BRPI0712771A2 - sais de n-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1h-indol-3-il)etil]amino] metil]fenil]-2e-2-propenamida - Google Patents

Abstract

SAIS DE N-HIDRóXI-3-[4-[[[2-(2-METIL-1H-INDOL-3-IL)ETIL]METIL]FENIL]- 2E-2-PROPENAMIDA. A presente invenção refere-se a sais de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-ii)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-pro penamida que são preparados e caracterizados.

Description

Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "SAIS DE N- HIDRÓXI-3-[4-[[[2-(2-METIL-1H-INDOL-3-IL)ETIL]AMINO] METIL]FENIL]- 2E-2-PROPENAMIDA"

Antecedentes da Invenção

Campo da Invenção

A presente invenção refere-se aos sais de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2- metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida, assim como às suas composições farmacêuticas compreendendo e métodos de tratamento usando-os.

Técnica Antecedente Relacionada

O composto N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3- il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida (alternativamente, N-hidróxi-3-(4- {[2-(2-metil-1H-indol-3-il)-etilamino]-metil}-fenil)-acrilamida) possui a fórmula (I):

<formula>formula see original document page 2</formula>

como descrito na WO 02/22577. As propriedades farmacológicas valiosas são atribuídas a este composto; assim, ele pode ser usado, por exemplo, como um inibidor da histona deacetilase útil na terapia para doenças que respondem à inibição da atividade de histona deacetilase. A WO 02/22577 não descreve qualquer sal específico ou hidratos ou solvatos de sal de N- hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2- propenamida.

Sumário da Invenção

A presente invenção é direcionada aos sais de N-hidróxi-3-[4- [[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida. As moda- lidades preferidas da presente invenção são direcionadas aos sais de clori- dreto, lactato, maleato, mesilato, tartarato, acetato, benzoato, citrato, fumara- to, gentisato, malato, malonato, oxalato, fosfato, propionato, sulfato, succina- to, sódio, potássio, cálcio e zinco de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3- il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida. A invenção é ainda direcionada às composições farmacêuticas compreendendo (a) uma quantidade terapeuticamente eficaz de um sal da invenção de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E- 2-propenamida; e (b) pelo menos um portador, diluente, veículo ou excipien- te farmaceuticamente aceitável.

A presente invenção também é direcionada a um método de tra- tamento de um doença que respondes a uma inibição da atividade de histo- na deacetilase compreendendo a etapa de administração a um indivíduo com necessidade de tal tratamento de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um sal da invenção de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3- il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida.

Breve Descrição dos Desenhos

A figura 1 apresenta os padrões de difração em pó de raio χ para as formas A, B, C, Ha e Hb da base livre de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H- indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida.

A figura 2 apresenta o padrão de difração em pó de raio χ para o sal de cloridreto de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-índol-3- il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida.

As figuras 3A, 3B e 3C mostram os padrões de difração em pó de raio χ para as formas A, Ha e SA, respectivamente, do sal de DL-lactato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2- propenamida. As figuras 3D e 3E apresentam os padrões de difração em pó de raio χ for os sais de L-lactato e D-lactato anídricos, respectivamente, de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2- propenamida.

A figura 4 apresenta os padrões de difração em pó de raio χ para as formas A e Ha do sal de maleato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3- il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida.

A figura 5 apresenta os padrões de difração em pó de raio χ para as formas A, B e C do sal de hemitartarato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H- indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida.

A figura 6 apresenta os padrões de difração em pó de raio χ para as formas A e B do sal de mesilato (metanossulfonato) de N-hidróxi-3-[4-[[[2- (2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida.

A figura 7 apresenta os padrões de difração em pó de raio χ para as formas A e Sa do sal de acetato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3- il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida.

A figura 8 apresenta os padrões de difração em pó de raio χ para as formas A, Sa e Sb do sal de benzoato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H- indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida de acordo com a presente invenção.

A figura 9 apresenta os padrões de difração em pó de raio χ para o sal de citrato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3- il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida de acordo com a presente invenção.

A figura 10 apresenta os padrões de difração em pó de raio χ para as formas A, B e Ha do sal de hemifumarato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2- metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida.

A figura 11 apresenta os padrões de difração em pó de raio χ para o sal de gentisato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3- il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida de acordo com a presente invenção.

A figura 12 apresenta os padrões de difração em pó de raio χ para as formas A e Sa do sal de hemimalato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil- 1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida de acordo com a pre- sente invenção.

A figura 13 apresenta os padrões de difração em pó de raio χ para o sal de malonato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3- il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamída de acordo com a presente invenção.

A figura 14 apresenta os padrões de difração em pó de raio χ para o sal de oxalato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3- il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida de acordo com a presente invenção. A figura 15 apresenta os padrões de difração em pó de raio χ para as formas A, SA, Sb e Ha do sal de fosfato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2- metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida.

A figura 16 apresenta os padrões de difração em pó de raio χ para as formas A e Sa do sal de propionato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1 H- indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida.

A figura 17 apresenta os padrões de difração em pó de raio χ para as formas A e Sa do sal de sulfato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H- indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida.

A figura 18 apresenta os padrões de difração em pó de raio χ para as formas A, B, Sa e Ha do sal de hemissuccinato de N-hidróxi-3-[4-[[[2- (2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida.

Descrição Detalhada da Invenção

Como aqui usado, "sal" refere-se a um composto preparado pela reação de um medicamento ácido ou básico orgânico com um ácido ou base mineral ou orgânico farmaceuticamente aceitável; como aqui usado, "sal" inclui hidratos e solvatos de sais produzidos de acordo com esta invenção. Os ácidos ou bases minerais ou orgânicos farmaceuticamente aceitáveis exemplares são como listados nas Tabelas 1-8 em Handbook of Pharmaceu- tical Salts, P.H. Stahl and C.G. Wermut (eds.), VHCA, Zurich 2002, pp. 334- 345. Como aqui usado, "polimorfo" refere-se a uma "modificação de cristal" ou "forma polimórfica" ou "forma cristalina" distinta, que difere de uma outra com respeito ao padrão de difração em pó de raio x, as propriedades fisico- químicas e/ou farmacocinéticas, e a estabilidade termodinâmica.

A primeira modalidade da presente invenção é direcionada aos sais de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2- propenamida. Nas modalidades preferidas, o sal é selecionado dos sais de cloridreto, lactato, maleato, mesilato (metanossulfonato), tartarato, acetato, benzoato, citrato, fumarato, gentisato, malato, malonato, oxalato, fosfato, propionato, sulfato, succinato, sódio, potássio, cálcio e zinco de N-hidróxi-3- [4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida. As mo- dalidades particularmente preferidas da presente invenção são direcionadas aos sais de cloridreto, lactato (formas de DL-lactato1 L-lactato, D-lactato; a- nídricas, hidrato e solvato), maleato, mesilato e hemitartarato de N-hidróxi-3- [4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida.

Conseqüentemente, a presente invenção é direcionada ao sal de cloridreto de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E- 2-propenamida, preferivelmente ao 1:1 sal de cloridreto de N-hidróxi-3-[4- [[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida. O sal de cloridreto possui uma boa solubilidade aquosa de 2,4 mg/mL e uma boa taxa de dissolução intrínseca. Também apresenta solubilidade elevada em meta- nol e solubilidade considerável em outros solventes orgânicos comuns. É produzido como um polimorfo anídrico/não-submetido a solvato único exce- lentemente cristalino com uma temperatura de decomposição de cerca de 235,7°C. Ele é não-higroscópico (0,32%) e é a forma predominante de N- hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida na presença do íon de cloreto em altas concentrações. Nenhum polimorfo adicional é detectado após o equilíbrio à temperatura ambiente; o sal de clo- ridreto se converte na base livre em um tamponante de fosfato (pH = 6,8). O XRPD do sal de cloridreto de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3- il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida é apresentado na figura 2.

A presente invenção é ainda direcionada ao sal de lactato de N- hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2- propenamida, preferivelmente um sal de lactato 1:1 de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2- metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida, um sal de mo- noidrato lactato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]ami- no]metil]fenil]-2E-2-propenamida, ou um sal de lactato anídrico de N-hidróxi- 3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida. Em uma modalidade preferida da invenção, o sal de lactato é um sal de DL- lactato, mais preferivelmente o sal de monoidrato DL-lactato 1:1 de N- hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida ou o sal de DL-lactato anídrico 1:1 de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3- il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida. As formas polimórficas A, Ha e Sa para o sal de DL-lactato podem ser vistas nos padrões de XRPD mostrados nas figuras 3A-3C, respectivamente. O sal de DL-lactato possui uma exce- lente solubilidade aquosa e uma boa dissolução intrínseca. A forma polimór- fica A do sal de DL-lactato (sal de DL-lactato anídrico) se funde e se decom- põe ao redor de 183 a 186°C e é ligeiramente higroscópica com uma perda na secagem (LOD) de 0,2% até 120°C. A forma A é mais estável em sol- ventes orgânicos e em água do que as outras formas do sal de DL-lactato. Sob a maioria das circunstâncias, a forma A não se converte em qualquer outra forma, embora após o equilíbrio em pH 1 e 2, o sal de cloreto seja for- mado e em 0°C e 10°C e na mistura de acetona/água, a forma A foi obser- vada junto da forma Ha do sal de DL-lactato. A forma Ha do sal de DL-lactato (sal de monoidrato DL-lactato) se funde e se decompõe ao redor de 120°C e é ligeiramente higroscópico com uma LOD de 0,4% até 110°C, 3,0% até 130°C e 4,4% até 155°C (com degradação). Sob a maioria das circunstân- cias, a forma Ha lentamente se converte na forma A, embora após o equilí- brio em pH 1 e 2, o sal de cloreto seja formado. Após o equilíbrio em meta- nol, a forma Ha do sal de DL-lactato se converte para formar Sa que é um solvato de monometanol do sal de DL-lactato. A Forma Sa se funde e se de- compõe ao redor de 123°C com uma LOD de 5,9% até 140°C (com degra- dação).

Em uma outra modalidade preferida da presente invenção, o sal de lactato é o sal de L-(+)-lactato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3- il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida; mais preferivelmente, o sal de lactato é o sal anídrico de L-(+)-lactato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H- indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida. O padrão de XRPD para o sal de L-(+)-lactato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3- il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida é mostrado na figura 3D. A fusão e a decomposição ambas ocorrem ao redor 184,7°C para o sal de L-(+)- lactato da forma de anidrato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3- il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida. Em mais uma outra modalidade preferida da presente invenção, o sal de lactato é o sal de D-(-)-lactato de N- hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2- propenamida; mais preferivelmente, o sal de lactato é o sal de D-(-)-lactato anídrico de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E- 2-propenamida. O padrão de XRPD para o sal de D-(-)-lactato de N-hidróxi- 3-[4-[[[2-(2-metil-1 H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida é a- presentado na figura 3E. A fusão e a decomposição ambas ocorrem ao redor 184,1°C para o sal de D-(-)-lactato da forma de anidrato de N-hidróxi-3-[4- [[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida.

A presente invenção é ainda direcionada ao sal de maleato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2- propenamida, preferivelmente o sal de maleato 1:1 de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2- metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida. O ácido maléico é o único agente de formação de sal de ácido dicarboxílico que forma um sal 1:1 com N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-N)etil]amino]metil]fenil]-2E-2- propenamida. As formas polimórficas A e Ha para o sal de maleato podem ser vistas nos padrões de XRPD mostrados na figura 4. A forma A do sal de maleato, após o aquecimento, se decompõe sem fusão ao redor de 177°C. Sua LOD é menor do que 0,2% a 150°C, e é não-higroscópico. O sal de maleato possui uma boa solubilidade aquosa de 2,6 mg/ml e uma boa disso- lução intrínseca. Ele apresenta solubilidade elevada em metanol e etanol e considerável solubilidade em outros solventes orgânicos comuns. A forma Ha do sal de maleato, um hidrato de forma A, após aquecimento, se decom- põe sem fusão ao redor de 150°C. A LOD é ao redor de 6,0% a 100°C.

A presente invenção é ainda direcionada ao sal de mesilato (ou metanossulfonato) de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3- il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida, preferivelmente o sal de mesilato 1:1 de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2- propenamida. As formas AeB para o sal de mesilato podem ser vistas nos padrões de XRPD apresentados na figura 5. A forma A do sal de mesilato após o aquecimento, se decompõe sem fusão ao redor de 192°C. Sua LOD é menor do que 0,2% a 150°C, e a forma A é muito ligeiramente higroscó- pica (menos do que 0,35% de umidade em 85% r.h.). O sal de mesilato possui uma excelente solubilidade aquosa de 12,9 mg/ml e uma taxa de dis- solução intrínseca elevada. Ele possui solubilidade elevada em metanol e etanol e solubilidade apreciável nos solventes orgânicos remanescentes. Após equilíbrio, a forma A se converte na forma B em água, com o sal de cloridreto em HCI a 0,1 N, e com a base livre em um tamponante de fosfato (pH = 6,8). A forma B do sal de mesilato pode ser obtida a partir da reação em acetato de etila à temperatura ambiente, com subseqüente aquecimento da suspensão em 50 0C ou a partir da conversão da forma A em água. O sal de mesilato é isolado em pelo menos quatro modificações cristalinas, duas das quais são altamente cristalinas, ligeiramente higroscópicas (0,82%), sólidas brancas (incluindo as formas A e B) e as outras duas das quais eram de cor amarela e continham mais do que o excesso estequimétrico de ácido metanossulfônico, isto é, menos do que um meio mol adicional per mol de N- hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2- propenamida; as duas últimas formas são altamente higroscópicas, isto é, ganham peso de pelo menos -40% em 93% r.h.

A presente invenção é ainda direcionada ao sal de tartrato de N- hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propena- mida, preferivelmente o sal de tartarato (hemitartarato) 2:1 de N-hidróxi-3-[4- [[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida, e mais preferivelmente o sal de L-tartarato 2:1 de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H- indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida. As formas A, B e C para o sal de hemitartarato podem ser vistas nos padrões de XRPD apresentados na figura 6. A forma A do sal de L-tartarato, um hemitartarato anídrico, após aquecimento, se decompõe sem fusão ao redor de 209°C. A LOD é menor do que 0,3% em 150°C, e a forma A é ligeiramente higroscópica (menos do que 0,5% de umidade em 85% r.h.). O sal de L-tartarato possui uma boa solubilidade aquosa de 3,5 mg/ml e uma boa dissolução intrínseca. Ele a- presenta boa solubilidade em acetona, acetato de etila e outros solventes orgânicos comuns e solubilidade limitada em álcoois. Após equilíbrio, a for- ma A se converte na forma C em metanol, no sal de cloridreto em HCI a 0,1 N, e na base livre em um tamponante de fosfato (pH = 6,8). A forma B do sal de tartarato, também um hemitartarato anídrico, após aquecimento, se de- compõe sem fusão acima de 160°C. A LOD é menor do que 2,0% em 150 °C, indicando a sua natureza higroscópica. A forma C do sal de tartarato é obtida a partir do equilíbrio da forma A em acetona à temperatura ambiente.

A presente invenção é ainda direcionada ao sal de acetato de N- hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida, preferivelmente o sal de acetato 1:1 de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3- il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida. As formas A e Sa para o sal de ace- tato podem ser vistas nos padrões de XRPD apresentados na figura 7. A forma A do sal de acetato, após aquecimento, se decompõe rapidamente sem fusão acima 60°C. Possui um solubilidade aquosa aproximada de 2 mg/ml. A forma Sa do sal de acetato é um solvato de acetona com a LOD de 13,5% ao redor de 140°C. Este solvato é estável abaixo de 90°C.

A presente invenção é ainda direcionada ao sal de benzoato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2- propenamida, preferivelmente o sal de de benzoato 1:1 de N-hidróxi-3-[4- [[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida. As formas A, Sa e Sb para o sal de benzoato podem ser vistas nos padrões de XRPD apresentados na figura 8. A forma A do sal de benzoato isolado da reação em acetona possui excelente cristalinidade e uma temperatura de decompo- sição elevada acima de 160°C. Sua LOD é menor do que 0,6% em 140°C. Possui uma solubilidade aquosa aproximada de 0,7 mg/ml. A forma Sa do sal de benzoato é um solvato de etanol com a LOD de 5,2% antes da de- composição que ocorre acima 110°C. A forma Sb do sal de benzoato é um solvato de 2-propanol com a LOD de 6,3% antes da decomposição que o- corre acima de 100°C.

A presente invenção é ainda direcionada ao sal de citrato de N- hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2- propenamida, preferivelmente o sal de citrato 2:1 (hemi-citrato) de N-hidróxi- 3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida. O sal de citrato pode ser visto no padrão de XRPD apresentado na figura 9. O sal de hemi-citrato possui uma solubilidade aquosa aproximada de 1,2 mg/ml. É produzido como um polimorfo único cristalino e anídrico/não-submetido a solvato com um temperatura de decomposição acima de 180°C. A presente invenção é ainda direcionada ao sal de fumarato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2- propenamida, preferivelmente o sal de fumarato 2:1 (hemifumarato) de N- hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2- propenamida. As formas A, B, e Ha para o sal de hemifumarato podem ser vistas nos padrões de XRPD apresentados na figura 10. A forma A do sal de hemifumarato isolada a partir da reação em etanol e água (1:0,05) possui excelente cristalinidade e uma temperatura de decomposição elevada de 217°C. Sua LOD é menor do que 0,7% em 200°C. Possui uma solubilidade aquosa aproximada de 0,4 mg/ml. A forma B do sal de hemifumarato isolada a partir da reação em etanol possui boa cristalinidade e uma temperatura de decomposição acima de 160°C. Apresenta uma LOD de duas etapas: ao redor de 1,1% até 150°C e uma subseqüente 1,7% entre 150°C e 200°C. A forma Ha do sal de hemifumarato, possível hidrato, isolada a partir da rea- ção em 2-propanol possui boa cristalinidade e temperatura de decomposição acima de 100°C. Apresenta uma LOD de duas etapas: ao redor de 3,5% até 75°C e uma subseqüente 6% entre 75°C e 150°C.

A presente invenção é ainda direcionada ao sal de gentisato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2- propenamida, preferivelmente o sal de gentisato 1:1 de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2- metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida. O sal de gentisa- to pode ser visto no padrão de XRPD apresentado na figura 11. O sal de gentisato possui uma solubilidade aquosa aproximada de 0,3 mg/ml. Ele é produzido como um polimorfo único cristalino e anídrico/não-submetido a solvato.

A presente invenção é ainda direcionada ao sal de malato de N- hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2- propenamida, preferivelmente o sal de malato (hemimalato) 2:1 de N-hidróxi- 3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida. As formas A e Sa para o sal de hemimalato podem ser vistas nos padrões de XRPD apresentadas na figura 12. A forma A do sal de hemimalato isolada a partir da reação em etanol e água (1:0,05) ou etanol puro e 2-propanol, pos- sui excelente cristalinidade e uma temperatura de decomposição elevada de 206°C. Apresentas uma LOD de 2% até 175°C. Possui uma solubilidade aquosa aproximada de 1,4 mg/ml. A forma Sa do sal de hemimalato foi obti- da a partir da reação de formação de sal em acetona. Possui excelente cris- talinidade, mas se decompõe gradualmente partindo ao redor de 80°C. Sua LOD até 75°C eleva-se a 0,6%.

A presente invenção é ainda direcionada ao sal de malonato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2- propenamida, preferivelmente o sal de malonate (hemimalonato) 2:1 de N- hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-

propenamida. O sal de malonato pode ser visto no padrão de XRPD apre- sentado na figura 13. O sal de hemimalonato possui uma solubilidade aquo- sa aproximada de 2 mg/mL. Ele é produzido como um polimorfo único crista- lino e anídrico/não-submetido a solvato com uma temperatura de decompo- sição acima de 170°C.

A presente invenção é ainda direcionada ao sal de oxalato de N- hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2- propenamida. O sal de oxalato pode ser visto no padrão de XRPD apresen- tado na figura 14.

A presente invenção é ainda direcionada ao sal de fosfato de N- hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2- propenamida, preferivelmente o sal de fosfato 1:1 de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2- metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida. As formas A, Sa, Sb e Ha para o sal de fosfato podem ser vistas nos padrões de XRPD apre- sentados na figura 15. A forma A do sal de fosfato, isolada a partir da reação em acetona, possui excelente cristalinidade e uma temperatura de decom- posição elevada de 187°C. Apresente uma LOD de 1% até 165°C. Possui uma solubilidade aquosa aproximada de 6 mg/ml. A forma Sa do sal de fos- fato, isolada a partir da reação em etanol, possui boa cristalinidade e apre- senta uma perda de peso gradual no aquecimento. Apresenta uma LOD de 6,6% até 150°C. A forma Sb do sal de fosfato, isolada a partir da reação em 2-propanol, possui excelente cristalinidade e apresenta uma perda de peso gradual no aquecimento. Apresenta uma LOD ao redor de 7% até 150°C. A forma Ha do sal de fosfato, um hidrato, isolada a partir da reação em etanol e água (1:0,05), possui excelente cristalinidade e uma temperatura de decom- posição elevada ao redor de 180°C. Apresenta uma LOD de 7% até 150°C.

A presente invenção é ainda direcionada ao sal de propionato de

N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1 H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2- propenamida, preferivelmente o sal de propionato 1:1 de N-hidróxi-3-[4-[[[2- (2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida. As formas A e Sa para o sal de propionato podem ser vistas nos padrões de XRPD apre- sentados na figura 16. A forma A do sal de propionato isolada a partir da re- ação em acetona possui excelente cristalinidade; sua temperatura de de- composição está ao redor de 99°C. A apresenta uma LOD ao redor de 7% até 140°C. Possui uma solubilidade aquosa aproximada de 4 mg/ml. A for- ma Sa do sal de propionato, isolada a partir da reação em 2-propanol, é um solvato de 2-propanol com excelente cristalinidade. Apresenta uma perda de peso gradual no aquecimento com uma LOD ao redor de 15% até 140°C.

A presente invenção é ainda direcionada ao sal de sulfato de N- hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2- propenamida, preferivelmente o sal de sulfato 1:1 de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2- metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida. As formas A e Sa para o sal de sulfato podem ser vistas nos padrões de XRPD apresentados na figura 17. A forma A do sal sulfato isolada a partir da reação em acetato de etila como um pó higroscópico amarelo possui cristalinidade fraca, uma temperatura de decomposição elevada por voltes de 160°C, e apresenta uma LOD ao redor de 7% até 150°C. É visivelmente higroscópico em con- dições ambientes. A forma Sa do sal de sulfato isolada a partir da reação em 2-propanol é um solvato de 2-propanol com excelente cristalinidade e uma temperatura de decomposição elevada ao redor de 162°C. Apresenta uma LOD ao redor de 9 a 12% até 150°C.

A presente invenção é ainda direcionada ao sal de succinato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propena- mida, preferivelmente o sal de succinato (hemissuccinato) 2:1 de N-hidróxi- 3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida. As formas A, B, Ha e Sa para o sal de hemissuccinato podem ser vistas nos pa- drões de XRPD apresentados na figura 18. A forma A do sal de hemissucci- nato reprodutivelmente isolada a partir da reação em etanol e água (1:0,05) ou etanol puro possui excelente cristalinidade e uma temperatura de decom- posição muito elevada ao redor de 204°C. Apresenta uma LOD ao redor de 1,1% até 200°C. Possui uma solubilidade aquosa aproximada de 0,4 mg/ml. A forma B do sal de hemissuccinato isolada a partir da reação em acetona ou acetato de etila possui boa cristalinidade e uma temperatura de decom- posição elevada acima de 150°C. Apresenta uma LOD de duas etapas: ao redor de 1,5% até 125°C e uma outra de 1,3 a 2,9% até 150°C. A forma Sa do sal de hemissuccinato isolada a partir da reação em 2-propanol é um solvato de 2-propanol com boa cristalinidade e uma temperatura de decom- posição elevada ao redor de 155°C. Apresenta uma LOD de duas etapas: ao redor de 3% até 70°C e uma outra de 4,6% até 140°C. A forma Ha, um monoidrato do sal de hemissuccinato, isolada a partir da reação em 2- propanol e água (1:0,05), possui excelente cristalinidade e uma temperatura de decomposição elevada ao redor de 180°C. Apresenta uma LOD ao redor de 4,6% até 160°C, correspondendo ao monoidrato.

A presente invenção é ainda direcionada ao sal de sódio de N- hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida. Este sal cristalino isolado como um pó amarelo é visivelmente higroscópico.

A presente invenção é ainda direcionada ao sal de potássio de N- hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida. Este sal cristalino isolado como um pó amarelo é visivelmente higroscópico.

A presente invenção é ainda direcionada ao sal de cálcio de N- hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2- propenamida. Este sal pode ser isolado como um material amorfo com uma temperatura de transição vítrea acima da ambiente. Embora amorfo, este sal era menos higroscópico do que os sais de sódio ou potássio.

A presente invenção é ainda direcionada ao sal de zinco de N- hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2- propenamida. Este sal pode ser isolado como um material amorfo com uma temperatura de transição vítrea acima da ambiente. Embora amorfo, este sal era menos higroscópico do que os sais de sódio ou potássio.

A segunda modalidade da presente invenção é direcionada a uma composição farmacêutica compreendendo:

(a) uma quantidade terapeuticamente eficaz de um sal de N- hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1 H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2- propenamida; e

(b) pelo menos um portador, diluente, veículo ou excipiente far- maceuticamente aceitável.

Uma "quantidade terapeuticamente eficaz" é planejada para signifi- car a quantidade do sal da invenção que, quando administrada a um indivíduo com sua necessidade, é suficiente para efetuar o tratamento para as condições doentias aliviadas pela inibição da atividade de histona deacetilase. A quantida- de de um dado composto da invenção que será terapeuticamente eficaz variará dependendo dos fatores tais como a condição doentia e a sua gravidade, a i- dentidade do indivíduo com sua necessidade, etc., em que a quantidade pode ser rotineiramente determinada pelo técnico versado na técnica.

O pelo menos um portador, diluente, veículo ou excipiente far- maceuticamente aceitável pode facilmente ser selecionado por uma pessoa versada na técnica e será determinado pelo modo desejado de administra- ção. Exemplos ilustrativos de modos adequados de administração incluem oral, nasal, parenteral, tópica, transdérmica e retal. As composições farma- cêuticas desta invenção podem tomar qualquer forma farmacêutica reconhe- cível pelo artífice versado como sendo adequada. As formas farmacêuticas adequadas incluem formulações sólidas, semisólidas, líquidas ou liofilizadas, tais como tabletes, pós, cápsulas, supositórios, suspensões, lipossomas e aerossóis.

A terceira modalidade da presente invenção é direcionada a um método de tratamento de uma doença que responde a uma inibição da ativi- dade de histona deacetilase compreendendo a etapa de administrar a um indivíduo com necessidade de tal tratamento uma quantidade terapeutica- mente eficaz de um sal de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]ami- no]metil]fenil]-2E-2-propenamida. Como observado acima, os modos ilustra- tivos de administração incluem oral, nasal, parenteral, tópica, transdérmica e retal. A administração da forma cristalina pode ser executada mediante a administração de uma composição farmacêutica da nona modalidade da in- venção ou através de qualquer outro meio eficaz.

As modalidades específicas da invenção serão agora demons- tradas pela referência aos exemplos que seguem. Deve ficar entendido quer estes exemplos são descritos somente por meio de ilustração da invenção e não devem ser tomados de qualquer maneira para limitar o escopo da pre- sente invenção.

Nos exemplos que seguem, com referência à cristalinidade, "ex- celente" refere-se a um material tendo picos principais de XRPD que são nítidos e possuem intensidades acima de 70 contagens; "bom" refere-se a um material tendo picos principais de XRPD que são nítidos e possuem in- tensidades dentro de 30 a 70 contagens; e "fraco" refere-se a um material tendo picos principais de XRPD que são amplos e possuem intensidades abaixo de 30 contagens. Além disso, "LOD" refere-se a perda de peso de- terminada entre as temperaturas ambientes e de decomposição. A posterior é aproximada pelo início do primeiro derivado da curva termogravimétrica vs. temperatura. Este não é o início real, visto que a perda de peso não ocorre com a mesma taxa para todos os sais. Em conseqüência, a temperatura de decomposição real pode ser mais baixa do que aquela mencionada. A for- mação de sal, estequiometria e a presença ou ausência de solventes é con- firmada pela observação das mudanças químicas de 1H-RMN dos agentes de formação de sal correspondentes e dos solventes de reação (as tabelas contêm uma mudança química característica para os agentes de formação de sal ou solventes). O teor de água não pode ser extraído dos dados de RMN, porque os picos de água eram amplos. A extensão de protonação da base livre é avaliada pela mudança na modificação química dos prótons benzílicos (Hbz). Além disso, os sais da presente invenção precipitaram co- mo pós de circulação livre (FFP), materiais amorfos pegajosos (SAM) (que possui uma consistência viscosa que tendeu ao aglomerado, formando uma unida massa esférica ou bastão nas paredes do recipiente de reação) ou géis amorfos (AG). Finalmente,"—" indica uma medida não tomada.

EXEMPLO 1

Preparação de Sal de Acetato

Cerca de 40 a 50 mg de monoidrato de base livre de N-hidróxi-3- [4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida foram colocados em suspensão em 1 ml de um solvente como listado na Tabela 1. Uma quantidade estequiométrica de ácido acético foi subseqüentemente adicionada à suspensão. A mistura foi agitada em 60°C ou temperatura am- biente (onde uma solução transparente se formou, a agitação continuou em 4°C). Os sólidos foram coletados por filtração e analisados por XRPD, TGA e em alguns exemplos 1H-RMN.

Tabela 1

<table>table see original document page 17</column></row><table>

A reação de formação de sal em acetona produziu um sal alta- mente cristalino, com a relação de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3- il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida em acetato de 1:1, identificada como um solvato de acetona estequiométrico SA. A reação de formação de sal em álcool isopropílico e acetato de etila em 60°C produziu o mesmo sal de acetato não-submetido a solvato cristalino (forma A). A perda de peso acompanhada acima de 105°C é devido à perda de água (se o sal for um hidrato) ou perda de ácido acético ou ambos.

EXEMPLO 2 Preparação de Sal de Benzoato

Cerca de 40 a 50 mg de monoidrato de base livre de N-hidróxi-3- [4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenN]-2E-2-propenamida foram colocados em suspensão em 1 ml de um solvente como listado na Tabela 2.

Uma quantidade estequiométrica de ácido benzóico foi subseqüentemente adicionada à suspensão. A mistura foi agitada à temperatura ambiente (onde uma solução transparente se formou, a agitação continuou em 4°C). Os só- lidos foram coletados por filtração e analisados por XRPD, TGA e em alguns exemplos 1H-RMN.

Tabela 2

<table>table see original document page 18</column></row><table>

*lsotérmico mantido em 120°C durante 10 minutos

A reação de formação de sal em etanol isoladamente e com á- gua produziu o mesmo solvato de etanol Sa- A estequiometria da ba- se:benzoato:etanol protonada é 1:1:0,5 por RMN. A perda de solvente e de- composição são eventos estritamente espaçados na taxa de aquecimento de 10°C/min, e o teor de etanol não pode ser determinado inicialmente. Even- tuamente, foi determinado por manter em 120°C durante 10 min A LOD de 5,2% corresponde a 0,5 mol de etanol per unidade de fórmula. O álcool iso- propílico isoladamente e com água produziu o mesmo solvato de isopropa- nol (IPA) SB. A estequiometria da base:benzoato protonada é 1:1 por RMN. A perda de solvente e decomposição são estritamente espaçadas na taxa de aquecimento de 10°C/min e o teor de isopropanol não pode ser determina- do inicialmente. Eventualmente, foi determinado por manter em 120°C du- rante 10 min A LOD de 6,3% corresponde a 0,5 mol de IPA per unidade de fórmula. Com base no teor de solvente e padrões de XRPD, os dois solvatos SA e SB mostraram-se ser isoestruturais. A reação de formação de sal em acetona produziu sal de benzoato que não continha qualquer solvente ou água, um sal estequimétrico 1:1 de excelente cristalinidade e temperatura de decomposição elevada (forma A).

EXEMPLO 3

Formação de Sal de Cloridreto

Cerca de 40 a 50 mg de base livre de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil- 1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida base foram colocados em suspensão em 1 ml de um solvente como listado na Tabela 3. Uma quantidade estequiométrica de ácido clorídrico foi subseqüentemente adicio- nada à suspensão. A mistura foi agitada em 60°C ou temperatura ambiente (onde uma solução transparente se formou, a agitação continuou em 4°C). Os sólidos foram coletados por filtração e analisados por XRPD, TGA e em alguns exemplos 1H-RMN.

Tabela 3

<table>table see original document page 19</column></row><table>

Todas as cinco reações acima produziram o mesmo sal cristali- no. O sal era anídrico e se decompôs em alta temperatura. EXEMPLO 4

Formação de Sal de Hemi-citrato

Cerca de 40 a 50 mg de base livre de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil- 1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida foi colocada em sus- pensão em 1 ml de um solvente como listado na Tabela 4. Uma quantidade estequiométrica de ácido cítrico foi subseqüentemente adicionada à suspen- são. A mistura foi agitada em 60°C ou temperatura ambiente (onde uma solução transparente se formou, a agitação continuou em 4°C). Os sólidos foram coletados por filtração e analisados por XRPD, TGA e em alguns e- xemplos 1H-RMN.

Tabela 4

<table>table see original document page 20</column></row><table>

Aquecimento para 60°C (acetona e etanol), assim como a intro- dução de água (álcool isopropílico e água, acetona e água em 60°C) produ- ziu um sal altamente cristalino que não contém qualquer solvente ou água. Um valor de LOD elevado para a acetona em ambiente/60°C é devido à presença de material amorfo dentro do pó cristalino. A estequiometria do sal não pode ser determinada por 1H-RMN em DMSO-d6, visto que o pico espe- rado para o íon de citrato coincide com aquele do solvente. No entanto, a espectroscopia de 13C-RMN indicou a presença de dois sinais 13C = O em 177,3 e 171,6 ppm. O primeiro é devido ao grupo carboxílico protonado e o último ao carboxilato desprotronado. EXEMPLO 5

Formação de Sal de Hemifumarato

Cerca de 40 a 50 mg de monoidrato de base livre de N-hidróxi-3- [4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida foram colocados em suspensão em 1 ml de um solvente como listado na Tabela 5. Uma quantidade estequiométrica de ácido fumárico foi subseqüentemente adicionada à suspensão. A mistura foi agitada em 60°C ou temperatura am- biente (onde uma solução transparente se formou, a agitação continuou em 4°C). Os sólidos foram coletados por filtração e analisados por XRPD, TGA e em alguns exemplos 1H-RMN.

Tabela 5

<table>table see original document page 21</column></row><table>

As reações de formação de sal em álcool isopropílico e acetona à temperatura ambiente produziram sais de fumarato de estequiometria 2:1 (base protonada:fumarato), isto é, sais de hemifumarato. Embora nenhuma delas fosse um solvato, elas tinham fraca cristalinidade e uma temperatura de decomposição baixa. A LOD para o álcool isopropílico à temperatura am- biente foi mais provavelmente associada com a perda de água. A reação de formação de sal em etanol, etanol e água, e álcool isopropílico e água, todas à temperatura ambiente ou 60°C, produziu um sal de fumarato de estequi- ometria 2:1 (base protonada:fumarato), isto é, sal de hemifumarato. A reação de formação de sal em etanol e água e álcool isopropílico e água (1:0,05), ambiente ou 60°C, produziu espectros de XRPD idênticos (forma anídrica A). O espectro do sal se formou por etanol à temperatura ambiente, embora similar, apresenta algumas pequenas diferenças e pode representar um po- limorfo de hemifumarato único (forma B) de estrutura similar.

EXEMPLO 6

Formação de Sal de Gentisato

Cerca de 40 a 50 mg de base livre de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil- 1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida foram colocados em suspensão em 1 ml de um solvente como listado na Tabela 6. Uma quanti- dade estequiométrica de ácido 2,5-diidroxibenzóico (ácido gentísico) foi sub- seqüentemente adicionada à suspensão. A mistura foi agitada em 60°C ou temperatura ambiente (onde uma solução transparente se formou, a agita- ção continuou em 4°C). Os sólidos foram coletados por filtração e analisa- dos por XRPD, TGA e em alguns exemplos 1H-RMN.

Tabela 6

<table>table see original document page 22</column></row><table>

O sal de gentisato preparado era altamente cristalino, anídrico e decomposto em uma temperatura muito elevada. A estequiometria do sal é 1:1 por RMN.

EXEMPLO 7

Formação de Sal de Monoidrato DL-Iactato

Cerca de 40 a 50 mg de base livre de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil- 1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida foram colocados em suspensão em 1 ml de um solvente como listado na Tabela 7. Uma quanti- dade estequiométrica de ácido lático foi subseqüentemente adicionada à suspensão. A mistura foi agitada à temperatura ambiente e quando uma so- lução transparente se formou, a agitação continuou em 4°C. Os sólidos fo- ram coletados por filtração e analisados por XRPD, TGA e 1H-RMN.

Tabela 7

<table>table see original document page 23</column></row><table>

A reação de formação de sal em álcool isopropílico e acetona em 4°C produziu um sal de DL-lactato estequimétrico (1:1), um monoidrato. O sal é cristalino, começa a desidratar acima de 77 °C, e se decompõe aci- ma de 150°C.

EXEMPLO 8

Formação de Sal de Maleato

Cerca de 40 a 50 mg de monoidrato de base livre de N-hidróxi-3- [4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida foram colocados em suspensão em 1 ml de um solvente como listado na Tabela 8. Uma quantidade estequiométrica de ácido maléico foi subseqüentemente adicionada à suspensão. A mistura foi agitada em 60°C ou temperatura am- biente (onde uma solução transparente se formou, a agitação continuou em 4°C). Os sólidos foram coletados por filtração e analisados por XRPD, TGA e em alguns exemplos 1H-RMN.

Tabela 8

<table>table see original document page 23</column></row><table> A reação de formação de sal em álcool isopropílico e acetona em 60°C produziu sólidos anídricos altamente cristalinos que se decompõe acima de -180°C. Ácido maléico foi o único ácido dicarboxílico que produziu um sal 1:1 com N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]- 2E-2-propenamida. Seu espectro de 1H-RMN apresenta ma ressonância em 6,01 ppm, correspondendo aos dois prótons olefínicos, e uma ressonância em 10,79 ppm devido a um ácido carboxílico desprotonado. O ácido maléico também formou um sal com teor elevado de água que é perdido sob condi- ções de aquecimento suaves. É provável que a reação de formação de sal em etanol (TA a 4°C) produzisse um hidrato (forma Ha).

EXEMPLO 9

Formação de Sal Hemimalato

Cerca de 40 a 50 mg de monoidrato de base livre de N-hidróxi-3- [4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida foram colocados em suspensão em 1 ml de um solvente como listado na Tabela 9. Uma quantidade estequiométrica de ácido málico foi subseqüentemente adi- cionada à suspensão. A mistura foi agitada em 60°C ou temperatura ambi- ente (onde uma solução transparente se formou, a agitação continuou em 4°C). Os sólidos foram coletados por filtração e analisados por XRPD, TGA e em alguns exemplos 1H-RMN.

Tabela 9

<table>table see original document page 24</column></row><table>

A reação de formação de sal em etanol e água, etanol e álcool isopropílico produziu o mesmo sal de hemimalato cristalino e anídrico. A di- ferença na LOD entre etanol e água (1:0,05) e etanol pode refletir quantida- des variáveis de material amorfo em o duas amostras. A reação de formação de sal em acetona proporcionou um sal de hemimalato diferente que conti- nuamente perde peso acima de -95°C. Este sal é um solvato de acetona (forma Sa). A perda de solvente e decomposição são eventos térmicos estri- tamente espaçados.

EXEMPLO 10

Formação de Sal Hemimalonato

Cerca de 40 a 50 mg de base livre de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil- 1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida foram colocados em suspensão em 1 ml de um solvente como listado na Tabela 10. Uma quanti- dade estequiométrica de ácido malônico foi subseqüentemente adicionada à suspensão. A mistura foi agitada em 60°C ou temperatura ambiente (onde uma solução transparente se formou, a agitação continuou em 4°C). Os só- lidos foram coletados por filtração e analisados por XRPD, TGA e em alguns exemplos 1H-RMN.

Tabela 10

<table>table see original document page 25</column></row><table>

Todas as reações proporcinaram o mesmo sal de hemimalonato.

A cristalinidade é geralmente boa, embora um haloamorfo pode ser visto em todos os espectros de XRPD. A água associada com estes materiais é pro- vavelmente devido ao aumento da sorção de umidade pelo componente a- morfo. As condições ambientes durante a síntese parecem produzir uma melhor qualidade de sal. EXEMPLO 11

Formação de Sal de Mesilato

Cerca de 40 a 50 mg de monoidrato de base livre de N-hidróxi-3- [4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida foram colocados em suspensão em 1 ml de um solvente como listado na Tabela 11. Uma quantidade estequiométrica de ácido metanossulfônico foi subse- qüentemente adicionada à suspensão. A mistura foi agitada em 60°C ou temperatura ambiente (onde uma solução transparente se formou, a agita- ção continuou em 4°C). Os sólidos foram coletados por filtração e analisa- dos por XRPD, TGA e em alguns exemplos 1H-RMN.

Tabela 11

<table>table see original document page 26</column></row><table>

A reação de formação de sal em acetato de etila proporcionou um sal amarelo, após agitação à temperatura ambiente. O sal (forma A) é cristalino, apresenta uma perda de peso de 2 etapas e, por RMN, não con- tém qualquer solvente, mas parece ter mais do que uma molécula de meta- nossulfonato (mesilato). A reação de formação de sal em acetona proporcio- nou o isolamento de um pó branco após o aquecimento em 60°C. Ela apre- sentou excelente cristalinidade, mas pode ser compósito de mais do que uma forma polimórfica (formas A e B). Por RMN, não contém qualquer sol- vente, mas parece conter mais do que uma molécula de metanossulfonato. Uma outra reação de formação de sal em acetato de etila, em que a reação é iniciada à temperatura ambiente e depois a suspensão em pó amarelada obtida é aquecida para 50°C, proporcionou o isolamento de uma nova forma B, como apresentada na figura 5.

EXEMPLO 12 Formação de Sal de Oxalato

Cerca de 40 a 50 mg de base livre de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil- 1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida foram colocados em suspensão em 1 ml de um solvente como listado na Tabela 12. Uma quanti- dade estequiométrica de agente de formação de sal, ácido oxálico, foi sub- seqüentemente adicionada à suspensão. A mistura foi agitada em 60°C ou temperatura ambiente (onde uma solução transparente se formou, a agita- ção continuou em 4°C). Os sólidos foram coletados por filtração e analisa- dos por XRPD, TGA e em alguns exemplos 1H-RMN.

Tabela 12

<table>table see original document page 27</column></row><table>

Sais de oxalato, embora precipitados imediatamente após a adi- ção de ácido oxálico às suspensões de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1 H-indol- 3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida, foram difíceis de isolar e pare- cem absorver água durante a filtração.

EXEMPLO 13

Formação de Sal de Fosfato

Cerca de 40 a 50 mg de monoidrato de base livre de N-hidróxi-3- [4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida foram colocados em suspensão em 1 ml de um solvente como listado na Tabela 13. Uma quantidade estequiométrica de ácido fosfórico foi subseqüentemen- te adicionada à suspensão. A mistura foi agitada em 60°C ou temperatura ambiente (onde uma solução transparente se formou, a agitação continuou em 4°C). Os sólidos foram coletados por filtração e analisados por XRPD, TGA e em alguns exemplos 1H-RMN.

Tabela 13 <table>table see original document page 28</column></row><table>

A reação de formação de sal em etanol e álcool isopropílico for- neceu hemissolvatos de etanol e isopropanol (formas Sa e SB, respectiva- mente). Em etanol e água, apenas traços de etanol foram detectados por RMN, a despeito da grande LOD. O material é higroscópico ou um hidrato (forma Ha) que perde água após aquecimento suave e condições de vácuo (a perda de água medida por TGA é completa a -60 0C em 10 °C/min). A reação de formação de sal em acetona e acetato de etila produziu o mesmo sal de fosfato cristalino e anídrico (forma A). A estequiometria é mais prova- velmente 1:1. O sal apresenta uma temperatura de decomposição elevada.

EXEMPLO 14

Formação de Sal de Propionato

Cerca de 40 a 50 mg de monoidrato de base livre de N-hidróxi-3- [4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida foram colocados em suspensão em 1 ml de um solvente como listado na Tabela 14. Uma quantidade estequiométrica de ácido propiônico foi subseqüente- mente adicionada à suspensão. A mistura foi agitada em 60°C ou tempera- tura ambiente (onde uma solução transparente se formou, a agitação conti- nuou em 4°C). Os sólidos foram coletados por filtração e analisados por XRPD, TGA e em alguns exemplos 1H-RMN. Tabela 14

<table>table see original document page 29</column></row><table>

Uma reação de formação de sal em etanol proporcionou a base livre não reagida (mais provavelmente a forma Hb). O álcool isopropílico pro- duziu um solvato de IPA do sal de propionato (forma Sa)- Com base em RMN, o teor de IPA é -0,5. O sal apresenta uma perda de peso de 15%, que corresponde à perda de IPA acrescido de um componente não identifi- cado. A reação de formação de sal em acetona e acetato de etila produziu o mesmo sal cristalino e não-submetido a solvato (forma A). Uma perda de peso de 6,3 a 7%, que começa em -100°C, é devido a água (se o sal for um hidrato), ácido propiônico ou um produto de decomposição. Após conclu- são da perda de peso (-14°C), o sal se decompõe. Deve ser salientado que quando o material for dissolvido em DMSO durante a RMN, ácido propi- ônico livre e apenas traços de propionato foram detectados.

EXEMPLO 15

Formação de Sal de Sulfato

Cerca de 40 a 50 mg de monoidrato de base livre de N-hidróxi-3- [4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida foram colocados em suspensão em 1 ml de um solvente como listado na Tabela 15. Uma quantidade estequiométrica de ácido sulfúrico foi subseqüentemen- te adicionada à suspensão. A mistura foi agitada em 60°C ou temperatura ambiente (onde uma solução transparente se formou, a agitação continuou em 4°C). Os sólidos foram coletados por filtração e analisados por XRPD, TGA e em alguns exemplos 1H-RMN. Tabela 15 <table>table see original document page 30</column></row><table>

A reação de formação de sal em álcool isopropílico proporcionou

o isolamento de um sal cristalino branco. Foi identificado como um solvato de isopropanol (forma Sa), contendo 1,5 mol de IPA per unidade de fórmula. Em DMSO, 0,5 mol de IPA é protonado. A reação de formação de sal em acetato de etila proporcionou o isolamento de um pó higroscópico amarelo (forma A). Durante a filtração, a amostra visivelmente absorveu umidade, e sua fraca cristalinidade é atribuída ao seu efeito. EXEMPLO 16

Formação de Sal de Hemissuccinato

Cerca de 40 a 50 mg de monoidrato de base livre de N-hidróxi-3- [4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida foram colocados em suspensão em 1 ml de um solvente como listado na Tabela

16. Uma quantidade estequiométrica de ácido succínico foi subseqüente- mente adicionada à suspensão. A mistura foi agitada em 60 0C ou tempera- tura ambiente (onde uma solução transparente se formou, a agitação conti- nuou em 4 °C). Os sólidos foram coletados por filtração e analisados por XRPD, TGA e em alguns exemplos 1H-RMN. Tabela 16 <table>table see original document page 30</column></row><table>

Solvente T, 0C Aparência Física Cristalinida- de e Forma LOD, % Tdecompos. 1H-RMN EtOH: H2O (1:0,05) 60 SAM para FFP Excelente A 1,1 203,7 2,31 (2H, succinato) 3,86 (Hb2) I PA: H2O (1:0,05) 60 SAM para FFP Excelente Ha 4,6 2,31 (2H, succinato) 3,85 (Hbz) EtOH Ambiente FFP para SAM para FFP Excelente A 1,1 194,6 2,31 (2H, succinato) 3,85 (Hbz) IPA Ambiente FFP Boa SA 2,8 + 4,6 (90,6) (2- step) 155,8 1,02 (~3H, I PA) 2,32 (2H, succinato) 3,88 (Hbz) Acetona Ambiente FFP Boa B 1,5 + 1,3 (2- etapas) 162,3 2,31 (2H, succinato) 3,86 (Hbz) AcOEt Ambiente FFP Boa B 1,3 + 2,9 154,5 — EtOH 60 SAM para FFP Excelente A — — EtOHiH2O (1:0,025) 60 SAM para FFP Excelente A 1,0 197,3 2,31 (2H, succinato) 3,85 (Hbz) Et0H:H20 (1:0,05) 60 SAM para FFP Excelente A — —

Quatro sais de hemissuccinato distintamente diferentes foram

isolados: um monoidrato (forma A) (etanol em ambiente), um hemi-solvato de isopropanol (forma SA) (álcool isopropílico), e duas formas não- submetidas a solvato A e Β. A forma A apresente cristalinidade mais eleva- da, perda de peso mínima até 200 °C, e temperatura de decomposição mais elevada. Além disso, pode ser sintetizado reprodutivelmente, como demons- trado em etanol e etanol e água a 60 °C. EXEMPLO 17

Formação de Sal de Hemitartarato Cerca de 40 a 50 mg de monoidrato de base livre de N-hidróxi-3-

[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida foram colocados em suspensão em 1 ml de um solvente como listado na Tabela 17. Uma quantidade estequiométrica de ácido tartárico foi subseqüentemen- te adicionada à suspensão. A mistura foi agitada em 60 0C ou temperatura ambiente (onde uma solução transparente se formou, a agitação continuou em 4 °C). Os sólidos foram coletados por filtração e analisados por XRPD, TGA e em alguns exemplos 1H-RMN.

Tabela 17 Solvente T, 0C Aparência Física Cristalinida- de e Forma LOD, % TdecomDos. 1H-RMN EtOHiH2O (1:0,05) RT a 60 FFP para SAM para FFP Excelente A 0,5 206,9 3,86 (1H, tartarato) 3,95 (Hbz) EtOHiH2O (1:0,025) 60 SAM para FFP Excelente A — — Et0H:H20 (1:0,05) 60 SAM para FFP Excelente A 0,5 207,6 3,86 (1H, tartarato) 3,95 (Hbz) EtOH 60 SAM para FFP Excelente A — — IPA:H20 (1:0,05 60 SAM para FFP Boa B 1,9 e 3,4 >1600C 3,90 (1H, tartarato) 3,96 (Hb2)

A reação de formação de sal da base livre com ácido tartárico

exigiu aquecimento em temperaturas elevadas. Um sal anídrico altamente cristalino que decompôs acima de 200 0C foi isolado como um hemitartarato e foi rotulado como forma A. A forma B foi isolada uma vez em álcool isopro- pílico e água a 60 0C e, embora muito similar na estrutura com A, diferenças significativas foram vistas em seu padrão de XRPD. EXEMPLO 18

Formação de Sal de DL-Lactato anídrico Ácido DL-lático (4,0 g, 85 % solução em água, correspondendo a

3,4 g de ácido DL-láctico puro) é diluído com água (27,2g), e a solução é aquecida para 90°C (temperatura interna) durante 15 horas. A solução é dei- xada esfriar à temperatura ambiente e é usada como solução de ácido lácti- co para a seguinte etapa de formação de sal. Base livre de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]ami-

no]metil]fenil]-2E-2-propenamida, forma Ha (10,0 g) é colocada em um frasco de reação de 4 gargalos com agitador mecânico. Água desmineralizada (110,5 g) é adicionada, e a suspensão é aquecida para 65 0C (temperatura interna) dentro de 30 minutos. A solução de ácido DL-lático é adicionada a esta suspensão durante 30 minutos em 65 °C. Durante a adição da solução de ácido DL-lático, a suspensão se converteu em uma solução. O funil de adição é enxaguado com água desmineralizada (9,1 g), e a solução é agita- da em 65 0C durante um adicional de 30 minutos. A solução é esfriada para 45 0C (temperatura interna) e cristais sementes (10 mg de monoidrato de DL-Iactato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1 H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]- 2E-2-propenamida) são adicionados nesta temperatura. A suspensão é es- friada para 33 0C e é agitada durante um adicional de 20 horas nesta tempe- ratura. A suspensão é re-aquecida para 65 °C, agitada durante 1 hora nesta temperatura e é esfriada para 33 0C dentro de 1 hora. Após agitação adicio- nal durante 3 horas em 33°C, o produto é isolado por filtração, e o bolo do filtro é lavado com água desmineralizada (2 χ 20 g). O bolo do filtro úmido é seco in vácuo em 50°C para obter o sal de DL-Iactato de N-hidróxi-3-[4-[[[2- (2-metil-1 H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida anídrico como um produto cristalino. O produto é idêntico ao sal de monoidrato (forma Ha) em HPLC e em 1H-RMN. XRPD indicou a presença da forma de anidrato.

Nas experiências de formação de sal adicionais realizadas de acordo com o procedimento descrito acima, a solução de produto foi filtrada em 65 0C antes do esfriamento para 45°C, semeadura e cristalização. Em todos os casos, a forma A (forma de anidrato) foi obtida como produto. EXEMPLO 19

Formação de Sal de DL-Lactato Anídrico

Ácido DL-láctico (2,Og, 85 % solução em água, correspondendo a 1,7 g de ácido DL-láctico puro) é diluído com água (13,6 g), e a solução é aquecida para 90 0C (temperatura interna) durante 15 horas. A solução foi deixada esfriar à temperatura ambiente e é usada como solução de ácido láctico para a seguinte etapa de formação de sal.

Base livre de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]ami- no]metil]fenil]-2E-2-propenamida, forma Ha (5,0 g) é colocada em um frasco de reação de 4 gargalos com agitador mecânico. Água Desmineralizada (54,85 g) é adicionada, e a suspensão é aquecida para 48 0C (temperatura interna) dentro de 30 minutos. A solução de ácido DL-lático é adicionada a esta suspensão durante 30 minutos em 48 °C. Cristais sementes são adicio- nados (como uma suspensão de 5 mg de sal de DL-Iactato N-hidróxi-3-[4- [[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida, forma A de anidrato, em 0,25 g de água) e a agitação continua durante 2 horas adicio- nais a 48 °C. A temperatura é elevada para 65 0C (temperatura interna) den- tro de 30 minutos, e a suspensão é agitada durante um adicional de 2,5 ho- ras nesta temperatura. Depois a temperatura é esfriada para 48 0C dentro de 2 horas, e a agitação continua nesta temperatura durante um adicional de 22 horas. O produto é isolado por filtração, e o bolo do filtro é lavado com água desmineralizada (2 χ 10 g). O bolo do filtro úmido é seco in vácuo em 45 a 50 0C para obter sal de DL-Iactato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3- il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida anídrico (forma A) como um pro- duto cristalino. Ponto de Fusão e decomposição ocorrem conjuntamente em 183,3 QC.

EXEMPLO 20

Conversão de monoidrato de Sal de DL-Lactato em Anidrato de Sal de DL- Lactato

Ácido DL-láctico (0,59 g, 85 % solução em água, corresponden- do a 0,5 g de ácido DL-láctico puro) é diluído com água (4,1 g), e a solução é aquecida para 90 0C (temperatura interna) durante 15 horas. A solução é deixada esfriar à temperatura ambiente e é usada como solução de ácido láctico para a seguinte etapa de formação de sal.

10 g de monoidrato de sal de DL-Iactato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2- metil-1 H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida são colocados em um frasco de reação de 4 gargalos. Água (110,9 g) é adicionada, seguida pela adição da solução de ácido láctico. O funil de adição do ácido láctico é enxaguado com água (15,65 g). A suspensão é aquecida para 82 0C (tempe- ratura interna) para obter uma solução. A solução é agitada durante 15 minu- tos em 82 0C e é filtrada quente em um outro frasco de reação para obter uma solução transparente. A temperatura é esfriada para 50 °C, e cristais sementes são adicionados (como uma suspensão de 10 mgde sal de DL- Iactato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1 H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2- propenamida, forma de anidrato, em 0,5 g de água). A temperatura é esfria- da para 33 0C e a agitação continua durante um adicional de 19 horas nesta temperatura. A suspensão formada é aquecida novamente para 65 0C (tem- peratura interna) dentro de 45 minutos, agitada em 65 0C durante 1 hora e esfriada para 33 0C dentro de 1 hora. Após agitação em 33 0C durante um adicional de 3 horas, o produto é isolado por filtração, e o bolo do filtro úmido é lavado com água (50 g). O produto é seco in vácuo a 50°C para obter sal de DL-Iactato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1 H-indol-3-il)etil]amino]me- til]fenil]-2E-2-propenamida cristalino anídrico (forma A). EXEMPLO 21

Formação de Sal de DL-Lactato Anídrico

Ácido DL-láctico (8,0 g, 85 % solução em água, correspondendo a 6,8 g ácido DL-láctico puro) foi diluído com água (54,4 g), e a solução foi aquecida para 90 0C (temperatura interna) durante 15 horas. A solução foi deixada esfriar à temperatura ambiente e foi usada como solução de ácido láctico para a seguinte etapa de formação de sal.

Base livre de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]ami- no]metil]fenil]-2E-2-propenamida, Forma Ha (20 g) é colocada em um reator de vidro de 1 L, e etanol/água (209,4 g de uma mistura de 1:1 p/p) é adicio- nada. A suspensão amarela clara é aquecida para 60 0C (temperatura inter- na) dentro de 30 minutos, e a solução de ácido láctico é adicionada durante 30 minutos nesta temperatura. O funil de adição é enxaguado com água (10 g). A solução é esfriada para 38 0C dentro de 2 horas, e cristais sementes (20 mg de sal de DL-Iactato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3- il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida, forma de anidrato) são adiciona- dos a 38 °C. Após agitação em 38 0C durante um adicional de 2 horas, a mistura é esfriada para 25 0C dentro de 6 horas. O esfriamento continua de 25 0C para 10 0C dentro de 5 horas, de 10 0C para 5 0C dentro de 4 horas e de 5 0C para 2 0C dentro de 1 hora. A suspensão é agitada durante um adi- cional de 2 horas a 2 0C, e o produto é isolado por filtração. O bolo do filtro úmido é lavado com água (2 χ 30 g), e o produto é seco in vácuo a 45 0C para obter sal de DL-Iactato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3- il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida cristalino anídrico (forma A). EXEMPLO 22

Formação de Sal de Sódio

Cerca de 50 mg de monoidrato de base livre de N-hidróxi-3-[4- [[[2-(2-metil-1 H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida foram colo- cados em suspensão em 1 ml de metanol. Uma quantidade estequiométrica de hidróxido de sódio foi subseqüentemente adicionada à suspensão. A mis- tura foi agitada em 50 °C. Assim que uma solução transparente se formou, a agitação continuou em 4 °C. Os sólidos foram coletados por filtração e anali- sados por XRPD e TGA. O sal de sódio de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H- indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida foi isolado como um pó amarelo altamente higroscópico, que absorveu umidade durante a filtração. EXEMPLO 23 Formação de Sal de Potássio

Cerca de 50 mg de monoidrato de base livre de N-hidróxi-3-[4- [[[2-(2-metil-1 H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida foram colo- cados em suspensão em 1 ml de metanol. Uma quantidade estequiométrica de hidróxido de potássio foi subseqüentemente adicionada à suspensão. A mistura foi agitada em 50 °C. Assim que uma solução transparente se for- mou, a agitação continuou em 4 °C. Os sólidos foram coletados por filtração e analisados por XRPD e TGA. O sal de potássio de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2- metil-1 H-índol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida foi isolado como um pó amarelo altamente higroscópico, que absorveu umidade durante a filtração.

EXEMPLO 24 Formação de Sal de Cálcio

Cerca de 50 mg de monoidrato de base livre de N-hidróxi-3-[4- [[[2-(2-metil-1 H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida foram colo- cados em suspensão em 1 ml de metanol. Uma quantidade estequiométrica de hidróxido de sódio foi subseqüentemente adicionada à suspensão. A mis- tura foi agitada em 50 °C. Assim que uma solução transparente se formou, uma quantidade estequiométrica de dicloreto de cálcio foi adicionada cau- sando uma precipitação imediata de sólido amarelado. Os sólidos foram co- Ietados por filtração e analisados por XRPD e TGA. O sal de cálcio de N- hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida foi menos higroscópico do que o sal de sódio ou potássio de N-hidróxi-3-[4- [[[2-(2-metil-1 H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida e pode ser facilmente isolado. EXEMPLO 25 Formação de Sal de Zinco Cerca de 50 mg de monoidrato de base livre de N-hidróxi-3-[4-

[[[2-(2-metil-1 H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida foram colo- cados em suspensão em 1 ml de metanol. Uma quantidade estequiométrica de hidróxido de sódio foi subseqüentemente adicionada à suspensão. A mis- tura foi agitada em 50 °C. Assim que uma solução transparente se formou, uma quantidade estequiométrica de sulfato de zinco foi adicionada causando uma precipitação imediata de sólido amarelado. Os sólidos foram coletados por filtração e analisados por XRPD e TGA. O sal de zinco de N-hidróxi-3-[4- [[[2-(2-metil-1 H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida foi menos higroscópico do que o sal de sódio ou potássio de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil- 1 H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida e pode ser facilmente isolado. EXEMPLO 26

Formação de Sal de Cloridreto

3,67 g (10 mmols) do monoidrato de base livre de (N-hidróxi-3- 20 [4-[[[2-(2-metil-1 H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida) e 40 ml de etanol absoluto foram carregados em um frasco de 3 gargalos de 250 ml equipado com um agitador magnético e um funil de adição. À suspensão agitada foram adicionados por gotejamento 7,5 mL de HCI a 2 M (15 mmols, 50 % excesso), proporcionado uma solução transparente. Um sólido branco se precipitou dentro de 10 minutos, e a agitação continuou em ambiente du- rante um adicional de 2 horas. A mistura foi esfriada em um banho de gelo durante aproximadamente 30 minutos, e o sólido branco foi recuperado por filtração. Foi lavado uma vez com etanol gelado (10 ml) e seco durante a noite sob vácuo para produzir 3,72 g do sal de cloreto de N-hidróxi-3-[4-[[[2- (2-metil-1 H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida (96,2 %).

Deve ser observado que HCI foi usado em excesso para melho- rar a produção, embora quantidades equimolares proporcionaram rendimen- tos maiores do que 80 %. A formação de di-sal através da protonação do anel de metil-1 H-indol-3-ila não ocorre mesmo quando o HCI for usado com grande excesso. As reações com 1, 1,5 e 2 equivalentes de HCI proporcio- naram o mesmo sal de monocloreto como um produto. Além disso, os dados de RMN não apresentam nenhuma mudança para qualquer um dos prótons nas adjacências do anel, como deve ter acontecido após a protonação. EXEMPLO 27

Formação de L-Sal de tartarato

3,67 g (10 mmols) do monoidrato de base livre de (N-hidróxi-3- [4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida) e 50 ml de etanol absoluto foram carregados em um frasco de 3 gargalos de 250 ml equipado com um agitador magnético e um funil de adição. A mistura foi a- quecida para 60 °C, e na suspensão quente foram adicionados por goteja- mento 0,83 g (5,5 mmols, 10 % excesso) de ácido L-tartárico dissolvido em 15 ml de etanol absoluto. Inicialmente, grandes aglomerados amarelos se formaram os quais impediram a agitação adequada, mas durante um tempo estes foram convertidos em pó amarelo de circulação livre e agitáveis. A agi- tação continuou em 60 0C durante 2 horas. A mistura foi subseqüentemente esfriada à temperatura ambiente e colocada em um banho de gelo durante aproximadamente 30 minutos. O pó amarelo foi recuperado por filtração e lavado uma vez por etanol absoluto gelado (10 ml). Foi seco durante a noite sob vácuo para produzir 4,1 g do sal de L-tartarato (hemitartarato) de N- hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida (96,6 %). EXEMPLO 28

Formação de Sal de monoidrato DL-Lactato

3,67g (10 mmols) do monoidrato de base livre, forma Ha (N- hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2- propenamida) e 75 ml de acetona foram carregados em um frasco de 3 gar- gaios de 250 mL equipados com um agitador magnético e um funil de adi- ção. À suspensão agitada foram adicionados por gotejamento, 10 ml de áci- do láctico a 1 M em água (10 mmols) dissolvidos em 20 ml de acetona, pro- porcionando uma solução transparente. A agitação continuou em ambiente e um sólido branco se precipitou após aproximadamente 1 hora. A mistura foi esfriada em um banho de gelo e agitada durante um adicional de 1 hora. O sólido branco foi recuperado por filtração e lavado uma vez com acetona gelada (15 mL). Foi subseqüentemente seco sob vácuo para produzir 3,94 g do sal de monoidrato DL-Iactato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3- il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida (86,2 %). EXEMPLO 29

Formação de Sal de Mesilato 3,67 g (10 mmols) do monoidrato de base livre de (N-hidróxi-3-

[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida) e 75 ml de acetato de etila foram carregados em um frasco de 3 gargalos de 250 ml equipados com um agitador magnético e um funil de adição. À suspensão agitada foram adicionados por gotejamento 0,65 ml (10 mmols) de ácido me- tano sulfônico dissolvido em 20 ml de acetato de etila, proporcionando uma suspensão agitável de um pó amarelo de circulação livre. A mistura foi a- quecida para 50 0C e mantida assim durante a noite, e durante este tempo o pó amarelo se converteu em um sólido branco. A suspensão foi esfriada à temperatura ambiente e o sólido branco foi recuperado por filtração. Foi Ia- vado uma vez com acetato de etila gelado (15 ml) e seco durante a noite sob vácuo para produzir 4,38 g do sal de mesilato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil- 1 H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida (98,3 %).

É observado que o pó amarelo inicialmente formado é um poli- morfo do sal de mesilato que contém mais do que a quantidade equimolar de ácido metano sulfônico. Como um resultado, este sólido é muito altamente higroscópico. Após aquecimento suave para 40 0C ou 50 0C e dentro de 2 a 4 horas, o pó amarelo se converte em um sólido cristalino branco que con- tém a quantidade equimolar do ácido metano sulfônico. Este sal é não- higroscópico. É também recomendado que a adição do ácido metano sulfô- nico seja feita à temperatura ambiente e a temperatura aumentada posteri- ormente. Foi observado que a adição em temperatura mais elevada propor- cionou a precipitação imediata do sal como um material mole e viscoso. EXEMPLO 30

Formação de Sal de Maleato

3,67 g (10 mmols) do monoidrato de base livre de (N-hidróxi-3- [4-[[[2-(2-metN-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida) e 75 ml de acetona foram carregados em um frasco de 3 gargalos de 250 ml equipa- dos com um agitador mecânico e um funil de adição. A mistura foi aquecida para 45 °C, e à suspensão quente foram adicionados por gotejamento 1,16 g (10 mmols) de ácido maléico dissolvido em 25 ml de acetona. Embora a adi- ção tenha sido lenta, o sal se precipitou como um sólido viscoso macio que impede a agitação. A agitação continuou durante a noite em 45 0C e durante este tempo o sólido se converteu em um pó de circulação livre branco. A mistura foi esfriada à temperatura ambiente e colocada em um banho de gelo durante aproximadamente 30 minutos. O sólido branco foi recuperado por filtração, lavado uma vez com acetona gelada (15 ml), e seco durante a noites sob vácuo para produzir 4,21 g do sal de maleato de N-hidróxi-3-[4- [[[2-(2-metil-1 H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida (90,5 %).

Foi observado que um solvente mais preferível para a síntese é o 2-propanol. Durante a otimização, no entanto, foi observado que, além da forma desejada, um outro polimorfo com uma temperatura de decomposição baixa (118,9 °C) pode ser isolado de 2-propanol como um pó amarelo. EXEMPLO 31

Formação de Sal de L-(+)-Lactato Anídrico

Base livre de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1 H-indol-3-il)etil]ami- no]metil]fenil]-2E-2-propenamida (20,0 g) foi tratada com ácido L-(+)-láctico (6,8 g) de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 19 para obter sal de L-(+)-lactato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1 H-indol-3-il)etil]amino]me- til]fenil]-2E-2-propenamida cristalino, forma de anidrato. O ponto de fusão e a decomposição ocorrem conjuntamente em 184,7 QC. O padrão de XRPD é como apresentado na figura 3D (2Θ = 9,9, 11,4, 13,8, 18,1, 18,5, 19,7, 20,2, 21,6,25,2,29,9). EXEMPLO 32

Formação de Sal de D-(-)-Lactato Anídrico Base livre de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]ami- no]metil]fenil]-2E-2-propenamida (20,0 g) foi tratada com ácido D-(-)-láctico (6,8 g) de acordo com o procedimento descrito no Exemplo 19 para obter sal de D-(-)-lactato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1 H-indol-3-il)etil]amino]me- til]fenil]-2E-2-propenamida cristalino, forma de anidrato. O ponto de fusão e a decomposição ocorrem conjuntamente em 184,1 sC. O padrão de XRPD é como apresentado na figura 3E (2Θ = 9,9, 11,4, 13,8, 18,1, 18,5, 19,7, 20,2, 21,6, 25,2).

Caracterização Física de Base Livre, Sais de Cloridreto, DL-Lactato, Malea- to, Mesilato e Tartarato

Para cada um da base livre, sal de cloreto, sal de maleato, sal de mesilato e sais de tartarato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3- il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida, vários estudos foram conduzidos, a saber, para determinar a composição elementar, estequiometria, pureza, ponto de fusão ou decomposição, pH de solução saturada, solubilidade, ter- mogravimetria, propriedades higroscópicas, dissolução intrínseca e estabili- dade.

Método de HPLC: Instrumento: AgiIentHOO Coluna: Zorbax SB-C18 (3,5 pm), 150 mm L χ 3,0 mm ID Fase móvel: (A) 0,1 % ácido trifluoroacético em água (v/v) (B) 0,1 % ácido trifluoroacético em acetonitrila (v/v)

Taxa de Fluxo: 0,8 ml/min Temp da coluna: 50 0C

Gradiente: _

Tempo % A % B 0,00 97,0 3,0 2,00 97,0 3,0 15,00 77,0 23,0 25,00 55,0 45,0 27,00 55,0 45,0 27,01 97,0 3,0 35,00 97,0 3,0

Volume de injeção: 5 μΙ

Massa injetada: 1 pg

Detecção: UV1 280 nm

Amostra de solvente: Metanol Todas as amostras foram preparadas/diluídas em uma concen-

tração de 0,2 mg/ml em metanol antes da análise por HPLC. Uma amostra recentemente preparada de cada sal foi usada como o padrão de referência para a análise de calibração padrão externa.

Análise LC/MS:

Identidade RT (min) Massa (neutra) Estrutura proposta Base livre 15,4 349 Produto da Hidró- Iise 16,3 334 Subproduto 18,3 333 Metilação 25,0 348 H N \-/ o \

Espectros de 1H-RMN foram registrados em DMSO-d6.

DSC: Todas as seis substâncias se decompõem antes da fusão e, portanto, a calorimetria de varredura diferencial não era aplicável.

Valor de pH: O pH à temperatura ambiente de uma solução satu- rada ou 1 % suspensão da substância medicamentosa em água foi registra- do.

Solubilidade Aquosa: uma quantidade cuidadosamente pesada (20 a 50 mg) de amostra é dissolvida em 1 ml de solvente com equilíbrio de 24 horas à temperatura ambiente. A solubilidade foi determinada gravimetri- camente ou por espectrometria UV-VIS. O pH da solução transparente tam- bém foi medida. No entanto, a dificuldade de determinar as solubilidades do sal em água deve ser realçada, visto que após a dissolução a dissociação na forma livre é possível, que afeta tanto a solubilidade quanto o pH. Não é im- provável que estes esforços para produzir soluções de um sal em uma con- centração bem abaixo da solubilidade relatada do sal sejam malsucedidos (para um debate completo ver: M. Pudipeddi, Α. Τ. M. Serajuddin, D. J. W. Grant, and Ρ. H. Stahl in "Handbook of Pharmaceutical Salts Properties Se- Iection and Use" page 27 e suas referências).

Soluções transparentes do sal de mesilato em concentração a - baixo da solubilidade relatada podem ser produzidas inicialmente, mas du- rante um tempo de precipitação de sólido em armazenagem ocorrido. Além disso, uma transformação polimorfica foi observada com relação ao sal de mesilato em soluções aquosas. O resíduo em ambos os casos foi analisado por espec. de massa e observado ser a base livre, indicando que o precipi- tado não é um produto de decomposição. Dissolução Intrínseca: aproximadamente 30 mg de cada subs-

tância foram comprimidos em grânulos de 0,13 cm3. A maior parte dos grâ- nulos de base livre se desintegrou após contato com o meio aquoso, e assim a taxa de dissolução relatada não corresponde à verdadeira dissolução in- trínseca da base livre. Em HCI a 0,1 No grânulo de base livre desintegrou completamente e a taxa de dissolução não foi determinada. Os grânulos dos outros sais permaneceram intactos durante pelo menos vários minutos per- mitindo a determinação da taxa de dissolução intrínseca. Os estudos de taxa de dissolução foram executados usando o método de disco rotativo (VanKeII lnstrument). Uma velocidade de rotação única de 200 rpm foi usada para dissolver a substância medicamentosa em um recipiente de 500 ml a 37 0C. A solução foi continuamente bombeada através de uma medição de célula UV e retornou ao recipiente de dissolução.

Os resultados para os estudos observados acima são apresen- tados na Tabela 18 abaixo. Tabela 18

Análise elementar Forma de Sal Base livre HCI L-Tartarato Mesilato Maleato Calc Fnd Calc Fnd Cale Fnd Calc Fnd Cale Fnd %C 68,64 68,53 65,36 65,09 65,08 65,24 59,31 59,13 64,51 64,19 % H 6,86 6,74 6,27 6,64 6,17 6,36 6,11 6,12 5,85 5,65 % N 11,44 11,41 10,89 10,77 9,90 9,94 9,43 9,39 9,03 8,92 %S — — 7,20 7,26 %CI 9,19 9,06 Estequiometria 1H-RMN NA 1:1 2:1 1:1 1:1 DSC-Pureza Taxa de aquecimen- to 2°C/min Não-aplicável Não-aplicável Não-aplicável Não-aplicável Não-aplicável HPLC-Pureza (por exemplo, área - %) 99,41 99,63 99,62 99,30 99,48 Ponto de Fusão (DSC) Taxa de aquecimen- to [10 K/min] em 0C Não-aplicável Não-aplicável Não-aplicável Não-aplicável Não-aplicável Entalpia de Fusão (J/g) Não-aplicável Não-aplicável Não-aplicável Não-aplicável Não-aplicável pH da solução saturada Em água 8,7 5,65 6,07 4,34 5,54 Em pH = 6,8 tampão 6,91 5,67 5,57 5,38 5,70 Solubilidade (aprox. em 25 °C, mg/ml) Metanol 2,3 16,6 2,6 >115 57,0 Etanol 1,5 2,1 0,5 < 14,6 7,2 2-Propanol 4,0 0,8 0,3 < 2,2 1,6 Acetona 6,5 4,5 4,6 3,0 3,0 Acetato de etila 5,6 6,5 3,9 6,4 5,6 Água 0,004 2,4 3,5 12,9 2,6 HCI a 0,1 N 0,3 0,2 0,4 0,6 0,7 pH = 6,8 tampão 0,3 0,7 1,9 4,1 1,5 Propileno qlicol 4,9 13,2 7,2 46,5 32,4 Termogravimetria ( perda de peso em %) LOD em % 4,8 % 0,4 % 0,3 % 0,2 % 0,1 % Tiniciai tem- peratura de desidração Ambiente - Tinicialtem- 157,4 0C 235,7 0C 209,0 °C 192,4 0C 176,7 0C Análise elementar Forma de Sal Base livre HCI L-Tartarato Mesilato Maleato Calc Fnd Calc Fnd Calc Fnd Calc Fnd Cale Fnd %C 68,64 68,53 65,36 65,09 65,08 65,24 59,31 59,13 64,51 64,19 % H 6,86 6,74 6,27 6,64 6,17 6,36 6,11 6,12 5,85 5,65 % N 11,44 11,41 10,89 10,77 9,90 9,94 9,43 9,39 9,03 8,92 %S — — 7,20 7,26 %CI 9,19 9,06 peratura de decomposi- ção Taxa de Dissolução Intrínseca (mg min"1 cm"2) HCI 0,1 N NA 0,13 1,16 6,51 1,00 Água 0,15 0,68 0,38 10,17 0,32

Como pode ser visto da Tabela 18, cada um dos sais supera a solubilidade da base livre em aproximadamente 3 ordens de magnitude. Os

sais de cloridreto, maleato e L-tartarato possuem solubilidades muito simila- res em aproximadamente 0,3 %. O sal de mesilato é o mais solúvel de todos em 1,3 %. (Solubilidades aproximadas foram estimadas a partir da concen- tração em mg/ml, assumindo que a densidade de uma solução é 1 g/ml.) As taxas de dissolução intrínseca variaram conseqüentemente.

Além disso, para cada um dos sal de monoidrato DL-Iactato e sal de DL-Iactato anídrico, vários estudos foram conduzidos, a saber, par deter- minar a pureza, ponto de fusão ou decomposição, termogravimetria, proprie- dades higroscópicas e dissolução intrínseca. Os resultados destes estudos são apresentados na Tabela 19 abaixo.

Tabela 19

Sal de monoidrato DL-Iactato Sal de DL-Iactato anídrico Pureza (HPLC) 98,4 % NA Início da fusão DSC 111C 181C Termogravimetria (TG, 10K/min) 2,7% (até 130 sC) 0,39 % (até 130 sC) Teor de Agua (Karl Fischer) 4,3 % 0,69 % Higroscopicidade (DVS) Leve 0,55 % em 80 % r.h. Leve 0,69 % em 80 % r.h. Taxa de dissolução intrínse- ca HCI a 0,1 N 0,02 0,13 pH = 4 0,08 0,09 Agua 0,06 0,14

Da mesma forma as experiências de agitação foram conduzidas com respeito ao monoidrato e sais de DL-Iactato anídricos. Em particular, um mistura das formas A e Ha do sal de DL-Iactato foi agitada durante certo tempo e temperatura. Os resultados destas experiências são apresentados nas Tabelas 20 e 21 abaixo.

Tabela 20

Temperatura (eC)/tempo de agitação 2 10 20 25 30 2 dias Nenhuma alteração Nenhuma alteração Nenhuma alteração Nenhuma alteração Nenhuma alteração 8 dias Nenhuma alteração Nenhuma alteração Aumento de A Conversão em A Conversão em A 24 dias Aumento de A Aumento de A Conversão em A Conversão em A Conversão em A

Tabela 21

Temperatura (sC) 25 35 50 70 Após 24 horas Nenhuma alte- ração Aumento de A Conversão em A Conversão em A

A estabilidade de cada um de base livre, sal de cloridreto, sal de

maleato, sal de monoidrato DL-lactato, sal de mesilato e sais de hemitartara- to de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1 H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2- propenamida em solução (Tabela 22), em estado sólido (Tabela 23) e na presença de misturas excipientes (Tabela 24) também foi determinada. <table>table see original document page 47</column></row><table>

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Forma de Sal ο co φ % DP Estabilidade em 50°C/75% r.h., 2 semanas cm o lo o" co o" ε'ο co o co o ε'ο co o" O co % DS 99,8 99,5 99,7 99,7 99,7 99,7 99,7 99,7 99,6 I _ι q o o ra "ίο %DP o co o" ■tf o" lo o lo o" lo o cd o" lo o co o" ■α ο õ Í5 c ο Ξ % DS 99,6 99,4 99,6 99,5 99,5 99,5 99,3 99,5 99,4 Cloridreto cl q co o cd o" LO o" cd o lo o" lo o" lo o io o" lo o % DS 99,7 99,4 99,5 99,4 99,5 99,5 99,5 99,5 99,5 ο "ίο ι- %DP cd o cvi co co co co co_ co_ co έ co i- % DS 99,4 98,8 98,7 98,7 98,7 98,7 98,7 98,7 98,7 Mesilato %DP io o~ co o" o o" co o" go o" r·- o cd o I % DS 99,5 99,2 99,3 99,3 99,2 99,2 99,3 99,4 I Base %DP io o" cn co o cd o lo o 00 o cd o" lo o" co o" % DS 99,5 98,8 99,4 99,3 99,4 99,2 99,4 " 99,5 98,6 Padrão Mistura 1 Mistura 2 Mistura 3 Mistura 4 Mistura 5 Mistura 6 Mistura 7 Mistura 8

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E Mistura 1: 50 % PVP + 50 % Crospovidona Mistura 2: 50 % Amido 1500 + 50 % MCC 102

Mistura 3: 5 % PVP + 5 % Crospovidona + 10 % Ammido 1500 + 80 % MCC 102

Mistura 4: 99 % Lactose + 1 % BHT/BHA Mistura 5: 99 % Manitol + 1 % BHT/BHA

Mistura 6: 50 % Manitol + 47 % HPCLH21 + 1 % BHT/BHA + 2 % Estearato de Magnésio (Observação: 1 % Estearato de Magnésio misturado ρ/ primeiro sal)

Mistura 7: 50 % Álcool Cetílico + 49 % HPCLH21 + 1 % Estearato de Magnésio Mistura 8: 100 % PEG 3350

Cada um da base livre, sal de cloridreto, sal de DL-lactato, sal de maleato, sal de mesilato e sais de tartarato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1 H- indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida apresentou muito boas características de estabilidade tanto em solução quanto no estado sólido. Aproximadamente, 1,5 % de degradação total foi observado para todos os sais e bases livres como soluções em tamponante de Iactato (pH 3,5), água e metanol. Os sais também apresentaram muito boa estabilidade em todas as soluções tox testadas (CMC, HPMC, Klucel e Tween-80). Além disso, cada uma da base livre, sal de cloridreto, sal de DL-

lactato, sal de maleato, sal de mesilato e sais de tartarato de N-hidróxi-3-[4- [[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida também apresentou muito boa estabilidade com todas as misturas excipientes testa- das após 2 semanas em 50 °C/75 % r.h. TesteSupIementar

Uma solubilidade aproximada dos sais listados abaixo foi deter- minada em água e em pH 1 por colocar em suspensão de 5 a 15 mg do sal em 1 ml de solvente. As amostras foram deixadas equilibrar à temperatura ambiente durante pelo menos 20 horas. O sobrenadante foi filtrado e usado para a determinação de solubilidade, que foi feita gravimetricamente, com relação à solubilidade aquosa, e por espectrocopia de UV-VIS para pH 1. O resíduo sólido foi analisado por XRPD. Adicionalmente, as amostras sólidas dos sais listados abaixo foram mantidas em 93 % r.h. durante 7 ou 10 dias. Elas foram subseqüentemente analisadas por XRPD e TGA1 no caso deste julgado necessário. Apenas os eventos irreversíveis ou lentamente reversí- veis podem ser detectados. Os resultados são listados na Tabela 25 abaixo.

Tabela 25 <table>table see original document page 51</column></row><table>

Sal (Rela- ção Ba- se:SFA) Solução (EQ t > 20 horas) Estado Sólido (EQ 93 % r.h.) Água pH 1 S mg/ml Cristalinidade & Forma por XRPD S mg/ml Padrão XRPD Cristalinidade & For- ma por XRPD LOD por TGA Acetato (1:1) 2,18 Boa B (nova forma) 0,27 Corresponde ao sal de cloridreto Boa B LOD = 8,8 % (105 °C) Ben- zoato (1:1) 0,69 Excelente B (nova forma) 0,50 Corresponde ao sal de cloridreto Nenhuma alteração (7 dias) Citrato 1,25 Nenhuma alte- ração 0,28 Corresponde ao sal de cloridreto Nenhuma alteração (IOdias) Fuma- rato (2:1) 0,41 Excelente C (nova forma) 0,35 Corresponde ao sal de cloridreto Nenhuma alteração (IOdias) Genti- sato 0,25 Nenhuma alte- ração 0,30 Corresponde ao sal de cloridreto Nenhuma alteração (IOdias) Malato 1,38 Nenhuma alte- ração 0,42 Corresponde ao sal de cloridreto Nenhuma alteração (IOdias) Malona- to 1,92 Amorfa 0,49 Corresponde ao sal de cloridreto Nenhuma alteração (IOdias) Propio- nato 4,19 NA resíduo de base livre 0,34 Corresponde ao sal de cloridreto Cristalinidade fraca Fosfato 6,26 (cristalinidade fraca) nenhuma alte- ração 0,61 Corresponde ao sal de cloridreto Nenhuma alteração (7 dias) Sucei- nato 0,39 Excelente C (nova forma) 0,29 Corresponde ao sal de cloridreto Nenhuma alteração (IOdias)

Como pode ser visto na Tabela 25 acima, a maior parte dos sais

não sofrem qualquer transformação irreversível após armazenagem em 93 % RH durante 7 ou 10 dias. No entanto, as seguintes observações foram mencionadas: o acetato se converteu em uma nova forma, que também foi isolada após o equilíbrio de o sal em água. É provável que esta nova forma constitua um hidrato.

Os resíduos sólidos a partir do equilíbrio em água foram exami- nados por XRPD e outras técnicas quando julgado necessário. Os resulta- dos podem ser resumidos como se segue:

• Nenhuma mudança estrutural foi observada nos sais de citrate, gentisato, malato e fosfato.

• O resíduo sólido do equilíbrio de propionato consistia apenas da base livre. · Acetato, benzoato, fumarato e succinato se converteram em novos polimor- fos de sal.

Em vista do tato de que a análise de XRPD mostrou que em to- dos os casos, com a exceção do sal de propionato, a solução estava em e- quilíbrio com o sal correspondente, as solubilidades aquosas na Tabela 25 são representativas do sal (Chapter 2, in Handbook of Pharmaceuticals Salts; Authors: M. Pudipeddi, Α. Τ. M. Serajuddin, D. J. W. Grant, e Ρ. H. Stahl).

Durante o equilíbrio em pH 1 das soluções tamponantes, todos os sais se converteram no sal de cloreto. Isto reflete na faixa limitada das solubilidades observadas, em que todas se situam entre 0,3 e 0,6 mg/ml (S = 0,25 mg/ml para o sal de cloreto).

Embora a invenção tenha sido descrita acima com referência às suas modalidades específicas, é evidente que muitas mudanças, modifica- ções e variações podem ser feitas sem divergir do conceito da invenção aqui divulgada. Conseqüentemente, é planejado abranger todas as tais mudan- ças, modificações e variações que caem dentro do espírito e do amplo esco- po das reivindicações anexas. Todos os pedidos de patente, patentes e ou- tras publicações aqui citadas são incorporadas por referência em sua totali- dade.

Claims (49)

REIVINDICAÇÕES

1. Sal de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1 H-indol-3-il)etil]amino]me- til]fenil]-2E-2-propenamida.

2. Sal de acordo com a reivindicação 1, em que o sal é um sal de cloridreto de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]- .2E-2-propenamida.

3. Sal de acordo com a reivindicação 2, em que o sal de cloridre- to é um sal de cloridreto 1:1 de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1 H-indol-3- il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida.

4. Sal de acordo com a reivindicação 1, em que o sal é um sal de Iactato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1 H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]- .2E-2-propenamida.

5. Sal de acordo com a reivindicação 4, em que o sal de Iactato é um sal de Iactato 1:1 de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1 H-indol-3- il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida.

6. Sal de acordo com a reivindicação 4, em que o sal de Iactato é um sal de monoidrato lactato.

7. Sal de acordo com a reivindicação 4, em que o sal de lactato é um sal de lactato anídrico.

8. Sal de acordo com a reivindicação 4, em que o sal de lactato é um sal de DL-lactato.

9. Sal de acordo com a reivindicação 8, em que o sal de DL- lactato é um sal de monoidrato DL-lactato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H- indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida.

10. Sal de acordo com a reivindicação 8, em que o sal de DL- lactato é um sal de DL-lactato anídrico de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H- indol-3-il)etil]amino]metíl]fenil]-2E-2-propenamida.

11. Sal de acordo com a reivindicação 4, em que o sal de lactato é um sal de L-lactato.

12. Sal de acordo com a reivindicação 11, em que o sal de L- Iactato é um sal de L-(+)-lactato anídrico de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H- indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida.

13. Sal de acordo com a reivindicação 4, em que o sal de Iactato é um sal de D-lactato.

14. Sal de acordo com a reivindicação 13, em que o sal de D- Iactato é um sal de D-(-)-lactato anídrico de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H- indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida.

15. Sal de acordo com a reivindicação 1, em que o sal é um sal de maleato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]- 2E-2-propenamida.

16. Sal de acordo com a reivindicação 15, em que o sal de ma- Ieato é um sal de maleato 1:1 de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3- il)etil]amino]metíl]fenil]-2E-2-propenamida.

17. Sal de acordo com a reivindicação 1, em que o sal é um sal de mesilato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]- .2E-2-propenamida.

18. Sal de acordo com a reivindicação 17, em que o sal de mesi- lato é um sal de mesilato 1:1 de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3- il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida.

19. Sal de acordo com a reivindicação 1, em que o sal é um sal de tartarato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]- 2E-2-propenamida.

20. Sal de acordo com a reivindicação 19, em que o sal de tarta- rato é um sal de hemitartarato 2:1 (hemi-tartrato) de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2- metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida.

21. Sal de acordo com a reivindicação 1, em que o sal é um sal de acetato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]- .2E-2-propenamida.

22. Sal de acordo com a reivindicação 21, em que o sal de ace- tato é um sal de acetato 1:1 de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3- il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida.

23. Sal de acordo com a reivindicação 1, em que o sal é um sal de benzoato N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1 H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E- .2-propenamida.

24. Sal de acordo com a reivindicação 23, em que o sal de ben- zoato é um sal de benzoato 1:1 de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1 H-indol-3- il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida.

25. Sal de acordo com a reivindicação 1, em que o sal é um sal de citrato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1 H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E- .2-propenamida.

26. Sal de acordo com a reivindicação 25, em que o sal de citra- to é um sal de hemi-citrato 2:1 de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3- il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida.

27. Sal de acordo com a reivindicação 1, em que o sal é um sal de fumarato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]- .2E-2-propenamida.

28. Sal de acordo com a reivindicação 27, em que o sal de fuma- rato é um sal de hemifumarato 2:1 de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3- il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida.

29. Sal de acordo com a reivindicação 1, em que o sal é um sal de gentisato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]- 2E-2-propenamida.

30. Sal de acordo com a reivindicação 29, em que o sal de gen- tisato é um sal de gentisato 1:1 de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3- il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida.

31. Sal de acordo com a reivindicação 1, em que o sal é um sal de malato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]- .2E-2-propenamida.

32. Sal de acordo com a reivindicação 31, em que o sal de mala- to é um sal de hemimalato 2:1 de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3- il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida.

33. Sal de acordo com a reivindicação 1, em que o sal é um sal de malonato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]- 2E-2-propenamida.

34. Sal de acordo com a reivindicação 33, em que o sal de ma- lonato é um sal de hemimalonato 2:1 de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1 H-indol- . 3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida.

35. Sal de acordo com a reivindicação 1, em que o sal é um sal de oxalato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]- 2E-2-propenamida.

36. Sal de acordo com a reivindicação 1, em que o sal é um sal de fosfato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1 H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]- .2E-2-propenamida.

37. Sal de acordo com a reivindicação 36, em que o sal de fosfa- to é um sal de fosfato 1:1 de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1 H-indol-3- il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida.

38. Sal de acordo com a reivindicação 1, em que o sal é um sal de propionato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3- il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida.

39. Sal de acordo com a reivindicação 38, em que o sal de pro- pionato é um sal de propionato 1:1 de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3- il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida.

40. Sal de acordo com a reivindicação 1, em que o sal é um sal de sulfato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]- .2E-2-propenamida.

41. Sal de acordo com a reivindicação 40, em que o sal de sulfa- to é um sal de sulfato 1:1 de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3- il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida.

42. Sal de acordo com a reivindicação 1, em que o sal é um sal de succinato de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]- 2E-2-propenamida.

43. Sal de acordo com a reivindicação 42, em que o sal de suc- cinato é um sal de hemissuccinato 2:1 de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H- indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E-2-propenamida.

44. Sal de acordo com a reivindicação 1, em que o sal é um sal de sódio de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E- .2-propenamida.

45. Sal de acordo com a reivindicação 1, em que o sal é um sal de potássio de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]- 2E-2-propenamida.

46. Sal de acordo com a reivindicação 1, em que o sal é um sal de cálcio de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E- 2-propenamida.

47. Sal de acordo com a reivindicação 1, em que o sal é um sal de zinco de N-hidróxi-3-[4-[[[2-(2-metil-1H-indol-3-il)etil]amino]metil]fenil]-2E- 2-propenamida.

48. Composição farmacêutica compreendendo: (a) uma quantidade terapeuticamente eficaz de um sal como definido em qualquer uma das reivindicações de 1 a 47; e (b) pelo menos um portador, diluente ou excipiente farmaceuticamente acei- tável.

49. Método de tratamento de uma doença que responde a uma inibição da atividade de proteína cinase compreendendo a etapa de adminis- trar a um indivíduo com necessidade de tal tratamento uma quantidade tera- peuticamente eficaz de um sal como definido em qualquer uma das reivindi- cações de 1 a 47.