BRPI0720254A2 - Derivados de benzamida como agonistas do receptor ep4 - Google Patents

Derivados de benzamida como agonistas do receptor ep4 Download PDF

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BRPI0720254A2
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Alessandra Gaiba
Mark Patrick Healy
Christopher Norbert Johnson
Susan Roomans
Steven James Stanway
Martin Edward Swarbrick
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Description

“DERIVADOS DE BENZAMIDA COMO AGONISTAS DO RECEPTOR EP4" Esta invenção refere-se aos derivados de benzamida, aos processos para sua pre- paração, às composições farmacêuticas contendo os mesmos e a seu uso na medicina.
Os compostos da presente invenção são agonistas do receptor EP4.
Vários artigos de revisão descrevem a caracterização e relevância terapêutica dos receptores prostanóides, assim como os agonistas e antagonistas seletivos mais comumen- te usados: Eicosanoids; From Biotechnoiogy to Therapeutic Applications, Folco, Samuels- son, Maclouf, e Velo eds, Plenum Press, Nova Iorque, 1996, cap. 14, 137-154 e Journal of Lipid Mediators and Cell Signalling, 1996, 14, 83-87 e Prostanoid Receptors, Structure, Pro- perties and Funetion, S Narumiya et al, Physiological Reviews 1999, 79(4), 1193-126.
O receptor EP4 é um receptor transmembranar do tipo 7 e seu Iigante natural é a prostaglandina PGE2. PGE2 também tem afinidade para os outros receptores EP (tipos EPi, EP2 e EP3). O receptor prostanóide EP4 cai em um grupo de receptores normalmente asso- ciados com a elevação de níveis de monofosfato cíclico de adenosina intracelulares (cAMP). O receptor EP4 está associado com relaxamento da musculatura lisa, pressão intraocular, dor (em particular dor inflamatória, neuropática e visceral), inflamação, neuroproteção, dife- renciação de linfócitos, processos metabólicos dos ossos, atividades alérgicas, promoção do sono, regulação renal, secreção de muco gástrico ou entérico e secreção de bicarbonato duodenal. Portanto, agonistas do receptor EP4 podem ser úteis para o tratamento da dor, inflamação e outras condições associadas com o receptor EP4. O receptor EP4 também de- sempenha um papel importante no fechamento do dueto arterioso, vasodepressão, inflama- ção e reconstituição óssea conforme revisto por Narumiya em Prostaglandins & Other Lipid Mediators 2002, 68-69 557-73.
Várias publicações demonstraram que PGE2 agindo através do receptor subtipo EP4, e agonistas de EP4 sozinhos, podem regular citocinas inflamatórias depois de um estí- mulo inflamatório. Takayama et al no Journal of Biologieal Chemistry 2002, 277(46), 44147- 54 mostraram que PGE2 modula a inflamação durante as doenças inflamatórias suprimindo- se a produção de quimiocina derivada de macrófago por intermédio do receptor EP4. Em Bioorganie & Medicinal Chemistry 2002, 10(7), 2103-2110, Maruyama et al demonstram que o agonista seletivo do receptor EP4 (ONO-AE1-437) suprime o TNF-σ induzido por LPS no sangue total humano embora aumentando os níveis de IL-10. Um artigo proveniente de A- nesthesiology, 2002, 97, 170-176 sugere que um agonista seletivo do receptor EP4 (ONO- AE1-329) eficazmente inibiu hiperalgesia mecânica e térmica e reações inflamatórias na monoartrite aguda e crônica.
Dois artigos independentes de Sakuma et al no Journal of Bone and Mineral Rese- arch 2000, 15(2), 218-227 e Miyaura et al no Journal of Biologieal Chemistry 2000, 275(26), 19819-23, relataram a formação de osteoclasto prejudicada em células cultivadas proveni- entes de camundongos nocauteados pelo receptor EP4. Yoshida et al em Proceedings of the National Academy of Sciences ofthe United States of America 2002, 99(7), 4580-4585, através do uso de camundongos carecendo dos subtipos EP receptores para PGE2, identifi- caram EP4 como o receptor que media a formação óssea em resposta à administração de 5 PGE2. Eles também demonstraram que um agonista seletivo do receptor EP4 (ONO-4819) consistentemente induz a formação óssea em camundongos do tipo selvagem. Adicional- mente, Terai et al em Bone 2005, 37(4), 555-562 mostraram que a presença de um agonis- ta seletivo do receptor EP4 (ONO-4819) realçou a capacidade de indução óssea de rhBMP-
2, uma citocina terapêutica que pode induzir a formação óssea.
Outra pesquisa de Larsen et al mostrou que os efeitos de PGE2 na secreção na
segunda parte do duodeno humano são mediados através do receptor EP4 (Acta. Physiol. Scand. 2005, 185, 133-140). Também, foi mostrado que um agonista seletivo do receptor EP4 (ONO-AE1-329) pode proteger contra a colite em ratos (Nitta et al em Scandinavian Journal of Immunology 2002, 56(1), 66-75).
Doré et al no The European Journal of Neuroscience 2005, 22(9), 2199-206 mos-
traram que PGE2 pode proteger neurônios contra a toxicidade do peptídeo beta amilóide pela ação nos receptores EP2 e EP4. Além disso, Doré demonstrou em Brain Research
2005, 1066(1-2), 71-77 que um agonista do receptor EP4 (ONO-AE1-329) protege contra a neurotoxicidade em um modelo agudo de excitotoxicidade no cérebro.
Woodward et al no Journal of Lipid Mediators 1993, 6(1-3), 545-53 julgaram que a
pressão intraocular pode ser diminuída usando agonistas de prostanóides seletivos. Dois papéis em Investigative Ophthalmology & Visual Science mostraram que o receptor prosta- nóide EP4 é expressado em células epiteliais de cristalino humano (Mukhopadhyay et al 1999, 40(1), 105-12), e sugerem um papel fisiológico para o receptor prostanóide EP4 na modulação do fluxo na estrutura trabecular do olho (Hoyng et al 1999, 40(11), 2622-6).
Compostos que exibem atividade de ligação ao receptor EP4 foram descritos em, por exemplo, W098/55468, WOOO/18744, W000/03980, WO00/15608, W00016760, WOOO/21532, EP0855389, EP0985663, W002/50031, W002/50032, W002/50033, W002/064564, W003/103604, W003/077910, W003/086371, W004/037813, 30 W004/067524, W004/085430, US2004142969, W005/021508, W005/105733, W005/105732, W005/080367, W005/037812, W005/116010, e W006/122403.
Derivados de indoprofeno tais como ácido [4-(1-oxo-1,3-diidro-2H-benzo[f]isoindol-
2-il)fenil]-2-propiônico, sal de sódio foram descritos por Rufer et al. em Eur. J. Med. Chem. - Chimica Therapeutica, 1978, 13, 193.
A presente invenção fornece compostos da fórmula (I) e/ou derivados farmaceuti-
camente aceitáveis dos mesmos, em que, R1 representa halogênio ou alquila C1^;
R2 representa alquila ou cloro;
R3 representa H, alquila Ci„4 ou halogênio;
R4 representa H;
R5 independentemente representa halogênio ou alquila C^4; m representa 0 ou 1; n representa 0, 1 ou 2; e X representa O ou NH;
com a condição de que quando n representa 2 e R5 representa halogênio, os gru- pos R5 junto ao grupo fenila ao qual eles são ligados não formam uma porção 2,3- difluorofenila.
Em uma modalidade:
R1 representa halogênio;
R2 representa alquila Ci^ ou cloro;
R3 representa H, alquila C1^ ou halogênio;
R4 representa H;
R5 independentemente representa halogênio ou alquila C^4; m representa 0 ou 1; n representa 0, 1 ou 2; e X representa O ou NH;
com a condição de que quando n representa 2 e R5 representa halogênio, os gru- pos R5 junto ao grupo fenila ao qual eles são ligados não formam uma porção 2,3- difluorofenila.
Em uma modalidade da invenção R1 representa halogênio, tal como cloro. Em uma outra modalidade da invenção R1 é ligado à posição C(2) do anel fenila e representa cloro. Em uma modalidade adicional da invenção R1 é ligado à posição C(3) do anel fenila e re- presenta cloro. Ainda em uma modalidade adicional R1 representa metila. Ainda em uma modalidade adicional R1 é metila e é ligado à posição C(3) do anel fenila. Em uma outra modalidade R1 representa flúor. Em uma modalidade adicional R1 é flúor e é ligado à posi- ção C(3) do anel fenila.
Em uma modalidade R2 representa cloro. Em uma modalidade da invenção, R2 re- presenta alquila C1^. Em uma modalidade adicional R2 representa metila.
Em uma modalidade da invenção R3 representa H. Em uma outra modalidade da invenção R3 representa flúor.
Em uma modalidade da invenção R5 representa cloro ou flúor. Em uma outra mo- dalidade da invenção R5 representa cloro. Em uma modalidade adicional da invenção R5 representa flúor. Em uma modalidade da invenção R5 representa alquila C1-4. Em uma mo- dalidade adicional R5 representa metila. Em uma outra modalidade R5 está na posição C(3) 10 no anel fenila em relação a -CH2COOH. Ainda em uma modalidade adicional R5 representa metila na posição C(3) no anel fenila em relação a -CH2COOH.
Em uma modalidade da invenção m representa 0. Em uma modalidade da invenção m representa 1.
Em uma modalidade da invenção n representa 0. Em uma modalidade da invenção n representa 1. Em uma modalidade da invenção n representa 2. Em uma outra modalidade da invenção n representa 2 e um R5 é flúor e o outro é cloro ou flúor.
Em uma modalidade da invenção X representa O. Em uma outra modalidade da in- venção X representa NH.
Em uma modalidade da invenção:
R1 representa halogênio;
R2 é alquila C1^;
R3 é H;
R5 representa alquila C1^; m representa 1;
n representa 1; e
X representa O.
Em uma outra modalidade da invenção:
R1 representa cloro;
R2 é alquila C1^;
R3 é H;
R5 representa alquila C1-4; m representa 1; n representa 1; e X representa O.
Em uma modalidade adicional da invenção:
R1 representa halo;
R2 é metila; R3 é Η;
R5 representa alquila C1-4; m representa 1; n representa 1; e X representa O.
Em uma modalidade adicional da invenção:
R1 representa cloro;
R2 é metila;
R3 é H;
R5 representa alquila Ci^;
m representa 1; n representa 1; e X representa O.
Em uma modalidade adicional da invenção:
R1 representa cloro;
R2 é metila;
R3 é H;
R5 representa metila; m representa 1;
n representa 1; e
X representa O.
Em uma modalidade adicional da invenção:
R1 representa cloro na posição C(3) no anel fenila;
R2 é metila;
R3 é H;
R5 representa metila na posição C(3) no anel fenila em relação a -CH2COOH; m representa 1; n representa 1; e X representa O.
Em uma outra modalidade da invenção é fornecido um composto da fórmula (I) se-
lecionado a partir do grupo que consiste de:
ácido (3-cloro-4-{[(2-cloro-5-{[(3-clorofenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}fenil)-
acético;
ácido {3-cloro-4-[({2-cloro-5-[(fenilmetil)óxi]fenil}carbonil)amino]fenil}acético;
ácido (4-{[(2-cloro-5-{[(3-clorofenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}fenil)acético;
ácido (4-{[(2-cloro-5-{[(3-clorofenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}-2-fluorofenil)-
acético; ácido (4-{[(2-cloro-5-{[(3-clorofenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}-3-fluorofenil)- acético;
ácido (4-{[(2-cloro-5-{[(3-clorofenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}-2,5-difluorofenil)-
acético;
ácido (3-cloro-4-{[(2-cloro-5-{[(3-clorofenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}-2-
fluorofenil)acético;
ácido (4-{[(2-cloro-5-{[(3-clorofenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}-3-metilfenil)-
acético;
ácido {4-[({2-cloro-5-[(fenilmetil)amino]fenil}carbonil)amino]fenil}acético; ácido (4-{[(2-cloro-5-{[(3-clorofenil)metil]amino}fenil)carbonil]amino}fenil)acético; ácido (4-{[(2-cloro-5-{[(2-clorofenil)metil]amino}fenil)carbonil]amino}fenil)acético; ácido (5-cloro-4-{[(2-cloro-5-{[(3-clorofenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}-2-
fluorofenil)acético;
ácido (4-{[(5-{[(3-clorofenil)metil]óxi}-2-metilfenil)carbonil]amino}fenil)acético;
ácido {4-[({2-metil-5-[(fenilmetil)óxi]fenil}carbonil)amino]fenil}acético;
ácido (4-{[(6-cloro-3-{[(3-clorofenil)metil]óxi}-2-fluorofenil)carbonil]amino}fenil)-
acético;
ácido {4-[({6-cloro-2-fluoro-3-[(fenilmetil)óxi]fenil}carbonil)amino]fenil}acético; ácido {3-cloro-4-[({2-metil-5-[(fenilmetil)óxi]fenil}carbonil)amino]fenil}acético; ácido (3-cloro-4-{[(5-{[(3-clorofenil)metil]óxi}-2-metilfenil)carbonil]amino}fenil)-
acético;
ácido {3-cloro-4-[({6-cloro-2-fluoro-3-[(fenilmetil)óxi]fenil}carbonil)amino]fenil}-
acético;
ácido (3-cloro-4-{[(6-cloro-3-{[(3-clorofenil)metil]óxi}-2-fluorofenil)carbonil]amino}- fenil)acético;
ácido (4-{[(2-cloro-5-{[(3-fluorofenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}-3-metilfenil)-
acético;
ácido (4-{[(2-cloro-5-{[(3-fluorofenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}-3-fluorofenil)-
acético;
ácido (4-{[(5-{[(3-clorofenil)metil]óxi}-2-metilfenil)carbonil]amino}-3-fluorofenil)-
acético;
ácido (4-{[(5-{[(3-clorofenil)metil]óxi}-2-metilfenil)carbonil]amino}-3-metilfenil)acético; ácido (4-{[(2-cloro-5-{[(3-metilfenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}-3-fluorofenil)-
acético;
ácido (4-{[(2-cloro-5-{[(3-metilfenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}-3-metilfenil)acético; ácido (4-{[(2-cloro-5-{[(2-clorofenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}fenil)acético; ácido (3-cloro-4-{[(2-cloro-5-{[(2-clorofenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}fenil)- acético; ácido (3-cloro-4-{[(2-cloro-5-{[(4-clorofenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}fenil)-
acético;
ácido (3-cloro-4-{[(2-cloro-5-{[(3-fluorofenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}fenil)-
acético;
ácido (3-cloro-4-{[(2-cloro-5-{[(3-metilfenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}fenil)-
acético;
ácido (3-fluoro-4-{[(5-{[(3-fluorofenil)metil]óxi}-2-metilfenil)carbonil]amino}fenil)-
acético;
ácido (4-{[(5-{[(3-fluorofenil)metil]óxi}-2-metilfenil)carbonil]amino}-3-metilfenil)-
acético;
ácido (3-fluoro-4-{[(2-metil-5-{[(3-metilfenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}fenil)-
acético;
ácido (3-cloro-4-{[(2-metil-5-{[(3-metilfenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}fenil)acético; ácido (4-{[(2-cloro-5-{[(3-clorofenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}-3,5-difluorofenil)-
acético;
ácido (3-metil-4-{[(2-metil-5-{[(3-metilfenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}fenil)acético; ácido (3-cIoro-4-{[(5-{[(3-fluorofenil)metil]óxi}-2-metilfenil)carbonil]amino}fenil)-
acético;
ácido (4-{[(6-cloro-3-{[(3-clorofenil)metil]óxi}-2-fluorofenil)carbonil]amino}-3-
fluorofenil)acético;
ácido (4-{[(5-{[(3-clorofenil)metil]óxi}-2-metilfenil)carbonil]amino}-3,5-difluorofenil)-
acético;
ácido (4-{[(6-cloro-3-{[(3-clorofenil)metil]óxi}-2-fluorofenil)carbonil]amino}-3-
metilfenil)acético;
ácido (3-cloro-4-{[(6-cloro-2-fluoro-3-{[(3-fluorofenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}- fenil)acético;
ácido (4-{[(6-cloro-2-fluoro-3-{[(3-fluorofenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}-3-
fluorofenil)acético;
ácido (4-{[(6-cloro-2-fluoro-3-{[(3-fluorofenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}-3-
metilfenil)acético;
ácido (4-{[(6-cloro-2-fluoro-3-{[(3-metilfenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}-3-
fluorofenil)acético;
e/ou um derivado farmaceuticamente aceitável do mesmo.
A presente invenção abrange todas as combinações das modalidades descritas neste relatório.
Conforme usado neste relatório, o termo “alquila C1V' inclui grupos alquila de ca- deia reta e cadeia ramificada contendo 1 a 4 átomos de carbono, tais como metila, etila, n- propila, iso-propila, n-butila e /so-butila.
Conforme usado neste relatório, “halogênio” significa flúor, cloro, bromo ou iodo.
Por derivado farmaceuticamente aceitável é significado qualquer sal ou éster far- maceuticamente aceitável, ou sal de tal éster dos compostos da fórmula (I), ou qualquer outro composto que sob administração ao recipiente é capaz de fornecer (direta ou indire- tamente) um composto da fórmula (I) ou um metabólito ativo ou resíduo do mesmo.
Será avaliado que, para o uso farmacêutico, os sais referidos acima serão os sais farmaceuticamente aceitáveis, porém outros sais podem encontrar uso, por exemplo, na preparação de compostos da fórmula (I) e os sais farmaceuticamente aceitáveis dos mes- mos.
Sais farmaceuticamente aceitáveis incluem aqueles descritos por Berge, Bighley e Monkhouse, J. Pharm. Sci., 1977, 66, 1-19. O termo “sais farmaceuticamente aceitáveis” refere-se a sais preparados a partir das bases farmaceuticamente aceitáveis incluindo ba- ses inorgânicas e bases orgânicas. Sais derivados de bases inorgânicas incluem alumínio, amônio, cálcio, cobre, férricos, ferrosos, lítio, magnésio, sais mangânicos, manganês, po- tássio, sódio, zinco, e semelhantes. Sais derivados de bases orgânicas farmaceuticamente aceitáveis incluem sais de aminas primárias, secundárias, e terciárias; aminas substituídas incluindo aminas substituídas que ocorrem naturalmente; e aminas cíclicas. Bases orgâni- cas farmaceuticamente aceitáveis particulares incluem arginina, betaína, cafeína, colina, Ν,Ν’-dibenziletilenodiamina, dietilamina, 2-dietilaminoetanol, 2-dimetilaminoetanol, etanola- mina, etilenodiamina, N-etil-morfolina, N-etilpiperidina, glucamina, glucosamina, histidina, hidrabamina, isopropilamina, lisina, metilglucamina, morfolina, piperazina, piperidina, proca- ína, purinas, teobromina, trietilamina, trimetilamina, tripropilamina, tris(hidroximetil)aminometano, e semelhantes. Sais também podem ser formados a partir das resinas de troca iônica básicas, por exemplo, resinas de poliamina.
Será avaliado que os compostos da fórmula (I) podem ser produzidos in vivo pelo metabolismo de um pró-medicamento adequado. Tais pró-medicamentos podem ser, por exemplo, ésteres metabolicamente lábeis fisiologicamente aceitáveis de compostos da fór- mula (I). Estes podem ser formados por esterificação do grupo ácido carboxílico no compos- to precursor da fórmula (I) com, onde apropriado, proteção prévia de quaisquer outros gru- pos reativos presentes na molécula seguido por desproteção, se necessário. Exemplos de tais ésteres metabolicamente lábeis incluem ésteres alquílicos C1^, por exemplo, ésteres metil etílicos ou ésteres t-butílicos, ésteres alquenílicos C3.6, por exemplo, ésteres alílicos substituídos ou aminoalquílicos não substituídos (por exemplo, aminoetílicos, 2-(N,N- dietilamino) etílicos, ou ésteres 2-(4-morfolino)etílicos ou ésteres aciloxialquílicos tais como, aciloximetílicos ou 1-aciloxietílicos, por exemplo, éster pivaloiloximetílico, 1-pivaloiloxietílico, acetoximetílico, 1-acetoxietílico, 1-(1-metóxi-1-metil)etilcarboniloxietílico, 1-benzoiloxietílico, isopropoxicarboniloximetílico, 1 -isopropoxicarboniloxietílico, cicloexilcarboniloximetílico, 1 - cicloexilcarboniloxietílico, cicloexiloxicarboniloximetílico, 1 -cicloexiloxicarboniloxietílico, 1 -(4- tetraidropiranilóxi)carboniloxietílico ou 1 -(4-tetraidropiranil)carboniloxietílico.
Deve ser entendido que a presente invenção abrange todos os isômeros dos com- postos da fórmula (I) e seus derivados farmaceuticamente aceitáveis, incluindo todas as formas geométricas, tautoméricas e ópticas, e misturas das mesmas (por exemplo, misturas racêmicas).
Visto que os compostos da fórmula (I) são intencionados para o uso em composi- ções farmacêuticas, será entendido que eles são fornecidos na forma substancialmente pura, por exemplo, pelo menos 50 % pura, mais adequadamente pelo menos 75 % pura e preferivelmente pelo menos 95 % pura (as % estão em uma base de p/p). Preparações im- puras dos compostos da fórmula (I) podem ser usadas para preparar as formas mais puras usadas nas composições farmacêuticas. Embora a pureza de compostos intermediários da presente invenção seja menos crítica, será facilmente entendido que a forma substancial- mente pura é preferida como para os compostos da fórmula (I). Preferivelmente, quando possível, os compostos da presente invenção são obtidos na forma cristalina.
Quando alguns dos compostos desta invenção são cristalizados ou são recristali- zados a partir dos solventes orgânicos, o solvente de cristalização pode estar presente no produto cristalino. Esta invenção inclui dentro de seu escopo tais solvatos, incluindo solvatos da molécula de ácido livre e solvatos de sais derivados da molécula de ácido livre. Similar- mente, alguns dos compostos desta invenção podem ser cristalizados ou recristalizados a partir dos solventes contendo água. Em tais casos, água de hidratação pode ser formada. Esta invenção inclui dentro de seu escopo hidratos estequiométricos, assim como compos- tos contendo quantidades variáveis de água que podem ser produzidos por processos tais como liofilização. Além disso, condições de cristalização diferentes podem levar à formação de formas polimórficas diferentes de produtos cristalinos. Esta invenção inclui dentro de seu escopo todas as formas polimórficas dos compostos da fórmula (I).
A presente invenção também inclui dentro de seu escopo todos os compostos iso- topicamente marcados da fórmula (I). Tais compostos são idênticos àqueles relatados aci- ma exceto que um ou mais átomos nestes são substituídos por um átomo tendo uma massa atômica ou número de massa diferente da massa atômica ou número de massa usualmente encontrado na natureza. Exemplos de isótopos que podem ser incorporados nos compostos da fórmula (I) e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos incluem isótopos de hidro- gênio, carbono, nitrogênio, oxigênio, cloro e flúor, tais como 2H, 3H, 11C, 13C, 14C, 15N, 170, 180, 36CI e 18F.
Compostos isotopicamente marcados da fórmula (I), por exemplo, aqueles em que os isótopos radioativos tais como 3H, 14C são incorporados, são úteis em ensaios de medi- camentos e/ou de distribuição de tecido de substrato. Isótopos tritiados, isto é, 3H, e carbo- no 14, isto é, 14C, são particularmente preferidos por sua facilidade de preparação e detec- tabilidade. Isótopos 11C e 18F são particularmente úteis na PET (tomografia de emissão positrônica), e são úteis no imageamento cerebral. A substituição adicional com isótopos mais pesados tais como deutério, isto é, 2H, pode fornecer certas vantagens terapêuticas resultantes de maior estabilidade metabólica, por exemplo, meia-vida in vivo aumentada ou necessidades de dosagem reduzidas e, consequentemente, pode ser preferida em algumas circunstâncias. Compostos isotopicamente marcados da fórmula (I) podem ser preparados realizando-se os procedimentos sintéticos divulgados nos Esquemas e/ou nos Exemplos abaixo, substituindo-se um reagente isotopicamente marcado prontamente disponível por um reagente não isotopicamente marcado.
Os compostos da fórmula (I) são agonistas do receptor EP4 e, portanto, podem ser úteis no tratamento de doenças mediadas pelo receptor EP4. Estas doenças incluem aque- las mediadas pela ação ou perda de ação de PGE2 em receptores EP4.
Em particular, os compostos da fórmula (I) podem ser úteis no tratamento da dor, por exemplo, dor articular crônica (por exemplo, artrite reumatóide, osteoartrite, espondilite reumatóide, artrite gotosa e artrite juvenil) incluindo a propriedade de modificação da doen- ça e preservação da estrutura da articulação; dor musculoesquelética; dor lombar e no pes- coço; distensões e tensões; dor neuropática; dor simpaticamente mantida; miosite; dor as- sociada com câncer e fibromialgia; dor associada com enxaqueca; dor associada com gripe ou outras infecções virais, tais como as comuns de resfriado; febre reumática; dor associa- da com distúrbios do intestino funcional tais como dispepsia não ulcerosa, dor torácica não cardíaca e síndrome do intestino irritável; dor associada com isquemia miocárdica; dor do pós-operatório; dor de cabeça; dor de dentes; e dismenorréia.
Os compostos da fórmula (I) podem ser particularmente úteis no tratamento da dor neuropática e sintomas associada a esta. As síndromes da dor neuropática incluem: neuro- patia diabética; dor do nervo ciático; dor lombar não específica; dor da esclerose múltipla; fibromialgia; neuropatia relacionada ao HIV; neuralgia pós-herpética; neuralgia trigêmea; e dor resultante de trauma físico, amputação, câncer, toxinas ou condições inflamatórias crô- nicas. Sintomas da dor neuropática incluem dor com fisgadas espontâneas e lancinantes, ou dor permanente e ardente. Além disso, existe dor incluída associada com sensações normalmente não dolorosas tais como “formigamento” (paraestesia e disestesia), sensibili- dade aumentada ao toque (hiperestesia), sensação dolorosa a seguir de estímulo inócuo (alodinia dinâmica, estática ou térmica), sensibilidade aumentada aos estímulos nocivos (hiperalgesia térmica, ao frio, mecânica), continuando a sensação de dor depois da remo- ção do estímulo (hiperpatia) ou uma ausência ou déficit nas vias sensoriais seletivas (hipo- algesia). Os compostos da fórmula (I) também podem ser úteis no tratamento de inflamação, por exemplo, no tratamento de condições da pele (por exemplo, queimadura de sol, quei- maduras, eczema, dermatite, psoríase); doenças oftálmicas tais como glaucoma, retinite, retinopatias, uveíte e de lesão aguda ao tecido ocular (por exemplo, conjuntivite); distúrbios pulmonares (por exemplo, asma, bronquite, enfisema, rinite alérgica, síndrome da angústia respiratória, doença dos criadores de pombos, pulmão do fazendeiro, COPD; distúrbios do trato gastrointestinal (por exemplo, úlcera aftosa, doença de Crohn, gastrite atópica, gastrite varioliforme, colite ulcerativa, doença celíaca, ileíte regional, síndrome do intestino irritável, doença inflamatória intestinal, doença do refluxo gastrointestinal, diarréia, constipação); transplante de órgãos; outras condições com um componente inflamatório tais como doença vascular, enxaqueca, periarterite nodosa, tireoidite, anemia aplástica, doença de Hodgkin, esclerodomia, miaestenia gravis, esclerose múltipla, sarcoidose, síndrome nefrótica, sín- drome de Bechet, polimiosite, gengivite, isquemia miocárdica, pirexia, lúpus eritematoso sistêmico, polimiosite, tendinite, bursite, e síndrome de Sjogren.
Os compostos da fórmula (I) também podem ser úteis no tratamento de doenças imunológicas tais como doenças autoimunes, doenças de deficiência imunológica ou trans- plante de órgãos. Os compostos da fórmula (I) também podem ser eficazes no aumento da latência de infecção por HIV.
Os compostos da fórmula (I) também podem ser úteis no tratamento de doenças de ativação plaquetária excessiva ou não desejada tais como claudicação intermitente, an- gina instável, acidente vascular cerebral, e síndrome coronariana aguda (por exemplo, do- enças vasculares oclusivas).
Os compostos da fórmula (I) também podem ser úteis como um medicamento com ação diurética, ou podem ser úteis para tratar síndrome da bexiga hiperativa.
Os compostos da fórmula (I) também podem ser úteis no tratamento de impotência ou disfunção erétil.
Os compostos da fórmula (I) também podem ser úteis no tratamento de doença ós- sea caracterizada pelo metabolismo ou reabsorsão óssea anormal tal como osteoporose (especialmente osteoporose pós-menopausa), hipercalcemia, hiperparatireoidismo, doenças ósseas de Paget, osteólise, hipercalcemia de malignade com ou sem metástases ósseas, artrite reumatóide, periodontite, osteoartrite, ostealgia, osteopenia, calculose, litíase (espe- cialmente urolitíase), gota e espondilíte anquilosante, tendinite e bursite.
Os compostos da fórmula (I) também podem ser úteis na reconstituição óssea e/ou promoção da geração óssea e/ou promoção do restabelecimento de fratura.
Os compostos da fórmula (I) também podem ser úteis para atenuar os efeitos cola- terais hemodinâmicos de NSAIDs e inibidores de COX-2. Os compostos da fórmula (I) também podem ser úteis no tratamento de doenças cardiovasculares tais como hipertensão ou isquemia miocárdica; insuficiência venosa fun- cional ou orgânica; terapia varicosa; hemorróidas; e estado de choque associado com uma queda acentuada na pressão arterial (por exemplo, choque séptico).
Os compostos da fórmula (I) também podem ser úteis no tratamento de doenças neurodegenerativas e neurodegeneração tais como demência, demência particularmente degenerativa (incluindo demência senil, doença de Alzheimer, doença de Pick, coréia de Huntingdon, doença de Parkinson e doença de Creutzfeldt-Jakob, ALS, doença neuromoto- ra); demência vascular (incluindo demência multi-infarto); assim como demência associada com lesões que ocupam espaço intracraniano; trauma; infecções e condições relacionadas (incluindo infecção por HIV); metabolismo; toxinas; anoxia e deficiência de vitaminas; e per- da cognitiva leve associada com o envelhecimento, particularmente Perda de Memória As- sociada à Idade.
Os compostos da fórmula (I) também podem ser úteis no tratamento de distúrbios neurológicos e podem ser úteis como agentes de neuroproteção. Os compostos da inven- ção também podem ser úteis no tratamento de neurodegeneração a seguir de acidente vas- cular cerebral, parada cardíaca, bypass pulmonar, lesão cerebral traumática, lesão da me- dula espinhal ou semelhantes.
Os compostos da fórmula (I) também podem ser úteis no tratamento de complica- ções de diabetes Tipo 1 (por exemplo, microangiopatia diabética, retinopatia diabética, ne- fropatia diabética, degeneração macular, glaucoma), síndrome nefrótica, anemia aplástica, uveíte, doença de Kawasaki e sarcoidose.
Os compostos da fórmula (I) também podem ser úteis no tratamento de disfunção renal (nefrite, particularmente glomerulonefrite proliferativa mesangial, síndrome nefrítica), disfunção do fígado (hepatite, cirrose) e disfunção gastrointestinal (diarréia).
Deve ser entendido que, conforme usado neste relatório, qualquer referência ao tratamento inclui tanto o tratamento de sintomas estabelecidos quanto o tratamento profiláti- co.
De acordo com uma modalidade adicional da invenção, é fornecido um composto da fórmula (I) ou um derivado farmaceuticamente aceitável do mesmo para o uso na medi- cina humana ou veterinária.
De acordo com uma outra modalidade da invenção, é fornecido um composto da fórmula (I) ou um derivado farmaceuticamente aceitável do mesmo para o uso no tratamen- to de uma condição que é mediada pela ação ou perda de ação de PGE2 em receptores EP4.
De acordo com uma modalidade adicional da invenção, é fornecido um método de tratar um paciente humano ou animal sofrendo de uma condição que é mediada pela ação ou pela perda de ação de PGE2 em receptores EP4 que compreende administrar ao dito pa- ciente uma quantidade eficaz de um composto da fórmula (I) ou um derivado farmaceutica- mente aceitável do mesmo.
De acordo com uma modalidade adicional da invenção é fornecido um método de tratar um paciente humano ou animal sofrendo de uma dor, ou um distúrbio inflamatório, imunológico, ósseo, neurodegenerativo ou renal, em que o método compreende administrar ao dito paciente uma quantidade eficaz de um composto da fórmula (I) ou um derivado far- maceuticamente aceitável do mesmo.
De acordo com uma outra modalidade da invenção, é fornecido o uso de um com- posto da fórmula (I) ou um derivado farmaceuticamente aceitável do mesmo para a fabrica- ção de um medicamento para o tratamento de uma condição que é mediada pela ação ou perda de ação de PGE2 em receptores EP4.
De acordo com uma outra modalidade da invenção é fornecido o uso de um com- posto da fórmula (I) ou um derivado farmaceuticamente aceitável do mesmo para a fabrica- ção de um medicamento para o tratamento ou prevenção de uma condição tal como uma dor, ou um distúrbio inflamatório, imunológico, ósseo, neurodegenerativo ou renal.
Os compostos da fórmula (I) e seus derivados farmaceuticamente aceitáveis são convenientemente administrados na forma de composições farmacêuticas. Tais composi- ções podem ser convenientemente apresentadas para o uso na maneira convencional em mistura com um ou mais portadores ou diluentes fisiologicamente aceitáveis.
Assim, em um outro aspecto da invenção, é fornecida uma composição farmacêuti- ca compreendendo um composto da fórmula (I) ou um derivado farmaceuticamente aceitá- vel do mesmo adaptada para o uso na medicina humana ou veterinária.
Embora seja possível que os compostos da fórmula (I) ou um derivado farmaceuti- camente aceitável dos mesmos sejam administrados como o produto químico bruto, é prefe- rível apresentá-los como uma formulação farmacêutica. As formulações da presente inven- ção compreendem os compostos da fórmula (I) ou um derivado farmaceuticamente aceitá- vel dos mesmos junto a um ou mais portadores ou diluentes aceitáveis para tal e opcional- mente outros ingredientes terapêuticos. 0(s) portador(s) deve(m) ser “aceitável(s)” no senti- do de ser(em) compatível(s) com os outros ingredientes da formulação e não deletério(s) ao recipiente dos mesmos. Assim, em uma modalidade, a invenção fornece uma composição farmacêutica compreendendo um composto da fórmula (I) ou um derivado farmaceutica- mente aceitável do mesmo e um portador ou diluente farmaceuticamente aceitável para tal.
As formulações incluem aquelas adequadas para administração oral, parenteral (incluindo subcutânea, por exemplo, por injeção ou por tablete de depósito, intradérmica, intratecal, intramuscular, por exemplo, por depósito e intravenosa), retal e tópica (incluindo dérmica, bucal e sublingual) embora a via mais adequada possa depender, por exemplo, da condição e do distúrbio do recipiente. As formulações podem ser convenientemente apre- sentadas na forma de dosagem unitária e podem ser preparadas por qualquer um dos mé- todos bem conhecidos na técnica da ciência farmacêutica (veja, por exemplo, métodos di- vulgados em “Remington - The Science and Practice of Pharmacy”, 21- Edição, Lippincott, 5 Williams & Wilkins, USA, 2005 e referências neste). Todos os métodos incluem a etapa de permitir a associação do composto da fórmula (I) ou um sal de adição de ácido farmaceuti- camente aceitável do mesmo (“ingrediente ativo”) com o portador que constitui um ou mais ingredientes adicionais. No geral, as formulações são preparadas permitindo-se uniforme e intimamente a associação do ingrediente ativo com portadores líquidos ou portadores sóli- 10 dos finamente divididos ou ambos e depois, se necessário, formando-se o produto na for- mulação desejada.
Formulações da presente invenção adequadas para a administração oral podem ser apresentadas como unidades distintas tais como cápsulas, hóstias ou tabletes (por e- xemplo, tabletes mastigáveis em particular para administração pediátrica) cada uma destas 15 contendo uma quantidade pré-determinada do ingrediente ativo; como um pó ou grânulos; como uma solução ou uma suspensão em um líquido aquoso ou um líquido não aquoso; ou como uma emulsão líquida óleo-em-água ou uma emulsão líquida água-em-óleo. O ingredi- ente ativo também pode ser apresentado como um bolo, eletuário ou pasta.
Um tablete pode ser preparado por compressão ou moldagem, opcionalmente com 20 um ou mais ingredientes adicionais. Tabletes comprimidos podem ser preparados por com- pressão em uma máquina adequada, o ingrediente ativo em uma forma de livre escoamento tal como um pó ou grânulos, opcionalmente misturado com um aglutinante, lubrificante, di- luente inerte, agente lubrificante, ativo de superfície ou dispersante. Tabletes moldados po- dem ser preparados por moldagem em uma máquina adequada, uma mistura do composto 25 em pó umedecida com um diluente líquido inerte. Os tabletes podem ser opcionalmente revestidos ou marcados e podem ser formulados de modo a fornecer liberação lenta ou con- trolada do ingrediente ativo nestes.
Formulações para administração parenteral incluem soluções para injeção estéreis aquosas e não aquosas que podem conter antioxidantes, tampões, bacteriostáticos e solu- 30 tos que tornam a formulação isotônica com o sangue do recipiente intencionado; e suspen- sões estéreis aquosas e não aquosas que podem incluir agentes de suspensão e agentes espessantes. As formulações podem ser apresentadas em recipientes de dose única ou de doses múltiplas, por exemplo, ampolas e frascos vedados, e podem ser armazenadas em uma condição de secagem a frio (IiofiIizada) exigindo apenas a adição de um portador líqui- 35 do estéril, por exemplo, água para injeção, imediatamente antes do uso. Soluções para inje- ção e suspensões extemporâneas podem ser preparadas a partir dos pós estéreis, grânulos e tabletes do tipo previamente descrito. Formulações para administração retal podem ser apresentadas como um supositó- rio com os portadores usuais tais como manteiga de cacau, gordura sólida ou polietilenogli- col.
Formulações para administração tópica na boca, por exemplo, bucal ou sublin- gualmente, incluem pastilhas expectorantes compreendendo o ingrediente ativo em uma base flavorizada tal como sacarose e acácia ou tragacanto, e pastilhas compreendendo o ingrediente ativo em uma base tal como gelatina e glicerina ou sacarose e acácia.
Os compostos da fórmula (I) também podem ser formulados como preparações de depósito. Tais formulações de ação prolongada podem ser administradas por implantação 10 (por exemplo, subcutânea ou intramuscularmente) ou por injeção intramuscular. Assim, por exemplo, os compostos da fórmula (I) podem ser formulados com materiais poliméricos ou hidrofóbicos adequados (por exemplo, como uma emulsão em um óleo aceitável) ou resinas de troca iônica, ou como derivados frugalmente solúveis, por exemplo, como um sal frugal- mente solúvel.
Além dos ingredientes particularmente mencionados acima, as formulações podem
incluir outros agentes convencionais na técnica levando em conta o tipo de formulação em questão, por exemplo, aquelas adequadas para administração oral podem incluir agentes flavorizantes.
Os compostos da fórmula (I) podem ser usados em combinação com outros agen- 20 tes terapêuticos, por exemplo, inibidores de COX-2, tais como celecoxib, rofecoxib, valdeco- xib ou parecoxib; inibidores de 5-lipoxigenase; analgésicos tais como paracetamol; NSAIDs, tais como diclofenaco, indometacina, nabumetona, naproxeno ou ibuprofeno; antagonistas de receptor de leucotrieno; DMARDs tais como metotrexato; bloqueadores do canal de só- dio, tais como lamotrigina; antagonistas do canal de cálcio do tipo N; moduladores do recep- 25 tor NMDA, tais como antagonistas do receptor de glicina; gabapentina, pregabalina e com- postos relacionados; antidepressivos tricíclicos tais como amitriptilina; medicamentos antie- pilépticos estabilizadores de neurônio; inibidores de absorção monoaminérgicos tais como venlafaxina; analgésicos opióides; anestésicos locais; agonistas de SHT1, tais como tripta- nos, por exemplo, sumatriptano, naratriptano, zolmitriptano, eletriptano, frovatriptano, almo- 30 triptano ou rizatriptano; Iigantes do receptor EP1; Iigantes do receptor EP2; Iigantes do recep- tor EP3; antagonistas de EP1; antagonistas de EP2 e antagonistas de EP3; agonistas do re- ceptor de canabinóide; antagonistas de VR1. Quando os compostos são usados em combi- nação com outros agentes terapêuticos, os compostos podem ser administrados seqüencial ou simultaneamente por qualquer via conveniente.
Deste modo, a invenção fornece, em uma modalidade adicional, uma combinação
compreendendo um composto da fórmula (I) ou um derivado farmaceuticamente aceitável do mesmo junto a um agente ou agentes terapêutico(s) adicional(s). Em uma modalidade adicional da invenção é fornecida uma combinação compreendendo um agonista do recep- tor EP4 da fórmula (I) ou um derivado farmaceuticamente aceitável do mesmo e paraceta- mol.
As combinações referidas acima podem ser convenientemente apresentadas para o uso na forma de uma formulação farmacêutica e, assim, formulações farmacêuticas com- preendendo uma combinação, conforme definido acima, junto a um portador ou diluente farmaceuticamente aceitável compreendem um aspecto adicional da invenção. Os compo- nentes individuais de tais combinações podem ser administrados seqüencial ou simultane- amente em formulações farmacêuticas separadas ou combinadas.
Quando um composto da fórmula (I) ou um derivado farmaceuticamente aceitável do mesmo é usado em combinação com um segundo agente terapêutico ativo contra a mesma doença, a dose de cada composto pode diferir daquela de quando o composto é usado sozinho. Doses apropriadas serão prontamente avaliadas por aqueles habilitados na técnica.
Em uma modalidade da invenção é fornecido um método de tratar um paciente humano ou animal sofrendo de uma condição que é mediada pela ação ou pela perda de ação de PGE2 em receptores EP4, o qual compreende administrar ao dito paciente uma quantidade eficaz de um composto da fórmula (I) ou um derivado farmaceuticamente acei- tável do mesmo e paracetamol.
Uma dosagem diária proposta de compostos da fórmula (I) ou seus sais farmaceu- ticamente aceitáveis para o tratamento do homem é de 0,001 a 30 mg/kg de peso corpóreo por dia e mais particularmente 0,1 a 3 mg/kg de peso corpóreo por dia, calculada como o ácido livre, a qual pode ser administrada como uma dose única ou dividida, por exemplo, uma a quatro vezes por dia. A faixa de dose para seres humanos adultos é geralmente de 0,1 a 1000 mg/dia, tal como de 10 a 800 mg/dia, preferivelmente 10 a 200 mg/dia, calculada como o ácido livre.
Uma dosagem diária adequada de paracetamol é de até 4000 mg por dia. Doses de unidade adequadas incluem 200, 400, 500 e 1000 mg, uma, duas, três ou quatro vezes por dia.
A quantidade precisa dos compostos da fórmula (I) administrada a um hospedeiro, particularmente um paciente humano, será de responsabilidade do médico atendente. En- tretanto, a dose utilizada dependerá de vários fatores incluindo a idade e sexo do paciente, a condição precisa sendo tratada e sua severidade, a via de administração, e qualquer tera- pia de combinação possível que possa estar sendo empregada.
A presente invenção fornece um processo para preparar os compostos da fórmula (I) e derivados farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.
Assim, em uma modalidade é fornecido um processo para preparar um composto da fórmula (I) ou um derivado farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que o processo compreende reagir um composto da fórmula (II),
em que, R1, R2, R3, R4, R5, m, n e X são conforme definidos na fórmula (I) e R re- presenta um grupo de proteção éster alquílico adequado, tal como um grupo metílico, etílico ou benzílico, com um ácido aquoso, e opcionalmente em seguida formando um derivado farmaceuticamente aceitável do composto então formado.
Um ácido adequado é ácido clorídrico 2N. A reação mencionada acima envolvendo um composto da fórmula (II) e um ácido pode ser convenientemente realizada em um sol- vente tal como ácido acético, em uma temperatura elevada, por exemplo, 90 °C.
Em uma modalidade adicional da invenção é fornecido um processo para preparar
um composto da fórmula (I) ou um derivado farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que o processo compreende reagir um composto da fórmula (II),
em que, R11 R2, R3, R4, R51 m, n e X são conforme definidos na fórmula (I) e R re- presenta um grupo de proteção éster alquílico adequado, tal como um grupo metílico, etílico ou benzílico, com uma base e opcionalmente em seguida formando um derivado farmaceu- ticamente aceitável do composto então formado.
Bases adequadas incluem hidróxido de sódio e hidróxido de lítio. A reação mencio- nada acima envolvendo o composto (II) e uma base pode ser convenientemente realizada em um solvente ou uma mistura de solventes, tal como metanol/água, etanol/água ou 1,4- dioxano/água. A reação pode ser realizada na temperatura ambiente ou em uma temperatu- ra elevada.
Compostos da fórmula (II) onde X representa O ou NH podem ser preparados de acordo com o Esquema 1 abaixo:
Esquema 1 R O
XH
'OH
Rj
(A)
R O
R 0
(R5)n °Λ
*\-Τ\ V°R
H
(D)
'N
OR
(R5)n
(R1)n
R0
X
(li)
em que, R11 R21 R3, R41 R51 m, n e X são conforme definidos na fórmula (I) e R re- presenta um grupo de proteção éster alquílico adequado, tal como um grupo metílico, etílico ou benzílico.
Compostos da fórmula (II) podem ser obtidos a partir dos compostos das fórmulas (C) e (D) usando um reagente de ligação amida tal como dicicloexilcarbodiimida ou cloridre- to de A/-(3-dimetilaminopropil)-A/’-etilcarbodiimida. A reação é convenientemente realizada em um solvente, tal como diclorometano, com ou sem uma base, tal como trietilamina, e na temperatura ambiente ou elevada.
Alternativamente, os compostos da fórmula (II) podem ser obtidos a partir dos 10 compostos da fórmula (C) por um procedimento de etapa dupla que envolve primeiro con- verter um composto da fórmula (C) a um cloreto de ácido. Este é convenientemente obtido tratando-se um composto da fórmula (C) com um reagente tal como cloreto de tionila ou cloreto de oxalila na temperatura ambiente ou elevada, e opcionalmente na presença de uma quantidade subestequiométrica de dimetilformamida. Depois da remoção do excesso 15 de reagente por evaporação e, se necessário, destilação azeotrópica com tolueno, o cloreto de ácido bruto é tratado com um composto da fórmula (D), tipicamente em um solvente, tal como diclorometano, na presença de uma base, tal como piridina ou trietilamina, e na tem- peratura ambiente ou elevada.
Compostos da fórmula (D) são comercialmente disponíveis ou podem ser prepara- dos de acordo com métodos conhecidos na técnica. Por exemplo, (4-aminofenil)acetato de etila está disponível da Lancaster Synthesis. Compostos da fórmula (C) podem ser convenientemente obtidos tratando-se um composto da fórmula (B) com base, tal como hidróxido de lítio. A reação pode ser conveni- entemente realizada em uma mistura de solventes, tal como 1,4-dioxano/água, e na tempe- ratura ambiente ou elevada, por exemplo, 60 °C.
Compostos da fórmula (B) podem ser obtidos tratando-se um composto da fórmula
(A) com um agente benzilante, tal como um haleto de benzila. A reação é convenientemente realizada em um solvente, tal como dimetilformamida, na presença de uma base, tal como carbonato de potássio e na temperatura ambiente ou elevada, por exemplo, 60 °C.
Compostos da fórmula (A) são comercialmente disponíveis ou podem ser prepara- dos de acordo com métodos conhecidos na técnica. Por exemplo, ácido 2-cloro-5- hidroxibenzóico está disponível da Apin Chemicals Ltd., UK.
Compostos da fórmula (II) onde X representa’NH também podem ser preparados de acordo com o Esquema 2 abaixo:
Esquema 2
(E) (D)
OR
(R5)n
(G)
em que, R1, R2, R3, R4, R5, m e n são conforme definidos na fórmula (I) e R repre-
senta um grupo de proteção éster alquílico adequado, tal como um grupo metílico, etílico ou benzílico.
Compostos da fórmula (II) podem ser obtidos tratando-se um composto da fórmula
(G) com um agente benzilante, tal como um haleto de benzila. A reação é convenientemen- te realizada em um solvente, tal como dimetilformamida, na presença de uma base, tal co- mo carbonato de potássio e na temperatura ambiente ou elevada.
Alternativamente, compostos da fórmula (II) podem ser obtidos tratando-se um composto da fórmula (G) com um aldeído, na presença de um agente redutor, tal como tria- cetoxiboroidreto de sódio e em um solvente, tal como diclorometano ou dicloroetano. A rea- ção é tipicamente realizada na temperatura baixa ou ambiente, e com ou sem uma quanti- dade catalítica de um ácido, tal como ácido acético.
Compostos da fórmula (G) podem ser obtidos por redução de um composto da fórmula (F) com uma mistura de pó de ferro e ácido acético em um solvente, tal como eta- nol. A reação é tipicamente realizada na temperatura elevada, por exemplo, 80 °C.
Compostos da fórmula (F) podem ser obtidos a partir dos compostos da fórmula (E) por um procedimento de etapa dupla que envolve primeiro converter um composto da fór- mula (E) a um cloreto de ácido. Este é convenientemente obtido tratando-se um composto da fórmula (E) com um reagente tal como cloreto de tionila ou cloreto de oxalila na tempera- tura ambiente ou elevada e com ou sem uma quantidade subestequiométrica de dimetilfor- mamida. Depois da remoção do excesso de reagente por evaporação e, se necessário, des- tilação azeotrópica com tolueno, o cloreto de ácido bruto é tratado com um composto da fórmula (D), tipicamente em um solvente, tal como diclorometano, na presença de uma ba- se, tal como piridina ou trietilamina, e na temperatura ambiente ou elevada.
Compostos da fórmula (E) são comercialmente disponíveis ou podem ser prepara- dos de acordo com os métodos conhecidos na técnica. Por exemplo, ácido 2-cloro-5- nitrobenzóico está disponível da Apollo Scientific.
Compostos da fórmula (II) onde X representa O também podem ser preparados de acordo com o Esquema 3 abaixo:
Esquema 3 em que, R11 R2, R31 R41 R5, m e n são conforme definidos na fórmula (I) e R repre- senta um grupo de proteção éster alquílico adequado, tal como um grupo metílico, etílico ou benzílico.
Compostos da fórmula (II) podem ser obtidos tratando-se um composto da fórmula (K) com um agente benzilante, tal como um haleto de benzila. A reação é convenientemente realizada em um solvente, tal como dimetilformamida, na presença de uma base, tal como carbonato de potássio e na temperatura ambiente ou elevada.
Compostos da fórmula (K) podem ser obtidos tratando-se um composto da fórmula (J) com um reagente tal como tribrometo de boro em um solvente, tal como diclorometano e na temperatura reduzida, por exemplo, -78 0C a 0 °C.
Compostos da fórmula (J) podem ser obtidos a partir dos compostos da fórmula (I) por um procedimento de etapa dupla que envolve primeiro converter um composto da fór- mula (I) a um cloreto de ácido. Este é convenientemente obtido tratando-se um composto da fórmula (I) com um reagente tal como cloreto de tionila ou cloreto de oxalila na tempera- tura ambiente ou elevada e com ou sem uma quantidade subestequiométrica de dimetilfor- mamida. Depois da remoção do excesso de reagente por evaporação e, se necessário, des- tilação azeotrópica com tolueno, o cloreto de ácido bruto é tratado com um composto da fórmula (D), tipicamente em um solvente, tal como diclorometano, na presença de uma ba- se, tal como piridina ou trietilamina, e na temperatura ambiente ou elevada.
Compostos da fórmula (I) podem ser obtidos tratando-se um composto da fórmula
(H) com um reagente organometálico, tal como n-butillítio, seguido por dióxido de carbono sólido. A reação pode ser convenientemente realizada em um solvente, tal como tetraidrofu- rano, e entre a temperatura baixa (por exemplo, -78 °C) e a temperatura ambiente.
Compostos da fórmula (H) são comercialmente disponíveis ou podem ser prepara-
dos de acordo com os métodos conhecidos na técnica. Por exemplo, 4-cloro-2-fluoro-1- (metilóxi)benzeno está disponível da Sigma-Aldrich.
Os exemplos seguintes ilustram a preparação dos compostos da fórmula (I). Os exemplos mostram a preparação de intermediários (“Intermediários”) e compostos da fórmu- 15 Ia (I) (“Exemplos”). O material de partida para a preparação de intermediários pode não ne- cessariamente ter sido preparado a partir do lote referido a menos que expressamente indi- cado. Os intermediários para a preparação dos exemplos podem não necessariamente ter sido preparados a partir do lote referido a menos que expressamente indicado.
Procedimentos analíticos
Para dados de LC/MS o método de 5 minutos é usado a menos que estabelecido de outro modo.
LC/MS - método de 5 minutos:
25
20
30
Abreviações
DCM Diclorometano
DMAP4-(Dimetilamino)piridina
DMFDimetiIformamida
DMSODimetilsuIfóxido
EtOHEtanoI
EtOAcAcetato de etila
HCIÁeido clorídrico
LC/MSCromatografia líquida/Espectroscopia de massa MeOHMetanoI
MDAPPreparação Automática Dirigida à Massa NaOHHidróxido de sódio
35
Hardware
• Bomba de Gradiente 1100 da Agilent •Autoamostrador 1100 da Agilent • Detector DAD 1100 da Agilent
• Desgaseificador 1100 da Agilent
• Forno 1100 da Agilent •Controlador 1100 da Agilent
·Espectrômetro de Massa ZQ da Waters ou Espectrômetro de Massa ZMD da Wa-
ters
•Sedex 75 da Sedere, Sedex 85 da Sedere ou PL-ELS-2100 da Polymer Labs Software
MassLynx versão 4.0 SP2 da Waters Coluna
A coluna usada é uma Atlantis da Waters, as dimensões da mesma são 4,6 mm x 50 mm. O tamanho de partícula da fase estacionária é de 3 pm.
Solventes
A: Solvente aquoso = Água + 0,05 % de Ácido Fórmico B: Solvente orgânico = Acetonitrila + 0,05 % de Ácido Fórmico
Método
Tempo / min % de B 0 3 0,1 3 4 97 4,8 97 4,9 3 5,0 3 •O método acima tem uma taxa de fluxo de 3 ml/min.
•O volume de injeção para o método genérico é de 5 μΙ •A temperatura da coluna é de 30 °
·Α faixa de detecção de UV é de 220 a 330 nm
Todos os tempos de retenção são medidos em minutos.
LC/MS - método de 2 minutos:
Hardware
Acquity Binary Solvent Manager da Waters Acquity Sample Manager da Waters
Acquity PDA da Waters Espectrômetro de Massa ZQ da Waters
Sedex 75 da Sedere, Sedex 85 da Sedere ou PL -ELS-2100 da Polymer Labs Software
MassLynx versão 4.1 da Waters Coluna
Acquity UPLC BEH Ci8 de 1,7 μιη, 2,1 mm x 50 mm Forno de coluna ajustado a 40 graus centígrados Solventes
A:. Solvente aquoso = Água 0,1 % de Ácido fórmico + 10 mM de Acetato de Amô-
B:. Solvente orgânico = MeCN:Água 95:5 + 0,05 % de Ácido Fórmico
Solvente de lavagem fraca = MeOH:Água 50:50
Solvente de lavagem forte = MeOH
Aiustes do Instrumento
Volume de injeção:0,5 μΙ
Técnica de injeção:Sobreenchimento de Ioop parcial
Lavagem Fraca: 500 μΙ
Lavagem Forte: 500 μΙ
Detecção de UV: 220 a 330 nm
Taxa de amostragem de UV:40 pontos por segundo
Faixa de varredura de MS: 100 a 1000 uma
Taxadevarredurade MS:varredura de 0,2 segundo com um atraso de varredura 0,1 segundo
Função de varredura de MS:Eletrospray com comutação pos neg
Tempo do ciclo:2 minutos e 30 segundos
Gradiente
Tempo Fluxo ml/min % de A % de B Curva 0 1 97 3 6 0,1 1 97 3 6 1,4 1 0 100 6 1,9 1 0 100 6 2 1 97 3 6 RMN
Espectros de RMN de 1H foram registrados em um espectrômetro de RMN AVANCE 400 da Bruker ou um espectrômetro de RMN DPX250 da Bruker. Substituições químicas são expressadas em partes por milhão (ppm, unidades δ). Constantes de ligação (J) estão em unidades de hertz (Hz). Padrões de separação descrevem multiplicidades evi-
nio
10
15
20
entre dentes e são designados como s (singleto), d (dupleto), t (tripleto), q (quarteto), dd (dupleto duplo), dt (tripleto duplo), m (multipleto), br (amplo).
Técnicas de Purificação
A purificação dos Exemplos pode ser realizada por métodos convencionais tais
como cromatografia e/ou recristalização usando solventes adequados. Métodos cromatográ- ficos incluem cromatografia em coluna, cromatografia instantânea, HPLC (cromatografia líquida de alto desempenho), SFC (cromatografia de fluido supercrítico), SCX (cromatogra- fia de troca catiônica forte) e MDAP (preparação automática dirigida à massa).
O termo “Biotage” quando usado neste relatório refere-se a cartuchos de gel de sí-
Iica pré-empacotados comercialmente disponíveis.
Preparação automática dirigida à massa (MDAP)
Coluna
Atlantis da Waters: 19 mm x 100 mm (pequena escala); e 30 mm x 100 mm (larga
escala).
Tamanho de partícula da fase estacionária, 5 μιη.
Solventes
A: Solvente aquoso = Água + 0,1 % de Ácido Fórmico B: Solvente orgânico = Acetonitrila + 0,1 % de Ácido Fórmico Composição de solvente = Metanol: Água 80:20 Solvente de lavagem por agulha = Metanol
Métodos
Cinco métodos foram usados dependendo do tempo de retenção analítico do com- posto de interesse:
(1) Larga/Pequena escala 1,0 a 1,5 = 5 a 30 % de B (2) Larga/Pequena escala 1,5 a 2,2 = 15 a 55 % de B
(3) Larga/Pequena escala 2,2 a 2,9 = 30 a 85 % de B
(4) Larga/Pequena escala 2,9 a 3,6 = 50 a 99 % de B
Tempo de execução, 13,5 minutos, compreendendo gradiente 10 minutos seguido por uma fluxo de coluna 3,5 minutos e etapa de reequilibração.
(5) Larga/Pequena escala 3,6 a 5,0 = 80 a 99 % de B
Tempo de execução, 13,5 minutos, compreendendo gradiente 6 minutos seguido por um fluxo de coluna 7,5 minutos e etapa de reequilibração.
Taxa de fluxo
20 ml/min (Pequena Escala) ou 40 ml/min (Larga Escala).
Exemplos
Intermediário 1: 2-Cloro-5-{[(3-clorofenil)metil]óxi}benzoato de (3-clorofenil)metila A uma mistura de ácido 2-cloro-5-hidroxibenzóico (500 mg, 2,9 mmols) em DMF (20 ml) foram adicionados carbonato de potássio (1,0 g, 7,3 mmols, 2,5 eq) e brometo de 3- clorobenzila (0,8 ml, 6,1 mmols, 2,1 eq). A mistura foi aquecida a 60 0C durante 2,5 horas. Sob resfriamento, a mistura foi diluída com acetato de etila (300 ml) e lavada com água (2 x 100 ml) e depois com salmoura (70 ml). A camada orgânica foi seca e evaporada a vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (Biotage SP4, coluna de sílica 100 g) eluindo com 0 a 30 % de acetato de etila em hexanos para fornecer o composto do título como um óleo claro (1,16 g).
MS (ES+) m/z 421 [M+H]+ (C2IH1535CI3O3).
RMN de 1H (400 MHz, DMSO-cfe) δ 5,19 (2H, s), 5,35 (2H, s), 7,26 (1H, dd, J 8,8, J
3,2), 7,40- 7,56 (10H, m).
Intermediário 2: Ácido 2-cloro-5-{[(3-clorofenil)metil]óxi}benzóico
Cl O
Uma solução de 2-cloro-5-{[(3-clorofenil)metil]óxi}benzoato de (3-clorofenil)metila (970 mg, 2,3 mmols) em dioxano (30 ml) e água (15 ml) foi tratada com hidróxido de lítio (monoidratado) (145 mg, 3,5 mmols, 1,5 eq). A mistura resultante foi agitada na temperatura ambiente durante 2 horas. O solvente depois foi evaporado a vácuo, o resíduo foi absorvido em água (50 ml) e lavado com éter (100 ml). A camada aquosa depois foi acidificada com HCI 2 M e extraída com éter (2 x 150 ml). As camadas orgânicas foram combinadas, lava- das com salmoura, secas e evaporadas a vácuo para fornecer o produto do título como um sólido branco (600 mg).
MS (ES-) m/z 295 [M-H]' (Ci4H1035CI2O3). RMN de 1H (400 MHz1 DMSO-d6) δ 5,17 (2H, s), 7,17 - 7,20 (1H, m), 7,38 - 7,53 (6H, m), 13,4 (1H, s).
Intermediário 3: (4-Amino-3-clorofenil)acetato de etila
O
H2N ^ Cl
N-clorossuccinimida (1 eq, 7,45 g, 55,8 mmols) foi adicionada a uma solução de 4-
aminofenilacetato de etila (10 g, 55,8 mmols) em clorofórmio (200 ml). A mistura de reação foi agitada na temperatura ambiente, sob argônio, durante 15 minutos.
A mistura de reação foi lavada com água (250 ml) e a camada orgânica coletada usando um material sintetizado hidrofóbico. Esta foi evaporada à secura para fornecer um óleo marrom escuro, 9,8 g.
Este foi purificado em 2 lotes usando o Biotage Horizon, cartucho C18 de fase re-
versa 100 g. O produto foi eluído usando um gradiente de 5 a 100 % de acetonitrila em á- gua. Aproximadamente 1200 ml de solvente foram usados para cada lote.
Frações purificadas a partir do primeiro lote foram combinadas e evaporadas à se- cura para produzir o composto do título como um óleo vermelho/marrom escuro, 2,28 g.
Intermediário 4: (3-Cloro-4-{[(2-cloro-5-{[(3-clorofenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}- fenil)acetato de etila
mmol) em diclorometano (3 ml) foi tratada com cloridreto de A/-[2-(dimetilamino)etil]-/\/’- etilcarbodiimida (178 mg, 0,93 mmol, 1,2 eq) e agitada na temperatura ambiente durante 30 minutos. Uma solução de (4-amino-3-clorofenil)acetato de etila (198 mg, 0,93 mmol, 1,2 eq) em diclorometano (2 ml) foi adicionada e a mistura resultante aquecida a 40 0C durante a noite. Como certa quantidade do material de partida ainda estava presente, outros 100 mg
15
MS (ES+) m/z 214 [M+H]+ (C10H1235CINO2).
RMN de 1H (400 MHz, CDCI3) δ 1,25 (3H, t, J 11,2), 3,47 (2H, s), 4,00 (2H, bs), 4,14 (2H, t, J 12), 6,71 (1H, d, J 13,2), 6,98 (1H, dd, J 13,3, J 3,2), 7,19 (1H, d, J 3,2).
20
cr
Uma solução de ácido 2-cloro-5-{[(3-clorofenil)metil]óxi}benzóico (230 mg, 0,77 de cloridreto de W-[2-(dimetilamino)etil]-Af-etilcarbodiimida foram adicionados e a mistura aquecida a 40 0C durante um adicional de 2 horas. Sob resfriamento, a mistura foi diluída com diclorometano (50 ml) e água (30 ml), as camadas separadas e a camada aquosa ex- traída novamente em diclorometano (50 ml). As camadas orgânicas foram combinadas, Ia- 5 vadas com salmoura, secas em sulfato de magnésio e evaporadas para fornecer o compos- to do título como um óleo amarelo. A camada aquosa contendo um sólido insolúvel foi eva- porada a vácuo, o resíduo purificado com cartucho de SCX eluindo com metanol para forne- cer uma outra safra do composto do título como um óleo amarelo (total de 72 mg).
MS (ES+) m/z 492 [M+H]+ (C24H2035CI3NO4).
RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 1,20 (3H, t, J 7,2), 3,72 (2H, s), 4,10 (2H, q, J
7,2), 5,20 (2H, s), 7,15 - 7,62 (10H, m).
Os intermediários 5 e 6 seguintes foram preparados em uma maneira similar ao (3- cloro-4-{[(2-cloro-5-{[(3-clorofenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}fenil)acetato de etila, sem recuperar uma segunda safra a partir da fase aquosa e com purificação adicional por cro- matografia em sílica, conforme apropriado:
Int na Estrutura LC MS Comentários 5 (V^Vnr 3,58 [C24H2135CI2NO4 Igual ao intermediário 4, οσ " M+H]+ 458 nenhuma recuperação da segunda safra, purificação adicional por cromatogra- fia em coluna 6 AT 3,49 [C24H2135CI2NO4 Igual ao intermediário 4, M+H]+ 458 nenhuma recuperação da segunda safra Intermediário 7: (2-Fluoro-4-nitrofenil)propanodioato de etil fenilmetila
O O
Hidreto de sódio (504 mg, 12,6 mmols) foi adicionado às porções a uma solução resfriada em banho de gelo de malonato de benzil etila (2,9 g, 12,6 mmols) em DMF seca (20 ml) e agitado durante 10 minutos. Na temperatura ambiente 3,4-difluoronitrobenzeno (2 g, 12,6 mmols) foi adicionado e agitado sob argônio e aquecido a 100 0Cdurante 20 horas. A mistura de reação foi esfriada e particionada entre Ácido clorídrico 2N (75 ml) e acetato de etila (75 ml). A camada aquosa foi extraída com acetato de etila (2 x 75 ml) e os orgâni- cos combinados foram evaporados a um óleo amarelo purificado por cromatografia em gel de sílica eluindo com acetato de etila/hexano (1:4) para fornecer o composto do título como um óleo amarelo (3,86 g, 10,6 mmols). LC/MS: Rt = 3,40, [MH]+ 362 Intermediário 8: (4-Amino-2-fluorofenil)acetato de etila
o
(2-Fluoro-4-nitrofenil)propanodioato de etil fenilmetila (3,86 g, 10,6 mmols) dissolvi- do em etanol, foi tratado com formiato de amônio (6,7 g, 10,6 mmols) e paládio em pasta de carbono 10 % (380 mg) foi adicionado sob argônio. A mistura de reação foi submetida ao refluxo durante 3 horas, esfriada e filtrada. Evaporada e purificada por cromatografia em gel 10 de sílica eluindo com acetato de etila/hexano (1:1) para fornecer o composto do título como um óleo amarelo (1,26 g). LC/MS: Rt = 2,10, [MH]+ 198.
Os intermediários 9 e 10 seguintes foram preparados em uma maneira similar ao (4-amino-2-fluorofenil)acetato de etila, usando os materiais de partida apropriados.
O intermediário 10 foi preparado de acordo com o método do intermediário 8 (inclu- indo o método do intermediário 7) usando os materiais de partida apropriados, exceto para as diferenças seguintes:
Diferenças do método do intermediário 7:
Agitado durante 30 minutos;
Aquecido a 100 0Cdurante 5 horas e depois durante a noite;
Extraído com acetato de etila, lavado com água (2 x) e salmoura, seco em sulfato
de sódio, filtrado e depois evaporado; A cromatografia foi conduzida em um gradiente de 10 a 20 % de acetato de etila em hexano.
Diferenças do método do intermediário 8:
Aquecido a 60 0Cdurante 2 horas;
A cromatografia foi conduzida em um gradiente de 0 a 50 % de acetato de etila em
hexano.
Intermediário 11: (2,5-Difluoro-4-nitrofenil)propanodioato de dietila
Nin
O O
Pelotas de hidróxido de sódio trituradas (2,26 g, 56,5 mmols) foram adicionadas às porções durante 20 minutos à solução de 1,2,4-trifluoro-5-nitrobenzeno (5,0 g, 28,2 mmols) 10 e cloropropanodioato de dietila (4,57 ml, 56,5 mmols) em DMF seca (50 ml) a 0 0C sob ar- gônio. A mistura de reação foi deixada aquecer até a temperatura ambiente e agitada du- rante a noite. A mistura de reação foi esfriada a 0 0C e acidificada com Ácido clorídrico 2N (50 ml) depois extraída com acetato de etila (150 ml) e lavada com água (150 ml). A cama- da orgânica foi seca em sulfato de magnésio, filtrada e evaporada a um óleo laranja. Purifi- 15 cada por cromatografia em gel de sílica (Biotage SP4, coluna de sílica 100 g) eluindo com 0 a 20 % de acetato de etila/hexano para fornecer o composto do título como um óleo amare- lo (4,84 g, 15,3 mmols). LC/MS: Rt = 3,07, [MH]' 316.
Os intermediários 12 e 13 seguintes foram preparados em uma maneira similar ao (2,5-difluoro-4-nitrofenil)propanodioato de dietila usando os materiais de partida apropria- dos.
Int N2 LC MS 12 NO, Rt = 3,21 [C13H1335CIFNO6 MH]' O O 332 13 NO2 Rt = 3,18 [C13H1335CIFNO6 MH]' Xf 332 ^°rSr°^ 0 0 Intermediário 14: (4-Amino-2,5-difluorofenil)propanodioato de dietila NH.
,F
0YY0'
10
O O
10 % de Pd/C (pasta úmida, 484 mg) foram adicionados a uma solução de (2,5- difluoro-4-nitrofenil)propanodioato de dietila (4,84 g, 15,3 mmols) e formiato de amônio (5 eq, 4,81 g, 76,34 mmols) em etanol (100 mL). A mistura de reação foi aquecida ao refluxo sob argônio durante uma hora. A reação foi deixada esfriar e depois filtrada através de celite para remover os resíduos de Pd. O filtrado foi evaporado à secura e depois particionado entre acetato de etila (100 mL) e água (100 mL). A camada orgânica foi separada, seca em sulfato de magnésio, filtrada e depois evaporada à secura para fornecer o composto do títu- lo como um óleo laranja (4,39 g). LC/MS: Rt = 1,07 min, [MH]+ 288.
Os intermediários 15 e 16 seguintes foram preparados em uma maneira similar ao (4-amino-2,5-difluorofenil)propanodioato de dietila usando os materiais de partida apropria- dos com purificação adicional por cromatografia em sílica conforme apropriado:
Int N- LC MS 15 NH2 Rt= 1,13 [C13H1535CIFNO4 O O MH]+ 304 16 NH, Rt= 1,13 [C13H1535CIFNO4 & MH]+ 304 0 O Intermediário 17: (4-Amino-2,5-difluorofenil)acetato de etila.
NH,
.F
Hidróxido de sódio (903 mg, 22,58 mmols) em água (7 ml) foi adicionado a uma so- lução de (4-amino-2,5-difluorofenil)propanodioato de dietila (4,32 g, 15,05 mmols) em etanol (35 ml). A mistura de reação foi aquecida a 90 0C sob argônio durante 1 h. A mistura de reação foi deixada esfriar e depois o solvente foi evaporado. O resíduo foi acidificado (HCI 2 M, 200 ml) e depois extraído com acetato de etila (200 ml). A camada orgânica foi seca 5 (MgSO4) e o solvente evaporado. O resíduo foi purificado por cromatografia instantânea (Biotage SP4, 40+M, 0 —» 25 % de acetato de etila / hexano) para fornecer o composto do título como um óleo amarelo claro (1,3 g).
MS (ES+) m/z 216 [M+H+] (C10H11FNO2).
Os intermediários 18 e 19 seguintes foram preparados em uma maneira similar ao (4-amino-2,5-difluorofenil)propanodioato de dietila usando os materiais de partida apropria- dos:
Intermediário 20: fluorofenil)acetato de etila
(4-{[(2-Cloro-5-{[(3-clorofenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}-2-
Uma solução de ácido 2-cloro-5-{[(3-clorofenil)metil]óxi}benzóico (207 mg, 0,7 mmol) em diclorometano (3 ml) foi tratada com cloridreto de A/-[2-(dimetilamino)etil]-/S/’- etilcarbodiimida (201 mg, 1,05 mmol, 1,5 eq) e agitada na temperatura ambiente durante 30 minutos. Uma solução de (4-amino-2-fluorofenil)acetato de etila (207 mg, 1,05 mmol, 1,5 eq) em diclorometano (2 ml) foi adicionada e a mistura resultante aquecida a 40 0C durante a noite. Sob resfriamento, a mistura foi diluída com metanol e purificada com cartucho de SCX eluindo com metanol para fornecer o composto do título como um óleo amarelo (110
mg)·
MS (ES+) m/z 476 [M+H]+ (C24H2035CI2FNO4).
RMN de 1H (400 MHz, DMSO-Cf6) δ 1,19 (3H, t, J 7,2), 3,68 (2H, s), 4,09 (2H, q, J
7,2), 5,20 (2H, s), 7,15 - 7,68 (10H, m).
Os intermediários 21 e 22 seguintes foram preparados em uma maneira similar ao (4-{[(2-cloro-5-{[(3-clorofenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}-2-fluorofenil)acetato de etila, com a adição de A/,/\/-dimetilaminopiridina (DMAP) como um catalisador, tempos de aquecimento mais longos conforme apropriado:
Int Estrutura LC MS Comentários n2 21 aXXJ ' 3,62 [C24H2035CI2FNO4 DMAP adicionada M+H]+ 476 22 JOCT 3,68 [C24H1935CI2F2NO4 Aquecido durante o fim M+H]+ 494 de semana, DMAP adi¬ cionada e aquecido durante a noite Intermediário 23: (3-Cloro-4-{[(2-cloro-5-{[(3-clorofenil)metil]óxi}fenil)carbonil]- amino}-2-fluorofenil)acetato de etila
.O. /
Uma solução de ácido 2-cloro-5-{[(3-clorofenil)metil]óxi}benzóico (200 mg, 0,67 mmol) em diclorometano (3 ml) foi tratada com cloreto de oxalila (90 μΙ, 1,0 mmol) e DMF (1 15 gota). A efervescência foi observada e a mistura foi agitada na temperatura ambiente duran- te 30 minutos. O solvente depois foi evaporado a vácuo e submetido à azeotropia com tolu- eno. O sólido resultante foi dissolvido em diclorometano (3 ml) e tratado com trietilamina (140 μΙ, 1,0 mmol) e uma solução de (4-amino-3-cloro-2-fluorofenil)acetato de etila (230 mg, 1,0 mmol) em diclorometano (2 ml). A mistura foi agitada na temperatura ambiente durante 2 horas. A mistura depois foi diluída com acetonitrila e purificada com cartucho de SCX elu- indo com acetonitrila. As frações foram combinadas e evaporadas, o resíduo purificado por MDAP para fornecer o composto do título como um sólido branco (110 mg).
MS (ES+) m/z 510 [M+H]+ (C24Hi935CI3FNO4).
RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 1,20 (3H, t, J 7,2), 3,81 (2H, s), 4,12 (2H, q, J
7,2), 5,20 (2H, s), 7,16 - 7,55 (9H, m).
Os intermediários 24 a 27 seguintes foram preparados em uma maneira similar ao (3-cloro-4-{[(2-cloro-5-{[(3-clorofenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}-2-fluorofenil)acetato de etila com tempos de reação mais longos, processamento aquoso, ou sem a necessidade quanto à purificação por MDAP conforme apropriado:
Int Estrutura LC MS Comentários n2 24 xà'·^ 3,50 [C2SH2335CI2NO4 Igual ao intermediᬠM+H]+ 472 rio 23, nenhuma purificação por MDAP F 3,84 [C24H1935CI3FNO4 Igual ao intermediᬠCl o M+H]+ 510 rio 23, agitado em (WVnr RT durante a noite jocr “ 26 Ax^onr 1,35 [C25H2435CINO4 Igual ao intermediᬠ(2 min) M+H]+ 438 rio 23, agitado du¬ rante o fim de se¬ mana, processa¬ mento aquoso antes de SCX 27 XXrCTf^ 1,29 [C25H25NO4 Igual ao intermediᬠoir " (2 min) M+H]+ 404 rio 23, agitado du¬ rante o fim de se¬ mana, processa¬ mento aquoso antes de SCX Exemplo 1: Ácido (3-cloro-4-{[(2-cloro-5-{[(3-clorofenil)metil]óxi}fenil)carbonil]- amino}fenil)acético Cl Uma solução de (3-cloro-4-{[(2-cloro-5-{[(3-clorofenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}- fenil)acetato de etila (72 mg, 0,15 mmol) em ácido acético (3 ml) e HCI 2 M (3 ml) foi aque- cida a 90 0C durante 2 horas. Sob resfriamento, água foi adicionada e a mistura filtrada. O sólido resultante foi seco em forno a vácuo, depois triturado com éter para fornecer o com- posto do título como um sólido branco amarelado (32 mg).
MS (ES+) m/z 464 [M+H]+ (C24H2035CI3NO4).
RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 3,63 (2H, s), 5,20 (2H, s), 7,17 (1H, dd, J 8,8, J 2,8), 7,25 - 7,60 (10H, m), 10,18 (1H, s), 12,5 (1H, s).
Os exemplos seguintes da invenção foram preparados em uma maneira similar ao Exemplo 1 a partir dos intermediários descritos acima, com a adição de reagente extra ou um solvente orgânico, tempo de reação mais longo e com purificação adicional por MDAP ao invés ou além da trituração conforme apropriado:
Ex Estrutura LC MS Comentários n2 2 Mrirr 3,07 [C22H1735CI2NO4 Purificação: solvente ClY M+H]+ 430 evaporado, resíduo puri¬ ficado por MDAP 3 χχχητ 3,08 [C22H1735CI2NO4 HCI 2 M adicionado (3 Ai M+H]+ 430 ml), aquecido durante 2,5 horas, depois um adicional de HCI 2 M adicionado (5 ml), de¬ pois aquecido durante um adicional de 3 horas 4 3,13 [C22H1635CI2FNO4 Nenhuma trituração M+H]+ 448 com éter (WPnr 3,11 [C22H1635CI2FNO4 Trituração com DCM .JXT ■ M+H]+ 448 6 O 3,19 [C22H1535CI2F2NO4 Purificação: solvente O M+H]+ 466 evaporado, resíduo puri¬ Z ficado por MDAP 7 ,OH 1,29 [C22H1535CI3FNO4 Nenhuma trituração Cl O iT Tt^ (2 min) M+H]+ 482 com éter 8 ..Oiwr 1,21 [C23H1935CI2NO4 Nenhuma trituração (2 min) M+H]+ 444 com éter 9 F 3,34 [C22H1535CI3FNO4 Aquecido durante 2 h C| 0 M+H]+ 482 depois dioxano adicio¬ aXXJ " nado e aquecido duran¬ te a noite. Trituração com DCM ao invés de éter A^j0nr 1,17 [C23H2035CINO4 Nenhuma trituração Ai (2 min) M+Hf 410 com éter 11 ocr 1,10 [C23H21NO4 M+H]+ Nenhuma trituração (2 min) 376 com éter Intermediário 28: (4-{[(2-Cloro-5-nitrofenil)carbonil]amino}fenil)acetato de etila
Ácido 2-cloro-5-nitrobenzóico (1,99 g, 9,87 mmols) foi agitado durante 18 h a 60 0C em cloreto de tionila (10 ml). O excesso de cloreto de tionila foi removido por evaporação e o óleo bruto dissolvido em clorofórmio (20 ml). A esta solução foi adicionado (4- aminofenil)acetato de etila (1,18 g, 6,58 mmols) e a reação foi agitada a 60 0C durante 18 h. A reação foi diluída com água e as fases separadas. A camada orgânica foi seca (Na2SO4)1 o solvente evaporado e o resíduo purificado por cromatografia instantânea (Biotage SP4, 5 40+M, 0 —» 50 % de acetato de etila / hexano) para fornecer o composto do título como um sólido branco amarelado (2,28 g, 96 %).
MS (ES+) m/z 363 [M+H+] (C17H1535CIN2O5).
RMN de 1H (250 MHz, CDCI3) δ 1,26 (3H, t, J 7), 3,62 (2H, s), 4,14 (2H, q, J 7), 7,30 (2H, d, J 8,5), 7,63 (3H, m), 7,93 (1H, br s), 8,24 (1H, dd, J 9, 3), 8,58 (1H, d, J 3).
Intermediário 29: (4-{[(5-Amino-2-clorofenil)carbonil]amino}fenil)acetato de etila
NH2
Uma solução de (4-{[(2-cloro-5-nitrofenil)carbonil]amino}fenil)acetato de etila (2,27 g, 6,3 mmols) em EtOH (20 ml) foi aquecida a 50 °C. Uma solução aquosa 20 % de ácido acético (10 ml) foi adicionada seguido por ferro (6 eq, 37,6 mmols, 2,1 g). A mistura foi a- quecida a 80 0C durante 30 minutos. Sob resfriamento, a mistura foi filtrada através de celite 15 lavando com EtOH. O solvente foi evaporado a vácuo. O resíduo foi absorvido em EtOAc e bicarbonato de sódio aquoso. As camadas foram separadas e a camada aquosa extraída com EtOAc (2 x). As camadas orgânicas foram combinadas e lavadas com salmoura, secas em sulfato de magnésio e evaporadas. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (Biotage SP4, coluna de sílica 100 g) eluindo com 25 a 75 % de acetato de etila em hexanos 20 para fornecer o composto do título como um óleo amarelo claro (1,8 g).
MS (ES+) m/z 333 [M+H]+ (C17H1735CIN2O3).
RMN de 1H (400 MHz, DMSO-Cf6) δ 1,18 (3H, m), 3,61 (2H, s), 4,05 (2H, m), 5,47 (2H, s), 6,65 (2H, m), 7,12 (1H, d, J 8,4), 7,22 (2H, d, J 8,4), 7,64 (2H, m).
Intermediário 30: {4-[({2-Cloro-5-[(fenilmetil)amino]fenil}carbonil)amino]fenil}acetato
de etila Uma solução de (4-{[(5-amino-2-clorofenil)carbonil]amino}fenil)acetato de etila (300 mg, 0,90 mmol) em DMF (5 ml) foi tratada com carbonato de potássio (152 mg, 1,1 mmol, 1,2 eq) e brometo de benzila (215 μΙ, 1,8 mmol, 2 eq) e agitada na temperatura ambiente durante a noite. A mistura foi diluída com acetato de etila (150 ml) e lavada com água (2 x 5 80 ml) e salmoura (80 ml). A camada orgânica foi seca em sulfato de magnésio e evaporada a vácuo. O resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (Biotage SP4, coluna de sílica 40 g) eluindo com 0 a 25 % de acetato de etila em hexanos para fornecer o composto do título como um sólido branco (90 mg).
MS (ES+) m/z 423 [M+H]+ (C24H2335CIN2O3).
RMN de 1H (400 MHz, DMSO-J6) δ 1,18 (3H, t, J 7,2), 3,61 (2H, s), 4,07 (2H, q, J
7,2), 4,30 (2H, d, J 6), 6,62 - 7,65 (13H, m).
Os intermediários 31 e 32 seguintes foram preparados em uma maneira similar ao {4-[({2-cloro-5-[(fenilmetil)amino]fenil}carbonil)amino]fenil}acetato de etila, com tempos de reação mais curtos onde apropriado:
Int Estrutura LC MS Comentários n2 31 JOO ' 3,41 [C24H2235CI2N2O3 Tempo de reação M+H]+ 457 de 6,5 horas 32 ΛΛΧΓΓ- 3,40 [C24H2235CI2N2O3 Tempo de reação 1 M+H]+ 457 de 5 horas Cl Exemplo 12: Ácido {4-[({2-cloro-5-[(fenilmetil)amino]fenil}carbonil)amino]fenil}-
acético
,OH
ΓΪΙ
Uma solução de {4-[({2-cloro-5-[(fenilmetil)amino]fenil}carbonil)amino]fenil}acetato de etila (90 mg, 0,21 mmol) em ácido acético (2 ml) e HCI 2 M (2 ml) foi aquecida a 90 °C durante 2 horas. Sob resfriamento, água foi adicionada, depois o solvente evaporado a vá- cuo e submetido à azeotropia com tolueno. O resíduo foi purificado por MDAP para fornecer o composto do título como um sólido branco (40 mg).
MS (ES+) m/z 395 [M+H]+ (C22Hi935CIN2O3).
RMN de 1H (400 MHz, DMSO-Cf6) δ 3,51 (2H, s), 4,30 (2H, d, J 4,4), 6,63 - 6,73 (3H,
m), 7,15 - 7,36 (10H, m), 10,3 (1H, s).
Os exemplos seguintes da invenção foram preparados por um método similar ao ácido {4-[({2-cloro-5-[(fenilmetil)amino]fenil}carbonil)amino]fenil}acético:
Ex n° Estrutura LC MS 13 I 2,92 [C22Hie35CI2N2O3 O M+H]+ 429 \=o \) <5 O 14 Cl 2,92 [C22H1835CI2N2O3 M+H]+ 429 Intermediário 33: Ácido 6-cloro-2-fluoro-3-(metilóxi)benzóico
Cl O
MeO
n-Butillítio (11,7 ml, 18,77 mmols) foi adicionado às gotas a uma solução de 4-
cloro-2-fluoroanisol (2,01 g, 12,52 mmols) em tetraidrofurano (20 ml) a -78 0C e a reação foi agitada durante 30 min. Dióxido de carbono sólido triturado foi adicionado em uma porção e a reação depois foi deixada aquecer até a temperatura ambiente. O solvente foi evaporado e o resíduo dissolvido em água. Hidróxido de sódio (2 M ao pH ~ 14) foi adicionado e a ca- 15 mada aquosa extraída com acetato de etila. A camada aquosa foi acidificada com ácido clorídrico (5 M, pH ~ 1) e o composto do título foi coletado como um sólido incolor (2,25 g, 88 %). O composto foi seco a vácuo.
MS (ES+) m/z 205 [M+H+] (C8H635CIFO3).
RMN de 1H (250 MHz, DMSO-Cf6) δ 3,87 (3H, s), 7,32 (2H, m), 14,1 (1H, br s).
Intermediário 34: [4-({[6-Cloro-2-fluoro-3-(metilóxi)fenil]carbonil}amino)fenil]acetato
de etila OEt
N
H
MeO
Cloreto de oxalila (193 μΙ, 2,21 mmols) foi adicionado às gotas a uma solução de ácido 6-cloro-2-fluoro-3-(metilóxi)benzóico (300 mg, 1,47 mmol) em diclorometano (5 ml). A esta foi adicionada dimetilformamida (1 gota) e a reação foi agitada na temperatura ambien- te durante 3 h. O solvente foi evaporado para fornecer um semissólido amarelo. Este se- missólido foi dissolvido em diclorometano (5 ml) e (4-aminofenil)acetato de etila (316 mg,
1,76 mmol) seguido por trietilamina (287 μΙ, 2,06 mmols) foram adicionados. A solução re- sultante foi agitada na temperatura ambiente durante a noite. A reação foi diluída com água e as fases foram separadas. A camada orgânica foi seca (Na2SO4), o solvente evaporado e o resíduo purificado por cromatografia instantânea (Biotage SP4, coluna de sílica 25+M, 0 10 —> 50 % de acetato de etila / gasolina) para fornecer o composto do título como um semis- sólido amarelo (506 mg, 94 %).
Tribrometo de boro (393 μΙ, 4,16 mmols) foi adicionado às gotas a uma solução de [4-({[6-cloro-2-fluoro-3-(metilóxi)fenil]carbonil}amino)fenil]acetato de etila (506 mg, 1,39 20 mmol) em diclorometano (30 ml) a -78 0C sob argônio e a reação foi agitada durante a noite enquanto aquecendo lentamente a 0 0C. A reação foi extinta pela adição cuidadosa de á- gua, agitada durante 1 hora, diluída ainda com acetato de etila, filtrada, as fases separadas, a camada orgânica seca (Na2SO4) e o solvente evaporado e o resíduo purificado por croma- tografia instantânea (Biotage SP4, coluna de sílica 25+M, 0 -*■ 80 % de acetato de etila / 25 gasolina, frações purificadas coletadas) para fornecer o composto do título como uma es- puma incolor (157 mg, 32 %).
MS (ES+) m/z 366 [M+H+] (Ci8H1735CIFNO4).
RMN de 1H (250 MHz, CDCI3) δ 1,26 (3H, t, J 7,25), 3,60 (2H, s), 3,91 (3H, s), 4,13 (2H, q, J 7), 6,97 (1H, t, J 9), 7,17 (1H, dd, J 9, 2), 7,29 (2H, d, J 8,75), 7,45 (1H, br s), 7,59 (2H, m).
Intermediário 35: (4-{[(6-Cloro-2-fluoro-3-hidroxifenil)carbonil]amino}fenil)acetato de
etila
OH MS (ES+) m/z 352 [M+H+] (C17H1535CIFNO4).
RMN de 1H (250 MHz, CDCI3) δ 1,26 (3H, t, J 7,25), 3,61 (3H, s), 4,14 (2H, q, J 7), 6,99 (1H, t, J 8,75), 7,10 (1H, dd, J 8,75, 1,5), 7,28 (1H, d, J 8,75), 7,57 (2H, m).
Intermediário 36: (4-{[(6-Cloro-3-{[(3-clorofenil)metil]óxi}-2-fluorofenil)carbonil]- amino}fenil)acetato de etila
,OEt
3-Clorobenzilbrometo (28 μΙ, 0,24 mmol) foi adicionado a uma suspensão de (4- {[(6-cloro-2-fluoro-3-hidroxifenil)carbonil]amino}fenil)acetato de etila (80 mg, 0,228 mmol) e carbonato de potássio (38 mg, 0,273 mmol) em dimetilformamida (3 ml) e a reação foi agi- tada na temperatura ambiente durante 4 h. O solvente foi evaporado e o resíduo particiona- 10 do entre água e acetato de etila. A camada orgânica foi separada, seca (Na2SO4) e o sol- vente evaporado para fornecer o composto do título como um óleo incolor (91 mg, 84 %).
MS (ES+) m/z 474 [M+H+] (C24H1835CI2NO4).
RMN de 1H (250 MHz, CDCI3) δ 1,25 (3H, t, J 7,25), 3,60 (2H, s), 4,12 (2H, q, J 7,25), 5,11 (2H, s), 6,95 (1H, t, J 8,75), 7,13 (1H, dd, J 8,75, 1,5), 7,33 (6H, m), 7,41 (1H, s), 7,61 (2H, m).
O intermediário seguinte foi preparado em uma maneira similar ao (4-{[(6-cloro-3- {[(3-clorofenil)metil]óxi}-2-fluorofenil)carbonil]amino}fenil)acetato de etila:
Int n2 Estrutura LC MS 37 A^onr 1,30 [C24H2135CIFNO4 I A H (2 min) M+H]+ 442 OX' Exemplo 15: Ácido (4-{[(6-cloro-3-{[(3-clorofenil)metil]óxi}-2-fluorofenil)carbonil]- amino}fenil)acético Hidróxido de lítio monoidratado (12 mg, 0,281 mmol) foi adicionado a uma solução de (4-{[(6-cloro-3-{[(3-clorofenil)metil]óxi}-2-fluorofenil)carbonil]amino}fenil)acetato de etila (91 mg, 0,192 mmol) em dioxano (2 ml) e água (1 ml) e a reação foi agitada na temperatura ambiente durante a noite. O solvente foi evaporado, o resíduo dissolvido em água (5 ml) e acidificado (HCI 2 M, pH ~ 1). A camada aquosa foi extraída cóm acetato de etila, os orgâni- cos secos (Na2SO4) e o solvente evaporado para fornecer um sólido incolor que foi coletado por filtração. Este foi purificado por preparação automática dirigida à massa (MDAP) para fornecer o composto do título como um sólido incolor (28 mg, 32 %).
MS (ES+) m/z 414 [M+H+] (C22H1635CI2FNO4).
RMN de 1H (250 MHz, DMSO-d6) δ 3,54 (2H, s), 5,26 (2H, s), 7,23 (2H, d, J 5,25), 7,33 - 7,60 (7H, m), 7,62 (2H, m).
O exemplo seguinte da invenção foi preparado em uma maneira similar ao ácido (4- {[(6-cloro-3-{[(3-clorofenil)metil]óxi}-2-fluorofenil)carbonil]amino}fenil)acético, sem a necessi- dade quanto à purificação por MDAP:
O intermediário 38 seguinte foi preparado em uma maneira similar ao (2,5-difluoro- 4-nitrofenil)propanodioato (intermediário 11), usando os materiais de partida apropriados.
Int N- LC MS 38 NO2 Rt = 3,06 [MH]+318 V ^°rSr0^ O O O intermediário 39 seguinte foi preparado em uma maneira similar ao (4-amino-2,5- difluorofenil)acetato de dietila (intermediário 14), usando os materiais de partida apropria- dos.
Int N2 LC MS NH, fTTf 39 O 0 Rt = 2,69 [MH]+ 288 O intermediário 40 seguinte foi preparado em uma maneira similar ao (4-amino-2,5- difluorofenil)acetato de etila (intermediário 17), usando os materiais de partida apropriados.
Int N2 LC MS 40 NH2 Rt = 2,52 [MH]+216 v 0 Intermediário 41: Ácido 6-cloro-2-fluoro-3-hidroxibenzóico.
OH
Tribrometo de boro (1,5 ml, 15,3 mmols) foi adicionado às gotas a uma solução de ácido 6-cloro-2-fluoro-3-(metilóxi)benzóico (intermediário 33, 1,04 g, 5,1 mmols) em dicloro- metano (100 ml) a 0 0C sob uma atmosfera de Argônio. A reação foi agitada na temperatura 10 ambiente durante 18 h. Água (5 ml) foi adicionada e o sólido formado agitado durante 5 min. Hidróxido de sódio (2 M, 4 ml) foi adicionado e o sólido remanescente dissolvido. As cama- das foram separadas e a camada aquosa evaporada para fornecer um sólido incolor. Este foi extraído com acetato de etila (3 x) e os orgânicos combinados evaporados para fornecer o composto do título como um sólido amarelo (831 mg).
RMN de 1H δ 7,02 (1H, t, J 10), 7,16 (1H, dd, J 10, 3), 10,48 (1H, s), 13,96 (1H, br
s).
Os intermediários 42 a 54 seguintes foram obtidos a partir do ácido 5- hidroxibenzóico substituído apropriado por um método de etapa dupla similar (alquilação seguido por hidrólise de éster) àquele usado para o intermediário 2, com quaisquer diferen- ças dos procedimentos descritos observadas na tabela seguinte:
Int LC MS Comentários N2 42 Cl O 2,84 [C14H1135CI hidrólise: agitado na temperatura 0a” O3 M-H]' ambiente durante 3 horas. OJ 261 43 O 1,20 [C15H1335CI alquilação: agente alquilante 2,0 eq, c^. (2 min) O3 M-H]- K2CO3 2,0 eq; aquecido a 70 °C 0 275 durante 2 horas, depois na tempera¬ 1 tura ambiente, durante a noite, de¬ pois a 80 0C durante 6 horas. Pro¬ duto bruto não purificado ainda, hidrólise: agitado na temperatura ambiente durante a noite; LiOH^H2O (1,5 eq) adicionado; agitado na temperatura ambiente durante a noite. Para uma descrição detalhada veja Intermediários 84 e 85. 44 P 1,11 [C15H14O3 alquilação: agente alquilante 2,0 eq, O (2 min) M-H]" 241 K2CO3 2,0 eq; aquecido a 70 0C X durante 2 horas, depois na tempera¬ tura ambiente durante a noite, de¬ pois a 80 0C durante 6 horas. Pro¬ duto bruto não purificado ainda, hidrólise: agitado na temperatura ambiente durante a noite; LiOH^H2O (1,5 eq) adicionado; agitado na temperatura ambiente durante a noite. 45 Cl O 1,12 [C14H935CI2 alquilação: agente alquilante 2,1 eq, JOXf (2 min) FO3 M-H]- K2CO3 2,4 eq. 313 hidrólise: aquecido a 50 0C durante a noite; acidificado com HCI 5N, sólido precipitado coletado para fornecer 0 produto. 46 Cl 0 1,03 [C14H1035CI alquilação: agente alquilante 2,1 eq, Λλ- (2 min) FO3 M-H]' K2CO3 2,4 eq; produto bruto não OXf 279 purificado ainda, hidrólise: aquecido a 50 0C durante a noite; acidificado com HCI 5N, sólido precipitado coletado para fornecer 0 produto. 47 Cl O 2,85 [C14H1035CI alquilação: agitado na temperatura 0a" FO3 M-H]- ambiente durante 67 h. Mistura de ,XXJ 279 reação diluída com EtOAc, filtrada, lavada com água e depois salmou¬ ra. Produto bruto não purificado ain¬ da. hidrólise: agitado 16 horas na tem¬ peratura ambiente. 48 Cl O 2,98 [C15H1335CI alquilação: agitado na temperatura 0a- O3 M-H]- ambiente durante 67 h. Mistura de xcr 275 reação diluída com EtOAc, filtrada, lavada com água e depois salmou¬ ra. Produto bruto não purificado ain¬ da. hidrólise: agitado 16 horas na tem¬ peratura ambiente. 49 Cl 0 3,06 [C14H1035CI alquilação: brometo (2,2 eq). Aque¬ 203 M-H]- cido a 80 0C durante 3 horas. Outra 295 porção de brometo (2,2 eq) adicio¬ nada. Aquecido a 80 0C durante uma hora adicional. Nenhuma lava¬ gem com salmoura em processa¬ mento. Produto bruto não purificado ainda. hidrólise: agitado na temperatura ambiente durante 18 horas. Lavado com EtOAc sem éter. Ne¬ nhuma lavagem com salmoura. 50 Cl 0 3,02 [C14H1035CI alquilação: brometo (2,2 eq). Aque¬ ç?- 203 M-H]" cido a 80 0C durante 3 horas. Outra Cl 295 porção de brometo (2,2 eq) adicio¬ nada. Aquecido a 80 0C durante uma hora adicional. Nenhuma lava¬ gem com salmoura em processa¬ mento. Produto bruto não purificado ainda. hidrólise: agitado na temperatura ambiente durante 18 horas. Lavado com EtOAc sem éter. Ne¬ nhuma lavagem com salmoura. 51 -b-\ 1,15 [C^H-iaFOa alquilação: agitado na temperatura Q (2 min) M-Η]' 259 ambiente durante 24 horas, outro U- agente alquilante (0,25 eq) adicio¬ nado, aquecido a 65 0C durante 24 horas; mistura de reação diluída com EtOAc, filtrada, lavada com água e depois salmoura. Produto bruto não purificado ainda, hidrólise: agitado na temperatura ambiente durante 6 horas, aquecido a 65 0C durante 2 horas, depois agitado na temperatura ambiente durante 16 horas. 52 0 1,21 [Ο^Η-ιβΟβ alquilação: agitado na temperatura 1 (2 min) M-Η]' 255 ambiente durante 24 horas, outro agente alquilante (0,25 eq) adicio¬ nado, aquecido a 65 0C durante 24 horas; mistura de reação diluída com EtOAc, filtrada, lavada com água e depois salmoura. Produto bruto não purificado ainda, hidrólise: agitado na temperatura ambiente durante 6 horas, aquecido a 65 0C durante 2 horas, depois agitado na temperatura ambiente durante a noite. 53 Cl O 2,76 [Ci4H935CI alquilação: Mistura de reação diluída (Y- F2O3 M-H]' com EtOAc, filtrada, lavada com XXT' 297 NaHCO3 aq. sat. e depois salmoura. Produto bruto não purificado ainda, hidrólise: agitado na temperatura ambiente durante a noite. 54 Cl o 1,12 [C15H1235CI alquilação: aquecido a 65 0C duran¬ (2 min) FO3 M-H]' te 2 horas; mistura de reação diluída 293 com EtOAc, filtrada, lavada com água e depois salmoura. Produto bruto não purificado ainda, hidrólise: aquecido a 65 0C durante 2 horas, depois agitado na tempera¬ tura ambiente durante a noite; de¬ pois da evaporação, resíduo absor¬ vido em NaOH 2N e depois Iava- do/acidificado conforme descrito. Os intermediários 55 a 83 seguintes foram preparados por um método de etapa dupla similar ao (3-cloro-4-{[(2-cloro-5-{[(3-clorofenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}-2- fluorofenil)acetato de etila (intermediário 23) a partir dos materiais de partida apropriados
com quaisquer diferenças do procedimento descrito observadas na tabela seguinte:
Int Composto LC MS Comentários N2 55 ^rr 1,37 [C25H2435CINO4 Formação de cloreto de 6 (2 min) M+H]+ 438 ácido agitado durante 2 horas. Agitado durante a noite depois da adição de amina. 56 UJ 1,43 [C25H2335CI2NO4 Formação de cloreto de O (2 min) M+H]+ 472 ácido agitado durante 2 V=O horas. Q-0 Agitado durante a noite ZI depois da adição de amina. 57 Ottfnr 1,34 [C24H2035CI2FNO4 Formação de cloreto de 6 (2 min) M+H]+ 476 ácido agitado durante 2 horas. Agitado durante a noite depois da adição de amina. Nenhuma etapa de azeo- tropia. Processamento: evaporado à secura, particionado en¬ tre EtOAc e água, fase orgânica seca e evaporada. Purificado por cromatogra¬ fia em sílica SP4 58 & 1,39 [C24H1935CI3FNO4 Formação de cloreto de (2 min) M+H]+ 510 ácido agitado durante 2 horas. Agitado durante a noite depois da adição de amina. Nenhuma etapa de azeo- tropia. Processamento: evaporado à secura, particionada en¬ tre EtOAc e água, fase orgânica seca e evaporada. Purificado por cromatogra¬ fia em sílica SP4 59 jwçnr 1,34 [M+H]+ 456 Nenhuma MDAP fjCLo ch· (2 min) (C25H23CIFNO4) 60 ,tVnV 0 1,35 [M+H]+ 460 Nenhuma MDAP nV H F (2 min) (C24H20CIF2NO4) 61 6, 1,39 [C24H2I35CIFNO4 Formação de cloreto de (2 min) M+H]+ 456 ácido agitado durante 1 hora. Agitado durante a noite depois da adição de amina. Nenhuma MDAP 62 S., 1,38 [C25H2435CINO4 Formação de cloreto de (2 min) M+H]+ 452 ácido agitado durante 1 hora. Agitado durante a noite depois da adição de amina. Nenhuma MDAP Para uma descrição deta¬ lhada veja Intermediários 86 e 87 63 ^cTr 1,39 [C25H2335CIFNO4 Formação de cloreto de ά. (2 min) M+H]+ 456 ácido agitado durante 1 hora. Agitado durante a noite depois da adição de amina. Nenhuma MDAP 64 IZ 1,37 [C26H2635CINO4 Formação de cloreto de s-Ò (2 min) M+H]+ 452 ácido agitado durante 1 O hora. m Agitado durante a noite depois da adição de amina. Nenhuma MDAP 65 ^yonT 1,36 [C24H2I35CI2NO4 Formação de cloreto de 6a (2 min) M+H]+ 458 ácido agitado durante 1 hora. Agitado durante a noite depois da adição de amina. Nenhuma MDAP 66 Cl 0 1,47 [C24Hzo35CIsNO4 Formação de cloreto de (Jrtfnf (2 min) M+H]+ 492 ácido agitado durante 1 6a hora. Agitado durante a noite depois da adição de amina. Nenhuma MDAP 67 í 1,47 [C24H2O35CIsNO4 Formação de cloreto de Cl (2 min) M+H]+ 493 ácido agitado durante 1 hora. Agitado durante a noite depois da adição de amina. Nenhuma MDAP 68 ^Mrir 1,32 nenhum íon com Formação de cloreto de ά. (2 min) massa detectada ácido agitado durante 3 horas. Agitado durante a noite depois da adição de amina. Nenhuma etapa de azeo- tropia. Nenhuma MDAP 69 ^rr 1,38 nenhum íon com Formação de cloreto de áCH, (2 min) massa detectada ácido agitado durante 3 horas. Agitado durante a noite depois da adição de amina. Nenhuma etapa de azeo- tropia. Nenhuma MDAP 70 foXHr 1,33 [M+H]+ 440 Agitado na temperatura (2 min) (C25H23F2NO4) ambiente durante a noite depois da adição amina Nenhuma MDAP 71 Wpnr 1,32 [M+H]+ 436 Agitado na temperatura fclt H CH· (2 min) (C26H26FNO4) ambiente durante a noite depois da adição amina Nenhuma MDAP 72 CH3 O (iiiYvIr0Et 1,38 [C26H26FNO4 Formação de cloreto de ÇrV?* (2 min) M+H]+ 436 ácido agitado durante 1 ^CH3 hora. Agitado durante a noite depois da adição de amina. 73 IZ 1,44 [C26H2635CINO4 Cloreto de oxalila (2 eqs). o=< (2 min) M+H]+ 452 Agitado na temperatura O ambiente 2 horas. Nenhu¬ m ma etapa de azeotropia. Anilina (1,1 eqs). Trietilamina (1,3 eqs). Agitado na temperatura ambiente durante a noite. 74 ci ορη^γ^ΐΓΟΒ 1,35 [M+H]+ 494 Agitado na temperatura ClAJ^o (2 min) (C24H1935CI2F2 ambiente durante a noite NO4) depois da adição de amina Purificação por trituração com DCM depois de SCX (nenhuma MDAP) 75 CH3 0 t^Y^Y °Et 1,36 [C27H29NO4 Formação de cloreto de 6^ (2 min) M+H]+ 432 ácido agitado durante 1 hora. Agitado durante a noite depois da adição de amina. Nenhuma MDAP 76 1,39 [C25H2335CIFN Cloreto de oxalila (2 eqs). (2 min) O4 M+H]+ 456 Agitado na temperatura ambiente 2 horas. Nenhu¬ ma etapa de azeotropia. Anilina (1,1 eqs). TrietiIamina (1,3 eqs). Agitado na temperatura ambiente durante a noite. Nenhuma MDAP 77 Mrr 1,35 [M+H]+ 494 Agitado na temperatura ClXXX""F (2 min) (C24H1935CI2F2 ambiente durante a noite NO4) depois da adição de amina Nenhuma MDAP 78 Ch3 ο ργΥγ0Β 1,36 [C25H2235CIF2NO4 Formação de cloreto de QaS T (2 min) M+H]+ 474 ácido agitado durante 2 6," horas. Piridina usada como base, agitado durante a noite depois da adição de amina. Nenhuma MDAP 79 a o rr>OEt 1,35 [M+H]+ 494 Agitado na temperatura ,tVnV 0 (2 min) (C25H2235CI2FNO4) ambiente durante a noite !^l VkFh CH3 depois da adição de amina Cl Nenhuma MDAP 80 ci o PssYYoa 3,47 [M+H]+ 494 Agitado na temperatura fO$th a (5 min) (C24H1935CI2F2NO4) ambiente durante a noite depois da adição de amina. Eluente para SCX MeOH Nenhuma MDAP 81 jmçnr 3,38 [M+H]+ 478 Agitado na temperatura foS^H r (5 min) (C24H1935CIF3NO4) ambiente durante a noite depois da adição de amina Nenhuma MDAP 82 'Ojr" “· 3,36 [M+H]+ 474 Agitado na temperatura (5 min) (C25H2235CIF2NO4) ambiente durante a noite depois da adição de amina Nenhuma MDAP 83 Cl 0 í^Y^Y°Et 1,35 [C25H2235CIF2NO4 Formação de cloreto de (Jcyinr (2 min) M+H]+ 474 ácido agitado durante 1 áCH, hora. Agitado durante o fim de semana depois da adição de amina. Os exemplos 17, 18, 21 a 29 e 40 seguintes foram preparados em uma maneira similar ao ácido (3-cloro-4-{[(2-cloro-5-{[(3-clorofenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}fenil)- acético (exemplo 1) a partir dos materiais de partida apropriados com quaisquer diferenças do procedimento descrito observado na tabela seguinte:
Ex. N2 Composto LC MS Via sintética / (método) comentários 17 OJ " 1,17 [C23H2035 Produto precipita¬ (2 min) CINO4 do sob resfriamen¬ M+H]+ to, coletado por 410 filtração e seco sob vácuo. 18 Z 1,24 [C23H1935 Aquecido a 90 0C O (2 min) CI2NO4 durante 2 horas N=° M+H]+ adicionais. Ch 444 Produto precipita¬ Q do sob resfriamen¬ o to, coletado por filtração e seco sob vácuo. 21 .a^rr 2,89 [C23H1935 igual ao exemplo 1 (5 min) CIFNO4 M+H]+ 428 22 Xxiwr 1,16 [C22H1635 igual ao exemplo 1 (2 min) CIF2NO4 M+H]+ 432 23 AVPnr 1,22 [C23H1935 Deixado esfriar até jccr F (2 min) CIFNO4 a temperatura am¬ M+H]+ biente durante a 428 noite. Água não foi adicionada. Produ¬ to extraído em EtOAc, seco, eva¬ porado e purifica¬ do por MDAP. 24 MjYnr" 1,21 [C24H2235 Deixado esfriar até ClAJCo (2 min) CINO4 a temperatura am¬ M+H]+ biente durante a 424 noite. Produto ex¬ traído em EtOAc, seco, evaporado e purificado por MDAP. Para uma descri¬ ção detalhada veja Intermediários 84 a 87 e Exemplo 46. Mrinr 1,24 [C23Hig35 Deixado esfriar até xcr ' (2 min) CIFNO4 a temperatura am¬ M+H]+ biente durante a 428 noite. Mistura de reação evaporada e purificada por MDAP. 26 k. 1,23 [C24H2235 Deixado esfriar até XZ (2 min) CINO4 a temperatura am¬ 0=λ M+H]+ biente durante a O 424 noite. Mistura de X reação evaporada e purificada por MDAP. 27 ΧΑ,ΧΓΓ 1,18 [C22H1735 Deixado esfriar até CXT (2 min) CI2NO4 a temperatura am¬ Cl M+H]+ biente durante a 430 noite. Produto pre¬ cipitado sob resfri¬ amento, coletado por filtração e seco sob vácuo 28 AVPnr 3,19 [C22H1635 Deixado esfriar até Qjr " (5 min) CI3NO4 a temperatura am¬ Cl M+H]+ biente durante a 464 noite. Produto pre¬ cipitado sob resfri¬ amento, coletado por filtração e seco sob vácuo 29 "Ocr ■ 1,28 [C22H1635 Deixado esfriar até (2 min) CI3NO4 a temperatura am¬ M+H]+ biente durante a 464 noite. Produto pre¬ cipitado sob resfri¬ amento, coletado por filtração e seco sob vácuo, purifi¬ cado ainda por MDAP. 40 o 1,21 [C23H1335 Deixado esfriar até £ (2 min) CIF2NO4 a temperatura am¬ % M+H]+ biente durante a XZ -Π 446 noite. Produto pre¬ ° \ cipitado em adição O de água, coletado X por filtração e seco sob vácuo Os exemplos 19, 20, 30 a 39 e 41 a 45 seguintes foram preparados em uma manei- ra similar ao ácido (4-{[(6-cloro-3-{[(3-clorofenil)metil]óxi}-2-fluorofenil)carbonil]amino}- fenil)acético (exemplo 15) a partir dos materiais de partida apropriados com quaisquer dife- renças do procedimento descrito observadas na tabela seguinte:
Ex. N2 LC Via sintética / Composto MS (método) comentários 19 A1-jTy 1,17 [C22H1635CI2FNO4 igual ao exemplo OJP ’ (2 min) M+H]+ 447 15 Λ^ςη· 1,22 [C22H1535CI3FNO4 igual ao exemplo .•ΟΧ- ° (2 min) M+H]+ 481 15 ,XXJ ’ 1,21 [C22H1635CI2FNO4 igual ao exemplo (2 min) M+H]+ 447 15 31 °-\_jhQ 1,27 [C23H1935CI2NO4 igual ao exemplo Z (2 min) M+H]+ 443 15 *-t~S oz^ ο 32 ,XXJ ' 1,16 [C23HigF2NO4 igual ao exemplo (2 min) M+H]+ 412 15 nenhuma MDAP 33 Tl 1,14 [C24H22FNO4 igual ao exemplo O (2 min) M+H]+ 408 15, porém o tempo de reação mais longo (6 horas extras), nenhuma MDAP 34 1,21 [C24H22FNO4 Aquecido a 65 (2 min) M+H]+ 408 0C durante 2 horas. Nenhuma MDAP (V-jTy 1,26 [C24H2235CINO4 Aquecido a 65 XXT (2 min) M+H]+ 424 0C durante 2 horas. Nenhuma MDAP 36 xXJçrr 1,20 [C22H1535CI2F2NO4 igual ao exemplo (2 min) M+H]+ 466 15, porém aque¬ cido a 65 0C durante 2 horas, nenhuma MDAP 37 O 1,19 [C25H25NO4 M+H]+ Aquecido a 65 ξ- (2 min) 404 0C durante 2 M horas. Nenhuma MDAP 38 .XiY ‘ 1,21 [C23H1935CIFNO4 Aquecido a 65 (2 min) M+H]+ 428 0C durante 2 horas. Nenhuma MDAP 39 ÃA.çrr 1,18 [C22H1535CI2F2NO4 igual ao exemplo .XXT- ' (2 min) M+H]+ 466 15, nenhuma MDAP 41 O 1,18 [C23H1835CI2FNO4 igual ao exemplo S- (2 min) M+H]+ 462 15 Z oK/ δΛ0 ο 42 «y^r 2,99 [C22H1535CI2F2NO4 igual ao exemplo XCP (5 min) M+Hf 466 15, porém agita¬ do na tempera¬ tura ambiente apenas durante 2 horas, não acidificado, dire- tamente purifi¬ cado por MDAP depois da eva¬ poração do sol¬ vente 43 .ΧλΧ- ’ 2,92 [C22Hi535CIF3NO4 igual ao exemplo (5 min) Μ+Η]+ 450 15, porém agita¬ do na tempera¬ tura ambiente apenas durante 2 horas, não acidificado, dire¬ tamente purifi¬ cado por MDAP depois da eva¬ poração do sol¬ vente 44 λ λ OH 2,89 [C23H1835CIF2NO4 igual ao exemplo .XXX (5 min) Μ+Η]+ 446 15, porém agita¬ do na tempera¬ tura ambiente apenas durante 2 horas, não acidificado, dire¬ tamente purifi¬ cado por MDAP depois da eva¬ poração do sol¬ vente 45 MjPrr 1,18 [C23H1835CIF2NO4 Aquecido a 65 XiX ' (2 min) Μ+Η]+ 446 0C durante 2 horas. Mistura de reação acidi- ficada extraída com EtOAc, fase orgânica seca e evaporada. 10
15
20
O experimento detalhado para a preparação do composto do exemplo 24 a partir da tabela acima é como segue:
Intermediário 84: 5-{[(3-Clorofenil)metil]óxi}-2-metilbenzoato de (3-clorofenil)metila (Intermediário 43, etapa de alquilação)
Cl
A uma solução de ácido 5-hidróxi-2-metilbenzóico (1,0 g, 6,6 mmols) em DMF (50 ml) foram adicionados carbonato de potássio (1,82 g, 13,14 mmols, 2,0 eq) e brometo de 3- clorobenzila (1,72 g, 13,14 mmols, 2,0 eq). A mistura foi agitada a 70 0C durante 2 horas e depois agitada na temperatura ambiente durante a noite. A temperatura foi aumentada a 80 0Ceo aquecimento continuado durante um adicional de 6 horas. Depois de esfriar a mistura foi diluída com acetato de etila (200 ml) e lavada com água (2 x 200 ml). A camada orgânica foi separada, seca em MgSO4, filtrada e evaporada à secura para fornecer o composto do título como um óleo amarelo, 2,67 g (contém 24 % de impureza de fenol monoalquilado). Nenhuma purificação adicional foi realizada.
MS (ES-) m/z 399 [M-H]" (C22H1835CI2O3).
RMN de 1H (400 MHz, CDCI3) δ 2,52 (3H, s), 5,04 (2H, s), 5,29 (2H, s), 7,02 (1H, dd, J 8,4, J 2,8), 7,16 (1H, d, J 8,4), 7,29 - 7,34 (6H, m), 7,43 (2H, d, J 1,2), 7,54 (1H, d, J 2,8).
Intermediário 85: Ácido 5-{[(3-clorofenil)metil]óxi}-2-metilbenzóico (Intermediário 43, etapa de hidrólise)
O
Uma solução de 5-{[(3-clorofenil)metil]óxi}-2-metilbenzoato de (3-clorofenil)metila a partir da preparação do Intermediário 84 descrita acima (2,67 g, 6,66 mmols) em 1,4- dioxano (20 ml) e água (10 ml) foi tratada com hidróxido de lítio (419 mg, 9,99 mmols, 1,5 eq). A mistura resultante foi agitada na temperatura ambiente sob argônio durante a noite. Uma outra porção de hidróxido de lítio (419 mg, 9,99 mmols, 1,5 eq) foi adicionada e a agi- tação continuada na temperatura ambiente durante 2 horas. A agitação foi continuada na 5 temperatura ambiente durante a noite. O solvente depois foi evaporado à secura e depois particionado entre HCI 2 M (100 ml) e dietiléter (100 ml). A camada orgânica foi separada e passada através de um material sintetizado hidrofóbico para remover água e evaporada à secura para fornecer o composto do título como um sólido branco (1,98 g) (contém 12 % de impureza). Nenhuma purificação adicional foi realizada.
Intermediário 86: 5-{[(3-Clorofenil)metil]óxi}-2-metilbenzoilcloreto (Intermediário 62, Formação de cloreto de ácido)
DMF (1 gota) foi adicionada a uma suspensão de ácido 5-{[(3-clorofenil)metil]óxi}-2- metilbenzóico a partir da preparação do Intermediário 85 conforme descrito acima (200 mg, 15 0,72 mmol) e cloreto de oxalila (95 μΙ, 1,08 mmol, 1,5 eq) em DCM (5 ml). A mistura resul- tante foi agitada na temperatura ambiente durante 1 hora. A mistura de reação depois foi evaporada à secura e submetida à azeotropia com tolueno (2 x 50 ml). A camada orgânica foi separada, seca e evaporada a vácuo para fornecer o composto do título como um sólido amarelo, 213 mg. Nenhuma purificação adicional foi realizada. A amostra de LCMS foi dis- 20 solvida em metanol, MS (ES+) m/z 291 [M+H]+ (C16H1535CIO3), correspondendo ao éster me- tílico gerado a partir do cloreto de ácido.
Intermediário 87: (4-{[(5-{[(3-Clorofenil)metil]óxi}-2-metilfenil)carbonil]amino}-3- metilfenil)acetato de etila (Intermediário 62, ligação amida)
10
MS (ES-) m/z 275 [M-H]' (C15H1335CIO3).
O
Cl Trietilamina (74 μΙ, 0,53 mmol, 1,5 eq) foi adicionada a uma suspensão de 5-{[(3- clorofenil)metil]óxi}-2-metilbenzoilcloreto (105 mg, 0,36 mmols) e (4-amino-3-metilfenil)- acetato de etila (103 mg, 0,53 mmol, 1,5 eq) em diclorometano (5 ml). A mistura foi agitada na temperatura ambiente durante a noite. A mistura depois foi diluída com acetonitrila e puri- 5 ficada com cartucho de SCX (5 g) eluindo com acetonitrila. Frações contendo o produto fo- ram combinadas e evaporadas para fornecer o composto do título como uma goma amare- la, 174 mg.
(4-{[(5-{[(3-Clorofenil)metil]óxi}-2-metilfenil)carbonil]amino}-3-metilfenil)acetato de etila (174 mg, 0,39 mmol) foi absorvido em ácido acético (10 ml) e HCI 2 M (10 ml) e aque- cido a 90 0C durante 2 horas. A mistura de reação foi deixada esfriar e a agitação continua- da na temperatura ambiente durante a noite. A mistura de reação foi extraída com acetato 15 de etila (50 ml), seca usando um material sintetizado hidrofóbico e depois evaporada à se- cura para fornecer um sólido amarelo/goma, 155 mg. Este foi purificado por MDAP para fornecer o composto do título como um sólido branco, 39 mg.
O composto do exemplo 24 também foi preparado em larga escala usando o méto- do seguinte. Outros compostos da presente invenção podem ser fabricados em larga escala usando métodos similares.
MS (ES+) m/z 452 [M+H]+ (C26H2635CINO4).
Exemplo 46: Ácido (4-{[(5-{[(3-clorofenil)metil]óxi}-2-metilfenil)carbonil]amino}-3- metilfenil)acético (Exemplo 24)
MS (ES+) m/z 424 [M+H]+ (C24H2235CINO4).
RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) δ 2,24 (3H, s), 2,34 (3H, s), 3,52 (2H, s), 5,17 (2H, s), 7,02 - 7,15 (4H, m), 7,22 (1H, d, J 8,4), 7,31 (1H, d, J 8,0), 7,39 - 7,44 (3H, m), 7,53 (1H, s), 9,71 (1H, s), 12,33 (1H, bs).
25
Intermediário 88: 5-Hidróxi-2-metilbenzoato de etila
OH Cloreto de alumínio (97 g, 731 mmols) foi adicionado durante 30 segundos ao DCM1 agitado (3 L) sob argônio a 16 cC resultando em um aumento de temperatura para 20 °C. Quando este foi dissolvido (aproximadamente 5 min) e a temperatura foi diminuída a 18 °C, etil-2-propionato (71,7 g, 731 mmols) foi adicionado. Uma solução de 2-metilfurano (60 g, 731 mmols) em DCM (600 ml) foi adicionada à solução agitada durante 35 minutos resul- tando em uma exotermia medida a 20,5 °C. A exotermia foi controlada por uma unidade de resfriamento de Huber e a faixa de temperatura observada durante a adição foi de 18 0C a 20,5 °C. Depois que a adição foi concluída, a mistura de reação marrom foi agitada a 20 °C. Depois de um total de 50 min a 20 °C, a mistura de reação foi vertida em água (3 L) e gelo (1 Kg) com agitação para fornecer uma mistura amarela. Esta foi transferida a um funil de separação e agitada vigorosamente. As camadas foram separadas e a fase aquosa extraída ainda com DCM (1 L). Os extratos orgânicos combinados foram lavados novamente com água (1,5 L), secos (Na2SO4) e filtrados através de diatomito. O filtrado foi concentrado a vácuo a um óleo marrom/verde. Este foi purificado por cromatografia instantânea em gel de sílica em 2 colunas 75 L Biotage em tolueno (700 ml) e a solução dividida em 2 porções iguais e cada uma passada através de um coluna 75 L, coletando frações 400 ml e eluindo com o sistemas eluentes solventes seguintes:
1â coluna: tolueno (3 L)
acetona/tolueno (3:97) (2,5 L) acetona/tolueno (6:94) (2,5 L) acetona/tolueno (9:91) (2,5 L)
Uma separação moderada foi obtida. A fração 14 foi reutilizada na 2a separação de
coluna
Frações 15 a 17 combinadas e produto contido.
2~ coluna: tolueno (3 L)
acetona/tolueno (1:99) (2,5 L) acetona/tolueno (3:97) (2,5 L) acetona/tolueno (4:96) (2,5 L) acetona/tolueno (5:95) (2,5 L)
Separação moderada obtida. A fração 17 foi misturada e reutilizada (17 g) na 3~ separação de coluna.
Frações 18 a 23 combinadas e produto contido.
3â coluna:
A mistura foi aplicada como uma solução em tolueno (50 ml) a uma coluna 75 M Biotage, eluindo 10
5
como segue e coletando frações de 200 ml. acetato de etila/ iso-hexano (5:95) (1,5 L) acetato de etila/ iso-hexano (1:9) (2,5 L) acetato de etila/ iso-hexano (15: 85) (2 L) Separação razoável obtida.
Frações 19 a 28 combinadas e produto contido. Combinação de frações de produto F15 a 17 (C1)
F18 a 23 (C2)
F19 a 28 (C3)
combinadas e concentradas a vácuo a um óleo amarelo que solidificou na secagem na temperatura ambiente sob vácuo durante 4 h: Peso = 41,7 g, (0,231 mol, 32 %).
Uma suspensão de 5-hidróxi-2-metilbenzoato de etila (39,06 g, 217 mmols), brome- to de 3-clorobenzila (31,3 ml, 238 mmols) e carbonato de potássio (44,9 g, 325 mmols) em N,N-dimetilformamida (1000 ml) foi agitada na temperatura ambiente durante 18 horas. A 20 reação depois foi filtrada, diluída com acetato de etila (2 L), lavada com água (2 L e depois 3 x 1 L) e salmoura (1 L), filtrada através de um material sintetizado hidrofóbico e concentrada para fornecer o composto do título como um óleo amarelo escuro (68,61 g) que foi usado sem outra purificação.
MS (ES') [Ci0H12O3 -H]" 179.
RMN de 1H (400 MHz) δ 1,38 (3H, t, J 7,2), 2,51 (3H, s), 4,35 (2H, q, J 7,2), 5,36
(1H, s), 6,91 (1H, dd, J 8,4, 2,8), 7,10 (1H, d, J 8,0), 7,43 (1H, d, J 2,8).
Intermediário 89: 5-{[(3-Clorofenil)metil]óxi}-2-metilbenzoato de etila
25
MS (ES+) [C17H1735CIO3 +H]+ 305.
RMN de 1H (400 MHz, DMSO-Cf6) δ 1,31 (3H, t, J 7,2), 2,42 (3H, s), 4,28 (2H, q, J
7,2), 5,14 (2H, 2), 7,13 - 7,16 (1H, m), 7,19 - 7,23 (1H, m), 7,33 - 7,45 (4H, m), 7,54 - 7,55 (1H, m).
Intermediário 90: Ácido 5-{[(3-clorofenil)metil]óxi}-2-metilbenzóico (Intermediário 43) Hidróxido de lítio (16,3 g, 389 mmols) foi adicionado a uma solução de 5-{[(3- clorofenil)metil]óxi}-2-metilbenzoato de etila (79 g, 259 mmols) em 1,4-dioxano (1 L) e água (0,5 L). A mistura de reação foi agitada a 65 0C durante 5 horas, deixada esfriar e mantida na temperatura ambiente durante 14 horas. A reação foi concentrada para remover o 1,4- 5 dioxano, e a solução aquosa marrom resultante foi lavada com éter dietílico (3x1 L). A ca- mada aquosa depois foi acidificada com HCI 2N (aproximadamente 200 ml) e o precipitado resultante filtrado e lavado com água para fornecer um sólido amarelo. Este foi seco durante a noite a 40 0C em um forno a vácuo para fornecer o composto do título como um sólido amarelo (66,38 g).
MS (ES') [C15H1335CIO3 -H]' 275.
RMN de 1H (400 MHz, DMSO-Cf6) δ 2,43 (3H, s), 5,14 (2H, s), 7,10 - 7,13 (1H, m), 7,21 - 7,23 (1H, m), 7,38 - 7,47 (4H, m), 7,52 (1H, s).
Intermediário 91: (3-Metil-4-nitrofenil)propanodioato de etil fenilmetila
NO,
O O
Hidreto de sódio (19,09 g, 477 mmols) foi adicionado às porções durante 30 minu- 15 tos a um solução esfriada em gelo de propanodioato de etil fenilmetila (115 ml, 477 mmols) em DMF (500 ml). Após a conclusão da adição, a reação foi deixada aquecer até a tempera- tura ambiente. Depois da agitação durante 30 minutos, uma solução de 4-fluoro-2-metil-1- nitrobenzeno (30 ml, 239 mmols) em DMF (250 ml) foi adicionada, a reação aquecida a 100 0C e agitada nesta temperatura durante 16 horas sob uma atmosfera de argônio. A reação 20 depois foi deixada repousar na temperatura ambiente durante 72 horas. A reação foi extinta com HCI concentrado (~ 100 ml) com agitação e resfriamento (banho de gelo), diluída com acetato de etila (2 L), lavada com água (3x2 L), salmoura (1 L), seca em sulfato de sódio, filtrada e concentrada para fornecer um óleo amarelo escuro (~ 150 g). A purificação foi por cromatografia em sílica, cartucho 1500 g, a amostra foi carregada como uma solução de 25 tolueno para a coluna pré-condicionada. Um gradiente de 0 a 5 % de acetona em pentano eluiu o componente de desenvolvimento superior, isto foi seguido por um gradiente de 5 a 15 % de acetona em isoexano para eluir o excesso de malonato de benzil etila e o produto necessário. Frações contendo o produto foram concentradas para fornecer o composto do título como um óleo amarelo claro (71,21 g).
MS (ES') [C19H19NO6 -H]' 356.
RMN de 1H (400 MHz, DMSO-Cf6) δ 1,14 (3H, t, J 7), 2,50 (3H, s), 4,01 - 4,21 (2H, m), 5,14 - 5,25 (2Η, m), 5,27 (1Η, s), 7,28 - 7,49 (7Η, m), 8,00 (1Η, d, J 8)
Intermediário 92: (4-Amino-3-metilfenil)acetato de etila (Intermediário 10)
o
Lote 1: (3-Metil-4-nitrofenil)propanodioato de etil fenilmetila (35 g, 98 mmols) foi ab- sorvido em Etanol (500 ml) e submetido a uma hidrogenação na pressão atmosférica usan- 5 do 10 % de paládio em carbono (3,13 g, 2,94 mmols). Depois de 18 horas, uma amostra pequena foi removida para análise. O catalisador foi removido por filtração através de celite e catalisador de paládio fresco em carbono (3,13 g, 2,94 mmols) foi adicionado à mistura de reação. A reação foi colocada novamente durante 3 horas. A hidrogenação foi continuada durante um adicional de 3 horas. O reservatório de hidrogenação foi enchido novamente e a 10 reação continuada durante a noite. O catalisador foi removido por filtração através de celite e catalisador de paládio fresco em carbono (3,13 g, 2,94 mmols) foi adicionado à mistura de reação. A reação foi colocada novamente durante 3 horas. Depois da agitação durante o fim de semana sob estas condições, a mistura de reação foi adicionada à mistura de reação equivalente do Lote 2.
Lote 2: (3-Metil-4-nitrofenil)propanodioato de etil fenilmetila (35 g, 98 mmols) foi ab-
sorvido em Etanol (500 ml) e submetido a uma hidrogenação na pressão atmosférica usan- do 10 % de paládio em carbono (3,13 g, 2,94 mmols). Depois de 2 horas, uma amostra foi tomada para análise. O reservatório foi enchido novamente com hidrogênio e a reação con- tinuada durante a noite. O catalisador foi removido por filtração através de celite e catalisa- 20 dor de paládio fresco em carbono (3,13 g, 2,94 mmols) foi adicionado à mistura de reação. A reação foi colocada novamente durante 3 horas. Depois de deixar a mistura de reação sob estas condições durante o fim de semana, ela foi combinada com a mistura de reação do LOTE 1 (mistura de reação equivalente) e filtrada através de celite para fornecer um fil- trado incolor. Esta solução foi concentrada a um sólido oleoso (peso = 31,9 g). A esta mistu- 25 ra foi adicionado tolueno (200 ml) e a mistura foi filtrada a partir de uma goma branca inso- lúvel (peso = 0,65g). O filtrado foi passado sob uma coluna de cromatografia 75 L Biotage em gel de sílica eluindo com a mistura gradiente de acetato de etila/iso-hexano seguinte e coletando frações de 400 ml:
acetato de etila/iso-hexano 440 ml:2500 ml (15 %)
833:2500 ml (25 %) 10
15
20
25
30
1000:1900 ml (35 %)
800:1250 ml (40 %)
As frações 13 a 19 foram combinadas e concentradas para fornecer o composto do título como um óleo que solidificado em secagem durante 2 horas na temperatura ambiente sob vácuo (peso = 24,5 g).
MS (ES+) [CiiHi5NO2 +H]+ 194.
RMN de 1H (400 MHz, CDCI3-Cf6) δ 1,25 (3H, t, J 7), 2,15 (3H, s), 3,48 (s, 2H), 3,56 (2H, br. s), 4,13 (2H, q, J 7), 6,63 (1H, d, J 8), 6,93 - 6,97 (2H, m).
Intermediário 93: (4-{[(5-{[(3-Clorofenil)metil]óxi}-2-metilfenil)carbonil]amino}-3- metilfenil)acetato de etila (intermediário 62)
Cloreto de oxalila (15,1 ml, 173 mmols) foi adicionado em aproximadamente 1 mi- nuto a uma suspensão agitada de ácido 5-{[(3-clorofenil)metil]óxi}-2-metilbenzóico (31,8 g, 115 mmols) em diclorometano (1,14 L) a 20 0C sob argônio. Isto foi seguido pela adição de N,N-dimetilformamida (2 ml, 25,8 mmols) durante 3 minutos com evolução de gás concomi- tante porém, nenhum aumento de temperatura perceptível. Dentro de aproximadamente 15 minutos a suspensão se dissolveu e se tornou um marrom mais escuro. A mistura foi agita- da sob argônio a 20 0C durante um total de 75 minutos. Depois de 75 minutos a mistura de reação foi evaporada a vácuo a um sólido cremoso que foi seco sob vácuo na temperatura ambiente durante 1 h. O sólido depois foi redissolvido em diclorometano (900 ml) e à solu- ção agitada a 20 0C sob argônio foi simultaneamente adicionada uma solução de (4-amino- 3-metilfenil)acetato de etila (24,4 g, 126 mmols) em diclorometano (240 ml) e trietilamina (24 ml) durante 10 a 15 minutos. O aumento de temperatura na reação foi de 20 0C a 30 0C durante este tempo e em seguida lentamente esfriada à temperatura ambiente. A solução marrom foi agitada sob argônio na temperatura ambiente durante 14 h. Depois de 14 h de agitação, a solução marrom foi lavada com água (2x1 L). As lavagens aquosas combina- das foram extraídas novamente com diclorometano (500 ml) e todos os extratos orgânicos foram combinados, secos (MgSO4) e evaporados a vácuo a um sólido oleoso marrom que foi seco na temperatura ambiente, sob vácuo durante 0,5 hora (peso = 51,7 g). Este materi- al foi dissolvido em diclorometano (200 ml) e a coluna de solução submetida à cromatografia no sistema 75 L Biotage eluindo com uma mistura gradiente de acetato de etila/iso-hexano e coletando frações de 400 ml como segue: 10
15
20
25
30
acetato de etila/iso-hexano 440 ml/2500 ml (15 %)
833 ml/2500 ml (25 %)
2016 ml/3750 ml (35 %)
As frações 15 a 20 foram combinadas e concentradas a um sólido rosa, secas na temperatura ambiente sob vácuo durante 2 horas (peso = 43,2 g). O sólido foi agitado com éter dietílico (100 ml) durante 1 h na temperatura ambiente para remover a maioria das co- res no sobrenadante. O sólido branco amarelado foi filtrado e seco a 40 0C sob vácuo du- rante 4 horas. Peso = 40,8 g.
MS (ES+) [C26H2635CINO4 +H]+ 452.
RMN de 1H (400 MHz) δ 1,26 (3H, t, J 7,2), 2,26 (3H, s), 2,45 (3H, s), 3,57 (2H, s), 4,15 (2H, q, J 7,2), 5,06 (2H, s), 6,95 - 7,33 (10H, m), 7,94 (1H, d, J 8)
Exemplo 47: Ácido (4-{[(5-{[(3-clorofenil)metil]óxi}-2-metilfenil)carbonil]amino}-3- metilfenil)acético (o composto do exemplo 24)
,OH
Método
A uma solução agitada de (4-{[(5-{[(3-clorofenil)metil]óxi}-2-metilfenil)carbonil]- amino}-3-metilfenil)acetato de etila (39,8 g, 88 mmols) em 1,4-dioxano (700 ml) na tempera- tura ambiente sob argônio foi adicionada uma solução de hidróxido de lítio monoidratado (5,5 g, 131 mmols) em água (400 ml) e a solução rosa agitada depois foi aquecida a uma temperatura de bloqueio de 65 °C. As temperaturas internas seguintes foram observadas durante o curso da reação: t = 0 min 20 0C t = 40 min 47 0C t = 60 min 50 0C t = 75 min 50 0C
Depois de 75 min a mistura de reação foi esfriada a 40 cC e concentrada a vácuo (temperatura do banho a 40 °C) para remover 650 ml de solvente, no momento em que a cristalização começou a ocorrer na mistura de reação. Neste ponto, ácido clorídrico 2 M (150 ml) foi adicionado à mistura causando outra cristalização e modificando a cor de rosa para amarelo. O sobrenadante foi medido como pH 1 e a mistura foi concentrada ainda para remover um adicional de 80 ml de solvente. A mistura agitada depois foi esfriada a 5 °C em um banho de gelo e depois de 0,5 h ela foi separada por filtração e lavada com água (3 x 150 ml), seca por sucção e depois novamente seca a 40 °C, sob vácuo, durante 20 horas (peso = 37,4 g).
MS (ES+) [C24H2235CINO4 +H]+ 424.
RMN de 1H (400 MHz, DMSO-Cf6) δ 2,24 (3H, s), 2,35 (3H, s), 3,53 (2H, s), 5,17
(2H, s), 7,02 - 7,53 (10H, m), 9,72 (1H, s), 12,35 (1H, br. s).
Dados biológicos
Estudos foram realizados usando células HEK-293(T) que expressam o receptor prostanóide EP4 humano recombinante (células HEK-EP4). As células foram cultivadas como 10 uma cultura de camada única em DMEM-F12/F12 contendo glutamax II® (uma fonte de L- Glutamina) (Gibco) e suplementadas com 10 % de soro fetal bovino (Gibco) e 0,4 mg.ml-1 G418. As células HEK-EP4 foram pré-tratadas durante 24 h e 30 min antes do experimento com 10 μΜ de indometacina e colhidas usando Versene® (EDTA) contendo 10 μΜ de indo- metacina. As células foram recolocadas em suspensão no tampão de ensaio (DMEM:F12, 15 10 μΜ de indometacina e 200 μΜ de IBMX) em células 1 χ 106 por ml e incubadas durante 20 min a 37 0C. Em seguida, 50 μΙ de células foram adicionados a 50 μΙ do composto de teste (composto da fórmula (I)) e incubados a 37 0C durante 4 minutos antes de interromper as reações com 100 μΙ de Triton® X-100 1 % (tensoativo não iônico). Níveis de cAMP nos Iisados celulares foram determinados usando um ensaio de ligação de competição. Neste 20 ensaio, a capacidade dos Iisados celulares em inibir a ligação de 3H-cAMP (Amersham) à subunidade de ligação da proteína cinase A foi medida e níveis de cAMP foram calculados a partir de uma curva padrão. Os dados para cada composto foram expressados como uma % da resposta a uma concentração máxima 10 nM da PGE2 agonista padrão. Para cada composto, a resposta e concentração máximas do composto ocasionando 50 % de sua res- 25 posta máxima foram calculadas (pEC50). A atividade intrínseca é expressada em relação à resposta máxima a PGE2 [(resposta máxima ao composto de teste) * 100 / (resposta máxi- ma a PGE2)]. De outro modo estabelecido, reagentes foram adquiridos comercialmente da Sigma.
Os Exemplos da presente invenção foram testados no ensaio mencionado acima e exibiram valores de pEC50 médios de 6,0 ou mais, e atividades intrínsecas médias de 20 % ou mais.

Claims (23)

1. Composto, CARACTERIZADO pelo fato de que é da fórmula (I) ou um derivado farmaceuticamente aceitável do mesmo, <formula>formula see original document page 70</formula> em que, R1 representa halogênio ou alquila C1-4; R2 representa alquila C1-4OU cloro; R3 representa H, alquila C1^ou halogênio; R4 representa H; R5 independentemente representa halogênio ou alquila C1-4; m representa O ou 1; n representa 0, 1 ou 2; e X representa O ou NH; com a condição de que quando n representa 2 e R5 representa halogênio, os gru- pos R5 junto ao grupo fenila ao qual eles são ligados não formam uma porção 2,3- difluorofenila.
2. Composto, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que X representa O.
3. Composto, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que X representa NH.
4. Composto, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, CARACTERIZADO pelo fato de que R1 representa halogênio.
5. Composto, de acordo com a reivindicação 4, CARACTERIZADO pelo fato de que R1 representa cloro.
6. Composto, de acordo com a reivindicação 5, CARACTERIZADO pelo fato de que R1 representa cloro na posição C(3) no anel fenila em relação a -CH2COOH.
7. Composto, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, CARACTERIZADO pelo fato de que R2 é metila.
8. Composto, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, CARACTERIZADO pelo fato de que R3 é H.
9. Composto, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, CARACTERIZADO pelo fato de que R5 representa metila.
10. Composto, de acordo com a reivindicação 9, CARACTERIZADO pelo fato de que R5 representa metila na posição C(3) no anel fenila em relação a -CH2COOH.
11. Composto, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, CARACTERIZADO pelo fato de que: R1 representa halogênio; R2 é alquila C1^; R3 é H; R5 representa alquila C^4; m representa 1; e n representa 1.
12. Composto, de acordo com a reivindicação 11, CARACTERIZADO pelo fato de que: R1 representa cloro; R2 é metila; R3 é H; R5 representa metila; m representa 1; e n representa 1.
13. Composto, de acordo com a reivindicação 12, CARACTERIZADO pelo fato de que: R1 representa cloro na posição C(3) no anel fenila; R2 é metila; R3 é H; R5 representa metila na posição C(3) no anel fenila em relação a -CH2COOH; m representa 1; e n representa 1.
14. Composto, CARACTERIZADO pelo fato de que é da fórmula (I) ou um derivado farmaceuticamente aceitável do mesmo, R1 representa cloro; R2 representa metila; R3 representa H; R4 representa H; R5 representa metila; m representa 1; n representa 1; e X representa O.
15. Composto, de acordo com a reivindicação 1, CARACTERIZADO pelo fato de que é selecionado a partir do grupo que consiste de: ácido (3-cloro-4-{[(2-cloro-5-{[(3-clorofenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}fenil)- acético; ácido {3-cloro-4-[({2-cloro-5-[(fenilmetil)óxi]fenil}carbonil)amino]fenil}acético; ácido (4-{[(2-cloro-5-{[(3-clorofenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}fenil)acético; ácido (4-{[(2-cloro-5-{[(3-clorofenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}-2-fluorofenil)- acético; ácido (4-{[(2-cloro-5-{[(3-clorofenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}-3-fluorofenil)- acético; ácido (4-{[(2-cloro-5-{[(3-clorofenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}-2,5-difluorofenil)- acético; ácido (3-cloro-4-{[(2-cloro-5-{[(3-clorofenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}-2- fluorofenil)acético; ácido (4-{[(2-cloro-5-{[(3-clorofenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}-3-metilfenil)- acético; ácido {4-[({2-cloro-5-[(fenilmetil)amino]fenil}carbonil)amino]fenil}acético; ácido (4-{[(2-cloro-5-{[(3-clorofenil)metil]amino}fenil)carbonil]amino}fenil)acético; ácido (4-{[(2-cloro-5-{[(2-clorofenil)metil]amino}fenil)carbonil]amino}fenil)acético; ácido (5-cloro-4-{[(2-cloro-5-{[(3-clorofenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}-2- fluorofenil)acético; ácido (4-{[(5-{[(3-clorofenil)metil]óxi}-2-metilfenil)carbonil]amino}fenil)acético; ácido {4-[({2-metil-5-[(fenilmetil)óxi]fenil}carbonil)amino]fenil}acético; ácido (4-{[(6-Cloro-3-{[(3-clorofenil)metil]óxi}-2-fluorofenil)carbonil]amino}fenil)- acético; ácido {4-[({6-cloro-2-fluoro-3-[(fenilmetil)óxi]fenil}carbonil)amino]fenil}acético; ácido {3-cloro-4-[({2-metil-5-[(fenilmetil)óxi]fenil}carbonil)amino]fenil}acético; ácido (3-cloro-4-{[(5-{[(3-clorofenil)metil]óxi}-2-metilfenil)carbonil]amino}fenil)- acético; ácido {3-cloro-4-[({6-cloro-2-fluoro-3-[(fenilmetil)óxi]fenil}carbonil)amino]fenil}- acético; ácido (3-cloro-4-{[(6-cloro-3-{[(3-clorofenil)metil]óxi}-2-fluorofenil)carbonil]amino}- fenil)acético; ácido (4-{[(2-cloro-5-{[(3-fluorofenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}-3-metilfenil)- acético; ácido (4-{[(2-cloro-5-{[(3-fluorofenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}-3-fluorofenil)- acético; ácido (4-{[(5-{[(3-clorofenil)metil]óxi}-2-metilfenil)carbonil]amino}-3-fluorofenil)- acético; ácido (4-{[(2-cloro-5-{[(3-metilfenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}-3-fluorofenil)- acético; ácido (4-{[(2-cloro-5-{[(3-metilfenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}-3-metilfenil)acético; ácido (4-{[(2-cloro-5-{[(2-clorofenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}fenil)acético; ácido (3-cloro-4-{[(2-cloro-5-{[(2-clorofenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}fenil)- acético; ácido (3-cloro-4-{[(2-cloro-5-{[(4-clorofenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}fenil)- acético; ácido (3-cloro-4-{[(2-cloro-5-{[(3-fluorofenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}fenil)- acético; ácido (3-cloro-4-{[(2-cloro-5-{[(3-metilfenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}fenil)- acético; ácido (3-fluoro-4-{[(5-{[(3-fluorofenil)metil]óxi}-2-metilfenil)carbonil]amino}fenil)- acético; ácido (4-{[(5-{[(3-fluorofenil)metil]óxi}-2-metilfenil)carbonil]amino}-3-metilfenil)- acético; ácido (3-fluoro-4-{[(2-metil-5-{[(3-metilfenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}fenil)- acético; ácido (3-cloro-4-{[(2-metil-5-{[(3-metilfenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}fenil)acético; ácido (4-{[(2-cloro-5-{[(3-clorofenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}-3,5-difluorofenil)- acético; ácido (3-metil-4-{[(2-metil-5-{[(3-metilfenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}fenil)acético; ácido (3-cloro-4-{[(5-{[(3-fluorofenil)metil]óxi}-2-metilfenil)carbonil]amino}fenil)- acético; ácido (4-{[(6-cloro-3-{[(3-clorofenil)metil]óxi}-2-fluorofenil)carbonil]amino}-3- fluorofenil)acético; ácido (4-{[(5-{[(3-clorofenil)metil]óxi}-2-metilfenil)carbonil]amino}-3,5-difluorofenil)- (4-{[(6-cloro-3-{[(3-clorofenil)metil]óxi}-2-fluorofenil)carbonil]amino}-3- acético; ácido metilfenil)acético; ácido (3-cloro-4-{[(6-cloro-2-fluoro-3-{[(3-fluorofenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}- fenil)acético; ácido (4-{[(6-cloro-2-fluoro-3-{[(3-fluorofenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}-3- fluorofenil)acético; ácido (4-{[(6-cloro-2-fluoro-3-{[(3-fluorofenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}-3- metilfenil)acético; ácido (4-{[(6-cloro-2-fluoro-3-{[(3-metilfenil)metil]óxi}fenil)carbonil]amino}-3- fluorofenil)acético; ou um derivado farmaceuticamente aceitável do mesmo.
16. Composto, de acordo com a reivindicação 1 ou reivindicação 14, CARACTERIZADO pelo fato de que é ácido (4-{[(5-{[(3-clorofenil)metil]óxi}-2-metilfenil)- carbonil]amino}-3-metilfenil)acético <formula>formula see original document page 74</formula> ou um derivado farmaceuticamente aceitável do mesmo.
17. Composição farmacêutica, CARACTERIZADA pelo fato de que compreende um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 16 e um portador ou diluente farmaceuticamente aceitável do mesmo.
18. Uso de um composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 16, CARACTERIZADO pelo fato de que é para a fabricação de um medicamento para o tratamento de uma condição que é mediada pela ação ou pela perda de ação de PGE2 em receptores EP4.
19. Uso, de acordo com a reivindicação 18, CARACTERIZADO pelo fato de que a condição é dor.
20. Uso, de acordo com a reivindicação 19, CARACTERIZADO pelo fato de que a condição da dor é selecionada a partir do grupo que consiste de: dor articular crônica; dor musculoesquelética; dor lombar e no pescoço; distensões e tensões; dor neuropática; dor simpaticamente mantida; miosite; dor associada com câncer e fibromialgia; dor associada com enxaqueca; dor associada com gripe ou outras infecções virais; febre reumática; dor associada com distúrbios do intestino funcional; dor associada com isquemia miocárdica; dor do pós-operatório; dor de cabeça; dor de dentes e dismenorréia.
21. Método de tratar um paciente humano ou animal sofrendo de uma condição que é mediada pela ação ou pela perda de ação de PGE2 em receptores EP4, CARACTERIZADO pelo fato de que compreende administrar ao dito paciente uma quanti- dade eficaz de um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações de 1 a 16.
22. Método, de acordo com a reivindicação 21, CARACTERIZADO pelo fato de que a condição é dor.
23. Método, de acordo com a reivindicação 22, CARACTERIZADO pelo fato de que a condição da dor é selecionada a partir do grupo que consiste de: dor articular crônica; dor musculoesquelética; dor lombar e no pescoço; distensões e tensões; dor neuropática; dor simpaticamente mantida; miosite; dor associada com câncer e fibromialgia; dor associada com enxaqueca; dor associada com gripe ou outras infecções virais; febre reumática; dor associada com distúrbios do intestino funcional; dor associada com isquemia miocárdica; dor do pós-operatório; dor de cabeça; dor de dentes e dismenorréia.
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