JP6969848B2 - プリナブリン組成物 - Google Patents

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関連出願の参照
本出願は、２０１５年７月１３日に出願された「プリナブリン組成物（PlinabulinCompositions）」と題する米国特許仮出願第６２／１９１９９０号に基づく優先権を主張し、該仮出願の開示は参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。

本発明は化学及び医学の分野に関する。より具体的に、本発明はプリナブリンの形態及び組成物並びにそれらの調製に関する。

プリナブリンは、海生及び陸生アスペルギルス属の種から発見されたジケトピペラジンフェニルアヒスチン（ハリミド（halimide））の合成類似体である。プリナブリンは、コルヒチン及びそのコンブレタスタチ様の類似体（例えば、フォスブレタブリン）と構造的に異なり、チューブリンモノマー上のコルヒチン結合部位又はその近くで結合する。これまでの研究は、プリナブリンがコルヒチンと比較して低い濃度で血管内皮細胞チューブリン脱重合及び単層透過性を誘導すること及びプリナブリンがジャーカット白血病細胞のアポトーシスを誘動すること示した。進行した悪性腫瘍（肺がん、前立腺がん、および大腸がん）をもつ患者における単剤としてのプリナブリンの研究は、好ましい薬物動態、薬力学、および安全性プロファイルを示した。

いくつかの実施形態は、プリナブリン一水和物に関する。

他の実施形態は、結晶形態のプリナブリン一水和物に関する。

いくつかの実施形態は、組成物の総重量に対して約９０重量％を超えるプリナブリンをもつ組成物に関する。

他の実施形態は、水、ジメチルホルムアミド、エタノール、酢酸エチル、メタノール、トルエン、及び酢酸以外の組成物中の分子の総重量に対して約９９重量％を超えるプリナブリンをもつプリナブリン組成物に関する。

いくつかの実施形態は、プリナブリン及び水以外の組成物の総重量に対して約１．９重量％を超えない不純物を含むプリナブリン組成物に関する。

他の実施形態は、プリナブリン及び組成物中の非溶媒分子の総重量に対して約１重量％を超えない非溶媒分子以外の不純物を含むプリナブリン組成物に関する。

いくつかの実施形態は、プリナブリン及びＨＰＬＣ分析にもとづいて約１重量％を超えない不純物をもつプリナブリン組成物に関する。

いくつかの実施形態は、プリナブリン一水和物又はプリナブリン組成物を調製する方法に関する。

図１は、プリナブリン一水和物の結晶形態のＸ線粉末回折（ＸＲＰＤ）パターンである。 図２は、プリナブリン一水和物の結晶形態を含む試料の偏光顕微鏡（ＰＬＭ）像を示す。 図３Ａは、プリナブリン一水和物の結晶形態（形態１）の熱重量（ＴＧＡ）を示し、図３Ｂは、プリナブリン一水和物の結晶形態（形態１）のデジタル走査熱量測定（ＤＳＣ）分析結果を示す。 図３Ｃは、動的水蒸気吸着測定（ＤＶＳ）等温線プロットを示す。 図４は、結晶形態２のＸＲＰＤパターンである。 図５は、結晶形態２を含む試料のＰＬＭ像を示す。 図６Ａは、結晶形態２のＴＧＡ分析を示し、図６Ｂは、結晶形態２のＤＳＣ分析結果を示す。 図７は、結晶形態３のＸＲＰＤパターンである。 図８は、結晶形態３を含む試料のＰＬＭ像を示す。 図９Ａは、結晶形態３のＴＧＡ分析を示し、図９Ｂは、結晶形態３のＤＳＣ分析結果を示す。 図１０は、結晶形態４のＸＲＰＤパターンである。 図１１は、結晶形態４を含む試料のＰＬＭ像を示す。 図１２Ａは、結晶形態４のＴＧＡ分析を示し、図１２Ｂは、結晶形態４のデジタル走査熱量測定（ＤＳＣ）分析結果を示す。 図１３は、結晶形態５のＸＲＰＤパターンである。 図１４は、結晶形態５のＴＧＡ分析を示す。 図１５は、結晶形態５のＤＳＣ分析結果を示す。 図１６は、結晶形態６のＸＲＰＤパターンである。 図１７は、結晶形態６のＴＧＡ分析を示す。 図１８は、結晶形態６のＤＳＣ分析結果を示す。 図１９は、結晶形態７のＸＲＰＤパターンである。 図２０は、結晶形態７のＴＧＡを示す。 図２１は、結晶形態７のＤＳＣ分析結果を示す。 図２２は、結晶形態８のＸＲＰＤパターンである。 図２３は、結晶形態８のＴＧＡを示す。 図２４は、結晶形態８のＤＳＣ分析結果を示す。 図２５は、結晶形態９のＸＲＰＤパターンである。 図２６は、結晶形態９のＴＧＡ分析を示す。 図２７は、結晶形態９のＤＳＣ分析結果を示す。 図２８は、プリナブリン多形の相互変換を示す。 図２９は、プリナブリン一水和物組成物を調製する流れ図である。

プリナブリン、（３Ｚ，６Ｚ）−３−ベンジリデン−６−｛［５−（２−メチル−２−プロパニル）−１Ｈ−イミダゾール−４−イル］メチレン｝−２，５−ピペラジンジオンは、天然化合物フェニルアヒスチンの合成類似体である。プリナブリンは、米国特許第７，０６４，２０１号及び同第７，９１９，４９７号に詳述されている方法及び手順に従って容易に調製することができる。該特許は参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。いくつかの実施形態は、プリナブリンの多形及び溶媒和物（例えば、水和物）並びにそれらを含む医薬組成物に関する。いくつかの実施形態は、調製の方法及び治療の方法を含む。特に、いくつかの実施形態はプリナブリン一水和物に関する。

プリナブリン一水和物
プリナブリン一水和物（形態１）は、プリナブリンの安定した結晶形態である。プリナブリン一水和物（形態１）のＸ線粉末回折（ＰＸＲＤ）パターンは、図１に示されるのと実質的に同じであり、対応する表形式ピークデータは表１に示される。

いくつかの実施形態では、本明細書に記載のプリナブリン一水和物（形態１）は、約８．１°、１３．１°、１６．３°、２３．９°、２４．２°、２４．５°、及び２６．６°２θにおけるピークからなる群より選択される少なくとも３の特徴的なピークを含む粉末Ｘ線回折パターンを示す結晶形態を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のプリナブリン一水和物（形態１）は、少なくとも約８．１°、１３．１°、１６．３°、２３．９°、２４．２°、２４．５°、及び２６．６°２θにおけるピークを含む粉末Ｘ線回折パターンを示す結晶形態を含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載のプリナブリン一水和物（形態１）は、少なくとも約８．１°、１３．１°、１６．１°、１６．３°、１９．８°、２２．９°、２３．９°、２４．２°、２４．５°、２６．６°、及び２９．３°２θにおけるピークを含む粉末Ｘ線回折パターンを示す結晶形態を含む。

当該技術分野において良く理解されているように、Ｘ線回折パターンが異なる計測器で測定されるときに実験のばらつきがあるので、２つのシータ（２θ）値が０．２°の範囲内（すなわち、±０．２°）で一致する場合はピーク位置が等しいと見なされる。例えば、米国薬局方には、最も強いものから１０個の回折ピークの角度設定が±０．２°の範囲
内で標準物質の角度設定と一致し、ピークの相対強度が２０％を超えて異ならない場合には同一であることが確定されると述べられている。したがって、本明細書に記載の位置の０．２°範囲内のピーク位置は同一と見なされる。別段の指示がない限り、本明細書に記載のＸ線回析角はすべてＣｕＫα源に基づく。

図３Ｂは、プリナブリン一水和物の結晶形態（形態１）のデジタル走査熱量測定（ＤＳＣ）分析結果を示す。図３Ｂに示されるように、プリナブリン一水和物の結晶形態（形態１）は、融点が約２６７℃であり、プリナブリン一水和物の結晶形態（形態１）は、吸熱ピークが約１４１℃及び約２６７℃にある示差走査熱量測定サーモグラムをもつ。

プリナブリン一水和物の結晶形態（形態１）は、他の多形と比べて安定である。試験中に重量変化及び分解を示しうる他の多形と比較して、プリナブリン一水和物（形態１）は、ＤＶＳ及び乾燥試験の間に安定した状態を保つことができる。

プリナブリン組成物
いくつかの実施形態は、組成物の総重量に対して、約５０重量％を超える本明細書に記載のプリナブリン一水和物（形態１）を含むプリナブリン組成物に関する。いくつかの実施形態では、プリナブリン組成物は約７５％を超える本明細書に記載のプリナブリン一水和物（形態１）を含む。いくつかの実施形態では、プリナブリン組成物は約９０％を超える本明細書に記載のプリナブリン一水和物を含む。いくつかの実施形態では、プリナブリン組成物は約９５％を超える本明細書に記載のプリナブリン一水和物を含む。いくつかの実施形態では、プリナブリン組成物は約９８％を超える本明細書に記載のプリナブリン一水和物を含む。いくつかの実施形態では、プリナブリン組成物は約９９％を超える本明細書に記載のプリナブリン一水和物を含む。いくつかの実施形態では、プリナブリン組成物は、組成物の総重量に対して、約５０％〜約９９％、約６０％〜約９９％、約７０％〜約９９％、約８０％〜約９９％、約９０％〜約９９％、約９５％〜約９９％、又は約９７．５％〜約９９％の範囲で、本明細書に記載のプリナブリン一水和物を含む。プリナブリン組成物の残りの部分は、他の形のプリナブリン及び／又は他の化学物質であってよい。

いくつかの実施形態は、高純度のプリナブリン組成物に関する。特に、いくつかの実施形態は、組成物の総重量に対して約９０重量％を超えるプリナブリンをもつプリナブリン組成物に関する。いくつかの実施形態では、プリナブリン組成物は約９２％を超えるプリナブリン化合物を含む。いくつかの実施形態では、プリナブリン組成物は、８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１，％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９６．５％、９６％、９８％、９９％、又は９９．６％を超えるプリナブリン化合物を含む。いくつかの実施形態では、プリナブリン組成物は、組成物中の非溶媒分子の総重量に対して約９９重量％を超えるプリナブリンを含む。いくつかの実施形態では、プリナブリン組成物は、組成物中の非溶媒分子の総重量に対して約９６％、９７％、９８％、９９％、又は９９．６重量％を超えるプリナブリンを含む。いくつかの実施形態では、溶媒は、水、ジメチルホルムアミド、エタノール、酢酸エチル、メタノール、トルエン、及び酢酸であることができる。いくつかの実施形態では、高純度組成物中のプリナブリンは、上記のように少なくとも部分的にプリナブリン一水和物で存在する。

いくつかの実施形態では、プリナブリン組成物は、水、ジメチルホルムアミド、エタノール、酢酸エチル、メタノール、トルエン、及び酢酸以外の組成物中の分子の総重量に対して、約９９重量％を超えるプリナブリンを含む。いくつかの実施形態では、プリナブリン組成物は、水、ジメチルホルムアミド、エタノール、酢酸エチル、メタノール、トルエン、及び酢酸以外の組成物中の分子の総重量に対して、約８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１，％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９６．５％、９６％、９８％、９９％、又は９９．６重量％を超えるプリナブリンを含む。
いくつかの実施形態では、組成物中のプリナブリンは、上記のように少なくとも部分的にプリナブリン一水和物で存在する。

いくつかの実施形態では、プリナブリン組成物は、ＨＰＬＣ分析に基づいて約９９重量％を超えるプリナブリンを含む。いくつかの実施形態では、プリナブリン組成物は、ＨＰＬＣ分析に基づいて、約８０％、８５％、８６％、８７％、８８％、８９％、９０％、９１，％、９２％、９３％、９４％、９５％、９６％、９６．５％、９６％、９８％、９９％、又は９９．６重量％を超えるプリナブリンを含む。いくつかの実施形態では、組成物中のプリナブリンは、上記のように少なくとも部分的にプリナブリン一水和物で存在する。

いくつかの実施形態は、不純物のレベルが低いプリナブリン組成物に関する。本明細書において使用される場合、「不純物」という用語は、組成物中の１つまたは複数の、プリナブリン及び水と異なる成分を指す。いくつかの実施形態では、不純物は、プリナブリンの合成中に導入された１つ以上の化学化合物を含むことができる。いくつかの実施形態では、不純物は、ジメチルホルムアミド、エタノール、酢酸エチル、メタノール、トルエン、酢酸、及び他の残留溶媒を含むことができる。

いくつかの実施形態では、プリナブリン組成物は、組成物の総重量に対して約１重量％を超えない不純物を含む。いくつかの実施形態では、プリナブリン組成物は、組成物の総重量に対して、約１５％、１４％、１３％、１２％、１１％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％、０．９７％、０．９％、０．８％、０．６％、０．４％、又は０．２重量％を超えない不純物を含む。いくつかの実施形態では、プリナブリン組成物は、組成物中の非溶媒分子の総重量に対して約１重量％を超えない不純物を含む。いくつかの実施形態では、プリナブリン組成物は、組成物中の非溶媒分子の総重量に対して、約１５％、１４％、１３％、１２％、１１％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％、０．９７％、０．９％、０．８％、０．６％、０．４％、又は０．２重量％を超えない不純物を含む。

いくつかの実施形態では、プリナブリン組成物は、水以外の組成物の総重量に対して約１．９重量％を超えない不純物を含む。いくつかの実施形態では、プリナブリン組成物は、水以外の組成物の総重量に対して、約１５％、１４％、１３％、１２％、１１％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％、０．９７％、０．９％、０．８％、０．６％、０．４％、又は０．２重量％を超えない不純物を含む。いくつかの実施形態では、プリナブリン組成物は、水以外の組成物中の非溶媒分子の総重量に対して約１重量％を超えない不純物を含む。いくつかの実施形態では、プリナブリン組成物は、水以外の組成物中の非溶媒分子の総重量に対して、約１５％、１４％、１３％、１２％、１１％、１０％、９％、８％、７％、６％、５％、４％、３％、２％、１％、０．９７％、０．９％、０．８％、０．６％、０．４％、又は０．２重量％を超えない不純物を含む。

いくつかの実施形態では、プリナブリン組成物は、水、ジメチルホルムアミド、エタノール、酢酸エチル、メタノール、トルエン、及び酢酸以外の組成物中の分子の総重量に対して、０．９重量％を超えないジメチルホルムアミド、エタノール、酢酸エチル、メタノール、トルエン、及び酢酸以外の不純物を含む。いくつかの実施形態では、プリナブリン組成物は、水、ジメチルホルムアミド、エタノール、酢酸エチル、メタノール、トルエン、及び酢酸以外の組成物中の分子の総重量に対して、５％、４％、３％、２％、１％、０．９７％、０．９％、０．８％、０．６％、０．４％、又は０．２重量％を超えないジメチルホルムアミド、エタノール、酢酸エチル、メタノール、トルエン、及び酢酸以外の不純物を含む。

いくつかの実施形態では、プリナブリン組成物は、ＨＰＬＣ分析に基づいて、１重量％を超えない不純物を含む。いくつかの実施形態では、プリナブリン組成物は、ＨＰＬＣ分析に基づいて、５％、４％、３％、２％、１％、０．９７％、０．９％、０．８％、０．６％、０．４％、又は０．２重量％を超えない不純物を含む。

調製の方法
いくつかの実施形態は、本明細書に記載のプリナブリン一水和物又はプリナブリン組成物を調製する方法に関し、その方法は、プリナブリン及び第１の溶媒系を混合して第１の混合物を形成すること、第１の混合物を約５０℃〜９０℃の範囲の温度に加熱すること、並びに第１の混合物を冷却して第１の沈殿物を形成することを含む。

いくつかの実施形態では、方法は、第１の混合物を冷却する前に濾過することをさらに含む。いくつかの実施形態では、方法は、加熱前に水を第１の混合物に加えることをさらに含む。

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の方法は、第１の沈殿物を濾過することをさらに含む。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の方法は、第１の沈殿物を洗うことをさらに含む。
いくつかの実施形態では、第１の溶媒系は、水、アルコール、又は水とアルコールの混合物であることができる。

いくつかの実施形態では、アルコールは、メタノール、エタノール、イソプロピルアルコール、ｔｅｒｔ−ブチルアルコール、及びｎ−ブチルアルコール、又はそれらの混合物から選択される。

いくつかの実施形態では、アルコールはエタノールである。
いくつかの実施形態では、第１の混合物を加熱することは、第１の混合物を還流することを含む。

いくつかの実施形態では、第１の混合物は約７０℃〜７８℃に加熱される。いくつかの実施形態では、第１の混合物は約６０℃〜９０℃に加熱される。いくつかの実施形態では、第１の混合物は約６０℃〜８０℃に加熱される。いくつかの実施形態では、第１の混合物はエタノールの沸点に加熱される。

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の方法は、第１の混合物を冷却する前に第１の混合物を還流温度で約１時間維持することをさらに含む。
いくつかの実施形態では、第１の混合物を熱することは、第１の混合物を少なくとも６５℃に熱することを含み、第１の混合物を冷却することは、第１の混合物を約５０℃〜６０℃に冷却することを含む。

いくつかの実施形態では、第１の混合物を冷却することは、水を第１の混合物に加えて第１の沈殿物を生じさせることを含む。

いくつかの実施形態では、第１の混合物を冷却することは、第１の混合物を少なくとも４時間撹拌することを含む。
いくつかの実施形態では、本明細書に記載の方法は、第１の沈殿物を分析して第１の沈殿物中のプリナブリン組成物を決定することをさらに含む。

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の方法は、第１の沈殿物及び第２の溶媒を混
合して第２の混合物を形成すること；第２の混合物を約５０℃〜９０℃の範囲の温度に加熱すること；第２の混合物を冷却して第２の沈殿物を形成すること；並びに第２の沈殿物を濾過すること及び第２の沈殿物を洗うことをさらに含む。

いくつかの実施形態では、第２の溶媒は、水、アルコール、又は水とアルコールの混合物である。

いくつかの実施形態では、アルコールは、メタノール、エタノール、イソプロピルアルコール、ｔｅｒｔ−ブチルアルコール、及びｎ−ブチルアルコール、又はそれらの混合物から選択される。いくつかの実施形態では、アルコールはエタノールである。

いくつかの実施形態では、第２の混合物を加熱することは、第２の混合物を還流することを含む。

いくつかの実施形態では、第２の混合物は約７０℃〜７８℃に加熱される。

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の方法は、第２の混合物を冷却する前に第２の混合物を還流温度で約１時間維持することを含む。

いくつかの実施形態では、第２の混合物を冷却することは、第１の混合物を約１５℃〜３０℃に冷却することを含む。

いくつかの実施形態では、第２の混合物を冷却することは、水を第２の混合物に加えて第２の沈殿物を生じさせることを含む。

いくつかの実施形態では、第２の混合物を冷却することは、第２の混合物を少なくとも４時間撹拌することを含む。

いくつかの実施形態では、第１の沈殿物はアルコールで洗浄され、洗浄したアルコールは回収され、加熱前に第２の混合物に加えられる。

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の方法は、第２の沈殿物を乾燥することを含む。

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の方法は、第２の沈殿物を分析して、第２の沈殿物中のプリナブリン組成物を決定することを含む。

いくつかの実施形態では、混合、冷却、及び濾過ステップが、第２の沈殿物中のプリナブリン組成物に基づいて１回以上繰り返される。

いくつかの実施形態は、プリナブリン一水和物又はプリナブリン組成物を調製する方法に関し、その方法は、プリナブリン、エタノール、及び水を混ぜて混合物を形成することを含む。いくつかの実施形態では、方法は混合物を含む。

いくつかの実施形態では、エタノールの水に対する体積比は約９５：５である。いくつかの実施形態では、エタノールの水に対する体積比は、約８５：１５、９０：１０、９５：５、９７．５：２．５、又は９９：１である。いくつかの実施形態では、エタノールの水に対する体積比は、約１５、１６、１７、１８、１９、２０、２１、２２、２３、２４、又は２５である。

いくつかの実施形態では、プリナブリン及び溶媒系の混合物は、少なくとも約１、２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１５、又は２０時間撹拌される。いくつかの実施形態では、混合物は少なくとも２時間撹拌される。

いくつかの実施形態では、混合又は撹拌は、約１０℃〜約５０℃；約２０℃〜約４０℃；約２５℃〜約３５℃、又は約２８℃〜約３２℃の範囲の温度で行われる。いくつかの実施形態では、プリナブリン、エタノール、及び水を混ぜて混合物を形成すること並びに混合物を撹拌することは、約２０℃、２５℃、３０℃、３５℃、又は４０℃で行われる。

図２９は、プリナブリン一水和物の形の組成物を作製する１つの方法のブロック図を示す。図２９に示されるように、プリナブリン化合物及びエタノールを反応フラスコに加え、次いで混合物を７０〜７８℃に熱し、この温度で約１時間混ぜた。必要に応じて、エタノールをさらに加えることができる。次いで、フラスコを約５０〜６０℃に冷やし、混合物を濾過し、エタノールをリンス溶媒として用いた。濾過した溶液及びリンス溶液を混ぜ合わせ、水をその混合溶液の約１０％まで加えた。次いで、溶液を７０〜７８℃に熱し、この温度で約１時間混ぜた。試料をＸＲＰＤ分析用に採った後、溶液を２０±５℃に冷やし、水を加えた。そのバッチを濾過し、水をリンスとして用いた。濾過生成物を水で洗浄した後、乾燥トレイに移して、その生成物が求められる含エタノール量レベル及び含水レベルに達するまで４０〜５０℃で約２４時間又はそれより長く乾燥させた。

プリナブリン結晶形態２
いくつかの実施形態は、プリナブリンの結晶形態２及びその調製方法に関する。いずれの特定の理論に縛られるものではないが、形態２は、プリナブリンイソプロピルアルコール（ＩＰＡ）溶媒和物であると考えられている。

いくつかの実施形態では、プリナブリンの結晶形態２は、図４に示されるものと実質的に同じＸＲＰＤパターンを有し、対応する表形式ピークデータは表２に示される。

さらに結晶形態２は、図６Ｂに記載のものと実質的に同じＤＳＣサーモグラムを特徴としうる。図６Ｂに示されるように、結晶形態２は融点が約２６７℃であり、プリナブリンの結晶形態２は、吸熱ピークが約１１３℃及び約２６７℃にある示差走査熱量測定サーモグラムをもつ。

プリナブリン結晶形態３
いくつかの実施形態は、プリナブリンの結晶形態３及びその調製方法に関する。いずれの特定の理論に縛られるものではないが、形態３はプリナブリンの無水形であると考えられている。

いくつかの実施形態では、プリナブリンの結晶形態３は、図７に記載のものと実質的に同じＸＲＰＤパターンを有し、対応する表形式ピークデータは表３に示される。

さらに結晶形態３は、図９Ｂに記載のものと実質的に同じＤＳＣサーモグラムを特徴としうる。図９Ｂに示されるように、結晶形態３は融点が約２６４℃であり、結晶形態３は、吸熱ピークが約２６４℃にある示差走査熱量測定サーモグラムをもつ。

プリナブリン結晶形態４
いくつかの実施形態は、プリナブリンの結晶形態４及びその調製方法に関する。いずれの特定の理論に縛られるものではないが、形態４はプリナブリンメタノール溶媒和物であると考えられている。

いくつかの実施形態では、プリナブリンの結晶形態４は、図１０に記載のものと実質的に同じＸＲＰＤパターンを有し、対応する表形式ピークデータは表４に示される。

さらに結晶形態４は、図１２Ｂに記載のものと実質的に同じＤＳＣサーモグラムを特徴としうる。図１２Ｂに示されるように、結晶形態４は融点が約２６７℃であり、結晶形態４は、吸熱ピークが約１１３℃及び約２６４℃にある示差走査熱量測定サーモグラムをもつ。

プリナブリン結晶形態５
いくつかの実施形態は、プリナブリンの結晶形態５及びその調製方法に関する。

いくつかの実施形態では、プリナブリンの結晶形態５は、図１３に記載のものと実質的に同じＸＲＰＤパターンを有し、対応する表形式ピークデータは表５に示される。

さらに結晶形態５は、図１５に記載のものと実質的に同じＤＳＣサーモグラムを特徴としうる。図１５に示されるように、結晶形態５は融点が約２６７℃であり、結晶形態５は、吸熱ピークが約７０℃及び約２６７℃にある示差走査熱量測定サーモグラムをもつ。

プリナブリン結晶形態６
いくつかの実施形態は、プリナブリンの結晶形態６及びその調製方法に関する。

いくつかの実施形態では、プリナブリンの結晶形態６は、図１６に記載のものと実質的に同じＸＲＰＤパターンを有し、対応する表形式ピークデータは表６に示される。

さらに結晶形態６は、図１８に記載のものと実質的に同じＤＳＣサーモグラムを特徴としうる。図１８に示されるように、結晶形態６は融点が約２６７℃であり、結晶形態６は、吸熱ピークが約２６７℃にある示差走査熱量測定サーモグラムをもつ。

プリナブリン結晶形態７
いくつかの実施形態は、プリナブリンの結晶形態７及びその調製方法に関する。

いくつかの実施形態では、プリナブリンの結晶形態７は、図１９に記載のものと実質的に同じＸＲＰＤパターンを有し、対応する表形式ピークデータは表７に示される。

さらに結晶形態７は、図２１に記載のものと実質的に同じＤＳＣサーモグラムを特徴としうる。図２１に示されるように、結晶形態７は融点が約２６７℃であり、結晶形態７は、吸熱ピークが約６３℃及び約２６７℃にある示差走査熱量測定サーモグラムをもつ。

プリナブリン結晶形態８
いくつかの実施形態は、プリナブリンの結晶形態８及びその調製方法に関する。

いくつかの実施形態では、プリナブリンの結晶形態８は、図２２に記載のものと実質的に同じＸＲＰＤパターンを有し、対応する表形式ピークデータは表８に示される。

さらに結晶形態８は、図２４に記載のものと実質的に同じＤＳＣサーモグラムを特徴としうる。図２４に示されるように、結晶形態８は融点が約２６２℃であり、結晶形態８は、吸熱ピークが約７４℃及び約２６４℃にある示差走査熱量測定サーモグラムをもつ。

プリナブリン結晶形態９
いくつかの実施形態は、プリナブリンの結晶形態９及びその調製方法に関する。

いくつかの実施形態では、プリナブリンの結晶形態９は、図２５に記載のものと実質的に同じＸＲＰＤパターンを有し、対応する表形式ピークデータは表９に示される。

さらに結晶形態９は、図２７に記載のものと実質的に同じＤＳＣサーモグラムを特徴としうる。図２７に示されるように、結晶形態９は融点が約２６７℃であり、結晶形態９は、吸熱ピークが約６３℃、約１１９℃、約２６７℃、及び約２８９℃にある示差走査熱量測定サーモグラムをもつ。

プリナブリン多形の変換
プリナブリン一水和物（形態１）は、同定された９つの多形のなかで最も安定した多形である。プリナブリン一水和物（形態１）は乾燥過程でも湿度ベース安定性試験下でも安定した状態を保つ（週末をかけた５０℃での真空下における乾燥に対して安定、相対湿度
９５％を超える湿度への１３日間の曝露時に固体形の変化なし）。

図２８は、形態１がどのようにしてプリナブリン多形の他の８つの形に変換できるかを示す。例えば、プリナブリン一水和物（形態１）は、形態１をイソプロピルアルコール（形態１の約１０倍体積）に３０℃で３時間スラリー化することによって形態２に変換することができ；形態１は、形態１をエタノール（形態１の約１０倍体積）に室温で一晩スラリー化することによって形態３に変換することができ；形態１は、形態１をメタノール（形態１の約１０倍体積）に３０℃で一晩スラリー化することによって形態４に変換することができ；形態１は、形態１をアセトニトリル（ＡＣＮ）に３０℃で３日間スラリー化及び撹拌することによって形態５に変換することができ；形態１は、形態１の飽和イソプロピルアルコール溶液を１５℃で調製した後、真空オーブンで４５℃にて蒸発させることによって形態６に変換することができ；形態１は、形態１の飽和メタノール溶液を４５℃で調製した後、真空オーブンで４５℃にて蒸発させることによって形態７に変換することができ；形態１は、形態１の飽和酢酸エチル（ＥｔＯＡｃ）溶液を４５℃で調製した後、真空オーブンで４５℃にて蒸発させることによって形態８に変換することができ；且つ形態１は、最初に形態１を形態４に変換し、次いで形態４を水分に曝露することによって形態９に変換することができる。

図２８はまた、他の形がどのようにして形態１に変換できるかも示す。例えば、形態２、形態３、及び形態４は、これらの形をエタノールと水の混合物（体積で９５：５）（エタノールと水の混合物の体積は開始時の多形の約１０倍である）に３０℃で２時間スラリー化することによって形態１に変換することができ；形態２は、それを真空オーブンで４５℃にて５日間乾燥させることによって形態６に変換することができ；形態４は、それを真空オーブンで４５℃にて一晩乾燥させることによって形態７に変換することができ；且つ形態４は、それを高い湿度に曝露することによって形態９に変換することができる。

投与及び医薬組成物
いくつかの実施形態は、本明細書に記載のプリナブリン多形及び薬学的に許容される担体を含む医薬組成物を含む。そのような組成物は、治療療法の一部として対象に投与することができる。

いくつかの実施形態では、組成物は、１つ以上の薬学的に許容される希釈剤をさらに含むことができる。いくつかの実施形態では、薬学的に許容される希釈剤は、クレモフォール（Ｋｏｌｌｉｐｈｏｒ（登録商標））（ポリオキシ１５ヒドロキシステアレート）を含むことができる。いくつかの実施形態では、薬学的に許容される希釈剤は、プロピレングリコールを含むことができる。いくつかの実施形態では、薬学的に許容される希釈剤は、クレモフォール（ｋｏｌｌｉｐｈｏｒ）及びプロピレングリコールを含むことができる。いくつかの実施形態では、薬学的に許容される希釈剤は、クレモフォール（ｋｏｌｌｉｐｈｏｒ）及びプロピレングリコールを含むことができ、そこにおいて、希釈剤の総重量に対して、クレモフォール（ｋｏｌｌｉｐｈｏｒ）は約４０重量％であり、プロピレングリコールは約６０重量％である。いくつかの実施形態では、組成物は、１つ以上の他の薬学的に許容される賦形剤をさらに含むことができる。

Remington's The Science and Practice of Pharmacy, 21st Ed., Lippincott Williams & Wilkins (2005) に開示されているものなどの標準的な医薬製剤技術が、本明細書に記載の医薬組成物を作るのに使用することができる。該文献は参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。したがって、いくつかの実施形態は、（ａ）安全で且つ治療に有効な量のプリナブリン多形又はその薬学的に許容される塩及び（ｂ）薬学的に許容される担体、希釈剤、賦形剤、又はそれらの組み合わせを含む医薬組成物を含む。

他の実施形態は、プリナブリン多形及びさらなる治療薬を別個の組成物又は同じ組成物で共投与することを含む。よって、いくつかの実施形態は、（ａ）安全で且つ治療に有効な量のプリナブリン多形又はその薬学的に許容される塩及び（ｂ）薬学的に許容される担体、希釈剤、賦形剤、又はその組み合わせを含む第１の医薬組成物並びに（ａ）安全で且つ治療に有効な量のさらなる治療薬及び（ｂ）薬学的に許容される担体、希釈剤、賦形剤、又はその組み合わせを含む第２の医薬組成物を含む。いくつかの実施形態は、（ａ）安全で且つ治療に有効な量のプリナブリン多形又はその薬学的に許容される塩、（ｂ）安全で且つ治療に有効な量のさらなる治療薬、及び（ｃ）薬学的に許容される担体、希釈剤、賦形剤、又はその組み合わせを含む医薬組成物を含む。

本明細書に記載の医薬組成物の投与は、同様の有用性を提供する許容可能な薬剤投与方法のいずれかを介して、例えば、限定されないが、経口で、舌下に、口腔に、皮下に、静脈内に、鼻腔内に、局所的に、経皮的に、皮内に、腹膜内に、筋肉内に、肺内に、経膣的に、経直腸的に、又は眼内に施される。経口投与及び非経口投与は、好ましい実施形態の対象である適応症を治療するのに慣用されている。

「薬学的に許容される担体」又は「薬学的に許容される賦形剤」という用語は、あらゆる溶媒、分散媒、コーティング、抗菌剤及び抗真菌剤、等張剤、及び吸収遅延剤などを包含する。薬学的に活性のある物質にそのような媒体及び薬剤を使用することは、当該技術分野において周知である。いずれの従来の媒体又は薬剤が活性成分と不適合でない限り、治療用組成物におけるその使用が企図される。くわえて、当該技術分野においてよく使用されるさまざまな補助剤が含まれうる。医薬組成物にさまざまな成分を含めることに関する考慮事項は、例えば、Gilman et al. (Eds.) (1990); Goodman and Gilman's: The Pharmacological Basis of Therapeutics, 8th Ed., Pergamon Pressに記載されている。該文献は参照によりその全体が本明細書に組み込まれる。

薬学的に許容される担体又はその成分としての役割を果たすことができる物質のいくつかの例は、ラクトース、グルコース、及びスクロースなどの糖；コーンスターチ及びポテトデンプンなどのデンプン；カルボキシメチルセルロースナトリウム、エチルセルロース、及びメチルセルロースなどのセルロース及びその誘導体；粉末トラガカント；麦芽；ゼラチン；タルク；ステアリン酸及びステアリン酸マグネシウムなどの固体滑沢剤；硫酸カルシウム；落花生油、綿実油、ゴマ油、オリーブ油、トウモロコシ油、及びテオブロマの油などの植物油；プロピレングリコール、グリセリン、ソルビトール、マンニトール、及びポリエチレングリコールなどの多価アルコール；アルギン酸；ツインなどの乳化剤；ラウリル硫酸ナトリウムなどの湿潤剤；着色剤；香料；打錠剤（tableting agent）、安定剤；抗酸化物質；防腐剤；発熱物質が含まれていない水；等張生理食塩水；並びにリン酸緩衝溶液である。

本明細書に記載の組成物は、好ましくは単位剤形で提供される。本明細書で使用される場合、「単位剤形」は、適切な診療実務（good medical practice）に従って、動物、好ましくは、哺乳類対象に単回投与で投与するのに適した化合物又は組成物の量を含む組成物である。しかし、単回又は単位剤形は、その剤形が１日１回又は治療の１過程に１回投与されることを示唆しない。そのような剤形は、１日に１回、２回、３回、又はそれより多く投与されることが企図され、ある一定の時間（例えば、約３０分間から約２〜６時間）にわたって注入で投与される場合もあり、持続注入で投与される場合もあり、単回投与が特に除外されるわけではないが治療過程において１回以上投与される場合もある。製剤が治療の全過程を企図しないことは当業者なら理解するであろう。そのような判断は、製剤よりもむしろ治療分野の当業者にゆだねられる。

上記のような有用な組成物は、多様な投与経路、例えば、経口、舌下、口腔、鼻内、直
腸、局所（経皮及び皮内を含む）、眼、脳内、頭蓋内、髄腔内、動脈内、静脈内、筋肉内、又は投与の他の非経口経路のための多様な適切な形態のいずれかでありうる。経口及び経鼻組成物を吸入によって投与され、利用可能な方法を用いて作られる組成物を含むことを当業者なら理解するであろう。所望の特定の投与経路に応じて、多様な当該技術分野において周知である薬学的に許容される担体が使用されうる。薬学的に許容される担体としては、例えば、固体又は液体充填剤、希釈剤、ハイドロトロピー剤、界面活性剤、及び被包物質が挙げられる。化合物又は組成物の活性を実質的に干渉しない随意の薬学的に活性のある物質が含まれてもよい。化合物又は組成物と併せて用いられる担体の量は、化合物の単位投与あたりの投与のための材料の実際の量を提供するのに十分である。本明細書に記載の方法において有用な剤形を作る技術及び組成物は、以下の参考文献に記載され、該文献はすべて、参照により本明細書に組み込まれる。Modern Pharmaceutics, 4th Ed., Chapters 9 and 10 (Banker & Rhodes, editors, 2002); Lieberman et al., Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets (1989); 及びAnsel, Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms 8th Edition (2004)。

さまざまな経口剤形が使用でき、例えば、錠剤などの固体形態、カプセル剤（例えば、液体ゲルカプセル剤及び固体ゲルカプセル剤）、顆粒、及び原末が挙げられる。錠剤は、圧縮されたもの、粉薬錠剤、腸溶コーティングされたもの、糖コーティングされたもの、フィルムコーティングされたもの、又は多重圧縮されたものであることができ、適切な結合剤、滑沢剤、希釈剤、崩壊剤、着色剤、香料、流動誘発剤（flow-inducing agent）、及び溶融剤を含有する。液体経口剤形としては、水溶液、エマルション、懸濁液、非発泡性顆粒を再溶解した溶液及び／又は懸濁液、及び発泡性顆粒を再溶解した発泡性調製物が挙げられ、適した溶媒、防腐剤、乳化剤、懸濁剤、希釈剤、甘味料、溶融剤、着色剤、及び香料を含有する。

経口投与用単位剤形の調製に適した薬学的に許容される担体は当該技術分野において周知である。錠剤は典型的に、炭酸カルシウム、炭酸ナトリウム、マンニトール、ラクトース、及びセルロースなどの不活性希釈剤；デンプン、ゼラチン、及びスクロースなどの結合剤；デンプン、アルギン酸、及びクロスカルメロースなどの崩壊剤；ステアリン酸マグネシウム、ステアリン酸、及びタルクなどの滑沢剤として従来の医薬的に適合する補助剤を含む。二酸化ケイ素などの流動化剤を、粉末混合物の流れ特性を向上するために使用することができる。ＦＤ＆Ｃ色素などの着色剤を外観のために加えることができる。アスパルテーム、サッカリン、メントール、ペパーミント、スクロース、及び果実フレーバーなどの甘味料及び香料は、咀嚼錠に有用な補助剤である。カプセル剤は典型的には、１つ以上の上記に開示されている固体希釈剤を含む。担体成分の選択は、味、コスト、及び保存安定性などの決定的に重要ではない二次的考慮事項に依存し、当業者によって容易に行うことができる。

また経口組成物には、液体溶液、エマルション、懸濁液なども含まれる。そのような組成物の調製に適した薬学的に許容される担体は、当該技術分野において周知である。シロップ、エリキシル、エマルション、及び懸濁液のための担体の典型的な成分としては、エタノール、グリセロール、プロピレングリコール、ポリエチレングリコール、液体スクロース、ソルビトール、及び水が挙げられる。懸濁液に関して、典型的な懸濁剤としては、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナトリウム、アビセルＲＣ−５９１、トラガカント、及びアルギン酸ナトリウムが挙げられ、典型的な湿潤剤としては、レシチン及びポリソルベート８０が挙げられ、典型的な防腐剤としては、メチルパラベン及び安息香酸ナトリウムが挙げられる。また経口液体組成物は、上記に開示されている甘味料、香料、及び着色剤などの１つまたは複数の成分を含んでもよい。

そのような組成物は、対象組成物が所望の局所適用の近くの消化管において放出された
り、所望の作用を延長するためにさまざまな時点で放出されたりするように、従来の方法、典型的にはｐＨ依存性コーティング又は時間依存性コーティングでコーティングされてもよい。そのような剤形は典型的に、限定されないが、１つ以上の酢酸フタル酸セルロース、ポリ酢酸フタル酸ビニル、フタル酸ヒドロキシプロピルメチルセルロース、エチルセルロース、オイドラギットコーティング、ロウ、及びシェラックを含む。

本明細書に記載の組成物は随意に他の活性薬剤を含んでもよい。

対象化合物の全身送達を達成するのに有用な他の組成物としては、舌下投与剤形、口腔投与剤形、及び鼻内投与剤形が挙げられる。そのような組成物は典型的に、スクロース、ソルビトール、及びマンニトールなどの可溶性充填剤物質並びにアカシア、微結晶性セルロース、カルボキシメチルセルロース、及びヒドロキシプロピルメチルセルロースなどの結合剤を１つ以上含む。さらに、上記に開示されている流動化剤、滑沢剤、甘味料、着色剤、抗酸化物質、及び香料が含まれてもよい。

局所的に眼に使用するために製剤される液体組成物は、局所的に眼に投与できるように製剤される。時として、製剤的な考慮事項（例えば、薬物安定性）のため最適な快適さが最適に満たないことが余儀なくされる場合があるが、快適性はできる限り最大にされうる。快適さが最大化できない場合、液剤が局所的な眼への使用に患者にとって忍容可能であるように液剤は製剤されうる。くわえて、眼科的に許容可能な液剤は、単回使用向けに包装されてもよく、複数回にわたる使用に際し雑菌混入を防ぐために防腐剤を含んでもよい。

眼科適用のために、溶液又は薬剤は多くの場合、主要な溶媒として生理食塩水溶液を用いて調製される。好ましくは、眼科用溶液は、安定したｐＨで適切な緩衝系とともに維持されうる。また製剤は、従来の、薬学的に許容される防腐剤、安定剤、及び界面活性剤を含有してよい。

本明細書に開示されている医薬組成物に使用されうる防腐剤としては、塩化ベンザルコニウム、ＰＨＭＢ、クロロブタノール、チメロサール、酢酸フェニル水銀、及び硝酸フェニル水銀が挙げられるが、これらに限定されない。有用な界面活性剤は、例えばツイン８０である。同様に、さまざまな有用な溶媒が、本明細書に開示されている眼科用調製物に使用されうる。これらの溶媒としては、ポリビニルアルコール、ポビドン、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポロクサマー、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキシエチルセルロース、及び精製水が挙げられるが、これらに限定されない。

必要に応じて又は利便性から、等張化剤を加えてもよい。それらの等張化剤としては、塩、特に、塩化ナトリウム、塩化カリウム、マンニトール、及びグリセリン、又は他のいずれの適切な眼科的に許容可能な等張化剤が挙げられるが、これらに限定されない。

結果として得られる調製物が眼科的に許容可能である限り、ｐＨを調整するためのさまざまなバッファー及び手段が用いられうる。多くの組成物については、ｐＨは４〜９であることになる。したがって、バッファーとしては、酢酸バッファー、クエン酸バッファー、リン酸バッファー、及びホウ酸バッファーが挙げられる。必要に応じて、これらの製剤のｐＨを調整するために酸又は塩基が使用されうる。

眼科的に許容可能な抗酸化物質としては、二亜硫酸ナトリウム、チオ硫酸ナトリウム、アセチルシステイン、ブチルヒドロキシアニソール、及びブチルヒドロキシトルエンが挙げられるが、これらに限定されない。

眼科用調製物に含まれうる他の賦形剤成分はキレート剤である。有用なキレート剤はエデト酸二ナトリウム（ＥＤＴＡ）であるが、他のキレート剤もＥＤＴＡに代えて又はＥＤＴＡとともに使用してよい。

局所使用のためには、本明細書に開示されている組成物を含有するクリーム、軟膏、ゲル、溶液、又は懸濁液などが用いられる。局所製剤は一般に、医薬担体、共溶媒、乳化剤、浸透促進剤、防腐剤系、皮膚軟化剤から構成されうる。

静脈内投与のために、本明細書に記載の組成物は、生理食塩水又はデキストロース溶液などの薬学的に許容される希釈剤に溶解又は分散されうる。適切な賦形剤が所望のｐＨを得るために含まれうる。例えば、限定されないが、ＮａＯＨ、炭酸ナトリウム、酢酸ナトリウム、ＨＣｌ、及びクエン酸が挙げられる。さまざまな実施形態において、最終組成物のｐＨは、２〜８、又は好ましくは４〜７の範囲に及ぶ。抗酸化賦形剤としては、亜硫酸水素ナトリウム、アセトン亜硫酸水素ナトリウム、ホルムアルデヒドスルホキシル酸ナトリウム、チオ尿素、及びＥＤＴＡが挙げられうる。最終静注用組成物に見られる適切な賦形剤の他の非限定的な例としては、リン酸ナトリウム又はリン酸カリウム、クエン酸、酒石酸、ゼラチン、並びにデキストロース、マンニトール、及びデキストランなどの炭水化物が挙げられうる。さらなる許容可能賦形剤は、Powell, et al., Compendium of Excipients for Parenteral Formulations, PDA J Pharm Sci and Tech 1998, 52 238-311及びNema et al., Excipients and Their Role in Approved Injectable Products: Current Usage and Future Directions, PDA J Pharm Sci and Tech 2011, 65 287-332に記載されている。両文献は参照によりそれらの全体が本願明細書に組み込まれる。また、静菌性又は静真菌性の溶液を得るために抗微生物剤が含まれてもよく、例えば、限定されないが、硝酸フェニル水銀、チメロサール、塩化ベンゼトニウム、塩化ベンザルコニウム、フェノール、クレゾール、及びクロロブタノールが挙げられる。

静脈内投与用組成物は、投与の少し前に滅菌水、生理食塩水、又は水中のデキストロースなどの適切な希釈剤で再溶解されるもう１つの固体形で医療従事者（caregiver）に提供されうる。他の実施形態では、組成物は、すぐに非経口投与する状態にある溶液で提供される。さらに他の実施形態では、組成物は、投与前にさらに希釈される溶液で提供される。本明細書に記載の化合物と別の薬剤との組み合わせを投与することを含む実施形態では、その組み合わせが混合物として医療従事者に提供されてもよく、医療従事者が２つの薬剤を投与前に混合しもよく、２つの薬剤が別々に投与されてもよい。

いくつかの実施形態では、プリナブリン多形又は他の治療薬の単回投与量は、体表面積あたり約５ｍｇ／ｍ^２〜約１５０ｍｇ／ｍ^２、体表面積あたり約５ｍｇ／ｍ^２〜約１００ｍｇ／ｍ^２、体表面積あたり約１０ｍｇ／ｍ^２〜約１００ｍｇ／ｍ^２、体表面積あたり約１０ｍｇ／ｍ^２〜約８０ｍｇ／ｍ^２、体表面積あたり約１０ｍｇ／ｍ^２〜約５０ｍｇ／ｍ^２、体表面積あたり約１０ｍｇ／ｍ^２〜約４０ｍｇ／ｍ^２、体表面積あたり約１０ｍｇ／ｍ^２〜約３０ｍｇ／ｍ^２、体表面積あたり約１３．５ｍｇ／ｍ^２〜約１００ｍｇ／ｍ^２、体表面積あたり約１３．５ｍｇ／ｍ^２〜約８０ｍｇ／ｍ^２、体表面積あたり約１３．５ｍｇ／ｍ^２〜約５０ｍｇ／ｍ^２、体表面積あたり約１３．５ｍｇ／ｍ^２〜約４０ｍｇ／ｍ^２、体表面積あたり約１３．５ｍｇ／ｍ^２〜約３０ｍｇ／ｍ^２、体表面積あたり約１５ｍｇ／ｍ^２〜約８０ｍｇ／ｍ^２、体表面積あたり約１５ｍｇ／ｍ^２〜約５０ｍｇ／ｍ^２、又は体表面積あたり約１５ｍｇ／ｍ^２〜約３０ｍｇ／ｍ^２でありうる。いくつかの実施形態では、プリナブリン多形又は他の治療薬の単回投与量は、体表面積あたり約１３．５ｍｇ／ｍ^２〜約３０ｍｇ／ｍ^２でありうる。いくつかの実施形態では、プリナブリン多形又は他の治療薬の単回投与量は、体表面積あたり約５ｍｇ／ｍ^２、約１０ｍｇ／ｍ^２、約１２．５ｍｇ／ｍ^２、約１３．５ｍｇ／ｍ^２、約１５ｍｇ／ｍ^２、約１７．５ｍｇ／ｍ^２、約２０ｍｇ／ｍ^２、約２２．５ｍｇ／ｍ^２、約２５ｍｇ／ｍ^２、約２７．５ｍｇ／ｍ^２、約３
０ｍｇ／ｍ^２、約４０ｍｇ／ｍ^２、約５０ｍｇ／ｍ^２、約６０ｍｇ／ｍ^２、約７０ｍｇ／ｍ^２、約８０ｍｇ／ｍ^２、約９０ｍｇ／ｍ^２、又は約１００ｍｇ／ｍ^２でありうる。

いくつかの実施形態では、プリナブリン多形又は他の治療薬の単回投与量は、約５ｍｇ〜約３００ｍｇ、約５ｍｇ〜約２００ｍｇ、約７．５ｍｇ〜約２００ｍｇ、約１０ｍｇ〜約１００ｍｇ、約１５ｍｇ〜約１００ｍｇ、約２０ｍｇ〜約１００ｍｇ、約３０ｍｇ〜約１００ｍｇ、約４０ｍｇ〜約１００ｍｇ、約１０ｍｇ〜約８０ｍｇ、約１５ｍｇ〜約８０ｍｇ、約２０ｍｇ〜約８０ｍｇ、約３０ｍｇ〜約８０ｍｇ、約４０ｍｇ〜約８０ｍｇ、約１０ｍｇ〜約６０ｍｇ、約１５ｍｇ〜約６０ｍｇ、約２０ｍｇ〜約６０ｍｇ、約３０ｍｇ〜約６０ｍｇ、又は約４０ｍｇ〜約６０ｍｇでありうる。いくつかの実施形態では、プリナブリン多形又は他の治療薬の単回投与量は、約２０ｍｇ〜約６０ｍｇ、約２７ｍｇ〜約６０ｍｇ、約２０ｍｇ〜約４５ｍｇ、又は約２７ｍｇ〜約４５ｍｇでありうる。いくつかの実施形態では、プリナブリン多形又は他の治療薬の単回投与量は、約５ｍｇ、約１０ｍｇ、約１２．５ｍｇ、約１３．５ｍｇ、約１５ｍｇ、約１７．５ｍｇ、約２０ｍｇ、約２２．５ｍｇ、約２５ｍｇ、約２７ｍｇ、約３０ｍｇ、約４０ｍｇ、約５０ｍｇ、約６０ｍｇ、約７０ｍｇ、約８０ｍｇ、約９０ｍｇ、約１００ｍｇ、約１２５ｍｇ、約１５０ｍｇ、又は約２００ｍｇでありうる。

投与期間は、腫瘍が制御された状態を保ち、レジメンが臨床的に忍容される限り、複数週の治療サイクルであることができる。いくつかの実施形態では、プリナブリン多形又は他の治療薬の単回投与は、週に１回、好ましくは、３週間（２１日）治療サイクルの１日目及び８日目の各々に１回投与することができる。いくつかの実施形態では、プリナブリン多形又は他の治療薬の単回投与は、１週間、２週間、３週間、４週間、又は５週間治療サイクルの間に週に１回、週に２回、週に３回、週に４回、週に５回、週に６回、又は毎日投与することができる。投与は、治療サイクル各々の週の同じ日又は異なった日に施行することができる。

治療サイクルは、レジメンが臨床的に忍容される限り繰り返すことができる。いくつかの実施形態では、治療サイクルはｎ回繰り返えされ、ここで、ｎは２〜３０の範囲の整数である。いくつかの実施形態では、ｎは、２、３、４、５、６、７、８、９、又は１０である。いくつかの実施形態では、新しい治療サイクルは、前の治療サイクルの完了後すぐに行うことができる。いくつかの実施形態では、新しい治療サイクルは、前の治療サイクルの完了の一定時間後に行うことができる。

いくつかの実施形態では、本明細書に記載の組成物は、他の治療薬と併用して使用することができる。いくつかの実施形態では、本明細書に記載の組成物は、化学療法、放射線、及び生物学的療法などの治療と併せて施行又は使用することができる。

実施例１
プリナブリン化合物の試料をエタノール中で撹拌し、熱して還流した。全試料が溶けるまでエタノールを分けて添加し還流を維持し、透明な黄色溶液を得た。還流において試料を完全に溶かすために合計１２４．７ｇのエタノールを要した。次いで溶液を冷まし、沈殿をモニターした。溶液が４９℃のとき、沈殿が見られた。混合物を再び熱して還流し、透明な黄色溶液を得た。熱い溶液をより大きい三角フラスコに９．４５ｇのエタノールリンスとともに移した（熱濾過を擬するため）。この還流溶液に６．６ｇの水（エタノールの約５％の水）を加えた。この溶液を撹拌しながらゆっくりと冷ました。溶液が７０℃まで冷えたとき、沈殿が見られた。この時点で、追加の水（１２８．６ｇ）をゆっくりと加え、大量の固体を沈殿させた。溶液を撹拌しながら室温にまで冷やした。固体を１７℃で濾過し、２０ｇの水で３回洗った。合計１３４ｇの水を濾液に加え、濁った溶液、濾過に
不十分な量の固体が生じた。さらなる生成物を沈殿させようとして１３７ｇの追加の水を加えたが、さらなる固体は回収できなかった。固体を４０〜４５℃で３日間乾燥させ、４．７３ｇを得た。９７．５％回収。ＸＲＰＤによる分析から、生成物がプリナブリン一水和物（形態１）であることが示された。カール・フィッシャーによる分析は水分レベルが４．９％であることを示した。

４５℃にて真空下でさらに７０時間乾燥させた後のＫＦによる分析は、水分レベルが４．１％に減少したことを示した。この試料のＸＲＰＤから、それがプリナブリン一水和物（形態１）であることが示された。この試料を蓋のない容器中のグローブバッグに、水の入った蓋のない容器とともに置き、水分レベルをモニターした。４時間後に水分レベルが測定され、５．０％であった。１８．５時間に水分レベルが測定され、４．８％であり、５１時間後にＫＦ結果は４．９％であった。

実施例２
プリナブリン化合物の試料（４．９２ｇ）をエタノール（１４７．６ｇ）中で撹拌し、熱して還流した（７５℃で完全に可溶）。次いで溶液を冷まし、沈殿をモニターした。溶液が４８℃のとき、沈殿が見られた。混合物を再び熱して還流し、透明な黄色溶液を得た。添加中に混合物を冷ましながら、熱い溶液に２９５ｇの水（エタノールの質量の約２倍）を加えた。約１５０ｍＬの温度４８℃の水を入れた後、沈殿が見られた。この溶液を室温にまで冷やした。固体を濾過し、２０ｇの水で３回洗った。固体を４０〜４５℃で２．５日間乾燥させ、４．８２ｇを得た。９８．０％回収。ＸＲＰＤによる分析は、生成物が、プリナブリン一水和物（形態１）（主生成物）及び無水プリナブリン（形態３）（少量生成物）の混合物であることを示した。カール・フィッシャーによる分析は水分レベルが５．０％であることを示した。４５℃にて真空下でさらに７０時間乾燥させた後のＫＦによる分析は、水分レベルが４．４％に減少したことを示した。この試料のＸＲＰＤは、本質的に不変であり、さらなるピーク（１２．２６°、１５．１９°、及び２８．７９°２θ度）をもつ形態１と形態３の混合物を示す。この試料を蓋のない容器中のグローブバッグに、水の入った蓋のない容器とともに置き、水分レベルをモニターした。４時間後に水分レベルが測定され、５．０％であった。１８．５時間後に水分レベルが測定され、４．９％であり、５１時間後にＫＦ結果は５．１％であった。

実施例３
プリナブリン化合物の試料を、激しく撹拌するか又は穏やかに熱して（５０℃）、１，２−プロパンジオールに溶かした。４時間後、試料は形態３に関連するピークを示した。週末にかけて撹拌した後、試料は水でスラリー化され、ＸＲＰＤスキャンで見られる結晶形態３に関連するピークをもたないプリナブリン一水和物（形態１）に完全に変換された。エタノール／水での実験についても同様の結果が見られ、非常に小さいピークが形態３について１時間及び４時間で見られ、形態１については６６時間後のみに観察された。

実施例４
再加工手順では、プリナブリン化合物（形態３）を、還流時に（重量で）１：２５の比でエタノールに溶かした。この溶液を５０℃より高い温度で濾過し、濾液を等しい質量の水と混ぜ合わせて生成物を得た。全量の水を加える前にポリッシュ濾過した（polish-filtered）エタノール溶液を再び熱し、（エタノールに対して）約５％の水を加え、この溶液を約７０℃で撹拌して形態１への変換を確実にすることが望ましいことがある。次いで、追加の水を加え、混合物を冷却して生成物を濾過によって分離した。試料を長期間乾燥させて、カール・フィッシャー分析で測定した水分含量を下げることができる。１つの試料を３日間乾燥させ、４．９％水分のＫＦ分析となった。さらに３日間乾燥させることにより、ＫＦ結果は４．１％に下がった。

乾燥生成物を湿度環境に曝すことにより、水分レベルは約５％に上がり、その生成物は安定した状態を保つようであった。水分が４．１％の１つの試料を、グローブバッグ中で蓋のない容器に入れた水に４時間曝した。水分レベルは５．０％に上がった。この環境でさらに１４．５時間経た後、試料の水分レベルは４．８％と測定された。合計で５１時間経った後、ＫＦ結果は４．９％であった。

実施例５
含水量に関してＫＦ分析が約３．１％であるプリナブリンのバッチをクレモフォール（ｋｏｌｌｉｐｈｏｒ）（４０重量％）とプロピレングリコール（６０重量％）の混合物に加えた。不溶性粒子が溶液中に形成され、不溶性粒子は無水プリナブリン（形態３）であると判断した。バッチを図２９に記載のステップに従って再加工してプリナブリン一水和物（形態１）を形成した。ＫＦによる分析は、再加工したプリナブリンの含水量が約５．１％であることを示した。それは一水和物の理論含水量と一致する。プリナブリン一水和物（形態１）はクレモフォール（ｋｏｌｌｉｐｈｏｒ）（４０重量％）とプロピレングリコール（６０重量％）の混合物に完全に溶け、不溶性粒子は溶液中に形成されなかった。したがって、無水プリナブリン（形態３）を含有するプリナブリン組成物と比べて、プリナブリン一水和物（形態１）のほうが良好な溶解度を示した。

実施例６
プリナブリン一水和物（形態１の結晶）を、ＸＲＰＤ（結晶、図１）、光学顕微鏡法（図２）、ＤＳＣ（図３Ａ）、ＴＧＡ（図３Ｂ）、及びＫＦによって特徴付けた。

ＤＳＣデータはＴＡインスツルメント Ｑ１０ ＤＳＣを用いて集めた。典型的には、試料（〜２ｍｇ）を密封したアロジン処理アルミニウムの試料パンに入れ、５０ｍＬ／分の窒素パージ下で１０℃／分の速度で３０から３００℃までスキャンした。ＴＡインスツルメントＴＧＡ Ｑ５００を用いてＴＧＡデータを集めた。典型的には、試料（〜１０ｍｇ）を蓋の無い、予めタールで被覆した（pre-tared）アルミニウム試料パンに入れ、６０ｍＬ／分の窒素パージ下で１０℃／分の速度で３０から３００℃までスキャンした。ＣｕＫα放射線源（１．５４オングストローム）、９位置試料ホルダー、及びＬＹＮＸＥＹＥ高速検出器を備えたブルカー Ｄ８ Ａｄｖａｎｃｅを用いて粉末Ｘ線回折パターンを得た。典型的には、各スキャン時間は１８０秒で、２θ範囲は４〜４０°であった。試料をゼロバックグラウンド、ケイ素プレートホルダーに置いた。Ａｑｕａｄｙｎｅ ＤＶＳ−２ 重量法水吸着測定装置を用いて試料を分析した。相対湿度を２〜９５％に調整して、試料の重量を継続的にモニターし、記録した。

ＸＲＰＤは物質が結晶であることを示した。ＤＳＣデータは、ブロードな吸熱（ピーク最大値１４１℃、水分消失と思われる）、小さい発熱事象（ピーク最大値１６４℃）、及びシャープな吸熱事象（ピーク最大値２６８℃）を示した。ＴＧＡは、約１３０℃で５．２６％の質量の消失（水分消失と思われる）を示した。また、ＫＦ分析は物質が水を５．２５重量％含有することを示した。

プリナブリン一水和物（形態１）の試料を５０℃で一晩及び週末にかけて真空オーブンに入れた。試料は乾燥試験中安定した状態を保ち、乾燥過程の間に重量の変化は起こらなかった。

ＤＶＳ実験をプリナブリン一水和物（形態１）について行った。試料は相対湿度９５％で質量が〜０．１％増え、その増量は０％ＲＨへの乾燥に際しヒステリシスなしに失われた。ＤＶＳ後試料をＸＲＰＤで分析し、変換が起こっていないことを確認した。図３ＣはＤＶＳ等温線プロットを示す。ＤＶＳ前試料のＸＲＰＤパターン（形態１プリナブリン一水和物）は、ＤＶＳ後試料（形態１プリナブリン一水和物）のＸＲＰＤパターンと重なる
。

プリナブリン一水和物（形態１）試料を高湿環境に１３日間置いた。質量は変化せず、安定した状態を保った。ＤＶＳ前及びＤＶＳ後試料はＸＲＰＤパターンの変化を示さなかった。

形態２の固体のＤＶＳ試験は、図６Ｃに示されるように、形態２の試料が相対湿度約８０％で約７％の質量を失い、ＸＲＰＤパターン分析に基づいてＤＶＳ後試料はＤＶＳ前試料と異なることを示した。

形態３の固体のＤＶＳ試験は、図９Ｃに示されるように、形態３の試料が相対湿度９０％で約０．２％の質量を失い、ＸＲＰＤパターン分析に基づいてＤＶＳ後試料はＤＶＳ前試料と異なることを示した。

形態４の固体のＤＶＳ試験は、試験中に形態３の試料が質量を失ったこと示した。形態４のＤＶＳ等温線プロットを図１２Ｃに示す。ＸＲＰＤパターン分析に基づいてＤＶＳ後試料はＤＶＳ前試料と異なった。

ＤＶＳ及び乾燥試験中、プリナブリン一水和物（形態１）は安定した状態を保った。比較してみると、他の多形はＤＶＳ試験中、不安定であり、且つ重量変化を示した。試験結果は、他の多形と比べて形態１は安定であることを示している。

実施例７
重量法による溶解度を測定するために、プリナブリン化合物を表９に示されるような１５の異なる溶媒／溶媒混合物に１５℃及び４５℃で３日間スラリー化した。各実験について約７０ｍｇの固体をバイアルに加えた後に、０．７ｍＬのそれぞれの溶媒を加えた。次に、スラリーを遠心分離し、上清を予め重さを量ったバイアルに入れ、真空下で蒸発させて乾燥させた。残留固体が入ったバイアルの重さを再び量って、溶解度を計算した。化合物は、ＴＨＦに溶解性が高く、試験した他の溶媒には中程度から低い溶解度を示した。溶解度データを表１０に示す。

重量法による溶解度分析の間、プリナブリン一水和物（形態１）をさまざまな溶媒に１５℃及び４５℃でスラリー化した。遠心分離後、得られた固体をウェットケーキとしてＸＲＰＤで分析した。形態１ではない試料を真空オーブンで乾燥させ、ＸＲＰＤで分析した。形態２、形態３、形態４、形態５、形態６、及び形態７が観察された。これら結果を表１１に示す。

蒸発結晶化実験をさまざまな溶媒中のプリナブリン一水和物の溶液を（室温で）蒸発させることによってセットアップした。これらの溶液は１５℃及び４５℃での重量法による溶解度の分析の間に得た。これらの溶液は濃度が異なった。得られた固体をＸＲＰＤで分析した。形態８が観察された。これら結果を表１２に示す。

６つの冷却結晶化実験及び１つのスラリー化実験を実施した。これらの実験の結果を表１３に示す。

実施例８
さまざまな結晶形態を、２００ｍｇスケールでの他の形への変換について試験した。

形態１の固体を２ｍＬのエタノールに室温で一晩スラリー化して形態３を作ることによって、形態３のスケールアップ実験を２００ｍｇスケールで実施した。

形態１の固体を２ｍＬのイソプロピルアルコールに３０℃で一晩スラリー化することによって、形態２のスケールアップ実験を２００ｍｇスケールで実施した。

形態１の固体を２ｍＬのＭｅＯＨに３０℃で一晩スラリー化することによって、形態４のスケールアップ実験を２００ｍｇスケールで実施した。

形態３の固体は９５：５のＥｔＯＨ：水混合物に３０℃にて２時間スラリー化され、ＸＲＰＤによって分析されて形態１に変換したことが示された。

形態２の固体は９５：５のＥｔＯＨ：水混合物に３０℃にて２時間スラリー化され（２０７１−１６−１）、ＸＲＰＤによって分析されて形態１に変換したことが示された。

形態４の固体は９５：５のＥｔＯＨ：水混合物に３０℃にて２時間スラリー化され、ＸＲＰＤによって分析されて形態１に変換したことが示された。

５０℃にて真空下で週末をかけて乾燥したとき、プリナブリン一水和物（形態１）は安定した状態を保った。形態１を高い湿度（相対湿度＞９５％）に１３日間曝したとき、固体形態の変化はなかった。乾燥過程を含む製造過程の間、形態１が安定であることが示された。また、形態１はさまざまな湿度条件下で安定であった。他方では、水分に曝したとき、結晶形は形態１の一水和物に変換された。したがって、形態１は最も安定した結晶形態であり、製造方法として最も実行可能な形である。

Claims (46)

1. 少なくとも８．１°±０．２°、１３．１°±０．２°、１６．３°±０．２°、２３．９°±０．２°、２４．２°±０．２°、２４．５°±０．２°、及び２６．６°±０．２°２θにおけるピークを含む粉末Ｘ線回折パターンを示す、プリナブリン一水和物の結晶。
2. 少なくとも８．１°±０．２°、１３．１°±０．２°、１６．３°±０．２°、２２．９°±０．２°、２３．９°±０．２°、２４．２°±０．２°、２４．５°±０．２°、及び２６．６°±０．２°２θにおけるピークを含む粉末Ｘ線回折パターンを示す、請求項１に記載のプリナブリン一水和物の結晶。
3. 少なくとも８．１°±０．２°、１３．１°±０．２°、１４．８°±０．２°、１６．１°±０．２°、１６．３°±０．２°、１７．６°±０．２°、１９．８°±０．２°、２２．４°±０．２°、２２．９°±０．２°、２３．９°±０．２°、２４．２°±０．２°、２４．５°±０．２°、２６．６°±０．２°、及び２９．３°±０．２°２θにおけるピークを含む粉末Ｘ線回折パターンを示す、請求項１に記載のプリナブリン一水和物の結晶。
4. 前記結晶が２６７℃の融点をもつ、請求項１に記載のプリナブリン一水和物の結晶。
5. 吸熱ピークが１４１℃及び２６７℃にある示差走査熱量測定サーモグラムをもつ、請求項１に記載のプリナブリン一水和物の結晶。
6. プリナブリン組成物であって、前記組成物の総重量に対して５０重量％を超える、請求項１〜５のいずれか一項に記載の前記プリナブリン一水和物の結晶を含むプリナブリン組成物。
7. 前記組成物の総重量に対して７５重量％を超えるプリナブリン一水和物の結晶を含む、請求項６の組成物。
8. 前記組成物の総重量に対して９０重量％を超えるプリナブリン一水和物の結晶を含む、請求項６の組成物。
9. 前記組成物の総重量に対して９５重量％を超えるプリナブリン一水和物の結晶を含む、請求項６の組成物。
10. 前記組成物の総重量に対して９８重量％を超えるプリナブリン一水和物の結晶を含む、請求項６の組成物。
11. 前記組成物の総重量に対して９９重量％を超えるプリナブリン一水和物の結晶を含む、請求項６の組成物。
12. 請求項１〜５のいずれか一項に記載のプリナブリン一水和物の結晶を固体形態で含む無菌容器。
13. 請求項１〜５のいずれか一項に記載のプリナブリン一水和物の結晶を調製する方法であって、
    プリナブリン及び第１の溶媒を混合して第１の混合物を形成すること；
    前記第１の混合物を５０℃〜９０℃の範囲の温度に加熱すること；並びに
    前記第１の混合物を冷却して第１の沈殿物を形成すること
    を含む方法。
14. 請求項６〜１１のいずれか一項に記載のプリナブリン組成物を調製する方法であって、
    プリナブリン及び第１の溶媒を混合して第１の混合物を形成すること；
    前記第１の混合物を５０℃〜９０℃の範囲の温度に加熱すること；並びに
    前記第１の混合物を冷却して第１の沈殿物を形成すること
    を含む方法。
15. 前記第１の混合物を冷却する前に濾過することをさらに含む、請求項１３又は１４に記載の方法。
16. 加熱前に水を前記第１の混合物に加えることをさらに含む、請求項１３〜１５のいずれか一項に記載の方法。
17. 前記第１の溶媒が、水、アルコール、又は水とアルコールの混合物である、請求項１３〜１６のいずれか一項に記載の方法。
18. 前記アルコールが、メタノール、エタノール、イソプロピルアルコール、ｔｅｒｔ−ブチルアルコール、及びｎ−ブチルアルコール、又はそれらの混合物から選択される、請求項１７に記載の方法。
19. 前記アルコールがエタノールである、請求項１８に記載の方法。
20. 前記第１の沈殿物を濾過することをさらに含む、請求項１３〜１９のいずれか一項に記載の方法。
21. 前記第１の沈殿物を洗うことをさらに含む、請求項１３〜２０のいずれか一項に記載の方法。
22. 前記第１の混合物が７０℃〜７８℃に加熱される、請求項１３〜２１のいずれか一項に
    記載の方法。
23. 前記第１の混合物を冷却する前に前記第１の混合物を７０℃〜７８℃の範囲の温度に１時間維持することをさらに含む、請求項１３〜２２のいずれか一項に記載の方法。
24. 前記第１の混合物を加熱することが、前記第１の混合物を少なくとも６５℃に加熱することを含み、且つ前記第１の混合物を冷却することが、前記第１の混合物を５０℃〜６０℃に冷却することを含む、請求項１３〜２３のいずれか一項に記載の方法。
25. 前記第１の混合物を前記冷却することが、水を前記第１の混合物に加えて前記第１の沈殿物を生じさせることを含む、請求項１３〜２４のいずれか一項に記載の方法。
26. 前記第１の混合物を前記冷却することが、前記第１の混合物を少なくとも４時間撹拌することを含む、請求項１３〜２５のいずれか一項に記載の方法。
27. Ｘ線粉末回折分析を用いて前記第１の沈殿物を分析することをさらに含む、請求項１３〜２６のいずれか一項に記載の方法。
28. 前記第１の沈殿物及び第２の溶媒を混合して第２の混合物を形成すること；
    前記第２の混合物を５０℃〜９０℃の範囲の温度に加熱すること；
    前記第２の混合物を冷却して第２の沈殿物を形成すること；並びに
    前記第２の沈殿物を濾過すること及び前記第２の沈殿物を洗うこと
    をさらに含む、請求項１３〜２７のいずれか一項に記載の方法。
29. 前記第２の溶媒が、水、アルコール、又は水とアルコールの混合物である、請求項２８に記載の方法。
30. 前記第２の溶媒が、メタノール、エタノール、イソプロピルアルコール、ｔｅｒｔ−ブチルアルコール、及びｎ−ブチルアルコール、又はそれらの混合物から選択される、請求項２９に記載の方法。
31. 前記第２の溶媒がエタノールである、請求項２８に記載の方法。
32. 前記第２の混合物を加熱することが、前記第２の混合物を還流することを含む、請求項２８〜３１のいずれか一項に記載の方法。
33. 前記第２の混合物が７０℃〜７８℃に加熱される、請求項２８〜３２のいずれか一項に記載の方法。
34. 前記第２の混合物を冷却する前に前記第２の混合物を還流温度で１時間維持することをさらに含む、請求項２８〜３３のいずれか一項に記載の方法。
35. 前記第２の混合物を前記冷却することが、１５℃〜３０℃に冷却することを含む、請求項２８〜３４のいずれか一項に記載の方法。
36. 前記第２の混合物を前記冷却することが、水を前記第２の混合物に加えて前記第２の沈殿物を生じさせることを含む、請求項２８〜３５のいずれか一項に記載の方法。
37. 前記第２の混合物を前記冷却することが、前記第２の混合物を少なくとも４時間撹拌することを含む、請求項２８〜３６のいずれか一項に記載の方法。
38. 前記第１の沈殿物がアルコールで洗浄され、前記洗浄したアルコールが回収されて、加熱前に第２の混合物に加えられる、請求項２８〜３７のいずれか一項に記載の方法。
39. 前記第２の沈殿物を乾燥することをさらに含む、請求項２８〜３８のいずれか一項に記載の方法。
40. 前記混合、冷却、及び濾過ステップが、前記第２の沈殿物中のプリナブリンの量に基づいて１回以上繰り返される、請求項２８〜３９のいずれか一項に記載の方法。
41. プリナブリン、エタノール、及び水を混ぜて混合物を形成すること
    を含む、請求項１〜５のいずれか一項に記載のプリナブリン一水和物の結晶を調製する方法。
42. プリナブリン、エタノール、及び水を混ぜて混合物を形成すること
    を含む、請求項６〜１１のいずれか一項に記載のプリナブリン組成物を調製する方法。
43. 前記混合物を撹拌することをさらに含む、請求項４１又は４２に記載の方法。
44. 前記エタノールの水に対する比が体積で１５：１〜２０：１の範囲にある、請求項４１〜４３のいずれか一項に記載の方法。
45. 前記混合物が少なくとも２時間撹拌される、請求項４１〜４４のいずれか一項に記載の方法。
46. 前記混ぜることが２０℃〜４０℃の範囲の温度で行われる、請求項４１〜４５のいずれか一項に記載の方法。

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