BRPI0609509A2

BRPI0609509A2 - composto ou um polimorfo, solvato, tautÈmero, enanciÈmero, pró-droga ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, composição farmacêutica, e, uso do composto, polimorfo, solvato, tautÈmero, enanciÈmero, pró-droga ou sal farmaceuticamente aceitável

Info

Publication number: BRPI0609509A2
Application number: BRPI0609509-7A
Authority: BR
Inventors: Srinivas R Kasibhatla; Marco A Biamonte; Jiandong Shi; Marcus F Boehm
Original assignee: Conforma Therapeutics Corp
Priority date: 2005-03-30
Filing date: 2006-03-29
Publication date: 2010-04-13
Also published as: IL186270A; CA2602257A1; US8093229B2; NO20075099L; MX2007011903A; NZ561939A; US7544672B2; IL186270A0; EP1869027A4; US20060223797A1; EP1869027A2; WO2006105372A2; ZA200708520B; WO2006105372A3; JP2008534609A; EA200702109A1; KR20080004550A; AU2006230447A1; US20090318387A1; EA013522B1

Abstract

COMPOSTO OU UM POLIMORFO, SOL VATO, TAUTÈMERO, ENANCIÈMERO, PRó-DROGA OU SAL FARMACEUTICAMENTE ACEITáVEL DO MESMO, COMPOSIçãO FARMACêUTICA, E, USO DO COMPOSTO, POLIMORFO, SOL VATO, TAUTÈMERO, ENANCIÈMERO, PRó-DROGA OU SAL FARMACEUTICAMENTE ACEITáVEL. Descreve-se pirrol[2,3d]pirimidinas de alquinila e análogos relacionados, e demonstra-se sua utilidade como agentes inibidores de proteína de choque com calor 90 (HSP9O, Heat Shock Protein 90) usados no tratamento e na prevenção de vários distúrbios mediados com HSP9O.

Description

"COMPOSTO OU UM POLIMORFO, SOLVATO, TAUTÔMERO,ENANCIÔMERO, PRÓ-DROGA OU SAL FARMACEUTICAMENTEACEITÁVEL DO MESMO, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA, MÉTODOPARA TRATAR UM INDIVÍDUO APRESENTANDO UM DISTÚRBIOMEDIADO COM HSP90, E, USO DO COMPOSTO, POLIMORFO,SOLVATO, TAUTÔMERO, ENANCIÔMERO, PRÓ-DROGA OU SALFARMACEUTICAMENTE ACEITÁVEL"

Referência cruzada

Este pedido reivindica o benefício relativamente ao PedidoProvisional dos USA n° 60/666.899 depositado em 30 de março de 2005, queé incorporado aqui integralmente por referência.

Campo da invenção

A invenção refere-se de uma maneira geral apirrolopirimidinas de alquinila e sua utilidade de amplo espectro, p. ex., nainibição da proteína de choque com calor 90 (HSP90) para, com isso, tratar ouprevenir doenças mediadas com HSP90.

Fundamentos

HSP90s são proteínas chaperone ubíquas que estão envolvidasna dobragem, ativação e montagem de uma ampla faixa de proteínas,incluindo proteínas-chave envolvidas em transdução de sinal, regulaçãotranscricional e controle do ciclo celular. Pesquisadores reportaram que asproteínas chaperone HSP90 estão associadas com importantes proteínas desinalização, como receptores de hormônio esteróide, e quinases de proteína,incluindo, p. ex., Raf-1, EGFR, quinases da família v-Src, Cdk4, e ErbB-2(Buchner J. TIBS 1999, 24, 136-141; Stepanova, L. et al. Genes Dev. 1996,10, 1491-502; Dai, K. et al. J. Biol. Chem. 1996, 271, 22030-4). Estudosindicam adicionalmente que determinadas co-guias, p. ex., HSP70,p60/Hop/Stil, Hip, Bagl, HSP40/Hdj2/Hsjl, imunofilinas, p23, e p50, podemauxiliar HSP90 em sua função (ver, p. ex., Caplan, A. Trends in Cell Biol.1999, 9, 262-68).

HSP90 apresenta um bolso de ligação em sua ponta N. Estebolso é altamente conservado e apresenta fraca homologia com o sítio deligação de ATP de DNA girase (Stebbins, C. et al, supra; Grenert, J.P. et al.J. Biol. Chem. 1997, 272, 23 843-50). Adicionalmente já se mostrou que,ambos, ATP e ADP, ligam este bolso com baixa afinidade, e que apresentambaia atividade de ATPase (Proromou, C. et al. Cell 1997, 90, 65-75;Panaretou, B. et al. EMBO J. 1998, 17,4829-36). Estudos realizados in vitro ein vivo demonstraram que a ocupação deste bolso N-terminal por ansamicinase outros inibidores de HSP90 altera a função de HSP90 e inibe a dobragem deproteína. Em concentrações mais elevadas já se mostrou que ansamicinas eoutros inibidores de HSP90 impedem a ligação de substratos de proteína àHSP90 (Scheibel, T.H. et al. Proc. Natl. Acad Sei. USA 1999, 96,1297-302;Schulte, T. W. et al, J. Biol Chem. 1995, 270, 24585-8; Whitesell, L., et al,

Proc. Natl. Acad. Sei. USA, 1994, 91, 8324-8328). Inibidores de HSP90, p.ex., ansamicinas, também demonstraram inibir a liberação dependente-de-ATP de substratos de proteína associados com chaperone (Schneider, CL. etal, Proc. Natl. Acad Sei., USA, 1996, 93, 1453641; Sepp-Lorenzino et al, J.Biol. Chem. 1995, 270, 16580-16587). Em qualquer caso, os substratos sãodegradados por meio de um processo dependente de ubiquitina no proteasoma(Schneider, C. L., supra; Sepp-Lorenzino, L., et al, J. Biol. Chem., 1995, 270,16580-16587; Whitesell, L. et al, Proc. Natl. Acad. Sei. USA. 1994, 91,8324-8328).

Desestabilização de substrato de HSP90 ocorre igualmente emcélulas de tumor e células não-transformadas, e mostrou-se que sãoparticularmente efetivas em um subconjunto de reguladores de sinalização, p.ex., Raf (Schulte, T. W. et al, Biochem. Biophys. Res. Commun.1997,239,655-9; Schulte, T. W., et al, J. Biol. Chem. 1995, 270, 24585-8),receptores esteróides nucleares (Segnitz, B.; U. Gebring, J. Biol. Chem., 1997,272, 18694-18701; Smith, D. F. et ai, Mol CellBiol, 1995, 15, 6804-12), v-Src (Whitesell, L., et ai, Proc. Natl. Acad. Sei. USA, 1994, 91, 8324-8328) edeterminadas tirosina quinases de transmembrana (Sepp-Lorenzino, L. et ai,J. Biol Chem., 1995, 270, 16580-16587), como receptor de EGF (EGFR) eHer2/Neu (Hartmann, F., et ai, Int. J. Câncer 1997, 70, 221-9; Miller, P. etai, Câncer Res. 1994, 54, 2724-2730; Mimnaugh, E. G., et ai, J. Biol.Chem., 1996, 271, 22796-801; Schnur, R et ai, J. Med. Chem., 1995, 38,3806-3812), CDK4, e p53 mutante, Erlichman et ai, Proc. AACR, 2001, 42,resumo 4474. A perda induzida com inibidor de HSP90 destas o proteínasleva à disrupção seletiva de determinadas vias reguladoras e a resultados nainterrupção do crescimento em fases específicas do ciclo celular (Muise-Heimericks, R. C. et ai, J. Biol. Chem., 1998, 273, 29864-72), e apoptose,e/ou diferenciação de células assim tratadas (Vasilevskaya, A. et ai, CâncerRes., 1999, 59, 3935-40). Portanto, inibidores de HSP90 representam umagrande promessa para o tratamento e/ou prevenção de muitos tipos decânceres e distúrbios proliferativos, e também são promissores comoantibióticos tradicionais.

Adicionalmente à atividade anti-câncer e anti-tumorogênica,inibidores de HSP90 também têm sido implicados numa ampla variedade deoutras utilidades, incluindo o uso como agentes antiinflamação, agentes anti-doença infecciosa, agentes para tratar autoimunidade, agentes para trataracidente vascular, isquemia, esclerose múltipla, distúrbios cardíacos,distúrbios relacionados com o sistema nervoso central e agentes úteis parapromover regeneração de nervos (ver, p. ex., Rosen et ai, WO 02/09696(PCT/US01/23640); Degranco et ai, WO 99/51223 (PCT/US99/07242);Gold, Patente dos Estados Unidos n° 6.210.974 BI; DeFranco et al, Patentedos Estados Unidos n° 6.174.875. Sobrepondo um tanto ao indicado acima, hárelatos na literatura de que distúrbios fibrogenéticos incluindo, embora semlimitação, escleroderma, polimiosite, lúpus sistêmico, artrite reumatóide,cirrose do fígado, formação de quelóide, nefrite intersticial, e fibrosepulmonar também pode se tratável com inibidores de HSP90. Strehlow, WO02/02123 (PCT/US01/20578). Outra modulação de HSP90, moduladores eusos adicionais dos mesmos são reportados nos Pedidos nums.PCT/US03/04283, PCT/US02/35938, PCT/US02/16287, PCTVUS02/06518,PCT7US98/09805, PCT/US00/09512, PCT/USO1/09512, PCT/US01/23640,PCT/US01/46303, PCT/US01/46304, PCT/US02/06518, PCT/US02/29715,PCT/US02/35069, PCT/US02/35938, PCT/US02/39993, 60/293,246,60/371,668, 60/335.391, 60/128.593, 60/337.919, 60/340.762, 60/359.484 e 60/331.893.

Recentemente reportou-se sobre derivados de purina, incluindopirrolopirimidinas apresentando atividade inibidora de HSP90, p. ex., noPCT/US02/35069; PCT/US02/36075, Pedido de Patente dos Estados Unidosn° 10/945.851 e PCT/US04/31248. No entanto, permanece uma necessidade einibidores de pirrolopirimidina HSP90 potentes e inéditos adicionais queatendem aos exigentes critérios biológicos e farmacêuticos requeridos paraproceder a ensaios clínicos em humanos.

Sumário da invenção

A presente invenção refere-se a pirrolo[2,3-d]pirimidinas dealquinila e compostos relacionados que apresentam ampla utilidade, p. ex.,inibindo HSP90 e tratando doenças que são dependentes de HSP90. Estescompostos diferem de uma pirrolopirimidina parental que foi divulgada empedidos de patentes precedentes pelo fato de que são substituídos por umalquino, p. ex., acetileno, no anel de carbono na quinta posição (posição C-5) e apresentam atividade inibidora de HSP90 aperfeiçoada relativamente acompostos parentais.

Em um aspecto, a invenção compreende compostos depirrolo[2,3-d]pirimidina de alquinila de Fórmula I:

(I)<formula>formula see original document page 6</formula>

em que:

R° é selecionado do grupo que consiste de hidrogênio,halogênio, alquila inferior, -CN, -SR, -OR8, e -NHR8;

R1 é selecionado do grupo que consiste de halogênio, -OR11, -SR11 e alquila inferior;

R2 é -NHR8;

R3 é selecionado do grupo que consiste de hidrogênio, -CN, -C(0)OH, -OR11 -SR11 -C(0)R9, -NR8R10, alquila inferior, alquenila inferior,alquinila inferior, per-haloalquila inferior, alquilsilila inferior, arila,heteroarila, aliciclila e heterociclila, todos opcionalmente substituídos, emque:

os grupos arila, heteroarila, aliciclila e heterociclila são mono-,bi- ou tri-cíclicos;

R8 e R10 tomados conjunto com o átomo de N a que estãoligados formam opcionalmente um anel opcionalmente substituídocompreendendo de 3 a 7 átomos de anel, em que, adicionalmente a referidoátomo de N, de 0 a 3 dos átomos de anel são heteroátomos selecionados dogrupo que consiste de O, S e N;

os substituintes opcionais em R3 são selecionados do grupoque consiste de alquila inferior, alquenila inferior, alquenila inferior, -CN, -C(0)OH, -N02,-SR8, -OR8,-C(0)R9, -NR8R8, arila inferior, heteroarila,aliciclila, heterociclila inferior, arilalquila, heteroarilalquila, amino,alquilamino, dialquilamino, arilalquilamino, diarilamino, heteroarilamino, di-heteroarilamino, aril-heteroarilamino, oxo, per-haloalquila, per-haloalcóxi,per-haloacila, guanidinila, piridinila, tiofenila, furanila, indolila, indazolila,fosfonila, fosfatidila, fosforamidila, sulfanila, sulfinila, sulfonila,sulfonamidila, carbamila, urila, tiourila e tioamidila, em que

R8 e R8 tomados conjunto com o átomo de N a que estãoligados formam opcionalmente um anel opcionalmente substituídocompreendendo de 3 a 7 átomos de anel, em que, adicionalmente a referidoátomo de N, de 0 a 3 dos átomos de anel são heteroátomos selecionados dogrupo que consiste de O, S e N;

R4 é selecionado do grupo que consiste de alquileno inferioropcionalmente substituído, -

C(R12)2-,

-C(O)-, -C(S)-, -S(O)- e -S02-;

R5 é selecionado do grupo que consiste de arila, heteroarila,aliciclila e heterociclila, em que:

o grupo arila é substituído por de 2 a 5 substituintes;

o grupo heteroarila é substituído por de 2 a 5 substituintes;

o grupo aliciclila é substituído por de 3 a 5 substituintes;

o grupo heterociclila é substituído por de 3 a 5 substituintes;

os substituintes em R5 são selecionados do grupo que consistede halogênio, alquila inferior, alquenila inferior, alquinila inferior, -CN, -C(0)OH, -N02, -SR, -OR8 -C(0)R9, -NR8R10, arila inferior, heteroarilainferior, aliciclila inferior, heterociclila inferior, arilalquila, heteroarilalquila,tioalquila, amino, alquilamino, dialquilamino, arilalquilamino, oxo, per-haloalquila, per-haloalcóxi, per-haloacila, guanidinila, piridinila, tiofenila,füranila, indolila, indazolila, fosfonila, fosfatidila, fosforamidila, sulfanila,sulfinila, sulfonila, sulfonamidila, carbamila, urila, tiourila e tioamidila, emque

R8 é selecionado do grupo que consiste de hidrogênio, alquilainferior, alquenila inferior, alquinila inferior, heteroalquila inferior,heteroalquenila inferior, heteroalquinila inferior, arila inferior, heteroarilainferior e -C(0)R9;

R9 é selecionado do grupo que consiste de H, alquila inferior,alquenila inferior, alquinila inferior, arila inferior, heteroarila inferior, -NR10R10e-OR11,em que

R10 e R10 tomados conjunto com o átomo de N a que estãoligados formam opcionalmente um anel opcionalmente substituídocompreendendo de 3 a 7 átomos de anel, em que, adicionalmente a referidoátomo de N, de 0 a 3 dos átomos de anel são heteroátomos selecionados dogrupo que consiste de O, S e N;

R10 é selecionado do grupo que consiste de hidrogênio, alquilainferior, alquenila inferior, alquinila inferior, heteroalquila inferior,heteroalquenila inferior, heteroalquinila inferior, arila inferior, heteroarilainferior e-C(0)Rn;

R11 é selecionado do grupo que consiste de alquila inferior,alquenila inferior, alquinila inferior, arila inferior e heteroarila inferior; e

R12 é selecionado do grupo que consiste de hidrogênio ealquila inferior.

Também se inclui no escopo da presente invenção formasestereoisoméricas, incluindo os enanciômero e diaestereoisômerosindividuais, misturas racêmicas, e misturas diaestereoméricas, e combinaçõesdos mesmos, onde apropriado, e também polimórficos, racemizados eestereoisômeros específicos, solvatos, ésteres, tautômeros, sais e pró-drogasfarmaceuticamente aceitáveis destes compostos.

Em outro aspecto, a invenção proporciona composiçõesfarmacêuticas compreendendo os compostos da invenção, em particular, oscompostos de fórmula I, ou um polimórfico, solvato, éster, tautômero,diaestereoisômero, enanciômero, sal ou pró-droga farmaceuticamenteaceitável do mesmo, e um ou mais excipientes farmacêuticos, para uso notratamento ou prevenção de doenças e condições que são dependentes deHSP90.

Em outro aspecto adicional, a invenção refere-se a métodos deprevenir ou tratar condições e distúrbios mediados com HSP90 por meio deadministrar uma composição farmacêutica que compreende uma quantidadefarmaceuticamente efetiva de um composto de fórmula I, ou um polimórfico,solvato, éster, tautômero, diaestereômero, enanciômero, sal ou pró-drogafarmaceuticamente aceitável do mesmo.

Em uma concretização, a invenção proporciona um métodopara tratar um indivíduo apresentando um distúrbio selecionado do grupo dedoenças inflamatórias, infecções, distúrbios autoimunes, acidente vascular,isquemia, distúrbios cardíacos, distúrbios neurológicos, distúrbiosfibrogenéticos, distúrbios proliferativos, tumores, leucemias, leucemialinfocítica crônica, síndrome de imunodeficiência adquirida, neoplasmas,cânceres, carcinomas, doenças metabólicas, e doenças malignas.

Em outra concretização, a invenção proporciona um métodopara tratar um indivíduo apresentando um distúrbio fibrogenético, como, porexemplo, escleroderma, polimiosite, lúpus sistêmico, artrite reumatóide,cirrose do fígado, formação de quelóide, nefrite intersticial ou fibrosepulmonar.

Em outra concretização, a invenção proporciona uma terapiade combinação compreendendo a administração de uma quantidadefarmaceuticamente efetiva de um composto de fórmula I, ou um solvato,tautômero, diaestereômero, enanciômero, sal, polimórfico, ou pró-drogafarmaceuticamente aceitável do mesmo de acordo com qualquer um dosaspectos precedentes ou concretizações, e pelo menos um agente terapêuticoselecionado do grupo de agentes citotóxicos, agentes anti-angiogênese eagentes anti-neoplásicos. O agente anti-neoplásico pode ser selecionado dogrupo de agentes alquiladores, anti-metabólitos, epidofilotoxinas, enzimasantineoplásicas, inibidores de topoisomerase, procarbazinas, mitoxantronas,complexos de coordenação de platina, modificadores de resposta biológica einibidores de crescimento, agentes terapêuticos hormonais/anti-hormonais, efatores de crescimento hematopoiético.

Em um aspecto adicional, a invenção refere-se ao uso doscompostos de fórmula I na fabricação de um medicamento.

Em outro aspecto adicional, a invenção refere-se ao uso doscompostos de fórmula I na fabricação de um medicamento para o tratamentoterapêutico e/ou profilático de condições e doenças dependentes de HSP90.

INCORPORAÇÃO POR REFERÊNCIA

Todas as publicações e pedidos de patentes mencionados nestaespecificação são incorporados aqui por referência na mesma medida como secada publicação ou pedido de patente individual houvesse sido indicadoespecificamente e individualmente como incorporado por referência.

BREVE DESCRIÇÃO DOS DESENHOS

As novas características da invenção são apresentadas comparticularidade nas reivindicações anexas. Uma compreensão melhor dascaracterísticas e vantagens da presente invenção será obtida com referência àdescrição detalhada a seguir que apresenta concretizações ilustrativas, em queos princípios da invenção são usados, e aos desenhos anexos em que:

FIGURA 1 representa um gráfico do volume do tumor (mm3)contra o tempo (dias), para animais que receberam administração decompostos da presente invenção (e controles) em um modelo de camundongoN87 de Enxerto de Carcinoma Gástrico, como descrito no Exemplo 70.

FIGURA 2 representa um gráfico do volume do tumor (mm3)contra o tempo (dias), para animais que receberam a administração decompostos da presente invenção (e controles) em um modelo de camundongoNCI295 de Enxerto exógeno de Carcinoma Adrenocortical, como descrito noExemplo 71.

FIGURA 3 representa um gráfico do volume do tumor (mm3)contra o tempo (dias), para animais que receberam administração decompostos da presente invenção (e controles) em um modelo de camundongode SK-MEL-28 Enxerto exógeno de Melanoma, como descrito no Exemplo72.

FIGURA 4 representa um gráfico do volume do tumor (mm3)contra o tempo (dias), para animais que receberam administração decompostos da presente invenção (e controles) em um modelo de camundongoum gráfico do volume do tumor (mm3) contra o tempo (dias), para animaisque receberam administração de compostos da presente invenção (e controles)em um modelo de camundongo de HT29 Enxerto exógeno de Carcinoma deColo, como descrito no Exemplo 73.

FIGURA 5 representa análise de proteína com Western Blot decélulas de carcinoma gástrico N87 após tratamento com compostos 2 e 23 emconcentrações e momentos variáveis, como descrito no Exemplo 74.

DESCRIÇÃO DETALHADA DA INVENÇÃO

Embora concretizações preferidas da presente invençãotenham sido mostradas e descritas aqui, será óbvio para aqueles com práticana arte de tal forma que referidas concretizações são proporcionadas apenas atítulo de exemplo. Numerosas variações, alterações, e substituições poderãoocorrer àqueles com prática na arte sem afastar-se da invenção. Deveria-secompreende que é possível empregar na prática da invenção váriasalternativas para as concretizações da invenção aqui descritas. Pretende-seque as reivindicações a seguir definam o escopo da invenção e que métodos eestruturas no escopo destas reivindicações e seus equivalentes sejam cobertos.Definições

Um "derivado ou pró-droga farmaceuticamente aceitável"meio qualquer sal, éster, sal de um éster farmaceuticamente aceitável ou outroderivado farmaceuticamente aceitável de um composto desta invenção, que,ao ser administrado a um recipiente, é capaz de proporcionar, seja diretamenteou indiretamente, um composto desta invenção ou um metabólicofarmaceuticamente ativo ou resíduo do mesmo. Derivados ou pró-drogasparticularmente favorecidos são aqueles que incrementam abiodisponibilidade dos compostos desta invenção quando referidos compostossão administrados a um paciente (p. ex., permitindo que compostoadministrado oralmente seja mais facilmente absorvido no sangue) ou queincrementam o fornecimento do composto parental em um compartimentobiológico (p. ex., o cérebro ou sistema linfático). Um "sal farmaceuticamenteaceitável" pode ser preparado para qualquer composto da invençãoapresentando funcionalidade capaz de formar um sal, por exemplo, umafuncionalidade de ácido ou base. Sais farmaceuticamente aceitáveis podemser derivados de bases e ácidos orgânicos ou inorgânicos. Compostos dainvenção que contêm um ou mais grupos funcionais básicos, (p. ex., amino,alquilamino), são capazes de formando sais farmaceuticamente aceitáveiscom ácidos orgânicos e inorgânicos farmaceuticamente aceitáveis. Estes saispodem ser preparados in situ durante o isolamento e purificação finais doscompostos da invenção, ou reagindo-se separadamente um compostopurificado da invenção em sua forma de base livre com um ácido orgânico ouinorgânico vantajoso, e isolando-se o sal assim obtido. Exemplos de sais deácidos vantajosos incluem acetato, adipato, alginato, aspartato, benzoato,benzenossulfonato, bissulfato, butirato, citrato, canforato, canforsulfato,ciclopentanopropionato, digluconato, dodecilsulfato, etanossulfonato,formiato, fumarato, glucoeptanoato, glicerofosfato, glicolato, hemissulfato,heptanoato, hexanoato, cloridrato, bromidrato, iodridrato, 2-hidroxietanossulfonato, lactato, maleato, malonato, metanossulfonato, 2-naftalenossulfonato, nicotinato, nitrato, oxalato, palmoato, pectinato,persulfato, 3-fenilpropionato, fosfato, picrato, pivalato, propionato, salicilato,succinato, sulfato, tartarato, tiocianato, tosilato e undecanoato. Outros ácidos,como oxálico, embora não sejam farmaceuticamente aceitáveis per se, podemser empregados na preparação de sais úteis como intermediários na obtençãodos compostos da invenção e seu sais de adição de ácido farmaceuticamenteaceitáveis. Ver, p. ex., Berge et ai, "Pharmaceutical Salts", J. Pharm. Sei.1977, 66:1-19.

Compostos da presente invenção que contêm um ou maisgrupos com funcionalidade ácido são capazes de formar saisfarmaceuticamente aceitáveis com bases farmaceuticamente aceitáveis. Otermo "sais farmaceuticamente aceitáveis" refere-se, nestes casos, aos sais deadição de base orgânica ou inorgânica relativamente não-tóxicos decompostos da presente invenção. Estes sais também podem ser preparados insitu durante o isolamento e purificação finais dos compostos, ou reagindo-seseparadamente o composto purificado em sua forma de ácido livre com umabase vantajosa, como o hidróxido, carbonato ou bicarbonato de um cátion demetal farmaceuticamente aceitável, com amônia, ou com uma amina orgânicaprimária, secundária ou terciária farmaceuticamente aceitável. Cátionsfarmaceuticamente aceitáveis representativos incluem sais alcalinos ou demetal alcalino, como sais de lítio, sódio, potássio, cálcio, magnésio, ealumínio e análogos. Exemplos ilustrativos de algumas das bases que podemser usados incluem hidróxido de sódio, hidróxido de potássio, hidróxido decolina, carbonato de sódio, N^Ci.4 alquila)4, e análogos. Aminas orgânicasrepresentativas úteis para a formação de sais de adição de base incluemetilamina, dietilamina, etilenodiamina, etanolamina, dietanolamina, piperazinae análogos. Esta invenção também compreende a quaternização de quaisquergrupos básicos contendo nitrogênio dos compostos aqui divulgados. Épossível obter produtos dispersáveis ou solúveis em água ou óleo por meio dereferida quaternização. Ver, por exemplo, Berge et al., supra.

Deveria-se compreender que uma referência a um sal inclui asformas de adição de solvente ou formas cristalinas dos mesmos,particularmente solvatos ou polimórficos. Solvatos contêm, ou quantidadesestequiométricas ou não-estequiométricas de um solvente, e sãofreqüentemente formadas durante o processo de cristalização com solventesfarmaceuticamente aceitáveis, como água, etanol, e análogos. Hidratos sãoformados quando o solvente é água, ou alcoolatos são formados quando osolvente é álcool. Polimórficos incluem as diferentes disposições deempacotamento cristalino da mesma composição elementar de um composto.Polimórficos apresentam usualmente diferentes padrões de difração de raios-X, espectros infravermelhos, pontos de fusão, densidade, dureza, forma decristal, propriedades ópticas e elétricas, estabilidade, e solubilidade. Diversosfatores, como o solvente de recristalização, taxa de cristalização, etemperatura de armazenamento podem ocasionar que uma única forma decristal venha a dominar. Pró-drogas farmaceuticamente aceitáveis doscompostos desta invenção incluem, embora sem limitação, ésteres,carbonates, tiocarbonatos, derivados de N-acila, derivados de N-aciloxialquila, derivados quaternários de amidas terciárias, bases de N-Mannich, bases de Schiff, conjugados de aminoácido, ésteres de fosfato, saismetálicos de ésteres de sulfonato.

Posições vantajosas para derivatização dos compostos dainvenção para criar "pró-drogas" incluem, embora sem limitação, substituiçãoem 2-amino. Aqueles com prática ordinária na arte terão o conhecimento e osmeios de realizar isto sem experimentação desnecessária. Várias formas depró-drogas são bem conhecidas na arte. Ver, por exemplo, Design ofProdrugs, Bundgaard, A. Ed., Elseview, 1985 e Method in Enzymology,Widder, K. et al., Ed.; Academic, 1985, vol. 42, p. 309-396; Bundgaard, H."Design and Application of Prodrugs" em A Textbook of Drug Design eDevelopment, Krosgaard-Larsen e H. Bundgaard, Ed., 1991, capítulo 5, p.113-191; e Bundgaard, H., Advanced Drug Delivery Review, 1992, 8, 1-38,cada uma das quais é incorporada aqui por referência.

O termo pró-drogas como empregado aqui inclui, embora semlimitação, os grupos e combinações destes grupos a seguir, por exemplo, biscarbomatos, ou um carbomato e um éster de aciloxialquila ou um cabomato euma amida, etc.

Pró-drogas de amina:

<formula>formula see original document page 15</formula>

Pró-drogas hidróxi incluem, embora sem limitação, ésteres deaciloxialquila, ésteres de alcoxicarboniloxialquila, ésteres de alquila, ésteresde arila e ésteres contendo dissulfeto.

O termo "alquila" como usado aqui, sozinho ou emcombinação, refere-se a um mono-radical hidrocarboneto saturado de cadeiareta opcionalmente substituído, ou de cadeia ramificada opcionalmentesubstituído apresentando de um a cerca de trinta carbonos, maispreferivelmente de um a doze carbonos. Exemplos de radicais alquila incluemmetila, etila, n-propila, isopropila, n-butila, isobutila, sec-butila, t-butila, t-amila, pentila, hexila, heptila, octila e análogos. O termo "cicloalquila" comousado aqui, sozinho ou em combinação, refere-se a mono-radicais alquilacíclica que incluem radicais alquila monocíclicos, bicíclicos, tricíclicos emulticíclicos superiores, em que cada porção cíclica tem de três a cerca deoito átomos de carbono. Exemplos de radicais cicloalquila incluemciclopropila, ciclobutila, ciclopentila, cicloexila e análogos. O termo "alquilainferior" como usado aqui, sozinho ou em combinação, refere-se a um alquilacontendo menos átomos de carbono, p. ex., um contendo de um a cerca deseis átomos de carbono. O termo "alquenila" como usado aqui, sozinho ou emcombinação, refere-se a um radical hidrocarboneto de cadeia retaopcionalmente substituído, ou de cadeia ramificada opcionalmente substituídoapresentando uma ou mais duplas ligações carbono-carbono e apresentandode dois a cerca de trinta átomos de carbono, mais preferivelmente de dois acerca de dezoito carbonos. Exemplos de radicais alquenila incluem etenila,propenila, butenila, 1,3-butadienila e análogos.

O termo "cicloalquenila" como usado aqui, sozinho ou emcombinação, refere-se a radicais alquenila cíclicos que incluem radicaisalquenila monocíclicos, bicíclicos, tricíclicos e multicíchcos superiores, emque cada porção cíclica tem de três a cerca de oito átomos de carbono.

O termo "alquenila inferior" como usado aqui, sozinho ou emcombinação, refere-se a um alquenila apresentando de dois a cerca de seiscarbonos.

O termo "alquinila" como usado aqui, sozinho ou emcombinação, refere-se a um radical hidrocarboneto de cadeia retaopcionalmente substituído ou de cadeia ramificada opcionalmente substituídoapresentando uma ou mais triplas ligações carbono-carbono e apresentando dedois a cerca de trinta átomos de carbono, mais preferivelmente de dois a cercade doze átomos de carbono, ou de dois a cerca de seis átomos de carbono, etambém aqueles apresentando de dois a cerca de quatro átomos de carbono.Exemplos de radicais alquinila incluem etinila, 2-propinila, 2-butinila, 1,3-butadiinila e análogos.

O termo "cicloalquinila" como usado aqui, sozinho ou emcombinação, refere-se a radicais alquinila cíclica que incluem radicaisalquinila monocíclicos, bicíclicos, tricíclicos e multicíchcos superiores emque cada porção cíclica tem de três a cerca de oito átomos de carbono.

O termo "alquinila inferior" como usado aqui, sozinho ou emcombinação, refere-se a um alquinila apresentando de dois a cerca de seiscarbonos.

Os termos "heteroalquila", "heteroalquenila" e"heteroalquinila" como usados aqui, sozinhos ou em combinação, referem-seincluindo estruturas alquila, alquenila e alquinila opcionalmente substituídas,como descrito acima, e que apresentam um ou mais átomos de cadeia doesqueleto selecionados de um átomo diferente de carbono, p. ex., oxigênio,nitrogênio, enxofre, fósforo ou combinações dos mesmos.

Os termos "heteroalquila inferior", "heteroalquenila inferior" e"heteroalquinila inferior" como usados aqui, sozinhos ou em combinação,referem-se, respectivamente, a um heteroalquila, heteroalquenila eheteroalquinila apresentando de dois a cerca de seis carbonos.

O termo "alquileno" como usado aqui, sozinho ou emcombinação, refere-se a um grupo hidrocarbila divalente; porque ele édivalente, ele pode ligar dois outros grupos entre si. Tipicamente, ele refere-sea -(CH2)n- em que n é 1 a 8 e, de preferência, n é de 1 a 4, embora ondeespecificado, um alquileno também pode se substituído por outros grupos, epode ser de qualquer outro comprimento, e as valências abertas não precisamencontrar-se em extremidades opostas de uma cadeia. Assim, -CH(Me)- e -C(Me)2- também podem ser referidos como alquilenos, como o pode umgrupo cíclico, como ciclopropan-l,l-diila. Onde um grupo alquileno ésubstituído, os substituintes incluem aqueles tipicamente presentes em gruposalquila como descrito aqui. O termo "alquileno inferior" como usado aqui,sozinho ou em combinação, refere-se a um grupo alquileno contendo menosátomos de carbono, p. ex., um contendo de um a cerca de seis átomos decarbono. O termo "cadeia de carbono" como usado aqui, sozinho ou emcombinação, refere-se a qualquer grupo alquila, alquenila, alquinila, ouheteroalquila, heteroalquenila, ou heteroalquinila, que é linear, cíclico, ouqualquer combinação do mesmo. Se a cadeia for parte de um ligante e aqueleligante compreender um ou mais anéis como parte da espinha dorsal denúcleo, para fins de calcular o comprimento da cadeia, a "cadeia" incluiapenas aqueles átomos de carbono que constituem a parte inferior ou a partesuperior de um dado anel, e não ambos, e onde a parte superior e a parteinferior do(s) anel/anéis não é/são equivalente(s) em termos de comprimento,deve-se usar a distância menor para determinar o comprimento da cadeia. Se acadeia contém heteroátomos como parte da espinha dorsal, aqueles átomosnão são calculados como parte do comprimento da cadeia de carbono.

O termo "anel com membros" como usado aqui, sozinho ouem combinação, refere-se a qualquer estrutura cíclica, incluindo anéisaromáticos, heteroaromáticos, alicíclicos, heterocíclicos, monocíclicos,policíclicos, e anéis fundidos. O termo "membros" deve significar a indicaçãodo número de átomos do esqueleto (ou anel) que constituem o sistema deanel. Assim, por exemplo, pirrol, pirrolidina, succinimida, maleimida,tetraidrofurano e tiofeno são anéis de cinco membros; piridina, pirano,morfolina, piperazina, piperidina e pirimidina são anéis de seis membros; eftalimida, indol e indano são anéis fundidos com nove membros.

O termo "arila" como usado aqui, sozinho ou em combinação,refere-se a um mono-radical hidrocarboneto aromático opcionalmentesubstituído de seis a cerca de vinte átomos de anel, e inclui anéis mono-aromáticos e anéis aromáticos fundidos. Um radical de anel aromáticofundido contém de dois a quatro anéis fundidos, em que o anel de ligação éum anel aromático, e os outros anéis individuais no anel fundido podem seraromáticos, heteroaromáticos, alicíclicos ou heterocíclicos.

Adicionalmente, o termo arila inclui anéis mono-aromáticos eanéis aromáticos fundidos contendo de seis a cerca de doze átomos decarbono, e também aqueles contendo de seis a cerca de dez átomos decarbono. Exemplos de grupos arila incluem, sem limitação, sistemas de anelfenila, naftila, antrila, crisenila, e benzopirenila.

O termo "arila inferior" como usado aqui, sozinho ou emcombinação, refere-se a um arila apresentando seis a cerca de dez carbonos deanel do esqueleto, p. ex., sistemas de anel fenila e naftila.

O termo "heteroarila" como usado aqui, sozinho ou emcombinação, refere-se a radicais aromáticos opcionalmente substituídoscontendo de cerca de cinco a cerca de vinte átomos de anel do esqueleto eonde um ou mais dos átomos de anel é um heteroátomo, como, por exemplo,oxigênio, nitrogênio, enxofre, selênio ou fósforo. O termo heteroarila incluiopcionalmente radicais mono-heteroarila substituídos e radicais heteroarilafundidos apresentando pelo menos um heteroátomo (p. ex., quinolina,benzotiazol). Um radical heteroarila fundido pode conter de dois a quatroanéis fundidos em que o anel de ligação é um anel heteroaromático, os outrosanéis individuais no sistema de anel fundido podem ser aromáticos,heteroaromáticos, alicíclicos ou heterocíclicos. O termo heteroarila tambéminclui mono-heteroarilas ou heteroarilas fundidas apresentando de cinco acerca de doze átomos de anel do esqueleto, e também aqueles apresentando decinco a cerca de dez átomos de anel do esqueleto. Exemplos de heteroarilasincluem, sem limitação, furanila, benzofuranila, cromenila, piridila, pirrolila,indolila, quinolinila, piridil-N-óxido, pirimidila, pirazinila, imidazolila,pirazolila, oxazolila, isoxazolila, benzotiozolila, benzimidazolila,benzoxazolila, benzotiadiazolila, benzoxadiazolila, benzotriazolila,quinolinila, isoquinolinila, indolila, purinila, indolizinila, tienila e análogos eseus óxidos.

O termo "heteroarila inferior" como usado aqui, sozinho ou emcombinação, refere-se a um heteroarila apresentando de cinco a cerca de dezátomos de anel do esqueleto, p. ex., piridila, tienila, pirimidila, pirazinila,pirrolila, ou furanila.Os termos "alicíclico" e "aliciclila" como usados aqui,sozinhos ou em combinação, referem-se a um sistema de anel hidrocarbonetonão-aromático saturado ou insaturado opcionalmente substituído contendo detrês a cerca de vinte átomos de anel. O termo alicíclico inclui radicais mono-alicíclicos e alicíclicos fundidos. Um alicíclico fundido pode conter de dois aquatro anéis fundidos em que o anel de ligação é um anel alicíclico, e osoutros anéis individuais no radical alicíclico fundido podem ser aromáticos,heteroaromáticos, alicíclicos e heterocíclicos. O termo alicíclico tambéminclui radicais mono-alicíclicos e alicíclicos fundidos contendo de três a cercade doze átomos de carbono, como também aqueles contendo de três a cerca dedez átomos de carbono. Exemplos de alicíclicos incluem, sem limitação,sistemas de anel ciclopropila, ciclopropenila, ciclobutila, ciclopentila,ciclodecila, ciclododecila, ciclopentadienila, indanila, e ciclooctatetraenila. Ostermos "alicíclico inferior" e "aliciclila inferior" como usado aqui, sozinho ouem combinação, referem-se a um alicíclico apresentando de três a cerca dedez carbonos de anel do esqueleto, p. ex., ciclopropila, ciclopropenila,ciclobutila, ciclopentila, decalinila, e cicloexila.

Os termos "heterocíclico" e "heterociclila" como usados aqui,sozinhos ou em combinação, referem-se a radicais de anel não-aromáticosaturado ou insaturado opcionalmente substituído contendo de cinco a cercade vinte átomos de anel, em que um ou mais dos átomos de anel sãoheteroátomos, como, por exemplo, oxigênio, nitrogênio, enxofre, e fósforo. Otermo heterocíclico inclui radicais de anel mono-heterocíclico e heterocíclicofundido. Um radical heterocíclico fundido pode conter de dois a quatro anéisfundidos em que o anel de ligação é um heterocíclico, e os outros anéisindividuais no radical heterocíclico fundido podem ser aromáticos,heteroaromáticos, alicíclicos ou heterocíclicos. O termo heterocíclico tambéminclui radicais alicíclicos mono-heterocíclicos e alicíclicos fundidosapresentando de cinco a cerca de doze átomos de anel do esqueleto, e tambémaqueles apresentando de cinco a cerca de dez átomos de anel do esqueleto.Exemplo de heterocíclicos incluem sem limitação, tetraidrofuranila,benzodiazepinila, tetraidroindazolila, diidroquinolinila, e análogos.

Os termos "heterocíclico inferior" e "heterociclila inferior"como usados aqui, sozinhos ou em combinação, referem-se a um sistema deanel heterocíclico apresentando cinco a cerca de dez átomos de anel doesqueleto, p. ex., diidropiranila, pirrolidinila, dioxolanila, piperidinila,piperazinila, e análogos. O termo "alquilarila" como usado aqui, sozinho ouem combinação, refere-se a um radical arila como definido acima em que pelomenos um átomo de H é substituído por um radical alquila como definidoacima, como, por exemplo, tolila, xilila e análogos.

Os termos "arilalquila e araalquila" como usados aqui,sozinhos ou em combinação, referem-se a um radical alquila como definidoacima em que pelo menos um átomo de H é substituídos por um radical arilacomo definido acima, como, por exemplo, benzila, 2-feniletila e análogos.

O termo "heteroarilalquila" como usado aqui, sozinho ou emcombinação, refere-se a um radical alquila como definido acima em que pelomenos um átomo de H é substituído por um radical heteroarila como definidoacima, em que cada um destes pode ser opcionalmente substituído.

O termo "alcóxi" como usado aqui, sozinho ou emcombinação, refere-se a um radical alquil éter, alquil-O-, em que o termoalquila é definido como acima de. Exemplos de radicais alcóxi incluemmetóxi, etóxi, n-propóxi, isopropóxi, n-butóxi, iso-butóxi, sec-butóxi, t-butóxie análogos. O termo "alcóxi inferior" como usado aqui, sozinho ou emcombinação, refere-se a um grupo alcóxi apresentando de um a cerca de seisátomos de carbono.

O termo "arilóxi" como usado aqui, sozinho ou emcombinação, refere-se a um radical aril éter, em que o termo arila é definidocomo acima. Exemplos de radicais arilóxi incluem fenóxi, tienilóxi eanálogos.

Os termos "alquiltio" e "tioalquila" como usados aqui,sozinhos ou em combinação, referem-se a um radical alquil tio, alquil-S-, emque o termo alquila é como definido acima.

O termo "ariltio" como usado aqui, sozinho ou emcombinação, refere-se a um radical aril tio, aril-S-, em que o termo arila écomo definido acima.

O termo "heteroariltio" como usado aqui, sozinho ou emcombinação, refere-se ao grupo heteroaril-S-, em que o termo heteroarila écomo definido acima.

O termo "acila" como usado aqui, sozinho ou em combinação,refere-se a um radical -C(0)R, em que R inclui alquila, alquenila, alquinila,arila, heteroarila, alicíclico, heterocíclico, arilalquila ou heteroarilalquila emque os grupos alquila, alquenila, alquinila, arila, heteroarila, alicíclico,heterocíclico, arilalquila ou heteroaril alquila podem ser opcionalmentesubstituídos.

O termo "acilóxi" como usado aqui, sozinho ou emcombinação, refere-se ao grupo éster -OC(0)R, em que R é H, alquila,alquenila, alquinila, arila, heteroarila, alicíclico, heterocíclico, arilalquila, ouheteroarilalquila, em que o alquila, alquenila, alquinila, arila, heteroarila,alicíclico, heterocíclico, arilalquila ou heteroarilalquila pode seropcionalmente substituído.

O termo "carbóxi ésteres" como usado aqui, sozinho ou emcombinação, refere-se a -C(0)OR, em que R é alquila, arila ou arilalquila, emque os grupos alquila, arila e arilalquila grupos podem ser opcionalmentesubstituídos.

O termo "BOC" como usado aqui, sozinho ou em combinação,refere-se a -C(0)Otbutila. O termo "carboxamido" como usado aqui, sozinhoou em combinação, refere-se a<formula>formula see original document page 23</formula>

em que cada um de R e R' são selecionados independentemente do grupo queconsiste de H, alquila, arila, heteroarila, alicíclico, heterocíclico, arilalquila eheteroarilalquila, em que os grupos alquila, arila, heteroarila, alicíclico,heterocíclico, ou arilalquila podem ser opcionalmente substituídos.

Os termos "tioamida" e "tioamidila" como usado aqui, sozinhoou em combinação, referem-se a

<formula>formula see original document page 23</formula>

em que cada um de R e R' são independentemente selecionados do grupo queconsiste de H, alquila, arila, heteroarila, alicíclico, heterocíclico, arilalquila eheteroarilalquila, em que os grupos alquila, arila, heteroarila, alicíclico,heterocíclico, ou arilalquila podem ser opcionalmente substituídos. O termo"oxo" como usado aqui, sozinho ou em combinação, refere-se a =0.

O termo "halogênio" como usado aqui, sozinho ou emcombinação, refere-se a F, Cl, Br e I.

O termo "haloalquila", "haloalquenila", "haloalquinila" e"haloalcóxi" como usado aqui, sozinho ou em combinação, referem-se aestruturas alquila, alquenila, alquinila e alcóxi, como descrito acima, que sãosubstituídos por um ou mais flúor, cloros, bromos ou iodos, ou comcombinações dos mesmos.

Os termos "per-haloalquila", "per-haloalquilóxi" e "per-haloacila" como usado aqui, sozinhos ou em combinação, referem-se aradicais alquila, alquilóxi e acila como descrito acima, em que todos osátomos de H são substituídos por flúor, cloros, bromos ou iodos, oucombinações dos mesmos. Os termos "per-haloalquila inferior", "per-haloalquilóxi inferior" e "per-haloacila inferior" como usado aqui, sozinho ouem combinação, referem-se a radicais per-haloalquila, per-haloalquilóxi e per-haloacila como descrito acima, apresentando de dois a cerca de seis carbonos.Os termos cicloalquila, arilalquila, arila, heteroarila, alicíclico,heterocíclico, alquila, alquinila, alquenila, haloalquila, e heteroalquila incluemgrupos cicloalquila, arilalquila, arila, heteroarila, alicíclico, heterocíclico,alquila, alquinila, alquenila, haloalquila e heteroalquila opcionalmentesubstituídos.

O termo "alquilsilila" como usado aqui, sozinho ou emcombinação, refere-se a -NRR'R", em que R, R' e R" são alquilas.

O termo "alquilsilila inferior" como usado aqui, sozinho ou emcombinação, refere-se a -NRR'R", em que R, R e R" são alquilas inferiores.

O termo "amino" como usado aqui, sozinho ou emcombinação, refere-se a -NH2.

O termo "alquilamino" como usado aqui, sozinho ou emcombinação, refere-se ao grupo -NHR em que R é alquila.

O termo "aminoalquila" como usado aqui, sozinho ou emcombinação, refere-se ao grupo -alquileno-NH2, em que alquileno é comodefinido aqui.

O termo "dialquilamino" como usado aqui, sozinho ou emcombinação, refere-se ao grupo -NRR' em que ReR' são alquilas.

O termo "arilalcamino" como usado aqui, sozinho ou emcombinação, refere-se ao grupo -NRR' em que R é alquila, e R' é arila.

O termo "diarilamino" como usado aqui, sozinho ou emcombinação, refere-se ao grupo -NRR' em que ReR' são arila.

O termo "heteroarilamino" como usado aqui, sozinho ou emcombinação, refere-se ao grupo -NHR em que R é heteroarila.

O termo "di-heteroarilamino" como usado aqui, sozinho ou emcombinação, refere-se ao grupo -NRR' em que ReR' são heteroarilas.

O termo "aril-heteroarilamino" como usado aqui, sozinho ouem combinação, refere-se ao grupo -NRR' em que R é arila, e R' é heteroarila.

O termo "carbamila" como usado aqui, sozinho ou emcombinação, refere-se aos grupos -NHC(0)OR e -OC(0)NHR, em que Rpode ser, embora sem limitação, alquila, alquenila, alquinila, arila, alicíclico,heterocíclico, arila, heteroarila, arilalquila e heteroarilalquila, em que osgrupos alquila, alquenila, alquinila, arila, alicíclico, heterocíclico, arila,heteroarila, arilalquila e heteroarilalquila podem ser opcionalmentesubstituídos. Exemplos não-limitantes de grupos sulfanila incluemmetilsulfanila (-SCH3) e iso-propilsulfanila (-SCH(CH3)2) e análogos.

O termo "urila" como usado aqui, sozinho ou em combinação,refere-se ao grupo -NHC(0)NHR, em que R pode ser, embora sem limitação,alquila, alquenila, alquinila, arila, alicíclico, heterocíclico, arila, heteroarila,arilalquila e heteroarilalquila, em que os grupos alquila, alquenila, alquinila,arila, alicíclico, heterocíclico, arila, heteroarila, arilalquila e heteroarilalquilapodem ser opcionalmente substituídos. Exemplos não-limitantes de grupossulfanila incluem metilsulfanila (-SCH3) e iso-propilsulfanila (-SCH(CH3)2) eanálogos.

O termo "tiourila" como usado aqui, sozinho ou emcombinação, refere-se ao grupo -NHC(S)NHR, em que R pode ser, emborasem limitação, alquila, alquenila, alquinila, arila, alicíclico, heterocíclico,arila, heteroarila, arilalquila e heteroarilalquila, em que os grupos alquila,alquenila, alquinila, arila, alicíclico, heterocíclico, arila, heteroarila, arilalquilae heteroarilalquila podem se opcionalmente substituídos. Exemplos não-limitantes de grupos sulfanila incluem metilsulfanila (-SCH3) e iso-propilsulfanila (-SCH(CH3)2) e análogos.

O termo "guanidinila" como usado aqui, sozinho ou emcombinação, refere-se ao grupo -NHC(NH)NHR, em que R pode ser, emborasem limitação, alquila, alquenila, alquinila, arila, alicíclico, heterocíclico,arila, heteroarila, arilalquila e heteroarilalquila, em que os grupos alquila,alquenila, alquinila, arila, alicíclico, heterocíclico, arila, heteroarila, arilalquilae heteroarilalquila podem se opcionalmente substituídos. Exemplos não-limitantes de grupos sulfanila incluem metilsulfanila (-SCH3) e iso-propilsulfanila (-SCH(CH3)2) e análogos.

Os termos "sulfeto e "tioéter" como usado aqui, sozinho ou emcombinação, referem-se ao átomo de enxofre ligado covalentemente a dois átomos; o estado de oxidação formal de referidos enxofre é (II). Estes termospodem ser usados intercambiavelmente.

O termo "sulfanila" como usado aqui, sozinho ou emcombinação, refere-se ao grupo -S-R, em que R pode ser, embora semlimitação, alquila, alquenila, alquinila, arila, alicíclico, heterocíclico, arila,heteroarila, arilalquila e heteroarilalquila, em que os grupos alquila, alquenila,alquinila, arila, alicíclico, heterocíclico, arila, heteroarila, arilalquila eheteroarilalquila podem se opcionalmente substituídos. Exemplos não-limitantes de grupos sulfanila incluem metilsulfonila (-SCH3) e iso-propilsulfanila (-SCH(CH3)2) e análogos.

O termo "sulfóxido" como usado aqui, sozinho ou emcombinação, refere-se a um átomo de enxofre ligado covalentemente a trêsátomos, em que pelo menos um destes é um átomo de oxigênio; o estado deoxidação formal de referido átomo de enxofre é (IV).

O termo "sulfinila" como usado aqui, sozinho ou emcombinação, refere-se aos grupos -S(0)-R, em que R pode ser, embora semlimitação, alquila, alquenila, alquinila, arila, alicíclico, heterocíclico, arila,heteroarila, arilalquila e heteroarilalquila, em que os grupos alquila, alquenila,alquinila, arila, alicíclico, heterocíclico, arila, heteroarila, arilalquila eheteroarilalquila podem se opcionalmente substituídos. Um exemplo não-limitante de um grupo sulfinila inclui metilsulfinila (-S(0)CH3) e análogos. Otermo "sulfona" como usado aqui, sozinho ou em combinação, refere-se a umátomo de enxofre ligado covalentemente a quatro átomos, em que pelo menosdois destes são átomos de oxigênio; o estado de oxidação formal de referidoátomo de enxofre é (VI).O termo "sulfonila" como usado aqui, sozinho ou emcombinação, refere-se aos grupos -S(02)-R, em que R pode ser, embora semlimitação, alquila, alquenila, alquinila, arila, alicíclico, heterocíclico, arila,heteroarila, arilalquila e heteroarilalquila, em que os grupos alquila, alquenila,alquinila, arila, alicíclico, heterocíclico, arila, heteroarila, arilalquila eheteroarilalquila podem ser opcionalmente substituídos. Um exemplo não-limitante de um grupo sulfonila inclui metilsulfonila (-S(02)CH3) e análogos.O termo "fosfito" como usado aqui, sozinho ou em combinação, refere-se aum átomo de fósforo ligado covalentemente aos três átomos de carbono, emque o estado de oxidação formal de referido fósforo é (III).

O termo "fosfinila" como usado aqui, sozinho ou emcombinação, refere-se ao mono-radical derivado de um grupo fosfito, comodefinido acima.

O termo "fosfonato" como usado aqui, sozinho ou emcombinação, refere-se a um átomo de fósforo ligado covalentemente a quatroátomos, em que três destes são oxigênio e um destes é carbono, em que oestado de oxidação formal de referida fósforo é (V).

O termo "fosfonila" como usado aqui, sozinho ou emcombinação, refere-se ao mono-radical derivado de um grupo fosfonato,como definido acima.

O termo fosfato como usado aqui, sozinho ou em combinação,refere-se a um átomo de fósforo ligado covalentemente a quatro átomos deoxigênio, em que o estado de oxidação formal de referida fósforo é (V).

O termo "fosfatidila" como usado aqui, sozinho ou emcombinação, refere-se ao mono-radical derivado de um grupo fosfato, comodefinido acima.

O termo "fosforamida" como usado aqui, sozinho ou emcombinação, refere-se a um átomo de fósforo ligado covalentemente a quatroátomos, em que três dos quais são nitrogênio e um dos quais é oxigênio, emque o estado de oxidação formal de referido fósforo é (V).

O termo "fosforamidila" como usado aqui, sozinho ou emcombinação, refere-se ao mono-radical derivado de um grupo fosforamida,como definido acima.

Os termos "opcional" ou "opcionalmente" significam que oevento ou circunstância descrita previamente pode ocorrer, mas não precisaocorrer, e que a descrição inclui casos em que o evento ou circunstânciaocorre, e casos em que não ocorre. Por exemplo, "arila opcionalmente mono-ou di-substituído por um alquila" significa que o alquila pode, mas nãoprecisa, estar presente, ou um alquila ou dois podem estar presente, e adescrição inclui situações em que o arila é substituído por um ou dois alquilas,e situações em que o arila não é substituído por um alquila. Grupos"posicionalmente substituídos" podem ser substituídos ou não-substituídos.

Os substituintes de um grupo "opcionalmente substituído" podem incluir, semlimitação, um ou mais substituintes selecionados independentemente dosseguintes grupos ou subconjuntos designados dos mesmos: alquila inferior,alquenila inferior, alquinila inferior, arila inferior, heteroarila, alicíclico,heterocíclico, arilalquila, heteroarilalquila, alcóxi inferior, arilóxi inferior,amino, alquilamino, dialquilamino, diarilalquilamino, alquiltio, ariltio,heteroariltio, oxo, oxa, acila (-C(O)R), (-C(O)), carboxiésteres (-C(O)OR),carboxamido (-C(0)NH2), carbóxi, acilóxi, -H, halo, -CN, -N02,-N3, -SH, -OH, -(0)CH3, per-haloalquila, per-haloalcóxi, per-haloacila, guanidina,piridinila, tiofeno, furanila, indol, indazol, ésteres, amidas, fosfonatos, ácidofosfônico, fosfatos, fosforamidas, sulfonatos, sulfonas, sulfatos,sulfonadmidas, carbamatos, uréias, tiouréia, tioamidas e tioalquilas. Umgrupo opcionalmente substituído pode ser não-substituído (p. ex., -CH2CH3),totalmente substituído (p. ex., -CF2CF3), monossubstituído (p. ex., -CH2CH2F)ou substituído em um nível qualquer entre totalmente substituído emonossubstituído (p. ex., -CH2CF3). O termo "piridina-l-óxi" tambémsignifica "piridina-N-óxi".

O termo "grupo heteroarila é substituído por de 2 a 5substituintes" compreende 1-óxi-piridila ou N-óxi-piridila apresentando de 1 a4 substituintes, i.e. o átomo de oxigênio do piridina-N-óxido deveria sercontado como um substituinte.

Alguns dos compostos da presente invenção podem conter umou mais centros quirais e, portanto, podem existir em formas enantioméricas ediaesteroméricas. O escopo da presente invenção destina-se a cobrir todos osisômeros per se, e também misturas de isômeros eis e trans, misturas dediastereômeros e também misturas racêmicas de enanciômeros (isômerosópticos). Adicionalmente, é possível usar técnicas bem conhecidas paraseparar as várias formas, e algumas concretizações da invenção podemapresentar espécies purificadas ou enriquecida de um dado enanciômero oudiaestereômero.

Alguns dos compostos da presente invenção podem existir emformas tautoméricas. O escopo da presente invenção destina-se a cobrir todosos tautômeros. Como um exemplo não-limitante, compostos de fórmula (I),em que R° é -SR8 ou -OR8, e R8 é hidrogênio, poderia existir como qualquerum dos tautômeros abaixo:

<formula>formula see original document page 29</formula>

Uma "composição farmacológica" refere-se a uma mistura deum ou mais dos compostos descritos aqui, ou seus sais farmaceuticamenteaceitáveis, com outros componentes químicos, como excipientes e/ou veículosfarmaceuticamente aceitáveis. A finalidade de uma composiçãofarmacológica é o de facilitar a administração de um composto a umorganismo.A expressão "veículo farmaceuticamente aceitável" comousado aqui significa um material, composição ou veículo farmaceuticamenteaceitável, como uma carga líquida ou sólida, diluente, excipiente, solvente oumaterial encapsulante, envolvido na realização ou no transporte do agentesujeito do órgão, ou porção do corpo, para outro órgão, ou porção do corpo.

Cada veículo precisa ser "aceitável" no sentido de sercompatível com os outros ingredientes da formulação e não prejudicial aopaciente. Alguns exemplos de materiais que podem servir como veículosfarmaceuticamente aceitáveis incluem: (1) açúcares, como lactose, glicose esacarose; (2) amidos, como amido de milho e amido de batata; (3) celulose, eseus derivados, como carboximetil celulose de sódio, etila celulose e acetatode celulose; (4) tragacanto em pó; (5) malte; (6) gelatina; (7) talco; (8)excipientes, como manteiga de cacau e ceras de supositório; (9) óleos, comoóleo de amendoim, óleo de semente de algodão, óleo de açafrão, óleo degergelim, óleo de oliva, óleo de milho e óleo de soja; (10) glicóis, comopropileno glicol; (11) polióis, como glicerina, sorbitol, manitol e polietilenoglicol; (12) ésteres, como oleato de etila e laurato de etila; (13) agar; (14)agentes tamponadores, como hidróxido de magnésio e hidróxido de alumínio;(15) ácido algínico; (16) água isenta de pirógeno, (17) solução salinaisotônica; (18) solução de Ringer; (19) álcool de etila; (20) soluçõestamponadoras de fosfato; e (21) outras substâncias não-tóxicas compatíveisempregadas em formulações farmacêuticas. Um veículo fisiologicamenteaceitável não deveria causar irritação significativa em um organismo e nãosuprime a atividade biológica e as propriedades do composto administrado.

Um "excipiente" refere-se a uma substância inerte adicionada auma composição farmacológica para facilitar adicionalmente a administraçãode um composto. Exemplos de excipientes incluem, embora sem limitação,carbonato de cálcio, fosfato de cálcio, vários açúcares e tipos de amido,celulose derivados, gelatina, óleos vegetais e polietileno glicóis.Uma "quantidade farmaceuticamente efetiva" significa umaquantidade que é capaz de proporcionar um efeito terapêutico e/ou profilático.A dose específica do composto administrado de acordo com esta invençãopara se obter efeito terapêutico e/ou profilático será determinada,evidentemente, pelas circunstâncias particulares que envolvem o caso,incluindo, por exemplo, o composto específico administrado, a via deadministração, a condição sendo tratada, e o indivíduo sendo tratado. Umadose diária típica (administrada em doses simples ou divididas) conterá umnível de dosagem de cerca de 0,01 mg/kg a cerca de 50-100 mg/kg de pesocorporal de um composto ativo da invenção. Doses diárias preferidas serão decerca de 0,05 mg/kg a cerca de 20 mg/kg e idealmente de cerca de 0,1 mg/kga cerca de 10 mg/kg. Fatores, como taxa de eliminação, meia-vida e dosemáxima tolerada (MTD) ainda precisam ser determinadas, mas alguém comprática ordinária na arte pode determinar os mesmos usando-se procedimentosconvencionais.

Em algumas concretizações de métodos, o efeito terapêuticopreferido é a inibição, até certo ponto, do crescimento de célulascaracterísticas de um distúrbio proliferativo, p. ex., câncer de mama. Umefeito terapêutico também aliviará normalmente, mas não obrigatoriamente,até certo ponto, um ou mais dos sintomas diferentes de crescimento celular outamanho da massa de células. Um efeito terapêutico pode incluir, porexemplo, um ou mais de 1) uma redução do número de células; 2) umaredução do tamanho de células; 3) inibição (i.e., desaceleração até certoponto, de preferência, interrupção) de infiltração de células em órgãosperiféricos, p. ex., no caso de metástase de câncer; 3) inibição (i.e.,desaceleração até certo ponto, de preferência, interrupção) de metástase detumor; 4) inibição, até certo ponto, de crescimento celular; e/ou 5) alívio, atécerto ponto, de um ou mais dos sintomas associados com o distúrbio. Comousado aqui, o termo IC50 refere-se a uma quantidade, concentração oudosagem de um composto de teste particular que proporciona uma inibição de50% de uma resposta máxima em um ensaio que mede referida resposta. Emalgumas concretizações de métodos da invenção, o valor "IC50" de umcomposto da invenção pode ser maior para células normais do que paracélulas que apresentam um distúrbio proliferativo, p. ex., células de câncermamário. O valor depende do ensaio usado.

Por um "padrão" compreende-se um controle positivo ounegativo. Um controle negativo no contexto dos níveis de expressão de Her2é, p. ex., uma amostra que apresenta uma quantidade de proteína Her2 que secorrelaciona com uma célula normal. Um controle negativo também podeincluir uma amostra que não contém proteína Her2. Em contraste, umcontrole positivo não contém proteína Her2, de preferência, numa quantidadeque se correlaciona com a superexpressão como encontrada em distúrbiosproliferativos, p. ex., cânceres de mama. Os controles podem ser de amostrasde células ou tecidos, ou então contêm ligante purificado (ou ligante ausente),imobilizado ou de outra forma. Em algumas concretizações, um ou mais doscontroles podem ser em forma de uma "haste de imersão" diagnostica.

Por "objetivar seletivamente" compreende-se afetar um tipo decélula em maior grau do que outro, p. ex., no caso de células com níveiselevados, em oposição a níveis relativamente baixos ou normais de Her2.Compostos da invenção

Compostos da invenção relacionam-se com alquinilapirrolo[2,3-d]pirimidinas de fórmula I

<formula>formula see original document page 32</formula>

e seus polimórficos, solvatos, ésteres, tautômeros, diastereômeros,enanciômeros, sais farmaceuticamente aceitáveis ou pró-drogas dos mesmos,que mostram utilidade para inibir HSP90 e tratar e prevenir doenças que sãodependentes de HSP90, em que:

R° é selecionado do grupo que consiste de hidrogênio,halogênio, alquila inferior, -CN, -SR8, -OR8, e -NHR8;

R2 é -NHR8;

R3 é selecionado do grupo que consiste de hidrogênio, -CN, -C(0)OH, -OR11, -SR11, -C(0)R9, -NR8R10, alquila inferior, alquenila inferior,alquinila inferior, per-haloalquila inferior, alquilsilila inferior, arila,heteroarila, aliciclila e heterociclila, todos opcionalmente substituídos, emque:

os substituintes opcionais em R3 são selecionados do grupoque consiste de alquila inferior, alquenila inferior, alquinila inferior, -CN, -C(0)OH, -N02,-SR8, -OR8, -C(0)R9, -NR8R8, arila inferior, heteroarila,aliciclila, heterociclila inferior, arilalquila, heteroarilalquila, amino,alquilamino, dialquilamino, arilalquilamino, diarilamino, heteroarilamino, di-heteroarilamino, aril-heteroarilamino, oxo, per-haloalquila, per-haloalcóxi,perhaoacila, guanidinila, piridinila, tiofenila, furanila, indolila, indazolila,fosfonila, fosfatidila, fosforamidila, sulfanila, sulfinila, sulfonila,sulfonadmidila, carbamila, urila, tiourila e tioamidila, em que

R4 é selecionado do grupo que consiste de alquileno inferioropcionalmente substituído,

-C(R12)2.,

-C(O)-, -C(S)-, -S(O)- e -S02-;

o grupo arila é substituído por de 2 a 5 substituintes;o grupo heteroarila é substituído por de 2 a 5 substituintes;o grupo aliciclila é substituído por de 3 a 5 substituintes;o grupo heterociclila é substituído por de 3 a 5 substituintes;

os substituintes em R5 são selecionados do grupo que consistede halogênio, alquila inferior, alquenila inferior, alquinila inferior, -CN, -C(0)OH, -N02, -SR8, -OR8, -C(0)R9, -NR8R10, arila inferior, heteroarilainferior, aliciclila inferior, heterociclila inferior, arilalquila, heteroarilalquila,tioalquila, amino, alquilamino, dialquilamino, arilalquilamino, oxo, per-haloalquila, per-haloalcóxi, per-haloacila, guanidinila, piridinila, tiofenila,furanila, indolila, indazolila, fosfonila, fosfatidila, fosforamidila, sulfanila,sulmila, sulfonila, sulfonadmidila, carbamila, urila, tiourila e tioamidila, emque

R9 é selecionado do grupo que consiste de H, alquila inferior,alquenila inferior, alquinila inferior, arila inferior, heteroarila inferior, -NR10R10e-ORI1,emque

R10 é selecionado do grupo que consiste de hidrogênio, alquilainferior, alquenila inferior, alquinila inferior, heteroalquila inferior,heteroalquenila inferior, heteroalquinila inferior, arila inferior, heteroarilainferior e-C(0)RH;

R12 é selecionado do grupo que consiste de hidrogênio ealquila inferior.

Em algumas concretizações, R° é hidrogênio, halogênio ou -CN. Em outras concretizações, R° é hidrogênio, alquila inferior, -SR8 ou -OR8. Em outras concretizações, R° é hidrogênio, -SR8, -OR8 ou -NHR8. Emoutras concretizações, R° é -SR8 ou -OR8. Em outras concretizações, R° éhidrogênio.

Em algumas concretizações, R1 é halogênio ou alquila inferior.Em outras concretizações, R1 é -OR11 ou -SR11. Em algumas concretizações,R1 é halogênio. Em algumas concretizações, R1 é cloro ou bromo. Emalgumas concretizações, R1 é cloro. Em algumas concretizações, R1 é bromo.

Em algumas concretizações, R2 é -NH2 ou -NHC(0)R9. Emoutras concretizações, R2 é -NH-alquila inferior, -NH-alquenila inferior, -NH-alquinila inferior, -NH-arila inferior ou -NH-heteroarila inferior. Em outrasconcretizações, R2 é -NHC(0)R9 em que R9 é alquila inferior, alquenilainferior, alquinila inferior, arila inferior ou heteroarila inferior. Em outrasconcretizações, R2 é -NH2. Em outras concretizações, R2 é - NH(0)tBu.

Em algumas concretizações, R3 é hidrogênio, alquila inferior,alquenila inferior, alquinila inferior, per-haloalquila inferior, arila, heteroarila,aliciclila, heterociclila, -CN ou -C(0)R9, todos opcionalmente substituídos.Em outras concretizações, R3 é hidrogênio, alquila inferior, arila, heteroarila,aliciclila, heterociclila ou -C(0)R9, todos opcionalmente substituídos. Emoutras concretizações, R3 é hidrogênio, alquila inferior, arila, heteroarila, ou -C(0)R9, todos opcionalmente substituídos. Em outras concretizações, R3 éalquila inferior substituída em que o substituinte na alquila inferior alquila éselecionado do grupo que consiste de alquila inferior, -OR8, -C(0)R9 e -NR8R8. Em outras concretizações, R3 é alquila inferior, arila, heteroarila, -CNou -C(0)R9, todos opcionalmente substituídos. Em outras concretizações, R3 éhidrogênio. Em outras concretizações, R3 é alquila inferior opcionalmentesubstituído. Em outras concretizações, R3 é fenila opcionalmente substituídoou piridinila. Em outras concretizações, R3 é -(CH2)nOH, em que n=l-3. Emoutras concretizações, R3 é -(CH2)mC(R12)2(CH2)nOH, em que m=0-2 e n=l-2.Em outras concretizações, R3 é -(CH2)nNR8R8, em que n=l-3, e cada R8 éindependentemente hidrogênio ou alquila inferior, ou -NR8R8 são tomados emconjunto formando uma morfolina ou ftalimida opcionalmente substituída.Em outras concretizações, R3 é -(CH2)nC(O)NR10R10, em que n=l-3, e cadaR10 é independentemente hidrogênio ou -C(0)RU, ou -NR10R10 são tomadosem conjunto formando uma piperazina opcionalmente substituída. Em outrasconcretizações, R3 é alquilsilila inferior opcionalmente substituído. Em outrasconcretizações, R3 é -C02Et. Em outras concretizações, R3 é-(CH2)nC(O)NR10R10 em que n=l-3, e cada R10 é independentementehidrogênio ou -C(0)RH. Em outras concretizações, R3 é -(CH2)nC(0)NHC(0)OtBu.

Em algumas concretizações, R4 é alquileno inferioropcionalmente substituído, -C(O)-, -S(O)- ou - S02-. Em outrasconcretizações, R4 é -CH2-, -S(O)- ou -S02. Em outras concretizações, R4 é -CHR12-. Em outras concretizações, R4 é -CH2-.

Em algumas concretizações, o grupo arila, heteroarila,aliciclila ou heterociclila de R5 é monocíclico ou bicíclico. Em outrasconcretizações, R5 é heteroarila ou arila substituído e os substituintes emreferido arila ou heteroarila são selecionados do grupo que consiste dehalogênio, alcóxi inferior, alquila inferior, tioalquila, amino, alquilamino,dialquilamino. Em outras concretizações, R5 é heteroarila ou arila substituídoe os substituintes no arila ou heteroarila são selecionados do grupo queconsiste de halogênio, alcóxi inferior e alquila inferior.

Em algumas concretizações, R° é hidrogênio, halogênio, -SH, -OH, ou -CN; R1 é halogênio; e R2 é -NH2 ou -NH-C(0)R9.

Em algumas concretizações, R1 é cloro ou bromo; R2 é -NH2ou -NH-C(0)R9; e R3 é alquila inferior, alquenila inferior, alquinila inferior,per-haloalquila inferior, arila inferior, ou heteroarila inferior, todosopcionalmente substituídos por -OR8, -NR8R8 ou -C(0)R9.

Em algumas concretizações, R° é hidrogênio, halogênio ou -CN; R2 é -NH2 ou -NH-C(0)R9; e R4 é -CH2-.

Em outras concretizações, R° é hidrogênio, halogênio, -SH, -OH ou -CN; R1 é halogênio; R2 é -NH2; R3 é hidrogênio, -OR11, -SR11, -NR8R8, alquila inferior, alquenila inferior, alquinila inferior, per-haloalquilainferior, arila inferior, ou heteroarila inferior, em que o R8 em R éhidrogênio, alquila inferior, heteroalquila inferior, arila inferior, ou -C(0)R9;R4 é -CH2-; e R5 é arila ou heteroarila, substituído por de 2 a 5 substituintes.

Em algumas concretizações, R° é selecionado dentrehidrogênio, halogênio e -CN; R1 é halogênio; R2 é -NHR8; R3 é selecionadodo grupo que consiste de hidrogênio, alquila inferior, alquenila inferior,alquinila inferior, per-haloalquila inferior, arila, heteroarila, aliciclila eheterociclila, todos opcionalmente substituídos; R4 é -CHR12-; e R5opcionalmente substituído é arila ou heteroarila.

Em outras concretizações, R° é selecionado dentre hidrogênio,halogênio e -CN; R1 é halogênio; R2 é -NH2; R3 é selecionado do grupo queconsiste de alquila inferior, alquenila inferior, alquinila inferior, todosopcionalmente substituídos por -OR8, -NR8R8 ou -C(0)R9; R4 é -CH2; e R5 éarila ou heteroarila.

Em outras concretizações, R1 é cloro ou bromo; R2 é -NH2; eR5 é a fenila apresentando pelo menos três substituintes.

Em outras concretizações, R1 é cloro ou bromo; R2 é -NH2; eR5 é um piridila apresentando pelo menos dois substituintes.

Em outras concretizações, R1 é cloro ou bromo; R2 -NH2; e R5é 1-óxi-piridila (N-óxi-piridila) apresentando pelo menos dois substituintes.

Em outras concretizações selecionadas, R° é hidrogênio; R1 écloro ou bromo; R2 é -NH2 ou -NHC(0)tBu; R3 é selecionado do grupo queconsiste de hidrogênio, alquila inferior, arila, heteroarila, -CN, alquilsililainferior opcionalmente substituído, -C02Et, -(CH2)mC(CH3)nOH em que m=0-2 e n=l-2, -(CH2)„ OH em que n=l-3, e -(CH2)nNR8R10 em que n=l-3, R8 eR10 são independentemente hidrogênio, alquila inferior, ou são tomados emconjunto formando uma piperazina, uma ftalimida ou uma morfolina; R4 é -CH2-; R5 é heteroarila ou arila substituída, e os substituintes no arila ouheteroarila são selecionados do grupo que consiste de halogênio, alcóxiinferior, alquila inferior, tioalquila, amino, alquilamino e dialquilamino.

Em algumas concretizações selecionadas, R° é hidrogênio; R1é cloro ou bromo; R2 é -NH2; R3 é selecionado do grupo que consiste dehidrogênio, alquila inferior, -(CH2)nOH, em que n=l-3, -(CH2)mC(CH3)nOH,/ em que m=0-2 e n=l-2, -(CH2)2C(0)NH2, -(CH2)OC(0)CH2N(CH3)2, -(CH2)n

NHC(0)OtBu e -(CH2)nNR8R8, em que n=l-3, R8 e R8 sãoindependentemente hidrogênio, alquila inferior, ou são tomados em conjuntoformando uma morfolina ou ftalimida opcionalmente substituída; R4 é -CH2-; R5 é heteroarila substituído, e os substituintes em referido heteroarila sãoselecionados independentemente do grupo que consiste de alcóxi inferior ealquila inferior.

Em algumas concretizações selecionadas, R° é hidrogênio; R1é cloro ou bromo; R2 é -NH2; R3 é selecionado do grupo que consiste dehidrogênio, alquila inferior, -(CH2)nOH, em que n=l-3, -(CH2)mC(CH3)n OH,em que m=0-2 e n=l-2, -(CH2)nC(O)NR10R10 em que n=l-3, e, R10 e R,0sãoindependentemente hidrogênio ou -C(0)RU, ou são tomados em conjuntoformando um piperazina opcionalmente substituída; R4 é -CH2-; R5 éheteroarila substituída, e os substituintes em referida heteroarila sãoindependentemente selecionados do grupo que consiste de alcóxi inferior ealquila inferior.

Em algumas concretizações selecionadas R3 é alquila inferiorsubstituída, e em algumas outras concretizações selecionadas R3 é alquilainferior substituída, e o substituinte em referida alquila inferior é fosfonila oufosfatidila.

Em outras concretizações preferidas, são os compostos aseguir:<formula>formula see original document page 40</formula><formula>formula see original document page 41</formula><formula>formula see original document page 42</formula><formula>formula see original document page 43</formula><formula>formula see original document page 44</formula><formula>formula see original document page 45</formula><formula>formula see original document page 46</formula><formula>formula see original document page 47</formula>

Deveria-se compreende que qualquer uma das concretizaçõesda invenção descritas acima pode ser combinada de qualquer maneira que sejaprática; aqueles com prática ordinária na arte perceberão as maneiras em queas várias concretizações podem ser combinadas de maneira útil dentro doespírito da invenção. Uma lista não-limitante de compostos baseados naFórmula I da invenção é exemplificada na TABELA 1.

Tabela 1: Compostos exemplares baseados na Fórmula

<formula>formula see original document page 48</formula>

em que R é H, e R é -CH2-.

<table>table see original document page 48</column></row><table><table>table see original document page 49</column></row><table><table>table see original document page 50</column></row><table><table>table see original document page 51</column></row><table><table>table see original document page 52</column></row><table><table>table see original document page 53</column></row><table><table>table see original document page 54</column></row><table><table>table see original document page 55</column></row><table><table>table see original document page 56</column></row><table><table>table see original document page 57</column></row><table><table>table see original document page 58</column></row><table><table>table see original document page 59</column></row><table><table>table see original document page 60</column></row><table><table>table see original document page 61</column></row><table><table>table see original document page 62</column></row><table><table>table see original document page 63</column></row><table><table>table see original document page 64</column></row><table><table>table see original document page 65</column></row><table><table>table see original document page 66</column></row><table><table>table see original document page 67</column></row><table><table>table see original document page 68</column></row><table><table>table see original document page 69</column></row><table><table>table see original document page 70</column></row><table>

em que cada abreviatura tem seu significado usual, que deve ser conhecido

por alguém com prática nas artes químicas, i.e. Me = metila; Et = etila; Pr =propila; i-Pr = iso-propila; Bu = butila; i-Bu = iso-butila; tBu = t-butila; Ph =fenila; BOC = t-butoxicarbonila; 2-Py = 2-piridila; 3-Py = 3-piridila; 4-Py =4-piridila.

Compostos selecionados na TABELA 1 são compostos 2, 3, 4,7, 8, 12, 13, 17, 18, 22, 23, 27, 28, 32, 33, 38, 42, 43, 47, 48, 52, 53, 57, 58,62, 63, 67, 68, 72, 73, 77, 78, 82, 83, 87, 88, 92, 93, 102, 103, 107, 108, 112,113, 117, 118, 122, 123, 127, 128, 132, 133, 137, 138, 147, 148, 152, 153,157, 158, 161, 162, 166, 167, 171, 172, 176, 177, 181, 182, 186, 187, 191,192, 196, 197, 201, 202, 206, 207, 211, 212, 216, 217, 221, 222, 226, 227,231, 232, 236, 237, 240, 241, 244, 246, 248, 265, 266, 285, 289, 291, 293,310, 311, 330, 331, 332, 334, 349, 350, 363, 364, 365, 367, 369, 382, 383,396, 397, 398, 400, 402, 415, 416, 429, 430, 431, 433, 435, 448, 449, 462,463, 464, 466, 468, 481, 482, 495, 496, 497, 499, 501, 514, 515, 528, 529,530, 532, 534, 547, 548, 560, 561, 652, 566, 587, 588, 590, 591, 592, 594,596, 602, 603, 620, 621, 622, 624, 626, 632, 633, 635, 636, 637, 639, 641,661, 662, 663, 664, 665, 667, 669, 675, 676, 678, 679, 680, 682, 684, 690,691, 692, 693, 694, 696, 698, 704, 705, 707, 708, 710, 711, 713, 714, 716,717, 718, 719, 720, 722, 730, 731, 732, 733, 734, 736, 738, 744, 745, 746,747, 748, 750, 752, 753, 754, 757, 759, 761, 778, 779, 782, 783, 784, 798,799, 802, 804, 806, 823, 824, 843, 844, 847, 849, 851, 861, 862, 863, 864,865, 866, 867, 868, 869, 870, 875, 894, 895, 896, 899, 900, 901, 903, 905,907, 920, 921, 934, 935, 936, 937, 938, 939, 940, e 941. Compostosadicionalmente selecionados são 77, 78, 82, 83, 87, 88, 92, 93, 240, 241, 248,265, 285, 293, 310, 330, 349, 382, 396, 415, 429, 448, 462, 481, 495, 514,528, 560, 587, 602, 620, 632, 635, 661, 663, 675, 678, 690, 692, 704, 718,730, 732, 744, 746, 753, 778, 798, 823, 863, 864, 865, 866, 867, 868, 869,875, 894, 895, 896, 899, 900, 901, 903, 905, 920, 934, 935, 936, 940, e 941.

Compostos da invenção apresentam atividades melhoradas deinibição de HSP90 relativamente a alguns compostos de pirrolo[2,3-d]pirimidina de fórmula II:

<formula>formula see original document page 71</formula>

em que R3' não é alquinila, que foram divulgados no Pedido de Patente dosEstados Unidos n° 10/945.851 e Pedido PCT US04/31248. Os compostos de pirrolopirimidina especificados nas seções de Exemplos dos pedidos depatentes acima portam, ou nenhum substituinte ou um grupo alquilasubstituído. Composto 0, uma das concretizações dos compostos de fórmulaII, não porta substituintes na posição C-5 (i.e. R3 - H) e tem uma IC50 = 98nM conforme medido por meio de um ensaio de degradação de Her-2(descrito na seção de Exemplos abaixo). Um alquila simples ou um alquilasubstituído em C-5 (i.e. R3 = alquila ou alquila substituído) só podeproporcionar atividade adicional de duas vezes. Inversamente, se C-5 foralquino substituído, a potência aumenta aproximadamente de 10 a 20 vezes,(ver, série A: compostos A, B, C e D abaixo).

<formula>formula see original document page 72</formula>

Série A: Não-alquinos

Série B; Alquinos

Por exemplo, os substituintes alquinila na posição C-5 posição(ver Series B: Compostos E, F, G e H), apresentaram uma faixa de potênciade 6 a 17 nM um melhoramento de pelo menos dez por cento relativamente aocomposto parental 0. Adicionalmente, quando dois compostos apresentandoexatamente a mesma estrutura, exceto quanto à presença de uma tripla ligaçãoversus ligação simples, p. ex., comparando Composto D a Composto E,Composto E que apresenta um álcool propargílico substituído em C-5apresenta uma IC50 =17 nM, enquanto que Composto D que apresentam umsubstituinte de propanol em C-5 apresenta uma IC50 = 38 nM, ummelhoramento de duas vezes. A diferença no índice de potência entre alquinose não-alquinos medida por meio de um ensaio secundário também é notável.O ensaio secundário mede a eficiência e eliminação de células de tumor. Paraum dado composto, o índice de potência é definido como:

índice = EC5o(composto)/EC5o(controle)

em que o controle é 17-AAG (17-alil-17-desmetóxi-geldanamicina). EC50 édefinida como a quantidade de composto adicionada para se efetuar umaredução de 50% do número de células viáveis. Compostos selecionados foramtestados em células de linhas de células de tumor de mama MCF7 e BT474. Oensaio mostra que Composto 0 é mais de 10 vezes menos ativo do que 17-AAG. Os melhores análogos substituídos por não-alquino são de 6 a >50vezes menos potente do que 17-AAG. Em contraste, os análogos substituídospor alquino podem ser mais potentes do que 17-AAG (ver Composto H) - umrecorde no campo dos inibidores de HSP90, ou quase tão ativo, com umíndice entre 0,7-6. TABELA 2 resumiu o resultado do ensaio.Tabela 2: índice de potência contra células de tumor de linha de células MCF7 e BT474

<table>table see original document page 73</column></row><table>

Síntese dos compostos da invenção

Os compostos da presente invenção podem ser preparados apartir de 5-halo-pirolo[2,3-d]pirimidinas de acordo com o Esquema A abaixo.A preparação do material de partida, N-(4-cloro-5-iodo-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-il)pivalamida, em que PG é o grupo protetor de pivaloíla eX =I, foi reportado em Seela, F. Synthesis 2004, 8, 1203 e referências ali contidas.

Esquema A

<formula>formula see original document page 74</formula>

Tratamento de N-(4-cloro-5-iodo-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-il)pivalamida com o agente alquilador apropriado em um solvente polar (p.ex., DMF, DMSO, NMP), na presença de uma base (p. ex., K2C03, C2C03,NaH, NaOH, t-BuOH) fornece o aduto alquilado em N(7). A alquilação érealizada tipicamente a de 20 a 60°C durante de 0,5 a 24 h.

Clivagem do grupo protetor de NH2 dá o derivado de 2-amino.Se o grupo protetor for um grupo pivaloíla, ele pode ser clivado com ZnCl2. Adespivaloilação é realizada tipicamente em EtOH, com de 1 a 10 vol% deágua, a de 50 a 85°C, durante de 2 a 24 h. Cloreto de zinco(II) pode sersubstituído por outros ácidos de Lewis, como Znl2 ou CuCl que, contudo,podem não proporcionar rendimentos tão elevados. Acoplamento deSonogasira de 4-cloro-7-alquil-5-halo-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-aminacom um alquino de fórmula HOC-R1 dá o alquino desejado. Condições dereação típicas requerem Pd(PPh3)4/CuI como sistema catalítico, Et3N comobase, e DCM ou DMF como solvente. As reações são realizadas tipicamente ade 20 a 50°C durante de 0,5 a 24 h. No entanto, é possível usar uma variedadede sistemas catalíticos / base / condições alternativos (ver Liang, B. et al., J.Org. Chem., 2005, 70, 391 e referências ali contidas).

O grupo R pode ser manipulado adicionalmente, se necessário,como ilustrado abaixo:<formula>formula see original document page 75</formula>

Para fins de ilustração, o álcool propargílico pode serconvertido ao mesilato ou brometo usando-se métodos bem conhecidos naarte. O grupo mesila ou brometo pode então ser deslocado por nucleófilos,como aminas. É preciso tomar cuidado com a substituição nucleofílicaindesejada do átomo de 4-C1.

A seqüência destas etapas pode ser realizada em uma ordemdiferente daquela indicada no Esquema, como por exemplo, (i) alquilação,(ii), acoplamento de Sonogashira, e (iii) desproteção.

Composições farmacêuticas, Medicamentos, Dosagem e Modos de Administração

A presente invenção também se refere ao uso de compostos dealquinil pirrolo[2,3-d]pirimidina de fórmula I e seus análogos relacionados, eseus polimórficos, solvatos, ésteres, tautômeros, diastereômeros,enanciômeros, sais farmaceuticamente aceitáveis e pró-drogas dos mesmos.Em algumas concretizações, os compostos são usados para o tratamento ouprevenção de doenças que são dependentes de HSP90. Em algumasconcretizações, os compostos são usados na fabricação de um medicamento.Em outras concretizações, os compostos são usados na fabricação de ummedicamento para o tratamento terapêutico e/ou profilático de doenças econdições que são dependentes de HSP90. Exemplos de referidas doenças econdições incluem distúrbios, como doenças inflamatórias, infecções,distúrbios autoimunes, acidente vascular, isquemia, distúrbio cardíaco,distúrbios neurológicos, distúrbios fibrogenéticos, distúrbios proliferativos,tumores, leucemias, leucemia linfocítica crônica, síndrome daimunodeficiência adquirida, neoplasmas, cânceres, carcinomas, doençasmetabólicas, e doença maligna. Os distúrbios fibrogenéticos incluem, emborasem limitação, escleroderma, polimiosite, lúpus sistêmico, artrite reumatóide,cirrose do fígado, formação de quelóide, nefrite intersticial e fibrosepulmonar.

A presente invenção proporciona composições farmacêuticas emedicamentos compreendendo o composto de fórmula I, ou um polimórfico,solvato, éster, tautômero, enanciômero, diaestereômero, salfarmaceuticamente aceitável do mesmo, ou pró-droga do mesmo, de qualquerum dos aspectos e concretizações precedentes e um ou mais excipientesfarmacêuticos. Aqueles com prática ordinária na arte estarão familiarizadoscom técnicas de formulação e administração que podem ser empregadas comos compostos e métodos da invenção, p. ex., como discutido em Goodman eGilman, The Pharmacological Basis of Therapeutics (10a edição); Pergamon;e Remington 's, Pharmaceutical Sciences (20a edição), Mack Publishing Co.,Easton, Pa.

Os compostos usados nos métodos da presente invençãopodem se administrados, ou sozinhos ou em combinação com veículos,excipientes ou diluentes farmaceuticamente aceitáveis, em uma composiçãofarmacêutica, de acordo com prática farmacêutica convencional. Oscompostos podem ser administrados oralmente ou parenteralmente, incluindoas vias de administração intravenosa, intramuscular, intraperitoneal,subcutânea, retal e tópica. Por exemplo, as composições terapêuticas oucomposições farmacêuticas da invenção podem ser administradas localmentena área que necessita de tratamento. Isto pode ser obtido, por exemplo,embora sem limitação, por meio de infusão local durante a cirurgia, aplicaçãotópica, p. ex., creme, ungüento, injeção, cateter, ou implante, em que referidoimplante é constituído, p. ex., de um material poroso, não-poroso, ougelatinoso, incluindo membranas, como membranas sialástica, ou fibras. Aadministração também pode ser por meio de injeção direta no sítio (ou sítioanterior) de um tumor ou tecido neoplásico ou pré-neoplásico. Além disso, oscompostos ou composições da invenção podem ser fornecidos em umavesícula, p. ex., um liposoma (ver, por exemplo, Langer, Science 1990, 249,1527-1533; Treat et al., Liposomes in the Therapy of Infeccious Disease andCâncer, Lopez-Bernstein e Fidler, Ed., Liss, N.Y., pp. 353-365, 1989).

Os compostos e composições farmacêuticas usados nosmétodos da presente invenção também podem ser fornecidos em um sistemade liberação controlada. Em uma concretização, é possível usar uma bomba(ver, Sefton, 1987, CRC Crit Ref. Biomed. Eng. 14:201; Buchwald et ai,Surgery, 1980 88, 507; Saudek et ai, N. Engl J. Med. 1989, 321, (574).Adicionalmente, um sistema de liberação controlada pode ser colocado naproximidade do alvo terapêutico, (ver, Goodson, Medicai Applications ofControlledRelease, 1984, vol. 2, pp. 115-138).

As composições farmacêuticas usadas nos métodos da presenteinvenção também podem conter o ingrediente ativo em uma forma vantajosapara uso oral, por exemplo, como tabletes, pastilhas, losangos, suspensõesaquosas ou oleosas, grânulos ou pós dispersáveis, emulsões, cápsulas duras oumoles, ou xaropes ou elixires. Composições destinadas ao uso oral podem serpreparadas de acordo com qualquer método conhecido na arte para afabricação de composições farmacêuticas, e referidas composições podemconter um ou mais agentes selecionados do grupo que consiste de agenteadoçantes, agentes aromatizantes, agentes corantes e agentes conservantespara proporcionar preparações farmaceuticamente elegantes e palatáveis.Tabletes contêm o ingrediente ativo em mistura com excipientes não-tóxicosfarmaceuticamente aceitáveis que são vantajosos para a fabricação de tabletes.Estes excipientes podem ser, por exemplo, diluentes inertes, como carbonatode cálcio, carbonato de sódio, lactose, fosfato de cálcio ou fosfato de sódio;agentes de granulação e agentes desintegrantes, como microcelulosecristalina, croscarmelose de sódio, amido de milho, ou ácido algínico; agentesde ligação, por exemplo, amido, gelatina, polivinil-pirrolidona ou acácia, eagentes lubrificantes, por exemplo, estearato de magnésio, ácido esteárico outalco. Os tabletes podem ser não-revestidos ou revestidos por meio de técnicasconhecidas para mascarar o sabor da droga ou retardar a desintegração eabsorção no trato gastrintestinal e, com isto, proporcionar uma açãosustentada ao longo de um período mais prolongado. Por exemplo, ummaterial mascarador de sabor e solúvel em água, como hidroxipropilmetil-celulose ou hidroxipropilcelulose, ou uma material de retardo no tempo, comoetil celulose, ou butirato de acetato de celulose pode ser empregado conformeapropriado.

Formulações para uso oral também podem ser apresentadascomo cápsulas de gelatina dura em que o ingrediente ativo é misturado comum diluente sólido inerte, por exemplo, carbonato de cálcio, fosfato de cálcioou caulim, ou como cápsulas de gelatina mole em que o ingrediente ativo émisturado com veículo solúvel em água, como polietilenoglicol ou um meiooleoso, por exemplo, óleo de amendoim, parafina líquida, ou óleo de oliva.

Suspensões aquosas contêm o material ativo em mistura comexcipientes vantajosos para a fabricação de suspensões aquosas. Referidosexcipientes são agentes de suspensão, por exemplo, carboximetilcelulose desódio, metilcelulose, hidroxipropilmetil-celulose, alginato de sódio, polivinil-pirrolidona, goma tragacanto e goma acácia; agentes dispersante ouumectantes podem ser um fosfatídeo naturalmente ocorrente, por exemplo,lecitina, ou produtos de condensação de um oxido de alquileno com ácidosgraxos, por exemplo, estearato de polioxietileno, ou produtos de condensaçãode oxido de etileno com alcoóis alifáticos de cadeia longa, por exemplo,heptadecaetileno-oxicetanol, ou produtos de condensação de oxido de etilenocom ésteres parciais derivados de ácidos graxos e um hexitol, comomonooleato de polioxietileno sorbitol, ou produtos de condensação de oxidode etileno com ésteres parciais derivados de ácidos graxos e anidridos dehexitol, por exemplo, monooleato de polietileno sorbitol. As suspensõesaquosas também podem conter um ou mais conservantes, por exemplo, p-hidroxibenzoato de etila, ou n-propila, um ou mais agentes corantes, um oumais agentes aromatizantes, e um ou mais agente adoçantes, como sacarose,sacarina ou aspartame.

Suspensões oleosas podem ser formuladas suspendendo-se oingrediente ativo em um óleo vegetal, por exemplo, óleo de araquis, óleo deoliva, óleo de gergelim ou óleo de coco, ou em óleo mineral, como parafinalíquida. As suspensões oleosas podem conter um agente espessante, porexemplo, cera de abelhas, parafina dura ou álcool de cetila. Agentesadoçantes, como aqueles apresentados acima, e agentes aromatizantes podemser adicionados para fornecer uma preparação oral palatável. Estascomposições podem ser conservadas por meio da adição de um anti-oxidante,como hidroxianisol butilado ou alfa-tocoferol.

Grânulos e pós dispersáveis vantajosos para a preparação deuma suspensão aquosa por meio da adição de água proporcionam oingrediente ativo em mistura com um agente dispersantes ou umectante,agente de suspensão e um ou mais conservantes. Agentes dispersante ouumectantes e agentes de suspensão vantajosos são exemplificados por aquelesjá mencionados acima. Também podem estar presentes excipientes adicionais,por exemplo, agentes adoçantes, aromatizantes e corantes. Estas composiçõespodem ser conservadas por meio da adição de um anti-oxidante, como ácidoascórbico.

Os compostos e composições farmacêuticas usados nosmétodos da presente invenção também podem ser em forma de uma emulsãoóleo-em-água. A fase oleosa pode se um óleo vegetal, por exemplo, óleo deoliva ou óleo de araquis, ou um óleo mineral, por exemplo, parafina líquida,ou misturas dos mesmos. Agentes emulsificantes vantajosos podem serfosfatídeos naturalmente ocorrentes, por exemplo, lecitina de soja, e ésteresou ésteres parciais derivados de ácidos graxos e anidridos de hexitol, porexemplo, monooleato de sorbitol, e produtos de condensação dos referidosésteres parciais com oxido de etileno, por exemplo, monooleato depolioxietileno sorbitol. As emulsões também podem conter agentes adoçantes,agentes aromatizantes, conservantes e antioxidantes.

Xaropes e elixires podem ser formulados com agentesadoçantes, por exemplo, glicerol, propileno glicol, sorbitol ou sacarose.Referidas formulações também podem conter um demulcente, umconservante, agentes aromatizantes e agentes corantes e antioxidantes.

As composições farmacêuticas podem encontrar-se em formade uma solução aquosa injetável estéril. Entre os veículos e solventesaceitáveis que podem ser empregados encontram-se água, solução de Ringer esolução isotônica de cloreto de sódio.

A preparação injetável estéril também pode ser umamicroemulsão óleo-em-água injetável estéril em que o ingrediente ativo édissolvido na fase óleo. Por exemplo, o ingrediente ativo pode ser dissolvidoprimeiro em uma mistura de óleo de soja e lecitina. A solução de óleo podeser introduzida então em uma mistura de água e glicerol e processada paraformar uma microemulsão.

As soluções ou microemulsões injetáveis podem serintroduzidas no fluxo de sangue do paciente por meio de injeção local debolo. Alternativamente, pode ser vantajoso administrar a solução oumicroemulsão de tal forma a manter uma concentração circulante constantedo presente composto. Para manter uma tal concentração constante, é possívelusar um dispositivo de fornecimento intravenoso contínuo. Um exemplo deum dispositivo do tipo referido é a bomba intravenosa Deltec CADD-PLUS™modelo 5400.

As composições farmacêuticas podem ser em forma de umasuspensão oleaginosa ou aquosa injetável estéril para administraçãointramuscular e subcutânea. Esta suspensão pode ser formulada de acordocom a arte conhecida usando-se agentes dispersantes ou umectantes e agentesde suspensão vantajosos que foram mencionados acima. A preparaçãoinjetável estéril também pode ser uma solução ou suspensão injetável estérilem um diluente ou solvente não-tóxico parenteralmente aceitável, porexemplo, como uma solução em 1,3-butanodiol. Adicionalmente, óleos fixosestéreis são empregados de maneira vantajosa como um solvente ou meio desuspensão. Para este fim é possível empregar qualquer óleo fixo brando incluindo mono- ou diglicerídeos sintéticos. Adicionalmente, ácidos graxos,como ácido oléico podem ser usados na preparação de injetáveis.

Os compostos da presente invenção usados nos métodos dapresente invenção também podem ser administrados em forma de supositóriospara administração retal da droga. Estas composições podem ser preparadasmisturando-se os inibidores com um excipiente não-irritante vantajoso que ésólido a temperaturas ordinárias, mas líquido na temperatura retal e, portanto,se fundirão no reto para liberar a droga. Referidos materiais incluem manteigade cacau, gelatina glicerinada, óleos vegetais hidrogenados, misturas depolietileno glicóis com vários pesos moleculares e ésteres de ácido graxo de polietileno glicol. Para uso tópico, é possível usar cremes, ungüentos, geléias,soluções ou suspensões, etc, contendo um composto ou composição dainvenção. Como usado aqui, aplicação tópica pode incluir lavagens bucais eprodutos para gargarejos.

Os compostos usados nos métodos da presente invenção podem ser administrados em forma intranasal via uso tópico de veículosintranasais e dispositivos de fornecimento vantajosos, ou por viastransdérmicas, usando-se aquelas formas de adesivos transdérmicos bemconhecidos por aqueles com prática ordinária na arte. Para ser administradaem forma de um sistema de fornecimento transdérmico, a dosagemadministração será evidentemente contínua ao invés de intermitente durante oregime de dosagem.

Os métodos, compostos e composições da presente invençãotambém podem ser usados em conjunto com outros agentes terapêuticos bemconhecidos que são selecionados quanto a sua utilidade particular contra acondição que está sendo tratada. Por exemplo, os presentes compostos podemser úteis em combinação com agentes anti-câncer e citotóxicos.Adicionalmente, os presentes métodos e compostos também podem ser úteisem combinação com outros inibidores de partes da via de sinalização que ligareceptores de fator de crescimento de superfície celular a sinais nucleares queiniciam proliferação celular.

Os métodos da presente invenção também podem ser úteiscom outros agentes que inibem angiogênese e, com isto, inibem o crescimentoe a invasividade de células de tumor, incluindo, embora sem limitação,inibidores de receptor de VEGF, incluindo ribozimas e anti-sentido objetivadoa receptores de VEGF, angiostatina e endostatina. Exemplos de agentesantineoplásicos que podem ser usados em combinação com os compostos emétodos da presente invenção incluem, de uma maneira geral, e conformeapropriado, agentes alquiladores, anti-metabólitos, epidofilotoxinas, umaenzima antineoplásica, um inibidor de topoisomerase, procarbazina,mitoxantrona, complexos de coordenação de platina, modificadores deresposta biológica e inibidores de crescimento, agentes terapêuticoshormonais/anti-hormonais e fatores de crescimento hematopoiético. Classesexemplares de antineoplásicos incluem as antraciclinas, drogas vinca,mitomicinas, bleomicinas, nucleosídeos citotóxicos, epotilonas,discodermolida, pteridinas, diinenos e podofilotoxinas. Membrosparticularmente úteis daquelas classes incluem, por exemplo, carminomicina,daunorubicina, aminopterina, metotrexato, metopterina, diclorometotrexato,mitomicina C, porfiromicina, 5-fluorouracila, 6-mercaptopurina, gemcitabina,citosina arabinosida, podofilotoxina ou derivados de podo-fllotoxina, comoetoposida, fosfato de etoposida ou teniposida, melfalano, vinblastina,vincristina, leurosidina, vindesina, leurosina, paclitaxel e análogos. Outrosagentes antineoplásicos úteis incluem estramustina, carboplatina,ciclofosfamida, bleomicina, gemcitibina, ifosamida, melfalano, hexametilmelamina, tiotepa, citarabin, idatrexato, trimetrexato, dacarbazina, L-asparaginase, camptotecina, CPT-11, topotecano, ara-C, bicalutamida,flutamida, leuprolida, derivados de piridobenzoindol, interferon einterleucinas.

Quando um composto ou composição da invenção éadministrado em sujeito humano, a dosagem diária será determinadanormalmente pelo médico prescrivente, em que a dosagem varia geralmentede acordo com a idade, peso, e resposta do paciente individual, e também agravidade dos sintomas do paciente. Em uma aplicação exemplar, umaquantidade vantajosa de composto é administrada a um mamífero que estãosendo submetidos a tratamento para câncer, por exemplo, câncer de mama. Aadministração ocorre tipicamente em uma quantidade entre cerca de 0,01mg/kg de peso corporal a cerca de 100 mg/kg de peso corporal por dia(administrada em doses simples ou divididas), mais preferivelmente pelomenos cerca de 0,1 mg/kg de peso corporal por dia. Uma dosagem terapêuticaparticular pode incluir, p. ex., de cerca de 0,01 mg a cerca de 1000 mg decomposto, e, de preferência, inclui, p. ex., de cerca de 1 mg a cerca de 1000mg. A quantidade composto ativo em uma dose unitária de preparação podeser variada ou ajustada em de cerca de 0,1 mg a 1000 mg, de preferência, decerca de 1 mg a 300 mg, mais preferivelmente de 10 mg a 200 mg, de acordocom a aplicação particular. A quantidade administrada variará dependendo dovalor particular de IC5o do composto usado e da avaliação do médicoresponsável, considerando fatores, como saúde, peso, e idade. Em aplicaçõesde combinação em que o composto não é o único ingrediente ativo, pode sepossível administrar quantidades menores de composto e ainda ter efeitoterapêutico ou profilático.

De preferência, a precursores farmacêutica encontra-se emforma de dosagem unitária. Desta forma, a preparação é subdividida em dosesunitárias contendo quantidades apropriadas do componente ativo, p. ex., umaquantidade efetiva para se obter a finalidade desejada. A dosagem efetivaempregada pode ser variada dependendo das exigências do paciente e dagravidade da condição que está sendo tratada. A determinação da dosagemapropriada para uma situação particular encontra-se dentro da prática da arte.

De uma maneira geral, o tratamento é iniciado com dosagens menores que sãomenos do que a dosagem ótima do composto. Em seguida, a dosagem éincrementada em pequenas quantidades até se obter o efeito ótimo nascircunstâncias. Para maior conveniência, a dosagem diária total pode serdividida e administrada em posição durante o dia, se desejado. A quantidade ea freqüência de administração dos compostos e composições da presenteinvenção usados nos métodos da presente invenção, e, se aplicável, de outrosagentes quimioterápicos e/ou terapia de radiação, será regulada de acordocom a avaliação do clínico responsável (médico) considerando fatores, comoidade, condição e tamanho do paciente e também a gravidade da doença queestá sendo tratada.

O agente quimioterápico e/ou terapia de radiação pode seradministrada de acordo com protocolos terapêuticos bem conhecidos na arte.Aqueles com prática na arte perceberão que a administração do agentequimioterápico e/ou terapia de radiação pode ser variada dependendo dadoença que está sendo tratada e dos efeitos conhecidos do agentequimioterápico e/ou terapia de radiação sobre a doença. Da mesma forma, deacordo com o conhecimento do clínico versado, os protocolos terapêuticos (p.ex., quantidades de dosagem e tempos de administração) podem ser variadosconsiderando os efeitos observados dos agentes terapêuticos administrados(i.e., agente antineoplásico ou radiação) ao paciente, e considerando asrespostas observadas da doença aos agentes terapêuticos administrados.

Também, de uma maneira geral, os compostos da invençãonão precisam ser administrados na mesma composição farmacêutica como umagente quimioterápico, e podem ser administrados por uma via diferentedevido a características físicas e químicas diferentes. Por exemplo, oscompostos/composições podem ser administrados oralmente para gerar emanter bons níveis sangüíneos dos mesmos; enquanto que o agentequimioterápico pode ser administrado intravenosamente. A determinação domodo de administração e a indicação da administração, onde possível namesma composição farmacêutica, encontra-se bem dentro do conhecimentodo clínico habilitado. A administração inicial pode ser realizada de acordocom protocolos estabelecidos conhecidos na arte e, então, com base nosefeitos observados, o clínico habilitado pode modificar a dosagem, modos deadministração e tempos de administração.

A escolha particular do composto (e, onde apropriado, agentequimioterápico e/ou radiação) dependerá do diagnóstico dos médicosresponsáveis e de sua avaliação da condição do paciente e do protocolo detratamento apropriado.

Os compostos/composições da invenção (e, onde apropriado,agente quimioterápico e/ou radiação) podem ser administradosconcorrentemente (p. ex., simultaneamente, de forma substancialmentesimultânea, ou dentro do mesmo protocolo de tratamento) ouseqüencialmente, dependendo da natureza da doença proliferativa, dacondição do paciente, e da escolha efetiva do agente quimioterápico e/ouradiação a ser administrada em conjunto (i.e., dentro de um único protocolode tratamento) com o composto/composição. Em aplicações e usoscombinatórios, o composto/composição e o agente quimioterápico e/ouradiação não precisam ser administrados simultaneamente ou de formasubstancialmente simultânea, e da ordem inicial de administração docomposto/composição, e o agente quimioterápico e/ou radiação, pode não serimportante. Assim, os compostos/composições da invenção podem seradministrados primeiro, seguido da administração do agente quimioterápico e/ou radiação; ou o agente quimioterápico e/ou radiação pode seradministrada primeiro, seguida da administração dos compostos/composiçõesda invenção. Esta administração alternada pode ser repetida durante um únicoprotocolo de tratamento. A determinação da ordem de administração, e donúmero de repetições de administração de cada agente terapêutico durante um protocolo de tratamento, encontra-se bem dentro do conhecimento do médicohabilitado após avaliação da doença que está sendo tratada e da condição dopaciente. Por exemplo, o agente quimioterápico e radiação podem seadministrados primeiro, particularmente se for um agente citotóxico, e, então,o tratamento continua com a administração dos compostos/composições dainvenção, seguido, onde determinado como vantajoso, da administração doagente quimioterápico e/ou radiação, e assim até completar-se o protocolo dotratamento.

Assim, de acordo com a experiência e o conhecimento, omédico responsável pode modificar cada protocolo para a administração de um composto/composição para o tratamento de acordo com as necessidadesdo paciente individual, à medida que o tratamento prossegue. O médicoresponsável, ao avaliar se o tratamento é efetivo na dosagem administrada,considerará o bem estar geral do paciente e também sinais mais definidos,como alívio de sintomas relacionados com doença, inibição do crescimento do tumor, encolhimento efetivo do tumor, ou inibição de metástase. Otamanho do tumor pode ser medido por meio de métodos convencionais,como estudos radiológicos, p. ex., varredura por CAT ou MRI, e é possívelusar medições sucessivas para julgar se o crescimento do tumor foi ou nãoretardado ou mesmo invertido. Também é possível usar o alívio de sintomasrelacionados com doença, como dor, e melhoramento da condição global paraauxiliar a avaliar a efetividade do tratamento.

Ensaios para determinar ligação de HSP90 e efeito a jusante

Uma variedade in vitro e in vivo ensaios encontra-sedisponível para testar o efeito dos compostos de alquinil pirrolo[2,3-d]pirimidina da invenção sobre HSP90. É possível realizar ensaios ligaçãocompetitiva com HSP90 e ensaios funcionais como é de conhecimento geralna arte por meio de substituição nos compostos da invenção. Chiosis et ai,Chemistry & Biology 2001, 8, 289-299, descrevem algumas das maneirasconhecidas em que isto pode ser realizado. Por exemplo, é possível usarensaios de ligação de competição usando, p. ex., geldanamicina ou 17-AAGcomo um inibidor de ligação competitiva de HSP90 para determinar aafinidade relativa por HSP90 dos compostos da invenção medianteimobilização do composto de interesse ou outro inibidor competitivo em umamatriz de gel ou sólida, pré-incubando-se HSP90 com o outro inibidor,passando-se a mistura pré-incubada sobre o gel ou matriz, e, então, medindo-se a quantidade de HSP90 que é retida ou que não é retida no gel ou matriz.

Efeitos a jusante também podem ser avaliados com base noefeito conhecido da inibição de HSP90 sobre a função e estabilidade de vários receptores de esteróides e proteínas de sinalização incluindo, p. ex., Rafl eHer2. Compostos da presente invenção induzem degradação dependente-da-dose destas moléculas, que pode ser medida usando-se técnicasconvencionais. A inibição de HSP90 também resulta em regulação para cimade HSP90 e proteínas-guia relacionadas que podem ser medidas de maneirasemelhante. A atividade antiproliferativa em várias linha de células de câncertambém pode ser medida, como o pode a diferenciação morfológica efuncional relacionada com a inibição de HSP90.

Muitos tipos de métodos diferentes são conhecidos na arte paradeterminação de concentrações de proteína e medição ou predição do nível deproteínas em células e em amostras de fluido. Técnicas indiretas incluemhibridação e amplificação de ácido nucleico usando, p. ex., reação em cadeiade polimerase (PCR). Estas técnicas são conhecidas pela pessoa versada e sãodiscutidas, p. ex., em Sambrook, Fritsch & Maniatis Molecular Cloning: ALaboratory Manual, 2a ed., Cold Spring Harbor Laboratory, Cold SpringHarbor, N.Y., 1989; Ausubel, et ai, Current Protocols in Molecular Biology,John Wiley & Sons, NY, 1994, e, como aplicado especificamente naquantificação, detecção, e atividade relativa de HER2/Neu em amostras dopaciente, p. ex., nas Patentes dos Estados Unidos nums. 4.699.877, 4.918.162,4.968.603, e 5.846.749. A seguir, uma breve discussão de duas técnicasgenéricas que podem ser usadas.

A determinação de se células superexpressam ou contêmníveis elevados de Her2 pode ser determinada usando-se técnicas conhecidosde anticorpos, como imuno-blotting, ensaios radiológicos, Western blott,imunoprecipitação, ensaios imunosorvente ligados a enzima (ELISA), etécnicas derivadas que fazem uso de anticorpos dirigidos contra Heft. Comoum exemplo, a expressão Her2 em células de câncer de mama pode serdeterminada com o uso de um ensaio imuno-histoquímico, como o teste DakoHercep™ (Dako Corp., Carpinteria, CA). O teste Hercep™ é um ensaios demanchamento de anticorpo projetado para detectar superexpressão de Heft emamostras de tecido de tumor. Este ensaio particular classifica a expressão deHer2 em quatro níveis: 0, 1, 2, e 3, em que nível 3 representa o nível maiselevado de expressão de Her2. A quantificação precisa pode ser acentuadaempregando-se um sistema de diagnóstico por imagem celular automatizado(ACIS) como descrito, p. ex., por Press, M. et ai, Modem Pathology 2000,13,225A.

Anticorpos, policlonais ou monoclonais, podem ser adquiridosde uma variedade de fornecedores comerciais, ou podem ser fabricadosempregando-se métodos bem conhecidos, p. ex., como descrito em Harlow etal, Antibodies: A Laboratory Manual, 2a ed; Cold Spring Harbor Laboratory,Cold Spring Harbor, N.Y., 1988.

A superexpressão de Her2 também pode ser determinada nonível do ácido nucleico porque há uma elevada correlação reportada entre asuperexpressão da proteína Her2 e a amplifícação do gene que a codifica.Uma maneira de testar isto é com o uso de RT-PCR. As seqüências genômicae de cDNA para Her2 são conhecidas. Iniciadores de DNA específicos podemser gerados empregando-se técnicas convencionais bem conhecidas, e entãopodem ser usados para amplificar modelo já presente na célula. Um exemplodisto é descrito em Kurokawa, H. et ai, Câncer Res. 2000, 60, 5887-5894.PCR pode ser padronizado de tal forma que diferenças quantitativas sãoobservadas como entre células normais e anormais, p. ex., células cancerosase não-cancerosas. Métodos bem conhecidos que empregam, p. ex.,densitometria, podem ser usados para quantificar e/ou comparar níveis doácido nucleico amplificado usando-se PCR.

De maneira similar, é possível usar ensaios de hibridação insitu fluorescente (FISH) e outros ensaios, p. ex., Northern e/ou Southern blot.Estes baseiam-se na hibridação de ácido nucleico entre o gene Her2 oumRNA e uma sonda de ácido nucleico correspondente que pode ser projetadada mesma maneira ou de maneira similar para iniciadores de PCR, acima.Ver, p. ex., Mitchell MS, e Press M.F. Oncol, Supl. 1999, 12, 108-116. Nocaso de FISH, esta sonda de ácido nucleico pode ser conjugada com umamolécula fluorescente, p. ex., fluoresceína e/ou rodamina, que, de preferência,não interfere com a hibridação, e em que a fluorescência pode ser medidamais tarde após hibridação. Ver, p. ex., Kurokawa, H et al, Câncer Res. 2000,60, 5887-5894 (descrevendo uma sonda de ácido nucleico específicaapresentando seqüência 5-FAM NucleicAcid-TAMRA-p-3' seqüência). Épossível empregar abordagens à base de ACTS, como descrito acima, parapreparar o ensaio mais quantitativo (de la Torre-Bueno, J., et al, ModemPathology 2000, 13, 221A).

Detecção imune e de ácido nucleico também pode ser dirigidacontra proteínas diferentes de HSP90 e HER2, em que referidas proteínas nãosão afetadas em resposta à inibição de HSP90. Os exemplos a seguir sãooferecidos a título de ilustração apenas e não devem ser interpretados comolimitando o pleno escopo e espírito da invenção.

EXEMPLOS

Materiais e Métodos

Os reagentes químicos usados para criar os produtos inéditosda invenção abaixo são todos comercialmente obteníveis, p. ex., da AldrichChemical Co., Milwaukee, WI, E.U.A.. De outra forma, sua preparação é fácile conhecida por alguém com prática ordinária na arte, ou é referida oudescrita aqui.

Os compostos finais foram purificados usualmente por meiode TLC preparativa (sílica-gel 60 Â, Whatman Partisil PK6F) oucromatografia de flash (sílica-gel 60 Â, EMD Chemicals) usando-seEtOAc/hexano ou McOH/CH2Cl2 como eluentes. Rf s foram medidos usando-se placas de TLC em sílica-gel (sílica-gel 60 Â, EMD Chemicals). Obteve-secromatogramas de HPLC analítica usando uma coluna C18 (Agilent Zorbax300SB-C18; 5 mícrons; 4,6 mm x 150 mm). Aplicou-se um gradiente entresolvente A (0,1% de TF A em H20) e solvente B (0,5% de TF A em CH3CN)aumentando-se a proporção de A linearmente de 5% (t=0) a 100% (t=7,00min), com uma taxa de fluxo constante de 1 ml/min. As amostras foramdiluída tipicamente a 0,1-1 mg/ml em MeOH ou CH3CN e os volumes deinjeção foram tipicamente de 10 ul. A coluna não foi aquecida, e a detecçãode UV foi efetuada a 254 nm. Espectros de RMN *H foram registrados em umespectrômetro Bruker Avance 400 MHz.

Os nomes químicos foram gerados usando-se o programaBeilstein Autonom 2.1.Procedimentos gerais

Procedimento Geral A: Acoplamento de Sonogashira.

<formula>formula see original document page 91</formula>

Uma mistura da 5-iodo-pirrolo[2,3-d]pirimidina apropriada,alquino (2-5 equiv.), Et3N (2-5 equiv.), Pd(PPh3)4 (0,01-0,05 equiv.), e Cul(0,05-0,30 equiv.) em DCM (5 ml/ mmol de iodeto de partida) foi aquecidaem refluxo durante de 0,5 a 3 h. A mistura de reação foi lavada com NaHC03aq. sat. e salmoura, secada (Na2S04), e concentrada. Cromatografia de flash(EtOAc/DCM/Et3N a 15:74:1, adicionando-se MeOH (de 0 a 7 vol%)) deu a5-alquinil-pirrolo[2,3-d]pirimidina desejada com rendimento típico de 20 a 70%.

Procedimento Geral B: Desproteção mediada com ZnCl2.

<formula>formula see original document page 91</formula>

Uma suspensão de 2-(pivaloílamino)-pirrolo[2,3-d]pirimidinae ZnCl2 (3-20 equiv.) em EtOH úmido (5 vol% em água) foi aquecida a 80°C,e monitorada por meio de HPLC. Quando a reação atingiu o completamento,adicionou-se DCM, e a camada orgânica foi lavada com solução sat. aq. deNaHC03. Secagem (Na2S04) e concentração deram a 2-amino-pirrolo[2,3-d]pirimidina desejada.

Exemplo 1

3 - [2-Amino-4-cloro-7-(4-metóxi-3,5 -Dimetil-piridin-2-ilmetil)-7H-pirrolo [2,3 -d]pirimidin-5 -il] -prop-2-in-1 -olETAPA 1 ETAPA 2

<formula>formula see original document page 92</formula>

Ver Shih, C. et ai, Heterocycles, 1993, 35, 825 e Patente dos Estados Unidosn° 5.196.424.

Etapa 1. 2 Amino-3,7-diidro-pirrolor2,3-dlpirimidin-4-ona

Uma mistura de 2,4-diamino-6-hidroxipirimidina (300 g, 2,37mol), cloroacetaldeído (solução aquosa a 50%, 382 g, 2,43 mol, 303 ml, 1,02eq.), acetato de sódio (195 g, 2,37 mol), DMF (2,5 1), e água (360 ml) foiagitada mecanicamente à temperatura ambiente durante 2 dias. O sólidoresultante foi recolhido por meio de filtração, e lavado com água (50 ml x3).O licor-mãe foi concentrado dando material adicional que foi lavado comágua (50 mlx3). Os materiais sólidos combinados foram recristalizados deMeOH dando o composto título as um pó branco (186 g, 52% de rendimento,pureza por HPLC: 100%). tR: 2,21 min. RMN *H (DMSO-d6) 6 11,00 (br, s,1H), 10,33 (br, s, 1H), 6,63 (q, 1H), 6,21 (q, 1H), 6,12 (br, s, 2H).

Etapa 2. 2,2-Dimetil-N-(4-oxo-4J-diidro-3H-pirrolor2J-dlpirimidin-2-iDpropionamida

Uma solução de 2-amino-3,7-diidro-pirrolo[2,3-d]pirimidin-4-ona (186 g, 1,23 mol) em piridina (2 1) foi tratada com cloreto detrimetilacetila (475 g, 3,94 mol, 485 ml, 3,2 eq.) a 90°C durante 2b, dandouma mistura de material monoacilado N(2) e material bisacilato N(2),N(7). Osolvente foi evaporado e o resíduo foi recolhido em amônia aquosa (37% deNH3, 310 ml) e MeOH (2 1), e agitado à temperatura ambiente durante 30min, para clivar seletivamente o grupo pivaloíla N(7). O sólido foi recolhidopor meio de filtração, lavado com água (500 mlx5), e secado em alto vácuodando o composto título como um sólido (193 g). Concentração do licor-mãedeu material sólido adicional, que foi recolhido, lavado com água (50 mlx5), esecado (77 g). O rendimento combinado foi de 93% (pureza por HPLC98,6%). tR: 4,57 min. RMN *H (DMSO-dô) 8 12,00, (br. s, 1H), 7,40 (br. s,1H), 6,96 (q, 1H), 6,40 (q, 1H), 1,24 (s, 9H).

Etapa 3. N-(4-Cloro-7H-pirrolor2,3-dlpirimidin-2 il)-2,2-dimetilpropionamida

Uma mistura de 2,2-Dimetil-N-(4-oxo-4,7-diidro-3H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-il)-propionamida (210 g, 0,90 mol), POCl3 (828 g,5,40 mol, 503 ml, 6,0 eq), cloreto de benziltrietilamônio (411 g, 1,80 mol),N,N-dimetilanilina (220 g, 231 ml, 1,80 mol), e acetonitrilo (2,0 1) foiaquecida em refluxo durante de 40 a 60 min, monitorando-se com HPLC. Osolvente foi evaporado em um evaporador rotativo, e o resíduo foi adicionadocuidadosamente (cuidado: exotérmica e corrosiva) e lentamente em gel e água(16 1). O pH foi ajustado em 7 com NaOH sólido, e o precipitado resultantefoi recolhido por meio de filtração. Secagem deu o composto título (159 g,70% de rendimento 70%, pureza por HPLC 100%). tR: 5,37 min, RMN *H(DMSO-d6) S 12,35 (br, s, 1H), 10,06 (br, s, 1H), 7,54 (q, 1H), 6,52 (q, 1H),1,25 (s, 9H).

Etapa 4. N-(4-Cíoro-5-iodo-7H-pirrolor2,3-d1pirimidin-2-il)-2,2-dimetilpropionamida

Uma solução de N-(4-cloro-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-il)-2,2-dimetil-propionamida (101 g, 0,40 mol) em THF anidro (2 1) foi tratadacom N-iodossuccinimida (98,9 g, 0,44 mol, 1,1 eq.) em atmosfera de N2 àtemperatura ambiente durante 40 min. O solvente foi evaporado, e o resíduofoi recolhido em CH2C12 (1,5 1), e lavado com Na2S03 (500 mlx3) e salmoura(300 mlx3). Evaporação e recristalização de MeOH deu o composto títulocomo um pó branco (122 g, 81% de rendimento, pureza por HPLC: 98,2%). tR: 6,19 min, RMN 'H (DMSO-d6) 5 12,65 (br.s, 1H), 10,11 (br, s, 1H), 7,76(d, 1H), 1,24 (s, 9H).

Etapa 5. N-r4-Cloro-5-iodo-7-(4-metóxi-3,5-dimetila piridin-2-ilmetil)-7H-pirrolof2,3-dlpirimidin-2-il]-2,2-dimetil propionamida

Uma mistura de N-(4-cloro-5-iodo-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-il)-2,2-dimetil-propionamida (37,8 g, 0,1 mol), cloridrato de 2-clorometil-4-metóxi-3,5-dimetil-piridina (23,1 g, 0,104 mol), K2C03 finamentepulverizado, (41,5 g, 0,3 mol, 3,0 eq.), e DMF anidro (200 ml) foi agitada àtemperatura ambiente de um dia para o outro. O solvente foi evaporado, e oresíduo foi recolhido em CH2C12 (500 ml), lavado com salmoura (200 ml x3), evaporado, e recristalizado de MeOH dando o produto titular como um póbranco (42,0 g, 80% de rendimento; pureza por HPLC 98%). tR: 6,49 min,RMN !H (DMSO-d6) ô 10,16 (br. s,lH), 8,04 (s, 1H), 7,72 (s, 1H), 5,46 (s,2H), 3,73 (s, 3H), 2,33 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 1,21 (s, 9H).

Etapa 6. 4-Cloro-5-iodo-7-('4-metóxi-3,5-dimetil-piridin-2-ilmetil)-7H- pirrolor2,3-dlpirimidin-2 ilamina

Uma mistura de N-[4-cloro-5-iodo-7-(4-metóxi-3,5-Dimetil-piridin-2-ilmetil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-il]-2,2-dimetil-propionamida(l,0g, 1,89 mmol), ZnCl2 (1,29 g, 9,47 mol, 5,0 eq.), e solução de EtOH/H20(25 ml, relação volumétrica de 100:5) foi agitada a 80°C de um dia para ooutro. A mistura de reação foi agitada em água, e o sólido foi recolhido pormeio de filtração, lavado com água (10 mlx3), e recristalizado de MeOHdando o produto titular (0,67 g, 85% de rendimento; pureza por HPLC 98%).tR: 5,39 min. RMN *H (DMSO-d6) ô 8,07 (s, M), 7,28 (s, 1H), 6,75 (br. s,2H), 5,29 (s, 2H), 3,73 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 2,17 (s, 3H).Etapa 7. 3-[2-Amino-4-cloro-7-(4-metóxi-3,5-dimetil-piridin-2-ilmetil)-7H-pirrolo["2,3-dlpirimidin-5-ill-prop-2-in-l-ol

O composto título foi preparado por meio de acoplamento deSonogashira de 4-cloro-5-iodo-7-(4-metóxi-3,5-dimetil-piridm-2-ilmetil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-ilamina (ver exemplo 1) com álcool propargílico deacordo com o Procedimento Geral A. tR: 4,42 min. RMN !H (DMSO-d6) 58,04 (s, 1H), 7,32 (s, 1H), 6,71 (br, s, 2H), 5,27 (s, 2H), 5,22 (t, 1H), 4,26 (d,1H), 3,71 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 2,14 (s, 3H).

Exemplo 2

4- \2-Amino-4-cloro-7-(4-metóxi-3,5 -dimetil-piridin-2-ilmetil)-7H-pirrolo[2,3-dlpirimidin-5-ill-but-3-in-l-ol

<formula>formula see original document page 95</formula>

O composto título foi preparado por meio de acoplamento deSonogashira de 4-cloro-5-iodo-7-(4-metóxi-3,5-dimetil-piridin-2-ilmetil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-ilamina (ver Exemplo 1) com 3-butin-l-ol de acordocom o Procedimento Geral A. tR: 4,54 min. RMN !H (DMSO-d6) ô 8,04 (s,1H), 7,22 (s, 1H), 6,69 (br. s, 2H), 5,25 (s, 2H), 4,82 (d, 1H), 3,70 (s, 3H),3,55 (q, 2H), 2,49 (t, 2H), 2,23 (s, 3H), 2,14 (s, 3H).

Exemplo 3

5 - [2-Amino-4-cloro-7-(4-metóxi-3,5 -dimetil-piridin-2-ilmetil)-7H-pirrolor2,3-d1pirimidin-5-ill-pent-4-in-l-ol

<formula>formula see original document page 95</formula>

O composto título foi preparado por meio de acoplamento deSonogashira de 4^1oro-5-iodo-7-(4-metóxi-3,5-dimetil-piridin-2-ilmetil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-ilamina (ver Exemplo 1) com 4-pentin-l-ol deacordo com o Procedimento Geral A. tR: 4,71 min. RMN JH (DMSO-d,) 88,04 (s, 1H), 7,22 (s, 1H), 6,69 (br, s, 2H), 5,25 (s, 2H), 4,48 (d, 1H), 3,71 (s,3H), 3,50 (q, 2H), 2,42 (t, 2H), 2,23 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 1,65 (5, 2H).

Exemplo 4

4-Cloro-5-(3-diisobutilamino-prop-l-inin-7-('4-metóxi-3,5-dimetil-piridin-2-ilmetiD-7H-pirrolo[2,3-dlpirimidin-2-ilamina

<formula>formula see original document page 96</formula>

Etapa 1. N-r4-Cloro-5-(3-hidróxi prop-l-inil)-7-(4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-ilmetin-7H-pirrolo[2,3-d1pirimidin-2-ill-2,2-dimetil propionamida

O composto título foi preparado por meio de acoplamento deSonogashira de N-[4-cloro-5-iodo-7-(4-metóxi-3,5-Dimetil-piridin-2-ilmetil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-il]-2,2-dimetil-propionamida (ver Exemplo 1)com álcool propargílico de acordo com o Procedimento Geral A. tR: 5,58 min, RMN !H (DMSO-dé): 8 10,15 (br, s, 1H), 8,04 (s, 1H), 7,80 (s, 1H), 5,48 (s,2H), 5,31 (t, 1H), 4,33 (d, 2H), 3,74 (s, 3H), 2,33 (s, 3H), 2,15 (s, 3H), 1,21 (s, 9H).

Etapa 2. N-r4-Cloro-5-(3-diisobutilamino-prop-l-inil)-7-(4-metóxi-3,5-dimetil-piridin-2-ilmetil)-7H-pirrolo[2,3-dlpirimidin-2-ill-2.,2-dimetil propionamida

Uma solução de N-[4-cloro-5-(3-hidróxi-prop-l-inil)-7-(4-metóxi-3,5-dimetil-piridin-2-ilmetil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-il]-2,2-dimetil-propionamida (9,0 g, 19,7 mmol) e Et3N (2 ml) em DCM (50 ml) foitratada com MsCl (15,3 ml, 19,7 mmol) a 0°C durante 20 min e evaporadadando um sólido amarelo, contendo em sua maior parte o mesilato desejado(10,7 g). Uma fração deste sólido (106,8 mg, 0,2 mmol) foi tratada comdiisobutilamina (25,9 mg, 24,8 ul) em DCM (2 ml) a 0°C durante lOh, edepois a 25°C durante 3 dias. Evaporação e cromatografia de placapreparativa deu o composto título.

Etapa 3. 4-Cloro-5-(3-diisobutilamino-prop-l-inil)-7-('4-metóxi-3,5-dimetil-piridin-2-ilmetil)-7H-pirrolor2,3-d]pirimidin-2-ilamina

O composto título foi preparado por meio de clivagem dogrupo protetor pivaloíla de N-[4-cloro-5-(3-diisobutilamino-prop-l-inil)-7-(4-metóxi-3,5-dimetil-piridin-2-ilmetil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-il]-2,2-dimetil-propionamida com ZnCl2 de acordo com o Procedimento Geral B.tR: 5,23 min. H-RMN (CDC13 ô 8,23 (s, 1H), 7,08 (s, 1H), 5,31 (s, 2H), 4,99(s, 1H), 3,76 (s, 3H), 3,56 (s, 2H), 2,29 (s, 3H), 2,27 (d, 4H), 2,21 (s, 3H),1,74 (m, 2H), 0,90 (d, 12H).

Exemplo 5

4-Cloro-5-(3-diisopropilamino-prop-l-inil)-7-(4-metóxi-3,5-dimetil-piridin-2-ilmetilV 7H-pirrolo [2,3 -dl pirimidin-2-ilamina

Etapa 1. N-r4-Cloro-5-(3-diisopropilamino-prop-1 -inil)-7-(4-metóxi-3,5-dimetil_piridin-2-ilmetil)-7H-pirrolo [2,3 -d]pirimidin-2-il] -2,2-dimetilpropionamida

<formula>formula see original document page 97</formula>

Uma solução de N-[4-cloro-5-(3-hidróxi-prop-l-inil)-7-(4-metóxi-3,5-dimetil-piridin-2-ilmetil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-il]-2,2-dimetil-propionamida (9,0 g, 19,7 mmol) e Et3N (2 ml) em DCM (50 ml) foitratada com MsCl (15,3 ml, 19,7 mmol) a 0°C durante 20 min e evaporadadando um sólido amarelo, contendo em sua maior parte o mesilato desejado(10,7 g). Uma fração deste sólido (106,8 mg, 0,2 mmol) foi tratada com

diisopropilamina (20,3 mg, 28,1 ul) em DCM (2 ml) a 0°C durante 10 h, e,depois, a 25°C durante 3 dias. Evaporação e cromatografia de placapreparativa deu o composto título.

Etapa 2. 4-Cloro-5-('3-diisopropilamino-prop-l-inil)-7-(4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-ilmetil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-ilamina

O composto título foi preparado por meio de clivagem dogrupo protetor de pivaloíla de N-[4-cloro-5-(3-diisopropilamino-prop-l-inil)-7-(4-metóxi-3,5-dimetil-piridin-2-ilmetil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-il]-2,2-dimetil-propionamida com ZnCl2 de acordo com o Procedimento Geral B.tR: 4,71 min. RMN !H (CDC13) 5 8,24 (s, 1H1), 7,05 (s, 1H), 5,30 (s, 2H),4,96 (s, 1H), 3,76 (s, 3H), 3,68 (s, 2H), 3,27 (7, 2H), 2,27 (s, 2H), 2,20 (s,2H), 1,15 (d, 12H).

Exemplo 6

4-Cloro-7-('4-metóxi-3,5-dimetil-piridin-2-ilmetil)-5-piridin-2-iletinil-7H-pirrolor2,3-dlpirimidin-2-ilamina

<formula>formula see original document page 98</formula>

O composto título foi preparado por meio de acoplamento deSonogashira de 4-cloro-5-iodo-7-(4-metóxi-3,5-dimetil-piridin-2-ilmetil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-ilamina (ver Exemplo 1) com 2-etinilpiridina deacordo com o Procedimento Geral A. tR: 4,65 min. RMN lK (DMSO-d6) ô8,59 (a, 1H), 8,07 (s, 1H), 7,82 (td, 1H), 7,62 (s, 1H), 7,56 (d, 1H), 7,36 (td,1H), 6,84 (br, s, 2H), 5,36 (s, 2H), 3,74 (s, 3H), 2,28 (s, 3H), 2,17 (s, 3H).

Exemplo 7

6-r2-Amino-4-cloro-7-(,4-metóxi-3,5-dimetil-piridin-2-ilmetil)-7H-pirrolo [2,3 -dlpirimidin-5 -il] -hex-5 -in-1 -ol

<formula>formula see original document page 99</formula>

O composto título foi preparado por meio de acoplamento deSonogashira de 4-cloro-5-iodo-7-(4-metóxi-3,5-dimetil-piridin-2-ilmetil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-ilamina (ver Exemplo 1) com 5-hexin-l-ol deacordo com o Procedimento Geral A. tR: 4,92 min. RMN (DMSO-d6) 58,04 (s, 1H), 7,22 (s, 1H), 6,69 (br, s, 2H), 5,25 (s, 2H), 4,39 (t, 1H), 3,70 (s,3H), 3,40 (q, 2H), 2,39 (t, 2H),2,23 (s, 3H), 2,14 (s, 3), 1,55 (m, 4H).

Exemplo 8

4-Cloro-7-(4-metóxi-3,5-dimetil-piridin-2-ilmetil)-5-trimetilsilaniletinil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-ilamina

<formula>formula see original document page 99</formula>

Etapa 1. N-r4-Cloro-l-('4-metóxi-3,5(dimetil-piridin-2-ilmetil)-5-trimetilsilaniletinil-7H-pirrolo[2,3-dlpirimidin-2-il]-2,2-dimetil-propionamida

O composto título foi preparado por meio de acoplamento deSonogashira de N-[4-cloro-5-iodo-7-(4-metóxi-3,5-dimetil-piridin-2-ilmetil)-7H-pirrolo[2,3-d]pimidin-2-il]-2,2-dimetil-propionamida (ver Exemplo 1)com etinil-trimetilsilano de acordo com o Procedimento Geral A. tR = 7,48min, RMN !H (CDC13) ô 8,18 (s, 2H), 7,38 (s, 1H), 5,49 (s, 2H), 3,74 (s, 3H),2,24 (s, 6H), 1,35 (s, 9H), 0,24 (s, 9H).

Etapa_2j_4-Cloro-7-(4-metóxi-3,5-dimetil_piridin-2-ilmetil)-5-trimetilsilaniletinil-7H-pirrolor2,3-dlpirimidin-2-ilaminaO composto título foi preparado por meio de clivagem dogrupo protetor de pivaloíla de N-[4-cloro-7-(4-metóxi-3,5-dimetil-piridin-2-ilmetil)-5-trimetilsilaniletinil-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-il]-2,2-dimetil-propionamida com Z11CI2 de acordo com o Procedimento Geral B. tR = 6,56min, RMN lH (CDC13) ô 8,22 (s, 1H), 7,11 (s, 1H), 5,30 (s, 2H), 5,09 (s, 2H),3,75 (s, 3H), 2,26 (a, 3H), 2,18 (s, 3H), 0,24 (s, 9H).

Exemplo 9

Ácido 5-[2-amino-4-cloro-7-C4-metóxi-3,5-dimetil-piridin-2-ilmetilV7H-pirrolo["2,3-d]pirimidin-5-il1-pent-4-inóico

<formula>formula see original document page 100</formula>

O composto título foi preparado por meio de acoplamento deSonogashira de 4-Cloro-5-iodo-7-(4-metóxi-3,5-dimetil-piridin-2-ilmetil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-ilamina (ver Exemplo 1) com ácido 4-pentinóico deacordo com o Procedimento Geral A. tR = 4,73 min, RMN lK (DMSO-d6) 512,2 (s, 1H), 8,15 (s, 1H), 7,28 (s, 1H), 6,80 (s, 2H), 5,33 (s, 2H), 3,73 (s,3H), 3,31 (br, s, 2H), 2362 (br, t, 2H), 2,27 (s, 3H), 2,17 (s, 3H).

Exemplo 10

dietilamida do ácido 5-r2-amino-4-cloro-7-(4-metóxi-3,5-dimetil-piridin-2-ilmetil)-7H-pirrolor2,3-dlpirimidin-5-ill-pent-4-inóico

<formula>formula see original document page 100</formula>

Uma mistura de ácido 5-[2-amino-4-cloro-7-(4-metóxi-3,5-dimetil-piridin-2-ilmetil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-5-il]-pent-4-inóico (verexemplo precedente, 25 mg), Et2NH (100 ul), EDCI (87 mg), HOBt (50 mg),e DMF (1 ml) foi agitada à temperatura ambiente durante 16 h. Cromatografiade placa preparativa (EtOAc/hexano 2:1) deu o composto título. tR= 5,33 min,RMN lK (CDC13) 5 8,23 (s, 1H), 7,01 (s, 1H), 5,32 (s, 2H), 4,98 (s, 2H), 3,76(s, 3H), 3,42 (q, 2H), 3,33 (q, 2H), 2,78 (dd, 2H), 2,64 (dd, 2H), 2,27 (s, 3H),2,18 (s, 3H), 1,20 (t, 3H), 1,13 (t, 3H).

Exemplo 11

5-[2-Amino-4-cloro-7-(4-metóxi-3,5-dimetil-piridin-2-ilmetil)-7H-pirrolo|"2,3-dlpirimidin-5-ill-l-(4-metil-piperazin-l-il)-pent-4-in-l-ona

<formula>formula see original document page 101</formula>

Etapa 1: l-(4-Metil-piperazin-l-il)pent-4-in-l-ona

Uma solução de ácido 4-pentinóico (519 mg, 5,29 mmol) eEt3N (737 ul, 5,29 mmol) em DCM (10 ml) foi tratada com cloroformiato deetila (504 ul, 5,29 mmol) à temperatura ambiente durante 15 min. Emseguida, adicionou-se N-metil-piperazina (588 ul, 5,29 mmol), e a agitaçãofoi prolongada durante 45 min. Tratamento (NaHC03 aquoso saturado) econcentração deu o composto título como um óleo incolor. RMN *H (CDC13)ô 3,63 (t, 2H), 3,48 (t, 2H), 2,55 (m, 4H), 2,38 (quint, 4H), 2,30 (s, 311).

Etapa 2: 5-f2 Amino-4-cloro-7-(4-metóxi-3,5-dimetil piridin-2 ilmetil)-7H-pirrolor2,3 -dlpirimidin-5-ill-1 -(4-metil-piperazin-1 -il)pent-4-in-1 -ona

O composto título foi obtido por meio de acoplamento deSonogashira de 4-cloro-5-iodo-7-(4-metóxi-3,5-dimetil-piridin-2-ilmetil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-ilamina (ver Exemplo 1) com l-(4-metil-piperazin-l-il)-pent-4-in-l-ona de acordo com o Procedimento Geral A. tR= 4,16 min.RMN !H (CDCl3)ô 8,22 (s, 1H), 5,30 (s, 2H), 5,14 (s, 2H), 3,74 (s, 3H), 3,64(t, 2H), 3,50 (t, 2H), 2,76 (dd, 2H), 2,64 (dd, 2H), 2,29 (s, 3H), 2,24 (s, 3H),2,18 (s, 3H).

Exemplo 12

amida de ácido 5-r2-amino-4-cloro-7-(4-metóxi-3,5-dimetil-piridin-2-ilmetil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-5-il]-pent-4-inóico

<formula>formula see original document page 102</formula>

Etapa 1: amida do ácido pent-4-inóico

Uma solução de ácido 4-pentinóico (517 mg, 5,29 mmol) eEt3N (737 ul, 5,29 mmol) em DCM (10 ml) foi tratada com cloroformiato deetila (504 ul, 5,29 mmol) à temperatura ambiente durante 15 min. Depoisadicionou-se NH3 (7M em MeOH, 1 ml, 7 mmol), e a agitação foi prolongadadurante 5 min. Tratamento (NaHC03 aquoso saturado) e concentrações deu ocomposto título como um sólido incolor. RMN !H (CDC13) ô 6,03 (s, 1H),5,86 (s, 1H), 2,55 (m, 2H), 2,46 (m, 2H), 2,02 (t, 1H).

Etapa 2: amida do ácido 5-r2-amino-4-cloro-7-(4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-ilmetil)-7H-pirrolo|"2,3-dlpirimidin-5-il"|-pent-4-inóico

O composto título foi obtido por meio de acoplamento deSonogashira de 4-cloro-5-iodo-7-(4-metóxi-3,5-dimetil-piridin-2-ilmetil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-ilamina (ver Exemplo 1) com amida de ácido pent-4-inóico de acordo com o procedimento geral A. tR= 4,35 min. RMN JH(DMSO-d6) 5 8,07 (s, 1H), 7,36 (s, 1H), 7,23 (s, 1H), 6,87 (s, 1H), 6,71 (s,2H), 5,28 (s, 2H), 3,72 (s, 3H), 2,59 (t, 2H), 2,34 (t, 2H), 2,25 (s, 3H), 2,16 (s,3H).

Exemplo 13

t-butil éster do ácido {3-|"2-amino-4-cloro-7-(4-metóxi-3,5-dimetil-piridin-2-ilmetil)-7H-pirrolo r2,3-d]pirimidin-5-il]-prop-2-inil)-carbâmico

<formula>formula see original document page 103</formula>

Etapa 1: t-butil éster do ácido prop-2-inil-carbâmico

Uma solução de propargilamina (1 g, 18 mmol) em DCM (10ml) foi tratada com (BOC)20 (4,0 g, 18 nmiol) à temperatura ambiente durante 3 h. Evaporação deu o composto título como um óleo. RMN JH(CDC13) S 4,80 (s, 1H), 3,93 (s, 2H), 2,23 (t, 1H), 1,47 (s, 9H).

Etapa 2: t-butil éster do ácido (3-r2-amino-4-cloro-7-(4-metóxi-3,5-dimetil-piridin-2-ilmetil)-7H-pirrolor2,3-dlpirimidin-5-il]-prop-2-inil)-carbâmico

O composto título foi obtido por meio de acoplamento deSonogashira de 4-cloro-5-iodo-7-(4-metóxi-3,5-dimetil-piridin-2-ilmetil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-ilamina (ver Exemplo 1) com t-butil éster do ácidoprop-2-inil-carbâmico de acordo com o Procedimento Geral A. tR = 5,91 min,RMN lU (CDCI3) 8 8,20 (s, 1H), 7,05 (s, 1H), 5,36 (s, 2H), 5,31 (s, 2H), 4,82(s, 1H), 4,16 (s, 2H), 3,76 (s, 3H), 2,26 (s, 3H), 2,24 (s, 3H), 1,47 (s, 9H).

Exemplo 14

5 -(3 - Amino-prop-1 -inil V4-cloro-7-(4-metóxi-3,5 -dimetil-piridin-2-ilmetil)-7H-pirrolor2,3-dlpirimidin-2-ilamina

<formula>formula see original document page 103</formula>

Uma solução de t-butil éster do ácido {3-[2-amino-4-cloro-7-(4-metóxi-3,5-dimetil-piridin-2-ilmetil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-5-il]-prop-2-inil}-carbâmico (ver exemplo precedente, 22 mg) em DCM (3 ml) foitratada com TFA (0,6 ml) à temperatura ambiente durante 15 min.Evaporação, tratamento (DCM/NaHC03 aquoso saturado), secagem(Na2S04), e evaporação deu o composto título como um óleo. tR = 3,85 min.RMN lH (CDC13) ô 8,24 (s, 1H), 7,06 (s, 1H), 5,32 (s, 2H), 5,02 (s, 2H), 3,75(s, 3H), 2,27 (s, 3H), 2,20 (s, 3H).

Exemplo 15

t-butil éster do ácido (5-r2-amino-4-cloro-7-('4-metóxi-3,5-dimetil-piridin-2-ilmetil)-7H-pirrolo-r2,3-dlpirimidin-5-ill-pent-4-inil)-carbâmico

<formula>formula see original document page 104</formula>

Etapa 1: t-butil éster do ácido pent-4-inil-carbâmico

Uma solução de pent-4-inilamina (480 mg; Li, Y. et ai, J. Am.Chem. Soe. 1996, 118, 9295) em DCM (5 ml) foi tratada com (BOC)20 àtemperatura ambiente durante 15 min. Evaporação deu o composto títulocomo um óleo incolor. RMN JH (CDC13) ô 4,68 (s, 1H), 3,24 (q, 2H), 2,25(td, 2H), 1,97 (t, 1H), 1,70 (quint, 2H), 1,45 (s, 9H).

Etapa 2: t-butil éster do ácido (5-r2-amino-4-cloro-7-(4-metóxi-3,5-dimetil-piridin-2-ilmetil)-7H-pirrolor2,3-dlpirimidin-5-ill-pent-4-inil)-carbâmico.

O composto título foi obtido por meio de acoplamento deSonogashira de 4-cloro-5-iodo-7-(4-metóxi-3,5-dimetil-piridin-2-ilmetil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-ilamina (ver Exemplo 1) com t-butil éster do ácidopent-4-inil-carbâmico de acordo com o Procedimento Geral A. tR = 5,96 min,RMN *H (CDCI3) ô 8,23 (s, 1H), 7,02 (s, 1H), 5,30 (s, 2H), 5,07 (s, 2H), 4,80(br, t, 1H), 3,75 (s, 3H), 3,30 (q, 2H), 2,48 (t, 2H), 2,26 (s, 3H), 2,19 (s, 3H),1,80 (quint, 2H), 1,43 (s, 9H).

Exemplo 16

5-(5-Amino-pent-l-inil)-4-cloro-7-('4-metóxi-3,5-dimetil-piridin-2-ilmetil)-7H-pirrolo [2,3 -dlpirimidin-2-ilamina

<formula>formula see original document page 105</formula>

Uma solução de t-butil éster do ácido {5-[2-amino-4-cloro-7-(4-metóxi-3,5 -dimetil-piridin-2-ilmetil)-7H-pirrolo [2,3 -d]pirimidin-5 -il] -pent-4-inil}-carbâmico (ver exemplo precedente, 33 mg) em DCM (1,0 ml) foitratada com TFA (0,2 ml) à temperatura ambiente durante 10 min. A misturade reação foi concentrada, recolhida em água (1,5 ml), lavada com EtOAc(1,5 ml), tomada alcalina com NH4OH aquoso saturado (0,5 ml), e reextraídaem EtOAc (25 ml). Lavagem (NH4OH 1M), secagem (Na2S04) econcentração deu o composto título. tR = 4,37 min. RMN !H (CDC13) ô 8,15(s, 1H), 6,97 (s, 1H) 5,25 (s, 2H), 3,72 (s, 3H), 2,94 (m, 2H), 2,48 (t, 2H),2,23 (s, 3H), 2,16 (s, 3H), 1,80 (quint., 2H).

Exemplo 17

2-{5-r2-Amino-4-cloro-7-('4-metóxi-3,5-dimetil-piridin-2-ilmetil)-7H-pirrolo[2,3 -d]pirimidin-5 -il]-pent-4-inil} -isoindol-1,3 -diona

<formula>formula see original document page 105</formula>

O composto título foi obtido por meio de acoplamento deSonogashira de 4-cloro-5-iodo-7-(4-metóxi-3,5-dimetil-piridin-2-ilmetil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-ilamina (ver Exemplo 1) com 2-pent-4-inil-isoindol-1,3-diona (Li, Y. et ai, J. Am. Chem. Soe. 1996, 118, 9295) de acordo com oProcedimento Geral A. tR= 6,08 min. RMN JH (CDC13) 5 8,17 (s, 1H), 7,75(dd, 2H), 7,58 (dd, 2H), 6,85 (s, 1H), 5,22 (s, 2H), 3,81 (t, 2H), 3,72 (s, 3H),2,46 (t, 2H), 2,23 (s, 3H), 2,14 (s, 3H), 1,95 (quint, 2H).

Exemplo 18

4-Cloro-7-r4-metóxi-3,5-dimetil-piridin-2-ilmetil)-5-('4-morfolin-4-il-but-l-inil)-7H-pirrolor2,3-dlpirimidin-2-ilamina

<formula>formula see original document page 106</formula>

Etapa 1: but-3-inil éster de ácido metanossulfônico

Uma solução de 3-but-l-inol (5,62 g, 80,2 mmol) e Et3N (14,5ml, 104 mmol) em DCM (40 ml) foi tratada com MsCl (7,48 ml, 96,2 mmol)a 0°C durante 10 min. Tratamento (água; NaHC03 aquoso saturado), secagem(Na2S04), e concentração deu o composto título como um óleo laranja claro.RMN 'h (CDC13) ô 4,32 (t, 2H), 3,07 (s, 3H), 2,67 (td, 2H), 2,09 (t, 2H).

Etapa 2: 4-But-3 inil-morfolina

Uma mistura de but-3-inila éster do ácido metanossulfônico(10,1 g, 68 mmol) e morfolina (12,5 ml, 143 mmol) foi aquecida a 100°Cdurante 1 h. A mistura foi diluída com Et20 (50 ml) e filtrada. O resíduosólido foi descartado, e o licor-mãe extraído com HC1 3N. A camada aquosafoi basificada com NAOH, e reextraída com EtOAc. Secagem (Na2S04),concentração, e destilação (via curta, ponto de ebulição = 130°C a ~5 mm Hg)deu o composto título como um óleo incolor. RMN !H (CDC13) ô 3,72 (t, 4H),2,60 (t, 2H), 2,48 (t, 4H), 2,39 (td, 2H), 2,00 (t, 1H).

Etapa 3: 4-Cloro-7-(4-metóxi-3,5-dimetil piridin-2-ilmetil)-5-(4-morfolin-4-il-but-l-inil)-7H-pirrolo[2,3-dlpirimidin-2-ilamina

O composto título foi obtido por meio de acoplamento deSonogashira de 4-cloro-5-iodo-7-(4-metóxi-3,5-dimetil-piridin-2-ilmetil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-ilamina (ver Exemplo 1) com 4-but-3-inil-morfolinade acordo com o Procedimento Geral A. tR = 4,12 min. RMN *H (CDC13) ô8,33 (s, 1H), 6,96 (s, 1H), 5,26 (s, 2H), 5,12 (s, 2H), 3,76 (s, 3H), 3,72 (t, 4H),2,67 (m, 2H), 2,60 (m, 2H), 2,52 (t, 4H), 2,25 (s, 3H), 2,20 (s, 3H).

Exemplo 19

4-Cloro-7-( 4-metóxi-3,5-dimetil-piridin-2-ilmetil)-5-(5-morfolin-4-il-pent-1 -inil)-7H-pirrolo[2,3-dlpirimidin-2-ilamina

<formula>formula see original document page 107</formula>

Etapa 1: 5-Iodo-pent-l-ino

Uma mistura de 5-cloro-pent-l-ino (5,0 ml, 47 mmol), NaI(9,7 g, 65 mmol) e acetona (20 ml) foi aquecida em refluxo durante 15 h.Adicionou-se mais NaI (9,7 g, 65 mmol), e o refluxo foi prolongado durante24 h. Após filtração e concentração, o resíduo foi dissolvido em hexano elavado com água e Na2S203 aq. Secagem (Na2SC>4) e concentração deu ocomposto título. RMN 'H (CDC13) ô 3,33 (t, 2H), 2,36 (td, 2H), 2,03 (quint,2H), 2,01 (t, 1H).

Etapa 2: 4-Pent-4-inil-morfolina

Uma mistura de 5-iodo-pent-l-ino (2,40 g, 12,3 mmol) emorfolina (2,70 g, 30,9 mmol) foi aquecida a 80°C durante 15 min. A misturafoi diluída com Et20 e filtrada. O resíduo sólido foi descartado, e o licor-mãefoi extraído com HC1 3N. A camada aquosa foi tornada básica com NAOH, ereextraída em EtOAc. Secagem (Na2S04), e concentração deu o compostotítulo como um óleo laranja claro. RMN !H (CDC13) 5 3,67 (t, 4H), 2,39 (m,6H), 2,21 (td, 2H), 1,93 (t, 1H), 1,67 (quint, 2H).

Etapa 3: 4-Cloro-7-(4-metóxi-3,5-dimetil piridin-2-ilmetin-5-r5-morfolin-4-il-pent-l-inil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-ilamina

O composto título foi obtido por meio de acoplamento deSonogashira de 4-cloro-5-iodo-7-(4-metóxi-3,5-dimetil-piridin-2-ilmetil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-ilamina (ver Exemplo 1) com 4-pent-4-inil-morfolina de acordo com o procedimento geral A tR = 4,26 min.RMN 'H (CDCI3) ô 8,21 (s, 1H), 7,00 (s, 1H), 5,29 (s, 2H), 5,13 (s, 2H), 3,74(s, 3H), 3,71 (t, 4H), 2,51-2,45 (m, 8H), 2,25 (s, 3H), 2,18 (s, 3H), 1,78(quint., 2H).

Exemplo 20

5-(,4-t-Butilamino-but-l-inilV4-cloro-7-(4-metóxi-3,5-dimetil-piridin-2-ilmetil)-7H-pirrolor2,3-d1pirimidin-2-ilamina

<formula>formula see original document page 108</formula>

Etapa 1: t-Butil-but-3 inil-amina

Uma solução de but-3-inila éster do ácido tolueno-4-sulfônico(1,57 g, 7,1 mmol) em t-BuNH2 (3,54 g, 48 mmol) foi aquecida em refluxodurante 18 h. A mistura de reação foi diluída com Et20 (20 ml), filtrada, econcentrada dando o produto titular. RMN *H (CDC13) ô 2,74 (t, 2H), 2,38(td, 2H), 2,00 (t, 1H),1,12 (s, 9H).

Etapa 2: 5-(4-t-Butilamino-but-1 -iniD-4-cloro-7-(4-metóxi-3,5 -dimetil-piridin-2-ilmetil)-7H-pirrolor2,3-d1pirimidin-2-ilamina

O composto título foi obtido por meio de acoplamento deSonogashira de 4-cloro-5-iodo-7-(4-metóxi-3,5-dimetil-piridin-2-ilmetil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-ilamina (ver Exemplo 1) com t-butil-but-3-inil-amina de acordo com o Procedimento Geral A. tR = 4,38 min, RMN 'H(CDC13) ô 8,21 (s, 1H), 7,03 (s, 1H), 5,29 (s, 2H), 5,10 (s, 2H), 3,74 (s, 3H),2,81 (t, 2H), 2,62 (t, 2H), 2,25 (s, 3H), 2,18 (s, 3H), 1,13 (s, 9H).

Exemplo 21

5 -(5 -t-Butilamino-pent-1 -inil V4-cloro-7-(4-metóxi-3,5 -dimetil-piridin-2-ilmetilV7H-pirrolor2,3-dlpirimidin-2-ilamina

<formula>formula see original document page 109</formula>

Etapa 1: pent-4-inil-amina de f-butila

Uma solução de 5-iodo-pent-l-ino (1,0 g, 5,2 mmol) em t-BuNH2 (2,0 g, 27 mmol) foi aquecida em refluxo durante 4 h, evaporada,diluída com Et20, filtrada, e concentrada dando o composto título. RMN !H(CDCI3) ô 2,67 (t, 2H), 2,27 (td, 2H), 1,96 (t, 1H), 1,70 (quint, 2H), 1,11 (s, 9H).

Etapa 2: 5-( 5-t-Butilamino-pent-l-inil)-4-cloro-7-('4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-ilmetil)- 7H-pirrolo\2,3 -d]pirimidin-2-ilamina

O composto título foi obtido por meio de acoplamento deSonogashira de 4-cloro-5-iodo-7-(4-metóxi-3,5-dimetil-piridin-2-ilmetil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-ilamina (ver Exemplo 1) com t-butil-pent-4-inil-amina de acordo com o Procedimento Geral A. tR = 4,51 min. RMN lH(CDCI3) 5 8,23 (s, 1H), 7,02 (s, 1H), 5,30 (s, 2H), 5,00 (s, 2H), 3,75 (s, 3H),2,74 (t, 2H), 2,50 (t, 2H), 2,27 (s, 3H), 2,19 (s, 3H), 1,76 (quint., 2H), 1,12 (s, 9H).

Exemplo 22

3-r2-amino-4-cloro-7-(4-metóxi-3,5-dimetil-piridin-2-ilmetil)-7H-pirrolor2,3-d]pirimidin-5-il"l-prop-2-inila éster do ácido dimetilamino-acético

<formula>formula see original document page 110</formula>

Uma solucao de 3-[2-qmino-4 cloro-7-(4-metoxi-3,5-dimetil-piridin-2-ilmetil-)7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-5-il]-prop-2-in-1-ol (verexemplo 1, 177 mg, 0,48 mmol) em piridina anidra (3 ml) foi tratada comcloridrato de cloreto de N,N-dimetilamino-acetila (113 mg, 0,72 mmol) àtemperatura ambiente durante 30 min. A adição de tolueno (10 ml) causou aformação de um pellet pegajoso. A solução de tolueno foi descartada, e opellet foi repartido entre água e DCM. A camada de DCM foi concentrada, epurificada por meio de cromatografia de flash (EtOAc/DCM/Et3N 33:66:1,adicionando-se gradualmente MeOH (0-2%)) dando o composto título. tR=4,51 min. RMN *H (CDC13) ô 8,23 (s, 1H), 7,14 (a, 1H), 5,31 (s, 2H), 5,00 (s,2H), 4,98 (s, 2H), 3,76 (s, 3H), 3,25 (s, 2H), 2,38 (s, 6H), 2,28 (s, 3H), 2,20(s, 3H).

Exemplo 23

5-(2-amino-4-cloro-7-((4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolor2,3-dlpirimidin-5-il)-2-metilpent-4-in-2-ol

<formula>formula see original document page 110</formula>

Acoplamento de Sonogashira de 4-cloro-5-iodo-7-((4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-amina com 2-metilpent-4-in-2-ol (H. Zhang et ai, Tetrahedron Lett. 1999, 40, 7851) deacordo com o procedimento geral A deu o composto título, como um sólido.P.f. = 163-165°C. Tempo de retenção de HPLC = 4,98 min.

Exemplo 24

4-cloro-7-((4-metóxi-3,5 -dimetilpiridin-2-iDmetil >5 -(5 -(4-metilpiperazin-1 -iDpent-1 -inil)-7H-pirrolo[2,3-d1pirimidin-2-amina

<formula>formula see original document page 111</formula>

Etapa 1: l-metil-4-(pent-4-ini0piperazina

Uma mistura de metanossulfonato de pent-4-inila (887 mg) eN-metil piperazina (607 ul) foi aquecida a 80°C durante 4,5 h, diluída com1,2-dicloroetano (5 ml) e aquecida a 70°C durante 18h. Adicionou-seNaHC03 aquoso saturado (10 ml) e a mistura foi extraída com DCM (3 x 40ml), secada sobre Na2S04, e concentrada dando l-metil-4-(pent-4-inil)piperazina (0,23 g).

Etapa 2.

Acoplamento de Sonogashira de 4-cloro-5-iodo-7-((4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-amina com 1-metil-4-(pent-4-inil)piperazina, de acordo com o procedimento geral A deu ocomposto título, como um sólido. P.f. = 160,1-162,3°C. Tempo de retençãode HPLC = 4,08 min.

Exemplo 25

4-cloro-5-(5-(4-etilpiperazin-l-il)pent-l-inil)-7-(f4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolo[2,3-d1pirimidin-2-amina

<formula>formula see original document page 111</formula>Etapa 1: l-etil-4-(pent-4-inil)piperazina

Uma mistura de metanossulfonato de pent-4-inila (849 mg) eN-metil piperazina (665 ul) foi aquecida a 80°C durante 3 h, diluída com 1,2-dicloroetano (5 ml) e aquecida a 70°C durante 18 h. Adicionou-se NaHC03aq. sat. (10 ml) e a mistura foi extraída com DCM (1 x 40 ml), secada sobreNa2S04, e concentrada dando 0,56 g de l-etil-4-(pent-4-inil)piperazina.

Etapa 2

Acoplamento de Sonogashira de 4-cloro-5-iodo-7-((4metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolo[2,3d]pirimidin-2-amina com l-etil-4-(pent-4-inil)piperazina, de acordo com o procedimento geral A deu ocomposto título, como um sólido P.f. = 142,3-144,1°C. Tempo de retenção déHPLC = 4,11 min.

Exemplo 26

4-cíoro-7-(r4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-5-(4(4-metilpiperazin-l-il)but-1 -inil)-7H-pirrolo[ 2,3-d]pirimidin-2-amina

<formula>formula see original document page 112</formula>

Etapa 1: l-(but-3-inil)-4-metilpiperazina

Uma mistura de 4-metilbenzenossulfonato de but-3-inila (972mg) e N-metil piperazina (482 gl) foi aquecida a 80°C durante 4,5 h, diluídacom 1,2-dicloroetano (5 ml) e aquecida a 70°C durante 18 h. Adicionou-seNaHCC>3 aq. sat. (10 ml) e a mistura foi extraída com DCM (3 x 40 ml), econcentrada dando 0,70 g de l-(but-3-inil)-4-metilpiperazina como umamistura a 3:2 de sal de tosilato e base livre.

Etapa 2

Acoplamento de Sonogashira de 4-cloro-5-iodo-7-((4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-amina com 1 -(but-3- inil)-4-metilpiperazina de acordo com o procedimento geral A deu ocomposto título, como um óleo. Tempo de retenção de HPLC = 4,05 min.

Exemplo 27

4- (5-(2-amino-4-cloro-7-(r4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-5-inpent-4-inil)-N-metilpiperazina-l-carboxamida

<formula>formula see original document page 113</formula>

Etapa 1: 1 -(pent-4-inil)piperazina

Uma solução de metanossulfonato de pent-4-inila (19,55 g) epiperazina (41,5 g) em EtOH (80 ml) foi aquecida em refluxo durante 1 h, eevaporada. O resíduo foi recolhido em NaOH 2M (70 ml) e extraído comEt20 (70 ml). Evaporação deu l-(pent-4-inil)piperazina (4,4 g).

Etapa 2: 4-nitrofenil 4-(pent-4-inil)piperazina-l-carboxilato

Uma solução de l-(pent-4-inil)piperazina (2,2 g) e Et3N (22ml) em 1,2-dicloroetano (22 ml) foi tratada com cloroformiato de p-nitrofenila (2,9 g) à temperatura ambiente durante 10 min. Tratamento ecromatografia de sílica-gel (DCM:EtOAc 1:3 -> 0:3) deu 4-(pent-4-inil)piperazina-l-carboxilato de 4-nitrofenila como um óleo amarelo (2,96 g).

Etapa 3: N-metil-4-(pent-4-inil)piperazina-l-carboxamida

Uma solução de 4-(pent-4-inil)piperazina-l-carboxilato de 4-nitrofenila (1,37 g) em THP (10 ml) foi tratada com MeNH2 aq. a 40% (10ml) a 70°C durante 2 h. A mistura foi concentrada e diluída com NH4OHcone. (5 ml) e água (15 ml). Extração (DCM, 80 ml) e concentração deu N-metil-4-(pent-4-inil)piperazina-l-carboxamida (0,659 g).

Etapa 4

Acoplamento de Sonogashira de 4-cloro-5-iodo-7-((4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-amina com N-metil-4-(pent-4-inil)piperazina-l-carboxamida de acordo com o procedimentogeral A deu o composto título, como um sólido. P.f. = 191,2-193,2°C. Tempode retenção de HPLC = 4,24 min.

Exemplo 28

4-(5-('2-amino-4-cloro-7-('('4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-5-il)pent-4-inil)-N-etilpiperazina-l-carboxamida

Etapa 1: N-etil-4-('pent-4-inil)piperazina-l-carboxamida

<formula>formula see original document page 114</formula>

Uma solução de l-(pent-4-inil)piperazina (1,08) em DCM (5ml) foi tratada com isocianato de etila (0,56 ml) à temperatura ambientedurante 2 h, e evaporada dando N-etil-4(pent-4-inil)piperazina-l-carboxamida.

Etapa 2

Acoplamento de Sonogashira de 4-cloro-5-iodo-7-((4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-amina com N-etil-4-(pent-4-inil)piperazina-l-carboxamida de acordo com o procedimento geralA deu o composto título, como um sólido. P.f. = 200,5-203,3°C. Tempo deretenção de HPLC = 4,35 min.

Exemplo 29

4-cloro-7-Cf4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-5-(4(4-fenilpiperazin-l-il)but-l-inil)-7H-pirrolo|"2,3-dlpirimidin-2-amina<formula>formula see original document page 115</formula>

Etapa 1: l-(but-3-inil)-4 fenilpiperazina

Uma solução de 4-metilbenzenossulfonato de but-3-inila (1,72g), N-fenil piperazina (1,17 ml) e diisoproiletilamina (1,45 ml) em 1,2-dicloroetano (5 ml) foi aquecida em refluxo de um dia para o outro. A misturafoi concentrada, diluída com NaHC03 aquoso saturado (5 ml) e extraída comDCM (2 x 50 ml). Secagem (Na2S04) e cromatografía de flash em sílica-gel(3% de Et3N em EtOAc) deu l-(but-3-inil)-4-fenilpiperazina (0,76 g)

Etapa 2

Acoplamento de Sonogashira de 4-cloro-5-iodo-7-((4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-amina com 1 -(but-3- inil)-4-fenilpiperazina de acordo com o procedimento geral A deu ocomposto título, como um sólido. Tempo de retenção de HPLC = 4,97 min.

Exemplo 30

4- cloro-7-('('4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-5-C4-('4-(piridin-2-iPpiperazin-1 -il)but-1 -inil)-7H-pirrolor2<3-dipirimidin-2-amina

<formula>formula see original document page 115</formula>

Etapa 1: l-(but-3-inil)-4-(piridin-2 iDpiperazina

Uma solução de 4-metilbenzenossulfonato de but-3-inila (1,27g), l-(piridin-2-il)piperazina (1,17 g) e diisoproiletilamina (1,37 ml) em 1,2-dicloroetano (7 ml) foi aquecida em refluxo de um dia para o outro. A misturafoi concentrada, diluída com NaHC03 aquoso saturado (5 ml) e extraída comDCM (2 x 50 ml). Secagem (Na2S04) e cromatografía de flash em sílica-gel(EtOAc/hexano 1:1—>1:0) deu l-(but-3-inil)-4(piridin-2-il)piperazina (0,59 g)

Etapa 2

Acoplamento de Sonogashira de 4-cloro-5-iodo-7-((4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-amina com 1 -(but-3- inil)-4-(piridin-2-il)piperazina de acordo com o procedimento geral A deu ocomposto título, como um sólido HPLC Rt = 4,09 min.

Exemplo 31

4- cloro-7-('('4-metóxi-3<5-dimetilpiridin-2-il)metil)-5-C4-('4-(pirimidin-2-il)piperazin-l-il)but-l-inil)-7H-pirrolo[2,3-dlpirimidin-2-amina

<formula>formula see original document page 116</formula>

Etapa 1: 2-(4-(,but-3-inil)piperazin-l-il)pirimidina

Uma solução de but-3-inila 4-metilbenzenossulfonato (1,14 g),2-(piperazin-l-il)pirimidina (1,06 g) e diisoproiletilamina (1,24 ml) em 1,2-dicloroetano (6 ml) foi aquecida em refluxo de um dia para o outro. A misturafoi concentrada, diluída com NaHC03 aquoso saturado (5 ml) e extraída comDCM (2 x 50 ml). Secagem (Na2S04) e cromatografia de flash em sílica-gel(EtOAc/hexano a 1:14 1:0) deu 2-(4-(but-3-inil)piperazin-l-il)pirimidina (0,60 g).

Etapa 2

Acoplamento de Sonogashira de 4-cloro-5-iodo-7-((4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metiI)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-amina com 2-(4(but-3-inil)piperazin-l-il)pirimidina de acordo com o procedimento geral Adeu o composto título, como um sólido. Tempo de retenção de HPLC = 4,50 min.

Exemplo 32

4-cloro-7-(Y4-metóxi-3,5 -dimetilpiridin-2-iDmetilV 5-(5 -(4-fenilpiperazin-1 -iDpent-1 -inil)-7H-pirrolor2,3-dlpirimidin-2-amina

<formula>formula see original document page 117</formula>

Etapa 1: l-(pent-9 inil)-4 fenilpiperazina

Uma solução de metanossulfonato de pent-4-inila (1,05 g), N-fenil piperazina (1,02 g) e diisoproiletilamina (1,2 ml) em THF (5 ml) foiaquecida em refluxo de um dia para o outro. A mistura foi concentrada,diluída com NaOH aq. 2M (10 ml) e extraída com DCM (2 x 50 ml).Secagem (Na2S04) e cromatografía de flash em sílica-gel (EtOAc/hexano2:14 2:0) deu l-(pent-4-inil)-4-fenilpiperazina (1,03 g).

Etapa 2

Acoplamento de Sonogashira de 4-cloro-5-iodo-7-((4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-amina com 1-(pent-4-inil)-4-fenilpiperazina de acordo com o procedimento geral A deu ocomposto título, como um sólido. Tempo de retenção de HPLC = 5,08 min.

Exemplo 33

4-cloro-7-((4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-5-('5-(4-(,piridin-2-iDpiperazin-1 -iDpent-1 -inil)-7H-pirrolo[2,3-dlpirimidin-2-amina

<formula>formula see original document page 117</formula>

Etapa 1: 1 -(pent-4-inil)-4-(piridin-2 il)piperazina

Uma solução de metanossulfonato de pent-4-inila (1,05 g), 1-(piridin-2-il)piperazina (1,02 g) e diisoproiletilamina (1,2 ml) em THF (5 ml)foi aquecida em refluxo de um dia para o outro. A mistura foi concentrada,diluída com NaOH aq. 2M (10 ml) e extraída com DCM (2 x 50 ml).Secagem (Na2S04) e cromatografia de flash em sílica-gel (EtOAc/hexano2:1-» 2:0) deu l-(pent-4-inil)-4-(piridin-2-il)piperazina (1,02 g).

Etapa 2

Acoplamento de Sonogashira de 4-cloro-5-iodo-7-((4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-ií)metil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-amina com 1-(pent-4-inil)-4-(piridin-2-il)piperazina de acordo com o procedimento geral Adeu o composto título, como um sólido. Tempo de retenção de HPLC = 4,23 min.

Exemplo 34

4-cloro-7-(r4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-5-(,5-(4-('pirimidin-2-iDpiperazin-1 -iDpent-1 -inil)-7H-pirrolor2.,3-dlpirimidin-2-amina

<formula>formula see original document page 118</formula>

Etapa 1: 2-(4-(pent-4-inil)piperazin-l-il)pirimidina

Uma solução de metanossulfonato de pent-4-inila (1,05 g), 2-piperazin-l-il)pirimidina (1,02 g) e diisoproiletilamina (1,2 ml) em THF (5ml) foi aquecida em refluxo de um dia para o outro. A mistura foiconcentrada, diluída com NaOH aq. 2M (10 ml) e extraída com DCM (2 x 50ml). Secagem (Na2S04) e cromatografia de flash em sílica-gel (EtOAc/hexano2:1 -> 2:0) deu 2-(4-(pent-4-inil)piperazin-l-il)pirimidina (0,95 g).

Etapa 2

Acoplamento de Sonogashira de 4-cloro-5-iodo-7-((4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-amina com 2-(4-(pent-4-inil)piperazin-l-il)pirimidina de acordo com o procedimento geral Adeu o composto título, como um sólido. Tempo de retenção de HPLC= 4,61 min.Exemplo 35

5-(5-nH-imidazol-l-il)pent-l-inil)-4-cloro-7-(('4-metóxi-3,5-dimetilpirídin-2-il)metil)-7H-pirrolo|"2,3-dlpirimidin-2-amina

<formula>formula see original document page 119</formula>

Etapa 1: l-(pent-4-inil)lH-imidazol

Uma mistura de metanossulfonato de pent-4-inila (1,06 g),imidazol (534 mg) e K2C03 (3,66 g) em 2-butanona (11 ml) foi aquecida emrefluxo de um dia para o outro. Tratamento (DCM, H20), secagem (Na2S04) econcentração deu l-(pent-4-inil)-lH-imidazol (472 mg).

Etapa 2

Acoplamento de Sonogashira de 4cloro-5-iodo-7-((4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-amina com 1-(pent-4-inil)-lH-imidazol de acordo com o procedimento geral A deu ocomposto título, como um sólido. Tempo de retenção de HPLC = 4,40 min.

Exemplo 36

4-(2-amino-4-cloro-7-(('4metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolor2,3-dlpirindin-5-il)but-3-inila etila carbonato

<formula>formula see original document page 119</formula>

Uma solução de 4-[2-Amino-4-cloro-7-(4-metóxi-3,5-dimetil-piridin-2-ilmetil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-5-il]-but-3-in-1 -ol (ver exemplo2) (1,53 g) e NaH (95%, 0,38 g) em DMA anidro (25 ml) foi tratada comcloroformiato de etila (1,5 ml) a de 0 a 23°C durante 0,5 h. Tratamento eHPLC preparativa deu o composto título. HPLC RI = 5,65 min. [0141]

Exemplo 37

Etil-4-cloro-5 -(4(etoxicarbonilóxi)but-1 -inil)-7-((4-metóxi-3,5 -dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolo[2,3-dlpirimidin-2-ilcarbmato

<formula>formula see original document page 120</formula>

Uma suspensão de 4-[2-Amino-4-cloro-7-(4-metóxi-3,5-dimetil-piridin-2-ilmetil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-5-il]-but-3-in-1 -ol (verexemplo 2) (0,73 g) em piridina anidra (5 ml) e DCM (25 ml) foi tratada comcloroformiato de etila (1 ml) à temperatura ambiente durante 30 min. Amistura foi resinada a 0°C, tratada com adição de EtOCOCl (1 ml), e atemperatura foi deixada atingir lentamente a temperatura ambiente de um diapara o outro. A mistura de reação foi diluída com DCM (30 ml) e lavadaseqüencialmente com H20, NH2OH 1M, e salmoura. O DCM foi evaporada,mas não a piridina residual. Adição de MeOH (20 ml) induziu cristalização doproduto, como agulhas brancas. Tempo de retenção de HPLC = 6,28 min.

Exemplo 38

4-('4-(2-amino-4-cloro-7-((4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolo[2,3-dlpirimidin-5-il)but-3-inil)-N-metilpiperazina-l-carboxamida

<formula>formula see original document page 120</formula>

Etapa 1: l-fbut-3-inil)piperazina

Uma solução de 4-metilbenzenossulfonato de but-3-inila (2,0ml) e piperazina (2,0 g) em EtOH (6 ml) foi aquecida em refluxo durante 30min. A mistura foi concentrada, diluída com NAOH 2 M (8 ml) e extraídacom Et20 (50 ml). Evaporação da camada orgânica deu uma mistura a 2:1 depiperazina mono- e bis-alquilada (450 mg) que foi descartada. A camadaaquosa foi extraída adicionalmente com DCM (100 ml) dando l-(but-3-inil)piperazina (640 mg).

Etapa 2: 4-(but-3 inilVN-metilpiperazina-l-carboxamida

Uma solução de l-(but-3-inil)piperazina (445 mg) em THF (4ml) foi tratada com carbonocloridrato de 4-nitrofenila (649 mg) à temperaturaambiente durante 5 min. Um precipitado formou-se imediatamente, e asuspensão foi tratada com Et3N (0,45 ml) para assegurar uma reaçãocompleta. A suspensão foi diluída com H20 (2 ml), MeOH (2 ml) e MeNH2aq. a 40% (4,0 ml) e agitada à temperatura ambiente durante 3 dias. Extraçãocom DCM (50 ml), lavagem (NaOH 2M), secagem (Na2S04) e concentraçãodeu 4-(but-3-inil)-N-metilpiperazina-l-carboxamida (370 mg).

Etapa 3

Acoplamento de Sonogashira de 4-cloro-5-iodo-7-((4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-amina com 4-(but-3-inil)-N-metilpiperazina-l-carboxamida de acordo com o procedimento geralA deu o composto título, como um sólido;. Tempo de retenção de HPLC =4,10 min.

Exemplo 39

5-(4-( 1 H-imidazol-1 -il)but-1 -inil)-4-cloro-7-(Y4-metóxi-3,5 -dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolor2,3-d1pirimidin-2-amina

<formula>formula see original document page 121</formula>

Etapa 1: l-fbut-3 iniD-l H-imidazol

Uma mistura de 4-metilbenzenossulfonato de but-3-inila (1,04g), imidazol (573 mg) e K2C03 (3,88 g) em 2-butanona (10 ml) foi aquecidaem refluxo de um dia para o outro. Tratamento (DCM, H20), secagem(Na2S04) e concentração deu l-(but-3-inil)-lH-imidazol (501 mg).

Etapa 2

Acoplamento de Sonogashira de 4-cloro-5-iodo-7-((4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-amina com l-(but-3-inil)-lH-imidazol de acordo com o procedimento geral A deu o compostotítulo., como um sólido. Tempo de retenção de HPLC = 4,21 min.

Exemplo 40

2-amino-3-metilbutanoato de (R)-4-(2-amino-4-cloro-7-((4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolo Í2,3 -dlpirimidin-5 -iDbut-3 -inila

<formula>formula see original document page 122</formula>

Uma solução de 4-[2-Amino-4-cloro-7-(4-metóxi-3,5-dimetil-piridin-2-ilmetil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-5-il]-but-3-in-l-ol (ver exemplo2) (51,7 mg), N-Boc alanina (53,3 mg), DMAP (33,7 mg), e EDCI (54,9 mg)em DMA anidro (4 ml) foi agitada à temperatura ambiente de um dia para ooutro. Tratamento (EtOAc; H20) deu o intermediário protegido com Bocbruto. Uma solução deste intermediário (40 mg) em DCM (1,0 ml) foi tratadacom TFA (0,2 ml) à temperatura ambiente durante 5 min, e evaporada. Omaterial foi dissolvido em MeOH (1 ml) e água (10 ml), e lavada com Et20(10 ml). A camada orgânica foi descartada. A camada aquosa foi levada a pH >7 com NaHC03 aquoso saturado e reextraída com DCM. O composto títulofoi isolada como um sólido. Tempo de retenção de HPLC = 4,37 min.

Exemplo 41

2-aminopropanoato de_(S)-4-(2-amino-4-cloro-7-((4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolor2,3-dlpirimidin-5-il)but-3-inila<formula>formula see original document page 123</formula>

Este composto foi obtido por meio do mesmo procedimentocomo usado, por exemplo, 40, usando-se N-Boc valina em lugar de N-Bocalanina, dando o composto título como um sólido. Tempo de retenção deHPLC - 4,58 min.

Exemplo 42

(,R)-4-(,2-amino-4-cloro-7-('(4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-ils)metil)-7H-pirrolo[2,3-dlpirimidin-5-il)but-3-inila 2-amino-4-metilpentanoato

<formula>formula see original document page 123</formula>

Este composto foi obtido por meio do mesmo procedimentocomo usado, por exemplo, 40, usando N-Boc isoleucina em lugar de N-Bocvalina, dando o composto título como um sólido. Tempo de retenção deHPLC = 4,76 min.

Exemplo 43

4-(2-amino-4-cloro-7-((4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolor2,3-dlpirimidin-5-il)but-3-inila di-t-butila fosfato

<formula>formula see original document page 123</formula>

Uma solução de 4-[2-Amino-4-cloro-7-(4-metóxi-3,5-dimetil-piridm-2-ilmetil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-5-il]-but-3-iri-l-ol (ver exemplo2) (4,0 g) e 1-H-tetrazol (0,45 M em acetonitrilo, 70 ml) em THF (160 ml) foitratada com diisopropilfosforamidita de di-t-butila (16,4 ml) à temperaturaambiente durante 2 h. A solução foi resfriada a 0°C e tratada com H202 aq. a30% (11 ml) durante 30 min. Tratamento (EtOAc, aq. NaHC03) e HPLCpreparativa de fase invertida deu o composto título, como um sólido. Tempode retenção de HPLC = 6,13 min.

Exemplo 44

diidrogen fosfato de 4-(2-amino-4-cloro-7-(('4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolor23-dlpirimidin-5-il)but-3-inila

<formula>formula see original document page 124</formula>

Uma solução de di-t-butil fosfato de 4-(2-amino-4-cloro-7-((4-metóxi-3,5 -dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolo[2,3 -d]pirimidin-5 -il)but-3 -inila (ver exemplo 43) em DCM / foi tratada com TF A / à temperaturaambiente durante [] h. Evaporação deu o composto título como um sal deTFA (5 g). O bruta foi dissolvido em uma mistura de Et3N (0,7 ml e MeOH(60 ml), carregada em Dowex 50Wx2-400 (20 g, pré-lavada com MeOH), e aresina foi lavada com MeOH (200 ml) para remover o excesso de TFA. Ofosfato desejado foi liberado da resina com Et3N:MeOH a 1:10 (200 ml). Asolução foi concentrada dando o fosfato como um sal de trietilamina oleoso(2,75 g). Cristalização foi induzida com EtOH (60 ml). A mistura foi deixadaà temperatura ambiente durante 1,5 h e a -20°C de um dia para o outro dandouma primeira safra de cristais (0,64 g). A mistura foi concentrada e oprocedimento de cristalização foi repetido dando uma segunda safra (0,74 g).Os sais de trietilamina combinados (1274 mg) foram dissolvidos em MeOH(50 ml) com o auxílio de Et3N (326 ul) e tratados com uma solução 1,0 M deNaOH em MeOH (4,68 ml). Evaporação e secagem em alto vácuo de um diapara o outro deu o composto título como um sal de sódio sólido. Tempo deretenção de HPLC = 4,21 min.

Exemplo 45

2-((2-amino-4-cloro-5-(4-hidroxibut-l-inin-7H-pirrolor2,3-dipirimidin-7-i0metil)-4-metóxi-3,5-dimetilpiridina 1 -oxido

Etapa 1: 2-(T4-cloro-5-iodo-2-pivalamido-7H-pirrolo(2,3-dlpirimidin-7-iDmetiiy 4-metóxi-3,5 -dimetilpiridina 1 -oxido

<formula>formula see original document page 125</formula>

Uma mistura de N-(4-cloro-5-iodo-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-il)pivalamida (235 mg), 2-(clorometil)-4-metóxi-3,5-dimetilpiridina 1-oxido(129 mg), e K2C03 (413 mg) em DMF (6,0 ml) foi agitada à temperaturaambiente durante 3 dias, e diluída com água. O precipitado foi recolhido pormeio de filtração e lavado com IPA dando 2-((4-cloro-5-iodo-2-pivalamido-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)metil)-4-metóxi-3,5-dimetilpiridina 1-óxido(124 mg).

Sólido. Tempo de retenção de HPLC = 6,73 min

Etapa 2: 2-((4-cloro-5-(4-hidroxibut-1 -inil)-2-pivalamido-7H-pirrolo[2,3-dlpirimidin-7-il)metil)-4-metóxi-3,5-dimetilpiridina 1 -oxido

Acoplamento de Sonogashira de 2-((4cloro-5-iodo-2-pivalamido-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)metil)-4-metóxi-3,5-dimetilpiridina 1-óxido (335 mg) com but-3-in-l-ol (200 ul) de acordo com oprocedimento geral A deu 2-((4-cloro-5-(4-hidroxibut-l-inil)-2-pivalamido-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-7-il)metil)-4-metóxi-3,5-dimetilpiridina 1-óxidobruto (291 mg).

Sólido, Tempo de retenção de HPLC - 5,82 min.Etapa 3

2-((4-cloro-5-(4-hidroxibut-1 -inil)-2-pivalamido-7H-piirolo[2,3-d]pirimidm-7-il)metil)-4-metóxi-3,5-dimetilpiridina 1 -oxido bruto (291 mg) foi dissolvido em 10 ml de EtOH. Uma fração desta solução (2 ml) 5 foi diluída adicionalmente com EtOH (5 ml) e tratada com ZnCl2 (103 mg) a 120°C durante 20 min em um forno de microondas. HPLC preparativa de fase invertida deu o composto título (2,2 mg), como um sólido. Tempo de retenção de HPLC = 4,88 min.

Exemplo 46

5 -íbut-3 -en-1 -inil V4-cloro-7-( (4-metóxi-3,5 -dimetilpiridin-2-il)metilV 7H-pirrolo[2,3-d]pirimidiu-2-amina

<formula>formula see original document page 126</formula>

Uma mistura de 4-metilbenzenossulfonato de 4-(2-amino-4-cloro-7-((4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-5-il)but-3-inila (516 mg) e CsF (2,0 g) em DMF (7,0 ml) foi aquecida a 70°C durante 1 h. Tratamento e cromatografia de flash (l-> 3% de MeOH em DM deu o composto título (280 mg), como um óleo amarelo claro. Tempo de retenção de HPLC - 5,90 min.

Exemplo 47

metanossulfonato de 5-('2-amino-4-cloro-7-C(4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolo["2,3-dlpirimidin-5-il)pent-4-inila

<formula>formula see original document page 126</formula>

Acoplamento de Sonogashira de 4-cloro-5-iodo-7-((4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-amina commetanossulfonato de pent-4-inila de acordo com o procedimento geral A deu o composto título, como um sólido. Tempo de retenção de HPLC = 5,31 min.

Exemplo 48

4-cloro-5-('5-fluoropent-l-inil)-7-('('4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-amina

<formula>formula see original document page 127</formula>

Uma solução de KF (77,8 mg), Kryptofix 222 (Aldrich, 839 mg) e água (10 ml) foi evaporada à secura, e secada primeiro azeotropicamente com CH3CN anidro (3 x 20 ml), depois em alto vácuo a 50°C de um dia para o outro. O sólido foi redissolvido em acetonitrilo anidro (13 ml) dando uma solução de 0,1 M fluoreto. Tratamento de metanossulfonato de 5-(2-amino-4-cloro-7-((4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-5-il)pent-4-inila (ver exemplo 47) (42 mg) com esta solução (3 ml) a 60-70°C durante 2 h, tratamento e HPLC preparativa de fase invertida deu o composto título, como um óleo. Tempo de retenção de HPLC = 5,88 min.

Exemplo 49

(S)-4-(2-amino-4-cloro-7-((4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-5-il)but-3-ino-l,2-diol

<formula>formula see original document page 127</formula>

Tratamento de 5-(but-3-en-l-inil)-4-cloro-7-((4metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-amina (ver exemplo 46) (35 mg) com AD-mix-a (Aldrich, 540 mg) em t-BuOH: THF: água 1:1:1(6 ml) à temperatura ambiente de um dia para o outro, seguido de tratamento e HPLC preparativa de fase invertida deu o composto título (10 mg), como um sólido. Tempo de retenção de HPLC = 4,13 min

Exemplo 50

(R)-4-(2-amino-4-cloro^-C^-metóxi-S^-dimetilpiridin^-inmetin^H-pirrolo[2,3-d1pirimidin-5-il)but-3-ino-l,2-diol

<formula>formula see original document page 128</formula>

Tratamento de 5-(but-3-en-l-inil)-4cloro-7-((4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-amina (ver exemplo 46) (35 mg) com AD-mix-(3 (Aldrich, 540 mg) em t-BuOH:TBF:água a 1:1:1 (6 ml) à temperatura ambiente de um dia para o outro, seguido de tratamento e HPLC preparativa de fase invertida deu o composto título (10 mg), como um sólido. Tempo de retenção de HPLC = 4,13 min

Exemplo 51

4-cloro-7-('(4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-5-(3-metilbut-3-en-l-inil)-7H-pirrolor2,3-dlpirimidin-2-amina

<formula>formula see original document page 128</formula>

Acoplamento de Sonogashira de 4-cloro-5-iodo-7-((4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirímidin-2-amina com 2-metilbut-l-en-3-ino de acordo com o procedimento geral A deu o composto título, como um sólido HPLC Rt = 6,00 min.

Exemplo 52

( S)-4-( 2-amino-4-cloro-7-( (4-metóxi-3,5 -dimetilpirídin-2-il)metil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-5-il)-2-metilbut-3-ino-l,2-diol

<formula>formula see original document page 129</formula>

Tratamento de 4-cloro 7-((4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-5-(3-metilbut-3-en-1 -inil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-amina (ver exemplo 51) (263 mg) com AD-mix-a (Aldrich, 1,41 g) em t-BuOH:água a 1:1 (7 ml) à temperatura ambiente durante 3 dias, seguido de extinção (NaHSC>3, 1,6 g), tratamento, e HPLC preparativa deu o composto título (69 mg), como um sólido. Tempo de retenção de HPLC = 4,36 min.

Exemplo 53

(R)-4-(2-amino-4-cloro-7-((4-metóxi-3<5-dimetilpiridin-2-il)metii)-7H-pirrolor2<3-dlpirimidin-5-il)-2-metilbut-3-ino-l,2-diol

<formula>formula see original document page 129</formula>

Tratamento de 4-cloro-7-((4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-5-(3-metilbut-3-en-1 -inil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-amina (ver exemplo 51) (357 mg) com AD-mix-S (Aldrich, 1,57 g) em t-BuOH:água a 1:1 (10 ml) à temperatura ambiente durante 18 h, seguido de extinção (NaHSC>3, 1,2 g), tratamento, e cromatografia de flash em sílica-gel (1—»10% de MeOH em DCM) deu o composto título (61 mg) e material de partida recuperado (263 mg).

Sólido. Tempo de retenção de HPLC = 4,36 min.

Exemplo 54

(RH ( S V4-( 2-amino-4-cloro-7-((4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolo[2,3-dlpirimidin-5-il)-2-hidróxi-2-metilbut-3-inil)3,3,3-trifluoro-2-metóxi-2-fenilpropanoato

<formula>formula see original document page 130</formula>

Uma mistura de (S)-4-(2-amino-4-cloro-7-((4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-5-il)-2-metilbut-3-ino-1,2-diol (ver exemplo 52) (18 mg), cloreto (S)-(+)-a-metóxi-alfa-(trifluorometil)fenilacetila (45 ul), e Et3N (50 ul) em THF (3,0 ml) foi aquecida a 70°C durante 2 h, e depois a 40°C de um dia para o outro. TLC preparativa (EtOAc/DCM 25:65) deu o composto título, como um sólido. Tempo de retenção de HPLC = 6,45 min.

Exemplo 55

3,3,3-trifluoro-2-metóxi-2-fenilpropanoato de (R)-((R)-4-(2-amino-4-cloro-7-C('4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolor2,3-dlpirimidin-5-il)-2-hidróxi-2-metilbut-3-inila

<formula>formula see original document page 130</formula>

Uma mistura de (R)-4-(2-amino-4-cloro-7-((4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-5-il)-2-metilbut-3-ino-1,2-diol (ver exemplo 53) (22 mg), cloreto de (S)-(+)-a metóxi-alfa-(trifluorometil)fenilacetila (45 ul), e Et3N (50 ul) em THF (3,0 ml) foi aquecida a 40°C de um dia para o outro. TLC preparativa (EtOAc/DCM 25:65) deu o composto título, como um sólido. Tempo de retenção de HPLC = 6,44 min.

Exemplo 56

diacetato de 2-((2-amino-4-cloro-7-((4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-inmetil)-7H-pirrolor2J-dlpirimidin-5-inetínin-2-hidroxipropano-l,3-diila

<formula>formula see original document page 131</formula>

Etapa 1: diacetato de 2-etinil-2-hidroxipropano-l.,3-diila

Uma solução de brometo de etinilmagnésio (0,5 M em THF) foi resfriada a -78°C sob nitrogênio. Adicionou-se uma solução de 1,3-5 diacetoxiacetona (0,5 g) em THF (3,0 ml), e a mistura resultante foi agitada durante 30 min a -78°C, depois a 0°C durante 5 min, extinta com HC1 1,0 N aq. (3 ml) e extraída em EtOAc. Evaporação deu diacetato de 2-etinil-2-hidroxipropano-l,3-diila bruto, contaminado com cerca de 50 mol% de 1,3-diacetoxiacetona. O material bruto foi usado sem purificação adicional.

Etapa 2

Acoplamento de Sonogashira de 4-cloro-5-iodo-7-((4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-amina com diacetato de 2-etinil-2-hidroxipropano-l,3-diila bruto de acordo com o procedimento geral A deu o composto título, como um óleo1. Tempo dé 15 retenção de HPLC = 4,89 min.

Exemplo 57

2-((2-amino-4-cloro-7-(('4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolor2,3-dlpirimidin-5-il)etininpropano-l.,2,3-triol

<formula>formula see original document page 131</formula>

Uma solução de diacetato de 2-((2-amino-4-cloro-7-((4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-5-il)etinil)-2-hidroxipropano-l,3-diila (ver exemplo 56) (60 mg) e Et3N (1 ml) em THF (1 ml) e MeOH (6 ml) foi aquecida em um forno de microondas a 150°C durante 20 min. Concentração e HPLC preparativa deu o composto título, como um sólido. Tempo de retenção de HPLC = 3,90 min.

Exemplo 58

4-(2-amino-4-cloro-7-((4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolo[2,3-d1pirimidin-5-il)-2-metilbut-3-in-2-ol

<formula>formula see original document page 132</formula>

Acoplamento de Sonogashira de 4-cloro-5-iodo-7-((4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-amina com 2-metilbut-3-in-2-ol de acordo com o procedimento geral A deu o composto título, como um sólido. Tempo de retenção de HPLC = 4,81 min.

Exemplo 59

5-(2-amino-4-cloro-7-('(4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolo[2,3-d1pirimidin-5-il)pent-4-in-2-ol

<formula>formula see original document page 132</formula>

Acoplamento de Sonogashira de 4-cloro-5-iodo-7-((4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirroIo[2,3-d]pirimidin-2-amina com pent-4-in-2-ol de acordo com o procedimento geral A deu o composto título, como um sólido. Tempo de retenção de HPLC = 4,29 min

Exemplo 60

acetato de 4-(2-amino-4-cloro-7-(,('4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolor2,3"dlpirimidin-5-inbut-3-inila<formula>formula see original document page 133</formula>

Uma solução de but-3-in-l-ol (3,0 ml) e Et3N (6,6 ml) em 1,2-dicloroetano (10 ml) foi tratada com AcCl (3,1 ml) com cuidado (muitoexotérmica). Tratamento deu acetato de but-3-inila.

Etapa 2

Acoplamento de Sonogashira de 4-cloro-5-iodo-7-((4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-amina com acetatode but-3-inila de acordo com o procedimento geral A deu o composto título,como um sólido. Tempo de retenção de HPLC = 5,31 min.

Exemplo 61

sulfamato de 4-(2-amino-4-cloro-7-((4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolo [23 -dlpirimidin-5 -il)but-3 -inila

<formula>formula see original document page 133</formula>

Uma mistura de ácido fórmico (0,463 g) e N,N-dimetilacetamida (1 gota) foi adicionada a uma solução de isocianato declorosulfonila (1,31 g) em DCM (9 ml), e aquecida em refluxo durante 3 h. Asolução resultante foi adicionada a solução de 4-[2-Amino-4-cloro-7-(4-metóxi-3,5 -dimetil-piridin-2-ilmetil)-7H-pirrolo [2,3 -d]pirimidin-5 -il] -but-3 -in-l-ol (ver exemplo 2) (200 mg) em DMA (10 ml) e agitada à temperaturaambiente durante 30 min. Tratamento e HPLC preparativa de fase invertidadeu o composto título, como um sólido;. Tempo de retenção de HPLC = 4,96 min.Exemplo 62

Sulfamato de 5-(2-amino-4-cloro-7-(('4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-inmetil)-7H-pirrolor2,3-d]pirimidin-5-inpent-4-inila

<formula>formula see original document page 134</formula>

O composto título foi obtido por meio do mesmoprocedimento que no Exemplo 61, realizando-se a reação em 5-[2-amino-4-cloro-7-(4-metóxi-3,5-dimetil-piridin-2-ilmetil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-5-il]-pent-4-in-l-ol (ver exemplo 2) Sólido. Tempo de retenção de HPLCJ = 4,77 min.

Exemplo 63

Hidrogenossulfato de 4-(2-amino-4-cloro-7-((4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolo \23 -dl pirimidin-5 -il)but-3 -inila

<formula>formula see original document page 134</formula>

Etapa 1: Hidrogenossulfato de but-3-inila, sal de piridina

But-3-in-l-ol (2,1 g) em DCM (20 ml) foi tratado comcomplexo de trióxido de enxofre-piridina (4,77 g) de um dia para o outro. Osólido foi removido por filtração e a mistura de reação foi concentrada eusada sem purificação adicional.

Etapa 2

Acoplamento de Sonogashira de 4-cloro-5-iodo-7-((4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-2-amina com o salde piridina de hidrogenossulfato de but-3-inila de acordo com o procedimentogeral A deu o composto título.

Sólido. Tempo de retenção de HPLC = 4,24 min.

Exemplo 64

bis(2,2.,2-tricloroetil) fosfato de 4-(2-amino-4-cloro-7-((4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolor2,3-d]pirimidin-5-il)but-3-inila

<formula>formula see original document page 135</formula>

Etapa 1: bis(2,2,2-tricloroetil) fosfato de but-3-inila

Uma solução de but-3-in-l-ol (0,413 g) em DCE (20 ml) foitratada com Et3N (2 ml) e bis(2,2,2-tricloroetil)fosforocloreto (2,27 g) a 50°Cde um dia para o outro. Tratamento deu bis(2,2,2-tricloroetil)fosfato de but-3-inila bruto como um óleo que foi usado sem purificação adicional.

Etapa 2

Acoplamento de Sonogashira de 4-cloro-5-iodo-7-((4-metóxi-3,5 -dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolo [2,3 -d]pirimidin-2-amina combis(2,2,2-tricloroetil)fosfato de but-3-inila de acordo com o procedimentogeral I deu o composto título.

Sólido. Tempo de retenção de HPLC = 6,69 min.

Exemplo 65

Ensaio de ligação competitiva de rHSP90

Cinco microgramas de proteína rHSP90 purificada (Stressgen,BC, Canadá, n° SPP-770) em solução salina tamponada com fosfato (PBS)foram aplicados revestindo placas de 96 poços e com incubação de um diapara o outro a 4°C. Proteína não-ligada foi removida, e os poços revestidosforam lavados duas vezes com 200 ul de PBS. Adicionou-se então controlesde DMSO (considerados como amostras não-tratadas) ou compostos de teste auma diluição de 100-30-10-3-1-0,3 uM (em PBS), as placas misturadasdurante 30 segundos no agitador de placa, e, depois, incubadas durante 60min a 37 C. Os poços foram lavados duas vezes com 200 ul de PBS, eadicionou-se 10 uM de geldanamicina de biotinilada (biotina-GM) e isto foiincubado durante 60 min a 37 C. Os poços foram lavados mais duas vezescom 200 ul de PBS, antes da adição de 20 ug/ml de estreptavidina-ficoeritrina(estreptavidina-PE) (Molecular Probes, Eugene, OR) e incubação durante 60min a 37 C. Os poços foram lavados mais duas vezes com 200 ul de PBS.Unidades de fluorescência relativa (RFU) foram medidas usando-se umespectrofluorímetro SpectraMax Gemini XS Spectrofluorometer (MolecularDevices, Sunnyvale, CA) com uma excitação a 485 nm e emissão a 580 nm;dados foram adquiridos empregando software SOFTmax®PRO (MolecularDevices Corporation, Sunnyvale, CA). O fundo foi definido como as RFUgeradas de poços que não foram revestidos com HSP90 mas que foramtratados com a biotina-GM e estreptavidina-PE. As medições de fundo foramsubtraídas de cada amostra tratada com medições de biotina-GM eestreptavidina-PE antes de qualquer outra computação. O percentual deinibição para cada amostra foi calculado a partir dos valores subtraídos dofundo como a seguir:

% de inibição de ligação = [(RFU não-tratada - RFU tratada)/RFU nãotratada] x 100.

Exemplo 66

Ensaio de ligação de lisado de células

Lisados de células de carcinoma de mama MCF7 forampreparados por meio de procedimento conhecido como douncing emtamponador de lise (20 mM de FÍEPES, pH 7,3, 1 mM de EDTA, 5 mM deMgCl2, 100 mM de KC1), e depois incubados com ou sem composto de testedurante 30 min a 4°C, seguido de incubação com biotina-GM ligada a pérolasmagnéticas de estreptavidina BioMag™ (Qiagen) durante 1 h a 4 C. Os tubosforam colocados em um suporte magnético, e o sobrenadante não-ligado foiremovido. As pérolas magnéticas foram lavadas três vezes em tamponador delise e fervidas durante 5 min a 95 °C em tamponador de amostra SDS-PAGE.Amostras foram analisadas em géis de proteína SDS, e Western Blots foramrealizados para rHSP90. Bandas nos Western Blots foram quantificadasusando-se o equipamento Bio-rad Fluor-S Multilmager, e calculou-se o% deinibição de ligação de rHSP90 com a biotina-GM. A capacidade de ligação delisado de compostos selecionados da invenção baseados no ensaio acima éresumida na Tabela 3. A IC50 reportada é a concentração de composto de testenecessária para se obter 50% de inibição da ligação de biotina-GM à rHSP90nos lisados de células MCF7.

Exemplo 67

Ensaio de degradação de Her2

Muitos cânceres são associados com a superexpressão daproteína Her2. Mostrou-se que compostos capazes de diminuir níveis de Her2representam uma boa promessa como agentes anti-câncer. Assim, um bomensaio in vitro para identificação de compostos da presente invenção,prováveis de demonstrar atividade anti-câncer, é o ensaio de degradação deHer2, como descrito abaixo: células de carcinoma de mama MCF7 (ATCC)foram desenvolvidas em meio Eagle modificado da Dulbecco (DMEM)contendo 10% de soro bovino fetal (FBS) e 10 mM de HEPES, e plaqueadasem placas de 24 poços (50% de confluência). Vinte e quatro horas mais tarde(células se mostram de 65 a 70% confluentes), adicionou-se compostos deteste e isto foi incubado de um dia para o outro durante 16 h. No caso doscompostos menos potentes, as quantidades adicionadas foram de 100 uM, 30uM, 10 uM e 1 uM, e, no caso dos compostos mais potentes, as quantidadesadicionadas foram de 1 uM, 0,3 uM, 0,1 uM, 0,03 pM, 0,01 uM e 0,003 uM.Os poços foram lavados com 1 ml de solução salina tamponada com fosfato(PBS), e adicionou-se 200 ul de tripsina em cada poço. Após ocompletamento da tripsinização, adicionou-se 50 ul de FBS em cada poço.Em seguida, 200 ul de células foram transferidos para placas de 96 poços. Ascélulas foram pipetadas para cima e para baixo para se obter uma suspensãode células simples. As placas foram centrifugadas a 2.500 rpm durante 1 minusando-se uma centrífuga de mesa Sorvall Legend RTT (Kendro LaboratoryProducts, Asheville, NC). As células foram então lavadas uma vez em PBScontendo 0,2% de BSA e 0,2% de azida de sódio (tamponador BA).Adicionou-se anticorpo anti-HER27Neu conjugado com Ficoeritrina (PE)(Becton Dickinson, n° 340552), ou anticorpo de controle anti-hemocianina delimpeto buraco-de-fechadura [KLH] conjugado com PE (Becton Dickinson,n° 340761) a uma diluição de 1:20 e 1:40, respectivamente (concentraçãofinal foi de 1 )J.g/ml) e as células foram pipetadas para cima e para baixo paraformar uma suspensão de células simples, e isto foi incubado durante 15 min.As células foram lavadas duas vezes com 200 ul de tamponador BA, eressuspensas em 200 ul de tamponador BA, e transferida para tubosFACSCAN com mais 250 ul de tamponador BA. Amostras foram analisadasusando-se um citômetro de fluxo FACSCalibur™ (Becton Dickinson, SanJose, CA) equipado com laser de íons de argônio que emite 15 mW de luz a488 nm para excitação do fluorocromo PE. Coletou-se 10.000 eventos poramostra. Gerou-se um histograma de fluorescência e determinou-se aintensidade de fluorescência média (MFI) de cada amostra usando o softwareCellquest. O fundo foi definido como a MFI gerada de células incubadas comIgG-PE de controle, e foi subtraído de cada amostra manchada com oanticorpo HER2/Neu. Células incubadas com DMSO foram usadas comocontroles não-tratados porque os compostos foram ressuspensos em DMSO.

O percentual de degradação de Her2 foi calculado como a seguir:% degradação de Her2 = [(MFI de células não-tratadas - MFI de célulastratadas)/MFI células não-tratadas] x 100.

A capacidade de degradação de Her2 de compostosselecionados baseada neste ensaio encontra-se resumida na Tabela 3. IC5o édefinida como a concentração à qual se obteve 50% de degradação daproteína HER2/Neu.

Exemplo 68

Ensaio de MTS

Ensaios com 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-5-(3-carboximetoxifenil)-2-(4-sulfofenil)-2H-tetrazólio medem a citotoxicidade dederivados de geldanamicina. MTS (3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-5-(3-carboximetoxifenil)-2-(4-sulfofenil)-2H-tetrazólio) é um corante de tetrazólioque é convertido a um produto de formazano por meio de enzimas desidrogenase de células metabolicamente ativas (Corey, A. et ai, "Use of anaqueous soluble tetrazolium/formazan assay for cell growth assays inculture", Câncer Commun. 1991, 3, 207-212). Células foram semeadas emplacas de 96 poços a 2000 células/poço e deixadas aderir de um dia para ooutro em meio Eagle modificado da Dulbecco suplementado com 10% de soro bovino fetal. O volume de cultura final foi de 100 ul. O número decélulas viáveis foi determinado usando-se o ensaio não-radioativo deproliferação de células Celltiter 96 AQue0us Non-radioactive Cell ProliferationAssay (Promega, Madison WI). A solução de MTS /PMS (metossulfato defenazina) foi misturada numa relação de 20:1, e adicionou-se 20 ul por poço a 100 ul de meio de cultura. Após de 2 a 4 horas, a formação do produto deformazano foi medida a 490 nm de absorbância usando-se umespectrofotômetro de placa e múltiplos poços. O fundo foi determinadomedindo-se a Abs a 490 nm do meio de cultura de células e MTS-PMS naausência de células e foi subtraído de todos os valores. O percentual de células viáveis foi calculado como a seguir:

% de células viáveis = "(Abs a 490 mn de células tratadas / Abs a 490 nm decélulas não-tratadas) x 100

O efeito de compostos selecionados da invenção sobre célulasde carcinoma de mama MCF7 de acordo com o ensaio MTS encontra-seresumido na Tabela 3. A IC50 foi definida como a concentração do compostoque ocasionou uma redução de 50% do número de células viáveis.

Tabela 3 - Atividades biológicas de compostos selecionados da invenção

<formula>formula see original document page 140</formula>

<table>table see original document page 140</column></row><table>

Exemplo 69

Estudos de tumor de camundongo in vivo

Seis camundongos Balb/C e nu/nu fêmeas atímicos com 8semanas de vida foram obtidos da Harlan Sprague Dawley, (Indianapolis, IN).Os camundongos foram mantidos em gaiolas com topo de filtro esterilizadasou gaiolas ventiladas em um recinto com um ciclo de luz-escuridão de 12horas. Comida pelotizada irradiada (Harlan Teklad n° 7912) e água deionizadaautoclavada foram fornecidos ad libitum. Animais foram identificados pormeio do uso de etiquetas auriculares numeradas individualmente.Experimentos foram realizados de acordo com diretrizes institucionais para ouso apropriado e humano de animais em pesquisa como estabelecido pelo Instituto para Pesquisa de Animais de Laboratório (ILAR, Institute forLaboratory Animal Research).

Fragmentos de tumor (aproximadamente 2 mm3) ou 5 x IO6células de tumor foram inoculadas subcutaneamente no flanco direito e noflanco esquerdo do animal. Camundongos com tumores estabelecidos (de 50 a 200 mm3) foram selecionados para estudo (n=7-l 0/grupo de tratamento).Dimensões do tumor foram medidas usando-se calibres e volumes de tumorforam calculados usando-se a equação para uma esfera elipsóide (1 x w2)/2 =mm3, em que 1 e w referem-se às dimensões maior e menor coletadas emcada medição. Camundongos foram monitorados até que os volumes de tumor no grupo de controle atingissem aproximadamente 1000 mm3 e foramsacrificados por meio de eutanásia com C02. Calculou-se os volumes detumor médios de cada grupo. A alteração no volume médio do tumor tratadofoi dividido pela alteração do volume médio do tumor de controle,multiplicado por 100 e subtraído de 100% para dar a inibição do crescimento de tumor para cada grupo. Análise estatística foi realizada usando-se o teste Tpadrão e usando o programa GraphPad PrismO Software.

Exemplo 70

Enxerto exógeno de carcinoma gástrico N87

Tumores foram estabelecidos em camundongos, por meio deinoculação de células de câncer de estômago humano N87, de acordo com oexemplo 69. Quatro grupos de tratamento (n=7-l 0/grupo de tratamento)foram estabelecidos para estudo:

I. 4-[2-Amino-4-cloro-7-(4-metóxi-3,5-dimetil-piridin-2-ilmetil)-7H-pirrolo[2,3 -d]pirimidin-5 -il] -but-3 -in-1 -ol, preparado comodescrito no Exemplo 2 acima, foi administrado a 8 mg/kg p.o.

II. 5-(2-amino-4-cloro-7-((4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-5-il)-2-metilpent-4-in-2-ol, preparadocomo descrito no Exemplo 23 acima, foi administrado a 8 mg/kg p.o.

III. 5-(2-amino-4-cloro-7-((4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-5-il)-2-metilpent-4-in-2-ol, preparadocomo descrito no Exemplo 23 acima, foi administrado a 16 mg/kg p.o.

IV. Administrou-se veículo apenas ao grupo de controle.

Os resultados são mostrados na Figura 1, um gráfico dovolume do tumor (mm3) contra o tempo (dias).

Exemplo 71

Enxerto exógeno de carcinoma adrenocortical NCI295

Tumores foram estabelecidos em camundongos, por meio deinoculação de células de carcinoma adrenocortical NCI295, de acordo com oExemplo 69. Estabeleceu-se dois grupos de tratamento (n=7-l O/grupo detratamento) para estudo:

I. 5-(2-amino-4-cloro-7-((4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-5-il)-2-metilpent-4-in-2-ol, preparadocomo descrito no Exemplo 23 acima, foi administrado a 8 mg/kg p.o.

II. Administrou-se veículo apenas ao grupo de controle.

Os resultados são mostrados na Figura 2, um gráfico dovolume do tumor (mm) contra o tempo (dias).

Exemplo 72

Enxerto exógeno de melanoma SK-AWL-28

Tumores foram estabelecidos em camundongos, por meio deinoculação de células de melanoma SK-MEL-28, de acordo com o exemplo69. Dois grupos de tratamento (n=7-l O/grupo de tratamento) foramestabelecidos para estudo:

I. 5-(2-amino-4-cloro-7-((4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-piirolo[23-d]pirímidin-5-il)-2-rnetilpent-4-in-2-ol, preparadocomo descrito no Exemplo 23 acima, foi administrado a 8 mg/kg p.o.

II. Administrou-se veículo apenas ao grupo de controle.

Os resultados são mostrados na Figura 3, um gráfico do volume do tumor (mm3) contra o tempo (dias).

Exemplo 73

Enxerto exógeno de carcinoma de colo HT29

Tumores foram estabelecidos em camundongos, por meio deinoculação de células de carcinoma de colo HT29, de acordo com o exemplo 69. Três grupos de tratamento (n=7-l O/grupo de tratamento) foramestabelecidos para o estudo:

I. 5-(2-amino-4-cloro-7-((4-metóxi-3,5-dimetilpiridin-2-il)metil)-7H-pirrolo[2,3-d]pirimidin-5-il)-2-metilpent-4-in-2-ol, preparadocomo descrito no Exemplo 23 acima, foi administrado a 4 mg/kg p.o.

III. Administrou-se veículo apenas ao grupo de controle.

Os resultados são mostrados na Figura 4, um gráfico do volume do tumor (mm) contra o tempo (dias).

Exemplo 74

Efeitos farmacodinâmicos

Preparação de tamponadores e reagentes

Os reagentes e tamponadores a seguir são preparados antecipadamente aos experimentos.

Tamponador de lise Western (WLS) contém 10 mM deHEPES, 42 mM de KC1, 5 mM de. MgCl2, 0,1 mM de EDTA, 0,1 mM deEGTA, 1 mM de DTT, 1 mM de PMSF, 1 ug/ml de Pepstatina A, 1 ug/ml deLeupeptina, 5 ug/ml de Aprotinina, e 1% de Triton X-100. Fracionar earmazenar a -20 C.

5 X de tamponador de amostra Western (5X WSB, 5XWestern Sample Buffer) contém 20 ml de glicerol, 4 ml de P-mercaptoetanol,5 g de SDS, 12,5 ml de Tris 1M pH 6,8, e 50 mg de azul bromofenol.Adicionar água até um volume final de 50 ml. Fracionar e armazenar a -20 C.

Tamponador de Transferência Western contém 23,3 g de baseTris, 116 g de glicina e 1,6 1 de metanol. Adicionar água até um volume finalde 8 1 e armazenar a 4°C.

TB ST (IX) contém 10 mM de Tris pH 8,0, 150 mM de NaCl e0,l%deTweene20.

Solução de bloqueio contém leite em pó desnatado a 5% emIX TB ST. Manter a 4°C.

Processamento de amostras de tumor:

Tumores de carcinoma gástrico N85 congelados subitamentesão transferidos de nitrogênio líquido para um freezer à temperatura de -80°C.WLB é suplementado com coquetel inibidor de protease (armazenar a 100X)sobre gelo. Cada tumor é descongelado sobre gelo e transferido para a tampade um disco de Petri. Isto é coberto com 50 ul de WLB e é dissecado empedaços menores com bisturis descartáveis. Remove-se qualquer pele residualfixada ao tumor. As peças de tumor são então picadas adicionalmente, etransferidas para 300-500 ul de WLB gelado. A amostra afinada é sonicadaem ajuste de 3 no desmembrador sônico da Fisher Scientific 550 até que nãofosse mais possível despedaçar pedaços sólidos. Em seguida, a suspensão écentrifugada a 15.000 g, a 4°C, durante 5 minutos. O sobrenadante érecolhido em um tubo de Eppendorf limpo sobre gelo, como lisado. Usa-se 2ul do lisado para quantificação da proteína total seguindo-se as instruções nokit de ensaio de proteína BCA Protein Assay. O resto do lisado é congeladosubitamente em nitrogênio líquido enquanto o ensaio BCA estiver emandamento. A concentração de proteína total em cada lisado é calculada apóso completamento do ensaio de BCA. Os lisados são descongelados em banhode água, e suas concentrações de proteína total são ajustadas em 410 mg/mlusando-se 5X WSB (até um final de 20% do volume total) e WLB (senecessário). Os lisados ajustados são fervidos a 95°C durante 5 minutos eresinados à temperatura ambiente. Neste estágio, eles são congelados a -20°Cdurante futura análise de manchamento Western.

Análise de manchamento Western:

Os lisados quantificados e ajustados de amostras de tumor oude baço são descongelados em um banho de água, e carregados numa quantidade igual de proteína total sobre géis previamente aplicados com de 4a 12% de Tris-glicina juntamente com marcador de proteína biotinilado.Eletroforese é realizada a 140 V durante 1,5 hora. As proteínas separadas nosgéis são transferidas para membranas de PVDF a 100 V durante cerca de 1hora em tamponador de transferência Western. Os manchamentos sãoincubados em tamponador de bloqueio à temperatura ambiente durante 1 horaou a 4°C de um dia para o outro com sacudimento delicado. Anticorposprimários contra várias proteínas de interesse clientes de HSP90 são aplicadosà temperatura ambiente durante 1 hora com sacudimento delicado. O excessode anticorpos é removido por meio de lavagem com seis lavagens de 5 minutos em TBST. Os manchamentos são então incubados em anticorpossecundários conjugados com HRP e conjugado de estreptavidina-HRP àtemperatura ambiente durante 1 hora com sacudimento cuidadoso. O excessode anticorpos secundários é removido por meio de lavagem com seis lavagensde 5 minutos em TBST. Os manchamentos são então revelados usando-se substrato quimioluminescente SuperSignal West Femto da Pierce por meio demistura de volumes iguais recentemente preparados de acentuador luminal etamponador de peróxido e adicionando-se a mistura nos manchamentos umpor vez. As bandas de proteína podem ser visualizadas em equipamento fluor-S Max2 Multilmager da Bio-Rad usando-se software Quantity One da Bio-Rad. Os resultados da análise de manchamento Western Blot são mostradosna figura 5.

Os exemplos precedentes não são limitantes e devemmeramente ilustrar os vários aspectos e concretizações da presente invenção.

Todos os documentos indicados aqui são indicativos dos níveis de capacitaçãona arte à qual a invenção se refere e são incorporados aqui integralmente porreferência. No entanto, nenhum é admitido como sendo estado da técnica.

Alguém versado na arte saberá reconhecer facilmente que apresente invenção é bem adaptada para se realizar os objetos e obter os fins e vantagens mencionados, bem como aqueles inerentes aqui. Os métodos ecomposições descritos ilustram concretizações preferidas como exemplares, enão devem ser compreendidos como limitações ao escopo da invenção.Determinadas modificações e outros usos ocorrerão àqueles com prática naarte, e são compreendidos no espírito da invenção, como definido pelo escopo das reivindicações.

A invenção descrita aqui de maneira ilustrativa pode serpraticada vantajosamente na ausência de qualquer elemento ou elementos,limitação ou limitações, não especificamente descritos aqui. Os termos eexpressões que foram empregados são usados em termos de descrição e não de limitação, e não há intenção de uso de referidos termos e expressões paraexcluir quaisquer equivalentes das características mostradas e descritas, ouporções dos mesmos. Reconhece-se que várias modificações são possíveis noescopo da invenção reivindicada. Assim, deveria-se compreender que, emboraa presente invenção tenha sido revelada especificamente por meio deconcretizações preferidas, aqueles com prática na arte também poderãorecorrer a particularidades, modificações e variações opcionais dos conceitosaqui revelados, e que referidas modificações e variações são consideradascomo compreendidas pelo escopo desta invenção como definido peladescrição e nas reivindicações anexas.Adicionalmente, onde se descreve características ou aspectosda invenção em termos de grupos Markush ou outros grupamentos dealternativas, p. ex., gêneses, aqueles com prática na arte perceberão que ainvenção também é descrita aqui em termos de qualquer membro ou subgrupode membros do grupo Markush ou subgênero, e exclusões de membrosindividuais, conforme apropriado, p. ex., por qualificação.

Outras concretizações encontram-se nas reivindicações aseguir.

Claims

1. Composto ou um polimorfo, solvato, tautômero,enanciômero, pró-droga ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo,caracterizado pelo fato de que é representado pela Fórmula I,<formula>formula see original document page 148</formula>em que:R° é selecionado do grupo que consiste de hidrogênio,halogênio, alquila inferior, -CN, -SR8, -OR8, e -NHR8;R1 é selecionado do grupo que consiste de halogênio, -OR11, -SR11 e alquila inferior;R2 é -NHR8;R3 é selecionado do grupo que consiste de hidrogênio, -CN, -C(0)OH, -OR11, -SR11, -C(0)R9, -NR8R10, alquila inferior, alquenila inferior,alquinila inferior, per-haloalquila inferior, alquilsilila inferior, arila,heteroarila, aliciclila e heterociclila, todos opcionalmente substituídos, emque:os grupos arila, heteroarila, aliciclila e heterociclila são mono-,bi- ou tri-cíclicos;R8 e R10 tomados em conjunto com o átomo de N a que estãoligados formam opcionalmente um anel opcionalmente substituídocompreendendo de 3-7 átomos de anel, sendo que, adicionalmente a referidoátomo de N, de 0-3 dos átomos de anel são heteroátomos selecionados dogrupo que consiste de O, S e N;os substituintes opcionais em R3 são selecionados do grupoque consiste de alquila inferior, alquenila inferior, alquinila inferior, -CN,-C(0)OH, N02; SR8, -OR8, -C(0)R9, -NR8R8, arila inferior, heteroarila,aliciclila, heterociclila inferior, arilalquila, heteroarilalquila, amino,alquilamino, diarilamino, arilalquilamino, diarilamino, heteroarilamino, di-heteroarilamino, aril-heteroarilamino, oxo, per-haloalquila, per-haloalcóxi,per-haloacila, guanidinila, piridinila, tiofenila, furanila, indolila, indazolila,fosfonila, fosfatidila, fosforamidila, sulfanila, sulfinila, sulfonila,sulfonamidila, carbamila, urila, tiourila e tioamidila, sendo que.R8 e R8 tomados em conjunto com o átomo de N a que estãoligados opcionalmente formam um anel opcionalmente substituídocompreendendo de 3-7 átomos de anel, sendo que, adicionalmente a referidoátomo de N, de 0-3 dos átomos de anel são heteroátomos selecionados dogrupo que consiste de O, S e N;R4 é selecionado do grupo que consiste de alquileno inferioropcionalmente substituído, -C(R12)2", -C(O)-, -C(S)-, -S(O)- e -S02-;R5 é selecionado do grupo que consiste de arila, heteroarila,aliciclila e heterociclila, em que:o grupo arila é substituído por de 2 a 5 substituintes;o grupo heteroarila é substituído por de 2 a 5 substituintes;o grupo aliciclila é substituído por de 3 a 5 substituintes;o grupo heterociclila é substituído por de 3 a 5 substituintes;os substituintes em R5 são selecionados do grupo que consistede halogênio, alquila inferior, alquenila inferior, alquinila inferior, -CN,-C(0)OH, -N02, -SR8, -OR8, -C(0)R9, -NR8R10, arila inferior, heteroarilainferior, aliciclila inferior, heterociclila inferior, arilalquila, heteroarilalquila,tioalquila, amino, alquilamino, dialquilamino, arilalquilamino, oxo, per-haloalquila, per-haloalcóxi, per-haloacila, guanidinila, piridinila, tiofenila,furanila, indolila, indazolila, fosfonila, fosfatidila, fosforamidila, sulfanila,sulfinila, sulfonila, sulfonamidila, carbamila, urila, tiourila e tioamidila, emqueR8 e R10 tomados em conjunto com o átomo de N a que estãoligados opcionalmente formam um anel opcionalmente substituídocompreendendo de 3-7 átomos de anel, sendo que, adicionalmente a referidoátomo de N, de 0-3 dos átomos de anel são heteroátomos selecionados dogrupo que consiste de O, S e N;R8 é selecionado do grupo que consiste de hidrogênio, alquilainferior, alquenila inferior, alquinila inferior, heteroalquila inferior,heteroalquenila inferior, heteroalquinila inferior, arila inferior, heteroarilainferior e-C(0)R9;R9 é selecionado do grupo que consiste de H, alquila inferior,alquenila inferior, alquinila inferior, arila inferior, heteroarila inferior,-NR10R10e-OR11,emqueR10 e R10 tomados em conjunto com o átomo de N a que estãoligados opcionalmente formam um anel opcionalmente substituídocompreendendo de 3-7 átomos de anel, sendo que, adicionalmente a referidoátomo de N, de 0-3 dos átomos de anel são heteroátomos selecionados dogrupo que consiste de O, S e N;R10 é selecionado do grupo que consiste de hidrogênio, alquilainferior, alquenila inferior, alquinila inferior, heteroalquila inferior,heteroalquenila inferior, heteroalquinila inferior, arila inferior, heteroarilainferior e-C(0)Rn;R11 é selecionado do grupo que consiste de alquila inferior,alquenila inferior, alquinila inferior, arila inferior e heteroarila inferior; eR12 é selecionado do grupo que consiste de hidrogênio ealquila inferior.

2. Composto de acordo com a reivindicação 1, ou umpolimorfo, solvato, éster, tautômero, enanciômero, pró-droga ou salfarmaceuticamente aceitável, caracterizado pelo fato de queR° é hidrogênio, halogênio ou -CN.

3. Composto de acordo com a reivindicação 1, ou umpolimorfo, solvato, tautômero, enanciômero, pró-droga ou salfarmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de queR1 é halogênio.

4. Composto de acordo com a reivindicação 1, ou umpolimorfo, solvato, tautômero, enanciômero, pró-droga ou salfarmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de queR2 é -NH2 ou -NH-C(0)R9.

5. Composto de acordo com a reivindicação 1, ou umpolimorfo, solvato, tautômero, enanciômero, pró-droga ou salfarmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de queR3 é selecionado do grupo que consiste de alquila inferior,alquenila inferior, alquinila inferior, per-haloalquila inferior, arila, heteroarila,aliciclila, heterociclila, -CN e -C(0)R9, todos opcionalmente substituídos.

6. Composto de acordo com a reivindicação 1, ou umpolimorfo, solvato, tautômero, enanciômero, pró-droga ou salfarmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de queR3 é selecionado do grupo que consiste de alquila inferior,arila, heteroarila, -CN e - C(0)R9, todos opcionalmente substituídos.

7. Composto de acordo com a reivindicação 1, ou umpolimorfo, solvato, tautômero, enanciômero, pró-droga ou salfarmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de queR3 é hidrogênio.

8. Composto de acordo com a reivindicação 1, ou umpolimorfo, solvato, tautômero, enanciômero, pró-droga ou salfarmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de queR3 é fenila ou piridinila opcionalmente substituído.

9. Composto de acordo com a reivindicação 1, ou umpolimorfo, solvato, tautômero, enanciômero, pró-droga ou salfarmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de queR3 é -(CH2)n OH, sendo que n=l-3.

10. Composto de acordo com a reivindicação 1, ou umpolimorfo, solvato, tautômero, enanciômero, pró-droga ou salfarmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que R3 é -(CH2)mC(R12)2(CH2)nOH, em que m = 0-2; n=l-2;ecada R12 é independentemente hidrogênio ou alquila inferior.

11. Composto de acordo com a reivindicação 1, ou umpolimorfo, solvato, tautômero, enanciômero, pró-droga ou salfarmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que R3 é -(CH2)nNR8R8, em que n=l-3;cada R8 é independentemente hidrogênio ou alquila inferior,ou NRBR8 é um <formula>formula see original document page 152</formula>opcionalmente substituído

12. Composto de acordo com a reivindicação 1, ou umpolimorfo, solvato, tautômero, enanciômero, pró-droga ou salfarmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que R3 é -(CH2)nC(O)NR10R10' sendo que n= 1-3; cada R10 é independentemente hidrogênio ou -C(0)R11, ou NR10R10é<formula>formula see original document page 153</formula>opcionalmente substituído

13. Composto de acordo com a reivindicação 1, ou umpolimorfo, solvato, tautômero, enanciômero, pró-droga ou salfarmaceuticamente aceitável dos mesmos; caracterizado pelo fato de queR3 é -(CH2)nC(O)NR10R10 sendo quen= 1-3; ecada R10é independentemente hidrogênio ou -C(0)RU.

14. Composto de acordo com a reivindicação 1, ou umpolimorfo, solvato, tautômero, enanciômero, pró-droga ou salfarmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de queR3 é -(CH2)nC(0)R9, sendo que n = 1-3.

15. Composto de acordo com a reivindicação 1, ou umpolimorfo, solvato, tautômero, enanciômero, pró-droga ou salfarmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de queR3 é alquila inferior opcionalmente substituído e o substituinteem referido alquila inferior é selecionado do grupo que consiste de -SR8,-OR8, -C(0)R9 e NR8R10.

16. Composto de acordo com a reivindicação 1, ou umpolimorfo, solvato, tautômero, enanciômero, pró-droga ou salfarmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de queR3 é alquila inferior substituído.

17. Composto de acordo com a reivindicação 1, ou umpolimorfo, solvato, tautômero, enanciômero, pró-droga ou salfarmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de queR3 é alquila inferior substituído, e o substituinte em referidoalquila inferior é fosfonila ou fosfatidila.

18. Composto de acordo com a reivindicação 1, ou umpolimorfo, solvato, tautômero, enanciômero, pró-droga ou salfarmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de queR4 é -CH2-.

19. Composto de acordo com a reivindicação 1, ou umpolimorfo, solvato, tautômero, enanciômero, pró-droga ou salfarmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de quecada um de referido grupo arila, heteroarila, aliciclila ouheterociclila de R5 é monocíclico ou bicíclico.

20. Composto de acordo com a reivindicação 1, ou umpolimorfo, solvato, tautômero, enanciômero, pró-droga ou salfarmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de queR5 é heteroarila ou arila substituído e os substituintes emreferido arila ou heteroarila are selecionados do grupo que consiste dehalogênio, alcóxi inferior, alquila inferior, tioalquila, amino e dialquilamino.

21. Composto de acordo com a reivindicação 1, ou umpolimorfo, solvato, tautômero, enanciômero, pró-droga ou salfarmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de queR5 é heteroarila ou arila substituído e os substituintes emreferido arila ou heteroarila são selecionados do grupo que consiste dehalogênio, alquila inferior ou alcóxi inferior.

22. Composto de acordo com a reivindicação 1 ou umpolimorfo, solvato, tautômero, enanciômero, pró-droga ou salfarmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que:R° é hidrogênio, halogênio, -SH, -OH, ou -CN;R1 é halogênio; eR2 é -NH2 ou NH-C(0)R9.

23. Composto de acordo com a reivindicação 1, ou umpolimorfo, solvato, tautômero, enanciômero pró-droga ou salfarmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que:R1 é cloro ou bromo;R2 é -NH2 ou -NH-C(0)R9; eR3 é alquila inferior, alquenila inferior, ou alquinila inferior,per-haloalquila inferior, arila inferior, ou heteroarila inferior, todosopcionalmente substituídos, sendo que os substituintes opcionais em R3 sãoselecionados do grupo que consiste de hidrogênio, -OR8, -NR8R8 e -C(0)R9.

24. Composto de acordo com a reivindicação 1, ou umpolimorfo, solvato, tautômero, enanciômero, pró-droga ou salfarmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que:R° é hidrogênio, halogênio ou -CN;R2 é -NH2 ou -NH-C(0)R9; eR4é-CH2-.

25. Composto de acordo com a reivindicação 1, ou umpolimorfo, solvato, tautômero, enanciômero, pró-droga ou salfarmaceuticamente aceitável dos mesmos, caracterizado pelo fato de que:R° é hidrogênio, halogênio, -SH, -OH ou -CN;R1 é halogênio;R3 é hidrogênio, -OR11, -SR11, -NR8R10, alquila inferior,alquenila inferior, alquinila inferior, per-haloalquila inferior, arila inferior ouheteroarila inferior;R4 é -CH2-; eR5 é heteroarila ou arila opcionalmente substituído, sendo quecada um de referido arila e heteroarila é monocíclico ou bicíclico.

26. Composto de acordo com a reivindicação 1, ou umpolimorfo, solvato, tautômero, enanciômero, pró-droga ou salfarmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de queR° é hidrogênio, halogênio ou -CN;R1 é halogênio;R3 é selecionado do grupo que consiste de hidrogênio, alquilainferior, alquenila inferior, alquinila inferior, per-haloalquila inferior, arila,heteroarila, aliciclila e heterociclila, todos opcionalmente substituídos;R4 é -CHR12-; eR5 é heteroarila ou arila opcionalmente substituído.

27. Composto de acordo com a reivindicação 1, ou umpolimorfo, solvato, tautômero, enanciômero, pró-droga ou salfarmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de queR° é hidrogênio;R1 é halogênio;R2 é -NH2;R3 é selecionado do grupo que consiste de alquila inferior,alquenila inferior, alquinila inferior, todos opcionalmente substituídos;R4 é -CH2-; eR5 é heteroarila ou arila opcionalmente substituído.

28. Composto de acordo com a reivindicação 25, ou umpolimorfo, solvato, tautômero, enanciômero, pró-droga ou salfarmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de queR1 é cloro ou bromo;R2 é -NH2; eR5 é um fenila apresentando pelo menos três substituintes.

29. Composto de acordo com a reivindicação 25, ou umpolimorfo, solvato, tautômero, enanciômero, pró-droga ou salfarmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de queR1 é cloro ou bromo;R2 é -NH2; eR5 é um piridila apresentando pelo menos dois substituintes.

30. Composto de acordo com a reivindicação 25, ou umpolimorfo, solvato, tautômero, enanciômero, pró-droga ou salfarmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de queR1 é cloro ou bromo;R2 é -NH2; eR5 é 1 -oxi-piridila (N-oxi-piridila) apresentando pelo menosdois substituintes.

31. Composto, ou um polimorfo, solvato, tautômero,enanciômero, pró-droga ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo,caracterizado pelo fato de que é selecionado do grupo: <formula>formula see original document page 157</formula><formula>formula see original document page 12</formula><formula>formula see original document page 13</formula><formula>formula see original document page 14</formula><formula>formula see original document page 161</formula><formula>formula see original document page 162</formula><formula>formula see original document page 163</formula>

32. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de quecompreende o composto, polimorfo, solvato, tautômero, enanciômero, pró-droga ou sal farmaceuticamente aceitável como definido na reivindicação 1, eum ou mais excipientes farmaceuticamente aceitáveis.

33. Método para tratar um indivíduo apresentando umdistúrbio mediado com HSP90, caracterizado pelo fato de que compreendeadministrar a referido indivíduo uma composição farmacêuticacompreendendo uma quantidade farmaceuticamente eficaz do composto,polimorfo, solvato, tautômero, enanciômero, pró-droga ou salfarmaceuticamente aceitável como definido na reivindicação 1.

34. Método de acordo com a reivindicação 33, caracterizadopelo fato de que o distúrbio mediado com HSP90 é selecionado do grupo queconsiste de doenças inflamatórias, infecções, distúrbios auto-imunes, acidentevascular, isquemia, distúrbios cardíacos, distúrbios neurológicos, distúrbiosfibrogenéticos, distúrbios proliferativos, tumores, leucemias, neoplasmas,cânceres, carcinomas, doenças metabólicas, e doenças malignas.

35. Método de acordo com a reivindicação 34, caracterizadopelo fato de que o distúrbio fibrogenético é selecionado adicionalmente dogrupo que consiste de escleroderma, polimiosite, lúpus sistêmico, artritereumatóide, cirrose do fígado, formação de quelóide, nefrite intersticial efibrose pulmonar.

36. Método de acordo com a reivindicação 32, caracterizadopelo fato de que compreende adicionalmente administrar pelo menos umagente terapêutico selecionado do grupo que consiste de agentes citotóxicos,agentes anti-angiogênese e agentes anti-neoplásicos.

37. Método de acordo com a reivindicação 36, caracterizadopelo fato de que o pelo menos um agente anti-neoplásico é selecionado dogrupo que consiste de agentes de alquilação, anti-metabólitos,epidofilotoxinas, enzimas anti-neoplásicas, inibidores de topoisomerase,procarbazinas, mitoxantronas, complexos de coordenação de platina,modificadores de resposta biológica e inibidores do crescimento, agentesterapêuticos hormonais/anti-hormonais, e fatores de crescimentohematopoiético.

38. Uso do composto, polimorfo, solvato, tautômero,enanciômero, pró-droga ou sal farmaceuticamente aceitável como definido nareivindicação 1, caracterizado pelo fato de que é na fabricação de ummedicamento.

39. Uso do composto, polimorfo, solvato, tautômero,enanciômero, pró-droga ou sal farmaceuticamente aceitável como definido nareivindicação 1, caracterizado pelo fato de que é na fabricação de ummedicamento para o tratamento terapêutico e profilático de condições edoenças dependentes de HSP90.

40. Composto, ou um polimorfo, solvato, tautômero,enanciômero, pró-droga ou sal farmaceuticamente aceitável do mesmo,caracterizado pelo fato de que é selecionado do grupo que consiste de:<formula>formula see original document page 165</formula>

41. Composto de acordo com a reivindicação 1, ou umpolimorfo, solvato, tautômero, enanciômero, pró-droga ou salfarmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de que éselecionado do grupo:<formula>formula see original document page 166</formula><formula>formula see original document page 167</formula>