BRPI0709866A2

BRPI0709866A2 - composto hÉtero

Info

Publication number: BRPI0709866A2
Application number: BRPI0709866-9A
Authority: BR
Inventors: Hironori Harada; Kazuyuki Hattori; Kazuya Fujita; Masataka Morita; Sunao Imada; Yoshito Abe; Hiromichi Itani; Tatsuaki Morokata; Hideo Tsutsumi
Original assignee: Astellas Pharma Inc
Priority date: 2006-04-03
Filing date: 2007-04-02
Publication date: 2011-07-26
Also published as: BRPI0709866B8; CA2648303C; AU2007236707B2; TW200815423A; PT2003132E; AU2007236707A1; ES2453372T3; EP2003132A1; KR101345473B1; PL2003132T3; IL194354A0; WO2007116866A1; NO342171B1; AU2007236707C1; MX356221B; TWI382984B; CA2648303A1; US20090076070A1; EP2003132B1; KR20090007740A

Abstract

<B>COMPOSTO HÉTERO<D>Para prover um composto útil como um ingrediente ativo para um agente de prevenção e/ou tratamento para rejeição em transplante de um árgão, medula óssea, ou um tecido, uma doença auto-imune ou semelhantes, que tem uma excelente atividade agonísticaem S1P~ 1~. Desde que o composto da invenção tenha uma atividade agonística em SIP~ 1~, ele é útil como um ingrediente ativo para um agente de tratamento ou prevenção para uma doença causada por infiltração linfocítica desfavorável, por exemplo, uma doença autoimune tais como rejeição de enxerto no transplante de um árgão, medula óssea, ou um tecido, uma doença exerto-versus-hospedeiro, artrite reumatóide, esclerose múltipla, lupus eritematoso sistêmico, uma síndrome nefrótica, encefalomeningite, miastenia gravis, pancreatite, hepatite, nefrite, diabetes, distúrbio pulmonar, asma, dermatite atópica, doença inflamatória do intestino, e ainda, uma doença causada por crescimento anormal ou acúmulo de células tais como câncer e leucemia.

Description

"COMPOSTO HÉTERO"

Campo Técnico

A presente invenção relaciona-se a um novo composto hetero e um medicamentocontend o mesmo como um ingrediente, particularmente um agente para tratar doençasimunológicas.

Antecedente da Técnica

Esfingosina-1-fosfato é um metabólito de esfingolipídio que é um uma substânciafisiologicamente ativa secretada a partir de uma plaqueta ativada (Documento de NãoPatente 1). O receptor de esfingosina-1-fosfato é um tipo ligado de proteína G, e pertence auma família Edg que é um gene de diferenciação endotelial. Até agora, cinco receptores deS1P1 (Edg 1), S1P2 (Edg5), S1P3 (Edg3), S1)4 (Edg6) e S1P5 (Edg 8) têm sidoencontrado. Todos esses receptores são amplamente distribuídos nas células e tecidosatravés do corpo, mas S1P1, S1P3 e S1P4 são predominantemente expressos em linfócitose células endoteliais, S1P2 é predominantemente expresso na células muscular lisasvascular do mesmo são bem conservadas em humano e roedor (Documento Não Patente1). Muitos receptores se ligam a proteínas G por estimulação de esfingosina-1-fosfato. S1P1se liga a G1'0, e S1P3 se liga a G1'0, G12/13 e GS1 S1P4 se liga a G1/0, G12/13 e GS,S1P5 é acoplado a G1/0 e G12/13, e crescimento celular por ativação de MAPK, muda dosistema citoesqueleto e infiltração celular causado por ativação de Rac (e/ou Rho), egeração de citocina e mediador causado por ativação de PLC e influxo de cálcio, esemelhantes (Documento Não Patente 1) são induzidos. Ele tem sido que por estimulaçãoda ação de S1P1 de esfingosina-1-fosfato, migração de linfócito, inibição de apoptose,geração de citocina, seqüestrando linfócito no timo e outros tecidos linfócidos secundáriossão induzidos, e angioplastia na células endotelial vascular é promovida (Documento NãoPatente 2). Por outro lado, a expressão de S1P3 é também encontrado no cardiomiócito, ediminuição transientemente na taxa do coração (pulso infrequente) ou na pressão sangüíneapor estimulação de esfingosina-1-fosfato é observado (Documento Não Patente 3) enquantoo pulso é não observado por estimulação de esfingosina-1-fosfato em um camundongo"knockout" em que S1P3 é geneticamente deletado (Documento Não Patente 4). Tem sidorelatado que éster fosfato FTY720 que é um corpo ativo de FTY720 correntemente natriagem clínica tem uma atividade agonista não agonista para S1P1, S1P3, S1P4 e S1P5(Documento Não Patente 5), e especialmente pulso infrequente induzido por estimulação doefeito através de S1P3 é freqüentemente expresso como um efeito colateral indesejável natriagem clínica (Documento Não Patente 6). De acordo, é considerado que para sequenciarlinfócito através de um receptor esfingosina-1-fosfato, a estimulação de S1P1 é essencial(Documento Não Patente 7), enquanto a estimulação de S1P3 é não essencial que é depreferência considerada ser relacionada a indução do efeito colateral não desejável. Então,para o desenvolvimento do agente imunossupressor com poucos efeitos colerais,desenvolvimento de agonista tendo efeito fraco em S1P3 e seletivamente terndo efeito emS1P1 é desejado.

Por exemplo, como um composto tendo atividade agonista S1P1, um derivado deácido carboxílico representado pela seguinte fórmula tem sido conhecido (Documento dePatente 1).

[Quim. 1]

<formula>formula see original document page 3</formula>

[Para símbolo na fórmula, referente a publicação]

Como um composto tendo atividade agonista S1P1, um derivado indanorepresentado pela seguinte fórmula tem sido bem conhecido (Documento de Patente 2).

[Quím. 2]

<formula>formula see original document page 3</formula>

[Para símbolo na fórmula, referente a publicação]

Como um composto tendo atividade agonista S1P1, um derivado oxadiazolrepresentado pela seguinte fórmula tem sido bem conhecido (seguindo figura, Documentosde Patente 3, 4, 5 e 6).

[Quím. 3]<formula>formula see original document page 4</formula>

[Para símbolo na fórmula, referente à publicação]

Como um composto tendo atividade agonista S1P1, um derivado representadopelas seguintes fórmulas tem sido bem conhecido (seguindo figura, Documentos de Patente 7).

[Quim. 4]

<formula>formula see original document page 4</formula>

[Para símbolo na fórmula, referente à publicação]

Entretanto, o composto da presente invenção não tem sido revelado em qualquerdocumento.

Documento Não Patente 1: Annual Review Biochemistry, 2004, 73, 321-354Documento Não Patente 2: Nature Review Immunology, 2005, 5, 560-570Documento Não Patente 3: Japanese Journal of Pharmacology, 2000, 82, 338-342Documento Não Patente 4: Journal of Pharmacology and ExperimentalTherapeutics, 2004, 309, 758-768

Documento Não Patenteõ: Science, 2002, 296, 346-349

Documento Não Patente 6: Journal of American Society of Nephrology, 2002, 13,1073-1083

Documento Não Patente: Nature, 2004, 427, 355-360Documento Patente 1: Publicação Internacional WO 2005/058846 Revista

Documento Patente 2: Publicação Internacional WO 2004/058149 Revista

Documento Patente 3: Publicação Internacional WO 2003/105771 Revista

Documento Patente 4: Publicação Internacional WO 2004/103279 Revista

Documento Patente 5: Publicação Internacional WO 2005/032465 Revista

Documento Patente 6: Publicação Internacional WO 2006/047195 Revista

Documento Patente 7: Publicação Internacional WO 2006/001463 Revista

REVELAÇÃO DA INVENÇÃO

PROBLEMA QUE ESTA INVENÇÃO É PARA RESOLVER

Inventores da presente invenção têm realizado pesquisa a fim de prover umcomposto útil para prevenir e/ou tratar rejeição no transplante de órgão/medula óssea/tecidoou doenças autoimune, baseado na atividade agonista S1P1, e além disso prover ummedicamento contendo o mesmo.

MEIOS PARA RESOLVER O PROBLEMA

Inventores da presente invenção têm feito estudos extensivos a cerca de umcomposto tendo uma atividade do agonista S1P1, e um resultado, eles encontraram que umnovo composto hetero é útil como agonista S1P1, então completando a presente invenção.Em outras palavras, de acordo com a presente invenção, um novo composto heterorepresentado pela seguinte fórmula geral (I) ou um sal farmaceuticamente aceitável domesmo pode ser provido.

Um composto representado pela fórmula (I):

<formula>formula see original document page 5</formula>

Ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[Na fórmula, os símbolos significam como segue;O anel A é:

{Quim 6]<formula>formula see original document page 6</formula>

X é uma ligação única, -CH2-, -NR3-, -O-, -S-, -S(=0)0, ou -S(=02)-,R1 é -H; halogênio; arila; heteroarila; cicloalquilaC3-C8); cicloalquenila(C3-C8);heterocicloalquila(C3-C8); ou BlquiIa(C1-C6) ou alqueniIa(C2-C8), cada um dos quais podeconter halogênio, -CONH2, aril ou cicloalquila(C3-C8), como um substituinte,

R2 é -CN, -OaIquiIa(C1-C6), -C(=0)H, halogênio; ou BlquiIa(C1-C6) que pode sersubstituído com halogênio ou -OH,

R3 é -H; em que R3 pode formar morfolina, 1-pirrolidinil ou 3,4-deidropipelidin-1-il,junto com R1 e nitrogênio,

em que, quando -X- é uma ligação simples, R1 e R2 podem em combinação formarum anel de 5 membros e ainda conter BlquiIa(C1-C6), como um substituinte,R4 é um seguinte anel;

em que qualquer uma das ligações a partir do anel é ligada a um anel oxadiazol,[Quim 7]

<formula>formula see original document page 6</formula>

R5 é -H; alquila(CrC6) que pode ser substituído com pelo menos um gruposelecionado do grupo consistindo de -CN, -C(=0)NRxRY, -NHRx1 -SRx, -S(=0)2Rx, e -ORx1(este é definido como R0-BlquiIa(C1-C6); R0-BlquiLa(C1-C6)-O-; R0-alquila(C1-C6)-C(=O)-; R0-alquila(C1-C6)-S(=0)2-; R0-O-BlquiIa(C1-C6)-; R0-C(=0)-alquila(C1-C6)-; R0-S(O)2-alquila(C1-C6)-; -alquenila(C2-C6)-; -C(=0)H; -ORx; -S(=0)2Rx; halogênio; =0; -NRxRy; -C(=0)NRxRY;

Rx e Ry podem ser os mesmos com ou diferente um do outro, e é -H; ou alquila(C1-C6) que pode ser substituído com -OH, -NH2 que pode ser protegido com um grupo protetorou heteroarila, em que Rx e Ry pode formar heterociclolalquila(C3-C8), junto com ou

Como -X- na fórmula (I), é preferido uma ligação única ou -O-, e mais preferido é -O-. Como R1, preferido é alquila(C1-C4) ou alquenil(C2-C4), cada um dos quais pode sersubstituído com halogênio ou cicloalquila(C3-C6), e além disso preferido é alquila(C1-C4)que pode ser substituído com F. Como o anel A, preferido é:

[Quim 8]

<formula>formula see original document page7</formula>

Como R2, é preferido halogênio, -CN, alquil(C1-C4) que pode ser substituído comhalogênio, e mais preferido é -Cl, -CF3. Como R4, é preferido:

[Quim 9]

<formula>formula see original document page7</formula>

E mais preferido e:

{Quim 10}

<formula>formula see original document page7</formula>

Como R5 é -H; ou alquila(C1-C6) que pode ser substituído com pelo menos um -C(=0)NRxRY. Como Rx1 é preferido -H; alquila(c1-C6) que pode ser substituído com -OH.Como RY1 é preferido -H; alquila(C1-C6) que pode ser substituída com -OH.

Um composto da presente invenção representado por uma fórmula (I) écaracterizado em uma estrutura química do ponto que um anel insaturado contendonitrogênio bicíclico ou um anel hetero insaturado parcialmente contendo nitrogênio é ligado aposição 3 do oxadiazol, e tem características farmacológicas a partir do ponto que ocomposto tem atividade agonista S1P1.

EFEITOS DA INVENÇÃO

Desde o composto da invenção tem uma atividade agonista S1P1, é útil como umingrediente ativo de um agente para tratamento ou um agente para prevenção de umadoença causada por infiltração linfocítica desfavorável, por exemplo, rejeição de enxerto notransplante de um órgão, medula óssea, ou tecido ou doença enxerto-versus-hospedeiro,uma doença autoimune ou uma doença inflamatória tal como artrite reumática, esclerosemúltipla, Iupus sistêmico eritematoso, síndrome nefrótica, encefalomeningite, miasteniagravis, pancreatite, hepatite, nefrite, diabetes, distúrbio pulmonar, asma, dermatite atópica,doença inflamatória do intestino, ou injúria de reperfusão isquêmica, e ainda, uma doençacausada por crescimento anormal ou acúmulo de células tais como câncer ou leucemia.

MELHOR MODO PARA REALIZAR DA INVENÇÃO

De agora em diante, a presente invenção será descrita em maiores detalhes.

Na especificação, "alquila" significa um grupo monovalente linear ou ramificada."AIquiIaCi-C6" significa uma alquila linear e ramificada Ci-C6, e exemplos específicos dosmesmos incluindo metila, etila, n-propila, isopropila, n-butila, isobutila, t-butila, n-propila, e n-hexila, preferivelmente alquilaC1-4, e particularmente preferivelmente metila, etila, n-propila,e isopropila.

Na espeficação, "halogênio" representa F, Cl, Br e I, e preferivelmente exemplosdos mesmos incluem F ou Cl.

Na especificação, "alquenilC2-C6" significa alquenila linear ou ramificada C2-C6 quetem uma ligação dupla em um dado sítio, e exemplos específicos dos mesmos etenila(vinila), 1-propenila, 2-propenila, 1-metileteno-1-il, butenil-1-il, 2-buteni-1-il, 3-buten-1-il, 1-metil-1-propen-1-il, 2-metil-1-propen-1-il, 1-metil-2-propen-1-il, e 2-metil-2-propen-1-il, epreferivelmente, 1-metil-2-propen-1-il ou 1-pentenil.

Na especificação, "cicloalquilC3-C8" significa um grupo monovalente de um anelcarbono não aromático tendo um número de redução de 3 a 8, que pode ter ligaçõesparcialmente insaturadas. Então, exemplos específicos dos mesmos incluem ciclopropila,ciclobutila, ciclopentila, e cicloexila.

Na especificação, "heterocicloalquilaC3-C8" significa um grupo monovalente de umanel de carbono não aromático tendo um número de redução de 4 a 9, contendo um ou maisheteroátomos que são os mesmos como ou diferente de cada outro, selecionado do grupoconsistindo de nitrogênio, oxigênio, e opcionalmente e enxofre oxidado, que pode terinsaturações parciais. Exemplos específicos dos mesmos incluem aziridinila, azetidinila,pirrolidinila, piperidinila, homopiperidinila, morfolina, tiomorfolil, tetraidropiranil, etetraidrotiopiranila.

Na especificação, "arila" significa um grupo hidrocarboneto aromático, maspreferido em um grupo arila tendo 6 a 14 átomos de carbono. Exemplos específicos dosmesmos incluem fenila, naftila, e antrila, e mais preferido é fenila.

Na especificação, "heteroarila" significa um anel aromático de 5- a 6-membrosheterociclo, contendo um ou mais heteroátomos que são os mesmos como ou diferentes decada um, selecionados do grupo consistindo de nitrogênio, oxigênio e enxofre. Exemplosespecíficos dos mesmos incluem piridil, pirazil, pirimidinil, piridazinil, pirrolil, pirazolil,imidazolil, oxazolil, tiazolil, tienil, furil, oxadiazolil, e tiadiazolil. Preferido é um heteroaril de 6membros e particularmente preferido é piridil.

O composto da presente invenção pode existir na forma de um isômero geométricoou um tautômero em alguns casos dependendo do tipo de substituintes. Ainda o compostoda presente invenção pode ter carbonos assimétricos. A presente invenção inclui ou asduplicatas isoladas desses isômeros, e uma mistura dos mesmos. Também, os compostosmarcados, isto é, os compostos tendo pelo menos um elemento dos compostos da presenteinvenção substituídos com isótopos radioativos ou isótopos não radioativos são tambémincluídos na presente invenção.

Além disso, assim chamados os pró-fármacos farmaceuticamente aceitáveis doscompostos da presente invenção são também incluídos na presente invenção. O pró-fármaco farmaceuticamente aceitável é um composto tendo um grupo que pode serconvertido em um grupo amino, um grupo hidroxila, um grupo carboxílico, ou semelhantesdo composto da presente invenção, por solvólise ou sob uma condição fisiológica. Exemplosde grupos capazes de formar um pró-fármaco incluem os grupo como descritos em "Prog.Med. Vol. 5, 2157-2161 (1965), e "lyakuhin no Kaihatsu (Development of Medicines)(Hirokawa Shoten, 1990), vol 7, Bunshi Sekkei (Molecular Design)", 163-196.

O composto representado pela fórmula (I) pode formar sais com ácidos ou bases.Esses sais podem ser quaisquer um que sejam farmaceuticamente aceitáveis, e exemplosespecíficos dos mesmos incluem sais de adição ácida com ácidos inorgânicos tais comoácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido iodídrico, ácido sulfúrico, ácido nítrico, e ácidofosfórico, e com ácidos orgânicos tais como ácido fórmico, ácido acético, ácido propiônico,ácido oxálico, ácido malônico, ácido succínico, ácido fumárico, ácido maléico, ácido lático,ácido málico, ácido tartárico, ácido cítrico, ácido metanossulfônico, ácido etanossulfônico,ácido aspártico, e ácido glutâmico, e sais com bases inorgânicas tais como sais de sódio,potássio, magnésio, cálcio, e alumínio, e com bases orgânicas tais como metilamina,etilamina, etanolamina, Iisina1 e ornitina e amônio.

Em adição, a presente invenção também inclui vários hidratos e solvatos, esubstâncias polimórficas do composto representadas pela fórmula (I) e um sal do mesmo.

Na especificação, as seguintes abreviações foram utilizadas.

Pr: método de preparação, AcOH: ácido acético, n-BuLi: butil lítio normal, t-BuOH:butanol terciário, n-BuOH: butanol normal, BrCN: brometo de cianogênio, CDI: 1,1'-carbonilbis-1H-imidazol, DBU: 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undeca-7-eno, DMAP: 4-(N,N-dimetilamino)piridina, DIC: Ν,Ν'-diisopropilcarbodimida, DMF: Ν,Ν'-dimetilformamida, DCC:dicicloexilcarbodimida, DMA: Ν,Ν-dimetilacetamida, DMSO: dimetilsulfóxido, DPPA:difenilfosforilazida, Et: etila, EDCI/HCI: N-[3-cloridrato de (dimetilamino)propil]-N'-etilcarboxamida, HPLC: cromatografia líquida de alto desempenho, IPE: éter diisopropílico, i-PrOH: 2-propanol, K2C03: carbonato de potássio, KNC: cianida de potássio, KHC03:carbonato de potássio hidrogenado, KotBu: butóxido de potássio terciário, CL-SM:cromatografia líquida - espectroscopia de massa, LiH: hidreto de lítio, MeOH: metanol, NaH.Hidreto de sódio, NaOH: hidróxido de sódio, NaBH4: bromoidreto de sódio, NaCN: cianetode sódio, NaHC03: carbonato de sódio hidrogenado, Na2C03: carbonato de sódio, NaOMe:metóxido de sódio, NaOEt: etóxido de sódio, NCS: N-clorosuccinimida, NH4CI: cloreto deamônio, NMP: N-metilpirrolidona, POCI3: oxicloreto de fósforo, P205: pentaóxido de fósforo,THF: tetraidrofurano, CCF: cromatografia de camada fina, TMEDA: Ν,Ν,Ν'Ν'-tetrametiletilenodiamina, Zn(CN)2: cianeto de zinco.

(Preparação do Método)

O composto (I) da presente invenção e um sal farmaceuticamente aceitável domesmo pode ser preparado por aplicação de vários métodos sintéticos conhecidos, tomandovantagens das características baseadas em suas estruturas básicas ou o tipo desubstituintes. Aqui, dependendo do tipo de grupos funcionais, ele é em alguns casos efetivoa partir do ponto de vista das técnicas de preparação para proteger o grupo funcional comum grupo protetor apropriado, ou para substitui-lo por um grupo que pode ser facilmenteconvertido no grupo funcional, durante os passos a partir do material de partida aosintermediários. Exemplos de tal grupo funcional inclui um grupo amino, um grupo hidroxila, eum grupo carbonila, e exemplos de um grupo protetor do mesmo incluem os gruposprotetores como descritos em "Protective Groups in Organic Synthesis", editado por T.W.Greene e P.G.M. Wuts, (EUA) (3a edição, 1999), que pode ser opcionalmente selecionado eutilizado em resposta às condições de reação. Por tal método, o composto desejado podeser obtido por intridução de um grupo protetor para realizar a reação, e então, se desejado,remover o grupo protetor ou convertê-lo no grupo desejado.

Em adição, um pró-fármco do composto (I) da presente invenção pode serpreparado por introduzir um grupo específico durante os passos a partir dos materiais departida aos intermediários, similares aos grupos protetores acima mencionados, ou porrealizar a reação utilizando o composto obtido (I) da presente invenção. A reação pode serrealizada por empregar esterificação comum, amidação, deidratação, ou um métodoconvencionalmente conhecido por um versado na técnica.

< Método de Preparação do Primeiro Intermediário[Quim. 1]

<formula>formula see original document page 11</formula>

[em que R ou R'significa alquila inferior que pode ser susbtituída com pelo menosum substituinte selecionado do grupo consistindo de -CN1 -C(=0)0H, -C(=0)0RX, -C(=0)NRXRY, -C(=0)NHS02RX, -C(=0)-(heerocicloalquilC1-C8), -NHRX, -OH, -SRX, -S(=02)RX, halogênio, e -ORX (que é definido como RZ-alquila inferior); R^aIquiIa(C1-C6)-O-; R°-alquila(Ci-C6)-C(=0)-; R°-alquila(C1-C6)-S(=0)2-; R0-O-BlquiIa(C1-C6)-; R0- C(=0)-BlquiIa(C1-C6)-; R°-S(=0)2-alquila(C1-C6)-; -alquenila(C2-C6)-; -C(=0)H; -ORx; -S(=0)2Rx;halogênio; =0; -NRxRy; -C(=0)NRxRy;

Rx e Ry podem ser os mesmos com ou diferente um do outro, e é -H; ou alquilaíC!-C6) que pode ser substituído com -OH ou piridil. Também, Rx pode ser ligado com RY eátomo de nitrogênio para formar heterociclolalquila(C3-C8).

Este método de preparação é um método para preparar um composto benzimidazolrepresentado pela fórmula (1-c) por permitir um composto aldeído para submeter a reaçãocom um composto 1,2-diaminobenzeno representado pela fórmula (1-b) que pode ser obtidopela redução de um composto representado pela fórmula (1-a).

O passo representado pelo Passo 1-1 é um passo para redução de um grupo nitrodo composto representado pela fórmula (1-a) para um grupo amino, que pode ser realizadoem pressão normal ou sob pressão elevado, em um solvente inerte a reação.

No passo representado pelo Passo 1-2 em que R' é H, um anel imidazol pode serconstruído, por exemplo, por permitir um éster ortofórmico tal como ortoformato de etila parasofre a reação com o composto representado pela fórmula (1-b) em presença de ácidocatalisador.Além disso, no passo representado pelo Passo 1-2 em que R'não é H, por exemplo,um método em que um grupo amino do composto representado pela fórmula (1-a) épreliminarmente acilado utilizando um ácido carboxílico, um cloreto ácido, um ácidocarboxilico anidrido, ou semelhantes, e ciclizado sob aquecimento ou em presença de umácido, um método em que ortocarbonato tetraalquila, CDI1 ou BrCN é utilizado ao invés deum éster ortofórmico, ou outros métodos podem ser exemplificados.

Além disso, como outros métodos, um método em que um composto nitrobenzenoda fórmula (1-a) é sujeito a carbamoilação de sua fração amina, induzida em um compostoacilamina (1-e), sujeito a redução de seu grupo nitro, e ciclizado com aquecido podetambém ser exemplificado (Passo 1-3, Passo 1-4).

Todas essas reações pode ser realizadas em um solvente inerte para a reação, ousem um solvente, a partir da temperatura ambiente a sob aquecimento, ou a partir de sobaquecimento ou sob refluxo.

<Método de Preparação do Segundo lntermediário>[Quím. 12]

<formula>formula see original document page 12</formula>

[em que R tem os mesmos significados como definido acima].Este método de preparação é um método para preparar um imidazo[1,2-a]piridinasubstituído com um grupo nitrila representado pela fórmula (2-b), por uso de um composto2-aminopiridina representada pela fórmula (2-a) como um material de partida.

O passo representado pelo Passo 2-1 é uma reação para construção de um anelimidazo[1.2-a]piridina por permitir um cloroacetaldeído ou um σ-clorocetona ou sofre areação com o composto representado pela fórmula (2-a).

É preferivelmente realizado na presença de uma base, e exemplos específicos debase incluem carbonatos álcali tais como Na2CO3 e K2CO3; carbonatos de hidrogênio álcalitais como NaHCO3 e KHCO3; alcóxidos tais como NaOMe, NaOEt, e KOtBu; aminasterciárias tais como Et3N e DIPEA; e aminas orgânicas tais como DBU, piridina, e lutidina.

Todas essas reações podem ser realizadas em um solvente inerte a reação, ousem um solvente, a partir da temperatura ambiente sob aquecimento, ou sob aquecimentocom refluxo.

<Método de Preparação do Terceiro lntermediário>

[Quím. 13]<formula>formula see original document page 13</formula>

[em que R tem os mesmos significados como definido acima].

Este método de preparação é um método para preparar um composto indazolrepresentado pela fórmula (3-c) por permitir um hidrato hidrazina com um grupo nitrila parasofre a reação com um composto cianobenzeno representado pela fórmula (3-b) obtido porsubtaituindo um grupo halogênio de um composto pela fórmula (3-a).

O passo representado pela Passo 3-1 é uma reação para substituir uma ligação dehalogênio com uma nel aromático com um grupo nitrila. É exemplicado por um método parareação de Zn (CN)2 em presença de tetracisfenilfosfina paládio (0), um método para permitirTMEDAe catalisador Pd para sofre a reação em presença de Na2CO3 em DMA, e ummétodo para permitir KCN1 NaCN1 ou semelhantes para sofre a reação ao invés de Zn(CN)2.Usualmente, o composto representado pela fórmula (3-b) pode ser obtida pela reação docomposto representado pela fórmula (3-a) com tris(benzilídenoacetona)dipaládio (0), V-bis(difenilfosfino)ferroceno, e Zn(CN)2.

Aqui, exemplos do grupo abandonar incluem halogênio tal como br e Cll;metanossulfonilóxi, etanossulfonilóxi, benzenosulfonilóxi, p-toluenosulfonilóxi, etrifluormetanosulfonilóxi.

O passo representado pelo Passo 3-2 é uma reação para construir um anel indazola partir de um composto cianobenzaldeído representado pela fórmula (3-b). Usualmente, umhidrato de hidrazina é utilizado nesta reação, que pode ser realizado sem um solvente, ouem um solvente inerte para a reação tal como MeOH e tolueno, a partir da temperaturaambiente sob aquecimento, ou sob aquecimento com refluxo. Em adição, um métodoutilizando cianeto de cobre pode também ser exemplificado, e uma base tal como piridinapode ser adicionada. Também, esta reação é preferivelmente realizada sob uma atmosferade nitrogênio.

<Método de Preparação do Quarto lntermediário>

[Quim. 14]<formula>formula see original document page 14</formula>

[em que R tem os mesmos significados como definido acima. Z representa-CH= ou-N=].

Este método de preparação é um método para preparar um composto benzotriazolou benzimidazol representado pela fórmula (4-c) por deidratação e ácido aminadorepresentado pela fórmula (4-b), obtido utilizando um composto ácido carboxílicorepresentado pela fórmula (4-a) como um material de partida.

O passo representado pelo Passo 4-1 é uma reação para condensar um compostoácido carboxílico com amônia representado pela fórmula (4-a), e construindo um grupoaminoácido representado pela fórmula (4-b). O composto representado pela fórmula (4-a)pode ser utilizado na reação como ácido livre, mas um derivado reativo do mesmo podetambém ser utilizado na reação. Exemplos do derivado reativo induzido a partir do compostorepresentado pela fórmula (4-b) inclui haletos ácidos tais como cloreto ácido e brometoácido; ésteres comuns tais como metil éster, etil éster, e benzil éster; azidas ácidas; ésteresativos tais como HOBt1 p-nitrofenol, e N-hidroxisuccinimda; anidratos ácidos simétricos; umamistura de ácido anidrato de um alquil éster do ácido halocarboxílico tais como haleto doácido alquil carobônico, um haleto pivaloil, e um cloreto do ácido p-tolueno sulfônico; e umácido anidrato misturado tal como anidrato do ácido fosfórico misturado, tais como aquelesobtidos por reação do cloreto de difenilfosforil com N-metil-morfolina.

Em um caso onde o composto representado pela fórmula (4-a) é reagido como umácido livre, ou sem isolamento de um éster ativo, ou semelhantes, um agente condensadortal como DCC, CDI1 DPPA, dietilfosforil cianida, e EDCI/HCI é preferivelmente utilizado.

O solvente de reação varia dependendo de um derivado reativo ou um agentecondensante a ser utilizado, mas a reação é realizada em um solvente orgânico inerte auma reação tal como haletos hidrocarbonetos, hidrocarbonetos aromáticos, éteres, ésterestais como EtOAc, acetonitrila DMF, e DMSO, ou uma mistura dos mesmos. Também, areação é realizada sob arrefecimento, a partir de arrefecimento em temperatura ambiente,ou partir de temperatura ambiente sob aquecimento.

Além disso, na reação, é em alguns casos vantajoso no avanço reação lentamenterealizar a reação com uma quantidade excessiva de amônia ou em presença de uma basetal como N-metilmorfolina, trietilamina, Et3N, DIPEA, Ν,Ν-dimetilanilina, piridina, DMAP,picolina, e lutidina. Piridina pode ser utilizada na combinação com o solvente.O passo representado pelo Passo 4-2 é deidratação, para o qual uma base pode ounão existir e um agente deidratante tal como anidrato de trifluoracético, POCI3 e P205 podeser utilizado.

Além disso, em um caso para sintetizar um heterociclo intermediário condensado,outro que aqueles descritos nos métodos de preparação descritos acima, os métodosdescritos nos Exemplos de Referência ou Exemplos na presente especificação, ou métodosequivalentes podem ser empregados, ou adicionalmente, métodos bem conhecidosaparentes ao versado na técnica podem também ser utilizados para a preparação.

< Primeiro Método de Preparação>[Quim. 15]

<formula>formula see original document page 15</formula>

[emq ue A, X, R1 e R4 são como descritos acima. Lv representa um grupoabandonador. Um ácido carboxílico representado pela fórmula (5-c), (5-d) e (5-g) pode seradquirido como um produto comercialmente disponível, ou preparado para um produtocomercialmente disponível].

Este método de preparação é um método para preparar o composto da presenteinvenção pela fórmula (I) pela reação de uma hidroxiamidina representada pela fórmula (5-b)obtida por permitir uma hidroxilamina sofre a reação com um composto nitrila aromáticorepresentado pela fórmula (5-a), com um ácido carboxílico representado pela fórmula (5-c).

No passo representado pelo Passo 5-1, a hidroxiamidina representada pela fórmula(5-b) pode ser preparada por permitir uma hidroxilamina livre ou cloridrato de hidroxilaminasofre a reação em presença de uma base.

Esta reação pode ser realizada em um solvente inerte à reação. Exemplosespecíficos do solvente incluem álcoois tais como MeOH1 EtOH, e i-PrOH; hidrocarbonosaromáticos tais como tolueno e xileno; éteres tais como éter, THF1 dioxano, e dietoxietano;hidrocarbonos halogenados tais como diclorometano, 1,2-diclorometano, clorofórmio, etetracloreto de carbono; acetonitrilas; solvente polar aprótico tais como DMF1 1,3-dimetil-2-imidazolidinona, e DMSO; água, ou um solvente misturado dos mesmos. Normalmente,alcoóis são utilizados na reação. Como descrito acima, em um caso onde cloridrato dehidroxilamina é utilizado nesta reação, a reação é preferivelmente utilizada em presença deuma base, e exemplos específicos da base incluem carbonatos álcali tais como Na2CO3 eK2CO3; carbonatos de hidrogênio alcalinos tais como NaHC03 e KHCO3; alcóxidos taiscomo NaOMe, NaOEt1 e KotBu; aminas terciárias tais como Et3N e DIPEA; e aminas orgânicas tais como DBU1 piridina, e lutidina. A temperatura de reação varia dependendodos tipos de compostos de material de partida, as condições de reação, ou semelhantes,mas a reação pode ser realizada normalmente a partir da temperatura ambiente para umacerta temperatura de refluxo do solvente. Tipicamente, em presençã de uma base tal comoNa2CO3, a reação pode ser realizada em um solvente orgânico inerte à reação, tal comoMeOH, a partir de uma temperatira ambiente à sob aquecimento.

O passo representado pelo Passo 5-2 consiste de dois passos, isto é, um passo deuma acilação de um produto de hidroxiamidina, e um passo de uma reação de ciclizaçãonesta ordem. O passo de acilação pode ser realizado na seguinte forma. O compostorepresentado pela fórmula (5-c) pode ser utilizado na reação como um ácido livre, mas umderivado reativo do mesmo pode também ser utilizado na reação. Exemplos do derivadoreativo inclui haletos acídicos tais como cloreto ácido e brometo ácido; ésteres comuns taiscomo metil éster, etil éster, e benzil éster; azidas ácidas; ésteres ativos tais como HOBt, p-nitrofenil, e N-hidroxisuccinimida; anidratos ácidos simétricos; um anidrato ácido misturadode um alquil éster do ácido halocarboxílico tal como um haleto do ácido alquil carbônico, umhaleto pivaloil, e um cloreto do ácido p-tolueno sulfônico; e uma mistura de anidrato ácido talcomo uma anidrato de ácido fosfórico misturado, tais como aqueles obtidos pela reação decloreto de difenilfosforila com n-metil morfolina.

Em um caso onde o composto representado pela fórmula (5-c) é reagido com umácido livre, ou sem isolamento de um éster ácido, ou semelhantes, um agente condensantetal como DCC1 CDI, DPPA, dietilfosforil cianida, e EDCI/HCI é preferivelmente utilizado.

O solvente de reação varia dependendo de um derivado reativo ou um agentecondensante a ser utilizado, mas a reação é realizada em um solvente orgânico inerte àreação tais como haletos hidrocarbonetos, hidrocarbonetos aromáticos, éteres, ésteres taiscomo EtOAc, acetonitrila, DMF, e DMSO, ou um solvente misturado do mesmo, sobarrefecimento, a partir de sob arrefecimento à temperatura ambiente, ou a partir detemperatura ambiente a sob aquecimento.

Na reação, a reação pode ser lentamente avançada em alguns casos para realizara reação em presença de uma base tal como N-metilmorfolina, trimetilamina, Et3N, DIPEA,Ν,Ν-dimetilanilina, piridina, DMAP, picolina, e litidina. Também, piridina pode ser utilizadaem combinação com o solvente. Um produto adiado como um intermediário pode serpurificado por isolamento, e aquecido em um solvente orgânico inerte à reação, tais comoEtOH, dioxano, tolueno e água. Usualmente, esta reação de dois passos pode ser realizadaem uma operação, por aquecimento ou radição de microondas para o produto como ele é oucomo uma mistura de reação, após acilação.

Exemplos específicos do solvente incluem aromáticos, tais como tolueno, xileno, epiridina; éteres tais como dietil éter, THF, dioxano, e dietoxietano; hidrocarbonetoshalogenados tais como diclorometano, 1,2-diclorometano, clorofórmio, e tetracloreto decarbono; acetonitrilas; solventes polares apróticos tais como DMF1 DMA, 1,3-dimetil-2-imidazolidinona, NMP, e DMSO; água; ou um solvente misturado do mesmo. A temperaturade reação varia dependendo dos tipos de compostos de materiais de partida, as condiçõesde reação, ou semelhantes, mas a reação pode ser realizada usualmente a partir datemperatura ambiente a sob aquecimento.

No caso onde X represente -O- ou -NH-, síntese pode ser feita pelos seguintesmétodos de preparação.

Os passos representados pelo Passo 5-3 e Passo 5-5 pode ser realizado damesma forma como o passo representado pelo Passo 5-2.

Os passos representados pelo Passo 5-4 e Passo 5-6 são passos para preparar ocomposto da presente invenção representados pela fórmula (I) pelo allowing fenol, anilina,álcool, ou amina representada pela fórmula (5-e) ou a fórmula (5-i) a sofre a reação com umcomposto tendo um grupo abandonador, representado pela fórmula (5-f) ou a fórmula (5-h).Aqui, exemplos de grupo abandonador incluem halogênios tais como cloro e bromo,sulfonilóxi tais como metanossulfonilóxi, etanossulfonilóxi, benzenossulfonilóxi, p-toluenossulfonilóxi, p-nitrobenzenossulfonilóxi, e trifluormetanossulfonilóxi.

A reação é realizada em pressão normal ou sob pressão elevada, sem um solventeou em solvente apropriado.

Exemplos específicos do solvente incluem hidrocarbonetos aromáticos tais comotolueno e xileno; cetonas tais como acetona e metiletilacetona; éteres tais como éter, THF,dioxano, e dietoxietano; alcóois tais como MeOH1 EtOH, i-PrOH, e n-BuOH; hidrocarbonetoshalogenados tais como diclorometano, 1,2-dicloroetano, clorofórmio, e tetracloreto decarbono; acetonitrilas; solventes polares apróticos tais como DMF, 1,3-dimetil-2-imidazolidinona, NMP1 e DMSO; água; ou um solvente misturado do mesmo. Esta reação épreferivelmente utilizada em presença de uma base, e exemplos específicos da baseincluem NaH; carbonatos álcalis tais como NaOMe1 NaOEt, e KotBu; aminas terciárias taiscomo Et3N, tributilamina, e DIPEA; e aminas orgânicas tais como DBU, piridina, e lutidina,mas uma quantidade excessiva pode ser combinada em uma amina representada pelafórmula (5-e) ou a fórmula (5-i). A temperatura de reação caria dependendo dos tipos decompostos de materiais de partida, as condições de reação, ou semelhantes, mas a reaçãopode ser realizada usualmente a partir de temperatura ambiente a cerca de umatemperatura de refluxo do solvente. Usualmente, a reação pode ser realizada em presençãode uma base tal como NaH e Na2CO3, em um solvente orgânico inerte para a reação, taiscomo DMF e DMA, a partir de -10oC a son aquecimento. Também, a amina representadapela fórmjula (5-e) ou a fórmula (5-i) pode ser provida para a reação como um sal domesmo. Em adição, uma microonda pode ser radiada sob aquecimento para a preparação.

Além disso, vários compostos representados pela fórmula (I) podem ser preparadospor qualquer combinação de processo bem conhecidos que podem ser usualmeneempregados por um versado na técnica, tais como alquilação, acilação, reácido desubstituição, oxidação, redução, hidrólise, desproteção, e halogenação bem conhedias apartir de um composto da presente invenção como preparado da forma descrita acima.

Por exemplo, para alquilação, a reação de alquilação que pode ser usualmenteutilizada por um versado na técnica pode ser empregada, a mesma pode ser realizada emum solvente orgânico inerte para a reação, tais como éteres; hidrocarbonetos aromáticos,hidrocarbonetos halogenados tais como dicloroetano, dicloroetano e clorofórmio; DMF,acetonitrilas;e solventes polares apróticos, sob arrefecimento, a partir do arrefecimento emtemperatura ambiente, ou a partir de uma temperatura ambiente sob aquecimento, empresenção de uma base tal como NaH; carbonatos álcalis; carbonatos hidrogenados álcalis;alcóxidos; aminas terciárias; e bases orgânicas.

Além disso, por exemplo, para acilação, a reação de acilação que pode serusualmente utilizada por um versado na técnica pode ser empregado, que pode serparticularmente realizado em presença de HOBt, em um solvente variando dependendo deum agente condesador tal como EDCI/HCI ou CDI1 e difenilfosforilcianida, em um solventevariando dependendo a condição de reação, mas usualmente em um solvente orgânico taiscomo éteres; hidrocarbonetos aromáticos; hidrogênio halogenado tais como diclorometano,dicloetano e clorofórmfio; ésteres EtAOc; acetonitrilas; e solvente apróticos, sobarrefecimento, a partir de sob arrefecimento até temperatura ambiente, ou a paritr detemperatira ambiente a até aquecimento.

Então, composto preparado é purificado por isolamento, como ele é ou um sal domesmo após um tratamento formador de sal por um método convencional. A purificação porisolamento é realizada por operações químicas comuns aplicadas tais como extração,concentração, remoção por detilação, cristalização, filtração, recristalização, e vários tiposde cromatografia.

Vários tipos de isômeros pode ser isolados por um método convencional, tomandovantagem da diferença nas propriedades fisico-qtiímicas entre os isômeros. Por exemplo,uma mistura racêmica pode ser induziada em isômeros opticammente puros, por exemplo,por um método de resolução geral para produos racêmicos, tais como método de resoluçãoótica para induzir sais diastereômeros com ácidos ativos opticamente gerais tal como ácidotartárico. Também, a mistura diastereomérica pode ser separada, por exemplo, porcristalização fracional, ou vários tipos de cromatografia. Além disso, os compotosopticamente ativos podem também serem preparados por uso dos materiais de partidaopticalmente ativos correspondentes.

As ações dos compostos da presente invenção foram confirmadas pelos seguintestestes farmacológicos.

Exemplo Experimental 1: Teste para confirmar uma atividade agonista S1P1

1 )Avaliação de uma atividade agonista do receptor por ensaio de ligação de GTP[y-35S] utilizando a membrana de uma célula expressando S1P1 humano.

A atividade agonista S1P1 in vitro do composto da presente invenção foi avaliadapor um aumento na atividade de ligação funcional na Proteína-G de um GTP[y-35S]utilizando a membrana de uma células expressando S1P1 humano. Um cDNA codificandoum S1P1 humano foi clonado a partir de uma biblioteca de cDNA coloretal humano, eintroduzido a um vetor de expressão pcDNA3.1 para construir um S1P1-pcDNA3.1. Então,por Lipofectamina 2000 (GIBCO), o S1P1-pcDNA3.1 foi transfectada em uma células CHO,e cultivada em um meio de cultura F-12 de Ham contendo 10% de soro fetal bovino, 100U/mL de Penicilina, 100 pg/mL de Estreptomicina, e 1 mg/mL de G418 de dissulfato, paraobter uma cepa resistente a G418 estável. A cultura de células expressando S1P1 humanoforam isoladas em um PBS contendo EDTA/2Na 1 mM, e rompida sob arrefecimento comgelo por homogeneizador feito de vidro em uma solução tampão Tris HCI 1 mM (pH 7.4)contendo EDTA 0,1 mM e um inibidor de proteína. Ele foi centrifugado a 1.400 χ 10 min, eum sobrenadante foi ainda centrifugado a 4oC por 60 minutos a 100.000 χ g, e suspenssoem uma solução tampão Tris HCI 10 mM (pH 7.4) contendo 1 mM de EDTA. A menbranaobtida (0,13 mg/mL) e 50 pM de GTP [y-35S] (NEN; inativo 1250 ci/mmol) foram reagidosem uma solução tampão (pH 7.0) HEPES 20 nm (quantidade total: 150 pL) contendo 100mM de NaCI 10 mM de MgCI2, 0,1% de BSA livre de ácido graxo, e 5 μΜ de GDP por 1 horajunto com o composto da presente invenção (10-12 a 10-5 M), e então a membrana foirecuperada em uma placa GF-C com um Coletor Celular (Packard, FiIterMate). O FiIterMatefoi seco a 50oC por 60 min, e Microscinti-o (Packard) foi adicionado ao mesmo para medirpor um contador de líquido de cintilação para uma microplaca (Packard, contador TOP).

Para avaliação da atividade do agonista S1P1 humano do composto da presente invenção eo composto comparativo, as porcentagens com as taxas de uma reação máxima de ligaçãoGTP[y-35S] saturada em presença do composto sendo fixado a 100%, e a taxa da reaçãodas ligações GTP[y-35S] na ausência do composto sendo fixado a 0% foi utilizado, umacurva de regressão não linear foi plotada, e uma concentração para causar uma atividadeagonista operando 50% da reação máxima foi definida como um valor EC50 (nM).

Tabela 1

<table>table see original document page 20</column></row><table> Como um resultado, ele pode ser confirmado que o composto da presente invençãotem uma atividade agonista S1P1.

2) Avaliação da Iinfopenia sangüínea periférica em rato

A linfopenia sangüínea periférica em rato foi medida 24 horas após administraçãooral na seguinte maneira. Ratos Lewis machos de seis a dez semanas de idade(Laboratórios Japan Charles River) foram aleatoriamente divididos nos grupos (n=3), e ocomposto da presente invenção foi suspenso em água destilada contendo metilcelulose0,5%, e administrado oralmente com uma sonda. Em 24 horas após administração, sobanestesia com éter, 0,2 mL de sangue foi coletado a partir do fundo ocular. À amostrasangüínea foram imediatamente adicionados EDTA/4K e heparina para prevenir acoagulação, e o número dos linfócitos no sangue foi medido com um analisadorhematológico automático (Sysmex Corp.: XT-2000Í). Para, a redução do número doslinfócitos em sangue peroférico pelo composto da presente invenção, a porcetagem com onúmero dos linfócitos em grupos administrados com água contendo metil celulose 0,5%,água destilada fixada a 100%, como feito ao mesmo tempo foi utilizado, e a dose paracausar 50% de redução do número de linfócitos no sangue periférico por administração docomposto da presente invenção foi definido um valor ED50 (mg/kg).

Para os compostos comparativos 1 e 2 como descritos no folheto da PublicaçãoInternacional No. W02004/103279, o composto comparativo 3 como descrito no folheto daPublicação Internacional No. W02005/032465, e o composto do Exemplo 119, os valoresED50 em 24 horas após administração foram comparados para a redução do número delinfócitos no sangue periférico no rato.

Tabela 2

<table>table see original document page 21</column></row><table>

Como um resultado, foi demonstrado que o composto do Exemplo 119 mostrou umalto valor ED50 mesno após 24 horas, indicando persistência.

Desde que o composto da presente invenção tem um efeito agonista S1P1, ele éútil como um ingrediente ativo de um agente para tratamento ou agente para prevenção deuma doença causada por infiltração linfocítica desfavorável, por exemplo, uma doençaautoimune tal como rejeição de enxerto no transplante de um órgão, medula óssea, ou umadoença hospedeiro-versus-enxerto ou tecido, artrite reumatóide, esclerose múltipla, lúpuseritematoso sistêmico, síndrome nefrótica, encefalomeningite, miastenia gravis, pancreatite,hepatite, nefrite, diabetes, distúrbio pulmonar, asma, dermatite atópica, doença inflamatóriado intestino, aterosclerose, ou injúria da reperfusão isquêmica ou uma doença inflamatória,e ainda, uma doença causada por crescimento anormal ou acúmulo de células, tais comocâncer e leucemia.

Além disso, o composto da presente invenção é útil para tratar e/ou prevenir asseguintes doenças, baseados na atividade agonista contra um S1P1.

Ele é útil no tratamento e/ou prevenção de doenças dapele hiperplásicas ouinflamatórias tais como psoríase, dermatite de contato, dermatite eczematóide, dermatiteseborréica, Iichen planus, pênfigo, semelhante a pênfigo, epidermólise bolhosa, urticária,edema vascular, obliterante, eritema, eosinofiliá da pele, Iupus eritematoso, acne, e alopécia areata, ou expressão de doenças da pele através de um sistema imune; doençasautoimunes ou doenças alérgicas dos olhos, tais como ceratoconjuntivite, conjuntivite vernal,conjuntivite alérgica, uveite associada com doença Behcet, queratite, queratite Herperviral,Heratoconus keratitis, distrofias epiteliais corneal, Ieucoma corneal, pênfigo ocular, úlcerade Mooren, esclerite, oftalmopatia de Graves, doença Vogt-Koyanagi-Harada,Leratococonjuntivite sicca (olho seco), vesícula, iridociclite, sarcoidoses, e doençasoftálmicas das glândulas inendócrinas; doença pulmonar obstrutiva reverssível (asma, porexemplo, asma brônquica, asma alérgica, asma intrínsica, asma extrínseca, e asma apoeira), em particular, asma crônica ou difícil (por exemplo, asma de início retardado, edoenças das vias aéreas); mucosa ou angite (por exemplo, úlceras gástricas, injuriasvasculares isquêmicas ou trombóticas, maculopatia relacionada a idade, maculopatiadiabética, doença isquêmica do intestino, doença do intestino, enterite necrosante, lesão dotrato intestinal por queimadura por calor, e doenças por um transmissor de um LeucotrienoB4): doenças inflamatória do intestino ou alérgica, incluindo, por exemplo, proctite, enteriteeosinofílica, amstocitose, doença celíaca, doença de Crohn, e colite ulcerativa; doençasalérgicas relacionadas a alimento expressando as condições em um local que é remoto parao trato gastro-intestinal incluindo, por exemplo, enxaqueca, rinite, e eczama; doenças auto-imunes ou doenças inflamatórias incluindo, por exemplo, edema mucoso primário, gastriteatrófica autoimune, período climatérico precoce, diabetes juvenil, pênfigo vulgaris,semelhante a pênfigo , oftalmolima simpatética, uveite induzida por lentes, Ieucopeniaparoxismal, hepatite crônica ativa, cirrose do fígado paroxismal, lúpus eritematoso discóide,síndrome de Sjoegren, orquite autoimune, artrite (por exemplo, artrite modificada), epolicondrit; doenças renais incluindo, por exemplo, nefropatia membranosa, nefritemembranoproliferativa, glomeruloesclerose global focai, nefrite crescente,, nefrite glomerular,nefropatia IgA1 nefrite intersticial tubulopática, e nefropatia diabética. Além disse, ocomposto da presente invenção é também útil para tratar e/ou prevenir doenças do fígado(por exemplo, doenças imunogênicas (por exemplo, doenças autoimune do fígado, doençasautoimunes crônicas do fígado tais como cirrose biliar primária, colangite esclerosante, esemelhantes), dissecção hepática parcial, necrose hepática aguda (por exemplo, hepatitefulminante, hepatite de início tardio, falência hepática (falência hepática aguda ou doençahepática crônica)), e semelhantes.

Em adição, composto da presente invenção pode ser administrado como umagonista S1P1 sozinho, ou em combinação com pelo menos um agente, na mesma dose oudoses diferentes, através da mesma ou diferente rota de administração. Exemplos doagente que pode ser combinado incluem, mas não limitado a, ciclosporina A, tacrolimus,sirolimus, everolimus, micofenolato, azatioprina, brequinar, leflunomida, fingolimod, umanticorpo anti-IL-2 (por exemplo, daclizumab), um anticorpo anti-CD3 (por exemplo, OKT3),uma imunoglobulina anti - células T (por exemplo, AtGam), belatacept, abatacept,ciclofosfamida, interferon β, aspirina, acetaminofeno, ibuprofeno, naproxeno, piroxicam, eesteróides antiinflamatórios (por exemplo, prednisolona, e dexametasona).

Uma preparação contendo o composto representado pela fórmula (I), ou um, oudois ou mais tipos de sais dos mesmos como ingredientes efetivos são preparados por usarum veículo, em excipiente ou outros aditivos que são usualmente utilizados na preparaçãodos medicamentos.

A administração pode ser feita em qualquer uma forma para ou administração oralpor comprimidos, pílulas, cápsulas, grânulos, pós, e soluções, ou para administraçãoparenteral por injeções para injeção intravenosa, e injeção intramuscular, supositórios,preparações percutâneas, preparações transnasais, inalações ou semelhantes. A dose éapropriadamente decidida em resposta a um caso individual por levar em consideração ossintomas, idade e sexo do paciente, mas é usualmente cerca de 0,001 mg/kg a cerca de100 mg/kg por dia por adulto no caso de administração oral, e este é administrados em umaporção ou dividido em 2 a 4 porções. Também, no caso de administração intravenosa deacordo com os sintomas, ele é administrado usualmente dentro da variação de cerca de0,0001 mg/kg a 10 mg/kg por dia por adulto, uma vez ao dia ou duas mais vezes ao dia. Emadição, no caso da inalação, ele e administrado geralmente dentro na variação de cerca de0,0001 mg/kg a 1 mg/kg por adulto, uma vez ao dia ou duas ou mais vezes ao dia.

Com respeito a composição sólida da presente invenção para administração oral,comprimidos, pós, grânulos, ou semelhantes são utilizados. Em tal uma composição sólida,uma ou mais substâncias ativas são misturadas com pelo menos um excipiente inativo taiscomo lactose, manitol, glicose, hidroxipropilcelulose, celulose microcristalina, amido, polivinilpirrolidona, e silicato de alumínio magnésio. Em um método convencional, a composiçãopode conter aditivos inativos, por exemplo, um lubrificante tal como esterato de magnésio,um desintegrante tal como carboximetilamido de sódio ou um agente solubilizante. Comoocasião demanda, comprimidos ou píludas podem ser revestidos com um revestimento deaçúcar, ou um agente de revestimento gástrico ou entérico.

A composição líquida para administração oral inclui emulsões, soluções,suspensões, xaropes, elixires farmaceuticamente aceitáveis e semelhantes, e contêmgeralmente solventes inertes utilizados tais como água e etanol purificados. Em adição aosolvente inerte, esta composição pode conter um agente auxiliar tal como um agentesolubilizante, um agente de mistura, e um agente de suspensão, um adoçante, um corretivo,um áromático e um antiséptico.

Injeções para administração parenteral incluem soluções aquosas e não aquosas,suspensões e emulsões. Exemplos de solvente aquoso incluiem água destilada para injeçãoe salina fisiológica. Exemplos de solvente não aquoso incluem propileno glicol, polietilenoglicol, óleos de planta tais como óleo de oliva, álcoois tais como etanol e Polisorbato 80(Farmacopéia). Tal como uma composição pode ainda conter um agente de tonicidade, umantiséptico, um agente de mistura, um agente emulsificante, um agente de dispersão, umagente estabilizante, a um agente solubilizante. Esses são esterilizados, por exemplo, porfiltração através de filtro retendo bactéria, misturando bactericidas ou irradiação. Em adição,esses podem também ser utilizados por produção de uma composição sólida estéril, edissolvendo ou suspendendo em uma água estéril ou um solvente estéril para injeção antesde seu uso.

Com respeito a a um agente transmucosa tais como um agente de inalação e umtransnasal, aqueles em um estado sólido, líquido ou semi-sólido são utilizados, e podem serproduzidos de acordo com um método convencionalmente conhecido. Por exemplo, umexcipiente tal como Iactose e amido, e também um agente ajustador de pH, um antiséptico,um tensoativo, um lubrificante, um estabilizador, um espessante, e semelhantes podem seropcionalmente adicioandos ao mesmo. Para sua administração, um dispositivo apropriadopara inalação ou sopro pode ser utilizado. Por exemplo, um composto pode ser administradosozinho ou como um pó de fórmula misturada, ou como uma solução ou uma suspensão porsua combinação com um veículo farmaceuticamente aceitável, utilizando um dispositivo oupulverizador convencionalmente conhecido, tal como um dispositivo de inalação deadministração medida. O inalador de pó seco ou semelhantes pode ser para uso deadministração única ou múltipla, e um pó seco ou uma cápsula contendo pó pode serutilizada. Alternativamente, este pode ser na forma tal pulverizador aerosol de alta pressãoque usa um propulsor apropriado, por exemplo, um gás adequado tal comoclorofluoroalcano, hidrofluoralcano e dióxido de carbono.O agente externo inclui pomadas, emplastro, cremes, géis, mingais, pulverizadores,loções, colírios, pomadas oftálmicas e semelhantes. O agente externo contém bases depomadas, bases de loçõ, líquidos aquosos e não aquosos, suspensões, emulsões, esemelhantes para uso geral. Exemplos de bases de pomada ou loção incluem polietileno,propileno glicol, vaselina branca, cera de abelha branca, óleo de rícino reforçado compolioxietileno, monoesterato de glicerina, álcool estearil, álcool cetílico, lauromacrogol, esesquioleato de sorbitano.

Exemplo

Agora em diante, os compostos da presente invenção serão descritos em maisdetales com referências aos Exemplos. A presente invenção não é limitada às invençõescomo descrito nos seguintes Exemplos. Os métodos de preparação dos compostos dematerial de partida são mostrados nos Exemplos de Preparação.

[Nas seguintes tabelas, Pr representa Exemplo de Preparação No., e Estruturarepresenta uma fórmula estrutural. Como símbolos de abreviações na fórmula estrutural, Merepresenta um grupo metila, e Et representa um grupo etila. Ligaçõ dupla cruzada Criisrepresente uma mistura cis/trans, e se a seção de Dados descreve somente os números, elamostra dados SM. SM representa dados de espectrometria de massa. Nas tabelas, TRrefere-se a um tempo de retenção em uma cromatografia liquida de alto desempenho(HPLC), e M representa minutos. A condição para HPLC é como segue: coluna: IntertsilODS-34,6x150 mm, eluente 0,01 M de KH2PO4 aq / MeCN (3:7), taxa de fluxo: 1,0 mL/min,comprimento de onde de detecção: 254 nm. Se dados 1H-RMN são descritos nas tabelas,tetrametilsilano é utilizado como um padrão interno, e a menos que de outra formaespecificamente mencionado, δ (ppm) (valores integrados, modelos de variação) dos sinaisem 1H-RMN utilizando DMSO-d6 como solvente de medida é mostrado. Símbolos deabreviação têm os mesmos significados como segue. S: singlete, d: doblete, t: triplete, q:quartete, dd: duplo doblete, ddd: duplo duplo doblete, dt: duplo triplete, dm: duplo multiplete,br: amplo, brs; singlet amplo, Hz: Hertz, CDCI3: clorofórmio deuterado, DMSO-d6:dimetilsulfóxido-d6, e na presente especificação, RMN representa 1H-RMN: próton deressonância magnética nuclear. O mesmo deve ser aplicado daqui em diante].

Preparação Exemplo 1

Cloridrato de imidazo[1,2-a]piridina-7-carbonitrila (1,50 g), cloridrato dehidroxilamina (301 mg), e Na2CO3 (3,50 g) foram agitados a 60°C por 6 horas em CH3OH(57 mL). A solução de reação foi arrefecida e concentrada, e compleição da reação foiconfirmada por LC-SM. Ao resíduo foi adicionado adicionado água, seguido por duasextrações com EtOAc. A camada orgânica foi lavada com água e soluço salina saturada,seca em MgS04 anidro, e então filtrada, e o filtrado foi concentrado para obter N'-hidroxiimidazol[1,2-a]piridina-7-carboxamida (850 mg) como um sólido branco.Os composto mostrados em Pr 1-1 a Pr 1-17 foram preparados na mesma maneiracomo na Preparação do Exemplo 1.

Tabela 3

<table>table see original document page 26</column></row><table><table>table see original document page 27</column></row><table>

Preparação Exemplo 2

Em um vaso de reação de 50 mL, a uma solução de 1 H-indol-4-carbonitrila (5,00 g)em Ch30H (100 mL) foi adicionado hidroxilamina (50 % solução aquosa) em temperaturaambiente, seguido por refluxo por 15 horas (compleção da reação foi confirmada por CCF).

A solução de reação foi concentrada sob pressão reduzida, e azeótropo com tolueno tr6esvezes. O sólido obtido foi lavado com IPE. N'-Hidróxi-1H-inzol-4-carboximidamida (6,12 g)foi obtido como um sólido branco.

Os compostos mostrados em Pr 2-1 através de Pr 2-26 foram preparados damesma maneira como na Preparação do Exemplo 2.

Tabela 4

<table>table see original document page 27</column></row><table>Tabela 5

<table>table see original document page 28</column></row><table><table>table see original document page 29</column></row><table>

Tabela 6

<table>table see original document page 29</column></row><table>

Preparação Exemplo 3

Uma suspensão de N2-hidróxi-1H-indol-4-carboxamida (1,00 g), ácido 4-flúor-3-(trifluormetil)benzóico (1,19 g), e EDCI/HCI (1,32 g) em dioxano (30 ml_) foi agitado emtemperatura ambiente por 1 hora, e ainda aquecido sob refluxo por 18 horas. A mistura dereação foi concentrada sob pressão reduzida, clorofórmio e água foram adicioandos amesma, seguida por agitação. Os insolúveis foram coletados por filtração. A camadaorgânica do licor mãe foram lavados com água, secos em MgS04 anidro, e então filtrados, eo filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. Os insolúveis coletados por filtração, juntocom o licor mãe, foram purificados por cromatografia em sílica gel (n-hexano: EtOAc =80:20). À substância objetivo foi adicionada acetona, seguida por dissolução sobaquecimento, e adição com n-hexano, e o sólido precipitado foi coletado por filtração paraobter 4-{5-[4-flúor-3-(trifluormetil)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}-1H-indol (391 mg) como umsólido branco.

Tabela 7

<table>table see original document page 29</column></row><table>

Preparação Exemplo 4

N2-{[5,6-Dicloropiridin-3-il)carbonil]óxi}-1H-indol-4-carboxamidina (1,91 g) foiadicionado ao dioxano (40 mL), seguido por aquecimento sob refluxo por 5 horas. Ele foiconcentrado sob pressão reduzida, e então purificado por cromatografia em sílica gel(EtOAc). Ao sólido obtido foi adicioanda acetona, seguida por suspensão sob aquecimento.Após ser deixado para arrefecer, os insolúveis foram coletados por filtração para obter 4-[5-(5,6-dicloropiridin-3-il)-1,2,4-oxadiazol-3-il]-1H-indol (1,44 g) como um pó amarelo claro.

Tabela 8

<table>table see original document page 30</column></row><table>

Preparação Exemplo 5

Uma solução de N2-hidróxi-1H-indol-4-carboxamida (3,42 g) e ácido 4-flúor-3-(trifluormetil)benzóico (4,07 g) em THF (70 mL) foi arrefecido a -10°C ou menos, eadicionado com DIC (3,7 mL). Após agitação a -15 a -5°C por 3 horas, a mistura de reaçãofoi concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi suspensso em clorofórmio, e então osinsolúveis foram coletados por filtração. Os pós obtidos foram purificados por cromatografiaem sílica gel (n-hexano:etOAc = 50:50) para obter N2-{[4-flúor-3-(trifluormetil)benzoil]óxi}-1 H-indol-4-carboxamida (8,40 g) como um sólido branco.

O composto mostrado em Pr 5-1 foi preparado da mesma forma como naPreparação Exemplo 5.

Tabela 9

<table>table see original document page 30</column></row><table>

Preparação do Exemplo 6

A uma solução de 6-amino-2-metilnicotinonitrila (960 mg) em etanol (34 mL) foiadicionado a 40% de solução cloroacetaldeído aquosa (2,36 mL) a 60°C. A mistura dereação foi deixada em refluxo por 8 horas. Os precipitados resultantes foram coletados porfiltração para obter cloridrato de 5-metilimidazo[1,2-a]piridina-6-carbonitrila (580 mg) comoum sólido branco.

Os compostos mostrados em Pr 6-1 a Pr 6-11 foram preparados na mesma formacomo na Preparação Exemplo 6.Tabela 10

<table>table see original document page 31</column></row><table>

Tabela 11

<table>table see original document page 31</column></row><table>

Preparação Exemplo 7

A uma solução de 3,4-diaminobenzonitrila (500 mg) em AcOH (10 ml_) foiadicionado Ac20 (372 μΙ_) em temperatura ambiente. A mistura de reação foi deixada emrefluxo por 15 horas (banho de

Óleo a 150 oC). Ela foi arrefecida em temperatura ambiente, e concentrada até aquantidade de AcOH ser reduziada pela metade. Ela foi neutralizada com uma soluçãoNa2C03 aquosa, e extraída com EtOAc. A camada orgânica foi lavada com uma soluçãoaquosa saturada de NaHC03 e solução salina saturada, seca sob MgS04 anidra, e entãofiltrada, e o filtrado foi concentrado. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna desílica gel para obter 2-metil-1H-benzimidazol-5-carbonitrila (390 mg) como um vermelhoclaro.

Tabela 12

<table>table see original document page 32</column></row><table>

Preparação Exemplo 8

Uma mistura de reação de 4,5-diamino-2-metilbenzonitrila (20 mg) e ácido fórmico(6 ml_) foi deixado em refluxo por 3 horas. A solução de reação foi arrefecida e concentrada.Ao resíduo foi adicionado uma solução de NaOH aquosa 1M, e extraída com EtOAc. Acamada orgânica foi seca em MgSO4 anidro e então filtrada, e o filtrado foi concentrado paraobter 5-metil-1H-benzimidazol-6-carbonitrila como pós incolores.

O composto mostrado em Pr-8-1 foi preparado da mesma forma como umaPreparação Exemplo 8.

Tabela 13

<table>table see original document page 32</column></row><table>

Preparação Exemplo 9

Uma solução de 3,4-diaminobenzonitrila (400 mg) em ortoformato de etila (6,48 mL)foi adionada a AcOH (138 mg), seguida por agitação a 80oC por 2 horas. A solução dereação foi arrefecida em temperatura ambiente, e particionada entre EtOAc e uma soluçãode NaOH aquosa 1M. A camada orgânica foi lavada com solução saturada, seca sobNa2SO3 anidra, e então coletada por filtração, e o filtrado foi concentrado, e purificado porcromatografia em sílica gel para obter 2-etóxi-1H-benzimidazol-6-carbonitrile (164 mg) comoum pó incolor.

Tabela 14

<table>table see original document page 33</column></row><table>

Preparação Exemplo 10

A uma suspensão de 2,4-diaminobenzonitrila (400 mg) em CH30H (4 mL) foiadicionada BrCN (477 mg), seguido por agitação a 20°C por 14 horas. À mistura de reaçãofoi adicioanda uma solução NaOH aquosa 1M (0,117 mL), seguida por concentração. Aoresíduo foi adicionado clorórmio CH30H = 10:1 (10 mL), e os insolúveis resultantes foramremovidos por filtração. O filtrado foi concentrado, e o resíduo obtido foi purificado porcromatografia em coluna de sílica gel para obter 2-amino-1H-benzimidazol-6-carbonitrila(311 mg) como pós de cor laranja clara.

Tabela 15

<table>table see original document page 33</column></row><table>

Preparação Exemplo 11

A uma solução de 3,4-diaminobenzonitrila (350 mg) em tolueno (5,5 mL) foiadicionado CDI (554 mg), seguido por agitação a 125°C por 2 horas. À mistura de reação foiadicionada uma solução de NaOH aquosa de 1 M (0,117 mL), seguida por extração comEtOAc. A camada orgânica foi seca sob MgSO4 anidro, e então filtrada, e o filtrado foiconcentrado. Ela pulverizada/lavada com IPE/IPA para obter 2-oxo-2,3-diidro-1H-benzimidazol-5-carbonitrila (423 mg) como pós incolores.

Tabela 16<table>table see original document page 34</column></row><table>

Preparação Exemplo 12

A uma solução misturada de N-(4-ciano-2-nitrofenil)penta-4-enamida (1,0 g) emAcOH/etanol (1:1,20 mL) foi adicionado ferro em pó (710 mg). A solução de reação foiaquecida a 11 OoC por 3 horas, e então concentrada. Ao resíduo foi adicionado clorofórmio,seguido por neutralização com uma solução de NaHC03 aquosa saturada. A camadaorgânica foi seca sob MgS04 anidro, e então filtrado para remover um dissecante, e osolvente foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografiaem sílica gel para obter 3-butenil-1H-benzimidazol-5-carbonitrila (405 mg) como um líquidoincolor.

Os compostos mostrados no Pr 12-1 a Pr 12-2 foram preparados na mesmamaneira como na Preparação Exemplo 12.

Tabela 17

<table>table see original document page 34</column></row><table>

Preparação Exemplo 13

A uma solução de 2-fluortereftalonitrila (500 mg) e Et3N (572 μΐ_) em EtOH (20 mL)foi adicionada hidrazina (monoidratada), seguida pela reação a 60oC por 16 horas, econcentrada. O resíduo foi lavado com éter dietílico para obter 3-amino-1H-indazol-6-carbonitrila (488 mg) como um sólido amarelo.

O composto mostrado em Pr 13-1 foi preparado na mesma maneira como naPreparação Exemplo 13.

Tabela 18<table>formula see original document page 35</column></row><table>

Preparação Exemplo 14

A uma suspensão de 3-amino-1H-indazol-6-carbonitrila (345 mg) em AcOH foilentamente adicionada uma solução NaNO2 aquosa (301 mg) a O0C. Ela foi agitada emtemperatura ambiente por 2,5 dias, e o resíduo foi coletado por filtração, e lavado com águagelada. Ao resíduo foram adicionados HCI 0,1 M e DME1 seguido por agitação a 80°C por 2horas. A mistura de reação foi neutralizado com uma solução NaHC03 aquosa saturada, eextraída com EtOAc. A camada orgânica foi seca sob MgS04 anidra e concentrada. Acamada orgânica foi seca sob MgSO4 anidro, e concentrado. O resíduo foi purificado porcromatografia em coluna de sílica gel (n-hexano: EtOAc=80:20 a 50:50) para obter 1H-indazol-6-carbonitrila (175 mg) como um sólido amarelo.

Tabela 19

<table>formula see original document page 35</column></row><table>

Preparação Exemplo 15

Metil (4-ciano-2-nitrofenil)acetato (128 mg) foi dissolvido em AcOH (3,0 mL),seguido por adição de ferro em pó (129 mg), e a solução de reação foi agitada em um banhode óleo a IOOoC por 1,5 horas. Ele foi concentrado para remover AcOH, seguido por adiçãode EtOAc. O sólido marrom foi separado por filtração, e a camada orgânica foi lavada comuma solução de HCI 1 M e solução salina saturada, seca sobre MgSO4 anidro, econcentrada. O resíduo foi purificada por cromatografia em coluna de sílica gelclorofórmio:CH3OH = 99:1 a 95:5) para obter 2-oxoindolina-6-carbonitrila (52,0 mg) como umsólido amarelo claro.

Tabela 20<table>table see original document page 36</column></row><table>

Preparação Exmeplo 16

A uma solução de 6-bromo-2,2-dimetilindanometilindan-1-ona (124 mg) em TFA(4,44 g, 3,0 mL) foi trietilsilano adicionado (150 mg, 207 μL) em temperatura ambiente. Apósagitação em temperatura ambiente por 2,5 dias, para a solução de reação foi adicionadaágua para parar a reação, seguida por lavagem com água e uma solução NaHCO3 aquosasaturada. A mistura de reação foi extraída com EtOAc. A camada orgânica foi seca emMgSO4 anidro, e então filtrado, e o filtrado foi concentrado. O resíduo foi purificado porcromatografia de coluna de sílica gel (n-hexano somente) para obter 5-bromo-2,2-dimetilindano (114 mg) como um óleo incolor.

Tabela 21

<table>table see original document page 36</column></row><table>

Preparação Exemplo 17

Em THF (30 mL), a uma mistura de 6-bromo-1-indanona (300 mg) e diazometano(504 mg, 221 μL) foi adicionado 60% NaH (125 mg) a 0°C. Ele foi agitado em temperaturaambiente por 3,5 horas, e lavado com uma solução de NH4CI saturada. A mistura foi15 extraída com EtOAc, e a camada orgânica foi seca sob MgS04 anidra, e então filtrada, e ofiltrado foi concentrado. O resíduo foi purificado por cormatografia em coluna de sílica gel (n-hexano: EtOAc = 100:0 a 80:20) para obter 6-bromo-2,2-dimetil-1-indanona (158 mg) comoum óleo amarelo claro.

Tabela 22<table>table see original document page 37</column></row><table>

Preparação Exemplo 18

A uma solução de 3-amino-4-hidroxibenzonitrila (730 mg) em DMF (10 ml_) foiadicionado CDI (1,06 g) a O°C1 seguido por agitação em temperatura ambiente por 3,5horas. A solução de reação foi diluída com água (10 mL), e extraída com EtOAc (200 mL). Acamada orgânica foi diluída sob MgSO4 anidra, e então filtrada, e o filtrado foi concentradosob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel(clorofórmio:CH3OH - 98:2 a 93:7) para obter um sólido amarelo claro.

O composto mostrado em Pr 18-1 foi preparado na mesma maneira como naPreparação Exemplo 18.

Tabela 23

<table>table see original document page 37</column></row><table>

Preparação Exemplo 19

A uma solução de 60% NaH (12, 38 g) em DMF (480 mL) foi adcicionada umasolução de 1 H-indol-4-carbonitrila (40,0 g) em DMF (80 mL) a O°C. Após agitação a O°C por30 minutos, ela foi agitada em temperatura ambiente por 0,5 hora. Em seguida, uma soluçãode 2-bromoacetamida (40,76 g) em DMF (80 mL) foi adicionada gota a gota a mesma a O°C.A solução foi aquecida de O°C a temperatura ambiente, e agitada por 12 horas. A soluçãode reação foi adicionada (1200 mL), e o precipitado de sólido branco foi coletado porfiltração. A solução foi lavada com água quente (300 mL) e éter diisopropílico (200 mL) paraobter 2-(4-ciano-1H-1-il)acetamida (52,1 g) como um sólido branco.

Tabela 24<table>table see original document page 38</column></row><table>

A uma solução de 3-cloro-4-(2,2,2-triflúor-1-metiletóxi)benzonitrila (430 mg) em IPA(3 mL) foi adicionada uma solução NaOH aquosa 5 M (1,37 mL), seguido por agitação a80oC por 24 horas, e uma solução de NaOH aquosa de 5 M (1, 37 mL) foi ainda adicionadaao mesmo.s eguida por agitação a 95oC por 24 horas. A solução de reação foi concentradaaté a quantidade ser reduzida a metade. Ao resíduo foi adicionado HC112 M1 e o precipitadoresultante foi coletado por filtração, e então seco para obter ácido 3-cloro-4-(2,2,2-triflúor-1-metiletóxi)benzóico como um ácido amarelo.

Os compostos mostrados em Pr 20-1 a Pr 20-3 foram preparados da mesmamaneira como na Preparação Exemplo 20.

Tabela 25

<table>table see original document page 38</column></row><table>

Preparação Exemplo 21

A 3-(difluormetil)-4-(2,2,2-triflúor-1-metiletóxi)benzonitrila (234 mg) foramadicionados água (2 mL) e ácido sulfúrico (2 mL), seguido por refluxo por 24 horas. Apósarrefecer em temperatura ambiente, a solução re reação foi alcalificada com solução deNaOH aquosa 5 M, e extraída com éter dietílico (30 mL). A camada aquosa foi acidificadapor HCI 1 M e extraíada com EtOAc. A camada orgânica foi seca em MgS04 anidra, eentão filtrada, e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado porcromatografia em coluna de silica gel (clorofórmio: CH30H=97:3 a 90:10) para obter ácido3-formil-4-(2,2,2-triflúor-1-metiletóxi)benzóico (151 mg) como um sólido branco.

Os compostos mostrados em Pr 21-1 a Pr 21-6 foram preparados da mesmamaneira como na Preparação Exemplo 21.

Tabela 26

<table>table see original document page 39</column></row><table>

Preparação Exemplo 22

A 5-bromo-2-(2,2,2-triflúor-1-metiletóxi)benzonitrila em um solvente misturado detolueno/THF (4:1) foi adicionado a uma solução de n-BuLi em n-hexano a -78°C. Através dapassagem de gás CO2, a solução foi agitada por 0,5 hora. À solução de reação foiadicionada a solução NaOH aquosa 1 M para completar a reação, e seguida por extraçãocom éter dietílico. A camada orgânica foi acidificada por adição de HCI 1M1 extraída comEtOAc, seca em MgS04 anidro, e concentrado. O resíduo foi purificado por cromatografiaem sílica gel (clorofórmío: CH3OH=97:3 a 90:10) para obter ácido 3-ciano-4-(2,2,2-triflúor-1-metiletóxi)benzóico como um sólido branco.

O composto mostrado em Pr 22-1 foi preparado na mesma maneira como naPreparação Exemplo 22.

Tabela 27<table>table see original document page 40</column></row><table>

Preparação Exemplo 23

A uma solução misturada foi adicionada uma solução aquosa de NaOH de 1 M (4,1mL) de metil 1-isobutil-2-oxo-1,2-diidropiridina-4-carboxilato (430 mg) em CH30H-THF (4 mL- 3 mL). A solução foi agitada em temperatura ambiente por 10 horas, e então concentradosob pressão reduzida, e água (10 mL) foi adicionada, e subseqüentemente HCI 1 M foiadicionado ao mesmo até o pH se tornar 3. O sólido resultante foi coletado por filtraçãolavado com água e seco sob a pressão reduzida para obter um ácido 1-isobutil-2-oxo-1,2-diidropiridina-4-carboxílico (325 mg) como um pó branco.

Tabela 28

<table>table see original document page 40</column></row><table>

Uma solução de ácido 1H-benzimidazol-5-carboxilico (75,0 g) em diclorometano(750 mL) foi permitido ser reagido com cloreto de exalil (76,3 g, 52,4 mL) em temperaturaambiente por 1 hora, e então a solução de reação foi concentrada. A uma solução doresíduo em THF (750 mL) foi adicionada uma solução de NH3 aquosa 28% (5 mL) sobarrefecimento. Esta mistura re reação foi agitada na mesma temperatura, e o a solução rereação foi concentrada. O resíduo púrpura foi pulverizado/lavado com IPE/IPA, e entãocoletado por filtração para obter 1 H-benzimidazol-6-carboxamina (129 g) (incluindo saisinorgânicos).

O composto mostrado em Pr 24-1 foi preparado na mesma maneira como naPreparação Exemplo 24.

Tabela 29<table>table see original document page 41</column></row><table>

Preparação Exemplo 25

Preparação Exemplo 25-1

A uma solução de ácido 1H-1,2,3-benzotriazol-5-carboxilico (2 g), EDCI/HCI (2,82 g), e HOBt em DMF (70 mL) foi adicionada uma solução NH3 aquosa (5,1 mL), seguida porreação em temperatura ambiente por 2 horas. Ela foi concentrada, e o resíduo foi lavadocom solução NaHC03 saturada, coletada por filtração, e seca para obter 1H-1,2,3-benzotriazol-5-carboxamida (1,98 g) como um sólido branco.

Preparação Exemplo 25-3

Em um recipiente de reação de 50 mL, a uma solução de éster metil 4-cloro-2-metil-1 H-benzilmidazol-6-carboxilato (300 mg) em formamida (2,65 mL) foi adicionado NaOCH3(288 mg) em temperatura ambiente. A solução foi agitada a 80oC por 3 horas. Término dareação foi confirmado por CCF e LC1 e então a solução de reação foi concentrada eadicioanda com água para completar a reação. Ela foi extraída com EtOAc. A camadaorgânica foi lavada com solução salina saturada, seca em MgS04 anidro, e então filtrada, eo filtrado foi concentrado. Ele foi purificado por cromatografia em coluna de silica gel(purificador automático, clorofórmio: CH30H - 100:0 a 90:10) para obter 4-cloro-2-metil-1H-benzimidazol-6-carboxamida (257 mg) como um sólido branco.

O composto mostrado em Pr 25-2 foi preparado na mesma maneira como naPreparação Exemplo 25-1.

Tabela 30

<table>table see original document page 41</column></row><table>Preparação Exemplo 26

A uma solução de ácido 3-formil-4-(2,2,2-triflúor-1-metiletóxi)benzóico (490 mg) eK2C03 (387 mg) em acetona (10 mL) foi acidicionado iodometano (350 pL) em temperaturaambiente, seguido por agitação por 2 horas. A mistura de reação foi diluída com água (15mL), e extraída com EtOAc (30 mL). A camada orgânica foi seca em MgSO4 anidro, e filtradopara remover o dissecante, e o solvente foi concentrado. O resíduo foi purificado porcromatografia em coluna de sílica gel (n-hexano: EtOAc = 95:5 a 80:20) para obter metil 3-formil-4-(2,2,2-triflúor-1-metiletóxi)benzoato (122 mg) como um sólido branco.

Tabela 31

<table>table see original document page 42</column></row><table>

Preparação Exemplo 27

Sob arrefecimento, o DMF (30 mL) foi lentamente adicionado gota a gota de POCI3(6,68 g, 4,06 mL), seguido pela reação em temperatura ambiente por 2 horas, e então umasolução de 1H-benzimidazol-6-carboxamida (2,38 g) em DMF (47,6 mL) foi adicionado aomesmo, seguido por agitação em temperatura ambiente por 2 horas. À solução foiadicioanda uma solução de NaOH aquosa 1M (pH 6 a 7), seguida por agitação emtemperatura ambiente por 0,5 hora. A solução foi extraída com EtOAc, e a camada orgânicafoi combinada, lavada com solução salina saturada, seca em MgS04 anidro, e então filtrado,e o filtrado foi concentrado. O resíduo foi purificado por cromatografia em sílica gel, epulverizado/lavado com IPE para obter 1 H-benzimidazol-6-carbonitrila (0,58 g) como umcristal vermelho claro.

Os compostos mostrados em Pr 27-1 a Pr 27-2 foram preparados na mesmamaneira como na Preparação Exemplo 27.

Tabela 32<table>table see original document page 43</column></row><table>

Preparação Exemplo 28

Uma solução de 1,3-benzotiazol-6-carboxamida (1,96 g) em P0CI3 (10 mL) foideixado em refluxo por 4 horas. A solução de reação foi concentrada, e água foi lentamenteadicioanda a mesma a OoC. Ela foi extraída com EtOAc1 e a camada orgânica foi seca emMgSO4 anidro, e então filtrada, e o filtrado foi concentrado. O resíduo foi purificado porcromatografia em coluna de sílica gel (n-hexano:EtOAc = 80:20 a 60:40) para obter 1,3-benzotiazol-6-carbonitrila como um sólido amarelo claro.

O seguinte Pr 28-1 foi preparado da mesma forma como na Preparação Exemplo 28.

Tabela 33

<table>table see original document page 43</column></row><table>

Preparação Exemplo 29

A uma solução de 6-bromo[1,2,4]pirazol[1,5-a]piridina (400 mg) em DMF foiadicionado tris(dibenzilidenoacetona)dipaládio (0), 1'-bis(difenilfosfino)ferroceno, e Zn(CN)2sob uma atmosfera de nitrogênio, seguido por agitação a 1100C por 23 horas. Ela foiarrefecida em temperatura ambiente, e NH4CI saturado (12 mL), solução NH3 saturada (6mL), e H2O (12 mL) foram adicionados a mesma. A mistura de reação foi seca três vezescom EtOAc. A camada orgânica foi lavada com solução salina saturada, seca em MgSO4anidro, e então filtrado, e o filtrado foi concentrado. O resíduo foi purificado porcromatografia em coluna de sílica gel (0 a 5% CH3OH/clorofórmio)[1,2,4]triazol[1,5-a]piridina-6-carbonitrila como um sólido vermelho escuro.Preparação Exemplo 30

Em um recipiente de reação de 100 mL de uma solução de 6-bromo-metil-1 H-benzimidazol (500 mg) em DMF foram adicionados Zu(CN)2 (834 mg) e Pd(PPh)4 (547 mg)em temperatura ambiente, seguido pela agitação a 150°C por 5 horas. A solução de reaçãofoi vertida em uma mistura de solvente 1:1 de uma solução de NaHC03 e EtOAc1 seguidopor agitação por 1 hora. A camada orgânica foi lavada com soluçõa salina saturada, secaem MgS04 anidro e então filtrada, e o filtrado foi concentrado. Ela foi purificada porcromatografia em coluna de silica gel (purificador automético, clorofórmio: CH30H=98:2 a90:10) para obter 7-metil-1H-benzimidazol-6-carbonitrila (161,8 mg) como um solidomarrom.

O seguinte Pr 30-1 a Pr 30-7 foram preparados da mesma maneira que aPreparação Exemplo 30. Eles foram preparados pelo método como na Preparação Exemplo29.

Tabela 34

<table>table see original document page 44</column></row><table><table>table see original document page 45</column></row><table>

Preparação Exemplo 31

A uma solução misturada de 4-hidróxi-3-nitrobenzonitrila (1 g) e NH4CI (163 mg)em etanol (20 ml_), THF (10 mL), e água (10 mL) foram adicionados Celite (5 g) e ferroreduzido (1,7 g), seguido pelo aquecimento sob refluxo a 70°C por 30 minutos. A solução dereação foi arreferida em temperatura ambiente, diluída com EtOAc (200 mL), e então filtradaatravés de celite. A solução foi lavada com solução salina, a camada orgânica foi seca emMgSO4 anidro, e filtrado, e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida para obter 3-amino-4-hidroxibenzonitrila (740 mg) como um sólido marrom claro.

Os seguintes Pr 31-1 a Pr 31-3 foram preparados na mesma forma que naPreparação Exemplo 31.

Tabela 35

<table>table see original document page 45</column></row><table>

Preparação Exemplo 32

A uma solução misturada de 4-amino-3-nitrobenzonitrila (8 g) em EtOH/THF (40mL/ 40 mL) foi adicionado Pd-C (50% úmido) (0,8 g), seguido pela agitação sob uma atmosfera de H2 por 12 horas. A solução de reação foi filtrada através de celite, econcentrada. O resídio foi pulverizada/lavado com um solvente misturad de IPE e IPA, ecoletado por filtração para obter 3,4-diaminobenzonitrila (6,3 g) como pós laranja.

Tabela 36<table>formula see original document page 46</column></row><table>

Preparação do Exemplo 33

A uma solução de 2-amino-3-nitrobenzonitrila (2 g) em THF (30 mL) foramadicioandos cloreto de 4-pentenoila (2,90 g) e diisopropiletilamina (4,27 mL), seguido poragitação a 80oC por 12 horas. A solução de reação foi vertida em água, e extraída comEtOAc. A camada orgânica foi seca em MgSo4 anidro, e então filtrada, e o filtrado foiconcentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna emsilica gel (clorofórmio: CH3OH) para obter N-(4-ciano-2-nitrofenil)pent-4-enamida (174 mg)como um líquido incolor.

Q seguinte Pr 33-1 a Pr 33-2 foram preparados na mesna forma como naPreparação Exemplo 33.

Tabela 37

<table>formula see original document page 46</column></row><table>

Preparação Exemplo 34

A uma solução de 3-cloro-4-fluorbenzonitrila (300 mg) e 1,1,1-triflúor-2-propanol(263 mg) em THF (15 mL) foi adicionado 60% de NaH (92,5 mg) e 5oC, seguido poragitação em temperatura ambiente por 2 horas, adição de uma solução de NH4CI sautadapara completar a reação, e extração com EtOAc. A camada orgânica obtida foi seca emMgS04 anidra, e concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia em sílica gel (n-hexano: EtOAc = 97:3 a 85:15) para obter 3-cloro-4-(2,2;2-triflúor-1-metiletóxi)benzonitrila(435 mg) como ums substância oleosa incolor.

O seguinte Pr 34-1 a Pr 34-6 foram preparados na mesma forma como naPreparação Exemplo 34.

Tabela 38

<table>table see original document page 47</column></row><table>

Tabela 39

<table>table see original document page 47</column></row><table>

Preparação Exemplo 35

Em um recipiente de reação de 50 mL, a uma solução de 4-{5-[3-trifluormetil)-4-(2,2,2-triflúor-1 -metiletóxi)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}-1 H-indol (100 mg) em DMF (1 mL) foiadicionado 60% de NaH (10,9 mg) a OoC. A solução foi aquecida em temperatura ambiente,seguida por 0,5 hora. Ainda, terciário-butil (2-iodoetóxi)dimetilsilano foi adicionado aomesmo a O0C, seguido por agitação em temperatura ambiente por 15 horas. Término dareação foi confirmado por LC-SM, e então a solução de reação foi adicionada com água (30mL). Ela foi extraída três vezes com EtOAc (20 mL). A camada orgânica foi lavada comsolução salina saturada, seca em MgS04 anidro, e concentrado sob pressão reduziada. Elafoi purificada por cromatografia em coluna de sílica gel (purificador automático, n-hexanoEtOAc = 100:0 a 90:10) para obter 1-(2-{[terciário-butil(dimetil)silil]óxi}etil)-4-{5-[3-trifIuormetiI)-4-2,2,2-trifIúor-1 -metiletóxi)fenil[-1,2,4-oxadiazol-3-il}-1 H-indol (86,4 mg) comoum sólido branco.

Tabela 40

<table>table see original document page 48</column></row><table>

Preparação Exemplo 36

LiH (78 mg) foi suspenso em DMF (5 mL), e uma suspensão de metil-2-oxo-1,2-diidropiridina-4-carboxilato (500 mg) em DMF (5 mL) foi adicionado gota a gota ao mesmoem temperatura ambiente. A suspensão foi agitada, e uma solução de 1-iodo-2-metilpropano(506 pL) e DMF (5 mL) foi adicionado gota a gota ao mesmo por 10 minutos, seguidoporagita'vão a 50oC por 15 horas. À solução de reação foi adicionada HCI 1M a OoC, seguidopor extração com EtOAc, e a camada orgânica foi lavada com solução salina saturada, secaem MgSO4 anidro, e filtrada, e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. O resíduo foipurificado por cromatografia em síica gel (n-hexano:EtOAc = 90:10 a 50:10) par aobter metil-1-isobutil-2-oxo-1,2-diidropiridina-4-carboxilato (440 mg) como pós brancos.

Tabela 41

<table>table see original document page 48</column></row><table>Preparação Exemplo 37

A uma solução de 4-flúor-3-nitrobenonitrila (300 mg) e malonato de dimetila (286mg) em DMF foi adicionado 60% de NaH a OoC1 seguido pela reação em temperaturaambiente para obter o dimetil (4-ciano-2-nitrofenil)malonato (198 mg)Tabela 42

<table>table see original document page 49</column></row><table>

Preparação Exemplo 38

A uma solução de malonato de dimetil (4-ciano-2-nitrofenil) em DMSO (5 mL) foramadicionados LiCI (60,3 mg) e H20 (12 μΐ_), seguido por agitação a 100oC por 3 horas. Asolução de reação foi arrefecida em temperatura ambiente, e colocada em EtOA e soluçãosalina anidra MgS04. A camada orgânica foi lavada com solução salina saturada, seca emMgSO4 anidro, e então filtrado, e o filtrado foi concentrado. O resíduo foi purificado porcromatografia em sílica gel (n-hexane: EtOAc = 90:10 a 75:25) para obter aceatato de metila(4-ciano-2-nitrofenil)(128 mg) um óleo amarelo.

Tabela 43

<table>table see original document page 49</column></row><table>

Preparação Exemplo 39

A uma solução de 4-cloro-3-(trifluormetil)benzonitrila (1 g) e tris(2Z)-4-oxopent-2-eno-2-oleato] de ferro(3+) (86 mg), e 1-metilpirrolidin-2-ona (2,8 mL) em THF (30 mL) foiadicionado uma solução de 2M de bromo (isobutil)magnésio em dietil éter (2,9 mL) sobarrefecimento. A solução foi agitada em temperatura ambiente por 30 minutos, e diluída cométer dietílico (30 mL), e então 1 M de HCI foi cuidadosamente adicionado ao mesmo paracompletar a reação. A solução de reação foi extraída com EtOAc (100 mL), o a camadaorgânica foi seca em MgS04 anidra, e então filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressãoreduziada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel (n-hexano:EtOAc = 100:0 a 95:5) para obter 4-istobutil-3-(trifluormetil)benzonitrila (320 mg)como um líquido amarelo claro.

O seguinte Pr 39-1 foi preparado na mesma maneiroa que na Preparação Exemplo39.

Tabela 44

<table>table see original document page 50</column></row><table>

Preparação Exemplo 40

A uma solução de 4-flúor-3-formilbenzonitrila (300 mg) em diclorometano (7 mL) foiadicionado 2-metóxi-N-(2-metóxi)-N-trifluor-A4-sulfanil)etanamina (757 mg) em temperaturaambiente, seguido pela agitação de 6 horas, e adição de uma solução NaHC03 aquosasaturada (15 mL). Após extração com clorofórmio (30 mL), a camada orgânica foi derivadaem MgS04 anidro filtrado, e concentrado. O resíduo foi purificado por cromatografia emcoluna de sílica gel (n-hexano: EtOAc = 95:5 a 80:20) para obter 3-(difluormetil)-4-fluorbenzonitrila (174 mg) como um líquido incorlor.

O segiunte Pr 40-1 foi preparado na mesma maneiroa como a Preparação Exemplo40.

Tabela 45

<table>table see original document page 50</column></row><table>Preparação Exemplo 41

Os seguintes Pr 41-1 a Pr 41-10 foram preparados na mesma maneira como noExemplo 2.'

Tabela 46

<table>table see original document page 51</column></row><table>

Preparação Exemplo 42

Os seguintes Pr 42-1 a Pr 42-3 foram preparados na mesma maneira como noExemplo 5.

Tabela 47<table>table see original document page 52</column></row><table>

Preparação Exemplo 43

O seguinte Pr 43 foi preparado na mesma maneira como no Exemplo 6.Tabela 48

<table>table see original document page 52</column></row><table>

Preparação Exemplo 44

Os seguintes Pr 44-1 a Pr 44-2 foram preparados na mesma maneira como noExemplo 12.

Tabela 49<table>table see original document page 53</column></row><table>

Preparação Exemplo 45

O seguinte Pr 45 foi preparado na mesma maneira como no Exemplo 47.Tabela 50

<table>table see original document page 53</column></row><table>

Exemplo 19.

Tabela 51

<table>table see original document page 53</column></row><table><table>table see original document page 54</column></row><table>

Preparação Exemplo 47

A uma solução de (7-{5-[3-(trifluormetil)-4-(2,2,2-trifluor-1-metiletóxi)fenil]1,2,4-oxadíazol-3-}imidazol[1.2-a]acetato de etila (230 mg) em THF (2,0 mL) foi adicionado umasolução de NaOH aquosa 1M (1,0 mL) seguido por agitação a 80oC por 2 horas. Apósarrefecimento em temperatura ambiente, uma solução aquosa de HCI 1 M (1,0 mL) foiadicionada, seguido por extração com clorofórmio. A camada orgânica foi seca em MgSo4anidro, e então filtrada, e o filtrado foi concentrado. O resíduo foi purificado por porcromatografia de coluna de sílica gel (clorofórmio:CH30H = 10:1 a 5:1) para obter pósincolores. A uma solução deste pós incorlor em EtOAc foi adicionado uma soluçãoHCI/EOAc 4 M, seguido por concentração. O pó incolor resultante foi pulverizada / levadocom IPE para obter cloridrato do ácido (7-{5-[(3-trif I uormeti I )-4-(2,2,2-trifI úo r-1 -metiletóxi)fenil]-1,2,4-oxadiazol-2-il)imidazo[1,2-a]piridin-2-il acético (180,4 mg) como pósincolores.

Os seguintes Pr 47-1 a Pr 47-13 foram preparados na mesma maneira como naPreparação Exemplo 47.

Tabela 52<table>table see original document page 55</column></row><table>

Tabela 53<table>table see original document page 56</column></row><table>

Exemplo 1

Uma solução de ácido 3-(trifluormetil)-4-(2,2,2-triflúor-1-metiletóxi)benzóico (810mg), EDCI/HCI (616 mg), e N'-hidróxi-7-metilimidazo[1,2-a]piridina-6-carboxamida (510 mg)em dioxano foi agitada a 115oC por 60 horas. A solução de reação foi concentrada, e oresíduo foi particionado entre água e clorofórmio. A camada orgânica foi seca sob MgSO4anidro, e então filtrada, e o filtrado foi concentrado. O resíduo foi purificado porcromatogradia de coluna de sílica gel (CH2OH/clorofórmio = Oa 5%), e recristalizado comEtOH para obter 7-metil-6-{5-[3-(trifluormetil)-4-(2,2,2-trifluor-1-metiletóxi)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}imidazo[1,2-a]piridina (60 mg) como um sólido branco.

Exemplo 2

A uma solução de ácido 3-(trifluormetil)-4-(2,2,2-triflúor-1-metiletóxi)benzóico (349mg) em diclorometano (6 ml_) foram adicionados cloreto de oxalil (333 mg) e umaquantidade de catalítica de DMF sob arrefecimento, seguido por agitação em temperaturaambiente por 1 hora. A solução de reação foi concentrada, e azeótropo com tolueno. Parauma solução do resíduo em THF foram adicioandos N'-hidróxi-2-metil-1H-benzimidazol-6-carboxamida (200 mg) e N-etil-N-isopropil-2-propanoamina (543 mg). A mistura de reaçãofoi agitada em temperatura ambiente por 2 horas. À solução de reação foi adicionada água,seguida por três vezes de extração com EtOAc. A camada orgânica foi combinada, seca emMgS04 anidro, e então filtrada, e o filtrado foi concentrado. O resíduo foi dissolvido emdioxano, seguido por agitação a 100°C por 3 horas. Após arrefecimento em temperaturaambiente, ela foi concentrada sob pressão reduziada para remover o solvente, e purificadaem cromatografia de coluna de sílica gel para obter uma substância oleosa incolor. À umasolução desta substância em EtOAc foi adicionado uma solução de HCI/EtOAc 4 M, seguidopor agitação por poucos minutos, e então a mistura reacional foi concentrada para obtercloridrato de 2-metil-5-{3-(trifluormetil)-4-(2,2,2-triflúor-1-metiletóxi)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}-1H-benzimidazol (239 mg) como um cristal incolor.Exemplo 3

À uma solução de ácido 2-(2,2,2-triflúor-1,1-dimetiletóxi)-3-(trifluormetil)benzoíco(118 mg) e 2-{4-[amino(hidroxiimino)metil]-1H-indol-1-il}acetamida (104 mg) em dioxano (5mL) foi adicionado DIC (69 μΙ_), seguido por agitação em temperatura ambiente por 3 horas,e então aquecimento sob refluxo por 20 horas. A solução de reação foi concentrada, e entãoo resíduo foi adicionado água (15 mL),seguido de extração com clorofórmio (15 mLO. Acamada orgânica foi lavada com uma solução aquosa NaHC02 aquosa saturada e soluçãosalina saturada, seca em MgS04 anidro , filtrada, e o filtrado foi concentrado sob pressãoreduzida. O resíduo foi purificado por HPLC preparativa (coluna: CAPCEL PAK, C18, MG, S-5, 30x50 mm; solvente: 50-90% acetonitrila /10 mM de carbonato de amônia - amônia (pH9.2); 40 mL/min), e cristalizada com éter diisopropílico para obter 2-(4-{5-[4-(2,2,2-triflúor-1,1 -d i meti letóxi )-3-(trif Iuormeti I )fen il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}-1 H-indol-1 -il)acetamida (40 mg)como um sólido branco.

Exemplo 4

A uma suspensão de 60% de NaH (68,0 mg) em DMF foi adicionadociclopropilmetanol (99 mg) a OoC, seguido por agitação na mesma temperatura por 15minutos, e então 5-[{5-[4-flúor-3-(trifluormetil)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}-1H-benzimidazol(120 mg) foi adicionado ao mesmo. E mistura de reação foi agitada em temperaturaambiente por 2 horas, e então adicioanda com água. A mesma foi extraída com EtOAc, e ocamada orgânica foi concentrada. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna desílica gel (CH30H/clorofórmio = Oa 5%) para obter uma substância oleosa. Uma solução dasubstância oleosa em clorofórmio - CH30H foi adicionada com uma solução HCI/dioxano 4M (0,5 mL), e concentrada para obter cloridrato de 5-{5-[4-(ciclopropilmetóxi)-3-(trifluormetil)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}-1H-benzimidazol (20 mg) como um sólido branco.

Análises de HPLC: Condição (TSL-GEL (TOSOH) ODS-80 TM 4,6x150 mm, MeCN:0,01 M de KH2P04 (7:3), 1,0 mL/min, 254 nm) \JR: 7,90 min]

Exemplo 5

A uma solução de 2-(4-{5-[4-flúor-3-(trifluormetil)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}-1H-indol-1-il)acetamida (100 mg) e 2-propanol (35 pL) em DMF (3 mL) foi adicionado 60% NaH (12mg) a OoC, seguido por agitação em temperatura ambiente por 9 horas. A solução dereação foi adicioanda com água (5 mL) para completar a reação, e extraída com umamistura de solvente de clorofórmio: CH30H (8:2). A camanda orgânica foi lavada comsolução salina saturada, seca sob MgS04 anidro, e então filtrada, e o filtrado foiconcentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna desílica gel (clorofórmio: CH30H = 98:2 a 93:7), e cristalizado com dietil éter para obter 2-(4-{5-[4-isopropóxi-3-(trifIuormetil)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}-1 H-indol-1-il)acetamida (25 mg)como um sólido amarelo claro.Exemplo 6

A uma solução de 1,3-difluorpropanol (62 mg) em DMF (2,4 mL) foi adicionado 60%de NaH (19 mg ) a -10°C, seguido por agitação a -10°C por 0,5 hora. À esta mistura dereação foi adicionada 2-{4-[5-(3-cloro-4-fluorfenil)-1,2,4-oxadiazol-3-il]-1H-indol-1-il]acetamida (120 mg) a -10°C, seguida por agitação a -10°C por 3 horas. Após adição deágua à solução de reação, a mistura de reação foi extraída com EtOAc, a camada orgânicafoi lavada com solução salina saturada, seca em MgS04 anidro, e então filtrada, e o filtradofoi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em colunade sílica gel (clorofórmio: CH30H = 100:0 a 95:5) para obter 2-[4-(5-{3-cloro-4-[2-flúor-1-(fluorometil)etóxi]fenil}-1,2,4-oxadiazol-3-il)-1H-indol-1-il]acetamida (76,9 mg) como umsólido branco.

Exemplo 7

A uma solução de 2-{4-[5-(4-flúor-3-metilfenil)-1,2,4-oxadiazol-3-il]-1H-indol-1-il}acetamida (100 mg) e (2R)-1,1,1-trifluorpropano-1-ol (109 mg) em DMF (3 mL) foiadicionado a 60% de NaH (17 mg) a 0°C, seguido por agitação a 80°C por 4 horas. Asolução de reação foi adicionada com água (15 mL) para completar a reação, filtrar, e entãosecar. O pó obtido foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel (clorofórmio:

CH30H = 100:0 a 95:5), e cristalizado com éter diisopropílico para obter 2-[4-(5-{3-metil-4-[(1R)-2,2,2-triflúor-1-metiletóxi]fenil}-1,2,4-oxadiazol-3-il)-1H-1-il]acetamida (70 mg) como umsólido amarelo claro.

Exemplo 8

A uma suspensão de 60% de NaH 43 mg), em DMF (4 mL) foi adicionado 2-propanol (65 mg) a 0°C, seguido por agitação em temperatura ambiente por 20 minutos.Após arrefecimento a 0°C novamente, 2-{4-[5-(3-cloro-4-fluorfenil)-1,2,4-oxadiazol-3-il]-1H-indol-1-il-acetamida (200 mg) foi adicionado a mesma. A mistura reacional foi radiada comum microondas a 60oC por 50 minutos. A solução de reação foi adicionada a uma soluçãoaquosa NH4CI, seguido por agitação, e então o solvente foi evaporado. Apóes adição de umsolvente misturado (4:1) de clorofórmio-CH30H, e suspensão, o sólido foi removido,cromatografia de coluna de sílica gel (clorofórmio: CH30H = 100:0 a 98:2; n-hexano:EtOAc= 0:100) para obter 2-{4-[5-(3-cloro-4-isopropilfenil)-1,2,4-oxadiazol-3-il[-1H-indol-1-iljacetamida (17,5 mg) como um sólido branco.

Exemplo 9

A uma solução de 4-{5-[4-flúor-3-(trifluormetil)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}-1H-indol(300 mg) em THF (1,5 mL) foi adicionada, propano-2-amina (0,75 mL), e após selar o tubo,a solução foi agitada a 50 a 55°C por 40 horas. A mesma foi concentrada sob pressãoreduzida, e então purificada por cromatografia de sílica gel (n-hexano:EtOAc). O sólidoobtido foi dissolvido eni acetona sob aquecimento, e adicionado com n-hexano, e oprecipitado foi filtrado para obter 4-[3-(1H-indol-4-il)-1,2,4-oxadiazol-5-il]-N-isopropil-2-(trifluormetil)anilina (295 mg).

Exemplo 10

A uma mistura de solução de 2-{4-[5-(5,6-dicloropiridin-3-il)-1,2,4-ocadiazol-3-il]-1H-indol-1-il}acetamida (100 mg) em dioxano (2 mL) e NMP (2 mL) foo adicionadoisopropilamina (220 μL), seguido por agitação a 150oC por 1 hora em um recopiente dereação de microonda. A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida, e então oresíduo foi purificado por cromatografia de sílica gel (n-hexano:EtOAc = 40:60 a 0:100), e oresíduo obtido foi suspensso em éter diisopropílico sob aquecimento, e coletado por filtraçãopara obter 2-(4-{5-[5-cloro-6-(isopropilamino)piridin-3-il]-1,2,4-oxadiazol-3-il}-1 H-indol-1 -il)acetamida (62 mg) como pós brancos.

Exemplo 11 (11-1 e 11-2)

A uma solução de 5-{5-[3-(trifluormetil)-4-(2,2,2-trifluor-1-metiletóxi)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}-1 H-benzimidazol (105 mg) em DMF (3,15 mL) foi adicionado a 60% de NaH(31 mg) sob arrefecimento, seguido por agitação na mesma temperatura por 15 minutos, eiodeto de metila (0,22 mL) foi adicionado a mesma, seguida pela agitação em temperaturaambiente por 5 horas. À reação foi adicionada água, seguida por extração com EtOAc, acamada orgânica foi lavada com solução salina, seca sob MgSO4 anidro, e então filtrado, e ofiltrado foi concentrado. O resíduo foi purificado por cromatografia de coluna de sílica gel(produtor automático, clorofórmio:CH30H = 10:1). A substância alvo foi dissolvida em EtOAc(5 mL), adicionada com solução de HCI/EtOAc 4 M (5 mL), e concentrada para produzircerca de 1:1 de dois regioisômeros. A mistura foi cristalizada com acetonitrila para obtercloridrato de 1-metil-5-{5-[3-trifluormetil)-4-(2,2,2-triflúor-1-metiletoxi)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}-1 H-benzimidazol (12,1 mg). O licor mãe foi concentrado para obter cloridrato de 1-metil-5-{5-[3-trifluormetil)-4-(2,2,2-triflúor-1-metiletoxi)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}-1 H-benzimidazol ecloridrato de 1 -metil-6-{5-[3-trifluormetil)-4-(2,2,2-triflúor-1 -metiletóxi)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}-1 H-benzimidazol (70,2 mg) como pós incolores.

Exemplo 12

A uma solução de ^(5-{3-(trifluormetil)-4-[(1S)-2,2,2-triflúor-1-metiletóxi]fenil}-1,2Aoxadiazol-3-il)-1 H-indol (150 mg) em DMF (1,5 mL) foi adicionada 60% de NaH (16 mg) a0oc, seguida por agitação em temperatura ambiente por 0,5 hora. Então, à mistura dereação foi adicionada 2-bromoacetamida (70 mg) novamente a OoC, seguida por agitaçãoem temperatura ambiente por 3 horas. A reação foi adicionada com água, seguida porextração com EtOAc, a camada orgânica foi lavada com com solução slaina saturada, secocom MgS04 anidro e então filtrado, e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. Oresíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel (clorofórmio: CH30H = 100:0a 90:10) para obter cloridrato de 2-[4-(5-{3-(trifluormetil)-4-[(1S)-(2,2,2-triflúor-1-metiletoxi)fenil}-oxadiazol-3-il)-1H-indol-1-il]acetamida (145 mg) como u sólido branco.

Exemplo 13

A uma solução de 4-{5-[3-(trifluometN)-4-(2,2,20triflúor-1-metiletóxi]fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il)indolina (100 mg) em acetonitrila (2,5 mL) foi adicionado K2CO3 (46 mg) e 3-iodopropanamida (124 mg) em temperatura ambiente, seguida por agitação a 80oC por 15horas. À solução de reação foi adicionada uma solução saturada aquosa de NaHCO3,seguida por extração com EtOAc. A camada orgânica foi lavada com solução salinasaturada, seca em MgS04 anidro, e então filtrada, e o filtrado foi concentrado sob pressãoreduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel(clorofórmio:CH30H = 100:0 a 90:10) para obter 3-(4-{5-[3-(trifluormetil)-4-(2,2,2-triflúor-1-metiletóxi)fenil-1,2,4-oxadiazol-3-il}-2,3-diidro-1H-indol-1-il)propanamida (23,6 mg) como umsólido branco.

Exemplo 14

A uma solução de 4-{5-[3-(trifluormetil)-4-(2,2,2-triflúor-1-metiletóxi)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}-1H-indol-3-carboaldeído (150,0 mg) em CH3OH (1,5 mL) foi adicionado asolução de 40% CH30H de CH3NH2 (74,5 mg) a OoC. Após aquecimento em temperaturaambiente, a solução foi agitada em temperatura ambiente por 3 horas. Após confirmar aprodução de um sal imínium, o solvente orgânico foi evaporado sob pressão reduzida. Oresíduo foi dissolvido em EtOH (1,5 mL). A este foi adicionado NaBH4 (12,09 mg) a OoC.Após aquecimento em temperatura ambiente, a solução foi agitada em temperaturaambiente por 15 horas. À solução de reação foi adicionada água (30 mL), seguida por trêsextrações com EtOAc (20 mL). A camada orgânica foi combinada, lavada com soluçãosalina saturada, seca em MgS04 anidro, e então filtrada, e o filtrado foi concentrado. Oresíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel (pirificador automático,clorfórmio: CH30H = 100:0 a 90:10) para obter N-metil-1-(4-{5-[3-(trifluormetil)-4-(2,2,2-triflúor-1 -metiletóxi)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}-1 H-indol-3-il}-1 H-indol-3-il)metanamina (87,4mg) como um sólido branco.

Exemplo 15

A uma solução de 4-{5-[3-(trifluormetil)-4-(2,2,2-trifúor-1-metiletóxi)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-indolina (100 mg) em DMF (1,0 mL) foi adicionado a 60% de NaH (10,9 mg) aOoC, seguido por agitação em temperatura ambiente para 0,5 hora. Cloreto de acetila (24,1pL) foi adicionado a mesma OoC, seguida por agitação em temperatura ambiente por 3horas. À reação de solução foi adicionada água (30 mL), seguido por extração por trêsvezes com EtOAc (20 mL). A camada orgânica foi lavada com solução salina saturada, secaem MgS04 anidro, e então filtrada, e o filtrado foi concentrado. O resíduo foi purificado porcromatografia em coluna de sílica gel (purificador automático, n-hexano: EtOAc = 90:10 a60:40) para obter 1 -acetil-4-{5-[3-trifluormetil)-4-(2,2,2-trifluor-1 -metiletóxi)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}indolina (56,8 mg) como um cristal branco.

Exemplo 16

A uma solução de 4-{5-[3-(trifluometil)-4-(2,2,2-trifluor-1-metiletóxi)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}-1 H-indol (80 mg) em DMF (0,80 mL) foi adicionado 60% de NaH (8,7 mg) aOoC, seguido por agitação em temperatura ambiente por 0,5 hora. Cloreto demetanossulfonila (21,1 pL) foi adicionado a mesma a OoC1 seguido por agitação emtemperatura ambiente por 3 horas. À solução de reação foi adicionada água (30 mL),seguido por extração por três vezes com EtOAc (20 mL). A camada orgânica foi combinada,lavada com solução salina saturada, seca em MgS04 anidro, e então filtrada, e o filtrado foiconcentrado. O filtrado foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel (purificadorautomático, clorofórmio: CH3OH = 100:0 a 98:2) para obter 1-(metilsulfonil)-4-{5-[3-trifluormetil)-4-(2,2,2-trifluor-1-metiletóxi)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}-1 H-indol (16,6 mg) comoum sólido branco.

Exempo 17

4-{5-[3-(trif I uo meti I )-4-(2,2,2-trifIuor [-1 -metiletóxi)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}-1 H-indol(100 mg) foi dissolvido em DMF (1,0 mL) seguido por adição de 60% de NaH (10,9 mg) aOoC1 e agitação em temperatura ambiente por 0,5 hora. Carbonato de Cloreto de Metila(26,3 pL) foi adicionado a mesma a OoC, seguido por agitação em temperatura ambiente por3 horas. À solução de reação foi adicionada água (30 mL), seguido por extração por trêsvezes com EtOAc (20 mL), a camada orgânica foi combinada, lavada com solução salinasaturada, seca em MgSO4 anidro, e então filtrada, e o filtrado foi concentrado. O resíduo foipurificado por cromatografia em coluna de sílica gel (purificador automático, clorofórmio:CH30H = 100:0 a 98:2) para obter metil 4-{5-[3-trifluormetil)-4-(2,2,2-trifluor-1-metiletóxi)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}-1H-indol-1-carboxilato (98,6 mg) como um sólidobranco.

Exemplo 18

A uma solução de ácido 3-(5-{5-[3-(trifluormetil)-4-(2,2,2-triflúor-1-metiletóxi)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}-1H-benzimidazol-2-il)propanóico (23,5 mg) em diclorometano (0,7 mL)foram adicionados em cloreto de oxalil (0,01 mL) e umas poucas gotas de DMF, seguido poragitação em temperatura ambiente por 1 hora. A mistura de reação foi concentrada pararemover o solvente e o reagente. À solução do resíduo em THF foi adicionado NH40H,seguido por ainda agitação por 1 hora. À solução de reação foi adicionada uma soluçãoaquosa de NH4CI, seguida por extração com EtOAc. A camada orgânica foi seca em MgSO4anidro, e o filtado foi concentrado. O resíduo foi purificado por cromatografia em soluna desílica gel (clorofórmio: CH3CO = 10:1) par aobter pós incolores. À uma solução dos pósincolores em EtOAc foi adicionado uma solução de HCI 4N em EtOAc. A mistura de reaçãofoi concentrada e o resíduo foi pulverizada e lavado com IPE e para obter cloridrato de 3-(5-{5-[3-(triflúor-1-metiletóxi)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}-1H-benzimidazol-2-il)propanamida comopós amarelos pálidos.

Exemplo 19

À uma solução de ácido (4-{5-[3-(trifluometil)-4-(2,2,2-triflúor-1-metiletóxi)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}-1H-indol-1-il)acético (150 mg) e HOBt (65 mg) DMF (1,5 mL) foiadicionado EDCI'HCI (69 mg) a OoC1 seguido por agitação em temperatura ambiente por 1hora. Após arrefecimento a OoC novamente, 1-piridin-2-ilmetanamina (39 mg) foi adicionadoao mesmo, seguido por agitação em temperatura ambiente por 15 horas. Para a solução dereação foi adicionada uma solução de NaHCO3 para completar a reação. A mesma foiextraída com EtOAc, a camada orgânica foi lavada com solução salina, seca em MgSO4anidro e então filtrada, e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foipurificado por cromatografia de coluna de sílica gel (clorofórmio: CH3OH = 100:0 a 95:5)para obter N-(piridin-2-ilmetil)-2-(4-{5-[3-trifluormetil)-4-(2,2,2-triflúor-1-metiletoxi)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}-1H-indol-1-il)acetamida (157,8 mg) como um sólido branco. À uma soluçãode N-(piridin-2-ilmetil)-2-(4-{5-[3-trifluormetil)-4-(2,2,2-triflúor-1-metiletóxi)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}-1H-indol-1-il)acetamida (120 mg) em cloreto de metileno (2,4 mL) foiadicionada gota a gota 10 equivalente de HCI/dioxano 4M, seguido por agitação por 1 hora.A mistura de reação foi concentrada sob pressão reduzida, e o pulverizada/lavado com IPE.O sólido obtido foi coletado por filtração, e seco para obter cloridrato de N-(piridin-2-ilmetil)-2-(4-{5-[3-trifluormetil)-4-(2,2,2-triflúor-1-metiletoxi)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}-1H-indol-1-il)acetamida (12 mg) como um sólido branco.

Exemplo 20

À uma solução de ácido (4-{5-[3-(trifluometil)-4-[(1S)-2,2,2-triflúor-1-metiletóxi]fenil}-1,2,4-oxadiazol-3-il)-1H-indol-1-il)acético (100 mg) em DMF (1 mL) foi adicionado CDI (39mg), e após 30 min, metanossulfonamida 2 2,3,4,6,7,8,9,10-octaidropirimida por 15 horas. Amistura de reação foi adicionada com água para completar a reação. Ela foi extraída comEtOAc, a camada orgânica obtida foi lavada com solução salina saturada, seca em MgSO4anidro, e então filtrada e o filtrado foi concentrado. O resíduo foi purificado por cromatografiade coluna de sílica gel (clorofórmio:CH30H = 100:0 a 90:10) para obter N-(metilsulfonil)-2-[4-(5-{3-(trifluormetii)-4-[(1S)-2,2,2,-triflúor-1-metiletóxi]fenil}-1,2,4-oxadiazol-3-il)-1H-indol-1-iljacetamida (56,4 mg) como um sólido branco.

Exemplo 21

POCI3 (158,4 μL) foi adicionado gota a gota à solução de DMF (4 mL) a OoC. Apósaquecimento em temperatura ambiente, ela foi agitada por 0,5 hora. Então, uma solução de4-{5-[3-(trifluorfenil)-4-(2,2,2-triflúor-1 -metiletóxi)fneil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}-1H-indol (500,0mg) em DMF (1 mL) foi adicionado a mesma a OoC, seguindo por agitação em temperaturaambiente por 15 horas. Após arrefecimento a OoC, a solução de reação foi adicionada auma solução de NaOH aquosa 1M para ajuste de seu pH para 9 a 10. Esta solução foiagitada a 100°C por 1 hora. Após ser deixada arrefecer, à solução de reação foi adicionadoágua (30 mL), seguido por três extrações com EtOAc (20 mL). A camada orgânica foicombinada, lavada com solução salina saturada, seca em MgS04 anidro, e então filtrada, eo filtrado foi concentrado. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel(purificador automático, n-hexano, EtOAc = 90:10 a 70:30) para obter 4-{5-[3-(trifluometil)-4-(2,2,2-triflúor-1-metiletóxi)fneil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}-1H-indol-3-carboaldeído (456,7 mg)como um sólido branco.

Exemplo 22

A uma solução misturada de 5-[3-(1H-benzimidazol-6-íl)-1,2,4-oxadiazol-5-il]-2-(2,2,2-triflúor-1-metiletóxi)benzaldeído (83 mg), fosfoto de potássio diidrogenado (421 mg), e2-metil-2-buteno (0,5 mL) em tBuOH (2 mL) e água (0,5 mL) foi adicionado clorito de sódio(187 mg) em temperatura ambiente. A solução de reação misturada foi agitada emtemperatura ambiente por 3 horas, seguida por diluição com água (10 mL), e extração comEtOAc (20 mL). A camada orgânica foi lavada com solução salina saturada, seca emMgSO4 anidro, e então filtrada, e o filtrado foi concentrado. À uma solução do resíduo emdioxano foi adicionado uma solução de HCI-dioxano 4N, seguida por concentração. O póresultante foi recristalizado com IPA (10 mL) para obter cloridrato do ácido 5-[3-(1H-benzimidazol-5-il)-1,2,4-oxadiazol-5-il]-2-(2,2,2-triflúor-1-metiletóxi)benzóico (80 mg) comopós brancos.

Exemplo 23

A uma solução de 2-[2-(metiltio)etil]-5-{5-[3-(trifluormetil)-4-(2,2,2-triflúor-1-metiletóci)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}-1H-benzimidazol (400 mg) em diclorometano (8,0 mL)foi adicionado mCPBA (534 mg), seguido por agitação em temperatura ambiente por 3horas. À mistura de reação foi adicionada uma solução aquosa de Na2S204, seguida poragitação por 1hora. A solução de reação foi extraída por três vezes com EtOAc, e a camadaorgânica foi combinada, seca em MgSO4 anidro, filtrada e concentrada. O resíduo foipurificado por cromatografia de sílica gel (clorofórmio:CH30H = 10:1) para obter umasubstância oleosa amarela. Esta foi dissolvida em EtOAc, e ums solução HCI/EtOAc 4 M foiadicionada a mesma, seguida por concetração. O resíduo foi lavado com IPE para obtercloridrato de 2-[2-(metilsulfonil)etil]-5-{5-[3-(trifluormetil)-4-(2,2,24riflúor-1-metiletóxi)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}-1H-benzimidazol (146 mg) como pós amarelo claro.

Exemplo 24

A uma mistura de reação de 2-but-3-en-1-il-5-{5-[3-(trifluormetil)-4-(2,2,2-triflúor-1-metiletóxi)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}-1H-benzimidazol (200 mg) em acetona (4 mL) e água (1mL) foram adicionados tetraoxoósmio (51 mg) e 4-óxido de 4-metilmorfolina (94 mg),seguido por agitação por uma noite. A mistua de reação foi filtrada, e o filtrado foi adicionadoa uma solução de tiosulfato de sódio aquoso seguido por agitação por 1 hora. A solução foiextraída com clorofórmio, e a camada orgânica foi concentrada. O resíduo foi purificado porcromatografia em soluna de sílica gel (clorofórmio CH3OH), e concentrado, e o pó incolorobtido foi adicionado com uma solução de HCI em etanol, e dissolvido no mesmo, seguidopor concentração. O resíduo foi pulverizada/lavado com éter diisopropílico para obtercloridrato de 4-(5-{5-[3-(trifluormetil)-4-(2,2,2-triflúor-1 -metiletóxi)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}-1 H-benzimidazol-2-il)burano-1,2-diol (102,3 mg).

Exemplo 25

A uma solução de 3-(4-{5-[3-(trifluometil)-4-(2,2,2-triflúor-1-metiletóxi)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}-2,3-diidro-1H-indol-1-il)propanamida (100 mg) em clorofórmio (1 mL) foiadicionado dióxido de manganês (67,6 mg), seguido por refluxo por 15 horas. A solução dereação foi deixada arrefecer em temperatura ambiente, e filtrado através de Celite pararemover o dióxido de manganês. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduofoi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel (clorofórmio: CH30H = 100:0 a90:10) para obter 3-(4-{5-[3-(trifluometil)-^(2,2,2-triflúor-1-metiletóxi)fenil]-1,2,4-oxadiil}-2,3-diidro-1H-indol-1-il)propanamida (46,3 mg).

Exemplo 26

A uma solução de 4-{5-[3-(trifluometil)-4-(2,2,2-triflúor-1-metiletilóxi)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}-1 H-indol (100 mg) em AcOH (3 mL) foi adicionado lentamente cianoborato desódio (29 mg). A mistura de reação foi agitada em temperatura ambiente por 2 horas. Amistura de reação foi disluída com água, alcalinizada com solução de NaOH aquosa 1 M, eextraída com EtOAc. A camada orgânica foi lavada com solução salina saturada, seca emMgS04 anidro, e então filtrada, o filtrado foi concentrado, e o resíduo foi purificado porcromatografia em coluna de sílica gel (n-hexano:EtOAc = 90:10 a 75:25), e lavado com n-hexano para obter 4-{5-[3-(trifluometil)-4-(2,2,2-triflúor-1-metiletilóxi)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-iljindolina (90 mg) como um sólido amarelo claro.

Exemplo 27

A uma solução de 5-[3-(1H-benzimidazol-6-il)-1,2,4-oxadiazol-5-il]-2-(2,2,2-triflúor-1-metiletóxi)benzadeído (80 mg) em etanol (3 mL) foi adicionado NaBH4 (9 mg) a OoC. Apósagitar em temperatura ambiente por 0,5 hour, uma solução NH4CI saturado (10 mL) foiadicionado a mesma, seguida por extração com EtOAc (20 mL). A camada orgânica foilavada com solução salina saturada, seca em MgSO4 anidra, e então filtrada, e o filtrado foiconcentrado. À uma solução do resíduo (78 mg) em dioxano foi adicionada uma soluçãoHCI/dioxano 4M, seguido por concentração. O pó resultante foi recristalizado com IPA (10mL) para obter cloridrato de [5-[3-(1H-benzimidazol-5-il)-1,2,4-oxadiazol-5-il]-2-(2,2,2-triflúor-1-metiletilóxi)fenil]metanol (70 mg) como pós brancos.

Exemplo 28Uma solução ;de 5-metil-6-{5-[3-triflúor-(4-2,2,2-triflúor-1-metiletóxi)fenrl]-1,2,4-oxadiazol-3-il}imidazo[1,2-a]piridina (120 mg) e NCS em THF/EtOH (1/1) foi agitado a 80oCpor uma noite. A mesma foi concentrada, e o resíduo obtido foi purificado por cromatografiaem coluna de sílica gel (CH30H/clorofórmio 0 a 5%) para obter 3-cloro-5-metil-6-{5-[3-(trifluormetil)-4-(2,2,2-triflúor-1-metiletóxi)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}imidazo[1,2-a]piridina (45mg) como um sólido amarelo claro.

Exemplo 29

A uma solução de 5-{5-[3-(trifluometil)-4-(2,2,2-triflúor-1-metiletilóxi)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}-imidazo[1,2-a]piridina (150 mg) em etanol foi adicionado NCS (67 mg) emtemperatura ambiente, seguido por agitação a 80oC por 15 horas. À solução de reação foiadicionado água, seguido por filtração com EtOAc. A camada orgânica foi lavada comsolução salina, seca em MgS04 anidro, e então filtrada, e o filtrado foi concentrado. Ele foipurificado por cromatografia em coluna de síliva gel (n-hexano:EtOAc = 90:10 a 75:25) paraobter 3-cloro-5-{5-[3-(trifluometil)-4-(2,2,2-triflúor-1-metiletilóxi)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}-imidazo[1,2-a]piridina (110,4 mg) como um sólido branco. Para uma solução de -cloro-5-{5-[3-(trifluometil)-4-(2,2,2-triflúor-1-metiletiloxi)fenil]-1,2,4-oxidiazol-3-il{-imidazol[1,2-a]piridina(100 mg) em cloreto de metilano (2 ml) foi adicionado lentamente 10 equivalentes deHCI/dioxano 4M em temperatura ambiente. Após agitação em temperatura ambiente comoser fosse por 1 hora, ela foi concentrada sob pressão reduzida. Ela foi pulverizada/lavadacom éter diisopropílico, e então coletada por filtração para obter cloridrato de 3-cloro-5-{5-[3-(trifluometil)-4-(2,2,2-triflúor-1-metiletilóxi)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}-i(102,6 mg) com oum sólido branco.

Exemplo 30

1-(2-{[terciário-butildimetilsilil]óxi}etil)-445-[3-(trifluormetil)-4-(2,2,2-triflmetiletóxi)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}-1 H-indol (960 mg) foi dissolvido em THF (1,2 mL), eTBAF (150 μι.) foi adicionado ao mesmo a OoC, seguido por agitação em temperaturaambiente por 3 horas. Para a solução de reação foi adicionada água (30 mL), seguido porextração três vezes com EtOAc (20 mL). A camada orgânica foi combinada, lavada comsolução salina saturada, seca em MgS04 anidro, e então filtrado, a o filtrado foiconcentrado. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel (purificadorautomático, clorofórmio: CH30H = 100:0 a 90:10) para obter 2-(4-{5-[3-(trifluormetil)-4-(2,2,2-triflúor-1-metiletóxi)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}-1H-indol)etanol (36,5 mg) como umsólido branco.

Exemplo 31

A uma solução de terciário-butil 4-{[4-(5-{3-(trifluormetil)-4-[(1S)-2,2,2-triflúor-1-metiletóxi)fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il}-1 H-indol-1 -il]acetil}piperazina-1 -carboxilato (70,7 mg)em cloreto de metileno (1 mL) foi adicionado lentamente 10 equivalentes de HCI/dioxano 4M1 seguido por agitação em temperatura ambiente por 3 horas. Após 5 horas, a solução rereação foi concentrada. Com adição de éter, um sólido branco foi precipitado. O solidobranco foi lavado com IPE para obter cloridrato de 1-(2-oxo-2-piperazin-1-iletil)-4-(5-{3-(trifluormetil)-4-[(1 S)-2,2,2-triflúor-1-metiletóxi]fenil}-1,2,4-oxadiazol-3-il)-1 H-indol (58,9 mg)como um sólido vermelho claro.

Nas seguintes tabelas, a fórmula estrutural dos compostos do Exemplo sãomostradas. Ex: Exemplo No.

Tabela 54

<table>table see original document page 66</column></row><table><table>table see original document page 67</column></row><table>

Tabela 55

<table>table see original document page 67</column></row><table><table>table see original document page 68</column></row><table><table>table see original document page 69</column></row><table>

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Tabela 58

<table>table see original document page 70</column></row><table><table>table see original document page 71</column></row><table>

Tabela 59

<table>table see original document page 71</column></row><table><table>table see original document page 72</column></row><table>

Tabela 60

<table>table see original document page 72</column></row><table><table>table see original document page 73</column></row><table>

Tabela 61

<table>table see original document page 73</column></row><table><table>table see original document page 74</column></row><table><table>table see original document page 75</column></row><table>Tabela 64

<table>table see original document page 76</column></row><table><table>table see original document page 77</column></row><table>

Tabela 65

<table>table see original document page 21</column></row><table><table>table see original document page 78</column></row><table>

Tabela 66

<table>table see original document page 78</column></row><table><table>table see original document page 79</column></row><table>

Tabela 67

<table>table see original document page 79</column></row><table><table>table see original document page 80</column></row><table><table>table see original document page 81</column></row><table><table>table see original document page 82</column></row><table><table>table see original document page 83</column></row><table>

Tabela 70

<table>table see original document page 83</column></row><table><table>table see original document page 84</column></row><table><table>table see original document page 85</column></row><table>

Tabela 72

<table>table see original document page 85</column></row><table><table>table see original document page 86</column></row><table>

Tabela 73

<table>table see original document page 86</column></row><table><table>table see original document page 87</column></row><table><table>table see original document page 88</column></row><table><table>table see original document page 89</column></row><table><table>table see original document page 90</column></row><table>

Tabela 76

<table>table see original document page 90</column></row><table><table>table see original document page 91</column></row><table><table>table see original document page 92</column></row><table>Tabela 78

<table>table see original document page 93</column></row><table><table>table see original document page 94</column></row><table>

Tabela 79

<table>table see original document page 94</column></row><table><table>table see original document page 95</column></row><table>

Tabela 80

<table>table see original document page 95</column></row><table><table>table see original document page 96</column></row><table>

Tabela 81

<table>table see original document page 96</column></row><table><table>table see original document page 97</column></row><table><table>table see original document page 98</column></row><table>Tabela 83

<table>table see original document page 99</column></row><table><table>table see original document page 100</column></row><table><table>table see original document page 101</column></row><table>

Nas seguintes tabelas, os dados de RMN dos compostos dos Exemplos sãomostradas. Tetrametilsilano é utilizado como um padrão interno, e a menos que de outraforma especificamente mencionado, δ (ppm) dos sinais em 1H-RMN utilizando DMSO-d6como uma medida do solvente é mostrado. Ref-Ex representa Exemplo No. (Ex), que podeser referido à preparação.

O composto da presente invenção é útil como um medicamento, e em particular,para prevenção e/ou tratamento de rejeição no transplante de um órgão, medula óssea, outecido, uma doença autoimune, ou semelhantes, desde que ele tenha atividade agonista emS1P1.

Claims

1. Composto representado pela formula (I):<formula>formula see original document page 102</formula>ou um sal faramaceuticamente aceitável do mesmo,CARACTERIZADO pelo fato de que os símbolos significam como segue;o anel A é<formula>formula see original document page 102</formula>X é uma ligação simples, -CH2-, -NR3-, -O-, -S-, -S(=0)- ou -S(=0)2-,R1 é -H; halogênio; arila; heteroarila; cicloalquilaC3-C8); cicloalquenila(C3-C8); hete-rocicloalquila(C3-C8); ou alquila(Ci-C6) ou alquenila(C2-C8), cada um dos quais pode conterhalogênio, -C0NH2, aril ou cicloalquila(C3-C8), como um substituinte,R2 é -CN1 -OaIquiIa(C1-C6)1 -C(=0)H, halogênio; ou alquila(CrC6) que pode sersubstituído com halogênio ou -OH,R3 é -H; em que R3 pode formar morfolina, 1-pirrolidinil ou 3,4-deidropipelidin-1-il,junto com R1 e nitrogênio,em que, quando -X- é uma ligação simples, R1 e R2 podem em combinação formarum anel de 5 membros e ainda conter alquila(CrC6), como um substituinte,R4 é um seguinte anel;<formula>formula see original document page 103</formula>em que qualquer uma das ligações a partir do anel é ligada a um anel oxadiazol,R5 é -H; alquila(C1-C6) que pode ser substituído com pelo menos um grupo selecio-nado do grupo consistindo de -CN, -C(=O)NRxRY, -NHRx, -SRx, -S(=O)2Rx, e -ORx1 (este édefinido como R0-alquila(C1-C6); R0-alquila(C1-C6)-O-; R0-alquila(C1-C6)-C(=O)-; R0- alquila(C1-C6)-S(=O)2-; R0-O-alquila(C1-C6)-; R0-C(=O)-alquila(C1-C6)-; R0-S(=O)2-alquila(C1-C6)-; -alquenila(C2-C6)-; -C(=O)H; -ORx; -S(=O)2Rx; halogênio; =O; -NRxRy; -C(=O)NRxRY;Rx e Ry podem ser os mesmos com ou diferente um do outro, e é -H; ou alquila(C1-C6) que pode ser substituído com -OH,-NH2 que pode ser protegido com um grupo protetorou heteroarila, em que Rx pode formar Heterociclolalquila(C3-C8), junto com Ry ou nitrogênio.

2. Composto, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de serrepresentado pela fórmula (II):<formula>formula see original document page 103</formula>ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

3. Composto, de acordo com a reivindicação 2, ou sal farmaceuticamente aceitáveldo mesmo CARACTERIZADO pelo fato de que R1 é alquila(C1-C6) que pode conter halogê-nio como um substituinte.

4. Composto, de acordo com a reivindicação 2, ou sal farmaceuticamente aceitáveldo mesmo CARACTERIZADO pelo fato de que R2 é -CN, halogênio; ou alquila(C1-C6) quepode ser substituído com halogênio ou -OH.

5. Composto, de acordo com a reivindicação 2, ou um sal farmaceuticamente acei-tável do mesmo CARACTERIZADO pelo fato de que R5 é -H; ou alquila(CrC6) que podeser substituído com pelo menos um -C(=0)NRxRY.

6. Composto, de acordo com a reivindicação 2, ou um sal farmaceuticamente acei-tável do mesmo CARACTERIZADO pelo fato de queX é uma ligação simples, -CH2- ou -0-.

7. Composto, de acordo com a reivindicação 2, ou um sal farmaceuticamente acei-tável do mesmo CARACTERIZADO pelo fato de que R4 é um seguinte anel;<formula>formula see original document page 104</formula>em que qualquer uma das ligações a partir do anel de R4 está ligado a um anel oxi-dazoL

8. Composto CARACTERIZADO pelo fato de ser o seguinte:cloridrato de 5-(5-[3-(trifluormetil)-4-[(1S)-2,2,2-trifluor-1-metiletóxi]fenil)-1,2,4-oxadiazol-3-il)-1H-benzimidazol;cloridrato de 5-(5-[3-(trifluormetil)-4-[(1 R)-2,2,2-trifluor-1-metiletóxi]fenil)-1,2,4-oxadiazol-3-il)-1H-benzimidazol;cloridrato de 6-{5-[3-bromo-4-(2,2,2-trifluor-1-metiletóxi]fenil)-1,2,4-oxadiazol-3-il)-1H-benzimidazol;cloridrato de 5-(5-[4-fenóxi-3-(trifluormetil)fenil)-1,2,4-oxadiazol-3-il)-1 H-benzimidazol;2-(4-{5-[3-(trifluormetil)-4-(2,2,2-trifluor-1-metiletóxi)fenil)-1,2,4-oxadiazol-3-il}-1 H-indol-1-il)acetamida;cloridrato de 4-{5-[3-(trifluormetil)-4-(2,2,2-triflúor-1-metiletóxi)fenil)-1,2,4-oxadiazol-3-il)-1H-pirroI[2,3-b]piridina;cloridrato de 6-{5-[3-(difluormetil)-4-(2,2,2-trifluor-1-metiletóxi)fenil)-1,2,4-oxadiazol-3-il)-1H-benzimidazol;2-(4-{5-[3-cloro-4-(2,2,2-triflúor-1-metiletóxi)fenil)-1,2,4-oxadiazol-3-il}-1H-indol-1-il)acetamida;2-(4-{5-[4-ciclopentil-3-(trifluormetil)-fenil]-1,2,4-oxadiazol-3-il)-1 H-indol-1 -il)acetamida;2-[4-(5-{3-(trifluormetil)-4-[(1S)-(2,2,2-triflúor-1-metiletóxi]fenil)-1,2,4-oxadiazol-3-i1H-indol-1-il)acetamida;-2-[4-(5-{4-[2-flúor-1 -(fluormetil)etóxi]-3-(trifluormetil)fenil-1,2,4-oxadiazol-3-il)-1 H-indol-1-il)acetamida;-2-(4-{5-[3-ciano-4-(2,2,2-trifluor-1 -metiletóxi]fenil)-1,2,4-oxadiazol-3-il)-1 H-indol-1 -il)acetamida;N-(2-hidroxietil)-2-[4-(5-{3-(trifluorTnetil)-4-[(1S)-(2,2,2-triflúor-1-metiletóx-1,2,4-oxadiazol-3-il)-1 H-indol-1 -il)acetamida;-2-[4-(5-{5-cloro-6-[(1SH2,2,2-triflúor-1-metiletóxi]piridina-3-il]-1,2^-oxadiazo-1 H-indol-1 -il)acetamida;-2-[4-(5-{5-cloro-6-[2-flúor-1 -(fluormetil)etóxi]piridin-3-il)-1,2,4-oxadiazol-3-il)-1 H-indol-1-il)acetamida;-2-[4-(5-{3-cloro-4-[2-flúor-1-(fIuormetil)etóxi]fenil)-1,2,4-oxadiazol-3-il)-1 H-indol-1 -il)acetamida;-2-[4-(5-{3-metil-4-[(1S)-2,2,2-triflúor-1-metiletóxi]fenil)-1,2,4-oxadiazol-3-iO^-1-il)acetamida;-2-(4-{5-[4-isopropil-3-(trifluormetil)fenil)-1,2,4-oxadiazol-3-il)-1 H-indol-1 -il)acetamida;-2-{4-[5-(3-cloro-4-isopropoxifenil)-1,2,4-oxadiazol-3-il)-1 H-indol-1-il)acetamida;N-(2-hidroxietil)-2-[4-(5-{3-metil-4-[(1S)-2,2,2-triflúor-1-metiletóxi]fenil)-1,2,4-oxadiazol-3-il)-1 H-indol-1 -il)acetamida;N-(2-hidroxietil)-2-(4-{5-[4-isopropóxi-3-(trifluormetil)fenil)-1,2,4-oxadiazol-3-il)-^indol-1-il)acetamida; e-2-[4-(5-{3-cloro-4-[2-flúor-1 -(fluormetil)etóxi]fenil}-1,2,4-oxadiazol-3-il)-1 H-indol-1 -il]-N-(2-hidroxietil)acetamida.

9. Composição farmacêutica CARACTERIZADA pelo fato de compreender umcomposto conforme descrito em qualquer uma das reivindicações 1 a 8, como um ingredien-te ativo.

10. Composição, de acordo com quaisquer uma das reivindicações 1 a 8,CARACTERIZADA pelo fato de ser utizada para o tratamento e/ou prevenção de rejeiçãoem transplantes de órgão/tecido em humano ou animal, doença autoimune, esclerose múlti-pla, reumatismo, psoríase, asma, atrofia, doença de Alzheimer, tumor ou leucemia.

11. Agente CARACTERIZADO pelo fato de compreender o composto conformedescrito em quaisquer uma das reivindicações 1 a 8 como um ingrediente ativo.

12. Agente CARACTERIZADO pelo fato de compreender o composto conformedescrito em qualquer uma das reivindicações 1 a 8 como um ingrediente ativo, e um veículoou excipiente farmaceuticamente aceitável.

13. Composição farmacêutica CARACTERIZADA pelo fato de compreender o com-posto conforme descrito em quaisquer uma das reivindicações 1 a 8, que é agonista S1Pi.

14. Método para tratamento e/ou prevenção de rejeição no transplante de ór-gão/medula óssea/tecido em humano ou animal, doença enxerto-versus-hospedeiro, artritereumatóide, esclerose múltipla, Iupus eritematoso sistêmico, síndrome nefrótica, encefalo-meningite, miastenia gravis, pacreatite, hepatite, nefrite, diabetes, asma, dermatite atópica,doença inflamatória do intestino, aterosclerose, repercussão de injuria isquêmica, câncer ouleucemia, o referido método CARACTERIZADO pelo fato de compreender a administraçãodo composto conforme descrito em quaisquer uma das reivindicações 1 a 8 a um pacientesofrendo de doença acima mencionada.

15. Uso do composto, de acordo com quaisquer das reivindicações 1 a 8,CARACTERIZADO pelo fato de ser para fabricação de um agente para tratar e/ou prevenirrejeição no transplante de órgão/medula óssea/tecido em humano ou animal, doença enxer-to-versus-hospedeiro, artrite reumatóide, esclerose múltipla, Iupus eritematoso sistêmico,síndrome nefrótica, enfalomeningite, miastenia gravis, pancreatite, hepatite, nefrite, diabe-tes, asma, dermatite atópica, doença inflamatória do intestino, ateroesclerose, repercussãode injuria isquêmica, câncer ou leucemia.

16. Uso do composto, de acordo com quaisquer das reivindicações 1 a 8,CARACTERIZADO pelo fato de ser para tratar e/ou prevenir rejeição no transplante de ór-gão/medula óssea/tecido em humano ou animal, doença enxerto-versus-hospedeiro, artritereumatóide, esclerose múltipla, Iupus eritematoso sistêmico, síndrome nefrótica, enfalome-ningite, miastenia gravis, pancreatite, hepatite, nefrite, diabetes, asma, dermatite atópica,doença inflamatória do intestino, ateroesclerose, injuria de repercussão isquêmica, câncerou leucemia.

17. Composição farmacêutica CARACTERIZADA pelo fato de compreender o com-posto conforme descrito em quaisquer das reivindicações 1 a 8, para tratar e/ou prevenirrejeição no transplante de órgão/medula óssea/tecido em humano ou animal, doença enxer-to-versus-hospedeiro, artrite reumatóide, esclerose múltipla, Iupus eritematoso sistêmico,síndrome nefrótica, enfalomeningite, miastenia gravis, pancreatite, hepatite, nefrite, diabe-tes, asma, dermatite atópica, doença inflamatória do intestino, ateroesclerose, injuria de re-percussão isquêmica, câncer ou leucemia.