BRPI0706540A2 - terapia especìfica usando ligantes de integrina para tratar cáncer - Google Patents

Abstract

TERAPIA ESPECIFICA USANDO LIGANTES DE INTEGRINA PARA TRATAR CáNCER. A presente invenção refere-se a uma terapia de combinação para o tratamento de tumores e metástases tumorais compreendendo administração de ligantes de integrina, preferencialmente integrina antagonistas, junto com agentes co-terapêuticos ou formas de terapia que têm eficácia sinérgica quando administrados consecutivamente com os referidos ligantes, tais como agentes quimioterápicos e ou terapia de radiação. A terapia resulta em um potencial aumento sinérgico do efeito de inibição de cada terapêutico individual sobre a proliferação de células tumorais, produzindo tratamento mais eficaz do que o visto por administração de um componente individual sozinho, simultaneamente ou não no regime de dosagem da presente invenção.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "TERAPIAESPECÍFICA USANDO LIGANTES DE INTEGRINA PARA TRATAR CÂNCER".

Campo Técnico da Invenção

A presente invenção refere-se a uma forma de terapia específicapara o tratamento de tumores (ou tümores) e metástases tumorais compre-endendo administração de Iigantes de integrina junto com agentes cotera-pêuticos contra câncer ou outras formas de terapia coterapêutica contracâncer que têm eficácia aditiva ou sinérgica quando administrados junto como referido Iigante de integrina, tais como agentes quimioterápicos, imunote-rapêuticos, incluindo anticorpos, radioimunoconjugados e imunocitocinas eou terapia de radiação, preferencialmente em uma maneira oportuna contro-lada. A terapia resultará em um aumento potencial sinergístico do efeito deínibição de cada terapêutico individual sobre proliferação de células endote-liais tumorais e células tumorais, produzindo tratamento mais eficaz do que ovisto por administração de componente individual somente, junto ou em ou-tro regime de terapia que o regime da presente invenção.Antecedentes da Invenção:

Sabe-se que as células endoteliais vasculares contêm no míni-mo três integrinas RGD-dependentes, incluindo os receptores de vitronectinaανβ3 ou ανβ5 bem como os receptores de colágeno tipos I e IV ανβ1 e α2β1os receptores de Iaminina αββι e ο^βιΥβ o receptor de fibronectina α5β1 (Da-vis et al., 1993, J. Cell. Biochem. 51, 206). Sabe-se que a célula de músculoliso contém no mínimo seis integrinas RGD-dependentes, incluindo ανβ3 eανβ5.

A inibição da adesão celular in vitro usando anticorpos monoclo-nais imunoespecíficos para várias subunidades de integrina α ou β tem im-plicado o receptor de vitronectina 0^3 em processos de adesão celular deuma variedade de tipos celulares incluindo células endoteliais microvascula-res (Davis et al., 1993, J. Cell. Biol. 51, 206).

Integrinas são uma classe de receptores celulares conhecidospor ligar proteínas da matriz extracelular, e mediar interações célula-matrizextracelular e célula-célula, referidas de modo geral como eventos de ade-são celular. Os receptores de integrina constituem uma família de proteínascom partilhadas de complexos de glicoproteínas heterodiméricas associadasde modo não-covalente formadas de subunidads a e β. Sabe-se agora que oreceptor de vitronectina, denominado por sua característica original de liga-ção preferencial a vitronectina, refere-se a quatro integrinas diferentes, de-signadas ανβ1, ανβ3, ανβ5, e ανβ8.ανβ1 liga fibronectina e vitronectina. (ανβ3 ligauma grande variedade de ligantes, incluindo fibrina, fibrinogênio, laminina,trombospondina, vitronectina e fator de von Willebrand. ανβ5 liga vitronectina.

É evidente que há diferentes integrinas com funções biológicas diferentesbem como diferentes integrinas e subunidades tendo especificidade e funçãobiológicas partilhadas. Um sítio de reconhecimento importante em um Iigantepara muitas integrinas é a seqüência tripeptídica Arg-Gly-Asp (RGD). RGD éencontrada em todos os ligantes identificados acima para as integrinas re-ceptoras de vitronectina. Foi identificada a base molecular de reconhecimen-to de RGD por o^3(Xiong et ai, 2001) Este sítio de reconhecimento de RGDpode ser simulado por (poli)peptídeos lineares e cíclicos que contêm a se-qüência RGD. Os peptídeos RGD referidos são conhecidos por serem inibi-dores ou antagonistas, respectivamente, da função de integrina. É importan-te notar, no entanto, que dependendo da seqüência e da estrutura do peptí-deo RGD, a especificidade da inibição pode ser alterada para atingir integri-nas específicas. Vários polipeptídeos RGD de especificidade de integrinavariável foram descritos, por exemplo, por Cheresh, et al., 1989, Cell 58,945, Aumailley et ai, 1991, FEBS Letts. 291, 50, e em numerosos pedido depatente de patente e patentes (por exemplo, as patentes dos Estados Uni-dos N2s 4.517.686, 4.578.079, 4.589.881, 4.614.517, 4.661.111, 4.792.525; ea patente européia Nq EP 0770 622).

A produção de novos vasos sangüíneos, ou angiogênese, temum papel-chave no crescimento de doença maligna e isto tem gerado muitointeresse no desenvolvimento de agentes que inibem a angiogênese.

Não obstante, embora estejam sendo investigadas várias terapi-as de combinação utilizando potenciais inibidores da angiogênese, em pro-vas clínicas e no mercado, os resultados destas terapias não são suficien-temente úteis. Portanto, existe a necessidade na técnica de desenvolvercombinações adicionais as quais podem apresentar aumento da eficácia ereduzidos efeitos colaterais.

É sabido agora que a vasculatura tumoral é diferente da vascula-tura do tecido saudável. A vasculatura é característica para o tumor e distintada vasculatura estável, latente de tecido saudável. Freqüentemente é carac-terizada por um aumento da expressão e priming de moléculas de adesãocelular específica da série alfa-v-integrina, especialmente ανβ3 e ανβ5. Quan-do ativadas estas intégrinas reforçam a reação celular a fatores de cresci-mento que dirigem a angiogênese, por exemplo, VEGFA e FGF2: VEGFA foioriginalmente denominado fator de permeabilidade vascular, e age atravésdo caminho da SRC quinase aumentando a permeabilidade vascular local.VEGRF2, quando ativado, aumenta a atividade da ανβ3 integrina.

Além disso, tumores sólidos dependem de uma vasculatura in-duzida e confinada do hospedeiro para se desenvolver. Esta vasculatura tempropriedades moleculares incomuns que a distinguem da vasculatura normaldo hospedeiro: tende a ser ativada, isto é, progredindo através do ciclo celu-lar sob a influência de fatores tumorais derivados como VEGFs, FGFs e ou-tros, e expressa marcadores da ativação endotelial como ICAM, VCAM eIntégrinas da série alfa-v, por exemplo, ανβ3 e ανβ5, em um estado de ligantecompetente. Tem uma matriz extracelular defeituosa, e é descrita classica-mente como permeável. É notável que os tumores freqüentemente resistama terapias aplicadas sistemicamente através da corrente sangüínea, devidoà natureza anormal da vasculatura do tumor.

O processo metastático é um evento multietapas e representa oprincipal aspecto desagradável do câncer. No momento do diagnóstico, oscânceres freqüentemente estão bastante avançados em seu histórico natu-ral, e a presença de metástases é um evento comum. De fato, aproximada-mente 30% dos pacientes têm metástases detectáveis no momento do diag-nóstico clínico e um adicional de 30% dos pacientes têm metástases ocultas.Metástases podem ser disseminadas e podem infestar diferentes órgãos aomesmo tempo, ou se localizar em um órgão específico. No caso de doençalocalizada, cirurgia é o tratamento de escolha; no entanto, recaída e prog-nóstico dependem de muitos critérios tais como: ressecabilidade, situaçãoclínica do paciente, e número de metástases.

Depois da ressecção, é comum a recaída, sugerindo que focosmicrometastáticos estão presentes no momento do diagnóstico. Quimiotera-pia sistêmica é um cenário ideal mas somente poucos pacientes são cura-dos por esta, e na maioria a quimioterapia sistêmica fracassa. Muitas barrei-ras fisiológicas e parâmetros farmacocinéticos contribuem para reduzir suaeficácia.

O fígado, pulmões e Iinfonodos são órgãos de filtração e portan-to inclinados a metastasização. A pobre quimossensibilidade das metásta-ses, peculiarmente as de origem colorretal tem forçado muitos pesquisado-res a usar métodos para aumentar o tempo e a concentração dos fármacos.A necessidade de reduzir ou limitar os efeitos colaterais para este importantee delicado órgão levou ao desenvolvimento da técnica de isolamento do fí-gado para perfusão de agentes antineoplásicos. (K. R. Aigner, Isolated Iiverperfusion. In: Morris DL, McArdIe CS, Onik GM, eds. Hepatic Metastases.Oxford: Butterworth Heinemann, 1996. 101-107). Desde 1981, modificaçõese aprimoramentos técnicos têm sido introduzidos continuamente. Metástasesdo fígado podem ser de origem diferente e sua quimossensibilidade podevariar de acordo com o tipo histológico e sua resposta em presença de calor.

Ainda existe uma necessidade crescente na técnica de modo adesenvolver novas estratégias terapêuticas para tratar câncer, especialmen-te metástases sistemicamente.

O objetivo da presente invenção portanto foi desenvolver umanova estratégia similar. Deve ser aplicável a tratamento sistêmico, e devereduzir a dose e/ou aumentar a eficiência dos agentes terapêuticos contracâncer a serem aplicados. Um objetivo adicional foi normalizar a vasculaturatumor para aumentar a liberação de terapêuticos tumorais sistêmicos, isto é,restabelecer a vasculatura tumoral para a funcionalidade da vasculatura detecido não tumoral.Portanto, é um objeto preferencial da presente invenção propor-cionar um tratamento mais eficaz e melhor tolerado para pacientes de cân-cer levando a aumento da sobrevida livre de progressão (em inglês, PFS),QOL e aumento da sobrevida média.

Breve Descrição dos Desenhos:

A figura 1 mostra ós resultados dos experimentos de programa-ção de cilengitida e radioterapia do modelo de glioblastoma ortotópico derato. Os resultados também são mostrados na Tabela 1.

A figura 2 mostra os resultados de um estudo clínico em glio-blastoma (GBM). Os resultados também são mostrados no Exemplo 3.

Sumário da Invenção:

A presente invenção descreve pela primeira vez um novo trata-mento farmacêutico o qual se baseia no novo conceito em terapia tumoralpara administrar a um indivíduo em uma quantidade terapeuticamente eficazum ligante de integrina antes da aplicação de um agente coterapêutico con-tra câncer.

Foi visto surpreendentemente que a vasculatura do tumor po-dem ser normalizada funcionalmente por Iigantes de integrina aplicados sis-temicamente conforme definido abaixo. As funções dos inibidores de integri-na referidos, também referidos como ligantes de integrina no contexto dapresente invenção, aumentam a quantidade de agentes citotóxicos e agen-tes outros coterapêuticos contra câncer penetarndo no tumor. Além disso, foidemonstrado que eles aumentam os números de leucócitos que penetramno tumor depois de terapia sistêmica com imunocitocinas, e podem aumen-tar diretamente as quantidades de anticorpos penetrando no compartimentotumoral em terapia de anticorpos antitumorais, ou aumentar o acesso a vaci-nas antitumorais.

Embora não sabido atualmente, existe a possibilidade de queesta normalização funcional da vasculatura do tumor possa levar a umamaior concentração de oxigênio no tumor, e permitir que terapias dependen-tes de oxigênio como radioterapia de feixe externo se tornem mais eficazes.

O "agente de normalização funcional" da presente invenção édefinido empiricamente aqui como um reagente tendo por alvo alfa-v-integrinas dentro do compartimento tumoral, que aumentam os níveis de te-rapêuticos tumorais sistêmicos ou de bioindicadores específicos de uma te-rapia sistêmica dentro do tumor. O aumento da terapêutica local supera osmecanismos de resistência tumoral, e reforçam o índice terapêutico. Por e-xemplo, a terapêutica sistêmica pode ser um reagente quimioterápico clássi-co, algumas imunocitocinas, uma imunotoxina, ou uma radioimunoterapia eetc.

Em uma modalidade a presente invenção refere-se a uma com-posição compreendendo como o agente coterapêutico compostos terapeuti-camente ativos, preferencialmente selecionados entre o grupo consistindoem agentes citotóxicos, agentes quimioterápicos e agentes imunotóxicos, econforme pode ser o caso outros compostos farmacologicamente ativos osquais podem reforçar a eficácia dos agentes referidos ou reduzir os efeitoscolaterais dos agentes referidos.

Portanto, na mesma modalidade a presente invenção refere-se acomposições farmacêuticas compreendendo um Iigante de integrina, prefe-rencialmente quaisquer dos Iigantes de avP3, avP5. avP6 ou avPe integrina re-ceptores, mais preferencialmente um peptídeo linear ou cíclico contendoRGD1 ainda mais preferencialmente inibidores de integrina contendo RGD,mais preferencialmente o peptídeo cíclico ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val).

De acordo com a presente invenção composições terapeutica-mente ativas também podem ser proporcionadas por meio de um kit farma-cêutico compreendendo um pacote compreendendo um ou mais dos Iigantesde integrina referidos, e um ou mais agentes citotóxico e/ou quimioterápicose/ou imunotóxicos em embalagens únicas ou em recipientes separados. Aterapia com estas combinações pode incluir opcionalmente tratamento comradiação com ou sem um agente coterapêutico adicional conforme definidoacima.

A invenção refere-se além disso a uma nova forma de terapiacompreendendo a administração de um Iigante de integrina antes da radiote-rapia.

Nesta nova forma de terapia compreendendo a administração deum ligante de integrina antes da radioterapia, é uma característica preferen-cial que o ligante de integrina seja administrado antes do agente coterapêu-tico contra câncer adicional. Neste contexto, de acordo com a presente in-venção, radiação, ou, radioterapia deve ser entendido como um agente cote-rapêutico contra câncer.

De modo geral, esta aplicação anterior ocorre 1 a 8 horas (h),preferencialmente 1 a 5 h, e mais preferencialmente 1 a 3 h antes da aplica-ção do agente coterapêutico contra câncer adicional. Ainda mais preferenci-almente, esta aplicação anterior ocorre 2 a 8 horas (h), preferencialmente 2a 6 h, e mais preferencialmente 2 a 4 h antes da aplicação do agente cote-rapêutico contra câncer adicional, tal como 1 a2h,2a3h, 3 .a 6 h, 2 a 5 hou 3 a 7 h antes da aplicação do agente terapêutico contra câncer adicional.Com respeito à invenção, esta aplicação ou administração anterior tambémé referida como "administração oportuna" ou "aplicação oportuna".

Conforme é mostrado pelos dados contidos neste pedido de pa-tente, o efeito de acordo com a invenção é obtido em animais não-humanos,especialmente ratos, se esta aplicação anterior ocorrer preferencialmente 1a 8 horas (h), preferencialmente 1 a 5 h, e mais preferencialmente 1 a 3 hantes da aplicação do agente coterapêutico contra câncer adicional; e aindamais preferencialmente esta aplicação anterior ocorre 2 a 8 horas (h), prefe-rencialmene 2 a 6 h, e mais preferencialmente 2 a 4 h antes da aplicação doagente coterapêutico contra câncer adicional, tais como 1 a 2 h, 2 a 3 h, 3 a6 h, 2a 5h ou 3a 7h antes da aplicação do agente terapêutico contra cân-cer adicional. Com respeito à invenção, esta aplicação ou administração an-terior também é referida como "administração oportuna" ou "aplicação opor-tuna"

No entanto, os dados destes experimentos com animais huma-nos preferencialmente mostram que o tempo da "aplicação anterior" descritae discutida acima/abaixo pode ser retardado ou multiplicado pelo fator 1 a 4e especialmente 2 a 4. Esta diferença na resposta ou tempo de resposta en-tre animais não-humanos, especialmente roedores, tais como ratos, e ani-mais humanos é conhecida e extensivamente discutida na técnica. Apesarda requerente não desejar ser limitada por esta teoria, ela acredita que estadiferença seja no mínimo em parte causada pelo comportamento farmacoci-nético diferente das diferentes espécies, o qual entre outros se reflete emdiferentes meias-vidas (ti/2) nos diferentes tipos de animais. Por exemplo,para compostos tais como ciclopeptídeos, as meias-vidas em ratos geral-mente são na faixa de 10 a 30 minutos, ao passo que as meias-vidas emanimais humanos para os mesmos compostos são dentro de 2 a 6 horas eespecialmente 3 a 4 horas.

Por conseguinte, um objeto deste pedido de patente é um méto-do de tratamento e/ou um método de fabricação conforme descrito aci-ma/abaixo, em que a aplicação anterior ocorre preferencialmente 1 a 32 ho-ras (h), preferencialmente 2 a 32 h, mais preferencialmente 2 a 24 h, aindamais preferencialmente 4 a 24 h, ainda mais preferencialmente 6 a 20 h eespecialmente 6 a 16 h, antes da aplicação do agente coterapêutico contracâncer adicional; ou alternativamente preferencialmente esta aplicação ante-rior ocorre 6 a 32 horas (h), preferencialmente 10 a 24 h, e mais preferenci-almente 12 a 20 h antes da aplicação do agente coterapêutico contra cânceradicional. Com respeito à invenção, esta aplicação ou administração referidatambém é referida como "administração oportuna" ou "aplicação oportuna"

Um objeto adicional deste pedido de patente é um método detratamento e/ou um método de fabricação conforme descrito acima/abaixo,em que a aplicação anterior ocorre preferencialmente 18 a 23 h horas (h),preferencialmente 20 a 23 h, mais preferencialmente 20 a 22 h antes da a-plicação do agente coterapêutico contra câncer adicional; ou alternativamen-te preferencialmente esta aplicação anterior ocorre 25 a 32 h horas (h), pre-ferencialmente 25 a 30 h, e mais preferencialmente 26 a 30 h antes da apli-cação do agente coterapêutico contra câncer adicional. Com respeito à in-venção, esta aplicação ou administração referida também é referida como"administração oportuna" ou "aplicação oportuna"

No entanto, em um aspecto mais preferencial da presente inven-ção, a administração oportuna (independente de se o paciente é um animalhumano ou não-humano) do Iigante de integrina específico ocorre 1 a 10horas (h), preferencialmente 2 a 8 h, mais preferencialmente 2 a 6 h, aindamais preferencialmente 3 a 8 h, ainda mais preferencialmente 3 a 6 h e es-pecialmente 4 a 8 h antes da aplicação do um ou mais agentes coterapêuti-cos contra câncer, por exemplo, 1 a 2 h, 1 a 3 h, 1 a 4 h, 2 a 3 h, 2 a 4 h, 2 a6 h, 2 a 8 h, 2 a 10 h, 3 a 4 h, 3 a 10 h, 4 a 6 h, 4 a 10 h, 5 a 8 ou 5 a 10 h.Isto é especialmente preferencial se o um ou mais agentes coterapêuticoscontra câncer compreendem radiação de feixe externo ou consistem em ra-diação de feixe externo. Com respeito à invenção, esta aplicação ou admi-nistração referida também é referida como "administração oportuna" ou "a-plicação oportuna".

Com respeito à referida administração oportuna ou aplicaçãooportuna (do Iigante de integrina específico), as horas dadas para a referidaadministração anterior ou aplicação preferencialmente refere-sem ao inícioou começo da respectiva administração ou aplicação. Por conseguinte, porexemplo, uma administração do Iigante de integrina específico iniciando trêshoras antes da aplicação do respectivo agente coterapêutico contra câncerdeve ser considerada como uma administração oportuna ou aplicação opor-tuna 3 h antes da aplicação do um ou mais agentes coterapêuticos contracâncer de acordo com a invenção, mesmo se o ligante de integrina específi-co for administrado por Infusão i. v. que leva uma hora ou duas horas paraser completada. Estai definição de aplicação anterior/administração anteriorestá em perfeito acordo com o entendimento daqueles versados na técnica.

Se no mínimo um ligante de integrina específico é administradoao paciente em uma administração oportuna conforme descrito aqui, prefe-rencialmente é oportuna com respeito ao um ou mais agentes coterapêuticoscontra câncer com o qual é combinado. Com respeito à administração opor-tuna do Iigante de integrina específico em combinação com dois ou maisagentes coterapêuticos contra câncer, preferencialmente é oportuna comrespeito ao dois ou mais agentes coterapêuticos contra câncer, mais prefe-rencialmente oportuna com respeito a no mínimo um dos agentes coterapêu-ticos contra câncer. Se um ou mais agentes coterapêuticos contra câncercompreendem radioterapia, especialmente radioterapia conforme descritoaqui, a administração oportuna preferencialmente refere-se no mínimo à ra-dioterapia.

Especial e preferencialmente, a administração oportuna do ligan-te de integrina específico refere-se a radioterapia como o coterapêutico con-tra câncer oportunamente relevante. Por conseguinte, na administração o-portuna, a administração anterior do ligante de integrina específico preferen-cialmente refere-se a um tempo antes da administração de radioterapia. Noentanto, em muitos casos, pode ser vantajoso também administrar o um oumais agentes coterapêuticos contra câncer adicionais diferentes de radiote-rapia dentro da janela de tempo dada pela administração oportuna do Iigantede integrina específico e a administração ou liberação da radioterapia.

Com referência à administração oportuna de no mínimo um li-gante de integrina específico, preferencialmente um ligante de integrina es-pecífico selecionado entre o grupo consistindo em ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val), os derivados, solvatos e/ou sais farmaceuticamente aceitáveis domesmo, e os agentes coterapêuticos contra câncer temozolomida e radiote-rapia, a administração oportuna de no mínimo um ligante de integrina espe-cífico preferencialmente refere-se à administração ou liberação da radiotera-pia, e mais preferencialmente à administração ou liberação de radioterapia eà administração da temozolomida.

Mais preferencialmente, a administração oportuna do ligante deintegrina específico refere-se à administração do ligante de integrina especí-fico e à radioterapia, e o agente coterapêutico contra câncer adicional, porexemplo temozolomida, é preferencialmente administrado depois da admi-nistração do ligante de integrina específico, tal como 1 a 2 ou 1 a 3 horasdepois da administração deste ligante de integrina específico, mas preferen-cialmente antes da administração ou liberação da radioterapia, preferencial-mente no mínimo dentro de uma hora antes da administração ou liberaçãoda radioterapia, e mais preferencialmente no mínimo 1 hora antes da radio-terapia, por exemplo 1 a 2 ou 1 a 3 h antes da administração ou liberação daradioterapia.

Se dois ou mais Iigantes de integrina específicos são adminis-trados em uma administração oportuna conforme descrito aqui, a adminis-tração e oportuna preferencialmente refere-se no mínimo a um dos Iigantesde integrina específicos e mais preferencialmente aos dois ou mais Iigantesde integrina específicos a serem administrados na administração oportunaconforme descrito aqui.

Deve ser entendido que a administração de qualquer combina-ção da presente invenção pode ser acompanhada opcionalmente por terapiade radiação, em que o tratamento de radiação pode ser feito preferencial-mente depois da administração do Iigante de integrina. A administração dosdiferentes agentes da terapia de combinação de acordo com a invençãotambém pode ser realizada opcional) substancial, simultânea ou seqüenci-almente.

É sabido que tumores fazem surgir vias alternativas para seudesenvolvimento e crescimento. Se uma via for bloqueada freqüentementeeles têm a capacidade de trocar para outra via expressando e usando outrosreceptores e caminhos de sinalização. Portanto, as combinações farmacêu-ticas da presente invenção podem bloquear várias das referidas estratégiasde desenvolvimento possíveis do tumor e proporcionam conseqüentementevários benefícios terapêuticos. As combinações de acordo com a presenteinvenção são úteis para tratar e prevenir tumores, distúrbios semelhantes atumor e de neoplasia e metástases tumorais, as quais se desenvolvem ecrescem por ativação de seus receptores hormonais relevantes os quais es-tão presentes sobre a superfície das células tumorais.

Preferencialmente, os diferentes agentes combinados da pre-sente invenção são administrados em uma baixa dose, isto é, em uma dosemenor do que tem sido usado convencionalmente em situações clínicas. Umbenefício de reduzir a dose dos compostos, composições, agentes e terapiasda presente invenção administrados a um indivíduo inclui uma redução naincidência de efeitos adversos associados com maiores dosagens. Por e-xemplo, pela redução da dosagem de um agente descrito acima e abaixo,resultará uma redução na freqüência e na gravidade de náusea e vômitoquando comparadas com as observadas em maiores dosagens. Reduzindoa incidência de efeitos adversos, espera-se uma melhora na qualidade devida de um paciente com câncer. Benefícios adicionais de reduzir a incidên-cia de efeitos adversos incluem uma melhora na aceitação do paciente, umaredução no número de hospitalizações necessárias para o tratamento deefeitos adversos, e uma redução na administração de agentes analgésicosnecessários para tratar dor associada com os efeitos adver-sos. Alternativamente, os métodos e combinação da presente invenção tam-bém podem maximizar o efeito terapêutico em maiores doses.

Tumores, preferencialmente apresentando um aumento da ex-pressão e priming de moléculas de adesão celular específicas da série dealfa-v-integrinas, especialmente ανβ3 e ανβδ em sua vasculatura podem sertratados com sucesso pelas combinações e regime terapêutico de acordocom a invenção. As combinações dentro do tratamento farmacêutico de a -cordo com a invenção mostram um efeito sinérgico surpreendente. Ao admi-nistrar a combinação de fármacos podem ser observados real encolhimentoe desintegração do tumor durante estudos clínicos ao passo que não foramdetectáveis significativas reações adversas a fármacos.

Modalidades preferenciais da presente invenção refere-sem a:Um método para a produção de um medicamento para o usooportuno e combinado como uma terapia de combinação para o tratamentode câncer, o medicamento compreendendo, preferencialmente em duas for-mas de aplicação distintas (separadas),

a) uma composição contende no mínimo um Iigante de integrina específi-co, e

b) no mínimo um agente coterapêutico adicional contra câncer diferentede no mínimo um Iigante de integrina específico de a),

em que a) é administrado 1 a 8 horas (h), preferencialmente 1 a 5 h, e maispreferencialmente 1 a 3 h antes da aplicação de b).

Um método preferencial para a produção de um medicamentopara o uso oportuno e combinado como uma terapia de combinação para otratamento de câncer, o medicamento compreendendo, preferencialmenteem duas formas de aplicação distintas (separadas),

a) uma composição contende no mínimo um Iigante de integrina específi-co, e

b) no mínimo um agente coterapêutico adicional contra câncer diferentede no mínimo um Iigante de integrina específico de a),

em que a) é administrado 1 a 8 horas (h), preferencialmente 2 a 6 h, e maispreferencialmente 2 a 4 h antes da aplicação de b).

Outro método preferencial para a produção de um medicamentopara o uso oportuno e combinado como uma terapia de combinação para otratamento de câncer, o medicamento compreendendo, preferencialmenteem duas formas de aplicação distintas (separadas),

a) uma composição contende no mínimo um Iigante de integrina específi-co, e

b) no mínimo um agente coterapêutico adicional contra câncer diferentede no mínimo um Iigante de integrina específico de a),

em que a) é administrado 2 a 8 horas (h), preferencialmente 3 a 6 h, e maispreferencialmente 3 a 4 h antes da aplicação de b).

Um referido medicamento em que no mínimo um Iigante de inte-grina é selecionado entre o grupo consistindo em Ocv inibidores de integrina,preferencialmente ανβ3 inibidores, mais preferencialmente ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVaI).

Um referido medicamento em que no mínimo um agente cotera-pêutico contra câncer é selecionado entre o grupo consistindo em agentesquimioterápicos, agentes citotóxicos, agentes imunotóxicos e radioterapia.

Um o referido medicamento preferencial em que no mínimo umagente coterapêutico contra câncer é selecionado entre o grupo consistindoem agentes quimioterápicos, agentes citotóxicos e agentes imunotóxicos.

Outro medicamento preferencial similar em que no mínimo umagente coterapêutico adicional contra câncer diferente de no mínimo um Ii-gante de integrina específico de a) é radioterapia.

Um método para o tratamento de câncer caracterizado por tratarum sujeito que necessite do mesmo com uma quantidade terapeuticamenteeficaz de no mínimo um ligante de integrina a) é no mínimo um agente cote-rapêutico contra câncer b) em que a) é administrado 1 a 8 horas (h), prefe-rencialmente 1 a 5 h, e mais preferencialmente 1 a 3 h antes da aplicação deb).

Um método preferencial para o tratamento de câncer caracteri-zado por tratar um sujeito que necessite do mesmo com uma quantidadeterapeuticamente eficaz de no mínimo um Iigante de integrina a) e no míni-mo um agente coterapêutico contra câncer b) em que a) é administrado 2 a8 horas (h), preferencialmente 2 a 5 h, e mais preferencialmente 2 a 4 h an-tes da aplicação de b).

Outro método preferencial para o tratamento de câncer caracte-rizado por tratar um sujeito que necessite do mesmo com uma quantidadeterapeuticamente eficaz de no mínimo um Iigante de integrina a) e no míni-mo um agente coterapêutico contra câncer b) em que a) é administrado 3 a8 horas (h), preferencialmente 3 a 5 h, e mais preferencialmente 3 a 4 h an-tes da aplicação de b).

Outro método preferencial para o tratamento de câncer caracte-rizado por tratar um sujeito que necessite do mesmo com uma quantidadeterapeuticamente eficaz de no mínimo um Iigante de integrina a) e no míni-mo um agente coterapêutico contra câncer b) em que a) é administrado 4 a8 horas (h), preferencialmente 4 a 7 h, e mais preferencialmente 4 a 6 h an-tes da aplicação de b).

Um método referido em que no mínimo um Iigante de integrina éselecionado entre o grupo consistindo em av inibidores de integrina, prefe-rencialmente <Χνβ3 inibidores, mais preferencialmente ciclo-(Arg-GIy-Asp-DPhe-NMeVaI).

Um método referido em que no mínimo um agente coterapêuticocontra câncer é selecionado entre o grupo consistindo em agentes quimiote-rápicos, agentes citotóxicos, agentes imunotóxicos e radioterapia.

Uma série para o tratamento de câncer compreendendo formasde dosagens independentes de:a) uma quantidade terapeuticamente eficaz de no mínimo um ligante deintegrina preferencialmente sendo selecionado entre o grupo consistin-do em av inibidores de integrina, preferencialmente ανββ inibidores,mais preferencialmente ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal), e

b) uma quantidade terapeuticamente eficaz de no mínimo um agente co-terapêutico adicional contra câncer diferente do ligante de integrina dea), selecionado entre o grupo consistindo em agentes quimioterápicos,agentes citotóxicos, agentes imunotóxicos,

em que a) é administrado 1 a 8 horas (h), preferencialmente 1 a 5 h, e maispreferencialmente 1 a 3 h antes da aplicação de b).

Uma série para o tratamento de câncer compreendendo formasde dosagens independentes de:

a) uma quantidade terapeuticamente eficaz de no mínimo um Iigante deintegrina preferencialmente sendo selecionado entre o grupo consistin-do em av inibidores de integrina, preferencialmente ανβ3 inibidores,mais preferencialmente ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal), e

b) uma quantidade terapeuticamente eficaz de no mínimo um agente co-terapêutico adicional contra câncer diferente do Iigante de integrina dea), selecionado entre o grupo consistindo em agentes quimioterápicos,agentes citotóxicos, agentes imunotóxicos,

em que a) é administrado 2 a 8 horas (h), preferencialmente 2 a 5 h, e maispreferencialmente 2 a 4 h antes da aplicação de b).

Uma série para o tratamento de câncer compreendendo formasde dosagens independentes de:

a) uma quantidade terapeuticamente eficaz de no mínimo um Iigante deintegrina preferencialmente sendo selecionado entre o grupo consistin-do em av inibidores de integrina, preferencialmente θνβ3 inibidores,mais preferencialmente ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal), e

b) uma quantidade terapeuticamente eficaz de no mínimo um agente co-terapêutico adicional contra câncer diferente do ligante de integrina dea), selecionado entre o grupo consistindo em agentes quimioterápicos,agentes citotóxicos, agentes imunotóxicos,em que a) é administrado 3 a 8 horas (h), preferencialmente 3 a 5 h, e maispreferencialmente 3 a 4 h antes da aplicação de b).

Uma série para o tratamento de câncer compreendendo formasde dosagens independentes de:

a) uma quantidade terapeuticamente eficaz de no mínimo um Iigante deintegrina preferencialmente sendo selecionado entre o grupo consistin-do em av inibidores de integrina, preferencialmente ανβ3 inibidores,mais preferencialmente ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal), e

b) uma quantidade terapeuticamente eficaz de no mínimo um agente co-terapêutico adicional contra câncer diferente do Iigante de integrina dea), selecionado entre o grupo consistindo em agentes quimioterápicos,agentes citotóxicos, agentes imunotóxicos,

em que a) é administrado 4 a 8 horas (h), preferencialmente 4 a 7 h, e maispreferencialmente 4 a 6 h antes da aplicação de b).

A série referida é adicionalmente caracterizada pelo fato de queserá vantajoso dar instruções detalhadas a e como usar o agente coterapêu-tico contra câncer, por exemplo, radioterapia, em conexão com o Iigante deintegrina sob a forma de algumas embalagens específicas, bulas de pacotesespecíficas e similares.

Portanto, uma modalidade preferencial adicional da presenteinvenção é um medicamento consistindo em um Iigante de integrina comoum ingrediente ativo, designado para ser aplicado antes de um agente cote-rapêutico contra câncer adicional, por exemplo, radioterapia, e contido emum recipiente ou similar, o recipiente dando em forma de detalhadas instru-ções por escrito e/ou outras informações técnicas como usar o referido me-dicamento em combinação com radioterapia, por exemplo, com respeito aoesquema de aplicação acima.

Uma modalidade preferencial adicional da presente invenção é ouso de no mínimo um Iigante de integrina a) e no mínimo um agente cotera-pêutico contra câncer b) para a preparação de um medicamento para o tra-tamento de câncer, no mínimo um Iigante de integrina preferencialmentesendo selecionado entre o grupo consistindo em inibidores de integrina av,preferencialmente ανβ3 inibidores, mais preferencialmente ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVaI) e o agente coterapêutico contra câncer b) sendo sele-cionado entre o grupo consistindo em agentes quimioterápicos, agentes cito-tóxicos e/ou agentes imunotóxicos, em que a) é administrado 1 a 8 horas (h),preferencialmente 1 a 5 h, e mais preferencialmente 1 a 3 h antes da aplica-ção de b), e a) e b) são proporcionados e/ou formulados em (para) formasde aplicação separadas.

Um referido uso em que o órgão é fígado e o câncer é carcino-ma hepatocelular.

Uma modalidade preferencial da presente invenção portanto re-fere-se a uma composição farmacêutica correspondente, em que o referidoIigante de integrina é um inibidor de integrina ανβ3, ανβδ. ανβ6 ou ανβ8; umacomposição farmacêutica correspondente, em que o referido inibidor de in-tegrina é um peptídeo linear ou cíclico contendo RGD; e, como uma modali-dade específica e muito preferencial, uma composição farmacêutica referida,em que o referido Iigante de integrina é ciclo(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal),opcionalmente em recipientes ou pacotes separados, um agente quimioterá-pico selecionado entre qualquer um dos compostos do grupo: cisplatina, do-xorrubicina, gencitabina, docetaxel, paclitaxel, bleomicina; e uma composi-ção farmacêutica correspondente, opcionalmente em recipientes ou pacotesseparados, em que o referido inibidor de integrina é um anticorpo ou um de-rivado funcionalmente intacto do mesmo, compreendendo um sítio de liga-ção o qual liga a um epitopo de um receptor de integrina, preferencialmenteselecionado entre o grupo de anticorpos ou seus derivados bi- ou monova-lentes (Fab'2)-(Fab'): LM609, Vitaxin, Abegrin, Abciximab (7E3), P1F6,14D9.F8, CNT095, versões humanizadas, quiméricas e deimunizadas dosmesmos incluídas.

Em outra modalidade da presente invenção o agente quimioterápico pode ser melfalan ou TNFa, preferencialmente aplicado em combinação.

Deve ser entendido que todos os agentes coterapêuticos contracâncer independente de sua natureza podem ser usados em combinação.Por exemplo, pode-se usar cisplatina, doxorrubicina, gencitabina, docetaxel,paclitaxel, bleomicina junto com TNFa.

Uma modalidade preferencial da presente invenção refere-se aum pacote para uso em terapia contra câncer compreendende no mínimoum Iigante de integrina, preferencialmente um agente inibidor de receptor deintegrina 0^3, Ονββ, Ονββ ou Ονββ, rnais preferencialmente um peptídeo linearou cíclico contendo RGD, especialmente ciclo(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal);opcionalmente compreendendo adicionalmente um pacote compreendendoum agente citotóxico.

Uma modalidade preferencial adicional da presente invençãorefere-se a um kit farmacêutico correspondente, em que o referido Iigante deintegrina é um anticorpo ou um derivado ativo do mesmo, preferencialmenteselecionado entre o grupo de anticorpos: LM609, P1F6, e 14D9.F8 bem co-mo Vitaxin, Abegrin, CNT095, Abciximab.

Uma modalidade preferencial da presente invenção refere-se auma modalidade específica da invenção, um kit farmacêutico específico,compreendendo

(i) um pacote compreendendo ciclo(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal),

(ii) um pacote compreendende no mínimo um agente quimiote-rápico o qual é selecionado entre qualquer um dos compostos do grupo: cis-platina, doxorrubicina, gencitabina, docetaxel, paclitaxel, bleomicina e 5FU,opcionalmente em combinação com TNFa, para o tratamento de câncer a-través do esquema de aplicação da presente invenção.

Em uma modalidade preferencial adicional o kit compreendemelfalan e/ou TNFa como agentes coterapêuticos contra câncer.

Uma modalidade preferencial adicional da presente invençãorefere-se ao uso de uma composição farmacêutica ou um kit farmacêuticoconforme definido acima, abaixo e nas reivindicações, para a fabricação deum medicamento para tratar tumores e metástases tumorais em que o Iigan-te de integrina a) é administrado 1 a 8 horas (h), preferencialmente 1 a 5 h, emais preferencialmente 1 a 3 h antes da aplicação do agente coterapêuticocontra câncer b).Outra modalidade preferencial adicional da presente invençãorefere-se ao uso de uma composição farmacêutica ou um kit farmacêuticoconforme definido acima, abaixo e nas reivindicações, para a fabricação deum medicamento para tratar tumores e metástases tumorais em que o Iigan-te de integrina a) é administrado 2 a 8 horas (h), preferencialmente 2 a 6 h, emais preferencialmente 2 a 4 h antes da aplicação do agente coterapêuticocontra câncer b).

Uma modalidade preferencial adicional da presente invençãorefere-se a um tratamento farmacêutico ou método para tratar tumores oumetástases tumorais èm um paciente, o tratamento ou método compreen-dendo administrar ao referido paciente uma quantidade terapeuticamenteeficaz de um agente ou agentes tendo

(i) especificidade para Iigante de integrina, e

(ii) um agente coterapêutico contra câncer

em que a) é administrado 1 a 8 horas (h), preferencialmente 1 a 5 h, e maispreferencialmente 1 a 3 h antes da aplicação de b).

Outra modalidade preferencial adicional da presente invençãorefere-se a um tratamento farmacêutico ou método para tratar tumores oumetástases tumorais em um paciente, o tratamento ou método compreen-dendo administrar ao referido paciente uma quantidade terapeuticamenteeficaz de um agente ou agentes tendo

(i) especificidade para Iigante de integrina, e

(ii) um agente coterapêutico contra câncer

em que a) é administrado 2 a 8 horas (h), preferencialmente 2 a 6 h, e maispreferencialmente 2 a 4 h antes da aplicação de b).

O agente coterapêutico contra câncer opcionalmente é um cito-tóxico, preferencialmente agente quimioterápico, e o referido agente (i) é uminibidor de integrina avp3, avps ou um avP6 ou um agente bloqueador deVEGF receptor.

Uma modalidade preferencial adicional da presente invençãorefere-se a um método correspondente, em que o referido Iigante de integri-na é ciclo(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal), e é opcionalmente administrado juntocom um fármaco citòtóxico selecionado entre o grupo: cisplatina, doxorrubi-cina, gencitabina, docetaxel, paclitaxel, bleomicina.

O tratamento farmacêutico usando as composições farmacêuti-cas e kits de acordo com a invenção pode ser acompanhado, simultânea ouseqüencialmente, por uma terapia de radiação.

A terapia de radiação pode ser o único agente coterapêutico aser aplicado junto com o Iigante de integrina.

As combinações farmacêuticas e métodos da presente invençãoproporcionam vários benefícios. As combinações de acordo com a presenteinvenção são úteis no tratamento e na prevenção de tumores, distúrbios se-melhantes a tumores e de neoplasia. Preferencialmente, os diferentes agen-tes combinados da presente invenção são administrados em combinação emuma baixa dose, isto é, em uma dose menor do que tem sido usado conven-cionalmente em situações clínicas. Um benefício de reduzir a dose dos com-postos, composições, agentes e terapias da presente invenção administra-dos a um mamífero inclui uma redução na incidência de efeitos adversosassociados com maiores dosagens. Por exemplo, pela diminuição da dosa-gem de um agente quimióterápico tal como metotrexato, doxorrubicina, gen-citabina, docetaxel, paclitaxel, bleomicina, cisplatina e/ou Melphalan, resulta-rá uma redução na freqüência e na gravidade da náusea e vômito quandocomparada com as observadas em maiores dosagens. Benefícios similaressão contemplados para os compostos, composições, agentes e terapias emcombinação com os antagonistas de integrina da presente inven-ção. Diminuindo a incidência de efeitos adversos, é contemplada uma me-lhora na qualidade de vida de um paciente com câncer. Benefícios adicionaisde diminuir a incidência de efeitos adversos incluem uma melhora na aceita-ção do paciente, uma redução no número de hospitalizações necessáriaspara o tratamento de efeitos adversos, e uma redução na administração deagentes analgésicos necessários para tratar dor associada com os efeitosadversos.

Alternativamente, os métodos e a combinação da presente in-venção também podem maximizar o efeito terapêutico em maiores doses.Descrição Detalhada da Invenção

Caso não salientado de modo diverso, os termos e expressõesusados nesta invenção preferencialmente têm os significados e definiçõesconforme dado abaixo. Além disso, estas definições e significados descre-vem a invenção em modalidade s preferenciais incluídas mais detalhes.

Caso não salientado de modo diverso, a referência a um com-posto a ser usado dé acordo com a invenção preferencialmente inclui a refe-rência a os derivados, solvatos e sais farmaceuticamente aceitáveis domesmo. Caso não salientado de modo diverso, a referência aos Iigantes deintegrina, antagonistas de integrina, agonistas de integrina, bem como a re-ferência aos agentes coterapêuticos contra âncer que são compostos, prefe-rencialmente inclui os derivados, solvatos e sais farmaceuticamente aceitá-veis do mesmo. Ainda mais preferencialmente, a referência ao Iigante deintegrina ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) também inclui os derivados, sol-vatos e sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo, mais preferencialmen-te os solvatos e sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo e especial epreferencialmente os sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo, casonão indicado de modo diverso.

Por "terapia de combinação" se indica preferencialmente umacombinação de no mínimo duas formas de terapia distintas assim combina-das de modo a formar um único conceito terapêutico em uma maneira con-secutiva oportuna controlada.

Em uma modalidade preferencial da presente invenção isto sig-nifica a combinação de um Iigante de integrina com um agente coterapêuticoadicional. É importante observar que "terapia de combinação" preferencial-mente não significa uma composição farmacêutica ou medicamento distintoe/ou único. A título de contraste, em uma modalidade preferencial da presen-te invenção o Iigante de integrina e o agente coterapêutico adicional sãoproporcionados em recipientes distintos, embalagens, medicamentos, formu-lações ou equivalentes. Igualmente, a combinação de terapia de Iigante deintegrina com terapia de radiação preferencialmente se situa dentro do signi-ficado de "terapia de combinação" da presente invenção."Formas de terapia" preferencialmente são quaisquer meios,usos e/ou formulações para tratar câncer conhecidas na técnica. Pelo termo"formas distintas de terapia" portanto se indica que são combinados doismeios, usos e/ou formulações diferentes para tratar câncer. No contexto dapresente invenção é preferencial que a primeira forma de terapia a ser apli-cada tenha atividade antiintegrina (sinônimo: Iigante de integrina), e seja a-plicada antes da segunda forma de terapia, preferencialmente seguindo oesquema conforme detalhado acima.

O termo "composição compreendendo radioterapia" preferenci-almente significa simplesmente que subseqüente ao Iigante de integrina éaplicada radioterapia. Portanto, o termo "composição compreendendo radio-terapia" no contexto da presente invenção preferencialmente não se aplica auma composição farmacêutica como tal, mas a uma composição farmacêuti-ca a ser usada em combinação com radioterapia.

Com "agente coterapêutico contra câncer" ou "agente coterapêu-tico" preferencialmente se indica um agente citotóxico, quimioterápico ouimunotóxico. Igualmente preferencial é radioterapia.

Um "receptor" ou "molécula receptora" é preferencialmente umaproteína ou glicoproteína solúvel ou ligada a membrana ou associada amembrana compreendendo um ou mais domínios aos quais um Iigante ligapara formar um complexo receptor-ligante. Por ligação do ligante, o qual po-de ser um agonista ou um antagonista, o receptor é ativado ou inativado epode iniciar ou bloquear o caminho de sinalização.

Por "ligante" ou "ligante de receptor" se indica preferencialmenteum composto natural ou sintético o qual liga uma molécula receptora paraformar um complexo receptor-ligante. O termo ligante inclui agonistas, anta-gonistas, e compostos com atividade parcial agonista/antagonista.

Um "agonista" ou "agonista de receptor" é preferencialmente umcomposto natural ou sintético o qual liga o receptor para formar um comple-xo receptor-agonista ativando o referido receptor e o complexo receptor-agonista, respectivamente, iniciando um caminho de sinalização e processosbiológicos adicionais.Por "antagonista" ou "antagonista de receptor" se indica prefe-rencialmente composto natural ou sintético que tem um efeito biológico o-posto ao de um agonista. Um antagonista liga o receptor e bloqueia a açãode um agonista de receptor competindo com o agonista pelo receptor. Umantagonista é definido por sua capacidade para bloquear as ações de umagonista. Um antagonista de receptor também pode ser um anticorpo ou umfragmento imunoterapeuticamente eficaz do mesmo. Antagonistas preferen-ciais de acordo com a presente invenção são citados e discutidos abaixo.

O termo "antagonistas/inibidores de integrina" ou "antagonis-tas/inibidores de receptores de integrina" preferencialmente refere-se a umamolécula natural ou sintética, preferencialmente uma molécula sintética, quebloqueia e inibe um receptor de integrina. Em alguns casos, O termo incluiantagonistas dirigidos para os Iigantes dos referidos receptores de integrina(tais como para ανββ: vitronectina, fibrina, fibrinogênio, fator de von Wille-brand, trombospondina, laminina; pára otvps: vitronectina; para Ονβι: fibronec-tina e vitronectina; para ανββ: fibronectina). Antagonistas dirigidos para osreceptores de integrina são preferenciais de acordo com a invenção. Anta-gonistas de integrina (receptores) podem ser peptídeos naturais ou sintéti-cos, não-peptídeos, peptidomiméticos, imunoglobulinas, tais como anticor-pos ou fragmentos funcionais do mesmo, ou imunoconjugados (proteínas defusão), inibidores de integrina preferenciais da invenção são dirigidos parareceptor de Otv integrinas (por exemplo, «νβθ. «νβδ, «νβδ e sub-classes). inibi-dores de integrina preferenciais são Ocv antagonistas, e em particular θνβ3antagonistas. Otv Antagonistas preferenciais de acordo com a invenção sãopeptídeos RGD, peptidomiméticos (não-peptídeo) antagonistas e anticorposcontra receptores antiintegrina tais como anticorpos bloqueadores de Ocv re-ceptores.

ανβ3 Antagonistas não-imunológicos típicos são descritos nosensinamentos da Patente dos Estados Unidos N9 US 5.753.230 e da Patentedos Estados Unidos N9 US 5.766.591. Antagonistas preferenciais são peptí-deos contendo RGD lineares e cíclicos. Peptídeos cíclicos são, via de regra,mais estáveis e provocam uma meia-vida sérica maior. O antagonista deintegrina mais preferencial da invenção, no entanto, é ciclo-(Arg-G Iy-Asp-DPhe-NMeVai) (EMD 121974, Cilengitide®, Merck KGaA, Alemanha; PatenteEuropéia N9 EP 0770 622) o qual é eficaz no bloqueio dos receptores deintegrina 0^3, ανβι, «νββ, ανββ, α^β3, e preferencialmente especialmenteeficaz com respeito aos receptores de integrina ανβ3 e/ou Ονβδ- Conforme éevidente para aqueles versados na técnica, o ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVaI) também pode ser aplicado no contexto da presente invenção sob aforma de um derivado fisiologicamente funcional, derivado fisiologicamenteaceitávewl, um solvato e/ou um sal do mesmo. O mesmo preferencialmentetambém se aplica a todos os outros compostos ou ingredientes ativos a se-rem usados no contexto da presente invenção.

Peptidila bem como peptidomiméticos (não-peptídeo) antagonis-tas adequados do receptor de ανββ/ανβδ/ο^νββ integrina têm sido descritostanto na literatura científica quanto de patente. Por exemplo, é feita referên-cia em Hoekstra e Poulter, 1998, Curr. Med. Chem. 5, 195; na Patente Inter-nacional Ne WO 95/32710; na Patente Internacional Ng WO 95/37655; naPatente Internacional Nq WO 97/01540; na Patente Internacional N5 WO97/37655; na Patente Internacional Ne WO 97/45137; na Patente Internacio-nal N2 WO 97/41844; na Patente Internacional N9 WO 98/08840; na PatenteInternacional Ne WO 98/18460; na Patente Internacional Ns WO 98/18461;na Patente Internacional Nq WO 98/25892; na Patente Internacional Nq WO98/31359; na Patente Internacional Ns WO 98/30542; na Patente Internacio-nal N9 WO 99/15506; na Patente Internacional Ns WO 99/15507; na PatenteInternacional N9 WO 99/31061; na Patente Internacional N9 WO 00/06169;na Patente Européia N9 EP 0853 084; na Patente Européia N9 EP 0854 140;na Patente Européia N9 EP 0854 145; na Patente dos Estados Unidos N9 US5.780.426; e na Patente dos Estados Unidos N9 US 6.048.861. Patentes quedescrevem benzazepina, bem como antagonistas de receptores de 01^3 in-tegrina de benzodiazepina e benzociclohepteno relacionados, os quais tam-bém são adequados para o uso nesta invenção, incluem a Patente Interna-cional N9 WO 96/00574, a Patente Internacional N9 WO 96/00730, a PatenteInternacional N9 WO 96/06087, a Patente Internacional N9 WO 96/26190, aPatente Internacional N9 WO 97/24119, a Patente Internacional N9 WO97/24122, a Patente Internacional N9 WO 97/24124, a Patente InternacionalN9 WO 98/15278, a Patente Internacional N9 WO 99/05107, a Patente Inter-nacional N9 WO 99/06049, a Patente Internacional N9 WO 99/15170, a Pa-tente Internacional N9 WO 99/15178, a Patente Internacional N9 WO97/34865, a Patente Internacional N9 WO 97/01540, a Patente InternacionalN9 WO 98/30542, a Patente Internacional N9 WO 99/11626, e a Patente In-ternacional N9 WO 99/15508. Outros antagonistas de receptores de integrinacaracterizando restrições de anéis conformacionais da estrutura principalforam descritos na Patente Internacional N9 WO 98/08840; na Patente Inter-nacional Ns WO 99/30709; na Patente Internacional N9 WO 99/30713; naPatente Internacional N9 WO 99/31099; na Patente Internacional N9 WO00/09503; na Patente dos Estados Unidos N9 US 5.919.792; na Patente dosEstados Unidos N9 US 5.925.655; na Patente dos Estados Unidos N9 US5.981.546; e na Patente dos Estados Unidos N9 US 6.017.926. Na Patentedos Estados Unidos N9 US 6.048.861 e na Patente Internacional N9 WO00/72801 foi descrita uma série de derivados do ácido nonanóico os quaissão potentes antagonistas de receptores de 0^3 integrina. Outros antago-nistas de integrina de pequena molécula química (principalmente antagonis-tas de vitronectina) são descritos na Patente Internacional N9 WO 00/38665.Foi demonstrado que outros antagonistas de ανβ3 receptores são eficazespara inibir a angiogênese. Por exemplo, antagonistas de receptores sintéti-cos tais como Ácido (S)-10,11-diidro-3-[3-(piridin-2-ilamino)-1-propilóxi]-5H-dibenzo[ a,d]ciclohepteno-10-acético (conhecido como SB-265123) foramtestados em uma variedade de sistemas de modelos de mamíferos. (Keenanet.ai, 1998, Bioorg. Med. Chem. Lett. 8(22), 3171; Ward et ai, 1999, DrugMetab. Dispôs. 27(11), 1232). Testes para a identificação de antagonistas deintegrina adequados para uso como um antagonista são descritos, por e-xemplo, por Smith et ai, 1990, J. Biol. Chem. 265, 12267, e na literatura depatente referida. Anticorpos contra receptores antiintegrina tamnbém sãoconhecidos de modo geral. Anticorpos monoclonais antiintegrinas adequa-dos (por exemplo, ανβ3, Ονβε, ανββ) podem ser modificados para englobarfragmentos de ligação antigênica dos mesmos, incluindo F(ab)2, Fab, e anti-corpo de cadeia única ou Fv produzido por engenharia genética. Um anticor-po monoclonal adequado e usado preferencialmente dirigido contra receptorde integrina o^é identificado como LM609 (Brooks et ai, 1994, Cell 79,1157; ATCC HB 9537). Um potente anticorpo anti-ocvp5 específico, P1F6, érevelado na Patente Internacional N5 WO 97/45447, o qual também é prefe-rencial de acordo com esta invenção. Um anticorpo ανββ seletivo adequadopreferencial é MAb 14D9.F8 (Patente Internacional N9 WO 99/37683, DSMACC2331, Merck KGaA, Alemanha) o qual é dirigido seletivamente para acadeia Otv de receptores de integrina. Outro anticorpo antiintegrina adequadoé o Vitraxin® comercializado.

O termo "anticorpo" ou "imunoglobulina" aqui, neste pedido depatente de patente, preferencialmente é usado no sentido mais amplo e es-pecificamente cobre anticorpos monoclonais intactos, anticorpos policlonais,anticorpos multiespecíficos (por exemplo, anticorpos biespecíficos) formadosde no mínimo dois anticorpos intactos, e fragmentos de anticorpos, na medi-da que apresentem a atividade biológica desejada. O termo geralmente in-clui heteroanticorpos os quais são compostos de dois ou mais anticorpos oufragmentos dos mesmos de diferentes especificidades de ligação os quaissão ligados juntos.

Dependendo da seqüência de aminoácidos de suas regiõesconstantes, anticorpos intactos podem ser atribuídos a diferentes "classesde anticorpos (imunoglobulina)". Há cinco classes principais de anticorposintactos: IgA, IgD, IgE, IgG, e IgM, e vários destes podem ser adicionalmentedivididos em "subclasses" (isotipos), por exemplo, IgGI1 lgG2, lgG3, lgG4,IgA, and lgA2. Os domínios constantes de cadeia pesada que correspondemàs diferentes classes de anticorpos são denominados α, δ, ε, γ e μ respecti-vamente. A classe principal preferencial para anticorpos de acordo com ainvenção é IgG, em mais detalhes IgGI e lgG2.

Anticorpos são geralmente glicoproteínas tendo um peso mole-cular de cerca de 150.000, compostas de duas cadeias leves (L) idênticas eduas cadeias pesadas (H) idênticas. Cada cadeia leve é ligada a uma cadeiapesada por uma ligação dissulfeto covalente, enquanto o número de liga-ções dissulfeto varia entre as cadeias pesadas de diferentes isotipos de i-munoglobulinas. Cada cadeia pesada e leve também tem pontes dissulfetointracadeia regularmente espaçadas. Cada cadeia pesada tem em uma ex-tremidade um domínio variável (VH) seguido por uma série de domíniosconstantes. As regiões variáveis compreendem regiões hipervariáveis ouregiões "CDR", as quais contêm o sítio de ligação antigênica e são respon-sáveis pela especificidade do anticorpo, e as regiões "FR", as quais são im-portantes com respeito à afinidade/avidez do anticorpo. A região hipervariá-vel geralmente compreende resíduos aminoácidos de uma "região determi-nante de complementaridade" ou "CDR" (por exemplo, resíduos 24-34 (L1),50-56 (L2) e 89-97 (L3) no domínio variável de cadeia leve e 31-35 (H1), 50-65 (H2) e 95-102 (H3) no domínio variável de cadeia pesada; e/ou os resí-duos de uma "alça hipervariável" (por exemplo, resíduos 26-32 (L1 ), 50-52(L2) e 91-96 (L3) no domínio variável de cadeia leve e 26-32 (H1), 53-55(H2) e 96-101 (H3) no domínio variável de cadeia pesada; Chothia e Lesk J.Mol. Biol. 196:901-917 (1987)).Os resíduos de "FR" (região de estrutura) sãoos resíduos de domínio variável diferente dos resíduos da região hipervariá-vel conforme definido aqui, neste pedido de patente de patente. Cada cadeialeve tem um domínio variável em uma extremidade (VL) e um domínio cons-tante em sua outra extremidade. O domínio constante da cadeia leve é ali-nhado com o primeiro domínio constante da cadeia pesada, e o domínio va-riável de cadeia leve é alinhado com o domínio variável da cadeia pesada.Acredita-se que resíduos aminoácidos particulares formem uma interfaceentre os domínios variáveis de cadeia leve e de cadeia pesada. As "cadeiasleves" de anticorpos de quaisquer espécies de vertebrados podem ser atri-buídas a um de dois tipos claramente distintos, denominados kappa (κ) elâmbda (λ), com based nas seqüências de aminoácido de seus domíniosconstantes.

O termo "anticorpo monoclonal" conforme usado aqui, preferen-cialmente refere-se a um anticorpo obtido de uma população de anticorpossubstancialmente homogêneos, isto é, os anticorpos individuais compreen-dendo a população são idênticos exceto por possíveis mutações que ocor-rem naturalmente que podem estar presentes em quantidades menores. An-ticorpos monoclonais são altamente específicos, sendo dirigidas contra umúnico sítio antigênico. Além disso, em contraste com preparações de anti-corpos policlonais as quais incluem diferentes anticorpos dirigidos contradiferentes determinantes (epitopos), cada anticorpo monoclonal é dirigidocontra um único determinante sobre o antígeno. Além de sua especificidade,os anticorpos monoclonais são vantajosos pelo fato de que podem ser sinte-tizados não contaminados por outros anticorpos. Métodos para preparar an-ticorpos monoclonais incluem o método do hibridoma descrito por Kohler eMilstein (1975, Nature 256, 495) e em "Monoclonal Antibody Technology,The Production and Characterization of Rodent and Human Hybridomasu(1985, Burdon et ai, Eds, Laboratory Techniques in Biochemistry and Mole-cular Biology, Volume 13, EIsevier Science Publishers, Amsterdam), ou po-dem ser preparados por meio de métodos de DNA recombinante de conhe-cimento geral (vide, por exemplo, a Patente dos Estados Unidos Ns US4.816.567). Anticorpos monoclonais também podem ser isolados das biblio-tecas de anticorpos de fagos usando as técnicas descritas em Clackson etai, Nature, 352:624-628 (1991) e Marks et ai, J. MoL Biol., 222:58, 1-597(1991), por exemplo.

O termo "anticorpo quimérico" preferencialmente significa anti-corpos nos quais uma porção da cadeia pesada e/ou leve é idêntica com ouhomóloga a seqüências correspondentes em anticorpos derivados de umaespécie em particular ou pertencente a uma classe ou subclasse de anticor-po em particular, enquanto o restante da uma ou mais cadeias é idênticacom ou homóloga a seqüências correspondentes em anticorpos derivadosde outra espécie ou pertencentes a outra classe ou subclasse de anticorpos,bem como fragmentos de similars anticorpos, na medida que apresentem aatividade biológica desejada (por exemplo,: Patente dos Estados Unidos NeUS 4.816.567; Morrison et aL, Proc. Nat. Acad. Sci., USA, 81:6851-6855 (1984)). Métodos para preparar anticorpos quiméricos e humanizadostambém são conhecidos na técnica. Por exemplo, métodos para prepararanticorpos quiméricos incluem os descritos nas patentes de Boss (CeIItech)e de Cabilly (Genentech) (Patente dos Estados Unidos N9 US 4.816.397;Patente dos Estados Unidos N2 US 4.816.567).

"Anticorpos humanizados" preferencialmente são formas de an-ticorpos quimérticos não humanos (por exemplo, de roedores) que contêmmínima seqüência derivada de imunoglobulina não humana. Na maior parte,anticorpos humanizados são imunoglobulinas humanas (anticorpo do recep-tor) nas quais resíduos de uma região hipervariável (CDRs) do receptor sãosubstituídos por resíduos de uma região hipervariável de uma espécie não-humana (anticorpo do doador) tais como camundongo, rato, coelho ou pri-mata não-humano tendo a especificidade, afinidade e capacidade deseja-das. Em alguns casos, resíduos da região de estrutura (FR) da imunoglobu-lina humana são substituídos por resíduos não-humanos correspondentes.

Além disso, anticorpos humanizados podem compreender resíduos que nãosão encontrados no anticorpo do receptor ou no anticorpo do doador. Estasmodificações são feitas para refinar adicionalmente a desempenho do anti-corpo. Em geral, o anticorpo humanizado compreenderá substancialmentetodos de no mínimo um, e tipicamente dois, domínios variáveis, nos quaistodas ou substancialmente todas as alças hipervariáveis correspondem àsde uma imunoglobulina não-humana e todas ou substancialmente todas asFRs são as de uma seqüência de imunoglobulina humana. O anticorpo hu-manizado opcionalmente também compreenderá no mínimo uma porção deuma região constante de imunoglobulina (Fc), tipicamente a de uma imuno-globulina humana. Métodos para preparar anticorpos humanizados são des-critos, por exemplo, por Winter (Patente dos Estados Unidos Nq US5.225.539) e Boss (Celltech, Patente dos Estados Unidos N9 US 4.816.397).

"Fragmentos de anticorpos" preferencialmente compreencemuma porção de um anticorpo intacto, preferencialmente compreendendo aregião variável ou de ligação antigênica do mesmo. Exemplos de fragmentosde anticorpos incluem fragmentos Fab, Fab', F(ab')2, Fv e Fc, diacor-pos, anticorpos lineares, moléculas de anticorpo de cadeia única; e anticor-pos multiespecíficos formados de um ou mais fragmentos de anticorpos. Umanticorpo "intacto" é um anticorpo o qual compreende uma região variável deligação antigênica bem como um domínio constante de cadeia leve (CL) edomínios constantes de cadeia pesada, CH1, CH2 e CH3. Preferencialmen-te, o anticorpo intacto tem uma ou mais funções efetoras. A digestão de anti-corpos por papaína produz dois fragmentos idênticos de ligação antigênica,denominados fragmentos "Fab", cada um compreendendo um único sítio deligação antigênica e uma região CL e uma região CH1, e um fragmento "Fe"residual, cujo nome reflete sua capacidade para cristalizar prontamente. Aregião "Fc" dos anticorpos compreende, via de regra, uma região CH2, CH3e a região de dobradiça de uma classe importante de anticorpos IgGI oulgG2. A região de dobradiça é um grupo de cerca de 15 resíduos aminoáci-dos os quais combinam a região CH1 com a região CH2-CH3. O tratamentocom pepsina produz um fragmento "F(ab')2" que tem dois sítios de ligaçãoantigênica e ainda é capaz de reticulação com antigênio. "Fv" é o fragmentode anticorpo mínimo o qual contém um sítio completo de reconhecimentoantigênico e de ligação antigênica. Esta região consiste em um dímero deuma cadeia pesada e um domínio variável de cadeia leve em firme associa-ção, não-covalente. É nesta configuração que as três regiões hipervariáveis(CDRs) de cada domínio variável interagem definindo um sítio de ligaçãoantigênica sobre a superfície do dímero VH - VL. Coletivamente, as seis re-giões hipervariáveis conferem especificidade de ligação antigênica ao anti-corpo. No entanto, mesmo um único domínio variável (ou metade de um Fvcompreendendo somente três regiões hipervariáveis específicas para umantígeno) tem a capacidade de reconhecer e ligar antígeno, embora em umamenor afinidade do que todo o sítio de ligação. O fragmento Fab tambémcontém o domínio constante da cadeia leve e o primeiro domínio constante(CH1)da cadeia pesada. Fragmentos " Fab1 " diferem de fragmentos Fabpela adição de uns poucos resíduos no término carbóxi do domínio de ca-deia pesada CH1 incluindo uma ou mais cisteínas da região de dobradiça deanticorpo. Fragmentos de anticorpos F(ab')2 originalmente foram produzidoscomo pares de fragmentos de Fab' os quais têm cisteínas de dobradiça en-tre os mesmos. Outras ligações químicas de fragmentos de anticorpos tam-bém são conhecidas (vide por exemplo, Hermanson1 Bioconjugate Techni-ques, Academic Press, 1996;. Patente dos Estados Unidos Ne US4.342.566). Fragmentos de anticorpos "Fv de cadeia única" ou "scFv" prefe-rencialmente compreendem os domínios de anticorpo V, e V, em que estesdomínios estão presentes em uma única cadeia de polipeptídeos. Preferen-cialmente, o polipeptídeo Fv compreende adicionalmente um Iigante de poli-peptídeo entre os domínios VH e VL o qual permite que o scFv forme a es-trutura desejada para ligação de antígeno. Anticorpos FV de cadeia únicasão conhecidos, por exemplo, de Plückthun (The Pharmacology of Monoclo-nal Anticorpos, Vol. 113, Rosenburg and Moore eds., Springer-Verlag, NewYork, pp. 269-315 (1994)), da Patente Internacional N9 WO 93/16185; daPatente dos Estados Unidos Ns US 5.571.894; da Patente dos Estados Uni-dos Ne US 5.587.458; Huston et ai (1988, Proc. Natl. Acad. Sei. 85, 5879)ou Skerra e Plueckthun (1988, Science 240, 1038).

"Anticorpos biespecíficós" preferencialmente são anticorpos úni-cos, divalentes (ou fragmentos imunoterapeuticamente eficazes dos mes-mos) os quais têm dois sítios de ligação antigênica diferentemente específi-cos. Por exemplo o primeiro sítio de ligação antigênica é dirigido para umreceptor de angiogênese (por exemplo, receptor de integrina ou VEGF re-ceptor), o passo que o segundo sítio de ligação antigênica é dirigido para umErbB receptor (por exemplo, EGFR ou Her 2). Anticorpos biespecíficós po-dem ser produzidos por técnicas químicas (vide por exemplo, Kranz et al.(1981) Proc. Natl. Acad. Sei. USA 78, 5807), por técnicas de "polidoma" (Vi-de a Patente dos Estados Unidos N9 US 4.474.893) ou por técnicas de DNArecombinante, as quais são conhecidas per se. Métodos adicionais são des-critos na Patente Internacional Ne WO 91/00360, na Patente Internacional N9WO 92/05793 e na Patente Internacional N9 WO 96/04305. Anticorpos bies-pecíficós também podem ser preparados a partir de anticorpos de cadeiaúnica (vide por exemplo, Huston etal. (1988) Proc. Natl. Acad. Sei. 85, 5879;Skerra and Plueckthun (1988) Science 240, 1038). Estes são análogos deregiões variáveis de anticorpos produzidas como uma única cadeia de poli-peptídeo. Para formar o agente de ligação biespecífico, os anticorpos de ca-deia única podem sér acoplados juntos quimicamente ou por métodos deengenharia genética conhecidos na técnica. Também é possível produziranticorpos biespecíficos de acordo com esta invenção usando seqüênciasde zíperes de leucina. As seqüências empregadas são derivadas de regiõesde zíperes de leucina dos fatores de transcrição Fos e Jun (Landschulz etal, 1988, Science 240,1759; pára revisão, vide Maniatis and Abel, 1989, Na-ture 341, 24). Zíperes de leucina são seqüências de aminoácidos específicosde cerca de 20 a 40 resíduos de extensão com leucina ocorrendo tipicamen-te em cada sétimo resíduo. As seqüências de zíperes referidas formam a-hélices anfipáticas, com os resíduos leucina revestidos sobre o lado hidrofó-bico para formação de dímeros. Peptídeos correspondentes aos zíperes deleucina das proteínas Fos e Jun formamj heterodímeros preferencialmente(O1Shea et ai, 1989, Science 245, 646). Anticorpos biespecíficos contendozíperes e métodos para preparar os mesmos também são revelados na Pa-tente Internacional Ns WO 92/10209 e na Patente Internacional N- WO93/11162. Um anticorpo biespecífico de acordo com a invenção pode ser umanticorpo, dirigido para VEGF receptor e ανβ3 receptor conforme distido a-cima com respeito ao anticorpos tendo única especificidade.

"Heteroanticorpos" preferencialmente são dois ou mais anticor-pos ou fragmentos de ligação de anticorpos os quais são ligados juntos, ca-da um destes tendo uma diferente especificidade de ligação. Heteroanticor-pos podem ser preparados conjugando junto dois ou mais anticorpos oufragmentos de anticorpos. Heteroanticorpos preferenciais consistem emfragmentos Fab/Fab' reticulados. Uma variedade de agentes de ligação oude reticulação podem ser usados para conjugar os anticorpos. São exemplosproteína A, carboimida, N-succinimidil-S-acetil-tioacetato (SATA) e N-succinimidil-3-(2-piridilditio) propionato (SPDP) (vide por exemplo, Karpovskyet ai (1984) J. EXP. Med. 160,1686; Liu et a. (1985) Proc. Natl. Acad. Sei.USA 82, 8648). Outros métodos incluem os descritos por Paulus, Behringlnst. Mitt., N9 78, 118 (1985); Brennan et a. (1985) Science 30 Method: 81 ouGlennie et aí. (1987) J. Immunol. 139, 2367. Outro método usa o-fenilenodimaleimida (oPDM) para ligar três fragmentos Fab1 (Patente Inter-nacional Ns WO 91/03493). Anticorpos multiespecíficos também são ade-quados no contexto desta invenção e podem ser preparados, por exemplo,de acordo com o ensinamento da Patente Internacional N2 WO 94/13804 eda Patente Internacional N9 WO 98/50431.

O termo "proteína de fusão" preferencialmente refere-se a umamolécula natural ou sintética consistindo em uma ou mais proteínas ou umou mais peptídeos ou fragmentos dos mesmos tendo diferente especificida-de os quais são fundidos juntos opcionalmente por uma molécula ligante.Como modalidade específica o termo inclui constructos de fusão, em que nomínimo uma proteína ou um peptídeo é uma imunoglobulina ou um anticor-po, respectivamente ou partes do mesmo ("imunoconjugados").

O termo "imunoconjugado" preferencialmente refere-se a umanticorpo ou uma imunoglobulina respectivamente, ou um fragmento imuno-Iogicamente eficaz dos mesmos, o qual é fundido por ligação covalente auma molécula não imunologicamente eficaz . Preferencialmente este parcei-ro de fusão é um peptídeo ou uma proteína, o qual pode ser glicosilado. Amolécula não anticorpo referida pode ser ligada ao C-terminal das cadeiaspesadas constantes do anticorpo ou aos N-terminais das cadeias variáveisleves e/ou pesadas. Os parceiros de fusão podem ser ligados através deuma molécula ligante, a qual é, via de regra, um peptídeo contendo 3 a 15resíduos aminoácidos. Imunoconjugados de acordo com a invenção consis-tem em uma imunoglobulina ou fragmento imunoterapeuticamente eficaz damesma, dirigida para uma tirosina quinase receptora, preferencialmente umErbB (ErbB1/ErbB2) receptor e um peptídeo antagonista de integrina, ou umreceptor angiogênico, preferencialmente um receptor de integrina ou VEGFreceptor e TNFa ou uma proteína de fusão consistindo essencialmente deTNFa e IFNyou outra citocina adequada, a qual é ligada com seu N-terminalao C-terminal da referida imunoglobulina, preferencialmente a porção Fc damesma. O termo também inclui constructos de fusão correspondentes com-preendendo imunoglobulinas bi- ou muItiespecíficas (anticorpos) ou fragmen-tos das mesmas.

O termo "derivado funcionalmente intacto" significa de acordocom o entendimento desta invenção preferencialmente um fragmento ouporção, modificação, variante, homólogo ou uma forma desimunizada (umamodificação, em que epitopos, os quais são responsáveis por reações imu-nes, são removidos) de um composto, peptídeo, proteína, anticorpo (imuno-globulina), imunconjugado, e etc., que tem principalmente a mesma funçãobiológica e/ou terapêutica comparado com o composto, peptídeo, proteína,anticorpo (imunoglobulina), imunconjugado, e etc. originais. No entanto, Otermo também inclui os derivados referidos, os quais provocam uma eficáciareduzida ou reforçada.

O termo "citocina" é preferencialmente um termo genérico paraproteínas liberadas por uma população celular a qual age sobre outra célulacomo mediacores intercelulares. Exemplos de similars citocinas são Iinfoci-nas, monocinas, e hormônios polipeptídicos tradicionais. Incluídos entre ascitocinas estão hormônio de crescimento tais como hormônio de crescimentohumano, hormônio de crescimento humano N-metionila, e hormônio de cres-cimento bovino; hormônio paratiroidiano; tiroxina; insulina; proinsulina; rela-xina; prorrelaxina; hormônios de glicoproteína tais como hormônio folículoestimulante (FSH), hormônio tiróide estimulante (TSH), e hormônio Iuteini-zante (LH); fator de crescimento hepático; fator de crescimento de fibroblas-tos; prolactina; lactogênio placentário; peptídeo associado com gonadotropi-na de camundongo; inibina; activina; fator de crescimento vascular endotelial(VEGF); integrina; trombopoietina (TPO); fatores de crescimento nervosotais como NGFP; fatores de crescimento plaquetário; fatores de crescimentotransformantes (TGFs) tais como TGFa e TGFP; eritropoietina (EPO); inter-ferons tais como IFNa, IFNp, e IFNy; fatores estimulantes de colônias taiscomo M-CSF, GM-CSF e G-CSF; interleucinas tais como IL-1, IL-Ia, IL-2, IL-3, IL-4, IL-5, IL-6, IL-7, IL-8, IL-9, IL-10, IL-11, IL-12; eTNFoc ou TNFp. cito-cinas preferenciais de acordo com a invenção são interferons e TNFa.

O termo "agente citotóxico" conforme usado aqui, preferencial-mente refere-se a uma substância que inibe ou previne a função de célulase/ou causa destruição das células. O termo pretende incluir preferencialmen-te isótopos radioativos, agentes quimioterápicos, e toxinas tais como toxinasenzimaticamente ativas de origem bacteriana, fúngica, vegetal ou animal, oufragmentos das mesmas. O termo pode incluir também membros da famíliadas citocinas, preferencialmente IFNy bem como agentes antineoplásicostambém tendo atividade citotóxica.

O termo "agente quimioterápico", "agente quimioterapêutico" ou"agente antineoplásico" é considerado de acordo com o entendimento destainvenção preferencialmente como um membro da classe de "agentes citotó-xicos", conforme especificado acima, e inclui agentes químicos que exercemefeitos antineoplásicos, isto é, evitam o desenvolvimento, a maturação, oudisseminação de células neoplásicas, diretamente sobre a célula tumoral,por exemplo, por efeitos citostáticos ou citotóxicos, e não indiretamente atra-vés de mecanismos tais como modificação da reação biológica. Agentesquimioterápicos adequados de acordo com a invenção são preferencialmen-te compostos químicos naturais ou sintéticos, mas moléculas biológicas, taiscomo proteínas, polipeptídeos e etc. não são expressamente excluídos. Hágrandes números de agentes antineoplásicos disponíveis em uso comercial,em avaliação clínica e em desenvolvimento pré-clínico, os quais podem serincluídos na presente invenção para tratamento de tumores/neoplasia porterapia de combinação com TNFa e os agentes anti-angiogênicos conformecitado acima, opcionalmente com outros agentes tais como antagonistas deEGF receptores. Deve ser salientado que os agentes quimioterápicos podemser administrados opcionalmente junto com a combinação de fármacos refe-rida acima. Exemplos de quimioterapêuticos ou agentes incluem agentesalquilantes, por exemplo, mostardas de nitrogênio, compostos de etilenoimi-na, sulfonatos de alquila e outros compostos com uma ação alquilante taiscomo nitrosouréias, cisplatina e dacarbazina; antimetabólitos, por exemplo,ácido fólico, antagonistas de purina ou pirimidina; inibidores mitóticos, porexemplo, vinca alcalóides e derivados de podofilotoxina; antibióticos citotóxi-co e derivados de camptotecina. Agentes quimioterápicos ou quimioterapiapreferenciais incluem amifostina (etiol), cisplatina, dacarbazina (DTIC), dac-tinomicina, mecloretamina (mostarda de nitrogênio), estreptozocina, ciclofos-famida, carrnustina (BCNU), Iomustina (CCNU), doxorrubicina (adriamicina),doxorrubicina Iipo (dòxil), gencitabina (gemzar), daunorrubicina, daunorrubi-cina Iipo (daunoxome), procarbazine, mitomicina, citarabina, etoposídeo, me-totrexato, 5-fluorouracil (5-FU), vinblastina, vincristina, bleomicina, paclita-xel (taxol), docetaxel (taxotere), aldesleucina, asparaginase, bussulfan, car-boplatina, cladribina, camptotecina, CPT-11, 10-hidróxi-7-etil-camptotecina(SN38), dacarbazina, floxuridina, flüdarabina, hidroxiuréia, ifosfamida, idar-rubicina, mesna, alfa interferon, beta interferon, irinotecan, mitoxantrone,topotecan, leuprolida, megestrol, melfalan, mercaptopurina, plicâmicina, mi-totano, pegaspargase, pentostatin, pipobroman, plicamicina, estreptozocina,tamoxifen, teniposídeo, testolactona, tioguanina, tiotepa, mostarda de uraci-la, vinorelbina, clorambucil e combinações dos mesmos.

Agentes quimioterápicos preferenciais de acordo com a inven-ção incluem cisplatina, gencitabina, temozolomida, doxorrubicina, paclitaxel(taxol) e bleomicina.

O termo "imunotóxico" preferencialmente refere-se a um agenteo qual combina a especificidade de uma imunomolécula .por exemplo, umanticorpo ou um equivalente funcional do mesmo com uma porção tóxica,por exemplo, uma função citotóxica conforme definido acima.

Exemplos adicionais de agentes coterapêuticos contra câncer epreferencialmente de agentes quimioterápicos, agentes citotóxicos, agentesimunomoduladores e/ou agentes imunotóxicos preferencialmente incluemanticorpos contra um ou mais alvos, preferencialmente selecionados entre ogrupo consistindo em HER, HER2, PDGF1 PDGFR, EGF1 EGFR, VEGF,VEGFR e/ou VEGFR2, em que os referidos anticorpos são preferencialmen-te selecionados entre Herceptin, Bevacizumab (rhuMAb-VEGF, Avastin®),Cetuximab (Érbitux®) e Nimotuzumab, e preferencialmente moléculas pe-quenas ou NCEs contra um ou mais dos alvos referidos, preferencialmenteselecionados entre o grupo consistindo em Sorafenib (Nexavar®), Sunitinib(Sutent®) e ZD6474 (ZACTIMA®).

Em um aspecto preferencial da presente invenção, os agentesquimioterápicos, agentes citotóxicos, agentes imunomoduladores e/ou agen-tes imunotóxicos são selecionados entre um ou mais dos seguintes grupos:a) agentes alquilantes,

b) antibióticos,

c) antimetabólitos,

d) biológicos e imunomoduladores,

e) hormônios e antagonistas dos mesmos,

f) derivados do gás mostarda,

g) alcalóides,

h) inibidores da quinase protéica.

Em um aspecto mais preferencial da presente invenção, os a-gentes quimioterápicos, agentes citotóxicos, agentes imunomoduladorese/ou agentes imunotóxicos são selecionados entre um ou mais dos seguin-tes grupos:

a) agentes alquilantes, selecionados entre bussulfan, melfalan,carboplatina, cisplatina, ciclofosfamida, dacarbazina, carmustina (BCNU),nimustin (ACNU), Iomustina (CCNU), ifosfamida, temozolomida e altretamina,

b) antibióticos, selecionados entre leomicina, doxorrubicina, a-driamicina, idarrubicina, epirrubicina e plicamicina,

c) antimetabólitos, selecionados entre sulfonamidas, antagonis-tas de ácido fólico, gencitabina, 5-fluorouracil (5-FU), leucovorina, Ieucovori-na com 5-FU, 5-FU com folinato de cálcio, e leucovorin, capecitabina, mer-captopurina, cladribina, pentostatina, -metotrexato, raltitrexed, pemetrexed,tioguanina, derivados de camptotecina (topotecan, irinotecan)

d) biológicos e imunomoduladores, selecionados entre interferona2A, interleucina 2 e levamisol,

e) hormônios e antagonistas dos mesmos, selecionados entreflutamida, goserelin, mitotano e tamoxífen,

f) derivados do gás mostarda, selecionados entre melfalan, car-mustina e mostarda de nitrogênio,

g) alcalóides, selecionados entre taxanos, docetaxel, paclitaxel,etoposídeo, vincristina, vinblastina e vinorelbina.

Dosagens e preferencialmente esquemas de administração derotina para os agentes coterapêuticos contra câncer dados acima são co-nhecidos na técnica.

Os termos "câncer" e "tumor" preferencialmente refere-sem a oudescrevem a condição fisiológica em mamíferos que se caracteriza tipica-mente por crescimento celular desregulado. Por meio das composições far-macêuticas de acordo com a presente invenção tumores podem ser tratadostais como tumores da mama, coração, pulmão, intestino delgado, colon, ba-ço, rim, bexiga, cabeça e pescoço, ovário, próstata, cérebro, pâncreas, pele,osso, medula óssea, sangue, timo, útero, testículos, colo uterino, e fígado.Mais especificamente o tumor é selecionado entre o grupo consistindo emadenoma, angiossarcoma, astrocitoma, carcinoma epitelial, germinoma, gli-oblastoma, glioma, hamartoma, hemangioendothelioma, hemangiossarcoma,hematoma, hepato-blastoma, leucemia, linfoma, meduloblastoma, melano-ma, neuroblastoma, osteossarcoma, retinoblastoma, rabdomiossarcoma,sarcoma e teratoma.

Em detalhes, o tumor/câncer é selecionado entre o grupo consis-tindo em melanoma acral lentiginoso, ceratoses actínicas, adenocarcinoma,carcinoma adenóide cístico, adenomas, adenossarcoma, carcinoma adeno-escamoso, tumores astrocíticos, carcinoma da glândula de bartholin, carci-noma celular basal, carcinomas de glândulas bronquiais, capilar, carcinói-des, carcinoma, carcinossarcoma, colangio-carcinoma, cavernoso, condros-sarcoma, papiloma/carcinoma do plexo coróide, carcinoma de células claras,cistadenoma, tumor do seio endodermal, hiperplasia endometrial, sarcomaestromal endometrial, adenocarcinoma endometrióide, ependimal, epiteliói-de, sarcoma de Ewing, fibrolamelar, hiperplasia nodular focai, gastrinoma,tumores de células germinativas, glioblastoma, glucagonoma, hemangiblas-tomas, hemangioendotelioma, hemangiomas, adenoma hepático, adenoma-tose hepática, carcinoma hepatocelular, insulinoma, neoplasia intraepiteli-al, neoplasia interepitelial de células escamosas, carcinoma invasivo de célu-las escamosas, carcinoma de células grandes, leiomiossarcoma, melanomasde Ientigos malignos, melanoma maligno, tumores mesoteliais malignos,meduloblastoma, meduloepitelioma, melanoma, meníngeal, mesotelial, car-cinoma metastático, carcinoma mucoepidermóide, neuroblastoma, adeno-carcinoma neuroepitelial melanoma nodular, carcinoma de células de aveia,oligodendroglial, osteossarcoma, polipeptídeo pancreático, adeno-carcinomaseroso papilar, célula pineal, tumores da pituitária, plasmacitoma, pseudos-sarcoma, blastoma pulmonar, carcinoma de células renais, retinoblastoma,rabdomiossarcoma, sarcoma, carcinoma seroso, carcinoma de células pe-quenas, carcinomas de tecidos moles, tumor secretor de somatostatina, car-cinoma escamoso, carcinoma de células escamosas, submesotelial, mela-noma de disseminação superficial, carcinoma indiferenciado, melanoma u-veal, carcinoma verrucoso, vipoma, carcinoma bem diferenciado, e tumor deWilms. Mais preferencialmente, o tumor/câncer é selecionado entre o grupoconsistindo em câncer intracerebral, câncer de cabeça e pescoço, câncerretal, astrocitoma, preferencialmente astrocitoma grau II, Ill ou IV, glioblas-toma, preferencialmente glioblastoma multiforme (GBM), câncer pulmonar decélulas pequenas (SCLC) e câncer pulmonar de células não-pequenas (NS-CLC), preferencialmente câncer pulmonar de células não-pequenas (NS-CLC), melanoma metastático, câncer de próstata metastático independentede androgênio (AIPCa), câncer de próstata metastático dependente de an-drogênio (ADPCa) e câncer de mama. Ainda mais preferencialmente, o tu-mor/câncer é selecionado entre o grupo consistindo em astrocitoma, prefe-rencialmente astrocitoma grau II, Ill ou IV, glioblastoma, preferencialmenteglioblastoma multiforme, câncer pulmonar de células pequenas (SCLC) ecâncer pulmonar de células não-pequenas (NSCLC), preferencialmente cân-cer pulmonar de células não-pequenas (NSCLC), melanoma metastático,câncer de próstata metastático independente de androgênio (AIPCa), câncerde próstata metastático dependente de androgênio (ADPCa). Além disso,mais preferencialmente, o tumor/câncer é selecionado entre metástases,preferencialmente metástases cerebrais, de câncer pulmonar de células pe-quenas (SCLC) e câncer pulmonar de células não-pequenas (NSCLC), pre-ferencialmente câncer pulmonar de células não-pequenas (NSCLC), mela-noma metastático, câncer de próstata metastático independente de andro-gênio (AIPCa), câncer de próstata metastático dependente de androgênio(ADPCa) e câncer de mama.

As "composições farmacêuticas" da invenção podem compreen-der agentes que reduzem ou evitam efeitos colaterais associados com a te-rapia de combinação da presente invenção ("terapia adjuntiva"), incluindo,mas não limitados a, os agentes, por exemplo, que reduzem o efeito tóxicode fármacos anticancerígenos, por exemplo, inibidores da reabsorção ós-sea, agentes cardioprotetores. Os agentes adjuntivos referidos previnem oureduzem a incidência de náusea e vômito associados com quimioterapi-a, radioterapia ou operação, ou reduzem a incidência de infecção associadacom a administração de fármacos anticancerífenos mielossupressores. A-gentes adjuntivos são de conhecimento geral na técnica. Os agentes imuno-terapêuticos de acordo com a invenção podem ser administrados adicional-mente com adjuvantes como BCG e estimuladores do sistema imune. Alémdisso, as composições podem incluir agentes imunoterapêuticos ou agentesquimioterápicos os quais contêm isótopos radiomarcados eficazes citotóxi-cos, ou outros agentes citotóxicos, tais como alguns peptídeos citotóxicos(por exemplo, citocinas) ou fármacos citotóxicos e similars.

O termo "kit farmacêutico" para tratar tumores ou metástasestumorais refere-se a um pacote e, via de regra, instruções para usar os rea-gentes em métodos para tratar tumores e metástases tumorais. Um reagenteem um kit desta invenção é tipicamente formulado como uma composiçãoterapêutica conforme descrito aqui e portanto pode ser em qualquer um deuma variedade de formas adequadas para distribuição em um kit. As for-mas referidas podem incluir um líquido, pó, comprimido, suspensão e a for-mulação similar para proporcionar o antagonista e/ou a proteína de fusão dapresente invenção. Os reagentes podem ser proporcionados dentro de reci-pientes separados adequados para administração separadamente de acordocom os presentes métodos, ou alternativamente podem ser proporcionadoscombinados em uma composição em um único recipiente na embalagem. Aembalagem pode conter uma quantidade suficiente para uma ou mais dosa-gens de reagentes de acordo com os métodos de tratamento descritos aqui.Um kit desta invenção também contém "instruções para uso" dos materiaiscontidos dentro da embalagem.

Conforme usado aqui, os termos "fármaceuticamente aceitável"e variações gramáticas do mesmo, uma vez que refere-sem a composições,carregadores, diluentes e reagentes, são usados de modo intercambiável erepresentam que os materiais são capazes de administração a ou em ummamífero sem a produção de efeitos fisiológicos indesejáveis tais como náu-sea, vertigem, indisposição gástrica e similars. A preparação de uma com-posição farmacológica que contém ingredientes ativos dissolvidos ou disper-sados na mesma é de entendimento geral na técnica e não precisa ser limi-tada com base na formulação. Tipicamente, as composições referidas sãopreparadas como injetáveis ou como soluções ou suspensões líquidas, noentanto, formas sólidas adequadas para solução, ou suspensões, em líquidoantes do uso também podem ser preparadsa. A preparação também podeser emulsificada. O ingrediente ativo pode ser misturado com excipientes osquais são farmaceuticamente aceitáveis e compatíveis com o ingredienteativo e em quantidades adequadas para uso nos métodos terapêuticos des-critos aqui, neste pedido de patente de patente. Excipientes adequados são,por exemplo, água, solução salina, dextrose, glicerol, etanol ou similares ecombinações dos mesmos. Além disso, caso desejado, a composição podeconter quantidades menores de substâncias auxiliares tais como agentesumectantes ou emulsificantes, agentes de tamponamento de pH e similarsos quais reforçam a eficácia do ingrediente ativo. A composição terapêuticada presente invenção pode incluir sais farmaceuticamente aceitáveis doscomponentes na mesma. Sais farmaceuticamente aceitáveis incluem os saisde adição de ácido (formados com os grupos amino livres do polipeptídeo)que são formados com ácidos inorgânicos tais como, por exemplo, ácidosclorídricos ou fosfóricos, ou ácidos orgânicos semelhantes como acético,tartárico, mandélico e similars. Sais formados com os grupos carboxila livrestambém podem ser derivados de bases inorgânicas tais como, por exemplo,hidróxidos de sódio, potássio, amônio, cálcio ou férrico, e bases orgânicassemelhantes como isopropilamína, trimetilamina, 2-etilamino etanol, histidi-na, procaína e similars. Particularmente preferencial é o sal de HCI quandousado na preparação de αν antagonistas de polipeptí-deos cíclicos. Carregadores fisiologicamente toleráveis são de conhecimentogeral na técnica. Exemplos de carregadores líquidos são soluções aquosasestéreis que não contêm materiais além dos ingredientes ativos e água, oucontêm um tampão tal como fosfato de sódio em valor de pH fisiológico, so-lução salina fisiológica ou ambos, tais como solução salina tamponada comfosfato. Ainda adicionalmente, carregadores aquosos podem conter mais deum sal de tampão, bem como sais tais como cloretos de sódio e potássio,dextrose, polietileno glicol e outros solutos. Composições líquidas tambémpodem conter fases líquidas além de e com a exclusão de água. Exemplosde similars fases líquidas adicionais são glicerina, óleos vegetais tais comoóleo de semente de algodão, e emulsões de água-em-óleo.

Tipicamente, uma quantidade terapeuticamente eficaz de umagente imunoterapêutico sob a forma de, por exemplo, um anticorpo oufragmento de anticorpo ou conjugado de anticorpo é uma quantidade tal quequando administrado em composição fisiologicamente tolerável é suficientepara obter uma concentração plasmática de a partir de cerca de0,01 micrograma ^g) por mililitro (ml) a cerca de 100jig/ml, preferencial-mente a partir de cerca de 1 μg/ml a cerca de 5 μg/ml e geralmente cerca de5 μg/ml. Dito de modo diferente a dosagem pode variar a partir de cerca de0,1 mg/kg a cerca de 300 mg/kg, preferencialmente a partir de cerca de 0,2mg/kg a cerca de 200 mg/kg, mais preferencialmente a partir de cerca de 0,5mg/kg a cerca de 20 mg/kg, em uma ou mais administrações de doses diari-amente por um ou vários dias. Onde o agente imunoterapêutico está sob aforma de um fragmento de um anticorpo monoclonal ou um conjugado, aquantidade pode ser prontamente ajustada com base na massa do fragmen-to/conjugado relativo à massa do anticorpo inteiro. Uma concentração plas-mática preferencial em molaridade é a partir de cerca de 2 micromolar (μΜ)a cerca de 5 milimolar (mM) e preferencialmente, cerca de 100 μΜ a 1 mMde antagonista de anticorpos. Uma quantidade terapeuticamente eficaz deum agente de acordo com esta invenção o qual é um peptídeo não-imunoterapêutico ou um polipeptídeo de proteína (por exemplo, IFN-alpha),ou outra molécula pequena de tamanho similar, é tipicamente uma quantida-de de polipeptídeo tal que quanto administrada em uma composição fisiolo-gicamente tolerável é suficiente para obter uma concentração plasmática dea partir de cerca de 0,1 micrograma (μς) por mililitro (ml) a cerca de 200μς/ml, preferencialmente a partir de cerca de 1 μς/ml a cerca de 150 μςml.Com base em um polipeptídeo tendo uma massa de cerca de 500 gramaspor mol, a concentração plasmática preferencial em molaridade é a partir decerca de 2 micromolar (μΜ) a cerca de 5 milimolar (mM) e preferencialmentecerca de 100 μΜ a 1 mM de antagonista de polipeptídeos. A dosagem típicade um agente ativo, o qual é preferencialmente um antagonista químico ouum agente quimioterápico (químico) de acordo com a invenção (nem um a-gente imunoterapêutico nem uma proteína/um peptídeo não-imunoterapêutico) é 10 mg a 1000 mg, preferencialmente cerca de 20 a 200mg, e mais preferencialmente 50 a 100 mg por quilograma de peso corporalpor dia. A dosagem preferencial dê um agente ativo, o qual é preferencial-mente um antagonista químico ou um agente quimioterápico (químico) deacordo com a invenção (nem um agente imunoterapêutico nem uma proteí-na/um peptídeo não-imunoterapêutico) é 0,5 mg a 3000 mg por paciente edia, mais preferencialmente 10 a 2500 mg por paciente e por dia, e especi-almente 50 a 1000 mg por paciente e por dia, ou, por quilograma de pesocorporal, preferencialmente cerca de 0,1 a 100 mg/kg, e mais preferencial-mente 1 mg a 50 mg/kg, preferencialmente por unidade de dosagem e maispreferencialmente por dia, ou, por metro quadrado da superfície corporal,preferencialmente 0,5 mg a 2000 mg/m2, mais preferencialmente 5 a 1500mg/m2, e especialmente 50 a 1000 mg/m2, preferencialmente por unidade dedosagem e mais preferencialmente por dia.

O termo "terapeuticamente eficaz" ou "quantidade terapeutica-mente eficaz" refere-se a uma quantidade de um fármaco eficaz para trataruma doença ou distúrbio em um mamífero. No caso de câncer, a quantidadeterapeuticamente eficaz do fármaco pode reduzir o número de células can-cerígenas; reduzir o tamanho do tumor; inibir (isto é, retardar em alguma ex-tensão e preferencialmente parar) a infiltração de células cancerígenas nosórgãos periféricos; inibir (isto é, retardar em alguma extensão e preferenci-almente parar) metástase tumoral; inibir, em alguma extensão, o crescimen-to do tumor; e/ou aliviar em alguma extensão um ou mais dos sintomas as-sociados com o câncer. Na medida que o fármaco possa prevenir cresci-mento e/ou matar células cancerígenas existentes, pode ser citostático e/oucitotóxico. Para terapia contra câncer, a eficácia pode ser medida, por e-xemplo, avaliando o tempo para progressão da doença (TTP) e/ou determi-nando a taxa de resposta (RR).

Conforme usado aqui, neste pedido de patente de patente, otermo "derivado fisiològicamente funcional " preferencialmente refere-se aqualquer derivado farmaceuticamente aceitável de um composto a ser usadode acordo com a presente invenção, por exemplo, um éster ou uma amida,que na administração a um mamífero é capaz de proporcionar (direta ou in-diretamente) um composto da presente invenção ou um metabólito ativo domesmo. Os derivados referidos são evidentes para os versados na técnica,sem indevida experimentação, e com referência ao ensinamento da Burger1SMedicinal Chemistry And Drug Discovery, 5th Edition, Vol 1: Principies andPractice, que é incorporada aqui, a este pedido de patente de patente, pormeio de referência na medida que ensina derivados fisiologicamente funcio-nais.

Conforme usado aqui, neste pedido de patente de patente, otermo "solvato" preferencialmente refere-se a um complexo de estequiome-tria variável formada por um soluto (nesta invenção, um Iigante de integrinaespecífico e/ou um agente coterapêutico adicional contra câncer (ou um salou derivado fisiologicamente funcional do mesmo)) e um solvente. Os sol-ventes referidos para os fins da invenção podem não interferir com a ativida-de biológica do soluto. Exemplos de solventes adequados incluem, mas nãoestão limitados a, água, metanol, etanol e ácido acético. Preferencialmente osolvente usado é um solvente farmaceuticamente aceitável. Exemplos desolventes farmaceuticamente aceitáveis incluem, sem limitação, água, etanole ácido acético. Mais preferencialmente o solvente usado é água. Sais far-maceuticamente aceitáveis de compostos a serem usados de acordo com ainvenção e sua preparação são conhecidos na técnica. Se o próprio compos-to não for um sal, pode ser facilmente transferido para um sal por adição deum ácido farmaceuticamente aceitável ou de uma base farmaceuticamenteaceitável. Ácidos e bases farmaceuticamente aceitáveis são conhecidos natécnica, por exemplo, a partir da literatura citada aqui, neste pedido de pa-tente de patente.

Os compostos a serem usados de acordo com a invenção, preferencialmente o ligante de integrina específico e/ou no mínimo um agentecoterapêutico adicional contra câncer diferente de no mínimo um ligante deintegrina específico, pode ser administrado geralmente ao paciente sob umaforma e em um modo ou maneira que é de conhecimento na técnica para oscompostos respectivos ou classe de compostos, por exemplo, conformedescrito aqui, neste pedido de patente de patente, ou conforme descrito naliteratura citada aqui, neste pedido de patente de patente.

O ligante de integrina específico ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVaI) é preferencialmente aplicado como um sal farmaceuticamente acei-tável, mais preferencialmente o sal de cloridrato farmacologicamente aceitá-vel, e especialmente e preferencialmente aplicado como o sal interior (ouinterno), o qual é o composto ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) comò tal.

Com respeito ao Iigante de integrina específico ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVaI), os seguintes tipos de escrito do nome devem ser consi-derados preferencialmente como equivalentes:

ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) = ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val) =ciclo(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) = ciclo(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val) =CRGDfNMeV = C(RGDfNMeV).

Resultados recentes mostram que a inibição de integrinas, es-pecialmente ανβ3 e/ou ανβ5, comumente expressadas em várias célulascancerosas, tais como glioblastoma, pode reduzir significativamente a resis-tência para radiação ionizante de células cancerosas radiorresistentes demodo diverso e/ou pode induzir um aumento da sensibilidade de célulascancerosas para radiação ionizante. Radiação ionizante a este respeito épreferencialmente radiação de feixe externo e especialmente radiação defeixe externo fracionádo.

Especialmente com respeito a tumores cerebrais primários, taiscomo astrocitoma e glioblastoma multiforme, uma percentagem significativados pacientes morrerá de uma recidiva originada nos campos da radiação,provavelmente em conseqüência de baixa sensibilidade tumoral a radiaçãocausada por uma ativação da sinalização de sobrevida. Esta aumentada re-sistência a radiação (a seguir denominada "radiorresistência") é devida àmodulação de diferentes caminhos de transdução de sinais biológicos e auma conversação cruzada entre as células tumorais e seu microambiente.

Por conseguinte, ligantes de integrina específicos, especialmen-te ligantes de integrina específicos para ανβ3 e/ou ανβ5 integrinas de acordocom a invenção pode ser aplicados com sucesso para melhorar a eficácia devários agentes coterapêuticos contra câncer e especialmente a eficácia daterapia de radiação. Terapia de radiação a este respeito é preferencialmenteradiação de feixe externo e especialmente radiação de feixe externo fracio-nado.

Glioblastoma (GBM, Astrocitoma, Organização Mundial de Saú-de Grau IV), também denominado Glioblastomamultiforma ou Glioblastomamultiforme, são tumores cerebrais invasivos com um mau prognóstico, euma sobrevida média independente de tratamento de em torno de 14 a 15meses. De modo geral, tumores localmente invasivos inevitavelmente recidi-vam, quer tratados com cirurgia, quimioterapia ou irradiação. O estado cor-rente do regime da técnica ("protocolo EORTC", conforme estabelecido porStupp e colaboradores) usa RTX graduada acompanhada pelo agente cito-tóxico temozolomida (vide especialmente R.Stupp et al., NEJM 2005). Até omomento, este no máximo estendeu a espectativa de vida dos pacientes poralguns meses.

Glioblastoma é altamente vascularizado, e o processo angiogê-nico é necessário para desenvolvimento tumoral. Tanto a vasculatura doGBM quanto os próprios GBMs superexpressam a integrina ανβ3· Foi de-monstrado in vitro que isto suporta a sobrevida de linhagens de células deGBM, bem como é uma característica de endotélios angiogênicos, dirigidospara dentro do ciclo celular por fatores de crescimento derivados de tumorescomo VEGF. A inibição de ανββ sobre células endoteliais e linhagens de cé-lulas de glioblastoma isoladas induz morte celular, e pode ativar apoptose.Também foi demonstrado que RTX induz expressão de Ονββ sobre célulasendoteliais. Juntos estes dados sugerem que ανββ pode suportar a sobrevidado compartimento vascular e tumoral do GBM.

Cilengitide é um pentapeptídeo cíclico que liga especificamentea alfa-v integrinas, notavelmente a 0^3, e inibe sua ativação por seus Iigan-tes dentro da matriz extracelular. Cilengitide preferencialmente induz apop-tose em culturas de células endoteliais e de GBM.

Um estudo clínico fase I usou tratamento com cilengitide em umestudo de aumento progressivo da dose sobre vários tumores cerebrais(NABT 9911). Em alguns dos pacientes com GBM neste estudo, foi vistauma indicação da reação. Cilengitide (= ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val),em contraste muito acentuado com a maioria dos terapêuticos contra cânceratualmente em uso tem um perfil de efeito colateral muito inócuo, sem MTDconhecido em seres humanos - e é muito bem-tolerado.

Além da mortalidade de essencialmente 100% em pacientescom GBM (índice de sobrevida de 2 anos de cerca de 25%), a morbidez apartir de complicações neurológicas também degrada rapidamente a quali-dade de vida (QOL).

Portanto, é um objeto da presente invenção proporcionar umtratamento mais eficaz e melhor tolerado para pacientes com GBM levandoa reforço da qualidade de vida e aumento da sobrevida média, preferencial-mente tanto em pacientes com GBM depois da 1a recidiva como no trata-mento de pacientes com GBM de primeira linha.

Portanto, um objeto preferencial da presente invenção é um mé-todo de tratamento de GBM, compreendendo administração de Cilengitidepor infusão i.v. em pacientes com GBM, preferencialmente pacientes comGBM depois da 1a recidiva, mais preferencialmente pacientes com GBMrecém-diagnosticados (tratamento de 1a linha), preferencialmente até a pro-gressão do tumor, doença estável ou ocorrer a cura. Neste método de trata-mento, a Cilengitide preferencialmente é administrada duas vezes por se-mana (por exemplo, q3q4), preferencialmente em uma infusão i.v. de cercade 1 h, preferencialmente em infusão de solução salina, e preferencialmenteou em 500 mg de dose exata ou 2000 mg de dose exata.

Vantajosamente, MRI e indicações neurológicas de respostatumoral objetiva a este método de tratamento também podem ser mostradasno mínimo 20% dos pacientes de GBM confirmados patologicamente sobterapia.

Este método de tratamento pode ser combinado opcional, parcialou totalmente, com administração de um ou mais agentes coterapêuticoscontra câncer, preferencialmente conforme descrito aqui, neste pedido depatente de patente.

Além disso, devido às propriedades sinérgicas de reforço da efi-cácia do Iigante de integrina específico Cilengitide com vários agentes cote-rapêuticos contra câncer, a combinação de Cilengitide, no mínimo um quimi-oterápico e radiação de feixe externo é um aspecto preferencial da presenteinvenção.

Por exemplo, o padrão de tratamento de glioblastoma multifor-me, associando radioterapia e temozolomida, somente aumentou a sobrevi-da média de pacientes ressecados por 2,5 meses (12,1 14,6 meses),comparado com somente radioterapia (Stupp et al., 2005). No entanto, emcombinação com no mínimo um ligánte de integrina específico de acordocom a invenção, preferencialmente selecionado entre Vitaxin, Abegrin, CN-T095 e ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val), mais preferencialmente selecio-nado entre Vitaxin, Abegrin e ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val) e especiale preferencialmente ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val), este tratamento derotina apresenta eficácia significativamente aprimorada com respeito a umaumento da sobrevida média e da qualidade de vida. Por conseguinte, estacombinação de radioterapia, temozolomida e no mínimo um Iigante de inte-grina específico conforme descrito aqui, neste pedido de patente de patente,é um aspecto preferencial da presente invenção.

Portanto, combinações de no mínimo um Iigante de integrinaespecífico conforme descrito aqui, neste pedido de patente de patente, e nomínimo um agente coterapêutico contra câncer conforme descrito aqui, nes-te pedido de patente de patente, pode ser usado de modo eficaz para tratarcrescimento de tumor intracerebral no cérebro de um hospedeiro. O cresci-mento de tumor intracerebral no cérebro de um hospedeiro de acordo com ainvenção inclui, mas não está limitado a tumores cerebrais primários, astroci-toma, tais como astrocitoma grau I a IV (WHO), e especialmente glioblasto-ma multiforme. O crescimento de tumor intracerebral preferencialmente tam-bém inclui metástases intercerebrais dos outros tipos de câncer, preferenci-almente tipos de câncer selecionados entre câncer pulmonar de células pe-quenas e câncer pulmonar de células não-pequenas, preferencialmente cân-cer pulmonar de células não-pequenas, câncer de mama, melanoma metas-tático, câncer de próstata metastático independente de androgênio, câncerde próstata metastático dependente de androgênio, e mais preferencialmen-te de câncer de mama, câncer pulmonar de células pequenas e especial-mente câncer pulmonar de células não pequenas.

Portanto, a presente invenção preferencialmente também refere-se ao uso de

a) (uma composição contendo) no mínimo um Iigante de integrina especí-fico, e

b) no mínimo um agente coterapêutico adicional contra câncer diferentede no mínimo um Iigante de integrina específico de a)

para a fabricação de um medicamento para o tratamento de crescimentotumoral intracerebral no cérebro de um hospedeiro, preferencialmente tumo-res cerebrais primários e especialmente astrocitoma.

Mais preferencialmente, a invenção também refere-se ao uso de

a) (uma composição contendo) no mínimo um Iigante de integrina especí-fico, e

b) no mínimo um agente coterapêutico adicional contra câncer diferentede no mínimo um Iigante de integrina específico de a)

para a fabricação de um medicamento para o tratamento de crescimentotumoral intracerebral no cérebro de um hospedeiro, preferencialmente turno-res cerebrais primários e especialmente astrocitoma, em que no mínimo umligante de integrina específico é selecionado entre Vitaxin, Abegrin, CNT095e ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val), preferencialmente selecionado entreVitaxin, Abegrin e ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val), mais preferencialmen-te ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val).

Mais preferencialmente, a invenção também refere-se ao uso de

a) (uma composição contendo) no mínimo um Iigante de integrina especí-fico, e

b) no mínimo um agente coterapêutico adicional contra câncer diferentede no mínimo um Iigante de integrina específico de a)

para a fabricação de um medicamento para o tratamento de crescimentotumoral intracerebral no cérebro de um hospedeiro, preferencialmente tumo-res cerebrais primários e especialmente astrocitoma em que no mínimo umligante de integrina específico é selecionado entre Vitaxin, Abegrin e ciclo-(Arg-GIy-Asp-DPhe-NMe-VaI), e no mínimo um agente coterapêutico adicio-nal contra câncer diferente de no mínimo um Iigante de integrina específicode a) é selecionado entre radioterapia, preferencialmente radiação de feixeexterno, e temozolomida.

Especial e preferencialmente, a invenção também refere-se aouso de (uma composição contendo) no mínimo um Iigante de integrina espe-cífico, selecionado entre e ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val), para a fabri-cação de um medicamento para o tratamento de crescimento tumoral intra-cerebral no cérebro de um hospedeiro, preferencialmente tumores cerebraisprimários e especialmente astrocitoma, em que o medicamento deve serusado em combinação com os dois agentes coterapêuticos contra cânceradicionais, temozolomida e radioterapia, preferencialmente mais preferenci-almente radiação de feixe externo e especialmente radiação de feixe externofracionado. O ligante de integrina específico é preferencialmente aplicadosubstancial, simultanea ou seqüencialmente a no mínimo um dos agentescoterapêuticos contra câncer.

Por conseguinte, um aspecto preferencial da presente invençãorefere-se ao uso de (uma composição contendo) no mínimo um Iigante deintegrina específico, compreendendo ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val),para a fabricação de um medicamento para o tratamento de glioblastomamultiforme, em que o medicamento deve ser usado em combinação com osdois agentes coterapêuticos contra câncer adicionais, temozolomida e radio-terapia, preferencialmente temozolomida e radiação de feixe externo e espe-cialmente temozolomida e radiação de feixe externo fracionado. Tambémneste aspecto preferencial, no mínimo o Iigante de integrina específico é pre-ferencialmente aplicado oportuno conforme descrito aqui, neste pedido depatente de patente.

Especial e preferencialmente, a invenção também refere-se aouso de (uma composição contendo) no mínimo um Iigante de integrina espe-cífico, selecionado entre e ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val), para a fabri-cação de um medicamento para o tratamento de crescimento tumoral intra-cerebral no cérebro de um hospedeiro, preferencialmente tumores cerebraisprimários e especialmente astrocitoma, em que o medicamento deve serusado em combinação com os dois agentes coterapêuticos contra cânceradicionais, temozolomida e radioterapia, preferencialmente mais preferenci-almente radiação de feixe externo e especialmente radiação de feixe externofracionado, em que no mínimo um dos Iigantes de integrina específicos éadministrado em uma administração oportuna conforme descrito aqui, nestepedido de patente de patente, preferencialmente 1 a 8 horas (h), preferenci-almente 2 a 6 h, e mais preferencialmente 2 a 4 h antes da aplicação da ra-dioterapia e/ou da temozolomida.

Ainda mais preferencialmente, a invenção também refere-se aouso de

a) (uma composição contendo) no mínimo um Iigante de integrina especí-fico, e

b) no mínimo um agente coterapêutico adicional contra câncer diferentede no mínimo um Iigante de integrina específico de a)para a fabricação de um medicamento para o tratamento glioblastoma, pre-ferencialmente glioblastoma multiforme, em que no mínimo um Iigante deintegrina específico é selecionado entre Vitaxin, Abegrin e ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-VaI), em que a) é administrado em uma administração opor-tuna conforme descrito aqui, neste pedido de patente de patente, preferenci-almente 1 a 8 horas (h), preferencialmente 2 a 6 h, e mais preferencialmente2 a 4 h antes da aplicação de b).

Ainda mais preferencialmente, a invenção também refere-se aouso de

a) (uma composição contendo) no mínimo um Iigante de integrina especí-fico, e

b) no mínimo um agente coterapêutico adicional contra câncer diferentede no mínimo um Iigante de integrina específico de a)

para a fabricação de um medicamento para o tratamento glioblastoma, pre-ferencialmente glioblastoma multiforme, em que no mínimo um Iigante deintegrina específico é selecionado entre Vitaxin, Abegrin e ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-VaI), e no mínimo um agente coterapêutico adicional contracâncer diferente de no mínimo um Iigante de integrina específico de a) é se-lecionado entre radioterapia, preferencialmente radiação de feixe externo, eagentes quimioterápicos, agentes citotóxicos e/ou agentes imunotóxicos,preferencialmente temozolomida,

em que a) é administrado em uma administração oportuna conforme descritoaqui, neste pedido de patente de patente, preferencialmente 1 a 8 horas (h),preferencialmente 2 a 6 h, e mais preferencialmente 2 a 4 h antes da aplica-ção de b).

Ainda mais preferencialmente, a invenção também refere-se aouso de

a) (uma composição contendo) no mínimo um Iigante de integrina especí-fico, e

b) no mínimo um agente coterapêutico adicional contra câncer diferentede no mínimo um Iigante de integrina específico de a)

para a fabricação de um medicamento para o tratamento glioblastoma, pre-ferencialmente glioblastoma multiforme, em animais humanos,em que no mínimo um Iigante de integrina específico é selecionado entreVitaxin, Abegrin e ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val),em que a) é administrado 2 a 32 horas (h), preferencialmente 4 a 24h, maispreferencialmente 6 a 20 h e mais preferencialmente 6 a 16 h antes da apli-cação de b).

Ainda mais preferencialmente, a invenção também refere-se aouso de >

a) (uma composição contendo) no mínimo um ligante de integrina especí-fico, e

b) no mínimo um agente coterapêutico adicional contra câncer diferentede no mínimo um Iigante de integrina específico de a)

para a fabricação de um medicamento para o tratamento glioblastoma, pre-ferencialmente glioblastoma multiforme, em animais humanos,

em que no mínimo um ligante de integrina específico é selecionado entreVitaxin, Abegrin e ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val), e no mínimo um agen-te coterapêutico adicional contra câncer diferente de no mínimo um Iigantede integrina específico de a) é selecionado entre radioterapia, preferencial-mente radiação de feixe externo, e agentes quimioterápicos, agentes citotó-xicos e/ou agentes imunotóxicos, preferencialmente temozolomida,em que a) é administrado 2 a 32 horas (h), preferencialmente 4 a 24h, maispreferencialmente 6 a 20 h e mais preferencialmente 6 a 16 h antes da apli-cação de b).

Especial e preferencialmente, a invenção também refere-se aouso de (uma composição contendo) no mínimo um Iigante de integrina espe-cífico, selecionado entre ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val), os derivados,solvatos e sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo, e especialmenteciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val), para a fabricação de um medicamentopara o tratamento de crescimento tumoral intracerebral no cérebro de umhospedeiro, preferencialmente tumores cerebrais primários e especialmenteastrocitoma, em que o medicamento deve ser usado em combinação com osdois agentes coterapêuticos contra câncer adicionais, temozolomida e radio-terapia, preferencialmente temozolomida e radiação de feixe externo e espe-cialmente temozolomida e radiação de feixe externo fracionado, em que nomínimo um dos Iigantes de integrina específicos é administrado em umaadministração oportuna conforme descrito aqui, neste pedido de patente depatente, preferencialmente 1 a 8 horas (h), preferencialmente 2 a 6 h, e maispreferencialmente 2 a 4 h antes da aplicação da radioterapia e/ou da temo-zolomida.

Especial e preferencialmente, a invenção também refere-se aouso de (uma composição contendo) no mínimo um Iigante de integrina espe-cífico, selecionado entre ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val) e os sais farma-ceuticamente aceitáveis do mesmo, para a fabricação de um medicamentopara o tratamento de crescimento tumoral intracerebral no cérebro de umanimal humano, preferencialmente tumores cerebrais primários e especial-mente astrocitoma, em que o medicamento deve ser usado em combinaçãocom os dois agentes coterapêuticos contra câncer adicionais, temozolomidae radioterapia, preferencialmente temozolomida e radiação de feixe externoe especialmente temozolomida e radiação de feixe externo fracionado, emque no mínimo um dos Iigantes de integrina específicos é administrado 2 a32 horas (h), preferencialmente 4 a 24 h, mais preferencialmente 6 a 20 h emais preferencialmente 6 a 16 h antes da aplicação da radioterapia e/ou datemozolomida.

Especial e preferencialmente, a invenção também refere-se aouso de (uma composição contendo) no mínimo um Iigante de integrina espe-cífico, compreendendo ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val), para a fabricaçãode um medicamento para o tratamento de glioblastoma multiforme, em que omedicamento deve ser usado em combinação com os dois agentes cotera-pêuticos contra câncer adicionais, temozolomida e radioterapia, preferenci-almente temozolomida e radiação de feixe externo e especialmente temozo-lomida e radiação de feixe externo fracionado, em que no mínimo o Iigantede integrina específico ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val) é administradoem uma administração oportuna conforme descrito aqui, neste pedido depatente de patente, preferencialmente 1 a 24 horas (h), preferencialmente 1a 20 h, mais preferencialmente, 2 a 20 h, mais preferencialmente 2 a 16 h, 3a 16, ainda mais preferencialmente 3 a 12 h e especialmente 4 a 10 h antesda aplicação da radioterapia e/ou da temozolomida.Especial é preferencialmente, a invenção também refere-se aouso de (uma composição contendo) no mínimo um Iigante de integrina espe-cífico, compreendendo ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val), para a fabricaçãode um medicamento para o tratamento de glioblastoma multiforme, em que omedicamento deve ser usado em combinação com os dois agentes cotera-pêuticos contra câncer adicionais, temozolomida e radioterapia, preferenci-almente temozolomida e radiação de feixe externo e especialmente temozo-lomida e radiação de feixe externo fracionado, em que no mínimo o Iigantede integrina específico ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val) é administradoem uma administração oportuna conforme descrito aqui, neste pedido depatente de patente, preferencialmente 1 a 10 horas (h), preferencialmente 2a 8 h, mais preferencialmente 2 a 6 h, ainda mais preferencialmente 3 a 8 h,ainda mais preferencialmente 3 a 6 h e especialmente 4 a 8 h antes da apli-cação da radioterapia e/ou da temozolomida.

Recentes resultados in vitro mostram um aumento na mor-te/deterioração celular depois de tratamento de combinação de linhagenscelulares de câncer pulmonar, tais como A549, H157, H322, H460 e/ouH1975, com Iigantes de integrina específicos, tais como Vitaxin, Abegrin,CNT095 e ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val), e agentes coterapêuticoscontra câncer, tais como Cisplatina, Oxaliplatina, Vinblastina, Taxol, Genci-tabina, Gleevec, lressa, e radioterapia, preferencialmente radiação de feixeexterno e/ou radiação de feixe externo fracionado. Os resultados sugeremque agentes coterapêuticos contra câncer, tais como radiação, podem indu-zir expressão de integrinas relevantes em células de câncer pulmonar, e/ouo o Iigante de integrina específico está agindo como um amplificador da efi-cácia, por exemplo, como um radio amplificador. Além disso, a aplicaçãocombinada de no mínimo um Iigante de integrina específico e no mínimo umagente coterapêutico contra câncer, preferencialmente radiação, resulta emmorte celular significativa e portanto reduz as curvas de sobrevida das célu-las tratadas respectivas consideravelmente. Por conseguinte, as combina-ções parecem induzir de modo eficaz morte celular, provavelmente devido aapoptose e/ou morte celular mitótica, em células endóteliais e células turno-rais, especialmente em células de câncer pulmonar e especialmente em cé-lulas de câncer pulmonar de células não-pequènas. A extensão do efeitopode depender do grau de expressão-alvo, isto é, expressão de integrina.Portanto, combinações de no mínimo um ligante de integrina específico con-forme descrito aqui, neste pedido de patente de patente, e no mínimo umagente coterapêutico contra câncer conforme descrito aqui, neste pedido depatente de patente, pode ser usado de modo eficaz para tratar câncer pul-monar, e especialmente câncer pulmonar de células pequenas, câncer pul-monar de células não-pequenas e/ou metástases dos mesmos.

Portanto, a presente invenção preferencialmente também refere-se ao uso de

a) (uma composição contendo) no mínimo um ligante de integrina especí-fico, e

b) no mínimo um agente coterapêutico adicional contra câncer diferentede no mínimo um Iigante de integrina específico de a)

para a fabricação de um medicamento para o tratamento de câncer pulmo-nar, preferencialmente câncer pulmonar de células não-pequenas (NSCLC).

Mais preferencialmente, a invenção também refere-se ao uso de

a) (uma composição contendo) no mínimo um ligante de integrina especí-fico, e

b) no mínimo um agente coterapêutico adicional contra câncer diferentede no mínimo um Iigante de integrina específico de a)

para a fabricação de um medicamento para o tratamento de câncer pulmo-nar, preferencialmente câncer pulmonar de células não-pequenas (NSCLC),em que no mínimo um ligante de integrina específico é selecionado entreVitaxin, Abegrin, CNT095 e ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val), preferenci-almente selecionado entre Vitaxin, Abegrin e ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val), mais preferencialmente selecionado entre ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val) e os sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo.

Mais preferencialmente, a invenção também refere-se ao uso dea) (uma composição contendo) no mínimo um Iigante de integrina específico, eb) no mínimo um agente coterapêutico adicional contra câncer diferente

de no mínimo um Iigante de integrina específico de a)para a fabricação de um medicamento para o tratamento de câncer pulmo-nar, preferencialmente câncer pulmonar de células não-pequenas (NSCLC),em que no mínimo um Iigante de integrina específico é selecionado entreVitaxin, Abegrin e ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val), and no mínimo umagente coterapêutico adicional contra câncer diferente de no mínimo um Ii-gante de integrina específico de a) é selecionado entre radioterapia, prefe-rencialmente radiação de feixe externo, agentes quimioterápicos, agentescitotóxicos e/ou agentes imunotóxicos, preferencialmente selecionado entreCisplatina, Oxaliplatina, Vinblastina, Taxol, Gencitabina, Gleevec e Iressa.

Ainda mais preferencialmente, a invenção também refere-se aouso de

a) (uma composição contendo) no mínimo um Iigante de integrina especí-fico, e

b) no mínimo um agente coterapêutico adicional contra câncer diferentede no mínimo um Iigante de integrina específico de a)

para a fabricação de um medicamento para o tratamento de câncer pulmo-nar, preferencialmente câncer pulmonar de células não-pequenas (NSCLC),em que no mínimo um Iigante de integrina específico é selecionado entreVitaxin, Abegrin, CNT095 e ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val), preferenci-almente selecionado entre Vitaxin, Abegrin e ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val), mais preferencialmente selecionado entre ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val) e os sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo, em que a) éadministrado em uma administração oportuna conforme descrito aqui, nestepedido de patente de patente, preferencialmente 1 a 8 horas (h), preferenci-almente 2 a 6 h, e mais preferencialmente 2 a 4 h antes da aplicação de b).

Ainda mais preferencialmente, a invenção também refere-se aouso de

a) (uma composição contendo) no mínimo um Iigante de integrina especí-fico, e

b) no mínimo um agente coterapêutico adicional contra câncer diferentede no mínimo um ligante de integrina específico de a)para a fabricação de um medicamento para o tratamento de câncer pulmo-nar, preferencialmente câncer pulmonar de células não-pequenas (NSCLC),em que no mínimo um ligante de integrina específico é selecionado entreVitaxin1 Abegrin, CNT095 e ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val), preferenci-almente selecionado entre Vitaxin1 Abegrin e ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val), mais preferencialmente selecionado entre ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val) e os sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo, e no mínimoum agente coterapêutico adicional contra câncer diferente de no mínimo umIigante de integrina específico de a) é selecionado entre radioterapia, prefe-rencialmente radiação de feixe externo, agentes quimioterápicos, agentescitotóxicos e/ou agentes imunotóxicos, preferencialmente selecionado entreCisplatina1 Oxaliplatina, Vinblastina, Taxol, Gencitabina, Gleevec e Iressa1

em que a) é administrado em uma administração oportuna con-forme descrito aqui, neste pedido dé patente de patente, preferencialmente 1a 8 horas (h), preferencialmente 2 a 6 h, e mais preferencialmente 2 a 4 hantes da aplicação de b).

Ainda mais preferencialmente, a invenção também refere-se aouso de

a) (uma composição contendo) no mínimo um ligante de integrina especí-fico, e

b) no mínimo um agente coterapêutico adicional contra câncer diferentede no mínimo um Iigante de integrina específico de a)

para a fabricação de um medicamento para o tratamento de câncer pulmo-nar, preferencialmente câncer pulmonar de células não-pequenas (NSCLC),em animais humanos,

em que no mínimo um ligante de integrina específico é selecionado entreVitaxin, Abegrin, CNT095 e ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val), preferenci-almente selecionado entre Vitaxin, Abegrin e ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val), mais preferencialmente selecionado entre e ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val),

em que a) é administrado 2 a 32 horas (h), preferencialmente 4 a 24h, maispreferencialmente 6 ã 20 h e mais preferencialmente 6 a 16 h antes da apli-cação de b).

Ainda mais preferencialmente, a invenção também refere-se aouso de

a) (uma composição contendo) no mínimo um Iigante de integrina especí-fico, e

b) no mínimo um agente coterapêutico adicional contra câncer diferentede no mínimo um Iigante de integrina específico de a)

para a fabricação de um medicamento para o tratamento decâncer pulmonar, preferencialmente câncer pulmonar de células não-pequenas (NSCLC), em animais humanos,

em que no mínimo um Iigante de integrina específico é selecio-nado entre Vitaxin, Abegrin, CNT095 e ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val),preferencialmente selecionado entre Vitaxin, Abegrin e ciclo-(Arg-GIy-Asp-DPhe-NMe-VaI), mais preferencialmente selecionado entre ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-VaI) e os sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo,

e no mínimo um agente coterapêutico adicional contra câncerdiferente de no mínimo um Iigante de integrina específico de a) é seleciona-do entre radioterapia, preferencialmente radiação de feixe externo, agentesquimioterápicos, agentes citotóxicos e/ou agentes imunotóxicos, preferenci-almente selecionado entre Cisplatina, Oxaliplatina, Vinblastina, Taxol, Genci-tabina, Gleevec e Iressa,

em que a) é administrado 2 a 32 horas (h), preferencialmente 4 a24h, mais preferencialmente 6 a 20 h e mais preferencialmente 6 a 16 h an-tes da aplicação de b).

Uso de ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) e/ou os sais farma-ceuticamente aceitáveis do mesmo para a fabricação de um medicamentopara o tratamento de câncer, em que o medicamento deve ser usado emcombinação com radioterapia, preferencialmente radiação de feixe externo,em que o ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) e/ou os sais farmaceuticamenteaceitáveis do mesmo é administrado 2 a 32 horas (h), preferencialmente 4 a24 h, mais preferencialmente 6 a 20 h e mais preferencialmente 6 a 16 h an-tes da aplicação de radioterapia. A este respeito, o câncer é preferencial-mente selecionado entre câncer intracerebral, câncer de cabeça e pescoço,câncer retal, câncer de mama, câncer pulmonar de células pequenas, câncerpulmonar de células não-pequenas e especialmente de glioblastoma multi-forme, câncer de mama, câncer pulmonar de células pequenas, câncer pul-monar de células não-pequenas e metástases cerebrais do mesmo.

O objetivo da presente invenção é o uso de no mínimo um ligan-te de integrina específico, compreendendo ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVaI) e/ou os sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo, para a fabri-cação de um medicamento para o tratamento de tumores cerebrais primá-rios, em que o medicamento deve ser usado em combinação com radiotera-pia, preferencialmente radiação de feixe externo, em que no mínimo o ligan-te de integrina específico ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) e/ou os saisfarmaceuticamente aceitáveis do mesmo é administrado a um paciente emuma quantidade de cerca de 1000 mg por semana ou cerca de 4000 mg porsemana. Em um aspecto da presente invenção, o medicamento é usado naausência de um agente coterapêutico adicional contra câncer. Em outro as-pecto da presente invenção, o medicamento é combinado com um ou maisagentes coterapêuticos contra câncer adicionais, preferencialmente agentecoterapêutico contra câncer conforme descrito aqui, neste pedido de patentede patente.

O objetivo da presente invenção é o uso de no mínimo um ligan-te de integrina específico, compreendendo ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) e/ou os sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo, para a fabri-cação de um medicamento para o tratamento de tumores, em que o medi-camento deve ser usado em combinação com temozolomida e/ou radiotera-pia, preferencialmente radiação de feixe externo, em que no mínimo o Iigan-te de integrina específico ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) e/ou os saisfarmaceuticamente aceitáveis do mesmo é administrado a um paciente emuma quantidade de 800 mg a 7000 mg por semana.

Preferencialmente, a quantidade de ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVaI) e/ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, preferencial-mente ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal), a ser administrada a um pacientepor semana é administrada em cerca de quantidades iguais de cerca de 500mg ou cerca de 2000 mg para cada administração.

Mais preferencialmente, a quantidade de ciclo-(Arg-G Iy-Asp-DPhe-NMeVaI) e/ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, prefe-rencialmente ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal), é administrada a um paci-ente em uma quantidade de cerca de 1000 mg por semana, cerca de 1500mg por semana, cerca de 2500 mg por semana, cerca de 4000 mg por se-mana ou cerca de 6000 mg por semana.

Preferencialmente, a quantidade de cerca de 1000 mg de ciclo-(Arg-GIy-Asp-DPhe-NMeVaI) e/ou um sal farmaceuticamente aceitável domesmo, preferencialmente de ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal), por sema-na é administrada em um esquema de administração de duas vezes por se-mana.

Preferencialmente, a quantidade de cerca de 4000 mg de ciclo-(Arg-GIy-Asp-DPhe-NMeVaI) e/ou um sal farmaceuticamente aceitável domesmo, preferencialmente de ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal), por sema-na é administrada em um esquema de administração de duas vezes por se-mana, preferencialmente em cerca de quantidades iguais de cerca de 2000mg cada.

No esquema de administração de duas vezes por semana, aadministração é feita preferencialmente em um dia um e em seguida no diatrês ou um dia quatro. Portanto, o esquema de administração de duas vezespor semana é feito preferencialmente ou em um esquema alternado a cadaterceiro dia/a cada quarto dia ou em um esquema alternado a cada quartodia/a cada terceiro dia, tal como uma administração às segundas-feiras e àsquintas-feiras (como um exemplo do esquema 3/4) ou às terças-feiras e àssextas-feiras (como um exemplo adicional do esquema 3/4), ou às quintas-feiras às quintas-feiras e às segundas-feiras (como um exemplo do esquema4/3) ou às sextas-feiras e às terças-feiras (como um exemplo adicional doesquema 4/3).

O esquema de administração de duas vezes por semana, prefe-rencialmente o esquema de administração de duas vezes por semana con-forme descrito acima, pode ser aplicado ao paciente uma vez ou várias ve-zes. Preferencialmente, é aplicado várias vezes, ainda mais preferencial-mente no mínimo três vezes ou no mínimo seis vezes. Por exemplo, o es-quema de administração de duas vezes por semana pode ser aplicado con-tinuamente até ocorrer cura, doença estável ou progressão do tumor. Tipi-camente, o esquema de administração de duas vezes por semana, prefe-rencialmente o esquema de administração de duas vezes por semana con-forme descrito acima, é aplicado 4 a 156 vezes, tais como cerca de 4 vezes,cerca de 8 vezes, cerca de 16 vezes, cerca de 24 vezes, cerca de 35 vezes,cerca de 70 vezes ou cerca de 104 vezes.

O esquema de administração de duas vezes por semana podeser combinado parcial ou totalmente com radioterapia, preferencialmenteradioterapia conforme descrito aqui, neste pedido de patente de patente.Preferencialmente, o esquema de administração de duas vezes por semanaé combinado parcialmente com radioterapia.

Preferencialmente, a quantidade de cerca de 1500 mg de ciclo-(Arg-GIy-Asp-DPhe-NMeVaI) e/ou um sal farmaceuticamente aceitável domesmo, preferencialmente de ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal), por sema-na é administrada em um esquema de administração de três vezes por se-mana, preferencialmente em cerca de quantidades iguais de cerca de 500mg cada.

Preferencialmente, a quantidade de cerca de 6000 mg de ciclo-(Arg-GIy-Asp-DPhe-NMeVaI) e/ou um sal farmaceuticamente aceitável domesmo, preferencialmente de ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal), por sema-na é administrada em um esquema de administração de três vezes por se-mana, preferencialmente em cerca de quantidades iguais de cerca de 2000mg cada.

No esquema de administração de três vezes por semana, a ad-ministração é feita preferencialmente ou em um dia um, em um dia três ouem um dia quatro e em seguida em um dia 6, ou mais preferencialmente emum dia um, em um dia 3 e em um dia 5, e então seguido de dois dias conse-qutivos sem administração. O último esquema de administração de três ve-zes por semana, por exemplo, tipicamente se inicia em uma segunda-feira,seguido por uma administração na quarta-feira seguinte e uma administra-ção na sexta-feira, com sábado e domingo sem tratamento.

O esquema de administração de três vezes por semana, prefe-rencialmente o esquema de administração de três vezes por semana con-forme descrito acima, pode ser aplicado ao paciente uma vez ou várias ve-zes. Preferencialmente, é aplicado várias vezes, ainda mais preferencial-mente no mínimo três vezes ou no mínimo seis vezes. Por exemplo, o es-quema de administração de três vezes por semana pode ser aplicado conti-nuamente até ocorrer cura ou progressão do tumor. Tipicamente, o esquemade administração de duas vezes por semana, preferencialmente o esquemade administração de duas vezes por semana conforme descrito acima, é a-plicado 4 a 156 vezes, tal como cerca de 4 vezes, cerca de 8 vezes, cercade 16 vezes, cerca de 24 vezes, cerca de 35 vezes, cerca de 70 vezes oucerca de 104 vezes.

O esquema de administração de três vezes por semana podeser combinado parcial ou totalmente com radioterapia, preferencialmenteradioterapia conforme descrito aqui, neste pedido de patente de patente.Preferencialmente, o esquema de administração de três vezes por semana écombinado parcialmente com radioterapia.

Preferencialmente, a quantidade de cerca de 2500 mg de ciclo-(Arg-GIy-Asp-DPhe-NMeVaI) e/ou um sal farmaceuticamente aceitável domesmo, preferencialmente de ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal), por sema-na é administrada em um esquema de administração de cinco vezes porsemana, preferencialmente em cerca de quantidades iguais de cerca de 500mg cada. No esquema de administração de cinco vezes por semana, a ad-ministração é feita preferencialmente em cinco dias consecutivos, preferen-cialmente seguidos por 2 dias em uma série sem administração. Este es-quema de "5 dias de administração consecutiva seguidos por 2 dias conse-cutivos sem administração" pode ser repetido uma vez ou várias vezes. Pre-ferencialmente, este esquema de "5 dias de administração consecutiva se-guidos por 2 dias consecutivos sem administração" descrito acima é realiza-do mais de uma vez mas preferencialmente merios de 18 vezes, mais prefe-rencialmente 2 a 12 vezes, ainda mais preferencialmente 3 a 8 vezes e es-pecialmente 4 a 6 vezes, por exemplo 2 vezes, 3 vezes, 4 vezes, 5 vezes, 6vezes, 8 vezes ou 12 vezes. Especial e preferencialmente, esquema de "5dias de administração consecutiva seguidos por 2 dias consecutivos semadministração" é aplicado 6 vezes.

Preferencialmente, este esquema de "5 dias de administraçãoconsecutiva seguidos por 2 dias consecutivos sem administração" é combi-nado com radioterapia conforme descrito aqui, neste pedido de patente depatente, preferencialmente radioterapia conforme descrito aqui, neste pedidode patente de patente, que é aplicado ao paciente em um esquema de "5dias de administração consecutiva seguidos por 2 dias consecutivos semadministração" análogo que preferencialmente corre em paralelo ao outroesquema, preferencialmente com os mesmos dois dias sem administração.

Com referência às quantidades e/ou aos esquemas de adminis-tração por semana descritos aqui, neste pedido de patente de patente. o Ii-gante de integrina específico ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) e/ou os saisfarmaceuticamente aceitáveis do mesmo, preferencialmente ciclo-(Arg-GIy-Asp-DPhe-NMeVal), é preferencialmente administrado em uma administra-ção oportuna conforme descrito aqui, neste pedido de patente de patente,geralmente 1,5 a 20 horas (h), preferencialmente 2 a 16 h, mais preferenci-almente 2 a 12 h, ainda mais preferencialmente 2 a 10 h, ainda mais prefe-rencialmente 3 a 10 h e especialmente 2 a 8 h antes da aplicação da radiote-rapia. Alternativamente, o Iigante de integrina específico ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVaI) e/ou os sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo é ad-ministrado em uma administração oportuna conforme descrito aqui, nestepedido de patente de patente, preferencialmente 1 a 10 horas (h), preferen-cialmente 1 a 6, mais preferencialmente 2 a 8, ainda mais preferencialmente3 a 8 h, ainda mais preferencialmente 3 a 6 e especialmente 4 a 8 h antes daaplicação da radioterapia.

De acordo com a invenção, o Iigante de integrina específico ci-Clo-(Arg-GIy-Asp-DPhe-NMeVaI) e/ou os sais farmaceuticamente aceitáveisdo mesmo, preferencialmente ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal), e opcio-nalmente no mínimo um agente coterapêutico adicional contra câncer dife-rente de no mínimo um Iigante de integrina específico, preferencialmenteselecionado entre agentes quimioterápicos, agentes citotóxicos e/ou agentesimunotóxicos, mais preferencialmente selecionado entre Temozolomida,Cisplatina, Oxaliplatina, Carboplatina, 5-FU, Darcabarzina, Procarbazina1Vinblastina, Vincristina, Irinotecan, Paclitaxel, Docetaxel, Gencitabina1 Glee-vec, lressa, Tarceva e Nexavar, ainda mais preferencialmente preferencial-mente selecionado entre Temozolomida, Cisplatina, Oxaliplatina, Vinblastina,Taxol, Gencitabina1 Gleevec e Iressa, e/ou selecionado entre o grupo consis-tindo em Herceptin, Bevacizumab (rhuMAb-VEGF, Avastin®), Cetuximab(Erbitux®) e Nimotuzumab1 and preferencialmente Sorafenib (Nexavar®), Su-nitinib (Sutent®) e ZD6474 (ZACTIMA®), e radioterapia, preferencialmenteradioterapia conforme descrito aqui, neste pedido de patente de patente, épreferencialmente administrado a um paciente que necessite do mesmo emuma dose/um modo de administração/esquema de dosagem dado abaixo:

O Iigante de integrina específico ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVaI) e/ou os sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo, preferenci-almente ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) é preferencialmente administradoem uma dose exata de cerca de 500 mg ou cerca de 2000 mg por adminis-tração, preferencialmente em um esquema de administração semanal sele-cionado entre um esquema de administração de duas vezes por semana, umesquema de administração de três vezes por semana e um esquema deadministração de cinco vezes por semana, preferencialmente conforme des-crito aqui, neste pedido de patente de patente, mais preferencialmente noesquema de administração de duas vezes por semana conforme descritoaqui, neste pedido de patente de patente, cujo esquema de administração épreferencialmente repetide no mínimo uma vez, mais preferencialmente nomínimo duas vezes, mais preferencialmente no mínimo 5 vezes e ainda maispreferencialmente no mínimo 35 vezes. Preferencialmente, é repetido menosde 150 vezes, mais preferencialmente menos de 100 vezes, no mínimo sefor administrado sem uma pausa, intervalo ou hiato de no mínimo uma se-mana, preferencialmente de no mínimo quatro semanas. Depois de umapausa, hiato ou intervalo similar, o esquema de administração acima descritopode ser repetido uma vez ou várias vezes, caso necessário. Por conseguin-te, o esquema de administração acima descrito é preferencialmente aplicadoao paciente por no mínimo 2 semanas, preferencialmente no mínimo 6 se-manas, mais preferencialmente no mínimo 12 semanas, ainda mais prefe-rencialmente no mínimo 24 semanas, e especialmente no mínimo 35 sema-nas, por exemplo por cerca de 4 semanas, por cerca de 6 semanas, por cer-ca de 35 semanas, por cerca de 36 semanas, por cerca de 72 semanas oupor cerca de 120 semanas. No esquema de administração acima descrito, oIigante de integrina específico ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) e/ou ossais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo, preferencialmente ciclo-(Arg-GIy-Asp-DPhe-NMeVaI), é preferencialmente administrado. No esquema deadministração acima descrito, o Iigante de integrina específico ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVaI) e/ou os sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo,preferencialmente ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal), é preferencialmenteadministrado por infusão i. v. duas vezes por semana, preferencialmente noDia 1 e 4, por exemplo, segunda-feira e quinta-feira ou terça-feira e sexta-feira), preferencialmente por 35 semanas ou no mínimo 35 semanas semuma pausa. No esquema de administração acima descrito, a adminstraçãopode ser continuada até ocorrer progressão, doença estável ou cura. Prefe-rencialmente, a administração do Iigante de integrina específico ciclo-(Arg-GIy-Asp-DPhe-NMeVaI) e/ou os sais farmaceuticamente aceitáveis do mes-mo, preferencialmente ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal), se inicia no Dia 1de cada semana.

Preferencialmente, a administração do Iigante de integrina espe-cífico ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) e/ou os sais farmaceuticamente a-ceitáveis do mesmo, preferencialmente ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal), écombinada, parcial ou totalmente, preferencial e parcialmente, com a admi-nistração de no mínimo um agente coterapêutico adicional contra câncerdiferente de no mínimo um Iigante de integrina específico, em que o agentecoterapêutico contra câncer adicional é preferencialmente conforme definidoaqui, neste pedido de patente de patente, mais preferencialmente seleciona-do entre o grupo consistindo em agentes quimioterápicos, agentes citotóxi-cos, agentes imunotóxicos e/ou radioterapia, e especial e preferencialmenteselecionado entre o grupo consistindo em Temozolomída, Cisplatina, Oxali-platina, Carboplatina1 5-FU, Darcabarzina, Procarbazina1 Vinblastina1 Vincris-tina, Irinotecan, Paclitaxel, Docetaxel1 Gencitabina, Gleevec, lressa, Tarcevae Nexavar1 até mais preferencialmente selecionado entre Temozolomida,Cisplatina, Oxaliplatina, Vinblastina, Taxol, Gencitabina, Gleevec e Iressa,e/ou selecionado entre o grupo consistindo em Herceptin, Bevacizumab(rhuMAb-VEGF, Avastin®), Cetuximab (Erbitux®) e Nimotuzumab1 e prefe-rencialmente Sorafenib (Nexavar®), Sunitinib (Sutent®) e ZD6474 (ZACTI-MA®), e/ou radioterapia.

Preferencialmente, a administração do ligante de integrina espe-cífico ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) e/ou os sais farmaceuticamente a-ceitáveis do mesmo, preferencialmente ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal), écombinada, parcial ou totalmente, preferencial e parcialmente, com a admi-nistração ou liberação de radioterapia, preferencialmente radiação de feixeexterno e especialmente radioterapia focai. Preferencialmente, a radioterapiaé administrada ou liberada em um ou mais dias dentro de uma ou mais se-manas nas quais o Iigante de integrina específico ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) e/ou os sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo, preferenci-almente ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal), é administrado em um esquemade administração semanal, preferencialmente um esquema de administraçãosemanal conforme descrito aqui, neste pedido de patente de patente. Maispreferencialmente, a radioterapia é administrada ou liberada em um ou maisdias dentro de uma ou mais semanas nas quais o Iigante de integrina espe-cífico ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) e/ou os sais farmaceuticamente a-ceitáveis do mesmo, preferencialmente ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) éadministrado em um esquema de administração de duas vezes por semana.A radioterapia, preferencialmente radiação de feixe externo e especialmenteradioterapia focai, é preferencialmente administrada ou liberada durante umperíodo de 1 a 12 semanas, preferencialmente 2 a 10 semanas, mais prefe-rencialmente 3 a 8 semanas e especialmente 4 a 6 semanas, por exemplocerca de 3 semanas, cerca de 5 semanas, cerca de 6 semanas, cerca de 7semanas ou cerca de 9 semanas, com uma administração ou liberação em 1a 7 dias, preferencialmente 2 a 6 dias e especialmente 3 a 5 dias, por exem-plo, 2 dias, 3 dias, 5 dias or 7 dias, por semana.

Preferencialmente, a administração do Iigante de integrina espe-cífico ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) e/ou os sais farmaceuticamente a-ceitáveis do mesmo, preferencialmente ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal), écombinada, parcial ou totalmente, preferencial e parcialmente, com a admi-nistração ou liberação de radioterapia focai, em que 40 a 70 Gray (Gy), pre-ferencialmente 50 a 66 Gy, mais preferencialmente 55 a 62 Gy, por exemplocerca de 58 Gy, cerca de 60 Gy ou cerca de 65 Gy são administrados ouliberados ao paciente, preferencialmente em frações de 0,5 a 5 Gy, maispreferencialmente 1 a 3 Gy e especialmente 1,5 a 2,5 Gy, por exemplo cercade 1,3 Gy, cerca de 1,6 Gy, cerca de 1,8 Gy, cerca de 2,0 Gy ou cerca de2,2 Gy, por por administração ou liberação, a qual é preferencialmente tam-bém a quantidade de radiações por dia na qual a the administração ou libe-ração da radiaçã ocorre. Por conseguinte, uma administração ou liberaçãode 1,5 a 2,5 Gy e preferencialmente 1,8 a 2,2 Gy pos dia por 5 dias dentrode uma semana, ainda mais preferencialmente 5 dias consecutivos dentrode uma semana, é preferencial. O tipo de aplicação de radioterapia focaiconforme descrito acima é preferencial no tratamento de tumores cerebraisprimários, incluindo astrocitoma, preferencialmente astrocitoma grau Ill e/ougrau IV, e especialmente GBM.

Alternativamente, a administração do Iigante de integrina especí-fico ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) e/ou os sais farmaceuticamente acei-táveis do mesmo, preferencialmente ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVàl), écombinada, parcial ou totalmente, preferencial e parcialmente, com a admi-nistração ou liberação de radioterapia focai, em que 20 a 50 Gray (Gy), pre-ferencialmente 25 a 40 Gy, mais preferencialmente 28 a 25 Gy, por exemplocerca de 28 Gy, cerca de 30 Gy ou cerca de 35 Gy são administrados ouliberados ao paciente, preferencialmente em frações de 0,5 a 5 Gy, maispreferencialmente 0,8 a 3 Gy e especialmente 1 a 2,5 Gy1 por exemplo cercade 1,0, cerca de 1,3 Gy, cerca de 1,6 Gy, cerca de 1,8 Gy, cerca de 2,0 Gy,cerca de 2,5 Gy ou cerca de 3,0 Gy, por administração ou liberação, a qual épreferencialmente também a quantidade de radiação por dia na qual a admi-nistração ou liberação da radiação ocorre. Por conseguinte, uma administra-ção ou liberação de 1.5 to 2,5 Gy and preferencialmente 1,8 a 2,2 Gy por diapor 2 ou 3 dias dentro de uma semana é preferencial. Por conseguinte, umaadministração ou liberação de 0,7 a 1,3 Gy e preferencialmente 0,9 a 1,2 Gypor dia por 3 a 6 dias, preferencialmente por 5 dias e mais preferencialmente5 dias consecutivos, dentro de uma semana, também é preferencial. Geral-mente, a administração ou liberação de 1,0 a 3,0 Gy, preferencialmente cer-ca de 1,0, cerca de 2,0 Gy ou cerca de 3,0 Gy por dia por 2 ou 3 dias dentrode uma semana é especialmente preferencial. O tipo de aplicação de radio-terapia focai conforme descrito acima é preferencial no tratamento de mètás-tases cerebrais, preferencialmente metástases cerebrais de tipos de cânce-res selecionados entre o grupo consistindo em câncer pulmonar de célulaspequenas e câncer pulmonar de células não-pequenas, preferencialmentecâncer pulmonar de células não-pequenas, câncer de mama, melanoma me-tastático, câncer de próstata metastático independente de androgênio, cân-cer de próstata metastático dependente de androgênio.

Tipicamente, ambas as quantidades de cerca de 30 Gy e cercade 60 Gy são administradas ou liberadas ao paciente dentro de cerca deseis semanas consecutivas.

Por conseguinte, um objeto preferencial da presente invenção éum método de tratamento (A)1 compreendendo por paciente dentro de umasemana

a) a administração do Iigante de integrina específico ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVaI) e/ou os sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo,preferencialmente ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMèVal), em um esquemade administração de duas vezes por semana compreendendo cerca de500 mg ou cerca de 2000 mg (exato) de ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVaI) por administração; e

b) a administração ou liberação uma vez ao dia de radioterapia focai fra-cionada a 1,5 a 2,5 Gy por fração, em 2 a 7 dias, preferencialmente 3 a6 dias, mais preferencialmente 5 dias e especial e preferencialmenteem 5 dias consecutivos dentro de uma semana;

em que o referido tratamento é preferencialmente aplicado ao paciente porno mínimo 2 semanas, mais preferencialmente por no mínimo 2 semanasconsecutivas, ainda mais preferencialmente por no mínimo 4 semanas con-secutivas e especialmente por 6 ou mais semanas consecutivas, mas geral-mente por menos de 13 semanas consecutivas, preferencialmente menos deentão 11 semanas consecutivas e ainda mais preferencialmente menos de 9semanas consecutivas, por exemplo uma aplicação por 2 semanas consecu-tivas, 4 semanas consecutivas, 5 semanas consecutivas, 6 semanas conse-cutivas, 7 semanas consecutivas ou 10 semanas consecutivas.

Com respeito a este método, o referido Iigante de integrina es-pecífico é preferencialmente administrado em dias nos quais a radioterapiafocai fracionada é administrada ou liberada ao paciente, mais preferencial-mente administrado em uma administração oportuna conforme descrito aqui,neste pedido de patente de patente. Com respeito a este método, o referidoIigante de integrina específico é preferencialmente administrado em umaadministração oportuna conforme descrito aqui, neste pedido de patente depatente, mais preferencialmente 1,5 a 20 horas (h), preferencialmente 2 a 16h, mais preferencialmente 2 a 12 h, ainda mais preferencialmente 2 a 10 h,ainda mais preferencialmente 3 a 10 h e especialmente 2 a 8 h antes da a-plicação da radioterapia.

O método de tratamento descrito acima é especialmente vanta-joso no tratamento de tumores ou câncer conforme descrito aqui, neste pe-dido de patente de patente, preferencialmente tumores ou câncer seleciona-do entre o grupo consistindo em tumores cerebrais primários, astrocitoma,preferencialmente astrocitoma grau II, Ill e/ou IV, glioblastoma, preferencial-mente glioblastoma multiforme, e metástases cerebrais de outros tipos decânceres, preferencialmente selecionados entre o grupo consistindo emcâncer pulmonar de células pequenas e câncer pulmonar de células não-pequenas, preferencialmente câncer pulmonar de células não-pequenas,câncer de mama, melanoma metastático, câncer de próstata metastáticoindependente de androgênio, câncer de próstata metastático dependente deandrogênio.

O método de tratamento descrito acima pode opcionalmente sercombinado com a administração adicional de um ou mais Iigantes de integri-na específicos conforme descrito aqui, neste pedido de patente de patente,diferente de ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) e/ou os sais farmaceutica-mente aceitáveis do mesmo, preferencialmente Iigantes de integrina especí-ficos selecionado entre o grupo consistindo em LM609, Vitaxin, Abegrin, Ab-ciximab, P1F6, 14D9.F8 e CNT095, mais preferencialmente Vitaxin, Abe-grin, CNT095 e Abciximab), e/ou a administração adicional de no mínimoum agente coterapêutico contra câncer conforme descrito aqui, neste pedidode patente de patente, diferente de radioterapia, preferencialmente no míni-mo um agente coterapêutico contra câncer selecionado entre o grupo con-sistindo em Temozolomida, Cisplatina, Oxaliplatina, Carboplatina, 5-FU,Darcabarzina, Procarbazina, Vinblastina, Vincristina, Irinotecan, Paclitaxel,Docetaxel, Gencitabina, Gleevec, lressa, Tarceva e Nexavar, de modo aindamais preferencial preferencialmente selecionado entre Temozolomida, Cis-platina, Oxaliplatina, Vinblastina, Taxol, Gencitabina, Gleevec e Iressa, e/ouselecionado entre o grupo consistindo em Herceptin, Bevacizumab (rhuMAb-VEGF, Avastin®), Cetuximab (Erbitux®) e Nimotuzumab, e preferencialmenteSorafenib (Nexavar®), Sunitinib (Sutent®) e ZD6474 (ZACTIMA®).

Por conseguinte, um objeto preferencial da presente invenção éum método de tratamento (B), compreendendo por paciente dentro de umasemana

a) a administração do Iigante de integrina específico ciclo-( Arg-G Iy-Asp-DPhe-NMeVaI) e/ou os sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo,preferencialmente ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal), em um esquemade administração de duas vezes por semana compreendendo cerca de500 mg ou cerca de 2000 mg (exato) de ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVaI) por administração; e

b) a administração ou liberação uma vez ao dia de radioterapia focai frac-tionada a 1,5 a 2,5 Gy por fração, preferencialmente em 2 a 5 dias den-tro de uma semana, mais preferencialmente em 5 dias consecutivosdentro de uma semana;

c) a administração de temozolomida em 2 a 7 dias, preferencialmente 3 a6 dias, mais preferencialmente 5 dias e especial e preferencialmenteem 5 dias consecutivos dentro de uma semana, preferencialmente emuma quantidade por dia de 25 mg/m2 a 250 mg/m2, mais preferencial-mente 50 mg/m2 a 150 mg/m2, ainda mais preferencialmente 65 mg/m2a 100 mg/m2, e especialmente cerca de 75 mg/m2;

em que o referido método de tratamento é preferencialmente aplicado aopaciente por no mínimo 2 semanas, mais preferencialmente por no mínimo 2semanas consecutivas, ainda mais preferencialmente por no mínimo 4 se-manas consecutivas e especialmente por 6 ou mais semanas consecutivas,mas geralmente por menos de 13 semanas consecutivas, preferencialmentemenos de 11 semanas consecutivas e ainda mais preferencialmente menosde 9 semanas consecutivas, por exemplo, é aplicado por 2 semanas conse-cutivas, 4 semanas consecutivas, 5 semanas consecutivas, 6 semanas con-secutivas, 7 semanas consecutivas ou 10 semanas consecutivas.

Com respeito a este método, o referido Iigante de integrina es-pecífico é preferencialmente administrado em dias nos quais a radioterapiafocai fractionada é administrada ou liberada ao paciente, mais preferencial-mente administrado em uma administração oportuna conforme descrito aqui,neste pedido de patente de patente. Com respeito a este método, o referidoIigante de integrina específico é mais preferencialmente administrado emuma administração oportuna conforme descrito aqui, neste pedido de paten-te de patente, mais preferencialmente 1,5 a 20 horas (h), preferencialmente2 a 16 h, mais preferencialmente 2 a 12 h, ainda mais preferencialmente 2 a10 h, ainda mais preferencialmente 3 a 10 h e especialmente 2 a 8 h antesda aplicação da radioterapia. Com respeito a este método, a temozolomida épreferencialmente administrada por via oral, preferencialmente 15 a 300 mi-nutos, mais preferencialmente 30 a 180 minutos, ainda mais preferencial-mente 45 a 90 minutos e especialmente cerca de uma hora ou dentro deuma hora antes da administração ou liberação da radioterapia. Este esque-ma de administração para agentes coterapêuticos contra câncer diferentesde radioterapia, preferencialmente temozolomida, é preferencialmente ade-quado também para os outros métodos ou usos conforme descrito aqui, nes-te pedido de patente de patente.

O método de tratamento descrito acima é especialmente vanta-joso no tratamento de tumores ou câncer conforme descrito aqui, neste pe-dido de patente de patente, preferencialmente tumores ou câncer seleciona-do entre o grupo consistindo em tumores cerebrais primários, astrocitoma,preferencialmente astrocitoma grau II, III e/ou IV, glioblastoma, preferencial-mente glioblastoma multiforme, e metástases cerebrais de outros tipos decânceres, preferencialmente selecionados entre o grupo consistindo emcâncer pulmonar de células pequenas e câncer pulmonar de células não-pequenas, preferencialmente câncer pulmonar de células não-pequenas,câncer de mama, melanoma metastático, câncer de próstata metastáticoindependente de androgênio, câncer de próstata metastático dependente deandrogênio.

Por conseguinte, um objeto preferencial da presente invenção éum método de tratamento (C), compreendendo por pacientea) opcionalmente a administração do ligante de integrina específico ciclo-(Arg-GIy-Asp-DPhe-NMeVaI) e/ou os sais farmaceuticamente aceitá-veis do mesmo, preferencialmente ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal),preferencialmente como um único agente, em um esquema de adminis-tração de duas vezes por semana compreendendo cerca de 500 mg oucerca de 2000 mg (exato) de ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) poradministração, em que o esquema de administração semanal é aplica-do ao paciente por no mínimo uma semana, preferencialmente 1 a 12semanas, mais preferencialmente 1 a 6 semanas, ainda mais preferen-cialmente 1 a 3 semanas e especialmente 1 ou 2 semanas; seguidopor, preferencialmente na uma ou mais semanas consecutivas,b) a administração de temozolomida em 2 a 7 dias, preferencialmente 3 a6 dias, mais preferencialmente 5 dias e especial e preferencialmenteem 5 dias consecutivos, dentro de uma semana, preferencialmente emuma quantidade por dia de 50 mg/m2 a 350 mg/m2, mais preferencial-mente 75 mg/m2 a 250 mg/m2, ainda mais preferencialmente 150mg/m2 a 250 mg/m2, e especialmente cerca de 200 mg/m2; preferenci-almente combinada dentro da referida semana com a administração doIigante de integrina específico ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) e/ouos sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo, preferencialmente ci-clo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal), em um esquema de administração deduas vezes por semana compreendendo cerca de 500 mg ou cerca de2000 mg (exato) de ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) por administração,

em que a etapa b) é aplicada ao paciente no mínimo uma vez, preferencial-mente 1 a 12 semanas consecutivamente, mais preferencialmente 1 a 6 se-manas consecutivamente, ainda mais preferencialmente 1 a 3 semanas con-secutivamente e especialmente uma semana ou 2 semanas consecutiva-mente;

e em que o referido Iigante de integrina específico ciclo-(Arg*Gly-Asp-DPhe-NMeVaI) e/ou os sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo, preferenci-almente ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) é preferencialmente administradoem dias onde a temozolomida também é administrada; opcionalmente se-guido por, preferencialmente na uma ou mais semanas consecutivas,

c) a administração do Iigante de integrina específico ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVaI) e/ou os sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo,preferencialmente ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal), preferencialmen-te como um único agente, em um esquema de administração de duasvezes por semana compreendendo cerca de 500 mg ou cerca de 2000mg (exato) de ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) por administração, emque o esquema de administração semanal é aplicado ao paciente porno mínimo uma semana, preferencialmente 1 a 12 semanas, mais pre-ferencialmente 2 a 6 semanas, ainda mais preferencialmente 2 a 4 se-manas e especialmente 3 semanas.

Preferencialmente, o referido método de tratamento é preferen-cialmente aplicado ao paciente no mínimo uma vez, mais preferencialmenteno mínimo duas vezes, ainda mais preferencialmente no mínimo quatro ve-zes e especial e preferencialmente seis ou mais vezes, preferencialmenteseis vezes, mas geralmente menos de 13 vezes, preferencialmente menosde 9 vezes, ainda mais preferencialmente menos de sete vezes, por exem-plo 3 vezes, 5 vezes, 6 vezes, 7 vezes ou 6 vezes, preferencialmente emuma série consecutiva, isto é, sem uma ou mais pausas entre a repetição dométodo.

Com respeito a este método, o referido Iigante de integrina es-pecífico é mais preferencialmente administrado em uma administração opor-tuna conforme descrito aqui, neste pedido de patente de patente, mais prefe-rencialmente 1,5 a 20 horas (h), preferencialmente 2 a 16 h, mais preferen-cialmente 2 a 12 h, ainda mais preferencialmente 2 a 10 h, ainda mais prefe-rencialmente 3 a 10 h e especialmente 2 a 8 h antes da aplicação da radiote-rapia. Com respeito a este método, a temozolomida é preferencialmenteadministrada por via oral, preferencialmente em maneira análoga conformedescrito aqui, neste pedido de patente de patente, para a administração o-portuna do Iigante de integrina específico, ou preferencialmente dentro de 5h, preferencialmente dentro de 3 h e especialmente dentro de 1 h antes oudepois, preferencialmente depois, da liberação da radioterapia.

O método de tratamento descrito acima (G) é especialmentevantajoso no tratamento de tumores ou câncer conforme descrito aqui, nestepedido de patente de patente, preferencialmente tumores ou câncer selecio-nado entre o grupo consistindo em tumores cerebrais primários, astrocitoma,preferencialmente astrocitoma grau II, Ill e/ou IV, glioblastoma, preferencial-mente glioblastoma multiforme, e metástases cerebrais de outros tipos decânceres, preferencialmente selecionados entre o grupo consistindo emcâncer pulmonar de células pequenas e câncer pulmonar de células não-pequenas, preferencialmente câncer pulmonar de células não-pequenas,câncer de mama, melanoma metastático, câncer de próstata metastáticoindependente de androgênio, câncer de próstata metastático dependente deandrogênio.

Por conseguinte, um objeto preferencial da presente invenção éum método de tratamento (D)1 compreendendo por paciente

a) dentro de uma primeira semana: a administração de temozolomida em2 a 7 dias, preferencialmente 3 a 6 dias, mais preferencialmente 5 diase especial e preferencialmente em 5 dias consecutivos, preferencial-mente em uma quantidade por dia de 50 mg/m2 a 350 mg/m2, mais pre-ferencialmente 75 mg/m2 a 250 mg/m2, ainda mais preferencialmente150 mg/m2 a 250 mg/m2, e especialmente cerca de 200 mg/m2; combi-nada dentro da referida primeira semana com a administração do Iigan-te de integrina específico ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) e/ou ossais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo, preferencialmente ciclo-(Arg-GIy-Asp-DPhe-NMeVaI), em um esquema de administração deduas vezes por semana compreendendo cerca de 500 mg ou cerca de2000 mg (exato) de ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) por administração,

b) e nas semanas 2, 3 e 4 diretamente seguintes: a administração do Ii-gante de integrina específico ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) e/ou ossais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo, preferencialmente ciclo-(Arg-GIy-Asp-DPhe-NMeVaI), preferencialmente como um único agen-te, em um esquema de administração de duas vezes por semana com-preendendo cerca de 500 mg ou cerca de 2000 mg (exato) de ciclo-(Arg-GIy-Asp-DPhe-NMeVaI) por administração.

Preferencialmente, o referido método de tratamento (D) é aplica-do ao paciente no mínimo uma vez, mais preferencialmente no mínimo duasvezes, ainda mais preferencialmente no mínimo quatro vezes e especial-mente seis ou mais vezes, mas geralmente menos de 24 vezes, preferenci-almente menos de 15 vezes, mais preferencialmente menos de 11 vezes,por exemplo 3 vezes, 4 vezes, 5 vezes, 6 vezes, 7 vezes ou 12 vezes, prefe-rencialmente no mínimo se for administrado sem uma pausa, intervalo ouhiato de no mínimo uma semana, preferencialmente de no mínimo quatrosemanas. Depois de uma pausa, hiato ou intervalo similar, o esquema deadministração acima descrito pode ser repetido uma vez ou várias vezes,caso necessário.

Com respeito a este método, o referido Iigante de integrina es-pecífico é mais preferencialmente administrado em uma administração opor-tuna conforme descrito aqui, neste pedido de patente de patente, mais prefe-rencialmente 1,5 a 20 horas (h), preferencialmente 2 a 16 h, mais preferen-cialmente 2 a 12 h, ainda mais preferencialmente 2 a 10 h, ainda mais prefe-rencialmente 3 a 10 h e especialmente 2 a 8 h antes da aplicação da radiote-rapia. Com respeito à este método, a temozolomida é preferencialmenteadministrada por via oral, preferencialmente Com respeito a este método, atemozolomida é preferencialmente administrada por via oral, preferencial-mente em maneira análoga conforme descrito aqui, neste pedido de patentede patente, para a administração oportuna do Iigante de integrina específico,ou preferencialmente dentro de 5 h, preferencialmente dentro de 3 h e espe-cialmente dentro de 1 h antes ou depois, preferencialmente depois, da libe-ração da radioterapia.

O método de tratamento descrito acima (D) pode opcionalmenteser combinado com um ou mais semanas de tratamento, compreendendo aadministração do Iigante de integrina específico ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVaI) e/ou os sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo, preferenci-almente ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal), a um paciente, preferencialmen-te como um único agente, em um esquema de administração de duas vezespor semana compreendendo cerca de 500 mg ou cerca de 2000 mg (exato)de ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) por administração, antes, preferencialdiretamente antes, e/ou depois, preferencial diretamente depois do métodode tratamento (D) acima descrito. Preferencialmente, o método de tratamen-to (D) é combinado com uma ou mais semanas de tratamento adicional,compreendendo a administração do Iigante de integrina específico ciclo-(Arg-GIy-Asp-DPhe-NMeVaI) e/ou os sais farmaceuticamente aceitáveis domesmo, preferencialmente ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal), a um pacien-te, preferencialmente como um único agente, em um esquema de adminis-tração de duas vezes por semana compreendendo cerca de 500 mg ou cer-ca de 2000 mg (exato) de ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) por administra-ção, no mínimo na semana diretamente anterior à primeira semana do mé-todo de tratamento (D)1 e/ou no mínimo uma semana do refeirdo tratamentoadicional (com ou sem pausas), por exemplo até ocorrer progressão, doençaestável ou cura.

O método de tratamento descrito acima (D) é especialmentevantajoso no tratamento de tumores ou câncer conforme descrito aqui, nestepedido de patente de patente, preferencialmente tumores ou câncer selecio-nado entre o grupo consistindo em tumores cerebrais primários, astrocitoma,preferencialmente astrocitoma grau II, III e/ou IV, glioblastoma, preferencial-mente glioblastoma multiforme, e metástases cerebrais de outros tipos decânceres, preferencialmente selecionados entre o grupo consistindo emcâncer pulmonar de células pequenas e câncer pulmonar de células não-pequenas, preferencialmente câncer pulmonar de células não-pequenas,câncer de mama, melanoma metastático, câncer de próstata metastáticoindependente de androgênio, câncer de próstata metastático dependente deandrogênio.

Um objeto preferencial da presente invenção é um método detratamento (E), compreendendo a administração do ligante de integrina es-pecífico ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) e/ou os sais farmaceuticamenteaceitáveis do mesmo, preferencialmente ciclo-(Arg-GIy-Asp-DPhe-NMeVai),a um paciente, preferencialmente como um único agente, em um esquemade administração de duas vezes por semana compreendendo cerca de 500mg ou cerca de 2000 mg (exato) de ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) poradministração, preferencialmente por uma semana ou por no mínimo duassemanas consecutivas.

Se o método de tratamento (E) é aplicado por duas ou mais se-manas consecutivas, é preferencialmente aplicado ao paciente no mínimopor quatro semanas consecutivas, mais preferencialmente no mínimo porseis semanas consecutivas, por exemplo até ocorrer progressão do tumor,doença estável ou cura. Preferencialmente, o método de tratamento (E) écombinado com um òu mais dos métodos de tratamento (A), (B)1 (C) e/ou(D) acima/abaixo descritos. Se o método de tratamento (E) for combinadocom um ou mais dos métodos de tratamento (A), (B)1 (C) e/ou (D) aci-ma/abaixo descritos, é preferencialmente aplicado anteriormente ou ao finaldos métodos de tratamento (A)1 (B)1 (C) e/ou (D) referidos, ou tanto anteri-ormente quanto ao final dos métodos referidos. Combinações preferenciaisincluindo um ou mais métodos de tratamento (A), (B)1 (C) e/ou (D) e adicio-nalmente o método de tratamento (E) são dadas abaixo.

Um objeto preferencial da presente invenção é um método detratamento, em que dòis ou mais dos regimes de tratamento, esquemas deadministração e/ou métodos de tratamento descritos aqui, neste pedido depatente de patente, são combinados. Um objeto mais preferencial da presen-te invenção é um método de tratamento, compreendendo dois ou mais dosmétodos de tratamento (A), (B), (C), (D), (E) e/ou (F) descritos acima/abaixo,preferencialmente incluindo uma ou mais das opções preferenciais conformedescrito com respeito ao método (A), (B), (C), (D), (E) e/ou (F) respectivo.

Um objeto especialmente preferencial da presente invenção é um método detratamento, consistindo em três ou mais dos métodos de tratamento (A), (B),(C), (D), (E) e/ou (F) descritos acima/abaixo, preferencialmente incluindouma ou mais das opções preferenciais conforme descrito com respeito aosmétodos (A), (B), (C), (D), (E) e/ou (F) respectivos.

É preferencial um método de tratamento (A), em que o referidométodo é aplicado ao paciente por 2 a 8 semanas e especialmente 6 sema-nas, preferencialmente sem uma pausa.

É preferencial um método de tratamento, compreendendo ouconsistindo em:

o método de tratamento (E), em que o referido método é aplica-do ao paciente por 1 a 4 semanas, preferencialmente sem uma pausa,

seguido diretamente pelo método de tratamento (A), em que oreferido método é aplicado ao paciente por 2 a 8 semanas e especialmente 6semanas, preferencialmente sem uma pausa,

opcionalmente seguido diretamente pelo método de tratamento(Ε), em que o referido método é aplicado ao paciente por no mínimo quatrosemanas, ou preferencialmente até ocorrer progressão, doença estável, rea-ção parcial/total ou cura.

É preferencial um método de tratamento, compreendendo ouconsistindo em:

o método de tratamento (E), em que o referido método é aplica-do ao paciente por 1 a 4 semanas sem uma pausa, mais preferencialmentecerca de uma semana,

seguido diretamente pelo método de tratamento (B), em que oreferido método é aplicado ao paciente por 2 a 8 semanas e especialmente 6semanas, preferencialmente sem uma pausa,

opcionalmente seguido diretamente pelo método de tratamento(E)1 em que o referido método é aplicado ao paciente por no mínimo quatrosemanas, ou preferencialmente até ocorrer progressão, doença estável, rea-ção parcial/total ou cura.

É preferencial um método de tratamento, compreendendo ouconsistindo em:

o método de tratamento (B), em que o referido método é aplica-do ao paciente por 2 a 8 semanas e especialmente 6 semanas, preferenci-almente sem uma pausa,

seguido diretamente pelo método de tratamento (D), em que oreferido método é aplicado ao paciente 2 a 12 vezes, mais preferencialmente4 a 8 vezes e especialmente cerca de 6 vezes, preferencialmente sem umapausa.

É preferencial um método de tratamento, compreendendo ouconsistindo em:

o método de tratamento (B), em que o referido método é aplica-do ao paciente por 2 a 8 semanas e especialmente 6 semanas, preferenci-almente sem uma pausa,

opcionalmente seguido diretamente pelo método de tratamento(E), em que o referido método é aplicado ao paciente por uma ou mais se-manas, preferencialmente uma semana,seguido diretamente pelo método de tratamento (D), em que oreferido método é aplicado ao paciente 2 a 12 vezes, mais preferencialmente4 a 8 vezes e especialmente cerca de 6 vezes, preferencialmente sem umapausa.

É preferencial um método de tratamento, compreendendo ouconsistindo em:

o método de tratamento (B), em que o referido método é aplica-do ao paciente por 2 a 8 semanas e especialmente 6 semanas, preferenci-almente sem uma pausa,

seguido diretamente pelo método de tratamento (E), em que oreferido método é aplicado ao paciente por uma ou mais semanas, preferen-cialmente uma semana,

seguido diretamente pelo método de tratamento (D), em que oreferido método é aplicado ao paciente 2 a 12 vezes, mais preferencialmente4 a 8 vezes e especialmente cerca de 6 vezes, preferencialmente sem umapausa.

É preferencial um método de tratamento, compreendendo ouconsistindo em:

o método de tratamento (E), em que o referido método é aplica-do ao paciente por 1 a 4 semanas sem uma pausa, mais preferencialmentecerca de uma semana,

seguido diretamente pelo método de tratamento (B), em que oreferido método é aplicado ao paciente por 2 a 8 semanas e especialmente 6semanas, preferencialmente sem uma pausa,

opcionalmente seguido diretamente poro método de tratamento (E), em que o referido método é aplica-do ao paciente por uma ou mais semanas, preferencialmente uma semana,seguido diretamente por

o método de tratamento (D), em que o referido método é aplica-do ao paciente 2 a 12 vezes, mais preferencialmente 4 a 8 vezes e especi-almente cerca de 6 vezes, preferencialmente sem uma pausa,

opcionalmente seguido diretamente pelo método de tratamento(Ε), em que o referido método é aplicado ao paciente por no mínimo 4 se-manas, ou preferencialmente até ocorrer progressão, doença estável, reaçãoparcial/total ou cura.

É preferencial um método de tratamento, compreendendo ou consistindo em:

o método de tratamento (E), em que o referido método é aplica-do ao paciente por 1 a 4 semanas sem uma pausa, mais preferencialmentecerca de uma semana,

seguido diretamente pelo método de tratamento (B), em que oreferido método é aplicado ao paciente por 2 a 8 semanas e especialmente 6semanas, preferencialmente sem uma pausa,

seguido diretamente pelo método de tratamento (E), em que oreferido método é aplicado ao paciente por uma ou mais semanas, preferen-cialmente uma semana,

seguido diretamente pelo método de tratamento (D), em que oreferido método é aplicado ao paciente 2 a 12 vezes, mais preferencialmente4 a 8 vezes e especialmente cerca de 6 vezes, preferencialmente sem umapausa,

opcionalmente seguido diretamente pelo método de tratamento(E), em que o referido método é aplicado ao paciente por no mínimo 4 se-manas, ou preferencialmente até ocorrer progressão, doença estável, reaçãoparcial/total ou cura.

Um objeto preferencial da presente invenção refere-se a um mé-todo ou um uso de acordo com a invenção, em que o referido Iigante de in-tegrina específico é preferencialmente administrado em dias nos quais a ra-dioterapia focai fracionada é administrada ou liberada para o paciente, e pre-ferencialmente em que a administração é uma administração oportuna con-forme descrito aqui, neste pedido de patente de patente.

Mais preferencialmente, a radioterapia é administrada ou libera-da em um ou mais dias nos quais a administração do Iigante de integrinaespecífico ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) e/ou os sais farmaceuticamen-te aceitáveis do mesmo, preferencialmente ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVai), também ocorre.

Um objeto preferencial da presente invenção portanto é um mé-todo para tratar câncer, preferencialmente selecionado entre tumores cere-brais conforme descrito aqui, neste pedido de patente de patente, em que:

a) na semana 1, opcionalmente ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) é ad-ministrado ao paciente ém um esquema de administração semanalconforme descrito aqui, neste pedido de patente de patente,

b) nas semanas 2 a 7, no mínimo um agente coterapêutico contra câncerconforme descrito aqui, neste pedido de patente de patente, é aplicadoao paciente, preferencialmente selecionado entre agentes quimioterá-picos e radioterapia conforme descrito aqui, neste pedido de patente depatente, junto com a administração de ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVaI) em um esquema de administração semanal conforme descritoaqui, neste pedido de patente de patente,

c) nas semanas 8 a 11, ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) é administradoao paciente em um esquema de administração semanal conforme des-crito aqui, neste pedido de patente de patente,

d) nas semanas 12 a 35, ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) é administra-do ao paciente em um esquema de administração semanal conformedescrito aqui, neste pedido de patente de patente, a cada quarta se-mana suplementado pela administração de um agente coterapêuticocontra câncer diferente de radioterapia, preferencialmente o agentequimioterápico da etapa b), em que o agente coterapêutico contra cân-cer diferente de radioterapia é preferencialmente administrado nas se-manas 12,16, 20, 24, 28 e 32.

Uma administração oportuna conforme descrito aqui, neste pe-dido de patente de patente, é preferencial para ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVaI) durante as semanas 2 a 7. O agente coterapêutico contra câncerdiferente de radioterapia a ser aplicado nas etapas b) e c) é preferencialmen-te selecionado entre agentes quimioterápicos, mais preferencialmente sele-cionado entre agentes alquilantes, ainda mais preferencialmente selecionadoentre carboplatina, cisplatina, ciclofosfamida, dacarbazina, carmustina, ifos-famida, lomustina, temozolomida e altretamina, e especial e preferencial-mente selecionado entre temozolomida e dacarbazina.

Um objeto preferencial da presente invenção portanto é um mé-todo para tratar câncer, preferencialmente selecionado entre tumores cere-brais conforme descrito aqui, neste pedido de patente de patente, em que:

d) na semana 1, opcionalmente ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) é ad-ministrado ao paciente em um esquema de administração semanalconforme descrito aqui, neste pedido de patente de patente,

e) nas semanas 2 a 7, radioterapia conforme descrito aqui, neste pedidode patente de patente, preferencialmente fracionada ou uma radiotera-pia focai conforme descrito aqui, neste pedido de patente de patente, éaplicada ao paciente, preferencialmente, junto com a administração deciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) em um esquema de administraçãosemanal conforme descrito aqui, neste pedido de patente de patente, ejunto com no mínimo um agente quimioterápico,

f) nas semanas 8 a 11, ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) é administradoao paciente em um esquema de administração semanal conforme des-crito aqui, neste pedido de patente de patente,

g) nas semanas 12 a 35, ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) é administra-do ao paciente em um esquema de administração semanal conformedescrito aqui, neste pedido de patente de patente, a cada quarta se-mena suplementado pela administração de no mínimo um agente qui-mioterápico da etapa b), em que o referido agente quimioterápico épreferencialmente administrado nas semanas 12,16, 20, 24, 28 e 32.

Neste método de tratamento, no mínimo um agente quimioterá-pico é preferencialmente selecionado entre agentes alquilantes, tais comocarboplatina, cisplatina, ciclofosfamida, dacarbazina, carmustina, ifosfamida,lomustina, temozolomida e altretamina, e mais preferencialmente seleciona-dos entre temozolomida e dacarbazina, e ou selecionados entre o grupoconsistindo em Herceptin, Bevacizumab, Cetuximab, Nimotuzumab, Sorafe-nib, Sunitinib e ZD6474. Uma administração oportuna conforme descrito a-qui, neste pedido de patente de patente, é preferencial para ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVaI) durante as semanas 2 a 7.

Um objeto preferencial da presente invenção é um método detratamento (F), compreendendo ou preferencialmente consistindo das se-guintes etapas ou tratamentos:

• Ciclo-(Arg-GIy-Asp-DPhe-NMeVaI) é administrado em uma dose exatade cerca de 500 mg ou cerca de 2000 mg por i. v. duas vezes por se-mana (preferencialmente no Dia 1 e 4, por exemplo, segunda-feira equinta-feira ou terça-feira e sexta-feira) por 35 semanas, preferencial-mente sem pausa. O tratamento com ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVaI) preferencialmente se inicia no Dia 1 de cada semana;

• Tratamento adicional (1) (Semanas 2 a 7 (máx. de 7 semanas)):Iniciando no Dia 1 da Semana 2, tratamento com TMZ e RT será admi-nistrado além do ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal), como se segue:Temomozolomida (TMZ) é administrado por via oral por 6 semanas, emuma dose diária de cerca de 75 mg/m2 (7 dias por semana),

Radioterapia focai (RT) é liberada por 6 semanas, preferencialmenteuma vez ao dia em cerca de 2 Gy por fração, 5 dias consecuti-vos/semana, para um total de cerca de 60 Gy. (preferencialmente a serprescrito de acordo com as orientações da Comissão Internacional so-bre Unidades Radiológicas). Máscaras de imobilização adequadas po-dem ser usadsa opcionalmente para assegurar a reprodutibilidade. ovolume do tratamento pode opcionalmente ser determinado com basieem Gd-MRI pré-operatório do cérebro. O volume do tratamento prefe-rencialmente inclui o contraste reforçador de lesão conforme determl·nado pela Gd-MRI, preferencialmente mais uma margem de 2 a 3 cmem torno da lesão.

• Tratamento adicional (2) (Semanas 8 a 35)):. Iniciando 4 semanas depois do fim da RT (isto é, na Semana 12), con-comitante com tratamento com cilengitide, os sujeitos recebem quimio-terapia com TMZ em uma dose de 150 a 200 mg/m2 diariamente por 5dias (preferencialmente dias 1 a 5 de uma dada semana de tratamento)a cada 4 semanas (isto é, Semanas 12, 16, 20, 24, 28 e 32) por até 6ciclos.

Neste método de tratamento (F), o ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) é preferencialmente administrado em administração oportuna con-forme descrito aqui, neste pedido de patente de patente, preferencialmentecom respeito ao administração da RT e/ou da TMZ; por exemplo, o ciclo-(Arg-GIy-Asp-DPhe-NMeVaI) é administrado cerca de 3 horas (h) (= início dainfusão de cerca de 1 hora) antes da liberação da RT; e TMZ é preferencial-mente depois da administração do ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal), maspreferencialmente antes da liberação da RT, mais preferencialmente dentrode duas horas antes da liberação da RT, ainda mais preferencialmente den-tro de uma hora antes da liberação da RT, e especialmente cerca de umahora antes da liberação da RT. No entanto, também pode ser opcionalmenteadequado administrar a TMZ dentro de cerca de uma hora depois da Iibera-ção da RT.

No entanto, o esquema de 35 semanas do método de tratamen-to (F) pode ser terminado ou encurtado, se ocorrerem efeitos adversos ina-ceitáveis, uma progressão precoce, doença estável ou cura do paciente.

Um método de tratamento preferencial é representado no es-quema abaixo:

<figure>figure see original document page 87</figure>

(N. do T.: Fazer as seguintes substituições no esquema acima: "Screening"por "Triagem", "Treatment Start" por "Início do Tratamento", "6 months" por"6 meses", "weeks" por "semanas", "Final Visit" por "Visita Final", "ContinuingTreatment" por "Continuação do Tratamento", "2x/week, until progression"por "2χ/ semana até progressão", "Additional treaments" por "Tratamentosadicionais", "p.o. daily for 6 weeks (during radiation)" por "por via oral diaria-mente por 6 semanas (durante radiação)", "Followed by" por "Seguida por","p.o. day 1-5 every 28 days for 6 cycles (maintenance therapy)" por "por viaoral dia 1-5 a cada 28 dias por 6 ciclos (terapia de manutenção)", "Focai RT5x/week" por "RT Focai 5x/semana", e "total dose" por "dose total".)

Cilengitide (EMD121 974) e temozolomida com terapia de radia-ção concomitante, seguido por terapia de manutenção com cilengitide e te-mozolomida em sujeitos que necessitem do mesmo, tais como sujeitos comglioblastoma recém-diagnosticado

Os métodos de tratamento conforme descrito aqui, neste pedidode patente de patente, e especialmente os métodos de tratamento (A) a (F)conforme descrito acima, opcionalmente podem ser seguidos por um trata-mento de continuação compreendendo ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal),preferencialmente um tratamento de continuação conforme dado abaixo:

Sujeitos que completam 35 semanas de tratamento sem pro-gressão e preferencialmente para os quais o tratamento continuado com ci-Clo-(Arg-GIy-Asp-DPhe-NMeVaI) é considerado benéfico, por exemplo, pelomédico, podem continuar em terapia com ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal)(duas vezes por semana cerca de 500 mg ou cerca de 2000 mg, i. v.). Porconseguinte, depois das primeiras 35 semanas de terapia, a referida terapiacom ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) pode ser continuada até ocorrer pro-gressão, doença estável, cura ou efeitos adversos inaceitáveis.

Um objeto preferencial da presente invenção refere-se a méto-dos de tratamento conforme descrito aqui, neste pedido de patente de paten-te, e preferencialmente um ou mais dos métodos de tratamento, preferenci-almente selecionado entre o grupo consistindo do método de tratamento (A),método de tratamento (B), método de tratamento (C), método de tratamento(D), método de tratamento (E), método de tratamento (F)1 e combinaçõesdos mesmos, em que o esquema de administração de duas vezes por se-mana referente a ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) e/ou os derivados, sol-vatos e/ou sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo, é substituído porum esquema de administração de três vezes por semana, preferencialmenteum esquema de administração de três vezes por semana conforme descritoaqui, neste pedido de patente de patente, ou um esquema de administraçãode cinco vezes por semana, preferencialmente um esquema de administra-ção de cinco vezes por semana conforme descrito aqui, neste pedido de pa-tente de patente. Este objetivo preferencial preferencialmente pode ser van-tajosamente aplicado a pacientes que não pertencem ao grupo de "pacien-tes metilados" de acordo com a invenção. Os critérios para os "pacientesmetilados" são dados e discutidos em detalhes abaixo. Preferencialmente,pacientes não pertencem ao grupo de "pacientes metilados" que não podeser mostrado que têm um estado de metilação de DNA aumentado, metila-ção parcial ou completa ou no mínimo um promotor de no mínimo um genede MGMT e/ou ou somente um nível Moderado de proteína MGMT, ou prefe-rencialmente menos, em comparção com o nível de proteína MGMT expres-sado por linfócitos normais.

Um objeto especialmente preferencial da presente invenção é ouso de um Iigante de integrina específico conforme descrito aqui, neste pe-dido de patente de patente, preferencialmente um Iigante de integrina espe-cífico selecionado entre o grupo consistindo em ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVaI), os derivados, solvatos e sais farmaceuticamente aceitáveis domesmo, e especialmente o uso de ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) para afabricação de um medicamento a ser usado nos métodos de tratamentodescrito aqui, neste pedido de patente de patente, e especialmente para afabricação de um medicamento a ser usado em um ou mais dos métodos detratamento, preferencialmente selecionados entre o grupo consistindo emmétodo de tratamento (A), método de tratamento (B), método de tratamento(C), método de tratamento (D), método de tratamento (E), método de trata-mento (F), e combinações dos mesmos.

Outro objeto preferencial da presente invenção refere-se a ummétodo de tratamento de tumores cerebrais primários, compreendendo ad-ministrar um Iigante de integrina específico conforme descrito aqui, nestepedido de patente de patente, preferencialmente um Iigante de integrina es-pecífico selecionado entre o grupo consistindo em LM609, Vitaxin, Abegrin,Abciximab1 P1F6, 14D9.F8, CNT095 e ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val),mais preferencialmente Vitaxin1 Abegrin1 CNT095, Abciximab e ciclo-(Arg-GIy-Asp-DPhe-NMe-VaI), ainda mais preferencialmente selecionado entreVitaxin1 Abegrin e ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val), e no mínimo um agen-te coterapêutico contra câncer, preferencialmente selecionado entre no mí-nimo um agente coterapêutico contra câncer conforme descrito aqui, nestepedido de patente de patente, mais preferencialmente selecionado entre a-gentes quimioterápicos conforme descrito aqui, neste pedido de patente depatente, preferencialmente selecionado entre o grupo consistindo em nitrosouréia e dervados de nitroso uréia, tais como ACNU, BCNU e CCN.U, vincris-tina, taxanos, tais como paclitaxel e docetaxel, e radioterapia, preferencial-mente radioterapia focai fractionada conforme descrito aqui, neste pedido depatente de patente. Preferencialmente, o Iigante de integrina específico éadministrado em uma administração oportuna conforme descrito aqui, nestepedido de patente de patente. Se for aplicada radioterapia, preferencialmen-te é aplicada como uma radioterapia focai fractionada consistindo em cercade 60 Gy, preferencialmente liberada durante um período de seis semanas.Se o Iigante de integrina específico for ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal),preferencialmente é administrado ao paciente em uma dosagem e/ou umesquema de administração semanal conforme descrito nos métodos de tra-tamento e/ou esquemas de administração descritos aqui, neste pedido depatente de patente.

Outro objeto preferencial da presente invenção refere-se a ummétodo de tratamento de tumores cerebrais primários, compreendendo ad-ministrar um Iigante de integrina específico conforme descrito aqui, nestepedido de patente de patente, preferencialmente um Iigante de integrina es-pecífico selecionado entre o grupo consistindo em LM609, Vitaxin, Abegrin,Abciximab, P1F6, 14D9.F8, CNT095 e ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val),mais preferencialmente Vitaxin, Abegrin, CNT095, Abciximab e ciclo-(Arg-GIy-Asp-DPhe-NMe-VaI), ainda mais preferencialmente selecionado entreVitaxin, Abegrin e ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val), e no mínimo um agen-te coterapêutico contra câncer, selecionado entre agentes quimioterápicosconforme descrito aqui, neste pedido de patente de patente, preferencial-mente procarbazina ou dacarbazina, e radioterapia, preferencialmente radio-terapia focai fractionada conforme descrito aqui, neste pedido de patente depatente. Mais preferencialmente, é aplicada uma combinação de no mínimoum agente quimioterápico, incluindo dacarbazina ou procarbazina, e radiote-rapia. Preferencialmente, o Iigante de integrina específico é administrado emuma administração oportuna conforme descrito aqui, neste pedido de paten-te de patente. A radioterapia aplicada é preferencialmente aplicada comouma radioterapia focai fractionada consistindo em cerca de 60 Gy, preferen-cialmente liberada durante um período de seis semanas. Se o Iigante de in-tegrina específico for ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal), preferencialmente éadministrado ao paciente em uma dosagem e/ou um esquema de adminis-tração semanal conforme descrito nos métodos de tratamento e/ou esque-mas de administração descritos aqui, neste pedido de patente de patente.

Outro objeto preferencial da presente invenção refere-se a ummétodo de tratamento de tumores cerebrais primários, compreendendo ad-ministrar um Iigante de integrina específico conforme descrito aqui, nestepedido de patente de patente, preferencialmente um Iigante de integrina es-pecífico selecionado entre o grupo consistindo em LM609, Vitaxin, Abegrin,Abciximab, P1F6, 14D9.F8, CNT095 e ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val),mais preferencialmente Vitaxin, Abegrin, CNT095, Abciximab e ciclo-(Arg-GIy-Asp-DPhe-NMe-VaI), ainda mais preferencialmente selecionado entreVitaxin, Abegrin e ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val), e no mínimo um agen-te coterapêutico contra câncer, preferencialmente selecionado entre agentesquimioterápicos conforme descrito aqui, neste pedido de patente de patente,preferencialmente selecionado entre o grupo consistindo em Herceptin, Be-vacizumab (rhuMAb-VEGF, Avastin®), Cetuximab (Erbitux®) e Nimotuzumab,e preferencialmente Sorafenib (Nexavar®), Sunitinib (Sutent®) e ZD6474(ZACTIMA®), opcionalmente combinados com radioterapia, preferencialmen-te radioterapia focai fractionada conforme descrito aqui, neste pedido de pa-tente de patente. Preferencialmente, o Iigante de integrina específico é ad-ministrado em uma administração oportuna conforme descrito aqui, nestepedido de patente de patente. Se for aplicada radioterapia, preferencialmen-te é aplicada como uma radioterapia focai fractionada consistindo em cercade 60 Gy1 preferencialmente liberada durante um período de cerca de seissemanas. Se o Iigante de integrina específico for ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVaI), preferencialmente é administrado ao paciente em uma dosageme/ou um esquema de administração semanal conforme descrito nos métodosde tratamento e/ou esquemas de administração descritos aqui, neste pedidode patente de patente.

Outro objeto preferencial da presente invenção refere-se a ummétodo de tratamento de câncer pulmonar localmente avançado, compreen-dendo administrar no mínimo um Iigante de integrina específico, mais prefe-rencialmente no mínimo um Iigante de integrina específico conforme descritoaqui, neste pedido de patente de patente, ainda mais preferencialmente umIigante de integrina específico selecionado entre o grupo consistindo emLM609, Vitaxin, Abegrin, Abciximab, P1F6, 14D9.F8, CNT095 e ciclo-(Arg-GIy-Asp-DPhe-NMe-VaI), mais preferencialmente Vitaxin, Abegrin, CNT095,Abciximab e ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val), e especial e preferencial-mente consistindo em ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) e/ou um sal farma-ceuticamente aceitável do mesmo, em combinação com no mínimo um a-gente coterapêutico contra câncer conforme descrito aqui, neste pedido depatente de patente, preferencialmente selecionado entre agentes alquilantese antimetabólitos conforme descrito aqui, neste pedido de patente de paten-te, e radioterapia conforme descrito aqui, neste pedido de patente de paten-te. Preferencialmente é aplicada uma combinação de no mínimo um agentealquilante e no mínimo um antimetabólito, preferencialmente em combinaçãocom radioterapia, preferencialmente radioterapia focai fractionada conformedescrito aqui, neste pedido de patente de patente. Preferencialmente, umacombinação do agente alquilante cisplatina com o antimetabólito gencitabinaou uma combinação do agente alquilante carboplatina e o antimetabólitogencitabina é aplicada, opcionalmente combinada com radioterapia focaifractionada, preferencialmente consistindo em cerca de 60 Gy, preferencial-mente liberada durante um período de cerca de seis semanas. Preferencial-mente, o Iigante de integrina específico é administrado em uma administra-ção oportuna conforme descrito aqui, neste pedido de patente de patente.Se o Iigante de integrina específico for ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal),preferencialmente é administrado ao paciente em uma dosagem e/ou umesquema de administração semanal conforme descrito nos métodos de tra-tamento e/ou esquemas de administração descritos aqui, neste pedido depatente de patente.

Outro objeto preferencial da presente invenção refere-se a ummétodo de tratamento de câncer de cabeça e pescoço localmente avançado,compreendendo administrar no mínimo um Iigante de integrina específico,mais preferencialmente no mínimo um Iigante de integrina específico con-forme descrito aqui, neste pedido de patente de patente, ainda mais prefe-rencialmente um Iigante de integrina específico selecionado entre o grupoconsistindo em LM609, Vitaxin, Abegrinl Abciximab, P1F6, 14D9.F8, CN-T095 e ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val), mais preferencialmente Vitaxin,Abegrin, CNT095, Abciximab e ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val), e espe-cial e preferencialmente consistindo em ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal)e/ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em combinação comno mínimo um agente coterapêutico contra câncer conforme descrito aqui,neste pedido de patente de patente, preferencialmente selecionado entreagentes alquilantes, por exemplo cisplatina, antimetabólitos, por exemplo 5-FU ou combinações compreendendo 5-FU, alcalóides, por exemplo paclita-xel ou docetaxel, e compostos orientados contra PDGF, PDGFR, EGFR,VEGF, VEGFR e/ou VEGFR2, preferencialmente selecionados entre Bevaci-zumab (rhuMAb-VEGF, Avastin®), Cetuximab (Erbitux®), Nimotuzumab, So-rafenib (Nexavar®), Sunitinib (Sutent®) e ZD6474 (ZACTIMA®), e radioterapi-a, preferencialmente radioterapia focai fractionada conforme descrito aqui,neste pedido de patente de patente, e combinações dos mesmos.

É preferencial uma combinação de no mínimo um agente alqui-lante, preferencialmente compreendendo cisplatina, e radioterapia, preferen-cialmente radioterapia focai fractionada conforme descrito aqui, neste pedidode patente de patente. Adicionalmente preferencial é uma combinação de nomínimo um antimetabólito, compreendendo 5-FU, e radioterapia, preferenci-almente radioterapia focai fractionada conforme descrito aqui, neste pedidode patente de patente. Adicionalmente preferencial é uma combinação de nomínimo um alcalóide, compreendendo paclitaxel ou docetaxel, e radioterapi-a, preferencialmente radioterapia focai fractionada conforme descrito aqui,neste pedido de patente de patente.

É preferencial uma combinação de no mínimo um agente alqui-lante, preferencialmente compreendendo cisplatina, no mínimo um antimeta-bólito, compreendendo 5-FU, e radioterapia, preferencialmente radioterapiafocai fractionada conforme descrito aqui, neste pedido de patente de paten-te. Adicionalmente preferencial é uma combinação de no mínimo um com-posto orientado contra PDGF, PDGFR, EGFR, VEGF, VEGFR e/ou VEG-FR2, preferencialmente selecionado entre Bevacizumab (rhuMAb-VEGF,Avastin®), Cetuximab (Erbitux®), NimotUzumab, Sorafenib (Nexavar®), Suni-tinib (Sutent®) e ZD6474 (ZACTIMA®), e radioterapia, preferencialmente ra-dioterapia focai fractionada conforme descrito aqui, neste pedido de patentede patente. A radioterapia focai fractionada preferencialmente consiste emcerca de 60 a 70 Gy, preferencialmente liberada durante um período de cer-ca de seis semanas, cerca de 2 ou cerca de 3 Gy por fração. Preferencial-mente, o Iigante de integrina específico é administrado em uma administra-ção oportuna conforme descrito aqui, neste pedido de patente de patente.Se o Iigante de integrina específico for ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal),preferencialmente é administrado ao paciente em uma dosagem e/ou umesquema de administração semanal conforme descrito nos métodos de tra-tamento e/ou esquemas de administração descrito aqui, neste pedido depatente de patente.

Outro objetivo preferencial da presente invenção refere-se a ummétodo de tratamento de câncer de cabeça e pescoço localmente avançado,compreendendo administrar no mínimo um Iigante de integrina específico,mais preferencialmente no mínimo um Iigante de integrina específico con-forme descrito aqui, neste pedido de patente de patente, ainda mais prefe-rencialmente um Iigante de integrina específico selecionado entre o grupoconsistindo em LM609, Vitaxin, Abegrin, Abciximab, P1F6, 14D9.F8, CN-T095 e ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val), niais preferencialmente Vitaxin,Abegrin, CNT095, Abciximab e ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val), e espe-cial e preferencialmente consistindo em ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal)e/ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em combinação comno mínimo um agente coterapêutico contra câncer conforme descrito aqui,neste pedido de patente de patente, preferencialmente três agentes cotera-pêuticos contra câncer, selecionado entre agentes alquilantes, por exemplocisplatina, antimetabólitos, por exemplo 5-FU ou combinações compreen-dendo 5-FU, e alcalóides, por exemplo paclitaxel ou docetaxel. Em câncerde cabeça e pescoço metastático, a combinação de um Iigante de integrinaespecífico com os coterapéuticos contra câncer Cisplatina, 5-FU e Taxan1preferencialmente paclitaxel ou docetaxel, é especialmente preferencial.

Outro objeto preferencial da presente invenção refere-se a ummétodo de tratamento de câncer de cabeça e pescoço, preferencialmentecâncer de cabeça e pescoço localmente avançado, compreendendo admi-nistrar no mínimo um Iigante de integrina específico, mais preferencialmenteno mínimo um Iigante de integrina específico conforme descrito aqui, nestepedido de patente de patente, ainda mais preferencialmente um Iigante deintegrina específico selecionado entre o grupo consistindo em LM609, Vita-xin, Abegrin, Abciximab, P1F6, 14D9.F8, CNT095 e ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val), mais preferencialmente Vitaxin, Abegrin, CNT095, Abcixi-mab e ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val), e especial e preferencialmenteconsistindo em ciclo-(Arg-GIy-Asp-DPhe-NMeVaI) e/ou um sal farmaceuti-camente aceitável do mesmo, em combinação com no mínimo um agentecoterapêutico contra câncer conforme descrito aqui, neste pedido de patentede patente, selecionado entre compostos orientados contra PDGF, PDGFR,EGFR, VEGF, VEGFR e/ou VEGFR2, preferencialmente selecionado entreBevacizumab (rhuMAb-VEGF, Avastin®), Cetuximab (Erbitux®), Nimotuzu-mab, Sorafenib (Nexavar®), Sunitinib (Sutent®) e ZD6474 (ZACTIMA®), eradioterapia, preferencialmente radioterapia focai fractionada conforme des-crito aqui, neste pedido de patente de patente, mais preferencialmente 50 a70 Gy, em frações de 1,2 a 2,2 Gy, preferencialmente cerca de 2 Gy, prefe-rencialmente aplicada em 5 dias por semana. Especial e preferencialmente,é aplicada uma combinação de um Iigante de integrina específico, no mínimoum composto orientado e radioterapia conforme descrito acima.

Se for aplicada radioterapia focai fractionada com respeito a me-tástases cerebrais, preferencialmente metástases cerebrais de outros tiposde câncer conforme descrito aqui, neste pedido de patente de patente, prefe-rencialmente consiste em cerca de 25 a 45 Gy, mais preferencialmente 30 a40 gy, preferencialmente liberada em frações de 1,5 a 3,5, mais preferenci-almente 1,8 a 3, por exemplo, cerca de 2 Gy ou cerca de 3 Gy, preferencial-mente durante um período de cerca de três semanas, preferencialmente 5dias por semana.

Outro objeto preferencial da presente invenção refere-se a ummétodo de tratamento de melanoma maligno metastático, compreendendoadministrar no mínimo um Iigante de integrina específico, mais preferencial-mente no mínimo um Iigante de integrina específico conforme descrito aqui,neste pedido de patente de patente, ainda mais preferencialmente no míni-mo um Iigante de integrina específico selecionado entre o grupo consistindoem LM609, Vitaxin, Abegrin, Abciximab, P1F6, 14D9.F8, CNT095 e ciclo-(Arg-GIy-Asp-DPhe-NMe-VaI), mais preferencialmente Vitaxin, Abegrin, CN-T095, Abciximab e ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val), e especial e prefe-rencialmente um ou dois Iigantes de integrina específicos, incluindo ciclo-(Arg-GIy-Asp-DPhe-NMeVaI) e/ou um sal farmaceuticamente aceitável domesmo, em combinação com no mínimo um agente coterapêutico contracâncer conforme descrito aqui, neste pedido de patente de patente, prefe-rencialmente selecionado entre agentes alquilantes, por exemplo dacarbazi-na, e radioterapia conforme descrito aqui, neste pedido de patente de paten-te. Preferencialmente é aplicada uma combinação de no mínimo um agentealquilante em combinação com radioterapia, preferencialmente radioterapiafocai fractionada conforme descrito aqui, neste pedido de patente de paten-te. Preferencialmente, o Iigante de integrina específico é administrado emuma administração oportuna conforme descrito aqui, neste pedido de paten-te de patente. Se o ligante de integrina específico for ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal), preferencialmente é administrado ao paciente em uma do-sagem e/ou um esquema de administração semanal conforme descrito nosmétodos de tratamento e/ou esquemas de administração descritos aqui, nes-te pedido de patente de patente.

Outro objetivo preferencial da presente invenção refere-se a ummétodo de tratamento de carcinoma de próstata metastático, compreenden-do administrar no mínimo um ligante de integrina específico, mais preferen-cialmente no mínimo um Iigante de integrina específico conforme descritoaqui, neste pedido de patente de patente, ainda mais preferencialmente umIigante de integrina específico selecionado entre o grupo consistindo emLM609, Vitaxin, Abegrin, Abciximab, P1F6, 14D9.F8, CNT095 e ciclo-(Arg-GIy-Asp-DPhe-NMe-Val), mais preferencialmente Vitaxin, Abegrin, CNT095,Abciximab e ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val), e especial e preferencial-mente consistindo em ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) e/ou um sal farma-ceuticamente aceitável do mesmo, em combinação com no mínimo um a -gente coterapêutico contra câncer conforme descrito aqui, neste pedido depatente de patente, preferencialmente selecionado entre alcalóides, por e-xemplo docetaxel e paclitaxel, antibiotics, por exemplo doxorrubicina e epir-rubicina, e hormônios e antagonistas dos mesmos, por exemplo esteróides,e preferencialmente radioterapia conforme descrito aqui, neste pedido depatente de patente. Preferencialmente, o ligante de integrina específico éadministrado em uma administração oportuna conforme descrito aqui, nestepedido de patente de patente. Se o ligante de integrina específico for ciclo-(Arg-GIy-Asp-DPhe-NMeVal), preferencialmente é administrado ao pacienteem uma dosagem e/ou um esquema de administração semanal conformedescrito nos métodos de tratamento e/ou esquemas de administração descri-tos aqui, neste pedido de patente de patente.

Outro objetivo preferencial da presente invenção refere-se a ummétodo de irradiação profilática, preferencialmente irradiação cranial profilá-tica ou irradiação mediastinal profilática, compreendendo administrar no mí-nimo um Iigante de integrina específico, mais preferencialmente no mínimoum Iigante de integrina específico conforme descrito aqui, neste pedido depatente de patente, ainda mais preferencialmente um Iigante de integrinaespecífico selecionado entre o grupo consistindo em LM609, Vitaxin, Abe-grin, Abciximab, P1F6, 14D9.F8, CNT095 e ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val), mais preferencialmente Vitaxin, Abegrin1 CNT095, Abciximab e ciclo-(Arg-GIy-Asp-DPhe-NMe-VaI), e especial e preferencialmente consistindoem ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) e/ou um sal farmaceuticamente acei-tável do mesmo, e radioterapia, preferencialmente radioterapia focai fractio-nada conforme descrito aqui, neste pedido de patente de patente. O métodode irradiação cranial profilática preferencialmente è aplicado com respeito acâncer pulmonar, preferencialmente câncer pulmonar de células pequenas,ainda mais preferencialmente câncer pulmonar de células pequenas emcompleta remissão, preferencialmente depois de quimioterapia e/ou proce-dimentos cirúrgicos. O método de irradiação mediastinal profilática preferen-cialmente é aplicado com respeito a câncer pulmonar, mais preferencialmen-te câncer pulmonar de células pequenas, ainda mais preferencialmente cân-cer pulmonar de células pequenas em completa remissão, preferencialmentedepois de quimioterapia e/ou procedimentos cirúrgicos.

Em todos os métodos de tratamento ou métodos de irradiaçãoprofilática dados acima, é preferencial a administração oportuna de no míni-mo um Iigante de integrina específico.

Com respeito aos métodos de tratamento, às quantidades admi-nistradas e/ou aos esquemas de administração descritos aqui, neste pedidode patente de patente, com referência ao Iigante de integrina específico ci-Clo-(Arg-GIy-Asp-DPhe-NMeVaI) e/ou um sal farmaceuticamente aceitáveldo mesmo, preferencialmente de ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal), asquantidades de (cerca de) 500 mg ou (cerca de) 1000 mg a serem adminis-tradas em cada administração bem como as quantidades de (cerca de)1000mg, (cerca de) 1500 mg, (cerca de) 2000 mg, (cerca de) 2500 mg, (cerca de)4000 mg e (cerca de) 6000 mg administradas para os esquemas de adminis-tração semanais são preferencialmente calculadas sobre o composto ciclo-(Arg-GIy-Asp-DPhe-NMeVaI) como tal (o qual também é referido como o salinterior ou interno de ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal). Por conseguinte, seuma forma diferente ou derivado, tal como os sais e solvatos farmacologi-camente aceitáveis, do Iigante de integrina específico ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVaI) for ser administrada ao paciente, preferencialmente é admi-nistrada em uma quantidade equimolar às quantidades dadas acima para ocomposto ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) como tal.

Os Iigantes de integrina específicos a serem usados de acordocom a invenção surpreendentemente apresentam um efeito vantajosamenteaprimorado sobre pacientes que estão tendo estado de metilação de DNAaumentado, estão tendo uma metilação parcial ou completa ou no mínimoum promotor de no mínimo um gene de MGMT e/ou estão tendo um nívelanormal de proteína MGMT, especialmente um baixo nível anormal de prote-ína MGMT. Por conseguinte, a invenção proporciona medicamentos e méto-dos que podem ser usados vantajosamente para tratar pacientes associadoscom um ou mais dos efeitos ou defeitos supracitados.

Portanto, o objeto da presente invenção é o uso de um medica-mento conforme descrito aqui, neste pedido de patente de patente, e/ou ummétodo usando o referido medicamento para o tratamento de pacientes, emque o medicamento deve ser usado no tratamento de pacientes tendo umestado de metilação de DNA aumentado, pacientes apresentando metilaçãoparcial ou completa ou no mínimo um promotor de no mínimo um gene deMGMT e ou pacientes tendo um nível anormal de proteína MGMT, especi-almente um baixo nível anormal de proteína MGMT. Os pacientes referidossão preferencialmente referidos como "pacientes metilados".

Estes objetivos são explicados e discutidos em mais detalhesabaixo:

Metilação do gene de reparo de DNA 06-metilguanina-DNA me-tiltransferase (MGMT), denominado mais corretamente gene de reparo de06-metilguanina-DNA metiltransferase ou gene curto de reparo de MGMT,causa silenciamento genético. Esta modificação epigenética tem sido asso-ciada com um prognóstico favorável em pacientes com muitos tipos de cân-cer diferentes, tais como glioblastoma (GBM), os quais recebem agentesalquilantes, por exemplo, mostardas de nitrogênio, compostos de etilenoimi-na, sulfonatos de alquila e outros compostos com uma ação de alquilação,preferencialmente selecionados entre nitrosouréias, preferencialmente AC-NU1 BCNU e CCNU, bussulfan, melfalan, carboplatina, cisplatina, oxaliplati-na, ciclofosfamida, dacarbazinã, carmustina, ifosfamida e lomustina, temozo-Iomida e altretamina, ou camptotecina. Por conseguinte, há uma relação en-tre metilação de promotor de MGMT e o índice de sobrevida e sensibilidadea agentes alquilantes, tais como temozolomida. A enzima MGMT removegrupos alquila da posição 06 de guanina, o sítio de uma série de alquilaçõesde DNA induzidas por quimioterapia. Estas alquilações induzidas por quimio-terapia levam a lesão de DNA nas células tumorais, incluindo rompimentos ecombinações inadequadas de filamentos duplos de DNA, as quais disparamapoptose e citotoxidade [5,6]. A enzima MGMT repara dano de DNA, destemodo interferindo com os efeitos terapêuticos de agentes alquilantes dequimioterapia [7-10]. A metilação de regiões distintas do promotor MGMTilhota CpG está associada com silenciamento do gene e diminuída atividadede enzima de reparo de DNA [11-13]. Estudos prévios indicaram que 30 a40% dos pacientes com GBM têm promotor de MGMT metilado [1-4].

A metilação do promotor de MGMT e portanto o estado de meti-lação da MGMT pode ser determinada vantajosamente usando uma análisede PCR específica para metilação de 2 estágios sobre DNA extraído de a -mostras tumorais, tais como amostras tumorais as quais foram instantanea-mente congeladas na cirurgia. A análise de PCR específica para metilaçãopode ser facilmente realizada de acordo com métodos na técnica. Preferen-cialmente pode ser realizada pelo Method by Hegi et al., NEJM, 2005, 352;997-1003); o método seguinte foi usado com sucesso em uma prova Fase Illavaliando o estado de metilação de um subgrupo dos pacientes (tecido dis-ponível):

Extração de DNA e realção de cadeia polimerase específica para metilação

DNA genômico é isolado de uma ou duas seções de parafina detecido de glioblastoma (Ex-Wax DNA Extraction Kit S4530, Chemicon) (adigestão por proteinase durou um máximo de seis seis horas). DNA é desna-turado com hidróxido de sódio em um volume dè 35 μl e submetido a trata-mento com bissulfito em um volume de 360 μl (4,14 M de bissulfito de sódio e20 mM de hidroquinona) por cinco horas a 55°C e em seguida purificado(Wizard DNA Clean-Up System A7280, Promega). Citosina não metilada,mas não seu complemento metilado, é modificada em uracila pelo tratamen-to. A reação de cadeia polimerase (PCR) específica para metilação é reali-zada em uma abordagem de duas etapas. [Palmisano WA, Divine KK, Sac-comanno G, et al. Predicting Iung câncer by detecting aberrant promoter me-thilation in sputum. Câncer Res 2000;60:5954-8.]

Os resultados podem ser confirmados em um experimento inde-pendente, inicianco com reisolamento de DNA do tumor. Os produtos dePCR são separados sobre géis agarose a 4 por cento. Os pesquisadoresque selecionaram e analisaram as amostras de glioblastoma não tiveramacesso a nenhuma informação clínica.

Alternativamente, pode ser realizado de acordo com o métododescrito por Donson et al. no Journal Pedriatic Blood Câncer, 2006.

De acordo com Donson et al., a metilação do promotor deMGMT/estado de metilação da MGMT pode ser vantajosamente determina-do de acordo com o seguinte procedimento:

Extração de DNA e Reação de Cadeia Polimerase Específica para Metilação

DNA genômico é isolado a partir de tumor instantaneamentecongelado obtido em cirurgia (COMIRB 95-500) e linhagens de células deGBM usando um kit DNeasy (Qiagen, Valencia, CA). Padrões de metilaçãode DNA na ilha de CpG do gene MGMT são determinados por PCR específi-ca para metilação. Este procedimento envolve modificação química de cito-sinas não metiladas, porém não citosinas metiladas, em uracila, seguida poruma reação de PCR estabelecida em dois estágios [17]. Um micrograma deDNA é desnaturado com hidróxido de sódio (conc. final de 0,3 M) em umvolume de 55 ml e submetido a tratamento com bissulfito em um volume de610 ml (3,3 M de bissulfito de sódio e 0,5 mM de hidroquinona) por 16 horasa 55°C e em seguida purificado usando o sistema Wizard DNA Clean-UpSystem (Promega, Madison, Wl). PCR é realizado para amplificar um frag-mento de 289 bp do gene MGMT incluindo uma porção da região promotorarica em CpG. Os iniciadores reconhecem o modelo modificado com bissulfitomas não discriminam entre alelos metilados e não metilados. Seqüências deiniciadores usadas no estágio 1 de amplificação do gene de MGMT são co-mo se segue:

MGMT-estágio 1-Forward, 50-GGATATGTTGGGATAGTT- 30; e MGMT-estágio 1-Reversoe, 50-CCAAAAACCCCAAACCC- 30. Master Mix (Fermen-tas, Hanover, MD). O protocolo de amplificação por PCR para o estágio 1 écomo se segue: 95°C por 10 min, em seguida desnaturar a 95°C por 30 seg,recozer a 52°C por 30 seg, extensão a 72°C por 30 seg por 40 ciclos segui-dos por uma extensão final de 10 min. Um volume de 25 ml é usado em to-das as reações de PCR. Os produtos de PCR do estágio -1 são diluídos 50vezes, e 5 ml desta diluição é submetido a uma reação de PCR do estágio -2na qual são usados iniciadores específicos para modelo metilado ou nãometilado. Seqüências de iniciadores para o estágio 2 de PCR para a reaçãonão metilada são MGMT-estágio 2-Forward, 50-TTTGTGTTTTGATGTTTGTAGGTTTTTGT-30 e MGMT-estágio 2-Reversoe,50-AACTCCACACTCTTCCAAAAACAAAACA- 30 e para a reação metiladaMGMT-estágio 2-forward 50-TTTCGACGTTCGTAGGTTTTCGC- 30 eMGMT-estágio 2-reverso 50-GCACTCTTCCGAAAACGAAACG- 30. O pro-tocolo de amplificação por PCR para o estágio 2 é como se segue: 95°C por10 min, em seguida desnaturar a 95°C por 15 seg, recozer a 62QC por 15seg, extensão a 72°C por 15 seg por 40 ciclos seguidos por uma extensão25 de final 10 min a 72°C. DNA de linfócitos humanos normais tratados in vitrocom Sssl metiltransferase (New England Biolabs, Beverly, MA) é usado co-mo controle positivo para alelos metilados de MGMT e DNA não tratado delinfócitos normais é usado como controle negativo para alelos metilados deMGMT. Cada reação de PCR (10 ml) é diretamente carregada sobre 4% degel agarose, corada com brometo de etídio e visualizada sob iluminação UV.Análise estatística pode ser realizada com métodos conhecidos na técnica,tais como os métodos de Kaplan-Meier, correlação e análises da importân-cia estatística, por exemplo usando o programa de análise estatística Prism(GraphPad Software, Inc., San Diego, CA).

Análise do estado de metilação do promotor de metiylguanina-DNA metiltransferase é realizada sobre tecido instantaneamente congeladodos pacientes. O estado de metilação de MGMT pode ser regularmente de-terminado a partir dos tumores. Em uma parte dos pacientes, as amostrastestadas para estado de metilação do promotor de MGMT se comprovaramparcialmente metiladas (figura 1). Nenhuma das amostras apresentou meti-lação completa. A metilação incompleta observada pode ser devida a hete-rogeneidade do tumor, linfócitos do sangue periférico infiltrantes e/ou vascu-latura. Para fins de comparação, pode ser determinado se metilação parcialdo promotor da MGMT tumoral pode ser responsável por esta observaçãoinvestigando o estado de metilação do promotor de MGMT das 6 linhagenscelulares de GBM, incluindo a linhagem celular 145 a qual é estabelecida apartir de um paciente que é tratado com temozolomida e cujo tumor instan-taneamente congelado também é analisado no estudo acima. Em quatro dasseis linhagens celulares estudadas, observa-se metilação parcial do promo-tor (figura 2). Os resultados mostram que mesmo em linhagens celulares deGBM puras, pode existir metilação de promotor de MGMT parcial.

Figura 1

Estado de metilação do promotor de MGMT em amostras debiópsia de GBM, conforme determinado por uma reação de PCR específicapara metilação estabelecida. DNA de linfócitos do sangue periférico normal(PBL) é usado como um controle para o promotor de MGMT não metilado(U), DNA enzimaticamente metilado de PBL (MPBL) serviu como um contro-le positivo para o promotor de MGMT metilado (M), e água é usada como umcontrole negativo para a reação de PCR. Uma escala de marcadores de 100bp é carregada para estimar o tamanho molecular, conforme mostrado naescala à esquerda (L).

Figura 2

Estado de metilação do promotor de MGMT em linhagens celula-res de GBM, conforme determinado por uma reação de PCR específica parametilação estabelecida. Uma escala de marcadores de 100 bp é carregadapara estimar o tamanho molecular, conforme mostrado na escala à esquerda (L).

A técnica de análise de MGMT descrita acima tem sido empre-gada na maioria dos estudos recentes mostrando que a metilação de MGMTé um previsor com sucesso dá resposta a agentes alquilantes [1-3]. Estatécnica superou técnicas anteriores de medição da atividade enzimática de-pois que foi demonstrado que a metilação de MGMT era a principal causa deperda de atividade enzimática de MGMT no GBM.

Pacientes que são testados como pacientes apresentando meti-lação de MGMT ou que podem ser testados como pacientes apresentandometilação de MGMT1 preferencialmente usando o método acima descrito, ummétodo análogo do mesmo, ou qualquer outro método o qual é igualmenteadequado de acordo com o entendimento daqueles versados na técnica,devem ser considerados como "pacientes metilados" de acordo com â in-venção, mais preferencialmente como pacientes tendo um aumento do esta-do de metilação de DNA e/ou como pacientes apresentando metilação par-cial ou completa ou no mínimo um promotor de no mínimo um gene deMGMT. Portanto eles pertencem ao coletivo de pacientes que podem serespecial vantajosamente tratados pelos métodos de tratamento ou os medi-camentos de acordo com a invenção.

No entanto, as técnicas referidas, por exemplo, o método descri-to abaixo, podem ser usadas preferencialmente de acordo com a presenteinvenção com respeito ao estado de MGMT.

A eficácia quimioterapêutica, a capacidade da quimioterapia er-radicar células tumorais sem causar toxicidade letal ao hospedeiro, dependeda seletividade do fármaco. Uma classe de fármacos anticancerígenos, a -gentes alquilantes, causa morte celular por ligação ao DNA a qual distorceestruturalmente a estrutura helicoidal do DNA evitando a transcrição e trans-lação do DNA. Em células normais, a ação prejudicial dos agentes alquilan-tes pode ser reparada por enzimas de reparo do DNA celular, em particularO6-InetiIguanina-DNA metiltransferase (MGMT) também conhecida como O6-alquilguanina-DNA-alquiltransferase (AGAT). O nível de MGMT varia nascélulas tumorais, mesmo entre tumores do mesmo tipo. O gene codificandoMGMT não é comumente mutado ou eliminado. Ao invés, baixos níveis deMGMT nas células tumorais são devidos a uma modificação epigenética; aregião promotora de MGMT é metilada, deste modo inibindo a transcrição dogene de MGMT e evitando a expressão de MGMT.

Foi demonstrado por várias linhas de evidência que a metilaçãotem um papel na expressão genética, na diferenciação celular, na tumorigê-nese, na inativação do cromossoma X, na impressão genômica e em outrosprocessos biológicos importantes. Em células eucarióticas, a metilação deresíduos citosina que estão imediatamente 5' para uma guanosina, ocorrepredominantemente em regiões pobres de citosina-guanina (CG). Em con-traste, ilhas de CpG permanecem não metiladas em células normais, excetodurante inativação do cromossoma X e impressão específica parental onde ametilação de regiões 5' regulatórias pode levara repressão transcripcional. Aexpressão de um gene supressor tumoral também pode ser abolida por meti-lação de DNA de novo de um CpG normalmente não metilado.

A hipermetilação de genes codificando enzimas de reparo deDNA pode servir como marcadores para prever a resposta clínica a algunstratamentos de câncer.

Alguns agentes quimioterápicos (incluindo agentes alquilantes,por exemplo) inibem a proliferação celular por reticulação de DNA, resultan-do em morte celular.

Esforços de tratamento com os agentes referidos podem ser im-pedidos e se desenvolve resistência a semelhantes agentes porque as en-zimas de reparo de DNA removem as estruturas reticuladas. Em vista dosefeitos colaterais prejudiciais da maioria dos fármacos quimioterápicos, e aineficácia de alguns fármacos para vários tratamentos, é desejável prever aresposta clínica ao tratamento com agentes quimioterápicos.

A Patente dos Estados Unidos Ns 6.773.897 descreve métodosrelativos a tratamento quimioterápico de um distúrbio proliferativo celular. Emparticular, é proporcionado um método para "prever a resposta clínica a al-guns tipos de agentes quimioterápicos", incluindo agentes alquilantes espe-cíficos. O método acarreta determinação e comparação do estado de metila-ção de ácido nucléico codificando uma enzima de reparo de DNA de um pa-ciente que necessite de tratamento com a de um sujeito que não necessitede tratamento. Qualquer diferença é considerada "preditiva" de resposta. Ométodo, no entanto, não oferece sugestão de como melhorar o desfechoclínico para qualquer paciente com uma "previsão" desfavorável.

Temozolomida é um agente alquilante disponível ria ScheringCorp. sob o nome comercial de Temodar® nos Estados Unidos e Temodal®na Europa.

Temodar® Cápsulas para administração oral contém temozoio-mida, um derivado de imidazotetrazina. O nome químico da temozolomida é3,4-diidro-3-metil-4-oxoimidazo[5,1 -d]-as-tetrazina-8-carboxamida (vide aPatente dos Estados Unidos N9 5.260.291). Imagina-se que a citotoxicidadeda temozolomida ou metabólito da mesma, MTIC, seja essencialmente devi-da a alquilação de DNA. Ocorre alquilação (metilação) essencialmente nasposições O6 e N7 da guanina.

Temodar® (temozolomida) Cápsulas são indicadas atualmentenos Estados Unidos para o tratamento de pacientes adultos com gliobasto-ma multiforme recém-diagnosticado bem como astrocitoma anaplásico refra-tário, isto é, pacientes em primeira recidiva que experimentaram progressãoda doença em um regime de fármaco contendo uma nitrosouréia e procar-bazina. Temodal® é aprovado atualmente na Europe para o tratamento depacientes com glíoma maligno, tal como glioblastoma multiforme ou astroci-toma anaplásico apresentando recaída ou progressão depois da terapia derotina.

De acordo com a invenção, alternativamente ao método descritoacima, o nível de metilação do gene de MGMT é avaliado determinando onível de proteína MGMT em uma amostra obtida do paciente. O nível podeser classificado como sendo "Muito Baixo" "Baixo", "Moderado", ou "Eleva-do", preferencialmente conforme descrito em mais detalhes abaixo.

A avaliação se ou não o gene de MGMT é metilado pode serrealizada usando qualquer método de conhecimento de um versado na téc-nica. Técnicas úteis para detectar metilação de um gene ou ácido nucléicoincluem, mas não estão limitadas às descritas por Ahrendt et aL, J. Natl.Câncer Inst., 91:332-339 (1999); Belsinky etal., Proc. Natl. Acad. Sei. U.S.A.,95:11891-11896 (1998), Clark et al., NucIeicAcids Res., 22:2990-2997(1994); Herman etaL, Proc Natl Acad Sd U.S.A., 93:9821-9826 (1996); Xionge Laird, Nucleic Acids Res., 25:2532-2534 (1997); Eads et al_, Nuc. Acids.Res., 28:e32 (2002); Cottrell et al., Nucleic Acids Res., 32:1-8 (2004). Todasas referências citadas aqui, neste pedido de patente de patente, são incorpo-radas aqui, a este pedido de patente de patente, por meio de referência.

PCR específico para metilação (MSP; Herman et al., Proc. Natl.Acad Sei. USA, 93(18):9821-9826 (1996); Esteller etal., Câncer Res.,59:793-797 (1999)) vide também a Patente dos Estados Unidos N95.786.146, emitida em 28 de julho de 1998; a Patente dos Estados UnidosNq 6,-017.704, emitida em 25 de janeiro de 2000; a Patente dos Estados U-nidos Ns 6.200.756, emitida em 13 de março de 2001; e a Patente dos Esta-dos Unidos Nq 6.265.171, emitida em 24 de julho de 2001; a Patente dosEstados Unidos Ns 6.773.897 emitida em 10 de agosto de 2004; cujos con-teúdos inteiros são incorporados aqui, a este pedido de patente de patente,por meio de referência, pode rapidamente avaliar o estado de metilação devirtualmente qualquer grupo de sítios CpG dentro de uma ilha de CpG, inde-pendente do uso de enzimas de restrição sensíveis a metilação. Este testeacarreta modificação inicial de DNA por bissulfito de sódio, convertendo to-das as citosinas não metiladas, porém não as citosinas metiladas, em uraci-Ia, e subseqüente amplificação com iniciadores específicos para DNA meti-Iado versus não metilado. MSP requer somente pequenas quantidades deDNA, é sensível a 0,1% de alelos metilados de um dado lócus de ilha deCpG, e pode ser realizado sobre DNA extraído de amostras embutidas emparafina. MSP elimina os resultados falso positivos inerentes às abordagensanteriores à base de PCR as quais se baseavam em clivagem de enzimasde restrição diferenciais para distinguir DNA metilado de não metilado. Estemétodo é muito simples e pode ser usado sobre pequenas quantidades detecido ou umas poucas células.

Um exemplo ilustrativo de um teste Western blot útil para estamodalidade da invenção para medir o nível de proteína MGMT em amostrasde pacientes é apresentado na Patente dos Estados Unidos N9 5.817.514por Li et al., cuja descoberta inteira é incorporada aqui, a este pedido de pa-tente de patente, por meio de referência. Li et al. descreveu anticorpos mo-noclonais capazes de ligar especificamente ou a proteína MGMT humananativa ou a proteína MGMT humana tendo um sítio ativo o qual é alquilado.Um exemplo ilustrativo de uma técnica imunohistoquímica útil para esta mo-dalidade da invenção para medir o nível de proteína MGMT em amostras depacientes é apresentado na Patente dos Estados Unidos N9 5. 407.804, cujadescoberta inteira é incorporada aqui, a este pedido de patente de patente,por meio de referência. São revelados anticorpos monoclonais os quais sãocapazes de ligar especificamente à proteína MGMT em preparações de célu-las únicas (testes de colocação imunohistoquímica) e em extratos celulares(imunoensaios).

O uso de leitura de fluorescente acoplada com digitalização daimagem celular é descrito e permite a medição quantitativa dos níveis deMGMT em amostras do paciente e controle, incluindo mas não limitadas aamostras de biópsia tumoral.

Técnicas úteis para medir a atividade enzimática de proteínaMGMT incluem mas não estão limitadas aos métodos descritos por: Myrneset al., Carcinogenesis, 5:1061-1 064 (1984); Futscher etal., Câncer Comm.,1: 65-73 (1989); Kreklaw etal., J. Pharmacol. Exper. Ther., 297(2):524-530(2001); and Nagel et al., Anal. Biochem., 321(1):38-43 (2003), cujas descri-ções inteiras são incorporadas aqui, a este pedido de patente de patente, emsuas totalidades.

De acordo com um modo desta invenção, o nível de proteínaMGMT expressado por células do paciente é avaliado por medição da prote-ína MGMT, por exemplo, por Western blot usando um anticorpo específicopara MGMT, vide por exemplo, a Patente dos Estados Unidos N9 5.817.514(supra) por Li et al. para uma descrição de um teste Western blot para de-terminar o nível de MGMT. O nível é comparado com o expressado por linfó-citos normais conhecidos por expressar MGMT.

Os níveis de proteína MGMT dos pacientes são preferencial-mente classificados como se segue: Muito Baixo = Oa 30% da MGMT ex-pressada por linfócitos normais; Baixo = 31 a 70% da MGMT expressada porlinfócitos normais; Moderado = 71 a 90% e Elevado = 91 a 300% ou mais daMGMT expressada por linfócitos normais.

Pacientes que são testados como pacientes tendo níveis Mode-rados ou menores de proteína MGMT ou que podem ser testados como pa-cientes tendo níveis Moderados ou menores de proteína MGMT, preferenci-almente usando o método acima descrito, um método análogo do mesmo,ou qualquer outro método o qual é igualmente adequado de acordo com oentendimento daqueles versados na técnica, devem ser considerados como"pacientes metilados" de acordo com a invenção. Portanto eles pertencemao coletivo de pacientes que podem ser tratados especial vantajosamentepelos métodos de tratamento ou os medicamentos de acordo com a invenção.

Por conseguinte, pacientes que têm ou foi demonstrado que têmnível Moderado (= 71 a 90%), preferencialmente (Baixo = 31 a 70%) e maispreferencialmente Muito Baixo (=Oa 30%), da MGMT expressada por linfó-citos normais devem ser considerados preferencialmente como "pacientesmetilados" de acordo com a invenção, mais preferencialmente como pacien-tes tendo um aumento do estado de metilação de DNA e/ou como pacientesapresentando metilação parcial ou completa ou no mínimo um promotor deno mínimo um gene de MGMT. Portanto eles pertencem ao coletivo de paci-entes que podem ser tratados especial vantajosamente pelos métodos detratamento ou os medicamentos de acordo com a invenção.

Portanto, um objetivo especialmente preferencial da invenção éum método ou um uso conforme descrito aqui, neste pedido de patente depatente, em que o medicamento deve ser usado no tratamento de pacientestendo um aumento do estado de metilação de DNA.

Portanto, um objetivo especialmente preferencial da invenção éum método ou um uso conforme descrito aqui, neste pedido de patente depatente, em que o medicamento deve ser usado no tratamento de pacientesapresentando metilação parcial ou completa ou no mínimo um promotor deno mínimo um gene de MGMT.

Portanto, um objetivo especialmente preferencial da invenção éum método ou um uso conforme descrito aqui, neste pedido de patente depatente, em que o medicamento deve ser usado no tratamento de pacientes,tendo um nível Moderado, preferencialmente um nível Baixo e mais prefe-rencialmente um nível Muito Baixo de proteína MGMT, preferencialmente emcomparação da MGMT expressada por linfócitos normais.

Portanto, um objetivo especialmente preferencial da invenção éum método ou um uso conforme descrito aqui, neste pedido de patente depatente, em que o medicamento deve ser usado no tratamento de pacientestendo um aumento do estado de metilação de DNA, e em que o referido mé-todo compreende a administração de um ou mais agentes alquilantes, prefe-rencialmente selecionados entre, mostardas de nitrogênio, compostos deetilenoimina, sulfonatos de alquila e outros compostos com uma ação dealquilação, preferencialmente selecionados entre nitrosouréias, preferenci-almente ACNU, BCNU e CCNU, bussulfan, melfalan, carboplatina, cisplatina,oxaliplatina, ciclofosfamida, dacarbazina, carmustina, ifosfamida e lomustina,temozolomida e altretamina, ou camptotecina.

Portanto, um objetivo especialmente preferencial da invenção éum método ou um uso conforme descrito aqui, neste pedido de patente depatente, em que o medicamento deve ser usado no tratamento de pacientesapresentando metilação parcial ou completa ou no mínimo um promotor deno mínimo um gene de MGMT e em que o referido método compreende aadministração de um ou mais agentes alquilantes, preferencialmente sele-cionados entre, mostardas de nitrogênio, compostos de etilenoimina, sulfo-natos de alquila e outros compostos com uma ação de alquilação, preferen-cialmente selecionados entre nitrosouréias, preferencialmente ACNU, BCNUe CCNU, bussulfan, melfalan, carboplatina, cisplatina, oxaliplatina, ciclofos-famida, dacarbazina, carmustina, ifosfamida e lomustina, temozolomida ealtretamina, ou camptotecina.

Portanto, um objetivo especialmente preferencial da invenção éum método ou um uso conforme descrito aqui, neste pedido de patente depatente, em que o medicamento deve ser usado no tratamento de pacientes,tendo um nível Moderado, preferencialmente um Baixo e mais preferencial-mente um nível Muito Baixo de proteína MGMT, preferencialmente em com-paração da MGMT expressada por linfócitos normais, e em que o referidométodo compreende a administração de um ou mais agentes alquilantes,preferencialmente selecionados entre, mostardas de nitrogênio, compostosde etilenoimina, sulfonatos de alquila e outros compostos com uma ação dealquilação, preferencialmente selecionados entre nitrosouréias, preferenci-almente ACNU, BCNU e CCNU, bussulfan, melfalan, carboplatina, cisplatina,oxaliplatina, ciclofosfamida, dacarbazina, carmustina, ifosfamida e lomustina,temozolomida e altretamina, ou camptotecina.

Nos métodos ou usos descritos acima com respeito a MGMT, osmétodos ou usos preferencialmente compreendem a administração de umou mais Iigantes de integrina específicos, preferencialmente selecionadosentre ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val), os derivados, solvatos e sais far-maceuticamente aceitáveis do mesmo, e especialmente ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-VaI).

Métodos para avaliar um estado de metilação de DNA aumenta-do e/ou apresentando metilação parcial ou completa ou no mínimo um pro-motor de no mínimo um gene de MGMT em pacientes são conhecidos natécnica. Por conseguinte, pacientes a serem tratáveis beneficamente pelosmétodos ou alguns usos conforme descrito aqui, neste pedido de patente depatente, podem ser prontamente determinados por aqueles versados na téc-nica.

Um objetivo preferencial da presente invenção é um método ouum uso conforme descrito aqui, neste pedido de patente de patente, em queo medicamento deve ser usado no tratamento de câncer recidivante, por e-xemplo em um cenário de segunda linha de tratamento ou de tratamentosubseqüente.Um objetivo mais preferencial da presente invenção é um méto-do ou um uso conforme descrito aqui, neste pedido de patente de patente,em que o medicamento deve ser usado no tratamento de câncer recidivante,por exemplo em um cenário de segunda linha de tratamento ou de tratamen-to subseqüente, em que o câncer é selecionado entre o grupo consistindoem astrocitoma, mais preferencialmente astrocitoma grau II, III e/ou IV, eespecialmente consistindo em glioblastoma ou glioblastoma multiforme.

Um objetivo ainda mais preferencial da presente invenção é ummétodo ou um uso conforme descrito aqui, neste pedido de patente de pa-tente, em que o medicamento deve ser usado no tratamento de câncer re-cém-diagnosticado, preferencialmente em um cenário de tratamento de pri-meira linha.

Um objeto especialmente preferencial da presente invenção éum método ou um uso conforme descrito aqui, neste pedido de patente depatente, em que o medicamento deve ser usado no tratamento de câncerrecém-diagnosticado, preferencialmente em um cenário de tratamento deprimeira linha, em que o câncer é selecionado entre o grupo consistindo emastrocitoma, mais preferencialmente astrocitoma grau II, III e/ou IV, e espe-cialmente consistindo em glioblastoma ou glioblastoma multiforme.

Exemplos

Os exemplos seguintes são dados de modo a auxiliar o técnicoversado ára melhor entender a presente invenção a título de exemplificação.Os exemplos não pretendem limitar o âmbito de proteção conferido pelasreivindicações. As características, propriedades e vantagens exemplificadaspara os compostos e usos definidos nos exemplos podem ser atribuídas aoutros compostos e usos não especificamente descritos e/ou definidos nosexemplos, mas estando sob o âmbito do que é definido nas reivindicações.Exemplo 1: Radioterapia de modelo de glioblastoma ortotópico de rato, ex-perimentos de esquemas de Cilengitide (= ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val))

Ratos nús NlH rnu são anestesiados, restritos, e injetados por via intracere-bral 1 mm retro orbitalmente, 3 mm à direita do bregma e em uma profundi-dade de 2,5 mm com 5x10E5 U251 células de glioblastoma humano sus-pendidas em 10 ul de meio de cultura, usadno uma seringa Hamilton no.2701 equipada com uma agulha calibre 26, essencialmente conforme previ-amente descrito (Engebraaten et al., 1999). Depois de 14 dias, cilengitide (4mg/kg) é adminsitrado como um bolus intraperitoneal em PBS, em váriostempos (8 h, 4 h, 2 h, 1 h) antes de um único tratamento com único feixe co-limado, dorsal-ventral de 6 MV raios X, de modo que 95 a 100% da dose doeixo central de 25 Gy atinja o volume tumoral (Kim et al., 1999). Cada umdos 7 dias subseqüentes os animais também receberam um bolus i.p. idênti-co de cilengitide. Os animais são mantidos com alimento e bebida à vontadeaté se tornarem moribundos, ou são amostrados para análise de tecido (nosgrupos t-4 e t-8 h, onde os animais estão saudáveis depois de 230 dias pósinjeção de tumor). Uma curva de sobrevida de Kaplan-Meier é calculada eplotada (figurai) a partir dos dados brutos (Tabela 1). Todos os animais nogrupo da monoterapia com RT morreram por volta de 120 dias.

Lista de Referência:

Engebraaten1O., Hjortland,G.O., Hirschberg.H., and Fodstad.O. (1999).Growth of precultured human glioma specimens in nús rat brain. J. Neuro-surg. 90, 125-132.

Kim.J.H., Khil.M.S., Kolozsvary.A., Gutierrez.J.A., and Brown.S.L. (1999).Fractionated radiosurgery for 9L gliosarcoma in the rat brain. Int. J. Radiat.Oncol. Biol. Phys. 45, 1035-1040.

O Resultados são dados na Tabela 1 abaixo e na figura 1:

Tabela 1

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Doente = moribundo e removido do estudo

Saudável = indica amostrado para tecido na data mostrada, porém vivo nes-te ponto

Vivo = sobrevivente no ponto de tempo mostrado.

Tempo pré-irradiação = quando é administrado cilengitide 4 mg/kg.

Rt = radioterapia 25 Gy

EMD = cilengitide bolus de 4 mg/kg

Convenção de datas americanas na data de coluna de término,européias na data da coluna de radiação

Exemplo 2: Teste Fase Ila de Cilengitide ((= ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val))) Terapia com Agente Único em Pacientes com Glioblastoma Recorrente

Antecedentes: O presente estudo fase Ila foi planejado para avaliar a segu-rança, toxicidade, e atividade clínica do pentapeptídeo RGD cíclico cilengiti-de ((= ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val)), um inibidor das integrinas βνβ3 eavP5, como um único agente em doses de 500 e 2000 mg em pacientes(pts) com glioblastoma recidivante (GBM).

Métodos: Neste estudo aberto multicêntrico, randomizado, não controlado,pacientes com GBM e doença mensurável que recidivaram depois de terapiaprévia com temozolomida e radioterapia foram randomizados para recebercilengitide em doses de ou 500 mg ou 2000 mg i.v., 2x/semana, até a pro-gressão. O diagnóstico histopatológico e estudo por imagens de MRI foramsubmetidos a revisão oculta independente. O desfecho primário foi Sobrevi-da Livre de Progressão (PFS) em 6 meses (mths). Desfechos secundáriosincluíram resposta, sobrevida, tempo para progressão da doença, seguran-ça, tolerabilidade e farmacocinética.

Resultados: Incremento real; 81 pacientes (Status de Performance de Kar-nofsky médio 80%; idade média 57 anos) em 15 locais. 41 pacientes recebe-ram 500 mg e 40 pacientes para receber 2000 mg de cilengitide i.v. 2x/ se-mana. Não foi observado desequilíbrio óbvio nos fatores de prognóstico. In-fusões médias;16 [faixa, 4-179]. Eventos adversos (AEs) grau 3 NCI CTCrelacionados com o tratamento incluíram enzimas hepáticas elevadas (em500 mg), artralgia/mialgia (em 500 mg), e aumento do peso/edema (em 2000mg) em 1 paciente, respectivamente. Não foram reportados AEs grau 4 rela-cionados com a terapia pelos pesquisadores. Foi reportada uma hemorragiacerebral CTC grau 2, possivelmente relacionada ou com o fármaco ou com adoença. A taxa de Sobrevida Livre de Progressão (PFS) em 6 meses foi de16,1% (n = 13/81 pacientes). 10 destes pacientes (12,3 %, η = 4 com 500mg, η = 6 com 2000 nig) receberam 12 ou mais ciclos de terapia (1 ciclo = 4semanas). Seis pacientes (7,4%) ainda estavam livres de progressão e emtratamento por ocasião de quando este resumo foi publicado. No ramo de500 mg, a Sobrevida Global média (mOS) foi de 6,5 meses [95% de Cl: 5,2 a9,3 meses], a taxa de sobrevida global (05) de 12 meses foi 24,4%. No ramode 2000 mg, a Sobrevida Global média foi de 9,9 meses [95% de Cl, 6,3 a15,7 meses], a taxa de sobrevida global (OS) de 12 meses foi de 37,5%.

Embora não estatisticamente significante, houve uma tendência para melhorcontrole do tumor em pacientes recebendo 2000 mg 2x/ semana.

Conclusão: Cilengitide foi bem-tolerado em terapia de único agente em dosníveis de dose. Cilengitide demonstrou vantajosa atividade de agente únicoem glioblastoma recidivante, com estabilização da doença de longo termoem um subgrupo de pacientes.

Exemplo 3: Teste Fase l/lla de Cilengitide (= ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val)) e Temozolomida com Radioterapia Concomitante, Seguido por Terapiade Manutenção com Temozolomida e Cilengitide em Pacientes Com Glio-blastoma Recém-Diagnosticado (GBM).

Finalidade: Avaliar a segurança, toxicidade, e eficácia da combinação dopentapeptídeo RGD cíclico Cilengitide (= ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val)), um inibidor de integrinas βνβ3 e avp5, em adição a temozolomida(TMZ) e radioterapia (RT).

Pacientes e Métodos: Cinqüenta e dois pacientes (PS 0-1: 92%, 2: 8%; ida-de média 57 anos) depois da biópsia (n= 9/17%) ou ressecção tumoral (n =43/83% ) foram tratados com TMZ/RT padrão (Stupp et al. NEJM 2005). A-lém disso Cilengitide (500 mg i.v., 2x/ semana) foi iniciado uma semana an-tes de TMZ/RT e administrado por toda a duração da quimioterapia ou até aprogressão. O desfecho primário foi índice de sobrevida livre de progressãoem 6 meses (alvo: 65%). Os pacientes foram seguidos com MRI a cada 2meses. O diagnóstico histopatológico e estudo por imagens de MRI foramrevisados de modo independente, o estado de metilação do promotor deMGMT foi avaliado em 45 (86,5%) pacientes.

Resultados: Quarenta e seis pacientes (92%) completaram RT, > 90% deTMZ concomitante foi recebida por 42 pacientes e cilengitide por 45 pacien-tes. 20 pacientes (3 em andamento) completaram 6 ciclos de manutenção deTMZ e cilengitide. A toxicidade hematológica grau 3 e 4 observada foi: Iinfo-penia (28/52, 53,8%), trombocitopenia (7/52 pacientes. 13,4%) e neutropenia(5/52, 9,6%). Foram reportadas toxicidades não hematológicas grau 3 rela-cionadas com o tratamento para η = 3/52 (5,7%) pacientes: sintomas consti-tucionais (astenia, fadiga, anorexia, η = 3); testes de função hepática eleva-dos (n = 1), trombose venosa profunda e embolismo pulmonar (n = 1). Umpaciente com um histórico de diverticulose sigmóide sofreu perfuração sig-móide (grau 2). No total, 34/52 (65,4% [95% Cl, 50,9 a 78,0%]) dos pacien-tes estavam livres de progressão em 6 meses. Pacientes com metilação dopromotor genético O6-MetiIguanina-DNA metiltransferase (MGMT) no tumortiveram mais probabilidade de atingir 6 meses de desfecho de sobrevida livrede progressão (PFS). No total, 34/52 (65,4% [95% Cl, 50,9 a 78,0%]) dospacientes estavam livres de progressão em 6 meses. Uma importante con-tribuição para o resultado global foi proporcionada por um subgrupo de paci-entes (23/52 sujeitos, com promotor de MGMT metilado, silenciando a enzi-ma de reparo de DNA MGMT), o qual apresentou um forte aumento do índi-ce de PFS-6 comparado com controle histórico (91% vs. 69%). O outro sub-grupo importante (22/52, promotor de MGMT não metilado) apresentou umadiferença menos relevante para o controle histórico (40,9% vs. 40%), a qualprovavelmente é significativamente aprimorada por uma maior dosagem deCilengitide em comparação com o subgrupo com promotor de MGMT metila-do. Especialmetne o estudo atingiu seu desfecho primário (PFS-6 = 65,4%)Conclusão: O estudo atingiu seu desfecho primário. A combinação do peptí-deo RGD inibidor de integrina Cilengitide e TMZ/RT foi bem tolerada, PFSem 6 meses é muito benéfico. Metilação do promotor genético MGMT pro-porciona prognóstico ainda melhor.

Claims (25)

1. Método para a produção de um medicamento para o uso o-portuno e combinado como uma terapia de combinação para o tratamentode câncer, o medicamento compreendendo, preferencialmente em duas for-mas de terapia distintas,a) uma composição contende no mínimo um ligante de integrina específi-co, eb) no mínimo um agente coterapêutico adicional contra câncer diferentede no mínimo um Iigante de integrina específico dè a),em que a) é administrado 1 a 8 horas (h), preferencialmente 2 a 6 h, e maispreferencialmente 2 a 4 h antes da aplicação de b).

2. Método de acordo com a reivindicação 1, em que no mínimoum Iigante de integrina é selecionado entre o grupo consistindo em Ov inibi-dores de integrina, preferencialmente otvp3 inibidores, mais preferencialmenteciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal).

3. Método de acordo com qualquer reivindicação anterior, emque no mínimo um agente coterapêutico contra câncer diferente de no míni-mo um Iigante de integrina específico de a) é selecionado entre o grupo con-sistindo em agentes quimioterápicos, agentes citotóxicos, agentes imunotó-xicos e/ou radioterapia.

4. Método de acordo com qualquer reivindicação anterior, emque no mínimo um agente coterapêutico contra câncer diferente de no míni-mo um ligante de integrina específico de a) é selecionado entre o grupo con-sistindo em agentes quimioterápicos, agentes citotóxicos, agentes imuno-moduladores e/ou agentes imunotóxicos presentes sob a forma de composi-ções.

5. Método de acordo com qualquer reivindicação anterior, emque no mínimo um agente coterapêutico adicional contra câncer diferente deno mínimo um Iigante de integrina específico de a) é radioterapia.

6. Método para o tratamento de câncer caracterizado por tratarum sujeito que necessite do mesmo com uma quantidade terapeuticamenteeficaz de no mínimo um Iigante de integrina a) e no mínimo um agente cote-rapêutico adicional contra câncer b) sendo diferente de no mínimo um Iigantede integrina específico a),, em que a) é administrado 1 a 8 horas (h), prefe-rencialmente 2 a 6 h, e mais preferencialmente 2 a 4 h antes da aplicação de b).

7. Método de acordo com a reivindicação 6, em que no mínimoum Iigante de integrina é selecionado entre o grupo consistindo em Ov inibi-dores de integrina, preferencialmente ανβ3 inibidores, mais preferencialmenteciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal).

8. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 6 e-7, em que no mínimo um agente coterapêutico contra câncer diferente de nomínimo um Iigante de integrina específico de a) é selecionado entre o grupoconsistindo em agentes quimioterápicos, agentes citotóxicos, agentes imu-notóxicos e/ou radioterapia.

9. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 6, 7-e 8, em que no mínimo um agente coterapêutico contra câncer diferente deno mínimo um Iigante de integrina específico de a) é selecionado entre ogrupo consistindo em agentes quimioterápicos, agentes citotóxicos e/ou a-gentes imunotóxicos estando sob a forma de composições farmacêuticas.

10. Método de acordo com qualquer uma das reivindicações 6,-7, 8 e 9, em que no mínimo um agente coterapêutico adicional contra câncerdiferente de no mínimo um Iigante de integrina específico de a) é radioterapia.

11. Uso de no mínimo um Iigante de integrina a) e no mínimo umagente coterapêutico contra câncer b) diferente do referido Iigante de integri-na para o tratamento de câncer em um sujeito que necessite do mesmo, emque a) é administrado 1 a 8 horas (h), preferencialmente 2 a 6 h, e mais pre-ferencialmente 2 a 4 h antes da aplicação de b).

12. Uso de no mínimo um Iigante de integrina específico, com-preendendo ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val), os derivados, solvatos e/ousais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo, para a fabricação de um me-dicamento para o tratamento de câncer, em que o medicamento deve serusado em combinação com radioterapia, preferencialmente radiação de feixeexterno, em que no mínimo o Iigante de integrina específico ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-VaI), os derivados, solvatos e/ou sais farmaceuticamenteaceitáveis do mesmo é administrado 1 a 10 horas (h), preferencialmente 1 a- 6, mais preferencialmente 2 a 8, ainda mais preferencialmente 3 a 8 h, aindamais preferencialmente 3 a 6 e especialmente 4 a 8 h antes da aplicação daradioterapia.

13. Uso de no mínimo um ligante de integrina específico, com-preendendo ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val), os derivados, solvatos e/ousais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo, para a fabricação de um me-dicamento para o tratamento de tumores cerebrais primários, em que o me-dicamento deve ser usado em combinação com radioterapia, preferencial-mente radiação de feixe externo, em que no mínimo o Iigante de integrinaespecífico ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val), os derivados, solvatos e/ousais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo é administrado a um pacienteem uma quantidade de cerca de 1000 mg por semana ou cerca de 4000 mgpor semana.

14. Uso de no mínimo um Iigante de integrina específico, com-preendendo ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val), os derivados, solvatos e/ousais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo, para a fabricação de um me-dicamento para o tratamento de tumores, em que o medicamento deve serusado em combinação com temozolomida e/ou radioterapia, preferencial-mente radiação de feixe externo, em que no mínimo o Iigante de integrinaespecífico ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val), os derivados, solvatos e/ousais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo é administrado a um pacienteem uma quantidade de 800 mg a 7000 mg por semana.

15. Uso de acordo com uma das reivindicações 12 a 14, em queciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMeVal) é administrado a um paciente em umaquantidade de cerca de 1000 mg por semana, cerca de 1500 mg por sema-na, cerca de 2500 mg por semana, cerca de 4000 mg por semana ou cercade 6000 mg por semana.

16. Uso de acordo com a reivindicação 13 ou 15, em que aquantidade de cerca de 1000 mg por semana ou cerca de 4000 mg por se-mana é administrada em um esquema de administração de duas vezes porsemana, e a quantidade de cerca de 1500 mg por semana ou cerca de 6000mg por semana é administrada em um esquema de administração de trêsvezes por semana.

17. Uso de acordo com a reivindicação 13, 15 ou 16, em que aquantidade de cerca de 1000 mg por semana é administrada em um esque-ma de administração de duas vezes por semana consistindo em cerca de- 500 mg por administração ou a quantidade de cerca de 4000 mg por semanaé administrada em um esquema de administração de duas vezes por sema-na de cerca de 2000 mg por administração.

18. Uso de acordo com uma das reivindicações 13 a 17, em queno mínimo o Iigante de integrina específico ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Val), os derivados, solvatos e/ou sais farmaceuticamente aceitáveis domesmo é administrado 1,5 a 20 horas (h), preferencialmente 2 a 16 h, maispreferencialmente 2 a 12 h, ainda mais preferencialmente 2 a 10 h, aindamais preferencialmente 3 a 10 h e especialmente 2 a 8 h antes da aplicaçãoda radioterapia.

19. Uso de acordo com uma das reivindicações 13 a 17, em queno mínimo o Iigante de integrina específico ciclo-(Arg-Gly-Asp-DPhe-NMe-Vai), os derivados, solvatos e/ou sais farmaceuticamente aceitáveis domesmo é administrado 1 a 10 horas (h), preferencialmente 1 a 6, mais prefe-rencialmente 2 a 8, ainda mais preferencialmente 3 a 8 h, ainda mais prefe-rencialmente 3 a 6 e especialmente 4 a 8 h antes da aplicação da radioterapia.

20. Método ou um uso de acordo com uma das reivindicações 1a 12 e/ou 14 a 19, em que o câncer é selecionado entre câncer intracerebral,câncer de cabeça e pescoço, câncer retal, câncer pulmonar de células pe-quenas, câncer pulmonar de células não-pequenas, glioblastoma multiforme,câncer pulmonar de células pequenas, câncer pulmonar de células não-pequenas, câncer de mama, melanoma metastático, câncer de próstata me-tastático independente de androgênio, câncer de próstata metastático de-pendente de androgênio, e metástases cerebrais dos mesmos.

21. Método ou um uso de acordo com uma das reivindicações 1a 20, em que é aplicade no mínimo um agente coterapêutico contra câncerdiferente de radioterapia, preferencialmente selecionado entre agentes qui-mioterápicos, agentes citotóxicos e/ou agentes imunotóxicos, mais preferen-cialmente selecionado entre Temozolomida, Cisplatina1 Oxaliplatina, Carbo-platina, 5-FU, Darcabarzina, Procarbazina1 Vinblastina1 Vincristina, Irinote-can, Taxol1 Paclitaxel1 Docetaxel1 Gencitabina1 Gleevec1 Iressa1 Tarceva eNexavar1 Herceptin1 Bevacizumab1 Cetuximab1 Nimotuzumab1 Sorafenib1Sunitinib e ZD6474 (ZACTIMA®), e ainda mais preferencialmente seleciona-do entre Temozolomida, Cisplatina, Oxaliplatina, Vinblastina, Taxol1 Gencita-bina, Gleevec e Iressa

22. Método ou um uso de acordo com uma das reivindicações 1a 21, em que adicionalmente é aplicado um agente coterapêutico adicionalcontra câncer, preferencialmente selecionado entre agentes quimioterápicos,agentes citotóxicos e/ou agentes imunotóxicos, mais preferencialmente sele-cionado entre Temozolomida, Cisplatina, Oxaliplatina, Carboplatína, 5-FU,Darcabarzina, Procarbazina, Vinblastina, Vincristina, Irinotecan1 Taxol1 Pacli-taxel, Docetaxel1 Gencitabina1 Gleevec1 lressa, Tarceva e Nexavar1 Hercep-tin, Bevacizumab, Cetuximab1 Nimotuzumab1 Sorafenib1 Sunitinib e ZD6474(ZACTIMA®), e ainda mais preferencialmente selecionado entre Temozolo-mida, Cisplatina, Oxaliplatina, Vinblastina, Taxol1 Gencitabina, Gleevec eIressa.

23. Método ou um uso de acordo com uma das reivindicações 1a 22, em que o medicamento deve ser usado no tratamento de pacientestendo um estado de metilação de DNA aumentado.

24. Método ou um uso de acordo com uma das reivindicações 1a 22, em que o medicamento deve ser usado no tratamento de pacientesapresentando metilação parcial ou completa ou no mínimo um promotor deno mínimo um gene MGMT.

25. Método ou um uso de acordo com uma das reivindicações 1a 24, em que o medicamento deve ser usado no tratamento de câncer recém-diagnostícado, preferencialmente em um cenário de tratamento de primeira linha.