 65,68, 67,72, 68,60, 70,61, 79,09, 113,95, 127,71, 127,86, 128,35, 129,63, 130,22, 158,48, 168,46, 169,36, 169,84, 170,29, 170,93, 171,00, 173,73.

[00292] ESI-EM: calculado para C54H80N6O13: 1.020,58; encontrado m/z 1.021,5 (M+H)+. Exemplo 53 Síntese de [VaI]3Z-didemnina A (SVPL3)

[00293] Seguindo o procedimento descrito para a síntese de SAPL3, partindo de SVPL4 (20 mg, 25 μmoles) e SAPLH1 (11 mg, 37,5 μmoles), o composto do título (19 mg, 72%) foi obtido como um sólido branco após purificação por cromatografia de coluna flash (síli- ca-gel, gradiente de hexano:EtQAc entre 1:1 e 1:5). Rf = 0,44 (EtQAc).

[00294] 1H RMN (300 MHz, CDCI3): δ 0,85-1,06 (m, 21 H), 1,10-1,4 (m, 5H),1,16 (d, J = 6,6, 3H), 1,50-1,63 (m, 6 H), 1,72-1,87 (m, 2 H), 1,88-2,40(m, 6H), 2,58 (s, 3H), 2,86 (s, 3H), 3,17 (dd, J1 = 10,5, J2 = 14,2, 1H), 3,36 (dd, J1 = 3,9, J2=14,2, 1H), 3,43 (bs, 1H), 3,51-3,72 (m, 4H), 3,79 (s, 3H), 3,98-4,16 (m, 1H), 4,40-4,47 (m, 2H), 4,58 (dd, J, = 5,7, J2=7,8, 1H),4,67-4,85 (m, 2H), 4,80-5,09 (m, 1H), 5,16 (d, J=12,4, 1H), 5,24 (d,J=12,4, 1H), 6,84 (d, J = 8,4, 1H), 6,90-6,94 (bs, 1H), 7,09 (d, J = 8,4,1H), 7,28-7,50 (m, 6H).

[00295] 13H RMN (75 MHz, CDCI3) δ 11,99, 14,37, 15,70, 18,55, 19,82, 21,40, 21,99, 22,81, 23,17, 23,98, 24,62, 25,00, 25,24, 27,28, 28,26, 29,93, 30,23, 33,58, 34,10, 36,16, 38,78, 41,98, 47,10, 48,79, 54,73, 55,45, 56,62, 57,40, 59,51, 66,02, 68,18, 70,37, 71,03, 114,30, 128,00, 128,27, 128,72, 129,86, 130,56, 136,49, 158,28, 158,85, 168,75, 169,27, 170,40, 170,75, 171,04, 173,91, 175,03.

[00296] ESI-EM: calculado para C54H81N7Q12: 1.019,59; encontrado m/z 1.020,5 (M+H)+. Exemplo 54 Síntese de Didemnina A (SAPL2)

[00297] Adicionou-se Pd(QH)2-C (20% de Pd, 3,29 g, 50% p/p) a uma solução de SAPL3 (6,59 g, 6,1 mmoles) em THF (isento de estabilizador, 262 ml) desgaseificada e purgada com argônio. A mistura foi agitada sob H2 (1 atm) por 20 h, e depois filtrada em um filtro de teflon de 0,45 μm e concentrada sob pressão reduzida, para dar um sólido branco. Adicionou-se CHCh, e a mistura foi concentrada novamente sob pressão reduzida, para dar SAPL2 (5,51 g, 96%) como um sólido branco. Rf = 0,22 (CHCktBuQH 90:10).

[00298] 1H RMN (500 MHz, CDCI3) δ 0,82-0,92 (m, 24H), 1,11-1,19 (m, 1H),1,22 (d, J = 6,9, 3H), 1,32 (d, J = 6,8, 3H), 1,30-1,35 (m, 1H), 1,35-1,63(m, 6H), 1,71-1,81 (m, 2H), 1,93-2,07 (m, 1H), 2,07-2,18 (m, 2H), 2,28-2,34 (m, 1H), 2,49-2,52 (dd, J1 = 11, J2 = 10,5, 1H), 2,54 (s, 3H), 2,72 (bs,3H), 2,79 (bs, 3H), 2,86-2,94 (bs, 1H), 2,72-2,79 (bd, J = 10,5, 1H), 3,15-3,18 (dd, J1 = 14,5, J2 = 10,5, 1H), 3,33-3,36 (dd, J1 = 14,5, J2 = 4,5, 1H),3,54-3,57 (dd, J1 = 10,5, J2 = 4,5, 1H), 3,56-3,61 (m, 1H), 3,78 (s, 3H), 3,96-4,00 (m, 1H), 4,03-4,08 (m, 1H), 4,11-4,80 (bs, 1H), 4,56-4,62 (m,1H), 4,68-4,81 (m, 3H), 4,99-5,01 (q, J = 3,5, 1H), 5,16 (bs, 1H), 6,83 (d,J 8,5, 2H), 6,95 (bs, 1H), 7,07 (d, J = 8,5, 2H), 7,21-7,25 (bs, 1H), 7,95(bs, 1H).

[00299] 13C RMN (75 MHz, CDCI3) δ 11,55, 14,95, 15,26, 16,82, 18,56, 20,89, 22,00, 23,08, 23,76, 24,58, 24,85, 25,10, 27,12, 29,35, 29,35, 29,65, 29,69, 31,36, 33,96, 34,14, 38,51, 38,64, 40,14, 55,38, 55,56, 57,31, 66,17, 67,85, 70,58, 80,96, 80,98, 81,57, 114,12, 130,33, 158,63, 168,41, 169,33, 169,70, 170,38, 171,24, 172,28, 172,28, 172,93, 204,83.

[00300] m/z (FAB) 944,2 [(M+H)+, 100]. Exemplo 55 Síntese de [Aip]3-didemnina A (SNPL2)

[00301] Adicionou-se Pd(QH)2-C (20% de Pd, 20 mg, 60% p/p) a uma solução de SNPL3 (33 mg, 35 μmoles) em uma mistura de IPA/H2O (2 ml:1 ml) desgaseificada e purgada com argônio. A mistura foi agitada sob H2 (1 atm) por 20 h, e depois filtrada em um filtro de teflon de 0,45 μm e concentrada sob pressão reduzida, para dar um sólido branco. Adicionou-se IPA (2 x 5 ml) e a solução foi concentrada novamente sob pressão reduzida, para dar SNPL2 (32 mg, 97%) como um sólido branco.

[00302] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 0,78 (d, J=6,8, 3H), 0,82-0,92 (m,21H), 1,11-2,58 (m, 21H), 2,41 (s, 3H), 2,62 (s, 3H), 2,75-3,00 (m, 4H), 3,15-3,18 (dd, J1 = 10,7, J2 = 14,7, 1H), 3,33-3,36 (dd, J1 = 14,5, J2= 4,2,1 H), 3,51-3,78 (m, 3H), 3,78 (s, 3H), 3,92 (m, 1H), 4,01-4,20 (m, 2H),4,50 (t, J=4,8, 1H), 4,59 (t, J=6,3, 1H), 4,75-4,91 (m, 2H), 5,05 (m, 1H),6,84 (d, J 8,3, 2H), 7,07 (d, J = 8,3, 2H), 7,70 (d, J=5,8, 1H), 7,78 (d,J=9,7, 1H), 7,89 (d, J=6,3, 1H), 8,14 (d, J=7,8, 1H).

[00303] ESI-EM: calculado para C49H79N7O11: 941,58; encontrado m/z 942,7 (M+H)+. Exemplo 56 Síntese de [Hiv]3Z-didemnina A (SHPL2)

[00304] Seguindo o procedimento descrito para a síntese de SAPL2, partindo de SHPL3 (86 mg, 0,08 mmoles), o composto do título foi obtido como um sólido branco (73 mg, 97%). Rf = 0,36 (CHCl3:MeOH 95:5).

[00305] 1HRMN (300 MHz, CDCh) δ 0,82-1,02 (m, 24H), 1,12-2,42 (m, 16H), 2,54 (s, 3H), 2,64 (s, 3H), 2,95 (m, 1H), 3,15 (m, 1H), 3,35 (m, 1H), 3,52-3,90 (m, 5H), 3,78 (s, 3H), 4,04 (m, 1H), 4,38 (m, 1H), 4,48 (m, 1H), 4,57 (m, 1H), 4,88 (m, 1H), 4,91 (d, J=5,3, 1H), 5,22 (m, 1H), 6,84 (d, J=8,3, 2H), 7,07 (d, J=8,3, 2H), 7,54 (d, J=9,2, 1H), 7,60 (d, J=9,4, 1H), 8,68 (d, J=6,2, 1H).

[00306] 13H RMN (75 MHz, CDCI3) δ 11,78, 14,07, 16,13, 17,90, 18,56, 20,98, 21,74, 22,94, 23,60, 24,44, 24,78, 25,06, 27,17, 27,92, 30,09, 33,34, 33,89, 38,71, 40,30, 46,86, 48,22, 54,99, 55,23, 56,97, 57,21, 65,81, 68,53, 70,37, 79,47, 114,03, 129,76, 130,29, 158,57, 168,18, 169,40, 169,86, 170,20, 170,92, 174,16.

[00307] ESl-EM: calculado para C46H74N6O11: 886,54; encontrado m/z 887,2 (M+H)+. Exemplo 57 Síntese de [VaI]3Z-didemnina A (SVPL2)

[00308] Seguindo o procedimento descrito para a síntese de SAPL2, partindo de SVPL3 (19 mg, 18 μmoles), o composto do título foi obtido como um sólido branco (16 mg, 97%). Rf = 0,36 (CHCh: MeOH 95:5).

[00309] 1H RMN (300 MHz, CDCh): δ -0,82-1,02 (m, 2 1H), 1,85 1,32(m, 9H), 1,42-1,83 (m, 7H), 1,87-2,23 (m, 8H), 2,34 (bs, 3H), 2,60 (b s, 1H),2,85 (dd, J1 = 5,7, J2=7,8, 1H), 3,16 (dd, J1 = 10,8, J2 = 14,2, 1H), 3,37 (dd, J1 = 4,2, J2=14,2, 1H), 3,48 (bs, 1H), 3,57-3,68 (m, 4H), 3,79 (s, 3H), 3,95-4,15 (m, 2H), 4,45-4,52 (m, 2H), 4,61 (dd, J1 = 4,8, J2=7,8, 1H), 4,77 (t, J = 9,9, 1H), 5,02-5,15 (m, 1H), 6,84 (d, J = 8,4, 1H), 7,09 (d, J = 8,4, 1H), 7,59-7,62 (m, 2H), 7,78-7,81 (m, 2H).

[00310] 13C RMN (75 MHz, CDCI3) δ 11,98, 14,46, 16,14, 18,50, 19,83, 21,50, 22,55, 22,81, 22,95, 23,46, 23,98, 27,33, 28,27, 28,33, 29,94, 33,71, 34,16, 38,94, 41,93, 42,11, 45,72, 47,18, 48,94, 53,64, 55,03, 55,50, 56,72, 57,55, 59,22, 59,56, 66,16, 70,71, 114,36, 118,53, 120,85, 130,02, 130,58, 168,71, 169,74, 170,23, 171,18, 175,10.

[00311] ESI-EM: calculado para C46H75N7O10: 885,56; encontrado m/z 856,5 (M+H)+. Exemplo 58 Sintese de Pir-Pro-OBn (F2)

[00312] Adicionou-se NMM (4,55 ml, 43,8 mmoles) em gotas por meio de uma seringa a uma solução de H-Pro-OBn-HCl (10,0 g, 41,3 mmoles) em DMF anidra (50 ml) a 0°C sob Ar, mantendo ao mesmo tempo a temperatura a 0°C. Depois, adicionou-se parceladamente HOBt (18,98 g, 124 mmoles). Depois de 15 min, adicionou-se em gotas, por meio de uma seringa, ácido pirúvico (8,61 g, 97,79 mmoles) dissolvido em DCM anidro (10 ml), e ao mesmo tempo mantendo a temperatura abaixo de 3°C. Finalmente, adicionou-se em gotas, por meio de um funil compensado, DCC (22,17 g, 107,46 mmoles) dissolvido em DCM (80 ml). A mistura foi deixada atingir a temperatura ambiente (2 h) e agitou-se por mais 12 h. A mistura da reação foi filtrada para remover o precipitado e a solução foi concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi dissolvido em EtOAc (500 ml) e lavado sucessivamente com solução aquosa a 10% de KHSO4 (100 ml), solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (400 ml) e salmoura (400 ml), seca com sulfato de sódio e filtrado. 0 solvente foi eliminado sob pressão reduzida e o resíduo foi capturado com ACN (100 ml), resfriado até -30°C por 2 h e filtrado para remover o excesso de N,N-dicloro- hexil-uréia. O óleo marrom resultante (15,82 g) foi purificado por cromatografia de coluna flash (sílica-gel, gradiente de hexano puro até hexano:EtOAc 2:1), para produzir F2 (9,06 g, 66% de rendimento) co-mo um sólido branco. Rf = 0,25 (hexano:EtOAc 2:1).

[00313] IV (filme, DCM) v 3035, 2956, 2884, 1744, 1645, 1499, 1443, 1383, 1352, 1273, 1175, 1092 cm-1.

[00314] 1H RMN (200 MHz, CDCh) δ 1,75-2,40 (m, 4H), 2,37 (s, 3H), 2,44 (s,3H), 3,45-3,82 (m, 2H), 4,52-4,61 (m, 1H), 4,88-4,97 (m, 1H), 5, 14-5,15 (m, 2H), 5,17-5,20 (m, 2H), 7,34 (bs, 5H).

[00315] 13C RMN (50 MHz, CDCh) δ 22,11, 25,22, 26,5, 27,10, 28,53, 31,48, 47,53, 44,81, 59,76, 67,02, 67,31, 128,11, 128,64, 135,24, 170,1, 170,2, 198,0.

[00316] m/z (CI) 293 [(M+NH√, 100]; analítico: calculado para C15H17NO4: C, 65,44; H, 6,22; N, 5,08. Encontrado: C, 65,04; H, 6,01; N, 5,11. Exemplo 59 Síntese de Pir-Pro-OH (F1)

[00317] Uma solução de F2 (8,63 g, 31,34 mmoles) e paládio sobre carvão ativado (10%, 86 mg, 10% p/p) em MeOH desgaseificado (125 ml) foi colocada em um reator Parr de alta pressão e purgada com gás nitrogênio (2 x 2,04 atm ou (2 x 30 psi)). A mistura da reação foi selada sob hidrogênio a 2,04 atm (30 psi) e agitada a 23°C por 4,5 h. A mistura foi filtrada através de um filtro de teflon de 0,45 μm, e concetrada sob pressão reduzida. O resíduo (6,29 g) foi revestido sobre SiO2 e carregado no topo de uma coluna (LC 5,5 x 10,0 cm) e eluído com he- xano:EtOAc 1:2, para produzir F1 (4,64 g, 80%) como um sólido branco. Rf = 0,22 (hexano:EtOAc 1:1). [a]D20 -92,4 (c 0,12, CHCh). p.f. 6769°C.

[00318] IV (filme, DCM) v 3450-3000, 2961-2870, 1719, 1643, 1615, 1452, 1354, 1205, 1175, 1094, 1018 cm-1.

[00319] 1H RMN (200 MHz, CDCh) δ 1,85-2,45 (m, 4H), 2,43 e 2,47 (s, 3H), 3,42-3,85 (m, 2H), 4,52-4,61 (m, 1H), 4,88-4,97 (m, 1H), 7,217,40 (bs, 1H).

[00320] 13C RMN (75 MHz, CDCh) δ 22,03, 25,23, 26,48, 27,00, 28,23, 31,44, 47,57, 48,37, 59,61, 59,39, 162,47, 162,52, 175,04, 176,29, 197,18

[00321] m/z (CI) 220 [(M+N2Hy)+, 15] 203 [(M+NH√, 100], 186 [(M+H)+, 16; analítico: calculado para C8H11NO4: C, 51,88; H, 5,99; N, 7,56. Encontrado: C, 52,13; H, 5,85; N, 7,65. Exemplo 60 Síntese de Aplidina (SAPL1)

[00322] Adicionou-se uma solução de DIPCDI (1,806 mg, 14,3 mmoles) em DCM (10 ml) a uma solução de F1 gelada (3°C) (4,908 g, 26,5 mmoles), sob nitrogênio, e a solução foi agitada a 3°C por 60 min. Depois, transferiu-se uma solução de SAPL2 (5,0 g, 5,3 mmoles) em DCM (50 ml) por intermédio de uma cânula para a solução anterior sob pressão de nitrogênio. Depois de 90 h (4 dias) nesta temperatura, adi-cionou-se solução aquosa 0,1 N de HCl (50 ml), e a mistura da reação foi agitada por 15 min. Depois, a camada orgânica foi decantada e fra-cionada entre solução aquosa a 5% de KHS0>(50 ml), solução aquosa de bicarbonato de sódio a 5% (50 ml) e salmoura (25 ml). A fase orgânica foi seca com sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O sólido amarelo-pálido resultante foi purificado por cromatografia de coluna (Lichroprep RP-18, 40-63 μm, gradiente de MeOH:HiO:TFA entre 70:30:0,1 e 90:10:0,1), para produzir SAPL1 (5,4 g, 93%) (mistura de rotâmeros). Rf = 0,40 e 0,28 (DCM:EtOAc 2:3), 0,52 e 0,45 (CHCkMeOH 9,5:0,5); [a]D -95,9 (c 1,8, CHCh).

[00323] 1H RMN (500 MHz, CDCh) 50,84-0,93 (m, 24H), 1,16-1,70 (m, 9H),1,72-1,81 (m, 1H), 1,81-1,90 (m, 1H), 1,90-2,24 (m, 6H), 2,302,39 (m,1H), 2,49 (s, 3H) 2,51 (s, 3H), 2,55 (s, 3H), 2,52-2,64 (m, 1H), 2,85 (bs,1H), 2,94 (bs, 1H), 3,09 (s, 3H), 3,13 (s, 3H), 3,15-3,18 (m, 1H), 3,2 1-3,26 (dd, J1 = 15,8, J2=6,1, 1H), 3,32-3,36 (dd, J1 = 14,5, J2 = 4,1, 1H), 3,54-3,60 (m, 1H), 3,66-3,72 (m, 1H), 3,78 (s, 3H), 3,803,87(m, 1H), 3,96-3,99 (m, 1H), 4,03-4,11 (m, 2H), 4,15-4,23 (2q, J = 7,5, 1H)> 4,55-4,57(2d, J1 = 5,5, J2=2,2, 1H), 4,59-4,62 (t, 1H), 4,564,64 (dd, J, = 6,5, J2 =2,5, 1H), 4,68-4,71 (t, 1H), 4,76-4,81 (t, 1H), 5,10-5,18 (m, 1H), 5,17 (d, J= 3,5, 1H), 5,18 (d, J = 3,5, 1H), 5,27-5,31 (m, 2H), 6,82 (d, J = 8,5, 2H), 6,83 (d, J = 8,5, 2H), 7,05 (d, J = 8,5, 2H), 7,06 (d, J = 8,5, 2H), 7,02 (d, J=7,1, 1H), 7,16 (d, J 9,5, 1H), 7,17 (d, J = 9,5, 1H), 7,59 (d, J = 5,5,1H), 7,77 (d, J = 9,5, 1H), 7,83 (d, J = 9,4, 1H).

[00324] 13H RMN (75 MHz, CDCI3) δ 11,63, 11,68, 14,11, 14,70, 15,26,15,30, 16,00, 16,20, 16,88, 16,93, 18,62, 18,85, 20,89, 20,94, 21,62, 21,36, 23,44, 23,57, 23,84, 23,93, 24,66, 24,77, 24,85, 25,02, 26,22, 26,34, 27,09, 27,6, 27,06, 27,30, 27,95, 27,99, 29,33, 29,69, 31,31-31,37, 33,97, 34,06, 36,02, 36,45, 38,68, 38,76, 41,01, 41,15, 47,00, 48,42, 48,48, 48,86, 49,20, 49,51, 54,65, 54,75, 55,26, 55,58, 55,61, 57,14, 57,27, 57,47, 57,79, 66,24, 67,80, 67,99, 70,34, 70,67, 81,0, 81,52, 114,10, 130,31, 156,0, 158,65, 161,1, 161,60, 168,20, 169,53, 169,59, 170,45, 171,25, 171,80, 171,95, 172,26, 172,33, 197,5, 204,80, 204,85.

[00325] m/z (FAB) 1.132,6 [(M+Na)+, 42], 1.110,8 [(M+H)+, 100]. Exemplo 61 Síntese de [Aip]3-aplidina (SNPL1)

[00326] Seguindo o procedimento descrito para a síntese de SAPL1, partindo de SNPL2 (10 mg, 10,6 μmoles) e F1 (10 mg, 54 μmoles), o composto do título foi obtido como um sólido branco (8 mg, 68%) após purificação por HPLC (HyperPrep PEP 100 C18, isocrática ACN:H2Ü 85:15 (vazão 7 ml/min, 250x21 mm a 720 nm, Rf= 10,5 e 12,0 min).

[00327] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 0,80-1,03 (m, 24H), 1,11-1,70 (m, 9H),1,72-1,81 (m, 1H), 1,81-1,90 (m, 1H), 1,90-2,24 (m, 6H), 2,302,39 (m,1H), 2,53 (s, 3H) 2,55 (s, 3H), 2,65 (s, 3H), 2,52-2,66 (m, 2H), 2,94 (m,1H), 3,07 (s, 3H), 3,11 (s, 3H), 3,15-3,18 (m, 1H), 3,22-3,31 (dd, J2 = 4,3, J2=15,1, 1H), 3,54-3,60 (m, 2H), 3,67-3,92 (m, 2H), 3,80 (s, 3H), 3,98 (m,1H), 4,13-4,29 (m, 3H), 4,45-4,75 (m, 4H), 4,81 (t, J=9,7, 1H), 5,09 (m,1H), 5,18 (m, 1H), 5,26-5,44 (m, 3H), 6,84 (d, J = 8,3, 2H), 7,07 (d, J =8,3, 2H), 7,30 (d, J = 8,3, 1H), 7,36 (d, J = 8,3, 1H), 7,68 (d, J = 9,7, 1H),7,87 (d, J = 4,3, 1H), 8,09 (d, J = 9,7, 1H), 8,28 (d, J = 10,2, 1H).

[00328] ESl-EM: calculado para C57H88N8O14: 1.108,64; encontrado m/z 1.110,3 (M+H)+. Exemplo 62 Síntese de [Hiv]3-aplidina (SHPL1)

[00329] Seguindo o procedimento descrito para a síntese de SAPL1, partindo de SHPL2 (72 mg, 0,081 mmoles) e F1 (75 mg, 0,405 mmoles), o composto do título foi obtido como um sólido branco (68 mg, 79%) após purificação por cromatografia de coluna (Lichroprep RPC18, gradiente de ACN:H2O:TFA entre 70:30:0,5 a 90:10:0,5) Rf = 0,49 (ACN:H2O:TFA 90:10:1).

[00330] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 0,80-1,10 (m, 24H), 1,12-1,50 (m, 18H), 1,50-2,30 (m, 6H), 2,42 (m, 1H), 2,53 (s, 3H) 2,55 (s, 3H), 2,57 (s, 3H), 2,96-3,40 (m, 3H), 3,05 (s, 3H), 3,10 (s, 3H), 3,63 (m, 5H), 3,78 (s, 3H), 3,90 (m, 1H), 4,01 (m, 1H) 4,30 (m, 1H), 4,63 (m, 1H), 4,69 (m, 1H) 4,86 (m, 1H), 5,02 (d, J = 4,8, 1H), 5,09 (m 1H), 5,20 (m, 1H), 5,30 (m1H), 6,83 (d, J = 8,3, 2H), 6,89 (d, J = 6,3, 1H), 7,07 (d, J = 8,3, 2H), 7,29(d, J = 9,7, 1H), 7,34 (m, 2H), 7,43 (d, J = 5,3, 1H), 7,74 (d, J = 9,7, 1H) 7,80 (d, J = 10,2, 1H).

[00331] 13C RMN (75 MHz, CDCh) δ 12,06, 14,22, 14,30, 16,49, 16,76, 17,84, 19,17, 21,08, 21,41, 21,54, 22,54, 23,79, 23,94, 24,05, 24,16, 24,82, 24,96, 25,05, 25,98, 26,45, 27,37, 27,57, 28,21, 28,59, 30,31, 30,83, 31,56, 31,62, 33,74, 34,24, 36,02, 36,25, 38,91, 38,96, 39,46, 39,86, 46,92, 48,44, 48,71, 49,06, 54,95, 55,49, 57,16, 57,68, 58,23, 59,13, 66,16, 66,28, 69,10, 70,83, 71,14, 79,12, 114,31, 129,96, 130,12, 130,59, 158,86, 168,69, 168,81, 169,75, 169,82, 170,18, 170,45, 170,52, 170,69, 170,84, 171,21, 171,28, 172,47, 173,17, 174,66, 174,82, 197,63, 201,38.

[00332] ESI-EM: calculado para C54H83N7O14: 1.053,60; encontrado m/z 1.054,9 (M+H)+. Exemplo 63 Sintese de [Val]3-aplidina (SVPL1)

[00333] Seguindo o procedimento descrito para a sintese de SAPL1, partindo de SVPL2 (10 mg, 11 μmoles) e F1 (10,5 mg, 57 μmoles), o composto do titulo foi obtido como um sólido branco (8 mg, 69%) após purificação por HPLC (HyperPrep PEP 100 C18, isocrática ACN:H2O 85:15 (vazão: 7ml/min, 250x21 mm, a 270 nm, tR = 10,9 e 12,3 min).

[00334] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 0,82-1,02 (m, 24H), 1,13-1,38 (m, 9H), 1,55 (m, 2H), 1,67-1,81 (m, 4H), 1,95-2,02 (m, 3H), 2,10-2,17 (m, 2H), 2,26-2,39 (m, 2H), 2,56 (s, 3H), 2,57 (s, 3H), 2,58 (s, 3H), 2,74-2,92 (m,1H), 3,10 (s, 3H), 3,15 (s, 3H), 3,20 (m, 1H), 3,36 (dd, J1 = 4,4, J2= 14,2, 1H), 3,49-3,72 (m, 5H), 3,79 (s, 3H), 3,97-4, 13 (m, 2H), 4,38 (dd, Ji = 4,6, Ji= 14,2, 1H), 4,49 (m, 1H), 4,60 (m, 1H), 4,684,81 (m, 2H), 5,11 (m,1H), 5,26-5,30 (m, 1H), 5,33-5,40 (m, 1H), 6,84 (d, J= 7,8, 2H), 7,08 (d, J = 8,3, 2H), 7,36-7,52 (m, 2H), 7,48 (d, J=9,6, 1H), 7,61 (d, J=6,8, 1H).

[00335] ESI-EM: calculado para C54H84N8O13: 1.052,62; encontrado m/z 1.053,6 (M+H)+. Exemplo 64 Síntese de [Hiv]3-[isobutiril]8-didemnina A (8ISHPL1)

[00336] Adicionou-se DIPEA (3 μl, 16,8 μmoles) e cloreto de isobuti- rila (1,4 μl, 13,4 μmoles) a uma solução de SHPL2 (10 mg, 11,2 μmoles) em DCM (200 μl) a 0°C sob Ar. Depois de 3 h a 22°C, adicionou- se DCM (3 ml) e a mistura foi lavada sucessivamente com solução aquosa 0,1 N de HCl (2 ml), solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (2 ml) e salmoura (2 ml), seca com sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob vácuo. A purificação do resíduo por HPLC (HyperPrep PEP 100 C18, isocrática, ACN:H2O 85:15 (vazão 7 ml/min, 250x21 mm, a 270 nm, tR = 19 min) produziu o composto do título (10 mg, 94%) como um sólido branco.

[00337] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 0,82-1,10 (24H, m), 1,13-1,65 (18H, m), 1,72-2,58 (6H, m), 2,56 (s, 3H), 2,89 (s, 3H), 2,92 (m, 2H), 3,13 (m, 2H), 3,36 (dd, J1 = 4,6, J2 = 15,6, 1H), 3,54-3,73 (m, 3H), 3,78 (s, 3H), 3,91(m, 2H), 4,40 (m, 1H), 4,60 (m, 1H), 4,89 (m, 1H), 4,99 (d, J= 5,3, 1H), 5,03 (m, 1H), 5,20 (m, 1H), 6,73 (d, J = 9,3, 1H), 6,84 (d, J= 9,6, 2H), 7,08(d, J= 9,6, 2H), 7,55 (d, J= 8,6, 1H), 7,82 (d, J= 11, 1H).

[00338] 13H RMN (75 MHz, CDCI3) δ 11,78, 14,63, 15,69, 17,92, 19,03, 19,31, 19,66, 21,03, 22,29, 23,19, 23,85, 24,71, 25,14, 27,27, 28,22, 30,39, 30,51, 31,15, 33,80, 34,25, 35,61, 38,85, 39,63, 46,98, 48,51, 53,29, 53,65, 55,49, 56,01, 56,35, 57,26, 66,07, 69,07, 70,94, 79,33, 114,31, 130,08, 130,60, 158,84, 168,79, 169,75, 170,34, 170,68, 171,36, 171,73, 174,02, 179,84.

[00339] ESl-EM: calculado para C50H80N6O12: 956,58; encontrado mlz 957,5 (M+H)+. Exemplo 65 Síntese de [Val]3-[isobutiril]8-didemnina A (8ISVPL1)

[00340] Seguindo o procedimento descrito para a síntese de 8ISHPL1, partindo de SVPL2 (20 mg, 22,6 μmoles). O composto do título (19 mg, 88%) foi obtido após purificação por HPLC (HyperPrep PEP 100 C18, isocrática ACN:H2O 85:15 (vazão: 7mllmin, 250x21 mm, a 270 nm, Rt= 19 min).

[00341] 1H RMN (300 MHz, CDCh): δ 0,81-1,02 (m, 24 H), 1,14-1 38 (m,5H), 1,15 (d, J = 6,6, 3H), 1,19 (d, J = 6,6, 3H), 1,38-1,80 (m, 7H), 1,80-2,40 (m, 6 H), 2,57 (s, 3H), 2,58-2,64 (m, 1H), 2,85-2,92 (m, 1H), 2,93 (s,3H), 3,16 (dd, J1 = 10,5, J2=14,4, 1H), 3,36 (dd, J1 = 4,5, J2=14,4, 1H), 3,39 (bs, 1H), 3,56 (dd, 1H, J = 4,5, 10,8), 3,59-3,72 (m, 3H), 3,78 (s,3H), 4,01 (td, J1 = 3,3, J2 =10,2, 1H), 4,39-4,47 (m, 2H), 4,58 (dd, Ji = 5,7, J2 = 7,5, 1H), 4,79 (t, J = 9,9, 1H), 5,03-5,14 (m, 2H), 6,84 (d, J = 8,4, 2H), 7,04 (d, J = 7,8, 1H), 7,08 (d, J = 8,4, 1H), 7,36 (d, J = 9,0, 1H), 7,45 (d, J = 10,2, 1H), 7,51 (d, J = 10,2, 1H).

[00342] 13H RMN (75 MHz, CDCI3) δ 180,24, 175,10, 173,18, 171,14, 170,72, 170,42, 169,38, 168,73, 158,87, 130,60, 130,02, 114,33, 71,31, 70,50, 66,11, 59,47, 57,42, 56,56, 55,51, 54,93, 53,84, 48,83, 47,13, 41,94, 38,94, 35,67, 34,17, 33,63, 31,32, 31,10, 29,96, 28,32, 27,25, 25,30, 25,05, 24,82, 24,01, 23,22, 21,42, 19,88, 19,72, 11,25, 18,51, 15,60, 14,32, 11,96.

[00343] ESI-EM: calculado para C50H81N7O11: 955,6; encontrado m/z 956,8 (M+H)+. Exemplo 66 Sintese de [Hiv]3-[butiril]8-didemnina A (8BSHPL1)

[00344] Seguindo o procedimento descrito para a sintese de 8ISHPL1, partindo de SHPL2 (10 mg, 11,2 μmoles). O composto do titulo (9 mg, 84%) foi obtido como um sólido branco após purificação por HPLC (HyperPrep PEP 100 C18, isocrática ACN:H2O 85:15 (vazão: 7ml/min, 250x21 mm, a 270 nm, tR = 18,6 min).

[00345] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 0,82-1,10 (m, 24H), 1,11-1,72 (m, 18H), 1,75-2,51 (m, 6H), 2,56 (s, 3H), 2,84 (s, 3H), 2,92 (m, 2H), 3,15 (m, 2H), 3,35 (dd, J1 = 5,0, J2= 15,6, 1H), 3,54-3,77 (m, 3H), 3,79 (s, 3H), 3,91 (m, 2H), 4,40 (m, 1H), 4,60 (m, 1H), 4,89 (m, 1H), 4,98 (d, J1 = 6,0, 1H), 5,04 (m, 1H), 5,20 (m, 1H), 6,78 (d, J1 = 9,6, 1H), 6,84 (d, J1 = 9,6, 2H), 7,08 (d, J1 = 9,6, 2H), 7,54 (d, J1 = 9,6, 1H), 7,82 (d, J1 = 10,6, 1H).

[00346] 13H RMN (75 MHz, CDCI3) δ 11,82, 14,15, 14,55, 15,72, 17,96, 18,67, 19,01, 21,05, 22,37, 23,13, 23,84, 24,71, 25,14, 27,30, 28,21, 29,92, 30,38, 30,63, 33,78, 34,25, 35,69, 35,97, 38,85, 39,61, 46,98, 48,52, 53,27, 55,49, 55,99, 56,25, 57,27, 66,07, 69,07, 70,96, 79,40, 114,31, 130,08, 130,59, 158,85, 168,78, 169,73, 170,42, 170,64, 171,36, 171,65, 174,07, 175,79.

[00347] ESI-EM: calculado para C50H80N6O12: 956,60; encontrado m/z 957,8 (M+H)+. Exemplo 67 Síntese de [Hiv]3-[hexanoil]8-didemnina A (8HSHPL1)

[00348] Seguindo o procedimento descrito para a síntese de 8ISHPL1, partindo de SHPL2 (10 mg, 11,2 μmoles), o composto do título (9 mg, 82%) foi obtido como um sólido branco após purificação por HPLC (HyperPrep PEP 100 C18, isocrática ACN:H2O 85:15 (vazão: 7ml/min, 250x21 mm, a 270 nm, tR = 27,8 min).

[00349] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 0,82-1,10 (m, 24H), 1,11-1,72 (m, 22H), 1,80-2,51 (m, 6H), 2,56 (s, 3H), 2,84 (s, 3H), 2,93 (m, 2H), 3,14 (m, 2H), 3,35 (dd, J1 = 4,4, 82= 14,1, 1H), 3,54-3,76 (m, 3H), 3,79 (s, 3H), 3,91 (m, 2H), 4,41 (m, 1H), 4,60 (m, 1H), 4,88 (m, 1H), 4,98 (d, J1 = 5,3, 1H), 5,03 (m, 1H), 5,19 (m, 1H), 6,76 (d, J,= 8,7, 1H), 6,84 (d, J,= 8,7, 2H), 7,08 (d, J1 = 8,7, 2H), 7,51 (d, J1 = 8,8, 1H), 7,81 (d, J1 = 9,7, 1H).

[00350] 13H RMN (75 MHz, CDCh) δ 11,59, 13,94, 14,34, 15,49, 17,73, 18,77, 20,81, 22,14, 22,46, 22,90, 23,60, 24,47, 24,69, 24,90, 27,08, 27,97, 30,14, 30,40, 31,54, 33,53, 33,76, 34,02, 35,47, 38,62, 39,40, 46,76, 48,28, 53,04, 55,26, 55,78, 55,90, 57,04, 65,84, 68,82, 70,72, 79,17, 114,07, 129,84, 130,36, 158,61, 168,54, 169,51, 170,15, 170,41, 171,12, 171,42, 173,86, 175,75.

[00351] ESl-EM: calculado para C52H84N6O12: 984,61; encontrado m/z 985,8 (M+H)+. Exemplo 68 Síntese de isobutiril-Pro-Obn

[00352] Adicionou-se NMM (680 μl, 6,21 mmoles) sob argônio a uma solução de H-Pro-OBn-HCl (500 mg, 2,07 mmoles) em DCM (10 ml) a 0°C. Depois de 10 min, adicionou-se cloreto de isobutirila (240 μl, 2,27 mmoles), e a mistura da reação foi deixada aquecer até 20°C e agitada por 5 h. A mistura foi filtrada e o filtrado lavado sucessivamente com solução aquosa 1 N de ácido clorídrico (15 ml), solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (10 ml) e salmoura (10 ml), e depois seco com sulfato de sódio, filtrado e concentrado sob pressão reduzida, para produzir 560 mg (98%) do composto do título. Rf = 0,42 (he- xano:EtOAc 1:1).

[00353] 1H-RMN (300 MHz, CDCh) δ 1,20-1,40 (2d, 6H), 1,90-2,35 (m, 4H), 2,35 (q, 1H), 3,40-3,80 (m, 2H), 4,30 (m, 1H), 5,20 (m, 2H), 7,40 (m, 5H). Exemplo 69 Síntese de isobutiril-Pro-QH

[00354] Adicionou-se Pd/C a 10% (43 mg, de isobutiril-Pro-QBn (430 mg, 1,56 mmol) em MeQH desgaseificado, e depois purgou-se sucessivamente com Ar e borbulhou-se com hi-drogênio. A mistura foi agitada sob H2 por 14 h, e depois desgaseifica- da e filtrada. A solução foi concentrada e o resíduo cristalizado em MTBE/hexano, para dar 140 mg (48%) do composto do título como um sólido branco.

[00355] 1H-RMN (300 MHz, CDCh) δ 1,20 (m, 6H), 1,90-2,10 (m, 3H), 2,50 (m, 1H), 2,70 (q, 1H), 3,40-3,70 (m, 2H), 4,60 (dd, 1H).

[00356] ESI-EM: calculado para C9H15NQ3: 185,11; encontrado m/z 186,1 (M+H)+. Exemplo 70 Síntese de [Hiv]3-[isobutiril]9-aplidina (9ISHPL1)

[00357] Adicionou-se DIPCDI (5 μl, 32 μmoles) a uma solução de isobutiril-Pro-QH (10 mg, 54 μmol) em DCM (150 μl) a 0oC. Continuou- se a agitação por 60 min, e depois, a mistura foi transferida para um frasco contendo SHPL2 (10 mg, 11,2 μmoles) em DCM (150 μl). Depois de 4 dias a 2-4°C, a mistura foi diluída com DCM (2 ml) e lavada sucessivamente com solução aquosa 0,1 N de HCl, (1 ml) e salmoura (1 ml), e a fase orgânica foi seca com sulfato de sódio, filtrada e con-centrada. 0 resíduo foi purificado por HPLC (HyperPrep PEP 100 C18, isocrática ACN:Hi0 85:15 (vazão: 7ml/min, 250x21 mm, a 270 nm, Rt = 13 e 14 min), para produzir 9ISHPL1 (9 mg, 72%) como um sólido branco.

[00358] 1H RMN (300 MHz, CDCla) δ 0,82-1,10 (m, 24H), 1,12-1,50 (m, 18H), 1,52-2,70 (m, 10H), 2,56 (s, 3H), 3,00-3,44 (m, 4H), 3,08 (s, 3H), 3,55-3,72 (m, 5H) 3,78 (s, 3H), 4,00 (m, 3H), 4,26 (m, 1H), 4,62 (m, 2H), 4,86 (m, 1H), 5,02 (d, J= 5,3, 1H), 5,30 (m, 2H), 6,84 (d, J = 9,0, 2H), 7,07 (d, J= 9,0, 2H), 7,29 (d, J= 11,0, 1H), 7,80 (d, J= 9,0, 1H); 7,88 (d, J 11, 1H).

[00359] 13H RMN (75 MHz, CDCh) δ 12,04, 14,44, 16,91, 17,94, 18,96, 19,03, 19,15, 21,07, 21,59, 23,87, 24,10, 24,89, 25,08, 26,04, 27,54, 28,21, 28,87, 30,33, 31,61, 32,64, 33,77, 34,24, 36,19, 39,07, 39,33, 39,81, 46,87, 47,52, 48,45, 54,74, 55,49, 56,20, 57,08, 58,50, 66,41, 69,13, 71,48, 79,16, 114,27, 130,30, 130,59, 158,80, 168,55, 169,88, 170,86, 171,06, 171,22, 173,63, 174,92, 176,19.

[00360] ESI-EM: calculado para C55H87N7O13: 1.053,64; encontrado m/z 1.054,6 (M+H)+. Exemplo 71 Síntese de [Val]3-[isobutiril]9-aplidina (9ISVPL1)

[00361] Seguindo o procedimento descrito para a síntese de 9ISHPL1, partindo de SVPL2 (10 mg, 11,2 μmoles), o composto do título (9 mg, 77%) foi obtido como um sólido branco após purificação por HPLC (HyperPrep PEP 100 C18, isocrática ACN:H2O 85:15 (vazão: 7ml/min, 250x21 mm, a 270 nm, tR= 15,3 min).

[00362] 1H RMN (300 MHz, CDCL3): δ 0,82-1,01 (m, 24H), 1,14 1,37(m, 12H), 1,148-2,35 (m, 8H), 2,55 (s, 3H), 2,57-2,68 (m, 1H), 2,77-2,83 (m, 1H), 3,12 (s, 3H), 3,19-3,23 (m, 1H), 3,35-3,41 (m, 2H), 3,52-3,56 (m, 1H), 3,58-3,70 (m, 3H), 3,78 (s, 3H), 4,03-4,13 (m, 1H), 4,33-4,35 (m, 1H), 4,44-4,48 (m, 1H), 4,55-4,66 (m, 2H), 4,70-4,83 (m, 1H), 5,35-5,39 (m, 2 H), 6,82 (d, J = 8,4, 2H), 7,06 (d, J = 8,4, 2H), 7,25 (bs, 2H), 7,37 (d,10,5, 1 H), 7,46 (d, J = 8,7, 1 H), 7,60 (d, J = 9,3, 1 H), 8,07 (bs, 1 H),

[00363] 13C RMN (75 MHz, CDCI3) δ 12,10, 14,44, 16,84, 18,63, 18,95, 19,92, 21,31, 21,61, 23,91, 24,05, 24,86, 25,00, 25,30, 26,06, 27,41, 28,33, 28,93, 30,00, 31,76, 32,65, 33,59, 31,16, 36,21, 39,17, 41,71,42,19, 47,08, 47,57, 48,88, 54,37, 54,65, 55,50, 56,15, 57,33, 58,70, 59,33, 66,45, 70,92, 71,54, 114,29, 130,28, 130,59, 158,82, 168,41, 170,08, 170,52, 170,69, 171,03, 172,65, 173,80, 175,68, 176,42.

[00364] ESI-EM Calculada para C55H88N80O12: 1052,65, Encontrada m/z: 1053,8 (M+H)+. Exemplo 72 Síntese de Z-NVa-Pro-Ome

[00365] Seguindo o procedimento descrito para a síntese de F2, partindo de Z-NVa-OH (261 mg, 1,04 μmol), H-Pro-OMe-HCl (156,6 mg, 0,94 mmoles), o composto do título (315 mg, 87%) foi obtido como um óleo incolor após purificação por cromatografia de coluna flash (sílica, hexano:Et0Ac, gradiente 3:1 até 1:1). Rf = 0,42 (hexano:Et0Ac 1:1)

[00366] 1H RMN (300 MHz, CDCI3): δ 0,97 (t, J = 6,9, 2H), 1,44 (seis, J = 7,5,2H), 1,53-1,65 (m, 1H), 1,68-1,77 (m, 1H), 1,82-2,09 (m, 3H), 2,17-2,24 (m, 1H), 3,43-3,80 (m, 2H), 3,71 (s, 3H), 4,45-4,55 (m, 2H), 5,07 (s, 2H), 5,51 (d, J = 8,4, 1H), 7,32-7,35 (m, 5H). Exemplo 73 Síntese de NVa-Pro-0H

[00367] Adicionou-se Li0H (130 μl, 15% p/p/) a uma solução de Z- NVa-Pro-OMe (36 mg, 99 μmoles) em uma mistura de THF e Me0H (130 μl: 130 μl) a 0°C. Depois de agitar por 6 h, a mistura da reação foi fracionada entre H20 (3 ml) e dietil-éter (3 x 2 ml). A fase orgânica foi então extraída com bicarbonato de sódio (3 x 2 ml). As fases aquosas combinadas foram neutralizadas (pH = 5) com solução aquosa 0,1 N de HCl, e fracionadas com Et20 (3 x 3 ml). A fase orgânica foi seca com sulfato de sódio, filtrada e concentrada, para dar o composto do título (36 mg, quantitativo) como um óleo incolor.

[00368] 1HRMN (300 MHz, CDCh): δ 0,96 (t, J = 6,9, 2H), 1,41 (seis, J = 7,4, 2H), 1,53-1,65-1,77 (m, 2H), 1,82-2,10 (m, 3H), 2,17-2,24 (m, 1H), 3,52-3,81 (m, 2H), 4,45-4,58 (m, 2H), 5,07 (bs, 2H), 5,81 (d, J = 8,4, 1H), 7,30-7,35 (m, 5H), 7,41 (bs, 1H).

[00369] ESI-EM: calculado para C18H24N205: 348,17; encontrado m/z 349,2 (M+H)+. Exemplo 74 Síntese de [ZNVa-Pro]9-aplidina (9NVSAPL2)

[00370] Seguindo o procedimento descrito para a síntese de SAPL1, partindo de SAPL2 (18 mg, 19 βmoles) e Z-NVa-Pro-0H (34 mg, 97 imoles), o composto do título (16 mg, 66%) foi obtido como um sólido branco após purificação por HPLC (HyperPrep PEP 100 C18, isocrática ACN:Hi0 85:15 (vazão: 7ml/min, 250x21 mm, a 270 nm, Rt = 29 min).

[00371] 1HRMN (300 MHz, CDCh): δ 0,84-0,96 (m, 27H), 1,12-1,85 (m, 19H), 2,00-2,25 (m, 7H), 2,30-2,40 (m, 1H), 2,54 (s, 3H), 2,62 (dd, J1 =10,5, J2 = 17,7, 1H), 2,93 (d, 4,2, 1H), 3,14 (s, 3H), 3,14-3,20 (m, 1H), 3,28-3,34 (m, 2H), 3,50-3,67 (m, 4H), 3,77-3,80 (m, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,82-3,91 (m, 1H), 4,00-4,17 (m, 2H), 4,27 (dd, J1 = 6,3, J2=13,2, 1H), 4,43-4,51 (m, 2H), 4,58-4,63 (m, 1H), 4,69-4,75 (m, 1H), 4,77-4,82 (m,1H), 5,07 (d, 1H, J = 12,9, 2H), 5,13 (d, J = 12,9, 1H), 5,32-5,41 (m, 2H), 6,07 (d, J = 8,7, 1H), 6,83 (d, J 8,4, 2H), 7,06 (d, J = 8,4, 2H), 7,17 (d, J1 = 9,9, 1H), 7,32 (m, 5H), 7,83 (d, J = 9,0, 1H).

[00372] 13C RMN (75 MHz, CDCh) δ 11,68, 13,74, 14,56, 15,24, 16,39, 16,85, 18,61, 20,94, 21,26, 23,34, 23,70, 24,76, 24,90, 25,02, 26,00, 27,17, 27,81, 28,54, 31,29, 31,40, 33,30, 33,85, 33,86, 36,19, 38,62, 38,84, 41,31, 46,91, 47,21, 49,38, 49,49, 52,50, 54,96, 55,24, 55,25, 56,50, 57,17, 57,96, 62,53, 66,40, 67,93, 70,64, 81,37114,04, 127,89, 127,77, 128,32, 129,97, 130,29, 136,84, 156,72, 158,55, 168,48, 169,36, 169,58, 170,52, 17 1,27, 171,71, 172,54, 173,22, 205,08.

[00373] ESI-EM: calculado para C67HiooN8θi6: 127,73; encontrado m/z 1.273,7 (M+H)+. Exemplo 75 Síntese de [Hiv]3-[ZNVa-Pro]9-aplidina (9NVSHPL2)

[00374] Seguindo o procedimento descrito para a síntese de SAPL1, partindo de SHPL2 (10 mg, 11,2 μmoles) e Z-NVa-Pro-0H (20 mg, 56 μmoles), o composto do título (8 mg, 60%) foi obtido como um sólido branco após purificação por HPLC (HyperPrep PEP 100 C18, isocrática ACN:H20 85:15 (vazão: 7ml/min, 250x21 mm, a 270 nm, Rt = 26,7 min).

[00375] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 0,82-1,10 (m, 24H), 1,12-1,80 (m, 22H), 1,82-2,35 (m, 6H), 2,42 (m, 1H), 2,56 (s, 3H), 2,96-3,38 (m, 4H) 3,10 (s, 3H), 3,48-3,72 (m, 5H), 3,78 (s, 3H), 3,88 (m, 1H), 4,01 (m, 1H), 4,18 (m, 1H), 4,47 (m, 1H), 4,68 (m, 2H), 4,87 (m, 1H), 5,02 (d, J1= 5,3,1H), 5,08 (m, 2H), 5,28 (m, 1H), 5,42 (m, 1H), 6,10 (d, J = 8,3, 1H), 6,84(d, J= 8,3, 2H), 7,07 (d, J= 8,3, 2H), 7,31 (m, 6H), 7,72 (d, J= 4,3, 1H),7,78 (d, J= 8,7, 1H).

[00376] 13C RMN (75 MHz, CDCL3) δ 12,06, 13,88, 14,22, 16,85, 17,76, 18,89, 19,18, 21,12, 21,47, 23,72, 23,98, 25,08, 26,25, 27,57, 28,15, 28,79, 30,32, 31,61, 33,45, 33,72, 34,07, 35,95, 38,92, 39,59, 39,90, 46,87, 47,44, 48,46, 52,76, 55,21, 55,49, 56,77, 57,17, 58,37, 66,41, 66,65, 69,22, 71,14, 79,07, 114,24, 127,87, 128,00, 128,56, 130,25, 130,55, 157,00, 158,79, 168,82, 169,86, 170,36, 170,58, 170,77, 171,30, 171,86, 173,28, 174,94.

[00377] ESI-EM: calculado para C^HgeNsOis: 1216,7; encontrado m/z 1.217,5 (M+H)+. Exemplo 76 Sintese de [NVa-Pro]9-aplidina (9NVSAPL1)

[00378] Uma mistura desgaseificada de 9NVSAPL2 (10 mg, 7,9 kmoles) e Pd/C (10%, 5 mg) em IPA:HiO (0,2 ml:0,1 ml) foi saturada (e mantida a 1 atm) com hidrogênio sob agitação por 14 h. Depois, a mistura foi filtrada (teflon, 0,45 μm) e concentrada sob vácuo, para produzir o composto do titulo (9,9 mg, quantitativo) como um sólido branco.

[00379] 1H RMN (300 MHz, CDCI3) δ 0,95-0,95 (m, 27H), 1,19-1,51 (m,19H), 1,50-2,45 (m, 7H), 2,59-2,93 (m, 1H), 2,57 (s, 3H), 2,57-2,90 (m, 3H), 2,91-2,95 (m, 1H), 3,14 (s, 3H), 3,15-3,40 (m, 3H), 3,52-3,79 (m, 4H), 3,79 (s, 3H), 4,45-4,52 (m, 1 H), 4,61-4,65 (m, 1H), 4,70-4,95 (m, 2H), 5,17 (d, J = 3,3, 1H), 5,36-5,39 (m, 2H), 6,94 (d, J = 9,1, 2H), 7,96(d, J H9,7, 2H), 7,19 (d, J = 10,2, 1H), 7,92 (d, J = 9,0, 1H), 7,907,95 (m,1H).

[00380] ESI-EM: calculado para C59H40N9O14: 1.139,69; encontrado m/z 1.139,7 (M+H)+. Exemplo 77 Sintese de [Hiv]3-[NVa-Pro]9-aplidina (9NVSHPL1)

[00381] Seguindo o procedimento descrito para a síntese de 9NVSAPL1, partindo de 9NVSHPL2 (10 mg, 8,2 μmoles), o composto do título (8 mg, quantitativo) foi obtido como um sólido branco.

[00382] 1H RMN (300 MHz, CDCL3) δ 0,82-1,10 (m, 30H), 1,12-1,85 (m, 22H), 1,92-2,35 (m, 6H), 2,42 (m, 1H), 2,56 (s, 3H), 3,10-3,45 (m, 4H), 3,10 (s, 3H), 3,50-3,70 (m, 5H), 3,78 (s, 3H), 3,82 (m, 1H), 4,01 (m, 1H), 4,26 (m, 1H), 4,65 (m, 1H), 4,64 (m, 1H), 4,88 (m, 1H), 5,02 (d, J= 5,3,1H), 5,32 (m, 2H), 6,84 (d, J = 8,3, 2H), 7,07 (d, J = 8,3, 2H), 7,38 (d, J= 8,7, 1H), 7,60 (d, J= 4,3, 11H), 7,80 (d, J= 9,3, 1H).

[00383] 13C RMN (75 MHz, CDCI3) δ 12,03, 14,13, 14,30, 16,80, 17,81, 18,72, 19,15, 21,09, 21,55, 23,73, 23,96, 25,07, 26,16, 27,55, 28,17, 28,72, 29,91, 30,33, 31,52, 33,80, 34,17, 36,00, 38,94, 39,51, 39,84, 46,88, 47,51, 48,45, 55,01, 55,49, 56,91, 57,15, 58,10, 66,37, 69,17, 71,10, 79,12, 114,29, 130,21, 130,57, 158,82, 163,66, 168,91, 169,86, 170,38, 170,75, 170,82, 171,30, 173,22, 174,79.

[00384] ESl-EM: calculado para C56H90N8O13: 1.082,66; encontrado m/z 1.083,7 (M+H)+. Exemplo 78 Síntese de [Hiv]3-[L-Lac(OTBDMS)]9-aplidina [(9LSHPL2(L)]

[00385] Seguindo o procedimento descrito para a síntese de SAPL1, partindo de SHPL2 (10 mg, 11,2 μmoles) e (L)-Lac-(OTBDMS) -Pro-OH (17 mg, 56 μmoles), o composto do título (9 mg, 68%) foi obtido como um sólido branco após purificação por HPLC (HyperPrep PEP 100 C18, gradiente ACN:H2O 85:15 até 100:0 (vazão: 7ml/min, 250x21 mm, a 270 nm, Rt= 30,1 min).

[00386] 1H RMN (300 MHz, CDCI3) δ 0,08 (s, 3H), 0,10 (s, 3H), 0,82-1,10 (m, 24H), 1,11-1,72 (m, 18H), 1,75-2,51 (m, 6H), 2,41 (m, 1H), 2,56 (s, 3H), 3,00-3,40 (m, 5H), 3,11 (s, 3H), 3,53-3,82 (m, 3H), 3,79 (s, 3H), 3,91 (m, 2H), 4,02 (m, 1H), 4,27 (m, 1H), 4,50 (m, 1H), 4,63 (m, 2H), 4,87 (m, 1H), 5,01 (d, J= 4,8, 1H), 5,27 (m, 2H), 6,84 (d, J= 8,7, 2H), 7,07 (d, J= 8,7,2H), 7,29 (d, J= 9,7, 1H), 7,63 (d, J= 5,8, 1H), 7,88 (d, J= 9,7, 1H),

[00387] 13H RMN (75 MHz, CDCI3) δ 4,26, -4,12, 12,04, 14,40, 16,91, 17,97, 19,14, 20,60, 21,11, 21,66, 23,82, 24,11, 24,96, 25,08, 26,11, 26,37, 27,53, 28,18, 28,37, 30,33, 31,69, 33,75, 34,19, 36,23, 39,00, 39,36, 39,81, 46,87, 47,64, 48,45, 54,91, 55,37, 55,48, 56,81, 57,08, 58,37, 66,38, 69,14, 69,89, 71,42, 79,19, 82,66, 114,23, 130,36, 130,59, 158,77, 168,43, 469,86, 170,72, 171,01, 171,21, 172,03, 173,62,174,91.

[00388] ESI-EM: calculado para C60H99N7O14SÍ: 1.169,7; encontrado m/z 1.170,9 (M+H)+. Exemplo 79 Síntese de [Hiv]3-[D-Lac(OTBDMS)]9-apIidina [(9LSHPL2(D)]

[00389] Seguindo o procedimento descrito para a síntese de SAPL1, partindo de SHPL2 (10 mg, 11,2 μmoles) e (D)-Lac-(OTBDMS) -Pro-OH (17 mg, 56 μmoles), o composto do título (9 mg, 68%) foi obtido como um sólido branco após purificação por HPLC (HyperPrep PEP 100 C18, gradiente ACN:H2O 85:15 até 100:0 (vazão: 7ml/min, 250x21 mm, a 270 nm, RT= 30,4 min).

[00390] 1H RMN (300 MHz, CDCI3) δ 0,03 (m, 3H), 0,06 (m, 3H) 0,87 (s, 9H), 0,82-1,10 (m, 24H), 1,11-1,72 (m, 18H), 1,75-2,30 (m, 6H), 2,41 (m, 1H), 2,56 (s, 3H), 3,00-3,40 (m, 5H), 3,06 (s, 3H), 3,56 (m, 1H), 3,65 (m, 2H), 3,78 (s, 3H), 3,90 (m, 1H), 4,01 (m, 1H), 4,17 (m, 1H), 4,25 (m, 1H), 4,39(m, 1H), 4,61, (m, 2H), 4,86 (m, 1H), 5,00 (d, J= 4,8, 1H), 5,25 (m, 2H), 6,84 (d, J= 8,3, 2H), 7,07 (d, J= 8,3, 2H), 7,29 (d, J= 9,7, 1H), 7,74 (d, J=5,3, 1H), 7,87 (d, J= 9,7, 1H),

[00391] 13H RMN (75 MHz, CDCI3) δ -4,87, -4,84, 12,04, 14,38, 16,89, 17,94, 19,14, 20,24, 21,08, 21,60, 23,85, 24,12, 24,90, 25,06, 25,13, 26,01, 26,53, 27,53, 27,83, 28,20, 30,33, 31,51, 33,76, 34,20, 36,16, 38,99, 39,35, 39,82, 46,87, 47,02, 48,46, 54,79, 55,42, 55,48, 57,08, 57,18, 58,28, 66,39, 69,11, 71,43, 72,61, 79,18, 114,25, 130,29, 130,59, 158,79, 168,45, 169,86, 170,77, 170,81, 170,97, 171,20, 172,53, 173,67, 174,84.

[00392] ESI-EM: calculado para C60H40N7O14SÍ: 1.169,7; encontrado m/z 1.170,8 (M+H)+. Exemplo 80 Sintese de [VaI]3-[L-Lac(OTBDMS)]9-apIidina [(9LSVPL2(L)]

[00393] Seguindo o procedimento descrito para a sintese de SAPL1, partindo de SVPL2 (10 mg, 11,2 μmoles) e (L)-Lac-(OTBDMS) -Pro-OH (17 mg, 56 μmoles), o composto do titulo (9 mg, 68%) foi obtido como um sólido branco após purificação por HPLC (HyperPrep PEP 100 C18, isocrático ACN:H2O 85:15 (vazão: 7ml/min, 250x21 mm, a 270 nm, Rt= 17,8 min).

[00394] 1H RMN (300 MHz, CDCh): δ 0,14 (s, 6H), 0,71-1,06 (m, 27H), 1,10-1,42 (m, 10H), 1,43-1,84 (m, 8H), 1,85-2,40 (m, 11H), 2,57 (s, 3H), 2,80 (d, J = 14,7, 1H), 3,15 (s, 3H), 3,15-3,23 (m, 1H), 3,333,42 (m, 2H), 3,54(dd, J1 = 4,2, J2=10,8, 1H), 3,58-3,69 (m, 3 H), 3,79 (s, 3H), 3,88-3,90 (m,1H), 4,05-4, 12 (bt, 1H), 4,32 (bs, 1h), 4,43-4,68 (m, 4H), 4,77 (t, J = 10,5,1H), 5,31-5,35 (m, 2H), 6,83 (d, J 8,4, 2H), 7,08 (d, J H 8,7, 2H), 7,39(d, J = 9,9, 1H), 7,45 (d, J = 9,0, 1H), 7,60 (d, J = 10,5, 1H), 7,83 (d, J =4,5, 1H).

[00395] 13C RMN (75 MHz, CDCI3) δ-4,67, -4,49, 11,84, 14,13, 16,67, 18,19, 18,41, 19,68, 20,48, 21,15, 21,40, 23,61, 23,92, 24,72, 24,80, 25,06, 25,88, 26,24, 27,17, 28,04, 28,13, 29,78, 31,57, 33,33, 33,81, 35,99, 38,84, 41,56, 41,95, 46,83, 47,52, 48,68, 54,09, 54,64, 55,26, 56,63, 57,13, 58,36, 59,12, 66,20, 70,10, 70,57, 71,27, 77,20, 114,01, 130,13, 130,36, 158,55, 168,09, 169,76, 170,07, 170,48, 170,77, 172,21, 172,33, 173,58, 175,45,

[00396] ESI-EM: calculado para C59H94N8O14: 1.168,72; encontrado m/z 1.169,8 (M+H)+. Exemplo 81 Síntese de [Hiv]3-[L-Lac]9-apIidina [9LSHPL1(L)]: Tamandarina A

[00397] Adicionou-se TBAF (50 μl, 1 M, em THF) a uma solução de 9LSHPL2(L) (16 mg, 14 μmoles) em THF (500 μl/anh.) a 0OC sob Ar. Depois de 1 h a 22OC, a mistura foi concentrada sob vácuo e o produto bruto foi purificado por cromatografia de coluna flash (sílica-gel, gradi-ente de DCM:MeOH de 1% até 5%), para produzir o composto do títu- lo (813 mg, 88%) como um sólido branco.

[00398] Os dados experimentais foram publicados: Fenical, W. et al., J. Org. Chem. 2000 65:782-792.

[00399] 1H RMN (300 MHz, CDCh): δ 0,82-0,96 (m, 18H), 1,02 (d, J=3,4,3H), 1,04 (d, J=3,4, 3H), 1,14-2,28 (m, 14H), 1,24 (s, 3H), 1,34 (d, J=6,8, 3H), 1,43 (d, J=6,8, 3H), 2,44 (dd, J1 =7,8, J2=17,1, 1H), 2,58 (s, 3H), 3,00 (bs, 1H), 3,10 (s, 3H), 3,14-3,3 1 (m, 2H), 3,37-3,43 (m, 2H), 3,56-3,72 (m, 5H), 3,79 (s, 3H), 3,90 (t, J=7,8, 1H), 4,02 (dt, J1 =3,4, J2=9,8, 1H), 4,25(d, J= 3,9, 1H), 4,30 (t, J= 6,8, 1H), 4,37 (dd, J1 =7,3, J2=8,3, 1H), 4,65(m, 1H), 4,71 (t, J1 = 7,4, 1H), 4,87 (t, J=11,2, 1H), 5,03 (d, J=4,9, 1H), 5,29 (dd, J1 =3,4, J2=11,7, 1H), 5,42 (m, 1H), 6,83 (d, J=8,3, 2H), 7,07 (d,J=8,3, 2H), 7,34 (d, J= 9,8, 1H), 7,48 (d, J= 5,4, 1H), 7,76 (d, J=9,8, 1H).

[00400] ESl-EM: calculado para C54H85N7O14: 1.055,6; encontrado m/z 1.056,7 (M+H)+. Exemplo 82 Síntese de [Hiv]3-[D-Lac]9-aplidina [(9LSHPL1(D)]

[00401] Seguindo o procedimento descrito para a síntese de 9LSHPL2(D), partindo de 9LSHPL2(D) (20 mg, 17 μmoles) e TBAF (50 μl, 1 M em THF), o composto do título (14 mg, 78%) foi obtido como um sólido branco após purificação por cromatografia de coluna flash (sílica-gel, gradiente de DCM:MeOH 1% até 5%).

[00402] 1H RMN (300 MHz, CDCh): δ 0,78-1,08 (m, 18H), 1,02 (d, J=3,9,3H), 1,04 (d, J=3,4, 3H), 1,10-2,36 (m, 14H),1,20 (d, J=6,3, 3H), 1,34 (d,J=6,3, 3H), 1,37 (d, J=6,3, 3H), 2,38-2,50 (dd, Ji=7,8, J2=17,5, 1H), 2,56(s, 3H), 3,10 (s, 3H), 3,13-3,20 (m, 1H), 3,22-3,28 (m, 1H), 3,37-3,42 (dd,J1=3,9, J2=4,3, 1H), 4,61-4,68 (m, 3H), 3,69-3,76 (m, 3H), 3,77 (m, 1H),3,78 (s, 3H), 3,90 (t, J=7,8, 1H), 3,97-4,07 (m, 1H), 4,26 (m, 1H), 4,41 (q,J=6,3, 1H), 4,63 (m, 1H), 4,71 (m, 1H), 4,86 (t, J=10,7, 1H), 5,01 (d, J=4,8, 1H), 5,21-5,37 (m, 2H), 6,83 (d, J=8,3, 2H), 7,06 (d, J=8,3, 2H),7,41 (m, 2H), 7,77 (d, J=9,2, 1H).

[00403] ESI-EM: calculado para C54H85N7O14: 1.055,62; encontrado m/z 1.056,6 (M+H)+. Exemplo 83 Sintese de [Val]3-[L-Lac]9-aplidina [(9LSVPL1(L)]

[00404] Seguindo o procedimento descrito para a sintese de 9LSHPL1, partindo de 9LSVPL2 (5 mg, 4,3 μmoles), o composto do titulo (4 mg, 88%) foi obtido como um sólido branco após purificação por cromatografia de coluna flash (silica-gel, gradiente de DCM:MeOH 1% até 5%).

[00405] 1H RMN (300 MHz, CDCh): δ 0,82-1,02 (m, 18H), 1,16-1,42 (m, 4H), 1,32 (d, J = 3,0, 3H), 1,40 (d, J = 6,6, 3H), 1,56-1,83 (m, 8H), 1,95-2,34 (m, 11H), 2,58 (s, 3H), 2,84 (d, J = 14,7, 1H), 3,15 (s, 3H), 3,15-3,23 (m, 1H), 3,36-3,42 (m, 1H), 3,55 (dd, J1 = 9,0, J2 =10,5, 2H), 3,64-3,66 (m, 3H), 3,95 (dd, J1 = 3,3, J2=9,9, 1H), 4,08 (td, J1 = 7,5, J2=17,1, 1H), 4,32 (bs, 1H), 4,41 (dd, J1 = 6,6, J2=9,9, 1H), 4,48 (dd, J1 = 5,1, J2=10,5, 1H),4,61 (dd, Ji=6,0, J2=6,6, 1H), 4,69-4,80 (m, 2H), 5,29-5,35 (m, 1H), 5,57(m, 1H), 6,84 (d, J = 8,1, 2H), 7,08 (d, J = 8,7, 2H), 7,37 (d, J = 3,9, 1H),7,40 (d, J = 5,4, 1H), 7,60 (d, J = 10,8, 1H), 7,72 (d, J 3,9, 1H).

[00406] ESI-EM: calculado para C54H86N8O13: 1.054,63; encontrado m/z 1.055,8 (M+H)+. Síntese da unidade espiro[4,4]nonano: Exemplo 84 Síntese de N-[(2R)-2-alil-N-(terc-butóxi-carbonil)propil]-D-leucina (9)

[00407] Adicionou-se HOAt (980 mg, 7,2 mmoles), D-Leu- OBn-pTsOH (2,65 g, 12 mmoles), NMM (1,21 g, 12 mmoles) e DCC (1,48 g, 7,2 mmoles) a uma solução resfriada (0°C) de 8 (1,53 g, 6 mmoles) em DCM anidro (33 ml). A mistura foi agitada por 2 h a 0°C e depois por 12 h à temperatura ambiente; adicionou-se mais D-Leu- OBn-pTsOH (0,66 g, 3 mmoles) e NMM (0,30 g, 3 mmoles), e a mistura foi agitada por mais 3 h. A mistura foi filtrada e o solvente foi removido sob vácuo. O resíduo foi dissolvido em EtOAc (30 ml) e lavado sucessivamente com solução saturada de bicarbonato de sódio (2 x 25 ml), solução de ácido cítrico a 10% (2 x 25 ml) e salmoura (25 ml). A solução orgânica foi seca com sulfato de sódio e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna flash (sílica-gel, hexano:EtOAc 6:1), para produzir 9 (2,63 g, 96%) como um óleo incolor. [a]D20 12,4 (c 1, MeOH). A HPLC [coluna 'Bondpack C18 (Waters), 10 m, 3,9x300 mm, vazão: 1 ml/min, a 214 nm, elu- ente ACN:0,05% de TFA (40:60); tR= 9,08 min].

[00408] 1H-RMN (300 MHz, DMSO-d6) δ 0,86 (m, 6H), 1,37 (s, 9H), 1,55-1,72 (m, 5H), 2,00 (m, 2H), 2,64 (m, 1H), 2,86 (m, 1H), 3,15 (m, 1H), 3,55(m, 1H), 4,41 (m, 1H), 5,05-5,11 (m, 4H), 5,63-5,72 (m, 1H), 7,28-7,35(m, 5H).

[00409] 13C-MNR (75 MHz, acetona-d?) δ 21,6, 22,8, 24,6, 28,3, 34,7, 38,2, 41,3, 49,38, 51,0, 66,9, 69,7, 80,1, 119,1, 128,3, 132,7, 153,9, 172,8.

[00410] Referência para Síntese de 8: a) Seebach, D. et al., J. Am. Chem. Soc. 105:5390-5398 (1983); b) Genin, M.J. et al., J. Org. Chem. 58:2334-2337 (1993). Exemplo 85 Síntese de [5R,8RS)-1-(terc-butóxi-carbonil)-7-[(1R)-1-benzilóxi- carbonil-3-metil-butil]-8-hidróxi-6-oxo-1,7-diazaespiro[4,4]nonano (10)

[00411] Adicionou-se uma solução de 0sÜ4 (2,5% em peso, 2,9 ml) em terc-butanol a uma solução de 9 (1,56 g, 3,42 mmoles) em Me0H:H20 2:1 (108 ml) sob argônio. Continuou-se agitando por 10 min e adicionou-se Nal04 (2,195 g, 10,3 mmoles). Depois de agitar por 24 h, a mistura da reação foi diluída com água (100 ml) e extraída com Et0Ac (3 x 50 ml). 0s extratos orgânicos combinados foram lavados com salmoura (50 ml), secos com sulfato de sódio e concentrados sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado por cromatografia de coluna flash (sílica, hexano:Et0AC, gradiente de 80:20 até 0:100%), para produzir os diastereoisômeros 10a e 10b (combinados: 1,17 g, 76%) como um sólido branco.

[00412] 10a: *HPLC [Column Novapack C18 (água), 3,9 x 150 mm, ^=1ml/min, λ=214nm, eluente: CH3CN/0,05%TFA, (40/60)] Rt=14,45min. P.f.: 140-141oC. [U]20D -4O (c 1, Me0H).

[00413] 1H-RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 0,90 (m, 6H), 1,29 (s, 9H), 1,64-2,30 (m, 9H); 2,68 (dd, 1H, J,= 6, J1=13, 1H), 3,37 (m, 2H), 4,51 (dd, 1H), 5,13 (d, J=15, 2H), 5,79 (t, J= 5, 2H), 7,40 (m, 5H).

[00414] 13C-MNR (75 MHz, acetona-d6) δ 21,8, 23,8, 24,1, 24,9, 28,5, 39,6, 40,8, 41,5, 48,5, 66,8, 79,4, 79,8, 81,2, 129,1, 129,3, 128,6, 171,7,172,0.

[00415] ESI-EM: calculado para C25H36N2O6: 460,26; encontrado m/z 483,4 (M+Na)+.

[00416] 10b: HPLC [Column Novapack C18 (água), 3,9 x 150 mm, ^=1ml/min, λ=214nm, eluente: CHsCN/0,05%TFA, (40/60)] Rt=18,75min. P.f.: 134-135oC. [α]20D+ 26 (c 1,2, MeOH).

[00417] 1H-RMN (300 MHz, CDCh) δ 0,90 (6H, m), 1,40 (9H, s), 1,50-2,60 (9H, m), 3,40 (2H, m), 4,20-5,40 (5H, m), 7,40 (5H, m).

[00418] 13C-RMN (75 MHz, acetona-d6) δ 21,3, 23,2, 24,1, 24,9, 28,3, 38,9, 40,2, 42,5, 47,9, 53,2, 66,8, 77,5, 79,4, 80,6, 129,1, 171,2, 174,1.

[00419] ESI-EM: calculado para C25H36N2O6: 460,26; encontrado m/z 483,5 (M+Na)+. Exemplo 86 Sintese do sal triflúor-acetato de (5R)-7-[(1R)-1-benzilóxi-carbonil-3- metil-butil]-6-oxo-1,7-diazaespiro[4,4]nonano (11)

[00420] Adicionou-se NaBH4 (106 mg, 2,8 mmoles) a uma solução de 10 (430 mg, 0,93 mmol) em TFA (10 ml). A mistura foi agitada por 2 h, e depois, a reação foi concentrada sob pressão reduzida. O residuo foi fracionado entre água (5 ml) e DCM (20 ml). A fase orgânica foi se- ca com sulfato de sódio e concentrada sob vácuo, para produzir 11 como um óleo laranja (318 mg, quantitativo). [α]D20+15 (c 1, MeQH).

[00421] 1H-RMN (300 MHz, acetona-d6) 0,91 (m, 6H), 1,50 (m, 1H), 1,66-1,94 (m, 2H), 2,11-2,72 (m, 6H), 3,48-3,72 (m, 4H), 4,74 (dd, J = 61 J2= 15, 1H), 5,18 (s, 2H), 7,37 (m, 5H).

[00422] 13C-RMN (75 MHz, acetona-d6) δ 21,2, 23,2, 23,9, 25,5, 30,2, 34,6, 38,0, 42,2, 46,6, 53,9, 67,6, 69,6, 129,3, 161,1, 161,6, 170,9, 172,6.

[00423] ESI-EM: calculado para C20H28N2Q3: 344,21; encontrado m/z 345,3 (M+H)+. Exemplo 87 Síntese de (5R)-1-(terc-butóxi-carbonil)-7-[(1 R)-1-carbóxi-3-metil-butil]- 6-oxo-1,7-diazaespiro[4,4]nonano (12)

[00424] Adicionou-se hidróxido de tetrametil-amonio (TMAH) pen- taidratado (158 mg, 0,87 mmoles) e Boc2Q (144 mg, 0,66 mmoles) a uma solução de 11 (150 mg, 0,44 mmoles) em ACN (5 ml). Depois de 6 h, adicionou-se mais TMAH-5H2Q (158 mg) e Boc2Q (192 mg). A reação foi agitada por 2 dias, e depois, ela foi fracionada entre água (10 ml) e DCM (25 ml). A fase aquosa foi liofilizada e purificada por croma- tografia de coluna flash (sílica, DCM:MeQH, gradiente de 92:8 até 60:40), para produzir 12 (100 mg, 64%) como um sólido branco. Exemplo 88 Síntese de (5R)-1-(isobutiril)-7-[(1R)-1-benzilóxi-carbonil-3-metil-butil]- 6-oxo-1,7-diazaespiro[4,4]nonano (13)

[00425] Adicionou-se TEA (199 mg, 1,96 mmol), DMAP (6 mg, 0,049 mmol) e cloreto de isobutirila em gotas (104 mg, 0,98 mmol) a uma solução de 11 (169 mg, 0,49 mmoles) em DCM anidro (10 ml) a 0°C sob argônio. A mistura da reação foi deixada aquecer até a temperatura ambiente e agitada por 24 h. O produto bruto foi fracionado entre água (10 ml) e DCM (10 ml). A fase orgânica foi lavada com salmoura (10 ml), seca com sulfato de sódio e concentrada sob vácuo. O composto 13 puro (150 mg, 74%) foi obtido como um sólido branco após LC em sílica (hexano:EtOAc, gradiente de 60:40 até 0:100).

[00426] HPLC [Coluna Novapack C18 (água), 3,9 x 150mm, ^=1ml/min, λ=214 nm, eluente: CH3CN/0,05%TFA, (50/50)] tR=4,50 min. P.F.: 87°C. [«]20D + 9,6 (c 1.4, MeOH).

[00427] 1H-RMN (300 MHz, CDCh) δ 0,90 (2d, J= 7, 6H), 1,09-1,12 (2d, 6H), 1,37 (septopleto, J = 6, 1H), 1,61-2,10 (m, 7H), 2,64 (m, 2H), 3,14 (dd, J1 =9, J2 =17, 1H), 3,64 (m, 3H), 4,85 (dd, J1 = 5, J2 = 10, 1H), 5,14 (d, J = 6, 2H), 7,32 (m, 5H).

[00428] 13C-RMN (300 MHz, CDCh) δ 18,6, 18,7, 21,2, 23,1, 24,0, 24,8, 29,5, 32,5, 35,7, 37,6, 40,5, 47,8, 52,7, 66,7, 76,3, 170,8, 174,3, 174,9.

[00429] ESl-EM: calculado para C24H34N2O4: 414,25; encontrado m/z 415,4 (M+H)+. Exemplo 89 Síntese de (5R)-1-(piruvil)-7-[(1R)-1-benzilóxi-carbonil-3-metil-butil]-6- oxo-1,7-diazaespiro[4,4]nonano (14)

[00430] Preparou-se cloreto de piruvila de acordo com o método descrito na literatura, Pansare, S.V., Gnana, R.R., "Asymmetric Allyla- tion and Reduction on an Ephedrine-Derived Template: Stereoselective Synthesis of α-Hydroxy Acids and Derivatives", J. Org. Chem. 1998 63:4120-4124, e adicionado a ácido pirúvico (115 mg, 1,31 mmol). A mistura da reação foi agitada por 20 min e a solução resultante foi aquecida até 50-55°C, e depois, agitada por mais 30 min. A mistura da reação foi deixada resfriar até a temperatura ambiente e adicionou-se DCM (3 ml).

[00431] Adicionou-se TEA (200 mg, 1,98 mmol) e DMAP (4 mg, 0,033 mmol) a uma solução de 11 (150 mg, 0,33 mmoles) em DCM anidro (4 ml) a 0°C sob argônio, e adicionou-se esta à solução recém- preparada de cloreto de piruvila a 0°C. A mistura da reação foi deixada aquecer até a temperatura ambiente e agitada por 6 h. O produto bruto foi lavado sucessivamente com solução de ácido cítrico a 10% (5 ml), solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (5 ml) e salmoura (5 ml). A fase orgânica foi seca com sulfato de sódio e concentrada. O composto 14 puro (77 mg, 56%) foi obtido como um óleo após croma- tografia de coluna flash (sílica, hexano:EtOAc 1:3).

[00432] HPLC [Coluna Novapack C18 (água), 3,9 x 150mm, ^=1ml/min, λ=214nm, eluente: ACN /0,05%TFA, (50/50)] TR=5,87 e 6,72 min.

[00433] 1H-RMN (200 MHz, CDCh) δ 0,92 e 0,95 (2d, J = 6, 6H); 1,42 (m, 1H); 1,61-2,39 (m, 7H), 2,44 (s, 3H), 2,77 [m, 1H), 3,22 (m, 1H), 3,56-3,78 (m, 2H), 3,92 (m, 1H), 4,67 e 4,85 (dd, J1 = 6, J2 = 10, 1H), 5,21 (s, 2H), 7,34 (m, 5H).

[00434] 13C-RMN (75 MHz, CDCI3) δ 21,1, 23,0, 24,4, 24,8, 26,4, 29,3, 35,6, 37,3, 40,7, 48,9, 53,0, 66,8, 68,6, 135,0, 166,0, 170,8, 173,0, 198,0.

[00435] ESI-EM: calculado para C23H30N2O5: 414,22; encontrado m/z 415,4 (M+H)+. Exemplo 90 Síntese de (5R)-1-(2-metiI-acriIoiI)-7-[(1R)-1-benziIóxi-carboniI-3-metiI- butiI]-6-oxo-1,7-diazaespiro[4,4]nonano (15)

[00436] Seguindo o procedimento descrito para a síntese de 13, partindo de 11 (200 mg, 0,43 mmoI) e cIoreto de metacriIoíIa (89 mg, 0,86 mmoI), o composto do títuIo (70 mg, 50%) foi obtido como um óIeo incoIor após purificação por cromatografia de coIuna fIash (síIica- geI, hexano:EtOAc 2:1). HPLC [coIuna Novapack C18 (água), 3,9x150 mm, vazão: ^1 mI/min, a λ214 nm, eIuente: ACN:0,05% de TFA (25:75); Tr = 6,38 min].

[00437] 1H-RMN (200 MHz, CDCI3) δ 0,91 (t, J = 6, 6H), 1,44 (m, 1H), 1,64-1,93 (m, 5H), 1,93 (s, 3H), 1,96-2,12 (m, 2H), 2,78 (m, 1H), 3,20 (m, 1H), 3,56-3,68 (m, 3H), 4,80 e 4,77 (2d, J = 10, 1H), 5,16 (s, 2H), 5,19 (d, J = 9, 2H), 7,32 (m, 5H).

[00438] 13C-RMN (75 MHz, CDCI3) δ 19,8, 21,4, 23,0, 24,2, 24,9, 29,9, 37,1, 37,7, 41,1, 50,2, 53,2, 66,6, 67,4, 116,9, 128,1, 128,3, 128,4, 135,0, 141,7, 170,7, 174,1.

[00439] ESl-EM: calculado para C24H32N2O4: 412,24; encontrado m/z 413,3 (M+H)+. Exemplo 91 Síntese de (5R)-1-(isobutiril)-7-[(1R)-1-carbóxi-3-metil-butil]-6-oxo-1,7- diazaespiro[4,4]nonano (16)

[00440] Uma solução desgaseificada de 13 (134 mg, 0,32 mmoles), em metanol contendo 10% de Pd/C (27 mg) foi hidrogenada sob 1,09 atm (16 psi) por 24 h. A mistura foi filtrada através de um leito de celi- te, e a solução filtrada foi concentrada sob pressão reduzida, para produzir 16 (100 mg, 95%) como um óleo incolor. p.f. 68-69 oC. [a]20D -2 (c 1,1, MeOH).

[00441] 1H RMN (300 MHz, acetona-d6) δ 0,87-0,91 (2d, J=7,6H), 1,09-1,12 (2d, 6H), 1,46 (m, 1H), 1,70 (m, 2H), 1,90-2,10 (m, 5H), 2,49 (m, 1H), 2,70 (m, 1H), 3,49 (dt, J1 = 8, J2 = 10, 1H), 3,61-3,75 (m, 2H), 4,71 (d, J1 = 5, J2 = 11, 1H).

[00442] 13C RMN (75 MHz, CDCh) δ 16,4, 16,6 21.1. 23,0, 24,3, 25,0, 30,8, 32,6, 36,6, 36,9, 40,4 48,0, 53,4, 67,5, 171,8, 174,2, 176,2.

[00443] ESl-EM: calculado para C17H28N2O4: 324,20; encontrado m/z 323,3 (M+H)+. Exemplo 92 Síntese de (5R)-1-(piruvil)-7-[(1R)-1-carbóxi-3-metil-butil]-6-oxo-1 ,7- diazaespiro[4,4]nonano (17)

[00444] Uma solução desgaseificada de 14 (79 mg, 0,26 mmol) em metanol (20 ml), contendo 10% de Pd/C (22 mg) foi hidrogenada sob pressão atmosférica por 45 min. A solução filtrada foi concentrada sob pressão reduzida, para produzir 17 (79 mg, 95%) como um sólido branco. HPLC [coluna Novapack C18 (água), 3,9x150 mm, ^ 1 ml/min, λ= 214 nm, eluente: ACN:0,05% de TFA (20:80)]; Tr = 13,14 min.

[00445] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 0,93 (m, 6H), 1,43 (m, 1H), 1,71-2,22 (m, 7H), 2,34 (s, 3H), 2,41 (s, 3H), 2,74 (m, 1H), 3,31 (m, 1H), 3,74 (m, 2H), 3,92 (m, 1H), 4,80 (dd, 81=6, 82= 10, 1H), 7,07 (bs, 1H).

[00446] 13C RMN (75 MHz, CDCh) δ 21,3, 23,2, 24,7, 25,1, 27,1, 29,9, 36,0, 37,0, 41,0, 49,3, 53,6, 69,1, 162,1, 172,7, 173,7, 197,5.

[00447] ESI-EM: calculado para C23H30N2O5: 324,17; encontrado m/z 325,1 (M+H)+. Exemplo 93 Síntese de (5R)-1-(2-metil-acriloil)-7-[(1R)-1-carbóxi-3-metil-butil]-6- oxo-1,7-diazaespiro[4,4]nonano (18)

[00448] Adicionou-se solução aquosa 1 N de NaOH (1,6 ml) e H2O (1,6 ml) a uma solução de 15 (65 mg, 0,16 mmol) em metanol (2,5 ml), e a mistura foi agitada à temperatura ambiente por 1 h. A mistura resultante foi concentrada sob pressão reduzida, e o resíduo foi fracionado entre água (20 ml) e DCM (20 ml). A fase aquosa foi acidificada até pH = 2 com HCl 0,1 N (10 ml) e extraída com DCM (3 x 20 ml). As fases orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura (25 ml), secas com sulfato de sódio e concentradas sob pressão reduzida, para produzir 18 (44 mg, 85%) como um sólido branco. HPLC [coluna Novapack C18 (água), 3,9x150 mm, vazão: ^1 ml/min, a λ214 nm, eluente: ACN:0,05% de TFA (25:75); Tr = 6,38 min].

[00449] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 0,86 (d, J=5,3H), 0,89 (d, J=5, 3H), 1,42 (m, 1H), 1,55-2,25 (m, 8H), 2,56 (m, 1H), 3,19-3,44 (m, 2H), 3,57-3,67 (m, 2H), 4,78 (d, J=11, 1H), 4,82 (d, J=11, 1H), 5,18 (d, J=6,2H).

[00450] 13C RMN (75 MHz, CDCh) δ 19,5, 21,2, 23,1 24,2, 25,1, 30,9, 36,5, 37,6, 40,9, 50,5, 53,7, 67,5, 117,5, 140,6, 170,8, 174,2.

[00451] ESI-EM: calculado para C17H26N2O4: 322,19; encontrado m/z 323,2 (M+H)+. Exemplo 94 Síntese de [(5R)-1-(terc-butóxi-carbonil)-7-[(1 R)-1-carbóxi-3-metil- butil]-6-oxo-1,7-diazaespiro[4,4]nonano]7-9-aplidina (9SBSAPL1).

[00452] Seguindo o procedimento descrito para a síntese de SAPL3, partindo de SAPL4 (10 mg, 13 μmoles), 12 (5 mg, 14 μmoles), HATU (12,4 mg), HOAt (4,5 mg), NMM (3,3 μl), DCM (140 μl) e DMF (70 μl), o composto do título (11 mg, 73%) foi obtido como um sólido branco após purificação por HPLC [coluna HyperPrep PEP 100 Cie isocrática ACN:Hi0 85:15 (vazão: 7 ml/min, 250x21 mm, a 270 nm, Tr = 30 min],

[00453] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 0,85-0,97 (m, 24 H), 1,19-1,34 (m, 18 H), 1,48 (s, 9H), 1,50-2,20 (m, 6H), 2,32-2,36 (m, 1H), 2,54 (s, 3H), 2,58-2,72 (m, 2H), 2,97-3,08 (m, 1H), 3,10-3,22 (m, 3H), 3,34, (dd, 1H, J=3,9, 13,8), 3,46-3,79 (m, 6H), 3,79 (s, 3H), 4,03-4,12 (m, 2H), 4,28 (dd, 1H, J=6,6, 13,2), 4,57-4,63 (m, 2H), 4,79-4,88 (m, 2H), 5,15 (d, 1H, J = 3,3), 5,21-5,23 (m, 1H), 6,84 (d, 2H, J=8,4), 7,07 (d, 2H), J=8,7), 7,28 (d, 1H, J=10,8), 7,79 (d, 1H, J=6,6), 7,82 (d, 1H), J=9,9),

[00454] 13C RMN (75 MHz, CDCh) δ 11,66, 15,21, 15,43, 16,79, 17,23, 18,69, 18,77, 21,24, 23,67, 23,95, 24,10, 24,90, 25,10, 25,38, 27,04, 28,23, 28,75, 29,93, 31,61, 34,50, 33,88, 34,16, 36,20, 36,57, 38,76, 39,09, 39,78, 41,29, 47,76, 49,60, 49,96, 52,66, 55,50, 56,26, 57,38, 58,18, 66,74, 66,86, 68,34, 70,53, 80,75, 81,93, 114,33, 130,23, 130,54, 168,08, 169,83, 170,18, 170,80, 171,43, 172,55, 175,04, 205,04,

[00455] ESl-EM: calculado para C60H93N7O15: 1.151,7; encontrado m/z 1.152,4 (M+H)+. Exemplo 95 Síntese de [Hiv]3-[(5R)-1-(terc-butóxi-carbonil)-7-[(1 R)-1-carbóxi-3- metil-butil]-6-oxo-1,7-diazaespiro[4,4]nonano]7-9-aplidina (9SBSHPL1).

[00456] Seguindo o procedimento descrito para a síntese de SAPL3, partindo de SAPL4 (10 mg, 13 μmoles), 12 (5 mg, 14 μmoles), HATU (14 mg), HQAt (5 mg), NMM (6 μl), DCM (150 μl) e DMF (50 μl), o composto do título (10 mg, 73%) foi obtido como um sólido branco após purificação por HPLC [coluna HyperPrep PEP 100 C-ie isocrática ACN: H2Q 85:15 (vazão: 7 ml/min, 250x21 mm, a 270 nm, Rt = 28,1 min].

[00457] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 0,80-1,07 (m, 24H), 1,08-167 (m, 12H), 1,48 (s, 9H), 1,68-2,30 (m, 10H), 2,41 (m, 1H), 2,55 (s, 3H), 2,68 (m, 1H), 2,94 (m, 1H), 3,07-3,40 (m, 4H), 3,42-3,72 (m, 6H), 3,78 (s, 3H), 3,90 (m, 1H), 4,01 (m, 1H), 4,29 (m, 1H), 4,63 (m, 1H) 4,77 (m, 1H), 4,87 (m, 1H), 5,02 (d, J=4,8, 1H), 5,25 (m, 1H), 6,84 (d, J=8,3, 2H), 7,07 (d, J=8,3, 2H), 7,31 (d, J=9,7, 1H), 7,50 (d, J=5,8 1H), 7,85 (d, J=9,7, 1H).

[00458] 13C RMN (75 MHz, CDCh) δ 12,07, 14,25, 17,12, 17,92, 19,15, 21,11, 21,18, 23,80, 24,00, 24,06, 24,86, 25,08, 25,15, 27,58, 28,21, 29,82, 30,33, 31,18, 33,78, 34,28, 35,77, 36,65, 39,07, 39,45, 39,86, 46,91, 48,14, 48,47, 52,62, 55,49, 57,13, 58,42, 66,36, 66,80, 69,14, 70,84, 79,19, 80,55, 114,27, 130,29, 130,59, 154,12, 158,81, 168,25, 169,84, 170,72, 170,80, 170,90, 171,25, 174,89.

[00459] ESI-EM: calculado para C57H89N7Q14: 1.095,6; encontrado m/z 1.096,9 (M+H)+. Exemplo 96 Síntese de [(5R)-1-(isobutiril-7-[(1R)-1-carbóxi-3-metil-butil]-6-oxo-1,7- diaza-espiro[4,4]nonano]7-9-aplidina (9SISAPL1).

[00460] Seguindo o procedimento descrito para a síntese de SAPL3, partindo de SAPL4 (11 mg, 12,9 μmoles), 16 (5 mg, 15,4 μmo- les), HATU (14 mg), HOAt (5 mg), NMM (3,6 μl), DCM (155 μl) e DMF (78 μl), o composto do título (10 mg, 69%) foi obtido como um sólido branco após purificação por HPLC [coluna HyperPrep PEP 100 C18 isocrática ACN:Hi0 85:15 (vazão: 7 ml/min, 250x21 mm, a 270 nm, Tr= 19 min],

[00461] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 0,86-1,00 (m, 24H), 1,12 (d, J=6,9, 3H), 1,18 (d, J=6,6 3H), 1,34 (t, J=6,6 2H), 0,90-1,30 (m, 7H), 1,562,25(m, 16H), 2,30-2,80 (m, 3H), 2,55 (s, 3H), 2,95-3,06 (m, 1H), 3,153,25(m, 3H), 3,65 (dd, 1H), 3,52-3,79 (m, 6H), 3,79 (s, 3H), 3,98-4,15 (m, 1H), 4,28 (dd, J1 = 6,6, J2=10,3, 1H), 4,59 (m, 2H), 4,79-4,85 (m, 2H), 5,17 (d, J=3,6, 1H), 5,40-5,44 (m, 1H), 6,84 (d, J=8,4, 2H), 7,06 (d, J=8,7, 2H), 7,24 (d, J=11,1, 1H), 7,90 (d, J=9,3, 1H), 8,56 (d, J=5,1, 1H),

[00462] 13C RMN (75 MHz, CDCh) δ: 11,50, 14,92, 15,22, 16,68, 16,95, 18,50, 18,59, 18,81, 20,94, 23,42, 23,80, 24,49, 24,68, 24,90, 25,11, 26,91, 27,98, 30,93, 31,30, 35,58, 33,88, 34,16, 35,85, 36,24, 38,64, 38,84, 39,71, 41,29, 47,01, 47,76, 49,42, 49,62, 52,66, 55,26, 55,73, 57,12, 58,21, 66,57, 67,40, 68,10, 70,79, 81,57, 114,07, 130,05, 130,31, 158,57, 168,12, 169,66, 170,08, 170,56, 171,13, 171,96, 172,37, 174,04, 175,41, 205,04,

[00463] ESI-EM: calculado para C59H91N7O14: 1,121,66; encontrado m/z 1,122,8 (M+H)+, Exemplo 97 Síntese de [Hiv]3-[(5R)-1-(terc-butóxi-carbonil)-7-[(1 R)-1-carbóxi-3- metil-butil]-6-oxo-1,7-diazaespiro[4,4]nonano]7-9-aplidina (9SISHPL1).

[00464] Seguindo o procedimento descrito para a síntese de SAPL3, partindo de SHPL4 (10 mg, 13 μmoles), 16 (4,5 mg, 14 μmoles), HATU (14 mg), HOAt (5 mg), NMM (6 μl), DCM (150 μl) e DMF (78 μl), o composto do título (10 mg, 72%) foi obtido como um sólido branco após purificação por HPLC [coluna HyperPrep PEP 100 C18 isocrática ACN:Hi0 85:15 (vazão: 7 ml/min, 250x21 mm, a 270 nm, Tr = 16,9 min],

[00465] 1H RMN (300 MHz, CDCh) δ 0,80-1,07 (m, 24H), 1,08-1,47 (m, 12H), 1,48-2,30 (m, 16H), 2,36 (m, 2H), 2,56 (s, 3H), 2,65 (m, 1H), 2,96 (m, 1H), 3,18 (m, 2H), 3,36 (m, 2H), 3,65 (m, 6H), 3,78 (s, 3H), 3,91 (m, 1H), 4,02 (m, 1H), 4,25 (m, 1H), 4,63 (m, 1H), 4,72 (m, 2H), 4,87 (m, 1H), 5,02 (d, J=4,8, 1H), 5,45 (m, 1H), 6,84 (d, J=8,7, 2H), 7,07 (d, J=8,7, 2H), 7,27 (d, J=4,8, 1H), 7,88 (d, J=9,7, 1H), (d, J=4,8, 1H),

[00466] ESl-EM: calculado para C56H87N7O13: 1.065,6; encontrado m/z 1.066,7 (M+H)+. Exemplo 98 Síntese de [(5R)-1-(piruvil)-7-[(1 R)-1 -carbóxi-3-metil-butil]-6-oxo-1,7- diazaes-piro[4,4]nonano]7-9-aplidina (9SPSAPL1).

[00467] Seguindo o procedimento descrito para a síntese de SAPL3, partindo de SAPL4 (10 mg, 11,7 μmoles), 17 (5 mg, 15,4 μmoles), HATU (12 mg), HOAt (5 mg), NMM (5 μl), DCM (140 μl) e DMF (70 μl), o composto do título (9 mg, 63%) foi obtido como um sólido branco após purificação por HPLC [coluna HyperPrep PEP 100 C18 isocrática ACN:H20 85:15 (vazão: 7 ml/min, 250x21 mm, a 270 nm, Tr = 14,4 min],

[00468] 1H RMN (300 MHz, CDCI3): δ 0,90-1,00 (m, 24H), 1,05-1,40 (m, 12 H), 1,40-2,25 (m, 16H), 2,27-2,41 (m, 1H), 2,42-2,70 (m, 3H), 2,54 (s, 3H), 2,92-2,98 (m, 1H), 3,12-3,38 (m, 4H), 3,54-3,78 (m, 4H), 3,79 (s, 3H), 4,01-4,12 (m, 2H), 4,20-4,26 (m, 2H), 4,57-4,62(m, 2H), 4,77-4,82 (m, 2H), 535,18 (d, J=3,0, 2H), 5,37-5,42 (m, 1H), 6,84 (d, J=8,7, 2H), 7,07 (d, J=8,7, 2H), 7,20 (d, J=9,6, 1H), 7,85 (d, J=9,6, 1H), 98,04 (d, J=5,4, 1H),

[00469] 13C RMN (75 MHz, CDCI3) δ 11,86, 14,97, 15,47, 16,78, 17,12, 18,84, 21,20, 21,27, 23,62, 24,14, 15,03, 25,15, 25,30, 27,35, 27,51, 28,19, 30,46, 31,52, 34,27, 35,95, 39,01, 40,07, 41,59, 47,25, 49,72, 53,08, 55,51, 55,81, 57,38, 58,21, 66,66, 68,19, 69,23, 70,74, 81,69, 85,15, 114,33, 130,13, 130,56, 158,85, 161,12, 168,49, 169,81, 169,91, 170,81, 171,38, 171,69, 172,60, 173,34, 197,64, 205,19,

[00470] ESI-EM: calculado para C58H87N7O15: 1,121,63; encontrado m/z 1,122,3 (M+H)+, Exemplo 99 Síntese de [Hiv]3-[(5R)-1-(piruviI)-7-[(1R)-1-carbóxi-3-metiI-butiI]-6-oxo- 1,7-diazaespiro[4,4]nonano]7-9-apIidina (9SPSHPL1),

[00471] Seguindo o procedimento descrito para a síntese de SAPL3, partindo de SHPL4 (10 mg, 13 μmoIes), 17 (4,5 mg, 14 μmo- Ies), HATU (14 mg), HOAt (5 mg), NMM (6 μI), DCM (150 μI) e DMF (50 μl), o composto do título (10 mg, 72%) foi obtido como um sólido branco após purificação por HPLC [coluna HyperPrep PEP 100 Cis isocrática ACN:H2Ü 85:15 (vazão: 7 ml/min, 250x21 mm, a 270 nm, Tr = 13,6 min],

[00472] 13C RMN (75 MHz, CDCh) δ 0,80-1,10 (24H, m), 1,11-1,80 (12H, m), 1,81-2,30 (10H, m), 2,45 (m, 1H), 2,55 (s, 3H), 2,57 (s, 3H), 3,07-3,43 (m, 6H), 3,52-3,77 (m, 6H), 3,78 (s, 3H), 3,91 (m, 1H), 4,03 (m, 1H), 4,29 (m, 1H), 4,63 (m, 1H), 4,72 (m, 1H), 4,87 (m, 1H), 5,03 (d, J=4,3, 1H), 5,45, (m, 1H), 6,84 (d, J=8,3, 2H), 7,07 (d, J=8,3, 2H), 7,29 (d, J=8,7, 1H), 7,81 (d, J1=9,2, 1H), 7,87 (d, J=4,8, 1H),

[00473] ESI-EM: calculado para C55H83N7O14: 1.065,6; encontrado m/z 1.066,4 (M+H)+. Exemplo 100 Síntese de [Hiv]3-[(5R)-1 -(acriloil)-7-[(1 R)-1 -carbóxi-3-metil-butil]-6-oxo- 1,7-diazaespiro[4,4]nonano]7-9-aplidina (9SASHPL1).

[00474] Seguindo o procedimento descrito para a síntese de SAPL3, partindo de SHPL4 (10 mg, 13 μmoles), 18 (5,8 mg, 14 μmoles), HATU (14 mg), HOAt (5 mg), NMM (6 μl), DCM (150 μl) e DMF (50 μl), o composto do título (10 mg, 72%) foi obtido como um sólido branco após purificação por HPLC [coluna HyperPrep PEP 100 C18 isocrática ACN:H2O 85:15 (vazão: 7 ml/min, 250x21 mm, a 270 nm, Tr = 16,4 min].

[00475] 1H RMN (300 MHz, CDCh): δ 0,85-0,96 (m, 18H), 1,02-1,05 (m, 6H), 1,14-1,45 (m, 12H), 1,49-1,64 (m, 4H), 1,68-1,77 (m, 1H), 1,89-2,05 (m, 3H), 1,99 (s, 3H), 2,10-2,28 (m, 4H), 2,43 (d, J1=7,8, J2=17,1, 1H), 2,57 (s, 3H), 2,60-2,68 (m, 1H), 2,97 (bs, 1H), 3,13-3,40 (m, 4H), 3,54-3,77 (m, 5H), 3,79 (s, 3H), 3,89-4,07 (m, 2H), 4,27 (m, 1H), 4,64 (m, 1H), 4,73 (m, 1H), 4,88 (m, 1H), 5,03 (d, J=4,4, 1H), 5,30 (d, J=20, 1H), 5,30-5,39 (m, 1H), 6,84 (d, J=8,3, 2H), 7,08 (d, J=8,3, 2H), 7,29 (s, 1H), 7,88 (d, J=9,8, 1H), 8,23 (d, J=7,4, 1H).

[00476] ESl-EM: calculado para C56H85N7O13: 1.063,6; encontrado m/z 1.064,6 (M+H)+. Exemplo 101 Síntese de [Hiv]3-[Z-Ala]9-aplidina (9ZASHPL2)

[00477] Adicionou-se DlPCDl (10 μl, 64 'moles) a um frasco contendo Z-Ala-Pro-OH (36 mg, 112 'moles) em DCM (0,4 ml) a 0°C, sob argônio, e a mistura foi agitada por 60 min. Depois, adicionou-se uma solução de SHPL2 (20 mg, 22,5 'moles) em DCM (0,2 ml), e depois de 3 dias, a reação foi interompida rapidamente pela adição de solução aquosa 0,1 N de HCl (3 ml). A mistura foi agitada por 5 min, e depois, diluída com DCM (4 ml) e lavada sucessivamente com solução aquosa a 10% de KHSO4 (4 ml), solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (4 ml) e salmoura (4 ml). A fase orgânica foi seca com sulfato de sódio, filtrada e concentrada. A purificação por HPLC [coluna HyperPrep PEP 100 C18 isocrática ACN:H2O 85:15 (vazão: 7 ml/min, 250x21 mm, a 270 nm, Rt = 18,2 min) produziu 9ZASHPL2 (30 mg, 67%) como um sólido branco.

[00478] 1H RMN (300 MHz, CDCI3): δ 0,82-1,10 (m, 24H), 1,12-1,50 (m, 18H), 1,52-2,70 (m, 6H), 2,45 (m, 1H), 2,56 (s, 3H), 2,96-3,38 (m, 4H), 3,10 (s, 3H), 3,52-3,72 (m, 5H), 3,85 (m, 1H), 3,78 (s, 3H), 4,01 (m, 1H), 4,18 (m, 1H), 4,51 (m, 1H), 4,64 (m, 1H), 4,71 (m, 1H), 4,87 (m,1H), 5,02 (d, J1=5,3, 1H), 5,06 (m, 2H), 5,25 (m, 1H), 5,42, (m, 1H), 6,10 (d, J=8,3, 1H), 6,84 (d, J=8,3, 2H), 7,07 (d, J=8,3, 2H), 7,31 (m, 6H), 7,70 (d, J=4,3, 1H), 7,77 (d, J=9,7, 1H).

[00479] 13C RMN (75 MHz, CDCI3) δ 11,80, 13,97, 16,63, 17,02, 17,48, 18,93, 20,86, 21,15, 23,45, 23,76, 24,78, 25,96, 27,31, 27,92, 28,50, 30,06, 31,36, 33,44, 33,82, 35,66, 38,70, 39,38, 39,63, 46,54, 46,62, 46,98, 47,10, 48,19, 48,59, 54,89, 54,97, 55,22, 56,44, 56,90, 58,14, 66,16, 66,36, 68,95, 70,94, 78,78, 114,00, 127,75, 128,30, 129,90, 130,26, 156,31, 158,53, 168,67, 169,57, 170,06, 170,25, 170,65, 171,97, 173,08, 174,67.

[00480] ESI-EM: calculado para C62H92N8O15: 1.188,67; encontrado m/z 1.189,7 (M+H)+. Exemplo 102 Síntese de [Hiv]3-[Boc-AIa]9-apIidina (9BASHPL2)

[00481] Seguindo o procedimento descrito para a síntese de 9ZASHPL2, partindo de SHPL2 (10 mg, 11,2 μmoles), Boc-AIa-Pro-OH (17 mg, 57 μmoles), DIPCDI (5 μl) e DCM (300 μl), o composto do título (9 mg, 70%) foi obtido como um sólido branco após purificação por HPLC [coluna HyperPrep PEP 100 C18, gradiente de ACN:H2Q 85:15 até 100:0 em 10 min (vazão: 7 ml/min, 250x21 mm, a 270 nm, Tr = 14,5 min],

[00482] 1H RMN (300 MHz, CDCh): δ 0,82-1,10 (m, 24H), 1,12-1,50 (m, 15H), 1,40 (s, 9H), 1,52-2,70 (m, 9H), 2,45 (m, 1H), 2,60 (s, 3H), 3,00- 3,43(m, 4H), 3,10 (s, 3H), 3,62 (m, 5H), 3,79 (s, 3H), 3,90 (m, 1H), 4,02 (m, 1H), 4,20 (m, 1H), 4,41 (m, 1H), 4,67 (m, 2H), 4,87 (m, 1H), 5,02 (d, J1=4,3, 1H), 5,26 (m, 1H), 5,40 (m, 1H), 5,76 (d, J=7,8, 1H), 6,84 (d, J=8,3, 2H), 7,07 (d, J=8,3, 2H), 7,32 (d, J=9,7, 1H), 7,73 (d, J=4,8, 1H), 7,80 (d, J=9,7),

[00483] 13C RMN (75 MHz, CDCI3) δ 12,06, 14,34, 16,88, 17,20, 17,77, 19,17, 21,10, 21,41, 23,72, 24,03, 25,06, 26,17, 27,60, 28,19, 28,60, 30,31, 31,63, 33,74, 35,96, 38,96, 38,96, 38,93, 39,59, 39,86, 46,86, 47,27, 48,29, 48,45, 55,18, 55,49, 56,59, 57,16, 58,44, 66,43, 69,14, 71,30, 79,05, 79,40, 114,29, 130,21, 130,54, 156,06, 158,3, 168,80, 169,87, 170,51, 170,64, 170,94, 171,31, 172,59, 173,45, 174,92,

[00484] ESI-EM: calculado para C59H94N8Q15: 1.154,68; encontrado m/z 1.155,6 (M+H)+. Exemplo 103 Síntese de [Hiv]3-[AIa]9-apIidina (9ASHPL1)

[00485] Adicionou-se uma solução de ácido clorídrico em dioxano anidro (1,5 ml, 5,3 N, 7,9 mmoles) a um frasco contendo 9BASHPL2 (8 mg, 6,92 μmoles). A solução resultante foi agitada à temperatura am-biente por 5 h ou até o desaparecimento completo do material de partida (TLC). Depois, a solução foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi dissolvido em DCM e concentrado novamente. A espuma branca bruta foi precipitada com DCM:hexano (2 ml:4 ml), para produzir 9ASHPL1 (7,2 mg, quantitativo) como um sólido branco.

[00486] ESl-EM: calculado para C54H86N8Q13: 1.054,6; encontrado m/z 1.055,6 (M+H)+. Exemplo 104 Síntese de [Hiv]3-[Boc-Pro]8-didemnina A (8PSHPL2)

[00487] Seguindo o 9ZASHPL2, partindo de SHPL2 (10 mg, mg, 57 μmoles), DlPCDl (5 μl) e DCM (300 μl), o composto do título (9 mg, 74%) foi obtido como um sólido branco após purificação por HPLC [coluna HyperPrep PEP 100 C18, gradiente de ACN:H2Q 85:15 até 100:0 em

[00488] 1H RMN (300 MHz, CDCh): δ 0,82-1,10 (m, 24H), 1,12-2,30 1,47 (s, 9H), 2,41 (m, 1H), 3,04 (s, 3H), 3,10-3,74 (m, 7H), 3,78 (s, 3H), 3,91 (m, 1H), 4,01 (m, 1H) 4,31 (m, 1H), 4,59 (m, 1H), 4,87 (m, 1H), 5,02 (d, J=4,8, 1H), 5,16 (m, 1H), 5,36 (m, 1H), 6,84 (d, J=8,3, 2H), 7,07 (d, J=8,3, 2H), 7,17 (d, J=6,3, 1H), 7,35 (d, J=9,7, 1H), 7,85 (d, J=9,7, 1H).

[00489] 13C RMN (75 MHz, CDCI3) δ 12,04, 14,41, 16,76, 17,97, 19,12, 21,03, 21,66, 23,92, 24,00, 24,77, 25,09, 25,20, 27,53, 28,21, 28,72, 29,67, 30,35, 31,23, 33,80, 34,30, 36,34, 39,05, 39,37, 39,80, 46,90, 47,33, 48,42, 54,48, 55,49, 55,58, 55,84, 57,12, 58,08, 66,31, 69,11, 71,05, 79,23, 80,28, 114,29, 130,23, 130,59, 154,91, 158,82, 168,37, 169,88, 170,66, 170,86, 171,28, 171,40, 174,10, 174,79.

[00490] ESI-EM: calculado para C56H91N7O14: 1.085,6; encontrado m/z 1.086,7 (M+H)+. Exemplo 105 Sintese de [Hiv]3-[Pro]8-didemnina A (8PSHPL1)

[00491] Seguindo o procedimento descrito para a sintese de 9ASHPL1, partindo de 8PSHPL2 (7 mg, 6,4 μmoles), o composto do titulo (6 mg, quantitativo) foi obtido como um sólido branco.

[00492] ESI-EM: calculado para C51H81N7O12: 983,59; encontrado m/z 984,6 (M+H)+. Exemplo 106 Sintese de [Hiv]3-[Boc-Val]8-didemnina A (8VSHPL2)

[00493] Seguindo o procedimento descrito para a sintese de 9ZASHPL2, partindo de SHPL2 (10 mg, 11,2 μmoles), Boc-Val-QH (12 mg, 56 μmoles), DIPCDI (5 μl) e DCM (300 μl), o composto do título (9 mg, 82%) foi obtido como um sólido branco após purificação por HPLC [coluna HyperPrep PEP 100 C18, gradiente de ACN:H2Q 85:15 até 100:0 em 10 min (vazão: 7 ml/min, 250x21 mm, a 270 nm, Rt = 22,1 min).

[00494] 1H RMN (300 MHz, CDCh): δ 0,82-1,10 (m, 30H), 1,12-1,82 (m, 12H), 1,45 (s, 9H), 1,84-2,40 (m, 6H), 2,56 (s, 3H), 2,96 (s, 3H), 2,97 (m, 3H), 3,13 (m, 1H), 3,35 (m, 1H), 3,56 (m, 1H), 3,65 (m, 2H), 3,79 (s, 3H), 3,85 (m, 1H), 4,03 (m, 1H), 4,24 (m, 1H), 4,41 (m, 1H), 4,61 (m, 1H), 4,88 (m, 1H), 4,99 (d, J1=5,3, 1H), 5,07 (m, 1H), 5,19 (m, 1H), 5,60 (d, J=8,3, 1H), 6,84 (d, J=8,3, 2H), 7,03 (d, J=8,7, 2H), 7,07 (d, J=8,3, 2H), 7,46 (d, J=10,2, 1H), 7,84 (d, J=9,2, 1H).

[00495] ESI-EM: calculado para C56H91N7Q14: 1.085,6; encontrado m/z 1.086,7 (M+H)+. Exemplo 107 Síntese de [Hiv]3-[Val]8-didemnina A (8VSHPL1)

[00496] Seguindo o procedimento descrito para a síntese de 9ASHPL1, partindo de 8VSHPL2 (8 mg, 7,4 μmoles), o composto do título (7 mg, quantitativo) foi obtido como um sólido branco.

[00497] ESI-EM: calculado para C51H83N7Q12: 985,61; encontrado m/z 986,6 (M+H)+. Exemplo 108 Síntese de [Hiv]3-[Val]8-[isobutiril]9-didemnina A (8V9ISHPL1)

[00498] Adicionou-se NMM (3,3 μl, 30 μmoles) e cloreto de isobutiri- la (2 μl, 19 'moles) a uma solução de 8VSHPL1 (6 mg, 5,8 μmoles) em DCM (200 'l) a 0°C sob Ar. Depois de agitar por 5 h à temperatura ambiente, a mistura da reação foi diluída com DCM (5 ml) e lavada sucessivamente com solução aquosa a 10% de KHS0>(5 ml), solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (5 ml) e salmoura (5 ml). A solução orgânica foi seca com sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob pressão reduzida, para produzir 8V9ISHPL1 (6 mg, 97%) como um sólido branco.

[00499] 1H RMN (300 MHz, CDCh): δ 0,82-1,10 (m, 36H), 1,12-1,85 (m, 10H), 1,90-2,45 (m, 6H), 2,56 (s, 3H), 2,90 (m, 1H), 3,00 (s, 3H), 3,13 (m, 2H), 3,36 (dd, J1=4,3, J2=14,1, 1H), 3,64 (m, 6H), 3,78 (s, 3H), 3,87 (m, 1H), 3,97 (m, 1H), 4,21 (m, 1H), 4,34 (m, 2H), 4,61 (m, 1H), 4,87 (m, 1H), 4,98 (d, J=4,8, 1H), 5,17 (m, 2H), 6,24 (d, J=6,3, 1H), 6,84 (d, J=8,3, 2H), 7,07 (d, J=8,3, 2H), 7,32 (d, J=6,3, 1H), 7,35 (d, J=4,3, 1H), 7,81 (d, J=9,7, 1H).

[00500] ESI-EM: calculado para C55H89N7O13: 1.055,6; encontrado m/z 1.056,7 (M+H)+. Exemplo 109 Síntese de [cumarina]8-didemnina A (8CSAPL1)

[00501] Seguindo o procedimento descrito para a síntese de 9ZASHPL2, partindo de SAPL2 (20 mg, 21 μmoles) e ácido cumarino- 3-carboxílico (20 mg, 107 μmoles), o composto do título (18 mg, 76%) foi obtido como um sólido branco após purificação por HPLC coluna HyperPrep PEP 100 C18, isocrática, ACN:H2O 85:15 (vazão: 7 ml/min, 250x21 mm, a 270 nm, Rt = 16,5 min).

[00502] 1H RMN (300 MHz, CDCh): δ 0,78-1,00 (m, 24H), 1,20-2,50 (m, 22H), 2,56 (s, 3H), 2,92 (s, 3H), 3,08-3,25 (m, 2H), 3,90 (m, 1H), 3,60 (m, 2H), 3,70 (m, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,92-4,25 (m, 3H), 4,60 (m, 1H), 4,80 (m, 2H), 5,15 (m, 1H), 5,18 (d, J=3,4, 1H), 5,28 (m, 1H), 6,84 (d, 8,3, 2H), 7,08 (d, J=8,3, 2H), 7,20 (d, J=6,3, 1H), 7,37 (m, 2H), 7,45 (d, J=9,7, 1H), 7,58 (m, 2H), 7,96 (m, 1H), 8,23 (m, 1H).

[00503] ESI-EM: calculado para C59H82N6O15: 1.114,58; encontrado m/z 1.116,3 (M+H)+. Exemplo 110 Síntese do éster metílico do ácido cumarino-3-carbonil-amino-acético(8G9C2)

[00504] Adicionou-se cloridrato de N’-(3-dimetil-amino-propil)-N-etil- carbodiimida (EDC) (479 mg, 2,50 mmoles) e DMAP (489 mg, 4,00 mmoles) à temperatura ambiente a um frasco com fundo redondo con-tendo metil-glicina (89 mg, 1,00 mmol), 3-carbóxi-cumarina anidra e DCM (25 ml) sob Ar. A mistura resultante foi agitada por 1h30min (a conversão total foi observada por TLC). Depois, adicionou-se DCM (20 ml) e a solução foi lavada sucessivamente com solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (10 ml) e salmoura (10 ml). A fase orgânica foi seca com sulfato de sódio, filtrada e concentrada. O sólido laranja resultante foi purificado por cromatografia de coluna sílica-gel, gradiente de hexano:EtOAc 1:1 até 2:1), para dar o composto do título (445 mg, quantitativo) como um óleo incolor. Rf = 0,08 (hexano:EtOAc 1:1).

[00505] 1H RMN (300 MHz, CDCh): δ 3,79 (s, 3H), 4,25 (d, J=5,4, 2H), 7,40 (m, 2H), 7,74 (d, J=7,3, 1H), 7,68 (m, 2H), 8,91 (s, 1H), 9,25 (s, 1H).

[00506] ESI-EM: calculado para C13H11NO5: 261,06; encontrado m/z 283,1 (M+H)+. Exemplo 111 Síntese do ácido cumarino-3-carbonil-amino-acético (8G9C1)

[00507] Adicionou-se LiOH em H2O (0,2 M) em gotas a uma solução do éster metílico do ácido cumarino-3-carbonil-amino-acético (312 mg, 1,19 mmoles) em THF (12 ml) sob atmosfera de Ar a 0°C (banho de gelo). A mistura da reação foi agitada intensamente à temperatura ambiente até que a conversão total fosse observada por TLC (2 h). A solução foi concentrada parcialmente, e adicionou-se Et2O (10 ml). A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de bicarbo- nato de sódio (10 ml) e as camadas aquosas combinadas foram acidi-ficadas com KHSÜ4 a 10% (pH = 3-4), e extraídas com éter (3 x 20 ml). A camada orgânica foi concentrada sob pressão reduzida, para produzir 8G9C1 (280 mg, 95%) como um sólido branco.

[00508] 1H RMN (300 MHz, CDCh): δ 4,18 (d, J=5,3, 2H), 7,41 (m, 1H), 7,45 (d, J=7,8, 1H), 7,74 (d, J=7,3, 1H), 7,78 (t, J=8,3, 1H), 7,85 (d, J=7,8, 1H), 8,89 (s, 1H), 9,41 (m, 1H).

[00509] ESl-EM: calculado para C12H9NO5: 247,05; encontrado m/z 248,0 (M+H)+. Exemplo 112 Síntese de [Gly]8-[cumarina]9-didemnina A (8G9CSAPL1)

[00510] Seguindo o procedimento descrito para a síntese de 9ZASHPL2, partindo de SAPL2 (20 mg, 21 μmoles) e ácido cumarino- 3-carbonil-amino-acético (26 mg, 105 μmoles), o composto do título (18 mg, 72%) foi obtido como um sólido branco após purificação por HPLC [SymetryPrep® C18, isocrática, ACN:H2O 60:40 (vazão: 3 ml/min, 150x7,8 mm, a 270 nm, tR = 17,5 min).

[00511] 1H RMN (300 MHz, CDCh): δ 0,85-0,94 (m, 24H), 1,23-2,17 (m, 21H), 2,30-2,44 (m, 1H), 2,56 (s, 3H), 3,01 (s, 3H), 3,10-3,24 (m, 2H), 3,40 (dd, J1=5,4, J2=14,2, 1H), 3,59-3,74 (m, 3H), 3,79 (s, 3H) 3,99-4,21 (m, 4H), 4,37-4,44 (m, 1H), 4,60 (m, 1H), 4,68 (m, 1H), 4,81 (t, J=9,8, 1H), 5,18 (d, J=3,4, 1H), 5,25 (dd, J1=2,9, J2=5,9, 1H), 5,205,45(m, 1H), 6,84 (d, J=8,3, 2H), 7,08 (d, J=8,3, 2H), 7,19-7,28 (m, 1H), 7,34-7,42 (m, 2H), 7,63-7,72 (m, 2H), 7,88 (d, J=8,3, 2H), 9,00 (s, 1H), 9,57 (m, 1H).

[00512] ESI-EM: calculado para C61H85N7O16: 1.171,61; encontrado m/z 1.172,5 (M+H)+. Exemplo 113 Síntese de N-metilsulfonil-Pro-OBz (P2)

[00513] Adicionou-se DIPEA (0,7 μl) e cloreto de metano-sulfonila (116 μl) em gotas por meio de uma seringa a uma solução de Pro- OBn-HCl (300 mg, 1,24 mmol) em DCM anidro (25 ml) a 0°C sob Ar. A mistura da reação foi agitada à temperatura ambiente durante a noite. Adicionou-se DCM (10 ml) e a solução foi lavada sucessivamente com solução aquosa de KHSO4 a 10% (15 ml), solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (15 ml) e salmoura (15 ml). A fase orgânica foi seca com sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob pressão reduzida, para produzir P2 puro (350 mg, 1,24 mmol, quantitativo) como um sólido branco. Rf = 0,55 (hexano:EtOAc 1:1).

[00514] 1H RMN (300 MHz, CDCh): δ 1,91-2,08 (m, 3H), 2,19-2,31 (m, 1H), 2,93 (s, 3H), 3,38-3,54 (m, 2H), 3,65 (s, 3H), 4,51 (dd, J1=3,4 82=8,3, 1H), 5,11 (d, J=12,2, 1H), 5,18 (d, J=12,2, 1H), 7,31 (m, 5H).

[00515] ESI-EM: calculado para C13H17NO4: 283,09; encontrado m/z 284,1 (M+H)+. Exemplo 114 Síntese de N-metilsulfonil-Pro-OH (P1)

[00516] Uma mistura desgaseificada de N-metilsulfonil-Pro-QBz (P2) (250 mg, 0,88 mmol) e Pd(QH)2/C (20% de Pd, 100 mg, 40% p/p) em IPA:HiQ (26 ml:13 ml) foi saturada com H2 e mantida em 1 atm de gás hidrogênio sob agitação por 3 h. Depois, a mistura foi filtrada através de um filtro de Teflon de 0,45 μm, e concentrada sob vácuo, para produzir o composto do título (128 mg, 75% de rendimento) como um sólido branco sem qualquer purificação adicional.

[00517] 1H RMN (300 MHz, CDCh): δ 1,94-2,03 m (m, 2H), 2,07 2,14(m, 1H), 2,22-2,35 (m, 1H), 2,96 (s, 3H), 3,44 (m, 2H), 4,44 (dd, J1=3,9, 82=8,8, 2H), 9,10 (m, 1H).

[00518] 13C RMN (75 MHz, CDCh) δ 24,96, 31,08, 38,46, 48,06, 60,66, 174,75.

[00519] ESI-EM: calculado para C6H11NQ4S: 193,22; encontrado m/z 194,0 (M+H)+. Exemplo 115 Síntese de [metilsulfonil]9-aplidina (9MSAPL1)

[00520] Seguindo o procedimento descrito para a síntese de 9ZASHPL2, partindo de SAPL2 (10 mg, 10,7 μmoles) e N-metilsulfonil- Pro-QH (10 mg, 53 μmoles), o composto do título (9 mg, 74%) foi obtido como um sólido branco após purificação por HPLC [SymetryPrep® C18, isocrática, ACN:H2Q 60:40 (vazão: 3 ml/min, 150x7,8 mm, a 270 nm, Tr= 9 min).

[00521] 1H RMN (300 MHz, CDCh): δ 0,78-1,00 (m, 24H), 1,20-2,50 (m, 26H), 2,56 (s, 3H), 2,93 (m, 1H), 3,04 (s, 3H), 3,06 (s, 3H), 3,083,25 (m, 2H), 3,28-3,50 (m, 2H), 3,60 (m, 2H), 3,70 (m, 1H), 3,79 (s, 3H), 4,05 (m, 2H), 4,17 (m, 1H), 4,60 (m, 2H), 4,81 (m, 2H), 5,10 (m, 1H), 5,19 (d, J=3,4, 1H), 5,33 (m, 1H), 6,84 (d, J=8,3,2H), 6,86 (m, 1H), 7,07 (d, J=8,3, 2H), 7,09 (m, 1H), 7,82 (d, J=9,2, 1H).

[00522] ESl-EM: calculado para C55H87N7O15S: 1.171,60; encontrado m/z 1.118,7 (M+H)+. Exemplo 116 Síntese de [metilsulfonil]8-didemnina A (8MSAPL1)

[00523] Adicionou-se DlPEA (3 μl) e cloreto de metano-sulfonila (0,85 μl) a uma solução de SAPL2 (10 mg, 10,7 μmoles) em DCM anidro (200 μl) a 0°C sob Ar. A mistura da reação foi agitada a 5 oC durante a noite. Adicionou-se DCM (10 ml) e a solução foi lavada sucessivamente com solução aquosa de KHSO4 a 10% (5 ml), NaHCO3 aquoso (5 ml) e salmoura (5 ml). A fase orgânica foi seca com sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob pressão reduzida, para produzir 8MSAPL1 puro (11 mg, quantitativo) como um sólido branco. Rf = 0,55 (hexano:EtOAc 1:1).

[00524] 1H RMN (300 MHz, CDCh): δ 0,83-0,97 (m, 24H), 1,10-1,45 (m, 10H), 1,50-1,65 (m, 5H), 1,76-1,82 (m, 2H), 2,00-2,20 (m, 3H), 2,27-2,36 (m, 1H), 2,45-2,55 (m, 1H), 2,56 (s, 3H), 2,90 (s, 3H), 3,02 (s, 3H), 3,08 (d, J=16,6, 1H), 3,17 (dd, J1 = 10,7, J2=14,1, 1H), 3,37 (m, 1H), 3,60 (m, 2H), 3,70 (m, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,99-4,11 (m, 3H), 4,49 (m, 1H), 4,59 (m, 1H), 4,78 (m, 2H), 5,06 (m, 1H), 5,19 (d, J=3,9, 1H), 6,68 (d, 8,8, 1H), 6,84 (d, J=8,3, 2H), 7,07 (d, J=8,3, 2H), 7,33 (d, J=9,8, 1H), 7,61 (d, J=8,8, 1H).

[00525] ESI-EM: calculado para C50H80N6O14S: 1.020,55; encontrado m/z 1.022,1 (M+H)+. Exemplo 117 Síntese de [biotina]8-didemnina A (8BISAPL1)

[00526] Adicionou-se NMM em gotas por meio de uma seringa a uma solução de HATU (24 mg, 61 μmoles), HOAt (8 mg, 63 μmoles), SAPL2 (20 mg, 21,4 μmoles) e D-biotina (7,8 mg, 32 μmoles) em DCM anidro (400 μl) a 0°C sob Ar. A mistura resultante foi agitada por 2 h a 0°C, e depois, por mais 4 h à temperatura ambiente. Adicionou-se DCM (10 ml) e a solução foi lavada suscessivamente com solução aquosa de KHSO4 a 10% (5 ml), NaHCO3 aquoso (5 ml) e salmoura (5 ml). A fase orgânica foi seca com sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O composto do título (18 mg, 72%) foi obtido como um sólido branco após purificação por HPLC [SymetryPrep® C18, gradiente de ACN:H2O 60:40 até 100:0 em 10 min (vazão: 3 ml/min, 150x7,8 mm, a 270 nm, Tr= 6 min).

[00527] 1H RMN (300 MHz, CDCh): δ 0,78-1,00 (m, 24H), 1,20-1,98 (m, 23H), 2,00-2,62 (m, 7H), 2,53 (s, 3H), 2,80-3,00 (m, 2H), 2,86 (s, 3H), 3,16 (m, 2H), 3,35 (m, 2H), 3,57 (m, 2H), 3,70 (m, 1H), 3,79 (s, 3H), 4,01 (m, 2H), 4,10 (m, 1H), 4,31 (m, 1H), 4,46 (m, 1H), 4,56 (m, 1H), 4,82 (m, 2H), 5,00 (m, 1H), 5,14 (m, 2H), 5,67 (s, 1H), 6,23 (s, 1H), 6,84 (d, J=8,3, 2H), 7,07 (d, J=8,3, 2H), 7,28 (d, J=8,5, 1H), 7,35 (d, J=7,8, 1H), 8,01 (d, J=8,7, 1H).

[00528] ESI-EM: calculado para C59H92N8O14S: 1.168,65; encontrado m/z 1.169,6 (M+H)+. Exemplo 118 Síntese de [fenil-uréia]8-didemnina A (8PUSAPL1)

[00529] Adicionou-se isocianato de fenila (1,3 μl, 12 μmoles) a uma solução de SAPL2 (10 mg, 10,7 μmoles) em DCM anidro (200 μl) a 0°C sob Ar, e a mistura da reação foi agitada à temperatura ambiente por 4 h. Adicionou-se DCM (10 ml) e a solução foi lavada sucessivamente com solução aquosa de KHSO4 a 10% (5 ml), solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio (5 ml) e salmoura (5 ml). A fase orgânica foi seca com sulfato de sódio, filtrada e concentrada sob pressão reduzida, para produzir 8PUSAPL1 (11 mg, 94%) como um sólido branco.

[00530] 1H RMN (300 MHz, CDCh): δ 0,85-0,94 (m, 24H), 1,11-1,43 (m, 4H), 1,22 (d, J=6,8, 3H), 1,35 (d, J=6,8, 3H), 1,49-1,83 (m, 5H), 1,73 (s, 3H), 2,02 (m, 1H), 2,14 (m, 2H), 2,34 (dt, J1=3,4, J2=6,8, 1H), 2,54 (s, 3H), 2,91 (s, 3H), 3,04 (d, J=16,6, 1H), 3,17 (dd, J1 = 11,2, J2=14,6, 1H), 3,36 (d, J1=3,9, J2=14,2, 1H), 3,57 (dd, J1=4,4, J2=10,7, 1H), 3,59-3,63 (m, 1H), 3,67-3,75 (m, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,96-4,10 (m, 2H), 4,19 (q, J=6,8, 1H), 4,58 (m, 1H), 4,74 (dd, J1=3,9 J2=8,8, 1H), 4,78-4,85 (m, 1H), 5,05 (m, 2H), 5,17 (d, J=3,4, 1H), 6,52 (s, 1H), 6,84 (d, J=8,3 2H), 7,03-7,09 (m, 3H), 7,22-7,32 (m, 4H), 7,39 (d, J=8,3, 2H), 7,93 (d, J=8,8, 1H).

[00531] 13C RMN (75 MHz, CDCI3) δ 11,70, 15,51, 17,16, 18,74, 21,11, 22,41, 23,29, 23,98, 24,94, 25,10, 25,32, 26,97, 28,18, 30,36, 31,57, 34,44, 36,51, 38,86, 41,64, 45,23, 47,30, 49,80, 50,08, 54,60, 55,50, 56,06, 57,51, 62,77, 66,45, 68,17, 70,72, 81,93, 114,36, 120,76, 123,86, 129,12, 130,04, 130,57, 138,78, 141,00, 157,78, 158,87, 169,92, 170,68, 171,49, 172,43, 173,44, 181,47, 192,38, 204,93, 206,66.

[00532] ESl-EM: calculado para C56H83N7O13: 1.161,60; encontrado m/z 1.062,6 (M+H)+. Exemplo 119 Síntese de [feniltiouréia]8-didemnina A (8PTSAPL1)

[00533] Seguindo o procedimento descrito para a síntese de 8PUSAPL1, partindo de SAPL2 (10 mg, 10,7 μmoles) e tioisocianato de fenila (1,3 μl, 12 μmoles), e depois de 15 h de agitação, o composto do título (11 mg, 93%) foi obtido como um sólido branco sem qualquer purificação adicional.

[00534] 1H RMN (300 MHz, CDClβ): δ 0,84-0,99 (m, 24H), 1,14-1,46 (m, 9H), 1,46-1,78 (m, 9H), 1,98-2,19 (m, 3H), 2,34 (m, 1H), 2,54 (s, 3H), 2,91 (m, 1H), 3,00 (s, 3H), 3,08-3,21 (m, 1H), 3,36 (dd, J1=4,4, J2 = 14,1, 1H), 3,55-3,64 (m, 2H), 3,66-3,74 (m, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,96- 4,12 (m, 2H), 4,21 (q, J=6,8, 1H), 4,59 (t, J=5,3, 1H), 4,75 (dd, Ji=3,4, J2=8,3, 1H), 4,83 (t, J=10,3, 1H), 5,05-5,12 (m, 2H), 5,16 (d, J=3,4, 1H), 6,30 (t, J=7,3, 1H), 6,84 (d, J=8,3, 2H), 7,07 (d, J=8,3, 2H), 7,217,37 (m, 6H), 7,93 (d, J=8,8, 1H), 8,08 (d, J=8,8, 1H).

[00535] 13C RMN (75 MHz, CDCI3) δ 11,68, 15,28, 15,85, 17,15, 18,73, 21,12, 22,73, 23,66, 24,01, 25,13, 25,33, 26,62, 28,16, 29,92, 31,53, 32,42, 32,90, 34,41, 36,77, 38,86, 41,69, 47,28, 50,12, 55,50, 56,48, 57,51, 59,87, 66,47, 70,75, 81,91, 114,37, 125,25, 125,95, 126,57, 127,54, 129,12, 129,77, 130,06, 130,57, 135,43, 158,88, 168,54, 169,90, 170,70, 171,49, 172,38, 190,41.

[00536] ESI-EM: calculado para C56H83N7O12S: 1.077,58; encontrado m/z 1.078,5 (M+H)+. Exemplo 120 Síntese de [butil-uréia]8-didemnina A (8BUSAPL1)

[00537] Seguindo o procedimento descrito para a síntese de 8PUSAPL1, partindo de SAPL2 (10 mg, 10,7 μmoles) e tioisocianato de butila (1,4 μl, 12 μmoles), e depois de 4 h de agitação, o composto do título (9 mg, 78%) foi obtido como um sólido branco sem qualquer purificação adicional.

[00538] 1H RMN (300 MHz, CDCh): δ 0,85-0,94 (m, 24H), 1,10-1,80 (m, 24H), 2,03 (m, 1H), 2,13 (m, 2H), 2,33 (m, 1H), 2,55 (s, 3H), 2,72 (s, 3H), 3,02 (d, J=16,1, 1H), 3,17 (dd, J1 = 11,2, J2=14,2, 1H), 3,23-3,40 (m, 3H), 3,62-3,78 (m, 3H), 3,79 (s, 3H), 4,03 (m, 2H), 4,19 (q, J=6,8, 1H), 4,58 (m, 2H), 4,71 (dd, Ji=3,4, J2=8,3, 1H), 4,82 (m, 1H), 5,00 (m, 2H), 5,16 (d, J=3,4, 1H), 5,22-5,28 (m, 2H), 6,85 (d, J=8,8, 2H), 7,08 (d, J=8,3, 2H), 7,21-7,29 (m, 1H), 7,96 (d, J=9,2, 1H).

[00539] ESI-EM: calculado para C54H87N7O13: 1.041,64; encontrado m/z 1.042,7 (M+H)+. Exemplo 121 Síntese de [butiltiouréia]8-didemnina A (8BTSAPL1)

[00540] Seguindo o procedimento descrito para a síntese de 8PUSAPL1, partindo de SAPL2 (10 mg, 10,7 μmoles) e tioisocianato de butila (1,5 μl, 12 μmoles), e depois de 15 h de agitação, o composto do título (10 mg, 86%) foi obtido como um sólido branco sem qualquer purificação adicional.

[00541] 1H RMN (300 MHz, CDCh): δ 0,86-0,97 (m, 24H), 1,14-1,78 (m, 27H), 1,99-2,14 (m, 3H), 2,34 (m, 1H), 2,55 (s, 3H), 2,88 (s, 3H), 3,01 (d, J=16,6, 1H), 3,16 (dd, J1=11,2, J2=14,6, 1H), 3,36 (dd, J1=4,4, J2= 14,2, 1H), 3,49-3,74 (m, 3H), 3,79 (s, 3H), 4,02 (d, J=6,8, 2H), 4,21 (q, J=6,8, 1H), 4,58 (m, 1H), 4,70 (dd, J1=2,9, J2=8,3, 1H), 4,82 (t, J=10,3, 1H), 5,07-5,12 (m, 2H), 5,09 (d, J=3,9, 1H), 5,60 (m, 1H), 6,36 (dd, J1=5,4, J2=8,3, 1H), 6,84 (d, J=8,8 2H), 7,84 (d, J=8,3, 1H), 7,91 (d, J=9,3, 1H).

[00542] ESI-EM: calculado para C54H87N7O12S: 1.057,61; encontrado m/z 1.080,7 (M+Na)+.

Claims

1. Composto, caracterizado pelo fato de que apresenta a fórmula:

em que: X é -0- ou -NH-; Y é C0 ou -COCHCH3CO-; R4 é metila; XI é O ou S; e quando Y é CO, então a) X2 é CR, O (e R2 está ausente), ou N, em que R é inde-pendentemente H ou um grupo Ci a Ce alquila; Ri é H ou um grupo orgânico selecionado do grupo Ci a Ce alquila, um grupo fenila, ou um grupo benzila; e R2 é H; ou b) o grupo aa8:

forma uma prolina N-substituída da fórmula:

em que R3 é um grupo orgânico selecionado de um grupo RSO2- ou um grupo acila RCO-, em que R é um grupo Ci a Ce alquila, e derivados substituídos com um grupo amino opcionalmente protegido por carbamato; ou c) Ri e R2 juntos com X2 formam um grupo cumarinila; ou d) aa8 é substituído por um grupo orgânico selecionado de um grupo RSO2- ou um grupo acila RCO-, onde R é um grupo Ci a Ce alquila, e derivados substituídos com um grupo amino; quandoa) X2 é CR, O (e R2 está ausente), ou N, em que R é inde-pendentemente H ou um grupo Ci a Ce alquila; Ri é H ou um grupo orgânico selecionado do grupo Ci a Ce alquila, um grupo fenila, ou um grupo benzila; e R2 é H; ou b) o grupo aa8:

forma uma prolina N-substituída da fórmula:

em que R3 é um grupo orgânico selecionado de Y é -COCHCH3CO-, então e) X2 é N, Ri é H ou um grupo orgânico selecionado de um grupo Ci a Ce alquila, e um grupo fenila; e R2 é H; ou f) o grupo aa8: forma uma prolina N-substituída da fórmula: em que R3 é um grupo RSO2- , em que R é um grupo Ci a Ce alquila; ou g) Ri e R2 junto com X2 formam um grupo cumarinila; ou h) aa8 é substituído por um grupo RSO2-, onde R é um grupo Ci a Ce alquila; e seus sais farmaceuticamente aceitáveis.

2. Composto de acordo com a reivindicação i, caracterizado pelo fato de que X é -NH-.

3. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que X é -0-.

4. Composto de acordo com qualquer uma das reivindica-ções 1 a 3, caracterizado pelo fato de que Y é -C0-.

5. Composto de acordo com qualquer uma das reivindica-ções 1 a 4, caracterizado pelo fato de que Xi é 0.

6. Composto de acordo com qualquer uma das reivindica-ções 1 a 5, caracterizado pelo fato de que Y é -CO- e X2R1 é um grupo benzilóxi.

7. Composto de acordo com qualquer uma das reivindica-ções 1 a 5, caracterizado pelo fato de que X2R1 é um grupo amino op-cionalmente substituído com um grupo fenila ou butila.

8. Composto de acordo com qualquer uma das reivindica-ções 1 a 5, caracterizado pelo fato de que Y é -CO- e X2R1 é um grupo C1 a C6 alquila.

9. Composto de acordo com a reivindicação 8, caracterizado pelo fato de que X2R1 é um grupo propila, um grupo isopropila ou um grupo pentila.

10. Composto de acordo com qualquer uma das reivindica-ções 1 a 5, caracterizado pelo fato de que -C(=O)XiR1R2 forma uma prolina substituída, em que a prolina substituída é norvalina-prolina, Z- norvalina-prolina, alanina-prolina, Z-alanina-prolina, Boc-alanina- prolina ou isobutiril-prolina.

11. Composto de acordo com qualquer uma das reivindica-ções 1 a 4, caracterizado pelo fato de que X1 é S e X2R1 é um grupo - NHR1, em que R1 é um grupo fenila ou um grupo butila.

12. Composto de acordo com qualquer uma das reivindica-ções 1 a 5, caracterizado pelo fato de que R1 e R2 com X2 formam um grupo cumarinila.

13. Composto de acordo com qualquer uma das reivindica-ções 1 a 4, caracterizado pelo fato de que aa8 é substituído por um grupo orgânico RSO2-, em que R é metila.

14. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que é selecionado dentre:

em que Z e um grupo carboxibenzila.

15. Composto, caracterizado pelo fato de que e selecionado de:

em que Z e um grupo carboxibenzila.

16. Composto de acordo com a reivindicacao 14, caracterizado pelo fato de que e da formula:

17. Composto de acordo com qualquer uma das reiveindicacoes 1 a 16, caracterizado pelo fato de que esta na forma de um sal farmaceuticamente aceitavel.