BRPI0809326A2 - Métodos de preparação de microesfera de liberação controlada contendo exendina com camada de revestimento, composição e microesfera - Google Patents

Métodos de preparação de microesfera de liberação controlada contendo exendina com camada de revestimento, composição e microesfera Download PDF

Info

Publication number
BRPI0809326A2
BRPI0809326A2 BRPI0809326-1A2A BRPI0809326A BRPI0809326A2 BR PI0809326 A2 BRPI0809326 A2 BR PI0809326A2 BR PI0809326 A BRPI0809326 A BR PI0809326A BR PI0809326 A2 BRPI0809326 A2 BR PI0809326A2
Authority
BR
Brazil
Prior art keywords
ala
gly
lys
ser
exendin
Prior art date
Application number
BRPI0809326-1A2A
Other languages
English (en)
Inventor
Hee-Yong Lee
Eun-Young Seol
Joon-Sik Kim
Mi-Jin Baek
Jung-Soo Kim
Ju-Han Lee
Yeon-Jin Chae
Chae-Jin Lim
Mi-Young Baek
Ho-Il Choi
Original Assignee
Peptron Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Peptron Co Ltd filed Critical Peptron Co Ltd
Publication of BRPI0809326A2 publication Critical patent/BRPI0809326A2/pt
Publication of BRPI0809326B1 publication Critical patent/BRPI0809326B1/pt
Publication of BRPI0809326B8 publication Critical patent/BRPI0809326B8/pt

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
    • A61K9/1605—Excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/1629—Organic macromolecular compounds
    • A61K9/1641—Organic macromolecular compounds obtained otherwise than by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyethylene glycol, poloxamers
    • A61K9/1647—Polyesters, e.g. poly(lactide-co-glycolide)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • A61K38/22—Hormones
    • A61K38/2278—Vasoactive intestinal peptide [VIP]; Related peptides (e.g. Exendin)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A61K9/0024—Solid, semi-solid or solidifying implants, which are implanted or injected in body tissue
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/16—Agglomerates; Granulates; Microbeadlets ; Microspheres; Pellets; Solid products obtained by spray drying, spray freeze drying, spray congealing,(multiple) emulsion solvent evaporation or extraction
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/14—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles
    • A61K9/19—Particulate form, e.g. powders, Processes for size reducing of pure drugs or the resulting products, Pure drug nanoparticles lyophilised, i.e. freeze-dried, solutions or dispersions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/5005—Wall or coating material
    • A61K9/5015—Organic compounds, e.g. fats, sugars
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/50—Microcapsules having a gas, liquid or semi-solid filling; Solid microparticles or pellets surrounded by a distinct coating layer, e.g. coated microspheres, coated drug crystals
    • A61K9/5005—Wall or coating material
    • A61K9/5021—Organic macromolecular compounds
    • A61K9/5026—Organic macromolecular compounds obtained by reactions only involving carbon-to-carbon unsaturated bonds, e.g. polyvinyl pyrrolidone, poly(meth)acrylates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
    • A61P5/48—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones
    • A61P5/50—Drugs for disorders of the endocrine system of the pancreatic hormones for increasing or potentiating the activity of insulin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/30—Macromolecular organic or inorganic compounds, e.g. inorganic polyphosphates
    • A61K47/36—Polysaccharides; Derivatives thereof, e.g. gums, starch, alginate, dextrin, hyaluronic acid, chitosan, inulin, agar or pectin
    • A61K47/38—Cellulose; Derivatives thereof

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Manufacturing Of Micro-Capsules (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Description

“Métodos de Preparação de Microesfera de Liberação Controlada Contendo Bxendina com Camada de Revestimento, Composição e Microesfera”
Relatório Descritivo Referência Cruzada a Pedido Correlato
Este Pedido reivindica prioridade e o benefício do Pedido Patente coreano 10-2007-0029586, depositado em 27 de março de 2007, que é por este meio incorporado por referência para todos os propósitos como se completamente aqui descrito.
Antecedentes da Invenção
(a) Campo da Invenção
A presente invenção relaciona-se com um composição de liberação controlada e uma microesfera de liberação controlada contendo exendina como um ingrediente ativo e um método de preparação das mesmas.
(b) Descrição da Técnica Correlata
As exendinas são agonistas peptídeos semelhantes ao glucagon I (GLP-I) que atuam como um hormônio GLP-1 sobre o corpo e a exendina-4 tem 53% de homologia de seqüência com a seqüência de aminoácido de GLP-I (7-36)NH2 (Goke e colaboradores, J. Biol Chem., 268: 19650-19655, 1993).
O GLP-I, um hormônio de incretina representativo, é um peptídeo secretado a partir de células L no intestino, é secretado quando acontece o influxo de nutrients no caminho digestivo e abaixa o nível de açúcar do sangue por estimulação da secreção de insulina a partir das células beta pancreáticas (Orskov, e colaboradores, Diabetes, 42:658-661, 1993). Além disso, o GLP-I inibe a liberação de glucagon a partir células alfa pancreáticas (D 'Alessio e colaboradores, J. Clin. Invest., 97:133-138, 1996) e aumenta o tempo esvaziamento gastrointestinal resultando na inibição do influxo de nutrientes (Schira e 5 colaboradores, J. Clin. Invest., 97:92-103, 1996). O GLP-I tem funções não só de estimulação da secreção da insulina a partir das células beta pancreáticas, mas também de aumento taxa da proliferação e taxa de sobrevivência das células beta (Buteau e colaboradores, Diabetologia, 42:856-864, 1999). Todavia, o GLP-I perde a sua função por clivagem 10 da sua região terminal-N pela dipeptidil peptidase-4 (DPP-4) e tem uma meia vida muito pequena de cerca de 2 minutos (Pridal e colaboradores, Eur. J. Drug Metab. Pharmacokinet, 21:51-59, 1996; Deacon e colaboradores, Diabetes, 47:764-769, 1998).
As exendinas têm sido conhecidas por aumentar a secreção 15 da insulina dependendo do nível de açúcar no sangue no corpo, para inibir a liberação de glucagon põs-prandial e abaixar a taxa de esvaziamento gastrointestinal, o que resulta na inibição do influxo de nutrientes. Além disso, as exendinas têm uma vantagem de ter uma meia vida mais longa do que o GLP-I, visto que a exendina, diferentemente do 20 GLP-I, não é clivada na região terminal N pela DPP-4 e, deste modo, as exendinas podem exibir a sua função no corpo durante um tempo maior do que o GLP-I (Thum e colaboradores, Exp. Clin. Endocrinol. Diabetes, 110:113-118, 2002). As exendinas são encontradas em secreções salivais do monstro de GiIa e o Lagarto mexicano Enfeitado com contas, 25 em que a exendina-3 é encontrada num Lagarto mexicano Enfeitado com contas, Heloderma horridum, e a exendina-4 é encontrada num monstro de GiIa, Heloderma suspectum (Eng, J., e colaboradores, J. Biol. Chem., 265:20259-62, 1990; Eng., J. e colaboradores, J. Biol Chem., 267:7402-05, 1992).
Foi confirmado por injeções intraperitoneais de exendina-4
em ratos diabéticos ob/ob uma vez por dia que a exendina-4 tem um efeito prolongado de abaixar o nível de açúcar no sangue- (Greig e colaboradores, Diabetologia 42:45-50, 1999). Recentemente, a exendina-4 foi formulada como um agente de injeção que é injetado subcutaneamente duas vezes ao dia numa dose de 5 pg ou 10 pg.
Embora a exendina seja estável contra a enzima DPP-4, ela é conhecida por causar efeitos colaterais tais como vômitos, náuseas, enxaquecas e semelhantes, quando é injetada subcutaneamente numa pessoa humana numa dose de 0,2 μg/kg ou mais (Drug Development Research, 53:260-267, 2001). Para administração de exendinas, o limite de dose 10 devido aos efeitos colaterais por explosão e concentração de sangue inicial alta inicial é o maior obstáculo para desenvolvimento de um agente de liberação controlada de exendina.
Geralmente, um agente de liberação controlada de uma droga aquosa exibe uma liberação muito elevada na fase inicial a seguir 15 à administração e existem vários estudos para diminuir a explosão inicial excessiva. Em particular, desenvolver um agente de liberação controlada de exendinas, diminuindo a explosão inicial, é indispensável para impeder efeitos colaterais tais como vômitos, náuseas, enxaquecas e semelhantes causados pela explosão inicial excessiva.
A fim de diminuir a explosão inicial de microesferas de lib
eração controlada contendo octreotide tendo um efeito terapêutico sobre a acromegalia e semelhantes, houve um estudo para preparar microesferas preparando uma emulsão primária da droga junto com glicose e, então, realizando um método de emulsão dupla. Neste estudo, foi 25 revelado que a explosão inicial pode ser diminuída carregando a droga junto com glicose. Todavia, sob uma condição de preparação em que a explosão inicial a partir de microesferas é de mais ou menos 5%, a adição de glicose não consegue lever a um aumento na quantidade de carga e, em vez disso, aumenta a explosão inicial (J. Wang e colabora30 dores, Biomatenals, 25:1919- 1927, 2004). Portanto, a técnica descoberta no documento acima é difícil de aplicar a uma preparação de uma formulação de liberação controlada de uma exendina em que a explosão inicial deve ser de 5% ou abaixo para diminuir os efeitos colaterais causados pela explosão inicial.
A Patente US 7164005 e US2005/0271702 revelam um método de preparação de microesferas contendo exendinas por um método de separação de fase que usa um polímero poli(lactídeo-coglicolídeo) (PLGA) em que a relação de lactídeo:glicolídeo é 50:50. Nos 10 documentos acima, o polímero 3A (IV=0,38 dL/g), o polímero 4A (IV=0,42 dL/g) e semelhantes, particularmente o polímero 4A, proporcionado por Alkermes Inc., são usados como polímeros. Nos documentos acima, as microesferas são preparadas misturando uma droga de peptídeo com componentes de salinização tais como sulfato de amônio e 15 açúcares tais como sacarose e manitol para preparar uma emulsão primária, a fim de melhorar a biodisponibilidade das microesferas que consiste numa exendina e o polímero 3A ou 4A e a estabilidade da droga de peptídeo. Isto é, os documentos pretendem melhorar a biodisponibilidade adicionando aditivos tais como açúcares, sulfato de amônio 20 e semelhantes, permitindo, assim, liberação suficiente de uma exendina a partir da matriz de polímero. Como resultado, a biodisponibilidade pode ser melhorada até certo ponto, mas o valor Cmax também é elevado, gerando, assim, o problema de efeitos colaterais causados por uma explosão inicial alta. Ou seja, quando a biodisponibilidade ficar 25 elevada, a explosão inicial fica excessiva, enquanto, quando a explosão inicial ficar baixa, a biodisponibilidade fica baixa.
Como descrito acima, as técnicas existentes de preparação de uma microesfera de liberação controlada têm limitações na medida em que a microesfera preparada tem uma explosão inicial excessivamente elevada e uma biodisponibilidade insuficiente para ser aplicada à preparação de microesferas de liberação controlada contendo exendina que exigem a minimização dos efeitos colaterais causados por uma explosão inicial alta em conjunto com uma biodisponibilidade melhorada.
Portanto, para resolver os problemas acima, é necessário desenvolver uma formulação biodegradável contendo exendina que exiba uma explosão inicial baixa e biodisponibilidade melhorada.
Sumário da Invenção
A fim de satisfazer as necessidades acima, é um objetivo da presente invenção proporcionar um agente de liberação controlada de 10 elevada biodisponibilidade contendo exendina como ingrediente ativo e um polímero biodegradável como portador, em que a explosão inicial excessive, que é um dos problemas dos agentes de liberação controlada existentes é diminuído e um método de preparar o mesmo.
Breve Descrição dos Desenhos
A Figura 1 é um gráfico que mostra uma mudança na con
centração sanguínea da droga em ratazanas que depende da presença de uma camada de revestimento numa formulação contendo exendina de RG502H.
A Figura 2 é um gráfico mostrando uma mudança na concentração sanguínea da droga em ratazanas que depende da presença de uma camada de revestimento numa formulação contendo exendina de RG503H.
A Figura 3 é um gráfico que mostra uma mudança na concentração sanguínea da droga em ratazanas que depende da presença de uma camada de revestimento e o tipo de materiais de revestimento numa mistura de formulação contendo exendina de RG502H:RG503H = 1:1.
A Figura 4a é uma imagem de microscópio eletrônico de microesferas preparadas por um método de emulsão dupla convencional.
A Figura 4b é uma imagem de microscópio eletrônico de microesferas cobertas de materiais de revestimento específicos por um método de emulsão dupla de acordo com a presente invenção.
A Figura 4c é uma imagem de microscópio eletrônico de microesferas preparadas por um método de emulsão dupla com materiais de revestimento em fase aquosa primária.
A Figura 4d é uma imagem de microscópio eletrônico de microesferas preparadas por um método de emulsão dupla com materiais de revestimento dissolvidos com polímeros em fase oleosa.
Descrição Detalhada das Modalidades Preferidas
Uma avaliação mais completa da invenção e muitas das vantagens resultants da mesma ficará prontamente evidente, à medida que a mesma fica melhor entendida por referência à descrição detalhada seguinte.
A presente invenção relaciona-se com uma composição de microesferas de liberação controlada contendo exendina de elevada biodisponibilidade e uma explosão inicial minimizada da droga, quando administrada ao corpo.
A Patente coreana 140209 revela um método de preparação de uma microesfera por dissolução de uma droga aquosa com materiais orgânicos básicos específicos para preparar uma emulsão primária e, 25 então, realizando um método de emulsão dupla, a fim de inibir a explosão inicial da droga aquosa. O documento acima revela o aumento da eficiência de carga da droga e a inibição de uma explosão inicial alta desnecessária por formação de uma camada forte por interação entre resíduos ácidos de polímeros biodegradáveis e resíduos básicos da droga. Conforme revelado no documento acima, o método acima pode ser útil para preparar um composição de liberação controlada contendo um polipeptídeo básico ou neutro, tal como LHRH, TRH e derivados dos 5 mesmos. Todavia, o método pode não ser útil, dependendo das características das drogas a serem carregadas, em particular, na preparação de uma composição de liberação controlada contendo uma droga ácida com peso molecular relativamente maior em comparação com LHRH e TRH, tal como a exendina e semelhantes. Além disso, no método acima, 10 a adição de materiais básicos ocasiona porosidade aumentada da superfície de microesfera preparada e, deste modo, o método não é apropriado para preparar uma formulação de liberação controlada contendo uma exendina que exibe vários efeitos colaterais causados pela explosão inicial.
Os inventores presentes confirmaram que as microesferas
tendo elevada biodisponibilidade e sem efeitos colaterais a partir de uma explosão inicial excessiva podem ser formadas por revestimento das mesmas com materiais de revestimento específicos durante ou depois da preparação de microesferas contendo exendinas usando 20 polímeros biodegradáveis como portadores, para completar a presente invenção.
Primeiro, a presente invenção proporciona uma composição de liberação controlada contendo exendina como ingrediente ativo, um polímero biodegradável com uma viscosidade específica e materiais de 25 revestimento, tendo elevada biodisponibilidade e exibindo liberação sustentada do ingrediente ativo a uma concentração efetiva durante certo período sem uma explosão inicial excessiva do ingrediente ativo.
Noutro aspecto, a presente invenção proporciona uma microesfera de liberação controlada contendo um núcleo que inclui exendina como ingrediente ativo e um polímero biodegradável; e uma camada de revestimento que recobre o núcleo.
Em seguida, a presente invenção é descrita de modo mais
concreto.
Na presente invenção, a exendina pode ser um ou mais selecionados do grupo que consiste em exendina-3 (SEQ ID NO: 1), exendina-4 (SEQ ID NO:2) e fragmentos, derivados e sais farmaceuticamente aceitáveis dos mesmos.
Os derivados de exendina podem ser um composto representado pela seguinte Fórmula Química I ou seu sal farmaceuticamente aceitável.
Fórmula Química I
Xaal Xaa2 Xaa3 Xaa4 Xaa5 Xaa6 Xaa7 Xaa8 Xaa9 XaalO Xaall Xaal2 Xaal3 Xaal4 Xaal5 Xaa 16 Xaal7 Ala Xaa 19 Xaa20 Xaa21 Xaa22 Xaa23 Xaa24 Xaa25 Xaa26 Xaa27 Xaa28 -Zl,
em que:
Xaal é His, Arg, Tyr, Ala, Norval, Vai, Norleu ou 4- imidazopropionil;
Xaa2 é Ser, Gly, Ala ou Thr;
Xaa3 é Ala, Asp ou Glu;
Xaa4 é Ala, Norval, Vai, Norleu ou Gly;
Xaa5 é Ala ou Thr;
Xaa6 é Ala, Phe, Tyr ou naftilalanina;
Xaa7 é Thr ou Ser;
Xaa8 é Ala, Ser ou Thr;
Xaa9 é Ala, Norval, Vai, Norleu, Asp ou Glu; XaalO é Ala, Leu, Ile, Vai, pentilglicina ou Met;
Xaal 1 é Ala ou Ser;
Xaa 12 é Ala ou Lys;
Xaa 13 é Ala ou Gin;
Xaal4 é Ala, Leu, Ile, pentilglicina, VaI ou Met;
Xaal5 é Ala ou Glu;
Xaa 16 é Ala ou Glu;
Xaal7 é Ala ou Glu;
Xaa 19 é Ala ou Vai;
Xaa20 é Ala ou Arg;
Xaa21 é Ala, Leu ou Lys-NHe-R (em que R é Lys, Arg ou um alcanoil de cadeia reta ou ramificada de Cl-C 10);
Xaa22 é Ala, Phe, Tyr ou naftilalanina;
Xaa23 é Ile, Vai, Leu, pentilglicina, tert-butilglicina ou Met; Xaa24 é Ala, Glu ou Asp;
Xaa25 é Ala, Trp, Phe, Tyr ou naftilalanina;
Xaa26 é Ala ou Leu;
Xaa27 é Ala ou Lys;
Xaa28 é Ala ou Asn; e Zl é -OH,
-NH2,
Gly-Z2, Gly Gly-Z2, Gly Gly Xaa31-Z2,
Gly Gly Xaa31 Ser-Z2,
Gly Gly Xaa31 Ser Ser-Z2,
Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly-Z2,
Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala-Z2,
Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36-Z2,
Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36 Xaa37-Z2,
Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36 Xaa37 Xaa38-Z2 ou Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36 Xaa37 Xaa38 Xaa39-
Z2,
(em que Xaa31, Xaa36, Xaa37 e Xaa38 são independentemente Pro, homoprolina, 3Hyp, 4Hyp, tioprolina, N-alquilglicina, Nalquilpentilglicina ou N-alquilalanina,
Xaa39 é Ser ou Tyr e, com maior preferência, Ser e Z2 é -OH ou -NH2),
desde que não mais do que três dentre Xaa3, Xaa4, Xaa5, Xaa6, Xaa8, Xaa9, XaalO, Xaal 1, Xaal2, Xaal3, Xaal4, Xaal5, Xaa 16, Xaal7, Xaal9, Xaa20, Xaa21, Xaa24, Xaa25, Xaa26, Xaa27 e Xaa28 sejam Ala e, quando Xaal for His, Arg ou Tyr, pelo menos um dentre Xaa3, Xaa4 e Xaa9 é Ala.
Os grupos N-alquil preferidos para N-alquilglicina, Nalquilpentilglicina e N- alquilalanina podem incluir grupos de alquil mais baixos, de preferência desde 1 até mais ou menos 6 átomos de carbono, com maior preferência de 1 a 4 átomos de carbono. O com25 posto representado pela Fórmula Química I pode incluir compostos identificados nos Exemplos de 1 a 89 (Compostos de 1 a 89, respectivãmente) e os compostos correspondentes identificados nos Exemplos 104 e 105 no Pedido PCT de número de série PCT/US98/24273 depositado em 13 de novembro de 1998, intitulado “Novel Exendin Agonist Compounds”, que é por este meio aqui incorporado por referência.
Os derivados preferidos de exendina da Fórmula Química I
podem incluir aqueles em que Xaal é His, Ala, Norval ou 4-imidazopropionil, com maior preferência, Xaal é His, Ala ou 4-imidazopropionil, e, mesmo com maior preferência, Xaal é His ou 4-imidazopropionil.
Os derivados de exendina preferidos da fórmula Química I podem ser aqueles em que Xaa2 é Gly.
Os derivados de exendina preferidos da Fórmula Química I podem ser aqueles em que Xaa3 é Ala.
Os derivados de exendina preferidos da Fórmula Química I podem ser aqueles em que Xaa4 é Ala.
Os derivados de exendina preferidos da Fórmula Química I
podem ser aqueles em que Xaa9 é Ala.
Os derivados de exendina preferidos da Fórmula Química I podem ser aqueles em que Xaa 14 é Leu, pentilglicina ou Met.
Os derivados de exendina preferidos da Fórmula Química I podem ser aqueles em que Xaa21 é Lys-NHe-R (em que R é Lys, Arg ou alcanoil de cadeia reta ou ramificada CI-C10).
Os derivados de exendina preferidos da Fórmula Química I podem ser aqueles em que Xaa25 é Trp ou Phe.
Os derivados de exendina preferidos da Fórmula Química I podem ser aqueles em que Xaa6 é Ala, Phe ou naftilalanina, Xaa22 é Phe ou naftilalanina e Xaa23 é Ile ou VaL Além disso, os derivados de exendina preferidos da Fórmula Química I podem ser aqueles em que Xaa31, Xaa36, Xaa37 e Xaa38 são selecionados independentemente do grupo que consiste em Pro, homoprolina, tioprolina e N-alquilalanina e, com maior preferência, Zl é -NH2 e Z2 é -NH2.
Noutro aspecto, os derivados de exendina preferidos da 5 Fórmula Química I podem ser aqueles em que Xaal é Ala, His ou Tyr e, com maior preferência, Ala ou His; Xaa2 é Ala ou Gly; Xaa6 é Phe ou naftilalanina; Xaa 14 é Ala, Leu, pentilglicina ou Met; Xaa22 é Phe ou naftilalanina; Xaa23 é Ile ou Vai; Xaa31, Xaa36, Xaa37 e Xaa38 são selecionados independentemente do grupo que consiste em Pro, ho10 moprolina, tioprolina e N-alquilalanina; Xaa39 é Ser ou Tyr e, com maior preferência, Ser; e, de preferência, Zl é -NH2.
De acordo com um aspecto especialmente preferido, derivados de exendina especialmente preferidos da Fórmula Química I podem ser aqueles em que Xaal é His ou Ala; Xaa2 é Gly ou Ala; Xaa3 é Ala, Asp ou Glu; Xaa4 é Ala ou Gly; Xaa5 é Ala ou Thr; Xaa6 é Phe ou naftilalanina; Xaa7 é Thr ou Ser; Xaa8 é Ala, Ser ou Thr; Xaa9 é Ala, Asp ou Glu; XaalO é Ala, Leu ou pentilglicina; Xaall é Ala ou Ser; Xaal2 é Ala ou Lys; Xaal3 é Ala ou Gin; Xaal4 é Ala, Leu, Met ou pentiglicina; Xaa 15 é Ala ou Glu; Xaa 16 é Ala ou Glu; Xaal7 é Ala ou Glu; Xaal9 é Ala ou Vai; Xaa20 é Ala ou Arg; Xaa21 é Ala ou Leu; Xaa22 é Phe ou naftilalanina; Xaa23 é Ile, VaI ou tert-butilglicina; Xaa24 é Ala, Glu ou Asp; Xaa25 é Ala, Trp ou Phe; Xaa26 é Ala ou Leu; Xaa27 é Ala ou Lys; Xaa28 é Ala ou Asn; Zl é -OH, -NH2, Gly-Z2, Gly Gly-Z2, Gly Gly Xaa31-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly AlaZ2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36 Xaa37-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36 Xaa37 Xaa38-Z2 ou Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36 Xaa37 Xaa38 Xaa39-Z2; Xaa31, Xaa36, Xaa37, e Xaa38 são independentemente Pro, homoprolina, tioprolina ou N-metilalanina; Xaa39 é Ser ou Tyr e, com maior preferência, Ser; e Z2 é OH ou -NH2, desde que não mais do que três dentre Xaa3, Xaa5, Xaa6, Xaa8, XaalO, Xaal 1, Xaal2, Xaal3, Xaal4, Xaal5, Xaa 16, Xaal7, Xaa 19, Xaa20, Xaa21, Xaa24, Xaa25, Xaa26, Xaa27 e Xaa28 são Ala e, quando Xaal for His, Arg ou Tyr, pelo menos um dentre Xaa3, Xaa4 e Xaa9 pode ser Ala.
Os compostos especialmente preferidos da Fórmula Química I podem incluir aqueles que têm as seqüências de aminoácido de SEQ ID Nos: de 5 a 93 descritas no Pedido PCT de número de série PCT/US98/25728 ou aqueles descritos no Pedido Provisório US 60/066029, que são aqui por este meio incorporados por referência.
De acordo com um aspecto especialmente preferido, são providos compostos em que o Xaa 14 é Leu, Ile, VaI ou pentilglicina e, com maior preferência, Leu ou pentilglicina; e Xaa25 é Ala, Phe, Tyr ou naftilalanina e, com maior preferência, Phe ou naftilalanina.
Estes compostos serão menos suscetíveis à degradação oxidativa, tanto in vitro como in uivo, assim como também durante a síntese do composto.
Noutro aspecto, os derivados de exendina podem também incluir os compostos representados pela Fórmula Química II ou seus sais farmaceuticamente aceitáveis.
Fórmula Química II
Xaal Xaa2 Xaa3 Xaa4 Xaa5 Xaa6 Xaa7 Xaa8 Xaa9 XaalO Xaall Xaal2 Xaa 13 Xaa 14 Xaa 15 Xaa 16 Xaa 17 Ala Xaal 9 Xaa20 Xaa21 Xaa22 Xaa23 Xaa24 Xaa25 Xaa26 Xl-Zl,
em que
Xaal é His, Arg, Tyr, Ala, Norval, Vai, Norleu ou 4- imidazopropionil;
Xaa2 é Ser, Gly, Ala ou Thr; Xaa3 é Ala, Asp ou Glu;
Xaa4 é Ala, Norval, Vai, Norleu ou Gly;
Xaa5 é Ala ou Thr;
Xaa6 é Ala, Phe, Tyr ou naftilalanina;
Xaa7 é Thr ou Ser;
Xaa8 é Ala, Ser ou Thr;
Xaa9 é Ala, Norval, Vai, Norleu, Asp ou Glu;
XaalO é Ala, Leu, Ile, Vai, pentilglicina ou Met;
Xaal 1 é Ala ou Ser;
Xaal2 é Ala ou Lys;
Xaa 13 é Ala ou Gin;
Xaal4 é Ala, Leu, Ile, pentilglicina, VaI ou Met;
Xaa 15 é Ala ou Glu;
Xaa 16 é Ala ou Glu;
Xaa 17 é Ala ou Glu;
Xaa 19 é Ala ou Vai;
Xaa20 é Ala ou Arg;
Xaa21 é Ala, Leu ou Lys-NHe-R (em que, R é Lys, Arg, alcanoil de cadeia reta ou ramificada Cl-ClO ou cicloaleil-alcanoil);
Xaa22 é Phe, Tyr ou naftilalanina;
Xaa23 é Ile, Vai, Leu, pentilglicina, tert-butilglicina ou Met; Xaa24 é Ala, Glu ou Asp; Xaa25 é Ala, Ponta, Phe, Tyr ou naftilalanina;
Xaa26 é Ala ou Leu;
Xl é Lys Asn, Asn Lys, Lys-NHe-R Asn, Asn Lys-NHe-R, Lys-NHe-R Ala, Ala Lys-NHe-R (em que R é Lys, Arg, um alcanoil de cadeia reta ou ramificada Cl-ClO ou cicloalquilalcanoil);
Zl é -OH,
-NH2,
Gly-Z2,
Gly Gly-Z2,
Gly Gly Xaa31-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser-Z2,
Gly Gly Xaa31 Ser Ser-Z2,
Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly-Z2,
Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala-Z2,
Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36 Xaa37-Z2,
Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36 Xaa37 Xaa38-Z2 ou
Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36 Xaa37 Xaa38 Xaa39-
Z2,
(em que Xaa31, Xaa36, Xaa37, e Xaa38 são selecionados independentemente do grupo que consiste em Pro, homoprolina, 3Hyp, 4Hyp, tioprolina, N-alquilglicina, N-alquilpentilglicina e N-alquilalanina, Xaa39 é Ser ou Tyr, e Z2 é -OH ou -NH2),
desde que não mais do que três dentre Xaa3, Xaa4, Xaa5, Xaa6, Xaa8, Xaa9, Xaa 10, Xaal 1, Xaal2, Xaal3, Xaal4, Xaal5, Xaa 16, Xaal7, Xaal9, Xaa20, Xaa21, Xaa24, Xaa25, e Xaa26 sejam Ala e, quando Xaal for His, Arg, Tyr ou 4-imidazopropionil, pelo menos um dentre Xaa3, Xaa4 e Xaa9 é Ala.
Os derivados de exendina preferidos da Fórmula Química II podem incluir aqueles em que Xaal é His, Ala, Norval ou 4- imidazopropionil, de preferência His, 4-imidazopropionil ou Ala e, com maior preferência, His ou 4-imidazopropionil.
Os derivados de exendina preferidos da Fórmula Química II podem ser aqueles em que Xaa2 é Gly.
Os derivados de exendina preferidos da Fórmula Química II podem ser aqueles em que Xaa4 é Ala.
Os derivados de exendina preferidos da Fórmula Química II podem ser aqueles em que Xaa9 é Ala.
Os derivados de exendina preferidos da Fórmula Química II podem ser aqueles em que Xaa 14 é Leu, pentilglicina ou Met.
Os derivados de exendina preferidos da Fórmula Química II
podem ser aqueles em que Xaa25 é Trp ou Phe.
Os derivados de exendina preferidos da Fórmula Química II podem ser aqueles em que Xaaõ é Ala, Phe ou naftilalanina, Xaa22 é Phe ou naftilalanina e Xaa23 é Ile ou Vai.
Os derivados de exendina preferidos da Fórmula Química II
podem ser aqueles em que Zl é -NH2.
Os derivados de exendina preferidos da Fórmula Química II podem ser aqueles em que Xaa31, Xaa36, Xaa37 e Xaa38 são selecionados independentemente do grupo que consiste em Pro, homoprolina, tioprolina e N-alquilalanina.
Os derivados de exendina preferidos da Fórmula Química II podem ser aqueles em que Xaa39 ê Ser ou Tyr e, de preferência, Ser. Os derivados de exendina preferidos da Fórmula Química II podem ser aqueles em que Z2 é -NH2.
Os derivados de exendina preferidos da Fórmula Química II podem ser aqueles em que Zl é -NH2.
Os derivados de exendina preferidos da Fórmula Química II
podem ser aqueles em que Xaa21 é Lys-NHe-R (em que, R é Lys, Arg ou alcanoil de cadeia reta ou ramificada CI-C10).
Os derivados de exendina preferidos de Fórmula Química II podem ser aqueles em que Xl é Lys Asn, Lys-NHe-R Asn ou Lys-NHe-R Ala (em que R é Lys, Arg ou um alcanoil de cadeia reta ou ramificada C1-C10).
Os derivados de exendina preferidos da Fórmula Química II podem incluir compostos tendo as seqüências de aminoácidos identificadas como SEQ ID Nos: 95-110 descritas em W099/025728. Os 15 derivados de exendina de Fórmula Química II podem incluir compostos tendo as seqüências de aminoácidos identificadas como SEQ ID Nos: 5- 93, conforme descrito no Pedido PCT/US98/24210, depositado em 13 de novembro de 1998, intitulada uNovel Exendin Agonist Compoundsf. Noutro aspecto, os derivados de exendina da Fórmula Química II podem 20 incluir compostos tendo as seqüências de aminoácidos identificadas como SEQ ID Nos: 37-40 descritas em W099/007404. Os documentos acima s-ão por este meio aqui incorporados por referência.
As abreviações usadas em Fórmula Química I e II suportam
o seguinte.
“ACN” e “CH3CN” referem-se a acetonitrila.
“Boc”, “tBoc” e “Tboc” referem-se a t-butoxi carbonil.
“DCC” refere-se a diciclohexilcarbodiimida do KN. “Fmoc” refere-se a fluorenilmetoxicarbonil.
“HBTU” refere-se a 2-(lH-benzotriazol-l-il)-l, 1,3,3, te trame tilorônio hexafluorfosfato.
“HOBt” refere-se a monohidrato de 1-hidroxibenzotriazol.
“HomoP” e “hPro” refere-se a homoprolina.
“MeAIa” e “Nme” referem-se a N-metilalanina.
“naph” refere-se a naftilalanina.
“pG” e “pGly” referem-se a pentilglicina.
“tBuG” refere-se a -butilglicina terciária.
“ThioP” e “tPro” referem-se a tioprolina.
“3Hyp” refere-se a 3-hidroxiprolina.
“4Hyp” refere-se a 4-hidroxiprolina.
“NAG” refere-se a N-alquilglicina.
“NAPG” refere-se a N-alquilpentilglicina.
“Norval” refere-se a norvalina.
Numa modalidade preferível, os fragmentos ou derivados de exendina podem ter um terminal C substituído ou não substituído com um grupo amida e podem ser selecionados a partir do grupo que consiste em exendina-4(l-28) (SEQ ID NO:3), Exendina-4(l-28) amida, exendina-4(l-30) (SEQ ID NO:4), Exendina-4(l-30) amida, exendina-4(l31) (SEQ ID NO:5), Exendina-4(1-31) amida, 14Leu25Phe exendina4(SEQ ID NO:6), 14Leu25Phe exendina-4 amida e seus sais farmaceuticamente aceitáveis.
De acordo com a modalidade preferível, a composição ou as microesferas de liberação controlada podem conter exendina como ingrediente ativo na quantidade de 0,1 a 10 partes em peso e, com maior preferência, a 0,8 a 6 partes em peso, baseadas em 100 partes em peso da composição ou microesfera contendo exendina, polímeros biodegradáveis e materiais de revestimento. Quando a quantidade de 5 exendina contida na composição ou microesferas de acordo com a presente invenção é mais baixa do que a faixa acima, o efeito eficiente da exendina não pode ser obtido e, quando a quantidade de exendina é mais alta do que a acima faixa, a explosão inicial de exendina é aumentada, ocasionando, assim efeitos colaterais devidas a uma explosão 10 inicial excessiva e deste modo é preferível que a quantidade de exendina fique dentro da faixa acima.
O polímero biodegradável refere-se a todos os polímeros que não prejudicam os seres humanos, porque, quando forem administrados no corpo, podem ser degradados e excretados lentamente. O 15 polímero biodegradável pode incluir um ou mais selecionados do grupo que consiste em polilactídeo (PLA), poliglicolídeo (PGA), poli(lactídeo-coglicolídeo) (PLGA), poliortoéster, polianidrido, ácido polihidroxibutírico, policaprolactona e polialquilcarbonato e copolímeros de um ou mais polímeros e polietilenoglicol (PEG), em que o ou mais polímeros podem 20 estar na forma de um copolímero ou uma mistura simples.
Por exemplo, o polímero biodegradável pode ser um ou mais selecionados do grupo que consiste em poli(lactídeo-co-glicolídeo)s (PLGA) consistindo em RG502H (IV=0,16 para 0,24 dL/g), RG503H (IV=0,32 a 0,44 dL/g) e RG504H (IV=0,45 a 0,60 dL/g), tendo a relação 25 de lactídeo:glicolídeo de 1:1 e RG752H (IV=0,14 a 0,22 dL/g) tendo a relação de lactídeo:glicolídeo de 75:25, polilactídeos (PLA), R202H (IV=0,16 a 0,24 dL/g) e R203H (IV=0,25 a 0,35 dL/g), que são proporcionados por Boehringer-Ingelheim, Alemanha; poli(lactídeo-coglicolídeo)s, 5050DL 2A (IV=0,15 a 0,25 dL/g), 5050DL 3A (IV=0,25 a 30 0,43 dL/g) e 5050DL 4A (IV=0,38 a 0,48 dL/g), que são copolímeros providos por Lakeshore Biomaterials Company (anteriormente, Alkermes Company), EUA, tendo uma relação de lactídeo:glicolídeo de 1 :1; e semelhantes.
Noutro aspecto, o polímero biodegradável pode ser um complexo de açúcar-polímero em que um açúcar está ligado a
um polímero selecionado do grupo que consiste em polilac
tídeos (PLA), poliglicolídeos (PGA), poli(lactídeo-co-glicolídeo)s (PLGA), poliortoésters, polianidridos, ácido polihidroxibutíricos, policaprolactonas e polialquilcarbonatos,
um copolímero de pelo menos dois do grupo de polímeros
ou
um copolímero de polietilenoglicol (PEG) e um do grupo de
polímeros.
Numa modalidade da presente invenção, o complexo de açúcar-polímero pode referir-se a um complexo em que o polímero é 15 substituído para um grupo hidroxil do açúcar. O açúcar pode incluir monossacarídeos e polissacarídeos que incluem de 1 a 8 unidades de sacarídeo, em que cada unidade de sacarídeo inclui de 3 a 6 grupos de hidroxil, e álcoois de açúcar de cadeia reta que incluem de 3 a 6 grupos de hidroxil e tendo um peso molecular de 20.000 ou menos. Os álcoois 20 de açúcar podem incluir manitol, pentaeritritol, sorbitol, ribitol e xilitol. O polímero liga-se ao açúcar em três ou mais grupos de hidroxil presentes no açúcar. O complexo de açúcar-polímero de acordo com a modalidade acima tem propriedades in vivo semelhantes ao polímero que é se liga ao açúcar, tem várias taxas de degradação que dependem 25 do tipo do polímero usado e é degradado num açúcar e polímero inofensivos no corpo e, portanto, podem ser apropriados para o polímero biodegradável. Numa modalidade preferível, o complexo de açúcarpolímero pode ser um complexo de PLA-glicose, um complexo de glicose de PGA ou um complexo de glicose de PLGA, em que o complexo PLGAglicose pode ser um que tem a estrutura seguinte:
Nas microesfera de liberação controlada de acordo com a presente invenção, a camada de revestimento formada sobre a super5 fície da mesma permite o controle efetivo da explosão inicial de exendina, impedindo, assim, os efeitos colaterais ocasdionados pela explosão inicial excessiva. O polímero biodegradável pode ser usado sem qualquer limitação de viscosidade.
Na composição de liberação controlada de acordo com a presente invenção, o polímero biodegradável desempenha um papel de matriz para preservar o ingrediente ativo, a exendina, em que uma viscosidade insuficientemente baixa do polímero falha efetivamente em preservar o ingrediente ativo, aumentando, assim, a explosão inicial e uma viscosidade excessivamente alta do polímero ocasiona uma diminuição na quantidade total liberada do ingrediente ativo, diminuendo, assim, a biodisponibilidade da mesma. Na presente invenção, não só o polímero biodegradável mas também os materiais de revestimento contidos na composição desempenham um papel de controle da liberação da droga e, deste modo, pode ser usado o polímero biodegradável que tem uma viscosidade relativamente baixa. Portanto, a fim de controlar efetivamente a explosão inicial da droga e melhorar a biodisponibilidade, a viscosidade intrínseca (IV) do polímero biodegradável, que é medida para um polímero biodegradável dissolvido em clorofórmio a uma concentração de 1% (p/v) a 25°C±0,1°C usando um Viscosímetro Ubbelohde, pode ser, de preferência, de 0,1 a 0,6 dL/g, com maior preferência de 0,15 a 0,31 dL/g e mesmo com maior preferência de 0,16 a 0,24 dL/g. Na composição ou nas microesferas da presente invenção, o polímero biodegradável desempenha um papel de matriz para preservar o ingrediente ativo durante a liberação e controlar a taxa de liberação, em que o seu conteúdo na composição ou nas microesferas pode ser, de 5 preferência, de 85 a 99,89 partes em peso e, com maior preferência, de 91 a 99 partes em peso, com base em 100 partes em peso da composição ou das microesferas contendo a exendina, polímero(s) biodegradável(eis) e material(ais) de revestimento.
O material de revestimento é usado para impeder liberação 10 excessive e aumentar a biodisponibilidade do ingrediente ativo e nas microesferas da presente invenção, pode estar na forma de uma camada de revestimento sobre a superfície das mesmas. O material de revestimento pode ser um ou mais selecionados dentre aminoácidos básicos, polipeptídeos e compostos de nitrogênio orgânico. O aminoácido básico 15 pode incluir arginina, lisina, histidina e seus derivados. O polipeptídeo pode incluir de 2 a 10 aminoácidos e, com maior preferência, de 2 a 5 aminoácidos, incluindo um ou mais selecionados a partir de arginina, lisina e histidina. O polipeptídeo pode incluir mais aminoácidos básicos do que aminoácidos acídicos, exibindo, assim, uma propriedade básica. 20 Por exemplo, o polipeptídeo pode ser L-Ala-L-His-L-Lys, L-Arg-L-Phe, Gly-L-His, Gly-L-His-Gly, Gly-L-His-L-Lys, L-His-Gly, L-His-Leu, L-LysL-Tyr-L-Lys, L-His-L-Val, L-Lys-L-Lys, L-Lys-L-Lys-L-Lys, L-Lys-L-ThrL- Thr-L-Lys-L-Ser e semelhantes. Além disso, o composto de nitrogênio orgânico pode ser creatina, creatinina, ureia e semelhantes.
O conteúdo do material de revestimento contido na com
posição da presente invenção ou revestida sobre as microesferas, de preferência pode ser de 0,01 a 5 partes em peso e, com maior preferência, de 0,015 a 3 partes em peso, com base em 100 partes em peso da composição ou microesferas contendo a exendina, polímero(s) biode30 gradável(s) e material(ais) de revestimento. Não pode ser obtido um controle efetivo da liberação da droga, se o conteúdo do material de revestimento for mais baixo do que o escopo acima, considerando que o efeito de controlar a explosão inicial não é adicionalmente aumentado, ainda que o conteúdo do material de revestimento seja aumentado acima do escopo mencionado acima. Deste modo, pode ser preferível o escopo acima do conteúdo do material de revestimento.
Cada microesfera de liberação controlada de acordo com a presente invenção tem uma superfície lisa revestido com o material de revestimento e um tamanho médio de 1 a 50 μηι e, de preferência, de 5 a 30 pm (ver Figura 4-b). Essa superfície lisa da microesfera permite a 10 realização do controle efetivo da explosão inicial e biodisponibilidade excelente.
Diferentemente da forma convencional, a microesfera de liberação controlada ou uma microesfera preparada a partir da composição da presente invenção é revestida com o material de revesti15 mento, permitindo o impedimento de uma explosão inicial excessiva e um aumento na biodisponibilidade, que não podem ser obtidos na microesfera contendo exendina convencional. Em particular, uma explosão inicial excessiva da exendina ocasiona vários efeitos colaterais, tais como vômitos, náuseas, enxaqueca e semelhantese e, deste modo, é 20 muito importante abaixar a quantidade da explosão inicial para 5% ou menos. A microesfera de liberação controlada ou uma microesfera preparada a partir da composição da presente invenção permite abaixar a quantidade liberada durante as 24 horas iniciais para 5% ou menos. A fim de diminuir os efeitos colaterais devido à administração de mi25 croesfera de liberação controlada contendo exandina, a quantidade de explosão inicial durante a hora inicial pode ser de preferência de 5% ou menos e, com maior preferência, 1% ou menos, conforme medido por um teste de liberação in vitro aqui descrito.
Existem várias tentativas de abaixar os efeitos colaterais devido à explosão inicial excessiva de microesferas contendo exendinas preparadas por métodos convencionais. Todavia, a maior parte dessas tentativas que alcançam a prevenção bem sucedida da explosão inicial excessiva tem alguns problemas na medida em que a liberação total, assim como também a explosão inicial, é diminuída, diminuendo, 5 assim, consideravelmente a biodisponibilidade da droga. Todavia, as microesferas da presente invenção contêm uma camada de revestimento do material de revestimento sobre a superfície das mesmas, permitindo que o controle efetivo da explosão inicial remova os efeitos colaterais devido à explosão inicial excessiva e obtenha uma liberação 10 duradoura e suficiente da droga de forma a alcançar excelente biodisponibilidade.
Numa modalidade da presente invenção, a composição ou as microesferas podem conter adicionalmente excipientes tais como colóides e/ou estabilizadores protetores.
A composição ou as microesferas podem conter adicional
mente um ou mais colóides protetores selecionados a partir de álcoois de polivinila, albuminas, polivinilpirrolidonas, gelatinas e semelhantes. Embora o colóide protetor não tenha nenhum efeito especial para impeder a explosão inicial excessiva da exendina contida nas microes20 feras, desempenha um papel para impeder a agregação entre as microesferas e melhorar a dispersibilidade. Considerando esse papel, o conteúdo do colóide protetor pode ser de preferência de 0,02% (p/p) a 1,0% (p/p), com base no peso da composição ou nas microesferas contendo a exendina, polímero(s) biodegradável(eis) e material(ais) de 25 revestimento.
Além disso, a fim de melhorar a estabilidade das microesferas durante a secagem por congelamento, a composição ou as microesferas da presente invenção podem conter adicionalmente excipientes selecionados a partir de manitol, trehalose, sacarose, carboximetil celulose de sódio e semelhantes, numa quantidade de 5% (p/p) a 30% (p/p) e, com maior preferência, de 10% (p/p) a 20% (p/p), com base no peso da composição ou nas microesferas contendo a exendina, polímero(s) biodegradável(eis) e material(ais) de revestimento.
Além disso, a composição ou a microesfera da presente invenção podem conter adicionalmente quaisquer aditivos e excipientes convencionalmente usados na formulação de droga, cujo tipo e conteúdo podem ser facilmente determinados por uma pessoa qualificada na técnica relevante.
Noutro aspecto, a presente invenção proporciona um método de preparação das microesferas que contêm exendina de liberação controlada, conforme descrito acima. As microesferas contendo exendina de liberação controlada de acordo com a presente invenção podem ser preparada por vários métodos, por exemplo, revestindo a superfície das microesferas através da suspensão das microesferas na solução de material de revestimento durante ou depois da preparação das microesferas, para preparar as microesferas de liberação controlada. O método de preparação das microesferas de acordo com a presente invenção pode ser realizado por um método de emulsão dupla (método de W/O/W), método de emulsão única (método de O/W), um método de separação de fase, um método de secagem por spray e semelhantes.
Especificamente, o método de preparar as microesferas contendo exendinas de liberação controlada pode incluir as etapas de:
misturar exendina e polímero(s) biodegradável(eis) para preparar uma emulsão ou uma mistura homogênea do tipo W/O; e
emulsificar por adição da emulsão ou da mistura homogênea numa solução aquosa de um material de revestimento para formar uma camada de revestimento.
Mais especificamente, no caso de uso de um método de emulsão dupla, o método da presente invenção pode incluir as etapas de emulsionar misturando uma solução aquosa de exendina e um polímero biodegradável dissolvido num solvente orgânico para formar uma emulsão primária (tipo W/O); suspendendo a emulsão numa 5 solução aquosa de um material de revestimento para formar uma emulsão do tipo W/O/W; aquecer a emulsão do tipo W/O/W para remover o solvente e endurecer as microesferas obtidas; coletar e lavar as microesferas endurecidas; e secar as microesferas por congelamento. O solvente orgânico pode ser qualquer solvente orgânico que seja capaz 10 de formar uma emulsão por dissolução do polímero biodegradável e, então, sendo misturado com uma solução aquosa e, por exemplo, pode ser um ou mais selecionados do grupo que consiste em clorofórmio, etilacetato, metilenocloreto, e metiletilcetona, e é de preferência metilenocloreto. Neste caso, o material de revestimento fica contido 15 numa fase aquosa secundária (fase aquosa exterior da emulsão de W/O/W), para formar uma camada de revestimento no lado de fora das microesferas contendo exendina e o polímero biodegradável, quando o solvente orgânico é removido.
Alternativamente, se for empregado um método de emulsão único, o método da presente invenção pode incluir as etapas de dissolver a exendina e um polímero biodegradável em um solvente orgânico para formar uma mistura homogênea; adicionar uma solução aquosa contendo um material de revestimento à mistura obtida para formar uma emulsão; aquecer a emulsão para remover o solvente e endurecer as microesferas obtidas; coletar e lavar as microesferas endurecidas; e secar as microesferas por congelament. O solvente orgânico pode ser qualquer solvente orgânico que seja capaz de misturar completamente a exendina e o polímero biodegradável para formar uma mistura homogênea e de ser misturado com uma solução aquosa para formar uma emulsão. Por exemplo, o solvente orgânico pode ser um solvente misturado em que um ou mais selecionados do grupo que consiste em álcoois tendo de 1 a 5 átomos de carbono, ácido acético glacial, ácido fórmico, dimetil sulfóxido e n-metilpirrolidona e um ou mais selecionados do grupo que consiste em clorofórmio, acetato de etilo, metiletilcetona e cloreto de metileno são misturados e, de preferência, em que são misturados metanol e cloreto de metileno. Neste caso, a superfície das microesferas finalmente obtidas tem uma camada de revestimento sobre elas, por emulsificação da mistura homogênea do polímero biodegradável e a exendina e adição do material de revestimento a uma solução aquosa para remover o solvente orgânico.
Noutro aspecto, o método de preparar microesferas de liberação controlada contendo exendina de acordo com a presente invenção pode incluir as etapas:
misturar a exendina e um polímero biodegradável para formar uma emulsão ou uma mistura homogênea;
solidificar a emulsão obtida ou mistura homogênea para preparar microesferas primárias; e
suspender as microesferas primárias obtidas numa solução aquosa de um material de revestimento para formar uma camada de revestimento em cada microesfera.
O método de solidifcação não tem nenhuma limitação e pode ser qualquer método de solidifcação convencionalmente usado na técnica relevante, por exemplo um método de separação de fase ou um método de secagem por spray.
Mais especificamente, se for empregado um método de separação de fase na etapa de solidificação, o método da presente invenção pode incluir as etapas de:
misturar uma solução aquosa de exendina e um polímero biodegradável dissolvido num solvente orgânico para formar uma emulsão ou misturar a exendina e um polímero biodegradável num solvente misturado para formar uma solução de mistura homogênea;
adicionar um óleo, tal como óleo de silício, à emulsão ou solução obtida para preparar microesferas primárias;
adicionar um não solvente ao polímero biodegradável, tal como um solvente misturado de um álcool tendo de 1 a 5 átomos de carbono e um alcano tendo de 1 a 12 átomos de carbono, de preferência um solvente misturado de etanol e heptano, para remover o solvente orgânico a partir das microesferas e endurecer as microesferas;
suspender as microesferas obtidas numa solução aquosa de um material de revestimento para formar uma camada de revestimento em cada microesfera; e
coletar, lavar e secar por congelamento as microesferas de revestimento formado em camadas.
O solvente orgânico pode ser um ou mais selecionados do grupo que consiste em clorofórmio, acetato de etilo, cloreto de metileno e metiletilcetona e, de preferência, pode ser cloreto de metileno. O solvente misturado pode ser um em que um ou mais selecionados do grupo que consiste num álcool tendo de 1 a 5 átomos de carbono, ácido acético glacial, ácido fórmico, dimetil sulfóxido e n-metilpirrolidona e um ou mais selecionados do grupo que consiste em clorofórmio, acetato de etilo, metiletilcetona e cloreto de metileno, são misturados e, de preferência, pode ser um solvente misturado de metanol e cloreto de metileno.
Alternativamente, se for empregado um método de secagem por spray, o método da presente invenção pode incluir as etapas de:
misturar uma solução aquosa de exendina e um polímero biodegradável dissolvido num solvente orgânico para formar uma emulsão ou misturar exendina e um polímero biodegradável num solvente único ou um solvente misturado para formar uma solução de mistura homogênea;
secar por spray a emulsão ou a solução obtida para preparar microesferas primárias;
suspender as microesferas primárias obtidas numa solução aquosa de um material de revestimento para formar uma camada de revestimento sobre cada microesfera; e
lavar e secar por congelamento as microesferas de revestimento formado por camadas.
O solvente orgânico pode ser um ou mais selecionados do grupo que consiste em clorofórmio, acetato de etilo, cloreto de metileno e metiletilcetona e, de preferência, pode ser cloreto de metileno. O solvente único pode ser um ou mais selecionados do grupo que consiste 15 em ácido glacial acético ácido e fórmico e o solvente misturado pode ser um em que um ou mais selecionados do grupo que consiste num álcool tendo de 1 a 5 átomos de carbono, ácido acético glacial, ácido fórmico, dimetil sulfóxido e n-metilpirrolidona e um ou mais selecionados do grupo que consiste em clorofórmio, acetato de etilo, metiletilcetona e 20 cloreto de metileno, são misturados e é de preferência um solvente misturado de metanol e cloreto de metileno.
O método da presente invenção pode incluir, além disso, uma etapa de adicionar um material de colóide protetor através de qualquer método convencional e, de preferência, o material de colóide protetor pode ser adicionado durante a etapa de revestimento das microesferas com o material de revestimento.
A concentração preferível do material de revestimento dissolvido em fase aquosa ou em solução aquosa pode ser a partir de 0,01 M até I M e, de preferência, a partir de 0,1 M até 0,5 M. Uma concentração do material de revestimento mais baixa do que o escopo acima falha em revestir completamente a superfície das microesferas com o material de revestimento, ao passo que uma concentração do material de revestimento mais elevada do que o escopo acima resulta numa solução de material de revestimento supersaturada, que não pode resultar num efeito melhorado para controlar a explosão inicial e, deste modo,a concentração do material de revestimento pode estar, de preferência, dentro do acima escopo.
No método da presente invenção, os tipos e o conteúdo de exendina, os polímeros biodegradáveis e os materiais de revestimento são como descritos acima.
A composição da presente invenção contendo exendina pode ser administrada por uma rota oral ou parenteral e, de preferência, uma rota parenteral, tal como rota intravenosa, uma rota subcutânea, uma rota intramuscular, uma rota intraperitoneal e semelhantes. Portanto, numa modalidade preferível da presente invenção, a composição que contém exendina pode ser aplicada como solução de injeção na forma de uma solução dispersada. A quantidade efetiva da composição pode ser adequadamente ajustada de acordo com a idade do sujeito, o tipo e a seriedade da doença e a condição do sujeito e a dosagem do ingrediente ativo na composição pode ser de 0,01 até 100 pg/kg/dia e, com maior preferência, de 0,1 até 10 pg /kg/dia, que pode ser administrada de uma vez ou divididamente em várias vezes.
A presente invenção é, além disso, explicada em maior detalhe com referência aos exemplos seguintes. Estes exemplos, porém, não devem ser interpretados como limitando o escopo da presente invenção de maneira nenhuma.
Exemplo 1
Preparação de microesferas contendo exendina-4 por um método de secagem por spray
4,850 g de um polímero biodegradável, RG502H (Lote de número 1009848, IV=O, 19 dL/g) e 0,150 g de exendina-4 (Polypeptide Laboratories, EUA) foram homogeneamente dissolvidos em 97 mL de 5 ácido acético glacial. A solução preparada foi suprida para um secador de spray (SODEVA, França) equipado com um bico ultrassônico (Sonotek, 120 kHz) a uma taxa de fluxo de 1,5 mL/minuto usando uma bomba de pistão, ao mesmo tempo em que se supria ar seco a 1.800°C, para preparar microesferas. As microesferas preparadas foram suspen10 sas numa solução aquosa de lisina 0,5 M (Formulação 1-1), uma solução aquosa de lisina 0,01 M (Formulação 1-2), uma solução aquosa de histidina 0,1 M (Formulação 1-3) e uma solução aquosa de arginina 0,5 M (Formulação 1-4), respectivamente, onde as soluções contêm 1% (p/p) de álcool polivinílico (álcool polivinílico, Gohsenol, EG-50) como 15 colóide protetor, agitadas durante três horas, coletadas, lavadas com água destilada e, então, secas por congelamento. Para comparação, as mesmas etapas de suspensão, agitação, lavagem e secagem por congelamento foram realizadas exceto o uso de solução aquosa a 1% (p/v) de álcool polivinílico sem materiais de revestimento (Formulação 1).
Exemplo 2
Efeitos da composição que dependem do polímero
Foram preparadas microesferas contendo exendina-4 pelo mesmo método que no Exemplo 1, com exceção do uso de RG503H (Lote de número 1006370, IV=O,38 dL/g, Formulações 2, 2-1 e 2-2), 25 uma mistura da mesma quantidade de RG502H e RG503H (Lote de número 1009848: Lote de número 1006370=1:1, IV=O,29 dL/g, Formulações 3 e 3-1), RG504H (Lote de número 1016605, IV=O,51 dL/g, Formulações 4 e 4-1), 5050DL 2A (Lote de número LP-207, IV=O, 18 dL/g, Formulações 5 e 5-1) e 5050DL 4A (Lote de número LP-206, 30 IV=O,46 dL/g, Formulações 6 e 6-1), como polímero biodegradável. Exemplo Experimental 1-1
Testando os efeitos do revestimento da microesfera
O conteúdo da exendina contida nas microesferas preparadas nos Exemplos 1 e 2 foi quantificado pelo seguinte método.
Exendina-4 (Polypeptide Laboratories, EUA) foi dissolvida em DMSO (Dimetilsulfóxido), diluído por DMSO para a concentração como 2, 5 e 10 pg/mL, respectivamente, que foram usadas como soluções padrão, e sujeita a medição de fluorescência a Ex 280 nm e Em 350 nm usando um espectrômetro de fluorescência (Cary Eclipsa, Varian, EUA) para 10 obter uma linha de medição. As microesferas preparadas foram dissolvidas em DMSO à concentração de 150 pg/mL e, então, a fluorescência medida a partir delas foi extrapolada na linha de medida, determinando, assim, o conteúdo de exendina nas microesferas.
Foi usado um método de quantificação da fluorescamina 15 para determinar o conteúdo dos materiais de revestimento usados na composição da presente invenção e, em particular, lisina, arginina, histidina e semelhantes contidos na superfície das microesferas. Uma solução onde as microesferas obtidas são dissolvidas em DMSO à concentração de 150 μg/mL foi misturada com solução de acetona 20 fluorescamina a 0,01% (p/v) e solução de borato de sódio 0,5M (pH 9,5), incubada à temperatura ambiente durante 20 minutos e sujeita a uma medida de fluorescência em Ex 392 nm e Em 480 nm usando um espectrômetro de fluorescência (Cary Eclipsa, Varian, EUA). Usando o mesmo método, os materiais de revestimento usados foram dissolvidos 25 em DMSO e diluídos com DMSO às concentrações de 2, 5 e 10 pg/mL, respectivamente, para preparar soluções padrão. Depois disso, foi conduzida uma medida de fluorescência para obter uma linha de medida, quantificando, assim, os materiais de revestimento na superfície das microesferas.
30
A fim de confirmar o efeito de inibição da explosão inicial pelas microesferas, foram medidas as quantidades liberadas in vitro a partir das microesferas cobertas com o material de revestimento e as microesferas existentes sem revestimento. 10 mg de cada uma das microesferas foram suspensos em 1 mL de uma solução de teste de 5 liberação (10 mm HEPES, pH 7,5, NaCl 100 mM) e incubados a 37°C enquanto rodavam a 5 rpm. Depois de 1 e 24 horas, cada amostra foi coletada e centrifugada. A quantidade liberada de exendina no subrenadante foi determinada por uma medição da fluorescência em Ex 280 nm e Em 350 nm.
O conteúdo e a explosão inicial in vitro das microesferas
preparadas neste Exemplo foram examinados como descrito acima e os resultados obtidos são resumidos na Tabela seguinte I. A Tabela 1 mostra diminuição na explosão inicial in vitro dependendo dos tipos de materiais de revestimento e os polímeros biodegradáveis. (Tabela 1)
15 Tabela I
Formulação Polímero Suspensão TL (%) DC (%) Conteúdo de Liberação Liberação n° Superfície dos de 1 h (%) de 24 h (%) Materiais Orgânicos Básicos (%) 1 502H PVA1% 3 2,76 - 4,50 9,90 1-1 502H PVA1%+Iys 0,5M 3 2,73 0,249 0,79 3,84 1-2 502H PVAl%+lys 0,0 IM 3 2,72 0,099 3,76 5,66 1-3 502H PVAl%+his 0,1M 3 2,71 0,015 1,53 3,51 1-4 502H PVAl%+arg 0,5M 3 2,56 0,156 1,46 4,60 2 503H PVA1% 3 2,88 - 1,40 1,50 2-1 503H PVAl%+lys 0,5M 3 2,96 0,057 0,00 0,29 2-2 503H PVAl%+lys 0,0 IM 3 2,85 0,132 0,00 0,58 3 502H.503H PVA1% 3 2,75 - 2,80 4,00 3-1 502H.503H PVAl%+lys 0,5M 3 2,91 0,056 0,00 0,75 4 504H PVA1% 3 2,46 - 1,23 2,25 4-1 504H PVAl%+lys 0,5M 3 2,47 0,018 0,81 0,84 5 5050DL 2A PVA1% 3 2,53 - 1,31 1,95 5-1 5050DL 2A PVAl%+lys 0,5M 3 2,54 0,034 1,02 1,66 6 5050DL 2A PVA1% 3 2,40 - 1,21 2,03 6-1 5050DL 2A PVAl%+lys 0,5M 3 2,51 0,018 0,79 0,82 * TL (%) Percentual de carga do alvo DC (%) % de conteúdo de droga real Como mostrado na Tabela 1, é revelado que as quantidades liberadas das formulações cobertas com os materiais de revestimento de acordo com a presente invenção na hora inicial e às 24 horas são diminuídos em comparação com aquelas das formulações 1, 2, 3, 4, 5 e 5 6 que estão meramente suspensas num colóide protetor, solução de álcool polivinílico, depois de secagem por spray. Esses efeitos são obtidos não importando a faixa de viscosidade do polímero e são importante para prevenir os efeitos colaterais causados por um aumento súbito da concentração inicial do sangue logo depois da administração 10 da microesferas contendo exendina de liberação controlada.
Exemplo Experimental 1-2
Diminuição na concentração da droga no sangue durante a fase inicial depois da administração de acordo com a viscosidade de polímeros e materiais de revestimento
Visto que os efeitos colaterais das exendinas são causados
por um aumento súbito na concentração da droga no sangue na fase inicial depois da administração, é muito importante impedir o aumento da concentração da droga no sangue pela liberação inicial da droga diretamente depois da administração. Foi revelado que as concentrações da droga no sangue das formulações de acordo com a presente invenção alcança uma concentração de pico durante a hora depois da administração e, depois, declina. A fim de determinar a biodisponibilidade e o pico da concentração inicial do sangue (Cone. lh) das formulações preparadas pelos Exemplos 1 e 2 depois da administração, as formulações foram administradas em camundongos S. D. machos (350 + 20 g). As microesferas contendo exendinas preparadas como acima foram suspensas num meio (celulose carboximetil de sódio 0,5% (p/p), manitol 5% (p/p) e Tween 80 0,1% (p/p)) e então injetadas subeutaneamente numa dose de 0,6 mg (exendina)/kg depois de anestesiar com éter. O sangue foi coletado através da veia da cauda no tempo 0 e ao fim da Ia hora e no 1°, 2o, 4o, 7o, 14°, 21° e 28° dia depois da administração e centrifugado a 12.000 rpm a 4°C durante 10 minutos. Depois,
o soro foi coletado e armazenado a -20°C. A exendina no soro foi quantificada usando um kit de imunoensaio de enzima (EK-070-94, Phoenix Pharmaceuticals, Inc., EUA) e a biodisponibilidade relativa foi comparada pela área sob uma curva (AUC) da curva da concentração de sangue-tempo obtida.
Os gráficos da concentração de sangue obtida são mostrados nas Figuras de 1 a 3 e os resultados obtidos são sumarizados na 10 Tabela 2. A Tabela 2 mostra os resultados da diminuição na concentração da droga no sangue na fase inicial depois da administração e a comparação AUC de acordo com os materiais de revestimento e a viscosidade do polímero. Tabela 2
Formulação Polímero Suspensão TL (%) DC (%) Cone. Ih AUC n° 1 502H PVA1% 3 2,76 10969 (Ih) 24169 1-1 502H PVAl%+lys 0,5M 3 2,73 900 (Ih) 26681 2 503H PVA1% 3 2,88 3561 (Ih) 5401 2-1 503H PVAl%+lys 0,5M 3 2,96 159 (Ih) 5569 3 502H.503H PVA1% 3 2,75 6363 (Ih) 8030 3-1 502H.503H PVAl%+lys 0,5M 3 2,91 320 (Ih) 10909 DC (%) % ponderai da droga real AUC: Área sob a curva (pg* dia/ml) Como mostrado nas Figuras de 1 a 3 e na Tabela 2, é revelado que as formulações não cobertas exibem concentração de sangue de pico mais elevado na fase inicial depois da administração do que as formulações revestidas. Além disso, também é revelado que o polímero 5 RG502H que tem a viscosidade mais baixa exibiu o valor de AUC mais alto estimar, isto é, a biodisponibilidade mais elevada e que o revestimento com os materiais de revestimento permite a melhoria da biodisponibilidade das formulações com polímeros de peso molecular alto, assim como também as formulações com polímeros de peso molecular 10 baixo. Em conclusão, embora a biodisponibilidade dependa da viscosidade do polímero usado, a inibição efetiva da explosão inicial, que não pode ser alcançada nas formulações existentes preparadas pelos métodos convencionais, pode ser alcançada por revestimento com os materiais de revestimento de acordo com a presente invenção.
Exemplo 3
Preparação de microesferas com várias cargas de droga
O polímero biodegradável RG502H e a exendina-4 foram misturados para fazer o conteúdo de exendina-4 1% (p/p) (Formulações 20 7 e 7-1) e 7 % (p/p) (Formulações 8 e 8-1), respectivamente, e as misturas foram dissolvidas em ácido acético glacial. As soluções obtidas foram secas por spray pelo mesmo método que no Exemplo 1 para preparar microesferas. As microesferas preparadas foram suspensas numa solução aquosa de álcool polivinílico a 1% (Formulações 7 e 8) e 25 álcool polivinílico a 1%, solução aquosa de lisina 0,5 M (Formulações 7-
1 e 8-1), respectivamente, por três horas, e foram coletadas, lavadas com água destilada e secas por congelamento.
Exemplo Experimental 2
Diminuição da explosão inicial dependente de várias cargas de droga
A explosão inicial das microesferas preparadas no Exemplo
3 foi quantificada pelo mesmo método que no Exemplo Experimental 1-
1 e os resultados obtidos estão resumidos na Tabela 3. A Tabela 3 mostra o efeito de revestimento com os materiais de revestimento dependendo do conteúdo da droga. Tabela 3
Formulação TL% DC (%) Conteúdo de Superfície Liberação de 1 Liberação de 24 h (%) n° dos Materiais Or¬ h (%) gânicos Básicos (%) 7 1 0,85 - 3,06 3,87 7-1 1 0,81 0,295 2,63 3,68 1 3 2,76 - 4,60 9,90 1-1 3 2,73 0,249 0,79 3,84 8 7 5,79 - 8,00 11,34 8-1 7 5,85 1,636 2,04 5,47 Como mostrado na Tabela 3, as Formulações 1, 7 e 8 que não são cobertas com os materiais de revestimento exibem explosão inicial aumentada de acordo com um aumento da quantidade de exendina carregada no polímero biodegradável, ao passo que as Formu5 lações 1-1, 7-1 e 8- 1 que são cobertas com os materiais de revestimento exibem explosão inicial consideravelmente diminuída, não importando a quantidade de exendina carregada no polímero biodegradável.
Exemplo 4
Preparação de microesferas contendo exendina-4
por um método de emulsão dupla
970 mg de RG502H foram dissolvidos em 3,23 mL de diclorometano (Junsei Chem.). 30 mg de exendina-4 dissolvidas em 0,3 mL de água destilada foram adicionados à solução de RG502H obtida e sonicada para preparar uma emulsão W/O primária. A emulsão obtida foi injetada em 270 mL de solução aquosa de álcool polivinílico a 0,5 % (p/v) com agitação a 5.000 rpm para preparar uma emulsão W/O/W. A emulsão foi suspensa a 4.000 rpm a 40°C durante uma hora, removendo, assim, o diclorometano e endurecendo o polímero e, então, foram coletadas as microesferas obtidas. As microesferas coletadas foram lavadas duas vezes com água destilada e sujeitas a secagem por congelamento para preparar microesferas. Ao preparar as formulações pelo mesmo método acima, a suspensão para injetar a emulsão primária foi suspensa em PVA a 1% (Formulação 9), solução aquosa de lisina 0,5 M + PVA a 1% (Formulação 9-1), solução 0,5 M de Tris aquosa + PVA a 1% (Formulação 9-2), solução aquosa de ureia 0,5 M + PVA a 1% (Formulação 9-3), solução aquosa de creatinina 0,05 M + PVA a 1% (Formulação 9- 4), solução aquosa de creatina 0,5 M + PVA a 1% (Formulação 9-5), respectivamente, por uma hora, e coletada, lavada com água destilada e sujeita a secagem por congelamento. As imagens de microscópio eletrônico das microesferas obtidas como acima são mostradas nas Figuras 4a e 4b. A Figura 4a mostra a Formulação 9 que não é coberta com o material de revestimento e a Figura 4b mostra a Formulação 9-1 que é coberta com o 5 material de revestimento. Conforme mostrado na Figura 4b, é revelado que a formulação de acordo com a presente invenção tem uma superfície lisa.
Exemplo Experimental 3
Diminuição na explosão inicial
dependendo do tipo de material de revestimento
A liberação da droga das microesferas obtidas no Exemplo 4 durante as 24 horas iniciais depois da administração foi quantificada pelo mesmo método que no Exemplo Experimental 1-1 e os resultados obtidos estão resumidos na Tabela 4. A Tabela 4 mostra a explosão inicial diminuída dependendo do material de revestimento.
Tabela 4
Formu¬ Suspensão Liberação Liberação lação n° de 1 h (%) de 24 h (%) 9 PVA1% 3,06 3,87 9-1 PVAl%+lys 0,5M 2,63 3,68 9-2 PVAl%+tris 0,5M 4,60 9,90 9-3 PVAl%+ureia 0,5M 0,79 3,84 9-4 PVAl%+creatinina 0,05M 8,00 11,34 9-5 PVAl%+creatina 0,5M 2,04 5,47 Como mostrado na Tabela 4, embora a quantidade diminuída da explosão inicial varie ligeiramente dependendo do tipo do material de revestimento usado, as Formulações de microesferas de 9-1 a 9-5 cobertas com os materiais de revestimento exibem explosão inicial 5 consideravelmente diminuída em comparado com a Formulação 9 de microesferas que não é coberta com os materiais de revestimento.
Exemplo Comparativo
Preparação de microesferas carregadas com exendina-4
e materiais de revestimento e medição da explosão inicial
Foram dissolvidos 970 mg de RG502H em 3,23 mL de di
clorometano (Junsei Chem.). Foram dissolvidos 30 mg de exendina-4 e 6,68 mg de lisina em 0,3 mL de água destilada e adicionados à solução de RG502H obtida para preparar uma emulsão primária W/O. A emulsão obtida foi suspensa numa solução aquosa a 1% de PVA e a 15 Formulação de microesferas 10 foi preparada pelo mesmo método do Exemplo 4. Além disso, 970 mg de RG502H e 6,68 mg de lisina foram dissolvidos em 3,23 mL de diclorometano (Junsei Chem.). À solução obtida, foram adicionados 30 mg de exendina-4 dissolvida em 0,3 mL de água destilada, para preparar uma emulsão primária W/O. A emulsão 20 foi suspensa numa solução aquoso de PVA a 1% para preparar a Formulação 11 de microesferas.
As imagens de microscópio eletrônico das Formulações 10 e
11 acima preparadas são mostradas nas Figuras 4c e 4d. Conforme mostrado na Figura 4c, as microesferas preparadas no Exemplo Comparativo têm muitos poros sobre as suas superfícies.
As quantidades liberadas das microesferas preparadas no Exemplo Comparativo para a 1 h inicial e as 24 horas foram mensuradas respectivamente pelo mesmo método do Exemplo Experimental 1-1 e os resultados obtidos estão sumarizados na Tabela 5. A Tabela 5 mostra a mudança na quantidade de explosão inicial dependendo dos métodos pelos quais os materiais de revestimento são adicionados, quando se prepara as microesferas. Tabela 5 Formu¬ Suspensão Suspensão Liberação Liberação lação n° de 1 h (%) de 24 h (%) 9 502H, exendina-4 PVA a 1% 7,45 13,88 9-1 502H, exendina-4 PVA a 1% + lisina 0,5 M 0,87 1,87 10 502H, exendina-4 + lisina PVA a 1% 65,63 71,64 (fase aquosa) 11 502H + lisina (fase oleosa), PVA a 1% 80,31 87,00 exendina-4 Como mostrado na Tabela 5, quando os materiais de revestimento são simplesmente carregados em conjunto com a exendina sem formar uma camada de revestimento ou são usados com polímeros sendo simplesmente misturados, ocorre uma explosão inicial excessiva, que atua como um defeito crítico para impedir que a exendina seja formulada como uma forma de liberação controlada.
Como mostrado nas Figuras 4c e 4d, a adição dos materiais de revestimento tanto à fase oleosa como à fase aquosa ocasiona um aumento na porosidade da superfície das microesferas. Em conclusão, a adição dos materiais de revestimento no interior das microesferas aumenta a porosidade da superfície, resultando finalmente numa explosão inicial excessiva da droga nelas contida. Ao contrário, as microesferas cobertas com os materiais de revestimento de acordo com a presente invenção não têm nenhum aumento na porosidade da superfície e exibem uma explosão inicial mais baixa do que a Formulação 9 que tem uma superfície lisa mas não coberta com os materiais de revestimento.
Em conclusão, as formulações existentes que contêm exendina preparadas pelos métodos convencionais, por exemplo, revelados na Patente coreana 140209, não conseguem alcançar a diminuição desejada da explosão inicial e, deste modo, não são vantajosamente usadas como uma formulação eficiente que contém exendina devido aos efeitos colaterais, em razão de uma explosão inicial excessiva. Ao contrário, a composição de acordo com a presente invenção é muito útil no desenvolvimento de microesferas de liberação controlada contendo exendina que se exige que tenham uma liberação inicial extremamente controlada. Além disso, a presente invenção pode alcançar elevada biodisponibilidade da formulação contendo exendina, que não pode ser alcançada pela técnica convencional para controlar a explosão inicial de uma formulação contendo exendina. Exemplo 5
Preparando microesferas que contêm exendina-3 por um método de secagem por spray
4.850 g de um polímero biodegradável, RG502H (Lote de número 1009848, IV=O,19 dL/g) e 0,150 g de exendina-3 (Peptron Inc.,
Coréia do Sul) foram homogeneamente dissolvidos em 97 mL de ácido acético glacial. A solução obtida foi fornecida a um secador de spray (SODEVA, França) equipado com um bico ultrassônico (Sono-tek, 120 kHz) usando uma bomba de pistão a uma taxa de fluxo de 1,5 10 mL/minuto, ao mesmo tempo em que era suprido ar seco a 180°C, para preparar microesferas. As microesferas preparadas foram suspensas numa solução aquosa de lisina 0,5 suplementada com álcool polivinílico a 1% (p/v) (álcool polivinílico, Gohsenol, EG-50) como colóide protetor, agitadas por três horas, coletadas, lavadas com a água destilada e, 15 então, secas por congelamento.
Exemplo 6
Preparação de microesferas contendo exendina-4(l-28)amida por um método de secagem por spray
4.850 g de um polímero biodegradável, RG502H (Lote de número 1009848, IV=0,19 dL/g) e 0,150 g de exendina-4(l-28)amida
(Peptron Inc., Coréia do Sul) foram homogeneamente dissolvidos em 97 mL de ácido acético glacial. A solução preparada foi fornecida para um secador de spray (SODEVA, França) equipado com um bico ultrassônico (Sono-tek, 120 kHz) à taxa de fluxo de 1,5 mL/minuto usando uma 25 bomba de pistão, ao mesmo tempo em que era suprido ar seco a 180°C, para preparar microesferas. As microesferas preparadas foram suspensas numa solução aquoso de L-Lys-L-Thr-L-Thr-L-Lys-L-Ser 0,5 M suplementada com álcool polivinílico a 1% (p/v) (álcool polivinílico, Gohsenol, EG-50) como colóide protetor, agitadas por três horas, coletadas, lavadas com água destilada, suspensas cm 10 mL de solução aquosa a 10% (p/p) de D-manitol e, então, sccas por congelamento.
Exemplo 7
Preparação de microesferas contendo excndina-4
por um método de separação de Iase
0,1 g de exendina-4 (Polvpeptide Laboratories, EUA) foram dissolvidos em 1,86 mL de água destilada, sendo lentamente injetada numa solução onde 1,86 g de RG502H (Lote de número 1009848. IV=O. 19 dL/g) foram dissolvidos em 23,32 mL de diclorometano e sonicados. para preparar uma emulsão primária. A emulsão obtida foi homogeneizada adicionando-lhe 58.8 g de óleo de silicone, para formar microesferas embrionárias. Uma mistura de 400 g de heptano e 50 g de etanol foi lentamente adicionada às microesferas embrionárias formadas sob agitação a 500 rpm e mantendo a temperatura de 3”C, para endurecer as microesferas embrionárias. Depois de agitado por aproximadamente uma hora, o solvente foi removido por decantação. Então, 20Qg de heptano foram ainda adicionados c agitados por uma hora, para remover o óleo de silicone c diclorometano a partir das microesferas embrionárias. As microesferas obtidas foram filtradas, coletadas, lavadas com heptano a 4°C e secas a vácuo, para preparar microesferas. As microesferas preparadas foram suspensas em álcool polivinílico a 0,5% (p/v) e uma solução aquosa de lisina 0,5 M por uma hora, coletadas, lavadas com água destilada e secas por congelamento, para preparar uma formulação.
Como mostrado nos Exemplos acima, a presente invenção proporciona uma formulação inovativa de microesferas de liberação controlada contendo exendina com efeitos colaterais diminuídos e biodisponibilidade melhorada, por revestimento da superfície das microesferas com materiais de revestimento, diminuindo, assim, uma liberação excessiva da droga durante a fase inicial, depois da administração.

Claims (20)

“Métodos de Preparação de Microesfera de Liberação Controlada Contendo Exendina com Camada de Revestimento, Composição e Microesfera” Reivindicações
1. Composição de Liberação Controlada, caracterizada por que compreende uma exendina como ingrediente ativo, um polímero biodegradável tendo uma viscosidade intrínseca de 0,15 a 0,31 dL/g e um material de revestimento, em que o polímero biodegradável é um polímero selecionado do grupo que consiste em polilactídeo (PLA), poliglicolídeo (PGA), poli(lactídeo-co-glicolídeo) (PLGA), poliortoéster, polianidrido, ácido polihidroxibutírico, policaprolactona e polialquilcarbonato; um copolímero ou uma mistura simples de dois ou mais selecionados a partir do grupo de polímero; um copolímero do polímero e polietilenoglicol (PEG); ou um complexo de açúcar-polímero onde um açúcar é acoplado ao polímero ou ao copolímero e o material de revestimento é um ou mais selecionados do grupo que consiste em aminoácidos básicos, polipeptídeos e compostos de nitrogênio orgânico, em que o aminoácido básico é um ou mais selecionados do grupo que consiste em arginina, lisina e histidina, o polipeptídeo compreende de 2 a 10 aminoácidos em que são compreendidos um ou mais aminoácidos básicos selecionado do grupo que consiste em arginina, lisina e histidina e o número de aminoácidos básicos é mais do que aqueles de aminoácidos acídicos e o composto de nitrogênio orgânico é um ou mais selecionados a partir do grupo que consiste em creatina, creatinina e ureia.
2.Composigao de Liberagao Controlada7 de acordo com a Reivindi-cagao 1，caracterizada por que o conteudo da exendina e de 0,1 ate 10 partes em peso com base em 100 partes em peso da composigao.
3. C0mp0si9a0 de Libera9a0 Controlada, de acordo com a Reivindi-ca9a0 1，caracterizada por que 0 conteudo do material de revestimento e de 0,01 ate 5 partes em peso com base em 100 partes em peso da c0mp0si9a0.
4. C0mp0si9a0 de Libera9a0 Controlada, de acordo com a Reivindi-ca9a0 1，caracterizada por que 0 polipeptideo e um ou mais seleciona-dos do grupo que consiste em L-Ala-L-His-L-Lys, L-Arg-L-Phe, Gly-L-Hisj Gly-L-His-Gly，Gly-L-His-L-Lys, L-His-Gly, L-His-Leuj L-Lys-L-Tyr-L-Lys，L-His-L-Val, L-Lys-L-Lysj L-Lys-L-Lys-L-Lys e L-Lys-L-Thr-L-Thr-L-Lys-L-Ser.
5. C0mp0si9a0 de Libera9a0 Controlada, de acordo com a Reivindi-cagao 1，caracterizada por que a exendina e um ou mais selecionados do grupo que consiste em exendina-3 (SEQ ID NO: 1), exendina-4 (SEQ ID NO:2), um representado pela Formula Quimica I ou II，tendo um derivado de exendina um terminal em C substitu1d0 ou nao substitu1d0 com um grupo amida e um sal farmaceuticamente aceitavel da mesma de: (Formula Quimica I) Xaal Xaa2 Xaa3 Xaa4 Xaa5 Xaa6 Xaa7 Xaa8 Xaa9 XaalO Xaall Xaal2 Xaal3 Xaal4 Xaal5 Xaal6 Xaal7 Ala Xaal9 Xaa20 Xaa21 Xaa22 Xaa23 Xaa24 Xaa25 Xaa26 Xaa27 Xaa28-Zl, em que Xaal e His, Argj Tyr? Ala, Norvalj VaI5 Norleu ou 4-imidazopropionil; Xaa2 é Ser, Gly, Ala ou Thr; Xaa3 é Ala, Asp ou Glu; Xaa4 é Ala, Norval, Vai, Norleu ou Gly; Xaa5 é Ala ou Thr; Xaa6 é Ala, Phe, Tyr ou naftilalanina; Xaa7 é Thr ou Ser; Xaa8 é Ala, Ser ou Thr; Xaa9 é Ala, Norval, Vai, Norleu, Asp ou Glu; Xaa10 é Ala, Leu, Ile, Vai, pentilglicina ou Met; Xaa11 é Ala ou Ser; Xaa 12 é Ala ou Lys; Xaa 13 é Ala ou Gin; Xaa 14 é Ala, Leu, Ile, pentilglicina, VaI ou Met; Xaa15 é Ala ou Glu; Xaa 16 é Ala ou Glu; Xaa17 é Ala ou Glu; Xaa19 é Ala ou VaI; Xaa20 é Ala ou Arg; Xaa21 é Ala, Leu ou Lys-NHe-R, em que R é Lys, Arg ou cadeia reta ou ramificada de C1-C10 alcanoil; Xaa22 é Ala, Phe, Tyr ou naftilalanina; Xaa23 é Ile, Vai, Leu, pentilglicina, tert-butilglicina ou Met; Xaa24 é Ala, Glu ou Asp; Xaa25 é Ala, Trp, Phe, Tyr ou naftilalanina; Xaa26 é Ala ou Leu; Xaa27 é Ala ou Lys; Xaa28 é Ala ou Asn; Zl é -OH, -NH2, Gly-Z2, Gly Gly-Z2, Gly Gly Xaa31-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly-Z2, GlyGly Xaa31 Ser Ser Gly Ala-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36 Xaa37-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36 Xaa37 Xaa38-Z2 ou Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36 Xaa37 Xaa38 Xaa39-Z2, em que Xaa31, Xaa36, Xaa37 e Xaa38 são selecionados independentemente do grupo que consiste em Pro, homoprolina, 3Hyp, 4Hyp, tioprolina, N-alquilglicina, N-alquilpentilglicina ou N-alquilalanina, Xaa39 é Ser ou Tyr e Z2 é -OH ou -NH2, desde que não mais do que três dentre Xaa3, Xaa4, Xaa5, Xaa6, Xaa8, Xaa9, XaalO, Xaal 1, Xaal2, Xaal3, Xaal4, Xaal5, Xaaló, Xaal7, Xaal9, Xaa20, Xaa21, Xaa24, Xaa25, Xaa26, Xaa27, e Xaa28 sejam Ala; e, quando Xaal for His, Arg ou Tyr, um ou mais dentre Xaa3, Xaa4 e Xaa9 são Ala; (Fórmula Química II) Xaal Xaa2 Xaa3 Xaa4 Xaa5 Xaa6 Xaa7 Xaa8 Xaa9 XaalO Xaall Xaal2 Xaa 13 Xaa 14 Xaa 15 Xaa 16 Xaa 17 Ala Xaal 9 Xaa20 Xaa21 Xaa22 Xaa23 Xaa24 Xaa25 Xaa26 Xl-Zl, em que Xaal é His, Arg, Tyr, Ala, Norval, Vai, Norleu ou 4- imidazopropionil; Xaa2 é Ser, Gly, Ala ou Thr; Xaa3 é Ala, Asp ou Glu; Xaa4 é Ala, Norval, Vai, Norleu ou Gly; Xaa5 é Ala ou Thr; Xaa6 é Ala, Phe, Tyr ou naftilalanina; Xaa7 é Thr ou Ser; Xaa8 é Ala, Ser ou Thr; Xaa9 é Ala, Norval, Vai, Norleu, Asp ou Glu; XaalO é Ala, Leu, Ile, Vai, pentilglicina ou Met; Xaal 1 é Ala ou Ser; Xaa 12 é Ala ou Lys; Xaa 13 é Ala ou Gin; Xaal4 é Ala, Leu, Ile, pentilglicina, VaI ou Met; Xaa 15 é Ala ou Glu; Xaa 16 é Ala ou Glu; Xaa 17 é Ala ou Glu; Xaa 19 é Ala ou Vai; Xaa20 é Ala ou Arg; Xaa21 é Ala, Leu ou Lys-NHs-R, em que R é Lys, Arg, alcanoil ou cicloaleil-alcanoil de cadeia reta ou ramificada CI-C10; Xaa22 é Phe, Tyr ou naftilalanina; Xaa23 é Ile, Vai, Leu, pentilglicina, tert-butilglicina ou Met; Xaa24 é Ala, Glu ou Asp; Xaa25 é Ala, Trp, Phe, Tyr ou naftilalanina; Xaa26 é Ala ou Leu; Xl é Lys Asn, Asn Lys, Lys-NHe-R Asn, Asn Lys-NHe-R, Lys-NHe-R Ala ou Ala Lys-NHe-R, em que R é Lys, Arg, uma alcanoil de cadeia reta ou ramificada Cl-ClO ou um cicloalquilalcanoil; Zl é OH, -NH2, Gly-Z2, Gly Gly-Z2, Gly Gly Xaa31-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser- Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36 Xaa37-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36 Xaa37 Xaa38-Z2 ou Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36 Xaa37 Xaa38 Xaa39-Z2, em que Xaa31, Xaa36, Xaa37 e Xaa38 são selecionados independentemente do grupo que consiste em Pro, homoprolina, 3Hyp, 4Hyp, tioprolina, N-alquilglicina, N-alquilpentilglicina e N-alquilalanina, Xaa39 é Ser ou Tyr e Z2 é -OH ou -NH2, desde que não mais do que três dentre Xaa3, Xaa4, Xaa5, Xaa6, Xaa8, Xaa9, Xaa 10, Xaal 1, Xaal2, Xaal3, Xaal4, Xaal5, Xaa 16, Xaal7, Xaal9, Xaa20, Xaa21, Xaa24, Xaa25 e Xaa26 sejam Ala; e, quando Xaal for His, Arg, Tyr ou 4-imidazopropionil, pelo menos um dentre Xaa3, Xaa4 e Xaa9 é Ala.
6. Composição de Liberação Controlada, de acordo com a Reivindicação 5, caracterizada por que o derivado de exendina é um polipeptídeo de SEQ ID Nos: 3, 4, 5 ou 6, tendo um terminal em C substituído ou não substituído por um grupo amida.
7.Microesfera de Liberação Controlada, com uma camada de revestimento caracterizada por que compreende um núcleo compreendendo uma exendina como ingrediente ativo e um polímero biodegradável e uma camada de revestimento que reveste o núcleo com um material de revestimento, em que o polímero biodegradável é um polímero selecionado a partir do grupo que consiste em polilactídeo (PLA), poliglicolídeo (PGA), poli(lactídeo-co-glicolídeo) (PLGA), poliortoéster, polianidrido, ácido polihidroxibutírico, policaprolactona e polialquilcarbonato; um copolímero ou uma mistura simples de duas ou mais selecionados a partir do grupo de polímero; um copolímero do polímero e polietilenoglicol (PEG); ou um complexo de açúcar-polímero em que um açúcar é acoplado ao polímero ou ao copolímero, o material de revestimento é um ou mais selecionados do grupo que consiste em aminoácidos básicos, polipeptídeos e compostos de nitrogênio orgânico, onde o aminoácido básico é um ou mais selecionados do grupo que consiste em arginina, lisina e histidina, o polipeptídeo compreende de 2 a 10 aminoácidos em que são compreendidos um ou mais aminoácidos básicos selecionados do grupo que consiste em arginina, lisina e histidina e o número de aminoácido básico é mais do que aquele de aminoácidos acídicos e o composto de nitrogênio orgânico é um ou mais selecionados do grupo que consiste em creatina, creatinina e ureia.
8. Microesfera de Liberação Controlada, de acordo com a Reivindicação 7, caracterizada por que o polímero biodegradável tem uma viscosidade intrínseca de 0,1 a 0,6 dL/g.
9. Microesfera de Liberação Controlada, de acordo com a Reivindicação 7, caracterizada por que o polímero biodegradável tem uma viscosidade intrínseca de 0,15 a 0,31 dL/g.
10.Microesfera de Liberação Controlada, de acordo com a Reivindicação 7, caracterizada por que o conteúdo da exendina é de 0,1 até 10 partes em peso com base em 100 partes em peso da microesfera.
11. Microesfera de Liberação Controlada, de acordo com a Reivindicação 7, caracterizada por que o conteúdo da camada de revestimento é de 0,01 até 5 partes em peso com base em 100 partes em peso da microesfera.
12. Microesfera de Liberação Controlada, de acordo com a Reivindicação 7, caracterizada por que o polipeptídeo é um ou mais selecionados do grupo que consiste em L-Ala-L-His-L-Lys, L-Arg-L-Phe, Gly-LHis, Gly-L-His-Gly, Gly-L-His-L-Lys, L-His-Gly, L-His-Leu, L-Lys-L-TyrL-Lys, L-His-L-Val, L-Lys-L-Lys, L-Lys-L-Lys-L-Lys e L-Lys-L-Thr-L-ThrL-Lys-L-Ser.
13. Microesfera de Liberação Controlada, de acordo com a Reivindicação 7, caracterizada por que a exendina é um ou mais selecionados do grupo que consiste em exendina- 3 (SEQ ID NO:l), Exendina-4 (SEQ ID NO:2), uma representada pela Fórmula Química I ou II, um derivado de exendina tendo um terminal em C substituído ou não substituído com um grupo amida e um sal farmaceuticamente aceitável da mesma: (Fórmula Química l) Xaal Xaa2 Xaa3 Xaa4 Xaa5 Xaa6 Xaa7 Xaa8 Xaa9 XaalO Xaall Xaal2 Xaal3 Xaal4 Xaal5 Xaa 16 Xaal7 Ala Xaa 19 Xaa20 Xaa21 Xaa22 Xaa23 Xaa24 Xaa25 Xaa26 Xaa27 Xaa28 -Zl, em que Xaal é His, Arg, Tyr, Ala, Norval, VaI, Norleu ou 4-imidazopropionil; Xaa2 é Ser, Gly, Ala ou Thr; Xaa3 é Ala, Asp ou Glu; Xaa4 é Ala, Norval, Vai, Norleu ou Gly; Xaa5 é Ala ou Thr; Xaa6 é Ala, Phe, Tyr ou naftilalanina; Xaa7 é Thr ou Ser; Xaa8 é Ala, Ser ou Thr; Xaa9 é Ala, Norval, Vai, Norleu, Asp ou Glu; XaalO é Ala, Leu, Ile, Vai, pentilglicina ou Met; Xaal 1 é Ala ou Ser; Xaa 12 é Ala ou Lys; Xaa 13 é Ala ou Gin; Xaa 14 é Ala, Leu, Ile, pentilglicina, VaI ou Met; Xaa 15 é Ala ou Glu; Xaa 16 é Ala ou Glu; Xaa 17 é Ala ou Glu; Xaa 19 é AIa ou Vai; Xaa20 é Ala ou Arg; Xaa21 é Ala, Leu ou Lys-NHe-R, em que R é Lys, Arg ou um alcanoil de cadeia reta ou ramificada Cl-C 10; Xaa22 é Ala, Phe, Tyr ou naftilalanina; Xaa23 é Ile, VaI, Leu, pentilglicina, tert-butilglicina ou Met; Xaa24 é Ala, Glu ou Asp; Xaa25 é Ala, Trp, Phe, Tyr ou naftilalanina; Xaa26 é Ala ou Leu; Xaa27 é Ala ou Ly s; Zl é -OH, -NH2, Gly-Z2, Gly Gly-Z2, Gly Gly Xaa31 -Z2, Gly Gly Xaa31 Ser-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36 Xaa37-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36 Xaa37 Xaa38-Z2 ou Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36 Xaa37 Xaa38 Xaa39-Z2, em que Xaa31, Xaa36, Xaa37 e Xaa38 são selecionados independentemente do grupo que consiste em Pro, homoprolina, 3Hyp, 4Hyp, tioprolina, N-alquilglicina, N-alquilpentilglicina ou N-alquilalanina, Xaa39 é Ser ou Tyr e Z2 é -OH ou -NH2, desde que não mais do que três dentre Xaa3, Xaa4, Xaa5, Xaa6, Xaa8, Xaa9, Xaa 10, Xaal 1, Xaal2, Xaal3, Xaal4, Xaal5, Xaa 16, Xaal7, Xaa 19, Xaa20, Xaa21, Xaa24, Xaa25, Xaa26, Xaa27 e Xaa28 sejam Ala; E quando Xaal for His, Arg ou Tyr, um ou mais de Xaa3, Xaa4, e Xaa9 sejam Ala; (Fórmula Química II) Xaal Xaa2 Xaa3 Xaa4 Xaa5 Xaa6 Xaa7 Xaa8 Xaa9 XaalO Xaall Xaa 12 Xaal3 Xaal4 Xaal5 Xaal6 Xaal7 Ala Xaal 9 Xaa20 Xaa21 Xaa22 Xaa23 Xaa24 Xaa25 Xaa26 Xl-Zl, em que Xaal é His, Arg, Tyr, Ala, Norval, Vai, Norleu ou 4- imidazopropionil; Xaa2 é Ser, Gly, Ala ou Thr; Xaa3 é Ala, Asp ou Glu; Xaa4 é Ala, Norval, Vai, Norleu ou Gly; Xaa5 é Ala ou Thr; Xaa6 é Ala, Phe, Tyr ou naftilalanina; Xaa7 é Thr ou Ser; Xaa8 é Ala, Ser ou Thr; Xaa9 é Ala, Norval, Vai, Norleu, Asp ou Glu; XaalO é Ala, Leu, Ile, Vai, pentilglicina ou Met; Xaal 1 é Ala ou Ser; Xaal2 é Ala ou Lys; Xaa 13 é Ala ou Gin; Xaal4 é Ala, Leu, Ile, pentilglicina, VaI ou Met; Xaa 15 é Ala ou Glu; Xaa 16 é Ala ou Glu; Xaa 17 é Ala ou Glu; Xaa 19 é Ala ou Vai; Xaa20 é Ala ou Arg; Xaa21 é Ala, Leu ou Lys-NHe-R, em que R é Lys, Arg, alcanoil ou cicloaleil-alcanoil de cadeia reta ou ramificada de Cl-C 10; Xaa22 é Phe, Tyr ou naftilalanina; Xaa23 é He, Vai, Leu, pentilglicina, tert-butilglicina ou Met; Xaa24 é Ala, Glu ou Asp; Xaa25 é Ala, Trp, Phe, Tyr ou naftilalanina; Xaa26 é Ala ou Leu; Xl é Lys Asn, Asn Lys, Lys-NHe-R Asn, Asn Lys-NHe-R, Lys-NHe-R Ala ou Ala Lys-NHe-R, em que R é Lys, Arg, alcanoil ou cicloalquilalcanoil de cadeia reta ou ramificada de Cl-C 10; Zl é OH, -NH2, Gly-Z2, Gly Gly-Z2, Gly Gly Xaa31-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser- Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36 Xaa37-Z2, Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36 Xaa37 Xaa38-Z2 ou Gly Gly Xaa31 Ser Ser Gly Ala Xaa36 Xaa37 Xaa38 Xaa39-Z2, em que Xaa31, Xaa36, Xaa37 e Xaa38 são selecionados independentemente do grupo que consiste em Pro, homoprolina, 3Hyp, 4Hyp, tioprolina, N-alquilglicina, N-alquilpentilglicina e N-alquilalanina, Xaa39 é Ser ou Tyr e Z2 é -OH ou -NH2, desde que não mais do que três dentre Xaa3, Xaa4, Xaa5, Xaaó, Xaa8, Xaa9, Xaa 10, Xaal 1, Xaal2, Xaal3, Xaal4, Xaal5, Xaa 16, Xaal7, Xaal9, Xaa20, Xaa21, Xaa24, Xaa25, e Xaa26 sejam Ala; e, quando Xaal for His, Arg, Tyr ou 4-imidazopropionil, pelo menos um dentre Xaa3, Xaa4, e Xaa9 é Ala.
14. Microesfera de Liberação Controlada, de acordo com a Reivindicação 13, caracterizada por que o derivado de exendina é um polipeptídeo de SEQ ID Nos: 3, 4, 5 ou 6, tendo um terminal em C substituído ou não substituído por um grupo amida.
15. Microesfera de Liberação Controlada, de acordo com qualquer uma das Reivindicações de 7 a 14, caracterizada por que compreende, além disso, um ou mais selecionados do grupo que consiste em colóides e excipientes protetores farmaceuticamente aceitáveis.
16.Método de Preparação de Microesfera de Liberação Controlada Contendo Exendina com Camada de Revestimento, caracterizado por que compreende as etapas de: misturar uma exendina e um polímero biodegradável para preparar uma emulsão ou mistura homogênea do tipo W/O; e emulsificar adicionando a emulsão ou a mistura homogênea a uma solução aquosa de um material de revestimento, para formar uma camada de revestimento, em que o polímero biodegradável é um polímero selecionado do grupo que consiste em polilactídeo (PLA), poliglicolídeo (PGA), poli(lactídeo-co-glicolídeo) (PLGA), poliortoéster, polianidrido, ácido polihidroxibutírico, policaprolactona e polialquilcarbonato, um copolímero ou uma mistura simples de dois ou mais selecionados a partir do grupo de polímero, um copolímero do polímero e polietilenoglicol (PEG) ou um polímero-complexo de açúcar onde um açúcar é acoplado ao polímero ou ao copolímero e o material de revestimento é um ou mais selecionados do grupo que consiste em aminoácidos básicos, polipeptídeos e compostos de nitrogênio orgânico, em que o aminoácido básico é um ou mais selecionados a partir do grupo que consiste em arginina, lisina e histidina, o polipeptídeo compreende de 2 a 10 aminoácidos em que são compreendidos um ou mais aminoácidos básicos selecionados a partir do grupo que consiste em arginina, lisina e histidina e o número de aminoácido básico é maior do que aqueles de aminoácidos acídicos e o composto de nitrogênio orgânico é um ou mais selecionados a partir do grupo que consiste em creatina, creatinina e ureia.
17.Método de Preparação de Microesfera de Liberação Controlada Contendo Exendina com Camada de Revestimento, de acordo com a Reivindicação 16, caracterizado por que a concentração da solução aquosa de um material de revestimento é de 0,01 M a 1 M.
18.Método de Preparação de Microesfera de Liberação Controlada Contendo Exendina com Camada de Revestimento, caracterizado por que compreende as etapas de: misturar uma exendina e um poHmero biodegradavel para formar uma emulsao ou uma mistura homogenea; solidificar a emulsao ou mistura homogenea obtida para preparar microesferas primarias; e suspender as microesferas primarias obtidas numa solugao aquosa de um material de revestimento，para formar uma camada de revestimento em cada microesfera， em que o poHmero biodegradavel e um polimero selecionado do grupo que consiste em polilactideo (PLA), poliglicoHdeo (PGA), poli(lactideo-co-glicoHdeo) (PLGA), poliortoester， polianidrido, acido polihidroxibutirico, policaprolactona e polialquilcarbonato, um co-polimero ou uma mistura simples de dois ou mais selecionados do grupo de polimero, um copoHmero do polimero e polietilenoglicol (PEG) ou um complexo de agucar-polimero em que um agucar e acoplado ao polimero ou ao copoHmero e o material de revestimento e um ou mais selecionados a partir do grupo que consiste em aminoacidos basicos， polipeptxdeos e compostos de nitrogerxio organico, em que o aminoacido basico e um ou mais selecionados do grupo que consiste em arginina， lisina e histidina, o polipeptideo compreende de 2 a 10 aminoacidos em que sao compreendidos um ou mais aminoacidos basicos selecionados do grupo que consiste em arginina lisina e histidina e o numero de aminoacidos basicos e maior do que aquele de aminoacidos acidicos e o composto de nitrogenio organico e um ou mais selecionados a partir do grupo que consiste em creatina, creatinina e ureia.
19. Metodo de Prepara9a0 de Microesfera de Libera9a0 Controlada Contendo Exendina com Camada de Revestimento，de acordo com a Reivindicagao 18，caracterizado por que a etapa de solidificagao e realizada por um metodo de separagao de fase ou um metodo de se-cagem de spray.
20.Método de Preparação de Microesfera de Liberação Controlada Contendo Exendina com Camada de Revestimento, de acordo com a Reivindicação 18, caracterizado por que a concentração da solução aquosa de um material de revestimento éde0,01MalM.
BRPI0809326A 2007-03-27 2008-01-22 métodos de preparação de microesfera de liberação controlada contendo exendina com camada de revestimento, composição e microesfera BRPI0809326B8 (pt)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
KR1020070029586A KR100805208B1 (ko) 2007-03-27 2007-03-27 엑센딘 함유 서방성 제제 조성물, 엑센딘 함유 서방성미립구 및 이의 제조 방법
KR10-2007-0029586 2007-03-27
PCT/KR2008/000397 WO2008117927A1 (en) 2007-03-27 2008-01-22 Composition and microsphere for controlled-release of exendin, and method of preparing the same

Publications (3)

Publication Number Publication Date
BRPI0809326A2 true BRPI0809326A2 (pt) 2014-09-23
BRPI0809326B1 BRPI0809326B1 (pt) 2020-10-13
BRPI0809326B8 BRPI0809326B8 (pt) 2021-05-25

Family

ID=39382592

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
BRPI0809326A BRPI0809326B8 (pt) 2007-03-27 2008-01-22 métodos de preparação de microesfera de liberação controlada contendo exendina com camada de revestimento, composição e microesfera

Country Status (16)

Country Link
US (1) US9155702B2 (pt)
EP (1) EP2134329B1 (pt)
JP (1) JP5135428B2 (pt)
KR (1) KR100805208B1 (pt)
CN (1) CN101646424B (pt)
AU (1) AU2008230297B2 (pt)
BR (1) BRPI0809326B8 (pt)
CA (1) CA2682499C (pt)
ES (1) ES2528282T3 (pt)
IL (1) IL201024A (pt)
MX (1) MX2009010280A (pt)
MY (1) MY150087A (pt)
PL (1) PL2134329T3 (pt)
RU (1) RU2463040C2 (pt)
WO (1) WO2008117927A1 (pt)
ZA (1) ZA200906381B (pt)

Families Citing this family (29)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
BRPI0810140A2 (pt) * 2007-04-19 2014-10-29 Dong A Pharm Co Ltd Composição de microempresa biodegradável adequada para a liberação controlada de um peptídeo de controle de glicose e formulação da mesma
US9292307B2 (en) 2008-07-30 2016-03-22 Kyocera Corporation User interface generation apparatus
US20100183876A1 (en) * 2008-12-23 2010-07-22 Hell Andre Process for the Preparation of a Peptide Powder Form
EP2538929A4 (en) 2010-02-25 2014-07-09 Univ Johns Hopkins DELAYED RELEASE OF THERAPIES IN A PART OF THE EYE
CN102370611B (zh) * 2010-08-17 2013-09-18 东莞太力生物工程有限公司 一种包含exendin-4的温度敏感型水凝胶及其注射剂
US20140004198A1 (en) * 2011-01-19 2014-01-02 Novo Nordisk A/S Glp-1 particles and compositions
WO2012109363A2 (en) 2011-02-08 2012-08-16 The Johns Hopkins University Mucus penetrating gene carriers
EP2790681B9 (en) 2011-11-18 2023-07-26 Regeneron Pharmaceuticals, Inc. Method of manufacturing an extended release pharmaceutical formulation comprising polymer coated protein microparticles using spray-drying
CN102688198B (zh) * 2012-06-19 2015-04-15 广州帝奇医药技术有限公司 多肽药物缓释微球制剂及其制备方法
US10568975B2 (en) 2013-02-05 2020-02-25 The Johns Hopkins University Nanoparticles for magnetic resonance imaging tracking and methods of making and using thereof
CN104107165B (zh) * 2013-04-17 2018-11-30 长春百益制药有限责任公司 一种艾塞那肽微球制剂、其制备方法及其应用
CN104840415B (zh) 2014-02-19 2019-03-15 香港浸会大学 含有降血糖活性成分的长效控释脂质体凝胶组合物及其制备方法
JP2017511371A (ja) * 2014-04-16 2017-04-20 シャンドン ルイ ファーマシューティカル カンパニー リミテッド エクセナチド含有組成物及びその製造方法
WO2015175545A1 (en) 2014-05-12 2015-11-19 The Johns Hopkins University Highly stable biodegradable gene vector platforms for overcoming biological barriers
US9480640B2 (en) * 2014-09-24 2016-11-01 Hongkai Zhang Nano freeze dry process of preparation of highly bioactive agent and its method of use
US10485757B2 (en) 2015-01-27 2019-11-26 The Johns Hopkins University Hypotonic hydrogel formulations for enhanced transport of active agents at mucosal surfaces
EP3352735B1 (en) 2015-09-21 2023-08-30 Teva Pharmaceuticals International GmbH Sustained release olanzapine formulations
MX391259B (es) 2015-10-14 2025-03-21 X Therma Inc Composiciones y métodos para reducir la formación de cristales de hielo.
WO2017107906A1 (zh) * 2015-12-22 2017-06-29 四川科伦药物研究院有限公司 一种艾塞那肽微球制剂及其制备方法
EP4635569A3 (en) * 2016-10-20 2025-12-31 Peptron, Inc. METHODS OF ADMINISTRATING A NEUROPROTECTIVE POLYPEPTIDE TO THE CENTRAL NERVOUS SYSTEM
AU2018238136A1 (en) 2017-03-20 2019-11-07 Teva Pharmaceuticals International Gmbh Sustained release olanzapine formulations
JP7054954B2 (ja) * 2018-01-10 2022-04-15 ジー２ジーバイオ インコーポレイテッド コラーゲンペプチドを含有したポリカプロラクトン微粒球フィラーおよびその製造方法
JP7699377B2 (ja) * 2018-12-17 2025-06-27 ジー２ジーバイオ インコーポレイテッド デスロレリンを含有する徐放性注射剤およびその製造方法
US12496279B2 (en) 2019-04-11 2025-12-16 The Johns Hopkins University Nanoparticles for drug delivery to brain
JP7336813B2 (ja) 2019-07-29 2023-09-01 ペプトロン インコーポレイテッド レボドパ誘発性ジスキネジアの治療または進行抑制用の薬学組成物
KR102552385B1 (ko) * 2019-07-29 2023-07-06 주식회사 펩트론 레보도파 유발 이상 운동증의 치료 또는 진행 억제용 약학 조성물
EP4277661A1 (en) 2021-01-18 2023-11-22 Anton Frenkel Pharmaceutical dosage form
CN117098529A (zh) * 2021-01-29 2023-11-21 天温轮特拉皮踢诗 初期突发释放受控的贮库组合物及其方法
CN118284414A (zh) 2021-07-06 2024-07-02 M·哈斯莱顿 血清素再摄取抑制剂戒断综合征的治疗

Family Cites Families (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4389330A (en) 1980-10-06 1983-06-21 Stolle Research And Development Corporation Microencapsulation process
US5271961A (en) * 1989-11-06 1993-12-21 Alkermes Controlled Therapeutics, Inc. Method for producing protein microspheres
GB9210574D0 (en) 1992-05-18 1992-07-01 Ca Nat Research Council Biotherapeutic cell-coated microspheres for wound/burn and prothesis implant applications
JPH09315975A (ja) * 1995-09-28 1997-12-09 Takeda Chem Ind Ltd ２−ピペラジノン−１−酢酸誘導体の徐放剤
JP4900984B2 (ja) * 1997-07-15 2012-03-21 武田薬品工業株式会社 徐放性製剤の製造法
DE60032331T2 (de) 1999-01-14 2007-06-21 Amylin Pharmaceuticals, Inc., San Diego Exendine zur glucagon suppression
EP1140145B2 (en) * 1999-01-14 2019-05-15 Amylin Pharmaceuticals, LLC Novel exendin agonist formulations and methods of administration thereof
JP2003519667A (ja) 2000-01-10 2003-06-24 アミリン・ファーマシューティカルズ，インコーポレイテッド トリグリセリドレベルの調節および脂質異常血症の治療のためのエキセンジンおよびそのアゴニストの使用
JP5160005B2 (ja) * 2000-12-28 2013-03-13 武田薬品工業株式会社 徐放性製剤
KR100566573B1 (ko) 2002-04-13 2006-03-31 주식회사 펩트론 Ｌｈｒｈ 동족체를 함유하는 서방성 미립구의 제조방법
WO2004035762A2 (en) * 2002-10-17 2004-04-29 Alkermes Controlled Therapeutics, Inc. Ii Microencapsulation and sustained release of biologically active polypeptides
SI21402A (sl) * 2003-02-12 2004-08-31 LEK farmacevtska dru�ba d.d. Obloženi delci in farmacevtske oblike
WO2005110425A1 (en) * 2004-04-15 2005-11-24 Alkermes, Inc. Polymer-based sustained release device
US7456254B2 (en) * 2004-04-15 2008-11-25 Alkermes, Inc. Polymer-based sustained release device
KR101231856B1 (ko) * 2004-08-12 2013-02-08 큐피에스 엘엘씨 생물학적 활성 화합물의 제어 방출 전달용 약학 조성물
PL1824460T3 (pl) * 2004-11-10 2015-09-30 Tolmar Therapeutics Inc Stabilizowany polimerowy układ dostarczania

Also Published As

Publication number Publication date
BRPI0809326B8 (pt) 2021-05-25
BRPI0809326B1 (pt) 2020-10-13
EP2134329B1 (en) 2015-01-07
EP2134329A1 (en) 2009-12-23
MX2009010280A (es) 2009-10-12
JP5135428B2 (ja) 2013-02-06
ES2528282T3 (es) 2015-02-06
RU2463040C2 (ru) 2012-10-10
US20100136126A1 (en) 2010-06-03
ZA200906381B (en) 2010-11-24
EP2134329A4 (en) 2013-07-10
MY150087A (en) 2013-11-29
WO2008117927A1 (en) 2008-10-02
CN101646424A (zh) 2010-02-10
CA2682499C (en) 2013-01-08
CA2682499A1 (en) 2008-10-02
PL2134329T3 (pl) 2015-07-31
IL201024A0 (en) 2010-05-17
RU2009136655A (ru) 2011-05-10
US9155702B2 (en) 2015-10-13
CN101646424B (zh) 2013-03-20
AU2008230297A1 (en) 2008-10-02
JP2010522743A (ja) 2010-07-08
KR100805208B1 (ko) 2008-02-21
IL201024A (en) 2014-01-30
AU2008230297B2 (en) 2010-07-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
BRPI0809326A2 (pt) Métodos de preparação de microesfera de liberação controlada contendo exendina com camada de revestimento, composição e microesfera
AU2017200295B2 (en) Stable formulations for parenteral injection of peptide drugs
US20240342249A1 (en) Methods for producing stable therapeutic formulations in aprotic polar solvents
US8299025B2 (en) Suspension formulations of insulinotropic peptides and uses thereof
AU2009212373B2 (en) Non-polymeric compositions for controlled drug delivery
ES2650667T3 (es) Rápido establecimiento y/o terminación de la administración sustancial de fármaco en estado estacionario
US20140220134A1 (en) Method for treating diabetes with extended release formulation of glp-1 receptor agonists
CN107405307B (zh) 一种艾塞那肽微球制剂及其制备方法
US11590205B2 (en) Methods for producing stable therapeutic glucagon formulations in aprotic polar solvents
BRPI0906045B1 (pt) Composição farmacêutica para administração nasal
TW201300131A (zh) 包含艾塞那肽（ｅｘｅｎｄｉｎ）連接子接合物之前藥

Legal Events

Date Code Title Description
B07D Technical examination (opinion) related to article 229 of industrial property law [chapter 7.4 patent gazette]
B06F Objections, documents and/or translations needed after an examination request according [chapter 6.6 patent gazette]
B07E Notification of approval relating to section 229 industrial property law [chapter 7.5 patent gazette]

Free format text: NOTIFICACAO DE ANUENCIA RELACIONADA COM O ART 229 DA LPI

B06A Patent application procedure suspended [chapter 6.1 patent gazette]
B09A Decision: intention to grant [chapter 9.1 patent gazette]
B16A Patent or certificate of addition of invention granted [chapter 16.1 patent gazette]

Free format text: PRAZO DE VALIDADE: 10 (DEZ) ANOS CONTADOS A PARTIR DE 13/10/2020, OBSERVADAS AS CONDICOES LEGAIS.

B16C Correction of notification of the grant [chapter 16.3 patent gazette]

Free format text: PRAZO DE VALIDADE: 20 (VINTE) ANOS CONTADOS A PARTIR DE 22/01/2008 OBSERVADAS AS CONDICOES LEGAIS. PATENTE CONCEDIDA CONFORME ADI 5.529/DF